DE68904326T2

DE68904326T2 - Physiologisch aktive substanzen enthaltende mikrosphaeren des polymilchsaeuretyps sowie verfahren zu deren herstellung.

Info

Publication number: DE68904326T2
Application number: DE8989103091T
Authority: DE
Inventors: Suong-Hyu Hyon; Yoshito Ikada
Original assignee: Biomaterials Universe Inc
Current assignee: Biomaterials Universe Inc
Priority date: 1988-02-24
Filing date: 1989-02-22
Publication date: 1993-05-27
Anticipated expiration: 2009-02-23
Also published as: US5100669A; EP0330180B1; EP0330180B2; EP0330180A1; DE68904326D1; JPH01216918A; DE68904326T3; JP2670680B2

Description

Die vorliegende Erfindung betrifft Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp mit kontrollierter Freisetzung, die eine wasserlösliche, physiologisch aktive Substanz enthalten, und ein Verfahren zu deren Herstellung.
In den vergangenen Jahren bestand ein stark anwachsendes Interesse an der Entwicklung eines neuen Systems zur Abgabe von Arzneimitteln (DDS). Dies ist eine Folge des sozialen Erfordernisses, sowohl Sicherheit als auch eine hohe biologische Verfügbarkeit des Arzneimittels zu erzielen, d.h. eine pharmazeutische Wirkung eines bekannten Arzneimittels zu maximieren, ebenso wie eine Nebenwirkung davon zu minimieren. Bei der Untersuchung bezüglich DDS ist ein üblicherweise verwendeter, pharmazeutischer Träger eine nicht-abbaubare Verbindung mit hohem Molekulargewicht, wie ein Silicongummi, Polyethylen oder ein Ethylen-Vinylacetat-Copolymeres. Diese Träger ergaben bei einem percutanen Präparat, das durch die Haut oder die Schleimhaut verabreicht wird, ein gutes Ergebnis. Wenn jedoch diese Verbindungen mit hohem Molekulargewicht in den menschlichen Körper implantiert oder injiziert werden, bleiben diese Träger nach Freisetzen des Arzneimittels im Körper als Fremdmaterial, was eine gewisse Störung für den Körper verursacht. Wenn im Gegensatz dazu eine Verbindung mit einem hohen Molekulargewicht, die in vivo abbaubar und absorbierbar ist, als Träger verwendet wird, wird der Träger schrittweise in dem lebenden Gewebe hydrolysiert, und gleichzeitig wird das darin enthaltene Arzneimittel schrittweise freigesetzt, und daher besteht keine Notwendigkeit nach irgendeiner chirurgischen Behandlung, um den Träger nach der Behandlung herauszunehmen.
Die in vivo abbaubare und absorbierbare Verbindung mit hohem Molekulargewicht umfaßt eine natürliche Verbindung mit hohem Molekulargewicht, für die ein typisches Beispiel Collagen ist, und eine synthetische Verbindung mit hohem Molekulargewicht, für die ein typisches Beispiel Polymilchsäure ist. Die Polymilchsäure wird aus Milchsäure synthetisiert, die in der Natur weit verbreitet ist. Abgesehen davon wird diese Polymilchsäure nicht-enzymatisch in vivo hydrolysiert und schließlich als Kohlendioxid und Wasser entsorgt, und daher ist sie eine interessante in vivo abbaubare und absorbierbare Verbindung niit hohem Molekulargewicht. Sie wurde daher als Träger mit kontrollierter Freigabe für verschiedene Arzneistoffe seit den 70er Jahren [Suong-Hyu Hyon, Seiyaku Kojo (Pharmazeutische Fabrik), Bd. 13, Nr. 10, S. 552, 1983] untersucht.
Unter den bekannten Studien ist eine Repräsentative ein Verfahren, bei dem man ein hydrophobes Arzneimittel, wie ein Hormon (z.B. Östradiol und dgl.) in einem organischen Lösungsmittel, wie Benzol, zusammen mit der Polymilchsäure auflöst, und dann das Lösungsmittel durch Destillation zur Formulierung in einen Film, ein Pulver, Pellets und dgl. entfernt (zweite japanische Patentpublikation Nr. 17525/1975). Es ist auch ein sog. Lösungsmittelverdampfungs-Trocknungsverfahren bekannt, bei dem man die Polymilchsäure und das hydrophobe Arzneimittel in einem organischen Lösungsmittel zur Auflösung beider Komponenten auflöst, ein Mittel zur Phasenscheidung der Lösung zusetzt, um eine Emulgierung zu bewirken, und dann das Lösungsmittel durch Destillation entfernt, um die Mikroteilchen zu gewinnen (erste japanische Patentpublikation Nr. 33414/1980). Jedoch sind diese Verfahren nur auf hydrophobe Arzneimittel anwendbar, da bei ihnen ein hydrophobes, organisches Lösungsmittel, wie Benzol, Chloroform oder dgl., verwendet wird.
Andererseits wurden für ein Präparat mit kontrollierter Freigabe eines wasserlöslichen Arzneimittels durch eine Verbindung mit hohem Molekulargewicht des Polymilchsäuretyps die folgenden Verfahren durchgeführt. Die erste japanische Patentpublikation Nr. 100516/1985 beschreibt ein Verfahren, bei dem eine dreischichtige Emulsion des W/O/W-Typs in Wasser gebildet wird und dem Trocknen in Wasser unterworfen wird, um Mikrokapseln des Polymilchsäuretyps zu ergeben. Jedoch besitzt dieses Verfahren verschiedene Nachteile, d.h. ein aufwendiges Verfahren zur Herstellung, das Erfordernis der dritten Komponente, wie Gelatine, zusätzlich zu dem Arzneimittel und der Polymilchsäure, schwierig erhältliche Mikrokugeln in Submikrongröße und eine niedrige Einarbeitunnsrate des Arzneimittels in die Kapseln infolge der dreischichtigen Struktur und das Auftreten von Brüchen durch Beschädigung der Polymilchsäurewand der Mikrokapsel infolge einer dünnen Wand der Mikrokapseln, was zu einer instabilen Freisetzung des Arzneimittels führt.
Die erste japanische Patentpublikation Nr. 150609/1982 beschreibt ausführlich eine verzögerte Freigabe eines säurestabilen Polypeptids, bei dem hydrophobe Polymilchsäure und ein hydrophiles Polypeptid in einem Gemisch aus Dioxan und Wasser aufgelöst sind. Da jedoch mindestens eine Verbindung der Polymilchsäure und des Polypeptids nicht vollständig in dem Gemisch aufgelöst ist, ist die erhaltene Lösung nicht klar. Um weiter eine unerwünschte Ungleichförmigkeit der Polymilchsäure und des Polypeptids zu vermeiden, wird ein Film, der nach einem Gießverfahren hergestellt worden ist, weiter einer Kompressionsverformung mit einer heißen Presse zu dessen Formulierung in einen polypeptidhaltigen Polymilchsäurefilm, -folie, -zylinder oder ein pulverisiertes Produkt davon unterworfen. Obwohl Eisessig als Lösungsmittel für die Polymilchsäure verwendet wird, wird eine gemischte Lösung der Polymilchsäure und des Polypeptids lyophilisiert und dann einer Extrusionsformbehandlung bei einer hohen Temperatur zu dessen Formulierung in eine zylindrische Form unterworfen. Somit beschreibt diese Literaturstelle keine Formulierung von Mikrokugeln mit einem Teilchendurchmesser von 0,01 um bis 300 um wie in der vorliegenden Erfindung.
Wie aus der obigen Beschreibung hervorgeht, stellen diese bekannten Erfindungen DDS-Systeme mit einigen Wirkungen bereit, sind jedoch hinsichtlich der Tatsache nachteilig, daß keine Mikrokugeln hergestellt werden, bei denen hydrophile, physiologisch aktive Substanzen und hydrophobe Polymilchsäure gleichförmig in molekularer Ordnung vermischt werden oder dahingehend, daß ein aufwendiges Herstellungsverfahren beteiligt ist.
Die EP-A-0 145 240 beschreibt eine Mikrokapsel, die durch Herstellen einer Wasser-in-Öl-Emulsion, umfassend eine innere, wäßrige, das wasserlösliche Arzneimittel und eine das Arzneimittel zurückhaltende Substanz dafür enthaltende Schicht, und eine Ölschicht, enthaltend eine polymere Substanz, anschließendes Verdicken oder Verfestigen der inneren, wäßrigen Schicht auf eine Viskosität von nicht weniger als etwa 5000 Centipoise und anschließendes Unterwerfen der entstandenen Emulsion einer Wassertrocknung, hergestellt worden ist und eine verlängerte Freigabe des wasserlöslichen Arzneimittels ergibt.
Die EP-A-0 134 318 beschreibt lange haltbare, injizierbare und implantierbare Insulinpräparate, die in Form einer insulin-bioabbaubaren Polymermatrix bereitgestellt werden. Das bioabbaubare Polymere ist bevorzugt ein Milchsäurepolymeres und kann in Form von Mikrokugeln oder Pellets bereitgestellt werden.
Unter solchen Umständen führten die vorliegenden Erfinder intensive Studien durch, um ein verbessertes Verfahren zur Herstellung eines Präparats vom Polymilchsäuretyp mit kontrollierter Freigabe, das einfach ist und eine stabile Freisetzung eines Wirkstoffes gewährleisten kann, herzustellen und fanden heraus, daß ein Präparat in Form von Mikrokugeln, das eine verzögerte Freigabe eines Wirkstoffes für eine lange Zeitspanne unter Vermeidung des unerwünschten Auftretens von Brechen erhalten werden kann, indem eine Lösung einer wasserlöslichen, physiologisch aktiven Substanz und Polymilchsäure, die gleichförmig in einem Mischlösungsmittel aus einem hydrophilen, organischen Lösungsmittel und Wasser oder in einer organischen Säure aufgelöst sind, hergestellt wird, die Lösung mit einem schlechten Lösungsmittel, das mit dem Mischlösungsmittel oder der organischen Säure nicht-mischbar ist, unter Erhalt einer Emulsion vermischt wird, und dann das Gemisch dem Trocknen durch Verdampfen des Lösungsmittels unterworfen wird.
Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist die Bereitstellung einer Mikrokugel, die Polymilchsäure, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus einem L-Milchsäurepolymeren, einem D,L-Milchsäurepolymeren, einem Copolymeren von L-Milchsäure und Glykolsäure, einem Copolymeren von D,L-Milchsäure und Glykolsäure, und eine wasserlösliche, physiologisch aktive Substanz, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus einer Substanz vom Polypeptidtyp oder einer proteinartigen Substanz, einem antimikrobiellen Mittel, einem Antitumormittel, einem Antipyretikum, einem antiinflammatorischen Mittel, einem Analgetikum, einem Antitussivum, einem Expektorans, einem Antidepressivum, einem Muskelrelaxans, einem Antiulcermittel, einem antiallergischen Mittel, einem Hypotensivum, einem Diuretikum, einem Antidiabetikum, einem Kardiotonikum, einem Vasodilatator, einem Antiarrhythmikum, einem Antikoagulans, einem hämostatischen Mittel, einem Narkoseantagonisten, einem Antituberkulosemittel, einem Hormon, einem Immunaktivator, einem Antiepileptikum, einem Antihistaminikum und einem landwirtschaftlichen Mittel enthält, und eine mittlere Teilchengröße von etwa 0,01 um bis 300 um besitzt, wobei die eluierte Menge der physiologisch aktiven Substanz, bezogen auf den Gehalt der physiologisch aktiven Substanz in der Mikrokugel, nach 24 h bei dem in vitro Elutionstest in Phosphatpuffer mit einem pH-Wert von 7,4 bei 37ºC nicht mehr als 30 % beträgt.
Eine weitere Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist die Bereitstellung eines Verfahrens zur Herstellung von Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp, die eine wasserlösliche, physiologisch aktive Substanz enthalten, bei dem eine Lösung der wasserlöslichen, physiologisch aktiven Substanz und der Polymilchsäure, die gleichförmig einem Mischlösungsmittel aus einem hydrophilen, organischen Lösungsmittel und Wasser oder in einer organischen Säure aufgelöst sind, hergestellt wird, die Lösung mit einem schlechten Lösungsmittel, das mit dem Mischlösungsmittel oder der organischen Säure nicht-mischbar ist, unter Erhalt einer Emulsion vom O/O-Typ oder W/O-Typ vermischt, und dann das Gemisch durch Verdampfen des Lösungsmittels trocknet.
Die "wasserlösliche, physiologisch aktive Substanz" gemäß vorliegender Erfindung ist ein Arzneimittel mit einer hohen Hydrophilie und einer niedrigen Verteilungsgeschwindigkeit in Öl und Wasser, aber umfaßt solche Substanzen, die sowohl mit Öl als auch mit Wasser verträglich sind und ist aus der Gruppe, bestehend aus hydrophilen Antikrebsmitteln, Antibiotika, Polypeptiden mit einer physiologischen Aktivität, Antipyretika, Sedativen, Immunaktivatoren, antiinflammatorischen Mitteln, Antitussiva, Antiepileptika, Antihistaminika, Hypotensiva, Diuretika, Antidiabetika, Muskelrelaxantien, Antiulcusmitteln, Antidepressiva, Antiallergika, Kardiotonika, Antiarrhythmika, Vasodilatatoren, Antikoagulantien, Narkoseantagonisten, Hämostatika, Antituberkulosemitteln und Hormonen, ausgewählt.
Bevorzugte Beispiele für Antikrebsmittel sind Adriamycin, Mitomycin, Bleomycin, Cisplatin, 5-Fluoruracil, Methotrexat, Actinmycin D, Crestin, Picibanil und Lentinan.
Die Polypeptide mit einer physiologischen Aktivität umfassen beispielsweise Insulin, Somatostatin, luteinisierendes Hormon-Releasing Hormon (LHRH) und ein Derivat von LHRH, Prolactin, adrenocorticotropes Hormon (ACTH), Wachstumshormon (GH), schilddrüsenstimulierendes Hormon-Releasing Hormon, Melanocyten stimulierendes Hormon (MSH), luteinisierendes Hormon (LH), Palipresin, Calcitonin, Oxytocin, Nebenschilddrüsenhormon, Gastrin, Tetragastrinhydrochlorid, Glucagon, Pankreozymin, Cholecystokinin, Angiotensin, Lactogen aus der menschlichen Plazenta, menschliches Choriongonadotropin (HCG), Enkephallin, Endorphin, Keutorphin, Interferon, Interleukin (I, II, III), Tumornecrosefaktor (TNF), Tuftsin, Thymopoietin, Thymosin, Thymostimulin, humoraler Faktor aus Thymus, Thymusfaktor aus Blut, koloniestimulierender Faktor, Motilin, Deinorphin, Bompesin, Neurotensin, Cerulein, Bradykinin, Urokinase, Asparaginase, Kallikrein, Substanz P, Nervenwachstumsfaktor, blutkoagulierender Faktor, Lysozymchlorid, Polymyxin B, Colistin, Glamicidin und Bacitracin.
Die Antibiotika umfassen beispielsweise Tetracycline (TCs), wie Chlortetracyclin (CTC), Oxytetracyclin (OTC), Doxycyclin (DOXY) und Tetracyclin (TC), eine Vielzahl von Penicilinen (PCs), Cephalosporine (CEPs), Streptomycin, Novabiosin, Neomycin, Erythromycin, Colistin, Lincomycin, Nalidixinsäure, Aburamycin, Salinomycin, Nigericin, Kanamycin, Kitosamycin, Tylosin, Furaltadon, Vancomycin, Thiostrepton, Gentamycin, Tobramycin, Spiramycin, Ristocetin, Seumycin, Erythromycin, 5-O-Mycaminoturutyronorid und Dibekacin-Hydrochlorid.
Die antipyretischen, analgetischen und antiinflammatorischen Mittel umfassen beispielsweise Natriumsalicylat, Sulpyrin, Diclofenacnatrium, Indomethacinnatrium, Natriumflufenamat, Pethidinhydrochlorid, Morphinhydrochlorid, Oxymorphon und Levorphanoltartrat.
Die Sedativa umfassen beispielsweise Prochlorperazin, Trichlorperazin, Chlorpromazinhydrochlorid, Atropinsulfat und Scopolaminmethylbromid.
Die Antitussiva und Expectrantien umfassen beispielsweise Noscapinhydrochlorid, Codeinphosphat, Methylephedrinhydrochlorid, Ephedrinhydrochlorid, Alloclamidhydrochlorid, Dihydrocodeinphosphat, Chlophedianolhydrochlorid, Picoperidaminhydrochlorid, Cloperastin, Isoproterenolhydrochlorid, Protokylolhydrochlorid, Salbutamolsulfat und Terbutalinsulfat.
Die Antidepressiva umfassen beispielsweise Phenelzinsulfat, Clomipramin, Noxiptilin und Imipramin.
Die Antiepileptika umfassen beispielsweise Ethosuximid, Acetazolamidnatrium und Chlordiazepoxidhydrochlorid.
Die Muskelrelaxantien umfassen beispielsweise Pridinolmethansulfonat, Pancuroninbromid und Tubocurarinchlorid.
Die Antiulcusmittel umfassen beispielweise Histidinhydrochlorid und Metoclopramid.
Die Antiallergika umfassen beispielsweise Ketotifenfumarat, Diphenhydraminhydrochlorid, Chlorpheniraminmaleat, Methdilazinhydrochlorid, Tripelennaminhydrochlorid, Clemizolhydrochlorid, Diphenylpyralinhydrochlorid und Methoxyphenaminhydrochlorid.
Die Hypotensiva und Diuretika umfassen beispielsweise Clonidinhydrochlorid, Captopril, Bunitrololhydrochlorid, Hexamethoniumbromid, Pentolinium, Ecarazinhydrochlorid und Mecamylaminhydrochlorid.
Die Antidiabetika umfassen beispielsweise Glipizid, Glymidinnatrium, Phenforminhydrochlorid, Methformin und Buforminhydrochlorid.
Die Kardiotonika umfassen beispielsweise Etilefrinhydrochlorid, Aminophyllin, Trans-p-oxocamphor und Theophyllol.
Die Vasodilatatoren umfassen beispielsweise Oxyfedrinhydrochlorid, Tolazolinhydrochlorid, Diltiazemhydrochlorid, Bamethansulfat und Hexobendin.
Die Antiarrhythmika umfassen beispielsweise Propanololhydrochlorid, Oxyprenololhydrochlorid, Bufetololhydrochlorid und Alprenololhydrochlorid.
Die Antikoalulantien umfassen beispielsweise Heparinnatrium und Natriumcitrat.
Die Hämostatika umfassen beispielsweise Acetomenaphthon, Thrombin, Thromboplastin, Menadionnatriumbisulfat, Tranexamsäure, e-Aminocapronsäure, Adrenochrommonoaminoguanidinmethansulfonat und Carbazochromnatriumsulfat.
Die Narkoseantagonisten umfassen beispielsweise Levallorphantartrat, Naloxonhydrochlorid und Nalorphinhydrochlorid.
Die Antituberkulosemittel umfassen beispielsweise Isoniazid, Ethambutol und Natriumparaaminosalicylat.
Die Hormone umfassen beispielsweise Dexamethasonnatriumsulfat, Prednisolonnatriumphosphat, Prednisolonnatriumhemisuccinat, Methimazol, Betamethasonnatriumphosphat, Hexestrolphosphat und Hexestrolacetat.
Die erfindungsgemäßen Präparate können eine Matrix aus einem Polymilchsäurehomopolymeren oder Copolymeren und die oben erwähnten, physiologisch aktiven Substanzen im Gemisch mit anderen pharmazeutisch annehmbaren Substanzen, die üblicherweise zur Herstellung pharmazeutischer Präparate verwendet werden, wie einem festen Verdünnungsmittel, einem Träger, einem Bindemittel, einem Adjuvans und einem Excipiens, enthalten. Geeignete Beispiele für solche pharmazeutisch annehmbare Substanzen sind Tragacanth, Gummi arabicum, Maisstärke, Gelatine, Alginsäure, Magnesiumstearat, Albumin, Aluminiummonostearat, gelbes Bienenwachs, Saccharose, Lactose, Methylparaben, Propylparaben, Mannit, Propylenglykol, mikrokristalline Cellulose, Calciumsilicat, Siliciumdioxid, Polyvinylpyrrolidon, Kakaobutter, Polyoxyethylensorbitan, Monolaurat, Ethyllactat, Sorbitantrioleat, Ethyllaurat, Calciumstearat, Talk, Ölsäure und Linolsäure.
Die obige, physiologisch aktive Substanz kann in den erfindungsgemäßen pharmazeutischen Präparaten in einer Menge im Bereich von etwa 0,01 bis etwa 60 % (Gewicht/Gewicht, im folgenden die gleiche Bezeichnung), bevorzugter von etwa 0,1 bis etwa 50 %, bezogen auf eine Menge der Polymilchsäureverbindung mit hohem Molekulargewicht, enthalten sein, obwohl sie je nach den Arten der verwendeten Arzneimitteln, der gewünschten pharmakologischen Wirkung, der Zeit für die verzögerte Freisetzung und dgl. variiert werden kann.
Eine Größe der erfindungsgemäßen Mikrokapsel liegt bevorzugt im Bereich von mehreren Nanometern bis mehreren hundert Nanometern und kann gemäß den Aufgaben, wie der Leichtigkeit zur intravenösen Injektion, der Richtung zu den Lymphocyten, der Leichtigkeit zur intramuskularen Injektion oder der Anhäufung in einem Gewebe des reticuloendothelialen Systems (RES), wie der Leber, der Lunge oder des Pankreas, kontrolliert werden. Die Größenverteilung ist bevorzugt so schmal wie möglich, aber eine geeignete Verteilung kann durch Sieben erreicht werden.
Die erfindungsgemäße Polymilchsäure ist aus der Gruppe, bestehend aus Poly-L-milchsäure, Poly-D,L-milchsäure, einem Copolymeren aus L- Milchsäure-Glykolsäure und einem Copolymeren aus D,L-Milchsäure und Glykolsäure ausgewählt, und die geeignetste Polymilchsäure kann gemäß der Hydrolyserate, der Verträglichkeit mit dem verwendeten Arzneimittel oder dgl. je nach den Aufgaben ausgewählt werden. Die erfindungsgemäße Polymilchsäure kann bevorzugt ein gewichtsdurchschnittliches Molekulargewicht im Bereich von 3000 bis 500.000, bevorzugter von 3000 bis 20.000 (im Bereich eines oligomeren Moleküls) haben, obwohl der Gegenstand der vorliegenden Erfindung nicht darauf beschränkt ist.
Das erfindungsgemäß verwendete, hydrophile, organische Lösungsmittel ist bevorzugt ein organisches Lösungsmittel, das mit Wasser in jedem beliebigen Verhältnis gut mischbar ist, aber mit einem schlechten Lösungsmittel für die Polymilchsäure nicht-mischbar ist, und umfaßt Acetonitril, Dioxan, Aceton, Ethylalkohol, Methylalkohol, Tetrahydrofuran, Dimethylformamid, Dimethylacetamid, Phenol, Dimethylsulfoxid, Propylalkohol, Glycerin und Ethylenglykol. Unter diesen sind Acetonitril und Dioxan besonders bevorzugt.
Die organische Säure zur Auflösung der Polymilchsäure ist bevorzugt Essigsäure, Ameisensäure, Glykolsäure oder Milchsäure, am bevorzugtesten Essigsäure. Ein Derivat der Essigsäure kann auch verwendet werden und umfaßt Methylacetat, Ethylacetat, Trichloressigsäure, Trifluoressigsäure oder ein Essigsäuresalz, wie Natriumacetat, Calciumacetat oder Kaliumacetat. Wenn Essigsäure als organische Säure verwendet wird, ist es bevorzugt, Eisessig zu verwenden. Jedoch wird im Falle eines Arzneimittels, das in Eisessig kaum löslich ist, wie einem Protein mit einem hohen Molekulargewicht, 80- bis 90%ige Essigsäure bevorzugt verwendet. Wenn andererseits Acetonitril oder Dioxan als organisches Lösungsmittel verwendet werden, wird ein Gemisch des organischen Lösungsmittels und Wasser bevorzugt in einem Verhältnis von 70:30 bis 99,9:0,1 (bezogen auf das Gewicht, nachstehend das gleiche), bevorzugter in einem Verhältnis von 80:20 bis 95:5, verwendet, da 100%iges Acetonitril oder Dioxan die aktive Substanz vom Polypeptidtyp nur schlecht löst.
Ein erfindungsgemäß schlechtes Lösungsmittel ist bevorzugt ein Lösungsmittel, das im wesentlichen mit dem Lösungsmittel zur Auflösung der physiologisch aktiven Substanz und der Polymilchsäure nicht verträglich ist und leicht aus den Präparaten nach Formulierung entfernt werden kann, und umfaßt Siliconöl, flüssiges Paraffin, Pflanzenöle, wie Baumwollöl, Sesamöl, Rizinusöl und Zapfenöl oder tierische Öle, wie Walöl und organische Lösungsmittel, wie Toluol, Xylol und Hexan.
Die erfindungsgemäßen Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp, die die wasserlösliche, physiologisch aktive Substanz enthalten, können nach dem Trocknungsverfahren durch Verdampfung des Lösungsmittels hergestellt werden, d.h. durch Trocknen in einer Emulsion vom O/O-Typ (d.h. Öl-in-Öl- Emulsion), in dem Falle, daß das Gemisch aus organischem Lösungsmittel/Wasser als Lösungsmittel verwendet wird oder durch Trocknen in einer Emulsion vom W/O-Typ (d.h. Wasser-in-Öl-Emulsion) im Falle, daß Essigsäure als Lösungsmittel verwendet wird. Um die Formulierung zu erleichtern, wird bevorzugt ein Emulgiermittel verwendet. Das Emulgiermittel umfaßt alle beliebigen, herkömmlichen Emulgiermittel, insofern sie eine stabile Emulsion vom O/O- oder W/O-Typ bilden können und bevorzugt nicht-ionische, grenzflächenaktive Mittel, wie solche mit einem HLB-Wert von 3 bis 6,5, beispielsweise Sorbitanmonostearat, Sorbitandistearat, Sorbitanmonooleat, Sorbitansesquioleat, Sorbitantrioleat und Lecithin, sind. Diese hydrophoben Emulgiermittel werden üblicherweise in einer Menge im Bereich von 0,1 bis 5 Gewichtsteilen (im folgenden die gleiche Bezeichnung), bevorzugt von 1 bis 3 Teilen, bezogen auf 100 Teile des hydrophoben Mediums, verwendet. Die Emulgierung kann nach irgendwelchen bekannten Dispergierverfahren durchgeführt werden, wie beispielsweise dem Rührverfahren mit einem Propeller, dem Verfahren mit einer Kolloidmühle, dem Verfahren mit einem Homogenisator, einem Ultraschallverfahren oder einem Mikrofluidisierungsverfahren. Das Ultraschallverfahren wird bevorzugt verwendet, um Mikrokugeln mit einer Größe von mehreren Mikrometern zu erhalten. Andererseits wird das Mikrofluidisationsverfahren bevorzugt verwendet, um Mikrokugeln mit einer Größe von mehreren zehn Nanometern bis mehreren hundert Nanometern zu erhalten.
Von der so durch ein Emulgierverfahren, wie das Ultraschallverfahren, hergestellten Emulsion vom O/O-Typ oder W/O-Typ wird das Lösungsmittel zur Auflösung sowohl des Polymeren als auch der physiologisch aktiven Substanz abdestilliert, um die Mikrokapsel des Polymilchsäuretyps, die die physiologisch aktive Substanz enthält, herzustellen. Die so erhaltenen Mikrokapseln werden von dem schlechten Lösungsmittel mittels Filtration oder Zentrifugation abgetrennt, mit einem organischen Lösungsmittel, wie Aceton oder Hexan, zur Entfernung des auf der Oberfläche der Mikrokapseln verbliebenen schlechten Lösungsmittels gewaschen und dann getrocknet.
Die erfindungsgemäßen Mikrokapseln des Polymilchsäuretyps, die eine wasserlösliche, physiologisch aktive Substanz enthalten, können in Form von Injektionen, Präparaten für die orale Verabreichung, Präparaten für die perkutane Verabreichung, Suppositorien, Präparaten für die pernasale Verabreichung, Präparaten für die Verabreichung in die Mundhöhle oder intraokulare Präparate verwendet werden.
Die erfindungsgemäßen Mikrokapseln des Polymilchsäuretyps, die eine wasserlösliche, physiologisch aktive Substanz enthalten, besitzen dahingehend Vorteile, daß die wasserlösliche, physiologisch aktive Substanz gleichförmig in die Verbindung mit hohem Molekulargewicht vom Polymilchsäuretyp ohne Aktivitätsverlust eingearbeitet werden kann, wodurch das Auftreten eines unerwünschten Brechens verhindert wird und die aktive Substanz schrittweise für eine lange Zeitspanne von mehr als einer Woche freigesetzt wird, und das Inkorporationsverhältnis des Wirkstoffs in die Mikrokapsel um mehr als 90 % erhöht wird.

Beispiel 1

Eine Lösung aus Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 3600 (1 g), aufgelöst in Acetonitril (9 ml) wurde mit einer Lösung von Adriamycinpulver (50 mg), aufgelöst in destilliertem Wasser (1 ml) vermischt, und das Gemisch wurde mit einem Magnetrührer gerührt. Die so erhaltene Lösung wurde zu Baumwollöl (100 ml), welches Span 80 (2 Gew.-%) als grenzflächenaktives Mittel enthielt, unter Rühren mit einem Rührer vom Propellertyp zugetropft. Nach Erhitzen des Gemisches auf 40 bis 60ºC, um das Mischlösungsmittel aus Acetonitril und Wasser abzudestillieren, wurde der erhaltene Rückstand zentrifugiert und mit n-Hexan unter Herstellung von Mikrokugeln des Polymilchsäuretyps, die Adriamycin enthielten und eine mittlere Teilchengröße von 20 bis 30 um hatten, gewaschen. Die Tabelle 1 zeigt die Ergebnisse des in vitro Elutionsversuches, worin eine feste Menge der Mikrokugeln in Phosphatpuffer (pH 7,4) in einen Inkubator mit Schüttler bei 37ºC gegeben wurde und die Konzentration des Wirkstoffs nach einem Fluoreszenzverfahren gemessen wurde.

Vergleichsbeispiel 1

Zu einer Lösung aus Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 3600 (1 g), aufgelöst in Methylenchlorid (10 ml), wurde Adriamycinpulver (50 mg) gegeben, und das Gemisch wurde mit einem Magnetrührer gerührt. Danach wurde das Verfahren nach Beispiel 1 wiederholt, um die Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp, die Adriamycin enthielten, herzustellen. Die Tabelle 1 zeigt die Ergebnisse des in vitro Elutionsversuches.

Beispiel 2

Das Verfahren nach Beispiel 1 wurde wiederholt, jedoch mit der Ausnahme, daß Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 7500 zur Herstellung der Mikrokugeln vom Poly-L- milchsäuretyp, die Adriamycin enthielten, verwendet wurde. Tabelle 1 zeigt die Ergebnisse des in vitro Elutionsversuches.

Beispiel 3

Das Verfahren nach Beispiel 1 wurde wiederholt, jedoch mit der Ausnahme, daß ein L-Milchsäure-Glykolsäure-Copolymeres (Copolymerisationsverhältnis 7:3) mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 7000 zur Herstellung der adriamycinhaltigen Mikrokugeln vom Poly-L- milchsäuretyp verwendet wurde. Die Tabelle 1 zeigt die Ergebnisse des in vitro Elutionsversuches.

Beispiel 4

Eine Lösung aus Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 3600 (1 g), aufgelöst in Acetonitril (9 ml), wurde mit einer Lösung von Tobramycinpulver (200 mg), aufgelöst in destilliertem Wasser (1 ml), vermischt, und das Gemisch wurde mit einem Magnetrührer gerührt. Danach wurde das Verfahren von Beispiel 1 wiederholt, um tobramycinhaltige Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp herzustehlen. Die Tabelle 2 zeigt die Ergebnisse des in vitro Elutionsversuches, welcher auf gleiche Weise wie in Beispiel 1 durchgeführt wurde, jedoch mit der Ausnahme, daß die Konzentration des Wirkstoffs in einem Bioassayverfahren unter Verwendung von Bacillus subtilus bestimmt wurde.

Vergleichsbeispiel 2

Zu einer Lösung von Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 3600 (1 g), aufgelöst in Methylenchlorid (10 ml), wurde Tobramycinpulver (200 mg) gegeben, und das Gemisch wurde mit einem Magnetrührer gerührt. Danach wurde das Verfahren von Beispiel 1 zur Herstellung der tobramycinhaltigen Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp wiederholt. Die Tabelle 2 zeigt die Ergebnisse des in vitro Elutionsversuchs.

Beispiel 5

Eine Lösung aus Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 3600 (1 g), aufgelöst in Acetonitril (8 ml), wurde mit einer Lösung aus Cisplatin (2 mg), aufgelöst in destilliertem Wasser (2 ml), vermischt, und das Gemisch wurde mit einem Magnetrührer gerührt. Danach wurde das Verfahren von Beispiel 1 wiederholt, um cisplatinhaltige Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp herzustellen. Das Inkorporationsverhältnis des Wirkstoffes in die Mikrokugeln betrug fast 100 %. Das in vitro Elutionsexperiment wurde wie in Beispiel 1 durchgeführt, jedoch mit der Ausnahme, daß die Messung der eluierten Menge durch Atomabsorptionsspektrometrie durchgeführt wurde.

Vergleichsbeispiel 3

Eine Lösung aus Cisplatin (2 mg), aufgelöst in einer 20%igen wäßrigen Gelatinelösung (2 mg), wurde zu einer 20%igen Lösung (10 ml) aus Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 3600 in Methylenchlorid gegeben, und das Gemisch wurde mit Ultraschall unter Herstellung einer Emulsion vom W/O-Typ emulgiert, und diese wurde schnell abgekühlt, um die Gelatineschicht zu gelieren. Die entstandene Lösung wurde in eine 1%ige wäßrige Lösung aus Polyvinylalkohol (100 mg), die zuvor eisgekühlt worden war, gegossen, und das Gemisch wurde mit einem Homogenisator unter Herstellung einer Emulsion vom W/O/W- Typ dispergiert. Dann wurde das Methylenchlorid verdampft, und der Rückstand wurde getrocknet, um Mikrokapseln vom Polymilchsäuretyp aus Gelatine, die Cisplatin enthielten, herzustellen. Das Inkorporationsverhältnis von Cisplatin in die Mikrokapseln betrug nur etwa 29 %. Die Tabelle 2 zeigt die Ergebnisse des in vitro Elutionsversuches.

Beispiel 6

Eine Lösung eines L-Milchsäure-Glykolsäure-Copolymeren (Copolymerisationsverhältnis 80:20) mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von 12000 (2 g), aufgelöst in Eisessig (20 ml), und eine Lösung des luteinisierenden Hormon-Releasing Hormons (LHRH; N-Ac[D-P-Cl-Phe1,2, D-Trp³, D-Arg&sup6;, D-Ala¹&sup0;]-LH-RH) (200 mg), aufgelöst in destilliertem Wasser (2 ml) wurden miteinander unter Rühren mit einem Magnetrührer vermischt. Das Gemisch wurde nicht trüb und blieb immer noch klar und zeigte eine vollständige Auflösung sowohl des Polymeren als auch des Wirkstoffes. Diese Lösung wurde zu Sesamöl (200 ml), welches 1 Gew.-% Lecithin als grenzflächenaktives Mittel enthielt, unter Rühren mit einem Rührer vom Propellertyp und weiterem Emulgieren mit einem Ultraschallhomogenisator getropft. Nach Verdampfen der Essigsäure und des Wassers durch Erhitzen auf 40 bis 60ºC wurde der Rückstand zentrifugiert, mit n-Hexan gewaschen und unter Herstellung der LHRH enthaltenden Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp mit einer durchschnittlichen Teilchengröße von 0,5 bis 5 um getrocknet.
Die erhaltenen Mikrokugeln wurden in raffiniertem Sesamöl dispergiert und weiblichen Ratten mit einem Gewicht von 350 g in einer Menge von 12 mg/kg LHRH subkutan injiziert. Die Wirkung von LHRH auf den lebenden Körper, d.h. Atrophie der Organe des genitalen Systems infolge Desensibilisierung des Hypophyse-Gonaden-Systems wurde für eine lange Zeitspanne beobachtet. Als Ergebnis hielt die Wirkung etwa 60 Tage lang an.

Beispiel 7

Eine Lösung aus Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von 16.000 (2 g), aufgelöst in Eisessig (20 mg), und eine Lösung aus Schweineinsulin (Pulver, hergestellt von Sigma, 100 mg), aufgelöst in 0,1 N HCl (2 ml), wurden miteinander unter Rühren mit einem Magnetrührer vermischt. Danach wurde das Verfahren von Beispiel 6 wiederholt, um die insulinhaltigen Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp herzustellen. Die Tabelle 3 zeigt die Ergebnisse des in vitro Elutionsversuches, bei dem die Insulinkonzentration nach dem Glukoseoxidaseverfahren (enzymatisches Verfahren) gemessen wurde.

Vergleichsbeispiel 4

Zu einer Lösung aus Poly-D,L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von 16.000 (2 g), aufgelöst in Chloroform (20 ml), wurde pulverförmiges Insulin (100 mg) gegeben, und das Gemisch wurde mit einem Magnetrührer gerührt. Danach wurde das Verfahren nach Beispiel 7 wiederholt, um insulinhaltige Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp herzustellen. Die Tabelle 3 zeigt die Ergebnisse des in vitro Elutionsversuchs.

Beispiel 8

Ein Milchsäure-Glykolsäure-Copolymeres (Copolymerisationsverhältnis: 80:20) mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von 7600 (2 g) und Calcitonin (10.000 U) wurden in 98 % Essigsäure (20 ml) unter Rühren mit einem Magnetrührer aufgelöst. Danach wurde das Verfahren nach Beispiel 6 wiederholt, um calcitoninhaltige Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp herzustellen. Die Messung der das Serum Calcium erniedrigenden Aktivität ergab keine Erniedrigung der Calcitoninaktivität. Das Inkorporationsverhältnis des Calcitonins in die Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp betrug etwa 95 %. Tabelle 3 zeigt die Ergebnisse des in vitro Elutionsversuchs, bei dem die Messung der eluierten Menge mittels HPLC wie in Beispiel 1 durchgeführt wurde.

Vergleichsbeispiel 5

Das Verfahren von Vergleichsbeispiel 3 wurde wiederholt, mit der Ausnahme, daß Calcitonin (10.000 U) verwendet wurde, um eine W/O/W-Emulsion herzustellen, und ferner, um calcetoninhaltige Mikrokapseln vom Polymilchsäuretyp aus Gelatine herzustellen. Das Inkorporationsverhältnis von Calcetonin in die Mikrokapseln vom Polymilchsäuretyp betrug etwa 53 %. Die Tabelle 3 zeigt die Ergebnisse des in vitro Elutionsversuches.

Beispiel 9

Eine Lösung aus einem Milchsäure-Glykolsäure-Copolymeren (Copolymerisationsverhältnis: 75:25) mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 5300 (1 g) und je 1 x 10&sup8; U Mausinterferon α und -interferon γ, aufgelöst in 92%iger Essigsäure (10 ml), wurde zu Sesamöl (100 ml), das 1 Gew.-% Lecithin als grenzflächenaktives Mittel enthielt, getropft. Das Gemisch wurde mit einem Mikrofluidisator (M-110H, hergestellt von Microfluidics Corporation) emulgiert und in der Flüssigkeit getrocknet, um interferonhaltige Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp mit einer durchschnittlichen Teilchengröße von 100 bis 500 nm herzustellen. Das Inkorporationsverhältnis von Interferon in die Mikrokugeln betrug etwa 98 %.

Beispiel 10

Meth-A-Fibrosarcomzellen, abgeleitet von BALB/C-Mäusen wurden intraperitoneal BALB/C-Mäusen in einer Menge von 2 x 10&sup6; Zellen pro Tier implantiert. Drei Tage nach der Implantation wurden die in Beispiel 9 hergestellten Mausinterferon α enthaltenden Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp dem Tier jeden dritten Tag intraperitoneal verabreicht. Zehn Tage nach der Implantation wurde die Anzahl der Meth-A-Zellen im Abdomen und die lebensverlängernde Wirkung auf die Maus bewertet. Die erhaltenen Ergebnisse sind in Tabelle 4 gezeigt.

Vergleichsbeispiel 6

Das Verfahren von Vergleichsbeispiel 3 wurde wiederholt, mit der Ausnahme, daß Mausinterferon α (1 x 10&sup8; U) verwendet wurde, um eine W/O/W-Emulsion herzustellen und um ferner interferon α-haltige Mikrokapseln aus Gelatine des Polymilchsäuretyps herzustellen. Das Inkorporationsverhältnis des Interferons in die Mikrokapsel betrug etwa 47 %. Das in vivo Experiment wurde wie in Beispiel 10 durchgeführt. Die Ergebnisse sind in Tabelle 4 gezeigt.

Beispiel 11

Das Verfahren von Beispiel 9 wurde wiederholt, mit der Ausnahme, daß eine Lösung von Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 3600 (500 mg) und menschlicher Tumornecrosefaktor (TNF) (7,8 x 10&sup5; U), aufgelöst in 88%iger Essigsäure (10 ml), verwendet wurde, um TNF-haltige Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp herzustellen. Der in vitro Elutionsversuch von Beispiel 1 wurde wiederholt, und die Messung der eluierten Menge wurde mittels eines Enzymimmunassays durchgeführt. Als Ergebnis hielt die Aktivität 30 Tage lang an.

Beispiel 12

Das Verfahren von Beispiel 9 wurde wiederholt, jedoch mit der Ausnahme, daß eine Lösung aus Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 3600 (500 mg) und menschliches Interleukin II (1 x 10&sup6; U), aufgelöst in 88%iger Essigsäure (10 ml), verwendet wurde, um interleukin II-haltige Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp herzustellen.
Die erhaltenen Mikrokugeln wurden Mäusen in das Blut injiziert, und der Blutspiegel an IL-II wurde unter Verwendung der IL-II-abhängigen Zell-Linie CTLL-2 bestimmt. Das Ergebnis zeigt eine hohe Konzentration an IL-II von nicht weniger als 1 x 10³ U/ml für 96 h.

Beispiel 13

Das Verfahren von Beispiel 6 wurde wiederholt, jedoch mit der Ausnahme, daß eine Lösung aus Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 3600 (500 mg) und der epidermale Wachstumsfaktor (EGF) der Ratte (0,5 mg), aufgelöst in 90%iger Essigsäure (20 ml), verwendet wurden, um EGF-haltige Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp herzustellen.
Die erhaltenen Mikrokugeln wurden Carotis-intubierten Ratten verabreicht, und der Serumspiegel an EGF wurde mittels eines Radioimmunoassays gemessen. Das Ergebnis zeigte eine Erhöhung des Serumspiegels an EGF, die sich am zweiten Tag fand und für etwa 30 Tage anhielt.

Beispiel 14

Das Verfahren von Beispiel 6 wurde wiederholt, jedoch mit der Ausnahme, daß eine Lösung aus Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 3600 (500 mg) und Urokinase (6 x 10&sup5; U), aufgelöst in Eisessig, verwendet wurden, um urokinasehaltige Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp herzustellen. Der in vitro Elutionsversuch wurde durchgeführt, und die Enzymaktivität wurde nach dem Fibrinplattenverfahren gemessen. Das Ergebnis zeigte Urokinase in einer Konzentration von nicht weniger als 1000 U für etwa vier Wochen.

Beispiel 15

Das Verfahren von Beispiel 6 wurde wiederholt, jedoch mit der Ausnahme, daß eine Lösung aus Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 3600 (500 mg) und Prolactin (100 mg) aufgelöst in Eisessig, verwendet wurden, um prolactinhaltige Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp herzustellen. Die erhaltenen Mikrokugeln wurden der Ratte subkutan verabreicht, und der Serumspiegel von Prolactin wurde mittels eines Radioimmunoassays gemessen. Das Ergebnis zeigte eine hohe Konzentration an Prolactin für etwa 60 Tage.

Beispiel 16

Das Verfahren von Beispiel 1 wurde wiederholt, jedoch mit der Ausnahme, daß eine Lösung aus Poly-L-milchsäure mit einem gewichtsdurchschnittlichen Molekulargewicht von etwa 4700 (1 g) und Panimycin (Dibekacinsulfat) (100 mg), aufgelöst in einem Gemisch aus Acetonitril und Wasser (9:1) (20 ml), verwendet wurden, um panimycinhaltige Mikrokugeln vom Polymilchsäuretyp herzustellen. Die erhaltenen Mikrokugeln wurden dem in vitro Elutionsversuch unterworfen, bei dem die Dauer der antimikrobiellen Aktivität mittels eines Bioassays unter Verwendung von Bacillus subtilis gemessen wurde. Das Ergebnis bewies, daß eine hohe Konzentration von nicht weniger als 10 ug/ml Panimycin für etwa 30 Tage anhielt. Tabelle 1 Elution (Tag) Kumulative Elution von Adriamycin (%) Beispiel Vergl.-Beispiel Tabelle 2 Elution (Tag) Kumulative Elution von Tobramycin (%) Kumulative Elution von Cisplatin (%) Beispiel Vergl.-Beisp. Tabelle 3 Elution (Tag) Kumulative Elution von Insulin (%) Kumulative Elution von Calcitonin (%) Beispiel Vergl.-Beisp. Tabelle 4 Meth-A-Zelle Nr. (x 10&sup5;) Überlebenszeitraum (Tage) Beispiel

Claims

1. Mikrokugel, dadurch gekennzeichnet, daß sie Polymilchsäure, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus einem L-Milchsäurepolymeren, einem D,L-Milchsäurepolymeren, einem Copolymeren aus L-Milchsäure und Glykolsäure und einem Copolymeren aus D,L-Milchsäure und Glykolsäure, und eine wasserlösliche, physiologisch aktive Substanz, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus einer Substanz vom Polypeptidtyp oder einer proteinartigen Substanz, einem antimikrobiellen Mittel, einem Antitumormittel, einem Antipyretikum, einem antiinflammatorischen Mittel, einem Analgetikum, einem Antitussivum, einem Expektorans, einem Antidepressivum, einem Muskelrelaxans, einem Antiulcermittel, einem Antiallergikum, einem Hypotensivum, einem Diuretikum, einem Antidiabetikum, einem Kardiotonikum, einem Vasodilatator, einem Antiarhythmikum, einem Antikoagulans, einem Hämostatikum, einem Narkoseantagonisten, einem Antituberkulosemittel, einem Hormon, einem Immunaktivator, einem Antiepileptikum, einem Antihistaminikum und einem landwirtschaftlichen Mittel, umfaßt und eine mittlere Teilchengröße von etwa 0,01 um bis 300 um besitzt, wobei die eluierte Menge der physiologisch aktiven Substanz, bezogen auf den Gehalt der physiologisch aktiven Substanz in der Mikrokugel, nach 24 h bei dem in vitro Elutionstest in Phosphatpuffer mit einem pH-Wert von 7,4 bei 37ºC nicht mehr als 30 % beträgt.

2. Verfahren zur Herstellung einer Mikrokugel, die Polymilchsäure und eine wasserlösliche, physiologisch aktive Substanz umfaßt, dadurch gekennzeichnet, daß man eine Lösung der in Wasser löslichen, physiologisch aktiven Substanz und der Polymilchsäure, die gleichförmig in einem Mischlösungsmittel aus einem hydrophilen organischen Lösungsmittel und Wasser oder in einer organischen Säure aufgelöst sind, herstellt, die Lösung mit einem schlechten Lösungsmittel, das mit dem Mischlösungsmittel oder der organischen Säure nicht-mischbar ist, vermischt, um eine Emulsion vom O/O-Typ oder W/O-Typ herzustellen und die Emulsion durch Lösungsmittelverdampfung trocknet.

3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die Polymilchsäure eine Verbindung, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus einem L- Milchsäurepolymeren, einem D,L-Milchsäurepolymeren, einem Copolymeren der L-Milchsäure und der Glykolsäure, und einem Copolymeren der D,L-Milchsäure und Glykolsäure ist.

4. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß das hydrophile, organische Lösungsmittel für das Lösungsmittel der Polymilchsäure eine Verbindung, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Acetonitril, Dioxan, Aceton, Ethylalkohol, Methylalkohol, Tetrahydrofuran, Dimethylformamid, Dimethylacetamid, Phenol, Dimethylsulfoxid, Propylalkohol, Glycerin und Ethylenglykol ist.

5. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß die organische Säure für das Lösungsmittel der Polymilchsäure eine Verbindung, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Essigsäure und Ameisensäure, ist.

6. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß das schlechte Lösungsmittel, das mit dem Mischlösungsmittel oder der organischen Säure nicht-mischbar ist, eine Verbindung, ausgewählt aus der Gruppe, bestehend aus Siliconöl, flüssigem Paraffin, Baumwollöl, Sesamöl, Rizinusöl, Zapfenöl, Walöl, Toluol, Xylol und Hexan, ist.