EA020954B1 - Загруженные лекарственным средством полимерные наночастицы, фармацевтическая композиция и способ лечения рака - Google Patents

Загруженные лекарственным средством полимерные наночастицы, фармацевтическая композиция и способ лечения рака Download PDF

Info

Publication number
EA020954B1
EA020954B1 EA201170038A EA201170038A EA020954B1 EA 020954 B1 EA020954 B1 EA 020954B1 EA 201170038 A EA201170038 A EA 201170038A EA 201170038 A EA201170038 A EA 201170038A EA 020954 B1 EA020954 B1 EA 020954B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
peg
polymer
pmk
nanoparticles
acid
Prior art date
Application number
EA201170038A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201170038A1 (ru
Inventor
Стефен И. Зейл
Грег Трояно
Мир Муккарам Али
Джефф Хркач
Джеймс Райт
Original Assignee
Бинд Терапьютикс, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=41507660&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=EA020954(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Бинд Терапьютикс, Инк. filed Critical Бинд Терапьютикс, Инк.
Publication of EA201170038A1 publication Critical patent/EA201170038A1/ru
Publication of EA020954B1 publication Critical patent/EA020954B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61J—CONTAINERS SPECIALLY ADAPTED FOR MEDICAL OR PHARMACEUTICAL PURPOSES; DEVICES OR METHODS SPECIALLY ADAPTED FOR BRINGING PHARMACEUTICAL PRODUCTS INTO PARTICULAR PHYSICAL OR ADMINISTERING FORMS; DEVICES FOR ADMINISTERING FOOD OR MEDICINES ORALLY; BABY COMFORTERS; DEVICES FOR RECEIVING SPITTLE
    • A61J3/00—Devices or methods specially adapted for bringing pharmaceutical products into particular physical or administering forms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4355—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having oxygen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/436—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having oxygen as a ring hetero atom, e.g. rapamycin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/475—Quinolines; Isoquinolines having an indole ring, e.g. yohimbine, reserpine, strychnine, vinblastine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6905—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a colloid or an emulsion
    • A61K47/6911—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a colloid or an emulsion the form being a liposome
    • A61K47/6915—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a colloid or an emulsion the form being a liposome the form being a liposome with polymerisable or polymerized bilayer-forming substances, e.g. polymersomes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
    • A61K47/6925—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a microcapsule, nanocapsule, microbubble or nanobubble
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
    • A61K47/6921—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere
    • A61K47/6927—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores
    • A61K47/6929—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle
    • A61K47/6931—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer
    • A61K47/6935—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer the polymer being obtained otherwise than by reactions involving carbon to carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamides or polyglycerol
    • A61K47/6937—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit the form being a particulate, a powder, an adsorbate, a bead or a sphere the form being a solid microparticle having no hollow or gas-filled cores the form being a nanoparticle, e.g. an immuno-nanoparticle the material constituting the nanoparticle being a polymer the polymer being obtained otherwise than by reactions involving carbon to carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamides or polyglycerol the polymer being PLGA, PLA or polyglycolic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/107—Emulsions ; Emulsion preconcentrates; Micelles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/51—Nanocapsules; Nanoparticles
    • A61K9/5107—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/513—Organic macromolecular compounds; Dendrimers
    • A61K9/5146—Organic macromolecular compounds; Dendrimers obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, polyamines, polyanhydrides
    • A61K9/5153—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B82—NANOTECHNOLOGY
    • B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
    • B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
    • A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C59/00—Compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C59/01—Saturated compounds having only one carboxyl group and containing hydroxy or O-metal groups
    • C07C59/08—Lactic acid
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S977/00—Nanotechnology
    • Y10S977/70—Nanostructure
    • Y10S977/773—Nanoparticle, i.e. structure having three dimensions of 100 nm or less

Abstract

Настоящее изобретение в целом относится к наночастицам, имеющим от приблизительно 0,2 до приблизительно 35 весовых процентов терапевтического средства и от приблизительно 10 до приблизительно 99 весовых процентов биологически совместимого полимера, такого как диблок-сополимер поли(молочная)кислота-поли(этилен)гликоль. Другие аспекты изобретения включают способы получения такой наночастицы.

Description

Системы, которые доставляют некоторые лекарственные средства пациенту (например, нацеленные на конкретную ткань или тип клеток, или нацеленные на определенную патологически измененную ткань, но не на нормальную ткань) или которые контролируют высвобождение лекарственных средств, давно рассматриваются как полезные.
Например, терапевтические средства, которые включают активное лекарственное средство и которые, например, нацелены на конкретную ткань или тип клеток, или нацелены на определенную патологически измененную ткань, но не на нормальную ткань, могут позволить уменьшить количество лекарственного средства в тканях организма, которые не являются мишенью. Это особенно важно при лечении такого состояния, как рак, где желательно, чтобы цитотоксическая доза лекарственного средства была доставлена в раковые клетки, не уничтожая окружающую неопухолевую ткань. Эффективное нацеливание лекарственного средства может уменьшить нежелательные и иногда угрожающие жизни побочные эффекты, обычные в противораковой терапии. Кроме того, такие терапевтические средства могут позволить лекарственным средствам достигать определенных тканей, которых они иначе были бы неспособны достигнуть.
Терапевтические средства, которые обеспечивают контролируемое высвобождение и/или нацеленную терапию, также должны быть в состоянии доставлять эффективное количество лекарственного средства, которое является известным ограничением в других системах доставки в форме наночастиц. Например, может стоять задача получения систем в форме наночастиц, которые содержали бы подходящее количество лекарственного средства, связанное с каждой наночастицей, при сохранении достаточно малого размера наночастицы для того, чтобы иметь выгодные свойства доставки. Однако несмотря на то что желательно загружать наночастицы большим количеством терапевтического средства, препараты в форме наночастиц, которые используют загрузку лекарственного средства, которая является слишком большой, приводят к наночастицам, которые являются слишком крупными для терапевтического использования на практике.
Соответственно, существует потребность в терапевтических средствах в форме наночастиц и способах получения таких наночастиц, которые были бы способны к доставке терапевтических уровней лекарственного средства для лечения таких заболеваний, как рак, также уменьшая побочные эффекты у пациента.
Сущность изобретения
В одном аспекте изобретение относится к терапевтической наночастице, которая включает активное средство или терапевтическое средство, например, таксан, и один, два или три биологически совместимых полимера. Например, в изобретении раскрыта терапевтическая наночастица, включающая от 5 до 30 вес. процентов терапевтического средства; от 10 до 90 вес. процентов диблок-сополимера полимолочная кислота-полиэтиленгликоль или диблок-сополимера полимолочная-со-полигликолевая кислотаполиэтиленгликоль; и до 75 вес. процентов полимолочной кислоты или сополимера молочной кислоты и гликолевой кислоты. Примеры терапевтических средств включают противоопухолевые средства, такие как таксаны, например, доцетаксел, и могут включать от приблизительно 10 до приблизительно 30 вес. процентов терапевтического средства, например, таксанового средства.
Гидродинамический диаметр раскрытых в изобретении наночастиц может составлять от 70 до 130 нм.
Примеры терапевтических наночастиц могут включать от 40 до 90 вес. процентов диблок-сополимера полимолочная кислота-полиэтиленгликоль или от 40 до 80 вес. процентов диблок-сополимера полимолочная кислота-полиэтиленгликоль. Такие диблок-сополимеры полимолочная кислотаполиэтиленгликоль могут включать полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу приблизительно от 15 до 20 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу от 4 до 6 кДа. Например, раскрытая в изобретении терапевтическая наночастица может включать от приблизительно 70 до приблизительно 90 вес. процентов ПМК-ПЭГ и от приблизительно 15 до приблизительно 25 вес. процентов доцетаксела, или от приблизительно 30 до приблизительно 50 вес. процентов ПМК-ПЭГ, от приблизительно 30 до приблизительно 50 вес. процентов ПМК или ПМГК и от приблизительно 15 до приблизительно 25 вес. процентов доксетаксела. Такая ПМК (полимолочная кислота) может иметь среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 5 до приблизительно 10 кДа. Такая ПМГК (полимолочная-со-гликолевая кислота) может иметь среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 8 до приблизительно 12 кДа.
Раскрытые в изобретении терапевтические наночастицы могут быть стабильными (например, сохраняют в основном большую часть активного средства) в течение по меньшей мере 5 дней при 25°С, например, могут оставаться стабильными более 5 дней ίη νίίτο, например, в растворе сахарозы. В другом варианте осуществления раскрытые в изобретении частицы могут, по существу, немедленно высвобождать менее чем приблизительно 2% или менее чем приблизительно 5%, или даже менее чем приблизительно 10% терапевтического средства в фосфатном буферном растворе при комнатной температуре или при 37°С. В варианте осуществления раскрытые в изобретении наночастицы могут сохранять размер и/или молекулярную массу в течение более чем одной недели или одного месяца или больше.
- 1 020954
В некоторых вариантах осуществления раскрытые в изобретении наночастицы могут дополнительно включать от приблизительно 0,2 до приблизительно 10 вес. процентов ПМК-ПЭГ, функционализированного нацеливающим лигандом, и/или могут включать от приблизительно 0,2 до приблизительно 10 вес. процентов блок-сополимера поли(молочная)кислота-со-поли(гликолевая)кислота-ПЭГ, функционализированного нацеливающим лигандом. Такой нацеливающий лиганд может быть, в некоторых вариантах осуществления, ковалентно связан с ПЭГ, например, связан с ПЭГ через алкиленовый линкер, например, ПМК-ПЭГ-алкилен-СЬ2. Например, раскрытая в изобретении наночастица может включать от приблизительно 0,2 до приблизительно 10 мол. процентов ПМК-ПЭГ-СЬ2 или поли(молочная)кислотасо-поли(гликолевая)кислота-ПЭГ-СЬ2. Следует понимать, что ссылка на ПМК-ПЭГ-СЬ2 или ПМГКПЭГ-СЬ2 относится к группам, которые могут включать алкиленовый линкер (например, С1 -С20, например, (СН2)5), связывающий ПЭГ с СЬ2. Например, раскрытая в изобретении наночастица может быть полимером, выбранным из
где К1 выбран из группы, состоящей из Н и С1-С20 алкильной группы, необязательно замещенной галогеном;
К2 обозначает связь, сложноэфирную связь или амидную связь;
К3 обозначает С1-С10 алкилен или связь;
х равно от 50 до приблизительно 1500, например, от приблизительно 170 до приблизительно 260; у равно от 0 до приблизительно 50, например, у=0; и ζ равно от приблизительно 30 до приблизительно 456, или от приблизительно 30 до приблизительно 200, например, ζ равно от приблизительно 80 до приблизительно 130.
В варианте осуществления терапевтическая наночастица может включать от 5 до 30 вес. процентов терапевтического средства; от 30 до 90 вес. процентов диблок-сополимера полимолочная кислотаполиэтиленгликоль или диблок-сополимера полимолочная-со-полигликолевая кислота-полиэтиленгликоль; до 50 вес. процентов полимолочной кислоты или сополимера молочной кислоты и гликолевой кислоты; и от приблизительно 0,2 до приблизительно 10 вес. процентов, или от приблизительно 0,2 до приблизительно 30 вес. процентов ПМК-ПЭГ-СЬ2 или поли(молочная)кислота-со-поли(гликолевая)кислота-ПЭГ-СЬ2. Например, ПМК-ПЭГ-СЬ2 может включать поли(молочную)кислоту со среднечисловой молекулярной массой от приблизительно 10000 до приблизительно 20000 Да и поли(этилен)гликоль со среднечисловой молекулярной массой от приблизительно 4000 до приблизительно 8000.
Изобретение относится к таким композициям, как композиция, включающая множество раскрытых в изобретении наночастиц и фармацевтически приемлемый зксципиент. В некоторых вариантах осуществления такая композиция может иметь менее чем приблизительно 10 ч./млн (ррт) палладия.
Пример композиции может включать множество полимерных наночастиц, каждая из которых включает от 5 до 30 вес. процентов таксанового средства и от 10 до 90 вес. процентов диблок-сополимера полимолочная кислота-полиэтиленгликоль или диблок-сополимера полимолочная-со-полигликолевая кислота-полиэтиленгликоль; и фармацевтически приемлемый эксципиент, такой как сахароза. Также изобретение относится к составу наночастиц, включающему множество раскрытых в изобретении наночастиц, сахарозу и воду; где, например, весовое отношение наночастицы/сахароза/вода составляет приблизительно 5-10%/10-35%/60-90% (вес./вес./вес.), или приблизительно 4-10%/10-30%/60-90% (вес./вес./вес.).
Изобретение также относится к способу лечения рака, например, рака предстательной железы, включающему введение пациенту эффективного количества терапевтических наночастиц, содержащих от 5 до 30 вес. процентов противоопухолевого средства, такого как доксетаксел; от 30 до 90 вес. процентов диблок-сополимера полимолочная кислота-полиэтиленгликоль или диблок-сополимера полимолочная-со-полигликолевая кислота-полиэтиленгликоль; от 5 до 20 вес. процентов полимолочной кислоты или сополимера молочной кислоты и гликолевой кислоты; и, необязательно, от приблизительно 0,2 до приблизительно 30 вес. процентов (например, от приблизительно 0,2 до приблизительно 20 вес. процентов, или от приблизительно 0,2 до приблизительно 10 вес. процентов) ПМК-ПЭГ-СЬ2 или поли(молочная)кислота-со-поли(гликолевая)кислота-ПЭГ-СЬ2.
- 2 020954
Краткое описание чертежей
Фиг. 1 изображает иллюстрированное представление одного варианта раскрытой в изобретении наночастицы.
Фиг. 2 изображает пример схемы синтеза раскрытой в изобретении наночастицы.
Фиг. 3 представляет собой карту технологического эмульсионного процесса для образования раскрытой в изобретении наночастицы.
Фиг. 4 представляет собой диаграмму раскрытого в изобретении эмульсионного процесса.
Фиг. 5 показывает влияние грубого эмульсионного препарата на размер частиц. Использовали органические вещества плацебо в количестве 30% от твердых частиц, эмульгировали в пропорции 5:1 \У:О. используя стандартную водную фазу (1% холата натрия, 2% бензилового спирта, 4% этилацетата).
Фиг. 6 показывает влияние давления подачи на размер полученных частиц.
Фиг. 7 изображает зависимость размера частиц в масштабе.
Фиг. 8 показывает влияние концентрации твердых частиц на размер частиц.
Фиг. 9 показывает влияние концентрации твердых частиц на загрузку лекарственного средства.
Фиг. 10 показывает влияние гомополимера ПМК с ПМГК-ПЭГ или ПМК-ПЭГ на загрузку ОТХЬ (доцетаксела).
Фиг. 11 показывает влияние гомополимера ПМК как части наночастицы на скорость высвобождения лекарственного средства из наночастицы.
Фиг. 12 показывает влияние цетилового спирта на начальную скорость высвобождения лекарственного средства из наночастицы.
Фиг. 13 показывает высвобождение ίη νίίτο доцетаксела из раскрытой в изобретении наночастицы по сравнению с обычным доцетакселом.
Фиг. 14 показывает влияние концентрации твердых частиц и гомополимера поли(молочной)кислоты на процент загрузки сиролимуса (рапамицина).
Фиг. 15 показывает высвобождение ίη νίίτο сиролимуса в течение времени из раскрытых в изобретении наночастиц.
Фиг. 16 показывает влияние гомополимера поли(молочной)кислоты на процент загрузки темсиролимуса.
Фиг. 17 показывает влияние концентрации твердых частиц на размер частиц, содержащих темсиролимус.
Фиг. 18 показывает высвобождение ίη νίίτο темсиролимуса в течение времени из раскрытых в изобретении наночастиц.
Фиг. 19 показывает свойства высвобождения ίη νίίτο примера раскрытой в изобретении наночастицы, которая включает винорелбин.
Фиг. 20 показывает свойства высвобождения ίη νίίτο раскрытых наночастиц, которые включают винкристин или доцетаксел.
Фиг. 21 изображает фармакокинетические свойства винкристина и винкристина ΡΤΝΡ на крысах.
Фиг. 22 показывает средний объем опухоли после введения раскрытых наночастиц, которые включают доцетаксел, на модели ксенотрансплантата рака молочной железы мыши МХ-1.
Фиг. 23 показывает концентрацию доцетаксела в опухолях мыши в случае рака молочной железы на модели ксенотрансплантата МХ-1 мыши спустя 24 ч после внутривенного введения раскрытых в изобретении наночастиц, которые включают доцетаксел.
Фиг. 24 показывает распределение в опухоли предстательной железы раскрытых в изобретении наночастиц, содержащих доцетаксел, после введения мышам, инокулированным человеческими раковыми клетками предстательной железы ΕΝί'ύιΡ.
Фиг. 25 показывает подавление роста опухоли у мышей, инокулированных человеческими раковыми клетками предстательной железы ΕΝΕαΡ, после введения раскрытых в изобретении наночастиц с доцетакселом.
Подробное описание
Настоящее изобретение в целом относится к полимерным наночастицам, которые включают активное или терапевтическое средство или лекарственное средство, и к способам получения и применения таких терапевтических наночастиц. Как правило, наночастица относится к любой частице, имеющей диаметр менее 1000 нм, например, от приблизительно 10 до приблизительно 200 нм. Раскрытые в изобретении терапевтические наночастицы могут включать наночастицы, имеющие диаметр от приблизительно 60 до приблизительно 120 нм или от приблизительно 70 до приблизительно 130 нм, или от приблизительно 60 до приблизительно 140 нм.
Раскрытые в изобретении наночастицы могут включать от приблизительно 0,2 до приблизительно 35 вес. процентов, от приблизительно 3 до приблизительно 40 вес. процентов, от приблизительно 5 до приблизительно 30 вес. процентов, от 10 до приблизительно 30 вес. процентов, от 15 до 25 вес. процентов или даже от приблизительно 4 до приблизительно 25 вес. процентов активного средства, такого как противоопухолевое средство, например, таксановое средство (например, доцетаксел).
Наночастицы, раскрытые в изобретении, включают один, два, три или более биологически совмес- 3 020954 тимых и/или биоразлагаемых полимеров. Например, рассмотренная в описании наночастица может включать от приблизительно 10 до приблизительно 99 вес. процентов одного или более блок-сополимеров, которые включают биоразлагаемый полимер и полиэтиленгликоль, и от приблизительно 0 до приблизительно 50 вес. процентов биоразлагаемого гомополимера.
В одном варианте осуществления раскрытые терапевтические наночастицы могут включать нацеливающий лиганд, например, низкомолекулярный лиганд Р8МА, эффективный для лечения у нуждающегося в этом пациента заболевания или нарушения, такого как рак предстательной железы. В некоторых вариантах осуществления низкомолекулярный лиганд конъюгирован с полимером, и наночастица включает определенное отношение конъюгированного с лигандом полимера (например, лиганд ПМКПЭГ) к нефункционализированному полимеру (например, ПМК-ПЭГ или ПМГК-ПЭГ). Наночастица может иметь оптимизированное соотношение этих двух полимеров, такое, что эффективное количество лиганда связано с наночастицей для лечения заболевания или нарушения, такого как рак. Например, увеличенная плотность лиганда может увеличить связывание с мишенью (связывание с клеткой/захват мишени), делая наночастицу мишеньспецифической. Альтернативно, определенная концентрация нефункционализированного полимера (например, сополимера нефункционализированный ПМГК-ПЭГ) в наночастице может позволить контролировать воспаление и/или иммуногенность (т.е. способность вызывать иммунный ответ) и обеспечить наночастице период полужизни в кровотоке, который является достаточным для лечения заболевания или нарушения (например, рака предстательной железы). Кроме того, нефункционализированный полимер, в некоторых вариантах осуществления, может снизить скорость клиренса из кровеносной системы через ретикулоэндотелиальную систему (РЭС). Таким образом, нефункционализированный полимер может придать наночастице характеристики, которые могут позволить частице перемещаться в организме после введения. В некоторых вариантах осуществления нефункционализированный полимер может уравновесить высокую в иных случаях концентрацию лигандов, которые могут в иных случаях ускорить клиренс из организма пациента, приводя к ослаблению доставки к клеткам-мишеням.
Например, в настоящем изобретении раскрыты наночастицы, которые могут включать функционализированные полимеры, конъюгированные с лигандом, которые составляют приблизительно 0,1-50, например, 0,1-30, например, 0,1-20, например, 0,1-10 мол. процентов от всей полимерной композиции наночастицы (т.е. функционализированный + нефункционализированный полимер). Также в другом варианте осуществления изобретения раскрыты наночастицы, которые включают полимер, конъюгированный (например, ковалентно с (т.е. через линкер (например, алкиленовый линкер) или связь) с одним или более низкомолекулярными лигандами, причем весовой процент низкомолекулярного лиганда относительно общего полимера составляет от приблизительно 0,001 до 5, например, от приблизительно 0,001 до 2, например, от приблизительно 0,001 до 1.
Также настоящее изобретение относится к полимерным наночастицам, которые включают от приблизительно 2 до приблизительно 20 вес. процентов активного средства. Например, композиция, содержащая такие наночастицы, может быть способна к доставке эффективного количества к, например, целевой области тела пациента.
Например, раскрытые в изобретении наночастицы могут быть способны эффективно связываться или иначе ассоциироваться с биологическим объектом, например, конкретным мембранным компонентом или рецептором поверхности клетки. Нацеливание терапевтического средства (например, на конкретную ткань или тип клеток, на определенную патологически измененную ткань, но не на нормальную ткань, и т.д.) является желательным для лечения тканеспецифических заболеваний, таких как солидные опухоли (например, рак предстательной железы). Например, в отличие от системной доставки цитотоксического противоракового средства, наночастицы, раскрытые в изобретении, могут, по существу, предотвратить уничтожение этим средством здоровых клеток. Дополнительно, раскрытые в изобретении наночастицы могут обеспечить возможность введения более низкой дозы средства (по сравнению с эффективным количеством средства, вводимого без раскрытых наночастиц или составов), что может уменьшить нежелательные побочные эффекты, обычно связанные с традиционной химиотерапией.
Полимеры
В некоторых вариантах осуществления наночастицы по изобретению включают матрицу полимеров и терапевтическое средство. В некоторых вариантах осуществления терапевтическое средство и/или нацеливающая группа (т.е. низкомолекулярный лиганд Р8МА) могут быть связаны с по меньшей мере частью полимерной матрицы. Например, в некоторых вариантах осуществления нацеливающая группа (например, лиганд) может быть ковалентно связана с поверхностью полимерной матрицы. В некоторых вариантах осуществления ковалентная ассоциация опосредуется линкером. Терапевтическое средство может быть связано с поверхностью, инкапсулировано внутри, окружено и/или диспергировано по всей полимерной матрице.
В области доставки лекарственных средств известно широкое разнообразие полимеров и способов для образования из них частиц. В некоторых вариантах осуществления раскрытие направлено к наночастицам по меньшей мере с двумя макромолекулами, из которых первая макромолекула включает первый полимер, связанный с низкомолекулярным лигандом (например, нацеливающей группой); и вторая мак- 4 020954 ромолекула включает второй полимер, который не связан с нацеливающей группой. Наночастица необязательно может включать один или более дополнительных нефункционализированных полимеров.
Любой полимер может быть использован в соответствии с настоящим изобретением. Полимеры могут быть природными или неприродными (синтетическими) полимерами. Полимеры могут быть гомополимерами или сополимерами, включающими два или более мономеров. В терминах последовательности, сополимеры могут быть случайными, блок-полимерами, или включать комбинацию случайных и блокпоследовательностей. Как правило, полимеры в соответствии с настоящим изобретением представляют собой органические полимеры.
Термин полимер в рамках изобретения имеет свое обычное значение, как оно используется в данной области техники, т.е. означает молекулярную структуру, включающую одно или более повторяющихся звеньев (мономеров), связанных ковалентными связями. Повторяющиеся звенья могут быть все одинаковыми или, в некоторых случаях, может быть более одного типа повторяющегося звена, присутствующего в составе полимера. В некоторых случаях полимер может быть получен биологически, т.е. представлять собой биополимер. Неограничивающие примеры включают пептиды или белки. В некоторых случаях в полимере могут также присутствовать дополнительные группы, например, биологические группы, такие как группы, описанные ниже. Если в составе полимера присутствует более одного типа повторяющегося звена, то полимер, как говорят, является сополимером. Следует понимать, что в любом варианте осуществления, в котором используют полимер, используемый полимер может в некоторых случаях быть сополимером. Повторяющиеся звенья, образующие сополимер, могут быть расположены любым образом. Например, повторяющиеся звенья могут быть расположены в случайном порядке, в переменном порядке или в форме блок-сополимера, т.е. включающего одну или более областей, каждая из которых содержит первое повторяющееся звено (например, первый блок), и одну или более областей, каждая из которых содержит второе повторяющееся звено (например, второй блок), и т.д. Блок-сополимеры могут иметь два (диблок-сополимер), три (триблок-сополимер) или более различных блоков.
Раскрытые в изобретении частицы могут включать сополимеры, которые, в некоторых вариантах осуществления, описывают два или более полимеров (таких как описанные в данном документе), которые были связаны друг с другом, обычно ковалентным связыванием этих двух или более полимеров. Таким образом, сополимер может включать первый полимер и второй полимер, которые конъюгированы друг с другом с образованием блок-сополимера, где первый полимер может быть первым блоком блоксополимера, а второй полимер может быть вторым блоком блок-сополимера. Конечно, специалисту понятно, что блок-сополимер может, в некоторых случаях, содержать множество блоков полимера и что блок-сополимер, в рамках изобретения, не ограничен только блок-сополимерами, имеющими только единственный первый блок и единственный второй блок. Например, блок-сополимер может содержать первый блок, включающий первый полимер, второй блок, включающий второй полимер, и третий блок, включающий третий полимер или первый полимер, и т.д. В некоторых случаях, блок-сополимеры могут содержать любое количество первых блоков первого полимера и вторых блоков второго полимера (и в некоторых случаях, третьих блоков, четвертых блоков и т.д.). Кроме того, должно быть отмечено, что блок-сополимеры можно также образовать, в некоторых случаях, из других блок-сополимеров. Например, первый блок-сополимер может быть конъюгирован с другим полимером (который может быть гомополимером, биополимером, другим блок-сополимером и т.д.), образуя новый блок-сополимер, содержащий множество типов блоков, и/или с другими группами (например, с неполимерными группами).
В некоторых вариантах осуществления полимер (например, сополимер, например, блок-сополимер) может быть амфифильным, т.е. имеющим гидрофильную часть и гидрофобную часть, или относительно гидрофильную часть и относительно гидрофобную часть. Гидрофильный полимер может быть полимером, который обычно притягивает воду, а гидрофобный полимер может быть полимером, который обычно отталкивает воду. Гидрофильный или гидрофобный полимер может быть идентифицирован, например, путем получения образца полимера и измерения его краевого угла с водой (обычно полимер будет иметь краевой угол менее 60°, в то время как гидрофобный полимер будет иметь краевой угол более чем приблизительно 60°). В некоторых случаях, гидрофильность двух или более полимеров может быть измерена относительно друг друга, т.е. первый полимер может быть более гидрофильным, чем второй полимер. Например, первый полимер может иметь меньший краевой угол, чем второй полимер.
В одном ряду вариантов осуществления полимер (например, сополимер, например, блок-сополимер), рассмотренный в описании, включает биологически совместимый полимер, т.е. полимер, который обычно не вызывает неблагоприятную реакцию при внедрении или введении в организм пациента, например, без значительного воспаления и/или острого отторжения полимера иммунной системой, например, через Т-клеточный ответ. Соответственно, терапевтические частицы, рассмотренные в описании, могут быть неиммуногенными. Термин неиммуногенный в рамках изобретения относится к эндогенному фактору роста в его нативном состоянии, который обычно не вызывает появления, или вызывает появление только минимальных уровней, циркулирующих антител, Т-клеток или реактивных иммунных клеток и который обычно не вызывает в организме человека иммунный ответ против себя.
Биосовместимость обычно относится к острому отторжению материала по меньшей мере частью иммунной системы, т.е. биологически несовместимый материал, имплантированный в организм пациен- 5 020954 та, вызывает иммунный ответ у пациента, который может быть достаточно тяжелым, таким что отторжение материала иммунной системой нельзя адекватно контролировать, и часто имеет такую степень, что материал должен быть удален из организма пациента. Один простой тест для определения биосовместимости может заключаться в экспонировании полимера к клеткам ίη νίΐτο; биологически совместимые полимеры представляют собой полимеры, которые обычно не приводят к значительной гибели клеток в умеренных концентрациях, например, в концентрациях 50 мкг/106 клеток. Например, биологически совместимый полимер может вызывать менее чем приблизительно 20%-ю гибель клеток при экспонировании к таким клеткам, как фибробласты или эпителиоциты, даже будучи захвачен такими клетками в результате фагоцитоза или иным образом. Неограничивающие примеры биологически совместимых полимеров, которые могут быть использованы в различных вариантах осуществления настоящего изобретения, включают полидиоксанон (ΡΌΟ), полигидроксиалканоат, полигидроксибутират, поли(глицеринсебацинат), полигликолид, полилактид, ПМГК, поликапролактон, или сополимеры или производные, включающие их и/или другие полимеры.
В некоторых вариантах осуществления рассмотренные биологически совместимые полимеры могут быть биоразлагаемыми, т.е. полимер может разлагаться, химически и/или биологически, в физиологической среде, такой как среда организма. В рамках изобретения биоразлагаемые полимеры представляют собой полимеры, которые при введении в клетки расщепляются клеточной машинерией (биологически разлагаемые) и/или химическим процессом, таким как гидролиз (химически разлагаемые), на компоненты, которые клетки могут либо повторно использовать, либо избавляться от них без значительного токсического эффекта на клетки. В одном варианте осуществления биоразлагаемый полимер и его побочные продукты разложения могут быть биологически совместимыми.
Например, рассмотренный полимер может быть полимером, который гидролизуется спонтанно при воздействии воды (например, в организме пациента), полимер может разлагаться при воздействии источника повышенной температуры (например, при температурах приблизительно 37°С). Разложение полимера может происходить с различной скоростью, в зависимости от используемого полимера или сополимера. Например, период полураспада полимера (время, за которое 50% полимера может разложиться на мономеры и/или другие неполимерные группы) может составлять величину порядка дней, недель, месяцев или лет, в зависимости от полимера. Полимеры могут биологически разлагаться, например, за счет ферментативной активности или клеточной машинерии, в некоторых случаях, например, через экспонирование к лизоциму (например, имеющие относительно низкий рН). В некоторых случаях полимеры могут расщепляться на мономеры и/или другие неполимерные группы, которые клетки могут либо повторно использовать, либо избавляться от них без значительного токсического эффекта на клетки (например, полилактид может быть гидролизован с образованием молочной кислоты, полигликолид может быть гидролизован с образованием гликолевой кислоты и т.д.).
В некоторых вариантах осуществления полимеры могут быть полиэфирами, включающими сополимеры, содержащие звенья молочной кислоты и гликолевой кислоты, такие как поли(молочная кислотасо-гликолевая кислота) и поли(лактид-со-гликолид), все вместе называемые в описании как ПМГК; и гомополимеры, содержащие звенья гликолевой кислоты, называемые в описании как ПГК, и звенья молочной кислоты, такие как поли-Ь-молочная-кислота, поли-Э-молочная кислота, поли-О,Ь-молочнаякислота, поли-Ь-лактид, поли-Э-лактид и поли-О,Ь-лактид, все вместе называемые в описании как ПМК. В некоторых вариантах осуществления примеры полиэфиров включают, например, полигидроксикислоты; ПЭГилированные полимеры и сополимеры лактида и гликолида (например, ПЭГилированные ПМК, ПЭГилированные ПГК, ПЭГилированные ПМГК) и их производные. В некоторых вариантах осуществления полиэфиры включают, например, полиангидриды, поли(ортоэфир), ПЭГилированный поли(ортоэфир), поли(капролактон), ПЭГилированный поли(капролактон), полилизин, ПЭГилированный полилизин, поли(этиленимин), ПЭГилированный поли(этиленимин), поли(Ь-лактид-со-Ь-лизин), поли (сериновый эфир), поли(4-гидрокси-Ь-пролиновый эфир), поли[а-(4-аминобутил)-Ь-гликолевая-кислота] и их производные.
В некоторых вариантах осуществления полимером может быть ПМГК. ПМГК представляет собой биологически совместимый и биоразлагаемый сополимер молочной кислоты и гликолевой кислоты, и различные формы ПМГК могут быть охарактеризованы отношением молочная кислота:гликолевая кислота. Молочной кислотой может быть Ь-молочная кислота, Ό-молочная кислота или Ό,Ό-молочная кислота. Скорость разложения ПМГК может быть отрегулирована путем изменения отношения молочная кислота-гликолевая кислота. В некоторых вариантах осуществления ПМГК, которая используется в соответствии с настоящим изобретением, может быть охарактеризована отношением молочная кислота:гликолевая кислота приблизительно 85:15, приблизительно 75:25, приблизительно 60:40, приблизительно 50:50, приблизительно 40:60, приблизительно 25:75 или приблизительно 15:85. В некоторых вариантах осуществления отношение мономеров молочной кислоты к мономерам гликолевой кислоты в полимере частицы (например, блок-сополимер ПМГК или блок-сополимер ПМГК-ПЭГ) может быть выбрано таким образом, чтобы оптимизировать различные параметры, такие как водопоглощение, высвобождение терапевтического средства и/или кинетика разложения полимера.
В некоторых вариантах осуществления полимеры могут быть одним или более акриловыми поли- 6 020954 мерами. В некоторых вариантах осуществления акриловые полимеры включают, например, сополимеры акриловой кислоты и метакриловой кислоты, сополимеры метилметакрилата, этоксиэтилметакрилаты, цианоэтилметакрилат, сополимер аминоалкилметакрилата, поли(акриловую кислоту), поли(метакриловую кислоту), сополимер метакриловой кислоты и акриламида, поли(метилметакрилат), полиакриламид поли(метакриловой кислоты), сополимер аминоалкилметакрилата, сополимеры глицидилметакрилата, полицианоакрилаты и комбинации, содержащие один или более указанных полимеров. Акриловый полимер может содержать полностью полимеризованные сополимеры эфиров акриловой и метакриловой кислоты с низким содержанием групп четверичного аммония.
В некоторых вариантах осуществления полимеры могут быть катионными полимерами. Как правило, катионные полимеры могут конденсировать и/или защищать отрицательно заряженные нити нуклеиновых кислот (например, ДНК, РНК или их производные). Аминосодержащие полимеры, такие как поли(лизин), полиэтиленимин (ПЭИ) и дендримеры поли(амидоамина), рассматриваются как пригодные для использования, в некоторых вариантах осуществления, в раскрытой в изобретении частице.
В некоторых вариантах осуществления полимеры могут быть разлагаемыми полиэфирами, несущими катионные боковые цепи. Примеры этих полиэфиров включают поли(Ь-лактид-со-Ь-лизин), поли(сериновый эфир), поли(4-гидрокси-Ь-пролиновый эфир).
Частицы, раскрытые в изобретении, могут содержать или могут не содержать ПЭГ. Кроме того, некоторые варианты осуществления могут быть направлены на сополимеры, содержащие поли(сложный эфир-простой эфир), например, полимеры, имеющие повторяющиеся звенья, связанные сложноэфирными связями (например, связями К-С(О)-О-К') и простыми эфирными связями (например, связями К-О-К'). В некоторых вариантах осуществления изобретения биоразлагаемый полимер, такой как гидролизуемый полимер, содержащий группы карбоновой кислоты, может быть конъюгирован с повторяющимися звеньями поли(этиленгликоля), образуя поли(сложный эфир-простой эфир). Полимер (например, сополимер, например, блок-сополимер), содержащий повторяющиеся звенья поли(этиленгликоля), может также быть назван как ПЭГилированный полимер.
Согласно изобретению ПЭГ может иметь окончание и включать концевую группу, например, когда ПЭГ не конъюгирован с лигандом. Например, ПЭГ может заканчиваться гидроксильной группой, метоксигруппой или другой алкоксильной группой, метильной или другой алкильной группой, арильной группой, карбоновой кислотой, амином, амидом, ацетильной группой, гуанидиногруппой или имидазолом. Другие рассмотренные концевые группы включают азид, алкин, малеимид, альдегид, гидразид, гидроксиламин, алкоксиамин или тиольные группы.
Специалистам в данной области техники известны способы и методики ПЭГилирования полимера, например, с использованием БОС (гидрохлорида 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида) и ΝΗ8 (Ν-гидроксисукцинимида) для введения полимера в реакцию с группой ПЭГ, заканчивающейся амином, методами полимеризации с раскрытием кольца (ΚΘΜΡ) или т.п.
В одном варианте осуществления молекулярная масса полимеров может быть оптимизирована для эффективного лечения, как раскрыто в изобретении. Например, молекулярная масса полимера может влиять на скорость разложения частицы (как в случае, когда молекулярная масса биоразлагаемого полимера может быть отрегулирована), растворимость, водопоглощение и кинетику высвобождения лекарственного средства. Например, молекулярная масса полимера может быть отрегулирована таким образом, чтобы частица подвергалась биоразложению в организме получающего лечение пациента в течение приемлемого промежутка времени (в пределах от нескольких ч до 1-2 недель, 3-4 недель, 5-6 недель, 7-8 недель и т.д.). Раскрытая в изобретении частица может, например, включать диблок-сополимер ПЭГ и ПМ(Г)К, в котором, например, часть ПЭГ может иметь среднечисловую молекулярную массу приблизительно 1000-20000, например, приблизительно 2000-20000, например, от приблизительно 2 до приблизительно 10000, и часть ПМ(Г)К может иметь среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 5000 до приблизительно 20000, или приблизительно 5000-100000, например, приблизительно 2000070000, например, приблизительно 15000-50000.
Например, пример раскрытой в изобретении терапевтической наночастицы включает от приблизительно 10 до приблизительно 99 вес. процентов сополимера поли(молочная)кислота-поли(этилен) гликоль или сополимера поли(молочная)-со-поли(гликолевая)кислота-поли(этилен)гликоль, или от приблизительно 20 до приблизительно 80 вес. процентов, от приблизительно 40 до приблизительно 80 вес. процентов, или от приблизительно 30 до приблизительно 50 вес. процентов, или от приблизительно 70 до приблизительно 90 вес. процентов сополимера поли(молочная)кислота-поли(этилен) гликоль или сополимера поли(молочная)-со-поли(гликолевая)кислота-поли(этилен)гликоль. Примеры сополимеров поли(молочная)кислота-поли(этилен)гликоль могут включать среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 15 до приблизительно 20 кДа или от приблизительно 10 до приблизительно 25 кДа поли(молочной)кислоты и среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 4 до приблизительно 6, или от приблизительно 2 до приблизительно 10 кДа поли(этилен)гликоля.
Раскрытые в изобретении наночастицы могут необязательно включать от приблизительно 1 до приблизительно 50 вес. процентов поли(молочной)кислоты или поли(молочной)кислоты-со-поли(гликолевой)кислоты (которая не включает ПЭГ), или может необязательно включать от приблизительно 1 до при- 7 020954 близительно 50 вес. процентов, или от приблизительно 10 до приблизительно 50 вес. процентов, или от приблизительно 30 до приблизительно 50 вес. процентов поли(молочной) кислоты или поли(молочной)кислоты-со-поли(гликолевой)кислоты. Например, поли(молочная) или поли(молочная)-со-поли(гликолевая)кислота может иметь среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 5 до приблизительно 15 кДа, или от приблизительно 5 до приблизительно 12 кДа. Пример ПМК может иметь среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 5 до приблизительно 10 кДа. Пример ПМГК может иметь среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 8 до приблизительно 12 кДа.
В некоторых вариантах осуществления полимеры наночастиц могут быть конъюгированы с липидом. Полимер может быть, например, оканчивающимся липидом ПЭГ. Как описано ниже, липидная часть полимера может быть использована для самосборки с другим полимером, облегчая образование наночастицы. Например, гидрофильный полимер может быть конъюгирован с липидом, который будет сам собираться с гидрофобным полимером.
В некоторых вариантах осуществления липиды представляют собой масла. Как правило, любое масло, известное в данной области техники, может быть конъюгировано с полимерами, используемыми в изобретении. В некоторых вариантах осуществления масло содержит одну или более групп жирной кислоты или ее солей. В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты может включать расщепляемые длинноцепочечные (например, С8-С50), замещенные или незамещенные углеводороды. В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты может быть С10-С20 жирной кислотой или ее солью. В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты может быть С15-С20 жирной кислотой или ее солью. В некоторых вариантах осуществления жирная кислота может быть ненасыщенной. В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты может быть мононенасыщенной. В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты может быть полиненасыщенной. В некоторых вариантах осуществления двойная связь группы ненасыщенной жирной кислоты может находиться в цис-конформации. В некоторых вариантах осуществления двойная связь ненасыщенной жирной кислоты может быть в транс-конформации.
В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты может представлять собой одну или более из числа масляной, капроновой, каприловой, каприновой, лауриновой, миристиновой, пальмитиновой, стеариновой, арахидиновой, бегеновой или лигноцериновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления группа жирной кислоты может представлять собой одну или более из числа пальмитолеиновой, олеиновой, вакценовой, линолевой, альфа-линоленовой, гамма-линолевой, арахидоновой, гадолиновой, эйкозапентаеновой, докозагексаеновой или эруковой кислоты.
В конкретном варианте осуществления липид имеет формулу V
и ее соли, где каждый К обозначает, независимо, С1-30 алкил. В одном варианте формулы V липид представляет собой 1,2-дистеароил-8п-глицеро-3-фосфоэтаноламин (ΌδΡΕ) и его соли, например, натриевую соль.
В одном варианте осуществления необязательные нацеливающие малые молекулы группы связаны, например, ковалентно связаны, с липидным компонентом наночастицы. Например, изобретение относится к наночастице, включающей терапевтическое средство, полимерную матрицу, содержащую функционализированный и нефункционализированный полимеры, и липид, и низкомолекулярный нацеливающий лиганд ΡδΜΑ, причем нацеливающий лиганд связан, например, ковалентно связан, с липидным компонентом наночастицы. В одном варианте осуществления липидный компонент, который связан с низкомолекулярной нацеливающей группой, имеет формулу V. В другом варианте осуществления изобретение относится к мишень-специфической наночастице, включающей терапевтическое средство, полимерную матрицу, ΌδΡΕ и низкомолекулярный нацеливающий лиганд ΡδΜΑ, причем лиганд связан, например, ковалентно связан, с ΌδΡΕ. Например, наночастица по изобретению может включать полимерную матрицу, содержащую ПМГК-^δΡΕ-ПЭГ-лиганд.
Рассматриваемая в описании наночастица может включать отношение связанного с лигандом полимера к нефункционализированному полимеру, эффективное для лечения рака предстательной железы, причем гидрофильный, связанный с лигандом полимер конъюгирован с липидом, который самособирается с гидрофобным полимером таким образом, что гидрофобные и гидрофильные полимеры, которые составляют наночастицу, не связаны ковалентно. Самосборка относится к процессу спонтанной сборки структуры более высокого порядка, которая основана на естественном притяжении компонентов структуры более высокого порядка (например, молекулы) друг к другу. Это обычно происходит посредством случайных движений молекул и образования связей, основанных на размере, форме, составе или химических свойствах. Например, такой способ включает получение первого полимера, который вводят в реак- 8 020954 цию с липидом с образованием конъюгата полимер/липид. Конъюгат полимер/липид затем вводят в реакцию с низкомолекулярным лигандом, чтобы получить связанный с лигандом конъюгат полимер/липид; и смешивание связанного с лигандом конъюгата полимер/липид со вторым, нефункционализированным полимером и терапевтическим средством; с получением, таким образом, наночастицы. В некоторых вариантах осуществления первый полимер представляет собой ПЭГ, такой, что образуется завершенный липидом ПЭГ. В одном варианте осуществления липид имеет формулу V, например, представляет собой 2-дистеароил-кп-глицеро-3-фосфоэтаноламин (Ό8ΡΕ) и его соли, например, натриевую соль. Завершенный липидом ПЭГ может затем, например, быть смешан с ПМГК с образованием наночастицы.
Нацеливающие группы
Изобретение относится к наночастицам, которые могут включать необязательную нацеливающую группу, т.е. группу, способную связываться или иным образом ассоциироваться с биологическим объектом, например, мембранным компонентом, рецептором поверхности клетки, простатоспецифическим мембранным антигеном или т.п. Нацеливающие группы, присутствующие на поверхности частицы, могут обеспечить частице возможность оставаться локализованной на конкретном участке нацеливания, например, опухоли, участке болезни, ткани, органе, типе клеток и т.д. Также, наночастица может быть специфичной к мишени. Лекарственное средство или другая полезная загрузка может затем, в некоторых случаях, высвобождаться из частицы и взаимодействовать локально с конкретным участком нацеливания.
В одном варианте осуществления раскрытая в изобретении наночастица включает нацеливающую группу, которая является низкомолекулярным лигандом, например, низкомолекулярным лигандом Ρ8ΜΑ. Термин связывается, или связывание, в рамках изобретения, относится к взаимодействию между соответствующей парой молекул или их частей, которые проявляют взаимное сродство или связывающую способность, обычно вследствие специфического или неспецифического связывания или взаимодействия, включая, но не ограничиваясь ими, биохимические, физиологические и/или химические взаимодействия. Биологическое связывание определяет тип взаимодействия, которое происходит между парами молекул, включая белки, нуклеиновые кислоты, гликопротеиды, углеводы, гормоны или т.п. Термин партнер связывания относится к молекуле, которая может подвергаться связыванию с конкретной молекулой. Специфическое связывание относится к молекулам, таким как полинуклеотиды, которые могут связываться с партнером связывания или распознавать партнера связывания (или ограниченное число партнеров связывания) в значительно более высокой степени, чем в случае других подобных биологических объектов. В одном ряду вариантов осуществления нацеливающая группа обнаруживает сродство (измеренное через константу диссоциации) менее чем приблизительно 1 мкМ, по меньшей мере приблизительно 10 мкМ или по меньшей мере приблизительно 100 мкМ.
Например, нацеливающая часть может заставить частицы локализоваться на опухоли (например, солидной опухоли), болезненном участке, ткани, органе, типе клеток и т.д. в организме пациента, в зависимости от используемой нацеливающей группы. Например, низкомолекулярный лиганд Ρ8ΜΑ может локализоваться на солидной опухоли, например, опухоли молочной железы или опухоли предстательной железы, или на раковых клетках. Пациентом может быть человек или животное. Примеры пациентов включают, но не ограничиваются ими, млекопитающее, такое как собака, кошка, лошадь, осел, кролик, корова, свинья, овца, коза, крыса, мышь, морская свинка, хомяк, примат, человек или т.п.
Рассматриваемые в описании нацеливающие группы включают малые молекулы. В некоторых вариантах осуществления термин малая молекула относится к органическим соединениям, имеют ли они природное происхождение или являются искусственно созданными (например, путем химического синтеза), которые имеют относительно низкую молекулярную массу и которые не являются белками, полипептидами или нуклеиновыми кислотами. Малые молекулы обычно имеют множество углеродуглеродных связей. В некоторых вариантах осуществления малые молекулы имеют размер менее чем приблизительно 2000 г/моль. В некоторых вариантах осуществления малые молекулы имеют размер менее чем приблизительно 1500 г/моль или менее чем приблизительно 1000 г/моль. В некоторых вариантах осуществления малые молекулы имеют размер менее чем приблизительно 800 г/моль или менее чем приблизительно 500 г/моль, например, от приблизительно 100 г/моль до приблизительно 600 г/моль, или от приблизительно 200 г/моль до приблизительно 500 г/моль.
Например, нацеливающая группа может нацеливать на опухоли предстательной железы, например, группа-мишень может быть ингибитором пептидазы Ρ8ΜΑ. Эти группы также называют в описании как низкомолекулярные лиганды Ρ8ΜΑ. При сравнении с экспрессией в нормальных тканях, экспрессия простатоспецифического мембранного антигена (Ρ8ΜΑ) по меньшей мере в 10 раз выше в злокачественной ткани предстательной железы относительно нормальной ткани, и уровень экспрессии Ρ8ΜΑ далее положительно регулируется по мере того, как болезнь переходит в метастатические фазы (8йуег с1 а1. 1997, С1ш. Сапсег Кек., 3:81).
- 9 020954
В некоторых вариантах осуществления низкомолекулярный лиганд Р8МЛ представляет собой соединение формулы I, II, III или IV
и их энантиомеры, стереоизомеры, ротамеры, таутомеры, диастереомеры или рацематы; где т и η означают, каждый независимо, 0, 1, 2 или 3; р равно 0 или 1;
К1, К2, К4 и К5, каждый независимо, выбраны из группы, состоящей из замещенного или незамещенного алкила (например, С1-10-алкила, С1-6-алкила или С1-4-алкила), замещенного или незамещенного арила (например, фенила или пиридинила) и любой их комбинации; и К3 обозначает Н или С1-6-алкил (например, СН3).
Для соединений формул I, II, III и IV К1, К2, К4 или К5 включают точки присоединения к наночастице, например, точку присоединения к полимеру, который является частью раскрытой в изобретении наночастицы, например, ПЭГ. Точка присоединения может быть образована ковалентной связью, ионной связью, водородной связью, связью, образуемой адсорбцией, включая хемосорбцию и физическую адсорбцию, связью, образуемой связями Ван-дер-Ваальса, или дисперсионными силами. Например, если К1, К2, К4 или К5 определены как анилин или группа С1-6-алкил-ПН2, то любой атом водорода (например, водород аминогруппы) этих функциональных групп может быть удален таким образом, что низкомолекулярный лиганд Р8МЛ становится ковалентно связанным с полимерной матрицей (например, ПЭГ-блок полимерной матрицы) наночастицы. В рамках изобретения термин ковалентная связь относится к связи между двумя атомами, образуемой благодаря совместному использованию по меньшей мере одной пары электронов.
В конкретных вариантах формул I, II, III или IV К1, К2, К4 и К5, каждый независимо, обозначают С1-6алкил или фенил, или любую комбинацию С1-6-алкила или фенила, которые независимо замещены одной или более группами ОН, §Н, ΝΗ2 или СО2Н, и причем алкильная группа может быть прервана Ν(Η), δ или О. В другом варианте осуществления К1, К2, К4 и К5, каждый независимо, обозначают СН2-Рй, (СН2)2-§Н, СН2-§Н, (ΟΗ2)2ΟΗ)(ΝΗ2^Ο2Η, ^^(^(N^^0^, СН(Й1Н2)СН2СО2Н, (СН2)2С(Н)(8Н)СО2Н, СН2^(Н)-Рй, О-СН2Рй или О-(СН2)2-Рй, причем каждый Рй может быть независимо замещен одной или более группами ОН, ΝΒ2, СО2Н или §Н. Для этих формул группы ΝΒ2, ОН или §Н служат точкой ковалентного присоединения к наночастице (например, -ЖН)-ПЭГ, -О-ПЭГ или -δ-ПЭГ).
В другом варианте осуществления низкомолекулярный лиганд Р8МЛ выбран из группы, состоящей из
и их энантиомеров, стереоизомеров, ротамеров, таутомеров, диастереомеров или рацематов, и где группы Ν42, ОН или §Н служат точкой ковалентного присоединения к наночастице (например, N(4)ПЭГ, -О-ПЭГ или -δ-ПЭГ).
В другом варианте осуществления низкомолекулярный лиганд Р8МЛ выбран из группы, состоящей из
и их энантиомеров, стереоизомеров, ротамеров, таутомеров, диастереомеров или рацематов, где К независимо выбран из группы, состоящей из ΝΒ2, 8Н, ОН, СО2Н, С1-6-алкила, который замещен ΝΒ2, 8Н, ОН или СО2Н, и фенила, который замещен ΝΒ2, 8Н, ОН или СО2Н, и где К служит точкой ковалентного присоединения к наночастице (например, -^Н)-ПЭГ, -δ-ПЭГ, -О-ПЭГ или СО2-ПЭГ).
- 10 020954
В другом варианте осуществления низкомолекулярный лиганд Р8МА выбран из группы, состоящей из
и их энантиомеров, стереоизомеров, ротамеров, таутомеров, диастереомеров или рацематов, где группы ΝΗ2 или СО2Н служат точкой ковалентного присоединения к наночастице (например, -Ν(Η)-Π3Γ или СО2-ПЭГ). Эти соединения могут быть дополнительно замещены ΝΗ2, 8Η, ОН, СО2Н, С1-6-алкилом, который замещен ΝΗ2, 8Η. ОН или СО2Н, или фенилом, который замещен ΝΗ2, 8Η. ОН или СО2Н, причем эти функциональные группы могут также служить точкой ковалентного присоединения к наночастице.
В другом варианте осуществления низкомолекулярный лиганд Р8МЛ представляет собой со»н
и его энантиомеры, стереоизомеры, ротамеры, таутомеры, диастереомеры или рацематы, где п=1, 2, 3, 4, 5 или 6. Для этого лиганда группа ΝΗ2 служит точкой ковалентного присоединения к наночастице (например, Х(Н)-ПЭГ).
В другом варианте осуществления низкомолекулярный лиганд Р8МЛ представляет собой
и их знантиомеры, стереоизомеры, ротамеры, таутомеры, диастереомеры или рацематы. В частности, соединение бутиламина имеет преимущество, заключающееся в легкости синтеза, особенно ввиду отсутствия бензольного кольца. Кроме того, вне связи с теорией, соединение бутиламина вероятно расщепляется на природные молекулы (т.е. лизин и глутаминовую кислоту), таким образом минимизируя токсичность.
В некоторых вариантах осуществления нацеливающие группы в форме малых молекул, которые могут быть использованы в отношении клеток-мишеней, связанных с солидными опухолями, такими как опухоли предстательной железы или молочной железы, включают ингибиторы Р8МЛ пептидазы, такие как 2-РМРА, СР15232, УА-033, фенилалкилфосфонамидаты и/или их аналоги и производные. В некоторых вариантах осуществления нацеливающие группы в форме малых молекул, которые могут быть использованы в отношении клеток-мишеней, связанных с опухолями предстательной железы, включают производные тиола и индолтиола, такие как 2-МРРА и производные 3-(2-меркаптоэтил)-1Н-индол-2карбоновой кислоты. В некоторых вариантах осуществления нацеливающие группы в форме малых молекул, которые могут быть использованы в отношении клеток-мишеней, связанных со злокачественными опухолями предстательной железы, включают гидроксаматные производные. В некоторых вариантах осуществления нацеливающие группы в форме малых молекул, которые могут быть использованы в отношении клеток-мишеней, связанных со злокачественными опухолями предстательной железы, включают ингибиторы на основе РВЭА и мочевины, такие как Ζ1 43, Ζ1 11, Ζ1 17, Ζ1 38 и/или их аналоги и производные, средства нацеливания на рецептор андрогена (АКТА), полиамины, такие как путресцин, спермин и спермидин, ингибиторы фермента глутаматкарбоксилазы II (ОСРП), также известного как ΝΑΑΟпептидаза или ΝΛΛΕ·ΛΟ;·γϊ;·ι.
В другом варианте осуществления настоящего изобретения нацеливающая группа может быть лигандом, который имеет мишенью рецепторы Исг2, ЕОРК или ίοΐΐ.
Например, рассматриваемые в описании нацеливающие группы могут включать нуклеиновую кислоту, полипептид, гликопротеин, углевод или липид. Например, нацеливающая группа может быть группой нацеливания нуклеиновой кислоты (например, аптамера, например, А10 аптамера), которая связывается с маркером, специфичным в отношении определенного типа клеток. Как правило, аптамер представляет собой олигонуклеотид (например, ДНК, РНК или их аналог или производное), который связывается с конкретной мишенью, такой как полипептид. В некоторых вариантах осуществления нацеливающая группа может быть природным или синтетическим лигандом рецептора поверхности клетки, например, фактором роста, гормоном, ЛПНП, трансферрином и т.д. Нацеливающая группа может быть
- 11 020954 антителом, каковой термин включает фрагменты антитела, характерные части антител, нацеливающие группы одиночной цепи могут быть идентифицированы, например, с использованием такой методики, как фаговый дисплей.
Нацеливающие группы могут быть нацеливающим пептидом или нацеливающим пептидомиметиком длиной приблизительно до 50 остатков. Например, нацеливающие группы могут включать аминокислотную последовательность АКЕКС, СКЕКА, ЛКУЪрКЬМ или ΑΧΥΣΖΖΕΝ, где X и Ζ являются варьирующими аминокислотами, или их консервативные варианты или пептидомиметики. В конкретных вариантах осуществления нацеливающая группа представляет собой пептид, который включает аминокислотную последовательность АКЕКС, СКЕКА, ΑΡΥΕ-ΟΚΗΝ или ΑΧΥΣΖΖΕΝ, где X и Ζ являются варьирующими аминокислотами, и имеет длину менее 20, 50 или 100 остатков. Пептид СКЕКА (Су8 Агд С1и Ьу8 А1а) или пептидомиметик этого пептида, или октапептид ΑΧΥΕΖΖΕΝ также рассматриваются в качестве нацеливающих групп, а также пептиды, или их консервативные варианты или пептидомиметики, которые связываются или образуют комплекс с коллагеном IV, или с базальной мембраной тканимишени (например, базальная мембрана кровеносного сосуда), могут быть использованы в качестве нацеливающей группы. Примеры нацеливающих групп включают пептиды, которые имеют мишенью 1САМ (молекула межклеточной адгезии, например, 1САМ-1).
Нацеливающие группы, раскрытые в изобретении, обычно конъюгированы с раскрытым в изобретении полимером или сополимером (например, ПМК-ПЭГ), и такой конъюгированный полимер может образовывать часть раскрытой в изобретении наночастицы. Например, раскрытая терапевтическая наночастица может необязательно включать от приблизительно 0,2 до приблизительно 10 вес. процентов ПМК-ПЭГ или ПМГК-ПЭГ, причем ПЭГ функционализирован нацеливающим лигандом (например, ПМК-ПЭГ-лиганд). Рассматриваемые в описании терапевтические наночастицы могут включать, например, от приблизительно 0,2 до приблизительно 10 мол. процентов ПМК-ПЭГ-СЬ2 или поли(молочная)кислота-со-поли(гликолевая)кислота-ПЭГ-СЬ2. Например, ПМК-ПЭГ-СЬ2 может включать среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 10 до приблизительно 20 кДа и среднечисловую молекулярную массу от приблизительно 4000 до приблизительно 8000.
Такой нацеливающий лиганд может быть, в некоторых вариантах осуществления, ковалентно связан с ПЭГ, например, связан с ПЭГ через алкиленовый линкер, например, ПМК-ПЭГ-алкилен-СЬ2. Например, раскрытая в изобретении наночастица может включать от приблизительно 0,2 до приблизительно 10 мол. процентов ПМК-ПЭГ-СЬ2 или поли(молочная)кислота-со-поли(гликолевая) кислота-ПЭГСЬ2. Следует понимать, что ссылка на ПМК-ПЭГ-СЬ2 или ПМГК-ПЭГ-СЬ2 относится к группам, которые могут включать алкиленовый линкер (например, С1-С20, например, (СН2)5), связывающий ПМК-ПЭГ или ПМГК-ПЭГ с СЬ2.
Примеры полимерных конъюгатов включают
где Ρι выбран из группы, состоящей из Н и С1-С20 алкильной группы, необязательно замещенной одним, двумя, тремя или более атомами галогена;
К2 обозначает связь, сложноэфирную связь или амидную связь;
К3 обозначает С1-С10 алкилен или связь;
х равно от 50 до приблизительно 1500 или от приблизительно 60 до приблизительно 1000; у равно от 0 до приблизительно 50; и ζ равно от приблизительно 30 до приблизительно 200 или от приблизительно 50 до приблизительно
180.
В другом варианте осуществления х означает от 0 до приблизительно 1 молярной доли; и у может означать от приблизительно 0 до приблизительно 0,5 молярной доли. В примере варианта осуществления х+у может составлять от приблизительно 20 до приблизительно 1720, и/или ζ может составлять от приблизительно 25 до приблизительно 455.
- 12 020954
Например, раскрытая в изобретении наночастица может включать полимерную нацеливающую группу, представленную формулой VI где η равно от приблизительно 200 до приблизительно 300, например, приблизительно 222, и т равно от приблизительно 80 до приблизительно 130, например, приблизительно 114. Раскрытые в изобретении наночастицы, в некоторых вариантах осуществления, могут включать от приблизительно 0,1 до приблизительно 4 вес. процентов, например, полимерного конъюгата формулы VI, или от приблизительно 0,1 до приблизительно 2 вес. процентов, или от приблизительно 0,1 до приблизительно 1 вес. процентов, или от приблизительно 0,2 до приблизительно 0,8 вес. процентов, например, полимерного конъюгата формулы VI.
В примере варианта осуществления раскрытая в изобретении наночастица включает наночастицу, имеющую конъюгат ПМК-ПЭГ-алкилен-СЬ2, где, например, ПМК имеет среднечисловую молекулярную массу приблизительно 16000 Да, ПЭГ имеет молекулярную массу приблизительно 5000 Да и, например, алкиленовый линкер представляет собой Οι-Ο20 алкилен, например, (СН2)5.
Например, раскрытая в изобретении наночастица может включать конъюгат, представленный формулой где у равно приблизительно 222 и ζ равно приблизительно 114.
Раскрытый в изобретении полимерный конъюгат может быть образован с использованием любой подходящей методики конъюгирования. Например, два соединения, такие как нацеливающая группа и биологически совместимый полимер, биологически совместимый полимер и поли(этиленгликоль) и т.д., можно конъюгировать вместе, используя такие методики, как химия ΕΌΟ-ΝΗδ (гидрохлорид 1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимида и Ν-гидроксисукцинимид) или реакция, включающая малеимид или карбоновую кислоту, которая может быть конъюгирована с одним концом тиола, амина или аналогично функционализированного простого полиэфира. Конъюгация таких полимеров, например, конъюгация сложного поли(эфира) и простого поли(эфира) с образованием поли(сложный эфир-простой эфир), может быть осуществлена в органическом растворителе, таком как, но не ограничиваясь ими, дихлорметан, ацетонитрил, хлороформ, диметилформамид, тетрагидрофуран, ацетон или т.п. Конкретные условия реакции могут быть определены специалистом с использованием не более чем обычного экспериментирования.
В другом ряду вариантов осуществления реакция конъюгации может быть осуществлена путем введения полимера, который содержит функциональную группу карбоновой кислоты (например, соединение поли(сложный эфир-простой эфир)), в реакцию с полимером или другой группой (такой как нацеливающая группа), включающей амин. Например, нацеливающая группа, такая как низкомолекулярный лиганд Р8МЛ, может быть введена в реакцию с амином с образованием содержащей амин группы, которая может быть затем конъюгирована с карбоновой кислотой полимера. Такая реакция может протекать как одноступенчатая реакция, т.е. конъюгацию осуществляют, не используя промежуточные соединения, такие как Ν-гидроксисукцинимид или малеимид. Реакция конъюгации между содержащей амин группой и полимером с концевой группой карбоновой кислоты (таким как соединение поли(сложный эфирпростой эфир)) может быть осуществлена, в одном ряду вариантов осуществления, путем добавления содержащей амин группы, солюбилизированной в органическом растворителе, таком как (но не ограничиваясь ими), дихлорметан, ацетонитрил, хлороформ, тетрагидрофуран, ацетон, формамид, диметилформамид, пиридины, диоксан или диметилсульфоксид, к раствору, содержащему полимер с концевой группой карбоновой кислоты. Полимер с концевой группой карбоновой кислоты может находиться в органическом растворителе, таком как, но не ограничиваясь ими, дихлорметан, ацетонитрил, хлороформ, диметилформамид, тетрагидрофуран или ацетон. Реакция между содержащей амин группой и полимером с
- 13 020954 концевой группой карбоновой кислоты может проходить спонтанно в некоторых случаях. Неконъюгированные реагенты могут быть смыты после таких реакций, и полимер может быть осажден в растворителях, таких как, например, простой диэтиловый эфир, гексан, метанол или этанол.
В качестве конкретного примера низкомолекулярный лиганд Р8МА может быть получен в качестве нацеливающей группы в частице следующим образом. Модифицированный карбоновой кислотой поли(лактидсо-гликолид) (ПМГК-СООН) может быть конъюгирован с модифицированным амином гетеробифункциональным поли(этиленгликолем) (ЫН2-ПЭГ-СООН) с образованием сополимера ПМГК-ПЭГ-СООН. При использовании модифицированного амином низкомолекулярного лиганда Р8МА (ИН2-Ь1§) триблок-полимер ПМГК-ПЭГ-Ыд можно образовать, конъюгируя конец карбоновой кислоты ПЭГ с функциональной аминогруппой на лиганде. Мультиблок-полимер может быть тогда использован, например, как обсуждается ниже, например, для терапевтических применений.
В рамках изобретения термин алкил включает насыщенные алифатические группы, включая алкильные группы с прямой цепью (например, метил, этил, пропил, бутил, пентил, гексил, гептил, октил, нонил, децил и т.д.), алкильные группы с разветвленной цепью (изопропил, трет-бутил, изобутил и т.д.), циклоалкильные (алициклические) группы (циклопропил, циклопентил, циклогексил, циклогептил, циклооктил), алкилзамещенные циклоалкильные группы и циклоалкилзамещенные алкильные группы.
Термин арил включает группы, включая 5- и 6-членные однокольцевые ароматические группы, которые могут содержать от нуля до четырех гетероатомов, например, фенил, пиррол, фуран, тиофен, тиазол, изотиазол, имидазол, триазол, тетразол, пиразол, оксазол, изоксазол, пиридин, пиразин, пиридазин и пиримидин и т.п. Кроме того, термин арил включает полициклические арильные группы, например, трициклические, бициклические, например, нафталин, бензоксазол, бензодиоксазол, бензотиазол, бензимидазол, бензотиофен, метилендиоксифенил, хинолин, изохинолин, антрил, фенантрил, нафтиридин, индол, бензофуран, пурин, бензофуран, деазапурин или индолизин. Эти арильные группы, имеющие гетероатомы в кольцевой структуре, могут также упоминаться как арильные гетероциклы, гетероциклы, гетероарилы или гетероароматические соединения. Ароматическое кольцо может быть замещено в одном или более положениях кольца такими заместителями, как описано выше, как, например, алкил, галоген, гидроксил, алкокси, алкилкарбонилокси, арилкарбонилокси, алкоксикарбонилокси, арилоксикарбонилокси, карбоксилат, алкилкарбонил, алкиламинокарбонил, аралкиламинокарбонил, алкениламинокарбонил, алкилкарбонил, арилкарбонил, аралкилкарбонил, алкенилкарбонил, алкоксикарбонил, аминокарбонил, алкилтиокарбонил, фосфат, фосфонато, фосфинато, циано, амино (включая алкиламино, диалкиламино, ариламино, диариламино и алкилариламино), ациламино (включая алкилкарбониламино, арилкарбониламино, карбамоил и уреидо), амидино, имино, сульфгидрил, алкилтио, арилтио, тиокарбоксилат, сульфаты, алкилсульфинил, сульфонато, сульфамоил, сульфонамидо, нитро, трифторметил, циано, азидо, гетероциклил, алкиларил или ароматическая или гетероароматическая группа. Арильные группы могут также быть конденсированы или связаны мостиковой связью с алициклическими или гетероциклическими кольцами, которые не являются ароматическими, с образованием полицикла (например, тетралина).
Нацеливающие группы могут быть, например, дополнительно замещены функциональной группой, которая может быть введена в реакцию с полимером по изобретению (например, ПЭГ), с получением полимера, конъюгированного с нацеливающей группой. Функциональные группы включают любую группу, которая может быть использована для создания ковалентной связи с полимером (например, ПЭГ), такую как амино, гидрокси и тио. В конкретном варианте осуществления малые молекулы могут быть замещены ΝΗ2, 8Н или ОН, которые или связаны непосредственно с малой молекулой, или связаны с малой молекулой через дополнительную группу, например, алкил или фенил. В неограничивающем примере малые молекулы, раскрытые в патентах, заявках на патент и непатентной литературе, процитированных в описании, могут быть связаны с анилином, алкил-ΝΗ (например, (ΟΗ^^ΝΗ) или алкил-8Н (например, (СН2)1-6МН2), где группы ΝΗ2 и 8Н могут быть введены в реакцию с полимером (например, ПЭГ) с образованием ковалентной связи с этим полимером, т.е. с образованием полимерного конъюгата.
Например, в настоящем изобретении раскрыта наночастица, имеющая терапевтическое средство; и первую макромолекулу, содержащую сополимер ПМГК-ПЭГ или сополимер ПМК-ПЭГ, который конъюгирован с лигандом, имеющим молекулярную массу приблизительно от 100 и 500 г/моль, причем сополимер ПМГК-ПЭГ или сополимер ПМК-ПЭГ, который конъюгирован с лигандом, составляет от приблизительно 0,1 до приблизительно 30 мол. процентов общего содержания полимера, или от приблизительно 0,1 до приблизительно 20 мол. процентов, или от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мол. процентов, или от приблизительно 1 до приблизительно 5 мол. процентов общего содержания полимера в наночастице. Такая наночастица может дополнительно включать вторую макромолекулу, содержащую сополимер ПМГК-ПЭГ или сополимер ПМК-ПЭГ, причем сополимер не связан с нацеливающей группой; и фармацевтически приемлемый эксципиент. Например, первый сополимер может иметь от приблизительно 0,001 до 5 вес. процентов лиганда по отношению к общему содержанию полимера.
Типичная наночастица может включать терапевтическое средство и полимерную композицию, причем полимерная композиция включает первую макромолекулу, содержащую первый полимер, связанный с лигандом; и вторую макромолекулу, содержащую второй полимер, не связанный с нацеливающей
- 14 020954 группой; причем полимерная композиция включает от приблизительно 0,001 до приблизительно 5,0 вес. процентов указанного лиганда. Такие лиганды могут иметь молекулярную массу от приблизительно 100 г/моль до приблизительно 6000 г/моль, или менее чем приблизительно 1000 г/моль, например, от приблизительно 100 г/моль до приблизительно 500 г/моль. В другом варианте осуществления изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей множество специфичных к мишени полимерных наночастиц, каждая из которых включает терапевтическое средство; и полимерную композицию, причем полимерная композиция включает от приблизительно 0,1 до приблизительно 30 мол. процентов, или от приблизительно 0,1 до приблизительно 20 мол. процентов, или от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мол. процентов первой макромолекулы, содержащей первый полимер, связанный с лигандом; и вторую макромолекулу, содержащую второй полимер, не связанный с нацеливающей группой; и фармацевтически приемлемый эксципиент.
Наночастицы
Раскрытые в изобретении наночастицы могут иметь, по существу, сферическую (т.е. частицы в целом предстают как сферические) или несферическую конфигурацию. Например, частицы после набухания или сжатия могут принимать несферическую конфигурацию. В некоторых случаях частицы могут включать полимерные смеси. Например, можно получить смесь полимеров, которая включает первый полимер, содержащий нацеливающую группу (т.е. низкомолекулярный лиганд ΡδΜΆ), и биологически совместимый полимер, и второй полимер, включающий биологически совместимый полимер, но не содержащий нацеливающую группу. Регулируя соотношение первых и вторых полимеров в конечном полимере, можно легко регулировать концентрацию и местоположение нацеливающих групп в конечном полимере в любой подходящей степени.
Раскрытые в изобретении наночастицы могут иметь характерный размер менее чем приблизительно 1 мкм, где характерный размер частицы представляет собой диаметр идеальной сферы, имеющей тот же самый объем, что и частица. Например, частица может иметь характерный размер частицы менее чем приблизительно 300 нм, менее чем приблизительно 200 нм, менее чем приблизительно 150 нм, менее чем приблизительно 100 нм, менее чем приблизительно 50 нм, менее чем приблизительно 30 нм, менее чем приблизительно 10 нм, менее чем приблизительно 3 нм или менее чем приблизительно 1 нм в некоторых случаях. В конкретных вариантах осуществления наночастица по настоящему изобретению имеет диаметр приблизительно 80-200 нм, от приблизительно 60 до приблизительно 150 нм или от приблизительно 70 до приблизительно 200 нм.
В одном ряду вариантов осуществления частицы могут иметь внутреннюю часть и поверхность, где поверхность имеет композицию, отличную от внутренней части, т.е. может быть по меньшей мере одно соединение, присутствующее во внутренней части, но не присутствующее на поверхности (или наоборот), и/или по меньшей мере одно соединение присутствует во внутренней части и на поверхности в отличающихся концентрациях. Например, в одном варианте осуществления соединение, такое как нацеливающая группа (т.е. низкомолекулярный лиганд) полимерного конъюгата по настоящему изобретению, может присутствовать как во внутренней части, так и на поверхности частицы, но в более высокой концентрации на поверхности, чем во внутренней части частицы, хотя в некоторых случаях концентрация во внутренней части частицы может быть, по существу, отличной от нуля, т.е. представлять собой обнаружимое количество соединения, присутствующего во внутренней части частицы.
В некоторых случаях внутренняя часть частицы является более гидрофобной, чем поверхность частицы. Например, внутренняя часть частицы может быть относительно гидрофобной по отношению к поверхности частицы, и лекарственное средство или другая полезная загрузка могут быть гидрофобными и легко связываются с относительно гидрофобным центром частицы. Лекарственное средство или другая полезная загрузка могут, таким образом, содержаться в пределах внутренней части частицы, которая может защитить их от внешней среды, окружающей частицу (или наоборот). Например, лекарственное средство или другая полезная загрузка, содержащиеся в пределах частицы, вводимой пациенту, будут защищены от организма пациента, и организм будет также изолирован от лекарственного средства. Еще один аспект изобретения относится к полимерным частицам, имеющим более одного полимера или макромолекулы, и к библиотекам, включающим такие полимеры или макромолекулы. Например, в одном ряду вариантов осуществления частицы могут содержать более чем один различимый полимер (например, сополимеры, например, блок-сополимеры), и соотношения двух (или более) полимеров можно независимо регулировать, что позволяет регулировать свойства частицы. Например, первый полимер может быть полимерным конъюгатом, содержащим нацеливающие группы и биологически совместимую часть, а второй полимер может включать биологически совместимую часть, но не содержать нацеливающую группу, или второй полимер может содержать различимую, биологически совместимую часть от первого полимера. Регулирование количеств этих полимеров в пределах полимерной частицы может, таким образом, быть использовано для регулирования различных физических, биологических или химических свойств частицы, например, размера частицы (например, путем изменения молекулярных масс одного или обоих полимеров), поверхностного заряда (например, путем регулирования соотношений полимеров, если полимеры имеют разные заряды или концевые группы), гидрофильности поверхности (например, если полимеры имеют разные молекулярные массы и/или гидрофильности), поверхностную плотность
- 15 020954 нацеливающих групп (например, путем регулирования соотношений этих двух или более полимеров) и т.д.
В качестве конкретного примера частица может включать первый диблок-полимер, содержащий поли(этиленгликоль) и нацеливающую группу, конъюгированную с поли(этиленгликолем), и второй полимер, содержащий поли(этиленгликоль), но не нацеливающую группу, или содержащий как поли (этиленгликоль), так и нацеливающую группу, где поли(этиленгликоль) второго полимера имеет другую длину (или число повторяющихся звеньев), чем поли(этиленгликоль) первого полимера. В качестве другого примера частица может включать первый полимер, содержащий первую биологически совместимую часть и нацеливающую группу, и второй полимер, содержащий вторую биологически совместимую часть, отличающуюся от первой биологически совместимой части (например, имеющую другую композицию, в основном другое число повторяющихся звеньев и т.д.), и нацеливающую группу. В качестве еще одного примера, первый полимер может содержать биологически совместимую часть и первую нацеливающую группу, а второй полимер может содержать биологически совместимую часть и вторую нацеливающую группу, отличающуюся от первой нацеливающей группы.
Например, в настоящем изобретении раскрыта терапевтическая полимерная наночастица, способная связываться с мишенью, включающая первый нефункционализированный полимер; необязательный второй нефункционализированный полимер; функционализированный полимер, содержащий нацеливающую группу; и терапевтическое средство; причем указанная наночастица включает от приблизительно 15 до приблизительно 300 молекул функционализированного полимера, или от приблизительно 20 до приблизительно 200 молекул, или от приблизительно 3 до приблизительно 100 молекул функционализированного полимера.
В конкретном варианте осуществления полимер первых или вторых макромолекул наночастицы по изобретению представляет собой ПМК, ПМГК или ПЭГ, или их сополимеры. В конкретном варианте осуществления полимер первой макромолекулы представляет собой сополимер ПМГК-ПЭГ, а вторая макромолекула представляет собой сополимер ПМГК-ПЭГ или сополимер ПМК-ПЭГ. Например, типичная наночастица может иметь корону ПЭГ с плотностью приблизительно 0,065 г/см3 или от приблизительно 0,01 до приблизительно 0,10 г/см3.
Раскрытые в изобретении наночастицы могут быть стабильными (например, сохраняют, по существу, все активное средство), например, в растворе, который может содержать сахарид, в течение по меньшей мере приблизительно 3 дней, приблизительно 4 дней или по меньшей мере приблизительно 5 дней при комнатной температуре или при 25°С.
В некоторых вариантах осуществления раскрытые в изобретении наночастицы могут также включать спирт жирного ряда, который может увеличить скорость высвобождения лекарственного средства. Например, раскрытые в изобретении наночастицы могут включать С8-С30 спирт, такой как цетиловый спирт, октанол, стеариловый спирт, арахидиловый спирт, докозанол или октакозанол.
Наночастицы могут иметь свойства контролируемого высвобождения, например, могут быть способны доставлять количество активного средства пациенту, например, к конкретному участку в организме пациента, в течение расширенного промежутка времени, например, в течение 1 дня, 1 недели или больше. В некоторых вариантах осуществления раскрытые в изобретении наночастицы, по существу, немедленно высвобождают (например, за промежуток времени от приблизительно 1 мин до приблизительно 30 мин) менее чем приблизительно 2%, менее чем приблизительно 5% или менее чем приблизительно 10% активного средства (например, таксана), например, при нахождении в фосфатном буферном растворе при комнатной температуре и/или при 37°С.
Например, раскрытые в изобретении наночастицы, которые включают терапевтическое средство, в некоторых вариантах осуществления могут высвобождать терапевтическое средство, находясь в водном растворе, например, при 25°С со скоростью, по существу, соответствующей а) от приблизительно 0,01 до приблизительно 20% от общего количества терапевтического средства высвобождается приблизительно через 1 ч; Ь) от приблизительно 10 до приблизительно 60% терапевтического средства высвобождается приблизительно через 8 ч; с) от приблизительно 30 до приблизительно 80% от общего количества терапевтического средства высвобождается приблизительно через 12 ч; и й) не менее чем приблизительно 75% от общего количества высвобождается приблизительно через 24 ч.
В некоторых вариантах осуществления после введения пациенту раскрытой в изобретении наночастицы или композиции, которая включает раскрытую в изобретении наночастицу, пиковая плазменная концентрация (Стах) терапевтического средства в организме пациента значительно выше по сравнению с Стах терапевтического средства, вводимого индивидуально (например, не как часть наночастицы).
В другом варианте осуществления раскрытая в изобретении наночастица, включающая терапевтическое средство, при введении пациенту может иметь 1тах терапевтического средства значительно более длительное по сравнению с 1тах терапевтического средства, вводимого индивидуально.
Могут быть сформированы библиотеки таких частиц. Например, изменяя соотношения двух (или более) полимеров в составе частицы, эти библиотеки могут быть использованы для скрининговых тестов, высокопроизводительных анализов или т.п. Объекты в составе библиотеки могут варьировать по своим свойствам, таким как описанные выше, и в некоторых случаях более чем одно свойство частиц может
- 16 020954 варьировать в пределах библиотеки. Соответственно, один вариант осуществления изобретения относится к библиотеке наночастиц, имеющих различные соотношения полимеров с отличающимися свойствами. Библиотека может включать любое подходящее соотношение полимеров.
Фиг. 1 иллюстрирует, что библиотеки могут быть получены с использованием полимеров, таких как полимеры, описанные выше. Например, на фиг. 1 полимерные частицы, включающие первую макромолекулу, содержащую биологически совместимый гидрофобный полимер, биологически совместимый гидрофильный полимер и низкомолекулярный лиганд ΡδΜΑ, и вторую макромолекулу, которая содержит биологически совместимый гидрофобный полимер и биологически совместимый гидрофильный полимер, могут быть использованы для создания библиотеки частиц, имеющих различные соотношения первых и вторых макромолекул.
Такая библиотека может быть полезной для получения частиц, имеющих любое число желаемых свойств, например, таких свойств, как поверхностная функциональность, поверхностный заряд, размер, зета (ζ) потенциал, гидрофобность, способность контролировать иммуногенность и т.п.
В качестве конкретных примеров в некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения библиотека включает частицы, содержащие полимерные конъюгаты биологически совместимого полимера и низкомолекулярный лиганд, как обсуждается в описании. Обращаясь теперь к фиг. 1, одна такая частица показана в качестве неограничивающего примера. На этой фиг. полимерный конъюгат по изобретению используется для получения частицы 10. Полимер, образующий частицу 10, включает низкомолекулярный лиганд 15, присутствующий на поверхности частицы, и биологически совместимую часть 17. В некоторых случаях, как показано здесь, нацеливающая группа 15 может быть конъюгироваа с биологически совместимой частью 17. Однако не вся биологически совместимая часть 17 показана конъюгированной с нацеливающей группой 15. Например, в некоторых случаях, частицы, такие как частица 10, можно образовать, используя первый полимер, содержащий биологически совместимую часть 17 и низкомолекулярный лиганд 15, и второй полимер, содержащий биологически совместимую часть 17, но не нацеливающую группу 15. Регулируя соотношение первого и второго полимеров, можно образовать частицы, имеющие различные свойства, и в некоторых случаях можно образовать библиотеки таких частиц. Кроме того, в центре частицы 10 содержится лекарственное средство 12. В некоторых случаях лекарственное средство 12 может содержаться в пределах частицы вследствие гидрофобных эффектов. Например, внутренняя часть частицы может быть относительно гидрофобной по отношению к поверхности частицы, и лекарственное средство может быть гидрофобным лекарственным средством, которое связывается с относительно гидрофобным центром частицы. В одном варианте осуществления терапевтическое средство связано с поверхностью, инкапсулировано внутри, окружено или диспергировано по всей наночастице. В другом варианте осуществления терапевтическое средство инкапсулировано в гидрофобной сердцевине наночастицы.
В качестве конкретного примера, частица 10 может содержать полимеры, включая относительно гидрофобный биологически совместимый полимер и относительно гидрофильную нацеливающую группу 15, так что в ходе образования частицы более высокая концентрация гидрофильной нацеливающей группы экспонирована на поверхности, а более высокая концентрация гидрофобного биологически совместимого полимера присутствует в пределах внутренней части частицы.
В некоторых вариантах осуществления биологически совместимый полимер представляет собой гидрофобный полимер. Неограничивающие примеры биологически совместимых полимеров включают полилактид, полигликолид и/или поли(лактид-со-гликолид).
В другом варианте осуществления это раскрытие относится к наночастице, содержащей 1) полимерную матрицу; 2) необязательно, амфифильное соединение или слой, который окружает полимерную матрицу или диспергирован в ней, образуя непрерывную или прерывистую оболочку для частицы; 3) нефункционализированный полимер, который может быть частью полимерной матрицы, и 4) низкомолекулярный лиганд ΡδΜΑ, ковалентно присоединенный к полимеру, который может быть частью полимерной матрицы. Например, амфифильный слой может уменьшить проникновение воды в наночастицу, тем самым усиливая эффективность инкапсулирования лекарственного средства и замедляя высвобождение лекарственного средства.
В рамках изобретения термин амфифильный относится к свойству, когда молекула имеет как полярную часть, так и неполярную часть. Часто амфифильное соединение имеет полярную головку, присоединенную к длинному гидрофобному хвосту. В некоторых вариантах осуществления полярная часть растворима в воде, в то время как неполярная часть нерастворима в воде. Кроме того, полярная часть может иметь либо формальный положительный заряд, либо формальный отрицательный заряд. Альтернативно, полярная часть может иметь как формальный положительный, так и отрицательный заряд и представлять собой цвиттерион или внутреннюю соль. В рамках изобретения амфифильное соединение может быть, но не ограничено ими, одним или множеством из следующего: имеющие природное происхождение липиды, поверхностно-активные вещества или синтезированные соединения как с гидрофильными, так и с гидрофобными группами.
Конкретные примеры амфифильных соединений включают, но не ограничиваются ими, фосфолипиды, такие как 1,2-дистеароил-8п-глицеро-3-фосфоэтаноламин (ΌδΡΕ), дипальмитоилфосфатидилхолин
- 17 020954
ЩРРС), дистеароилфосфатидилхолин (ΟδΟν?)- диарахидоилфосфатидилхолин (ЭЛРС), дибегеноилфосфатидилхолин (ЭВРС), дитрикозаноилфосфатидилхолин (ЭТРС) и дилигноцероилфатидилхолин (ПЬРС), включенный в отношении 0,01-60 (вес липида/вес полимера), наиболее предпочтительно 0,1-30 (вес липида/вес полимера). Фосфолипиды, которые могут быть использованы, включают, но не ограничиваются ими, фосфатидиновые кислоты, фосфатидилхолины как с насыщенными, так и с ненасыщенными липидами, фосфатидилэтаноламины, фосфатидилглицерины, фосфатидилсерины, фосфатидилинозиты, производные лизофосфатидила, кардиолипин и β-ацил-у-алкильные фосфолипиды. Примеры фосфолипидов включают, но не ограничиваются ими, фосфатидилхолины, такие как диолеоилфосфатидилхолин, димиристоилфосфатидилхолин, дипентадеканоилфосфатидилхолин, дилауроилфосфатидилхолин, дипальмитоилфосфатидилхолин (ЭРРС), дистеароилфосфатидилхолин (ΟδΕΟ^), диарахидоилфосфатидилхолин (ЭАРС), дибегеноилфосфатидилхолин (ЭВРС), дитрикозаноилфосфатидилхолин (ЭТРС), дилигноцероилфатидилхолин (ОЬРС); и фосфатидилэтаноламины, такие как диолеоилфосфатидилэтаноламин или 1гексадецил-2-пальмитоилглицерофосфоэтаноламин. Могут быть также использованы синтетические фосфолипиды с асимметричными ацильными цепями (например, с одной ацильной цепью с 6 атомами углерода и другой ацильной цепью с 12 атомами углерода).
В конкретном варианте осуществления амфифильный компонент, который может быть использован для образования амфифильного слоя, представляет собой лецитин и, в частности, фосфатидилхолин. Лецитин представляет собой амфифильный липид и, как таковой, образует двойной слой фосфолипида, имеющий гидрофильные (полярные) головки, обращенные в окружающую среду, которая является часто водной, и гидрофобные хвосты, обращенные друг к другу. Лецитин обладает тем преимуществом, что он является природным липидом, который доступен, например, из сои и уже имеет одобрение ΡΌΆ для использования в других устройствах для доставки. Кроме того, смесь липидов, таких как летицин, более выгодна, чем один-единственный чистый липид.
В некоторых вариантах осуществления раскрытая в изобретении наночастица имеет амфифильный мономолекулярный слой, что означает, что слой не является двойным слоем фосфолипида, но существует как единственный непрерывный или прерывистый слой вокруг или внутри наночастицы. Амфифильный слой связан с наночастицей по изобретению означает, что он расположен в некоторой близости к полимерной матрице, например, окружает внешнюю сторону полимерной оболочки или диспергирован в полимерах, которые составляют наночастицу.
Получение наночастиц
Другой аспект этого раскрытия относится к системам и способам получения раскрытых в изобретении наночастиц. В некоторых вариантах осуществления, используя два или более различных полимеров (например, сополимеров, например, блок-сополимеров) в различных соотношениях и получая частицы из этих полимеров (например, сополимеров, например, блок-сополимеров), регулируют свойства частиц. Например, один полимер (например, сополимер, например, блок-сополимер) может включать низкомолекулярный лиганд РδМΑ, в то время как другой полимер (например, сополимер, например, блоксополимер) может быть выбран по критерию его биосовместимости и/или его способности контролировать иммуногенность получаемой частицы.
В одном ряду вариантов осуществления частицы образуют, получая раствор, содержащий один или более полимеров, и вводя этот раствор в контакт с полимерным нерастворителем, с получением частицы. Раствор может быть смешивающимся или несмешивающимся с полимерным нерастворителем. Например, смешивающаяся с водой жидкость, такая как ацетонитрил, может содержать полимеры, и частицы образуют, когда ацетонитрил вводят в контакт с водой, полимерным нерастворителем, например, вливая ацетонитрил в воду с регулируемой скоростью. Полимер, содержащийся в составе раствора, после контакта с полимерным нерастворителем может осаждаться, образуя частицы, такие как наночастицы. Две жидкости, как говорят, являются неспособными смешиваться или не смешивающимися друг с другом, когда каждая из них не растворима в другой на уровне по меньшей мере 10 вес. процентов при температуре окружающей среды и атмосферном давлении. Как правило, органический раствор (например, дихлорметан, ацетонитрил, хлороформ, тетрагидрофуран, ацетон, формамид, диметилформамид, пиридины, диоксан, диметилсульфоксид и т.д.) и водная жидкость (например, вода, или вода, содержащая растворенные соли или другие молекулы, клеточную или биологическую среду, этанол и т.д.) являются несмешивающимися по отношению друг к другу. Например, первый раствор можно вливать во второй раствор (с подходящей скоростью). В некоторых случаях частицы, такие как наночастицы, можно образовать, вводя первый раствор в контакт с несмешивающейся второй жидкостью, например, осаждение полимера после контакта заставляет полимер образовывать наночастицы, в то время как первый раствор вливают во вторую жидкость, и в некоторых случаях, например, когда скорость введения тщательно контролируют и поддерживают относительно медленной, могут образоваться наночастицы. Контроль такого образования частиц может быть легко оптимизирован специалистом с использованием только обычного экспериментирования.
Свойства, такие как поверхностная функциональность, поверхностный заряд, размер, зета (ζ) потенциал, гидрофобность, способность контролировать иммуногенность и т.п., можно в высокой степени
- 18 020954 регулировать, используя раскрытый в изобретении процесс. Например, библиотека частиц может быть синтезирована и скринирована для идентификации частиц, имеющих определенное соотношение полимеров, которое позволяет частицам иметь определенную плотность групп (например, низкомолекулярных лигандов Р8МА), присутствующих на поверхности частицы. Это обеспечивает возможность получать частицы, имеющие одно или более конкретных свойств, например, определенный размер и определенную плотность поверхностных групп, без излишних усилий. Соответственно, некоторые варианты осуществления изобретения относятся к способам скрининга с использованием таких библиотек, а также к любым частицам, идентифицированным с использованием таких библиотек. Кроме того, идентификация может быть осуществлена любым подходящим способом. Например, идентификация может быть прямой или косвенной, или может осуществляться количественно или качественно.
В некоторых вариантах осуществления уже образованные наночастицы функционализируют нацеливающей группой, используя методики, аналогичные методикам, описанным для получения функционализированных лигандом полимерных конъюгатов. Например, первый сополимер (ПМГК-ПЭГ, поли(лактид-со-гликолид) и поли(этиленгликоль)) смешивают с терапевтическим средством, образуя частицы. Частицы затем связывают с низкомолекулярным лигандом, образуя наночастицы, которые могут быть использованы для лечения рака. Частицы могут быть связаны с варьирующими количествами низкомолекулярных лигандов для контроля поверхностной плотности лиганда на наночастице, таким образом изменяя терапевтические характеристики наночастицы. Кроме того, например, за счет контроля таких параметров, как молекулярная масса, молекулярная масса ПЭГ и поверхностный заряд наночастицы, могут быть получены очень точно контролируемые частицы.
В другом варианте осуществления изобретение относится к способу наноэмульгирования, такому как способ, представленный на фиг. 3 и 4. Например, терапевтическое средство, первый полимер (например, диблок-сополимер, такой как ПМК-ПЭГ или ПМГК-ПЭГ, любой из которых может быть необязательно связан с лигандом, например, СЬ2) и необязательный второй полимер (например, (ПМ(Г)КПЭГ или ПМК) с органическим раствором образуют первую органическую фазу. Такая первая фаза может включать от приблизительно 5 до приблизительно 50 вес. процентов твердых частиц, например, от приблизительно 5 до приблизительно 40 вес. процентов твердых частиц, или от приблизительно 10 до приблизительно 30 вес. процентов твердых частиц. Первая органическая фаза может быть объединена с первым водным раствором с образованием второй фазы. Органический раствор может включать, например, толуол, метилэтилкетон, ацетонитрил, тетрагидрофуран, этилацетат, изопропиловый спирт, изопропилацетат, диметилформамид, метиленхлорид, дихлорметан, хлороформ, ацетон, бензиловый спирт, Т\уссп 80, §раи 80 или т.п. и их комбинации. В варианте осуществления органическая фаза может включать бензиловый спирт, этилацетат и их комбинации. Вторая фаза может составлять приблизительно от 1 до 50 вес. процентов, например, приблизительно 5-40 вес. процентов, твердых частиц. Водным раствором может быть вода, необязательно в комбинации с одним или более веществами из числа холата натрия, этилацетата, поливинилацетата и бензилового спирта.
Например, масляная или органическая фаза может включать растворитель, который является только частично смешивающимся с нерастворителем (водой). Поэтому при смешивании в достаточно низком соотношении и/или при использовании воды, предварительно насыщенной органическими растворителями, масляная фаза остается жидкой. Масляная фаза может быть эмульгирована в водном растворе и, в форме жидких капелек, введена в наночастицы с использованием, например, высокоэнергетических дисперсионных систем, таких как гомогенизаторы или ультразвуковые аппараты. Водная часть эмульсии, иначе известная как водная фаза, может быть раствором поверхностно-активного вещества, состоящим из холата натрия и предварительно насыщенным этилацетатом и бензиловым спиртом.
Эмульгирование второй фазы для образования эмульсионной фазы может быть осуществлено в одну или две стадии эмульгирования. Например, может быть получена первичная эмульсия и затем эмульгирована с образованием тонкодисперсной эмульсии. Первичную эмульсию можно получить, например, используя простое смешивание, гомогенизатор высокого давления, обработку с использованием ультразвукового аппарата, магнитную мешалку или роторно-статорный гомогенизатор. Первичную эмульсию можно преобразовать в тонкодисперсную эмульсию с помощью, например, обработки с использованием ультразвукового аппарата или гомогенизатора высокого давления, например, при использовании 1, 2, 3 или более проходов через гомогенизатор. Например, когда используют гомогенизатор высокого давления, используемое давление может составлять от приблизительно 1000 до приблизительно 8000 ρδί, от приблизительно 2000 до приблизительно 4000 ρδί, от 4000 до приблизительно 8000 ρδί, или от приблизительно 4000 до приблизительно 5000 ρδί, например, приблизительно 2000, 2500, 4000 или 5000 ρδί.
Для завершения экстракции растворителя и отверждения частиц могут быть необходимы либо выпаривание растворителя, либо разбавление. Для лучшего контроля кинетики экстракции и более масштабируемого процесса можно использовать разбавление растворителя посредством гашения водой. Например, эмульсия может быть разбавлена в холодной воде до концентрации, достаточной для растворения всего органического растворителя с получением гашеной фазы. Гашение может быть осуществлено, по меньшей мере частично, при температуре приблизительно 5°С или ниже. Например, вода, используемая для гашения, может иметь температуру ниже комнатной температуры (например, от приблизительно 0 до
- 19 020954 приблизительно 10°С или от приблизительно 0 до приблизительно 5°С).
В некоторых вариантах осуществления не все терапевтическое средство (например, доцетаксел) инкапсулируют в частицах на этой стадии, и солюбилизатор лекарственного средства добавляют к гашеной фазе для образования солюбилизированной фазы. Солюбилизатор лекарственного средства может представлять собой, например, Т\уссп 80, Т\уссп 20, поливинилпирролидон, циклодекстран, додецилсульфат натрия или холат натрия. Например, Т\уссп 80 может быть добавлен к гашеной суспензии наночастиц для солюбилизации свободного лекарственного средства и предотвращения образования кристаллов лекарственного средства. В некоторых вариантах осуществления отношение солюбилизатора лекарственного средства к терапевтическому средству (например, доцетакселу) составляет от приблизительно 100:1 до приблизительно 10:1.
Солюбилизированную фазу можно отфильтровать, чтобы рекуперировать наночастицы. Например, мембраны для ультрафильтрации можно использовать для того, чтобы сконцентрировать суспензию наночастиц и, по существу, удалить органический растворитель, свободное лекарственное средство и другие вещества для улучшения технологических свойств (поверхностно-активные вещества). Например, фильтрация может быть осуществлена с использованием тангенциальной системы фильтрации потока. Например, при использовании мембраны с размером пор, подходящим для удержания наночастиц, но пропускающим растворенные вещества, мицеллы и органический растворитель, наночастицы могут быть селективно отделены. Например, могут быть использованы мембраны с отсечкой по молекулярной массе приблизительно 300-500 кДа (~5-25 нм).
Диафильтрацию можно осуществить, используя подход постоянного объема, означающий, что диафильтрат (холодная деионизированная вода, например, с температурой от приблизительно 0 до приблизительно 5°С, или от 0 до приблизительно 10°С) можно добавить к суспензии, подаваемой с той же самой скоростью, с которой фильтрат удаляют из суспензии. В некоторых вариантах осуществления фильтрация может включать первую фильтрацию с использованием первой температуры от приблизительно 0 до приблизительно 5°С, или от 0 до приблизительно 10°С, и второй температуры от приблизительно 20 до приблизительно 30°С, или от 15 до приблизительно 35°С. Например, фильтрация может включать обработку приблизительно от 1 до приблизительно 6 диаобъемов при температуре от приблизительно 0 до приблизительно 5°С и обработку по меньшей мере одного диаобъема (например, от приблизительно 1 до приблизительно 3 или приблизительно 1-2 диаобъема) при температуре от приблизительно 20 до приблизительно 30°С.
После очистки и концентрирования суспензии наночастиц можно пропустить частицы через один, два или более стерилизующих и/или объемных фильтров, например, с использованием объемных предфильтров с диаметром пор ~0,2 мкм.
В другом варианте осуществления получения наночастиц получают органическую фазу, состоящую из смеси терапевтического средства, например, доцетаксела, и полимера (гомополимера, сополимера и сополимера с лигандом). Органическую фазу смешивают с водной фазой в отношении приблизительно 1:5 (масляная фаза:водная фаза), где водная фаза состоит из поверхностно-активного вещества и некоторого количества растворенного растворителя. Первичную эмульсию получают комбинацией этих двух фаз при простом смешивании или с помощью роторно-статорного гомогенизатора. Первичную эмульсию затем преобразуют в тонкодисперсную эмульсию с помощью гомогенизатора высокого давления. Тонкодисперсную эмульсию затем гасят путем добавления к деионизиризованной воде при перемешивании. Отношение гашение:эмульсия составляет приблизительно 8,5:1. Затем к гашению добавляют раствор Т\уссп (например, Т\уссп 80), чтобы получить в целом концентрацию приблизительно 2% Т\уссп. Это обеспечивает растворение свободного, неинкапсулированного лекарственного средства. Наночастицы затем отделяют либо центрифугированием, либо ультрафильтрацией/диафильтрацией.
Следует понимать, что количества полимера и терапевтического или активного средства, которые используют при получении состава, могут отличаться от конечного состава. Например, некоторое количество активного средства может быть не полностью включено в наночастицу, и такое свободное терапевтическое средство можно, например, отфильтровать. Например, в варианте осуществления приблизительно 20 вес. процентов активного средства (например, доцетаксела) и приблизительно 80 вес. процентов полимера (например, полимер может включать приблизительно 2,5 мол. процентов ПМК-ПЭГ-ОЬ2 и приблизительно 97,5 мол. процентов ПМК-ПЭГ) может быть использовано при получении состава, который приводит, например, к конечной наночастице, содержащей приблизительно 10 вес. процентов активного средства (например, доцетаксела) и приблизительно 90 вес. процентов полимера (где полимер может включать приблизительно 1,25 мол. процентов ПМК-ПЭГ-ОЬ2 и приблизительно 98,75 мол. процентов ПМК-ПЭГ). Такие способы могут обеспечить конечные наночастицы, подходящие для введения пациенту, которые включают от приблизительно 2 до приблизительно 20 вес. процентов терапевтического средства, например, приблизительно 5, приблизительно 8, приблизительно 10, приблизительно 15 вес. процентов терапевтического средства.
Терапевтические средства
Согласно настоящему изобретению любые средства, включая, например, терапевтические средства (например, противораковые средства), диагностические средства (например, контрастные вещества; ра- 20 020954 дионуклиды и флуоресцентные, люминесцентные и магнитные группы), профилактические средства (например, вакцины) и/или нутрицевтические средства (например, витамины, минералы и т.д.) могут быть доставлены с помощью раскрытых в изобретении наночастиц. Примеры средств, доставляемых в соответствии с настоящим изобретением, включают, но не ограничиваются ими, малые молекулы (например, цитотоксические средства), нуклеиновые кислоты (например, миРНК, иРНК и микроРНК), белки (например, антитела), пептиды, липиды, углеводы, гормоны, металлы, радиоактивные элементы и соединения, лекарственные средства, вакцины, иммунологические средства и т.д. и/или их комбинации. В некоторых вариантах осуществления доставляемое средство представляет собой средство, пригодное для использования при лечении рака (например, рака предстательной железы).
Например, нацеливающая группа, если она используется, может нацеливать или локализовывать частицу в определенных частях в организме пациента, и полезная загрузка может быть доставлена в эти части. В конкретном варианте осуществления лекарственное средство или другая полезная загрузка могут высвобождаться контролируемым образом из частицы и взаимодействовать локально с определенным участком нацеливания (например, опухолью). Термин контролируемое высвобождение (и варианты этого термина) в рамках изобретения (например, в контексте системы с контролируемым высвобождением) в целом охватывает высвобождение вещества (например, лекарственного средства) на выбранном участке или иным образом контролируемое по скорости, интервалу и/или количеству. Контролируемое высвобождение охватывает, но не обязательно ограничено этим, по существу, непрерывную доставку, запрограммированную доставку (например, неустойчивую доставку в течение времени, которое прервано регулярными или нерегулярными временными интервалами) и болюсную доставку выбранного вещества (например, в виде предопределенного, дискретного количества вещества в течение относительно короткого промежутка времени (например, нескольких с или мин)).
Активным средством или лекарственным средством могут быть терапевтическое средство, такое как противоопухолевые средства, такие как ингибиторы тТог (например, сиролимус, темсиролимус или эверолимус), алкалоиды барвинка, такие как винкристин, производное дитерпена или таксан, такой как паклитаксел (или его производные, такие как ΌΗΑ-паклитаксел или РС-паклитаксел) или доцетаксел.
В одном ряду вариантов осуществления полезная загрузка представляет собой лекарственное средство или комбинацию более чем одного лекарственного средства. Такие частицы могут быть пригодны, например, в вариантах осуществления, где нацеливающая группа может быть использована для направления частицы, содержащей лекарственное средство, к определенному локализованному месту в организме пациента, например, для обеспечения локализованной доставки лекарственного средства. Примеры терапевтических средств включают химиотерапевтические средства, такие как доксорубицин (адриамицин), гемцитабин (гемзар), даунорубицин, прокарбазин, митомицин, цитарабин, этопозид, метотрексат, венорелбин, 5-фторурацил (5-РИ), алкалоиды барвинка, такие как винбластин или винкристин; блеомицин, паклитаксел (таксол), доцетаксел (таксотер), альдеслейкин, аспарагиназа, бусульфан, карбоплатин, кладрибин, камптотецин, СРТ-11, 10-гидрокси-7-этилкамптотецин (§N38), дакарбазин, 8-1 капецитабин, фторафур, 5'-дезоксифторуридин, ИРТ, энилурацил, дезоксицитидин, 5-азацитозин, 5-азадезоксицитозин, аллопуринол, 2-хлораденозин, триметрексат, аминоптерин, метилен-10-деазааминоптерин (ΜΌΑΜ), оксаплатин, пикоплатин, тетраплатин, сатраплатин, платина-ЭАСН, ормаплатин, С1-973, ΙΜ216 и их аналоги, эпирубицин, этопозид фосфат, 9-аминокамптотецин, 10,11-метилендиоксикамптотецин, каренитецин, 9-нитрокамптотецин, ТА8 103, виндезин, Ь-фенилаланиновая горчица, ифосфамидмефосфамид, перфосфамид, трофосфамид кармустин, семустин, эпотилоны А-Е, томудекс, 6меркаптопурин, 6-тиогуанин, амсакрин, этопозид фосфат, каренитецин, ацикловир, валацикловир, ганцикловир, амантадин, римантадин, ламивудин, зидовудин, бевацизумаб, трастузумаб, ритуксимаб, 5фтороурацил и их комбинации.
Неограничивающие примеры потенциально подходящих лекарственных средств включают противораковые средства, включая, например, доцетаксел, митоксантрон и гидрохлорид митоксантрона. В другом варианте осуществления полезной загрузкой может быть противораковое лекарственное средство, такое как 20-эпи-1,25-дигидроксивитамин Ό3, 4-ипомеанол, 5-этинилурацил, 9-дигидротаксол, абиратерон, ацивицин, акларубицин, акодазол гидрохлорид, акронин, ацилфульвен, адеципенол, адоцелезин, альдеслейкин, а11-1к антагонисты, альтретамин, амбамустин, амбомицин, аметантрон ацетат, амидокс, амифостин, аминоглутетимид, аминолевулиновая кислота, амрубицин, амсакрин, анагрелид, анастрозол, андрографолид, ингибиторы ангиогенеза, антагонист Ό, антагонист С, антареликс, антрамицин, антидорсализирующий морфогенетический белок-1, антиэстроген, антинеопластон, антисмысловые олигонуклеотиды, афидиколин глицинат, генные модуляторы апоптоза, регуляторы апоптоза, апуриновая кислота, АКА-СПР-ОЬ-РТВА, аргининдезаминаза, аспарагиназа, асперлин, асулакрин, атаместан, атримустин, аксинастатин 1, аксинастатин 2, аксинастатин 3, азацитидин, азасетрон, азатоксин, азатирозин, азетепа, азотомицин, производные баккатина III, баланол, батимастат, бензохлорины, бензодепа, бензоилстауроспорин, производные бета-лактама, бета-алетин, бетакламицин В, бетулиновая кислота, ингибитор ВРСР, бикалутамид, бисантрен, бисантрен гидрохлорид, бисазуидинилспермин, биснафид, биснафид димезилат, бистратен А, бицелезин, блеомицин, блеомицин сульфат, антагонисты ВКС/АВЬ, брефлат,
- 21 020954 бреквинар натрий, бропиримин, будотитан, бусульфан, бутионин сульфоксимин, кактиномицин, кальципотриол, кальфостин С, калустерон, производные камптотецина, канарипокс 1Ь-2, капецитабин, карацераид, карбетимер, карбоплатин, карбоксамид-амино-триазол, карбоксиамидотриазол, карест М3, кармустин, еагп 700, ингибитор хрящевого происхождения, карубицин гидрохлорид, карцелезин, ингибиторы казеинкиназы, кастаноспермин, цекропиан В, цедефингол, цетрореликс, хлорамбуцил, хлорины, хлорхиноксалин сульфонамид, цикапрост, циролемицин, цисплатин, цис-порфирин, кладрибин, аналоги кломифена, клотримазол, коллисмицин А, коллисмицин В, комбретастатин А4, аналог комбретастатина, конагенин, крамбесцидин 816, криснатол, криснатол мезилат, криптофицин 8, производные криптофицина А, курацин А, циклопентантрахиноны, циклофосфамид, циклоплатам, ципемицин, цитарабин, цитарабин окфосфат, цитолитический фактор, цитостатин, дакарбазин, дакликсимаб, дактиномицин, даунорубицин гидрохлорид, децитабин, дегидродидемнин В, деслорелин, дексифосфамид, дексормаплатин, дексразоксан, дексверапамил, дезагуанин, дезагуанин мезилат, диазиквон, дидемнин В, дидокс, диэтигиорспермин, дигидро-5-азацитидин, диоксамицин, дифенил спиромустин, доцетаксел, доконазол, доласетрон, доксифлуридин, доксорубицин, доксорубицин гидрохлорид, дролоксифен, дролоксифен цитрат, дромостанолон пропионат, дронабинол, дуазомицин, дуоканницин 8Л, эбселен, экомустин, эдатрексат, эдельфосин, эдреколомаб, эфломитин, эфломитин гидрохлорид, элемен, эльсарнитруцин, эмитефур, энлоплатин, энпромат, эпипропидин, эпирубицин, эпирубицин гидрохлорид, эпристерид, эрбулозол, векторная система эритроцитарной генотерапии, эзорубицин гидрохлорид, эстрамустин, аналог эстрамустина, эстрамустин фосфат натрия, агонисты эстрогена, антагонисты эстрогена, этанидазол, этопозид, этопозид фосфат, этоприн, эксеместан, фадрозол, фадрозол гидрохлорид, фазарабин, фенретинид, филграстим, финастерид, флавопиридол, флезеластин, флоксуридин, флуастерон, флударабин, флударабин фосфат, фтордауноруницин гидрохлорид, фторурацил, фторцитабин, форфенимекс, форместан, фосквидон, фостриецин, фостриецин натрия, фотемустин, гадолиний тексафирин, нитрат галлия, галоцитабин, ганиреликс, ингибиторы желатиназы, гемцитабин, гемцитабин гидрохлорид, ингибиторы глутатиона, гепсульфам, герегулин, гексаметилен бисацетамид, гидроксимочевина, гиперицин, ибандроновая кислота, идарубицин, идарубицин гидрохлорид, идоксифен, идрамантон, ифосфамид, ихнофосин, иломастат, имидазоакридоны, имиквимод, иммуностимулирующие пептиды, ингибитор рецептора инсулиноподобного фактора роста-1, агонисты интерферона, альфа-интерферон-2А, альфа-интерферон-2В, альфа-интерферон-Ш, альфа-интерферон-Ш, бета-интерферон-1А, гамма-интерферон-ΙΒ, интерфероны, интерлейкины, иобенгуан, йододоксорубицин, ипроплатин, иринотекан, иринотекан гидрохлорид, ироплакт, ирсогладин, изобенгазол, изогомогаликондрин В, итасетрон, джасплакинолид, кахалалид Р, ламелларин-Ν триацетат, ланреотид, ланреотид ацетат, леинамицин, ленограстим, лентинан сульфат, лептолстатин, летрозол, лейкозингибирующий фактор, лейкоцитарный альфа-интерферон, лейпролид ацетат, лейпролид/эстроген/прогестерон, лейпрорелин, левамизол, лиарозол, лиарозол гидрохлорид, линейный аналог полиамина, липофильный пептид дисахарида, липофильные соединения платины, лиссоклинамид, лобаплатин, ломбрицин, лометрексол, лометрексол натрия, ломустин, лонидамин, лозоксантрон, лозоксантрон гидрохлорид, ловастатин, локсорибин, луртотекан, тексафирин лютеция лизофиллин, литические пептиды, маитансин, манностатин А, маримастат, мазопрокол, маспин, ингибиторы матрилизина, ингибиторы матриксной металлопротеиназы, маитансин, мехлоретамин гидрохлорид, мегестрол ацетат, меленгестрол ацетат, мелфалан, меногарил, мербарон, меркаптопурин, метерелин, метиониназа, метотрексат, метотрексат натрия, метоклопрамид, метоприн, метуредепа, ингибиторы протеинкиназы С микроводорослей, ингибитор ΜΙΡ, мифепристон, милтефосин, миримостин, двухцепочечная РНК с некомплементарными цепями, митиндомид, митокарцин, митокромин, митогиллин, митогуазон, митолактол, митомальцин, митомицин, аналоги митомицина, митонафид, митоспер, митотан, митотоксин фактор роста фибробластов-сапорин, митоксантрон, митоксантрон гидрохлорид, мофаротен, молграмостин, моноклональное антитело, человеческий хорионический гонадотропин, монофосфорил липид а/клеточная оболочка миобактерий 8К, мопидамол, ингибитор гена множественной лекарственной резистентности, терапевтическое средство на основе множественного супрессора опухоли-1, противораковое средство на основе горчицы, микапероксид В, экстракт клеточной оболочки микобактерий, микофенольная кислота, мириапорон, п-ацетилдиналин, нафарелин, нагрестип, налоксон/пентазоцин, напавин, нафтерпин, нартограстим, недаплатин, неморубицин, неридроновая кислота, нейтральная эндопептидаза, нилутамид, низамицин, модуляторы оксида азота, нитроксидный антиоксидант, нитруллин, нокодазол, ногаламицин, пзамещенные бензамиды, О6-бензилгуанин, октреотид, окиценон, олигонуклеотиды, онапристон, ондансетрон, орацин, пероральный индуктор цитокина, ормаплатин, осатерон, оксалиплатин, оксауномицин, оксисуран, паклитаксел, аналоги паклитаксела, производные паклитаксела, палауамин, пальмитоилризоксин, памидроновая кислота, панакситриол, паномифен, парабактин, пазеллиптин, пегаспаргаза, пелдезин, пелиомицин, пентамустин, пентозан полисульфат натрия, пентостатин, пентрозол, пепломицин сульфат, перфлуброн, перфосфамид, периллиловый спирт, феназиномицин, фенилацетат, ингибиторы фосфатазы, пицибанил, пилокарпин гидрохлорид, пипоброман, пипосульфан, пирарубицин, пиритрексим, пироксантрон гидрохлорид, плацетин А, плацетин В, ингибитор активатора плазминогена, платиновый комплекс, соединения платины, комплекс платина-триамин, пликамицин, пломестан, порфимер натрий, порфиромицин, преднимустин, прокарбазин гидрохлорид, пропил бис-акридон, простагландин 12,
- 22 020954 антиандроген рака предстательной железы, ингибиторы протеасомы, иммунномодуляторы на основе белка А, ингибитор протеинкиназы С, ингибиторы протеинтирозинфосфатазы, ингибиторы пуриннуклеозидфосфорилазы, пуромицин, пуромицин гидрохлорид, пурпурины, пиразорурин, пиразолоакридин, конъюгат пиридоксилированного гемоглобина и полиэтиленоксида, антагонисты КАР, ралтитрексед, рамосетрон, ингибиторы КА8 фарнезилпротеинтрансферазы, ингибиторы КА8, ингибитор КА8-САР, диметилированный ретеллиптин, рения КЕ 186 этидронат, ризоксин, рибоприн, рибозимы, КН ретинарнид, РНКи, роглетимид, рохитукин, ромуртид, роквинимекс, рубигинон В1, рубоксил, сафингол, сафингол гидрохлорид, саинтопин, саркну, саркофитол А, сарграмостим, миметики 8ΌΙ1. семустин, полученный в процессе старения ингибитор 1, смысловые олигонуклеотиды, ингибиторы трансдукции сигнала, модуляторы трансдукции сигнала, симтразен, одноцепочечный антигенсвязывающий белок, сизофиран, собузоксан, борокаптат натрия, фенилацетат натрия, сольверол, соматомединсвязывающий белок, сонермин, спарфозаф натрия, спарфозовая кислота, спарсомицин, спикамицин Ό, спирогерманий гидрохлорид, спиромустин, спироплатин, спленопентин, спонгистатин 1, скваламим, ингибитор стволовой клетки, ингибиторы деления стволовых клеток, стипиамид, стрептонигрин, стрептозоцин, ингибиторы стромелизина, сульфинозин, сулофенур, антагонист суперактивного вазоактивного интестинального пептида, сурадиста, сурамин, свайнсонин, синтетические гликозаминогликаны, тализомицин, таллимустин, тамоксифен метиодид, тауромустин, тазаротен, текогалан натрия, тегафур, теллурапирилий, ингибиторы теломеразы, телоксантрон гидрохлорид, темопорфин, темозоломид, тенипозид, тероксирон, тестолактон, тетрахлордекаоксид, тетразомин, талибластин, талидомид, тиамиприн, тиокоралин, тиогуанин, тиотепа, тромбопоэтин, миметик тромбопоэтина, тималфазин, агонист рецептора тимопоэтина, тимотринан, тироидстимулирующий гормон, тиазофурин, этилэтиопурпурин олова, тирапазамин, титаноцен дихлорид, топотекан гидрохлорид, топсентин, торемифен, торемифен цитрат, тотипотентный фактор стволовых клеток, ингибиторы трансляции, трестолон ацетат, третиноин, триацетилуридин, трицирибин, трицирибин фосфат, триметрексат, триметрексат глюкуронат, трипторелин, трописетрон, тубулозол гидрохлорид, туростерид, ингибиторы тирозинкиназы, тирфостины, ингибиторы иВС, убенимекс, урациловая горчица, уредепа, урогенитальный синусовый ингибирующий фактор роста, антагонисты рецептора урокиназы, вапреотид, вариолин В, веларесол, верамин, вердины, вертепорфин, винбластин сульфат, винкристин сульфат, виндезин, виндезин сульфат, винепидин сульфат, винглицинат сульфат, винлейрозин сульфат, винорелбин или винорелбин тартрат, винрозидин сульфат, винксалтин, винзолидин сульфат, витаксин, ворозол, занотерон, зениплатин, зиласкорб, зиностатин, зиностатин стималамер или зорубицин гидрохлорид.
Фармацевтические составы
Согласно другому аспекту изобретения наночастицы, раскрытые в изобретении, могут быть объединены с фармацевтическими приемлемыми носителями с получением фармацевтической композиции. Как понятно специалисту, носители могут быть выбраны на основании пути введения, как описано ниже, локализации цели, доставляемого лекарственного средства, динамики доставки лекарственного средства и т.д.
Фармацевтические композиции по изобретению могут быть введены пациенту любым известным способом, включая пероральный и парентеральный пути. Термин пациент, в рамках изобретения, относится к людям, а также к животным, включая, например, млекопитающих, птиц, рептилий, амфибий и рыб. Например, животные могут быть млекопитающими (например, грызуном, мышью, крысой, кроликом, обезьяной, собакой, кошкой, приматом или свиньей). В некоторых вариантах осуществления желательны парентеральные пути, так как они позволяют избежать контакта с пищеварительными ферментами, которые находятся в пищеварительном тракте. Согласно таким вариантам осуществления композиции по изобретению могут быть введены путем инъекции (например, путем внутривенной, подкожной или внутримышечной, внутрибрюшинной инъекции), ректально, вагинально, топически (в виде порошков, кремов, мазей или капель) или путем ингаляции (в виде спреев).
В конкретном варианте осуществления наночастицы согласно настоящему изобретению вводят нуждающемуся в этом пациенту системно, например, путем внутривенной инфузии или инъекции.
Инъекционные препараты, например, стерильные инъецируемые водные или масляные суспензии могут быть составлены согласно известному уровню техники с использованием подходящих диспергирующих или смачивающих веществ и суспендирующих агентов. Стерильный инъецируемый препарат может также быть стерильным инъецируемым раствором, суспензией или эмульсией в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например, в форме раствора в 1,3-бутандиоле. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть использованы, можно назвать воду, раствор Рингера, И.8.Р. и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, стерильные нелетучие масла традиционно используются в качестве растворителя или суспендирующей среды. С этой целью можно использовать любое мягкое нелетучее масло, включая синтетические моно- или диглицериды. Кроме того, при получении инъецируемых препаратов используют жирные кислоты, такие как олеиновая кислота. В одном варианте осуществления конъюгат по изобретению суспендируют в жидком носителе, содержащем 1% (вес./об.) натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы и 0,1% (об./об.) Τ\νΕΕΝτ™ 80. Инъецируемые составы можно стерилизовать, например, фильтрацией через задерживающий бактерии
- 23 020954 фильтр или включением стерилизующих агентов в форме стерильных твердых композиций, которые могут быть растворены или диспергированы перед использованием в стерилизованной воде или другой стерильной среде для инъекций.
Твердые лекарственные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, пилюли, порошки и гранулы. В таких твердых лекарственных формах инкапсулированный или неинкапсулированный конъюгат смешивают с по меньшей мере одним инертным, фармацевтически приемлемым эксципиентом или носителем, таким как цитрат натрия или дикальцийфосфат, и/или (а) наполнителями или добавками, такими как крахмалы, лактоза, сахароза, глюкоза, маннит и кремниевая кислота, (Ь) связующими, такими как, например, карбоксиметилцеллюлоза, альгинаты, желатин, поливинилпирролидон, сахароза и камедь, (с) увлажнителями, такими как глицерин, (ά) дезинтеграторами, такими как агар-агар, карбонат кальция, крахмал картофеля или тапиоки, альгиновая кислота, некоторые силикаты и карбонат натрия, (е) ингибиторами растворения, такими как парафин, (£) ускорителями абсорбции, такими как четвертичные аммониевые соединения, (д) смачивающими веществами, такими как, например, цетиловый спирт и моностеарат глицерина, (Ь) абсорбирующими веществами, такими как каолиновая и бентонитовая глина, и (ί) лубрикантами, такими как тальк, стеарат кальция, стеарат магния, твердые полиэтиленгликоли, лаурилсульфат натрия, и их смесями. В случае капсул, таблеток и пилюль лекарственная форма может также включать буферирующие агенты.
Следует понимать, что точная дозировка Р§МА-нацеливаемой частицы должна быть выбрана врачом индивидуально с учетом получающего лечение пациента, как правило, дозировку и введение выбирают так, чтобы доставить эффективное количество Р§МА-нацеливаемой частицы получающему лечение пациенту. В рамках изобретения эффективное количество Р§МА-нацеливаемой частицы относится к количеству, необходимому для индукции желаемого биологического ответа. Как понятно специалисту, эффективное количество Р§МА-нацеливаемой частицы может варьировать в зависимости от таких факторов, как желаемый биологический результат, доставляемое лекарственное средство, ткань-мишень, путь введения и т.д. Например, эффективное количество Р§МА-нацеливаемой частицы, содержащей противораковое лекарственное средство, может представлять собой количество, которое приводит к сокращению размера опухоли на желаемую величину за желаемый промежуток времени. Дополнительные факторы, которые могут быть приняты во внимание, включают тяжесть болезненного состояния; возраст, массу тела и пол получающего лечение пациента; диету, время и частоту введения; комбинации лекарственных средств; чувствительность реакции и переносимость/ответ на терапию.
Наночастицы по изобретению могут быть составлены в стандартной лекарственной форме для простоты введения и однородности введения. Выражение стандартная лекарственная форма в рамках изобретения относится к физически дискретной единице наночастицы, подходящей для лечения пациента. Следует, однако, понимать, что полная суточная доза композиций согласно настоящему изобретению должна быть определена лечащим врачом в рамках обычного медицинского суждения. Для любой наночастицы терапевтически эффективная доза может быть оценена первоначально либо в тесте на клеточной культуре, либо на моделях животных, обычно мышей, кроликов, собак или свиней. Модель животных также используется для определения желаемого диапазона концентраций и пути введения. Такая информация может затем быть использована для определения полезных доз и путей введения у человека. Терапевтическая эффективность и токсичность наночастиц могут быть определены в соответствии с обычными фармацевтическими процедурами на клеточных культурах или подопытных животных, например, ЕО50 (доза является терапевтически эффективной у 50% популяции) и ЬО50 (доза является летальной для 50% популяции). Отношение дозы, вызывающей токсический эффект, к дозе, вызывающей терапевтический эффект, представляет собой терапевтический индекс, и он может быть выражен как отношение ΕΌ50ΈΌ50. Фармацевтические композиции, которые показывают большие терапевтические индексы, могут быть использованы в некоторых вариантах осуществления. Данные, полученные в тестах на клеточной культуре и в исследованиях на животных, можно использовать при определении диапазона доз для применения человеком.
В варианте осуществления композиции, раскрытые в изобретении, могут включать менее чем приблизительно 10 ч./млн палладия или менее чем приблизительно 8 ч./млн, или менее чем приблизительно 6 ч./млн палладия. Например, изобретение относится к композиции, которая включает наночастицы, имеющие полимерный конъюгат ПМК-ПЭГ-СЬ2, причем композиция имеет менее чем приблизительно 10 ч./млн палладия.
В типичном варианте осуществления раскрыта фармацевтическая композиция, которая включает множество наночастиц, каждая из которых содержит терапевтическое средство; от приблизительно 0,1 до приблизительно 30 мол. процентов общего содержания полимера или от приблизительно 0,1 до приблизительно 20 мол. процентов, или от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 мол. процентов, или от приблизительно 1 до приблизительно 5 мол. процентов общего содержания полимера в наночастице, первую макромолекулу, содержащую сополимер ПМГК-ПЭГ или сополимер ПМК-ПЭГ, которая конъюгирована с лигандом, имеющим молекулярную массу приблизительно от 100 до 500 г/моль; и вторую макромолекулу, содержащую сополимер ПМГК-ПЭГ или сополимер ПМК-ПЭГ, причем сополимер не связан с нацеливающей группой; и фармацевтически приемлемый эксципиент. Например, первый сопо- 24 020954 лимер может иметь приблизительно от 0,001 до 5 вес. процентов лиганда относительно общего содержания полимера.
В некоторых вариантах осуществления рассматривается композиция, подходящая для замораживания, включающая наночастицы, раскрытые в изобретении, и раствор, подходящий для замораживания, например, раствор сахарозы добавляют к суспензии наночастиц. Сахароза может действовать, например, как криопротектор, чтобы препятствовать агрегации частиц после замораживания. Например, изобретение относится к составу наночастиц, включающему множество раскрытых в изобретении наночастиц, сахарозу и воду; причем наночастицы/сахароза/вода составляют приблизительно 3-30%/10-30%/50-90% (вес./вес./вес.) или приблизительно 5-10%/10-15%/80-90% (вес./вес./вес.).
Способы лечения
В некоторых вариантах осуществления нацеливаемые частицы в соответствии с настоящим изобретением могут быть использованы для лечения, облегчения, ослабления, уменьшения, задержки начала, ингибирования развития, уменьшения тяжести и/или уменьшения степени одного или более симптомов или признаков заболевания, нарушения и/или состояния. В некоторых вариантах осуществления нацеливаемые частицы по изобретению могут быть использованы для лечения солидных опухолей, например, рака и/или раковых клеток. В некоторых вариантах осуществления нацеливаемые частицы по изобретению могут быть использованы для лечения любого рака, причем Р8МА экспрессируется на поверхности раковых клеток или в новообразованных сосудах опухоли у пациента, включая новообразованные сосуды солидных опухолей предстательной железы или не относящихся к предстательной железе опухолей. Примеры Р8МА-связанных показаний включают, но не ограничиваются ими, рак предстательной железы, рак молочной железы, немелкоклеточный рак легкого, колоректальный рак и глиобластому.
Термин рак включает предзлокачественные состояния, а также злокачественный рак. Рак включает, но не ограничивается ими, рак предстательной железы, рак желудка, колоректальный рак, рак кожи, например, меланомы или базально-клеточный рак, рак легкого, рак молочной железы, рак головы и шеи, рак бронха, рак поджелудочной железы, рак мочевого пузыря, мозга или рак центральной нервной системы, рак периферической нервной системы, рак желудка, рак полости рта или глотки, рак печени, рак почек, рак яичек, рак желчного тракта, рак тонкой кишки или аппендикса, рак слюнной железы, рак щитовидной железы, рак надпочечника, остеосаркому, хондросаркому, рак гематологических тканей и т.п. Раковые клетки могут быть в форме опухоли, существовать в виде отдельных клеток в организме пациента (например, клетки лейкоза) или представлять собой линии клеток, происходящие от рака.
Рак может быть связан с различными физическими симптомами. Симптомы рака обычно зависят от типа и местоположения опухоли. Например, рак легкого может вызывать кашель, одышку и боль в груди, в то время как рак толстой кишки часто вызывает понос, запор и кровь в стуле. Однако чтобы привести несколько примеров, следующие симптомы часто в целом связывают со многими видами рака: лихорадка, озноб, ночная потливость, кашель, одышка, снижение массы тела, потеря аппетита, анорексия, тошнота, рвота, понос, анемия, желтушность, гепатомегалия, кровохарканье, усталость, недомогание, когнитивная дисфункция, депрессия, гормональные расстройства, нейтропения, боль, незаживающие раны, увеличенные лимфатические узлы, периферическая невропатия и половая дисфункция.
В одном аспекте изобретение относится к способу лечения рака (например, рака предстательной железы или молочной железы). В некоторых вариантах осуществления лечение рака включает введение пациенту терапевтически эффективного количества нацеливаемых частиц по изобретению в таких количествах и в течение такого времени, которые необходимы для достижения желаемого результата. В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения терапевтически эффективное количество нацеливаемой частицы по изобретению представляет собой количество, эффективное для лечения, облегчения, улучшения, устранения, задержки начала, ингибирования развития, уменьшения тяжести и/или уменьшения степени одного или более симптомов или признаков рака.
В одном аспекте изобретение относится к способу введения композиций по изобретению пациенту, страдающему раком (например, раком предстательной железы). В некоторых вариантах осуществления частицы вводят пациенту в таких количествах и в течение такого времени, которые необходимы для достижения желаемого результата (т.е. лечения рака). В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения терапевтически эффективное количество нацеливаемой частицы по изобретению представляет собой количество, эффективное для лечения, облегчения, улучшения, устранения, задержки начала, ингибирования развития, уменьшения тяжести и/или уменьшения степени одного или более симптомов или признаков рака.
Терапевтические протоколы по изобретению включают введение терапевтически эффективного количества нацеливаемой частицы по изобретению здоровому человеку (т.е. пациенту, который не демонстрирует симптомов рака и/или у которого не был диагностирован рак). Например, здоровые люди могут быть иммунизированы нацеливаемой частицей по изобретению до развития рака и/или начала симптомов рака; лица с риском (например, пациенты, которые имеют семейную историю рака; пациенты, несущие одну или более генетических мутаций, связанных с развитием рака; пациенты, имеющие генетический полиморфизм, связанный с развитием рака; пациенты, инфицированные вирусом, связанным с развитием рака; пациенты с особенностями и/или образом жизни, связанным с развитием рака; и т.д.) могут
- 25 020954 быть подвергнуты лечению в основном одновременно с (например, в течение 48 ч, в течение 24 ч или в течение 12 ч спустя) началом симптомов рака. Конечно лица, о которых известно, что у них имеется рак, могут получить лечение по изобретению в любое время.
В других вариантах осуществления наночастицы согласно настоящему изобретению могут быть использованы для ингибирования роста раковых клеток, например, раковых клеток предстательной железы. В рамках изобретения термин ингибирует рост раковых клеток или ингибирование роста раковых клеток относится к любому замедлению скорости пролиферации и/или миграции раковых клеток, задержке пролиферации и/или миграции раковых клеток или уничтожению раковых клеток, так что скорость роста раковых клеток снижается по сравнению с наблюдаемой или предсказанной скоростью роста контрольных необработанных раковых клеток. Термин ингибирует рост может также относиться к сокращению размера или исчезновению раковых клеток или опухоли, а также к сокращению его метастатического потенциала. Предпочтительно такое ингибирование на клеточном уровне может уменьшить размер, сдержать рост, уменьшить агрессивность или предотвратить или ингибировать метастаз рака в организме пациента. Специалист легко может определить, на основании любого подходящего признака, ингибируется ли рост раковых клеток.
Ингибирование роста раковых клеток может быть доказано, например, остановкой раковых клеток в конкретной фазе клеточного цикла, например, остановка в фазе Ο2/Μ клеточного цикла. Ингибирование роста раковых клеток может также быть доказано прямым или косвенным измерением размера опухоли или раковых клеток. У людей, больных раком, такие измерения обычно проводят, используя известные способы отображения, такие как отображение магнитного резонанса, компьютерная томография и рентгеновское облучение. Рост раковых клеток может также быть определен косвенно, например, определением циркулирующих уровней карциноэмбрионального антигена, простатоспецифического антигена или других рак-специфических антигенов, которые коррелируют с ростом раковых клеток. Ингибирование роста рака также обычно коррелирует с продолжительностью выживания и/или с улучшением здоровья и самочувствия пациента.
Изобретение также относится к способам введения пациенту наночастицы, раскрытой в изобретении, включающей активное средство, причем, при введении пациенту, такие наночастицы, по существу, уменьшают объем распределения и/или, по существу, уменьшают свободную Стах, по сравнению с индивидуальным введением средства (т.е. не в форме раскрытых в изобретении наночастиц).
Примеры
Изобретение, описываемое в настоящее время в целом, будет более понятным в свете следующих примеров, которые включены просто в целях иллюстрации некоторых аспектов и вариантов осуществления настоящего изобретения и не предназначены для ограничения объема изобретения.
Пример 1. Синтез низкомолекулярного лиганда Ρ8ΜΑ (СЬ2)
г (10,67 ммоль) Исходного соединения растворяли в 150 мл безводного ДМФА. К этому раствору добавляли аллилбромид (6,3 мл, 72 ммоль) и К2СО3 (1,47 г, 10,67 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч, растворитель удаляли, сырой материал растворяли в ЛсОЕ1 и промывали Н2О до нейтрального рН. Органическую фазу сушили с помощью Μ§804 (безводного) и упаривали, получая 5,15 г (95%) продукта. (ТСХ (тонкослойная хроматография) в СН2С12:МеОН 20:1 К=0,9, исходное соединение К£=0,1, показано с нингидрином и УФ-излучением).
К раствору соединения (5,15 г, 10,13 ммоль) в СН3СЫ (50 мл) добавляли Εΐ2ΝΗ (20 мл, 0,19 моль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 мин. Растворитель удаляли и соединение очищали методом колоночной хроматографии (гексан^^Е! 3:2), получая 2,6 г (90%). (ТСХ в СН2С12:МеОН 10:1 К£=0,4, показано с нингидрином (соединение имеет фиолетовый цвет). 1НЯМР (СПС13, 300 МГц) δ 5,95-5,85 (м, 1Н, СН2СНСН2), 5,36-5,24 (м, 2Н, -СН2СНСН2), 4,62-4,60 (м, 3Н, СН2СНСН2, Ν^οή, 3,46 (т, 1Н, СН(Ьук)), 3,11-3,07 (м, 2Н, СН^Вос), 1,79 (уш.с, 2Н, Ν^), 1,79-1,43
- 26 020954 (м, 6Н, 3СН2(Ьув)), 1,43 (с, 9Н, Вос).
К перемешиваемому раствору диаллилглутамата (3,96 г, 15 ммоль) и трифосгена (1,47 г, 4,95 ммоль) в СН2С12 (143 мл) при температуре -78°С добавляли Εΐ3Ν (6,4 мл, 46 ммоль) в СН2С12 (28 мл). Реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 1,5 ч. Затем при -78°С добавляли производное лизина (2,6 г, 9,09 ммоль) в растворе СН2С12 (36 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Раствор разбавляли СН2С12, промывали дважды Н2О, сушили над М§804 (безводный) и очищали методом колоночной хроматографии (гексан:Ас0Е1 3:1^2:1^Ас0Е1), получая 4 г (82%) (ТСХ в СН2С12:Ме0Н 20:1 Κί=0,3, показано с нингидрином). Ή-ЯМР (СОС13, 300 МГц) δ 5,97-5,84 (м, 3Н, 3-СН2СНСН2), 5,50 (уш.т, 2Н, 2ΝΉ мочевина), 5,36-5,20 (м, 6Н, 3-СН2СНСН2), 4,81 (уш.с, 1Н, ЯНВос), 4,68-4,40 (м, 8Н, 3-СН2СНСН2, СН(Ьу5), СН(§1и.)), 3,09-3,05 (м, 2Н, СНАНВос). 2,52-2,39 (м, 2Н, СН2(д1и.)), 2,25-2,14 и 2,02-1,92 (2м, 2Н, СН2(§1ц.)), 1,87-1,64 (м, 4Н, 2СН2(Ьу5)), 1,51-1,35 (м, 2Н, СН2(Ьу5)), 1,44 (с, 9Н, Вос).
К раствору соединения (4 г, 7,42 ммоль) в сухом СН2С12 (40 мл) добавляли при 0°С ТФУК (9 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляли в вакууме до полного высушивания, получая 4,1 г (количественный выход). (ТСХ в СН2С12:Ме0Н 20:1 Κί=0,1, показано с нингидрином). Ή-ЯМР (СИС13, 300 МГц) δ 6,27-6,16 (2д, 2Н, 2ΝΉ мочевина), 5,965,82 (м, 3Н, 3-СН2СНСН2), 5,35-5,20 (м, 6Н, 3-СН2СНСН2), 4,61-4,55 (м, 6Н, 3-СН2СНСН2), 4,46-4,41 (т, 2Н, СН(Ьу5), СН(§1и.)), 2,99 (м, 2Н, СНАНВос). 2,46 (м, 2Н, СН2(д1и.)), 2,23-2,11 и 2,01-1,88 (2м, 2Н, СН2(§1ц.)), 1,88-1,67 (м, 4Н, 2СН2(Ьу5)), 1,45 (м, 2Н, СН2(Ьу5)).
К раствору соединения (2 г, 3,6 ммоль) в ДМФА (безводный) (62 мл) в атмосфере аргона добавляли Рб(РРЬ3)4 (0,7 г, 0,6 ммоль) и морфолин (5,4 мл, 60,7 ммоль) при 0°С. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляли. Сырой продукт промывали дважды СН2С12 и затем растворяли в Н2О. К этому раствору добавляли разбавленный раствор №ЮН (0,01 н.), пока рН не становился сильно основным. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Твердое вещество промывали снова СН2С12, Ас0Е1 и смесью МеОН-СН2С12 (1:1), растворяли в Н2О и нейтрализовали смолой АтЬет1йе ΙΚ-120 Н+.
Растворитель выпаривали и соединение осаждали МеОН, получая 1 г (87%) ОЬ2. Ή-ЯМР (И20, 300 МГц) δ 4,07 (м, 2Н, СН(Ьу5), СН(д1и.)), 2,98 (м, 2Н, СН2ЯН2), 2,36 (м, 2Н, СН2(д1и.)), 2,08-2,00 (м, 1Н, СН2(§1и.)), 1,93-1,60 (м, 5Н, СЩ^и.), 2СЩ(Еу5)), 1,41 (м, 2Н, СЩЩув)), Ма55 ΕδΙ: 320,47 [М+Н+], 342,42 [М+№+].
- 27 020954
Пример 2. Синтез низкомолекулярного лиганда Р8МА (СЬ1)
130 мг (0,258 ммоль) Исходного соединения растворяли в 3 мл ДМФА (безводный). К этому раствору добавляли аллилбромид (150 мкл, 1,72 ммоль) и К2СО3 (41 мг, 0,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, растворитель удаляли, сырой продукт растворяли в АсОЕ! и промывали Н2О до нейтрального рН. Органическую фазу высушивали с помощью Мд§О4 (безводный) и упаривали, получая 130 мг (93%). (ТСХ в СН2С12:МеОН 20:1 Рй=0,9, исходное соединение К1=0,1, показано с нингидрином и УФ-излучением). 1Н-ЯМР (СИС13, 300 МГц) δ 7,81-7,05 (12Н, ароматические), 6,81 (уш.с, 1Н, ИНРтос), 5,93-5,81 (м, 1Н, -СН2СНСН2), 5,35-5,24 (м, 2Н, -СН2СНСН2), 5,00 (уш.д, 1Н, ИНЬос), 4,61-4,53 (м, 5Н, -СН2СНСН2, СН2(Ртос), СН (феала.)), 4,28 (т, 1Н, СН(Ртос)), 3,12-2,98 (м, 2Н, СН2 (феала.), 1,44 (с, 9Н, Вос).
К раствору соединения (120 мг, 0,221 ммоль) в сухом СН2С12 (2 мл) добавляли при 0°С ТФУК (1 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляли в вакууме, добавляли воду и удаляли снова, СН2С12 добавляли и удаляли снова досуха, получая 120 мг (количественный выход). (ТСХ в СН2С12:МеОН 20:1 КТ=0,1, показано с нингидрином и УФ-излучением). ’Н-ЯМР (СИС13, 300 МГц) δ 7,80-7,00 (13Н, ароматический, ИНРтос), 5,90-5,75 (м, 1Н, -СН2СНСН2), 5,35-5,19 (м, 3Н, -СН2СНСН2, ИНЬос), 4,70-4,40 (2м, 5Н, -СН2СНСН2, СН2(Ртос), СН (феала.)), 4,20 (т, 1Н, СН(Ртос)), 3,40-3,05 (м, 2Н, СН2 (феала.)).
К перемешиваемому раствору диаллилглутамата (110 мг, 0,42 ммоль) и трифосгена (43 мг, 0,14 ммоль) в СН2С12 (4 мл) при температуре -78°С добавляли Ε!3Ν (180 мкл, 1,3 ммоль) в СН2С12 (0,8 мл). Реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры и перемешивали в течение 1,5 ч. Производное фенилаланина (140 мг, 0,251 ммоль) в растворе СН2С12 (1 мл) и Ε!3Ν (70 мкл, 0,5 ммоль) затем добавляли при -78°С и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Раствор разбавляли СН2С12, промывали дважды Н2О, сушили над Мд§О4 (безводный) и очищали методом колоночной хроматографии (гексан:АсОЕ! 3:1), получая 100 мг (57%) (ТСХ в СН2С12:МеОН 20:1 Κί=0,3, показано с нингидрином и УФ-излучением). 'Н-ЯМР (СИС13, 300 МГц) δ 7,80-6,95 (13Н, ароматический, ИНРтос), 5,98-5,82 (м, 3Н, 3-СН2СНСН2), 5,54 (уш.д, 1Н, ИН мочевина), 5,43-5,19 (м, 7Н, 3СН2СНСН2, ИН мочевина), 4,85-4,78 (м, 1Н, СН (феала.)), 4,67-4,50 (м, 9Н, 3-СН2СНСН2, СН2(Ртос), СН (§1и.)), 4,28 (т, 1Н, СН(Ртос)), 3,05 (д, 2Н, СН2 (феала.)), 2,53-2,33 (м, 2Н, СН2(д1и.)), 2,25-2,11 и 1,98-1,80 (2м, 2Н, СН2(§1и.)).
К раствору исходного материала (60 мг, 0,086 ммоль) в СН3СИ (1 мл) добавляли Е!2ИН (1 мл, 10 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 мин. Растворитель удаляли и соединение очищали методом колоночной хроматографии (гексан:АсОЕ! 2:1), получая 35 мг (85%). (ТСХ в СН2С12:МеОН 10:1 К1=0,5, исходное соединение К1=0,75, показано с нингидрином (соединение имеет фиолетовый цвет) и УФ-излучением). 1Н-ЯМР (СИС13, 300 МГц) δ 6,85 и 6,55 (2д, 4Н, ароматические), 5,98-5,82 (м, 3Н, 3-СН2СНСН2), 5,56 (уш.д, 1Н, ИН мочевина), 5,44-5,18 (м, 7Н, 3СН2СНСН2, ИН мочевина), 4,79-4,72 (м, 1Н, СН (феала.)), 4,65-4,49 (м, 7Н, 3-СН2СНСН2, СН(д1и.)), 3,64 (уш.с, 2Н, ИН2), 3,02-2,89 (м, 2Н, СН2 (феала.)), 2,49-2,31 (м, 2Н, СН2(д1и.)), 2,20-2,09 и 1,91-1,78 (2м, 2Н,
- 28 020954
СВДи.)).
К раствору соединения (50 мг, 0,105 ммоль) в ДМФА (безводный; 1,5 мл) в атмосфере аргона при 0°С добавляли Ρά(ΡΡΡ3)4 (21 мг, 0,018 ммоль) и морфолин (154 мкл, 1,77 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляли. Сырой материал дважды промывали СН2С12 и растворяли в Н2О. К этому раствору добавляли разбавленный раствор ΝαΟΗ (0,01 н.), пока рН не становился сильно основным. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Твердое вещество промывали снова СН2С12, ЛсОЕ1 и смесью МеОН-СН2С12 (1:1), растворяли в Н2О и нейтрализовали смолой ЛтЬегШе ГК-120 Н+. Растворитель выпаривали и соединение осаждали МеОН, получая 25 мг (67%) СЬ1. ’Н-ЯМР (Ό2Ο, 300 МГц) δ 7,08 и 6,79 (2д, 4Н, ароматические), 4,21 (м, 1Н, СН (феала.)), 3,90 (т, 1Н, СН (§1и.)), 2,99 и 2,82 (2дд, 2Н, СН2 (феала.)), 2,22-2,11 (м, 2Н, СН2(д1и.)), 2,05-1,70 (2м, 2Н, СН2(§1и.)). 13С-ЯМР (Ό2Ο, 75 МГц) δ 176,8, 174,5, 173,9 (3 СОО), 153,3 (]ЧНСО]ЧН), 138,8 (Н^-С^Ь)), 124,5, 122,9, 110,9 (ароматические), 51,3 (СН (феала.)), 49,8 (СН(д1и.)), 31,8 (СН (феала.)), 28,4 и 23,6 (2СН2-§1и.)). Маев ΕδΙ: 354,19 [М+Н+], 376,23 [Μ+Να+].
Пример 3. Получение ПМК-ПЭГ
Синтез осуществляли полимеризацией с раскрытием кольца б,1-лактида, используя а-гидрокси-ωметоксиполи(этиленгликоль) в качестве макро-инициатора, и проводили при повышенной температуре, используя 2-этилгексаноат олова (II) в качестве катализатора, как показано ниже (ПЭГ Μη«5000 Да; ПМК Μη «16000 Да; ПЭГ-ПМК Μη «21000 Да)
Полимер очищали, растворяя полимер в дихлорметане и осаждая в смеси гексана и простого диэтилового эфира. Полимер, рекуперируемый на этой стадии, должен быть высушен в сушильном шкафу.
Пример 4. Получение ПМК-ПЭГ-лиганда
Синтез, показанный на фиг. 2, начинается с преобразования ΡΜΟС, ВОС лизина в ΡΜΟС, ВОС, аллиллизин путем взаимодействия ΡΜΟС, ВОС лизина с аллилбромидом и карбонатом калия в диметилформамиде с последующей обработкой диэтиламином в ацетонитриле. ВОС, аллиллизин затем вводят в реакцию с трифосгеном и диаллилглутаматом с последующей обработкой трифторуксусной кислотой в метиленхлориде, получая соединение ΟΡ2Ρ.
Амин боковой цепи лизина в ΟΡ2Ρ затем ПЭГ илируют добавлением гидрокси-ПЭГ-карбоновой кислоты с ЕЭС и Ν4δ. Конъюгацию ΟΡ2Ρ с ПЭГ осуществляют через амидную связь. Структуру этого полученного соединения отмечают как НО-ПЭГ-СЕА?. После ПЭГилирования полимеризацию с раскрытием кольца (ΚΌΡ) б,1-лактида с гидроксильной группой в НО-ПЭГ-СЕ2Г в качестве инициатора используют, чтобы присоединить блок-полимер полилактида к НО-ПЭГ-СЕ2Г через эфирную связь с получением ПМИ-ПЭГ-СЕА?. 2-Этилгексаноат олова (II) используют в качестве катализатора для полимеризации с раскрытием кольца.
Наконец, аллильные группы на ПМК-ПЭГ-С^2Ρ удаляют, используя морфолин и тетракис(трифенилфосфин)палладий (в качестве катализатора) в дихлорметане, получая конечный продукт ПМК-ПЭГ-лиганд. Конечное соединение очищают осаждением в смеси 30/70% (об./об.) простой диэтиловый эфир/гексан.
Пример 5. Получение наночастицы - нанопреципитация
Наночастицы могут быть получены с использованием лиганда СЬ1 или СЬ2. СЬ2 ингибитор ΡδΜΑ на основе мочевины, который имеет свободную аминогруппу, расположенную в области, не критической для связывания ΡδΜΑ, синтезируют из коммерчески доступного исходного продукта Βο^ ΡЬе(4NНΡтοс)-ОН и диаллилглутаминовой кислоты в соответствии с процедурой, показанной на схеме 1. Наночастицы образуют, используя нанопреципитацию: конъюгат полимер-лиганд растворяют в смешивающемся с водой органическом растворителе вместе с лекарственным средством или другим средством, предназначенным для включения в частицы. Дополнительный нефункционализированный полимер может быть включен для модуляции поверхностной плотности лиганда. Раствор полимера диспергируют в водной фазе и полученные частицы собирают фильтрацией. Частицы могут быть высушены или немедленно протестированы на захват клетками ίη νίίτο или противоопухолевую активность в отношении рака предстательной железы ίη νίνο.
- 29 020954
Образуют органическую фазу, состоящую из 5% твердого вещества (вес.%), включая 2% поли(лактид-со-гликолид)-поли(этиленгликоль) диблок-сополимер (ПМГК-ПЭГ; 45-5 кДа), 2% поли(О,Ьлактид) (ПМК; 8,5 кДа) и 1% доцетаксела (ОТХЬ), причем доцетаксел имеет структуру
Органическими растворителями являются этилацетат (ЕА) и бензиловый спирт (ВА), где ВА содержит 20% (вес.%) органической фазы. ВА используют частично для солюбилизации доцетаксела. Органическую фазу смешивают с водной фазой в отношении приблизительно 1:5 (масляная фаза:водная фаза), где водная фаза состоит из 0,5 вес. процентов холата натрия, 2 вес. процентов ВА и 4 вес. процентов ЕА в воде. Первичную эмульсию образуют комбинацией этих двух фаз при простом смешивании или с помощью роторно-статорного гомогенизатора. Первичную эмульсию затем преобразуют в тонкодисперсную эмульсию обработкой с помощью ультразвукового аппарата или гомогенизатора высокого давления.
Тонкодисперсную эмульсию затем гасят добавлением к охлажденной среде для гашения (0-5°С) из деионизированной воды при перемешивании. Отношение среда для гашения:эмульсия составляет приблизительно 8,5:1. Затем к среде для гашения добавляют раствор 25 вес. процентов Тгееи 80, чтобы достигнуть приблизительно 2 вес. процентов Тгееи 80 в целом. Наночастицы затем отделяют либо центрифугированием, либо ультрафильтрацией/диафильтрацией. Суспензия наночастиц может быть затем заморожена с криопротектором, таким как 10 вес. процентов сахарозы.
Было обнаружено, что добавление ПМК в дополнение к сополимеру ПМГК-ПЭГ значительно увеличивает загрузку лекарственного средства. Возможно, что использование ВА непосредственно также служит для увеличения эффективности инкапсулирования, также увеличивая эффективность инкапсулирования, даже если ВА не требуется для солюбилизации ЭТХБ. Было обнаружено, что температура среды для гашения играет критическую роль в загрузке лекарственного средства. Использование холодной среды для гашения (обычно поддерживаемой при 0-5°С) значительно увеличило загрузку лекарственного средства по сравнению с загрузкой лекарственного средства, когда использовали среду для гашения комнатной температуры.
ЭТХБ имеет очень низкую водорастворимость, и было обнаружено, что неинкапсулированный ЭТХБ часто образовывал кристаллы, которые было трудно отделить от образованных наночастиц. Солюбилизатор лекарственного средства (Тетееи 80) добавляли после гашения тонкодисперсной эмульсии. Т\\ееп 80 способен эффективно солюбилизировать кристаллы ЭТХБ и обеспечить возможность отделения наночастиц от неинкапсулированного ЭТХБ, предотвращая образование кристаллов ЭТХБ и/или эффективно солюбилизируя любые кристаллы ЭТХБ, которые образуются при гашении тонкодисперсной эмульсии. Стандартный набор условий наноэмульсии был следующим.
- 30 020954
Критерий Значение
Блок-сополимер (тип/количество) 45/5 ПМГК (50/50 М:Г)-ПЭГ (5 кДа), 80%
Гомополимер (тип/количество) Нет
Лекарственное средство (количество БТХЬ) 10%
Органический растворитель (тип/количество) Этилацетат (ЕА)
Органический сорастворитель (тип/количество) Нет
Водная фаза 1% РУА с 6,5% ЕА
Температура гашения ~5сС
РЕЗУЛЬТАТЫ
Критерий Значение
Размер частиц 191 нм
Загрузка лекарственного средства 0,8%
Высвобождение ίη νίϋτο (24 часа при 37°С) Не определено (ΝΟ)
Другое ΝΑ
Добавление гомополимера в качестве добавки привело к увеличенной загрузке лекарственного средства, в то время как размер частиц уменьшился, как показано ниже.
Критерий Контрольно· Значение Значение из примера
Блок-сополимер (тип/количество) 45/5 ПМГК (50/50 М:Г)-ПЭГ (5 кДа), 90% 45/5 ПМГК (50/50 М:Г)-ПЭГ (5 кДа), 45%
Гомополимер (тип/количество) Нет 8,5 кДа ПМК, 45%
Лекарственное средство (количество ЭТХЬ) 10% 10%
Органический растворитель (тип/количество) ЕА ЕА, 80%
Органический сорастворитель (тип/количество) Нет Бензиловый спирт (ВА), 20%
Водная фаза 1% РУА с 6,5% ЕА 1% РУА с 6,5% ЕА
Температура гашения ~5*С ~5*С
РЕЗУЛЬТАТЫ
Критерий Контрольное значение Значение из примера
Размер частиц 191 нм 134 нм
Загрузка лекарственного средства 0,8% 2,4%
Высвобождение 1л νίίΓο (24 часа при 37*С) Не определено (ΝΟ) Не определено (N0)
Другое ΝΑ ΝΑ
Температура среды для гашения
Здесь контроль, используемый для сравнения, отличается от контроля выше, поскольку он был уже реализован при низкой температуре гашения.
Критерии Контрольное значение Значение из примера
Блок-сополимер (тип/количество) 45/5 ПМГК (50/50 М:Г)ПЭГ (5 кДа), 47,5% 45/5 ПМГК (50/50 М:Г)-ПЭГ (5 кДа), 47,5%
Гомополимер (тип/количество) -30 кДа ПМГК (50/50 М:Г), 47,5% -30 КДа ПМГК (50/50 М:Г), 47,5%
Лекарственное средство (количество БТХЬ) 5% 5%
Органический растворитель (тип/количество) Дихлорметан (ОСМ) Дихлорметан (ОСМ)
Органический сорастворитель (тип/количеств о) Нет Нет
Водная фаза 0,5% холата натрия 0,5% холата натрия
Температура гашения -25°С -5°С
РЕЗУЛЬТАТЫ
Критерий Контрольное значение Значение из примера
Размер частицы 210 нм 214 нм
Загрузка лекарственного средства 1,2% 3,6%
Высвобождение ίη νίύΓΟ (24 часа при 37вС) Не определено (Νβ) Не определено (Νϋ)
Другое ΝΑ ΝΑ
- 31 020954
Параметры из примера
Критерий Значение
Блок-сополимер (тип/количестао) 45/5 ПМК-ПЭГ, 40% (5 мол.% содержащий ПМК-ПЭГ-61.2)
Гомополимер (тип/количест а о) 8,5 кДа ПМК, 40%
Лекарственное средство (количество ЭТХЬ) 20%
Органический растворитель (тип/количеств о) ЕА, 80%
Органический сорастворитель (тип/количество) ВА, 20%
Водная фаза 0,5% холата натрия, 4% ЕА, 2% ВА
Температура гашения ~5°С
РЕЗУЛЬТАТЫ
Критерий Значение
Размер частицы 98,5 нм
Загрузка лекарственного средства 3,0%
Высвобождение ίη νίϋτο (24 часа при 37°С) -60%
Пример 7. Эмульсионный процесс
В процессе, описанном ниже, использовали увеличение содержания твердого остатка масляной фазы. Общая карта технологического процесса изображена на фиг. 3, и схема процесса изображена на фиг. 4. Уменьшение содержание растворителя эмульгированной масляной фазы приводит к уменьшению потери лекарственного средства в жидкости для гашения при отверждении наночастиц. Твердые частицы и систему растворителя выбирают так, чтобы избежать чрезмерной вязкости, которая может ограничить способность к эмульгированию в капельки размером ~100 нм. Использование относительно низкомолекулярного сополимера (ПМК-ПЭГ ~16-5 кДа) и низкомолекулярного гомополимера (ПМК ~7 кДа) позволяет составу сохранять достаточно низкую вязкость при высоком содержании твердого остатка. Выбранная система растворителя имеет подходящую сольватирующую способность для поддержания лекарственного средства в растворе в высоких концентрациях. Использование системы со-растворителя (обычно 79:21 этилацетат:бензиловый спирт) позволяет получить непрерывный раствор до 50% твердых частиц со смесью 80:20 полимер:доцетаксел.
Получают органическую фазу, состоящую из смеси доцетаксела (ΌΤΧΌ) и полимера (гомополимер, сополимер и сополимер с лигандом). Органическую фазу смешивают с водной фазой в отношении приблизительно 1:5 (масляная фаза:водная фаза), где водная фаза состоит из поверхностно-активного вещества и некоторого количества растворенного растворителя. Чтобы достичь высокой загрузки лекарственного средства, используют приблизительно 30% твердых частиц в органической фазе.
Получают органическую фазу, состоящую из смеси доцетаксела (ΌΤΧΣ) и полимера (гомополимер, сополимер и сополимер с лигандом). Композиции и органические растворители перечислены в таблице. Органическую фазу смешивают с водной фазой в отношении приблизительно 1:5 (масляная фаза:водная фаза), где водная фаза состоит из поверхностно-активного вещества и некоторого количества растворенного растворителя. Первичную эмульсию образуют комбинацией этих двух фаз при простом смешивании или с помощью роторно-статорного гомогенизатора. Первичную эмульсию затем перерабатывают в тонкодисперсную эмульсию с помощью гомогенизатора высокого давления. Тонкодисперсную эмульсию затем гасят добавлением к деионизированной воде при данной температуре (указанной в таблице) при перемешивании. Отношение среда для гашения:эмульсия составляет приблизительно 8,5:1. Затем к среде для гашения добавляют раствор 25% (вес.%) Тетееп 80, чтобы достигнуть приблизительно 2% Т\уссп 80 в целом. Это обеспечивает растворение свободного, неинкапсулированного лекарственного средства и делает выполнимым процесс отделения наночастиц. Наночастицы затем отделяют либо центрифугированием, либо ультрафильтрацией/диафильтрацией.
- 32 020954
Контроль
Стандартный набор условий наноэмульгирования является следующим. Образуют не содержащие лиганд частицы (ненацеленные наночастицы).
Критерий Значение
Партия # 15^1570
Гомополимер (тип/количество) 6,5 кДа ПМК
Сополимер (тип/количество) 16/5 ПМК-ПЭГ, 40%
Лекарственное средство (количество ОТХЬ) 20%
Органический растворитель (тип/количество) Этилацетат (ЕА), 79%
Органический сорастворитель (тип/количество) Бензиловый спирт (ВА), 21%
Водная фаза 0,5% холата натрия, 2% ВА, 4% ЕА в воде
(Твердое вещество] в масляной фазе 5 вес.%
РЕЗУЛЬТАТЫ
Критерий Значение
Размер частицы 114,7 нм
Загрузка лекарственного средства 3,97%
10% Твердых частиц
Критерий Контрольное значение Значение ма примера
Партия # 15-1570 15-157С
Гомополимер (тип/количество) 6,5 кДа ПМК 6,5 кДа ПМК
Сополимер (тип/количество) 16/5 ПМК-ПЭГ, 40% 16/5 ПМК-ПЭГ, 40%
Лекарственное средство (количество ОТХЬ) 20% 20%
Органический растворитель (тип/количество) Этилацетат (ЕА), 79% Этилацетат (ЕА), 79%
Органический сорастворитель (тип/количество) Бензиловый спирт (ВА), 21% Бензиловый спирт (ВА), 21%
Водная фаза 0,5% холата натрия, 2% ВА, 4% ЕА в воде 0,5% холата натрия, 2% ВА, 4% ЕА в воде
[Твердое вещество] в масляной фазе 5 вес.% 10 вес.%
РЕЗУЛЬТАТЫ
Критерий Контрольное значение Значение ма примера
Размер частиц 114,7 нм 115,1 нм
Загрузка лекарственного средства 3,97% 13,36%
20% Твердых частиц
Критерий Контрольное значение Значение из примера
Партия # 15-1570 15-157А
Гомополимер (тип/количество) 6,5 кДа ПМК 6,5 кДа ПМК
Сополимер (тип/количество) 16/5 ПМК-ПЭГ, 40% 16/5 ПМК-ПЭГ, 40%
Лекарственное средство (количество ОТХЬ) 20% 20%
Органический растворитель (тип/количество) Этилацетат (ЕА), 79% Этилацетат (ЕА), 79%
Органический сорастворитель (тип/количество) Бензиловый спирт (ВА), 21% Бензиловый спирт (ВА), 21%
Водная фаза 0,5% холата натрия, 2% ВА, 4% ЕА в воде 0,5% холата натрия, 2% ВА, 4% ЕА в воде
[Твердое вещество] в масляной фазе 5 вес.% 20 вес.%
РЕЗУЛЬТАТЫ
Критерий Контрольное значение Значение из примера
Размер частицы 114,7 нм 130,3 нм
Загрузка лекарственного средства 3,97% 16,15%
- 33 020954
40% Твердых частиц
Критерик Контрольное «качение Значение ин примера
Партия # 15-1570 15-171А
Гомополимер (тип/количество) 6,5 кДа ПМК 6,5 кДа ПМК
Сополимер (тип/количество) 16/5 ПМК-ПЭГ, 40% 16/5 ПМК-ПЭГ, 40%
Лекарственное средство (количество ϋΤΧΙ,) 20% 20%
Органический растворитель (тип/количество) Этилацетат (ЕА), 79% Этилацетат (ЕА), 79%
Органический сорастворитель (тип/количество) Бензиловый спирт (ВА), 21% Бензиловый спирт (ВА), 21%
Водная фаза 0,5% холата натрия, 2% ВА, 4% ЕА в воде 0,5% холата натрия, 2% ВА, 4% ЕА в воде
[Твердое вещество] в масляной фазе 5 вес.% 40 вес.%
РЕЗУЛЬТАТЫ
Критерии Контрольное значение Значение иа примера
Размер частицы 114,7 нм 130 нм
Загрузка лекарственного средства 3,97% 14,07%
30% Твердых частиц с более высокой концентрацией поверхностно-активного вещества для уменьшения размера частиц; загрузка нацеливаемой наночастицы._
Критерии Контрольное значение Значение на примера
Партия # 15-1570 35-03А
Гомополимер (тип/количество) 6,5 кДа ПМК 8,2 кДа ПМК
Сополимер (тип/количество) 16/5 ПМК-ПЭГ, 40% 16/5 ПМК-ПЭГ, 40% с 1 вес.% в виде СЬ2-ПЭГ-ПМК
Лекарственное средство (количество ОТХЬ) 20% 20%
Органический растворитель (тип/количество) Этилацетат (ЕА), 79% Этилацетат (ЕА), 79%
Органичесикй сорастворитель (тип/количество) Бензиловый спирт (ВА), 21% Бензиловый спирт (ВА), 21%
Водная фаза 0,5% холата натрия, 2% БА, 4% ЕА в воде 1% холата натрия, 2% ВА, 4% ЕА в воде
[Твердое вещество] в масляной фазе 5 вес.% 30 вес.%
РЕЗУЛЬТАТЫ
Критерий Контрольное «качение Значение не примера
Размер частицы 114,7 нм 114,1 нм
Загрузка лекарственного средства 3,97% 11,85%
Пример 8. Получение наночастиц - эмульсионный процесс 2
Образуют органическую фазу, состоящую из смеси доцетаксела (ОТХЬ) и полимера (гомополимер, сополимер и сополимер с лигандом). Органическую фазу смешивают с водной фазой в отношении приблизительно 1:5 (масляная фаза:водная фаза), где водная фаза состоит из поверхностно-активного вещества и некоторого количества растворенного растворителя. Чтобы достичь высокой загрузки лекарственного средства, используют приблизительно 30% твердых частиц в органической фазе.
Первичную грубую эмульсию образуют комбинацией этих двух фаз при простом смешивании или с помощью роторно-статорного гомогенизатора. Ротор/статор приводит к гомогенному молочно-белому раствору, в то время как магнитная мешалка производит явно более грубую эмульсию. Наблюдали, что способ с использованием магнитной мешалки привел к значительным капелькам масляной фазы, прилипшим к стенкам питающего сосуда, что позволяет предположить, что, хотя размер частиц грубой эмульсии не является параметром процесса, критичным для качества, его следует сделать достаточно тонким, чтобы предотвратить снижение выхода или разделение фаз. Поэтому ротор-статор используют как стандартный метод образования грубой эмульсии, хотя высокоскоростная мешалка может быть подходящей в большем масштабе.
Первичную эмульсию затем преобразуют в тонкодисперсную эмульсию с помощью гомогенизатора высокого давления. Размер частиц грубой эмульсии, по существу, не воздействует на величину частиц после последовательных проходов (103) через гомогенизатор. М-110-ЕН (фиг. 5).
Было обнаружено, что давление подачи в гомогенизатор оказывает значительное воздействие на размер получаемых частиц. Было обнаружено, что и на пневматическом, и на электрическом гомогенизаторах М-110ЕН снижение давления подачи также уменьшило размер частиц (фиг. 6). Поэтому стандартное рабочее давление, используемое для Μ-110ЕН, составляет 4000-5000 ρκί на камеру взаимодействия, что является минимальным давлением обработки на единицу. Μ-110ЕН также имеет выбор одной или двух камер взаимодействия. Стандартной является рестриктивная Υ-камера в ряду с менее рестриктивными 200-мкм Ζ-камерами. Было обнаружено, что размер частиц был фактически уменьшен, когда Υ- 34 020954 камеру удаляли и заменяли чистой камерой. Кроме того, удаление Υ-камеры значительно увеличивает объемную скорость потока эмульсии в ходе обработки.
После 2-3 проходов размер частиц не был значительно уменьшен, и последовательные проходы могут даже вызвать увеличение размера частиц. Результаты суммированы на фиг. 7, где органическая фаза плацебо состояла из 25,5% полимерного сырья, состоящего из 50:50 16,5/5 ПМК/ПЭГ:8,2 ПМК. Органическую фазу эмульгировали в отношении 5:1 М:В со стандартной водной фазой и осуществляли многократные осторожные проходы, производя гашение небольшой части эмульсии после каждого прохода. Обозначенный масштаб представляет собой сумму твердых частиц состава.
Эффект масштаба на размер частиц показал удивительную зависимость от масштаба. Тенденция показывает, что в диапазоне размера загрузки 2-10 г большие загрузки приводят к меньшим частицам. Было показано, что эта зависимость от масштаба исчезает при масштабе загрузки более 10 г. Количество твердых частиц, используемых в масляной фазе, составляло приблизительно 30%. Фиг. 8 и 9 изображают эффект концентрации твердых частиц на загрузку лекарственного средства и размер частиц; за исключением серий 15-175, все загрузки представляли собой плацебо. Для загрузки плацебо значение % твердых частиц представляет % твердых частиц, где лекарственное средство присутствовало в стандартной доле 20% вес./вес.
В табл. А суммированы параметры процесса эмульгирования.
Таблица А
Параметр Значение Наблюдение
Образование грубой эмульсии Роторно- статорный гомогенизатор Размер частиц грубой эмульсии не влияет на конечный размер частиц, но большой размер грубой эмульсии может вызвать увеличение задержки масляной фазы в питающем сосуде
Давление подачи в гомогенизатор 4000-5000 рзх на камеру Более низкое давление уменьшает размер частиц
Камера(ы) взаимодействи я 2-камера 2x200 мкм Ζ-камера размером 200 мкм приводит к более мелкому размеру частиц и позволяет повысить производительность гомогенизатора
Число проходов через гомогенизатор 2-3 прохода Исследования показали, что размер частиц не существенно уменьшается после двух отдельных проходов и что размер может даже увеличиться при последовательных проходах
Водная фаза [холат натрия] 0,1% [Холат натрия] может эффективно менять размер частиц; значение оптимизируют для данного прохода и состава
Отношение В:М 5:1 Наименьшее отношение, которое не приводит к существенному увеличению размера частиц, составляет ~5:1
[Твердые частицы] в масляной фазе 30% Чем выше эффективность процесса, тем выше инкапсулирование лекарственного средства, тем более оптимальна вязкость
Тонкодисперсную эмульсию затем гасят добавлением к деионизированной воде при данной температуре при перемешивании. На единицу операции гашения эмульсию добавляют к холодной водной среде для гашения при перемешивании. Это обеспечивает экстрагирование значительной части растворителей масляной фазы, эффективно отверждая наночастицы для последующей фильтрации. Охлаждение среды для гашения значительно улучшает инкапсулирование лекарственного средства. Отношение среда для гашения:эмульсия составляет приблизительно 5:1.
Раствор 35 вес. процентов Т\уссп 80 добавляют к среде для гашения, чтобы достигнуть приблизительно 2% Т\уссп 80 в целом. После гашения эмульсии добавляют раствор Т\уссп 80, который действует в качестве солюбилизатора лекарственного средства, позволяя эффективное удаление неинкапсулированного лекарственного средства в ходе фильтрации. В табл. В указан каждый из параметров процесса гашения.
- 35 020954
Таблица В. Итоговые параметры процесса гашения
Параметр Значение Наблюдение
Начальная температура гашения <5вС Низкая температура приводит к высокой степени инкапсулирования лекарственного средства
Раствор [Тмееп80] 35% Наивысшая концентрация, которая может быть получена и легко диспергирована в среде для гашения
Отношение Тмееп80:лекарственное средство 25:1 Минимальное количество Тиееп-80, необходимое для эффективного удаления неинкапсулированного лекарственного средства
Отношение Г:Э 5:1 Минимальное отношение Г:Э при сохранении высокой степени инкапсулирования лекарственного средства
Температура гашения/обработки <5аС {при текущем отношении Г:Э 5:1, отношении Тиееп8 0:лекарственное средство 25:1) Температура, которая позволяет предупредить выщелачивание лекарственного средства при нахождении в среде для гашения и на стадии начальной концентрации
Температура должна оставаться достаточно низкой с достаточно разбавленной суспензией (достаточно низкая концентрация растворителей), чтобы остаться ниже Т„ частиц. Если отношение Г:Э не достаточно высоко, то более высокая концентрация растворителя пластифицирует частицы и приводит к потере лекарственного средства. Наоборот, более низкие температуры обеспечивают высокую степень инкапсулирования лекарственного средства при низких отношениях Г:Э (до ~3:1), позволяя более эффективно контролировать процесс.
Наночастицы затем выделяют посредством процесса фильтрации тангенциального потока, чтобы сконцентрировать суспензию наночастиц и осуществить буферный обмен растворителей, свободного лекарственного средства и солюбилизатора лекарственного средства из раствора для гашения в воду. Используют мембрану из регенерированной целлюлозы с отсечкой по молекулярной массе (М^СО) 300.
Осуществляют диафильтрацию (ΌΡ) постоянного объема, чтобы удалить растворители для гашения, свободное лекарственное средство и Ттеееп 80. Чтобы осуществить ΌΕ постоянного объема, буфер добавляют в удерживающий сосуд с той же самой скоростью, с которой удаляют фильтрат. Параметры процесса для действий ТРР представлены в табл. С. Поперечная скорость потока относится к скорости перетекания раствора через питающие каналы и через мембрану. Этот поток обеспечивает силу для удаления молекул, которые могут загрязнить мембрану и ограничить поток фильтрата. Трансмембранное давление представляет собой силу, которая проводит проницаемые молекулы через мембрану.
Таблица С. Параметры ТРР
Параметр ОпФимиаированяое значение Эффект
Материал мембраны Регенерированная целлюлоза-Соагзе Зсгееп МетЬгапе Нет различия в производительности между РЦ и РЕЗ, но совместимость с растворителем выше у РЦ
Отсечка по молекулярной массе 300 кДа Нет разницы в характеристиках ΝΡ (т.е. остаточное количество Тмееп). Увеличение скоростей потока наблюдается в случае мембраны 500 кДа, но 500 кДа невозможны в случае РЦ
Поперечная скорость потока 11 л/мин/м2 Более высокая поперечная скорость приводит к увеличению потока
Трансмембранное давление 20 рзШ Мембраны с открытыми каналами имеют максимальные скорости потока от 10 до 30 рз±0. Грубые канальные мембраны имеют максимальные скорости потока с мин. ТМР (~20 ρ3Ϊά).
Концентрация суспензии наночастиц для диафильтрации 30 мг/мл Диафильтрация более эффективна при [ΝΡ] ~50 мг/мл с мембранами с открытыми каналами ТЕГ в расчете на скорости потока и производительность. В случае грубых канальных мембран скорость потока оптимизируют на уровне ~30 мг/мл в исходном буфере.
Число диаобъемов £15 (в расчете на увеличение потока) Примерно 15 диаобъемов необходимы для эффективного удаления Тмееп-80. Конечную точку диафильтрации определяют с помощью внутрипроцессового контроля (плато усиления потока)
Ареал мембраны -1 м!/кг Размер мембраны, рассчитанный на основе предполагаемых скоростей потока и требуемых объемов
Отфильтрованную суспензию наночастиц затем подвергают циклической термообработке, повышая
- 36 020954 температуру в процессе обработки. Небольшая часть (обычно 5-10%) инкапсулированного лекарственного средства очень быстро высвобождается из наночастицы после первого воздействия 25°С. Из-за этого явления загрузки, которые поддерживаются холодными в течение всей обработки, могут высвобождать лекарственное средство или кристаллы лекарственного средства, образующиеся в ходе доставки или любой стадии хранения в размороженном состоянии. При действии на суспензию наночастиц повышенной температуры в ходе обработки это свободно инкапсулированное лекарственное средство может быть удалено и стабильность продукта улучшена за счет небольшого снижения в загрузке лекарственного средства. В табл. И показаны два примера обработки при 25°С. Другие эксперименты показали, что продукт достаточно стабилен после экспонирования ~2-4 диаобъемов действию температуры 25°С без потери большей части инкапсулированного лекарственного средства. 5 Диаобъемов используются как количество для холодной обработки перед обработкой при 25°С.
Таблица Ό
Партия А Партия В
Загрузка лекарственного средства Холодная обработка 11,3% 9,7%
Обработка при 25^01 8,7-9,1% 9,0-9,9%
Стабильность2 Холодная обработка <1 дня <1 дня
Обработка при 25*С* 5-7 дней 2-7 дней
Разрушение3 Холодная обработка -10% Не проводилось
Обработка при 2 5вС1 -2%
'Субпартии, подвергаемые обработке при 25°С, были подвергнуты действию 25°С по меньшей мере после 5 диаобъемов в течение различных промежутков времени. Диапазоны указаны, потому что было множество субпартий с экспонированием 25°С.
2Данные по стабильности представляют время, в течение которого конечный продукт мог быть поддержан при 25°С в концентрации наночастиц 10-50 мг/мл до образования кристаллов в суспензии (видимых с помощью микроскопии). 3Разрушение ίη νίίΓο представляет лекарственное средство, высвобождаемое в первый момент времени (по существу, немедленно)
После процесса фильтрации суспензию наночастиц пропускают через фильтр стерилизующего качества (0,2 мкм в абсолюте). Предварительные фильтры применяются для защиты стерилизующего фильтра, чтобы использовать приемлемую область фильтрации/время для процесса. Значения представлены в табл. Е.
ТаблицаЕ
Параметр Звачение Эффект
Концентрация суспензии наночастиц 50 мг/мл Снижение выхода выше при более высоком [ΝΡ], но способность к фильтрации при 50 мг/мл делает очевидной необходимость асептической концентрации после фильтрации
Скорость потока фильтрации -1,3 л/мин/м2 Способность к фильтрации снижается при увеличении скорости потока
Фильтровальный механизм: Ег1е1 АИор МкготеФа ХЬ мембрана объемного фильтра М953Р (0,2 мкм номинал); Ра11 8ИРКАсар со средой объемного фильтра δοίΐζ ЕК8Р (0,1-0,3 мкм номинал); Ра11 ЬЬе 8скпсе§ 8ирог ЕКУ 0,65/0,2 мкм фильтр стерилизующего качества РЕδ.
Могут использоваться 0,2 м2 площади поверхности фильтрации на кг наночастиц для объемных фильтров и 1,3 м2 площади поверхности фильтрации на кг наночастиц для фильтров стерилизующего качества.
Пример 9.
Могут быть получены специфические к мишени наночастицы, которые включают биологически совместимый полимер, конъюгированный, например, с ПЭГ, описанными в данном документе химиотерапевтическими препаратами, и необязательно конъюгированный с СЬ1 или СЬ2. Примеры наночастиц показаны ниже в табл. 1.
- 37 020954
Таблица 1. Наночастицы, имеющие указанное терапевтическое средство и полимерный конъюгат, содержащий Биосовместимый Полимер-Полимер-(Нацеливающая Группа)
Терапевтическое средство Биосовместимый полимер Полимер группа {необязательно)
винкристин ПМГК ПЭГ си
винкристин ПМК ПЭГ си
винкристин пгк ПЭГ сы
винкристин ПМГК ПЭГ 602
винкристин ПМК ПЭГ СО2
винкристин пгк ПЭГ СЬ2
винкристин ПМГК ПЭГ-ОЗРЕ 601
винкристин ПМК Π3Γ-ϋ3ΡΕ си
винкристин пгк ПЭГ-ОЗРЕ СЫ
винкристин ПМГК ПЭГ-ОЗРЕ СЬ2
винкристин ПМК ПЭГ-ϋδΡΕ СО2
винкристин пгк ПЭГ-ϋδΡΕ СО2
доцетаксел ПМГК ПЭГ СЫ
доцетаксел ПМК ПЭГ С01
доцетаксел пгк пэг сы
доцетаксел ПМГК ПЭГ СЬ2
доцетаксел ПМК ПЭГ СО2
доцетаксел ПГК ПЭГ СЬ2
доцетаксел ПМГК ПЭГ-ϋδРЕ СЫ
доцетаксел ПМК ПЭГ-ϋδΡΕ СЫ
доцетаксел ПГК ПЭГ-ВЗРЕ СЫ
доцетаксел ПМГК ПЭГ-йЗРЕ 602
доцетаксел ПМК Π3Γ-ϋ5ΡΕ 602
доцетаксел пгк ПЭГ-ОЗРЕ СО2
сиролимус ПМГК пэг СЫ
сиролимус ПМК ПЭГ СЫ
сиролимус пгк пэг СЫ
сиролимус ПМГК ПЭГ С02
сиролимус ПМК ПЭГ СО2
сиролимус ПГК ПЭГ 602
сиролимус ПМГК ПЭГ-05РЕ СЫ
сиролимус ПМК ПЭГ-ОЗРЕ СЫ
сиролимус пгк пэг-озре сы
сиролимус ПМГК · ПЭГ-ϋδΡΕ СЬ2
сиролимус ПМК ПЭГ-ϋδΡΕ 6Ь2
сиролимус пгк ПЭГ-ϋδΡΕ 602
гемцитабин ПМГК ПЭГ СЫ
гемцитабин ПМК ПЭГ СЫ
гемцитабин пгк ПЭГ СЫ
гемцитабин ПМГК ПЭГ 602
гемцитабин ПМК ПЭГ 602
гемцитабин ПГК пэг 602
гемцитабин ПМГК ПЭГ-03РЕ сы
гемцитабин ПМК ПЭГ-ОЗРЕ сы
гемцитабин пгк ПЭГ-ОЗРЕ сы
гемцитабин ПМГК ПЭГ-ϋδΡΕ С02
гемцитабин ПМК ПЭГ-ОЗРЕ 002
гемцитабин пгк ПЭГ-05РЕ 002
5-фторурацил ПМГК пэг сы
5-фторурацил ПМК пэг сы
5-фторурацил пгк пэг сы
5-фторурацил ПМГК пэг 602
5-фторурацил ПМК пэг 602
5-фторурацил пгк пэг С02
5-фторурацил ПМГК ПЭГ-ОЗРЕ СО1
5-фторурацил ПМК ПЭГ-ОЗРЕ сы
5-фторурацил пгк ПЭГ-ОЗРЕ сы
5-фторурацил пмгк ПЭГ-ОЗРЕ 602
5-фторурацил ПМК ПЭГ-ОЗРЕ 002
5-фторурацил ПГК ПЭГ-ОЗРЕ 602
паклитаксел ПМГК ПЭГ сы
паклитаксел ПМК пэг сы
паклитаксел пгк ПЭГ сы
паклитаксел пмгк пэг 602
паклитаксел ПМК пэг 002
паклитаксел ПГК пэг 602
паклитаксел пмгк ПЭГ-ОЗРЕ сы
паклитаксел ПМК ПЭГ-ОЗРЕ сы
паклитаксел пгк ПЭГ-ОЗРЕ сы
паклитаксел пмгк ПЭГ-ОЗРЕ 002
паклитаксел ПМК ПЭГ-ОЗРЕ 002
паклитаксел пгк ПЭГ-ОЗРЕ 602
даунорубицин ПМГК пэг 001
даунорубицин ПМК пэг СЪ1
даунорубицин пгк пэг 601
даунорубицин ПМГК пэг СЬ2
даунорубицин ПМК пэг С02
даунорубицин ПГК пэг 602
даунорубицин ПМГК ПЭГ-ОЗРЕ 6Ь1
даунорубицин ПМК ПЭГ-ОЗРЕ 6Ъ1
даунорубицин пгк ПЭГ-ОЗРЕ 001
даунорубицин пмгк ПЭГ-ОЗРЕ СЪ2
даунорубицин ПМК ПЭГ-ОЗРЕ СЬ2
даунорубицин пгк ПЭГ-ОЗРЕ 0Ь2
- 38 020954
Пример 10.
Наночастицы, показанные в табл. 2, получали, используя методику, описанную в примере 8. Наночастицы, включающие макромолекулы ПМГК-ПЭГ и макромолекулы ПМГК-ПЭГ-лиганд малой молекулы (§МЬ), были получены, как показано в исследованиях 1 и 2, ниже. В исследованиях 3 и 4 были получены наночастицы, включающие макромолекулы ПМК-ПЭГ, макромолекулы ПМГК-ПЭГ-§МЬ и макромолекулы ПМК (ИВ=диблок-сополимер).
Соотношение макромолекул, функционализированных нацеливающей малую молекулу группой, и нефункционализированных макромолекул может быть отрегулировано, и с использованием исследования 1 могут быть получены наночастицы с полимерными композициями, которые приблизительно на 0,94, 4,63 и 9,01 мол. процентов представляют собой функционализированные макромолекулы (см. мол. проценты ОВ-ОЬ2 от общего полимера). Дополнительно, с использованием этих способов могут быть получены наночастицы, включающие приблизительно 0,015, 0,073 и 0,143 вес. процентов лиганда малой молекулы относительно полного полимера (см. вес. проценты ОЬ2 от полного полимера).
Могут также быть получены наночастицы с функционализированными полимерами, которые составляют приблизительно 0,1-30, например, 0,1-20, например, 0,1-10 мол. процентов всей полимерной композиции наночастицы, а также наночастицы, имеющие весовой процент низкомолекулярного лиганда относительно полного полимера от 0,001 до 5, например, от 0,001 до 2, например, от 0,001 до 1.
Таблица 2
Вес.% твердых веществ Вес.% полимера Вес.% ВВ61*2 от ПМК-ПЭГ Мол.% ВВ6Ь2 от полмого полимера
Исследование 1 0,362 0,381052632 Неприменимо 0,947217483
1,81 1,905263158 Неприменимо 4,630814102
3,62 3,810526316 Неприменимо 9,011251618
Исследование 2 0,181 0,190526316 Неприменимо 0,474958408
0,362 0,381052632 Неприменимо 0,947217483
0,543 0,571578947 Неприменимо 1,416800171
1,81 1,905263158 Неприменимо 4,630814102
Исследование 3 0,362 0,4525 Неприменимо 0,178974269
1,81 2,2625 Неприменимо 0,891043972
Исследование 4 0,080241 0,100300903 0,200601805 0,079390136
Рассу, для 45К-5К ПМК-ПЭГ 0,161616 0,202020202 0,404040404 0,159825753
0,842105 1,052631579 2,105263158 0,829427309
1,702128 2,127659574 4/255319149 1,668024361
Исследование 4 0,190522 0,238151941 0,476303882 0,16998719
Рассе, для 16К-5К ПМК-ПЭГ
0,381134 0,476417342 0,952834683 0,340027827
1,909308 2,386634845 4,77326969 1,702280075
3,827751 4,784688995 9,56937799 3,409927685
Веа пмк 0,323232 0,404040404 0,404040404 0,159825753
Мол.% СЬ2 Вес.% ст ПОЛНОГО полимера Содержание С1>2, ч./иди.
Исследование 1 0,947217483 0,015108 151,0812
4,630814102 0,073861 738,6148
9,011251618 0,143729 1437,295
Исследование 2 0,474958408 0,007576 75,75587
0,947217483 0,015108 151,0812
1,416800171 0,022598 225,9796
4,630814102 0,073861 738,6148
Исследование 3 0,178974269 0,002855 28,5464
0,891043972 0,014212 142,1215
Исследование 4 Рассу. для 45К-5К ПМК-ПЭГ 0,079390136 0,001266 12,66273
0,159825753 0,002549 25,49221
0,829427309 0,013229 132,2937
1,668024361 0,026605 266,0499
Исследование 4 Рассу, для 16К-5К ПМК-ПЭГ 0,16998719 0,002711 27,11296
0,340027827 0,005423 54,23444
1,702280075 0,027151 271,5137
3,409927685 0,054388 543,8835
Бе» ПМК 0,159825753 0,002549 25,49221
- 39 020954
Пример 11.
Различные составы наночастиц получали, используя методику примера 8, как показано и сравнивается в табл. Р.
Таблица Р
Состав Тип полимера % твердых веществ Загрузка и равмер частиц
Отношение полимерПЭГ:ПМК (80:0? 60:20; 40:40 (базовое), 20:60) 16-5 отношение ПМК-ПЭГ :ПМК 5%
45-5 отношение ПМГК-ПЭГ:ПМК 5%
Молекулярная масса ПМК»1,9, 4, 6,5 (базовая), 8,5 кДа 16-5 ПМКПЭГ :ПМК (40:40) 5% 1,9 и 4 кДа имеют более низкую загруэку=2,5%
15-5 νδ 16-5 ПМКПЭГ:ПМК (40:40) 15-5 ПМКПЭГ :ПМК (40:40) 5% Как 15-5 ПМК-ПЭГ, так и 16-5 ПМК-ПЭГ имеют одинаковую загрузку и размер частиц
Общий % твердых веществ 5% ν5 15% 16-5 ПМКПЭГ :ПМК (40:40) 5% или 15% При использовании 15% твердых веществ? Зх увеличение эффективности инкапсулирования
16-5 ПМГК-ПЭГ νδ ПМК-ПЭГ (базовый) с ПМК (40:40) 16-5 ПМГКПЭГ :ПМК (40:40) 15% 16-5 ПМГК-ПЭГ и 16-5 ПМК-ПЭГ эквивалентны в отношении % загрузки и размера частиц
Альтернативный полимер: ПМГК-ПЭГ 28-5 ПМГКПЭГ :ПМК (40:40) 15% 28-5 ПМГК-ПЭГ = больший размер частиц по сравнению с остальными
45-5 ПМГКПЭГ :ПМК (40:40) 15% 45-5 ПМГК-ПЭГ = больший размер частиц
Отношение бензинового спирта к зтилацетату: 11:89, 21:79 (базовое), 32:68 БС:ЭА 16-5 ПМК- ПЭГ :ПМК (40:40) 15% Отношение = 21:79 (10,8% загрузки)? 32:68 и 11:89 приводят к загрузке 9,4 и 8,8%, соответственно
Сравнение растворителя с бензиловый спиртом: гептанол или гексанол 16-5 ПМК- ПЭГ :ПМК (40:40) 15% Растворитель бензиловый спирт (10,8% загрузки)? гептанол и гексанол оба приводят к загрузке ~2%
Загрузка мишени 10, 20 (базовая), 30% 16-5 ПМК- ПЭГ :ПМК (40:40) 15% Загрузка увеличивается с загрузкой мишени: %эагруэки = 5,8%, 9%, 13,3%, соответственно
Оптимального размера частиц можно достичь без использования гомополимера ПМК и без значительной потери загрузки лекарственного средства, как показано на фиг. 10. Загрузки с гомополимером ПМК высвобождают лекарственное средство значительно быстрее, чем загрузки, сделанные с использованием только сополимера (фиг. 11). Различные типы полимера и молекулярные массы не добавляли никакого дополнительного значения в отношении оптимизации загрузки лекарственного средства и размера частиц. Наоборот, при 15% твердых частиц с альтернативным полимером размер частиц был обычно больше, чем целевой размер 100-120 нм. Включение цетилового спирта в количестве 5 вес. процентов обычно увеличивало скорость высвобождения ίη νΐίΓΟ (фиг. 12).
Пример 12. Криопротектор
Замораживание суспензии наноэмульсии наночастиц только в деионизированной воде приводит к агрегации частиц. Это, как полагают, является следствием кристаллизации и переплетения цепей ПЭГ на поверхностях наночастиц ОасдНсгс с1 а1.; РНагтасеи11са1 КекеагсЬ 16(6), р. 859-852). Эксципиенты на основе сахара (сахароза, трегалоза или маннит) могут действовать в качестве криопротекторов этих наночастиц в условиях замораживания/оттаивания с такими низкими концентрациями, как 1 вес.% для разбавленных (~10 мг/мл) суспензий наночастиц. Один состав включает 10 вес. процентов сахарозы, что является избытком сахарозы по сравнению с необходимым, и имеет такую же осмоляльность, как физиологический солевой раствор.
В табл. С показано, что сополимер 16/5 ПМК-ПЭГ менее склонен к агрегации при замораживанииоттаивании (з/о).
- 40 020954
Таблица С
Описание Вачалыше медианные РЗС/РС Медианный РЗ после а/о (мм) Пояодмсперсяость после а/о Бааовый индекс после а/о
1:1 45/5 и ПМК (базовый) 143,4, 0,124 358,9 0,358 0,0/23,16*
16/5 ПМК-ПЭГ и ПМК (1:1) 186,7, 0,080 189,5 0,126 9,7/91,57%
2:1:1 16/5 ПМК:цетил 174,1, 0,084 232,7 0,146 0,0/61,194
2:1:1 45/5 ПМК:цетил 111,0/ 0,182 0 0 0,0/1,554
Только 16/5 ПМК-ПЭГ 218,8, 0,098 226,9 0,03 7,3/60,56%
16/5 ПМК-ПЭГ и ПМК (3:1) 222,2, 0,126 230,7 0,065 4,1/35,36%
45/5 ПМГК’ПЭГ и ПМК (3:1) 162,7, 0,099 178,6 0,091 7,7/95,41%
2:1:1 45/5 ПМК-ПЭГ- ПМКгцетил 115,9, 0,154 734,6 0,392 0,0/13,27%
Пример 13. Удаление палладия
В расчете на уровень дозы (мкг/сутки) в клинических испытаниях на людях максимальный приемлемый уровень палладия в композиции ПМК-ПЭГ-СЬ2 составляет приблизительно 10 ч./млн. Растворы полимера (ПМК-ПЭГ-СЬ2) (20 или 35 мг/мл) в дихлорметане (Όί','Μ) загружали на 5 г колонки со смолой (предварительно сольватированной 10 мл ЭСМ) и затем элюировали с использованием 30 мл ЭСМ под действием силы тяжести. Полимер рекуперировали удалением растворителя, используя выпаривание на роторном испарителе с последующей вакуумной сушкой при комнатной температуре. Восстановление полимера было определено гравиметрически, а остаточное содержание палладия было определено методом спектроскопии с индуктивно-связанной плазмой (1СР) в Са1Ьгайй ЬаЬогаЛпек 1пс.
Таблица Н
Испольвуе* мая смола Раствор ЛМК-ПЭГ-ВД2 и выход Содержание палладия (ч./млн.)
Раство- ритель мг/ип мг/5 I* смолы Вес.% восста- новления Тее» 1 Тест 2 Средне*
Гуанидин ОСМ 20 220 23 337 347 342
Тиол ОСМ 20 220 62 39 30 34,5
ТМТ □СМ 20 220 92 11 7 9
Мочевина осм 20 220 60 4470 НА 4470
Тиоыочевина ОСМ 20 220 45 40 36 38
Контроль осм 20 НА НА 4060 3980 4020
ТМТ ОСМ 35 335 91 9 7 8
Мочевина ОСМ 35 335 60 5360 4920 5140
Контроль осм ΝΑ ΝΑ НА 4240 4300 4270
ТМТ ОСИ 35 1050 92 3,8 2,7 3,25
Контроль ОСМ МА НА НА 3780 3880 3830
Как видно из табл. Н, функциональные группы тиола, ТМТ, мочевины и тиомочевины приводят к уровням палладия ниже 50 ч./млн в полимерной загрузке на оцениваемую единицу массы смолы. Однако только смола ТМТ (тримеркаптотриазин) приводит к хорошему (>90%) восстановлению полимера. Кроме того, смола ТМТ также приводит к содержанию палладия ниже порога 10 ч./млн. По-видимому, существует некоторая вариабельность результатов в зависимости от используемых экспериментальных условий. В частности, удаление палладия более эффективно, когда в 5-г колонку со смолой ТМТ загружали 1050 мг полимера. Это может быть следствием более длительного времени пребывания полимерных молекул и палладиевого катализатора в этих экспериментальных условиях.
Пример 14. Состав
Получали состав, который включает наночастицы ПМК-ПЭГ-лиганд, ПМК, ПМК-ПЭГ и доцетаксел, в композиции сахарозы/воды
Компонент Номинальная концентрация (мг/мл)
Доцетаксел 5
ПМК-ПЭГ-лиГанд 1,1
ПМК-ПЭГ 21,4
ПМК 22,5
Сахароза 100
Вода 0.5.
Пример 15. Высвобождение ίη νίίτο
Способ высвобождения ш νίίτο используется для определения фазы высвобождения начального взрыва из этих наночастиц как при температуре окружающей среды, так и при 37°С. Для поддержания условий стока и предотвращения попадания наночастиц в образцы высвобождения была разработана система диализа. После получения ультрацентрифуги, способной пеллетировать частицы размером 100 нм, мембраны для диализа удаляли и центрифугирование использовали, чтобы отделить высвобожденное лекарственное средство от инкапсулированного лекарственного средства.
Система диализа представляет собой следующее: 3 мл суспензии наночастиц доцетаксела (наноча- 41 020954 стицы с приблизительно 250 мкг/мл лекарственного средства/ПМГК/ПМК, что соответствует концентрации твердого вещества 2,5 мг/мл) в деионизированной воде помещали в камеру 300 кДа МАСО диализатора с помощью пипетки. Наночастицы суспендировались в этой среде. Диализатор помещали в стеклянные колбы, содержащие среду для высвобождения в количестве 130 мл (2,5% гидроксил-бетациклодекстрина в РВ8), которые непрерывно взбалтывали при 150 об/мин, используя вибросито, чтобы предотвратить образование водного слоя на границе мембрана/внешний раствор. В предопределенные моменты времени аликвоты образцов (1 мл) извлекали из внешнего раствора (диализат) и анализировали в отношении концентрации доцетаксела с помощью ВЭЖХ.
Центрифужную систему использовали в аналогичных условиях при более низких объемах суспензии без пакетов для диализа. Образцы центрифугировали при 60000 д в течение 30 мин и супернатант тестировали в отношении содержания лекарственного средства, чтобы определить высвобожденное лекарственное средство.
Пример 16. Высвобождение наночастиц доцетаксела ίη νίίτο
Суспензию наночастиц доцетаксела, полученных так, как в примере 8 (10 вес. процентов доцетаксела и 90 вес. процентов полимера (1,25 вес. процентов ПМК-ПЭГ-СЬ2 и 98,75 вес. процентов ПМКПЭГ, Μη ПМК=16 Да; Μη ПЭГ=5 Да), помещали в кассету для диализа и инкубировали в резервуаре РВ8 при 37°С с перемешиванием. Образец диализата собирали и анализировали на доцетаксел методом ВЭЖХ с обращенной фазой. Для сравнения обычный доцетаксел был подвергнут той же самой процедуре. На фиг. 13 показан профиль высвобождения наночастиц ίη νίίτο по сравнению с обычным доцетакселом. Высвобождение инкапсулированного доцетаксела из полимерной матрицы было, по существу, линейным за первые 24 ч, при этом остаток постепенно высвобождался из частиц в течение приблизительно 96 ч.
Пример 17. Наночастицы сиролимуса
Загрузки наночастиц получали, используя общую методику примера 8, с 80% (вес./вес.) полимераПЭГ или полимера-ПЭГ с гомополимером ПМК в количестве 40% (вес./вес.) каждый, с загрузкой в % от суммы твердых частиц 5, 15 и 30%. Используемыми растворителями были следующие: 21% бензилового спирта и 79% этилацетата (вес./вес.). Для каждой 2-граммовой загрузки использовали 400 мг лекарственного средства и 1,6 г 16-5 полимера-ПЭГ или 0,8 г 16-5 полимера-ПЭГ + 0,8 г 10 кДа ПМК (гомополимер). Использовали диблок-полимер 16-5 ПМК-ПЭГ или ПМГК-ПЭГ (50:50 М:Г) и, если он используется, гомополимер: ПМК с Μη=6,5 кДа, Μ\ν=10 кДа и Μν/Μη=1,55.
Органическую фазу (лекарственное средство и полимер) получали в 2-г загрузках: в сцинтилляционную ампулу на 20 мл добавляют лекарственное средство и полимер(ы). Масса растворителей, необходимых при концентрации твердых частиц в %, показана ниже
ί) 5% твердых частиц: 7,98 г бензилового спирта + 30,02 г этилацетата; ίί) 15% твердых частиц: 2,38 г бензилового спирта + 8,95 г этилацетата; ίίί) 30% твердых частиц: 0,98 г бензилового спирта + 3,69 г этилацетата.
Водный раствор получали с 0,5% холата натрия, 2% бензилового спирта и 4% этилацетата в воде. В колбу объемом 2 л добавляют 7,5 г холата натрия, 1402,5 г деионизированной воды, 30 г бензилового спирта и 60 г этилацетата и перемешивают на планшете для перемешивания до растворения.
Для образования эмульсии используется отношение водной фазы к масляной фазе 5:1. Органическую фазу вливают в водный раствор и гомогенизируют с использованием 1КА в течение 10 с при комнатной температуре, получая грубую эмульсию. Раствор пропускают через гомогенизатор (1108) при 9 Κρδΐ (45 ρδί на шкале) в виде 2 отдельных проходов, чтобы получить наноэмульсию.
Эту эмульсию вливают в среду для гашения (деионизированная вода) при температуре <5°С, перемешивая на планшете для перемешивания. Отношение среды для гашения к эмульсии составляет 8:1. Добавляют 35% (вес./вес.) Т\уссп 80 в воду для гашения при отношении Т\уссп 80 к лекарственному средству 25:1. Наночастицы концентрируют посредством ТРР и среду для гашения концентрируют на ТРР с кассетой 500 кДа Ра11 (2 мембраны) до ~100 мл. Диафильтрацию проводят, используя ~20 диаобъемов (2 л) холодной деионизированной воды, и объем доводят до минимального объема, затем собирают конечную суспензию, ~100 мл. Концентрацию твердых частиц в неотфильтрованной конечной суспензии определяют с использованием тарированной сцинтилляционной ампулы на 20 мл и с добавлением 4 мл конечной суспензии и сушкой в вакууме на лиофилизирующей печи и определяют массу наночастиц в 4 мл высушенной суспензии. Концентрированную сахарозу (0,666 г/г) добавляют к образцу конечной суспензии до достижения 10% сахарозы.
Концентрацию твердых частиц отфильтрованной (0,45 мкм) конечной суспензии определяли путем фильтрации приблизительно 5 мл образца конечной суспензии перед добавлением сахарозы через 0,45мкм шприцевой фильтр; в тарированную сцинтилляционную ампулу на 20 мл добавляли 4 мл отфильтрованного образца и высушивали в вакууме на лиофилизирующей печи.
- 42 020954
Оставшийся образец неотфильтрованной конечной суспензии замораживали с сахарозой.
Составы рапамицина (сиролимус)
Название Полимер Размер (нм) Загрузка лек. средства Высвобождение лек. средства (£=ч)
т=о Т-2 Т-4 Т-24
5% твердого вещества 16/5 ПМК/ПЭГ 123,1 3,61% N0 МО N0 МО
16/5 ПМК/ПЭГ+ПМК 119,7 4,49% N0 N0 N0 N0
15% твердого вещества 16/5 ПМК/ПЭГ 82,1 4,40% Νϋ НО N0 N0
16/5 ПМК/ПЭГ+ПМК 120,6 11,51% N0 НО N0 N0
23% твердого вещества 16/5 ПМК/ПЭГ 88,1 7,40% N0 но N0 НО
16/5 ПМК/ПЭГ+ПМК 118,3 7,8% N0 но ΝΟ НО
30% твердого вещества 16/5 ПМК/ПЭГ 88,5 10,26% 8,5 17,3 22,4 64,2
16/5 ПМК/ПЭГ+ПМК 118,3 10,18% 9,3 30,4 44,7 98,2
ΝΏ = нет данных
Эффект содержания твердого вещества и включения гомополимера поли(молочной)кислоты показан на фиг. 14.
Эксперименты по высвобождению ίη νίίΓο проводили, диспергируя наночастицы в ΡΒδ, содержащей 10% (вес./вес.) Тетееп 20 (Т20), при 37°С. Т20 использовали для повышения растворимости рапамицина в ΡΒδ до уровней, хорошо детектируемых с помощью ВЭЖХ, а также для поддержания условий стока. 3 мл Загруженных лекарственным средством наночастиц повторно диспергировали в 130 мл среды для высвобождения в широкогорлом сосуде в известной концентрации (приблизительно 250 мкг/мл). Эти объемы были выбраны для гарантии того, что максимальная концентрация лекарственного средства в среде для высвобождения всегда будет меньше, чем 10% максимальной растворимости, т.е. условий стока. Среду и суспензию наночастиц перемешивали при 150 об/мин. В предопределенные моменты времени аликвоты по 4 мл центрифугировали при 50000 об/мин (236000 §) в течение 1 ч, чтобы отделить наночастицы от среды для элюирования. Среду для элюирования вводили в ВЭЖХ, чтобы определить лекарственное средство, высвобожденное из наночастиц. Высвобождение рапамицина показало медленное и пролонгированное высвобождение, как показано на фиг. 15.
Пример 18. Темсиролимус
Наночастицы получали так, как в примере 17 и 8, за исключением того, что темсиролимус использовали с 30%-м содержанием твердых веществ в органической фазе перед эмульгированием
Название Полимер Размер (нм) Загрузка лек. средства Выс с вобождение лек. редства (1с—ч)
т=о т=2 Т-4 Т-24
30% твердого вещества 16/5 ПМК/ПЭГ 97,5 9,9% 11,5 15, 6 17,9 40,9
16/5 ПМК/ПЭГ+ПМК 112,8 14,2% 9,8 22,3 29,9 88,0
16/5 ПМГК/ПЭГ+ПМК 150,3 4,6 Ηϋ ΝΟ НО НО
16/5 ПМГК/ПЭГ+ПМК ΝΟ 6,9 10,6 35,7 45,8 87,0
ΝΏ = нет данных
Фиг. 16 показывает вес. проценты темсиролимуса, и фиг. 17 показывает наночастицу для различных полимерных наночастиц, содержащих темсиролимус. Результаты эксперимента по высвобождению ίη νίίτο, как в примере 17, показывают медленное и пролонгированное высвобождение темсиролимуса, показанное на фиг. 18.
Пример 19. Наночастицы винорелбина
Загрузки наночастиц получали, используя общую методику примера 8, с 80% (вес./вес.) полимераПЭГ или полимера-ПЭГ с гомополимером ПМК в количестве 40% (вес./вес.) каждый, с загрузкой в % от суммы твердых частиц 5, 15 и 30%. Используемыми растворителями были следующие: 21% бензилового спирта и 79% этилацетата (вес./вес.). Для каждой 2-граммовой загрузки использовали 400 мг винорелбина и 1,6 г 16-5 полимера-ПЭГ или 0,8 г 16-5 полимера-ПЭГ + 0,8 г 10 кДа ПМК (гомополимер). Использовали диблок-полимер 16-5 ПМК-ПЭГ или ПМГК-ПЭГ (50:50 М:Г) и, если он используется, гомополимер: ПМК с Мп=6,5 кДа, М\у=10 кДа и М\у/Мп=1,55.
Органическую фазу (лекарственное средство и полимер) получали в 2-г загрузках: в сцинтилляционную ампулу на 20 мл добавляют лекарственное средство и полимер(ы). Масса растворителей, необходимых при концентрации твердых частиц в %, показана ниже
ί) 5% твердых частиц: 7,98 г бензилового спирта + 30,02 г этилацетата; ίί) 15% твердых частиц: 2,38 г бензилового спирта + 8,95 г этилацетата; ίίί) 30% твердых частиц: 0,98 г бензилового спирта + 3,69 г этилацетата.
Водный раствор получали с 0,5% холата натрия, 2% бензилового спирта и 4% этилацетата в воде. В колбу добавляют 7,5 г холата натрия, 1402,5 г деионизированной воды, 30 г бензилового спирта и 60 г этилацетата и перемешивают на планшете для перемешивания до растворения.
Для образования эмульсии используют отношение водной фазы к масляной фазе 5:1. Органическую фазу вливают в водный раствор и гомогенизируют с использованием ΙΚΑ в течение 10 с при комнатной температуре, получая грубую эмульсию. Раствор пропускают через гомогенизатор (110δ) при 9 Κρδί (45
- 43 020954 ρβί на шкале) в виде 2 отдельных проходов, чтобы получить наноэмульсию.
Эту эмульсию вливают в среду для гашения (деионизированная вода) при температуре <5°С, перемешивая на планшете для перемешивания. Отношение среды для гашения к эмульсии составляет 8:1. Добавляют 35% (вес./вес.) Т\уеен 80 в воду для гашения при отношении Т\уеен 80 к лекарственному средству 25:1. Наночастицы концентрируют посредством ТРР и среду для гашения концентрируют на ТРР с кассетой 500 кДа Ρα11 (2 мембраны) до ~100 мл. Диафильтрацию проводят, используя ~20 диаобъемов (2 л) холодной деионизированной воды, и объем доводят до минимального объема, затем собирают конечную суспензию, ~100 мл. Концентрацию твердых частиц в неотфильтрованной конечной суспензии определяют с использованием тарированной сцинтилляционной ампулы на 20 мл и с добавлением 4 мл конечной суспензии и сушкой в вакууме на лиофилизирующей печи и определяют массу наночастиц в 4 мл высушенной суспензии. Концентрированную сахарозу (0,666 г/г) добавляют к образцу конечной суспензии до достижения 10% сахарозы.
Концентрацию твердых частиц отфильтрованной (0,45 мкм) конечной суспензии определяли путем фильтрации приблизительно 5 мл образца конечной суспензии перед добавлением сахарозы через 0,45мкм шприцевой фильтр; в тарированную сцинтилляционную ампулу на 20 мл добавляли 4 мл отфильтрованного образца и высушивали в вакууме на лиофилизирующей печи.
Оставшийся образец неотфильтрованной конечной суспензии замораживали с сахарозой.
Составы винорелбина
% твердого вещества Проведенное высвобождение ίη νέτο Тип полимера % загрузки винорелбина (ВЭЖХ) Размер частиц (нм)
5% 16-5 ПМК-ПЭГ 4,27 143,3
16-5 пмк-пэг+пмк 3,39 105,7
15% 16-5 ПМК-ПЭГ 6,2 100,3
16-5 ПМК-ПЭГ+ПМК 15,95 141,3
30% 16-5 ПМК-ПЭГ (п=3) 10,41 90,е
10,31 84,4
* 12,01 95
* 16-5 ПМК-ПЭГ+ПМК 15,03 125,5
* 16-5 ПМГК-ПЭГ+ПМК 14,66 120,3
♦«высвобождение ίη νΐετο, полученное на образцах
Высвобождение ίη νίίτο проводили на трех составах при 30% общего количества твердого вещества: 16-5 ПМК-ПЭГ; 16-5 ПМК-ПЭГ + ПМК и 16-5 ПМГК-ПЭГ + ПМК, и данные по высвобождению ίη νίίτο получали при 37°С в воздушной камере, используя 10% мочевины в растворе в ΡΒδ в качестве среды для высвобождения. В табл. ниже и на фиг. 19 показаны результаты.
Пример 20. Винкристин
Составы наночастиц, которые включают винкристин, получали, используя общую методику примера 8.
Составы винкристина
Ссыл. № Компоненты Весовой состав (%)
50-103-3-5 шПЭГ(5 к)-1ПМК(16К)/винкристин 96/4
50-117-1-5 тПЭГ(5 к)-2ПМК£ 16К)/винкри стин 95/5
50-117-2-5 лЛЭГ(5к)-1ПМК£16К)/винкристин 96/4
50-103-4 л1ПЭГ(5к)- 1ΠΜΚΪ16Κ)/1ΠΜΚΪ16Κ)/винкристин 46/46/8
50-103-2 шПЭГ £5к)- 1ПМК£16К)/1ПМК(16К)/винкристин 4-7/47/6
- 44 020954
Аналитическое определение характеристик составов винкристина
Ссыл. № Размер (нм) Загрузка лекарственного средства (%) Эффективность инкапсулирования <%>
50-103-3-5 103 4,4 21,8
50-117-1-5 110 4,6 22,8
50-117-2-5 115 4,2 20, 8
50-103-4 146 8,3 41,6
50-103-2 98 6,0 30,0
Высвобождение ίη νίΐτο проводили на составах винкристина, и данные по высвобождению ίη νίΐτο получали при 37°С в воздушной камере, используя 10% мочевины в растворе ΡΒδ в качестве среды для высвобождения. На фиг. 20 показано высвобождение ίη νίΐτο для нескольких из обозначенных партий.
Пример 21. Фармакокинетика
Фармакокинетические свойства (РК) наночастиц, содержащих винкристин, полученных так, как в примере 20, и содержащих доцетаксел, полученных так, как в примере 8, определяли на крысах 8ргадиеЭау1су (8Ό). Крысам (самцы §ргадие-Оау1еу, приблизительно 300 г с канюлированными яремными венами) вводили единственную внутривенную дозу 0,5 мг/кг свободного лекарственного средства или пассивно нацеливаемые наночастицы с инкапсулированным лекарственным средством (10 вес.% лекарственного средства, 90 вес.% полимера (ПМК-ПЭГ, Μη ПМК=16 Да; Μη ПЭГ=5 Да, ΡΤΝΡ) с 5 мг/кг лекарственного средства и ΡΤΝΡ в момент времени = 0. В различные моменты времени после введения собирали пробы крови из яремных вен через канюли в пробирки, содержащие гепарин лития, и получали плазму. Плазменные уровни определяли экстракцией лекарственных средств из плазмы с последующим анализом методом ЬСМ§.
На фиг. 21 показаны профили РК винкристина и винкристина ΡΤΝΡ, и доцетаксела и доцетаксела ΡΤΝΡ.
Пример 22. Анализ размера частиц
Размер частиц анализировали по двум методикам - динамическому рассеянию света (ΌΕ8) и лазерной дифракции. ОЬ§ осуществляли с помощью прибора ΒιόοΚΙκπόπ ΖеΐаΡа18 при 25°С в разбавленной водной суспензии, используя рассеяние с помощью 660-нм лазера при 90°, и анализировали с использованием способов ί'ϊιιηιι1;·ιηΐ5 и ΝΝΣδ (ΤΡ008). Лазерную дифракцию осуществляли с помощью прибора НютЛа Ь§950 в разбавленной водной суспензии, используя как лазер Не№ при 633 нм, так и ЬЕО при 405 нм, осуществляя рассеяние при 90°, и анализировали с использованием оптической модели М1е (ΤΡ009). Данные ОЬ§ связаны с гидродинамическим радиусом частиц, который включает корону ПЭГ, в то время как прибор для лазерной дифракции более близко связан с геометрическим размером ядра частицы ПМК.
Пример 23. Плотность лигандов
Если предположить, что полный диаметр частицы эквивалентен гидродинамическому диаметру, измеренному измерителем частицы ΒΐΌο1<1ι;·ι\Όη, наночастицы представляют собой совершенные сферы, и весь гидрофильный ПЭГ и лиганд экспрессируются на поверхности, а также то, что весь ПЭГ полностью гидратирован, модель поверхности частицы может быть построена так, как показано в табл. I.
Таблица I. Модель поверхности частицы для 100 нм частиц 16/5 сополимера и 6,5 кДа гомополимера
% лиганда Полимер (молекулы или δΑ/частнна) Покрытие лиганда
Мол. % сополимера Гомо- полимер Со- полимер нм'/ПЭГ моль/γΝΡ Молекулы/ частица нм^/лиганд
0%(ΝΤΝΡ) 7050 2182 14,40 0 0 ΝΑ
1%ОЬ2 7049 2183 14,39 1,72x10^ 22 1439
5%ОЬ2 7047 2187 14,37 8,63 х1(С 109 287
10%СЬ2 7043 2191 14,34 1,73х10г 219 143
Пример 24. Нацеливание на опухоль молочной железы
Способность внутривенно вводимых наночастиц, полученных так, как в примере 8 (10 вес. процентов доцетаксела, 90 вес. Процентов полимера (~1,25 вес. процентов ПМК-ПЭГ-СЬ2 и ~98,75% ПМКПЭГ, Μη ПМК=16 Да; Μη ПЭГ=5 Да) (маркированных как ΒΙΝΏ-14), ингибировать рост опухоли, не являющейся опухолью предстательной железы, оценивали в сравнении с обычным доцетакселом и контрольными ненацеливаемыми частицами, имеющими тот же самый состав лекарственного средства/полимера (ΡΤΝΡ), на мышах, которым были имплантированы ксенотрансплантаты МХ-1. Когда опухоли достигли среднего объема 300 мм3, мышам вводили тестируемые продукты (сахароза, доцетаксел, ΡΤΝΡ, ΒΙΝΏ-14) каждые 4 дня в количестве 3 доз. Средние объемы опухоли в течение долгого времени для каждой группы лечения показаны на фиг. 22.
Способность нацеливаемых наночастиц (ΒΙΝΏ-14) улучшать доставку доцетаксела к опухолям после внутривенного введения оценивали на мышах, несущих ксенотрансплантат рака молочной железы человека МХ-1, со средним объемом опухоли 1700 мм3. Концентрации доцетаксела (нг/мг) в опухолях, иссеченных спустя 24 ч после внутривенного введения из животных, которым вводили ΒΙΝΏ-14, ΡΤΝΡ и
- 45 020954 обычный доцетаксел, анализировали в отношении содержания доцетаксела с использованием ЬС/Μδ/Μδ, и результаты представлены на фиг. 23.
Пример 25. Нацеливание на опухоль предстательной железы
Доставку наночастиц доцетаксела с использованием наночастиц, полученных так, как в примере 8 (10 вес. процентов доцетаксела, 90 вес. процентов полимера (~1,25 вес. процентов ПМК-ПЭГ-СЬ2 и ~98,75% ПМК-ПЭГ, Μη ПМК=16 Да; Μη ПЭГ=5 Да; ΒΙΝΏ-14), к опухолям после внутривенного введения оценивали на самцах мышей δί'ΊΏ, несущих человеческие ксенотрансплантаты рака предстательной железы ЬМСаГ. Самцов мышей δί'ΊΏ подкожно инокулировали человеческими раковыми клетками предстательной железы ЬМСаГ. Спустя три-четыре недели после инокуляции вводили единственную внутривенную дозу 5 мг/кг доцетаксела, а также ΒΙΝΏ-14 или обычный доцетаксел. Мышей умерщвляли через 2 или 12 ч после введения. Опухоли от каждой группы иссекали и исследовали на доцетаксел способом ЬС-Μδ.
Спустя 12 ч после введения единственной дозы 50 мг/кг ΒΙΝΏ-14 концентрация доцетаксела в опухолях животных, получавших ΒΙΝΏ-14, была приблизительно в 7 раз выше, чем у животных, получающих обычный ОТХЬ, демонстрируя, что долгоциркулирующие ΡδΜΑ-нацеливаемые наночастицы доставляют большее количество ОТХЬ в опухолевый участок, как показано на фиг. 24.
Способность повторных доз ΒΙΝΏ-14 подавлять рост опухоли также оценивали на модели опухоли ксенотрансплантата ί-ΝΟ-ιΡ, как показано на фиг. 25. Самцов мышей δί'ΊΏ подкожно инокулировали человеческими раковыми клетками предстательной железы ЕМСаГ. Спустя три-четыре недели после инокуляции мышей обрабатывали через день четырьмя дозами ΒΙΝΏ-14, обычного доцетаксела (ОТХЬ), ОТХЬ, инкапсулированного в ненацеливаемых наночастицах (ΡΤNΡ), и носителя (контроль). После введения четырех доз 5 мг/кг сокращение объема опухоли было больше у животных, получавших ΒΙΝΏ-14, по сравнению с обычным доцетакселом или ненацеливаемыми частицами (БТ^). Увеличение концентрации доцетаксела в опухоли приводит к более явному цитотоксическому эффекту.
Эквиваленты
Для специалиста очевидно, или он может определить, используя обычное экспериментирование, множество эквивалентов конкретных вариантов осуществления изобретения, описанных в данном документе. Такие эквиваленты входят в рамки формулы изобретения.
Включение путем ссылки
Полное содержание всех патентов, опубликованных заявок на патент, веб-сайтов и других источников, процитированных в описании, тем самым явным образом полностью включено в настоящее описание путем ссылки.

Claims (12)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Терапевтическая наночастица, включающая от 5 до 30 вес.% терапевтического средства;
    от 10 до 90 вес.% диблок-сополимера полимолочная кислота-полиэтиленгликоль, включающего полимолочную кислоту, имеющую среднечисловую молекулярную массу 15-20 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу от 4 до 6 кДа, или диблок-сополимера полимолочная-сополигликолевая кислота-полиэтиленгликоль, включающего сополимер молочной и гликолевой кислот, имеющий среднечисловую молекулярную массу 5-20 кДа, и полиэтиленгликоль, имеющий среднечисловую молекулярную массу от 2 до 10 кДа; и до 75 вес.% полимолочной кислоты или сополимера молочной кислоты и гликолевой кислоты; причем гидродинамический диаметр терапевтической наночастицы составляет от 70 до 130 нм.
  2. 2. Терапевтическая наночастица по п.1, в которой терапевтическое средство представляет собой таксан.
  3. 3. Терапевтическая наночастица по п.1, в которой терапевтическое средство представляет собой винкристин или винорелбин.
  4. 4. Терапевтическая наночастица по п.1, в которой терапевтическое средство представляет собой сиролимус, темсиролимус или эверолимус.
  5. 5. Терапевтическая наночастица по любому из пп.1-4, гидродинамический диаметр которой составляет от 70 до 120 нм.
  6. 6. Терапевтическая наночастица по любому из пп.1-5, включающая от 40 до 90 вес.% диблоксополимера полимолочная кислота-полиэтиленгликоль.
  7. 7. Терапевтическая наночастица по любому из пп.1-6, включающая от 30 до 50 вес.% диблоксополимера полимолочная кислота-полиэтиленгликоль, от 30 до 50 вес.% полимолочной кислоты или сополимера молочной и гликолевой кислот и от 15 до 25 вес.% терапевтического средства.
  8. 8. Терапевтическая наночастица по любому из пп.1-7, дополнительно включающая полимер, представленный следующей формулой:
    - 46 020954 где у рав!н 222 и ζ равно 114.
  9. 9. Терапевтическая наночастица по любому из пп.1-8, дополнительно включающая спирт жирного ряда.
  10. 10. Фармацевтическая композиция, включающая множество наночастиц по любому из пп.1-9 и фармацевтически приемлемый эксципиент.
  11. 11. Композиция по п.10, включающая менее 10 ч./млн палладия.
  12. 12. Способ лечения рака предстательной железы или молочной железы, включающий введение пациенту эффективного количества терапевтических наночастиц по любому из пп.1-9 или композиций по п.10 или 11.
EA201170038A 2008-06-16 2009-06-16 Загруженные лекарственным средством полимерные наночастицы, фармацевтическая композиция и способ лечения рака EA020954B1 (ru)

Applications Claiming Priority (16)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US6176008P 2008-06-16 2008-06-16
US6169708P 2008-06-16 2008-06-16
US6170408P 2008-06-16 2008-06-16
US8815908P 2008-08-12 2008-08-12
US10591608P 2008-10-16 2008-10-16
US10677708P 2008-10-20 2008-10-20
US16951909P 2009-04-15 2009-04-15
US16951409P 2009-04-15 2009-04-15
US16954109P 2009-04-15 2009-04-15
US17378409P 2009-04-29 2009-04-29
US17379009P 2009-04-29 2009-04-29
US17520909P 2009-05-04 2009-05-04
US17522609P 2009-05-04 2009-05-04
US17521909P 2009-05-04 2009-05-04
US18230009P 2009-05-29 2009-05-29
PCT/US2009/047513 WO2010005721A2 (en) 2008-06-16 2009-06-16 Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201170038A1 EA201170038A1 (ru) 2011-08-30
EA020954B1 true EA020954B1 (ru) 2015-03-31

Family

ID=41507660

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201170038A EA020954B1 (ru) 2008-06-16 2009-06-16 Загруженные лекарственным средством полимерные наночастицы, фармацевтическая композиция и способ лечения рака
EA201170039A EA021422B1 (ru) 2008-06-16 2009-06-16 Полимерные наночастицы, содержащие терапевтическое средство, и способ их получения

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201170039A EA021422B1 (ru) 2008-06-16 2009-06-16 Полимерные наночастицы, содержащие терапевтическое средство, и способ их получения

Country Status (18)

Country Link
US (14) US8420123B2 (ru)
EP (3) EP2309990B2 (ru)
JP (5) JP6363320B2 (ru)
KR (3) KR20160116062A (ru)
CN (1) CN104997732A (ru)
AU (1) AU2009268923B2 (ru)
CA (1) CA2728176C (ru)
DK (1) DK2774608T3 (ru)
EA (2) EA020954B1 (ru)
ES (2) ES2765240T3 (ru)
HK (1) HK1211492A1 (ru)
HU (1) HUE047004T2 (ru)
IL (1) IL210024A (ru)
MX (1) MX2010014018A (ru)
PL (1) PL2774608T3 (ru)
PT (1) PT2774608T (ru)
SI (1) SI2774608T1 (ru)
WO (2) WO2010005721A2 (ru)

Families Citing this family (249)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007001448A2 (en) * 2004-11-04 2007-01-04 Massachusetts Institute Of Technology Coated controlled release polymer particles as efficient oral delivery vehicles for biopharmaceuticals
WO2007070682A2 (en) 2005-12-15 2007-06-21 Massachusetts Institute Of Technology System for screening particles
CA2648099C (en) 2006-03-31 2012-05-29 The Brigham And Women's Hospital, Inc System for targeted delivery of therapeutic agents
US20110052697A1 (en) * 2006-05-17 2011-03-03 Gwangju Institute Of Science & Technology Aptamer-Directed Drug Delivery
WO2007150030A2 (en) 2006-06-23 2007-12-27 Massachusetts Institute Of Technology Microfluidic synthesis of organic nanoparticles
WO2008019142A2 (en) * 2006-08-04 2008-02-14 Massachusetts Institute Of Technology Oligonucleotide systems for targeted intracellular delivery
WO2008147456A2 (en) * 2006-11-20 2008-12-04 Massachusetts Institute Of Technology Drug delivery systems using fc fragments
EP2134830A2 (en) 2007-02-09 2009-12-23 Massachusetts Institute of Technology Oscillating cell culture bioreactor
WO2008124639A2 (en) * 2007-04-04 2008-10-16 Massachusetts Institute Of Technology Poly (amino acid) targeting moieties
HUE047200T2 (hu) 2007-08-17 2020-04-28 Purdue Research Foundation PSMA kötõ ligandum-linker konjugátumok és azok alkalmazási módszerei
EP2436376B1 (en) 2007-09-28 2014-07-09 BIND Therapeutics, Inc. Cancer cell targeting using nanoparticles
ES2627292T3 (es) 2007-10-12 2017-07-27 Massachusetts Institute Of Technology Nanotecnología de vacunas
US8613951B2 (en) 2008-06-16 2013-12-24 Bind Therapeutics, Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles with mTor inhibitors and methods of making and using same
ES2721850T3 (es) 2008-06-16 2019-08-05 Pfizer Nanopartículas poliméricas terapéuticas que comprenden alcaloides vinca y procedimientos de fabricación y uso de las mismas
EP2309990B2 (en) * 2008-06-16 2017-03-15 Pfizer Inc. Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same
US8277812B2 (en) 2008-10-12 2012-10-02 Massachusetts Institute Of Technology Immunonanotherapeutics that provide IgG humoral response without T-cell antigen
US8591905B2 (en) 2008-10-12 2013-11-26 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Nicotine immunonanotherapeutics
US8563041B2 (en) 2008-12-12 2013-10-22 Bind Therapeutics, Inc. Therapeutic particles suitable for parenteral administration and methods of making and using same
JP2012512175A (ja) * 2008-12-15 2012-05-31 バインド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド 治療薬を徐放するための長時間循環性ナノ粒子
US20110262490A1 (en) * 2009-03-30 2011-10-27 Jerry Zhang Polymer-agent conjugates, particles, compositions, and related methods of use
WO2010117668A1 (en) * 2009-03-30 2010-10-14 Cerulean Pharma Inc. Polymer-agent conjugates, particles, compositions, and related methods of use
WO2010114768A1 (en) * 2009-03-30 2010-10-07 Cerulean Pharma Inc. Polymer-epothilone conjugates, particles, compositions, and related methods of use
WO2010114770A1 (en) * 2009-03-30 2010-10-07 Cerulean Pharma Inc. Polymer-agent conjugates, particles, compositions, and related methods of use
BRPI1011836A2 (pt) * 2009-04-21 2017-05-16 Selecta Biosciences Inc imunonanoterapêuticos que fornecem uma resposta induzida por th1
AU2010254551B2 (en) 2009-05-27 2016-10-20 Selecta Biosciences, Inc. Immunomodulatory agent-polymeric compounds
US8357401B2 (en) 2009-12-11 2013-01-22 Bind Biosciences, Inc. Stable formulations for lyophilizing therapeutic particles
EA201290498A1 (ru) * 2009-12-15 2013-01-30 Байнд Байосайенсиз, Инк. Терапевтические полимерные наночастицы, включающие эпотилон, и способы их получения и применения
ES2780156T3 (es) 2009-12-15 2020-08-24 Pfizer Composiciones terapéuticas de nanopartículas poliméricas con alta temperatura de transición vítrea o copolímeros de alto peso molecular
WO2011084518A2 (en) * 2009-12-15 2011-07-14 Bind Biosciences, Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles comprising corticosteroids and methods of making and using same
US9951324B2 (en) 2010-02-25 2018-04-24 Purdue Research Foundation PSMA binding ligand-linker conjugates and methods for using
JP2013522653A (ja) 2010-03-24 2013-06-13 ノースイースタン ユニヴァーシティ 早期癌病巣のための多重モード診断技術
US20110237686A1 (en) 2010-03-26 2011-09-29 Cerulean Pharma Inc Formulations and methods of use
US8207290B2 (en) 2010-03-26 2012-06-26 Cerulean Pharma Inc. Methods and systems for generating nanoparticles
WO2011123479A1 (en) * 2010-03-29 2011-10-06 Academia Sinica Quantitative measurement of nano / micro particle endocytosis with cell mass spectrometry
CN101804021B (zh) * 2010-04-21 2012-05-09 山东大学 载多烯紫杉醇纳米粒混合胶束制剂及冻干剂的制备方法
CN102232927A (zh) * 2010-04-30 2011-11-09 中南大学 长春新碱-peg-plga嵌段共聚物纳米粒及其制备方法和用途
CA2798323A1 (en) 2010-05-26 2011-12-01 Selecta Biosciences, Inc. Dose selection of adjuvanted synthetic nanocarriers
US9101647B2 (en) * 2010-06-04 2015-08-11 Hough Ear Institute Composition and method for inner ear sensory hair cell regeneration and replacement
EP3578205A1 (en) 2010-08-06 2019-12-11 ModernaTX, Inc. A pharmaceutical formulation comprising engineered nucleic acids and medical use thereof
WO2012026316A1 (ja) * 2010-08-23 2012-03-01 株式会社 島津製作所 スイッチング型蛍光ナノ粒子プローブ及びそれを用いた蛍光分子イメージング法
CA2813466A1 (en) 2010-10-01 2012-04-05 Moderna Therapeutics, Inc. Modified nucleosides, nucleotides, and nucleic acids that disrupt major groove binding partner interactions
US20120101390A1 (en) * 2010-10-20 2012-04-26 Iftimia Nicusor V Multi-Modal Imaging for Diagnosis of Early Stage Epithelial Cancers
WO2012054923A2 (en) * 2010-10-22 2012-04-26 Bind Biosciences, Inc. Therapeutic nanoparticles with high molecular weight copolymers
WO2012059936A1 (en) 2010-11-03 2012-05-10 Padma Venkitachalam Devarajan Pharmaceutical compositions for colloidal drug delivery
US9994443B2 (en) 2010-11-05 2018-06-12 Selecta Biosciences, Inc. Modified nicotinic compounds and related methods
RU2018102375A (ru) 2010-11-18 2019-02-21 Зе Дженерал Хоспитал Корпорейшен Новые композиции и применения антигипертензивных средств для терапии рака
WO2012103182A1 (en) 2011-01-28 2012-08-02 Cerulean Pharma Inc. Method for fabricating nanoparticles
WO2012109363A2 (en) 2011-02-08 2012-08-16 The Johns Hopkins University Mucus penetrating gene carriers
CA2831613A1 (en) 2011-03-31 2012-10-04 Moderna Therapeutics, Inc. Delivery and formulation of engineered nucleic acids
CN103517707A (zh) 2011-04-29 2014-01-15 西莱克塔生物科技公司 从合成纳米载体中控制释放免疫抑制剂
US20140308363A1 (en) * 2011-05-31 2014-10-16 Bind Therapeutics, Inc. Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same
US20130028857A1 (en) 2011-07-29 2013-01-31 Selecta Biosciences, Inc. Synthetic nanocarriers comprising polymers comprising multiple immunomodulatory agents
US8865796B2 (en) * 2011-08-09 2014-10-21 University Of South Carolina Nanoparticles with multiple attached polymer assemblies and use thereof in polymer composites
US9464124B2 (en) 2011-09-12 2016-10-11 Moderna Therapeutics, Inc. Engineered nucleic acids and methods of use thereof
JP2014531456A (ja) * 2011-09-22 2014-11-27 バインド セラピューティックス インコーポレイテッド 治療用ナノ粒子と癌を治療する方法
CN110511939A (zh) 2011-10-03 2019-11-29 现代泰克斯公司 修饰的核苷、核苷酸和核酸及其用途
US9498471B2 (en) 2011-10-20 2016-11-22 The Regents Of The University Of California Use of CDK9 inhibitors to reduce cartilage degradation
RU2631599C2 (ru) * 2011-12-14 2017-09-25 Дзе Джонс Хопкинс Юниверсити Наночастицы, легче проникающие в слизистую оболочку или вызывающие меньше воспаления
EP2791160B1 (en) 2011-12-16 2022-03-02 ModernaTX, Inc. Modified mrna compositions
EP2811980A4 (en) * 2012-01-31 2015-12-23 Cerulean Pharma Inc POLYMER-AGENT CONJUGATES, PARTICLES, COMPOSITIONS AND METHODS OF USE THEREOF
US9618501B2 (en) * 2012-02-23 2017-04-11 University Of South Florida Three-dimensional fibrous scaffolds for cell culture
US9624473B2 (en) * 2012-02-23 2017-04-18 Subhra Mohapatra Three-dimensional fibrous scaffolds for cell culture
US9572897B2 (en) 2012-04-02 2017-02-21 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cytoplasmic and cytoskeletal proteins
US9878056B2 (en) 2012-04-02 2018-01-30 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of cosmetic proteins and peptides
US9283287B2 (en) 2012-04-02 2016-03-15 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of nuclear proteins
EP2833923A4 (en) 2012-04-02 2016-02-24 Moderna Therapeutics Inc MODIFIED POLYNUCLEOTIDES FOR THE PRODUCTION OF PROTEINS
CN108949772A (zh) 2012-04-02 2018-12-07 现代泰克斯公司 用于产生与人类疾病相关的生物制剂和蛋白质的修饰多核苷酸
AU2013299641A1 (en) 2012-08-10 2015-03-19 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Drug delivery vehicle comprising conjugates between targeting polyamino acids and fatty acids
US9095625B2 (en) 2012-08-31 2015-08-04 University Of Massachusetts Graft-copolymer stabilized metal nanoparticles
BR112015005940A2 (pt) * 2012-09-17 2017-07-04 Bind Therapeutics Inc processo para a preparação de nanopartículas terapêuticas
MX363147B (es) * 2012-09-17 2019-03-11 Pfizer Inc Star Nanoparticulas terapeuticas que comprenden un agente terapeutico y metodos para realizarlas y usarlas.
CN102871966B (zh) * 2012-10-19 2013-11-20 东南大学 用于改善雷帕霉素生物利用度的纳米载药颗粒及其制备方法
WO2014066002A1 (en) * 2012-10-23 2014-05-01 The Johns Hopkins University Novel self-assembling drug amphiphiles and methods for synthesis and use
JP6892218B2 (ja) 2012-11-15 2021-06-23 エンドサイト・インコーポレイテッドＥｎｄｏｃｙｔｅ， Ｉｎｃ． 薬物送達結合体およびｐｓｍａ発現細胞によって引き起こされる疾患の治療方法
PT2922554T (pt) 2012-11-26 2022-06-28 Modernatx Inc Arn modificado nas porções terminais
GB2528404A (en) 2013-03-11 2016-01-20 Univ North Carolina State Functionalized environmentally benign nanoparticles
EP2971010B1 (en) 2013-03-14 2020-06-10 ModernaTX, Inc. Formulation and delivery of modified nucleoside, nucleotide, and nucleic acid compositions
US8980864B2 (en) 2013-03-15 2015-03-17 Moderna Therapeutics, Inc. Compositions and methods of altering cholesterol levels
US9283285B2 (en) * 2013-03-28 2016-03-15 Bbs Nanotechnology Ltd. Stable nanocomposition comprising docetaxel, process for the preparation thereof, its use and pharmaceutical compositions containing it
KR20220025909A (ko) 2013-05-03 2022-03-03 셀렉타 바이오사이언시즈, 인크. 면역 관용의 유도를 위한 특정된 약역학적 유효 수명을 갖는 면역억제제 및 항원의 전달
KR20160022370A (ko) 2013-06-24 2016-02-29 넥스이뮨 면역요법을 위한 조성물 및 방법
WO2014210485A1 (en) * 2013-06-28 2014-12-31 Bind Therapeutics, Inc. Docetaxel polymeric nanoparticles for cancer treatment
AU2014287009B2 (en) 2013-07-11 2020-10-29 Modernatx, Inc. Compositions comprising synthetic polynucleotides encoding CRISPR related proteins and synthetic sgRNAs and methods of use
US20160166507A1 (en) * 2013-07-25 2016-06-16 Nemucore Medical Innovations, Inc. Nanoemulsions of hydrophobic platinum derivatives
EP3041938A1 (en) 2013-09-03 2016-07-13 Moderna Therapeutics, Inc. Circular polynucleotides
JP2016530294A (ja) 2013-09-03 2016-09-29 モデルナ セラピューティクス インコーポレイテッドＭｏｄｅｒｎａ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ，Ｉｎｃ． キメラポリヌクレオチド
MX370490B (es) 2013-09-16 2019-12-16 Astrazeneca Ab Nanopartículas poliméricas terapéuticas y métodos para su elaboración y uso.
WO2015048744A2 (en) 2013-09-30 2015-04-02 Moderna Therapeutics, Inc. Polynucleotides encoding immune modulating polypeptides
SG11201602503TA (en) 2013-10-03 2016-04-28 Moderna Therapeutics Inc Polynucleotides encoding low density lipoprotein receptor
WO2015058111A1 (en) * 2013-10-17 2015-04-23 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Cationic nanoparticles for co-delivery of nucleic acids and thereapeutic agents
PE20160678A1 (es) 2013-10-18 2016-08-06 Deutsches Krebsforsch Inhibidores marcados de antigeno prostatico especifico de membrana (psma), su uso como agentes formadores de imagenes y agentes farmaceuticos para el tratamiento de cancer de prostata
US20150110814A1 (en) 2013-10-18 2015-04-23 Psma Development Company, Llc Combination therapies with psma ligand conjugates
JP6908964B2 (ja) * 2013-10-18 2021-07-28 ピーエスエムエー ディベロップメント カンパニー，エルエルシー Ｐｓｍａリガンドコンジュゲートによる併用療法
WO2015073896A2 (en) 2013-11-15 2015-05-21 Psma Development Company, Llc Biomarkers for psma targeted therapy for prostate cancer
SI3071696T1 (sl) 2013-11-22 2019-11-29 Mina Therapeutics Ltd C/EBP alfa kratko delujoči RNA sestavki in postopki uporabe
CA2933579A1 (en) 2013-12-11 2015-06-18 University Of Massachusetts Compositions and methods for treating disease using salmonella t3ss effector protein (sipa)
EP3104838B1 (en) 2014-02-13 2020-01-01 Pfizer Inc. Therapeutic nanoparticles comprising a therapeutic agent and methods of making and using same
US10556980B2 (en) 2014-03-03 2020-02-11 University Of South Carolina Poly alkyl (meth)acrylates grafted nanoparticles and their methods of manufacture and use
MX2016012009A (es) * 2014-03-14 2016-12-05 Pfizer Nanoparticulas terapeuticas que comprenden un agente terapeutico, y metodos para su elaboracion y uso.
US10022360B2 (en) 2014-03-17 2018-07-17 Merck Sharp & Dohme Corp. Polymeric nanoparticles and methods of making and using same
EP3131542A1 (en) * 2014-04-18 2017-02-22 Pfizer Inc. Methods of treating cancers with therapeutic nanoparticles
WO2015164779A1 (en) * 2014-04-24 2015-10-29 Rensselaer Polytechnic Institute Matrix-free polymer nanocomposites and related products and methods thereof
PL3140269T3 (pl) 2014-05-09 2024-03-11 Yale University Cząstki pokryte hiperrozgałęzionym poliglicerolem oraz sposoby ich wytwarzania i zastosowania
US11918695B2 (en) 2014-05-09 2024-03-05 Yale University Topical formulation of hyperbranched polymer-coated particles
WO2015175545A1 (en) 2014-05-12 2015-11-19 The Johns Hopkins University Highly stable biodegradable gene vector platforms for overcoming biological barriers
LT3766916T (lt) 2014-06-25 2023-01-10 Acuitas Therapeutics Inc. Nauji lipidai ir lipidų nanodalelių kompozicijos, skirtos nukleorūgščių tiekimui
CA2953996A1 (en) * 2014-07-03 2016-01-07 Pfizer Inc. Targeted therapeutic nanoparticles and methods of making and using same
US10660861B2 (en) 2014-07-09 2020-05-26 The Johns Hopkins University Glutaminase inhibitor discovery and nanoparticle-enhanced delivery for cancer therapy
WO2016008401A1 (zh) * 2014-07-15 2016-01-21 腾鑫 一种含多西他赛的药物组合物
US20170204152A1 (en) 2014-07-16 2017-07-20 Moderna Therapeutics, Inc. Chimeric polynucleotides
IL282559B (en) 2014-07-17 2022-07-01 Univ California Self-reinforced and controllable microgel particles for biomedical applications
US20170210788A1 (en) 2014-07-23 2017-07-27 Modernatx, Inc. Modified polynucleotides for the production of intrabodies
WO2016025922A1 (en) * 2014-08-14 2016-02-18 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Coated particles for drug delivery
BR112017001470A2 (pt) 2014-09-07 2018-02-20 Selecta Biosciences Inc métodos e composições para atenuar as respostas imunes do vetor de transferência anti-viral de terapia genética
US10583091B2 (en) * 2014-10-23 2020-03-10 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Amphiphile-polymer particles
FI3834823T3 (fi) * 2014-11-05 2024-04-02 Cartesian Therapeutics Inc Menetelmiä ja koostumuksia liittyen alhaisen hlb:n omaavien pinta-aktiivisten aineiden käyttöön rapalogin käsittävien synteettisten nanokantajien valmistuksessa
CA2969263C (en) * 2014-12-01 2022-11-29 Innoup Farma, S.L. Nanoparticles for encapsulating compounds, the preparation and uses thereof
AU2015371265B2 (en) 2014-12-24 2021-06-03 Neximmune, Inc Nanoparticle compositions and methods for immunotherapy
US10188759B2 (en) 2015-01-07 2019-01-29 Endocyte, Inc. Conjugates for imaging
US10370488B2 (en) 2015-04-08 2019-08-06 The Regents Of The University Of California Stimulus-responsive poly(lactic-co-glycolic)-based polymers and nanoparticles formed therefrom
EP3313829B1 (en) 2015-06-29 2024-04-10 Acuitas Therapeutics Inc. Lipids and lipid nanoparticle formulations for delivery of nucleic acids
US11364292B2 (en) 2015-07-21 2022-06-21 Modernatx, Inc. CHIKV RNA vaccines
TW201718638A (zh) 2015-07-21 2017-06-01 現代治療公司 傳染病疫苗
MA44833A (fr) * 2015-08-17 2018-06-27 Phosphorex Inc Nanoparticules extrêmement petites de polymères dégradables
WO2017034991A1 (en) * 2015-08-21 2017-03-02 Pfizer Inc. Therapeutic nanoparticles comprising a therapeutic agent and methods of making and using same
PT3350157T (pt) 2015-09-17 2022-03-18 Modernatx Inc Compostos e composições para administração intracelular de agentes terapêuticos
US20170128592A1 (en) * 2015-10-01 2017-05-11 Indian Institute Of Technology, Bombay Targeted polymeric nano-complexes as drug delivery system
CN117731769A (zh) 2015-10-22 2024-03-22 摩登纳特斯有限公司 用于水痘带状疱疹病毒(vzv)的核酸疫苗
MA45209A (fr) 2015-10-22 2019-04-17 Modernatx Inc Vaccins contre les maladies sexuellement transmissibles
KR20180096592A (ko) 2015-10-22 2018-08-29 모더나티엑스, 인크. 호흡기 세포융합 바이러스 백신
EP4349404A2 (en) 2015-10-22 2024-04-10 ModernaTX, Inc. Respiratory virus vaccines
EP3364950A4 (en) 2015-10-22 2019-10-23 ModernaTX, Inc. VACCINES AGAINST TROPICAL DISEASES
TN2018000155A1 (en) 2015-10-22 2019-10-04 Modernatx Inc Herpes simplex virus vaccine
JP6921833B2 (ja) 2015-10-22 2021-08-18 モデルナティーエックス， インコーポレイテッド ヒトサイトメガロウイルスワクチン
BR112018008078A2 (pt) 2015-10-22 2018-11-13 Modernatx Inc vacina de vírus influenza de amplo espectro
LT3368507T (lt) 2015-10-28 2023-03-10 Acuitas Therapeutics Inc. Nauji lipidai ir lipidų nanodalelių kompozicijos, skirtos nukleorūgščių tiekimui
CA3004849A1 (en) 2015-11-16 2017-05-26 Georges Gaudriault A method for morselizing and/or targeting pharmaceutically active principles to synovial tissue
JP2018535228A (ja) 2015-11-25 2018-11-29 ファイザー・インク 抗生物質を含む治療用ナノ粒子ならびにそれを作製および使用する方法
US20180271998A1 (en) 2015-12-04 2018-09-27 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Disulfide-stabilized fabs
ES2924407T3 (es) 2015-12-10 2022-10-06 Modernatx Inc Composiciones y procedimientos para el suministro de agentes terapéuticos
WO2017106630A1 (en) 2015-12-18 2017-06-22 The General Hospital Corporation Polyacetal polymers, conjugates, particles and uses thereof
ES2913626T3 (es) 2015-12-22 2022-06-03 Modernatx Inc Compuestos y composiciones para la administración intracelular de agentes
PT3394093T (pt) 2015-12-23 2022-05-30 Modernatx Inc Métodos de utilização de polinucleotídeos que codificam ligandos ox40
MA43587A (fr) 2016-01-10 2018-11-14 Modernatx Inc Arnm thérapeutiques codant pour des anticorps anti-ctla-4
WO2017138983A1 (en) * 2016-02-10 2017-08-17 Pfizer Inc. Therapeutic nanoparticles having egfr ligands and methods of making and using same
US20210188979A1 (en) * 2016-02-10 2021-06-24 Pfizer Inc. Therapeutic Nanoparticles Comprising A Therapeutic Agent And Methods of Making and Using Same
WO2017142879A1 (en) 2016-02-16 2017-08-24 The Regents Of The University Of California Methods for immune system modulation with microporous annealed particle gels
CA3014708A1 (en) * 2016-02-18 2017-08-24 University Of South Florida Methods of screening drugs for cancer treatment using cells grown on a fiber-inspired smart scaffold
US10548881B2 (en) 2016-02-23 2020-02-04 Tarveda Therapeutics, Inc. HSP90 targeted conjugates and particles and formulations thereof
CN105748440B (zh) * 2016-03-14 2019-05-03 杭州普施康生物科技有限公司 一种包括胆盐的药物组合物及其制备方法和用途
US20170266187A1 (en) * 2016-03-15 2017-09-21 Pfizer Inc. Pemetrexed Polymeric Nanoparticles And Methods Of Making And Using Same
ES2847249T3 (es) * 2016-03-23 2021-08-02 Academia Sinica Nanopartículas poliméricas de envoltura delgada y usos de las mismas
WO2018038267A1 (ja) * 2016-08-26 2018-03-01 株式会社 先端医療開発 ポリラクチドグリコライド共重合体ナノ粒子及びポリラクチドグリコライド共重合体ナノ粒子の製造方法
EP3512560A4 (en) * 2016-09-13 2020-05-27 Rasna Research Inc. DACTINOMYCIN COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING MYELODYSPLASTIC SYNDROME AND ACUTE MYELOID LEUKEMIA
JP2019535660A (ja) * 2016-10-20 2019-12-12 ファイザー・インク 脂質を含む治療用ポリマーナノ粒子ならびにその作製および使用方法
WO2018089540A1 (en) 2016-11-08 2018-05-17 Modernatx, Inc. Stabilized formulations of lipid nanoparticles
EP3538146A4 (en) 2016-11-11 2020-07-15 ModernaTX, Inc. INFLUENZA VACCINE
EP3808380A1 (en) 2016-12-08 2021-04-21 CureVac AG Rna for treatment or prophylaxis of a liver disease
WO2018104540A1 (en) 2016-12-08 2018-06-14 Curevac Ag Rnas for wound healing
US11103578B2 (en) 2016-12-08 2021-08-31 Modernatx, Inc. Respiratory virus nucleic acid vaccines
CN117582559A (zh) * 2016-12-29 2024-02-23 泰普治疗公司 用于治疗医疗植入物部位的方法和系统
CN110612122A (zh) 2017-03-11 2019-12-24 西莱克塔生物科技公司 与用抗炎剂和包含免疫抑制剂之合成纳米载体进行的组合治疗相关的方法和组合物
US11576961B2 (en) 2017-03-15 2023-02-14 Modernatx, Inc. Broad spectrum influenza virus vaccine
US11045540B2 (en) 2017-03-15 2021-06-29 Modernatx, Inc. Varicella zoster virus (VZV) vaccine
WO2018170322A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Crystal forms of amino lipids
WO2018170256A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Herpes simplex virus vaccine
WO2018170260A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Modernatx, Inc. Respiratory syncytial virus vaccine
ES2940259T3 (es) 2017-03-15 2023-05-04 Modernatx Inc Compuesto y composiciones para la administración intracelular de agentes terapéuticos
MA48047A (fr) 2017-04-05 2020-02-12 Modernatx Inc Réduction ou élimination de réponses immunitaires à des protéines thérapeutiques administrées par voie non intraveineuse, par exemple par voie sous-cutanée
US10369230B2 (en) 2017-04-06 2019-08-06 National Guard Health Affairs Sustained release of a therapeutic agent from PLA-PEG-PLA nanoparticles for cancer therapy
CN116693411A (zh) 2017-04-28 2023-09-05 爱康泰生治疗公司 用于递送核酸的新型羰基脂质和脂质纳米颗粒制剂
EP3621598A4 (en) * 2017-05-08 2020-05-13 Purdue Research Foundation CHINIC ACID-MODIFIED NANOPARTICLES AND USES THEREOF
EP3625345B1 (en) 2017-05-18 2023-05-24 ModernaTX, Inc. Modified messenger rna comprising functional rna elements
CA3063723A1 (en) 2017-05-18 2018-11-22 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding tethered interleukin-12 (il12) polypeptides and uses thereof
WO2018232006A1 (en) 2017-06-14 2018-12-20 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding coagulation factor viii
US11446267B2 (en) 2017-06-15 2022-09-20 Dignity Health Nanoparticle compositions, methods of fabrication, and use for drug delivery
MA49421A (fr) 2017-06-15 2020-04-22 Modernatx Inc Formulations d'arn
PL3641730T3 (pl) 2017-06-22 2021-08-23 SNBioScience Inc. Cząstka i kompozycja farmaceutyczna zawierająca nierozpuszczalną pochodną kamptotecyny z podwójną strukturą rdzenia i powłoki oraz sposób ich wytwarzania
US11666527B2 (en) 2017-07-17 2023-06-06 Medincell Biodegradable block copolymer drug delivery composition
US11744801B2 (en) 2017-08-31 2023-09-05 Modernatx, Inc. Methods of making lipid nanoparticles
EP3453385A1 (de) * 2017-09-07 2019-03-13 Justus-Liebig-Universität Gießen Erfindung betreffend nanopartikel enthaltend taxane zur inhalativen applikation
WO2019048645A1 (en) 2017-09-08 2019-03-14 Mina Therapeutics Limited STABILIZED COMPOSITIONS OF SMALL ACTIVATOR RNA (PARNA) FROM CEBPA AND METHODS OF USE
CA3075219A1 (en) 2017-09-08 2019-03-14 Mina Therapeutics Limited Hnf4a sarna compositions and methods of use
EP3681514A4 (en) 2017-09-14 2021-07-14 ModernaTX, Inc. RNA VACZINE AGAINST ZIKA VIRUS
CA3079428A1 (en) 2017-11-22 2019-05-31 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding ornithine transcarbamylase for the treatment of urea cycle disorders
MA50802A (fr) 2017-11-22 2020-09-30 Modernatx Inc Polynucléotides codant pour des sous-unités alpha et bêta de propionyl-coa carboxylase pour le traitement de l'acidémie propionique
MA50801A (fr) 2017-11-22 2020-09-30 Modernatx Inc Polynucléotides codant pour la phénylalanine hydroxylase pour le traitement de la phénylcétonurie
EP3735270A1 (en) 2018-01-05 2020-11-11 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding anti-chikungunya virus antibodies
US11911453B2 (en) 2018-01-29 2024-02-27 Modernatx, Inc. RSV RNA vaccines
WO2019157200A1 (en) * 2018-02-07 2019-08-15 Lovelace Respiratory Research Institute Inhalable dry powder cytidine analogue composition and method of use as a treatment for cancer
AU2019247655A1 (en) 2018-04-03 2020-10-01 Vaxess Technologies, Inc. Microneedle comprising silk fibroin applied to a dissolvable base
WO2019200171A1 (en) 2018-04-11 2019-10-17 Modernatx, Inc. Messenger rna comprising functional rna elements
EP4242307A3 (en) 2018-04-12 2023-12-27 MiNA Therapeutics Limited Sirt1-sarna compositions and methods of use
CN112566673A (zh) * 2018-04-23 2021-03-26 加利福尼亚大学董事会 局部递送cdk9抑制剂的缓释制剂
EP3790607B1 (en) 2018-05-11 2023-12-27 Lupagen, Inc. Systems for closed loop, real-time modifications of patient cells
MA52709A (fr) 2018-05-23 2021-03-31 Modernatx Inc Administration d'adn
US20220184185A1 (en) 2018-07-25 2022-06-16 Modernatx, Inc. Mrna based enzyme replacement therapy combined with a pharmacological chaperone for the treatment of lysosomal storage disorders
WO2020033791A1 (en) 2018-08-09 2020-02-13 Verseau Therapeutics, Inc. Oligonucleotide compositions for targeting ccr2 and csf1r and uses thereof
WO2020047201A1 (en) 2018-09-02 2020-03-05 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding very long-chain acyl-coa dehydrogenase for the treatment of very long-chain acyl-coa dehydrogenase deficiency
MA53609A (fr) 2018-09-13 2021-07-21 Modernatx Inc Polynucléotides codant la glucose-6-phosphatase pour le traitement de la glycogénose
US20220243182A1 (en) 2018-09-13 2022-08-04 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding branched-chain alpha-ketoacid dehydrogenase complex e1-alpha, e1-beta, and e2 subunits for the treatment of maple syrup urine disease
AU2019339430A1 (en) 2018-09-14 2021-04-29 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding uridine diphosphate glycosyltransferase 1 family, polypeptide A1 for the treatment of Crigler-Najjar Syndrome
US20220152225A1 (en) 2018-09-27 2022-05-19 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding arginase 1 for the treatment of arginase deficiency
WO2020097409A2 (en) 2018-11-08 2020-05-14 Modernatx, Inc. Use of mrna encoding ox40l to treat cancer in human patients
RU2681933C1 (ru) * 2018-11-28 2019-03-14 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" Способ получения полимерных противоопухолевых частиц в проточном микрореакторе и лиофилизата на их основе
SG11202106987WA (en) 2019-01-11 2021-07-29 Acuitas Therapeutics Inc Lipids for lipid nanoparticle delivery of active agents
US11351242B1 (en) 2019-02-12 2022-06-07 Modernatx, Inc. HMPV/hPIV3 mRNA vaccine composition
WO2020208361A1 (en) 2019-04-12 2020-10-15 Mina Therapeutics Limited Sirt1-sarna compositions and methods of use
JP2022532078A (ja) 2019-05-08 2022-07-13 アストラゼネカ アクチボラグ 皮膚及び創傷のための組成物並びにその使用の方法
AU2020283956A1 (en) * 2019-05-28 2021-12-16 Cytodigm, Inc. Microparticles and nanoparticles having sulfate groups on the surface
WO2020263985A1 (en) 2019-06-24 2020-12-30 Modernatx, Inc. Messenger rna comprising functional rna elements and uses thereof
US20220251577A1 (en) 2019-06-24 2022-08-11 Modernatx, Inc. Endonuclease-resistant messenger rna and uses thereof
CN114728887A (zh) 2019-09-19 2022-07-08 摩登纳特斯有限公司 用于治疗剂的细胞内递送的支链尾端脂质化合物和组合物
CN114391040A (zh) 2019-09-23 2022-04-22 欧米茄治疗公司 用于调节载脂蛋白b(apob)基因表达的组合物和方法
WO2021061815A1 (en) 2019-09-23 2021-04-01 Omega Therapeutics, Inc. COMPOSITIONS AND METHODS FOR MODULATING HEPATOCYTE NUCLEAR FACTOR 4-ALPHA (HNF4α) GENE EXPRESSION
WO2021127407A1 (en) * 2019-12-18 2021-06-24 Forwardvue Pharma, Inc. Cai nanoemulsions
KR102327606B1 (ko) * 2020-02-28 2021-11-17 한국과학기술연구원 수중유형 에멀젼 혼합법을 이용한 스테레오컴플렉스 폴리락트산 복합체의 제조방법, 이를 이용한 약물전달용 조성물의 제조방법 및 이에 의해 제조된 약물전달용 조성물
JP2023517326A (ja) 2020-03-11 2023-04-25 オメガ セラピューティクス， インコーポレイテッド フォークヘッドボックスｐ３（ｆｏｘｐ３）遺伝子発現をモジュレートするための組成物および方法
CA3169441A1 (en) * 2020-04-13 2021-10-21 US Nano Food & Drug INC Basic chemotherapeutic intratumour injection formulation
JP2023527875A (ja) 2020-06-01 2023-06-30 モダーナティエックス・インコーポレイテッド フェニルアラニンヒドロキシラーゼバリアント及びその使用
WO2022040006A1 (en) * 2020-08-19 2022-02-24 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Targeting cartilage egfr pathway for osteoarthritis treatment
WO2022066636A1 (en) * 2020-09-22 2022-03-31 Goldilocks Therapeutics, Inc. Nanoparticles and methods of use thereof
CN114262428A (zh) * 2020-09-25 2022-04-01 亭创生物科技(上海)有限公司 一种官能化双嵌段共聚物及其制备方法和用途
EP4243776A1 (en) 2020-11-13 2023-09-20 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding cystic fibrosis transmembrane conductance regulator for the treatment of cystic fibrosis
WO2022108934A1 (en) * 2020-11-17 2022-05-27 Phosphorex, Inc. Novel drug delivery composition and process for blood-brain barrier crossing
RU2756757C1 (ru) * 2020-12-10 2021-10-05 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный исследовательский центр "Курчатовский институт" Способ получения суспензии, содержащей наноразмерные частицы лекарства
US11524023B2 (en) 2021-02-19 2022-12-13 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticle compositions and methods of formulating the same
JP2024512026A (ja) 2021-03-24 2024-03-18 モデルナティエックス インコーポレイテッド オルニチントランスカルバミラーゼ欠損症の治療を目的とした脂質ナノ粒子及びオルニチントランスカルバミラーゼをコードするポリヌクレオチド
WO2022204369A1 (en) 2021-03-24 2022-09-29 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding methylmalonyl-coa mutase for the treatment of methylmalonic acidemia
WO2022204390A1 (en) 2021-03-24 2022-09-29 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticles containing polynucleotides encoding phenylalanine hydroxylase and uses thereof
WO2022204371A1 (en) 2021-03-24 2022-09-29 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticles containing polynucleotides encoding glucose-6-phosphatase and uses thereof
WO2022204380A1 (en) 2021-03-24 2022-09-29 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticles containing polynucleotides encoding propionyl-coa carboxylase alpha and beta subunits and uses thereof
KR20230160872A (ko) 2021-03-26 2023-11-24 미나 테라퓨틱스 리미티드 Tmem173 sarna 조성물 및 사용 방법
EP4337177A1 (en) 2021-05-11 2024-03-20 Modernatx, Inc. Non-viral delivery of dna for prolonged polypeptide expression in vivo
WO2022266083A2 (en) 2021-06-15 2022-12-22 Modernatx, Inc. Engineered polynucleotides for cell-type or microenvironment-specific expression
WO2022271776A1 (en) 2021-06-22 2022-12-29 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding uridine diphosphate glycosyltransferase 1 family, polypeptide a1 for the treatment of crigler-najjar syndrome
WO2023283359A2 (en) 2021-07-07 2023-01-12 Omega Therapeutics, Inc. Compositions and methods for modulating secreted frizzled receptor protein 1 (sfrp1) gene expression
CA3171750A1 (en) 2021-07-30 2023-02-02 Tim SONNTAG Mrnas for treatment or prophylaxis of liver diseases
WO2023056044A1 (en) 2021-10-01 2023-04-06 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding relaxin for the treatment of fibrosis and/or cardiovascular disease
WO2023099884A1 (en) 2021-12-01 2023-06-08 Mina Therapeutics Limited Pax6 sarna compositions and methods of use
WO2023144193A1 (en) 2022-01-25 2023-08-03 CureVac SE Mrnas for treatment of hereditary tyrosinemia type i
WO2023161350A1 (en) 2022-02-24 2023-08-31 Io Biotech Aps Nucleotide delivery of cancer therapy
WO2023170435A1 (en) 2022-03-07 2023-09-14 Mina Therapeutics Limited Il10 sarna compositions and methods of use
WO2023183909A2 (en) 2022-03-25 2023-09-28 Modernatx, Inc. Polynucleotides encoding fanconi anemia, complementation group proteins for the treatment of fanconi anemia
WO2023196399A1 (en) 2022-04-06 2023-10-12 Modernatx, Inc. Lipid nanoparticles and polynucleotides encoding argininosuccinate lyase for the treatment of argininosuccinic aciduria
WO2023215498A2 (en) 2022-05-05 2023-11-09 Modernatx, Inc. Compositions and methods for cd28 antagonism
WO2023250117A2 (en) 2022-06-24 2023-12-28 Vaxess Technologies, Inc. Applicator for medicament patch
CN115317515A (zh) * 2022-07-19 2022-11-11 沈阳药科大学 氯尼达明/牛血清白蛋白/磷酸铁多效协同仿生矿化纳米制剂及制备方法和应用
WO2024026254A1 (en) 2022-07-26 2024-02-01 Modernatx, Inc. Engineered polynucleotides for temporal control of expression

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030143184A1 (en) * 2000-05-17 2003-07-31 Min-Hyo Seo Stable polymeric micelle-type drug composition and method for the preparation thereof
US20050037075A1 (en) * 2003-06-06 2005-02-17 Farokhzad Omid C. Targeted delivery of controlled release polymer systems
US20060165987A1 (en) * 2002-04-05 2006-07-27 Patrice Hildgen Stealthy polymeric biodegradable nanospheres and uses thereof
WO2008058192A2 (en) * 2006-11-08 2008-05-15 Molecular Insight Pharmaceuticals, Inc. Heterodimers of glutamic acid

Family Cites Families (152)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0394265B1 (en) 1987-07-29 1994-11-02 The Liposome Company, Inc. Method for size separation of particles
US5542935A (en) 1989-12-22 1996-08-06 Imarx Pharmaceutical Corp. Therapeutic delivery systems related applications
US5766635A (en) 1991-06-28 1998-06-16 Rhone-Poulenc Rorer S.A. Process for preparing nanoparticles
KR0131678B1 (ko) 1991-12-09 1998-04-17 유미꾸라 레이이찌 파라티로이드 호르몬류의 안정화 조성물
US5302401A (en) * 1992-12-09 1994-04-12 Sterling Winthrop Inc. Method to reduce particle size growth during lyophilization
US5543158A (en) * 1993-07-23 1996-08-06 Massachusetts Institute Of Technology Biodegradable injectable nanoparticles
US5565215A (en) 1993-07-23 1996-10-15 Massachusettes Institute Of Technology Biodegradable injectable particles for imaging
GB9412273D0 (en) * 1994-06-18 1994-08-10 Univ Nottingham Administration means
US6007845A (en) 1994-07-22 1999-12-28 Massachusetts Institute Of Technology Nanoparticles and microparticles of non-linear hydrophilic-hydrophobic multiblock copolymers
JPH10511957A (ja) 1995-01-05 1998-11-17 ザ ボード オブ リージェンツ オブ ザ ユニヴァーシティ オブ ミシガン 表面改質ナノ微粒子並びにその製造及び使用方法
JP4979843B2 (ja) 1995-03-10 2012-07-18 ロッシュ ディアグノスティクス ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング 微粒子の形のポリペプチド含有投薬形
US6902743B1 (en) 1995-05-22 2005-06-07 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Therapeutic treatment and prevention of infections with a bioactive material(s) encapuslated within a biodegradable-bio-compatable polymeric matrix
US7422902B1 (en) 1995-06-07 2008-09-09 The University Of British Columbia Lipid-nucleic acid particles prepared via a hydrophobic lipid-nucleic acid complex intermediate and use for gene transfer
FR2742357B1 (fr) * 1995-12-19 1998-01-09 Rhone Poulenc Rorer Sa Nanoparticules stabilisees et filtrables dans des conditions steriles
US5792477A (en) 1996-05-07 1998-08-11 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Ii Preparation of extended shelf-life biodegradable, biocompatible microparticles containing a biologically active agent
US8038994B2 (en) * 1996-05-15 2011-10-18 Quest Pharmatech Inc. Combination therapy for treating disease
JP2942508B2 (ja) 1997-01-14 1999-08-30 順也 藤森 温度感受性徐放性基剤及び温度感受性徐放性システム
JPH1192468A (ja) * 1997-09-17 1999-04-06 Yakult Honsha Co Ltd 新規なタキサン誘導体
US6201072B1 (en) 1997-10-03 2001-03-13 Macromed, Inc. Biodegradable low molecular weight triblock poly(lactide-co- glycolide) polyethylene glycol copolymers having reverse thermal gelation properties
US6254890B1 (en) 1997-12-12 2001-07-03 Massachusetts Institute Of Technology Sub-100nm biodegradable polymer spheres capable of transporting and releasing nucleic acids
US6541606B2 (en) 1997-12-31 2003-04-01 Altus Biologics Inc. Stabilized protein crystals formulations containing them and methods of making them
JP2002519333A (ja) 1998-06-30 2002-07-02 アムジエン・インコーポレーテツド 生物学的に活性な物質の徐放運搬のための感熱性生分解性ヒドロゲル
US6395718B1 (en) 1998-07-06 2002-05-28 Guilford Pharmaceuticals Inc. Pharmaceutical compositions and methods of inhibiting angiogenesis using naaladase inhibitors
US6265609B1 (en) 1998-07-06 2001-07-24 Guilford Pharmaceuticals Inc. Thio-substituted pentanedioic acid derivatives
KR100274842B1 (ko) * 1998-10-01 2001-03-02 김효근 미립구를 이용한 레티노익산의 서방형 약물방출 시스템
DE19856432A1 (de) 1998-12-08 2000-06-15 Basf Ag Nanopartikuläre Kern-Schale Systeme sowie deren Verwendung in pharmazeutischen und kosmetischen Zubereitungen
US6194006B1 (en) 1998-12-30 2001-02-27 Alkermes Controlled Therapeutics Inc. Ii Preparation of microparticles having a selected release profile
US7311924B2 (en) 1999-04-01 2007-12-25 Hana Biosciences, Inc. Compositions and methods for treating cancer
US6528499B1 (en) 2000-04-27 2003-03-04 Georgetown University Ligands for metabotropic glutamate receptors and inhibitors of NAALADase
AU6132700A (en) 1999-09-30 2001-04-05 Chienna B.V. Polymers loaded with bioactive agents
US6136846A (en) 1999-10-25 2000-10-24 Supergen, Inc. Formulation for paclitaxel
US20050037086A1 (en) 1999-11-19 2005-02-17 Zycos Inc., A Delaware Corporation Continuous-flow method for preparing microparticles
KR100416242B1 (ko) 1999-12-22 2004-01-31 주식회사 삼양사 약물전달체용 생분해성 블록 공중합체의 액체 조성물 및이의 제조방법
US6890946B2 (en) 1999-12-23 2005-05-10 Indiana University Research And Technology Corporation Use of parthenolide to inhibit cancer
US6495164B1 (en) 2000-05-25 2002-12-17 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. I Preparation of injectable suspensions having improved injectability
KR100418916B1 (ko) 2000-11-28 2004-02-14 한국과학기술원 생분해성 고분자와 항암제의 접합체를 이용한 서방형미셀제제의 제조방법
KR100446101B1 (ko) 2000-12-07 2004-08-30 주식회사 삼양사 수난용성 약물의 서방성 제형 조성물
DE60128261T3 (de) 2000-12-21 2016-06-30 Alrise Biosystems Gmbh Verfahren umfassend einen induzierten phasenübergang zur herstellung von hydrophobe wirkstoffe enthaltenden mikropartikeln
US6623761B2 (en) * 2000-12-22 2003-09-23 Hassan Emadeldin M. Method of making nanoparticles of substantially water insoluble materials
SI1345597T1 (sl) * 2000-12-27 2007-12-31 Ares Trading Sa Amfifilni lipidni nanodelci za vgradnjo peptidov in/ali proteinov
DE60214134T2 (de) 2001-02-07 2007-07-19 Beth Israel Deaconess Medical Center, Boston Modifizierte psma-liganden und deren verwendung
WO2002080846A2 (en) 2001-04-03 2002-10-17 Kosan Biosciences, Inc. Epothilone derivatives and methods for making and using the same
WO2003000014A2 (en) 2001-06-21 2003-01-03 Altus Biologics, Inc. Spherical protein particles and methods of making and using them
US7498045B2 (en) 2001-08-31 2009-03-03 Thomas M. S. Chang Biodegradable polymeric nanocapsules and uses thereof
US6592899B2 (en) 2001-10-03 2003-07-15 Macromed Incorporated PLA/PLGA oligomers combined with block copolymers for enhancing solubility of a drug in water
ES2541908T3 (es) * 2001-10-10 2015-07-28 Pierre Fabre Medicament Microesferas biodegradables de liberación prolongada y su procedimiento de preparación
CN1592607A (zh) 2001-10-15 2005-03-09 克里蒂泰克公司 水溶性差药物的组合物、其给药方法和治疗方法
IL162183A0 (en) 2001-12-21 2005-11-20 Celator Technologies Inc Polymer-lipid delivery vehicles and methods for the preparation thereof
US20030235619A1 (en) 2001-12-21 2003-12-25 Christine Allen Polymer-lipid delivery vehicles
EP1472541B1 (en) 2002-01-10 2009-09-16 The Johns Hopkins University Imaging agents and methods of imaging naaladase of psma
US20030232887A1 (en) 2002-04-10 2003-12-18 Johnson Douglas Giles Preparation and use of a stable formulation of allosteric effector compounds
AU2003223600A1 (en) * 2002-04-11 2003-10-27 Altarex Medical Corporation Binding agents and their use in targeting tumor cells
US6890950B2 (en) 2002-04-23 2005-05-10 Case Western Reserve University Lapachone delivery systems, compositions and uses related thereto
JP2003342168A (ja) 2002-05-24 2003-12-03 Nano Career Kk 注射用薬物含有ポリマーミセル製剤の製造方法
US7767803B2 (en) 2002-06-18 2010-08-03 Archemix Corp. Stabilized aptamers to PSMA and their use as prostate cancer therapeutics
US7879351B2 (en) 2002-10-29 2011-02-01 Transave, Inc. High delivery rates for lipid based drug formulations, and methods of treatment thereof
CA2504268A1 (en) 2002-10-30 2004-11-18 Spherics, Inc. Nanoparticulate bioactive agents
CA2508279A1 (en) 2002-12-23 2004-07-22 Vical Incorporated Method for freeze-drying nucleic acid/block copolymer/cationic surfactant complexes
US6841547B2 (en) 2003-02-28 2005-01-11 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshevia University Method for decreasing low density lipoprotein
US20040185170A1 (en) 2003-03-21 2004-09-23 Shubha Chungi Method for coating drug-containing particles and formulations and dosage units formed therefrom
EP1974726B1 (en) 2003-03-26 2010-01-13 Egalet A/S Matrix compositions for controlled delivery of drug substances
JP2006521367A (ja) 2003-03-26 2006-09-21 株式会社Ｌｔｔバイオファーマ ターゲッティングと徐放を目的とした静脈注射用ナノ粒子
WO2004089291A2 (en) 2003-04-03 2004-10-21 Au Jessie L-S Tumor-targeting drug-loaded particles
US20040247624A1 (en) 2003-06-05 2004-12-09 Unger Evan Charles Methods of making pharmaceutical formulations for the delivery of drugs having low aqueous solubility
US20050256071A1 (en) 2003-07-15 2005-11-17 California Institute Of Technology Inhibitor nucleic acids
US20050142205A1 (en) 2003-07-18 2005-06-30 Julia Rashba-Step Methods for encapsulating small spherical particles prepared by controlled phase separation
CA2533592C (en) 2003-07-23 2015-11-10 Pr Pharmaceuticals, Inc. Controlled release compositions
WO2005020989A1 (en) 2003-09-02 2005-03-10 Novartis Ag Cancer treatment with epothilones
US7311901B2 (en) 2003-10-10 2007-12-25 Samyang Corporation Amphiphilic block copolymer and polymeric composition comprising the same for drug delivery
WO2005039622A2 (en) * 2003-10-21 2005-05-06 Medtronic Minimed, Inc. Modulation of socs expression in the therapeutic regimens
US7846412B2 (en) 2003-12-22 2010-12-07 Emory University Bioconjugated nanostructures, methods of fabrication thereof, and methods of use thereof
US20070053845A1 (en) 2004-03-02 2007-03-08 Shiladitya Sengupta Nanocell drug delivery system
WO2005084710A2 (en) 2004-03-02 2005-09-15 Massachusetts Institute Of Technology Nanocell drug delivery system
US8043631B2 (en) 2004-04-02 2011-10-25 Au Jessie L S Tumor targeting drug-loaded particles
US20080124400A1 (en) 2004-06-24 2008-05-29 Angiotech International Ag Microparticles With High Loadings Of A Bioactive Agent
EP1768692B8 (en) 2004-07-01 2015-06-17 Yale University Targeted and high density drug loaded polymeric materials
US7473678B2 (en) 2004-10-14 2009-01-06 Biomimetic Therapeutics, Inc. Platelet-derived growth factor compositions and methods of use thereof
US20060094676A1 (en) * 2004-10-29 2006-05-04 Ronit Lahav Compositions and methods for treating cancer using compositions comprising an inhibitor of endothelin receptor activity
JP2006131577A (ja) 2004-11-09 2006-05-25 Ltt Bio-Pharma Co Ltd 異なる粒子径を有する薬物封入ナノ粒子の作製方法および当該方法で得られたナノ粒子
EA011594B1 (ru) 2004-12-30 2009-04-28 Синвеншен Аг Композиция, включающая агент, обеспечивающий сигнал, имплантируемый материал и лекарство
WO2006093991A1 (en) 2005-03-02 2006-09-08 The Cleveland Clinic Foundation Compounds which bind psma and uses thereof
CN101189016B (zh) 2005-04-04 2013-03-27 因特尔赛克特耳鼻喉公司 治疗鼻窦病症的装置
JP2006321763A (ja) * 2005-05-20 2006-11-30 Hosokawa Funtai Gijutsu Kenkyusho:Kk 生体適合性ナノ粒子及びその製造方法
AU2006282042B2 (en) 2005-06-17 2011-12-22 The University Of North Carolina At Chapel Hill Nanoparticle fabrication methods, systems, and materials
KR20080031379A (ko) 2005-07-11 2008-04-08 와이어쓰 글루타메이트 아그레카나제 저해제
CA2615122A1 (en) 2005-08-03 2007-02-15 Immunogen, Inc. Immunoconjugate formulations
AU2006284657B2 (en) * 2005-08-31 2012-07-19 Abraxis Bioscience, Llc Compositions and methods for preparation of poorly water soluble drugs with increased stability
JP2009507049A (ja) 2005-09-09 2009-02-19 北京徳科瑞医薬科技有限公司 リン脂質のポリエチレングリコール誘導体に包み込まれたビンカアルカロイド系制癌剤のナノミセル製剤
US20090022806A1 (en) 2006-12-22 2009-01-22 Mousa Shaker A Nanoparticle and polymer formulations for thyroid hormone analogs, antagonists and formulations and uses thereof
US20080267876A1 (en) 2005-09-20 2008-10-30 Yissum Research Development Company Nanoparticles for Targeted Delivery of Active Agent
JP5806444B2 (ja) 2005-12-02 2015-11-10 ノバルティス アーゲー 免疫原性組成物で使用するためのナノ粒子
US8916206B2 (en) 2005-12-26 2014-12-23 Ltt Bio-Pharma Co., Ltd. Nanoparticles containing water-soluble non-peptide low-molecular weight drug
US7842312B2 (en) 2005-12-29 2010-11-30 Cordis Corporation Polymeric compositions comprising therapeutic agents in crystalline phases, and methods of forming the same
US20090155349A1 (en) 2006-02-23 2009-06-18 Jonathan Daniel Heller Methods of treating influenza viral infections
DE102006013531A1 (de) 2006-03-24 2007-09-27 Lts Lohmann Therapie-Systeme Ag Polylactid-Nanopartikel
CA2648099C (en) 2006-03-31 2012-05-29 The Brigham And Women's Hospital, Inc System for targeted delivery of therapeutic agents
CA2652280C (en) * 2006-05-15 2014-01-28 Massachusetts Institute Of Technology Polymers for functional particles
US8232245B2 (en) 2006-07-26 2012-07-31 Sandoz Ag Caspofungin formulations
EP2056793A4 (en) 2006-07-31 2011-08-17 Neurosystec Corp NANOPARTICLES WITH FREE BASE OF GACYCLIDINE
WO2008019142A2 (en) 2006-08-04 2008-02-14 Massachusetts Institute Of Technology Oligonucleotide systems for targeted intracellular delivery
US20080057102A1 (en) 2006-08-21 2008-03-06 Wouter Roorda Methods of manufacturing medical devices for controlled drug release
KR100946275B1 (ko) * 2006-09-26 2010-03-08 주식회사 삼양사 수 난용성 캄토테신 유도체의 미세 나노입자 및 그의제조방법
WO2008147456A2 (en) 2006-11-20 2008-12-04 Massachusetts Institute Of Technology Drug delivery systems using fc fragments
CN1957911A (zh) 2006-12-01 2007-05-09 济南康泉医药科技有限公司 一种抗实体肿瘤缓释剂
CN101396340A (zh) 2006-12-12 2009-04-01 济南帅华医药科技有限公司 一种含埃坡霉素衍生物的抗癌缓释注射剂
CN101433520A (zh) 2006-12-12 2009-05-20 济南帅华医药科技有限公司 含埃坡霉素的抗癌缓释剂
CN101396342A (zh) 2006-12-12 2009-04-01 济南帅华医药科技有限公司 含埃坡霉素衍生物的抗癌缓释注射剂
CN1969816A (zh) 2006-12-12 2007-05-30 济南帅华医药科技有限公司 一种含埃坡霉素的抗癌缓释剂
CN1969818A (zh) 2006-12-12 2007-05-30 济南帅华医药科技有限公司 一种含埃坡霉素衍生物的抗癌缓释注射剂
CN1961864A (zh) 2006-12-12 2007-05-16 济南帅华医药科技有限公司 一种抗癌的组合物
WO2008091465A2 (en) 2006-12-21 2008-07-31 Wayne State University Peg and targeting ligands on nanoparticle surface
DK2481409T3 (en) 2007-03-07 2018-08-06 Abraxis Bioscience Llc Nanoparticle comprising rapamycin and albumin as anticancer agent
CN101053553B (zh) 2007-03-16 2011-04-20 吉林大学 一种生物可降解氟尿嘧啶聚酯载药纳米球及其制备方法
WO2008124639A2 (en) 2007-04-04 2008-10-16 Massachusetts Institute Of Technology Poly (amino acid) targeting moieties
WO2008124634A1 (en) 2007-04-04 2008-10-16 Massachusetts Institute Of Technology Polymer-encapsulated reverse micelles
EP2156848A4 (en) 2007-05-14 2012-11-28 Ltt Bio Pharma Co Ltd NANOPARTICLE CONTAINING A LOW MOLECULAR WEIGHT DRUG HAVING A NEGATIVELY PROLONGED RELEASE GROUP
US8486423B2 (en) 2007-08-21 2013-07-16 Board Of Regents, The University Of Texas System Thermo-kinetic mixing for pharmaceutical applications
US20090061009A1 (en) 2007-08-29 2009-03-05 Joseph Schwarz Composition and Method of Treatment of Bacterial Infections
EP2436376B1 (en) 2007-09-28 2014-07-09 BIND Therapeutics, Inc. Cancer cell targeting using nanoparticles
US20090306120A1 (en) 2007-10-23 2009-12-10 Florencia Lim Terpolymers containing lactide and glycolide
US8974814B2 (en) 2007-11-12 2015-03-10 California Institute Of Technology Layered drug delivery polymer monofilament fibers
WO2009070302A1 (en) 2007-11-30 2009-06-04 The Johns Hopkins University Prostate specific membrane antigen (psma) targeted nanoparticles for therapy of prostate cancer
DE102007059752A1 (de) 2007-12-10 2009-06-18 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Funktionalisierte, feste Polymernanopartikel enthaltend Epothilone
WO2009084801A1 (en) 2007-12-31 2009-07-09 Samyang Corporation Amphiphilic block copolymer micelle composition containing taxane and manufacturing process of the same
EP2106806A1 (en) 2008-03-31 2009-10-07 Fraunhofer-Gesellschaft zur Förderung der Angewandten Forschung e.V. Nanoparticles for targeted delivery of active agents to the lung
US20090312402A1 (en) 2008-05-20 2009-12-17 Contag Christopher H Encapsulated nanoparticles for drug delivery
ES2721850T3 (es) 2008-06-16 2019-08-05 Pfizer Nanopartículas poliméricas terapéuticas que comprenden alcaloides vinca y procedimientos de fabricación y uso de las mismas
EP2309990B2 (en) 2008-06-16 2017-03-15 Pfizer Inc. Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same
US8613951B2 (en) * 2008-06-16 2013-12-24 Bind Therapeutics, Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles with mTor inhibitors and methods of making and using same
JP2011525180A (ja) 2008-06-16 2011-09-15 バインド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド 治療的標的化ナノ粒子の製作に用いるためのジブロックコポリマーで官能化された標的薬の製造方法
RU2559525C2 (ru) 2008-07-08 2015-08-10 Эббви Инк Белки, связывающие простагландин е2, и их применение
WO2010030763A2 (en) 2008-09-10 2010-03-18 Bind Biosciences, Inc. High throughput fabrication of nanoparticles
US8563041B2 (en) 2008-12-12 2013-10-22 Bind Therapeutics, Inc. Therapeutic particles suitable for parenteral administration and methods of making and using same
JP2012512175A (ja) 2008-12-15 2012-05-31 バインド バイオサイエンシズ インコーポレイテッド 治療薬を徐放するための長時間循環性ナノ粒子
WO2010114770A1 (en) 2009-03-30 2010-10-07 Cerulean Pharma Inc. Polymer-agent conjugates, particles, compositions, and related methods of use
WO2010114768A1 (en) 2009-03-30 2010-10-07 Cerulean Pharma Inc. Polymer-epothilone conjugates, particles, compositions, and related methods of use
WO2010117668A1 (en) 2009-03-30 2010-10-14 Cerulean Pharma Inc. Polymer-agent conjugates, particles, compositions, and related methods of use
CA2763456C (en) 2009-05-27 2017-10-24 Alkermes Pharma Ireland Limited Reduction of flake-like aggregation in nanoparticulate active agent compositions
US8357401B2 (en) 2009-12-11 2013-01-22 Bind Biosciences, Inc. Stable formulations for lyophilizing therapeutic particles
WO2011084518A2 (en) 2009-12-15 2011-07-14 Bind Biosciences, Inc. Therapeutic polymeric nanoparticles comprising corticosteroids and methods of making and using same
ES2780156T3 (es) 2009-12-15 2020-08-24 Pfizer Composiciones terapéuticas de nanopartículas poliméricas con alta temperatura de transición vítrea o copolímeros de alto peso molecular
EA201290498A1 (ru) 2009-12-15 2013-01-30 Байнд Байосайенсиз, Инк. Терапевтические полимерные наночастицы, включающие эпотилон, и способы их получения и применения
CN102740895B (zh) 2009-12-23 2016-02-24 伊利诺伊大学董事会 纳米轭合物以及纳米轭合物配制品
US20110237686A1 (en) 2010-03-26 2011-09-29 Cerulean Pharma Inc Formulations and methods of use
WO2012040513A1 (en) 2010-09-22 2012-03-29 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Compositions and methods for the delivery of beta lapachone
WO2012054923A2 (en) 2010-10-22 2012-04-26 Bind Biosciences, Inc. Therapeutic nanoparticles with high molecular weight copolymers
US20140308363A1 (en) 2011-05-31 2014-10-16 Bind Therapeutics, Inc. Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same
JP2014531456A (ja) 2011-09-22 2014-11-27 バインド セラピューティックス インコーポレイテッド 治療用ナノ粒子と癌を治療する方法
JP6229666B2 (ja) 2012-02-29 2017-11-15 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングＭｅｒｃｋ Ｐａｔｅｎｔ Ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ｍｉｔ ｂｅｓｃｈｒａｅｎｋｔｅｒ Ｈａｆｔｕｎｇ 活性化合物を取り込んだナノ粒子の製造プロセス
MX363147B (es) 2012-09-17 2019-03-11 Pfizer Inc Star Nanoparticulas terapeuticas que comprenden un agente terapeutico y metodos para realizarlas y usarlas.
BR112015005940A2 (pt) 2012-09-17 2017-07-04 Bind Therapeutics Inc processo para a preparação de nanopartículas terapêuticas
WO2014210485A1 (en) 2013-06-28 2014-12-31 Bind Therapeutics, Inc. Docetaxel polymeric nanoparticles for cancer treatment

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030143184A1 (en) * 2000-05-17 2003-07-31 Min-Hyo Seo Stable polymeric micelle-type drug composition and method for the preparation thereof
US20060165987A1 (en) * 2002-04-05 2006-07-27 Patrice Hildgen Stealthy polymeric biodegradable nanospheres and uses thereof
US20050037075A1 (en) * 2003-06-06 2005-02-17 Farokhzad Omid C. Targeted delivery of controlled release polymer systems
WO2008058192A2 (en) * 2006-11-08 2008-05-15 Molecular Insight Pharmaceuticals, Inc. Heterodimers of glutamic acid

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
IDA HEDERSTROM, Purification and surface modification of polymeric nanoparticles for medical applications. Master's thesis, 03.03.2008, с. 8, п. 2.3.2, с. 23, п. 4.4, с. 33, п. 5.3.1 *
OMID C. FAROKHZAD et al., Nanoparticle - Aptamer Bioconjugates: A New Approach for Targeting Prostate Cancer Cells., Cancer Research, 2004, No. 64, pp. 7668-7672, особенно с. 7671, фиг. 1 *

Also Published As

Publication number Publication date
US9393310B2 (en) 2016-07-19
JP2012501964A (ja) 2012-01-26
JP2016041756A (ja) 2016-03-31
EP2774608A1 (en) 2014-09-10
HUE047004T2 (hu) 2020-04-28
IL210024A0 (en) 2011-02-28
WO2010005723A3 (en) 2010-03-11
US20130236500A1 (en) 2013-09-12
JP2015134759A (ja) 2015-07-27
KR20160116062A (ko) 2016-10-06
AU2009268923B2 (en) 2015-09-17
EA021422B1 (ru) 2015-06-30
US20160338959A1 (en) 2016-11-24
US20130280339A1 (en) 2013-10-24
CA2728176C (en) 2017-07-04
US8206747B2 (en) 2012-06-26
MX2010014018A (es) 2011-06-21
US20140356444A1 (en) 2014-12-04
US8609142B2 (en) 2013-12-17
US8617608B2 (en) 2013-12-31
EP2309990B2 (en) 2017-03-15
US20130230567A1 (en) 2013-09-05
US9579386B2 (en) 2017-02-28
EP2774608B1 (en) 2019-11-20
CA2728176A1 (en) 2010-01-14
US8652528B2 (en) 2014-02-18
AU2009268923A1 (en) 2010-01-14
EP2309989A4 (en) 2011-08-10
WO2010005723A2 (en) 2010-01-14
ES2462090T3 (es) 2014-05-22
US20120288541A1 (en) 2012-11-15
US9872913B2 (en) 2018-01-23
US9375481B2 (en) 2016-06-28
DK2774608T3 (da) 2020-01-13
EP2309990A4 (en) 2012-02-22
IL210024A (en) 2017-03-30
US20130251757A1 (en) 2013-09-26
PL2774608T3 (pl) 2020-05-18
US8603534B2 (en) 2013-12-10
ES2765240T3 (es) 2020-06-08
EP2309990A2 (en) 2011-04-20
US20110274759A1 (en) 2011-11-10
WO2010005721A3 (en) 2010-03-11
US20100068285A1 (en) 2010-03-18
HK1211492A1 (en) 2016-05-27
SI2774608T1 (sl) 2020-02-28
JP2018065862A (ja) 2018-04-26
US8613954B2 (en) 2013-12-24
KR20110036810A (ko) 2011-04-11
US8293276B2 (en) 2012-10-23
ES2462090T5 (es) 2017-07-12
WO2010005721A2 (en) 2010-01-14
US20130243827A1 (en) 2013-09-19
US20130302433A1 (en) 2013-11-14
EP2309989A2 (en) 2011-04-20
US8663700B2 (en) 2014-03-04
JP6363320B2 (ja) 2018-07-25
US20120276162A1 (en) 2012-11-01
JP2012501965A (ja) 2012-01-26
US20100068286A1 (en) 2010-03-18
EA201170039A1 (ru) 2011-12-30
US8420123B2 (en) 2013-04-16
KR20170127069A (ko) 2017-11-20
PT2774608T (pt) 2020-01-17
EP2309990B1 (en) 2014-01-15
JP6104289B2 (ja) 2017-03-29
EP2309989B1 (en) 2016-09-07
EA201170038A1 (ru) 2011-08-30
US20130302432A1 (en) 2013-11-14
US8318208B1 (en) 2012-11-27
KR101706178B1 (ko) 2017-02-15
CN104997732A (zh) 2015-10-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA020954B1 (ru) Загруженные лекарственным средством полимерные наночастицы, фармацевтическая композиция и способ лечения рака
JP6356678B2 (ja) 治療用ナノ粒子を製造する方法
US20160354320A1 (en) Drug loaded polymeric nanoparticles and methods of making and using same

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

QB4A Registration of a licence in a contracting state
PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment