CN105748440B - 一种包括胆盐的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种药物组合物，其中所述药物组合物包括活性物质、聚合物和表面活性剂，所述表面活性剂包括胆盐，并且所述药物组合物包括纳米颗粒。本发明还涉及该组合物的制备方法和用途。

Description

一种包括胆盐的药物组合物及其制备方法和用途

技术领域：

本发明涉及一种药物组合物，同时本发明还涉及该药物组合物的制备方法和用途。

背景技术：

癌症是人类生命健康的最大杀手，化学治疗是癌症治疗最重要的手段，然而多数化学治疗药物缺少特定到达肿瘤组织的能力，对肿瘤细胞缺乏选择杀伤作用，在杀伤肿瘤细胞的同时也伤及正常细胞，特别是癌细胞因为给药处理产生耐药性，为了克服癌细胞的耐药性需要给予更高的抗癌药剂量，从而对正常细胞造成较大的副作用，甚至迫使治疗中断；另一方面，多数抗肿瘤药物的功效由于其自身性质(如水溶性差、治疗窗口窄等)也限制了肿瘤治疗的效果。

从上世纪70年代开始，纳米载体作为化疗药物传递系统用于癌症治疗引起了人们的极大关注。用于药物传递系统的纳米粒子粒径在10～1000nm，可以由多种材料构成，例如聚合物、脂质和有机金属复合物等。

近年来，聚合物纳米制剂因为具有较好的理化性能而备受关注。纳米粒(Nanoparticle，NP)是一类由高分子物质组成的固态胶体粒子，粒径大小介于10～1000nm，可分散在水中形成近似胶体溶液，是具有均一纳米级粒径及球形的载体。由于纳米粒作为药物载体的优越性，已成为国内外医药学的重要研究方向。

用于制备纳米粒制剂的辅料多为高分子可降解聚合物。聚酯类是迄今为止研究最多，应用最广的生物可降解高分子材料，常用的聚酯有聚乳酸(PLA)、聚羟基乙酸(PGA)、聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物(PLGA)和聚-己内酯(PCL)等。

由于PLA和PLGA纳米粒容易被巨噬细胞识别并吞噬，在体内循环时间短，不能发挥足够的药效，因此往往需要对纳米粒进行表面修饰。常用的表面修饰剂有聚乙二醇(PEG)、聚乙烯醇(PVA)、聚维酮、肝素、人血白蛋白、唾液酸及神经节苷酯等。使用PEG进行修饰是最常用的一种方法。

虽然现有技术中已有一些可供使用的纳米粒，但是现有技术中的纳米粒尚存在诸多缺陷，例如包封率低、释放迅速、靶向性能不好、体内药效差等，因此本领域对新的具有更优 异性质的聚合物纳米粒还有迫切的需要。

发明内容：

本发明的一个方面提供了一种药物组合物，其中所述药物组合物包括活性物质、聚合物和表面活性剂，所述表面活性剂包括胆盐，并且所述药物组合物包括纳米颗粒。

活性物质

本领域技术人员可以根据实际需要选择适合的活性物质。在一些实施方式中，所述活性物质是疏水性物质。

本申请所使用的术语“疏水性物质”指的是在25℃在100g水中该物质的可溶解质量小于1g、0.1g、0.01g、1mg或0.5mg。

在一些实施方式中，所述活性物质选自抗肿瘤药物、抗生素药物、心血管药物、抗糖尿病药物、非甾体抗炎药物或其组合。

本申请的活性物质的示例性例子可以是：抗肿瘤药物，例如紫杉醇、多烯紫杉醇、卡巴他赛、5-氟尿嘧啶、依托泊苷、苯丙氨酸氮芥、苯丁酸氮芥、六甲三聚氰胺、甲氨碟呤、甲环亚硝脲、去甲长春花碱、替尼泊苷、高三尖杉酯碱、羟喜树碱等；抗生素药物，例如氯霉素、红霉素、依托红霉素、琥乙红霉素、麦迪霉素、交沙霉素、克拉霉素、罗他霉素、磺胺嘧啶、甲氧苄氨嘧啶、呋喃妥因、利副平、利福昔明、异丁呱利福霉素、氨苯砜、醋氨苯砜、眯康唑等；心血管药物，如硝苯地平、尼卡地平、尼群地平、尼伐地平、桂利嗪、呱克昔林、吗多明、洋地黄毒甙、地高辛、毛花甙丙、去乙酰毛花甙、普罗帕酮、胺碘酮、硝酸甘油、戊四硝酯、环扁桃酯、烟酸生育酚酯等；抗糖尿病药物，例如甲苯黄丁脲、格列本脲、格列吡嗪等；非甾体抗炎药物，例如氯马撕汀、赛庚啶、苯噻啶、酮替芬、曲尼司等。上述各具体药物的结构可以参见各国家或地区的药品管理部门批准的药品说明书，例如中国食品药品监督管理局、美国食品药品监督管理局、日本药品与医疗器械管理局或者欧洲药品管理局批准的那些。

在一些实施方式中，所述活性物质是紫杉醇、喜树碱及其衍生物。

本申请所使用的术语“衍生物”是指母体化合物分子中的原子或原子团被其他原子或原子团取代所形成的化合物。紫杉醇的衍生物包括但不限于紫杉醇的丁二酸和戊二酸衍生物、磺酸盐衍生物、氨基酸衍生物、磷酸盐衍生物、有机酸酯和碳酸酯衍生物、N-甲基吡啶盐、 聚乙二醇衍生物、聚甲基丙烯酸衍生物、聚谷氨酸或聚天门冬氨酸衍生物。

在一些实施方式中，所述活性物质是紫杉醇、多西他赛或卡巴他赛(7B，10B-二甲氧基多西紫杉醇)或羟基喜树碱。

本申请所涉及的化合物包括该化合物的盐、酯、内消旋体、外消旋体及其异构体。本申请中所述的“异构体”包括顺反异构体和旋光异构体。

聚合物

本领域技术人员可以根据实际需要选择适合的聚合物。在一些实施方式中，所述聚合物是可降解的高分子材料。在一些实施方式中，所述聚合物选自PLGA、PLA、PLGA或PLA的衍生物、或其组合。

在本申请中，术语“PLGA或PLA的衍生物”是指对PLGA或PLA的基本结构进行修饰后的PLGA或PLA，所述修饰可以包括对其亲水和疏水性质进行改变的基团修饰。

在一些实施方式中，所述PLGA或PLA的衍生物是PLGA或PLA的聚乙二醇衍生物。在一些实施方式中，所述聚合物选自PEG-PLA、PEG-PLGA或其组合。

本申请所使用的聚合物的组成和分子量范围为商业上可购买到的或者是在药物输送系统中常用的。在一些实施方式中，根据目标缓释时间来选择聚合物的组成和分子量范围。

在一些实施方式中，本申请所使用的聚合物的分子量范围是0.5K-500K。在一些实施方式中，本申请所使用的聚合物分子量范围是0.5K-300K、1K-300K、3K-300K、5K-300K、8K-300K、10K-300K、12K-300K、15K-300K、18K-300K、1K-200K、5K-150K、8K-100K、10K-50K、15K-30K、18K-25K。

本申请中所述的分子量可以是重均分子量或数均分子量。可以使用本领域常用的方法来检测分子量，例如通过光散射法、超速离心沉降速度法或凝胶色谱法进行检测。

在一些实施方式中，本申请所使用的聚合物是封端的或是不封端的。在一些实施方式中，本申请所使用的聚合物是甲氧基、乙氧基、甲基丙烯酰基或乙酰基封端的聚合物。

在一些实施方式中，本申请所使用的PLGA中LA和GA的比例为1∶4-6∶1、1∶3-6∶1、1∶2-6∶1、1∶1-6∶1、2∶1-6∶1、3∶1-6∶1、1∶4-5∶1、1∶4-4∶1、1∶4-3∶1、1∶2-4∶1、1∶1-4∶1或2∶1-4∶1。在一些实施方式中，本申请所使用的PLGA中LA和GA的比例为50∶50、75∶25或者85∶15。

胆盐

胆盐是胆汁(由肝脏分泌的黄绿色液体)的主要构成成分，人体的胆汁中含有丰富的胆 盐，对于类脂、脂溶性的维生素以及药物吸收起着重要作用，有“生理去污剂”之称。胆盐含有亲水的羟基和羧基，以及疏水的甲基和“-CH2-”结构，使得其具有界面活性的特征，能降低脂/水两相之间的表面张力，从而达到增溶许多难溶性药物的效果。

在一些实施方式中，本申请所述胆盐选自胆酸钠、脱氧胆酸钠、牛磺胆酸钠或其组合。

在一些实施方式中，本申请所述的胆酸钠具有如下结构：

在一些实施方式中，本申请所述的脱氧胆酸钠具有如下结构：

在一些实施方式中，本申请所述的牛磺胆酸钠具有如下结构：

不希望受到理论的束缚，胆盐的加入使得制备出的纳米颗粒具有更高的包封率、更优异的缓释效果以及更好的体内靶向作用和药效。

表面活性剂

在一些实施方式中，本申请的药物组合物包括除了胆盐之外的表面活性剂。在一些实施方式中，本申请的药物组合物不包括脂类表面活性剂。在一些实施方式中，本申请的药物组合物不包括磷脂。

在一些实施方式中，本申请的药物组合物不包括除了胆盐之外的表面活性剂。

组分比例

本领域技术人员可以根据实际需要选择活性物质同聚合物的比例。在一些实施方式中，所述聚合物与活性物质的重量比为5∶1至40∶1。在一些实施方式中，组合物中所述聚合物与活性物质的质量比是5∶1-35∶1、5∶1-30∶1、5∶1-25∶1、5∶1-23∶1、5∶1-21∶1、6∶1-35∶1、8∶1-35∶1、10∶1-35∶1、12∶1-35∶1、15∶1-35∶1、16∶1-35∶1、18∶1-35∶1、6∶1-30∶1、8∶1-28∶1、10∶1-25∶1、12∶1-24∶1、15∶1-22∶1或18∶1-22∶1。

本领域技术人员可以根据实际需要选择表面活性剂同活性物质的比例。在一些实施方式中，所述表面活性剂与活性物质的重量比为0.1∶1至4∶1。在一些实施方式中，组合物中所述表面活性剂与活性物质的质量比是0.2∶1-4∶1、0.3∶1-4∶1、0.4∶1-4∶1、0.5∶1-4∶1、0.6∶1-4∶1、0.7∶1-4∶1、0.8∶1-4∶1、0.9∶1-4∶1、1∶1-4∶1、2∶1-4∶1、3∶1-4∶1、0.2∶1-3∶1、0.2∶1-2∶1、0.2∶1-1∶1、0.2∶1-0.8∶1、0.2∶1-0.6∶1、0.2∶1-0.5∶1、0.3∶1-4∶1、0.4∶1-3∶1、0.5∶1-2∶1或1∶1-2∶1。

本领域技术人员可以根据实际需要选择表面活性剂同聚合物的比例。在一些实施方式中，所述表面活性剂与聚合物的重量比为1∶5至1∶50。在一些实施方式中，组合物中所述表面活性剂与聚合物的质量比是1∶5-1∶45、1∶5-1∶42、1∶5-1∶40、1∶5-1∶35、1∶5-1∶30、1∶5-1∶25、1∶5-1∶20、1∶5-1∶15、1∶5-1∶10、1∶6-1∶50、1∶7-1∶50、1∶8-1∶50、1∶9-1∶50、1∶10-1∶50、1∶12-1∶50、1∶15-1∶50、1∶18-1∶50、1∶20-1∶50、1∶25-1∶50、1∶30-1∶50、1∶35-1∶50、1∶40-1∶50、1∶6-1∶45、1∶8-1∶42、1∶10-1∶40、1∶35-1∶40、1∶10-1∶15、1∶6-1∶15或1∶8-1∶12。

组合物

在一些实施方式中，本申请的组合物为固体制剂。示例性的固体制剂包括片剂、胶囊、颗粒剂、散剂或锭剂。在一些实施方式中，所述组合物为纳米颗粒。在一些实施方式中，所述组合物是干燥的纳米颗粒。在一些实施方式中，所述组合物是冻干的纳米颗粒。

在一些实施方式中，所述纳米颗粒的粒径在10-500nm。在一些实施方式中，所述纳米颗粒的粒径在50-200nm。在一些实施方式中，所述纳米颗粒的粒径在10-400nm、10-300nm、10-250nm、10-200nm、10-150nm、10-120nm、10-100nm、10-90nm、20-90nm、30-90nm、40-90nm、50-90nm、60-90nm、70-90nm或70-110nm。在一些实施方式中，所述纳米颗 粒的粒径在10-100nm。

可以使用本领域常用的方法测量粒径，例如扫描电镜法、光散射法。在一些实施方式中，使用光散射法检测粒径。在一些实施方式中，使用激光动态散射仪检测粒径。

本申请纳米粒具有可接受的分散系数。在一些实施方式中，本申请纳米粒的分散系数不大于0.3、0.2、0.19或0.18。

本领域技术人员知晓，除了活性物质、聚合物和表面活性剂之外，所述组合物还包括药学上可接受的其他成分。在一些实施方式中，所述其他成分包括冻干保护剂，包括但不限于乳糖、甘露糖、右旋糖酐、蔗糖和甘氨酸。在一些实施方式中，所述其他成分包括溶液，包括但不限于氯化钠溶液、葡萄糖溶液、PBS缓冲液、乙醇溶液等。

本申请所使用的术语“药学上可接受的”是指这样的化合物、原料、组合物和/或剂型，它们在合理医学判断的范围内，适用于与患者组织接触而无过度毒性、刺激性、变态反应或与合理的利益/风险比不相称的其他问题和并发症，并有效用于既定用途。

本申请的组合物适于通过任何合适的途径给药，例如通过口服(包括口腔或舌下)、直肠、鼻、局部(包括口腔、舌下或经皮)、阴道或胃肠外(包括皮下、皮内、肌内、关节内、滑膜内、胸骨内、鞘内、病灶内、静脉内或者真皮下注射或输注)途径。在一些实施方式中，本申请的组合物用于胃肠外给药。在一些实施方式中，本申请的组合物用于静脉输注给药。在一些实施方式中，本申请的组合物用于皮下给药。

有益效果

不希望受理论的束缚，本申请的药物组合物具有如下一个或多个优势：1.更高的包封率；2.更均匀的粒径分布；3.稳定性更优异；4.有更优异的靶向作用；5.更深入的进入肿瘤；6.更高的药效。本发明的另一个方面提供了一种制备本发明组合物的方法，其中所述方法包括如下步骤：(i)将聚合物与活性物质溶解在有机溶剂中；(ii)将表面活性剂溶解在水溶液中；(iii)在剪切力的作用下将步骤(ii)获得的水溶液同步骤(i)获得的有机溶液相混合；(iv)除去有机溶剂。

步骤(i)将聚合物与活性物质溶解在有机溶剂中

本领域技术人员可以根据活性物质的溶解性和制备工艺的需要来选择适合的有机溶剂。在一些实施方式中，所述有机溶剂选自丙酮、二氯甲烷、乙腈或其组合。在一些实施方式中，所述有机溶剂是丙酮。

在一些实施方式中，所述活性物质在所述有机溶剂中的浓度为0.1～1mg/mL。在一些实施方式中，所述活性物质在所述有机溶剂中的浓度为0.1～1mg/mL、0.2～1mg/mL、0.3～1mg/mL、0.4～1mg/mL、0.5～1mg/mL、0.6～1mg/mL、0.7～1mg/mL、0.8～1mg/mL、0.1～0.9mg/mL、0.1～0.8mg/mL、0.1～0.7mg/mL、0.1～0.6mg/mL、0.1～0.5mg/mL、0.1～0.4mg/mL、0.1～0.3mg/mL、0.2～0.6mg/mL或0.3～0.5mg/mL。

在一些实施方式中，所述聚合物在所述有机溶剂中的浓度为2～10mg/mL。在一些实施方式中，所述聚合物在所述有机溶剂中的浓度为2～9mg/mL、2～8mg/mL、2～7mg/mL、2～6mg/mL、2～5mg/mL、3～10mg/mL、3～9mg/mL、3～8mg/mL、3～7mg/mL、3～6mg/mL、3～5mg/mL、3～9mg/mL或4～8mg/mL。

步骤(ii)将表面活性剂溶解在水溶液中

在一些实施方式中，所述表面活性剂在水溶液中的浓度为0.05～1mg/mL。在一些实施方式中，所述表面活性剂在水溶液中的浓度为0.06～1mg/mL、0.07～1mg/mL、0.08～1mg/mL、0.09～1mg/mL、0.1～1mg/mL、0.2～1mg/mL、0.3～1mg/mL、0.05～0.9mg/mL、0.05～0.8mg/mL、0.05～0.7mg/mL、0.05～0.6mg/mL、0.05～0.5mg/mL、0.05～0.4mg/mL、0.06～0.8mg/mL、0.08～0.6mg/mL、0.08～0.5mg/mL、0.08～0.4mg/mL、0.1～0.3mg/mL。

步骤(iii)在剪切力的作用下将步骤(ii)获得的水溶同步骤(i)获得的有机溶液 相混合

在一些实施方式中，所述步骤(iii)还包括将步骤(ii)获得的水溶滴加到步骤(i)获得的有机溶液中。

本申请所述的剪切力可以是通过搅拌、剪切或均质提供的，条件是剪切力不高于1000rmp、800rmp、700rmp、600rmp、500rmp或400rmp机械搅拌提供的剪切力。在一些实施方式中，所述剪切力是搅拌。在一些实施方式中，所述剪切力是机械搅拌。在一些实施方式中，搅拌的速度为100-1000rmp、100-800rmp、100-700rmp、100-600rmp、100-500rmp或100-400rmp。

在一些实施方式中，所述有机相和水相的比例为1∶10～20∶1。在一些实施方式中，所述有机相和水相的比例为1∶10～18∶1、1∶10～15∶1、1∶10～12∶1、1∶10～10∶1、1∶10～8∶1、1∶10～5∶1、1∶10～3∶1、1∶10～2∶1、1∶10～1∶1、1∶9～20∶1、1∶8～20∶1、1∶7～20∶1、1∶6～20∶1、1∶5～20∶1、1∶4～20∶1、1∶3～20∶1、1∶2～20∶1、1∶8～10∶1、1∶6～6∶1、1∶5～5∶1、1∶4～4∶1、1∶3～3∶1、1∶3～2∶1或1∶3～1∶1。

步骤(iv)除去有机溶剂

本申请所述的减压可以通过本领域的任何适合的方式进行，例如，旋转蒸发、减压干燥等。在一些实施方式中，通过减压旋转蒸发除去有机溶剂。在一些实施方式中，减压旋转蒸发的真空度低于0.6个大气压、0.5个大气压、0.4个大气压、0.3个大气压、0.2个大气压、0.1个大气压。在一些实施方式中，减压旋转蒸发的真空度为0.1-0.6个大气压、0.1-0.5个大气压、0.1-0.4个大气压、0.1-0.3个大气压或0.1-0.2个大气压。

包封率

可以使用本领域常用的方法测量包封率，例如葡聚糖凝胶、超速离心法或透析法。在一些实施方式中，使用透析法测量包封率。

在一些实施方式中，本申请方法制得的组合物的包封率不低于80％、83％、85％、87％、89％、90％、92％、93％、94％或95％。在一些实施方式中，纳米粒的药物包封率可达到80％至95％。

本申请的另一方面提供了本申请的药物组合物在制备用于治疗疾病的药物中的用途。在一些实施方式中，所述疾病是癌症。

附图说明：

图1实施例1制备的载紫杉醇纳米粒的粒径分布图和TEM图。

图2实施例1制备的载紫杉醇纳米粒冻干粉及复溶后溶液的外观。

图3制剂I(实施例1制备的载紫杉醇纳米粒)、制剂II(实施例4制备的载紫杉醇纳米粒)和市售紫杉醇注射液的体外释放曲线。

图4制剂I(实施例1制备的载紫杉醇纳米粒)、制剂II(实施例4制备的载紫杉醇纳米粒)和市售紫杉醇注射液的大鼠血浆药物浓度随时间变化的曲线图。

图5制剂I(实施例1制备的载紫杉醇纳米粒)、制剂II(实施例4制备的载紫杉醇纳米粒)和市售紫杉醇注射液的体内组织分布。

图6制剂I(实施例1制备的载紫杉醇纳米粒)、制剂II(实施例4制备的载紫杉醇纳米粒)和市售紫杉醇注射液的肝癌BEL-7402裸鼠异种移植瘤的生长抑制作用图和体重变化图。

具体实施方式：

下面用实施例来进一步说明本发明，但本发明并不受其限制。

除另有明确表示，本实施例使用的PEG-PLA共聚物获得自Advanced polymermaterials inc.(一家加拿大高分子公司)，其分子量为21000。本实施例使用的PEG-PLGA共聚物获得自Advanced polymer materials inc.(一家加拿大高分子公司)，其LG和LA的比例为75/25，分子量为20000。本申请使用的激光动态散射仪为Zetasizer Nano ZS，Malvern(一家英国公司)。

实施例1：

将40mg PEG-PLA和2mg紫杉醇在超声条件下共同溶解于5ml丙酮溶剂中。将3mg胆酸钠溶解于10ml双蒸水中。将胆酸钠水溶液以1ml/min的速度滴入到丙酮溶液中，在300r/min低速搅拌下反应10min，随后转移到旋转蒸发仪，在真空-0.1MPa下旋转蒸发30min以去除丙酮，得到稳定的载紫杉醇纳米粒。使用激光动态散射仪测试，平均粒径为粒径分布结果如图1所示。纳米粒的包封率为91.2±3.5％，分散系数为0.198。

实施例2：

将20mg PEG-PLA和1mg多西紫杉醇在超声条件下共同溶于5ml丙酮溶剂中。将2mg胆酸钠溶解于10ml双蒸水中。将胆酸钠水溶液以1ml/min的速度滴入到丙酮溶液中，在300r/min低速搅拌下反应10min，随后转移到旋转蒸发仪，在真空-0.1MPa下旋转蒸发30min以去除丙酮，得到稳定的载多西紫杉醇纳米粒。使用激光动态散射仪测试，平均粒径为89.09±8.9nm，纳米粒的包封率为87.4±4.1％，分散系数为0.211。

实施例3：

将40mg PEG-PLGA和2mg卡巴他赛在超声条件下共同溶于5ml丙酮溶剂中。将1mg胆酸钠溶解于10ml双蒸水中。将胆酸钠水溶液以1ml/min的速度滴入到丙酮溶液中，在300r/min低速搅拌下反应10min，随后转移到旋转蒸发仪，在真空-0.1MPa下旋转蒸发30min以去除丙酮，得到稳定的载卡巴他赛纳米粒。使用激光动态散射仪测试，平均粒径为78.95±3.3nm，纳米粒的包封率为93.4±2.3％，分散系数为0.153。

实施例4：

将40mg PEG-PLA和2mg紫杉醇在超声条件下共同溶于5ml丙酮溶剂中。将10ml双蒸水以1ml/min的速度滴入到丙酮溶液中，在300r/min低速搅拌下反应10min，随后转移到旋转蒸发仪，在真空-0.1MPa下旋转蒸发30min以去除丙酮，得到稳定的载紫杉醇纳米粒。使用激光动态散射仪测试，平均粒径为纳米粒的包封率为81.2±3.8％，分散系 数为0.178。

实施例5：纳米粒包封率的测定

采用液相高效色谱检测紫杉醇的含量。使用的条件如下：色谱柱：Hypersil ODS2(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈：水(50、50，v/v)；检测波长：227nm；流速：1.0m1/min；进样量：20μL。分别取浓度为0.25～50μg/ml的紫杉醇标准品溶液，按照色谱条件进行测试，以峰面积对紫杉醇浓度进行曲线拟合，建立回归方程。

将得到的纳米粒混悬液先在4000r/min低速离心10min去掉没有包进去的药物结晶，再在10000r/min高速离心30min，将上清液吸掉，然后用高纯水复溶再加入同等体积的乙腈破乳，将破乳得到的溶液按照色谱条件测定紫杉醇的含量。同时取未经任何处理的纳米粒混悬液加同样体积的乙腈破乳，按照HPLC条件测紫杉醇的含量：

包封率(％)＝纳米粒包封的药物的量/投入药物总的量×100％

所得纳米粒的平均包封率为80～95％。

实施例6：纳米粒的冻干

将纳米粒混悬液离心处理过后，加入10％体积分数的蔗糖，在-40℃下预冻10小时，然后在-60℃冷阱条件下冷冻干燥48小时，即得到长循环纳米粒冻干粉末。冻干粉末复溶后粒径基本没有发生变化，没有聚集现象出现。

实施例7：体外稳定性实验

根据实施例1的方法制备紫杉醇纳米粒，只是将胆酸盐分别替换为聚乙二醇15羟硬脂酸酯(HS15)和聚乙烯醇(PVA)。分别将实施例1制备的紫杉醇纳米粒、使用HS15制备的纳米粒和使用PVA制备的纳米粒放置于室温。使用PVA制备的纳米粒在放置1小时后有紫杉醇结晶析出；使用HS15制备的纳米粒在放置2小时后有紫杉醇结晶析出；实施例1制备的紫杉醇纳米粒在室温放置3小时时未发现明显的紫杉醇结晶析出。

实施例8：体外释放实验

将1mL实施例1和4制备的紫杉醇纳米粒(1mg/mL)和0.167mL市售紫杉醇注射液(6mg/mL)用蒸馏水稀释至10mL，取1mL作为零点，剩余9mL置于透析袋中，扎紧透析袋。将透析袋放入50mL PBS缓冲液(pH＝7.4，含0.2％吐温-80)，在37℃，100r/min的摇床中振荡透析，于不同时间点取透析袋外PBS液1.0mL并同时补充空白释放介质1.0mL。将各取样点样品中加入1.0mL乙腈，混合均匀后，进样分析，测定各取样点中的紫杉醇含量，计算累积释放百分率，制作了释放曲线(参见附图3)。结果显示，本发明实施例1所制备的紫杉醇纳米粒在体外模 拟的生理条件下，紫杉醇的释放速度比市售紫杉醇注射液和实施例4所制备的紫杉醇纳米粒慢很多，这表明胆酸盐的引入使得纳米粒具有更优异的缓释性质。

实施例9：药代动力学试验

A、实验动物：

雄性SD大鼠，体重250±20g，随机分为3组，每组均为6只，备用。

B、实验制剂：

制剂I：按照实施例1制备的纳米颗粒；

制剂II：按照实施例4制备的纳米颗粒；

Taxol：作为参比的市售紫杉醇注射液Taxol，浓度为6mg/mL；

C、给药与样本采集：

制剂I、II和Taxol分别于临用前溶解稀释至合适浓度，以8mg/kg的剂量(均以紫杉醇计)经尾静脉注射给予各组大鼠。分别于给药后不同时刻经大鼠眼眶静脉丛采集血样于肝素抗凝离心试管中，离心分离血浆，置-80℃超低温冰箱冻存，待测。

D、血浆处理与测定：

血浆样品以乙腈萃取后进行HPLC分析，测定其中紫杉醇药物浓度。

E、实验结果：

绘制两种制剂的血浆紫杉醇药物浓度经时变化曲线(参见附图4)，并计算了主要的血浆药动学参数。结果显示，制剂I和Taxol以及制剂II在相同剂量下经静脉途径给予大鼠，制剂I有显著高的血浆药物浓度和AUC，紫杉醇在体内清除率显著降低，消除半衰期延长。结果反映了与Taxol和制剂II相比，制剂I具有优异的体内释药特性。

实施例10：体内组织分布

将15只荷瘤鼠随机均匀分为三组(制剂I组、制剂II组和Taxol组)，每组5只，尾静脉给药(10mg/kg)2小时后处死裸鼠，同时剥取瘤组织，并取出心、肝、脾、肺、肾和瘤等主要组织。准确称量组织，分别加入3倍量生理盐水匀浆后配制成脏器液待用。量取500μL置于2mL圆底离心管中，加入乙腈萃取后，使用HPLC进行分析，检测条件同实施例5。受试制剂在荷瘤裸鼠各个组织中的分布如附图5所示，可以看出制剂I在肿瘤组织中的分布比Taxol和制剂II多很多，表明制剂I具有更好的肿瘤靶向性。

实施例11：药效学试验

在雄性BALB/c裸小鼠腹侧皮下接种5×10⁷个BEL-7402细胞。约两周以后，荷瘤鼠肿瘤平均体积达100mm³以上时，将35只荷瘤小鼠按肿瘤体积随机分层分组，分别为：PBS组、制剂I(10mg/kg，根据实施例1制备)、制剂I(30mg/kg，根据实施例1制备)、制剂II(10mg/kg，根据实施例4制备)和Taxol(10mg/kg)。通过静脉给药，每隔3天给一次药，共计3次。实验期间，隔天测定动物肿瘤体积(体积＝ab²/2，a、b分别为肿瘤的长和宽)和裸鼠体重。结果如图6所示，同等剂量的制剂I的肿瘤抑制率优于Taxol和制剂II，当制剂I的给药量增加至30mg/kg时，肿瘤抑瘤率非常显著，肿瘤有的甚至消失。

Claims (18)

1.一种药物组合物，其中所述药物组合物包括活性物质、聚合物和表面活性剂，所述表面活性剂为胆酸钠，并且所述药物组合物是纳米颗粒，其中所述表面活性剂与所述聚合物的重量比为1∶5至1∶50，所述活性物质是紫杉醇、多西紫杉醇、卡巴他赛或羟基喜树碱，所述聚合物是PEG-PLA，所述聚合物与所述活性物质的重量比为10∶1至25∶1。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述表面活性剂与所述聚合物的重量比为1∶5至1∶25。

3.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述表面活性剂与所述聚合物的重量比为1∶5至1∶15。

4.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述表面活性剂不包括脂类表面活性剂。

5.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述药物组合物不包括磷脂。

6.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述聚合物与活性物质的重量比为5∶1至40∶1。

7.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述表面活性剂与活性物质的重量比为0.1∶1至4∶1。

8.根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述药物组合物的平均粒径为50-200nm。

9.一种制备权利要求1-8中任一项所述的药物组合物的方法，其中所述方法包括如下步骤：

(i)将聚合物与活性物质溶解在有机溶剂中；

(ii)将表面活性剂溶解在水溶液中；

(iii)在剪切力的作用下将步骤(ii)获得的水溶液同步骤(i)获得的有机溶液相混合；

(iv)除去有机溶剂。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述有机溶剂选自丙酮、二氯甲烷、乙腈或其组合。

11.根据权利要求9所述的方法，其中步骤(iii)中所述的剪切力是搅拌。

12.根据权利要求9所述的方法，其中所述步骤(iii)还包括将步骤(ii)获得的水溶液滴加到步骤(i)获得的有机溶液中。

13.根据权利要求9所述的制备方法，其中所述有机溶溶液与所述水溶液的比例为1∶10～20∶1。

14.根据权利要求9所述的制备方法，其中所述表面活性剂在水溶液中的浓度为0.05～1mg/mL。

15.根据权利要求9所述的制备方法，其中所述活性物质在所述有机溶剂中的浓度为0.1～1mg/mL。

16.根据权利要求9所述的制备方法，其中所述聚合物在所述有机溶剂中的浓度为2～10mg/mL。

17.权利要求1-8中任一项所述的药物组合物在制备用于治疗疾病的药物中的用途。

18.根据权利要求17所述的用途，其中所述疾病是癌症。