CZ302271B6 - Zpusob výroby produktu obsahujícího antihypertenzivní tripeptidy - Google Patents

Zpusob výroby produktu obsahujícího antihypertenzivní tripeptidy Download PDF

Info

Publication number
CZ302271B6
CZ302271B6 CZ20021431A CZ20021431A CZ302271B6 CZ 302271 B6 CZ302271 B6 CZ 302271B6 CZ 20021431 A CZ20021431 A CZ 20021431A CZ 20021431 A CZ20021431 A CZ 20021431A CZ 302271 B6 CZ302271 B6 CZ 302271B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
product
fermentation
product according
peptides
nanofiltration
Prior art date
Application number
CZ20021431A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ20021431A3 (cs
Inventor
Tossavainen@Olli
Suomalainen@Tarja
Sahlstein@Janne
Mäyrä-Mäkinen@Annika
Original Assignee
Valio Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Valio Ltd filed Critical Valio Ltd
Publication of CZ20021431A3 publication Critical patent/CZ20021431A3/cs
Publication of CZ302271B6 publication Critical patent/CZ302271B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P21/00—Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/02—Preparation of peptides or proteins having a known sequence of two or more amino acids, e.g. glutathione
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/14—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment
    • A23C9/142—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by dialysis, reverse osmosis or ultrafiltration
    • A23C9/1427—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations in which the chemical composition of the milk is modified by non-chemical treatment by dialysis, reverse osmosis or ultrafiltration by dialysis, reverse osmosis or hyperfiltration, e.g. for concentrating or desalting
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
    • A23J3/30—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis
    • A23J3/32—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents
    • A23J3/34—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes
    • A23J3/341—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins
    • A23J3/343—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins of dairy proteins
    • A23J3/344—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins of dairy proteins of casein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Preparation or treatment thereof
    • A23L2/52—Adding ingredients
    • A23L2/66—Proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; PREPARATION OR TREATMENT THEREOF
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/0808—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms, e.g. Val, Ile, Leu
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
    • A23V2400/11—Lactobacillus
    • A23V2400/147—Helveticus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

Zpusob prípravy produktu obsahujícího antihypertenzivní peptidy fermentací výchozí látky obsahující kasein s bakteriemi mlécného kvašení. Použití získaného funkcního produktu jako takového nebo jako složky nebo doplnku poživatelných látek.

Description

Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká způsobu přípravy produktu obsahujícího antíhypertenzivní tripeptidy. Vynález se týká získaného produktu, jeho použití jako takového nebo jako složky či doplňku poživatelných látek.
Dosavadní stav techniky
V současnosti jsou kardiovaskulární onemocnění zahrnuty mezi nejběžnější onemocnění ve vyvinutých zemích a jejich výskyt bude stárnutím populace dále stoupat. Vysoký krevní tlak značně přispívá k vývoji těchto onemocnění. Léčba hypertenze je jedním z nej důležitějších zaměření s ohledem jak na prevenci tak na efektivní léčbu.
Při sledování krevního tlaku na úrovni buněk má hlavní funkci konvertující enzym angiotensin I, ACE. Enzym ACE způsobuje jednak přeměnu angiotensinu I na angiotensin II, který je látkou silně zvyšující krevní tlak zúžením cév a také inaktivuje bradykinin, který má naopak vasodilatační efekt. Obě funkce enzymu vedou ke zvyšování krevního tlaku. Inhibitory ACE zabraňují tomuto efektu a následkem toho fungují jako antíhypertenzivní činidla. Mnoho farmaceutických činidel používaných v léčbě hypertenze jsou ACE inhibitory. Jeden z nich je captopril (D-2methyl-3-merkaptopropanoyl-L-prolin), který je komerčně dostupný ve Finsku pod názvy Capoten (produkt Bristol-Myers Squibb) a Captopril (produkt Merc Generics).
Ostatní způsoby snižování krevního tlaku jsou také žádoucí, jako alternativa k lékům nebo i jako samostatné působící. Zahrnují například redukci obezity, zvýšení cvičební aktivity a konzumaci diet s nízkým obsahem sodíku. Jedna z nej novějších cest je použití funkčních potravin jako podílu normální diety, která je konzumenty označena jako přijatelná alternativa.
Bylo uvedeno, že kvaŠné mléčné výrobky obsahují peptidy vykazující antíhypertenzivní efekt. Předpokládá se, že peptidy jsou produkovány mléčnými výrobky jako výsledek hydrolýzy mléčné bílkoviny způsobené bakteriemi mléčného kvašení a částečně její extracelulámí proteinázou. Čištění a charakterizace proteinázy odvozené od mikroorganismu Lactobacillus helveticus CP790 je popsáno v J. Biochem. 114 (1993) 740, Yamamoto a kol. V této publikaci je podána zpráva o studii, kde byl a5i- a /7-kasein hydrolyzován touto proteinázou a získané peptidy byly studovány pro jejich ACE-inhihiční efekt (J Dairy Sci 77 (1994) 917). Celkem bylo studováno 25 peptidů, jejich molekulové rozměry a efekty byly značně rozdílné. Největší aktivitu vykazovaly tri peptidy získané z /7-kaseinu, obsahující 8, 18 a 27 aminokyselin. Studie obsahuje porovnání ACEaktivity mléka fennentovaného kmenem Lactobacillus helveticus CP790 a jeho varianty CP791 s narušenou proteinázovou aktivitou, kde první byl nalezen účinným u spontánně hypertenzních krys SHR, ne u běžných krys a druhý nevykazoval žádnou aktivitu.
Použití zákvasu obsahujícího Lactobacillus helveticus a Saccharomyces cerevisiae pro přípravu dvou ACE inhibitorů je popsáno vJDiary Sci 78 (1995) 777-783, Nakamura a kol. Netučné mléko bylo fermentováno těmito zákvasy, poté byly inhibitory ACE chromatograficky čištěny a analyzovány. Aktivními složkami byly oba tripeptidy, Val-Pro-Pro a Ile-Pro-Pro. V publikaci není popsán jejich antíhypertenzivní efekt in vivo ani příprava kvašeného mléka ze zákvasu, ale jak je v této publikaci uvedeno, bude to předmětem dalšího výzkumu.
US Patent 5 449 661 (Nakumura a kol.) uvedl ve známost přípravu peptidu obsahujícího tripeptidovou sekvenci Val-Pro-Pro a jeho použití pro snižování krevního tlaku. Peptid byl připraven fermentací odměněného mléka poháněnou kmenem Lactobacillus helveticus JCMM—1004, poté byl peptid chromatografícky čištěn a lyofilizován.
- 1 CZ 302271 B6
V mezinárodní žádosti o udělení patentu WO99/16862 (Yamamoto a kol.) je popsán kmen Lactobacillus helveticus CM4, FERM BP-6060, který je schopen produkovat velké množství tripeptidu Val-Pro-Pro a/nebo Ile-Pro-Pro a vykazuje extracelulámí proteinázovou aktivitu. V této publikaci je také popsána fermentace mléčných produktů obsahující tyto tripeptidy a baktérie a způsob jejich přípravy fermentaeí produktů obsahujících tri peptidové sekvence těmito bakteriemi.
K produktům připravených fermentaeí bakteriemi mléčného kvašení, obsahujícím antihyperten10 živní tripeptidy jsou vztaženy dvě nevýhody. Hlavním produktem kvašení je kyselina mléčná, která je produkována účinnými fermentačními reakcemi. Jak je zřejmé z názvu samotného, kyselina mléčná je kyselá a dává hořkou příchuť produktům obsahujícím antihypertenzivní tripeptidy, kromě toho mnoho konzumentů nachází vysokou kyselost a nízké pH nepříjemným. Velké množství jednomocných kovů, obzvláště sodných iontů je přítomno v produktech obsahujících antihy15 pertenzivní peptidy připravených fermentaeí. U těchto iontů je známo, že zvyšují krevní tlak a z čehož vyplývá, že působí proti požadovaným antihypertenzivním peptidům.
V předešlých publikacích byly zveřejněny způsoby čištění peptidů, produkovaných fermentaeí. Tyto způsoby částečně dovolují vyvarovat se výše zmíněným nevýhodám, zatímco je získán koncentrovaný produkt. Tyto způsoby čištění v předešlých publikacích poskytují čisté produkty, které jsou vhodné pro analýzy a zkoušky aktivity. Tyto způsoby jsou několika krokové a obsahují různé chromát ografické čistící metody a nejsou vhodné pro výrobu ve velkém objemu.
Proto je nutné vytvářet funkční produkty, které mají antihypertenzivní efekt a které budou kon25 zumenti shledávat příjemným a dobře známým a které mohou být snadno použity jako součást normální diety. Je důležité, aby tyto produkty neobsahovaly nepříjemné nebo škodlivé složky a aby byly snadno produkovatelné v průmyslovém měřítku.
ni Podstata vynálezu
Předkládaný vynález zahrnuje produkty o vysokém obsahu antihypertenzivních peptidů, které vykazují antihypertenzivní efekt.
Produkty předkládaného vynálezu, jednak obsahující vysoký obsah antihypertenzivních peptidů mají také výhodný obsah solí, neboť obsah škodlivých jednomocných kationtů je nízký a obsah prospěšných dvojmocných kationtů je vysoký ve srovnání se známými produkty tohoto typu.
Předkládaný vynález zahrnuje způsob pro přípravu těchto produktů. Tento způsob je jednoduchý a snadný pro provedení a vhodný pro výrobu v průmyslovém měřítku.
Předkládaný vynález zahrnuje produkt pro použití jako antihypertenzivní činidlo nebo pro výrobu poživatelných funkčních pokrmů nebo farmaceutik.
Předkládaný vynález zahrnuje použití perorálně přijímaných produktů, jako jsou funkční pokrmy nebo farmaceutika, které obsahují výše popsané produkty jako jednu z aktivních složek.
Detailní popis vynálezu
Předkládaný vynález se týká způsobu pro přípravu produktu obsahujícího antihypertenzivní peptidy fermentaeí výchozí látky obsahující kase i n s bakteriemi mléčného kvašení a následnou nanofihrací získaného, peptidy obsahujícího fermentačního produktu.
-2CZ 302271 B6
Předkládaný vynález tak zahrnuje nové způsoby přípravy těchto produktů založených na nových vynálezeckých kombinacích: preparát obsahující antihypertenzivní peptidy je produkován fermentací, poté je koncentrován a složení je výsledně upraveno nanofiltrací. Kombinace podle předkládaného vynálezu zahrnuje znamenité možnosti v použití výchozích látek různých typů a modifikací složení konečného produktu na požadovaný typ, který bude popsán podrobněji dále.
Předkládaný vynález se týká způsobu přípravy produktu obsahujícího antihypertenzivní peptidy. Tento způsob je charakterizován složením fermentačním kroku výchozí sloučeniny, obsahující kasein, bakteriemi mléčného kvašení a filtrací získaného peptidy obsahujícího fermentačního io produktu.
Předkládaný vynález se také týká produktů obsahujících antihypertenzivní peptidy, které jsou charakterizovány vysokým obsahem antihypertenzivních peptidů a jsou připraveny způsobem, kde je kasein obsahující výchozí látka fermentována bakteriemi mléčného kvašení a získaný pep15 tid obsahující fermentační produkt je filtrován.
Předkládaný vynález se také týká použití výše popsaného produktu jako antihypertenzivního činidla.
2o Předkládaný vynález se dále týká použití výše popsaného produktu ve výrobě poživatelných látek.
Předkládaný vynález se dále týká poživatelných produktů obsahujících výše popsané koncentrované produkty s vysokým obsahem peptidů a obvyklých složek těchto produktů.
V prvním kroku způsobu výroby podle předkládaného vynálezu je fermentací produkován preparát obsahující antihypertenzivní peptidy. Pro fermentací je jako použitelná výchozí látka jakákoliv látka, obsahující požadované antihypertenzivní peptidy jako část jejich vlastní peptidové nebo proteinové sekvence. Mléčný protein, zejména kasein, je výhodně použit jako takový nebo ve formě různých úprav. Vhodný výchozí materiál také zahrnuje různé kasein obsahující mléčné produkty, jako jsou netučné mléko, nebo mléko s různým obsahem tuku, nebo ve formě odpovídajícího mléčného prášku a fermentovaných mléčných produktů, jako jsou kyselé mléko, podmáslí, jogurt, sražené mléko a nedozrálý sýr atd.
Fermentace nemůže být provedena bez bakterií mléčného kvašení, které jsou schopné produkovat antihypertenzivní tri peptidy z výchozího materiálu. Vhodné bakterie mléčného kvašení byly nalezeny mezi odrůdou druhu např. Lactobacillus, Lactococcus, Leuconostoc, Streptococcus a Bifidobacterium. Lactobacillus helveticus je nejvíce proteolytická z bakterií mléčného kvašení a je proto považována za obzvláště vhodnou pro tento účel. Výhodný kmen Lactobacillus helveticus je L. helveticus LBK-16H. Bakterie mléčného kvašení byly použity jako čisté kultury nebo jako smíšené kultury, použité samostatně nebo s obvyklými a komerčně dostupnými zákvasy. Bakterie mléčného kvašení může být také použita s dalšími mikroorganismy. Pokud jde o kombinaci mikrobů, vhodnou kombinací jsou vybrané podle efektu, jako je nejlepší možná příchuť dosažená v konečném produktu a zamezení nebezpečí kontaminace.
Podmínky fermentace byly zvoleny podle požadavků použitého kmene při fermentací jako je dostačující množství antihypertenzivních peptidů vzniklých k poskytnutí požadovaného efektu, Výběr vhodných podmínek, jako je teplota, pH a provzdušňování je součástí znalostí odborníků. Teplota může být například 30 až 45 °C.
Fermentace pokračuje tak dlouho, dokud nevznikne požadované množství antihypertenzivních peptidů. Délka fermentace je 20 až 30 hodin, výhodně 22 až 24 hodin.
Při fermentací vzniká směs různých peptidů. Pokud trvá fermentace dostatečně dlouho, pak jsou získány hlavně relativně malé di- a tripeptidy jako jsou Val-Pro-Pro (VPP) a Ile-Pro-Pro (IPP).
-3 CZ 302271 B6
Po fermcntaci je buněčná suspenze regenerována. Regenerace může být použita také v dalším kroku, například pro separaci nebo koncentraci peptidů. Buněčná suspenze může být také koncentrována, například odpařením za sníženého tlaku, nebo sušením, ať již částečně nebo komplet5 ně, jako je roztírání po desce, sušení a konečné rozmělnění na suchý prášek.
V některých případech, může být vhodné fermentovaný produkt předčistit, například odstranit kasein nebo všechny mléčné proteiny nanofiltrací. Způsob vhodný pro přečištění je známý a zahrnuje například různé srážecí a filtrační metody. Jedna použitelná metoda zahrnuje úpravu to pH fermentačního produktu na oblast, ve které se kasein vysráží, například při pH 4,6 a teplotě kolem 37 °C. Poté je kasein oddělen separátorem tvarohu, separačními síty, dekantací nebo použitím jiné metody. Druhá metoda zahrnuje ultrafiItrací fermentačního produktu při pH 3 až
3,5, při kterém jsou všechny proteiny uchovány v membráně a získaný permeát je blízký bezbílkovinné syrovátce. Srážení, které produkuje blízkou bezbílkovinnou nebo peptidy obsahující i5 syrovátku je dosaženo například přídavkem CaCl·, zahřátím nebo přidáním kyseliny. Pokud je nezbytné, je kaseinový prášek odstraněn centrifugací. Ostatní substance jako je laktosa, může být také odstraněna nanofiltrací, například enzymatickou hydrolýzou nebo fermentací.
Fermentační produkt, který může být předběžně zpracován vhodným způsobem, jako je syrovátko ka získána výše, je poté filtrován. Konvenční NF membrána, jako je Nanomax-50 (Millipore) nebo Desal 5 (Desal lne., USA) může být použita jako nanofiltraění membrána. Podmínky byly vybrány k uspokojení požadavků a instrukcí výrobců membrán. Výběr nanofiltraění membrány a podmínek přispívá ke složení solí a cukrů.
Podle předkládaného vynálezu je nanofiltrace prováděna pro požadovaný obsah sušiny nebo na poměr objemových koncentrací, který je obvykle nejvýše možný. Obsah sušiny je řádově mezi 20 až 40 % (objemově) a poměr objemových koncentrací je mezi 5 až 20. Koncentrát syrovátky může být zředěn vodou, kde je mnoho solí a mléčná kyselina odstraněna z koncentrátu nanofiltrací. Toto je jednoduchá a efektivní cesta úpravy množství soli v koncentrátu na požadovanou úro30 veň.
Malé peptidy, jako jsou tripeptidy IPP a VPP s okolo 350 D (molekulární váha), vzniklé fermentací a vykazující efekt na krevní tlak, jsou kompletně zachyceny nanofiltraění membránou.
Způsob podle předkládaného vynálezu také umožňuje kompletní odstranění laktózy: předchází nanofiltračnímu kroku, laktóza může být enzymaticky degradována, přičemž je hlavní část monosaeharidů odstraněna. Při nanofiltrací, zahrnuté do předkládaného vynálezu, prostoupí kyselina mléčná, malé molekuly obsahující dusík (močovina) a jednovazné kovy membránou. Obsah peptidů v produktu vzrůstá ve smyslu nanofiltrace. Následkem koncentrace vzrůstá obsah dvojit) vazných iontů, zvláště požadovaných vápenatých a hořečných iontů, zatímco relativní poměr jednovazných iontů, jako jsou sodné, draselné a chloridové ionty klesají. Zvláště sodné ionty vykazují významný efekt na rovnováhu tekutin a na krevní tlak v lidském těle, a tím snížení množství těchto škodlivých iontů může být považováno za značnou výhodu. Vápenaté a horečnaté ionty, jak je známo, přispívají ke snižování krevního tlaku a vysoký obsah těchto iontů je znač45 ně žádoucí.
Tabulka 1 ukazuje složky preparátu jak vznikají ve fermentačním kroku procesu podle předkládaného vynálezu a jak jsou zachovány v nanofiltračním kroku. Složení je reprezentováno prostřednictvím příkladů k ilustraci vynálezu a je produkováno fermentací odtučněného mléka kmenem Lactobacillus helveticus. Jak je ukázáno výše, také ostatní produkty mohou být použity jako výchozí materiály. Kromě toho, fermentační podmínky, nanofiltrace, ostatní přečištění a další úprava, pokud je požadována, přispívá k výslednému složení. Složení a výsledky nanofiltrace konečného produktu mohou být odlišné od zde prezentovaných.
-4CZ 302271 B6
Tabulka 1: Průběh nanofiltrace složek syrovátky obsahující antihypertenzivnípeptidy
Membrána: Nanomax 50; podmínky: 40 °C, 3OxlO5Pa, poměr objemových koncentrací C = 9, pH = 4,6
Molekulová váha D Retence (%)
IPP 361,4 100
VPP 347,4 100
mléčná kyselina 90, 1 24
Ca 40,1 68
Mg 24,3 72
K 39,1 11
Na 23,0 10
Cl 35,5 9
PO4 95,0 47
močovina 60,1 10
laktoza 342,3 63
Produkt koncentrovaný na antihypertenzivní peptidy a získaný způsobem podle předkládaného vynálezu může být použit sám o sobě jako antihypertenzivní činidlo. Produkt může být sušen io a použit ve formě prášku nebo lyofilizovaného přípravku. Podle předkládaného vynálezu může být produkt výhodně použit při výrobě funkčních potravin nebo dalších produktů.
V předkládaném dokumentu, je termín potrava používán v širokém významu, zahrnující poživatelné produkty, které mohou být v pevné, v gelovité nebo kapalné formě a zahrnuje jak hotové potraviny tak i produkty, kde je předmět vynálezu přidán v souvislosti se spotřebou, jako aditivní nebo podstatná složka produktu. Například, potraviny mohou být produktem mléčného průmyslu, masného průmyslu, potravinářského průmyslu, průmyslu vyrábějícího nápoje a cukrovamického průmyslu. Typické produkty zahrnují mléčné produkty, jako jsou jogurty, sražené mléko, měkký tvaroh, kvašené mléko, podmáslí a další fermentované mléčné nápoje, nezralý sýr, zralý sýr, lehká plniva atd. Nápoje, jako jsou syrovátkové nápoje, ovocné nápoje a piva, tvoří další významnou skupinu.
Produkt získaný podle předkládaného vynálezu je použit v množství postačujícím k poskytnutí požadovaného, antihypertenzivnímu efektu. Použité množství podstatně závisí na koncentračním stupni syrovátky, který je například 0,1 až 30 % (hmotnostně), výhodněji 5 až 15 % (hmotnostně), počítaný z váhy konečného produktu.
Způsob výroby podle předkládaného vynálezu, obzvláště pak nanofiltrační krok poskytuje základ pro přípravu produktu požadovaného typu a je možné redukovat obsah složek, které mají nepříz-5CZ 302271 B6 nivý efekt na chuť nebo odstranit tyto složky úplně a následkem toho uchovat nebo vylepšit chuť produktu.
Produkt obsahující antihypertenzívní peptidy může být přidán do potravin během výrobního pro5 cesu nebo do již hotových potravin. Tyto produkty obsahují výše popsané koncentrované produkty obsahující antihypertenzívní peptidy spolu s ostatními složkami které jsou obvyklé v potravinách a jejich chuť a použití úplně odpovídá konvenčním produktům.
Tento dvojstupňový proces podle předkládaného vynálezu poskytuje produkty, obsahující značně io vysoký obsah antihypertenzivních peptidů, pouze pokud jsou produkty připravovány fermentací.
Nezávisle na obsahu peptidů, dovoluje tento proces snadno upravovat obsah solí a jejich vzájemné poměry na požadovanou úroveň. Především je možné zvýšit obsah požadovaných dvojmocných iontů a redukovat obsah škodlivých jednomocných iontů. Proces je jednoduchý a laciný, což je vhodné pro výrobu ve velkém měřítku a tím se po této stránce liší od dříve používaných procesů.
Proteinová frakce získaná oddělením kaseinu nebo celkových proteinů může být použita stejně tak při výrobě antihypertenzivních peptidů, jako jsou například výše popsané mléčné produkty. Způsob výroby je celkově vysoce ekonomický.
Dále je předkládaný vynález popsán podrobněji, ve smyslu uvedení příkladů. Tyto příklady jsou prezentovány pro ilustraci předkládaného vynálezu a v žádném případě neomezují jeho obsah.
Příklady provedení vynálezu
Srovnávací příklad 1: Antihypertenzívní efekt produktu předkládaného vynálezu
3<> ACE inhibiční aktivita byla stanovena pro peptid IPP a VPP a pro známý ACE inhibitor, lisinopril, na základě inhibiční konstanty (Holmquist B., Bunning P., Riordan J. F. Kontinuální spektrofotometrická analýza konvertovacího enzymu angiotensinu, Analytical Biochemistry 95 (1979) 540-548). Čím nižší číslo, tím je účinnější ACE inhibitor. Výsledky byly následující: IPP 4,4x10 6, VPP l,8xlO“5 a lisinipril 7,5x10“. Jak bylo shledáno, IPP a VPP vykazovaly jasnou
ACE inhibiční aktivitu.
Antihypertenzívní efekt produktu podle předkládaného vynálezu byl prostudován od počátku, od kyselého mléčného produktu předkládaného vynálezu popsaného v Příkladu 5 k samovolnému hypertenzivnímu SHR u krys. Kontroly byly provedeny na třech odpovídajících skupinách krys,
4o kterým byla podána voda, mléko a komerčně dostupné kyselé mléko. Jako srovnávací skupina byla použita stejná skupina krys, které byl podán Japanease Calpis kyselý mléčný produkt (Calpis Food Industry Company Ltd.) Krevní tlak všech krys byl měřen v týdenních intervalech po dobu třináctí týdnů. Výsledky jsou uvedeny na Obrázku 1 jako vzrůst systolického tlaku v závislosti na čase. Jak je zřejmé z výsledku, produkt předkládaného vynálezu je schopen značně předcházet zvýšení hladiny krevního tlaku, jak je srovnáno s kontrolní skupinou a srovnávací skupinou.
Srovnávací příklad 2: Antihypertenzívní efekt produktu předkládaného vynálezu
Antihypertenzívní efekt předkládaného vynálezu může být také studován na lidských bytostech. V předběžných testech byla testovací skupina 12 nahodile vybraných osob, které denně přijmuly 1,5 dl produktu předkládaného vynálezu popsaného v Příkladu 5 a kontrolní skupina se skládala z 11 nahodile vybraných osob, které denně přijmuly stejné množství komerčně dostupného odtučněného kyselého mléka. Krevní tlak byl měřen v týdenních intervalech po dobu osmi týdnů.
Krevní tlak devíti osob v testovací skupině byl zřejmě redukován: systolický tlak okolo 13 %
-6CZ 302271 B6 v průměru a diastolický okolo 12 % v průměru, u jedné osoby byla pozorována menší redukce tlaku, okolo 5 % a u tří osob nebyly pozorovány žádné změny. V kontrolní skupině, bylo u dvou osob pozorováno zřejmé snížení krevního tlaku, kdežto u sedmi osob nebyly pozorovány žádné změny. Výsledky dvou osob nebyly zahrnuty. Výsledky předběžných testů jasně ukazovaly, že produkt předkládaného vynálezu je schopen značně předcházet zvýšení hladiny krevního tlaku u lidských bytostí.
Příklad 1: Příprava produktu obsahujícího antihypertenzivní peptidy to
Kmen Lactobacillus helveticus LBK 16-H byl kultivován v živné půdě při teplotě 37 °C po dobu 24 h a byl inokulován do rekonstituovaného mléka (10 %, objemových) pro přípravu inokulua. Po dvou kultivačních cyklech bylo inokulum (15 %, objemových) inokulováno do fermentačního prostředí, které bylo tvořeno 9 až 10 % (objemových) mléka zodtučněného mléčného prášku i5 a které bylo sterilizováno při 100 °C 10 minut. Fermentace byla provedena při 37 °C po dobu 22 až 24 hodin, za silného míchání. Produkt byl poté sušen a rozemlet nebo převeden jako takový na nanofíltrační zpracování.
U fermentovaného kyselého mléka získaného v množství (viz výše) bylo upraveno pH na 4,6 2o hydroxidem draselným a kasein byl odstraněn na nakloněné přepážce. Zbytkový kaseinový prášek byl odstraněn centrifugách GLL koncentrovaná laktáza (Biocon Ltd., Japan) byla přidána k syrovátce, která byla hydrolyzována při 5 °C po dobu 24 hodin, pro degradaci laktózy na monosacharidy. Získané množství syrovátky bylo předběžně upraveno nanofiHrací skrz Nanomax-50 membránu (Millipore).
Filtrace byla provedena při 10 °C a tlaku 30x10“5 Pa. Syrovátka byla filtrována tak, aby poměr objemových koncentrací byl roven 9. Složení získaného koncentrátu a suchého prášku z něho získaného je podáno v Tabulce 2.
Tabulka 2: Složení koncentrátu a suchého prášku obsahujícího antihypertenzivní peptidy
Peptidový koncentrát Suchý prášek
Sušina 30,0 94,5
Popel 3,69 13,3
Na (mg/kg) 130 470
K (mg/kg) 1600 5600
Ca (mg/kg) 10000 36000
Mg (mg/kg) 1700 6300
Cl Π (mg/kg) 550 2000
P (mg/kg) 6700 24500
IPP(mg/l) 510 2500
VPP(mg/l) 540 2700
-ΊCZ 302271 B6
Odstraněný kasein byl neutralizován na směs kaseinu s kovem a vysušen.
Příklad 2: Příprava produktu obsahujícího antihypertenzivní peptidy
Fermentace popsaná v Příkladu 1 byla opakována za použití (a) mléka obsahujícího tuk a (b) podmáslí místo odtučněného mléka. pH produktu z Příkladu 2 (b) bylo upraveno na pH 4,5 a kasein byl odstraněn koagulačním odstředivkou. K syrovátce byla přidána laktáza a prášek byl io odstraněn. Syrovátka byla poté nanofiltrována skrz NF membránu (Desal-5, Desal lne.), odpařena za sníženého tlaku a sušena. Složení získaného nanofiltračního koncentrátu bylo velmi podobné složení, které je uvedeno v Tabulce 2. Odstraněný kasein obsahoval velké množství syrovátky, ve kterém byl obsah antihypertenzivních peptidů stejný jako ve fermentovaném kyselém mléce.
Kasein byl použit jako takový v měkkém tvarohu, do kterého byly antihypertenzivní peptidy 15 zavedeny v tomto množství.
Příklad 3: Příprava produktu obsahujícího antihypertenzivní peptidy
2« Kmen LactohaciUus helveticus LBK 16-H byl kultivován v MRS živné půdě při 37 °C po dobu 24 hodin pro přípravu inokulua jak je popsáno v Příkladu 1. Inokulum bylo inokulováno do fermentaěního prostředí, které se skládalo z vodného roztoku kaseinu, sraženého kyselinou (2,8 %, objemových) a glukózou (2,5 %, objemových). Kasein byl rozpuštěn zvýšením pH na 6,7 roztokem 10% KOH (objemově). Kultivace byla provedena při 37 °C po dobu 24 hodin. Touto cestou byly produkovány antihypertenzivní peptidy (VPP, IPP) v množství odpovídajícím produkci za použití fermentovaného mléka, avšak zde je možno snadněji oddělit peptidy z kaseinového roztoku než z mléka. pH fermentované živné půdy bylo zvýšeno na pH = 4,6 roztokem hydroxidu draselného při teplotě 37 °C, kdy se kasein vysráží. Kasein byl oddělen koagulační odstředivkou a získaná syrovátka byla regenerována. Syrovátka obsahovala peptidy, kyselinu mléčnou a soli, ale ne laktózu. Hlavní část kyseliny mléčné, jednovazných iontů a glukózy v syrovátce bylo odstraněno nanofiltrací. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku na koncentrát nebo sušen na hodně koncentrovaný prášek, čímž byl získán konzervovaný preparát, obsahující antihypertenzivní peptidy.
Příklad 4: Příprava produktu obsahujícího antihypertenzivní peptidy
Fermentace byla opakována za použití (a) a směsi několika kmenů, tj. L. helveticus LB161, L. helveticus LBK-16 H a L. helveticus LB230, (b) a směsi kmenů L. helveticus LBK-16 H,
L. rhamnosus LC705 a (c) směsi kmenů L. helveticus LBK-16 H a Streptococcus thermophilus TI01. Všechny tyto kmeny byly dostupné ze sbírky mikroorganismů Valio Oy. Použité kultivační prostředí obsahovalo 9% (objemových) mléka a bylo sterilizováno při 100°C po dobu 15 minut. Pro přípravu inokulua byly kultivovány kmeny L. helveticus a L. rhamnosus LC705 v MRS živné půdě po dobu 24 hodin, při 37 °C, z čehož bylo l % (objemově) převedeno do mlé45 ka. Kmen thermophilus TI01 byl kultivován v LM17 živné půdě po dobu 18 h a při 37 °C, odkud bylo inokulum převedeno do mléka. První kultivace byla provedena kultivací všech kmenů odděleně v mléce, inkubací při 37 °C po dobu 24 hodin. Pro druhou kultivaci bylo 1 % (objemově) kmenů z každé směsi pipetováno do mléka, poté byla společná kultivace provedena při 37 °C po dobu 24 hodin. Třetí kultivace, 5 až 10 % (objemově) dříve získané společné kultivace bylo pipe50 továno do mléka a inkubováno při 37 °C po dobu 24 hodin. Množství VPP a IPP produkovaných kmeny L. helveticus LBK-16 H a rozdílnými směsmi mikroorganismů a koncentrace některých bakterií jsou uvedeny v Tabulce 3. Žádné rozdíly mezi směsmi nebo kmenem LBK-16 H nebyly pozorovány. Ostatní kmeny nezasahovaly do proteolýzy.
-8CZ 302271 B6
Tabulka 3: IPP a VPP množství produkované směsmi mikroorganismu
Mikroorganismus (snes) VPP mg/1 IPP mg/1 Končentra ce cfu/ml
L161+LBK-16+LB230, 5 % (objemově) 13-14 6-7
L161+LBK-16+LB230, 10 % (obj emově) 13-14 6-7
LBK16H+LC705, 5 % (objemově) 13-14 6-7
LBK16H+LC705, 10 % (objemově) 13-14 6-7
LBK16H+Str. T101, 10 % (objemově) 13-15 6-8 lxlO8
LBK16H (dno) 13-15 6-8 lxlO7
Příklad 5: Příprava fermentovaného mléčného produktu
Kyselé mléko obsahující antihypertenzivní peptidy bylo připraveno přidáním 3,5 % (objemově) peptidového koncentrátu získaného v Příkladu 3 ke komerčně dostupnému kyselému mléčnému io produktu. Složení získaného produktu je uvedeno v Tabulce 4, která současně ukazuje složení komerčně dostupného kyselého mléčného produktu, AB kyselé mléko (Valio Oy) pro srovnání.
Tabulka 4: Složení produktu podle předkládaného vynálezu a komerčně dostupného 15 fermentovaného mléčného produktu
AB kyselé mléko Biopep-produkt předkládaného vynálezu
Sušina (%) 9,0 9,8
Na (mg/kg) 390 380
K (mg/kg) 1700 1700
Ca (mg/kg) 1200 1510
Mg (mg/kg) 114 170
Cl (mg/kg) 1000 980
VPP (mg/1) 0 19
IPP (mg/1) 0 18

Claims (23)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    5 1. Způsob pro přípravu produktu obsahujícího antihypertenzivní peptidy, vyznačující se tím, že se fermentuje výchozí látka obsahující kasem sbakteriemi mléčného kvašení a provede se nanofiltrace získaného, peptidy obsahujícího fermentačního produktu.
  2. 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že výchozí látkou je kasein.
  3. 3. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že výchozí látkou je mléko nebo produkt založený na mléce.
  4. 4. Způsob podle kteréhokoliv z nároků laž3, vyznačující se tím, že při fermentaci i ? se použije směs bakterií mléčného kvašení nebo dalších mikroorganismů.
  5. 5. Způsob podle jakéhokoliv z nároků 1 až 4, vyznačující se tím, že při fermentaci se použije mikroorganismus Lactobacillus helveticus.
    ao
  6. 6. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že mikroorganismem je kmen Lactobacillus helveticus LBK-16H.
  7. 7. Způsob podle kteréhokoliv z nároků laž6, vyznačující se tím, že navíc zahrnuje odstranění kaseinu z fermentačních produktů, které předchází nanofiltraci,
  8. 8. Způsob podle jakéhokoliv z nároků 1 až 6, vyznačující se tím, že navíc zahrnuje odstranění všech mléčných proteinů z fermentačních produktů, které předchází nanofiltraci.
  9. 9. Způsob podle kteréhokoliv z nároků laž8, vyznačující se tím, že navíc zahmu30 je odstranění laktózy z fermentačního produktů, které předchází nanofiltraci.
  10. 10. Produkt obsahující antihypertenzivní peptidy, vyznačující se tím, že má vysoký obsah antihypertenzivních peptidů a je připraven procesem, kde se fermentuje výchozí látka obsahující kasein s baktériemi mléčného kvašení, a kde je provedena nanofiltrace pro získání
    35 peptidu z fermentačního produktu.
  11. 11. Produkt podle nároku 10, vyznačující se tím, že se skládá ze směsi peptidů a krátkými řetězci.
    40
  12. 12. Produkt podle nároku 10 nebo 11, vyznačující se tím, že peptidy jsou di- nebo tri-peptidy.
  13. 13. Produkt podle kteréhokoliv z nároků 10 až 12, vyznačující se tím, že obsahuje vysoký obsah tripeptidů, obzvláště Ile-Pro-Pro a/nebo Val-Pro-Pro.
  14. 14. Produkt podle kteréhokoliv z nároků 10 až 13, vyznačující se tím, že obsahuje vysoký obsah dvojmocných kationtů.
  15. 15. Produkt podle kteréhokoliv z nároků 10 až 14, vyznačující se nízký obsah jednomocných kationtů.
    tím, že obsahuje
  16. 16. Produkt podle kteréhokoliv z nároků 10 až 15, obsah sušiny 20 až 60 obj. %.
    vyznačující se tím, že vykazuje
    - 10CZ 302271 B6
  17. 17. Produkt podle kteréhokoliv z nároků 10 až 16, vyznačující se tím, zeje vysušen na prášek a vykazuje obsah sušiny přesahující 90 obj. %.
  18. 18. Použití produktu podle kteréhokoliv z nároků 10 až 17 jako antihypertenzivního činidla.
  19. 19. Použití produktu podle kteréhokoliv z nároků 10 až 17 pří výrobě poživatelných látek.
  20. 20. Použití produktu podle nároku 19 v mlékařském průmyslu, potravinářském průmyslu, masném průmyslu, cukrovamickém průmyslu, v průmyslu výroby nápojů a v pekařství.
  21. 21. Požíváte Iný produkt, vyznačující se tím, že obsahuje produkt podle kteréhokoliv nároku 10 až 17.
  22. 22. Poživatelný produkt podle nároku 21, vyznačující se tím, že existuje ve fermen15 tovaných mléčných produktech.
  23. 23. Poživatelný produkt podle nároku 21, vyznačující se tím, že existuje v nápojích, přednostně v syrovátkových nápojích, ovocných nápojích nebo pivě.
CZ20021431A 1999-11-01 2000-10-30 Zpusob výroby produktu obsahujícího antihypertenzivní tripeptidy CZ302271B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI992360A FI113741B (fi) 1999-11-01 1999-11-01 Menetelmä verenpainetta alentavia peptidejä sisältävän tuotteen valmistamiseksi

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20021431A3 CZ20021431A3 (cs) 2002-08-14
CZ302271B6 true CZ302271B6 (cs) 2011-01-19

Family

ID=8555541

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20021369A CZ294146B6 (cs) 1999-11-01 2000-10-30 Lactobacillus helveticus LBK@�@ H a jeho použitíŹ bakteriální preparát a jedlý produkt
CZ20021431A CZ302271B6 (cs) 1999-11-01 2000-10-30 Zpusob výroby produktu obsahujícího antihypertenzivní tripeptidy

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20021369A CZ294146B6 (cs) 1999-11-01 2000-10-30 Lactobacillus helveticus LBK@�@ H a jeho použitíŹ bakteriální preparát a jedlý produkt

Country Status (23)

Country Link
US (2) US6890529B1 (cs)
EP (2) EP1226230B1 (cs)
JP (2) JP3695648B2 (cs)
KR (2) KR100718709B1 (cs)
CN (2) CN1164761C (cs)
AT (2) ATE266735T1 (cs)
AU (2) AU769432B2 (cs)
CA (2) CA2387738C (cs)
CZ (2) CZ294146B6 (cs)
DE (2) DE60016959T2 (cs)
DK (2) DK1226267T3 (cs)
EE (2) EE200200231A (cs)
ES (2) ES2220557T3 (cs)
FI (1) FI113741B (cs)
HR (2) HRP20020377B1 (cs)
HU (2) HUP0203185A3 (cs)
NO (2) NO20022062L (cs)
NZ (2) NZ518470A (cs)
PL (2) PL364790A1 (cs)
PT (2) PT1226267E (cs)
RU (2) RU2270855C2 (cs)
WO (2) WO2001032836A1 (cs)
ZA (2) ZA200203172B (cs)

Families Citing this family (53)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FI113741B (fi) * 1999-11-01 2004-06-15 Valio Oy Menetelmä verenpainetta alentavia peptidejä sisältävän tuotteen valmistamiseksi
FI112031B (fi) 2002-02-25 2003-10-31 Valio Oy Biologisesti aktiivisen tuotteen uusi käyttö
WO2003102195A1 (en) 2002-06-04 2003-12-11 Dsm Ip Assets B.V. Protein hydrolysate rich in tripeptides
AU2003260281B2 (en) 2002-08-09 2007-11-29 Chr. Hansen A/S Process for preparing peptides with anti-hypertensive properties
EP1581062A1 (en) * 2003-01-06 2005-10-05 Unilever N.V. Fermented milk product comprising tripeptide vpp and/or ipp
TWI411441B (zh) * 2003-03-18 2013-10-11 Suntory Holdings Ltd 血管收縮素轉化酶抑制性肽類
US7718171B2 (en) 2003-04-07 2010-05-18 Chr. Hansen A/S Reducing heart rate in mammals using milk derived fermentation products produced using Lactobacillus helveticus
US7785824B2 (en) 2003-05-05 2010-08-31 Conopco Inc. Hydrolysed casein product comprising tripeptides IPP and/or VPP
EP1727440A1 (en) * 2004-03-19 2006-12-06 Campina Nederland Holding B.V. Method of preparing a food ingredient and food product having angiotensin-i-converting enzyme inhibiting properties and products thus obtained
EP1736164A4 (en) 2004-03-31 2009-06-24 Calpis Co Ltd AGENT TO PREVENT OR REMOVE HEPATOPATHY AND FUNCTIONAL FEED TO PREVENT OR DELETE HEPATOPATHY
US7862808B2 (en) 2004-07-01 2011-01-04 Mead Johnson Nutrition Company Method for preventing or treating respiratory infections and acute otitis media in infants using Lactobacillus rhamnosus LGG and Bifidobacterium lactis Bb-12
JP4723501B2 (ja) * 2004-07-05 2011-07-13 カルピス株式会社 ペプチド混合物の製造法、抗高血圧ペプチド含有発酵乳の製造法及び抗高血圧ペプチド製剤の製造法
US20070207944A1 (en) * 2004-07-12 2007-09-06 Luppo Edens Blood Pressure Lowering Oligopeptides
EP1685764A1 (en) 2005-01-27 2006-08-02 Globus Egg Sciences B.V. Anti-hypertensive functional food products
JP2008511593A (ja) 2004-09-03 2008-04-17 セーホーエル．ハンセン アクティーゼルスカブ 受容体リガンドを含む発酵乳又は植物性タンパク質及びその使用
FR2876876B1 (fr) * 2004-10-22 2007-02-16 Gervais Danone Sa Protection d'ingredients alimentaires bioactifs par l'utilisation de microorganismes presentant une capacite de metabolisation reduite
FR2876874B1 (fr) * 2004-10-22 2007-02-16 Gervais Danone Sa Protection d'ingredients alimentaires bioactifs par l'utilisation d'ingredients leurres
CN101084004A (zh) * 2004-12-22 2007-12-05 帝斯曼知识产权资产管理有限公司 单个酶促步骤中的血压降低寡肽
WO2006084560A1 (en) * 2005-02-09 2006-08-17 Unilever N.V. Composition comprising peptide
AU2006217901B2 (en) * 2005-02-24 2011-09-29 Dsm Ip Assets B.V. Blood pressure lowering peptides from glycomacropeptide
US7303745B2 (en) 2005-04-15 2007-12-04 Bristol-Myers Squibb Company Method for preventing or treating the development of respiratory allergies
JP5544088B2 (ja) * 2005-11-28 2014-07-09 ディーエスエム アイピー アセッツ ビー．ブイ． クリーンな味を産み出す酵素調製物
TW200808338A (en) * 2006-02-14 2008-02-16 Calpis Co Ltd Vasodilator and functional food
EP1992352B1 (en) * 2006-02-14 2014-04-30 Calpis Co., Ltd. Agent for use in the prophylaxis of atherosclerosis
ATE421572T1 (de) * 2006-02-20 2009-02-15 Gervais Danone Sa Neue stämme von lactobacillus helveticus
ES2384096T3 (es) * 2006-02-20 2012-06-29 Compagnie Gervais Danone Cepas de Lactobacillus helveticus que no fermentan la lactosa
PT1820850E (pt) * 2006-02-20 2009-05-29 Gervais Danone Sa Novas estirpes de lactobacillus helveticus
CN100370019C (zh) * 2006-04-21 2008-02-20 江南大学 一种具有抗高血压作用的植物乳杆菌cw006
RU2457852C2 (ru) * 2006-05-15 2012-08-10 Валио Лтд Новое применение терапевтически эффективных пептидов
CA2652388A1 (en) * 2006-05-15 2007-11-22 Valio Ltd New use of therapeutically useful peptides
AU2007292786B2 (en) * 2006-09-04 2013-02-14 Megmilk Snow Brand Co., Ltd. Agent for accelerating the increase in and/or preventing the decrease in blood adiponectin level, and visceral fat accumulation inhibitor
PL1915913T3 (pl) * 2006-10-23 2016-06-30 Nestec Sa Modulowanie smaku oraz aromatu w mlecznych produktach poprzez biotransformację
ES2351230T3 (es) * 2007-02-02 2011-02-01 May, Amadeus Alexander Producto con microorganismos prebióticos vivos.
US11759477B2 (en) 2007-02-26 2023-09-19 Heartbeet Ltd. Compositions of nitrates and methods of use thereof
US10842813B2 (en) 2007-02-26 2020-11-24 Heartbeet Ltd Compositions of nitrates and methods of use thereof
MX2009010428A (es) * 2007-03-27 2009-12-01 Calpis Co Ltd Agente profilactico para insuficiencia renal.
JP2011524744A (ja) * 2008-06-12 2011-09-08 ネステク ソシエテ アノニム 降圧ペプチドを産生するためのラクトバチルス・ヘルベティカス株
DE102008032828A1 (de) 2008-07-02 2010-01-07 Technische Universität Dresden Tryptophanhaltige Peptide aus alpha-Lactalbumin mit blutdrucksenkender und vasoprotektiver Wirkung für biofunktionelle Lebensmittel
FI122531B (fi) * 2009-09-30 2012-03-15 Valio Oy Juusto ja menetelmä sen valmistamiseksi
CN102786579B (zh) * 2012-07-17 2014-07-09 上海交通大学 抗高血压活性肽vip
CN102786580A (zh) * 2012-07-17 2012-11-21 上海交通大学 抗高血压活性肽ivp
RU2580052C1 (ru) * 2014-12-24 2016-04-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" Штамм lactobacillus helveticus вкпм в-11176, полученный на доступных питательных средах
RU2577112C1 (ru) * 2014-12-25 2016-03-10 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Горский государственный аграрный университет" Штамм lactobacillus helveticus вкпм в-11175, полученный на доступных питательных средах
EP3788881B1 (en) 2016-12-02 2022-07-06 Fairlife, LLC Non-browning lactose-free milk powder and methods of making same
RU2685912C1 (ru) * 2018-03-14 2019-04-23 Федеральное государственное автономное научное учреждение "Научно-исследовательский институт хлебопекарной промышленности" Штамм бактерий lactobacillus amylolyticus, используемый для приготовления термофильной заквашенной заварки
RU2728171C2 (ru) * 2018-11-08 2020-07-28 Общество с ограниченной ответственностью "Инновационные биотехнологии" (ООО "Инбиотех") Штамм бактерий Lactobacillus helveticus T-5068, используемый в качестве закваски прямого внесения для приготовления кисломолочных продуктов
CN109517763B (zh) * 2018-12-27 2022-03-22 内蒙古农业大学 瑞士乳杆菌h11及其应用
TWI713972B (zh) * 2019-01-14 2020-12-21 大江生醫股份有限公司 改善呼吸道健康之益生菌株及其組合物與用途
US20230180778A1 (en) * 2020-04-02 2023-06-15 Fatah Bashir Ahtesh Milk fermentation process
CN112029784A (zh) * 2020-09-16 2020-12-04 内蒙古农业大学 一个与蛋白水解能力相关的基因及基于该基因的高蛋白水解能力瑞士乳杆菌的筛选方法
KR102684805B1 (ko) 2023-12-20 2024-07-12 푸른하늘환경주식회사 우수 유출수의 정화 처리 장치
KR102687298B1 (ko) 2023-12-20 2024-07-22 푸른하늘환경주식회사 비점오염물질 저감 및 우수 정화 장치
CN117986337B (zh) * 2024-02-02 2024-08-16 杭州御寿生物科技有限公司 一种提高免疫力的益生菌组合物以及在治疗疾病中的应用

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5449661A (en) * 1992-07-23 1995-09-12 The Calpis Food Industry Co., Ltd. Angiotensin converting enzyme inhibitor and method for preparing same
GB2294191A (en) * 1994-10-06 1996-04-24 Waterford Creamery Ltd Cheese manufacture
EP0737690A2 (en) * 1995-04-10 1996-10-16 The Calpis Food Industry Co., Ltd. Antihypertensive agent and method for preparing same

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2483748A1 (fr) * 1980-06-06 1981-12-11 Corning Glass Works Procede d'hydrolyse du lactose contenu dans les lactoserums a l'aide de lactase immobilisee
SU1264889A1 (ru) * 1984-07-25 1986-10-23 Киевский Ордена Трудового Красного Знамени Технологический Институт Пищевой Промышленности Способ производства молочно-белкового продукта дл плавлени
JPS6153216A (ja) 1984-08-23 1986-03-17 Rikagaku Kenkyusho 高血圧症予防治療剤
JP2782153B2 (ja) * 1992-11-09 1998-07-30 カルピス株式会社 アンジオテンシン変換酵素阻害ペプチドの製造法
JP2824821B2 (ja) 1993-11-04 1998-11-18 カルピス株式会社 乳酸菌及び発酵乳製品
JPH09188694A (ja) 1996-01-10 1997-07-22 Otsuka Shokuhin Kk ペプチド、アンジオテンシン変換酵素阻害組成物及びその製法
JP3746556B2 (ja) 1996-02-09 2006-02-15 カルピス株式会社 プラスミド及びプラスミドベクター
US5854029A (en) 1996-08-02 1998-12-29 Calpis Co., Ltd. Method for preparing antihypertensive agent
JP4727770B2 (ja) * 1997-09-26 2011-07-20 カルピス株式会社 尿中カテコールアミン低下、尿中ノルアドレナリン低下、尿中ドーパミン低下及びＦｉｓｃｈｅｒ比低下の少なくとも１つの軽減剤
JP3028411B2 (ja) 1997-09-26 2000-04-04 カルピス株式会社 トリペプチド高生産性ラクトバチルス・ヘルベチカス乳酸菌
GB9720633D0 (en) * 1997-09-29 1997-11-26 Univ Bristol BHV-2 vector
FI104783B (fi) 1998-02-12 2000-04-14 Valio Oy Herasuolajauhe, menetelmä sen valmistamiseksi ja sen käyttö
FI113741B (fi) * 1999-11-01 2004-06-15 Valio Oy Menetelmä verenpainetta alentavia peptidejä sisältävän tuotteen valmistamiseksi
US6514941B1 (en) * 1999-12-10 2003-02-04 Campina Melkunie B.V. Method of preparing a casein hydrolysate enriched in anti-hypertensive peptides

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5449661A (en) * 1992-07-23 1995-09-12 The Calpis Food Industry Co., Ltd. Angiotensin converting enzyme inhibitor and method for preparing same
GB2294191A (en) * 1994-10-06 1996-04-24 Waterford Creamery Ltd Cheese manufacture
EP0737690A2 (en) * 1995-04-10 1996-10-16 The Calpis Food Industry Co., Ltd. Antihypertensive agent and method for preparing same

Also Published As

Publication number Publication date
HUP0203185A3 (en) 2005-07-28
ES2234686T3 (es) 2005-07-01
RU2270855C2 (ru) 2006-02-27
AU777795B2 (en) 2004-10-28
ES2220557T3 (es) 2004-12-16
CA2388354A1 (en) 2001-05-10
KR20020060220A (ko) 2002-07-16
WO2001032836A1 (en) 2001-05-10
HUP0203185A2 (hu) 2003-01-28
DK1226267T3 (da) 2004-09-20
NO20022062L (no) 2002-06-28
US6890529B1 (en) 2005-05-10
PL364790A1 (pl) 2004-12-13
CZ20021431A3 (cs) 2002-08-14
WO2001032905A1 (en) 2001-05-10
EE200200231A (xx) 2003-06-16
HRP20020378B1 (en) 2005-06-30
PL355670A1 (pl) 2004-05-04
DE60010742T2 (de) 2005-05-12
HUP0203256A3 (en) 2005-11-28
RU2276689C2 (ru) 2006-05-20
NZ518493A (en) 2003-03-28
EP1226230B1 (en) 2004-12-22
KR100704441B1 (ko) 2007-04-24
JP2003513636A (ja) 2003-04-15
KR20020064895A (ko) 2002-08-10
JP4172681B2 (ja) 2008-10-29
EP1226267B1 (en) 2004-05-12
HUP0203256A2 (hu) 2003-01-28
CN1164761C (zh) 2004-09-01
KR100718709B1 (ko) 2007-05-16
ZA200203179B (en) 2003-07-22
NO20022062D0 (no) 2002-04-30
NO20022061D0 (no) 2002-04-30
US6972282B1 (en) 2005-12-06
CZ294146B6 (cs) 2004-10-13
PT1226267E (pt) 2004-08-31
EE05461B1 (et) 2011-08-15
CA2387738C (en) 2008-09-16
DK1226230T3 (da) 2005-04-04
CN1387564A (zh) 2002-12-25
HRP20020377A2 (en) 2003-08-31
NO330951B1 (no) 2011-08-22
DE60010742D1 (de) 2004-06-17
JP3695648B2 (ja) 2005-09-14
PL204119B1 (pl) 2009-12-31
CN1387577A (zh) 2002-12-25
HU226200B1 (en) 2008-06-30
HRP20020378A2 (en) 2003-08-31
FI19992360L (fi) 2001-05-02
DE60016959T2 (de) 2005-12-22
PT1226230E (pt) 2005-04-29
CN1197956C (zh) 2005-04-20
AU769432B2 (en) 2004-01-29
DE60016959D1 (de) 2005-01-27
NZ518470A (en) 2003-03-28
EP1226230A1 (en) 2002-07-31
CZ20021369A3 (cs) 2002-07-17
ATE285470T1 (de) 2005-01-15
EE200200230A (et) 2003-06-16
EP1226267A1 (en) 2002-07-31
AU1149901A (en) 2001-05-14
CA2387738A1 (en) 2001-05-10
AU1149801A (en) 2001-05-14
FI113741B (fi) 2004-06-15
ZA200203172B (en) 2003-09-23
JP2003513621A (ja) 2003-04-15
HRP20020377B1 (en) 2005-06-30
ATE266735T1 (de) 2004-05-15
NO20022061L (no) 2002-06-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1226267B1 (en) Process for producing a product containing antihypertensive tripeptides
Takano Anti-hypertensive activity of fermented dairy products containing biogenic peptides
Minervini et al. Fermented goats’ milk produced with selected multiple starters as a potentially functional food
JP2011504363A (ja) 改良された生理活性ペプチドの生成
US20080292750A1 (en) Method of Preparing a Food Ingredient and Food Product Having Angiotensin-I-Converting Enzyme Inhibiting Properties and Products Thus Obtained
US10092619B2 (en) Composition comprising peptides made by Lactococcus lactis strains
MXPA05007267A (es) Producto de leche fermentada que comprende tripeptidos val-pro-pro (vpp) e ile-pro-pro (ipp).
JPH1033115A (ja) ホエー飲料とその製造法
JP4242293B2 (ja) 骨の強化および骨形成を増加させるための組成物
TW200800047A (en) Method for producing fermented milk and fermented milk food and beverage
EP1640447A1 (en) BIOACTIVE PEPTIDE-PRODUCING STRAINS OF i ENTEROCOCCUS FAECALIS /i , BIOACTIVE PEPTIDES AND APPLICATIONS THEREOF
FI120267B (fi) Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten peptidien valmistamiseksi
KR20070009626A (ko) 안지오텐신-ｉ-전환 효소를 억제하는 성질을 갖는 식품원료 및 식품을 제조하는 방법 및 그로부터 수득된 제품
Acharya Production of functional food, Fruit ravioli with antihypertensive peptides

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of fee

Effective date: 20110414