CZ279289B6 - Pyrazolopyrimidinonové sloučeniny, způsob jejich přípravy, farmaceutický prostředek a použití těchto sloučenin - Google Patents

Abstract

Pyrazolopyrimidinové sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém znamená R.sup.1 .n.vodík, alkyl, cykloalkyl nebo pefluoralkyl, R.sup.2 .n.je vodík, alkyl, který je případně substituovaný, nebo perfluoralkyl, R.sup.3 .sup..n.je alkyl, alkenyl, alkinyl, cykloalkyl, perfluoralkyl nebo cykloalkylalkyl, R.sup.4 .n.tvoří společně s atomem dusíku, ke kterému je připojen pyrrolidinyl, piperidinovou, morfolinovou nebo 4-N-(R.sup.6.n.)-piperazinylovou skupinu, R.sup.5 .n.je vodík, alkyl, alkoxyl, skupina NR.sup.7.n.R.sup.8 .n.nebo CONR.sup.7.n.R.sup.8.n., kde R.sup.6.n., R.sup.7 .n.a R.sup.8 .n.mají různé významy a farmaceuticky přijatelné soli, jako selektivní inhibitory cGm PDE použitelné při léčení kardiovaskulárních chorob. Do rozsahu rovněž náleží farmaceutické prostředky obsahující tyto sloučeniny a použití těchto sloučenin pro výrobu léků. Rovněž do rozsahu vynálezu náleží postup výroby těchto sloučenin provádění reakcí sloučeniny II se sloučeninou III.ŕ

Description

Pyrazolopyrimidinonové sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém znamená: R¹ vodík, Ci- C3 alkylovou skupinu, C3 - Č5 cykloalkylovou skupinu nebo Cl - C3 pefluoralkylovou skupinu; R2 znamená vodík, Cl - C6 alkylovou skupinu, popřípadě substituovanou, nebo Cl - C3 perfluoralkylovou skupinu; R³ znamená Ci- Ce alkylovou skupinu, C3- Ce alkenylovou skupinu, C3- C6 alkinylovou skupinu, C3 - C7 cykloalkylovou skupinu, Ci - C6 períluoralkylovou skupinu a C3- Ce-cykloalkyl- Ci- Ce-alkylovou skupinu; R⁴ tvoří společně s atomem dusíku, ke kterému je připojen, pyrrolidinylovou skupinu, piperidinovou skupinu, morfolinovou skupinu nebo 4N-(R⁶)-piperazinylovou skupinu; a R⁵ znamená vodík, Ci- C4 alkylovou skupinu, Ci - C3 alkoxyskupinu, skupinu NR⁷ R⁸nebo CONR⁷ R⁸; přičemž R⁶, R⁷ a R⁸ mají různý význam uvedený v popisu. Tyto sloučeniny představují selektivní inhibitory cGMP PDE, přičemž je možno jich použít pro léčení kardiovaskulárních chorob a k různému Jinému účelu. Do rozsahu vynálezu také náleží postup přípravy uvedených sloučenin reakcí sloučenin obecného vzorce II se sloučeninou obecného vzorce III, kde uvedené symboly mají již uvedený význam, dále farmaceutický prostředek a použití.

(ΠΙ) (I) (II)

Pyrazolopyrimidinonové sloučeniny, způsob jejich přípravy, meziprodukt tohoto postupu, farmaceutický prostředek a použití těchto sloučenin

Oblast techniky

Vynález se týká řady pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-onů, které jsou účinnými a selektivními inhibitory cyklické guanosin-3',5' -monofosfátofosfodiesterázy (cGMP PDE), přičemž je možno je použít k terapeutickým účelům, jako například k léčení různých kardiovaskulárních onemocnění, například k léčení angíny, vysokého krevního tlaku, srdečního selhávání a aterosklerózy. Do rozsahu vynálezu také náleží způsob přípravy těchto sloučenin, meziprodukty tohoto postupu, farmaceutické prostředky obsahující sloučeniny podle vynálezu a použití těchto sloučenin.

Sloučeniny podle vynálezu projevují selektivitu při inhibování cGMP PDE na rozdíl od cyklických adenosin-3',5'-monofosfátofosfodiesteráz (cAMP PDE), přičemž výsledkem této selektivní inhibice PDE je zvýšená hladina cGMP, což zase přispívá k zabraňování agregace krevních destiček, zabraňování zužování cév a podporování rozšiřování cév (antivazospastický a dilatační účinek) , a také tak i ke zvyšování účinku relaxačního faktoru endotelu (EDRF) a vazodilatačních nitrátů. Tyto sloučeniny podle vynálezu jsou proto použitelné při léčení řady různých chorob, jako je stabilní, nestabilní a variantní (Prinzmetalova) angína, hypertenze, městnavé srdeční selhání, ateroskleróza, stavy snížené průchodnosti tepen, například po perkutánní transluminální koronární angioplastice (post-PTCA), periferní cévní choroba, cévní mozková příhoda, bronchitida, chronické astma, alergické astma, alergická rhinitida, glaukom a choroby charakterizované poruchami střevní motility, například syndromu dráždivého trakčníku (IBS).

Dosavadní stav techniky

Určité pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-ony jsou popisovány v evropské patentové přihlášce č. EP-A-0201188, přičemž o těchto sloučeninách se zde uvádí, že představují antagonisty adenosinového receptoru a inhibitory PDE a že jsou použitelné pro léčení kardiovaskulárních chorob, jako je srdeční selhávání nebo srdeční nedostatečnost. Tyto sloučeniny však nejsou ani obzvláště účinnými inhibitory PDE, ani nejsou uváděny jako selektivní inhibitory cGMP PDE.

Podstata vynálezu

Podstatu uvedeného vynálezu tvoří sloučeniny obecného vzorce I:

-1A

R⁵ ve kterém znamená:

η ,

R atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, cykloalkylovou skupinu obsahující 3 až 5 atomů uhlíku nebo perfluoralkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Z Z χ χ

R znamena atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, popřípadě substituovanou skupinou OH, alkoxylovou skupinou obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo cykloalkylovou skupinou obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, nebo perfluoralkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

O z o z

R znamena alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomu uhlíku, alkenylovou skupinu obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, alkinylovou skupinu obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylovou skupinu obsahující 3 až 7 atomů uhlíku, perfluoralkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku a cykloalkylalkylovou skupinu obsahující v cykloalkylové části 3 až 6 atomů uhlíku a v alkylové části 1 až 6 atomů uhlíku,

R⁴ tvoří společně s atomem dusíku, ke kterému je připojen pyřrolidinylovoů skupinu, piperidinovou skupinu, morfolinovou skupinu nebo 4-N-(R⁶)-piperazinylovou skupinu,

K z z χ x

R znamena atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupinu NR⁷R⁸ nebo CONR⁷R⁸,

R⁶ představuje atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkoxyalkylovou skupinu obsahující v alkoxy části 1 až 3 atomy uhlíku a v alkylové části 2 až 6 atomů uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu obsahující 2 až 6 atomů uhlíku, (R⁷R⁸N)-alkylovou skupinu obsahující v alkylové části 2 až 6 atomů uhlíku, (R⁷R⁸NCO)-alkylovou skupinu obsahující v alkylové části 1 až 6 atomů uhlíku, skupinu CONR⁷R⁸, CSNR⁷R⁸ nebo C(NH)NR⁷R⁸,

R a R znamenají každý nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyalkylovou skupinu obsahující v alkoxy části 1 až 3 atomy uhlíku a v alkylové části 2 až 4 atomy uhlíku nebo hydroxyalkylovou skupinu obsahující 2 až 4 atomy uhlíku, a farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

-2CZ 279289 B6

Výhodnou skupinu sloučenin o shora obecném vzorci I představují sloučeniny, ve kterých:

R představuje atom vodíku, methylovou skupinu nebo ethylovou skupinu, o

R znamena alkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinou OH nebo methoxyskupinou,

R³ znamená alkylovou skupinu obsahující 2 až 3 atomy uhlíku nebo allylovou skupinu,

R⁴ tvoří společně s atomem dusíku, ke kterému je připojen, piperidinovou nebo 4-N-(R⁶)-piperazinylovou skupinu,

R⁵ znamená atom vodíku, skupinu NR⁷R⁸ nebo CONR⁷R⁸,

R znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu obsahující 2 až 3 atomy uhlíku, skupinu CONR⁷R⁸, CSNR⁷R⁸ nebo C(NH)NR⁷R⁸, a o

R a R znamenají nezávisle atom vodíku nebo methylovou skupinu.

Obzvláště výhodnou skupinu sloučenin obecného vzorce I představují sloučeniny, ve kterých:

R¹ znamená methylovou skupinu, o

R znamena n-propylovou skupinu, o

R znamena ethylovou skupinu, n-propylovou skupinu nebo allylovou skupinu,

R⁴ tvoří společně s atomem dusíku, ke kterému je připojen, 4-N-(R⁶)-piperazinylovou skupinu,

R znamena atom vodíku, a zr

R znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až atomy uhlíku nebo 2-hydroxyethylovou skupinu.

Jako konkrétní příklad ... zejména výhodných sloučenin podle uvedeného vynálezu je možno uvést následující sloučeniny:

5-[2-allyloxy-5-(4-methylpiperazinylsulfonyl)fenyl]-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]-pyrimidin-7-on,

5-[2-ethoxy-5-(piperazinylsulfonyl)fenyl]-l-methyl-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on,

5-[2-ethoxy-5-(4-methylpiperazinylsulfonyl)fenyl]-1-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]-pyrimidin-7-on,

5-{2-ethoxy-5-[4-(2-propyl)piperazinylsulfonyl]-fenyl}-1-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo-[4,3-d]pyrimidin-7-on,

5-{2-ethoxy-5-[4-(2-hydroxyethyl)piperazinyl-sulfonyl]fenyl} -l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo[ 4,3-d]pyrimidin-7-on, l-methyl-5-[5-(piperazinylsulfonyl)-2-n-propoxyfenyl]-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on,

-3A

5-{5-[4-(2-hydróxyethyl)piperazinylsulfonyl]-2-n-propoxyfenyl}-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on, a jejich farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

Do rozsahu uvedeného vynálezu patří také farmaceutický prostředek vhodný pro použití v lékařství, zejména pro léčení angíny, vysokého krevního tlaku nebo městnavého srdečního selhání, jehož podstata spočívá v tom, že obsahuje sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl společně s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičovou látkou.

Do rozsahu uvedeného vynálezu také náleží pyrazolopyrimidinonové sloučeniny obecného vzorce I nebo farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin pro použití v lékařství, zejména pro léčení angíny, vysokého krevního tlaku, srdečního selhání nebo aterosklerózy.

Do rozsahu uvedeného vynálezu náleží také použití sloučenin obecného vzorce I nebo jejich farmaceuticky přijatelných soli pro přípravu léčiv, zejména léčiv pro léčení stabilní, nestabilní a variantní (Prinzmetalovy) angíny, vysokého krevního tlaku, městnavého srdečního selhání, aterosklerózy, mozkové cévní příhody, periferní cévní choroby, stavů snížené průchodnosti cév, například po PTCA, chronického astma, bronchitidy, alergického astma, alergické rinitidy, glaukomu nebo chorob charakterizovaných poruchami střevní motility, například IBS.

Při definování shora uvedených substituentů mohou být alkylové nebo perfluoralkylové skupiny obsahující 3 nebo více atomů uhlíku lineární nebo rozvětvené, pokud nebude výslovně uvedeno jinak. Také alkenylové nebo alkinylové skupiny obsahující 4 nebo více atomů uhlíku nebo alkoxylové skupiny obsahující 3 atomy uhlíku mohou být lineární nebo rozvětvené.

Sloučeniny obecného vzorce I mohou obsahovat jedno nebo více asymetrických center a mohou proto existovat ve formě enantiomerů nebo diastereoizomerů. Do rozsahu uvedeného vynálezu patří jak směsi, tak i jednotlivé izomery.

Sloučeniny podle vynálezu obecného vzorce I mohou také existovat v tautomerních formách, přičemž do rozsahu vynálezu náleží jak směsi, tak i jednotlivé tautomery.

Do rozsahu uvedeného vynálezu patři také značené radioizotopy odvozené od sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu, které jsou vhodné pro biologické výzkumy.

Farmaceuticky přijatelnými solemi sloučenin obecného vzorce I podle vynálezu, které obsahují bazické centrum, jsou adiční soli s kyselinami vytvořené pomocí farmaceuticky přijatelných kyselin. Jako příklad těchto solí je možno uvést hydrochloridové soli, hydrobromidové soli, síranové soli nebo hydrosíranové soli, fosforečnanové soli nebo hydrogenfosforečnanové soli, acetátové soli, citronátové soli, fumarátové soli, glukonátové soli, mléčnanové soli, maleinanové soli, jantaranové soli a vínanové soli.

-4CZ 279289 B6

Sloučeniny obecného vzorce I mohou také tvořit s bazickými látkami farmaceuticky přijatelné kovové soli, zejména soli s alkalickými kovy. Jako příklad je možno uvést sodné a draselné soli těchto sloučenin.

Do rozsahu uvedeného vynálezu také náleží postup výroby pyrazolopyrimidinových sloučenin obecného vzorce I a jejich farmaceuticky přijatelných solí jehož podstata spočívá v tom, že zahrnuje reakci sloučeniny obecného vzorce II:

ve kterém:

R¹, R² a R³ mají stejný význam jako bylo uvedeno shora, a

Y znamená atom halogenu (ve výhodném provedení atom chloru), se sloučeninou obecného vzorce III:

(III) ve kterém

R⁴ a R⁵ mají stejný význam jako bylo uvedeno shora, a potom popřípadě následuje převedení vzniklého produktu na farmaceuticky přijatelnou sůl.

Tato shora uvedená reakce se obvykle provádí při teplotě místnosti, ve výhodném provedení v přítomnosti rozpouštědla, například alkanolu obsahujícího 1 až 3 atomy uhlíku, a za použití přebytku sloučeniny obecného vzorce III pro vázání kyselého vedlejšího produktu (HY).

Sloučeniny obecného vzorce II je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce IV:

-5CZ 279289 B6 (IV)

ve kterem mají R , R a R jiz shora uvedeny význam, za použiti postupů používaných pro zavádění skupiny SO₂Y (ve které má Y již shora definovaný význam) do aromatického kruhu, které jsou z dosavadního stavu techniky dostatečně dobře známé, například postup, při kterém se do reakce uvádí daná sloučenina s kyselinou chlorsulfonovou při teplotě 0 “C nebo v okolí této teploty, pokud Y představuje atom chloru.

V případě, že R představuje skupinu náchylnou k odštěpeni za podmínek chlorsulfonace, například allylovou skupinu, potom může být tato skupina zavedena v závěrečném stupni syntézy. To o

tedy znamená, že se fenol obecného vzorce IV, ve kterém R předz Ί O z stavuje atom vodíku a R a R mají shora uvedený význam, který je možno získat odstraněním chránící skupiny z 0-allylového analogu pomocí Pd(O), což je ilustrováno v příkladu 25, podrobí chlorsulfonací za vzniku sloučeniny obecného vzorce II, ve kterém Y znaměna atom chloru, R znamena atom vodíku a R a R mají shora definovaný význam. Sloučenina obecného vzorce II se potom uvádí do reakce s příslušným aminem obecného vzorce III za vzniku slou_v z >2 z z Ί ceniny obecného vzorce I, ve kterem R znamena atom vodíku a R , R , R a R mají shora definovaný význam, která se nakonec O-alkyluje, čímž se získá sloučenina obecného vzorce I, ve kterém R³, R², R³ , R^ a R⁵ mají stejný význam jako bylo uvedeno v případě sloučeniny obecného vzorce I. Tuto alkylaci je možno provést za standardních podmínek za použiti vhodného alkylhalogenidu, například allylbromidu, v přítomnosti bazické látky, jako je například uhličitan draselný, ve vhodném rozpouštědle, například v 2-butanonu, a při teplotě varu reakční směsi pod zpětným chladičem. V alternativním provedeni je možno tuto alkylaci provést za reakčních podmínek metody podle Mitsunobu známé z dosavadního stavu techniky.

V případě dalších sloučenin obecného vzorce IV, u kterých není možno použít reakčních podmínek chlorsulfonace, například sloučeniny, ve kterých R² znamená hydroxyalkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, může být hydroxylová skupina chráněna acylovou skupinou, jako je například acetylová nebo benzoylová skupina. Tato chránící skupina se potom odstraní v závěrečném stupni syntézy za podmínek standardní alkalické hydrolýzy, čímž se získá sloučenina obecného- vzorce I, ve kterém R² znamená hydroxyalkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku a R¹,

-6CZ 279289 B6

R³, R⁴ . a R⁵ mají stejný význam jako bylo uvedeno u sloučeniny obecného vzorce I. Tyto sloučeniny je možno také získat příležitostně jako vedlejší produkty při chlorsulfonací odpovídajících alkoxy-analogů, to znamená sloučenin obecného vzorce IV, ve kterém · R² představuje alkoxyalkylovou skupinu obsahující v alkoxy části 1 až 3 atomy uhlíku a v alkylové části 1 až 6 atomů uhlíku, přičemž potom následuje reakce surového produktu s vhodným aminem obecného vzorce III, jak je tento postup ilustrován v příkladu 48.

Sloučeniny obecného vzorce IV je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce V:

ve kterém mají R¹, R² a R³ shora definovaný význam, za použití běžně známých postupů cyklizace podle dosavadního stavu techniky k vytvoření.pyrimidinonového kruhu. Cyklizace může být proto provedena například působením bazické látky, jako je například hydroxid sodný nebo uhličitan draselný, za vzniku sloučeniny obecného vzorce V, popřípadě se tato reakce provádí v přítomnosti peroxidu vodíku, v prostředí ethanol/voda a při teplotě varu.pod zpětným chladičem po dobu 2 až 40 hodin. Za těchto podmínek je možno také použít jako prekuržoru sloučeniny obecného vzorce IV odpovídajícího nitrilu obecného vzorce VI:

NC (VI) ve kterém R¹, R² a R³ mají shora .definovaný význam.

Podle alternativního postupu cyklizace je možno sloučeniny obecného vzorce IV získat zpracováním sloučenin obecného vzorce V kyselinou polyfosforéčnou při teplotě přibližně 140 °C po dobu v rozmezí od 6 do 18 hodin.

Sloučeniny obecného vzorce V a VI je možno připravit ze sloučenin obecného vzorce VII, respektive VIII:

-7CZ 279289 B6

(Vil)

HoN

(Vlil) , Ί 2 ve kterých mají R a R již definovaný význam, reakcí se sloučeninou obecného vzorce IX:

(IX) ve kterém mají R³ a Y již shora definovaný význam.

Tato reakce se obvykle provádí za použití přebytku sloučeniny obecného vzorce IX v přítomnosti přebytku alifatického terciárního aminu’,' jako je například triethylamin, který slouží k vázání kyselého vedlejšího produktu (HY), popřípadě v přítomnosti katalyzátoru, jako je například 4-dimethylaminopyridin, v inertním reakčním rozpouštědle, jako je například dichlormethan, a při teplotě v rozmezí od 0 °C do 25 °C po dobu v rozmezí od 2 do 6 hodin.

Aminové sloučeniny obecného vzorce III, aminopyrazolové sloučeniny obecného vzorce VII a VIII a acylhalogenidové sloučeniny obecného vzorce IX představují bud' běžně obchodně dostupné sloučeniny, nebo je možno je připravit syntetickými metodami známými z dosavadního stavu techniky za pomoci snadno dostupných výchozích sloučenin a standardních reakčních činidel a za použití běžných reakčních podmínek.

Některé sloučeniny obecného vzorce I, ve kterém R⁴ tvoří společně s atomem dusíku, ke kterému je připojen, 4-N-(R⁶)-piperazinylovou skupinu a R^ má již, shora uvedený význam, ovšem neznamená atom vodíku, je možno připravit přímo z odpovídajícího 4-N-nesubstituovaného piperazinového analogu, což je sloučenina

-8CZ 279289 B6 obecného vzorce I, ve kterém R⁶ znamená atom vodíku, za použití vhodných standardních syntetických postupů běžně známých z dosavadního stavu techniky.

Všechny shora uvedené reakce jsou běžně známé z dosavadního stavu techniky, přičemž příslušné, reakční látky a podmínky přípravy je možno snadno zjistit z literatury a z příkladů, které následují. Pro přípravu sloučenin obecného vzorce I je možno také použít i dalších alternativních a obdobných postupů, které jsou pro odborníky pracující v daném oboru zřejmé.

Biologickou účinnost sloučenin podle vynálezu je možno zjistit následujícími testy.

Afinitu sloučenin k fosfodiesterázám cGMP PDE a cAMP PDE je možno určit stanovením jejich hodnot IC₅₀ (koncentrace inhibitoru potřebná pro 50% inhibici účinnosti enzymu). Enzymy PDE se izolují z krevních destiček králíka a z ledvin krysy, přičemž se použije v podstatě metody podle W.J. Thomsona a kol., Biochem., 1971, 10, 311. Vápník (calmodulin (Ca/CAM)-independentní cGMP PDE a cGMP-inhibované enzymy cAMP PDE se získají z krevních destiček králíka, zatímco ze čtyř hlavních enzymů PDE z ledvin krysy se izoluje Ca/CAM-dependentní cGMP PDE (frakce I). Testy se provádí za použití modifikace vsázkové metody podle E.J. Thompsona a M.M. Applemana, Biochem., 1979, 18, 5228. Výsledky provedené podle těchto testů ukázaly, že sloučeniny podle vynálezu jsou účinnými a selektivními inhibitory obou cGMP PDE. Konkrétní výsledky jsou uvedeny v příkladové části.

Účinnost vůči srážení krevních destiček se stanoví na základě schopností sloučenin inhibovat agregaci destiček in vivo vyvolanou aktivačním faktorem destiček (PAF) a na základě schopnosti podpoření antiagregačního účinku aktivátorů guanylátcyklázy in vivo, jako je například nitrosoferrikyanid a EDRF. Očištěné destičky se připraví v podstatě metodou podle J.F. Mustarda a kol., Methods in Enzymol., 1989, 169, 3, a agregace se stanoví za použití standardního turbidimetrického postupu, jak je to uvedeno v publikaci: G.V.R. Born, J. Physiol. (Lond), 1962, 162, 67P.

Antihypertenzní účinnost se stanoví po nitrožilní nebo perorální aplikaci sloučeniny na spontánně hypertenzních krysách. Krevní tlak se zaznamenává pomocí kanyly implantované do arteria carotis buď při vědomí, nebo anesterizovaných.

Při podání sloučenin podle vynálezu lidem při léčení nebo profylaxi angíny, vysokého krevního tlaku nebo městnavého srdečního selhání, se perorální dávky sloučenin obecně pohybují v rozmezí od 4 do 800 miligramů denně v případě průměrného dospělého pacienta (o hmotnosti 70 kilogramů). To znamená, že jednotlivé tablety nebo kapsle pro typického dospělého pacienta obsahují 2 až 400 miligramů účinné látky ve vhodném farmaceuticky přijatelném vehikulu nebo v nosičové látce, pro aplikování ve formě jednotlivých dávek nebo v násobných dávkách, jednou nebo několikrát denně. Dávkování v případě intravenózního podávání, bukálního podávání nebo sublinguálního podávání se obvykle pohybuje v rozmezí od 1 ďo 400 miligramů na jednotkovou dávku, podle konkrétní potřeby. Při praktické aplikaci stanoví skutečný dávkový režim,

-9CZ 279289 B6 který bude nejlépe vyhovovat konkrétnímu pacientu, ošetřující lékař, přičemž toto dávkování závisí na věku pacienta, na jeho hmotnosti a odezvě na podávané léčivo. Tyto shora uvedené dávky jsou uváděny pouze jako příklad, který se vztahuje pro průměrné případy. Může však dojít k okolnostem, kdy je zapotřebí použít vyšších nebo nižších dávek, přičemž i tato dávková rozmezí náleží do rozsahu uvedeného vynálezu.

V případě použití u lidí je možno sloučeniny obecného vzorce I aplikovat samostatně, ale obvykle se aplikují ve směsi s farmaceutickou nosičovou látkou vybranou podle konkrétního způsobu podávání podle standardní farmaceutické praxe. Například je možno sloučeniny podle vynálezuaplikovat perorálně, bukálně nebo sublinguálně, ve formě tablet obsahujících nosičovou látku, jako je například škrob nebo laktóza nebo ve formě kapslí buď samostatně, nebo ve směsi s nosičovou látkou nebo ve formě tinktur nebo suspenzí obsahujících chuťová nebo zbarvovací činidla. Sloučeniny podle vynálezu je možno také aplikovat parenterálně ve formě injekcí, například intravenózně, intramuskulárně, subkutánně nebo intrakoronárně. Při parenterální aplikaci je nejvýhodnější použít sloučenin podle vynálezu ve formě sterilních vodných roztoků, které mohou obsahovat další látky, například dostatečné množství solí nebo glukózy, aby byl připraven roztok isotonický s krví.

Příklady provedení vynálezu

Sloučeniny podle vynálezu, jejich postup přípravy a blíže ilustrovány pomocí výsledky farmakologických testů budou v dalším konkrétních příkladů provedení, přičemž tyto příklady jsou pouze ilustrativní a nijak neomezují rozsah sloučenin byla běžným způsobem stanovována metodou chromatografie v tenké tohoto vynálezu. Čistota

Hodnoty QE-300, túrám.

vrstvě (TLC) za použití desek Měrek Kieselgel 60 F₂₅₄· Ί spekter H NMR byly zjištěny na spektrometru Nicolet. přičemž všechny hodnoty odpovídaly předpokládaným strukPříklad 1

Postup přípravy ethylesteru kyseliny l-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové

Podle tohoto provedení byla směs obsahující ethylester kyseliny 3-n-propylpyrazol-5-karboxylové (v množství 24,1 gramu, což představuje 0,132 molu), který byl připraven postupem podle Chem. Pharm. Bull., 1984, 32, 1568, a dimethylsulfát (v množství 16,8 gramu, což představuje 0,133 molu) zahřívána při teplotě 90 °C po dobu 2,5 hodiny. Takto připravená reakční směs byla potom rozpuštěna v dichlormethanu a- získaný roztok byl promyt roztokem uhličitanu sodného. Organická fáze byla oddělena, vysušena (MgSO₄) a odpařena za vakua, čímž se získala pevná látka. Chromatografií na silikagelu (300 g) s elucí dichlormethanem se získal produkt ve formě bezbarvého oleje (20,4 g, 79 %). R_f 0,8 (silikagel; dichlormethan, methanol, kyselina octová; 80:20:1).

-10CZ 279289 B6

Příklad 2

Kyselina l-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylová

Ethylester kyseliny l-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové (20,2 g, 0,10 mol) byl suspendován v 6N vodném roztoku hydroxidu sodného (50 ml, 0,30.mol). Směs byla zahřívána na teplotě 80 °C po dobu 2 hodin, potom byla zředěna vodou (50 ml) a okyselena kyselinou chlorovodíkovou (25 ml, koncentrovaná). Filtrací se získala karboxylová kyselina ve formě bledě hnědých krystalů (12,3. g, 71 %).

Teplota tání: 150 až 154 °C.

Analýza: C - 56,99; H - 7,25; N - 16,90.

Teoretické složení pro CgH₁₂ ^N2°2^:C “ 57,13; H - 7,19; N - 16,66 %.

Příklad 3

Kyselina l-methyl-4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxylová

Kyselina l-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylová (12,1 g, 0,07 2 mol) byla přidávána po částech do směsi olea (13 ml) a dýmavé kyseliny dusičné (11 ml), přičemž se teplota udržovala pod 60 °C. Po ukončení přídavků byla směs zahřívána přes noc na teplotě 60 °C a potom byla ochlazena na teplotu místnosti a nalita na led.

Filtrací sraženiny se získal nitropyrazol ve formě bílé pevné látky (11,5 g,.75 %).

Teplota tání: 124 až 127 °C.

Analýza: C - 45,43; H - 5,22; N - 19,42.

Teoretické obsahy pro C_gH₁₁N₃O₄:C - 45,57; H - 5,20; N - 19,71 %.

Příklad 4

Amid kyseliny l-methyl-4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové

Kyselina l-methyl-4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karbovylová (11,3 g, 0,053 mol) byla přidána do thionylchloridu (50 ml) a výsledná směs byla zahřívána pod refluxem po dobu 3 hodin. Reakční směs byla potom ochlazena a přebytek thionylchloridu byl odstraněn odpařováním ve vakuu. Olejovitý zbytek byl rozpuštěn v acetonu (50 ml) a roztok byl opatrně přidáván do směsi ledu (50 gramů) a koncentrovaného vodného roztoku hydroxidu amonného (50 ml). Odfiltrováním sraženiny byl získán amid kyseliny pyrazolokarboxylové ve formě světle žluté pevné látky (8,77 g; 78 %).

Teplota tání: 141 až 143 °C.

Analýza: C - 45,22; H - 5,71; N - 26,12.

Teoretické složení ^C8^H12^N4°3^: C - 45,28; H - 5,70; N - 26,40 %.

Příklad 5

Amid kyseliny 4-amino-l-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové

Amid kyseliny l-methyl-4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové (3,45 g, 16,2 mmol) a chlorid cínatý-dihydrát (18,4 g, 81 mmol) byly suspendovány v ethanolu a směs byla zahřívána pod refluxem po dobu 2 hodin. Výsledná směs byla ochlazena na teplotu místnosti, zalkalizována na pH 9 přídavkem 2N vodného roztoku hydroxidu sodného a extrahována dichlormethanem (3 x 150 ml). Organické extrakty byly spojeny, vysušeny (MgSO₄) a odpařeny za vakua. Rozetřením zbytku s etherem se získal aminopyrazol ve formě špinavě 'bílé pevné, látky (2,77 g; 94 %).

Teplota tání: 98 až 101 °C.

Analýza: C - 52,84; H - 7,81; N - 30,38. Teoretické složení CgH₁₄N₄O: C - 52,73; H - 7,74; N - 30,75 %.

Příklad 6

Amid kyseliny 4-(2-ethoxybenzamido)-l-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové

Roztok 2-ethoxybenzoylchloridu (6,1 g, 33,0 mmol) v dichlormethanu (50 ml) byl přidán do míchaného roztoku 4-amino-l-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxamidu (3,0 g, 16,4 mmol), 4-dimethylaminopyridinu (0,02 g, 0,164 mmol) a triethylaminu (3,34 g, 33,0 mmol) v dichlormethanu (50 ml) při teplotě 0 °C. Výsledná směs se nechala zahřát na teplotu místnosti a promíchávala se po dobu dalších 2 hodin. Rozpouštědlo bylo odpařeno za vakua, zbytek byl rozpuštěn ve směsi dichlormetanu a metanolu 19:1 (250 ml) a potom byl roztok promyt IN kyselinou chlorovodíkovou (100 ml), vysušen (MgSO₄) a odpařen za vakua. Surová látka byla chromatograficky separována na silikagelu (200 g) při eluci směsí dichlormetanu a metanolu 97:3, čímž se získala růžová pevná látka.

Krystalizací z roztoku ethylacetát-hexan se vytěžil amid kyseliny pyrazol-5-karboxylové ve formě světle růžové pevné látky (2,2 g, 40 %).

Teplota tání: 153 až 155 °C.

Analýza: C - 61,66; H - 6,77; N - 16,95. Teoretické složení ^ci7^H22^N4°3^: C - 61,80; H - 6,71; N - 16,96 %.

Příklad 7

5-(2-Ethoxyfenyl)-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

Amid kyseliny 4-(2-ethoxybenzamido)-l-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové (223 g, 0,676 mol) byl přidáván po částech do roztoku hydroxidu sodného (54 g, 1,35 mol) a 30% roztoku peroxidu vodíku (224 ml) ve vodě (2 000 ml). Byl přidán ethanol (700 ml) a výsledná směs byla zahřívána pod refluxem po dobu 2,5 hodin, ochlazena a potom odpařena za vakua. Výsledná pevná látka byla za

-12CZ 279289 B6 vnějšího chlazení zpracována pomocí 2N kyseliny chlorovodíkové (380 ml) a směs byla extrahována dichlormethanem (1 x 700 ml, 3 x 200 ml). Spojené organické extrakty byly následně promývány vodným roztokem uhličitanu sodného (3 x 400 ml) a solankou (300 ml), potom vysušeny (Na₂SO₄) a odpařeny za vakua.

Chromatografickou separací zbytku na silikagelu (1 000 g), za použití elučního gradientu methanolu v dichlormethanu (0 až 1 %), následovanou rozetřením surového produktu s etherem (300 ml) se vytěžila žádaná sloučenina ve formě bezbarvé pevné látky.

Výtěžnost: 152,2 g, 72 %. Teplota tání: 143 až 146 °C.

Analýza: C - 65,56; H - 6,44; N - 18,14. Teoretické složení C₁₇H₂₀N₄O₂: C - 65,36; H - 6,45; N - 17,94 %.

Příklad 8

5-(5-Chlorsulfonyl-2-ethoxyfenyl)-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

5-(2-Ethoxyfenyl)-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on (10,0 gramu, 32,1 mmol) byl přidáván po částech do kyseliny chlorsulfonové (20 ml) při teplotě 0 °C pod atmosférou dusíku. Reakční směs byla potom přes noc promíchávána, potom byl roztok opatrně nalit do směsi led-voda (150 ml) a vodná směs byla extrahována směsí dichlormethanu a methanolu v poměru 9:1 (4 x 100 ml). Spojené extrakty byly vysušeny (Na₂SO₄) a odpařeny ve vakuu za tvorby žádaného sulfonylchloridu ve formě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 12,8 g, 97 %. Teplota tání: 179 až 181 °C.

Analýza: C - 50,07; N - 13,29; H - 4,71.

Teoretické složení C₁₇H₁₉C1N₄O₄S:C - 49,70; H - 4,66; N - 13,64 %.

Příklad 9

5-/2-Ethoxy-5- ( 4-karbamoylpiperidinylsulf onyl) f enyl/-1-methy 1-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

4-Karbamoylpiperidin (703 mg, 5,50 mmol) byl přidán při teplotě místnosti do míchané suspenze 5-(5-chlorosulfonyl-2-ethoxyf enyl) -l-methyl-3-n-propyl-l, 6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-onu (750 mg, 1,80 mmol) v ethanolu (50 ml). Výsledná směs byla promíchávána po dobu 4 dní a potom se odstranilo rozpouštědlo odpařováním za vakua. Zbytek byl rozpuštěn ve směsi dichlormethanu a methanolu v poměru 9:1 (100 ml) a roztok byl promyt nasyceným vodným roztokem uhličitanu sodného (100 ml). Vodná fáze byla dále extrahována pomocí směsí dichlormethan-methanol (3 x 100 ml) a všechny organické frakce byly sloučeny, vysušeny (MgSO₄) a po odpaření ve vakuu poskytly pevnou látku.

-13CZ 279289 B6

Krystalizací ze směsi methanol-dimethylformamid se získal žádaný sulfonamid ve formě špinavě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 446 mg, 49 %..

Teplota tání: 274 až 276 °C.

Analýza: C - 55,36; H - 6,01; N - 16,65.

Teoretické složení ^C23^H29^N6°5^{S: c} ~ 55,08; H - 5,83; N - 16,75 %.

Příklady 10 - 14

Za použití postupu podle příkladu 9 byly připraveny následující sloučeniny za použití příslušného aminu.

Příklad

R⁴

NH

Teplota tání °C

Analýza, % (teoretické složení v závorkách)

C H

161-162

54,82 (54,77

6,13

6,13

17,95

18,25)

OH < A/

N

N¹ Pr

194-196

187-189

187-188

209-212

54,63 (54,75

55,61 (55,68

57,48 (57,35

57,64 (57,35

6,47

6,39

6,23

6,37

6,74

6,82

6,66

6,82

16,50

16,65)

17,74

17,71)

-14CZ 279289 B6

51,25 5,56 18,72 (50,85 5,63 18,87)

Pokračování tabulky:

ncsnh₂

229-230

Příklad 16

Hydrojodid 5-{2-ethoxy-5-/4-(methylthioimidoyl)piperazinylsulfonyl/-fenyl}-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/-pyrimidin-7-onu

Směs 5-/2-ethoxy-5-(4-thiokarbamoylpiperazinylsulfonyl)fenyl/-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/-pyrimidin-7-onu (0,78 g, 1,5 mmol), methyljodidu (426 mg, 3,0 mmol) a methanolu (20 ml) byla promíchávána pod refluxem po dobu 2 hodin a potom se nechala zchladnout.

Výsledná bílá pevná látka se oddělila filtrací a krystalizací z roztoku ethylacetát-methanol se získala žádaná sloučenina ve formě bezbarvých krystalů.

Výtěžnost: 0,70 g, 71 %.

Teplota tání: 227 až 228 °C. Analýza: C - 41,43; H - 4,79; N - 14,42. Teoretické složení pro ^C23^H31^N7°4^S2^HI: C

N

- 41,75; H - 4,88;

- 14,82 %.

Příklad 17

Hydrojodid _ř.5-{2-ethoxy-5-/4-(methylamidino)piperazinylsulfonyl/-fenyl}-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/-pyrimidin-7-onu

Hydrojodid 5-{2-ethoxy-5-/4-(methylthioimidoyl)piperazinylsulfonyl/-fenyl}-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/-pyrimidin-7-onu (0,5 gramu, 0,75 mmol) bylo přidáno do 33% roztoku methylaminu v ethanolu (20 ml) a směs byl promíchávána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Roztok byl odpařen za vakua a zbytek byl rozetřen s etherem.

Chromatografií vzniklé pevné látky na silikagelu (10 g) za použití elučního gradientu methanolu v dichlormethanu (0 až 4 %) následovanou rozetřením surového produktu s etherem, se získal světle hnědý prášek. Krystalizací z roztoku ethylacetát-methanol se získala žádaná sloučenina ve formě bezbarvých krystalů.

Výtěžnost: 112 mg, 23 %.

Teplota tání: 253 až 255 °C.

Analýza: C - 42,90; H - 5,09; N - 17,41.

Teoretické složení. ^C23^H32^8°4^SHI: C - 42,86; H - 5,16;

N - 17,39 %.

-15CZ 279289 B6

Příklad 18

Amid kyseliny l-methyl-4-(2-n-propoxybenzamido)-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové

Tento amid byl připraven z 2-n-propoxybenzoylchloridu postupem, který byl popsán v příkladu 6 a byl získán ve formě růžové pevné látky.

Výtěžnost: 63 %.

Teplota tání:’ 148 až 149 °C.

Analýza: C - 62,97; H - 7,00; N - 16,29.

Teoretické složení ..pro ^ci8^H24^N4°3^: C - 62,77; H - 7,02;

N - 16,27 %.

Příklad 19 l-Methyl-5-(2-n-propoxyfenyl)-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo -/4,3-d/pyrimidin-7-on

Amid kyseliny l-methyl-4-(2-n-propoxybenzamido)-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové (0,34 g, 0,99 mmol) byl přidán do promíchávané směsi 30% roztoku peroxidu vodíku (1,0 ml), uhličitanu draselného (0,54 g, 3,92 mmol), vody (10 ml) a ethanolu (5 ml). Směs byla zahřívána pod refluxem po dobu 38 hodin a potom byla odpařena za vakua. Zbytek byl suspendován ve vodě (20 ml), směs byla potom okyselena ,..2N kyselinou chlorovodíkovou a extrahována dichlormethanem (3 x 20 ml). Extrakty byly spojeny, vysušeny (Na₂SO₄) a odpařeny ve vakuu.

Vzniklý zbytek byl separován chromatograficky na silikagelu (6 g) za použití methanolu v dichlormethanu jako elučního gradientu (0,0 až 1,0 %), čímž vznikl olej, který po následném rozetření s etherem poskytl produkt ve formě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 0,19 g, 59 %. Teplota tání: 111 až 114 ”C.

Analýza: C - 66,26; H - 6,92; N - 17,15. Teoretické složení pro ^ci8^H22^N4°2^: C - 66,23; H - 6,80;

N - 17,17 %.

Příklad 20

5-(5-Chlorsulfonyl-2-n-propoxyfenyl)-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

Tento sulfonylchlorid byl připraven z 5-(2-n-propoxyfenyl)-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/-pyrimidin-7-onu postupem popsaným v příkladu 8 a byl získán ve formě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 92 %. Analýza: C - 51,26; H - 5,02; N - 12,90. Teoretické složení pro ^ci8^H21^C-^LN4°4^{S :} C ,- 50,88; H - 4,98;

N - 13,19 %.

Příklad 21 l-Methyl-5-/5-(piperazinylsulfonyl)-2-n-propoxyfenyl/-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo/4, 3-d/pyrimidin-7-on

Tento sulfonamid byl připraven z piperazinu a 5-(5-chlorsulfonyl-2-n-propoxyfenyl)-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-onu podle postupu příkladu 9 a byl získán ve formě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 70 %.

Teplota tání: 185 až 186 °C. Analýza.: C - 56,17; H - 6,38; N - 17,65. Teoretické složení pro ^C22^H30^N6°4^S: C - 55,67; H - 6,37;

N - 17,71 %.

Příklad 22

5-{5-/4-(2-Hydroxyethyl)piperazinylsulfonyl/-2-n-propoxyfenyl}-1-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

Tento sulfonamid byl připraven z N-(2-hydroxyethyl)-piperazinu a 5-(5-chlorsulfonyl-2-n-propoxyfenyl)-l-methyl-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-onu postupem popsaným v příkladu 9 a byl získán ve formě bezbarvých jehliček.

Výtěžnost: 66 %. ,

Teplota tání: 158 až 159 °C.

Analýza: C - 55,83; H - 6,58; N - 16,13. Teoretické ..složení pro C₂₄H₃₄NgOgS: C - 55,58; H - 6,61;

N - 16,20 %.

Příklad 23

Amid kyseliny 4-(2-allyloxybenzamido)-l-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové

Roztok 2-allyloxybenzoylchloridu (3,93 g, 0,02 mol) v dichlormethanu (20 ml) byl po kapkách přidáván do promíchávaného částečného roztoku 4-amino-l-methyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxamidu (3,64 g, 0,02 mol) v pyridinu (50 ml) a výsledná směs byla promíchávána při teplotě místnosti přes noc v suché atmosféře. Rozpouštědlo bylo odpařeno za vakua a zbytek byl separován mezi dichlormethan (50 ml) a nasycený vodný roztok uhličitanu sodného (50 ml). Organická vrstva byla oddělena a vodná vrstva dokonale extrahována dalším dichlormethanem. Spojené organické roztoky byly promyty pomocí 2M HC1 (3 x 30 ml), potom solankou (1 x 30 ml) a vysušeny (Na₂SO₄). Po filtraci a odpaření pod vakuem se nechal surový produkt krystalizovat z etylacetátu, přičemž poskytl žádanou sloučeninu.

Výtěžnost: 4,525 g, 66 %. Teplota tání: 132 až 134 °C. Analýza: C - 63,49; H - 6,42; N - 16,33. Teoretické složení pro ^cigH22^N4°3^: C - 63,14; H - 6,48;

N - 16,36 %. .

-17CZ 279289 B6

Příklad 24

5- ( 2-Allyloxyfenyl) -l-methyl-3-n-propyl-l, 6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

Směs amidu kyseliny 4-(2-allyloxybenzamido)-l-methyl-3-npropylpyrazol-5-karboxylové (1,2 g, 0,0035 mol), hydroxidu sodného (0,70 g, 0,018 mol), vody (34 ml) a ethanolu (8 ml) byla refluxována po dobu 5 hodin. Po ochlazení byl roztok dokonale extrahován etylacetátem. Spojené extrakty byly promyty solankou (30 ml), vysušeny (Na₂SO₄), zfiltrovány a rozpouštědlo bylo odpařeno za vakua.

Surový produkt se nechal krystalizovat z roztoku ethylacetát/hexan, čímž se získala žádaná sloučenina.

Výtěžnost: 0,476 g, 37 % Teplota tání: 116 až 119 °C Analýza: C - 67,00; H - 6,21; N - 17,23. Teoretické složení pro ^ci8^H20^N4°2^{: c} “ ⁶⁶,65; ^H ” 6,21;

N - 17,27 %

Příklad 25

5-(2-Hydroxyfenyl)-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

Směs 5-(2-allyloxyfenyl)-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-onu (0,25 g, 0,0008 mol), fenolu (0,145 g, 0,0015 mol), piperidinu (0,131 g, 0,0015 mol) a tetrakis(trifenylfosfin)paladia (0) (0,046 g, 0,00004 mol) v absolutním ethanolu (5 ml) byla zahřívána pod refluxem přes noc v atmosféře dusíku. Potom se směs nechala zchladnout, rozpouštědlo se odpařilo ve vakuu a zbytek byl rozpuštěn v etylacetátu (40 ml). Tento roztok byl promyt vodou (3 x 10 ml),1M HC1 (3 x 10 ml) a solankou (lx 10 ml). Po vysušení (Na₂SO₄) a filtraci byl filtrát odpařen za vakua, čímž se získal surový produkt. Žádaný fenol byl získán po rozetření s dietyletherem a krystalizaci z roztoku etylacetát/pentan.

Výtěžnost: 0,021 g, 10 %

Teplota tání: 233 až 238 °C Analýza: C - 63,17; H - 5,65; N Teoretické složení pro ^C15^H16^N4°2^:

19,52.

C - 63,36; H

N - 19,71 %

5,67;

Příklad 26

5-(5-Chlorsulfonyl-2-hydroxyfenyl)-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

5-(2-Hydroxyfenyl)l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on (0,239 g, 0,00084 mol) byl přidáván po částech do promíchávané kyseliny chlorsulfonové (3 ml) ochlazené

18CZ 279289 B6 na O °C pod atmosférou dusíku a vzniklý temně rudý roztok byl promícháván při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Reakční směs byla potom po kapkách přidávána opatrně do promíchávané směsi ledu s vodou, čímž se získala hnědá pevná látka. Směs byla extrahována dichlormethaném (3 x 30 ml), spojené extrakty byly vysušeny (Na₂SO₄) a zfiltrovány a filtrát byl odpařen ve vakuu za·vzniku hnědé pevné látky (výtěžnost 0,24 g, 75 %), která byla v následujícím stupni použita bez čištění.

Rf(silikagel; dichlormetan, metanol; 95:5), 0,3

Příklad 27

5-/2-Hydroxy-5-(4-methylpiperazinylsulfonyl)fenyl/-l-methyl-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

Roztok 5-(5-chlorsulfonyl-2-hydroxyfenyl)-l-methyl-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-onu (0,235 g,

0,0006 mol) a N-methylpiperazinu (0,5 ml, 0,0045 mol) v etanolu (40 ml) byla promíchávána při teplotě místnosti po dobu 18 hodin. Roztok byl odpařen za vakua a zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát (40 ml) a vodu (40 ml). Jemná sraženina byla odfiltrována, promyta vodou a potom ethylacetátem a krystalizací z roztoku ethylacetát/DMF se získala žádaná sloučenina ve formě špinavě bílého prášku (0,260 g, 49 %).

Teplota tání: 283 až 284 °C.

Analýza: C - 53,43; H - 5,89; N - 18,40. Teoretické složení C₂₀H₂₆N₆O₄S: C - 53,80; H - 5,87; N - 18,82 %

Příklad 28

5-/2-Allyloxy-5-(4-methylpiperazinylsulfonyl)fenyl/-l-methyl-3-npropyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

Allylbromid (0,02 ml, 0,00023 mol) byl přidáván do míchané suspenze 5-/2-hydroxy-5-(4-methylpiperazinylsulfonyl)-fenyl/-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/-pyrimidin-7-onu (0,103 g, 0,00023 mol) a uhličitanu draselného (0,032 g, 0,00023 mol) v 2-butanonu (10 ml) a směs byla zahřívána pod refluxem po dobu 8 hodin. Po ochlazení byla reakční směs odpařena pod vakuem a zbytek byl suspendován ve vodě (20 ml). Vodná suspenze byla extrahována etylacetátem (3 x 20 ml), spojené extrakty byly vysušeny (Na₂SO₄) a po filtraci odpařeny ve vakuu za tvorby oleje.

Kolonovou chromatografií na silikagelu (2 g) za použití methanolu v dichlormetanu jako elučního gradientu (0 až 3 %), následovanou odpařením ve vakuu příslušných frakcí, se získala polotuhá látka, která byla rozpuštěna v acetonu. Odpařením roztoku za vakua se získala žádaná sloučenina.

Výtěžnost: 0,011 g, 10 %

Teplota tání: 151 až 153 C

R^: 0,5 (silikagel; dichlormetan, metanol; 95:5) m/e: 487 (M⁺+ 1).

-19CZ 279289 B6

Příklad 29

Amid kyseliny 4-(2-etoxybenzamido)-1,3-dimetylpyrazol-5-karboxylové

Tento amid byl připraven z amidu kyseliny 4-amino-l,3-dímethylpyrazol-5-karboxylové (připravené metodou podle J.Med. Chem 1987, 30, 91) postupem podle příkladu 6 a byl získán ve formě bílé pevné látky.

Teplota tání: 178 až 181 °C.

Výtěžnost: 81 % Analýza: C - 59,89; H - 6,05; N - 18,44.

Teoretické složení C₁₅H_lgN₄O₃: C - 59,59; H -6,00; N - 18,53 %

Příklad 30

5-(2-Ethoxyfenyl)-1,3-dimethyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/-pyrimidin-7-on

Amid kyseliny 4-(2-ethoxybenzamido)-1,3-dimethylpyrazol-5-karboxylové (1,6 g, 5,29 mmol) byl přidán do kyseliny polyfosforečné (50 g) a směs byla zahřáta na 140 C a při této teplotě udržována po dobu 6 hodin. Roztok byl ochlazen, nalit do směsi ledu a vody (100 ml) a potom byla směs alkalizována pomocí 10% vodného roztoku hydroxidu sodného a extrahována dichlormethanem (3 x 100 ml). Organické extrakty byly spojeny, vysušeny (MgSO₄) a odpařeny za vakua. Zbytek byl separován na silikagelu chromatograficky, za použití směsi dichlormethanu a methanolu 97:3 jako elučního činidla. Krystalizací surového produktu z vodného ethanolu se získala žádaná sloučenina jako bezbarvá pevná látka.

Teplota tání: 201 až 204 °C. Analýza: C - 63,43; H - 5,57; N - 19,35.

Teoretické složení pro ^ci5^Hi6^N ₄C>2^{: c} “ ⁶³,36; H -.5,67;

N - 19,71 %

Příklad 31

5- (5-Chlorsulfonyl-2-ethoxyfenyl)-1,3-dimethyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

Tento sulfonylchlorid byl připraven z 5-(2-ethoxyfenyl)-1,3-dimethyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-onu podle postupu uvedeného v příkladu 8 a byl získán v kvantitativním výtěžku ve formě bílé pevné látky. 0,3 (silikagel:ether). Byl použit bez dalšího čistění.

Příklad 32-34

Následující sloučeniny byly připraveny z 5-(5-chlorsulfonyl-2-ethoxyfenyl)-1, -3-dimethyl-l,6-díhýdro-7H-pyrazol/4,3-d/pyri-20CZ 279289 B6 midin-7-onu a příslušného aminu podle postupu uvedeného v příkla-

°C (teoretické složení v závorkách)

53,88 5,81 18,42 (53,79 5,87 18,82)

240-242

53,07 5,77 19,27 (52,76 5,59 19,43)

228-229

53,23 5,87 17,72 (52,93 5,92 17,63)

Příklad 35

Kyselina 4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxylová

Kyselina 3-n-propylpyrazol-5-karboxylová (připravená podle Chem. Pharm. Bull. 1984, 32, 1568) byla nitrována-postupem podle příkladu 3, čímž vznikla žádaná sloučenina ve formě bezbarvé pevné látky.

Výtěžnost: 75 %

Teplota tání: 169 až 173 °C

Analýza: C - 4.2,35; H - 4,56; N - 21,07 •Teoretické složení pro C₇H_gN₃O₄: C -^42,21; H - 4,55; N - 21,10 %

Příklad 36

Amid kyseliny 4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové

Směs kyseliny 4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové (7,8 g; .39,2 mmol) a thionylchloridu (35 ml) byla zahřívána pod refluxem po dobu 3 hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno odpařováním za vakua a pevný zbytek byl po částech přidán do vodného

-21CZ 279289 B6 roztoku hydroxidu amonného (40 ml) při teplotě 0 °C. Směs byla potom zředěna vodou (60 ml) a extrahována směsí dichlořmethanu a methanolu 9:1 (3 x 100 ml).

Organické frakce byly spojeny, vysušeny (MgSO₄) a odpařeny ve vakuu. Zbytek vykrystalizovaný z ethanolu byl žádaný amid ve formě bezbarvé pevné látky.

Výtěžek: 1,0 g, 13 %

Teplota tání: 202 až 206 °C

Analýza: C - 42,35; H - 5,01; N - 28,38

Teoretické složení pro C₇H₁₀N₄O₃:C - 42,42; H - 5,09; N - 28,27 %

Příklad 37

Amid kyseliny 4-amino-3-n-pyrazol-5-karboxylové

Roztok amidu kyseliny 4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové (198 mg, 1,0 mmol) v metanolu (5 ml) byl po kapkách přidáván do směsi borohydridu sodného (113 mg, 2,97 mmol), 10% paladia na uhlíku (5 mg) a vody (3 ml). Směs byla promíchávána při teplotě místnosti po dobu 3 hodin, zfiltrována a rozpouštědlo bylo odstraněno odpařováním za vakua.

Krystalizací zbytku z roztoku ethylacetát-methanol se získala žádaná sloučenina ve formě špinavě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 61 mg, 36 %

Teplota tání: 196 až 201 °C

Rf: 0,4 (silikagel; dichlormethan, methanol, hydroxid amonný;

90:10:1)

Analýza: C - 48,96; H - 6,98; N - 32,08

Teoretické složení pro C₇H₁₉N_A0: C - 49,98; H - 7,19;

N — 33 31 %

Příklad 38

Amid kyseliny 4-(2-ethoxybenzamido)-3-n-propylpyrazol-5-karbonylové ·

Tento amid byl připraven z amidu kyseliny 4-amino-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové postupem podle příkladu 6 a byl získán ve formě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 64 %

Teplota tání: 209 až 211 °C Analýza: C - 60,73; H - 6,41; N - 17,80 Teoretické složení pro ^ci6^H20^N4°3^{: c} “ ⁶⁰<⁷⁴; N - 17,71;

H - 6,37 %.

Příklad 39

5-(2-Ethoxyfenyl)-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazol/4,3-d/-pyrimidin-7-on

-22CZ 279289 B6

Žádaná sloučenina byla připravena z amidu kyseliny 4-(2-ethoxybenzamido)-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové podle postupu uvedeného v přikladu 30 a byla získána ve formě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 16 %

Teplota tání: 199 až 201 ’C Analýza: C -64,44; H - 6,19; N - 18,44 Teoretické složeni pro C₁₆H₁₈N₄O₂: C - 64,41; H - 6,08;

N - 18,78 %

Příklad 40

5- ( 5-Chlorsulfonyl-2-ethoxyfenyl)-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazol/4,3-d/pyrimidin-7-on

Žádaný sulfonylchlorid byl připraven z 5-(2-ethoxyfenyl)-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazol/4,3-d/pyrimidin-7-onu podle postupu uvedeného v příkladu 8 a byl získán ve formě bílé pevné látky.

Rf 0,25 (silikagel; ether).

Byl použit bez dalšího čistění.

Příklad 41

5-/2-Ethoxy-5-(4-methylpiperazinyl)sulfonylfenyl/-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

Žádaný sulfonamid byl připraven z 5-(5-chlorsulfonyl-2-ethoxyfenyl)-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-onu postupem uvedeným v příkladu 9 a byl získán ve formě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 70 % .Teplota tání:. 236 až 239 °C

Analýza: C - 54,84; H - 6,27; N - 18,10 Teoretické složeni pro C ₂₁H₂₈N₆O₄S: C - 54,76; H - 6,13;

N - 18,25 %

Příklad 42

3-Brommethyl-5-chlor-l-methyl-4-nitropyrazol

N-Bromsukcinimid (10,7 g, 60,0 mmol) byl přidán do roztoku 5-chlor-l, 3-dimethyl-4-nitropyrazolu (8,78 g, 50,0 mmol) v tetrachlormethanu (100 ml) a roztok byl zahříván pod refluxem, přičemž byl ozařován viditelným světlem (150W, žárovka s wolframovým vláknem) po dobu 3 dnů. V intervalech byly během reakce přidávány dávky benzoylperoxidu (6 x 50 mg) . Rozpouštědlo, bylo odstraněno odpařováním za vakua a zbytek byl separován chromatograficky na silikagelu, přičemž jako eluent byla použita směs dichlormethanu a hexanu v poměru 1:1. Žádaný bromid se získal jako špinavě bílá pevná látka.

-23CZ 279289 B6

Výtěžnost: 8,0 g, 63 %

Teplota tání: 80 až 82 °C

Analýza: C - 23,95; H - 2,05; N - 16,31

Teoretické složeni pro C₅H₅BrClN₃O₂: C - 23,60; H - 1,98; N - 16,51 % .

Příklad 43

5-Chlor-3-methoxymethyl-l-methyl-4-nitropyrazol

Roztok 3-bromomethyl-5-chlor-l-methyl-4-nitropyrazolu (5,0 g, 19,6 .mmol) v .mathanolu (50 ml) byl smísen s dusičnanem stříbrným (5,75 g, 33,8 mmol) a směs byla zahřívána pod refluxem po dobu 2 hodin. Ochlazená reakční směs byla odfiltrována a filtrát byl odpařen za vakua. Zbytek byl rozdělen mezí ethylacetát (100 ml) a vodu (50 ml) a vodná fáze byla extrahována dalším podílem ethylacetátu (50 ml). Organické extrakty byly spojeny, vysušeny (MgSO₄) a odpařeny ve vakuu.

Chromatografií na silikagelu, při eluci směsí dichlormethan/ methanol v poměru 97:3, se získal žádaný pyrazol ve formě bílé pevné látky.

Výtěžnost 1,6 g, 40 % Teplota-tání: 59 až 63 °C Analýza: C - 34,65; H - 3,83; N - 20,05 Teoretické složení pro C_gHgClN₃O₃: C - 35,05; H - 3,92;

N - 20,44 %

Příklad 44

5-Kyano-3-methoxymetyl-l-methyl-4-nitropyrazol

Roztok 5-chlor-3-methoxymethyl-l-methyl-4-nitropyrazolu (205 mg, 1,0 mmol), kyanidu draselného (130 mg, 2,0 mmol) a 18-crown-6 (10 mg) v acetonitrilu (2 ml) byla zahřívána pod refluxem přes noc. Rozpouštědlo bylo odpařeno za vakua a zbytek byl rozdělen mezi ethylacetát (20 ml) a vodu (20 ml). Organická fáze byla oddělena, vysušena (MgSO₄) a odpařena za vakua. Zbytek byl separován chromatografíčky na silikagelu za použití směsi ethylacetátu a pentanu v poměru 1:1, jako elučního činidla.

Rozetřením surového produktu s etherem se získala žlutá pevná látka.

Výtěžnost: 38 mg, 19 % Teplota tání: 48 až 50 °C Analýza: C - 42,89; H - 4,15; N - 28,78 Teoretické složení pro C₇HqN₄O₇: C - 42,86; H - 4,11;

N - 28,56 %

Příklad 4 5..

,4-Amino-5-kyano-3-methoxymethyl-l-methylpyrazol

-24CZ 279289 B6

Tato sloučenina byla připravena z 5-kyano-3-methoxymethyl-l-methyl-4-nitropyrazolu podle postupu příkladu 5 a byla získána ve formě špinavě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 68 %

Teplota tání: 82 až 84 °C

Analýza: C - 50,81; H - 6,13; N - 33,94

Teoretické složení pro C₇H_1QN₄0: C - 50,59; H - 6,07; N - 33,72 %

Příklad 46

5-Kyano-4-(2-ethoxybenzamido)-3-methoxymethyl-l-methylpyrazol

Žádaná sloučenina byla připravena z 4-amino-3-methoxymethyl-1-methylpyrazolu podle postupu uvedeného v příkladu 6 a byla získána v podobě špinavě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 61 %

Teplota tání: 103 až 105 °C

Analýza: C - 61,21; H - 5,98; N - 17,80

Teoretické složení pro ^ci6^Hi8^N4°3^: C - 61,13; H - 5,77;

N - 17,83 %

Příklad 47

5-(2-Ethoxyfenyl)-3-methoxymethyl-l-methyl-l,6-dihydro-7H-pyrazol/4,3-d/pyrimidin-7-on

Žádaná sloučenina byla připravena z 5-kyano-4-(2-ethoxybenzamido ) -3-methoxymethyl-l-methylpyrazolu podle postupu uvedeného v příkladu 7, při vytvoření 5-primárního amidového derivátu in šitu, a byla získána ve formě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 38 %

Teplota tání: 160 až 161 °C

Analýza: C - 61,35; H - 5,75; N - 17,98

Teoretické složení pro ^ci6^Hi8^N4°3^{: c} “ ⁶¹'^{14; H} “ ⁵>⁷⁷ '

N - 1.7,83 %.

Příklad 48

3-Methoxymethyl-l-methyl-5-/5- (4-methylpiperazinylsulf onyl) -2-ethoxyfenyl/-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

5-(2-Ethoxyfenyl)-3-methoxymethyl-l-methyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrímídin-7-on (470 mg, 1,50 mmol) byl rozpuštěn v kyselině chlorsulfonové (3 ml) při teplotě 0 °C. Roztok byl promícháván při teplotě místnosti 2 hodiny a potom byl opatrně přidán do směsi led-voda (50 ml). Výsledný roztok byl neutralizován nasyceným roztokem uhličitanu sodného, potom byl extrahován směsí dichlormetanu a methanolu 20:1 (2 x 50 ml). Spojené organické extrakty byly odpařeny za vakua a zbytek byl rozpuštěn v ethanolu (5 ml) a roztok byl. zpracován pomocí N-methylpiperazinu (450 mg, 4,5 mmol).

-25CZ 279289 B6

Po 1 hodině při teplotě místnosti bylo rozpouštědlo odpařeno za vakua a zbytek byl podroben chromatografické separaci na silikagelu, přičemž jako eluční činidlo byla použita směs dichlormethanu, methanolu a vodného roztoku hydroxidu amonného (90:10:1, objemové podíly). Rozetřením surového produktu s etylacetátem se získala žádaná sloučenina v podobě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 49 mg, 7 %

Teplota tání: 198 až 199 °C Analýza: C - 52,94; H - 6,04; N - 17,67 Teoretické složení pro ^C2i^H28^N6°5^S: C - 52,93; H - 5,92;

N - 17,64 %.

Po chromatografii a krystalizaci ze směsi etylacetátu a methanolu byl také získán 3-hydroxymethyl-l-methyl-5/5-(4-methylpiperazinylsulfpnyl)-2-ethoxyfenyl/-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on ve formě bílé pevné látky.

Výtěžnost: 51 mg, 7 % Teplota tání: 209 až 210 “C Analýza: C - 51,94; H - 5,77; N - 18,05 Teoretické složení pro C₂₀H₂₆NgO₅S: C - 51,94; H - 5,67;

N - 18,78 %

Příklad 49

Ethylester kyseliny l-ethyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové

Tento pyrazol byl připraven z ethylesteru kyseliny 3-n-propylpyrazol-5-karboxylové a diethylsulfátu podle postupu uvedeného v příkladu 1, a byl získán ve formě bezbarvého oleje.

Výtěžek: 72 %

Rf 0,5 (silikagel; ethylacetát, hexan; 1:1).

Příklad 50

Kyselina l-ethyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylová

Tato karboxylová kyselina byla připravena z ethylesteru kyseliny l-ethyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové podle postupu uvedeného v příkladu 2, a byla získána v podobě světle hnědé pevné látky.

Výtěžnost: 89 %

Teplota tání: 73 až 77 °C

Analýza: C - 58,62; H - 7,69; N - 15,23 Teoretické složení pro C_gH₁₄N₂O₂: C - 59,32; H - 7,74;

N - 15,37 %.

Příklad 51

Kyselina l-ethyl-4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxylová

-26CZ 279289 B6

Žádaná sloučenina byla připravena z kyseliny l-ethyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové podle postupu uvedeného v příkladu 3, a byla získána v podobě bezbarvé pevné látky.

Výtěžnost: 96 %

Teplota tání: 120 až 123 °C

Analýza: C - 47,61; H - 5,81; N - 18,54 Teoretické složeni pro C_gH₁₃N₃O₄: C - 47,57; H - 5,77;

N - 18,49 %

Příklad 52

Amid kyseliny l-ethyl-4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové

Žádaný amid byl připraven z kyseliny l-ethyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové postupem popsaným v přikladu 4, a byl získán jako špinavě bílá pevná látka.

Výtěžnost: 86 %

Teplota tání: 119 až 120 °C

Analýza: C - 47,38; H - 6,18; N - 24,34

Teoretické složení pro C_gH₁₄N₄O₃: C - 47,78; H - 6,24;

N - 24,77 %

Příklad 53

Amid kyseliny 4-amino-l^ethyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové

Žádaná sloučenina byla připravena z amidu kyseliny l-ethyl-4-nitro-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové postupem popsaným v příkladu 5, a byla získána ve formě špinavě bílé pevné látky.

Výtěžnost: .100 %

Teplota tání: 93 až 97 °C

Analýza: C - 55,17; H- 8,34; N - 28,93

Teoretické složení pro C_gH_lgN₄O: C - 55,08; H - 8,22; N - 28,55 %

Příklad 54

Amid kyseliny 4-(2-ethoxybenzamido)-l-ethyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové

Žádaný amid byl připraven z amidu kyseliny 4-amino-l-ethyl-3-n-propylpyrazol-5-karboxylové a 2-ethoxybenzoylchloridu podle postupu popsaného v příkladu 6. Produkt byl získán ve formě bezbarvé pevné látky.

Výtěžnost: 73 %

Teplota tání: 139 až 141 °C ' Analýza: C - 63,03; H - 7,15; N - 16,50 Teoretické složení pro ^C18^H24^N4°3' ^C 62,77; H 7,02;

N - 16,27 %

-27CZ 279289 B6

Příklad 55

5-(2-Ethoxyfenyl)-T-ethyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

Žádaná sloučenina byla připravena z amidu kyseliny 4-(2-ethoxybenzamido)-l-ethyl-3-n-propylpyrazolo-5-karboxylové postupem, který byl popsán v příkladu 7. Produkt byl získán ve formě bezbarvé pevné látky.

Výtěžnost: 46 %

Teplota tání: ' 11-2 až 114 °C

Analýza: C - 66,59; H - 6,85; N - 17,26 Teoretické složení pro ^cis^H22^N4°2^{: C} “ ⁶⁶r²³' ^H - 6,79;

N - 17,17 %

Příklad 56

5-(5-Chlorsulfonyl-2-ethoxyfenyl)-l-ethyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

Žádaná sloučenina byla připravena z 5-(2-ethoxyfenyl)-1-ethyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-onu podle postupu popsaného v příkladu 8. Produkt byl získán jako solvát v methylenchloridu.

Výtěžnost: 86 %

Teplota tání: 170 až 172 °C Analýza: C - 49,82; H - 4,84; N - 12,77 Teoretické složení pro ^ci8^H21^C1N4°4^S; 1/6 CH₂C1₂: C - 49,70;

H - 4,90; N - 12,77 %.

Příklad 57

5-/2-Ethoxy-5-(4-methylpiperazinylsulfonyl)fenyl/-l-ethyl-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

Žádaný sulfonamid byl připraven z 5-(5-chlorsulfonyl-2-ethoxyfenyl)-l-ethyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/ pyrimidin-7-onu a N-methylpiperazinu podle postupu, který byl uveden v přikladu 9.

Produkt byl získán ve formě bezbarvé pevné látky.

. Výtěžnost: 43 %

Teplota tání: 160 až 162 °C. .·

Analýza: C - 57,24; H - .6,17; N - 16,83

Teoretické složení pro ^C23^H32^N6°4^S: C - 56,54; H - 6,60; N - 17,20 %

Rf 0,35 (silikagel; dichlormetan, metanol; 9:1).

-28CZ 279289 B6

5-{2-Ethoxy-5-/4-(2-hýdroxýethyl)piperazinylsulfony1/fenyl)-l-ethyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/pyrimidin-7-on

Příklad 58

Žádaný sulfonamid byl připraven z 5-(5-chlorsulfonyl-2-ethoxyfenyl)-l-ethyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo/4,3-d/ pyrimidin-7-onu a N-(2-hydroxyethyl)piperazinu podle postupu uvedeného v příkladu 9.

Produkt byl získán jako bezbarvá pevná látka.

Výtěžnost: 88 %

Teplota tání: 191 až .193 °C

Analýza: C - 55,74; H - 6,55; N - 15,78

Teoretické složení pro ^C24^H34^N6°5^{S: c _ 55}'^{58; H} ~ 6,61;

N - 16,20 %.

Testy farmakologické účinnosti

Afinita sloučenin podle vynálezu k fosfodiesterázám cGMP PDE a cAMP PDE (cyklická guanosin-3',5'-monofosfát-fosfodiesteráza a cyklická ádenosin-3', 5'-monotrifosfát-fosfodiesteráza) byla stanovena testem, který je podrobně popsán v popisné části. Získané výsledky, tzn. hodnoty IC_5Q (koncentrace inhibitoru potřebná k 50% inhibici aktivity enzymu) a poměr selektivity jsou uvedeny v následující tabulce.

Tabulka

Hodnoty inhibice PDE in vitro:

Selektivita mezi vápník/calmodulin (Ca/CAM) independentní cGMP PDE a cGMP-inhibovanou cAMP PDE.

Příklad ^IC50 nebo % aktivita Poměr při 10 ⁴ M selektivit cGMP ' cAMP

9	2,1	34	000	16	190
10	5,7	46	%; 10-4	M	>	17	544
11	1,9	62	000			32	632
12	3,6	65	000			18	056
13	11	37	%; 10~4	M	>	9	091
14	1,9 .	41	%; 10~4	M	>	52	632
15	1,1	19	000			17	273
16	11	49	000			4'	455
17	92	43	%; 10~4	M	>	1	087

-29CZ 279289 B6

Tabulka - pokračování

Příklad ^IC50 (^nM) nebo % aktivita Poměr při 10^-4 M selektivit cGMP cAMP

21	2,5	32	%; 10 *	M	>	40	000
22	0,51	41	000			80	392
28	1,0	NT					—
32	62	44	%; 10-4	M	>	1	613
33	130	41	%; 104	M	>		769
34	17	46	%; 10~4	M	>	13	333
41	7,5	100	000			13	333
48	55	16	%; 10~4	M	>	1	818
48a*	300	14	%; 10-4	M	>		333
57	4	23	000			5	750
58	2,2	25	000			11	364

NT = nestanoveno * produkt podle příkladu 48a je minoritním produktem podle příkladu 48.

PATE NT O V É NÁROKY

Claims (3)

Ί R atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 az 3 atomy uhlíku, cykloalkylovou skupinu obsahující 3 až 5 atomů uhlíku nebo perfluoralkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, -30CZ 279289 B6 R znamena atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 az 6 atomů uhlíku, popřípadě substituovanou skupinu OH, alkoxylovou skupinou obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo cykloalkylovou skupinou obsahující 3 až 6 atomů uhlíku nebo perfluoralkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, Q z z o R znamena alkylovou skupinu obsahující 1 az 6 atomu uhlíku, alkenylovou skupinu obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, alkinylovou skupinu obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, cykloalkyvou skupinu obsahující 3 až 7 atomů uhlíku, perfluoralkylovou skupinu obsahující 1 až 6 atomů uhlíku a cykloalkylalkylovou skupinu obsahující v cykloalkylové části 3 až 6 atomů uhlíku a v alkylové části 1 až 6 atomů uhlíku, R2 * 4 tvoří společně s atomem dusíku, ke kterému je připojen pyrrolidinylovou skupinu, piperidinovou skupinu, morfolinovou skupinu nebo 4-N-(R6)-piperažinylovou skupinu, R5 znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyskupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupinu NR7R8 nebo CONR7R8, R6 představuje atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující

1 a í c í vzorce jejich farmaceuticky přijatelných solí, s e tím, že zahrnuje reakci slouve (II) se kterém:

R^T,R² a R³

Y znamená atom chloru, bromu sloučeninou obecného vzorce III:

mají stejný význam jako v nároku 1, nebo fluoru, (!!!) ve kterem R a R mají stejný význam jako v nároku 1, a potom popřípadě následuje převedeni vzniklého produktu na farmaceuticky, přijatelnou sůl.

-33CZ 279289 B6

10. Způsob podle nároku 9, vyznačující se tím, že se jako výchozích látek použije sloučenin obecného vzorce II a III, ve kterých mají R⁴, R², R⁴ a R⁵ stejné substituenty

O jako v nároku 9, a R představuje atom vodíku, přičemž potom následuje O-alkylace fenolu a popřípadě konverze takto získaného produktu na farmaceuticky přijatelnou sůl.

11. Způsob podle nároků 9 nebo 10, vyznačující se tím, že se jako výchozích látek použije sloučenin obecného vzorce II a III, ve kterých mají R¹, R⁴ a R⁵ stejný význam jako v nároku 1, R ma stejný význam jako v nároku 1 nebo 2, o

pricemz R⁶ obsahuje hydroxyskupinu chráněnou acetylovou nebo benzoylovou skupinou a uvedená chránící skupina se v následné fázi odstraní hydrolýzou v zásaditém prostředí před případnou konverzí produktu na farmaceuticky přijatelnou sůl.

12. Způsob podle některého z nároků 9až 11, vyznačuj ící se tím, že se použije jako výchozích látek sloučenin obecného vzorce II a III, ve kterých znamená:

Ί _z

R atom vodíku, methylovou skupinu nebo ethylovou skupinu,

R znamena alkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinou OH nebo methoxyskupinou,

R znamena alkylovou skupinu obsahující 2 až 3 atomy uhlíku nebo allylovou skupinu,

R⁴ tvoří společně s atomem dusíku, ke kterému je připojen, piperidinovou nebo 4-N-(R⁶)-piperazinylovou skupinu,

R⁵ znamená atom vodíku, skupinu NR⁷R⁸ nebó CONR⁷R⁸,

R⁶ znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až

1 až 6 atomů uhlíku, alkoxyalkylovou skupinu obsahující v alkoxy části 1 až 3 atomy uhlíku a v alkylové části 2 až 6 atomů uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu obsahující 2 až 6 atomů uhlíku, (R^/R°N)-alkylovou skupinu obsahující v alkylové části

2 _z z z

R⁶ znamena alkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, popřípadě substituovanou skupinou OH nebo methoxyskupinou,

O _x

R znamena alkylovou skupinu obsahující 2 až 3 atomy uhlíku nebo allylovou skupinu,

R⁴ tvoří společně s atomem dusíku, ke kterému je připojen, piperidinovou nebo 4-N-(R)-piperažinylovou skupinu,

R⁵ znamená atom vodíku, skupinu NR⁷R⁸ nebo CONR⁷R⁸,

R⁶ znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až

3 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu obsahující 2 až 3 atomy uhlíku, skupinu CONR⁷R⁸, CSNR⁷R⁸ nebo C(NH)NR⁷R⁸, a

-31CZ 279289 B6

7 o

R a R znamenají nezávisle atom vodíku nebo methylovou skupinu.

3. Pyrazolopyrimidinonové sloučeniny podle nároku 2, ve kterých znamená:

R¹ methylovou skupinu,

R² znamená n-propylovou skupinu,

R³ znamená ethylovou skupinu, n-propylovou skupinu nebo allylovou skupinu,

R⁴ tvoří společně s atomem dusíku, ke kterému je připojen, 4-N-(R⁶)-piperázinylovou skupinu,

R⁵ znamená atom vodíku, a

R⁶ znamená atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo 2-hydroxyethylovou skupinu.

4. Pyrazolopyrimidinonové sloučeniny podle nároku 3, které jsou vybrány ze souboru zahrnujícího:

5-[2-allyloxy-5-(4-methylpiperazinylsulfonyl)fenyl]-1-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]-pyrimidin-7-on,

5-[2-ethoxy-5-(piperazinylsulfonyl)fenyl]-l-methyl-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidín-7-on,.

5-[2-ethoxy-5-(4-methylpiperazinylsulfonyl)fenyl]-1-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]-pyrimidin-7-on,

5-{2-ethoxy-5-[4-(2-propyl)piperazinylsulfonyl]-fenyl}-1-methyl-3-n-propy1-1,6-dihydro-7H-pyrazolo-[4,3-d]pyrimidin-7-on,

5-{2-ethoxy-5-[4 —(2-hydroxyethyl)piperazinylsulfonyl] fenyl}-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d] pyrimidin-7-on, l-methyl-5-[5-(piperazinylsulfonyl)-2-n-propoxyfenyl]-3-n-propyl-1,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on,

5-{5-[4-)2-hydroxyethyl)piperazinylsulfonyl]-2-n-propoxyfenyl}-l-methyl-3-n-propyl-l,6-dihydro-7H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-7-on, a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

5. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl podle nároků 1 až 4 společně s farmaceuticky přijatelným ředidlem nebo nosičovou látkou.

6. Pyrazolopyrimidinonová sloučenina obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelná sůl podle některého z nároků 1 až 4 pro použití v lékařství, zejména pro léčení angíny, vysokého krevního tlaku, srdečního selhání nebo aterosklerózy.

7. Použití sloučeniny obecného vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelné soli podle některého z nároků 1 až 4 pro přípravu

-32CZ 279289 B6 léčiva, zejména léčiva pro léčení angíny, vysokého krevního tlaku, srdečního selhání, aterosklerózy, mozkové cévní příhody, periferní cévní choroby, stavů snížené průchodnosti cév, chronického astma, bronchitidy, alergického astma, alergické rhinitidy, glaukomu nebo chorob charakterizovaných poruchami střevní motility.

O

R představuje stejne substituenty jako v nároku 1 a kromě toho navíc atom vodíku, a

Y znamená atom chloru, bromu nebo fluoru, jako meziprodukt pro přípravu sloučeniny obecného vzorce I.

9.

Způsob výroby pyrazolopyrimidinových sloučenin obecného vzorce I podle nároku vyznačuj čeniny obecného

2. Pyrazolopyrimidinové sloučeniny podle nároku 1, ve kterých znamená:

Ί ,

R atom vodíku, methylovou skupinu nebo ethylovou skupinu,

2 až 6 atomů uhlíku, (R⁷R⁸NCO)-alkylovou skupinu obsahující

7 fí v alkylové časti 1 až 6 atomu uhlíku, skupinu CONR R , CSNR⁷R⁸ nebo C(NH)NR⁷R⁸,

7 Q z z

R a R znamenají každý nezávisle atom vodíku, alkylovou skupinu obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkoxyalkylovou skupinu obsahující v alkoxy části 1 až 3 atomy uhlíku a v alkylové části 2 až 4 atomy uhlíku nebo hydroxyalkylovou skupinu obsahující 2 až 4 atomy uhlíku, a farmaceuticky přijatelné soli odvozené od těchto sloučenin.

3 atomy uhlíku, hydroxyalkylovou skupinu obsahující 2 až 3 atomy uhlíku, skupinu CONR⁷R⁸, CSNR⁷R⁸ nebo C(NH)NR⁷R⁸, a

R a R znamenají nezávisle atom vodíku nebo methylovou skupinu.