EA022669B1 - 1,2,5-оксадиазолы в качестве ингибиторов индоламин-2,3-диоксигеназы - Google Patents

1,2,5-оксадиазолы в качестве ингибиторов индоламин-2,3-диоксигеназы Download PDF

Info

Publication number
EA022669B1
EA022669B1 EA201170161A EA201170161A EA022669B1 EA 022669 B1 EA022669 B1 EA 022669B1 EA 201170161 A EA201170161 A EA 201170161A EA 201170161 A EA201170161 A EA 201170161A EA 022669 B1 EA022669 B1 EA 022669B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
amino
compound
oxadiazole
hydroxy
carboximidamide
Prior art date
Application number
EA201170161A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201170161A1 (ru
Inventor
Эндрю П. Комбс
Эдди В. Юэ
Ричард Б. Спаркс
Вэньюй Чжу
Цзячэн Чжоу
Циянь Лин
Линкай Вен
Тай-Юйэнь Юэ
Пинли Лю
Original Assignee
Инсайт Холдингс Корпорейшн
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41128289&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA022669(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Инсайт Холдингс Корпорейшн filed Critical Инсайт Холдингс Корпорейшн
Publication of EA201170161A1 publication Critical patent/EA201170161A1/ru
Publication of EA022669B1 publication Critical patent/EA022669B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4245—Oxadiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A61P27/12—Ophthalmic agents for cataracts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D271/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms
    • C07D271/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having two nitrogen atoms and one oxygen atom as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D271/08—1,2,5-Oxadiazoles; Hydrogenated 1,2,5-oxadiazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Ophthalmology & Optometry (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Изобретение направлено на производные 1,2,5-оксадиазола и их композиции, которые являются ингибиторами индоламин-2,3-диоксигеназы и полезны в лечении рака и других расстройств, а также способы и промежуточные соединения для получения таких производных 1,2,5-оксадиазола.

Description

Данное изобретение относится к производным 1,2,5-оксадиазола, которые являются ингибиторами индоламин-2,3-диоксигеназы и пригодны для лечения рака и других расстройств, и к способам и промежуточным соединениям для их получения.
Уровень техники
Триптофан (Тгр) представляет собой неотъемлемую аминокислоту, необходимую для биосинтеза белков, ниацина и нейромедиатора 5-гидрокситриптамина (серотонин). Фермент индоламин-2,3диоксигеназа (также известный как ΙΝΏΘ или ГОО) катализирует первую, ограничивающую скорость стадию разложения Ь-триптофана до Ν-формил-кинуренина. В человеческих клетках истощение Тгр в результате действия ГОО - это очевидный противомикробный эффекторный механизм, индуцируемый гамма-интерфероном (ΙΡΝ-γ). Стимуляция ΙΡΝ-γ индуцирует активацию ГОО, что ведет к истощению Тгр, таким образом останавливая рост Тгр-зависимых внутриклеточных патогенов, таких как Тохор1а§та допйи и СЫатуФа 1гас1ютаЙ5. Активность ГОО также включает антипролиферативное действие на многочисленные опухолевые клетки, и индукция ГОО наблюдается ίη νί\Ό в ходе отторжения аллогенных опухолей, указывая на возможную роль данного фермента в процессе отторжения опухоли (ПанЬепег е! а1., 1999, Αάν. Ехр. Мей. Бю1., 467: 517-24; Тау1ог, е! а1., 1991, РАЗИВ 1., 5: 2516-22).
Наблюдалось, что клетки НеЬа, культивируемые совместно с лимфоцитами периферической крови (РВЬк), приобретают ингибирующий иммунитет фенотип путем регуляции активности ГОО. Считается, что уменьшение пролиферации РВИ при обработке интерлейкином-2 (1Ь2) является результатом высвобождения ГОО клетками опухоли в ответ на секрецию ΙΡΝΟ РВИ. Данный эффект изменяли обработкой 1-метилтриптофаном (1МТ) - специфическим ингибитором ГОО. Допускается, что активность ГОО в клетках опухоли может служить цели ослабления противоопухолевых реакций (Ьодап, е! а1., 2002, 1ттипо1оду, 105: 478-87).
В последнее время больше внимания уделяется иммунорегулирующей роли истощения Тгр. Несколько линий доказательств свидетельствуют, что ГОО вовлечен в индукцию иммунной толерантности. Исследования беременности, резистентности опухоли, хронических инфекций и аутоиммунных заболеваний у млекопитающих показали, что клетки, которые экспрессируют ГОО, могут подавлять реакции Тклеток и способствовать толерантности. Ускоренный катаболизм наблюдается при заболеваниях и расстройствах, связанных с иммунной активацией клеток, например инфекция, злокачественное новообразование, аутоиммунные заболевания и СПИД, а также в ходе беременности. Например, повышенные уровни интерферонов и повышенные уровни метаболитов Тгр в моче наблюдаются при аутоиммунных заболеваниях; был выдвинут постулат, что системное или местное истощение Тгр, которое возникает при аутоиммунных заболеваниях, возможно, связано с дегенерацией и симптомами истощения при этих заболеваниях. В подтверждение данной гипотезы, высокие уровни ГОО наблюдались в клетках, выделенных из синовия артритных суставов. Уровни интерферонов также повышаются у людей, инфицированных вирусом иммунодефицита (ВИЧ), и повышение уровней интерферона связано с прогнозом ухудшения. Таким образом, допускается, что ГОО индуцируется хронической ВИЧ-инфекцией и, кроме того, его содержание увеличивается при оппортунистических инфекциях и что хроническая потеря Тгр инициирует механизмы, ответственные за кахексию, слабоумие, понос и, возможно, иммуносупрессию у больных СПИДом (Вго^п, е! а1., 1991, Αάν. Ехр. Мей. Вю1., 294: 425-35). С этой точки зрения недавно было продемонстрировано, что ингибирование ГОО может увеличивать уровни специфических по отношению к вирусу Т-клеток и одновременно уменьшать количество инфицированных вирусом макрофагов на модели ВИЧ у мышей (Ройи1а е! а1., 2005, В1оой, 106: 2382-90).
Считается, что ГОО играет роль в процессах угнетения иммунитета, которые предупреждают отторжение эмбриона в матке. Более 40 лет назад наблюдали, что в ходе беременности генетически незрелое оплодотворенное яйцо млекопитающих выживает, невзирая на прогноз иммунологии пересадки ткани (Мейатаг, 1953, Зутр. Зое. Ехр. Вю1., 7: 320-38). Анатомический отсек матери и утробного плода и антигенная незрелость утробного плода не могут полностью объяснять выживания аллотрансплантированного эмбриона. В последнее время внимание сосредоточено на иммунологической толерантности матери. Поскольку ГОО экспрессируется человеческими синцитиотрофобластными клетками, и системная концентрация триптофана снижается на протяжении нормальной беременности, выдвинута гипотеза, что экспрессия ГОО в материнско-эмбрионном интерфейсе необходима для предупреждения иммунологического отторжения эмбрионного аллотрансплантата. Чтобы проверить данную гипотезу, беременных мышей (с сингенными или аллогенными утробными плодами) подвергали действию 1МТ, и наблюдалось быстрое, индуцируемое Т-клетками отторжение всех аллогенных оплодотворенных яиц. Таким образом, по-видимому, путем катаболизма триптофана оплодотворенное яйцо млекопитающих подавляет активность Т-клеток и защищает себя от отторжения, а блокирование катаболизма триптофана в ходе мышиной беременности позволяет материнским Т-клеткам провоцировать отторжение аллотрансплантированного эмбриона (Мипп, е! а1., 1998, Зе1епее, 281: 1191-3).
Последующие доказательства механизма иммунорезистентности опухолей, основанной на разложении триптофана под действием ГОО, полученные в результате наблюдения, что большинство человеческих опухолей конститутивно экспрессируют ГОО и что экспрессия ГОО клетками иммуногенной опухо- 1 022669 ли мыши предупреждает их отторжение предварительно иммунизированными мышами. Такое влияние сопровождается отсутствием аккумуляции специфических Т-клеток в месте опухоли и может быть частично обращено системным лечением мышей ингибитором ГОО при отсутствии заметной токсичности. Таким образом, это наводит на мысль, что эффективность терапевтической вакцинации больных раком может быть повышена сопутствующим введением ингибитора ГОО (иуйеиЬоуе е! а1., 2003, №йиге Мей., 9: 1269-74). Также продемонстрировано, что ингибитор ГОО, 1-МТ, может осуществлять синергетическое действие с химиотерапевтическими средствами с целью уменьшения роста опухолей у мышей, указывая на то, что ингибирование ГОО также может усиливать противоопухолевую активность обычной цитотоксической терапии (Ми11ег е! а1., 2005, Ыа1иге Мей., 11: 312-9).
Один из механизмов, который способствует отсутствию иммунологической реакции против опухолей, может заключаться в презентации антигенов опухоли толерогенными хозяина АРСк. Также описано подмножество экспрессирующих ГОО человеческих антиген-презентующих клеток (АРСк), соэкспрессирующих СГО123 (ГО3КЛ) и ССК6 и подавляющих пролиферацию Т-клеток. Как зрелые, так и незрелые СО123-положительные дендритные клетки подавляли активность Т-клеток, и такая подавляющая ГОО активность блокировалась 1МТ (Мипп, е! а1., 2002, §с1епсе, 297: 1867-70). Также продемонстрировано, что дренирующие опухоль лимфатические узлы у мышей (ТЭЬ№) содержат подмножество плазмацитоидных дендритных клеток (рЭС), которые конститутивно экспрессируют иммуносупресивные уровни ГОО. Несмотря на содержание только 0,5% клеток лимфатического узла, ίη νίΐτο эти рЭС мощно подавляют реакции Т-клеток на антигены, презентованные непосредственно рЭС. а также доминирующим образом подавляют реакции Т-клеток на антигены третьей стороны, презентованные несупрессорными АРСк. В пределах популяции рЭС большая часть опосредствованной функциональным ГОО супрессорной активности отделена с новым подмножеством рЭС соэкспрессирующих маркер В-выстилки СГО19. Таким образом, выдвинута гипотеза, что опосредствованное ГОО угнетение рЭСк в ТЭЬ№ создает местное микроокружение, которое мощно подавляет противоопухолевые реакции Т-клеток хозяина (Мипп, е! а1., 2004, ί. Сйп. 1^е5!., 114(2): 280-90).
ГОО разлагает индольный фрагмент триптофана, серотонина и мелатонина и инициирует выработку нейроактивных и иммунорегулирующих метаболитов, коллективно известных как кинуренины. Путем локального истощения триптофана и увеличения проапоптотических кинуренинов ГОО, экспрессирующийся дендритными клетками (ОСк), может существенно поражать пролиферацию и выживание Тклеток. Индукция ГОО в ЭСк может быть распространенным механизмом делеционной толерантности, которой управляют регуляторные Т-клетки. Поскольку можно ожидать, что такие толерогенные реакции действуют при разнообразных физиопатологических состояниях, метаболизм триптофана и продуцирование кинуренина могут представлять критический интерфейс между иммунной и нервной системами (ОгоЬтапп, е! а1., 2003, Тгепйк 1ттипо1., 24: 242-8). При состояниях постоянной иммунной активации доступность свободного Тгр в сыворотке уменьшается и как результат сниженной выработки серотонина серотонинергические функции также могут быть нарушены (ЛУМеЬпег е! а1., 2003, Сшт. Мей. СЬет., 10: 1581-91).
Интересно, что при введении интерферона-α наблюдалась индукция нейропсихиатрических побочных эффектов, таких как депрессивные симптомы и изменения когнитивной функции. Прямое влияние на серотонинергическую нейромедиацию, возможно, способствует таким побочным эффектам. Кроме того, поскольку активация ГОО приводит к снижению уровней триптофана, прекурсора серотонина (5НТ), ГОО может играть роль в развитии таких нейропсихиатрических побочных эффектов, уменьшая центральный синтез 5-НТ. К тому же, метаболиты кинуренинов, например 3-гидроксикинуренин (3-ОНΚΥΝ) и хинолиновая кислота (ΟυίΝ) оказывают токсичное действие на функции мозга. 3-ОН-КУЯ может вызывать окислительный стресс, увеличивая выработку реакционноспособных форм кислорода (КО8), и ΟυίΝ может вызывать избыточную стимуляцию рецепторов Ν-метил-О-аспартата (NМ^Α) в гиппокампе, что приводит к апоптозу и атрофии гиппокампа. Как избыточная выработка КО8, так и атрофия гиппокампа, вызванная избыточной стимуляцией NМ^Α, связаны с депрессией (ХУюЬегк апй Маек, 2004, ί. РкусЫаЦу №иго5С1., 29: 11-17). Таким образом, активность ГОО может играть роль в механизме депрессии.
Созданы низкомолекулярные ингибиторы ГОО для лечения или предупреждения связанных с ГОО заболеваний, таких как описанные выше. Например, оксадиазол и другие гетероциклические ингибиторы ГОО раскрыты в патенте США 2006/0258719 и патенте США 2007/0185165. В публикации РСТ \УО 99/29310 раскрыты способы изменения опосредствованного Т-клетками иммунитета, включающие изменение местных внеклеточных концентраций триптофана и метаболитов триптофана, с применением ингибитора ГОО, такого как 1-метилГОЬ-триптофан, п-(3-бензофуранил)ГОЬ-аланин, п-[3-бензо(Ь) тиенил]ОЬ-аланин и 6-нитро-Ь-триптофан) (Мипп, 1999). В \УО 03/087347, также опубликованной как Европейский Патент 1501918, раскрыты способы получения антиген-презентующих клеток для увеличения или уменьшения толерантности Т-клеток (Мипп, 2003). Соединения, которые обладают ингибирующей индоламин-2,3-диоксигеназу (ГОО) активностью, дополнительно раскрыты в \УО 2004/094409; и публикация патентной заявки США № 2004/0234623 направлена на способы лечения субъекта с раком или инфекцией путем введения ингибитора индоламин-2,3-диоксигеназы в комбинации с другими схемами лечения.
- 2 022669
В свете экспериментальных данных, которые указывают на роль ГОО в угнетении иммунитета, резистентности и/или отторжении опухоли, хронических инфекциях, ВИЧ-инфекции, СПИДе (в частности, его проявлениях, таких как кахексия, слабоумие и понос), аутоиммунных заболеваниях или расстройствах (таких как ревматоидный артрит) и иммунологической толерантности и предотвращении отторжения эмбриона ίη и1ето, желательными являются терапевтические средства, направленные на угнетение разложения триптофана путем ингибирования активности ГОО. Ингибиторы ГОО могут применяться для активации Т-клеток и, таким образом, усиления активации Т-клеток, когда Т-клетки угнетены беременностью, злокачественным новообразованием или вирусом, например ВИЧ. Ингибирование ГОО может также быть важной стратегией лечения для пациентов с неврологическими или нейропсихиатрическими заболеваниями или расстройствами, такими как депрессия. Соединения, композиции и способы в данном описании помогают удовлетворить существующую потребность в модуляторах ГОО.
Сущность изобретения
В данном изобретении предлагаются, в частности, ингибиторы ГОО формулы I
или их фармацевтически приемлемые соли, где переменные определены в данном описании.
В данном изобретении дополнительно предлагается фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
В данном изобретении дополнительно предлагается способ ингибирования активности индоламин2,3-диоксигеназы, включающий контакт индоламин-2,3-диоксигеназы (ГОО) с соединением формулы I или его фармацевтически приемлемой солью.
В данном изобретении дополнительно предлагается способ угнетения иммуносупрессии у пациента, который включает введение указанному пациенту эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
В данном изобретении дополнительно предлагается способ лечения рака, вирусной инфекции, депрессии, нейродегенеративного расстройства, травмы, возрастной катаракты, отторжения пересаженного органа или аутоиммунного заболевания у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
В данном изобретении дополнительно предлагается способ лечения меланомы у пациента, который включает введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли.
В данном изобретении дополнительно предлагается соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль для применения в терапии.
В данном изобретении дополнительно предлагается применение соединения формулы I или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства с целью применения в терапии.
В данном изобретении дополнительно предлагаются промежуточные соединения, способы их получения и содержащие их композиции, пригодные для получения соединения формулы Р15
В данном изобретении дополнительно предлагаются промежуточные соединения, способы их получения и содержащие их композиции, пригодные для получения соединения формулы Р28
Краткое описание фигур
Фиг. 1 демонстрирует пример рентгеноструктурной дифрактограммы, характерной для соединения по изобретению, полученного в примере 1;
фиг. 2 демонстрирует термограмму 05>С. характерную для соединения по изобретению, полученного в примере 1;
фиг. 3 демонстрирует характеристику данных ТГА соединения по изобретению, полученного в примере 1.
- 3 022669
Подробное описание изобретения
В данном изобретении предлагаются, среди прочего, ингибиторы ГОО формулы I
или их фармацевтически приемлемые соли, где К1 представляет собой ΝΗ2 или СН3;
К2 представляет собой С1, Вг, СР3, СН3 или СК К3 представляет собой Н или Р и η равно 1 или 2.
В некоторых вариантах К1 представляет собой ΝΗ2.
В некоторых вариантах К1 представляет собой СН3.
В некоторых вариантах К2 представляет собой С1.
В некоторых вариантах К2 представляет собой Вг.
В некоторых вариантах К2 представляет собой СР3.
В некоторых вариантах К2 представляет собой СН3.
В некоторых вариантах К2 представляет собой СК
В некоторых вариантах К3 представляет собой Н.
В некоторых вариантах К3 представляет собой Р.
В некоторых вариантах η равно 1.
В некоторых вариантах η равно 2.
Соединения по данному изобретению могут существовать в различных твердых формах. В данном описании твердая форма обозначает твердое вещество, которое характеризуется одним или больше свойствами, например температурой плавления, растворимостью, стабильностью, кристалличностью, гигроскопичностью, содержанием воды, показателями ТГА, показателями Э8С. показателями ДСВ, показателями РГАДП и т.п. Формы твердых веществ, например, могут быть аморфными, кристаллическими, или могут быть смесями указанных компонентов.
Различным кристаллическим твердым формам обычно свойственные разные кристаллические решетки (например, единичные ячейки) и, обычно в результате этого, разные физические свойства. В некоторых случаях разные кристаллические твердые формы содержат разное количество воды или растворителя. Разные кристаллические решетки могут быть идентифицированы методами описания твердого состояния, такими как рентгеноструктурный анализ дифракции порошка (РГАДП). Другие способы описания, такие как дифференциальная сканирующая калориметрия (ΌδΟ), термогравиметрический анализ (ТГА), динамическая сорбция паров (ДСВ) и подобные дополнительно помогают идентифицировать твердую форму, а также помогают определить стабильность и содержание растворителя/воды.
В одном из аспектов данного изобретения предлагаются различные твердые формы 4-({2[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-К-(3-бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида (см. пример 1). В некоторых вариантах твердая форма представляет собой кристаллическое твердое вещество. В некоторых вариантах твердая форма является в существенной мере безводной (например, содержит менее чем приблизительно 1% воды, менее чем приблизительно 0,5% воды, менее чем приблизительно 1,5% воды, менее чем приблизительно 2% воды). В некоторых вариантах твердая форма характеризуется температурой плавления или эндотермой центрированной в интервале от приблизительно 162 до приблизительно 166°С. В некоторых вариантах твердая форма характеризуется температурой плавления или эндотермой центрированной при приблизительно 164°С. В некоторых вариантах твердая форма демонстрирует в существенной мере такую же термограмму как показано на фиг. 2. В других вариантах на РГАДП твердой формы присутствуют по меньшей мере один, два или три пика в единицах 2-тета, выбранных из приблизительно 18,4°, приблизительно 18,9°, приблизительно 21,8°, приблизительно 23,9°, приблизительно 29,2° и приблизительно 38,7°. В других вариантах твердая форма демонстрирует в существенной мере такой же характер РГАДП, как показано на фиг. 1.
В данном изобретении дополнительно предлагается композиция, содержащая твердую форму 4-({2[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-К-(3-бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида (см. пример 1). Композиция может содержать по меньшей мере приблизительно 50, по меньшей мере приблизительно 75, по меньшей мере приблизительно 90, по меньшей мере приблизительно 95 или по меньшей мере приблизительно 99 мас.% твердой формы. Композиция может также содержать фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество. В некоторых вариантах твердая форма является в существенной мере очищенной.
Характер РГАДП отображения (пики) обычно считается отпечатком пальцев конкретной кристаллической формы. Хорошо известно, что относительная интенсивность пиков РГАДП может широко варьировать в зависимости от, среди прочего, техники изготовления образца, распределения размера
- 4 022669 кристаллов, различных применяемых фильтров, методики монтажа образца и конкретного использованного прибора. В некоторых случаях могут наблюдаться новые пики или существующие пики могут исчезать в зависимости от вида прибора или установленных параметров. В данном описании термин пик обозначает отображение с относительной высотой/интенсивностью по меньшей мере приблизительно 4% от максимальной высоты/интенсивности пика. Кроме того, инструментальная вариация и другие факторы могут влиять на значение 2-тета. Поэтому отнесения пиков, например, приведенные в данном описании, могут варьировать в пределах приблизительно ±0,2° (2-тета), и термин в существенной мере в контексте РГ АДП в данном описании предназначен охватывать вышеприведенные вариации.
Таким же образом, значения температуры в связи с И§С, ТГА или другими термическими экспериментами могут варьировать в пределах приблизительно ±3°С в зависимости от прибора, конкретных параметров прибора, способа подготовки образцов и т.п. Соответственно, если кристаллическая форма, приведенная в данном описании, демонстрирует термограмму 05>С. в существенной мере такую же, как показано на любом из чертежей, это предусматривает включение данной вариации.
В разных местах данного описания заместители соединений по изобретению могут быть раскрыты в группах или в интервалах. Конкретно предусматривается, что изобретение включает каждую и любую индивидуальную подкомбинацию членов таких групп и интервалов.
Предусматривается, что соединения по изобретению являются стабильными. В данном описании стабильный обозначает соединение, которое является достаточно устойчивым, чтобы выдержать выделение до пригодной степени чистоты из реакционной смеси, и предпочтительно пригодное к введению в рецептуру эффективного терапевтического средства.
Дополнительно предусматривается, что некоторые признаки изобретения, которые с целью ясности описаны в контексте отдельных вариантов, могут также быть приведены в комбинации в одном и том же варианте. С другой стороны, различные признаки изобретения, которые с целью краткости описаны в контексте одного и того же варианта, могут также быть приведены отдельно или в какой-либо подходящей подкомбинации.
Дополнительно предусматривается, что соединения по изобретению включают все возможные геометрические изомеры. цис-и транс-Геометрические изомеры соединений по данному изобретению описаны и могут быть выделены как смесь изомеров или как отделенные изомерные формы. Предусматривается, что связь, представленная в структурной формуле волнистой линией ^^νο·1, показывает, что структура представляет цис- или транс-изомер, либо смесь цис- и транс-изомеров в любом соотношении.
Соединения по изобретению также включают таутомерные формы. Таутомерные формы образуются в результате миграции одинарной связи и смежной двойной связи с сопутствующей миграцией протона.
Соединения по изобретению могут также включать все изотопы атомов, присутствующих в промежуточных соединениях или конечных соединениях. Изотопы включают атомы с таким же атомным числом, но разной массой. Например, изотопы водорода включают тритий и дейтерий.
В некоторых вариантах соединения по изобретению и их соли являются в существенной мере выделенными. В существенной мере выделенный означает, что соединение, по меньшей мере, частично или в существенной мере выделено из окружения, в котором оно было образовано или найдено. Частичное выделение может включать, например, композицию, обогащенную соединением по изобретению. Существенное выделение может включать композиции, содержащие по меньшей мере приблизительно 50, по меньшей мере приблизительно 60, по меньшей мере приблизительно 70, по меньшей мере приблизительно 80, по меньшей мере приблизительно 90, по меньшей мере приблизительно 95, по меньшей мере приблизительно 97 или по меньшей мере приблизительно 99 мас.% соединения по изобретению или его соли. Способы выделения соединений и их солей шаблонно описаны в уровне техники.
Данное изобретение также включает соли соединений, описанных в данном описании. В данном описании соли обозначают производные раскрытых соединений, где начальное соединение модифицировано путем превращения существующего кислотного или основного фрагмента в его солевую форму. Примеры солей включают, не ограничиваясь ими, соли минеральных кислот (например, НС1, НВг, Н2§04) или органических кислот (например, уксусная кислота, бензойная кислота, трифторуксусная кислота) и основных остатков, таких как амины; соли щелочного металла (например, Ы, Иа, К, Мд, Са) или органического основания (например, триалкиламмоний) и кислотных остатков, таких как карбоновые кислоты; и т.п. Соли по данному изобретению могут быть синтезированы из начального соединения, которое содержит основной или кислотный фрагмент, традиционными химическими способами. В целом, такие соли могут быть получены реакцией свободной кислоты или основания указанных соединений со стехиометрическим количеством соответствующего основания или кислоты в воде или в органическом растворителе, или в смеси двух растворителей; в целом неводные среды, такие как эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил (АСИ), являются предпочтительными.
Фармацевтически приемлемые соли по данному изобретению включают подмножество солей, описанных выше, которые представляют собой традиционные нетоксичные соли начального соединения, образованные, например, с нетоксичными неорганическими или органическими кислотами. Перечни
- 5 022669 пригодных солей можно найти у КеттдЮп'к РЬагтасеиИса1 8с1спес5. 17ΐ1ι еб., Маек РиЬйкЫпд Сотрапу, ΕαδΙοη. Ра., 1985, р. 1418 и 1оигпа1 оГ РЬагтасеиПса1 8с1епсе, 66, 2 (1977), каждая из которых включена в данное описание путем ссылки во всей ее полноте. Фраза фармацевтически приемлемый используется в данном описании для обозначения таких соединений, материалов, композиций и/или лекарственных форм, которые являются, в пределах контекста звукового медицинского диагноза, пригодными для применения в контакте с тканями человеческого существа и животных без избыточной токсичности, раздражения, аллергической реакции или другой проблемы или осложнения, с рациональным соотношением пользы/риска.
Методы синтеза.
Соединения по данному изобретению могут быть получены различными путями, известными специалисту в области органического синтеза. Соединения по данному изобретению могут быть синтезированы с применением описанных ниже способов, вместе с синтетическими методами, известными из уровня техники в области синтетической органической химии или их вариаций, как будет понятно специалистам в данной области.
Соединения по данному изобретению могут быть получены из легкодоступных начальных материалов, с использованием следующих общих способов и методик. Следует понимать, что в случае указания типичных или предпочтительных условий (т.е. температура реакции, длительность реакции, молярное соотношение реагентов, растворители, давление и т.п.) способа получения, могут также быть использованы другие условия процесса, если не указано противоположное. Оптимальные условия реакции могут варьировать для конкретных используемых реагентов или растворителей, но такие условия могут быть определены специалистом в данной области шаблонными методами оптимизации.
Контроль процессов, описанных в данном описании, может быть осуществлен в соответствии с любым пригодным способом, известным из уровня техники. Например, образование продукта может контролироваться спектроскопическими средствами, например спектроскопия ядерного магнитного резонанса (например, 1Н или 13С), спектроскопия в инфракрасной области, спектрофотомерия (например, в видимой или УФ-области) или масс-спектрометрия; или хроматографическими методами, например высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЕРХ) или тонкослойная хроматография. Соединения, полученные в ходе реакций, могут быть очищены любым пригодным способом, известным из уровня техники. Например, хроматография ВЭЖХ (среднее давление) на подходящем адсорбенте (например, силикагель, кремния диоксид и т.п.), или препаративная тонкослойная хроматография; дистилляция/сублимация, растирание или перекристаллизация.
Получение соединений может включать введение и удаление защитных групп для различных химических групп. Потребность во введении и удалении защитной группы, а также выбор соответствующих защитных групп может быть легко осуществлен специалистом в данной области. Химия защитных групп описана, например, в ^и18 апб Огеепе, Огеепе'к Рго1есйуе Огоирк ίη Огдашс Зуп1ке818, 41Н Еб., 1оЬп \УПеу & Зопк: №\ν Уогк, 2006, которая включена в данное описание путем ссылки во всей ее полноте.
Реакции способов, описанных в данном описании, могут осуществляться в подходящих растворителях, которые могут быть легко выбраны специалистом в области органического синтеза. Подходящие растворители могут в существенной мере не реагировать с начальными материалами (реагентами), промежуточными соединениями или продуктами при температурах, при которых осуществляются реакции, т.е. температурах, которые могут варьировать от температуры замерзания растворителя до температуры кипения растворителя. Реакция получения может быть осуществлена в растворителе или смеси более чем одного растворителя. В зависимости от стадии реакции может быть выбран подходящий растворитель(и) для конкретной указанной стадии реакции. Подходящие растворители включают воду, алканы (например, пентан, гексан, гептан, циклогексан и т.п. или смесь указанных растворителей), ароматические растворители (например, бензол, толуол, ксилен и т.п.), спирты (например, метанол, этанол, изопропанол и т.п.), эфиры (например, диалкиловые эфиры, трет-бутилметиловый эфир (МТБЭ), тетрагидрофуран (ТГФ), диоксан и т.п.), сложные эфиры (например, этилацетат, бутилацетат и т.п.), галогенированные растворители (например, дихлорметан (ДХМ), хлороформ, дихлорэтан, тетрахлорэтан), диметилформамид (ДМФА), диметилсульфоксид (ДМСО), ацетон, ацетонитрил (ΑΟΝ), гексаметилфосфорамид (ГМФА) и Ν-метилпирролидон (ΝΜΤ). Такие растворители могут применяться в водных или безводных формах.
Разделение рацемических смесей соединений может быть осуществлено любым из многочисленных способов, известных из уровня техники. Пример способа включает фракционную перекристаллизацию с использованием хиральной разделяющей кислоты, которая представляет собой оптически активную органическую кислоту, образующую соль. Подходящие разделяющие агенты для способов фракционной перекристаллизации представляют собой, например, оптически активные кислоты, например формы Ό- и Ь-винной кислоты, диацетилвинной кислоты, дибензоилвинной кислоты, миндальной кислоты, яблочной кислоты, молочной кислоты или различных оптически активных сульфокамфорных кислот. Разделение рацемических смесей может также быть осуществлено элюацией на колонке, заполненной оптически активным разделяющим агентом (например, динитробензоилфенилглицином). Подходящий состав смеси растворителей для элюации может быть определен специалистом в данной области.
- 6 022669
Соединения по изобретению могут быть получены, например, с использованием реакционных путей и способов, описанных ниже.
Способы и промежуточные соединения по данному изобретению пригодны для получения ингибиторов ШО. Общая схема получения соединений Р15 по изобретению показана на схеме 1.
Схема 1
Обращаясь к схеме 1, в изобретении предлагается способ получения соединений формулы Р15 или их солей, где К2 представляет собой С1, Вг, СР3, СН3 или ΟΝ; К3 представляет собой Н или Р и η равно 1 или 2, путем реакции соединения формулы Р13 или ее солей, где Рд1 представляет собой защитную группу для аминогруппы, с реагентом для удаления защитной группы с аминогруппы (стадия М), с получением соединения формулы Р14 или его соли; и реакции соединения формулы Р14 с основанием (стадия Ν), с получением соединения формулы Р15. Соединение формулы Р15 может быть очищено растиранием или перекристаллизацией с использованием таких растворителей, как, например, вода, этанол, МТБЭ или их комбинация.
В некоторых вариантах К2 представляет собой Вг, К3 представляет собой Р и η равно 1.
В некоторых вариантах К2 представляет собой Вг, К3 представляет собой Р и η равно 2.
В некоторых вариантах К2 представляет собой С1, К3 представляет собой Р и η равно 1.
В некоторых вариантах К2 представляет собой С1, К3 представляет собой Р и η равно 2.
В некоторых вариантах К2 представляет собой СР3, К3 представляет собой Р и η равно 1.
В некоторых вариантах К2 представляет собой СР3, К3 представляет собой Р и η равно 2.
В некоторых вариантах К2 представляет собой СР3, К3 представляет собой Н и η равно 1.
В некоторых вариантах К2 представляет собой СР3, К3 представляет собой Н и η равно 2.
В некоторых вариантах К2 представляет собой ΟΝ, К3 представляет собой Р и η равно 1.
Защитные группы для аминогруппы регулярно применяются в органическом синтезе для предупреждения нежелательных реакций аминогруппы при осуществлении целевого превращения. Защитные группы для аминогруппы позволяют легко осуществить ковалентное присоединение к атому азота, а также селективное отщепление от атома азота. Разнообразные защитные группы для аминогруппы, широко классифицированные как алкоксикарбонил (например, этоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил (Вос), бензилоксикарбонил (СЬ/). 9-флуоренилметилоксикарбонил (Ртос) и т.п.), ацил (например, ацетил (Ас), бензоил (Вг) и т.п.), сульфонил (например, метансульфонил, трифторметансульфонил и т.п.), арилалкил (например, бензил, дифенилметил, трифенилметил (тритил и т.п.), алкенилалкил (например, аллил, пренил и т.п.), диарилметиленил (например, ^<5Η5)^=Ν и т.п.) и силил (например, третбутилдиметилсилил, триизопропилсилил и т.п.), известные специалисту в данной области. Химия защитных групп для аминогруппы описана в \УШ5 αηά ΟΓββηβ, Сгсснс'к Рго1ссйус Огоирк ίη Огдашс δνηΐΗοδίδ, 4ΐ1ι Е6., р. 696-926, 1о1т \Уйсу & §опк: №\у Уогк, 2006. В некоторых вариантах Рд1 может представлять собой алкоксикарбонил (например, трет-бутоксикарбонил).
Защитные группы для аминогруппы, описанные выше, могут быть подходящим образом удалены с использованием многочисленных доступных реагентов для удаления защитной группы с аминогруппы, которые являются специфическими для разных групп, упомянутых выше, без воздействия на другие целевые фрагменты соединения. Группа трет-бутоксикарбонил может быть отщеплена (например, гидролизом) от атома азота, например, обработкой кислотой (например, трифторуксусной кислотой, толуолсульфоновой кислотой, хлористо-водородной кислотой и т.п.); комбинацией реагентов (например, смесь хлорангидрида уксусной кислоты и метанолы), которая, как известно, образует кислоту; или кислотой Льюиса (например, ВР3-Е12О). Группа бензилоксикарбонил может быть отщеплена (например, гидрогенолизом) от атома азота, например, обработкой водородом и катализатором (например, палладий-на-угле). В некоторых вариантах реагент для удаления защитной группы с аминогруппы может быть трифторуксусной кислотой. В некоторых вариантах реагент для удаления защитной группы с аминогруппы содержит трифторуксусную кислоту и >0,5 об.% воды, например >1,0 об.% воды, >1,5 об.% воды, >2,0 об.% воды, от приблизительно 2 до приблизительно 10 об.% воды, от приблизительно 10 до приблизительно 20 об.% воды или от приблизительно 20 до приблизительно 50 об.% воды. В некоторых вариантах реагент для
- 7 022669 удаления защитной группы с аминогруппы может быть смесью трифторуксусной кислоты и воды в объемном соотношении приблизительно 98:2. В некоторых вариантах реагент для удаления защитной группы с аминогруппы может быть хлористо-водородной кислотой, необязательно в растворителе (например, вода, ТГФ или диоксан). В таких вариантах хлористо-водородная кислота может быть прибавлена в концентрации приблизительно 4н., например приблизительно 1, приблизительно 2, приблизительно 3, приблизительно 5, приблизительно 6, приблизительно 7, приблизительно 8, приблизительно 9 или приблизительно 10н. В некоторых вариантах удаление защитной группы можно осуществлять в спирте (например, изопропанол). В некоторых вариантах стадию М (схема 1) можно осуществлять при температуре от приблизительно -10 до приблизительно 60°С, например от приблизительно -10 до приблизительно 0°С, от приблизительно 0 до приблизительно 25°С, от приблизительно 25 до приблизительно 45°С или от приблизительно 45 до приблизительно 60°С.
Основание может использоваться для превращения (например, гидролизом) оксадиазолонового кольца в Р14, чтобы открыть амидоксим в Р15, необязательно в растворителе (стадия Ν, схема 1). Защита амидоксима в форме оксадиазолона может быть подходящей для предупреждения побочных реакций гидроксильной группы или амидоксима в целом. Основание может быть или органическим основанием, например ациклическим амином (например, триэтиламин, диизопропилэтиламин (ДИПЭА) и т.п.), или циклическим амином (например, пирролидин, пиперидин и т.п.); или неорганическим основанием, например щелочью (например, ΝαΟΗ, ПОН, КОН, Мд(ОН)2 и т.п.). Основание может быть сделано доступным в форме смолы (например, АтЪетШе® и т.п.). В некоторых других вариантах основание может присутствовать в форме раствора в воде, например приблизительно 2н. раствора (например, приблизительно 0,5н. раствора, приблизительно 1н. раствора, приблизительно 1,5н. раствора, приблизительно 2,5н. раствора, от приблизительно 3 до приблизительно 5н. раствора, от приблизительно 5 до приблизительно 10н. раствора). В некоторых вариантах основание представляет собой гидроксид щелочного металла (например, гидроксид натрия). В некоторых вариантах основание может представлять собой 2н. раствор ΝαΟΗ в воде. В некоторых вариантах растворитель может быть метанолом или тетрагидрофураном (ТГФ). В некоторых вариантах стадию Ν (схема 1) можно осуществлять при температуре от приблизительно -10 до приблизительно 60°С, например от приблизительно -10 до приблизительно 0°С, от приблизительно 0 до приблизительно 25°С, от приблизительно 25 до приблизительно 45°С или от приблизительно 45 до приблизительно 60°С.
На стадии Ь (схема 1) соединение формулы Р13 может быть получено путем обработки соединения формулы Р12 или его соли Ρ§1-NΗ-сульфонилхлоридом, необязательно в растворителе, с последующей обработкой полученной смеси органическим основанием, с получением соединения формулы Р13. В ходе указанной стадии Ь (схема 1) первичный амин Р12 превращается в сульфонилмочевину Р13 с использованием защищенного амино-сульфонилхлорида (Ρ^-ΝΗ-δΟ^Ι). Защищенный аминосульфонилхлорид может быть получен и немедленно использован в реакции с Р12. Защитная группа может быть выбрана как любая из защитных групп, известных из уровня техники для защиты аминов или сульфонамидов (выше). В некоторых вариантах Рд1 может быть алкоксикарбонильной группой (например, трет-бутоксикарбонил). В таких вариантах алкоксикарбонил ΝΗ-сульфонилхлорид может быть получен реакцией спирта (например, этанол, трет-бутиловый спирт и т.п.) с хлорсульфонилизоцианатом (С18(О)^СО). Подходящие растворители для этой реакции включают, не ограничиваясь ими, галогенированные растворители, например дихлорметан и т.п. Органическое основание может быть любым основанием, которое служит для нейтрализации НС1, образованного в ходе реакции первичного амина, например Р12, и защищенного аминосульфонилхлорида. Органическое основание может включать ациклические третичные амины, например три(С1-6)алкиламин (например, триэтиламин, диизопропилэтиламин (ДИПЭА) и т.п.), циклические третичные амины (например, Ν-метилпиперидин, 1,4диазабицикло[2.2.2]октан (ДАБЦО) и т.п.). В некоторых вариантах органическим основанием может быть триэтиламин. В некоторых вариантах данную стадию можно осуществлять при температуре от приблизительно -10 до приблизительно 60°С, например от приблизительно -10 до приблизительно 0°С, от приблизительно 0 до приблизительно 25°С, от приблизительно 25 до приблизительно 45°С или от приблизительно 45 до приблизительно 60°С.
Органические соединения могут быть восстановлены до низшей степени окисления с использованием восстанавливающих агентов. Восстановление обычно включает добавление атомов водорода или удаление атомов кислорода из группы. Органические азиды, например Р11, могут быть восстановлены до аминов, например Р12 (стадия К, схема 1), добавлением водорода, в форме элементарного водорода или с использованием гидридного реагента (например, ΝαΒΗ4. ПА1Н4 и т.п.); с использованием трифенилфосфина; или с использованием комбинации натрия йодида, хлортриметилсилана и метанола. В некоторых вариантах соединение формулы Р12 может быть получено восстановлением соединения формулы Р11 или его соли. В некоторых вариантах восстановление можно осуществлять в присутствии йодида натрия, хлортриметилсилана и метанола. В некоторых вариантах молярное соотношение йодида натрия и хлортриметилсилана может составлять приблизительно 1,0, например приблизительно 0,9, приблизительно 0,95, приблизительно 1,0, приблизительно 1,05 или приблизительно 1,1. В некоторых вариантах хлортриметилсилан может быть прибавлен к смеси Р11, йодида натрия и метанола как раствор в метано- 8 022669 ле. В некоторых вариантах стадию К (схема 1) можно осуществлять при приблизительно комнатной температуре, например от приблизительно 10 до приблизительно 50°С, от приблизительно 15 до приблизительно 40°С, от приблизительно 20 до приблизительно 30°С или от приблизительно 25 до приблизительно 30°С.
Аминные соединения Р12 в некоторых случаях может быть сложно получить в существенной мере чистой форме по данным ВЭЖХ или ЯМР-спектроскопии и т.п. Без намерения связываться с теорией, считается, что некоторые из указанных аминов, возможно, сложно очищать хроматографией на силикагеле из-за увеличения высокого сродства по отношению к силикагелю или из-за нежелательного разложения в ходе очистки. В таких вариантах обращаясь к схеме 2, соединение формулы Р12 может быть очищено путем реакции соединения формулы Р12 с защитным агентом для аминогруппы, с получением соединения формулы Р12' или его соли, где Ρβ2Ν представляет собой защищенный амин. За введением защиты (стадия К') может следовать очистка соединения формулы Р12' с получением очищенного соединения формулы Р12', и реакция очищенного соединения формулы Р12' с агентом для удаления защитной группы с аминогруппы (стадия К), с получением очищенного соединения формулы Р12. Защитные агенты для аминогруппы и агенты для удаления защитной группы с аминогруппы известны специалисту в данной области, например, из \УШ5 и Стееие (там же). В некоторых вариантах защитный агент для аминогруппы представляет собой ди-трет-бутилдикарбонат (Вос2О). В таких вариантах Ρβ2Ν представляет собой трет-бутоксикарбонил-ΝΗ. В таких вариантах реагент для удаления защитной группы с аминогруппы представляет собой реагент, пригодный для удаления защитной группы Вос (выше). В таких вариантах реагент для удаления защитной группы с аминогруппы представляет собой кислоту (например, хлористо-водородная кислота, трифторуксусная кислота т.п.), необязательно в растворителе (например, вода, ТГФ или диоксан). В некоторых вариантах хлористо-водородная кислота может быть прибавлена в концентрации приблизительно 4н., например приблизительно 1, приблизительно 2, приблизительно 3, приблизительно 5, приблизительно 6, приблизительно 7, приблизительно 8, приблизительно 9 или приблизительно 10н. В некоторых вариантах снятия защиты можно осуществлять в спирте (например, изопропанол). В некоторых вариантах стадию К' или К можно осуществлять при температуре от приблизительно -10 до приблизительно 60°С, например от приблизительно -10 до приблизительно 0°С, от приблизительно 0 до приблизительно 25°С, от приблизительно 25 до приблизительно 45°С или от приблизительно 45 до приблизительно 60°С. Подходящие способы очистки известны специалисту в данной области и могут включать хроматографию, кристаллизацию, сублимацию и т.п. В некоторых вариантах очистку можно осуществлять хроматографией на силикагеле. В целом чистоту соединений определяют физическими способами, например измерением температуры плавления (в случае твердого вещества), получения ЯМР-спектра или разделения методом ВЭЖХ. Если температура плавления снижается, если нежелательные сигналы в ЯМР-спектре уменьшены или если внешние пики на хроматограмму ВЭЖХ удалены, соединение можно назвать очищенным. В некоторых вариантах соединения являются в существенной мере очищенными.
Схема 2
В некоторых вариантах соединение формулы Р11 (схема 1) может быть получено путем обработки соединения формулы Р10 или его соли, где Ь1 может быть выбран из алкилсульфонила (например, метансульфонил), галогеналкилсульфонила (например, трифторметансульфонил), арилсульфонила (например, толуолсульфонил) и т.п.; с азидным реагентом, с получением соединения формулы Р11 (стадия I). В некоторых вариантах Ь1 представляет собой алкилсульфонил. Азидные реагенты включают любой реагент, способный к продуцированию нуклеофильного иона азида. Примеры азидных реагентов включают азиды щелочных металлов (например, азид натрия, азид калия и т.п.). В некоторых необязательных вариантах азидный реагент, например азид натрия, может использоваться в комбинации с йодидом натрия. Пригодными растворителями для такого превращения являются полярные растворители, в том числе ДМФА, ДМСО, ΝΜΡ и т.п. В некоторых вариантах стадию I можно осуществлять в ДМФА. Стадию I можно осуществлять при повышенной температуре, например от приблизительно 40 до приблизительно 100°С, от приблизительно 50 до приблизительно 90°С или от приблизительно 60 до приблизительно 80°С. В некоторых вариантах стадию I можно осуществлять приблизительно при 50°С. В некоторых вариантах стадию I можно осуществлять приблизительно при 85°С.
Соединение формулы Р10 или его соль может быть получено в результате последовательности стадий, показанных на схеме 3. Получение промежуточного соединения, 4-амино-№-гидрокси-1,2,5оксадиазол-3-карбоксимидамида Р2 описано в I. Не1егосус1. СЬет. (1965), 2, 253, которая включена в
- 9 022669 данное описание путем ссылки во всей ее полноте, и его превращение в хлороксим Р3 описано в δνηΐΐι. Соттип. (1988), 18, 1427, которая включена в данное описание путем ссылки во всей ее полноте. Амины (например, первичные или вторичные амины, в том числе амины, которые содержат защищенную функциональную группу, например этиламин, 2-метоксиэтиламин или диметиламин) могут сочетаться с хлороксимом Р3, необязательно в растворителе (например, этилацетате), со следующим добавлением органического основания (например, триэтиламина или ДИПЭА, для гашения НС1, образующегося в ходе реакции), с получением амидоксима соединения Р4. Реорганизация таких соединений, как Р4, с целью перемещения аминогруппы на кольцевой атом углерода и аминогруппы на атом углерода оксима, с получением соединений Р5, может быть осуществлена обработкой Р4 основанием (например, КОН, ΝαΟΗ, ЫОН, Мд(ОН)2, А1(ОН)3 и т.п.), необязательно в растворителе (например, вода, этанол, этиленгликоль и т.п.), и кипячением реакционной смеси с обратным холодильником при повышенной температуре, например приблизительно 70, приблизительно 80, приблизительно 90, приблизительно 100, приблизительно 110, приблизительно 120, приблизительно 130, приблизительно 140, приблизительно 150, приблизительно 160, приблизительно 170, приблизительно 180, приблизительно 190 или приблизительно 200°С. Амидоксим Р5 может быть активирован снова как хлороксим Р6 добавлением Р5 к кислой водной смеси, содержащей хлористо-водородную кислоту и, необязательно, уксусную кислоту. В этом способе превращения Р5 на Р6, кислая смесь Р5 может быть нагрета до температуры приблизительно 45°С, например приблизительно 30, приблизительно 40, приблизительно 50 или приблизительно 60°С, для растворения. Хлорид натрия может быть прибавлен к полученному раствору, а затем обработан нитритным реагентом, который может необязательно присутствовать как водный раствор, при температуре ниже приблизительно 0°С, например ниже приблизительно -10, ниже приблизительно -5, ниже приблизительно 5 или ниже приблизительно 10°С. Нитритный реагент способен образовывать нитрит-анион. Нитритные реагенты включают нитрит щелочного металла (например, нитрит натрия, нитрит калия и т.п.) и органический нитрит (например, тетраэтиламмония нитрит), который включает органический катион. В некоторых вариантах этилацетат, ТГФ или диоксан может использоваться как сорастворитель. Хлороксим Р6 может сочетаться с ароматическими аминами, например производными анилина, необязательно в полярном растворителе (например, метанол, вода, этанол и т.п.) при повышенной температуре, например приблизительно 50, приблизительно 60, приблизительно 70, приблизительно 80, приблизительно 90, приблизительно 100, приблизительно 110 или приблизительно 120°С, необязательно в присутствии неорганического основания (например, КНСО3, NаНСΟ3), с получением ариламидоксима Р7. В некоторых вариантах неорганическое основание может присутствовать в форме водного раствора. В некоторых вариантах неорганическое основание может быть прибавлено к реакционной смеси при повышенной температуре. Функциональная группа амидоксим Р7 далее может быть защищена как оксадиазолон с использованием 1,1'-карбонилдиимидазолов (КДИ) в растворителе (например, этилацетат, диоксан, ТГФ и т.п.) при повышенной температуре, например приблизительно 50, приблизительно 60, приблизительно 70, приблизительно 80, приблизительно 90 или приблизительно 100°С. Метоксигруппа Р8 далее может быть преобразована в гидроксильную группу в Р9 с использованием агента для удаления защитной группы с метоксигруппы, известного специалисту в данной области, например, см. \УШ5 апб Огеепе, Огеепе'к РгоЮсОус Огоирк щ Огдапю §уп1Ьек15, 4ΐ1ι Еб., р. 24-30, 1оЬп \УПеу & §опз: №ν Уогк, 2006. Например, добавлением трибромида бора к холодному (например, от приблизительно -78 до приблизительно 25°С, например от приблизительно -78 до приблизительно 10°С, от приблизительно -78 до приблизительно 0°С, от приблизительно -78 до приблизительно -10°С, от приблизительно 0 до приблизительно 25°С или от приблизительно 0 до приблизительно 10°С) раствору Р8, необязательно в растворителе, например галогенированном растворителе (например, ДХМ, хлороформ и т.п.) или этилацетате. Первичная гидроксильная группа в Р9 далее может быть активирована как группа Ь1О- (см. Р10), которая уходит последовательной обработкой Ь1С1, необязательно в растворителе (например, этилацетат или ДХМ), и органическим основанием, чтобы нейтрализовать образованный НС1 (например, триэтиламин или ДИПЭА). Ь1, например, может быть выбран из алкилсульфонила (например, метансульфонил), галогеналкилсульфонила (например, трифторметансульфонил), арилсульфонила (например, толуолсульфонил) и т.п. Соединение Р10 далее может быть обработано каким-либо нуклеофилом для вытеснения (например, по механизму δΝ2) группы Ь!О, которая уходит.
- 10 022669
Схема 3
Альтернативно, соединение формулы Р12 может быть получено в результате последовательности стадий, изображенных на схеме 4.
Схема 4
(Ο^ΐίΙΗΤΦΚίΡΓ^ιΗ
ИВУ
Обращаясь к схеме 4, в некоторых вариантах соединение формулы Р12 может быть получено путем реакции соединения формулы Р24 или его соли, где Ρβ3Ν представляет собой защищенный амин (например, (СбНДзС-ΝΗ, (^Η5)^=Ν и т.п.); с агентом для удаления защитной группы с аминогруппы, с получением соединения формулы Р12. Обработка соединения Р24 с целью замены Ρβ3Ν на ΝΗ2 (стадия О) может быть осуществлена способами удаления защитной группы с конкретного амина, известными специалисту в данной области, например, описанными в АШк αηά Сгеепе, Сгеепе'к Рго1есОуе Сгоирк ίη Огдашс 8уйЬе515, 4ΐ1ι Εά., р. 696-926, άοΐιη АПеу & δοηκ: Νον Уогк, 2006. В некоторых вариантах если Ρβ3Ν представляет собой (С6Н5)2С=Ы, агент для удаления защитной группы может представлять собой кислоту, например органическую кислоту (например, трифторуксусная кислота, метансульфоновая кислота и т.п.) или неорганическую кислоту (например, хлористо-водородная кислота); водород и палладий; или кислотный гидроксиламин (МН2ОН). В некоторых вариантах если Ρβ3Ν представляет собой -(С6Н5)3СΝΗ, агент для удаления защитной группы может включать органическую кислоту (например, метансульфоновая кислота, трифторуксусная кислота и т.п.) и необязательно органическое соединение силана; водород и палладий; или натрий в нашатырном спирте. Органические соединения силана представляют собой соединения, которые содержат по меньшей мере одну связь δί-Η, и остальные группы, присоединенные к кремнию, представляют собой алкил, арил или их комбинацию. Примеры органических соединений силана включают триалкилсилан (например, три(изопропил)силан)), триарилсилан (например, трифенилсилан) или дифенилметилсилан. Стадию О можно осуществлять при температуре от приблизительно -10 до приблизительно 60°С, например от приблизительно -10 до приблизительно 0°С, от приблизительно 0 до приблизительно 25°С, от приблизительно 25 до приблизительно 45°С или от приблизительно 45 до приблизительно 60°С.
Соединения Р24, которые представляют собой защищенные вторичные амины, могут быть получены реакцией Мицунобу спиртов Р25 с защищенными первичными аминами Р22 в присутствии реагента сочетания (стадия Р). Реагент сочетания может быть комбинацией третичного фосфина, такого как триарилфосфин (например, трифенилфосфин), или триалкилфосфина (например, трибутилфосфин) и диалкилазодикарбоксилата. Диалкилазодикарбоксилаты имеют общую структуру КООС-М=Ы-СООК, где К может быть алкильной группой (например, диизопропилазодикарбоксилат, диэтилазодикарбоксилат или
- 11 022669 ди-п-хлорбензилазодикарбоксилат). Без намерения связываться с теорией, считается, что защита аминогруппы с помощью трифторацетильного фрагмента (например, в Р22) предупреждает побочные реакции и улучшает выход вторичного амина Р24. Гидроксильная группа спиртов, например Р25, может быть активирована в присутствии реагента сочетания. Аминный нуклеофил может вытеснять активированную гидроксильную группу с образованием вторичного амина. Реакцию Мицунобу можно осуществлять в растворителе, например эфире, таком как ТГФ, диоксан, диалкиловый эфир и т.п.; галогенированных растворителях, например дихлорметане, хлороформе и т.п.; неполярных растворителях, например бензоле, толуоле и т.п.; полярных апротонных растворителях, например ДМФА, ГМФА и т.п. В некоторых вариантах соединение формулы Р24 может быть получено путем обработки соединения формулы Р22 или его соли соединением формулы Р25 или его солью и реагентом сочетания с получением соединения формулы Р24. В некоторых вариантах эту стадию можно осуществлять при температуре от приблизительно -10 до приблизительно 60°С, например от приблизительно -10 до приблизительно 0°С, от приблизительно 0 до приблизительно 25°С, от приблизительно 25 до приблизительно 45°С или от приблизительно 45 до приблизительно 60°С.
Соединения Р22 могут быть получены в ходе двухстадийного способа (стадии О' и О) из соединений Р21. Соединения Р21 могут быть обработаны 1,1'-карбонилдиимидазолом (КДИ), необязательно в растворителе (например, этилацетате или ТГФ), при повышенной температуре, например приблизительно 50°С, например приблизительно 60, приблизительно 65, приблизительно 70, приблизительно 80 или приблизительно 90°С, для превращения амидоксима в соединениях Р21 в оксадиазолон, присутствующий в соединениях Р26. Указанные соединения Р26, в свою очередь, могут быть обработаны ангидридом трифторуксусной кислоты, необязательно в растворителе (например, ДХМ, ТГФ, диоксане или этилацетате) в присутствии органического основания (например, пиридин, триэтиламин, ДИПЭА и т.п.), с получением соединений Р22. В некоторых вариантах соединение формулы Р22 может быть получено путем обработки соединения формулы Р21 или его соли карбонилдиимидазолом (КДИ) с образованием соединения формулы Р26 или его соли, с последующей обработкой соединения формулы Р26 ангидридом трифторуксусной кислоты, с получением соединения формулы Р22.
Схема 5
Обращаясь к схеме 5 (стадия Р') и базируясь на упомянутом выше описании реакции Мицунобу, в другом аспекте изобретения предлагается способ получения соединений формулы Р8 или их солей, где К2, К3 и η определены в данном описании, который включает реакцию соединения формулы Р22 или его соли и соединения формулы Р25' или его соли с реагентом сочетания, необязательно в растворителе (например, ТГФ, диалкиловый эфир или дихлорметан) с образованием соединения формулы Р8. В некоторых вариантах эту стадию можно осуществлять при температуре от приблизительно -10 до приблизительно 60°С, например от приблизительно -10 до приблизительно 0°С, от приблизительно 0 до приблизительно 25°С, от приблизительно 25 до приблизительно 45°С или от приблизительно 45 до приблизительно 60°С.
Схема 6
На схеме 6 показан альтернативный путь введения сульфонамидной группы в аминное соединение Р12. Обработка Р12 сульфамидом в присутствии основания (стадия К), например органического основания, которое может представлять собой гетероциклическое основание (например, пиридин) или триалкиламин (например, триэтиламин, ДИПЭА и т.п.), каждое из которого необязательно может использоваться как растворитель для данного превращения, может давать сульфонилмочевину, например Р14. Указанную реакцию можно осуществлять при повышенной температуре, например приблизительно 130°С, например приблизительно 100, приблизительно 110, приблизительно 120, приблизительно 130 или приблизительно 140°С. Такое нагревание может быть с успехом применено с использованием облучения микроволнами. Облучение микроволнами можно осуществлять в коммерческой микроволновой печи (например, Ιηίΐίαΐοτ 3 от Вю1аде) с одним режимом работы. Из соединений Р14, которые содержат оксадиазолоновое кольцо, может быть удалена защитная группа (например, гидролизом) с образованием целевых амидоксимов Р15 в присутствии основания (стадия Ν'). Основание может быть или органическим осно- 12 022669 ванием, например ациклическим амином (например, триэтиламин, диизопропилэтиламин (ДИПЭА) и т.п.) или циклическим амином (например, пирролидин, пиперидин и т.п.); или неорганическим основанием, например щелочью (например, ΝαΟΗ, ЫОН, КОН, Мд(ОН)2 и т.п.). Основание может быть сделано доступным в форме смолы (например, АтЪегШе® и т.п.). В некоторых других вариантах основание может присутствовать в форме раствора в воде, например приблизительно 2н. раствора (например, приблизительно 0,5н. раствора, приблизительно 1н. раствора, приблизительно 1,5н. раствора, приблизительно 2,5н. раствора, от приблизительно 3 до приблизительно 5н. раствора, от приблизительно 5 до приблизительно 10н. раствора). В некоторых вариантах основание может быть гидроксидом щелочного металла (например, гидроксидом натрия). В некоторых вариантах основание может быть 2н. раствором ΝαΟΗ в воде. В некоторых вариантах растворитель может быть метанолом или тетрагидрофураном (ТГФ). В некоторых вариантах удаление защитной группы можно осуществлять при температуре от приблизительно -10 до приблизительно 60°С, например от приблизительно -10 до приблизительно 0°С, от приблизительно 0 до приблизительно 25°С, от приблизительно 25 до приблизительно 45°С или от приблизительно 45 до приблизительно 60°С. Таким образом, в данном аспекте изобретения предлагается способ получения соединений формулы Р15 или их солей, где К2, К3 и η являются такими, как определено в данном описании, который включает реакцию соединения формулы Р12 или его соли с сульфамидом и органическим основанием с образованием соединения формулы Р14 или его соли, и реакцию соединения формулы Р14 или его соли с основанием с получением соединения формулы Р15.
В данном изобретении дополнительно предлагается соединение формулы Р9, Р12 и Р14 или его соль, где К2 представляет собой С1, Вг, СР3, СН3 или СУ К3 представляет собой Н или Р и η равно 1 или 2.
В некоторых вариантах К2 представляет собой Вг, К3 представляет собой Р и η равно 1.
В некоторых вариантах К2 представляет собой Вг, К3 представляет собой Р и η равно 2.
В некоторых вариантах К2 представляет собой С1, К3 представляет собой Р и η равно 1.
В некоторых вариантах К2 представляет собой С1, К3 представляет собой Р и η равно 2.
В некоторых вариантах К2 представляет собой СР3, К3 представляет собой Р и η равно 1.
В некоторых вариантах К2 представляет собой СР3, К3 представляет собой Р и η равно 2.
В некоторых вариантах К2 представляет собой СР3, К3 представляет собой Н и η равно 1.
В некоторых вариантах К2 представляет собой СР3, К3 представляет собой Н и η равно 2.
В некоторых вариантах К2 представляет собой СН3, К3 представляет собой Р и η равно 1.
В некоторых вариантах К2 представляет собой ΟΝ, К3 представляет собой Р и η равно 1.
Схема 9
Соединение Р28 может быть получено, как описано на схеме 9. Хлороксим Р6 (схема 1, выше) может сочетаться с гетероциклическими аминами (например, соединение формулы Р38), необязательно в полярном растворителе (например, метанол, вода, этанол и т.п.), в присутствии основания, например неорганического основания или органического основания (например, Εΐ3Ν, пиридин или ДИПЭА), с получением ариламидоксима Р36 (стадия Р). В некоторых вариантах превращение Р6 в Р36 можно осуществлять при таких температурах, как, например, приблизительно 10, приблизительно 20, приблизительно 30, приблизительно 40, приблизительно 50, приблизительно 60 или приблизительно 90°С. В некоторых вариантах неорганическое основание может присутствовать в форме водного раствора. В некоторых вариантах неорганическое основание может быть прибавлено к реакционной смеси при повышенной температуре. Амидоксимовая функциональная группа Р36 далее может быть защищена как оксадиазолон с использованием 1,1'-карбонилдиимидазолов (КДИ) в растворителе (например, этилацетате, диоксане,
- 13 022669
ТГФ и т.п.) при повышенной температуре, например приблизительно 50, приблизительно 60, приблизительно 70, приблизительно 80, приблизительно 90 или приблизительно 100°С (стадия С). Метоксигруппа Р35 далее может быть преобразована в гидроксильную группу в Р34 способами, известными специалисту в данной области для удаления защитной группы с метоксигруппы (стадия Н'), например, как описано в \УШ5 апб Сгеепе, Сгеепе'к Рго1есйуе Сгоирк ίη Огдашс БуШНемь 41П Еб., р. 24-30, ίοΐιη \УПсу & 8оп5: №\у Уогк, 2006. Например, добавлением трибромида бора к холодному (например, от приблизительно -78 до приблизительно 25°С, например от приблизительно -78 до приблизительно 10°С, от приблизительно -78 до приблизительно 0°С, от приблизительно -78 до приблизительно -10°С, от приблизительно 0 до приблизительно 25°С или от приблизительно 0 до приблизительно 10°С) раствору Р35, необязательно в растворителе, например галогенированном растворителе (например, ДХМ, хлороформ и т.п.) или этилацетате. Первичная гидроксильная группа в Р34 далее может быть активирована как группа Ь1О- (см. стадию I', Р32), которая уходит, последовательной обработкой Ь1С1, необязательно в растворителе (например, этилацетат или ДХМ), и органическом основании для нейтрализации образующегося НС1 (например, триэтиламин или ДИПЭА). В соединениях Р32, Ь1 может быть выбран из алкилсульфонила (например, метансульфонил), галогеналкилсульфонила (например, трифторметансульфонил), арилсульфонила (например, толуолсульфонил) и т.п. Соединение Р32 далее может быть обработано какимлибо нуклеофилом для вытеснения 8,2 группы Ь1О, которая уходит. В некоторых вариантах эту стадию можно осуществлять при температуре от приблизительно -10 до приблизительно 60°С, например от приблизительно -10 до приблизительно 0°С, от приблизительно 0 до приблизительно 25°С, от приблизительно 25 до приблизительно 45°С или от приблизительно 45 до приблизительно 60°С.
Если нуклеофил представляет собой ион азида, Р32 дает Р31 (стадия ί'). Азидные реагенты включают любой реагент, способный к продуцированию нуклеофильного иона азида. Примеры азидных реагентов включают азиды щелочных металлов (например, азид натрия, азид калия). В некоторых необязательных вариантах азидный реагент, например азид натрия, может использоваться в комбинации с йодидом натрия. Подходящими растворителями для такого превращения являются полярные растворители, в том числе ДМФА, ДМСО, ΝΜΡ и т.п. В некоторых вариантах эту стадию можно осуществлять в ДМФА. В некоторых вариантах эту стадию можно осуществлять при повышенной температуре, например, от приблизительно 40 до приблизительно 100°С, от приблизительно 50 до приблизительно 90°С или от приблизительно 60 до приблизительно 80°С. В некоторых вариантах эту стадию можно осуществлять при 50°С. В некоторых вариантах эту стадию можно осуществлять при 85°С. Органические азиды, например Р31, могут быть восстановлены до органических аминов, таких как Р29, добавлением водорода, в форме элементарного водорода; с использованием гидридного реагента (например, ,аВН4, Ь1А1Н4 и т.п.); с использованием трифенилфосфина; или с использованием комбинации йодида натрия, хлортриметилсилана и метанола (стадия К'). В некоторых вариантах восстановление можно осуществлять в присутствии йодида натрия, хлортриметилсилана и метанола. В некоторых вариантах восстановление можно осуществлять приблизительно при комнатной температуре, например от приблизительно 10 до приблизительно 50°С, от приблизительно 15 до приблизительно 40°С, от приблизительно 20 до приблизительно 30°С или от приблизительно 25 до приблизительно 30°С. В некоторых вариантах молярное соотношение йодида натрия и хлортриметилсилана может составлять приблизительно 1,0, например приблизительно 0,9, приблизительно 0,95, приблизительно 1,0, приблизительно 1,05 или приблизительно 1,1. В некоторых вариантах хлортриметилсилан может быть прибавлен к смеси Р31, йодида натрия и метанола в виде раствора в метаноле.
Обработка Р29 сульфамидом в присутствии основания, например органического основания, которое может быть гетероциклическим основанием (например, пиридин) или триалкиламином (например, триэтиламин, ДИПЭА и т.п.), каждое из которых может необязательно использоваться как растворитель для данного превращения, дает сульфонилмочевину, такую как Р30 (стадия К'). Указанную реакцию можно осуществлять при повышенной температуре, например приблизительно 130°С, например приблизительно 100, приблизительно 110, приблизительно 120, приблизительно 130 или приблизительно 140°С. Такое нагревание может быть соответствующим образом осуществлено с использованием облучения микроволнами. Облучение микроволнами можно осуществлять в коммерческой микроволновой печи (например, 1шба1ог 3 от Вю1аде), которая работает в одном режиме. Из соединений Р30, которые содержат оксадиазолоновое кольцо, может быть удалена защитная группа (например, гидролизом) с образованием целевых амидоксимов Р28 в присутствии основания (стадия Ν'). Основание может быть или органическим основанием, таким как ациклические амины (например, триэтиламин, диизопропилэтиламин (ДИПЭА) и т.п.) или циклические амины (например, пирролидин, пиперидин и т.п.); или неорганическим основанием, таким как щелочь (например, ΝαΟΗ, ЫОН, КОН, Мд(ОН)2 и т.п.). Основание может быть сделано доступным в форме смолы (например, АтЪегШе® и т.п.). В некоторых других вариантах основание может присутствовать в форме раствора в воде (водное основание), например приблизительно 2н. раствора (например, приблизительно 0,5н. раствора, приблизительно 1н. раствора, приблизительно 1,5н. раствора, приблизительно 2,5н. раствора, от приблизительно 3 до приблизительно 5н. раствора, от приблизительно 5 до приблизительно 10н. раствора). В некоторых вариантах основание может быть гидроксидом щелочного металла (например, гидроксид натрия). В некоторых вариантах основание может быть
- 14 022669
2н. раствором ΝαΟΗ в воде. В некоторых вариантах растворитель может быть метанолом или тетрагидрофураном (ТГФ). В некоторых вариантах удаление защитной группы можно осуществлять при температуре от приблизительно -10 до приблизительно 60°С, например от приблизительно -10 до приблизительно 0°С, от приблизительно 0 до приблизительно 25°С, от приблизительно 25 до приблизительно 45°С или от приблизительно 45 до приблизительно 60°С.
Соответственно в другом аспекте изобретения предлагается способ получения соединений формулы Р28 или их солей, где К4 представляет собой Р, С1, Вг или I и η равно 1 или 2, который включает реакцию соединения формулы Р29 или его соли с сульфамидом и органическим основанием, с образованием соединения формулы Р30 или его соли, и реакцию соединения формулы Р30 с основанием, с получением соединения формулы Р28.
В некоторых вариантах К4 представляет собой С1 и η равно 1.
В некоторых вариантах К4 представляет собой Вг и η равно 1.
В некоторых вариантах реакция соединения формулы Р29 дополнительно включает нагревание реакционной смеси (например, с использованием облучения микроволнами).
В другом аспекте изобретения предлагается способ получения соединения формулы Р29 восстановлением соединения формулы Р31 или его соли. В некоторых вариантах восстановление можно осуществлять с использованием комбинации йодида натрия, хлортриметилсилана и метанола.
В другом аспекте изобретения соединение формулы Р31 может быть получено путем обработки соединения формулы Р32 или его соли, где Ь1 выбран из алкилсульфонила, галогеналкилсульфонила и арилсульфонила; азидным реагентом, с получением соединения формулы Р31.
В данном описании термин алкил, при использовании отдельно или вместе с дополнительными терминами, которые обозначают фрагменты, обозначает насыщенную углеводородную, линейную или разветвленную группу, содержащую от 1 до 6 атомов углерода, от 1 до 4 атомов углерода или от 1 до 3 атомов углерода. Примеры алкильных групп включают метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил и т.п.
В данном описании термин алкенил обозначает алкильную группу, содержащую одну или больше двойных углерод-углеродных связей. Примеры алкенильных групп включают этенил (винил), пропенил и т.п.
В данном описании термин арил обозначает ароматическую углеводородную группу, которая может быть моно- или полициклической и содержит от 6 до 14 атомов углерода. Примеры арильной группы включают фенил, нафтил, антраценил, фенантренил, инданил, инденил и т.п.
В данном описании термин галогеналкил при использовании отдельно или вместе с дополнительным фрагментом обозначает алкильную группу, замещенную одним или больше атомами галогена, независимо выбранными из Р, С1, Вг и I. Примеры галогеналкильных групп включают СР3, СНР2, СН2СР3 и т.п.
В данном описании термин алкокси обозначает группу -Ο-алкил. Примеры алкоксильных групп включают метокси, этокси, пропокси (например, н-пропокси и изопропокси), трет-бутокси и т.п.
В данном описании алкиламин обозначает аминогруппу (ΝΗ2), замещенную алкильной группой. Примеры алкиламинных групп включают метиламин, гексиламин и т.п.
В данном описании триалкиламин обозначает атом азота, замещенный тремя алкильными группами. Примеры триалкиламинных групп включают триметиламин, триэтиламин и т.п.
В данном описании термин алкоксикарбонил обозначает СО, замещенный алкоксильной группой: -С(О)-О-алкил. Примеры алкоксикарбонильных групп включают этоксикарбонил, трет-бутоксикарбонил (Вое), бензилоксикарбонил (С’Ь/). 9-флуоренилметилоксикарбонил (Ртос) и т.п.
В данном описании термин алкилсульфонил обозначает сульфонильную группу, замещенную алкильной группой: алкил-8(О)2-. Примеры алкилсульфонильных групп включают метансульфонил, этансульфонил и т.п.
В данном описании термин галогеналкилсульфонил обозначает сульфонильную группу, замещенную галогеналкильной группой. Примеры галогеналкилсульфонильных групп включают трифторметансульфонил, 1,1,1-трифторетансульфонил и т.п.
В данном описании термин арилсульфонил обозначает сульфонильную группу, замещенную арильной группой или замещенной арильной группой, где заместители в арильной группе выбраны из галогена, нитро, С1-4 алкила и С1-4 галогеналкила.
В данном описании термин гетероциклическое основание обозначает 4-14-членный, необязательно замещенный гетероцикл, где по меньшей мере один атом кольца представляет собой атом азота. Гетероциклическое основание может быть ароматическим или неароматическим. Примеры гетероциклических оснований включают пиридин, пирролидин, пиперидин, морфолин и т.п. Примеры заместителей в гетероцикле включают Р, С1, Вг, С1-4 алкил и С1-4 галогеналкил.
Способы применения
Соединения по изобретению могут ингибировать активность фермента индоламин-2,3диоксигеназы (ГОО). Например, соединения по изобретению могут быть применены для ингибирования активности ГОО в клетке или в организме индивидуума, который нуждается в модуляции фермента, пу- 15 022669 тем введения ингибирующего количества соединения по изобретению.
В данном изобретении дополнительно предлагаются способы ингибирования разложения триптофана в системе, содержащей клетки, которые экспрессируют ГО0, например, в ткани, живом организме или культуре клеток. В некоторых вариантах данного изобретения предлагаются способы изменения (например, увеличения) внеклеточных уровней триптофана у млекопитающего путем введения эффективного количества соединения или композиции, предложенной в данном описании. Способы измерения уровней триптофана и разложения триптофана шаблонно известные из уровня техники.
В данном изобретении дополнительно предлагаются способы ингибирования иммуносупрессии, например опосредствованной ГО0 иммуносупрессии, у больного путем введения больному эффективного количества соединения или композиции, заявленной в данном изобретении. Опосредствованная ГО0 иммуносупрессия связана, например, с различными видами рака, ростом опухоли, метастазом, вирусной инфекцией, репликацией вируса и т.п.
В данном изобретении дополнительно предлагаются способы лечения заболеваний, связанных с активностью или экспрессией, в том числе аномальной активностью и/или избыточной экспрессией ГО0 у индивидуума (например, больного) путем введения индивидууму, который нуждается в таком лечении, терапевтически эффективного количества или дозы соединения по данному изобретению или его фармацевтической композиции. Примеры заболеваний могут включать любое заболевание, расстройство или состояние, которое прямо или косвенно связано с экспрессией или активностью фермента ГО0, например избыточной экспрессией или аномальной активностью. Связанное с ГО0 заболевание может также включать какое-либо заболевание, расстройство или состояние, которое может быть предупреждено, облегчено или излечено путем модуляции активности фермента. Примеры связанных с ГО0 заболеваний включают рак, вирусную инфекцию, например ВИЧ-инфекцию, инфекцию вирусом гепатита С, депрессию, нейродегенеративные расстройства, например болезнь Альцгеймера и болезнь Хантингтона, травму, возрастную катаракту, пересадку органа (например, отторжение пересаженного органа) и аутоиммунные заболевания, в том числе астму, ревматоидный артрит, рассеянный склероз, аллергическое воспаление, воспалительное заболевание кишечника, псориаз и красную системную волчанку. Примеры разных видов рака, которые поддаются лечению способами по данному изобретению, включают рак ободочной и прямой кишки, поджелудочной железы, молочной железы, предстательной железы, легкого, мозга, яичника, шейки матки, яичка, почки, головы и шеи, лимфому, лейкоз, меланому и т.п. Соединения по изобретению могут также быть пригодными для лечения ожирения и ишемии.
В данном описании термин клетка обозначает клетку, которая находится ίη νίίτο, ех νίνο или ίη νίνο. В некоторых вариантах клетка ех νίνο может быть частью образца ткани, полученного из организма, например, млекопитающего. В некоторых вариантах клетка ίη νίνο может быть клеткой в культуре клеток. В некоторых вариантах клетка ίη νίνο представляет собой клетку, живущую в организме, например, млекопитающего.
В данном описании термин обеспечение контакта (контакт) обозначает сочетание указанных фрагментов в системе ίη νίίτο или в системе ίη νίνο. Например, контакт фермента ГО0 с соединением по изобретению включает введение соединения по данному изобретению индивидууму или больному, например человеку, организм которого содержит ГО0, а также, например, введение соединения по изобретению в образец, содержащий клеточный или очищенный препарат, который содержит фермент ГО0.
В данном описании термины индивидуум или больной (пациент) употребляются равнозначным образом и обозначают любое животное, в том числе млекопитающих, предпочтительно мышей, крыс, других грызунов, кроликов, собак, котов, свиней, крупный рогатый скот, овец, коней или приматов, и наиболее предпочтительно человека.
В данном описании фраза терапевтически эффективное количество обозначает количество активного соединения или фармацевтического средства, которое вызывает биологический или медицинский ответ в ткани, системе, организме животного, индивидууму или человека, предусмотренный исследователем, ветеринаром, врачом или другим клиническим специалистом.
В данном описании термин лечение обозначает 1) профилактику заболевания; например профилактику заболевания, состояния или расстройства у индивидуума, который может быть склонным к заболеванию, состоянию или расстройству, но еще не испытывает или у которого не проявляется патология или симптомы заболевания; 2) подавление заболевания; например подавление заболевания, состояния или расстройства у индивидуума, который испытывает или у которого проявляется патология или симптомы заболевания, состояния или расстройства (т.е. остановка последующего развития патологии и/или симптомов заболевания); или 3) улучшение состояния при заболевании; например облегчение заболевания, состояния или расстройства у индивидуума, который испытывает или у которого проявляется патология или симптомы заболевания, состояния или расстройства (т.е. обращение патологии и/или симптомов).
Фармацевтические композиции и лекарственные формы.
При применении в качестве фармацевтических средств соединения по изобретению можно вводить в форме фармацевтических композиций, которые представляют собой комбинацию соединения по изобретению и фармацевтически приемлемого носителя. Указанные композиции в известной степени могут
- 16 022669 быть получены хорошо известными в фармацевтической области способами и могут быть введены различными способами в зависимости от предусмотренного местного или системного лечения, и от участка, который подлежит лечению. Введение может быть местным нанесением (в том числе в глаза и на слизистые оболочки, в том числе интраназальное, вагинальное и ректальное введение), легочным (например, ингаляцией или инсуффляцией порошков или аэрозолей, в том числе с помощью небулайзера; интратрахеальным, интраназальным, эпидермальным и трансдермальным), глазным, пероральным или парентеральным введением. Способы введения в глаза могут включать местное нанесение (глазные капли), субконъюнктивальную, периокулярную или интравитреальную инъекцию или введение с помощью баллонного катетера или глазных вставок, хирургически размещенных в конъюнктивальном мешочке. Парентеральное введение включает внутривенную, внутриартериальную, подкожную, внутрибрюшную или внутримышечную инъекцию или инфузию; или интракраниальное, например интратекальное или интравентрикулярное введение. Парентеральное введение может осуществляться в форме однодозового большого болюса или может осуществляться, например, насосом для непрерывной перфузии. Фармацевтические композиции и препараты для местного применения могут включать трансдермальные пластыри, мази, лосьоны, кремы, гели, капли, суппозитории, спреи, жидкости и порошки. Традиционные фармацевтические носители, водные, порошкообразные или масляные основы, загустители и т.п. могут быть необходимыми или желательными.
Данное изобретение также включает фармацевтические композиции, содержащие в качестве активного ингредиента одно или больше соединений по изобретению, описанных выше, в комбинации с одним или больше фармацевтически приемлемых носителей. При изготовлении композиций по изобретению активный ингредиент обычно смешивают со вспомогательным веществом, разбавляют вспомогательным веществом или помещают в пределы такого носителя в форме, например, капсулы, саше, бумажной или другой емкости. Если вспомогательное вещество служит разбавителем, она может быть твердым, полутвердым или жидким материалом, который действует как растворитель, носитель или среда для активного ингредиента. Таким образом, композиции могут приобретать форму таблеток, пилюль, порошков, леденцов, саше, каше, эликсиров, суспензий, эмульсий, растворов, сиропов, аэрозолей (в виде твердого вещества или в жидкой среде), мазей с содержанием, например, до 10 мас.% активного соединения, мягких и твердых желатиновых капсул, суппозиториев, стерильных инъекционных растворов и стерильных расфасованных порошков.
В ходе изготовления препарата активное соединение может быть смолото для получения соответствующего размера частиц перед объединением с другими ингредиентами. Если активное соединение является в существенной мере нерастворимым, оно может быть смолото до размера частиц меньше 200 меш. Если активное соединение является в существенной мере растворимым в воде, размер частиц может быть скорректирован путем помола, для получения в существенной мере однородного распределения в препарате, например, приблизительно 40 меш.
Некоторые примеры подходящих вспомогательных веществ включают лактозу, глюкозу, сахарозу, сорбит, маннит, различные виды крахмала, акациевую камедь, фосфат кальция, альгинат, трагакантовую камедь, желатин, силикат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, поливинилпирролидон, целлюлозу, воду, сироп и метилцеллюлозу. Рецептуры могут дополнительно включать смазывающие средства, например тальк, стеарат магния и минеральное масло; увлажняющие средства; эмульгирующие и суспендирующие средства; консерванты, например метил- и пропилгидроксибензоаты; подсластители и вкусовые добавки. Композиции по изобретению могут быть разработаны таким образом, чтобы обеспечивать быстрое, пролонгированное или замедленное высвобождение активного ингредиента после введения больному, с применением методик, известных из уровня техники.
Композиции могут быть разработаны в дозированной лекарственной форме, где каждая единица дозированной формы содержит от приблизительно 5 до приблизительно 100 мг, чаще от приблизительно 10 до приблизительно 30 мг активного ингредиента. Термин дозированная лекарственная форма обозначает подходящие физически дискретные единицы как единицы дозированной лекарственной формы для субъекта-человека и других млекопитающих, где каждая единица содержит предварительно определенное количество активного материала, вычисленное таким образом, чтобы осуществлять целевое терапевтическое воздействие, в сочетании с подходящим фармацевтическим вспомогательным веществом.
Активное соединение может быть эффективным в широком интервале доз, и, в общем, вводится в фармацевтически эффективном количестве. Однако следует понимать, что количество соединения, которое фактически вводят, обычно будет определяться врачом в соответствии с существующими обстоятельствами, в том числе состояния, которое подлежит лечению, выбранного способа введения, конкретного соединения, которое вводят, возраста, массы тела и ответа конкретного больного, тяжести симптомов у больного и т.п.
Для получения твердых композиций, например таблеток, основной активный ингредиент смешивают с фармацевтическим вспомогательным веществом для образования твердой композиции премикса, содержащей гомогенную смесь соединения по данному изобретению. Если считать указанные композиции премикса гомогенными, активный ингредиент обычно диспергирован равномерно в композиции таким образом, что композиция может быть легко разделена на одинаково эффективные единицы лекарст- 17 022669 венной формы, например таблетки, пилюли и капсулы. Такой твердый премикс далее разделяют на единицы лекарственной формы описанного выше типа, содержащие, например, от 0,1 до приблизительно 500 мг активного ингредиента по данному изобретению.
Таблетки или пилюли по данному изобретению могут быть покрыты покрытиями или изготовлены таким образом, чтобы получить лекарственную форму, обеспечивающую преимущество пролонгированного действия. Например, таблетка или пилюля может включать внутреннюю дозу и внешний компонент дозы, где последний присутствует в форме оболочки над первым. Два компонента могут быть разделены кишечнорастворимым слоем, который служит для защиты от разложения в желудке и позволяет прохождение внутреннего компонента в неповрежденном виде в двенадцатиперстную кишку или его замедленное высвобождение. Различные материалы могут применяться для такого кишечнорастворимого слоя или покрытия, среди таких материалов целый ряд полимерных кислот и смесей полимерных кислот с такими материалами как шеллак, цетиловый спирт и ацетат целлюлозы.
Жидкие формы, в которые соединения и композиции по данному изобретению могут быть введены с целью введения путем приема внутрь или инъекции, включают водные растворы, сиропы с подходящими вкусовыми добавками, водные или масляные суспензии и ароматизированные эмульсии со съедобными маслами, такими как хлопковое масло, кунжутное масло, кокосовое масло или арахисовое масло, а также и эликсиры и т.п. фармацевтические носители.
Композиции для ингаляции или инсуффляции включают растворы и суспензии в фармацевтически приемлемых, водных или органических растворителях или их смесях, и порошки. Жидкие или твердые композиции могут содержать подходящие фармацевтически приемлемые вспомогательные вещества, как описано выше. В некоторых вариантах композиции вводят перорально или интраназально в дыхательные пути для местного или системного воздействия. Композиции могут быть распылены с использованием небулайзера и инертных газов. Распыленные растворы можно вдыхать непосредственно из устройства для распыления, или устройство для распыления может быть присоединено к палатке, маскам или вентилятору с перемежающимся положительным давлением. Раствор, суспензию или композиции в форме порошка можно вводить через рот или интраназально из устройств, которые доставляют препарат соответствующим образом.
Количество соединения или композиции для введения больному будет варьировать в зависимости от состава композиции для введения, цели введения, например профилактика или терапия, состояния больного, способа введения и т.п. При терапевтическом применении композиции можно вводить пациенту, который уже страдает заболеванием, в количестве, достаточном для излечивания или, по меньшей мере, частично для остановки симптомов заболевания и его осложнений. Эффективные дозы будут зависеть от патологического состояния, подлежащего лечению, а также от решения клинициста, которое будет зависеть от таких факторов, как тяжесть заболевания, возраст, масса тела, общее состояние больного и т.п.
Композиции, которые вводят больному, могут приобретать форму фармацевтических композиций, описанных выше. Указанные композиции могут быть стерилизованы традиционными методами стерилизации или стерилизующей фильтрацией. Водные растворы могут быть расфасованы для применения в форме растворов или лиофилизированы, лиофилизированный препарат объединяют со стерильным водным носителем перед введением. ρΗ препаратов соединения обычно будет составлять от 3 до 11, более предпочтительно от 5 до 9 и наиболее предпочтительно от 7 до 8. Следует понимать, что применение некоторых упомянутых выше вспомогательных веществ, носителей или стабилизаторов будет приводить к образованию фармацевтических солей.
Терапевтические дозы соединений по данному изобретению могут варьировать в соответствии, например, с конкретным показанием, для которого назначено лечение, способом введения соединения, состоянием здоровья и патологическим состоянием больного и решением врача. Доля или концентрация соединения по изобретению в фармацевтической композиции может варьировать в зависимости от целого ряда факторов, в том числе дозировки, химических свойств (например, гидрофобность) и способа введения. Например, соединения по изобретению могут быть предоставлены в водном буферизованном физиологическом растворе, содержащем от приблизительно 0,1 до приблизительно 10% мас./об. соединения для парентерального введения. Некоторые типичные интервалы дозы составляют от приблизительно 1 мг/кг до приблизительно 1 г/кг массы тела в сутки. В некоторых вариантах интервал дозы составляет от приблизительно 0,01 до приблизительно 100 мг/кг массы тела в сутки. Вероятно, дозы будут зависеть от таких переменных, как вид и степень прогрессирования заболевания или расстройства, общее состояние здоровья конкретного пациента, относительная биологическая эффективность выбранного соединения, состав вспомогательных веществ и способ введения. Эффективные дозы могут быть экстраполированы на базе кривых доза-реакция, полученных в результате исследований ίη νίίτο или на животных моделях.
Соединения по изобретению могут также быть введены в комбинации с одним или больше дополнительных активных ингредиентов, которые могут включать какое-либо фармацевтическое средство, например противовирусные средства, вакцины, антитела, средства для усиления иммунитета, иммуносупрессанты, противовоспалительные средства и т.п.
Изобретение будет описано более подробно с помощью конкретных примеров. Следующие приме- 18 022669 ры приведены для целей иллюстрации и не предназначены для ограничения изобретения каким-либо образом. Для специалистов в данной области будут очевидными различные некритические параметры, которые могут быть изменены или модифицированы с получением, по существу, таких же результатов. Обнаружено, что соединения из примеров являются ингибиторами ΙΌΘ по результатам одного или больше анализов, описанных в данном описании.
Примеры
Пример 1. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)-^(3-бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Стадия А. 4-Амино-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид
Νν Ν
Малононитрил |Л1йг1сН. продукт № М1407] (320,5 г, 5 моль) добавляют к воде (7 л), нагревают до 45°С и перемешивают в течение 5 мин. Полученный раствор охлаждают на ледяной бане и добавляют натрия нитрит (380 г, 5,5 моль). Когда температура достигает 10°С, добавляют 6н. раствор хлористоводородной кислоты (55 мл). Происходит умеренно экзотермическая реакция, и температура достигает 16°С. После 15 мин охлаждающую баню удаляют и реакционную смесь перемешивают в течение 1,5 ч при 16-18°С. Реакционную смесь охлаждают до 13°С и добавляют 50% водный раствор гидроксиламина (990 г, 15 моль) в виде одной порции. Температуру увеличивают до 26°С. После окончания экзотермической реакции охлаждающую баню удаляют и перемешивание продолжают в течение 1 ч при 26-27°С, затем реакционную смесь медленно нагревают до кипения с обратным холодильником. Кипячение с обратным холодильником продолжают в течение 2 ч и затем реакционную смесь охлаждают в течение ночи. Реакционную смесь перемешивают на ледяной бане и добавляют порциями 6н. раствор хлористоводородной кислоты (800 мл) в течение 40 мин до достижения рН 7,0. Перемешивание продолжают на ледяной бане при 5°С. Остаток собирают фильтрованием, тщательно промывают водой и сушат под вакуумом (50°С) с получением целевого продукта (644 г, 90%). ЖХМС для С3Н6^О2 (М+Н)': соотношение массы к заряду=144,0. 13С ЯМР (75 МГц, СП3ОП): δ 156,0, 145,9, 141,3.
Стадия В. 4-Амино-^гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидоила хлорид
ΝνΝ
4-Амино-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид (422 г, 2,95 моль) добавляют к смеси воды (5,9 л), уксусной кислоты (3 л) и 6н. раствору хлористо-водородной кислоты (1,475 л, 3 экв.) и суспензию перемешивают при 42-45°С до полного растворения. Добавляют натрия хлорид (518 г, 3 экв.) и раствор перемешивают на бане, которая содержит смесь лед/вода/метанол. Добавляют раствор натрия нитрита (199,5 г, 0,98 экв.) в воде (700 мл) в течение 3,5 ч, поддерживая температуру ниже 0°С. После окончания добавления перемешивание продолжают на ледяной бане в течение 1,5 ч и затем реакционную смесь нагревают до 15°С. Осадок собирают фильтрованием, тщательно промывают водой, помещают в этилацетат (3,4 л), обрабатывают безводным натрия сульфатом (500 г) и перемешивают в течение 1 ч. Суспензию фильтруют сквозь натрия сульфат (200 г) и фильтрат упаривают на роторном вращающемся испарителе. Остаток растворяют в метил трет-бутиловом эфире (5,5 л), обрабатывают углем (40 г), перемешивают в течение 40 мин и фильтруют сквозь броунмиллерит. Растворитель удаляют с помощью роторного испарителя и полученный продукт сушат под вакуумом (45°С) с получением целевого продукта (256 г, 53,4%). ЖХМС для С3Н4СШ4О2 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=162,9. 13С ЯМР (100 МГц, СО3ОП): δ 155,8, 143,4, 129,7.
Стадия С. 4-Амино-№-гидрокси-^(2-метоксиэтил)-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид
4-Амино-^гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидоилхлорид (200,0 г, 1,23 моль) смешивают с этилацетатом (1,2 л). При 0-5°С 2-метоксиэтиламин [ЛЫпсЬ, продукт № 143693] (119,0 мл, 1,35 моль) добавляют в виде одной порции при перемешивании. Температуру реакционной смеси увеличивают до 41°С. Реакционную смесь охлаждают до 0-5°С. Добавляют триэтиламин (258 мл, 1,84 моль). После перемешивания в течение 5 мин ЖХМС показывает завершение реакции. Реакционную смесь промывают
- 19 022669 водой (500 мл) и рассолом (500 мл), сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением целевого продукта (294 г, 119%) в виде темного неочищенного масла. ЖХМС для С6Н12ЖО3 (М+Н)': соотношение массы к заряду=202,3. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Т.): δ 10,65 (с, 1Н), 6,27 (с, 2Н), 6,10 (т, 1=6,5 Гц, 1Н), 3,50 (м, 2Н), 3,35 (д, 1=5,8 Гц, 2Н), 3,08 (с, 3Н).
Стадия Ό. №-Гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид „он
Η ϋ ΝνΝ
4-Амино-№-гидрокси-Ж(2-метоксиэтил)-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид (248,0 г, 1,23 моль) смешивают с водой (1 л). Добавляют калия гидроксид (210 г, 3,7 моль). Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником при 100°С, выдерживая при этой температуре в течение ночи (15 ч). Данные ТСХ с использованием 50% раствора этилацетата (содержащего 1% аммония гидроксида) в гексане показывают завершение реакции (для продукта КТ=0,6, для исходного материала КТ=0,5). ЖХМС также показывает завершение реакции. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и экстрагируют этилацетатом (3x1 л). Объединенные растворы этилацетата сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением целевого продукта (201 г, 81%) в виде неочищенного твердого вещества практически белого цвета. ЖХМС для С6Н12Ы5Оз (М+Н)+: соотношение массы к заряду=202,3. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 10,54 (с, 1Н), 6,22 (с, 2Н), 6,15 (т, 1=5,8 Гц, 1Н), 3,45 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 3,35 (м, 2Н), 3,22 (с, 3Н).
Стадия Е. М-Гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидоила хлорид
При комнатной температуре №-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамид (50,0 г, 0,226 моль) растворяют в 6,0 М водном растворе хлористо-водородной кислоты (250 мл, 1,5 моль). Добавляют натрия хлорид (39,5 г, 0,676 моль) с последующим добавлением воды (250 мл) и этилацетата (250 мл). При 3-5°С предварительно подготовленный водный раствор (100 мл) натрия нитрита (15,0 г, 0,217 моль) медленно добавляют в течение 1 ч. Реакционную смесь перемешивают при 3-8°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч и затем при комнатной температуре в течение уик-энда. ЖХМС показывает завершение реакции. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (2x200 мл). Объединенные растворы этилацетата сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением целевого продукта (49,9 г, 126%) в виде неочищенного твердого вещества белого цвета. ЖХМС для С6Н10С1Ы4О3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=221,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 13,43 (с, 1Н), 5,85 (т, 1=5,6 Гц, 1Н), 3,50 (т, 1=5,6 Гц, 2Н), 3,37 (дд, 1=10,8, 5,6 Гц, 2Н), 3,25 (с, 3Н).
Стадия Р. Ы-(3-Бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамид
М-Гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидоилхлорид (46,0 г, 0,208 моль) смешивают с водой (300 мл). Смесь нагревают до 60°С. Добавляют 3-бром-4-фторанилин [Оак№θθά ргойис18, продукт № 013091] (43,6 г, 0,229 моль) и перемешивают в течение 10 мин. Добавляют натретый раствор (300 мл воды) натрия бикарбоната (26,3 г, 0,313 моль) в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивают при 60°С, выдерживая при этой температуре в течение 20 мин. ЖХМС показывает завершение реакции. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и экстрагируют этилацетатом (2x300 мл). Объединенные растворы этилацетата сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением целевого продукта (76,7 г, 98%) в виде неочищенного твердого вещества коричневого цвета. ЖХМС для С12Н14ВгРЫ5О3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=374,0, 376,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Т.): δ 11,55 (с, 1Н), 8,85 (с, 1Н), 7,16 (т, 1=8,8 Гц, 1Н), 7,08 (дд, 1=6,1, 2,7 Гц, 1Н), 6,75 (м, 1Н), 6,14 (т, 1=5,8 Гц, 1Н), 3,48 (т, 1=5,2 Гц, 2 Н), 3,35 (дд, 1=10,8, 5,6 Гц, 2Н), 3,22 (с, 3Н).
Стадия С. 4-(3-Бром-4-фторфенил)-3-{4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
Смесь N-(3 -бром-4-фторфенил) -№-гидрокси-4 - [(2-метоксиэтил)амино] -1,2,5 -оксадиазол-3 карбоксимидамида (76,5 г, 0,204 моль), 1,1'-карбонилдиимидазола (49,7 г, 0,307 моль) и этилацетата (720
- 20 022669 мл) нагревают до 60°С и перемешивают в течение 20 мин. ЖХМС показывает завершение реакции. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, промывают 1н. раствором НС1 (2x750 мл), сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением целевого продукта (80,4 г, 98%) в виде неочищенного твердого вещества коричневого цвета. ЖХМС для С13Н12ВгРЩО4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=400,0, 402,0. !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 7,94 (т, 1=8,2 Гц, 1Н), 7,72 (дд, 1=9,1, 2,3 Гц, 1Н), 7,42 (м, 1Н), 6,42 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 3,46 (т, 1=5,4 Гц, 2Н), 3,36 (т, 1=5,8 Гц, 2Н), 3,26 (с, 3Н).
Стадия Н. 4-(3-Бром-4-фторфенил)-3-{4-[(2-гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
4-(3-Бром-4-фторфенил)-3-{4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4-оксадиазол5(4Н)-он (78,4 г, 0,196 моль) растворяют в дихлорметане (600 мл). При -67°С добавляют бора трибромид (37 мл, 0,392 моль) в течение 15 мин. Реакционную смесь нагревают до -10°С в течение 30 мин. ЖХМС показывает завершение реакции. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. При 0-5°С реакционную смесь медленно гасят насыщенным раствором натрия бикарбоната (1,5 л) в течение 30 мин. Температуру реакционной смеси повышают до 25°С. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (2x500 мл, органическая фракция, которая экстрагируется первой, - на дне, и органическая фракция, которая экстрагируется второй, - вверху). Объединенные органические фракции сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением целевого продукта (75 г, 99%) в виде неочищенного твердого вещества коричневого цвета. ЖХМС для С12НюВгРЩО4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=386,0, 388,0. ΊI ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 8,08 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,70 (м, 1Н), 7,68 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,33 (т, 1=5,6 Гц, 1Н), 4,85 (т, 1=5,0 Гц, 1Н), 3,56 (дд, 1=10,6, 5,6 Гц, 2Н), 3,29 (дд, 1=11,5, 5,9 Гц, 2Н).
Стадия I. 2-({4-[4-(3-Бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3-ил}амино)этилметансульфонат
К раствору 4-(3-бром-4-фторфенил)-3-{4-[(2-гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она (1,5 кг, 3,9 моль, содержит также некоторое количество бромсодержащего соединения) в этилацетате (12 л) добавляют метансульфонилхлорид (185 мл, 2,4 моль) по каплям в течение 1 ч при комнатной температуре. Триэтиламин (325 мл, 2,3 моль) добавляют по каплям в течение 45 мин, во время чего температуру реакционной смеси повышают до 35°С. По прохождении 2 ч реакционную смесь промывают водой (5 л), раствором соли (1 л), сушат над натрия сульфатом, объединяют еще с тремя объемами такой же реакционной смеси и растворители удаляют под вакуумом с получением целевого продукта (7600 г, количественный выход) в виде твердого вещества рыжевато-коричневого цвета. ЖХМС для С1зНпВгРЩО6З№ (М+№)+: соотношение массы к заряду=485,9, 487,9. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОй6): δ 8,08 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,72 (м, 1Н), 7,58 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,75 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 4,36 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 3,58 (дд, 1=11,2, 5,6 Гц, 2Н), 3,18 (с, 3Н).
Стадия 1. 3-{4-[(2-Азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
К раствору 2-({4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3-ил}амино)этил метансульфоната (2,13 кг, 4,6 моль, который содержит также некоторое количество бромсодержащего соединения) в диметилформамиде (4 л) при перемешивании в 22-л колбе добавляют натрия азид (380 г, 5,84 моль). Реакционную смесь нагревают до 50°С, выдерживая при этой температуре в течение 6 ч, выливают в смесь лед/вода (8 л) и экстрагируют смесью этилацетат/гептан (20 л, 1:1). Органическую фракцию промывают водой (5 л) и раствором соли (5 л) и растворители удаляют под вакуумом с получением целевого продукта (1464 г, 77%) в виде твердого вещества рыжеватокоричневого цвета. ЖХМС для СпЩВгР^О^Ыа (М+№)+: соотношение массы к заряду=433,0, 435,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 8,08 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,72 (м, 1Н), 7,58 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,75 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 3,54 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 3,45 (дд, 1=11,1, 5,2 Гц, 2Н).
- 21 022669
Стадия К. 3-{4-[(2-Аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он гидрохлорид
Натрия йодид (1080 г, 7,2 моль) добавляют к 3-{4-[(2-азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-он (500 г, 1,22 моль) в метаноле (6 л). Смесь перемешивают в течение 30 мин и в ходе этого периода происходит умеренное выделение тепла. Добавляют по каплям хлортриметилсилан (930 мл, 7,33 моль) в виде раствора в метаноле (1 л) с такой скоростью, чтобы температура не превышала 35°С, и реакционную смесь перемешивают в течение 3,5 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь нейтрализуют 33 мас.% раствором натрия тиосульфата пентагидрата в воде (~1,5 л), разбавляют водой (4 л) и рН доводят до 9 осторожным добавлением твердого калия карбоната (250 г добавляют маленькими порциями: наблюдается образование пены). Добавляют ди-третбутилдикарбонат (318 г, 1,45 моль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре. Дополнительное количество калия карбоната (200 г) добавляют порциями по 50 г в течение 4 ч, чтобы убедиться, что рН составляет приблизительно или выше 9. После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи твердое вещество фильтруют, растирают с водой (2 л) и затем с МТБЭ (1,5 л). Всего осуществляют 11 таких циклов (5,5 кг, 13,38 моль). Объединенные твердые вещества растирают со смесью ТГФ/дихлорметан (24 л, 1:1, 4 цикла в колбе роторного испарителя объемом 20 л, 50°С, 1 ч), фильтруют и промывают дихлорметаном (по 3 л каждый цикл) с получением твердого вещества практически белого цвета. Неочищенный материал растворяют при 55°С тетрагидрофураном (5 мл/г), обрабатывают обесцвечивающим углем (2 мас.%) и силикагелем (2 мас.%) и фильтруют в горячем состоянии сквозь броунмиллерит с получением продукта в виде твердого вещества практически белого цвета (5122 г). Объединенные фильтраты МТБЭ, ТГФ и дихлорметан упаривают под вакуумом и хроматографируют (2 кг силикагеля, гептан с градиентом 0-100% этилацетата, 30 л) с получением дополнительной порции продукта (262 г). Объединенные твердые вещества сушат до получения требуемой массы в конвекционной печи (5385 г, 83%).
В колбу объемом 22 л помещают водорода хлорид (4н. раствор в 1,4-диоксане, 4 л, 16 моль). Добавляют порциями трет-бутил-[2-({4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]1.2.5- оксадиазол-3-ил}амино)этил]карбамат (2315 г, 4,77 моль) в виде твердого вещества в течение 10 мин. Суспензию перемешивают при комнатной температуре, и она постепенно превращается в густую пасту, которую невозможно перемешивать. После стояния в течение ночи при комнатной температуре, пасту суспендируют в этилацетате (10 л), фильтруют, повторно суспендируют в этилацетате (5 л), фильтруют и сушат до получения требуемой массы с получением целевого продукта в виде твердого вещества белого цвета (объединяют с продуктами других циклов, использовали 5 кг исходного материала, 4113 г, 95%). ЖХМС для С^НцВгРуОз (М+Н)+: соотношение массы к заряду=384,9, 386,9. 'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): δ 8,12 (м, 4Н), 7,76 (м, 1 ч), 7,58 (т, 1=8,7 Гц, 1 ч), 6,78 (т, 1=6,1 Гц, 1 ч), 3,51 (дд, 1=11,8, 6,1 Гц, 2Н), 3,02 (м, 2Н).
Стадия Ь. трет-Бутил-({ [2-({4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]1.2.5- оксадиазол-3 -ил}амино)этил]амино}сульфонил)карбамат
В круглодонную колбу объемом 5 л помещают хлорсульфонилизоцианат |А16г1сН. продукт № 142662] (149 мл, 1,72 моль) и дихлорметан (1,5 л) и охлаждают с использованием ледяной бани до 2°С. Добавляют по каплям трет-бутанол (162 мл, 1,73 моль) в дихлорметане (200 мл) с такой скоростью, чтобы температура не превысила 10°С. Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 30-60 мин с получением трет-бутил-[хлорсульфонил]карбамата.
В колбу объемом 22 л помещают 3-{4-[(2-аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-бром-4фторфенил)-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она гидрохлорид (661 г, 1,57 моль) и 8,5 л дихлорметана. После охлаждения до -15°С на бане лед/соль добавляют раствор трет-бутил-[хлорсульфонил]карбамата (полученный, как описано выше) с такой скоростью, чтобы температура не превысила -10°С (время добавления 7 мин). После перемешивания в течение 10 мин добавляют триэтиламин (1085 мл, 7,78 моль) с такой скоростью, чтобы температура не превысила -5°С (время добавления 10 мин). Охлаждающую баню удаляют, реакционную смесь нагревают до 10°С, делят на две порции и нейтрализуют 10% конц. раствором НС1 (4,5 л каждая порция). Каждую порцию переносят в делительную лейку объемом 50 л и разбавляют этилацетатом до образования раствора твердого вещества белого цвета (~25 л). Слои разделяют и орга- 22 022669 ническую фракцию промывают водой (5 л), раствором соли (5 л) и растворители удаляют под вакуумом с получением твердого вещества практически белого цвета. Твердое вещество растирают с МТБЭ (2x1,5 л) и сушат до получения требуемой массы с получением твердого вещества белого цвета. Таким же образом обрабатывают общее количество исходного материала 4113 г (5409 г, 98%). 'Н ЯМР (400 МГц, ДМСОά6): δ 10,90 (с, 1Н), 8,08 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,72 (м, 1Н), 7,59 (т, 1=8, 6 Гц, 1Н), 6,58 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 3,38 (дд, 1=12,7, 6,2 Гц, 2 Н), 3,10 (дд, 1=12,1, 5,9 Гц, 2Н), 1,41 (с, 9Н).
Стадия М. ^[2-({4-[4-(3-Бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3-ил}амино)этил]сульфамид
В колбу объемом 22 л, содержащую смесь трифторуксусная кислота/вода (8,9 л, 98:2), порциями добавляют трет-бутил ({[2-({4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3-ил}амино)этил]амино}сульфонил)карбамат (1931 г, 3,42 моль) в течение 10 мин. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 ч, растворители удаляют под вакуумом и перегоняют дихлорметаном (2 л). Полученное твердое вещество обрабатывают второй раз новой смесью трифторуксусная кислота/вода (8,9 л, 98:2), нагревают в течение 1 ч до 40-50°С, растворители удаляют под вакуумом и перегоняют дихлорметаном (3x2 л). Полученное твердое вещество белого цвета сушат под вакуумом при 50°С, выдерживая при этой температуре в течение ночи. Всего таким способом было обработано 5409 г (4990 г, количественный выход). ЖХМС для С12Н12ВгРЩО58 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=463,9, 465,9. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): δ 8,08 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,72 (м, 1Н), 7,59 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,67 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 6,52 (т, 1=6,0 Гц, 1Н), 3,38 (дд, 1=12,7, 6,3 Гц, 2Н), 3,11 (дд, 3=12,3, 6,3 Гц).
Стадия Ν. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)-^(3-бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5оксадиазол-3 -карбоксимидамид.
К неочищенной смеси ^[2-({4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3ил]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}амино)этил]сульфамида (2,4 моль), содержащей остаточное количество трифторуксусной кислоты, при перемешивании в колбу объемом 22 л добавляют ТГФ (5 л). Полученный раствор охлаждают до 0°С с использованием ледяной бани, добавляют 2н. раствор №ЮН (4 л) с такой скоростью, чтобы температура не превысила 10°С. После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 ч (ЖХМС показывает отсутствие исходного материала) рН доводят до 3-4 концентрированием НС1 (~500 мл). ТГФ удаляют под вакуумом и полученную смесь экстрагируют этилацетатом (15 л). Органическую фракцию промывают водой (5 л), раствором соли (5 л) и растворители удаляют под вакуумом с получением твердого вещества. Твердое вещество растирают с МТБЭ (2x2 л), объединяют с тремя другими реакционными смесями такого ж объема и сушат в течение ночи в конвекционной печи с получением твердого вещества белого цвета (3535 г). Твердое вещество перекристаллизуют (3x22 л колба, смесь вода/этанол, 2:1, 14,1 л каждая колба) и сушат в конвекционной печи при температуре 50°С до получения требуемой массы названного в заголовке соединения в виде твердого вещества практически белого цвета (3290 г, 78%). ЖХМС для СцН14ВгРЩО48 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=437,9, 439,9. 4Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): δ 11,51 (с, 1Н), 8,90 (с, 1Н), 7,17 (т, 1=8,8 Гц, 1Н), 7,11 (дд, 1=6,1, 2,7 Гц, 1Н), 6,76 (м, 1Н), 6,71 (т, 1=6,0 Гц, 1Н), 6,59 (с, 2 Н), 6,23 (т, 1=6,1 Гц, 1Н), 3,35 (дд, 1=10,9, 7,0 Гц, 2Н), 3,10 (дд, 1=12,1, 6,2 Гц, 2Н).
Конечный продукт представляет собой безводное кристаллическое твердое вещество. Определенное содержание воды меньше 0,1% титрования по методу Карла Фишера. Получены данные рентгеноструктурного анализа порошка (РГАП) (дифрактометр для порошков Шдаки М1шР1ех; Си при 1,054056 А с фильтром Κβ; начальный угол=3, угол остановки=45, отбор образца=0,02, скорость сканирования=2) и представлены на фиг. 1. Перечень 2-тета пиков приведен в табл. 1 ниже. Интервал температуры плавления твердого вещества определен на приборе Мейег То1е6о ΌίΠοΐΌηΐί;·ι1 8саηη^ηд Са1опте1гу (И8С, И8С) 822. Образец нагревали от 40 до 240°С со скоростью нагревания 10°С на 1 мин. Термограмма И8С (фиг.
2) демонстрирует То1ке1 при 162,7°С и Треак при 163,8°С. Термогравиметрический анализ (ТГА, ТОА) (фиг.
3) показывает потери в массе 0,3% при нагревании от 20 до 150°С при скорости нагревания 10°С/мин с использованием прибора ТАО500.
Таблица 1
- 23 022669
2-Тета Высота Н, %
3,9 74 1,1
7,2 119 1,8
13,4 180 2,8
14,0 150 2,3
15,9 85 1,3
18,4 903 13,9
18,9 1469 22,7
21,3 519 8
21,8 6472 100
22,7 516 8
23,9 2515 38,9
24,8 804 12,4
25,3 182 2,8
27,4 476 7,4
28,6 354 5,5
29,2 1767 27,3
29,9 266 4,1
30,6 773 11,9
31,2 379 5, 8
31,6 291 4,5
32,7 144 2,2
33,5 221 3,4
36,4 469 7,2
37,6 152 2,3
38,7 1381 21,3
41, 0 153 2,4
42,1 382 5,9
43,6 527 8,1
44,4 1080 16,7
Пример 2. ^(3-Бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Названное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой из примера 17 стадия Е, с использованием №-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида и 3-бром-4-фторанилина [Оак^оой РгобисК 1пс., продукт № 013091] как исходных материалов. ЖХМС для С’12Н15ВгРН-,О48 (Μ+Η)+: соотношение массы к заряду=437,0, 439,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-δ..): δ 11,49 (с, 1Η), 8,90 (с, 1Η), 7,17 (м, 2Η), 7,09 (дд, 1=6,3, 2,5 Гц, 1Η), 6,26 (т, 1=6,1 Гц, 1Η), 3,33 (м, 2Η), 3,13 (к, 1=6,0 Гц, 2Η), 2,89 (с, 3Η).
Пример 3. 4-({3-[(Аминосульфонил)амино]пропил}амино)-^(3-бром-4-фторфенил)-№-гидрокси- 24 022669
1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Стадия А. 3-(4-Амино-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-он
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 5, стадия А, с использованием 4-амино-^(3-бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида [см. публикацию патентной заявки США № 2006/0258719] как исходного материала, с выходом 98%. ЖХМС для СюНбВШ^Оз (М+Н)': соотношение массы к заряду=342,0, 344,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 8,06 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,72-7,67 (м, 1Н), 7,58 (дд, 1=8,7, 8,7 Гц, 1Н), 6,60 (с, 2Н).
Стадия В. ^{4-[4-(3-Бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5-
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 5, стадия В, с использованием 3-(4-амино-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она как исходного материала, с выходом 81%. ЖХМС для С'2Н5В^Ρ.1N5Ο.^ (М+Н)+: соотношение массы к заряду=437,9, 439,9. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 7,92-7,89 (м, 1Н), 7,54-7,52 (м, 2Н).
Стадия С. 4-(3-Бром-4-фторфенил)-3-{4-[(3-метоксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
Раствор 3-метоксипропан-1-ола [Иика продукт № 38457] (3,1 мл, 32 ммоль) и трифенилфосфина (8,4 г, 32 ммоль) в тетрагидрофуране (93 мл) при 0°С обрабатывают диизопропилазодикарбоксилатом (6,7 мл, 34 ммоль) по каплям. Реакционную смесь перемешивают при 0°С, выдерживая при этой температуре в течение 15 мин, обрабатывают раствор ^{4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4оксадиазол-3-ил]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-2,2,2-трифторацетамидом (10 г, 23 ммоль) в тетрагидрофуране (47 мл) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 72 ч. Реакционную смесь упаривают, разбавляют этилацетатом (200 мл), обрабатывают трифторуксусной кислотой (20 мл) и водой (20 мл) и нагревают до 50°С, выдерживая при этой температуре в течение 6 ч. Реакционную смесь упаривают, разбавляют этилацетатом (200 мл) и промывают водой (3x80 мл), насыщенным раствором натрия бикарбоната (2x80 мл) и раствором соли (80 мл), сушат над безводным натрия сульфатом, фильтруют и упаривают до неочищенного остатка. Полученный материал очищают на силикагеле с получением целевого продукта (6,4 г, 54%) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХМС для С14Н14ВгР^О4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=414,0, 416,0.
Стадия Ό. 4-(3-Бром-4-фторфенил)-3-{4-[(3-гидроксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
Раствор 4-(3-бром-4-фторфенил)-3-{4-[(3-метоксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она (6,3 г, 14 ммоль) в дихлорметане (60 мл) при -78°С обрабатывают 1 М раствором бора трибромида в дихлорметане (28 мл, 28 ммоль) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждают до 0°С и гасят насыщенным раствором натрия бикарбоната (100 мл). Водную фракцию отделяют и экстрагируют дихлорметаном (2x150 мл). Объединенные органические фракции промывают раствором соли (100 мл), сушат над безводным натрия суль- 25 022669 фатом, фильтруют и упаривают до неочищенного твердого вещества практически белого цвета. Полученный материал очищают на силикагеле с получением целевого продукта (4,0 г, 73%) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХМС для С13Н12ВгЖ5О4 (М+Н)': соотношение массы к заряду=400,0, 402,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): 88,07 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,72-7,68 (м, 1Н), 7,59 (дд, 1=8,8, 8,6 Гц, 1Н), 6,54 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 4,60 (т, 1=5,1 Гц, 1Н), 3,48-3,43 (м, 2Н), 3,32-3,26 (м, 2 Н), 1,74-1,67 (м, 2Н).
Стадия Е. 3-{4-[(3-Азидопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
Раствор 4-(3-бром-4-фторфенил)-3-{4-[(3-гидроксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она (3,0 г, 7,5 ммоль) в дихлорметане (27 мл) обрабатывают метансульфонилхлоридом (0,75 мл, 9,7 ммоль) и Ν,Ν-диизопропилэтиламином (2,6 мл, 15 ммоль) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляют водой (20 мл) и экстрагируют дихлорметаном (20 мл). Органическую фракцию отделяют, сушат над безводным натрия сульфатом, фильтруют и упаривают с получением мезилата, который используют без дальнейшей очистки. Раствор неочищенного мезилата в Ν,Ν-диметилформамиде (24 мл) обрабатывают натрия азидом (0,73 г, 11 ммоль) и нагревают до 85°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляют этилацетатом (300 мл) и промывают водой (100 мл), насыщенным раствором натрия бикарбоната (100 мл) и раствором соли (100 мл), сушат над безводным натрия сульфатом, фильтруют и упаривают с получением целевого продукта (3,2 г, 99%). Полученный материал используют без дополнительной очистки. ЖХМС для СиН^ВгР^О^Ыа (М+№)+: соотношение массы к заряду=446,9, 448,9.
Стадия Р. 3-{4-[(3-Аминопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она гидройодид
Раствор 3-{4-[(3-азидопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она (2,0 г, 4,7 ммоль) в метаноле (36 мл) обрабатывают натрия йодидом (4,2 г, 28 ммоль) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 5 мин. Реакционную смесь обрабатывают раствором хлортриметилсилана (3,6 мл, 28 ммоль) в метаноле (7 мл) по каплям и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 40 мин. Реакционную смесь медленно выливают в раствор натрия тиосульфата (5,0 г, 32 ммоль) в воде (200 мл), охлажденного до 0°С. Осажденное твердое вещество отфильтровывают, промывают водой и сушат с получением целевого продукта (2,3 г, 93%) в виде твердого вещества. ЖХМС для С13Н13ВгРН-,О3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=399,0, 401,0. !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 8,08 (дд, 1=6,1, 2,3 Гц, 1Н), 7,74-7,70 (м, 1Н), 7,60 (дд, 1=8,8, 8,6 Гц, 1Н), 7,22 (шс, 2 Н), 6,69 (шс, 1Н), 2,81-2,77 (м, 2Н), 1,86-1,79 (м, 2Н).
Стадия О. ^[3-({4-[4-(3-Бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3 -ил}амино)пропил] сульфамид
Раствор 3-{4-[(3-аминопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она гидройодида (150 мг, 0,28 ммоль) и сульфамида (160 мг, 1,7 ммоль) в пиридине (2,5 мл) нагревают в микроволновом реакторе при 130°С, выдерживая при этой температуре в течение 10 мин. Реакционную смесь упаривают с получением неочищенного остатка. Полученный материал очищают препаративной ЖХМС с получением целевого продукта (96 мг, 71%) в виде твердого вещества. ЖХМС для С’иНмВгРН-О.-Я (М+Н)+: соотношение массы к заряду=478,0, 480,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 8,07 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,73-7,69 (м, 1Н), 7,59 (дд, 1=8,8, 8,6 Гц, 1Н), 6,57-6,51 (м, 4 Н), 3,31-3,26 (м, 2Н), 2,92-2,87 (м, 2Н), 1,79-1,72 (м, 2Н).
- 26 022669
Стадия Н. 4-({3-[(Аминосульфонил)амино]пропил}амино)-^(3-бром-4-фторфенил)-№-гидрокси1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамид.
Раствор ^[3-({4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3-ил}амино)пропил]сульфамида (35 мг, 73 мкмоль) в метаноле (1 мл) обрабатывают 2 М раствором №ЮН (0,3 мл, 0,6 ммоль) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь обрабатывают уксусной кислотой (50 мкл, 0,9 ммоль), фильтруют и очищают препаративной ЖХМС с получением целевого продукта (14 мг, 42%) в виде твердого вещества. ЖХМС для С12Н16ВтР^О48 (М+Н)': соотношение массы к заряду=451,8, 453,9. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 11,5 (с, 1Н), 8,89 (с, 1Н), 7,17 (дд, 1=8,8, 8,6 Гц, 1Н), 7,09 (дд, 1=6,1, 2,7 Гц, 1Н), 6,76-6,72 (м, 1Н), 6,56 (дд, 1=6,1, 6,1 Гц, 1Н), 6,51 (с, 2Н), 6,17 (дд, 1=5,9, 5,9 Гц, 1Н), 3,27-3,21 (м, 2Н), 2,94-2,88 (м, 2Н), 1,78-1,71 (м, 2Н).
Пример 4. ^(3-Бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-4-({3-[(метилсульфонил)амино]пропил}амино)1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Стадия А. трет-Бутил {3-[(метилсульфонил)амино]пропил}карбамат
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 17, стадия А, с использованием ^(3-аминопропил)(трет-бутокси)карбоксамида |А1бг1сН продукт № 436992] как исходного материала, с выходом 70%. ЖХМС для С4Н1^2О28 ([М-Вос+Н]+Н)+: соотношение массы к заряду=153,1.
Стадия В. ^(3-Аминопропил)метансульфонамид гидрохлорид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 17, стадия В, с использованием трет-бутил-{3-[(метилсульфонил)амино]пропил}карбамата как исходного материала. ЖХМС для СДз^ОгЗ (М+Н)+: соотношение массы к заряду=153,1.
Стадия С. 4-Амино-№-гидрокси^-{3-[(метилсульфонил)амино]пропил}-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 17, стадия С, с использованием ^(3-аминопропил)метансульфонамид гидрохлорида и 4-амино-^гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидоилхлорида [приготовленного в соответствии с примером 1, стадии А-В] как исходных материалов, с выходом 19%
Стадия Ό. Ν'-Г идрокси-4-({3-[(метилсульфонил)амино]пропил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 17, стадия Ό, с использованием 4-амино-№-гидрокси-^{3-[(метилсульфонил)амино]пропил}-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида как исходного материала. ЖХМС для С7Н15^О48 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=279,0.
Стадия Е. ^(3-Бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-4-({3-[(метилсульфонил)амино]пропил}амино)1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамид.
Названное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой из примера 17, стадия Е, с использованием №-гидрокси-4-({3-[(метилсульфонил)амино]пропил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамида и 3-бром-4-фторанилина [Оак^ооб Ртобис18, 1пс., продукт № 013091] как исходных материалов, с выходом 12%. ЖХМС для СвНгВгРН-,О45 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=451,0, 453,0. Ή ЯМР (400 МГц, СП3ОП): δ 7,12 (дд, 1=5,9, 2,4 Гц, 1Н), 7,05 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,83 (м, 1Н), 3,39 (т, 1=6,8 Гц, 2Н), 3,14 (т, 1=6,6 Гц, 2Н), 2,94 (с, 3Н), 1,87 (м, 2Н).
Пример 5. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)-^(3-хлор-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5оксадиазол-3 -карбоксимидамид
- 27 022669
Стадия А. 3-(4-Амино-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-4-(3-хлор-4-фторфенил)-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-он
Раствор 4-амино-№-(3-хлор-4-фторфенил)-№-гидрокси-3,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида (80 г, 0,29 моль) [см. публикацию патентной заявки США № 2006/0258719] в тетрагидрофуране (500 мл) обрабатывают раствором 1,1'-карбонилдиимидазола (53 г, 0,32 моль) в тетрагидрофуране (200 мл) и кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждают до 25°С и упаривают до точки, где осаждается большое количество твердого вещества. Гетерогенную смесь разбавляют этилацетатом (1,5 л) и промывают 1н. раствором НС1 (2x300 мл), водой (300 мл) и раствором соли (200 мл). Органическую фракцию отделяют, сушат над безводным натрия сульфатом, фильтруют и упаривают с получением целевого продукта (88 г, количественный выход) в виде твердого вещества практически белого цвета. Полученный материал используют без дальнейшей очистки. ЖХМС для С10Н6С1РАО3, (М+Н)': соотношение массы к заряду=298,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 7,96 (дд, Л=6,6, 2,3 Гц, 1Н), 7,69-7,60 (м, 2Н), 6,60 (с, 2Н).
Стадия В. ^{4-[4-(3-Хлор-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5-
Раствор 3-(4-амино-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-4-(3-хлор-4-фторфенил)-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она (15 г, 50 ммоль) в дихлорметане (120 мл) обрабатывают трифторуксусным ангидридом (14 мл, 100 ммоль), охлаждают до 0°С и обрабатывают пиридином (8,2 мл, 100 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 10 мин, охлаждают до 0°С и гасят водой (10 мл). Реакционную смесь разбавляют этилацетатом (500 мл) и промывают 1н. раствором НС1 (300 мл), водой (2x200 мл) и раствором соли (200 мл). Органическую фракцию отделяют, сушат над безводным натрия сульфатом, фильтруют и упаривают до объема ~50 мл. Полученный раствор нагревают (~40-50°С) и обрабатывают гексаном (600 мл) при энергичном перемешивании и затем петролейным эфиром (200 мл). Смесь перемешивают при 0°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин, и твердое вещество отделяют фильтрацией, промывают гексаном и сушат с получением целевого продукта (19,7 г, 99%) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХМС для С12Н5С1РА5О4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=394,0. !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 7,82 (дд, ί=6,6, 2,5 Гц, 1Н), 7,59 (дд, >9,0, 9,0 Гц, 1Н), 7,527,47 (м, 1Н).
Стадия С. 4-(3-Хлор-4-фторфенил)-3-(4-{ [2-(тритиламино)этил]амино}-1,2,5-оксадиазол-3-ил)1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-он
Раствор 2-(тритиламино)этанола (10 г, 33 ммоль) [ЕР599220 и ί. Огд. СЬет. (2001), 66, 7615] и трифенилфосфина (8,7 г, 33 ммоль) в тетрагидрофуране (65 мл) при 0°С обрабатывают диизопропилазодикарбоксилатом (7,0 мл, 35 ммоль) по каплям. Реакционную смесь перемешивают при 0°С, выдерживая при этой температуре в течение 15 мин, обрабатывают раствором ^{4-[4-(3-хлор-4-фторфенил)-5-оксо4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-2,2,2-трифторацетамида (9,3 г, 24 ммоль) в тетрагидрофуране (28 мл) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь упаривают, разбавляют этилацетатом (350 мл), охлаждают до 0°С, обрабатывают 1н. раствором НС1 (200 мл) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч.
Реакционную смесь обрабатывают дополнительно 1н. раствором НС1 (150 мл) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 3 ч. Органическую фракцию отделяют, промывают насыщенным раствором натрия бикарбоната (200 мл) и раствором соли (100 мл), сушат над безводным натрия сульфатом, фильтруют и упаривают до желтой пены, которую повторно упаривают с гексаном с
- 28 022669 получением маслянистого твердого вещества. Маслянистое твердое вещество обрабатывают метил третбутил эфиром (50 мл) и перемешивают с получением гетерогенной смеси. Твердое вещество отфильтровывают, промывают метил трет-бутил эфиром (30 мл) и сушат с получением целевого продукта (10 г, 74%) в виде белого твердого вещества. ЖХМС для С3,1Н3..|С1РН-О3,№ (Μ+Να)': соотношение массы к заряду=605,2. Ή ЯМР (300 МГц, ДМСО-66): δ 7,97 (дд, >6,7, 2,6 Гц, 1Н), 7,71-7,66 (м, 1Н), 7,60 (дд, >9,1, 8,8 Гц, 1Н), 7,40-7,37 (м, 6Н), 7,28-7,23 (м, 6 Н), 7,18-7,12 (м, 3Н), 6,59 (дд, >5,9, 5,6 Гц, 1Н), 3,37-3,31 (м, 2Н), 2,96 (дд, >7,6, 7,6 Гц, 1Н), 2,27-2,19 (м, 2Н).
Стадия Ό. 3-{4-[(2-Аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-хлор-4-фторфенил)-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она гидрохлорид
Предварительно подготовленный раствор триизопропилсилана (3,4 мл, 17 ммоль) и трифторуксусной кислоты (44 мл, 57 0 ммоль) добавляют к 4-(3-хлор-4-фторфенил)-3-(4-{[2(тритиламино)этил]амино}-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она (6,5 г, 11 ммоль) и полученную суспензию перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь фильтруют и промывают трифторуксусной кислотой. Фильтрат упаривают до состояния масла, которое разбавляют метанолом (25 мл), охлаждают до 0°С, обрабатывают 4 М раствором НС1 в
1,4-диоксане (14 мл) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 15 мин. Смесь упаривают до твердого вещества, которое обрабатывают диэтиловым эфиром (50 мл) и фильтруют. Твердое вещество промывают диэтиловым эфиром (50 мл) и сушат с получением целевого продукта (4,1 г, 98%) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХМС для С12НцС1РН-О3, (М+Н)+: соотношение массы к заряду=341,1. 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-66): δ 8,05-8,00 (м, 4Н), 7,75-7,69 (м, 1Н), 7,64 (дд, 1=9,1, 8,8 Гц, 1Н), 6,77 (дд, 1=5,9, 5,9 Гц, 1Н), 3,54-3,47 (м, 2Н), 3,04-2,99 (м, 2Н).
Стадия Е. Ы-[2-({4-[4-(3-Хлор-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3 -ил}амино)этил] сульфамид
Раствор хлорсульфонилизоцианата (2,0 мл, 23 ммоль) в дихлорметане (70 мл) обрабатывают третбутиловым спиртом (2,2 мл, 23 ммоль) при 0°С и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Полученную смесь добавляют к суспензии 3-{4-[(2-аминоэтил)амино]-1,2,5оксадиазол-3-ил}-4-(3-хлор-4-фторфенил)-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она гидрохлорида (4,3 г, 11 ммоль) в дихлорметане (70 мл). Реакционную смесь обрабатывают раствором триэтиламина (6,3 мл, 45 ммоль) в дихлорметане (20 мл) при 0°С и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляют 0,1н. раствором НС1 и экстрагируют этилацетатом (2x100 мл). Объединенные органические фракции промывают раствором соли (100 мл), сушат над безводным натрия сульфатом, фильтруют и упаривают до твердого вещества белого цвета. Твердое вещество белого цвета разбавляют дихлорметаном (100 мл), обрабатывают трифторуксусной кислотой (20 мл) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь упаривают до неочищенного остатка, который очищают хроматографией на силикагеле с получением целевого продукта (3,7 г, 78%) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХМС для С^Н^СГР^ОзЗ (М+Н)+: соотношение массы к заряду=420,0. 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-66): δ 7,98 (дд, 1=6,4, 2,1 Гц, 1Н), 7,70-7,60 (м, 2Н), 6,66 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 6,57 (с, 2Н), 6,52 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 3,42-3,35 (м, 2Н), 3,13-3,06 (м, 2Н).
Стадия Р. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)-М-(3-хлор-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5оксадиазол-3 -карбоксимидамид.
Раствор М-[2-({4-[4-(3-хлор-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3-ил}амино)этил]сульфамида (3,7 г, 8,8 ммоль) в метаноле (70 мл) обрабатывают 2 М раствором ЫаОН (18 мл, 35 ммоль) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь гасят с помощью 6н. раствора НС1 до рН ~7 и удаляют метанол при сниженном давлении. Осажденное твердое вещество фильтруют и промывают водой с получением целевого продукта (3,2 г, 92%) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХМС для СцН14С1РМ7О48 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=394,0. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): δ 7,96 (дд, 1=6,8, 2,1 Гц, 0,05Н), 7,32-7,29 (м, 0, 1Н),
7,18 (дд, 1=9,1, 9,1 Гц, 0,95Н), 6,93 (дд, 1=6,4, 2,7 Гц, 0,95Н), 6,71-6,66 (м, 0,95Н), 6,33 (шс, 1Н), 3,35-3,27 (м, 2Н), 3,10-3,06 (м, 2Н).
Пример 6. Ы-(3-Хлор-4-фторфенил)-№-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5- 29 022669 оксадиазол-3 -карбоксимидамид '3-, ΝνΝ
С1
Названное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой из примера 17, стадия Е, с использованием №-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамида и 3-хлор-4-фторанилина |Л10г1сН, продукт № 228583] как исходных материалов. ЖХМС для ί.’ι2Ηι5ΟΕΝ6Ο.·|δ (М+Н)': соотношение массы к заряду=393,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-46): δ 11,50 (с, 1Н), 8,91 (с, 1Н), 7,19 (м, 2Н), 6,96 (дд, 1=6,7, 2,5 Гц, 1Н), 6,71 (м, 1Н), 6,26 (т, 1=6,4 Гц, 1Н), 3,32 (м, 2Н), 3,13 (к, 1=5,8 Гц, 2Н), 2,89 (с, 3Н).
Пример 7. 4-({3-[(Аминосульфонил)амино]пропил}амино)-^(3-хлор-4-фторфенил)-№-гидрокси1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Стадия А. 3-[(Дифенилметилен)амино]пропан-1-ол
РЬ
Раствор 3-амино-1-пропанола [ЛЫпсН продукт № А76400] (2,0 мл, 26 ммоль) в дихлорметане (79 мл) обрабатывают бензофенонимином (4,4 мл, 26 ммоль) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь фильтруют и фильтрат упаривают с получением целевого продукта (6,3 г, количественный выход) в виде масла. Полученный материал используют без дальнейшей очистки. ЖХМС для С16Н^О (М+Н)+: соотношение массы к заряду=240,2.
Стадия В. 3-{4-[(3-Аминопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-хлор-4-фторфенил)-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она трифторацетат
Раствор 3-[(дифенилметилен)амино]пропан-1-ола (80 мг, 0,33 ммоль) и трифенилфосфина (93 мг, 0,36 ммоль) в тетрагидрофуране (1 мл) при 0°С обрабатывают диизопропилазодикарбоксилатом (75 мкл, 0,38 ммоль) по каплям. Реакционную смесь перемешивают при 0°С, выдерживая при этой температуре в течение 15 мин, обрабатывают раствором ^{4-[4-(3-хлор-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4оксадиазол-3-ил]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-2,2,2-трифторацетамида (100 мг, 0,25 ммоль) в тетрагидро фуране (0,5 мл) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь обрабатывают трифторуксусной кислотой (1 мл), перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 3 ч, и упаривают до неочищенного остатка. Полученный материал очищают препаративной ЖХМС с получением целевого продукта (18 мг, 15%). ЖХМС для ^зН^СГР^Оз (М+Н)+: соотношение массы к заряду=355,1.
Стадия С. 4-({3-[(Аминосульфонил)амино]пропил}амино)-^(3-хлор-4-фторфенил)-№-гидрокси1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидамид.
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 15, стадия О, с использованием 3-{4-[(3-аминопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-хлор-4-фторфенил)-1,2,4-оксадиазол5(4Н)-она трифторацетата как исходного материала, с выходом 34%. ЖХМС для С12Н16С1Р^О48 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=408,1. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-46): δ 8,90 (с, 1Н), 7,20 (дд, 1=9,2, 9,0 Гц, 1Н), 6,96 (дд, 1=6,4, 2,7 Гц, 1Н), 6,72-6,69 (м, 1Н), 6,55 (т, 1=6,0 Гц, 1Н), 6,51 (с, 2Н), 6,16 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 3,28-3,21 (м, 2Н), 2,93-2,87 (м, 2Н), 1,76-1,72 (м, 2Н).
Пример 8. ^(3-Хлор-4-фторфенил)-№-гидрокси-4-({3-[(метилсульфонил)амино]пропил}амино)1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Названное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой из примера 4, стадия Е, с использованием №-гидрокси-4-({3-[(метилсульфонил)амино]пропил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамида [приготовленного в соответствии с примером 4, стадии Ά-Ό] и 3-хлор-4-фторанилина [ЛЫпсЬ, продукт № 228583] как исходных материалов, с выходом 10%. ЖХМС для С13Н17С1РТС6О48
- 30 022669 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=407,1. 1Н ЯМР (400 МГц, СЭ300): δ 7,06 (т, 1=8,9 Гц, 1Н), 6,98 (м, 1Н), 6,80 (м, 1Н), 3,73 (м, 2Н), 3,28 (м, 2Н), 2,94 (с, 3Н), 1,28 (м, 2Н).
Пример 9. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)-И-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-№гидрокси-1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Стадия А. И-[4-Фтор-3-(трифторметил)фенил]-№-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 13, стадия А, с использованием И-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидоилхлорида [приготовленного в соответствии с примером 1, стадии А-Е] и 3-трифторметил-4-фторанилина |А10г1сН, продукт № 217778] как исходных материалов, с количественным выходом. ЖХМС для С13Н14Р4И503 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=364,0. ' Н ЯМР (400 МГц, СП30П): δ 7,15 (м, 2Н), 7,08 (м, 1Н), 3,60 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 3,46 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 3,38 (с, 3Н).
Стадия В. 4-[4-Фтор-3-(трифторметил)фенил]-3-{4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-он
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 13, стадия В, с использованием И-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-№-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамида как исходного материала, с выходом 79%. ЖХМС для С14Н12Р4И504 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=390,0. 'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-16): δ 8,20 (дд, 1=6,3, 2,4 Гц, 1Н), 8,03 (м, 1Н), 7,76 (т, 1=9,5 Гц, 1Н), 6,41 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 3,49 (т, 1=5,5 Гц, 2 Н), 3,39 (к, 1=5,7 Гц, 2Н), 3,25 (с, 3Н).
Стадия С. 4-[4-Фтор-3-(трифторметил)фенил]-3-{4-[(2-гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3ил}-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-он
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 13, стадия С, с использованием 4-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-3-{4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она как исходного материала, с выходом 99%. ЖХМС для С13Н10Р4И504 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=376,0. 'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-16): δ 8,22 (м, 1Н), 8,05 (м, 1Н), 7,76 (т, 1=9,9 Гц, 1Н), 6,34 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 4,87 (т, 1=5,2 Гц, 1Н), 3,56 (к, 1=5,5 Гц, 2Н), 3,29 (к, 1=5,7 Гц, 2Н).
Стадия Ό. 2-[(4-{4-[4-Фтор-3-(трифторметил)фенил]-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил}1,2,5-оксадиазол-3 -ил)амино]этилметансульфонат
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 13, стадия Ό, с использованием 4-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-3-{4-[(2-гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она как исходного материала, с выходом 95%. ЖХМС для С14Н12Р4И5068 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=454,0. 'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-16): δ 8,23 (дд, 1=6,5, 2,5 Гц, 1Н), 8,06 (м, 1Н), 7,76 (т, 1=9, 6 Гц, 1Н), 6,76 (т, 1=5,8 Гц, 1Н), 4,37 (т, 1=5,4 Гц, 2Н), 3,60 (к, 1=5,5 Гц, 2Н), 3,17 (с, 3Н).
Стадия Е. 3-{4-[(2-Азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-он
- 31 022669
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 13, стадия Е, с использованием 2-[(4-{4-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил}-1,2,5оксадиазол-3-ил)амино]этилметансульфоната как исходного материала, с выходом 100%. ЖХМС для С13Н9Р4Н'О3 (М-,2+Н)+: соотношение массы к заряду=372,8. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 8,22 (дд, 1=6,2, 2,4 Гц, 1Н), 8,05 (м, 1Н), 7,76 (т, 1=9,6 Гц, 1Н), 6,75 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 3,53 (т, ί=5, 9 Гц, 2Н), 3,45 (к, 1=5,6 Гц, 2Н).
Стадия Р. 3-{4-[(2-Аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 13, стадия Р, с использованием 3-{4-[(2-азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она как исходного материала, с выходом 80%. ЖХМС для С13Н11Р4,6О3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=375,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 8,20 (дд, Л=6,2, 2,4 Гц, 1Н), 8,03 (м, 1Н), 7,74 (т, 1=9,8 Гц, 1Н), 7,10 (ш с, 0,4Н), 6,68 (т, 1=5,5 Гц, 1Н), 3,42 (к, 1=5,8 Гц, 2Н), 2,95 (т, 1=6,5 Гц, 2Н).
Стадия С. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)-,-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-№гидрокси-1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидамид.
Названное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой из примера 13, стадия С, с использованием 3-{4-[(2-аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она гидройодида как исходного материала, с выходом 55%. ЖХМС для С12Н14Р4,7О48 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=428,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 11,60 (с, 1Н), 9,06 (с, 1Н), 7,30 (т, 1=10,1 Гц, 1Н), 7,14 (дд, 1=6,1, 2,7 Гц, 1Н), 7,03 (м, 1Н), 6,71 (т, 1=5,3 Гц, 1Н), 6,58 (с, 2Н), 6,23 (т, 1=6,2 Гц, 1Н), 3,36 (к, 1=6,5 Гц, 2Н), 3,08 (м, 2Н).
Пример 10. ,-[4-Фтор-3-(трифторметил)фенил]-№-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид
Названное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой из примера 17, стадия Е, с использованием №-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамида и 3-трифторметил-4-фторанилина |А1бг1сН, продукт № 217778] как исходных материалов. ЖХМС для С13Н15Р4,6О48 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=427,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 11,60 (с, 1Н), 9,07 (с, 1Н), 7,30 (т, 1=10,1 Гц, 1Н), 7,18 (т, 1=6,0 Гц, 1Н), 7,13 (дд, 1=6,0, 2,7 Гц, 1Н), 7,03 (м, 1Н), 6,27 (т, 1=6,3 Гц, 1Н), 3,32 (м, 2Н), 3,13 (к, 1=6,0 Гц, 2Н), 2,89 (с, 3Н).
Пример 11. 4-({3-[(Аминосульфонил)амино]пропил}амино)-,-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-№гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид
ОХ, н н А п й о О N.. Л1
О
Стадия А. 4-Амино-№-гидрокси-,-(3 -метоксипропил)-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 1, стадия С, с использованием 3-метокси-1-пропанамина как исходного материала, с выходом 93%. ЖХМС для С7Н14,5О3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=216,1.
Стадия В. Ν'-Г идрокси-4-[(3 -метоксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамид
- 32 022669 χΟΗ н 5) χ°'^^νΧ<νΗ2
V
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 1, стадия Ό, с использованием 4-амино-№-гидрокси-Ы-(3-метоксипропил)-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида как исходного материала, с выходом 72%. ЖХМС для СЩ^Ы^ (Μ+Η)+: соотношение массы к заряду=216,1. 'Η ЯМР (300 МГц, ДМСО-ά..): δ 10,4 (с, 1Η), 6,21-6,13 (м, 3Η), 3,37 (т, 1=6,1 Гц, 2Η), 3,28-3,21 (м, 5Η), 1,82-1,74 (м, 2Η).
Стадия С. Ν-Г идрокси-4-[(3 -метоксипропил)амино] -1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидоилхлорид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 1, стадия Е, с использованием №-гидрокси-4-[(3-метоксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида как исходного материала, с количественным выходом. ЖХМС для С7Η12С1N4О3 (М+Щ+: соотношение массы к заряду=235,1.
Стадия Ό. М-[4-Фтор-3 -(трифторметил)фенил]-№-гидрокси-4-[(3 -метоксипропил)амино] -1,2,5оксадиазол-3 -карбоксимидамид
СР,
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 1, стадия Р, с использованием М-гидрокси-4-[(3-метоксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидоилхлорида и 4-фтор-3(трифторметил)бензоламина как исходных материалов, с выходом 87%. ЖХМС для Ο14Η16Ρ4Ν5ϋ3 (Μ+Η)+: соотношение массы к заряду=378,1. 'Η ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 11,5 (с, 1Η), 9,05 (с, 1Η), 7,30 (дд, 1=10,0, 9,6 Гц, 1Η), 7,13-7,11 (м, 1Η), 7,05-7,00 (м, 1Η), 6,22 (т, 1=5,7 Гц, 1Η), 3,35-3,32 (м, 2Η), 3,25-3,19 (м, 5Η), 1,79-1,72 (м, 2Η).
Стадия Е. 4-[4-Фтор-3-(трифторметил)фенил]-3-{4-[(3-метоксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3илЩДД-оксадиазол^ДЩ-он
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 1, стадия С, с использованием М-[4-фтор-3 -(трифторметил)фенил] -№-гидрокси-4-[(3 -метоксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3 карбоксимидамида как исходного материала, с количественным выходом. ЖХМС для С15Η14Р4N5О4 (Μ+Η)+: соотношение массы к заряду=404,0.
Стадия Р. 4 -[4-Фтор-3-(трифторметил)фенил]-3-{4-[(3-гидроксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3илЩДД-оксадиазол^ДЩ-он
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 3, стадия Ό, с использованием 4-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-3-{4-[(3-метоксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол^ДЩ-она как исходного материала, с выходом 97%. ЖХМС для Ο14Η12Ρ4Ν5ϋ4 (Μ+Η)+: соотношение массы к заряду=390,0. 'Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-й6): δ 8,20 (дд, 1=6,4, 2,6 Гц, 1Η), 8,06-8,01 (м, 1Η), 7,75 (дд, 1=10,0, 9,4 Гц, 1Η), 6,53 (т, 1=5,7 Гц, 1Η), 4,59 (т, 1=5,0 Гц, 1Η), 3,51-3,42 (м, 2Η), 3,32-3,26 (м, 2Η), 1,73-1,68 (м, 2Η).
Стадия С. 3-{4-[(3-Азидопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]1,2,4-оксадиазол-5(4Ц)-он
- 33 022669
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 3, стадия Е, с использованием 4-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-3-{4-[(3-гидроксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она как исходного материала, с количественным выходом. ЖХМС для С14НюР4^О3№ (М+№)+: соотношение массы к заряду=437,0.
Стадия Н. 3-{4-[(3-Аминопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил] -1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она гидройодид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 3, стадия Р, с использованием 3-{4-[(3-азидопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она как исходного материала, с выходом 81%. ЖХМС для С14Н13Р^6О3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=389,1. 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-й6): δ 8,18 (дд, 1=6,4, 2,3 Гц, 1Н), 8,06-8,01 (м, 1Н), 7,72 (дд, 1=9,7, 9,4 Гц, 1Н), 7,34 (шс, 2Н), 6,71 (шс, 1Н), 2,78-2,73 (м, 2Н), 1,85-1,75 (м, 2Н).
Стадия I. 4-({3-[(Аминосульфонил)амино]пропил}амино)-Ы-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-№гидрокси-1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидамид.
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 15, стадия С, с использованием 3-{4-[(3-аминопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она гидройодида как исходного материала, с выходом 60%. ЖХМС для С13Н16Р4ЩО4З (М+Н)+: соотношение массы к заряду=442,0. 1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-й6): δ 11,6 (с, 1Н), 9,08 (с, 1Н), 7,31 (дд, 1=10,0, 9,4 Гц, 1Н), 7,13 (дд, 1=6,4, 2,9 Гц, 1Н), 7,05-6,99 (м, 1Н), 6,58 (т, 1=6,0 Гц, 1Н), 6,52 (с, 2Н), 6,17 (т, 1=5, 9 Гц, 1Н), 3,28-3,21 (м, 2Н), 2,94-2,87 (м, 2Н), 1,79-1,72 (м, 2Н).
Пример 12. №[4-Фтор-3-(трифторметил)фенил]-№-гидрокси-4-({3-[(метилсульфонил)амино]пропил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 16 с использованием 3-{4[(3 -аминопропил)амино] -1,2,5-оксадиазол-3 -ил}-4-[4-фтор-3 -(трифторметил)фенил] -1,2,4-оксадиазол5(4Н)-она гидройодида как исходного материала, с выходом 70%. ЖХМС для С14Н17Р4Ы6О4З (М+Н)+: соотношение массы к заряду=441,1. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 11,6 (с, 1Н), 9,07 (с, 1Н), 7,30 (дд, 1=10,0, 9,6 Гц, 1Н), 7,13 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,05-7,02 (м, 2Н), 6,19 (т, 1=5,8 Гц, 1Н), 3,27-3,21 (м, 2Н), 2,99-2,94 (м, 2Н), 2,87 (с, 3Н), 1,76-1,72 (м, 2Н).
Пример 13. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)-№-гидрокси-Ы-[3-(трифторметил)фенил]1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Стадия А. №-Гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-Н-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамид
^Гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидоилхлорид (1,3 г, 5,0 ммоль) [приготовленный в соответствии с примером 1, стадии А-Е] перемешивают в воде (10 мл) и нагревают до 60°С, выдерживая при этой температуре в течение 5 мин. Добавляют 3-(трифторметил)анилин [А1йпсЬ, продукт № А41801] (880 мг, 5,5 ммоль) в виде одной порции и реакционную смесь перемешивают в течение 15 мин. При температуре 60°С добавляют по каплям раствор натрия бикарбоната (630 мг, 7,5
- 34 022669 ммоль) в воде (10 мл) в течение 5 мин. Реакционную смесь перемешивают при 60°С, выдерживая при этой температуре еще в течение 50 мин, и затем охлаждают до комнатной температуры. В колбу добавляют этилацетат (20 мл) и раствор соли (30 мл) и органическую фракцию собирают. Водную фракцию экстрагируют этилацетатом (2x20 мл) и объединенные органические фракции сушат над натрия сульфатом. Растворитель удаляют под вакуумом с получением целевого продукта в виде твердого вещества оранжевого цвета (1,4 г, 80%). ЖХМС вычислено для С13Н15Р3^О3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=346,1. !Н ЯМР (400 МГц, СП3ОП): δ 7,36 (т, 1=8,2 Гц, 1Н), 7,23 (д, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,09 (с, 1Н), 7,02 (д, 1=8,2 Гц, 1Н), 3,60 (т, 1=5,2 Гц, 2Н), 3,46 (т, 1=5,2 Гц, 2Н), 3,38 (с, 3Н).
Стадия В. 3-{4-[(2-Метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
№-Гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-^[3-(трифторметил)фенил]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид (1,4 г, 3,80 ммоль) и 1,1'-карбонилдиимидазол (1,16 г, 7,16 ммоль) растворяют в этилацетате (20 мл). Реакционную смесь нагревают до 70°С, выдерживая при этой температуре в течение 40 мин. Добавляют дополнительное количество 1,1'-карбонилдиимидазола (0,26 г, 1,16 ммоль). После перемешивания при 70°С еще в течение 50 мин реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры. Добавляют этилацетат (20 мл) и неочищенную реакционную смесь промывают 1н. раствором НС1 в воде (2x20 мл). Добавляют солевой раствор, чтобы способствовать разделению первой промывной жидкости. Органическую фракцию сушат над натрия сульфатом и упаривают под вакуумом. Очистка флеш-хроматографией на силикагеле с элюированием этилацетатом в гексане дает целевой продукт (1,3 г, 90%). ЖХМС вычислено для С14Н13Р3^О4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=372,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 8,07 (с, 1Н), 7,92 (м, 2Н), 7,79 (т, 1=8,1 Гц, 1Н), 6,42 (т, 1=6,0 Гц, 1Н), 3,47 (т, 1=5,8 Гц, 2Н), 3,38 (к, 1=5,0 Гц, 2Н), 3,24 (с, 3Н).
Стадия С. 3-{4-[(2-Гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
В круглодонной колбе в атмосфере азота 3-{4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3(трифторметил)фенил]-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-он (1,3 г, 3,6 ммоль) перемешивают в дихлорметане (11 мл). Температуру доводят до -78°С и добавляют по каплям 1,0 М раствор бора трибромида в дихлорметане (7,9 мл, 7,9 ммоль) в течение 15 мин. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение 45 мин и продолжают перемешивание при комнатной температуре в течение дополнительных 45 мин. Реакционную смесь охлаждают до 0°С и добавляют по каплям насыщенный раствор натрия бикарбоната в воде (25 мл) в течение 15 мин. После нагревания до комнатной температуры в колбу добавляют этилацетат (10 мл) и воду (10 мл). Органическую фракцию собирают и водную фракцию экстрагируют этилацетатом (2x20 мл). После сушки над натрия сульфатом объединенных органических фракций растворитель удаляют под вакуумом с получением целевого продукта (1,0 г, 81%). ЖХМС вычислено для С13НцР3^О4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=358,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-46): δ 8,08 (с, 1Н), 7,93 (т, 1=8,2 Гц, 2Н), 7,79 (т, 1=8,2 Гц, 1Н), 6,35 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 4,86 (ш с, 1Н), 3,55 (т, 1=6,0 Гц, 2Н), 3,28 (м, 2Н).
Стадия Ό. 2-[(4-{5-Оксо-4-[3-(трифторметил)фенил]-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил}-1,2,5оксадиазол-3 -ил)амино] этилметансульфонат
К раствору 3-{4-[(2-гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она (1,0 г, 2,9 ммоль) в этилацетате (8,5 мл) добавляют метансульфонилхлорид (0,29 мл, 3,7 ммоль) в виде одной порции. Реакционную смесь перемешивают в течение 5 мин и добавляют триэтиламин (0,52 мл, 3,7 ммоль), также в виде одной порции. После перемешивания в течение дополнительных 10 мин реакционную смесь гасят добавлением воды (5 мл). Продукт экстрагируют этилацетатом (2x5 мл), сушат над натрия сульфатом и упаривают под вакуумом с получением целевого продукта (1,2 г, 99%). ЖХМС вычислено для С14Н13Р3^О68 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=436,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 8,10 (с, 1Н), 7,92 (м, 2Н), 7,80 (т, 1=8,2 Гц, 1Н), 6,77 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 4,36 (т, 1=5,5 Гц, 2Н), 3,58 (м, 2Н), 3,17 (с, 3Н).
- 35 022669
Стадия Е. 3-{4-[(2-Азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
2-[(4-{5-Оксо-4-[3-(трифторметил)фенил]-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил}-1,2,5-оксадиазол-3ил)амино]этилметансульфонат (1,2 г, 2,9 ммоль) растворяют в Ν,Ν-диметилформамиде (2,7 мл). Далее натрия азид (280 мг, 4,3 ммоль) добавляют в виде одной порции, температуру доводят до 65°С и реакционную смесь перемешивают в течение 6 ч. После охлаждения до комнатной температуры добавляют воду (10 мл) для гашения реакции. Продукт экстрагируют этилацетатом (3x10 мл) и объединенные органические фракции сушат над натрия сульфатом. Растворитель удаляют под вакуумом с получением целевого продукта (1,05 г, 96%). ЖХМС вычислено для С13Н10Р3К6О3 (Μ-Ν2+Η)+: соотношение массы к заряду=355,0. !Н ЯМР (400 МГц, ДМСОЛ): δ 8,09 (с, 1Н), 7,93 (м, 2Н), 7,79 (т, 1=8,2 Гц, 1Н), 6,75 (т, 1=5,8 Гц, 1Н), 3,52 (т, 1=5,7 Гц, 2Н), 3,44 (к, 1=5,5 Гц, 2Н).
Стадия Р. 3-{4-[(2-Аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она гидройодид
К раствору 3-{4-[(2-азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она (1,05 г, 2,8 ммоль) в метаноле (12 мл) добавляют натрия йодид (2,5 г, 17 ммоль). После перемешивания в течение 10 мин добавляют по каплям раствор хлортриметилсилана (2,1 мл, 17 ммоль) в метаноле (1,41 мл) в течение 15 мин. Реакционную смесь продолжают перемешивать в течение 40 мин и затем добавляют раствор натрия тиосульфата (2,7 г, 17 ммоль) в воде (12,5 мл) в виде одной порции. Твердое вещество бежевого цвета осаждают добавлением раствора натрия тиосульфата и собирают вакуумной фильтрацией. Твердое вещество промывают водой (2x10 мл) и сушат под вакуумом в течение ночи с получением целевого продукта. Твердое вещество также осаждают из фильтрата и отделяют вакуумной фильтрацией. После промывания водой (3x10 мл) в лейке продукт сушат в течение ночи под вакуумом. Твердое вещество суспендируют промыванием этилацетатом (3,8 мл) в течение 1 ч и повторно отделяют фильтрацией. После промывания этилацетатом (2x2 мл) и сушки в течение ночи получают дополнительный продукт. В общем, 760 мг названного продукта (57%) получают в виде соли гидройодида. ЖХМС вычислено для С^Н^Р^^ (М+Н)+: соотношение массы к заряду=357,1. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6): δ 8,10 (с, 1Н), 7,95 (м, 2Н), 7,81 (т, 1=8,1 Гц, 1Н), 7,68 (ш с, 2Н), 6,74 (т, 1=6,7 Гц, 1Н), 3,49 (м, 2Н), 3,03 (т, 1=6,7 Гц, 2Н).
Стадия С. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)-№-гидрокси-^[3-(трифторметил)фенил]1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамид.
К раствору хлорсульфонилизоцианата (9,2 мкл, 0,11 ммоль) в дихлорметане (0,24 мл) при 0°С и в атмосфере азота добавляют трет-бутиловый спирт (10 мкл, 0,11 ммоль) по каплям. Раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч до получения раствора трет-бутил[хлорсульфонил]карбамата.
В отдельной колбе 3-{4-[(2-аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]1.2.4- оксадиазол-5(4Н)-она гидройодид (26 мг, 0,053 ммоль) суспендируют в дихлорметане (0,5 мл). Помещают в атмосферу азота и температуру доводят до 0°С. Раствор трет-бутил-[хлорсульфонил]карбамата (подготовленный, как описано выше) добавляют в течение 5 мин при перемешивании к суспензии соли амина. Через 10 мин добавляют по каплям триэтиламин (37 мкл, 0,27 ммоль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 ч. После упаривания под вакуумом остаток обрабатывают трифторуксусной кислотой (0,5 мл, 6 ммоль). Полученную смесь перемешивают в течение 1 ч и смесь снова упаривают до сухого состояния под вакуумом. Сухие твердые вещества суспендируют в метаноле (0,5 мл) и добавляют 2,0н. раствор №ОН в воде (0,53 мл, 1,1 ммоль) в виде одной порции. Реакционную смесь нагревают до 45°С и перемешивают в течение 30 мин. После нейтрализации уксусной кислотой (60 мкл, 1,1 ммоль) продукт очищают препаративной ЖХМС с получением целевого продукта (8,5 мг, 39%). ЖХМС вычислено для С12Н15Р^-О28 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=410,0. 1Н ЯМР (400 МГц, СОзОО): δ 7,36 (т, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,23 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,10 (с, 1Н), 7,03 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 3,48 (м, 2Н), 3,29 (м, 2Н).
Пример 14. №-Гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-^[3-(трифторметил)фенил]1.2.5- оксадиазол-3 -карбоксимидамид
- 36 022669
Названное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой из примера 17, стадия Е, с использованием №-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамида и 3-трифторметиланилина [АМпсЪ, продукт № А41801] как исходных материалов. ЖХМС для С13Н19Р3УО48 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=409,1. 1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-66): δ 11,63 (с, 1Н), 9,08 (с, 1Н), 7,39 (т, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,21 (м, 2Н), 7,10 (с, 1Н), 6,99 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 6,28 (т, 1=5,4 Гц, 1Н), 3,36 (к, 1=5,8 Гц, 2Н), 3,17 (к, 1=5,8 Гц, 2Н), 2,91 (с, 3Н).
Пример 15. 4-({3-[(Аминосульфонил)амино]пропил}амино)-№-гидрокси-^[3-(трифторметил)фенил] -1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Стадия А. 3-(4-Амино-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-он
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 5, стадия А, с использованием 4-амино-№-гидрокси-^[3-(трифторметил)фенил]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида [см. публикацию патентной заявки США № 2006/0258719] как исходного материала, с выходом 97%. ЖХМС для СцНР3уО3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=314,1.
Стадия В. 2,2,2-Трифтор-^(4-{5-оксо-4-[3-(трифторметил)фенил]-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3ил}-1,2,5 -оксадиазол-3 -ил)ацетамид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 5, стадия В, с использованием 3-(4-амино-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она как исходного материала, с выходом 90%. ЖХМС для С13Н<5Р6УО4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=410,0. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): δ 7,91-7,88 (м, 2Н), 7,76-7,69 (м, 2Н).
Стадия С. 3-{4-[(3-Метоксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-он
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 3, стадия С, с использованием 2,2,2-трифтор^-(4-{5-оксо-4-[3-(трифторметил)фенил]-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил}-1,2,5оксадиазол-3-ил)ацетамида как исходного материала, с выходом 49%. ЖХМС для С15Н15Р3УО4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=386,1. 1Н ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 7,83 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 7,72-7,67 (м, 2Н), 7,59 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 6,08-6,04 (м, 1Н), 3,57 (т, 1=5,6 Гц, 2 Н), 3,54-3,47 (м, 2 Н), 3,40 (с, 3 Н), 2,01-1,93 (м, 2Н).
Стадия Ό. 3-{4-[(3-Гидроксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-он
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 3, стадия Ό, с использованием 3-{4-[(3-метоксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она как исходного материала, с выходом 69%. ЖХМС для С14Н13Р3УО4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=372,1. !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): δ 8,07 (с, 1Н), 7,95-7,90 (м, 2 Н), 7,79 (дд, 1=7,9, 7,9 Гц, 1Н), 6,55 (т, 1=5,6 Гц, 1Н), 4,59 (т, 1=5,1 Гц, 1Н), 3,47-3,42 (м, 2Н), 3,30-3,25 (м, 2Н), 1,72-1,65 (м, 2Н).
Стадия Е. 3-{4-[(3-Азидопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
- 37 022669
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 3, стадия Е, с использованием 3-{4-[(3-гидроксипропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она как исходного материала, с выходом 92%. ЖХМС для С14НПР3^О3№ (Μ+Να)': соотношение массы к заряду=419,0.
Стадия Р. 3-{4-[(3-Аминопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она гидройодид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 3, стадия Р, с использованием 3-{4-[(3-азидопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4-оксадиазол5(4Н)-она как исходного материала, с выходом 92%. ЖХМС для (М+Н)+: соотношение массы к заряду=371,1. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 8,09 (с, 1Н), 7,96-7,92 (м, 2 Н), 7,80 (дд, 1=8,0, 7,8 Гц, 1Н), 7,53 (шс, 2 Н), 6,70-6,65 (м, 1Н), 4,10 (шс, 1Н), 3,32-3,31 (м, 2Н), 2,81-2,78 (м, 2Н), 1,85-1,82 (м, 2Н).
Стадия О. 4-({3-[(Аминосульфонил)амино]пропил}амино)-№-гидрокси-^[3-(трифторметил)фенил] -1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидамид.
Раствор 3-{4-[(3-аминопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она гидройодида (1,5 г, 3,0 ммоль) и сульфамида (1,7 г, 18 ммоль) в пиридине (60 мл) нагревают в микроволновом реакторе при 130°С, выдерживая при этой температуре в течение 10 мин. Реакционную смесь упаривают с получением неочищенного промежуточного соединения Ν-{3-[(4-{5оксо-4-[3-(трифторметил)фенил]-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил}-1,2,5-оксадиазол-3-ил)амино]пропил}сульфамид. Раствор неочищенного полупродукта в метаноле (90 мл) обрабатывают 2н. раствором №ОН (12 мл, 24 ммоль) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь обрабатывают 6 М раствором НС1 до кислой реакции раствора и экстрагируют этилацетатом (250 мл). Органическую фракцию промывают водой (100 мл) и раствором соли (100 мл), сушат над безводным натрия сульфатом, фильтруют и упаривают с получением неочищенного остатка. Полученный материал очищают препаративной ЖХМС с получением целевого продукта (1,1 г, 82%) в виде смолоподобного твердого вещества. ЖХМС для С13Н17Р3^О48 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=424,0. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 11,6 (с, 1Н), 9,12 (с, 1Н), 7,37 (дд, 1=8,0, 8,0 Гц, 1Н), 7,21-7,18 (м, 1Н), 7,07 (с, 1Н), 6,95 (д, 1=10,0 Гц, 1Н), 6,52 (ш с, 3Н), 6,17 (т, 1=6,0 Гц, 1Н), 3,28-3,22 (м, 2Н), 2,932,89 (м, 2Н), 1,77-1,73 (м, 2Н).
Пример 16. №-Гидрокси-4-({3-[(метилсульфонил)амино]пропил}амино)^-[3-(трифторметил)фенил] -1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Раствор 3-{4-[(3-аминопропил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она гидройодида (из примера 15, стадия Р; 25 мг, 50 мкмоль) в дихлорметане (1 мл) обрабатывают триэтиламином (17 мкл, 0,12 ммоль) и метансульфонилхлоридом (6 мкл, 70 мкмоль) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь упаривают с получением промежуточного соединения ^{3-[(4-{5-оксо-4-[3-(трифторметил)фенил]-4,5-дигидро1.2.4- оксадиазол-3-ил}-1,2,5-оксадиазол-3-ил)амино]пропил}метансульфонамида в виде неочищенного остатка, который используют без дальнейшей очистки. Раствор неочищенного полупродукта в метаноле (1 мл) обрабатывают 2н. раствором №ЮН (0,25 мл, 0,5 ммоль) и перемешивают при 25°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь обрабатывают уксусной кислотой (50 мкл, 0,9 ммоль), фильтруют и очищают препаративной ЖХМС с получением целевого продукта (13 мг, 65%) в виде твердого вещества. ЖХМС для С14Н18Р^6О48 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=423,1. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 11,6 (с, 1Н), 9,11 (с, 1Н), 7,37 (дд, 1=8,0, 8,0 Гц, 1Н), 7,20 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,07-7,01 (м, 2 Н), 6,96 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 6,20 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 3,27-3,22 (м, 2Н), 2,99-2,94 (м, 2Н), 2,87 (с, 3 Н), 1,78-1,71 (м, 2Н).
Пример 17. ^(4-Фтор-3-метилфенил)-№-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)1.2.5- оксадиазол-3 -карбоксимидамид
- 38 022669
Стадия А. трет-Бутил {2-[(метилсульфонил)амино]этил}карбамат
ΗΝ-^Ο
-ΝΗ ^(2-Аминоэтил)(трет-бутокси)карбоксамид (17,5 мл, 0,11 моль) |А1Га № Ь19947] перемешивают в дихлорметане (320 мл) и добавляют триэтиламин (33 мл, 0,24 моль). Добавляют раствор метансульфонилхлорида (8,5 мл, 0,11 моль) в дихлорметане (10 мл). Полученную смесь перемешивают в течение 1 ч и добавляют воду (30 мл). Продукт экстрагируют дихлорметаном (3x30 мл), сушат над натрия сульфатом и упаривают под вакуумом с получением целевого продукта (21 г, 81%). ЖХМС вычислено для С3НП^О2З (М-Вос+Н)+: соотношение массы к заряду=139,1.
Стадия В. ^(2-Аминоэтил)метансульфонамида дигидрохлорид / 2НС1
ТТГо / о
Нгй трет-Бутил {2-[(метилсульфонил)амино]этил}карбамат (21 г, 88 ммоль) перемешивают в 4н. растворе хлороводорода в 1,4-диоксане (97 мл, 388 ммоль) в течение 30 мин. Растирание с этилацетатом и гексаном с последующим добавлением диэтилового эфира и гексана дает целевое соединение в виде смолы (19 г, 100%). ЖХМС вычислено для С3Нц^О2З (М+Н)+: соотношение массы к заряду=139,0.
Стадия С. 4-Амино-№-гидрокси-Ы-{2-[(метилсульфонил)амино]этил}-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамид
4-Амино-Н-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидоила хлорид (9,7 г, 60 ммоль) перемешивают в этаноле (460 мл), медленно добавляют порциями ^(2-аминоэтил)метансульфонамида дигидрохлорид (19 г, 10 9 ммоль) и увеличивают температуру до 25°С. После охлаждения до 0°С добавляют по каплям триэтиламин (53 мл, 380 ммоль) в течение 15 мин и реакционную смесь перемешивают еще в течение 15 мин. Раствор промывают водой (300 мл) и раствором соли (300 мл). Органическую фракцию сушат над натрия сульфатом и упаривают под вакуумом с получением целевого продукта (16 г, 100%). ЖХМС вычислено для (М+Н)+: соотношение массы к заряду=265,1. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ
10,16 (с, 1Н), 9,07 (м, 1Н), 7,18 (м, 1Н), 6,37 (с, 2Н), 3,36 (м, 2Н), 3,15 (м, 2Н), 2,87 (с, 3Н).
Стадия Ό. Ν'-Г идрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамид
4-Амино-№-гидрокси-Н-{2-[(метилсульфонил)амино]этил}-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид (0,47 г, 1,8 ммоль) перемешивают в 1,2-этандиоле (38 мл). Калия гидроксид (600 г, 11 ммоль) добавляют в виде одной порции. Реакционную смесь нагревают до 130°С, выдерживая при этой температуре в течение 4 ч, и охлаждают до комнатной температуры. Добавляют 1н. раствор НС1 (60 мл) и продукт экстрагируют этилацетатом (4x40 мл). Объединенные органические фракции сушат над натрия сульфатом и упаривают под вакуумом с получением целевого продукта (0,45 г, 96%). ЖХМС вычислено для С6Н12И6О4З (М+Н)+: соотношение массы к заряду=265,1. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 10,49 (с, 1Н),
7,18 (м, 1Н), 6,20 (м, 3Н), 3,36 (м, 2Н), 3,15 (м, 2Н), 2,87 (с, 3Н).
Стадия Е. ^(4-Фтор-3-метилфенил)-№-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5оксадиазол-3 -карбоксимидамид.
№-Гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид (35 мг, 0,13 ммоль) перемешивают в 1,4-диоксане (2 мл) и добавляют 6н. раствор хлороводорода (4 мл). Раствор охлаждают до 0°С и медленно добавляют раствор натрия нитрита (11 мг, 0,16 ммоль) в воде (3 мл). Смесь перемешивают в течение 1 ч при 0°С и выпаривают. Добавляют сухой 1,4-диоксан (2 мл) и смесь выпаривают в течение в два раза большего времени. Добавляют раствор 4-фтор-3-метиланилина [А1бпсЬ, продукт № 559415] (25 мг, 0,20 ммоль) в этаноле (2 мл) и смесь перемешивают в течение 1 ч. Очистка
- 39 022669 препаративной ЖХМС (рН 2) дает названное соединение (17 мг, 27%). ЖХМС вычислено для С13Н18РЖО48 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=373,1. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-ф): δ 11,25 (с, 1Н), 8,61 (с, 1Н), 7,18 (м, 1Н), 6,91 (м, 1Н), 6,72 (м, 1Н), 6,58 (м, 1Н), 6,24 (с, 1Н), 3,32 (м, 2Н), 3,11 (м, 2Н), 2,89 (с, 3Н), 2,05 (с, 3Н).
Пример 18. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)-Ж(3-циано-4-фторфенил)-№-гидрокси-
Стадия А. Ж(3-Циано-4-фторфенил)-№-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 13, стадия А, с использованием Жгидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидоила хлорида [полученного в соответствии с примером 1, стадии А-Е] и 5-амино-2-фторбензонитрила |А10г1сН. продукт № 639877] как исходных материалов, с выходом 100%. ЖХМС для САНмЕНО (М+Н)+: соотношение массы к заряду=321,0.
Стадия В. 2-Фтор-5-[3-{4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-5-оксо-1,2,4-оксадиазол4(5Н)-ил]бензонитрил
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 13, стадия В, с использованием Ж(3-циано-4-фторфенил)-№-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида как исходного материала, с выходом 91%. ЖХМС для С14Н12РЖО4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=347,0. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-сЕ): δ 8,25 (дд, 1=5,7, 2,6 Гц, 1Н), 8,06 (м, 1Н), 7,77 (т, 1=9,2 Гц, 1Н), 6,41 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 3,48 (м, 2Н), 3,40 (к, 1=5,4 Гц, 2Н), 3,25 (с, 3Н).
Стадия С. 2-Фтор-5-[3-{4-[(2-гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-5-оксо-1,2,4-оксадиазол4(5Н)-ил]бензонитрил
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 13, стадия С, с использованием 2-фтор-5-[3-{4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-5-оксо-1,2,4-оксадиазол-4(5Н)ил]бензонитрила как исходного материала, с количественным выходом. ЖХМС для С13Н10РЖО4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=333,0.
Стадия Ό. 2-({4-[4-(3-Циано-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3-ил}амино)этилметансульфонат
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 13, стадия Ό, с использованием 2-фтор-5-[3-{4-[(2-гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-5-оксо-1,2,4-оксадиазол-4(5Н)ил]бензонитрила как исходного материала, с выходом 88%. ЖХМС для С14Н12РЖО68 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=411,0.
Стадия Е. 5-[3-{4-[(2-Азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-5-оксо-1,2,4-оксадиазол-4(5Н)-ил]2-фторбензонитрил
- 40 022669
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 13, стадия Е, с использованием 2-({4-[4-(3-циано-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5-оксадиазол-3ил}амино)этилметансульфоната как исходного материала, с выходом 95%.
Стадия Р. 5-[3-{4-[(2-Аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-5-оксо-1,2,4-оксадиазол-4(5Н)-ил]2-фторбензонитрила гидройодид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 13, стадия Р, с использованием 5-[3-{4-[(2-азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-5-оксо-1,2,4-оксадиазол-4(5Н)-ил]-2фторбензонитрила как исходного материала, с выходом 57%. ЖХМС для С13НПРАО3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=332,0. !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 8,29 (дд, 1=5,8, 2,7 Гц, 1Н), 8,09 (м, 1Н), 7,83 (ш с, 3Н), 7,79 (т, >9,0 Гц, 1Н), 6,77 (т, Л=5,9 Гц, 1Н), 3,50 (к, >6,4 Гц, 2Н), 3,04 (м, 2Н).
Стадия О. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)А-(3-циано-4-фторфенил)А-гидрокси1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидамид.
Во флаконе для обработки микроволнами 5-[3-{4-[(2-аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-5оксо-1,2,4-оксадиазол-4(5Н)-ил]-2-фторбензонитрила гидройодид (20,0 мг, 0,044 ммоль) и сульфамид (25 мг, 0,2 6 ммоль) суспендируют в пиридине (0,5 мл). Реакционную смесь нагревают до 120°С, выдерживая при этой температуре в течение 10 мин в микроволновом реакторе. Растворитель удаляют и остаток растворяют в метаноле (0,17 мл). Добавляют 2,0н. раствор №ЮН в воде (0,22 мл, 0,44 ммоль) в виде одной порции. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи. После нейтрализации уксусной кислотой (50 мкл) продукт очищают с использованием препаративной ЖХМС с получением названного в заголовке соединения (4,9 мг, 29%). ЖХМС для С12Н14Р^О48 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=385,0. !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 11,65 (с, 1Н), 9,08 (с, 1Н), 7,34 (т, 1=9,1 Гц, 1Н),
7,22 (дд, 1=5,4, 2,8 Гц, 1Н), 7,13 (м, 1Н), 6,70 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 6,59 (с, 2Н), 6,20 (т, 1=6,1 Гц, 1Н), 3,34 (м, 2Н), 3,09 (м, 2Н).
Пример 19. ^(3-Циано-4-фторфенил)-Ы-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Названное в заголовке соединение получают в соответствии с методикой из примера 17, стадия Е, с использованием №-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида и 3-циано-4-фторанилина [А1йпсЬ, продукт № 639877] как исходных материалов. ЖХМС для С13Н14РТС7№О48 (М+№)+: соотношение массы к заряду=406,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 11,65 (с, 1Н), 9,08 (с, 1Н), 7,35 (м, 1Н), 7,18 (м, 3Н), 6,56 (м, 1Н), 6,23 (м, 1Н), 6,24 (с, 2Н), 3,32 (м, 2Н), 3,14 (м, 2Н), 2,89 (с, 3Н).
Пример 20. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)-Ы-[(4-бром-2-фурил)метил]-№-гидрокси1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Стадия А. трет-Бутил [(4-бром-2-фурил)метил]карбамат
Вг
4-Бром-2-фуральдегид |А1йпсЬ, продукт № 666599] (10,0 г, 57,1 ммоль) растворяют в этаноле (50 мл) и воде (50 мл). Ν-Гидроксиамингидрохлорид (7,15 г, 103 ммоль) и натрия ацетат (8,44 г, 103 ммоль) добавляют последовательно и реакционную смесь доводят до кипения с обратным холодильником при 100°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Раствор частично упаривают, осадок собирают и промывают холодной водой (2x10 мл). Фильтрат экстрагируют этилацетатом (3x25 мл) и объединенные
- 41 022669 органические фракции промывают раствором соли (50 мл). После сушки над натрия сульфатом раствор упаривают под вакуумом. Остаток объединяют с осадком и растворяют в уксусной кислоте (70 мл). После помещения на ледяную баню порциями добавляют цинк (14,7 г, 225 ммоль) в течение 25 мин. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение 1,5 ч и фильтруют сквозь броунмиллерит. Растворитель удаляют под вакуумом.
Остаток перемешивают в тетрагидрофуране (72 мл). Добавляют по каплям 2,0н. раствор №ЮН в воде (179 мл, 358 ммоль) в течение 45 мин. Через 5 мин добавляют по каплям ди-трет-бутилдикарбонат (16,9 г, 77,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч и тетрагидрофуран удаляют под вакуумом. Добавляют этилацетат (100 мл) и суспензию фильтруют. Органическую фракцию собирают и продукт экстрагируют этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические фракции промывают раствором соли (100 мл) и водой (100 мл), сушат над натрия сульфатом и упаривают под вакуумом с получением целевого продукта (15,3 г, 79%). ЖХМС вычислено для С'0Η',|В^NNа03, (М+№)+: соотношение массы к заряду=298,0. 4Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): δ 7,79 (с, 1Н), 7,37 (т, 4=5,8 Гц, 1Н), 6,33 (с, 1Н), 4,06 (д, 1=6,1 Гц, 2Н), 1,36 (с, 9Н).
Стадия В. 1-(4-Бром-2-фурил)метанамин трифторацетат
Вг
В атмосфере азота раствор трет-бутил [(4-бром-2-фурил)метил]карбамата (15,3 г, 55,4 ммоль) в дихлорметане (86 мл) при 0°С обрабатывают трифторуксусной кислотой (43 мл) в течение 15 мин. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение 30 мин. Растворитель удаляют под вакуумом и перегоняют толуолом (3x50 мл). Продукт лиофилизируют в течение 18 ч с получением целевого продукта в виде твердого вещества коричневого цвета (13,0 г, 81%). ЖХМС вычислено для С5Н4ВгО (МЯН2)+: соотношение массы к заряду=158,9, 160,9. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): δ 8,34 (ш с, 3 Н), 8,01 (с, 1Н), 6,70 (с, 1Н), 4,08 (с, 1Н).
Стадия С. ^[(4-Бром-2-фурил)метил]-№-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамид
Ν-Г идрокси-4-(2-метоксиэтиламино)-1,2,5-оксадиазол-3-карбимидоилхлорид [приготовленный в соответствии с методикой примера 1, стадии А-Е] (4,5 г, 20,3 ммоль) перемешивают в этаноле (20 мл) при комнатной температуре. Добавляют раствор 1-(4-бром-2-фурил)метанамина трифторацетата (6,5 г, 22,4 ммоль) в этаноле (24 мл) и смесь перемешивают в течение 15 мин. Триэтиламин (6,3 мл, 44,8 ммоль) добавляют по каплям в течение 10 мин и реакционную смесь еще перемешивают в течение 15 мин. Растворитель удаляют под вакуумом и после добавления воды (50 мл) продукт экстрагируют этилацетатом (3x50 мл). Объединенные органические фракции промывают раствором соли (50 мл), сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением целевого продукта (7,5 г, 100%). ЖХМС вычислено для СцН15ВгЩО4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=359,9, 361,9.
Стадия Ό. 4-[(4-Бром-2-фурил)метил]-3-{4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
^[(4-Бром-2-фурил)метил]-№-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид (7,3 г, 20,4 ммоль) и 1,1'-карбонилдиимидазол (5,0 г, 30,5 ммоль) растворяют в этилацетате (72 мл). Реакционную смесь нагревают до 65°С, выдерживая при этой температуре в течение 15 мин. Добавляют этилацетат (70 мл) и неочищенную реакционную смесь промывают 0,1н. раствором хлороводорода в воде (2x70 мл). Органическую фракцию сушат над натрия сульфатом и упаривают под вакуумом. Очистка флеш-хроматографией на силикагеле с элюированием этилацетатом в гексане дает целевой продукт (4,1 г, 90%). ЖХМС вычислено для С12Н13ВгЩО5 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=386,0, 388,0. 1Н ЯМР (400 МГц, СИ3ОП): δ 7,88 (с, 1Н), 6,67 (с, 1Н), 6,39 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 5,07 (с, 2Н), 3,50 (м, 2Н), 3,41 (к, 1=5,7 Гц, 2Н), 3,25 (с, 3Н).
Стадия Е. 4-[(4-Бром-2-фурил)метил]-3-{4-[(2-гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
- 42 022669
В круглодонной колбе в атмосфере азота перемешивают 4-[(4-бром-2-фурил)метил]-3-{4-[(2метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-он (8,2 г, 21 ммоль) в дихлорметане (68 мл). Температуру доводят до -78°С и 1,0 М раствор бора трибромида в дихлорметане (43 мл, 43 ммоль) добавляют по каплям в течение 45 мин. Реакционную смесь перемешивают при -78°С, выдерживая при этой температуре в течение 45 мин, и продолжают перемешивание при 0°С, выдерживая при этой температуре еще в течение 30 мин. При 0°С добавляют по каплям насыщенный раствор натрия бикарбоната в воде (120 мл) в течение 25 мин. После нагревания до комнатной температуры органическую фракцию собирают и водную фракцию экстрагируют этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические фракции промывают раствором соли (100 мл), сушат над натрия сульфатом и упаривают под вакуумом с получением целевого продукта (7,7 г, 97%) вместе с небольшим количеством 3-{4-[(2бромэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[(4-бром-2-фурил)метил]-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она. ЖХМС вычислено для С’11НцВгИ505 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=371,7, 374,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-ά..): δ 7,89 (с, 1Н), 6,68 (с, 1Н), 6,31 (т, 1=5,8 Гц, 1Н), 5,08 (с, 2Н), 4,85 (ш с, 1Н), 3,56 (м, 2Н), 3,30 (к, 1=5,6 Гц, 2Н).
Стадия Р. 2-[(4-{4-[(4-Бром-2-фурил)метил]-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил}-1,2,5оксадиазол-3 -ил)амино] этил метансульфонат
К раствору 4-[(4-бром-2-фурил)метил]-3-{4-[(2-гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она (7,7 г, 21 ммоль, содержит также некоторое количество бромсодержащего соединения) в этилацетате (100 мл) добавляют метансульфонилхлорид (0,96 мл, 12 ммоль) в виде одной порции. Реакционную смесь перемешивают в течение 5 мин и добавляют триэтиламин (1,6 мл, 11 ммоль), также в виде одной порции. После перемешивания в течение 30 мин дополнительно добавляют метансульфонилхлорид (0,4 мл, 5 ммоль) с последующим, после 5 мин, добавлением триэтиламина (0,58 мл, 4,2 ммоль). По истечении 15 мин реакционную смесь гасят с помощью добавления воды (100 мл). Продукт экстрагируют этилацетатом (3x50 мл) и объединенные органические фракции промывают раствором соли (100 мл). После высушивания над натрия сульфатом растворитель удаляют под вакуумом с получением целевого продукта (9,3 г, 100%). ЖХМС вычислено для С13Н13,ВгИ50-5 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=449,8, 451,8. !Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-й6): δ 7,88 (с, 1Н), 6,73 (т, 1=6,2 Гц, 1Н), 6,68 (с, 1Н), 5,08 (с, 2Н), 4,37 (м, 2Н), 3,59 (к, 1=5,8 Гц, 2Н), 3,16 (с, 3Н).
Стадия О. 3-{4-[(2-Азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[(4-бром-2-фурил)метил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
2-[(4-{4-[(4-Бром-2-фурил)метил]-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил}-1,2,5-оксадиазол-3ил)амино]этилметансульфонат (9,1 г, 20 ммоль, содержит также некоторое количество бромсодержащего соединения) растворяют в диметилформамиде (90 мл). Добавляют натрия азид (1,97 г, 30,3 ммоль) в виде одной порции и после прохождения 5 мин температуру доводят до 65°С. Реакционную смесь перемешивают в течение 2 ч и охлаждают до комнатной температуры. Добавляют воду (200 мл) для гашения реакции. Продукт экстрагируют этилацетатом (3x100 мл) и объединенные органические фракции промывают раствором соли (2x150 мл) и водой (150 мл). После просушивания над натрия сульфатом растворитель удаляют под вакуумом с получением целевого продукта (7,7 г, 96%). ЖХМС вычислено для С11Н9ВгИ8Иа0.1 (М+Иа)+: соотношение массы к заряду=418,7, 421,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 7,88 (с, 1Н), 6,71 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 6,68 (с, 1Н), 5,08 (с, 2Н), 3,54 (т, 1=5,7 Гц, 2Н), 3,47 (к, 1=5,7 Гц, 2Н).
Стадия Н. 3-{4-[(2-Аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[(4-бром-2-фурил)метил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она гидройодид
К раствору 3-{4-[(2-азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[(4-бром-2-фурил)метил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она (7,7 г, 19 ммоль) в метаноле (80 мл) добавляют натрия йодид (17,4 г, 116 ммоль).
- 43 022669
После перемешивания в течение 10 мин добавляют по каплям раствор хлортриметилсилана (14,8 мл, 116 ммоль) в течение 5 мин. Реакционную смесь продолжают перемешивать в течение 1 ч, во время чего медленно добавляют к раствору натрия тиосульфата (23,0 г, 145 ммоль) в воде (800 мл) при 0°С, получая осадок. Колбу промывают метанолом (10 мл) и осадок собирают фильтрованием под вакуумом. Твердое вещество промывают холодной водой (2x25 мл) и сушат под вакуумом с получением целевого продукта (5,8 г, 60%) в виде соли гидройодида. ЖХМС вычислено для СцН12ВгН5О4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=370,9, 372,8. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 7,86 (с, 1Н), 7,36 (шс, 3 Н), 6,68 (т, 1=5,8 Гц, 1Н), 6,65 (с, 1Н), 5,07 (с, 2Н), 3,45 (к, 1=5,8 Гц, 2Н), 2,98 (т, 1=5,8 Гц, 2Н).
Стадия I. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)-Ы-[(4-бром-2-фурил)метил]-№-гидрокси-
Во флаконе для обработки микроволнами 3-{4-[(2-аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[(4бром-2-фурил)метил]-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она гидройодид (30 мг, 0,060 ммоль) и сульфамид (29 мг, 0,30 ммоль) суспендируют в пиридине (1 мл). Реакционную смесь продувают азотом и нагревают до 130°С, выдерживая при этой температуре в течение 3 мин в микроволновом реакторе. Растворитель удаляют и неочищенное промежуточное соединение суспендируют в метаноле (1 мл). Добавляют 2,0н. раствор №ЮН в воде (0,30 мл, 0,60 ммоль) в виде одной порции и реакционную смесь нагревают до 45°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. После нейтрализации уксусной кислотой (68 мкл, 1,2 ммоль) продукт очищают препаративной ЖХМС с получением целевого продукта (10,4 мг, 41%). ЖХМС вычислено для С10Н15Вг^О58 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=423,9, 426,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 10,87 (с, 1Н), 7,75 (с, 1Н), 6,83 (т, 1=7,3 Гц, 1Н), 6,68 (т, 1=6,0 Гц, 1Н), 6,56 (с, 2Н), 6,30 (т, 1=6,0 Гц, 1Н), 6,23 (с, 1Н), 4,56 (д, 1=7,0 Гц, 2Н), 3,32 (к, 1=6,3 Гц, 2Н), 3,07 (к, 1=6,3 Гц, 2Н).
Пример 21. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)-Ы-[(4-хлор-2-фурил)метил]-Ν'-гидрокси-
При перемешивании к суспензии алюминия трихлорида (29,8 г, 0,223 моль) в дихлорметане (200 мл) в атмосфере азота добавляют 2-фуранкарбоксальдегид (8,44 мл, 0,102 моль) в течение 15 мин. После перемешивания на протяжении 30 мин хлор пропускают сквозь суспензию с использованием пипетки в течение 50 мин. Колбу укупоривают и перемешивают при комнатной температуре в течение 90 ч. Реакционную смесь медленно добавляют к смеси льда (500 мл) в 1,0н. растворе НС1 в воде (300 мл). Смеси позволяют натреться до комнатной температуры в течение следующего часа. Слои отделяют и органическую фракцию собирают. Дополнительное количество продукта экстрагируют дихлорметаном (2x200 мл). Объединенные органические фракции промывают водой (250 мл) и сушат над натрия сульфатом. Растворитель удаляют под вакуумом с получением неочищенной смеси, содержащей целевой продукт (14,0 г, 100%, чистота 60%). Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 9,56 (с, 1Н), 8,36 (с, 1Н), 7,71 (с, 1Н).
Стадия В. трет-Бутил [(4-хлор-2-фурил)метил]карбамат
С1
4-Хлор-2-фуральдегид (14,0 г, чистота 60%, 64 ммоль) растворяют в этаноле (50 мл) и воде (50 мл). Ν-Гидроксиамина гидрохлорид (12,6 г, 182 ммоль) и натрия ацетат (14,9 г, 182 ммоль) добавляют последовательно и реакционную смесь кипятят с обратным холодильником при 100°С, выдерживая при этой температуре в течение 1 ч. Раствор частично упаривают, затем добавляют воду (25 мл) и этилацетат (50 мл). Органическую фракцию собирают и водную фракцию экстрагируют этилацетатом (2x25 мл). Объединенные органические фракции промывают раствором соли (50 мл) и водой (50 мл). После просушивания над натрия сульфатом раствор упаривают под вакуумом. Промежуточное соединение суспендируют в уксусной кислоте (115 мл). Раствор охлаждают на ледяной бане и порциями добавляют цинк (33,1 г, 506 ммоль) в течение 20 мин. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение 2 ч и
- 44 022669 фильтруют сквозь броунмиллерит. Растворитель удаляют под вакуумом.
Остаток перемешивают в тетрагидрофуране (100 мл). Добавляют по каплям 2,0 М раствор NаОΗ в воде (152 мл, 304 ммоль) в течение 30 мин. Реакционную смесь помещают на ледяную баню и, после 5 мин, добавляют по каплям ди-трет-бутилдикарбонат (24,3 г, 111 ммоль) в течение 15 мин. Реакционную смесь нагревают до комнатной температуры в течение следующих 2 ч и затем тетрагидрофуран удаляют под вакуумом. Добавляют этилацетат (100 мл) и суспензию фильтруют. Органическую фракцию собирают и водную фракцию экстрагируют этилацетатом (2x100 мл). Объединенные органические фракции промывают смесью вода/солевой раствор (100 мл, 1:1), сушат над натрия сульфатом и упаривают под вакуумом. Очистка флеш-хроматографией на силикагеле с элюированием этилацетатом в гексане дает целевой продукт (3,05 г, 22%). ЖХМС вычислено для С10Η14С1NNаО3 (Μ+Να)': соотношение массы к заряду=253,9. !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 7,81 (с, 1Η), 7,37 (т, 1=5,3 Гц, 1Η), 6,32 (с, 1Η), 4,05 (д, 1=6,0 Гц, 2Η), 1,36 (с, 9Η).
Стадия С. 1-(4-Хлор-2-фурил)метанамина трифторацетат
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 20, стадия В, с использованием трет-бутил-[(4-хлор-2-фурил)метил]карбамата как исходного материала, с количественным выходом. ЖХМС вычислено для СЩдСЮ (Μ-ΝΗ2)+: соотношение массы к заряду=115,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6): δ 8,29 (шс, 3Η), 8,04 (с, 1Η), 6,69 (с, 1Η), 4,07 (с, 2Η).
Стадия Ό. М-[(4-Хлор-2-фурил)метил]-№-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 20, стадия С, с использованием М-гидрокси-4-(2-метоксиэтиламино)-1,2,5-оксадиазол-3-карбимидоилхлорида и 1-(4-хлор-2фурил)метанамина трифторацетата как исходных материалов, с количественным выходом. ЖХМС вычислено для С11Η15С1N5О4 (М+Η)': соотношение массы к заряду=316,0.
Стадия Е. 4-[(4-Хлор-2-фурил)метил]-3-{4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Щ-он
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 20, стадия Ό, с использованием М-[(4-хлор-2-фурил)метил]-№-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида как исходного материала, с выходом 51%. ЖХМС вычислено для С12Η13С1N5О5 (Μ+Η)+: соотношение массы к заряду=342,0.
Стадия Р. 4-[(4-Хлор-2-фурил)метил]-3-{4-[(2-гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Щ-он
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 20, стадия Е, с использованием 4-[(4-хлор-2-фурил)метил]-3-{4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4-оксадиазол5(4Ц)-она как исходного материала, с количественным выходом. ЖХМС вычислено для С11Η10С1N5NаО5 (Μ+Να)': соотношение массы к заряду=349,9.
Стадия С. 2-[(4-{4-[(4-Хлор-2-фурил)метил]-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил}-1,2,5оксадиазол-3 -ил)амино] этилметансульфонат
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 20, стадия Р, с использованием 4-[(4-хлор-2-фурил)метил]-3-{4-[(2-гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4-оксадиазол-5(4Щ-она как исходного материала, с выходом 69%. ЖХМС вычислено для С12Η13С1N5О7δ (Μ+Η)+: соотношение массы к заряду=405,8.
- 45 022669
Стадия Н. 3-{4-[(2-Азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[(4-хлор-2-фурил)метил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 20, стадия О, с использованием 2-[(4-{4-[(4-хлор-2-фурил)метил]-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил}-1,2,5-оксадиазол-3ил)амино]этилметансульфоната как исходного материала, с количественным выходом. ЖХМС вычислено для СцН9С1М8МаО4 (Μ+Να)': соотношение массы к заряду=374,9.
Стадия I. 3-{4-[(2-Аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[(4-хлор-2-фурил)метил]-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она гидройодид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 20, стадия Н, с использованием 3-{4-[(2-азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[(4-хлор-2-фурил)метил]-1,2,4-оксадиазол5(4Н)-она как исходного материала, с выходом 57%. ЖХМС вычислено для СцН12СШ6О4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=326,9.
Стадия 1. 4-({2-[(Аминосульфонил)амино]этил}амино)-М-[(4-хлор-2-фурил)метил]-№-гидрокси1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамид
Названное соединение получают в соответствии с методикой из примера 20, стадия I, с использованием 3-{4-[(2-аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-[(4-хлор-2-фурил)метил]-1,2,4-оксадиазол5(4Н)-она гидройодида как исходного материала, с выходом 53%. ЖХМС вычислено для С’нН^СШ-ОяЗ (М+Н)+: соотношение массы к заряду=379,9. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): δ 10,88 (с, 1Н), 7,77 (с, 1Н), 6,83 (т, 1=6,8 Гц, 1Н), 6,68 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 6,56 (с, 2Н), 6,30 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 6,22 (с, 1Н), 4,55 (д, 2 Н), 3,32 (к, 1=6,3 Гц, 2Н), 3,06 (к, 1=6,3 Гц, 2Н).
Пример 22. Альтернативное получение промежуточного соединения 3-(4-(2-аминоэтиламино)-1,2,5оксадиазол-3-ил)-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она гидройодида
Стадия А. 4-Амино-№-гидрокси-М-(2-метоксиэтил)-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид
4-Амино-М-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидоила хлорид (может быть получен в соответствии с примером 1, стадии А-В, 200,0 г, 1,23 моль) смешивают с этилацетатом (1,2 л). При 0-5°С 2метоксиэтиламин |А1бпс11, продукт № 143693] (119,0 мл, 1,35 моль) добавляют в виде одной порции при перемешивании. Температуру реакционной смеси увеличивают до 41°С. Реакционную смесь охлаждают до 0-5°С. Добавляют триэтиламин (258 мл, 1,84 моль). После перемешивания в течение 5 мин ЖХМС показывает завершение реакции. Реакционную смесь промывают водой (500 мл) и раствором соли (500 мл), сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением целевого продукта (294 г, 119%) в виде неочищенного темного масла. ЖХМС для С6Н12Ы5О3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=202,3. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): δ 10,65 (с, 1Н), 6,27 (с, 2 Н), 6,10 (т, 1=6,5 Гц, 1Н), 3,50 (м, 2Н), 3,35 (д, 1=5,8 Гц, 2Н), 3,08 (с, 3Н).
Стадия В. №-Гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид
4-Амино-№-гидрокси-М-(2-метоксиэтил)-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид (248,0 г, 1,23 моль) смешивают с водой (1 л). Добавляют калия гидроксид (210 г, 3,7 моль). Реакционную смесь кипятят с обратным холодильником при 100°С, выдерживая при этой температуре в течение ночи (15 ч). Данные
- 46 022669
ТСХ с использованием 50% этилацетата (который содержит 1% аммония гидроксида) в гексане показывают завершение реакции (для продукта К£=0,6, для исходного материала К£=0,5). ЖХМС также показывает завершение реакции. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и экстрагируют этилацетатом (3x1 л). Объединенные растворы этилацетата сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением целевого продукта (201 г, 81%) в виде неочищенного твердого вещества практически белого цвета. ЖХМС для С6Н12^О3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=202,3. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6): δ 10,54 (с, 1Н), 6,22 (с, 2 Н), 6,15 (т, 1=5,8 Гц, 1Н), 3,45 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 3,35 (м, 2 Н), 3,22 (с, 3Н).
Стадия С. ^Гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидоил хлорид
К ,Ν о
При комнатной температуре №-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамид (50,0 г, 0,226 моль) растворяют в 6,0 М водном растворе хлористо-водородной кислоты (250 мл, 1,5 моль). Добавляют натрия хлорид (39,5 г, 0,676 моль) с последующим добавлением воды (250 мл) и этилацетата (250 мл). При 3-5°С предварительно подготовленный водный раствор (100 мл) натрия нитрита (15,0 г, 0,217 моль) медленно добавляют в течение 1 ч. Реакционную смесь перемешивают при 3-8°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч, и затем при комнатной температуре в течение уикэнда. ЖХМС показывает завершение реакции. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (2x200 мл). Объединенные растворы этилацетата сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением целевого продукта (49,9 г, 126%) в виде неочищенного твердого вещества белого цвета. ЖХМС для С<5Н10СШ4О3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=221,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6): δ 13,43 (с, 1Н), 5,85 (т, 1=5,6 Гц, 1Н), 3,50 (т, 1=5,6 Гц, 2Н), 3,37 (дд, 1=10,8, 5,6 Гц, 2Н), 3,25 (с, 3Н).
Стадия Ό. ^(3-Бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамид
N-Гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидоила хлорид (46,0 г, 0,208 моль) смешивают с водой (300 мл). Смесь нагревают до 60°С. Добавляют 3-бром-4-фторанилин [Оак^οοά ргойисК продукт № 013091] (43,6 г, 0,229 моль) и перемешивают в течение 10 мин. Нагретый раствор натрия бикарбоната (26,3 г, 0,313 моль) (300 мл вода) добавляют в течение 15 мин. Реакционную смесь перемешивают при 60°С, выдерживая при этой температуре в течение 20 мин. ЖХМС показывает завершение реакции. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры и экстрагируют этилацетатом (2x300 мл). Объединенные растворы этилацетата сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением целевого продукта (76,7 г, 98%) в виде неочищенного твердого вещества коричневого цвета. ЖХМС для С12Н14ВгР^О3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=374,0, 376,0. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6): δ 11,55 (с, 1Н), 8,85 (с, 1Н), 7,16 (т, 1=8,8 Гц, 1Н), 7,08 (дд, 1=6,1, 2,7 Гц, 1Н), 6,75 (м, 1Н), 6,14 (т, 1=5,8 Гц, 1Н), 3,48 (т, 1=5,2 Гц, 2 Н), 3,35 (дд, 1=10,8, 5,6 Гц, 2Н), 3,22 (с, 3Н).
Стадия Е. 4-(3-Бром-4-фторфенил)-3-{4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
Смесь ^(3-бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3карбоксимидамида (76,5 г, 0,204 моль), 1,1'-карбонилдиимидазола (49,7 г, 0,307 моль) и этилацетата (720 мл) нагревают до 60°С и перемешивают в течение 20 мин. ЖХМС показывает завершение реакции. Реакционную смесь охлаждают до комнатной температуры, промывают 1н. раствором НС1 (2x750 мл), сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением целевого продукта (80,4 г, 98%) в виде неочищенного твердого вещества коричневого цвета. ЖХМС для С13Н12ВгР^О4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=400,0, 402,0. !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6): δ 7,94 (т, 1=8,2 Гц, 1Н), 7,72 (дд, 1=9,1, 2,3 Гц, 1Н), 7,42 (м, 1Н), 6,42 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 3,46 (т, 1=5,4 Гц, 2Н), 3,36 (т, 1=5,8 Гц, 2Н), 3,26 (с, 3Н).
Стадия Р. 4-(3-Бром-4-фторфенил)-3-{4-[(2-гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
- 47 022669
4-(3-Бром-4-фторфенил)-3-{4-[(2-метоксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4-оксадиазол5(4Н)-он (78,4 г, 0,196 моль) растворяют в дихлорметане (600 мл). При -67°С добавляют бора трибромид (37 мл, 0,392 моль) в течение 15 мин. Реакционную смесь нагревают до -10°С в течение 30 мин. ЖХМС показывает завершение реакции. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч. При 0-5°С реакционную смесь медленно гасят насыщенным раствором натрия бикарбоната (1,5 л) в течение 30 мин. Температуру реакционной смеси увеличивают до 25°С. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (2x500 мл, органическая фракция, которая экстрагируется первой, - на дне, и органическая фракция, которая экстрагируется второй, - вверху). Объединенные органические фракции сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением целевого продукта (75 г, 99%) в виде неочищенного твердого вещества коричневого цвета. ЖХМС для С12Н10ВгРЫ5О4 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=386,0, 388,0. ΊI ЯМР (400 МГц, ДМСО-46): δ 8,08 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,70 (м, 1Н), 7,68 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,33 (т, 1=5, 6 Гц, 1Н), 4,85 (т, 1=5,0 Гц, 1Н), 3,56 (дд, 1=10,6, 5,6 Гц, 2Н), 3,29 (дд, 1=11,5, 5,9 Гц, 2Н).
Стадия О. 2-({4-[4-(3-Бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3-ил}амино)этилметансульфонат
4-(3-Бром-4-фторфенил)-3-(4-(2-гидроксиэтиламино)-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-1,2,4-оксадиазол5(4Н)-он (72,2 г, 0,188 моль) смешивают с этилацетатом (600 мл). Добавляют метансульфонилхлорид (19,2 мл, 0,248 моль) с последующим добавлением триэтиламина (34,9 мл, 0,250 моль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 5 мин. Когда ЖХМС показывает завершение реакции (М+Н=442), добавляют 500 мл воды к реакционной смеси. Реакционную смесь экстрагируют этилацетатом (2x500 мл). Объединенные растворы этилацетата промывают раствором соли (500 мл), сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением 85,1 г неочищенного твердого вещества коричневого цвета. По данным 1Н ЯМР проверяют структуру. Выход неочищенного продукта 97%. ЖХМС для С13НпВгР^О68№ (Μ+Να)': соотношение массы к заряду=485,9, 487,9. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-46): δ 8,08 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,72 (м, 1Н), 7,58 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,75 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 4,36 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 3,58 (дд, 1=11,2, 5,6 Гц, 2Н), 3,18 (с, 3Н).
Стадия Н. 3-{4-[(2-Азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
2-(4-(4-(3-Бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-1,2,5-оксадиазол-3-иламино)этилметансульфонат (50,0 г, 0,108 моль) растворяют в Ν,Ν-диметилформамиде (83 мл). Добавляют натрия азид (10,5 г, 0,162 моль). Реакционную смесь перемешивают при 65°С, выдерживая при этой температуре в течение 5-6 ч. ЖХМС показывает завершение реакции (Μ+Να=435). Реакцию гасят водой (250 мл) и экстрагируют этилацетатом (2x250 мл). Объединенные растворы этилацетата промывают водой (250 мл, разделение слоев медленное, добавляют 100 мл раствора соли для содействия разделению), сушат над натрия сульфатом и упаривают с получением 49,7 г неочищенного твердого вещества коричневого цвета. Выход неочищенного продукта 112%. ЖХМС для С!2Н8ВгР^О3№ (Μ+Να)': соотношение массы к заряду=433,0, 435,0. Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-46): δ 8,08 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,72 (м, 1Н), 7,58 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,75 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 3,54 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 3,45 (дд, 1=11,1, 5,2 Гц, 2Н).
Стадия I. 3-(4-(2-Аминоэтиламино)-,2,5-оксадиазол-3-ил)-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4-оксадиазол5(4Н)-она гидройодид
3-(4-(2-Азидоэтиламино)-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-он
- 48 022669 (80,0 г, 0,194 моль) смешивают с метанолом (800 мл). Добавляют натрия йодид (175,0 г, 1,17 моль). Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 10 мин. Хлортриметилсилан (148 мл, 1,17 моль) растворяют в метаноле (100 мл) и добавляют к реакционной смеси в течение 30 мин. Температуру реакционной смеси увеличивают до 42°С. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 30 мин. ЖХМС показывает завершение реакции (М+Н=386). Реакцию гасят с помощью натрия тиосульфата (190,0 г, 1,20 моль) в воде (900 мл). Осаждается большое количество твердого вещества. Продукт собирают фильтрацией (скорость фильтрации медленная), промывают водой (200 мл) и сушат под вакуумом в течение ночи. Остаток на фильтре суспендируют в этилацетате (500 мл) в течение 30 мин. Продукт фильтруют (скорость фильтрации медленная) и сушат под вакуумом в течение уик-энда с получением 95 г твердого вещества практически белого цвета. ЖХМС для СЦНпВгРНО (М+Н)+: соотношение массы к заряду=384,9, 386,9. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-й6): δ 8,12 (м, 4 Н), 7,76 (м, 1Н), 7,58 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,78 (т, 1=6,1 Гц, 1Н), 3,51 (дд, 1=11,8, 6,1 Гц, 2 Н), 3,02 (м, 2Н).
Пример 23. Альтернативный способ получения 4-({2-[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-Ы-(3бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида
Стадия А. 4-(3-Бром-4-фторфенил)-3-(4-(2-гидроксиэтиламино)-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
К раствору 4-(3-бром-4-фторфенил)-3-(4-(2-метоксиэтиламино)-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она (может быть подготовленный в соответствии с примером 1, стадии А-С; 1232 г, 3,08 моль) в дихлорметане (12 л) при перемешивании в колбу объемом 22 л при 0°С добавляют бора трибромид (354 мл, 3,67 мл) по каплям с такой скоростью, чтобы не превысить температуру 10°С. После перемешивания на льду в течение 1 ч осторожно добавляют насыщенный водный раствор натрия бикарбоната (2 л) с такой скоростью, чтобы не превысить температуру 20°С (время добавления 10 мин). Полученную смесь переносят в делительную лейку объемом 50 л, разбавляют водой (10 л) и рН водных слоев доводят от 1 до 8 с использованием твердого натрия бикарбоната. Фракции отделяют, органическую фракцию промывают водой (10 л) и растворители удаляют под вакуумом с получением твердого вещества рыжевато-коричневого цвета (24 моль обрабатывают несколькими циклами, 9,54 кг, количественный выход). Материал суспендируют в 4 объемах смеси гептан/этилацетат (4x22 л колбы, 7:1), фильтруют и сушат с получением названного соединения в виде твердого вещества рыжевато-коричневого цвета (8679 г, 94%). Продукт представляет собой смесь соответствующих гидрокси- и бром-производных.
Стадия В. 2-(4-(4-(3-Бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-1,2,5оксадиазол-3-иламино)этилметансульфонат
К раствору 4-(3-бром-4-фторфенил)-3-{4-[(2-гидроксиэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-она (1,5 кг, 3,9 моль, содержит также некоторое количество бромсодержащего соединения) в этилацетате (12 л) добавляют метансульфонилхлорид (185 мл, 2,4 моль) по каплям в течение 1 ч при комнатной температуре. По каплям добавляют триэтиламин (325 мл, 2,3 моль) в течение 45 мин, во время чего температуру реакционной смеси повышают до 35°С. По прохождении 2 ч реакционную смесь промывают водой (5 л), раствором соли (1 л), сушат над натрия сульфатом, объединяют с втрое большим объемом такой же реакционной смеси и растворители удаляют под вакуумом с получением целевого продукта (7600 г, количественный выход, содержит также некоторое количество соответствующего бромсодержащего соединения. Осторожно: раздражающая пыль) в виде твердого вещества рыжеватокоричневого цвета. ЖХМС для С13НцВгР^О68№ (Μ+Να)': соотношение массы к заряду=485,9, 487,9. !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-а6): δ 8,08 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,72 (м, 1Н), 7,58 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,75 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 4,36 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 3,58 (дд, 1=11,2, 5,6 Гц, 2Н), 3,18 (с, 3Н).
Стадия С. 3-(4-(2-Азидоэтиламино)-1,2,5-оксадиазол-3-ил)-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он
- 49 022669
К раствору 2-({4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3-ил}амино)этилметансульфоната (2,13 кг, 4,6 моль, содержит также некоторое количество бромсодержащего соединения) в диметилформамиде (4 л) при перемешивании в колбе объемом 22 л добавляют натрия азид (380 г, 5,84 моль). Реакционную смесь нагревают до 50°С, выдерживая при этой температуре в течение 6 ч, выливают в смесь лед/вода (8 л) и экстрагируют смесью этилацетат/гептан (20 л, 1:1). Органическую фракцию промывают водой (5 л) и раствором соли (5 л) и растворители удаляют под вакуумом с получением целевого продукта (14 64 г, 77%) в виде твердого вещества рыжеватокоричневого цвета. ЖХМС для С^ЩВгР^О^Ыа (М+№)+: соотношение массы к заряду=4 33,0, 435,0. 1Н ЯМР (ДМСО-й6, 400 МГц): δ 8,08 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,72 (м, 1Н), 7,58 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,75 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 3,54 (т, 1=5,3 Гц, 2Н), 3,45 (дд, 1=11,1, 5,2 Гц, 2Н).
Стадия Ό. 3-{4-[(2-Аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4оксадиазол-5(4Н)-он гидрохлорид
Стадия Ό, часть 1. трет-Бутил 2-(4-(4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3ил)-1,2,5 -оксадиазол-3 -иламино)этилкарбамат
р
Натрия йодид (108 0 г, 7,2 моль) добавляют к 3-{4-[(2-азидоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4(3-бром-4-фторфенил)-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она (500 г, 1,22 моль) в метаноле (6 л). Смесь перемешивают в течение 30 мин, в течение которых наблюдается незначительное выделение тепла. Добавляют по каплям хлортриметилсилан (930 мл, 7,33 моль) в виде раствора в метаноле (1 л) с такой скоростью, чтобы температура не превышала 35°С, и реакционную смесь перемешивают в течение 3,5 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь нейтрализуют 33 мас.% раствором натрия тиосульфата пентагидрата в воде (~1,5 л), разбавляют водой (4 л) и рН осторожно доводят до 9 твердым калия карбонатом (250 г добавляют маленькими порциями: наблюдается пенообразование). Добавляют ди-трет-бутилдикарбонат (318 г, 1,45 моль) и реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре. Добавляют дополнительное количество калия карбоната (200 г) порциями по 50 г в течение 4 ч, чтобы рН не изменилось или стало больше 9. После перемешивания при комнатной температуре в течение ночи твердое вещество фильтруют, растирают водой (2 л) и затем МТБЭ (1,5 л). Всего производят 11 циклов (5,5 кг, 13,38 моль). Объединенные твердые вещества растирают со смесью ТГФ/дихлорметан (24 л, 1:1, 4 цикла в колбе роторного испарителя объемом 20 л, 50°С, 1 ч), фильтруют и промывают дихлорметаном (3 л каждый цикл) с получением твердого вещества практически белого цвета. Неочищенный материал растворяют при 55°С тетрагидрофураном (5 мл/г), обрабатывают обесцвечивающим углем (2 мас.%) и силикагелем (2 мач.%) и фильтруют в горячем виде сквозь броунмиллерит с получением продукта в виде твердого вещества практически белого цвета (5122 г). Объединенные МТБЭ, ТГФ и дихлорметан фильтраты упаривают под вакуумом и хроматографируют (2 кг силикагеля, градиент 0-100% этилацетата в гептане, 30 л) с получением дополнительной порции продукта (262 г). Объединенные твердые вещества трет-бутил 2-(4-(4(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил)-1,2,5-оксадиазол-3-иламино)этилкарбамата сушат до получения требуемой массы в конвекционной печи (5385 г, 83%).
Стадия Ό, часть 2. 3-{4-[(2-Аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-бром-4-фторфенил)1.2.4- оксадиазол-5(4Н)-она гидрохлорид.
Метод А.
В колбу объемом 22 л помещают хлороводород (4н. раствор в 1,4-диоксане, 4 л, 16 моль). Добавляют порциями трет-бутил [2-({4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]1.2.5- оксадиазол-3-ил}амино)этил]карбамат (2315 г, 4,77 моль) в виде твердого вещества в течение 10 мин. Суспензию перемешивают при комнатной температуре, и она постепенно превращается в густую пасту, которую невозможно перемешивать. После стояния в течение ночи при комнатной температуре пасту суспендируют в этилацетате (10 л), фильтруют, повторно суспендируют в этилацетате (5 л), фильтруют и сушат до получения требуемой массы с получением целевого продукта в виде твердого вещества
- 50 022669 белого цвета (объединяют с продуктами других циклов, использовали 5 кг исходного материала, 4113 г, 95%). ЖХМС для С12НцВгРН5О3 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=384,9, 386,9. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): δ 8,12 (м, 4 Н), 7,76 (м, 1Н), 7,58 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,78 (т, 1=6,1 Гц, 1Н), 3,51 (дд, 1=11,8, 6,1 Гц, 2Н), 3,02 (м, 2Н).
Метод В.
трет-Бутил [2-({4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3-ил}амино)этил] карбамат (5000 г) добавляют к смеси изопропанола (20 л) и 4н. раствора НС1 в 1,4-диоксане (10 л) при комнатной температуре. Партию нагревают до 40-45°С и выдерживают в течение 1 ч. Этилацетат добавляют к партии при 40-45°С и выдерживают в течение 2,5 ч. После завершения реакции, что проверяется с помощью ВЭЖХ, добавляют гептан (10 л) к партии. Партию охлаждают до 25°С. Продукт отделяют фильтрацией и влажный остаток на фильтре промывают этилацетатом (3x5,0 л). Продукт сушат в вакуумной печи при 20°С с получением 4344 г (93,4%) названного в заголовке соединения. Данные ЖХ-МС, 1Н, 13С ЯМР и ВЭЖХ для этой партии идентичны данным продукта, полученного способом А.
Стадия Е. трет-Бутил ({[2-({4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]1,2,5-оксадиазол-3 -ил}амино)этил]амино}сульфонил)карбамат
Круглодонную колбу объемом 5 л заполняют хлорсульфонилизоцианатом [А16псЪ, продукт № 142662] (149 мл, 1,72 моль) и дихлорметаном (1,5 л) и охлаждают с использованием ледяной бани до 2°С. трет-Бутанол (162 мл, 1,73 моль) в дихлорметане (200 мл) добавляют по каплям с такой скоростью, чтобы температура не превысила 10°С. Полученный раствор перемешивают при комнатной температуре в течение 30-60 мин с получением трет-бутил-[хлорсульфонил]карбамата.
Колбу объемом 22 л заполняют 3-{4-[(2-аминоэтил)амино]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}-4-(3-бром-4фторфенил)-1,2,4-оксадиазол-5(4Н)-она гидрохлоридом (661 г, 1,57 моль) и 8,5 л дихлорметана. После охлаждения до -15°С на бане лед/соль раствор трет-бутил-[хлорсульфонил]карбамата (подготовленный, как описано выше) добавляют с такой скоростью, чтобы температура не превысила -10°С (время добавления 7 мин). После перемешивания в течение 10 мин добавляют триэтиламин (1085 мл, 7,78 моль) с такой скоростью, чтобы температура не превысила -5°С (время добавления 10 мин). Охлаждающую баню убирают, реакционную смесь нагревают до 10°С, разделяют на две порции и нейтрализуют 10% конц. раствором НС1 (4,5 л каждая порция). Каждую порцию переносят в делительную лейку объемом 50 л и разбавляют этилацетатом до полного растворения твердого вещества белого цвета (~25 л). Фракции отделяют и органическую фракцию промывают водой (5 л), раствором соли (5 л), растворители удаляют под вакуумом с получением твердого вещества практически белого цвета. Твердое вещество растирают с МТБЭ (2x1,5 л) и сушат до получения требуемой массы с получением твердого вещества белого цвета. Таким образом обрабатывают все 4113 г исходного материала (5409 г, 98%). 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОά6): δ 10,90 (с, 1Н), 8,08 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,72 (м, 1Н), 7,59 (т, 1=8, 6 Гц, 1Н), 6,58 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 3,38 (дд, 1=12,7, 6,2 Гц, 2Н), 3,10 (дд, 1=12,1, 5,9 Гц, 2Н), 1,41 (с, 9Н).
Стадия Р. ^[2-({4-[4-(3-Бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3-ил}амино)этил]сульфамид
Метод А: с использованием трифторуксусной кислоты.
В колбу объемом 22 л, содержащую смесь трифторуксусная кислота/вода (8,9 л, 98:2), добавляют порциями трет-бутил ({[2-({4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5оксадиазол-3-ил}амино)этил]амино}сульфонил)карбамат (1931 г, 3,42 моль) в течение 10 мин. Полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 ч, растворители удаляют под вакуумом и перегоняют дихлорметаном (2 л). Полученное твердое вещество обрабатывают второй раз свежеприготовленной смесью трифторуксусная кислота/вода (8,9 л, 98:2), нагревают в течение 1 ч до 40-50°С, растворители удаляют под вакуумом и перегоняют дихлорметаном (3x2 л). Полученное твердое вещество белого цвета сушат в вакуумной печи при 50°С, выдерживая при этой температуре в течение ночи. Таким образом обрабатывают все 5409 г (4990 г, количественный выход). ЖХМС для С'2Н'2В^РN-Ο58 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=463,9, 465,9. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): δ 8,08 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н), 7,72 (м, 1Н), 7,59 (т, 1=8,7 Гц, 1Н), 6,67 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 6,52 (т, 1=6,0 Гц, 1Н), 3,38 (дд, 1=12,7,
- 51 022669
6,3 Гц, 2Н), 3,11 (дд, 1=12,3, 6,3 Гц).
Метод В: с использованием хлористо-водородной кислоты.
К раствору трет-бутил ({[2-({4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]1.2.5- оксадиазол-3-ил}амино)этил]амино}сульфонил)карбамата (4500 г) в изопропаноле (9 л) добавляют 4н. раствор НС1 в диоксане (8,0 л). Реакционную смесь нагревают до 40-45°С и выдерживают при этой температуре приблизительно 5 ч. После завершения реакции (проверяется по данным ВЭЖХ) к реакционной смеси добавляют гептан (72 л). Полученную смесь нагревают до 68°С и выдерживают при этой температуре в течение 1 ч. Партию охлаждают до приблизительно 23°С. Продукт в виде твердого вещества собирают фильтрацией. Влажный остаток на фильтре промывают смесью гептана (16 л) и изопропанола (1,2 л) и сушат на фильтровальной лейке под вакуумом. Сырой продукт растворяют в этилацетате (10,8 л) при приблизительно 43°С. Гептан (32,4 л) добавляют к раствору этилацетата в течение 15 мин. Партию нагревают до 70°С и выдерживают при этой температуре в течение 1 ч. Партию охлаждают до 21°С и твердый продукт собирают фильтрацией. Влажный остаток на фильтре промывают гептаном (14,4 л) и сушат на фильтровальной лейке под вакуумом. Выход продукта составляет 3034 г. Данные ЖХ-МС, 1Н и 13С ЯМР и ВЭЖХ для данной партии идентичны данным продукта, полученного способом А.
Стадия С. (2)-4-({2-[(Лминосульфонил)амино]этил}амино)-,-(3-бром-4-фторфенил)-№-гидрокси1.2.5- оксадиазол-3 -карбоксимидамид.
Метод А.
К неочищенной смеси ,-[2-({4-[4-(3-бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3ил]-1,2,5-оксадиазол-3-ил}амино)этил]сульфамида (2,4 моль), содержащей остаточное количество трифторуксусной кислоты, при перемешивании добавляют в 22-л колбу ТГФ (5 л). Полученный раствор охлаждают до 0°С с использованием ледяной бани и добавляют 2н. раствор №ЮН (4 л) с такой скоростью, чтобы температура не превысила 10°С. После перемешивания при комнатной температуре в течение 3 ч (ЖХМС показывает отсутствие исходного материала) рН доводят до 3-4 упариванием НС1 (~500 мл). ТГФ удаляют под вакуумом и полученную смесь экстрагируют этилацетатом (15 л). Органическую фракцию промывают водой (5 л), раствором соли (5 л) и растворители удаляют под вакуумом с получением твердого вещества. Твердое вещество растирают с МТБЭ (2x2 л), объединяют с тремя другими реакционными смесями такого же объема и сушат в течение ночи в конвекционной печи с получением твердого вещества белого цвета (3535 г). Твердое вещество перекристаллизуют (3x22 л колбы, обработка ультрафильтрацией смесью вода/этанол 2:1, 14,1 л каждая колба) и сушат при 50°С в конвекционной печи до получения требуемой массы названного соединения в виде твердого вещества практически белого цвета (3290 г, 78%). ЖХМС для СцН14ВгР,7О48 (М+Н)+: соотношение массы к заряду=437,9, 439,9. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 11,51 (с, 1Н), 8,90 (с, 1Н), 7,17 (т, 1=8,8 Гц, 1Н), 7,11 (дд, 1=6,1, 2,7 Гц, 1Н), 6,76 (м, 1Н), 6,71 (т, .16® Гц, 1Н), 6,59 (с, 2 Н), 6,23 (т, 1=6,1 Гц, 1Н), 3,35 (дд, 1=10,9, 7,0 Гц, 2Н), 3,10 (дд, 1=12,1, 6,2 Гц, 2Н). С помощью рентгеноструктурного кристаллографического анализа определено, что названное соединение находится в Ζ-конфигурации (Ζ-изомер) с учетом двойной связи углерод-азот (Ο=Ν) оксимовой функциональной группы.
Метод В.
,-[2-({4-[4-(3-Бром-4-фторфенил)-5-оксо-4,5-дигидро-1,2,4-оксадиазол-3-ил]-1,2,5-оксадиазол-3ил}амино)этил]сульфамид (1500 г) добавляют к ТГФ (6,0 л) и партию охлаждают до 2°С. Трифторуксусную кислоту (0,006 л) добавляют к партии при 2°С с последующим добавлением водного раствора натрия гидроксида (384 г твердого вещества №ОН в 4,8 л воды) при 0-2°С. Партию нагревают до приблизительно 16°С и выдерживают в течение 5 ч. После завершения реакции, что проверяется с помощью ВЭЖХ, добавляют концентрированную хлористо-водородную кислоту (0,7 л) до доведения рН партии до 3-4. Около 4 л растворителя удаляют из партии дистилляцией при сниженном давлении. Партию добавляют к этилацетату (18,0 л) и двухфазную смесь перемешивают в течение 15 мин. Органическую фракцию последовательно промывают водой (6,0 л) и раствором соли (6,0 л). Органический раствор сушат над безводным магния сульфатом. Магния сульфат фильтруют и фильтрат выпаривают до сухого состояния при сниженном давлении. К полученному твердому веществу добавляют МТБЭ (3,0 л) и суспензию перемешивают в течение 15 мин. Твердое вещество продукта отделяют фильтрацией. Остаток на фильтре промывают последовательно МТБЭ (1,2 л) и гептаном (1,2 л). Твердое вещество сушат на фильтровальной лейке под вакуумом с получением 1416 г (87,9%) продукта. Продукт (2440 г, полученный в виде двух партий) дополнительно очищают повторным суспендированием в МТБЭ (9,6 л) при 17°С, выдерживая при этой температуре в течение 2 ч. Партию охлаждают до 6°С, выдерживая при этой температуре в течение 30 мин. Твердое вещество продукта собирают фильтрацией и влажный остаток на фильтре последовательно промывают МТБЭ (3,6 л) и гептаном (1,2 л). Продукт сушат в вакуумной печи при 20°С с получением 1962 г названного соединения, с выходом 81,7%. Данные ЖХ-МС, 1Н и 13С ЯМР и ВЭЖХ для данной партии идентичны данным продукта, полученного способом А.
Пример 24. Данные соединений.
Некоторые физические характеристики и данные биологической активности для соединений из примеров 1-19 представлены в табл. 2 ниже. Данные 1С50 получены в результате анализа, описанного в
- 52 022669 примере А.
Таблица 2
Пример № К1 К2 к3 η ΙΌΟ 1С5о (нМ) МС [М+Н]
1 ин2 Вг Р 1 <200 437,9, 439,9
2 Ме Вг Р 1 <200 437,0, 439,0
3 ын2 Вг Р 2 <100 451,8,
453,9
4 ме Вг г 2 <100 451,0, 453,0
5 ИН2 С1 Р 1 <200 394,0
б Ме С1 Р 1 <200 393,0
7 ын2 С1 Р 2 <200 408,1
8 Ме С1 Р 2 <200 407,1
Э νη2 СРз Р 1 <100 428,0
10 Ме СР3 Е 1 <100 427,0
11 ын2 СРз Г 2 <100 442,0
12 Ме СР3 Р 2 <100 441,1
13 ин2 СРз н 1 <500 410,0
14 Ме СР3 н 1 <200 409,1
15 КН2 СР3 н 2 <200 424,0
16 Ме СР3 н 2 <200 423,1
17 Ме СН3 Р 1 <500 373,1
18 НН2 сы Р 1 <750 385, 0
19 Ме сы Р 1 <500 406,0*
♦[М+Νβ].
Пример 25. Данные соединений.
Данные ГОО 1С50 (см. пример А) для соединений из примеров 20 и 21 представлены в табл. 3 ниже.
Таблица 3
Пример № ИЗО 1С5о (нМ)
20 <500
21 <750
Пример 26. Данные ЯМР.
Данные 1Н ЯМР (спектрометр Уапап 1поуа 500, спектрометр Мегсигу 400 или спектрометр Уапап (или Мегсигу) 300) для соединений из примеров 1-21 представлены в табл. 4 ниже.
- 53 022669
Таблица 4
Пример РаствоМГц
Спектры 'н ЯМР № ритель дМСО-с^
400
δ 11, 5 (с, 1Н), 8,89 (с. 1Н>, 7,17 (дд,
7=8, 8 , 8,6 Гц, 1Н) , 7,09 (дд, 7=6,1, 2,7
Гц, 1Н> , 6,76-6,72 (м, 1Н) , 6,56 (ДД,
7=6,1 , 6,1 Гц, 1Н) , 6,51 (с, 2 Н), 6,17
{дд. 7=5, 9, 5, 9 Гц, 1Н) , 3 ,27-3, '21 (м^ 2Н) ,
2,94- 2,88 (м, 2Н), 1,78-1,' 71 (м, 2Н)
ДМСО-с(6
400
11,49 (с, 1Н), 8,90 (с, 1Н), 7,17 (м,
2Н), 7,09 (дд, 7=6,3, 2,5 Гц, 1Н) , 6,26 (т, 7=6,1 Гц, 1Н>, 3,33 (м, 2И), 3,13 (к, 7=6,0 Гц, 2Н), 2,89 (с, ЗН)
ДМСО-7, δ 11,5 (с, 1Н), 8,89 (с, 1Н), 7,17 (дд,
7=8,8, 8,6 Гц, 1Н), 7,09 {дд, 7=6,1, 2,7 Гц, 1Н> , 6,76-6,72 (м, 1Н), 6,56 {дд, 7=6,1, 6,1 Гц, 1Н), 6,51 (с, 2Н), 6,17 (дд, 7=5,9, 5,9 Гц, 1Н) , 3,27-3,21 (м, 2 Η) ,
2,94-2,88 (м, 2 Η) , 1,78-1,71 (м, 2 Н)
СЕ,00
400 δ 7,12 (дд, 7=5,9, 2,4 Гц, 1Н), 7,05 (т,
7=8,7 Гц, 1Н), 6,83 (м, 1Н), 3,39 (т, 7=6,8 Гц, 2Н) , 3,14 (т, 7=6,6 Гц, 2Н), 2,94 (с, ЗН) , 1,87 (м, 2Н) дмсо-<г6 δ 7,96 (дд, 7=6,8, 2,1 Гц, 0,05 Н), 7,327,29 (м, 0, 1Н) , 7,18 (дд, 7=9,1, 9,1 Гц, 0,95Н), 6,93 (дд, 7=6,4, 2,7 Гц, 0,95Н),
6,71-6,66 (м, 0,95Н), 6,33 (ш с, 1Н), 3,353,27 (м, 2Н), 3,10-3,06 (м, 2Н)
ДМСО-<76
400
δ 11,50 (с, 1Н), 8,91 (с, 1Н) , 7,19 (м,
2Н) , 6,96 (ДД, 7=6, 7, 2, 5 Гц, 1Н), 6,71 (м,
1Н) , 6,26 {т, 7=6,4 Гц, 1Н) , 3,32 (м, 2Н),
3,13 (к, σ = 5,8 Гц, 2Н), 2,89 (с, ЗН)
ДМСО-άί
400
300 δ 8,90 (с, 1Н) , 7,20 (дд, 7=9,2, 9,0 Гц,
1Н) , 6,96 (дд, 7=6,4, 2,7 Гц, 1Н) , 6,726,69 (м, 1Н) , 6,55 (т, 7=6,0 Гц, 1Н) , 6,51 (с, 2 Н), 6,16 (т, 7=5,9 Гц, 1Н) , 3,28-3,21 (м, 2 Н), 2,93-2,87 {м, 2 Η), 1,76-1,72 (м, 2 Н) δ 7,06 (г, Д=8,9 Гц, 1Н), 6,98 (м, 1Н) ,
- 54 022669
6,80 (м, 1Н), 3,73 (Μ, 2Н), 3,28 (м, 2Н) , 2,94 {с, ЗН), 1,28 (м, 2Н)
9 ДМСО-с/б 400 6 11,60 (с, 1Н) , 9,06 (с, 1Н), 7,30 (т, 1=10,1 Гц, 1Н), 7,14 (дд, 1=6,1, 2,7 Гц, 1Н) , 7,03 (м, 1Н>, 6,71 (т, 1=5,3 Гц, 1Н) , 6,58 (с, 2Н), 6,23 (т, .1=6,2 Гц, 1Н) , 3,36 (к, 1=6,5 Гц, 2Н), 3,08 (Μ, 2Н)
10 ДМСО-йб 400 а 11,60 (с, 1Н), 9,07 (с, 1Н) , 7,30 (т, 1=10,1 Гц, 1Н), 7,18 {¢, 1=6,0 Гц, 1Н), 7,13 (дд, 1=6,0, 2,7 Гц, 1Н>, 7,03 (м, 1Н) , 6,27 (т, 1=6,3 Гц, 1Н) , 3,32 (Μ, 2Н), 3,13 (к, 1=6,0 Гц, 2Н) , 2,89 (с, ЗН)
11 ДМСО-Йб 300 δ 11,6 (с, 1Н), 9,08 (с, 1Н), 7,31 (дд, 1=10,0, 9,4 Гц, 1Н) , 7,13 (дд, 1=6,4, 2,9 Гц, 1Н>, 7,05-6,99 (м, 1Н) , 6,58 (т, 1=6,0 Гц, 1Н) , 6,52 (с, 2 Н) , 6,17 (т, 1=5,9 Гц, 1Н) , 3,28-3,21 (м, 2Н) , 2,94-2,87 (м, 2Н) , 1,79-1,72 (ы, 2Н)
12 ДМСО-С.Х 400 а 11,6 (с, 1Н) , 9,07 (с, 1Я), 7,30 (дд, 1=10,0, 9,6 Гц, 1Н) , 7,13 (дд, 1=6,2, 2,5 Гц, 1Н) , 7,05-7,02 (м, 2Н, , 6,19 (т, 1=5,8 Гц, 1Н) , 3,27-3,21 (м, 2Н) , 2,99-2,94 (м, 2Н), 2,87 (с, ЗН), 1,76-1,72 (м, 2Н)
13 СЭ3ОС 400 8 7, 36 (т, 0=7,8 Гц, 1Н), 7,23 (д, 1=7,8 Гц, 1Н) , 7,10 (О, 1Н) , 7,03 (д, 1=7,8 Гц, 1Н) , 3,48 (м, 2Н) , 3,29 (м, 2Н)
14 ДМСО-Йб 500 δ 11,63 (с, 1Н), 9,08 (с, 1Н), 7,39 (т, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,21 (м, 2Н) , 7,10 (с, 1Н), 6,99 (д, 1=8,1 Гц, 1Н), 6,28 (г, 1=5,4 Гц, 1Н) , 3,36 (к, 1=5,8 Гц, 2Н), 3,17 (к, 1=5,8 Гц, 2Н) , 2,91 (с, ЗН)
15 ДМСО-С(6 400 δ 11,6 (с, 1Н), 9,12 (с, 1Н), 7,37 (дд, 1=8,0, 8,0 Гц, 1Н), 7,21-7,18 (м, 1Н), 7,07 (с, 1Н), 6,95 (Д, 1=10,0 Гц, 1Н) , 6,52 (ш с, 3 Н), 6,17 (т, 1=6,0 Гц, 1Н), 3,28-3,22 (м, 2 Н), 2,93-2,89 (м, 2 Н), 1,77-1,73 <м, 2Н)
- 55 022669
16 ДМСО-с!6 400 δ 11,6 (с, 1Н), 9,11 (с, 1Н), 7,37 <7=8,0, 8,0 Гц, 1Н), 7,20 (д, <7=7,8 Гц, 7,07-7,01 (м, 2 Н), 6,96 (д, <7=8,0 Гц, (ДД, 1Н), 1Н), Н), 1,71
6,20 (т, <7=5,9 Гц, 1Н) , 3,27-3,22 2,99-2,94 (Μ, 2Н) , 2,87 (с, 3 Н) , (м, 2Н) (м, 2 1,78-
6 11,25 (с, 1Н), 8,61 (с, 1Н>, 7,18 (м,
17 ДМСО-й6 400 1Н) , 6,91 (Μ, 1Н), 6,72 (м, 1Н>, 1Н) , 6,24 (с, 2Н), 3,32 (м, 2Н), 2Н), 2,89 (с, ЗН), 2,05 (с, ЗН). 6,58 3,11 (м, (м.
δ 11,65 (с, 1Н), 9,08 (о, 1Н>, 7,34 (т,
Л=9,1 Гц, 1Н), 7,22 (дд, Л=5,4, 2,8 Гц,
18 ДМСО-Ц6 400 1Н) , 7,13 (м, 1Н>, 6,70 (т, Л=5,9 Гц, 1Н) ,
6,59 (с, 2Н), 6,20 (т, Л=6,1 Гц, 1н), 3,34
(м, 2Н) , 3,09 (м, 2Н)
8 11,65 (с, 1Н), 9,08 (с, 1Н), 7,35 {м.
19 ДМСО-Ц6 400 1Н), 7,18 (м, ЗН), 6,56 (м, 1Н) , 1Н) , 6,24 (с, 2Н), 3,32 (м, 2Н), 2Н) , 2, 89 (с, ЗН) , 6,23 3,14 (м, (м.
δ 10,87 (с, 1Н) , 7,75 (с, 1Н>, 6, 83 ΪΤ,
Э=7,3 Гц, 1Н) , 6,68 (τ, ι7=6,0 Гц, 1Н), 6,56
20 ДМСО-Й6 400 (с, 2 Н) , 6,30 (т, <7=6,0 Гц, 1Н) , 6,23 (с,
1Н) , 4,56 (д, <7=7,0 Гц, 2Н) , 3,32 (к, и г=6,3
Гц, 2Н) , 3,07 (к, <7=6,3 Гц, 2Н)
δ 10,88 {с, 1Н), 7,77 (с, 1Н>, 6,83 (т,
<7=6,3 Гц, 1Н) , 6,68 (т, <7=5,9 Гц, 1Н), 6, 56
21 ДМСО-ЦЙ 400 (с, 2Н), 6,30 (г, <7=5,9 Гц, 1Н) , 6,22 (о,
1Н), 4,55 (д, 2Н), 3,32 (к, <7=6,3 ГЦ, 2Н),
3,06 (к, <7=6,3 Гц, 2Н)
Пример А. Анализ человеческого фермента индоламин-2,3-диоксигеназы (ГОО).
Человеческую индоламин-2,3-диоксигеназу (ГОО) с Ν-концевой меткой Н15 экспрессируют в Е. соП и очищают до гомогенного состояния. ГОО катализирует окислительное расщепление пиррольного кольца индольного ядра триптофана с образованием Ν'-формилкинуренина. Анализы осуществляют при комнатной температуре, как описано в литературе, с использованием 95 нМ ГОО и 2 мМ Ό-Тгр в присутствии 20 мМ аскорбата, 5 мМ метиленового синего и 0,2 мг/мл каталазы в 50 мМ калий-фосфатном буфере (рН 6,5). Начальные скорости реакции регистрируют, непрерывно измеряя рост оптической плотности на длине волны 321 нм за счет образования Ν'-формилкинуренина (см. §опо, М., е! а1., 1980, 1. Бю1. СЬет., 255, 1339-1345).
Пример Б. Определение ингибирующей активности в клеточном анализе индоламин-2,3диоксигеназы (ГОО)/кинуренина с использованием клеток НеЬа.
Клетки НеЬа (#ССЬ-2) были получены от Американской Коллекции типичных культур ткани (АТСС, Мапаккак, УА), их шаблонно содержат в минимальной эссенциальной среде (Игла), содержащей 2 мМ Ь-глутамина, и осуществляют коррекцию сбалансированного солевого раствора Эрла до концентрации 1,5 г/л натрия бикарбоната, 0,1 мМ заменимых аминокислот, 1 мМ натрия пирувата и 10% сыворотки телячьего эмбриона (все от 1^йгодеп). Клетки содержат при температуре 37°С в увлажненном инкубаторе, содержащем 5% СО2. Анализ осуществляют, как указано ниже. Клетки НеЬа высевают на 96-луночные планшеты для культивирования с плотностью 5х103/лунку и культивируют на протяжении ночи. На следующий день ίΡΝ-γ (конечная концентрация 50 нг/мл) и серийные разведения соединений (в общем объеме 200 мл питательной среды) добавляют к клеткам. Через 48 ч инкубации 140 мл супернатанта из каждой лунки переносят на новые 96-луночные планшеты. 10 мл 6,1н. раствора трихлоруксусной кислоты (#Т0699, §1дта) смешивают с содержимым каждой лунки и инкубируют при 50°С на протяжении 30 мин для гидролиза Ν-формилкинуренина, образованного под действием индоламин-2,3диоксигеназы, до кинуренина. Реакционную смесь далее центрифугируют на протяжении 10 мин при 2500 об/мин для удаления осадка. 100 мл супернатанта из каждой лунки переносят на другие 96луночные планшеты и смешивают с 100 мл 2% (мас./об.) п-диметиламинобензальдегида (#15647-7, §1дта-А1йгюЬ) в уксусной кислоте. Оптическую плотность в результате желтого цвета кинуренина изме- 56 022669 ряют на длине волны 480 нм с использованием устройства для считывания микропланшетов 8РЕСТКАтах 250 (Мо1еси1аг Ое\зсек). Ь-Кинуренин (#К8625, 81дта) используют как стандартный образец. Стандартные растворы (240; 120; 60; 30; 15; 7,5; 3,75; 1,87 мМ) готовят в 100 мл питательной среды и смешивают с равным объемом 2% (мас./об.) п-диметиламинобензальдегида. Определяют процент ингибирования для отдельных концентраций и вычисляют средние значения для двойных повторений. Данные были проанализированы с применением нелинейной регрессии для получения значений 1С50 (Рпкт Огарйраб); см. Та1ака\\а О, е( а1., 1988, к Вю1. Скет., 263(4): 2041-8.
Пример В. Определение влияния ингибиторов ШО на пролиферацию Т-клеток, подавляемую дендритными клетками, экспрессирующими ШО.
Моноциты получают лейкоферезом из моноядерных клеток периферической крови человека. Далее моноциты высевают с плотностью 1ж 106 клеток/лунку в 96-луночные планшеты, используя среду КРМ1 1640 с добавлением 10% сыворотки телячьего эмбриона и 2 мМ Ь-глутамина (все от Iην^ί^одеη). Прикрепленные клетки содержат на планшете после культивирования в течение ночи при температуре 37°С. Прикрепленные моноциты далее стимулируют на протяжении 5-7 дней с помощью 100 нг/мл ОМ-С8Р (#300-03, РергоТеск) и 250 нг/мл Ш-4 (#200-04, РергоТеск), с последующей активацией 5 мкг/мл липополисахарида 8а1тоηе11а 1ур1нтипит (#437650, 81дта) и 50 нг/мл ΙΕΝ-γ (# 285-1Р, К&И 8ук!етк) на протяжении дополнительных 2 дней для индукции дозревания дендритных клеток.
После активации дендритных клеток среду заменяют на полную среду КРМ1 1640 с добавлением 100-200 Ед Ш-2 (#СУТ-209, Р^о8рес-Таηу ТесктОе^) и 100 нг/мл анти-СШ3 антитела (#555336, РкагМюде^, Т-клеток (2-3ж 105 клеток/лунку) и серийных разведений соединений ШО. После инкубации еще на протяжении 2 дней пролиферацию Т-клеток измеряют анализом инкорпорации ВгбИ с помощью колориметрического набора ЕЫ8А для определения пролиферации клеток в соответствии с инструкцией производителя (#1647229, Коске Мо1еси1аг Вюскепнсак). Клетки непрерывно культивируют на протяжении 16-18 ч в присутствии 10 мМ раствора метки ВгбИ. Далее, среду с меткой удаляют, 200 мл ЯхВеш-Н/лунку добавляют к клеткам и инкубируют на протяжении 30 мин при комнатной температуре. Раствор ЯхОешЦ удаляют и добавляют 100 мл/лунку рабочего раствора конъюгата анти-ВКОИ антитела/РОЭ. Реакцию осуществляют на протяжении 90 мин при комнатной температуре. Конъюгированное антитело далее удаляют и клетки трижды споласкивают 200 мл/лунку раствора для промывания. В конце добавляют 100 мл/лунку раствора субстрата и результаты считывают с помощью прибора для считывания микропланшетов (8рес1га Мах РЬИ8, Мо1еси1аг Ое\асек) в ходе развития окрашивания. Множественные значения в разных точках времени получают для гарантии того, что данные находятся в пределах линейного интервала. Данные были шаблонно получены в результате повторяемых экспериментов и были включены соответствующие средства контроля; см. Тетекк Р, е( а1., 2002, к Ехр. Меб., 196(4): 447-57/ и Нмш, Р, е1 а1., 2000, к 1ттицо1., 164(7): 3596-9.
Пример Г. Тестирование ίη νί\Ό ингибиторов ШО на предмет противоопухолевой активности.
Противоопухолевая эффективность ίη νί\Ό может быть проверена с применением модифицированных протоколов аллотрансплантата/ксенотрансплантата опухоли. Например, в литературе описано, что эффект ингибирования ШО может быть синергетическим с цитотоксической химиотерапией у иммунокомпетентных мышей (Ми11ег, А.к, е( а1., 2005, №-Н. Меб. 11:312-319). Было показано, что такой синергизм зависит от Т-клеток путем сравнения синергетического действия исследуемого ингибитора ШО на мышиных моделях ксенотрансплантата опухолей (например, В16 и родственные варианты, СТ-26, ЬЬС), выращенных в организме сингенных иммунокомпетентных мышей, с действием, наблюдающимся у сингенных мышей, которых лечат нейтрализующими анти-СШ4 антителами, или таких же опухолей, выращенных у иммуноскомпрометированных мышей (например, пи/пи).
Концепция дифференциального противоопухолевого действия у иммунокомпетентных против иммуноскомпрометированных мышей также может позволять проверку исследуемых ингибиторов ШО как монотерапии. Например, опухоли ЬЬС хорошо растут у сингенной породы хозяев, С57В1/6. Однако, если таких мышей лечат ингибитором ШО 1-МТ (по сравнению с плацебо), образование опухолей заметно замедляется, показывая, что ингибирование ГОО задерживает рост (РпЬегд, М., е( а1., 2002, Ιηΐ. ί. Слтсег, 101:151-155). Следуя данной логике, можно исследовать эффективность ингибирования ШО на модели ксенотрансплантата опухоли ЬЬС, выращенной у иммунокомпетентных мышей С57В16, и сравнивать с влиянием ингибиторов ШО на рост опухоли ЬЬС у голых или 8СГО мышей (или мышей С57В16, которые получают антитела, нейтрализующие активность Т-клеток). Поскольку эффект уменьшения опосредствованной опухолью иммуносупрессорной активности ШО, вероятно, будет различаться в зависимости от иммуногенного потенциала разных моделей опухоли, генетические модификации могут быть осуществлены в клетках опухоли, чтобы увеличить их иммуногенный потенциал. Например, экспрессия ОМ-С8Р в клетках В16.Р10 увеличивает их иммуногенный потенциал (Ошпой, О., е( а1., 1993, Ргос. №п1. Асай 8с1., И8А, 90:3539-3543). Таким образом, в некоторых моделях опухолей (например, В16.Р10) можно генерировать [поли]клоны, которые экспрессируют иммуностимулирующие белки, такие как ОМ-С8Р, и проверять тормозящее рост влияние ингибиторов ШО против опухолей, образованных из таких опухолевых клеток как у иммунокомпетентных, так и иммуноскомпрометированных мышей.
- 57 022669
Третья магистраль для оценки эффективности ингибиторов ГО0 ίη νίνο заключается в использовании доиммунизационных мышиных моделей аллотрансплантата опухоли. В таких моделях иммунокомпетентных мышей сенсибилизируют к специфическому антигену или антигенам опухоли, чтобы имитировать терапевтическую противоопухолевую вакцинацию. Это обусловливает опосредствованную иммунной системой противоопухолевую реакцию у мышей при последующей нагрузке линиями клеток мышиных опухолей (содержащих опухолевые антигены, сходные с примененными для иммунизации) в экспериментах с использованием ксенотрансплантатов. Показано, что экспрессия ГО0 подавляет противоопухолевую реакцию и позволяет ксенотрансплантатам расти быстрее. Важно, что рост опухолей в данной модели тормозится ингибитором ГО0 1-МТ (ΌγΙΝη1ιο\Ό, С., еί а1., 2003, Ν;·ιΙ. Мей., 9:1269-1274). Данная модель является особенно привлекательной, поскольку активность ГО0 позволяет рост опухоли Р815, и, таким образом, специфическое ингибирование ГО0 должно тормозить рост.
Наконец, терапевтическая иммунизация может быть использована для оценки влияния ингибиторов ГО0 ίη νίνο. Например, это продемонстрировано с использованием клеток В16-ВЬ6 при нагрузке мышей В1к/6 внутривенной инъекцией клеток опухоли, с последующим лечением хорошо описанным иммуногенным пептидом (например, ТКР-2), который экспрессируется клетками опухоли (ίί, еί а1., 2005, ί. 1ттию^ 175: 1456-63). Важно, что модификаторы иммунной системы, такие как анти-СТЬ-4 антитело, могут улучшать реакцию на такую терапевтическую иммунизацию. Влияние ингибиторов ГО0 может быть оценено подобным образом - иммунизацией опухолевым пептидом с или без ингибитора ГО0. Эффективность оценивают по продолжительности жизни животных (период до возникновения заболевания) или по измерению метастазов опухоли в легких и/или других органах в определенной точке времени.
В любой/всех из вышеупомянутых моделей также может быть возможным непосредственное и/или непрямое измерение количества и/или активности реагирующих на опухоль иммунных клеток. Способы измерения количества и/или активности реагирующих на опухоль иммунных клеток хорошо описаны и могут выполняться с применением способов, известных специалистам в данной области (СиггеШ Ρτοίο^1δ ίη Iттиηο1οду, νο1. 4, САНдат ТЕ., еί а1.; IттиηοίЬе^аρу ο£ Салсег, Нитаη Рге88, 20 06, Όίδίδ, М.Ь. и процитированные в ней ссылки). Концептуально, уменьшение иммуносупрессорного влияния ГО0 может приводить к увеличению количества или реакционноспособности специфических по отношению к опухоли иммунных клеток. Кроме того, ингибирование ГО0 может дополнительно увеличивать количество или реакционноспособность реагирующих на опухоль иммунных клеток при сочетании с другим видом лечения, например химиотерапевтическими средствами и/или иммуномодуляторами (например, антиСТЬА4 антитело).
Все эксперименты с применением аллотрансплантатов могут выполняться с применением стандартных методов работы с опухолями (рассмотрены в СоЛеи, еί а1., Ιη Саисег Эгид ^^8сονе^у амй Эехе1ορтеηί: Аткамсег Эгид ^еνе1ορтеηί Ои1йе: Ргес1шка1 Бсгееитд, С1тка1 Тпак, аЫ Αρρτονπ1, 2пй Ей. ТекЬег, В.А. амй Апйгс\у8, Р.А., Оитага Рге88 1пс.: Ш^га, N1, 2004). Клонирование и введение генов (например, ГО0, ОМ-С8Р) в линии опухолевых клеток может быть осуществлено с применением способов, известных специалистам в данной области (рассмотрены в §атЬ^οοк, I. амй Ки88е1, Ό., Мο1еси1а^ Скитд: А 1аЬο^аίο^у Маииа1 (3гй ейккц), Со1й §ргшд Наг^т ΕπόοπιΙοΓν Рге88: Со1й §ргтд На^Ьο^. ΝΥ, 2001).
Пример Д. Проверка ίη νίνο ингибиторов ΙΌ0 на модели энцефалита, вызванного вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ-1).
1. Выделение клеток и инфицирование вирусом.
Моноциты и лейкоциты периферической крови могут быть получены центробежным сцеживанием пакетов для лейкофереза, полученных от серонегативных относительно ВИЧ-1, ВИЧ-2 и гепатита В доноров. Моноциты культивируют в суспензионной культуре с использованием колб ТеРкм в модифицированной Дульбекко среде Игла (МДСИ, §1дта-А1йгкЬ) с добавлением 10% пула человеческой сыворотки, инактивированной нагреванием, 1% глютамина, 50 мг/мл гентамицина, 10 мг/мл ципрофлоксацина (§1дта) и 1000 Ед рекомбинантного человеческого колониестимулирующего макрофагального фактора с высокой степенью чистоты. Через 7 дней культивирования МОМ инфицируют ВИЧ-1А0А С кратностью инфекции 0,01.
2. Мыши Ни-РВЬ^0О/8С1О НГТЕ.
Мыши-самцы N00/0.6-17 §СГО возрастом 4 недели могут быть приобретены (Εκ1<8οη ^аЬο^аίο^у). Животных содержат в стерильных клетках микроизолятора в свободных от патогенов условиях. Всем животным вводят инъекционным способом интраперитонеально крысиные анти-СО122 (0,25 мг/мышь) за 3 дня перед пересадкой РВЬ и дважды вводят кроличьи асиало-ОМ1 антитела (0,2 мг/мышь) (^Vакο) за 1 день перед и через 3 дня после инъекции РВЬ (20х106 клеток/мышь). Инфицированные ВИЧ-1А0А МОМ (3х105 клеток в 10 мл) вводят инъекционным способом интракраниально через 8 дней после восстановления РВЬ, что дает мышей Ьи-РВЕ^0О/8С10 НIVΕ. Немедленно после интракраниальной инъекции инфицированные ВИЧ-1 МОМ имплантируют мышам Ьи-РВЬ^0О/8С1О НIVΕ подкожно с контролем (растворитель) или гранулами соединения (замедленное высвобождение на протяжении 14 или 28 дней, Iηηονаί^νе Ке8еагсЬ). Начальные эксперименты разработаны таким образом, чтобы подтвердить
- 58 022669 индукцию специфического для вируса СТЬ у животных Ии РВЬ-НОЭ/ЗСГО Н1УЕ, которых лечат соединениями ГОО. Это подтверждают окрашиванием тетрамера и нейропатологическими анализами элиминации МЭМ из ткани мозга. Далее эксперимент разработан таким образом, чтобы проанализировать восстановление лимфоцитов человека, гуморальные иммунные реакции и невропатологические изменения. В этих экспериментах у животных берут образцы крови на 7-й день и забивают на 14-й и 21-й дни после интракраниальной инъекции МЭМ человека. Кровь собирают в пробирки, содержащие ЭДТА, и используют для проточной цитометрии, а плазму используют для выявления ВИЧ-1 р24 с помощью ЕП8А (Весктап Соикет™). Специфические антитела против ВИЧ-1 найдены методом вестерн-блотинга согласно инструкциям производителя (набор ХУеЧегп Ъ1о1 Н1У-1 СатЪпбде ВюЮсИ, Са1ур1е Вютебюа1). Подобное количество специфических антител против вируса найдено у контрольных и леченых соединением животных. Всего три независимых эксперимента могут быть выполнены с применением трех разных доноров человеческих лейкоцитов.
3. РАС8саи периферической крови и селезенки мышей Ии РВЬ-НОЭ/ЗСГО Н1УЕ.
Двухцветный анализ РАС8 может выполняться на периферической крови на неделях 1-3 и на спленоцитах на неделях 2 и 3 после интракраниальной инъекции человеческих МОМ. Клетки инкубируют с конъюгированными с флуорохромом моноклональными антителами (тАЪ) против человеческих СЭ4, СГО8, СЭ56, СЭ3, ΙΕΝ-γ (еВюкшепсе) на протяжении 30 мин при температуре 4°С. Для оценки клеточной иммунной реакции внутриклеточное окрашивание ΙΤΝ-γ осуществляют в комбинации с античеловеческим СЭ8 и конъюгированным с Р1ТС анти-мышиным СО45, чтобы исключить мышиные клетки. Для определения Ад-специфического СТЬ, окрашивание конъюгированного с аллофикоцианином тетрамера для ВИЧ-1ОАО (р17 (аа77-85) ЗЬУИТУАТЬ, 8Ь-9) и ВИЧ-1РО1. [(аа476-485) ГОКЕРУНОУ, 1Ь-9] выполняется на стимулированных фитогемагглютинином/интерлейкином-2 (РНА/ГО-2) спленоцитах. Клетки окрашивают в соответствии с рекомендацией №Н/№Шопа1 ПъШШе оГ А11егду апб 1пГесбопк ОРеа^е, №-Шопа1 Те1гатег Соге РасШбек. Данные проанализированы с помощью РАС8 СаНЪит™ с применением программного обеспечения СеНЦиек! (система иммуноцитометрии ВеШоп Июкшкоп).
4. Гистопатологические анализы и анализы изображений.
Ткань мозга собирают через 14 и 21 день после интракраниальной инъекции МОМ, фиксируют в 4% буферизованном фосфатом растворе параформальдегиде и монтируют в парафине или замораживают при -80°С для более позднего использования. Коронарные секции монтируемых блоков вырезают для идентификации места инъекции. Для каждой мыши 30-100 (толщина 5 мкм) серийных секций вырезают из места инъекции человеческих МОМ и 3-7 срезов (с промежутком 10 секций) анализируют. Секции мозга депарафинизируют с помощью ксилена и гидратируют в градиентах спиртов. Иммуногистохимическое окрашивание выполняют в соответствии с основным непрямым протоколом, применяя демаскирование антигена нагреванием до 95°С в 0,01 моль/л цитратном буфере на протяжении 30 мин для демаскирования антигена. Для идентификации человеческих клеток в мозге мыши применяют тАЪ против виментина (1:50, клон 3В4, Эако СотротаНоп), которые позволяют идентифицировать все человеческие лейкоциты. Человеческие лимфоциты МОМ и СЭ8+ обнаруживают с помощью антител против СО68 (разведение 1:50, клон КР 1) и СЭ8 (разведение 1:50, клон 144В) соответственно. Инфицированные вирусом клетки метят тАЪ против ВИЧ-1 р24 (1:10, клон Ка1-1, все от Эако). Реакционноспособные мышиные клетки микроглии обнаруживают с помощью антитела 1Ъа-1 (1:500, \Уако). Экспрессию человеческого ГОО (НиГОО) визуализируют с помощью АЪ, полученных из Департамента фармакологии клетки, Центрального исследовательского института Аспирантуры в области медицины, Университета Хокайдо, Саппоро, Япония. Первичные антитела обнаруживают с помощью соответствующих биотинилированных вторичных антител и визуализируют с помощью комплексов авидин-биотин (набор Уес1ак1аш ЕН1е АВС, УесЮг ЬаЪотаЮпек) и пероксидазы хрена (НИР), сочетанной с полимером декстрана (Епу1кюи, Эако). Иммуноокрашенные секции противоположно окрашивают гематоксилином Мауег. Секции, из которых первичное антитело удалено или инкорпорирован иррелевантный изотип 1дО, служат средствами контроля. Два независимых наблюдателя вслепую пересчитывают количества лимфоцитов СЭ8+, СГО68+ МИМ и клеток р24+ ВИЧ-1 в каждой секции от каждой мыши. Осмотр с помощью светового микроскопа выполняют с использованием микроскопа №коп ЕсНрке 800 (№коп 1пк1ттеп15 1пс). Полуколичественный анализ 1Ъа1 (процент области, занятой иммуноокрашиванием) получают путем анализа изображения (1таде-Рго® Р1ик, Меб1а СуЪетпеНск) с помощью компьютера, как описано выше.
5. Статистический анализ.
Данные могут быть проанализированы с применением Рпкт (ОгарИ Раб) с ΐ-тестом Стьюдента для сравнения и АИОУА. Значение Р<0,05 считалось значимым.
6. Ссылка.
Ро1иекЮуа СУ., Мипп Э.Н., Регабкку В., апб Оепбе1тап Н.Е. (2002). Оепетабоп оГ суЮЮ.хю Т се11к адаиШ укик-тГеШеб Иитап Ъгат тасторНадек ш а тигше тобе1 оГ Н1У-1 епсерНаННк, 1. 1ттипо1., 168(8):3941-9.
Различные модификации изобретения, в дополнение к описанным в данном описании, будут очевидными для специалистов в данной области на базе вышеизложенного описания. Предусматривается,
- 59 022669 что такие модификации также находятся в пределах контекста приложенной формулы изобретения. Каждая ссылка, в том числе все патенты, патентные заявки и публикации, процитированные в данном изобретении, включены в данное описание путем ссылки во всей их полноте.

Claims (57)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы I или его фармацевтически приемлемая соль, где К1 представляет собой ΝΗ2 или СЩ;
    К2 представляет собой С1, Вг, СР3, СЩ или СМ;
    К3 представляет собой Н или Р и η равно 1 или 2.
  2. 2. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где К1 представляет собой ΝΗ2.
  3. 3. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где К1 представляет собой СЩ.
  4. 4. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где К2 представляет собой С1.
  5. 5. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где К2 представляет собой Вг.
  6. 6. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где К2 представляет собой СР3.
  7. 7. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где К2 представляет собой СЩ.
  8. 8. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где К2 представляет собой ΟΝ.
  9. 9. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где К3 представляет собой Н.
  10. 10. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где К3 представляет собой Р.
  11. 11. Соединение по п. 1 или его фармацевтически приемлемая соль, где η равно 1.
  12. 12. Соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль, где η равно 2.
  13. 13. Соединение по п.1, выбранное из
    4-({2-[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-Н-(3-бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    N-(3-бром-4-фторфенил)-N'-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    4-({3-[(аминосульфонил)амино]пропил}амино)-Н-(3-бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    N-(3-бром-4-фторфенил)-N'-гидрокси-4-({3-[(метилсульфонил)амино]пропил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    4-({2-[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-Н-(3-хлор-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    N-(3-хлор-4-фторфенил)-N'-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5-оксадиазол3-карбоксимидамида;
    4-({3-[(аминосульфонил)амино]пропил}амино)-Н-(3-хлор-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    N-(3-хлор-4-фторфенил)-N'-гидрокси-4-({3-[(метилсульфонил)амино]пропил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    4-({2-[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-Н-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-№-гидрокси-1,2,5оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    N-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-N'-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    4-({3-[(аминосульфонил)амино]пропил}амино)-Н-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-№-гидрокси1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    Н-[4-фтор-3-(трифторметил)фенил]-К'-гидрокси-4-({3-[(метилсульфонил)амино]пропил}амино)1,2,5 -оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    4-({2-[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-N'-гидрокси-N-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    N'-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-N-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    4-({3-[(аминосульфонил)амино]пропил}амино)-К'-гидрокси-К-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    №-гидрокси-4-({3-[(метилсульфонил)амино]пропил}амино)-Н-[3-(трифторметил)фенил]-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    - 60 022669
    М-(4-фтор-3-метилфенил)-№-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамида;
    4-({2-[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-М-(3-циано-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида и
    Ы-(3-циано-4-фторфенил)-№-гидрокси-4-({2-[(метилсульфонил)амино]этил}амино)-1,2,5-оксадиазол-3 -карбоксимидамида, или его фармацевтически приемлемая соль.
  14. 14. Соединение, которое представляет собой 4-({2-[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-Ы-(3бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид, или его фармацевтически приемлемая соль.
  15. 15. Соединение, которое представляет собой 4-({2-[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-Ы-(3бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид.
  16. 16. Соединение по п.15 в виде кристаллического вещества.
  17. 17. Соединение по п.15 в виде твердого вещества с температурой плавления от приблизительно 162 до приблизительно 166°С.
  18. 18. Соединение по п.15 в виде твердого вещества, которое демонстрирует термограмму ОЗС такую, как показано на фиг. 2.
  19. 19. Соединение по п.15 в виде твердого вещества, которое демонстрирует на дифрактограмме рентгеноструктурного анализа порошка по меньшей мере один пик в единицах 2-тета, выбранный из приблизительно 18,4, приблизительно 18,9, приблизительно 21,8, приблизительно 23,9, приблизительно 29,2 и приблизительно 38,7°.
  20. 20. Соединение по п.15 в виде твердого вещества, которое демонстрирует на дифрактограмме рентгеноструктурного анализа порошка по меньшей мере два пика в единицах 2-тета, выбранных из приблизительно 18,4, приблизительно 18,9, приблизительно 21,8, приблизительно 23,9, приблизительно 29,2 и приблизительно 38,7°.
  21. 21. Соединение по п.15 в виде твердого вещества, которое демонстрирует на дифрактограмме рентгеноструктурного анализа порошка по меньшей мере три пика в единицах 2-тета, выбранных из приблизительно 18,4, приблизительно 18,9, приблизительно 21,8, приблизительно 23,9, приблизительно 29,2 и приблизительно 38,7°.
  22. 22. Соединение по п.15 в виде твердого вещества, которое демонстрирует дифрактограмму рентгеноструктурного анализа порошка такую, как показано на фиг. 1.
  23. 23. Соединение формулы Р28
    Р28 или его фармацевтически приемлемая соль, где К4 представляет собой Р, С1, Вг или I и η равно 1 или 2.
  24. 24. Соединение, которое представляет собой 4-({2-[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-М-[(4бром-2-фурил)метил]-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид, или его фармацевтически приемлемая соль.
  25. 25. Соединение, которое представляет собой 4-({2-[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-М-[(4хлор-2-фурил)метил]-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамид, или его фармацевтически приемлемая соль.
  26. 26. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы I по любому из пп.1-15 и 2325 или его фармацевтически приемлемую соль и по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
  27. 27. Способ ингибирования активности индоламин-2,3-диоксигеназы, отличающийся тем, что включает контакт указанной индоламин-2,3-диоксигеназы с соединением по пп.1-15 и 23-25 или его фармацевтически приемлемой солью.
  28. 28. Способ лечения рака у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества соединения по пп.1-15, 23-25 или его фармацевтически приемлемой соли.
  29. 29. Способ по п.28, где указанный рак выбирают из рака яичника, рака молочной железы, меланомы, рака прямой кишки, рака поджелудочной железы, рака предстательной железы, рака легкого, рака шейки матки, рака яичка, рака почки, рака головы и шеи, лимфомы и лейкоза.
  30. 30. Способ по п.29, дополнительно включающий введение указанному пациенту противоопухолевой вакцины, анти-СТЬ-4 антитела, анти-РЭ-1 антитела, противовирусного средства, химиотерапевтического средства, иммуносупрессанта, радиационное облучение, введение противоопухолевой вакцины, противовирусной вакцины, терапию цитокином или ингибитором тирозикиназы.
  31. 31. Способ по п.30, где указанная терапия цитокинов включает Ф2.
    - 61 022669
  32. 32. Способ по п.30, где химиотерапевтическое средство представляет собой цитотоксическое средство.
  33. 33. Способ лечения рака, выбранного из рака яичника, рака молочной железы и меланомы, у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества 4-({2[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-Ы-(3-бром-4-фторфенил)-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида или его фармацевтически приемлемой соли.
  34. 34. Способ по п.33, где рак представляет собой рак яичника.
  35. 35. Способ по п.33, где рак представляет собой рак молочной железы.
  36. 36. Способ по п.33, где рак представляет собой меланому.
  37. 37. Способ по любому из пп.33-36, дополнительно включающий введение указанному пациенту анти-СТЬ-4 антитела или анти-ΡΌ-Ι антитела.
  38. 38. Способ лечения рака, выбранного из рака яичника, рака молочной железы и меланомы, у пациента, включающий введение указанному пациенту терапевтически эффективного количества 4-({2[(аминосульфонил)амино]этил}амино)-Ы-[(4-бром-2-фурил)метил]-№-гидрокси-1,2,5-оксадиазол-3-карбоксимидамида или его фармацевтически приемлемой соли.
  39. 39. Способ по п.38, где рак представляет собой рак яичника.
  40. 40. Способ по п.38, где рак представляет собой рак молочной железы.
  41. 41. Способ по п.38, где рак представляет собой меланому.
  42. 42. Способ по любому из пп.38-41, дополнительно включающий введение указанному пациенту анти-СТЬ-4 антитела или анти-ΡΌ-Ι антитела.
  43. 43. Способ получения соединения формулы Р15 ^ОН рз н я иг Н N N Н '0'
    Р15 или его соли, где К2 представляет собой С1, Вг, СР3, СН3 или 0Ν;
    К3 представляет собой Н или Р и п равно 1 или 2, отличающийся тем, что включает: а) реакцию соединения формулы Р13 или его соли, где Рд1 представляет собой защитную группу для защиты аминогруппы, с агентом для удаления защитной группы с аминогруппы с получением соединения формулы Р14 или его соли;
    б) реакцию указанного соединения формулы Р14 с основанием с получением указанного соединения формулы Р15.
  44. 44. Способ по п.43, отличающийся тем, что К2 представляет собой Вг; К3 представляет собой Р и п равно 2.
  45. 45. Способ по п.43, отличающийся тем, что указанный алкоксикарбонил представляет собой третбутоксикарбонил.
  46. 46. Способ по п.43, отличающийся тем, что указанный агент для удаления защитной группы с аминогруппы представляет собой трифторуксусную кислоту.
  47. 47. Способ по п.43, отличающийся тем, что указанный агент для удаления защитной группы с аминогруппы представляет собой хлористо-водородную кислоту.
  48. 48. Способ по п.43, отличающийся тем, что указанное основание представляет собой натрия гидроксид.
  49. 49. Способ по п.43, отличающийся тем, что указанное соединение формулы Р13 получают обработкой соединения формулы Р12
    - 62 022669 или его соли Р^-МН-сульфонилхлоридом с последующей обработкой органическим основанием с получением указанного соединения формулы Р13.
  50. 50. Способ по п.49, отличающийся тем, что указанный Рд1 представляет собой третбутоксикарбонил.
  51. 51. Способ по п.49, отличающийся тем, что указанное органическое основание представляет собой триэтиламин.
  52. 52. Способ по п.49, отличающийся тем, что указанное соединение формулы Р12 получают восстановлением соединения формулы Р11 или его соли.
  53. 53. Способ получения соединения формулы Р15
    Р15 или его соли, где К2 представляет собой С1, Вг, СР3, СН3 или СЫ; К3 представляет собой Н или Р и η равно 1 или 2, который включает:
    или его соли с сульфамидом и органическим основанием с получением соединения формулы Р14 или его соли;
    Ь) реакцию указанного соединения формулы Р14 или его соли с основанием с получением указанного соединения формулы Р15.
  54. 54. Способ по п.53, отличающийся тем, что указанное органическое основание представляет собой пиридин.
  55. 55. Способ по п.53, отличающийся тем, что реакция соединения формулы Р12 дополнительно включает нагревание реакционной смеси.
  56. 56. Способ по п.55, отличающийся тем, что указанное нагревание осуществляется с использованием микроволнового излучения.
  57. 57. Соединение формулы Р9
EA201170161A 2008-07-08 2009-07-07 1,2,5-оксадиазолы в качестве ингибиторов индоламин-2,3-диоксигеназы EA022669B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US7887608P 2008-07-08 2008-07-08
US15087309P 2009-02-09 2009-02-09
PCT/US2009/049794 WO2010005958A2 (en) 2008-07-08 2009-07-07 1,2,5-oxadiazoles as inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201170161A1 EA201170161A1 (ru) 2011-08-30
EA022669B1 true EA022669B1 (ru) 2016-02-29

Family

ID=41128289

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201170161A EA022669B1 (ru) 2008-07-08 2009-07-07 1,2,5-оксадиазолы в качестве ингибиторов индоламин-2,3-диоксигеназы
EA201500530A EA029781B1 (ru) 2008-07-08 2009-07-07 1,2,5-оксадиазолы в качестве ингибиторов индоламин-2,3-диоксигеназы

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201500530A EA029781B1 (ru) 2008-07-08 2009-07-07 1,2,5-оксадиазолы в качестве ингибиторов индоламин-2,3-диоксигеназы

Country Status (37)

Country Link
US (12) US8088803B2 (ru)
EP (3) EP2824100B1 (ru)
JP (2) JP5465720B2 (ru)
KR (5) KR101649548B1 (ru)
CN (2) CN102164902B (ru)
AR (1) AR072490A1 (ru)
AU (6) AU2009268739B2 (ru)
BR (2) BRPI0915692B8 (ru)
CA (2) CA2743975C (ru)
CL (2) CL2009001554A1 (ru)
CO (1) CO6341622A2 (ru)
CR (1) CR11871A (ru)
CY (1) CY1120617T1 (ru)
DK (2) DK2824100T3 (ru)
EA (2) EA022669B1 (ru)
EC (1) ECSP11010798A (ru)
ES (2) ES2524266T3 (ru)
HK (2) HK1157692A1 (ru)
HR (2) HRP20141094T1 (ru)
HU (1) HUE036813T2 (ru)
IL (2) IL210402A (ru)
LT (1) LT2824100T (ru)
ME (1) ME03065B (ru)
MX (1) MX2011000235A (ru)
MY (3) MY192633A (ru)
NO (1) NO2824100T3 (ru)
NZ (1) NZ590268A (ru)
PE (1) PE20110308A1 (ru)
PH (1) PH12014500947B1 (ru)
PL (2) PL2315756T3 (ru)
PT (2) PT2824100T (ru)
RS (2) RS57132B1 (ru)
SG (2) SG10201805844QA (ru)
SI (2) SI2315756T1 (ru)
SM (1) SMT201400179B (ru)
TW (1) TWI453204B (ru)
WO (1) WO2010005958A2 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2741911C2 (ru) * 2016-04-29 2021-01-29 Иомет Фарма Лтд. Новые замещенные соединения имидазопиридина в качестве ингибиторов индоламин-2,3-диоксигеназы и/или триптофан-2,3-диоксигеназы

Families Citing this family (167)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG10201809390QA (en) 2005-05-10 2018-11-29 Incyte Holdings Corp Modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of using the same
EP1971583B1 (en) * 2005-12-20 2015-03-25 Incyte Corporation N-hydroxyamidinoheterocycles as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
CL2007002650A1 (es) 2006-09-19 2008-02-08 Incyte Corp Compuestos derivados de heterociclo n-hidroxiamino; composicion farmaceutica, util para tratar cancer, infecciones virales y desordenes neurodegenerativos entre otras.
JP5319532B2 (ja) * 2006-09-19 2013-10-16 インサイト・コーポレイション インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼのモジュレーターとしてのｎ−ヒドロキシアミジノヘテロサイクル
CN102164902B (zh) * 2008-07-08 2014-07-23 因塞特公司 作为吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂的1,2,5-噁二唑
GB0919757D0 (en) * 2009-11-12 2009-12-30 Johnson Matthey Plc Polymorphs of bromfenac sodium and methods for preparing bromfenac sodium polymorphs
US8299295B2 (en) 2009-10-15 2012-10-30 Johnson Matthey Public Limited Company Polymorphs of bromfenac sodium and methods for preparing bromfenac sodium polymorphs
NO2694640T3 (ru) 2011-04-15 2018-03-17
EP2781517B1 (en) * 2011-11-09 2017-10-11 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Nitrogen-containing heterocyclic compound
GB201120860D0 (en) 2011-12-05 2012-01-18 Cambridge Entpr Ltd Cancer immunotherapy
MX367055B (es) 2012-06-26 2019-08-02 Del Mar Pharmaceuticals El uso de una composición que comprende dianhidrogalactitol, diacetildianhidrogalactitol, y dibromodulcitol, y análogos o derivados de cada uno para el tratamiento de malignidades resistentes a inhibidores de tirosina cinasa.
WO2014066834A1 (en) 2012-10-26 2014-05-01 The University Of Chicago Synergistic combination of immunologic inhibitors for the treatment of cancer
US11491154B2 (en) 2013-04-08 2022-11-08 Dennis M. Brown Therapeutic benefit of suboptimally administered chemical compounds
AR098343A1 (es) * 2013-11-08 2016-05-26 Incyte Holdings Corp Proceso para la síntesis de un inhibidor de indolamina 2,3-dioxigenasa
CA2938566A1 (en) * 2014-02-04 2015-08-13 Incyte Corporation Combination of a pd-1 antagonist and an ido1 inhibitor for treating cancer
CA2943262A1 (en) 2014-03-31 2015-10-08 Genentech, Inc. Anti-ox40 antibodies and methods of use
BR112016022345A2 (pt) 2014-03-31 2017-10-10 Genentech Inc terapia de combinação compreendendo agentes antiangiogênese e agonistas de ligação de ox40
PL3148579T3 (pl) 2014-05-28 2021-07-19 Agenus Inc. Przeciwciała anty-gitr i sposoby ich zastosowania
WO2015188085A1 (en) 2014-06-06 2015-12-10 Flexus Biosciences, Inc. Immunoregulatory agents
SG11201700341PA (en) * 2014-07-17 2017-02-27 Chdi Foundation Inc Methods and compositions for treating hiv-related disorders
CN105481789B (zh) * 2014-09-15 2020-05-19 中国科学院上海有机化学研究所 一种吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂及其制备方法
UY36390A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido), sus métodos de síntesis y composiciones farmacéuticas que los contienen
CA2964276A1 (en) 2014-11-05 2016-05-12 Flexus Biosciences, Inc. Immunoregulatory agents
AR102537A1 (es) 2014-11-05 2017-03-08 Flexus Biosciences Inc Agentes inmunomoduladores
US10525035B2 (en) 2014-12-18 2020-01-07 Lankenau Institute For Medical Research Methods and compositions for the treatment of retinopathy and other ocular diseases
EP3097102B1 (en) 2015-03-04 2017-10-18 Gilead Sciences, Inc. Toll-like receptor modulating 4,6-diamino-pyrido[3,2-d]pyrimidine compounds
KR102013512B1 (ko) * 2015-03-17 2019-08-22 화이자 인코포레이티드 신규 3-인돌 치환 유도체, 제약 조성물 및 사용 방법
WO2016155545A1 (zh) * 2015-03-31 2016-10-06 江苏恒瑞医药股份有限公司 含氨磺酰基的1,2,5-噁二唑类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
MX2017012805A (es) 2015-04-07 2018-04-11 Genentech Inc Complejo de unión a antígenos con actividad agonista y métodos de uso.
RU2717577C2 (ru) 2015-04-21 2020-03-24 Цзянсу Хэнжуй Медицин Ко., Лтд. Производное имидазоизоиндола, способ его получения и медицинское применение
CN113603784A (zh) 2015-05-29 2021-11-05 艾吉纳斯公司 抗-ctla-4抗体及其使用方法
US9891882B2 (en) * 2015-06-01 2018-02-13 Nagravision S.A. Methods and systems for conveying encrypted data to a communication device
WO2016200835A1 (en) 2015-06-08 2016-12-15 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using anti-ox40 antibodies and pd-1 axis binding antagonists
WO2016200836A1 (en) 2015-06-08 2016-12-15 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using anti-ox40 antibodies
ES2752455T3 (es) 2015-07-02 2020-04-06 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Inhibidores de la indolamina 2,3-dioxigenasa
EP3322444A4 (en) 2015-07-14 2019-06-12 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. A TUMOR THERAPEUTIC AGENT COMPRISING AN IDO INHIBITOR ADMINISTERED IN ASSOCIATION WITH ANTIBODY
EP3744340A3 (en) 2015-07-16 2021-03-03 Biokine Therapeutics Ltd. Compositions and methods for treating cancer
CA3051388C (en) 2015-07-24 2021-11-09 Newlink Genetics Corporation Salts and prodrugs of 1-methyl-d-tryptophan
CN107001271B (zh) * 2015-08-07 2019-05-10 江苏恒瑞医药股份有限公司 羟基脒类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CA2995004A1 (en) 2015-08-26 2017-03-02 Gilead Sciences, Inc. Deuterated toll-like receptor modulators
MX2018002315A (es) 2015-09-01 2018-04-11 Agenus Inc Anticuerpos anti muerte programada 1 (pd 1) y metodos de uso de los mismos.
CN107396498B (zh) 2015-09-14 2019-07-23 昂宝电子（上海）有限公司 用于发光二极管照明系统中的电流调节的系统和方法
CN106565696B (zh) * 2015-10-09 2020-07-28 江苏恒瑞医药股份有限公司 噁二唑类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
EP3370699A1 (en) * 2015-11-04 2018-09-12 Incyte Corporation Pharmaceutical compositions and methods for indoleamine 2,3-dioxygenase inhibition and indications therefor
JP2018532406A (ja) 2015-11-09 2018-11-08 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ Ｉｄｏ１および／またはｔｄｏ修飾因子を同定するためのスクリーニングアッセイ
US11447557B2 (en) 2015-12-02 2022-09-20 Agenus Inc. Antibodies and methods of use thereof
WO2017106062A1 (en) 2015-12-15 2017-06-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase inhibitors
CN106883193B (zh) * 2015-12-15 2021-10-15 上海翰森生物医药科技有限公司 吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂及其制备方法与应用
TWI709647B (zh) 2016-01-19 2020-11-11 美商輝瑞股份有限公司 癌症疫苗
US9624185B1 (en) * 2016-01-20 2017-04-18 Yong Xu Method for preparing IDO inhibitor epacadostat
CN105646389B (zh) * 2016-01-28 2019-06-28 中国科学院上海有机化学研究所 一种作为吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂的氨基磺酸脂及其制备方法和用途
EP3416725A1 (en) 2016-02-19 2018-12-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of obesity
WO2017143874A1 (zh) * 2016-02-25 2017-08-31 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 一种取代的恶二唑类化合物及包含该化合物的组合物及其用途
CN107176933B (zh) * 2016-03-09 2020-10-09 中国科学院上海有机化学研究所 一种含氮烷基化和芳基化亚砜亚胺的吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂
CN107304191B (zh) * 2016-04-20 2023-09-29 上海翰森生物医药科技有限公司 吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂及其制备方法与应用
WO2017181849A1 (zh) * 2016-04-20 2017-10-26 江苏豪森药业集团有限公司 吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂及其制备方法与应用
US10696648B2 (en) 2016-05-04 2020-06-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
BR102017010009A2 (pt) 2016-05-27 2017-12-12 Gilead Sciences, Inc. Compounds for the treatment of hepatitis b virus infection
JP7267012B2 (ja) 2016-05-27 2023-05-01 アジェナス インコーポレイテッド 抗ｔｉｍ－３抗体及びその使用方法
US11738013B2 (en) 2016-05-27 2023-08-29 Gilead Sciences, Inc. Methods for treating hepatitis B virus infections using NS5A, NS5B or NS3 inhibitors
AR108586A1 (es) 2016-06-10 2018-09-05 Lilly Co Eli Compuestos de 2,3-dihidro-1h-indol
CN106109472A (zh) * 2016-06-13 2016-11-16 中山大学 氯氮卓作为吲哚胺2,3-双加氧酶-1抑制剂的用途
JP2019527699A (ja) * 2016-08-02 2019-10-03 シャンドン ルイ ファーマシューティカル カンパニー リミテッド Ｉｄｏ１阻害剤及びその製造方法と応用
WO2018027204A1 (en) 2016-08-05 2018-02-08 Genentech, Inc. Multivalent and multiepitopic anitibodies having agonistic activity and methods of use
US20190185439A1 (en) * 2016-08-24 2019-06-20 H. Lee Moffitt Cancer Center & Research Institute, Inc. Radiofluorinated carboximidamides as ido targeting pet tracer for cancer imaging
JOP20190024A1 (ar) 2016-08-26 2019-02-19 Gilead Sciences Inc مركبات بيروليزين بها استبدال واستخداماتها
KR20190040990A (ko) * 2016-08-26 2019-04-19 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 인돌아민 2,3-디옥시게나제의 억제제 및 그의 사용 방법
US10640499B2 (en) 2016-09-02 2020-05-05 Gilead Sciences, Inc. Toll like receptor modulator compounds
EP3507276B1 (en) 2016-09-02 2021-11-03 Gilead Sciences, Inc. Toll like receptor modulator compounds
CA3037333A1 (en) 2016-09-19 2018-03-22 University Of South Florida Method of targeting oncolytic viruses to tumors
MX2019003683A (es) 2016-10-11 2019-08-22 Agenus Inc Anticuerpos anti gen 3 de activación linfocítica (lag 3 ) y métodos para usarlos.
WO2018071873A2 (en) 2016-10-13 2018-04-19 Juno Therapeutics, Inc. Immunotherapy methods and compositions involving tryptophan metabolic pathway modulators
KR102305215B1 (ko) 2016-10-14 2021-09-28 프리시젼 바이오사이언시스 인코포레이티드 B형 간염 바이러스 게놈 내의 인식 서열에 대해 특이적인 조작된 메가뉴클레아제
CN107954999B (zh) * 2016-10-17 2023-01-24 上海医药集团股份有限公司 含噁二唑环化合物、制备方法、中间体、组合物及应用
EP3532091A2 (en) 2016-10-29 2019-09-04 H. Hoffnabb-La Roche Ag Anti-mic antibidies and methods of use
UY37466A (es) * 2016-11-03 2018-01-31 Phenex Discovery Verwaltungs Gmbh N-hidroxiamidinheterociclos sustituidos como moduladores de la indolamina 2,3-dioxigenasa
CA3041340A1 (en) 2016-11-09 2018-05-17 Agenus Inc. Anti-ox40 antibodies, anti-gitr antibodies, and methods of use thereof
WO2018095432A1 (en) 2016-11-28 2018-05-31 Shanghai Fochon Pharmaceutical Co., Ltd. Sulfoximine, sulfonimidamide, sulfondiimine and diimidosulfonamide compounds as inhibitors of indoleamine 2, 3-dioxygenase
MD3551660T2 (ro) 2016-12-07 2024-03-31 Agenus Inc Anticorpi anti-CTLA-4 și procedee de utilizare a acestora
JP7106538B2 (ja) 2016-12-07 2022-07-26 アジェナス インコーポレイテッド 抗体およびその使用方法
CN108218807A (zh) * 2016-12-22 2018-06-29 上海长森药业有限公司 一种作为吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂的砜脒及其制备方法和用途
LT3559009T (lt) 2016-12-22 2021-06-25 Calithera Biosciences, Inc. Kompozicijos ir būdai, skirti arginazės aktyvumo slopinimui
KR20190103226A (ko) 2017-01-13 2019-09-04 아게누스 인코포레이티드 Ny-eso-1에 결합하는 t 세포 수용체 및 이의 사용 방법
WO2018136437A2 (en) 2017-01-17 2018-07-26 Tesaro, Inc. Compounds useful as inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and/or tryptophan dioxygenase
TWI784370B (zh) 2017-01-31 2022-11-21 美商基利科學股份有限公司 替諾福韋埃拉酚胺(tenofovir alafenamide)之晶型
JOP20180008A1 (ar) 2017-02-02 2019-01-30 Gilead Sciences Inc مركبات لعلاج إصابة بعدوى فيروس الالتهاب الكبدي b
AU2018243640A1 (en) 2017-03-29 2019-09-12 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel substituted N'-hydroxycarbamimidoyl-1,2,5-oxadiazole compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) inhibitors
WO2018187479A1 (en) 2017-04-04 2018-10-11 Case Western Reserve University Method of modulating ribonucleotide reductase
CN108689958B (zh) * 2017-04-05 2021-09-17 南京华威医药科技集团有限公司 一种含有肼基的吲哚胺2,3-双加氧化酶抑制剂
CN106967005B (zh) * 2017-04-07 2019-07-16 上海肇钰医药科技有限公司 一种能抑制ido的化合物、其制备方法及其用途
AU2018253176B2 (en) 2017-04-13 2023-02-02 Agenus Inc. Anti-CD137 antibodies and methods of use thereof
JOP20180040A1 (ar) 2017-04-20 2019-01-30 Gilead Sciences Inc مثبطات pd-1/pd-l1
CN114920710A (zh) * 2017-04-27 2022-08-19 鲁南制药集团股份有限公司 亚氨脲衍生物
SI3618863T1 (sl) 2017-05-01 2023-12-29 Agenus Inc. Protitelesa proti tigitu in načini uporabe njih
CN109081818B (zh) * 2017-06-14 2022-04-22 南京华威医药科技集团有限公司 新型吲哚胺2,3-双加氧化酶抑制剂
CN109111438B (zh) * 2017-06-26 2021-11-02 正大天晴药业集团股份有限公司 用于ido抑制剂的脒类化合物
CA3069363A1 (en) 2017-07-11 2019-01-17 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising cea muc1 and tert
TW201920202A (zh) 2017-08-17 2019-06-01 瑞士商愛杜西亞製藥有限公司 吲哚胺2,3-二氧酶及/或色胺酸2,3-二氧酶的抑制劑
CN107311956A (zh) * 2017-08-22 2017-11-03 合肥圣迪利克医药科技有限公司 一种艾卡跺司他合成方法
CN111278854A (zh) 2017-09-04 2020-06-12 艾吉纳斯公司 与混合谱系白血病(mll)特异性磷酸肽结合的t细胞受体和其使用方法
MX2020002649A (es) 2017-09-11 2020-09-25 Atossa Therapeutics Inc Metodos para hacer y usar endoxifeno.
CN108863976B (zh) * 2017-09-11 2022-09-16 郑州泰基鸿诺医药股份有限公司 用作ido调节剂的化合物及其应用
JP2020534289A (ja) 2017-09-14 2020-11-26 ランケナー インスティテュート フォー メディカル リサーチ がんの治療のための方法および組成物
CN110248931B (zh) * 2017-09-20 2022-12-23 上海翰森生物医药科技有限公司 一种双加氧酶抑制剂的盐及其制备方法和用途
CN109897011B (zh) * 2017-12-08 2023-10-31 上海华汇拓医药科技有限公司 一类ido抑制剂及其应用
CN109928922A (zh) * 2017-12-18 2019-06-25 成都华健未来科技有限公司 一类环己烷类化合物
CN109942565B (zh) 2017-12-20 2021-03-26 海创药业股份有限公司 一种吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂及其制备方法和用途
JP7037667B2 (ja) 2017-12-20 2022-03-16 インスティチュート オブ オーガニック ケミストリー アンド バイオケミストリー エーエスシーアール，ヴイ．ヴイ．アイ． Ｓｔｉｎｇアダプタータンパク質を活性化するホスホン酸結合を有する３’３’環状ジヌクレオチド
US11203610B2 (en) 2017-12-20 2021-12-21 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2′3′ cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the sting adaptor protein
CA3084829A1 (en) 2018-01-05 2019-07-11 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Reducing beta-catenin and ido expression to potentiate immunotherapy
ES2907282T3 (es) 2018-01-15 2022-04-22 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Inhibidores de la indoleamina 2,3-dioxigenasa y/o de la triptófano dioxigenasa
CN108586378B (zh) 2018-01-22 2020-06-19 南京华威医药科技集团有限公司 吲哚胺2,3-双加氧化酶抑制剂及其制备方法和用途
CN110066253B (zh) * 2018-01-24 2023-06-23 江苏柯菲平医药股份有限公司 1,2,5-噁二唑类衍生物，其制备方法及其在医药中的应用
CN110577501A (zh) * 2018-06-07 2019-12-17 江苏柯菲平医药股份有限公司 吲哚胺2,3-双加氧酶调节剂，其制备方法及用途
WO2019144859A1 (zh) * 2018-01-24 2019-08-01 南京柯菲平盛辉制药有限公司 吲哚胺2,3-双加氧酶调节剂，其制备方法及用途
WO2019149255A1 (zh) * 2018-02-02 2019-08-08 成都海创药业有限公司 一种吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制剂及其制备方法和用途
CN108101899B (zh) * 2018-02-11 2021-01-26 中国药科大学 IDO1抑制剂Epacadostat中间体的制备方法
CR20200347A (es) 2018-02-13 2020-09-23 Gilead Sciences Inc Inhibidores pd-1/pd-l1
KR102526964B1 (ko) 2018-02-26 2023-04-28 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Hbv 복제 억제제로서의 치환된 피롤리진 화합물
WO2019195181A1 (en) 2018-04-05 2019-10-10 Gilead Sciences, Inc. Antibodies and fragments thereof that bind hepatitis b virus protein x
TWI833744B (zh) 2018-04-06 2024-03-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 3'3'-環二核苷酸
TWI818007B (zh) 2018-04-06 2023-10-11 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 2'3'-環二核苷酸
TW202005654A (zh) 2018-04-06 2020-02-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 ２，２，─環二核苷酸
US11142750B2 (en) 2018-04-12 2021-10-12 Precision Biosciences, Inc. Optimized engineered meganucleases having specificity for a recognition sequence in the Hepatitis B virus genome
US20190314324A1 (en) 2018-04-13 2019-10-17 The University Of Chicago Combination of micheliolide derivatives or nanoparticles with ionizing radiation and checkpoint inhibitors for cancer therapy
CN112041311B (zh) 2018-04-19 2023-10-03 吉利德科学公司 Pd-1/pd-l1抑制剂
WO2019210055A2 (en) 2018-04-26 2019-10-31 Agenus Inc. Heat shock protein-binding peptide compositions and methods of use thereof
CN110407765B (zh) * 2018-04-28 2022-12-06 上海挚盟医药科技有限公司 1,2,5-噁二唑类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
WO2019211799A1 (en) 2018-05-03 2019-11-07 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3'-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide
GB201809050D0 (en) 2018-06-01 2018-07-18 E Therapeutics Plc Modulators of tryptophan catabolism
KR20230159715A (ko) 2018-07-13 2023-11-21 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Pd-1/pd-l1 억제제
EP3823604A4 (en) 2018-07-17 2022-03-16 Board of Regents, The University of Texas System COMPOUNDS USEFUL AS INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE AND/OR TRYPTOPHANE DIOXYGENASE INHIBITORS
WO2020028097A1 (en) 2018-08-01 2020-02-06 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of (r)-11-(methoxymethyl)-12-(3-methoxypropoxy)-3,3-dimethyl-8-0x0-2,3,8,13b-tetrahydro-1h-pyrido[2,1-a]pyrrolo[1,2-c] phthalazine-7-c arboxylic acid
CN109180603A (zh) * 2018-10-10 2019-01-11 中国药科大学 Epacadostat关键中间体的制备方法
AU2019366355B2 (en) 2018-10-24 2022-10-13 Gilead Sciences, Inc. PD-1/PD-L1 inhibitors
LT3873903T (lt) 2018-10-31 2024-05-10 Gilead Sciences, Inc. Pakeistieji 6-azabenzimidazolo junginiai, kaip hpk1 inhibitoriai
US11071730B2 (en) 2018-10-31 2021-07-27 Gilead Sciences, Inc. Substituted 6-azabenzimidazole compounds
CN111617078B (zh) * 2019-02-28 2023-02-03 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 用于疾病治疗和/或预防的药物组合物、方法及其用途
AU2020231115A1 (en) 2019-03-07 2021-08-26 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof
US11766447B2 (en) 2019-03-07 2023-09-26 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3′3′-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide as sting modulator
WO2020178769A1 (en) 2019-03-07 2020-09-10 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof
TWI751517B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
TWI751516B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
EP3972695A1 (en) 2019-05-23 2022-03-30 Gilead Sciences, Inc. Substituted exo-methylene-oxindoles which are hpk1/map4k1 inhibitors
CA3140708A1 (en) 2019-06-18 2020-12-24 Helen Horton Combination of hepatitis b virus (hbv) vaccines and pyridopyrimidine derivatives
CR20210687A (es) 2019-06-25 2022-03-03 Gilead Sciences Inc PROTEÍNAS DE FUSIÓN FLT3L-Fc Y MÉTODOS DE USO
CN110204537B (zh) * 2019-07-10 2021-10-08 盛世泰科生物医药技术(苏州)有限公司 一种用作吲哚胺2，3-双加氧酶的抑制剂的1，2，5-噁二唑衍生物
JP2022540146A (ja) 2019-07-11 2022-09-14 イドーシア ファーマシューティカルズ リミテッド インドールアミン ２，３－ジオキシゲナーゼ及び／又はトリプトファン ２，３－ジオキシゲナーゼの阻害剤
US20220257619A1 (en) 2019-07-18 2022-08-18 Gilead Sciences, Inc. Long-acting formulations of tenofovir alafenamide
AU2020319875A1 (en) 2019-08-01 2022-02-17 Incyte Corporation A dosing regimen for an IDO inhibitor
WO2021034804A1 (en) 2019-08-19 2021-02-25 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical formulations of tenofovir alafenamide
TW202122420A (zh) 2019-08-30 2021-06-16 美商艾吉納斯公司 抗ｃｄ９６抗體及其使用方法
TWI755055B (zh) * 2019-09-18 2022-02-11 台灣神隆股份有限公司 用於製備惡拉戈利鈉及其中間體的方法
KR20220074917A (ko) 2019-09-30 2022-06-03 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 Hbv 백신 및 hbv를 치료하는 방법
WO2021113765A1 (en) 2019-12-06 2021-06-10 Precision Biosciences, Inc. Optimized engineered meganucleases having specificity for a recognition sequence in the hepatitis b virus genome
CN113045655A (zh) 2019-12-27 2021-06-29 高诚生物医药(香港)有限公司 抗ox40抗体及其用途
JP2023518433A (ja) 2020-03-20 2023-05-01 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ４’－ｃ－置換－２－ハロ－２’－デオキシアデノシンヌクレオシドのプロドラッグ並びにその製造法及び使用法
AU2021320236A1 (en) 2020-08-07 2023-04-13 Gilead Sciences, Inc. Prodrugs of phosphonamide nucleotide analogues and their pharmaceutical use
WO2022064526A1 (en) * 2020-09-25 2022-03-31 Msn Laboratories Private Limited, R&D Center Solid state forms of epacadostat and their processes for preparation thereof
TWI815194B (zh) 2020-10-22 2023-09-11 美商基利科學股份有限公司 介白素2-Fc融合蛋白及使用方法
KR20230152715A (ko) 2021-03-05 2023-11-03 유니버시타트 바셀 Ebv 관련 질환 또는 질병의 치료용 조성물
EP4052705A1 (en) 2021-03-05 2022-09-07 Universität Basel Vizerektorat Forschung Compositions for the treatment of ebv associated diseases or conditions
EP4337223A1 (en) 2021-05-13 2024-03-20 Gilead Sciences, Inc. Combination of a tlr8 modulating compound and anti-hbv sirna therapeutics
CA3222277A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
KR20240005901A (ko) 2021-06-23 2024-01-12 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 디아실글리세롤 키나제 조절 화합물
EP4359389A1 (en) 2021-06-23 2024-05-01 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
CA3222439A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060258719A1 (en) * 2005-05-10 2006-11-16 Combs Andrew P Modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of using the same
WO2007075598A2 (en) * 2005-12-20 2007-07-05 Incyte Corporation N-hydroxyamidinoheterocycles as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
WO2008036652A2 (en) * 2006-09-19 2008-03-27 Incyte Corporation Amidines as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
WO2008058178A1 (en) * 2006-11-08 2008-05-15 Incyte Corporation N-hydroxyamidinoheterocycles as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase

Family Cites Families (122)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3236855A (en) 1964-01-17 1966-02-22 Merck & Co Inc Certain n-phenyl(thiazole-hydroxamidine) compounds and their preparation
US3354174A (en) 1964-02-19 1967-11-21 Sterling Drug Inc 1-and 2-benzimidazolyl-lower-alkylamidoximes, amidines-, and guanidines
US3553228A (en) 1967-09-26 1971-01-05 Colgate Palmolive Co 3-substituted-4h(1)benzopyrano(3,4-d) isoxazoles
DE2040628A1 (de) 1970-08-17 1972-02-24 Fahlberg List Veb Neue herbizide Mittel
US3948928A (en) 1972-03-17 1976-04-06 Dainippon Pharmaceutical Co., Ltd. 3-Substituted-1,2-benzisoxazoles and pharmaceutically acceptable acid addition salts thereof
JPS5621033B2 (ru) 1973-09-05 1981-05-16
DD128918A5 (de) 1975-09-11 1977-12-21 Philagro Sa Phythohormonale und herbizide zusammensetzungen
FR2323683A1 (fr) 1975-09-11 1977-04-08 Philagro Sa Nouveaux derives d'amidoximes, leur preparation et les compositions qui les contiennent
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4323681A (en) 1980-09-29 1982-04-06 American Home Products Corporation 4-Amino-2-substituted-5-pyrimidinecarboxamidoximes and carbothioamides
US5156840A (en) 1982-03-09 1992-10-20 Cytogen Corporation Amine-containing porphyrin derivatives
JPS58208275A (ja) 1982-05-20 1983-12-03 Lion Corp ５−アミノ−ピラゾ−ル誘導体及び該化合物を含有する抗腫瘍剤
EP0132680B1 (de) 1983-07-22 1987-01-28 Bayer Ag Substituierte Furazane
US4507485A (en) 1984-01-23 1985-03-26 Bristol-Myers Company 3,4-Disubstituted-1,2,5-oxadiazoles having histamine H2 -receptor antagonist activity
JPS60193968A (ja) 1984-03-13 1985-10-02 Toyo Jozo Co Ltd シクロペンテン環を有するイミダゾ−ルアミドオキシムおよびその製造法
JPS6259283A (ja) 1985-09-10 1987-03-14 Kaken Pharmaceut Co Ltd セフアロスポリン化合物
US5057313A (en) 1986-02-25 1991-10-15 The Center For Molecular Medicine And Immunology Diagnostic and therapeutic antibody conjugates
JPS6320710A (ja) 1986-07-11 1988-01-28 Matsushita Electric Ind Co Ltd 薄膜磁気ヘツドの製造方法
WO1988007089A1 (en) 1987-03-18 1988-09-22 Medical Research Council Altered antibodies
JP2696342B2 (ja) 1988-06-27 1998-01-14 日本曹達株式会社 アミジン誘導体、その製造方法及び殺ダニ剤・農園芸用殺菌剤
DE68901424D1 (de) 1988-07-05 1992-06-11 Akzo Nv Verbindungen mit bronchodilatatorischer aktivitaet.
IL162181A (en) 1988-12-28 2006-04-10 Pdl Biopharma Inc A method of producing humanized immunoglubulin, and polynucleotides encoding the same
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
DE3920358A1 (de) 1989-06-22 1991-01-17 Behringwerke Ag Bispezifische und oligospezifische, mono- und oligovalente antikoerperkonstrukte, ihre herstellung und verwendung
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
JPH04297449A (ja) 1991-03-27 1992-10-21 Hokko Chem Ind Co Ltd Ｎ−ヒドロキシベンジルグアニジン誘導体および農園芸用殺菌剤
JPH05186458A (ja) 1991-04-26 1993-07-27 Japan Tobacco Inc 新規なベンゾピラン誘導体
FR2677019B1 (fr) 1991-05-27 1994-11-25 Pf Medicament Nouvelles piperidines disubstituees-1,4, leur preparation et leur application en therapeutique.
CA2103059C (en) 1991-06-14 2005-03-22 Paul J. Carter Method for making humanized antibodies
DK1136556T3 (da) 1991-11-25 2005-10-03 Enzon Inc Fremgangsmåde til fremstilling af multivalente antigen-bindende proteiner
US5714350A (en) 1992-03-09 1998-02-03 Protein Design Labs, Inc. Increasing antibody affinity by altering glycosylation in the immunoglobulin variable region
US5521184A (en) 1992-04-03 1996-05-28 Ciba-Geigy Corporation Pyrimidine derivatives and processes for the preparation thereof
JP2709677B2 (ja) 1992-06-19 1998-02-04 株式会社大塚製薬工場 ホスホン酸ジエステル誘導体
SI9200344B (sl) 1992-11-26 1998-06-30 Lek, Postopek za pripravo amlodipin benzensulfonata
US5827690A (en) 1993-12-20 1998-10-27 Genzyme Transgenics Corporatiion Transgenic production of antibodies in milk
FR2720396B1 (fr) 1994-05-27 1996-06-28 Adir Nouveaux N-pyridyl carboxamides et dérivés leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent.
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5869046A (en) 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US5731315A (en) 1995-06-07 1998-03-24 Rhone-Poulenc Rorer Pharmaceuticals Inc. Substituted sulfonic acid n- (aminoiminomethyl)phenylalkyl!-azaheterocyclamide compounds
JP4436457B2 (ja) 1995-08-18 2010-03-24 モルフォシス アイピー ゲーエムベーハー 蛋白質／（ポリ）ペプチドライブラリー
SK45898A3 (en) 1995-10-17 1999-01-11 Astra Pharma Prod Pharmaceutically active quinazoline compounds
AU1730497A (en) 1996-02-17 1997-09-02 Agrevo Uk Limited Fungicidal 1,2,4-oxadiazoles and analogues
US5955495A (en) 1996-05-03 1999-09-21 Hoffmann-La Roche Inc. Method of treating diseases of the CNS
JPH11171702A (ja) 1997-09-24 1999-06-29 Takeda Chem Ind Ltd 害虫防除方法
US6451840B1 (en) 1997-12-05 2002-09-17 Medical College Of Georgia Research Institute, Inc. Regulation of T cell-mediated immunity by tryptophan
PT1038874E (pt) 1997-12-10 2004-06-30 Dainippon Ink & Chemicals Derivados de oxima e produtos agro-quimicos que os contem
CA2333759A1 (en) 1998-06-02 1999-12-09 Takeda Chemical Industries, Ltd. Oxadiazoline derivatives and their use as insecticides
DE69942097D1 (de) 1998-08-11 2010-04-15 Novartis Ag Isochinoline derivate mit angiogenesis-hemmender wirkung
FR2784678B1 (fr) 1998-09-23 2002-11-29 Sod Conseils Rech Applic Nouveaux derives de n-(iminomethyl)amines, leur preparation, leur application a titre de medicaments et les compositions pharmaceutiques les contenant
US6133031A (en) 1999-08-19 2000-10-17 Isis Pharmaceuticals Inc. Antisense inhibition of focal adhesion kinase expression
WO2000052001A1 (en) 1999-03-03 2000-09-08 Samjin Pharmaceutical Co., Ltd. Piperazine derivatives and process for the preparation thereof
GB9905075D0 (en) 1999-03-06 1999-04-28 Zeneca Ltd Chemical compounds
WO2000061609A2 (de) 1999-04-09 2000-10-19 Basf Aktiengesellschaft Prodrugs von thrombininhibitoren
DE60022504T2 (de) 1999-05-24 2006-06-29 Mitsubishi Pharma Corp. Phenoxypropylamin-derivate
JP2001158785A (ja) 1999-11-30 2001-06-12 Takeda Chem Ind Ltd 農薬組成物
JP2001158786A (ja) 1999-11-30 2001-06-12 Takeda Chem Ind Ltd 哺乳動物の外部寄生虫防除剤
DE60131138T2 (de) 2000-01-13 2008-08-14 Amgen Inc., Thousand Oaks Antibakterielle mittel
JP2001233861A (ja) 2000-02-22 2001-08-28 Ube Ind Ltd ピラゾールオキシム化合物、その製法及び用途
GB0004890D0 (en) 2000-03-01 2000-04-19 Astrazeneca Uk Ltd Chemical compounds
PL202623B1 (pl) 2000-06-28 2009-07-31 Smithkline Beecham Plc Sposób wytwarzania drobno zmielonego preparatu substancji leczniczej, drobno zmielona substancja lecznicza wytworzona tym sposobem i zawierająca ją kompozycja farmaceutyczna
GB0108102D0 (en) 2001-03-30 2001-05-23 Pfizer Ltd Compounds
AU2002319237B2 (en) 2001-06-18 2008-01-03 Merck Serono Sa Pyrrolidine oxadiazole- and thiadiazole oxime derivatives being oxytocin receptor antagonists
MXPA04002243A (es) 2001-09-19 2004-06-29 Aventis Pharma Sa Compuestos quimicos.
ATE335490T1 (de) 2001-10-30 2006-09-15 Novartis Pharma Gmbh Staurosporin-derivate als hemmer der flt3- rezeptor-tyrosinkinase-wirkung
KR20060111716A (ko) 2002-01-22 2006-10-27 워너-램버트 캄파니 엘엘씨 2-(피리딘-2-일아미노)-피리도[2,3-ｄ]피리미딘-7-온
AU2003218989A1 (en) 2002-02-19 2003-09-09 Pharmacia Italia S.P.A. Tricyclic pyrazole derivatives, process for their preparation and their use as antitumor agents
GB0208224D0 (en) 2002-04-10 2002-05-22 Celltech R&D Ltd Chemical compounds
EP2177601A1 (en) 2002-04-12 2010-04-21 Medical College of Georgia Research Institute, Inc Antigen-presenting cell populations and their use as reagents for enhancing or reducing immune tolerance
CA2484822A1 (en) 2002-05-28 2003-12-04 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Novel thiophene amidines, compositions thereof, and methods of treating complement-mediated diseases and conditions
TW200406374A (en) 2002-05-29 2004-05-01 Novartis Ag Diaryl urea derivatives useful for the treatment of protein kinase dependent diseases
GB0215676D0 (en) 2002-07-05 2002-08-14 Novartis Ag Organic compounds
US7157462B2 (en) 2002-09-24 2007-01-02 Euro-Celtique S.A. Therapeutic agents useful for treating pain
US7015321B2 (en) 2002-10-12 2006-03-21 The Scripps Research Institute Synthesis of non-symmetrical sulfamides using burgess-type reagents
TWI335913B (en) 2002-11-15 2011-01-11 Vertex Pharma Diaminotriazoles useful as inhibitors of protein kinases
UA80767C2 (en) 2002-12-20 2007-10-25 Pfizer Prod Inc Pyrimidine derivatives for the treatment of abnormal cell growth
WO2004063351A2 (en) 2003-01-09 2004-07-29 Macrogenics, Inc. IDENTIFICATION AND ENGINEERING OF ANTIBODIES WITH VARIANT Fc REGIONS AND METHODS OF USING SAME
US20050079574A1 (en) 2003-01-16 2005-04-14 Genentech, Inc. Synthetic antibody phage libraries
WO2004072266A2 (en) 2003-02-13 2004-08-26 Kalobios Inc. Antibody affinity engineering by serial epitope-guided complementarity replacement
GB0305929D0 (en) 2003-03-14 2003-04-23 Novartis Ag Organic compounds
EP1613308A4 (en) 2003-03-27 2008-02-20 Lankenau Inst Medical Res CANCER TREATMENT METHODS
US7598287B2 (en) 2003-04-01 2009-10-06 Medical College Of Georgia Research Institute, Inc. Use of inhibitors of indoleamine-2,3-dioxygenase in combination with other therapeutic modalities
AU2004253868B2 (en) 2003-06-13 2011-06-16 Biogen Ma Inc. Aglycosyl anti-CD154 (CD40 ligand) antibodies and uses thereof
WO2005019190A2 (en) 2003-08-20 2005-03-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated (4 -amino -1,2, 5-oxadiazol-4-yl) -hetξroaromatic compounds useful as protein kinase inhibitors
CN1871259A (zh) 2003-08-22 2006-11-29 比奥根艾迪克Ma公司 具有改变的效应物功能的经改进的抗体和制备它的方法
AR045944A1 (es) 2003-09-24 2005-11-16 Novartis Ag Derivados de isoquinolina 1.4-disustituidas
DE10348023A1 (de) 2003-10-15 2005-05-19 Imtm Gmbh Neue Alanyl-Aminopeptidasen-Inhibitoren zur funktionellen Beeinflussung unterschiedlicher Zellen und zur Behandlung immunologischer, entzündlicher, neuronaler und anderer Erkrankungen
DE10348022A1 (de) 2003-10-15 2005-05-25 Imtm Gmbh Neue Dipeptidylpeptidase IV-Inhibitoren zur funktionellen Beeinflussung unterschiedlicher Zellen und zur Behandlung immunologischer, entzündlicher, neuronaler und anderer Erkrankungen
US7745437B2 (en) 2004-06-10 2010-06-29 Irm Llc Compounds and compositions as protein kinase inhibitors
EP1801108B9 (en) 2004-09-08 2013-11-20 Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation Morpholine compounds for the treatment of inflammations
WO2006056399A2 (en) 2004-11-24 2006-06-01 Novartis Ag Combinations of jak inhibitors and at least one of bcr-abl, flt-3, fak or raf kinase inhibitors
US8193359B2 (en) 2004-12-24 2012-06-05 Prosidion Limited G-protein coupled receptor agonists
US7429667B2 (en) 2005-01-20 2008-09-30 Ardea Biosciences, Inc. Phenylamino isothiazole carboxamidines as MEK inhibitors
CN101213297B (zh) * 2005-05-09 2013-02-13 小野药品工业株式会社 程序性死亡-1(pd-1)的人单克隆抗体及单独使用或与其它免疫治疗剂联合使用抗pd-1抗体来治疗癌症的方法
WO2006133417A1 (en) 2005-06-07 2006-12-14 Valeant Pharmaceuticals International Phenylamino isothiazole carboxamidines as mek inhibitors
US20070038298A1 (en) 2005-06-30 2007-02-15 Sulner Joseph W Repair of tympanic membrane using placenta derived collagen biofabric
DE102005060466A1 (de) 2005-12-17 2007-06-28 Bayer Cropscience Ag Carboxamide
WO2007095050A2 (en) 2006-02-09 2007-08-23 Incyte Corporation N-hydroxyguanidines as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
JP4297449B2 (ja) 2006-05-12 2009-07-15 株式会社サクラクレパス 墨汁
CL2007002650A1 (es) 2006-09-19 2008-02-08 Incyte Corp Compuestos derivados de heterociclo n-hidroxiamino; composicion farmaceutica, util para tratar cancer, infecciones virales y desordenes neurodegenerativos entre otras.
WO2008036643A2 (en) 2006-09-19 2008-03-27 Incyte Corporation Amidinoheterocycles as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
JP5319532B2 (ja) 2006-09-19 2013-10-16 インサイト・コーポレイション インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼのモジュレーターとしてのｎ−ヒドロキシアミジノヘテロサイクル
US7998995B2 (en) 2006-12-08 2011-08-16 Exelixis Patent Company Llc LXR and FXR modulators
CL2008000066A1 (es) 2007-01-12 2008-08-01 Smithkline Beecham Corp Compuestos derivados de (5-hidroxi-3-oxo-2,3-dihidropiridazina-4-carbonil)glicina, inhibidores de hif prolil hidroxilasas; procedimiento de preparacion; composicion farmaceutica que comprende a dichos compuestos; y su uso en el tratamiento de la anem
CN101945867A (zh) 2007-12-19 2011-01-12 安姆根有限公司 作为细胞周期抑制剂的稠合吡啶、嘧啶和三嗪化合物
CA2709784A1 (en) 2007-12-21 2009-07-09 University Of Rochester Method for altering the lifespan of eukaryotic organisms
CN102164902B (zh) * 2008-07-08 2014-07-23 因塞特公司 作为吲哚胺2,3-双加氧酶的抑制剂的1,2,5-噁二唑
PA8852901A1 (es) 2008-12-22 2010-07-27 Lilly Co Eli Inhibidores de proteina cinasa
UY33227A (es) 2010-02-19 2011-09-30 Novartis Ag Compuestos de pirrolopirimidina como inhibidores de la cdk4/6
EP3567042B1 (en) 2010-10-25 2021-07-07 G1 Therapeutics, Inc. Cdk inhibitors
DK2937349T3 (en) 2011-03-23 2017-02-20 Amgen Inc CONDENSED TRICYCLIC DUAL INHIBITORS OF CDK 4/6 AND FLT3
WO2014066834A1 (en) 2012-10-26 2014-05-01 The University Of Chicago Synergistic combination of immunologic inhibitors for the treatment of cancer
AR098343A1 (es) 2013-11-08 2016-05-26 Incyte Holdings Corp Proceso para la síntesis de un inhibidor de indolamina 2,3-dioxigenasa
CA2938566A1 (en) 2014-02-04 2015-08-13 Incyte Corporation Combination of a pd-1 antagonist and an ido1 inhibitor for treating cancer
EP3200775B1 (en) 2014-10-03 2019-11-20 Novartis AG Combination therapies
GEP20227419B (en) 2015-07-30 2022-10-10 Macrogenics Inc Pd-1-binding molecules and methods of use thereof
PE20181295A1 (es) 2015-09-01 2018-08-07 First Wave Bio Inc Metodos y composiciones para tratar afecciones asociadas a una respuesta inflamatoria anomala
EP3370699A1 (en) 2015-11-04 2018-09-12 Incyte Corporation Pharmaceutical compositions and methods for indoleamine 2,3-dioxygenase inhibition and indications therefor
JP2018020710A (ja) 2016-08-05 2018-02-08 三井造船株式会社 船舶用舵及び船舶
CA3084829A1 (en) 2018-01-05 2019-07-11 Dicerna Pharmaceuticals, Inc. Reducing beta-catenin and ido expression to potentiate immunotherapy
AU2020319875A1 (en) 2019-08-01 2022-02-17 Incyte Corporation A dosing regimen for an IDO inhibitor

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20060258719A1 (en) * 2005-05-10 2006-11-16 Combs Andrew P Modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of using the same
WO2007075598A2 (en) * 2005-12-20 2007-07-05 Incyte Corporation N-hydroxyamidinoheterocycles as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
US20070185165A1 (en) * 2005-12-20 2007-08-09 Combs Andrew P N-hydroxyamidinoheterocycles as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
WO2008036652A2 (en) * 2006-09-19 2008-03-27 Incyte Corporation Amidines as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
WO2008058178A1 (en) * 2006-11-08 2008-05-15 Incyte Corporation N-hydroxyamidinoheterocycles as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2741911C2 (ru) * 2016-04-29 2021-01-29 Иомет Фарма Лтд. Новые замещенные соединения имидазопиридина в качестве ингибиторов индоламин-2,3-диоксигеназы и/или триптофан-2,3-диоксигеназы

Also Published As

Publication number Publication date
MY192633A (en) 2022-08-29
KR20180133538A (ko) 2018-12-14
US20120058079A1 (en) 2012-03-08
ES2524266T3 (es) 2014-12-04
US20170348289A1 (en) 2017-12-07
RS57132B1 (sr) 2018-07-31
ES2524266T9 (es) 2015-10-05
DK2315756T5 (en) 2015-08-03
LT2824100T (lt) 2018-05-10
CN102164902A (zh) 2011-08-24
EP2315756B1 (en) 2014-09-03
BRPI0915692B1 (pt) 2019-12-03
CY1120617T1 (el) 2019-12-11
KR101847107B1 (ko) 2018-04-10
CA2743975C (en) 2018-09-11
CN104042611B (zh) 2019-05-14
RS53688B1 (en) 2015-04-30
US8993605B2 (en) 2015-03-31
SI2315756T1 (sl) 2014-12-31
US9320732B2 (en) 2016-04-26
JP5465720B2 (ja) 2014-04-09
ME03065B (me) 2019-01-20
KR20170113707A (ko) 2017-10-12
US20140315962A1 (en) 2014-10-23
IL235870A (en) 2016-05-31
CL2009001554A1 (es) 2009-10-30
BR122019015876B8 (pt) 2021-07-27
ES2665419T3 (es) 2018-04-25
ECSP11010798A (es) 2011-03-31
KR101927291B1 (ko) 2018-12-10
SMT201400179B (it) 2015-01-15
US20220331296A1 (en) 2022-10-20
PE20110308A1 (es) 2011-06-10
PH12014500947A1 (en) 2015-03-30
CA3012229C (en) 2020-11-10
EP2315756A2 (en) 2011-05-04
RS53688B9 (sr) 2020-01-31
AU2016204914A1 (en) 2016-08-04
PH12014500947B1 (en) 2015-03-30
AU2020239772B2 (en) 2022-09-15
AU2014210662A1 (en) 2014-08-28
WO2010005958A3 (en) 2010-06-24
EA201170161A1 (ru) 2011-08-30
SI2824100T1 (en) 2018-06-29
CR11871A (es) 2011-03-30
US20100015178A1 (en) 2010-01-21
CN104042611A (zh) 2014-09-17
US10653677B2 (en) 2020-05-19
CN102164902B (zh) 2014-07-23
US20190298700A1 (en) 2019-10-03
US10034864B2 (en) 2018-07-31
DK2824100T3 (en) 2018-04-16
JP5819451B2 (ja) 2015-11-24
EP2824100B1 (en) 2018-02-21
KR102031538B1 (ko) 2019-11-08
EP2315756B9 (en) 2015-07-22
SG192485A1 (en) 2013-08-30
KR20110031971A (ko) 2011-03-29
EP2824100A1 (en) 2015-01-14
AU2020239772A1 (en) 2020-10-22
TWI453204B (zh) 2014-09-21
JP2011527686A (ja) 2011-11-04
KR101649548B1 (ko) 2016-08-19
NZ590268A (en) 2012-11-30
US20160220543A1 (en) 2016-08-04
EP3360873A1 (en) 2018-08-15
US20240173303A1 (en) 2024-05-30
PT2824100T (pt) 2018-05-10
HK1206029A1 (en) 2015-12-31
AU2018267589A1 (en) 2018-12-06
HRP20141094T1 (hr) 2015-01-16
CO6341622A2 (es) 2011-11-21
US8822511B2 (en) 2014-09-02
AU2009268739B2 (en) 2014-05-08
HK1157692A1 (en) 2012-07-06
PL2315756T3 (pl) 2015-02-27
DK2315756T3 (da) 2014-10-13
AR072490A1 (es) 2010-09-01
AU2018200457A1 (en) 2018-02-08
WO2010005958A2 (en) 2010-01-14
US9789094B2 (en) 2017-10-17
US8796319B2 (en) 2014-08-05
IL210402A0 (en) 2011-03-31
MY177058A (en) 2020-09-03
JP2014114299A (ja) 2014-06-26
US10369137B2 (en) 2019-08-06
KR20180037325A (ko) 2018-04-11
CA3012229A1 (en) 2010-01-14
MX2011000235A (es) 2011-02-23
US20140023663A1 (en) 2014-01-23
US20150190378A1 (en) 2015-07-09
US8088803B2 (en) 2012-01-03
CL2014000363A1 (es) 2014-08-01
NO2824100T3 (ru) 2018-07-21
TW201006827A (en) 2010-02-16
KR101783004B1 (ko) 2017-09-28
MY171866A (en) 2019-11-05
PT2315756E (pt) 2014-12-16
SG10201805844QA (en) 2018-08-30
AU2018267589B2 (en) 2020-06-25
US20180177769A1 (en) 2018-06-28
HUE036813T2 (hu) 2018-07-30
US11207302B2 (en) 2021-12-28
EA029781B1 (ru) 2018-05-31
HRP20180662T1 (hr) 2018-06-01
AU2009268739A1 (en) 2010-01-14
IL235870A0 (en) 2015-01-29
EA201500530A1 (ru) 2015-08-31
US20210030722A1 (en) 2021-02-04
BR122019015876B1 (pt) 2020-03-10
IL210402A (en) 2015-02-26
BRPI0915692B8 (pt) 2021-05-25
PL2824100T3 (pl) 2018-07-31
KR20160110969A (ko) 2016-09-23
CA2743975A1 (en) 2010-01-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA022669B1 (ru) 1,2,5-оксадиазолы в качестве ингибиторов индоламин-2,3-диоксигеназы
JP6633163B2 (ja) インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼ阻害剤の合成のためのプロセス