CZ20021431A3 - Způsob výroby produktu obsahujícího antihypertenzivní tripeptidy - Google Patents

Způsob výroby produktu obsahujícího antihypertenzivní tripeptidy Download PDF

Info

Publication number
CZ20021431A3
CZ20021431A3 CZ20021431A CZ20021431A CZ20021431A3 CZ 20021431 A3 CZ20021431 A3 CZ 20021431A3 CZ 20021431 A CZ20021431 A CZ 20021431A CZ 20021431 A CZ20021431 A CZ 20021431A CZ 20021431 A3 CZ20021431 A3 CZ 20021431A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
product
peptides
fermentation
nanofiltration
antihypertensive
Prior art date
Application number
CZ20021431A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ302271B6 (cs
Inventor
Olli Tossavainen
Tarja Suomalainen
Janne Sahlstein
Annika Mäyrä-Mäkinen
Original Assignee
Valio Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Valio Ltd filed Critical Valio Ltd
Publication of CZ20021431A3 publication Critical patent/CZ20021431A3/cs
Publication of CZ302271B6 publication Critical patent/CZ302271B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/14—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment
    • A23C9/142—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by dialysis, reverse osmosis or ultrafiltration
    • A23C9/1427—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by dialysis, reverse osmosis or ultrafiltration by dialysis, reverse osmosis or hyperfiltration, e.g. for concentrating or desalting
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
    • A23J3/30—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis
    • A23J3/32—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents
    • A23J3/34—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes
    • A23J3/341—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins
    • A23J3/343—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins of dairy proteins
    • A23J3/344—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins of dairy proteins of casein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Preparation or treatment thereof
    • A23L2/52—Adding ingredients
    • A23L2/66—Proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/147—Helveticus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Description

Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká způsobu přípravy produktu obsahujícího antihypertenzivní tripeptidy. Vynález se týká získaného produktu, jeho použití jako takového nebo jako složky či doplňku poživatelných látek.
Dosavadní stav techniky
V současnosti jsou kardiovaskulární onemocnění zahrnuty mezi nejběžnější onemocnění ve vyvinutých zemích a jejich výskyt bude stárnutím populace dále stoupat. Vysoký krevní tlak značně přispívá k vývoji těchto onemocnění. Léčba hypertenze je jedním z nejdůležitějších zaměření s ohledem jak na prevenci tak na efektivní léčbu.
Při sledování krevního tlaku na úrovni buněk má hlavní funkci konvertující enzym angiotensin I, ACE. Enzym ACE způsobuje jednak přeměnu angiotensinu I na angiotensin II, který je látkou silně zvyšující krevní tlak zúžením cév a také inaktivuje bradykinin, který má naopak vasodilatační efekt. Obě funkce enzymu vedou ke zvyšování krevního tlaku. Inhibitory ACE zabraňují tomuto efektu a následkem toho fungují jako antihypertenzivní činidla. Mnoho farmaceutických činidel používaných v léčbě hypertenze jsou ACE inhibitory. Jeden z nich je captoril (D-2-methyl-3-merkaptopropanoyl-Lprolin), který je komerčně dostupný ve Finsku pod názvy Capoten (produkt Bristol-Myers Squibb) a Captopril (produkt Merc Generics).
Ostatní způsoby snižování krevního tlaku jsou také žádoucí, jako alternativa k lékům nebo i jako samostatně působící. Zahrnují například redukci obezity, zvýšení cvičební ·· ·· • · ··· · aktivity a konzumaci diet s nízkým obsahem sodíku. Jedna z nejnovějších cest je použití funkčních potravin jako podílu normální diety, která je konzumenty označena jako přijatelná alternativa.
Bylo uvedeno, že kvašené mléčné výrobky obsahují peptidy vykazující antihypertenzivní efekt. Předpokládá se, že peptidy jsou produkovány mléčnými výrobky jako výsledek hydrolýzy mléčné bílkoviny způsobené bakteriemi mléčného kvašení a částečně její extracelulární proteinázou. Čištění a charakterizace proteinázy odvozené od mikroorganismu Lactobacillus helveticus CP790 je popsáno v ď. Biochem. 114 (1993) 740, Yamamoto a kol. V této publikaci je podána zpráva o studii, kde byl aSi- a /3-kasein hydrolyzován touto proteinázou a získané peptidy byly studovány pro jejich ACEinhibiční efekt ( J Dairy Sci 77 (1994) 917) . Celkem bylo studováno 25 peptidů, jejich molekulové rozměry a efekty byly značně rozdílné. Největší aktivitu vykazovaly tři peptidy získané z /3-kaseinu, obsahující 8, 18 a 27 aminokyselin. Studie obsahuje porovnání ACE-aktivity mléka fermentováného kmenem Lactobacillus helveticus CP790 a jeho varianty CP791 s narušenou proteinázovou aktivitou, kde první byl nalezen účinným u spontánně hypertenzních krys SHR, ne u běžných krys a druhý nevykazoval žádnou aktivitu.
Použití zákvasu obsahujícího Lactobacillus helveticus a Saccharomyces cerevisiae pro přípravu dvou ACE inhibitorů je popsáno v J Diary Sci 78 (1995) 777-783, Nakamura a kol. Netučné mléko bylo fermentováno těmito zákvasy, poté byly inhibitiry ACE chromatograficky čištěny a analyzovány. Aktivními složkami byly oba tripeptidy, Val-Pro-Pro a Ile-ProPro. V publikaci není popsán jejich antihypertenzivní efekt in vivo ani příprava kvašeného mléka ze zákvasu, ale jak je v této publikaci uvedeno, bude to předmětem dalšího výzkumu.
US Patent 5 449 661 (Nakumura a kol.) uvedl ve známost přípravu peptidů obsahujícího tripeptidovou sekvenci Val-ProPro a jeho použití pro snižování krevního tlaku. Peptid byl připraven fermentací odtučněného mléka poháněnou kmenem Lactobacillus helveticus JCM-1004, poté byl peptid chromatograficky čištěn a lyofilizován.
V mezinárodní žádosti o udělení patentu WO99/16862 (Yamamoto a kol.) je popsán kmen Lactobacillus helveticus CM4, FERM BP-6060, který je schopen produkovat velké množství tripeptidu Val-Pro-Pro a/nebo Ile-Pro-Pro a vykazuje extracelulární proteinázovou aktivitu. V této publikaci je také popsána fermentace mléčných produktů obsahující tyto tripeptidy a baktérie a způsob jejich přípravy fermentací produktů obsahujících tripeptidové sekvence těmito bakteriemi.
K produktům připravených fermentací bakteriemi mléčného kvašení, obsahujících antihypertenzivní tripeptidy jsou vztaženy dvě nevýhody. Hlavním produktem kvašení je kyselina mléčná, která je produkována účinnými fermentačními reakcemi. Jak je zřejmé z názvu samotného, kyselina mléčná je kyselá a dává hořkou příchuč produktům obsahujícím antihypertenzivní tripeptidy, kromě toho mnoho konzumentů nachází vysokou kyselost a nízké pH nepříjemným. Velké množství jednomocných kovů, obzvláště sodných iontů je přítomno v produktech obsahujících antihypertenzivní peptidy připravených fermentací. U těchto iontů je známo, že zvyšují krevní tlak a z čehož vyplývá, že působí proti požadovaným antihypertenzivním peptidům.
V předešlých publikacích byly zveřejněny způsoby čištění peptidů, produkovaných fermentací. Tyto způsoby částečně dovoluj i vyvarovat se získán koncentrovaný výše zmíněným nevýhodám, produkt. Tyto způsoby předešlých publikacích poskytují čisté produkty, zatímco je čištění v které jsou • to • to ···· ·· ·* to to · · · · ♦ • · ··· · · · ·· · ··· · · • · · · · · • · ··· ·· ···· vhodné pro analýzy a zkoušky aktivity. Tyto způsoby jsou několika krokové a obsahují různé chromatografické čistící metody a nejsou vhodné pro výrobu ve velkém objemu.
Proto je nutné vytvářet funkční produkty, které mají antihypertenzivní efekt a které budou konzumenti shledávat příjemným a dobře známým a které mohou být snadno použity jako součást normální diety. Je důležité, aby tyto produkty neobsahovaly nepříjemné nebo škodlivé složky a aby byly snadno produkovatelné v průmyslovém měřítku.
Podstata vynálezu
Předkládaný vynález zahrnuje produkty o vysokém obsahu antihypertenzivních peptidů, které vykazují antihypertenzivní efekt.
Produkty předkládaného vynálezu, jednak obsahující vysoký obsah antihypertenzivních peptidů mají také výhodný obsah solí, neboř obsah škodlivých jednomocných kationtů je nízký a obsah prospěšných dvojmocných kationtů je vysoký ve srovnání se známými produkty tohoto typu.
Předkládaný vynález zahrnuje způsob pro přípravu těchto produktů. Tento způsob je jednoduchý a snadný pro provedení a vhodný pro výrobu v průmyslovém měřítku.
Předkládaný vynález zahrnuje produkt pro použití jako antihypertenzivní činidlo nebo pro výrobu poživatelných funkčních pokrmů nebo farmaceutik.
Předkládaný vynález zahrnuje použití perorálně přijímaných produktů, jako jsou funkční pokrmy nebo farmaceutika, které obsahují výše popsané produkty jako jednu z aktivních složek.
Detailní popis vynálezu
Předkládaný vynález zahrnuje nové způsoby pro přípravu těchto produktů založených na nových vynálezeckých kombinacích: preparát obsahující antihypertenzivní peptidy je produkován fermentací, poté je koncentrován a složení je výsledně upraveno nanofiltrací. Kombinace podle předkládaného vynálezu zahrnuje znamenité možnosti v použití výchozích látek různých typů a modifikaci složení konečného produktu na požadovaný typ, který bude popsán podrobněji dále.
Předkládaný vynález se týká způsobu přípravy produktu obsahujícího antihypertenzivní peptidy. Tento způsob je charakterizován složením fermentačního kroku výchozí sloučeniny, obsahující kasein, bakteriemi mléčného kvašení a filtrací získaného peptidy obsahujícího fermentačního produktu.
Předkládaný vynález se také týká produktů obsahujících antihypertenzivní peptidy, které jsou charakterizovány vysokým obsahem antihypertenzivních peptidů a jsou připraveny způsobem, kde je kasein obsahující výchozí látka fermentována bakteriemi mléčného kvašení a získaný peptid obsahující fermentační produkt je filtrován.
Předkládaný vynález se také týká použití výše popsaného produktu jako antihypertenzivního činidla.
Předkládaný vynález se dále týká použití výše popsaného produktu ve výrobě poživatelných látek.
Předkládaný vynález se dále týká poživatelných produktů obsahujících výše popsané koncentrované produkty s vysokým obsahem peptidů a obvyklých složek těchto produktů.
• · · · · ·
V prvním kroku způsobu výroby podle předkládaného vynálezu je fermentací produkován preparát obsahující antihypertenzivní peptidy. Pro fermentací je jako použitelná výchozí látka jakákoliv látka, obsahující požadované antihypertenzivní peptidy jako část jejich vlastní peptidové nebo proteinové sekvence. Mléčný protein, zejména kasein, je výhodně použit jako takový nebo ve formě různých úprav. Vhodný výchozí materiál také zahrnuje různé kasein obsahující mléčné produkty, jako jsou netučné mléko, nebo mléko s různým obsahem tuku, nebo ve formě odpovídajícího mléčného prášku a fermentovaných mléčných produktů, jako jsou kyselé mléko, podmáslí, jogurt, sražené mléko a nedozrálý sýr atd.
Fermentace nemůže být provedena bez bakterií mléčného kvašení, které jsou schopné produkovat antihypertenzivní tripeptidy z výchozího materiálu. Vhodné bakterie mléčného kvašení byly nalezeny mezi odrůdou druhu např. Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc, Streptococcus a Bifidobacterium. Laktobacillus helveticus je nejvíce proteolytická z bakterií mléčného kvašení a je proto považována za obzvláště vhodnou pro tento účel. Výhodný kmen Laktobacillus helveticus je L. helveticus LBK-16H. Bakterie mléčného kvašení byly použity jako čisté kultury nebo jako smíšené kultury, použité samostatně nebo s obvyklými a komerčně dostupnými zákvasy. Bakterie mléčného kvašení může být také použita s dalšími mikroorganismy. Pokud jde o kombinaci mokrobů, vhodnou kombinací jsou vybrané podle efektu, jako je nej lepší možná příchuť, dosažená v konečném produktu a zamezení nebezpečí kontaminace.
Podmínky fermentace byly zvoleny podle požadavků použitého kmene při fermentací jako je dostačující množství antihypertenzivních peptidů vzniklých k poskytnutí požadovaného efektu. Výběr vhodných podmínek, jako je teplota,
Ί
4··· • · pH a provzdušňováni je součástí znalostí odborníků. Teplota může být například 30 až 45 °C.
Fermentace pokračuje tak dlouho, dokud nevznikne požadované množství antihypertenzivních peptidů. Délka fermentace je 20 až 30 hodin, výhodně 22 až 24 hodin.
Při fermentaci vzniká směs různých peptidů. Pokud trvá fermentace dostatečně dlouho, pak jsou získány hlavně relativně malé di- a tripeptidy jako jsou Val-Pro-Pro (VPP) a Ile-Pro-Pro (IPP).
Po fermentaci je buněčná suspenze regenerována. Regenerace může být použita také v dalším kroku, například pro separaci nebo koncentraci peptidů. Buněčná suspenze může být také koncentrována, například odpařením za sníženého tlaku, nebo sušením, aú již částečně nebo kompletně, jako je roztírání po desce, sušení a konečné rozmělnění na suchý prášek.
V některých případech, může být vhodné fermentovaný produkt předčistit, například odstranit kasein nebo všechny mléčné proteiny nanofiltrací. Způsob vhodný pro přečištění je známý a zahrnuje například různé srážecí a fitrační metody. Jedna použitelná metoda zahrnuje úpravu pH fermentačního produktu na oblast, ve které se kasein vysráží, například při pH 4,6 a teplotě kolem 37 °C. Poté je kasein oddělen separátorem tvarohu, separačními síty, dekantaci nebo použitím jiné metody. Druhá metoda zahrnuje ultrafiltrací fermentačního produktu při pH 3 až 3,5, při kterém jsou všechny proteiny uchovány v membráně a získaný parmeát je blízký bezbílkovinné syrovátce. Srážení, které produkuje blízkou bezbílkovinnou nebo peptidy obsahující syrovátku je dosaženo například přídavkem CaCl2, zahřátím nebo přidáním kyseliny. Pokud je nezbytné, je kaseinový prášek odstraněn centrifugací. Ostatní • · · ftft ftft · · ft · • · · • · ·
substance jako je laktóza, může být také odstraněna nanofiltrací, například enzymatickou hydrolýzou nebo fermentací.
Fermentační produkt, který může být předběžně zpracován vhodným způsobem, jako je syrovátka získána výše, je poté filtrován. Konvenční NF membrána, jako je Nanomax-50 (Millipore) nebo Desal 5 (Desal lne., USA) může být použita jako nanofiltrační membrána. Podmínky byly vybrány k uspokojení požadavků a instrukcí výrobců membrán. Výběr nanofiltrační membrány a podmínek přispívá značně ke složení výsledné peptidové frakce, především ke složení solí a cukrů.
Podle předkládaného vynálezu je nanofiltrace prováděna pro požadovaný obsah sušiny nebo na poměr objemových koncentrací, který je obvykle nejvýše možný. Obsah sušiny je řádově mezi 20 až 40 % (objemově) a poměr objemových koncentrací je mezi 5 až 20. Koncentrát syrovátky může být zředěn vodou, kde je mnoho solí a mléčná kyselina odstraněna z koncentrátu nanofiltrací. Toto je jednoduchá a efektivní cesta úpravy množství solí v koncentrátu na požadovanou úroveň.
Malé peptidy, jako jsou tripeptidy IPP a VPP s okolo 350 D (molekulární váha), vzniklé fermentací a vykazující efekt na krevní tlak, jsou kompletně zachyceny nanofiltrační membránou.
Způsob podle předkládaného vynálezu také umožňuje kompletní odstranění laktozy: předchází nanofiltračnímu kroku, laktóza může být enzymaticky degradována, přičemž je hlavní část monosacharidů odstraněna. Při nanofiltrací, zahrnuté do předkládaného vynálezu, prostoupí kyselina mléčná, malé molekuly obsahující dusík (močovina) a jednovazné kovy membránou. Obsah peptidů v produktu vzrůstá ve smyslu nanofiltrace. Následkem koncentrace vzrůstá obsah dvojvazných iontů, zvláště požadovaných vápennatých a horečných iontů, ·«· · zatímco relativní poměr jednovazných iontů, jako jsou sodné, draselné a chloridové ionty klesají. Zvláště sodné ionty vykazují významný efekt na rovnováhu tekutin a na krevní tlak v lidském těle, a tím snížení množství těchto škodlivých iontů může být považováno za značnou výhodu. Vápennaté a horečnaté ionty, jak je známo, přispívají ke snižování krevního tlaku a vysoký obsah těchto iontů je značně žádoucí.
Tabulka 1 ukazuje složky preparátu jak vznikají ve fermentačním kroku procesu podle předkládaného vynálezu a jak jsou zachovány v nanofiltračním kroku. Složení je reprezentováno prostřednictvím příkladů k ilustraci vynálezu a je produkováno fermentací odtučněného mléka kmenem Lactobacillus helveticus. Jak je ukázáno výše, také ostatní produkty mohou být použity jako výchozí materiály. Kromě toho, fermentační podmínky, nanofiltrace, ostatní přečištění a další úprava, pokud je požadována, přispívá k výslednému složení. Složení a výsledky nanofiltrace konečného produktu mohou být odlišné od zde prezentovaných.
Tabulka 1: Průběh nanofiltrace složek syrovátky obsahující antihypertenzivní peptidy
Membrána: Nanomax 50; podmínky: 40 °C, 3 0xl05Pa, poměr objemových koncentrací C = 9, pH = 4,6
9
9 •
0999
9
Molekulová váha D Retence (%)
IPP 361,4 100
VPP 347,4 100
mléčná kyselina 90,1 24
Ca 40,1 68
Mg 24,3 72
K 39,1 11
Na 23,0 10
Cl 35,5 9
PO4 95,0 47
močovina 60,1 10
laktóza 342,3 63
Produkt koncentrovaný na antihypertenzivní peptidy a získaný způsobem podle předkládaného vynálezu může být použit sám o sobě jako antihypertenzivní činidlo. Produkt může být sušen a použit ve formě prášku nebo lyofilizovaného přípravku. Podle předkládaného vynálezu může být produkt výhodně použit při výrobě funkčních potravin nebo dalších produktů.
V předkládaném dokumentu, je termín potrava používán v širokém významu, zahrnující poživatelné produkty, které mohou být v pevné, v gelovité nebo kapalné formě a zahrnuje jak je předmět vynálezu jako aditivní nebo potraviny mohou být hotové potraviny tak i produkty, kde přidán v souvislosti se spotřebou, podstatná složka produktu. Například, produktem mléčného průmyslu, masného průmyslu, potravinářského průmyslu, průmyslu vyrábějícího nápoje a cukrovarnického průmyslu. Typické produkty zahrnují mléčné produkty, jako jsou • fr frfrfrfr frfr frfr fr frfr fr • · » • frfrfr • * • frfrfr frfr ► frfrfrfr • fr • frfrfr jogurty, sražené mléko, měkký tvaroh, kvašené mléko, podmáslí a další fermentované mléčné nápoje, nezralý sýr, zralý sýr, lehká plniva atd. Nápoje, jako jsou syrovátkové nápoje, ovocné nápoje a piva, tvoří další významnou skupinu.
Produkt získaný podle předkládaného vynálezu je použit v množství postačujícím k poskytnutí požadovaného, antihypertenzivnímu efektu. Použité množství podstatně závisí na koncentračním stupni syrovátky, který je například 0,1 až 30 % (hmotnostně), výhodněji 5 až 15 % (hmotnostně), počítaný z váhy konečného produktu.
Způsob výroby podle předkládaného vynálezu, obzvláště pak nanofiltrační krok poskytuje základ pro přípravu produktu požadovaného typu a je možné redukovat obsah složek, které mají nepříznivý efekt na chuú nebo odstranit tyto složky úplně a následkem toho uchovat nebo vylepšit chuč produktu.
Produkt obsahující antihypertenzivní peptidy může být přidán do potravin během výrobního procesu nebo do již hotových potravin. Tyto produkty obsahují výše popsané koncentrované produkty obsahující antihypertenzivní peptidy spolu s ostatními složkami které jsou obvyklé v potravinách a jejich chué a použití úplně odpovídá konvenčním produktům.
Tento dvojstupňový proces podle předkládaného vynálezu poskytuje produkty, obsahující značně vysoký obsah antihypertenzivních peptidů, pouze pokud jsou produkty připravovány fermentací. Nezávisle na obsahu peptidů, dovoluje tento proces snadno upravovat obsah solí a jejich vzájemné poměry na požadovanou úroveň. Především je možné zvýšit obsah požadovaných dvojmocných iontů a redukovat obsah škodlivých jednomocných iontů. Proces je jednoduchý a laciný, což je vhodné pro výrobu ve velkém měřítku a tím se po této stránce liší od dříve používaných procesů.
• 4 4 ·
«4 ·9 ♦ 4 · • · · • · · • 44
44*4
Proteinová frakce získaná oddělením kaseinu nebo celkových proteinů může být požita stejně tak při výrobě antihypertenzivních peptidů, jako jsou například výše popsané mléčné produkty. Způsob výroby je celkově vysoce ekonomický.
Dále je předkládaný vynález popsán podrobněji, ve smyslu uvedení příkladů. Tyto příklady jsou prezentovány pro ilustraci předkládaného vynálezu a v žádném případě neomezují jeho dosah.
Příklady provedení vynálezu
Srovnávací příklad 1: Antihypertenzivní efekt produktu předkládaného vynálezu
ACE inhibiční aktivita byla stanovena pro peptidy IPP a VPP a pro známý ACE inhibitor, lisinopril, na základě inhibiční konstanty (Holmquist B., Bunning P., Riordan J. F. Kontinuální spektrofotometrická analýza konvertovacího enzymu angiotensinu, Analytical Biochemistry 95 (1979) 540-548). Čím nižší číslo, tím je účinnější ACE inhibitor. Výsledky byly následující: IPP 4,4xl0'6, VPP l,8xl0'5 a lisinipril 7,5xl0‘9. Jak bylo shledáno, IPP a VPP vykazovaly jasnou ACE inhibiční aktivitu.
Antihypertenzivní efekt produktu podle předkládaného vynálezu byl prostudován od počátku, od kyselého mléčného produktu předkládaného vynálezu popsaného v Příkladu 5 k samovolnému hypertenzivnímu SHR u krys. Kontroly byly provedeny na třech odpovídajících skupinách krys, kterým byla podána voda, mléko a komerčně dostupné kyselé mléko. Jako srovnávací skupina byla použita stejná skupina krys, které byl titi titi • ti ti • · ·
• ti titititi • titi • ti tititi • ti ti • ti · • ti tititi
titi tititi ti podán Japanease Calpis kyselý mléčný produkt (Calpis Food Industry Company Ltd.) Krevní tlak všech krys byl měřen v týdenních intervalech po dobu třinácti týdnů. Výsledky jsou uvedeny na Obrázku 1 jako vzrůst systolického tlaku v závislosti na čase. Jak je zřejmé z výsledku, produkt předkládaného vynálezu je schopen značně předcházet zvýšení hladiny krevního tlaku, jak je srovnáno s kontrolní skupinou a srovnávací skupinou.
Srovnávací příklad 2: Antihypertenzivní efekt produktu předkládaného vynálezu
Antihypertenzivní efekt předkládaného vynálezu může být také studován na lidských bytostech. V předběžných testech byla testovací skupina 12 nahodile vybraných osob, které denně přijmuly 1,5 dl produktu předkládaného vynálezu popsáného v Příkladu 5 a kontrolní skupina se skládala z 11 nahodile vybraných osob, které denně přijmuly stejné množství komerčně dostupného odtučněného kyselého mléka. Krevní tlak byl měřen v týdenních intervalech po dobu osmi týdnů. Krevní tlak devíti osob v testovací skupině byl zřejmě redukován: systolický tlak okolo 13 % v průměru a diastolický okolo 12 % v průměru, u jedné osoby byla pozorována menší redukce tlaku, okolo 5 % a u tří osob nebyly pozorovány žádné změny. V kontrolní skupině, bylo u dvou osob pozorováno zřejmé snížení krevního tlaku, kdežto u sedmi osob nebyly pozorovány zádně změny. Výsledky dvou osob nebyly zahrnuty. Výsledky předběžných testů jasně ukazovaly, že produkt předkládaného vynálezu je schopen značně předcházet zvýšení hladiny krevního tlaku u lidských bytostí.
•to ··*· • · • ··· ·« • toto · • · ♦ ··· ♦ ·· •to ··*·
Příklad 1: Příprava produktu obsahujícího antihypertenzivní peptidy
Kmen Lactobacillus helveticus LBK 16-H byl kultivován v živné půdě při teplotě 37 °C po dobu 24 h a byl inokulován do rekonstituovaného mléka (10 %, objemových) pro přípravu inokulua. Po dvou kultivačních cyklech bylo inokulum (15 %, objemových) inokulováno do fermentačního prostředí, které bylo tvořeno 9 až 10 % (objemových) mléka z odtučněného mléčného prášku a které bylo sterilizováno při 100 °C 10 minut. Fermentace byla provedena při 37 °C po dobu 22 až 24 hodin, za silného míchání. Produkt byl poté sušen a rozemlet nebo převeden jako takový na nanofiltrační zpracování.
U fermentováného kyselého mléka získaného v množství (viz výše) bylo upraveno pH na 4,6 hydroxidem draselným a kasein byl odstraněn na nakloněné přepážce. Zbytkový kaseinový prášek byl odstraněn centrifugací. GLL koncentrovaná laktáza (Biocon Ltd., Japan) byla přidána k syrovátce, která byla hydrolyzována při 5 °C po dobu 24 hodin, pro degradaci laktozy na monosacharidy. Získané množství syrovátky bylo předběžně upraveno nanofiltrací skrz Nanomax-50 membránu (Millipore).
Filtrace byla provedena při 10 °C a tlaku 30xl05 Pa. Syrovátka byla filtrována tak, aby poměr objemových koncentrací byl roven 9. Složení získaného koncentrátu a suchého prášku z něho získaného je podáno v Tabulce 2.
Tabulka 2: Složení koncentrátu a suchého prášku obsahujícího antihypertenzivní peptidy ·· ** ► «to « t · 1 to· ··-»· • * • ··· ·· • · •
to to ·· to ·
Peptidovy koncentrát Suchý prášek
Sušina 30,0 94,5
Popel 3,69 13,3
Na (mg/kg) 130 470
K (mg/kg) 1600 5600
Ca (mg/kg) 10000 36000
Mg (mg/kg) 1700 6300
Cl (mg/kg) 550 2000
P (mg/kg) 6700 24500
IPP(mg/l) 510 2500
VPP(mg/l) 540 2700
Odstraněný kasein byl neutralizován na směs kaseinu s kovem a vysušen.
Příklad 2 peptidy
Příprava produktu obsahujícího antihypertenzivní
Fermentace popsaná v Příkladu 1 byla opakována za použití (a) mléka obsahujícího tuk a (b) podmáslí místo odtučněného mléka. pH produktu z Příkladu 2 (b) bylo upraveno na pH 4,5 a kasein byl odstraněn koagulačním odstředivkou. K syrovátce byla přidána laktáza a prášek byl odstraněn. Syrovátka byla poté nanofiltrována skrz NF membránu (Desal-5, Desal lne.), odpařena za sníženého tlaku a sušena. Složení získaného nanofiltračního koncentrátu bylo velmi podobné složení, které je uvedeno v Tabulce 2. Odstraněný kasein obsahoval velké množství syrovátky, ve kterém byl obsah antihypertenzivních peptidů stejný jako ve fermentovaném kyselém mléce. Kasein byl použit jako takový v měkkém tvarohu, do kterého byly antihypertenzivní peptidy zavedeny v tomto množství.
4
4« 4»·· ·
♦·« ·· • 4 4 · • 4 4
Příklad 3: Příprava produktu obsahujícího antihypertenzivní peptidy
Kmen Lactobacillus helveticus LBK 16-H byl kultivován v MRS živné půdě při 37 °C po dobu 24 hodin pro přípravu inokulua jak je popsáno v Příkladu 1. Inokulum bylo inokulováno do fermentačním prostředí, které se skládalo z vodného roztoku kaseinu, sraženého kyselinou (2,8 %, objemových) a glukózou (2,5 %, objemových). Kasein byl rozpuštěn zvýšením pH na 6,7 roztokem 10% KOH (objemově). Kultivace byla provedena při 37 °C po dobu 24 hodin. Touto cestou byly produkovány antihypertenzivní peptidy (VPP, IPP) v množství odpovídajícím produkci za použití fermentovaného mléka, avšak zde je možno snadněji oddělit peptidy z kaseinového roztoku než z mléka. pH fermentované živné půdy bylo zvýšeno na pH = 4,6 roztokem hydroxidu draselného při teplotě 37 °C, kdy se kasein vysráží. Kasein byl oddělen koagulační odstředivkou a získaná syrovátka byla regenerována. Syrovátka obsahovala peptidy, kyselinu mléčnou a soli, ale ne laktozu. Hlavní část kyseliny mléčné, jednovazných iontů a glukózy v syrovátce bylo odstraněno nanofiltrací. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku na koncentrát nebo sušen na hodně koncentrovaný prášek, čímž byl získán konzervovaný preparát, obsahující antihypertenzivní peptidy.
Příklad 4: Příprava produktu obsahujícího antihypertenzivní peptidy
Fermentace byla opakována za použití (a) a směsi několika kmenů, tj . L. helveticus LB161, L. helveticus LBK-16 H a L. helveticus LB230, (b) a směsi kmenů L. helveticus LBK-16 H, L.
rhamnosus LC705 a (c) směsi kmenů L. helveticus LBK-16 H a
Streptococcus thermophilus T101. Všechny tyto kmeny byly dostupné ze sbírky mikroorganismů Valio Oy. Použité kultivační prostředí obsahovalo 9 % (objemových) mléka a bylo toto ·· • tu · ·· · • *·· ··«· to* • toto· • to to to·· ·· • to ·· • to • to • · · • « to » to · • ••to sterilizováno při 100 °C po dobu 15 minut. Pro přípravu inokulua byly kultivovány kmeny L. helveticus a L. rhamnosus LC705 v MRS živné půdě po dobu 24 hodin, při 37 °C, z čehož bylo 1 % (objemově) převedeno do mléka. Kmen thermophilus T101 byl kultivován v LM17 živné půdě po dobu 18 ha při 37 °C, odkud bylo inokulum převedeno do mléka. První kultivace byla provedena kultivací všech kmenů odděleně v mléce, inkubací při 37 °C po dobu 24 hodin. Pro druhou kultivaci bylo 1 % (objemově) kmenů z každé směsi pipetováno do mléka, poté byla společná kultivace provedena při 37 °C po dobu 24 hodin. Třetí kultivace, 5 až 10 % (objemově) dříve získané společné kultivace bylo pipetováno do mléka a inkubováno při 37 °C po dobu 24 hodin. Množství VPP a IPP produkovaných kmeny L. helveticus LBK-16 H a rozdílnými směsemi mikroorganismů a koncentrace některých bakterií jsou uvedeny v Tabulce 3. Žádné rozdíly mezi směsemi nebo kmenem LBK-16 H nebyly pozorovány. Ostatní kmeny nezasahovaly do proteolýzy.
Tabulka 3: IPP a mikroorganismů
VPP množství produkované směsemi
Mikroorganismus (směs) VPP mg/1 IPP mg/1 Koncentra ce cfu/ml
L161+LBK-16+LB230, 5 % (obj emově) 13-14 6-7
L161+LBK-16+LB230, 10 % (obj emově) 13-14 6-7
LBK16H+LC705, 5 % (objemově) 13-14 6-7
LBK16H+LC705, 10 % (obj emově) 13-14 6-7
LBK16H+Str. T101, 10 % (obj emově) 13-15 6-8 lxlO8
LBK16H (dno) 13-15 6-8 lxlO7
·· ·· • · · > · ···
Příklad 5: Příprava • to «· » · 4 • to to •
• tototo • toto to· • toto· • · • ··· • · • · ··· to · to · ·· fermentovaného mléčného produktu
Kyselé mléko obsahující antihypertenzivní peptidy bylo připraveno přidáním 3,5 % (objemově) peptidového koncentrátu získaného v Příkladu 3 ke komerčně dostupnému kyselému mléčnému produktu. Složení získaného produktu je uvedeno v Tabulce 4, která současně ukazuje složení komerčně dostupného kyselého mléčného produktu, AB kyselé mléko (Valio Oy) pro srovnání.
Tabulka 4: Složení produktu podle předkládaného vynálezu a komerčně dostupného fermentovaného mléčného produktu
AB kyselé mléko Biopep-produkt předkládaného vynálezu
Sušina (%) 9,0 9,8
Na (mg/kg) 390 380
K (mg/kg) 1700 1700
Ca (mg/kg) 1200 1510
Mg (mg/kg) 114 170
Cl (mg/kg) 1000 980
VPP (mg/l) 0 19
IPP (mg/l) 0 18
• ·

Claims (19)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Způsob pro přípravu produktu obsahujícího antihypertenzivní peptidy, vyznačující se tím, že se fermentuje výchozí látka obsahující kasein bakteriemi mléčného kvašení a provede se nanofiltrace získaného, peptidy obsahujícího fermentačního produktu.
  2. 2. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že je výchozí látkou kasein.
  3. 3. Způsob podle nároku 1,vyznačující se tím, že výchozí látkou je mléko nebo produkt založený na mléce.
  4. 4. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 3, vyznačující se tím, že je směs baktérií mléčného kvašení nebo dalších mikroorganismů použita při fermentací.
  5. 5. Způsob podle jakéhokoliv z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že je miroorganismus Lactobacillus helveticus použit při fermentací.
  6. 6. Způsob podle nároku 5,vyznačující se tím, že mikroorganismus je kmen Lactobacillus helveticus LBK-16H.
  7. 7. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 6, vyznačující se tím, že navíc zahrnuje odstranění kaseinu z fermentačních produktů předcházející nanofiltraci.
  8. 8. Způsob podle jakéhokoliv z nároků 1 až 6, vyznačující se tím, že navíc zahrnuje odstranění všech mléčných proteinů z fermentačních produktů předcházející nanofiltraci.
  9. 9. Způsob podle kteréhokoliv z nároků 1 až 8, vyznačující se tím, že navíc zahrnuje odstranění laktozy z fermentačních produktů předcházející nanofiltraci.
  10. 10. Produkt obsahující antihypertenzivní peptidy, vyznačující se tím, že má vysoký obsah antihypertenzivních peptidů a je připraven procesem kde se fermentuje kasein obsahující výchozí látka bakteriemi mléčného kvašení a kde je provedena nanofiltrace pro získání peptidu z fermentačního produktu.
  11. 11. Produkt podle nároku 10, vyznačuj ící setím, že se skládá ze směsi peptidů a krátkými řetězci.
  12. 12. Produkt podle nároku 10 nebo 11, vyznačuj ící se t í m, že peptidy jsou di- nebo tri peptidy.
  13. 13. Produkt podle kteréhokoliv z nároků 10 až 12, vyznačující se tím, že obsahuje vysoký obsah tripeptidů, obzvláště Ile-Pro-Pro a/nebo Val-ProPro.
    14 . Produkt podle kteréhokoliv z nároků 10 až 13 vyznačuj í c í se t í m, že obsahuje vysoký obsah dvojmocných kationtů. 15 . Produkt podle kteréhokoliv z nároků 10 až 14, vyznačuj í c í se t i m, že obsahuje nízký obsah
    jednomocných kationtů.
    16. Produkt podle kteréhokoliv z nároků 10 až 15, v y z n a č u j ící se t í m, že vykazuje obsah sušiny : 20 až 60 % objemových. 17. Produkt podle kteréhokoliv z nároků 10 až 16, v y z n a č u j ící se tím, že je vysušen na prášek
    a vykazuje obsah sušiny přesahující 90 % objemových.
  14. 18. Použití produktu podle kteréhokoliv z nároků 10 až 16 jako antihypertenzivního činidla.
  15. 19. Použití produktu podle kteréhokoliv z nároků 10 až 17 při výrobě poživatelných látek.
  16. 20. Použití produktu podle nároku 19 v mlékařském průmyslu, potravinářském průmyslu, masném průmyslu, cukrovarnickém průmyslu, v průmyslu výroby nápojů a v pekařství.
  17. 21. Poživatelný produkt, vyznačující se tím, že obsahuje produkt podle kteréhokoliv nároku 10 až 20.
  18. 22. Poživatelný produkt podle nároku 21, vyznačuj ící se t í m, že existuje ve fermentováných mléčných produktech.
  19. 23. Poživatelný produkt podle nároku 21, vyznačuj ící se t í m, že existuje v nápojích, výhodněji v syrovátkových nápojích, ovocných nápojích nebo pivě.
CZ20021431A 1999-11-01 2000-10-30 Zpusob výroby produktu obsahujícího antihypertenzivní tripeptidy CZ302271B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI992360A FI113741B (fi) 1999-11-01 1999-11-01 Menetelmä verenpainetta alentavia peptidejä sisältävän tuotteen valmistamiseksi

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20021431A3 true CZ20021431A3 (cs) 2002-08-14
CZ302271B6 CZ302271B6 (cs) 2011-01-19

Family

ID=8555541

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20021369A CZ294146B6 (cs) 1999-11-01 2000-10-30 Lactobacillus helveticus LBK@�@ H a jeho použitíŹ bakteriální preparát a jedlý produkt
CZ20021431A CZ302271B6 (cs) 1999-11-01 2000-10-30 Zpusob výroby produktu obsahujícího antihypertenzivní tripeptidy

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20021369A CZ294146B6 (cs) 1999-11-01 2000-10-30 Lactobacillus helveticus LBK@�@ H a jeho použitíŹ bakteriální preparát a jedlý produkt

Country Status (23)

Country Link
US (2) US6890529B1 (cs)
EP (2) EP1226230B1 (cs)
JP (2) JP4172681B2 (cs)
KR (2) KR100704441B1 (cs)
CN (2) CN1164761C (cs)
AT (2) ATE285470T1 (cs)
AU (2) AU777795B2 (cs)
CA (2) CA2388354A1 (cs)
CZ (2) CZ294146B6 (cs)
DE (2) DE60010742T2 (cs)
DK (2) DK1226230T3 (cs)
EE (2) EE05461B1 (cs)
ES (2) ES2220557T3 (cs)
FI (1) FI113741B (cs)
HR (2) HRP20020378B1 (cs)
HU (2) HUP0203185A3 (cs)
NO (2) NO20022062L (cs)
NZ (2) NZ518470A (cs)
PL (2) PL364790A1 (cs)
PT (2) PT1226267E (cs)
RU (2) RU2270855C2 (cs)
WO (2) WO2001032836A1 (cs)
ZA (2) ZA200203172B (cs)

Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FI113741B (fi) * 1999-11-01 2004-06-15 Valio Oy Menetelmä verenpainetta alentavia peptidejä sisältävän tuotteen valmistamiseksi
FI112031B (fi) 2002-02-25 2003-10-31 Valio Oy Biologisesti aktiivisen tuotteen uusi käyttö
AU2003236689A1 (en) 2002-06-04 2003-12-19 Dsm Ip Assets B.V. Protein hydrolysate rich in tripeptides
EP1529114A1 (en) * 2002-08-09 2005-05-11 Chr. Hansen A/S Process for preparing peptides with anti-hypertensive properties
CA2509627A1 (en) * 2003-01-06 2004-07-22 Unilever Plc Fermented milk product comprising tripeptide vpp and/or ipp
TWI328457B (en) * 2003-03-18 2010-08-11 Suntory Holdings Ltd Angiotensin-converting enzyme inhibitory peptides
US7718171B2 (en) 2003-04-07 2010-05-18 Chr. Hansen A/S Reducing heart rate in mammals using milk derived fermentation products produced using Lactobacillus helveticus
BRPI0409536A (pt) 2003-05-05 2006-04-18 Unilever Nv processo para a preparação de um produto de caseìna hidrolisada, produtos de caseìna hidrolisada e produtos alimentìcios
EP1727440A1 (en) * 2004-03-19 2006-12-06 Campina Nederland Holding B.V. Method of preparing a food ingredient and food product having angiotensin-i-converting enzyme inhibiting properties and products thus obtained
CN101039685B (zh) 2004-03-31 2010-06-16 卡尔皮斯株式会社 预防、抑制肝病的制剂和预防、抑制肝病的功能食品
US7862808B2 (en) 2004-07-01 2011-01-04 Mead Johnson Nutrition Company Method for preventing or treating respiratory infections and acute otitis media in infants using Lactobacillus rhamnosus LGG and Bifidobacterium lactis Bb-12
JP4723501B2 (ja) * 2004-07-05 2011-07-13 カルピス株式会社 ペプチド混合物の製造法、抗高血圧ペプチド含有発酵乳の製造法及び抗高血圧ペプチド製剤の製造法
EA011865B1 (ru) * 2004-07-12 2009-06-30 ДСМ Ай Пи ЭССЕТС Б.В. Протеиновые гидролизаты, снижающие давление крови
EP1685764A1 (en) 2005-01-27 2006-08-02 Globus Egg Sciences B.V. Anti-hypertensive functional food products
BRPI0514903A (pt) 2004-09-03 2008-06-24 Hansens Lab proteìnas vegetais ou leite fermentado compreendendo ligando de receptor e uso dos mesmos
FR2876876B1 (fr) * 2004-10-22 2007-02-16 Gervais Danone Sa Protection d'ingredients alimentaires bioactifs par l'utilisation de microorganismes presentant une capacite de metabolisation reduite
FR2876874B1 (fr) * 2004-10-22 2007-02-16 Gervais Danone Sa Protection d'ingredients alimentaires bioactifs par l'utilisation d'ingredients leurres
DK1827477T3 (en) * 2004-12-22 2015-11-09 Dsm Ip Assets Bv Antihypertensive Oligopeptides IN A SINGLE STEP ENZYMATIC
WO2006084560A1 (en) * 2005-02-09 2006-08-17 Unilever N.V. Composition comprising peptide
US8088597B2 (en) * 2005-02-24 2012-01-03 Dsm Ip Assets B.V. Blood pressure lowering peptides from glycomacropeptide
US7303745B2 (en) 2005-04-15 2007-12-04 Bristol-Myers Squibb Company Method for preventing or treating the development of respiratory allergies
EP2439266B1 (en) * 2005-11-28 2017-02-01 DSM IP Assets B.V. Enzyme preparations yielding a clean taste
KR20080095898A (ko) 2006-02-14 2008-10-29 칼피스가부시키가이샤 혈관확장제
TWI418359B (zh) 2006-02-14 2013-12-11 Calpis Co Ltd 動脈硬化預防劑，血管內膜增厚抑制劑，血管內皮功能改善劑及功能性食品
DE602006004956D1 (de) * 2006-02-20 2009-03-12 Gervais Danone Sa Neue Stämme von Lactobacillus helveticus
EP1820850B1 (fr) * 2006-02-20 2009-02-25 Compagnie Gervais Danone Nouvelles souches de lactobacillus helveticus
EP1820851B9 (fr) * 2006-02-20 2012-06-27 Compagnie Gervais Danone Souches de Lactobacillus helveticus ne fermentant pas le lactose
CN100370019C (zh) * 2006-04-21 2008-02-20 江南大学 一种具有抗高血压作用的植物乳杆菌cw006
RU2457852C2 (ru) * 2006-05-15 2012-08-10 Валио Лтд Новое применение терапевтически эффективных пептидов
US20090111758A1 (en) * 2006-05-15 2009-04-30 Valio Ltd. Use of therapeutically useful peptides
NZ597178A (en) * 2006-09-04 2012-08-31 Megmilk Snow Brand Co Ltd Agent comprising Lactobacillus helveticus for accelerating the increase in and/or preventing the decrease in blood adiponectin level, and visceral fat accumulation inhibitor
PT1915913E (pt) * 2006-10-23 2016-02-16 Nestec Sa Modulação do sabor e do aroma de produtos lácteos por biotransformação
EP1952703B1 (de) * 2007-02-02 2010-08-25 May, Amadeus Alexander Produkt mit lebenden probiotischen Mikroorganismen
US10842813B2 (en) 2007-02-26 2020-11-24 Heartbeet Ltd Compositions of nitrates and methods of use thereof
US11759477B2 (en) 2007-02-26 2023-09-19 Heartbeet Ltd. Compositions of nitrates and methods of use thereof
MX2009010428A (es) * 2007-03-27 2009-12-01 Calpis Co Ltd Agente profilactico para insuficiencia renal.
BRPI0915107A2 (pt) * 2008-06-12 2015-08-11 Nestec Sa Cepas de lactobacillus heveticus para produção de peptídeos hipotensivos
DE102008032828A1 (de) 2008-07-02 2010-01-07 Technische Universität Dresden Tryptophanhaltige Peptide aus alpha-Lactalbumin mit blutdrucksenkender und vasoprotektiver Wirkung für biofunktionelle Lebensmittel
FI122531B (fi) * 2009-09-30 2012-03-15 Valio Oy Juusto ja menetelmä sen valmistamiseksi
CN102786579B (zh) * 2012-07-17 2014-07-09 上海交通大学 抗高血压活性肽vip
CN102786580A (zh) * 2012-07-17 2012-11-21 上海交通大学 抗高血压活性肽ivp
RU2580052C1 (ru) * 2014-12-24 2016-04-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" Штамм lactobacillus helveticus вкпм в-11176, полученный на доступных питательных средах
RU2577112C1 (ru) * 2014-12-25 2016-03-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" Штамм lactobacillus helveticus вкпм в-11175, полученный на доступных питательных средах
BR112019010024B1 (pt) 2016-12-02 2023-01-31 Fairlife, Llc Processos para a preparação de uma composição láctea seca, composição láctea seca, processo de reconstituição de um produto de leite e produto de leite reconstituído
RU2685912C1 (ru) * 2018-03-14 2019-04-23 Федеральное государственное автономное научное учреждение "Научно-исследовательский институт хлебопекарной промышленности" Штамм бактерий lactobacillus amylolyticus, используемый для приготовления термофильной заквашенной заварки
RU2728171C2 (ru) * 2018-11-08 2020-07-28 Общество с ограниченной ответственностью "Инновационные биотехнологии" (ООО "Инбиотех") Штамм бактерий Lactobacillus helveticus T-5068, используемый в качестве закваски прямого внесения для приготовления кисломолочных продуктов
CN109517763B (zh) * 2018-12-27 2022-03-22 内蒙古农业大学 瑞士乳杆菌h11及其应用
TWI713972B (zh) * 2019-01-14 2020-12-21 大江生醫股份有限公司 改善呼吸道健康之益生菌株及其組合物與用途
WO2021195718A1 (en) * 2020-04-02 2021-10-07 Ahtesh Fatah Bashir Milk fermentation process
CN112029784A (zh) * 2020-09-16 2020-12-04 内蒙古农业大学 一个与蛋白水解能力相关的基因及基于该基因的高蛋白水解能力瑞士乳杆菌的筛选方法
KR102684805B1 (ko) 2023-12-20 2024-07-12 푸른하늘환경주식회사 우수 유출수의 정화 처리 장치
KR102687298B1 (ko) 2023-12-20 2024-07-22 푸른하늘환경주식회사 비점오염물질 저감 및 우수 정화 장치
CN117986337B (zh) * 2024-02-02 2024-08-16 杭州御寿生物科技有限公司 一种提高免疫力的益生菌组合物以及在治疗疾病中的应用

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2483748A1 (fr) * 1980-06-06 1981-12-11 Corning Glass Works Procede d'hydrolyse du lactose contenu dans les lactoserums a l'aide de lactase immobilisee
SU1264889A1 (ru) * 1984-07-25 1986-10-23 Киевский Ордена Трудового Красного Знамени Технологический Институт Пищевой Промышленности Способ производства молочно-белкового продукта дл плавлени
JPS6153216A (ja) * 1984-08-23 1986-03-17 Rikagaku Kenkyusho 高血圧症予防治療剤
JP2782142B2 (ja) * 1992-07-23 1998-07-30 カルピス株式会社 アンジオテンシン変換酵素阻害剤及びその製造法
JP2782153B2 (ja) 1992-11-09 1998-07-30 カルピス株式会社 アンジオテンシン変換酵素阻害ペプチドの製造法
JP2824821B2 (ja) 1993-11-04 1998-11-18 カルピス株式会社 乳酸菌及び発酵乳製品
GB2294191B (en) * 1994-10-06 1997-10-01 Waterford Creamery Ltd Cheese manufacture
JP3782837B2 (ja) * 1995-04-10 2006-06-07 カルピス株式会社 血圧降下剤及びその製造法
JPH09188694A (ja) 1996-01-10 1997-07-22 Otsuka Shokuhin Kk ペプチド、アンジオテンシン変換酵素阻害組成物及びその製法
JP3746556B2 (ja) 1996-02-09 2006-02-15 カルピス株式会社 プラスミド及びプラスミドベクター
US5854029A (en) * 1996-08-02 1998-12-29 Calpis Co., Ltd. Method for preparing antihypertensive agent
JP3028411B2 (ja) * 1997-09-26 2000-04-04 カルピス株式会社 トリペプチド高生産性ラクトバチルス・ヘルベチカス乳酸菌
JP4727770B2 (ja) * 1997-09-26 2011-07-20 カルピス株式会社 尿中カテコールアミン低下、尿中ノルアドレナリン低下、尿中ドーパミン低下及びＦｉｓｃｈｅｒ比低下の少なくとも１つの軽減剤
GB9720633D0 (en) * 1997-09-29 1997-11-26 Univ Bristol BHV-2 vector
FI104783B (fi) 1998-02-12 2000-04-14 Valio Oy Herasuolajauhe, menetelmä sen valmistamiseksi ja sen käyttö
FI113741B (fi) * 1999-11-01 2004-06-15 Valio Oy Menetelmä verenpainetta alentavia peptidejä sisältävän tuotteen valmistamiseksi
US6514941B1 (en) * 1999-12-10 2003-02-04 Campina Melkunie B.V. Method of preparing a casein hydrolysate enriched in anti-hypertensive peptides

Also Published As

Publication number Publication date
JP4172681B2 (ja) 2008-10-29
ES2220557T3 (es) 2004-12-16
EE200200230A (et) 2003-06-16
AU1149901A (en) 2001-05-14
FI19992360L (fi) 2001-05-02
WO2001032836A1 (en) 2001-05-10
HU226200B1 (en) 2008-06-30
EP1226230B1 (en) 2004-12-22
ZA200203179B (en) 2003-07-22
NO330951B1 (no) 2011-08-22
NZ518493A (en) 2003-03-28
RU2270855C2 (ru) 2006-02-27
KR100718709B1 (ko) 2007-05-16
ATE266735T1 (de) 2004-05-15
NO20022062D0 (no) 2002-04-30
DE60016959D1 (de) 2005-01-27
EP1226267A1 (en) 2002-07-31
CZ302271B6 (cs) 2011-01-19
CA2387738C (en) 2008-09-16
HRP20020378A2 (en) 2003-08-31
PL355670A1 (pl) 2004-05-04
CZ294146B6 (cs) 2004-10-13
US6890529B1 (en) 2005-05-10
DK1226267T3 (da) 2004-09-20
CA2387738A1 (en) 2001-05-10
AU777795B2 (en) 2004-10-28
HUP0203256A2 (hu) 2003-01-28
AU1149801A (en) 2001-05-14
CN1197956C (zh) 2005-04-20
PL364790A1 (pl) 2004-12-13
WO2001032905A1 (en) 2001-05-10
EP1226230A1 (en) 2002-07-31
FI113741B (fi) 2004-06-15
DK1226230T3 (da) 2005-04-04
JP2003513621A (ja) 2003-04-15
RU2276689C2 (ru) 2006-05-20
ZA200203172B (en) 2003-09-23
HRP20020378B1 (en) 2005-06-30
US6972282B1 (en) 2005-12-06
HUP0203185A2 (hu) 2003-01-28
JP3695648B2 (ja) 2005-09-14
PT1226267E (pt) 2004-08-31
AU769432B2 (en) 2004-01-29
EE200200231A (xx) 2003-06-16
CA2388354A1 (en) 2001-05-10
KR100704441B1 (ko) 2007-04-24
EP1226267B1 (en) 2004-05-12
ES2234686T3 (es) 2005-07-01
EE05461B1 (et) 2011-08-15
NZ518470A (en) 2003-03-28
DE60010742D1 (de) 2004-06-17
KR20020060220A (ko) 2002-07-16
PT1226230E (pt) 2005-04-29
CN1387577A (zh) 2002-12-25
KR20020064895A (ko) 2002-08-10
DE60010742T2 (de) 2005-05-12
HUP0203256A3 (en) 2005-11-28
CN1164761C (zh) 2004-09-01
DE60016959T2 (de) 2005-12-22
NO20022061L (no) 2002-06-28
CN1387564A (zh) 2002-12-25
PL204119B1 (pl) 2009-12-31
HUP0203185A3 (en) 2005-07-28
HRP20020377A2 (en) 2003-08-31
JP2003513636A (ja) 2003-04-15
ATE285470T1 (de) 2005-01-15
NO20022061D0 (no) 2002-04-30
HRP20020377B1 (en) 2005-06-30
NO20022062L (no) 2002-06-28
CZ20021369A3 (cs) 2002-07-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ20021431A3 (cs) Způsob výroby produktu obsahujícího antihypertenzivní tripeptidy
Takano Anti-hypertensive activity of fermented dairy products containing biogenic peptides
JP2011504363A (ja) 改良された生理活性ペプチドの生成
US10864246B2 (en) Method for lowering triglyceride
US20080292750A1 (en) Method of Preparing a Food Ingredient and Food Product Having Angiotensin-I-Converting Enzyme Inhibiting Properties and Products Thus Obtained
MXPA05007267A (es) Producto de leche fermentada que comprende tripeptidos val-pro-pro (vpp) e ile-pro-pro (ipp).
JPH1033115A (ja) ホエー飲料とその製造法
JP4242293B2 (ja) 骨の強化および骨形成を増加させるための組成物
TW200800047A (en) Method for producing fermented milk and fermented milk food and beverage
EP1640447A1 (en) BIOACTIVE PEPTIDE-PRODUCING STRAINS OF i ENTEROCOCCUS FAECALIS /i , BIOACTIVE PEPTIDES AND APPLICATIONS THEREOF
FI120267B (fi) Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidien valmistamiseksi
Acharya Production of functional food, Fruit ravioli with antihypertensive peptides
KR20070009626A (ko) 안지오텐신-ｉ-전환 효소를 억제하는 성질을 갖는 식품원료 및 식품을 제조하는 방법 및 그로부터 수득된 제품

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20110414