DD240217A5 - Verfahren zur gewinnung eines gereinigten tierischen wachstumshormons - Google Patents

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Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung eines gereinigten menschlichen oder tierischen Wachstumshormons oder Analogen desselben aus einer Bakterienzelle, in der das tierische Wachstumshormon mittels Expression eines Plasmids mit einer das Hormon oder dessen Analoges kodierenden DNS-Sequenz erzeugt wurde. Erfindungsgemaess geht man so vor, dass mana) die Zellenwand der Bakterienzelle zur Bildung eines Lysats zerbricht;b)den p H-Wert des Lysats auf eine Neutral-p H-Wert einstellt, um das Hormon oder dessen Analoges auszufaellen;c)den Niederschlag durch Einstellen des p H-Werts auf einen alkalischen p H-Wert loeslich macht;d)den loeslichgemachten Niederschlag des Hormons oder dessen Analogen durch Gelfiltrationschromatographie von anderen loeslichen Komponenten abtrennt unde)das derart abgetrennte Hormon oder dessen Analoge zur Konzentration des Hormons oder Analogen und Reindarstellung desselben einer Ionenaustauschchromatographie unterwirft.

Description

Anwendungsgebiet der Erfindung
Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung eines gereinigten menschlichen oder tierischen Wachstumshormons oder Analogen desselben aus einer Bakterienzelle, in der das tierische Wachstumshormon mittels Expression eines Plasmids mit einer das Hormon oder dessen Analoges kodierenden DNS-Sequenz erzeugt wurde.
Ziel der Erfindung
Mit der Erfindung soll ein Verfahren zur Gewinnung eines gereinigten Wachstumshormons oder Analogen desselben bereitgestellt werden.
Darlegung des Wesens der Erfindung
Das erfindungsgemäße Verfahren ist dadurch gekennzeichnet, daß man
a) die Zellenwand der Bakterienzeile zur Bildung eines Lysats zerbricht;
b) den pH-Wert des Lysats auf einen Neutral-pH-Wert einstellt, um das Hormon oder dessen Analoges auszufällen;
c) den Niederschlag durch Einstellen des pH-Werts auf einen alkalischen pH-Wert löslich macht;
d) den löslichgemachten Niederschlag des Hormons oder dessen Analogen durch Gelfiltrationschromatographie von anderen löslichen Komponenten abtrennt und
e) das derart abgetrennte Hormon oder dessen Analoge zur Konzentration des Hormons oder Analogen und Reindarstellung desselben einer lonenaustauschchromatographie unterwirft.
Die bei dem erfindungsgemäßen Verfahren als Ausgangsmaterial eingesetzten Bakterienzellen erhält man dadurch, daß man ein Bakterium-Vektorsystem mit einem Plasmid, enthaltend
a) einen Vektor, der nach dem Einbau in eine geeignete Bakteriumzelle mit dem thermolabilen Repressor Q die Bakteriumzelle nach Erhöhung ihrer Temperatur auf eine Temperatur, bei der der Repressor zerstört wird, zur Expression eines in den Vektor eingebauten gewünschten Gels und zur Bildung eines durch das Gen kodierten Wachstumshormons oder Analogen desselben befähigt und
1) ein Doppelstrang-DNS-Molekül, welches in der Reihenfolge 5' bis 3'
— eine DNS-Sequenz mit dem Promotor und Operator PLOL eines λ-Bakteriophagen;
— die N-Nutzungsstelle zur Bindung von durch die Bakteriumzelle gebildeten Antiterminator-N-Protein;
— eine DNS-Sequenz mit einer Ribosomenbindungsstelle zur Befähigung der mRNS des gewünschten Gens zur Bindung an Ribosomen in der Bakteriumzelle;
— ein ATG-Initiationscodon oder eine DNS-Sequenz, die bei Einfügung des gewünschten Gens in den Vektor in ein ATG-Initiationscodon übergeht, und
— eine Restriktionsenzymstelle zum Einbau des gewünschten Gens in den Vektor in Phase mit dem ATG-Initiationscodon
enthält, sowie
2) zusätzlich eine DNS-Sequenz mit einem Replikationspunkt aus einem zur autonomen Replikation in der Bakteriumzelle fähigen bakteriellen Plasmid sowie eine DNS-Sequenz mit einem wählbaren oder indentifizierbaren Phänotypusmerkmal zugeordneten Gen, das sich bei Anwesenheit des Vektors in der Bakteriumzelle zu erkennen gibt, umfaßt, und b) ein das Wachstumshormon oder ein Analoges desselben kodierendes und in die Restriktionsenzymstelle eingefügtes Gen in einem geeigneten Bakterium, unter die Bildung des Wachstumshormons oder Analogen desselben gestattenden geeigneten Bedingungen wachsen läßt.
Bevorzugte Wachstumsbedingungen sind: 10-30 min, insbesondere 15 min, bei etwa 420C, und so langes Weiterwachsen bei etwa 37-390C, bis die gesamte Wachstumsdauer etwa 60-90 min beträgt. Das Weiterwachsen dauert vorzugsweise etwa 75 min bei 38-390C. Bevorzugte Wachstumsmedien sind mit Glucose oder Gehim/Herz-Aufschwemmung (Infusion) versetztes Lactalbuminhydrolysat
Bevorzugte Vektoren sind pMG 100 und pND5.
Gene, d. h. cDNSn, mit Kodierung für die gewünschten Wachstumshormone, wie Rinder-, Schweine- oder Hühnerwachstumshormone oder menschliche Wachstumshormone oder Analoge derselben können zur Erzeugung von Plasmiden in die Restriktionsenzymstelle des Vektors eingebaut werden. Die Plasmide ihrerseits können in geeignete Wirte, in denen eine Genexpression und eine Produktion gewünschten Polypeptids stattfinden können, eingebaut werden. Bevorzugte Plasmidefür bGH sind pRec2/3 und pR011 und für hGHpTV 18(1) und pTV 104(2). Geeignete Wirte sind Escherichiacoli-Stämme A1637, A1645, A2602 und A1563, vorzugsweise der Stamm A1637.
Diese erfindungsgemäß erhaltenen gereinigten Wachstumshormone oder Analogen derselben können tierärztlichen Zubereitungen oder Humanarzneimitteln einverleibt werden. Die jeweiligen Hormone oder deren Analogen können direkt oder in Form entsprechender Zubereitungen zur Stimulierung der Milch- oder Fleischproduktion bei Rindern oder zur Behandlung von Defiziten an menschlichem Wachstumshormon eingesetzt werden.
Unter Analogen von Wachstumshormonen sind Wachstumshormone derselben Aktivität, wie sie das natürlich vorkommende Wachstumshormon aufweist, jedoch mit einer oder mehreren unterschiedlichen Aminosäure(n) am N-Ende des Wachstumshormons, zu verstehen.
Ausführungsbeispiel
1 kg Bakterienzellen mit darin enthaltenem, auf gentechnologischem Wege erzeugtem Rinder-Wachstumshormon wird in 10 Volumina einer Lösung mit 50 mM Tris-Cl (pH-Wert: 7,4), 5OmM Ethylendiamintetraessigsäure und 25% Saccharose in einem Warring-Mischer suspendiert. Hierbei wirddie Mischergeschwindigkeit derart gesteuert, daß das Ganze nur minimal schäumt. Die homogene Suspension wird kontinuierlich durch einen handelsüblichen Zellenbrecher laufengelassen. Die hierbei erhaltene homogene Suspension zerbrochener Zellen wird zunächst durch Zentrifugieren in einer Sharpless-Zentrifuge und anschließendes kontinuierliches Zentrifugieren mit 20000 Umdrehungen/min in einer Sorvall-Zentrifuge geklärt. Der Niederschlag aus beiden Zentrifugierstufen wird gesammelt, mit 5OmM Tris-Cl (pH-Wert: 7,4) gewaschen und in 500ml desselben Puffers resuspendiert. Nach Zusatz von Lysozyme bis zu einer Endkonzentration von 2 mg/ml wird die Suspension 1 h lang bei 37°C inkubiert. Danach wird Triton X-100 bis zu einer Endkonzentration von 1 % zugesetzt. Nun wird die Suspension auf 4°C gekühlt und 20min lang mit 20000 Umdrehungen/min in einem Sorvall SS34-Rotor zentrifugiert. Der gesammelte Niederschlag wird zweimal mit 5OmM Tris-Cl gewaschen, in 500 ml 5OmM Tris-Cl (pH-Wert: 7,4) resuspendiert und mit 5mM MgCI2 und Desoxyribonuclease bis zu einer Endkonzentration von 20/x.g/ml versetzt. Nach 30minutiger Inkubation bei Raumtemperatur wird der Niederschlag in der geschilderten Weise gesammelt, zweimal mit 500 ml 2OmMTHs-CI (pH-Wert: 7,4), 10OmM NaCI und 1OmM Ethylendiamintetraessigsäure gewaschen und schließlich noch zweimal mit 500ml destilliertem Wasser gewaschen. Der Niederschlag wird durch Zentrifugieren gesammelt und läßt sich unbeschränkt lange bei — 20 °C lagern. In dieser Stufe ist das Rinderwachstumshormon 80% rein (Schätzung aufgrund einer Natriumdodecylsulfat-Gelelektrophorese). Die Ausbeute beträgt etwa 15g Rinderwachstumshormon.
100g Niederschlag werden in 40ml destilliertem Wasser suspendiert und durch Titration mitO,5M NaOH (pH-Wert: 11,8) in Lösung gebracht. Die Lösung erfährt dann eine 2minutige Ultraschallbehandlung. Anschließend wird sie durch 20minutiges Zentrifugieren mit 20000 Umdrehungen/min in einem Sorvall SS34-Rotor geklärt. Nun wird die Lösung auf eine Sepharose CL-6B-Säule (5 χ 100cm), die mit 6,5 mM Boratpuffer (pH-Wert: 11,8) ins Gleichgewicht gesetzt ist, aufgegeben. Die Säule wird mit einer Geschwindigkeit von 100 ml/h entwickelt, wobei Fraktionen in einer Menge von 12 ml aufgefangen werden. Der erste Ablauf der Säule wird verworfen. Die folgenden beiden Abläufe werden getrennt und gesammelt. Der erste entspricht aggregiertem Rinderwachstumshormon niedriger Aktivität, der zweite Rinderwachstumshormon hoher Aktivität. Eine DEAE-Sephacel (25g/100g äquivalent ppt)-Säule wird mit 6,5mM Boratpuffer (pH-Wert: 9,0) ins Gleichgewicht gesetzt. Der zweite Rinderwachstumshormon-Peak wird mit auf die DEAE-Spehacel-Säule mit einer Geschwindigkeit von 250 ml/h aufgebrachter HCI auf einen pH-Wert von 9,0 gebracht. Die Säule wird mit 7,5 ml 6,5 mM Boratpuffer (pH-Wert: 9,0) gewaschen
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und mit 6,5mM Boratpuffer (pH-Wert: 9,0) mit75mM NaCI eluiert. Die Fraktionen mit OD28O über 0,3 werden gesammelt, gegen H2O in einer Millipore Pellicon-Dialysevorrichtung dialysiert und dann lyophilisiert. ·

Claims (10)

  1. Patentansprüche:
    1. Verfahren zur Gewinnung eines gereinigten menschlichen oder tierischen Wachstumshormons oder Analogen desselben aus einer Bakterienzelle, in der das tierische Wachstumshormon mittels Expression eines Plasmids mit einer das Hormon oder dessen Analoges kodierenden DNS-Sequenz erzeugt wurde, dadurch gekennzeichnet, daß man
    a) die Zellenwand der Bakterienzelle zur Bildung eines Lysats zerbricht;
    b) den pH-Wert des Lysats auf einen Neutral-pH-Wert einstellt, um das Hormon oder dessen Analoges auszufällen;
    c) den Niederschlag durch Einstellen des pH-Werts auf einen alkalischen pH-Wert löslich macht;
    d) den löslichgemachten Niederschlag des Hormons oder dessen Analogen durch Gelfiltrationschromatographie von anderen löslichen Komponenten abtrennt und
    e) das derart abgetrennte Hormon oder dessen Analoge zur Konzentration des Hormons oder Analogen und Reindarstellung desselben einer lonenaustauschchromatographie unterwirft.
  2. 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Hormon oder dessen Analoges aus Rinderwachstumshormon oder einem Analogen desselben besteht.
  3. 3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Hormon oder dessen Analogesaus einem Schweinewachstumshormon oder einem Analogen desselben besteht.
  4. 4. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das Hormon oder dessen Analoges aus Hühnerwachstumshormon oder einem Analogen desselben besteht.
  5. 5. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man die Zellen auf mechanischem Wege zerstört.
  6. 6. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man dem Lysat vor Einstellung des pH-Werts Lysozym zusetzt.
  7. 7. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man dem Lysat vor Einstellung des pH-Werts Desoxyribonuclease zusetzt.
  8. 8. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man das Lysat auf einen Neutral-pH-Wert von etwa 7,4 einstellt.
  9. 9. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man (zum Löslichmachen des Niederschlags) auf einen alkalischen pH-Wert von etwa 11,8 einstellt.
  10. 10. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man das Hormon oder dessen Analoges durch Dialyse und nachgeschaltete Lyophilisierung weiter konzentriert.
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Families Citing this family (67)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5340926A (en) * 1983-03-25 1994-08-23 Celltech, Limited Process for the recovery of recombinantly produced protein from insoluble aggregate
US5236828A (en) * 1983-07-06 1993-08-17 Papas Takis S Plasmid pJL6
US5670371A (en) * 1983-07-15 1997-09-23 Bio-Technology General Corp. Bacterial expression of superoxide dismutase
BG49718A3 (en) * 1983-07-15 1992-01-15 Bio Technology General Corp Method for preparing of polypeptid with superoxiddismutasne activitty
US5332805A (en) * 1984-02-03 1994-07-26 Celltech Limited Process for the recovery of recombinantly produced chymosin from insoluble aggregate
EP0159123B1 (de) * 1984-03-06 1992-01-15 Eli Lilly And Company Expressionsvektoren für Rinderwachstumshormonderivate
US6030611A (en) * 1984-08-27 2000-02-29 Bio-Technology General Corp. Therapeutic SOD compositions and uses thereof
US5162217A (en) * 1984-08-27 1992-11-10 Bio-Technology General Corp. Plasmids for expression of human superoxide dismutase (SOD) analogs containing lambda PL promoter with engineered restriction site for substituting ribosomal binding sites and methods of use thereof
CA1340597C (en) * 1984-08-27 1999-06-22 Haim Aviv Expression vectors containing pl promoter, and engineered restriction site for convenient replacement of ribosomal binding site, plasmids containing the vectors, hosts containing the plasmids and related methods
US5143836A (en) * 1984-08-27 1992-09-01 Bio-Technology General Corp. Plasmids for expression of human superoxide dismutase (SOD) analogs containing lambda pl promoter with engineered restriction site for substituting ribosomal binding sites and methods of use thereof
US5759816A (en) * 1984-08-27 1998-06-02 Bio-Technology General Corp. Expression vectors containing λPL promoter and T1 T2 rRNA termination sequence plasmids containing the vectors hosts containing the plasmids and related methods
US5112744A (en) * 1984-08-27 1992-05-12 Bio-Technology General Corp. Plasmids for the production of human Cu-Zn superoxide dismutase, bacterial hosts containing the plasmids and methods for production and recovery of such superoxide dismutase
CA1267615A (en) * 1984-08-27 1990-04-10 Dan Hadary Method for recovering purified growth hormones from genetically engineered microorganisms
US4743546A (en) * 1985-02-13 1988-05-10 Biotechnica International, Inc. Controlled gene excision
US4861868A (en) * 1985-02-22 1989-08-29 Monsanto Company Production of proteins in procaryotes
FR2579223B1 (fr) * 1985-03-25 1988-12-09 Genetica Procede de preparation microbiologique de la serum-albumine humaine
EP0229110B1 (de) 1985-06-26 1992-05-20 The Upjohn Company Solubilisation und oxidation von somatotropin aus transformierten mikroorganismen
US4788144A (en) * 1985-06-28 1988-11-29 International Minerals & Chemical Corp. Fermentation process for the high level production of swine growth
US4762784A (en) * 1985-07-15 1988-08-09 International Minerals & Chemical Corp. Fermemtation process for the high level production of bovine growth hormone
US4874703A (en) * 1985-08-26 1989-10-17 Eli Lilly And Company Expression vectors for use in E. coli
US5631227A (en) * 1985-09-18 1997-05-20 The Upjohn Company Somatotropin analogs
JPS63500941A (ja) * 1985-09-18 1988-04-07 ジ・アップジョン・カンパニ− 選択的脱アミノ化による哺乳動物ソマトトロピンの生物学的活性の増強
JPH07110232B2 (ja) * 1985-10-14 1995-11-29 株式会社日立製作所 遺伝子組換え大腸菌の遺伝子生産物を採取する方法および装置
IE59498B1 (en) * 1985-11-22 1994-03-09 Bio Technology General Corp Human manganese superoxide dismutase analog, plasmid for its expression and method of recovering it in enzymatically active form
US6610520B1 (en) * 1985-11-22 2003-08-26 Bio-Technology General Corp. Gene encoding human manganese superoxide dismutase and recombinant polypeptide encoded thereby
ES2019874B3 (es) * 1986-10-08 1991-07-16 Upjohn Co Bioactividad mejorada de somatotropina de mamiferos mediante desamidacion selectiva.
US5089406A (en) * 1987-01-07 1992-02-18 Allied-Signal Inc. Method of producing a gene cassette coding for polypeptides with repeating amino acid sequences
GB8701848D0 (en) * 1987-01-28 1987-03-04 Celltech Ltd Polypeptides
US5240837A (en) * 1987-02-19 1993-08-31 The Upjohn Company CDNAS encoding somatotropin, expression vectors and hosts
JP2580303B2 (ja) * 1987-02-19 1997-02-12 ジ・アップジョン・カンパニー 異種蛋白をコ−ド付けするｃＤＮＡ類、発現ベクタ−類および宿主類
US5104796A (en) * 1987-04-06 1992-04-14 International Minerals & Chemical Corp. High titer production of human somatomedin c
US5047504A (en) * 1987-04-28 1991-09-10 Amgen, Inc. Method for purifying granulocyte-macrophage colony stimulating factor
US4966841A (en) * 1987-05-22 1990-10-30 The Board Of Regents Of The University Of Washington Enhanced vector production and expression of recombinant DNA products
US5030563A (en) * 1987-07-07 1991-07-09 Genetics Institute, Inc. Bacterial hypersecretion using mutant repressor sequence
US5079345A (en) * 1988-08-19 1992-01-07 Eli Lilly And Company Proteins having growth hormone anabolic properties with reduced effect on carbohydrate metabolism
EP0365858B1 (de) * 1988-10-26 1994-11-30 American Cyanamid Company Verfahren zur Verringerung des Aggregatinhaltes in Wachstumshormonen gleichenden Stoffen
US6780613B1 (en) * 1988-10-28 2004-08-24 Genentech, Inc. Growth hormone variants
WO1990004788A1 (en) 1988-10-28 1990-05-03 Genentech, Inc. Method for identifying active domains and amino acid residues in polypeptides and hormone variants
JPH04503154A (ja) * 1988-11-07 1992-06-11 ルニベルシー・ド・ルタ・ア・リージュ 変型ヒト成長ホルモン
US4975529A (en) * 1989-08-18 1990-12-04 Monsanto Company Method of folding somatotropins
US5958879A (en) * 1989-10-12 1999-09-28 Ohio University/Edison Biotechnology Institute Growth hormone receptor antagonists and methods of reducing growth hormone activity in a mammal
US6583115B1 (en) 1989-10-12 2003-06-24 Ohio University/Edison Biotechnology Institute Methods for treating acromegaly and giantism with growth hormone antagonists
IE912345A1 (en) * 1990-08-03 1992-02-12 Pharmacia Ab Treatment of human lactation failure
US5612198A (en) * 1990-09-04 1997-03-18 The Salk Institute Production of insulin-like growth factor-1 in methylotrophic yeast cells
US5844097A (en) * 1990-11-30 1998-12-01 Monoclonetics International, Inc. Methods for the diagnosis of peripheral nerve damage
DK0559795T3 (da) * 1990-11-30 1996-01-29 Monoclonetics Int Fremgangsmåder til diagnosticering af kroniske smerter i lænderegionen og halshvrivelsøjlen
US5231178A (en) * 1991-01-16 1993-07-27 The Salk Institute Biotechnology/Industrial Associates, Inc. Method for the purification of intact, correctly-folded insulin-like growth factor-1
JP3417558B2 (ja) * 1991-05-10 2003-06-16 ジェネンテク，インコーポレイテッド 配位子作用薬および拮抗薬の選択
US5395761A (en) * 1991-11-27 1995-03-07 Eli Lilly And Company Plasmid pHKY334, an expression vector for EK-BGH and host cells transformed therewith
ZA94169B (en) * 1993-01-26 1994-09-07 Lilly Co Eli Non-denaturing potency assay for bovine somatotropin
AU693478B2 (en) * 1994-11-10 1998-07-02 Metabolic Pharmaceuticals Limited Treatment of obesity
US20020142965A1 (en) * 1994-11-15 2002-10-03 Metabolic Pharmaceuticals, Ltd. Treatment of obesity
US6335319B1 (en) 1994-11-15 2002-01-01 Metabolic Pharmaceuticals, Inc. Treatment of obesity
WO1996040203A1 (en) * 1995-06-07 1996-12-19 Ohio University/Edison Biotechnology Institute Methods of treatment using growth hormone antagonists
KR970006498A (ko) * 1995-07-31 1997-02-21 유충식 활성형 인성장호르몬의 정제 방법
PT1568772E (pt) * 1995-09-21 2010-04-14 Genentech Inc Variantes da hormona do crescimento humana
US5849293A (en) * 1996-01-11 1998-12-15 Cornell Research Foundation, Inc. Use of human transferrin in controlling insulin levels
AU723494B2 (en) * 1996-02-13 2000-08-31 Jcr Pharmaceuticals Co., Ltd. Mutant human growth hormones and their uses
EP1012189B1 (de) 1997-09-08 2007-10-31 Metabolic Pharmaceuticals Ltd. Behandlung von fettleibigkeit
DE19951765A1 (de) * 1999-10-27 2001-05-03 Thomas Schweder Wirts-Vektor-Systeme zur Überproduktion von thermolabilen Enzymen psychrophiler Organismen
KR100400638B1 (ko) * 2000-12-06 2003-10-08 주식회사 엘지생명과학 재조합 인간 성장호르몬 유사체의 분리방법
IL157378A0 (en) 2001-03-09 2004-02-19 Genentech Inc Process for production of polypeptides
AU2003263552A1 (en) * 2002-09-09 2004-03-29 Nautilus Biotech Rational evolution of cytokines for higher stability, the cytokines and encoding nucleic acid molecules
US7998930B2 (en) 2004-11-04 2011-08-16 Hanall Biopharma Co., Ltd. Modified growth hormones
EP2386571B1 (de) 2005-04-08 2016-06-01 ratiopharm GmbH Zusammensetzungen und Verfahren zur Herstellung von Glycosylierungsmutanten eines Proteaseresistenten menschlichen Wachstumshormons
US20080260820A1 (en) * 2007-04-19 2008-10-23 Gilles Borrelly Oral dosage formulations of protease-resistant polypeptides
EP2446898A1 (de) 2010-09-30 2012-05-02 Laboratorios Del. Dr. Esteve, S.A. Verwendung von Wachstumshormonen zur Verbesserung der Immunantwort bei immunsupprimierten Patienten

Family Cites Families (32)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GR68404B (de) * 1979-06-01 1981-12-29 Univ California
US4342832A (en) * 1979-07-05 1982-08-03 Genentech, Inc. Method of constructing a replicable cloning vehicle having quasi-synthetic genes
US4426323A (en) * 1980-01-10 1984-01-17 Ionics, Incorporated Selected recovery of proteins from fermentation broths
US4443539A (en) * 1980-02-05 1984-04-17 The Upjohn Company Process for preparing bovine growth hormone
IL59690A (en) * 1980-03-24 1983-11-30 Yeda Res & Dev Production of bovine growth hormone by microorganisms and modified microorganisms adapted to produce it
BR8101972A (pt) * 1980-06-06 1982-08-17 Biogen Nv Vetor, processo para sua producao, processo para produzir uma molecula recombinante de dna, e processo para produzir um polipeptideo
US4352443A (en) * 1980-06-24 1982-10-05 U.S. Cap & Closure, Inc. Dispenser having a trigger-bulb pump
JPS6045848B2 (ja) * 1980-07-31 1985-10-12 株式会社林原生物化学研究所 ヒト成長ホルモンの製造方法
IE52755B1 (en) * 1980-08-26 1988-02-17 Univ California Bovine pre-growth and growth hormone
DE3231658A1 (de) 1981-01-21 1983-11-17
EP0061250A3 (de) * 1981-03-23 1983-09-28 Biogen N.V. Verfahren zur Rückgewinnung von Produkten erzeugt durch Wirtorganismen
NZ201918A (en) * 1981-09-18 1987-04-30 Genentech Inc N-terminal methionyl analogues of bovine growth hormone
US4436815A (en) * 1981-11-27 1984-03-13 Eli Lilly And Company Method for stabilizing and selecting recombinant DNA containing host cells
US4665160A (en) * 1982-03-22 1987-05-12 Genentech, Inc. Novel human growth hormone like protein HGH-V encoded in the human genome
GB2129810B (en) * 1982-06-07 1985-09-18 Celltech Ltd A process for the preparation of chymosin
EP0103395A3 (de) * 1982-08-17 1985-05-22 Biogen N.V. DNS-Sequenzen, rekombinante DNS-Moleküle und Verfahren zur Herstellung von rinderwachstumshormonähnlichen Polypeptiden, mit grosser Ausbeute
EP0111814A3 (de) * 1982-12-16 1985-08-14 Mgi Pharma, Inc. Klonierung und Expression von nucleotiden Sequenzen die für Rinderwachstumshormon kodieren
US4512922A (en) * 1982-12-22 1985-04-23 Genentech, Inc. Purification and activity assurance of precipitated heterologous proteins
CA1224168A (en) * 1982-12-23 1987-07-14 Dean H. Hamer Human growth hormone produced by recombinant dna in mouse cells
US4728609A (en) * 1983-01-10 1988-03-01 Hoffmann-La-Roche Inc. Recombinant growth hormone releasing factor
JPS59145876A (ja) * 1983-02-09 1984-08-21 株式会社リコー 開閉体用のヒンジ
ATE53220T1 (de) * 1983-03-07 1990-06-15 Hoffmann La Roche Polypeptide.
JPH06102034B2 (ja) * 1983-03-25 1994-12-14 セルテク リミテツド タンパク質の生産方法
US4755465A (en) * 1983-04-25 1988-07-05 Genentech, Inc. Secretion of correctly processed human growth hormone in E. coli and Pseudomonas
BG49718A3 (en) * 1983-07-15 1992-01-15 Bio Technology General Corp Method for preparing of polypeptid with superoxiddismutasne activitty
AU587176B2 (en) * 1984-02-14 1989-08-10 Mycogen Plant Science, Inc. Transfer vector
US4767709A (en) * 1984-06-28 1988-08-30 The Johns Hopkins University Growth-related hormones
DE3426532A1 (de) * 1984-07-18 1986-01-30 Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH (GBF), 3300 Braunschweig Verwendung einer dna-sequenz zur expression sowie dna-struktur und expressionsvektor mit der dna-sequenz
CA1340597C (en) * 1984-08-27 1999-06-22 Haim Aviv Expression vectors containing pl promoter, and engineered restriction site for convenient replacement of ribosomal binding site, plasmids containing the vectors, hosts containing the plasmids and related methods
US4612367A (en) * 1985-04-08 1986-09-16 Eli Lilly And Company Process for purifying growth hormone-like materials
US4677196A (en) * 1985-09-06 1987-06-30 International Minerals & Chemical Corp. Purification and activation of proteins from insoluble inclusion bodies
US4656255A (en) * 1985-09-09 1987-04-07 International Minerals & Chemical Corp. Protein recovery

Also Published As

Publication number Publication date
SK524684A3 (en) 1997-10-08
DE3486425D1 (de) 1996-05-23
IL112178A0 (en) 1995-03-15
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IL72396A (en) 1992-05-25
US4831120A (en) 1989-05-16
EP0691406A1 (de) 1996-01-10
EP0319049A3 (en) 1990-01-03
ES8604252A1 (es) 1986-01-16
IL91828A (en) 1992-05-25
EP0319049B1 (de) 1996-04-17
NZ208897A (en) 1990-06-26
AU615663B2 (en) 1991-10-10
AU1977788A (en) 1988-12-22
JP2568376B2 (ja) 1997-01-08
AU3034584A (en) 1985-01-17
JPH09131190A (ja) 1997-05-20
IL72396A0 (en) 1984-11-30
IE922469A1 (en) 1985-01-15
HUT34543A (en) 1985-03-28
SK278576B6 (en) 1997-10-08
IE841818L (en) 1985-01-15
FI90564B (fi) 1993-11-15
CZ524684A3 (en) 1997-07-16
ES8602947A1 (es) 1985-12-01
IL91826A0 (en) 1990-06-10
FI842842A (fi) 1985-01-16
US4997916A (en) 1991-03-05
ATE136934T1 (de) 1996-05-15
FI842842A0 (fi) 1984-07-13
IL108108A0 (en) 1994-04-12
BR8403523A (pt) 1985-06-25
ES544976A0 (es) 1986-01-16
AU577298B2 (en) 1988-09-22
DK347184D0 (da) 1984-07-13
US4871835A (en) 1989-10-03
HK128095A (en) 1995-08-18
ZA845345B (en) 1985-03-27
FI90564C (fi) 1994-02-25
DD229427A5 (de) 1985-11-06
DK347184A (da) 1985-01-16
CA1254527A (en) 1989-05-23
JPH0799990A (ja) 1995-04-18
EP0131843B1 (de) 1991-09-04
EP0131843A1 (de) 1985-01-23
BG49721A3 (en) 1992-01-15
BG49718A3 (en) 1992-01-15
NZ227962A (en) 1990-06-26
CZ282867B6 (cs) 1997-11-12
IL91826A (en) 1992-05-25
RO91332A (ro) 1987-04-30
IL91828A0 (en) 1990-06-10
JPH0687780B2 (ja) 1994-11-09
DE3486425T2 (de) 1996-10-17

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