CN1150004C - 用辛酸钠作分离剂的低温白蛋白分级分离法 - Google Patents

用辛酸钠作分离剂的低温白蛋白分级分离法 Download PDF

Info

Publication number
CN1150004C
CN1150004C CNB951090518A CN95109051A CN1150004C CN 1150004 C CN1150004 C CN 1150004C CN B951090518 A CNB951090518 A CN B951090518A CN 95109051 A CN95109051 A CN 95109051A CN 1150004 C CN1150004 C CN 1150004C
Authority
CN
China
Prior art keywords
albumin
sodium caprylate
plasma
mixture
proteins
Prior art date
Application number
CNB951090518A
Other languages
English (en)
Other versions
CN1120439A (zh
Inventor
R・A・田诺尔德
R·A·田诺尔德
Original Assignee
美国拜尔公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority to US08/288,180 priority Critical patent/US5561115A/en
Application filed by 美国拜尔公司 filed Critical 美国拜尔公司
Publication of CN1120439A publication Critical patent/CN1120439A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1150004C publication Critical patent/CN1150004C/zh

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K14/00Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/76Albumins
    • C07K14/765Serum albumin, e.g. HSA
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL, OR TOILET PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/829Blood
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/827Proteins from mammals or birds
    • Y10S530/829Blood
    • Y10S530/83Plasma; serum

Abstract

本发明涉及通过将辛酸钠在较低温度加至Cohn组分II+III或IV-1流出液中能制备浊度水平不高于5NTU的高度稳定的源自血浆的治疗用白蛋白溶液的方法。辛酸钠起分离剂的作用将白蛋白与不想要的蛋白质分开。由于它往往是净化剂分子,白蛋白通过用含辛酸钠的缓冲液透析滤过而选择性地被稳定,因而能确保白蛋白单体含量高且浊度低。选择性稳定作用所需的辛酸钠的量由白蛋白分子上可提供的结合位置的量来定。

Description

用辛酸钠作分离剂的低温 白蛋白分级分离法

本发明总的来讲涉及源自血浆的治疗用蛋白质溶液的制备方法,具体来讲,本发明涉及由血清或血浆制备选择性稳定的动物或人血清白蛋白(HSA)、α-1蛋白酶抑制剂(α-1PI)和抗凝血酶III(ATIIII)。

Cohn分级分离法最初发表是在1946年,在美国仍是加工血浆的一个基本方法,该方法在白蛋白的制备时利用乙醇、一定的温度、pH、蛋白质浓度、离子强度和时间以使不想要的蛋白质不溶解(Cohn等人,J.Am.Chem.Soc.68,459(1946))。T.Gerelough在Cohn分级分离过程中连续使用95%乙醇大大减少所需的生产用体积,因而降低了相应的生产成本。Gerelough法在美国也是一个血浆分级分离的认可的标准方法(美国专利2710294,2710293(1955))。在欧洲,H.Nitschamann和P.Kistler描述了加工白蛋白的更简单的方法,但所得到的产品不能满足当时美国一些机构施行的规定的指标(Vox Sang.,5,272(1960))。

在美国,自从Cohn等人1946年发表了Cohn分级分离法以来,血浆的分级分离法一直采用Cohn技术。因此,二十多年来,制造厂商对寻求替代的白蛋白分级分离技术既无兴趣,亦无必要(M.Steinbuch,Vox Sang.,23,92(1972))。此外,由于常规的分级分离技术能制得可成功地用巴氏灭菌法(在60℃加热10小时)使病毒失活的白蛋白,因此白蛋白的制造厂商在寻求替代的和改进的分级分离法方面无积极性并且非常谨慎。

1972年,M.Steinbuch开发出除乙醇外能通过沉淀分离血浆蛋白质的几种试剂。Steinbuch用Cohn组分III作原料,研究了以前用于稳定白蛋白(M.Steinbuch,Vox Sang.23:92-106,1972,Yu L.Hao,美国专利4,222,934,1980)随后将脂质包膜病毒灭活的辛酸的沉淀能力(Seng等人,U.S 4939176,1990)。结果,科学家们后来开发出几种用于纯化IgG、IgA、α-1酸性糖蛋白和前白蛋白的技术,同时发现该沉淀反应高度依赖于温度和pH。

在制备人免疫球蛋白时,辛酸通常被认为是在pH4.8时对大多数血浆蛋白质有效的沉淀剂,只要参数例如温度和离子强度是最适宜的(Steinbuch等人,Preparative Biochemistry,3(4),363-373(1973))。于是Steinbuch等人描述了用辛酸从哺乳动物血清中分离IgG的方法,指出大批的无免疫性球蛋白沉淀最好在略带酸性的pH但不低于4.5的pH下获得(Steinbuch等人,Arch.Biochem.Biophys.,134,279-294(1969))。

Habeeb等人用辛酸沉淀以获得不含凝聚物、血纤维蛋白溶酶和血纤维蛋白溶酶原、抗补体活性低且储存稳定的源自血浆的IgG。(Preparative Biochemistry,14(1),1-17(1984))。IgA还能基于IgA的溶解性在辛酸存在下和pH4.8的条件下由Cohn组分III作为常规分组分离的副产物制得(Pejaudier等人,Vox Sang.23,165-175(1972))。此外,组分III还能用作制备富IgM血浆部分的原料。

辛酸钠也已用于纯化白蛋白。按照这些方法,辛酸钠被加至生产用血浆中,并在该工业生产液流暴露于高温时保护白蛋白。温度过高不仅能使生产液流的球蛋白变性,而且常常产生污染物新抗原(Schneider等人,美国专利4,156,681(1979);Institute Merieux,美国专利3992367)。

Cohn组分III还用辛酸处理以沉淀有助于血浆铜转运的α球蛋白-血浆铜蓝蛋白。用这种技术制备血浆铜蓝蛋白能避免牵涉乙醇或丙酮的变性步骤,但该方法仅已用于马、骡、兔、山羊、绵羊和狒狒的血浆(M.Steinbuch,Vox Sang.,23,92-106(1972))。

目前,各种技术和专利文献中包含无数加入辛酸钠作稳定剂的制备白蛋白的方法和涉及辛酸沉淀以由源自血浆的Cohn组分III获得免疫球蛋白的纯化技术。但是,我们尚未见到在制备白蛋白时用辛酸钠作分离剂(partitioning agent)以将白蛋白与不想要的球蛋白和生产废料分开的文献公开。

我们还出乎意料地发现了用辛酸钠将白蛋白与不想要的物质分开而不使用乙醇沉淀剂来制备白蛋白的方法的显著的优点。第一,辛酸钠分离缩短了常规白蛋白制备方法的时间,这减少了产品处理环节,相应地将白蛋白的回收率提高25%或25%以上,所得到的白蛋白成品基本上不含铝并呈现出不低于97%的单体浓度。第二,辛酸钠分离显著减少了完成白蛋白制备所需的时间,因而将生产相关设备成本降低至少65%。第三,辛酸钠分离提高了由Cohn组分II+III制备α-1PI和AT-III的收率,并且通常比制备血浆产品的常规方法能效率高。最后一点,也许是最重要的一点,辛酸钠分离显著减少了乙醇的使用,并且在白蛋白的制备过程中能完全避免使用丙酮,这就大大避免了有毒和对环境有害的溶剂残留物污染我们的环境。下面详细论述我们的发明。

本发明提供用辛酸钠作分离剂制备基本上是单体的不含铝的白蛋白的方法。由本发明方法制得的源自血浆的治疗用溶液包括白蛋白溶液、α-1蛋白酶抑制剂和抗凝血酶III。在本发明方法中,优选地,辛酸钠在约20-30℃的温度下被加至含白蛋白的溶液中。所述含白蛋白的溶液的pH为约5.25-5.6。辛酸钠优选以约0.04M-0.08M辛酸钠的量被加至含白蛋白的溶液中。优选将辛酸钠处理的溶液培养约2-8小时。

在本发明方法的一优选实施方案中,当加入辛酸钠以达到约0.04M-0.08M浓度时,将含白蛋白的溶液的pH调至约5.4-5.6、温度升至约20-30℃并混合,培养约2-8小时。优选地,将含白蛋白的溶液调至约pH5.4,加热至约30℃,用约0.06M的辛酸钠处理,并培养约6小时。

本发明还提供按照本发明的方法制得的白蛋白产品。所述白蛋白产品优选地在药学上可接受的载体中,再优选地其适宜于静脉内用药,再优选地其铝浓度在0-20ppb范围内,再优选地其白蛋白含量约为1-40重量%,最优选其pH为5.4-5.6。

辛酸钠的使用在Cohn组分II+III或组分IV-1流出液步骤中插入常规血浆分级分离。按照本发明,将辛酸钠加至包括期望的白蛋白和不期望的非白蛋白蛋白质和污染物的胶体流出液中。

将温度和pH升高后,将混合物培养约6小时,使得辛酸钠起分离剂的作用而将该胶体溶液分成含白蛋白的上清液和含不想要的非白蛋白蛋白质(例如球蛋白)和生产废料的分散相。然后将辛酸钠处理过的的悬浮液离心,并加入deae sephadex帮助过滤。接着将悬浮液过滤,超滤至12%蛋白质,用0.02M辛酸钠透析滤过,收集,并混合用于灭菌过滤。当该灭菌产品通过无菌检验时,将该白蛋白装入最终的容器中。

图1是区分本发明和按照Cohn分级分离工艺的常规的白蛋白制备方法的流程图。该流程图仅着重指出了为区分本发明的简化的白蛋白制备法和费时的Cohn分级分离技术所必需的那些Cohn分级分离步骤。用于该在先技术方法的加工时间基于20厦普勒斯离心机,大多数其它的时间均基于1000升加工用血浆。

术语的定义:

1.分离剂本文中所用的分离剂是指这样的物质,即当在制备白蛋白的过程中将其加至血浆蛋白质混合物中时能形成由两个分开的相组成的胶体悬浮液,所述两相为:含白蛋白的上清液;和含附聚的蛋白质颗粒、包括α和β球蛋白的乳光分散相。

2.沉淀剂本文中所用的沉淀剂是指这样的物质、即当在制备白蛋白的过程中将其加至血浆蛋白质混合物中时,若该溶液pH在特定范围之内则能可逆性地使溶液物质不溶。

3.非白蛋白蛋白质本文中所用的非白蛋白蛋白质是指所有的非白蛋白蛋白质,主要是α、β和γ球蛋白以及酸性糖蛋白。

4.生产废料本文中所用的生产废料是指非蛋白质污染物,主要包括多价金属离子例如铝,和生产用溶剂例如乙醇。

5.含白蛋白的溶液本文所用的含白蛋白的溶液是指Cohn组分II+III流出液或Cohn组分IV-1流出液。

优选的实施方案:材料:1.本发明的原料Cohn组分-IV-1流出液按照常规Cohn血浆分级分离法制备,并得自由北卡罗来那Clayton的Miles Inc.分级分离的源血浆。

2.源血浆由按照Miles流动筛选法(Miles′current screeningprocedure)的全筛选血浆(fully screened plasma)制得,这是在Miles许可下在北卡罗来那Clayton的实验室中进行的。

3.仅评估最后加热的样品以对此方法提供支持。本领域技术人员识别到在巴氏灭菌的最终处理过程中的蛋白质迁移不能预测现今的试验工艺。

4.CBBR和外国政府的规定所需的试验构成最终容器试验标准。方法:1.纯度测定A.醋酸纤维素电泳(CAE)用于存在除白蛋白以外的蛋白质的情况。

B.高效液相色谱(HPLC)用于测定凝聚物的存在和其它蛋白质的分子量。

C.白蛋白滤液浊度用Hach浊度计以国家浊度单位(National Turbi-dity Units)来测定。

实施例I改进的白蛋白制备法以四个标准的Cohn分级分离步骤开始。首先,汇集人血浆,使其融化并将其离心。收集形成的冷沉淀物并对其进行处理以制备因子VIII浓缩液,同时流出液的温度被降至约-2℃,期间加入含pH4.0乙酸缓冲剂(缓冲剂A)的95%乙醇。

加完乙醇后,当用盐水或蒸馏水稀释1∶5时,所得到的悬浮液Cohn组分I为约8%乙醇(体积),pH7.3。大部分血浆血纤维蛋白原在2个小时反应时间内沉淀。

将组分I8%离心以除去形成的固体。然后通过缓慢加入含缓冲剂A的乙醇使流出组分I成为组分II+III20%,并将其温度降至约-5℃。最终的血浆pH为约6.8。约2小时反应时间后,将组分II+III20%离心,分离出含Y球蛋白部分的粗II+III糊状物。以后对该糊状物进行处理以制备IGIV的ISG。

然后将所得到的Cohn组分II+III流出液用冷乙酸缓冲剂处理,用蒸馏水1∶10稀释,得到pH约为5.2的悬浮液。将液出物培养约6小时反应时间,包括沉啶和变性。然后收集α球蛋白和其它的不溶蛋白质,并将得到的沉淀用于制备α-I PI和ATIII。

按照常规分级分离法,组分IV-1流出液被进一步加工成Cohn组分IV-4,主要除去对热不稳定的α和β球蛋白,然后进行四次连续的乙醇沉淀,之后进行丙酮干燥、冷冻干燥、薄膜蒸发或超滤和透析滤过。

按照本发明,然后将辛酸钠加至Cohn组分IV-1流出液中,通过润湿或将白蛋白与这些不想要的蛋白质分开使α和β球蛋白不溶。辛酸钠还可起抗病毒剂的作用,此外可机械分离白蛋白。

将约10g辛酸钠/升加至组分IV-1流出液中,加热至约25-35℃,同时使溶液的pH升至约5.4-5.8。反应在不低于6小时的时间内完成,其间,pH保持在约5.3-5.6,但最好是在5.4。

增加溶液的温度能帮助溶解辛酸以完成反应。增大pH能提高白蛋白的回收率,因为低于约5.4的pH值接近白蛋白的等电点范围,该范围小于优选的pH,结果能导致白蛋白损失。然而,大于约5.8的pH水平可增溶溶液解热不稳定的球蛋白,因而可使它们进入最终产物中。加入辛酸钠后总培养时间为约6小时。

然后将辛酸钠处理的溶液冷却至约18℃或18℃以下以抑制细菌生长,并离心。此后将约1g Deae Sephadex加至该流出液中以帮助过滤。然后使该辛酸盐流出液通过0.2微米厚的膜滤器而将其澄清,制得deae滤液(参见图1)。然后用碳酸钠将所得滤液的pH增至中性(pH6.8-7.2)。

按照常规方法,当将酸性滤液的pH升至中性时,溶液的浊度改善。在pH5.5,浊度水平通常为12NTU或大于12NTU,当将pH升至5.5以上时降至约8NTU。此现象是由于与污染球蛋白的等电点不一致所致。

然而按照本发明,Deae滤液的浊度为约不大于3NTU,并且,当将pH升至6.8时,即使在60℃10小时或超过10小时后,浊度水平均无明显改变。

因此,将辛酸钠处理的滤液的pH升至中性不影响浊度水平。相反,由辛酸钠处理的IV-1流出液得到的滤液,即使在升高的pH下仍保持不高于5NTU的浊度水平,这是因为在与辛酸钠一起培养后,滤液中基本上不含污染物球蛋白。

然后将Deae-Sephadex澄清的滤液用Rhomicon型超滤器超滤,并与至少7体积的辛酸钠透析滤过缓冲液交换而进行透析滤过,以除去金属污染物、乙醇和盐。该透析滤过缓冲液根据最终容器的白蛋白浓度来制备。例如,若期望的最终白蛋白浓度为25%,则使用0.02M辛酸钠透析滤过缓冲液。若最终的白蛋白浓度为5%,则需要0.004M辛酸钠透析滤过缓冲液。使用30000分子量(MWCO)的超滤介质能提供极佳的流速。

然后用常规技术对白蛋白进行超滤以达到期望的最终容器白蛋白浓度。该目标浓度必须足以能用透析滤过缓冲液经仪器冲洗下来,从而制得25%、20%、7%或5%的最终白蛋白浓度。最后,将该浓缩液灭菌过滤,收集供释放试验,并装入最终容器中。

在影响本发明的许多条件中包括温度、pH、辛酸钠浓度和反应时间。以Cohn组分流出液IV-1进行实验,一次改变一个参数以建立辛酸盐反应的理想温度。试过20℃范围内的温度,发现能制得浑浊的终容器。还人为地定了6个小时的反应时间,因为加工大体积的白蛋白需要改变完成反应所需的时间。

本发明依赖于上述试验和热对白蛋白的影响。

实施例II试验批量为100-200升Cohn组分IV-1流出液。进行几批试验以获得理想的参数。合格的终试验基于将该白蛋白于60℃加热10小时后的浊度。

放大由Cohn组分IV-1制备白蛋白的批量。在该批试验中,将1100升流出液Cohn组分IV-1用实施例1中所述的方法加工成25%白蛋白终容器。

结果这里所述的放大工艺得到下列数据:蛋白质浓度:                        24.03%蛋白质CAE:                               100%白蛋白pH:                                6.78耐热性(一式两份)(50小时@57)                         合格铝:                                7.53ppbPKA:                               1%参考柠檬酸盐:                          少于5ppm浊度:                              2.6NTU钠:                                152Meq/LHPLC:单体:                              97.58%二聚体:                            2.42%粘度:                              7.98 CPS密度:                              1.0699热原(3只兔)                         总共0.2辛酸盐:                            0.086M选择性结合两体积CWFI透析滤过会将此浓度降至约0.07M。

讨论我们已证实,通过使用辛酸钠将白蛋白与不想要的蛋白质和生产废料分开能较快、更高效率地并以较低成本制备广泛用作治疗剂的人血清白蛋白。此外,如本文所述的辛酸钠白蛋白分级分离能避免使用溶剂例如丙酮,因而能避免化学溶剂对环境的污染;降低生产和设备成本;减少白蛋白终容器的生产时间;并增加白蛋白和其它源自血浆的产品例如α-1 PI和AT III的收率。

此外,我们还发现,白蛋白自然地通过分子吸引选择并结合一定量的留在最终白蛋白溶液中的辛酸钠。加入辛酸钠后,即使在随后的过滤、超滤、透析滤过和于60℃巴氏灭菌10小时后,白蛋白溶液的浊度水平仍在5NTU之下。因此,辛酸钠能在制备过程中增强产品的稳定性,正如加入辛酸钠后浊度水平低所证明的那样;并且能在最后的高热巴氏灭菌过程中保护白蛋白免受热解,这能避免在长期贮存过程中浊度增大。

常规白蛋白制备方法通常使用乙酰基-dl-色氨酸—-一种可疑的致癌因子或氯化钠来稳定白蛋白。但是,色氨酸或氯化钠均不能短期和长期增加白蛋白的稳定性。白蛋白不与色氨酸结合,但色氨酸还是能在暴露于高温时保护白蛋白结构的完整性。相反,白蛋白与氯化钠的结合性强,但氯化钠不能在暴露于高温时保护白蛋白。因此,除能将白蛋白与不想要的物质分开外,辛酸钠在制备过程中或之后还具有增进和保持白蛋白的稳定性的双重功能。

根据上述的实施例和讨论,本领域技术人员能对本发明做出潜在的改进和改变。因此,所给出的实施例仅用于举例说明本发明。本发明应仅受所附权利要求限制。

Claims (8)

1.由血浆蛋白质的混合物分离白蛋白的方法,所述混合物包括白蛋白和非白蛋白蛋白质,所述方法包括以下步骤:(a)将辛酸钠作为分离剂加入pH为5.3-5.6的血浆蛋白质的混合物中,使得白蛋白和非白蛋白蛋白质形成分开的相;和(b)将白蛋白相与非白蛋白蛋白质相分开。
2.按照权利要求1的方法,其中,非白蛋白蛋白质选自包含Y、α和β球蛋白和酸性糖蛋白的溶液。
3.按照权利要求1的方法,其中在25-35℃的温度下将辛酸钠作为分离剂加至血浆蛋白质的混合物中。
4.按照权利要求1的方法,其中辛酸钠以0.06M存在于血浆蛋白质的混合物中。
5.按照权利要求1的方法,其中将辛酸钠和血浆蛋白质的混合物一起培养6小时以上。
6.按照权利要求5的方法,其中将辛酸钠在0.06M辛酸钠的浓度和2 5-35℃的温度下作为分离剂加入血浆蛋白质的混合物中。
7.按照权利要求1的方法,其中血浆蛋白质的混合物包括Cohn组分II+III流出液或Cohn组分IV-1流出液。
8.权利要求6的方法,其中将辛酸钠在pH5.4下作为分离剂加入血浆蛋白质的混合物中。
CNB951090518A 1994-08-10 1995-08-09 用辛酸钠作分离剂的低温白蛋白分级分离法 CN1150004C (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US08/288,180 US5561115A (en) 1994-08-10 1994-08-10 Low temperature albumin fractionation using sodium caprylate as a partitioning agent

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1120439A CN1120439A (zh) 1996-04-17
CN1150004C true CN1150004C (zh) 2004-05-19

Family

ID=23106084

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB951090518A CN1150004C (zh) 1994-08-10 1995-08-09 用辛酸钠作分离剂的低温白蛋白分级分离法

Country Status (11)

Country Link
US (1) US5561115A (zh)
EP (1) EP0696595B1 (zh)
JP (1) JP3874029B2 (zh)
KR (1) KR100418821B1 (zh)
CN (1) CN1150004C (zh)
AT (1) AT172744T (zh)
AU (1) AU684202B2 (zh)
CA (1) CA2155630C (zh)
DE (2) DE69505610D1 (zh)
DK (1) DK0696595T3 (zh)
ES (1) ES2123874T3 (zh)

Families Citing this family (47)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2103236B1 (es) * 1996-01-30 1998-04-16 Grifols Grupo Sa Albumina humana terapeutica con baja capacidad para la fijacion de aluminio.
AT403989B (de) * 1996-09-16 1998-07-27 Immuno Ag Verfahren zur herstellung eines plasmaprotein-hältigen arzneimittels
US6955917B2 (en) * 1997-06-20 2005-10-18 Bayer Healthcare Llc Chromatographic method for high yield purification and viral inactivation of antibodies
US5886154A (en) 1997-06-20 1999-03-23 Lebing; Wytold R. Chromatographic method for high yield purification and viral inactivation of antibodies
USRE43655E1 (en) 1997-06-20 2012-09-11 Bayer Healthcare Llc Chromatographic method for high yield purification and viral inactivation of antibodies
AUPP521298A0 (en) * 1998-08-12 1998-09-03 Life Therapeutics Limited Purification of fibrinogen
AUPP790698A0 (en) 1998-12-23 1999-01-28 Life Therapeutics Limited Separation of microorganisms
AUPP790898A0 (en) 1998-12-23 1999-01-28 Life Therapeutics Limited Renal dialysis
US7077942B1 (en) 1999-12-23 2006-07-18 Gradipore Limited Removal of biological contaminants
GB9902000D0 (en) 1999-01-30 1999-03-17 Delta Biotechnology Ltd Process
AU3624400A (en) * 1999-03-19 2000-10-09 Bayer Corporation Chromatographic albumin process
US20050224355A1 (en) * 1999-12-23 2005-10-13 Brendon Conlan Removal of biological contaminants
AUPQ691400A0 (en) 2000-04-14 2000-05-11 Life Therapeutics Limited Separation of micromolecules
AUPQ697300A0 (en) * 2000-04-18 2000-05-11 Life Therapeutics Limited Separation apparatus
JP2003531362A (ja) 2000-04-18 2003-10-21 グラディポア・リミテッド 試料の電気泳動性分離および処理
CA2774959C (en) 2000-08-04 2016-05-31 Dmi Biosciences, Inc. Method of using diketopiperazines and composition containing them
US6923896B2 (en) * 2000-09-22 2005-08-02 The Texas A&M University System Electrophoresis apparatus and method
EP1341596B1 (en) * 2000-10-06 2010-07-07 Arturus Capital Limited Multi-port electrophoresis separation apparatus and corresponding method
AUPR222300A0 (en) * 2000-12-21 2001-01-25 Life Therapeutics Limited Electrophoresis device and method
US20020124526A1 (en) * 2001-03-12 2002-09-12 Lewis James D. Albumin in a flexible polymeric container
EP1622633B1 (en) 2003-05-15 2016-02-24 Ampio Pharmaceuticals, Inc. Treatment of t-cell mediated diseases
CN1314447C (zh) * 2004-04-12 2007-05-09 爱华生物科技(香港)有限公司 一种具有抑制蛋白酶作用的药物的制备方法
US20070219131A1 (en) * 2004-04-15 2007-09-20 Ben-Sasson Shmuel A Compositions capable of facilitating penetration across a biological barrier
NZ550320A (en) * 2004-04-15 2010-02-26 Chiasma Inc Compositions capable of facilitating penetration across a biological barrier
CN1313488C (zh) * 2004-12-29 2007-05-02 三九集团湛江开发区双林药业有限公司 从组分沉淀123中回收白蛋白的方法
US8293242B2 (en) * 2005-09-01 2012-10-23 Plasma Technologies, Llc Ultra-high yield of alpha-1-anti-trypsin
US7879332B2 (en) * 2005-09-01 2011-02-01 Plasma Technologies, Llc Ultra-high yield intravenous immune globulin preparation
US20070049732A1 (en) * 2005-09-01 2007-03-01 Zurlo Eugene J Ultra-high yield intravenous immune globulin preparation
WO2007079886A1 (de) 2005-12-22 2007-07-19 Csl Behring Gmbh Oktanoatreduziertes human albumin
US7735167B2 (en) * 2006-06-07 2010-06-15 Posey Company Bed enclosure
ES2294976B1 (es) 2007-11-12 2008-12-16 Grifols, S.A. "procedimiento de obtencion de albumina humana de alta eficacia para su uso en terapia de detoxificacion".
US8217047B2 (en) 2008-05-27 2012-07-10 Dmi Acquisition Corp. Therapeutic methods and compounds
DK2343982T3 (en) * 2008-09-17 2017-07-10 Chiasma Inc Pharmaceutical compositions and procedures for delivering thereof
CN101367865B (zh) 2008-09-26 2012-01-04 广州倍绣生物技术有限公司 一种高纯度猪血白蛋白的生产工艺及其应用
CN101927011B (zh) * 2009-06-23 2014-03-19 武汉生物制品研究所有限责任公司 一种球蛋白溶液的病毒灭活方法
EP2496246B1 (en) 2009-11-03 2018-06-27 Grifols Therapeutics LLC Composition, method, and kit for alpha-1 proteinase inhibitor
ES2648249T3 (es) 2009-11-24 2017-12-29 Grifols Therapeutics Inc. Procedimientos, composiciones y kits de liofilización
CN102127164B (zh) * 2010-12-20 2013-01-30 武汉禾元生物科技有限公司 一种从水稻种子中提取重组人血清白蛋白的方法
CN102532254B (zh) * 2010-12-24 2015-06-24 武汉禾元生物科技股份有限公司 一种从水稻种子中分离纯化重组人血清白蛋白的方法
AU2012323305B2 (en) 2011-10-10 2017-07-27 Ampio Pharmaceuticals, Inc. Treatment of degenerative joint disease
AU2012323320B2 (en) 2011-10-10 2017-05-11 Ampio Pharmaceuticals, Inc. Implantable medical devices with increased immune tolerance, and methods for making and implanting
AU2013205138B2 (en) 2012-08-09 2015-06-25 Grifols, S.A. Caprylate Viral Deactivation
MX2015009908A (es) * 2013-02-01 2015-09-24 Ampio Pharmaceuticals Inc Metodos para producir dicetopiperazinas y composiciones que contienen dicetopiperazinas.
SG10201707619RA (en) 2013-03-15 2017-10-30 Ampio Pharmaceuticals Inc Compositions for the mobilization, homing, expansion and differentiation of stem cells and methods of using the same
JP2017524024A (ja) 2014-08-18 2017-08-24 アンピオ ファーマシューティカルズ,インコーポレイテッド 関節病態の治療
CN104356231B (zh) * 2014-11-10 2017-08-08 北海开元生物科技有限公司 一种有效去除人免疫球蛋白多聚体的方法
CN104447987A (zh) * 2014-11-22 2015-03-25 贵州中泰生物科技有限公司 辛酸法血浆免疫球蛋白分离工艺

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2710293A (en) 1953-10-30 1955-06-07 Olin Mathieson Blood fractionation
US2710294A (en) 1953-11-02 1955-06-07 Olin Mathieson Blood fractionation
FR2190437B1 (zh) * 1972-07-05 1975-08-08 Merieux Inst
US3926939A (en) * 1973-08-24 1975-12-16 Mikhail Ivanovich Ivanov Method of extracting pure serum albumin from biological fluids using a salt of a carboxylic aliphatic acid
CH583745A5 (en) * 1973-09-13 1977-01-14 Ts I Gematologii I Perelivania Pure serum albumin isolated from biological liquids - by treatment with alcohol and aliphatic carboxylic acid salt
US4156681A (en) * 1974-03-28 1979-05-29 Plasmesco Ag Process for isolating albumin from blood
DK25877A (da) * 1977-01-21 1978-08-15 Nordisk Insulinlab Fremgangsmaade til udvinding af renset albumin fra blodplasma
US4222934A (en) * 1979-04-12 1980-09-16 American National Red Cross Preparation of albumin using ethanol
AT363190B (de) * 1979-05-28 1981-07-10 Oesterr Rotes Kreuz Herstellung von albumin aus plasma
US4378346A (en) * 1979-08-15 1983-03-29 Tankersley Donald L Intravenously injectable solution of plasma protein fraction free from bradykinin, kininogen and prekallikrein activators and processes for its production
JPS62294621A (en) * 1986-06-13 1987-12-22 Green Cross Corp:The Method for recovering albumin
US4990447A (en) * 1988-06-24 1991-02-05 Gist-Brocades Nv Process for the purification of serum albumin
US4939176A (en) 1988-12-20 1990-07-03 Miles Inc. Viral inactivation process
JPH0671434B2 (ja) * 1989-09-18 1994-09-14 株式会社ミドリ十字 ヒト血清アルブミンの製造方法
ES2224094T3 (es) * 1990-04-19 2005-03-01 Bayer Corporation Procedimiento para preparar seroalbumina normal (humana) esencialmente monomerica.

Also Published As

Publication number Publication date
DE69505610D1 (de) 1998-12-03
EP0696595B1 (en) 1998-10-28
AU2839095A (en) 1996-02-22
CN1120439A (zh) 1996-04-17
DE69505610T2 (de) 1999-03-25
US5561115A (en) 1996-10-01
AU684202B2 (en) 1997-12-04
ES2123874T3 (es) 1999-01-16
AT172744T (de) 1998-11-15
DK0696595T3 (da) 1999-07-12
EP0696595A1 (en) 1996-02-14
KR960006939A (ko) 1996-03-22
CA2155630A1 (en) 1996-02-11
KR100418821B1 (ko) 2004-05-20
JP3874029B2 (ja) 2007-01-31
JPH08176010A (ja) 1996-07-09
CA2155630C (en) 2007-10-23
DK696595T3 (zh)

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Frommhagen et al. The role of aggregated γ-globulins in the anticomplementary activity of human and animal sera
Miekka et al. Rapid methods for isolation of human plasma fibronectin
JP4445202B2 (ja) 治療的使用のためのヒト免疫グロブリン濃縮物の調製方法
DK2270044T3 (en) Liquid immunoglobulin G (IgG) product
US5610285A (en) Purification of α-1 proteinase inhibitor using novel chromatographic separation conditions
JP5042817B2 (ja) ウイルス安全精製抗体調製物を提供する方法
KR970007941B1 (ko) 소수성 상호 작용 크로마토그래피에 의한 불안정한 생물학적 혼합물로부터의 처리화학약품의 제거
US6486306B1 (en) Filtration
CN1196714C (zh) 生产用于静脉给药的免疫球蛋白和其他免疫球蛋白产品的方法
EP0037078B1 (en) Process for heat treatment of aqueous solution containing human blood coagulation factor xiii
US6103693A (en) Method for isolation of highly pure von willebrand factor
JP2805364B2 (ja) 血漿蛋白質のクロマトグラフィーによる分離
AU749336B2 (en) Chromatographic method for high yield purification and viral inactivation of antibodies
US4086222A (en) Method of isolating albumin from blood products
US5138034A (en) Method of fractionating plasma proteins
JP3338060B2 (ja) 濃縮抗体製剤
US5190752A (en) Intravenously administerable polyclonal immunoglobulin preparation containing igm and method of manufacture
EP0315968B2 (en) Plasma and recombinant protein formulations in low ionic strength media
US4069216A (en) Simplified methods for preparation of very high purity Factor VIII concentrate
CA2165203C (fr) Concentre d'immunoglobulines g a usage therapeutique et procede de production dudit concentre
US5099003A (en) Method of preparing a sterile plasma-protein solution containing fibrinogen and factor xiii
US20070244305A1 (en) Process for The Manufacture of Virus Safe Immunoglobulin
US4136094A (en) Preparation of intravenous human and animal gamma globulins and isolation of albumin
AU618157B2 (en) Viral inactivation process
EP0314095B1 (en) Plasma and recombinant protein formulation in high ionic strength media

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
C10 Entry into substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
C56 Change in the name or address of the patentee

Owner name: GRIFOLS THERAPEUTICS INC.

Free format text: FORMER NAME: TALECRIS BIOTHERAPEUTICS INC.

ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: BAYER HEALTHCARE LLC

Free format text: FORMER OWNER: MILES INC.

Effective date: 20141117

Owner name: TALECRIS BIOTHERAPEUTICS INC.

Free format text: FORMER OWNER: BAYER HEALTHCARE LLC

Effective date: 20141117

EXPY Termination of patent right or utility model