JP6356678B2 - 治療用ナノ粒子を製造する方法 - Google Patents

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関連出願の相互参照

本出願は、２０１２年９月１７日出願の米国特許仮出願６１／７０２，０３７号の利益および優先権を主張し、その全内容が参照により本明細書に組み込まれる。

これまで、特定の薬剤を患者に送達し（例えば、具体的な組織もしくは細胞型を標的とした、または特定の罹患組織を標的とするが正常な組織を標的としない）、または薬剤の放出を制御する系が有益であると認識されてきた。

例えば、活性薬剤を含み、例えば、具体的な組織もしくは細胞型を標的とし、または特定の罹患組織を標的とするが正常な組織を標的としない治療薬は、標的としない体内の組織に含まれる薬剤量を減少させることができる。これは、薬剤の細胞傷害性となる用量を周囲の非がん性組織を死滅させることなくがん細胞に送達させることが望ましい、がんなどの疾病を治療するときに特に重要となる。効率的な薬剤標的化は抗がん療法において共通する望ましくない、時に生命を脅かす副作用を減少させることができる。さらに、このような治療薬は薬剤を特定の組織に到達させるが、それ以外は到達できない。

制御放出し、かつ／または標的療法を行う治療薬はまた、有効量の薬剤を送達することができる必要があるが、他のナノ粒子送達系において限界があることが知られている。例えば、有利な送達特性を保持するのに十分に小さいナノ粒子の大きさを維持しつつ、各ナノ粒子と会合する適量の薬剤を保持するナノ粒子系を製造することは困難かもしれな。しかし、高品質の治療剤を含むナノ粒子を負荷することが望ましい一方で、あまりに高い薬剤負荷を使用するナノ粒子の製造物は実際の治療用途においてあまりに大きなナノ粒子となるだろう。

そのため、がんなどの疾患を治療するための治療レベルの薬剤を送達することができる一方で、患者の副作用を低減させるナノ粒子治療剤およびこのようなナノ粒子を作製する方法が必要とされている。

ここでは、治療剤と有機酸とを混合することを含む、治療用ナノ粒子を製造する方法を記載する。

一観点では、複数の治療用ナノ粒子の製造方法が提供される。この方法は、治療薬、第１ポリマーおよび有機酸を有機溶媒と合わせて、固形分約１〜約５０％を有する第１有機相を形成し、第１有機相を第１水溶液と合わせて、複数の治療用ナノ粒子を形成し、治療用ナノ粒子を濾過によって回収することを含む。

ある実施形態では、有機酸が、２５℃で約３．５未満のｐＫ_aを有し、ある実施形態で
は、有機酸が、２５℃で約２．０未満のｐＫ_aを有し、ある実施形態では、有機酸が、２
５℃で約１未満のｐＫ_aを有し、ある実施形態では、有機酸が、２５℃で約０未満のｐＫ_aを有する。

場合によって、有機酸が、約５０〜約１１０℃の沸点を有し、ある実施形態では、
有機酸が、約−３０〜約０℃の融点を有する。

ある実施形態では、治療用ナノ粒子が、前記治療薬を約０．２〜約３５重量％含む。他の実施形態では、治療用ナノ粒子が、治療薬を約１〜約１０重量％含む。

ある実施形態では、方法が第１の方法であり、かつ前記治療用ナノ粒子が、第２の方法によって製造された治療用ナノ粒子と比較して少なくとも約２倍高い治療薬ローディングを有し、前記第２の方法が前記有機酸を含まないことを除いては、前記第２の方法が前記第１の方法と同一である。場合によっては、治療用ナノ粒子が、少なくとも約５倍高い治療薬ローディングを有する。場合によっては、治療用ナノ粒子が、少なくとも約１０倍高い治療薬ローディングを有する。

場合によっては、治療薬が、前記治療薬、前記有機溶媒および前記有機酸からなる第１溶液中で、前記治療薬および前記有機溶媒からなる第２溶液と比較して少なくとも５倍高い溶解性を有する。他の場合によっては、治療薬が、前記治療薬、前記有機溶媒および前記有機酸からなる第１溶液中で、前記治療薬および前記有機溶媒からなる第２溶液と比較して約２〜約２０倍高い溶解性を有する。ある実施形態では、有機酸の濃度が、少なくとも約１重量％であり、少なくとも約２重量％であり、少なくとも約３重量％である、ある実施形態では、有機酸の濃度が、約１〜約１０重量％である。

ある実施形態では、前記有機酸がハロゲン化カルボン酸である。例えば、前記ハロゲン化カルボン酸がトリフルオロ酢酸である。

ある実施形態では、前記治療用ナノ粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液中に入れた場合に、前記治療薬の約５％未満を実質的に即時に放出する。ある実施形態では、治療用ナノ粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液中に入れた場合に、約１時間にわたって前記治療薬の約０．０１〜約２５％を放出する。ある実施形態では、治療用ナノ粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液中に入れた場合に、約４時間にわたって前記治療薬の約１０〜約４５％を放出する。

ある実施形態では、前記治療用ナノ粒子が、直径約６０〜約１５０ｎｍ、直径約８０〜約１５０ｎｍ、直径約９０〜約１４０ｎｍを有する。

ある実施形態では、前記第１有機相を前記第１水溶液と合わせる工程が、前記第１有機相を前記第１水溶液と合わせることから形成される第２相を乳化して、エマルジョン相を形成することを含む。

ある実施形態では、前記エマルジョン相をクエンチして、クエンチ相を形成することをさらに含む。例えば、薬物可溶化剤を前記クエンチ相に添加して、未封入治療薬の可溶化相を形成することをさらに含む。

場合によっては、前記第２相を乳化する工程が、前記第２相を乳化して、粗いエマルジョンを形成する工程と、前記の粗いエマルジョンを乳化して、微細エマルジョン相を形成する工程とを含む。

ある実施形態では、前記有機溶媒が、酢酸エチル、ベンジルアルコール、塩化メチレン、クロロホルム、トルエン、メチルエチルケトン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、アセトン、アセトニトリル、酢酸、Ｔｗｅｅｎ８０およびＳｐａｎ８０およびその２種類以上の組み合わせからなる群から選択される溶媒を含む。

ある実施形態では、前記水溶液が、コール酸ナトリウム、酢酸エチル、ベンジルアルコールまたはその組み合わせからなる群から選択される試剤を含む。

ある実施形態では、前記第２相を乳化する工程が、ローターステーター・ホモジナイザー、プローブ超音波処理器、撹拌子または高圧ホモジナイザーを使用することを含む。ある実施形態では、粗いエマルジョンを乳化する工程が、高圧ホモジナイザーを使用することを含む。ある実施形態では、前記第１エマルジョンが、ホモジナイザーによる約２〜約３パスを含む。ある実施形態では、ホモジナイザー供給圧力が、約２０００〜約８０００ｐｓｉ／相互作用チャンバである。

ある実施形態では、前記ホモジナイザーが、複数の相互作用チャンバを含む。ある実施形態では、クエンチを、約５℃以下の温度で少なくとも一部行う。ある実施形態では、クエンチを、約０〜約５℃で行う。

ある実施形態では、前記クエンチ：エマルジョン比が、約２：１〜約４０：１であるか、約５：１〜約１５：１である。

ある実施形態では、前記薬物可溶化剤が、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｔｗｅｅｎ２０、ポリビニルピロリドン、シクロデキストラン、ドデシル硫酸ナトリウム、およびコール酸ナトリウムからなる群から選択される。ある実施形態では、前記薬物可溶化剤が、ジエチルニトロソアミン、酢酸ナトリウム、尿素、グリセリン、プロピレングリコール、グリコフロール、ポリ（エチレン）グリコール、ビス（ポリオキシエチレングリコールドデシルエーテル、安息香酸ナトリウム、およびサリチル酸ナトリウムからなる群から選択される。ある実施形態では、薬物可溶化剤と治療薬の比が約２００：１〜約１０：１である。

例えば、濾過が、接線フロー濾過を含む。ある実施形態では、濾過が、約０〜約５℃の第１温度での濾過を含む。場合によっては、約２０〜約３０℃の第２温度での濾過をさらに含む。ある実施形態では、濾過が、約０〜約５℃で約１〜約３０のダイア容積を処理すること、かつ約２０〜約３０℃で少なくとも１のダイア容積を処理することを含む。別の実施形態では、濾過が、約０〜約５℃で約１〜約３０のダイア容積を処理すること、かつ約２０〜約３０℃で約１〜約１５のダイア容積を処理することを含む。例えば、濾過が、異なる温度で異なるダイア容積を処理することを含む。

ある実施形態では、前記有機溶媒、未封入治療薬、および／または薬物可溶化剤を実質的に除去するために、濾過前に可溶化相を精製することをさらに含む。

ある実施形態では、濾過が、滅菌濾過を含む。例えば、前記滅菌濾過が、制御速度にて濾過系（filtration train)を用いて、前記治療用ナノ粒子を濾過することを含む。前記
濾過系が、デプスフィルターと滅菌フィルターを含む。

ある実施形態では、前記第１ポリマーが、ジブロックポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーである。他の実施形態では、前記第１ポリマーが、ジブロックポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーである。場合によっては、第２ポリマーを前記有機溶媒と合わせることをさらに含み、前記第２ポリマーが、標的化リガンドで官能化されたポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーである。ある実施形態では、第２ポリマーを前記有機溶媒と合わせることをさらに含み、前記第２ポリマーが、標的化リガンドで官能化されたポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーである。ある実施形態では、前記標的化リガンドが、前記ポリ（エチレン）グリコールに共有結合されている。

ある実施形態では、前記有機酸が、２種類以上の有機酸の混合物を含む。ある実施形態では、前記有機酸が、２種類の有機酸の混合物を含む。ある実施形態では、前記有機酸が
、３種類の有機酸の混合物を含む。ある実施形態では、前記有機酸が、４種類の有機酸の混合物を含む。ある実施形態では、前記有機酸が、５種類の有機酸の混合物を含む。

別の観点では、複数の治療用ナノ粒子を製造する方法が提供される。その方法は、治療薬、第１ポリマー、および有機酸を有機溶媒と合わせて、固形分約１〜約５０％を有する第１有機相を形成し、前記第１有機相を第１水溶液と合わせて、第２相を形成し、前記第２相を乳化して、エマルジョン相を形成し、前記エマルジョン相をクエンチして、クエンチ相を形成し、前記可溶化相を濾過して、前記治療用ナノ粒子を回収することを含む。

さらに別の観点では、治療用ナノ粒子が提供される。治療用ナノ粒子は、第１ポリマー、治療薬、および有機酸を含む第１有機相を乳化し、それによってエマルジョン相が形成され、前記エマルジョン相をクエンチして、それによってクエンチ相が形成され、前記クエンチ相を濾過して、前記治療用ナノ粒子が回収されることによって製造される。

さらに別の観点では、治療用ナノ粒子が提供される。治療用ナノ粒子は、
Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤約０．２〜約３５重量％；
ジブロックポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはジブロックポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー約５０〜約９９．８重量％を含み、ポリ（エチレン）グリコール約１０〜約３０重量％を含む。

ある実施形態では、２５℃で約３．５未満のｐＫ_aを有する有機酸をさらに含む。別の
実施形態では、有機酸が、２５℃でｐＫ_a約−１〜約２を有する。

ある実施形態では、前記有機酸がトリフルオロ酢酸である。

ある実施形態では、前記治療用ナノ粒子の流体力学的直径が約６０〜約１５０ｎｍである。別の実施形態では、流体力学的直径が約９０〜約１４０ｎｍである。

ある実施形態では、Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤を約１〜約１０重量％含む。例えば、Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤を約２〜約５重量％含む。

ある実施形態では、前記治療用ナノ粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液に入れた場合に、前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤を少なくとも１分間、実質的に保持する。ある実施形態では、前記粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液に入れた場合に、約５％未満の前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤を実質的に即時に放出する。ある実施形態では、前記粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液に入れた場合に、前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤約０．０１〜約２５％を約１時間にわたって放出する。ある実施形態では、前記粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液に入れた場合に、前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤約１０〜約４５％を約４時間にわたって放出する。

場合によっては、前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤が、ダサチニブまたはその薬剤として許容される塩である。場合によっては、前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤が、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、ボスチニブ、ポナチニブ、バフェチニブ、およびその薬剤として許容される塩からなる群から選択される。

ある実施形態では、前記ポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーが、ポリ（乳酸）数平均分子量約０．６〜約０．９５、約０．６〜約０．８、約０．７５〜約０．８５、約０．７〜約０．９を有する。

ある実施形態では、ポリ（エチレン）グリコールを約１０〜約２５重量％、ポリ（エチレン）グリコールを約１０〜約２０重量％、ポリ（エチレン）グリコールを約１５〜約２５重量％、ポリ（エチレン）グリコールを約２０〜約３０重量％含む。

場合によっては、標的化リガンドで官能化されたポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーを約０．２〜約３０重量％さらに含む。ある実施形態では、標的化リガンドで官能化されたポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーを約０．２〜約３０重量％さらに含む。ある実施形態では、前記標的化リガンドが、前記ポリ（エチレン）グリコールに共有結合されている。

別の観点では、治療用ナノ粒子が提供される。治療用ナノ粒子は、ダサチニブまたはその薬剤として許容される塩約０．５〜約３５重量％；
ポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー約３０〜約９９．５重量％；
任意に、２５℃で約３．５未満のｐＫ_aを有する有機酸約０．０００１〜約０．５重量
％；
を含む治療用ナノ粒子であって、ポリ（エチレン）グリコールを約１０〜約２５重量％含む。

ある実施形態では、前記有機酸が、２種類以上の有機酸の混合物を含む。ある実施形態では、前記有機酸が、２種類の有機酸の混合物を含む。ある実施形態では、前記有機酸が、３種類の有機酸の混合物を含む。ある実施形態では、前記有機酸が、４種類の有機酸の混合物を含む。ある実施形態では、前記有機酸が、５種類の有機酸の混合物を含む。

別の観点では、治療用ナノ粒子が提供される。治療用ナノ粒子は、第１ポリマー、Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤、および２５℃で約３．５未満のｐＫ_aを有する有機
酸を含む第１有機相を乳化し、それによってエマルジョン相が形成されること；
前記エマルジョン相をクエンチして、それによってクエンチ相が形成されること；
前記クエンチ相を濾過して、前記治療用ナノ粒子が回収されること；
によって製造される。

さらに別の観点では、薬剤として許容される組成物が提供される。薬剤として許容される組成物は、ここで記載した複数の治療用ナノ粒子と、薬剤として許容される賦形剤とを含む。

ある実施形態では、薬剤として許容される組成物は、サッカリドをさらに含む。例えば、前記サッカリドが、ショ糖またはトレハロース、またはその混合物からなる群から選択される二糖である。別の実施形態では、薬剤として許容される組成物は、シクロデキストリンをさらに含む。例えば、前記シクロデキストリンが、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、およびその混合物からなる群から選択される。

さらに別の観点では、その必要がある患者において癌を治療する方法が提供される。その方法は、ここに記載の治療用ナノ粒子を含む、治療有効量の組成物を前記患者に投与することを含む。ある実施形態では、前記癌が慢性骨髄性白血病である。他の実施形態では、前記癌が、慢性骨髄単球性白血病、好酸球増多症候群、腎細胞癌、肝細胞癌、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ性白血病、非小細胞肺癌、膵臓癌、乳癌、固形腫瘍およびマントル細胞リンパ腫からなる群から選択される。

さらに別の観点では、その必要がある患者において消化管間質腫瘍を治療する方法が提供される。その方法は、ここに記載の治療用ナノ粒子を含む、治療有効量の組成物を前記患者に投与することを含む。

別の実施形態では、ヒトのような温血動物において医薬として使用するための本明細書中に記載の治療用ナノ粒子が提供される。

さらに別の観点では、ヒトのような温血動物における抗増殖効果の産生において使用するためのここで記載の治療用ナノ粒子が提供される。

さらに別の実施形態では、そのような封じ込めおよび／または固形腫瘍疾患の治療における抗浸潤剤としてのヒトのような温血動物で使用するためのここで記載の治療用ナノ粒子が提供される。

さらに別の実施形態では、ヒトのような温血動物における癌の予防または治療における、本明細書に記載のような治療のナノ粒子の使用が提供される。

さらに別の実施形態では、ヒトのような温血動物における癌の予防又は治療に使用するためのここに記載の治療用ナノ粒子が提供される。

さらに別の実施形態では、ヒトのような温血動物における癌の予防または治療のための薬剤の製造における、ここに記載のような治療のナノ粒子の使用が提供される。

さらに別の実施形態では、ヒトのような温血動物における抗増殖効果の産生のためにここに記載されるような治療のナノ粒子の使用が提供される。

さらに別の実施形態では、ヒトのような温血動物における抗増殖効果の産生において使用するための医薬の製造における、ここに記載のような治療のナノ粒子の使用が提供される。

さらに別の実施形態では、固形腫瘍疾患の封じ込め及び/又は治療における抗浸潤剤と
しての人間としての温血動物で使用するための医薬の製造における、ここに記載のような治療のナノ粒子の使用が提供される。

さらに別の実施形態では、ここに記載の治療用ナノ粒子の有効量を投与することを含む、そのような治療を必要とする、ヒト等の温血動物において抗増殖効果を産生するための方法が提供される。

さらに別の観点では、ここに記載の治療用ナノ粒子の有効量を投与することを含む、そのような治療を必要とする、ヒト等の温血動物に、封じ込めおよび／または固形腫瘍疾患の治療によって抗浸潤効果を産生するための方法が提供される。

さらに別の観点では、ヒトのような温血動物における充実性腫瘍疾患の予防または治療に使用するためのここに記載の治療用ナノ粒子が提供される。

さらに別の観点では、ヒトのような温血動物における固形性腫瘍疾患の予防または治療に使用するための医薬の製造における、ここに記載のような治療のナノ粒子の使用が提供される。

さらに別の観点では、そのような治療を必要とする患者に、ここに記載のようナノ粒子の有効量を投与することを含む、ヒトのような温血動物において固形腫瘍疾患の予防または治療のための方法が提供される。

開示されたナノ粒子の一実施形態の概略図である。

開示されたナノ粒子を形成するための乳化プロセスのフローチャートである。

開示された乳化プロセスのフロー図である。

開示された乳化プロセスのフロー図である。

種々のナノ粒子製剤のインビトロ放出プロファイルを示す。

発明の詳細な説明

本明細書においては、治療剤と有機酸とを混合することを含む、治療用ナノ粒子を製造する方法を記載する。いくつかの実施形態では、ナノ粒子の製造方法において有機酸を含有することにより実質的に高負荷の治療剤を含有するナノ粒子を生じさせることができる。さらに特定の実施形態において、有機酸の存在下において含まれ、または製造されるナノ粒子は、制御放出特性の改良を示すことができる。例えば、開示のナノ粒子は有機酸の非存在下において製造されたナノ粒子に比べ治療剤をさらにゆっくり放出することができる。また、本明細書において、開示の方法により製造された治療用ナノ粒子について記載する。

当業者として、一部の治療剤のナノ粒子配合物が他の治療剤においてよりも問題を引き起こすことが理解されるだろう。例えば、問題のある治療剤を含有するナノ粒子の製造を試みると、薬剤負荷が不十分であり、制御放出特性が不良であり、粒子があまりに大きいなどのナノ粒子を生じることがある。特筆すべきことに、治療用ナノ粒子を製造する方法に酸（例えば、トリフルオロ酢酸）を含むことにより、得られた治療用ナノ粒子の特性を改良することができることが見出されている。上記で考察したように、いくつかの実施形態において、開示の方法における酸の使用は、本方法により製造された治療用ナノ粒子に有利な特性、例えば薬剤負荷の改良および／または制御放出特性の改良などを与えることができる。いずれかの理論に束縛されることを望まないが、治療用ナノ粒子の製造に使用される溶剤における治療剤の溶解度を改良することにより、酸が開示のナノ粒子に有利な特性を与えると思われる。

任意の適切な酸をナノ粒子の製造方法において使用することができる。いくつかの実施形態において、酸は有機酸とすることができる。例えば、検討される酸は、カルボン酸（例えば、モノカルボン酸、ジカルボン酸、トリカルボン酸など）、スルフィン酸、スルフェン酸、またはスルホン酸とすることができる。いくつかの場合、検討される酸は２種以上の酸の混合物を含むことができる。例えば、いくつかの実施形態において、検討される酸は２種の酸の混合物、いくつかの実施形態において、３種の酸の混合物、いくつかの実施形態において、４種の酸の混合物、またはいくつかの実施形態において、５種の酸の混合物を含むことができる。特定の実施形態において、酸のエステルを使用することができる。いくつかの場合、酸の塩を使用することができる。いくつかの実施形態において、酸は無機酸とすることができる。無機酸の例として、塩酸、硝酸、リン酸、硫酸、ホウ酸、フッ化水素酸、および臭化水素酸がある。

例えば、開示のカルボン酸は、脂肪族カルボン酸（例えば、環式または非環式、分岐状または非分岐状の炭化水素鎖を有するカルボン酸）とすることができる。開示のカルボン酸は、いくつかの実施形態において、ハロゲン（すなわち、Ｆ、Ｃｌ、Ｂｒ、およびＩ）、スルホニル、ニトロ、およびオキソを含むが、それらに限定されない１種以上の官能基で置換することができる。例えば、カルボン酸はハロゲン化カルボン酸（例えば、トリフルオロ酢酸）とすることができる。特定の実施形態において、開示のカルボン酸は非置換型とすることができる。

例示のカルボン酸は、置換または非置換の脂肪酸（例えば、Ｃ₈〜Ｃ₅₀の脂肪酸）を含
むことができる。いくつかの例において、脂肪酸はＣ₁₀〜Ｃ₂₀の脂肪酸とすることができる。他の例において、脂肪酸はＣ₁₅〜Ｃ₂₀の脂肪酸とすることができる。脂肪酸は、いくつかの場合、飽和されていてもよい。他の実施形態において、脂肪酸は不飽和とすることができる。例えば、脂肪酸は、モノ不飽和脂肪酸またはポリ不飽和脂肪酸とすることができる。いくつかの実施形態において、不飽和脂肪酸基の二重結合はシス配置とすることができる。いくつかの実施形態において、不飽和脂肪酸の二重結合はトランス配置とすることができる。

カルボン酸の非限定的な例として、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、酪酸、吉草酸、カプロン酸、ヘプタン酸、カプリル酸、ノナン酸、カプリン酸、ウンデカノン酸、ラウリン酸、トリデカノン酸、ミリスチン酸、ペンタデカン酸、パルミチン酸、ヘプタデカン酸、ステアリン酸、ノナデカノン酸、アラキジン酸、ヘンエイコサン酸、ベヘン酸、トリコサン酸、リグノセリン酸、ペンタコサン酸、セロチン酸、ヘプタコサン酸、モンタン酸、ノナコサン酸、メリシン酸、ヘンアトリアコンタン酸（ｈｅｎａｔｒｉａｃｏｎｔａｎｏｉｃ ａｃｉｄ）、ラッセル酸、プシリン酸、ゲダ酸、セロプラスチン酸、ヘキサトリアコンタン酸、２−メチルプロピオン酸、２−メチル酪酸、３−メチル酪酸、２−メチルペンタン酸、２−エチルヘキサン酸、２−プロピルヘプタン酸、ピバル酸、パルミトレイン酸、オレイン酸、バクセン酸、リノール酸、アルファ−リノール酸、ガンマ−リノール酸、アラキドン酸、ガドレイン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、エルカ酸、シクロヘキサンカルボン酸、アクリル酸、メタクリル酸、クロトン酸、ケイ皮酸、フェニル酢酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸、グルタル酸、アジピン酸、マレイン酸、リンゴ酸、酒石酸（例えば、Ｄ−酒石酸、メソ酒石酸など）、クエン酸、グルコン酸、アスパラギン酸、グルタミニン酸（ｇｌｕｔａｍｉｎｉｃ ａｃｉｄ）、フマル酸、イタコン酸、ハロゲン化カルボン酸、例えば、フルオロ酢酸、ジフルオロ酢酸、トリフルオロ酢酸、クロロ酢酸、ジクロロ酢酸、およびトリクロロ酢酸、スルホン酸、例えば、トリフリン酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、およびｐ−トルエンスルホン酸、およびそれらの組み合わせがある。

いくつかの例において、検討される酸は、約１０００Ｄａ未満、いくつかの実施形態において、約５００Ｄａ未満、いくつかの実施形態において、約４００Ｄａ未満、いくつかの実施形態において、約３００Ｄａ未満、いくつかの実施形態において、約２５０Ｄａ未満、いくつかの実施形態において、約２００Ｄａ未満、いくつかの実施形態において、約１５０Ｄａ未満、いくつかの実施形態において、約１００Ｄａ未満、いくつかの実施形態において、約９０Ｄａ未満、いくつかの実施形態において、約８５Ｄａ未満、およびいくつかの実施形態において、約７５Ｄａ未満の分子量を有していてもよい。いくつかの場合、酸は、約４０Ｄａ〜約１０００Ｄａ、いくつかの実施形態において、約９１Ｄａ〜約１０００Ｄａ、いくつかの実施形態において、約９５Ｄａ〜約１０００Ｄａ、いくつかの実施形態において、約１００Ｄａ〜約１０００Ｄａ、いくつかの実施形態において、約９１Ｄａ〜約１５０Ｄａ、いくつかの実施形態において、約９５Ｄａ〜約１５０Ｄａ、およびいくつかの実施形態において、約１００Ｄａ〜約１５０Ｄａの分子量を有していてもよい。

いくつかの実施形態において、酸は、少なくとも一部において、酸の強度を基準に選択することができる。例えば、酸は、２５℃での測定時に、約−１５〜約７、いくつかの実施形態において、約−３〜約５、いくつかの実施形態において、約−３〜約４、いくつかの実施形態において、約−３〜約３．５、いくつかの実施形態において、約−３〜約３、いくつかの実施形態において、約−３〜約２、いくつかの実施形態において、約−３〜約１、いくつかの実施形態において、約−３〜約０．５、いくつかの実施形態において、約−０．５〜約０．５、いくつかの実施形態において、約１〜約７、いくつかの実施形態において、約２〜約７、いくつかの実施形態において、約３〜約７、いくつかの実施形態において、約４〜約６、いくつかの実施形態において、約４〜約５．５、いくつかの実施形態において、約４〜約５、およびいくつかの実施形態において、約４．５〜約５の水における酸解離定数（ｐＫ_a）を有することができる。いくつかの実施形態において、酸は、
２５℃での測定時に、約７未満、約５未満、約３．５未満、約３未満、約２未満、約１未満または約０未満のｐＫ_aを有することができる。

いくつかの実施形態において、検討される酸は、例えば、治療用ナノ粒子の特性を改良するのに、または最終治療用ナノ粒子中の酸の濃度を（例えば、真空により）減少させるのに有利な相転移温度を有することができる。例えば、酸は、約３００℃未満、またはいくつかの場合、約１００℃未満の沸点を有することができる。特定の実施形態において、酸は、約５０℃〜約１１０℃またはいくつかの場合、約６０℃〜約９０℃の沸点を有することができる。いくつかの場合、酸は、約１５℃未満、いくつかの場合、約１０℃未満、またはいくつかの場合、約０℃未満の融点を有することができる。特定の実施形態において、酸は、約−３０℃〜約０℃またはいくつかの場合、約−２０℃〜約−１０℃の融点を有することができる。

例えば、各方法で使用される酸、本明細書に開示のナノ粒子は、少なくとも一部において、酸を含む溶剤における治療剤の溶解度を基準にして選択することができる。例えば、いくつかの実施形態において、酸を含む溶剤に溶解した治療剤は、約１５ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬ、約７５ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ〜約２００ｍｇ／ｍＬ、または約１２５ｍｇ／ｍＬ〜約１７５ｍｇ／ｍＬの溶解度を有することができる。いくつかの実施形態において、酸を含む溶剤に溶解した治療剤は、約５０ｍｇ／ｍＬ超、または約１００ｍｇ／ｍＬ超の溶解度を有することができる。いくつかの実施形態において、酸を含む溶剤に溶解した治療剤（例えば、治療剤、溶剤、および酸からなる第１の溶液）は、治療剤が酸を含有しない溶剤に溶解した（例えば、治療剤および溶剤からなる第２の溶液）ときより少なくとも約２倍超、いくつかの実施形態において、少なくとも約５倍超、いくつかの実施形態において、少なくとも約１０倍超、いくつかの実施形態において、少なくとも約２０倍超、いくつかの実施形態において、約２倍〜約２０倍超、またはいくつかの実施形態において、約１０倍〜約２０倍超の溶解度を有することができる。以下でさらに詳細に考察するように、薬剤溶液中の酸の濃度は約１％〜約１０％、またはいくつかの実施形態において、約２．５％〜約３．５％とすることができる。

以下でさらに詳細に考察するように、いくつかの例にておいて、薬剤溶液（すなわち、治療剤溶液）中の酸の濃度は、約１重量パーセント〜約１０重量パーセント、またはいくつかの実施形態において、約２．５重量パーセント〜約３．５重量パーセントとすることができる。特定の実施形態において、薬剤溶液中の酸の濃度は、少なくとも約１重量パーセント、いくつかの実施形態において、少なくとも約２重量パーセント、いくつかの実施形態において、少なくとも約３重量パーセント、いくつかの実施形態において、少なくとも約１０重量パーセントとすることができる。

いくつかの例において、治療剤を含有する溶液を、ポリマーを含有する溶液と別個に製造することができ、次いでこの２つの溶液をナノ粒子配合前に混合することができる。例えば、一実施形態において、第１の溶液は、治療剤および酸を含有し、第２の溶液は、ポリマーおよび場合により酸を含有する。第２の溶液が酸を含有しない配合物は、例えば、ある方法で使用される酸の量を最小限にし、またはいくつかの場合、酸と例えば、酸の存在下において分解し有していてもよいポリマーとの接触時間を最小限にするために有利かもしれない。他の場合、治療剤、ポリマー、および酸を含有する単一の溶液を製造することができる。

特定の実施形態において、酸は、２５℃での測定時に、水１００ｍＬ当たり少なくとも約１００ｍｇ、水１００ｍＬ当たり少なくとも約１ｇ、水１００ｍＬ当たり少なくとも約１０ｇ、または水１００ｍＬ当たり少なくとも約５０ｇの溶解度を有し有していてもよい。他の実施形態において、酸は、２５℃での測定時に、水１００ｍＬ当たり約１００ｍｇ〜水１００ｍＬ当たり約１ｇ、水１００ｍＬ当たり約０．５ｇ〜水１００ｍＬ当たり約２ｇ、水１００ｍＬ当たり約１ｇ〜水１００ｍＬ当たり約１０ｇ、または水１００ｍＬ当たり約５ｇ〜水１００ｍＬ当たり約５０ｇの溶解度を有することができる。いくつかの実施形態において、酸は、２５℃で水に混和性とすることができる。

いくつかの実施形態において、開示のナノ粒子は、ナノ粒子の製造中に使用される酸を本質的に非含有であってよい。他の実施形態において、開示のナノ粒子は酸を含み有していてもよい。例えば、いくつかの実施形態において、開示のナノ粒子の酸含有量は、約０．０００１ｗｔ％〜約０．５ｗｔ％、約０．００１ｗｔ％〜約０．５ｗｔ％、約０．０１ｗｔ％〜約０．５ｗｔ％、約０．１ｗｔ％〜約０．５ｗｔ％、約０．０００１ｗｔ％〜約０．４ｗｔ％、約０．０００１ｗｔ％〜約０．３ｗｔ％、約０．０００１ｗｔ％〜約０．２ｗｔ％、約０．０００１ｗｔ％〜約０．１ｗｔ％、約０．０００１ｗｔ％〜約０．０１ｗｔ％、または約０．０００１ｗｔ％〜約０．００１ｗｔ％とすることができる。

いくつかの実施形態において、開示のナノ粒子は、例えば、室温（例えば、２５℃）および／または３７℃のリン酸緩衝液に入れたときに、実質的に即時に（例えば、約１分〜約３０分、約１分〜約２５分、約５分〜約３０分、約５分〜約１時間、約１時間、または約２４時間にわたり）、治療剤の約２％未満、約５％未満、約１０％未満、約１５％未満、約２０％未満、約２５％未満、または約３０％未満を放出する。特定の実施形態において、開示の、治療剤を含むナノ粒子は、治療剤を例えば２５℃および／または３７℃の水溶液（例えば、リン酸緩衝液）に入れたときに、約１時間にわたり放出される治療剤の約０．０１〜約５０％、いくつかの実施形態において、約０．０１〜約２５％、いくつかの実施形態において、約０．０１〜約１５％、またはいくつかの実施形態において、約０．０１〜約１０％に実質的に相応する割合で放出することができる。いくつかの実施形態において、開示の、治療剤を含むナノ粒子は、治療剤を例えば２５℃および／または３７℃の水溶液（例えば、リン酸緩衝液）に入れたときに、約４時間にわたり放出される治療剤の約１０〜約７０％、いくつかの実施形態において、約１０〜約４５％、いくつかの実施形態において、約１０〜約３５％、またはいくつかの実施形態において、約１０〜約２５％に実質的に相応する割合で放出することができる。

いくつかの実施形態において、開示のナノ粒子は、実質的に治療剤を、３７℃のリン酸緩衝液に入れたときに例えば少なくとも約１分間、少なくとも約１時間またはそれ以上にて実質的に滞留させることができる。

本明細書に開示のナノ粒子は、１種、２種、３種以上の生体適合性および／または生分解性ポリマーを含む。例えば、検討されるナノ粒子は、約４０〜約９９．８重量パーセン
ト、いくつかの実施形態において、約５０〜約９９．８重量パーセント、いくつかの実施形態において、約５０〜約９９．５重量パーセント、いくつかの実施形態において、約５０〜約９８重量パーセント、いくつかの実施形態において、約４０〜約９４重量パーセント、いくつかの実施形態において、約５０〜約９４重量パーセント、いくつかの実施形態において、約６０〜約９６重量パーセント、いくつかの実施形態において、約６０〜約８５重量パーセント、およびいくつかの実施形態において、約６５〜約８５重量パーセントの、生分解性ポリマーおよびポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）を含む１種以上のブロックコポリマーと、約０〜約５０重量パーセントの生分解性ホモポリマーを含むことができる。

開示のナノ粒子は治療剤を含み有していてもよい。例えば、このようなナノ粒子を含む組成物は、有効量の治療剤を、例えば、患者の標的体内領域に送達することができる。任意の適切な治療剤を開示のナノ粒子に使用することができる。

いくつかの実施形態において、開示のナノ粒子は、約０．２〜約３５重量パーセント、約０．２〜約２０重量パーセント、約０．２〜約１０重量パーセント、約０．２〜約５重量パーセント、約０．３〜約５重量パーセント、約０．４〜約５重量パーセント、約０．５〜約５重量パーセント、約０．７５〜約５重量パーセント、約１〜約５重量パーセント、約２〜約５重量パーセント、約０．３〜約３重量パーセント、約０．４〜約３重量パーセント、約０．５〜約３重量パーセント、約０．７５〜約３重量パーセント、約１〜約３重量パーセント、約２〜約３重量パーセント、約２〜約１０重量パーセント、約２〜約２０重量パーセント、約２〜約３０重量パーセント、約３〜約４０重量パーセント、約５〜約１５重量パーセント、約５〜約３０重量パーセント、約１０〜約３０重量パーセント、約１５〜２５重量パーセント、またはさらに約４〜約２５重量パーセントの治療剤を含むことができる。

特定の実施形態において、開示のナノ粒子は酸を含み、かつ／または酸を含む方法により製造される。このようなナノ粒子は、酸を含まない方法により製造されたナノ粒子より高い薬剤負荷を有することができる。例えば、酸を含む方法により製造された開示のナノ粒子の薬剤負荷（例えば、重量基準）は、酸を含まない方法により製造された開示のナノ粒子より、約２倍〜約１０倍高くすることができる。いくつかの実施形態において、酸を含む第１の方法により製造された開示のナノ粒子の薬剤負荷（重量基準）は、酸を含まないことを除き第１の方法と同一である第２の方法により製造された開示のナノ粒子より少なくとも約２倍高く、少なくとも約３倍高く、少なくとも約４倍高く、少なくとも約５倍高く、または少なくとも約１０倍高くすることができる。

一実施形態において、開示の治療用ナノ粒子は、標的リガンド、例えば前立腺特異的膜抗原を標的とし、またはこれに結合するのに有効な低分子量ＰＳＭＡリガンドを含むことができる。特定の実施形態において、低分子量リガンドはポリマーに抱合し、ナノ粒子はリガンド抱合ポリマー（例えば、ＰＬＡ−ＰＥＧ−リガンド）と非官能性ポリマー（例えば、ＰＬＡ−ＰＥＧまたはＰＬＧＡ−ＰＥＧ）の特定の比を含む。ナノ粒子は、これらの２つのポリマーを、有効量のリガンドが疾患または障害、例えばがんの治療のためのナノ粒子と会合するのに最適な比で有することができる。例えば、リガンド密度が増加すると、標的結合（細胞結合／標的取り込み）が増大し、ナノ粒子を「標的特異的」にすることができる。代わりに、ナノ粒子中の特定の濃度の非官能性ポリマー（例えば、非官能性ＰＬＧＡ−ＰＥＧコポリマー）は炎症および／または免疫原性を制御することができ（すなわち、免疫応答を誘起させる能力）、ナノ粒子が疾患または障害（例えば、前立腺癌）の治療に十分な循環半減期を有することを可能にする。さらに、非官能性ポリマーは、いくつかの実施形態において、細網内皮系（ＲＥＳ）を介して循環系からのクリアランスの速度を低下させることができる。したがって、非官能性ポリマーは投与時に粒子が体内を移
動することを可能にする特性をナノ粒子に与えることができる。いくつかの実施形態において、非官能性ポリマーは、別の方法で対象によるクリアランスを促進することができる、他の高濃度のリガンドと調和し、標的細胞への送達を少なくさせる。

いくつかの実施形態において、本明細書に開示のナノ粒子は、ナノ粒子の全体のポリマー組成物（すなわち、官能性＋非官能性ポリマー）のおよそ０．１〜５０、例えば、０．１〜３０、例えば、０．１〜２０、例えば、０．１〜１０モルパーセントを構成するリガンドを抱合した官能性ポリマーを含み有していてもよい。さらに、本明細書において、別の実施形態において、１種以上の低分子量リガンドと（例えば、共有（すなわち、リンカー（例えば、アルキレンリンカー）を介して））抱合したポリマーを含むナノ粒子を開示し、この場合総ポリマーに対する低分子量リガンドの重量パーセントは約０．００１〜５、例えば、約０．００１〜２、例えば、約０．００１〜１である。

いくつかの実施形態において、開示のナノ粒子は、生物学的実体、例えば、具体的な膜成分または細胞表面受容体と効率的に結合し、またはさもなければ会合することができる。治療剤の（例えば、具体的な組織または細胞型への、特異的な罹患組織へではあるが、正常な組織へではないなど）標的化は、充実性腫瘍がん（例えば、前立腺癌）などの組織特異的疾患の治療に望ましい。例えば、細胞傷害性抗がん剤の全身送達に対して、本明細書に開示のナノ粒子は、薬剤が健常な細胞を死滅させることを実質的に予防することができる。さらに、開示のナノ粒子は、従来の化学療法と通常関連する望ましくない副作用を低減させ有していてもよい低用量の薬剤（開示のナノ粒子または配合物を含まずに投与された有効量の薬剤と比較して）の投与を可能にする。

一般に、「ナノ粒子」は、１０００ｎｍ未満、例えば、約１０ｎｍ〜約２００ｎｍの直径を有する任意の粒子を指す。開示の治療用ナノ粒子は、約６０〜約１２０ｎｍ、もしくは約７０〜約１２０ｎｍ、または約８０〜約１２０ｎｍ、または約９０〜約１２０ｎｍ、または約１００〜約１２０ｎｍ、または約６０〜約１３０ｎｍ、または約７０〜約１３０ｎｍ、または約８０〜約１３０ｎｍ、または約９０〜約１３０ｎｍ、または約１００〜約１３０ｎｍ、または約１１０〜約１３０ｎｍ、または約６０〜約１４０ｎｍ、または約７０〜約１４０ｎｍ、または約８０〜約１４０ｎｍ、または約９０〜約１４０ｎｍ、または約１００〜約１４０ｎｍ、または約１１０〜約１４０ｎｍ、または約６０〜約１５０ｎｍ、または約７０〜約１５０ｎｍ、または約８０〜約１５０ｎｍ、または約９０〜約１５０ｎｍ、または約１００〜約１５０ｎｍ、または約１１０〜約１５０ｎｍあるいは約１２０〜約１５０ｎｍの直径を有するナノ粒子を含むことができる。
ポリマー

いくつかの実施形態において、ナノ粒子は、ポリマーのマトリクスおよび治療剤を含むことができる。いくつかの実施形態において、治療剤および／または標的断片（すなわち、低分子量ＰＳＭＡリガンド）は、ポリマーマトリクスの少なくとも一部と会合することができる。例えば、いくつかの実施形態において、標的断片（例えば、リガンド）は、ポリマーマトリクスの表面と共有的に会合することができる。いくつかの実施形態において、共有会合はリンカーを介在する。治療剤は、ポリマーマトリクスの表面と会合し、ポリマーマトリクス内に封入され、ポリマーマトリクスにより包囲され、かつ／またはポリマーマトリクスを通して分散されることができる。

多種多様なポリマーおよびそれから粒子を形成する方法は、薬剤送達の分野において公知である。いくつかの実施形態において、本開示は、第１の巨大分子が低分子量リガンド（例えば、標的断片）に結合する第１のポリマーを含み、第２の巨大分子が標的断片に結合しない第２のポリマーを含む少なくとも２つの巨大分子を有するナノ粒子に関する。ナノ粒子は場合により１種以上のさらなる非官能性ポリマーを含むことができる。

任意の適切なポリマーを開示のナノ粒子に使用することができる。ポリマーは天然または非天然（合成）ポリマーであり有していてもよい。ポリマーはホモポリマーまたは２種以上のモノマーを含むコポリマーすることができる。配列に関して、コポリマーはランダム、ブロックであってよく、またはランダムおよびブロック配列の組み合わせを含むことができる。典型的に、ポリマーは有機ポリマーである。

本明細書において使用される用語「ポリマー」は、当技術分野において使用される通常の意味、すなわち、共有結合により結合した、１種以上の繰り返し単位（モノマー）を含む分子構造とされる。繰り返し単位は全て同一であってよく、またはいくつかの場合、ポリマー内に存在する２種以上の繰り返し単位であってよい。いくつかの場合、ポリマーは生物学的に由来した、すなわち、バイオポリマーであり有していてもよい。非限定的な例として、ペプチドまたはタンパク質がある。いくつかの場合、追加の断片もポリマー、例えば、以下に記載のものなどの生物学的断片に存在し有していてもよい。２種以上の繰り返し単位がポリマー内に存在する場合、この時ポリマーは「コポリマー」であると言われる。ポリマーを使用する任意の実施形態において、いくつかの場合、使用されるポリマーはコポリマーすることができることが理解される。コポリマーを形成する繰り返し単位は任意の形態で配置され有していてもよい。例えば、繰り返し単位は、ランダムな順に、交互の順に、またはブロックコポリマー、すなわち、それぞれが第１の繰り返し単位（例えば、第１のブロック）を含む１つ以上の領域、および第２の繰り返し単位（例えば、第２のブロック）を含む１つ以上の領域を含むブロックコポリマーとして配置され有していてもよい。ブロックコポリマーは２つ（ジブロックコポリマー）、３つ（トリブロックコポリマー）またはそれ以上の数の個別のブロックを有することができる。

開示の粒子はコポリマーを含むことができ、これはいくつかの実施形態において、通常２種以上のポリマーを合わせて共有結合することにより互いに会合した２種以上のポリマー（例えば、本明細書に記載のもの）と説明される。したがって、コポリマーは第１のポリマーおよび第２のポリマーを含むことができ、これらは、合わせて抱合され、第１のポリマーがブロックコポリマーの第１のブロックであってよく、第２のポリマーがブロックコポリマーの第２のブロックであり有していてもよいブロックコポリマーを形成する。当然ながら、当業者であれば、ブロックコポリマーがいくつかの場合、ポリマーの複数のブロックを含有することができ、かつ本明細書において使用される「ブロックコポリマー」が単一の第１のブロックと単一の第２のブロックのみを有するブロックコポリマーのみに限定されないことが理解されるだろう。例えば、ブロックコポリマーは第１のポリマーを含む第１のブロック、第２のポリマーを含む第２のブロック、および第３のポリマーまたは第１のポリマーを含む第３のブロックなどを含み有していてもよい。いくつかの場合、ブロックコポリマーは、任意の数の第１のポリマーの第１のブロックおよび第２のポリマーの第２のブロック（および特定の場合、第３のブロック、第４のブロックなど）を含有することができる。さらに、ブロックコポリマーはまた、いくつかの例において、他のブロックコポリマーから形成することができることに留意すべきである。例えば、第１のブロックコポリマーは、多種のブロックを含有する新たなブロックコポリマーを形成するため別のポリマー（ホモポリマー、バイオポリマー、別のブロックコポリマーなどであり有していてもよい）に、および／または他の断片に（例えば、非ポリマー断片に）抱合することができる。

いくつかの実施形態において、ポリマー（例えば、コポリマー、例えば、ブロックコポリマー）は両親媒性であり、すなわち、親水性部分および疎水性部分を有し、または相対的に親水性部分および相対的に疎水性部分を有し有していてもよい。親水性ポリマーは一般に水に引き付けられるものであってよく、疎水性ポリマーは一般に水をはじくものであってよい。親水性または疎水性ポリマーを例えば、ポリマーのサンプルを製造し、水との
その接触角度（典型的にポリマーは６０°未満の接触角度を有するが、疎水性ポリマーは約６０°を超える接触角度を有する）を測定することにより識別することができる。いくつかの場合、２種以上のポリマーの親水性を互いに対して測定することができ、すなわち、第１のポリマーは第２のポリマーより親水性を高くすることができる。例えば、第１のポリマーは第２のポリマーより接触角度を小さくすることができる。

一連の実施形態において、本明細書において検討されるポリマー（例えば、コポリマー、例えば、ブロックコポリマー）は、生体適合性ポリマー、すなわち、生対象に挿入または注入されたときに顕著な炎症および／または、例えばＴ細胞応答を介した免疫系によるポリマーの急激な拒絶がなく、典型的に有害応答を誘発しないポリマーを含む。したがって、本明細書において検討される治療用粒子は非免疫原性とすることができる。本明細書において使用される用語、非免疫原性とは、通常血中抗体、Ｔ細胞または応答性免疫細胞を誘起せず、または最小濃度を誘起するに過ぎず、かつ通常個体内で個体自体に対する免疫応答を誘起しない天然の状態における内因性成長因子を指す。

生体適合性は典型的に、免疫系の少なくとも一部により材料の急激な拒絶、すなわち、対象に移植された非生体適合性材料が免疫系による材料の拒絶を十分に制御することができないほどの重篤となり得、かつ多くの場合、材料を対象から除去する必要がある段階の免疫応答を対象に誘発することを指す。生体適合性を決定する簡易な試験の１つとして、インビトロでポリマーを細胞下に置くことができ、つまり生体適合性ポリマーは適度な濃度にて、例えば５０マイクログラム／１０⁶個の細胞の濃度にて顕著な細胞死を生じない
ポリマーである。例えば、生体適合性ポリマーは、繊維芽細胞または上皮細胞などの細胞下に置かれたときに、貪食された、またはさもなければそのような細胞に取り込まれる場合であっても、細胞死は約２０％未満とすることができる。種々の実施形態において有用となり有していてもよい生体適合性ポリマーの非限定的な例として、ポリジオキサノン（ＰＤＯ）、ポリヒドロキシアルカン酸、ポリヒドロキシ酪酸、ポリ（グリセロールセバシン酸）、ポリグリコライド（すなわち、ポリ（グリコール）酸）（ＰＧＡ）、ポリラクチド（すなわち、ポリ（乳）酸）（ＰＬＡ）、ポリ（乳）酸−コ−ポリ（グリコール）酸（ＰＬＧＡ）、ポリカプロラクトン、またはこれらおよび／または他のポリマーを含むコポリマーもしくは誘導体がある。

特定の実施形態において、検討される生体適合性ポリマーは生分解性であってよく、すなわち、ポリマーが体内などの生理学的環境内で化学的および／または生物学的に分解されることができる。本明細書において使用される「生分解性」ポリマーは、細胞に導入されたときに、細胞機構（生物学的分解性）により、および／または化学的プロセス、例えば、細胞上で顕著な毒性作用を有することなく、細胞が再利用するか廃棄することができる成分に加水分解（化学的分解性）により分解されるものである。一実施形態において、生分解性ポリマーおよびそれらの分解副生成物は生体適合性することができる。

本明細書に開示の粒子はＰＥＧを含有してもよく、またはしなくてもよい。さらに、特定の実施形態は、ポリ（エステル−エーテル）を含有するコポリマー、例えば、エステル結合（例えば、Ｒ−Ｃ（Ｏ）−Ｏ−Ｒ’結合）およびエーテル結合（例えば、Ｒ−Ｏ−Ｒ’結合）により結合した繰り返し単位を有するポリマーに関するものとすることができる。いくつかの実施形態において、生分解性ポリマー、例えばカルボン酸基を含有する加水分解性ポリマーは、ポリ（エチレングリコール）繰り返し単位と抱合し、ポリ（エステル−エーテル）を形成させることができる。ポリ（エチレングリコール）繰り返し単位を含有するポリマー（例えば、コポリマー、例えば、ブロックコポリマー）は「ＰＥＧ化」ポリマーとも呼ばれるかもしれない。

例えば、検討されるポリマーは、（例えば、対象内の）水分下に置かれたと同時に加水
分解するものであってよく、ポリマーは加熱下に（例えば、約３７℃に）置かれたときに分解することができる。ポリマーの分解は、使用されるポリマーまたはコポリマーに応じて種々の割合で生じさせることができる。例えば、ポリマーの半減期（ポリマーの５０％がモノマーおよび／または他の非ポリマー断片に分解されることができる時間）は、ポリマーに応じて日、週、月または年単位であり有していてもよい。ポリマーは、例えば、酵素活性または細胞機構により、いくつかの場合例えばリゾチーム下（例えば、相対的にｐＨが低い）に置かれることにより生物学的に分解させることができる。いくつかの場合、ポリマーは、細胞上で顕著な毒性作用を有することなく、細胞が再利用するか廃棄することができるモノマーおよび／または他の非ポリマー断片に分解されることができる（例えば、ポリラクチドを加水分解し、乳酸を形成することができ、ポリグリコライドを加水分解しグリコール酸を形成することができるなど）。

いくつかの実施形態において、ポリマーは、乳酸とグリコール酸の単位、例えば、本明細書において「ＰＬＧＡ」と総称される、ポリ（乳酸−コ−グリコール酸）およびポリ（ラクチド−コ−グリコリド）を含むコポリマーおよび、本明細書において「ＰＧＡ」と呼ばれるグリコール酸単位を含むホモポリマーおよび乳酸単位、例えば、本明細書において「ＰＬＡ」と総称される、ポリ−Ｌ−乳酸、ポリ−Ｄ−乳酸、ポリ−Ｄ，Ｌ−乳酸、ポリ−Ｌ−ラクチド、ポリ−Ｄ−ラクチド、およびポリ−Ｄ，Ｌ−ラクチドを含む、ポリエステルであり有していてもよい。いくつかの実施形態において、ポリエステルの例として、例えば、ポリヒドロキシ酸、ラクチドおよびグリコリドの、ＰＥＧ化ポリマーおよびコポリマー（例えば、ＰＥＧ化ＰＬＡ、ＰＥＧ化ＰＧＡ、ＰＥＧ化ＰＬＧＡ、およびそれらの誘導体）がある。いくつかの実施形態において、ポリエステルは、例えば、ポリ無水物、ポリ（オルトエステル）ＰＥＧ化ポリ（オルトエステル）、ポリ（カプロラクトン）、ＰＥＧ化ポリ（カプロラクトン）、ポリリジン、ＰＥＧ化ポリリジン、ポリ（エチレンイミン）、ＰＥＧ化ポリ（エチレンイミン）、ポリ（Ｌ−ラクチド−コ−Ｌ−リジン）、ポリ（セリンエステル）、ポリ（４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンエステル）、ポリ［α−（４−アミノブチル）−Ｌ−グリコール酸］、およびそれらの誘導体を含む。

いくつかの実施形態において、ポリマーはＰＬＧＡとすることができる。ＰＬＧＡは、乳酸およびグリコール酸の生体適合性および生分解性コポリマーであり、種々の形態のＰＬＧＡを乳酸：グリコール酸の比により特徴づけることができる。乳酸はＬ−乳酸、Ｄ−乳酸、またはＤ，Ｌ−乳酸であり有していてもよい。ＰＬＧＡの分解速度は乳酸−グリコール酸の比を変更することにより調節することができる。いくつかの実施形態において、ＰＬＧＡを、およそ８５：１５、およそ７５：２５、およそ６０：４０、およそ５０：５０、およそ４０：６０、およそ２５：７５、またはおよそ１５：８５の乳酸：グリコール酸の比により特徴づけることができる。いくつかの実施形態において、粒子のポリマー中の乳酸とグリコール酸のモノマー（例えば、ＰＬＧＡブロックコポリマーまたはＰＬＧＡ−ＰＥＧブロックコポリマー）の比を、水分取り込み、治療剤放出および／またはポリマー分解動態などの種々のパラメータに対して最適化するよう選択することができる。

いくつかの実施形態において、ポリマーは１種以上のアクリルポリマーであり有していてもよい。特定の実施形態において、アクリルポリマーは、例えば、アクリル酸とメタクリル酸のコポリマー、メタクリル酸メチルコポリマー、メタクリル酸エトキシエチル、メタクリル酸シアノエチル、メタクリル酸アミノアルキルのコポリマー、ポリ（アクリル酸）、ポリ（メタクリル酸）、メタクリル酸アルキルアミドのコポリマー、ポリ（メタクリル酸メチル）、ポリ（メタクリル酸ポリアクリルアミド、メタクリル酸アミノアルキルのコポリマー、メタクリル酸グリシジルコポリマー、ポリシアノアクリル酸、および上記のポリマーの１種以上を含む組み合わせを含む。アクリルポリマーは、少量の第４級アンモニウム基を含む、アクリル酸エステルおよびメタクリル酸エステルの完全に重合化されたコポリマーを含むことができる。

いくつかの実施形態において、ポリマーは陽イオンポリマーとすることができる。一般に、陽イオンポリマーは、負に荷電された核酸の鎖（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、またはそれらの誘導体）を凝縮し、かつ／または保護することができる。アミン含有ポリマー、例えば、ポリ（リジン）、ポリエチレンイミン（ＰＥＩ）、およびポリ（アミドアミン）デンドリマーをいくつかの実施形態において、開示の粒子に使用することを検討する。

いくつかの実施形態において、ポリマーは、陽イオン側鎖を担持する分解性ポリエステルであり有していてもよい。これらのポリエステルの例として、ポリ（Ｌ−ラクチド−コ−Ｌ−リジン）、ポリ（セリンエステル）、およびポリ（４−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンエステル）がある。

例えば、ＰＥＧがリガンドと抱合されないとき、ＰＥＧが末端処理され、末端基を含むことができると考えられる。例えば、ＰＥＧはヒドロキル、メトキシもしくは他のアルコキシル基、メチルもしくは他のアルキル基、アリール基、カルボン酸、アミン、アミド、アセチル基、グアニジノ基、またはイミダゾールで末端処理することができる。他の検討される末端基は、アジド、アルキン、マレイミド、アルデヒド、ヒドラジド、ヒドロキシルアミン、アルコキシアミンまたはチオール断片を含む。

当業者であれば、例えば、ＥＤＣ（ｌ−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸）およびＮＨＳ（Ｎ−ヒドロキシスクシンイミド）を使用し、ポリマーをアミンで末端処理したＰＥＧ基に反応させることにより、開環重合法（ＲＯＭＰ）によりまたは同様のものによりポリマーをＰＥＧ化する方法および技法について公知であるだろう。

一実施形態において、ポリマーの分子量（または、例えば、コポリマーの異なるブロックなどの分子量の比）を本明細書に開示の有効な治療のために最適化することができる。例えば、ポリマーの分子量は、粒子分解速度（例えば、生分解性ポリマーの分子量を調節することができるとき）、溶解度、水分取り込みおよび薬剤放出動態に影響させることができる。例えば、ポリマーの分子量（または、例えば、コポリマーの異なるブロックなどの分子量の比）を、治療される対象内で合理的な期間内（数時間から１〜２週間、３〜４週間、５〜６週間、７〜８週間などの範囲）に粒子が分解するように調節することができる。開示の粒子は例えば、ＰＥＧとＰＬ（Ｇ）Ａのジブロックコポリマーを含むことができ、この場合、例えば、ＰＥＧ部分は約１，０００〜２０，０００、例えば約２，０００〜２０，０００、例えば約２〜約１０，０００の数平均分子量を有することができ、ＰＬ（Ｇ）Ａ部分は、約５，０００〜約２０，０００または約５，０００〜１００，０００、例えば約２０，０００〜７０，０００、例えば約１５，０００〜５０，０００の数平均分子量を有することができる。

例えば、本明細書において、約１０〜約９９重量パーセントのポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーもしくはポリ（乳酸）−コ−ポリ（グリコール）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー、または約２０〜約８０重量パーセント、約４０〜約８０重量パーセント、もしくは約３０〜約５０重量パーセント、または約７０〜約９０重量パーセントのポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーもしくはポリ（乳酸）−コ−ポリ（グリコール）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーを含む例示的治療用ナノ粒子を開示する。ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーの例として、約１５〜約２０ｋＤａ、または約１０〜約２５ｋＤａの数平均分子量のポリ（乳）酸および約４〜約６、または約２ｋＤａ〜約１０ｋＤａの数平均分子量のポリ（エチレン）グリコールとすることができる。

いくつかの実施形態において、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーは、約０．６〜約０．９５、いくつかの実施形態において、約０．７〜約０．９、いくつかの実施形態において、約０．６〜約０．８、いくつかの実施形態において、約０．７〜約０．８、いくつかの実施形態において、約０．７５〜約０．８５、いくつかの実施形態において、約０．８〜約０．９、およびいくつかの実施形態において、約０．８５〜約０．９５のポリ（乳）酸数平均分子量の割合を有することができる。ポリ（乳）酸数平均分子量の割合は、コポリマーのポリ（乳）酸成分の数平均分子量を、ポリ（乳）酸成分の数平均分子量とポリ（エチレン）グリコール成分の数平均分子量の和で除算することにより算出することができる。

開示のナノ粒子は場合により、約１〜約５０重量パーセントのポリ（乳）酸もしくはポリ（乳）酸−コ−ポリ（グリコール）酸（ＰＥＧを含まない）を含むことができ、または場合により約１〜約５０重量パーセント、もしくは約１０〜約５０重量パーセントまたは約３０〜約５０重量パーセントのポリ（乳）酸もしくはポリ（乳）酸−コ−ポリ（グリコール）酸を含むことができる。例えば、ポリ（乳酸）またはポリ（乳酸）−コ−ポリ（グリコール）酸は、約５〜約１５ｋＤａ、または約５〜約１２ｋＤａの数平均分子量を有し有していてもよい。例示的ＰＬＡは、約５〜約１０ｋＤａの数平均分子量を有することができる。例示的ＰＬＧＡは、約８〜約１２ｋＤａの数平均分子量を有することができる。

治療用ナノ粒子は、いくつかの実施形態において、約１０〜約３０重量パーセント、いくつかの実施形態において、約１０〜約２５重量パーセント、いくつかの実施形態において、約１０〜約２０重量パーセント、いくつかの実施形態において、約１０〜約１５重量パーセント、いくつかの実施形態において、約１５〜約２０重量パーセント、いくつかの実施形態において、約１５〜約２５重量パーセント、いくつかの実施形態において、約２０〜約２５重量パーセント、いくつかの実施形態において、約２０〜約３０重量パーセント、またはいくつかの実施形態において、約２５〜約３０重量パーセントのポリ（エチレン）グリコールを含有することができ、この場合、ポリ（エチレン）グリコールは、ポリ（乳）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー、ポリ（乳酸）−コ−ポリ（グリコール）酸−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー、またはポリ（エチレン）グリコールホモポリマーとして存在させることができる。

特定の実施形態において、ナノ粒子のポリマーを脂質に抱合することができる。ポリマーは、例えば脂質末端ＰＥＧすることができる。以下に記載のように、ポリマーの脂質部分を、ナノ粒子の形成を促進する、別のポリマーとの自己組織化に使用することができる。例えば、親水性ポリマーを、疎水性ポリマーと自己組織化する脂質に抱合することができる。

いくつかの実施形態において、脂質は油類である。一般に当技術分野において知られる任意の油をナノ粒子に使用されるポリマーに抱合することができる。いくつかの実施形態において、油は１種以上の脂肪酸基またはそれらの塩を含むことができる。いくつかの実施形態において、脂肪酸基は可消化長鎖（例えばＣ₈〜Ｃ₅₀）の置換または非置換炭化水
素を含むことができる。いくつかの実施形態において、脂肪酸基はＣ₁₀〜Ｃ₂₀の脂肪酸またはその塩とすることができる。いくつかの実施形態において、脂肪酸基はＣ₁₅〜Ｃ₂₀の脂肪酸またはその塩とすることができる。いくつかの実施形態において、脂肪酸は非飽和型であり有していてもよい。いくつかの実施形態において、脂肪酸基はモノ非飽和型とすることができる。いくつかの実施形態において、脂肪酸基はポリ非飽和型とすることができる。いくつかの実施形態において、非飽和脂肪酸基の二重結合はシス配置とすることができる。いくつかの実施形態において、非飽和脂肪酸の二重結合はトランス配置とすることができる。

いくつかの実施形態において、脂肪酸基は、酪酸、カプロン酸、カプリル酸、カプリン酸、ラウリン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、アラキジン酸、ベヘン酸、またはリグノセリン酸の１種以上することができる。いくつかの実施形態において、脂肪酸基は、パルミトレイン酸、オレイン酸、バクセン酸、リノール酸、アルファ−リノール酸、ガンマ−リノール酸、アラキドン酸、ガドレイン酸、アラキドン酸、エイコサペンタエン酸、ドコサヘキサエン酸、またはエルカ酸の１種以上することができる。

具体的な実施形態において、脂質は式Ｖ：
（Ｖ）
のものおよびその塩であり、式中、各Ｒは独立してＣ_1-30アルキルである。式Ｖの一実施形態において、脂質は、１，２ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、およびその塩、例えばナトリウム塩である。

一実施形態において、任意選択の小分子標的断片をナノ粒子の脂質成分に結合、例えば共有結合する。例えば、本明細書において、治療剤を含むナノ粒子、官能性および非官能性ポリマーを含むポリマーマトリクス、場合により脂質、および場合により低分子量ＰＳＭＡ標的リガンドを提供し、この場合、標的リガンドはナノ粒子の脂質成分に結合、例えば共有結合する。一実施形態において、低分子量標的断片に結合する脂質成分は式Ｖのものである。別の実施形態において、治療剤、ポリマーマトリクス、ＤＳＰＥ、および低分子量ＰＳＭＡ標的リガンドを含む標的特異的ナノ粒子が提供され、この場合、リガンドはＤＳＰＥに結合、例えば共有結合する。例えば、ナノ粒子は、ＰＬＧＡ−ＤＳＰＥ−ＰＥＧ−リガンドを含むポリマーマトリクスを含みことができる。

標的断片
本明細書において、任意選択の標的断片、すなわち、生物学的実体、例えば、膜成分、細胞表面受容体、前立腺特異的膜抗原などに結合し、またはさもなければ会合することができる断片を含み有していてもよいナノ粒子を提供する。粒子の表面に存在する標的断片は、粒子を具体的な標的部位、例えば、腫瘍、疾患部位、組織、器官、一細胞型などに局在させるようにすることができる。それゆえ、この時ナノ粒子は「標的特異的」となり有していてもよい。薬剤または他のペイロードはこの時、いくつかの場合、粒子から放出され、具体的な標的部位と局所的に相互作用することが可能となる。

一実施形態において、開示のナノ粒子は、低分子量リガンド、例えば低分子量ＰＳＭＡリガンドである標的断片を含む。本明細書において使用される用語「結合する」または「結合すること」は、典型的には生化学的、生理学的、および／または化学的相互作用を含むがそれらに限定されない特異的または非特定的結合または相互作用による相互の親和性または結合能を示す分子またはその部分の対応する対の間の相互作用を指す。「生物学的結合」は、タンパク質、核酸、糖タンパク質、炭水化物、ホルモンなどを含む分子の対の間で生じる相互作用の一種と定義する。用語「結合パートナー」は、具体的な分子と結合を行うことができる分子を指す。「特異的結合」は、他の類似の生物学的実体に対してより実質的高い程度で結合パートナー（または特定の数の結合パートナー）に結合し、または認識することができるポリヌクレオチドなどの分子を指す。一連の実施形態において、
標的断片は、約１マイクモル未満、少なくとも約１０マイクロモルまたは少なくとも約１００マイクロモルの親和性（解離定数を介して測定）を有する。

例えば、標的部分は、使用する標的断片に応じて、対象の体内で粒子を腫瘍（例えば、充実性腫瘍）、疾患部位、組織、器官、一細胞型に局在するようにさせることができる。例えば、低分子量ＰＳＭＡリガンドは、充実性腫瘍、例えば、乳房もしくは前立腺の腫瘍またはがん細胞に局在するようになり有していてもよい。対象はヒトまたは非ヒト動物であり有していてもよい。対象の例として、イヌ、ネコ、ウマ、ロバ、ウサギ、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ラット、マウス、モルモット、ハムスター、霊長類、ヒトなどの哺乳類を含むがそれらに限定されない。

検討される標的断片は小分子を含み有していてもよい。特定の実施形態において、用語「小分子」は、相対的に低分子量の天然または（例えば化学合成を介して）人工的に作製され、タンパク質、ポリペプチド、または核酸でない有機化合物を指す。小分子は典型的に多数の炭素−炭素結合を有する。特定の実施形態において、小分子は約２０００ｇ／ｍｏｌ未満の大きさである。いくつかの実施形態において、小分子は約１５００ｇ／ｍｏｌ未満または約１０００ｇ／ｍｏｌ未満である。いくつかの実施形態において、小分子は約８００ｇ／ｍｏｌ未満または約５００ｇ／ｍｏｌ未満、例えば約１００ｇ／ｍｏｌ〜約６００／ｍｏｌ、または約２００／ｍｏｌ〜約５００ｇ／ｍｏｌである。

例えば、標的断片は前立腺癌腫瘍を標的することができ、例えば、標的断片はＰＳＭＡペプチダーゼ阻害剤とすることができる。これらの断片は本明細書において「低分子量ＰＳＭＡリガンド」とも呼ばれる。正常な組織における発現と比較したとき、前立腺特異的膜抗原（ＰＳＭＡ）は正常組織に対して悪性前立腺において少なくとも１０倍過剰発現し、ＰＳＭＡ発現のレベルはさらに、疾患が転移相に進行すると上方制御される（Ｓｉｌｖｅｒら、１９９７，Ｃｌｉｎ．Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．，３：８１）。

いくつかの実施形態において、低分子量ＰＳＭＡリガンドは式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶのものおよびそのエナンチオマー、ステレオアイソマー、ロータマー、タウトマー、ジアステレオマーまたはラセミ体である。
式中、ｍおよびｎはそれぞれ独立して０、１、２または３であり、ｐは０または１であり、
Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ⁴、およびＲ⁵はそれぞれ独立して、置換または非置換アルキル（例えば、Ｃ_1-10−アルキル、Ｃ_1-6−アルキル、またはＣ_1-4−アルキル）、置換または非置換アリール（例えば、フェニルまたはピリジニル）、およびそれらの任意の組み合わせからなる群から選択され、Ｒ³はＨまたはＣ_1-6−アルキル（例えば、ＣＨ₃）である。

式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩおよびＩＶの化合物において、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ⁴またはＲ⁵はナノ粒子の結合点、例えば、開示のナノ粒子の一部を形成するポリマー、例えばＰＥＧへの結合点を含む。結合点は、共有結合、イオン結合、水素結合、化学吸着および物理的吸着を含む吸着により形成される結合、ファンデルワールス結合から形成される結合または分散力により形成することができる。例えば、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ⁴、またはＲ⁵がアニリンまたはＣ_1-6
−アルキル−ＮＨ₂基と定義される場合、これらの官能基のいずれかの水素（例えば、ア
ミノ水素）を、低分子量ＰＳＭＡリガンドがナノ粒子のポリマーマトリクス（例えば、ポリマーマトリクスのＰＥＧブロック）に共有結合するように脱離することができる。本明細書において使用される用語「共有結合」は、少なくとも１対の電子を共有することにより形成される２つの原子間の結合を指す。

式Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩまたはＩＶの具体的な実施形態において、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ⁴、および
Ｒ⁵はそれぞれ独立して、Ｃ_1-6−アルキルもしくはフェニルまたはＣ_1-6−アルキルもし
くはフェニルの任意の組み合わせであり、これらは独立して、ＯＨ、ＳＨ、ＮＨ₂、また
はＣＯ₂Ｈと１回以上置換され、アルキル基はＮ（Ｈ）、Ｓ、またはＯにより遮断され有
していてもよい。別の実施形態において、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ⁴、およびＲ⁵はそれぞれ独立して、ＣＨ₂−Ｐｈ、（ＣＨ₂）₂−ＳＨ、ＣＨ₂−ＳＨ、（ＣＨ₂）₂Ｃ（Ｈ）（ＮＨ₂）ＣＯ₂Ｈ、ＣＨ₂Ｃ（Ｈ）（ＮＨ₂）ＣＯ₂Ｈ、ＣＨ（ＮＨ₂）ＣＨ₂ＣＯ₂Ｈ、（ＣＨ₂）₂Ｃ（Ｈ）（ＳＨ）ＣＯ₂Ｈ、ＣＨ₂−Ｎ（Ｈ）−Ｐｈ、Ｏ−ＣＨ₂−Ｐｈ、またはＯ−（ＣＨ₂）₂−Ｐ
ｈであり、各Ｐｈは独立して、ＯＨ、ＮＨ₂、ＣＯ₂Ｈ、またはＳＨと１回以上置換され有していてもよい。これらの式において、ＮＨ₂、ＯＨまたはＳＨ基は、ナノ粒子への共有
結合点として作用する（例えば、−Ｎ（Ｈ）−ＰＥＧ、−Ｏ−ＰＥＧ、または−Ｓ−ＰＥＧ）。

さらに別の実施形態において、低分子量ＰＳＭＡリガンドは、
およびそのエナンチオマー、ステレオアイソマー、ロータマー、タウトマー、ジアステレオマー、またはラセミ体からなる群から選択される。
式中、ＮＨ₂、ＯＨ、またはＳＨ基はナノ粒子への共有結合点（例えば、−Ｎ（Ｈ）−
ＰＥＧ、−Ｏ−ＰＥＧ、または−Ｓ−ＰＥＧ）として作用する。

別の実施形態において、低分子量ＰＳＭＡリガンドは、
およびそのエナンチオマー、ステレオアイソマー、ロータマー、タウトマー、ジアステレオマー、またはラセミ体からなる群から選択される。
式中、Ｒは独立してＮＨ₂、ＳＨ、ＯＨ、ＣＯ₂Ｈ、ＮＨ₂、ＳＨ、ＯＨ、またはＣＯ₂Ｈと置換されるＣ_1-6−アルキル、およびＮＨ₂、ＳＨ、ＯＨ、またはＣＯ₂Ｈと置換される
フェニルからなる群から選択され、Ｒはナノ粒子への共有結合点（例えば、−Ｎ（Ｈ）−ＰＥＧ、−Ｓ−ＰＥＧ、−Ｏ−ＰＥＧ、またはＣＯ₂−ＰＥＧ）として作用する。

別の実施形態において、低分子量ＰＳＭＡリガンドは、
およびそのエナンチオマー、ステレオアイソマー、ロータマー、タウトマー、ジアステレオマー、またはラセミ体からなる群から選択される。
式中、ＮＨ₂またはＣＯ₂Ｈ基は、ナノ粒子への共有結合点（例えば、−Ｎ（Ｈ）−ＰＥＧ、またはＣＯ₂−ＰＥＧ）として作用する。これらの化合物さらに、ＮＨ₂、ＳＨ、ＯＨ、ＣＯ₂Ｈ、ＮＨ₂、ＳＨ、ＯＨ、またはＣＯ₂Ｈと置換されるＣ_1-6−アルキル、またはＮＨ₂、ＳＨ、ＯＨ、またはＣＯ₂Ｈと置換されるフェニルと置換されることができ、この場合、これらの官能基はナノ粒子への共有結合点としても作用する。

別の実施形態において、低分子量ＰＳＭＡリガンドは、
およびそのエナンチオマー、ステレオアイソマー、ロータマー、タウトマー、ジアステレオマー、またはラセミ体である。
ｎは１、２、３、４、５、または６である。このリガンドにおいて、ＮＨ₂基はナノ粒
子への共有結合点（例えば、−Ｎ（Ｈ）−ＰＥＧ）として作用する。

さらに別の実施形態において、低分子量ＰＳＭＡリガンドは、
およびそのエナンチオマー、ステレオアイソマー、ロータマー、タウトマー、ジアステレオマー、またはラセミ体である。具体的にブチル−アミン化合物は、特にベンゼン環がないことから合成が容易であるという利点を有する。さらに理論に束縛されることを望まないが、ブチル−アミン化合物は、天然の分子（すなわち、リジンおよびグルタミン酸）に分解する可能性があり、それにより、毒性の懸念が最小限に抑えられる。

いくつかの実施形態において、前立腺癌または乳癌の腫瘍などの充実性腫瘍と関連する細胞を標的にするために使用され有していてもよい小分子標的断片はＰＳＭＡペプチダーゼ阻害剤、例えば、２−ＰＭＰＡ、ＧＰＩ５２３２、ＶＡ−０３３、フェニルアルキルホスホンアミデートおよび／またはその類似体および誘導体を含む。いくつかの実施形態に
おいて、前立腺癌の腫瘍に関連する細胞を標的とするために使用され有していてもよい小分子標的断片は、チオールおよびインドールチオール誘導体、例えば２−ＭＰＰＡおよび３−（２−メルカプトエチル）−１Ｈ−インドール−２−カルボン酸誘導体を含む。いくつかの実施形態において、前立腺癌の腫瘍に関連する細胞を標的とするために使用することができる小分子標的断片は、ヒドロキサム酸誘導体を含む。いくつかの実施形態において、前立腺癌の腫瘍に関連する細胞を標的とするために使用することができる小分子標的断片は、ＰＢＤＡ系および尿素系阻害剤、例えば、ＺＪ４３、ＺＪ１１、ＺＪ１７、ＺＪ３８および／またはおよびその類似体および誘導体、アンドロゲン受容体標的物質（ＡＲＴＡ）、ポリアミン、例えばプトレシン、スペルミン、およびスペルミジン、ＮＡＡＧペプチダーゼまたはＮＡＡＬＡＤａｓｅとも知られている酵素、グルタミン酸カルボキシラーゼ（ＧＣＰＩＩ）の阻害剤を含む。

別の実施形態において、標的断片はＨｅｒ２、ＥＧＦＲ、葉酸受容体またはｔｏｌｌ受容体を標的とするリガンドとすることができる。別の実施形態において、標的断片は葉酸塩、葉酸、またはＥＧＦＲ結合分子である。

例えば、検討される標的断片は、核酸、ポリペプチド、糖タンパク質、炭水化物、または脂質を含むことができる。例えば、標的断片は細胞型特異的マーカーに結合する核酸標的断片（例えば、アプタマー、例えば、Ａ１０アプタマー）とすることができる。一般に、アプタマーはポリペプチドなどの具体的な標的に結合するオリゴヌクレオチド（例えば、ＤＮＡ、ＲＮＡ、またはそれらの類似体もしくは誘導体）である。いくつかの実施形態において、標的断片は、細胞表面受容体のための天然または合成のリガンド、例えば、成長因子、ホルモン、ＬＤＬ、トランスフェリンなどとすることができる。標的断片は抗体であってよく、この用語は抗体フラグメントを含むことを意図し、抗体の特徴的な部分である、一本鎖標的断片を例えば、ファージディスプレイなどの方法を使用して識別することができる。

標的断片は、最大約５０残基の長さを有する標的ペプチドまたは標的ペプチド模倣物とすることができる。例えば、標的断片はアミノ酸配列ＡＫＥＲＣ、ＣＲＥＫＡ、ＡＲＹＬＱＫＬＮ、またはＡＸＹＬＺＺＬＮを含むことができ、この場合ＸおよびＺは可変アミノ酸、またはその保存的変異体、またはペプチド模倣物である。具体的な実施形態において、標的断片は、アミノ酸配列ＡＫＥＲＣ、ＣＲＥＫＡ、ＡＲＹＬＱＫＬＮ、またはＡＸＹＬＺＺＬＮを含むペプチドであり、この場合ＸおよびＺは可変アミノ酸であり、２０、５０または１００残基未満の長さを有する。ＣＲＥＫＡ（Ｃｙｓ Ａｒｇ Ｇｌｕ Ｌｙｓ
Ａｌａ）ペプチドもしくはそのペプチド模倣物ペプチドまたはオクタペプチドＡＸＹＬＺＺＬＮも標的断片ならびにコラーゲンＩＶと結合し、または複合体を形成し、あるいは組織基底膜（例えば、血管の基底膜）を標的とする、ペプチドまたはその保存的変異体またはペプチド模倣体として考えられる。標的断片の例として、ＩＣＡＭ（細胞間接着分子、例えば、ＩＣＡＭ−１）を標的とするペプチドがある。

本明細書に開示の標的断片を、いくつかの実施形態において、開示のポリマーまたはコポリマー（例えば、ＰＬＡ−ＰＥＧ）に抱合することができ、このようなポリマー抱合体は開示のナノ粒子の一部を形成することができる。

いくつかの実施形態において、治療用ナノ粒子は、ポリマー薬剤抱合体を含み有していてもよい。例えば、薬剤を開示のポリマーまたはコポリマー（例えば、ＰＬＡ−ＰＥＧ）に抱合することができ、このようなポリマー薬剤抱合体は開示のナノ粒子の一部を形成することができる。例えば、開示の治療用ナノ粒子は場合により約０．２〜約３０重量パーセントのＰＬＡ−ＰＥＧまたはＰＬＧＡ−ＰＥＧを含むことができ、この場合、ＰＥＧは薬剤と官能化される（例えば、ＰＬＡ−ＰＥＧ薬剤）。

開示のポリマー抱合体は、任意の適切な抱合技法を使用して形成され有していてもよい。例えば、標的断片または薬剤および生体適合性ポリマー（例えば、生体適合性ポリマーおよびポリ（エチレングリコール））などの２つの化合物を、ＥＤＣ−ＮＨＳ化学物質（ｌ−エチル−３−（３−ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩およびＮ−ヒドロキシスクシンイミド）などの技法またはチオール、アミンまたは類似の官能化ポリエーテルの一末端に抱合することができる、マレイミドもしくはカルボン酸を含む反応を使用して合わせて抱合することができる。ポリマー標的断片抱合体またはポリマー薬剤抱合体を形成するための標的断片または薬剤およびポリマーの抱合は、ジクロロメタン、アセトニトリル、クロロホルム、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、アセトンなどのこれらに限定されない有機溶剤で行われることができる。特定の反応条件を通常の実験以上のことを使用することなく、当業者が決定することができる。

別の一連の実施形態において、抱合反応を、カルボン酸官能基（例えば、ポリ（エステル−エーテル）化合物）を含むポリマーと、アミンを含むポリマーまたは他の断片（標的断片または薬剤など）を反応させることにより行うことができる。例えば、標的断片、例えば、低分子量ＰＳＭＡリガンド、または薬剤、例えばダサチニブをアミンと反応させ、アミン含有断片を形成することができ、次いでこれをポリマーのカルボン酸に抱合することができる。このような反応は、単一工程の反応として行われることができ、すなわち、抱合は、Ｎ−ヒドロキシスクシンイミドまたはマレイミドなどの中間体を使用することなく行われる。いくつかの実施形態において、薬剤とアミン含有リンカーを反応させ、アミン含有薬剤を形成することができ、次いでこれを上記のようにポリマーのカルボン酸に抱合することができる。アミン含有断片とカルボン酸末端ポリマー（ポリ（エステル−エーテル）化合物など）との抱合反応を、一連の実施形態において、ジクロロメタン、アセトニトリル、クロロホルム、テトラヒドロフラン、アセトン、ホルムアミド、ジメチルホルムアミド、ピリジン、ジオキサン、またはジメチルスルホキシドなどの（それらに限定されない）有機溶剤に可溶化したアミン含有断片を、カルボン酸末端ポリマーを含有する溶液に添加することにより有していてもよいことができる。カルボン酸末端ポリマーを例えば、ジクロロメタン、アセトニトリル、クロロホルム、ジメチルホルムアミド、テトラヒドロフラン、またはアセトンなどの、それらに限定されない有機溶剤内に含有させることができる。アミン含有断片とカルボン酸末端ポリマーとの間の反応はいくつかの場合自然に生じさせることができる。非抱合型の反応物を上記の反応の後に洗浄し、ポリマーを例えば、エチルエーテル、ヘキサン、メタノール、またはエタノールなどの溶剤に析出させることができる。特定の実施形態において、抱合体を、アルコール含有断片とポリマーのカルボン酸官能基との間に形成することができ、これは上記のアミンとカルボン酸の抱合体と同様に有していてもよいことができる。

特定の例として、低分子量ＰＳＭＡリガンドを以下のように粒子中の標的断片として製造することができる。カルボン酸修飾ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）（ＰＬＧＡ−ＣＯＯＨ）をアミン修飾ヘテロ二官能性ポリ（エチレングリコール）（ＮＨ₂−ＰＥＧ−Ｃ
ＯＯＨ）に抱合し、ＰＬＧＡ−ＰＥＧ−ＣＯＯＨのコポリマーを形成することができる。アミン修飾低分子量ＰＳＭＡリガンド（ＮＨ₂−Ｌｉｇ）を使用することにより、ＰＬＧ
Ａ−ＰＥＧ−Ｌｉｇのトリブロックポリマーを、ＰＥＧのカルボン酸末端をリガンドのアミン官能基に抱合することにより形成することができる。次いで、マルチブロックポリマーを例えば、以下に考察するように治療用途のためなどに使用することができる。

ナノ粒子
開示のナノ粒子は、例えばサッカライドを含有し有していてもよい溶液において、少なくとも約３日間、約４日間または少なくとも約５日間、室温または２５℃で安定させる（例えば、実質的に全ての治療剤を保持する）ことができる。

いくつかの実施形態において、開示のナノ粒子はまた、薬剤放出の速度を増加させることができる脂肪酸を含み有していてもよい。例えば、開示のナノ粒子は、Ｃ₈−Ｃ₃₀アル
コール、例えば、セチルアルコール、オクタノール、ステアリルアルコール、アラキジルアルコール、ドコサノール（ｄｏｃｏｓｏｎａｌ）、またはオクタソナールを含むことができる。

ナノ粒子は制御放出特性を有することができ、例えば、ある量の治療剤を患者に、例えば患者の特定部位に長期間、例えば１日、１週間、またはそれ以上にわたり送達することができる。

いくつかの実施形態において、対象または患者への、開示のナノ粒子または開示のナノ粒子を含む組成物の投与後、患者の治療剤の最高血漿中濃度（Ｃ_max）は、単独で投与し
た場合（例えば、ナノ粒子の一部としてではなく）の治療剤のＣ_maxに比較して実質的に
高値である。

別の実施形態において、治療剤を含む開示のナノ粒子は、対象に投与したときに、単独で投与した治療剤のｔ_maxに比較して実質的に長い治療剤のｔ_maxを有することができる。

このような粒子のライブラリも形成することができる。例えば、粒子内の２種（以上）のポリマーの割合を変化させることにより、これらのライブラリはスクリーニング試験、ハイスループットアッセイなどに有用となり有していてもよい。ライブラリ内の実体は上記のものなどの特性により変化させることができ、いくつかの場合、粒子の２つ以上の特性をライブラリ内で変化させることができる。それゆえ、一実施形態は、様々な比の、様々な特性を含むポリマーを有するナノ粒子のライブラリに関する。ライブラリは任意の適切な比（各比）のポリマーを含むことができる。

いくつかの実施形態において、生体適合性ポリマーは疎水性ポリマーである。生体適合性ポリマーの非限定的な例として、ポリラクチド、ポリグリコリド、および／またはポリ（ラクチド−コ−グリコリド）がある。

様々な実施形態において、本開示は、１）ポリマーマトリクス、２）場合により、粒子の連続の、または不連続のシェルを形成するポリマーマトリクスを囲み、またはポリマーマトリクス内で分散する両親媒性化合物または層、３）ポリマーマトリクスの一部を形成し有していてもよい非官能性ポリマー、および４）場合により、ポリマーに共有結合するＰＳＭＡなどの標的タンパク質抱合体に結合し、ポリマーマトリクスの一部を形成することができる低分子量リガンドを含むナノ粒子を提供する。例えば、両親媒性層がナノ粒子への水浸透性を減少させ、それにより薬剤封入効率を高め、薬剤放出を遅延させることができる。

本明細書において使用される用語「両親媒性」は、分子が極性部分および非極性部分の両方を有する特性を指す。多くの場合、両親媒性化合物は、長い疎水性の尾部に接着した極性の頭部を有する。いくつかの実施形態において、極性部分は水溶性である一方で、非極性部分は水不溶性である。さらに、極性部分は、形式の正の電荷または形式の負の電荷のいずれかを有し有していてもよい。代わりに、極性部分は、形式の正および負の電荷をともに有することができ、双生イオンまたは分子内塩であり有していてもよい。いくつかの実施形態において、両親媒性化合物は以下の、天然由来の脂質、界面活性剤または親水性および疎水性断片をともに有する合成化合物の１つまたは複数であり有していてもよいがそれらに限定されない。

両親媒性化合物の特定の例として、リン脂質、例えば、１，２ジステアロイル−ｓｎ−グリセロ−３−ホスホエタノールアミン（ＤＳＰＥ）、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジアラキドイルホスファチジルコリン（ＤＡＰＣ）、ジベヘノイルホスファチジルコリン（ＤＢＰＣ）、ジトリコサノイルホスファチジルコリン（ＤＴＰＣ）、およびジリグノセロイルファチジルコリン（ＤＬＰＣ）があるが、これらに限定されず、０．０１〜６０（脂質重量／ポリマー重量）、最も好ましくは０．１〜３０（脂質重量／ポリマー重量）の比で組み込まれる。使用され有していてもよいリン脂質は、ホスファチジン酸、飽和および不飽和脂質をともに含むホスファチジルコリン、ホスファチジルエタノールアミン、ホスファチジルグリセロール、ホスファチジルセリン、ホスファチジルイノシトール、リソホスファチジル誘導体、カルジオリピン、およびβ−アシル−ｙ−アルキルリン脂質を含むが、それらに限定されない。リン脂質の例として、ホスファチジルコリン、例えば、ジオレオイルホスファチジルコリン、ジミリストイルホスファチジルコリン、ジペンタデカノイルホスファチジルコリン ジラウロイルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）、ジステアロイルホスファチジルコリン（ＤＳＰＣ）、ジアラキドイルホスファチジルコリン（ＤＡＰＣ）、ジベヘノイルホスファチジルコリン（ＤＢＰＣ）、ジトリコサノイルホスファチジルコリン（ＤＴＰＣ）、ジリグノセロイルファチジルコリン（ＤＬＰＣ）、およびホスファチジルエタノールアミン、例えば、ジオレオイルホスファチジルエタノールアミンまたは１−ヘキサデシル−２−パルミトイルグリセロホスホエタノールアミンがあるがそれらに限定されない。非対称アシル鎖を有する合成リン脂質（例えば、一方は炭素６個のアシル鎖およびもう一方は炭素１２個のアシル鎖）も使用することができる。

具体的な実施形態において、両親媒性層を形成するために使用することができる両親媒性成分はレシチンおよび特に、ホスファチジルコリンである。レシチンは両親媒性脂質であり、それゆえ、多くの場合水性である、周囲に対面している親水性（極性）の頭部と、互いに対面している疎水性の尾部を有するリン脂質二重層を形成する。レシチンは例えば大豆から利用可能な天然の脂質であるという利点があり、既に他の送達デバイスの使用において、ＦＤＡが承認している。さらに、レシチンなどの脂質の混合物は一単体の純粋な脂質より利点が多い。

特定の実施形態において、開示のナノ粒子は、両親媒性の単層を有し、この層はリン脂質二重層ではないが、ナノ粒子の周囲に、またはナノ粒子内に単一の連続または不連続層として存在することを意味する。両親媒性層は、ナノ粒子と「会合」し、これはポリマーシェルの外側を囲み、またはナノ粒子を構成するポリマー内に分散するといった、ポリマーマトリクスにある程度近接して位置することを意味する。

ナノ粒子の製造
本開示の別の態様は開示のナノ粒子の系および作製方法に関する。いくつかの実施形態において、異なる比の２種以上の異なるポリマー（例えば、コポリマー、例えば、ブロックコポリマー）を使用し、粒子を該ポリマー（例えば、コポリマー、例えば、ブロックコポリマー）から生成して、粒子の特性を制御する。例えば、１つのポリマー（例えば、コポリマー、例えば、ブロックコポリマー）は低分子量ＰＳＭＡリガンドを含むことができ、その一方で別のポリマー（例えば、コポリマー、例えば、ブロックコポリマー）を、得られた粒子の生体適合性および／または免疫原性の制御能において選択することができる。

いくつかの実施形態において、ナノ粒子製造方法（例えば、以下に考察のナノ析出方法またはナノ乳濁液方法）に使用される溶剤は酸を含むことができ、これにより本方法を使用してのされたナノ粒子に有利な特性を与えることができる。上記で考察したように、い
くつかの場合、酸は開示のナノ粒子の薬剤負荷を改良することができる。さらに、いくつかの例において、開示のナノ粒子の制御放出特性を酸の使用により改良することができる。いくつかの場合、酸を、例えば、本方法に使用される有機溶液または水溶液に含むことができる。一実施形態において、薬剤（すなわち、治療剤）を有機溶液および酸ならびに場合により１種以上のポリマーと混合する。薬剤を溶解させるのに使用される溶液中の酸の濃度は、例えば、約０．５重量パーセント〜約１０重量パーセント、約２重量パーセント〜約１０重量パーセント、約５重量パーセント〜約１０重量パーセント、約１．５重量パーセント〜約５重量パーセント、約２重量パーセント〜約５重量パーセント、または約２．５重量パーセント〜約３．５重量パーセントとすることができる。一実施形態において、有機溶液中の酸の濃度は、少なくとも約３重量パーセントとすることができる。特定の実施形態において、薬剤溶液中の酸の濃度は、少なくとも約１重量パーセント、いくつかの実施形態において、少なくとも約２重量パーセント、いくつかの実施形態において、少なくとも約３重量パーセント、いくつかの実施形態において、少なくとも約１０重量パーセントとすることができる。

一連の実施形態において、粒子は１種以上のポリマーを含む溶液を得、該溶液とポリマー非溶剤を接触させて粒子を生成することにより形成される。溶液はポリマー非溶剤に混和性、または非混和性とすることができる。例えば、アセトニトリルなどの水混和性液体はポリマーを含有することができ、粒子は、アセトニトリルが水、つまりポリマー非溶剤と例えば、速度を制御してアセトニトリルを水に注入することにより接触させたときに形成される。ポリマー非溶剤との接触時に溶液内に含有されるポリマーはこの時析出し、ナノ粒子などの粒子を形成することができる。２つの液体は、雰囲気温度および雰囲気圧にて少なくとも１０重量％のレベルで他のものに可溶性でないとき、互いに「非混和性」または混和しないと言える。典型的に、有機溶液（例えば、ジクロロメタン、アセトニトリル、クロロホルム、テトラヒドロフラン、アセトン、ホルムアミド、ジメチルホルムアミド、ピリジン、ジオキサン、ジメチルスルホキシドなど）および水性液体（例えば、水または溶解塩もしくは他の種を含有する水、細胞もしくは生物学的媒体、エタノールなど）は互いに非混和性である。例えば、第１の溶液を第２の溶液に（適切な割合つまり速度にて）注入することができる。いくつかの場合、ナノ粒子などの粒子を、第１の溶液が非混和性の第２の液体と接触したときに形成することができ、例えば、第１の溶液を第２の液体に注入する間に、接触したポリマーが析出し、ポリマーからナノ粒子を形成し、いくつかの場合例えば、導入の速度を相対的に遅い速度に慎重に調節し、維持すると、ナノ粒子を形成することができる。このような粒子形成の制御は通常の実験のみを使用して当業者により容易に最適化することができる。

例えば表面官能性、表面電荷、大きさ、ゼータ（ζ）電位、疎水性、免疫原性の制御能などの特性は開示の方法を使用してかなり制御することができる。例えば、粒子のライブラリを合成し、スクリーニングし、粒子の表面に存在する特定の密度の断片（例えば、低分子量ＰＳＭＡリガンド）を粒子に担持させることを可能にする具体的なポリマー比を有する粒子を識別することができる。これにより、製造される１つ以上の特定の特性、例えば、断片の特定の大きさおよび特定の表面密度を有する粒子を過度の努力を要せずに製造することを可能にする。それゆえ、特定の実施形態はこのようなライブラリを使用するスクリーニング技法ならびにこのようなライブラリを使用して識別された任意の粒子に関する。さらに、識別を任意の適切な方法により行うことができる。例えば、識別は直接もしくは間接的であってよく、または定量的もしくは定性的に進めることができる。

いくつかの実施形態において、既に形成されたナノ粒子を、リガンド官能化ポリマー抱合体を生成するために記載したものと類似の方法を使用して標的断片を用いて官能化する。例えば、第１のコポリマー（ＰＬＧＡ−ＰＥＧ、ポリ（ラクチド−コ−グリコリド）およびポリ（エチレングリコール））を治療剤と混合し、粒子を形成する。次いで、粒子を
低分子量リガンドと会合させ、がんの治療に使用することができるナノ粒子を形成する。粒子を種々の量の低分子量リガンドと会合させ、ナノ粒子のリガンド表面密度を制御し、それによりナノ粒子の治療特性を変更することができる。さらに、例えば、分子量、ＰＥＧの分子量およびナノ粒子表面電荷などのパラメータを制御することにより、非常に正確に制御された粒子を有していてもよいことができる。

別の実施形態において、図２、３Ａおよび３Ｂに示された方法などのナノ乳濁液方法を提供する。例えば、治療剤、酸、第１のポリマー（例えば、ジブロックコ−ポリマー、例えば、ＰＬＡ−ＰＥＧまたはＰＬＧＡ−ＰＥＧ、このいずれかが場合によりリガンドに結合することができる）および任意選択の第２のポリマー（例えば、（ＰＬ（Ｇ）Ａ−ＰＥＧまたはＰＬＡ）を有機溶液と混合し、第１の有機相を形成することができる。上記の第１の相は約１〜約５０重量％の固体、約５〜約５０重量％の固体、約５〜約４０重量％の固体、約１〜約１５重量％の固体、または約１０〜約３０重量％の固体を含むことができる。第１の有機層を第１の水溶液と混合し、第２の相を形成することができる。有機溶液は、例えば、トルエン、メチルエチルケトン、アセトニトリル、テトラヒドロフラン、酢酸エチル、イソプロピルアルコール、酢酸イソプロピル、ジメチルホルムアミド、塩化メチレン、ジクロロメタン、クロロホルム、アセトン、ベンジルアルコール、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｓｐａｎ８０などおよびそれらの組み合わせを含むことができる。一実施形態において、有機層は、ベンジルアルコール、酢酸エチル、およびそれらの組み合わせを含むことができる。第２の相は、約０．１〜５０重量％、約１〜５０重量％、約５〜４０重量％または約１〜１５重量％の固体であり有していてもよい。水溶液は、水、場合によりコール酸ナトリウム、酢酸エチル、ポリ酢酸ビニルおよびベンジルアルコールの１つ以上との組み合わせとすることができる。

例えば、油相または有機相は、非溶剤（水）と部分的にのみ混和性である溶剤を使用することができる。それゆえ、十分に小さい比で混合したときおよび／または有機溶剤と予め飽和させた水を使用するとき、油相は液体のままである。油相を水溶液に乳化することができ、液体小滴として、例えば高エネルギー分散系、例えばホモジナイザーまたは超音波粉砕機を使用してナノ粒子にせん断することができる。乳濁液の水性部分または「水相」として知られる水性部分は、コール酸ナトリウムからなる界面活性剤溶液であってよく、酢酸エチルおよびベンジルアルコールで予め飽和させてもよい。

乳濁液相を形成するための第２の相の乳化は例えば、１つまたは２つの乳化工程において行われることができる。例えば、主要な乳濁液を調製し、次いで乳化し、微細な乳濁液を形成することができる。主要な乳濁液を例えば簡易な混合、高圧ホモジナイザー、プローブ超音波粉砕機、撹拌バー、またはローターステーターホモジナイザーを使用して形成することができる。主要な乳濁液を例えばプローブ超音波粉砕機または高圧ホモジナイザーの使用により、例えばホモジナイザーへの１、２、３回、またはそれ以上のパスを使用することにより、微細な乳濁液へと形成することができる。例えば、高圧ホモジナイザーを使用するとき、使用する圧は約１０００〜約８０００ｐｓｉ、約２０００〜約４０００ｐｓｉ、約４０００〜約８０００ｐｓｉまたは約４０００〜約５０００ｐｓｉ、例えば約２０００、２５００、４０００または５０００ｐｓｉとすることができる。

溶剤の蒸発または希釈のいずれかが溶剤の抽出および粒子の固化を完了するために必要となるかもしれない。抽出の動態におけるより良好な制御およびより測量可能な方法において、水による急冷を介した溶剤希釈液を使用することができる。例えば、乳濁液を、全ての有機溶剤を溶解させ、急冷相を形成させるのに十分な濃度に冷水に希釈させることができる。いくつかの実施形態において、急冷を約５℃以下の温度で少なくとも部分的に行うことができる。例えば、急冷に使用される水は、室温より低い温度（例えば、約０〜約１０℃、または約０〜約５℃）とすることができる。

いくつかの実施形態において、治療剤の全てではないが、この段階で粒子に封入し、薬剤可溶化剤を急冷相に添加し、可溶化相を形成する。薬剤可溶化剤は、例えば、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｔｗｅｅｎ２０、ポリビニルピロリドン、シクロデキストラン、ドデシル硫酸ナトリウム、コール酸ナトリウム、ジエチルニトロサミン、酢酸ナトリウム、尿素、グリセリン、プロピレングリコール、グリコフロール、ポリ（エチレン）グリコール、ブリス（ポリオキシエチレングリコールドデシルエーテル、安息香酸ナトリウム、サリチル酸ナトリウム、またはそれらの組み合わせとすることができる。例えば、Ｔｗｅｅｎ−８０を急冷したナノ粒子懸濁液に添加し、遊離薬剤を可溶化し、薬剤結晶の形成を防止することができる。いくつかの実施形態において、薬剤可溶化剤と治療剤の比は約２００：１〜約１０：１またはいくつかの実施形態において約１００：１〜約１０：１である。

可溶化相を濾過し、ナノ粒子を回収することができる。例えば、限外濾過膜を使用し、ナノ粒子懸濁液を濃縮し、実質的に有機溶剤、遊離薬剤（すなわち、封入されていない治療剤）、薬剤可溶化剤、および他の処理助剤（界面活性剤）を除外することができる。例示的な濾過をタンジェンシャルフロー濾過系を使用して行うことができる。例えば、ナノ粒子を滞留させるが、溶質、ミセル、および有機溶剤を通過させるのに適した孔の大きさを有する膜を使用することにより、ナノ粒子を選択的に分離することができる。約３００〜５００ｋＤａ（約５〜２５ｎｍ）の分画分子量の例示的な膜を使用することができる。

濾液が懸濁液から除去されるのと同じ速度で、透析濾液（冷却脱イオン水、例えば約０〜約５℃、または０〜約１０℃）をフィード懸濁液に添加することができることを意味する、定量法を使用して透析濾過を行うことができる。いくつかの実施形態において、濾過は約０〜約５℃または０〜約１０℃の第１の温度および約２０〜約３０℃または１５〜約３５℃の第２の温度を使用する第１の濾過を含み有していてもよい。いくつかの実施形態において、濾過は約１〜約３０、いくつかの場合、約１〜約１５、またはいくつかの場合、１〜約６の透析容量を処理することを含むことができる。例えば、濾過は約１〜約３０、またはいくつかの場合、約１〜約６の透析容量を約０〜約５℃にて処理することおよび少なくとも１つの透析容量（例えば、約１〜約１５、約１〜約３、または約１〜約２の透析容量）を約２０〜約３０℃にて処理することを含み有していてもよい。いくつかの実施形態において、濾過は異なる透析容量を異なる個別の温度にて処理することを含む。

ナノ粒子懸濁液を精製し、濃縮後、粒子を、例えば約０．２μｍのデプスプレフィルタを使用して、１つ、２つ以上の滅菌フィルタおよび／またはデプスフィルタに通過させることができる。例えば、滅菌濾過工程は、濾過トレインを使用して速度を制御して治療用ナノ粒子を濾過することを含み有していてもよい。いくつかの実施形態において、濾過トレインはデプスフィルタおよび滅菌フィルタを含むことができる。

ナノ粒子を製造する別の実施形態において、治療剤および酸ならびにポリマー（ホモポリマー、コポリマー、およびリガンドを含むコポリマー）の混合物からなる有機相を形成する。界面活性剤および一部の溶解した溶剤からなる水性相をおよそ１：５の比（油相：水性相）にて有機相と混合する。単純な混合下またはローターステーターホモジナイザーの使用により２つの相を組み合わせることにより、主要な乳濁液が形成される。次いで主要な乳濁液を、高圧ホモジナイザーを使用することにより、微細な乳濁液に形成する。次いで微細な乳濁液を混合しながら脱イオン水に添加することにより急冷させる。いくつかの実施形態において、急冷液：乳濁液の比は約２：１〜約４０：１、またはいくつかの実施形態において約５：１〜約１５：１とすることができる。いくつかの実施形態において、急冷液：乳濁液の比はおよそ８．５：１である。次いでＴｗｅｅｎ（例えば、Ｔｗｅｅｎ８０）の溶液を急冷液に添加し、全体でおよそ２％のＴｗｅｅｎを有していてもよい。これは遊離の封入されていない治療剤を溶解するよう作用する。次いでナノ粒子を遠心分
離または限外濾過／透析濾過のいずれかにより単離する。

配合物の調製に使用されるポリマー、治療剤、および酸の量は最終配合物と異なるかもしれないことが理解されるだろう。例えば、治療剤の一部はナノ粒子に完全に組み込まれない可能性があり、このような遊離治療剤は、例えば濾去される可能性がある。例えば、一実施形態において、約１％の酸を含有する有機溶液中の約３０重量パーセントの治療剤および約７０重量パーセントのポリマー（例えば、ポリマーはポリマーに抱合した標的断片約２．５ｍｏｌパーセントおよびＰＬＡ−ＰＥＧ約９７．５ｍｏｌパーセントを含み有していてもよい）を、例えば、約２．５重量パーセントの治療剤、約９７．５重量パーセントのポリマー（この場合、ポリマーはポリマーに抱合した標的断片約１．２５ｍｏｌパーセントおよびＰＬＡ−ＰＥＧ約９８．７５ｍｏｌパーセントを含み有していてもよい）および約０．５％未満の酸を含む最終ナノ粒子を生じる配合物の調製に使用することができる。このような方法は、約１〜約２０重量パーセントの治療剤、例えば、約１、約２、約３、約４、約５、約８、約１０、または約１５重量パーセントの治療剤を含む、患者への投与に適した最終ナノ粒子を提供することができる。

治療剤
上記に考察されるように、開示の方法を使用し、ナノ粒子中に任意の適切な治療剤を配合することができる。このような粒子は、例えば標的断片を対象内の具体的に局在する場所に薬剤を含有する粒子を方向づけし、例えば、薬剤の局在送達を生じさせることに使用することができる実施形態において有用かもしれない。一連の実施形態において、２種以上の治療剤の組み合わせを使用することができる。治療剤の例として、化学療法剤、例えば、Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシン−キナーゼ阻害剤（例えば、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、ボスチニブ、ポナチニブ、およびバフェチニブ）、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、ゲムシタビン（ジェムザール）、ダウノルビシン、プロカルバジン、マイトマイシン、シタラビン、エトポシド、メトトレキサート、ベノレルビン（ｖｅｎｏｒｅｌｂｉｎｅ）、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、ビンカアルカロイド、例えば、ビンブラスチンまたはビンクリスチン；ブレオマイシン、パクリタキセル（タキソール）、ドセタキセル（タキソテール）、カバジタキセル、アルデスロイキン、アスパラギナーゼ、ブスルファン、カルボプラチン、クラドリビン、カンプトテシン、ＣＰＴ−１１、１０−ヒドロキシ−７−エチルカンプトテシン（ＳＮ３８）、ダカルバジン、Ｓ−Ｉカペシタビン、フトラフル、５’デオキシフルロウリジン、ＵＦＴ、エニルウラシル、デオキシシチジン、５−アザシトシン、５−アザデオキシシトシン、アロプリノール、２−クロロアデノシン、トリメトレキサート、アミノプテリン、メチレン−１０−デアザアミノプテリン（ＭＤＡＭ）、オキサプラチン、ピコプラチン、テトラプラチン、サトラプラチン、白金−ＤＡＣＨ、オルマプラチン、ＣＩ−９７３、ＪＭ−２１６、およびそれらの類似体、エピルビシン、リン酸エトポシド、９−アミノカンプトテシン、１０，１１−メチレンジオキシカンプトテシン、カレニテシン、９−ニトロカンプトテシン、ＴＡＳ１０３、ビンデシン、Ｌ−フェニルアラニンマスタード、イホスファミドメホスファミド、ペルホスファミド、トロホスファミド カルムスチン、セムスチン、エポチロンＡ−Ｅ、トムデックス、６−メルカプトプリン、６−チオグアニン、アムサクリン、リン酸エトポシド、カレニテシン、アシクロビル、バラシクロビル、ガンシクロビル、アマンタジン、リマンタジン、ラミブジン、ジドブジン、ベバシズマブ、トラスツズマブ、リツキシマブ、５−フルオロウラシル、およびそれらの組み合わせがある。

潜在的に適切な併用薬の非限定的な例として、例えば、カバジタキセル、ミトキサントロン、およびミトキサントロン塩酸塩を含む抗がん剤がある。別の実施形態において、ペイロードは、２０−ｅｐｉ−１，２５ジヒドロキシビタミンＤ３、４−イポメアノール、５−エチニルウラシル、９−ジヒドロタキソール、アビラテロン、アシビシン、アクラルビシン、アコダゾール塩酸塩、アクロニン、アシルフィールベン、アデシペノール、アド
ゼレシン、アルデスロイキン、ａｌｌ−ｔｋアンタゴニスト、アルトレタミン、アンバムスチン、アンボマイシン、アメタントロン酢酸塩、アミドックス、アミフォスチン、アミノグルテチミド、アミノレブリン酸、アムルビシン、アムサクリン、アナグレリド、アナストロゾール、アンドログラホリド、血管新生阻害剤、アンタゴニストＤ、アンタゴニストＧ、アンタレリクス、アントラマイシン、抗背方化形態形成タンパク質−１、抗エストロゲン、アンチネオプラストン、アンチセンスオリゴヌクレオチド、アフィジコリングリシン酸、アポトーシス遺伝子制御剤、アポトーシス調節剤、アプリン酸、ＡＲＡ−ＣＤＰ−ＤＬ−ＰＴＢＡ、アルギニンデアミナーゼ、アスパラギナーゼ、アスペルリン、アスラクリン、アタメスタン、アトリムスチン、アキシナスタチン１、アキシナスタチン２、アキシナスタチン３、アザシチジン、アザセトロン、アザトキシン、アザチロシン、アゼテパ、アゾトマイシン、バッカチンＩＩＩ誘導体、バラノール、バチマスタット、ベンゾクロリン類、ベンゾデパ、ベンゾイルスタウロスポリン、ベータラクタム誘導体、ベータ−アレチン、ベタクラマイシンＢ、ベツリン酸、ＢＦＧＦ阻害剤、ビカルタミド、ビサントレン、ビサントレン塩酸塩、ビザズイジニルスペルミン（ｂｉｓａｚｕｉｄｉｎｙｌｓｐｅｒｍｉｎｅ）、ビスナフィド、ビスナフィドジメシル酸塩、ビストラテンＡ、ビゼレシン、ブレオマイシン、ブレオマイシン硫酸塩、ＢＲＣ／ＡＢＬアンタゴニスト、ブレフラート、ブレキナルナトリウム、ブロピリミン、ブドチタン、ブスルファン、ブチオニンスルホキシイミン、カクチノマイシン、カルシポトリオール、カルホスチンＣ、カルステロン、カンプトテシン誘導体、カナリアポックスＩＬ−２、カペシタビン、カラセライド、カバジタキセル、カルベチマー、カルボプラチン、カルボキサミド−アミノ−トリアゾール、カルボキシアミドトリアゾール、カレスト（ｃａｒｅｓｔ）Ｍ３、カルムスチン、アーン７００（ｅａｒｎ ７００）、軟骨由来阻害剤、カルビシン塩酸塩、カルゼルシン、カゼインキナーゼ阻害剤、カスタノスペルミン、セクロピンＢ、セデフィンゴール、セトロレリクス、クロラムブシル、クロリン、クロロキノキサリンスルホンアミド、シカプロスト、シロレマイシン、シスプラチン、シス−ポルフィリン、クラドリビン、クロミフェン類似体、クロトリマゾール、コリスマイシンＡ、コリスマイシンＢ、コンブレタスタチンＡ４、コンブレタスタチン類似体、コナゲニン、クランベシジン８１６、クリスナトール、クリスナトールメシル酸塩、クリプトフィシン８、クリプトフィシンＡ誘導体、クラシンＡ、シクロペンタンセラキノン類、シクロホスファミド、シクロプラタム、シペマイシン、シタラビン、シタラビンオクホスファート、細胞溶解因子、シトスタチン、ダカルバジン、ダクリキシマブ、ダクチノマイシン、ダウノルビシン塩酸塩、デシタビン、デヒドロジデムニンＢ、デスロレリン、デキシホスファミド、デキソルマプラチン、デクスラゾキサン、デクスベラパミル、デザグアニン、デザグアニンメシル酸塩、ジアジクオン、ジデムニンＢ、ジドックス、ジエチヒオルスペルミン、ジヒドロ−５−アザシチジン、ジオキサマイシン、ジフェニルスピロムスチン、ドセタキセル、ドコサノール、ドラセトロン、ドキシフルリジン、ドキソルビシン、ドキソルビシン塩酸塩、ドロロキシフェン、ドロキシフェンクエン酸塩、ドロモスタノロンプロピオン酸塩、ドロナビノール、デュアゾマイシン（ｄｕａｚｏｍｙｃｉｎ）、デュオカルマイシンＳＡ（ｄｕｏｃａｎｎｙｃｉｎ ＳＡ）、エブセレン、エコムスチン、エダトレキサート、エデルホシン、エドレコロマブ、エフロルニチン（ｅｆｌｏｍｉｔｈｉｎｅ）、エフロルニチン塩酸塩（ｅｆｌｏｍｉｔｈｉｎｅ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ）、エレメン、エルサルニトルシン、エミテフール、エンロプラチン、エンプロマート、エピプロピジン、エピルビシン、エピルビシン塩酸塩、エプリステリド、エルブロゾール、赤血球遺伝子治療ベクター系、エソルビシン塩酸塩、エストラムスチン、エストラムスチン類似体、エストラムスチンリン酸ナトリウム、エストロゲンアゴニスト、エストロゲンアンタゴニスト、エタニダゾール、エトポシド、エトポシドリン酸塩、エトプリン、エキセメスタン、ファドロゾール、ファドロゾール塩酸塩、ファザラビン、フェンレチニド、フィルグラスチム、フィナステリド、フラボピリドール、フレゼラスチン、フロクスウリジン、フルアステロン、フルダラビン、フルダラビンリン酸塩、フルオロダウノルニシン塩酸塩、フルオロウラシル、フルロシタビン、ホルフェニメクス、ホルメスタン、ホスキドン、フォストリエシン、フォストリエシン
ナトリウム、フォテムスチン、ガドリニウムテキサフィリン、ガリウム硝酸塩、ガロシタビン、ガニレリクス、ゼラチナーゼ阻害剤、ゲムシタビン、ゲムシタビン塩酸塩、グルタチオン阻害剤、ヘプスルファム、ヘレグリン、ヘキサメチレンビスアセタミド、ヒドロキシウレア、ヒペリシン、イバンドロン酸、イダルビシン、イダルビシン塩酸塩、イドキシフェン、イドラマントン、イホスファミド、イオノホシン、イロマスタット、イミダゾアクリドン、イミキモド、免疫刺激剤ペプチド、インスリン様成長因子−１受容体阻害剤、インターフェロンアゴニスト、インターフェロンアルファ−２Ａ、インターフェロンアルファ−２Ｂ、インターフェロンアルファ−Ｎｌ、インターフェロンアルファ−Ｎ３、インターフェロンベータ−ＩＡ、インターフェロンガンマ−ＩＢ、インターフェロン類、インターロイキン類、ヨーベングアン、ヨードドキソルビシン、イプロプラツム、イリノテカン、イリノテカン塩酸塩、イロプラクト、イルソグラジン、イソベンガゾール、イソホモハリコンドリンＢ、イタセトロン、ジャスプラキノリド、カハラリドＦ、ラメラリン−Ｎ三酢酸塩、ランレオチド、ランレオチド酢酸塩、レイナマイシン、レノグラスチム、レンチナン硫酸塩、レプトルスタチン、レトロゾール、白血病抑制因子、白血球アルファインターフェロン、ロイプロリド酢酸塩、ロイプロリド／エストロゲン／プロゲステロン、ロイプロレリン、レバミゾール、リアロゾール、リアロゾール塩酸塩、直鎖ポリアミン類似体、親油性二糖ペプチド、親油性白金化合物類、リッソクリナミド、ロバプラチン、ロンブリシン、ロメトレキソール、ロメトレキソールナトリウム、ロムスチン、ロニダミン、ロソキサントロン、ロソキサントロン塩酸塩、ロバスタチン、ロキソリビン、ルートテカン、ルテチウムテキサフィリン リソフィリン、細胞溶解性ペプチド、マイタンシン、マンノスタチンＡ、マリマスタット、マソプロコール、マスピン、マトリリシン阻害剤、マトリックスメタロプロテイナーゼ阻害剤、メイタンシン、メクロレタミン塩酸塩、メゲストロール酢酸塩、メレンゲストロール酢酸塩、メルファラン、メノガリル、メルバロン、メルカプトプリン、メテレリン、メチオニン分解酵素、メトトレキサート、メトトレキサートナトリウム、メトクロプラミド、メトプリン、メツレデパ、微細藻類タンパク質キナーゼＣ阻害剤、ＭＩＦ阻害剤、ミフェプリストン、ミルテホシン、ミリモスチム、ミスマッチ二本鎖ＲＮＡ、ミチンドミド、ミトカルシン、ミトクロミン、ミトギリン、ミトグアゾン、ミトラクトール、ミトマルシン、マイトマイシン、マイトマイシン類似体、ミトナフィド、マイトスペル、ミトタン、マイトトキシン線維芽細胞増殖因子−サポリン、ミトキサントロン、ミトキサントロン塩酸塩、モファロテン、モルグラモスチム、モノクローナル抗体、ヒト絨毛性ゴナドトロピン、モノホスホリルリピドａ／マイコバクテリア（ｍｙｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）細胞壁ＳＫ、モピダモール、多剤耐性遺伝子阻害剤、多重腫瘍抑制因子１系治療、マスタード抗がん剤、ミカペルオキシドＢ、マイコバクテリア細胞壁抽出物、ミコフェノール酸、ミリアポロン、ｎ−アセチルジナリン、ナファレリン、ナグレスチップ、ナロキソン／ペンタゾシン、ナパビン、ナフテルピン、ナルトグラスチム、ネダプラチン、ネモルビシン、ネリドロン酸、中性エンドペプチダーゼ、ニルタミド、ニサマイシン、一酸化窒素制御剤、ニトロキシド抗酸化剤、ニトルリン、ノコダゾール、ノガラマイシン、ｎ−置換ベンズアミド、Ｏ６−ベンジルグアニン、オクトレオチド、オキセノン、オリゴヌクレオチド、オナプリストン、オンダンセトロン、オラシン、経口サイトカイン誘導剤、オルマプラチン、オサテロン、オキサリプラチン、オキサウノマイシン、オキシスラン、パクリタキセル、パクリタキセル類似体、パクリタキセル誘導体、パラウアミン、パルミトイルリゾキシン、パミドロン酸、パナキシトリオール、パノミフェン、パラバクチン、パゼリプチン、ペグアスパラガーゼ、ペルデシン、ペリオマイシン、ペンタムスチン、ペントサンポリ硫酸ナトリウム、ペントスタチン、ペントロゾール、ペプロマイシン硫酸塩、ペルフルブロン、ペルホスファミド、ペリリルアルコール、フェナジノマイシン、フェニル酢酸塩、ホスファターゼ阻害剤、ピシバニール、ピロカルピン塩酸塩、ピポブロマン、ピポスルファン、ピラルビシン、ピリトレキシム、ピロキサントロン塩酸塩、プラセチンＡ、プラセチンＢ、プラスミノーゲン活性化因子阻害剤、白金錯体、白金化合物類、白金−トリアミン錯体、プリカマイシン、プロメスタン、ポルフィマーナトリウム、ポルフィロマイシン、プレドニムスチン、プロカルバジン塩酸塩、プロピルビス−アクリドン、プロスタグランジンＪ２、前立腺癌抗アンドロゲン、プロテアソーム阻害剤、タンパク質Ａ系免疫調節剤、タンパク質キナーゼＣ阻害剤、タンパク質チロシンホスファターゼ阻害剤、プリンヌクレオシドホスホリラーゼ阻害剤、ピューロマイシン、ピューロマイシン塩酸塩、プルプリン類、ピラゾルリン、ピラゾロアクリジン、ピリドキシル化ヘモグロビンポリオキシエチレン抱合体、ＲＡＦアンタゴニスト、ラルチトレキセド、ラモセトロン、ＲＡＳファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤、ＲＡＳ阻害剤、ＲＡＳ−ＧＡＰ阻害剤、脱メチル化レテルリプチン、レニウムＲＥ１８６エチドロン酸塩、リゾキシン、リボプリン、リボザイム、ＲＨレチナルニド、ＲＮＡｉ、ログレチミド、ロヒツキン、ロムルチド、ロキニメクス、ルビギノンＢｌ、ルボキシル、サフィンゴール、サフィンゴール塩酸塩、サイントピン、ｓａｒｃｎｕ、サルコフィトールＡ、サルグラモスチム、ＳＤＩ１模倣物、セムスチン、セネッセンス由来阻害剤１、センスオリゴヌクレオチド、シグナル伝達阻害剤、シグナル伝達調節剤、シムトラゼン、一本鎖抗原結合タンパク質、シゾフィラン、ソブゾキサン、ボロカプテイトナトリウム、フェニル酢酸ナトリウム、ソルベロール、ソマトメジン結合タンパク質、ソネルミン、スパルフォセート（ｓｐａｒｆｏｓａｆｅ）ナトリウム、スパルフォス酸、スパルソマイシン、スピカマイシンＤ、スピロゲルマニウム塩酸塩、スピロムスチン、スピロプラチン、スプレノペンチン、スポンギスタチン１、スクアラミン、幹細胞阻害剤、幹細胞分裂阻害剤、スチピアミド、ストレプトニグリン、ストレプトゾトシン、ストロメリシン阻害剤、スルフィノシン、スロフェヌル、過剰活性型血管作用性腸ペプチドアンタゴニスト、スラジスタ、スラミン、スワインソニン、合成グリコサミノグリカン、タリソマイシン、タリムスチン、タモキシフェンメチオジド、タウロムスチン、タザロテン、テコガランナトリウム、テガフール、テルラピリリウム、テロメラーゼ阻害剤、テトキサントロン塩酸塩、テモポルフィン、テモゾロミド、テニポシド、テロキシロン、テストラクトン、テトラクロロデカオキシド、テトラゾミン、タリブラスチン、サリドマイド、チアミプリン、チオコラリン、チオグアニン、チオテパ、トロンボポエチン、トロンボポエチン模倣物、チマルファシン、チモポエチン受容体アゴニスト、チモトリナン、甲状腺刺激ホルモン、チアゾフリン、エチルエチオプルプリンスズ、チラパザミン、二塩化チタノセン、トポテカン塩酸塩、トプセンチン、トレミフェン、トレミフェンクエン酸塩、全能性幹細胞因子、翻訳阻害剤、トレストロン酢酸塩、トレチノイン、トリアセチル
リジン、トリシリビン、トリシリビンリン酸塩、トリメトレキサート、グルクロン酸トリメトレキサート、トリプトレリン、トロピセトロン、ツブロゾール塩酸塩、ツロステリド、チロシンキナーゼ阻害剤、チルホスチン、ＵＢＣ阻害剤、ウベニメクス、ウラシルマスタード、ウレデパ、尿生殖洞由来成長阻害剤因子、ウロキナーゼ受容体アンタゴニスト、バプレオチド、バリオリンＢ、ベラレソール、ベラミン、ベルジン、ベルテポルフィン、ビンブラスチン硫酸塩、ビンクリスチン硫酸塩、ビンデシン、ビンデシン硫酸塩、ビネピジン硫酸塩、ビングリシナート硫酸塩、ビンロイロシン硫酸塩、ビノレルビンもしくはビノレルビン酒石酸塩、ビンロシジン硫酸塩、ビンキサルチン、ビンゾリジン硫酸塩、ビタキシン、ボロゾール、ザノテロン、ゼニプラチン、ジラスコルブ、ジノスタチン、ジノスタチンスチマラマー、またはゾルビシン塩酸塩などの抗がん薬とすることができる。

医薬製剤
別の実施形態によれば、本明細書に開示のナノ粒子を薬学的に許容され有していてもよい担体と混合し、薬学的組成物を形成することができる。当業者であれば理解されるように、担体を以下に記載の投与経路、標的組織の場所、送達される薬剤、薬剤の送達の時間経過などに基づき選択することができる。

薬学的組成物を経口および非経口経路を含む当技術分野において公知の任意の手段により患者に投与することができる。本明細書において使用される用語「患者」は、ヒトならびに例えば、哺乳類、鳥類、爬虫類、両生類、および魚類を含む非ヒトを指す。例えば、
非ヒトは哺乳類（例えば、齧歯類、マウス、ラット、ウサギ、サル、イヌ、ネコ、霊長類、またはブタ）であり有していてもよい。特定の実施形態において、消化管にある消化酵素との接触が回避されるため、非経口経路が望ましい。このような実施形態に従い、本発明の組成物を注射により（例えば、静脈内、皮下または筋肉内、腹腔内注射）、経腸、経膣、局所（粉末、クリーム、軟膏、またはドロップによる場合）または吸入により（噴霧による場合）投与することができる。

具体的な実施形態において、ナノ粒子を例えばＩＶ注入または注射により全身に投与を必要とする対象に投与する。

注射製剤、例えば滅菌注射水溶液または油性懸濁液を、適切な分散剤または湿潤剤および懸濁剤を使用して公知の技術に従い配合することができる。滅菌注射製剤はまた、非毒性の非経口に許容され有していてもよい希釈剤または溶剤中の、滅菌注射溶液、懸濁液、または乳濁液、例えば１，３−ブタンジオールの溶液とすることができる。使用することができる許容され有していてもよいベヒクルおよび溶剤の中で、水、リンゲル液、Ｕ．Ｓ．Ｐ、および等張性塩化ナトリウム溶液がある。さらに、滅菌性の不揮発性油剤は従来、溶剤または懸濁媒体として使用される。このため、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無菌性の不揮発性油剤を使用することができる。さらに、オレイン酸などの脂肪酸を注射剤の調製に使用する。一実施形態において、本発明の抱合体を１％（ｗ／ｖ）カルボキシメチルセルロースナトリウムおよび０．１％（ｖ／ｖ）ＴＷＥＥＮ（商標）８０を含む担体液に懸濁する。注射配合物を例えば、細菌保持フィルタによる濾過により、または使用前に滅菌水または他の滅菌注射媒体に溶解または分散させることができる滅菌固体組成物の形態で滅菌剤を組み込むことにより滅菌することができる。

経口投与のための固体剤形は、カプセル、錠剤、ピル、粉末、および顆粒を含む。このような固体剤形において、封入された、または封入されていない抱合体を少なくとも１種の不活性の薬学的に許容され有していてもよい賦形剤または担体、例えばクエン酸ナトリウムまたはリン酸二カルシウムおよび／または（ａ）充填剤または増量剤、例えばデンプン、ラクトース、スクロース、グルコース、マンニトール、およびケイ酸、（ｂ）結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、アルギン酸、ゼラチン、ポリビニルピロリジノン、スクロース、およびアカシアなど、（ｃ）保湿剤、例えばグリセロール、（ｄ）崩壊剤、例えば、寒天、炭酸カルシウム、ジャガイモまたはタピオカデンプン、アルギン酸、特定のケイ酸、および炭酸ナトリウム、（ｅ）溶液遅延剤、例えばパラフィン、（ｆ）吸収促進剤、例えば第４級アンモニウム化合物、（ｇ）湿潤剤、例えばセチルアルコールおよびモノステアリン酸グリセロール、（ｈ）吸収剤、例えばカオリンおよびベントナイト粘土、および（ｉ）潤滑剤、例えばタルク、ステアリン酸カルシウム、ステアリン酸マグネシウム、固体ポリエチレングリコール、ラウリル硫酸ナトリウム、およびそれらの混合物と混合する。カプセル、錠剤、およびピルの場合において、剤形はまた、緩衝剤を含むことができる。

治療剤を含有するナノ粒子の正確な用量を、治療される患者を考慮して医師個人が選択し、一般に用量および投与を有効量の治療剤ナノ粒子が治療される患者に投与されるよう調節することが理解される。本明細書において使用される治療剤を含有するナノ粒子の「有効量」は、所望の生物学的応答を誘起するのに必要な量を指す。当業者により理解されるように、治療剤を含有するナノ粒子の有効量は、所望の生物学的評価項目、送達される薬剤、標的組織、投与経路などの因子に応じて変化するかもしれない。例えば、治療剤を含有するナノ粒子有効量は所望の期間にわたり所望の量により腫瘍の大きさを減少させる量とすることができる。考慮され有していてもよいさらなる因子は、疾患状態の重症度、治療される患者の年齢、体重および性別、食事、投与の時間および回数、薬剤併用、応答感受性および治療に対する忍容性／応答を含む。

ナノ粒子を投与の容易さおよび用量の均一性において単位剤形で配合することができる。本明細書において使用される表現「単位剤形」は治療される患者に適切なナノ粒子の物理的に個別の単位を指す。しかし、組成物の１日の総使用量は健全な医学的判断の範囲内で担当医により決定されることが理解されるだろう。任意のナノ粒子において、治療有効用量は、はじめに細胞培養アッセイまたは動物モデル、通常マウス、ウサギ、イヌまたはブタのいずれかにおいて評価され有していてもよい。動物モデルはまた、所望の濃度範囲および投与経路を有していてもよいために使用される。次いでこのような情報を使用し、ヒトにおける有用な用量および投与経路を決定することができる。ナノ粒子の治療効力および毒性を細胞培養または実験動物の標準的な薬学的方法、例えばＥＤ₅₀（用量が集団の５０％において治療的に有効である）およびＬＤ₅₀（用量が集団の５０％に致死的である）により決定することができる。毒性と治療効果の用量比は治療指数となり、ＬＤ₅₀／ＥＤ₅₀の比として表すことができる。いくつかの実施形態において、大きな治療指数を示す薬学的組成物が有用であり有していてもよい。細胞培養アッセイおよび動物試験から得られたデータをヒト使用のためにある範囲の用量を配合するときに使用することができる。

一実施形態において、本明細書に開示の組成物は、約１０ｐｐｍ未満のパラジウムもしくは約８ｐｐｍ未満、または約６ｐｐｍ未満のパラジウムを含み有していてもよい。例えば本明細書において、約１０ｐｐｍ未満のパラジウムを有する、ポリマー抱合体を有するナノ粒子を含む組成物を提供する。

いくつかの実施形態において、本明細書に開示のナノ粒子を含む冷凍に適した組成物を検討し、冷凍に適した溶液、例えば糖、例えばモノ、ジ、またはポリサッカライド、例えば、スクロースおよび／またはトレハロース、および／または塩および／またはシクロデキストリン溶液をナノ粒子懸濁液に添加する。糖（例えば、スクロースまたはトレハロース）は、例えば冷凍時に粒子が凝集することを防ぐ凍結乾燥保護剤として作用し有していてもよい。例えば、本明細書において、複数の開示のナノ粒子、スクロース、イオンハロゲン化物、および水を含み、ナノ粒子／スクロース／水／イオンハロゲン化物が約３〜４０％／１０〜４０％／２０〜９５％／０．１〜１０％（ｗ／ｗ／ｗ／ｗ）または約５〜１０％／１０〜１５％／８０〜９０％／１〜１０％（ｗ／ｗ／ｗ／ｗ）であるナノ粒子配合物を提供する。例えば、このような溶液は本明細書に開示のナノ粒子、約５重量％〜約２０重量％のスクロースおよび塩化ナトリウムなどのイオンハロゲン化物を約１０〜１００ｍＭの濃度で含むことができる。別の例において、本明細書において、複数の開示のナノ粒子、トレハロース、シクロデキストリン、および水を含み、ナノ粒子／トレハロース／水／シクロデキストリンが約３〜４０％／１〜２５％／２０〜９５％／１〜２５％（ｗ／ｗ／ｗ／ｗ）または約５〜１０％／１〜２５％／８０〜９０％／１０〜１５％（ｗ／ｗ／ｗ／ｗ）であるナノ粒子配合物を提供する。

例えば、検討される溶液は、本明細書に開示のナノ粒子、約１重量％〜約２５重量％のジサッカライド、例えばトレハロースまたはスクロース（例えば、約５重量％〜約２５重量％のトレハロースもしくはスクロース、例えば、約１０重量％のトレハロースもしくはスクロース、または約１５重量％のトレハロースもしくはスクロース、例えば約５重量％のスクロース）およびβ−シクロデキストリンなどのシクロデキストリンを約１重量％〜約２５重量％の濃度（例えば、約５重量％〜約２０重量％、例えば１０重量％もしくは約２０重量％、または約１５重量％〜約２０重量％のシクロデキストリン）で含むことができる。検討される配合物は、複数の開示のナノ粒子（例えば、ＰＬＡ−ＰＥＧおよび活性物質を有するナノ粒子）および約２％〜約１５ｗｔ％（または約４％〜約６ｗｔ％、例えば約５ｗｔ％）のスクロースおよび約５ｗｔ％〜約２０％（例えば、約７％ｗｔパーセント〜約１２ｗｔ％、例えば約１０ｗｔ％）のシクロデキストリン、例えばＨＰｂＣＤ）を含むことができる。

本開示は一部において、再構成されるときに大きな凝集体の量が最も少ない凍結乾燥した薬学的組成物に関する。このような大きな凝集体は約０．５μｍ超、約１μｍ超、または約１０μｍ超の大きさを有することができ、再構成された溶液では不適切であり有していてもよい。凝集体の大きさを、参照により本明細書に組み込まれる米国薬局方３２＜７８８＞に示されたものを含む種々の技法を使用して測定することができる。ＵＳＰ３２＜７８８＞に概説された試験は、光遮蔽粒子計数試験、顕微鏡粒子計数試験、レーザー回折、および単一粒子光学的センシングを含む。一実施形態において、所与のサンプルの粒子径をレーザー回折および／または単一粒子光学センシングを使用して測定する。

ＵＳＰ３２＜７８８＞の光遮蔽粒子計数試験は、懸濁液中の粒子径をサンプリングするためのガイドラインを明記している。１００ｍＬ以下の溶液において、調製物は、存在する粒子の平均数が１０μｍ以下で容器当たり６０００個を超えず、２５μｍ以下で容器当たり６００個を超えないかどうかの試験に従う。

ＵＳＰ３２＜７８８＞に概説されるように、顕微鏡粒子計数試験は、接眼マイクロメータを有する１００±１０倍の倍率に調節された双眼顕微鏡を使用して粒子量を決定するためのガイドラインについて明記している。接眼マイクロメータは、１００倍の倍率で見たときに１０μｍおよび２５μｍを示す黒の基準円の象限に分けられた円からなる円形の直径網線である。線形目盛が網線の下に設けられている。１０μｍおよび２５μｍを参照して粒子の数を目視で数える。１００ｍＬ以下の溶液において、調製物は、存在する粒子の平均数が１０μｍ以下で容器当たり３０００個を超えず、２５μｍ以下で容器当たり３００個を超えないかどうかの試験に従う。

いくつかの実施形態において、再構成時の開示の組成物の１０ｍＬサンプル水溶液は、１０ミクロン以上の径を有する、１ｍｌ当たり６００個未満の粒子および／または２５ミクロン以上の径を有する１ｍｌ当たり６０個未満の粒子を含む。

動的光散乱法（ＤＬＳ）を使用し、粒子径を測定することができるが、これはブラウン運動によるため、この技法は一部の大きな粒子を検出することができない。レーザー回折は粒子と懸濁媒体との間の屈折指数の差による。この技法はミクロン以下〜ミリメートルの範囲の粒子を検出することが可能である。相対的に少ない（例えば、約１〜５重量％）量の大きな粒子をナノ粒子懸濁液において測定することができる。単一粒子光学的センシング（ＳＰＯＳ）は希釈懸濁液の光の遮蔽を使用し、約０．５μｍの個々の粒子を計数する。測定されたサンプルの粒子濃度を知ることにより、凝集体の重量百分率または凝集体濃度（粒子／ｍＬ）を算出することができる。

凝集体の形成は、凍結乾燥時の粒子の表面の脱水により生じさせることができる。この脱水を凍結乾燥保護剤、例えば、ジサッカライドを凍結乾燥前の懸濁液に使用することにより回避することができる。適切なジサッカライドは、スクロース、ラクツロース、ラクトース、マルトース、トレハロースまたはセロビオース、および／またはそれらの混合物を含む。他の検討されるジサッカライドは、コージビオース、ニゲロース、イソマルトース、β，β−トレハロース、α，β−トレハロース、ソホロース、ラミナリビオース、ゲンチオビオース、ツラノース、マルツロース、パラチノース、ゲンチオビウロース、マンノビアーゼ（ｍａｎｎｏｂｉａｓｅ）、メリビオース、メリビウロース、ルチノース、ルチヌロース、およびキシロビオースを含む。再構成は、出発懸濁液と比較したときに同等のＤＬＳの径分布を示す。しかし、レーザー回折は一部の再構成された溶液において１０μｍ未満の径の粒子を検出することができる。さらに、ＳＰＯＳはまた、ＦＤＡガイドラインのもの（１０μｍ未満の粒子に対して１０⁴〜１０⁵個の粒子／ｍＬ）より高い濃度にて１０μｍ未満の径の粒子を検出することができる。

いくつかの実施形態において、１種以上のイオンハロゲン化物の塩を糖、例えばスクロース、トレハロースまたはそれらの混合物にさらなる凍結乾燥保護剤として使用することができる。糖はジサッカライド、モノサッカライド、トリサッカライド、および／またはポリサッカライドを含むことができ、他の賦形剤、例えばグリセロールおよび／または界面活性剤を含むことができる。場合により、シクロデキストリンはさらなる凍結乾燥保護剤として含まれることができる。シクロデキストリンをイオンハロゲン化物の塩の代わりに添加することができる。代わりに、シクロデキストリンをイオンハロゲン化物の塩に加えて添加することができる。

適切なイオンハロゲン化物の塩は、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、塩化亜鉛、またはそれらの混合物を含み有していてもよい。さらなる適切なイオンハロゲン化物の塩は、塩化カリウム、塩化マグネシウム、塩化アンモニウム、臭化ナトリウム、臭化カルシウム、臭化亜鉛、臭化カリウム、臭化マグネシウム、臭化アンモニウム、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カルシウム、ヨウ化亜鉛、ヨウ化カリウム、ヨウ化マグネシウム、またはヨウ化アンモニウム、および／またはそれらの混合物を含む。一実施形態において、約１〜約１５重量パーセントのスクロースをイオンハロゲン化物の塩とともに使用することができる。一実施形態において、凍結乾燥させた薬学的組成物は約１０〜約１００ｍＭの塩化ナトリウムを含み有していてもよい。別の実施形態において、凍結乾燥させた薬学的組成物は約１００〜約５００ｍＭの二価のイオンの塩化物塩、例えば、塩化カルシウムまたは塩化亜鉛を含み有していてもよい。さらに別の実施形態において、凍結乾燥させる懸濁液はさらにシクロデキストリンを含むことができ、例えば約１〜約２５重量パーセントのシクロデキストリンを使用することができる。

適切なシクロデキストリンは、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、またはそれらの混合物を含み有していてもよい。本明細書に開示の組成物に使用のために検討されるシクロデキストリンの例として、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（ＨＰｂＣＤ）、ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン、スルホブチルエーテル−β−シクロデキストリン、メチル−β−シクロデキストリン、ジメチル−β−シクロデキストリン、カルボキシメチル−β−シクロデキストリン、カルボキシメチルエチル−β−シクロデキストリン、ジエチル−β−シクロデキストリン、トリ−Ｏ−アルキル−β−シクロデキストリン、グリコシル−β−シクロデキストリン、およびマルトシル−β−シクロデキストリンがある。一実施形態において、約１〜約２５重量パーセントのトレハロース（例えば、約１０重量％〜約１５重量％、例えば、５〜約２０重量％）をシクロデキストリンとともに使用することができる。一実施形態において、凍結乾燥させた薬学的組成物は約１〜約２５重量パーセントのβ−シクロデキストリンむことができる。例示の組成物は、ＰＬＡ−ＰＥＧ、活性物質／治療剤、約４％〜約６％（例えば、約５％ｗｔパーセント）のスクロースおよび約８〜約１２重量パーセント（例えば、約１０ｗｔ．％）のＨＰｂＣＤを含むナノ粒子を含むことができる。

一態様において、開示のナノ粒子を含む凍結乾燥させた薬学的組成物を提供し、この場合、１００ｍＬ未満または約１００ｍＬの水性媒体中の約５０ｍｇ／ｍＬのナノ粒子濃度の凍結乾燥させた薬学的組成物の再構成時に、非経口投与に適した再構成された組成物は、１０ミクロン以上のマイクロ粒子を６０００個未満、例えば３０００個未満、および／または２５ミクロン以上のマイクロ粒子を６００個未満、例えば３００個未満含む。

マイクロ粒子の数を、例えば、ＵＳＰ３２＜７８８＞の光遮蔽粒子計測試験、ＵＳＰ３２＜７８８＞の顕微鏡粒子計数試験、レーザー回折、および単一粒子光学的センシングなどの手段により決定することができる。

一態様において、複数の治療用粒子を含み、それぞれが疎水性のポリマーセグメントおよび親水性のポリマーセグメントを有するコポリマー、活性物質、糖およびシクロデキストリンを含む、再構成時の非経口使用に適した薬学的組成物を提供する。

例えば、コポリマーはポリ（乳）酸−ブロック−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーとすることができる。再構成時に、１００ｍＬのサンプル水溶液は１０ミクロン以上の径を有する６０００個未満の粒子、および２５ミクロン以上の径を有する６００個未満の粒子を含むことができる。

ジサッカライドおよびイオンハロゲン化物の塩を添加する工程は、約５〜約１５重量パーセントのスクロースまたは約５〜約２０重量パーセントのトレハロース（例えば、約１０〜約２０重量パーセントのトレハロース）および約１０〜約５００ｍＭのイオンハロゲン化物の塩を添加することを含むことができる。イオンハロゲン化物の塩を、塩化ナトリウム、塩化カルシウム、および塩化亜鉛またはそれらの混合物から選択することができる。一実施形態において、約１〜約２５重量パーセントのシクロデキストリンも添加する。

別の実施形態において、ジサッカライドおよびシクロデキストリンを添加する工程は、約５〜約１５重量パーセントのスクロースまたは約５〜約２０重量パーセントのトレハロース（例えば、約１０〜約２０重量パーセントのトレハロース）および約１〜約２５重量パーセントのシクロデキストリンを添加することを含むことができる。一実施形態において、約１０〜約１５重量パーセントのシクロデキストリンを添加する。シクロデキストリンをα−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、またはそれらの混合物から選択することができる。

別の態様において、糖および塩を凍結乾燥させた配合物に添加し、再構成時にナノ粒子の凝集を防ぐことを含む、薬学的ナノ粒子組成物中の粒子の実質的な凝集を防ぐ方法を提供する。一実施形態において、シクロデキストリンも凍結乾燥させた配合物に添加する。さらに別の態様において、糖およびシクロデキストリンを凍結乾燥させた配合物に添加し、再構成時にナノ粒子の凝集を防ぐことを含む、薬学的ナノ粒子組成物中の粒子の実質的な凝集を防ぐ方法を提供する。

検討される凍結乾燥させた組成物は、約４０ｍｇ／ｍＬ超の濃度の治療用粒子を有し有していてもよい。非経口投与に適した配合物は１０ｍＬ用量において１０ミクロン超の径を有する約６００個未満の粒子を有することができる。凍結乾燥は、約−４０℃超または例えば約−３０℃未満の温度にて組成物を凍結させ、凍結組成物を形成し、凍結組成物を乾燥させ、凍結乾燥組成物を形成することを含むことができる。乾燥工程は、約５０ｍＴｏｒｒ、約−２５〜約−３４℃、または−３０〜約−３４℃の温度にて生じさせることができる。
治療方法

いくつかの実施形態において、標的ナノ粒子を使用し、疾患、障害、および／または病態の１つ以上の症状または特徴を治療し、軽減し、改善し、緩和し、発症を遅延させ、進行を阻害し、重症度を低下させ、かつ／または発症率を減少させることができる。いくつかの実施形態において、標的ナノ粒子を使用して、充実性腫瘍、例えば、がんおよび／または癌細胞を治療することができる。特定の実施形態において、標的ナノ粒子を使用し、任意のがんを治療することができ、この場合、ＰＳＭＡが、前立腺もしくは非前立腺充実性腫瘍の血管新生系を含む、治療を必要とする対象のがん細胞の表面にまたは腫瘍血管新生系に発現する。ＰＳＭＡ関連の適応症の例として、前立腺癌、乳癌、非小細胞肺癌、直腸結腸癌および膠芽腫があるがそれらに限定されない。

用語「がん」は前悪性ならびに悪性がんを含む。がんは血液（例えば、慢性骨髄性白血病、慢性骨髄単球性白血病、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ性白血病、マントル細胞リンパ腫）、前立腺、胃癌、直腸結腸癌、皮膚癌、例えば、悪性黒色腫または基底細胞癌、肺癌（例えば、非小細胞肺癌）、乳癌、頭頸部の癌、気管支癌、膵臓癌、膀胱癌、脳または中枢神経系の癌、末梢神経系の癌、食道癌、口腔または咽頭の癌、肝癌（例えば、肝細胞癌）、腎癌（例えば、腎細胞癌）、精巣癌、胆管癌、小腸または虫垂の癌、消化管間質腫瘍、唾液腺癌、甲状腺癌、副腎癌、骨肉腫、軟骨肉腫、血液組織の癌などを含むが、それらに限定されない。「がん細胞」は腫瘍（すなわち、充実性腫瘍）の形態であってよく、対象内にのみ存在することができ（例えば、白血病細胞）、またはがん由来の細胞株とすることができる。

がんは種々の身体的な症状と関連し有していてもよい。がんの症状は一般に腫瘍の種類および場所に依存する。例えば、肺癌は、咳嗽、息切れ、および胸痛を生じることがあるが、結腸癌は多くの場合、下痢、便秘および血便を生じる。しかし、数例のみを挙げれば、以下の症状は多くの場合一般に多くの癌に関連する：発熱、悪寒、寝汗、咳、呼吸困難、体重減少、食欲低下、食欲不振、吐き気、嘔吐、下痢、貧血、黄疸、肝肥大、喀血、疲労、倦怠、認知障害、抑うつ状態、ホルモンの障害、好中球減少症、疼痛、非治癒性の痛み、リンパ節腫脹、末梢神経障害、および性機能不全。

一態様において、がん（例えば、白血病）の治療方法を提供する。いくつかの実施形態において、がんの治療は、治療有効量の本発明の標的粒子を、投与を必要とする対象に、所望の結果を有していてもよいために必要な量および時間において投与することを含む。特定の実施形態において、本発明の標的粒子の「治療有効量」は、がんの１つ以上の症状または特徴を治療し、軽減し、改善し、緩和し、発症を遅延させ、進行を阻害し、重症度を低下させ、かつ／または発症率を減少させるのに有効な量である。

一態様において、本発明の組成物をがん（例えば、白血病）に苦しむ対象に投与する方法を提供する。いくつかの実施形態において、粒子を所望の結果（例えば、がんの治療）を有していてもよいために必要な量および時間において対象に投与することができる。特定の実施形態において、本発明の標的粒子の「治療有効量」は、がんの１つ以上の症状または特徴を治療し、軽減し、改善し、緩和し、発症を遅延させ、進行を阻害し、重症度を低下させ、かつ／または発症率を減少させるのに有効な量である。

本発明の治療プロトコールは、治療有効量の本発明の標的粒子を健常な個人（すなわち、がんのなんらかの症状を示さず、かつ／またはがんと診断されていない対象）に投与することを含む。例えば、健常な個人は、本発明の標的粒子を用いて、がんの発症前および／またはがんの症状の発症前に「免疫化」することができ、つまり、危険のある個人（例えば、がんの家族歴のある患者、がんの発症に関連する１つ以上の遺伝的突然変異を担持する患者、がんの発症に関連する遺伝的多型を有する患者、がんの発症に関連するウイルスにより感染した患者、がんの発症に関連する嗜好および／または生活習慣を有する患者など）をがんの症状の発症（の、例えば、４８時間以内、２４時間以内、または１２時間以内）に実質的に同時に治療することができる。当然ながら、がんに罹患することがわかっている個人はいつでも本発明の治療を受けることができる。

他の実施形態において、開示のナノ粒子を使用し、がん細胞、例えば、前立腺癌細胞の成長を阻害することができる。本明細書において使用される用語「がん細胞の成長を阻害する」または「がん細胞の成長を阻害すること」は、がん細胞の成長の速度を未治療の対照がん細胞の成長の実測または予測速度と比較して低下させるように、がん細胞の増殖および／または遊走の速度をいくらか遅らせ、がん細胞の増殖および／または遊走を停止し、またはがん細胞を死滅させることを指す。用語「成長を阻害する」はまた、がん細胞ま
たは腫瘍の大きさの減少または消失ならびにその転移能の低下を指すことができる。好ましくは、このような細胞レベルの阻害が患者のがんの大きさを減少させ、成長を抑止し、攻撃性を低下させ、または転移を防止し、もしくは阻害することができる。当業者であれば、がん細胞の成長が阻害されたかどうかを種々の適切な兆候のいずれかにより容易に決定することができる。

がん細胞の成長の阻害を、例えば、具体的な細胞サイクルの相のがん細胞の停止、例えば、細胞サイクルのＧ２／Ｍ相にて停止することにより明らかとすることができる。がん細胞の成長の阻害はまた、がん細胞または腫瘍の大きさの直接または間接的測定により明らかにすることができる。ヒトのがん患者において、このような測定は一般に周知の画像方法、例えば、磁気共鳴画像、コンピュータ体軸断層撮影およびＸ線を使用してなされる。がん細胞の成長はまた間接的に、例えば、血中のがん胎児性抗原、前立腺特異的抗原またはがん細胞の成長に相関する他のがん特異的抗原の濃度を決定することにより決定することができる。がんの成長の阻害はまた一般に対象の生存率の延長および／または健常性および健康の増大と相関する。

本明細書において、治療剤を含む本明細書に開示のナノ粒子を患者に投与する方法も提供し、この場合、患者に投与時に、このようなナノ粒子は、薬剤のみ（すなわち、開示のナノ粒子ではなく）の投与と比較して、分布の容積を実質的に減少させ、かつ／または実質的に遊離型Ｃ_maxを減少させる。

「Ｄｒｕｇ Ｌｏａｄｅｄ Ｐｏｌｙｍｅｒｉｃ Ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｍａｋｉｎｇ ａｎｄ Ｕｓｉｎｇ Ｓａｍｅ」と題した２０１２年６月２６日発行の米国特許第８，２０６，７４７号を参照によりその全内容を本明細書に組み込む。
本発明は、非限定的に以下の態様を含む。
［態様１］
治療薬、第１ポリマーおよび有機酸を有機溶媒と合わせて、固形分約１〜約５０％を有する第１有機相を形成する工程、
前記第１有機相を第１水溶液と合わせて、複数の治療用ナノ粒子を形成する工程、
前記治療用ナノ粒子を濾過によって回収する工程を含む複数の治療用ナノ粒子の製造方法。
［態様２］
前記有機酸が、２５℃で約３．５未満のｐＫ_aを有する態様１に記載の方法。
［態様３］
前記有機酸が、２５℃で約２．０未満のｐＫ_aを有する態様１または２に記載の方法
。
［態様４］
前記有機酸が、２５℃で約１未満のｐＫ_aを有する態様１から３のいずれか一項に記
載の方法。
［態様５］
前記有機酸が、２５℃で約０未満のｐＫ_aを有する態様１から４のいずれか一項に記
載の方法。
［態様６］
前記有機酸が、約５０〜約１１０℃の沸点を有する態様１から５のいずれか一項に記載の方法。
［態様７］
前記有機酸が、約−３０〜約０℃の融点を有する態様１から６のいずれか一項に記載の方法。
［態様８］
前記治療用ナノ粒子が、前記治療薬を約０．２〜約３５重量％含む態様１から７のいずれか一項に記載の方法。
［態様９］
前記治療用ナノ粒子が、前記治療薬を約１〜約１０重量％含む態様１から８のいずれか一項に記載の方法。
［態様１０］
前記方法が第１の方法であり、かつ前記治療用ナノ粒子が、第２の方法によって製造された治療用ナノ粒子と比較して少なくとも約２倍高い治療薬ローディングを有し、前記第２の方法が前記有機酸を含まないことを除いては、前記第２の方法が前記第１の方法と同一である態様１から９のいずれか一項に記載の方法。
［態様１１］
前記治療用ナノ粒子が、少なくとも約５倍高い治療薬ローディングを有する態様１０に記載の方法。
［態様１２］
前記治療用ナノ粒子が、少なくとも約１０倍高い治療薬ローディングを有する態様１０に記載の方法。
［態様１３］
前記治療薬が、前記治療薬、前記有機溶媒および前記有機酸からなる第１溶液中で、前記治療薬および前記有機溶媒からなる第２溶液と比較して少なくとも５倍高い溶解性を有する態様１から１２のいずれか一項に記載の方法。
［態様１４］
前記治療薬が、前記治療薬、前記有機溶媒および前記有機酸からなる第１溶液中で、前記治療薬および前記有機溶媒からなる第２溶液と比較して約２〜約２０倍高い溶解性を有する態様１から１２のいずれか一項に記載の方法。
［態様１５］
前記有機酸の濃度が、少なくとも約１重量％である態様１３または１４に記載の方法。
［態様１６］
前記有機酸の濃度が、少なくとも約２重量％である態様１３または１４に記載の方法。
［態様１７］
前記有機酸の濃度が、少なくとも約３重量％である態様１３または１４に記載の方法。
［態様１８］
前記有機酸の濃度が、約１〜約１０重量％である態様１３または１４に記載の方法。
［態様１９］
前記有機酸がハロゲン化カルボン酸である態様１から１８のいずれか一項に記載の方法。
［態様２０］
前記ハロゲン化カルボン酸がトリフルオロ酢酸である態様１９に記載の方法。
［態様２１］
前記治療用ナノ粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液中に入れた場合に、前記治療薬の約５％未満を実質的に即時に放出する態様１から２０のいずれか一項に記載の方法。
［態様２２］
前記治療用ナノ粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液中に入れた場合に、約１時間にわたって前記治療薬の約０．０１〜約２５％を放出する態様１から２１のいずれか一項に記載の方法。
［態様２３］
前記治療用ナノ粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液中に入れた場合に、約４時間にわたって前記治療薬の約１０〜約４５％を放出する態様１から２２のいずれか一項に記載の方法。
［態様２４］
前記治療用ナノ粒子が、直径約６０〜約１５０ｎｍを有する態様１から２３のいずれか一項に記載の方法。
［態様２５］
前記治療用ナノ粒子が、直径約８０〜約１５０ｎｍを有する態様１から２３のいずれか一項に記載の方法。
［態様２６］
前記治療用ナノ粒子が、直径約９０〜約１４０ｎｍを有する態様１から２３のいずれか一項に記載の方法。
［態様２７］
前記第１有機相を前記第１水溶液と合わせる工程が、前記第１有機相を前記第１水溶液と合わせることから形成される第２相を乳化して、エマルジョン相を形成することを含む態様１から２６のいずれか一項に記載の方法。
［態様２８］
前記エマルジョン相をクエンチして、クエンチ相を形成することをさらに含む態様２７に記載の方法。
［態様２９］
薬物可溶化剤を前記クエンチ相に添加して、未封入治療薬の可溶化相を形成することをさらに含む態様２８に記載の方法。
［態様３０］
前記第２相を乳化する工程が、
前記第２相を乳化して、粗いエマルジョンを形成する工程と、
前記の粗いエマルジョンを乳化して、微細エマルジョン相を形成する工程とを含む態様２７から２９のいずれか一項に記載の方法。
［態様３１］
前記有機溶媒が、酢酸エチル、ベンジルアルコール、塩化メチレン、クロロホルム、トルエン、メチルエチルケトン、ジメチルホルムアミド、ジメチルスルホキシド、アセトン、アセトニトリル、酢酸、Ｔｗｅｅｎ８０およびＳｐａｎ８０、およびその２種類以上の組み合わせからなる群から選択される溶媒を含む態様１から３０のいずれか一項に記載の方法。
［態様３２］
前記水溶液が、コール酸ナトリウム、酢酸エチル、ベンジルアルコールまたはその組み合わせからなる群から選択される試剤を含む態様１から３１のいずれか一項に記載の方法。
［態様３３］
前記第２相を乳化する工程が、ローターステーター・ホモジナイザー、プローブ超音波処理器、撹拌子または高圧ホモジナイザーを使用することを含む態様１から３２のいずれか一項に記載の方法。
［態様３４］
前記の粗いエマルジョンを乳化する工程が、高圧ホモジナイザーを使用することを含む態様３０または３３に記載の方法。
［態様３５］
前記第１エマルジョンが、ホモジナイザーによる約２〜約３パスを含む態様３４に記載の方法。
［態様３６］
ホモジナイザー供給圧力が、約２０００〜約８０００ｐｓｉ／相互作用チャンバである態様３４または３５に記載の方法。
［態様３７］
前記ホモジナイザーが、複数の相互作用チャンバを含む態様３４から３６のいずれか一項に記載の方法。
［態様３８］
クエンチを、約５℃以下の温度で少なくとも一部行う態様２８から３７のいずれか一項に記載の方法。
［態様３９］
クエンチを、約０〜約５℃で行う態様２８から３７のいずれか一項に記載の方法。
［態様４０］
前記クエンチ：エマルジョン比が、約２：１〜約４０：１である態様２８から３９のいずれか一項に記載の方法。
［態様４１］
前記クエンチ：エマルジョン比が、約５：１〜約１５：１である態様２８から３９のいずれか一項に記載の方法。
［態様４２］
前記薬物可溶化剤が、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｔｗｅｅｎ２０、ポリビニルピロリドン、シクロデキストラン、ドデシル硫酸ナトリウム、およびコール酸ナトリウムからなる群から選択される態様２９から４１のいずれか一項に記載の方法。
［態様４３］
前記薬物可溶化剤が、ジエチルニトロソアミン、酢酸ナトリウム、尿素、グリセリン、プロピレングリコール、グリコフロール、ポリ（エチレン）グリコール、ビス（ポリオキシエチレングリコールドデシルエーテル、安息香酸ナトリウム、およびサリチル酸ナトリウムからなる群から選択される態様２９から４１のいずれか一項に記載の方法。
［態様４４］
薬物可溶化剤と治療薬の比が約２００：１〜約１０：１である態様２９から４３のいずれか一項に記載の方法。
［態様４５］
濾過が、接線フロー濾過を含む態様１から４４のいずれか一項に記載の方法。
［態様４６］
濾過が、約０〜約５℃の第１温度での濾過を含む態様１から４５のいずれか一項に記載の方法。
［態様４７］
約２０〜約３０℃の第２温度での濾過をさらに含む態様４６に記載の方法。
［態様４８］
濾過が、約０〜約５℃で約１〜約３０のダイア容積を処理すること、かつ約２０〜約３０℃で少なくとも１のダイア容積を処理することを含む態様４７に記載の方法。
［態様４９］
濾過が、約０〜約５℃で約１〜約３０のダイア容積を処理すること、かつ約２０〜約３０℃で約１〜約１５のダイア容積を処理することを含む態様４７に記載の方法。
［態様５０］
濾過が、異なる温度で異なるダイア容積を処理することを含む態様１から４５のいずれか一項に記載の方法。
［態様５１］
前記有機溶媒、未封入治療薬、および／または薬物可溶化剤を実質的に除去するために、濾過前に可溶化相を精製することをさらに含む態様２９から５０のいずれか一項に記載の方法。
［態様５２］
濾過が、滅菌濾過を含む態様１から５１のいずれか一項に記載の方法。
［態様５３］
前記滅菌濾過が、制御速度にて濾過系（filtration train)を用いて、前記治療用ナノ
粒子を濾過することを含む態様５２に記載の方法。
［態様５４］
前記濾過系が、デプスフィルターと滅菌フィルターを含む態様５３に記載の方法。
［態様５５］
前記第１ポリマーが、ジブロックポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーである態様１から５４のいずれか一項に記載の方法。
［態様５６］
前記第１ポリマーが、ジブロックポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーである態様１から５４のいずれか一項に記載の方法。
［態様５７］
第２ポリマーを前記有機溶媒と合わせることをさらに含み、前記第２ポリマーが、標的化リガンドで官能化されたポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーである態様１から５６のいずれか一項に記載の方法。
［態様５８］
第２ポリマーを前記有機溶媒と合わせることをさらに含み、前記第２ポリマーが、標的化リガンドで官能化されたポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーである態様１から５７のいずれか一項に記載の方法。
［態様５９］
前記標的化リガンドが、前記ポリ（エチレン）グリコールに共有結合されている態様５７または５８に記載の方法。
［態様６０］
前記有機酸が、２種類以上の有機酸の混合物を含む態様１から５９のいずれか一項に記載の方法。
［態様６１］
前記有機酸が、２種類の有機酸の混合物を含む態様６０に記載の方法。
［態様６２］
前記有機酸が、３種類の有機酸の混合物を含む態様６０に記載の方法。
［態様６３］
前記有機酸が、４種類の有機酸の混合物を含む態様６０に記載の方法。
［態様６４］
前記有機酸が、５種類の有機酸の混合物を含む態様６０に記載の方法。
［態様６５］
治療薬、第１ポリマー、および有機酸を有機溶媒と合わせて、固形分約１〜約５０％を有する第１有機相を形成する工程；
前記第１有機相を第１水溶液と合わせて、第２相を形成する工程；
前記第２相を乳化して、エマルジョン相を形成する工程；
前記エマルジョン相をクエンチして、クエンチ相を形成する工程；
前記可溶化相を濾過して、前記治療用ナノ粒子を回収する工程；
を含む複数の治療用ナノ粒子の製造方法。
［態様６６］
第１ポリマー、治療薬、および有機酸を含む第１有機相を乳化し、それによってエマルジョン相が形成されること；
前記エマルジョン相をクエンチして、それによってクエンチ相が形成されること；
前記クエンチ相を濾過して、前記治療用ナノ粒子が回収されること；
によって製造される治療用ナノ粒子。
［態様６７］
前記有機酸がハロゲン化カルボン酸である態様６６に記載の治療用ナノ粒子。
［態様６８］
前記ハロゲン化カルボン酸がトリフルオロ酢酸である態様６７に記載の治療用ナノ粒子。
［態様６９］
Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤約０．２〜約３５重量％；
ジブロックポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはジブロックポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー約５０〜約９９．８重量％；
を含む治療用ナノ粒子であって、
ポリ（エチレン）グリコール約１０〜約３０重量％を含む、治療用ナノ粒子。
［態様７０］
２５℃で約３．５未満のｐＫ_aを有する有機酸をさらに含む態様６９に記載の治療用
ナノ粒子。
［態様７１］
前記有機酸が、２５℃でｐＫ_a約−１〜約２を有する態様７０に記載の治療用ナノ粒
子。
［態様７２］
前記有機酸がトリフルオロ酢酸である態様７０または７１に記載の治療用ナノ粒子。
［態様７３］
前記治療用ナノ粒子の流体力学的直径が約６０〜約１５０ｎｍである態様６９から７２のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様７４］
前記流体力学的直径が約９０〜約１４０ｎｍである態様６９から７３のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様７５］
Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤を約１〜約１０重量％含む態様６９から７４のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様７６］
Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤を約２〜約５重量％含む態様６９から７５のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様７７］
前記治療用ナノ粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液に入れた場合に、前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤を少なくとも１分間、実質的に保持する態様６９から７６のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様７８］
前記粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液に入れた場合に、約５％未満の前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤を実質的に即時に放出する態様６９から７７のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様７９］
前記粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液に入れた場合に、前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤約０．０１〜約２５％を約１時間にわたって放出する態様６９から７８のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様８０］
前記粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液に入れた場合に、前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤約１０〜約４５％を約４時間にわたって放出する態様６９から７９のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様８１］
前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤が、ダサチニブまたはその薬剤として許容される塩である態様６９から８０のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様８２］
前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤が、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、ボスチニブ、ポナチニブ、バフェチニブ、およびその薬剤として許容される塩からなる群から選択される態様６９から８０のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様８３］
前記ポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーが、ポリ（乳酸）数平均分子量約０．６〜約０．９５を有する態様６９から８２のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様８４］
前記ポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーが、ポリ（乳酸）数平均分子量比率約０．６〜約０．８を有する態様６９から８２のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様８５］
前記ポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーが、ポリ（乳酸）数平均分子量比率約０．７５〜約０．８５を有する態様６９から８２のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様８６］
前記ポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーが、ポリ（乳酸）数平均分子量比率約０．７〜約０．９を有する態様６９から８２のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様８７］
ポリ（エチレン）グリコールを約１０〜約２５重量％含む態様６９から８６のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様８８］
ポリ（エチレン）グリコールを約１０〜約２０重量％含む態様６９から８６のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様８９］
ポリ（エチレン）グリコールを約１５〜約２５重量％含む態様６９から８６のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様９０］
ポリ（エチレン）グリコールを約２０〜約３０重量％含む態様６９から８６のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様９１］
標的化リガンドで官能化されたポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーを約０．２〜約３０重量％さらに含む態様６９から９０のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様９２］
標的化リガンドで官能化されたポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーを約０．２〜約３０重量％さらに含む態様６９から９０のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様９３］
前記標的化リガンドが、前記ポリ（エチレン）グリコールに共有結合されている態様９１または９２に記載の治療用ナノ粒子。
［態様９４］
２種類以上の有機酸の混合物をさらに含む態様６９から９３のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様９５］
２種類の有機酸の混合物を含む態様９４に記載の治療用ナノ粒子。
［態様９６］
３種類の有機酸の混合物を含む態様９４に記載の治療用ナノ粒子。
［態様９７］
４種類の有機酸の混合物を含む態様９４に記載の治療用ナノ粒子。
［態様９８］
５種類の有機酸の混合物を含む態様９４に記載の治療用ナノ粒子。
［態様９９］
ダサチニブまたはその薬剤として許容される塩約０．５〜約３５重量％；
ポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー約３０〜約９９．５重量％；
任意に、２５℃で約３．５未満のｐＫ_aを有する有機酸約０．０００１〜約０．５重量
％；
を含む治療用ナノ粒子であって、ポリ（エチレン）グリコールを約１０〜約２５重量％含む治療用ナノ粒子。
［態様１００］
前記有機酸がトリフルオロ酢酸である態様９９に記載の治療用ナノ粒子。
［態様１０１］
第１ポリマー、Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤、および２５℃で約３．５未満のｐＫ_aを有する有機酸を含む第１有機相を乳化し、それによってエマルジョン相が形成
されること；
前記エマルジョン相をクエンチして、それによってクエンチ相が形成されること；
前記クエンチ相を濾過して、前記治療用ナノ粒子が回収されること；
によって製造される治療用ナノ粒子。
［態様１０２］
前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤が、ダサチニブまたはその薬剤として許容される塩である態様１０１に記載の治療用ナノ粒子。
［態様１０３］
前記有機酸が、２５℃でｐＫ_a約−１〜約２を有する態様１０１または１０２に記載
の治療用ナノ粒子。
［態様１０４］
前記有機酸がトリフルオロ酢酸である態様１０１から１０３のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子。
［態様１０５］
態様６６から１０４のいずれかに記載の複数の治療用ナノ粒子と、薬剤として許容される賦形剤と、を含む薬剤として許容される組成物。
［態様１０６］
サッカリドをさらに含む態様１０５に記載の薬剤として許容される組成物。
［態様１０７］
シクロデキストリンをさらに含む態様１０５または１０６に記載の薬剤として許容される組成物。
［態様１０８］
前記サッカリドが、ショ糖またはトレハロース、またはその混合物からなる群から選択される二糖である態様１０６に記載の薬剤として許容される組成物。
［態様１０９］
前記シクロデキストリンが、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリン、およびその混合物からなる群から選択される態様１０７に記載の薬剤として許容される組成物。
［態様１１０］
その必要がある患者において癌を治療する方法であって態様６６から１０４のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子を含む、治療有効量の組成物を前記患者に投与することを含む方法。
［態様１１１］
前記癌が慢性骨髄性白血病である態様１１０に記載の方法。
［態様１１２］
前記癌が、慢性骨髄単球性白血病、好酸球増多症候群、腎細胞癌、肝細胞癌、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ性白血病、非小細胞肺癌、膵臓癌、乳癌、固形腫瘍、消化管間質腫瘍、およびマントル細胞リンパ腫からなる群から選択される態様１１０に記載の方法。

ここで、本発明が一般的に説明され、本発明の特定の態様および実施形態を単に説明する目的で含まれ、決して本発明を制限することを意図するものではない、以下の実施例を参照することによって、より容易に理解されよう。

実施例１：例示的なナノ粒子の製造−エマルジョンプロセス１
有機相の調製。２０ｍＬガラスバイアルに、ポリ（乳酸）−ポリ（エチレングリコール）ジブロックコポリマー（ＰＬＡ−ＰＥＧ）（９５０ｍｇ）およびベンジルアルコール（９ｇ）を添加する。その混合物を一晩ボルテックスし、ポリマー−ＢＡ有機相が形成される。ナノ粒子を配合する前に、ボルテックスすることによって薬物５０ｍｇを有機相に溶解する。

水相の調製。１Ｌボトルに、コール酸ナトリウム（ＳＣ）（４．７５ｇ）および脱イオン水（９５５．２５ｇ）を添加する。溶解するまで、その混合物を撹拌プレート上で撹拌する。コール酸ナトリウム／水に、ベンジルアルコール（４０ｇ）を添加し、溶解するまで、その混合物を撹拌プレート上で撹拌する。

エマルジョンの形成。水相：有機相の比は５：１である。有機相を水相に注ぎ、ハンドホモジナイザーを使用して室温で１０秒間、混合物をホモジナイズして、粗いエマルジョンを形成する。２つの別個のパスに対してゲージ圧力を４６ｐｓｉに設定して、その粗いエマルジョンを高圧ホモジナイザー（１１０Ｓ）を通して供給し、ナノエマルジョン（微細エマルジョン）を形成する。（注：１回目のパス後、エマルジョンに５％ＳＣをドープし、最終的に０．５％ＳＣを達成した）。

ナノ粒子の形成。撹拌プレート上で撹拌しながら、ナノエマルジョンを５℃未満のクエンチ（脱イオン水）に注ぎ、クエンチ相が形成される。クエンチとエマルジョンの比は１０：１である。クエンチ相に、Ｔｗｅｅｎ８０：薬物の比１００：１でＴｗｅｅｎ８０水溶液（３５重量％）を添加する。

接線フロー濾過（ＴＦＦ）によるナノ粒子の濃縮。３００ｋＤａ Ｐａｌｌカセット（２つの膜）を使用してＴＦＦによって、クエンチ相を濃縮して、約２００ｍＬのナノ粒子濃縮液が形成される。約２０ダイア容積（diavolume）（４Ｌ）の冷たい脱イオン水でナ
ノ粒子濃縮液をダイアフィルトレートする。ダイアフィルトレートされたナノ粒子濃縮液の容積は最小容積に低減される。冷水（１００ｍＬ）を容器に添加し、すすぎのために膜を通してポンピングして、スラリーが形成される。スラリー（約１００ｍＬ）をガラスバイアルに収集する。

未濾過最終スラリーの固形分濃度の決定。一定容積の最終スラリーを風袋引きされた２０ｍＬシンチレーションバイアルに添加し、凍結乾燥機／オーブンで真空下にて乾燥させる。乾燥スラリーの容積中のナノ粒子の重量を決定する。濃縮ショ糖（ショ糖０．６６６ｇ／ｇ）を最終スラリー試料に添加し、ショ糖１０％が達成される。

０．４５μｍ濾過された最終スラリーの固形分濃度の決定。ショ糖を添加する前に、０．４５μｍシリンジフィルターを通して、最終スラリー試料の一部を濾過する。一定容積の濾過試料を風袋引きされた２０ｍＬシンチレーションバイアルに添加し、凍結乾燥機／オーブンを使用して真空下にて乾燥させる。ショ糖を使用して、濾過されていない最終スラリーの残存試料を凍結する。

実施例２：例示的なナノ粒子の製造‐エマルジョンプロセス２
有機相の調製。一番目の２０ｍＬガラスバイアルに、ポリ（乳酸）−ポリ（エチレングリコール）ジブロックコポリマー（ＰＬＡ−ＰＥＧ）（７００ｍｇ）および酢酸エチル（１６．２２ｇ）を添加する。混合物を一晩ボルテックスして、ポリマー−ＥＡ溶液が得られる。２番目の２０ｍＬガラスバイアルに、ダサチニブ３００ｍｇ、ベンジルアルコール（ＢＡ）中の新たに調製された３％トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）約５ｇを添加し、その混合物を一晩ボルテックスし、薬物−酸−ＢＡ溶液が形成される。ナノ粒子を配合する前に、ポリマー−ＥＡ溶液を薬物−酸−ＢＡ溶液に添加し、混合物をボルテックスして有機相が形成される。

水相の調製。１Ｌボトルに、コール酸ナトリウム（ＳＣ）（５ｇ）および脱イオン水（９５５ｇ）を添加する。溶解するまで、混合物を撹拌プレート上で撹拌する。コール酸ナトリウム／水に、ベンジルアルコール（４０ｇ）を添加し、溶解するまで、混合物を撹拌プレート上で撹拌する。

エマルジョンの形成。水相：有機相の比は５：１である。有機相を水相に注ぎ、ハンドホモジナイザーを使用して室温で１０秒間、混合物をホモジナイズして、粗いエマルジョンを形成する。１パスに対してゲージ圧力を４６ｐｓｉに設定して、その粗いエマルジョンを、高圧ホモジナイザー（１１０Ｓ）を通して供給し、ナノエマルジョン（微細エマルジョン）を形成する。

ナノ粒子の形成。撹拌プレート上で撹拌しながら、ナノエマルジョンを５℃未満のクエンチ（脱イオン水）に注ぎ、クエンチ相が形成される。クエンチとエマルジョンの比は１０：１である。クエンチ相に、Ｔｗｅｅｎ８０：薬物の比１００：１でＴｗｅｅｎ８０水溶液（３５重量％）を添加する。

接線フロー濾過（ＴＦＦ）によるナノ粒子の濃縮。３００ｋＤａ Ｐａｌｌカセット（２つの膜）を使用してＴＦＦによって、クエンチ相を濃縮して、約２００ｍＬのナノ粒子濃縮液が形成される。約２０ダイア容積（４Ｌ）の冷たい脱イオン水でナノ粒子濃縮液をダイアフィルトレートする。ダイアフィルトレートされたナノ粒子濃縮液の容積は最小容積に低減される。冷水（１００ｍＬ）を容器に添加し、すすぎのために膜を通してポンピングして、スラリーが形成される。スラリー（約１００ｍＬ）をガラスバイアルに収集する。

未濾過最終スラリーの固形分濃度の決定。一定容積の最終スラリーを風袋引きされた２０ｍＬシンチレーションバイアルに添加し、凍結乾燥機／オーブンで真空下にて乾燥させる。乾燥スラリーの容積中のナノ粒子の重量を決定する。濃縮ショ糖（ショ糖０．６６６ｇ／ｇ）を最終スラリー試料に添加し、ショ糖１０％が達成される。

０．４５μｍ濾過された最終スラリーの固形分濃度の決定。ショ糖を添加する前に、０．４５μｍシリンジフィルターを通して、最終スラリー試料の一部を濾過する。一定容積の濾過試料を風袋引きされた２０ｍＬシンチレーションバイアルに添加し、凍結乾燥機／オーブンを使用して真空下にて乾燥させる。ショ糖を使用して、濾過されていない最終スラリーの残存試料を凍結する。

実施例３：配合物
酸をドーピングして、またはドーピングすることなく、６種のダサチニブ配合物を製造した。ローディング理論値および固形分濃度を表１に示す：

酸のドーピングなしの場合には、ＢＡ中の薬物の溶解性が低いため（９．４５ｍｇ／ｍＬ）、薬物ローディング理論値５％および固形分１９％が用いられる。酸のドーピングがある場合には、有機相（ＴＦＡまたはオレイン酸を含有するＢＡ）中の薬物の溶解性は、表２に示すようにかなり高く、より高い薬物ローディングを用いることができた。酸がドープされた配合物の固形分パーセンテージすべてが４．７％で維持され、キナーゼ阻害剤の酸ドープ配合物が疑似される。さらに、酸−ＢＡ混合物を薬物溶媒として使用した場合、配合前に薬物−ＢＡ溶液にポリマー−ＥＡを添加することによって、ＢＡ／ＥＡ２０／８０混合物が最終有機相溶媒８０％（重量）として使用された。

特徴付けのデータを表３にまとめる。配合物の粒径は、約１００〜１５０ｎｍの範囲内であった。４つのロットは、粒径１１０±１０ｎｍを有し、２つのロットがそれよりわずかに大きなサイズ、それぞれ１３７．２ｎｍおよび１４３．１ｎｍを有した。

酸がドーピングされていない２つの１６／５ロット（１＆２）および１つの４７／５ロット（３）は、薬物ローディング＜１％を得た。ＢＡ中の１％ＴＦＡまたは６％オレイン酸（４＆６）を使用して、薬物ローディング＜１％が得られた。ダサチニブは、３％ＴＦＡ中での最も高い溶解性を有し、そのため、３０％のかなり高い薬物ローディング理論値が可能となった（５）。薬物ローディングは、３％ＴＦＡでは２．５４％に向上した。

生体外データを図４および表３に示す。酸を含まない３つのロットおよび１つのオレイン酸ロットでは、薬物の約１０％の類似のバースト放出が生じた。酸を含まない２つの１
６／５ロットによる薬物放出は最も速く、薬物の約６０％が４時間で放出された。オレイン酸ロットおよび酸不含４７／５ロットは、約５０％を４時間で放出した。

１％ＴＦＡロット（４）は、最も高いバースト放出を示し、薬物の約２５．４４％が放出された。ロット（４）からの薬物の放出は、酸不含１６／５ロットと同程度の速さで起こり、薬物の５９．２２％が４時間で放出された。

すべての配合物の中で、３％ＴＦＡロット（５）が最も低いバースト、３．４％を示した。さらに、その放出は、２つの酸不含１６／５ロットと比較して有意に遅く、薬物の１７．０６％が４時間で放出された。

これら２つの時点で回収された薬物は著しい分解を示すため（薬物回収率のセクションにおいて表の下部にデータが示されている）、表４における２４時間および４８時間の放出データには下線が引かれている。３７℃で４時間インキュベートした後、ダサチニブの分解が確認される。

上記の配合物から、キナーゼ阻害剤配合物に関して確認されるように、薬物ローディングの向上と、薬物放出の減速の両方について、３％ＴＦＡをＢＡに添加する効力が実証されている。

等価物
当業者であれば、単なる慣例の実験を用いて、本明細書に記載の本発明の特定の実施形態の多くの等価物を理解されるであろう、あるいは確かめることができるであろう。かかる等価物は、以下の特許請求の範囲によって包含されることが意図される。

参照による援用
本明細書に記載のすべての特許、公開特許出願、ウェブサイト、および他の参考文献の内容全体が、参照によりその全体が本明細書に明示的に援用される。

Claims (44)

1. 治療薬、第１ポリマーおよび有機酸を有機溶媒と合わせて、固形分１〜５０％を有する第１有機相を形成する工程、ここにおいて、前記有機酸の濃度は、少なくとも２重量％である；
   前記第１有機相を第１水溶液と合わせて、複数の治療用ナノ粒子を形成する工程；そして、
   前記治療用ナノ粒子を濾過によって回収する工程、
   を含む複数の治療用ナノ粒子の製造方法、であって、
   ここにおいて、前記治療薬が、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、ボスチニブ、ポナチニブ、バフェチニブおよびその許容される塩から選択されるＢｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤であり；
   前記第１ポリマーが、ジブロックポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはジブロックポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーであり；
   前記有機酸がトリフルオロ酢酸を含み；そして、
   前記有機溶媒がベンジルアルコールを含む、
   前記方法。
2. 前記治療用ナノ粒子が、前記治療薬を０．２〜３５重量％含む請求項１に記載の方法。
3. 前記方法が第１の方法であり、かつ前記治療用ナノ粒子が、第２の方法によって製造された治療用ナノ粒子と比較して少なくとも２倍高い治療薬ローディングを有し、前記第２の方法が前記有機酸を含まないことを除いては、前記第２の方法が前記第１の方法と同一である請求項１または２に記載の方法。
4. 前記治療薬が、前記治療薬、前記有機溶媒および前記有機酸からなる第１溶液中で、前記治療薬および前記有機溶媒からなる第２溶液と比較して２〜２０倍又は少なくとも５倍高い溶解性を有する請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
5. 前記有機酸の濃度が、少なくとも１重量％である請求項４に記載の方法。
6. 前記治療用ナノ粒子が、前記治療薬を１〜１０重量％含む請求項４に記載の方法。
7. 前記治療用ナノ粒子が、３７℃のリン酸緩衝溶液中に入れた場合に、
   前記治療薬の５％未満を実質的に即時に放出する、または
   １時間にわたって前記治療薬の０．０１〜２５％を放出する、または
   ４時間にわたって前記治療薬の１０〜４５％を放出する請求項１から６のいずれか一項に記載の方法。
8. 前記治療用ナノ粒子が、直径６０〜１５０ｎｍを有する請求項１から７のいずれか一項に記載の方法。
9. 前記第１有機相を前記第１水溶液と合わせる工程が、前記第１有機相を前記第１水溶液と合わせることから形成される第２相を乳化して、エマルジョン相を形成することを含む請求項１から８のいずれか一項に記載の方法。
10. 前記エマルジョン相をクエンチして、クエンチ相を形成することをさらに含む請求項９に記載の方法。
11. 薬物可溶化剤を前記クエンチ相に添加して、未封入治療薬の可溶化相を形成することをさらに含む請求項１０に記載の方法。
12. 前記第２相を乳化する工程が、
    前記第２相を乳化して、粗いエマルジョンを形成する工程と、
    前記の粗いエマルジョンを乳化して、微細エマルジョン相を形成する工程とを含む請求項９から１１のいずれか一項に記載の方法。
13. 前記水溶液が、コール酸ナトリウム、酢酸エチル、ベンジルアルコールまたはその組み合わせからなる群から選択される試剤を含む請求項１から１２のいずれか一項に記載の方法。
14. 前記第２相を乳化する工程が、ローターステーター・ホモジナイザー、プローブ超音波処理器、撹拌子または高圧ホモジナイザーを使用することを含む請求項１から１３のいずれか一項に記載の方法。
15. 前記の粗いエマルジョンを乳化する工程が、高圧ホモジナイザーを使用することを含む請求項１２または１４に記載の方法。
16. 前記第１エマルジョンが、ホモジナイザーによる２〜３パスを含む請求項１５に記載の方法。
17. ホモジナイザー供給圧力が、２０００〜８０００ｐｓｉ／相互作用チャンバである請求項１５または１６に記載の方法。
18. 前記ホモジナイザーが、複数の相互作用チャンバを含む請求項１５から１７のいずれか一項に記載の方法。
19. クエンチを、５℃以下の温度で少なくとも一部行う請求項１０から１８のいずれか一項に記載の方法。
20. 前記クエンチ：エマルジョン比が、２：１〜４０：１又は５：１〜１５：１である請求項１０から１９のいずれか一項に記載の方法。
21. 前記薬物可溶化剤が、Ｔｗｅｅｎ８０、Ｔｗｅｅｎ２０、ポリビニルピロリドン、シクロデキストラン、ドデシル硫酸ナトリウム、コール酸ナトリウム、ジエチルニトロソアミン、酢酸ナトリウム、尿素、グリセリン、プロピレングリコール、グリコフロール、ポリ（エチレン）グリコール、ビス（ポリオキシエチレングリコールドデシルエーテル、安息香酸ナトリウムおよびサリチル酸ナトリウムからなる群から選択される請求項１１から２０のいずれか一項に記載の方法。
22. 薬物可溶化剤と治療薬の比が２００：１〜１０：１である請求項１１から２１のいずれか一項に記載の方法。
23. 濾過が、接線フロー濾過を含む請求項１から２２のいずれか一項に記載の方法。
24. 濾過が、０〜５℃の第１温度での濾過を含む請求項１から２３のいずれか一項に記載の方法。
25. ２０〜３０℃の第２温度での濾過をさらに含む請求項２４に記載の方法。
26. 濾過が、０〜５℃で１〜３０のダイア容積を処理すること、かつ２０〜３０℃で少なくとも１のダイア容積を処理することを含む請求項２５に記載の方法。
27. 濾過が、異なる温度で異なるダイア容積を処理することを含む請求項１から２３のいずれか一項に記載の方法。
28. 前記有機溶媒、未封入治療薬および／または薬物可溶化剤を実質的に除去するために、濾過前に可溶化相を精製することをさらに含む請求項１１から２７のいずれか一項に記載の方法。
29. 濾過が、滅菌濾過を含む請求項１から２８のいずれか一項に記載の方法。
30. 前記滅菌濾過が、制御速度にて濾過系（filtration train)を用いて、前記治療用ナノ粒子を濾過することを含む請求項２９に記載の方法。
31. 前記濾過系が、デプスフィルターと滅菌フィルターを含む請求項３０に記載の方法。
32. 第２ポリマーを前記有機溶媒と合わせることをさらに含み、前記第２ポリマーが、標的化リガンドで官能化されたポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマー、標的化リガンドで官能化されたポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーである請求項１から３１のいずれか一項に記載の方法。
33. 前記標的化リガンドが、前記ポリ（エチレン）グリコールに共有結合されている請求項３２に記載の方法。
34. 治療薬、第１ポリマー、および有機酸を有機溶媒と合わせて、固形分１〜５０％を有する第１有機相を形成する工程、ここにおいて、前記有機酸の濃度は、少なくとも２重量％である；
    前記第１有機相を第１水溶液と合わせて、第２相を形成する工程；
    前記第２相を乳化して、エマルジョン相を形成する工程；
    前記エマルジョン相をクエンチして、クエンチ相を形成する工程；
    前記可溶化相を濾過して、前記治療用ナノ粒子を回収する工程、
    を含む複数の治療用ナノ粒子の製造方法、であって、
    ここにおいて、前記治療薬が、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、ボスチニブ、ポナチニブ、バフェチニブおよびその許容される塩から選択されるＢｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤であり；
    前記第１ポリマーが、ジブロックポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはジブロックポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーであり；
    前記有機酸がトリフルオロ酢酸を含み；そして、
    前記有機溶媒がベンジルアルコールを含む、
    前記方法。
35. 有機溶媒と合わせた、第１ポリマー、治療薬、および有機酸を含む第１有機相を乳化し、それによってエマルジョン相が形成されること、ここにおいて、前記有機酸の濃度は、少なくとも２重量％である；
    前記エマルジョン相をクエンチして、それによってクエンチ相が形成されること；
    前記クエンチ相を濾過して、前記治療用ナノ粒子が回収されること；
    によって製造される治療用ナノ粒子、であって、
    ここにおいて、前記治療薬が、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、ボスチニブ、ポナチニブ、バフェチニブおよびその許容される塩から選択されるＢｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤であり；
    前記第１ポリマーが、ジブロックポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはジブロックポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーであり；
    前記有機酸がトリフルオロ酢酸を含み；そして、
    前記有機溶媒がベンジルアルコールを含む、
    前記治療用ナノ粒子。
36. 有機溶媒と合わせた、第１ポリマー、Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤、および２５℃で３．５未満のｐＫ_aを有する有機酸を含む第１有機相を乳化し、それによってエマルジョン相が形成されること、ここにおいて、前記有機酸の濃度は、少なくとも２重量％である；
    前記エマルジョン相をクエンチして、それによってクエンチ相が形成されること；
    前記クエンチ相を濾過して、前記治療用ナノ粒子が回収されること；
    によって製造される治療用ナノ粒子、であって、
    ここにおいて、前記治療薬が、イマチニブ、ニロチニブ、ダサチニブ、ボスチニブ、ポナチニブ、バフェチニブおよびその許容される塩から選択されるＢｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤であり；
    前記第１ポリマーが、ジブロックポリ（乳酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーまたはジブロックポリ（乳酸）−ｃｏ−ポリ（グリコール酸）−ポリ（エチレン）グリコールコポリマーであり；
    前記有機酸がトリフルオロ酢酸を含み；そして、
    前記有機溶媒がベンジルアルコールを含む、
    前記治療用ナノ粒子。
37. 前記Ｂｃｒ−Ａｂｌチロシンキナーゼ阻害剤が、ダサチニブまたはその薬剤として許容される塩である請求項３６に記載の治療用ナノ粒子。
38. 請求項３５から３７のいずれか一項に記載の複数の治療用ナノ粒子と、薬剤として許容される賦形剤とを含む薬剤として許容される組成物。
39. サッカリドをさらに含む請求項３８に記載の薬剤として許容される組成物。
40. シクロデキストリンをさらに含む請求項３８または３９に記載の薬剤として許容される組成物。
41. 前記サッカリドが、ショ糖またはトレハロース及びその混合物からなる群から選択される二糖である請求項３９に記載の薬剤として許容される組成物。
42. 前記シクロデキストリンが、α−シクロデキストリン、β−シクロデキストリン、γ−シクロデキストリンおよびその混合物からなる群から選択される請求項４１に記載の薬剤として許容される組成物。
43. 請求項３５から３７のいずれか一項に記載の治療用ナノ粒子を含む癌治療用組成物。
44. 前記癌が、慢性骨髄単球性白血病、好酸球増多症候群、腎細胞癌、肝細胞癌、フィラデルフィア染色体陽性急性リンパ性白血病、非小細胞肺癌、膵臓癌、乳癌、固形腫瘍、消化管間質腫瘍およびマントル細胞リンパ腫からなる群から選択される請求項４３に記載の組成物。