KR970006498A - 활성형 인성장호르몬의 정제 방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 유전자 재조합 기술을 이용하여 대장균에서 발현된 인성장호르몬의 봉입체를 활성화시킨 조 인성장호르몬액으로부터 인성장호르몬을 정제하는 방법에 있어서, 조 인성장호르몬액의 pH를 조정하여 이물 단백질을 제거하고 칼람크로마토그라피를 수행함을 포함하는 고순도의 인성장호르몬을 분리·정제하는 방법에 관한 것이다.
Description
본 내용은 요부공개 건이므로 전문내용을 수록하지 않았음
제1도는 본 활성화시키고 산침전하여 얻은 인성장호르몬액을 1차 DEAE-세파로즈 파스트 플로우 크로마토그라피한 결과를 나타낸 크로마토그램이고, 제2도는 1차 DEAE-세파로즈 파스트 플로우 크로마토그라피한 인성장호르몬 용출액을 2차 DEAE-세파로즈 파스트 플로우 크로마토그라피한 결과를 나타낸 크로마토그램이고, 제3도는 2차 DEAE-세파로즈 파스트 플로우 크로마토그라피한 인성장호르몬 용출액을 실리카 SC 크로마토그라피한 결과를 나타낸 크로마토그램이다.
Claims (10)
- 대장균에서 발현된 인성장호르몬이 함유된 봉입체를 회수하여 활성화시킨 조인성장호르몬액을 산침전시키고, 상기 산침전시킨 인성장호르몬액에 대하여 1차 음이온교환크로마토그라피법을 실시하고, 상기 1차 음이온교환크로마토그라피법을 실시한 인성장호르몬액에 2차 음이온교환크로마토그라피법을 실시하고, 상기 2차 음이온크로마토그라피법을 실시한 인성장호르몬액에 역상액체크로마토그라피법을 실시하는, 공정을 포함하는 인성장호르몬의 정제방법.
- 제1항에 있어서, 상기한 1차 음이온교환크로마토그라피를 실시한 후 아미노펩티다제 엠 용액, 고정화 아미노펩티다제 엠을 적용시키는 공정을 더욱 포함하는 인성장호르몬의 정제방법.
- 제1항에 있어서, 상기한 산침전시 액은 인산 또는 초산으로 pH를 조절하는 것인 인성장호르몬의 정제방법.
- 제1항에 있어서, 상기한 산침전시 액의 pH는 4.0 내지 6.0인성장호르몬의 정제방법.
- 제1항에 있어서, 상기한 산침전시 액의 pH는 4.5 내지 5.7인 인성장호르몬의 정제방법.
- 제1항에 있어서, 상기한 1차 음이온교환크로마토그라피는 DEAE-세파로즈 칼람, 상기한 2차 음이온교환크로마토그라피는 DEAE-세파로즈칼람, 상기한 역상액체크로마토그라피는 실리카 SC 칼람 상에서 실시하는 인성장호르몬의 정제방법.
- 제6항에 있어서, 상기한 1차 음이온교환크로마토그라피에서는 50mM과 250mM의 트리스·염산완충액(pH8.2)의 트리스 염 선형농도구배로 용출하는 것인 인성장호르몬의 정제방법.
- 제6항에 있어서, 상기한 2차 음이온교환크로마토그라피에서는 1~3M 요소가 함유된 완충액으로 용출하는 인성장호르몬의 정제방법.
- 제8항에 있어서, 상기한 완충액은 5~15mM MES, 5~15mM MOPS, 5~15mM TEA, 5~15mM Gly, 5~15mM Gly-Gly, 5~15mM Tris, pH 5.0 내지 6.0으로 이루어진 것인 인성장호르몬의 정제방법.
- 제6항에 있어서, 상기한 역상액체크로마토그라피에서는 35%와 50% 특히 38%와 45%의 아세토니트릴 선형농도구배로 인성장호르몬을 용출하는 것인 인성장호르몬의 정제방법.※ 참고사항 : 최초출원 내용에 의하여 공개하는 것임.
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KR1019950023424A KR970006498A (ko) | 1995-07-31 | 1995-07-31 | 활성형 인성장호르몬의 정제 방법 |
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Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8409586B2 (en) | 2006-07-06 | 2013-04-02 | Daewoong Co., Ltd. | Stable liquid formulation of human growth hormone |
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1995
- 1995-07-31 KR KR1019950023424A patent/KR970006498A/ko not_active Application Discontinuation
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