DE60103527T2

DE60103527T2 - Optimierte Tobramycin-Formulierung zur Aerosolbildung

Info

Publication number: DE60103527T2
Application number: DE60103527T
Authority: DE
Inventors: Chiara Malvolti; Raffaella Garzia
Original assignee: Chiesi Farmaceutici SpA
Current assignee: Chiesi Farmaceutici SpA
Priority date: 2001-07-02
Filing date: 2001-07-02
Publication date: 2005-06-16
Anticipated expiration: 2021-07-03
Also published as: HK1068784A1; US7939502B2; CN1529589A; ZA200400026B; BRPI0211320B8; CA2452638A1; BR0211320A; BG66328B1; BG108475A; US7696178B2; CZ20033580A3; AU2002319226B2; SI1273292T1; CZ299348B6; BRPI0211320B1; US20120184502A1; HU230807B1; US20110212912A1; US20050163722A1; DK1273292T3

Description

STAND DER TECHNIK
Obwohl Druckdosier-Inhalatoren (MDIs) und Trockenpulver-Inhalatoren (DPIs) die am meisten gebräuchlichen Inhalator-Arzneimittelverabreichungs-Systeme sind, sind Vernebler für die Behandlung von Luftwegverschlüssen, insbesondere bei Jugendlichen mit Asthma und Patienten mit schwerem Asthma oder chronischen Luftwegsverschlüssen zunehmend populär geworden. Vernebler verwenden Ultraschall oder komprimierte Gase um Aerosol-Tröpfchen in einem atembaren Größenbereich (1 – 5 μm) aus Flüssigkeiten, gewöhnliche wässrige Lösungen oder Suspensionen von Arzneimitteln, zu erzeugen. Sie haben gegenüber MDIs und DPIs den Vorteil, dass das Arzneimittel während des normalen Atmens durch ein Mundstück oder eine Gesichtsmaske inhaliert werden kann. Sie können somit verwendet werden, um aerosolisierte Arzneimittel an Patienten, wie Kinder, zu verabreichen, die Schwierigkeiten bei der Verwendung anderer Vorrichtungen haben.
Verschiedene Typen von therapeutisch nützlichen Arzneimitteln können mit Verneblern verabreicht werden, einschließlich β2-Agonisten, Kortikosteroide, Anticholinergika, Antiallergika, Mukolytika und Antibiotika. Die hauptsächlichste klinische Situation, bei der die Therapie mit aerosolisierten Antibiotika versucht wurde, ist die Behandlung von Patienten mit zystischer Fibrose (CF).
CF ist eine bekannte genetische Erkrankung, die durch die Entzündung und progressive Zerstörung des Lungengewebes gekennzeichnet ist. Die Schwächung der Lungen in CF-Patienten ist verbunden mit einer Akkumulierung von eitrigem Auswurf, der als Ergebnis der endobronchialen Infektionen, verursacht insbesondere durch Pseudomonas aeruginosa erzeugt wird. Letztere sind die Hauptursache der Morbidität und der Sterblichkeit unter den Patienten mit CF.
Tobramycin ist ein Aminoglykosid-Antibiotika, das spezifisch gegen Pseudomonas aeruginosa wirksam ist. Es penetriert endobronchiale Sekrete (Sputum) in geringem Ausmaß, was hohe intravenöse Dosierungen erfordert, um eine wirksame Konzentration am Ort der Infektion zu erlangen. Diese hohen Dosierungen setzen die Patienten einem Risiko für nephrotoxische und ototoxische Wirkungen aus. Die direkte Verabreichung von Tobramycin in die unteren Luftwege durch Aerosolverabreichung ist attraktiv, da sie hohe Konzentrationen des Antibiotikums am Ort der Infektion erzeugt. Im Hinblick auf die eingeschränkte Absorption im Kreislauf, sollte die Aerosolverabreichung von Tobramycin mit einer geringen systemischen Toxizität verbunden sein. Dies würde die Entwicklung einer sichereren Langzeittherapie erlauben.
In dieser Hinsicht stellt sich die Vernebelung, mit ihrer sehr hohen therapeutischen Dosis, als extrem günstig heraus, aufgrund der Tatsache, dass es nicht möglich ist, Tobramycin in einem MDI oder DPI zu formulieren.
Die klinischen Untersuchungen, die in der Literatur gezeigt sind, zeigen widersprüchliche Ergebnisse hinsichtlich des Nutzens von aerosolisiertem Tobramycin in Patienten mit CF. Die Variabilität in diesen Studien kann teilweise in den Unterschieden in den Patienten-Populationen, den therapeutischen Bedingungen, den Verneblern, den Formulierungen und der Art der Verabreichung begründet sein. Weiterhin wurden die meisten Untersuchungen durch die improvisierte Verwendung von kommerziell erhältlichen injizierbaren Lösungen durchgeführt, Diese Präparate enthalten normalerweise Antioxidationsmittel und Konservierungsmittel, die dafür bekannt sind, paradoxe Reaktionen wie Bronchospasmen und Husten zu verursachen (Nikolaizik et al Eur J Pediatr 1996, 155, 606 – 611; The Lancet, July 23rd 1988, 202).
Aus diesen Gründen besteht Bedarf nach standardisierten Verfahren ebenso wie nach der Verbesserung der Aerosolverabreichung für Antibiotika wie Tobramycin an CF-Patienten.
Im Hinblick auf alle oben skizzierten Probleme wäre es daher sehr vorteilhaft, eine Tobramycin-Formulierung mit einer therapeutisch nützlichen Konzentration bereitzustellen, die durch Aerosolisierung in den Endobronchialraum verabreichbar ist, die:

i) wirksam in relativ kurzer Zeit unter Verwendung von sowohl Strahl- als auch Ultraschallverneblern, vernebelt werden kann;
ii) die Bildung eines Aerosols erlauben würde, das durch die Patienten gut vertragen wird;
iii) fähig ist, Aerosolpartikel zu erzeugen, die wirksam die therapeutische Zielregion erreichen können;
iv) keine Substanzen (Konservierungsmittel und andere) enthält, die Anlass zu unerwünschten Nebeneffekten geben;
v) die längstmögliche Haltbarkeit, insbesondere bei Raumtemperatur, garantieren kann.

Um daher eine optimierte Formulierung für die Tobramycin-Aerosol-Verabreichung zu erhalten, müssen die folgenden Parameter sorgfältig eingestellt werden:

– Das Verhältnis Dosis/Volumen. Die Formulierung für die Aerosol-Verabreichung sollte die minimale noch wirksame Menge von Tobramycin, formuliert in der kleinsten noch möglichen Lösung enthalten. Je geringer das Volumen ist, umso geringer ist die Vernebelungszeit. Eine kurze Vernebelungszeit ist umgekehrt eine wichtige Bestimmungsgröße der Patienten-Akzeptanz und besitzt in Krankenhäusern Auswirkungen hinsichtlich der Mitarbeiterzeit (McCallion et al Int J Pharm 1996, 130, 1– 11).
– Die Osmolarität. Es ist bekannt, dass nachteilige Reaktionen gegenüber der Inhalationstherapie verursacht werden können durch Hypo- oder Hyperosmolarität der Arzneimittellösungen. Im Gegensatz dazu entfernen isotonische Lösungen das Risiko von paradoxen Bronchokonstriktionen und Husten (The Lancet, 1988, op. Cit.; Mann et al Br Med J 1984, 289, 469). Die Osmolarität beeinträchtigt auch die Eigenschaften des Verneblers hinsichtlich der Ausstoßrate und der Partikelgrößenverteilung (vide ultra).
– Die Partikelgrößenverteilung nach der Vernebelung. Die Effizienz eines klinischen Aerosols ist abhängig von der Fähigkeit, mit den Atemweg zu penetrieren. Um die peripheren Regionen zu penetrieren, erfordern die Aerosole eine Größe von 0,8 bis 5 μm mit einer Größe von ungefähr 3 μm, bevorzugt für die Alveolar-Abscheidung. Partikel, die kleiner als 0,5 μm sind, werden hauptsächlich ausgeatmet. Neben den therapeutischen Zwecken ist die Größe der Aerosolpartikel wichtig im Hinblick auf die Nebenwirkungen von Arzneimitteln. Größere Tröpfchen, die sich in den oberen Atemwegen abscheiden, werden in der Tat relativ rasch aus dem Tracheo-Bronchialtrakt durch das mukozilliäre Klärverfahren geklärt, mit dem Effekt, dass das Arzneimittel für die systemische Absorption und potentielle Nebenwirkungen verfügbar wird. Verschiedene Autoren (Newman et al Thorax 1988, 43, 318 – 322; Smaldone et al J Aerosol med, 1988, 1, 113 – 126; Thomas et al. Eur Respir J 1991, 4, 616 – 622) haben vorgeschlagen, dass der Tropfengröße des aerosolisierten Arzneimittels für die Antibiotikabehandlung von CF eine große Aufmerksamkeit geschenkt werden muss, da die Penetration der peripheren Luftwege besonders erwünscht ist.
– Der pH der Formulierung. Ein bedeutendes Erfordernis einer akzeptablen Formulierung ist eine adäquate Lebensdauer, die für die kommerzielle Verteilung, Lagerung und Verwendung geeignet ist. Im allgemeinen enthalten intravenöse Tobramycin-Formulierungen Phenol oder andere Konservierungsmittel und Antioxidationsmittel, um ihre Wirksamkeit zu behalten, und um die Bildung von Abbauprodukten, die die Lösung verfärben können, zu minimieren. Wie jedoch bereits ausgeführt wurde, können derartige Substanzen unerwünschte Reaktionen des Patienten mit Lungenerkrankungen wie CF induzieren. Die Stabilität von Tobramycin ist strikt pH-abhängig. Daher muss der pH-Wert seiner Formulierungen sorgfältig eingestellt werden, um die Bildung von Abbauprodukten zu verlangsamen oder zu verhindern ohne Hilfe von Konservierungsstoffen und/oder Antioxidationsmittel; es wäre außerdem vorteilhaft, den pH-Wert auf solche Weise zu steuern, damit eine Verfärbung soweit wie möglich verhindert wird, obwohl die Tiefe der Farbe kein zuverlässiger Indikator des Ausmaßes der Oxidation ist. Formulierungen, die eine adäquate Lebensdauer unter Umweltlagerungsbedingungen haben (Raumtemperatur und beim Auftreten, geschützt vor Licht) sind besonders bevorzugt, da die Stabilität bei Raumtemperatur von Präparaten aus dem Stand der Technik wenig zufriedenstellend ist. Während der Anwendung konnte die Formulierung hergestellt gemäß EP 734249 , die unter der Handelsbezeichnung Tobi^® vertrieben wird, in der Tat bei Raumtemperatur nur 28 Tage gehalten werden.

Aufgabe der Erfindung
Es stellt eine Aufgabe der Erfindung dar, eine Formulierung zur Verabreichung durch Vernebelung bereitzustellen, die für die verträgliche und wirksame Verabreichung von Tobramycin in den Endobronchialraum geeignet ist, zur Behandlung von Pseudomonas aeruginosa und/oder anderen empfänglichen Bakterieninfektionen, die mit Lungenerkrankungen wie CF verbunden sind.
Insbesondere ist es eine Aufgabe der Erfindung, eine Formulierung in der Form einer wässrigen Lösung, die durch Vernebelung verabreicht wird, bereitzustellen, worin die Tobramycin-Konzentration, die Tonizität und der pH optimiert wurden, um eine bessere Annahme durch den Patienten, eine maximale Verträglichkeit und Effizienz und die längstmögliche Haltbarkeit bei Raumtemperatur zu garantieren.
Gemäß der vorliegenden Erfindung wird eine Formulierung bereitgestellt, die sich aus 7,5% m/v Tobramycin in einer wässrigen 0,45% m/v Natriumchloridlösung mit einem pH von zwischen 4,0 und 5,5 zusammensetzt und deren Osmolarität zwischen 250 und 450 mOsm/l (ungefähr äquivalent zu mOsm/kg) liegt.
In einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung enthält die Formulierung 300 mg Tobramycin-Sulfat in 4 ml einer wässrigen halbkonzentrierten Salzlösung (0,45% Natriumchlorid), um eine Osmolarität im Bereich von 280 und 350 mOsm/l zu besitzen, und die einen pH von 5,2 hat.
Im Stand der Technik wurden verschiedene Tobramycin-Formulierungen für die Inhalation für die Behandlung von Patienten mit CF und Pseudomonas aeruginosa-Infektionen vorgeschlagen.
Die meisten der kommerziell erhältlichen Tobramycin-Lösungen für die Injektionen können, wenn sie improvisiert für die Inhalation verwendet werden, signifikante Bronchialobstruktionen verursachen, da sie nicht frei von Konservierungsmitteln sind, sondern Antioxidationsmittel wie Natrium-EDTA und/oder Natriummetabisulfit und Konservierungsstoffe wie Phenol enthalten.
Wall et al (The Lancet, 1983, June 11th, 1 325) berichten über das Ergebnis einer klinischen Untersuchung nach Inhalation von 80 mg Tobramycin plus 1 g Ticarcillin zweimal täglich aus einem Handvernebler. Bei eigener Verabreichung besteht ein Nachteil der Behandlung in der Zeit, die für die Inhalation erforderlich ist (ungefähr 30 Minuten).
Ramsey et al (New Eng J Med 1993, 328, 1740 – 1746) führten eine extensive Untersuchung durch, um die Sicherheit und die Effizienz von aerosolisiertem Tobramycin zu bewerten. Um die Zielkonzentration (400 g pro Gramm Sputum) zu erreichen, verwendeten sie 600 mg Konservierungsstofffreies Tobramycin-Sulfat gelöst in 30 ml einer halbkonzentrierten physiologischen Salzlösung, die auf einen pH von 6,85 bis 7,05 eingestellt wurde. Durch den Ultraschallvernebler, der verwendet wurde (De Vilbiss), war ein großen Volumen erforderlich. Daneben sind die lange Zeit, die für die Inhalation erforderlich ist und der pH ebenfalls nicht optimal. Unter dem Gesichtspunkt der Stabilität ist bekannt, dass bei einem pH, der ungefähr neutral ist, Tobramycin rasch oxidiert wird, obwohl es sehr stabil gegenüber Hydrolyse ist (Brandi et al Drug Dev Ind Pharm 1992, 18, 1423 – 1436), Übliche Handbücher (Martindale, Physician Desk Reference) schlagen in der Tat vor, eine Tobramycin-Lösung bei einem pH zwischen 3,0 und 6,5 zu halten.
Die EP 734249 beansprucht eine Formulierung, die von 200 mg bis 400 mg eines Aminoglykosids gelöst in ungefähr 5 ml einer Lösung, die 0,225 Natriumchlorid (1/4 normale Salzlösung – NS) enthält, umfasst und einen pH-Wert zwischen 5,5 und 6,5 aufweist. Gemäß der Erfinder enthält die Formulierung eine minimale, noch wirksame Menge des Aminoglykosids, formuliert im kleinstmöglichen Volumen einer physiologisch verträglichen Lösung mit einem Salzgehalt, der eingestellt ist, um die Bildung eines Aminoglykosid-Aerosols zu erlauben, dass durch die Patienten gut vertragen wird, aber die Entwicklung von unerwünschten Nebenwirkungen wie Bronchospasmen und Husten verhindert (Seite 4, Zeilen 51 – 55). Die bevorzugte Tobramycin-Formulierung enthält 1/4 NS mit 60 mg Tobramycin pro ml 1/4 NS (entsprechend 6% m/v), besitzt einen pH von ungefähr 6,0 und eine Osmolarität im Bereich von 165 – 190 mOsm/l. Gemäß der Erfinder liegt der Osmolaritätsbereich innerhalb des sicheren Bereichs von Aerosolen, die an Patienten mit zystischer Fibrose verabreicht werden und ein weiterer Vorteil der viertel-normalen Salzlösung, d.h. einer Salzlösung, die 0,225% Natriumchlorid mit 60 mg/ml Tobramycin enthält, besteht darin, dass diese Formulierung effektiver durch einen Ultraschallvernebler vernebelt werden kann, verglichen mit Tobramycin, das in einer 0,9 %-igen normalen Salzlösung formuliert ist (Seite 5, Zeilen 50 – 54). Die Erfinder stellen fest, dass eine konzentriertere Lösung (im Vergleich zu 60 mg pro ml) die Osmolarität der Lösung erhöht, wodurch der Ausstoß der Formulierung sowohl mit einem Strahl- als auch mit einem Ultraschall-Vernebler abnimmt. Auch die Alternative einer konzentrierteren Lösung in einem kleineren Volumen ist nachteilig infolge des typischen Tod-Volumens des Verneblers (1 ml): das bedeutet, dass mindestens 1 ml der Lösung verschwendet wird, da der Vernebler sonst nicht voll arbeitet (Seite 6, Zeilen 35 – 38). Der beanspruchte pH-Bereich wurde als der optimalste unter dem Gesichtspunkt der Lagerung und der langen Lebensdauer gefunden (Seite 7, Zeilen 2 – 3), aber in der Tat erlaubt er vollständig stabile Lösungen bei 5°C zu erzielen und effektiv stabile bei Raumtemperatur bei 6 Monaten; außerdem verbleibt die beanspruchte Formulierung in einem akzeptablen Farbbereich, erhalten nach Lagerung im Beutel (so dass sie vor Licht geschützt ist), aber es gibt keine Daten, die sich auf das Verhalten außerhalb des Beutels beziehen.
Ein pH zwischen 5,5 und 6,5 wurde beansprucht, da nach Meinung der Erfinder, jedes Aerosol mit pH von weniger als 4,5 normalerweise Bronchospasmen in einem empfänglichen Individuum verursacht und Aerosole mit einem pH zwischen 4,5 und 5,5 dieses Problem gelegentlich verursachen (Seite 5, Zeile 58 bis Seite 6, Zeile 1). Le Brun et al Int J Pharm 1999, 189, 205– 214 offenbaren eine 10 %ige m/v-Tobramycin-Lösung für die Inhalation mit einem pH-Wert von 7,5. Die gleichen Autoren (Int J Pharm 1999, 189, 215– 225) haben in einer weiteren Untersuchung mit dem Ziel der Entwicklung hoch konzentrierter Lösungen, die Aerosolisierungseigenschaften von verschiedenen Tobramycin-Lösungen im Bereich von 5 bis 30% m/v untersucht. Alle Lösungen, die zu diesem Papier offenbart sind, besitzen einen pH-Wert, der um den Neutralpunkt liegt, und zeigen eine Osmolarität, die vom isotonischen Wert (282 mOsm/l) weit entfernt liegt.
In keinem der zuvor erwähnten Dokumente sind die Merkmale der Formulierung der vorliegenden Erfindung offenbart, und keine der darin offenbarten Lehren trägt zur Lösung des Problems der vorliegenden Erfindung bei, eine konzentrierte Lösung bereitzustellen, die durch ein Aerosol in einem kleinen Volumen verabreicht wird, mit einer Tonizität, die näher am physiologischen Wert liegt.
Die Verwendung von konzentrierteren Lösungen im Hinblick auf das, was im Stand der Technik als optimal beschrieben ist (7,5% vs. 6,0% m/v) erlaubt es Fläschchen mit einem kleineren Volumen zu verwenden, so dass umgekehrt die Dauer der Vernebelung verringert werden kann. Obwohl es zutrifft, dass einige Vernebler ein Tod-Volumen von 1 ml aufweisen, besitzen andere kleinere (0,5 ml oder weniger), so dass der Abfall bei Verwendung von Fläschchen mit 4 ml ungefähr 10% oder weniger sein würde.
Die Osmolarität der vorliegenden Erfindung liegt in einem Bereich von Lösungen, die als isotonisch angesehen werden, wohingegen sowohl die Formulierung der EP 734249 als auch die von Ramsey et al eine Osmolarität, d.h. von 165 – 190 mOsm/l aufweisen, die typisch für Lösungen sind, die als hypotonisch angesehen werden (Derbracher et al Atemwege und Lunge, 1994, 20, 381 – 382). Obwohl die Formulierungen aus dem Stand der Technik sicher sind, können nur isotonische Lösungen vollständig das Risiko von paradoxen Bronchokonstriktionen verhindern. Außerdem zeigen die Ergebnisse, die in Beispiel 2 beschrieben sind, dass die Formulierungen, die eine Osmolarität im beanspruchten Bereich besitzen, im Gegensatz zu dem was in der EP 734249 geschrieben ist, effektiv vernebelt werden können, ungeachtet ihrer hohen Konzentration.
Der pH zwischen 4,0 und 5,5, bevorzugt 5,2, wurde als optimal im Hinblick auf die Lagerung und Haltbarkeit bei Raumtemperatur gefunden. Langzeit-Stabilitätsuntersuchungen zeigen, dass Tobramycin in der Formulierung der vorliegenden Erfindung stabil über 9 Monate ist. Außerdem ändert sich im gesamten Zeitraum die Farbe nicht signifikant und bleibt in einem akzeptablen Bereich, selbst wenn es nicht in einem Folienüberbeutel gelagert wird.
Gemäß einer weiteren Ausführungsform der Erfindung wird auch ein Verfahren bereitgestellt zur Herstellung einer solchen Formulierung, wobei das Verfahren die Schritte einschließt: i) Herstellung einer wässrigen Lösung, die 0,45% m/v Natriumchlorid enthält; ii) Einstellen des pH's mit einer konzentrierten starken Säure; iii) Zugeben eines wirksamen Bestandteils und Mischen zur vollständigen Auflösung; iv) erneut Einstellen des pH's auf den gewünschten Wert; v) Befüllen der Lösung in geeignete Behälter, bevorzugt vorsterilisiert durch die Filtration.
Die Aerosol-Formulierungen der Erfindung beziehen sich auf eine 7,5 %ige m/v wässrige Lösung von Tobramycin und Salzen davon zur Behandlung von Lungeninfektionen infolge von Gram-positiver und Gram-negativen Bakterien in Lungenerkrankungen wie zystischer Fibrose, Nicht-CF-Bronchiektase infiziert mit Pseudomonas aeruginosa und anderen chronischen Pneumopathien, insbesondere in einer Verschlimmerungsphase, wie Bronchiektase, COPD und Bronchialasthma.
Die Osmolarität der Formulierung sollte im Bereich zwischen 250 und 450 mOsm/l liegen, bevorzugt zwischen 260 und 400, noch bevorzugter zwischen 280 und 350 mOsm/l; sie kann eingestellt werden unter Verwendung beliebiger physiologisch verträglicher Salze oder nicht flüchtiger Verbindungen; bevorzugt wird Tobramycin in einer wässrigen 0,45%igen m/v Natriumchloridlösung gelöst.
Der pH kann unter Verwendung irgend einer konzentrierten starken Säure eingestellt werden, bevorzugt Schwefelsäure und sollte von 4,0 bis 5,5 reichen, bevorzugt von 5,0 bis 5,4.
Die Formulierungen der Erfindung können in geeigneten Behältern wie Mehrfachdosierungs-Fläschchen oder vorsterilisierten Einheitsdosis-Fläschchen von 2 oder 4 ml, abhängig von der therapeutischen Indikation, vertrieben werden; ansonsten können die Fläschchen aseptisch befüllt werden unter Verwendung der „blow, fill and seal"-Technologie. Das Abfüllen wird bevorzugt unter Inertgas-Atmosphäre durchgeführt, die Lösungsformulierungen können vorteilhaft durch Filtration sterilisiert werden.
Die Erfindung wird durch die folgenden Beispiele veranschaulicht.
Beispiel 1
Herstellung einer 7,5 %igen m/v Tobramycin-Lösung bei pH 5,2 und Stabilitätsuntersuchungen
Die Zusammensetzung betrifft ein Einheitsdosisfläschchen (2 ml)
Natriumchlorid wird in 40 l gereinigtem Wasser gelöst (Mischen für 15 Minuten, um die vollständige NaCl-Auflösung zu garantieren). Anschließend werden 30 l Schwefelsäure (2N H₂SO₄) zur Salzlösung gegeben; während des Betriebs wird die Lösungstemperatur überwacht. Wenn die Lösungstemperatur ungefähr 25 bis 30°C beträgt, wird N₂ eingeleitet, um einen Wert des gelösten O₂ von weniger als 1 mg/l zu ergeben. Danach wird Tobramycin hinzugegeben und bis zur vollständigen Auflösung (für nicht weniger als 15 Minuten) gemischt, während die Temperatur unterhalb von 25 bis 30°C gehalten wird. Der pH-Wert wird überprüft und gegebenenfalls Schwefelsäure 2N oder Natriumhydroxid-Lösung 1M hinzugegeben, um einen pH-Wert von 5,2 ± 0,2 zu ergeben. Wenn die Lösungstemperatur 25°C ± 2°C beträgt, wird das gereinigte Wasser hinzugegeben, um das Endvolumen zu erreichen. Die resultierende Lösung wird für 15 Minuten vermischt. Der pH-Wert wird erneut überprüft und eventuell wird Schwefelsäure 2N oder Natriumhydroxidlösung 1M hinzugegeben, um einen pH-Wert von 5,2 ± 0,2 zu ergeben. Die Lösung wird über einen 0,45 μm Nylon-Filter filtriert und über 0,2 μm Nylon-Filter.
Die Lösung wird in 2 ml Polyethylen farblosen Einheitsdosierungsfläschchen unter Stickstoffspülung abgefüllt.
Die Stabilität der Fläschchen wurde sowohl unter Langzeitbedingungen (25°C, 60% R.F.) als auch unter beschleunigten Bedingungen (40°C, 75% R.F.) (R.F. = relative Feuchte) bewertet. Die Ergebnisse sind in den Tabellen 1 und 2 gezeigt. Die Assays von Tobramycin und der hauptsächlichen verwandten Substanzen (Abbauprodukte) wurde durch HPLC bestimmt. Rückstandssauerstoff, pH und Osmolarität wurden ebenfalls aufgezeichnet. Die Osmolarität wurde unter Verwendung eines Gefrierpunkts-Erniedrigungs-Osmometers gemessen.
Die Formulierung der Erfindung zeigt sich stabil für mindestens 9 Monate bei Raumtemperatur und für 6 Monate unter beschleunigten Bedingungen. Der pH und die Osmolarität verbleiben im wesentlichen unverändert unter beiden Bedingungen. Bei Raumtemperatur ändert sich die Farbe der Formulierung der Erfindung nicht signifikant und verbleibt in einem akzeptablen Bereich, selbst wenn sie nicht in einem Folienüberbeutel gelagert wird.
Beispiel 2
Die Vernebelungseffizienz der Lösung für die Inhalation für Beispiel 1, ausgedrückt als Prozentsatz des aktiven Bestandteils, der vernebelt wird, wurde unter Verwendung eines kommerziellen Strahlverneblers (PARI-BOY) für eine Dauer von 5 Minuten Vernebelungszeit bewertet. Das Größenprofil der Tröpfchen, erzeugt durch Vernebelung der Lösung, ausgedrückt als Durchmesser, unterhalb dessen jeweils 10%, 50% bzw. 90% der Tropfen enthalten sind, wurde ebenfalls durch eine Malvern-Analyse charakterisiert.
Eine Formulierung, hergestellt gemäß der Lehre der bevorzugten Ausführungsform der EP 734249 , d.h. enthaltend 60 mg aktiver Bestandteil pro ml einer 0,225 %igen wässrigen Natriumchloridlösung und mit einem pH-Wert von ungefähr 6, wurde zum Vergleich vernebelt. Beide Formulierungen wurden in 2 ml Einheitsdosisfläschchen abgefüllt. Die Ergebnisse sind in Tabelle 3 als Durchschnitt von zwei Bestimmungen gezeigt.
Tabelle 3
Die Ergebnisse zeigen, dass die Formulierung gemäß Beispiel 1 mit einer Osmolarität, die nahe der Isotonizität liegt, wirksam vernebelt wird.
Das Größenprofil der durch Vernebelung erzeugten Tröpfchen ist demgegenüber praktisch das gleiche.

Claims

Aerosol-Formulierung, bestehend aus 75 mg/ml Tobramycin, gelöst in einer wässrigen Lösung, welche 0,45% m/v Natriumchlorid enthält, wobei der pH zwischen 4,0 und 5,5 liegt und die Osmolarität zwischen 250 und 450 mOsm/l liegt.
Aerosol-Formulierung nach Anspruch 1, wobei der pH 5,2 ist und die Osmolarität zwischen 280 und 350 mOsm/l liegt.
Verfahren zur Herstellung einer Aerosol-Formulierung nach Anspruch 1, wobei das Verfahren die Schritte einschließt: i) Herstellung einer wässrigen Lösung, welche 0,45 % m/v Natriumchlorid enthält; ii) Einstellung des pH mit konzentrierter starker Säure; iii) Zugabe des aktiven Bestandteils und Mischen bis zur vollständigen Auflösung; iv) Wiedereinstellung des pH auf den gewünschten Wert; v) Füllen der Lösung in geeignete Behälter, bevorzugt durch Filtration vorsterilisiert.