EA003509B1 - Сульфонамидные производные в качестве пролекарств, ингибиторов аспартилпротеаз - Google Patents

Abstract

Настоящее изобретение относится к пролекарствам класса сульфонамидов, которые представляют собой ингибиторы аспартилпротеаз. В одном из воплощений данное изобретение относится к новому классу пролекарств, являющихся ингибиторами аспартилпротеаз ВИЧ, характеризующихся хорошей водорастворимостью, высокой биологической доступностью при пероральном применении и легким воспроизведением in vivo активного компонента. Данное изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим данные пролекарства. Пролекарство и фармацевтические препараты по данному изобретению являются наиболее подходящими для снижения лекарственной нагрузки и большего удобства пациентов. Данное изобретение также относится к способам лечения млекопитающих данными пролекарствами и фармацевтическими композициями .

Description

Область техники

Настоящее изобретение относится к пролекарствам класса сульфонамидов, которые представляют собой ингибиторы аспартилпротеаз. В одном из воплощений данное изобретение относится к новому классу пролекарств, являющихся ингибиторами аспартилпротеаз ВИЧ, характеризующихся хорошей водорастворимостью, высокой биологической доступностью при пероральном применении и легким воспроизведением ίη νίνο активного компонента. Данное изобретение также относится к фармацевтическим композициям, содержащим данные пролекарства. Пролекарство и фармацевтические препараты по данному изобретению, являются особенно хорошо подходящими для снижения лекарственной нагрузки и большего удобства пациентов. Данное изобретение также относится к способам лечения млекопитающих данными пролекарствами и фармацевтическими композициями.

Предпосылки изобретения

Ингибиторы аспартилпротеаз рассматривают как наиболее эффективное существующее лекарство против ВИЧ-инфекции. Однако данные ингибиторы должны обладать определенными физико-химическими свойствами для достижения хорошей эффективности против фермента. Одним из данных свойств является высокая гидрофобность. К сожалению, данное свойство выражается в плохой водорастворимости и низкой биологической доступности при пероральном применении.

В патенте США 5585397 описан класс сульфонамидных соединений, представляющих собой ингибиторы аспартилпротеаз. Данные соединения иллюстрируют недостатки, присущие фармацевтическим композициям, содержащим гидрофобные ингибиторы аспартилпротеаз.

Например, УХ-478 (4-амино-Ы-((2-син,38)2-гидрокси-4-фенил-3((8)-тетрагидрофуран-3ил-оксикарбониламино)-бутил-Ы-изобутилбензолсульфонамид) является ингибитором аспартилпротеаз, описанным в патенте 5585397. Он обладает относительно низкой водорастворимостью. Хотя биологическая доступность при пероральном применении данного ингибитора в виде растворов является превосходной, дозировка УХ-478 в данном виде является строго ограниченной количеством присутствующей жидкости в отдельной жидкой дозированной форме, например, инкапсулированной в мягкую желатиновую капсулу. Более высокая водорастворимость позволит увеличить количество лекарства в разовой дозированной форме УХ-478.

В настоящее время препараты в виде растворов УХ-478 обеспечивает верхний предел дозировки 150 мг УХ-478 в каждой капсуле. При необходимой терапевтической дозе в 2400 мг/сутки УХ-478, использование данной формы вынудит пациента принимать 16 капсул в сутки.

Подобная высокая лекарственная нагрузка будет, вероятно, приводить к неудобству для пациента, таким образом приводя к субоптимальной терапевтической пользе лекарства. Высокая лекарственная нагрузка также сдерживает увеличение количества лекарства, принимаемого в сутки пациентом. Другой недостаток лекарственной нагрузки и сопутствующей проблемы участия пациента проявляется при лечении детей, инфицированных ВИЧ.

Более того, данные препараты в виде растворов, такие как мезилатный препарат, содержат насыщенный раствор УХ-478. Это создает реальную возможность кристаллизации лекарственного вещества из раствора при различных условиях хранения и/или транспортировки. Это, в свою очередь, вероятно, будет приводить к некоторому уменьшению биологической доступности при пероральном применении, достигаемой при применении УХ-478.

Одним путем решения данных проблем является создание стандартной твердой дозированной формы, такой как таблетка или капсула, или суспензионной формы. К сожалению, подобные твердые дозированные формы обладают гораздо более низкой биологической доступностью при пероральном применении лекарства.

Таким образом, существует необходимость в усовершенствовании лекарственной нагрузки на единицу дозированной формы для ингибиторов аспартилпротеаз. Подобная усовершенствованная дозированная форма будет снижать лекарственную нагрузку и увеличивать участие пациента в лечении. Также будет обеспечиваться возможность увеличения количества лекарства, принимаемого пациентом в сутки.

Сущность изобретения

Настоящее изобретение относится к новым пролекарствам, класса сульфонамидных соединений, которые являются ингибиторами аспартилпротеаз, в частности, аспартилпротеаз ВИЧ. Данные пролекарства характеризуются превосходной водорастворимостью, повышенной биологической доступностью и легко метаболизируются в активные ингибиторы ίη νίνο. Настоящее изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим данные пролекарства, и способам лечения ВИЧ-инфекции млекопитающих с помощью данных пролекарств и фармацевтических композиций на их основе.

Данные пролекарства могут применяться отдельно или в сочетании с другими терапевтическими или профилактическими средствами, такими как противовирусные средства, антибиотики, иммуномодуляторы или вакцины, для лечения или профилактики вирусной инфекции.

Основным объектом настоящего изобретения являются новые пролекарства класса сульфонамидных соединений, которые являются ингибиторами аспартилпротеаз, в частности, ингибиторами аспартилпротеаз ВИЧ. Данный новый класс сульфонамидов представлен формулой

где В⁷ выбран из -РО3^2-Ыа2⁺, -РО3^2-К2⁺. -РО₃ ^2-М§²⁺,

-РОЛСа²*,

н

Объектом данного изобретения также являются фармацевтические композиции, содержащие сульфонамидные производные, указанные выше, и способы их применения в качестве ингибиторов аспартилпротеаз ВИЧ.

Подобное описание изобретения

Для того чтобы описываемое здесь изобретение было более понятно, представлено следующее подробное описание. В описании используют следующие сокращения:

Обозначения Реагент или фрагмент

Ас ацетил

Ме метил

Εΐ этил

Βζΐ бензил

Тритил трифенилметил

Азп Б- или Ь-аспарагин

11е Б- или Ь-изолейцин

РЬе Б- или Ь-фенилаланин

Уа1 Б- или Ь-валин

Вос трет-бутоксикарбонил

ΟΕζ бензилоксикарбонил(карбобензилокси)

Гшос 9-флуоренилметоксикарбонил

ДЦК дициклогексилкарбодиимид

ДИК диизопропилкарбодиимид

ЕБС 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид

ΗΟΒΐ 1-гидроксибензотриазол

НО8и 1-гидроксисукцинимид

ТФК трифторуксусная кислота

ДИЭА диизопропилэтиламин

ДБУ 1,8-диазобицикло (5.4.0)-ундец-7-ен

ЕЮАс этилацетат

Здесь используются следующие термины.

Если не указано иного, термины -8О₂- и -8(О)₂-, используемые здесь, относятся к сульфону или производному сульфона (т.е. обе группы присоединены к 8), а не к сложному сульфинатному эфиру.

Для соединений указанной формулы и промежуточных соединений стереохимию группы ОВ⁷ определяют относительно бензильной группы на соседнем атоме углерода, когда молекулу изображают в виде вытянутого зигзага. Если оба они, и ОВ⁷, и бензильная группа, располагаются по одну сторону от плоскости, определяемой вытянутым скелетом соединения, то стереохимия ОВ⁷, несущего атом углерода, будет относиться к син. Если ОВ⁷ и бензильная группа располагаются по разные стороны плоскости, стереохимия ОВ⁷, несущего атом углерода, будет относиться к анти.

Термины протеаза ВИЧ и аспартилпротеаза ВИЧ являются взаимозаменяемыми и относится к аспартилпротеазе, кодируемой вирусом иммунодефицита человека типа 1 или 2. В предпочтительном воплощении данного изобретения данные термины относятся к аспартилпротеазе вируса иммунодефицита человека типа 1.

Термин фармацевтически эффективное количество относится к количеству, эффективному при лечении ВИЧ-инфекции у пациента.

Термин профилактически эффективное количество относятся к количеству, эффективному для предупреждения ВИЧ-инфекции у пациента. Используемый здесь термин пациент относится к млекопитающему, включая человека.

Термин фармацевтически приемлемый носитель или адъювант относится к нетоксичному носителю или адъюванту, который может быть введен пациенту вместе с соединением по данному изобретению и который не нарушает фармакологической активности данного соединения.

Фармацевтически приемлемые соли соединений по данному изобретению включают соли, полученные из фармацевтически приемлемых неорганических и органических кислот и оснований. Примерами подходящих кислот являются хлористо-водородная, бромистоводородная, серная, азотная, надхлорная, фумаровая, малеиновая, фосфорная, гликолевая, молочная, салициловая, янтарная, п-толуолсульфоновая, винная, уксусная, лимонная, метансульфоновая, муравьиная, бензойная, малоновая, 2-нафталинсульфоновая и бензолсульфоновая кислоты. Другие кислоты, такие как щавелевая, хотя и не являются сами фармацевтически приемлемыми, могут применяться для образования солей, используемых в качестве промежуточных соединений для получения соединений изобретения и их фармацевтически приемлемых кислотно-аддитивных солей.

Соли, полученные из подходящих оснований, включают соли щелочных металлов (например, натрия), щелочно-земельных металлов (например, магния), аммония и Ы-(С_1-4алкил)⁴⁺ соли.

Термин тиокарбаматы относится к соединениям, содержащим функциональную группу Ы-8О₂-О.

Соединения по данному изобретению содержат один или несколько асимметричных атомов углерода, и, таким образом, существуют в виде рацематов и рацемических смесей, отдельных энантиомеров, смесей диастереомеров и отдельных диастереомеров. Все подобные изомерные формы данных соединений несо5 мненно включены в настоящее изобретение. Каждый стереогенный атом углерода может иметь К- или 8-конфигурацию. Точно указанный гидроксил также предпочтительно находится в форме син относительно Ό, в вытянутой зигзагообразной конформации между атомами азота, показанными в соединениях формулы I.

Комбинациями заместителей и переменных, представленными в данном изобретении, являются только такие, которые приводят к образованию устойчивых соединений. Термин устойчивый, используемый здесь, относится к соединениям, которые обладают необходимой стабильностью, позволяющей изготавливать и вводить их млекопитающему методами, известными специалистам в данной области. Обычно подобные соединения устойчивы при температуре 40°С или ниже, при отсутствии влажности или других химически реакционноактивных условиях, по крайней мере, в течение недели.

Соединения по настоящему изобретению могут использоваться в виде солей, полученных из неорганических или органических кислот. Подобные соли кислот включают, например, следующие: ацетат, адипат, альгинат, аспартат, бензоат, бензилсульфонат, бисульфат, бутират, цитрат, камфорат, камфорсульфонат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, фумарат, глюкогептаноат, глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, 2гидроксиэтансульфонат, лактат, малеат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, оксалат, памоат, пектинат, персульфат, 3фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, тартрат, тиоцианат, тозилат и ундеканоат.

Данное изобретение также предусматривает кватернизацию любых основных азотсодержащих групп соединений, описываемых здесь. Основный азот может быть кватернизован с помощью любых агентов, известных специалистам в данной области, включая, например, низшие алкилгалогениды, такие как метил-, этил-, пропил- и бутилхлориды, бромиды и йодиды; диалкилсульфаты, включающие диметил-, диэтил-, дибутил- и диамилсульфаты; длинноцепочечные галогениды, такие как децил-, лаурил-, миристил- и стеарилхлориды, бромиды и йодиды; и аралкилгалогениды, включающие бензил- и фенэтилбромиды. Водо- или маслорастворимые или диспергируемые продукты могут быть получены в результате подобной кватернизации.

Новые сульфонамиды по данному изобретению представлены формулой I

где К⁷ выбран из -РО3^2-Ыа2⁺, -РО3^2-К2⁺,

-РО₃ ^2-Мд²⁺,

-РО₃ ²'Са²*,

О о?ч н

Предпочтительными являются соединения, где К⁷ выбран из -РОз^2-Ыа2⁺, -РОз^2-К2⁺ или -РОз^2-Са²⁺.

Более предпочтительными являются соединения, где К⁷ представляет собой -РО₃ ^2-Са²⁺.

Пролекарства по настоящему изобретению могут быть синтезированы с помощью традиционных синтетических методик.

В патенте США 5585397 описан синтез соединений формулы

I в

Α—(Β_)χ-Ν—С—2—С—Ν—ЗО-Е «Э)_х ОН (У где А, В, х, Ό, Ό' и Е имеют значения, указанные выше. Пролекарства формулы (I) по настоящему изобретению могут быть легко синтезированы из соединений 5585397 с помощью традиционных методик. Специалисту в данной области хорошо известны обычные реагенты синтеза для преобразования -ОН группы соединений 5585397 в желаемую -ОК⁷ по настоящему изобретению, где К⁷ имеет значение, указанное выше. Относительная легкость, с которой соединения по данному изобретению могут быть синтезированы, представляет огромное преимущество для широкомасштабного производства данных соединений.

Например, УХ-478, соединение, описанное в патенте США 5585397, может быть легко преобразованно в соответствующее бис-фосфатное производное сложного эфира, как показано ни же

Альтернативно, если требуется сложный монофосфатный эфир УХ-478, то схема синтеза может быть легко адаптирована с помощью замены исходного соединения 4-нитрофенильным производным УХ-478, как показано ниже

Нд, Рб/С

ЕЮАс.

фунтовЛсв. дюйм

гексаыетилдисилазан бис(триметнл)пероксмд 120°С, 2 ч

Примеры конкретных соединений, помимо

УХ-478, которые могут быть преобразованы в пролекарства по данному изобретению с помоΊ щью подобных методов (и синтезы таких промежуточных соединений в соединения по настоящему изобретению) описаны в XV О 94/05639 и νθ 96/33184, включенных сюда в качестве ссылки.

Фармацевтически приемлемые соли соединений по настоящему изобретению легко могут быть получены с помощью известных способов. Например, динатриевая соль монофосфатного эфира, изображенная выше, может быть получена, как показано ниже

о)Лиофплнзация

Соединения по данному изобретению могут быть модифицированы с помощью присоединения подходящих функциональных групп для усиления отдельных биологических свойств. Подобные модификации известны в данной области и включают такие, которые увеличивают биологическое проникновение в данные биологические системы (например, кровь, лимфатическую систему, центральную нервную систему), увеличивают биологическую доступность при пероральном применении, увеличивают растворимость, позволяющую производить инъекционное введение, изменяют метаболизм и изменяют скорость выведения.

Не ограничиваясь конкретной теорией, авторы предположили, что два различных механизма вовлечены в преобразование пролекарств по данному изобретению в активное лекарство в зависимости от структуры пролекарства. Первый механизм включает ферментативное или химическое преобразование пролекарственных частиц в активную форму. Второй механизм включает ферментативное или химическое расщепление функциональной группы пролекарства с получением активного соединения.

Химическое или ферментативное преобразование можно провести в виде переноса функциональной группы (т.е. К⁷) с одного гетероатома на другой гетероатом в пределах молекулы. Данный перенос продемонстрирован в химических реакциях, показанных ниже

Механизм расщепления продемонстрирован реакцией, приведенной ниже, в которой пролекарство с фосфоэфирной группой преобразуется в активную форму лекарства с помощью удаления фосфатной группы.

Данные ингибиторы протеаз и их применение в качестве ингибиторов аспартилпротеаз описаны в патенте США 5585397, включенном сюда в качестве ссылки.

Пролекарства по настоящему изобретению характеризуются неожиданно высокой водной растворимостью. Такая растворимость способствует введению более высоких доз пролекарства, что приводит к большему содержанию лекарства на разовую дозу. Пролекарства по настоящему изобретению также характеризуются легким гидролитическим расщеплением с высвобождением активного ингибитора аспартилпротеазы ίη νίνο. Высокая водорастворимость и незатруденный метаболизм ίη νίνο приводят к большей биологической доступности лекарства. В результате лекарственная нагрузка на пациента существенно уменьшается.

Пролекарства по данному изобретению могут применяться обычным образом для лечения вирусных инфекций, таких как ВИЧ или вирус человеческого Т-клеточного лейкоза, которые содержат аспартилпротеазы, необходимые для обязательных стадий в ходе их жизненного цикла. Подобные способы лечения, уровни дозировок и требования могут подбираться специалистами в данной области, исходя из доступных способов и технологий. Например, пролекарство по данному изобретению может быть объединено с фармацевтически приемлемым адъювантом для введения инфицированному вирусом пациенту фармацевтически приемлемым способом и в количестве, эффективном для снижения тяжести вирусной инфекции.

Альтернативно, пролекарства по данному изобретению могут применяться в виде вакцин и способов защиты человека от вирусной инфекции в течение длительного периода времени. Пролекарства могут применяться в подобных вакцинах как отдельно, так и с другими соединениями по данному изобретению согласно обычному способу применения вакцин с ингибиторами протеаз. Например, пролекарство по данному изобретению можно сочетать с фармацевтически приемлемым адъювантом, обычно применяемым в вакцинах, и вводить в профилактичеки эффективных дозах для защиты человека в течение длительного периода времени от ВИЧ-инфекции. Также новые ингибиторы протеаз по данному изобретению могут вводиться в качестве препаратов для лечения или профилактики ВИЧ-инфекции у млекопитающих.

Пролекарства по данному изобретению могут вводиться здоровым или ВИЧинфицированным пациентам как в виде отдельного препарата, так и в сочетании с другими противовирусными препаратами, которые препятствуют репликации ВИЧ. При введении соединений данного изобретения с другими противовирусными препаратами, имеющими мишенью различные стадии в жизненном цикле вируса, потенциируется терапевтический эффект данных соединений. Например, совместно вводимыми противовирусными препаратами могут служить препараты, влияющие на ранние стадии жизненного цикла вируса, такие как внедрение в клетку, обратная транскрипция и встраивание вирусной ДНК в ДНК клетки. Противовирусные препараты, влияющие на ранние стадии жизненного цикла, включают диданозин (66Ι), альцитабин (66С), 64Т, зидовудин (ΑΖΤ), полисульфатированные полисахариды, кТ4 (растворимый СИ4), ганикловир, дидезоксицитидин, тринатриевый фосфоноформиат, эфлорнитин, рибавирин, ацикловир, альфаинтерферон и трименотрексат. Кроме того, могут применяться ненуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы, такие как ΤΙΒΟ или невирапин, для потенциирования эффекта соединений по данному изобретению, а также ингибиторы декапсидации вируса, ингибиторы транс-активирующих белков, таких как 1а1 или теу или ингибиторы вирусной интегразы.

Совместная терапия согласно данному изобретению оказывает синергический эффект на ингибирование репликации ВИЧ, поскольку каждый входящий препарат воздействует на различные точки репликации ВИЧ. Применение подобных комбинаций также благоприятно уменьшает дозу принимаемого обычного противовирусного препарата, требующуюся для достижения желаемого терапевтического или профилактического эффекта, при сравнении с введением данного препарата в виде монотерапии. Данные комбинации могут уменьшать или устранять побочные эффекты лечения одним обычным противовирусным препаратом, не влияя при этом на противовирусную активность данных препаратов. Данные комбинации уменьшают возможность устойчивости к терапии отдельным препаратом, при этом минимизируя любую сопутствующую токсичность. Данные комбинации также могут увеличивать эффективность обычного препарата без увеличения сопутствующей токсичности. В частности, авторами открыто, что данные пролекарства действуют синергично на предотвращение репликации ВИЧ в Т-клетках человека. Предпочтительные схемы совместной терапии включают введение пролекарства по данному изобретению с ΑΖΤ, 661, 66С или 64Т.

Альтернативно, пролекарства по данному изобретению также могут вводиться вместе с друими ингибиторами ВИЧ протеаз, такими как Во 31-8959 (Воске), Ь-735,524 (Мегск), ХМ 323 (Ии-Роп1 Мегск) и Α-80,987 (АЬЬок) для увеличения эффекта лечения или профилактики про тив различных мутантов вируса или вирусов других сходных с ВИЧ видов.

Авторы считают предпочтительным введение пролекарств по данному изобретению в виде отдельных препаратов или в сочетании с ингибиторами ретровирусной обратной транскриптазы, такими как производные ΑΖΤ или другими ингибиторами аспартилпротеазы ВИЧ. Авторы полагают, что совместное введение соединений по данному изобретению с ингибиторами ретровирусной обратной транскриптазы или ингибиторами аспартилпротеазы ВИЧ может оказывать существенный синергитический эффект, таким образом предотвращая, существенно уменьшая или полностью устраняя вирусную инфекцию и связанные с ней симптомы.

Пролекарства по данному изобретению также можно вводить в сочетании с иммуномодуляторами (например, бромпиримином, антителами против альфа-интерферона человека, 1Ь2, СМ-С8Р, метионинэнкефалином, альфаинтерфероном, диэтилдитиокарбаматом, фактором некроза опухоли, налтрексоном и гЕРО); и антибиотиками (например, пентамидинизетиоратом) для предотвращения или борьбы с инфекцией и болезнями, связанными с ВИЧинфекцией, такими как СПИД и АВС.

Если пролекарства по данному изобретению вводятся в сочетании с другими препаратами, то введение пациенту можно проводить последовательно или одновременно. Альтернативно, фармацевтические или профилактические комбинации согласно данному изобретению могут включать сочетание пролекарства по данному изобретению и другого терапевтического или профилактического препарата.

Хотя данное изобретение сконцентрировано на применении описываемых здесь пролекарств для предупреждения и лечения ВИЧинфекции, соединения по данному изобретению также могут применяться в качестве ингибиторов, действующих на другие вирусы, находящиеся в зависимости от участия подобных аспартилпротеаз в обязательных стадиях их жизненного цикла. Данные вирусы включают, не ограничиваясь, также как и СПИД-подобные заболевания, вызванные ретровирусами, такими как вирусы иммунодефицита обезьян, вирусы человеческого Т-клеточного лейкоза Ι и ΙΙ. Кроме того, соединения по данному изобретению можно применять для ингибирования других аспартилпротеаз и, в частности, других аспартилпротеаз человека, включая ренин- и аспартилпротеазы, которые процессируют предшественники эндотелина.

Фармацевтические композиции по данному изобретению включают в себя любые соединения по настоящему изобретению и их фармацевтически приемлемые соли с любым фармацевтически приемлемым носителем, адъювантом или растворителем. Фармацевтически приемлемые носители, адъюванты и разбавители, которые могут применяться в фармацевтических препаратах по данному изобретению, включают, не ограничиваясь этим, ионообменники, оксид алюминия, стеарат алюминия, лецитин, сывороточные белки, такие как человеческий сывороточный альбумин, буферные вещества, такие как фосфаты, глицин, сорбиновую кислоту, сорбат калия, частичные глицеридные смеси насыщенных растительных жирных кислот, воду, соли или электролиты, такие как сульфат протамина, динатрийгидрофосфат, гидрофосфат калия, хлорид натрия, соли цинка, коллоидный кремнезем, трисиликат магния, поливинилпирролидон, вещества на основе целлюлозы, полиэтиленгликоль, натрийкарбоксиметилцеллюлозу, полиакрилаты, воски, (полиэтиленполиоксипропилен)блокполимеры, полиэтиленгликоль и ланолин.

Фармацевтические композиции по данному изобретению могут быть введены перорально, парентерально, в виде ингаляционного спрея, местно, ректально, назально, буккально, вагинально или посредством имплантированного депо. Авторы считают предпочтительным пероральное введение или инъекционное введение. Фармацевтические композиции по данному изобретению могут содержать любые обычные нетоксичные фармацевтически приемлемые основы, адъюванты или разбавители. Термин парентеральный, применяемый здесь, включает подкожный, внутрикожный, внутривенный, внутримышечный, внутрисуставный, внутрисиновиальный, внутристернальный, внутриоболочечный, внутриочаговый и внутричерепной инъекционные пути введения или инфузионные способы.

Фармацевтические композиции могут существовать в виде стерильного инъекционного раствора, например, в виде стерильной инъекционной водной или масляно-водной суспензии. Данная суспензия может быть приготовлена согласно известным в данной области способам, применяя подходящие диспергирующие или смачивающие агенты (такие как, например, Тчееи 80) и суспендирующие агенты. Стерильный инъекционный препарат также может существовать в виде стерильного инъекционного раствора или суспензии в нетоксичном, приемлемом для парентерального введения разбавителе или растворителе, например, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. Приемлемые разбавители и растворители, которые могут быть использованы, включают маннит, воду, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия. Кроме того, обычно в качестве растворителя или суспендирующей среды применяют стерильные нелетучие масла. Для этой цели может быть использовано любое мягкое нелетучее масло, включая моно- и диглицериды. Жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и ее глицериновые производные являются пригодными для приготовления инъекционных форм, как натуральные фармацевтически приемлемые масла, такие как оливковое масло или касторовое масло, особенно в их полиоксиэтилированных формах. Данные масляные растворы или суспензии также могут содержать длинноцепочечные спиртовые разбавители или диспергирующие агенты, такие как РН. Ней. или сходный спирт.

Фармацевтические композиции по данному изобретению могут вводиться перорально в виде любой перорально приемлемой дозированной формы, включая, но не ограничиваясь этим, капсулы, таблетки и водные суспензии и растворы. В случае таблеток для перорального применения обычно используемыми основами являются лактоза и кукурузный крахмал. Также обычно добавляют смазывающие агенты, такие как стеарат магния. Для перорального введения в виде капсул применяют наполнители, включающие лактозу и сухой кукурузный крахмал. При пероральном введении водных суспензий активное вещество смешивают с эмульгирующими и суспендирующими агентами. Если требуется, то могут быть добавлены определенные подсластители и/или ароматизаторы и/или красители.

Фармацевтические композиции по данному изобретению также можно вводить в виде ректальных суппозиториев. Данные препараты можно приготовить смешиванием соединения по данному изобретению с подходящей не вызывающей раздражения лекарственной основой, которая является твердой при комнатной температуре, но жидкой при ректальной температуре, и поэтому будет расплавляться в прямой кишке с высвобождением активных компонентов. Подобные вещества включают, не ограничиваясь, масло какао, пчелиный воск и полиэтиленгликоли.

Местное применение фармацевтических композиций по данному изобретению особенно приемлемо, когда желаемая обработка включает поверхности или органы, легко поддающиеся местной обработке. Для местного применения на коже фармацевтическая композиция может быть изготовлена в виде подходящей мази, содержащей активное вещество, суспендированное или растворенное в основе. Основами для местного применения соединений по данному изобретению могут служить, не ограничиваясь, минеральное масло, вазелиновое масло, медицинский вазелин, пропиленгликоль, полиоксиэтиленовое полиоксипропиленовое соединение, эмульгирующий воск и вода. Альтернативно, фармацевтическая композиция может быть изготовлена в виде лосьона или крема, содержащего активное вещество, суспендированное или растворенное в основе. Подходящими основами могут быть, не ограничиваясь, минеральное масло, сорбитмоностеарат, полисорбат 60, цетиловый эфирный воск, цетеариловый спирт, 2октилдодеканол, бензиловый спирт и вода.

Фармацевтические композиции по данному изобретению можно также местно применять в нижних отделах кишечного тракта в виде ректальных суппозиториев или в форме клизмы. В данном изобретении также рассматривается чрескожное введение.

Фармацевтические композиции по данному изобретению можно вводить в виде назальных аэрозолей или ингаляций. Подобные препараты получают согласно хорошо известным в области фармации способам и могут быть получены в виде растворов в физиологическом растворе, используя бензиловый спирт или другие подходящие консерванты, активаторы абсорбции для усиления биологической доступности, фторуглероды и/или другие солюбилизирующие или диспергирующие агенты, известные в данной области.

Уровни дозировки активного соединения, находящиеся между 0,01 и 100 мг/кг массы в сутки, предпочтительно между 0,5 и 50 мг/кг массы в сутки, являются подходящими для профилактики и лечения вирусной инфекции, включая ВИЧ-инфекцию. Обычно фармацевтические препараты по данному изобретению будут вводиться приблизительно от 1 до 5 раз в сутки или, напротив, путем непрерывного вливания. Подобное введение может применяться для хронического или острого лечения. Количество активного вещества, которое может сочетаться с веществами основы для получения отдельной дозированной формы, будет изменяться в зависимости от подвергаемого лечению пациента и конкретного способа введения. Обычный препарат будет содержать приблизительно от 5 до 95% активного соединения (мас./мас.). Предпочтительно, подобные препараты содержат приблизительно от 20 до 80% активного соединения.

При улучшении состояния пациента может вводиться, при необходимости, поддерживающая доза соединения, препарата или их сочетание по данному изобретению. Следовательно, доза или частота введения или они оба, как функция симптомов, могут быть уменьшены до уровня, при котором достигается лучшее состояние, а когда симптомы ослабляются до желаемого уровня, лечение будет прекращено. Однако пациентам может требоваться прерывистое лечение в течение длительного периода на основании любых возвратных симптомов болезней.

Как понятно специалисту в данной области, могут потребоваться меньшие или большие дозы, чем перечисленные выше. Специальная дозировка и схемы лечения для любого отдельного пациента будут зависеть от множества факторов, включающих активность применяемого специфического соединения, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол, питание, время введения, скорость выведения, сочетание лекарств, тяжесть и течение инфекции, подверженность пациента инфекции и мнение лечащего врача.

Для более полного понимания данного изобретения представлены следующие примеры. Данные примеры предназначены исключительно для иллюстративных целей и не должны истолковываться как какое-либо ограничение объема изобретения.

Пример 1.

Основные условия:

(A) Аналитическая ЖХВД 0-100%В/30 мин, 1,5 мл/мин, А=0,1% ТФК в воде, В=0,1% ТФК в ацетонитриле. Определение при 254 и 220 нм, С18 обращенная фаза Ууйае. 1о=2,4 мин (B) 1/3 об./об. ЕЮАс/гексан (C) 1/2 об./об. ЕЮАс/гексан (Ό) Аналитическая ЖХВД 0-100%В/10 мин, 1,5 мл/мин, А=0,1% ТФК в воде, В=0,1%

ТФК в ацетонитриле. Определение при 254 и 220 нм, С18 обращенная фаза Ууйас, 1₀=2,4 мин.

Смесь, состоящую из 2,0 г (3,7 ммоль) соединения 197 и 3,0 г (16 ммоль) пдинитрофенилкарбоната в 10 мл диметилформамида обрабатывали при 25° 4 мл (4 ммоль) Р4фосфазенового основания (Ийка, 1М в гексане). Смесь перемешивали в течение 6 ч при 25° до тех пор, когда весь исходный спирт не был израсходован. Реакционную смесь распределяли между этилацетатом и 1н. хлористо-водородной кислотой. Органическую фазу промывали 1н.

гидроксидом натрия и солевым раствором, сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Титрование дихлорметаном давало желаемый смешанный карбонат (1,2 г фракция 1 и 0,6 г фракция 2) в виде тонкоизмельченного порошка. Объединенный выход: 69%. Κί=0,13 (1/3 ЕЮАс/гексан, условия В), Ш=0,40 (1/2 ЕЮАс/гексан, условия С), ΐ (время удерживания) ЖХВД=23,83 мин (А), М8 (Е8+) 701 (М+1).

’Н-ЯМР (СИС1₃): 0,82 (6Н, дд), 1,9 (2Н, м),

2,15 (1Н, м), 2,8 (1Н, м), 3,0 (4Н, м), 3,5 (2Н, м),

3,6 (1Н, м), 3,8 (4Н, м), 4,3 (1Н, ушир.с), 4,8 (1Н, м), 5,17 (2Н, м), 7,7 (7Н, м), 7,95 (2Н, д), 8,35 (4Н, м).

¹³С (СИС1₃): 155,2, 152,2, 149,9, 145,6,

135,9, +129,0, +128,8, +128,5, +127,2, +125,4, +124,4, +121,8, +78,1, +75,8, -73,1, -66,9, -56,5, +52,7, -48,2, -35,9, -35,9, 32,6, -+26,4, + 19,9, +19,8.

Пример 2.

198

Пример 4.

-ί

198

К 0,20 г (0,286 ммоль) соединения 198, растворенного в 3 мл ТГФ, добавляли 0,11 г (1,14 ммоль) 1-метилпиперидина и смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Все растворители затем выпаривали и твердый остаток распределяли между ЕЮАс и водой. Летучие компоненты удаляли и остаток обрабатывали 1:1 ТФК/ОСМ в течение 30 мин при комнатной температуре для удаления Вос защитной группы. Продукт растворяли в 0,25 мл ТФК и 1,5 мл ТГФ. Желаемое соединение получали гидрированием в течение 10 ч в присутствии 30 мг 10% Рй/С. Окончательную очистку проводили на препаративной с обращенной фазой С18, используя условия примера 1, кроме скорости элюции, равной 18 мл/мин.

С, Η, Ν: вычислено: 49,27, 5,57, 8,25, найдено 49,15, 5,76, 8,29 С₃1Н₄₅^О₇81-1,9 СЕзСООН

ЬС/М8 (Е8+) 632 (М+1) 1 пик при 4,71 мин Аналитическая ЖХВД (А) ί=Ν/Α мин

Ή: 0,71 (3Н, д), 0,74 (3Н, д), 1,80 (2Н, м), 2,03 (1Н, м), 2,63 (2Н, м), 2,74 (1Н, м), 2,82 (3Н, с), 2,92 (2Н, м), 3,20 (4Н, м), 3,42 (3Н, м), 3,62 (2Н, м), 3,75 (1Н, м), 4,05 (3Н, м), 4,97 (2Н, м),

6,2 (1Н, ушир. с), 6,60 (2Н, м), 7,22 (5Н, м), 7,40 (3Н, м), ¹³С (ДМСО): 156,4, 154,0, 153,8, 138,8,

129,6, 129,5, 128,3, 126,5, 123,7, 112,7, 74,8, 72,9,

66.7, 58,2, 54,0, 53,1, 49,3, 42,3, 40,8, 36,0, 33,3,

25.8, 20,4, 20,3.

Пример 3.

198 200

Синтез соединения 200 из соединения 198 проводили, как описано в примере 1, за исключением того, что вместо п-динитрофенилкарбоната использовали Ν,Ν-диметиламиноэтанол.

Ή-ЯМР (ацетон-й₆): 0,82 (6Н, дд), 1,83 (2Н, м), 2,07 (1Н, м), 2,64 (2Н, м), 2,82 (6Н, с),

2,90 (2Н, м), 3,19 (1Н, м), 3,38 (4Н, м), 3,63 (2Н, м), 3,76 (1Н, м), 4,17 (2УН, м), 4,40 (1Н, м), 4,56 (1Н, м), 4,96 (1Н, м), 5,06 (1Н, м), 6,06 (1Н, д),

6,68 (2Н, д), 7,23 (5Н, м), 7,47 (2Н, д).

¹³С-ЯМР (ацетон-й6): 20,2, 20,3, 27,5, 33,4,

35,6, 43,8, 50,1, 54,2, 56,4, 58,5, 63,1, 67,4, 73,6,

76,2, 79,9, 114,2, 118,3, 127,4, 129,2, 130,1, 130,3,

139,3, 153,4, 157,0.

ЬС/М8: 1 пик, 621 (МН+).

Синтез соединения 201 из соединения 198 проводили, как описано в примере 1, за исключением того, что вместо п-динитрофенилкарбоната применяли Ν-ацетилэтилендиамин.

С, Н, Ν: вычисл.: 49,66, 5,64, 8,83, найдено

49,76, 5,98, 8,93 С₃₀Н₄₃Н₅О₈8₁-1,4 СЕ₃СООН.

ЬС/М8 (Е8+) 634 (М+1) 1 пик при 5,08 мин.

Аналитическая ЖХВД(А) 1=15,92 мин.

^!Н: й₃-ацетонитрил: 0,88 (6Н, дд), 1,92 (3Н, с), 1,94 (2Н, м), 2,17 (1Н, м), 2,72 (2Н, м), 2,96 (2Н, м), 3,07 (3Н, м), 3,29 (1Н, м), 3,42 (3Н, м),

3,69 (1Н, м), 3,77 (1Н, м), 3,82 (1Н, м), 4,133 (1Н, м), 4,40 (1Н, ушир.с), 5,05 (2Н, м), 5,80 (1Н, м),

6,10 (1Н, д), 6,78 (2Н, д), 6,83 (1Н, ушир.с), 7,28 (5Н, м), 7,58 (2Н, д).

¹³С (й₃-ацетонитрил): 157,1, 157,0, 153,2,

139,6, +130,3, +130,2, +129,2, +127,2, 126,2, +114,2, +76,0, +75,4, -73,6, -67,4, -58,2, +54,9, -50,2, -41,6, -39,8, -35,9, -33,4, +27,3, +23,1, +20,4, +20,2.

Пример 5.

198

202

Синтез соединения 202 из соединения 198 проводили, как описано в примере 1, за исключением того, что вместо п-динитрофенилкарбоната использовали Ν-Вос-пиперазин.

С, Н, Ν: вычисл.: 48,28, 5,68, 8,41, найдено:

48,28, 5,36, 8,28 С₃₀Н₄₃^О₇8_Г2 СЕ₃СООН

ЬС/М8 (Е8+) 618 (М+1) 1 пик при 4,36 мин.

Аналитическая ЖХВД(А) 1=14,84 мин.

¹Н: й6-ДМСО: 0,72 (3Н, д), 0,77 (3Н, д), 1,78 (2Н, м), 2,09 (1Н, м), 2,64 (2Н, м), 2,73 (1Н, м), 2,80 (1Н, м), 3,08 (4Н, м), 3,32 (2Н, м), 3,41 (1Н, м), 3,50 (4Н, м), 3,54 (1Н, м), 3,63 (1Н, м),

3,70 (1Н, м), 3,98 (1Н, м), 4,89 (1Н, м), 4,97 (1Н, м), 6,61 (2Н, д), 7,23 (5Н, м), 7,42 (3Н, м), 8,88 (2Н, ушир.с).

¹³С: (ДМСО): 155,7, 153,6, 153,0, 138,4, +129,1, +129,0, +128,1, +126,1, 123,2, +112,7, +75,2, +74,4, -72,5, -66,2, -56,9, +53,1, -48,8, -42,5, -40,8, -35,0, -32,2, +26,2, +20,0, +19,8.

Пример 6.

19® 203

Синтез соединения 203 из соединения 198 проводили, как описано в примере 1, за исключением того, что вместо п-динитрофенилкарбоната использовали Ν-Вос-моноэтилендиамин.

С, Η, Ν: вычисл.: 46,89, 5,29, 8,54, найдено:

46,50, 5,51, 8,54 С₂₈Н₄₁^О₇8_Г2 СР₃СООН.

ЬС/М8 (Е8+) 592 (М+1) 1 пик при 4,32 мин.

Аналитическая ЖХВД(А) 1=14,69 мин.

'Н: б.-ДМСО: 0,77 (6Н, д), 1,82 (2Н, м), 2,06 (1Н, м), 2,57 (2Н, м), 2,82 (4Н, м), 2,97 (1Н, м), 3,30 (5Н, м), 3,55 (1Н, м), 3,65 (1Н, м), 3,70 (1Н, м), 3,95 (1Н, м), 4,88 (1Н, м), 4,95 (1Н, м),

6,62 (2Н, д), 7,20 (6Н, м), 7,39 (3Н, м), 7,78 (3Н, ушир. с).

¹³С (ДМСО): 155,9, 152,9, 138,5, 129,2,

128,9, 128,1, 126,1, 122,9, 112,7, 74,7, 74,5, 72,6,

66,2, 57,2, 53,2, 49,4, 38,8, 37,94, 35,1, 32,1, 26,3, 20,0, 19,8.

Пример 7.

Синтез соединения 204 из соединения 198 проводили, как описано в примере 1, за исключением того, что вместо п-динитрофенилкарбоната использовали моно-1,33-диамино-3-№ Вос-пропан.

С, Н, Ν: вычисл.: 49,07, 5,64, 8,89, найдено:

48,95, 6,00, 8,92 С₂₉Н₄₃^О₇8_Г1,6 СР₃СООН ЬС/М8 (Е8+) 605 (М+1) 1 пик на 4,27 мин. Аналитическая ЖХВД(А) 1=14,72 мин.

'Н: б₆-ДМСО: 0,78 (6Н, дд), 1,64 (2Н, м),

1.83 (2Н, м), 2,03 (1Н, м), 2,57 (1Н, м), 2,78 (4Н, м), 2,94 (1Н, м), 3,03 (2Н, м), 3,32 (2Н, м), 3,58 (1Н, м), 3,63 (1Н, м), 3,73 (1Н, м), 3,87 (1Н, м),

4.84 (1Н, м), 4,92 (1Н, м), 6,61 (2Н, д), 7,22 (6Н, м), 7,36 (1Н, д), 7,28 (2Н, д), 7,76 (3Н, суж.с).

¹³С (ДМСО): 155,8, 155,7, 138,5, +129,1, +129,0, +128,0, +126,1, 122,9, +112,7, +74,6, +74,3, -72,7, -66,2, -57,2, +53,6, -49,5, -37,4, -36,7, -35,5, -32,1, -27,6, +26,2, +20,0, +19,8.

Пример 8.

Чз

198

Синтез соединения 205 из соединения 198 проводили, как описано в примере 1, за исключением того, что вместо п-динитрофенилкарбоната использовали 1,4-диамино-4-№Восбутан.

С, Н, Ν: вычисл.: 48,17, 5,59, 8,26, найдено: 48,02, 5,96, 8,24 С₃₀Н₄₅^О₇8_Г2 СР₃СООН

ЬС/М8 (Е8+) 620 (М+1) 1 пик на 4,36 мин. Аналитическая ЖХВД(А) 1=14,93 мин.

'Н: б.-ДМСО: 0,77 (6Н, дд), 1,43 (4Н, м), 1,82 (2Н, м), 2,03 (1Н, м), 2,77 (4Н, м), 2,95 (3Н, м), 3,31 (2Н, м), 3,56 (1Н, м), 3,63 (1Н, м), 3,70 (1Н, ушир.к), 3,82 (1Н, м), 4,85 (1Н, м), 4,92 (1Н, м), 6,62 (2Н, д), 7,2 (7Н, м), 7,38 (2Н, д), 7,72 (3Н, ушир.с).

¹³С: 155,7, 152,9, +138,6, +129,1, +129,0, +128,0, +126,1, +123,0, +112,7, +74,4, +74,3, -72,7, -66,2, -57,2, +53,7, -49,7, -38,6, -38,5, -35,4, -32,1, -26,3, +26,2, -24,4, +20,1, +19,9.

Пример 9.

Синтез соединения 206 из соединения 198 проводили, как описано в примере 1, за исключением того, что вместо п-динитрофенилкарбоната использовали (3К)-(+)-3-Вос-аминопирролидин.

С, Н, Ν: вычисл: 48,28, 5,36, 8,28, найдено: 47,89, 5,53, 8,57 С₃₀Н₄з^О₇8_г2 ТФК

ЬС/М8 (Е8+) 618 (М+1) 1 пик на 4,32 мин.

Аналитическая ЖХВД(А) 1=14,31 мин.

¹Н и ¹³С ЯМР: сложные и перекрывающиеся смеси ротомеров.

Пример 10.

198

Синтез соединения 207 из соединения 198 проводили, как описано в примере 1, за исключением того, что вместо п-динитрофенилкарбоната использовали (38)-(-)-3-Вос-аминопирролидин.

ЬС/М8 (Е8+) 618 (М+1) 1 пик на 4,19 мин. Аналитическая ЖХВД(А) 1=14,75 мин.

¹ Н и ¹³С ЯМР: сложные и перекрывающиеся смеси ротомеров. Пример 11.

а —

308

Синтез соединения 308 из соединения 198 проводили, как описано в примере 1, за исключением того, что вместо п-динитрофенилкарбоната использовали №трифенилметил-^№диметилэтандиамин.

^!Н-ЯМР: 0,76 (6Н, дд), 1,65 (2Н, м), 1,95 (1Н, м), 2,07 (1Н, м), 2,7 (2Н, м), 2,75 (3Н, с),

2,95 (3Н, м), 3,45 (2Н, м), 3,7 (4Н, м), 4,2 (2Н, ушир.м), 5,05 (2Н, ушир.д), 6,62 (2Н, д), 7,2 (5Н,

м), 7,5 (2Н, д).

БС/М8: 1 пик, 620 (МН+).

Пример 12.

Основные процессы.

Ацилирование:

197 208

К 200 мг (0,37 ммоль) соединения 197, растворенного в 5 мл СН₂С1₂, добавили 183 мг (0,41 ммоль) Н-СВх-Е-бензилтирозина. затем 231 мг (1,12 ммоль) ДЦК, затем 29 мг (0,23 ммоль) ДМАП. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Образовавшийся осадок удаляли с помощью фильтрации. Фильтрат затем концентрировали в вакууме. Конечное соединение очищали на препаративной колонке с обращенной фазой С18 с помощью ЖХВД С₁₈ Аа1сг5 Бе11а Ргер 3000 Со1итп: УМС-Раск ОБ8 АА 12805-2520АТ 250x20 мм 1.Б. 8-5 мм, 120А, 0-100% В в течение 1/2 ч, скорость элюции = 18 мл/мин, наблюдение при 220 нм, В=0,1% трифторуксусная кислота в ацетонитриле, А=0,1% трифторуксусная кислота в воде. Аналитическая колонка: УМС-Раек ОБ8 АА1 2805-2520АТ 250x4,6 мм Ι.ϋ. 8-5 мм, 120А, 0-100% В при 1,5 мл/мин, в течение 1/2 ч, наблюдение при 220 нм, В=0,1% трифторуксусная кислота в ацетонитриле, А=0,1% трифторуксусная кислота в воде.

Водную фазу лиофилизовали с получением 59 мг, (16,3%) 6А431896Х, (И11484-72-10) 1ж_ХВд=11,71 мин., МА=966,04,

ЬС/М8=МН+967.

Восстановление фунциональных нитрогрупп:

209

Взвесь соединения 209 (170 мг) и 10 мг 10% Рб.С в 95% ЕЮН продували током водорода в сцинтилляционной пробирке, снабженной перегородкой и механической мешалкой. Продолжавшееся в течение ночи гидрирование с помощью баллона с водородом привело к полному преобразованию. Неочищенный препарат далее отделяли от катализатора фильтрованием и очищали на ВР С18 ЖХВД (Ргер Νονα-Раск С186 ит, 60 А, градиент 0-100% В в течение 30 мин. Желаемый продукт собирали и лиофилизовали, получая белый твердый порошок (50 мг, 30,8%).

Пример 13.

Соединение 211 получали следующими способами ацилирования и восстановления по примеру 12.

е8+ 669,2 (М+1), 1_жХВд = 8,06 мин (Б), ¹³С ЯМР (ДМСО) 168,9, 156,9, 155,7, 153,1,

138,1, 130,5, 129,2, 129,1, 128,1, 126,2, 124,7,

122,5, 112,8, 76,2, 74,5, 72,5, 66,1, 58,0, 53,6,

52,6, 49,2, 33,6, 32,1, 26,6, 25,3, 20,0.

1_ЖХВд = 11,71 мин (Б), Е8+ 967 (М+1).

Пример 14.

197 212

Соединение 212 получали с помощью реакций примера 12.

1ЖХВД = 9,45 мин (Б), Е8+ 592,2 (М+1).

¹³С ЯМР (ДМСО) 171,5, 155,8, 148,9, 137,8,

129,5, 129,3, 128,5, 126,7, 115,2, 75,2, 73,8, 73,1,

68,3, 67,0, 58,7, 57,1, 53,3, 49,2, 35,4, 32,4, 26,7,

20.1, 19,8.

'Н (СБС1₃, 399,42 кГц): 8,33 (2Н, д, 1=8,8),

7,95 (2Н, д, 1=8,8), 7,23 (5Н, м), 5,22 (м, 2Н), 5,08 (м, 1Н), 4,08 (м, 1Н), 3,80-3,45 (7Н, м), 3,41 (3Н, с), 2,98 (м, 3Н), 2,66 (м, 1Н), 2,57 (м, 2Н), 2,10 (с, 1Н), 1,93 (2Н, м), 0,82 (3Н, д), 0,78 (3Н, д).

Е8+ 622 (М+1), 644 (М+№)

1жхвд =10,29 мин (Б).

¹³С ЯМР (СБС1₃): 171,3, 155,5, 149,9, 145,6,

136,9, 129,2, 128,6, 128,5, 126,8, 124,4, 76,7, 75,3,

73.2, 72,9, 68,2, 66,9, 58,7, 55,9, 53,1, 48,3, 35,3,

32,7, 26,3, 19,9, 19,8.

Пример 15.

Соединение 213 получали с помощью реакций примера 12.

1_ЖХВд = 9,21 мин (Б); Е8+ 622 (М+1).

¹³С ЯМР (СБС1₃): 170,54, 156,2, 148,6,

136,8, 129,4, 129,2, 128,6, 126,6, 115,7, 76,7, 74,6,

73,2, 71,8, 70,6, 68,2, 66,9, 58,9, 57,3, 53,8, 49,4,

36,2, 33,1, 26,8, 19,8, 19,5.

Промежуточно: 1_жхВд = 10,05 мин (Б);

Е8+= 652 (М+Н) 674 (М+№). Пример 16.

Соединение 214 получали с помощью реакций примера 12.

Е8+ 634,4 (М+1); 1_ЖХВД = 7,17 мин (Ό).

¹³С (ДМСО): 169,3, 155,8, 153,1, 138,0,

129,1, 129,0, 128,1, 126,3, 122,6, 112,8, 94,3, 75,6, 74,6, 72,4, 66,1, 57,8, 52,7, 52,0, 49,3, 38,4, 34,7,

32,2, 29,1, 26,6, 21,4, 20,1, 20,0.

Пример 17.

И? 215

Соединение 215 получали с помощью реакций примера 12.

1жхвд = 9,12 мин (Ό).

Ή (ДМСО) все сигналы широкие: 7,38 (3Н, ушир.м), 7,20 (5Н, ушир.м), 6,62 (2Н, ушир.м), 5,15 (1Н, ушир.м), 4,92 (1Н, ушир.м), 4,00 (3Н, м), 3,7-3,0 (16Н, м), 2,78 (2Н, м), 2,57 (3Н, м), 2,04 (м, 1Н), 1,78 (м, 2Н), 0,77 (6Н, м).

¹³С (ДМСО) 170,6, 156,3, 153,7, 139,1,

129,8, 128,4, 126,7, 123,7, 113,3, 79,8, 79,2, 77,3,

76,1, 75,4, 75,2, 73,0, 71,9, 52,3, 51,8, 48,2, 46,7,

39,9, 38,7, 25,8, 22,6.

Промежуточно:

1_ЖХВд = 10,18 мин (Ό); Е8+ 696,3 (М+1). Пример 18.

Соединение 216 получали с помощью реакций примера 12.

Ή-ЯМР: 0,97 (6Н, т), 1,95 (2Н, м), 2,20 (1Н, м), 2,9 (2Н, м), 2,96 (6Н, с), 3,00 (3Н, с),

3,38 (1Н, м), 3,42 (3Н, м), 3,36 (1Н, м), 3,6 (2Н, м), 3,7 (6Н, м), 3,98 (2Н, м), 4,2 (2Н, дд), 5,1 (1Н, ушир.с), 5,4 (1Н, м), 6,8 (2Н, д), 7,4 (5Н, м), 7,6 (2Н, д).

ЬС-М8: 1 пик, 692 (МН+).

Пример 19.

218. 219

Смесь из 0,5 г (1 ммоль) (38)-тетрагидро-3фурфурил-И-((18,2К)-1 -бензил-2-гидрокси-3(№изобутил-4-аминобензолсульфонамидо) пропил)карбамата, 0,4 г (1,5 ммоль) Вое-(8)-3пиридилаланина, 0,29 г (1,5 ммоль) ЕЭС1 и 0,1 г 4-диметиламинопиридина в 10 мл Ν,Ν-диметилформамида перемешивали при 25°С в течение 12 ч. Летучие примеси удаляли в вакууме и остаток распределяли между этилацетатом и 1н. хлористо-водородной кислотой. Органическую фазу промывали 1н. гидроксидом натрия и солевым раствором, сушили с помощью сульфата магния и концентрировали в вакууме. Остаток хроматографировали на 2-дюймовой колонке с силикагелем (1:1 этилацетат:гексан) с получением желаемого Ν-ацилированного вещества. Удаление защитных групп обработкой 50 мл трифторуксусной кислотой с последующим выпариванием оставшейся кислоты с метанолом приводило к получению желаемого пролекарства в виде белой пены (0,2 г, 26%).

Ή-ЯМР (ацетонитрил-О3): 0,95 (6Н, дд), 2,0 (2Н, м), 2,25 (1Н, м), 2,8-3,1 (5Н, м), 3,6-4,0 (7Н, м), 4,25 (1Н, м), 4,75 (1Н, м), 5,18 (1Н, м),

5,45 (1Н, м), 7,0 (2Н, д), 7,4 (5Н, м), 7,75 (2Н, д),

8,2 (1Н, м), 8,8 (1Н, д), 8,85 (1Н, д), 9,15 (1Н, с).

ЬС/М8: 1 пик, 654 (МН+).

Пример 21.

218 220

Соединение 220 получали, применяя основную реакцию по примеру 20.

¹ Н-ЯМР (ацетон-6₆/метанол-б₄): 0,95 (6Н, т), 2,0 (2Н, м), 2,2 (1Н, м), 2,90 (1Н, дд), 2,95 (2Н, д), 3,12 (1Н, дд), 3,4 (2Н, м), 3,6 (1Н, д), 3,8 (5Н, м), 4,4 (2Н, ушир.м), 6,82 (2Н, д), 7,20 (1Н, с), 7,4 (5Н, м), 7,65 (2Н, д), 8,0 (1Н, с).

ЬС/М8: 1 пик, 643 (МН+).

Соединение 217 получали с помощью реакций примера 12.

Ή-ЯМР (СОС1₃): 0,78 (6Н, дд), 1,9 (2Н, м),

2,1 (1Н, м), 2,3 (3Н, с), 2,9 (8Н, м), 2,9 (2Н, м),

3,15 (1Н, м), 3,35 (1Н, м), 3,5 (1Н, м), 3,75 (4Н, м), 4,06 (2Н, с), 4,15 (2Н, м), 4,9 (1Н, дд), 5,05 (1Н, ушир.с), 5,2 (1Н, ушир.с), 6,63 (2Н, д), 7,2 (5Н, м), 7,55 (2Н, д), 8,0 (2Н, м).

Е8М8Р: 676 (МН+).

Пример 20. Основная реакция получения Ν-ацилированных соединений.

Пример 22.

218 221

Соединение 221 получали, применяя основную реакцию по примеру 20.

Ή-ЯМР (ДМСО б₆): 0,76 (6Н, т), 1,80 (2Н,

м), 2,10 (1Н, м), 3,7 (4Н, м), 3,75 (3Н, с), 3,2 (5Н,

м), 3,58 (2Н, с), 3,7 (4Н, м), 4,97 (1Н, ушир.м),

5,18 (1Н, ушир.с), 6,7 (2Н, д), 7,22 (5Н, м), 7,45 (2Н, д).

ЬС/МЗ: 1 пик, 646 (МН+).

Пример 23.

222

218

Соединение 222 получали, применяя основную реакцию по примеру 20.

¹Н ЯМР (ацетонитрил-6₃): 1,0 (6Н, т), 2,0 (2Н, м), 2,2 (1Н, м), 3,00 (6Н, с), 3,02 (3Н, с), 3,1 (4Н, м), 3,5 (3Н, м), 3,8 (8Н, м), 4,4 (2Н, с), 5,15 (1Н, ушир.с), 7,4 (5Н, м), 7,97 (2Н, д), 8,04 (2Н, д).

ЬС/МЗ: 1 пик, 692 (МН+).

Пример 24.

218 223

Соединение 223 получали, применяя основную реакцию по примеру 20.

1жхвд = 9,22 мин (Ό); ЕЗ+ 622 (М+1).

'Н ЯМР 6₆-ДМСО: 0,76 (6Н, дд), 1,0-1,8 (15Н, м), 2,03 (1Н, м), 2,58 (2Н, м), 2,79 (2Н, м),

3,11 (1Н, м), 3,28 (3Н, с), 3,3-3,5 (12Н, м), 3,94 (1Н, м), 4,08 (1Н, м), 4,94 (1Н, м), 5,14 (1Н, м), 6,61 (2Н, д), 7,22 (5Н, м), 7,40 (3Н, м).

¹³С (ДМСО) 169,7, 165,9, 152,9, 138,4,

129.2, 129,1, 128,1, 126,2, 123,1, 112,8, 74,4, 74,1,

72,5, 71,2, 69,8, 66,1, 58,1, 57,1, 52,9, 47,5, 33,4,

33.2, 26,3, 24,5, 18,9, 18,8.

Пример 25.

218

Соединение 224 получали, применяя основную реакцию по примеру 20.

Пример 26. Ο,Ν-диацилированные пролекарства.

Основную реакцию получения Ν,Οдиацилированных соединений проводили согласно протоколу, изложенному выше в примере 20, за исключением того, что применяли пятикратный избыток реагентов относительно исходного вещества.

218 225

1_ЖХВд = 9,26 мин (Ό); ЕЗ+ 738 (М+1) 760 (Μ+Να).

¹³С (ДМСО): 170,2, 169,8, 156,4, 143,4,

138,8, 129,5, 128,8, 128,5, 126,8, 119,7, 74,9, 74,2,

73,7, 71,6, 70,7, 70,3, 68,0, 67,2, 59,3, 57,6, 53,8,

49,6, 35,7, 33,8, 27,1, 20,4.

'Н (ДМСО): 10,1 (1Н, с), 7,84 (д, 2Н, 1=8,5), 7,76 (д, 1=8,7, 2Н), 7,40 (1Н, д, 1=9,2),

7,22 (м, 5Н), 5,14 (1Н, м), 4,95 (1Н, м), 4,1 (м, 8Н), 3,7-3,3 (м, 13Н), 3,28 (с, 3Н), 3,26 (с, 3Н),

2,86 (м, 2Н), 2,73 (м, 1Н), 2,59 (м, 1Н), 2,04 (м, 1Н), 1,83 (м, 2Н), 0,78 (м, 6Н).

Пример 27.

192 226

К смеси соединения 197 (2,93 г, 5,47 ммоль) и фосфорной кислоты (Λΐάποίι. 2,2 экв., 12,03 ммоль, 987 мг) в 20 мл пиридина добавляли 1,3-дициклогексилкарбодиимид (А16псй, 2,1 экв., 11,49 ммоль, 2,37 г) и реакционную смесь нагревали до 60°С в атмосфере азота в течение 3 ч. Растворитель удаляли в вакууме, остаток обрабатывали 200 мл 0,1н. водного бикарбоната натрия и перемешивали 1 ч при температуре окружающей среды. Смесь фильтровали, фильтрат подкисляли до рН 1,5 добавлением конц. НС1 и экстрагировали этилацетатом (3-100 мл). Объединенные органические фазы сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 3,15 г (96%) желаемого продукта 226, который непосредственно использовали в следующей реакции. ЖХВД: Е1 = 8,91 мин (96%), МЗ (ΑΡ+) 600,5 (М+1).

Пример 28.

226 227

Суспензию соединения 226 (~5,47 ммоль) в 18 мл гексаметилдисилазана перемешивали при 120°С до гомогенного состояния с последующим добавлением бис(триметилсилил) пероксида (Се1е8!, 1пс., 2,3 экв., 12,58 ммоль, 2,24 г, 2,71 мл). Через час смесь охлаждали до комнатной температуры, растворитель удаляли в вакууме, остаток смешивали со 100 мл метанола, растворитель удаляли в вакууме, остаток смешивали со 100 мл 0,1н. водного бикарбоната натрия, подкисляли до рН 1,5 добавлением конц. НС1, обрабатывали насыщенным солевым раствором и экстрагировали этилацетатом (3-100 мл). Смешанные органические фазы сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением 2,98 г (88%) желаемого продукта 227, который непосредственно использовали в следующей реакции. ЖХВД: Ж = 9,28 мин (90%), М8 (АР+)

616,5 (М+1).

Альтернативно, 227 может быть синтезирован из 197. В данном способе 197 растворяли в пиридине (300 мл). Полученный раствор концентрировали в вакууме до приблизительно 150 мл при 50-55°С. Далее раствор охлаждали в атмосфере Ν₂ до 5°С, и обрабатывали РОС1₃ (6,5 мл, 1,24 экв.) в течение 2 мин. Охлаждающую баню убирали и реакционную смесь перемешивали при температуре окружающей среды в течение 2,5 ч. Далее раствор охлаждали до 5°С и добавляли воду (300 мл) в течение 30 мин.

Полученную смесь экстрагировали 4метилпентан-2-оном (М1ВК, 2x150 мл). Смешанные экстракты промывали 2н. НС1 (2x250 мл). Кислый промывной раствор вновь экстрагировали М1ВК (60 мл), затем смешанные М1ВК растворы обрабатывали 2н. НС1 (150 мл). Двухфазную смесь быстро перемешивали и нагревали до 50°С в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до 20°С, разделяли фазы и М1ВК раствор промывали насыщенным солевым раствором (150 мл). Продукт 227 выделяли, обезвоживая раствор над сульфатом магния, фильтруя осушитель и концентрируя в вакууме при 40°С с получением продукта в виде бледножелтой пены (31 г, 90% выхода).

Пример 29.

222 228

Раствор 227 (2,98 г, 4,84 ммоль) в 50 мл этилацетата обрабатывали 10%-м палладием на углероде (А1бпе11. 300 мг) и помещали под давлением водорода 35 фунтов на квадратный дюйм в аппарат Парра на 15 ч. Катализатор удаляли с помощью фильтрации и растворитель удаляли в вакууме с получением 2,66 г (94%) желаемого продукта 228. ЖХВД: К1 = 7,23 мин (92%), М8 (Е8+) 586,3 (М+1).

Пример 30.

228

Твердое соединение 228 (2,66 г, 4,54 ммоль) помещали в 10 мл водного бикарбоната натрия (Вакег, 3,0 экв., 13,63 ммоль, 1,14 г) и наносили на колонку со смолой [МйкиЫкЫ Каке! Согр., МС1-де1, СНР-20). Через колонку пропускали дистиллированную воду до тех пор, пока элюент не становился нейтральным, и затем элюировали продукт 1% ацетонитрилом в воде. Очищенные фракции смешивали и лиофилизовали с получением 918 мг очищенной динатриевой соли 229.

Альтернативно, 7 г 228 растворяли в 100 мл ЕЮАс с нагреванием и раствор экстрагировали 100 мл водного 250 ммоль бикарбоната триэтиламмония (ТЕАВС) (2х). Водные экстракты смешивали и разбавляли до 1500 мл водой. Данный раствор наносили на 300 мл ΌΕΑΕ52 колонку (ΧνΐιαΙιηαη)- которую уравновешивали 50 мМ ТЕАВС. Колонку промывали 8 л 50 мМ ТЕАВС и соль ТЕА элюировали 2 л 250 мМ ТЕАВС. Раствор выпаривали в вакууме до 100 мл, далее лиофилизовали с получением соли ТЕА (1,5 ТЕА эквивалента). Соль ТЕА (5,8 г) растворяли в 200 мл воды, добавляли 300 мл 1н.

НС1 и смесь экстрагировали ЕЮАс (3 х 200 мл). Раствор этилацетата сушили над Мд8О₄, затем выпаривали в вакууме с получением 4 г свободной кислоты. Два грамма свободной кислоты растворяли в 50 мл ацетонитрила и добавляли раствор 573 мг №1НС’О₃ в 200 мл воды. Смесь лиофилизовали с получением 2,1 г динатриевой соли (соединение 229).

Пример 31.

0,53 г (3,0 ммоль) 2-[2-(2-метоксиэтокси) этокси]уксусной кислоты добавляли в смешанный раствор 1,2 г (3,15 ммоль) НАТИ 0,2 г (1,47 ммоль) НОА1 0,4 г (4,0 ммоль) NММ в 10 мл безводного Ν,Ν-диметилформамида. Смесь пе ремешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, затем добавляли 0,5 г (1 ммоль) (38)-тетрагидро-3-фурфурил-№((18,2В)-1бензил-2-гидрокси-3-(№изобутил-4-аминобензолсульфонамидо)пропил)карбамата одной порцией. Смесь перемешивали при 20°С в течение одного часа, затем при 50°С дополнительно в течение 12 ч. Затем охлаждали до 20°С, добав ляли 50 мл эфира и раствор трижды промывали водой. Водную фазу промывали эфиром и затем смешанные органические фазы сушили с помощью безводного сульфата магния и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали хроматографией на силикагеле с получением желаемых моно-^)ацилированных (102 мг, 15%) и бис-(О,К1)-ацилированных (262 мг, 32%) соединений.

Моно-^)-ацилированные: ¹ Н-ЯМР (СБС1₃): 0,85 (дд, 6Н), 1,85 (м, 2Н), 2,08 (м, 1Н),

2,8-3,1 (м, 7Н), 3,33 (с, 3Н), 3,55 (м, 3Н), 3,70-

3,90 (м, 8Н), 4,1 (с, 2Н), 5,0 (д, 1Н), 5,08 (ушир.с, 1Н), 7,2 (м, 5Н), 7,70 (д, 2Н), 7,80 (д, 2Н), 9,09 (с, 1Н).

М8(ЕАВ+): 666 (М+1).

Бис-(О^)-ацилированные: ¹Н-ЯМР (СБС1₃): 0,77 (м, 6Н), 1,81 (м, 1Н), 1,95 (м, 1Н),

2,05 (м, 1Н), 2,6-3,0 (м, 6Н), 3,2 (м, 1Н), 3,332 (с, 3Н), 3,338 (с, 3Н), 3,5-3,8 (м, 18Н), 4,1 (с, 2Н),

4,14 (с, 2Н), 4,17 (м, 1Н), 5,05 (м, 2Н), 5,25 (ушир.с, 1Н), 7,2 (м, 5Н), 7,69 (д, 2Н), 7,78 (д, 2Н), 9,06 (с, 1Н).

М8 (РАВ+): 826 (М+1), 848 (М+Ыа). Пример 32.

Растворяли 0,521 г (1 мМ) 1273^94 в 5 мл ТГФ, затем охлаждали до -78°С в атмосфере азота и добавляли 1,56 мл (2,5 мМ) 1,6 М раствора н-ВиМ в гексане. После 20 мин при -78°С добавляли 105 мкл (1,1 мМ) этилхлоркарбамата и нагревали реакционную смесь до комнатной температуры с последующим добавлением других 105 мкл этилхлоркарбамата.

После перемешивания дополнительно в течение 4 ч реакционную смесь охлаждали водой и выпаривали органический растворитель. Часть неочищенного продукта очищали на силикагеле (КТ=0,69 (1:2 этилацетат: гексан)), получая 0,131 г продукта.

С, Н, Ν: вычисл.: 46,06, 4,97, 5,88, найдено: 45,90, 4,97, 5,88

С₂₃Н₃₃Ы₅О₅8_г2,2 ТФК

ЬС/М8 (Е8+) 594 (М+1) 1 пик на 6,96 мин. Аналитическая ЖХВД(А) ΐ=24,57 мин.

¹³С (СЭС1₃): 155,8, 154,4, 149,9, 145,7,

136,8, +129,2, +128,7, +126,8, +124,2, 80,1, +76,9, -64,3, -56,2, -52,5, -48,7, -36,2, +28,1, +26,4, +20,0, +19,8, +14,3.

карбоната в 4 мл ЭСМ и далее добавляли 4 мл ТФК. Затем растворители удаляли после выдерживания 45 мин при комнатной температуре, с получением вышеуказанного соединения.

¹Н (ДМСО): 8,37 (2Н, д, 1=7,2), 8,15 (2Н, м), 8,00 (2Н, д, 1=7,0), 7,37 (5Н, м), 5,04 (1Н, д, 1=6,9), 4,06 (2Н, к, 1=7,0), 3,82 (1Н, м), 3,35 (2Н, м), 2,95 (4Н, м), 1,82 (1Н, м), 1,20 (3Н, т, 1=7,0), 0,72 (перекрывающиеся дубли, 6Н, 1=6,2).

ЬС/М8 1 пик на 4,76 мин.

Е8+ 497,3 (М+1).

Пример 34. Ο,Ν-Ацилоксиперегруппировка.

N02

233

С, Н, Ν: вычисл.: 53,26, 6,14, 7,57, найдено: 53,22, 6,14, 7,57 С₂₃Н₃₃Ы₅О₅8_Г0,8 ТФК

ЬС/М8 (Е8+) 594 (М+1) 1 пик на 6,96 мин. Аналитическая ЖХВД(А) ΐ=24,57 мин.

¹Н (ДМСО): 8,34 (2Н, д, 1=8,7), 8,02 (2Н, д, 1=8,0), 7,19 (5Н, м), 6,98 (1Н, д, 1=7,2), 5,00 (1Н, м), 3,83 (2Н, ς), 3,50 (2Н, м), 3,06 (м, 2Н), 2,96 (2Н, м), 2,43 (1Н, м), 1,97 (1Н, м), 1,02 (3Н, ΐ), 0,84 (3Н, д), 0,82 (3Н, д).

¹³С (ДМСО): 156,2, 150,1, 145,7, 140,0, +129,7, +129,2, +128,5, +126,3, +125,0, +71,8, -60,0, +56,2, -56,0, -51,8, -36,0, +26,3, +20,3, +20,1, +14,6.

Пример 35.

Синтез соединения 235 выполняли аналогично данному в примере 1.

Выход 15,2%; 1_ЖХВд=25,2 мин (А).

Κί=0,54 (В); Е8+ 687,3 (М+1).

¹Н (СОС1₃): 8,34 (перекрывающиеся д+д, 4Н), 7,97 (д, 2Н, 1=8,9), 7,35 (7Н, м), 5,09 (1Н, м), 4,56 (1Н, д, 1=8,4), 4,20 (1Н, м), 3,54 (1Н, м), 3,00 (3Н, м), 2,82 (1Н, м), 1,84 (1Н, м), 1,37 (9Н, з), 0,84 (3Н, д), 0,82 (3Н, д).

Пример 36.

Растворяли 150 мг 235 в 3 мл безводного диоксана, добавляли 0,35 мл 8(+)-3-ОН-ТТФ и 0,14 мл триэтиламина. Смесь осторожно нагревали в колбе с обратным холодильником в атмосфере азота в течение 2 дней. Преобразование в 236 было количественное. Растворитель удаляли и соединение очищали на силикагеле (В).

1_ЖХВд=22,98 мин (А); Е8+ 636,2 (М+1).

¹Н ЯМР (СЭС1₃): 8,29 (2Н, д), 7,91 (2Н, д),

7,22 (5Н, м), 5,13 (1Н, м), 4,96 (1Н, м), 4,52 (1Н,

д), 4,02 (1Н, м), 3,84 (2Н, м), 3,44 (1Н, м), 3,36 (1Н, м), 3,10 (3Н, м, перекрывание), 2,88 (2Н, м),

2,64 (1Н, м), 2,14 (1Н, м), 2,05 (1Н, м), 1,84 (1Н,

м), 1,27 (9Н, δ), 0,78 (6Н, два перекрывающихся д).

Пример 37. Пролекарство на основе угле-

Смесь 0,54 г (1 ммоль) (38)-тетрагидро-3фурфурил-Ы-(( 18,2К)-1-бензил-2-гидрокси-3(Ы-изобутил-4-аминобензолсульфонамидо) пропил)карбамата, 0,46 г (2 ммоль) 5-диметилтрет-бутисилилоксипентановой кислоты, 0,346 г (1,8 ммоль) ЕЭС1 и 0,556 мл (4 ммоль) триэтиламина в 10 мл диметилформамида перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Добавляли другие 3 ммоль каждого из кислоты, ΕΌΟΙ и триэтиламина и продолжали перемешивание дополнительно в течение 96 ч. Добавляли третью порцию кислоты и ΕΌΟΙ (3 ммоль каждого) и смесь перемешивали 72 ч до завершения реакции.

Затем реакционную смесь разбавляли этилацетатом и экстрагировали 1н. хлористоводородной кислотой, насыщали бикарбонатом натрия и промывали водой. Выпаривание растворителя и очистка на силикагеле (30% этилацетат-гексан) давало желаемый продукт (500 мг) в виде воскообразного твердого продукта.

ЬСМ8: 1 пик, 772,5 (М+Ыа) 'Н ЯМР (СБС1₃): 0,01 (6Н, с), 0,78 (6Н, дд), 0,95 (9Н, с), 1,4-1,8 (6Н, м), 1,9 (2Н, м), 2,05 (1Н, м), 2,3 (2Н, м), 2,65 (1Н, м), 2,95 (2Н, м), 3,22 (1Н, м), 3,4 (1Н, м), 3,6 (2Н, м), 3,75 (3Н, м), 4,8 (1Н, д), 5,1 (1Н, ушир.с), 5,2 (1Н, ушир.с), 7,2 (5Н, м), 7,95 (2Н, д), 8,36 (2Н, д).

450 мг соединения 238 растворяли в 30 мл тетрагидрофурана и обрабатывали 20 мл воды и 50 мл уксусной кислоты. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и выпаривали. Титрование гексаном давало желаемый спирт (290 мг) в виде белого твердого вещества.

Смесь 0,15 г (0,24 ммоль) спирта, полученного выше по предыдущей реакции, 0,205 г (0,5 ммоль) тетраацетилглюкозилбромида и 0,191 г (0,7 ммоль) карбоната серебра в 3 мл дихлорметана перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Добавляли дополнительно 150 мг глюкозилбромида и 150 мг карбоната серебра и смесь перемешивали при ком натной температуре в течение ночи. Смесь помещали на колонку с силикагелем и элюировали 30% этилацетат/гексаном с получением желаемого защищенного углеводородного пролекарства в виде белой пены (200 мг).

ЬСМ8: 1 пик, 966 (М+Н) ^!Н-ЯМР (СОС1₃): 0,78 (6Н, дд), 1,9 (2Н, м), 2,00 (3Н, с), 2,02 (3Н, с), 2,05 (3Н, с), 2,06 (3Н, с), 2,1 (2Н, м), 2,3 (2Н, м), 2,7 (1Н, м), 2,94 (3Н, ушир.д), 3,35 (2Н, м), 3,45 (2Н, м), 3,8 (5Н, м),

4,1 (3Н, м), 4,5 (1Н, д), 4,9 (1Н, ушир.с), 4,95 (1Н, т), 5,08 (4Н, м), (2Н, д), 8,35 (2Н, д).

Пример 38.

<Т° «Αγ ^н

5ОзН

192 239

1,5 г (9,4 ммоль) комплекса 8О₃-Ру добавляли к перемешиваемому раствору 1 г (1,87 ммоль) 197 в 25 мл безводного тетрагидрофурана. Смесь перемешивали при 20°С в течение 12 ч, затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и ос таток переносили на колонку с силикагелем и элюировали ЕЮАс (неразбавленный), далее ЕЮАс:ЕЮН (4:1) с получением 471 мг (47%) 239 в виде бесцветной пены.

^!Н-ЯМР (СБС1₃): 0,80 (м, 6Н), 1,8-2,1 (м,

3Н), 4,15 (ушир.с, 1Н), 4,8 (т, 1Н), 5,04 (ушир.с, 1Н).

М8(Е8-): 614 (М-1).

ЗОэН

239

8О3Н

240

100 мг (0,162 ммоль) 239 растворяли в 15 мл безводного тетрагидрофурана и добавляли к раствору 200 мг Р6/Ва8О₄ (5%). Смесь перемешивали при атмосферном давлении водорода в течение 8 ч и затем отфильтровывали катализатор. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, затем высушивали в вакууме (~1 мм рт.ст., 48 ч) с получением 80 мг (81%) 240 в виде бесцветной пены.

'Н ЯМР (ДМСО-б₆): 0,85 (дд, 6Н), 0,90 (м, 1Н), 2,05 (м, 2Н), 2,58 (м, 3Н), 2,84 (дд, 1Н), 3,05 (м, 2Н), 3,55-3,80 (м, 6Н), 4,20 (т, 1Н), 4,42 (м, 1Н), 4,93 (ушир.с, 1Н), 6,09 (с, 2Н), 6,70 (д, 2Н),

6,80 (д, 1Н), 7,15-7,40 (м, 4Н), 7,51 (д, 2Н).

М8 (Е8-): 584 (М-1).

Пример 39.

780 мг (3 ммоль) 2-хлор-1,3,2-диоксафосфолана добавляли к перемешиваемому раствору

1,07 г (2 ммоль) 197 и 0,7 мл (4 ммоль) Ν,Νдиизопропилэтиламина в 25 мл дихлорметана при 0°С. Смесь нагревали до комнатной темпе31 ратуры и перемешивали в течение 2 ч. Затем смесь охлаждали до 0°С и добавляли 1,5 г (9,3 ммоль) брома в 5 мл дихлорметана. Смесь перемешивали в течение часа при 20°С с последующим выпариванием при пониженном давлении. К остатку добавляли водный раствор (50%) 15 мл триметиламина и смесь перемешивали при 20°С в течение 12 ч.

Растворители удаляли при пониженном давлении и к остатку добавляли 50 мл ЕЮАс:ЕЮН (9:1). Твердое вещество отфильтровывали, промывали ЕЮ Ас: ЕЮН (9:1), затем фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на 3дюймовой колонке силикагеля, используя этилацетат (неразбавленный), затем метанол (неразбавленный) в качестве элюентов с получением 1,15 г (82%) 241 в виде не совсем белого твердо го вещества.

'Н ЯМР (СБС1₃): 0,60 (дд, 6Н), 1,70 (м, 1Н), 1,95 (м, 1Н), 2,10 (м, 1Н), 2,8-3,2 (м, 6Н),

3,4 (ушир.с, 9Н), 5,09 (ушир.с, 1Н), 7,25 (м, 5Н), 7,83 (д, 2Н), 8,28 (д, 2Н).

М8 (Е8+): 701 (М+1), 184 (фосфотидилхолин+);

Пример 40.

250 мг Рб/С (10%) добавляли к раствору 250 мг (0,35 ммоль) 241 в 10 мл метанола, смесь перемешивали при атмосферном давлении водорода в течение 4 ч при 20°С. Смесь фильтровали и фильтрат концетрировали при пониженном давлении. Остаток затем растворяли в 10 мл воды и лиофилизовали с получением 174 мг (74%) 242 в виде твердого белого вещества.

'Н ЯМР (ДМСО-б₆): 0,82 (дд, 6Н), 1,802,00 (м, 2Н), 2,10 (м, 1Н), 2,80 (м, 3Н), 3,00 (м, 2Н), 3,2 (ушир.с, 9Н), 4,0-4,3 (м, 4Н), 4,91 (ушир.с, 1Н), 6,08 (ушир.с, 2Н), 6,67 (д, 2Н),

7,30 (м, 5Н), 7,48 (д, 2Н), 8,12 (д, 1Н).

М8 (Е8+): 671 (М+1), 184 (фосфотидилхо лин+).

Пример 41.

0,175 мл (2 ммоль) трихлорида фосфора добавляли к перемешиваемому раствору 1,07 г (2 ммоль) 197 и 0,35 мл (2 ммоль) Ν,Νдиизопропилэтиламина в 25 мл дихлорметана при 20°С. Смесь перемешивали в течение 4 ч при 20°С, затем добавляли 1 мл воды и переме шивали дополнительно в течение 12 ч при 20°С. К смеси добавляли 3 г безводного сульфата магния и перемешивали в течение 30 мин, затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали с помощью хроматографии на силикагеле, используя ЕЮАс:гексан (4:1), затем ЕЮАс:ЕЮН (1:1), с получением 402 мг (48%) 226 и 427 мг (36%) 243.

226:

'Н ЯМР (ДМСО-б₆): 0,82 (дд, 6Н), 1,84 (м, 1Н), 1,98 (м, 1Н), 2,10 (м, 1Н), 2,68 (дд, 1Н), 2,9-

3,2 (м, 4Н), 3,6-3,8 (м, 3Н), 3,94 (т, 1Н), 4,30, (ушир.с, 1Н), 4,97 (ушир.с, 1Н), 7,30 (м, 5Н),

8,14 (д, 2Н), 8,43 (д, 2Н).

М8(Е8-): 598 (М-1).

243: (1:1 смесь диастереомеров):

'Н ЯМР (СБС1₃): 0,80 (м, 6Н), 1,8-2,1 (м, 4Н), 2,8-3,2 (м, Н), 3,7-3,9 (м, 4Н), 4,15 (м, 1Н),

4,8-5,15 (м, 2Н), 5,57, 5,72 ((д,д), 1Н), 7,25 (м, 5Н), 7,95 (дд, 2Н), 8,35 (м, 2Н).

М8(Е8-): 580 (М-1), 598 ((М+Н₂О)-1).

Пример 42.

Восстановление проводили, как описано в примере 40; (выход 79%).

'Н ЯМР (ДМСО-б₆): 0,81 (дд, 6Н), 1,82 (м, 1Н), 1,95 (м, 1Н), 2,08 (м, 1Н), 2,6-3,15 (м, 6Н),

3,6-3,75 (м, 3Н), 4,03 (т, 1Н), 4,28 (м, 1Н), 4,96 (ушир.с, 1Н), 6,07 (с, 2Н), 6,65 (д, 2Н), 7,25 (м, 5Н), 7,42 (д, 2Н).

М8 (Е8-): 568 (М-1).

Пример 43.

Восстановление проводили, как описано в примере 40; (выход 98%).

(1:1 смесь диастереомеров):

'Н ЯМР (ДМСО-б₆): 0,82 (м, 6Н), 1,75-2,0 (м, 2Н), 2,05 (м, 1Н), 2,6-3,2 (м, 6Н), 3,55-3,8 (м, 4Н), 4,02, 4,22 (м, т, 1Н), 4,75 (м, 1Н), 4,90, 5,01 ((д,д), 1Н), 6,12 (с, 1Н), 6,68 (д, 2Н), 7,30 (м, 5Н),

7,49 (д, 2Н).

М8 (Е8-): 550 (М-1), 568 ((М+Н₂О)-1).

Пример 44. Фармакокинетика у крыс 8ргадие-Эач1еу после приема одной пероральной дозы.

Для изучения фармакокинетики пролекарств по данному изобретению авторы вводили отдельные пероральные дозы серии как пролекарств данного соединения, так и УХ-478, самцам и самкам крыс 8ргадие-Эач1еу. Исследовали введение молярных эквивалентов ряда пролекарств по данному изобретению в различных фармацевтических носителях.

Отдельные группы самцов и самок крыс 8ргадие-0а^1еу (3/пол/группа) получали пероральные дозы соединения 229 в виде пероральной формы в различных носителях в одинаковом эквиваленте дозы (40 мг/кг молярного эквивалента УХ-478). Различными носителями соединения 229 являлись: 1) вода; 2) 5/4/1; 3) ПЭГ 400; 4) ТРС8/ПЭГ 400; и 5) ПЭГ. Носителями для УХ-478 являлись: 1) 33% ТРС8/ПЭГ400/ ПЭГ; и 2) 12,5 % ТРС8/ПЭГ 400/ПЭГ.

Собирали образцы крови после введения в различные промежутки времени и анализировали на наличие соединения 229 и его метаболита, УХ-478, с помощью методов ЖХВД и МС. Результаты данного исследования представлены ниже в виде табл. 1.

Таблица 1

Соединение	229	229	229	229	УХ-478	УХ-478
Носитель	Н2О	Н2О:РС:Е1ОН 5:4:1	ПЭГ 400	ТРС8/ПЭГ 400/РС	33% ТРС8/ПЭГ 400/РС-	12,5% ТРС8/ПЭГ 400/РС
Количество крыс	3	3	3	3	6	>3
Молярная эквивалентная доза/доза 478, мг/кг	40 РО	40 РО	40 РО	40 РО	41 РО	50 РО
АИС, мкг-ч/мл	11,7 ± 4,8	10,6 ± 7,4	7,4 ± 1,8	8,2 ± 1,6	29,6 ± 5,8	16,2 ± 1,8
Стах, мкМ	7,1 ± 1,7	3,3 ± 0,6	3,1 ± 0,3	3,0 ± 0,7	14,0 ± 2,2	6,0 ± 1,0
Время полужизни, ч	1,7*	3,4*	2,8*	2,8*	2,5 ± 0,9	2,2 ± 1,0
Относительная доступность УХ-478	39,5 90,2	35,8 81,8	25,0 57,1	27,7 63,3	контроль	контроль

- доза 50 мг/кг соединения 229 является равной 40 мг/кг УХ-478.

- соединение 229 не обнаруживалось в плазме на 15 мин (первая точка данных) *- Представляет среднее гармоническое

Относительная доступность УХ-478 по сравнению с образцом клинического исследования

Относительная доступность УХ-478 по сравнению с образцом токсикологического исследования

Авторы проводили подобное исследование на собаках, применяя твердую капсульную форму соединения 229 и форму в виде этанол/метилцеллюлозного раствора, по сравнению с формой УХ-478 в виде ТРС8-содержащего раствора. Результаты исследования представлены ниже в табл. 2.

Таблица 2

Соединение	229	229	УХ-478
Носитель	Твердая капсула	Метилцеллюлоза в 5% ЕЮН/вода	22% ТРС8/ПЭГ 400/РС
Количество собак	2	2	> 2
Молярная экв. доза/доза 478, мг/кг	17 РО	17 РО	17 РО
ЛИС, мкг-ч/мл	16,7 ± 2,7	14,2 ± 3,2	23,5 ± 7,4
Стах, мкг/мл	6,1 ± 1,7	6,3 ± 0,3	6,8 ± 1,1
Ттах, ч	2,3 ± 0,6	0,5 ± 0,5	1,0 ± 0,8
Относительная доступность УХ-478, %	71,1	60,4	контроль

Результаты показали, что пероральное введение соединения 229 в виде водного раствора приводит к улучшению биологической доступности по сравнению с другими исследованными носителями. Также после введения соединения 229, оно не обнаруживается в образце крови на первой временной точке (или более поздних образцах), что предполагает первый метаболический переход в УХ-478. Сравнение водной дозы соединения 229 с двумя неводными препаратами, применяемыми для УХ-478, показало равнозначность в доставки, что иллюстрируется обнаруженным интервалом биологической доступности.

Пример 45.

122 400

Добавляли 0,28 мл (3,0 ммоль) РОС1₃ к перемешиваемому раствору 1,07 г (2,0 ммоль) соединения 197 в 10 мл безводного пиридина при 5°С. Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали при 20°С в течение 3 ч. Смесь охлаждали до 0°С, и резко охлаждали 10 мл воды. Растворители удаляли при пониженном давлении, остаток растворяли в 100 мл этилацетата и промывали 20 мл 1 М раствора бикарбоната натрия. Органическую фазу сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали, затем концентрировали. Хроматографиче ская очистка (8Ю₂, ЕЮАс) давала 280 мг соединения 400 (выход 23%).

¹Н ЯМР (ДМСО б₆): 0,86 (дд, 6Н), 2,05 (м, 2Н), 2,84 (д, 2Н), 2,95 (дд, 1Н), 3,06 (м, 1Н), 3,25 (дд, 1Н), 3,50-3,70 (м, 4Н), 4,20 (м, 1Н), 4,35 (м, 1Н), 7,2-7,4 (м, 5Н), 7,9-8,1 (м, 2Н), 8,40 (м, 2Н).

Соединение 400 преобразовывали в соединение 401 с помощью стандартного способа гидрирования, описанного выше, применяя Н₂/Рб.С(10%), атмосферное давление, 4 ч при комнатной температуре, растворитель: МеОНН₂О (5:1). Выход 401 = 68%.

¹Н ЯМР (ДМСО б6): 0,85 (дд, 6Н), 2,0 (м, 2Н), 2,6-3,1 (м, 4Н), 4,15 (м, 1Н), 4,40 (м, 1Н),

6.1 (ушир.с, 1Н), 6,61 (м, 2Н), 7,2-7,5 (м, 7Н).

М8(Е8-): 566 (М-1).

Пример 46.

В Ί 350А η · 2. А » н 350В п=3,Н=Н 350С η χ 2. Я = -С(«МН)ННС&2

218

Добавляли 1,0 г (2,8 ммоль) Να-1-Вос-пбС^-Ь-орнитина к перемешиваемому раствору

1.2 г (3,15 ммоль) НАТИ, 0,2 г (1,47 ммоль) НОЛЕ 0,4 г (4,0 ммоль) NММ в 10 мл ДМФ. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, далее добавляли 0,5 г (1,0 ммоль) соединения 218 и раствор перемешивали при 50°С в течение 12 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли 100 мл эфира и экстрагировали 5x50 мл воды. Органическую фазу сушили над безводным сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в условиях пониженного давления. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (гексан-ЕЮАс (1:1), затем ЕЮАс (неразбавленный)) с выходом 410 мг (48%) соединения 350.

Соединение 350А.

'Н ЯМР (СБС1₃): 0,85 (дд, 6Н), 1,41 (с, 3Н),

1.45 (с, 6Н), 1,60 (м, 4Н), 1,90 (м, 2Н), 2,1 (м, 1Н), 2,75-3,25 (м, 6Н), 3,60-3,90 (м, 6Н), 5,15 (дд, 2Н), 7,2-7,4 (м, 10Н), 7,68 (дд, 4Н).

М8 (Е8-): 852 (М-1).

М8 (Е8+): 854 (М+1).

Соединение 350В.

'Н ЯМР (СБС1₃): 0,81 (дд, 6Н), 1,39 (с, 9Н), 1,40-2,10 (м, 9Н), 2,70-3,20 (м, 8Н), 3,60-3,90 (м, 6Н), 4,10 (м, 1Н), 4,80 (д, 1Н), 5,04 (ушир.с, 2Н), 7,1-7,3 (м, 10Н), 7,61 (с, 4Н).

М8 (Е8-): 866 (М-1).

М8 (Е8+): 868 (М+1).

Соединение 350С.

'Н ЯМР (СБС1₃): 0,86 (дд, 6Н), 1,40 (с, 3Н),

1.46 (с, 6Н), 1,60-2,10 (м, 7Н), 2,70-3,15 (м, 6Н),

3,60 (д, 1Н), 3,70-4,10 (м, 6Н), 4,81 (д, 1Н), 5,05-

5,30 (м, 7Н), 7,18-7,4 (м, 17Н), 7,55 (д, 2Н).

М8 (ЕАВ+): 1030 (М+1), 1052 (М+№).

Соединения 350А, 350В и 350С преобразовывали в соединения 402, 403 и 404, соответственно, применяя стандартный способ гидрировали, рассматриваемый выше: Н₂/Рб.С(10%), атмосферное давление, 4 ч, комнатная температура, растворитель: ЕЮН, Выход: 81%.

Соединение 402.

' Н ЯМР (СБС1₃): 0,80 (дд, 6Н), 1,38 (с, 9Н),

1,8 (м, 6Н), 2,10 (м, 2Н), 2,75-3,30 (м, 8Н), 3,504,00 (м, 7Н), 4,55 (ушир.с, 1Н), 7,2 (м, 5Н), 7,60 (д, 2Н), 7,81 (д, 2Н).

М8 (Е8+): 720 (М+1).

Соединение 403.

' Н ЯМР (СБС1₃): 0,87 (дд, 6Н), 1,45 (с, 9Н),

1.50- 2,00 (м, 8Н), 2,08 (м, 1Н), 2,75-3,15 (м, 8Н),

3,60 (д, 1Н), 3,75-3,90 (м, 5Н), 4,28 (ушир.с, 1Н),

4,92 (д, 1Н), 5,11 (м, 1Н), 5,27 (ушир.с, 1Н), 7,28-

7,35 (м, 5Н), 7,70 (с, 4Н).

М8 (Е8+): 734 (М+1).

Соединение 404.

' Н ЯМР (СБС1₃): 0,80 (дд, 6Н), 1,32 (с, 9Н),

1.50- 2,10 (м, 7Н), 2,60-3,20 (м, 8Н), 3,40-3,80 (м, 5Н), 5,0 (ушир.с, 1Н), 7,05-7,2 (м, 5Н), 7,50-7,80 (м,4Н).

М8 (Е8+): 762 (М+1).

Пример 47.

Добавляли 5 мл ТФК к перемешиваемому раствору 260 мг (0,3 ммоль) соединения 350А, 350Β или 350С в 20 мл хлороформа. Смесь перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре и затем растворители удаляли при пониженном давлении. Остаток растворяли в 20 мл дихлорметана, 2 мл (11 ммоль) Ν,Νдиизопропилэтиламина и 1 мл (10 ммоль) уксусного ангидрида добавляли к реакционной смеси. Раствор перемешивали в течение одного часа, затем растворители удаляли. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (элюент: ЕЮАс-ЕЮН (9:1)) с получением 170 мг (71%) соединения 351 А, 351В или 351С соответственно.

Соединение 351 А.

'Н ЯМР (СБС1₃): 0,85 (дд, 6Н), 1,60 (м, 3Н), 1,80-2,00 (м, 3Н), 2,06 (2, 3Н), 2,75 (дд, 1Н),

2,80-3,20 (м, 5Н), 3,60-3,90 (м, 7Н), 4,85 (д, 2Н),

5,10 (м, 3Н), 6,46 (д, 1Н), 7,25 (м, 10Н), 7,67 (с, 4Н), 9,30 (с, 1Н).

М8 (Е8+): 796 (М+1), 818 (М+№).

Соединение 351В.

Ή ЯМР (СИС1₃): 0,80 (дд, 6Н), 1,38 (м, 2Н), 1,50 (м, 2Н), 1,70 (м, 2Н), 1,85 (м, 2Н), 2,00 (с, 3Н), 2,70 (дд, 1Н), 2,75-3,20 (м, 7Н), 3,55 (д, 1Н), 3,75 (м, 6Н), 4,45 (к, 1Н), 4,83 (д, 1Н), 4,95 (т, 1Н), 5,03 (ушир.с, 3Н), 6,46 (д, 1Н), 7,20 (м, 10Н), 7,61 (с, 4Н), 9,29 (с, 1Н).

М8 (Е8+): 810 (М+1), 832 (М+Ыа).

Соединение 351 С.

Ή ЯМР (СИС1₃): 0,85 (дд, 6Н), 1,70-2,00 (м, 6Н), 2,07 (с, 3Н), 2,70 (дд, 1Н), 2,80-3,00 (м, 3Н), 3,10 (дд, 1Н), 3,60 (д, 1Н), 3,65-4,00 (м, 6Н),

4,1 (м, 1Н), 4,62 (к, 1Н), 4,82 (д, 1Н), 5,00-5,30 (м, 5Н), 7,10-7,40 (м, 15Н), 7,55 (д, 2Н), 7,65 (м, 3Н), 9,18 (ушир.с, 1Н), 9,45 (ушир.с, 1Н), 9,56 (ушир.с, 1Н).

М8 (ИАВ+): 972 (М+1), 994 (М+Ыа).

ЗЛСп-г.А.-а-ННт 405П-2.К-Н

406 П = 3,Й«Н

407 η » 2. К -С(«МН)НН2

Преобразование соединений 351 А, 351В и 351С в 405, 406 и 407, соответственно, достигали путем стандартного гидрирования, используя Н₂/Рй.С (10%), атмосферное давление, 4 ч при комнатной температуре, растворитель: ЕЮН, выход = 46%.

Соединение 405.

Ή ЯМР (ДМСО й₆): 0,85 (дд, 6Н), 1,62 (м, 3Н), 1,81 (м, 2Н), 1,94 (с, 3Н), 2,00-2,2 (м, 2Н), 2,75-3,00 (м, 5Н), 3,10 (м, 2Н), 3,50-3,80 (м, 5Н),

4,54 (м, 1Н), 5,00 (м, 1Н), 5,11 (д, 1Н), 7,2-7,4 (м, 5Н), 7,80-8,00 (м, 5Н), 10,72 (с, 1Н).

М8 (Е8+): 662 (М+1).

Соединение 406.

Ή ЯМР (ДМСО й₆): 0,80 (дд, 6Н), 1,30-1,80 (м, 7Н), 1,85 (с, 3Н), 1, 95-2,10 (м, 2Н), 2,70 (м, 4Н), 2,99 (м, 2Н), 3,30 (м, 5Н), 3,40-3,80 (м, 4Н),

4,35 (м, 1Н), 4,90 (с, 1Н), 5,00 (д, 1Н), 7,08-7,25 (м, 5Н), 7,50 (ушир.с, 1Н), 7,71 (д, 2Н), 7,79 (д, 2Н), 10,54 (с, 1Н).

М8 (Е8+): 676 (М+1).

Соединение 407.

Ή ЯМР (ДМСО й₆): 0,80 (дд, 6Н), 1,40-1,60 (м, 4Н), 1,75 (м, 2Н), 1,86 (с, 3Н), 2,00 (м, 2Н),

2,75 (дт, 2Н), 3,00 (м, 2Н), 3,10 (к, 2Н), 3,40-3,70 (м, 5Н), 4,39 (к, 1Н), 4,92 (ушир.с, 1Н), 5,01 (д, 1Н), 7,20 (м, 5Н), 7,70 (д+м, 3Н), 7,81 (д, 2Н),

8,30 (д, 1Н), 10,60 (с, 1Н).

М8 (Е8+) : 704 (М+1).

Пример 48.

252

122

Добавляли 1,0 г (7,5 ммоль) метанфосфонилдихлорида к перемешиваемому раствору 2,14 г (4,00 ммоль) соединения 197 в 20 мл толуола, содержащего 10% пиридина. Смесь пе ремешивали при 100°С в течении 5 ч, затем охлаждали до 40°С, к реакционной смеси добавляли 2 г (18,5 ммоль) бензилового спирта и смесь перемешивали при 20°С в течение 12 ч. Осадок фильтровали, промывали 2x10 мл толуола и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью хроматографии на силикагеле (элюенты: гексанЕЮАс (1:1), затем ЕЮАс (неразбавленный)) с выходом 550 мг (20%) соединения 352.

'11 ЯМР (СИС1₃): 0,67 (дд, 6Н), 1,53 (д, 3Н),

1,70 (м, 1Н), 1,90-2,10 (м, 2Н), 2,65-3,20 (м, 6Н),

3,55 (д, 1Н), 3,80 (м, 3Н), 4,10 (м, 1Н), 4,70 (к, 1Н), 4,90-5,20 (м, 4Н), 6,37 (д, 1Н), 7,2-7,4 (м, 10Н), 7,90 (д, 2Н), 8,30 (д, 2Н).

М8 (Е8+): 704 (М+1), 726 (М+Ыа).

Соединение 352 преобразовывали в соединение 408, применяя стандартный способ гидрирования: Н₂/Рй.С (10%), атмосферное давление, 2 ч, комнатная температура, растворитель: МеОН; выход: 78%.

'11 ЯМР (ДМСО й₆): 0,84 (дд, 6Н), 1,44 (д, 3Н), 1,82 (м, 1Н), 1,90-2,10 (м, 2Н), 2,62 (м, 2Н),

2,95 (м, 2Н), 3,10 (д, 1Н), 3,39 (д, 1Н), 3,45-3,80 (м, 4Н), 4,14 (т, 1Н), 4,53 (м, 1Н), 5,00 (ушир.с, 1Н), 6,68 (д, 2Н), 7,2-7,4 (м, 5Н), 7,50 (д, 2Н).

М8 (Е8-): 582 (М-1).

Хотя авторы описали ряд осуществлений данного изобретения, очевидно, что данные основные конструкции могут быть изменены для обеспечения других воплощений, использующих продукты и реакции по данному изобретению. Поэтому, будет иметь большое значение, что возможности данного изобретения еще лучше определяются прилагаемой формулой изобретения, чем особые воплощения, представленные с помощью примера.

Claims (13)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Соединение формулы где В⁷ выбран из -РО3^2-Ыа2⁺, -РО3^2-К2⁺, -РО₃ ^2-Мд²⁺,
2. 2. Соединение по п.1, где В⁷ выбран из

   -РО₃ ^2-Ыа₂ ⁺, -РО3^2-К2⁺ или -РО₃ ^2-Са²⁺.
3. 3. Соединение по п.2, где В⁷ представляет собой -РО₃ ^2-Са²⁺.
4. 4. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение, охарактеризованное в любом из пп.1-3, в количестве, эффективном для лечения инфекции, вызванной вирусом, характеризующимся наличием аспартилпротеазы; и фармацевтически приемлемый носитель, адъювант или наполнитель.
5. 5. Фармацевтическая композиция по п.4, где указанный вирус представляет собой ВИЧ.
6. 6. Фармацевтическая композиция по п.4, где указанная фармацевтическая композиция приготовлена для перорального применения.
7. 7. Фармацевтическая композиция по п.4, дополнительно содержащая один или несколько агентов, независимо выбранных из противовирусного средства, ингибитора протеазы ВИЧ, отличного от соединения, охарактеризованного в п.1, или иммуностимулятора.
8. 8. Фармацевтическая композиция по п.7, дополнительно содержащая один или несколько агентов, выбранных из зидовудина (ΑΖΤ), зальцитабина (66С), диданозина (66Ι), ставудина (64Т), ламивудина (3ТС), абакавира (1592И89), саквинавира (Во 31-8959), индинавира (МК-639, Ь-735,524), ритонавира (АВТ 538, А84538), нелфинавира (АС 1343), ХМ 450, ССР 53,437, 935И83, 524У91, 8С-52151, ХМ 412, тускаразола, полисульфированных полисахаридов, ганцикловира, дидеоксицитидина, рибавирина, ацикловира, ΤΙΒΟ, невирапина, 1Ь-2, СМ-С8Р, альфа интерферона или эритропоэтина (ЕРО).
9. 9. Способ ингибирования аспартилпротеазной активности у млекопитающих, включаю щий стадию контактирования указанного млекопитающего с фармацевтической композицией, охарактеризованной в п.4, или введения указанному млекопитающему фармацевтической композиции, охарактеризованной в п.4.
10. 10. Способ лечения ВИЧ-инфекции у млекопитающего, включающий стадию введения указанному млекопитающему фармацевтической композиции, охарактеризованной в п.4.
11. 11. Способ по п.10, где указанному млекопитающему дополнительно вводят одно или несколько дополнительных средств, выбранных из противовирусного средства, ингибитора протеазы ВИЧ, отличного от соединения, охарактеризованного в п.1, или иммуностимулятора, либо в виде части одной дозированной формы с указанной фармацевтической композицией, либо в виде дробной дозированной формы.
12. 12. Способ по п.11, где указанное одно или несколько дополнительных средств выбраны из зидовудина (ΑΖΤ), зальцитабина (66С), диданозина (66Ι), ставудина (64Τ), ламивудина (3ТС), абакавира (1592И89), саквинавира (Во 31-8959), индинавира (МК-639, Ь-735,524), ритонавира (АВТ 538, А84538), нелфинавира (АС 1343), ХМ 450, ССР 53,437, 935И83, 524У91, 8С52151, ХМ 412, тускаразола, полисульфированных полисахаридов, ганцикловира, дидеоксицитидина, рибавирина, ацикловира, ΤΙΒΟ, невирапина, 1Ь-2, СМ-С8Р, альфа интерферона или эритропоэтина (ЕРО).
13. 13. Способ по п.10, где указанная стадия введения включает пероральное введение.