ES2752455T3 - Inhibidores de la indolamina 2,3-dioxigenasa - Google Patents

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Abstract

Un compuesto que tiene la estructura de fórmula (I):**Fórmula** o su sal farmacéuticamente aceptable, en la que: X es CH2 o C(O); R1 es -NR2R3; R2 es -H o -CH3; R3 se selecciona entre el grupo que consiste en:**Fórmula**

Description

DESCRIPCIÓN
Inhibidores de la indolamina 2,3-dioxigenasa
Campo de la invención
Se desvelan compuestos, procedimientos y composiciones farmacéuticas para la prevención y/o tratamiento de VIH; que incluye la prevención de la progresión del SIDA y la inmunosupresión general, mediante la administración de ciertos compuestos inhibidores de la indolamina 2,3-dioxigenasa en cantidades terapéuticamente eficaces. También se desvelan procedimientos para preparar dichos compuestos y procedimientos para usar los compuestos y composiciones farmacéuticas de los mismos.
Antecedentes de la invención
El virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) lleva a la contracción de la enfermedad de inmunodeficiencia adquirida (SIDA). El número de casos de VIH sigue aumentando, y actualmente más de veinticinco millones de personas en todo el mundo padecen el virus. Actualmente, la supresión a largo plazo de la replicación vírica con fármacos antiretrovíricos es la única opción para el tratamiento de infección por VlH-1. De hecho, la U.S. Food and Drug Administration ha aprobado veinticinco medicamentos en más de seis clases diferentes de inhibidores, que se ha demostrado que aumentan en gran medida la supervivencia y la calidad de vida del paciente. Sin embargo, aún se requieren terapias adicionales debido a una serie de problemas que incluyen, entre otros, interacciones no deseadas entre fármacos; interacciones fármaco-alimento; no adherencia a la terapia; y resistencia a los fármacos debido a la mutación de la diana enzimática; e inflamación relacionada con el daño inmunológico causado por la infección por VIH.
En la actualidad, casi todos los pacientes positivos para VIH se tratan con regímenes terapéuticos de combinaciones de medicamentos antirretrovirales denominados, terapia antirretrovírica altamente activa ("HAART"). Sin embargo, las terapias HAART, con frecuencia, son complejas ya que se debe administrar una combinación de fármacos diferentes al paciente a menudo con el fin de evitar la emergencia rápida de variantes de VIH-1 resistentes a fármacos. A pesar del impacto positivo de HAART sobre la supervivencia del paciente, la resistencia a los fármacos todavía puede ocurrir y la supervivencia y la calidad de vida no se normalizan en comparación con las personas no infectadas. De hecho, la incidencia de varias morbilidades y mortalidades no relacionadas con el SIDA, tales como enfermedades cardiovasculares, fragilidad y deterioro neurocognitivo, se incrementan en sujetos infectados por el VIH y suprimidos con HAART. Esta mayor incidencia de morbilidad/mortalidad no relacionada con el SIDA ocurre en el contexto de, y es potencialmente causada por, la inflamación sistémica elevada relacionada con el daño inmunológico causado por la infección por VIH.
Por lo tanto, el tratamiento exitoso sostenido de la población de pacientes infectados por VIH-1 con fármacos requerirá el desarrollo continuo de fármacos nuevos y mejorados con nuevas dianas y mecanismos de acción que incluyen antirretrovirales y/o intervenciones dirigidas a la restauración del sistema inmunitario y a disminuir la inflamación sistémica.
IDO es una dioxigenasa monomérica extrahepática que contiene hemo de 45 kDa que cataliza la reacción de escisión oxidativa del anillo de pirrol de I-Trp para W-formilquinurenina que utilizando oxígeno molecular u especies reactivas de oxígeno a través de tres mecanismos de reacción propuestos. IDO es una enzima que es la etapa limitante de la velocidad en la ruta de la kinurenina del catabolismo del triptófano. IDO cataliza la dioxidación del anillo de indol de triptófano (Trp), produciendo N-formil-linurenina (NFK), que luego se metaboliza por otras enzimas en varios metabolitos posteriores, como la kinurenina (Kyn) y el 3-hidroxi-antranilato (HAA). El agotamiento de Trp y la acumulación de Kyn y HAA tienen actividad inmunomoduladora, típicamente ejemplificado por la disminución de la activación y proliferación de linfocitos T, el enriquecimiento de los linfocitos T CD4+ reguladores y el agotamiento de los linfocitos T CD4+ productores de IL-17. La actividad IDO por lo tanto tiene un impacto inmunosupresor general.
IDO se expresa en respuesta a la inflamación y se considera un contrapeso importante para evitar daños en el tejido colateral durante la inflamación prolongada. La expresión y actividad de IDO son elevadas durante las infecciones víricas crónicas tales como el VIH y el VHC, las infecciones bacterianas crónicas, así como las afecciones agudas como septicemia. El cambio mediado por IDO de Th17 a la diferenciación Treg de linfocitos T colaboradores probablemente juega un papel en la disfunción inmune intestinal durante la infección por VIH, probablemente relacionado con la elevada inflamación sistémica observada y una mayor incidencia de morbilidad/mortalidad no relacionada con el SIDA. Además, la actividad de IDO probablemente también juega un papel en la persistencia de patógenos y del cáncer, y la inhibición de IDO puede mejorar el mecanismo de eliminación, potencialmente llevando a la cura de estas enfermedades crónicas. IDO también puede desempeñar un papel en enfermedades o trastornos neurológicos o neuropsiquiátricos como la depresión al modular la síntesis de serotonina o la producción de neurotoxinas excitadoras como la kinurenina. Como tales, la inhibición farmacológica de IDO tiene aplicación en una amplia gama de aplicaciones desde neurología, oncología y enfermedades infecciosas. El documento WO2010/005958 desvela compuestos de 1,2,5-oxadiazol como inhibidores de IDO.
Por lo tanto, sería un avance en la técnica descubrir inhibidores de IDO que equilibren eficazmente las propiedades mencionadas anteriormente como terapia de modificación de la enfermedad en las infecciones por VIH para disminuir la incidencia de morbilidad/mortalidad no relacionada con el SIDA; y/o una inmunoterapia para mejorar la respuesta inmunitaria al VIH, VHB, VHC y otras infecciones víricas, infecciones bacterianas, infecciones fúngicas y tumores; y/o para el tratamiento de la depresión u otros trastornos neurológicos/neuropsiquiátricos.
Sumario de la invención
La presente invención proporciona compuestos que son moduladores de IDO que tienen la fórmula (I):
Figure imgf000003_0001
X es CH2 o C(O);
R1 es -NR2R3;
R2 es -H o -CH3;
R3 se selecciona entre el grupo que consiste en:
Figure imgf000003_0002
La presente invención proporciona también composiciones que comprenden un compuesto de la invención o su sal farmacéuticamente y al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, los compuestos de la invención tienen la fórmula (II):
Figure imgf000003_0003
o su sal farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, los compuestos de la invención tienen la fórmula (III):
Figure imgf000004_0001
o su sal farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, los compuestos de la invención tienen la fórmula (IV):
Figure imgf000004_0002
o su sal farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, los compuestos de la invención tienen la fórmula (V):
Figure imgf000004_0003
o su sal farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, los compuestos de la invención tienen la fórmula (VI):
Figure imgf000004_0004
o su sal farmacéuticamente aceptable.
En algunas realizaciones, los compuestos de la invención tienen la fórmula (VII):
Figure imgf000005_0001
o su sal farmacéuticamente aceptable.
Descripción detallada de realizaciones representativas
A lo largo de la presente solicitud, se hace referencia a diversas realizaciones relacionadas con compuestos, composiciones y procedimientos. Las diversas realizaciones descritas están destinadas a proporcionar una diversidad de ejemplos ilustrativos y no deberían interpretarse como descripciones de especies alternativas. Más bien, debería observarse que las descripciones de las diversas realizaciones proporcionadas en el presente documento pueden tener un ámbito superpuesto. Las realizaciones analizadas en el presente documento son simplemente ilustrativas y no pretenden limitar el ámbito de la presente invención.
Debe entenderse que la terminología usada en el presente documento tiene el único fin de describir realizaciones concretas y no se pretende limitar el ámbito de la presente invención. En la presente memoria descriptiva y en las reivindicaciones que siguen, se hará referencia a varios términos que deberán definirse para que tengan los significados siguientes.
Se apreciará además que ciertas características de la invención, las cuales, en aras de la claridad, se han descrito en el contexto de realizaciones separadas, se pueden proporcionar también en combinación en una única realización. Por el contrario, varias características de la invención que, por brevedad, se han descrito en el contexto de una única realización, se pueden proporcionar también de forma separada o en cualquier subcombinación adecuada.
La presente invención también incluye sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos descritos en el presente documento. Como se usa en el presente documento, "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a derivados de los compuestos desvelados en los que el compuesto precursor se modifica convirtiendo un resto de ácido o base existente a su forma de sal. Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen, pero sin limitación, sales de ácidos minerales u orgánicos de restos básicos tales como aminas; sales alcalinas u orgánicas de restos ácidos tales como ácidos carboxílicos y similares. Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención incluyen las sales no tóxicas convencionales del compuesto precursor formado, por ejemplo, a partir de ácidos inorgánicos u orgánicos no tóxicos. Las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención pueden sintetizarse a partir del compuesto precursor que contiene un resto básico o ácido mediante procedimientos químicos convencionales. En general, dichas sales se pueden preparar haciendo reaccionar las formas básicas o ácidas libres de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o del ácido adecuados en agua, en un solvente orgánico o en una mezcla de los dos; en general, se prefieren medios no acuosos como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o ACN.
La expresión "farmacéuticamente aceptable" se utiliza en el presente documento para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosificación que son, dentro del ámbito del buen criterio médico, adecuados para su uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, acorde con una relación beneficio/riesgo razonable.
La presente invención también incluye isómeros o mezclas de isómeros, los cuales, por definición, son las moléculas de composiciones atómicas idénticas, pero con distintas disposiciones de unión de los átomos u orientaciones de sus átomos en el espacio, es decir, los isómeros son dos o más sustancias diferentes que tienen la misma fórmula molecular. Se describen los isómeros geométricos cis y trans del compuesto de la presente invención y pueden aislarse como una mezcla de isómeros o como formas isoméricas separadas. Un enlace en un diagrama de estructura representado por una línea ondulada " ™ '' o una línea cruzada " =**='' pretende indicar que la estructura representa el isómero cis o trans o una mezcla de los isómeros cis y trans en cualquier proporción. Isomerismo, en el ámbito de la farmacología y la farmacoterapia clínicas, puede diferir en su farmacocinética y farmacodinámica, lo que puede proporcionar la introducción de alternativas farmacológicas más eficaces de fármacos más nuevos así como de los existentes.
De acuerdo con una realización de la presente invención, se proporciona un compuesto que tiene la estructura de fórmula (I):
Figure imgf000006_0001
o su sal farmacéuticamente aceptable; en la que:
X es CH2 o C(O);
R1 es -NR2R3;
R2 es -H o -CH3;
R3 se selecciona entre el grupo que consiste en:
Figure imgf000006_0002
La presente invención proporciona también composiciones que comprenden un compuesto de la invención o su sal farmacéuticamente y al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable.
También se describen en el presente documento procedimientos para modular la actividad de la indolamina 2,3-dioxigenasa poniendo en contacto la indolamina 2,3-dioxigenasa con un compuesto de la invención o su sal farmacéuticamente aceptable.
La presente invención también desvela procedimientos para la prevención y/o tratamiento del VIH; que incluyen la prevención de la progresión del SIDA y la inmunosupresión general en un paciente administrando al paciente una cantidad eficaz de un compuesto de la invención o su sal farmacéuticamente aceptable.
En el presente documento también se desvelan procedimientos para tratar cáncer, infección vírica, infección bacteriana, sepsis, degeneración macular, heridas, depresión, un trastorno neurodegenerativo, traumatismo, cataratas relacionadas con la edad, rechazo al trasplante de órganos, enfermedad autoinmune o similar, en un paciente, que comprenden administrar al paciente una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención o su sal farmacéuticamente aceptable.
La presente invención proporciona también el uso de los compuestos en el presente documento para la producción de un medicamento para su uso en terapia.
En otra realización de la presente invención, se proporciona un compuesto que tiene la estructura de fórmula (II):
Figure imgf000006_0003
o su sal farmacéuticamente aceptable.
En otra realización de la presente invención, se proporciona un compuesto que tiene la estructura de fórmula (III):
Figure imgf000007_0001
o su sal farmacéuticamente aceptable.
En otra realización de la presente invención, se proporciona un compuesto que tiene la estructura de fórmula (IV):
Figure imgf000007_0002
o su sal farmacéuticamente aceptable.
En otra realización de la presente invención, se proporciona un compuesto que tiene la estructura de fórmula (V):
Figure imgf000007_0003
o su sal farmacéuticamente aceptable.
En otra realización de la presente invención, se proporciona un compuesto que tiene la estructura de fórmula (VI):
Figure imgf000007_0004
En otra realización de la presente invención, se proporciona un compuesto que tiene la estructura de fórmula (VII):
Figure imgf000008_0001
o su sal farmacéuticamente aceptable.
Dichos compuestos de la presente invención pueden existir en formas geométricas o estereoisoméricas particulares. La invención contempla todos estos compuestos, incluyendo isómeros cis y trans, enantiómeros (-) y (+), enantiómeros (R) y (S), diastereómeros, isómeros (D), isómeros (L), las mezclas racémicas de los mismos y otras mezclas de los mismos, tales como mezclas enriquecidas enantiomérica o diastereoméricamente, como incluidas dentro del ámbito de la invención. Pueden estar presentes átomos de carbono asimétricos adicionales en un sustituyente tal como un grupo alquilo. Se pretende que todos estos isómeros, así como sus mezclas, estén incluidos en la presente invención.
Se pueden preparar isómeros (R) y (S) e isómeros d y l ópticamente activos usando sintones quirales o reactivos quirales o se pueden resolver usando técnicas convencionales. Si, por ejemplo, se desea un enantiómero particular de un compuesto de la presente invención, puede prepararse mediante síntesis asimétrica o por derivación con un auxiliar quiral, en la que la mezcla diastereomérica resultante se separa y el grupo auxiliar se escinde para proporcionar los enantiómeros deseados puros. Como alternativa, cuando la molécula contiene un grupo funcional básico, tal como un grupo amino o un grupo funcional ácido, tal como un grupo carboxilo, pueden formarse sales diastereoméricas con un ácido o base ópticamente activa apropiada, seguido de la resolución de los diastereómeros formados de este modo mediante cristalización fraccionada o medios cromatográficos conocidos en la técnica y la posterior recuperación de los enantiómeros puros. Además, la separación de enantiómeros y diastereómeros se realiza con frecuencia usando cromatografía que emplea las fases quirales, estacionarias, opcionalmente junto con derivatización química (por ejemplo, formación de carbamatos a partir de aminas).
En otra realización de la invención, se proporciona un compuesto de las fórmulas I-VII, en las que el compuesto o la sal del compuesto se usa en la fabricación de un medicamento para su uso en el tratamiento de inmunosupresión en un humano.
En otra realización de la invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un diluyente farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto tal como se define en las fórmulas I-VII.
En una realización, la formulación farmacéutica que contiene un compuesto de las fórmulas I-VII o una de sus sales es una formulación adaptada para administración parenteral. En otra realización, la formulación es una formulación parenteral de acción prolongada. En una realización más, la formulación es una formulación de nanopartículas.
La presente invención se refiere a compuestos, composiciones y composiciones farmacéuticas que tienen utilidad como nuevos tratamientos para inmunosupresión. Aunque sin querer quedar ligado a teoría alguna en particular, se cree que los presentes compuestos son capaces de inhibir la enzima que cataliza la reacción de escisión oxidativa del anillo pirrol de I-Trp a N-formilquinurenina utilizando especies de oxígeno molecular u oxígeno reactivo.
Por lo tanto, se desvela un procedimiento para la prevención y/o tratamiento del VIH; que incluye la prevención de la progresión del SIDA y la inmunosupresión general.
Tabla 1
Figure imgf000009_0001
Los compuestos de la presente invención y sus sales, solvatos u otros derivados farmacéuticamente aceptables de los mismos, pueden emplearse en solitario o junto con otros agentes terapéuticos. Los compuestos de la presente invención y cualquier otro u otros agentes farmacéuticamente activos pueden administrarse juntos o por separado y, cuando se administran por separado, la administración puede producirse de manera simultánea o secuencial, en cualquier orden. Las cantidades de los compuestos de la presente invención y del otro u otros agentes farmacéuticamente activos y las pautas relativas de administración se seleccionarán para lograr el efecto terapéutico combinado deseado. La administración en combinación de un compuesto de la presente invención y las sales, solvatos u otros derivados farmacéuticamente aceptables de los mismos con otros agentes de tratamiento puede ser en combinación mediante administración concomitante en: (1) una composición farmacéutica unitaria que incluye ambos compuestos o (2) composiciones farmacéuticas separadas, incluyendo cada una uno de los compuestos. Como alternativa, la combinación se puede administrar por separado en una forma secuencial en la que un agente de tratamiento se administra primero y el otro después o viceversa. Dicha administración secuencial puede ser próxima en el tiempo o remota en el tiempo. Las cantidades del o de los compuestos de fórmula I-VII o sus sales y el u otros agentes farmacéuticamente activos y las pautas de administración relativas se seleccionarán para lograr el efecto terapéutico combinado deseado.
Por tanto, los compuestos de la presente invención pueden usarse junto con uno o más agentes útiles en la prevención o el tratamiento del VIH.
Los ejemplos de dichos agentes incluyen:
Inhibidores de transcriptasa inversa nucleotídicos tales como zidovudina, didanosina, lamivudina, zalcitabina, abacavir, estavudina, adefovir, adefovir dipivoxilo, fozivudina, todoxilo, emtricitabina, alovudina, amdoxovir, elvucitabina y agentes similares;
Inhibidores de la transcriptasa inversa no nucleotídicos (incluyendo un agente que tenga actividad antioxidante, tal como immunocal, oltipraz, etc.) tal como nevirapina, delavirdina, efavirenz, lovirida, immunocal, oltipraz, capravirina, lersivirina, GSK2248761, TMC-278, TMC-125, etravirina y agentes similares;
Inhibidores de proteasa tales como saquinavir, ritonavir, indinavir, nelfinavir, amprenavir, fosamprenavir, brecanavir, darunavir, atazanavir, tipranavir, palinavir, lasinavir y agentes similares;
Inhibidores de la entrada, unión y fusión tales como enfuvirtida (T-20), T-1249, PRO-542, PRO-140, TNX-355, BMS-806, BMS-663068 y BMS-626529, 5-Helix y agentes similares;
Inhibidores de la integrasa tales como raltegravir, elvitegravir, GSK1349572, GSK1265744 y agentes similares; Inhibidores de la maduración tales como PA-344 y PA-457 y agentes similares e
Inhibidores de CXCR4 y/o CCR5 tales como vicriviroc (Sch-C), Sch-D, TAK779, maraviroc (UK 427.857), TAK449, así como los desvelados en el documento WO 02/74769, documento PCT/US03/39644, documento PCT/US03/39975, documento PCT/US03/39619, documento PCT/US03/39618, documento PCT/US03/39740 y documento PCT/US03/39732 y agentes similares.
En la tabla 2 pueden encontrarse más ejemplos en los que los compuestos de la presente invención pueden usarse en combinación con uno o más agentes útiles en la prevención o el tratamiento del VIH.
Tabla 2:
Figure imgf000010_0001
continuación
Figure imgf000011_0001
El ámbito de las combinaciones de los compuestos de la presente invención con agentes del VIH no se limita a los mencionados anteriormente, pero incluye en principio cualquier combinación con cualquier composición farmacéutica útil para el tratamiento del VIH. Como se ha indicado, en dichas combinaciones los compuestos de la presente invención y otros agentes del HIV pueden administrarse de forma separada o de forma conjunta. Además, un agente puede ser anterior, simultáneo o posterior a la administración de otro agente (o agentes).
La presente invención se puede usar junto con uno o más agentes útiles como potenciadores farmacéuticos, así como también con o sin compuestos adicionales para la prevención o tratamiento del VIH. Los ejemplos de dichos potenciadores farmacológicos (o refuerzos farmacinéticos) incluyen, pero sin limitación, ritonavir, GS-9350 y SPI-452. Ritonavir es ácido 10-hidroxi-2-metil-5-(1-metietil)-1-1[2-(1-metiletil)-4-tiazolil]-3,6-dioxo-8,11-bis(fenilmetil)-2,4,7,12-tetraazatridecan-13-oico, 5-tiazolilmetil éster, [5S-(5S*,8R*,10R*,11R*)] y está disponible de Abbott Laboratories de Abbott park, Illinois, como Norvir. Ritonavir es un inhibidor de proteasa del VIH indicado con otros agentes antirretrovirales para el tratamiento de infección por VIH. Ritonavir también inhibe el metabolismo del fármaco mediado por P450, así como también el sistema de transporte celular de P-glicoproteína (Pgp), dando lugar de este modo a concentraciones mayores de compuesto activo en el organismo.
GS-9350 es un compuesto que se está desarrollando por Gilead Sciences de Foster City California como un potenciador farmacológico.
SPI-452 es un compuesto que se está desarrollando por Sequoia Pharmaceuticals de Gaithersburg, Mariland, como un potenciador farmacológico.
En una realización de la presente invención, se usa un compuesto de las fórmulas I-VII junto con ritonavir. En una realización, la combinación es una combinación de dosis fija oral. En otra realización, se formula el compuesto de las fórmulas I-VII en forma de una inyección parenteral de larga duración y el ritonavir se formula en forma de una composición oral. En una realización, es un kit que contiene el compuesto de las fórmulas I-VII formulado en forma de una inyección parenteral de larga duración y el ritonavir se formula en forma de una composición oral. En otra realización, se formula el compuesto de las fórmulas I-VII en forma de una inyección parenteral de larga duración y el ritonavir se formula como una composición inyectable. En una realización, es un kit que contiene el compuesto de las fórmulas I-VII formulado en forma de una inyección parenteral de larga duración y el ritonavir formulado como una composición inyectable.
En otra realización de la presente invención, se usa un compuesto de las fórmulas I-VII junto con GS-9350. En una realización, la combinación es una combinación de dosis fija oral. En otra realización, se formula el compuesto de las fórmulas I-VII en forma de una inyección parenteral de larga duración y el GS-9350 se formula en forma de una composición oral. En una realización, es un kit que contiene el compuesto de las fórmulas I-VII en forma de una inyección parenteral de larga duración y el GS-9350 se formula en forma de una composición oral. En otra realización, se formula el compuesto de las fórmulas I-VII en forma de una inyección parenteral de larga duración y el GS-9350 se formula en forma de una composición inyectable. En una realización, se proporciona un kit que contiene el compuesto de las fórmulas I-VII formulado en forma de una inyección parenteral de larga duración y el GS-9350 formulado en forma de una composición inyectable.
En una realización de la presente invención, se usa un compuesto de las fórmulas I-VII junto con SPI-452. En una realización, la combinación es una combinación de dosis fija oral. En otra realización, se formula el compuesto de las fórmulas I-VII en forma de una inyección parenteral de larga duración y el SPI-452 se formula en forma de una composición oral. En una realización, es un kit que contiene el compuesto de las fórmulas I-VII en forma de una inyección parenteral de larga duración y el SPI-452 se formula en forma de una composición oral. En otra realización, se formula el compuesto de las fórmulas I-VII en forma de una inyección parenteral de larga duración y el SPI-452 se formula en forma de una composición inyectable. En una realización, es un kit que contiene el compuesto de las fórmulas I-VII formulado en forma de una inyección parenteral de larga duración y el SPI-452 formulado en forma de una composición inyectable.
Ejemplos
Los siguientes ejemplos sirven para describir de forma más completa la manera de hacer y usar la invención descrita anteriormente. Se entiende que estos ejemplos de ningún modo sirven para limitar el verdadero ámbito de la invención, sino que más bien se presentan con fines ilustrativos. En los ejemplos y los esquemas sintéticos que siguen, las siguientes abreviaturas tienen los siguientes significados. Si no se define una abreviatura, esta tiene su significado aceptado generalmente.
ACN = acetonitrilo
AIBN = azobisisobutironitrilo
ac. = acuoso
|jl o ul = microlitros
|jM o uM = micromolar
RMN = resonancia magnética nuclear
boc = ferc-butoxicarbonilo
a = ancho
Cbz = benciloxicarbonilo
CDI = 1,1'-carbonildiimidazol
d = doblete
8 = desplazamiento químico
°C = grados Celsius
DCM = diclorometano
dd = doblete de dobletes
DHP = dihidropirano
DIAD = azodicarboxilato de diisopropilo
DIEA o DIPEA = W,A/-diisopropiletilamina
DMAP = 4-(dimetilamino)piridina
DMEM = medio Eagle modificado de Dulbeco
EtOAc = acetato de etilo
h = horas
HATU = hexafluorofosfato de 3-óxido de 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio VHC = virus de la hepatitis C
CLAR = cromatografía líquida de alto rendimiento
Hz = hercios
UI = unidades internacionales
CI50 = concentración inhibidora al 50 % de inhibición
J = constante de acoplamiento (dada en Hz a menos que se indique otra cosa)
CLEM = cromatografía líquida-espectrometría de masas
m = multiplete
M = molar
M+H+ = pico de espectro de masas de partida más H+
MeOH = metanol
mg = miligramos
min = minutos
ml = mililitros
mM = milimolar
mmol = milimol
EM = espectro de masas
MTBE = metil ferc-butil éter
N = normal
NFK = N-formilquinurenina
NBS = N-bromosuccinimida
nm = nanomolar
EP = éter de petróleo
ppm = partes por millón
c.s. = cantidad suficiente
s = singlete
TA = temperatura ambiente
Fr = factor de retardo
sat. = saturado
t = triplete
TEA = trietilamina
TFA = ácido trifluoroacético
TFAA = anhídrido trifluoroacético
THF = tetrahidrofurano
Los compuestos de la presente invención pueden prepararse de una diversidad de formas conocidas por un experto en la técnica de la síntesis orgánica. Los compuestos de la presente invención se pueden preparar usando los procedimientos descritos a continuación en el presente documento, junto con procedimientos sintéticos conocidos en la técnica de la química orgánica sintética o variaciones de los mismos como apreciarán los expertos en la técnica.
Los compuestos de la presente invención pueden prepararse a partir de materiales de partida fácilmente disponibles usando los siguientes procedimientos y métodos generales. Se apreciará que cuando se proporcionan las condiciones de procedimiento habituales o preferidas (es decir, temperaturas de reacción, tiempos, relaciones molares de reactivos, disolventes, presiones, etc.); también se pueden usar otras condiciones de procedimiento a menos que se indique otra cosa. Las condiciones de reacción óptimas pueden variar con los reactivos o el disolvente particulares usados, pero dichas condiciones pueden determinarse por de un experto en la técnica mediante procedimientos de optimización rutinarios.
Esquema I: Síntesis del intermedio A
Figure imgf000014_0001
Intermedio A
Clorhidrato de 3-(4-((2-ammoetil)ammo)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-4-(3-bromo-4-fíuorofeml)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona
Figure imgf000014_0002
Intermedio A
Etapa A
4-amino-N’-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida
Figure imgf000014_0003
Se añadió malononitrilo (3,2 kg, 50 mol) a agua (70 l) precalentada a 45 °C y se agitó durante 5 min. La solución resultante se enfrió en un baño de hielo y nitrito se añadió sódico (3,8 kg, 55 mol). Cuando la temperatura alcanzó los 10 °C, se añadió ácido clorhídrico 6 N (550 ml. Se produjo una reacción exotérmica leve con una temperatura que alcanzó los 16 °C. Después de 15 min se eliminó el baño de refrigeración y la mezcla de reacción se agitó durante 1,5 h a 16-18 °C. La mezcla de reacción se enfrió a 13 °C y se añadió hidroxilamina acuosa al 50 % (9,9 kg, 150 mol) de una vez. La temperatura se elevó a 26 °C. Cuando disminuyó la reacción exotérmica, se eliminó el baño de refrigeración y la agitación continuó durante 1 h a 26-27 °C, después se llevó lentamente a reflujo. El reflujo se mantuvo durante 2 h y después la mezcla de reacción se dejó enfriar durante una noche. La mezcla de reacción se agitó en un baño de hielo y se añadió ácido clorhídrico 6 N (8 l) en porciones durante 40 min a pH 7,0. La agitación continuó en el baño de hielo a 5 °C. El precipitado se recogió por filtración, se lavó bien con agua y se secó en un horno de vacío (50 °C) para dar el producto deseado (5,6 kg, 78 %) en forma de un sólido de color blanquecino. CLEM (M+H)+: m/z = 144,1. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): S 10,46 (s, 1H), 6,27 (s, 2H), 6,18 (s, 2H).
Etapa B
Cloruro de 4-amino-N-hidroxi- 1,2,5-oxadiazol-3-carbimidoilo
Figure imgf000015_0001
Se añadió 4-amino-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida (4,25 kg, 29,7 mol) a una mezcla de agua (60 l), ácido acético (30 l) y ácido clorhídrico 6 N (14,75 l) y esta suspensión se agitó a 42-45 °C hasta que se logró la solución completa. Se añadió cloruro sódico (5,22 kg, 89,1 mol) y esta solución se agitó en un baño de hielo/agua/metanol. Se añadió gota a gota una solución de nitrito sódico (2,01 kg, 29,1 mol) en agua (7 l) durante 3,5 h mientras se mantenía la temperatura por debajo de 0 °C. Después de completar la adición, la agitación continuó en el baño de hielo durante 1,5 h y después la mezcla de reacción se dejó calentar a 15 °C. El precipitado se recogió por filtración, se lavó bien con agua y se secó al vacío para dar el producto deseado (2,51 kg, 52 %) en forma de un sólido de color blanquecino. CLEM (M+H)+: m/z = 163,1. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6); 513,38 (s, 1H), 6,29 (s, 2H).
Etapa C
4-amino-N’-hidroxi-N-(2-metoxietil)-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida
Figure imgf000015_0002
Se mezcló cloruro de 4-amino-N-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carbimidoilo (2,13 kg, 13,15 mol) con EtOAc(13 l). A 0-5 °C, se añadió 2-metoxietilamina (1,1 kg, 14,46 mol) en una porción mientras se agitaba. La temperatura de reacción se elevó a 41 °C. La reacción se enfrió a 0-5 °C. Se añadió TEA (2,0 kg, 19,73 mol). Después de agitar 5 min, la reacción se lavó con agua (5 l) y salmuera (5 l), se secó sobre sulfato sódico y se concentró para dar el producto deseado (1,61 kg, 61 %) en forma de un aceite de color pardo. CLEM (M+H)+: m/z = 202,1. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 6 10,65 (s, 1H), 6,27 (s, 2H), 6,10 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 3,50 (m, 2H), 3,35 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 3,08 (s, 3H).
Etapa D
N’-hidroxi-4-((2-metoxietil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida
Figure imgf000015_0003
Se mezcló 4-amino-N'-hidroxi-N-(2-metoxietil)-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida (2,56 kg, 12,7 mol) con agua (10 l), se añadió hidróxido potásico (2,18 kg, 39 mol). La reacción se calentó a reflujo a 100 °C durante una noche. La reacción se enfrió a temperatura ambiente y se extrajo con EtOAc (10 l x 4), la solución orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico y se concentró para dar el producto deseado (1,87 kg, 73 %) en forma de un sólido de color blanquecino en bruto. CLEM (M+H)+: m/z = 202,1. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 6 10,54 (s, 1H), 6,22 (s, 2H), 6,15 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 3,45 (t, J = 5,3 Hz, 2H), 3,35 (m, 2H), 3,22 (s, 3H).
Etapa E
Cloruro de N-hidroxi-4-((2-metoxietil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-carbimidoilo
Figure imgf000015_0004
A temperatura ambiente, se disolvió N'-hidroxi-4-((2-metoxietil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida (1,87 kg, 9,3 mol) en solución acuosa 6 N de ácido clorhídrico (5,12 l). Se añadió cloruro sódico (1,63 kg, 27,9 mol) seguido de agua (10,2 l) y EtOAc (10,2 l). A 3-5 °C, se añadió lentamente durante 1 h una solución acuosa preparada con anterioridad (4,3 l) de nitrito sódico (615 g, 8,8 mol). La reacción se agitó a 3-8 °C durante 2 h y después a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc (10 l x 3). La solución orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico y se concentró para dar el producto deseado (1,5 kg, 73 %) en forma de un sólido de color blanquecino. CLEM (M+H)+: m/z = 221,1. RMN 1H (400 MHz, DMSO-c/6): 513,43 (s, 1H), 5,85 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 3,50 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,37 (dd, J = 10,8, 5,6 Hz, 2H), 3,25 (s, 3H).
Etapa F
N-(3-bromo-4-f¡uorofeni¡)-N’-hidroxi-4-((2-metoxieti¡)amino)-1,2,5-oxadiazo¡-3-carboximidamida
Figure imgf000016_0001
Se mezcló cloruro de N-hidroxi-4-((2-metoxietil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-carbimidoilo (1,5 kg, 6,8 mol) con agua (10 l). La mezcla se calentó a 60 °C. Se añadió 3-bromo-4-fluoroanilina (1,44 kg, 7,46 mol) y se agitó durante 10 min. Se añadió una solución (10 l de agua) templada de bicarbonato sódico (0,86 kg, 10 mol) durante 15 min. La mezcla de reacción se agitó a 60 °C durante 20 min. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se extrajo con EtOAc (10 l*2). La solución orgánica combinada se secó sobre sulfato sódico y se concentró para dar el producto deseado (2,3 kg, 90 %) en forma de un sólido de color pardo. CLEM (M H)+: m / z = 374,0, 376,0. RMN 1H (400 MHz, DMSO-cC6): 511,55 (s, 1H), 8,85 (s, 1H), 7,16 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 7,08 (dd, J = 6,1,2,7 Hz, 1H), 6,75 (m, 1H), 6,14 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 3,48 (t, J = 5,2 Hz, 2H), 3,35 (dd, J = 10,8, 5,6 Hz, 2H), 3,22 (s, 3H).
Etapa G
4-(3-bromo-4-f¡uorofeni¡)-3-(4-((2-metoxieti¡)amino)- 1,2,5-oxadiazo¡-3-i¡)- 1,2,4-oxadiazo¡-5(4H)-ona
Figure imgf000016_0002
Una mezcla de N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxi-4-((2-metoxietil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida (2,3 kg, 6,15 mol), CDI (1,49 kg, 9,2 mol) y EtOAc (20 l) se calentó a 60 °C y se agitó durante 20 min. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se lavó con HCl 1 N (2 x 15 l), se secó sobre sulfato sódico y se concentró para dar el producto deseado (1,95 kg, 80 %) en forma de un sólido de color pardo. CLEM (M H)+: m/z= 400,0, 402,0. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 57,94 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 7,72 (dd, J = 9,1,2,3 Hz, 1H), 7,42 (m, 1H), 6,42 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 3,46 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,36 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 3,26 (s, 3H).
Etapa H
4-(3-bmmo-4-fluomfeni¡)-3-(4-((2-hidmxieti¡)amino)- 1,2,5-oxadiazo¡-3-i¡)- 1,2,4-oxodiazo¡-5(4H)-ona
Figure imgf000016_0003
Se disolvió 4-(3-bromo-4-fluorofenil)-3-(4-((2-metoxietil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona (650 g, 1,625 mol) en diclorometano (5 l). A -67 °C, se añadió tribromuro de boro (313 ml, 3,25 mol) durante 50 min. La reacción se calentó a -10 °C en 60 min. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Después, la reacción se enfrió a -5 °C y se interrumpió lentamente con una solución saturada de bicarbonato sódico (12,5 l) durante 2 horas. La temperatura de reacción se elevó a 25 °C. La reacción se extrajo con EtOAc (2 x 4,5 l). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron para dar el producto deseado (627 g, 100 %) en forma de un sólido de color pardo. CLEM (M H)+: m/z= 386,0, 388,0. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 58,08 (dd, J = 6,2, 2.5 Hz, 1H), 7,70 (m, 1H), 7,68 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 6,33 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 4,85 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 3,56 (dd, J = 10,6, 5.6 Hz, 2H), 3,29 (dd, J = 11,5, 5,9 Hz, 2H).
Etapa I
Metanosulfonato de 2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etilo
Figure imgf000017_0001
Se trató una solución de 4-(3-bromo-4-fluorofenil)-3-(4-((2-hidroxietil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona (1,89 kg, 4,89 mol) en EtOAc (15 l) con la adición gota a gota de cloruro de metanosulfonilo (500 ml, 7,4 mol) durante 1 h, a temperatura ambiente. Se añadió trietilamina (1027 ml, 7,4 mol) gota a gota durante 50 min, tiempo durante el cual la temperatura de reacción se elevó a 37 °C. Después de 2 h, la mezcla de reacción se lavó con agua (6 l) y salmuera (2 l), se secó sobre sulfato sódico, se concentró para proporcionar el producto deseado (2,22 kg, 98 %) en forma de un sólido de color pardo. CLEM (M Na)+: m /z = 485,9, 487,9. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 88,08 (dd, J = 6,2, 2,5 Hz, 1H), 7,72 (m, 1H), 7,58 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 6,75 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 4,36 (t, J = 5,3 Hz, 2H), 3,58 (dd, J = 11,2, 5,6 Hz, 2H), 3,18 (s, 3H).
Etapa J
3-(4-((2-azidoetil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-4-(3-bromo-4-fluorofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona
Figure imgf000017_0002
Una solución de metanosulfonato de 2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etilo (2,22 kg, 4,8 mol) en dimetilformamida (4 l) en agitación en un matraz de 22 l se trató con azida sódica (400 g, 6,15 mol). La reacción se calentó a 50 °C durante una noche. La mezcla de reacción se vertió en hielo/agua (8 l) y se extrajo con 1:1 de acetato de etilo:heptano (20 l). La capa orgánica se lavó con agua (5 l) y salmuera (5 l) y los disolventes se eliminaron al vacío para proporcionar el producto deseado (1,7 kg, 86 %) en forma de un sólido de color castaño. CLEM (M Na)+: m/z = 433,0, 435,0. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 88,08 (dd, J = 6,2, 2,5 Hz, 1H), 7,72 (m, 1H), 7,58 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 6,75 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 3,54 (t, J = 5,3 Hz, 2H), 3,45 (dd, J = 11,1, 5,2 Hz, 2H).
Etapa K
(2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)carbamato de terc butilo
Figure imgf000017_0003
Se añadió yoduro sódico (4,09 kg, 27,3 mol) a 3-(4-((2-azidoetil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-4-(3-bromo-4-fluorofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona (1,7 kg, 4,1 mol) en metanol (23 l). La mezcla se agitó durante 30 min, tiempo durante el cual se observó una ligera exotermia. Se añadió clorotrimetilsilano (3,53 l, 27,8 mol) en forma de una solución en metanol (3,5 l) gota a gota, a una velocidad tal que la temperatura no superó los 35 °C y la reacción se agitó durante 3,5 h a temperatura ambiente. La reacción se neutralizó con solución al 33 % en peso de tiosulfato sódico pentahidrato en agua (5,7 l), se diluyó con agua (15 l) y el pH se ajustó a 9 cuidadosamente con carbonato potásico sólido (1,15 kg, 8,33 mol). Se añadió dicarbonato de di-terc-butilo (1,205 kg, 5,52 mol) y la reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente. Se añadió más carbonato potásico (750 g, 5,41 mol) en porciones de 150 g durante 4 h para asegurar que el pH se mantuviera a o por encima de 9. Después de agitar a temperatura ambiente durante una noche, el sólido se filtró, se trituró con agua (7,8 l) y después MTBE (6 l). Después el sólido se trituró con 1:1 de THF:diclorometano (6 l, en un matraz de evaporación rotativo de 22 l, 50 °C, 1 h), se filtró y se lavó con diclorometano (3 l) para proporcionar un sólido de color blanquecino. El material en bruto se disolvió en tetrahidrofurano al 55 °C (5 ml/g), se trató con carbón decolorante (2 % en peso) y gel de sílice (2 % en peso) y se filtró en caliente a través de celite para proporcionar el producto (1720 g, 86 %) en forma de un sólido de color blanquecino. CLEM (M Na)+: m/z = 506,8, 508,8. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 58,08 (dd, J = 6,2, 2,5 Hz, 1H), 7,72 (m, 1H), 7,60 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 6,94 m, 1H), 6,52 (m, 1H), 3,30 (m, 2H), 3,18 (m, 2H), 1,38 (s, 9H).
Etapa L
Clorhidrato de 3-(4-((2-aminoetil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-4-(3-bromo-4-fluorofenil)-1,2,4-oxodiazol-5(4H)-ona
Figure imgf000018_0001
Intermedio A
Se cargó un matraz de 22 l con cloruro de hidrógeno (solución 3 N en 1,4-dioxano, 4 l, 12 mol). Se añadió (2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)carbamato de tere-butilo (1,72 kg, 3,54 mol) en forma de un sólido en porciones durante 10 min. La suspensión se agitó a temperatura ambiente y se transformó gradualmente en una pasta espesa que no se podía agitar. Después de reposar durante una noche a temperatura ambiente, la pasta se suspendió en EtOAc (10 l), se filtró y se secó para proporcionar el producto deseado (1,38 kg, 93 %) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6); 58,12 (m, 4H), 7,76 (m, 1H), 7,58 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 6,78 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 3,51 (dd, J = 11,8, 6,1 Hz, 2H), 3,02 (m, 2H). CLEM (M H)+: m/z = 384,9, 386,9.
Esquema II: Síntesis del intermedio B
Figure imgf000018_0002
3-metil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metilo
Figure imgf000018_0003
Una solución de 2-bromo-3-metilbenzoato de metilo (5g, 21,83 mmol) en dioxano (100 ml) se trató con bis(pinacolato)diboro (6,65 g, 26,2 mmol) y acetato potásico (6,43 g, 65,5 mmol). La mezcla se desgasificó con N2 y se añadió cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (N) (1,532 g, 2,183 mmol) calentado a 90 °C durante 22 h. Después la reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de un lecho de celite pequeño. El filtrado se concentró y el residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (EtOAc al 10%/hexano) para dar 3-metil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metilo (4,3 g, 14,01 mmol, 64,2% de rendimiento) en forma de un sólido. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 1,44 (s, 12 H) 2,43 (s, 3 H) 3,89 (s, 3 H) 7,22 - 7,33 (m, 2 H) 7,76 (d, J=7,43 Hz, 1 H). CLEM (M H)+: m/z = 277,3.
Etapa B
3-(bromometil)-2-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metilo
Figure imgf000018_0004
Se trató una solución de 3-metil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metilo (4,8 g, 13,91 mmol) en tetracloruro de carbono (100,0 ml) con NBS (4,27 g, 24,01 mmol) seguido de AIBN (0,717 g, 4,37 mmol). La mezcla se calentó a reflujo durante 6 h. El disolvente se eliminó y el material en bruto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (EtOAc al 20 %/Hexanos) para proporcionar 3-(bromometil)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metilo (5,15 g, 10,15 mmol, 46,5 % de rendimiento, 70 % de pureza) en forma de un sólido. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,47 (s, 12 H) 3,90 (s, 3 H) 4,58 (s, 2 H) 7,38 (t, J=7,72 Hz, 1 H) 7,53 - 7,58 (m, 1 H) 7,87 (d, J=7,62 Hz, 1 H).
Etapa C
Ácido 1-hidroxi-1,3-dihidrobenzo[c][1,2]oxaborol-7-carboxílico
Figure imgf000019_0001
Intermedio B
Una solución de 3-(bromometil)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metilo (3,9 g, 10,98 mmol) en la mezcla de ACN (10,0 ml) y agua (10,0 ml) se trató con ácido trifluoroacético (10,09 ml, 131 mmol) y se agitó a 70 °C durante 16 h. Después de eliminar el acetonitrilo de la mezcla, la reacción se neutralizó a pH 7 con NaHCO3 ac. y se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Los orgánicos combinados se descartaron. La capa acuosa se acidificó después con HCl 1 N y se extrajo con EtOAc (4 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre Na2SO4 y el disolvente se evaporó proporcionando ácido 1-hidroxi-1,3-dihidrobenzo[c][1,2]oxaborol-7-carboxílico (1,4 g, 7,08 mmol, 32,4 % de rendimiento) en forma de un sólido. RMN 1H (400 MHz, DMsO-d6) 8 ppm 5,09 (s, 2 H) 7,58 - 7,68 (m, 1 H) 7,69 - 7,75 (m, 1 H) 7,98 (d, J=7,43 Hz, 1 H) 8,86 (s a, 1 H). CLEM (M H)+: m/z = 179,1.
Esquema III: Síntesis del intermedio C
Figure imgf000019_0002
Etapa A
(3-bromo-1,2-fenileno)dimetanol
Figure imgf000019_0003
Una solución de 3-bromoftalato de dimetilo, n.° CAS 58749-33-0 o fabricado de acuerdo con la preparación del documento US2007049618, (20 g, 73,5 mmol) en éter (60 ml) se enfrió a 0 °C y se trató mediante la adición gota a gota de LiBH4 (6,3 g, 220,6 mmol) en THF (140 ml) durante un periodo de 1 h. La mezcla de reacción se agitó durante una noche a temperatura ambiente. La reacción se vertió en agua enfriada con hielo y se acidificó con HCl concentrado a pH = 2. La capa orgánica se extrajo con EtOAc (3 x 200 ml), se secó sobre Na2SO4 y se concentró para dar (3-bromo-1,2-fenileno)dimetanol (4,7 g, 30 %) en forma de un sólido de color blanco. Fr = 0,1 (EtOAc al 30 %/PE). Etapa B
,2’-(((3-bromo-1,2-fenileno)bis(metileno))bis(oxi))bis(tetrahidro-2H-pirano)
Figure imgf000020_0001
Una solución de (3-bromo-1,2-fenileno)dimetanol (15 g, 69,1 mmol) en DHP (75 ml) se trató con HCl concentrado (0,3 ml). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. La reacción se diluyó después con EtOAc (300 ml) y se lavó con agua (800 ml). La capa orgánica se secó sobre Na2SO4 y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (EtOAc al 2 %/PE) para dar 2,2'-(((3-bromo-1,2-fenileno)bis(metileno))bis(oxi))bis(tetrahidro-2H-pirano) (28 g, 100 %) en forma de un sólido de color amarillo claro. Fr = 0,4 (EtOAc al 30 %/PE).
Etapa C
4-(hidroximetil)benzo[c][1,2]oxaborol-1(3H)-ol
Figure imgf000020_0002
Una solución de 2,2'-(((3-bromo-1,2-fenileno)bis(metileno))bis(oxi))bis(tetrahidro-2H-pirano) (14 g, 36,5 mmol) en THF (186 ml) se enfrió a -78 °C, después se trató mediante la adición gota a gota de n-BuLi (16,4 ml, 40,1 mmol). La mezcla se agitó durante 30 min., después se trató con la adición gota a gota de (iPrO)3B (53,6 ml, 219,6 mmol) a la misma temperatura. La reacción se dejó después en agitación con calentamiento a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se trató con HCl concentrado (84 ml) y se agitó durante una noche. La reacción se diluyó después con agua (200 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 200 ml) y después se basificó con Na2SO3 saturado y se separó la capa orgánica y se acidificó con HCl diluido (pH = 2) y se extrajo con EtOAc (2 x 200 ml). La capa orgánica separada se secó sobre Na2SO4 y se concentró a presión reducida para dar 4-(hidroximetil)benzo[c][1,2]oxaborol-1(3H)-ol (2,13 g, 36 %) en forma de un sólido de color blanquecino. Fr = 0,1 (MeOH al 5 %/CHCl3).
Etapa D
4-(bromometil)benzo[c][1,2]oxaborol-1(3H)-ol
Figure imgf000020_0003
Se trató un matraz que contenía 4-(hidroximetil)benzo[c][1,2]oxaborol-1(3H)-ol (1,0 g, 6,1 mmol) con HBr acuoso (10 ml, 10 M). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante una noche. La reacción se diluyó con agua y los sólidos se filtraron aclarando con agua y se secaron para dar 4-(bromometil)benzo[c][1,2]oxaborol-1(3H)-ol (1,2 g, 87 %) en forma de un sólido de color blanco. Fr = 0,6 (MeOH al 5 %/CHCl3).
Etapa E
((1-hidroxi-1,3-dihidrobenzo[c][1,2]oxaborol-4-il)metil)(metil)carbamato de tere butilo
Figure imgf000020_0004
Un matraz que contenía NaH (,42 g, 17,5 mmol) se lavó con n-hexanos, se trató con metilcarbamato de tere-butilo (1,15 g, 8,7 mmol) en dioxanos (15 ml) y se agitó durante 30 min. El matraz se lavó después mediante la adición de 4-(bromometil)benzo[c][1,2]oxaborol-l(3H)-ol (1 g, 4,3 mmol) a 10 °C, después se agitó la reacción a temperatura ambiente durante 8 horas. Después, la reacción se interrumpió con la adición de agua enfriada en hielo y se extrajo con éter. Los orgánicos se apartaron y los acuosos se acidificaron con HCl 1 N y se extrajeron con EtOAc, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron a presión reducida para dar ((1-hidroxM,3-dihidrobenzo[c][1,2]oxaborol-4-il)metil)(metil)carbamato de tere-butilo (1 g, 82 %) en forma de un líquido espeso.
Etapa F
4-((metilamino)metil)benzo[e][1,2]oxaborol-1(3H)-ol
Figure imgf000021_0001
Intermedio C
Un matraz que contenía ((1-hidroxi-1,3-dihidrobenzo[c][1,2]oxaborol-4-il)metil)(metil)carbamato de tere-butilo (1 g, 3,6 mmol) se trató con HCl concentrado (10 ml) y se agitó durante 4 horas. Los disolventes se eliminaron por destilación y se secaron a presión reducida para dar un residuo. Se volvió a cristalizar el residuo en acetona para dar 4-((metilamino)metil)benzo[c][1,2]oxaborol-1(3H)-ol (,3 g, 48 %) en forma de un sólido de color pardo.
Esquema IV: Síntesis del compuesto 1
Figure imgf000021_0002
Ejemplo 1: Compuesto 1
N-(2-((4-(N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N’-hidroxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxamida
Figure imgf000021_0003
Etapa A
2-bromo-3-(dibromometil)benzoato de metilo
Figure imgf000022_0001
A una solución de 2-bromo-3-metilbenzoato de metilo (8,0 g, 34,2 mmol) en tetracloruro de carbono (100 ml) se le añadió NBS (18,27 g, 103 mmol) seguido de peróxido de benzoilo (1,658 g, 6,85 mmol) y la mezcla se agitó a 75 °C en atmósfera de nitrógeno durante 3,5 h. La mezcla se concentró, se trituró con éter dietílico y se filtró. El filtrado se disolvió en 1:1 éter dietílico/hexanos y se lavó con agua. La fase orgánica se secó (Na2SO4), se concentró, se secó al vacío para proporcionar 2-bromo-3-(dibromometil)benzoato de metilo (14,0 g, 34,8 mmol, 98 % de rendimiento) en forma de un sólido de color amarillento. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 2,79 (s, 1 H) 3,97 (s, 3 H) 7,46 - 7,52 (m, 1 H) 7,64 (dd, J=7,65, 1,63 Hz, 1 H) 8,20 (dd, J=8,03, 1,51 Hz, 1 H). CL/EM (m/z) ES+: 386,9, 389,0 (M+1)+.
Etapa B
2-bromo-3-formilbenzoato de metilo
Figure imgf000022_0002
A una solución de 2-bromo-3-(dibromometil)benzoato de metilo (17,62 g, 45,5 mmol) en acetona (200 ml) se le añadió nitrato de plata (23,21 g, 137 mmol) y agua (50 ml). La suspensión se agitó a temperatura ambiente en la oscuridad durante 1 h. Las sales de plata se eliminaron por filtración y el filtrado se diluyó con EtOAc, se lavó con salmuera, bicarbonato sódico saturado y agua. La capa orgánica se secó (Na2SO4), se concentró y se purificó sobre sílice (EtOAc/hexanos, 0-20 %) para obtener 2-bromo-3-formilbenzoato de metilo (9,0 g, 37,0 mmol, 81 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 4,01 (s, 3 H) 7,52 (t, J=7,65 Hz, 1 H) 7,92 (dd, J=7,53, 1,76 Hz, 1 H) 8,04 (dd, J=7,53, 1,76 Hz, 1 H) 10,53 (s, 1 H). CL/EM (m/z) ES+: 243,0, 245,1 (M+1)+.
Etapa C
2-bromo-3-(2-metoxivinil)benzoato de metilo
Figure imgf000022_0003
A una suspensión de t-butóxido de potasio (5,73 g, 51,1 mmol) en THF (130 ml) en atmósfera de nitrógeno se le añadió cloruro de (metoximetil)trifenilfosfonio (17,52 g, 51,1 mmol) y la mezcla de color rojo oscuro se agitó a temperatura ambiente durante 45 min y después se añadió 2-bromo-3-formilbenzoato de metilo (6,21 g, 25,5 mmol) en una porción. La agitación a temperatura ambiente continuó durante 2 h. Se añadió NH4Cl/agua y EtOAc y la fase orgánica se secó (Na2SO4), se concentró y se purificó sobre gel de sílice (EtOAc/hexanos, 0-5 %) para proporcionar 2-bromo-3-(2-metoxivinil)benzoato de metilo (6,53 g, 24,09 mmol, 94% de rendimiento) en forma de una mezcla E/Z. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 3,77 (s, 3 H) 3,82 (s, 3 H) 3,96 (d, J=3,51 Hz, 6 H) 5,72 (d, J=7,28 Hz, 1 H) 6,20 (d, J=12,80 Hz, 1 H) 6,32 (d, J=7,28 Hz, 1 H) 6,98 (d, J=12,80 Hz, 1 H) 7,25 - 7,34 (m, 2 H) 7,39 - 7,48 (m, 3 H) 8,14 (dd, J=7,91, 1,63 Hz, 1 H). CL/EM (m/z) ES+: 271,1, 273,1 (M+1)+.
Etapa D
3-(2-metoxivinil)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metilo
Figure imgf000022_0004
Una mezcla de 2-bromo-3-(2-metoxivinil)benzoato de metilo (6,5 g, 22,30 mmol), bis(pinacolato)diboro (6,23 g, 24,53 mmol), acetato potásico (6,56 g, 66,9 mmol), 1,4-dioxano (170 ml) y cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (III) (4,70 g, 6,69 mmol) se desgasificó con una corriente de nitrógeno durante 10 min, se colocó en un tubo cerrado herméticamente y se calentó a 95 °C durante 28 h. La mezcla se filtró y el filtrado se repartió entre EtOAc y agua. La fase orgánica se secó (Na2SO4), se concentró y se purificó sobre gel de sílice usando (EtOAc/hexanos, 0-10 %) para proporcionar 3-(2-metoxivinil)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metilo (4,39 g, 13,80 mmol, 62 % de rendimiento) en forma de una mezcla E/Z. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 1,48 (d, J=3,76 Hz, 24 H) 3,72 (s, 3 H) 3,79 (s, 3 H) 3,93 (d, J=2,76 Hz, 6 H) 5,46 (d, J=7,28 Hz, 1 H) 6,06 (d, J=12,80 Hz, 1 H) 6,21 (d, J=7,28 Hz, 1 H) 6,98 (d, J=12,80 Hz, 1 H) 7,30 - 7,40 (m, 2 H) 7,48 (d, J=7,78 Hz, 1 H) 7,73 - 7,83 (m, 2 H) 8,19 (d, J=7,78 Hz, 1 H). CL/EM (m/z) ES+: 341,3 (M+23)+.
Etapa E
1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxilato de metilo
Figure imgf000023_0001
A una solución de 3-(2-metoxivinil)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metilo (4,14 g, 12,75 mmol) en tetrahidrofurano (90 ml) se le añadió HCl 4 N/agua (31,9 ml, 128 mmol) y la mezcla se agitó a 60 °C durante 3 h. La mezcla se repartió entre EtOAc y agua. La fase orgánica se lavó con agua (4X), se secó (Na2SO4), se concentró para proporcionar 1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxilato de metilo (2,12 g, 9,56 mmol, 75,0 % de rendimiento) en forma de un semisólido de color amarillo claro. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 4,01 (s, 3 H) 6,26 (d, J=5,27 Hz, 1 H) 7,14 (d, J=5,24 Hz, 1 H) 7,53 -7,68 (m, 2 H) 8,18 (dd, J=7,26, 1,30 Hz, 1 H) 10,27 (s, 1 H). CL/EM (m/z) ES+: 205,1 (M+1)+.
Etapa F
1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxilato de metilo
Figure imgf000023_0002
A una solución de 1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxilato de metilo (2,1 g, 9,47 mmol) en EtOAc (80 ml) se le añadió Pd al 10 %-C (1,008 g, 0,947 mmol) y la mezcla se agitó en atmósfera de hidrógeno a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se filtró lavando con EtOAc y MeOH. El filtrado se concentró, se secó al vacío para proporcionar 1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxilato de metilo (1,99 g, 8,98 mmol, 95 % de rendimiento) en forma de un aceite transparente. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 2,99 (s, 2 H) 3,96 (s, 3 H) 4,09 - 4,17 (m, 2 H) 7,36 - 7,62 (m, 2 H) 7,95 (d, J=7,53 Hz, 1 H) 9,04 - 9,47 (m, 1 H). CL/EM (m/z) ES+: 207,2 (M+1)+.
Etapa G
N-(2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxamida
Figure imgf000023_0003
Una mezcla de 1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxilato de metilo (220 mg, 0,929 mmol), 3-(4-((2-aminoetil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-4-(3-bromo-4-fluorofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona, clorhidrato, intermedio A (392 mg, 0,929 mmol), MeOH (8 ml), DIEA (0,974 ml, 5,57 mmol) y DMAP (45,4 mg, 0,372 mmol) se agitó en atmósfera de nitrógeno a 80 °C durante 18 h. La mezcla se concentró, se disolvió en EtOAc y se lavó con HCl 1 N/agua. La fase orgánica se secó (Na2SO4), se concentró y se purificó por CLAR C18 de fase inversa (ACN al 10­ 60 %/agua, ácido fórmico al 0,2%) para proporcionar N-(2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxamida (336 mg, 0,589 mmol, 63,4 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanquecino. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 2,92 (t, J=5,65 Hz, 2 H) 3,42 - 3,60 (m, 4 H) 3,99 (t, J=5,77 Hz, 2 H) 6,60 (t, J=5,77 Hz, 1 H) 7,34 - 7,45 (m, 2 H) 7,46 - 7,53 (m, 1 H) 7,58 - 7,68 (m, 1 H) 7,74 - 7,84 (m, 1 H) 8,14 (dd, J=6,15, 2,38 Hz, 1 H) 8,68 (t, J=5,52 Hz, 1 H) 9,18 (s, 1 H). CL/EM (m/z) ES+: 559,2, 561,3 (M+1)+.
Etapa H
N-(2-((4-(N-(3-bromo-4-fíuorofenil)-N’-hidroxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1 -hidroxi-3,4-dihidro- 1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxamida
Figure imgf000024_0001
A N-(2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxamida (260 mg, 0,451 mmol) en metanol (3 ml) se le añadió NaOH/agua 2 M (0,541 ml, 1,353 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 20 min, después se concentró. Se añadió una pequeña cantidad de agua y la solución transparente se trató con HCl/agua 3 N a pH~2. El sólido se filtró, se lavó con agua y se secó al vacío para proporcionar N-(2-((4-(N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N’-hidroxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxamida (220 mg, 0,409 mmol, 91 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanquecino. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 2,91 (t, J=5,52 Hz, 2 H) 3,43 - 3,58 (m, 4 H) 4,01 (t, J=5,65 Hz, 2 H) 6,35 (t, J=5,65 Hz, 1 H) 6,72 - 6,81 (m, 1 H) 7,10 -7,20 (m, 2 H) 7,33 - 7,52 (m, 3 H) 8,68 - 8,76 (m, 1 H) 8,94 (s, 1 H) 9,12 (s a, 1 H) 11,40 (s, 1 H). CL/EM (m/z) ES+: 533 (M+1)+.
Esquema V: Síntesis del compuesto 2
Figure imgf000024_0002
Compuesto 2
Ejemplo 2: Compuesto 2
N-(2-((4-(N-(3-bromo-4-fíuorofenil)-N’-hidroxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxamida
Figure imgf000024_0003
Etapa A
N-(2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro- 1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1 -hidroxi-IH-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxamida
Figure imgf000025_0001
Una mezcla de 3-(2-metoxiVinil)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metilo (43 mg, 0,136 mmol), 3-(4-((2-aminoetil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-4-(3-bromo-4-fluorofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona, clorhidrato, intermedio A (59 mg, 0,14 mmol), MeOH (2 ml), DIEA (0,105 g, 0,816 mmol) y DMAP (3,3 mg, 0,027 mmol) se calentó a 80 °C durante 5 h. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en THF (2 ml) y se añadió HCl/agua 3 N (0,2 ml, 0,6 mmol) y la mezcla se agitó a 50 °C durante 1,5 h. La mezcla se repartió entre EtOAc y agua. La fase orgánica se secó (Na2SO4), se concentró y se purificó por CLAR C18 de fase inversa (ACN al 10-90 %/agua, TFA al 0,05 %) para proporcionar N-(2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxamida (34,3 mg, 45 %) en forma de un sólido de color blanquecino. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 3,54 (dt, J=17,94, 5,33 Hz, 4 H) 6,41 (d, J=5,52 Hz, 1 H) 6,67 (t, J=5,65 Hz, 1 H) 7,20 (d, J=5,27 Hz, 1 H) 7,53 - 7,72 (m, 4 H) 7,73 - 7,80 (m, 1 H) 8,12 (dd, J=6,15, 2,38 Hz, 1 H) 8,85 (t, J=5,27 Hz, 1 H) 9,90 (s a, 1 H). CL/EM (m/z) ES+: 557 (M+1)+.
Etapa B
N-(2-((4-(N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxamida
Figure imgf000025_0002
A una solución de N-(2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxamida (32 mg, 0,055 mmol) en MeOH (0,5 ml) se le añadió NaOH 1 M/agua (0,327 ml, 0,327 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se purificó por CLAR C18 de fase inversa (ACN al 10-90 %/agua, TFA al 0,05%) para proporcionar N-(2-((4-(N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-8-carboxamida (16,1 mg, 0,029 mmol, 53,3% de rendimiento) en forma de un sólido de color blanquecino. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 3,45 - 3,59 (m, 4 H) 6,31 - 6,44 (m, 2 H) 6,76 (dt, J=8,72, 3,42 Hz, 1 H) 7,07 - 7,23 (m, 3 H) 7,56 (dd, J=16,94, 7,40 Hz, 2 H) 7,63 -7,73 (m, 1 H) 8,83 -8,94 (m, 2 H) 9,85 (s a, 1 H) 11,42 (s, 1 H). CL/EM (m/z) ES+: 531 (M+1)+.
Esquema VI: Síntesis del compuesto 3
Ejemplo 3: Compuesto 3
N-(2-((4-(N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N’-hidroxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxamida
Figure imgf000026_0001
Etapa A
3-bromo-4-(dibromometil)benzoato de metilo
Figure imgf000026_0002
A una solución de 3-bromo-4-metilbenzoato de metilo (15,0 g, 65,5 mmol) en CCI4 (100 ml) se le añadió NBS (24,5 g, 138,0 mmol) seguido de peróxido de benzoilo (1,6 g, 6,6 mmol). La mezcla se agitó a 75 °C durante 6 h en atmósfera de nitrógeno, se filtró y el filtrado se concentró, se trituró en éter dietílico, se filtró y el filtrado se concentró para obtener 3-bromo-4-(dibromometil)benzoato de metilo (32 g, 65,3 mmol, cuantitativo). Usado en la etapa siguiente sin purificación adicional. CL/EM (m/z) ES+: 386,9, 388,9 (M+1)+.
Etapa B
3-bromo-4-formilbenzoato de metilo
Figure imgf000026_0003
A una solución de 3-bromo-4-(dibromometil)benzoato de metilo (32,0 g, 65,3 mmol) en acetona (400 ml) se le añadió nitrato de plata (33,3 g, 196 mmol) y agua (100 ml). La suspensión se agitó a temperatura ambiente en la oscuridad durante 1 h. Las sales de plata se eliminaron por filtración y el filtrado se diluyó con EtOAc, se lavó con salmuera, bicarbonato sódico saturado y agua. La capa orgánica se secó (Na2SO4), se concentró y se purificó sobre sílice (EtOAc/hexanos, 0-20 %) para obtener 3-bromo-4-formilbenzoato de metilo (12,9 g, 52,0 mmol, 80 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,26 (s, 1H), 8,23 (s, 1H), 8,08 (d, J=8,1 Hz, 1H), 7,97 (d, J=8,0 Hz, 1H), 3,91 (s, 3H); CL/EM (m/z) ES+: 243 (M+1)+
Etapa C
3- bromo-4-(2-metoxivinil)benzoato de metilo
A una suspensión de t-butóxido de potasio (3,4 g, 28,8 mmol) en THF (100 ml) se le añadió cloruro de (metoximetil)trifenilfosfonio (11,20 g, 31,7 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 min y la solución de color rojo se transfirió a un matraz cerrado que contenía 3-bromo-4-formilbenzoato de metilo (3,5 g, 14,40 mmol) mediante una jeringa y se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla de reacción se inactivó con cloruro de amonio saturado y se repartió entre EtOAc y agua. La capa acuosa se extrajo otra vez con EtOAc y las capas orgánicas combinadas se secaron (Na2SO4), se concentraron al vacío y se purificaron sobre sílice (EtOAc/hexanos, 0-5%) para obtener 3-bromo-4-(2-metoxivinil)benzoato de metilo (3,5 g, 12,26 mmol, 85% de rendimiento, mezcla de isómeros E y Z) en forma de un sólido de color blanco. CL/EM (m/z) ES+: 271 (M+1)+.
Etapa D
4- (2-metoxivinil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metilo
Figure imgf000026_0004
Figure imgf000027_0001
A una mezcla de 3-bromo-4-(2-metoxivinil)benzoato de metilo (11,7 g, 43,2 mmol), bis(pinacolato)diboro (13,15 g, 51,8 mmol) y acetato potásico (12,71 g, 129 mmol) en 1,4-dioxano (200 ml) en atmósfera de N2 se le añadió cloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (3,03 g, 4,32 mmol) y la reacción se agitó a 95 °C durante 23 h. La mezcla de reacción se enfrió y se filtró. El filtrado se concentró y se purificó sobre gel de sílice (EtOAc/hexanos, 0-5 %) para obtener 4-(2-metoxivinil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metilo (11,72 g, 34,3 mmol, 79 % de rendimiento, mezcla de isómeros E y Z). CL/EM (m/z) ES+: 319 (M+1)+.
Etapa E
1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborínin-7-carboxilato de metilo
Figure imgf000027_0002
A una solución de 4-(2-metoxivinil)-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)benzoato de metilo (6,7 g, 21,06 mmol) en THF (211 ml) se le añadió HCl 4 N/agua (52,6 ml, 211 mmol) y se calentó a 70 °C durante 1,5 h. La mezcla se repartió entre EtOAc y agua. La capa orgánica se secó (Na2SO4), se concentró al vacío y se purificó sobre sílice (EtOAc/hexanos, 0-30%) para obtener 1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxilato de metilo (2,86 g, 13,60 mmol, 64,6 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,51 (s, 1H), 8,66 (d, J=1,4 Hz, 1H), 8,12 (dd, J=1,8, 8,2 Hz, 1H), 7,54 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,28 (d, J=5,4 Hz, 1H), 6,44 (d, J=5,5 Hz, 1H), 3,32 (s, 3H). CL/EM (m/z) ES+: 205 (M+1)+.
Etapa F
Ácido 1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxílico
Figure imgf000027_0003
A una suspensión de 1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxilato de metilo (2,8 g, 13,73 mmol) en MeOH (100 ml) se le añadió hidróxido de litio/agua 1 N (137 ml) y la mezcla se agitó a 50 °C durante 2 h. Se extrajo el metanol y la mezcla se acidificó añadiendo HCl concentrado gota a gota para formar un precipitado de color blanco. La mezcla se filtró y el sólido se secó para obtener un sólido de color blanco (1,6 g). El filtrado se extrajo con EtOAc, se secó (Na2SO4) y el disolvente se retiró al vacío para obtener otro sólido de color blanco (695 mg, 87 % de rendimiento combinado). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,91 (a, s, 1H), 9,45 (a, s, 1H), 8,65 (s, 1H), 8,10 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,51 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,26 (d, J=5,4 Hz, 1H), 6,43 (d, J = 5,4 Hz, 1H). CL/EM (m/z) ES+: 191 (M+1)+.
Etapa G
N-(2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxamida
Figure imgf000027_0004
A ácido 1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxílico (1,0 g, 5,26 mmol) en DMF (5 ml) se le añadió HATU (2,202 g, 5,79 mmol) y DIEA (2,69 ml, 15,79 mmol) y la mezcla se agitó durante 10 min seguido de la adición de 3-(4-((2-aminoetil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-4-(3-bromo-4-fluorofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona, clorhidrato, intermedio A (2,219 g, 5,26 mmol). La mezcla se agitó durante 1 h, se diluyó con etil EtOAc y se lavó con HCl 0,5 N y agua. La capa orgánica se concentró y se secó al vacío para obtener N-(2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxamida (3,13 g, 5,62 mmol, cuant.). CL/EM (m/z) ES+: 557 (M+1)+
Etapa H
N-(2-((4-(N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N’-hidroxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxamida
Figure imgf000028_0001
A una solución de N-(2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofeml)-5-oxo-4,5-dimdro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxamida (4,4 g, 7,90 mmol) en MeOH (40 ml) se le añadió NaOH/agua 1 N (23,69 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 min. Se eliminó el metanol y la mezcla se acidificó con HCl 1 N (pH ~ 2) para formar un precipitado que se filtró para obtener un sólido de color amarillo. El sólido se purificó por CLAR C18 de fase inversa (a Cn al 0-90 %/agua, TFA al 0,05 %) para obtener un sólido de color blanco (1,78 g, 3,07 mmol, 38,8 % de rendimiento). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,42 (s, 1H), 9,35 (a, s, 1H), 8,88 (s, 1H), 8,67 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,03 (dd, J = 4 Hz, 8,2 Hz 1H), 7,48 (d, J=8,2 Hz, 1H), 7,22 (d, J=5,5 Hz, 1H), 7,13 (d, J=8,5 Hz, 2H), 6,80 -6,68 (m, 1H), 6,40 (d, J=5,5 Hz, 1H), 6,34 (s, 1H), 3,50 (s, 2H), 3,46 - 3,41 (m, 2H). CL/EM (m/z) ES+: 531 (M+1)+.
Esquema VII: Síntesis del compuesto 4
Figure imgf000028_0002
Ejemplo 4: Compuesto 4
N-(2-((4-(N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N’-hidroxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxamida
Figure imgf000028_0003
Etapa A
1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxilato de metilo
Figure imgf000028_0004
A una solución de 1-hidroxi-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxilato de metilo (1,3 g, 6,37 mmol) en EtOAc (50 ml) se le añadió paladio al 10 % sobre carbono (1,35 g, 1,27 mmol) y la mezcla se agitó en atmósfera de hidrógeno durante 6 h. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró para obtener 1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxilato de metilo (1,03 g, 4,50 mmol, 70,6 % de rendimiento) en forma de un aceite incoloro. Este se usó en la etapa siguiente sin purificación adicional. RMN 1H (400 MHz, CLOROFORMO-d) 8 ppm 8,43 (d, J=1,6 Hz, 1H), 8,12 -8,00 (m, 1H), 7,32 - 7,16 (m, 1H), 4,24 (t, J=6,0 Hz, 2H), 3,92 (s, 3H), 3,01 (t, J=6,0 Hz, 2H). CL/EM (m/z) ES+: 207 (M+1)+.
Etapa B
Ácido 1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxílico
Figure imgf000029_0001
A una suspensión de 1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-benzo[c][1,2]oxaborinin-7-carboxilato de metilo (1 g, 4,85 mmol) en MeOH (50 ml) se le añadió hidróxido de litio/agua 1 N (49,5 ml). El metanol se eliminó al vacío y se añadió HCl/agua 1 N hasta pH ~ 1. El precipitado formado se filtró para obtener un sólido de color blanco (460 mg). El filtrado se extrajo con EtOAc, se secó (Na2SO4) y el disolvente se eliminó al vacío para obtener otros 270 mg del sólido de color blanco (64 % de rendimiento combinado). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,82 (a, s, 1H) 8,63 (s, 1H), 8,29 (s, 1H), 7,94 (d, J=7,8 Hz, 1H), 7,33 (d, J=7,8 Hz, 1H), 4,09 (t, J=6,0 Hz, 2H), 2,93 (t, J=6,0 Hz, 2H). CL/EM (m/z) ES+: 193 (M+1)+.
Etapa C
N-(2-((4-(N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N’-hidroxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-3,4-dihidro-1H-bemzo[c][1,2]oxaborímim-7-carboxamida
Figure imgf000029_0002
A acido 1-mdroxi-3,4-dimdro-1H-benzo[c][1,2]oxaborimn-7-carboxilico (101 mg, 0,474 mmol) en DMF (5 ml) se le añadió HATU (198 mg, 0,522 mmol) y D iEa (0,242 ml, 1,423 mmol). La mezcla se agitó durante 10 min seguido de la adición de 3-(4-((2-aminoetil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-4-(3-bromo-4-fluorofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona, clorhidrato, intermedio A (200 mg, 0,474 mmol) y se agitó durante 20 min. Se añadió NaOH/agua 1 N (2 ml) y la agitación continuó durante 2 h. La mezcla se purificó por CLAR C18 de fase inversa (ACN al 0-90%/agua, TFA al 0,05 % ) para obtener un sólido de color blanco (88 mg, 0,136 mmol, 28,7 % de rendimiento). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,43 (s, 1H), 8,88 (s, 1H), 8,59 (t, J = 7,9 Hz, 2H), 8,16 (s, 1H), 7,85 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,29 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,18 - 7,09 (m, 2H), 6,80 - 6,70 (m, 1H), 6,32 (s, 1H), 4,08 (t, J=6,0 Hz, 2H), 3,42 (s a, 3H), 2,91 ((t, J=6,0 Hz, 2H). CL/EM (m/z) ES+: 533 (M+1)+.
Esquema VIII: Síntesis del compuesto 5
Figure imgf000029_0003
Ejemplo 5: Compuesto 5
2,2,2-trifluoroacetato de 2-((4-(N-(3-bmmo-4-fluomfenil)-N’-hidmxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)-N-((1-hidroxi-1,3-dihidrobenzo[c][1,2]oxaborol-4-il)metil)-N-metilacetamida
Figure imgf000030_0001
Etapa A
N-(4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-2,2,2-trifluoroacetamida
Figure imgf000030_0002
Una solución de 3-(4-amino-1,2,5-oxadiazol-3-il)-4-(3-bromo-4-fluorofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona (1,026 g, 3,00 mmol) en DCM (12 ml) a 0 °C se trató con 2,2,2-anhídrido trifluoroacético (0,834 ml, 6,00 mmol) y piridina (0,485 ml, 6,00 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 min. La mezcla de reacción se enfrió después a 0 °C y se inactivó con agua (2 ml), se diluyó con EtOAc (30 ml) y se separaron las capas. Las orgánicas se lavaron con solución 1 M de HCl (10 ml), agua (2 x 10 ml) y salmuera (10 ml) y se secaron sobre Na2SO4. Se añadió gel de sílice (2 g) y se evaporó el disolvente para obtener un lecho de gel de sílice. El producto se purificó por cromatografía sobre gel de sílice (EtOAc al 10 % y al 20 %/hexano) para obtener N-(4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-2,2,2-trifluoroacetamida (1,14 g, 2,52 mmol, 84% de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 87,94 - 7,89 (m, 1H), 7,56 - 7,51 (m, 2H). CL/EM (m/z) ES-: 436,2, 438,2 (M-1)-.
Etapa B
2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)acetato de tercbutilo
Figure imgf000030_0003
Una solución de trifenilfosfina (1527 mg, 5,82 mmol), 2-hidroxiacetato de terc-butilo (769 mg, 5,82 mmol) y N-(4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-2,2,2-trifluoroacetamida (850 mg, 1,940 mmol) en THF (8 ml) se enfrió a 0 °C y se trató con diazen-1,2-dicarboxilato de (E)-diisopropilo (1,146 ml, 5,82 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 h. Se añadió gel de Sílice (5 g) y el disolvente se evaporó. El lecho de gel de sílice se purificó usando cromatografía sobre gel de sílice (EtOAc al 20 %/hexano) para dar un residuo semisólido. Se añadió MeOH para proporcionar 2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4 oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)acetato de tere-butilo (445 mg, 0,925 mmol, 47,7 % de rendimiento) en forma de cristales de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 58,12 (dd, J=2,5, 6,2 Hz, 1H), 7,75 (ddd, J=2,5, 4,4, 8,8 Hz, 1H), 7,64 - 7,57 (m, 1H), 6,83 (t, J=6,2 Hz, 1H), 3,95 (d, J=6,2 Hz, 2H), 1,41 (s, 9H). CL/EM (m/z) ES-: 454,2, 456,2 (M-1)-.
Etapa C
Áeido 2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)aeétieo
Figure imgf000031_0001
Se disolvió 2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)acetato de tere-butilo (55o mg, 1,206 mmol) en THF (10 ml) y se trató con HCI, 4 M en dioxanos (6,03 ml, 24,11 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 17 horas. La reacción se trató con más HCI, 4 M en dioxanos (6,03 ml, 24,1 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 22 horas más. La reacción se trató con más HCI, 4 M en dioxanos (6,03 ml, 24,1 mmol) y se agitó a temperatura ambiente durante 4 h, después se enfrió durante 48 horas. La reacción se devolvió a temperatura ambiente y se trató con más HCI, 4 M en dioxanos (4 ml) y se agitó durante 8 horas más. Después se evaporaron los disolventes para dar un aceite que se disolvió en MeoH y se purificó usando cromatografía de fase inversa (ACN/agua al 10-90 %, TFA al 0,05 %, 20 min) para proporcionar ácido 2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)acético (170 mg, 0,425 mmol, 35,2 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 512,73 - 13,40 (1 H, m), 8,12 (dd, J=2,5, 6,2 Hz, 1H), 7,76 (td, J=2,2, 4,4 Hz, 1H), 7,63 -7,57 (m, 1H), 6,79 (t, J=6,1 Hz, 1H), 3,98 (d, J=6,1 Hz, 2H). CL/EM (m/z) ES-: 398,1,400,2 (M-1)-.
Etapa D
2,2,2-trifluoroacetato de 2-((4-(N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N’-hidroxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)-N-((1-hidmxi-1,3-dihidmbenzo[c][1,2]oxaboml-4-il)metil)-N-metilacetamida
Figure imgf000031_0002
Una solución de ácido 2-((4-(4-(3-bromo-4-fluorofenil)-5-oxo-4,5-dihidro-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)acético (50 mg, 0,125 mmol) y 4-((metilamino)metil)benzo[c][1,2]oxaborol-1(3H)-ol, clorhidrato, intermedio C (53,4 mg, 0,250 mmol) en DMF (1 ml) se trató con N-etil-N-isopropilpropan-2-amina (0,109 ml, 0,625 mmol) y HATU (52,3 mg, 0,137 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La reacción se trató después con NaOH 1 N (,7 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 horas. La reacción se trató después con NaOH 1 N (,7 ml) y se agitó durante 1 hora. La mezcla de reacción se purificó usando cromatografía de fase inversa (ACN/agua al 10-90%, 0,05% TFA, 20 min) para proporcionar 2-((4-(N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N’-hidroxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)-N-((1-hidroxi-1,3-dihidrobenzo[c][1,2]oxaborol-4-il)metil)-N-metilacetamida, sal de ácido trifluoroacético 0,5 (44 mg, 0,074 mmol, 59,1 % de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (dos conjuntos de señales debido a la amida cis/trans) (400 MHz, METANOL-d4) 5 7,61 (d, J=4,3 Hz, 1H (dos conjuntos)), 7,43 - 7,27 (m, 2H (dos conjuntos)), 7,16 (dd, J=2,7, 5,9 Hz, 1H (dos conjuntos)), 7,08­ 7,01(m, 1H (dos conjuntos)), 6,91 - 6,83 (m, 1H (dos conjuntos)), 5,13 y 5,07 (s, 0,50+1,50H), 4,67 y 4,63 (s, 1,5+0,5H), 4,25 y 4,21 (s, 1,5+0,5H), 2,98 (s, 3H). CL/EM (m/z) ES+: 533,3, 535,2 (M+1)+.
Ejemplo 6: Compuesto 6
N-(2-((4-(N-(3-bmmo-4-fíuomfenil)-N’-hidmxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidmxi-1,3- dihidrobenzo[c][1,2]oxaborol-7-carboxamida
Figure imgf000032_0001
Una solución de ácido 1-hidroxi-1,3-dihidrobenzo[c][1,2]oxaborol-7-carboxílico, intermedio B (295 mg, 1,660 mmol), intermedio B y 3-(4-((2-aminoetil)amino)-1,2,5-oxadiazol-3-il)-4-(3-bromo-4-fluorofenil)-1,2,4-oxadiazol-5(4H)-ona, clorhidrato, intermedio A (700 mg, 1,660 mmol) en DMF (10 ml) se trató con DIPEA (0,870 ml, 4,98 mmol), seguido de HATU (694 mg, 1,826 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos. La reacción se trató después mediante la adición lenta gota a gota de NaOH 1 N (5 ml) y después se agitó durante 40 minutos. La reacción se trató después con NaOH 1 N (2 ml) y se agitó durante 1,5 horas. La reacción se mantuvo en el frigorífico durante una noche y se cogió y se trató con más NaOH 1 N (5 ml) y se agitó durante 3,5 horas. La mezcla de reacción se purificó usando cromatografía de fase inversa (ACN/agua al 10-90 %, 0,05 % TFA, 15 min) para proporcionar N-(2-((4-(N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxicarbamimidoil)-1,2,5-oxadiazol-3-il)amino)etil)-1-hidroxi-1,3-dihidrobenzo[c][1,2]oxaborol-7-carboxamida, sal de ácido trifluoroacético 0,2 (380 mg, 0,680 mmol, 41,0% de rendimiento) en forma de un sólido de color blanco. RMN 1H (400 MHz, MeOH-d4) 87,90 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,66 - 7,49 (m, 2H), 7,15 - 6,96 (m, 2H), 6,86 - 6,77 (m, 1H), 4,98 (s a, 2H), 3,83 - 3,75 (m, 2H), 3,61 (d, J=6,0 Hz, 2H). CL/EM (m/z) ES+: 519,2, 521,2 (M+1)+.
Administración y Formulación
En otra realización, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un diluyente farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de las fórmulas I-VII o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
Los compuestos de la presente invención pueden suministrarse en forma de una sal farmacéuticamente aceptable. La expresión "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a sales preparadas a partir de ácidos y bases orgánicas e inorgánicas farmacéuticamente aceptables. Por consiguiente, el término "o" en el contexto de "un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo" se entiende que hace referencia a un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo (alternativa) o a un compuesto y una sal farmacéuticamente aceptable del mismo (en combinación).
Como se usa en el presente documento, la expresión "farmacéuticamente aceptable" se refiere a los compuestos, materiales, composiciones y formas de dosificación que son, dentro del ámbito del buen criterio médico, adecuados para su uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin excesiva toxicidad, irritación y/u otro problema o complicación. El experto en la técnica apreciará que pueden prepararse sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de acuerdo con las fórmulas I-VII. Estas sales farmacéuticamente aceptables se pueden preparar in situ durante el aislamiento y purificación finales del compuesto o por separado haciendo reaccionar el compuesto purificado en su forma de ácido libre o base libre con una base o ácido apropiados, respectivamente.
Se pueden preparar sales de ácidos farmacéuticamente aceptables ilustrativas de los compuestos de la presente invención a partir de los siguientes ácidos, incluyendo, sin limitación, los ácidos fórmico, acético, propiónico, benzoico, succínico, glicólico, glucónico, láctico, maleico, málico, tartárico, cítrico, nítico, ascórbico, glucurónico, maleico, fumárico, pirúvico, aspártico, glutámico, benzoico, clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, isocítrico, trifluoroacético, pamoico, propiónico, antranílico, mesílico, oxalacético, oleico, esteárico, salicílico, p-hidroxibenzoico, nicotínico, fenilacético, mandélico, embónico (pamoico), metanosulfónico, fosfórico, fosfónico, etanosulfónico, bencenosulfónico, pantoténico, toluenosulfónico, 2-hidroxietanosulfónico, sulfanílico, sulfúrico, salicílico, ciclohexilaminosulfónico, algénico, p-hidroxibutírico, galactárico y galacturónico. Las sales farmacéuticamente aceptables preferidas incluyen las sales de ácido clorhídrico y ácido trifluoroacético.
Las sales de base inorgánica farmacéuticamente aceptables ilustrativas de los compuestos de la presente invención incluyen iones metálicos. Los iones metálicos más preferidos incluyen, pero sin limitación, sales de metales alcalinos apropiadas, sales de metales alcalinotérreos y otros iones metálicos fisiológicamente aceptables. Las sales procedentes de bases inorgánicas incluyen sales de aluminio, de amonio, de calcio, de cobre, férricas, ferrosas, de litio, de magnesio, sales mangánicas, manganosas, de potasio, de sodio, de cinc y similares y en sus valencias habituales. Las sales de bases ejemplares incluyen de aluminio, de calcio, de litio, de magnesio, de potasio, de sodio y de cinc. Otras sales de bases ejemplares incluyen las sales de amonio, de calcio, de magnesio, de potasio y de sodio. Otras sales de bases ejemplares más incluyen, por ejemplo, hidróxidos, carbonatos, hidruros y alcóxidos, incluyendo NaOH, KOH, Na2cOa, K2CO3, NaH y t-butóxido potásico.
Las sales derivadas de bases orgánicas no tóxicas farmacéuticamente aceptables incluyen sales de amina primarias, secundarias y terciarias, que incluyen, en parte, trimetilamina, dietilamina, N,N'-dibenciletilendiamina, cloroprocaína, colina, dietanolamina, etilendiamina, meglumina (N-metilglucamina) y procaína; aminas sustituidas incluyendo aminas sustituidas de origen natural; aminas cíclicas; cationes de amonio cuaternario y resinas de intercambio iónico básicas, tales como arginina, betaína, cafeína, colina, N,N-dibenciletilendiamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etilmorfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, resinas de poliamina, procaína, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, trometamina y similares.
Los expertos en la técnica pueden preparar todas las sales anteriores por medios convencionales a partir del correspondiente compuesto de la presente invención. Por ejemplo, las sales farmacéuticamente aceptables de la presente invención pueden sintetizarse a partir del compuesto precursor que contiene un resto básico o ácido mediante procedimientos químicos convencionales. En general, dichas sales se pueden preparar haciendo reaccionar las formas básicas o ácidas libres de estos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o del ácido adecuados en agua, en un solvente orgánico o en una mezcla de los dos; en general, se prefieren medios no acuosos como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo. La sal puede precipitar de la solución y recogerse por filtración o puede recuperarse por evaporación del disolvente. El grado de ionización en la sal puede variar de completamente ionizada a no casi ionizada. Se encuentran listas de las sales adecuadas en Remington's Pharmaceutical Sciences, 17a edición, Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, pág. 1418.
Los compuestos de la invención pueden existir en forma tanto sin solvatar como solvatada. El término 'solvato' se usa en el presente documento para describir un complejo molecular que comprende el compuesto de la invención y una o más moléculas de disolvente farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, etanol. El término "hidrato" se emplea cuando dicho disolvente es agua. Los solvatos farmacéuticamente aceptables incluyen hidratos y otros solvatos en los que el disolvente de cristalización puede estar sustituido isotópicamente, por ejemplo, D2O, d6-acetona, d6-DMSO.
Los compuestos de las fórmulas I-VII que contienen uno o más átomos de carbono asimétricos pueden existir como dos o más estereoisómeros. Cuando un compuesto de las fórmulas I-VII contiene un grupo amidoxima o alquenilo o alquenileno o un grupo cicloalquilo, son posibles los isómeros geométricos cis/trans (o Z/E). Cuando el compuesto contiene, por ejemplo, un grupo ceto u oxima o un resto aromático, puede producirse un isomerismo tautomérico ('tautomerismo'). Por lo tanto un único compuesto puede mostrar más de un tipo de isomerismo.
Todos los estereoisómeros, isómeros geométricos y formas tautoméricas de los compuestos de las fórmulas I-VII están incluidos en el ámbito de algunas realizaciones o realizaciones alternativas de los compuestos reivindicados de la presente invención, incluyendo los compuestos que muestran más de un tipo de isomería y mezclas de uno o más de los mismos. También se incluyen sales de adición de ácidos o de bases en las que el contraión es ópticamente activo, por ejemplo, D-lactato o L-lisina, o racémico, por ejemplo, DL-tartrato o DL-arginina.
Los isómeros cis/trans pueden separarse mediante técnicas convencionales bien conocidas por los expertos en la técnica, por ejemplo, cromatografía y cristalización fraccionada.
Las técnicas convencionales para la preparación/aislamiento de enantiómeros individuales incluyen síntesis quiral a partir de un precursor ópticamente puro adecuado o resolución del racemato (o el racemato de una sal o derivado) usando, por ejemplo, cromatografía líquida de alta presión quiral (HPLC).
Como alternativa, el racemato (o un precursor racémico) puede hacerse reaccionar con un compuesto ópticamente activo adecuado, por ejemplo, un alcohol o, en el caso en el que en algunas realizaciones o realizaciones alternativas los compuestos de las fórmulas I-VII contienen un resto ácido o básico, un ácido o base tal como ácido tartárico o 1-feniletilamina. La mezcla diastereomérica resultante puede separarse por cromatografía y/o cristalización fraccionada y uno o los dos diastereoisómeros convertirse en el enantiómero o los enantiómeros puros correspondientes por medios bien conocidos por un experto en la técnica.
Los compuestos quirales de la invención (y sus precursores quirales) pueden obtenerse en forma enantioméricamente enriquecida usando cromatografía, habitualmente HPLC, en una resina con una fase estacionaria asimétrica y con una fase móvil que consiste en un hidrocarburo, habitualmente heptano o hexano, que contiene del 0 al 50 % de isopropanol, típicamente del 2 al 20% y del 0 al 5% de una alquilamina, típicamente 0,1 % de dietilamina. La concentración del eluato proporciona la mezcla enriquecida.
Las mezclas de estereoisómeros pueden separarse por técnicas convencionales conocidas por los expertos en la técnica. [véase, por ejemplo, "Stereochemistry of Organic Compounds" de E L Eliel (Wiley, Nueva York, 1994).]
La presente invención incluye todos los compuestos marcados isotópicamente, farmacéuticamente aceptables, de las fórmulas I-VII en las que uno o más átomos están sustituidos por átomos que tienen el mismo número atómico, pero una masa atómica o número másico diferente de la masa atómica o número másico que se encuentra normalmente en la naturaleza.
Los ejemplos de isótopos adecuados para su inclusión en los compuestos de la presente invención incluyen isótopos de hidrógeno, tales como 2H y 3H, carbono, tales como 11C, 13C y 14C, cloro, tal como 36Cl, flúor, tal como 18F, yodo, tales como 123I y 125I, nitrógeno, tales como 13N y 15N, oxígeno, tales como 15O, 17O y 18O, fósforo, tal como 32P y azufre, tal como 35S.
Ciertos compuestos marcados con isótopos de las fórmulas I-VII, por ejemplo, los que incorporan un isótopo radiactivo, son útiles en estudios de la distribución en tejidos del fármaco y/o sustrato. Los isótopos radiactivos tritio, es decir 3H, y carbono-14, es decir, 14C, son particularmente útiles para este fin en vista de su facilidad de incorporación y sencillos medios de detección.
La sustitución con isótopos más pesados, tales como deuterio, es decir, 2H, puede proporcionar determinadas ventajas terapéuticas que son el resultado de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, un aumento de la semivida in vivo o menores requisitos de dosificación y, por lo tanto, puede preferirse en algunas circunstancias.
Los compuestos marcados con isótopos de las fórmulas I-VII pueden prepararse generalmente por técnicas convencionales conocidas por los expertos en la materia o por procesos análogos a los descritos en los ejemplos y preparaciones adjuntas usando un reactivo apropiado marcado isotópicamente en lugar del reactivo no marcado empleado previamente.
Los compuestos de la presente invención pueden administrarse como profármacos. Por lo tanto, ciertos derivados de los compuestos de las fórmulas I-VII, que pueden tener poca o ninguna actividad farmacológica pueden, cuando se administran a o sobre el cuerpo, convertirse en compuestos de fórmula I en forma de "profármacos".
La administración de las entidades químicas descritas en el presente documento puede ser vía cualesquiera modos de administración aceptados para los agentes que proporcionan utilidades similares incluyendo, pero sin limitación, 'por vía oral, por vía sublingual, por vía subcutánea, por vía intravenosa, por vía intranasal, por vía tópica, por vía transdérmica, por vía intraperitoneal, por vía intramuscular, por vía intrapulmonar, por vía vaginal, por vía rectal o por vía intraocular. En algunas realizaciones, se usa administración oral o parenteral.
Las composiciones o formulaciones farmacéuticas incluyen formas de dosificación sólidas, semisólidas, líquidas y en aerosol, tales como, por ejemplo, comprimidos, cápsulas, polvos, líquidos, suspensiones, supositorios, aerosoles o similares. Las entidades químicas también pueden administrarse en formas de dosificación de liberación sostenida o controlada, incluyendo inyecciones de depósito, bombas osmóticas, píldoras, parches transdérmicos (incluyendo electrotransporte) y similares, para administración pulsada, programada y/o prolongada a una velocidad predeterminada. En ciertas realizaciones, las composiciones se proporcionan en formas de dosificación unitaria adecuadas para una sola administración de una dosis precisa.
Las entidades químicas descritas en el presente documento se pueden administrar en solitario o más habitualmente junto con un vehículo, excipiente o similar farmacéutico convencional, (por ejemplo, manitol, lactosa, almidón, estearato de magnesio, sacarina sódica, talco, celulosa, croscarmelosa sódica, glucosa, gelatina, sacarosa, carbonato de magnesio y similares). Si se desea, la composición farmacéutica puede contener también cantidades menores de sustancias auxiliares no tóxicas tal como agentes de humectación, agentes emulsionantes, agentes solubilizantes, agentes tamponadores del pH y similares (por ejemplo, acetato sódico, citrato sódico, derivados de ciclodextrina, monolaurato de sorbitán, acetato de trietanolamina, oleato de trietanolamina y similares). En general, dependiendo del modo deseado de administración, la composición farmacéutica contendrá aproximadamente del 0,005 %
al 95 %; en ciertas realizaciones, aproximadamente del 0,5 % al 50 % en peso de una entidad química. Los expertos en la técnica conocen, o les serán evidentes, procedimientos concretos para preparar dichas formas de dosificación; por ejemplo, véase Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, Pensilvania.
En ciertas realizaciones, las composiciones adoptarán la forma de una píldora o comprimido y, por lo tanto, la composición contendrá, junto con el principio activo, un diluyente tal como lactosa, sacarosa, fosfato de dicalcio o similar; un lubricante tal como estearato de magnesio o similar y un aglutinante, tal como almidón, goma arábiga, polivinilpirrolidina, gelatina, celulosa, derivados de celulosa o similares. En otra forma de dosificación sólida, un polvo, gránulos, una solución o suspensión (por ejemplo, en carbonato de propileno, aceites vegetales o triglicéridos) se encapsula en una cápsula de gelatina.
Las composiciones líquidas farmacéuticamente administrables pueden, por ejemplo, prepararse disolviendo, dispersando, etc., al menos una entidad química y adyuvantes farmacéuticos opcionales en un vehículo (por ejemplo, agua, solución salina, dextrosa acuosa, glicerol, glicoles, etanol o similares) para formar una solución o suspensión. Los inyectables se pueden preparar en formas convencionales, ya sea como soluciones o suspensiones líquidas, como emulsiones, o en formas sólidas adecuadas para la disolución o suspensión en líquido antes de la inyección. El porcentaje de entidades químicas contenido en dichas composiciones precursoras es altamente dependiente de su naturaleza específica, así como de la actividad de las entidades químicas y de las necesidades del sujeto. Sin embargo, se pueden emplear porcentajes de principio activo del 0,0l% al 10% en solución y serán mayores si la composición es un sólido que se diluye posteriormente a los porcentajes anteriores. En ciertas realizaciones, la composición comprenderá de aproximadamente el 0,2 al 2 % del principio activo en solución.
Las composiciones farmacéuticas de las entidades químicas descritas en el presente documento pueden administrarse también al tracto respiratorio en forma de un aerosol o solución para un nebulizador o como un polvo microfino para insuflado, en solitario o junto con un vehículo inerte como lactosa. En tal caso, las partículas de la composición farmacéutica tienen diámetros de menos de 50 micrómetros, en ciertas realizaciones, menos de 10 micrómetros.
En general, las entidades químicas proporcionadas se administrarán en una cantidad terapéuticamente eficaz mediante cualquiera de los modos de administración aceptados para agentes que cumplen funciones similares. La cantidad real de la entidad química, es decir, el principio activo, dependerá de numerosos factores, tales como la gravedad de la enfermedad a tratar, de la edad y del estado de salud relativo del paciente, la potencia de la entidad química usada, la vía y la forma de administración y otros factores. El fármaco se puede administrar más de una vez al día, tal como una vez o dos veces al día.
Las cantidades terapéuticamente eficaces de las entidades químicas descritas en el presente documento pueden variar de aproximadamente 0,01 a 200 mg al día por kilogramo de peso corporal del receptor; tal como aproximadamente 0,01-100 mg/kg/día, por ejemplo, de aproximadamente 0,1 a 50 mg/kg/día. Por lo tanto, para administración a una persona de 70 kg, el intervalo de dosificación puede ser de aproximadamente 7-3500 mg al día.
En general, las entidades químicas se administrarán en forma de composiciones farmacéuticas por medio de una cualquiera de las siguientes vías: administración oral, sistémica (por ejemplo, transdérmica, intranasal o por supositorio) o parenteral (por ejemplo, intramuscular, intravenosa o subcutánea). En ciertas realizaciones, se puede usar la administración oral con un régimen de dosificación diario apropiado que se puede ajustar de acuerdo con el grado de aflicción. Las composiciones pueden adoptar la forma de comprimidos, píldoras, cápsulas, semisólidos, polvos, formulaciones de liberación sostenida, soluciones, suspensiones, elixires, aerosoles o cualquier otra composición apropiada. Otra forma de administrar las entidades químicas proporcionadas es la inhalación.
La elección de la formulación depende de diversos factores tales como el modo de administración de fármaco y la biodisponibilidad de la sustancia de fármaco. Para la administración a través de inhalación, la entidad química se puede formular en forma de solución líquida, suspensiones, propulsores de aerosol o polvo seco e introducido en un dispensador apropiado para administración. Existen diversos tipos de dispositivos de inhalación farmacéuticosinhaladores nebulizadores, inhaladores de dosis medida (IDM) e inhaladores de polvo seco (IPS). Los dispositivos de nebulizador producen una corriente de aire de alta velocidad que hace que los agentes terapéuticos (que se formulan en forma líquida) se pulvericen en forma de bruma que es transportada al interior del tracto respiratorio del paciente. Habitualmente, los iDm son una formulación envasada con un gas comprimido. Tras el accionamiento, el dispositivo descarga una cantidad medida de agente terapéutico por medio del gas comprimido, permitiendo de este modo un procedimiento fiable para la administración de una cantidad establecida de agente. El IPS dispensa agentes terapéuticos en forma de un polvo que fluye libremente que se pueden dispersar en la corriente de aire inspirado por el paciente durante la respiración mediante el dispositivo. Con el fin de conseguir un polvo de flujo libre, se formula el agente terapéutico con un excipiente tal como lactosa. Una cantidad medida del agente terapéutico se almacena en una forma de cápsula y se dispensa con cada accionamiento.
Recientemente, se han desarrollado composiciones farmacéuticas para fármacos que muestran pobre biodisponibilidad basándose en el principio de que la biodisponibilidad puede aumentar cuando aumenta el área superficial, es decir, disminuyendo el tamaño de partícula. Por ejemplo, la patente de Estados Unidos n.° 4.107.288 describe una formulación farmacéutica que tiene partículas en el intervalo de tamaños de 10 a 1.000 nm en la que el material activo se soporta en una matriz reticulada de macromoléculas. La patente de Estados Unidos n.° 5.145.684 describe la producción de una formulación farmacéutica en la que la sustancia de fármaco se pulveriza en nanopartículas (tamaño medio de partículas de 400 nm) en presencia de un modificador superficial y después se dispersa en un medio líquido para proporcionar una formulación farmacéutica que muestra una biodisponibilidad extraordinariamente elevada.
Las composiciones están formadas, en general, por al menos una entidad química descrita en el presente documento junto con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable. Los excipientes aceptables son una administración auxiliar, no tóxica y no afectan negativamente al beneficio terapéutico de al menos una entidad química descrita en el presente documento. Dicho excipiente puede ser cualquier excipiente sólido, líquido, semisólido o, en el caso de una composición de aerosol, gaseoso que se encuentra habitualmente disponible para el experto en la técnica.
Los excipientes farmacéuticos sólidos incluyen almidón, celulosa, talco, glucosa, lactosa, sacarosa, gelatina, malta, arroz, harina, tiza, gel de sílice, estearato de magnesio, estearato de sodio, monoesterato de glicerol, cloruro sódico, leche desnatada seca y similares. Los excipientes líquidos y semisólidos pueden seleccionarse entre glicerol, propilenglicol, agua, etanol y diversos aceites, incluidos aquellos cuyo origen es petróleo, animal, vegetal o sintético, por ejemplo, aceite de cacahuete, aceite de soja, aceite mineral, aceite de sésamo, etc. Los vehículos líquidos, para soluciones inyectables, incluyen agua, solución salina, dextrosa acuosa y glicoles.
Pueden usarse gases comprimidos para dispersar una entidad química descrita en el presente documento en forma de aerosol. Los gases inertes apropiados para esta finalidad son nitrógeno, dióxido de carbono, etc. Otros excipientes farmacéuticos adecuados y sus formulaciones se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences, editado por E. W. Martin (Mack Publishing Company, 18a ed., 1990).
La cantidad de entidad química en una composición puede variar dentro del intervalo completo empleado por los expertos en la técnica. Habitualmente, la composición contendrá, en una base de porcentaje en peso (% en peso), de aproximadamente un 0,01-99,99 % de al menos una entidad química descrita en el presente documento, basándose en la composición total, siendo el resto uno o más excipientes farmacéuticos adecuados. En ciertas realizaciones, la al menos una entidad química descrita en el presente documento está presente en una cantidad de aproximadamente el 1-80 % en peso.
Datos del compuesto
La enzima indoleamina 2,3-dioxigenasa (IDO) humana y los datos celulares, y los datos de eliminación en ratas y ratones se presentan en la Tabla 2 a continuación. El gráfico 1 muestra la farmacocinética (PK) oral en ratas como concentración de fármaco frente al tiempo. A continuación hay breves descripciones de los ensayos enzimáticos y celulares y de procedimientos farmacocinéticos in vivo para ratas, tras la tabla y los gráficos.
TABLA 2:
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Gráfico 1: Farmacocinética (PK) oral en ratas, concentración de fármaco (ng/ml) frente al tiempo (horas)
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T iem p o (ho ras)
Los compuestos 7, 8, 9 y 10, estructuras a continuación, se crearon por vía interna. La síntesis no se proporciona en el presente documento, pero se puede preparar de varias maneras conocidas por un experto en la técnica de la síntesis orgánica. En conjunto, sirven para ilustrar que no todos los compuestos activos de IDO tienen una buena eliminación en ratas.
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Los compuestos 11 tienen la estructura siguiente y se citan referencia en el documento WO 2010/005958.
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Ensayo de enzimas IDOi: Los compuestos de la presente invención se ensayaron contra indoleamina 2,3 dioxigenasa (IDO1) en un ensayo de lectura de absorbancia. IDO1 cataliza la oxidación del triptófano usando L-triptófano o D-triptófano y oxígeno molecular como sustratos para formar N-formilkinurenina (NFK). La NFK tiene un pico de absorbancia cercano a 320 nm, lo que permite controlar el progreso de la reacción espectrofotométricamente mediante un aumento de la absorbancia a 320 nm. La inhibición del aumento de la absorbancia observada con la formación del producto NFK se interpreta como inhibición de la actividad IDO1. La IDO1 humana recombinante que se había expresado en E. coli se utilizó para estos experimentos.
En preparación para el ensayo, los compuestos de ensayo se diluyeron en serie 3 veces en DMSO a partir de una concentración máxima típica de 5 mM y se sembraron a 0,5 |jl en placas UV-Star, de fondo plano de 384 pocillos (Greiner Bio-One, Kremsmünster, Austria) para generar curvas de respuesta a la dosis de 11 puntos. Los pocillos de bajo control (100 % de inhibición, 0 % de NFK) contenían 0,5 j l de DMSO en ausencia de IDO1, y los pocillos de alto control (0 % de inhibición, 100 % de NFK) contenían 0,5 j l de DMSO en presencia de la enzima.
Para comenzar el ensayo, 25 j l de una solución de enzima a 2X con una composición de fosfato de potasio de 100 mM (pH 7,2), CHAPS 1 mM, ácido L-ascórbico 40 mM, azul de metileno 2 jM , catalasa al 1 % en v/v (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) y IDO1 100 nM se añadieron a todos los pocillos de las placas de 384 pocillos del compuesto, con la excepción de los pocillos de bajo control. Los pocillos de bajo control recibieron 25 j l de una solución a 2X similar que carece de la enzima IDO1. Antes de la adición de sustrato a las placas, la solución enzimática y los compuestos se dejaron preincubar a temperatura ambiente durante 30 minutos.
Después de la preincubación, 25 j l de una solución de sustrato a 2X con una composición de fosfato de potasio de 100 mM (pH 7,2), CHAPS 1 mM y D-triptófano 4 mM (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) se agregaron a todos los pocillos de las placas de 384 pocillos del compuesto. La composición final del ensayo en la placa fue fosfato de potasio 100 mM (pH 7,2), CHAPS 1 mM, ácido L-ascórbico 20 mM, azul de metileno 1 jM , catalasa al 0,5 % en v/v, /- IDO1 50 nM y D-triptófano 2 mM.
Se capturaron dos lecturas de absorbancia a 320 nm para cada pocillo utilizando el lector EnVision® Multilabel (PerkinElmer Inc., Waltham, MA). La primera lectura se adquirió 5 minutos después de la adición de la solución de sustrato a 2X, y la segunda lectura se adquirió 55 minutos después. Para fines de análisis de datos, la lectura inicial se resta de la segunda lectura para tener en cuenta los pocillos con fondos de alta absorbancia debido a la absorbancia del compuesto de ensayo.
Los datos para las respuestas a la dosis se representaron como el % de inhibición de IDO1 frente a la concentración del compuesto después de la normalización utilizando la fórmula 100-(100*((U-C2)/(C1-C2))), en la que U era el valor desconocido, C1 era el promedio de los pocillos de control alto (NFK al 100 %; 0 % de inhibición) en los pocillos de control y C2 fue el promedio de los pocillos de control bajo (NFK al 0 %; 100 % de inhibición).
El ajuste de la curva se realizó con la ecuación y=A+((B-A)/(1+(10x/10C)D)), en la que A era la respuesta mínima, B era la respuesta máxima, C era el log(XC50) y D era la pendiente de la colina. Los resultados para cada compuesto de ensayo se registraron como valores de pCI50 (-C en la ecuación anterior).
Ensayo de IDOi en HeLa: Los compuestos de la presente invención se probaron mediante ensayos celulares de alto rendimiento que utilizan la detección de kinurenina mediante espectrometría de masas y citotoxicidad como puntos finales. Para los ensayos de espectrometría de masas y citotoxicidad, células HeLa epiteliales humanas (CCL-2; ATCC®, Manassas, VA) se estimularon con interferón-Y (IFN-y) humano (Sigma-Aldrich Corporation, St. Louis, MO) para inducir la expresión de indoleamina 2,3-dioxigenasa (IDOi). Los compuestos con propiedades inhibidoras de IDO1 disminuyeron la cantidad de kinurenina producida por las células a través de la vía catabólica del triptófano. La toxicidad celular debido al efecto del tratamiento compuesto se midió usando el reactivo CellTiter-Glo® (CTG) (Promega Corporation, Madison, WI), que se basa en la detección luminiscente de ATP, un indicador de células metabólicamente activas.
En la preparación para los ensayos, los compuestos de ensayo se diluyeron en serie 3 veces en DMSO a partir de una concentración máxima típica de 5 mM y se sembraron a 0,5 pl en placas tratadas de cultivo tisular de poliestireno de fondo claro de 384 pocillos con tapa (Greiner Bio-One, Kremsmünster, Austria) para generar curvas de respuesta a la dosis de 11 puntos. Los pocillos de control bajo (0 % de kinurenina o 100 % de citotoxicidad) contenían 0,5 pl de DMSO en presencia de células HeLa no estimuladas (-IFN-y) para el ensayo de espectrometría de masas o 0,5 pl de DMSO en ausencia de células para el ensayo de citotoxicidad, y los pocillos de alto control (100 % de kinurenina o 0 % de citotoxicidad) contenían 0,5 pl de DMSo en presencia de células HeLa estimuladas (+ IFN-y) para los ensayos de espectrometría de masas y de citotoxicidad.
Los reservorios congelados de células HeLa se lavaron y se recuperaron en medio DMEM con alto contenido de glucosa con HEPES (Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA) suplementado con suero fetal bovino certificado (FBS) 10 % en v/v (Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA) y una solución antibiótica de penicilina-estreptomicina a 1X (Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA). Las células se diluyeron a 100.000 células/ml en el medio DMEM suplementado. A los pocillos de control bajo se les añadieron 50 pl de cualquiera de las suspensiones celulares, para el ensayo de espectrometría de masas, o medio solo, para el ensayo de citotoxicidad, en las placas de 384 pocillos del compuesto preparadas previamente, dando como resultado 5.000 células/pocillo o 0 células/pocillo, respectivamente. Se añadió IFN-y a la suspensión celular restante a una concentración final de 10 nM, y se añadieron 50 pl de las células estimuladas a todos los pocillos restantes en las placas de compuesto de 384 pocillos. Las placas, con tapas, se colocaron después en una incubadora a 37 °C con CO2 al 5 % durante 2 días.
Tras la incubación, las placas de 384 pocillos se retiraron de la incubadora y se dejaron equilibrar a temperatura ambiente durante 30 minutos. Para el ensayo de citotoxicidad, se preparó CellTiter-Glo® de acuerdo con las instrucciones del fabricante, y se añadieron 10 pl a cada pocillo de la placa. Después de una incubación de veinte minutos a temperatura ambiente, la luminiscencia se leyó en un lector EnVision® Multilabel (PerkinElmer Inc., Waltham, MA). Para el ensayo de espectrometría de masas, se añadieron 10 pl de sobrenadante de cada pocillo de las placas tratadas con el compuesto a 40 pl de acetonitrilo, que contienen 10 pM de un patrón interno para la normalización, en placas de polipropileno de fondo en V de 384 pocillos (Greiner Bio-One, Kremsmünster, Austria) para extraer los analitos orgánicos. Después de la centrifugación a 2000 rpm durante 10 minutos, se añadieron 10 pl de cada pocillo de las placas de extracción de acetonitrilo a 90 pl de H2O estéril destilada en placas de 384 pocillos, de polipropileno, de fondo en V para el análisis de kinurenina y el estándar interno en RapidFire 300 (Agilent Technologies, Santa Clara, CA) y 4000 QTRAP MS (SCIEX, Framingham, MA). Los datos de MS se integraron utilizando el programa informático RapidFire Integrator de Agilent Technologies, y los datos se normalizaron para el análisis como una proporción de kinurenina con respecto al estándar interno.
Los datos para las respuestas a la dosis en el ensayo de espectrometría de masas se representaron como % de inhibición de IDO1 frente a la concentración del compuesto después de la normalización utilizando la fórmula 100-(100*((U-C2)/(C1-C2))), en la que U era el valor desconocido, C1 era el promedio de los pocillos de control alto (kinurenina al 100 %; 0 % de inhibición) en los pocillos de control y C2 fue el promedio de los pocillos de control bajo (kinurenina al 0 %; 100 % de inhibición). Los datos para las respuestas a la dosis en el ensayo de citotoxicidad se representaron como % de citotoxicidad frente a la concentración del compuesto después de la normalización utilizando la fórmula 100-(100*((U-C2)/(C1-C2))), en la que U era el valor desconocido, C1 era el promedio de los pocillos de control alto (0 % de citotoxicidad) y C2 era el promedio de los pocillos de control bajo (100 % de citotoxicidad).
El ajuste de la curva se realizó con la ecuación y=A+((B-A)/(1+(10x/10C)D)), en la que A era la respuesta mínima, B era la respuesta máxima, C era el log(XC50) y D era la pendiente de la colina. Los resultados para cada compuesto de ensayo se registraron como valores de pCI50 para el ensayo de espectrometría de masas y como valores de pCC50 para el ensayo de citoxicidad (-C en la ecuación anterior).
Ensayo de IDOi en PBMC: Los compuestos de la presente invención se probaron mediante ensayos celulares de alto rendimiento que utilizan la detección de kinurenina mediante espectrometría de masas y citotoxicidad como puntos finales. Para los ensayos de espectrometría de masas y citotoxicidad, las células mononucleares de sangre periférica humana (PBMC) (PB003F; AllCells®, Alameda, CA) se estimularon con interferón-Y (IFN-y) humano (Sigma-Aldrich Corporation, St. Louis, MO) y lipopolisacárido (LPS) de Salmonella minnesota (Invivogen, San Diego, CA) para inducir la expresión de indoleamina 2,3-dioxigenasa (IDO1). Los compuestos con propiedades inhibidoras de IDO1 disminuyeron la cantidad de kinurenina producida por las células a través de la vía catabólica del triptófano. La toxicidad celular debido al efecto del tratamiento compuesto se midió usando el reactivo CellTiter-Glo® (CTG) (Promega Corporation, Madison, WI), que se basa en la detección luminiscente de ATP, un indicador de células metabólicamente activas.
En la preparación para los ensayos, los compuestos de ensayo se diluyeron en serie 3 veces en DMSO a partir de una concentración máxima típica de 5 mM y se sembraron a 0,5 pl en placas tratadas de cultivo tisular de poliestireno de fondo claro de 384 pocillos con tapa (Greiner Bio-One, Kremsmünster, Austria) para generar curvas de respuesta a la dosis de 11 puntos. Los pocillos de control bajo (0 % de kinurenina o 100 % de citotoxicidad) contenían 0,5 pl de DMSO en presencia de PBMC no estimuladas (-IFN-Y/-LPS) para el ensayo de espectrometría de masas o 0,5 pl de DMSO en ausencia de células para el ensayo de citotoxicidad, y los pocillos de alto control (100 % de kinurenina o 0 % de citotoxicidad) contenían 0,5 pl de DMSO en presencia de PBMC estimuladas (+IFN-Y/+LPS) para los ensayos de espectrometría de masas y de citotoxicidad.
Los reservorios congelados de PBMC se lavaron y se recuperaron en medio RPMI 1640 (Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA) suplementado con suero bovino fetal (FBS) inactivado por calor al 10 % en v/v (Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA) y una solución antibiótica de penicilina-estreptomicina a 1X (Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA). Las células se diluyeron a 1.000.000 de células/ml en el medio RPMI 1640 suplementado. 50 pl de cualquiera de las suspensiones celulares, para el ensayo de espectrometría de masas, o medio solo, para el ensayo de citotoxicidad, se añadieron a los pocillos de bajo control, en las placas de 384 pocillos del compuesto preparadas previamente, dando como resultado 50.000 células/pocillo o 0 células/pocillo, respectivamente. Se agregaron IFN-y y LPS a la suspensión celular restante a concentraciones finales de 100 ng/ml y 50 ng/ml respectivamente, y se agregaron 50 pl de las células estimuladas a todos los pocillos restantes en las placas de compuesto de 384 pocillos. Las placas, con tapas, se colocaron después en una incubadora a 37 °C con CO2 al 5 % durante 2 días.
Tras la incubación, las placas de 384 pocillos se retiraron de la incubadora y se dejaron equilibrar a temperatura ambiente durante 30 minutos. Para el ensayo de citotoxicidad, se preparó CellTiter-Glo® de acuerdo con las instrucciones del fabricante, y se añadieron 40 pl a cada pocillo de la placa. Después de una incubación de veinte minutos a temperatura ambiente, la luminiscencia se leyó en un lector EnVision® Multilabel (PerkinElmer Inc., Waltham, MA). Para el ensayo de espectrometría de masas, se añadieron 10 pl de sobrenadante de cada pocillo de las placas tratadas con el compuesto a 40 pl de acetonitrilo, que contienen 10 pM de un patrón interno para la normalización, en placas de polipropileno de fondo en V de 384 pocillos (Greiner Bio-One, Kremsmünster, Austria) para extraer los analitos orgánicos. Después de la centrifugación a 2000 rpm durante 10 minutos, se añadieron 10 pl de cada pocillo de las placas de extracción de acetonitrilo a 90 pl de H2O estéril destilada en placas de 384 pocillos, de polipropileno, de fondo en V para el análisis de kinurenina y el estándar interno en RapidFire 300 (Agilent Technologies, Santa Clara, CA) y 4000 QTRAP MS (SCIEX, Framingham, MA). Los datos de MS se integraron utilizando el programa informático RapidFire Integrator de Agilent Technologies, y los datos se normalizaron para el análisis como una proporción de kinurenina con respecto al estándar interno.
Los datos para las respuestas a la dosis en el ensayo de espectrometría de masas se representaron como % de inhibición de IDO1 frente a la concentración del compuesto después de la normalización utilizando la fórmula 100-(100*((U-C2)/(C1-C2))), en la que U era el valor desconocido, C1 era el promedio de los pocillos de control alto (kinurenina al 100 %; 0 % de inhibición) en los pocillos de control y C2 fue el promedio de los pocillos de control bajo (kinurenina al 0 %; 100 % de inhibición). Los datos para las respuestas a la dosis en el ensayo de citotoxicidad se representaron como % de citotoxicidad frente a la concentración del compuesto después de la normalización utilizando la fórmula 100-(100*((U-C2)/(C1-C2))), en la que U era el valor desconocido, C1 era el promedio de los pocillos de control alto (0 % de citotoxicidad) y C2 era el promedio de los pocillos de control bajo (100 % de citotoxicidad).
El ajuste de la curva se realizó con la ecuación y=A+((B-A)/(1+(10x/10C)D)), en la que A era la respuesta mínima, B era la respuesta máxima, C era el log(XC50) y D era la pendiente de la colina. Los resultados para cada compuesto de ensayo se registraron como valores de pCI50 para el ensayo de espectrometría de masas y como valores de pCC50 para el ensayo de citoxicidad (-C en la ecuación anterior).
Ensayo IDOi en MDDC: Los compuestos de la presente invención se probaron mediante un ensayo celular de alto rendimiento que utiliza la detección de kinurenina mediante espectrometría de masas. Las células dendríticas derivadas de monocitos humanos (MDDC) (AllCells®, Alameda, CA) se estimularon con interferón-Y (IFN-y) humano (Sigma-Aldrich Corporation, St. Louis, MO) y lipopolisacárido (LPS) de Salmonella minnesota (Invivogen, San Diego, CA) para inducir la expresión de indoleamina 2,3-dioxigenasa (IDO1). Los compuestos con propiedades inhibidoras de IDO1 disminuyeron la cantidad de kinurenina producida por las células a través de la vía catabólica del triptófano.
En preparación para el ensayo, los compuestos de ensayo se diluyeron en serie 3 veces en DMSO a partir de una concentración máxima típica de 5 mM y se sembraron a 0,5 |jl en placas tratadas de cultivo tisular de poliestireno de fondo claro de 384 pocillos con tapa (Greiner Bio-One, Kremsmünster, Austria) para generar curvas de respuesta a la dosis de 11 puntos. Los pocillos de control bajo (0 % de kinurenina) contenían 0,5 j l de DMSO en presencia de MDDC no estimulados (-IFN-Y/-LPS), y los pocillos de control alto (100 % de kinurenina) contenían 0,5 j l de DMSO en presencia de MDDC estimulados (+ FN-y/+LPS).
Las reservas congeladas de MDDC se lavaron y recuperaron en medio RPMI 1640 (Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA) suplementado con suero bovino fetal (FBS) inactivado por calor al 10 % en v/v (Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA) y una solución antibiótica de penicilina-estreptomicina a 1X (Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA). Las células se diluyeron a 1.000.000 de células/ml en el medio RPMI 1640 suplementado. Se añadieron 50 j l de la suspensión celular a los pocillos de bajo control, en las placas de 384 pocillos del compuesto preparadas previamente, dando como resultado 50.000 células/pocillo. Se agregaron IFN-y y LPS a la suspensión celular restante a concentraciones finales de 100 ng/ml y 50 ng/ml respectivamente, y se agregaron 50 j l de las células estimuladas a todos los pocillos restantes en las placas de compuesto de 384 pocillos. Las placas, con tapas, se colocaron después en una incubadora a 37 °C con CO2 al 5 % durante 2 días.
Tras la incubación, las placas de 384 pocillos se retiraron de la incubadora y se dejaron equilibrar a temperatura ambiente durante 30 minutos. se añadieron 10 j l de sobrenadante de cada pocillo de las placas tratadas con el compuesto a 40 j l de acetonitrilo, que contienen 10 jM de un patrón interno para la normalización, en placas de polipropileno de fondo en V de 384 pocillos (Greiner Bio-One, Kremsmünster, Austria) para extraer los analitos orgánicos. Después de la centrifugación a 2000 rpm durante 10 minutos, se añadieron 10 j l de cada pocillo de las placas de extracción de acetonitrilo a 90 j l de H2O estéril destilada en placas de 384 pocillos, de polipropileno, de fondo en V para el análisis de kinurenina y el estándar interno en RapidFire 300 (Agilent Technologies, Santa Clara, CA) y 4000 QTRAP MS (SCIEX, Framingham, MA). Los datos de MS se integraron utilizando el programa informático RapidFire Integrator de Agilent Technologies, y los datos se normalizaron para el análisis como una proporción de kinurenina con respecto al estándar interno.
Los datos para las respuestas a la dosis en el ensayo de espectrometría de masas se representaron como % de inhibición de IDO1 frente a la concentración del compuesto después de la normalización utilizando la fórmula 100-(100*((U-C2)/(C1-C2))), en la que U era el valor desconocido, C1 era el promedio de los pocillos de control alto (kinurenina al 100 %; 0 % de inhibición) en los pocillos de control y C2 fue el promedio de los pocillos de control bajo (kinurenina al 0 %; 100 % de inhibición).
El ajuste de la curva se realizó con la ecuación y=A+((B-A)/(1+(10x/10C)D)), en la que A era la respuesta mínima, B era la respuesta máxima, C era el log(XC50) y D era la pendiente de la colina. Los resultados para cada compuesto de ensayo se registraron como valores de pCI50 (-C en la ecuación anterior).
Procedimientos farmacocinéticos in vivo, en rata: Las ratas Wistar Han machos sin ayuno (n = 3) recibieron el artículo de ensayo a dosis de 1 mg/kg por vía i.v. (1 ml/kg) y 5 mg/kg por vía p.o. (5 ml/kg) formulado en un vehículo de dosificación de DMSO/solutol/hidroxipropil p ciclodextrina al 10 % (10:10:80). Para todos los animales, se proporcionó alimento y agua ad libitum. Se extrajeron muestras de sangre de una cánula venosa implantada quirúrgicamente a intervalos cronometrados durante 24 h después de la administración de la dosis, se trataron con EDTA y se centrifugaron para recolectar el plasma para el análisis de LC/MS/MS. Los datos de concentración plasmática-tiempo para ratas individuales se analizaron mediante análisis no comparativo utilizando el programa informático Phoenix ™ WinNonlin® (versión 6.2.1, Pharsight Corp., St. Louis, MO) para generar estimaciones de parámetros farmacocinéticos.
Aunque la invención se ha mostrado y descrito anteriormente con referencia a algunas realizaciones, los expertos en la materia apreciarán fácilmente que los experimentos específicos detallados son solo ilustrativos de la invención.
Referencias
Lohse N, Hansen AB, Pedersen G, Kronborg G, Gerstoft J, S0rensen HT, Vaeth M, Obel N. Survival of persons with and without HIV infection in Denmark, 1995-2005. Ann Intern Med. 16 de enero de 2007; 146(2): 87-95.
Deeks SG. HIV infection, inflammation, immunosenescence, and aging. Annu Rev Med. 2011; 62:141-55.
Hunt PW, Sinclair E, Rodríguez B, Shive C, Clagett B, Funderburg N, Robinson J, Huang Y, Epling L, Martin JN, Deeks SG, Meinert CL, Van Natta ML, Jabs DA, Lederman MM. Gut epithelial barrier dysfunction and innate immune activation predict mortality in treated HIV infection. J Infect Dis. 15 de octubre de 2014; 210(8): 1228-38.
Tenorio AR, Zheng Y, Bosch RJ, Krishnan S, Rodríguez B, Hunt PW, Plants J, Seth A, Wilson CC, Deeks SG, Lederman MM, Landay AL. Soluble markers of inflammation and coagulation but not T-cell activation predict non-AIDS-defining morbid events during suppressive antiretroviral treatment. J Infect Dis. 15 de octubre de 2014; 210(8): 1248-59.
Byakwaga H, Boum Y 2°, Huang Y, Muzoora C, Kembabazi A, Weiser SD, Bennett J, Cao H, Haberer JE, Deeks SG, Bangsberg DR, McCune JM, Martin JN, Hunt PW. The kynurenine pathway of tryptophan catabolism, CD4+ T-cell recovery, and mortality among HIV-infected Ugandans initiating antiretroviral therapy. J Infect Dis. 1 de agosto de 2014; 210(3): 383-91.
Pearson JT, Siu S, Meininger DP, Wienkers LC, Rock DA. In vitro modulation of cytochrome P450 reductase supportedindoleamine 2,3-dioxygenase activity by allosteric effectors cytochrome b(5) and methylene blue. Biochemistry 49, 2647-2656 (2010)

Claims (10)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto que tiene la estructura de fórmula (I):
Figure imgf000042_0001
o su sal farmacéuticamente aceptable, en la que:
X es CH2 o C(O);
R1 es -NR2R3;
R2 es -H o -CH3;
R3 se selecciona entre el grupo que consiste en:
Figure imgf000042_0002
2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que tiene la estructura de fórmula (II):
Figure imgf000042_0003
o su sal farmacéuticamente aceptable.
3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que tiene la estructura de fórmula (III):
Figure imgf000042_0004
o su sal farmacéuticamente aceptable.
4. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que tiene la estructura de fórmula (IV):
Figure imgf000043_0001
o su sal farmacéuticamente aceptable.
5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que tiene la estructura de fórmula (V):
Figure imgf000043_0002
o su sal farmacéuticamente aceptable.
6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que tiene la estructura de fórmula (VI):
Figure imgf000043_0003
7. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 que tiene la estructura de fórmula (VII):
Figure imgf000044_0001
o su sal farmacéuticamente aceptable.
8. Un compuesto o su sal farmacéuticamente aceptable de acuerdo con las reivindicaciones 1-7 para su uso en terapia.
9. Un compuesto o su sal farmacéuticamente aceptable de acuerdo con las reivindicaciones 1-7 para su uso en la prevención y/o tratamiento del VIH; que incluye la prevención de la progresión del SIDA y la inmunosupresión general.
10. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto o su sal farmacéuticamente aceptable de acuerdo con las reivindicaciones 1-7 y al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable.
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Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN108530444B (zh) * 2018-06-11 2021-08-24 药康众拓(江苏)医药科技有限公司 一种新型nampt和ido双重抑制剂及其制备方法和医药用途
IL282535B2 (en) 2018-10-31 2024-05-01 Gilead Sciences Inc Transformed 6-azabanzimidazole compounds as HPK1 inhibitors
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CN110156629A (zh) * 2019-05-30 2019-08-23 广州药本君安医药科技股份有限公司 丙卡巴肼的合成方法
BR112023017582A2 (pt) 2021-03-05 2023-12-05 Univ Basel Composições para o tratamento de doenças ou condições associadas ao ebv
EP4052705A1 (en) 2021-03-05 2022-09-07 Universität Basel Vizerektorat Forschung Compositions for the treatment of ebv associated diseases or conditions

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB427857A (en) 1934-08-02 1935-05-01 Newsum Sons & Company Ltd H A new or improved system of construction for skeleton structures, particularly vehicle body frames and door frames
US4107288A (en) 1974-09-18 1978-08-15 Pharmaceutical Society Of Victoria Injectable compositions, nanoparticles useful therein, and process of manufacturing same
US5145684A (en) 1991-01-25 1992-09-08 Sterling Drug Inc. Surface modified drug nanoparticles
RU2003128075A (ru) 2001-03-19 2005-04-10 Оно Фармасьютикал Ко., Лтд. (Jp) Фармацевтическая композиция, содержащая, в качестве активного ингредиента, производное триазаспиро [5.5] ундекана
PL2559690T3 (pl) * 2005-05-10 2016-09-30 Modulatory 2,3-dioksygenazy indoloaminy i sposoby ich zastosowania
UA91560C2 (ru) 2005-08-31 2010-08-10 Селджин Корпорэйшн Соединения ряда изоиндолимидов, их композиция и применение
CA2743975C (en) * 2008-07-08 2018-09-11 Incyte Corporation 1,2,5-oxadiazoles as inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase
WO2012067663A1 (en) * 2010-11-18 2012-05-24 Glaxo Group Limited Compounds
US10034939B2 (en) * 2012-10-26 2018-07-31 The University Of Chicago Synergistic combination of immunologic inhibitors for the treatment of cancer

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