JPS63183539A - 静注用免疫グロブリン製剤の製造方法 - Google Patents

静注用免疫グロブリン製剤の製造方法

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JPS63183539A
JPS63183539A JP62021481A JP2148187A JPS63183539A JP S63183539 A JPS63183539 A JP S63183539A JP 62021481 A JP62021481 A JP 62021481A JP 2148187 A JP2148187 A JP 2148187A JP S63183539 A JPS63183539 A JP S63183539A
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上村　八尋
Katsuhiro Uryu
瓜生　勝寛
Kazuo Takechi
武智　和男
Yutaka Hirao
平尾　豊
Tadakazu Suyama
須山　忠和
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Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は静注用免疫グロブリン製剤の製法に関する。
〔従来の技術〕
静注用免疫グロブリン製剤は、これまで広く感染症の予
防および治療に用いられているが、熱安定性に欠けるた
めに加熱処理は行われていない。
しかし、肝炎ウィルス等の夾雑ウィルスの混在は必ずし
も否認されていない。そこで、夾雑ウィルスの不活化法
として液状加熱処理法〔特開昭６１−１９１６２２号等
〕或いは乾熱処理法〔特開昭６１−７８７３０号、特願
昭６０−２７０１９５号等〕が提案されている。
（発明が解決しようとする問題点〕 本発明の目的は、この加熱処理法を発展させて臨床上適
用できる製剤、すなわち、安全性と有効性の高い静注用
免疫グロブリン製剤の製造方法を提供することにある。
本発明者らは、この目的に沿って工業的な製法について
検討し、ポリエチレングリコール（以下、ＰＥＧという
）分画処理、加熱処理等を組み合わせ、各工程の処理条
件を設定して本発明を完成した。
〔問題点を解決するための手段〕
本発明の要旨は、その特許請求の範囲に記載した通りで
あり、特に免疫グロブリンを含む画分を出発原料とする
、以下の処理からなる静注用免疫グロブリン製剤の製造
方法に関する。
（ａｌ　　ｐＨ４〜６、イオン強度０．０００１〜０．
１　Ｍ　。
温度０〜４℃の条件下、分子量１．０００〜１０．００
０のＰＥＧで処理して上清を回収する。
（ｂ）　　（ａｌＯ上清をｐＨ６〜９、イオン強度０．
０００１〜ｏ、ＩＭ、１ｉＩｉ度０〜４°Ｃの条件下、
分子量１，０００〜１０，０００のＰＥＧＩ　Ｏ〜１５
ｗ／ｖ％で処理して沈澱を回収する。
［Ｃ１所望の工程で夾雑するウィルスが不活化するのに
充分な条件下、安定化剤の存在下で加熱処理する。
＋ｌ）　　出発原料 本発明の出発原料としては、免疫グロブリンを含む画分
が使用され、これはヒト血漿由来であって、免疫グロブ
リン画分を含むものであれば特に限定されない。具体的
には、コーンのエタノール分画により得られる画分ｎ＋
ｍ、画分■、および免疫グロブリンを含むこれらと同等
の画分のべ−スト等が挙げられる。また、この出発原料
は、ヒト血液型抗体、カリクレイン、プレカリクレイン
、ＩｇＭ、ＩｇＧ重合体などを含んでいてもよい。
（２）製法 本発明による製造方法は、好ましくは以下の処理よりな
る。
■低濃度ＰＥＧ処理工程 本工程は出発原料を低濃度ＰＥＧで処理し、上清を回収
する工程である。
出発原料を適当な水性溶媒に懸濁する。水性溶媒の溶質
として、たとえば塩化ナトリウム、リン酸ナトリウム、
リン酸カリウム、酢酸、酢酸ナトリウム、クエン酸、ク
エン酸ナトリウム等を含ませてもよい。
この懸濁液を分子量１　、０００〜１０，０００　（好
適には約２，０００〜６，０００　）のＰＥＧで処理す
る（たとえば、両者を混合する）。処理条件としては、
ＰＥＧｔｌＡ度４〜ＩＯＷ／Ｖ％（特に４〜８Ｗ／ｖ％
）、ｐＨ４〜６　（特に４．５〜５．５）、イオン強度
０．０００１〜０．１Ｍ（特に、０．０００１〜０．０
，１　Ｍ　”）であることが好ましい。
この際、蛋白濃度１〜２０ｗ／ｖ％（特に、５〜１５ｗ
／ｖ％）であることが好ましい。
当該処理は、０〜４℃程度で通常３０分〜６時間程度攪
拌することによって行われる。
その後、たとえば遠心分離（６０００〜８０００　ｒ　
ｐ　ｍ、１０〜３０分間）して上清を回収する。
■高濃度ＰＥＧ処理工程 本工程は■の工程で得られた上滑を高濃度ＰＥＧで処理
し、沈澱を回収する工程である。
上記上清を分子量１　、０００〜１０，０００　（好適
には２．０００〜６，０００　＞　　のＰＥＧにてさら
に処理する（たとえば、両者を混合する）。処理条件と
しては、ｐＥｃ＞ｇ度１０〜１５ｗ／ｖ％（特に、約１
１〜１３ｗ／ｖ％）、ｐＨ６〜９（特に７．５〜８．５
　＞　、イオン強度０．０００１〜０．１Ｍ（特に、０
．０００１〜０．０１Ｍ）であることが好ましい。
この際、蛋白濃度１〜２０ｗ／ｖ％（特に、５〜１５ｗ
／ｖ％）であることが好ましい。
当該処理は、０〜４℃程度で通常３０分〜６時間程度攪
拌することによって行われる。
その後、たとえば遠心分離（６０００〜８０００　ｒ　
ｐ　ｍ、１０〜３０分間）して沈澱を回収する。
■陰イオン交換体処理工程 本工程は■の工程で得られた沈澱画分を水性溶媒に溶解
後、または後記■の工程の処理後陰イオン交換体で接触
処理して非吸着画分を回収する工程である。
本工程は、ＩｇＭ、ＩｇＧ重合体を除くために行われる
。
（ｉ）陰イオン交換体の調製 陰イオン交換体は陰イオン交換基を不溶性担体に結合し
たものであるが、陰イオン交換基としてはジエチルアミ
ノエチル（ＤＥ’ＡＥ＞基、四級アミノエチル（ＱＡＥ
）基等を、不溶性担体としてはアガロース、セルロース
、デキストラン、ポリアクリルアミド等を用いることが
できる。
その結合は公知の方法で行われる。
（ｉｔ）処理方法 ■の工程で得られた沈澱画分を適当な水性溶媒に溶解す
る。水性溶媒はｐＨ５〜８（好ましくはｐＨ５，５〜７
．５）、低イオン強度（好ましくは０．０１〜０．２Ｍ
）の水溶液であることが好ましい。■の工程と同様の溶
質を含んでいてもよい。蛋白濃度としては１〜１５Ｗ／
ｖ％（特に、３〜１０Ｗ／Ｖ％）が好ましい。
さらに、上記水性溶媒で平衡化した陰イオン交換体と接
触処理する。その処理に際してはバッチ法、カラム法の
どちらを用いてもよい。
たとえば、ハツチ法では、陰イオン交換体１ｍｌに対し
て処理対象溶液１０〜１００ｍ１程度と混合　　。
させ、０〜４℃で３０分〜２時間程度攪拌した後、遠心
分離（６，０００〜８．００Ｏｒ　ｐ　ｍ、　１０〜３
０分間）して上清を回収する。
カラム法でも、陰イオン交換体１ｍｌに対して処理対象
溶液１０〜１００ｍ１程度を接触させ、非吸着画分を回
収する。
なお、零〇の工程は所望により省略することもできる。
また、液状加熱処理を行う場合には■の固定化ヒト血液
型物質処理後に当該陰イオン交換体処理を実施すること
が好ましい。
■固定化ジアミノ化合物による処理 本工程は、■の工程で得られた沈澱画分または■の工程
で得られた非吸着画分を固定化ジアミノ化合物で接触処
理して、非吸着画分を回収する工程である。
本工程はプレカリクレインまたはカリクレインを除くた
めに行われる。
（ｉ）固定化ジアミノ化合物の調製 固定化ジアミノ化合物はジアミノ化合物を不溶性担体に
固定化したものである。
ジアミノ化合物としては、アミノベンズアミジン、アミ
ノベンズグアニジン、リジン、アルギニン等を用いるこ
とができる。
一方、不溶性担体としてはアガロース、セルロース、デ
キストラン、シリカゲル、ガラス等が用いられる。
固定化は公知の方法に準じればよい。たとえば、アガロ
ース、セルロース等は、たとえばＣＮＢｒ活性化法によ
り、またシリカゲル、ガラス等はオキシラン法により、
ジアミノ化合物を固定化することができる。
（１１）処理方法 処理対象物、たとえば■の工程の非吸着画分をｐ１１５
〜８（特に、ｐＨ６〜７）、イオン強度０．０１〜０．
２Ｍ（特に０．０５〜０．１５Ｍ）の条件下で固定化ジ
アミノ化合物と接触処理する。その際、蛋白濃度１〜１
５　ｗ　／　ｖ％（特に、３〜１０Ｗ／ｖ％）であるこ
とがこのましく、またハツチ法、カラム法のいずれもが
好適に使用される。
たとえばバッチ法では、固定化ジアミノ化合物１ｍｌに
対して上記画分１０〜１００ｍ１程度を混合させ、０〜
１０℃、好ましくは０〜４°Ｃで３０分〜４時間、好ま
しくは３０分〜２時間程度攪拌した後、遠心分離（６，
０００〜８．００Ｏｒ　ｐ　ｍ、１０〜３０分間）して
上清を回収する。
カラム法でも、固定化ジアミノ化合物１ｍｌに対して上
記画分１０〜１００ｍ１程度を接触させ、非吸着画分を
回収する。
本■の工程は所望により省略することも可能である。
■固定化ヒト血液型物質処理工程 本工程は■の工程の沈澱画分または■の非吸着画分また
は■の非吸着画分を固定化ヒト血液型物質で接触処理し
て、非吸着画分を回収する工程である。
本工程はヒト血液型抗体を除くために行われる。
（ｉ）固定化ヒト血液型物質の調製 固定化ヒト血液型物質はヒト血液型物質を不溶性担体に
固定化したものである。
ヒト血液型物質の調製は、公知の方法を用いればよい。
たとえば、ヒトＡ、Ｂ、ＡＢまたはＯ型の赤血球を低張
溶液中で溶血、または超音波処理した後、硫安分画法ま
たはＰＥＧ分画法により精製すること等により得られる
。
さらにこのヒト血液型物質は生理的食塩液に溶解後、夾
雑するウィルスの不活化に有効とされている、たとえば
、約５０〜７０℃、好ましくは約６０℃で、７〜１３時
間、好ましくは約１０時間、又は約８０〜１３０℃、好
ましくは９５°Ｃ〜１２１℃で約１〜４０分、好ましく
は約２〜３０分間加熱処理する。その後、遠心分離して
不溶物を除去し、蒸留水に対して透析して、各ヒト血液
型物質を得る。
一方、不溶性担体としてはアガロース、セルロース、デ
キストラン、シリカゲル、ガラス等が用いられる。
固定化は公知の方法に準じればよい。例えば、アガロー
ス、セルロース等はＣＮＢｒ活性化法により、シリカゲ
ル、ガラス等はオキシラン法によりヒト血液型物質を固
定化できる。
（ＩＩ）処理方法 処理対象物、たとえば■の工程の非吸着画分をｐｕｓ〜
８　（特にｐＨ６〜７）、イオン濃度０．０１〜０．２
Ｍ（特に０．０５〜０．１５Ｍ）の条件下で、上記水性
溶媒で平衡化した固定化ヒト血液型物質と接触処理する
。その際、蛋白濃度１〜１５　ｗ　／　ｖ％（特に、３
〜１０ｗ／ｖ％）であることが好ましく、またバッチ法
、カラム法のどちらを用いてもよい。
たとえばバッチ法では、固定化ヒト血液型物質１ｍｌに
対して処理対象溶液１０〜１００ｍ１程度と混合させ、
０〜１０℃、好ましくは０〜４℃で、３０分〜４時間、
好ましくは３０分〜２時間程度攪拌した後、遠心分離（
６，０００〜８．ＯＯＯｒｐｍ、１０〜３０分間）して
よ清を回収する。
カラム法でも、固定化ヒト血液型物質１ｍｌに対して処
理対象溶液１０〜１００ｍ１程度を接触させ、非吸着画
分を回収する。
■加熱処理工程 本工程は、所望の段階で安定化剤の存在下に免疫グロブ
リンの抗体活性の減少は最小限にとどめるが、夾雑する
ウィルス、例えばＨＢウィルス、ＡＩＤＳウィルス等は
完全に不活化する条件下で加熱処理する工程である。加
熱処理は、含湿度３％以下の乾燥状態（即ち、乾熱処理
）、または溶液状態、即ち免疫グロブリンの水溶液状態
（即ち、液状加熱処理）で行う。より好ましくは液状加
熱処理が推奨される。
安定化剤としては、いずれの処理の場合も、二！Ｊ！Ｗ
Ａ　（例、サッカロース、マルトース）、糖アルコール
（例、ソルビト−ル、マンニトール）が好適に例示され
る。より好ましくはソルビトールである。
安定化剤の添加量は、乾熱処理法では、二糖頻、糊アル
コール等を０．５〜５　ｗ　／　ｖ％（好ましくは、１
〜３　ｗ　／　ｖ％）液状加熱処理法では二糖頻、糖ア
ルコール等を１０ｗ／ｖ％以上（好ましくは１０〜２０
Ｗ／ｖ％）を用いることが好適に例示される。
加熱の対象となる免疫グロブリンの量は、乾熱処理では
、蛋白量として１〜ＩＯＷ／Ｖ％（好ましくは３〜７　
ｗ　／　ｖ％）となるように調整することが好適である
。液状加熱処理では、蛋白量として０．１〜３０Ｗ／Ｖ
％（好ましくは５〜２０Ｗ／Ｖ％）に調整することが好
ましい。
加熱処理は、乾熱処理の場合、安定化剤を添加後、要す
れば除菌濾過し、たとえば凍結乾燥などによって含水率
３％以下、好ましくは１％以下とする。凍結乾燥の条件
としてはＱ、　５　龍ＨＨの真空下、２０〜４０°Ｃで
２４〜９６時間程度が例示される。
次いで、たとえば５０〜７０℃（好ましくは６０℃程度
）、１０〜２００時間（好ましくは５０〜１００時間程
度）で処理する。
また、本加熱処理工程は不活性ガス雰囲気下で行うこと
により、加熱時の安定性をより高めることができる。不
活性ガスとしては例えば、窒素ガス、アルゴン、ヘリウ
ムなどが挙げられる。
液状加熱処理の場合は水溶液のｐＨを４．５〜６．５、
好ましくはｐＨ５〜６に調整し、液状加熱処理法ではた
とえば５０〜７０℃（好ましくは６０“Ｃ程度）でｌＯ
分〜２０時間（好ましくは１０時間程度）処理される。
加熱処理の工程は、乾熱処理の場合は最終工程で行うこ
とが好ましく、たとえば■の工程の後に行うことが好ま
しい。
液状加熱処理の場合は、出発原料に対して、または■の
工程の後に行うのが好適である。なお、■の工程のあと
に行う場合は、■および■の処理を再度行うことが夾雑
物除去の点でより好ましい。
〔作用・効果〕
本発明により得られた製剤は免疫グロブリンが殆ど不活
化されておらず、しかも、抗ヒト血液型物質抗体等の夾
雑物は含まれず、加熱処理を施しているので夾雑ウィル
スも不活化され、溶解性もよく、抗補体活性も充分に低
い等の性質を有し、昭和６０年度発行の日本国生物学的
製剤基準（以下、主基準）をパスできる安全な製剤であ
る。
本発明により得られた製剤は、用時、適当な溶媒（例え
ば、注射用蒸留水）に溶解して、静脈内投与、点滴など
により、感染症等の予防または治療に用いられる。
すなわち、本発明は静注用免疫グロブリン製剤の工業的
製法として有益である。
（双子余白） 〔実施例〕 実施例１ コーン画分［＋■１ｋｇにＯ，ＯＯＩＭの塩化ナトリウ
ム溶液１０６を加え、ｐｎを５．０に調整した後、Ｐ　
Ｅ　Ｇ　＃４０００を終濃度が８％になるように添加し
、２℃で遠心分離を行った。
得られた上清をＩＮ−水酸化ナトリウムを用いｐＨ８，
０とした後、Ｐ　ＥＧ　＃４０００を終濃度が１２％に
なるように加え、２℃で遠心分離を行い、ＩｇＧ画分を
集めた。
このＩｇＧ画分を０．６％塩化ナトリウム溶液を用いＩ
ｇＧｔｍ度が７％になるように溶解せしめ、ｐＨを６．
５に調整した。
このＩｇＧ溶液１００ｍ１を別途調整したベンズアミジ
ンセファロース（登録商標、ファルマシア社製）カラム
５ｖ＋及びヒト血液型物質フォルミルセルロファインカ
ラム３ｍｌを通過させヒト血液型抗体を吸着除去した。
この工程での吸着により血液型抗体は（１：　３２）か
ら（１：　２）に低下した。
この未吸着画分にＩｇＧ５ｗ／ｖ％溶液当りヒトアルブ
ミンを１ｗ／ｖ％、サッカロースを２ｗ／Ｖ％添加し、
除菌濾過後、凍結乾燥した。
凍結乾燥後、６０℃で７２時間加熱処理を行い、静注用
免疫グロブリン製剤を得た。
本製剤は、実質的にＩｇＧ１量体のみを含み、ヒト血液
型抗体量も充分少なく、抗補体価も１０〜１５ＣＨｓｏ
程度であった。
また、溶解性も高く、静注用免疫グロブリンとしての生
基準にも合格した。
実施例２ コーンの画分■ペーストからも同様に処理を行い、同等
の結果を得た。
実施例３ コーン画分１１＋ｌｆｆ１ｋｇに０．００１Ｍの塩化ナ
トリウム溶液Ｉｏｎを加え、ｐＨを５．０に調整した後
、Ｐ　Ｅ　Ｇ　＃４００（ｌを終濃度が８％になるよう
に添加し、２℃で遠心分離を行った。
得られた上滑をＩＮ＝水酸化ナトリウムを用いｐＨ８，
０とした後、Ｐ　Ｅ　Ｇ　＃４０００を終濃度が１２％
になるように加え、２℃で遠心分離を行い、ＩｇＧ画分
を集めた。
このＩｇＧ画分を水を用いＩｇＧ濃度が１０％になるよ
うに溶解せしめ、ＩｇＧ１０ｗ／ｖ％溶液の１００ｍ１
当りソルビトールを５０ｇ添加し、６０℃で１０時間加
熱処理を行った。
加熱処理後、ｐＨを６．８に調整した後、ＰＥＧ＃４０
００をｎｔＭ度が６％になるように添加し、２°Ｃで遠
心分離を行った。
得られた上清をＩＮ−水酸化ナトリウムを用いｐＨ８，
０とした後、Ｐ　Ｅ　Ｃ，＃４０００を終濃度が１２％
になるように加え、２℃で遠心分離を行い、沈澱画分に
ＩｇＧ画分を得た。
この溶液にＤＥＡＥ−セファデックスを添加（５０ｍｌ
溶液当り１ｍ１）Ｌ、０〜４℃の条件下、約１時間接触
処理し、処理後遠心分離（７０００ｒｐｍ、約２０分間
）して上清（ＩｇＧ溶液）を回収した。
この■ｇＧ溶液１００ｍ１を別途調整したベンズアミジ
ンセファロース（登録商標、ファルマシア社製）カラム
５ｍｌおよびヒト血液型物質フォルミルセルロファイン
力ラム３ｍｌを通過させヒト血液型抗体を吸着除去した
。この工程での吸着により血液型抗体は（１：　３２）
から（１：　２）に低下した。
ＩｇＧ画分を生理的等張液に対して透析後、除菌濾過し
、凍結乾燥して静注用免疫グロブリン製剤を得た。
木製剤は、実質的にｒｇｃ単量体のみを含み、ヒト血液
型抗体量も充分少なく、抗補体価も１０〜１５ＣＨｓｏ
程度であった。
また、溶解性も高く、静注用免疫グロブリンとしての生
基準にも合格した。
実施例４ コーン画分］１＋ｌ１１１ｋｇに０．００１Ｍの塩化ナ
トリウム溶液１ｏｌｌを加え、さらに１００ｍ１当たり
ソルビトールを５０ｇ添加し、ｐＨを５．５に調整した
後、６０°Ｃで１０時間加熱処理を行った。
加熱処理後、ｐＨを５．５に調整し、Ｐ　Ｅ　Ｇ　＃４
０００をｖ！濃度が４％になるように添加し、２℃で遠
心分離を行った。
得られた上清をＩＮ−水酸化ナトリウムを用いｐＨ８，
８とした後、Ｐ　Ｅ　Ｇ　＃４０００を終濃度が１５％
になるように加え、２℃で遠心分離を行い、沈澱画分に
ＩｇＧ画分を得た。
この溶液にＤＥＡＥ−セファデックスを添加（５０ｍｌ
溶液当り１ｍ１）Ｌ、０〜４℃の条件下、約１時間接触
処理し、処理後遠心分離（７０００ｒｐｍ、約２０分間
）して上清（ＩｇＧ溶液）を回収した。
このＩｇＧ溶液１００ｍ１を別途調製したベンズアミジ
ンセファロース（登録商標、ファルマシア社製）カラム
５ｍｌおよびヒト血液型物質フォルミルセルロファイン
力ラム３ｍｌを通過させヒト血液型抗体を吸着除去した
。この工程での吸着により血液型抗体は（１：　３２）
から（１：　２）に低下した。
ＩｇＧ画分を生理的等張液に対して透析後、除菌濾過し
、凍結乾燥して静注用免疫グロブリン製剤を得た。
本製剤は、実質的にＩｇＧ単量体のみを含み、ヒト血液
型抗体量も充分少なく、抗補体価も１０〜１５ＣＨｓｏ
程度であった。
また、溶解性も高く、静注用免疫グロブリンとしての生
基準にも合格した。
実施例５ コーン画分１１＋ＩＩ［１ｋｇに水１０／を加え、さら
に１００ｒ１当たりソルビトールを５０ｇ添加し、ｐＨ
を５．５に調整した後、６０℃で１０時間加熱処理を行
った。
加熱処理後、ｐＨを５．５に調整した後、ＰＥＧ＃４０
００を終濃度が４％になるように添加し、２℃で遠心分
離を行った。
得られた上滑をＩＮ−水酸化ナトリウムを用いｐＨ８，
８とした後、Ｐ　Ｅ　Ｇ　＃４０００を終濃度が１５％
になるように加え、２℃で遠心分離を行い、沈澱画分に
ＩｇＧ画分を得た。
この沈澱を水性溶媒に溶解し、この溶液にＤＥＡＥ−セ
ファデックスを添加（５０ｍｌ溶液当り１ｍ１）　Ｌ、
、０〜４℃の条件下、約１時間接触処理し、処理後遠心
分離（７０００ｒｐｍ　、約２０分間）して上清（Ｉｇ
Ｇ溶液）を回収した。
このＩｇＧ溶液１００ｍ１をヒト血液型物質フ第ルミル
セルロファインカラム３ｍｌを通過させヒト血液型抗体
を吸着除去した。この工程での吸着により血液型抗体は
（１：　３２＞から（１：　２）に低下した。
ＩｇＧ画分を生理的等張液に対して透析後、除菌濾過し
、凍結乾燥して静注用免疫グロブリン製剤を得た。
本製剤は、実質的にＴｇＧ単量体のみを含み、ヒト血液
型抗体量も充分少なく、抗補体価も１０〜１５ＣＨｓ、
程度であった。
また、溶解性も高く、静注用免疫グロブリンとしての生
基準にも合格した。
実施例６ コーン画分■＋ｎ［１ｋｇに水３ｐを加え、さらに１０
０ｍ１当たりソルビトールを５０ｇ添加し、ｐＨを５．
５に調整した後、６０℃で１０時間加熱処理を行った。
加熱処理後、ｐｏを５．５に調整した後、ＰＥＧ＃４０
００を終濃度が６％になるように添加し、２°ｃ３時間
抽出を行った後、２℃で遠心分離を行った。
得られた上滑をＩＮ−水酸化ナトリウムを用いｐＨ８，
８とした後、Ｐ　Ｅ　Ｇ　＃４０００を終濃度が１２％
になるように加え、２℃で遠心分離を行い、沈澱画分に
ＩｇＧ画分を得た。この沈澱を法部水に溶解し、このＩ
ｇＧ溶液１００ｍ１を法部水で平衡化シタヒト血液型物
質フォルミルセルロファインヵラム３ｍｌを通過させヒ
ト血液型抗体を吸着除去した。この工程での吸着により
血液型抗体は（１：３２）から（１：　２）に低下した
。この沈澱に０．４％食塩水で平衡化したＤＥＡＥ−セ
ファデックスを添加（５（１ｍｌ溶液当り２（１）］）
　Ｌ、０〜４℃の条件下、約１時間接触処理し、処理後
濾過にてＤＥＡＥ−セファデックスを除き濾過液（Ｉｇ
Ｇ溶液）を回収した。
ＩｇＧ画分に２％ソルビトール、０．５％Ｎａ　Ｃｊ！
および１％アルブミンを添加溶解し、ｐＨ６，８とした
後、除菌濾過し、凍結乾燥して静注用免疫グロブリン製
剤を得た。
本製剤は、実質的にＩｇＧ単量体のみを含み、ヒト血液
型抗体量も充分少なく、抗補体価も１゜〜１５ＣＨ５０
程度であった。
また、溶解性も高く、静注用免疫グロブリンとしての主
基準にも合格した。

Claims (13)

    【特許請求の範囲】
  1. （１）免疫グロブリンを含む画分を出発原料とする、以
    下の処理からなる静注用免疫グロブリン製剤の製造方法
    ： （ａ）ｐＨ４〜６、イオン強度０．０００１〜０．１Ｍ
    、温度０〜４℃の条件下、分子量１，０００〜１０，０
    ００のポリエチレングリコール４〜１０ｗ／ｖ％で処理
    して上清を回収する。 （ｂ）（ａ）の上清をｐＨ６〜９、イオン強度０．００
    ０１〜０．１Ｍ、温度０〜４℃の条件下、分子量１，０
    ００〜１０，０００のポリエチレングリコール１０〜１
    ５ｗ／ｖ％で処理して沈澱を回収する。 （ｃ）所望の工程で夾雑するウィルスが不活化するのに
    充分な条件下、安定化剤の存在下で加熱処理する。
  2. （２）（ｂ）の工程の後に、ｐＨ５〜８、イオン強度０
    ．０１〜０．２Ｍの条件下、固定化ヒト血液型物質で処
    理して非吸着画分を回収する工程を含むことを特徴とす
    る特許請求の範囲第（１）項記載の製造方法。
  3. （３）（ｂ）の沈澱を水性溶媒に溶解し、ｐＨ５〜８、
    イオン強度０．０１〜０．２Ｍの条件下、陰イオン交換
    体で処理して非吸着画分を回収する工程を含んでなる特
    許請求の範囲第（１）項または第（２）項記載の製造方
    法。
  4. （４）（ｂ）の沈澱、または特許請求の範囲第（３）項
    記載のイオン交換体処理による非吸着物を、ｐＨ５〜８
    、イオン強度０．０１〜０．２Ｍの条件下、固定化ジア
    ミン化合物で処理して非吸着画分を回収した後固定化ヒ
    ト血液型物質で処理する特許請求の範囲第（２）項記載
    の製造方法。
  5. （５）加熱処理が含湿度３％以下の乾燥状態で行われる
    特許請求の範囲第（１）項〜第（４）項のいずれかに記
    載の製造方法。
  6. （６）加熱処理が固定化ヒト血液型物質で処理して非吸
    着画分を回収工程後の粗グロブリン画分において行われ
    る特許請求の範囲第（５）項記載の製造方法。
  7. （７）加熱処理が溶液状態で行われる特許請求の範囲第
    （１）項〜（４）項記載の製造方法。
  8. （８）加熱処理が（ｂ）の処理後に行われ、加熱処理後
    、さらに（ａ）および（ｂ）の処理を行う特許請求の範
    囲第（７）項記載の製造方法。
  9. （９）出発原料画分を夾雑するウィルスが不活化するの
    に十分な条件下、安定化剤の存在下で加熱処理した後に
    、下記（ａ）および（ｂ）の処理を行う特許請求の範囲
    第（７）項記載の製造方法。 （ａ）ｐＨ４〜６、イオン強度０．０００１〜０．１Ｍ
    、温度０〜４℃の条件下、分子量１，０００〜１０，０
    ００のポリエチレングリコール４〜１０ｗ／ｖ％で処理
    して上清を回収する、 （ｂ）（ａ）の上清をｐＨ７〜９、イオン強度０．００
    ０１〜０．１Ｍ、温度０〜４℃の条件下、分子量１，０
    ００〜１０，０００のポリエチレングリコール１０〜１
    ５ｗ／ｖ％で処理して沈澱を回収する。
  10. （１０）（ｂ）の沈澱を水性溶媒に溶解し、陰イオン交
    換体で処理を行う、特許請求の範囲第（９）項記載の製
    造方法。
  11. （１１）陰イオン交換体で処理を行う際の条件が、ｐＨ
    ５〜８、イオン強度０．０１〜０．２Ｍである特許請求
    の範囲第（１０）項記載の製造方法。
  12. （１２）（ｂ）の沈澱を水性溶媒に溶解し、これを陰イ
    オン交換体で処理して非吸着画分を回収し、さらに固定
    化ヒト血液型物質処理を行う、特許請求の範囲第（１０
    ）項または第（１１）項のいずれかに記載の製造方法。
  13. （１３）（ｂ）の沈澱を水性溶媒に溶解し、これを固定
    化ヒト血液型物質処理して非吸着画分を回収し、さらに
    陰イオン交換体処理を行う、特許請求の範囲第（１０）
    項または第（１１）項のいずれかに記載の製造方法。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001514672A (ja) * 1997-12-24 2001-09-11 アルファー セラピューティック コーポレーション 静脈投与用ガンマグロブリンの製造方法とその生産物
JP2003528803A (ja) * 1999-05-20 2003-09-30 アルファ・セラピューティック・コーポレーション 静注用免疫グロブリンの２回ウイルス不活化方法

Families Citing this family (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0778025B2 (ja) * 1990-03-20 1995-08-23 日本赤十字社 免疫グロブリンｇの製造方法
EP0674531A1 (de) * 1992-12-16 1995-10-04 IMMUNO Aktiengesellschaft Verfahren zur herstellung eines virussicheren biologischen präparates
DE4320294A1 (de) * 1993-06-18 1994-12-22 Immuno Ag Verwendung von humanem Protein C zur Verhinderung und Behandlung von Thrombozytenablagerungen
DE4434538C2 (de) * 1993-10-06 2000-08-10 Immuno Ag Verfahren zur Virusinaktivierung in Gegenwart eines Polyethers und eines chaotropen Agens
HRP940645A2 (en) * 1993-10-06 1996-12-31 Immuno Ag Process for virus deactivation in the presence of polyalkylene glycol and the pharmaceutical preparation thus obtained
US6632648B1 (en) * 1996-05-14 2003-10-14 Elan Drug Delivery Limited Methods of terminal sterilization of fibrinogen
US6124437A (en) * 1997-03-19 2000-09-26 Welfide Corporation Immunoglobulin preparation and preparation process thereof
ES2182202T5 (es) * 1997-10-23 2007-12-01 Mitsubishi Pharma Corporation Preparacion de inmunoglobulinas para inyeccion intravenosa apta para ser almacenada a temperatura ambiente.
US6162904A (en) * 1997-12-24 2000-12-19 Alpha Therapeutic Corporation Manufacturing method for intraveneously administrable immune globulin and resultant product
AU756071B2 (en) * 1999-06-15 2003-01-02 Grifols, Inc. Manufacturing method for intravenous immune globulin and resultant product
AU2005229674B2 (en) * 2004-11-18 2010-11-04 Kedrion Melville Inc. Low concentration solvent/detergent process of immuneglobulin with pre-treatment
FR2895263B1 (fr) 2005-12-26 2008-05-30 Lab Francais Du Fractionnement Concentre d'immunoglobines g (lg) appauvri en anticorps anti-a et anti-b, et en igg polyreactives
TWI532498B (zh) 2008-03-17 2016-05-11 巴克斯特保健公司 供免疫球蛋白及玻尿酸酶之皮下投藥之用的組合及方法
JP2012513425A (ja) 2008-12-22 2012-06-14 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 免疫グロブリンの精製
DK2477603T3 (en) 2009-09-17 2016-06-13 Baxalta Inc STABLE CO-DEVELOPMENT OF hyaluronidase and Immunoglobulin, AND METHODS OF USE THEREOF
ES2381828B1 (es) 2012-03-20 2012-11-16 Grifols, S.A. PROCEDIMIENTO PARA OBTENER UNA COMPOSICION DE IgG MEDIANTE TRATAMIENTO TERMICO

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5320415A (en) * 1976-08-06 1978-02-24 Coval M L Production of gammaa globlin capaple of administering into vein and gammaagloblin produced by said method
JPS5732228A (en) * 1980-08-05 1982-02-20 Green Cross Corp:The Preparation of immunoglobulin usable for intravenous injection
JPS6178730A (ja) * 1984-09-25 1986-04-22 Green Cross Corp:The 免疫グロブリンの加熱処理方法
JPS61191622A (ja) * 1985-02-21 1986-08-26 Green Cross Corp:The γ−グロブリンの加熱処理方法

Family Cites Families (22)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3869436A (en) * 1971-06-01 1975-03-04 Statens Bakteriologiska Lab Method for fractionating plasma proteins using peg and ion-exchangers
CA1064396A (en) * 1975-02-18 1979-10-16 Myer L. Coval Fractional precipitation of gamma globulin with polyethylene glycol
US4100149A (en) * 1975-08-28 1978-07-11 Rhone-Poulenc Industries Method of separating proteins by ion exchange
US4165370A (en) * 1976-05-21 1979-08-21 Coval M L Injectable gamma globulin
US4075193A (en) * 1976-11-26 1978-02-21 Parke, Davis & Company Process for producing intravenous immune globulin
US4124576A (en) * 1976-12-03 1978-11-07 Coval M L Method of producing intravenously injectable gamma globulin
DE2901822A1 (de) * 1979-01-18 1980-07-31 Biotest Serum Institut Gmbh Verfahren zur herstellung einer fuer die intravenoese applikation geeigneten immunglobulinloesung, die igm in ankonzentrierter form enthaelt
US4305870A (en) * 1979-01-31 1981-12-15 Immuno Aktiengesellschaft Fur Chemisch-Medizinische Produkte Intravenous plasma derivatives and their production
JPS55124719A (en) * 1979-03-22 1980-09-26 Kowa Co Preparation of immune globulin administrable by intravenous injection
US4278594A (en) * 1979-06-19 1981-07-14 David Amrani Process for separation and isolation of AHF, von Willebrand's ristocetin cofactor (VWF:RCF) and fibronectin from blood plasma
US4272521A (en) * 1979-07-16 1981-06-09 Cutter Laboratories, Inc. Purified immune serum globulin
JPS56113713A (en) * 1980-02-14 1981-09-07 Chemo Sero Therapeut Res Inst Preparation of immunoglobulin with high content of monomer
US4440679A (en) * 1980-03-05 1984-04-03 Cutter Laboratories, Inc. Pasteurized therapeutically active protein compositions
US4499073A (en) * 1981-08-24 1985-02-12 Cutter Laboratories, Inc. Intravenously injectable immune serum globulin
US4371520A (en) * 1981-10-28 1983-02-01 The Green Cross Corporation Process for preparing immunoglobulin suitable for intravenous injection
US4664913A (en) * 1982-05-24 1987-05-12 Xoma Corporation Method for treating plasma for transfusion
US4639513A (en) * 1984-02-02 1987-01-27 Cuno Inc. Intravenously injectable immunoglobulin G (IGG) and method for producing same
DE3473407D1 (en) * 1983-05-02 1988-09-22 Immuno Ag Method of inactivating pathogens
AT389815B (de) * 1984-03-09 1990-02-12 Immuno Ag Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutprodukten
ATE59144T1 (de) * 1984-07-07 1991-01-15 Armour Pharma Gmbh Verfahren zur herstellung von gamma-globulin zur intravenoesen anwendung.
IT8504813V0 (it) * 1985-03-13 1985-03-13 Piovani Natalino Mega Snc Portapane con apertura frontale chiudibile mediante una serracinesca e fiancate ricoperte da carte protettivi
US4606825A (en) * 1985-04-22 1986-08-19 J. T. Baker Chemical Company Purification of immunoglobulin G

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5320415A (en) * 1976-08-06 1978-02-24 Coval M L Production of gammaa globlin capaple of administering into vein and gammaagloblin produced by said method
JPS5732228A (en) * 1980-08-05 1982-02-20 Green Cross Corp:The Preparation of immunoglobulin usable for intravenous injection
JPS6178730A (ja) * 1984-09-25 1986-04-22 Green Cross Corp:The 免疫グロブリンの加熱処理方法
JPS61191622A (ja) * 1985-02-21 1986-08-26 Green Cross Corp:The γ−グロブリンの加熱処理方法

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001514672A (ja) * 1997-12-24 2001-09-11 アルファー セラピューティック コーポレーション 静脈投与用ガンマグロブリンの製造方法とその生産物
JP2003528803A (ja) * 1999-05-20 2003-09-30 アルファ・セラピューティック・コーポレーション 静注用免疫グロブリンの２回ウイルス不活化方法

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