CN110023304A - 钙蛋白酶调节剂及其治疗用途 - Google Patents

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CN110023304A CN201780073419.1A CN201780073419A CN110023304A CN 110023304 A CN110023304 A CN 110023304A CN 201780073419 A CN201780073419 A CN 201780073419A CN 110023304 A CN110023304 A CN 110023304A
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布拉德·欧文·巴克曼
约翰·比蒙德·尼古拉斯
袁沈东
马克·阿德勒
库马拉斯瓦米·艾玛研
马靖原
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Brad Therapy Co
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Abstract

本文公开了小分子钙蛋白酶调节剂组合物、药物组合物、其用途和制备。

Description

钙蛋白酶调节剂及其治疗用途
技术领域
本发明涉及化学和医学领域。更具体地，本发明涉及作为小分子钙蛋白酶调节剂的非大环α-酮酰胺化合物、组合物、其制备方法及其作为治疗剂的用途。
背景技术
在发达国家，纤维化疾病估计占死亡人数的45％，但这些疾病的治疗方法的开发仍处于初期阶段。目前针对纤维化疾病，例如特发性肺纤维化、肾纤维化、系统性硬化和肝硬化的治疗物数量很少，并且仅缓解纤维化的一些症状，但却不能治疗根本原因。
尽管目前对引起这些病况的不同病因学理解有限，但在纤维化疾病中受影响的器官的表型具有相似性，这强烈支持存在共同的致病途径。目前，人们认识到纤维化疾病的主要驱动因素是高转化生长因子-β(TGFβ)信号传导途径，其可以促进正常功能细胞向纤维化促进细胞的转化。这些转化后的细胞被称为“肌成纤维细胞”，它们可以分泌大量的细胞外基质蛋白和基质降解酶，导致瘢痕组织的形成和最终的器官衰竭。该细胞过程是转化性的并且被称为“肌成纤维细胞分化”(其包括上皮-间质转化(EpMT)及其变形，如内皮-间质转化(EnMT)和成纤维细胞-肌成纤维细胞转化(FMT))。该过程是治疗纤维化疾病的主要靶标。还显示肌成纤维细胞分化发生在长期暴露于高TGFβ的癌细胞内，导致静止的上皮细胞变得有活动性、侵袭性和转移性。因此，在癌症的背景下，已经证明该信号传导与耐药性的获得、免疫系统逃避和干细胞特性的发展相关联。
尽管肌成纤维细胞分化抑制药物有巨大的潜力并且为开发有效治疗进行了众多尝试，但迄今为止收集的数据尚未转化为实际治疗。这部分是由于缺乏理想的靶蛋白。靶向肌成纤维细胞分化过程的初始策略集中于通过各种方法近端抑制TGFβ信号传导途径，这些方法包括靶向配体激活剂(例如α-v整联蛋白)、配体-受体相互作用(例如，使用中和抗体)或TGFβ受体激酶活性(例如，阻断信号转导的小分子化合物药物)。不幸的是，TGFβ是具有许多生理功能的多效细胞因子，使得TGFβ信号传导的整体抑制也与严重的副作用相关。另外，目前的数据表明，这种近端抑制可能易受病理解决方案策略的影响(即，由于冗余或补偿)，这将限制这些药物的效用。进一步复杂化的问题是，在癌症中，TGFβ信号传导在早期作为抗肿瘤生长抑制剂起作用，但随后变成肿瘤促进剂，并且是如此强烈需要选择性抑制信号传导的致病因子的另一个原因。鉴于这些固有的局限性，目前的治疗策略已经重新关注TGFβ信号传导中关键远端事件的识别和抑制，这理论上优先靶向TGFβ信号传导的病理功能，而非生理功能。
发明内容
一种化合物，其具有式I的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
A1选自由以下组成的组：任选取代的5-10元杂环基，条件是5-10元杂环基不被氧代取代、任选取代的5元、8元或9元杂芳基、和任选取代的C3-10碳环基；
A2选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基和任选取代的C3-10碳环基、-CR2-、-S-、-S(＝O)-、-SO2-、-O-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-C≡C-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-和单键；
A4选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-4烷基、-(CR2)n-S-(CR2)n-、-(CR2)n-S(＝O)-(CR2)n-、-(CR2)n-SO2-(CR2)n-、-(CR2)n-O-(CR2)n-、-(CR2)n-C(＝S)-(CR2)n-、-(CR2)n-C(＝O)-(CR2)n-、-(CR2)n-NR-(CR2)n-、-(CR2)n-CH＝CH-(CR2)n-、-(CR2)n-OC(O)NH-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(O)NH-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(O)O-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(O)-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(S)NH-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(S)O-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(S)-(CR2)n-和单键；
当A2和A4为单键时，A3直接与A8连接；
A3选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基和任选取代的C3-10碳环基，或者如果A2选自任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基和任选取代的C3-10碳环基，那么A3选自由以下组成的组：氢、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、-C≡CH和任选取代的2元至5元聚乙二醇；
A5选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-8烷基、-S-、-S(＝O)-、-SO2-、-O-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-和单键；A6选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基和任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-8烷基、任选取代的C2-8烯基、任选取代的-O-C1-6烷基、任选取代的-O C2-6烯基、-OSO2CF3和任意天然或非天然氨基酸侧链；
A7选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-8烷基、-S-、S(＝O)-、-SO2-、-O-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-和单键；
当A5和A7为单键时，A6直接与R8所连接的碳连接；
A8是A1的环成员，并且选自由C、CH和N组成的组；
R8选自由以下组成的组：-COR1、-CN、-CH＝CHSO2R和-CH2NO2；
R1选自由以下组成的组：H、-OH、C1-4卤代烷基、-COOH、-CH2NO2、-C(＝O)NOR、-NH2、-CONR2R3、-CH(CH3)＝CH2、-CH(CF3)NR2R3、-C(F)＝CHCH2CH3、
R14是卤素；
每个R、R2和R3独立地选自-H、任选取代的C1-4烷基、任选取代的C1-8烷氧基烷基、任选取代的2元至5元聚乙二醇、任选取代的C3-7碳环基、任选取代的5-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基和任选取代的5-10元杂芳基；并且
R6独立地选自-H和任选取代的C1-4烷基。
本文公开的其他实施方案包括一种药物组合物，其包含治疗有效量的本文公开的化合物和药学上可接受的赋形剂。
本文公开的其他实施方案包括一种治疗至少部分地由CAPN1、CAPN2或CAP9或其组合的生理作用介导的疾病和病况的方法，其包括向有此需要的受试者施用本文公开的化合物。
在一些实施方案中，本文公开的化合物是以下之一的特异性抑制剂：CAPN1、CAPN2或CAPN9。
在一些实施方案中，本文公开的化合物是以下之一的选择性抑制剂：CAPN1、CAPN2或CAPN9。
在一些实施方案中，本文公开的化合物是以下之一的选择性抑制剂：CAPN1和CAPN2，或CAPN1和CAPN9，或CAPN2和CAPN9。
在一些实施方案中，本文公开的化合物是CAPN1、CAPN2和/或CAPN9的有效抑制剂。
在一些实施方案中，本文公开的非大环α-酮酰胺化合物在治疗由纤维化或炎症引起的一系列病况，并且特别包括与肌成纤维细胞分化相关的那些病况中广泛有效。因此，本文公开的化合物是用于多种疾病或病况的活性治疗剂，所述疾病或病况包括或产生包括但不限于以下的症状：肝纤维化、肾纤维化、肺纤维化、过敏性肺炎、间质纤维化、系统性硬皮病、黄斑变性、胰腺纤维化、脾纤维化、心肌纤维化、纵隔纤维化、骨髓纤维化、心内膜心肌纤维化、腹膜后纤维化、进行性大块纤维化、肾源性系统性纤维化、手术纤维化并发症、慢性移植物血管病变和/或移植器官慢性排斥反应、缺血再灌注损伤相关纤维化、注射纤维化、肝硬化、弥漫性实质性肺病、输精管切除术后疼痛综合征和类风湿性关节炎疾病或病症。在其他实施方案中，本文公开的化合物可用于代谢和反应动力学研究、检测和成像技术以及放射性治疗。
在一些实施方案中，本文公开的化合物用于治疗疾病或病况或在受试者中产生包括但不限于以下症状的疾病或病况：肝纤维化、肾纤维化、肺纤维化、过敏性肺炎、间质纤维化、系统性硬皮病、黄斑变性、胰腺纤维化、脾纤维化、心肌纤维化、纵隔纤维化、骨髓纤维化、心内膜心肌纤维化、腹膜后纤维化、进行性大块纤维化、肾源性系统性纤维化、手术纤维化并发症、慢性移植物血管病变和/或移植器官慢性排斥反应、缺血再灌注损伤相关纤维化、注射纤维化、肝硬化、弥漫性实质性肺病、输精管切除术后疼痛综合征和类风湿性关节炎疾病。
在某些实施方案中，提供了用于减轻或改善至少部分地受钙蛋白酶1(CAPN1)、钙蛋白酶2(CAPN2)和/或钙蛋白酶9(CAPN9)的酶活性影响，或至少部分地受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9的酶活性介导的病况或病症的方法，其中所述病况包括或产生的症状包括：肝纤维化、肾纤维化、肺纤维化、过敏性肺炎、间质纤维化、系统性硬皮病、黄斑变性、胰腺纤维化、脾纤维化、心肌纤维化、纵隔纤维化、骨髓纤维化、心内膜心肌纤维化、腹膜后纤维化、进行性大块纤维化、肾源性系统性纤维化、手术纤维化并发症、慢性移植物血管病变和/或移植器官慢性排斥反应、缺血再灌注损伤相关纤维化、注射纤维化、肝硬化、弥漫性实质性肺病、输精管切除术后疼痛综合征和/或类风湿性关节炎。
在一些实施方案中，本发明的方法、化合物和/或组合物用于预防性治疗。
在一些实施方案中，抑制CAPN1、CAPN2和/或CAPN9的化合物在人类疾病的动物模型中显示功效。具体地，用本文公开的化合物对小鼠、兔和其它哺乳动物受试者进行体内治疗确定了这些化合物作为治疗剂来调节人体中的CAPN1、CAPN2和/或CAPN9活性，从而改善相应的医学病况的用途。
一些实施方案提供了用来抑制肌成纤维细胞分化的化合物、药物组合物和方法。一些实施方案提供了用于抑制CAPN1、CAPN2和/或CAPN9或这些酶活性的组合(例如CAPN1和CAPN2，或CAPN1和CAPN9，或CAPN2和CAPN9)的化合物、药物组合物和方法。一些实施方案提供了通过抑制CAPN1、CAPN2和/或CAPN9或这些酶活性的组合来治疗疾病和病症的方法。
具体实施方式
在一些实施方案中，提供了非大环α-酮酰胺的化合物，其充当钙蛋白酶调节剂。这些化合物的各种实施方案包括具有如上所述的式I结构的化合物或其药学上可接受的盐。式I的结构涵盖所有立体异构体和外消旋混合物，包括以下结构及其混合物：
在式(I)化合物的一些实施方案中，该化合物不选自由以下组成的组：
在式(I)化合物的一些实施方案中：
A1选自由以下组成的组：任选取代的6-10元杂环基，条件是6-10元杂环基不被氧代取代；任选取代的5元、8元或9元杂芳基；和任选取代的C3-10碳环基；
A2选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的C3-10碳环基、-CR2-、-S-、-S(＝O)-、-SO2-、-O-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-和单键；
A4选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-4烷基、-S-、S(＝O)-、-SO2-、-O-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-和单键；
A3选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基和任选取代的C3-10碳环基；
A6选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-8烷基、任选取代的-O-C1-6烷基、任选取代的-O C2-6烯基和任意天然或非天然氨基酸侧链；并且
每个R、R2和R3独立地选自-H、任选取代的C1-4烷基、任选取代的C3-7碳环基、任选取代的5-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基和任选取代的5-10元杂芳基；
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-a)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
A、B和D各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；并且每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组。
在式(I-a)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施方案中；A、B和D独立地选自由CH和N组成的组。在一些实施方案中，A是N，B是CH，并且D是CH。在一些实施方案中，A是CH，B是N，并且D是CH。
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-b)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
A、B和D各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；并且每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组。
在式(I-b)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施方案中；A、B和D独立地选自由CH和N组成的组。
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-c)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；X和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且R5选自由以下组成的组：-H、C1-4烷基、C1-C4卤代烷基和C3-7碳环基。
在式(I-c)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施方案中；X和Z独立地选自由CH和N组成的组。
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-d)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；X和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且R5选自由以下组成的组：-H、C1-4烷基、C1-C4卤代烷基和C3-7碳环基。
在式(I-d)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施方案中；X和Z独立地选自由CH和N组成的组。
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-e)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；X和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且R5选自由以下组成的组：-H、C1-4烷基、C1-C4卤代烷基和C3-7碳环基。
在式(I-e)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施方案中；X和Z独立地选自由CH和N组成的组。
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-f)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；X和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且R5选自由以下组成的组：-H、C1-4烷基、C1-C4卤代烷基和C3-7碳环基。
在式(I-f)化合物的一些实施方案中，Z是N，Y是NR5，并且X是CH。
在式(I-f)化合物的一些实施方案中，R5选自由-H、C1-4烷基、C1-C4卤代烷基和环丙基组成的组。
在式(I-f)化合物的一些实施方案中，Z是N，Y是O，并且X是C(R4)。在式(I-f)化合物的一些实施方案中，Z是N，Y是S，并且X是C(R4)。在式(I-f)化合物的一些实施方案中，Z是C(R4)，Y是S，并且X是C(R4)。
在式(I-f)化合物的一些实施方案中，Z是C(R4)，Y是O，并且X是C(R4)。
在式(I-f)化合物的一些实施方案中，Z是N，Y是S，并且X是N。在式(I-f)化合物的一些实施方案中，Z是N，Y是O，并且X是N。
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-g)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；X和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且R5选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基和C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)组成的组。
在式(I-g)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施方案中；X和Z独立地选自由CH和N组成的组。在式(I-g)化合物的一些实施方案中，Y是NR5，Z是N，并且X是CH。
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-h)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；X和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且R5选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基和C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)组成的组。
在式(I-h)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施方案中；X和Z独立地选自由CH和N组成的组。在式(I-h)化合物的一些实施方案中，X是CH，Z是N，并且Y是NR5。
在式(I-h)化合物的一些实施方案中，X是CH，Z是N，并且Y是NR5。在式(I-h)化合物的一些实施方案中，X是N，Z是C(R4)，并且Y是O。
在式(I-h)化合物的一些实施方案中，其中R4选自–H和C1-4烷基。
在式(I-h)化合物的一些实施方案中，X是N，Z是C(R4)，并且Y是S。在式(I-h)化合物的一些实施方案中，X是N，Z是N，并且Y是S。
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-j)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐。
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-k)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
X选自由C(OR5)、-C(R4)和N组成的组；R4选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且R5选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基和C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)组成的组。
在式(I-k)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施方案中；X和Z独立地选自由CH和N组成的组；
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-m)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
X和Z独立地选自由C(R4)和N组成的组；E选自由任选取代的C5-6碳环基和任选取代的5元至6元杂环基组成的组；并且每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组。
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-n)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
A选自由C(R4)和N组成的组；E选自由以下组成的组：任选取代的C5-6碳环基、任选取代的5元至6元杂环基、任选取代的5元至6元杂芳基和任选取代的苯基；并且每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组。
一些实施方案包括式(III)的化合物
或其药学上可接受的盐，其中：
A1选自由以下组成的组：任选取代的5-10元杂环基，条件是6-10元杂环基不被氧代取代；任选取代的5元、8元或9元杂芳基；和任选取代的C3-10碳环基；
A2选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的C3-10碳环基、-CR2-、-S-、-S(＝O)-、-SO2-、-O-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-C≡C-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-和单键；
A4选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-4烷基、-(CR2)n-S-(CR2)n-、-(CR2)n-S(＝O)-(CR2)n-、-(CR2)n-SO2-(CR2)n-、-(CR2)n-O-(CR2)n-、-(CR2)n-C(＝S)-(CR2)n-、-(CR2)n-C(＝O)-(CR2)n-、-(CR2)n-NR-(CR2)n-、-(CR2)n-CH＝CH-(CR2)n-、-(CR2)n-OC(O)NH-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(O)NH-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(O)O-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(O)-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(S)NH-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(S)O-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(S)-(CR2)n-和单键；
当A2和A4为单键时，A3直接与A8连接；
A3选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基和任选取代的C3-10碳环基，或者如果A2选自任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基和任选取代的C3-10碳环基，那么A3选自由以下组成的组：氢、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、-C≡CH和任选取代的2元至5元聚乙二醇；
G是任选取代的C3至C7碳环基或任选取代的4元至7元杂环基；
A8是A1的环成员，并且选自由C和N组成的组；
R8选自由以下组成的组：-COR1、-CN、-CH＝CHSO2R、-CH2NO2；
R1选自由以下组成的组：H、-OH、C1-4卤代烷基、-COOH、-CH2NO2、-C(＝O)NOR、-NH2、-CONR2R3、-CH(CH3)＝CH2、-CH(CF3)NR2R3、-C(F)＝CHCH2CH3、
R14是卤素；并且
每个R、R2和R3独立地选自-H、任选取代的C1-4烷基、任选取代的C1-8烷氧基烷基、任选取代的2元至5元聚乙二醇、任选取代的C3-7碳环基、任选取代的5-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C6-10芳基(C1-C6)烷基和任选取代的5-10元杂芳基；R6独立地选自-H和任选取代的C1-4烷基；并且每个n独立地选择为0至3的整数。
式(III)化合物的一些实施方案包括具有式(III-a)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A2、A4和A3的任选取代的部分中的至少一个被18F取代。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A2、A4和A3的任选取代的部分中的至少一个被含有一个或多个11C的C1-C6烷基取代。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施方案中，A3选自由 组成的组；并且A9选自由以下组成的组：H、C6-10芳基、5-10元杂芳基、3-10元杂环基和C3-10碳环基、C1-4烷基；X2、X1和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；Y1选自由NR5、O和S组成的组；J、L、M1和M2各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；R4选自由以下组成的组：-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基、卤素、羟基和C1-C6烷氧基；R5选自由以下组成的组：-H、C1-4烷基、C1-C4卤代烷基和C3-7碳环基。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A2是-CH2-。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A2是–CH＝CH-。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A2是-O-。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A2是S。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A2是单键。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A2是苯基。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A3是任选取代的C6-10芳基。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A2选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5元或7-10元杂芳基、任选取代的C3-10碳环基、-S-、-S(＝O)-、-SO2-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-C≡C-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-和-NHC(S)-。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A2选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的C3-10碳环基和-C≡C-。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A2选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基和任选取代的C3-10碳环基。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A4是单键。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A3选自由苯基、 组成的组。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A3是任选取代的5-10元杂芳基。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，A3选自由 组成的组。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，其中A2是单键，A4是单键，并且A3是任选取代的C6-10芳基或任选取代的5-10元杂芳基。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，其中A3具有以下结构：
其中J、L、M1、M2、和M3各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；并且每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，其中J、L、M1、M2和M3中的每一个是C(R4)。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，其中每个R4独立地选自–H和卤素。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，其中M1是卤素，并且J、L、M2和M3中的每一个是CH。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，其中L是卤素，并且J、M1、M2和M3中的每一个是CH。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，其中A3具有选自由以下组成的组的结构：
其中J、L、M1、M2、M3、M4和M5各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；并且每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)或(I-p)的一些实施方案中，其中A3具有以下结构：
其中X选自由C(R4)和N组成的组；Y选自O和S；并且R4选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组。
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-o)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；X1选自由C(R4)和N组成的组；J、L、M1、M2和M3各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；R4选自由以下组成的组：-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基、卤素、羟基和C1-C6烷氧基；R5选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基和C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)组成的组。
在式(I-o)的化合物或其药学上可接受的盐的一些实施方案中；J、L、M1、M2和M3独立地选自由CH和N组成的组。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，其中A5、A7、和A6的任选取代的部分中的至少一个被18F取代。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，其中A5、A7、和A6的任选取代的部分中的至少一个被含有一个或多个11C的C1-C6烷基取代。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，A6是苯基。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，A6选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-8烷基、任选取代的-O-C1-6烷基和任选取代的-OC2-6烯基。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，A7是-CH2-。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，A7是–CH＝CH-。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，A7是–O-。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，A7是S。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，A7是单键。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，A7是任选取代的C6-10芳基。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，A7是苯基。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，A5是-CH2-。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，其中A5是-CH2-或-CH2CH2-；A7是单键；并且A6选自由以下组成的组：C1-C4烷基、任选取代的苯基、任选取代的5-10元杂芳基。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，A6是任选取代的苯基。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，其中A6是未取代的苯基。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，其中A6是任选被一个或多个C1-4烷基、C3-7碳环基、卤素、羟基和C1-C6烷氧基取代的苯基。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，A6具有以下结构：
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，其中A5是单键，A7是单键；并且A6是C1-C5烷基。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，A6选自由以下组成的组：乙基、正丙基、异丙基、异丁基、2,2-二甲基丙基和1,2-二甲基丙基。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，R1是CONR2R3。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，R2是-H并且R3是任选取代的C1-4烷基。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，其中R2是-H，并且R3选自由以下组成的组：-H、任选被C-酰氨基取代的C1-C4烷基和C3-C6环烷基。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，R3选自乙基或环丙基。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，R3是被C-酰氨基取代的甲基。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，R3是H。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，R3是任选取代的C1-4烷基。
在式(I)、(III)、(III-a)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，R3是苄基。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，R6是-H和任选取代的C1-4烷基。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，R6是任选取代的C1-4烷基。
在式(I)、(I-a)、(I-b)、(I-c)、(I-d)、(I-e)、(I-f)、(I-g)、(I-h)、(I-j)、(I-k)、(I-m)、(I-n)、(I-o)或(I-p)的一些实施方案中，R6是甲基。
在式(I)的一些实施方案中，A1选自由以下组成的组：任选取代的6-10元杂环基；任选被一个或多个C1-4烷基、C3-7碳环基、卤素、羟基或C1-C6烷氧基取代的5元杂环基；任选取代的5元、8元或9元杂芳基；和任选取代的C3-10碳环基。
在式(I)的一些实施方案中，A1选自由以下组成的组：任选被一个或多个C1-4烷基、C3-7碳环基、卤素、羟基或C1-C6烷氧基取代的5元杂环基和任选取代的5元杂芳基。
在式(I)的一些实施方案中，A1是任选取代的5元杂芳基。
式(I)化合物的一些实施方案包括具有式(I-p)结构的化合物：
或其药学上可接受的盐。
一些实施方案提供式(II)的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
P2是任选取代的环状部分，其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶9 P2口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶9P2口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶9 P2口袋部分选自由Gly190、Phe233、Gly253、His254和Ala255组成的组；
L1是键或由1至25个原子组成的部分，所述原子选自由碳、氧、氮、氢和硫组成的组；
P3是由L1定位的任选取代的环状部分，并且其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶9P3口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶9 P3口袋部分的 或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶9 P3口袋部分选自由Gly189、Gly190、Ser191、Thr236和Gly253组成的组；
R10是氧代并且由P2定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R10与钙蛋白酶9Gly190酰胺形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶9 Gly190酰胺的或更近之内；
R11是氮，并且由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R11与钙蛋白酶9 Gly253羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶9 Gly253羰基的或更近之内；
L2是键或由1至25个原子组成的部分，所述原子选自由碳、氧、氮、氢和硫组成的组；
P1是由L2定位的部分，并且其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶9 P1口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶9 P1口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶9 P1口袋部分选自由Gly95、Lys188、Gly189和Ser242组成的组；
R9是由与其连接的碳定位的部分，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶9部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶9部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶9部分选自由Gln91、Cys97和His254组成的组；并且
R6选自-H和任选取代的C1-4烷基。
式(II)化合物的一些实施方案包括一些化合物，其中；R9是–(C＝R12)(C＝R13)NR2R3；
R12是氧代并且其被定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R12与钙蛋白酶9His254咪唑形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶9 His254咪唑的或更近之内；
R13是氧代并且其被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R13与至少一个钙蛋白酶9部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶9部分的 或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶9部分选自由Gln91侧链羧酰胺和Cys97骨架酰胺组成的组；并且
R2和R3独立地选自-H、任选取代的C1-4烷基、任选取代的C3-7碳环基、任选取代的5-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C6-10芳基(C1-C6)烷基和任选取代的5-10元杂芳基。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R12被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R12在钙蛋白酶9 His254咪唑的2.6至或更近之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R12被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R12在钙蛋白酶9 His254咪唑的2.6至或更近之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R13被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R13在包括Gln91侧链甲酰胺和Cys97骨架酰胺的钙蛋白酶9部分的2.6至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R13被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R13在包括Gln91侧链甲酰胺和Cys97骨架酰胺的钙蛋白酶9部分的2.6至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中，R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶9部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶9部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶9部分选自由Gln91、Cys97和His254组成的组。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R9的至少一个原子在包括Gln91侧链甲酰胺和Cys97骨架酰胺的钙蛋白酶9部分的2.6至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R9的至少一个原子在包括Gln91侧链甲酰胺和Cys97骨架酰胺的钙蛋白酶9部分的2.9至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R9中在其连接点的碳原子与Cys97形成共价键。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中共价键长度在1.7和之间。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P2是任选取代的5元杂芳基。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R11与钙蛋白酶9 Gly253羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶9 Gly253羰基的或更近之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，P2的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶9 P2口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶9 P2口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1 P2口袋部分选自由Gly208、Ser251、Gly271、His272和Ala273组成的组；
P3由L1定位，并具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，P3的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1 P3口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1 P3口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1P3口袋部分选自由Gly207、Gly208、Ser209、Ile254和Gly271组成的组；
R10由P2定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R10与钙蛋白酶1 Gly208酰胺形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶1 Gly208酰胺的或更近之内；
R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R11与钙蛋白酶1Gly271羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶1 Gly271羰基的或更近之内；
P1由L2定位，并具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，P1的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1 P1口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1 P1口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1P1口袋部分选自由Gly113、Ser206、Gly207和Met260组成的组；并且
R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1部分选自由Gln109、Cys115和His272组成的组。
式(II)化合物的一些实施方案包括的化合物中：
P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，P2的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2 P2口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2P2口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2 P2口袋部分选自由Gly198、Ser241、Gly261、His262和Ala263组成的组；
P3由L1定位，并具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，P3的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2 P3口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2 P3口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2 P3口袋部分选自由Gly197、Gly198、Ala199、Ile244和Gly261组成的组；
R10由P2定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R10与钙蛋白酶2 Gly198酰胺形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶2 Gly198酰胺的或更近之内；
R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R11与钙蛋白酶2Gly261羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶2 Gly261羰基的或更近之内；
P1由L2定位，并具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，P1的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2 P1口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2 P1口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2 P1口袋部分选自由Gly103、Ser196、Gly197和Ser250组成的组；并且
R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2部分选自由Gln99、Cys105和His262组成的组。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Gly190羰基氧的2.6至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Gly190羰基氧的2.9至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Phe233中的碳原子的2.8到之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Phe233中的碳原子的2.9至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Gly253羰基氧的2.6至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Gly253羰基氧的2.9至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Ala255氮的2.9至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Ala255氮的3.2至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P3具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子在Gly189 C-阿尔法的3.1至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P3具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子在Gly189 C-阿尔法的3.2至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P3具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子在Gly190羰基氧的3.0至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P3具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子在Gly190羰基氧的3.2至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P3具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子在Ser191氮的3.2至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P3具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子在Ser191氮的3.2至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R10由P2定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R10在钙蛋白酶9 Gly190酰胺的2.6至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R10由P2定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R10在钙蛋白酶9 Gly190酰胺的2.9至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R11在钙蛋白酶9 Gly253羰基的2.6至或更近之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R11在钙蛋白酶9 Gly253羰基的2.9至或更近之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P1由L2定位，并且具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子在Gly95羰基氧的3.2至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P1由L2定位，并且具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子在Gly95羰基氧的3.2至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P1由L2定位，并且具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子在Lys188羰基碳的3.2至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P1由L2定位，并且具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子在Lys188羰基碳的2.6至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P1由L2定位，并且具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子在Gly189C-阿尔法的3.0至之内。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P1由L2定位，并且具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子在Gly189C-阿尔法的3.2至之内。
一些实施方案提供式(II)的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中：
P2是任选取代的环状部分，其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，P2的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1 P2口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1 P2口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1 P2口袋部分选自由Gly208、Ser251、Gly271、His272和Ala273组成的组；
L1是键或由1至25个原子组成的部分，所述原子选自由碳、氧、氮、氢和硫组成的组；
P3是由L1定位的任选取代的环状部分，并且其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，P3的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1 P3口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1 P3口袋部分的 或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1 P3口袋部分选自由Gly207、Gly208、Ser209、Ile254和Gly271组成的组；
R10是氧代并且由P2定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R10与钙蛋白酶1Gly208酰胺形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶1 Gly208酰胺的或更近之内；
R11是氮，并且由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R11与钙蛋白酶1 Gly271羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶1 Gly271羰基的或更近之内；
L2是键或由1至25个原子组成的部分，所述原子选自由碳、氧、氮、氢和硫组成的组；
P1是由L2定位的部分，并且其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，P1的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1 P1口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1 P1口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1 P1口袋部分选自由Gly113、Ser206、Gly207和Met260组成的组；
R9是由与其连接的碳定位的部分，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1部分选自由Gln109、Cys115和His272组成的组；并且R6选自-H和任选取代的C1-4烷基。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R9是–(C＝R12)(C＝R13)NR2R3；
R12是氧代并且其被定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R12与钙蛋白酶1His272咪唑形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶1 His272咪唑的或更近之内；
R13是氧代并且其被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R13与至少一个钙蛋白酶1部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1部分的 或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1部分选自由Gln109侧链羧酰胺和Cys115骨架酰胺组成的组；并且
R2和R3独立地选自-H、任选取代的C1-4烷基、任选取代的C3-7碳环基、任选取代的5-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C6-10芳基(C1-C6)烷基和任选取代的5-10元杂芳基；
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中，R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1部分选自由Gln109、Cys115和His272组成的组。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R9中在其连接点的碳原子与Cys115形成共价键。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中共价键长度在1.7和之间。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P2是任选取代的5元杂芳基。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R11与钙蛋白酶1 Gly271羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶1 Gly271羰基的或更近之内。
一些实施方案提供式(II)的化合物：
或其药学上可接受的盐，其中
P2是任选取代的环状部分，其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，P2的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2 P2口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2 P2口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2 P2口袋部分选自由Gly198、Ser241、Gly261、His262和Ala263组成的组；
L1是键或由1至25个原子组成的部分，所述原子选自由碳、氧、氮、氢和硫组成的组；
P3是由L1定位的任选取代的环状部分，并且其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，P3的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2 P3口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2 P3口袋部分的 或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2 P3口袋部分选自由Gly197、Gly198、Ala199、Ile244、和Gly261组成的组；
R10是氧代并且由P2定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R10与钙蛋白酶2Gly198酰胺形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶2 Gly198酰胺的或更近之内；
R11是氮，并且由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R11与钙蛋白酶2 Gly261羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶2 Gly261羰基的或更近之内；
L2是键或由1至25个原子组成的部分，所述原子选自由碳、氧、氮、氢和硫组成的组；
P1是由L2定位的部分，并且其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，P1的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2 P1口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2 P1口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2 P1口袋部分选自由Gly103、Ser196、Gly197和Ser250组成的组；
R9是由与其连接的碳定位的部分，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2部分选自由Gln99、Cys105和His262组成的组；并且R6选自-H和任选取代的C1-4烷基。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R9是–(C＝R12)(C＝R13)NR2R3；
R12是氧代并且其被定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R12与钙蛋白酶2His262咪唑形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶2 His262咪唑的或更近之内；
R13是氧代并且其被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R13与至少一个钙蛋白酶2部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2部分的 或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2部分选自由Gln99侧链羧酰胺和Cys105骨架酰胺组成的组；并且
R2和R3独立地选自-H、任选取代的C1-4烷基、任选取代的C3-7碳环基、任选取代的5-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C6-10芳基(C1-C6)烷基和任选取代的5-10元杂芳基；
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中，R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2部分选自由Gln99、Cys105和His262组成的组。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R9中在其连接点的碳原子与Cys195形成共价键。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中共价键长度在1.7和之间。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中P2是任选取代的5元杂芳基。
式(II)化合物的一些实施方案包括一种化合物，其中R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R11与钙蛋白酶2 Gly261羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶2 Gly261羰基的或更近之内。
一些实施方案包括选自由以下组成的组的化合物：化合物1至90、化合物92-94、化合物195、化合物197至235、化合物238至273、化合物276至281、化合物283至299、化合物303至309、化合物313至363、化合物365、化合物367-410、化合物413-424、化合物428-445、化合物447-448、化合物454-532、化合物540、化合物546-588、化合物591-605、化合物607-611、化合物613-630，及其药学上可接受的盐，这些化合物如本文所述。
一些实施方案包括选自由以下组成的组的化合物：化合物91、196、274、282、310至312、364、366、411、541，及其药学上可接受的盐，这些化合物如本文所述。
一些实施方案包括选自由以下组成的组的化合物：
或其药学上可接受的盐。各种实施方案包括上述化合物的S-对映异构体、R-对映异构体或外消旋物。
适用于本文所述并可通过使用本文所述方法制备的其他化合物列于表1中。
表1
当本文公开的化合物具有至少一个手性中心时，它们可以作为单独的对映异构体和非对映异构体存在，或作为这些异构体的混合物存在，包括外消旋体。通过应用本领域技术人员熟知的各种方法来完成单个异构体的分离或单个异构体的选择性合成。除非另有说明，否则所有这些异构体及其混合物都包括在本文公开的化合物的范围内。此外，本文公开的化合物可以以一种或多种结晶或无定形形式存在。除非另有说明，否则所有这些形式都包括在本文公开的化合物的范围内，包括任意多晶型。此外，本文公开的一些化合物可与水形成溶剂化物(即水合物)或与普通有机溶剂形成溶剂化物。除非另有说明，否则这些溶剂化物包括在本文公开的化合物的范围内。
本领域技术人员将认识到，本文所描述的一些结构可以是化合物的共振形式或互变异构体，其可以由其他化学结构相称地表示，即使在动力学上也是如此；技术人员认识到这些结构可能仅代表这种(些)化合物样品的很小一部分。这些化合物被认为在所描述的结构的范围内，尽管这种共振形式或互变异构体在本文中未表示。
同位素标记的化合物
同位素可存在于所述化合物中。化合物结构中表示的每种化学元素均可包括所述元素的任意同位素。同位素可以是碳、氯、氟、氢、碘、氮、氧、磷、硫和锝的同位素，包括11C、13C、14C、36Cl、18F、2H、3H、123I、125I、13N、15N、15O、17O、18O、31P、32P、35S和99mTc。例如，在化合物结构中，可明确公开或理解化合物中存在氢原子。在氢原子可能存在的化合物的任意位置上，氢原子可以是氢的任意同位素，包括但不限于氢-1(氕)和氢-2(氘)。因此，除非上下文另有明确规定，否则本文提及的化合物涵盖所有潜在的同位素形式。本发明实施方案的同位素标记的化合物可用于药物和底物组织分布和靶标占据测定。例如，同位素标记的化合物在SPECT(单光子发射计算机断层扫描)和PET(正电子发射断层扫描)中特别有用，如本文进一步讨论的。
定义
除非另外定义，否则本文使用的所有技术和科学术语具有与本公开所属领域的普通技术人员通常理解的含义相同的含义。所有专利、申请、公开申请和其他公开均通过引用整体并入。当本文中术语存在多个定义时，除非另有说明，否则以本节中的定义为准。
“前药”是指在体内转化为母体药物的药剂。前药通常是有用的，因为在某些情况下，它们可能比母体药物更容易施用。例如，它们可以通过口服施用而生物利用，而母体药物则不能。与母体药物相比，前药在药物组合物中还可以具有提高的溶解度。前药的一个实例(但不限于此)是作为酯(“前药”)施用以促进跨细胞膜传递(其中水溶性对移动性是有害的)的化合物，但随后该化合物在进入细胞后代谢水解成羧酸(活性物质)，在细胞中水溶性是有益的。前药的另一个实例可以是与酸基团键合的短肽(聚氨基酸)，其中肽被代谢以使活性部分显现。用于选择和制备合适的前药衍生物的常规方法描述于例如Design ofProdrugs,(H.Bundgaard编辑,Elsevier,1985)中，其通过引用整体并入本文。
术语“前药酯”是指通过添加任何几种在生理条件下水解的酯形成基团而形成的本文公开的化合物的衍生物。前药酯基团的实例包括新戊酰氧基甲基(pivoyloxymethyl)、乙酰氧基甲基、邻苯二甲酰基、茚满基和甲氧基甲基，以及本领域已知的其它这种基团，包括(5-R-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)甲基((5-R-2-oxo-1,3-dioxolen-4-yl)methyl)基团。前药酯基团的其他实例可见于例如T.Higuchi和V.Stella，"Pro-drugs as NovelDelivery Systems",Vol.14,A.C.S.Symposium Series,American Chemical Society(1975)；和"Bioreversible Carriers in Drug Design:Theory and Application",E.B.Roche编辑,Pergamon Press:New York,14-21(1987)(提供可用作含有羧基基团的化合物的前药的酯的实例)。上述每篇参考文献都通过引用整体并入本文。
本文公开的化合物的“代谢物”包括在将化合物引入生物环境中时产生的活性物质。
“溶剂化物”是指通过溶剂和本文所述的化合物、其代谢物或盐的相互作用而形成的化合物。合适的溶剂化物是药学上可接受的溶剂化物，包括水合物。
术语“药学上可接受的盐”是指保留了在生物学上或其他方面不适合用于药物的化合物的生物有效性和性质的盐。在许多情况下，由于存在氨基和/或羧基基团或与其类似的基团，本文的化合物能够形成酸和/或碱盐。可以用无机酸和有机酸形成药学上可接受的酸加成盐。可以衍生盐的无机酸包括例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等。可以衍生盐的有机酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。可以用无机碱和有机碱形成药学上可接受的碱加成盐。可以衍生盐的无机碱包括例如钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝等；特别优选的是铵盐、钾盐、钠盐、钙盐和镁盐。可以衍生盐的有机碱包括例如伯胺、仲胺和叔胺、取代的胺包括天然存在的取代的胺、环胺、碱性离子交换树脂等，特别是例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺和乙醇胺。许多这种盐是本领域已知的，如1987年9月11日公开的Johnston等人的WO 87/05297(通过引用整体并入本文)中所述。
如本文所用，“Ca至Cb”或“Ca-b”，其中“a”和“b”是整数，指特定基团中的碳原子数。也就是说，该基团可含有“a”至“b”(包括“a”和“b”)个碳原子。因此，例如，“C1-C4烷基”或“C1-4烷基”基团是指具有1至4个碳的所有烷基基团，即CH3-、CH3CH2-、CH3CH2CH2-、(CH3)2CH-、CH3CH2CH2CH2-、CH3CH2CH(CH3)-和(CH3)3C-。
如本文所用，术语“卤素”或“卤代”是指元素周期表第7列的放射稳定性原子中的任意一种，例如氟、氯、溴或碘，其中氟和氯是优选的。
如本文所用，“烷基”是指完全饱和的(即，不含双键或三键)直链或支链烃链。烷基可具有1至20个碳原子(无论何时在本文中出现，数值范围如“1至20”是指给定范围内的每个整数；例如，“1至20个碳原子”意指烷基基团可以由1个碳原子、2个碳原子、3个碳原子等组成，直至并包括20个碳原子，但本发明的定义也涵盖其中没有指定数值范围的术语“烷基”的出现)。烷基基团也可以是具有1至9个碳原子的中等大小的烷基。烷基也可以是具有1至4个碳原子的低级烷基。该化合物的烷基基团可以被指定为“C1-4烷基”或类似的名称。仅举例来说，“C1-4烷基”表示在烷基链中存在1至4个碳原子，即烷基链选自由以下组成的组：甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。典型的烷基包括但不限于甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、己基等。
如本文所用，“卤代烷基”是指在链中具有1至12个碳原子的、一个或多个氢被卤素取代的直链或支链烷基基团。卤代烷基基团的实例包括但不限于-CF3、-CHF2、-CH2F、-CH2CF3、-CH2CHF2、-CH2CH2F、-CH2CH2Cl、-CH2CF2CF3以及根据本领域普通技术和本文提供的教导的其他基团，将其认为等同于前述实例中的任意一个。
如本文所用，“烷氧基”是指式-OR，其中R是如上定义的烷基，例如“C1-9烷氧基”，包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、1-甲基乙氧基(异丙氧基)、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基等。
如本文所用，“聚乙二醇”是指式其中n是大于1的整数，并且R是氢或烷基。重复单元数“n”可以通过参考多个成员来指示。因此，例如，“2元至5元聚乙二醇”是指n是选自2至5的整数。在一些实施方案中，R选自甲氧基、乙氧基、正丙氧基、1-甲基乙氧基(异丙氧基)、正丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。
如本文所用，“杂烷基”是指在链骨架中含有一个或多个杂原子(即除碳以外的元素，包括但不限于氮、氧和硫)的直链或支链烃链。杂烷基基团可具有1指20个碳原子，但本发明的定义也涵盖其中未指定数值范围的术语“杂烷基”的出现。杂烷基基团也可以是具有1至9个碳原子的中等大小的杂烷基。杂烷基基团也可以是具有1至4个碳原子的低级杂烷基。在各种实施方案中，杂烷基可具有1至4个杂原子、1至3个杂原子、1或2个杂原子或1个杂原子。化合物的杂烷基基团可以被指定为“C1-4杂烷基”或类似的名称。杂烷基基团可含有一个或多个杂原子。仅举例来说，“C1-4杂烷基”表示在杂烷基链中存在1至4个碳原子并且在链的骨架中另外存在一个或多个杂原子。
术语“芳族”是指具有共轭π电子系统的环或环系统，并且包括碳环芳族(例如苯基)和杂环芳族基团(例如吡啶)。该术语包括单环或稠环多环(即，共享相邻原子对的环)基团，条件是整个环系统是芳族的。
如本文所用，“芳基”是指在环骨架中仅含有碳的芳环或环系统(即，共享两个相邻碳原子的两个或多个稠环)。当芳基是环系统时，该系统中的每个环都是芳族的。芳基基团可具有6至18个碳原子，但本发明的定义也涵盖其中没有指定数值范围的术语“芳基”的出现。在一些实施方案中，芳基基团具有6至10个碳原子。芳基基团可以被指定为“C6-10芳基”、“C6或C10芳基”或类似的名称。芳基基团的实例包括但不限于苯基、萘基、甘菊环基(azulenyl)和蒽基。
如本文所用，“芳氧基”和“芳硫基”是指RO-和RS-，其中R是如上定义的芳基，例如“C6-10芳氧基”或“C6-10芳硫基”等，包括但不限于苯氧基。
“芳烷基”或“芳基烷基”是通过亚烷基基团作为取代基连接的芳基，例如“C7-14芳烷基”等，包括但不限于苄基、2-苯乙基、3-苯丙基和萘基烷基。在某些情况下，亚烷基基团是低级亚烷基基团(即C1-4亚烷基基团)。
如本文所用，“杂芳基”是指在环骨架中含有一个或多个杂原子(即除碳以外的元素，包括但不限于氮、氧和硫)的芳族环或环系统(即，共享两个相邻原子的两个或多个稠合环)。当杂芳基是环系统时，该系统中的每个环都是芳族的。杂芳基基团可具有5至18个环成员(即，构成环骨架的原子数，包括碳原子和杂原子)，但本发明的定义也涵盖其中未指定数值范围的术语“杂芳基”的出现。在一些实施方案中，杂芳基基团具有5至10个环成员或5至7个环成员。杂芳基基团可以被指定为“5至7元杂芳基”、“5至10元杂芳基”或类似的名称。在各种实施方案中，杂芳基含有1至4个杂原子、1至3个杂原子、1至2个杂原子或1个杂原子。例如，在各种实施方案中，杂芳基含有1至4个氮原子、1至3个氮原子、1至2个氮原子、2个氮原子和1个硫原子或氧原子、1个氮原子和1个硫原子或氧原子或1个硫原子或氧原子。杂芳基环的实例包括但不限于呋喃基、噻吩基、酞嗪基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、异噁唑基、异噻唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、三嗪基、喹啉基、异喹啉基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、吲哚基、异吲哚基和苯并噻吩基。
“杂芳烷基”或“杂芳基烷基”是通过亚烷基基团作为取代基连接的杂芳基基团。实例包括但不限于2-噻吩基甲基、3-噻吩基甲基、呋喃基甲基、噻吩基乙基、吡咯基烷基、吡啶基烷基、异噁唑基烷基(isoxazollylalkyl)和咪唑基烷基。在某些情况下，亚烷基基团是低级亚烷基基团(即C1-4亚烷基基团)。
如本文所用，“碳环基”是指在环系统骨架中仅含有碳原子的非芳族环状环或环系统。当碳环基是环系统时，两个或多个环可以以稠合、桥接或螺连接的方式连接在一起。碳环基可具有任意饱和度，条件是环系统中的至少一个环不是芳族的。因此，碳环基包括环烷基、环烯基和环炔基。碳环基基团可具有3至20个碳原子，但本发明的定义也涵盖其中没有指定数值范围的术语“碳环基”的出现。碳环基基团还可以是具有3至10个碳原子的中等大小的碳环基。碳环基基团也可以是具有3至6个碳原子的碳环基。碳环基基团可以被指定为“C3-6碳环基”或类似的名称。碳环基环的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环己烯基、2,3-二氢-茚、双环[2.2.2]辛基、金刚烷基和螺[4.4]壬基。
“(碳环基)烷基”是通过亚烷基基团作为取代基连接的碳环基，例如“C4-10(碳环基)烷基”等，包括但不限于环丙基甲基、环丁基甲基、环丙基乙基、环丙基丁基、环丁基乙基、环丙基异丙基、环戊基甲基、环戊基乙基、环己基甲基、环己基乙基、环庚基甲基等。在某些情况下，亚烷基基团是低级亚烷基基团。
如本文所用，“环烷基”是指完全饱和的碳环基环或环系统。实例包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基。
如本文所用，“环烯基”是指具有至少一个双键的碳环基环或环系统，其中环系统中没有环是芳族的。一个实例是环己烯基。
如本文所用，“杂环基”是指在环骨架中含有至少一个杂原子的非芳族环状环或环系统。杂环基可以以稠合、桥接或螺连接的方式连接在一起。杂环基可具有任意饱和度，条件是环系统中的至少一个环不是芳族的。(多个)杂原子可以存在于环系统中的非芳族环或芳族环中。杂环基基团可具有3至20个环成员(即，构成环骨架的原子数，包括碳原子和杂原子)，但本发明的定义也涵盖其中没有指定数值范围的术语“杂环基”的出现。杂环基基团也可以是具有3至10个环成员的中等大小的杂环基。杂环基基团也可以是具有3至6个环成员的杂环基。杂环基可以被指定为“3-6元杂环基”或类似的名称。
在各种实施方案中，杂环基含有1至4个杂原子、1至3个杂原子、1至2个杂原子或1个杂原子。例如，在各种实施方案中，杂环基含有1至4个氮原子、1至3个氮原子、1至2个氮原子、2个氮原子和1个硫原子或氧原子、1个氮原子和1个硫原子或氧原子、或1硫原子或氧原子。在优选的六元单环杂环基中，(多个)杂原子选自O、N或S中的一个至三个，在优选的五元单环杂环基中，(多个)杂原子选自选自O、N或S的一个或两个杂原子。杂环基的实例包括但不限于，氮杂基、吖啶基、咔唑基、噌啉基、二氧杂环戊烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、吗啉基、环氧乙烷基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、哌啶基、哌嗪基、二氧代哌嗪基、吡咯烷基、吡咯烷酮基(pyrrolidonyl)、吡咯烷酮基(pyrrolidionyl)、4-哌啶基、吡唑啉基、吡唑烷基、1,3-二氧杂环己烯基(dioxinyl)、1,3-二恶烷基、1,4-二氧杂环己烯基(dioxinyl)、1,4-二恶烷基、1,3-氧硫杂环己烷基(1,3-oxathianyl)、1,4-氧硫杂环己烯基(1,4-oxathiinyl)、1,4-氧硫杂环己烷基、2H-1,2-恶嗪基、三恶烷基、六氢-1,3,5-三嗪基、1,3-二氧杂环戊烯基(1,3-dioxolyl)、1,3-二氧杂环戊烷基(1,3-dioxolanyl)、1,3-二硫杂环戊烯基(1,3-dithiolyl)、1,3-二硫杂环戊烷基(1,3-dithiolanyl)、异噁唑啉基、异噁唑烷基、噁唑啉基、噁唑烷基、噁唑烷酮基、噻唑啉基、噻唑烷基、1,3-氧硫杂环戊烷基、二氢吲哚基、异吲哚啉基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢噻吩基、四氢噻喃基、四氢-1,4-噻嗪基、硫代吗啉基、二氢苯并呋喃基、苯并咪唑烷基和四氢喹啉。
“(杂环基)烷基”是通过亚烷基基团作为取代基连接的杂环基基团。实例包括但不限于咪唑啉基甲基和吲哚基乙基。
如本文所用，“酰基”是指-C(＝O)R，其中R是如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。非限制性实例包括甲酰基、乙酰基、丙酰基、苯甲酰基和丙烯酰基。
“O-羧基”基团是指“-OC(＝O)R”基团，其中R选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。
“C-羧基”基团是指“-C(＝O)OR”基团，其中R选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。非限制性实例包括羧基(即-C(＝O)OH)。
“氰基”基团是指“-CN”基团。
“氰酰基”基团是指“-OCN”基团。
“异氰酰基”基团是指“-NCO”基团。
“硫氰酰基”基团是指“-SCN”基团。
“异硫氰酰基”基团是指“-NCS”基团。
“亚磺酰基”基团是指“-S(＝O)R”基团，其中R选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。
“磺酰基”基团是指“-SO2R”基团，其中R选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。
“S-磺酰氨基”基团是指“-SO2NRARB”基团，其中RA和RB各自独立地选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。
“N-磺酰氨基”基团是指“-N(RA)SO2RB”基团，其中RA和RB各自独立地选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。
“O-氨基甲酰基”基团是指“-OC(＝O)NRARB”基团，其中RA和RB各自独立地选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。
“N-氨基甲酰基”基团是指“-N(RA)OC(＝O)RB”基团，其中RA和RB各自独立地选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。
“O-硫代氨基甲酰基”基团是指“-OC(＝S)NRARB”基团，其中RA和RB各自独立地选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。
“N-硫代氨基甲酰基”基团是指“-N(RA)OC(＝S)RB”基团，其中RA和RB各自独立地选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。
“C-酰氨基”基团是指“-C(＝O)NRARB”基团，其中RA和RB各自独立地选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。
“N-酰氨基”基团是指“-N(RA)C(＝O)RB”基团，其中RA和RB各自独立地选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。
“氨基”基团是指“-NRARB”基团，其中RA和RB各自独立地选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基和5-10元杂环基。
“氨基烷基”基团是指通过亚烷基基团连接的氨基基团。
“烷氧基烷基”基团是指通过亚烷基基团连接的烷氧基基团，例如“C2-8烷氧基烷基”等。
如本文所用，“天然氨基酸侧链”是指天然存在的氨基酸的侧链取代基。天然存在的氨基酸具有与α-碳连接的取代基。天然存在的氨基酸包括精氨酸、赖氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸、半胱氨酸、蛋氨酸、色氨酸、丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸、脯氨酸和甘氨酸。
如本文所用，“非天然氨基酸侧链”是指非天然存在的氨基酸的侧链取代基。非天然氨基酸包括β-氨基酸(β3和β2)、同源氨基酸、脯氨酸和丙酮酸衍生物、3-取代的丙氨酸衍生物、甘氨酸衍生物、环取代的苯丙氨酸和酪氨酸衍生物、线性核心氨基酸和N-甲基氨基酸。示例性的非天然氨基酸可从Sigma-Aldridge获得，列于“非天然氨基酸和衍生物”下。还参见Travis S.Young和Peter G.Schultz,―Beyond the Canonical 20Amino Acids:Expanding the Genetic Lexicon,”J.Biol.Chem.2010 285:11039-11044，其全部内容通过引用并入本文。
如本文所用，取代的基团衍生自未取代的母体基团，其中已经存在一个或多个氢原子替换为另一个原子或基团。除非另有说明，否则当基团被认为是“取代的”时，意指该基团被一个或多个独立地选自以下的取代基取代：C1-C6烷基、C1-C6烯基、C1-C6炔基、C1-C6杂烷基、C3-C7碳环基(任选被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、C3-C7-碳环基-C1-C6-烷基(任选被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、5-10元杂环基(任选被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、5-10元杂环基-C1-C6-烷基(任选被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、芳基(任选被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、芳基(C1-C6)烷基(任选被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和、C1-C6卤代烷氧基取代)、5-10元杂芳基(任选被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、5-10元杂芳基(C1-C6)烷基(任选被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、氰基、羟基、C1-C6烷氧基、C1-C6烷氧基(C1-C6)烷基(即醚)、芳氧基、硫氢基(巯基)、卤代(C1-C6)烷基(例如-CF3)、卤代(C1-C6)烷氧基(例如-OCF3)、C1-C6烷硫基、芳硫基、氨基、氨基(C1-C6)烷基、硝基、O-氨基甲酰基、N-氨基甲酰基、O-硫代氨基甲酰基、N-硫代氨基甲酰基、C-酰氨基、N-酰氨基、S-磺酰氨基、N-磺酰氨基、C-羧基、O-羧基、酰基、氰酰基、异氰酰基、硫酰基、异硫酰基、亚磺酰基、磺酰基和氧代(＝O)。无论何处将基团描述为“任选取代的”，该基团可以被上述取代基取代。
在一些实施方案中，(多个)取代的基团被一个或多个取代基取代，所述取代基各自独立地选自C1-C4烷基、氨基、羟基和卤素。
应理解，取决于上下文，某些基团命名规则可包括单-基团或二-基团。例如，当取代基需要与分子其余部分的两个连接点时，应理解取代基是二-基团。例如，被鉴定为需要两个连接点的烷基的取代基包括二-基团，例如–CH2–、–CH2CH2–、–CH2CH(CH3)CH2–等。其他自由基命名规则清楚地表明该基团是二-基团，例如“亚烷基”或“亚烯基”。
当两个R基团被称为“与它们所连接的原子一起”形成环(例如，碳环基、杂环基、芳基或杂芳基环)时，意指该原子和两个R基团的集合单元是所述环。当单独采用时，环不受每个R基团的定义的限制。例如，当存在以下子结构：
并且R1和R2被定义为选自由氢和烷基组成的组，或R1和R2与它们所连接的氮一起形成杂环基时，意指R1和R2可选自氢或烷基，或者，子结构具有以下结构：
其中环A是含有所示氮的杂环基环。
类似地，当两个“相邻”R基团被称为“与它们所连接的原子一起”形成环时，意指该原子、中间键和两个R基团的集合单元是所述环。例如，当存在以下子结构：
并且R1和R2被定义为选自由氢和烷基组成的组，或R1和R2与它们所连接的原子一起形成芳基或碳环基时，意指R1和R2可选自氢或烷基，或者，子结构具有以下结构：
其中A是芳基环或含有所示双键的碳环基。
无论何处将取代基描述为二-基团(即，具有与分子其余部分的两个连接点)，应理解，除非另有说明，否则取代基可以以任意方向构型连接。因此，例如，被描述为-AE-或的取代基包括被定向以使A连接在分子的最左侧连接点的取代基，以及A连接在分子的最右侧连接点的情况。
如本文所用，子结构：
意指A8原子可以在环或环系统A1内的任意环原子位置。子结构：意指A8原子位于紧邻(即α)由*表示的连接点的环原子位置。
如本文所用，化学基团的“等排体(isostere)”是表现出相同或相似性质的其他化学基团。例如，四唑是羧酸的等排体，因为它模仿羧酸的性质，即使它们都具有非常不同的分子式。四唑是羧酸的许多可能的等排替代物之一。预期的其他羧酸等排体包括-SO3H、-SO2HNR、-PO2(R)2、-PO3(R)2、-CONHNHSO2R、-COHNSO2R和–CONRCN，其中R选自如本文所定义的氢、C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、C3-7碳环基、C6-10芳基、5-10元杂芳基和3-10元杂环基。此外，羧酸等排体可包括处于任意化学稳定氧化态的5-7元碳环或杂环(含有CH2、O、S或N的任意组合)，其中所述环结构的任意原子任选地在一个或多个位置被取代。以下结构是预期的碳环和杂环等排体的非限制性实例。所述环结构的原子可以在一个或多个位置任选地被如上所定义的R取代。
还预期当将化学取代基加入到羧酸等排体中时，该化合物保留羧酸等排体的性质。预期当羧酸等排体任选地被一个或多个选自如上定义的R的部分取代时，那么对取代和取代位置进行选择使得它不消除该化合物的羧酸等排性质。类似地，还预期在碳环或杂环羧酸等排体上放置一个或多个R取代基不是在一个或多个维持化合物的羧酸等排性质或化合物的羧酸等排性质不可或缺的原子上的取代，如果这样的取代基会破坏化合物的羧酸等排性质的话。
还考虑了在本说明书中未具体举例说明的其他羧酸等排体。
术语“试剂”或“测试剂”包括任意物质、分子、元素、化合物、实体或其组合。它包括但不限于例如蛋白质、多肽、肽或模拟物、有机小分子、多糖、多核苷酸等。它可以是天然产物、合成化合物或化学化合物或两种以上的物质的组合。除非另有说明，否则术语“试剂”、“物质”和“化合物”在本文中可互换使用。
本文使用的术语“类似物”是指在结构上类似于参照分子的分子，但已经通过用替代取代基取代参照分子的特定取代基而以靶向和受控方式对其进行了修饰。与参照分子相比，本领域技术人员可以预期类似物表现出相同、相似或改善的效用。为了找到具有改善特征(例如对靶分子的结合亲和力更高)的已知化合物的变体而进行的类似物的合成和筛选是药物化学中众所周知的方法。
术语“哺乳动物”以其通常的生物学意义使用。因此，它具体包括但不限于灵长类动物，包括猿类(黑猩猩、猿、猴)和人类、牛、马、绵羊、山羊、猪、兔、狗、猫、大鼠和小鼠，但也包括许多其他种类。
术语“微生物感染”是指通过病原微生物侵入宿主生物，无论该生物是脊椎动物、无脊椎动物、鱼、植物、鸟或哺乳动物。这包括通常存在于哺乳动物或其他生物的体内或体表上的微生物的过度生长。更一般地，微生物感染可以是(多个)微生物群体的存在对宿主哺乳动物而言是有害的任意情况。因此，当哺乳动物的体内或体表上存在过量的微生物群体时，或者当(多个)微生物群体的存在的影响破坏哺乳动物的细胞或其他组织时，哺乳动物正在“经受”微生物感染。具体地，该描述适用于细菌感染。注意，优选实施方案的化合物还可用于治疗细胞培养物或其他培养基或无生命的表面或物体的微生物生长或污染，并且除非在权利要求中明确说明，否则本文中的任何内容都不应将优选实施方案仅限于治疗高等生物。
术语“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”包括任意和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂等。这些介质和试剂用于药物活性物质的用途是本领域熟知的。除非任何常规介质或试剂与活性成分均不相容，否则考虑其在治疗组合物中的用途。另外，可以包括例如本领域常用的各种佐剂。例如，在Gilman等人(编辑)(1990)；Goodman和Gilman’s：The Pharmacological Basis of Therapeutics，第8版，Pergamon Press(其全部内容通过引用并入本文)中描述了在药物组合物中包含各种组分的考虑因素。
如本文所用，“受试者”是指人或非人哺乳动物例如狗、猫、小鼠、大鼠、牛、绵羊、猪、山羊、非人灵长类动物或鸟类例如鸡以及任意其他脊椎动物或无脊椎动物。
如本文所用，“有效量”或“治疗有效量”是指有效缓解(至一定程度)疾病或病况的一种或多种症状，或降低疾病或病况的一种或多种症状的发作的可能性(包括治愈疾病或病况)的治疗剂的量。“治愈”意指疾病或病况的症状被消除；然而，即使在治愈后，也可能存在某些长期或永久的影响(例如大量组织损伤)。
如本文所用，“治疗”(“treat”、“treatment”或“treating”)是指施用药物组合物用于预防和/或治疗目的。术语“预防性治疗”是指对尚未表现出疾病或病况的症状，但对特定疾病或病况易感或有患病风险的受试者进行治疗，由此该治疗降低患者发展疾病或病况的可能性。术语“治疗性治疗”是指施用治疗给
制备方法
本文公开的化合物可以通过下述方法或通过修改这些方法来合成。修改方法的方式包括本领域技术人员已知的温度、溶剂、试剂等。通常，在制备本文公开的化合物的任意方法中，可能必需和/或需要保护任意有关分子上的敏感或反应性基团。这可以通过常规保护基团的方式来实现，例如Protective Groups in Organic Chemistry(编辑J.F.W.McOmie,Plenum Press,1973)；和P.G.M.Green,T.W.Wutts,Protecting Groups inOrganic Synthesis(第3版)Wiley,New York(1999)(都通过引用整体并入本文)中所述的那些。可以使用本领域已知的方法在方便的后续阶段除去保护基团。可用于合成适用化合物的合成化学转化是本领域已知的，包括例如，在R.Larock,Comprehensive OrganicTransformations,VCH Publishers,1989或L.Paquette,编辑,Encyclopedia of Reagentsfor Organic Synthesis,John Wiley and Sons,1995(都通过引用整体并入本文)中描述的那些。本文示出和描述的路线仅是说明性的，并不意图也不应被解释为以任何方式限制权利要求的范围。本领域技术人员将能够辨认所公开的合成的修改并基于本文的公开内容设计替代路线；所有这些修改和替代路线都在权利要求的范围内。
在以下方案中，选择氧原子的保护基团是因为它们与必需的合成步骤具有相容性并且引入和去保护步骤与总体合成方案具有相容性(P.G.M.Green,T.W.Wutts,ProtectingGroups in Organic Synthesis(第3版)Wiley,New York(1999))。
如果本技术的化合物含有一个或多个手性中心，则这些化合物可以作为纯立体异构体制备或分离，即作为单独的对映异构体或d(1)立体异构体，或作为富含立体异构体的混合物。除非另有说明，否则所有这些立体异构体(和富集的混合物)都包括在本技术的范围内。纯立体异构体(或富集的混合物)可使用例如本领域熟知的光学活性起始物料或立体选择性试剂制备。或者，这些化合物的外消旋混合物可以例如使用手性柱色谱法、手性拆分剂等分离。
用于下列反应的起始物料通常是已知化合物，或者可以通过已知方法或其明显的修改方法制备。例如，许多起始物料可从商业供应商获得，供应商例如Aldrich ChemicalCo.(Milwaukee,Wisconsin,USA)、Bachem(Torrance,California,USA)、Emka-Chemce或Sigma(St.Louis,Missouri,USA)。其他可以通过标准参考文献中描述的方法或其明显的修改方法来制备，标准参考文献例如Fieser and Fieser's Reagents for OrganicSynthesis,第1-15卷(John Wiley和Sons，1991)、Rodd's Chemistry of CarbonCompounds,第1-5卷和增刊(Elsevier Science Publishers,1989)、Organic Reactions,第1-40卷(John Wiley和Sons,1991)、March's Advanced Organic Chemistry(John Wiley和Sons，第5版，2001)和Larock's Comprehensive Organic Transformations(VCHPublishers Inc.,1989)。
式I化合物的合成
在一个实施方案中，该方法包括使被酸性氢适当取代的中间体(IV)与酯(V)在碱催化条件下反应，得到酯衍生物(VI)。然后使所得产物在碱性条件下进行水解，得到羧酸衍生物(VII)，然后使其在酰胺偶联条件下与氨基酸衍生物(VIII)(其中羧酸基团用R1基团官能化)进行反应(方案1)。或者，然后使羧酸产物(VII)在酰胺偶联条件下与氨基醇衍生物(VIII-a)进行反应，得到相应的加合物(IX)。用DMP氧化(用高价碘)或通过氧化剂如PCC(氯铬酸吡啶鎓)使所得加合物(IX)经受氧化条件，得到α-酮酰胺产物(X)。或者，使用EDC和二氯乙酸或使用IBX作为氧化剂使加合物(IX)经受氧化条件，得到α-酮酰胺产物(X)。本领域技术人员将再次理解，存在许多氧化羟基基团的其他氧化条件和试剂，其在本公开的范围内。该合成路线通常示于方案2中。
方案1：
方案2：
提供以下实施例方案用于指导读者，并共同代表制备本文所涵盖的化合物的实例方法。此外，根据以下反应方案和实施例，本领域普通技术人员将容易想到制备本文所述化合物的其他方法。除非另有说明，否则所有可变因素如上所定义。
同位素标记的化合物的用途
一些实施方案提供了在：(i)代谢研究(优选用14C)、反应动力学研究(例如用2H或3H)；(ii)检测或成像技术[例如正电子发射断层扫描(PET)或单光子发射计算机断层扫描(SPECT)]，包括药物或基质组织分布测定；或(III)患者的放射性治疗中使用本公开的同位素标记的化合物和前药的方法。
同位素标记的化合物及其实施方案的前药通常可以通过进行方案或实施例和下述制备方法中公开的方法，通过用容易获得的同位素标记的试剂取代非同位素标记的试剂来制备。对于PET，特别优选18F或11C标记的化合物，对于SPECT研究，特别优选123I标记的化合物。用较重的同位素例如氘(即2H)进一步取代可以提供某些治疗优势，这是因为代谢稳定性更高，例如体内半衰期延长，或剂量需求减少。
同位素标记的化合物的合成
如下面的方案中所示合成18F标记的化合物。在一个实施方案中，该方法包括使用如Rotstein,等人,Spirocyclic hypervalent iodine(III)-mediatedradiofluorination of non-activated and hindered aromatics,NatureCommunications,2014,Vol.5,4365-4371和Rotstein,等人,Mechanistic Studies andRadiofluorination of Structurally Diverse Pharmaceuticals with SpirocyclicIodonium(III)Ylides,Chemical Science,2016,Vol.7,4407-4417(均通过引用整体并入本文)中所述的条件使中间体450与18F标记试剂反应，以得到18F标记的中间体2-((乙氧基羰基)氨基)-3-(4-(氟-18F)苯基)丙酸甲酯(631)，然后将其转化为由通用结构XI表示的最终α-酮酰胺产物(方案3)。
方案3：
或者，如方案4中所示合成18F标记的化合物XV。在一个实施方案中，使用如Rotstein,等人,Spirocyclic hypervalent iodine(III)-mediated radiofluorinationof non-activated and hindered aromatics,Nature Communications,2014,Vol.5,4365-4371和Rotstein,等人,Mechanistic Studies and Radiofluorination ofStructurally Diverse Pharmaceuticals with Spirocyclic Iodonium(III)Ylides,Chemical Science,2016,Vol.7,4407-4417中所述的条件，使用碘亚砜(iodanylidene)中间体XII来引入18F标记产生，以得到标记的α-酮酰胺产物XV。在另一个实施方案中，用DMP氧化(用高价碘)或通过氧化剂如PCC(氯铬酸吡啶鎓)使碘亚砜中间体(XIV)(方案4)经受氧化条件，得到α-酮酰胺产物(XV)。在另一个实施方案中，使碘亚砜中间体(XIII)(方案4)进行如前所述的18F-标记反应条件，然后在碱性条件下酯水解，得到羧酸衍生物，然后使其在酰胺偶联条件下与氨基酸衍生物(其中羧酸基团用R1基团官能化)反应，以得到标记的α-酮酰胺产物XV。
方案4：
施用和药物组合物
化合物以治疗有效剂量施用。虽然人体剂量水平尚未针对本文所述化合物进行优化，但通常，每日剂量可为约0.25mg/kg至约120mg/kg或更高体重，约0.5mg/kg或更低至约70mg/kg，约1.0mg/kg至约50mg/kg体重，或约1.5mg/kg至约10mg/kg体重。因此，对于向70kg的人施用，剂量范围为约17mg/天至约8000mg/天，约35mg/天或更低至约7000mg/天或更高，约70mg/天至约6000mg/天，约100mg/天至约5000mg/天，或约200mg至约3000mg/天。当然，施用的活性化合物的量取决于受治疗者和所治疗的疾病状态、痛苦的严重程度、施用方式和时间表以及处方医师的判断。
本文公开的化合物或其药学上可接受的盐的施用可以通过用于具有类似用途的药剂的任意可接受的施用方式，包括但不限于口服、皮下、静脉内、鼻内、局部、透皮、腹膜内、肌肉内、肺内、阴道、直肠或眼内。口服和肠胃外施用通常用于治疗优选实施方案的受试者的适应症。
可以将如上所述有用的化合物配制成用于治疗这些病况的药物组合物。使用标准药物制剂技术，例如Remington的The Science and Practice of Pharmacy,21st Ed.,Lippincott Williams&Wilkins(2005)(通过引用整体并入本文)中公开的那些技术。因此，一些实施方案包括药物组合物，其包括：(a)安全且治疗有效量的本文所述化合物(包括其对映异构体、非对映异构体、互变异构体、多晶型物和溶剂化物)，或其药学上可接受的盐；和(b)药学上可接受的载体、稀释剂、赋形剂或其组合。
除了如上所述有用的所选化合物之外，一些实施方案还包括含有药学上可接受的载体的组合物。术语“药学上可接受的载体”或“药学上可接受的赋形剂”包括任意和所有溶剂、分散介质、包衣、抗细菌和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂等。这些介质和试剂用于药物活性物质的用途是本领域熟知的。除非任何常规介质或试剂与活性成分均不相容，否则考虑其在治疗组合物中的用途。另外，可以包括例如本领域常用的各种佐剂。例如，在Gilman等人(编辑)(1990)；Goodman和Gilman’s：The Pharmacological Basis of Therapeutics，第8版，Pergamon Press(其全部内容通过引用并入本文)中描述了在药物组合物中包含各种组分的考虑因素。
可用作药学上可接受的载体或其组分的物质的一些实例是糖，例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素和甲基纤维素；粉末黄蓍草；麦芽；明胶；滑石；固体润滑剂，如硬脂酸和硬脂酸镁；硫酸钙；植物油，如花生油、棉籽油、芝麻油、橄榄油、玉米油和可可油；多元醇，如丙二醇、甘油、山梨糖醇、甘露醇和聚乙二醇；海藻酸；乳化剂，如TWEENS；润湿剂，如十二烷基硫酸钠；着色剂；调味剂；压片剂、稳定剂；抗氧化剂；防腐剂；无热原水；等渗盐水；和磷酸盐缓冲溶液。
与主题化合物联合使用的药学上可接受的载体的选择基本上由化合物的施用方式决定。
本文所述的组合物优选以单位剂型提供。如本文所用，“单位剂型”是含有一定量的化合物的组合物，其适于根据良好的医学实践以单一剂量施用给动物，优选哺乳动物受试者。然而，单一剂型或单位剂型的制备并不意味着每天或每疗程施用一次该剂型。预期此类剂型每天施用一次、两次、三次或更多次，并且可以在一段时间内(例如，约30分钟至约2-6小时)作为输注施用，或作为连续输注施用，并且可以在一个疗程中施用不止一次，尽管没有特别排除单次施用。技术人员将认识到该制剂没有特别考虑整个疗程，并且这些决定留给治疗领域而非制剂领域的技术人员。
如上所述有用的组合物可以是多种合适形式中的任意一种，用于多种施用途径，例如口服、鼻腔、直肠、局部(包括透皮)、眼、脑内、颅内、鞘内、动脉内、静脉内、肌肉内或其他肠道外施用途径。技术人员将理解，口服和鼻腔组合物包含通过吸入施用的组合物，并使用可用的方法制备。根据所需的特定施用途径，可以使用本领域熟知的多种药学上可接受的载体。药学上可接受的载体包括，例如，固体或液体填充剂、稀释剂、助溶剂、表面活性剂和包封物质。可以包括基本上不干扰化合物的抑制活性的任选的药学活性物质。与化合物一起使用的载体的量足以提供每单位剂量化合物施用的物质的实际量。用于制备可用于本文所述方法的剂型的技术和组合物描述于以下参考文献中，所有文献均通过引用并入本文：Modern Pharmaceutics,第4版.,第9章和第10章(Banker&Rhodes,编辑,2002)；Lieberman等人,Pharmaceutical Dosage Forms:Tablets(1989)；和Ansel,Introductionto Pharmaceutical Dosage Forms第8版(2004)。
可以使用多种口服剂型，包括片剂、胶囊、颗粒和散装粉末等固体形式。片剂可以是压片、片剂研磨剂、肠溶衣、糖衣、薄膜包衣或多重压片，其含有合适的粘合剂、润滑剂、稀释剂、崩解剂、着色剂、调味剂、流动诱导剂和熔化剂。液体口服剂型包括水溶液、乳液、悬浮液、由非泡腾颗粒重构的溶液和/或悬浮液、以及由泡腾颗粒重构的泡腾制剂，其含有合适的溶剂、防腐剂、乳化剂、悬浮剂、稀释剂、甜味剂、熔化剂、着色剂和调味剂。
适于制备用于口服施用的单位剂型的药学上可接受的载体是本领域熟知的。片剂通常包含常规的药学上相容的佐剂作为惰性稀释剂，例如碳酸钙、碳酸钠、甘露醇、乳糖和纤维素；粘合剂，如淀粉、明胶和蔗糖；崩解剂，如淀粉、海藻酸和交联羧甲基纤维素；润滑剂，如硬脂酸镁、硬脂酸和滑石粉。诸如二氧化硅的助流剂可用于改善粉末混合物的流动特性。可以添加着色剂，例如FD&C染料，用于外观。甜味剂和调味剂，例如阿斯巴甜、糖精、薄荷醇、薄荷和水果调味剂，是可咀嚼片剂的有用佐剂。胶囊通常包含一种或多种上文公开的固体稀释剂。载体组分的选择取决于并不重要的次要考虑因素如味道、成本和货架稳定性，并且可以由本领域技术人员容易地制造。
口服组合物还包括液体溶液、乳液、悬浮液等。适用于制备此类组合物的药学上可接受的载体是本领域熟知的。用于糖浆、酏剂、乳液和悬浮液的载体的典型组分包括乙醇、甘油、丙二醇、聚乙二醇、液体蔗糖、山梨糖醇和水。对于悬浮液，典型的悬浮剂包括甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、AVICEL RC-591、黄蓍胶和海藻酸钠；典型的润湿剂包括卵磷脂和聚山梨醇酯80；和典型的防腐剂包括对羟基苯甲酸甲酯和苯甲酸钠。口服液体组合物还可含有一种或多种组分，例如上面公开的甜味剂、调味剂和着色剂。
此类组合物还可以通过常规方法包衣，通常使用pH或时间依赖性包衣，使得主题化合物在胃肠道中在期望的局部施用附近释放，或在不同时间释放以使所期望的作用延长。此类剂型通常包括但不限于醋酸邻苯二甲酸纤维素、邻苯二甲酸聚乙酸乙烯酯、邻苯二甲酸羟丙基甲基纤维素、乙基纤维素、Eudragit包衣、蜡和虫胶中的一种或多种。
本文所述的组合物可任选地包含其他药物活性物质。
用于实现主题化合物的全身递送的其他组合物包括舌下、口腔和鼻腔剂型。此类组合物通常包含一种或多种可溶性填充物质，例如蔗糖、山梨糖醇和甘露醇；和粘合剂，如阿拉伯胶、微晶纤维素、羧甲基纤维素和羟丙基甲基纤维素。还可包括上文公开的助流剂、润滑剂、甜味剂、着色剂、抗氧化剂和调味剂。
配制用于局部眼科使用的液体组合物，使其可以向眼睛局部施用。应尽可能地使舒适度最大化，但是有时制剂考虑因素(例如药物稳定性)可能迫使低于最佳舒适度。在不能使舒适度最大化的情况下，应该配制液体使得液体对于患者的局部眼科使用是可耐受的。另外，眼科上可接受的液体应该包装成一次性使用或者含有防腐剂以防止多次使用间的污染。
对于眼科应用，通常使用生理盐水溶液作为主要溶媒来制备溶液或药物。眼科溶液应优选用适当的缓冲系统保持在舒适的pH值。制剂还可含有常规的药学上可接受的防腐剂、稳定剂和表面活性剂。
可用于本文公开的药物组合物的防腐剂包括但不限于苯扎氯铵、PHMB、氯丁醇、硫柳汞、苯基汞、乙酸盐和硝酸苯汞。有用的表面活性剂是例如吐温80。类似地，多种有用的溶媒可用于本文公开的眼用制剂中。这些溶媒包括但不限于聚乙烯醇、聚维酮、羟丙基甲基纤维素、泊洛沙姆、羧甲基纤维素、羟乙基纤维素和纯净水。
可以根据需要或方便添加张力调节剂。它们包括但不限于盐特别是氯化钠、氯化钾、甘露醇和甘油，或任意其它合适的眼科上可接受的张力调节剂。
可以使用多种缓冲剂和手段来调节pH，只要所得制剂是眼科上可接受的即可。对于许多组合物，pH将在4和9之间。因此，缓冲剂包括乙酸盐缓冲剂、柠檬酸盐缓冲剂、磷酸盐缓冲剂和硼酸盐缓冲剂。根据需要，可以使用酸或碱来调节这些制剂的pH。
以类似的方式，眼科上可接受的抗氧化剂包括但不限于偏亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、乙酰半胱氨酸、丁基化羟基苯甲醚和丁基化羟基甲苯。
可以包括在眼科制剂中的其他赋形剂组分是螯合剂。有用的螯合剂是依地酸二钠，但也可以使用其它螯合剂替代依地酸二钠或与其结合使用。
对于局部使用，使用含有本文公开的化合物的乳膏、软膏、凝胶、溶液或悬浮液等。局部制剂通常可以包含药物载体、共溶剂、乳化剂、渗透增强剂、防腐剂体系和润肤剂。
对于静脉内施用，可以将本文所述的化合物和组合物溶解或分散在药学上可接受的稀释剂中，例如盐水或右旋糖溶液。可包含合适的赋形剂以达到所需的pH，包括但不限于NaOH、碳酸钠、乙酸钠、HCl和柠檬酸。在各种实施方案中，最终组合物的pH范围为2至8，或优选4至7。抗氧化剂赋形剂可包括亚硫酸氢钠、丙酮亚硫酸氢钠、甲醛钠、次硫酸盐(sulfoxylate)、硫脲和EDTA。在最终静脉内组合物中可见的合适赋形剂的其他非限制性实例可包括磷酸钠或磷酸钾、柠檬酸、酒石酸、明胶和碳水化合物如右旋糖、甘露糖醇和葡聚糖。其他可接受的赋形剂描述于Powell等人，Compendium of Excipients for ParenteralFormulations,PDA J Pharm Sci and Tech 1998,52 238-311and Nema et al.,Excipients and Their Role in Approved Injectable Products:Current Usage andFuture Directions,PDA J Pharm Sci and Tech 2011,65 287-332(均通过引用整体并入本文)。还可以包括抗微生物剂以获得抑制细菌或抑制真菌的溶液，包括但不限于硝酸苯汞、硫柳汞、苄索氯铵、苯扎氯铵、苯酚、甲酚和氯丁醇。
用于静脉内施用的组合物可以以一种或多种固体的形式提供给护理人员，在施用前不久用合适的稀释剂如无菌水、盐水或右旋糖使该固体在水中重构。在其他实施方案中，组合物以溶液形式提供，准备肠胃外施用。在其他实施方案中，组合物以溶液提供，该溶液在施用前进一步被稀释。在包括施用本文所述化合物和另一种药剂的组合的实施方案中，该组合可以作为混合物提供给护理人员，或者护理人员可以在施用前将这两种药剂混合，或者这两种药剂可以分开施用。
本文所述活性化合物的实际剂量取决于具体化合物和待治疗的病况；适当剂量的选择完全在技术人员的知识范围内。
如果需要，本文所述的化合物和组合物可以存在于包装或分配器装置中，其含有一个或多个含有活性成分的单位剂型。这种包装或装置可以例如包括金属或塑料箔如泡罩包装或玻璃以及橡胶塞如小瓶。包装或分配器装置可附有施用说明。将本文所述的化合物和组合物配制在相容性药物载体中，也可以制备、置于合适的容器中，并标记用于治疗指定的病况。
制剂中化合物的量可以在本领域技术人员使用的全部范围内变化。通常，以重量百分比(wt％)为基础，基于总制剂，制剂将包含约0.01 99.99wt％的本技术的化合物，余量为一种或多种合适的药物赋形剂。优选地，化合物的存在水平为约1 80wt％。代表性的药物制剂描述如下。
制剂实施例
以下是含有式I化合物的代表性药物制剂。
制剂实施例1——片剂制剂
使以下成分紧密混合并压制成单刻痕片剂。
制剂实施例2——胶囊制剂
使以下成分紧密混合并装入硬壳明胶胶囊中。
制剂实施例3——悬浮液制剂
将以下成分混合以形成用于口服施用的悬浮液。
制剂实施例4——可注射制剂
将以下成分混合以形成可注射制剂。
制剂实施例5——栓剂制剂
通过将本技术的化合物与 H-15(饱和植物脂肪酸的甘油三酯；Riches Nelson公司，纽约)混合来制备总重2.5g的栓剂，其具有以下组成：
治疗方法
本文公开的化合物或其互变异构体和/或其药学上可接受的盐可有效地充当CAPN1、CAPN2和/或CAPN9抑制剂，并且治疗至少部分地受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的病况。一些实施方案提供了药物组合物，其包含一种或多种本文公开的化合物和药学上可接受赋形剂。一些实施方案提供了用有效量的一种或多种本文公开的化合物来治疗纤维化疾病的方法。
在一些实施方案中，受试者是人。
另外的实施方案包括向有此需要的受试者施用化合物的组合。组合可包括本文所述的化合物、组合物、药物组合物和另外的药物。
一些实施方案包括与另外的药物共同施用本文所述的化合物、组合物和/或药物组合物。“共同施用”是指可以在患者的血流中同时发现两种或更多种药剂，而不管它们实际上何时或如何施用。在一个实施方案中，该药剂同时施用。在一个这样的实施方案中，组合施用是通过将药剂合并在单一剂型中来完成的。在另一个实施方案中，相继施用药剂。在一个实施方案中，药剂通过相同途径例如口服施用。在另一个实施方案中，药剂通过不同途径施用，例如一种口服施用和另一种i.v.施用。
一些实施方案包括本文所述的化合物、组合物或药物组合物与批准用于治疗与纤维化或肌成纤维细胞分化有关的疾病或病况的任意其他药物化合物的组合。
一些实施方案提供了用于抑制CAPN1、CAPN2和/或CAPN9的方法和/或用有效量的一种或多种本文公开的化合物来治疗至少部分地受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法。
本文公开的化合物可用于抑制CAPN1、CAPN2和/或CAPN9酶和/或治疗与纤维化或肌成纤维细胞分化有关的病症。
一些实施方案提供了用于抑制CAPN1、CAPN2和/或CAPN9的方法，该方法包括使细胞(包括神经元/小胶质细胞/侵入巨噬细胞)与有效量的一种或多种本文公开的化合物接触。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，该方法包括向受试者施用有效量的一种或多种本文公开的化合物或包含药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分地受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，该方法包括向受试者施用有效量的一种或多种本文公开的化合物或包含药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
一些实施方案提供了用于抑制CAPN1、CAPN2和/或CAPN9的方法，其中该方法包括使细胞与有效量的一种或多种本文公开的化合物接触。在一些实施方案中，用于抑制CAPN1、CAPN2和/或CAPN9的方法在体外或体内进行。
钙蛋白酶也在除神经元、小胶质细胞和入侵巨噬细胞之外的细胞中表达。特别地，它们在骨骼肌中是重要的，并且本文中对钙蛋白酶的抑制也指在这些细胞中的抑制。
选择性抑制
一些实施方案提供了一种与钙蛋白酶抑制剂(CAST)竞争性结合的方法，该方法包括使本文公开的化合物与存在于受试者体内的CAPN1、CAPN2和/或CAPN9酶接触。在这种方法中，该化合物特异性地抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的一种或多种酶至少2倍、至少3倍、至少4倍、至少5倍、至少10倍、至少15倍、至少20倍、至少50倍、至少100倍、至少150倍、至少200倍、至少400倍或至少500倍。
一些实施方案提供了在CAPN2和CAPN9存在下选择性抑制CAPN1的方法，其包括使细胞(包括神经元/小胶质细胞/侵入巨噬细胞)与有效量的一种或多种本文公开的化合物接触。
一些实施方案提供了在CAPN1和CAPN9存在下选择性抑制CAPN2的方法，其包括使细胞(包括神经元/小胶质细胞/侵入巨噬细胞)与有效量的一种或多种本文公开的化合物接触。
一些实施方案提供了在CAPN2和CAPN1存在下选择性抑制CAPN9的方法，其包括使细胞(包括神经元/小胶质细胞/侵入巨噬细胞)与有效量的一种或多种本文公开的化合物接触。
一些实施方案提供了在CAPN9的存在下选择性抑制CAPN1和CAPN2的方法，其包括使细胞(包括神经元/小胶质细胞/侵入巨噬细胞)与有效量的一种或多种本文公开的化合物接触。
一些实施方案提供了在CAPN2的存在下选择性抑制CAPN1和CAPN9的方法，其包括使细胞(包括神经元/小胶质细胞/侵入巨噬细胞)与有效量的一种或多种本文公开的化合物接触。
一些实施方案提供了在CAPN1的存在下选择性抑制CAPN2和CAPN9的方法，其包括使细胞(包括神经元/小胶质细胞/侵入巨噬细胞)与有效量的一种或多种本文公开的化合物接触。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，该方法包括向受试者施用有效量的一种或多种特异性抑制CAPN1、CAPN2和/或CAPN9的化合物，所述化合物或包含一种或多种本文公开的化合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，该方法包括向受试者施用有效量的一种或多种特异性抑制CAPN1、CAPN2和/或CAPN9的化合物，所述化合物选自本文公开的化合物或包含一种或多种本文公开的化合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，该方法包括向受试者施用有效量的一种或多种选择性抑制CAPN1、CAPN2和/或CAPN9的化合物，所述化合物选自本文公开的化合物或包含一种或多种本文公开的化合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，该方法包括向受试者施用有效量的一种或多种选择性抑制CAPN1、CAPN2和/或CAPN9的化合物，所述化合物选自本文公开的化合物或包含一种或多种本文公开的化合物和药学上可接受的赋形剂的药物组合物。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：5的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：10的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：20的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：50的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：100的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：200的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：250的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：500的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：5的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：10的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：20的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：50的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：100的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：200的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：250的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗纤维化疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：500的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：5的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：10的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：20的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：50的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：100的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：200的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：250的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：500的比例特异性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：5的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：10的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：20的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：50的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：100的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：200的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：250的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于治疗至少部分受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用有效量的一种或多种化合物，所述化合物以至少1：1：500的比例选择性抑制选自由CAPN1、CAPN2和CAPN9组成的组的两种以上的酶。
一些实施方案提供了用于预防性治疗或治疗患有纤维变性病症的受试者的方法，其中所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的一种或多种本文公开的化合物。
一些实施方案提供了用于预防性治疗或治疗患有受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的病症的受试者的方法，其中所述方法包括向有此需要的受试者施用有效量的一种或多种本文公开的化合物。
一些实施方案提供了用于抑制肌成纤维细胞分化(例如，上皮/内皮-间质转化(EpMT/EnMT))的方法，其中该方法包括使细胞与有效量的一种或多种本文公开的化合物接触。在一个方面，该用于抑制肌成纤维细胞分化(例如，上皮/内皮-间质转化(EpMT/EnMT))的方法在体外或体内进行。
一些实施方案提供了用于治疗选自由以下组成的组的疾病或病况，或产生选自由以下组成的组的症状的疾病或病况的方法：肝纤维化、肾纤维化、肺纤维化、过敏性肺炎、间质纤维化、系统性硬皮病、黄斑变性、胰腺纤维化、脾纤维化、心肌纤维化、纵隔纤维化、骨髓纤维化、心内膜心肌纤维化、腹膜后纤维化、进行性大块纤维化、肾源性系统性纤维化、手术纤维化并发症、慢性移植物血管病变和/或移植器官慢性排斥反应、缺血再灌注损伤相关纤维化、注射纤维化、肝硬化、弥漫性实质性肺病、输精管切除术后疼痛综合征和类风湿性关节炎疾病，其中该方法包括向有此需要的受试者施用有效量的一种或多种本文公开的化合物。
一些实施方案提供了用于治疗肝纤维化的方法。
一些实施方案提供了用于治疗心肌纤维化的方法。
一些实施方案提供了用于治疗类风湿性关节炎疾病中的纤维化的方法。
一些实施方案提供了用于治疗受CAPN1、CAPN2和/或CAPN9影响的病况的方法，其对于受试者而言适用于治疗和预防背景两者。两种方法均包括向有此需要的受试者施用一种或多种本文公开的化合物。
一些实施方案提供了用于治疗僵硬皮肤综合症的方法。
优选的实施方案包括本文所述的化合物、组合物或药物组合物与其他CAPN1、CAPN2和/或CAPN9抑制剂，例如抗CAPN1、CAPN2和/或CAPN9抗体或抗体片段，CAPN1、CAPN2和/或CAPN9反义iRNA，或其他小分子CAPN1、CAPN2和/或CAPN9抑制剂的组合。
一些实施方案包括本文所述的化合物、组合物或药物组合物的组合以抑制肌成纤维细胞分化(例如，上皮/内皮-间质转化(EpMT/EnMT))。一些实施方案包括这些化合物(它们是一种或多种(或全部三种)CAPN1、CAPN2和/或CAPN9的抑制剂)中的一种或多种的组合或者这些化合物中的一种或多种的组合与其它TGFβ信号传导抑制剂的组合，其可用于治疗或预防或减轻包括以下的纤维化、硬化或炎症后疾病或病症的症状：肝纤维化、肾纤维化、肺纤维化、过敏性肺炎、间质纤维化、系统性硬皮病、黄斑变性、胰腺纤维化、脾纤维化、心肌纤维化、纵隔纤维化、骨髓纤维化、心内膜心肌纤维化、腹膜后纤维化、进行性大块纤维化、肾源性系统性纤维化、手术纤维化并发症、慢性移植物血管病变和/或移植器官慢性排斥反应、缺血再灌注损伤相关纤维化、注射纤维化、肝硬化、弥漫性实质性肺病、输精管切除术后疼痛综合征和类风湿性关节炎。
一些实施方案包括本文所述的化合物、组合物和/或药物组合物与另外的药剂的组合，另外的药剂例如抗炎药包括糖皮质激素、镇痛药(例如布洛芬)、阿司匹林和调节Th2-免疫应答的药剂、免疫抑制剂包括甲氨蝶呤、霉酚酸酯、环磷酰胺、环孢菌素、沙利度胺(thalidomide)、泊马度胺(pomalidomide)、来氟米特(leflunomide)、羟氯喹、硫唑嘌呤、可溶性牛软骨、血管扩张剂包括内皮素受体拮抗剂、前列环素类似物、硝苯地平(nifedipine)和西地那非(sildenafil)、IL-6受体拮抗剂、选择性和非选择性酪氨酸激酶抑制剂、Wnt通路调节剂、PPAR激活剂、半胱天冬酶-3抑制剂、LPA受体拮抗剂、B细胞耗竭剂、CCR2拮抗剂、吡非尼酮(pirfenidone)、大麻素受体激动剂、ROCK抑制剂、miRNA靶向剂、toll样受体拮抗剂、CTGF靶向剂、NADPH氧化酶抑制剂、类胰蛋白酶抑制剂、TGFD抑制剂、松弛素受体激动剂和自体脂肪来源的再生细胞。
适应症
在一些实施方案中，化合物和包含本文所述化合物的组合物可用于治疗由纤维化或炎症引起的许多病况，并且特别包括与肌成纤维细胞分化相关的那些病况。实例病况包括肝纤维化(酒精性、病毒性、自身免疫性、代谢性和遗传性慢性疾病)、肾纤维化(例如由慢性炎症、感染或II型糖尿病引起)、肺纤维化(特发性或由环境损害(包括有毒颗粒)、结节病、石棉沉滞症、过敏性肺炎、细菌感染(包括肺结核)、药物等引起)、间质纤维化、系统性硬皮病(其中许多器官变成纤维化的自身免疫性疾病)、黄斑变性(眼部纤维化疾病)、胰腺纤维化(由例如酒精滥用和胰腺的慢性炎症性疾病引起)、脾纤维化(由镰状细胞性贫血、其他血液疾病引起)、心肌纤维化(由感染、炎症和肥大引起)、纵隔纤维化、骨髓纤维化、心内膜心肌纤维化、腹膜后纤维化、进行性大块纤维化、肾源性系统性纤维化、手术纤维化并发症、慢性移植物血管病变和/或移植器官慢性排斥反应、缺血再灌注损伤相关纤维化、注射纤维化、肝硬化、弥漫性实质性肺病、输精管切除术后疼痛综合征和类风湿性关节炎疾病或病症。
为了进一步说明本发明，包括了以下实施例。当然，这些实施例不应被解释为具体限制本发明。在权利要求范围内的这些实施例的变化在本领域技术人员的知识范围内，并且被认为落入本文所述和要求保护的本发明的范围内。读者将认识到，具备本公开内容的技术人员和本领域技术人员能够在没有详尽实施例的情况下制备和使用本发明。以下实施例将进一步描述本发明，并且仅用于说明的目的，不应视为限制。
实施例
一般步骤
对于本领域技术人员显而易见的是，制备前体的方法和与本文要求保护的化合物相关的官能团通常在文献中描述。在这些反应中，还可以使用本领域普通技术人员已知的变体，但这些变体没有更详细地提及。被给予文献和本公开内容的本领域技术人员可以很好地制备任意化合物。
应该认识到，有机化学领域的技术人员可以在没有进一步指导的情况下容易地进行操作，也就是说，进行这些操作完全在本领域技术人员的范围和实践范围内。这些包括将羰基化合物还原成它们相应的醇、氧化、酰化、(亲电和亲核)芳族取代、醚化、酯化和皂化等。这些操作在标准文件中有讨论，例如March Advanced Organic Chemistry(Wiley),Carey and Sundberg,Advanced Organic Chemistry(通过引用整体并入本文)等。除非另有说明，否则本发明的所有中间体化合物无需进一步纯化即可使用。
本领域技术人员将容易理解，当在分子中掩蔽或保护其他官能团时，某些反应能够最佳地进行，从而避免任何不希望的副反应和/或增加反应的收率。本领域技术人员通常利用保护基团来实现这种收率增加或避免不希望的反应。这些反应可在文献中找到，并且也在本领域技术人员的范围内。许多这些操作的实例可以在例如T.Greene和P.WutsProtecting Groups in Organic Synthesis,第4版,John Wiley&Sons(2007)中找到，其通过引用整体并入本文。
提供了以下实施例方案用于指导读者，并且代表制备本文示例的化合物的优选方法。这些方法不是限制性的，并且显然可以采用其他途径来制备这些化合物。这些方法具体包括基于固相的化学，包括组合化学。本领域技术人员完全具备通过文献和本公开内容给出的那些方法制备这些化合物的方法。下面描述的合成方案中使用的化合物编号仅适用于那些特定方案，并且不应将其解释为本申请其他部分中的相同编号或与之混淆。
本文使用的商标仅是示例，并且反映了在本发明时使用的示例性材料。技术人员将认识到，预期在批次、制造过程等中存在变化。因此，实施例和其中使用的商标是非限制性的，并且它们不旨在限制，而仅仅是本领域技术人员如何选择执行本发明的一个或多个实施方案的示例。
以下缩写具有指示的含义：
DCM＝二氯甲烷
DIEA＝N,N-二异丙基乙胺
DIPEA＝N,N-二异丙基乙胺
DMF＝N,N-二甲基甲酰胺
DMP＝戴斯-马丁试剂(Dess Martin Periodinane)
DNs＝二硝基磺酰基
ESBL＝超广谱β-内酰胺酶
EtOAc＝乙酸乙酯
EA＝乙酸乙酯
FCC＝快速柱色谱
HATU＝2-(7-氮杂-1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲六氟磷酸盐
MeCN＝乙腈
NMR＝核磁共振
PE＝石油醚
Prep＝制备型
Py＝吡啶
Sat.＝饱和水溶液
TBDMSCl＝叔丁基二甲基甲硅烷基氯
TBS＝叔丁基二甲基甲硅烷基
TFA＝三氟乙酸
THF＝四氢呋喃
TLC＝薄层色谱
提供以下实施例方案用于指导读者，并共同代表制备本文提供的化合物的实例方法。此外，根据以下反应方案和实施例，本领域普通技术人员将容易明白制备本文所述化合物的其他方法。除非另有说明，否则所有变体如上所定义。
实施例1
化合物1-2、5-6、8、91-92
(S)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酰胺(1)
将化合物1A(102mg，1.0当量)、化合物1B(160mg，1.2当量)和HBTU(250mg，1.25当量)在DMF(8mL)中的混合物在室温下搅拌5分钟，然后加入DIEA(0.3mL，3.0当量)。在室温下搅拌30分钟后，将反应混合物用50mL乙酸乙酯和20mL己烷稀释，用水、饱和NaHCO3和盐水洗涤，真空浓缩，得到中间体化合物1C(190mg，收率92％)。
将化合物1C(190mg，1.0当量)的无水THF(15mL)溶液在N2下冷却至-50℃，然后在-50℃下滴加1N LAH的THF(0.55mL，1.1当量)溶液。将反应混合物在-30℃至-10℃下搅拌2小时，在-20℃下用饱和NaHCO3淬灭，然后用3×30mL乙酸乙酯萃取。将合并的有机相用Na2SO4干燥，得到粗混合物，将其在硅胶柱上纯化。化合物1(105mg，65％)：MS(ESI)m/z(M+H)+：320.3；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.64(s,1H),7.65(s,1H),7.56(s,1H),7.46(m,3H),7.26-7.33(m,5H),7.09(m,2H),6.29(d,1H),4.81(m,1H),3.19(d,2H)ppm
(S)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(2)
((S)-5-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(5)
(S)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-4-苯基噻唑-5-甲酰胺(6)
(S)-3-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(8)
如实施例1使用相应的羧酸分别制备化合物2、5、6和8。化合物2：MS(ESI)m/z(M+H)+：320.2；1H NMR(400MHz,DMSO)：δ9.6(s,1H),9.15(d,1H),7.73(s,1H),7.4-7.2(m,10H),6.8(s,1H),4.53(m,1H),3.25(dd,1H),2.8(dd,1H)ppm。
化合物5：MS(ESI)m/z(M+H)+：334.3；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.67(s,1H),7.54-7.4(m,6H),7.3-7.2(m,5H),6.73(s,1H),4.82(m,1H),3.21(d,2H),2.33(s,3H)ppm。
化合物6：MS(ESI)m/z(M+H)+：337.5；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.56(s,1H),8.88(s,1H),7.5-7.34(m,5H),7.27-7.2(m,3H),6.94(m,2H),6.35(d,1H),4.73(m,1H),3.1(dd,1H),3.08(dd,1H)ppm。
化合物8：MS(ESI)m/z(M+H)+：334.3；1H NMR(400MHz,DMSO)：δ9.59(s,0.6H),9.01(d,0.6H),8.35(d,0.4H),7.38-7.06(m,10H),6.58(s,0.6H),6.48(s,0.4H),4.82(m,0.2H),4.54(m,0.6H),3.98(m,0.4H),3.25(dd,0.6H),2.98(dd,0.4H),2.78(dd,0.6H),2.7(dd,0.4H),2.48(s,1.8H0,2.21(s,1.2H)ppm。
(S)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)噻唑-5-甲酰胺(91)
如实施例1由相应的起始物料——化合物91A和1B制备化合物91。化合物91：1HNMR(400MHz,CDCl3)：δ9.69(s,1H),8.85(s,1H),8.21(s,1H),7.06(d,1H),7.32-7.18(m,8H),4.88(m,1H),3.26(m,2H)ppm。MS(ESI)m/z(M+H)+261.3。
(S)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-2-苯基-1H-苯并[d]咪唑-7-甲酰胺(92)
如实施例1使用相应的羧酸制备化合物92。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ12.07(s,1H),11.92(d,1H),9.84(s,1H),8.1-8.0(m,3H),7.5-7.46(m,10H),7.32-7.18(m,8H),5.04(m,1H),3.34(d,2H)ppm。MS(ESI)m/z(M+H)+370.4。
实施例2
化合物3-4
(S)-1-(苯并[D]噻唑-2-基)-N-((S)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺(3)
将化合物3A(500g，1.0当量)、化合物3B(738g，1.0当量)、CuI(124g，0.15当量)和K2CO3(1.8g，3.0当量)在DMA(15L)中的混合物加热至100℃保持18小时，然后通过过滤除去无机物。将混合物用水(50mL)稀释，调节pH约6，然后用3×50mL乙酸乙酯萃取，得到中间体化合物3C。如实施例1使用相应的羧酸——中间体化合物3C制备化合物3。化合物3：MS(ESI)m/z(M+H)+：380.2；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.66(s,1H),8.32(d,1H),7.63(d,1H),7.52(d,1H),7.30(t,1H),7.10(t,1H),6.92-7.01(m,5H),4.69(m,2H),3.45(m,1H),3.36(m,1H),3.17(dd,1H),2.90(dd,1H),2.55(m,1H),2.03(m,3H)ppm。
(S)-1-(苯并[D]噁唑-2-基)-N-((S)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺(4)
如实施例2使用相应的起始物料制备化合物4。MS(ESI)m/z(M+H)+：364.3；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.65(s,1H),7.69(br d,1H),7.37(d,1H),7.33(t,1H),7.18(t,1H),6.98-7.10(m,6H),4.71(m,2H),4.59(m,1H),3.61(m,2H),3.19(dd,1H),2.97(dd,1H),2.41(m,1H),1.91-2.12(m,3H)ppm。
实施例3
(S)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-3-苯基异噻唑-4-甲酰胺(9)
向化合物9A(1.2g)的甲苯(15ml)悬浮液中加入氯羰基亚磺酰氯(1.3ml)。将混合物在100℃下加热2小时，得到澄清溶液(观察到气体逸出)。当TLC显示完全转化时，将反应混合物浓缩，将固体残余物用己烷研磨，过滤并干燥，得到化合物9B。
向化合物9B(1.4g)的α,α,α-三氟甲苯(10mL)溶液中加入乙炔二羧酸二乙酯(2.0ml)。在微波中在170℃下加热1小时后，将反应混合物浓缩，并通过快速柱色谱纯化油状残余物。将含产物的级分合并，浓缩，将残余物用己烷研磨，过滤并干燥，得到化合物9C。
将化合物9C(2.1g)和NaOH(1.4g)的水(20mL)溶液回流2.5小时。将反应混合物冷却，用水(150mL)稀释并用浓HCl(水溶液)酸化。形成沉淀物。用EtOAc(2×200mL；沉淀物缓慢溶解)萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩，得到化合物9D。
将化合物9D(1.8g)在1,2-二氯苯(20mL)中的悬浮液回流20分钟(观察到气体形成)。将反应混合物冷却，用己烷(50mL)稀释并过滤以使产物沉淀。向粗产物在水(40mL)中的悬浮液中加入1N NaOH(10ml)。用乙酸乙酯(2×100mL)萃取水层，并用浓HCl酸化至pH约3。用EtOAc(2×100mL)萃取产物。将合并的有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩，得到中间体化合物9E。
如实施例1使用相应的羧酸——中间体化合物9E制备化合物9。MS(ESI)m/z(M+H)+：359.1；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.59(s,1H),9.16(s,1H),7.56-7.5(m,2H),7.48-7.4(m,3H),7.27-7.22(m,3H),6.94(m,2H),6.15(d,1H),4.79(m,1H),3.1(d,2H)ppm。
实施例4
化合物7、10-11、14、18、20
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酰胺(7)
将化合物7A(50mg，1.0当量)、化合物7B(74mg，1.2当量)和HBTU(126mg，1.25当量)在DMF(3mL)中的混合物在室温下搅拌5分钟，然后加入DIEA(0.15mL，3.0当量)。在室温下搅拌30分钟后，将反应混合物用乙酸乙酯(30mL)和己烷(10mL)稀释，用1N HCl、水、饱和NaHCO3和盐水洗涤，真空浓缩，得到中间体化合物7C(65mg，收率67％)，为白色固体。
向化合物7C(65mg，1.0当量)在无水DCM(10ml)和DMSO(2mL)中的溶液中加入DMP(305mg，4.0当量)。在室温下搅拌1小时后，将混合物用DCM(30mL)稀释，通过添加10％Na2S2O3水溶液/饱和NaHCO3水溶液(v/v＝1/1，～10mL)淬灭。通过用DCM(30mL×5)萃取水层来分离有机层。将合并的有机层用H2O(10mL)、盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到白色固体，然后将其在CH2Cl2/己烷中研磨，得到纯产物化合物7(29mg，收率45％)。MS(ESI)m/z(M+H)+：363.4；1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.66(s,1H),7.57(s,1H),7.45(m,3H),7.26-7.35(m,5H),7.05(m,2H),6.72(s,1H),6.24(d,1H),5.58(m,2H),4.81(m,1H),3.38(dd,1H),3.14(dd,1H)ppm。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(10)
如实施例4使用相应的羧酸制备。MS(ESI)m/z(M+H)+：363.3；1H NMR(400MHz,DMSO)：δ9.15(d,1H),8.11(s,1H),7.71(s,1H),7.4-7.2(m,10H),7.07(d,1H),6.72(s,1H),5.26(m,1H),2.81(dd,1H),2.64(dd,1H)ppm。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-苯基异噻唑-4-甲酰胺(11)
如实施例4使用相应的羧酸——中间体化合物9E制备。MS(ESI)m/z(M+H)+380.2；1HNMR(400MHz,DMSO)：δ9.15(d,1H),9.05(s,1H),8.14(s,1H),7.89(s,1H),7.5-7.4(m,2H),7.3-7.2(m,8H),5.34(m,1H),3.2(d,2H)ppm。
(S)-1-(苯并[D]噁唑-2-基)-N-((S)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)吡咯烷-2-甲酰胺(14)
如实施例3制备中间体化合物14E。然后如实施例4使用相应的中间体羧酸——化合物14E制备化合物14。化合物14：MS(ESI)m/z(M+H)+：431.5；1H NMR(400MHz,DMSO)：δ9.14(s,1H),9.05(d,1H),8.16(d,1H),7.9(s,1H),7.62-7.56(m,2H),7.3-7.2(m,8H),5.36(m,1H),3.17(dd,1H),2.78(dd,1H)ppm。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-苯基噻唑-5-甲酰胺(18)
如实施例4使用相应的羧酸制备。MS(ESI)m/z(M+H)+：380.1；1H NMR(400MHz,DMSO)：δ10.11(d,1H),9.33(s,1H),8.49(d,1H),8.13(s,1H),8.07(d,1H),8.03(d,1H),7.85(s,1H),7.74(m,2H),7.65(m,1H),7.12-7(m,5H),5.51(m,1H),3.18(dd,1H)2.89(dd,1H)ppm。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-(苯并[D][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-3-甲基异噁唑-4-甲酰胺(20)
如实施例4使用相应的羧酸制备。MS(ESI)m/z(M+H)+：422.1；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.88(d,1H),8.19(s,1H),7.91(s,1H),7.17-7.30(m,7H),6.94(d,1H),6.11(s,2H),5.45(m,1H),3.22(dd,1H),2.72(dd,1H),2.03(s,3H)ppm。
实施例5
化合物12-13、15-17、19、27、44、47、54、60、94、117-118、128、148、207、235、303-305、309-312、23、39、456、461、492
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(12)
向化合物12A(5.0g，1.0当量)和化合物12B(2.64g，1.0当量)在无水DMF(20mL)中的溶液中加入4A°分子筛(5.0g，粉末)。将所得混合物在室温下在N2下搅拌20小时，过滤以除去分子筛，用己烷(80mL)和乙酸乙酯(80mL)稀释，然后用3×50mL水、50mL饱和NaHCO3和盐水洗涤。将粗混合物在硅胶柱上纯化，得到化合物12C(3.2g，收率48％)，为澄清油状物。
将化合物12C(350mg，1.0当量)和化合物12D(190mg，1.0当量)在乙酸(8mL)中的混合物在100℃下加热1小时。在真空去除溶剂后，将残余物悬浮在乙酸乙酯(80mL)中，用饱和NaHCO3和盐水洗涤。将粗混合物在硅胶柱上纯化，得到化合物12E(100mg，收率25％)。将化合物12E(100mg)用LiOH的MeOH/水溶液处理，得到化合物12F(87mg，收率100％)。
将化合物12F(85mg，1.0当量)、化合物12G(116mg，1.2当量)和HBTU(190mg，1.2当量)在DMF(5mL)中的混合物在室温下搅拌5分钟，然后加入DIEA(0.3mL，4.0当量)。在室温下搅拌30分钟后，将混合物用50mL乙酸乙酯和20mL己烷稀释，用1N HCl、水、饱和NaHCO3和盐水洗涤，真空浓缩，得到中间体化合物12H(150mg，收率94％)，为白色固体。
向化合物12H(150mg，1.0当量)在无水DCM(20ml)和DMSO(2.5mL)中的溶液中加入DMP(673mg，4.0当量)。在室温下搅拌1小时后，将混合物用DCM(80mL)稀释，通过添加10％Na2S2O3/饱和NaHCO3(v/v＝1/1，～20mL)淬灭。分离有机层。用DCM(30ml×2)萃取水层。将合并的有机层用H2O(10mL)、盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到白色固体。将固体在CH2Cl2/己烷中研磨，得到纯化合物12(95mg，收率64％)。MS(ESI)m/z(M+H)+：378.3；1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.15(d,1H),8.21(d,1H),7.91(t,1H),7.82(s,1H),7.54(d,1H),7.17-7.32(m,6H),6.49(s,1H),5.29(m,1H),3.15(dd,1H),2.84(dd,1H),2.23(s,3H)ppm。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(苯并[D]噻唑-2-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(13)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(喹啉-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(15)
(S)-1-([1,1'-联苯基]-3-基)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(16)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(4-(甲基磺酰基)苯基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(17)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(4-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(19)
如实施例5通过使用相应的肼衍生物分别制备化合物13、15-17和19。
化合物13：MS(ESI)m/z(M+H)+：434.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ10.09(d,1H),8.10(d,1H),7.99(d,1H),7.83(s,1H),7.62(d,1H),7.40(m,2H),7.04-7.24(m,5H),6.68(s,1H),5.51(m,1H),3.16(dd,1H),2.95(dd,1H),2.24(s,3H)ppm。
化合物：15：MS(ESI)m/z(M+H)+：428.4；1H NMR(400MHz,DMSO)：δ9.28(d,0.5H),8.77(d,0.5H),8.45(d,1H),8(d,1H),7.9-7.5(6H),7.2-7.1(6H),5.4(m,0.5H4.44(m,0.5H),3.2-2.7(m,2H)ppm。
化合物16：MS(ESI)m/z(M+H)+：453.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.10(d,1H),8.09(s,1H),7.87(s,1H),7.35-7.62(m,8H),7.19-7.29(m,5H),7.09(d,1H),6.61(s,1H),5.30(m,1H),3.17(dd,1H),2.81(dd,1H),2.25(s,3H)ppm。
化合物17：MS(ESI)m/z(M+H)+：455.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.27(d,1H),8.14(s,1H),7.88(m,2H),7.82(d,1H),7.35-7.62(m,8H),7.19-7.45(m,7H),6.62(s,1H),5.25(m,1H),3.19(m,4H),2.82(dd,1H),2.25(s,3H)ppm。
化合物19：MS(ESI)m/z(M+H)+：461.3；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.15(d,1H),8.11(s,1H),7.87(s,1H),7.82(d,1H),7.21-7.35(m,9H),6.61(s,1H),5.23(m,1H),3.20(dd,1H),2.82(dd,1H),2.24(s,3H)ppm。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-3-苯基异噁唑-4-甲酰胺(27)
如实施例12，由相应的羧酸——化合物27A制备化合物27(30.0mg，43.0％收率，白色固体)。化合物27：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.94(d,J＝7.6Hz,1H),8.17(s,1H),7.90(s,1H),7.49-7.41(m,3H),7.41-7.34(m,2H),7.33-7.21(m,5H),5.42-5.35(m,1H),3.29-3.21(m,1H),2.80-2.70(m,1H),2.35-2.27(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-苯基-1,2,3-噻二唑-5-甲酰胺(44)
如实施例12，由相应的中间体羧酸——化合物44A制备化合物44(42.4mg，收率：47.7％，白色固体)。化合物44：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(br d,J＝7.5Hz,1H),8.19(s,1H),7.93(s,1H),7.79-7.67(m,2H),7.52-7.39(m,3H),7.34-7.21(m,5H),5.52-5.39(m,1H),3.23(dd,J＝14.0,3.5Hz,1H),2.78(dd,J＝13.6,10.5Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+381.0。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-5-苯基噻唑-4-甲酰胺(54)
如实施例12，由相应的中间体羧酸——化合物54A制备化合物54(75mg，收率：75.4％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.46(br d,J＝7.7Hz,1H)8.05(br s,1H)7.81(br s,1H)7.43-7.29(m,1H)7.41-7.29(m,1H)7.29-7.29(m,1H)7.41-7.29(m,1H)7.30-7.28(m,1H)7.28-7.08(m,5H)5.37(td,J＝8.1,4.5Hz,1H)3.22-3.09(m,1H)3.17(brdd,J＝14.0,4.1Hz,1H)3.06–2.92(m,1H)2.72-2.60(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+394.0。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(60)
如实施例5，由相应的羧酸——化合物60A制备化合物60(40mg，收率36.20％，白色固体)。化合物60：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.02(d,J＝7.5Hz,1H),8.83(s,1H),8.16(s,1H),7.92-7.78(m,3H),7.59-7.42(m,3H),7.35-7.17(m,4H),5.43-5.34(m,1H),3.27-3.17(m,1H),2.90-2.79(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+364.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-氯-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(94)
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物94A制备化合物94。化合物94：1H NMR(400MHz,DMSO)：δ8.8(d,1H),8.16(s,1H),7.89(s,1H),7.5-7.46(m,2H),7.32-7.18(m,8H),5.41(m,1H),3.82(s,3H),3.17(dd,1H),2.76(dd,1H)ppm。MS(ESI)m/z(M+H)+410.9。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-异丙基-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(117)
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物117A制备化合物117(10mg，收率18.29％，白色固体)。化合物117：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.36(d,J＝7.8Hz,1H),8.09(s,1H),7.84(s,1H),7.63-7.47(m,5H),7.32-7.14(m,5H),6.66(s,1H),5.50-5.39(m,1H),3.23-3.13(m,1H),3.09-2.89(m,2H),1.12(d,J＝6.8Hz,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+405.2。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-2-苯基呋喃-3-甲酰胺(118)
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物118A制备化合物118(58mg，收率：55.4％，白色固体)。化合物118：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.54(d,J＝7.5Hz,1H),8.08(s,1H),7.81(s,1H),7.68(d,J＝7.0Hz,2H),7.35-7.26(m,7H),7.23-7.17(m,1H),6.39(d,J＝0.9Hz,1H),5.30(br d,J＝0.7Hz,1H),3.19-3.12(m,1H),2.88-2.79(m,1H),2.33-2.29(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(叔丁基)-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(128)
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物128A制备化合物128(101.7mg，68.04％收率，白色固体)。化合物128：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.55-7.44(m,3H),7.42-7.35(m,2H),7.34-7.28(m,1H),7.25-7.14(m,5H),6.74(br s,1H),6.70(s,1H),5.73-5.64(m,1H),5.53(br s,1H),3.44-3.35(m,1H),3.18-3.09(m,1H),1.16(s,9H)。MS(ESI)m/z(M+1)+419.3。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-苯基噁唑-4-甲酰胺(148)
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物148A制备化合物148(10mg，收率：30.8％，白色固体)。化合物148：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(s,1H),8.44(d,J＝7.7Hz,1H),8.14-8.03(m,3H),7.85(s,1H),7.49-7.42(m,3H),7.30-7.15(m,5H),5.49-5.40(m,1H),3.26-3.17(m,1H),3.12-3.02(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+364.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-环丙基-4-苯基噻唑-5-甲酰胺(207)
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物135A制备化合物207(54.0mg，44.09％收率，白色固体)。化合物207：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.52-7.45(m,2H),7.43-7.38(m,3H),7.21-7.17(m,3H),6.79-6.77(m,2H),6.70(s,1H),6.19–6.17(d,J＝6.0Hz,1H),5.53(s,1H),5.50–5.45(m,1H),3.25-3.21(m,1H),2.90-2.85(m,1H),2.33-2.27(m,1H),1.19–1.16(m,2H),1.13–1.10(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+1)+420.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2,6-二甲基嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(235)
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物235A制备化合物235(61.6mg，51.11％收率，白色固体)。化合物235：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.83(d,J＝7.2Hz,1H),7.57(s,1H),7.21-7.16(m,3H),7.11-7.06(m,2H),6.87(s,1H),6.75(br s,1H),5.84-5.76(m,1H),5.56(br s,1H),3.49-3.31(m,2H),2.55(s,3H),2.34-2.32(m,6H)。MS(ESI)m/z(M+1)+407.1。
((S)-N-(1-氨基-1,2-二氧代戊烷-3-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(47)
如实施例5，由相应起始物料——23A和47A制备化合物47(90.00mg，收率60.4％，白色固体)。化合物47：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.98(d,J＝6.6Hz,1H),8.12(br s,1H),7.88-7.79(m,3H),7.57-7.50(m,3H),5.12-5.02(m,1H),2.32(s,3H),1.95-1.77(m,1H),1.65-1.48(m,1H),0.93(t,J＝7.4Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+316.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-苯基噁唑-5-甲酰胺(303)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-苯基异噁唑-4-甲酰胺(304)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-苯基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(305)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1,3-二苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(309)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(叔丁基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(310)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-氯-1-乙基-1H-吡唑-5-甲酰胺(311)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-氯-1-乙基-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(312)
如实施例5，由相应的羧酸和化合物12G分别制备化合物303-305和309-312。
化合物303：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ1H NMR(400MHz,DMSO)：δ8.51(s,1H),7.9-7.85(m,2H),7.81(d,1H),7.4-7.0(m,10H),4.53(m,1H),2.98(dd,1H),2.57(dd,1H)ppm。MS(ESI)m/z(M+H)+364.3。
化合物304：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.2-8.9(m,1H),8.11(m,1H),7.7-7.1(m,12H),5.3(m,0.5H),4.4(m,0.5H),2.85-2.55(m,2H)ppm。MS(ESI)m/z(M+H)+364.3。
化合物305：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.3(d,1H),8.07(s,1H),7.83(s,1H),7.4-7.1(m,10H),5.24(m,1H),3.14(dd,1H),2.74(dd,1H)ppm。MS(ESI)m/z(M+H)+431.3。
化合物309：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.7(m,1H),8.49(d,1H),8.1-7.1(m,17H),5.31(m,0.5H),4.6-4.4(m,0.5H),3.1-2.7(m,2H)ppm。MS(ESI)m/z(M+H)+439.3。
化合物310：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.75(d,1H),7.4-7.1(m,5H),6.38(s,1H),6.1(d,2H),4.48(m,1H),3.02(dd,1H),2.52(dd,1H)2.08(s,3H),1.31(s,9H)ppm。MS(ESI)m/z(M+H)+379.3。
化合物311：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.89(d,1H),8.13(d,1H),7.86(s,1H),7.33(s,1H),7.3-7.1(m,5H),6.8(s,1H),5.38(m,1H),3.99(q,2H),3.21(dd,1H),2.78(dd,1H)1.11(t,3H)ppm。MS(ESI)m/z(M+H)+349.2。
化合物312：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(d,1H),8.1(s,1H),7.83(s,1H),7.4-7.2(m,5H),6.58(s,1H),5.29(m,1H),4.25(q,2H),3.18(dd,1H),2.87(dd,1H),2.13(s,3H),1.15(t,3H)ppm。MS(ESI)m/z(M+H)+329.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(23)
向化合物23A(500mg，2.46mmol)的THF(10mL)溶液中加入23B(311mg，2.71mmol)和EDCI(56 6mg，2.95mmol)与DCM(10mL)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物浓缩并用EA(20mL)稀释。然后将混合物用HCl(1M，20mL)、饱和NaHCO3水溶液(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。化合物23C(800mg，粗品，黄色油状物)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.93-7.88(m,2H),7.69-7.63(m,1H),7.62-7.56(m,2H),2.87(s,4H),2.54-2.51(m,3H)。
如实施例5，由相应的中间体化合物23C和12G制备化合物23(30.0mg，收率35.0％，白色固体)。化合物23：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08(br d,J＝8.0Hz,1H),8.22(s,1H),7.94(s,1H),7.64(br d,J＝7.2Hz,2H),7.55-7.41(m,3H),7.35-7.21(m,5H),5.54-5.45(m,1H),3.29-3.23(m,1H),2.81-2.71(m,1H),2.09(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.0。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(4-苯基-1H-吡唑-1-基)噻唑-5-甲酰胺(39)
如实施例5，由相应的起始物料——化合物21F和12G制备化合物39(5.20mg，26.12％收率，白色固体)。化合物39：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ11.75(d,J＝4.8Hz,1H),8.73-8.71(m,1H),8.73(s,1H),8.66(s,1H),7.69(s,1H),7.54(d,J＝7.6Hz,2H),7.45-7.41(m,2H),7.35-7.31(m,1H),7.29-7.27(m,1H),7.25-7.21(m,4H),6.78(br s,1H),5.82-5.74(m,1H),5.48(br s,1H),3.46-3.41(m,1H),3.27-3.20(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+446.1。
N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(456)
如化合物12，由相应的起始物料——化合物12F和3-氨基-N-环丙基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐制备化合物456(240mg，86.0％收率，白色固体)。化合物456：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ9.15(d,J＝7.2Hz,1H),8.80(d,J＝5.2Hz,1H),8.21-8.17(m,1H),7.92-7.86(m,1H),7.55(d,J＝8.4Hz,1H),7.33-7.16(m,6H),6.50(s,1H),5.36-5.27(m,1H),3.17-3.09(m,1H),2.88-2.79(m,1H),2.79-2.70(m,1H),2.24(s,3H),0.69-0.53(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+418.2。
N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(461)
如化合物12，由相应的起始物料——化合物60A和3-氨基-N-环丙基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐制备化合物461(270mg，68.77％收率，白色固体)。化合物461：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ9.04(d,J＝7.5Hz,1H),8.87(d,J＝4.8Hz,1H),8.82(s,1H),7.85(d,J＝7.3Hz,2H),7.59-7.44(m,3H),7.36-7.19(m,5H),5.37(br.s.,1H),3.27-3.17(m,1H),2.90-2.73(m,2H),0.72-0.51(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+404.1。
(S)-N-(4-氨基-1-(4-羟苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(492)
如化合物12，由相应的起始物料——化合物23A和(3S)-3-氨基-4-(4-(叔丁氧基)苯基)-2-羟基丁酰胺制备化合物492(35mg，60.9％收率，白色固体)，然后除去叔丁基基团，得到最终化合物492。化合物492：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ9.29(s,1H),9.01(d,J＝7.5Hz,1H),8.19(s,1H),7.92(s,1H),7.66-7.41(m,5H),7.07(d,J＝8.4Hz,2H),6.68(d,J＝8.6Hz,2H),5.46-5.29(m,1H),3.13(br d,J＝10.8Hz,1H),2.63(br d,J＝2.9Hz,1H),2.13(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+394.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(495)
如化合物12，由相应的起始物料——化合物12F和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐制备化合物495(4.0g，44.68％收率，白色固体)，以获得最终化合物495。化合物495：1HNMR(DMSO-d6,400MHz)：δ7.74(br d,J＝9.0Hz,1H),7.31(d,J＝8.5Hz,2H),7.20-7.08(m,5H),7.04(d,J＝9.0Hz,1H),6.97(d,J＝8.5Hz,2H),5.40(d,J＝6.3Hz,1H),4.96(s,2H),4.79(d,J＝2.3Hz,2H),4.48-4.15(m,2H),3.97-3.86(m,1H),3.68(t,J＝8.2Hz,1H),3.63-3.49(m,2H),2.98(dd,J＝3.4,13.9Hz,1H),2.70-2.59(m,1H),1.78(qd,J＝6.8,13.6Hz,1H),0.72(d,J＝6.8Hz,3H),0.69-0.62(m,1H),0.67(d,J＝6.8Hz,2H)。MS(ESI)m/z(M+Na)+493.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(531)
如化合物12，由相应的起始物料——化合物60A和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐制备化合物531(4.0g，44.68％收率，白色固体)，以获得最终化合物531。化合物531：1HNMR(CD3CN,400MHz)：δ8.52(s,1H),7.84-7.75(m,2H),7.57-7.51(m,1H),7.51-7.43(m,2H),7.32-7.23(m,3H),7.23-7.17(m,2H),7.17-7.07(m,1H),7.06-6.93(m,1H),6.23(s,1H),5.55-5.47(m,1H),3.29(dd,J＝4.9,14.1Hz,1H),2.92(dd,J＝8.9,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+364.1。
实施例6
化合物21-22、322、29、31、75、90、279
(S)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-4-(4-苯基-1H-吡唑-1-基)噻唑-5-甲酰胺(21)
将由化合物21A(500mg，2.12mmol)、化合物21B(306mg，2.12mmol)和Cs2CO3(2.07g，6.36mmol)组成的混合物在110.6℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱(石油醚：乙酸乙酯＝3：2，然后乙酸：乙酸乙酯＝1：100)纯化残余物，得到化合物21C(80mg，12.61％收率)，为浅黄色固体，和化合物21D(125mg，21.73％收率)，为黄色固体。
化合物21C：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.85(s,1H),8.49(s,1H),8.07(s,1H),7.57(d,J＝7.6Hz,2H),7.40(t,J＝7.6Hz,2H),7.30-7.26(m,1H),4.41-4.32(m,2H),1.34(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物21D：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ14.70(br.s.,1H),9.33(s,1H),8.87(d,J＝0.8Hz,1H),8.41(d,J＝0.8Hz,1H),7.75-7.71(m,2H),7.43-7.38(m,2H),7.30-7.24(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+271.8。
在25℃和N2下，向化合物21C(80mg，267.25μmol)的MeOH(5mL)和H2O(2.5mL)溶液中一次性加入LiOH(19.20mg，801.75μmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物减压浓缩，得到残余物。将残余物用水(10mL)稀释，并用1N HCl调节至pH约3，用乙酸乙酯90mL(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水30mL洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物21D(71.1mg，98.07％收率)，为白色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.84(s,1H),8.78(d,J＝0.8Hz,1H),8.13(d,J＝0.8Hz,1H),7.60-7.56(m,2H),7.45(t,J＝7.6Hz,2H),7.39-7.34(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+271.8。
在25℃和N2下，向化合物21D(80mg，294.89μmol)和1-羟基吡咯烷-2,5-二酮(21E)(35.6mg，309.63μmol)的DME(3.50mL)溶液中一次性加入EDCI(84.8mg，442.34μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌6小时。将混合物减压浓缩，用EtOAc(100mL)稀释，用1N HCl(10mL)和饱和NaHCO3水溶液(10mL×3)洗涤，然后用盐水(20mL)洗涤。将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到中间体化合物21F(100mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+368.9。
将由DME(3mL)中的化合物21F(100mg，271.47μmol)和化合物21G(41.1mg，271.47μmol)组成的混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物真空浓缩，用乙酸乙酯(100mL)稀释，用1NHCl(10mL)和饱和NaHCO3水溶液(10mL×3)洗涤，然后用盐水(20mL)洗涤。将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱(石油醚：乙酸乙酯＝3：2)纯化残余物，得到化合物21H(65mg，59.20％收率)。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ10.54(d,J＝7.6Hz,1H),9.21(d,J＝0.4Hz,1H),8.93(s,1H),8.40(s,1H),7.78(d,J＝7.6Hz,2H),7.45–7.38(m,2H),7.31-7.26(m,1H),7.24-7.18(m,4H),7.15–7.10(m,1H),4.96–4.89(m,1H),4.13–4.02(m,1H),3.52-3.43(m,2H),2.97–2.91(m,1H),2.82–2.74(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+405.0。
将DMP(63mg，148.34μmol)加入到化合物21H(30mg，74.17μmol)的二氯甲烷(6mL)溶液中。将混合物在25℃下搅拌12小时。加入另外的DMP(63mg，148.34μmol)并将混合物在25℃下再搅拌6小时。加入另外的DMP(157mg，0.37mmol)。再搅拌39小时后，将混合物用二氯甲烷(35mL)稀释，通过添加10％Na2S2O3/饱和NaHCO3水溶液(v/v＝1/1，～35mL)淬灭。分离有机层，水层用DCM(20mL×2)萃取。将合并的有机层用H2O(10mL)、盐水(10mL)洗涤，用无水MgSO4干燥，过滤并浓缩。将残余物用i-Pr2O(3mL)研磨。收集不溶物质并真空干燥。化合物21(20mg，67％收率，淡黄色固体)：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ11.71(br.d,J＝6.0Hz,1H),9.67(s,1H),8.68(s,1H),8.60(s,1H),7.66(s,1H),7.48-7.46(m,2H),7.36-7.34(m,3H),7.24-7.22(m,2H),7.20-7.16(m,3H),4.86-4.81(m,1H),3.21-3.18(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+403.1。
(S)-4-(1H-吲唑-1-基)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)噻唑-5-甲酰胺(22)
如实施例6，由相应的起始物料经过中间体化合物22E然后是化合物22G制备化合物22(4.70mg，16.87％收率，黄色固体)。化合物22：1H NMR(CD3CN,400MHz)：δ10.41(br.s,1H),9.67(s,1H),9.04(s,1H),8.21–8.19(m,1H),8.15(s,1H),7.91-7.89(m,1H),7.61-7.58(m,1H),7.40-7.37(m,1H)7.12-7.10(m,5H)4.77-4.72(m,1H),3.29-3.24(m,1H),3.11-3.05(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.0。
(S)-2-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-4-苯基噁唑-5-甲酰胺(322)
如实施例6，由相应的中间体化合物107B和21G((S)-2-氨基-3-苯基丙烷-1-醇)制备化合物322(102.9mg，36.1％收率，类白色固体)。化合物322：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.70(s,1H),8.17-8.09(m,2H),7.47-7.36(m,3H),7.35-7.26(m,3H),7.19(d,J＝6.84Hz,2H),6.82(d,J＝6.00Hz,1H),4.96-4.86(m,1H),3.40-3.28(m,1H),3.26-3.19(m,1H),2.55(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+335.1。
(S)-1-(苯并[D]噻唑-2-基)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(29)
将化合物29A(20g，133mmol)、2-氧代乙酸乙酯(136g，665mmol)、TsOH.H2O(2.5g，13.3mmol)在甲苯(200mL)中的混合物在120℃下搅拌1小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝3：1，Rf＝0.5)表明反应物29A几乎被消耗并形成一个新斑点。LCMS显示检测到具有所需MS的一个峰。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝20：1至5：1)纯化残余物，得到化合物29B(30.0g，粗品)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.40(s,1H),7.98-7.78(m,1H),7.77-7.57(m,1H),7.55-7.31(m,1H),7.30-7.07(m,1H),5.38-5.26(m,1H),4.33-4.21(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+234.9。
将甲基29B(10g，45.4mmol)、Tosmic(17.7g，90.8mmol)、K2CO3(9.4g，68.1mmol)在MeOH(200mL)中的混合物在70℃下搅拌0.5小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝3：1，Rf＝0.4)表明29B被完全消耗并且形成了一些新斑点。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝20：1至3：1)纯化残余物，得到化合物29C(1.2g，收率：10.2％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.22(d,J＝0.9Hz,1H),8.06(d,J＝7.9Hz,1H),7.93-7.88(m,3H),7.58(dt,J＝1.3,7.7Hz,1H),7.52-7.49(m,1H),7.49-7.43(m,1H),4.58(s,1H),3.87(s,3H),2.51(s,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+259.9。
向29C(1.1g，4.24mmol)在THF(30mL)、H2O(5mL)中的溶液中加入NaOH(339mg，8.48mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌3小时。LCMS显示29C被完全消耗，并且检测到具有所需MS的一个主峰。将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物溶于水(10mL)中，用HCl水溶液(2M)调节至pH约5，过滤，浓缩滤饼，得到产物29D(600mg，收率：57.7％)，为灰色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.48(d,J＝1.1Hz,1H),8.22-8.18(m,1H),8.06(dd,J＝0.8,8.0Hz,1H),7.81(d,J＝0.9Hz,1H),7.64-7.53(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+245.9。
如实施例21，由相应的中间体化合物29D和21G制备化合物29(55.00mg，收率76.12％，类白色固体)。化合物29：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.75(s,1H),9.01(d,J＝6.2Hz,1H),8.14(s,1H),7.90-7.75(m,3H),7.57-7.42(m,2H),7.19-7.00(m,5H),5.04-4.94(m,1H),3.37-3.21(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.2。
(S)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(31)
如实施例6，由相应的中间体化合物24E和21G制备化合物31(25mg，收率57.86％，淡黄色固体)。化合物31：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.70(s,1H),8.45-8.39(m,1H),7.94(d,J＝1.1Hz,1H),7.89-7.82(m,1H),7.67-7.59(m,2H),7.39-7.32(m,2H),7.30-7.27(m,1H),7.26-7.21(m,2H),7.17-7.11(m,2H),4.87(q,J＝6.6Hz,1H),3.25(dd,J＝2.5,6.5Hz,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+321.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(5-苯基嘧啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(75)
如实施例6，由相应的中间体化合物74E和21G制备化合物75(43.1mg，收率66.6％，白色固体)。化合物75：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ9.79(s,1H),9.61(br d,J＝6.0Hz,1H),8.75(s,2H),8.65(s,1H),7.84(s,1H),7.58-7.53(m,5H),7.25-7.14(m,5H),5.06-5.01(m,1H),3.43-3.38(m,1H),3.33-3.28(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+398.1。
(S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(90)
如实施例6，由相应的中间体化合物70D和21G((S)-2-氨基-3-苯基丙烷-1-醇)制备化合物90(20mg，收率：44.4％，白色固体)。化合物90：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.77(brs,1H),12.87-12.63(m,1H),9.75(s,1H),8.85(s,1H),7.71(br s,1H),7.57(s,1H),7.50(br s,1H),7.36-7.27(m,4H),7.19(br d,J＝6.8Hz,2H),6.99(br d,J＝5.3Hz,1H),4.93(q,J＝6.7Hz,1H),3.32(d,J＝6.4Hz,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+360.1。
(S)-3-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1-(嘧啶-4-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(279)
如实施例6，由相应的中间体化合物245D和21G((S)-2-氨基-3-苯基丙烷-1-醇)制备化合物279(102.0mg，304.15μmol，55.26％收率，白色固体)。化合物279：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.88(d,J＝5.6Hz,1H),9.76(s,1H),8.74(d,J＝5.6Hz,1H),8.61(s,1H),7.91–7.87(m,1H),7.27–7.23(m,3H),7.19–7.17(m,2H),8.89(s,1H),5.02–4.97(m,1H),3.40–3.35(m,1H),3.30–3.25(m,1H),2.34(s,1H)。MS(ESI)m/z(M+1)+336.1。
实施例7
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(24)
向化合物24B(16.2g，79.7mmol)的MeOH(25mL)溶液中加入化合物24A(5g，53.1mmol)。将混合物在80℃下搅拌6小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝2：1，Rf＝0.24)表明化合物24A仍存在，并且检测到具有较低极性的一个主要新斑点。然后将反应混合物减压浓缩，得到残余物。然后通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝30：1至15：1)纯化残余物，得到化合物24C(6g，收率：53.7％)，为黄色油状物。
向化合物24C(6g，28.5mmol)在EtOH(15mL)中的混合物中加入TosMIC(8.3g，42.8mmol)、K2CO3(11.8g，85.6mmol)。将混合物在80℃下搅拌12小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝1：1，Rf＝0.70)表明化合物24C仍存在，并且检测到具有较高极性的一个主要新斑点。然后将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝30：1至3：1)纯化残余物，得到化合物24D(1.60g，收率：25.8％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.61-8.54(m,1H),7.98(s,1H),7.92-7.83(m,2H),7.45-7.38(m,2H),4.25(q,J＝7.1Hz,2H),1.28(t,J＝7.2Hz,4H)。
向化合物24D(1.6g，7.37mmol)在THF(15mL)和H2O(5mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(618mg，14.7mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌12小时。LCMS显示化合物24D被完全消耗，并且检测到具有所需MS的一个主峰。然后通过加入HCl(1M)将混合物调节至pH约5，然后沉淀出白色固体。将白色固体过滤并干燥，得到化合物24E(1g，收率：71.7％)，为白色固体。MS(ESI)m/z(M+H)+189.1。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物24E，和化合物12G制备化合物24(20mg，收率：33.5％，黄色固体)。化合物24：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.95(d,J＝7.6Hz,1H),8.50-8.38(m,1H),8.12(s,1H),8.03(br.s.,1H),7.89-7.85(m,1H),7.80(br.s.,1H),7.53(s,1H),7.43-7.40(m,1H),7.33-7.25(m,4H),7.24-7.19(m,1H),7.15(d,J＝8.4Hz,1H),5.25-5.20(m,1H),3.17(dd,J＝4.0,14.4Hz,1H),2.83(dd,J＝10.0,13.6Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+364.1。
实施例8
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-4-苯基噻唑-5-甲酰胺(25)
在0.3小时的时间段内，在45-50℃下，向化合物25A(20g，104mmol)的CCl4(200ml)溶液中加入SO2Cl2(14g，104mmol)。然后将混合物在45–50℃下搅拌1h。将反应混合物用冰水(200mL)稀释。分离有机层，用H2O(200mL×2)、盐水(200mL)洗涤，用无水MgSO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物25B(25g，粗品)，为浅黄色油状物，将其直接用于下一步。1H NMR(CDCl3,400MHz,)：δ8.03-7.98(m,2H),7.67-7.62(m,1H),7.54-7.50(m,2H),5.62(s,1H),4.32-4.26(q,J＝7.2Hz,2H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H)。
将化合物25B(6.8g，30mmol)和硫代乙酰胺(2.25g，30.0mmol)在EtOH(75mL)中的混合物加热至80℃并搅拌6小时。减压蒸馏除去溶剂。通过硅胶柱色谱(洗脱液：石油醚/乙酸乙酯＝50/1)纯化残余物，得到化合物25C(3.0g，收率40.4％)，为黄色油状物。1H NMR(CDCl3,400MHz):δ7.77-7.71(m,2H),7.47-7.40(m,3H),4.28(q,J＝7.2Hz,2H),2.77(s,3H),1.29(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物25C(1.24g，5.01mmol)在MeOH/H2O混合物(39mL/13mL)中的溶液中加入NaOH(2N，12mL，24mmol)的溶液。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物用H2O(5mL)稀释。蒸发除去挥发性溶剂。将残余物用HCl(1N)处理直至pH约3。过滤收集沉淀物，减压干燥，得到化合物25D(650mg，收率59.2％)，为白色固体，将其直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz):δ7.72-7.65(m,2H),7.43-7.36(m,3H),2.68(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物25D制备化合物25(25mg，收率：42％，白色固体)。化合物25：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.81(d,J＝7.6Hz,1H),8.12(s,1H),7.86(s,1H),7.55-7.53(m,2H),7.31-7.19(m,8H),5.35-5.31(m,1H),3.15(dd,J＝3.6,13.8Hz,1H),2.77(dd,J＝9.9,13.8Hz,1H),2.67(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+394.1。
实施例9
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺(26)
将化合物26A(7.2g，37.46mmol，6.5mL)和乙酸铵(5.8g，74.92mmol)的混合物在EtOH(70mL)中混合，并在80℃下回流16小时。除去溶剂后，将残余物溶于水(50mL)中，用EtOAc(100mL×2)萃取。将该合并的有机相用饱和NaHCO3(50mL×2)和盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空除去溶剂。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20：1至10：1)纯化残余物，得到化合物26B(3.5g，收率：48.9％)，为黄色油状物。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.57-7.53(m,2H),7.48-7.37(m,3H),5.07-4.89(m,1H),4.22-4.11(m,2H),1.33-1.25(m,3H)。
在25℃和N2下，向化合物26B(2g，10.46mmol)的DCE(4mL)混合物中一次性加入PhI(OAc)2(4.4g，13.60mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(50mL)淬灭，并用DCM(50mL×3)萃取。将有机层合并，用无水Na2SO4干燥。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20：1至5：1)纯化残余物，得到化合物26C(400mg，收率：15.3％)，为黄色油状物。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.58(dd,J＝1.1,7.7Hz,1H),7.44-7.39(m,4H),4.28-4.21(m,2H),1.94(s,3H),1.66-1.60(m,1H),1.62(br s,1H),1.30-1.26(m,3H)。
将化合物26C(400mg，1.60mmol)在DCE(5mL)和AcOH(10mL)中的混合物在90℃下搅拌16小时。去除溶剂。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10：1至5：1)纯化残余物，得到化合物26D(220mg，收率：53.0％)，为黄色油状物。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.11-7.89(m,2H),7.56-7.32(m,3H),4.40(t,J＝7.3Hz,2H),2.59(s,3H),1.39(q,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+231.8。
向碘苯(2.5g，12.25mmol，1.4mL)和化合物26E(3.59g，13.48mmol)在CHCl3(25mL)中的混合物中加入m-CPBA(2.33g，13.48mmol)。将混合物在25℃和N2气氛下搅拌2小时。反应后，将MTBE(20mL)加入到反应混合物中，将所得混合物过滤，用MTBE(30mL)洗涤固体。得到化合物26F，为白色固体。
将3-氧代-3-苯基-丙酸乙酯26A(500mg，2.60mmol)和化合物26F(1.58g，3.38mmol)的CH3CN(30mL)溶液在80℃下加热回流1小时，并向混合物中加入乙酰胺(461mg，7.80mmol)。在微波辐射下将反应混合物在120℃下加热0.1小时。冷却至室温后，将悬浮液用饱和NaHCO3溶液(30mL)稀释，用EtOAc(10mL×2)萃取，经Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1)和制备型TLC(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化残余物。得到化合物26G(50mg，收率：8.32％)，为白色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.06-7.93(m,2H),7.48-7.39(m,3H),4.38(q,J＝7.1Hz,2H),2.58(s,3H),1.37(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+231.8。
在0℃下，向化合物26G(60mg，259.46μmol)在THF(2mL)和H2O(2mL)中的混合物中一次性加入NaOH(1M，778μL)。将混合物在25℃下搅拌16小时。用MTBE(2×30mL)萃取混合物并用水(3×30mL)洗涤。用1N HCl将水层酸化至pH约4，然后用EtOAc(3×30mL)萃取溶液。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到化合物5(50mg，收率：86.6％)，为黄色油状物，将其不经进一步纯化直接用于下一步骤。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.05-8.01(m,2H),7.48-7.43(m,3H),2.62(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+203.8。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物26H制备化合物26(15mg，收率：23.0％，白色固体)。化合物26：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.08(br d,J＝6.6Hz,2H),7.41(brd,J＝6.8Hz,2H),7.32-7.24(m,4H),7.13(br d,J＝6.6Hz,2H),6.77(br s,2H),5.76-5.68(m,1H),5.55(br s,1H),3.45(br dd,J＝5.3,14.3Hz,1H),3.24(br dd,J＝7.3,14.1Hz,1H),2.56(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
实施例10
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-苯基-1,2,3-噻二唑-4-甲酰胺(28)
将由化合物28A(200mg，843.63μmol)、苯基硼酸(23mg，110.98μmol)和Na2CO3(22.4mg，2.11mmol)组成的混合物在微波下在110℃下搅拌1.5小时。将反应混合物冷却至室温，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过Pre-HPLC(碱性条件)纯化残余物，得到化合物28B(23mg，收率11.64％)，为浅黄色油状物。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.44-7.58(m,5H),4.44(q,J＝7.20Hz,2H),1.32(t,J＝7.17Hz,3H)。
向化合物28B(50mg，213.43μmol)在MeOH(3mL)和H2O(1.50mL)中的混合物中一次性加入LiOH·H2O(26.9mg，640.29μmol)，并将混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。将残余物用H2O(8mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物28C(38mg，粗品)，为棕色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.63-7.57(m,2H),7.54-7.45(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+206.7。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物28C制备化合物28(18.9mg，38.00％收率，白色固体)。化合物28：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.07(d,J＝7.2Hz,1H),7.59-7.53(m,2H),7.49-7.41(m,3H),7.33-7.27(m,3H),7.23-7.19(m,2H),6.77(br s,1H),5.84-5.76(m,1H),5.52(br s,1H),3.51-3.45(m,1H),3.25-3.18(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+1)+381.1。
实施例11
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(30)
向t-BuONO(3.8mL，30.94mmol)的CH3CN(60mL)溶液中加入CuBr2(6.91g，30.94mmol)。在N2下将混合物在25℃下搅拌1小时。然后分批加入化合物30A(4g，25.78mmol)。然后将混合物加热至70℃并搅拌12小时。将反应用H2O(100mL)洗涤，用EtOAc(100mL×2)萃取。收集有机物，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到中间体化合物30B(6g，粗品)，为黑褐色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+218.9,220.9。
在0℃下，向NaH(1.64g，41.09mmol，60％纯度)的THF(80mL)溶液中加入化合物30B(6g，27.39mmol)的THF(20mL)溶液。加入后，将混合物温热至25℃并搅拌2小时。然后将溶液冷却至0℃，并在0℃下加入SEM-Cl(5.34mL，30.13mmol)的THF(100mL)溶液。然后将混合物温热至25℃并搅拌12小时。用H2O(100mL)逐滴淬灭反应。用EtOAc(100mL×2)萃取混合物。收集有机物并浓缩。通过柱子(石油醚：乙酸乙酯＝10：1)纯化残余物，得到化合物30C(3g，收率：31.14％)，为黄色油状物。
向化合物30C(2.60g，7.44mmol)和PhB(OH)2(1.09g，8.93mmol)在二噁烷(36mL)和H2O(12mL)的溶液中加入Pd(dtbpf)Cl2(485mg，0.74mmol)和K3PO4(4.74g，22.32mmol)。将混合物在70℃和N2下搅拌2小时。将反应用H2O(20mL)稀释，用EtOAc(20mL×2)萃取。收集有机物并浓缩。通过柱子(石油醚：乙酸乙酯＝10：1)纯化残余物，得到化合物30D(2.40g，收率：93.1％)，为无色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+347.1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.60(s,1H),7.78-7.72(m,2H),7.56-7.34(m,3H),5.52(s,2H),4.25-4.16(m,2H),3.70-3.62(m,2H),1.26(t,J＝7.1Hz,3H),0.94-0.85(m,2H),0.03-0.02(m,9H)。
滴加化合物30D(200mg，577.20μmol)的MeOH(4mL)溶液，然后滴加NaOH(230mg，5.77mmol)的H2O(4mL)溶液。将混合物在25℃下搅拌19小时。通过加入H2O(10mL)稀释反应混合物，然后用MTBE(10mL×2)萃取。将水层用1N HCl中和至pH约3，并用EtOAc(10mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物30E(140mg，收率：76.17％)，为黄色油状物。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.41(br s,1H),8.54(s,1H),7.81-7.74(m,2H),7.53-7.36(m,3H),5.50(s,2H),3.66(t,J＝8.0Hz,2H),0.90(t,J＝7.9Hz,2H),0.01-0.04(m,9H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物30E制备化合物30G(140mg，收率：93.72％，白色固体)。化合物30G：1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.54(d,J＝7.3Hz,1H),8.25(s,1H),8.15-8.00(m,1H),7.87(s,1H),7.66-7.52(m,2H),7.43-7.23(m,9H),5.46(br d,J＝6.8Hz,1H),5.38-5.30(m,1H),3.76-3.57(m,2H),3.27-3.12(m,1H),2.96-2.76(m,1H),0.94-0.89(m,2H),0.03-0.00(m,9H)。
向化合物30G(18.00mg，36.54μmol)的乙酸乙酯(1.00mL)溶液中加入4M HCl/EtOAc(5.00mL)。然后将反应在30℃下搅拌4小时。向反应混合物中加入石油醚(50mL)，将混合物搅拌3分钟，过滤，将所需固体真空干燥，得到化合物30(6.00mg，收率：45.31％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(d,J＝7.5Hz,1H),8.02(s,1H),7.99-7.95(m,1H),7.77(s,1H),7.59-7.53(m,2H),7.35-7.28(m,4H),7.28-7.23(m,5H),7.23-7.16(m,2H),5.30-5.21(m,1H),3.19-3.10(m,1H),2.83(dd,J＝9.8,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+363.1。
实施例12
化合物32、458、476-479、521
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(32)
向t-BuONO(3.19g，30.94mmol，3.67mL)的CH3CN(60mL)溶液中加入CuBr2(6.91g，30.94mmol)。在N2下将混合物在25℃下搅拌1小时。然后分批加入化合物32A(4.00g，25.78mmol)。加热至70℃并搅拌12小时后，将混合物浓缩并用乙酸乙酯(100mL)稀释。然后将混合物用HCl(1M，100mL)、饱和NaHCO3(100mL)、盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到中间体化合物32B(5.6g，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+220.9。
向化合物32B(5.6g，25.57mmol)的DMF(200mL)溶液中加入MeI(14.52g，102.28mmol，6.37mL)和Cs2CO3(33.32g，102.28mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将混合物用H2O(1000mL)稀释，用乙酸乙酯(500mL)萃取，然后将有机层用盐水(500mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。通过制备型HPLC(碱性条件)纯化残余物(4g)。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5：1)纯化残余物。得到化合物32C(1g，收率：16.8％)，为白色固体。得到化合物32D(2g，收率：33.6％)，为白色固体。
化合物32C：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.93(s,1H),4.24-4.18(m,2H),3.85(s,3H),1.28-1.23(m,3H)。
化合物32D：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(s,1H),4.22-4.16(m,2H),3.83(s,3H),1.26-1.22(m,3H)。
将乙基化合物32D(500.0mg，2.15mmol)、苯基硼酸(314.6mg，2.58mmol)、Pd(dtbpf)Cl2(140.1mg，215.00μmol)、K3PO4(1.37g，6.45mmol)在二噁烷(30mL)和H2O(10mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次。在N2气氛下在70℃下搅拌1小时后，将混合物浓缩并用乙酸乙酯(30mL)稀释。然后将混合物用HCl(1M，50mL)、饱和NaHCO3水溶液(50mL)、盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到中间体化合物32E(480mg，粗品)，为棕色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+230.9。
向化合物32E(380.0mg，1.65mmol)在MeOH(5mL)和THF(5mL)中的溶液中加入NaOH(2M，16.5mL)。将混合物在60℃下搅拌1小时。将混合物浓缩并用H2O(10mL)稀释，将混合物用乙酸乙酯(10mL)萃取，水相中加入HCl(1M)直至pH约3，然后用乙酸乙酯(20mL)萃取混合物，用盐水(10mL)洗涤有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。得到化合物32F(320mg，收率：95.9％)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.03-11.85(m,1H),8.27(s,1H),7.74-7.68(m,2H),7.40-7.30(m,3H),3.87(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物32F制备化合物32(40.0mg，收率：64.7％，白色固体)。化合物32：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(d,J＝7.2Hz,1H),8.05(s,2H),7.81(br s,1H),7.63-7.53(m,2H),7.39-7.20(m,8H),5.33-5.26(m,1H),3.93-3.86(m,3H),3.21-3.13(m,1H),2.88-2.79(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(458)
如化合物12，由相应的中间体羧酸——化合物32F和3-氨基-N-环丙基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐制备化合物458(270mg，收率：67.4％，白色固体)。化合物458：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(d,J＝4.4Hz,1H),8.38(d,J＝7.3Hz,1H),8.05(s,1H),7.56(s,2H),7.36-7.17(m,8H),5.28(s,1H),3.89(s,3H),3.16(d,J＝11.2Hz,1H),2.89-2.73(m,2H),0.71-0.52(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+417.1。
(S)-N-(4-氟-3-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(476)
如化合物12，由相应的中间体羧酸——化合物32F和(2S,3S)-3-氨基-1-氟-4-苯基丁烷-2-醇盐酸盐制备化合物476(36.8mg，收率：34.22％，白色固体)。化合物476：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.91(s,1H),7.52-7.47(m,2H),7.46-7.37(m,3H),7.25-7.19(m,3H),6.94-6.84(m,2H),6.06(d,J＝6.4Hz,1H),5.03-4.71(m,3H),3.93(s,3H),3.09-3.01(m,1H),2.85-2.76(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+366.1。
(S)-N-(4-氟-3-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(477)
如化合物12，由相应的中间体羧酸——化合物85B和(2S,3S)-3-氨基-1-氟-4-苯基丁烷-2-醇盐酸盐制备化合物477(110mg，收率：90.33％，白色固体)。化合物477：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.20(s,1H),9.08-9.00(m,1H),8.50-8.48(m,1H),8.11(s,1H),7.27-7.24(m,3H),7.17-7.12(m,2H),6.79(s,1H),5.33-5.24(m,1H),5.11-4.79(m,2H),3.45-3.33(m,1H),3.15-3.11(m,1H),2.38(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+368.1。
(S)-N-(4-氟-3-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(478)
如化合物12，由相应的中间体羧酸——化合物12F和(2S,3S)-3-氨基-1-氟-4-苯基丁烷-2-醇盐酸盐制备化合物478(82mg，收率：54.97％，白色固体)。化合物478：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.70(d,J＝6.40Hz,1H),8.14(d,J＝4.40Hz,1H),7.92-7.83(m,2H),7.26-7.14(m,6H),6.88(s,1H),5.24-5.20(m,1H),5.05–4.74(m,2H),3.29-3.18(m,2H),2.35(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+367.2。
(S)-N-(4-氟-3-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(479)
如化合物12，由相应的中间体羧酸——3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-羧酸和(2S,3S)-3-氨基-1-氟-4-苯基丁烷-2-醇盐酸盐制备化合物479(100mg，收率：82.06％，白色固体)。化合物479：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.46-7.28(m,8H),7.08-7.03(m,2H),6.51(s,1H),6.28(br d,J＝7.0Hz,1H),5.20-5.13(m,1H),5.03-4.73(m,2H),3.22-3.15(m,1H),3.02-2.95(m,1H),2.35(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+366.1。
(S)-N-(4-氟-3-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2-氟-4-((丙-2-炔-1-基氧基)甲基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(521)
化合物521(250mg，收率：78.40％，白色固体)如下制备：使用如化合物476中的偶联条件，从相应的中间体3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(2-氟-4-(羟甲基)苯基)硼酸开始，然后与3-溴丙-1-炔进行烷基化，然后使所得中间体进行水解并如化合物12中与(2S,3S)-3-氨基-1-氟-4-苯基丁烷-2-醇盐酸盐偶联，得到化合物521。化合物521：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.89(s,1H),7.40(t,J＝7.6Hz,1H),7.24-7.13(m,5H),6.94-6.92(m,2H),5.97(d,J＝6.4Hz,1H),5.09-5.01(m,1H),4.96-4.83(m,1H),4.83-4.70(m,1H),4.66(s,2H),4.19(d,J＝2.4Hz,2H),3.95(s,3H),3.03(d,J＝6.4Hz,1H),2.95-2.88(m,1H),2.49(t,J＝2.3Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+452.2。
实施例13
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-乙基-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(33)
在0℃下，将化合物33A(46.73mL，342.14mmol)和丁-2-酮(30.46mL，342.14mmol)的混合物滴加到NaOEt(由EtOH(200mL)中的Na(9.5g)制备)的溶液中。然后将反应在20-25℃下搅拌16h。用HCl(2M)将反应物调节至pH约6-7，然后除去溶剂，得到残余物，将其用乙酸乙酯(500mL)稀释，用盐水(150mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过快速柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝1：0至10：1)纯化，得到化合物33B(23.0g，收率：39.0％)，为黄色油状物。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ14.34(br s,1H),6.31(s,1H),4.28(q,J＝7.2Hz,2H),2.47(q,J＝7.3Hz,2H),1.34-1.27(m,3H),1.11(t,J＝7.5Hz,3H)。
将化合物33B(10g，58.08mmol)、O-甲基羟胺(4.85g，58.08mmol，HCl)和4A°分子筛(10g)在DMF(100mL)中的混合物在20-25℃下搅拌20小时。过滤除去4A°分子筛，滤液用H2O(800mL)稀释，用乙酸乙酯(300mL×3)萃取。将有机相合并，用盐水(300mL×3)洗涤，浓缩，得到粗产物，将其用快速柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝1：0至5：1)纯化，得到化合物33C(3.5g，收率：29.95％)，为黄色油状物。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ4.41-4.29(m,2H),4.06(s,3H),3.71(s,2H),2.60-2.46(m,2H),1.42-1.32(m,3H),1.08(t,J＝7.3Hz,3H)。
将化合物33C(3.5g，17.39mmol)和苯肼(1.88g，17.39mmol)在AcOH(20mL)中的混合物在100℃下搅拌2小时。除去溶剂并将残余物用饱和NaHCO3水溶液调节至pH约7-8并用乙酸乙酯(60mL×2)萃取。将有机相合并，用盐水(50mL)洗涤，浓缩，得到残余物，将其用快速柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝1：0至5：1)纯化，得到化合物33D(0.3g，1.23mmol，7.05％收率)，为黄色固体，和化合物33E(3.0g，12.21mmol，收率70.19％)，为黄色油状物。
化合物33D：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.50-7.37(m,5H),6.87(s,1H),4.24(q,J＝7.0Hz,2H),2.76(q,J＝7.5Hz,2H),1.32(t,J＝7.5Hz,3H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+245.0。化合物33E：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.46-7.31(m,1H),6.70(s,1H),4.35(q,J＝7.1Hz,1H),2.58(q,J＝7.4Hz,1H),1.33(t,J＝7.2Hz,1H),1.16(t,J＝7.5Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+245.0。
将化合物33D(3.0g，12.28mmol)和LiOH.H2O(3.09g，73.68mmol)在MeOH(10mL)和H2O(3mL)中的混合物在25℃下搅拌16小时。用HCl(2M)将反应物调节至pH约3-4并除去溶剂。将残余物用乙酸乙酯(100mL×3)萃取并合并，用盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥。过滤并浓缩滤液，得到化合物33F(2.7g，粗品)，为黄色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.58(br s,1H),7.46-7.34(m,5H),6.89(s,1H),2.73(q,J＝7.6Hz,2H),1.28(t,J＝7.6Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+216.9。
将化合物33F(2.7g，12.49mmol)和1-羟基吡咯烷-2,5-二酮(1.44g，12.49mmol)在THF(20mL)中的混合物在0℃下搅拌15分钟，然后在0℃下滴加DCC(2.6g，12.61mmol，2.55mL)的THF(10mL)溶液，并在25-30℃下搅拌16小时。过滤后，浓缩滤液，得到化合物33G(4.0g，粗品)，为黄色固体。产物直接用于下一步。
将化合物33G(0.2g，638.35μmol)、化合物12G(147.3mg，638.35μmol，HCl)和DIEA(0.25mL，1.28mmol)在DMF(10mL)中的混合物在20-25℃下搅拌16小时。将反应用H2O(60mL)和乙酸乙酯(30mL)稀释，并在20-25℃下搅拌0.5小时。沉淀出白色固体并过滤，滤饼用H2O(10mL×2)洗涤，减压干燥，得到化合物33H(100.0mg，收率：39.24％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.53-8.11(m,1H),7.40-7.20(m,10H),7.16-7.01(m,2H),6.59(s,1H),5.96-5.69(m,1H),4.49-4.36(m,1H),4.03-3.90(m,1H),2.96-2.70(m,2H),2.62(q,J＝7.7Hz,2H),1.22(t,J＝7.5Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+393.0。
将化合物33H(100mg，254.81μmol)和DMP(540.4mg，1.27mmol，394.44μL)在DMSO(5.0mL)中的混合物在25-30℃下搅拌16小时。将反应物用DCM(20mL)稀释，并用饱和NaHCO3水溶液和Na2S2O3水溶液的混合物(10％)(80mL，1：1)淬灭，并在20-25℃下搅拌0.5小时。沉淀出白色固体并过滤，滤饼用H2O(3mL×2)洗涤，减压干燥，得到化合物33(20.0mg，收率：20％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ9.10(d,J＝7.9Hz,1H),8.10(s,1H),7.85(s,1H),7.36-7.20(m,8H),7.18-7.10(m,2H),6.58(s,1H),5.30-5.21(m,1H),3.18(dd,J＝3.5,13.9Hz,1H),2.80(dd,J＝10.6,13.7Hz,1H),2.60(q,J＝7.7Hz,2H),1.20(t,J＝7.6Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+391.1。
实施例14
(S)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1-(1-苯基-1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(34)
向34A(15g，180.53mmol)的THF(200mL)溶液中加入2-氧代乙酸乙酯(47.9g，234.69mmol)。将混合物在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到中间体化合物34B(55.3g，粗品)，为棕色固体。MS(ESI)m/z(M+H)+167.8。
向34B(40g，239mmol)的EtOH(400mL)溶液中加入K2CO3(50g，362mol)和1-(异氰基甲基磺酰基)-4-甲基-苯(40g，204.88mmol)。将混合物在90℃下搅拌0.5小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：0至5：2)纯化残余物，得到化合物34C(12g，收率：24.3％)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.80-11.35(m,1H),7.87(d,J＝1.10Hz,1H),7.84(d,J＝1.10Hz,1H),7.58(d,J＝2.43Hz,1H),6.45(d,J＝2.43Hz,1H),4.25(q,J＝7.06Hz,2H),1.29(t,J＝7.17Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+207.0。
将34C(5g，24.3mmol)、苯基硼酸(4.4g，36.4mmol)、Cu(OAc)2(4.4g，24.3mmol)、三乙胺(7.4g，72.8mmol)在DCM(200mL)中的混合物脱气并用O2吹扫3次，然后在O2气氛下将混合物在25℃下搅拌10小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：0至2：1)纯化残余物。得到化合物34D(2.3g，收率：33.6％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.04-7.94(m,2H),7.87(s,1H),7.71(br d,J＝7.7Hz,2H),7.49(br t,J＝7.1Hz,2H),7.36(br d,J＝7.1Hz,1H),7.27(d,J＝2.0Hz,2H),6.70-6.61(m,1H),4.29(dd,J＝2.1,7.2Hz,2H),1.38-1.22(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+282.9。
向34D(2.5g，8.86mmol)在THF(30mL)和H2O(6mL)中的溶液中加入NaOH(708mg，17.7mmol)。将混合物在80℃下搅拌1.5小时。将反应混合物减压浓缩，以去除THF，然后用EtOAc(20mL)洗涤。将水层用1M HCl酸化(至pH约5)，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用H2O(40mL)、盐水(40mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到中间体化合物34E(1.90g，收率：84.31％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(d,J＝2.6Hz,1H),8.19(s,1H),7.86(d,J＝7.9Hz,2H),7.76(s,1H),7.53(t,J＝7.9Hz,2H),7.39-7.31(m,1H),6.77(d,J＝2.6Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+254.9。
如实施例6，由相应的中间体化合物34E和21G制备化合物34(50mg，收率62.8％，白色固体)。化合物34：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.66(s,1H),7.95(d,J＝2.4Hz,1H),7.89(s,1H),7.67(s,1H),7.58(d,J＝8.2Hz,2H),7.45(t,J＝7.8Hz,2H),7.36-7.31(m,1H),7.26-7.19(m,4H),7.08(d,J＝6.4Hz,2H),6.55(d,J＝2.4Hz,1H),4.84(q,J＝6.4Hz,1H),3.21(d,J＝6.4Hz,2H)。MS(ESI)m/z(M+H2O+H)+404.1。
实施例15
化合物35、205
(S)-N-(1-氨基-5-甲基-1,2-二氧代己烷-3-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(35)
在0℃下，向化合物35A(20g，86.47mmol)、N-甲氧基甲胺(12.65g，129.71mmol，HCl)、HOBt(11.68g，86.47mmol)在DCM(400mL)中的溶液中加入DIEA(33.53g，259.41mmol，45.31mL)。之后，将反应混合物在0℃下搅拌0.1小时，然后加入EDCI(19.89g，103.76mmol)，添加后，将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩，得到残余物，将残余物溶于EtOAc(400mL)中，用1N HCl(400mL×2)、饱和NaHCO3(400mL×2)和盐水(400mL)洗涤。将有机相用Na2SO4干燥并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚～石油醚：EtOAc＝10：1)纯化残余物。得到化合物35B(40.32g，收率：84.98％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.04(br d,J＝9.0Hz,1H),4.71(br s,1H),3.77(s,3H),3.18(s,3H),1.80-1.63(m,2H),1.42(s,10H),0.93(dd,J＝6.5,14.2Hz,6H)。
在0℃和N2气氛下，向LAH(1.53g，40.41mmol)的THF(200mL)混合物中滴加化合物35B(10.08g，36.74mmol)的THF(100mL)溶液。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌2小时。在0℃下，将EtOAc(150mL)滴加到反应混合物中并用1N HCl酸化至pH约1～2，然后加入饱和NaHCO3水溶液(150mL×3)和盐水(150mL)。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩。得到化合物35C(27.89g，收率：88.15％)，为黄色油状物，将其不经纯化直接用于下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.71-9.32(m,1H),4.99(br s,1H),4.20(br d,J＝2.9Hz,1H),1.79-1.69(m,1H),1.67-1.57(m,1H),1.43-1.40(m,10H),0.93(dd,J＝1.4,6.5Hz,6H)。
将化合物35C(4g，18.58mmol)、化合物35D(3.16g，37.16mmol，3.40mL)和Et3N(2.26g，22.30mmol，3.09mL)的无水DCM(40mL)溶液在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用50mL DCM稀释，用0.5N HCl(100mL)、水(100mL)和盐水(100mL)洗涤。将有机相用Na2SO4干燥，浓缩。然后通过柱色谱(SiO2，石油醚：EtOAc＝10：1)纯化残余物。得到化合物35E(3.9g，收率：86.63％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ4.80(br s,1H),4.58-4.36(m,1H),4.02-3.91(m,0.5H),3.77(br s,0.5H),1.75-1.60(m,2H),1.51-1.33(m,10H),1.03-0.89(m,6H)。
在N2和0℃下，向化合物35E(15g，61.90mmol)和K2CO3(17.11g，123.80mmol)的DMSO(300mL)溶液中加入H2O2(770.17g，2.15mol，60mL)。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌1小时。然后将反应混合物用水(150mL)稀释，并在冰水中缓慢地用饱和Na2S2O3水溶液(300mL)淬灭。将混合物用EtOAc(300mL×3)萃取，并将合并的萃取液用饱和Na2S2O3水溶液(300mL×3)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩。将残余物用EtOAc(20mL)和MTBE(200mL)稀释，收集固体并真空干燥。得到化合物35F(15.15g，收率：47.01％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.31-6.96(m,2H),6.33(br d,J＝9.0Hz,0.6H),5.95(d,J＝9.5Hz,0.4H),5.44(br d,J＝5.1Hz,1H),3.93-3.65(m,2H),1.57-1.47(m,1H),1.41-1.23(m,10H),0.95-0.70(m,7H)。
在25℃下，向化合物35F(5.42g，20.82mmol)的二噁烷(10mL)溶液中加入HCl/二噁烷(4M，55mL)。添加后，将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应物浓缩，并将40mL的MTBE加入到反应混合物中并将混合物搅拌5分钟。然后将混合物过滤，得到所需化合物。得到化合物35G(3.8g，收率：92.80％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.12(br s,1.5H),7.87(br s,0.5H),7.57-7.35(m,2H),4.22(d,J＝2.5Hz,0.7H),4.02(d,J＝3.8Hz,0.3H),3.57(s,1H),3.45(br d,J＝3.5Hz,1H),1.81-1.58(m,1H),1.54-1.33(m,1.3H),1.21(ddd,J＝4.3,9.5,14.1Hz,0.7H),0.93-0.67(m,6H)。
如实施例5，由相应的中间体化合物23A和35G制备化合物35(48mg，收率44.55％，白色固体)。化合物35：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.99(br d,J＝7.1Hz,1H),8.13(s,1H),7.89-7.77(m,3H),7.54-7.48(m,3H),5.20(ddd,J＝3.3,7.0,10.6Hz,1H),2.29(s,3H),1.74-1.62(m,1H),1.56-1.36(m,2H),0.92(d,J＝6.4Hz,3H),0.89-0.84(m,3H)。
(S)-N-(1-氨基-1,2-二氧代-5-苯基戊烷-3-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(205)
在0℃和N2下，向(S)-2-((叔丁氧基羰基)氨基)-4-苯基丁酸(5g，17.90mmol)和N-甲氧基甲胺(2.76g，28.26mmol，HCl)、HOBt(2.55g，18.84mmol)在DCM(100.00mL)的混合物中分批滴加DIEA(9.88mL，56.53mmol)和EDCI(4.33g，22.61mmol)。将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用H2O(200mL)稀释。分离两层，水相用乙酸乙酯(2×150mL)萃取。将合并的有机层用0.5N HCl(2×150mL)和NaHCO3(2×150mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10：1至3：1)纯化残余物，得到化合物205A(4.15g，68.32％收率)，为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.35-7.23(m,2H),7.22-7.04(m,4H),4.45-4.21(m,1H),3.59(s,3H),3.06(s,3H),2.81-2.68(m,1H),2.61-2.54(m,1H),1.86-1.65(m,2H),1.45-1.29(s,9H)。
在0℃和N2气氛下，向LiAlH4(88.3mg，2.32mmol)的THF(15mL)溶液中滴加化合物205A(500mg，1.55mmol)的THF(15mL)溶液。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌2小时。将混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释，并用1N HCl(20mL)、饱和NaHCO3(2×20mL)、盐水(15mL)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到化合物205B(400mg，1.52mmol)，为黄色油状物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.4(s,1H),7.33-7.05(m,5H),3.82-3.72(m,1H),2.71-2.51(m,2H),1.97-1.9(m,1H),1.81-1.66(m,1H),1.51-1.25(m,10H)。
将化合物205B(1.86g，7.06mmol)、2-羟基-2-甲基丙腈(1.29mL，14.12mmol)和Et3N(1.17mL，8.47mmol)的无水DCM(60mL)溶液在30℃下搅拌16个小时。将反应混合物用DCM(50mL)稀释，用0.5N HCl(20mL)、水(20mL)和盐水(20mL)洗涤。将有机相用Na2SO4干燥，浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至3：1)纯化残余物，得到化合物205C(900mg，43.90％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.44-7.21(m,5H),6.75-6.58(m,1H),4.70-4.29(m,1H),3.80-3.51(m,1H),2.86-2.68(m,1H),2.62-2.59(m,1H),2.04-1.64(m,2H),1.53-1.43(m,9H)。
在0℃下，向化合物205C(900mg，3.1mmol)和K2CO3(856.9mg，6.2mmol)的DMSO(18mL)溶液中加入H2O2(3.06mL，106.14mmol)。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(200mL)稀释，并在冰水中缓慢地用饱和Na2S2O3水溶液(500mL)淬灭。将混合物用EtOAc(3×500mL)萃取，并将合并的萃取液用饱和Na2S2O3水溶液(2×300mL)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩。将混合物用MTBE处理，然后过滤，得到化合物205D(500mg，52.30％收率)，为白色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.34-7.11(m,1H),6.81-6.67(m,1H),5.54-5.35(m,1H),5.19-5.05(m,2H),4.28-4.12(m,1H),3.85-3.72(s,1H),2.81-2.54(m,2H),2.24-1.99(m,2H),2.98-2.78(m,1H),1.65-1.41(m,9H)。
在25℃下，向化合物205D(250mg，810.71μmol)的二噁烷(2mL)溶液中加入HCl/二噁烷(4M，1.06mL)。添加后，将反应在32℃下搅拌2小时并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10：1至1：2)纯化残余物，得到化合物205E(180mg，90.64％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.15-8.02(m,1H),8.01-7.75(m,1H),7.65-7.48(m,2H),7.37-7.26(m,2H),7.25-7.05(m,5H),6.52-6.24(s,1H),4.16-4.05(m,1H),3.45-3.39(m,1H),1.95-1.61(m,2H),1.41-1.28(m,2H)。
如实施例5，由相应的中间体化合物23A和205E制备化合物205(23.5mg，31.69％收率，黄色固体)。化合物205：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.84-7.72(m,2H),7.60-7.50(m,3H),7.26-7.12(m,4H),7.07-7.00(m,2H),6.66(br s,1H),6.19(br s,1H),5.51-5.34(m,2H),2.66-2.54(m,2H),2.47(s,3H),2.38-2.25(m,1H),1.99-1.85(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+392.1。
实施例16
化合物36、49、409、455
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(嘧啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(36)
向化合物36B(1.31g，9.08mmol)的AcOH(50mL)溶液中加入化合物36A(1g，9.08mmol)。将混合物在120℃下搅拌1小时。混合物在DCM(50mL)中。将有机层用水(10mL)、NaHCO3洗涤至pH约8～9，用Na2SO4干燥并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10：1至5：1)纯化残余物，得到化合物36C和36D。化合物36C(500mg，2.29mmol,25.24％收率，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.03-8.79(m,2H),7.67-7.45(m,1H),6.87(s,1H),3.73(s,3H),2.29(s,3H)。化合物36D(1g,50.47％收率，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.03-8.89(m,J＝4.9Hz,2H),7.67-7.55(m,1H),6.81(s,1H),3.84(s,3H),2.60(s,3H)。
如实施例85，由化合物36C制备中间体化合物36F(39.6mg，90％收率，白色固体)。MS(ESI)m/z(M+1)+205。如实施例5，由相应的中间体化合物36F制备化合物36(15.5mg，43.77％收率，棕色固体)。化合物36：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.99-8.95(m,2H),8.50-8.39(m,1H),8.11(s,1H),7.85(s,1H),7.65-7.57(m,1H),7.31-7.17(m,5H),6.68(s,1H),5.51-5.45(m,1H),3.26-3.18(m,1H),3.13-3.03(m,1H),2.58(s,3H)。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(嘧啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(49)
按照如化合物36所用的步骤，由相应的中间体化合物36D制备化合物49(21mg，收率38.4％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08-8.98(m,1H),8.76-8.70(m,2H),8.05(s,1H),7.82(s,1H),7.49-7.44(m,1H),7.35-7.26(m,4H),7.26-7.19(m,1H),6.58(s,1H),5.31-5.25(m,1H),3.19-3.09(m,1H),2.90-2.78(m,1H),2.27(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+Na)+379。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(嘧啶-4-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(409)
按照如化合物36所用的步骤，由相应的起始物料，即4-肼基嘧啶和中间体化合物274D制备化合物409(4225.7mg，收率80.2％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(d,J＝7.2Hz,1H),8.84(d,J＝5.6Hz,1H),8.75(s,1H),8.14(s,1H),7.89(s,1H),7.78-7.74(m,1H),7.31-7.21(m,5H),6.52(s,1H),5.41-5.33(m,1H),3.22-3.12(m,1H),2.90-2.78(m,1H),2.28(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+379.0。
N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(嘧啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(455)
按照如化合物36所用的步骤，由相应的起始物料，即36F和3-氨基-N-环丙基-2-羟基-4-苯基丁酰胺制备化合物455(180mg，收率71.6％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.05-9.00(m,1H),9.03(d,J＝7.3Hz,1H),8.78(d,J＝5.1Hz,1H),8.69(d,J＝4.9Hz,2H),7.44(t,J＝4.9Hz,1H),7.29-7.18(m,5H),6.56(s,1H),5.31-5.24(m,1H),3.12(dd,J＝3.7,13.9Hz,1H),2.84-2.71(m,2H),2.24(s,2H),2.27-2.19(m,1H),0.67-0.54(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+419.2。
实施例17
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2H-吲唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(37)
将化合物37A(250mg，2.12mmol)、Cs2CO3(2.07g，6.36mmol)在甲苯(40mL)中的混合物在110℃下搅拌13小时。将混合物浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10：1至5：1)纯化残余物，得到化合物37B(43.75mg，7.55％收率)，为白色固体。MS(ESI)m/z(M+1)+274。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.93(s,1H),8.68(s,1H),7.85-7.65(m,2H),7.39-7.30(m,1H),7.17-7.05(m,1H),4.44-4.24(m,2H),1.28(m,3H)。
将化合物37B(35mg，128.06μmol)、LiOH(9.2mg，384.18μmol)在水(1mL)和MeOH(5mL)中的混合物在27℃下搅拌2小时。蒸发MeOH。向残余物中加入水(10mL)。用MTBE(5mL)萃取混合物并分离。用1N HCl将水层酸化至pH约3，并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层干燥并浓缩，得到化合物37D(25.3mg，80.55％收率)，为棕色固体。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物37D制备化合物37(4mg，8.47μmol，收率5.95％，黄色固体)。化合物37：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.72-12.49(m,1H),8.97(s,1H),8.80(s,1H),7.80-7.64(m,1H),7.46-7.29(m,2H),7.20-6.98(m,6H),6.83-6.72(m,1H),5.97-5.84(m,1H),5.52-5.40(m,1H),3.56-3.33(m,2H)。
实施例18
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(萘-1-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(38)
将由AcOH(30mL)中的化合物萘-1-基肼盐酸盐(4.05g，20.81mmol)和化合物38A(3.0g，20.81mmol)组成的混合物在120℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至25℃，减压浓缩并用CH2Cl2(100mL)稀释。将有机相用饱和NaHCO3(20mL×2)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，并将滤液减压浓缩，得到残余物，将其通过快速硅胶色谱(石油醚：乙酸乙酯＝4：1)纯化，得到化合物38B(154.3mg，2.79％收率)，为棕色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.96(d,J＝8.0Hz,1H),7.91(d,J＝8.4Hz,1H),7.57-7.52(m,1H),7.51-7.47(m,2H),7.46-7.41(m,1H),7.22(d,J＝8.4Hz,1H),6.90(s,1H),3.62(s,3H),2.43(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+267.1。
向化合物38B(160mg，570.78μmol)在MeOH(10mL)和H2O(5mL)中的混合物中一次性加入LiOH.H2O(71.9mg，1.71mmol)，并将混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。将残余物用H2O(10mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，然后用EtOAc(40mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物38C(140mg，收率97.23％)，为白色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.96-7.83(m,2H),7.52-7.44(m,2H),7.44-7.36(m,2H),7.15(d,J＝8.4Hz,1H),6.87(s,1H),2.37(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+252.9。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物38C制备化合物38(10.6mg，收率13.31％，白色固体)。化合物38：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.00-7.89(m,2H),7.57-7.43(m,4H),7.28(d,J＝8.4Hz,1H),7.22-7.10(m,3H),6.82-6.72(m,2H),6.69(s,1H),6.54(br s,1H),6.16(d,J＝6.8Hz,1H),5.48-5.33(m,2H),3.19-3.09(m,1H),2.94-2.84(m,1H),2.40(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+427.2。
实施例19
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(1H-吲唑-1-基)噻唑-5-甲酰胺(40)
将由甲苯(40mL)中的化合物40A(500mg，2.12mmol)、吲唑(250.5mg，2.12mmol)、Cs2CO3(2.07g，6.36mmol)组成的混合物在110.6℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至25℃，过滤，减压浓缩。通过制备型HPLC(HCl条件)纯化所获得的残余物，得到化合物40B(56mg，9.67％收率)，为浅黄色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.94(s,1H),8.26(s,1H),7.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.62(d,J＝8.4Hz,1H),7.48-7.43(m,1H),7.28-7.24(m,1H),4.24(q,J＝7.2Hz,2H),1.17-1.12(m,1H),1.14(t,J＝7.2Hz,2H)。
向化合物40B(50mg，182.94μmol)在MeOH(2mL)中的混合物中一次性加入LiOH(13.1mg，548.83μmol)，并将混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。将残余物用H2O(8mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物40C(42mg，93.61％收率)，为白色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.95(s,1H),8.73(d,J＝8.4Hz,1H),8.38(s,1H),7.89(d,J＝8.0Hz,1H),7.67(t,J＝7.6Hz,1H),7.43(t,J＝7.6Hz,1H)。
在25℃和N2下，向由DME(5mL)中的化合物40C(42mg，171.25μmol)和1-羟基吡咯烷-2,5-二酮(20.7mg，179.81μmol)组成的溶液中一次性加入EDCI(49.24mg，256.87μmol)。将混合物在25℃下搅拌9小时。将反应混合物减压浓缩，以去除DME。将残余物用EtOAc(60mL)稀释，用1N HCl(10mL)和饱和NaHCO3水溶液(10mL×3)洗涤。将有机层用盐水(20mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物40D(60mg，粗品)，为淡黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+1)+342.8。
如实施例6，由相应的起始物料——化合物40D和12G制备化合物40(15.10mg，50.57％收率，白色固体)。化合物40：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ11.07(d,J＝6.0Hz,1H),8.85(s,1H),8.33-8.28(m,1H),7.86(d,J＝0.8Hz,1H),7.77(d,J＝8.0Hz,1H),7.57-7.52(m,1H),7.35-7.31(m,1H),7.16-7.08(m,5H),6.77(br s,1H),5.81-5.75(m,1H),5.55(br s,1H),3.43-3.37(m,1H),3.26-3.19(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+1)+420.1。
实施例20
化合物41-43、64-65、67、71、76、87、100、116、132、134-135、137、203-204(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(吡啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(41)
在25℃下，向化合物24E(100mg，528μmol)和化合物41B(148mg，634μmol)在DMF(1.5mL)中的混合物中一次性加入HBTU(240mg，634μmol)，并搅拌5分钟，然后加入DIEA(273mg，2.1mmol)。将混合物在25℃下搅拌30分钟。LCMS显示化合物24E仍存在并且检测到所需的MS。然后通过制备型HPLC(TFA条件)纯化残余物，得到化合物41A(130mg，收率：60.6％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ9.12(br s,1H),8.49(br d,J＝3.8Hz,1H),7.95-7.74(m,2H),7.50(br s,1H),7.37-7.16(m,5H),7.13-7.01(m,1H),4.69-4.52(m,1H),4.22-4.03(m,1H),3.29(br s,1H),3.11-2.74(m,2H),2.69-2.51(m,1H),0.77-0.59(m,2H),0.56-0.38(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+405.2。
在0℃下，向化合物41A(130mg，320μmol)的DCM(10mL)溶液中一次性加入DMP(543mg，1.3mmol，397μL)。将混合物在25℃下搅拌10分钟。LCMS显示化合物41A被完全消耗，并且检测到具有所需MS的一个主峰。然后将混合物用DCM(80mL)稀释，通过添加10％Na2S2O3/饱和NaHCO3水溶液(v/v＝1/1，20mL)淬灭。分离有机层，水层用DCM(30mL×2)萃取。将合并的有机层用H2O(10mL)、盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到白色固体。然后通过从异丙醚(20mL)中重结晶来纯化残余物，得到化合物41(20.6mg，收率：30.9％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.96(d,J＝7.8Hz,1H),8.79(br d,J＝5.0Hz,1H),8.45(br d,J＝4.6Hz,1H),8.14(s,1H),7.88(t,J＝7.8Hz,1H),7.57(s,1H),7.44(dd,J＝7.0,5.2Hz,1H),7.34-7.28(m,4H),7.24(br d,J＝4.2Hz,1H),7.18(d,J＝8.2Hz,1H),5.32-5.22(m,1H),3.31(s,1H),3.19(dd,J＝13.8,3.6Hz,1H),2.89-2.71(m,2H),0.70-0.64(m,2H),0.60-0.55(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+403.2。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(1-苯基-1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(42)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物34E制备化合物42(19.3mg，收率：55.2％，黄色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.91(d,J＝7.7Hz,1H),8.82(d,J＝5.1Hz,1H),8.57(d,J＝2.6Hz,1H),8.14(s,1H),7.83(d,J＝7.9Hz,2H),7.63(s,1H),7.53(t,J＝8.0Hz,2H),7.36(t,J＝7.4Hz,1H),7.32(d,J＝4.4Hz,4H),7.27-7.20(m,1H),6.48(d,J＝2.6Hz,1H),5.34-5.26(m,1H),3.21(dd,J＝13.8,3.6Hz,1H),2.86(dd,J＝13.8,10.3Hz,1H),2.81-2.72(m,1H),0.71-0.63(m,2H),0.62-0.53(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+469.1。
(S)-1-(苯并[D]噻唑-2-基)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(43)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物29D制备化合物43(24.4mg，收率：43％，白色固体)。化合物43：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.13(d,J＝7.7Hz,1H),8.77(br d,J＝4.9Hz,1H),8.39(s,1H),8.08(d,J＝7.9Hz,1H),7.96(d,J＝8.2Hz,1H),7.67(s,1H),7.59-7.43(m,2H),7.27(d,J＝4.0Hz,4H),7.22-7.12(m,1H),5.34-5.16(m,1H),3.18(dd,J＝13.9,3.3Hz,1H),2.83(dd,J＝13.7,10.1Hz,1H),2.72(br d,J＝4.2Hz,1H),0.69-0.58(m,2H),0.54(br d,J＝2.9Hz,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+460.1。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(嘧啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(65)
向化合物65A(80mg，366.62μmol)在MeOH(5mL)和H2O(1mL)中的混合物中加入LiOH.H2O(27.1mg，645.87μmol)。将混合物在31℃下搅拌1小时。蒸发混合物以除去MeOH，然后用水(3×50mL)洗涤并用MTBE(2×50mL)萃取。用1N HCl将水层酸化至pH约4，然后用乙酸乙酯(3×100mL)萃取溶液。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到化合物65B(50mg，66.79％收率)，为白色固体。
如实施例20，由相应的中间体化合物65B和41B制备化合物65(11.8mg，87.93％收率，白色固体)。化合物65：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.94(s,2H),8.87-8.79(m,1H),8.51-8.44(m,1H),7.62-7.55(m,1H),7.34-7.09(m,5H),6.65(s,1H),5.53-5.39(m,1H),3.26-3.12(m,4H),3.10-3.00(m,1H),2.81-2.71(m,1H),2.56(s,3H),0.71-0.54(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+419.2。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2H-吲唑-2-基)噻唑-5-甲酰胺(64)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物64A制备化合物64(48.2mg，87.93％收率，白色固体)。化合物64：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.99-11.83(m,1H),9.33(s,1H),9.16(s,1H),8.95-8.84(m,1H),7.93-7.80(m,1H),7.56-7.50(m,1H),7.44-7.33(m,1H),7.27-7.15(m,1H),7.12-6.99(m,5H),5.71-5.60(m,1H),3.34-3.24(m,3H),3.19-3.10(m,1H),2.84-2.74(m,1H),0.73-0.54(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+460.1。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(3-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(67)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物67A制备化合物67(30.8mg，38.6％收率，白色固体)。化合物67：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.24(d,J＝4.4Hz,1H),7.67(d,J＝7.6Hz,1H),7.2(d,J＝7.2Hz,1H),7.34-7.26(m,2H),7.25-7.20(m,3H),6.99(d,J＝4.4Hz,2H),6.86(s,1H),6.56(s,1H),5.66-5.58(m,1H),3.38-3.29(m,1H),3.21-3.13(m,1H),2.82-2.74(m,1H),2.34(s,3H),2.16(s,3H),0.91-0.84(m,2H),0.64-0.57(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+432.1。
(S)-1-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(71)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物70D制备化合物71(75mg，收率：78.1％，白色固体)。化合物71：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.93(brs,1H),9.25(br s,1H),8.74(d,J＝4.9Hz,1H),8.29(s,1H),7.83(s,1H),7.52(br s,2H),7.30-7.18(m,6H),7.18-7.13(m,1H),5.42-5.25(m,1H),3.17(dd,J＝3.5,13.7Hz,1H),2.83(dd,J＝10.0,13.8Hz,1H),2.74-2.64(m,1H),0.70-0.42(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+443.0。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(5-苯基嘧啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(76)
如实施例20，由相应的中间体化合物74E制备化合物76(24.7mg，收率：44.7％，白色固体)。化合物76：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ9.46(br d,J＝6.4Hz,1H),8.66(s,2H),8.62(s,1H),7.80(s,1H),7.57-7.49(m,5H),7.22-7.16(m,2H),7.16-7.07(m,3H),6.93(br s,1H),5.86-5.82(m,1H),3.53-3.46(m,1H),3.41-3.32(m,1H),2.86-2.82(m,1H),0.92-0.86(m,2H),0.64-0.62(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+481.0。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(4-苯基-1H-吡唑-1-基)噻唑-5-甲酰胺(87)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物21D制备化合物87(60.0mg，75.3％收率，白色固体)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.72(br.d,J＝6.0Hz,1H),8.73(s,1H),8.68-8.64(m,1H),7.76-7.72(m,1H),7.58-7.52(m,2H),7.48-7.40(m,2H),7.37-7.30(m,1H),7.29-7.21(m,5H),6.97-6.91(m,1H),5.86-5.74(m,1H),3.53-3.41(m,1H),3.29-3.17(m,1H),2.88-2.75(m,1H),0.93-0.82(m,2H),0.68-0.58(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+1)+486.1。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(100)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物23A制备化合物100(85mg，收率：83.27％，白色固体)。化合物100：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.09(d,J＝7.5Hz,1H),8.94(brd,J＝5.1Hz,1H),7.62(d,J＝7.1Hz,2H),7.53-7.46(m,1H),7.44-7.39(m,2H),7.32-7.20(m,5H),5.48(ddd,J＝3.3,7.6,10.7Hz,1H),3.25(br dd,J＝3.2,14.0Hz,1H),2.85-2.67(m,2H),2.07(s,3H),0.73-0.56(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+418.1。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噻唑-4-甲酰胺(116)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物96D制备化合物116(88.00mg，87.41％收率，类白色固体)。化合物116：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.44(s,5H),7.20-7.09(m,3H),6.86(br s,1H),6.77-6.68(m,2H),5.93(br d,J＝6.6Hz,1H),5.68-5.57(m,1H),3.24-3.14(m,1H),2.99-2.89(m,1H),2.83-2.73(m,1H),2.46(s,3H),0.93-0.81(m,2H),0.69-0.53(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+434.1。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(132)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物136C制备化合物132(72.8mg，60.40％收率，白色固体)。化合物132：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.61(d,J＝2.4Hz,1H),8.57-8.54(m,1H),7.72-7.66(m,1H),7.34-7.26(m,4H),7.10-7.05(m,2H),7.03-6.94(m,1H),6.64-6.56(m,1H),6.44(s,1H),5.62-5.54(m,1H),3.44-3.36(m,1H),3.18-3.10(m,1H),2.85-2.76(m,1H),2.33(s,3H),0.92-0.85(m,2H),0.66-0.59(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+1)+418.1。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(异喹啉-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(134)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物133D制备化合物134(57.4mg，62.9％收率，黄色固体)。化合物134：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.31(brs,1H),8.47(br s,1H),8.06(d,J＝7.6Hz,1H),7.74-7.61(m,2H),7.43(d,J＝8.0Hz,1H),7.25-7.20(m,3H),6.92(br s,2H),6.84(br s,1H),6.60(s,1H),6.46(d,J＝7.2Hz,1H),5.50-5.41(m,1H),3.30-3.22(m,1H),3.14-3.04(m,1H),2.79-2.70(m,1H),2.40(s,3H),0.87-0.82(m,2H),0.63-0.53(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+468.1。
(S)-2-环丙基-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-苯基噻唑-5-甲酰胺(135)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物135A制备化合物135(52.8mg，53.03％收率，白色固体)。化合物135：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.53-7.45(m,2H),7.45-7.35(m,3H),7.22-7.11(m,3H),6.85(br s,1H),6.80-6.70(m,2H),6.17(d,J＝6.4Hz,1H),5.54-5.45(m,1H),3.27-3.22(m,1H),2.89-2.84(m,1H),2.80-2.75(m,1H),2.33-2.26(m,1H),1.20-1.14(m,2H),1.13-1.08(m,2H),0.91-0.79(m,2H),0.64-0.54(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+460.1。
(S)-3-(叔丁基)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(137)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物128A制备化合物137(96.70mg，64.74％收率，白色固体)。化合物137：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.54-7.45(m,3H),7.41-7.36(m,2H),7.31-7.27(m,1H),7.25-7.13(m,5H),6.87(br s,1H),6.69(s,1H),5.77-5.68(m,1H),3.44-3.36(m,1H),3.17-3.09(m,1H),2.82-2.74(m,1H),1.16(s,9H),0.89-0.81(m,2H),0.64-0.54(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+459.2。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(4-苯基噻唑-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(203)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物82D制备化合物203(30mg，收率：60.18％，白色固体)。化合物203：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.69-7.64(m,2H),7.41-7.33(m,3H),7.22(s,1H),7.12-7.06(m,3H),7.01-6.94(m,3H),6.84(br s,1H),5.65-5.58(m,1H),3.41-3.34(m,1H),2.97-2.89(m,1H),2.79-2.71(m,1H),2.32(s,3H),0.86-0.80(m,2H),0.61-0.53(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+500.1。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-苯基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(204)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物204A制备化合物204(4mg，8.9％收率，白色固体)。化合物204：1H NMR(CDCl3,400MHz)T＝80：δ8.55(br s,1H),8.41(d,J＝7.2Hz,1H),7.82-7.78(m,2H),7.50-7.35(m,4H),7.32-7.20(m,5H),5.51-5.45(m,1H),3.30-3.22(m,1H),3.05(br s,1H),2.81-2.74(m,1H),0.71-0.66(m,2H),0.64-0.59(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+404.1。
实施例21
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-5-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(45)
将乙基化合物32C(500.0mg，2.15mmol)、苯基硼酸(262.1mg，2.15mmol)、Pd(dtbpf)Cl2(140.1mg，215.00μmol)、K3PO4(1.37g，6.45mmol)在二噁烷(30mL)和H2O(10mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在N2气氛下将混合物在70℃下搅拌1小时。将混合物浓缩并用乙酸乙酯(30mL)稀释，用HCl(1M，50mL)、饱和NaHCO3水溶液(50mL)、盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，得到中间体化合物45A(490mg，粗品)，为棕色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+230.9。
向化合物45A(490.0mg，2.13mmol)在MeOH(5mL)和THF(5mL)中的溶液中加入NaOH(2M，21.28mL)。将混合物在60℃下搅拌1小时。将混合物浓缩并用H2O(10mL)稀释，将混合物用乙酸乙酯(10mL)萃取，水相中加入HCl(1M)直至pH约3，然后用乙酸乙酯(20mL)萃取混合物，用盐水(10mL)洗涤有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。得到化合物45B(400mg，收率：93.0％)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.09(br s,1H),7.87(s,1H),7.50-7.40(m,5H),3.63(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物45B制备化合物45(50.0mg，收率：71.4％，白色固体)。化合物45：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.97(s,1H),7.55-7.43(m,3H),7.32-7.27(m,2H),7.23-7.15(m,3H),6.85-6.65(m,3H),5.80-5.71(m,1H),5.55-5.40(m,2H),3.71-3.60(m,3H),3.29-3.19(m,1H),2.94-2.84(m,1H),2.94-2.84(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
实施例22
(S)-N-(4-氨基-1-(4-甲氧基苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(46)
在0℃下，向化合物46A(13g，44.02mmol，1当量)的DMF(150mL)溶液中加入K2CO3(12.17g，88.04mmol，2当量)。添加后，将混合物在该温度下搅拌0.2小时，然后在0℃下滴加CH3I(8.97g，63.20mmol，3.93mL)。将所得混合物在25℃下搅拌18.8小时。将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释。将合并的有机层用盐水(100mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物46B(13.4g，收率：98.4％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.04(d,J＝8.6Hz,2H),6.84(d,J＝7.7Hz,2H),4.96(br d,J＝7.3Hz,1H),4.55(br d,J＝7.1Hz,1H),3.79(s,3H),3.72(s,3H),3.09-2.94(m,2H),1.43(s,9H)。
在0℃下，将LAH(490mg，12.92mmol，2当量)的THF(10mL)溶液脱气并用N2吹扫3次，滴加化合物46B(2g，6.46mmol，1当量)在THF(30mL)中的混合物，然后在N2气氛下将混合物在0℃下搅拌2小时。通过加入H2O(0.5mL)淬灭反应混合物，然后加入NaOH(15％，在H2O中，0.5mL)、H2O(1.5mL)，然后用EtOAc(20mL)稀释，用Na2SO4干燥，搅拌30分钟，然后过滤得到有机层。将合并的有机层用盐水(20mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物46C(1.48g，收率：81.4％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.12(d,J＝8.4Hz,2H),6.89-6.78(m,2H),4.69(br s,1H),3.88-3.80(m,1H),3.79(s,3H),3.69-3.48(m,2H),2.77(d,J＝7.1Hz,2H),1.41(s,9H)。
将DMP(1.51g，3.56mmol)的DCM(10mL)溶液脱气并用N2吹扫3次，然后滴加化合物46C(500mg，1.78mmol)的DCM(10mL)溶液，然后在N2气氛下将混合物在25℃下搅拌20小时。通过加入饱和Na2S2O3水溶液(15mL)和饱和NaHCO3水溶液(15mL)淬灭反应混合物，然后用DCM(10mL)稀释并用H2O(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物46D(430mg，收率：86.48％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.62(s,1H),7.13-7.02(m,2H),6.84(br d,J＝8.6Hz,2H),5.05(br d,J＝5.5Hz,1H),4.46-4.32(m,1H),3.78(s,3H),3.06(br d,J＝6.4Hz,2H),1.43(s,9H)。
向化合物46D(1.53g，5.48mmol)的DMF(20mL)溶液中加入化合物2-羟基-2-甲基丙腈(3.30g，38.78mmol，3.55mL)和Et3N(832mg，8.22mmol，1.14mL)。将混合物在25℃下搅拌2小时。通过加入1N HCl(20mL)淬灭反应混合物，然后用H2O(20mL)稀释并用DCM(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至4：1)纯化残余物，得到化合物46E(980mg，收率：58.37％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.16-6.97(m,2H),6.90-6.71(m,2H),4.96-4.72(m,1H),4.52-4.37(m,1H),3.74-3.72(m,3H),3.07-2.66(m,2H),1.37(s,9H)。
向化合物46E(980mg，3.20mmol)和K2CO3(885mg，6.40mmol)的DMSO(15mL)溶液中加入H2O2(9.3mL，纯度：30％)。将混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用H2O(100mL)稀释，并用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物46F(560mg，收率：53.95％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.16-6.97(m,2H),6.90-6.71(m,2H),4.96-4.72(m,1H),4.52-4.37(m,1H),3.74-3.72(m,3H),3.07-2.66(m,2H),1.37(s,9H)。
向化合物46F(500mg，1.54mmol)的EtOAc(5mL)溶液中加入HCl/EtOAc(4M，5mL)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物用MTBE(20mL)稀释，过滤，得到化合物46G(300mg，收率：73.97％，HCl)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.06-7.81(m,3H),7.51(br s,2H),7.26-7.07(m,2H),6.95-6.79(m,2H),6.65-6.35(m,1H),4.21-3.78(m,1H),3.71(d,J＝1.5Hz,3H),3.53(br s,1H),2.87-2.62(m,2H)。
如实施例15，由相应的中间体化合物——23A和46G制备化合物46(65mg，收率65.3％，白色固体)。化合物46：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.05-8.64(m,1H),8.18(s,1H),7.90(s,1H),7.67-7.55(m,2H),7.53-7.32(m,3H),7.24-7.10(m,2H),6.89-6.76(m,2H),5.48-5.36(m,1H),3.74-3.65(m,3H),3.23-2.95(m,1H),2.76-2.58(m,1H),2.17-2.00(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+408.1。
实施例23
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-苯基-1H-咪唑-5-甲酰胺(48)
向冷却至0℃的化合物48A(40g)的CHCl3(200mL)溶液中滴加磺酰二氯(34g)。将混合物温热至30℃保持0.5小时，并在70℃下加热5小时。冷却至室温后，将反应混合物用氯仿(40mL)稀释，依次用NaHCO3水溶液(40mL×2)、水(20mL)和盐水(30mL)洗涤。将有机相经Na2SO4干燥并蒸发，得到化合物48B(47g，粗品)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06-7.87(m,2H),7.67-7.56(m,1H),7.52-7.42(m,1H),7.48-7.39(m,1H),7.48-7.39(m,1H),7.67-7.38(m,1H),7.26(s,1H),5.61(s,1H),5.29-5.26(m,1H),4.39-4.21(m,2H),1.70(s,1H),1.40-1.14(m,3H)。
将化合物48B(20g)在NH2CHO(40g，882.40mmol，35mL)和水(3.2g，176.48mmol)中的溶液在180℃下搅拌3.5小时。将混合物冷却至室温，然后加入水(50ml)并用DCM(100mL×3)萃取混合物。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱(洗脱液为0～100％乙酸乙酯/石油醚梯度@40mL/min)纯化残余物，得到化合物48C(1.3g)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.09(d,J＝7.3Hz,7H),4.28-4.08(m,2H),1.24(br t,J＝6.8Hz,1H),1.29-1.10(m,1H)。
在0℃下，向乙基化合物48C(800mg，3.70mmol)的EtOH(20mL)溶液中加入KOH(2.1g，37.00mmol)的H2O(20mL)溶液。添加后，将反应混合物在70℃下搅拌16小时，向反应混合物中加入20mL水，并用MTBE(20mL)萃取混合物。用1N HCl将水层酸化至pH约4并过滤，得到所需化合物。用EtOAc(50mL×3)萃取滤液。将合并的萃取液用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，将混合物真空浓缩，得到所需化合物48D(500mg，收率71.81％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.42-12.33(m,1H),7.97-7.67(m,3H),7.48-7.21(m,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物48D制备化合物48(10mg，收率25.1％，淡黄色固体)。化合物48：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.30-8.17(m,1H),8.00-7.53(m,5H),7.46-7.13(m,8H),5.50-5.30(m,1H),4.31-4.05(m,1H),3.32-3.21(m,1H),2.71-2.61(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+363.2。
实施例24
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(50)
将化合物50A(20g，133mmol)、化合物50B(136g，665mmol)、TsOH.H2O(2.5g，13.3mmol)在甲苯(200mL)中的混合物在120℃下搅拌1小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝3：1，Rf＝0.5)表明50A几乎被消耗并形成一个新斑点。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝20：1至5：1)纯化残余物，得到化合物50C(30g，粗品)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.40(s,1H),7.98-7.78(m,1H),7.77-7.57(m,1H),7.55-7.31(m,1H),7.30-7.07(m,1H),5.38-5.26(m,1H),4.33-4.21(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+234.9。
将甲基50C(10g，45.4mmol)、TosMIC(17.7g，90.8mmol)、K2CO3(9.4g，68.1mmol)在MeOH(200mL)中的混合物在70℃下搅拌0.5小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝3：1，Rf＝0.4)表明50C被完全消耗并且形成了一些新斑点。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝20：1至3：1)纯化残余物，得到化合物50D(1.2g，收率：10.2％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.22(d,J＝0.9Hz,1H),8.06(d,J＝7.9Hz,1H),7.93-7.88(m,3H),7.58(dt,J＝1.3,7.7Hz,1H),7.52-7.49(m,1H),7.49-7.43(m,1H),4.58(s,1H),3.87(s,3H),2.51(s,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+259.9。
向50D(1.1g，4.24mmol)在THF(30mL)、H2O(5mL)中的溶液中加入NaOH(339mg，8.48mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌3小时。LCMS显示50D被完全消耗，并且检测到具有所需MS的一个主峰。将反应混合物浓缩，得到残余物。将残余物溶于水(10mL)中，用HCl水溶液调节pH约5，过滤，浓缩滤饼，得到产物50E(0.6g，收率：57.7％)，为灰色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.48(d,J＝1.1Hz,1H),8.22-8.18(m,1H),8.06(dd,J＝0.8,8.0Hz,1H),7.81(d,J＝0.9Hz,1H),7.64-7.53(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+245.9。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物50E制备化合物50(12.9mg，收率18.8％，白色固体)。化合物50：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.11(br d,J＝7.7Hz,1H)8.39(s,1H)8.12-8.03(m,2H)7.96(d,J＝8.2Hz,1H)7.81(s,1H)7.66(s,1H)7.57-7.45(m,2H)7.26(d,J＝4.2Hz,4H)7.20-7.16(m,1H)5.33-5.20(m,1H)3.18(br dd,J＝13.9,3.5Hz,1H)2.90-2.76(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+420.0。
实施例25
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(1H-吲唑-3-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(51)
向51A(8.7g，65.3mmol)的MeOH(90mL)溶液中加入2-氧代乙酸乙酯(20g，98.01mmol)。在25℃下搅拌2小时后，将混合物过滤并浓缩，得到粗产物51B(15g，粗品)，为棕色固体，将其不经纯化用于下一步骤。
向51B(15g，69.1mmol)的EtOH(400mL)溶液中加入K2CO3(14.5g，104mmol)和TosMIC(11.6g，59.4mmol)。在90℃下搅拌0.5小时后，将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1：0至1：1)纯化残余物，得到化合物51C(2.9g，收率：16.4％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.04(br s,1H),7.98(d,J＝0.7Hz,1H),7.91(s,1H),7.48-7.41(m,3H),7.25-7.19(m,1H),4.24-4.14(m,2H),1.14(t,J＝7.1Hz,3H)。
向51C(2.9g，11.3mmol)在THF(40mL)和H2O(8mL)中的溶液中加入NaOH(905mg，22.6mmol)。将混合物在25℃下搅拌10小时。将混合物减压浓缩以除去有机溶剂，并用EtOAc(20mL)萃取。将水层用1M HCl酸化至pH约5，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用H2O(40mL)、盐水(40mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到51D(1.5g，收率：58.1％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.35(s,1H),8.16(s,1H),7.83(s,1H),7.61(d,J＝8.3Hz,1H),7.47-7.41(m,2H),7.20-7.15(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+228.9。
在0℃下，向51D(500mg，2.19mmol)和1-羟基吡咯烷-2,5-二酮(252mg，2.19mmol)在THF(10mL)、DCM(5mL)和DMF(10mL)中的溶液中加入EDCI(420mg，2.19mmol)。添加后，将混合物在25℃下搅拌12小时。真空去除溶剂。将残余物用EtOAc(50mL)稀释，用1N HCl(20mL)、饱和NaHCO3(20mL)和盐水(20mL)洗涤。合并有机物，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗品51E(476mg，收率：66.8％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.52(s,1H),8.57(s,1H),8.32(s,1H),7.63(d,J＝8.6Hz,1H),7.49-7.43(m,2H),7.24-7.17(m,1H),2.77(s,5H)。
如实施例20，由相应的中间体化合物51E和41B制备化合物51(28.5mg，收率：29.1％，黄色固体)。化合物51：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.66(br s,1H),7.86(s,1H),7.73(s,1H),7.49-7.34(m,3H),7.34-7.28(m,1H),7.23-7.10(m,4H),7.09-6.90(m,3H),5.65-5.53(m,1H),3.33(dd,J＝14.1,5.1Hz,1H),3.15(dd,J＝14.1,7.3Hz,1H),2.75(td,J＝7.2,3.6Hz,1H),0.76-0.86(m,2H),0.55(br d,J＝2.6Hz,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+443.1。
实施例26
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(5-苯基噻唑-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(52)
将化合物52A(4.2g，23.8mmol)和2-氧代乙酸乙酯(14.6g，71.4mmol)在MeOH(40mL)中的混合物在70℃下搅拌6小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝2：1，Rf～0.7)表明化合物52A被完全消耗，并且检测到具有较低极性的一个主要新斑点。将反应混合物浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝20：1至10：1)纯化残余物，得到化合物52B(7g，粗品)，为黄色油状物。
向化合物52B(7g，23.9mmol)和K2CO3(6.6g，47.8mmol)在EtOH(15mL)中的混合物中加入TosMIC(6.9g，35.9mmol)。将混合物在90℃下搅拌2小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝2：1，Rf～0.55)表明化合物52B被完全消耗，并且检测到具有较大极性的一个主要新斑点。将反应混合物浓缩，得到残余物。通过硅胶色谱纯化粗产物，用石油醚：乙酸乙酯＝15：1至5：1洗脱，得到化合物52C(6g，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)m/z(M+H)+299.9。
向化合物52C(3.5g，11.69mmol)在THF(20mL)和H2O(6mL)中的溶液中一次性加入LiOH.H2O(981mg，23.3mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝1：1，Rf～0.25)表明化合物52C被完全消耗并且形成了一个新的斑点。通过加入HCl(2M)将混合物调节至pH约5，然后沉淀出白色固体，过滤并在减压下干燥，得到化合物52D(1.5g，收率：47.3％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(s,1H),8.19(s,1H),7.76-7.70(m,3H),7.53-7.46(m,2H),7.45-7.38(m,1H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物52D制备化合物52(50.9mg，收率43％，白色固体)。化合物52：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.05(d,J＝7.5Hz,1H),8.32(s,1H),8.11(s,2H),7.85(s,1H),7.71-7.66(m,3H),7.48(t,J＝7.5Hz,2H),7.44-7.39(m,1H),7.30(d,J＝4.4Hz,4H),7.23-7.19(m,1H),5.35-5.25(m,1H),3.21(dd,J＝3.7,13.8Hz,1H),2.85(dd,J＝10.3,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+446.0。
实施例27
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(5-苯基噻唑-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(53)
在0℃下，向化合物53A(600mg，2.21mmol)和化合物1-羟基吡咯烷-2,5-二酮(254mg，2.21mmol)在THF(10mL)中的混合物中滴加EDCI(423mg，2.21mmol)的DCM(5mL)溶液。将混合物在25℃下搅拌12小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝1：1，Rf～0.4)表明化合物53A被完全消耗，并且检测到具有较低极性的一个主要新斑点。将反应混合物浓缩，以去除溶剂。将残余物用EtOAc(50mL)稀释，用H2O(20mL)、饱和NaHCO3(20mL)、盐水(20mL)洗涤。收集有机物，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到所需的中间体化合物53B(700mg，收率：85.9％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.29(s,1H),8.20(s,1H),7.86(s,1H),7.57(d,J＝6.5Hz,2H),7.48-7.36(m,3H),7.27(s,1H),2.88(s,4H)。
如实施例20，由相应的中间体化合物53B制备化合物53(41mg，收率：34.3％，白色固体)。化合物53：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08(d,J＝7.7Hz,1H),8.82(d,J＝5.0Hz,1H),8.32(d,J＝0.8Hz,1H),8.11(s,1H),7.72-7.64(m,3H),7.52-7.46(m,2H),7.44-7.39(m,1H),7.30(d,J＝4.4Hz,4H),7.24-7.18(m,1H),5.31-5.22(m,1H),3.21(dd,J＝13.7,3.6Hz,1H),2.90-2.70(m,2H),0.66-0.54(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+486.1。
实施例28
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-甲基-1-苯基-1H-1,2,3-三唑-5-甲酰胺(55)
在0℃下，向化合物55A(2.5g，26.8mmol)的MeCN(50mL)溶液中加入t-BuONO(4.15g，40.3mmol)，然后加入TMSN3(4.64g，40.3mmol)。将反应混合物在20℃下搅拌1小时。蒸发溶剂，得到中间体化合物55B(4g，粗品)，为黄色油状物。
将化合物55B(4g，粗品)和化合物丁-2-炔酸乙酯(1g，8.92mmol)在甲苯(20mL)中的混合物在110℃下搅拌5小时。蒸发溶剂。通过硅胶柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝20：1～5：1)纯化粗产物，得到化合物55C(150mg，收率：7.27％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.54-7.49(m,2H),7.44-7.40(m,2H),7.37(d,J＝5.1Hz,1H),4.25(q,J＝7.1Hz,2H),1.21(t,J＝7.1Hz,3H)。
向化合物55C(150mg，649μmol)在THF(2mL)和H2O(2mL)中的溶液中加入NaOH(51.9mg)。将反应混合物在20℃下搅拌30分钟。TLC显示产生了具有较高极性的新峰。蒸发溶剂，加入1M HCl直至pH约6。将混合物过滤，将滤饼干燥，得到化合物55D(120mg，收率：91.0％)，为黄色固体。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物55D制备化合物55(46mg，121μmol，收率42.0％，黄色固体)。化合物55：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.36(br d,J＝7.9Hz,1H),8.20(s,1H),7.94(s,1H),7.51-7.43(m,3H),7.36-7.28(m,7H),5.38(br t,J＝7.7Hz,1H),3.26(br s,1H),2.82-2.73(m,1H),2.21(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
实施例29
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-甲基-1-苯基-1H-1,2,3-三唑-5-甲酰胺(56)
在0℃下，将化合物56A(1.0g，4.08mmol)、化合物N,O-二甲基羟胺(478mg，4.90mmol，HCl)、HOBt(552mg，4.08mmol)和NMM(1.24g，12.24mmol，1.35mL)在CHCl3(20mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后分批加入EDCI(1.17g，6.12mmol)。在N2气氛下将混合物在25℃下搅拌20小时。通过加入H2O(20mL)淬灭反应混合物，然后用DCM(10mL)稀释。将合并的有机层用1N HCl(15mL×2)、饱和NaHCO3水溶液(15mL×2)和盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物56B(1.15g，收率：97.7％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ6.97(br d,J＝8.8Hz,1H),4.47(br t,J＝8.4Hz,1H),3.73-3.64(m,3H),3.06(s,3H),1.51-1.27(m,11H),0.87(s,9H)。
在0℃下，将LAH(303mg，7.98mmol)的THF(10mL)溶液脱气并用N2吹扫3次，滴加化合物56B(1.15g，3.99mmol)在THF(20mL)中的混合物，然后在N2气氛下将混合物在0℃下搅拌2小时。通过加入EtOAc(10mL)淬灭反应混合物，然后加入1N HCl(50mL)，然后用EtOAc(20mL)稀释，用Na2SO4干燥，搅拌30分钟，然后过滤，得到有机层。将合并的有机层用盐水(20mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物56C(900mg，收率：98.4％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.55(s,1H),4.83(brs,1H),4.24(br s,1H),1.86-1.55(m,2H),1.44(s,9H),1.03-0.91(m,9H)。
向化合物56C(900mg，3.92mmol)的DMF(20mL)溶液中加入化合物2-羟基-2-甲基丙腈(2.33g，27.32mmol，2.50mL)和Et3N(595mg，5.88mmol，815μL)。将混合物在25℃下搅拌2小时。通过加入1N HCl(20mL)淬灭反应混合物，然后用H2O(20mL)稀释并用DCM(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物56D(930mg，收率：92.55％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.06-4.66(m,1H),4.55-4.35(m,1H),4.05-3.73(m,1H),1.80-1.65(m,2H),1.45(br d,J＝6.8Hz,9H),1.10-0.80(m,9H)。
向化合物56D(930mg，3.63mmol)和K2CO3(1.00g，7.26mmol)的DMSO(15mL)溶液中加入H2O2(4.12g，36.30mmol，3.49mL，纯度：30％)。将混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用H2O(50mL)稀释，并用EtOAc(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。将残余物在DCM(0.1mL)和PE(5mL)中搅拌30分钟并过滤，得到化合物56E(480mg，收率：48.20％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ6.83(br s,1H),5.65(br s,1H),5.27-5.06(m,1H),4.99-4.82(m,1H),4.23-4.00(m,1H),3.88(br t,J＝8.6Hz,1H),1.77(br s,1H),1.60-1.51(m,1H),1.42(d,J＝9.3Hz,9H),0.94(d,J＝10.1Hz,9H)。
向化合物56E(480mg，1.75mmol)的EtOAc(5mL)溶液中加入HCl/EtOAc(4M，5mL)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物用PE(20mL)稀释，过滤并减压浓缩，得到化合物56F(360mg，收率：97.63％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.00(br s,1H),7.92-7.70(m,1H),7.58-7.41(m,2H),4.21-3.93(m,1H),3.33(br d,J＝3.5Hz,2H),1.76-1.24(m,2H),0.86(s,9H)。
如实施例35，由相应的中间体化合物——23A和56F制备化合物56(94.20mg，收率85.26％，白色固体)。化合物56：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.98-8.61(m,1H),8.20-7.95(m,1H),7.85-7.71(m,2H),7.57-7.37(m,3H),5.25(brt,J＝6.8Hz,1H),2.35-2.20(m,3H),1.63-1.28(m,2H),0.98-0.76(m,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+358.2。
实施例30
(S)-N-(4-氨基-1-(1H-吲哚-3-基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(57)
在0℃下，将化合物57A(5.00g，16.43mmol)、化合物N,O-二甲基羟胺(1.76g，18.07mmol，HCl)、HOBt(2.22g，16.43mmol)和NMM(4.99g，49.29mmol，5.42mL)在CHCl3(150mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后分批加入EDCI(4.72g，24.65mmol)，然后在N2气氛下将混合物在25℃下搅拌23小时。通过加入H2O(100mL)淬灭反应混合物，然后用1NHCl(200mL)稀释，并用NaHCO3(50mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝6/1至1/1)纯化残余物，得到化合物57B(5.94g)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.79(brs,1H),7.50(d,J＝7.7Hz,1H),7.32(d,J＝8.2Hz,1H),7.19-7.11(m,1H),7.07-6.96(m,3H),4.59(br s,1H),3.70(brs,3H),3.10(s,3H),3.03-2.94(m,1H),2.89-2.77(m,1H),1.29(s,9H)。
然后向LAH(330mg，8.64mmol)的THF(10mL)溶液中滴加化合物57B(2.00g，5.76mmol)的THF(20mL)溶液。将混合物在0℃下搅拌2小时。通过在0℃下加入EtOAc(10mL)淬灭反应混合物，然后用1N HCl(40mL)稀释，并用EtOAc(20mL×2)萃取。将合并的有机层用1N HCl(40mL)和NaHCO3(30mL×2)和盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物57C(1.55g，收率：93.33％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.02-10.75(m,1H),9.52(s,1H),7.50(br d,J＝7.7Hz,1H),7.32(d,J＝7.9Hz,1H),7.25(br d,J＝7.3Hz,1H),7.14(d,J＝1.8Hz,1H),7.05(t,J＝7.2Hz,1H),7.00-6.92(m,1H),4.14-4.05(m,1H),3.19-3.10(m,1H),2.95-2.85(m,1H),2.52-2.45(m,4H),1.39-1.23(m,9H)。
向化合物57C(1.50g，5.20mmol)的DCM(30.00mL)溶液中加入化合物N,O-二甲基羟胺(885mg，10.40mmol，960μL)和Et3N(790mg，7.80mmol，1.08mL)。在25℃下搅拌20小时后，通过加入0.5N HCl 30mL淬灭反应混合物，然后用DCM(30mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。化合物57D(1.74g，黄色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.64(s,1H),8.14(br s,1H),7.60(d,J＝7.7Hz,1H),7.37(d,J＝8.2Hz,1H),7.24-7.18(m,1H),7.17-7.11(m,1H),7.03(d,J＝2.2Hz,1H),5.14(br s,1H),4.51(brd,J＝6.6Hz,1H),3.41-3.16(m,2H),1.44(s,9H)。
在0℃下，向化合物57D(1.74g，5.52mmol)和K2CO3(1.53g，11.04mmol)的DMF(25.00mL)溶液中加入H2O2(6.43g，189.00mmol，5.45mL)。将混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用H2O(50mL)稀释，然后通过加入Na2S2O3(50mL)淬灭，并用EtOAc(50mL×3)和Na2S2O3(50mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/2至0：1)纯化残余物，得到化合物57E(689.60mg，收率：37.47％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(br s,1H),7.70(d,J＝8.3Hz,1H),7.38(d,J＝7.8Hz,1H),7.25-7.06(m,4H),5.42(br s,1H),5.19-5.04(m,1H),4.21-4.08(m,3H),3.30-3.12(m,2H),1.41(s,9H)。
向化合物57E(680.00mg，2.04mmol)的EtOAc(5.00mL)溶液中加入HCl/EtOAc(5.00mL)。将混合物在25℃下搅拌2.5小时。将反应混合物减压浓缩以除去溶剂，得到化合物57F(400.00mg，收率：72.69％，HCl)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.01(br s,1H),7.92(br s,2H),7.70-7.46(m,3H),7.39-7.26(m,2H),7.12-6.95(m,2H),4.01-3.89(m,1H),3.81-3.64(m,1H),3.14(s,2H),3.08-2.80(m,2H)。
如实施例15，由相应的中间体化合物——23A和57F制备化合物57(11.20mg，收率29.41％，白色固体)。化合物57：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.89(br s,1H),9.03(d,J＝7.3Hz,1H),8.23(s,1H),7.95(s,1H),7.70(d,J＝7.8Hz,1H),7.63(d,J＝7.5Hz,2H),7.48(br d,J＝7.5Hz,1H),7.39(t,J＝7.4Hz,3H),7.17(d,J＝1.8Hz,1H),7.13-6.96(m,2H),5.56(br s,1H),2.97-2.87(m,1H),2.70-2.54(m,1H),2.11(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+417.1。
实施例31
(S)-N-(4-氨基-1-(1H-吲哚-3-基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(58)
在0℃下，将N-甲氧基甲胺(1.89g 19.42mmol)、化合物58A(5.0g，17.65mmol)、HOBt(2.38g，17.65mmol)和NMM(52.95mmol，5.8mL)在CHCl3(100mL)中的溶液脱气并用N2吹扫3次，然后分批加入EDCI(5.1g，26.48mmol)。在N2气氛下将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用H2O(100mL)洗涤。将有机层用1mol/L HCl(100mL×2)、饱和NaHCO3(100mL×2)和饱和盐水(100ml)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱(80g Silica Flash Column，洗脱液为0～30％乙酸乙酯/石油醚梯度@40mL/min)纯化残余物，得到化合物58B(4.00g，收率69.4％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.11(dd,J＝5.6,8.3Hz,2H),6.94(t,J＝8.7Hz,2H),5.18(br d,J＝7.9Hz,1H),4.98-4.80(m,1H),4.13-4.07(m,2H),3.72-3.64(m,4H),3.14(s,3H),3.08-2.94(m,1H),2.91-2.70(m,1H),2.02(s,2H),1.78(br s,1H),1.37(s,10H),1.28-1.20(m,3H)。
在0℃下，向100mL干燥烧瓶中的LiAlH4(128mg，3.37mmol)中滴加THF(15mL)。添加后，在该温度下搅拌混合物，然后在0℃下向上述混合物中滴加化合物58B(1.0g 3.06mmol)的THF(15mL)溶液。将所得混合物在0℃下搅拌1.5小时。通过在0℃下缓慢加入EtOAc(20mL)淬灭反应混合物，然后加入1N HCl(20mL)并用EtOAc(30mL×2)萃取。将合并的有机层用NaHCO3(30mL×2)和盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物58C(810mg，收率：99.0％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.65(br s,1H),9.63(br s,1H),7.21-7.08(m,2H),7.00(br d,J＝8.6Hz,2H),5.05(br s,1H),4.42(br s,1H),3.09-3.02(m,1H),3.11(br d,J＝6.2Hz,1H),1.51-1.38(m,9H)。
向化合物58C(3.2g，11.86mmol)和2-羟基-2-甲基-丙腈(2.2mL，23.72mmol)在DCM(30mL)中的溶液中加入TEA(2mL，14.23mmol)。添加后，将反应混合物在28℃下搅拌14小时。将反应混合物用30mL的DCM稀释，并通过加入0.5N HCl 30mL淬灭混合物。将有机层用H2O(30mL)和盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物58D(3.4g，收率89.2％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.15-7.07(m,2H),7.01-6.90(m,2H),4.94-4.70(m,1H),4.52-4.36(m,1H),4.16-3.67(m,1H),3.11-2.78(m,2H),1.57-1.47(m,2H)。
在0℃下，向化合物58D(3.42g，11.62mmol)和K2CO3(3.21g，23.24mmol)的DMSO(30mL)溶液中加入H2O2(395.08mmol，12mL)。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌1.5小时。将反应混合物用水(100mL)稀释，并用饱和Na2S2O3水溶液缓慢淬灭到冰水中。将混合物用EtOAc(200mL×3)萃取，并将合并的萃取液用饱和Na2S2O3水溶液(100mL×3)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥，浓缩，得到残余物。将残余物用EtOAc(10mL)稀释，过滤，得到化合物58E(2.25g，收率61.99％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.25(brs,6H),6.62-6.03(m,1H),5.75-5.55(m,1H),4.02-3.67(m,2H),2.80-2.52(m,2H),2.52-2.51(m,1H),1.26(d,J＝3.7Hz,9H)。MS(ESI)m/z(M+Na+)334.9。
向化合物58E(1g 3.20mmol)的EtOAc(10mL)溶液中加入HCl/EtOAc(4mmol，20mL)。将混合物在28℃下搅拌2小时。将反应混合物用MTBE稀释，过滤，得到化合物58F(750mg，收率：94.25％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.25-7.94(m,3H),7.58-7.43(m,2H),7.41-7.33(m,1H),7.30-7.23(m,1H),7.41-7.23(m,1H),7.20-7.05(m,2H),6.90-6.37(m,1H),6.80-6.25(m,1H),4.24(br s,1H),3.88-3.81(m,1H),3.85(br s,1H),3.68-3.50(m,1H),2.96-2.76(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+213.1。
如实施例15，由相应的中间体化合物——23A和58F制备化合物58(130mg，收率78.40％，淡黄色固体)。化合物58：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.05(d,J＝7.7Hz,1H),8.20(br s,1H),7.93(brs,1H),7.66-7.59(m,2H),7.55-7.49(m,1H),7.48-7.41(m,2H),7.35-7.26(m,2H),7.17-7.06(m,2H),5.51-5.40(m,1H),3.28-3.19(m,1H),2.81-2.69(m,1H),2.11(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+396.1。
实施例32
(S)-N-(4-氨基-1-(1H-吲哚-3-基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(59)
向化合物59A(10g，55.08mmol)的EtOH(30mL)溶液中加入NH2NH2.H2O(32mL，550.80mmol)。添加后，将反应混合物在80℃下搅拌14小时。将反应混合物浓缩，将残余物溶于150mL的EtOAc中，将混合物用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，然后经Na2SO4干燥并真空浓缩，得到化合物59B(9.7g，收率99.4％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02(s,1H),7.71-7.53(m,1H),7.03-6.79(m,2H),4.23(s,2H)。
向化合物59B(1g，5.65mmol)的AcOH(10mL)溶液中加入2-甲氧基亚氨基-4-氧代-戊酸乙酯(1.1g，5.65mmol)。添加后，将反应混合物在120℃下搅拌14小时。将混合物真空浓缩，将残余物溶于80mL的EtOAc中，将混合物用30mL饱和NaHCO3水溶液和盐水(30mL)洗涤。将混合物用Na2SO4干燥并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至10/1)纯化残余物，得到所需化合物59C(1.2g，收率：71％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34-8.25(m,1H),8.05(d,J＝8.2Hz,1H),7.93(d,J＝7.5Hz,1H),6.86(s,1H),4.18(q,J＝7.1Hz,2H),2.29(s,3H),1.11(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+299.9。
在0℃下，向化合物59C(700mg，2.34mmol)的THF(10mL)溶液中加入LiOH.H2O(393mg，9.36mmol)的H2O(10mL)溶液。加完后，将反应混合物在28℃下搅拌16小时，向反应混合物中加入20mL MTBE，然后分离混合物，水层用1N HCl酸化至pH约4，将混合物过滤，得到白色固体，将其干燥，得到化合物59D(330mg，收率51.95％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.48(br s,1H),8.31-8.22(m,1H),8.02-7.89(m,2H),6.81(s,1H),2.27(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+271.8。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物59D制备化合物59(50mg，收率：37.9％，白色固体)。化合物59：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.07(d,J＝7.3Hz,1H),8.27-8.16(m,1H),8.04(s,1H),7.89-7.77(m,3H),7.30-7.19(m,5H),6.59(s,1H),5.40-5.28(m,1H),3.15(dd,J＝4.0,13.8Hz,1H),2.82(dd,J＝9.5,13.8Hz,1H),2.30(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+446.1。
实施例33
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(61)
将化合物61B(500mg，2.12mmol)、化合物61A(859mg，2.33mmol)、Pd(PPh3)4(122mg，106μmol)的混合物在105℃下搅拌14小时。将混合物浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝3/1至1/1)纯化残余物，得到化合物61C(376mg，74.95％收率)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+234.9。
向化合物61C(320mg，1.37mmol)的MeOH(20mL)溶液中加入LiOH.H2O(144mg，3.43mmol)。将混合物在32℃下搅拌0.5小时。蒸发MeOH。向残余物中加入水(20mL)。用MTBE(5mL)萃取混合物并分离。用1N HCl将水层酸化至pH约3，并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到化合物61D(220mg，77.9％收率)，为白色固体。
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物61D制备化合物61(21.8mg，21.78％收率，白色固体)。化合物61：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.06-12.79(m,1H),9.27(s,1H),8.95-8.84(m,1H),8.42-8.32(m,1H),8.32-8.24(m,1H),8.13-8.00(m,1H),7.55-7.45(m,1H),7.21-7.10(m,3H),7.22-7.03(m,2H),5.70-5.59(m,1H),3.32-3.25(m,1H),3.20-3.12(m,1H),2.85-2.74(m,1H),0.72-0.63(m,2H),0.63-0.54(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+421.1。
实施例34
(S)-N-(1-氨基-1,2-二氧代庚-3-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(62)
在0℃和N2气氛下，向化合物62A(2g，8.65mmol)和化合物N,O-二甲基羟胺盐酸盐(970.3mg，9.95mmol)、HOBt(1.34g，9.95mmol)在CHCl3(40mL)中的混合物中分批滴加4-甲基吗啉(2.62g，25.95mmol)和EDCI(2.32g，12.11mmol)。将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用H2O(5mL)稀释。分离两层，水相用EA(5mL×2)萃取。将合并的有机层用0.5N HCl(5mL×2)和NaHCO3(5mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物62B(1.7g，收率：71.7％)，为无色油状物。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ5.19-5.06(m,1H),4.66(br s,1H),3.77(s,3H),3.20(s,3H),1.76-1.66(m,1H),1.55-1.39(m,10H),1.37-1.28(m,4H),0.93-0.83(m,3H)。MS(ESI)m/z(M–Boc+H)+175.0。
在0℃和N2气氛下，向LiAlH4(258.7mg，6.82mmol)的THF(36mL)溶液中滴加化合物62B(1.7g，6.2mmol)的THF(18mL)溶液。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌2小时。将混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释，用1NHCl(20mL)、饱和NaHCO3(20mL×2)、盐水(15mL)洗涤。将有机层用无水Na2SO4干燥并浓缩，得到化合物62C(1.5g，粗品)，为黄色油状物。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ9.58(s,1H),5.03(br s,1H),4.28-4.16(m,1H),1.58-1.19(m,15H),1.01-0.80(m,3H)。
将化合物62C(.5g，6.97mmol)、化合物2-羟基-2-甲基丙腈(1.3mL，13.94mmol)和Et3N(1.16mL，8.36mmol)的无水DCM(30mL)溶液在30℃下搅拌16个小时。将反应混合物用DCM(50mL)稀释，用0.5N HCl(20mL)、水(20mL)和盐水(20mL)洗涤。将有机相用Na2SO4干燥，浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至3/1)纯化残余物，得到化合物62D(1.12g，66.32％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.44-4.34(m,3H),3.94-3.83(m,1H),3.74-3.61(m,1H),3.98-3.55(m,1H),1.66-1.28(m,14H),0.99-0.90(m,3H)。
在0℃下，向化合物62D(1.12g，4.62mmol)和K2CO3(1.28g，9.24mmol)在DMSO(18mL)中的混合物中加入H2O2(4.6mL，158.19mmol)。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌1小时。反应后，将MTBE(20mL)加入到反应混合物中，将所得混合物过滤，用MTBE(30mL)洗涤固体，得到化合物62E(1.1g，91.46％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.32-7.08(m,2H),6.42-5.86(m,1H),5.54-5.30(m,1H),3.88-3.59(m,2H),1.42-1.21(m,15H),0.92-0.78(m,3H)。
在25℃下，向化合物62E(600mg，20.82mmol)的二噁烷(10mL)溶液中加入HCl/二噁烷(3mL，4M)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物过滤，得到化合物62F(320mg，70.7％，收率，HCl)，为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.90(br s,2H),7.54-7.35(m,2H),6.26-6.17(m,1H),4.09(br s,1H),1.66-1.37(m,2H),1.37-1.12(m,5H),0.93-0.72(m,3H)
如实施例15，由相应的中间体化合物——23A和62F制备化合物62(9.1mg，收率38.6％，白色固体)。化合物62：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.84-7.67(m,2H),7.57-7.43(m,3H),6.73(s,1H),6.17-6.03(m,1H),5.52–5.29(m,2H),2.46(s,3H),1.99-1.84(m,1H),1.41-1.04(m,5H),0.90-0.78(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+344.1。
实施例35
化合物63、454
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(63)
向化合物2,4-二氧代戊酸甲酯(100mg，693.82μmol)的AcOH(20mL)溶液中加入化合物63A(76.4mg，693.82μmol)。将混合物在120℃下搅拌1小时。混合物在DCM(5mL)中。将有机层用水(10mL)、NaHCO3洗涤至pH约8～9，用Na2SO4干燥并浓缩，得到化合物63B(500mg，25.24％收率)，为白色固体。
向化合物63B(61mg，279.55μmol)在MeOH(6mL)和H2O(1mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(46.9mg，1.12mmol)。将混合物在31℃下搅拌1小时。蒸发MeOH。向残余物中加入水(10mL)并将混合物用MTBE(5mL)萃取并分离。用1N HCl将水层酸化至pH约3，并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到产物(50mg，87.59％收率)，为白色固体。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物63C制备化合物63(25.1mg，63.1％收率，白色固体)。化合物63：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.16(s,2H),9.08-8.97(m,1H),8.44(s,1H),7.95(s,1H),7.20(s,3H),7.08(s,2H),5.78(m,1H),5.54(s,1H),3.45(m,1H),3.38-3.24(m,1H),2.36(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.1。
N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(454)
如化合物12，由相应的中间体羧酸——化合物63C和3-氨基-N-环丙基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐制备化合物454(210mg，91.7％收率，白色固体)。化合物454：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.07(d,J＝7.2Hz,1H),8.84-8.77(m,2H),8.57(d,J＝2.8Hz,1H),8.31-8.27(m,1H),7.30-7.17(m,5H),6.64(s,1H),5.33-5.25(m,1H),3.17-3.09(m,1H),2.83-2.70(m,2H),2.27(s,3H),0.69-0.53(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+419.2。
实施例36
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(3-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(66)
将化合物2-肼基-3-甲基吡啶盐酸盐(2g，12.53mmol)和化合物66A(1.81g，12.53mmol)在AcOH(30mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在N2气氛下在120℃下搅拌1.5小时。将所得混合物减压浓缩以除去AcOH，并用DCM(10mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液中和。将混合物用DCM(20mL×3)萃取，并将合并的有机层经无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其通过快速硅胶色谱(石油醚：乙酸乙酯＝1：0至0：1)纯化，得到化合物66B(800.0mg，27.6％收率)，为白色固体，和化合物66B-1(110.0mg，4.04％收率)，为白色固体，和粗品66B-1(～800.0mg)。
化合物66B：3-甲基-1-(3-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-羧酸甲酯：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.42-8.37(m,1H),7.70(d,J＝7.6Hz,1H),7.33(d,J＝7.6Hz,1H),6.79(s,1H),3.74(s,3H),2.38(s,3H),2.14(s,3H)。
化合物66B-1：5-甲基-1-(3-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-3-羧酸甲酯：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.42(d,J＝3.6Hz,1H),7.72(d,J＝6.8Hz,1H),7.34(d,J＝7.6Hz,1H),6.74(s,1H),3.92(s,3H),2.26(s,3H),2.20(s,3H)。
向化合物66B(200.0mg，864.86μmol)在MeOH(10mL)和H2O(5mL)中的混合物中一次性加入LiOH·H2O(145.2mg，3.46mmol)。在25℃下搅拌1小时后，将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。将残余物用H2O(10mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，然后用EtOAc(40mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物66C(150mg，79.84％收率，白色固体)。化合物66C：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ13.11(br s,1H),8.31(d,J＝3.7Hz,1H),7.84(d,J＝7.3Hz,1H),7.47-7.40(m,1H),6.78(s,1H),2.25(s,3H),2.03(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+218.1。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物66C制备化合物66(24.5mg，54.7％收率，白色固体)。化合物66：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.23(d,J＝3.6Hz,1H),7.67(d,J＝7.2Hz,1H),7.34(d,J＝7.2Hz,1H),7.27(br s,1H),7.25-7.21(m,3H),7.04-6.99(m,2H),6.70(br s,1H),6.57(s,1H),5.65-5.6(m,1H),5.57(br s,1H),3.37-3.29(m,1H),3.2-3.14(m,1H),2.34(s,3H),2.17(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+392.2。
实施例37
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(1-苯基-1H-吡唑-3-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(68)
向68A(15g，181mmol)的THF(200mL)溶液中加入2-氧代乙酸乙酯(47.9g，235mmol)。将混合物在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到中间体化合物68B(55.3g，粗品)，为棕色固体。MS(ESI)m/z(M+H)+167.8。
向68B(40g，239mmol)的EtOH(400mL)溶液中加入K2CO3(50g，362mmol)和TosMIC(40g，204.88mmol)。将混合物在90℃下搅拌0.5小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：0至5：2)纯化残余物，得到化合物68C(12g，收率：24.3％)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.80-11.35(m,1H),7.87(d,J＝1.10Hz,1H),7.84(d,J＝1.10Hz,1H),7.58(d,J＝2.43Hz,1H),6.45(d,J＝2.43Hz,1H),4.25(q,J＝7.06Hz,2H),1.29(t,J＝7.17Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+207.0。
将68C(5g，24.3mmol)、苯基硼酸(4.4g，36.4mmol)、Cu(OAc)2(4.4g，24.3mmol)、TEA(7.4g，72.8mmol)在DCM(200mL)中的混合物脱气并用O2吹扫3次，然后在O2气氛下将混合物在25℃下搅拌10小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：0至2：1)纯化残余物。得到化合物68D(2.3g，收率：33.6％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.04-7.94(m,2H),7.87(s,1H),7.71(br d,J＝7.7Hz,2H),7.49(br t,J＝7.1Hz,2H),7.36(br d,J＝7.1Hz,1H),7.27(d,J＝2.0Hz,2H),6.70-6.61(m,1H),4.29(dd,J＝2.1,7.2Hz,2H),1.38-1.22(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+282.9。
向68D(2.5g，8.86mmol)在THF(30mL)和H2O(6mL)中的溶液中加入NaOH(708mg，17.7mmol)。将混合物在80℃下搅拌1.5小时。将反应混合物减压浓缩以除去THF，然后用EtOAc(20mL)洗涤。将水层用1M HCl酸化至pH约5，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用H2O(40mL)、盐水(40mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到粗中间体化合物68E(1.90g，收率：84.3％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(d,J＝2.6Hz,1H),8.19(s,1H),7.86(d,J＝7.9Hz,2H),7.76(s,1H),7.53(t,J＝7.9Hz,2H),7.39-7.31(m,1H),6.77(d,J＝2.6Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+254.9。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物68E制备化合物68(33.5mg，收率：42.1％，白色固体)。化合物68：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.86(d,J＝7.7Hz,1H),8.51(d,J＝2.6Hz,1H),8.10(d,J＝0.9Hz,1H),8.06(s,1H),7.79(dd,J＝8.7,1.0Hz,3H),7.60(d,J＝0.9Hz,1H),7.46-7.53(m,2H),7.30-7.36(m,1H),7.24-7.29(m,4H),7.16-7.23(m,1H),6.44(d,J＝2.6Hz,1H),5.23-5.32(m,1H),3.17(dd,J＝13.8,3.9Hz,1H),2.83(dd,J＝13.9,10.4Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+429.1。
实施例38
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(1H-吲唑-3-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(69)
向69A(8.7g，65.3mmol)的MeOH(90mL)溶液中加入2-氧代乙酸乙酯(20g，98.01mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物过滤并浓缩，得到中间体化合物69B(15g，粗品)，为棕色固体。
向69B(15g，69.1mmol)的EtOH(400mL)溶液中加入K2CO3(14.5g，104mmol)和TosMIC(11.6g，59.4mmol)。将混合物在90℃下搅拌0.5小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：0至1：1)纯化残余物，得到化合物69C(2.9g，收率：16.4％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.04(br s,1H),7.98(d,J＝0.7Hz,1H),7.91(s,1H),7.48-7.41(m,3H),7.25-7.19(m,1H),4.24-4.14(m,2H),1.14(t,J＝7.1Hz,3H)。
向69C(2.9g，11.3mmol)在THF(40mL)和H2O(8mL)中的溶液中加入NaOH(905mg，22.6mmol)。将混合物在25℃下搅拌10小时。将混合物减压浓缩以除去有机溶剂，并用EtOAc(20mL)萃取。将水层用1M HCl酸化至pH约5，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用H2O(40mL)、盐水(40mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到69D(1.5g，收率：58.1％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.35(s,1H),8.16(s,1H),7.83(s,1H),7.61(d,J＝8.3Hz,1H),7.47-7.41(m,2H),7.20-7.15(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+228.9。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物69D制备化合物69(16.7mg，收率：20.9％，黄色固体)。化合物69：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.16(brs,1H),8.84(br d,J＝7.7Hz,1H),8.08-7.95(m,2H),7.80-7.70(m,2H),7.52(d,J＝8.4Hz,1H),7.36(br t,J＝7.5Hz,1H),7.30-7.23(m,4H),7.22-7.13(m,3H),7.08-7.01(m,1H),5.21-5.12(m,1H),3.17-3.09(m,1H),2.84-2.75(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+403.1。
实施例39
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(70)
在N2气氛下，将70A(10g，75.1mmol)、2-氧代乙酸乙酯(30.6g，150mmol)在MeOH(300mL)中的混合物在70℃下搅拌12小时。LCMS显示70A被完全消耗，并且检测到具有所需MS的一个峰。将反应混合物减压浓缩，得到粗产物70B(15g，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+235.9。
将70B(15g，63.7mmol)、K2CO3(13.2g，95.6mmol)、TosMIC(24.9g，127mmol)在MeOH(300mL)中的混合物在70℃下搅拌1小时。LCMS显示70B被完全消耗，并且检测到具有所需MS的一个小峰。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝1：1，Rf～0.3)表明70B被完全消耗并且形成了一个新斑点。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1至1：1)纯化残余物，得到70C(350mg，收率：2.3％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.52(br s,1H)8.96(s,1H)7.98(s,1H)7.69(br d,J＝4.4Hz,1H)7.48(br s,1H)7.28(brdd,J＝5.8,2.8Hz,2H)3.99(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+243.1。
将70C(350mg，1.44mmol)、LiOH.H2O(120mg，2.88mmol)在THF(5mL)、H2O(2mL)中的混合物在25℃下搅拌4小时。LCMS显示70C被完全消耗，并且检测到具有所需MS的一个峰。向反应混合物中加入HCl水溶液(1M)以调节pH约5，过滤并将滤饼减压浓缩。将滤饼用水洗涤。得到化合物70D(230mg，收率：70.1％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.57(d,J＝1.3Hz,1H)7.38-7.63(m,3H)7.03-7.22(m,1H)7.03-7.17(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+229.0。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物70D制备化合物70(40mg，收率：46.7％，白色固体)。化合物70：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.94(br s,1H),9.31(br s,1H),8.38-8.23(m,1H),8.04(br s,1H),7.87-7.74(m,2H),7.60-7.43(m,2H),7.29-7.10(m,6H),5.33(br t,J＝6.6Hz,1H),3.17(br dd,J＝3.1,13.9Hz,1H),3.22-3.09(m,1H),2.84(br dd,J＝10.3,13.8Hz,1H),2.91-2.74(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+403.1。
实施例40
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺(72)
在N2下，向化合物72A(800mg，3.59mmol)和苯基硼酸(1.31g，10.8mmol)在甲苯(10mL)和H2O(500μL)中的混合物中加入KF(417mg，7.18mmol)和Pd(PPh3)4(414mg，359μmol)。然后将反应混合物在100℃和N2下搅拌16小时。蒸发溶剂。通过硅胶柱(石油醚：乙酸乙酯＝20：1至5：1)纯化粗产物，得到化合物72B(400mg，粗品)，为油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.70-7.68(m,2H),7.48-7.46(m,3H),3.94(s,3H)。
向化合物72B(500mg，2.27mmol)在THF(5mL)、H2O(5mL)和MeOH(5mL)中的溶液中加入NaOH(182mg，4.54mmol)。将反应混合物在20℃下搅拌1小时。向反应混合物中加入1M HCl直至pH约4。蒸发溶剂，得到粗产物72C(500mg，粗品)，为白色固体。粗产物不经纯化用于下一步。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物72C制备化合物72(50.5mg，收率：43.9％，白色固体)。化合物72：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.42(d,J＝7.7Hz,1H),8.18(s,1H),7.91(s,1H),7.60-7.55(m,2H),7.48-7.43(m,1H),7.42-7.36(m,2H),7.31-7.22(m,5H),5.51(ddd,J＝3.6,7.7,10.0Hz,1H),3.23(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.87(dd,J＝10.1,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+381.0。
实施例41
N-((3S,4R)-1-氨基-4-甲基-1,2-二氧代己烷-3-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(73)
在0℃下，将N-甲氧基甲胺(2.32g，23.78mmol)、化合物73A(5.00g，21.62mmol)、HOBt(2.92g，21.62mmol)和NMM(6.56g，64.86mmol)在CHCl3(100mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后分批加入EDCI(6.22g，32.43mmol)。在N2气氛下将混合物在25℃下搅拌16小时。通过加入H2O(100mL)淬灭反应混合物。将有机层用HCl(1N，100mL×2)和饱和NaHCO3(100mL×2)和饱和盐水(50ml)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱(洗脱液为0～10％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化残余物，得到化合物73B(5.0g，收率：84.3％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.10(d,J＝9.5Hz,1H),4.67-4.53(m,1H),3.76(s,3H),3.20(s,3H),1.70(qt,J＝6.8,9.9Hz,1H),1.54-1.51(m,1H),1.41(s,9H),1.15-1.07(m,1H),0.91-0.85(m,6H)。MS(ESI)m/z(M+Na+)296.9。
在0℃下，向LiAlH4(350mg，9.22mmol)的THF(30mL)溶液中加入化合物73B(2.30g，8.38mmol)的THF(30mL)溶液。添加后，将反应混合物在5℃下搅拌1小时。通过加入乙酸乙酯(10mL)和HCl(1N，10mL)淬灭反应混合物，并用EtOAc(100mL×2)萃取。将合并的有机层用HCl(1N，30mL×2)、饱和NaHCO3(30mL×3)和盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物73C(1.50g，收率：83.2％)，为无色油状物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45(d,J＝1.3Hz,1H),7.22(br d,J＝7.5Hz,1H),3.79(br t,J＝6.4Hz,1H),1.89-1.75(m,1H),1.42-1.32(m,10H),1.25-1.10(m,1H),0.86(d,J＝6.8Hz,3H),0.81(t,J＝7.4Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+216.0。
向化合物73C(1.5g，6.97mmol)的DMF(10mL)溶液中加入2-羟基-2-甲基丙腈(1.28mL，13.93mmol)和TEA(1.16mL，8.36mmol)，然后在25℃下搅拌14小时。将反应混合物用DCM(25mL)稀释，用HCl(1N，20mL×2)、H2O(30mL)和盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物73D(1.5g，收率：88.8％)，为无色液体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ5.24-5.08(m,1H),4.92-4.56(m,1H),3.90-3.25(m,1H),2.04-1.80(m,1H),1.66-1.52(m,1H),1.50-1.40(m,9H),1.33-1.09(m,2H),1.02-0.75(m,6H)。
在0℃下，向化合物73D(1.50g，6.19mmol)和K2CO3(1.71g，12.38mmol)的DMSO(15mL)溶液中加入H2O2(7.21g，211.95mmol)。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(20mL)稀释，并在冰水中缓慢地用饱和Na2S2O3水溶液淬灭。将混合物用EtOAc(50mL×3)萃取，并将合并的萃取液用饱和Na2S2O3水溶液(30mL×3)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱(洗脱液为0～20％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化残余物，得到化合物73E(870mg，收率：54.0％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.31-6.97(m,2H),6.29-5.87(m,1H),5.44-5.12(m,1H),3.99-3.80(m,1H),3.71-3.50(m,1H),1.67-1.41(m,2H),1.39-1.30(m,9H),1.11-0.92(m,1H),0.89-0.75(m,6H)。MS(ESI)m/z(M+Na)+282.9。
在0℃下，向化合物73E(870mg，3.34mmol)的EtOAc(10mL)溶液中加入HCl/EtOAc(4M，16.70mL)。添加后，将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，以去除溶剂。将残余物用MTBE(30mL)洗涤，过滤，得到化合物73F(620mg，收率：94.4％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14-7.71(m,3H),7.64-7.37(m,2H),6.57-6.28(m,1H),4.32-3.99(m,1H),3.21(br s,1H),1.82-1.43(m,2H),1.30-1.03(m,1H),0.99-0.71(m,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+161.1。
如实施例15，由相应的中间体化合物——23A和73F制备化合物73(100mg，收率63.6％，白色固体)。化合物73：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.92(d,J＝7.0Hz,1H),8.15(s,1H),7.96-7.65(m,3H),7.62-7.44(m,3H),5.19(t,J＝6.5Hz,1H),3.33(br s,1H),2.30(s,3H),2.10-1.94(m,1H),1.36-1.13(m,2H),0.92(d,J＝6.8Hz,3H),0.81(t,J＝7.4Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+344.1。
实施例42
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(5-苯基嘧啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(74)
将化合物74A(10.0g，57.47mmol)、苯基硼酸(10.5g，86.21mmol)、K3PO4(24.4g，114.94mmol)、Pd(OAc)2(1.3g，5.75mmol)在乙二醇(200mL)中的混合物在80℃下搅拌12小时。将反应混合物加入H2O(200mL)中，过滤除去不溶物；滤液用乙酸乙酯(200mL×3)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液(150mL×3)、饱和NaCl水溶液(150mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥并真空浓缩。将所得固体用乙酸乙酯(10mL)处理。过滤沉淀物并真空干燥，得到化合物74B(4.97g，收率：50.5％)，为浅黄色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.55(s,2H),7.62-7.58(m,2H),7.43-7.40(m,2H),7.33-7.27(m,1H),6.76(br.s.,2H)。
将化合物74B(3.0g，17.35mmol)和化合物2-氧代乙酸乙酯(2.3g，22.55mmol)在MeOH(50mL)中的混合物在80℃下搅拌12小时。将反应混合物浓缩，过滤固体。将所得固体用MeOH(10mL)处理，过滤并真空干燥，得到化合物74C(3.23g，收率：64.8％)，为浅黄色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.71(s,2H),8.24(d,J＝8.8Hz,1H),7.67-7.63(m,2H),7.47-7.41(m,2H),7.37-7.31(m,1H),5.64(d,J＝8.8Hz,1H),4.19-4.10(m,2H),3.33(s,3H),1.21(t,J＝7.2Hz,3H)。
将化合物74C(500mg，1.74mmol)、Tosmic(680mg，3.48mmol)、K2CO3(720mg，5.22mmol)在无水EtOH(50mL)中的混合物在65℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩；将所得残余物加入水(30mL)中并用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝15：1至8：1)纯化残余物，得到化合物4(293mg，收率：52.2％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ9.30(s,2H),8.46(s,1H),7.89(t,J＝7.2Hz,2H),7.76(s,1H),7.59-7.49(m,3H),4.23-4.13(m,2H),1.17(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+295.1。
在25℃下，向化合物74D(1.15g，3.91mmol)在THF(10mL)和MeOH(10mL)中的混合物中滴加KOH(2M，1.96mL，3.92mmol)。将混合物在25℃下搅拌23小时，然后减压浓缩，得到中间体化合物74E(2g，粗品)。
如实施例5，由相应的中间体化合物74E和12G制备化合物74(14.9mg，收率28.2％，白色固体)。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ9.60(br d,J＝6.4Hz,1H),8.64(br s,3H),7.82(s,1H),7.59-7.50(m,6H),7.22-7.11(m,5H),5.83(m,1H),5.61(br s,1H),3.52-3.44(m,1H),3.40-3.31(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+441.0。
实施例43
化合物77、88
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4-(噁唑-2-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(77)
将77A(20g，115.60mmol)和2-氧代乙酸乙酯(30.7g，150.28mmol)在MeOH(300mL)中的混合物加热至80℃保持3小时。LCMS显示所需的MS。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝3：1，Rf～0.8)显示新点，将混合物浓缩并通过硅胶柱(石油醚：乙酸乙酯＝20：1)纯化残余物。化合物77B(28.9g，收率86.5％，黄色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.96(d,J＝5.2Hz,1H),6.86(dd,J＝5.2,1.75Hz,1H),6.77(d,J＝1.3Hz,1H),5.75(br s,1H),5.61(d,J＝8.3Hz,1H),4.29(q,J＝7.0Hz,2H),3.41(s,3H),1.37-1.31(m,3H)。
将77B(15g，51.9mmol)和K2CO3(21.5g，156mmol)在EtOH(300mL)中的混合物在80℃下搅拌0.5小时，然后加入TosMIC(15.2g，77.82mmol)，将所得混合物在80℃下搅拌另外2小时。LCMS显示所需的MS，去除大部分乙醇并形成沉淀，将固体过滤并用水(100mL×2)洗涤，将固体干燥并浓缩，得到77C(6.4g，收率：41.7％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.38(d,J＝5.2Hz,1H),7.97(s,1H),7.85(s,1H),7.61(s,1H),7.56(dd,J＝5.26 1.3Hz,1H),4.27(q,J＝7.02Hz,2H),1.29(t,J＝7.02Hz,3H)。
将化合物77C(3g，10.13mmol)、Pin2B2(2.57g，10.13mmol)、KOAc(2.98g，30.4mmol)和Pd(dppf)Cl2(741mg，1.01mmol)的二噁烷(100mL)溶液脱气，然后在N2下在70℃下加热4小时。LCMS显示所需的MS、TLC(乙酸乙酯：甲醇＝10：1，Rf～0)，将混合物过滤，浓缩滤液，通过硅胶色谱(DCM：甲醇＝5：1)纯化残余物，得到77D(1.70g，粗品)，为黑色固体。
将化合物77D(300mg，1.15mmol)、2-碘代噁唑(157mg，805.00μmol)、Pd(dppf)Cl2(84.1mg，115.00μmol)和Na2CO3(244mg，2.30mmol)的甲苯(2mL)、EtOH(2mL)、H2O(1mL)溶液脱气，然后在微波条件下加热至120℃保持1小时。LCMS显示所需的MS，向混合物中加入水(5mL)并用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，将有机相干燥并浓缩，通过制备型TLC(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)纯化残余物，得到77E(80mg，收率：24.5％)，为黄色固体。
将77E(80mg，281.42μmol)和LiOH.H2O(17.7mg，422.13μmol)在THF(5mL)、H2O(1mL)中的混合物在25℃下搅拌12小时。LCMS显示所需的MS，真空除去THF，水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，用1N HCl将水层调节至pH约6并冻干，通过制备型HPLC(TFA)纯化残余物，得到77F(35mg，收率：48.5％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.70(d,J＝5.3Hz,1H),8.25(s,1H),8.16(s,1H),8.11(s,1H),8.08(d,J＝5.1Hz,1H),7.81(s,1H),7.46(s,1H)。
如实施例41，由相应的中间体羧酸——化合物77F制备化合物77(38.4mg，收率：64.3％，白色固体)。化合物77：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.93(d,J＝7.5Hz,1H),8.74(d,J＝5.1Hz,1H),8.60(d,J＝5.7Hz,1H),8.39(d,J＝0.7Hz,1H),8.22(d,J＝0.7Hz,1H),7.94(dd,J＝1.4,5.2Hz,1H),7.82(s,1H),7.65(d,J＝0.7Hz,1H),7.54(d,J＝0.7Hz,1H),7.28(d,J＝4.4Hz,4H),7.20(qd,J＝4.2,8.5Hz,1H),5.30-5.22(m,1H),3.16(dd,J＝3.9,13.8Hz,1H),2.85(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H),2.77-2.68(m,1H),0.67-0.59(m,2H),0.58-0.50(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+471.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4-(噁唑-2-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(88)
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物77F制备化合物88(18.5mg，收率：46.5％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.93(d,J＝7.5Hz,1H),8.58(d,J＝5.3Hz,1H),8.37(s,1H),8.21(s,1H),8.01(br s,1H),7.91(d,J＝5.1Hz,1H),7.79(s,2H),7.62(s,1H),7.52(s,1H),7.25(d,J＝4.2Hz,4H),7.18(br dd,J＝4.5,8.7Hz,1H),5.25-5.17(m,1H),3.14(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.83(dd,J＝10.5,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+431.1。
实施例44
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(喹啉-5-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(78)
在0℃下，向由浓HCl(4.00mL)中的化合物78A(1.0g，6.94mmol)组成的混合物中滴加NaNO2(526.8mg，7.63mmol)，将所得混合物在0℃下搅拌0.5小时。将反应混合物在0.5小时内温热至25℃，然后冷却至0℃。将SnCl2·2H2O(3.13g，13.88mmol，在1.2mL浓HCl中)滴加到反应混合物中，并在0℃下搅拌0.5小时。将所得混合物在4小时内在剧烈搅拌下温热至室温，然后减压浓缩除去溶剂。将残余物过滤，滤饼用乙醇(30mL×3)洗涤，然后减压干燥，得到化合物78B(700.0mg，51.55％收率)，为黄色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ9.95(br s,1H),9.25-9.13(m,2H),8.04-7.95(m,2H),7.88(d,J＝8.8Hz,1H),7.26(d,J＝7.6Hz,1H),7.28-7.23(m,1H)。
将化合物78B(500mg，3.14mmol)和化合物2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(588mg，3.14mmol)在AcOH(1mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在N2气氛下将混合物在110℃下搅拌2小时。将所得混合物减压浓缩，以去除AcOH。将残余物用CH2Cl2(100mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液调节至pH约7-8，然后用CH2Cl2(40mL×2)萃取。将有机相用无水Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩，得到残余物，将其通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1：0至1：0)纯化，得到化合物78C(200mg，22.6％收率)，为黄色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.93(d,J＝4.0Hz,1H),8.23(d,J＝8.4Hz,1H),7.78(t,J＝8.0Hz,1H),7.64(d,J＝8.4Hz,1H),7.56(d,J＝7.2Hz,1H),7.38(d,J＝8.8Hz,1H),6.93(s,1H),4.05(q,J＝7.2Hz,2H),2.41(s,3H),1.00(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+282.0。
如实施例85，由化合物78C制备中间体化合物78D(135mg，74.98％收率，白色固体)。化合物78D：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.97(d,J＝4.0Hz,1H),8.17(d,J＝8.4Hz,1H),7.89-7.82(m,1H),7.67-7.52(m,3H),6.97(s,1H),2.32(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+253.9。
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物78制备化合物78(8.8mg，16.77％收率，黄色固体)。化合物78：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.95(d,J＝4.0Hz,1H),8.22(d,J＝8.4Hz,1H),7.76-7.66(m,2H),7.49(d,J＝6.4Hz,1H),7.38(d,J＝8.4Hz,1H),7.24-7.16(m,3H),6.87(d,J＝7.6Hz,2H),6.79(br s,1H),6.64(s,1H),6.33(d,J＝7.2Hz,1H),5.49-5.42(m,1H),3.27-3.19(m,1H),3.08-2.98(m,1H),2.78–2.69(m,1H),0.90-0.83(m,2H),0.61-0.50(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+468.1。
实施例45
化合物79、146、160、264
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-5-苯基-1H-咪唑-4-甲酰胺(79)
将化合物79A(500mg，3.96mmol)的HCl/MeOH(4M，50mL)溶液在80℃下搅拌12小时。真空去除溶剂。用饱和NaHCO3水溶液将残余物调节至pH约8。用EtOAc(100mL×3)萃取溶液。收集有机物，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。化合物79B(360mg，收率：64.87％，淡黄色固体)：1HNMR(CDCl3,400MHz)δ7.90-7.88(m,1H),7.34-7.31(m,1H),7.15-7.09(m,2H),5.72-5.63(m,1H),4.87-4.76(m,2H),2.90-2.86(m,2H),1.92-1.87(m,2H),1.50-1.47(m,2H),1.26-1.14(m,8H)。
在0℃下，向化合物79B(360mg，2.57mmol)的DMF(5mL)溶液中加入NBS(550mg，3.08mmol)。然后将混合物温热至25℃并搅拌12小时。将反应用H2O(10mL)洗涤，用DCM(20mL)萃取。收集有机物，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到中间体化合物79C(550mg，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)m/z(M+2)+220.7。
在0℃下，向NaH(151mg，3.76mmol，60％纯度)的THF(8mL)溶液中滴加化合物79C(550mg，2.51mmol)的THF(2mL)溶液。加入后，将混合物温热至25℃并搅拌1小时。然后加入SEM-Cl(0.5mL，2.76mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应用H2O(10mL)淬灭，用EtOAc(20mL×2)萃取。收集有机物并浓缩。通过柱子(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)纯化残余物，得到化合物79D(180mg，收率：20.51％)，为无色油状物。MS(ESI)m/z(M+2)+350.9。
向化合物79D(180mg，0.52mmol)和苯基硼酸(76mg，0.62mmol)在二噁烷(12mL)和H2O(4mL)的溶液中加入Pd(dtbpf)Cl2(34mg，0.052mmol)和K3PO4(330mg，1.55mmol)。将混合物在80℃和N2下搅拌2小时。将反应用H2O(10mL)洗涤，用EtOAc(15mL×2)萃取。收集有机物并浓缩。通过柱子(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)纯化残余物，得到化合物79E(150mg，收率：84.0％)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+347.0。
向化合物79E(180mg，0.52mmol)在THF(5mL)、MeOH(5mL)和H2O(5mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(110mg，2.60mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应物用1N HCl酸化至pH约3。用EtOAc(10mL×2)萃取混合物。收集有机物，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到化合物79F(130mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+333.0。如实施例5，由相应的羧酸——化合物79F制备中间体化合物79H(65mg，粗品，黄色油状物)。化合物79H：MS(ESI)m/z(M+H)+507.2。
向化合物79H(65mg，0.13mmol)的EtOAc(5mL)溶液中滴加HCl/EtOAc(4M，10mL)。添加后，将混合物在25℃下搅拌12小时。真空去除溶剂。通过制备型HPLC(HCl)纯化残余物，得到化合物79(10.00mg，收率18.7％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,D2O)δ7.45-7.28(m,3H),7.23-6.97(m,7H),4.46-4.38(m,1H),3.02-2.93(m,1H),2.48-2.41(m,3H),2.39-2.29(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(3-((苄基氨基)甲基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(146)
在0℃和N2下，向化合物140C(250mg，0.72mmol)和苄基溴(310mg，1.8mmol)在DMF(10mL)中的混合物中分批加入NaH(87mg，2.2mmol，60％纯度)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物用NH4Cl(10mL)淬灭，用H2O(30mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。合并有机相，用盐水(30mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物。通过快速柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至5/1)纯化残余物，得到化合物146A(182mg，收率：57.7％)，为无色透明液体。
在25℃下，向化合物146A(180mg，0.41mmol)在MeOH(10mL)和H2O(2mL)中的混合物中一次性(in one portion)加入LiOH.H2O(52mg，1.24mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。然后将残余物用水(15mL)稀释并用MTBE(20mL)萃取，将水相用HCl水溶液(1M)酸化至pH约5～6并用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到化合物146B(158mg，收率：90.8％)，为无色液体，将其不经纯化直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ7.44-7.39(m,1H),7.37-7.30(m,3H),7.26(q,J＝6.9Hz,5H),6.81(s,1H),4.48-4.26(m,4H),2.25(s,3H),1.39(s,9H)。
如实施例45，由中间体化合物146B制备化合物146。化合物146(40.0mg，收率74.6％，白色固体)：1H NMR(D2O,400MHz)：δ7.51-7.42(m,6H),7.41-7.36(m,1H),7.36-7.27(m,5H),7.25(s,1H),6.78(d,J＝8.6Hz,1H),6.60(s,1H),4.52-4.43(m,1H),4.30-4.18(m,4H),3.24-3.15(m,1H),2.82-2.71(m,1H),2.29(s,3H)。MS(ESI)m/z(M-HCl+H)+496.2。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4-((苄基氨基)甲基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺盐酸盐(160)
在0℃下，向化合物153E(350mg，1.01mmol)和苄基溴(432mg，2.53mmol，0.3mL)的DMF(10mL)溶液中加入NaH(121mg，3.03mmol，60％纯度)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物用NH4Cl(5mL)淬灭，用H2O(20mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用NaCl(30mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至5/1)纯化残余物，得到化合物160A(400mg，收率：41.47％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.02(dd,J＝1.1Hz,1H),7.37-7.25(m,9H),6.88-6.75(m,1H),4.49-4.28(m,4H),2.98-2.88(m,4H),2.46-2.30(m,3H),1.57-1.41(m,8H)。MS(ESI)m/z(M-56)+380.0。
在25℃下，向化合物160A(400mg，918.46μmol)在THF(10mL)和H2O(10mL)中的混合物中分批(in portion)加入LiOH.H2O(116mg，2.76mmol)，并搅拌2.5小时。将混合物用H2O(10mL)稀释并浓缩以除去THF，然后用MTBE(30mL×2)萃取水。用1N HCl将水层酸化至pH约2，然后用乙酸乙酯(30mL×3)萃取溶液。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到中间体化合物160B(350mg，收率：86.82％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.40-7.20(m,9H),6.85(s,1H),4.43(s,2H),4.33(dd,J＝13.9Hz,2H),2.34(s,3H),1.47(s,8H)。MS(ESI)m/z(M-56)+366.1。
如实施例79，由相应的羧酸——化合物160B，然后通过中间体化合物160D制备化合物160。化合物160(30mg，收率：53.02％，淡黄色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.62-9.57(m,1H),9.15(d,J＝7.9Hz,1H),8.12(s,1H),7.88(s,1H),7.58-7.49(m,4H),7.44(dd,J＝6.8Hz,3H),7.36-7.27(m,5H),7.22(d,J＝8.4Hz,2H),6.61(s,1H),5.35-5.28(m,1H),4.18(s,4H),3.25-3.18(m,1H),2.83(dd,J＝10.6,13.9Hz,1H),2.26(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+496.2。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-5-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺(264)
向低于10℃的NaH(1.31g，32.8mmol，60％)的DMF(50mL)溶液中加入2-氯-1H-苯并[d]咪唑(5g，32.8mmol)。添加后，将反应混合物在20℃下搅拌2小时。然后向反应混合物中加入SEM-Cl(5.46g，32.8mmol)。将反应混合物在20℃下搅拌16小时。加入水(150mL)和EtOAc(150mL)。分离有机层并用盐水(100mL)洗涤，浓缩，得到残余物。通过硅胶柱(石油醚：乙酸乙酯＝20：1～4：1)纯化粗产物，得到化合物264A(3.50g，收率：37.8％)，为油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.78-7.71(m,1H),7.54-7.48(m,1H),7.41-7.32(m,2H),5.62(s,2H),3.66-3.59(m,2H),0.99-0.93(m,2H),0.07(d,J＝2.0Hz,2H),0.00(s,9H)。
如实施例79，由相应的中间体化合物264B，然后通过中间体化合物264D制备化合物264。化合物264(31.8mg，收率：28.0％，类白色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ13.04(brs,1H),8.39(d,J＝7.6Hz,1H),8.13(br s,1H),7.88(br s,1H),7.67(br d,J＝7.2Hz,1H),7.53(br d,J＝7.5Hz,1H),7.34-7.19(m,7H),6.79(s,1H),5.51(dt,J＝4.0,8.2Hz,1H),3.27(br d,J＝4.0Hz,1H),3.02(dd,J＝9.3,13.9Hz,1H),2.73(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+417.2。
实施例46
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-1-(4-苯基噻唑-2-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(80)
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-1-(4-苯基噻唑-2-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(125)
中间体化合物80B(182.00mg，99.95％收率，白色固体)：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.02(s,1H),7.96(br d,J＝7.5Hz,2H),7.47(br t,J＝7.5Hz,2H),7.41-7.32(m,1H),6.80(s,1H),2.78(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体化合物80B和12G制备化合物80(44mg，64.6％收率，白色固体)。化合物80：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.53(br d,J＝7.3Hz,1H),8.12(br s,1H),8.04-7.94(m,3H),7.86(br s,1H),7.52-7.44(m,2H),7.39(br d,J＝6.4Hz,1H),7.32-7.17(m,5H),6.76(s,1H),5.43(br s,1H),3.24(br d,J＝12.1Hz,1H),3.12-3.03(m,1H),2.78(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+460.1。
如实施例20，由相应的中间体羧酸化合物80B和41B制备化合物125(118mg，收率77.6％，白色固体)。化合物125：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.84(br s,1H),8.60-8.53(m,1H),8.06-7.94(m,3H),7.52-7.44(m,2H),7.42-7.35(m,1H),7.29(br s,4H),7.21(br s,1H),6.76(s,1H),5.44(br s,1H),3.27-3.19(m,1H),3.11-3.02(m,1H),2.78(br s,4H),0.72-0.57(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+500.1。
实施例47
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(2'-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(81)
将化合物81A(25g，111.86mmol)和化合物2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(22g，117.45mmol)在AcOH(150mL)中的混合物在110℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，以去除大量的AcOH。用饱和NaHCO3水溶液将残余物酸化至pH约7-8。通过过滤收集沉淀物，将滤饼用石油醚(20mL)研磨，过滤并真空干燥，得到化合物81B(26.41g，收率：74.0％)，为灰色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.71-7.68(m,1H),7.65(td,J＝1.5,7.7Hz,1H),7.50-7.38(m,2H),6.95-6.84(m,1H),4.18(q,J＝7.0Hz,2H),2.27(s,3H),1.17(t,J＝7.0Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+310.8。
在25℃下，向化合物81B(5g，16.17mmol)在MeOH(20.00mL)中的混合物中一次性加入NaOH(2M，40mL)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。向残余物中加入H2O(10mL)和乙酸乙酯(20mL)，然后将混合物用1M HCl酸化至水相pH约5-6。将分离的水层用乙酸乙酯(30×3mL)萃取，将合并的有机层用盐水(60mL)洗涤，用Na2SO4干燥，减压过滤，得到粗产物。将粗产物用异丙醚(15mL)处理，将沉淀物过滤并真空干燥，得到化合物81C(4.21g，收率：80.67％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.65-7.58(m,2H),7.45-7.36(m,2H),6.83(s,1H),2.23(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+282.8。
向化合物81C(1g，3.56mmol)的DMF(50mL)溶液中加入HOBt(144mg，1.07mmol)、化合物12G(903mg，3.92mmol，HCl)和DIEA(1.38g，10.68mmol)。搅拌5分钟后，在0℃下加入EDCI(682mg，3.56mmol)。然后将反应混合物在25℃下搅拌9小时。将反应混合物减压浓缩以去除DMF，向残余物中加入乙酸乙酯(100mL)，并分别用H2O(80mL)、饱和NaHCO3水溶液(80mL×2)、盐水(80mL×3)洗涤。将有机相用Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物用异丙基醚处理。收集固体并真空干燥，得到化合物81D(1.3g，收率79.85％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.55-8.18(m,1H),7.54-7.45(m,2H),7.34(br d,J＝18.5Hz,1H),7.30-7.14(m,7H),7.00-6.89(m,1H),6.58(d,J＝1.5Hz,1H),5.98-5.73(m,1H),4.44-4.33(m,1H),4.00-3.89(m,1H),2.93-2.87(m,0.5H),2.84-2.73(m,1H),2.71(br s,0.6H),2.22(s,3H)。
在25℃和N2下，向化合物81D(150mg，328.00μmol)和化合物邻甲苯基硼酸(89.2mg，656.00μmol)在THF(50mL)和H2O(10mL)中的混合物中一次性加入Na2CO3(70mg，656.00μmol)和Pd(PPh3)4(38mg，32.80μmol)。将混合物在80℃下搅拌12小时。然后向反应混合物中加入H2O(100mL)并用乙酸乙酯(100mL×3)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液(150mL×3)、盐水(150mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到化合物81E(110mg，收率：71.58％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.50-8.11(m,1H),7.38-7.32(m,2H),7.31-7.22(m,6H),7.18(br s,5H),7.10(br d,J＝6.4Hz,1H),7.00(br.dd,J＝8.0,16.4Hz,1H),6.57(s,1H),5.96-5.69(m,1H),4.51-4.30(m,1H),4.03-3.85(m,1H),2.92-2.63(m,2H),2.27-2.12(m,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+469.2。
在0℃下，向化合物81E(70mg，149.4μmol)在DCM(10mL)和DMSO(0.5mL)中的混合物中一次性加入DMP(190mg，448.2μmol)。将混合物在0℃下搅拌5分钟，然后加热至25℃并搅拌1.5小时。通过20mL的10％Na2S2O3水溶液和20mL的饱和NaHCO3水溶液淬灭反应，然后用DCM(30mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水(40mL×3)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用异丙基醚/CH3CN(v/v＝10/1，10mL)处理。收集固体并真空干燥，得到化合物81(48.3mg，收率：66.3％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ9.11(br d,J＝8.0Hz,1H),8.18-7.79(m,2H),7.49-7.37(m,1H),7.29-7.26(m,8H),7.21-7.12(m,4H),6.60(s,1H),5.32(br.s.,1H),3.21-3.18(m,1H),2.86-2.76(m,1H),2.25(br.s.,3H),2.18(br.s.,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+467.1。
实施例48
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(4-苯基噻唑-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(82)
向化合物82A(2.0g，10.46mmol)的CH3COOH(30.0mL)溶液中滴加化合物2,4-二氧代戊酸乙酯(1.65g，10.46mmol，1.48mL)，然后将混合物加热至120℃并搅拌2小时并在减压下除去溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯(20mL)中并用NaHCO3处理直至pH约8，然后收集有机层并减压蒸发。通过快速柱色谱(石油醚：乙酸乙酯：0至10/1)纯化残余物。
得到化合物82B(660.0mg，2.11mmol，20.14％收率)，为白色固体。化合物82B(低极性)：1H NMR(CDCl3,400MHz,)δ7.88-7.83(m,2H),7.43-7.38(m,3H),7.36-7.31(m,1H),6.71(s,1H),4.33(q,J＝7.2Hz,2H),2.37(s,3H),1.24(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物82B(650.0mg，2.07mmol)的MeOH(10.00mL)溶液中滴加NaOH(2M，6.00mL)，并将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应物用H2O(10mL)稀释，并用MBTE(10mL×2)萃取。用HCl(1M)处理水相直至pH约4，然后将沉淀物过滤并减压干燥。得到化合物82D(540.0mg，91.3％收率)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.04(s,1H),7.88(d,J＝7.1Hz,2H),7.47-7.41(m,2H),7.38-7.33(m,1H),6.83(s,1H),2.27(s,3H)
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物82D制备化合物82(20.0mg，42.74％收率，白色固体)。化合物82：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ9.49(d,J＝7.6Hz,1H),8.12(s,1H),7.94(s,1H),7.88(br s,1H),7.78(br d,J＝7.2Hz,2H),7.42-7.37(m,2H),7.35-7.29(m,1H),7.22-7.12(m,5H),6.55(s,1H),5.55-5.47(m,1H),3.16(m,1H),2.80(m,1H),2.27(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+403.1。
实施例49
化合物83、126、130
(S)-1-([1,1'-联苯基]-4-基)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(83)
向化合物83A(20.0g，89.49mmol，HCl)的CH3COOH(150.0mL)溶液中加入化合物2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(14.0g，89.49mmol)，然后将混合物加热至120℃并搅拌2小时并在减压下除去溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯(150mL)中，用NaHCO3处理直至pH约7并过滤。用石油醚处理固体。得到化合物83B(22.0g，71.16mmol，79.52％收率)，为黄色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.56(d,J＝8.4Hz,2H),7.31-7.24(m,2H),6.81(s,1H),4.23(q,J＝7.2Hz,2H),2.34(s,3H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物83B(5.0g，16.17mmol)的MeOH(40.0mL)溶液中滴加NaOH(2M，45.0mL)，将混合物在25℃下搅拌3小时，减压除去溶剂，然后将混合物用H2O(30mL)稀释，用MTBE(60mL×2)萃取。用HCl(1M)处理水相直至pH约4，然后将沉淀物过滤并减压干燥。用乙酸乙酯(50mL×2)萃取水相，减压蒸发有机层(用乙酸乙酯萃取)。收集的固体为化合物83C(3.75g，82.5％收率)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.62(d,J＝8.8Hz,2H),7.36(d,J＝8.8Hz,2H),6.81(s,1H),2.23(s,3H)。
如实施例47，由相应的中间体化合物83C、12G和苯基硼酸制备化合物83(25.0mg，61.24％收率，白色固体)。化合物83：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ9.49(d,J＝7.3Hz,1H),8.12(s,1H),7.94(s,1H),7.88(br s,1H),7.78(br d,J＝7.3Hz,2H),7.48-7.27(m,4H),7.26-6.96(m,7H),6.55(s,1H),5.55-5.47(m,1H),3.16(br dd,J＝4.2,14.1Hz,1H),2.80(brdd,J＝9.7,13.9Hz,1H),2.27(s,3H),2.06(s,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+453.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4'-氟-[1,1'-联苯基]-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(126)
如实施例63，由相应的起始物料——83D和(4-氟苯基)硼酸制备化合物126(32mg，收率25.5％，淡黄色固体)。化合物126：1H NMR(CD3CN,400MHz)δ7.73-7.67(m,2H),7.63-7.59(m,2H),7.37-7.22(m,10H),7.02(br s,1H),6.54(s,1H),6.27(br s,1H),5.42(ddd,J＝4.5,7.8,9.5Hz,1H),3.32(dd,J＝4.5,13.8Hz,1H),2.93(dd,J＝9.6,14.0Hz,1H),2.31(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+471.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4'-氟-[1,1'-联苯基]-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(130)
如实施例105，由相应的起始物料——化合物83D和对甲苯基硼酸制备化合物130(30mg，收率34.7％，黄色固体)。化合物130：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ9.14(br d,J＝7.7Hz,1H),8.11(br s,1H),7.87(br s,1H),7.60-7.55(m,3H),7.33-7.22(m,10H),6.56-6.50(m,1H),5.24(br s,1H),3.20(br d,J＝13.5Hz,1H),2.87-2.78(m,1H),2.33(s,3H),2.24(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+467.1。
实施例50
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(84)
将化合物84A(5g，39.19mmol)和NH2NH2.H2O(20g，391.94mmol)的混合物在回流(119℃)下加热36小时。将反应混合物减压浓缩，除去未反应的水合肼。将残余物用H2O(30mL)稀释，并用DCM(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过在-10℃下从石油醚(15mL)中重结晶来纯化残余物，得到化合物84B(2.40g，收率：49.35％)，为黑褐色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.39-7.29(m,1H),7.25(s,1H),6.51(d,J＝8.4Hz,1H),6.39(d,J＝7.3Hz,1H),4.06(s,2H),2.26(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+127.8。
向化合物84B(970mg，7.88mmol)的AcOH(20mL)溶液中加入化合物2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(1.36g，7.88mmol)。将混合物在120℃下搅拌20小时。将所得混合物减压浓缩，以去除溶剂。将残余物用H2O(30mL)稀释，并用乙酸乙酯(10mL×3)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液(15mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱，然后通过制备型HPLC(HCl条件)纯化残余物，得到化合物84C(160mg，收率：8.22％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.88(t,J＝7.8Hz,1H),7.50(d,J＝8.0Hz,1H),7.28(d,J＝7.5Hz,1H),6.76(s,1H),4.20(d,J＝7.3Hz,2H),2.43(s,3H),2.28(s,3H),1.14(t,J＝7.0Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+246.0。
在0℃下，向化合物84C(100mg，432.43μmol)的THF(5mL)溶液中加入LiOH.H2O(91mg，2.16mmol)的H2O(5mL)溶液。添加后，将反应混合物在25℃下搅拌14小时。将反应混合物用H2O(10mL)稀释，并用MTBE(30mL)萃取。将水相用1N HCl中和至pH约4，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物84D(50mg，收率：53.2％)，为红色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.06(d,J＝8.4Hz,1H),7.89(t,J＝8.0Hz,1H),7.20-7.14(m,2H),2.64(s,3H),2.36(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+217.9。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物84D制备化合物84(70mg，收率：54.12％，白色固体)。化合物84：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.09(d,J＝7.3Hz,1H),8.04(s,1H),7.81(s,1H),7.76(t,J＝7.7Hz,1H),7.32(d,J＝7.9Hz,1H),7.29-7.17(m,5H),7.15(d,J＝7.5Hz,1H),6.44(s,1H),5.37-5.25(m,1H),3.13(dd,J＝4.0,13.9Hz,1H),2.82(dd,J＝9.7,13.9Hz,1H),2.24(s,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+392.1。
实施例51
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(85)
向化合物63B(200mg，916.55μmol)在MeOH(10mL)和H2O(5mL)中的混合物中一次性加入LiOH·H2O(153.8mg，3.67mmol)，并将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。将残余物用H2O(10mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，然后用EtOAc(40mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物85B(160mg，85.49％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.60(br s,1H),8.67(br s,1H),8.32(br s,1H),7.25(br s,1H),2.41(br s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+205.0。
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物85B制备化合物85(30.7mg，59.7％收率，白色固体)。化合物85：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.95(d,J＝4.0Hz,1H),8.22(d,J＝8.4Hz,1H),7.76-7.66(m,2H),7.49(d,J＝6.4Hz,1H),7.38(d,J＝8.4Hz,1H),7.24-7.16(m,3H),6.87(d,J＝7.6Hz,2H),6.79(br s,1H),6.64(s,1H),6.33(d,J＝7.2Hz,1H),5.49-5.42(m,1H),3.27-3.19(m,1H),3.08-2.98(m,1H),2.78-2.69(m,1H),0.90-0.83(m,2H),0.61-0.50(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+419.1。
实施例52
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(1H-吲唑-1-基)噻唑-5-甲酰胺(86)
将由甲苯(15mL)中的化合物86A(250mg，1.06mmol)、1H-吲唑(125.2mg，1.06mmol)和Cs2CO3(1.04g，3.18mmol)组成的混合物在110℃下搅拌32小时。将反应混合物冷却至室温，过滤，并减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC(HCl条件)纯化，得到化合物86B(20mg，6.90％收率)，为白色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.87(s,1H),8.19(d,J＝0.8Hz,1H),7.75-7.70(m,1H),7.54(d,J＝8.4Hz,1H),7.41-7.35(m,1H),7.22-7.17(m,2H),4.17(q,J＝7.2Hz,2H),1.07(t,J＝7.2Hz,3H)。
向86B(40mg，146.35μmol)在MeOH(5mL)和H2O(1mL)中的混合物中一次性加入LiOH·H2O(24.6mg，585.40μmol)，并将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩以除去MeOH，并将残余物用H2O(10mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，然后用EtOAc(40mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水30mL洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物86C(30mg，83.58％收率)，为白色固体。MS(ESI)m/z(M+1)+245.8。
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物86C制备化合物86(5.4mg，10.0％收率，白色固体)。化合物86：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.97(d,J＝5.2Hz,1H),8.78(s,1H),8.23(d,J＝6.4Hz,1H),7.82(s,1H),7.71(d,J＝3.2Hz,1H),7.54-7.44(m,1H),7.32-7.23(m,1H),7.11-6.96(m,5H),6.85(br s,1H),5.79-5.66(m,1H),3.40-3.29(m,1H),3.21-3.09(m,1H),2.78-2.69(m,1H),0.80(d,J＝6.2Hz,2H),0.55(br s,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+460.1。
实施例53
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(5-(噁唑-2-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(89)
在25℃下，向化合物89A(40g，231mmol)的MeOH(500mL)溶液中加入2-氧代乙酸乙酯(188g，924mmol)。将反应混合物在70℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝50：1至30：1)纯化残余物。得到化合物89B(70g，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+258.8。
在25℃下，向化合物89B(35g，136mmol)的EtOH(300mL)溶液中加入TosMIC(66.4g，340mmol)和K2CO3(28.2g，204mmol)。将反应混合物在70℃下搅拌1小时。过滤反应混合物，浓缩滤液，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝20：1至3：1)纯化残余物。得到化合物89C(17g)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.62(d,J＝2.4Hz,1H),8.00-7.96(m,2H),7.86(d,J＝0.9Hz,1H),7.36-7.32(m,1H),4.27(q,J＝7.1Hz,2H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+297.0。
在25℃下，向化合物89C(5g，16.8mmol)的二噁烷(100mL)溶液中加入双(频哪醇合)二硼(8.58g，33.7mmol)、KOAc(16.5g，168mmol)。将混合物脱气并用N2吹扫3次，然后加入Pd(dppf)Cl2(617mg，844μmol)。将反应混合物脱气并用N2吹扫3次，并在75℃下搅拌4小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝20：1至二氯甲烷：甲醇＝5：1)纯化残余物。得到化合物89D(2.7g，收率：61.2％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.63(br s,1H),8.06(s,2H),7.76(s,1H),7.36(br d,J＝7.1Hz,1H),4.14(q,J＝7.1Hz,2H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+261.9。
在25℃下，向化合物89D(500mg，1.92mmol)的二噁烷(4mL)溶液中加入2-碘代噁唑(561.48mg，2.88mmol)K2CO3(796.09mg，5.76mmol)H2O(1mL)。将反应混合物脱气并用N2吹扫。然后加入Pd(dppf)Cl2(140mg，192μmol)。将混合物脱气并用N2吹扫并在微波条件下在150℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝10：1～1.5：1)纯化残余物。得到化合物89E(300mg，粗品)，为灰色固体。MS(ESI)m/z(M+H)+285.0。
向化合物89E(200mg，703μmol)的THF(2mL)H2O(500μL)溶液中加入LiOH.H2O(59mg，1.41mmol)，并在25℃下搅拌12小时。将反应混合物用HCl(1N)酸化至pH约5，过滤沉淀，得到粗产物。得到化合物89F(60mg，粗品)，为灰色固体。MS(ESI)m/z(M+H)+257.0。
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物89F制备化合物89(35mg，收率：65.4％，白色固体)。化合物89：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.04-8.93(m,2H),8.77(br d,J＝5.1Hz,1H),8.38-8.28(m,2H),8.20(s,1H),7.56(s,1H),7.46(s,1H),7.34(d,J＝8.6Hz,1H),7.29-7.22(m,4H),5.32-5.14(m,1H),3.28(br s,1H),3.20-3.10(m,1H),2.81(br dd,J＝10.1,13.7Hz,1H),2.77-2.69(m,1H),0.73-0.42(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+471.1。
实施例54
(S)-N-(1-(4-(烯丙氧基)苯基)-3-氧代丙烷-2-基)-3-甲基-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(93)
将化合物93A(1g，1.0当量)、N,O-二甲基羟胺(607mg，2当量)和HBTU(1.36g，1.15当量)合并在10mL DMF中，将混合物在室温下搅拌5分钟，然后加入TEA(1.3mL，3.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌1小时。将混合物用100mL乙酸乙酯和20mL己烷稀释，用0.25NHCl、水、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，真空浓缩，得到中间体化合物93B(1g，收率88％)，为白色固体。
向化合物93B(1g，1.0当量)在6mL无水DCM中的溶液中加入3mL 4MHCl的二噁烷溶液。将所得混合物在室温下搅拌2小时。真空除去DCM和二噁烷，残余物用EtOAc稀释，用饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，真空浓缩，得到中间体化合物93C(650mg，收率90％)，为白色固体。
将化合物93C(125mg，1.0当量)、化合物12F(115mg，1.2当量)和HBTU(226mg，1.25当量)合并在5mL DMF中，将混合物在室温下搅拌5分钟，然后加入DIEA(0.23mL，3.0当量)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将混合物用50mL乙酸乙酯和20mL己烷稀释，用水、饱和NaHCO3水溶液和盐水洗涤，真空浓缩，得到中间体化合物93D(180mg，收率85％)。
将化合物6(90mg，1.0当量)溶于8mL无水THF中，在N2下冷却至-50℃。在-50℃下滴加1N LAH的THF(0.22mL，1.1当量)溶液。将所得混合物在-30至-10℃下搅拌2小时。在-20℃下用饱和NaHCO3水溶液淬灭反应，然后用3×15mL乙酸盐萃取。将合并的有机相用Na2SO4干燥。将粗混合物在硅胶柱上纯化，得到化合物93(40mg，51％)。
实施例55
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噻唑-4-甲酰胺(96)
向苯甲醛(10.00g，94.23mmol)和丙二腈(6.54g，98.94mmol)的EtOH(75.00mL)溶液中加入催化哌啶(80.24mg，942.30μmol)。然后将反应在90℃下搅拌2小时。当反应混合物冷却至室温时沉淀出黄色固体，将混合物过滤，用EtOH(20mL)洗涤所需的黄色固体并真空干燥，得到中间体化合物96A(23.00g，79.2％收率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.91(d,J＝7.7Hz,2H),7.79(s,1H),7.67-7.60(m,1H),7.58-7.50(m,2H)。
向化合物96A(17.50g，113.51mmol)和氯硫烷基硫代次氯酸盐(chlorosulfanylthiohypochlorite)(70.00g，518.36mmol，41.42mL)的混合物中加入吡啶(900.00mg，11.38mmol)。然后将反应在140℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至室温并用冰/H2O(200mL)和EtOAc(500mL)淬灭，沉淀出黄色固体，过滤并用EtOAc(100mL×2)萃取滤液，合并的有机物用盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，将滤液真空浓缩。通过快速硅胶色谱(120g Silica Flash Column，洗脱液为0～10％乙酸乙酯/石油醚梯度@50mL/min)纯化残余物，得到化合物96B(21.00g，70.4％收率)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.77(br d,J＝7.1Hz,2H),7.65-7.53(m,3H)。
在N2下，向化合物96B(2.00g，9.06mmol)在二噁烷(150.00mL)中的混合物中加入AlMe3(2M，20.00mL)和Pd(PPh3)4(1.05g，906.00μmol)，然后将反应在110℃下搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温并用冰/H2O(100mL)和EtOAc(150mL)淬灭，沉淀出黄色固体，过滤并用EtOAc(60mL×2)萃取滤液，合并的有机物用盐水(70mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，将滤液真空浓缩。通过快速硅胶色谱(40g Silica Flash Column，洗脱液为0～10％乙酸乙酯/石油醚梯度@40mL/min)纯化残余物，得到化合物96C(700.00mg，16.59％收率，43％纯度)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.79-7.75(m,2H),7.56-7.51(m,3H),2.67(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+200.9。
向化合物96C(490.00mg，2.45mmol)中加入H2SO4(9.20g，93.81mmol，5.00mL)，并将反应在135℃下搅拌1.5小时。然后将反应冷却至0℃并向上述混合物中加入NaNO2(339.79mg，4.92mmol)的H2O(2.00mL)溶液，并将反应混合物在70℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至室温并倒入冰/H2O(40mL)和EtOAc(40mL)中，用EtOAc(50mL×2)萃取，将合并的有机物用0.1N NaOH(40mL×2)萃取，然后向所需的碱性水相中加入1N HCl至pH<4，然后用EtOAc(40mL×3)萃取并用盐水(40mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并将滤液真空浓缩，得到化合物96D(410.00mg，76.25％收率)，为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.49(s,5H),2.57(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+219.9。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物96D制备化合物96(35mg，收率：65.86％，白色固体)。化合物96：1H NMR(400MHz,CD3CN)δ7.48-7.33(m,5H),7.29-7.17(m,3H),7.15-7.06(m,3H),7.01(br s,1H),6.26(br s,1H),5.56(ddd,J＝4.4,7.5,9.5Hz,1H),3.23(dd,J＝4.3,14.2Hz,1H),2.77(dd,J＝9.5,14.3Hz,1H),2.28(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+394.1。
实施例56
(S)-N-(4-氨基-1-(3,5-二甲基苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(97)
在0℃下，将化合物97A(1.0g，3.41mmol)、化合物N,O-二甲基羟胺(400mg，4.09mmol，HCl)、HOBt(460mg，3.41mmol)和NMM(1.03g，10.23mmol，1.12mL)在CHCl3(20mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后分批加入EDCI(980mg，5.12mmol)。在N2气氛下将混合物在25℃下搅拌20小时。通过加入H2O(20mL)淬灭反应混合物，然后用DCM(10mL)稀释。将合并的有机层用1N HCl(15mL×2)、饱和NaHCO3(15mL×2)水溶液和盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物97B(1.13g，收率：98.5％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.08(br d,J＝8.2Hz,1H),6.82(s,3H),4.55(br s,1H),3.71(br s,3H),3.09(s,3H),2.82-2.72(m,1H),2.68-2.58(m,1H),2.22(s,6H),1.32(s,9H)。
在0℃下，将LAH(255mg，6.72mmol)的THF(10mL)溶液脱气并用N2吹扫3次，滴加化合物97B(1.13g，3.36mmol)在THF(20mL)中的混合物，然后在N2气氛下将混合物在0℃下搅拌2小时。通过加入EtOAc(10mL)淬灭反应混合物，然后加入1N HCl(50mL)，然后用EtOAc(20mL)稀释，用Na2SO4干燥，搅拌30分钟，然后过滤，得到有机层。将合并的有机层用盐水(20mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物97C(860mg，收率：92.3％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.48(s,1H),7.24(br d,J＝7.7Hz,1H),6.85-6.73(m,3H),4.08-3.94(m,1H),3.04-2.91(m,1H),2.70-2.57(m,1H),2.20(s,6H),1.39-1.19(m,9H)。
向化合物97C(860mg，3.10mmol)的DMF(10mL)溶液中加入化合物2-羟基-2-甲基丙腈(530mg，6.20mmol，570μL)和Et3N(470mg，4.65mmol，650μL)。将混合物在25℃下搅拌22小时。通过加入1N HCl(20mL)淬灭反应混合物，然后用H2O(20mL)稀释并用DCM(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物97D(930.00mg，收率：98.6％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.19-6.99(m,1H),6.91-6.78(m,3H),6.77-6.51(m,1H),4.66-4.34(m,1H),3.84(brs,1H),2.99-2.81(m,1H),2.75-2.60(m,1H),2.27(br s,6H),1.40-1.20(m,9H)。
向化合物97D(930mg，3.63mmol)和K2CO3(850mg，6.11mmol)的DMSO(10mL)溶液中加入H2O2(3.46g，30.55mmol，2.94mL，纯度：30％)。将混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用H2O(100mL)稀释，并用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。将残余物在DCM(3mL)和PE(25mL)中搅拌30分钟并过滤，得到化合物5(970mg，收率：98.32％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.42-7.08(m,1H),6.86-6.45(m,3H),6.21-5.49(m,1H),4.06-3.82(m,1H),3.31(s,1H),2.72-2.52(m,2H),2.26-2.13(m,6H),1.40-1.18(m,9H)。
向化合物97E(970mg，3.01mmol)的EtOAc(5mL)溶液中加入HCl/EtOAc(4M，5mL)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物用PE(20mL)稀释，过滤并减压浓缩，得到化合物97F(370mg，收率：43.7％，HCl)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.09-7.89(m,3H),7.58(br s,2H),6.96(br s,2H),6.89(s,1H),4.26(br s,1H),3.89(br s,1H),3.69-3.57(m,1H),2.91-2.73(m,2H),2.30(br s,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+223.1。
向化合物97F(310mg，1.18mmol，HCl)、化合物6A(200mg，984.30μmol)、HOBT(133mg，984.30μmol)和DIEA(520μL，2.95mmol)在DCM(15mL)中的混合物中加入EDCI(285mg，1.48mmol)，然后将混合物在25℃下搅拌18小时。将反应混合物用H2O(20mL×2)洗涤。将合并的有机层用HCl(1N,30mL)、饱和NaHCO3水溶液(30mL)和盐水(50ml)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。将残余物在石油醚(5mL)和DCM(1mL)中搅拌30分钟并过滤，得到化合物97G(270mg，收率：61.9％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59-8.24(m,1H),7.64-7.51(m,2H),7.49-7.28(m,5H),6.89-6.77(m,3H),5.98-5.63(m,1H),4.61-4.49(m,1H),4.11-3.86(m,1H),2.86-2.59(m,2H),2.21-2.03(m,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+408.1。
在0℃下，向化合物97G(100mg，245.42μmol)的DCM(10mL)溶液中加入DMP(320mg，736.26μmol)。将混合物在25℃下搅拌7小时。通过加入饱和Na2S2O3水溶液(15mL)和饱和NaHCO3水溶液(15mL)淬灭反应混合物，将混合物搅拌0.2小时，然后用DCM(10mL)稀释并用H2O(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。将残余物在石油醚(15mL)和EtOAc(1mL)中搅拌30分钟并过滤，得到化合物97(60mg，收率：60.3％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.01(br d,J＝7.5Hz,1H),8.18(br s,1H),7.90(br s,1H),7.64(br d,J＝7.3Hz,2H),7.53-7.46(m,1H),7.45-7.38(m,2H),6.92-6.81(m,3H),5.40(brt,J＝7.3Hz,1H),3.15(br d,J＝10.6Hz,1H),2.72-2.58(m,1H),2.18(s,6H),2.11(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+406.1。
实施例57
(S)-N-(4-氨基-1-(3,5-二甲基苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(98)
向化合物98A(1.0g，2.99mmol)和N-甲氧基甲胺(321mg，3.29mmol，HCl)的CHCl3(30mL)溶液中加入HOBt(404mg，2.99mmol)和EDCI(803mg，4.19mmol)。然后向反应混合物中加入NMM(1.3mL，11.96mmol)。添加后，将反应混合物在28℃下搅拌14小时。将反应混合物真空浓缩，将残余物溶于80mL的EtOAc中。将混合物用1N HCl(30mL×2)和饱和NaHCO2水溶液(30mL×2)洗涤，然后用盐水(30mL)洗涤。将混合物经Na2SO4干燥并真空浓缩，得到化合物98B(1.1g，收率82.9％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.44(s,1H),7.34-7.19(m,3H),4.55(br s,1H),3.71(br s,3H),3.17-3.00(m,3H),2.90-2.80(m,1H),2.76-2.67(m,1H),1.29(s,8H)。MS(ESI)m/z(M-56)+320.9。
在0℃和N2气氛下，向LiAlH4(122mg，3.21mmol)的THF(10mL)溶液中加入化合物98B(1.1g，2.92mmol)的THF(20mL)溶液。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌1小时。在0℃下，将2mL的EtOAc加入到反应混合物中并将混合物搅拌10分钟。然后向反应混合物中缓慢加入2mL的1N HCl。添加后，将混合物用80mL的EtOAc稀释，并将混合物用1N HCl(30mL×2)、盐水(30mL)洗涤。然后将混合物经Na2SO4干燥并真空浓缩，得到化合物98C(800mg，收率80.9％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52(s,1H),7.53-7.17(m,4H),4.20-4.08(m,1H),3.19-3.08(m,1H),2.72-2.63(m,1H),1.37-1.27(m,9H)。
在0-5℃下，向化合物98C(800mg，2.51mmol)的MeOH(10mL)溶液中滴加NaHSO3(261mg，2.51mmol)的H2O(15mL)溶液。之后，将反应混合物在25℃下搅拌5小时。向反应混合物中加入NaCN(129mg，2.64mmol)的H2O(20mL)溶液，然后加入EtOAc(40mL)。之后，将反应混合物在25℃下搅拌14小时。分离有机层并用盐水(30mL)洗涤，然后经Na2SO4干燥。将混合物浓缩，得到化合物98D(800mg，收率：92.33％)，为浅黄色胶状物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.46-7.22(m,3H),7.16-7.02(m,1H),6.89-6.70(m,1H),4.65-4.30(m,1H),3.95-3.76(m,1H),3.07-2.87(m,1H),2.76-2.55(m,1H),1.32-1.20(m,8H)。
在0℃下，向化合物98D(800mg，2.32mmol)和K2CO3(641mg，4.64mmol)的DMSO(8mL)溶液中加入H2O2(2mL，22.25mmol，30％纯度)。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用冰水(20mL)和50mL饱和Na2SO3水溶液稀释。将混合物用EtOAc(50mL×3)萃取，并将合并的萃取液用饱和Na2SO3水溶液(50mL×2)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到粗化合物。将粗化合物用MTBE(5mL)稀释并过滤，得到化合物98E(800mg，收率94.9％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.48-7.12(m,5H),6.73-6.20(m,1H),5.86-5.63(m,1H),4.04-3.71(m,2H),2.86-2.54(m,1H),1.34-1.19(m,9H)。MS(ESI)m/z(M+23)+384.9。
向化合物98E(800mg，2.20mmol)的EtOAc(10mL)溶液中加入HCl/EtOAc(4M，55mL)。添加后，将反应混合物在26℃下搅拌1小时。向反应混合物中加入20mL石油醚，将混合物过滤，得到化合物98F(400mg，收率58.87％，HCl)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(br s,1H),8.14(br s,1H),7.62-7.41(m,3H),7.33(d,J＝1.8Hz,1H),6.90-6.50(m,1H),4.28(br s,1H),3.94-3.84(m,1H),3.77-3.56(m,1H),3.03-2.80(m,2H)。
向化合物7(100mg，492.15μmol)和化合物98F(162mg，541.37μmol，HCl)的DMF(10mL)溶液中加入HOBT(67mg，492.15μmol)和DIEA(340μL，1.97mmol)，然后加入EDCI(133mg，689.01μmol)。添加后，将反应混合物在26℃下搅拌14小时。将混合物用30mL的EtOAc稀释。将混合物用1N HCl(15mL×2)和饱和NaHCO3水溶液(15mL×3)洗涤，然后用盐水(20mL)洗涤。将残余物用Na2SO4干燥并真空浓缩。将残余物用4mL的EtOAc稀释并过滤，得到化合物98G(110mg，收率45.87％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.65-8.26(m,1H),7.60-7.30(m,9H),7.28-7.17(m,1H),6.04-5.65(m,1H),4.73-4.56(m,1H),4.11-4.06(m,0.5H),4.01-3.95(m,0.5H),3.01-2.70(m,2H),2.18-2.09(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+448.1。
向化合物98G(110mg，245.37μmol)在DCM(30mL)和DMSO(4mL)中的溶液中加入DMP(416mg，981.48μmol)。添加后，将反应混合物在26℃下搅拌2小时。向反应混合物中加入10mL的饱和Na2S2O3水溶液和10mL的饱和NaHCO3水溶液，将混合物搅拌20分钟。然后分离混合物，有机层用10mL饱和Na2S2O3水溶液和10mL饱和NaHCO3水溶液洗涤，然后用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤。将混合物经Na2SO4干燥并真空浓缩，得到化合物98(30mg，收率24.66％)，为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08(d,J＝7.5Hz,1H),8.21(s,1H),7.94(s,1H),7.68-7.58(m,2H),7.54-7.42(m,4H),7.34(d,J＝1.8Hz,2H),5.45-5.33(m,1H),3.28-3.19(m,1H),2.83-2.73(m,1H),2.12(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+446.0。
实施例58
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(6-甲氧基吡啶-2-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(99)
将化合物2-氯-6-甲氧基吡啶(5.0g，34.83mmol)在NH2NH2.H2O(17.44g，348.30mmol，16.93mL)中的混合物在120℃下搅拌16小时。将反应混合物减压浓缩，得到残余物，然后用H2O(30mL)稀释，用乙酸乙酯(40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5：1至1：1)纯化残余物，得到化合物99B(1.06g，21.87％收率)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.41(t,J＝7.8Hz,1H),6.24-6.08(m,2H),5.73(br s,1H),3.86(s,3H),3.83-2.75(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+140.1。
将化合物99B(1.00g，7.19mmol)和2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(1.35g，7.19mmol)在HOAc(20.00mL)中的混合物在120℃下搅拌16小时。将反应混合物减压浓缩，以去除HOAc。将残余物用H2O(20mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1：0至5：1)纯化残余物，并通过制备型HPLC(TFA条件)进一步纯化，得到化合物99C(487.00mg，25.87％收率)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.70(t,J＝7.9Hz,1H),7.21(d,J＝7.5Hz,1H),6.71(d,J＝8.2Hz,1H),6.66(s,1H),4.27(q,J＝7.2Hz,2H),3.85(s,3H),2.36(s,3H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+261.9。
向化合物99C(487.00mg，1.99mmol)的THF(15.00mL)溶液中加入LiOH.H2O(417.50mg，9.95mmol)的H2O(5.00mL)溶液。将混合物在28℃下搅拌16小时。将反应混合物用H2O(10mL)稀释并用MTBE(15mL×2)萃取，向水相中加入1N HCl至pH约3～4，用EA(15mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物99D(396mg，91.61％收率)，为白色固体。化合物99D：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.86(t,J＝7.8Hz,1H),7.26(d,J＝7.5Hz,1H),6.80(d,J＝8.2Hz,1H),6.67(s,1H),3.80(s,3H),2.26(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+234.1。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物99D制备化合物99(10.00mg，13.78％收率，白色固体)。化合物99：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.68(br t,J＝7.9Hz,1H),7.26-7.18(m,4H),7.12-7.01(m,3H),6.73(br s,1H),6.68-6.60(m,1H),6.65(br d,J＝8.2Hz,1H),6.50(s,1H),5.73-5.64(m,1H),5.50(br s,1H),3.67(s,3H),3.45-3.35(m,1H),3.25-3.11(m,1H),2.33(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+408.1。
实施例59
化合物101、493
(S)-N-(4-((3,4-二氯苄基)氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(101)
向化合物23A(20.00g，98.43mmol)的THF(300mL)溶液中加入1-羟基吡咯烷-2,5-二酮(12.46g，108.27mmol)和EDCI(22.64g，118.12mmol)与DCM(200mL)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应混合物浓缩并用乙酸乙酯(200mL)稀释。然后将混合物用HCl(1M，20mL)、饱和NaHCO3水溶液(200mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。得到化合物101A(28.00g，粗品)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.94-7.88(m,2H),7.69-7.63(m,1H),7.62-7.56(m,2H),2.87(br s,4H),2.50-2.48(m,3H)。
向化合物101A(28.00g，93.25mmol)的DMF(200mL)溶液中加入(2S)-2-氨基-3-苯基-丙烷-1-醇(15.51g，102.57mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将混合物用H2O(1000mL)稀释，用乙酸乙酯(1000mL)萃取，将有机层用HCl(1000mL水溶液)、NaHCO3(1000mL水溶液)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。得到化合物3(20.00g，收率63.8％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45(br d,J＝8.8Hz,1H),7.66-7.61(m,2H),7.53-7.40(m,3H),7.32-7.18(m,5H),4.97-4.92(m,1H),4.33-4.23(m,1H),3.54-3.41(m,2H),3.01-2.97(m,1H),2.69-2.57(m,1H),2.06(s,3H)。
向化合物101B(3.00g，8.92mmol)的DCM(100mL)溶液中加入DMP(5.67g，13.38mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物用10％Na2S2O3(水溶液)：饱和NaHCO3(水溶液)(1：1，200mL)淬灭，用DCM(200mL)萃取并用盐水(200mL×3)洗涤。将合并的有机层用Na2SO4干燥并浓缩。得到化合物101C(2.70g，收率90.5％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.66(s,1H),8.91(d,J＝8.4Hz,1H),7.67-7.63(m,2H),7.53-7.47(m,1H),7.46-7.40(m,2H),7.29-7.19(m,5H),4.79-4.72(m,1H),3.37-3.32(m,1H),2.81-2.72(m,1H),2.09(s,3H)。
向化合物101C(500.0mg，1.50mmol)的DCM(20mL)溶液中加入TMSCN(223.2mg，2.25mmol，280μL)和TEA(15.2mg，150.00μmol，20μL)。将混合物在0℃下搅拌3小时。将混合物浓缩，用乙酸乙酯(20mL)稀释，用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到化合物101D(600.0mg，粗品)，为无色油状物。
向化合物101D(600.0mg，1.41mmol)的THF(10mL)溶液中加入HCl(10mL)。将混合物在60℃下搅拌12小时。将混合物用H2O(200mL)稀释，用乙酸乙酯(100mL)萃取，有机层用NaHCO3(100mL水溶液)洗涤，水相中加入HCl(1M)直至pH约1，然后用乙酸乙酯(100mL)萃取，将有机层用盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。得到化合物101E(240.0mg，粗产物)，为无色油状物，直接用于下一步骤。
向化合物101E(200.0mg，526μmol)的THF(10.00mL)溶液中加入(3,4-二氯苯基)甲胺(92.6mg，525.78μmol，70μL)、DIEA(203.85mg，1.58mmol，275.48μL)、HOBt(71.04mg，525.78μmol)和EDCI(120.95mg，630.93μmol)。将混合物在25℃下搅拌4小时。将混合物浓缩，用乙酸乙酯(50mL)稀释，用HCl(1M，50mL)、饱和NaHCO3(水溶液，50mL)、盐水(50mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。将混合物用CH3CN(5mL)研磨并过滤。得到化合物101F(70.0mg，收率24.7％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.63-8.53(m,1H),8.30(d,J＝9.2Hz,1H),7.58-7.10(m,13H),6.20-5.94(m,1H),4.68-4.57(m,1H),4.32-4.16(m,2H),4.08-3.99(m,1H),2.97-2.67(m,2H),2.07-1.96(m,1H),2.07-1.96(m,2H)。
向化合物101F(60.0mg，111.44μmol)在DCM(10mL)和DMSO(1.00mL)中的溶液中加入DMP(141.8mg，334.32μmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物用10％Na2S2O3(水溶液)：饱和NaHCO3(水溶液)(1：1，20mL)淬灭，用DCM(10mL)萃取并用盐水(20mL×3)洗涤。将合并的有机层用Na2SO4干燥并浓缩。得到化合物101(33.2mg，收率55.5％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.52-9.43(m,1H),9.12(d,J＝7.6Hz,1H),7.69-7.38(m,7H),7.35-7.20(m,6H),5.53-5.42(m,1H),4.40-4.32(m,2H),3.31-3.19(m,1H),2.93-2.71(m,1H),2.12-2.00(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+536.1。
(S)-N-(4-(((1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲基)氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(493)
化合物493(20mg，23.4％收率，黄色固体)如化合物101由相应的中间体羧酸——化合物101E和(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-5-基)甲胺制备，然后去除2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基基团，以得到化合物493。化合物493：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.07(s,1H),7.67-7.59(m,3H),7.56(br s,1H),7.52-7.38(m,4H),7.30(br s,1H),7.25-7.14(m,4H),6.89(br d,J＝6.2Hz,2H),6.12(br d,J＝6.8Hz,1H),5.72-5.63(m,1H),4.62(br d,J＝5.5Hz,2H),3.37(br dd,J＝4.7,14.0Hz,1H),2.99(brdd,J＝7.9,14.3Hz,1H),2.33(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
实施例60
(S)-1-(1H-吲唑-3-基)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(102)
向1H-吲唑-3-胺(8.7g，65.3mmol)的MeOH(90mL)溶液中加入2-氧代乙酸乙酯(20g，98.01mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物过滤并浓缩，得到粗产物102A(15g，粗品)，为棕色固体，将其不经纯化用于下一步骤。
向102A(15g，69.1mmol)的EtOH(400mL)溶液中加入K2CO3(14.5g，104mmol)和TosMIC(11.6g，59.4mmol)。将混合物在90℃下搅拌0.5小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1：0至1：1)纯化残余物，得到化合物102B(2.9g，收率：16.4％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.04(br s,1H),7.98(d,J＝0.7Hz,1H),7.91(s,1H),7.48-7.41(m,3H),7.25-7.19(m,1H),4.24-4.14(m,2H),1.14(t,J＝7.1Hz,3H)。
向102B(2.9g，11.3mmol)在THF(40mL)和H2O(8mL)中的溶液中加入NaOH(905mg，22.6mmol)。将混合物在25℃下搅拌10小时。将混合物减压浓缩以除去有机溶剂，并用EtOAc(20mL)萃取。将水层用1M HCl酸化至pH约5，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用H2O(40mL)、盐水(40mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到102C(1.5g，收率：58.1％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.35(s,1H),8.16(s,1H),7.83(s,1H),7.61(d,J＝8.3Hz,1H),7.47-7.41(m,2H),7.20-7.15(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+228.9。
如实施例6，由相应的中间体化合物102C和21G((S)-2-氨基-3-苯基丙烷-1-醇)制备化合物102(20mg，收率52.9％，淡黄色固体)。化合物102：1HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ13.22(s,1H),9.48(s,1H),8.95(d,J＝8.0Hz,1H),8.07(s,1H),7.72(s,1H),7.59-7.51(m,1H),7.42-7.40(m,1H),7.31-7.24(m,2H),7.24-7.18(m,4H),7.12-7.06(m,1H),7.06-7.06(m,1H),4.34-4.23(m,1H),3.19-3.15(m,1H),2.77-2.74(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+360.1。
实施例61
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(3'-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(105)
在25℃和N2下，向化合物103A(150mg，0.33mmol)和间-甲苯基硼酸(89mg，0.66mmol)在THF(50mL)中的混合物中一次性加入H2O(10mL)、Na2CO3(70mg，0.66mmol)和Pd(PPh3)4(38mg，0.033mmol)。将混合物在80℃下搅拌12小时。向反应混合物中加入H2O(100mL)并用EA(100mL×3)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液(150mL×3)、盐水(150mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物用异丙基醚/CH3CN(10/1，10mL)处理。收集固体并真空干燥，得到化合物2A(72.7mg，收率42.70％)，为灰色固体。化合物105A：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.51-8.10(m,1H),7.60-7.52(m,2H),7.47-7.38(m,2H),7.36-7.28(m,3H),7.26-7.12(m,7H),7.03-6.93(m,1H),6.57(d,J＝3.3Hz,1H),5.93-5.73(m,1H),4.49-4.29(m,1H),4.04-3.86(m,1H),2.90-2.81(m,1H),2.81-2.72(m,1H),2.35(s,3H),2.24(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+469.2。
在0℃下，向化合物105A(65mg，0.14mmol)在DCM(10mL)和DMSO(1mL)中的混合物中一次性加入DMP(177mg，0.42mmol)。将混合物在0℃下搅拌10分钟，然后升温至25℃并搅拌2小时。通过20mL的10％Na2S2O3水溶液和20mL的饱和NaHCO3水溶液淬灭反应，然后用DCM(30mL×3)萃取。将合并的有机相用盐水(40mL×3)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型HPLC(碱性条件)纯化残余物，得到化合物105(35.0mg，收率53.6％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ9.08(d,J＝7.7Hz,1H),8.08-8.00(m,1H),7.84(br s,1H),7.60-7.52(m,2H),7.45-7.37(m,3H),7.36-7.30(m,1H),7.28-7.25(m,3H),7.23-7.16(m,3H),7.12-7.06(m,1H),6.60(br s,1H),5.29(br s,1H),3.22-3.14(m,1H),2.86-2.76(m,1H),2.35(s,3H),2.28-2.22(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+467.2。
实施例62
化合物103、106、216-218、214
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4'-氟-[1,1'-联苯基]-3-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(103)
如实施例49，由相应的中间体化合物103A和(4-氟苯基)硼酸制备化合物103B(110mg，收率70.98％，类白色固体)。化合物103B：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.45(d,J＝9.0Hz,0.5H),8.15(d,J＝9.0Hz,0.5H),7.68-7.52(m,4H),7.40-7.13(m,10H),7.02(br d,J＝8.4Hz,0.5H),6.94(br d,J＝7.9Hz,0.5H),6.59(d,J＝2.4Hz,1H),5.93-5.74(m,1H),4.49-4.32(m,1H),4.02-3.88(m,1H),2.95-2.66(m,2H),2.26-2.19(m,3H)。
如实施例61，由相应的中间体化合物103B制备化合物103(78mg，收率：68.93％，淡黄色固体)。化合物103：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ9.09(d,J＝7.7Hz,1H),8.09(s,1H),7.86(s,1H),7.65(dd,J＝5.4,8.7Hz,2H),7.58(br d,J＝7.7Hz,1H),7.52(s,1H),7.41(t,J＝7.8Hz,1H),7.32-7.25(m,6H),7.23-7.19(m,1H),7.11(br d,J＝7.9Hz,1H),6.60(s,1H),5.35-5.25(m,1H),3.18(dd,J＝3.5,13.7Hz,1H),2.81(dd,J＝10.4,13.7Hz,1H),2.25(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+471.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(3'-氟-[1,1'-联苯基]-3-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(106)
如实施例61，由相应的起始物料——103A和(3-氟苯基)硼酸制备化合物106(18.7mg，收率46.2％，淡黄色固体)。化合物106：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ9.08(br d,J＝7.7Hz,1H),8.05(br s,1H),7.85(br s,1H),7.69-7.62(m,1H),7.60-7.56(m,1H),7.52-7.43(m,3H),7.43-7.37(m,1H),7.33-7.24(m,4H),7.24-7.15(m,2H),7.13-7.05(m,1H),6.62(s,1H),5.35-5.25(m,1H),3.20-3.15(m,1H),2.86-2.76(m,1H),2.28-2.21(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+471.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(3'-氟-[1,1'-联苯基]-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(216)
如实施例62，由相应的起始物料——83D和(3-氟苯基)硼酸制备化合物216(26mg，收率16.7％，黄色固体)。化合物216：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.59(br d,J＝7.7Hz,2H),7.47-7.35(m,4H),7.33-7.27(m,4H),7.05(br d,J＝6.4Hz,3H),6.75(br s,1H),6.49(s,1H),6.42-6.33(m,1H),5.66-5.50(m,2H),3.39(brdd,J＝5.0,13.8Hz,1H),3.16(br dd,J＝7.4,14.0Hz,1H),2.40-2.29(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+471.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2'-氟-[1,1'-联苯基]-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(217)
如实施例62由相应的起始物料——化合物83D和(2-氟苯基)硼酸制备化合物217。化合物217(13mg，收率14.49％，黄色固体)：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.59(d,J＝7.3Hz,2H),7.49-7.39(m,3H),7.37-7.26(m,3H),7.24-7.13(m,3H),7.02(br d,J＝6.0Hz,2H),6.72(br s,1H),6.49(s,1H),6.37-6.29(m,1H),5.62-5.49(m,2H),3.36(dd,J＝5.3,14.1Hz,1H),3.11(dd,J＝7.4,14.0Hz,1H),2.38-2.29(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+471.2。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(3'-甲基-[1,1'-联苯基]-4-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(218)
如实施例62由相应的起始物料——化合物83D和间甲苯基硼酸制备化合物218。化合物218(收率36.1％，黄色固体)：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ9.16(d,J＝7.7Hz,1H),8.11(s,1H),7.87(s,1H),7.60(d,J＝8.6Hz,2H),7.50-7.43(m,2H),7.38-7.28(m,5H),7.26-7.21(m,3H),7.18(br d,J＝7.5Hz,1H),6.54(s,1H),5.28-5.18(m,1H),3.20(br dd,J＝3.6,13.8Hz,1H),2.83(dd,J＝10.6,13.7Hz,1H),2.37(s,3H),2.24(s,3H)。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2'-氟-[1,1'-联苯基]-3-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(214)
如实施例62由相应的起始物料——化合物103A和(2-氟苯基)硼酸制备化合物214。化合物214(20mg，收率29.5％，白色固体)：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.62-7.55(m,2H),7.52-7.43(m,2H),7.41-7.30(m,2H),7.26-7.22(m,3H),7.21-7.13(m,2H),7.03-6.94(m,2H),6.65(br s,1H),6.49(s,1H),6.33-6.26(m,1H),5.56-5.52(m,1H),5.37(br s,1H),3.38-3.31(m,1H),3.17-3.09(m,1H),2.36-2.30(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+471.1。
实施例63
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-苯基呋喃-2-甲酰胺(104)
在-78℃下，向i-Pr2NH(3mL，18.71mmol)的无水THF(13mL)溶液中滴加n-BuLi(7mL，18.71mmol)并在0℃下搅拌30分钟。然后在-78℃下，向混合物中滴加3-溴呋喃(2.5g，17.01mmol)的THF(13mL)溶液，并将混合物在-78℃下搅拌30分钟。在-78℃下将无水CO2倒入溶液中30分钟。将反应用H2O(20mL)淬灭并用乙酸乙酯(20mL)萃取，然后用HCl处理水相直至pH约3。过滤沉淀物并减压干燥。得到化合物104A(1.8g，粗品)，为黄色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.96(d,J＝1.8Hz,1H),6.89(d,J＝1.8Hz,1H)。
向化合物104A(500mg，2.62mmol)的DMF(10mL)溶液中加入Cs2CO3(2.13g，6.55mmol)。然后向混合物中加入MeI(652.43μL，10.48mmol)。将混合物在25℃下搅拌13小时。将混合物用乙酸乙酯(35mL)和H2O(30mL)稀释。分离有机层，水层用乙酸乙酯(20mL×2)洗涤萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过快速柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝15/1)纯化残余物。得到化合物104B(250mg，收率46.54％)，为白色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.50(d,J＝2.0Hz,1H),6.61(d,J＝2.0Hz,1H),3.94-3.92(m,3H)。
向化合物104B(221mg，1.08mmol)在THF(4mL)和H2O(2mL)中的溶液中加入苯基硼酸(263mg，2.16mmol)和Cs2CO3(553mg，1.70mmol)，然后加入Pd(PPh3)4(125mg，108.00μmol)，然后将混合物加热至80℃并搅拌12小时。将反应混合物冷却至室温，加入H2O(6mL)以淬灭反应。用乙酸乙酯(10ml×2)萃取混合物。将合并的有机层用H2O(10mL)、盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，减压蒸发。通过FCC(PE/EA：0至10/1)纯化残余物。得到化合物104C(180mg，收率82.42％)，为黄色油状物。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.61-7.55(m,3H),7.45-7.35(m,3H),6.64(d,J＝1.8Hz,1H),3.86(s,3H)。
向化合物104C(170mg，840.71μmol)的MeOH(5mL)溶液中滴加NaOH(2M，2mL)，然后将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用H2O(5mL)稀释并在减压下除去溶剂，然后用MTBE(5mL)萃取混合物。将水相用HCl(1M)处理直至pH约3，然后用乙酸乙酯(5mL×3)萃取水相。用盐水洗涤有机层，用无水Na2SO4干燥，减压蒸发。得到化合物104D(120mg，收率75.85％)，为白色固体，将其直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.90(d,J＝1.8Hz,1H),7.59-7.53(m,2H),7.39-7.28(m,3H),6.80(d,J＝1.8Hz,1H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物104D制备化合物104(35mg，收率：44.0％，黄色固体)。化合物104：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.56(d,J＝7.5Hz,1H),8.07(s,1H),7.88(d,J＝1.8Hz,1H),7.81(s,1H),7.61-7.54(m,2H),7.36-7.29(m,3H),7.29-7.25(m,4H),7.21-7.17(m,1H),6.90-6.83(m,1H),5.39-5.29(m,1H),3.21-3.12(m,1H),3.01-2.92(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+363.1。
实施例64
化合物107、243、253、265、168、459、460、475
(S)-N-(4-氨基-1-(4-氟苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺(107)
(S)-N-(1-氨基-1,2-二氧代戊烷-3-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺(243)
(S)-N-(1-氨基-5-甲基-1,2-二氧代己烷-3-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺(253)
(S)-N-(1-氨基-1,2-二氧代庚-3-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺(265)
如实施例5，分别由相应的起始物料——化合物107B和化合物58F、47A、253A或62E制备化合物107、243、253和265。
化合物107(77.3mg，51.80％收率，白色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12-8.05(m,2H),7.46-7.36(m,3H),7.12-7.05(m,2H),7.00-6.94(m,2H),6.79-6.70(m,2H),5.72-5.64(m,1H),5.53(br s,1H),5.57-5.47(m,1H),3.46-3.38(m,1H),3.24-3.16(m,,1H),2.56(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+396.1。
化合物243(52.8mg，42.87％收率，黄色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.13(d,J＝6.8Hz,2H),7.47-7.33(m,3H),6.91-6.81(m,1H),6.75(br s,1H),5.53-5.36(m,2H),2.58(s,3H),2.20-2.08(m,1H),1.88-1.76(m,1H),0.99(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+316.1。
化合物253(6.5mg，6.42％收率，白色固体)：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.19-8.09(m,2H),7.50-7.34(m,3H),6.84-6.68(m,2H),5.55-5.38(m,2H),2.60(s,3H),1.87-1.74(m,2H),1.63-1.58(m,1H),1.04(d,J＝6.4Hz,3H),0.98(d,J＝6.4Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+344.1。
化合物265(79.7mg，94.04％纯度，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(d,J＝6.8Hz,1H),8.13-8.03(m,3H),7.79(s,1H),7.45-7.35(m,3H),5.17-5.10(m,1H),2.56(s,3H),1.87-1.76(m,1H),1.73-1.60(m,1H),1.45-1.26(m,4H),0.93-0.83(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+344.1。
(S)-N-(4-氨基-1-(4-氟苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(168)
如实施例64，由相应的起始物料——化合物32F和58F制备。化合物168(21.3mg，收率：45.1％，淡黄色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.38(brd,J＝7.7Hz,1H),8.12-7.99(m,2H),7.81(s,1H),7.54(br d,J＝3.7Hz,2H),7.36-7.24(m,5H),7.12(br t,J＝8.7Hz,2H),5.30-5.20(m,1H),3.89(s,3H),3.19-3.09(m,1H),2.87-2.74(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+395.1。
N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺(459)
如化合物107，由相应的起始物料——化合物107B和3-氨基-N-环丙基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐制备。化合物459(210mg，收率：65.2％，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.88-8.79(m,2H),8.06-7.99(m,2H),7.43-7.34(m,3H),7.33-7.26(m,4H),7.25-7.18(m,1H),5.48-5.35(m,1H),3.26-3.17(m,1H),3.05-2.94(m,1H),2.82-2.71(m,1H),2.55(s,3H),0.70-0.52(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+418.2。
N-(1-(环丙基氨基)-1,2-二氧代庚-3-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺(460)
如化合物107，由相应的起始物料——化合物107B和3-氨基-N-环丙基-2-羟基庚酰胺盐酸盐制备。化合物460(180mg，收率：53.3％，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.76(br s,2H),8.10(br s,2H),7.40(br s,3H),5.12(br s,1H),2.77(br s,1H),2.56(brs,3H),1.81(br s,1H),1.68(br s,1H),1.32(br s,4H),0.88(br s,3H),0.70-0.52(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+384.2。
(S)-N-(4-氟-3-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺(475)
如化合物107，由相应的起始物料——化合物107B和(2S,3S)-3-氨基-1-氟-4-苯基丁烷-2-醇盐酸盐制备。化合物475(75mg，收率：50.28％，白色固体)：1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.13-8.08(m,2H),7.47-7.38(m,3H),7.36-7.28(m,3H),7.18(d,J＝6.6Hz,2H),6.81-6.76(m,1H),5.31-5.22(m,1H),5.05-4.89(m,1H),4.88-4.72(m,1H),3.29-3.22(m,1H),3.17-3.10(m,1H),2.57(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+367.1。
实施例65
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(喹啉-5-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(108)
在0℃下，向由浓HCl(20mL)中的喹啉-5-胺(5g，34.68mmol)组成的混合物中滴加NaNO2(2.63g，38.15mmol)，并将所得混合物在0℃下搅拌0.5小时。将反应混合物在0.5小时内温热至25℃，然后冷却至0℃。将SnCl2·2H2O(15.65g，68.36mmol，在20mL浓HCl中)滴加到反应混合物中，并在0℃下搅拌0.5小时。将所得混合物在4小时内在剧烈搅拌下温热至25℃。将反应混合物减压浓缩，以去除溶剂。将残余物用乙醇90mL(30mL×3)稀释，过滤并减压浓缩，得到化合物108A(5.2g，76.64％收率，HCl)，为黄色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ9.98(br s,1H),9.26-9.15(m,2H),8.07-7.97(m,2H),7.89(d,J＝8.8Hz,1H),7.27(d,J＝7.8Hz,1H)。
将化合物108A(2g，12.56mmol，HCl)和2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(1.91g，10.22mmol)在AcOH(20mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在N2气氛下将混合物在110℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，以去除AcOH。将残余物用CH2Cl2(100mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液调节至pH约7-8，然后用CH2Cl2(40mL×2)萃取。有机相用无水Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩，得到残余物，将其通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1：0至0：1)纯化，得到化合物108B(1.2g，41.78％收率)，为黄色固体，和化合物108C(150mg，5.22％收率)，为黄色固体。化合物108B：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.93(d,J＝4.0Hz,1H),8.23(d,J＝8.4Hz,1H),7.78(t,J＝8.0Hz,1H),7.64(d,J＝8.4Hz,1H),7.56(d,J＝7.2Hz,1H),7.38(d,J＝8.8Hz,1H),6.93(s,1H),4.05(q,J＝7.2Hz,2H),2.41(s,3H),1.00(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物108C：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.98-8.87(m,1H),8.27(d,J＝8.8Hz,1H),7.83-8.77(m,1H),7.68-7.56(m,2H),7.45-7.40(m,1H),6.85(s,1H),4.42(q,J＝7.2Hz,2H),2.13(s,3H),1.40(t,J＝7.2Hz,3H)。
向108B(250mg，888.7μmol)在MeOH(10mL)和H2O(5mL)中的混合物中一次性加入LiOH·H2O(149.2mg，3.55mmol)，并将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。将残余物用H2O(10mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，然后用DCM(40mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物108D(200mg，88.03％收率)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.97(d,J＝4.0Hz,1H),8.17(d,J＝8.8Hz,1H),7.89-7.79(m,1H),7.67-7.62(m,1H),7.61-7.52(m,2H),6.96(s,1H),5.76(s,1H),2.32(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+253.9。
如实施例107，由相应的中间体化合物108D和12G制备化合物108(21.2mg，23.11％收率，白色固体)。化合物108：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.95(d,J＝2.8Hz,1H),8.22(d,J＝8.8Hz,1H),7.77-7.66(m,2H),7.50(d,J＝7.2Hz,1H),7.39(d,J＝8.4Hz,1H),7.24-7.18(m,3H),6.89(d,J＝5.6Hz,2H),6.63(s,2H),6.28(d,J＝7.2Hz,1H),5.53-5.39(m,2H),3.24(d,J＝14.4Hz,1H),3.03(d,J＝14.4Hz,1H),2.39(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.1。
实施例66
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(吡啶-2-基)噻唑-5-甲酰胺(109)
将4-溴噻唑-5-羧酸乙酯(500mg，2.12mmol)、2-(三丁基锡烷基)吡啶(858.5mg，2.33mmol)、Pd(PPh3)4(122.5mg，106μmol)在二噁烷(15mL)中的混合物在105℃下搅拌14小时。将混合物浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝3：1至1：1)纯化残余物，得到化合物109A(221mg，44.05％收率)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+235.0。
向化合物109A(221mg，943.36μmol)在MeOH(10mL)和水(2mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(99mg，2.36mmol，2.5当量)。将混合物在32℃下搅拌0.5小时。蒸发MeOH。向残余物中加入水(20mL)。用MTBE(5mL)萃取混合物并分离。用1N HCl将水层酸化至pH约3，并用乙酸乙酯(3×20mL)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到化合物109B(155mg，79.68％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.37(s,1H),8.84(br d,J＝4.8Hz,1H),8.57(d,J＝8.0Hz,1H),8.34(br t,J＝7.4Hz,1H),7.78(t,J＝6.2Hz,1H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物109B制备化合物109(5.7mg，13.91％收率，黄色固体)。化合物109：MS(ESI)m/z(M+H)+381.0。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ13.47-13.34(m,1H),8.85(s,1H),8.43(d,J＝8.0Hz,1H),8.03(d,J＝5.2Hz,1H),7.96-7.79(m,1H),7.26-7.22(m,1H),7.20-7.06(m,5H),6.81(br s,1H),5.94-5.86(m,1H),5.68(br s,1H),3.49-3.33(m,2H)。
实施例67
(S)-1-(4-(噁唑-2-基)吡啶-2-基)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(110)
将4-溴吡啶-2-胺(20g，115.60mmol)和2-氧代乙酸乙酯(30.7g，150.28mmol)在MeOH(300mL)中的混合物加热至80℃保持3小时。将混合物浓缩，通过硅胶柱(石油醚：乙酸乙酯＝20：1)纯化残余物。化合物110A(28.9g，收率：86.5％，黄色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.96(d,J＝5.2Hz,1H),6.86(dd,J＝5.2,1.75Hz,1H),6.77(d,J＝1.3Hz,1H),5.75(br s,1H),5.61(d,J＝8.3Hz,1H),4.29(q,J＝7.0Hz,2H),3.41(s,3H),1.37-1.31(m,3H)。
将110A(15g，51.9mmol)和K2CO3(21.5g，156mmol)在EtOH(300mL)中的混合物在80℃下搅拌0.5小时，然后加入1-(异氰基甲基磺酰基)-4-甲基-苯(15.2g，77.82mmol)，将所得混合物在80℃下搅拌另外2小时。去除大部分乙醇并形成沉淀，将固体过滤并用水(100mL×2)洗涤，将固体干燥并浓缩，得到110B(6.4g，收率：41.7％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.38(d,J＝5.2Hz,1H),7.97(s,1H),7.85(s,1H),7.61(s,1H),7.56(dd,J＝5.26,1.3Hz,1H),4.27(q,J＝7.02Hz,2H),1.29(t,J＝7.02Hz,3H)。
将110B(3g，10.13mmol)、Pin2B2(2.57g，10.13mmol)、KOAc(2.98g，30.4mmol)和Pd(dppf)Cl2(741mg，1.01mmol)的二噁烷(100mL)溶液脱气，然后在N2下在70℃下加热4小时。将混合物过滤，浓缩滤液，通过硅胶色谱(DCM：甲醇＝5：1)纯化残余物，得到110C(1.70g，粗品)，为黑色固体。
将110C(300mg，1.15mmol)、2-碘代噁唑(157mg，805.00μmol)、Pd(dppf)Cl2(84.1mg，115.00μmol)和Na2CO3(244mg，2.30mmol)的甲苯(2mL)、EtOH(2mL)、H2O(1mL)溶液脱气，然后在微波条件下加热至120℃保持1小时。LCMS显示所需的MS，向混合物中加入水(5mL)并用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，将有机相干燥并浓缩，通过制备型TLC(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)纯化残余物，得到110D(80mg，收率：24.5％)，为黄色固体。
将110D(80mg，281.42μmol)和LiOH.H2O(17.7mg，422.13μmol)在THF(5mL)、H2O(1mL)中的混合物在25℃下搅拌12小时。LCMS显示所需的MS，真空除去THF，水层用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，用1N HCl将水层调节至pH约6并冻干，通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到110E(35mg，收率：48.5％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,甲醇-d4)δ8.70(d,J＝5.3Hz,1H),8.25(s,1H),8.16(s,1H),8.11(s,1H),8.08(d,J＝5.1Hz,1H),7.81(s,1H),7.46(s,1H)。
如实施例6，由相应的中间体化合物110E和21G((S)-2-氨基-3-苯基丙烷-1-醇)制备化合物110(38mg，收率：58.8％，白色固体)。化合物110：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.69(s,1H),8.52(d,J＝5.1Hz,1H),7.98(br d,J＝9.9Hz,2H),7.92(br d,J＝5.1Hz,1H),7.81(s,1H),7.59(s,1H),7.52(br d,J＝5.3Hz,1H),7.34(s,1H),7.31-7.17(m,4H),7.13(br d,J＝7.1Hz,2H),4.84(q,J＝6.5Hz,1H),3.33-3.18(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+388.1。
实施例68
化合物111-112
(S)-1-(5-(噁唑-2-基)吡啶-2-基)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(111)
如实施例110，由相应起始物料——5-溴吡啶-2-胺制备化合物111E(60mg，粗品，灰色固体)。化合物111E：MS(ESI)m/z(M+H)+257.0。如实施例21，由相应的中间体化合物111E和21G((S)-2-氨基-3-苯基丙烷-1-醇)制备化合物111(55mg，收率：76.9％，白色固体)。化合物111：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.71(s,1H),9.05(d,J＝1.5Hz,1H),8.42(dd,J＝2.2,8.4Hz,1H),8.02(s,1H),7.79(s,1H),7.57(s,1H),7.39(d,J＝8.4Hz,1H),7.34(br d,J＝6.4Hz,1H),7.31(s,1H),7.28-7.24(m,2H),7.22-7.17(m,1H),7.14(br d,J＝7.1Hz,2H),4.87(q,J＝6.5Hz,1H),3.24(d,J＝6.4Hz,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+388.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(5-(噁唑-2-基)吡啶-2-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(112)
如实施例5，由相应的起始物料——化合物111E和12G制备化合物112(20mg，收率：48.2％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.06(d,J＝7.5Hz,1H),8.99(d,J＝1.8Hz,1H),8.39(dd,J＝2.4,8.4Hz,1H),8.34(s,1H),8.26-8.21(m,1H),8.08(s,1H),7.84(s,1H),7.57(s,1H),7.48(s,1H),7.34(d,J＝8.4Hz,1H),7.31-7.25(m,4H),7.24-7.16(m,1H),7.24-7.16(m,1H),5.28-5.13(m,1H),3.18(dd,J＝3.7,13.9Hz,1H),2.85(dd,J＝10.3,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+431.1。
实施例69
化合物113、115
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(5-苯基噻唑-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(113)
将5-苯基噻唑-2-胺(850mg，4.82mmol)加入到浓盐酸(5mL)中。在0℃下搅拌的同时，向混合物中缓慢滴加NaNO2(998mg，14.5mmol)的H2O(3mL)水溶液，并将混合物搅拌1小时。然后缓慢滴加SnCl2.2H2O(3.26g，14.4mmol)的盐酸溶液，并将混合物在25℃下搅拌3小时。LCMS显示5-苯基噻唑-2-胺被完全消耗，并且检测到具有所需MS的一个峰。将反应混合物过滤。将滤饼用水(20mL)洗涤，并减压浓缩，得到产物113A(1g，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)m/z(M+H)+191.9。
将化合物113A(1g，5.23mmol)、2,4-二氧代戊酸甲酯(754mg，5.23mmol)在HOAc(15mL)中的混合物在120℃下搅拌1小时。过滤反应混合物，减压浓缩滤液以除去溶剂，并用饱和NaHCO3水溶液将pH调节至8～9。然后用乙酸乙酯(60mL×3)萃取混合物。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。首先，通过柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝50：1至10：1)纯化残余物，得到纯化合物113C(300mg)和113B&113C(300mg)的混合物。然后通过制备型HPLC(TFA条件)纯化113B和113C(300mg)的混合物，得到113B(30mg)和113C(120mg)，均为黄色固体。
化合物113B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.79(br s,1H),7.60-7.51(m,2H),7.46-7.38(m,2H),7.38-7.29(m,1H),6.75(br s,1H),4.05-3.71(m,3H),2.54-2.16(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+300.0。
化合物113C：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.74(s,1H),7.58-7.53(m,2H),7.46-7.40(m,2H),7.38-7.32(m,1H),7.26(s,1H),6.72(d,J＝0.7Hz,1H),3.96(s,3H),2.75(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+300.0。
向113B(30mg，100μmol)在THF(5mL)、H2O(1mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(6.31mg，150μmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。向反应混合物中加入HCl水溶液以调节pH约5。然后将混合物冷冻。得到化合物113D(35mg，粗品)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.07(s,1H),7.68(d,J＝7.3Hz,2H),7.49-7.41(m,2H),7.40-7.32(m,1H),6.79(s,1H),2.25(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体化合物113D和12G制备化合物113(20mg，收率：66.4％，白色固体)。化合物113：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.73(br d,J＝5.5Hz,1H),7.55-7.45(m,2H),7.42(br t,J＝7.3Hz,2H),7.38-7.31(m,1H),7.23(br dd,J＝3.9,8.0Hz,6H),7.03(s,1H),6.80(br s,1H),5.87-5.70(m,1H),5.58(br s,1H),3.43(br dd,J＝4.5,14.2Hz,1H),3.22(br dd,J＝8.2,14.3Hz,1H),2.31(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+460.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-1-(5-苯基噻唑-2-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(115)
按照如化合物113所用的步骤，由相应的中间体羧酸——化合物115A制备化合物115(62.0mg，收率：68.3％，白色固体)。化合物115：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.71(s,1H),7.56(d,J＝7.3Hz,2H),7.48-7.40(m,2H),7.39-7.33(m,2H),7.33-7.27(m,2H),7.26(s,1H),7.19(br d,J＝6.8Hz,2H),6.76(br s,1H),6.65(s,1H),5.77-5.62(m,1H),5.52(brs,1H),3.43(dd,J＝5.5,13.9Hz,1H),3.26(dd,J＝7.1,13.9Hz,1H),2.71(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+23)+460.1。
实施例70
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-1-(5-苯基噁唑-2-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(114)
在-78℃下，向5-苯基噁唑(800mg，5.51mmol)的THF(10mL)溶液中滴加n-BuLi(2.5M，2.76mL)，搅拌30分钟，然后加入六氯乙烷(1.96g，8.27mmol)的THF(2mL)溶液，将反应混合物缓慢升温至25℃并搅拌12小时。将混合物倒入冰水(20mL)中，用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，有机相用盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，通过硅胶柱(石油醚：乙酸乙酯＝10：1)纯化残余物，得到114A(900mg，收率：90.9％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ7.58(d,J＝7.3Hz,2H),7.45-7.38(m,2H),7.38-7.31(m,1H),7.27(s,1H)。
将114A(90mg，501μmol)、3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯(92.7mg，601μmol)和K2CO3(103mg，752μmol)在CH3CN(3mL)中的混合物在微波条件下在120℃下搅拌2小时。将混合物用乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)稀释，将有机相经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，通过制备型TLC(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)纯化残余物，得到114B(0.14g，收率：60.4％)，为黄色油状物，1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.76-7.67(m,2H),7.47-7.41(m,2H),7.39-7.32(m,2H),6.75(d,J＝0.9Hz,1H),4.44(q,J＝7.2Hz,2H),2.67(d,J＝0.7Hz,3H),1.43(t,J＝7.2Hz,3H)。
将114B(140mg，471μmol)和LiOH.H2O(39.5mg，942μmol)在THF(5mL)、H2O(1mL)中的混合物在25℃下搅拌2小时。真空除去有机溶剂，用1N HCl将水层调节至pH约5并过滤，用DCM(10mL×3)萃取水层，用盐水(10mL)洗涤有机相，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，将残余物合并滤饼，得到114C(120mg，粗品)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.88(s,1H),7.81-7.71(m,2H),7.52(t,J＝7.7Hz,2H),7.46-7.40(m,1H),6.81(d,J＝0.7Hz,1H),2.62(s,3H)。
如实施例5，由相应的羧酸——化合物114C制备化合物114(53mg，收率：66.5％，白色固体)。化合物114：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59(d,J＝7.7Hz,1H),8.10(s,1H),7.87(s,1H),7.84(s,1H),7.76(d,J＝7.3Hz,2H),7.52(t,J＝7.7Hz,2H),7.45-7.38(m,1H),7.31-7.22(m,4H),7.19(qd,J＝4.3,8.8Hz,1H),6.72(d,J＝0.7Hz,1H),5.49-5.40(m,1H),3.25-3.17(m,1H),3.06(dd,J＝9.4,14.0Hz,1H),2.57(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+444.1。
实施例71
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(异喹啉-1-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(119)
向1-氯异喹啉(5.0g，30.56mmol)在二噁烷(10.00mL)中的混合物中加入NH2NH2.H2O(305.62mmol，15mL)。将混合物在80℃下搅拌16小时。将反应混合物用H2O(100mL)洗涤。将反应混合物用MTBE稀释并过滤，得到化合物119A(4.27g，87.77％收率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.16(d,J＝8.3Hz,1H),7.87(d,J＝5.8Hz,1H),7.72-7.65(m,1H),7.64-7.56(m,1H),7.48-7.41(m,1H),6.90(d,J＝5.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+160.1。
将化合物119A(4.20g，26.38mmol)和2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(4.94g，26.38mmol)在HOAc(40.00mL)中的混合物在120℃下搅拌48小时。将反应混合物减压浓缩，以去除HOAc。将残余物用H2O(20mL)稀释，并用乙酸乙酯(40mL)萃取。将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，用Na2SO4干燥，减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至0：1)纯化残余物，得到化合物119B(238.00mg，3.08％收率)，为黄色油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.46(br d,J＝5.5Hz,1H),7.92(d,J＝8.2Hz,1H),7.79(d,J＝5.5Hz,1H),7.72(t,J＝7.4Hz,1H),7.67-7.53(m,2H),6.92(s,1H),4.06(q,J＝7.1Hz,2H),2.43(s,3H),0.99(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+282。
向化合物119B(238.00mg，846.04μmol)的THF(6.00mL)溶液中加入LiOH.H2O(177.50mg，4.23mmol)的H2O(2.00mL)溶液。将混合物在28℃下搅拌16小时。将反应混合物用H2O(10mL)稀释并用MTBE(15mL×2)萃取，向水相中加入1N HCl至pH约3～4，用乙酸乙酯(15mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水15mL洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物119C(201.00mg，92.87％收率)，为黄色固体。化合物119C：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.42(d,J＝5.5Hz,1H),8.12(d,J＝8.2Hz,1H),8.01(d,J＝5.7Hz,1H),7.85(t,J＝7.2Hz,1H),7.69(t,J＝7.4Hz,1H),7.56(d,J＝8.4Hz,1H),6.92(s,1H),2.32(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+254.1。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物119C制备化合物119(20.00mg，35.64％收率，淡黄色固体)。化合物119：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.23(br d,J＝6.2Hz,1H),7.94-7.85(m,3H),7.75(br t,J＝7.8Hz,1H),7.69(br d,J＝5.3Hz,1H),7.62(br t,J＝7.7Hz,1H),7.12(br d,J＝7.1Hz,1H),7.09-7.03(m,2H),6.92(br d,J＝7.1Hz,2H),6.73(s,1H),6.67(br s,1H),5.65-5.59(m,1H),5.51(brs,1H),3.36-3.28(m,1H),3.21-3.14(m,1H),2.41(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.1。
实施例72
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(5-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(120)
将2-氟-5-甲基吡啶(10.00g，89.99mmol，9.35mL)在NH2NH2.H2O(53.00g，899.93mmol，51.5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在N2气氛下将混合物在120℃下搅拌15小时。将反应混合物减压浓缩，以去除溶剂。将残余物用H2O(30mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物120A(6.09g，收率：54.9％)，为浅粉色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.95(s,1H),7.32(dd,J＝2.0,8.4Hz,1H),6.63(d,J＝8.4Hz,1H),5.68(br s,1H),2.20(s,3H)。
将化合物120A(2g，16.24mmol)、2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(3.04g，16.24mmol)在HOAc(20mL)中的混合物在120℃下搅拌20小时。将反应混合物减压浓缩，以去除溶剂。将残余物用H2O(15mL)稀释，并用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。将合并的有机层用NaHCO3(20mL×3)洗涤，然后用盐水(20mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过制备型HPLC(HCl条件)纯化残余物，得到化合物120B(340mg，收率：8.5％)，为白色固体。化合物120B：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.27(s,1H),7.82(dd,J＝1.8,8.3Hz,1H),7.58(d,J＝8.3Hz,1H),6.77(s,1H),4.19(q,J＝7.0Hz,2H),2.35(s,3H),2.28(s,3H),1.14(t,J＝7.0Hz,3H)。
向化合物120B(340mg，1.39mmol)的THF(10mL)溶液中加入LiOH.H2O(291mg，6.95mmol)的H2O(3mL)溶液。将混合物在25℃下搅拌30小时。将反应混合物用H2O(15mL)稀释，并用MTBE(10mL)萃取。通过加入1NHCl将合并的水层调节至pH约6，然后用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物120D(300mg，收率：99.4％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.50(br s,1H),8.26(s,1H),7.79(dd,J＝1.8,8.2Hz,1H),7.54(d,J＝8.2Hz,1H),6.73(s,1H),2.33(s,3H),2.24(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物120D制备化合物120(15mg，收率54.1％，淡黄色固体)。化合物120：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.21(d,J＝7.3Hz,1H),8.09(s,1H),8.04(s,1H),7.85(s,1H),7.73(dd,J＝1.6,8.2Hz,1H),7.44(d,J＝8.3Hz,1H),7.31-7.23(m,5H),6.53(s,1H),5.35-5.26(m,1H),3.16(dd,J＝4.0,14.1Hz,1H),2.87(dd,J＝9.8,14.1Hz,1H),2.31(s,3H),2.26(s,3H)。
实施例73
化合物121-122、445
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(5-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(121)
如实施例120，由相应的起始物料——化合物121A和2-氯-5-(三氟甲基)吡啶制备中间体化合物121D(650mg，收率：89.8％，白色固体)。化合物121A：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.55(br s,1H),8.86(s,1H),8.39(dd,J＝2.3,8.5Hz,1H),7.91(d,J＝8.4Hz,1H),6.81(s,1H),2.27(s,3H)。
如实施例12，由相应的中间体羧酸——化合物121D制备化合物121(35.9mg，收率：55.2％，白色固体)。化合物121：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.15(d,J＝7.3Hz,1H),8.45(s,1H),8.29(dd,J＝2.1,8.7Hz,1H),8.11(s,1H),7.88-7.80(m,2H),7.28-7.24(m,4H),7.22-7.17(m,1H),6.51(s,1H),5.36-5.28(m,1H),3.14(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.81(dd,J＝9.9,14.1Hz,1H),2.27(s,3H)。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(122)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物122D制备化合物122(54.1mg，收率：87.9％，白色固体)。化合物122：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.16(d,J＝7.3Hz,1H),8.85(d,J＝5.1Hz,1H),8.42(s,1H),8.30(dd,J＝2.1,8.7Hz,1H),7.83(d,J＝8.6Hz,1H),7.29-7.23(m,4H),7.22-7.16(m,1H),6.51(s,1H),5.38-5.30(m,1H),3.14(dd,J＝3.7,14.1Hz,1H),2.86-2.72(m,2H),2.27(s,3H),0.68-0.55(m,4H)。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(445)
如化合物121，由相应的中间体121D和274D制备化合物445(140mg，收率：47.4％，白色固体)。化合物445：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.16(d,J＝7.5Hz,1H),8.50-8.43(m,1H),8.31(dd,J＝2.2,8.8Hz,1H),8.12(s,1H),7.90-7.81(m,2H),7.29-7.18(m,4H),6.53(s,1H),5.38-5.29(m,1H),3.16(dd,J＝4.0,14.1Hz,1H),2.83(dd,J＝9.9,14.1Hz,1H),2.28(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+446.1。
实施例74
化合物123-124
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4,6-二甲基吡啶-2-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(123)
如实施例120，由相应的起始物料——化合物123A和2-氯-5-(三氟甲基)吡啶制备中间体化合物123C(210mg，收率：78.29％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.38(s,1H),7.14(s,1H),6.77(s,1H),2.40(s,3H),2.37(s,3H),2.26(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+232.0。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物123C制备化合物123(40mg，收率38.78％，淡黄色固体)。化合物123：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.13(d,J＝7.3Hz,1H),8.04(s,1H),7.81(s,1H),7.28-7.18(m,6H),6.99(s,1H),6.44(s,1H),5.41-5.21(m,1H),3.12(dd,J＝4.0,13.9Hz,1H),2.82(dd,J＝9.7,13.9Hz,1H),2.31(s,3H),2.23(s,3H),2.19(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+406.1。
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-4-苯基噻唑-5-甲酰胺(124)
如实施例41，由相应的羧酸——2-甲基-4-苯基噻唑-5-羧酸制备化合物124(40mg，收率：57.35％，白色固体)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.58-7.50(m,2H),7.49-7.36(m,3H),7.22-7.13(m,3H),6.84(br s,1H),6.80-6.69(m,2H),6.22(br d,J＝6.3Hz,1H),5.58-5.46(m,1H),3.26(dd,J＝4.9,14.2Hz,1H),2.89(dd,J＝7.5,14.1Hz,1H),2.79(qt,J＝3.8,7.4Hz,1H),2.71(s,3H),0.94-0.82(m,2H),0.66-0.55(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+434.1。
实施例75
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-1-(4-苯基噻唑-2-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(127)
如实施例85，由化合物127A制备中间体化合物127B(150mg，94.78％收率，白色固体)。化合物127B：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.20(s,1H),8.99(s,2H),6.94(s,1H),2.27(s,3H)。
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物127B制备化合物127(55.3mg，45.18％收率，白色固体)。化合物127：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.15(s,1H),8.76(s,2H),7.35-7.28(m,3H),7.13-7.09(m,2H),6.95(br s,1H),6.66-6.60(m,1H),6.47(s,1H),5.60-5.54(m,1H),3.46-3.38(m,1H),3.20-3.13(m,1H),2.87-2.77(m,1H),2.35(s,3H),0.92-0.87(m,2H),0.66-0.61(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+1)+419.1。
实施例76
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(129)
在0℃下，向NaH(1.46g，36.59mmol，60％纯度)的THF(80mL)溶液中加入4-溴-1H-吡唑-3-羧酸甲酯(5.00g，24.39mmol)的THF(20mL)溶液。加入后，将混合物温热至25℃并搅拌2小时。然后将混合物冷却至0℃，并加入SEM-Cl(4.47g，26.83mmol，4.8mL)的THF(100mL)溶液。将混合物在25℃下搅拌12小时。将混合物用H2O(200mL)稀释，将有机层用HCl(1M，100mL)、饱和NaHCO3(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝10/1至3：1)纯化残余物。得到化合物129A(3.40g，收率41.6％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39(s,1H),5.51(s,2H),3.87(s,3H),3.62-3.56(m,2H),0.95-0.81(m,2H),0.07--0.07(m,9H)。
将化合物2(3.40g，10.14mmol)、苯基硼酸(1.48g，12.17mmol)、二叔丁基(环戊基)膦；二氯钯；铁(660.9mg，1.01mmol)、K3PO4(6.46g，30.42mmol)在二噁烷(30mL)和H2O(10mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在N2气氛下将混合物在70℃下搅拌1小时。将混合物减压浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至3：1)纯化残余物。得到化合物129B(3.00g，粗品)，为棕色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.26(s,1H),7.51-7.32(m,5H),5.53(s,2H),3.78(s,3H),3.67-3.59(m,2H),0.94-0.82(m,2H),0.06--0.07(m,9H)。
向化合物129B(3.00g，9.02mmol)在MeOH(100mL)和THF(100mL)中的溶液中加入NaOH(2M，90mL)。将混合物在60℃下搅拌1小时。将混合物浓缩并用H2O(200mL)稀释，将混合物用乙酸乙酯(200mL)萃取，水相中加入HCl(1M)直至pH约3，然后用乙酸乙酯(200mL)萃取混合物，用盐水(200mL)洗涤有机层，用Na2SO4干燥并浓缩。得到化合物129C(300.0mg，收率10.4％)，为棕色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.20(s,1H),7.51-7.47(m,2H),7.43-7.37(m,2H),7.35-7.30(m,1H),5.50(s,2H),3.67-3.61(m,2H),0.92-0.87(m,2H),0.03--0.03(m,9H)。
如实施例5，由相应的羧酸——化合物129C制备中间体化合物129E(70.0mg，粗品，无色油状物)。化合物129E：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45(d,J＝7.6Hz,1H),8.25-8.21(m,1H),8.20-8.13(m,1H),7.90(s,1H),7.44-7.38(m,2H),7.36-7.19(m,8H),5.51-5.43(m,3H),3.68-3.60(m,2H),3.26-3.18(m,1H),3.08-2.99(m,1H),0.95-0.87(m,2H),0.06--0.05(m,9H)。
向化合物129E(70.0mg，142.09μmol)的乙酸乙酯(10mL)溶液中加入HCl/EtOAc(4M，710μL)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物浓缩。通过制备型HPLC(HCl条件)纯化残余物。得到化合物129(20.0mg，HCl,收率34.4％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,D2O)δ7.74-7.61(m,1H),7.41-7.33(m,2H),7.30-7.09(m,10H),4.54-4.53(m,1H),3.00-2.92(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+363.1。
实施例77
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(4-(苯氧基甲基)苯基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(131)
向3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯(250mg，1.62mmol)、[4-(苯氧基甲基)苯基]硼酸(554.7mg，2.43mmol)、4A°MS(8g)和吡啶(141mg，1.78mmol，0.15mL)在DCM(50mL)中的混合物中加入Cu(OAc)2(383mg，2.11mmol)，在O2气球(15psi)下将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤以除去4A°MS和催化剂，然后浓缩滤液。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1)和制备型TLC(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化残余物。
得到化合物131A(69.3mg，收率：13.03％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.99-7.93(m,2H),7.91-7.82(m,2H),7.80-7.68(m,2H),7.46-7.40(m,3H),5.59(s,2H),4.68(q,J＝7.1Hz,2H),2.81(s,3H),2.05(s,1H),1.69(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+337.1。
向化合物131A(69.3mg，206.02μmol)在THF(5mL)和H2O(3mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(26mg，618.06μmol)。在25℃下搅拌3小时后，向反应混合物中加入H2O(10mL)并用MTBE(20mL)萃取。将有机层用H2O(10mL)洗涤。将合并的水层用1N HCl酸化至pH约1～2，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。化合物131C(70mg，粗品，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.23(br s,1H),7.57-7.51(m,2H),7.43(d,J＝8.3Hz,2H),7.35-7.27(m,2H),7.05(d,J＝7.8Hz,2H),6.96(t,J＝7.3Hz,1H),6.83(s,1H),5.17(s,2H),2.26(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物131C制备化合物131(37.2mg，收率：45.9％，白色固体)。化合物131：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.12(br d,J＝7.5Hz,1H),8.11(br s,1H),7.86(s,1H),7.39(br d,J＝8.2Hz,2H),7.33-7.26(m,6H),7.23(br d,J＝6.4Hz,1H),7.17(br d,J＝8.2Hz,2H),7.01(br d,J＝8.2Hz,2H),6.93(t,J＝7.4Hz,1H),6.56(s,1H),5.31-5.22(m,1H),5.09(s,2H),3.19(br dd,J＝3.2,13.8Hz,1H),2.82(brdd,J＝10.9,13.6Hz,1H),2.23(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+483.1。
实施例78
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(异喹啉-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(133)
在0℃下，向异喹啉-4-胺(1.4g，9.71mmol)在5N盐酸水溶液(12mL)中的溶液中加入NaNO2(670mg，9.71mmol)的去离子水(1mL)溶液。将反应混合物在0℃下搅拌0.5小时，滴加溶解在浓盐酸(5mL)中的SnCl2·2H2O(5.48g，24.28mmol)的溶液。将混合物在25℃下搅拌2小时。用20％NaOH水溶液将混合物调节至pH约12-14。用2：1CHCl3/iPrOH(200mL)萃取混合物。将有机层干燥(Na2SO4)，过滤，并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至0：1)纯化残余物，然后减压干燥，得到化合物133A(720mg，46.55％收率)，为棕色固体。1HNMR(DMSO-d6,400MHz)：δ9.95(br s,1H),9.25-9.13(m,2H),8.04-7.95(m,2H),7.88(d,J＝8.8Hz,1H),7.26(d,J＝7.6Hz,1H),7.28-7.23(m,1H)。
将化合物133A(620mg，3.89mmol)和2,4-二氧代戊酸乙酯(615.9mg，3.89mmol)在AcOH(5mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在N2气氛下将混合物在120℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，以去除AcOH。将残余物用EtOAc 10mL稀释，并用饱和NaHCO3调节，然后最后用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化反应溶液，得到化合物133B(600.00mg，45.16％收率)，为黄色油状物。化合物133B：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ9.34(s,1H),8.54(s,1H),8.07(d,J＝7.6Hz,1H),7.72-7.61(m,2H),7.37(d,J＝8.0Hz,1H),6.96(s,1H),4.05(q,J＝7.2Hz,2H),2.42(s,3H),0.98(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+282.1。
向133B(200mg，711μmol)在MeOH(10mL)和H2O(5mL)中的混合物中一次性加入LiOH·H2O(119.3mg，2.84mmol)，并将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。将残余物用H2O(5mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，然后用EtOAc(40mL×3)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物133D(150mg，75.43％收率)，为黄色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ9.45(s,1H),8.54(s,1H),8.28(d,J＝7.6Hz,1H),7.86-7.73(m,2H),7.27(d,J＝8.4Hz,1H),6.99(s,1H),2.33(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+254.0。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物133D制备化合物133(22.2mg，31.49％收率，白色固体)。化合物133：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ9.30(s,1H),8.46(s,1H),8.06(d,J＝8.0Hz,1H),7.73-7.63(m,2H),7.47(d,J＝8.4Hz,1H),7.26-7.24(m,3H),6.97-6.95(m,2H),6.66(br s,1H),6.59(s,1H),6.48(d,J＝7.2Hz,1H),5.65(br s,1H),5.41-5.36(m,1H),3.28-3.24(m,1H),3.11-3.06(m,1H),2.40(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.1。
实施例79
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(136)
向3-甲基-1-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯(2.0g，12.97mmol)和吡啶-3-基硼酸(1.59g，12.97mmol)的吡啶(30mL)溶液中加入Cu(OAc)2(1.18g，6.49mmol)。将混合物在55℃下搅拌18小时。将混合物过滤并真空浓缩。通过快速硅胶色谱(80g Silica Flash Column，洗脱液为0～50％乙酸乙酯/石油醚梯度@40mL/min)纯化残余物。化合物136A(850mg，28.34％收率，白色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.69(d,J＝2.0Hz,1H),8.65-8.62(m,1H),7.80-7.77(m,1H),7.42-7.38(m,1H),6.86(s,1H),4.27-4.21(m,2H),2.37(s,3H),1.27-1.23(m,3H)。
如实施例85制备化合物136C(160mg，60.57％收率，白色固体)。化合物136C：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.65-8.55(m,2H),7.91-7.85(m,1H),7.53-7.47(m,1H),6.88(s,1H),2.26(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体化合物136C和12G制备化合物136(46.2mg，54.66％收率，黄色固体)。化合物136：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.61(d,J＝2.4Hz,1H),8.58-8.55(m,1H),7.74-7.69(m,1H),7.36-7.28(m,4H),7.12-7.07(m,2H),6.79(br s,1H),6.55-6.48(m,1H),6.43(s,1H),5.69(br s,1H),5.56-5.49(m,1H),3.43-3.36(m,1H),3.20-3.13(m,1H),2.33(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
实施例80
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(嘧啶-5-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(138)
向嘧啶-5-基硼酸(5.00g，40.35mmol)的MeOH(32mL)溶液中加入Cu(OAc)2(732.8mg，4.04mmol)和DBAD(9.29g，40.35mmol)。将所得混合物在60℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至25℃，减压浓缩，用水(50mL)稀释，并用乙酸乙酯(80mL×3)萃取。萃取液经无水Na2SO4干燥，减压浓缩，得到标题化合物，为黄色油状物，将其不经纯化用于下一步骤。得到化合物138A(9.00g，71.87％收率)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.96(s,1H),8.89(br s,1H),1.53–1.50(m,18H)。
向化合物138A(9.00g，25.00mmol)的1,4-二噁烷(60mL)溶液中加入4M HCl 1，4-二噁烷(60mL)，将混合物在室温下搅拌30小时。过滤悬浮液，残余物用乙酸乙酯(100mL×2)洗涤，减压干燥，得到标题化合物(3.45g，粗品)，将其不经纯化用于下一步骤。得到化合物138B(3.45g，81.17％收率，HCl)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(s,1H),8.61(s,2H)。
向化合物138B(800.0mg，5.46mmol，HCl)的CH3COOH(12mL)溶液中加入2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(1.02g，5.46mmo)，然后将混合物在120℃下搅拌2小时。将混合物用CH2Cl2(70mL)稀释，并用饱和碳酸氢钠(20mL×2)和饱和盐水(20mL×2)洗涤，将有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过快速柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝10/1至3/1)纯化残余物。得到化合物138C(250.0mg，19.72％收率)，为白色固体。
向化合物138C(50.0mg，215.29μmol)在THF(3.00mL)中的溶液中加入TMSOK(55.2mg，430.58μmol)，然后将混合物在25℃下搅拌0.5小时。将混合物用石油醚(20mL)稀释，过滤沉淀物，得到中间体化合物138D(45.0mg，86.27％收率)，为白色固体。MS(ESI)m/z(M+1)+204.9。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物138D制备化合物138(10.0mg，14.63％收率)。化合物138：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ9.15(s,1H),8.78(s,2H),7.35-7.31(m,3H),7.13(d,J＝6.4Hz,2H),6.82(s,1H),6.58(d,J＝7.2Hz,1H),6.47(s,1H),5.57-5.52(m,1H),5.46-5.58(m,1H),3.45-3.40(m,1H),3.21-3.15(m,1H),2.35(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+379.1。
实施例81
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-(2H-吲唑-2-基)-3-甲基异噁唑-4-甲酰胺(139)
向2-乙酰丙二酸二乙酯(5g，24.7mmol)的EtOH(50mL)溶液中一次性加入NH2OH·HCl(1.9g，27.2mmol)和Na2CO3(1.3g，12.4mmol)，将混合物在90℃下搅拌2小时。然后将内容物倒入冰冷的水(6mL)中，然后过滤，得到中间体化合物139A(3.2g，收率：75.6％)，为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.37(q,J＝7.0Hz,2H),2.43-2.37(m,3H),1.38(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+126.2。
向化合物139A(3g，17.5mmol)中一次性加入POCl3(21.5g，140.2mmol，13mL)。然后加入TEA(1.8g，17.5mmol)。在N2下将混合物在110℃下搅拌24小时。然后向混合物中加入冰水(15mL)，水相用EtOAc(25mL×3)萃取，将合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到中间体化合物139B(2.6g，13.7mmol，收率：78.2％)，为棕色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.36(q,J＝7.1Hz,2H),2.48(s,3H),1.38(t,J＝7.2Hz,5H)。
向化合物139B(400mg，2.1mmol)和2H-吲唑(299mg，2.5mmol)在DMF(3mL)中的混合物中一次性加入K2CO3(1.2g，8.4mmol)。将混合物在80℃下搅拌12小时。然后向混合物中加入H2O(9mL)，用EtOAc(15mL×3)萃取水相，将合并的有机层浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝300：1至40：1)纯化残余物，得到化合物139C(340mg，收率：59.4％)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.33(s,1H),7.82(d,J＝7.9Hz,1H),7.68(d,J＝8.8Hz,1H),7.57-7.51(m,1H),7.35(t,J＝7.7Hz,1H),4.24(q,J＝7.0Hz,2H),2.56(s,3H),1.13(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物139C(100mg，368.6μmol)在THF(2mL)和H2O(500μL)中的溶液中一次性加入LiOH.H2O(15.5mg，368.6μmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。然后通过加入HCl(1M)将水相的pH调节至约5，将残余物在旋转蒸发仪上浓缩，得到中间体化合物139D(83mg，收率：92.6％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(s,1H),7.94(d,J＝7.9Hz,1H),7.59(d,J＝3.5Hz,2H),7.41-7.35(m,1H),3.30(br s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+243.9。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物139D制备化合物139(18mg，收率：24.8％，白色固体)。化合物139：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.32(br d,J＝5.7Hz,1H),8.17(d,J＝8.6Hz,1H),7.93(s,1H),7.81(d,J＝7.9Hz,1H),7.65(t,J＝7.4Hz,1H),7.43(t,J＝7.5Hz,1H),7.19-7.12(m,5H),6.77(br s,1H),5.77-5.69(m,1H),5.49(br s,1H),3.42(dd,J＝5.1,14.3Hz,1H),3.20(dd,J＝7.9,14.3Hz,1H),2.57(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+418.0。
实施例82
(S)-(3-(5-((4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)氨基甲酰基)-3-甲基-1H-吡唑-1-基)苄基)氨基甲酸甲酯(140)
向3-肼基苯甲腈(30.0g，176.9mmol，HCl盐)的HOAc(500mL)溶液中加入2-甲氧基亚氨基-4-氧代-戊酸乙酯(33.1g，176.9mmol)。将混合物在100℃下搅拌12小时。将混合物浓缩，用乙酸乙酯(200mL)稀释，用NaHCO3(水溶液，200mL)、盐水(200mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1：0至5：1)纯化残余物。将得到的产物用石油醚/乙酸乙酯＝10：1(100mL)研磨并过滤。得到化合物140A(20.0g，收率44.3％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.05-8.02(m,1H),7.93-7.88(m,1H),7.83-7.78(m,1H),7.70-7.63(m,1H),6.94(s,1H),4.21-4.13(m,2H),2.26(s,3H),1.19-1.11(m,3H)。
向化合物140A(9.00g，35.26mmol)的MeOH(500mL)溶液中加入Raney-Ni(1.51g)和NH3.H2O(4mL)。将混合物在25℃、H2和40psi下搅拌12小时。将混合物浓缩，用乙酸乙酯(500mL)稀释，用HCl(500mL)洗涤，向水相中加入NaHCO3(水溶液)直至pH约11。然后将混合物用乙酸乙酯(500mL)萃取，用盐水(500mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩，得到中间体化合物140B(15g，粗品)，为黄色油状物。
向化合物140B(9.6g，37.06mmol)的DCM(100mL)溶液中加入TEA(7mL，55.6mmol)，然后向混合物中加入Boc2O(9mL，40.77mmol)并将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应物用柠檬酸(10％，100mL)洗涤，用DCM(100mL×2)萃取，用H2O(100mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，在减压下蒸发。通过快速柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化粗产物，得到化合物140C(8.5g，收率：63.8％)，为黄色油状物。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.50-7.44(m,1H),7.43-7.37(m,1H),7.32-7.24(m,3H),6.88(s,1H),4.20-4.13(m,4H),2.27(s,3H),1.37(s,9H),1.20-1.14(m,3H)。
向化合物140C(4.5g，13.03mmol)在EA(350mL)中的悬浮液中加入HCl/EtOAc(4M，35mL)，并将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应物减压蒸发，得到化合物140D(3.3g，收率89.9％，HCl)，为白色固体，将其直接用于下一步骤。
向化合物140D(1g，3.38mmol，HCl)的DCM(20mL)溶液中加入TEA(1.4mL，10.1mmol)，然后加入化合物氯甲酸甲酯(1.6mL，20.1mmol)，然后将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应用H2O(10mL)稀释，将混合物用DCM(20mL×2)萃取。收集有机层，用盐水(20mL×3)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩。通过快速柱色谱(石油醚/乙酸乙酯，0至10/1)纯化产物，得到化合物140E(400mg，收率37.3％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.77(br t,J＝6.2Hz,1H),7.43-7.38(m,1H),7.33-7.25(m,3H),6.88(s,1H),4.23(d,J＝6.2Hz,2H),4.16(q,J＝7.1Hz,2H),3.55(s,3H),2.26(s,3H),1.14(t,J＝7.1Hz,3H)。
如实施例85，由中间体化合物140E制备化合物140F(230mg，收率64.6％，白色固体)。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.76(br t,J＝6.1Hz,1H),7.42-7.35(m,1H),7.31-7.22(m,3H),6.82(s,1H),4.23(br d,J＝6.2Hz,2H),3.55(s,3H),2.25(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物140F制备化合物140(35mg，收率21.1％，白色固体)。化合物140：1H NMR(CD3CN,400MHz)δ7.40-7.17(m,10H),7.07(br d,J＝18.3Hz,2H),6.47(br s,1H),6.26(br s,1H),6.09(br s,1H),5.34(br s,1H),4.29(brs,2H),3.60(br s,3H),3.27(br d,J＝9.5Hz,1H),2.99-2.85(m,1H),2.27(br s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+464.2。
实施例83
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(3-(苯甲酰氨基甲基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(141)
向化合物140D(300mg，1.22mmol)和苯甲酸(150mg，1.22mmol)的DCM(10mL)溶液中加入HOBt(330mg，2.44mmol)、DIEA(0.5mL，3.05mmol)和EDCI(470mg，2.44mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。真空去除溶剂。将残余物溶于EtOAc(20mL)中，用1N HCl(20mL)洗涤。收集有机物，用饱和NaHCO3(20mL)洗涤。收集有机物，用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到化合物141A(400mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+364.0。
向化合物141A(400mg，1.14mmol)在THF(5mL)和H2O(5mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(241mg，5.72mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应物用1N HCl酸化至pH约4，用EtOAc(15mL×2)萃取。收集有机物并浓缩。通过制备型HPLC(中性条件)纯化残余物，得到化合物141B(100mg，收率26.16％)，为白色固体。MS(ESI)m/z(M+Na)+358.0。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物141B制备化合物141(4.4mg，收率：14.40％，白色固体)。化合物141：MS(ESI)m/z(M+H)+510.0。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)-8.68(m,2H),7.94-7.88(m,2H),7.84-7.57(m,2H),7.54-7.20(m,11H),7.11-6.99(m,1H),6.55(s,1H),5.33-5.24(m,1H),4.56-4.48(m,2H),3.26-3.18(m,1H),2.95-2.86(m,1H),2.25(s,3H)。
实施例84
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(3-((3-苯基丙酰胺基)甲基)苯基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(142)
向化合物140D(500mg，2.04mmol)和3-苯基丙酸(310mg，2.04mmol)的DCM(20mL)溶液中加入DIEA(0.9mL，5.10mmol)、HOBt(552mg，4.08mmol)和EDCI(783mg，4.08mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。真空去除溶剂。将残余物溶于EtOAc(30mL)中，用1N HCl(30mL)洗涤。收集有机物，用饱和(30mL)、盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，收集并真空干燥，得到中间体化合物22(700mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+Na)+414.0。
向化合物142A(700mg，1.85mmol)在THF(10mL)和H2O(10mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(390mg，9.27mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将残余物用1N HCl酸化至pH约4。用EtOAc(20mL×2)萃取溶液。收集有机物并浓缩。通过制备型HPLC(中性)纯化残余物，得到化合物142B(210mg，收率31.24％)，为白色固体。MS(ESI)m/z(M+Na)+386.0。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物142B制备化合物142(49.5mg，收率：37.88％，白色固体)。化合物142：MS(ESI)m/z(M+H)+538.2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)-8.68(m,1H),8.18-8.08(m,1H),7.88-7.54(m,2H),7.33-7.02(m,15H),6.59-6.49(m,1H),5.33-5.26(m,1H),4.32-4.25(m,2H),3.26-3.20(m,1H),2.95-2.90(m,1H),2.90-2.85(m,2H),2.49-2.45(m,2H),2.28-2.22(m,3H)。
实施例85
(S)-1-(3-(乙酰氨基甲基)苯基)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(143)
向化合物140D(500mg，2.04mmol)和乙酰氯(160mg，2.04mmol)的DCM(20mL)溶液中加入TEA(0.7mL，5.10mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。用1N HCl(10mL)洗涤反应物。收集有机物，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到中间体化合物143A(580mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+Na)+323.9。
向化合物143A(580mg，2.02mmol)在THF(10mL)和H2O(10mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(424mg，10.09mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应物用1N HCl酸化至pH约4。用EtOAc(20mL×2)萃取溶液。收集有机物并浓缩。通过制备型HPLC(中性)纯化残余物，得到化合物26(100mg，收率18.11％)，为白色固体。MS(ESI)m/z(M+Na)+295.9。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物143B制备化合物143(6.2mg，收率：12.26％，白色固体)。化合物143：MS(ESI)m/z(M+H)+448.1。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)8.78-8.67(m,0.6H),8.19-8.05(m,1H),7.85-7.72(m,1H),7.67-7.53(m,0.6H),7.36-6.87(m,10H),6.59-6.46(m,1H),6.30-5.89(m,1H),5.33-5.23(m,0.6H),4.52-4.40(m,0.6H),4.32-4.22(m,2H),3.27-3.19(m,0.5H),2.96-2.85(m,0.6H),2.77-2.66(m,1H),2.29-2.19(m,3H),1.89(s,3H)。
实施例86
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(3-((2-苯基乙酰氨基)甲基)苯基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(144)
向化合物140D(500mg，2.04mmol)和2-苯基乙酸(278mg，2.04mmol)的DCM(20mL)溶液中加入DIEA(0.9mL，5.10mmol)、HOBt(552mg，4.08mmol)和EDCI(783mg，4.08mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。真空去除溶剂。将残余物溶于EtOAc(30mL)中，用1N HCl(30mL)洗涤。收集有机物，用饱和NaHCO3(30mL)洗涤。收集有机物，用盐水(30mL)洗涤。收集有机物，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到中间体化合物144A(700.00mg，粗品)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+378.0。
向化合物144A(700mg，1.93mmol)在THF(10mL)和H2O(10mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(405mg，9.63mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应物用1N HCl酸化至pH约4。用EtOAc(15mL×2)萃取溶液。收集有机物并浓缩。通过制备型HPLC(中性)纯化残余物，得到化合物144B(260mg，收率38.56％)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+349.9。
如实施例5，由相应的起始物料——化合物114B和12G制备化合物144(36mg，收率：45.17％，白色固体)。化合物144：MS(ESI)m/z(M+H)+524.2。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)9.07(d，J＝7.6Hz,1H),8.66-8.49(m,1H),8.08(br.s,1H),7.84(br.s,1H),7.34-7.10(m,13H),6.94-6.86(m,1H),6.53(s,1H),5.27-5.16(m,1H),4.32-4.16(m,2H),3.44(s,2H),3.22-3.10(m,1H),2.85-2.73(m,1H),2.22(s,3H)。
实施例87
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(3-(苯磺酰胺基甲基)苯基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(145)
向化合物140D(300mg，1.1mmol，HCl盐)的DCM(20mL)混合物中一次性加入TEA(0.44mL，3.2mmol)。在0℃下将苯磺酰氯(0.15mL，1.2mmol)滴加到混合物中30分钟，然后在25℃下搅拌1小时。将反应混合物用0.5N HCl(10mL)、饱和NaHCO3水溶液(10mL)和盐水(10mL)洗涤。将分离的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。将残余物用CH3CN(2mL)研磨。收集固体并真空干燥，得到化合物145A(330mg，收率79.2％)，为白色固体。MS(ESI)m/z(M+H)+386.0。
向化合物145A(150mg，0.39mmol)在MeOH(10mL)和H2O(0.5mL)中的混合物中一次性加入LiOH.H2O(81.6mg，1.9mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将所得混合物减压浓缩，以去除MeOH。然后将残余物用水(15mL)稀释并用乙酸乙酯(10mL)萃取，将水相用HCl水溶液(1M)酸化至pH约6～7并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(40mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到中间体化合物145B(140mg，粗品)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.29-8.22(m,1H),7.85-7.78(m,2H),7.65-7.54(m,3H),7.38-7.23(m,4H),6.82(s,1H),4.04(d,J＝6.0Hz,2H),2.26(s,3H)。
如实施例12，由相应的中间体羧酸——化合物145B制备化合物145(30mg，收率46.8％，白色固体)。化合物145：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.86-7.81(m,2H),7.58-7.46(m,3H),7.37-7.26(m,5H),7.15-7.06(m,5H),6.41(s,1H),6.24-6.18(m,1H),6.16-6.10(m,2H),5.38-5.31(m,1H),4.20-4.08(m,2H),3.34-3.27(m,1H),3.10-3.03(m,1H),2.30(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+546.1。
实施例88
(S)-(3-(5-((4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)氨基甲酰基)-3-甲基-1H-吡唑-1-基)苄基)氨基甲酸乙酯(147)
向化合物140D(1g，3.38mmol，HCl盐)的DCM(20mL)溶液中滴加TEA(1.4mL，10.14mmol)、氯甲酸乙酯(1.9mL，20.27mmol)，然后将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应物用H2O(10mL)稀释，将混合物用DCM(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL×3)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。通过快速柱色谱(石油醚/乙酸乙酯：0至10/1)纯化产物，得到化合物147A(570mg，收率50.9％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.72(brt,J＝6.1Hz,1H),7.43-7.37(m,1H),7.32-7.25(m,3H),6.88(s,1H),4.23(br d,J＝6.2Hz,2H),4.15(q,J＝7.1Hz,2H),4.03-3.97(m,2H),2.26(s,3H),1.16-1.12(m,6H)。
向化合物147A(560mg，1.69mmol)的MeOH(15mL)溶液中滴加LiOH(2M，5mL)，然后将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应用H2O(10mL)稀释，并减压浓缩。用TBME(10mL)萃取混合物，用HCl(1M)处理水相直至pH约5。将混合物用乙酸乙酯(15mL×3)萃取，将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到化合物147B(420mg，收率81.9％)，为白色固体，将其直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.69(br t,J＝6.2Hz,1H),7.38-7.33(m,1H),7.27-7.20(m,3H),6.78(s,1H),4.19(br d,J＝6.2Hz,2H),3.97(q,J＝7.1Hz,2H),2.22(s,3H),1.16-1.10(m,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物147B制备化合物147(45mg，收率27.4％，白色固体)。化合物147：1H NMR(CD3CN,400MHz)δ7.37-7.22(m,9H),7.10(br d,J＝7.7Hz,2H),6.49(s,1H),6.33(br s,1H),6.10(br s,1H),5.40-5.31(m,1H),4.31(br d,J＝6.2Hz,2H),4.08(q,J＝7.1Hz,2H),3.29(dd,J＝4.5,14.0Hz,1H),2.93(dd,J＝9.4,14.0Hz,1H),2.29(s,3H),1.21(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+478.2。
实施例89
(S)-N-(4-((3,4-二氯苄基)氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(149)
向苯基肼(1.00g，9.25mmol，910μL)的HOAc(20mL)溶液中加入2,4-二氧代戊酸乙酯(1.46g，9.25mmol，1.3mL)。将混合物在100℃下搅拌12小时。将混合物浓缩，用乙酸乙酯(50mL)稀释，用NaHCO3(水溶液，50mL×3)、盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。通过制备型HPLC(TFA条件)纯化残余物。得到化合物149A(700.0mg，收率32.9％)，为黄色油状物。得到化合物149B(1.00g，收率46.9％)，为黄色油状物。
化合物149A：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.48-7.36(m,5H),6.87(s,1H),4.18-4.10(m,2H),2.25(s,3H),1.16-1.11(m,3H)。
化合物149B：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.61-7.44(m,5H),6.75(s,1H),4.31-4.23(m,2H),2.31(s,3H),1.30-1.24(m,3H)。
向化合物149A(700.0mg，3.04mmol)在THF(20mL)和MeOH(5mL)中的溶液中加入NaOH(2M，30)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将混合物浓缩，用H2O(20mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL)萃取，水相中加入HCl(1M)直至pH约1，然后用乙酸乙酯(20mL)萃取混合物，将有机层用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。得到化合物149C(600.0mg，收率97.6％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.21(br s,1H),7.49-7.31(m,5H),6.81(s,1H),2.24(s,3H)。
向化合物149C(600.0mg，2.97mmol)的THF(20mL)溶液中加入DIEA(1.54g，11.88mmol，2mL)、(2S)-2-氨基-3-苯基-丙烷-1-醇(448.7mg，2.97mmol)、HOBt(401.3mg，2.97mmol)和EDCI(683.2mg，3.56mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将混合物浓缩，用乙酸乙酯(50mL)稀释，用HCl(1M，50mL)、饱和NaHCO3(水溶液，50mL)、盐水(50mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。得到化合物149D(600.0mg，收率60.2％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.38(d,J＝8.8Hz,1H),7.32-7.17(m,8H),7.12-7.07(m,2H),6.50(s,1H),4.89-4.83(m,1H),4.10-3.99(m,1H),3.48-3.35(m,2H),2.95-2.87(m,1H),2.68-2.59(m,1H),2.21(s,3H)。
向化合物149D(600.0mg，1.79mmol)的DCM(200mL)溶液中加入DMP(1.14g，2.69mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物用10％Na2S2O3(水溶液)：饱和NaHCO3(水溶液)(1:1，200mL)淬灭，用DCM(100mL)萃取并用盐水(20mL×3)洗涤。将合并的有机层用Na2SO4干燥并浓缩。得到化合物149E(500.0mg，收率83.8％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.58(s,1H),9.03(d,J＝8.0Hz,1H),7.36-7.13(m,10H),6.57(s,1H),4.56-4.49(m,1H),3.28-3.21(m,1H),2.81-2.72(m,1H),2.25-2.17(m,3H)。
向化合物149E(500.0mg，1.50mmol)的DCM(10mL)溶液中加入TEA(15.2mg，150.00μmol，20μL)和TMSCN(223.2mg，2.25mmol，280μL)。将混合物在0℃下搅拌3小时。将混合物用H2O(100mL)、盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到中间体化合物149F(600.0mg，粗品)，为无色油状物。
向化合物149F(600.0mg，1.39mmol)的THF(30mL)溶液中加入HCl(10mL)。在60℃下搅拌12小时后，将混合物用H2O(100mL)稀释，用乙酸乙酯(50mL)萃取。用NaHCO3(水溶液，50mL)洗涤有机层。向水相中加入HCl(1M)直至pH约1，然后用乙酸乙酯(500mL)萃取。将有机层用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到中间体化合物149G(500.0mg，粗品)，为无色油状物。
向化合物149G(500.0mg，1.32mmol)的THF(10mL)溶液中加入(3,4-二氯苯基)甲胺(255.6mg，1.45mmol，190μL)、HOBt(178.4mg，1.32mmol)、DIEA(682.4mg，5.28mmol，920μL)和EDCI(303.7mg，1.58mmol)与DCM(10mL)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将混合物浓缩，用乙酸乙酯(30mL)稀释，用HCl(1M，30mL)、饱和NaHCO3(水溶液，30mL)、盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。通过制备型HPLC(TFA条件)纯化粗产品。将所得产物(70mg)用CH3CN(5mL)研磨并过滤。得到化合物149H(30.0mg，4.23％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.67-8.50(m,1H),8.11(d,J＝9.6Hz,1H),7.50-7.41(m,1H),7.39-7.34(m,1H),7.32-7.14(m,9H),7.07-6.96(m,2H),6.47-6.36(m,1H),4.46-4.36(m,1H),4.34-4.10(m,2H),4.06-3.99(m,1H),2.95-2.71(m,2H),2.26-2.13(m,2H),2.26-2.13(m,1H)。
向化合物149H(30.0mg，55.82μmol)在DCM(10mL)和DMSO(1mL)中的溶液中加入DMP(47.4mg，111.64μmol)。将混合物在25℃下搅拌48小时。将混合物用10％Na2S2O3(水溶液)：饱和NaHCO3(水溶液)(1：1，20mL)淬灭，用DCM(10mL)萃取并用盐水(20mL×3)洗涤。将合并的有机层用Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物用CH3CN(3mL)研磨并过滤。得到化合物149(15.0mg，收率40.0％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.36-9.30(m,1H),9.11(brd,J＝7.6Hz,1H),7.54-7.48(m,2H),7.33-7.19(m,9H),7.13(br d,J＝6.6Hz,2H),6.52(s,1H),5.29-5.22(m,1H),4.34-4.28(m,2H),3.22-3.15(m,1H),2.89-2.80(m,1H),2.26-2.18(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+535.1。
实施例90
化合物150-152
(S)-N-(3,4-二氧代-1-苯基-4-((3-(三氟甲氧基)苄基)氨基)丁-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(150)
向化合物101E(500.0mg，1.31mmol)的THF(10mL)溶液中加入[3-(三氟甲氧基)苯基]甲胺(251.3mg，1.31mmol)、DIEA(509.6mg，3.94mmol，690μL)、HOBt(177.6mg，1.31mmol)和EDCI(302.4mg，1.58mmol)与DCM(5mL)。在25℃下搅拌12小时后，将混合物浓缩并用乙酸乙酯(50mL)稀释，用HCl(1M，50mL)、饱和NaHCO3水溶液(50mL)、盐水(50mL×3)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物(0.30g)用CH3CN(5mL)研磨并过滤。化合物150A(140.0mg，收率19.3％，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.75-8.53(m,1H),8.31(d,J＝9.6Hz,1H),7.59-7.08(m,14H),6.21-5.91(m,1H),4.71-4.56(m,1H),4.40-4.24(m,2H),4.22-4.01(m,1H),2.98-2.67(m,2H),2.09-1.96(m,3H)。
向化合物150A(60.0mg，108.40μmol)在DCM(10mL)和DMSO(1mL)中的溶液中加入DMP(137.9mg，325.20μmol)。在25℃下搅拌4小时后，将混合物用10％Na2S2O3(水溶液)：饱和NaHCO3水溶液(1：1，20mL)淬灭，用DCM(10mL)萃取并用盐水(20mL×3)洗涤。将合并的有机层用Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物用CH3CN(3mL)研磨并过滤。化合物150(50.0mg，收率82.8％，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54-9.45(m,1H),9.11(d,J＝7.6Hz,1H),7.67-7.57(m,2H),7.54-7.36(m,4H),7.34-7.18(m,8H),5.52-5.43(m,1H),4.40(br d,J＝6.0Hz,2H),3.27-3.18(m,1H),2.84-2.72(m,1H),2.04(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+552.1。
(S)-3-甲基-N-(4-((4-(甲基磺酰基)苄基)氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(151)
(S)-3-甲基-N-(4-((3-(甲基磺酰基)苄基)氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(152)
如实施例150，分别由化合物101E和相应的胺制备化合物151和152。化合物151(40.0mg，63.6％收率，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.58-9.51(m,1H),9.12(d,J＝7.2Hz,1H),7.86(d,J＝8.4Hz,2H),7.65-7.59(m,2H),7.56-7.38(m,5H),7.31-7.19(m,5H),5.53-5.44(m,1H),4.48-4.42(m,2H),3.29-3.21(m,1H),3.20-3.10(m,3H),2.83-2.73(m,1H),2.08-1.96(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+546.1。
化合物152(42.0mg，68.8％收率，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.59-9.51(m,1H),9.11(d,J＝7.6Hz,1H),7.91-7.78(m,2H),7.67-7.57(m,4H),7.53-7.37(m,3H),7.34-7.17(m,5H),5.53-5.45(m,1H),4.46(br d,J＝6.4Hz,2H),3.29-3.21(m,1H),3.20-3.10(m,3H),2.83-2.72(m,1H),2.09-1.98(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+546.1。
实施例91
(S)-(4-(5-((4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)氨基甲酰基)-3-甲基-1H-吡唑-1-基)苄基)氨基甲酸苄基酯(153)
向4-肼基苯甲腈(20g，117.92mmol，HCl)的HOAc(200mL)溶液中加入化合物2-甲氧基亚氨基-4-氧代-戊酸乙酯(23.18g，123.82mmol)，然后将混合物加热至110℃并搅拌12小时，然后在减压下除去溶剂。将残余物溶于乙酸乙酯(200mL)中并用NaHCO3处理直至pH约8，然后收集有机层并减压蒸发。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝15/1至3/1)纯化残余物，得到化合物153B(5g，收率：16.61％)，为白色固体。化合物153B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.71(dd,J＝7.9Hz,2H),7.53(br d,J＝7.5Hz,2H),6.84(s,1H),4.23(q,J＝7.0Hz,2H),2.33(s,3H),1.25(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+255.9。
在氩气下，向化合物153B(6.5g，25.46mmol)的MeOH(70mL)溶液中加入Raney-Ni(1.09g，12.73mmol)和NH3.H2O(2.68g，76.38mmol，3mL)。将悬浮液在真空下脱气并用H2吹扫3次。在H2(40psi)下，将混合物在30℃下搅拌16小时。过滤反应混合物，减压浓缩滤液，得到中间体化合物153D(6.6g，粗品)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.46-7.36(m,2H),7.35-7.29(m,2H),6.87(s,1H),3.77(s,2H),3.71(s,3H),2.26(s,3H)。
在25℃和N2下，向化合物153D(3.3g，13.45mmol)的DCM(40mL)混合物中分批加入Et3N(2.04g，20.17mmol，2.8mL)和Boc2O(3.52g，16.14mmol，3.7mL)。将混合物在25℃下搅拌1.5小时。将反应混合物用DCM(20mL)稀释，并用H2O(50mL)洗涤。分离有机层，水层用DCM(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至2/1)纯化残余物，得到化合物153E(3.3g，收率：64.86％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37(s,4H),6.80(s,1H),4.38(dd,J＝5.1Hz,2H),3.78(s,3H),2.36(s,3H),1.47(s,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+346.1。
在0℃下，向化合物153E(3.3g，9.55mmol)在乙酸乙酯(20mL)中的混合物中滴加入HCl/EtOAc(4M，20mL)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物浓缩，得到中间体化合物153F(2.7g，粗品，HCl)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.62(s,1H),7.63(dd,J＝7.9Hz,2H),7.40(dd,J＝7.5Hz,2H),6.80(s,1H),4.16(s,2H),3.74(s,3H),2.34(s,3H)。
在25℃下，向化合物153F(300mg，1.06mmol，HCl)在DCM(20mL)中的混合物中分批加入Et3N(268.15mg，2.65mmol，0.4mL)和氯甲酸苄酯(181mg，1.06mmol，0.2mL)，并搅拌1.5小时。将反应混合物用DCM(20mL)处理，加入H2O(30mL)。分离有机层并用盐水(30mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1)纯化残余物，得到化合物153G(350mg，收率：87.03％)，为类白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.42-7.29(m,9H),6.82-6.78(m,1H),5.16(s,2H),4.45(dd,J＝6.2Hz,2H),3.80-3.77(m,3H),2.39-2.34(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+380.0。
在25℃下，向化合物153G(350mg，922.48μmol)在THF(10mL)和H2O(10mL)中的混合物中分批加入LiOH.H2O(116mg，2.77mmol)，并搅拌1.5小时。将混合物用H2O(10mL)稀释并浓缩以除去THF，然后用MTBE(30mL×2)萃取水。用1N HCl将水层酸化至pH约2，然后用乙酸乙酯(30mL×3)萃取溶液。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到中间体化合物153H(300mg，收率：89.04％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.35(dd,J＝5.3,8.2Hz,6H),7.30-7.16(m,2H),7.14-6.98(m,1H),6.90-6.82(m,1H),5.15(s,2H),4.47-4.30(m,2H),2.46-2.28(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+366.1。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物153H制备化合物153(35mg，收率：50.19％，白色固体)。化合物153：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.04(d,J＝7.7Hz,1H),8.09(s,1H),7.84(br s,2H),7.38-7.17(m,12H),7.09(d,J＝8.2Hz,2H),6.53(s,1H),5.27(t,J＝7.5Hz,1H),5.04(s,2H),4.20(d,J＝6.0Hz,2H),3.19(dd,J＝3.3,14.1Hz,1H),2.86-2.75(m,1H),2.22(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+540.2。
实施例92
化合物154-159、496
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4-(苯甲酰氨基甲基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(154)
在25℃下，向化合物153F(300mg，1.06mmol，HCl)、苯甲酸(155mg，1.27mmol，0.2mL)、HOBt(286mg，2.12mmol)和DIEA(343mg，2.65mmol，0.5mL)在DCM(20mL)中的混合物中分批加入EDCI(406mg，2.12mmol)，并搅拌4小时。将反应混合物用DCM(10mL)处理，用H2O(20mL)洗涤。分离有机层，水层用DCM(10mL×2)萃取。将合并的有机层用0.5N HCl(20mL×2)、饱和NaHCO3(20mL×2)和盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空除去溶剂。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1)纯化残余物，得到化合物154A(280mg，收率：75.61％)，为类白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.81(dd,J＝6.4Hz,2H),7.58-7.40(m,7H),6.85-6.78(m,1H),6.48(br s,1H),4.72(br d,J＝5.1Hz,2H),3.84-3.77(m,3H),2.41-2.34(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+Na)+372.0。
在25℃下，向化合物154A(280mg，801.42μmol)在MeOH(10mL)和H2O(10mL)中的混合物中分批加入NaOH(2M，2mL)，并搅拌3小时。将混合物浓缩以除去MeOH，然后用MTBE(30mL×2)萃取水。用1N HCl将水层酸化至pH约2，然后用乙酸乙酯(20mL×2)萃取溶液。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到中间体化合物154B(200mg，收率：74.41％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.79(dd,J＝8.2Hz,2H),7.50-7.31(m,7H),6.78(s,1H),4.62(s,2H),2.31(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+336.0。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物154B制备化合物154(20mg，收率：29.53％，白色固体)。化合物154：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.11-9.04(m,2H),8.11(s,1H),7.96-7.91(m,2H),7.86(s,1H),7.56-7.47(m,3H),7.30(d,J＝4.4Hz,3H),7.27(d,J＝8.6Hz,2H),7.23-7.19(m,1H),7.12(d,J＝8.4Hz,2H),6.55(s,1H),5.32-5.26(m,1H),4.51(br d,J＝5.7Hz,2H),3.21(dd,J＝3.5,13.9Hz,1H),2.86-2.78(m,1H),2.25(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+510.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(4-((3-苯基丙酰胺基)甲基)苯基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(155)
按照如化合物154B所用的步骤，由化合物153F经过155A制备中间体化合物155B(200mg，收率：74.41％，白色固体)。化合物155B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.28-7.12(m,8H),6.94(s,1H),6.78(s,1H),4.42-4.31(m,2H),2.94(t,J＝7.5Hz,2H),2.50(t,J＝7.2Hz,2H),2.31(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+364.1。
如实施例12，由相应的中间体羧酸——化合物155B制备化合物155(20mg，收率27.16％，淡黄色固体)。化合物155：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.06(d,J＝7.7Hz,1H),8.38(t,J＝5.8Hz,1H),8.11(s,1H),7.87(s,1H),7.33-7.29(m,4H),7.27(d,J＝7.5Hz,2H),7.24-7.18(m,3H),7.13-7.07(m,4H),6.56(s,1H),5.30(dd,J＝2.6Hz,1H),4.27(d,J＝5.7Hz,2H),3.25-3.19(m,1H),2.87-2.83(m,2H),2.53(d,J＝2.0Hz,1H),2.49-2.44(m,2H),2.25(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+538.2。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(4-(苯磺酰胺基甲基)苯基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(156)
按照如化合物154B所用的步骤，由化合物153F经过156A制备中间体化合物156B(250mg，收率：86.48％，白色固体)。化合物156B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.85(dd,J＝7.7Hz,2H),7.61-7.43(m,3H),7.29-7.20(m,4H),6.78(s,1H),4.09(s,2H),2.30(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+372.0。
如实施例12，由相应的中间体羧酸——化合物156B制备化合物156(45mg，收率：78.05％，白色固体)。化合物156：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.10-9.01(m,1H),8.19(br s,1H),8.09(s,1H),7.86-7.79(m,3H),7.63-7.56(m,3H),7.32-7.25(m,5H),7.19(d,J＝8.4Hz,2H),7.07(d,J＝8.4Hz,2H),6.52(s,1H),5.26(brs,1H),3.97(d,J＝5.3Hz,2H),3.23-3.13(m,1H),2.87-2.75(m,1H),2.22(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+546.1。
(S)-1-(4-(乙酰氨基甲基)苯基)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(157)
按照如化合物154B所用的步骤，由化合物153F经过157A制备中间体化合物157B(162mg，收率：94.62％，白色固体)。化合物157B：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(br s,1H),8.43(br t,J＝5.8Hz,1H),7.37-7.25(m,4H),6.79(s,1H),4.29(d,J＝6.0Hz,2H),2.23(s,3H),1.88(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物157B制备化合物157(17mg，收率：33.13％，灰色固体)。化合物157：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(brd,J＝7.5Hz,1H),8.12(br s,1H),7.83-7.54(m,2H),7.31-7.18(m,9H),6.55(s,1H),5.35-5.27(m,1H),4.28(d,J＝6.0Hz,2H),3.25(d,J＝4.3Hz,0.5H),3.21(d,J＝4.0Hz,0.5H),2.94(s,0.5H),2.91(d,J＝4.3Hz,0.5H),2.25(s,3H),1.91(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+448.1。
(S)-(4-(5-((4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)氨基甲酰基)-3-甲基-1H-吡唑-1-基)苄基)氨基甲酸甲酯(158)
按照如化合物154B所用的步骤，由化合物153F经过158A制备中间体化合物158B(150mg，收率：62.91％，白色固体)。化合物158B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.28(m,4H),6.78(s,1H),4.36(s,2H),3.67(s,3H),2.34-2.30(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+289.9。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物158B制备化合物158(12mg，收率22.68％，淡黄色固体)。化合物158：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08(dd,J＝7.5Hz,1H),8.13(s,1H),7.87(br s,1H),7.74(s,1H),7.35-7.17(m,7H),7.16-7.07(m,2H),6.54(s,1H),5.34-5.24(m,1H),4.19(dd,J＝6.0Hz,2H),3.57(s,3H),3.28-3.18(m,1H),2.82(dd,J＝10.9,13.3Hz,1H),2.24(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+464.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(4-((2-苯基乙酰氨基)甲基)苯基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(159)
在25℃下，向化合物153F(300mg，1.06mmol，HCl)和2-苯乙酸(173mg，1.27mmol，0.16mL)在DMF(10mL)中的混合物中一次性加入DIEA(548mg，4.24mmol，0.75mL)和HBTU(603mg，1.59mmol)。将混合物在25℃下搅拌1.5小时。将混合物用30mL乙酸乙酯和20mL H2O稀释，分离有机层并用1N HCl(20mL×2)、饱和NaHCO3(20mL×2)和盐水(20mL)洗涤，将有机层用Na2SO4干燥，过滤，将有机层真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝4/1)纯化残余物。得到化合物159A(190mg，收率：49.32％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(br t,J＝5.8Hz,1H),7.36-7.14(m,9H),6.91-6.78(m,1H),4.31(d,J＝6.0Hz,2H),3.69(s,3H),3.48(s,2H),2.24(s,3H)。
向化合物159A(190mg，522.83μmol)在MeOH(8mL)和H2O(5mL)中的溶液中加入NaOH(84mg，2.09mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩并加入10mL水，用MTBE(10mL×2)萃取混合物，在0℃下用1N HCl将水层酸化至pH约2～3，并用EtOAc(10mL×2)萃取，将有机相用Na2SO4干燥，并浓缩，得到残余物。得到化合物159B(143mg，收率：78.28％)，为白色固体，将其直接用于下一步骤。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.62(br t,J＝5.7Hz,1H),7.34-7.24(m,8H),7.24-7.19(m,1H),6.76(s,1H),4.30(d,J＝5.7Hz,2H),3.48(s,2H),2.22(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物159B制备化合物159(25mg，收率：33.34％，白色固体)。化合物159：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31(brs,1H),7.40-7.05(m,17H),6.56(s,1H),5.31(dd,J＝4.3,9.8Hz,1H),4.31(d,J＝4.3Hz,2H),3.52(s,2H),3.23(dd,J＝4.3,14.1Hz,1H),2.91(dd,J＝10.0,13.8Hz,1H),2.25(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+524.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4-((4-氟苯甲酰氨基)甲基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(496)
如化合物154，使用中间体153F和4-氟苯甲酰氯制备化合物496(246.9mg，收率：80.2％，白色固体)，并使所得产物进行如化合物12中的反应，以得到化合物496。化合物496：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ99.20-9.05(m,2H),8.13(s,1H),8.05-7.96(m,2H),7.87(s,1H),7.40-7.16(m,9H),7.16-7.08(m,2H),6.54(s,1H),5.32-5.22(m,1H),4.55-4.45(m,2H),3.22-3.14(m,1H),2.83-2.73(m,1H),2.24(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+526.2。
实施例93
(S)-(4-(5-((4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)氨基甲酰基)-3-甲基-1H-吡唑-1-基)苄基)氨基甲酸甲酯(161)
在25℃下，向化合物153F(450mg，1.60mmol，HCl)在DCM(15.00mL)中的混合物中分批加入TEA(485mg，4.79mmol，0.7mL)和氯甲酸乙酯(ethylcarbonochloridate)(452mg，4.17mmol，0.4mL)，并搅拌2小时。将反应混合物用DCM(20mL)处理，用H2O(30mL)洗涤。分离有机层并用盐水(30mL)洗涤，经无水NaSO4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1)纯化残余物，得到化合物161A(400mg，收率：52.81％)，为类白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37(br s,4H),6.80(dd,J＝3.5Hz,1H),4.43(s,2H),4.20-4.09(m,2H),3.79(d,J＝3.7Hz,3H),2.36(dd,J＝3.5Hz,3H),1.27(td,J＝3.5,7.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+318.0。
在25℃下，向化合物161A(400mg，1.26mmol)在THF(10mL)和H2O(10mL)中的混合物中分批加入LiOH.H2O(159mg，3.78mmol)，并搅拌0.5小时。将混合物用H2O(10mL)稀释并浓缩以除去THF，然后用MTBE(30mL×2)萃取水。用1N HCl将水层酸化至pH约2，然后用乙酸乙酯(30mL×3)萃取溶液。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到中间体化合物161B(300mg，收率：78.50％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.33(s,4H),6.79(s,1H),4.35(s,2H),4.23-4.03(m,2H),2.38-2.27(m,3H),1.41-1.19(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+304.0。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物161B制备化合物161(25mg，收率：22.8％，白色固体)。化合物161：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.07(dd,J＝8.2Hz,1H),8.12(s,1H),7.87(s,1H),7.69(s,1H),7.42-7.27(m,5H),7.20(dd,J＝7.9Hz,2H),7.16-7.06(m,2H),6.54(s,1H),5.34-5.24(m,1H),4.18(dd,J＝5.5Hz,2H),4.02(q,J＝7.1Hz,2H),3.21(dd,J＝2.9,13.2Hz,1H),2.92-2.77(m,1H),2.24(s,3H),1.18(br t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+478.1。
实施例94
(S)-(4-(5-((4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)氨基甲酰基)-3-甲基-1H-吡唑-1-基)苄基)氨基甲酸苯基酯(162)
在25℃下，向化合物153E(300mg，868.58μmol)在THF(10mL)和H2O(10mL)中的混合物中分批加入LiOH.H2O(109mg，2.61mmol)，并搅拌12小时。将混合物用H2O(10mL)稀释并浓缩以除去THF，然后用MTBE(30mL×2)萃取水。用1N HCl将水层酸化至pH约2，然后用乙酸乙酯(30mL×3)萃取溶液。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到中间体化合物162A(250mg，收率：86.86％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.41-7.30(m,2H),7.27-7.04(m,2H),6.86(s,1H),4.43-4.26(m,2H),2.46-2.32(m,3H),1.60-1.40(m,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+332.0。
在25℃下，向化合物12G(209mg，905.33μmol，HCl)和化合物162A(250mg，754.44μmol)在DMF(10mL)中的混合物中分批加入DIEA(244mg，1.89mmol，0.3mL)和HBTU(343mg，905.33μmol)，并搅拌1.5小时。将反应混合物用乙酸乙酯(40mL)处理，用H2O(50mL×2)洗涤。将有机层用盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空除去溶剂。将残余物在DCM(2mL)和石油醚(10mL)中研磨，收集固体并真空干燥，得到化合物162B(300mg，收率：75.76％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.72-8.41(m,1H),7.95(s,1H),7.45-7.20(m,7H),7.12(dd,J＝8.4Hz,2H),7.02-6.91(m,2H),6.70-6.48(m,1H),6.08(d,J＝5.5Hz,1H),4.45(s,1H),4.12-3.98(m,2H),2.89(s,1H),2.87-2.80(m,1H),2.73(s,1H),2.28-2.14(m,3H),1.52-1.33(m,9H)。MS(ESI)m/z(M-56)+452.1。
在0℃下，向化合物162B(300mg，591.04μmol)在EA(10mL)中的混合物中滴加HCl/EtOAc(4M，10mL)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物浓缩，得到中间体化合物162C(250mg，收率：95.28％，HCl)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71-8.64(m,2H),7.53-7.35(m,3H),7.34-7.17(m,7H),7.03(dd,J＝8.4Hz,2H),6.65(s,1H),4.59-4.30(m,1H),4.15(s,2H),2.88(s,1H),2.83(dd,J＝11.9Hz,1H),2.72(s,1H),2.22(s,3H)。
在25℃下，向化合物162C(120mg，270.31μmol，HCl)在DCM(10mL)中的混合物中分批加入Et3N(68mg，675.78μmol，0.1mL)和氯甲酸苯酯(phenylcarbonochloridate)(51mg，324.38μmol，0.1mL)，并搅拌1小时。将反应混合物用DCM(20mL)处理，加入H2O(30mL)。分离有机层并用盐水(30mL)洗涤，经无水NaSO4干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC(HCl条件)纯化残余物，得到化合物162D(70mg，收率：47.71％)，为类白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.36(s,1H),8.50(dd,J＝9.0Hz,1H),7.41-7.11(m,14H),7.08(s,1H),7.02(dd,J＝8.4Hz,1H),6.99(dd,J＝8.4Hz,1H),6.78-6.72(m,2H),6.57-6.50(m,1H),4.43(s,1H),4.31-4.22(m,2H),3.99(s,1H),2.87-2.75(m,2H),2.74-2.65(m,2H),2.27-2.20(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+528.1。
在25℃和N2下，向化合物162D(40mg，75.82μmol)在DMSO(3mL)和DCM(15mL)中的混合物中一次性加入DMP(96mg，227.46μmol)。将混合物在25℃下搅拌1.5小时。将反应混合物用DCM(10mL)、NaHCO3(5mL)和Na2S2O3(10mL)稀释，然后搅拌10分钟并分离各层。将有机层用水(50mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。将残余物在DCM(2mL)和石油醚(10mL)中研磨，收集固体并真空干燥，得到化合物162(25mg，收率：51.13％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.15(d,J＝8.0Hz,1H),8.39(t,J＝6.0Hz,1H),8.14(s,1H),7.88(s,1H),7.41-7.19(m,11H),7.14(dd,J＝8.0Hz,3H),6.68-6.51(m,1H),5.41-5.22(m,1H),4.29(dd,J＝6.0Hz,2H),3.21(dd,J＝3.5,13.6Hz,1H),2.85(dd,J＝10.8,13.8Hz,1H),2.25(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+526.1。
实施例95
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(间甲苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(163)
向t-BuONO(3.8mL，30.94mmol)的CH3CN(60mL)溶液中加入CuBr2(6.91g，30.94mmol)。在N2下，将混合物在25℃下搅拌1小时。然后分批加入3-氨基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(4g，25.78mmol)。然后将混合物加热至70℃并搅拌12小时。将反应用H2O(100mL)洗涤，用EtOAc(100mL×2)萃取。收集有机物，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到中间体化合物163A(6g，粗品)，为黑色油状物。MS(ESI)m/z(M+2)+220.9。
向化合物163A(10g，45.65mmol)和Cs2CO3(29.75g，91.30mmol)的DMF(250mL)溶液中加入MeI(19.44g，136.95mmol，8.53mL)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物过滤，滤液用H2O(500mL)稀释，用乙酸乙酯(100mL×3)萃取，经Na2SO4干燥，浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化残余物。得到化合物163B(2.5g，收率23.50％)，为黄色油状物，并得到化合物163C(5.5g，收率51.70％)，为白色固体。
化合物163B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.93(s,1H),4.31(q,J＝7.1Hz,2H),3.95-3.87(m,3H),1.36(t,J＝7.1Hz,3H)。
化合物163C：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.82(s,1H),4.30(q,J＝7.1Hz,2H),3.99-3.77(m,3H),1.35(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物163B(600mg，2.57mmol)在MeOH(10mL)和H2O(10mL)中的溶液中加入NaOH(514mg，12.85mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物浓缩并加入20mL水，用MTBE(10mL×2)萃取混合物，在0℃下用1N HCl将水层酸化至pH约2～3，并用EtOAc(20mL×2)萃取，将有机相用Na2SO4干燥，浓缩，得到残余物。得到化合物163D(480mg，收率：91.05％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.65(s,1H),8.13(s,1H),3.82(s,3H)。
向化合物163D(450mg，2.20mmol)、(3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺12G(761mg，3.30mmol，HCl)和HOBT(445mg，3.30mmol)的DCM(20mL)溶液中加入DIEA(1.14g，8.80mmol，1.54mL)和EDCI(843mg，4.40mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物用CHCl3：iPrOH＝3：1(50mL)稀释，用1N HCl(30mL)、饱和NaHCO3水溶液(30mL)和盐水(30mL)洗涤。将有机层用无水Na2SO4干燥并真空浓缩。将固体在乙酸乙酯(30mL)中研磨，过滤。得到化合物163E(550mg，收率：61.64％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.09-7.95(m,1H),7.78(d,J＝8.8Hz,0.6H),7.46(d,J＝9.0Hz,0.4H),7.38-7.07(m,6H),6.01-5.86(m,1H),4.54-4.33(m,1H),4.00(dd,J＝3.4,5.2Hz,1H),3.85-3.74(m,4H),2.93-2.67(m,1H),2.62(dd,J＝2.3,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+381.0。
向化合物163C(2.6g，11.16mmol)在MeOH(10mL)和H2O(10mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(2.34g，55.80mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应混合物浓缩并加入20mL水，用MTBE(10mL×2)萃取混合物，在0℃下用1N HCl将水层酸化至pH约2～3，并用EtOAc(30mL×2)萃取，将有机相用Na2SO4干燥并浓缩，得到残余物。得到化合物163F(2.2g，收率：96.16％)，为灰色固体，将其直接用于下一步骤。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.55(brs,1H),8.24(s,1H),3.81(s,3H)。
在25℃下，向化合物163F(2.2g，10.73mmol)和化合物12G(2.97g，12.88mmol HCl)在DMF(20mL)中的混合物中一次性加入HOBt(2.17g，16.10mmol)和DIEA(4.16g，32.19mmol，5.62mL)和EDCI(4.11g，21.46mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应混合物用H2O(40mL)稀释，用CHCl3：异丙醇(v：v＝3：1；30×3mL)萃取，然后用1N HCl(20mL×2)和饱和NaHCO3水溶液(20mL×2)洗涤有机相。将混合物用Na2SO4干燥并浓缩。将残余物用EtOAc(15mL)稀释，收集固体并真空干燥。得到化合物163G(2.9g，收率：68.06％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.18(s,1H),7.61(br d,J＝8.8Hz,1H),7.31(br d,J＝2.4Hz,2H),7.24-7.13(m,5H),5.89(d,J＝5.7Hz,1H),4.51-4.40(m,1H),4.00-3.97(m,1H),3.79(s,3H),2.80-2.76(m,1H),2.65-2.58(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+381.0。
将化合物163G(200mg，525μmol)、间甲苯基硼酸(85.6mg，629μmol)、Pd(dppf)Cl2(38.4mg，52.5μmol)和K2CO3(145mg，1.05mmol)的二噁烷(5mL)溶液脱气，然后在N2下加热至100℃保持12小时。将混合物过滤并浓缩，通过制备型TLC(二氯甲烷：甲醇＝10：1)纯化残余物，得到化合物163H(100mg，收率：48.6％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.99(d,J＝19.4Hz,1H),7.37(br s,1H),7.31-7.06(m,11H),5.76(br s,1H),4.52-4.31(m,1H),3.98(br s,1H),3.83(s,3H),3.80(br s,1H),2.87-2.72(m,1H),2.71-2.56(m,1H),2.26(d,J＝6.8Hz,3H)。
将化合物163H(100mg，255μmol)和DMP(432mg，1.02mmol)在DCM(10mL)、DMSO(2mL)中的混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物用DCM(20mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(20mL)、饱和Na2S2O3水溶液(20mL)淬灭并搅拌20分钟，用DCM(20mL×2)萃取混合物，将合并的有机相用水(20mL)、盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，将残余物在DCM和正己烷中搅拌20分钟，将固体过滤并干燥，得到163(43.5mg，收率：43.7％)为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.23(br d,J＝7.3Hz,1H),8.08-7.97(m,2H),7.78(s,1H),7.38(s,1H),7.31(br d,J＝7.5Hz,1H),7.28-7.13(m,6H),7.11-7.05(m,1H),5.31-5.21(m,1H),3.85(s,3H),3.12(dd,J＝3.7,13.9Hz,1H),2.79(dd,J＝9.7,13.9Hz,1H),2.25(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+391.1。
实施例96
化合物164、169、480-488、498-518、530、548、567-573、585、587、591、593、597、601-605、607、611、613-617、620-621、624-629
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-5-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(164)
在N2(15psi)下，向163E(200mg，527μmol)和三丁基(2-吡啶基)锡烷(388mg，1.05mmol)在甲苯(5mL)中的混合物中加入Pd(PPh3)4(60.9mg，52.7μmol)。在110℃下搅拌10小时后，将混合物真空浓缩，得到残余物。通过制备型HPLC(酸)纯化残余物，得到化合物164A(85mg，收率：42.5％)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ8.97(br d,J＝7.06Hz,1H),8.72(br d,J＝7.28Hz,1H),8.55(dd,J＝17.64,4.85Hz,1H),8.03–7.95(m,1H),7.88-7.79(m,1H),7.43-7.31(m,2H),7.13-6.99(m,6H),5.49(br d,J＝10.14Hz,1H),4.27-4.17(m,2H),3.89(d,J＝3.53Hz,3H),3.26-2.91(m,2H)。
如实施例105，由中间体化合物164A制备化合物164(31mg，收率41.6％，白色固体)。化合物164：1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ8.51(br d,J＝6.4Hz,1H),8.43(d,J＝5.1Hz,1H),8.01(s,1H),7.84(br t,J＝7.8Hz,1H),7.49(d,J＝7.9Hz,1H),7.32(dd,J＝5.3,7.1Hz,1H),7.21-7.09(m,3H),6.96(br d,J＝5.7Hz,2H),6.75(br s,1H),5.70-5.60(m,2H),3.89(s,3H),3.33(dd,J＝5.1,14.3Hz,1H),3.15(dd,J＝7.1,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(169)
如化合物163，由相应的起始物料——163G和三丁基(2-吡啶基)锡烷制备化合物169(20mg，收率：48.2％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.88(br d,J＝7.9Hz,1H),8.32(br d,J＝5.3Hz,1H),8.20(s,1H),8.08(d,J＝8.3Hz,1H),7.91(t,J＝7.7Hz,1H),7.74(br s,1H),7.52(br s,1H),7.40-7.32(m,1H),7.20-7.05(m,5H),5.64-5.47(m,1H),3.91(s,3H),3.27(dd,J＝4.8,14.5Hz,1H),3.12-3.07(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2,3-二氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(480)
如化合物163，由相应的起始物料——化合物163G和(2,3-二氟苯基)硼酸制备化合物480(60mg，收率：48.13％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.39(d,J＝7.3Hz,1H),8.30(s,1H),8.03(s,1H),7.78(s,1H),7.45-7.34(m,1H),7.33-7.13(m,7H),5.28-5.22(m,1H),3.92(s,3H),3.13(dd,J＝3.6,13.8Hz,1H),2.83(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+413.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(6-氰基吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(481)
如化合物163，由相应的起始物料——化合物163G和(6-氰基吡啶-3-基)硼酸制备化合物481(15mg，收率：37.47％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.91(d,J＝1.8Hz,1H),8.67(d,J＝7.3Hz,1H),8.25(s,1H),8.15(dd,J＝2.0,8.2Hz,1H),8.08(s,1H),7.97(d,J＝8.2Hz,1H),7.81(s,1H),7.27(d,J＝4.4Hz,4H),7.24-7.17(m,1H),5.27(t,J＝3.0Hz,1H),3.94(s,3H),3.15(dd,J＝3.7,13.9Hz,1H),2.86-2.74(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+403.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(1H-吲唑-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(482)
如化合物163，由相应的起始物料——化合物163C和3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二噁硼烷-2-基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑制备化合物482(18mg，收率：14.77％，白色固体)，通过除去2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基基团得到最终化合物482。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.10(br s,1H),9.57(br s,1H),8.44(d,J＝8.0Hz,1H),8.08(s,1H),7.46-7.38(m,2H),7.24(s,6H),6.84(br s,1H),5.70(br s,1H),5.50(br s,1H),3.97(s,3H),3.42-3.32(m,1H),3.26-3.20(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+417.0。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-苄基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(483)
使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和2-苄基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷制备化合物483(65mg，收率：66.57％，白色固体)，通过去除2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基基团得到最终化合物483。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(d,J＝7.1Hz,1H),8.19(s,1H),8.05(s,1H),7.79(s,1H),7.31-7.23(m,4H),7.20-7.07(m,6H),5.31-5.23(m,1H),4.05(s,2H),3.77(s,3H),3.20-3.09(m,1H),2.91-2.80(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+391.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(484)
使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物163C和(2-氟苯基)硼酸制备化合物484(3.35g，白色固体)，得到最终化合物484。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.30(d,J＝7.3Hz,1H),8.26(s,1H),8.04(s,1H),7.79(s,1H),7.41-7.11(m,9H),5.30-5.18(m,1H),3.90(s,3H),3.12(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.83(dd,J＝9.8,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+395.0。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺盐酸盐(485)
化合物485由中间体590合成，该中间体590使用163H合成。化合物485(3.1g，收率：79.85％白色固体)由中间体590使用类似于化合物163的步骤由相应起始物料制备，得到最终化合物485。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.51(d,J＝7.3Hz,1H),8.12(s,2H),7.85(br s,1H),7.46(d,J＝8.3Hz,2H),7.39-7.28(m,5H),7.25-7.20(m,1H),7.14(t,J＝8.0Hz,1H),5.43-5.25(m,1H),3.18(dd,J＝3.4,13.7Hz,1H),2.84(dd,J＝10.3,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+395.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2,6-二氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(486)
化合物486(60mg，收率：43.0％淡黄色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物163C和(2,6-二氟苯基)硼酸制备，得到最终化合物486。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.94(s,1H),7.41-7.33(m,1H),7.22-7.17(m,3H),6.99-6.93(m,2H),6.88(dd,J＝3.0,6.3Hz,2H),6.67(br s,1H),6.01(br d,J＝7.1Hz,1H),5.63-5.57(m,1H),5.53(br s,1H),3.97(s,3H),3.27(dd,J＝5.3,14.1Hz,1H),3.09(dd,J＝6.6,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+413.1
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(6-甲氧基吡啶-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(487)
化合物487(10mg，收率：20.06％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物163C和2-甲氧基-6-(三丁基锡烷基)吡啶制备，得到最终化合物487。1H NMR(400MHz,CD3CN)δ11.02(d,J＝5.5Hz,1H),8.01(s,1H),7.81(t,J＝7.9Hz,1H),7.60(d,J＝7.5Hz,1H),7.14-7.06(m,5H),7.00-6.88(m,1H),6.81(d,J＝8.2Hz,1H),6.23-6.01(m,1H),5.21-5.15(m,1H),3.85(s,3H),3.73(s,3H),3.27(dd,J＝4.4,13.9Hz,1H),2.97(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+408.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-苄基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(488)
化合物488(35.6mg，收率：35.57％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物5-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和2-苄基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷制备，得到最终化合物488。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.40(d,J＝7.8Hz,1H),8.03(br.s,1H),7.92(s,1H),7.77(br.s,1H),7.31-7.03(m,10H),5.32-5.23(m,1H),4.36-4.24(m,2H),3.58(s,3H),3.19-3.10(m,1H),2.89-2.79(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+391.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(5-甲基呋喃-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(498)
化合物498(70mg，收率：54.1％，淡黄色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(5-甲基呋喃-2-基)硼酸制备，得到最终化合物498。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.38-8.22(m,1H),8.20-8.01(m,2H),7.91-7.71(m,1H),7.31-7.17(m,5H),6.90(d,J＝3.1Hz,1H),6.08(d,J＝2.2Hz,1H),5.47-5.20(m,1H),3.87(s,3H),3.17(dd,J＝3.9,13.8Hz,1H),2.88(dd,J＝9.7,14.1Hz,1H),2.29-2.19(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+381.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2,5-二甲基噻吩-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(499)
化合物499(110mg，收率：64.9％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(2,5-二甲基-3-噻吩基)硼酸制备，得到最终化合物499。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14-8.00(m,2H),7.87-7.73(m,2H),7.34-7.12(m,5H),6.58(d,J＝1.1Hz,1H),5.28(ddd,J＝4.0,7.3,9.5Hz,1H),3.91-3.79(m,3H),3.14(dd,J＝4.0,13.9Hz,1H),2.77(dd,J＝9.4,14.0Hz,1H),2.33(s,3H),2.22-2.12(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+411.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(呋喃-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(500)
化合物500(55mg，收率：91.2％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和2-呋喃基硼酸制备，得到最终化合物500。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(d,J＝7.1Hz,1H),8.14(s,1H),8.07(br s,1H),7.81(br s,1H),7.61(s,1H),7.28(s,4H),7.20(br s,1H),6.99(d,J＝2.9Hz,1H),6.48(brs,1H),5.37-5.28(m,1H),3.88(s,3H),3.18(dd,J＝3.5,13.7Hz,1H),2.86(dd,J＝9.7,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+367.1
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2-氯噻吩-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(501)
化合物501(110mg，收率：68.3％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(2-氯噻吩-3-基)硼酸制备，得到最终化合物501。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.13(s,1H),7.80-7.46(m,3H),7.35(d,J＝5.8Hz,1H),7.30-7.24(m,2H),7.23-7.16(m,3H),6.98(d,J＝5.8Hz,1H),5.31(m,1H),3.89(s,3H),3.17(dd,J＝4.4,13.9Hz,1H),2.88(dd,J＝8.9,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+417.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(呋喃-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(502)
化合物502(160mg，收率：63.78％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和呋喃-3-基硼酸制备，得到最终化合物502。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(d,J＝7.6Hz,1H),8.22-8.18(m,1H),8.13(s,1H),8.04(br.s,1H),7.76(br.s,1H),7.61-7.57(m,1H),7.31-7.14(m,5H),6.80-6.75(m,1H),5.32-5.23(m,1H),3.85(s,3H),3.19-3.11(m,1H),2.88-2.78(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+367.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(噻吩-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(503)
化合物503(65mg，收率：47.7％，淡黄色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和噻吩-3-基硼酸制备，得到最终化合物503。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(d,J＝7.3Hz,1H),8.04(s,2H),7.92(s,1H),7.77(br s,1H),7.50-7.34(m,2H),7.30-7.22(m,4H),7.18(dd,J＝4.4,8.6Hz,1H),5.38-5.18(m,1H),3.84(s,3H),3.22-3.08(m,1H),2.81(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+383.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(4-甲基噻吩-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(504)
化合物504(100mg，收率：65.93％，淡黄色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(4-甲基噻吩-2-基)硼酸制备，得到最终化合物504。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(d,J＝7.2Hz,1H),8.09(s,1H),8.06(br.s,1H),7.78(br.s,1H),7.57-7.54(m,1H),7.29-7.23(m,4H),7.22-7.15(m,1H),6.99-6.95(m,1H),5.34-5.27(m,1H),3.83(s,3H),3.19-3.10(m,1H),2.88-2.77(m,1H),2.14(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+397.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(5-甲基噻吩-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(505)
化合物505(130mg，收率：61％，淡黄色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(5-甲基噻吩-2-基)硼酸制备，得到最终化合物505。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(s,1H),8.57(d,J＝7.5Hz,1H),8.53-8.48(m,1H),8.23(s,1H),8.08(s,1H),7.92-7.86(m,1H),7.81(s,1H),7.34-7.25(m,4H),7.23-7.18(m,1H),5.36-5.28(m,1H),3.94(s,3H),3.17(dd,J＝3.9,14.0Hz,1H),2.83(dd,J＝10.0,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+396.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(5-氟吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(506)
化合物506(35mg，收率：20.4％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(5-氟吡啶-3-基)硼酸制备，得到最终化合物506。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.40(d,J＝7.3Hz,1H),8.16-8.03(m,2H),7.81(s,1H),7.54(d,J＝3.5Hz,1H),7.29(d,J＝4.2Hz,4H),7.24-7.19(m,1H),6.66(dd,J＝1.0,3.6Hz,1H),5.34-5.29(m,1H),3.85(s,3H),3.17(dd,J＝3.7,13.9Hz,1H),2.84(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H),2.40(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+397.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2-氟-5-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(507)
化合物507(34mg，收率：15.75％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(2-氟-5-甲氧基苯基)硼酸制备，得到最终化合物507。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14(s,1H),7.68(br d,J＝7.0Hz,2H),7.51(br s,1H),7.30-7.15(m,5H),7.10-7.01(m,1H),6.98-6.87(m,2H),5.28(ddd,J＝4.6,7.3,8.8Hz,1H),3.90(s,3H),3.75(s,3H),3.15(dd,J＝4.5,14.1Hz,1H),2.87(dd,J＝8.9,14.2Hz,1H)。19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-124.53(br d,J＝88.69Hz,1F)。MS(ESI)m/z(M+Na)+447.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-(二氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(508)
化合物508(140mg，收率：69.98％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(3-(二氟甲基)苯基)硼酸制备，得到最终化合物508。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.43(d,J＝7.6Hz,1H),8.09(s,1H),8.02(br.s,1H),7.85-7.81(m,1H),7.78(br.s,1H),7.73-7.67(m,1H),7.51-7.46(m,1H),7.44-7.39(m,1H),7.30-7.16(m,5H),7.15-6.84(m,1H),5.32-5.23(m,1H),3.89(s,3H),3.19-3.11(m,1H),2.87-2.76(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+427.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(509)
化合物509(190mg，收率：66.92％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(2-氟-3-甲氧基苯基)硼酸制备，得到最终化合物509。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.18(s,1H),8.13(d,J＝7.6Hz,1H),7.96(br.s,1H),7.73(br.s,1H),7.30-7.16(m,5H),7.14-7.01(m,2H),6.87-6.79(m,1H),5.27-5.16(m,1H),3.88(s,3H),3.80(s,3H),3.14-3.06(m,1H),2.84-2.74(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+425.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(510)
化合物510(70mg，收率：34％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)硼酸制备，得到最终化合物510。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.44(d,J＝7.5Hz,1H),8.19(s,1H),7.98(s,1H),7.76(s,1H),7.35(d,J＝7.8Hz,1H),7.31-7.12(m,7H),5.34-5.21(m,1H),3.93(s,3H),3.14(dd,J＝3.6,13.9Hz,1H),2.82(dd,J＝9.9,14.2Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+457.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(511)
化合物511(23mg，收率：8.04％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(2-甲氧基苯基)硼酸制备，得到最终化合物511。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.04(s,1H),7.72(br s,1H),7.55(br s,1H),7.37(br t,J＝7.9Hz,1H),7.28-7.10(m,5H),7.08-6.90(m,4H),5.30(br d,J＝4.3Hz,1H),3.91-3.81(m,3H),3.66-3.54(m,3H),3.12(br d,J＝4.3Hz,1H),2.76(dd,J＝8.8,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+Na)+407.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(512)
化合物512(60mg，收率：21.65％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和2-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷制备，得到最终化合物512。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.28(s,1H),8.21(d,J＝7.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.76(s,1H),7.67-7.59(m,1H),7.52-7.43(m,1H),7.31-7.17(m,5H),7.05(d,J＝7.7Hz,1H),5.25-5.16(m,1H),3.90(s,3H),3.11(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.79(dd,J＝10.0,14.0Hz,1H)。19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-55.03(d,J＝18.3Hz,3F),-114.43(tdd,J＝6.1,12.3,18.7Hz,1F)。MS(ESI)m/z(M+Na)+463.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(2-(三氟甲基)苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(513)
化合物513(45mg，收率：54.58％，白色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(2-(三氟甲基)苯基)硼酸制备，得到最终化合物513。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.25(s,1H),7.99(br d,J＝7.1Hz,2H),7.80-7.69(m,2H),7.62-7.52(m,2H),7.30-7.17(m,6H),5.20(ddd,J＝3.9,7.4,9.7Hz,1H),3.89(s,3H),3.17-3.03(m,1H),2.78(dd,J＝9.7,13.9Hz,1H)。19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-57.15(s,3F)。MS(ESI)m/z(M+H)+445.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(514)
化合物514(92mg，收率：34.71％，淡黄色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基硼酸制备，得到最终化合物514。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ2.82(dd,J＝13.89,9.48Hz,1H)3.12(dd,J＝14.00,4.08Hz,1H)3.88(s,3H)5.16-5.34(m,1H)5.77(s,1H)5.87(s,1H)6.76-6.90(m,3H)7.18-7.31(m,5H)7.77(s,1H)8.00(s,1H)8.07(s,1H)8.11(d,J＝7.28Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+421.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(5-甲氧基吡啶-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(515)
化合物515(60mg，收率：20.6％，黄色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(5-甲氧基吡啶-3-基)硼酸制备，得到最终化合物515。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.50(d,J＝7.5Hz,1H),8.39(d,J＝1.5Hz,1H),8.22(d,J＝2.6Hz,1H),8.17(s,1H),8.06(s,1H),7.80(s,1H),7.59(dd,J＝1.8,2.9Hz,1H),7.29(d,J＝4.4Hz,4H),7.24-7.18(m,1H),5.35-5.26(m,1H),3.93(s,3H),3.79(s,3H),3.16(dd,J＝3.6,13.8Hz,1H),2.83(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+408.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(516)
化合物516(85mg，收率：78.65％，淡黄色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)硼酸制备，得到最终化合物516。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.42(d,J＝7.5Hz,1H),8.29(s,1H),8.00(s,1H),7.79-7.72(m,2H),7.63(br t,J＝7.1Hz,1H),7.37(t,J＝7.7Hz,1H),7.31-7.18(m,5H),5.29-5.19(m,1H),3.93(s,3H),3.13(dd,J＝3.5,14.1Hz,1H),2.82(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H)。19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-59.92(s,1F),-59.96(s,1F),-116.72-116.79(m,1F),-116.80-116.86(m,1F)。MS(ESI)m/z(M+H)+463.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2-氟-3-甲基苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(517)
化合物517(170mg，收率：53.97％，淡黄色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(2-氟-3-甲基苯基)硼酸制备，得到最终化合物517。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.20(s,1H),8.13(d,J＝7.5Hz,1H),8.02(s,1H),7.78(s,1H),7.31-7.20(m,6H),7.15-7.10(m,1H),7.07–7.02(m,1H),5.25(ddd,J＝3.9,7.3,9.5Hz,1H),3.91(s,3H),3.75(s,3H),3.13(dd,J＝4.0,13.9Hz,1H),2.82(dd,J＝9.7,13.9Hz,1H).2.21(d,J＝1.5Hz,3H)。19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-116.59-120.74(m,1F)。MS(ESI)m/z(M+H)+409.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2,5-二氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(518)
化合物518(35.9mg，收率：24.08％，淡黄色固体)使用类似于化合物163的步骤，由相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(2,5-二氟苯基)硼酸制备，得到最终化合物518。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(d,J＝7.3Hz,1H),8.23(s,1H),8.02(s,1H),7.78(s,1H),7.31-7.17(m,8H),5.29-5.21(m,1H),3.92(s,3H),3.13(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.82(dd,J＝9.8,13.8Hz,1H)。19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-119.41(tdd,J＝4.8,8.7,17.7Hz,1F),-119.69-120.11(m,1F)。MS(ESI)m/z(M+H)+413.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(1H-吲唑-1-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(530)
化合物530(85mg，收率：39.2％，浅黄色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和1H-吲唑制备，并使用K3PO4、CuI、和(1R,2R)-N1,N2-二甲基环己烷-1,2-二胺进行烷基化，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物530。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.41(d,J＝5.8Hz,1H),8.28(d,J＝2.3Hz,2H),8.00(d,J＝8.5Hz,1H),7.91(d,J＝8.0Hz,1H),7.79(br s,1H),7.68-7.48(m,2H),7.33(t,J＝7.4Hz,1H),7.19-7.04(m,5H),5.47(dt,J＝4.8,7.7Hz,1H),3.95(s,3H),3.23(dd,J＝4.6,14.2Hz,1H),2.94(dd,J＝8.4,14.2Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+417.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(548)
化合物548(130mg，收率：53.1％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物548。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.48(d,J＝7.5Hz,1H),8.14-8.04(m,2H),7.82(s,1H),7.57(d,J＝1.5Hz,1H),7.46(dd,J＝1.8,8.4Hz,1H),7.36-7.17(m,5H),5.38-5.19(m,1H),3.90(s,3H),3.17(dd,J＝4.0,13.9Hz,1H),2.83(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+457.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(567)
化合物567(125mg，收率：72.7％，黄色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物567。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.29(d,J＝7.5Hz,1H),8.08-7.99(m,2H),7.80(s,1H),7.32-7.19(m,5H),7.16-7.08(m,2H),6.83(d,J＝8.2Hz,1H),6.01(s,2H),5.33-5.24(m,1H),3.86(s,3H),3.16(dd,J＝4.1,13.8Hz,1H),2.82(dd,J＝9.9,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+421.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1,2'-二甲基-1H,2'H-[3,3'-双吡唑]-4-甲酰胺(568)
化合物568(24mg，收率：12.0％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和(1-甲基-1H-吡唑-5-基)硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物568。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.28-8.10(m,1H),7.99-7.69(m,2H),7.59(br s,1H),7.40-7.10(m,6H),6.42-6.29(m,1H),5.31(br s,1H),3.98-3.85(m,3H),3.77-3.57(m,3H),3.19(br d,J＝13.6Hz,1H),2.92-2.81(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+381.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(萘-1-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(569)
化合物569(125mg，收率：72.0％，类白色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和萘-1-基硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物569。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.32(s,1H),8.02(s,1H)8.03-7.89(m,3H),7.82(d,J＝7.3Hz,1H),7.76(s,1H),7.68(d,J＝8.4Hz,1H),7.53-7.44(m,2H),7.40(dt,J＝1.1,7.6Hz,1H),7.35(dd,J＝1.1,7.1Hz,1H),7.28-7.15(m,3H),7.08-7.00(m,2H),5.15(ddd,J＝4.0,7.4,9.4Hz,1H),3.96(s,3H),3.04(dd,J＝3.5,13.9Hz,1H),2.67(dd,J＝9.7,13.7Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+427.2.。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧芑-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(570)
化合物570(41.8mg，收率：45.3％，类白色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和(2,3-二氢苯并[b][1,4]二氧芑-5-基)硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物570。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.09-7.93(m,2H),7.83-7.69(m,2H),7.31-7.10(m,5H),6.88-6.73(m,3H),5.34-5.22(m,1H),4.15-4.06(m,2H),4.02-3.93(m,1H),3.91-3.82(m,4H),3.11(dd,J＝4.0,13.9Hz,1H),2.79(dd,J＝9.3,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+435.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(萘-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(571)
化合物571(41.8mg，收率：45.3％，类白色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-2H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和萘-1-基硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物571。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45(d,J＝7.3Hz,1H),8.18-8.06(m,3H),7.92-7.81(m,4H),7.72(dd,J＝1.4,8.5Hz,1H),7.55-7.45(m,2H),7.33-7.19(m,5H),5.36-5.27(m,1H),3.94(s,3H),3.17(dd,J＝3.9,14.0Hz,1H),2.84(dd,J＝10.0,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+427.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2-(二氟甲基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(572)
化合物572(110mg，收率：40.9％，淡黄色固体)在钯催化剂的存在下，使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和1-溴-2-(二氟甲基)苯和4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物572。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31-8.21(m,2H),8.03(s,1H),7.79(s,1H),7.64(d,J＝7.5Hz,1H),7.55-7.42(m,2H),7.33-7.17(m,6H),7.00-6.66(m,1H),5.30-5.18(m,1H),3.92(s,3H),3.13(dd,J＝3.6,13.7Hz,1H),2.79(dd,J＝10.0,13.8Hz,1H).19F NMR(376MHz,DMSO-d6)δ-107.64-110.93(m,2F)。MS(ESI)m/z(M+H)+396。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-环己基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(573)
化合物573(172mg，收率：81.1％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和2-(环己-1-烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷制备，然后使所得产物氢解，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物573。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.11(d,J＝7.3Hz,1H),8.02(s,2H),7.76(s,1H),7.28-7.21(m,4H),7.20-7.11(m,1H),5.24(ddd,J＝3.6,7.1,10.3Hz,1H),3.74(s,3H),3.11(dd,J＝3.7,13.9Hz,1H),3.05-2.96(m,1H),2.79(dd,J＝10.0,13.8Hz,1H),1.76-1.55(m,5H),1.39-1.05(m,5H)。MS(ESI)m/z(M+H)+383.3。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(异喹啉-6-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(585)
化合物585(120mg，收率：60.0％，淡黄色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和异喹啉-7-基硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物585。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.28(s,1H),8.56(d,J＝7.3Hz,1H),8.48(d,J＝5.8Hz,1H),8.20(s,1H),8.16-8.08(m,2H),8.04(d,J＝8.8Hz,1H),7.90-7.77(m,3H),7.29(d,J＝4.3Hz,4H),7.25-7.18(m,1H),5.38-5.25(m,1H),3.95(s,3H),3.18(dd,J＝3.8,14.1Hz,1H),2.85(dd,J＝10.0,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(喹啉-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(587)
化合物587(70mg，收率：49.7％，淡粉色固体)在钯催化剂的存在下，使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和2-溴喹啉和4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物587。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.08(br d,J＝8.0Hz,1H),8.50(br d,J＝8.8Hz,1H),8.36(s,1H),8.26(br d,J＝8.8Hz,1H),8.14(br s,1H),8.02(br d,J＝7.5Hz,1H),7.84(br s,1H),7.74-7.59(m,3H),7.07-6.90(m,5H),5.75-5.66(m,1H),3.98(s,3H),3.31-3.26(m,1H),3.18-3.08(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(异喹啉-4-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(591)
化合物591(35mg，收率：56.3％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和4-异喹啉基硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物591。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.26(s,1H),8.36-8.30(m,2H),8.25-8.21(m,1H),8.14-8.09(m,1H),7.93(s,1H),7.71(br s,1H),7.68-7.60(m,3H),7.27-7.20(m,2H),7.19-7.13(m,3H),5.17-5.09(m,1H),3.95(s,3H),3.09-3.02(m,1H),2.77-2.69(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(喹啉-6-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(593)
化合物593(30mg，29.9％收率；淡黄色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和喹啉-6-基硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物593。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.86(br s,1H),8.50(br.d,J＝6.6Hz,1H),8.31(br.d,J＝7.9Hz,1H),8.20(br.s,1H),8.09(br.d,J＝9.5Hz,2H),7.93(br.s,2H),7.81(br s,1H),7.53-7.47(m,1H),7.30-7.15(m,5H),5.29(br.s,1H),3.92(s,3H),3.16(br.d,J＝11.5Hz,1H),2.88-2.78(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.1
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(喹啉-5-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(597)
化合物597(20mg，收率：25.1％，黄色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和喹啉-5-基硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物597。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.88(dd,J＝1.8,4.0Hz,1H),8.34-8.19(m,1H),8.17-7.97(m,2H),7.81-7.35(m,6H),7.27-7.03(m,5H),5.29-5.11(m,1H),4.02-3.90(m,3H),3.07-3.0(m,1H),2.80-2.74(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(异喹啉-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(602)
化合物602(55mg，收率：36.3％，白色固体)在钯催化剂的存在下，使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和3-溴异喹啉和4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物602。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.07(d,J＝7.1Hz,1H),8.98(s,1H),8.51(s,1H),8.28(s,1H),8.10(d,J＝7.5Hz,3H),7.89-7.79(m,2H),7.75-7.67(m,1H),7.15-7.06(m,4H),7.04-6.97(m,1H),5.64-5.53(m,1H),4.03-3.84(m,3H),3.27(dd,J＝5.0,14.0Hz,1H),3.10(dd,J＝7.7,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2-氯苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(604)
化合物604(120mg，收率：58.6％，淡黄色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和(2-氯苯基)硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物604。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.19(s,1H),8.03(d,J＝7.3Hz,1H),7.97(s,1H),7.73(s,1H),7.39-7.15(m,9H),5.24-5.19(m,1H),3.87(s,3H),3.08(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.76(dd,J＝9.8,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+411.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(喹啉-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(605)
化合物605(140mg，收率：55.6％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和喹啉-3-基硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物605。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08(s,1H),8.65-8.45(m,2H),8.23(s,1H),8.08(br s,1H),7.99(dd,J＝8.3,12.7Hz,2H),7.85-7.70(m,2H),7.60(t,J＝7.4Hz,1H),7.34-7.13(m,5H),5.36-5.20(m,1H),4.05-3.89(m,3H),3.18-2.78(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(异喹啉-5-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(607)
化合物607(50mg，收率：34.6％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和异喹啉-5-基硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物607。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.41-9.21(m,1H),8.52-8.27(m,2H),8.23-7.93(m,3H),7.81-7.48(m,4H),7.32-7.09(m,5H),5.22-5.10(m,1H),4.06-3.90(m,3H),3.09(dd,J＝3.2,13.8Hz,1H),2.76(dd,J＝9.8,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(喹啉-4-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(611)
化合物611(55mg，收率：78.2％，淡黄色固体)使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和喹啉-4-基硼酸制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物611。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.86-8.76(m,1H),8.41-8.34(m,1H),8.07-7.88(m,2H),7.85-7.58(m,3H),7.49(t,J＝7.8Hz,1H),7.33-7.11(m,7H),5.21-5.11(m,1H),4.30(br s,1H),4.04-3.93(m,3H),3.10(dd,J＝3.5,14.1Hz,1H),2.78(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(噻吩-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(615)
化合物615(122mg，收率：73.0％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物1-甲基-3-(噻吩-2-基)-1H-吡唑-4-羧酸和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，以得到化合物615。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.42(d,J＝7.3Hz,1H),8.10(s,1H),8.06(s,1H),7.79(s,1H),7.73(d,J＝3.5Hz,1H),7.41(dd,J＝1.1,5.1Hz,1H),7.28(d,J＝4.2Hz,4H),7.24-7.18(m,1H),6.97(dd,J＝3.6,5.0Hz,1H),5.49-5.20(m,1H),3.85(s,3H),3.16(dd,J＝3.5,13.9Hz,1H),2.83(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+383.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(616)
化合物616(120mg，收率：71.5％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，以得到化合物616。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.08(d,J＝7.5Hz,1H),8.04(s,1H),8.03(br s,1H),7.77(s,1H),7.27(d,J＝4.4Hz,4H),7.20-7.16(m,1H),5.31-5.26(m,1H),3.71(s,3H),3.15(dd,J＝3.9,13.8Hz,1H),2.84(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H),2.41-2.35(m,1H),0.77-0.70(m,2H),0.69-0.65(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+341.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(617)
化合物617(55mg，收率：34.4％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物1-甲基-3-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-羧酸和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，以得到化合物617。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.20(d,J＝7.5Hz,1H),8.07(s,1H),8.01(s,1H),7.75(s,1H),7.30-7.21(m,4H),7.19-7.14(m,1H),5.31-5.15(m,1H),3.80(d,J＝9.5Hz,2H),3.76(s,3H),3.29-3.20(m,3H),3.11(dd,J＝3.5,13.9Hz,1H),2.79(dd,J＝10.0,13.8Hz,1H),1.65-1.52(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+385.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-环戊基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(620)
化合物620(70mg，收率：53.1％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物3-环戊基-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，得到化合物620。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14(br d,J＝7.3Hz,1H),8.06-8.02(m,2H),7.77(br.s,1H),7.29(d,J＝4.3Hz,4H),7.24-7.17(m,1H),5.29-5.21(m,1H),3.77(s,3H),3.42(br.t,J＝8.0Hz,1H),3.14(br.dd,J＝3.5,13.8Hz,1H),2.83(br.dd,J＝10.2,13.4Hz,1H),1.80(br.d,J＝7.8Hz,2H),1.69-1.45(m,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+369.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(5-氯噻吩-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(621)
化合物621(25mg，收率：25.1％，淡黄色固体)使用相应的起始物料——化合物3-(5-氯噻吩-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，得到化合物621。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.53(br d,J＝6.8Hz,1H),8.22-8.04(m,2H),7.87-7.61(m,2H),7.35-6.97(m,6H),5.33(br s,1H),3.88(br s,3H),3.19(br d,J＝14.1Hz,1H),2.92-2.79(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+417.0。
3-(4-((4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡唑-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁基酯(624)
化合物624(100mg，收率：33.04％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物3-(1-(叔丁氧基羰基)哌啶-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，得到化合物624。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.27-8.18(m,1H),8.12(s,1H),8.02(d,J＝2.9Hz,1H),7.78(s,1H),7.32-7.13(m,5H),5.29(s,1H),4.02-3.85(m,2H),3.82-3.75(m,3H),3.20-3.09(m,2H),3.19-2.99(m,1H),2.99-2.78(m,2H),2.73-2.64(m,1H),1.84(s,1H),1.62(s,1H),1.48(d,J＝11.9Hz,1H),1.39-1.27(m,10H)。MS(ESI)m/z(M+H)+484.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]二氧庚英-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(625)
化合物625(70mg，收率：58.6％，黄色固体)使用相应的起始物料——化合物3-(3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]二氧庚英-7-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，得到化合物625。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.29(d,J＝7.3Hz,1H),8.09-7.94(m,2H),7.80(s,1H),7.32-7.14(m,7H),6.90-6.83(m,1H),5.39-5.22(m,1H),4.16-4.07(m,4H),3.88-3.82(m,3H),3.16(dd,J＝4.0,13.7Hz,1H),2.82(dd,J＝9.8,13.8Hz,1H),2.13-2.06(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+449.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1,1'-二甲基-1H,1'H-[3,4'-双吡唑]-4-甲酰胺(626)
化合物626(55mg，收率：34.4％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物1,1'-二甲基-1H,1'H-[3,4'-双吡唑]-4-羧酸和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，得到化合物626。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.06(d,J＝17.6Hz,2H),7.94(s,1H),7.76-7.45(m,3H),7.31-7.23(m,4H),7.23-7.15(m,1H),5.37-5.28(m,1H),3.83(d,J＝8.3Hz,6H),3.22(dd,J＝4.1,13.7Hz,1H),2.95(dd,J＝8.9,14.4Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+381.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(627)
化合物627(40mg，收率：25.1％，淡黄色固体)使用相应的起始物料——化合物1-甲基-3-(四氢呋喃-3-基)-1H-吡唑-4-羧酸和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，得到化合物627。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.06(s,1H),8.00-7.87(m,1H),7.69(s,0.5H),7.57-7.44(m,0.7H),7.30-7.03(m,6H),5.33-5.23(m,1H),3.92(dt,J＝2.6,7.7Hz,1H),3.86-3.81(m,1H),3.79(s,3H),3.77-3.73(m,1H),3.71(d,J＝7.8Hz,1H),3.62-3.54(m,1H),3.20(dd,J＝4.3,14.1Hz,1H),2.96-2.88(m,1H),2.09(q,J＝7.3Hz,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+371.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(苯并呋喃-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(628)
化合物628(143mg，收率：98.6％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物3-(苯并呋喃-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，得到化合物628。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(d,J＝7.3Hz,1H),8.24(s,1H),8.10(s,1H),7.82(s,1H),7.63(d,J＝6.8Hz,1H),7.56-7.50(m,2H),7.33-7.15(m,7H),5.36(ddd,J＝3.9,7.3,9.8Hz,1H),3.94(s,3H),3.24-3.14(m,1H),2.87(dd,J＝10.0,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+417.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(异喹啉-3-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(629)
化合物629(25mg，收率：50.14％，淡黄色固体)在钯催化剂的存在下，使用相应的起始物料——化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(198A)和7-溴异喹啉和4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)制备，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，得到化合物629。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(s,1H),8.54(d,J＝7.5Hz,1H),8.49(d,J＝5.7Hz,1H),8.35(s,1H),8.15(s,1H),8.11(s,1H),8.00-7.94(m,1H),7.92-7.87(m,1H),7.85-7.78(m,2H),7.30-7.17(m,5H),5.36-5.26(m,1H),3.95(s,3H),3.18(dd,J＝4.0,13.9Hz,1H),2.85(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.2。
4-(4-((4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡唑-3-基)哌嗪-1-羧酸苄基酯(601)
在N2气氛下，向化合物198A(500mg，1.79mmol)和哌嗪-1-羧酸苄基酯(590mg，2.68mmol)的1,4-二噁烷(20mL)溶液中加入Pd(OAc)2(40mg，0.18mmol)、Cs2CO3(116mg，3.57mmol)和Sphos(147mg，0.36mmol)。将反应物在100℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤并用EtOAc(10mL)洗涤。将有机相减压浓缩，得到残余物。将残余物在Combi flash上纯化(洗脱液：PE～10％～30％EtOAc/PE)，得到化合物601A(183mg，收率25.7％)，为黄色油状物。
化合物601(55mg，收率：78.8％，粉色固体)使用相应的起始物料——化合物4-(4-(乙氧基羰基)-1-甲基-1H-吡唑-3-基)哌嗪-1-羧酸苄基酯(601A)和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，得到化合物601。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.28-8.15(m,2H),8.03(s,1H),7.92(s,1H),7.43-7.33(m,5H),7.28-7.21(m,2H),7.19-7.13(m,1H),7.06(d,J＝7.0Hz,2H),5.53(q,J＝6.3Hz,1H),5.13-5.04(m,2H),3.79-3.68(m,3H),3.33-3.18(m,5H),3.17-3.08(m,1H),2.86(br s,2H),2.81-2.75(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+519.2。
4-(4-((4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)氨基甲酰基)-1-甲基-1H-吡唑-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(603)
使用与中间体601A相同的步骤，使用哌嗪-1-羧酸叔丁基酯制备中间体603A。
化合物603(18mg，收率：41.6％，白色固体)使用相应的起始物料——化合物4-(4-(乙氧基羰基)-1-甲基-1H-吡唑-3-基)哌嗪-1-羧酸叔丁基酯(603A)和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，得到化合物603。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.07(d,J＝7.5Hz,1H),7.98-7.81(m,2H),7.80-7.61(m,1H),7.30-7.24(m,2H),7.22-7.19(m,1H),7.13(d,J＝7.5Hz,2H),5.56-5.45(m,1H),3.76-3.67(m,3H),3.42(br s,1H),3.35-3.28(m,2H),3.27-3.21(m,2H),3.15-3.13(m,1H),2.88(d,J＝6.3Hz,2H),2.84-2.77(m,2H),1.44(s,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+485.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(613)
使用与中间体601A相同的步骤，使用硫代吗啉1,1-二氧化物制备中间体613A。
化合物613(70mg，收率：33.7％，淡黄色固体)使用相应的起始物料——化合物3-(1,1-二氧化硫代吗啉代)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(613A)和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，得到化合物613。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.15(d,J＝7.0Hz,2H),8.05(s,1H),7.87(s,1H),7.31-7.26(m,2H),7.23(br d,J＝7.0Hz,1H),7.16(d,J＝6.8Hz,2H),5.48-5.31(m,1H),3.75(s,3H),3.42(m,4H),3.25-3.20(m,1H),3.14-3.07(m,2H),3.06-2.98(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+434.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-吗啉代-1H-吡唑-4-甲酰胺(614)
使用与中间体601A相同的步骤，使用吗啉制备中间体614A。
化合物614(45mg，收率：86.3％，黄色固体)使用相应的起始物料——化合物1-甲基-3-吗啉代-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(614A)和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐，使用如化合物12中的步骤制备，得到化合物614。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.21-8.11(m,2H),7.98(s,1H),7.91-7.84(m,1H),7.26-7.21(m,2H),7.18(s,1H),7.07(d,J＝6.8Hz,2H),5.52-5.44(m,1H),3.71(s,3H),3.55-3.47(m,2H),3.46-3.39(m,2H),3.23(dd,J＝5.3,14.1Hz,1H),3.06(dd,J＝7.1,14.1Hz,1H),2.89-2.82(m,2H),2.80-2.75(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+386.2。
实施例97
化合物165-167、170-173、176-190、315、407、408、446、447
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-5-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(165)
在N2下，向化合物163E(200mg，525μmol)、4-吡啶基硼酸(129mg，1.05mmol)和K2CO3(218mg，1.57mmol)在二噁烷(9mL)和H2O(1mL)中的混合物中加入Pd(dppf)Cl2(76.8mg，105μmol)。在微波条件下，将混合物在130℃下搅拌2小时。真空去除溶剂。通过制备型TLC(二氯甲烷：甲醇＝10：1，Rf＝0.5)纯化残余物，得到165A(90mg，收率：45.2％)，为白色固体。化合物165A：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.55-8.70(m,2H),7.96(br dd,J＝15.55,5.40Hz,1H),7.79(br d,J＝7.94Hz,1H),7.03-7.44(m,10H),5.74-5.87(m,1H),4.25-4.45(m,1H),3.75-4.02(m,1H),3.68(br t,J＝5.40Hz,3H),2.57-2.91(m,3H)。
如实施例61，由相应的中间体化合物165A制备化合物165。化合物165：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.60-8.65(m,2H),8.40(d,J＝7.50Hz,1H),8.00(s,2H),7.77(s,1H),7.32-7.36(m,2H),7.18-7.31(m,5H),5.14-5.25(m,1H),3.68(s,3H),3.14(dd,J＝13.89,3.75Hz,1H),2.83(dd,J＝13.67,10.14Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(对甲苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(166)
如实施例97，由相应的起始物料——化合物163G和对甲苯基硼酸制备化合物166(17.5mg，收率：27.9％，类白色固体)。化合物166：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.28(d,J＝7.3Hz,1H),8.09-7.99(m,2H),7.81(br s,1H),7.46(d,J＝8.2Hz,2H),7.33-7.19(m,5H),7.11(d,J＝7.9Hz,2H),5.33-5.23(m,1H),3.93-3.81(m,3H),3.15(dd,J＝3.6,13.8Hz,1H),2.82(dd,J＝10.0,13.8Hz,1H),2.30(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+391.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-5-(对甲苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(167)
如实施例97，由相应的起始物料——化合物163E和对甲苯基硼酸制备化合物167(40.0mg，收率：66.9％，白色固体)。化合物167：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.98-7.91(m,2H),7.89(s,1H),7.73(s,1H),7.30-7.08(m,9H),5.24-5.11(m,1H),3.58(s,3H),3.08(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.77(dd,J＝9.8,13.6Hz,1H),2.32(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+391.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(170)
如实施例97，由相应的起始物料——化合物163G和4-吡啶基硼酸制备化合物170(15.6mg，收率：17.3％，类白色固体)。化合物170：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.61(br d,J＝7.50Hz,1H),8.49(d,J＝4.85Hz,2H),8.03-8.15(m,2H),7.82(br s,1H),7.56(d,J＝4.85Hz,2H),7.19-7.34(m,5H),5.22-5.36(m,1H),3.87-3.96(m,3H),3.18(br dd,J＝14.00,3.42Hz,1H),3.12-3.22(m,1H),2.83(br dd,J＝13.56,10.25Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H2O+H)+396.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(邻甲苯)-1H-吡唑-4-甲酰胺(171)
如实施例97，由相应的起始物料——化合物163G和邻甲苯基硼酸制备化合物171(16mg，41μmol，收率：14.6％，纯度：100.0％，白色固体)。化合物171：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.95(s,1H),7.38-7.33(m,1H),7.30-7.26(m,1H),7.25-7.21(m,2H),7.19-7.12(m,3H),6.75-6.71(m,2H),6.68(br s,1H),5.81(br d,J＝5.7Hz,1H),5.57(br s,1H),5.47-5.39(m,1H),3.94-3.87(m,3H),3.15(dd,J＝4.4,14.1Hz,1H),2.62(dd,J＝8.5,14.2Hz,1H),2.11(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+391.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-5-(间甲苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(172)
如实施例97，由相应的起始物料——化合物163E和间甲苯基硼酸制备化合物172(25.3mg，收率：21.2％，黄色固体)。化合物172：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.98(br s,1H),7.91(s,1H),7.88(br d,J＝7.3Hz,1H),7.75(br s,1H),7.33-7.21(m,4H),7.20-7.10(m,4H),7.07(br d,J＝7.3Hz,1H),5.19(br s,1H),3.58(s,3H),3.09(br dd,J＝3.3,13.7Hz,1H),2.77(br dd,J＝9.7,13.7Hz,1H),2.29(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+391.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(嘧啶-5-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(173)
如实施例97，由相应的起始物料——化合物163G和嘧啶-5-基硼酸制备化合物173(6.9mg，收率：18.6％，淡黄色固体)。化合物173：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.15-9.06(m,1H),8.97-8.77(m,1H),8.62(d,J＝7.5Hz,1H),8.34-8.22(m,1H),8.09(s,1H),7.86-7.62(m,1H),7.40-7.07(m,6H),5.36-5.25(m,1H),3.98-3.90(m,3H),3.17(dd,J＝4.0,13.7Hz,1H),2.83(br dd,J＝10.3,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-5-(嘧啶-5-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(176)
如实施例97，由相应的起始物料——化合物163E和嘧啶-5-基硼酸制备化合物176(15mg，收率：12.19％，白色固体)。1H NMR(400MHz,CD3CN)δ9.24-9.17(m,1H),8.77-8.68(m,1H),7.87(s,1H),7.61(s,1H),7.34-7.18(m,5H),6.97(br s,2H),6.24-6.09(m,1H),5.38-5.33(m,1H),3.73(s,3H),3.25(dd,J＝5.0,14.0Hz,1H),2.92(dd,J＝9.0,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(177)
如实施例97，由相应的起始物料——化合物163G和(3-甲氧基苯基)硼酸制备化合物177(46mg，收率：74.2％，白色固体)。化合物177：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02(s,1H),7.85(br d,J＝7.3Hz,1H),7.78-7.65(m,1H),7.54(br s,1H),7.30-7.25(m,3H),7.24-7.18(m,5H),6.92-6.87(m,1H),5.38-5.31(m,1H),3.89(s,3H),3.78-3.74(m,3H),3.20(dd,J＝4.5,14.1Hz,1H),2.90(dd,J＝9.0,14.1Hz,1H)。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(178)
如实施例97，由相应的起始物料制备化合物178(26mg，收率：49.4％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.46(br d,J＝7.3Hz,1H),8.07(s,2H),7.80(br s,1H),7.42(d,J＝8.2Hz,2H),7.36-7.31(m,1H),7.30-7.25(m,4H),7.22-7.18(m,1H),7.11(br t,J＝8.3Hz,1H),5.33-5.25(m,1H),3.88(s,3H),3.15(br dd,J＝3.5,13.7Hz,1H),2.80(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+395.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(4-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(179)
如实施例97，由相应的起始物料制备化合物179(15mg，收率：36.7％，淡黄色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.42(d,J＝7.5Hz,1H),8.07(s,2H),7.81(s,1H),7.61(dd,J＝5.7,8.8Hz,2H),7.34-7.19(m,5H),7.12(br t,J＝8.9Hz,2H),5.37-5.22(m,1H),3.89(s,3H),3.16(br dd,J＝3.5,14.1Hz,1H),2.82(br dd,J＝10.1,13.7Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+395.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-异丙基苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(180)
如实施例97，由相应的起始物料制备化合物180(58mg，收率：60.95％，白色固体)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.29(d,J＝7.5Hz,1H),8.11-7.98(m,2H),7.81(s,1H),7.48(s,1H),7.37-7.16(m,9H),5.38-5.23(m,1H),3.89(s,3H),3.15(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.91-2.77(m,3H),1.18(d,J＝6.8Hz,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+419.2.。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(181)
如实施例97，由相应的起始物料制备化合物181(46mg，收率：70.7％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.26-8.16(m,2H),8.01(s,1H),7.77(s,1H),7.43-7.07(m,9H),5.28-5.18(m,1H),3.96-3.85(m,3H),3.12(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.81(dd,J＝9.7,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+395.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-乙基苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(182)
如实施例97，由相应的起始物料制备化合物182(24mg，收率：65.4％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.13(s,1H),7.94(br d,J＝7.0Hz,1H),7.60(s,1H),7.52(d,J＝7.8Hz,1H),7.40-7.36(m,2H),7.35-7.26(m,6H),5.48-5.43(m,,1H),4.01(s,3H),3.30(dd,J＝4.5,14.1Hz,1H),3.00(dd,J＝9.0,14.1Hz,1H),2.74(q,J＝7.5Hz,3H),1.32(t,J＝7.7Hz,4H)。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(3-(三氟甲基)苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(183)
如实施例97，由相应的起始物料制备化合物183(38mg，收率：61.9％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.51(d,J＝7.5Hz,1H),8.12(s,1H),8.03(s,1H),7.97(s,1H),7.84(br d,J＝7.9Hz,1H),7.80(s,1H),7.63(br d,J＝7.7Hz,1H),7.55-7.48(m,1H),7.26(d,J＝4.2Hz,4H),7.21-7.16(m,1H),5.32-5.25(m,1H),3.89(s,3H),3.17-3.11(m,1H),2.83-2.76(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+445.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(3-(三氟甲氧基)苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(184)
如实施例97，由相应的起始物料制备化合物184(18mg，收率：53.5％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.48(d,J＝7.7Hz,1H),8.10(s,1H),8.03(s,1H),7.79(s,1H),7.64-7.56(m,2H),7.41(t,J＝8.2Hz,1H),7.30-7.24(m,5H),7.12-7.16(m,1H),5.33-5.27(m,1H),3.89(s,3H),3.15(dd,J＝3.9,13.8Hz,1H),2.81(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+461.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-氰基苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(185)
如实施例97，由相应的起始物料制备化合物185(20mg，收率：43.2％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.65(dd,J＝7.3Hz,1H),8.28(s,1H),8.07(s,1H),8.00(s,1H),7.89(dd,J＝7.5Hz,1H),7.82(s,1H),7.77(dd,J＝8.2Hz,1H),7.52(t,J＝7.9Hz,1H),7.31-7.19(m,5H),5.31(dd,J＝6.8Hz,1H),3.91(s,3H),3.16(dd,J＝9.9Hz,1H),2.91-2.81(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+402.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-环丙基苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(186)
如实施例97，由相应的起始物料制备化合物186(30mg，收率：53.72％，黄色固体)。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.36(dd,J＝6.8Hz,1H),8.14-8.01(m,2H),7.82(s,1H),7.30-7.14(m,8H),6.99(dd,J＝7.5Hz,1H),5.28(s,1H),3.88(s,3H),3.14(dd,J＝11.0Hz,1H),2.87-2.80(m,1H),1.89(s,1H),0.92(dd,J＝6.6Hz,2H),0.62(s,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+417.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-氯苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(187)
如实施例97，由相应的起始物料制备化合物187(35mg，收率：53.0％，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.52-8.44(m,1H),8.11(s,1H),8.06(s,1H),7.81(s,1H),7.74-7.65(m,1H),7.60-7.50(m,1H),7.39-7.33(m,2H),7.30-7.28(m,3H),7.25-7.18(m,2H),5.38-5.25(m,1H),3.90(s,3H),3.17(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.89-2.80(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+411.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(188)
如实施例97，由相应的起始物料——化合物163G和吡啶-3-基硼酸制备化合物188(15.8mg，收率：26.5％，白色固体)。化合物188：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.77(d,J＝1.6Hz,1H),8.53-8.47(m,2H),8.19(s,1H),8.06(br s,1H),7.92(td,J＝1.9,7.9Hz,1H),7.80(br s,1H),7.34(dd,J＝5.1,7.6Hz,1H),7.32-7.28(m,4H),7.26-7.18(m,1H),5.35-5.26(m,1H),3.93(s,3H),3.18(dd,J＝3.8,13.8Hz,1H),2.84(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-5-(吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(189)
如实施例97，由相应的起始物料——化合物163E和吡啶-3-基硼酸制备化合物189(16mg，42.4μmol，收率：30.9％，白色固体)。化合物189：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.74(br d,J＝4.2Hz,1H),8.60(s,1H),7.86(s,1H),7.69(br d,J＝7.9Hz,1H),7.42-7.36(m,1H),7.25(br d,J＝3.3Hz,2H),6.94(br d,J＝3.5Hz,2H),6.74(br s,1H),5.93(br d,J＝6.6Hz,1H),5.63(br s,1H),5.52(q,J＝6.5Hz,1H),3.73(s,3H),3.32(dd,J＝5.3,13.9Hz,1H),3.08(dd,J＝6.8,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-5-(邻甲苯)-1H-吡唑-4-甲酰胺(190)
如实施例97，由相应的起始物料——化合物163E和邻甲苯基硼酸制备化合物190(28.4mg，收率：30.7％，白色固体)。化合物190：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.94(d,J＝4.8Hz,1H),7.43-7.31(m,3H),7.30-7.15(m,5H),7.15-7.05(m,4H),5.30-5.19(m,1H),3.48(s,3H),3.12(dd,J＝4.4,14.0Hz,1H),2.76(ddd,J＝4.8,9.0,13.8Hz,1H),1.96(d,J＝10.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+391.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(315)
在20℃下，向3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐(1.35g，5.86mmol，HCl)和化合物163F(1g，4.88mmol)、HOBt(659mg，4.88mmol)在DMF(20mL)中的混合物中分批加入DIEA(1.58g，12.20mmol，2mL)和EDCI(1.4g，7.32mmol)，并搅拌16小时。将反应混合物用EA(40mL)处理，用H2O(50mL×2)洗涤。将有机层用0.5N HCl(40mL)、饱和NaHCO3水溶液(40mL)和盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空除去溶剂。将残余物用DCM(2mL)和PE(10mL)研磨，形成沉淀，收集固体并真空干燥，得到化合物315A(900mg，收率：45.38％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.25(s,1H),7.85-7.42(m,1H),7.35(dd,J＝7.3Hz,1H),7.28-7.18(m,5H),6.15(d,J＝6.2Hz,1H),5.95(d,J＝5.5Hz,1H),4.56-4.32(m,1H),3.86-3.78(m,4H),2.95-2.84(m,1H),2.82-2.73(m,1H),2.69-2.58(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+381.0。
如实施例97，由相应的中间体化合物——315A和(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)硼酸并经过中间体化合物315B制备化合物315(30mg，收率：28.27％，白色固体)。化合物315：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.92(s,1H),8.65(dd,J＝7.3Hz,1H),8.26(s,1H),8.20(dd,J＝8.4Hz,1H),8.05(s,1H),7.88-7.76(m,2H),7.28(d,J＝3.7Hz,4H),7.24-7.16(m,1H),5.27(t,J＝3.1Hz,1H),3.94(s,3H),3.16(dd,J＝3.7,14.1Hz,1H),2.83(dd,J＝10.4,13.7Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+446.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-甲氧基苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(407)
如实施例97，由相应的起始物料——化合物163C、(3-甲氧基苯基)硼酸和274D制备化合物407(3.9g，收率：94.15％，白色固体)。化合物407：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.44-8.25(m,1H),8.15-7.97(m,2H),7.84(br s,1H),7.37-7.11(m,8H),6.96-6.80(m,1H),5.44-5.19(m,1H),3.90(br s,3H),3.73(br s,3H),3.26-3.07(m,1H),2.92-2.72(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+407.1。
3-((1H-吡唑并[4,3-c]吡啶-1-基)甲基)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(408)
将化合物163C(2g，8.58mmol)、MeB(OH)2(2.05g，34.3mmol)、Pd(PPh3)4(793mg，687μmol)、K2CO3(2.37g，17.2mmol)在二噁烷(50mL)和H2O(10mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在N2气氛下将混合物在120℃下搅拌12小时。用乙酸乙酯50mL(50mL×2)萃取反应混合物。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝100：1至80：1)纯化残余物。得到化合物408A(1.4g，收率：97.0％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.87-7.73(m,1H),4.27(q,J＝7.1Hz,2H),3.91-3.75(m,3H),2.51-2.40(m,3H),1.33(t,J＝7.1Hz,3H)。
将化合物408A(1.2g，7.13mmol)、NBS(1.9g，10.7mmol)、AIBN(586mg，3.57mmol)在CCl4(30mL)中的混合物在80℃下搅拌12小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝98：1至90：1)纯化残余物。得到化合物408B(600mg，收率：34.1％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.76(s,1H),4.66(s,2H),4.30-4.21(m,2H),3.90-3.79(m,3H),1.38-1.22(m,3H)。
向1H-吡唑并[4,3-c]吡啶(797mg，6.69mmol)在DMF(20mL)中的混合物中加入KOH(501mg，8.92mmol)。将混合物在15℃下搅拌30分钟。然后在0℃下在10分钟内向混合物中逐滴加入化合物408B(550mg，2.23mmol)的DMF(10mL)溶液，并将混合物在0℃下搅拌2小时。通过NOE确认所需产物。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。通过制备型HPLC(碱性条件)纯化残余物。得到化合物408C(300mg，收率：47.2％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.14-8.99(m,1H),8.40(d,J＝6.2Hz,1H),8.15(s,1H),7.92-7.75(m,1H),7.51(d,J＝6.0Hz,1H),5.85(s,2H),4.26(q,J＝7.2Hz,2H),3.93-3.75(m,3H),1.29(t,J＝7.1Hz,3H)。
如实施例95，由相应的起始物料——化合物408C和274D制备化合物408(24.1mg，收率：40.4％，白色固体)。
化合物408：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.07(s,1H),8.91(br d,J＝5.5Hz,1H),8.46(br d,J＝5.5Hz,1H),7.93(s,1H),7.69(s,1H),7.59(br d,J＝5.5Hz,1H),7.24-7.17(m,1H),7.23(br s,2H),7.25-7.15(m,1H),6.79(br s,1H),5.69-5.51(m,1H),5.73-5.38(m,1H),5.49-5.37(m,1H),5.50-5.37(m,1H),5.74-5.33(m,1H),3.79(s,3H),3.56-3.42(m,1H),3.17(br dd,J＝9.5,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+432.3。
N-(4-氨基-3-羟基-4-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(4-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(446)和
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(4-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(447)
使用如化合物163E中的步骤，用(4-氟苯基)硼酸处理化合物446A，然后使用氢氧化钠使所得产物进行酯水解，并使用如化合物12中的步骤与中间体274D偶联，得到化合物446和化合物447。得到化合物446(550mg，收率：75.9％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.08-8.00(m,1H),7.75(d,J＝9.0Hz,1H),7.56(dd,J＝5.6,8.7Hz,2H),7.33-7.08(m,8H),5.83(d,J＝5.7Hz,1H),4.59-4.37(m,1H),4.00(d,J＝1.8Hz,1H),3.86(s,3H),2.80-2.73(m,1H),2.68(s,1H),2.66(d,J＝5.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+397.1。得到化合物447(80mg，收率：39.9％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.42(d,J＝7.3Hz,1H),8.11-8.03(m,2H),7.81(s,1H),7.65-7.57(m,2H),7.32-7.18(m,5H),7.12(t,J＝8.8Hz,2H),5.27(d,J＝3.1Hz,1H),3.89(s,3H),3.30-3.12(m,1H),2.83(dd,J＝9.9,13.7Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+395.1。
实施例98
化合物174-175、191-193、313、293
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(嘧啶-5-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(174)
向化合物163E(150mg，393.47μmol)和三丁基(吡嗪-2-基)锡烷(217mg，590.21μmol)的二噁烷(15mL)溶液中加入钯；三叔丁基膦(100mg，196.74μmol)。将混合物在90℃下搅拌16小时。将混合物用KF水溶液(20mL)淬灭，过滤，用乙酸乙酯(20mL)洗涤，滤液用乙酸乙酯(20mL×2)萃取。将有机相用Na2SO4干燥，浓缩，得到残余物。通过制备型HPLC(碱性条件)和制备型TLC(SiO2，DCM：MeOH＝10：1)纯化残余物。得到化合物174A(70mg，收率：45.6％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,MeOD)δ8.77-8.69(m,1H),8.66-8.54(m,2H),7.94-7.78(m,1H),7.25-7.12(m,5H),4.63-4.58(m,1H),4.26-4.02(m,1H),3.91-3.84(m,3H),3.01-2.83(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+381.1。
如实施例61，由中间体化合物174A制备化合物174(25mg，收率34.93％，白色固体)。化合物174A：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.75(d,J＝1.5Hz,1H),8.71(dd,J＝1.6,2.6Hz,1H),8.66-8.64(m,1H),8.31(d,J＝7.5Hz,1H),7.99(s,1H),7.70(br s,1H),7.51(br s,1H),7.28-7.23(m,4H),7.22-7.17(m,1H),5.33-5.28(m,1H),3.83(s,3H),3.20(dd,J＝4.5,14.1Hz,1H),2.93(dd,J＝9.3,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-5-(嘧啶-4-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(175)
如实施例98，由相应的起始物料——化合物163E和三丁基(嘧啶-4-基)锡烷制备化合物175(35mg，收率：47.75％，白色固体)。化合物175：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(d,J＝1.1Hz,1H),8.82(d,J＝5.3Hz,1H),8.71(d,J＝7.5Hz,1H),8.03(s,1H),7.93(s,1H),7.78(s,1H),7.54(dd,J＝1.3,5.3Hz,1H),7.27-7.17(m,6H),5.28-5.19(m,1H),3.85(s,3H),3.15(dd,J＝4.0,13.9Hz,1H),2.83(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-5-(嘧啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(191)
如实施例98，由相应的起始物料——化合物163E和三丁基(嘧啶-2-基)锡烷制备化合物191(20mg，收率：38.77％，白色固体)。化合物191：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.63(d,J＝6.3Hz,1H),8.86(d,J＝5.0Hz,2H),7.90(s,1H),7.81-7.56(m,2H),7.55(t,J＝4.9Hz,1H),7.21-7.14(m,3H),7.12-7.06(m,2H),5.47(t,J＝5.1,7.5Hz,1H),4.05(s,3H),3.24(dd,J＝5.1,14.2Hz,1H),3.05-3.00(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(嘧啶-4-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(192)
如实施例98，由相应的起始物料——化合物163G和4-(三丁基锡烷基)嘧啶制备化合物192(15mg，收率：29.82％，白色固体)。化合物192：1H NMR(400MHz,CD3CN)δ11.76-11.65(m,1H),8.81-8.73(m,2H),8.14(s,1H),8.07(dd,J＝1.1,5.3Hz,1H),7.59(s,1H),7.15(s,4H),7.04(s,1H),6.24(s,1H),5.65-5.59(m,1H),3.93(s,3H),3.33(dd,J＝5.1,14.1Hz,1H),3.14(dd,J＝7.7,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.1。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(嘧啶-4-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(193)
如实施例98，由相应的起始物料——化合物163G和三丁基(嘧啶-2-基)锡烷制备化合物193(25mg，收率：54.29％，白色固体)。化合物193：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.24(d,J＝7.3Hz,1H),8.69(d,J＝4.9Hz,2H),8.29(s,1H),8.08(s,1H),7.82(s,1H),7.47(t,J＝4.9Hz,1H),7.16-7.09(m,3H),7.07-7.03(m,2H),5.61-5.49(m,1H),3.92(s,3H),3.23(dd,J＝5.1,14.1Hz,1H),3.07(dd,J＝7.3,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.0。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(313)
如实施例98，由相应的起始物料——化合物163G和2-(三丁基锡烷基)吡嗪，经过中间体化合物313A制备化合物313。化合物313(70mg，收率：69.7％，白色固体)：1H NMR(400MHz,CD3CN)δ11.26(d,J＝6.0Hz,1H),9.34(d,J＝1.3Hz,1H),8.54(d,J＝2.6Hz,1H),8.23-8.10(m,2H),7.17-7.11(m,5H),7.01(br s,1H),6.19(br s,1H),5.67-5.55(m,1H),3.94(s,3H),3.33(dd,J＝5.3,14.1Hz,1H),3.13(dd,J＝7.7,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(6-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(316)
如实施例98，由相应的起始物料——化合物315A和2-甲基-6-(三丁基锡烷基)吡啶，经过中间体化合物316A制备化合物316。化合物316(20mg，收率：21.64％，白色固体)：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.79(d,J＝7.7Hz,1H),8.24(s,1H),8.02(s,1H),7.92-7.86(m,1H),7.84-7.78(m,1H),7.75(s,1H),7.24(d,J＝7.7Hz,1H),7.15-7.08(m,3H),7.08-7.02(m,2H),5.52(t,J＝5.2,8.1Hz,1H),3.89(s,3H),3.22(dd,J＝4.7,13.8Hz,1H),2.99(dd,J＝8.4,13.7Hz,1H),2.28(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+392.2。
实施例99
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-5-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(194)
在25℃和氮气气氛下，向2-溴-6-(三氟甲基)吡啶(3g，13.27mmol)和1,1,1,2,2,2-六甲基二锡烷(5.7g，17.40mmol)在1,4-二噁烷(96mL)中的混合物中加入Pd(PPh3)4(3.07g，2.65mmol)，将所得混合物在100℃下搅拌6小时。将反应混合物冷却至室温，并通过薄层硅藻土过滤。滤饼用DCM洗涤。将滤液真空浓缩，得到深色固体，将其通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100：1至10：1)纯化，得到粗化合物194A(3.2g，由LCMS确定纯度为26.46％)，为白色固体。MS(ESI)m/z(M+H)+311.8。
如实施例98，由相应的起始物料——中间体化合物163E和194A制备化合物194(32.1mg，62.15％收率，白色固体)。化合物194：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.98-7.91(m,1H),7.85(d,J＝7.6Hz,1H),7.75(s,1H),7.72(d,J＝7.6Hz,1H),7.26-7.21(m,3H),7.07-7.02(m,2H),6.74(br s,1H),6.63-6.56(m,1H),5.60-5.54(m,1H),5.51(br s,1H),3.94(s,3H),3.41-3.31(m,1H),3.14-3.06(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+446.0。
实施例100
N-(1-氨基-1,2-二氧代己-5-烯-3-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(195)
向化合物163B(2g，8.58mmol)和苯基硼酸(1.26g，10.30mmol)在二噁烷(30mL)和H2O(10mL)的溶液中加入Pd(dtbpf)Cl2(280mg，0.43mmol)和K3PO4(5.46g，25.74mmol)。将混合物在70℃和N2下搅拌3小时。将反应物用H2O(20mL)洗涤，用EtOAc(15mL×2)萃取。收集有机物并浓缩。通过柱子(石油醚：乙酸乙酯＝10：1)纯化残余物，得到化合物195A(1.9g，收率：96.17％)，为黄色油状物。
向化合物195A(1.9g，8.25mmol)在THF(20mL)和H2O(20mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(1.73g，41.25mmol)。将混合物在25℃下搅拌24小时。将反应物用1N HCl酸化至pH约4。用EtOAc(25mL×2)萃取混合物。收集有机物，用盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到化合物195B(1.3g，收率：77.93％)，为浅黄色固体。MS(ESI)m/z(M+1)+202.9。
向化合物195B(800mg，3.96mmol)和(S)-2-氨基-N-甲氧基-N-甲基戊-4-烯酰胺盐酸盐(926mg，4.75mmol)的DCM(20mL)溶液中加入DIEA(1.73mL，9.90mmol)、HOBt(1.07g，7.92mmol)和EDCI(1.52g，7.92mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。真空去除溶剂。将反应物用EtOAc(30mL)稀释，用1N HCl(20mL)洗涤。收集有机物并浓缩。通过柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)纯化残余物，得到化合物195C(1.2g，收率：88.50％)，为无色油状物。MS(ESI)m/z(M+1)+343.1。
在-40℃下，向化合物195C(1g，2.92mmol)的THF(10mL)溶液中滴加LiAlH4(1M，3.1mL)。添加后，将混合物在0℃下搅拌1小时。将反应用1N HCl(30mL)逐滴淬灭，用EtOAc(20mL×3)萃取。收集有机物，用盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到中间体化合物195D(800mg，粗品)，为白色固体。MS(ESI)m/z(M+1)+284.0。
向化合物195D(280mg，0.99mmol)和2-羟基-2-甲基丙腈(0.54mL，5.88mmol)在DCM(20mL)中的溶液中加入TEA(0.17mL，1.19mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。真空去除溶剂。通过柱子(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)纯化残余物，得到化合物195E(200mg，收率：65.21％)，为黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+1)+311.0。
在0℃下，向化合物195E(736mg，2.37mmol)的DMSO(5mL)溶液中加入K2CO3(656mg，4.74mmol)。然后滴加H2O2(2.28mL，23.72mmol，30％纯度)。将混合物在25℃下搅拌1小时。用10％Na2S2O3水溶液(30mL)逐滴淬灭反应。用EtOAc(20mL×3)萃取混合物。收集有机物，用盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物用CH3CN(5mL)洗涤。过滤固体，收集并真空干燥，得到化合物195F(200mg，收率：25.60％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.09(s,1H),7.72-7.61(m,2H),7.48-7.42(m,1H),7.40-7.26(m,3H),7.25-7.12(m,2H),5.81-5.60(m,2H),5.12-4.93(m,2H),4.33-4.17(m,1H),3.96-3.93(m,1H),3.86(s,3H),2.34-2.05(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+1)+329.0。
向化合物195F(200mg，609.07μmol)在DCM(15mL)和DMSO(5mL)中的溶液中加入DMP(775mg，1.83mmol)。将混合物在25℃下搅拌30分钟。将反应物用DCM(20mL)稀释，用10％Na2S2O3水溶液和饱和NaHCO3(v/v＝1/1)(40mL)的溶液淬灭。收集有机物，用盐水(30mL×3)洗涤。收集有机物，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物用CH3CN(5mL)洗涤。过滤固体，收集并真空干燥，得到195(38mg，收率：18.72％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.23(d,J＝6.8Hz,1H),8.13(s,1H),7.98(br.s,1H),7.73(br.s,1H),7.68-7.61(m,2H),7.38-7.25(m,3H),5.89-5.71(m,1H),5.11-4.98(m,3H),3.88(s,3H),2.57-2.50(m,1H),2.40-2.31(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+1)+327.1。
实施例101
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-溴-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(196)
如实施例61，由相应的中间体化合物163G制备化合物196(54mg，收率：50.44％，白色固体)。化合物196：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.21-8.15(m,2H),8.06(br s,1H),7.80(brs,1H),7.28-7.23(m,4H),7.20-7.16(m,1H),5.33-5.26(m,1H),3.82(s,3H),3.15(br dd,J＝3.7,13.9Hz,1H),2.83(br dd,J＝9.8,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.0&381.0。
实施例102
N-(1-氨基-1,2-二氧代己-5-烯-3-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(197)
向冷的(0℃)、搅拌的3-溴-1H-吲唑(5g，25.38mmol)的DMF(130mL)溶液中分批加入NaH(1.22g，50.76mmol)。0.2小时后，加入SEM-Cl(5.08g，30.46mmol)，然后在N2气氛下将混合物在25℃下搅拌6小时。用饱和NH4CI水溶液淬灭反应，得到的层用EtOAc(100mL×2)萃取。将合并的有机层干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过硅胶快速色谱(用100：1至10：1石油醚：EtOAc洗脱)纯化残余物，得到化合物化合物197A(5.5g，66.21％收率)，为油状物。1HNMR(CDCl3,400MHz)：δ7.71-7.69(m,1H),7.65-7.60(m,1H),7.57-7.51(m,1H),7.37-7.29(m,1H),5.76(d,J＝3.2Hz,2H),3.70-3.55(m,2H),1.02-0.87(m,2H),0.00(d,J＝3.2Hz,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+338.3。
将化合物197A(2g，6.11mmol)、化合物4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)(1.86g，7.33mmol)、KOAc(2.4g，24.44mmol)、Pd(dppf)Cl2(894.3mg，1.22mmol)在二噁烷(80mL)中的混合物在N2气氛下在80℃下加热12小时。获得化合物197B(粗品)，为溶液(15.8mg/mL，在二噁烷中)。
将化合物197B(461.6mg，1.23mmol，30mL，在二噁烷中)、化合物163E(100mg，262.3μmol)、Pd(dtbpf)Cl2(34.19mg，52.46μmol)和K3PO4(111.4mg，524.6μmol)在H2O(2mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在N2气氛下将混合物在70℃下搅拌2小时。通过制备型HPLC(碱性条件)纯化反应溶液，得到化合物197D(50mg，16.54％收率)，为棕色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.14-8.02(m,1H),8.01-7.82(m,1H),7.70-7.63(m,1H),7.58(t,J＝7.6Hz,1H),7.51(d,J＝8.4Hz,1H),7.39-7.32(m,1H),7.02-6.89(m,1H),6.88-6.69(m,5H),6.42(br s,1H),5.70-5.48(m,2H),5.34(br s,1H),4.39-4.27(m,1H),4.24-4.08(m,1H),3.84(s,3H),3.58(t,J＝8.0Hz,2H),3.04-2.74(m,2H),0.92-0.87(m,2H),-0.07(s,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+549.2。
在0℃和N2下，向化合物197D(50mg，91.12μmol)在DCM(10mL)中的混合物中一次性加入DMP(116mg，273.4μmol)，然后在N2气氛下将混合物在0℃下搅拌1小时。将混合物用饱和NaHCO3水溶液(15mL)和饱和Na2S2O3水溶液(15mL)淬灭，搅拌20分钟，然后用二氯甲烷(100mL)稀释。将混合物搅拌20分钟并用水(2×20mL)洗涤。将合并的有机层用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到粗产物。通过制备型HPLC(碱性条件)纯化残余物，得到化合物197E(30mg，55.67％收率)，为白色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.23(s,1H),7.98(d,J＝6.8Hz,1H),7.74(d,J＝8.8Hz,1H),7.70-7.60(m,2H),7.48-7.38(m,1H),7.03(t,J＝7.2Hz,1H),6.89-6.75(m,3H),6.74-6.67(m,2H),5.84-5.75(m,1H),5.63(d,J＝11.6Hz,2H),5.45(d,J＝11.2Hz,1H),4.01-3.87(m,3H),3.78-3.57(m,2H),3.39-3.12(m,2H),1.02-0.92(m,2H),0.16-0.07(m,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+547.2。
将化合物197E(30mg，54.88μmol)在HCl/EtOAc(4M，1.50mL)中的混合物在25℃下搅拌78小时。将反应混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过制备型HPLC(碱性条件)纯化，得到化合物197(1.6mg，6.68％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ10.35(br s,1H),8.12(s,1H),7.77(br s,1H),7.61-7.50(m,3H),7.34-7.28(m,1H),7.10-7.04(m,1H),6.98-6.90(m,2H),6.84-6.68(m,3H),5.62-5.42(m,2H),3.83(s,3H),3.29-3.19(m,1H),3.08-2.97(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+417.2。
实施例103
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(198)
在氮气气氛下，向化合物3-碘-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(200mg，714.13μmol)和化合物194A(1.91g，856.96μmol)在二噁烷(3mL)中的混合物中加入Pd(t-Bu3P)2(110mg，214.24μmol)。将混合物在90℃下搅拌48小时。将混合物用CH2Cl2(30mL)稀释，过滤除去沉淀物，减压浓缩滤液，得到残余物。通过快速柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5/1)纯化残余物，得到化合物(175.00mg，77.93％收率)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.01–7.91(m,3H),7.72–7.67(m,1H),4.26–4.20(m,2H),4.00(s,3H),1.25–1.19(s,3H)。
向化合物198B(170mg，568.09μmol)在MeOH(8mL)和H2O(4mL)中的混合物中一次性加入LiOH.H2O(191mg，4.54mmol)，并将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。将残余物用H2O(20mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，然后用EtOAc(20mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物198C(150mg，97.36％收率)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.44(s 1H),8.25(d,J＝4Hz,1H),8.00–7.98(m,2H),3.95(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物198C制备化合物198(94.2mg，63.09％收率，白色固体)。化合物198：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.92(d,J＝6.80Hz,1H),8.39(d,J＝8.40Hz,1H),8.08(s,1H)7.92-8.02(m,1H),7.65(d,J＝8.00Hz,1H),7.06-7.23(m,5H),6.72(s,1H),5.51(br s,1H),5.31-5.43(m,1H),3.93(s,3H),3.38-3.49(m,1H),2.96-3.11(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+1)+446.1。
实施例104
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(3'-甲基-[1,1'-联苯基]-3-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(199)
如实施例61，由相应的起始物料——化合物103A和间甲苯基硼酸制备化合物199(35.0mg，收率53.6％，白色固体)。化合物199：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ9.08(d,J＝7.7Hz,1H),8.08-8.00(m,1H),7.84(br s,1H),7.60-7.52(m,2H),7.45-7.37(m,3H),7.36-7.30(m,1H),7.28-7.25(m,3H),7.23-7.16(m,3H),7.12-7.06(m,1H),6.60(br s,1H),5.29(brs,1H),3.22-3.14(m,1H),2.86-2.76(m,1H),2.35(s,3H),2.28-2.22(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+467.2。
实施例105
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(6-苯基哒嗪-3-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(200)
向6-溴哒嗪-3-胺(10g，57mmol)和苯基硼酸(10.5g，86mmol)在甲苯(150mL)和EtOH(150mL)中的混合物中加入LiCl(7.3g，172.4mmol)。然后加入Na2CO3(1M，155mL)，然后加入Pd(PPh3)2Cl2(403mg，0.57mmol)。将混合物加热至回流保持16小时。将混合物通过硅藻土过滤。将滤液用H2O(15mL)稀释，用乙酸乙酯(15mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(15mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。将残余物用TBME/乙酸乙酯(v/v＝1/1，50mL)研磨。将滤饼真空干燥，得到化合物2(4.4g，收率44.7％)，为类白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.94(d,J＝7.2Hz,2H),7.79(d,J＝9.2Hz,1H),7.46-7.42(m,2H),7.38-7.36(m,1H),6.86(d,J＝9.2Hz,2H),6.52(s,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+172.0。
向化合物200A(4.4g，25.7mmol)的MeOH(100mL)溶液中加入2-氧代乙酸乙酯(26mL，128.50mmol)。将混合物加热至65℃并搅拌15小时。将混合物浓缩。通过快速柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝3/1)纯化残余物，得到化合物200B(5.5g，收率52％，69.8％纯度)，为棕色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+288.1。
向化合物200B(5.5g，19.14mmol)和甲苯磺酰甲基异氰化物(5.04g，25.84mmol)的EtOH(190mL)溶液中加入K2CO3(6.61g，47.85mmol)。将混合物加热至65℃并搅拌3小时。将混合物真空浓缩，残余物用乙酸乙酯(100mL)和H2O(75mL)处理。分离有机层，水层用乙酸乙酯(50mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过快速柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1)纯化残余物，得到(1.80g，收率30％)，为黄色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.22(s,1H),8.12-8.10(m,2H),8.01(d,J＝7.2Hz,1H),7.94,(s,1H),7.76-7.74(m,1H),7.56-7.54(m,3H),4.29(q,J＝6.8Hz,2H),1.33(t,J＝6.8Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+295.0。
将LiOH.H2O(114mg，2.72mmol)加入到化合物200C(100mg，0.34mmol)的MeOH(5mL)溶液中。然后加入H2O(0.5mL)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物用H2O(25mL)稀释，并将挥发性溶剂真空蒸发。用1N HCl将残余物酸化至pH约3。用乙酸乙酯(25mL×3)萃取混合物。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到化合物200D(90mg，收率99.5％)，为黄色固体，将其直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.50(d,J＝9.3Hz,1H),8.38(d,J＝1.0Hz,1H),8.24(dd,J＝1.9,7.7Hz,2H),8.13(d,J＝9.0Hz,1H),7.85(d,J＝1.0Hz,1H),7.66-7.55(m,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物200D制备化合物200(35mg，收率35.2％，白色固体)。在1H NMR中观察到水合物。化合物200：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.83(br s,1H),8.34-8.25(m,2H),8.19(dd,J＝1.8,7.8Hz,2H),7.81(br s,1H),7.75(s,1H),7.66-7.48(m,5H),7.34-7.20(m,5H),5.32-5.23(m,1H),3.24(dd,J＝4.3,14.1Hz,1H),2.94(dd,J＝9.7,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+441.1。
实施例106
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(6-苯基哒嗪-3-基)-1H-咪唑-5-甲酰胺(201)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物200D制备化合物201(89mg，收率54.5％，黄色固体)。在1H NMR上观察到水合物。化合物201：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.82(br s,0.8H),8.51(br s,0.9H),8.31-8.22(m,2.7H),8.20-8.14(m,2.3H),7.93(s,0.9H),7.79-7.70(m,1.7H),7.69-7.64(m,1.7H),7.63-7.54(m,5.7H),7.37(br d,J＝8.5Hz,0.9H),7.31(d,J＝4.5Hz,3.6H),7.28-7.17(m,5.2H),5.35-5.28(m,1H),4.42-4.35(m,0.9H),3.23(dd,J＝4.0,14.1Hz,0.7H),3.07(br s,1.7H),2.97-2.89(m,1.1H),2.80-2.74(m,1.7H),2.68-2.64(m,1.0H),0.71-0.63(m,2.0H),0.62-0.55(m,3.2H),0.48(br s,1.6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+481.1。
实施例107
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(2'-甲基-[1,1'-联苯基]-4-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(202)
向化合物83D(150mg，0.33mmol)在THF(6mL)和H2O(3mL)中的溶液中加入Cs2CO3(168mg，0.51mmol,)和邻甲苯基硼酸(89mg，0.66mmol)，然后加入Pd(PPh3)4(38mg，0.033mmol)。然后将混合物加热至80℃并搅拌12小时。将反应混合物冷却至室温，加入H2O(10mL)以淬灭反应，然后减压蒸发混合物。用乙酸乙酯(10mL×3)萃取水相。将合并的有机层用NaHCO3(10ml)、H2O(10mL)、盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，减压蒸发。将粗产物用异丙醚/乙腈(10/1，5mL)研磨，得到化合物202A(50mg，收率32.5％)，为黄色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.54(br d,J＝9.3Hz,1H),8.20(br d,J＝9.7Hz,1H),7.66-7.46(m,1H),7.38(br s,1H),7.35-7.19(m,12H),7.14(br d,J＝8.4Hz,1H),6.61-6.51(m,1H),6.01-5.66(m,1H),4.45(br s,1H),4.04-3.90(m,1H),3.00-2.62(m,2H),2.37-2.17(m,6H)。
向化合物202A(46mg，98.2μmol)的DCM(10mL)溶液中加入DMP(125mg，294.5μmol)，将混合物在25℃下2小时。将反应混合物用DCM(10mL)稀释，并用NaHCO3/Na2S2O3(1/1，20mL)淬灭，然后将混合物搅拌0.25小时。用DCM(10mL×2)萃取混合物，用NaHCO3(10mL×3)和盐水(10mL×3)洗涤合并的有机层，用无水Na2SO4干燥，过滤，减压蒸发。通过制备型HPLC(碱)纯化粗产物，得到202(30mg，收率60.65％)，为白色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.43-7.39(m,2H),7.39-7.35(m,2H),7.30-7.28(m,3H),7.26-7.21(m,4H),7.03(dd,J＝1.9,7.6Hz,2H),6.72(br s,1H),6.52(s,1H),6.37(br d,J＝7.5Hz,1H),5.66-5.60(m,1H),5.55(brs,1H),3.38(dd,J＝5.4,14.2Hz,1H),3.16(dd,J＝7.3,14.3Hz,1H),2.36(s,3H),2.29-2.27(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+467.1。
实施例108
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(6-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(206)
向2-肼基-6-甲基-4-(三氟甲基)吡啶(500mg，2.62mmol)的CH3COOH(10mL)溶液中加入2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(490.4mg，2.62mmol)，然后将混合物在120℃下搅拌2小时。将混合物用CH2Cl2(100mL)稀释，并用饱和碳酸氢钠(30mL×2)和饱和盐水(30mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过快速柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝10/1至3/1)纯化残余物。得到化合物206A(200.0mg，24.37％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.72(s,1H),7.33(s,1H),6.68(s,1H),4.33-4.28(m.2H),2.60(s,3H),3.23(s,3H),1.31-1.20(m,3H)。
向化合物206A(180.0mg，574.58μmol)在MeOH(6mL)和H2O(3mL)中的混合物中一次性加入LiOH·H2O(96.4mg，2.30mmol)，并将混合物在25℃下搅拌6小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。然后将混合物用H2O(10mL)稀释，用1N HCl将pH调节至约3，然后用EtOAc(40mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水30mL洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物206B(145.0mg，88.48％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.80(s,1H),7.73(s,1H),6.79(d,J＝4Hz,1H),2.56(s,3H),2.29(s,3H)。
如实施例41，由相应的中间体羧酸——化合物206B制备化合物206(52.0mg，52.16％收率，淡黄色固体)。化合物206：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.65(J＝7.6Hz,1H),7.86(s,1H),7.22(s,1H),7.18-7.16(m,3H),7.04–7.03(m,2H),6.88(s,1H),6.70(s,1H),5.77-5.72(m,1H),3.46-3.41(m,1H),3.35-3.30(m,1H),2.83-2.79(m,1H),2.34(s,3H),2.32(s,3H),0.91-0.86(m,2H),0.63-0.60(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+1)+500.2。
实施例109
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(6-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(208)
将2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(558.2mg，2.98mmol)和6-肼基烟腈(400mg，2.98mmol)在AcOH(5mL)中的混合物在118℃下搅拌5小时。将反应混合物冷却至25℃，减压浓缩得到残余物，将其用CH2Cl2(100mL)稀释。将有机相用饱和NaHCO3水溶液(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物，将其通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1：0至5：1)纯化，得到化合物208A(160mg，19.09％收率)，为白色固体，但N-H HMBC不能确认结构(所推荐的结构)。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.66(dd,J＝0.8,2.4Hz,1H),8.07(dd,J＝2.4,8.4Hz,1H),7.88(dd,J＝0.8,8.4Hz,1H),6.67(s,1H),4.35(q,J＝6.8Hz,2H),2.37(s,3H),1.32(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+257.1。
向化合物208A(100mg，390.23μmol)在THF(4mL)中的溶液中加入KOTMS(100mg，780.46μmol)，然后将混合物在25℃下搅拌0.3小时。将混合物用石油醚(20mL)稀释，过滤沉淀物，得到残余物。将混合物用石油醚(20mL)稀释，过滤沉淀物，得到中间体化合物208B(80mg，76.98％收率)，为白色固体。
如实施例5，由相应的起始物料——化合物208B和12G制备化合物208(13.5mg，27.13％收率，白色固体)。化合物208：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.09(d,J＝7.2Hz,1H),8.49(d,J＝1.6Hz,1H),8.40-8.36(m,1H),8.10(br s,1H),7.86(br s,1H),7.82(d,J＝8.4Hz,1H),7.31-7.23(m,5H),6.51(s,1H),5.35-5.29(m,1H),3.19-3.13(m,1H),2.84-2.76(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+1)+403.1。
实施例110
化合物209、439-441、443-444
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(吡啶-4-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(209)
向3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯(3.0g，19.46mmol)、吡啶-4-基硼酸(5.98g，48.65mmol)的吡啶(40mL)溶液中加入Cu(OAc)2(1.8g，9.73mmol)。将混合物在55℃下搅拌18小时。将混合物过滤并真空浓缩。通过快速硅胶色谱(120g Silica Flash Column，洗脱液为0～50％乙酸乙酯/石油醚梯度@40mL/min)纯化残余物。得到化合物209A(850mg，18.91％收率)，为白色固体。得到化合物209B(850mg，18.91％收率)，为白色固体。化合物209A(850mg，18.91％收率，白色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.75-8.65(m,2H),7.42(d,J＝6.0Hz,2H),6.87(s,1H),4.33-4.25(m,2H),2.36(s,3H),1.32-1.28(m,3H)。
向化合物209A(600mg，2.59mmol)在EtOH(5mL)中的混合物中一次性加入NaOH水溶液(1M，2.59mL)，将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，以去除EtOH。用1NHCl将残余物调节至pH约3，然后用EtOAc(200mL×4)萃取。将合并的有机层用盐水(80mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物209C(390mg，74.10％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.63(br s,2H),7.50(br d,J＝5.2Hz,2H),6.90(s,1H),2.26(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物209C制备化合物209(27.1mg，25.46％收率，白色固体)。化合物209：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.33(d,J＝7.8Hz,1H),8.55-8.49(m,2H),8.17(s,1H),7.92(s,1H),7.37-7.27(m,5H),7.22-7.18(m,2H),6.60(s,1H),5.33(s,1H),3.28-3.21(m,1H),2.88-2.79(m,1H),2.28(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(4-苯氧基苯基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(439)
化合物439(65mg，收率：61.4％，黄色固体)由3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯制备，如化合物209中使其与(4-苯氧基苯基)硼酸进行偶联，然后进行酯水解，并使用如化合物12中的步骤与中间体274D偶联，得到化合物439。化合物439：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08(br d,J＝7.3Hz,1H),8.12(br s,1H),7.87(br s,1H),7.44(br t,J＝7.4Hz,2H),7.31-7.13(m,8H),7.06(br d,J＝7.9Hz,2H),6.93(br d,J＝8.4Hz,2H),6.57(s,1H),5.26(brs,1H),3.20(br d,J＝14.6Hz,1H),2.81(br t,J＝12.3Hz,1H),2.24(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+469.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)苯基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(440)
化合物440(90mg，收率：58％，白色固体)由1-(4-羟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯制备，使其与四氢-2H-吡喃-4-醇进行mitsunobu偶联，然后进行酯水解，并使用如化合物12中的步骤与中间体274D偶联，得到化合物440。化合物440：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.03(d,J＝7.8Hz,1H),8.11(s,1H),7.87(s,1H),7.35-7.23(m,5H),7.07(d,J＝8.8Hz,2H),6.92(d,J＝9.0Hz,2H),6.53(s,1H),5.27-5.14(m,1H),4.59-4.54(m,1H),3.89-3.82(m,2H),3.49(t,J＝9.3Hz,2H),3.19(dd,J＝3.1,13.9Hz,1H),2.81(dd,J＝10.8,13.8Hz,1H),2.23(s,3H),1.97(d,J＝12.0Hz,2H),1.58(d,J＝7.8Hz,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+477.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4-(4-((二乙基氨基)甲基)苯氧基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺盐酸盐(441)
化合物441(14mg，收率：26.21％，白色固体)由1-(4-羟苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯制备，如化合物209中使其与(4-((二乙基氨基)甲基)苯基)硼酸进行偶联，然后进行酯水解，并使用如化合物12中的步骤与中间体274D偶联，得到化合物441。化合物441：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.55(br.s,1H),7.77-7.71(m,2H),7.37-7.15(m,8H),7.12-7.06(m,2H),6.99(d,J＝9.0Hz,2H),6.57(s,2H),6.13-5.96(m,1H),4.72-4.63(m,1H),4.23-4.13(m,2H),3.27-3.18(m,1H),3.13-2.92(m,5H),2.28(s,3H),1.34(t,J＝3.5,7.3Hz,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+554.3。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(443)
化合物443(75mg，收率：61.3％，白色固体)由3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯制备，如化合物209中使其与(4-(苄氧基)苯基)硼酸偶联，然后氢解得到酚衍生物，使其与2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷-1-醇进行mitsunobu偶联，然后进行酯水解，并使用如化合物12中的步骤与中间体274D偶联，得到化合物443。化合物443：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.02(br d,J＝7.8Hz,1H),8.10(s,1H),7.86(s,1H),7.37-7.20(m,5H),7.08(br d,J＝8.8Hz,2H),6.89(br d,J＝9.0Hz,2H),6.53(s,1H),5.28-5.17(m,1H),4.16-4.06(m,2H),3.80-3.71(m,2H),3.65-3.56(m,2H),3.51-3.44(m,2H),3.25(s,3H),3.21-3.14(m,1H),2.81(br dd,J＝10.7,13.7Hz,1H),2.23(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+495.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(3-(2-(2-甲氧基乙氧基)乙氧基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(444)
化合物444(60mg，收率：39.58％，白色固体)由3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯制备，如化合物209中使其与(3-(苄氧基)苯基)硼酸偶联，然后氢解得到酚衍生物，使其与2-(2-甲氧基乙氧基)乙烷-1-醇进行mitsunobu偶联，然后进行酯水解，并使用如化合物12中的步骤与中间体274D偶联，得到化合物444。化合物444：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.07(d,J＝7.3Hz,1H),8.09(s,1H),7.85(s,1H),7.35-7.18(m,6H),6.93-6.81(m,2H),6.71(d,J＝8.2Hz,1H),6.54(s,1H),5.28(s,1H),4.05(s,2H),3.72(s,2H),3.57(d,J＝4.2Hz,2H),3.46(d,J＝4.2Hz,2H),3.24(s,3H),3.18(s,1H),2.88-2.77(m,1H),2.24(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+495.2。
实施例111
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-5-(3-苯基-1H-吡唑-1-基)异噁唑-4-甲酰胺(211)
向5-氯-3-甲基异噁唑-4-羧酸乙酯(400mg，2.1mmol)和3-苯基-1H-吡唑(365mg，2.5mmol)在DMF(3mL)中的混合物中一次性加入K2CO3(1.2g，8.4mmol)。然后将混合物在80℃下搅拌12小时。然后向混合物中加入H2O(9mL)，用EtOAc(15mL×3)萃取水相，将合并的有机层浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝300：1至30：1)纯化残余物。化合物211A(256mg，收率：40.8％，淡黄色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.62(d,J＝2.6Hz,1H),7.93(d,J＝6.8Hz,2H),7.49-7.37(m,3H),6.86(d,J＝2.6Hz,1H),4.37(q,J＝7.1Hz,2H),2.53(s,3H),1.40-1.34(m,2H),1.41-1.33(m,1H)。
向化合物211A(150mg，504.5μmol)在THF(2mL)和H2O(500μL)中的溶液中一次性加入LiOH.H2O(31.8mg，756.8μmol)。然后将混合物在25℃下搅拌3小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝1：1，Rf～0.45)表明化合物211A被完全消耗并且形成了一个新的主要斑点。通过加入HCl(1M)将水相的pH调节至约5，然后将残余物在旋转蒸发仪上浓缩，得到中间体化合物211B(92mg，收率：67.7％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.39(br s,1H),7.92(d,J＝7.0Hz,2H),7.50-7.43(m,2H),7.42-7.36(m,1H),7.02(s,1H),2.51-2.51(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+269.9。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物211B制备化合物211(20mg，收率：44.7％，白色固体)。化合物211：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.59(br d,J＝6.8Hz,1H),8.19(d,J＝2.6Hz,1H),7.74-7.65(m,2H),7.45-7.38(m,3H),7.12-7.05(m,3H),7.03-6.98(m,2H),6.89(d,J＝2.4Hz,1H),6.72(br s,1H),5.73-5.64(m,1H),5.47(br s,1H),3.38(dd,J＝5.3,14.1Hz,1H),3.06(dd,J＝8.4,13.9Hz,1H),2.56(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+444.1。
实施例112
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(5-苯基噁唑-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(212)
将2-氯-5-苯基噁唑(化合物114A)(560mg，3.12mmol)和NH2NH2.H2O(468mg，9.35mmol)的二噁烷(10mL)溶液加热回流3小时。将混合物浓缩，得到化合物212A(610mg，粗品)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.27(br s,1H),7.48(br d,J＝7.9Hz,1H),7.36(br t,J＝7.7Hz,2H),7.29(s,1H),7.19(br t,J＝7.4Hz,2H),4.53-4.12(m,1H),4.35(br s,1H)。
将O-甲基羟胺(1.74g，20.8mmol)的H2O(20mL)溶液滴加到2,4-二氧代戊酸甲酯(5g，34.7mmol)在乙醇(45mL)、H2O(25mL)中的溶液中，将混合物在25℃下搅拌12小时。真空除去有机溶剂，水层用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，通过硅胶色谱纯化残余物，得到化合物212B(3.3g，收率：54.9％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ4.06(s,3H),3.87(s,3H),3.72(s,2H),2.21(s,2H)。
将化合物212B(360mg，2.05mmol)和化合物212A(355mg，2.05mmol)在二噁烷(5mL)中的混合物加热至110℃保持12小时。将混合物浓缩，通过TLC(石油醚：乙酸乙酯＝5：1)纯化残余物，得到化合物212C(140mg，收率：24.1％)，为黄色油状物。
将化合物212C(140mg，494μmol)和LiOH.H2O(31.1mg，741μmol)在THF(5mL)、H2O(1mL)中的混合物在25℃下搅拌2小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝1：1，Rf～0)显示反应完成，减压除去有机溶剂，水层用乙酸乙酯(3mL)萃取，然后用1N HCl将水层调节至pH约3，得到沉淀，过滤固体，干燥，得到化合物212D(100mg，收率：75.2％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.85(s,1H),7.74-7.69(m,2H),7.48(t,J＝7.7Hz,2H),7.44-7.37(m,1H),6.91(s,1H),2.28(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物212D制备化合物212(34mg，收率：52.6％，白色固体)。化合物212：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.17(brd,J＝7.5Hz,1H),8.08(br s,1H),7.83(br s,1H),7.73(s,1H),7.62(br d,J＝7.5Hz,2H),7.48-7.41(m,2H),7.40-7.34(m,1H),7.25(s,4H),7.19(br d,J＝4.0Hz,1H),6.92(s,1H),5.28(br d,J＝7.7Hz,1H),3.16(br dd,J＝3.0,14.0Hz,1H),2.81(br dd,J＝10.6,13.7Hz,1H),2.27(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+444.1。
实施例113
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-氯-5-苯基异噻唑-4-甲酰胺(213)
在0℃下，将(叔丁氧基羰基)-L-苯基丙氨酸(50g，188.47mmol)、N-甲氧基甲胺(20g，207.32mmol，HCl)、NMM(57g，565.41mmol)和HOBT(25g，188.47mmol)在CHCl3(700mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后分批加入EDCI(54g，282.71mmol)。在N2气氛下，将混合物在25℃下搅拌16小时。通过加入H2O(500mL)淬灭反应混合物。分离有机层，用1N HCl(300mL×2)、饱和NaHCO3水溶液(300mL×3)和盐水(300mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。将残余物用石油醚(300mL)溶解并搅拌2小时，过滤并减压浓缩，得到化合物213A(46g，收率：79.15％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.27-7.13(m,5H),5.26-4.85(m,2H),3.64(s,3H),3.15(br s,3H),3.04(br dd,J＝5.8,13.6Hz,1H),2.91-2.81(m,1H),1.37(s,9H)。MS(ESI)m/z(M+23)+331.0。
在0℃下，向LiAlH4(5.32g，140.09mmol)的THF(1L)溶液中加入化合物213A(36g，116.74mmol)的THF(500mL)溶液。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌1小时。通过加入乙酸乙酯(200mL)和1N HCl(200mL)淬灭反应混合物，然后用EtOAc(300mL×3)萃取。将合并的有机层用1N HCl(300mL×2)、饱和NaHCO3(300mL×3)水溶液和盐水(300mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物213B(25.3g，收率：86.93％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.61(s,1H),7.33-7.24(m,3H),7.16(br d,J＝7.1Hz,2H),5.16-5.03(m,1H),4.40(q,J＝6.6Hz,1H),3.10(br d,J＝5.3Hz,2H),1.42(s,9H)。
在0-5℃下，向化合物213B(32g，128.36mmol)的MeOH(250mL)溶液中滴加NaHSO3(13.5g)的H2O(400mL)溶液。之后，将反应混合物在28℃下搅拌5小时。向反应混合物中加入NaCN(6.6g，134.78mmol)的H2O(600mL)溶液，然后加入EtOAc(1.2L)。之后，将反应混合物在28℃下搅拌14小时。分离混合物，有机层用盐水(500mL)洗涤。将混合物用Na2SO4干燥并浓缩，得到化合物213C(35g，收率：98.68％)，为浅黄色胶状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.26-7.14(m,6H),6.82-6.70(m,1H),4.57-4.28(m,1H),3.88-3.72(m,1H),3.01-2.58(m,2H),1.31-1.22(m,9H)。MS(ESI)m/z(M-55)+220.9。
在0℃下，向化合物213C(35g，126.66mmol)和K2CO3(35g，253.32mmol)的DMSO(400mL)溶液中加入H2O2(148g，4.35mol)。添加后，将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤，得到残余物。将残余物用饱和Na2S2O3水溶液(100mL×2)和H2O(100mL)洗涤，用甲苯(200mL)溶解，减压浓缩除去H2O。在0℃下，用饱和Na2SO3水溶液缓慢淬灭滤液。将混合物用EtOAc(200mL×3)萃取，并将合并的萃取液用饱和Na2SO3水溶液(300mL×3)、盐水(200mL)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物213D(37.5g，收率88.51％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.29-7.16(m,7H),6.64-6.09(m,1H),5.74-5.61(m,1H),4.09-3.67(m,2H),2.86-2.56(m,2H),1.36-1.22(m,9H)。MS(ESI)m/z(M-100+H)+194.9。
在0℃下，向化合物213D(41g，139.29mmol)的EtOAc(300mL)溶液中加入HCl/EtOAc(4M，696.45mL)。添加后，将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物过滤，得到残余物。将残余物用乙酸乙酯(30mL)洗涤，减压浓缩，得到化合物12G(26g，收率：66.35％，HCl)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.42-7.95(m,3H),7.60-7.43(m,2H),7.37-7.12(m,6H),4.38-3.79(m,2H),3.73-3.62(m,1H),3.03-2.73(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+195.1。
向放置化合物96B(2.00g，9.06mmol)的100mL圆底中逐滴加入H2SO4(27.60g，281.40mmol)，并在135℃下搅拌1小时。然后，在0℃下向混合物中逐滴加入NaNO2(907mg，13.14mmol)的H2O(10mL)溶液。将所得溶液在50℃下搅拌0.5小时。将反应混合物用H2O(50mL)稀释，并用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。将合并的有机层用10％NaOH(50mL×2)萃取。用1N HCl将水相调节至3，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物213F(1.17g，收率：49.13％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.55(d,J＝1.3Hz,5H)。MS(ESI)m/z(M+H)+239.9。
如实施例5，由相应的起始物料——化合物12G和213F制备化合物213(65mg，收率：40.23％，灰色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.35(d,J＝7.3Hz,1H),8.19(br s,1H),7.91(br s,1H),7.51-7.32(m,5H),7.27-7.17(m,5H),5.71-5.21(m,1H),3.17(dd,J＝3.4,14.2Hz,1H),2.72(dd,J＝10.4,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+414.0。
实施例114
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(噻唑-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(215)
将2-肼基噻唑盐酸盐(600mg，3.9mmol，HCl盐)和2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(815mg，4.35mmol)在AcOH(15mL)中的混合物在110℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，以去除AcOH。将残余物用H2O(50mL)和乙酸乙酯(50mL)处理，然后将混合物用饱和NaHCO3水溶液酸化至水相pH～7-8。将分离的水层用乙酸乙酯(80mL×3)萃取，将合并的有机层用饱和NaCl水溶液(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，减压过滤，得到粗产物，将其通过快速柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝1～9)纯化，得到化合物215A(138mg，收率12.6％)，为白色固体。化合物215A：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.71-7.69(m,1H),7.66(d,J＝3.5Hz,1H),6.87(s,1H),4.23(q,J＝7.1Hz,2H),2.26(s,3H),1.20-1.15(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+237.9。
在25℃下，向化合物215A(130mg，0.55mmol)在MeOH(10mL)中的混合物中一次性加入NaOH(2M，1.4mL)。在25℃下搅拌1.5小时后，将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。向残余物中加入H2O(10mL)并用乙酸乙酯(10mL)萃取，将分离的水相用1M HCl酸化至pH约5-6。分离固体并减压过滤，得到化合物215B(70mg，粗品)，为白色固体。化合物215B：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.56(d,J＝3.7Hz,1H),7.21-7.17(m,2H),2.37(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物215B制备化合物215(10mg，收率53.7％，白色固体)。化合物215：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ11.76(s,1H),7.27-7.18(m,5H),7.17-7.12(m,1H),7.10-7.00(m,2H),6.78(s,1H),5.83-5.74(m,1H),5.50(s,1H),3.48-3.40(m,1H),3.28-3.18(m,1H),2.32(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+384.0。
实施例115
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-1-(噻唑-2-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(219)
向2-肼基噻唑盐酸盐(700mg，4.39mmol，HCl盐)的CH3COOH(15mL)溶液中滴加2,4-二氧代戊酸乙酯(632μL，4.48mmol)，然后将混合物加热至120℃并搅拌2小时。减压除去溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯(5mL)中并用NaHCO3处理直至pH约8。收集有机层并减压蒸发。通过快速柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝1/0至10/1)纯化残余物，得到化合物219A(160mg，收率15.4％)，为白色固体。化合物219A：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.60(d,J＝3.5Hz,1H),7.18(d,J＝3.5Hz,1H),6.70(d,J＝0.9Hz,1H),4.42(q,J＝7.1Hz,2H),2.74(d,J＝0.9Hz,3H),1.42(t,J＝7.1Hz,3H)。
向化合物219A(160mg，674.31μmol)的MeOH(10mL)溶液中滴加NaOH(2M，2.00mL)，然后将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用H2O(5mL)稀释，减压蒸发，然后用MBTE(5mL)萃取水相。水相(用HCl酸化，pH～3)用乙酸乙酯(10mL×3)萃取，然后收集有机物(乙酸乙酯)，用饱和盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥并过滤，减压浓缩。化合物219B(110mg，收率78％，白色固体)：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.72(d,J＝3.5Hz,1H),7.64(d,J＝3.5Hz,1H),6.77(d,J＝0.7Hz,1H),2.67(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物219B制备化合物219(15mg，收率31.8％，白色固体)。化合物219：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.58(d,J＝3.5Hz,1H),7.37-7.26(m,3H),7.26-7.24(m,1H),7.22-7.15(m,3H),6.78(br s,1H),6.65(s,1H),5.73-5.64(m,1H),5.58(br s,1H),3.43(dd,J＝5.4,14.0Hz,1H),3.26(dd,J＝6.9,14.2Hz,1H),2.71(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+384.1。
实施例116
(2S,4R)-N-((S)-4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(苄氧基)-1-苯基吡咯烷-2-甲酰胺(220)
将(2S,4R)-4-(苄氧基)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-2-羧酸(500mg，1.56mmol)在MeOH(3mL)、HCl/MeOH(15mL)中的混合物在20℃下搅拌12小时。LCMS显示起始物料被完全消耗，并且检测到具有所需MS的一个主峰。将反应混合物用NaHCO3水溶液稀释，调节pH约7，并用DCM(30mL×2)萃取。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。化合物220A(340mg，粗品，黄色油状物)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.37-7.20(m,5H),4.52-4.41(m,2H),4.12(br s,1H),4.00(br t,J＝7.6Hz,1H),3.77-3.62(m,3H),3.11(br s,2H),2.66(br s,1H),2.29(br dd,J＝7.8,13.1Hz,1H),1.98(td,J＝6.6,13.4Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+236.1。
将化合物220A(240mg，1.02mmol)、苯基硼酸(249mg，2.04mmol)、Cu(OAc)2(278mg，1.53mmol)、吡啶(161mg，2.04mmol)和4A°MS(400mg)在DCE(20mL)中的混合物脱气并用O2吹扫3次，然后在O2气氛下将混合物在60℃下搅拌12小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝50：1至10：1)纯化残余物。化合物220B(130mg，黄色油状物)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.16(m,5H),7.16-7.06(m,2H),6.68-6.57(m,1H),6.42(d,J＝8.1Hz,2H),4.45(s,2H),4.39-4.25(m,2H),3.77-3.67(m,1H),3.66-3.56(m,3H),3.34(dd,J＝4.4,9.5Hz,1H),2.42-2.28(m,1H),2.28-2.15(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+312.0。
将化合物220B(130mg，418μmol)、LiOH.H2O(26.3mg，626μmol)在THF(5mL)、H2O(2mL)中的混合物在20℃下搅拌12小时。向反应混合物中加入HCl水溶液以调节pH约5。然后将混合物过滤，并通过冷冻干燥器将滤饼干燥。化合物220C(130mg，粗品，白色固体：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.36-7.15(m,6H),7.13-6.98(m,2H),6.57-6.47(m,1H),6.40(br d,J＝7.9Hz,2H),4.48-4.40(m,2H),4.28(br s,1H),4.15-4.05(m,1H),3.29-3.26(m,1H),3.27-3.17(m,1H),2.33-2.22(m,1H),2.21-2.09(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+298.2。
如实施例12，由相应的中间体羧酸——化合物220C制备化合物220(18.6mg，收率：70.3％，棕色固体)。化合物220：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.33-7.07(m,11H),6.93(br s,2H),6.84-6.70(m,2H),6.59(br s,1H),6.49(br d,J＝8.4Hz,2H),5.35(br s,1H),5.30-5.13(m,1H),4.50-4.29(m,2H),4.01(br dd,J＝4.2,9.0Hz,1H),3.95-3.85(m,1H),3.62(dd,J＝5.8,8.9Hz,1H),3.30(br dd,J＝5.0,14.0Hz,1H),3.17(dd,J＝6.4,9.0Hz,1H),2.80(dd,J＝9.0,13.9Hz,1H),2.31-2.17(m,1H),2.16-2.03(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+472.2。
实施例117
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-苯基-1H-咪唑-2-甲酰胺(221)
向1H-咪唑-2-羧酸乙酯(5g，35.7mmol)和苯基硼酸(8.7g，71.4mmol)在DCE(150mL)中的混合物中加入Cu(OAc)2(7.13g，39.25mmol)、吡啶(5.64g，71.36mmol，5.76mL)、4A°MS(3g)。在O2下，将混合物在60℃下搅拌16小时。过滤反应混合物，浓缩滤液。通过硅胶色谱纯化粗产物，用石油醚：乙酸乙酯＝10：1、4：1洗脱，得到化合物221A(3g，13.9mmol，收率：38.9％)，为黄色固体。化合物221A：1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ7.43-7.39(m,3H),7.27-7.23(m,2H),7.22-7.19(m,1H),7.11(d,J＝1.0Hz,1H),4.22(q,J＝7.2Hz,2H),1.24(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物221A(300mg，1.39mmol)在THF(3mL)和H2O(1mL)中的混合物中加入LiOH.H2O(52mg，1.25mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。用乙酸乙酯(5ml×2)萃取残余物。用HCl水溶液(1M)将混合物调节至pH约5，并通过冷冻干燥浓缩，得到中间体化合物221B(550mg，粗品)，为白色固体。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物221B制备化合物221(17.1mg，收率：30.9％，黄色固体)。
化合物221：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.76(br d,J＝7.9Hz,1H),7.35(br d,J＝2.6Hz,3H),7.24-7.16(m,5H),7.12(br d,J＝7.1Hz,2H),7.08(s,1H),7.04(s,1H),6.67(br s,1H),5.60-5.47(m,2H),3.32(dd,J＝4.9,13.9Hz,1H),3.08(dd,J＝7.4,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+363.1。
实施例118
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-2-苯基噻吩-3-甲酰胺(222)
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-(2H-吲唑-2-基)-5-甲基噻吩-3-甲酰胺(428)和N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-5-甲基噻吩-3-甲酰胺(429)
将2-氨基-5-甲基噻吩-3-羧酸乙酯(9g，48.6mmol)和CuBr2(13g，58.3mmol)在MeCN(150mL)中的混合物在0℃–5℃下搅拌。滴加t-BuONO(5.5g，53.5mmol)。将反应混合物在0-5℃下搅拌0.5小时，在20℃下搅拌2小时。将反应混合物用EtOAc(400mL)稀释，用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝100：1)纯化残余物，得到化合物222A(2g，收率：16.5％)，为黄色油状物。化合物222A：1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ7.01(s,1H),4.30(q,J＝7.1Hz,2H),2.38(s,3H),1.40-1.29(m,3H)。
在N2下，向化合物222A(400mg，1.61mmol)和苯基硼酸(393mg，3.22mmol)、Cs2CO3(1.05g，3.22mmol)在二噁烷(20mL)和H2O(2mL)中的混合物中加入Pd(dppf)Cl2(118mg，161μmol)。在N2下，将混合物在110℃下搅拌12小时。过滤反应混合物，浓缩滤液。通过制备型TLC(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝5：1)纯化残余物，得到化合物222B(350mg，收率：88.3％)，为白色固体。化合物222B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.48(br s,2H),7.38(br s,3H),7.19(br s,1H),4.19(q,J＝6.9Hz,2H),2.50(br s,3H),1.23-1.15(m,3H)。
向化合物222B(350mg，1.42mmol)在EtOH(10mL)和H2O(5mL)中的混合物中加入NaOH(142mg，3.55mmol)。将混合物在80℃下搅拌3小时。将混合物浓缩以除去溶剂并用HCl水溶液(1M)调节至pH约5。将混合物过滤，用H2O(3mL)洗涤固体，得到中间体化合物222C(250mg，收率：81.0％)，为白色固体。化合物222C：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.47(br s,1H),7.43-7.38(m,2H),7.37-7.32(m,3H),7.10(d,J＝0.9Hz,1H),2.41(s,3H)。
如实施例12，由相应的中间体羧酸——化合物222C制备化合物222(15.7mg，收率：29.6％，白色固体)。化合物222：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.36-7.30(m,4H),7.19(s,1H),7.13-7.07(m,3H),6.97(s,1H),6.71-6.60(m,3H),5.89(br d,J＝5.3Hz,1H),5.49-5.34(m,2H),3.10(dd,J＝5.0,14.0Hz,1H),2.81(dd,J＝7.9,13.9Hz,1H),2.37(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+393.1。
化合物428(44.7mg，收率：40.5％，白色固体)使用中间体222A制备以合成中间体羧酸——2-(2H-吲唑-2-基)-5-甲基噻吩-3-羧酸，使用如化合物12的步骤将其转化为化合物428。化合物428：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.17(br d,J＝5.6Hz,1H),8.25(s,1H),7.70(brd,J＝8.3Hz,1H),7.61(br d,J＝8.7Hz,1H),7.34(br t,J＝7.5Hz,1H),7.21-7.13(m,2H),7.00(br s,3H),6.85(br s,2H),6.69(br s,1H),5.69-5.58(m,1H),5.43(br s,1H),3.27(br dd,J＝4.8,14.0Hz,1H),2.95(br dd,J＝7.3,14.1Hz,1H),2.48(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+433.1。
化合物429(31.6mg，收率：35.7％，黄色固体)使用中间体222A制备以合成中间体羧酸——5-甲基-2-(1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-苯并[d]咪唑-2-基)噻吩-3-羧酸，使用如化合物12的步骤将其转化为化合物429。化合物429：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ12.80(br s,1H),10.05(br d,J＝6.8Hz,1H),8.18(br s,1H),7.85(br s,1H),7.66-7.57(m,2H),7.32-7.19(m,7H),7.17-7.11(m,1H),5.44(br s,1H),3.27(br s,1H),3.03-2.93(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+433.1。
实施例119
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(223)
向4-甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯(2.00g，12.97mmol)、苯基硼酸(2.37g，19.45mmol)、Py(1.13g，14.27mmol，1.2mL)在DCM(40.00mL)中的混合物中加入4A°MS(10.00g)(活化的4A°MS)和Cu(OAc)2(2.59g，14.27mmol)，将混合物在40℃下搅拌63小时。过滤反应混合物，真空浓缩滤液。通过快速硅胶色谱(PE：EA＝1：0至5：1)纯化残余物，得到化合物223A(725mg，收率：24.3％)，为无色油状物。化合物223A：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.44(s,1H),7.83(d,J＝7.7Hz,2H),7.52(t,J＝7.9Hz,2H),7.43-7.32(m,1H),4.31(q,J＝7.1Hz,2H),2.27(s,3H),1.32(t,J＝7.1Hz,3H)。
向化合物223A(720mg，3.13mmol)的THF(20.00mL)溶液中加入LiOH.H2O(700mg，16.68mmol)的H2O(6.00mL)溶液。将反应在25℃下搅拌27小时，然后在混合物中加入NaOH(626mg，15.65mmol)在H2O(5.00mL)和MeOH(4.00mL)中的溶液。将混合物在25℃下搅拌3.5小时。将反应混合物用H2O(25mL)稀释，并用MTBE(15mL)萃取。通过添加1N HCl将水层调节至pH约3，然后用EA(20mL×3)萃取水层。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物223C(526mg，收率：83.1％)，为白色固体。化合物223C：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.63(s,1H),7.51-7.28(m,5H),2.25(s,3H)。
如实施例12，由相应的中间体羧酸——化合物223C制备化合物223(34mg，收率：68.3％，白色固体)。化合物223：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.18(d,J＝7.8Hz,1H),8.21(s,1H),7.94(s,1H),7.54(s,1H),7.37-7.22(m,10H),5.46-5.36(m,1H),3.26(br dd,J＝3.0,13.8Hz,1H),2.78(dd,J＝11.2,13.9Hz,1H),2.00-1.93(m,3H)。
实施例120
化合物224-225
(S)-N-(3,4-二氧代-1-苯基-4-((吡啶-3-基甲基)氨基)丁-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(224)
(S)-N-(4-((苯并[D][1,3]二氧杂环戊烯-5-基甲基)氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(225)
向化合物101E(350.0mg，920.11μmol)的DMF(10mL)溶液中加入3-吡啶基甲胺(119.4mg，1.10mmol，110μL)、DIEA(0.5mL)、HOBt(124.33mg，920.11μmol)和EDCI(211.66mg，1.10mmol)。在25℃下搅拌48小时后，向混合物中加入HBTU(418.7mg，1.10mmol)和DIEA(0.5mL)，然后在25℃下搅拌12小时。将混合物用H2O(100mL)稀释，用EA(30mL)萃取，用HCl(1M，30mL)、饱和NaHCO3(水溶液，30mL)、盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5：1至0：1)纯化残余物，得到化合物224A。
化合物224A(60.0mg，收率13.9％，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.67-8.50(m,1H),8.48-8.45(m,1H),8.42-8.37(m,1H),8.30-8.24(m,1H),7.73-7.33(m,6H),7.31-7.09(m,6H),6.14-5.86(m,1H),4.69-4.55(m,1H),4.36-4.14(m,2H),4.08-4.01(m,1H),2.97-2.87(m,1H),2.77-2.66(m,1H),2.08-1.96(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+471.2。
如上对224A所示，由相应的胺合成化合物225A(130.0mg，27.5％收率，白色固体)。化合物225A：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35-8.28(m,1H),8.26-8.21(m,1H),7.57-7.51(m,2H),7.48-7.42(m,1H),7.41-7.35(m,2H),7.29-7.12(m,5H),6.89-6.79(m,1H),6.79-6.68(m,2H),5.94-5.88(m,2H),5.87-5.81(m,1H),4.66-4.57(m,1H),4.23-4.09(m,2H),4.04-3.99(m,1H),4.04-3.99(m,1H),2.95-2.86(m,1H),2.78-2.66(m,1H),2.07-1.98(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+514.2。
向化合物225A(120.0mg，233.67μmol)在DMSO(10mL)和DCM(1mL)中的溶液中加入DMP(297.3mg，701.01μmol)。在25℃下搅拌1小时后，将混合物用10％Na2S2O3(水溶液)：饱和NaHCO3水溶液(1：1，50mL)淬灭，将有机层用盐水(50mL×3)洗涤。将合并的有机层用Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物用CH3CN(5mL)研磨并过滤，得到化合物225(62.0mg，收率51.9％)，为黄色固体。化合物225：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.41-9.32(m,1H),9.10(d,J＝7.6Hz,1H),7.66-7.62(m,2H),7.53-7.48(m,1H),7.46-7.40(m,2H),7.33-7.23(m,5H),6.89-6.83(m,2H),6.79-6.76(m,1H),5.98(s,2H),5.54-5.47(m,1H),4.27(d,J＝6.4Hz,2H),3.30-3.23(m,1H),2.83-2.74(m,1H),2.09-2.06(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+512.2。
如上对化合物225所示，由相应的中间体化合物224A合成化合物224。得到化合物224(25.0mg，50.2％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53-9.45(m,1H),9.11(d,J＝7.6Hz,1H),8.54(s,1H),8.49-8.46(m,1H),7.72-7.67(m,1H),7.67-7.62(m,2H),7.54-7.48(m,1H),7.46-7.40(m,2H),7.38-7.33(m,1H),7.32-7.23(m,5H),5.54-5.47(m,1H),4.40(d,J＝6.3Hz,2H),3.30-3.23(m,1H),2.83-2.75(m,1H),2.09-2.05(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+469.1。
实施例121
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-乙基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺(226)
向碘苯(5g，24.51mmol)和2,4-二硝基苯磺酸(7.83g，29.41mmol，H2O)在CHCl3(20mL)中的混合物中加入m-CPBA(4.23g，24.51mmol)。在N2气氛下，将混合物在25℃下搅拌2小时。反应后，向反应混合物中加入MTBE(20mL)，将所得混合物过滤，用MTBE(30mL)洗涤固体，得到化合物226A(8.9g，77.6％收率)，为白色固体。化合物226A：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ9.76(br s,1H),8.57(d,J＝2.4Hz,1H),8.43-8.40(m,1H),8.23(d,J＝7.6Hz,2H),8.10(d,J＝8.4Hz,1H),7.75-7.69(m,1H),7.66-7.59(m,2H)。
将3-氧代-3-苯基丙酸乙酯(1.3g，6.76mmol)和化合物226A(4.12g，8.79mmol)的CH3CN(50mL)溶液在80℃下搅拌1小时，向混合物中加入丙酰胺(5.93g，81.1mmol)，然后在微波辐射下将混合物在120℃下搅拌0.2小时。冷却至25℃后，将悬浮液用饱和NaHCO3溶液(30mL)稀释，用EtOAc(100mL×2)萃取，经Na2SO4干燥，过滤，并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化残余物，得到化合物226B(200mg，11.22％收率)，为白色固体。化合物226B：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.03-7.96(m,2H),7.46-7.35(m,3H),4.36(q,J＝7.2Hz,2H),2.88(q,J＝7.6Hz,2H),1.40(t,J＝7.6Hz,3H),1.35(t,J＝7.2Hz,3H)。
如实施例51，由相应的中间体化合物226B制备化合物226C(170mg，93.71％收率，黄色固体)。化合物226C：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.99-7.97(m,2H),7.47-7.35(m,3H),2.83(q,J＝7.6Hz,2H),1.27(t,J＝7.6Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+217.9。
如实施例5，由相应的羧酸——化合物226C制备化合物226(59.7mg，58.17％收率，白色固体)。化合物226：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.12-8.04(m,2H),7.45-7.35(m,3H),7.32-7.23(m,3H),7.13(d,J＝6.4Hz,2H),6.81-6.68(m,2H),5.74-5.59(m,2H),3.46-3.41(m,1H),3.26-3.21(m,1H),2.91-2.80(m,2H),1.40(t,J＝7.6Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+392.1。
实施例122
化合物268-269
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-4-苯基-1H-咪唑-5-甲酰胺(268)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-5-苯基-1H-咪唑-4-甲酰胺(269)
在0℃下，向3-氧代-3-苯基丙酸乙酯(40g，208mmol)的CHCl3(200mL)溶液中逐滴加入硫酰氯(33.7g，250mmol)。将混合物温热至25℃保持30分钟，然后加热至80℃保持3.5小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝10：1，Rf～0.45)显示反应完成。LCMS显示所需的MS，冷却至室温后，将反应混合物用氯仿(40mL)稀释，依次用NaHCO3(水溶液；40mL×2)、水(40mL)和盐水(30mL)洗涤。有机相经Na2SO4干燥，过滤并蒸发，得到粗产物化合物268A(48g，粗品)，为黄色油状物。化合物268A：1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ8.10-7.96(m,2H),7.73-7.58(m,1H),7.57-7.39(m,2H),5.62(s,1H),4.39-4.25(m,2H),1.32-1.13(m,3H)。
将化合物268A(20g，88.2mmol)、甲酰胺(39.7g，882mmol)和H2O(3.18g，176mmol)的溶液加热至180℃保持3.5小时。冷却后，向混合物中加入水(100mL)并用DCM(50mL×3)萃取，有机相得到沉淀，将固体过滤并干燥，得到化合物268B(1.45g，收率：7.6％)，为白色固体。化合物268B：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.26-12.66(m,1H),7.96-7.78(m,1H),7.81(s,1H),7.63(br d,J＝7.2Hz,1H),7.53-7.26(m,3H),4.33-4.09(m,2H),1.33-1.13(m,3H)。
向NaH(277mg，6.94mmol，60％纯度)的DMF(5mL)溶液中分批加入化合物268B(1.25g，5.78mmol)，搅拌30分钟，然后加入CH3I(903mg，6.36mmol)，将混合物在15℃下搅拌2小时。将混合物用水(15mL)淬灭并用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，将有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，通过制备型HPLC(中性)纯化残余物，得到化合物268C和268D。化合物268C(430mg，收率：64.7％，黄色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ7.67(br d,J＝7.1Hz,2H),7.57(s,1H),7.43-7.30(m,3H),4.25(q,J＝7.1Hz,2H),3.93(s,3H),1.22(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物268D(380mg，收率：57.1％，黄色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ7.54(s,1H),7.52-7.44(m,3H),7.41-7.34(m,2H),4.24(q,J＝7.1Hz,2H),3.50(s,3H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H)。
将化合物268C(200mg，869μmol)和NaOH(69.5mg，1.74mmol)在THF(5mL)、H2O(1mL)中的混合物在15℃下搅拌12小时。TLC(乙酸乙酯，Rf～0)显示反应完成，真空除去有机溶剂，用1N HCl将水层调节至pH约5，得到沉淀，过滤固体，干燥，得到化合物268E(120mg，收率：68.3％)，为白色固体。化合物268E：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.90(br s,1H),7.86(s,1H),7.62(br d,J＝7.1Hz,2H),7.38-7.21(m,3H),3.80(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物268E制备化合物268(40.2mg，收率：27.2％，白色固体)。化合物268：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.96(d,J＝7.5Hz,1H),8.19(s,1H),7.92(s,1H),7.66(s,1H),7.55(d,J＝6.8Hz,2H),7.31-7.18(m,8H),5.52(ddd,J＝3.5,7.4,10.5Hz,1H),3.40(s,3H),3.21(dd,J＝3.5,14.1Hz,1H),2.75(dd,J＝10.6,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
按照中间体化合物268E和化合物268所用的步骤，制备中间体化合物269A和化合物269。化合物269A(130mg，收率：74％，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.76(s,1H),7.47-7.30(m,5H),3.40(s,3H)。化合物269(32.4mg，收率：37.5％，白色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ7.67(br d,J＝7.2Hz,1H),7.51-7.43(m,4H),7.42-7.35(m,2H),7.32-7.29(m,1H),7.28(s,1H),7.26-7.23(m,1H),7.22-7.18(m,2H),6.72(br s,1H),5.64(dt,J＝5.3,7.5Hz,1H),5.44(br s,1H),3.51(s,3H),3.41(dd,J＝5.3,14.1Hz,1H),3.20(dd,J＝7.4,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
实施例123
化合物227-228
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4-(乙氧基甲基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(227)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4-((苄氧基)甲基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(228)
向3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯(2g，12.97mmol)、[4-(羟甲基)苯基]硼酸(3.94g，25.94mmol)的NMP(200mL)溶液中加入吡啶(2.05g，25.94mmol，2.09mL)、Cu(OAc)2(3.53g，19.45mmol)、4A°MS(20g，12.97mmol)。在25℃下搅拌24小时后，将混合物过滤。将滤液用H2O(500mL)洗涤，用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。将有机相用盐水(500mL)洗涤，用Na2SO4干燥，浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至3/1)纯化残余物，得到中间体化合物227A(1g，收率：29.62％)，为白色固体。化合物227A：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.41-7.34(m,4H),6.80(s,1H),4.71(s,2H),4.22(q,J＝7.1Hz,2H),2.35(s,3H),1.24(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+261.0。
在0℃下，向化合物227A(350mg，1.34mmol)和苄基溴(458mg，2.68mmol，318μL)的DMF(10mL)溶液中加入NaH(160mg，4.02mmol，60％纯度)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物用NH4Cl(1mL)淬灭，用H2O(30mL)稀释，用乙酸乙酯(20mL×3)萃取，合并有机相，用NaCl(50mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，并浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10：1至5：1)纯化残余物，得到化合物228B(350mg，收率：64.85％，黄色油状物)。化合物228B：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.47-7.28(m,9H),6.87-6.78(m,1H),4.66-4.60(m,2H),4.56(s,2H),4.23(q,J＝7.1Hz,2H),2.36(s,3H),1.24(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+351.0。
向化合物228B(350mg，998.83μmol)在MeOH(10mL)和H2O(10mL)中的溶液中加入NaOH(119mg，3.00mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物浓缩并加入20mL水，用MTBE(10mL×2)萃取混合物，在0℃下用1N HCl将水层酸化至pH约2～3，并用EtOAc(20mL×2)萃取，将有机相用Na2SO4干燥，浓缩，得到残余物。化合物228C(270mg，收率：83.86％，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.58-12.95(m,1H),7.45-7.24(m,9H),6.79(s,1H),4.57(d,J＝6.8Hz,4H),2.23(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+323.0。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物228C制备化合物228(37.6mg，收率：51.78％，白色固体)。化合物228：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.09(d,J＝7.9Hz,1H),8.11(s,1H),7.86(s,1H),7.39-7.21(m,12H),7.14(d,J＝8.2Hz,2H),6.58-6.50(m,1H),5.33-5.17(m,1H),4.53(d,J＝6.0Hz,4H),3.18(dd,J＝3.2,13.6Hz,1H),2.80(dd,J＝10.8,13.7Hz,1H),2.23(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+497.2。
使用与化合物228C相同的步骤，得到中间体化合物227C(300mg，收率：95.04％)，为白色固体。化合物227C：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.20(brs,1H),7.47-7.24(m,4H),6.79(s,1H),4.49(s,2H),3.50(q,J＝7.0Hz,2H),2.23(s,3H),1.16(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+261.0。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物227C制备化合物227(31mg，收率：54.75％，淡黄色固体)。化合物227：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.07(d,J＝7.7Hz,1H),8.11(d,J＝3.1Hz,1H),7.87-7.84(m,1H),7.31-7.24(m,7H),7.13(br d,J＝8.2Hz,2H),6.53(s,1H),5.25(t,J＝7.4Hz,1H),4.44(s,2H),3.52-3.44(m,2H),3.19(dd,J＝3.0,13.6Hz,1H),2.84-2.76(m,1H),2.23(s,3H),1.15(t,J＝6.9Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+435.1。
实施例124
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(3-(乙氧基甲基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(229)
向3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯(3g，19.46mmol)、[3-(羟甲基)苯基]硼酸(4.44g，29.19mmol)、4A°MS(8g)和吡啶(1.69g，21.41mmol，1.8mL)的DCM(70mL)溶液中加入Cu(OAc)2(4.59g，25.30mmol)，在O2气球(15psi)下将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，除去4A°MS和催化剂，然后浓缩滤液。通过制备型HPLC(TFA条件)纯化残余物。得到化合物229A(1.8g，收率：35.54％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.48-7.35(m,3H),7.32-7.28(m,1H),6.81(s,1H),4.71(s,2H),4.22(q,J＝7.0Hz,2H),2.35(s,3H),1.24(t,J＝7.0Hz,3H)。
在0℃下，向化合物229A(465mg，1.79mmol)和碘乙烷(1.4g，8.95mmol，0.75mL)的无水DMF(10mL)溶液中加入NaH(214.8mg，5.37mmol，60％纯度)，然后使混合物在25℃下反应2小时。在0℃下用50mL饱和NH4Cl淬灭反应混合物，用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，有机相用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化残余物。得到化合物229B(443mg，收率：85.83％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.43-7.36(m,3H),7.33-7.28(m,1H),6.80(s,1H),4.56(s,2H),4.21(q,J＝7.3Hz,2H),3.54(q,J＝7.0Hz,2H),2.35(s,3H),1.23(t,J＝2.4,7.1Hz,6H)。
向化合物229B(443mg，1.54mmol)在MeOH(10mL)和H2O(6mL)中的溶液中加入NaOH(184.8mg，4.62mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩并加入20mL水，用MTBE(10mL×2)萃取混合物，在0℃下用1N HCl将水层酸化至pH约2至3，并用EtOAc(10mL×2)萃取，将有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物。得到化合物229C(400mg，收率：99.79％)，为白色固体，将其直接用于下一步骤。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.43-7.37(m,1H),7.35-7.26(m,3H),6.79(s,1H),4.48(s,2H),3.48(q,J＝6.9Hz,2H),2.23(s,3H),1.16-1.12(m,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物229C制备化合物229(30.1mg，收率：47.21％，白色固体)。化合物229：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.07(br d,J＝7.7Hz,1H),8.08(s,1H),7.84(s,1H),7.32-7.22(m,8H),6.99(br d,J＝7.5Hz,1H),6.54(s,1H),5.31-5.20(m,1H),4.42(s,2H),3.47-3.43(m,2H),3.17(br dd,J＝3.4,13.8Hz,1H),2.80(br dd,J＝10.6,13.7Hz,1H),2.23(s,3H),1.11(t,J＝6.9Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+435.1。
实施例125
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(3-((苄氧基)甲基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(230)
在0℃下，向化合物229A(472mg，1.81mmol)和溴甲基苯(1.55g，9.05mmol，1.1mL)的无水DMF(15mL)溶液中加入NaH(218mg，5.43mmol，60％纯度)，然后使混合物在25℃下反应2小时。在0℃下用50mL饱和NH4Cl淬灭反应混合物，用乙酸乙酯(30mL×2)萃取，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化残余物。得到化合物230A(623mg，收率：98.23％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.43-7.41(m,3H),7.37-7.34(m,5H),7.31(d,J＝2.0Hz,1H),6.81(s,1H),4.62(s,2H),4.57(s,2H),4.23-4.18(m,2H),2.36(s,3H),1.22(t,J＝7.1Hz,3H)。
向化合物230A(623mg，1.78mmol)在MeOH(15mL)和H2O(8mL)中的溶液中加入NaOH(214mg，5.34mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩并加入20mL水，用MTBE(10mL×2)萃取混合物，在0℃下用1N HCl将水层酸化至pH约2～3，并用EtOAc(10mL×2)萃取，将有机相用Na2SO4干燥，浓缩，得到残余物。得到化合物230B(569mg，收率：99.16％)，为白色固体，将其直接用于下一步骤。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.45-7.23(m,10H),6.80(s,1H),4.57(s,2H),4.54(s,2H),2.24(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物230B制备化合物230(33.3mg，收率：54.97％，白色固体)。化合物230：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08(d,J＝7.7Hz,1H),8.08(s,1H),7.85(s,1H),7.35-7.25(m,12H),7.23-7.20(m,1H),7.03-6.98(m,1H),6.55(s,1H),5.30-5.21(m,1H),4.51(d,J＝2.9Hz,4H),3.17(dd,J＝3.4,13.8Hz,1H),2.80(dd,J＝10.6,13.7Hz,1H),2.23(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+497.1。
实施例126
化合物231、438、442
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(3-(苯氧基甲基)苯基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(231)
向化合物229A(400mg，1.54mmol)和苯酚(174mg，1.85mmol)在无水THF(10mL)中的悬浮溶液中加入PPh3(605mg，2.31mmol)，然后在N2下缓慢加入DIAD(467mg，2.31mmol，449μL)。在N2下使混合物在25℃下反应12小时。将反应混合物溶于DCM(30mL)和H2O(20mL)中，然后用DCM(20mL×2)萃取，合并有机层，将混合物用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝4/1)纯化残余物。得到化合物231A(489.7mg，收率：94.53％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.51-7.43(m,3H),7.36(d,J＝7.7Hz,1H),7.31-7.24(m,2H),7.13(t,J＝7.8Hz,1H),7.00(d,J＝7.7Hz,2H),6.87(s,1H),5.14(s,2H),4.13(q,J＝7.1Hz,2H),2.25(s,3H),1.11(t,J＝7.1Hz,3H)。
向化合物231A(551mg，1.64mmol)在MeOH(5mL)和H2O(5mL)中的溶液中加入NaOH(262mg，6.56mmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩并加入10mL水，用MTBE(10mL×2)萃取混合物，在0℃下用1N HCl将水层酸化至pH约2～3，并用EtOAc(10mL×2)萃取，将有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物。得到化合物231B(490mg，收率：96.90％)，为白色固体，将其直接用于下一步骤。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.50-7.42(m,3H),7.36-7.32(m,1H),7.31-7.25(m,2H),7.01(dd,J＝1.0,8.7Hz,2H),6.95-6.90(m,1H),6.81(s,1H),5.13(s,2H),2.24(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物231B制备化合物231(68mg，收率：65.87％，白色固体)。化合物231：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08(d,J＝7.7Hz,1H),8.07(s,1H),7.84(s,1H),7.40-7.23(m,10H),7.21-7.17(m,1H),7.04-6.95(m,3H),6.91(br t,J＝7.3Hz,1H),6.55(s,1H),5.28-5.20(m,1H),5.08(s,2H),3.17(dd,J＝3.3,13.9Hz,1H),2.80(br dd,J＝10.5,13.8Hz,1H),2.22(s,3H)。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(3-((苄氧基)甲基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(438)
化合物438(2.9g，收率：86.54％，白色固体)由相应的中间体化合物229A制备，通过使其与苄基溴进行烷基化，然后进行酯水解以及如化合物12中与中间体274D偶联。化合物438：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.10(d,J＝7.7Hz,1H),8.11(s,1H),7.87(s,1H),7.39-7.23(m,13H),7.10-6.99(m,1H),6.58(s,1H),5.28(s,1H),4.53(d,J＝3.1Hz,4H),3.32-3.16(m,1H),2.83(dd,J＝10.6,13.7Hz,1H),2.25(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+497.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(4-(吗啉代甲基)苯基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(442)
化合物442(50mg，收率：50.01％，黄色固体)由相应的中间体化合物229A制备，通过甲磺酸将其转化为吗啉代衍生物。使吗啉代衍生物进行酯水解并如化合物12中与中间体274D偶联。化合物442：1H NMR(400MHz,CD3CN)δ7.34-7.15(m,11H),7.07-6.96(m,1H),6.50(s,1H),6.24(s,1H),5.39(dd,J＝4.6,8.0,9.4Hz,1H),3.64-3.60(m,4H),3.50(s,2H),3.30-3.25(m,1H),2.89(dd,J＝9.4,14.0Hz,1H),2.40(s,4H),2.26(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+476.2。
实施例127
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2,6-二甲基嘧啶-4-基)-5-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺(232)
向4-氯-2,6-二甲基嘧啶(3.0g，21.04mmol)和NH2NH2.H2O(10.5g，210.40mmol)的EtOH(40mL)溶液。将混合物在70℃下搅拌2小时。将混合物冷却至室温并减压浓缩，得到中间体化合物232A(2.30g，62.60％收率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ6.33(brs,1H),2.24(s,3H),2.15(s,3H)。
向化合物232A(2.30g，13.17mmol，HCl)和2,4-二氧代戊酸乙酯(2.08g，13.17mmol)的AcOH(30mL)溶液。将混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩以除去AcOH，然后用H2O稀释，通过逐渐加入NaHCO3将pH调节至约9，然后在EtOAc(20mL×3)之间分配，用Na2SO4干燥。通过快速硅胶色谱(40g Silica FlashColumn，洗脱液为0～50％乙酸乙酯/石油醚梯度@30mL/min)纯化残余物，然后通过制备型HPLC(碱性条件)纯化残余物。得到化合物232C(50mg，1.46％收率)，为白色固体。化合物232C：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.76-7.71(m,1H),6.72-6.66(m,1H),4.48-4.37(m,2H),2.82-2.74(m,3H),2.73-2.66(m,3H),2.58-2.52(m,3H),1.47-1.38(m,3H)[1169]。如实施例85，由相应的中间体化合物232C制备化合物232D(38mg，85.18％收率，白色固体)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.63(s,1H),6.74(s,1H),2.68(s,3H),2.60(s,3H),2.50(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物232D制备化合物232(48.4mg，57.40％收率，白色固体)。化合物232：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.53(s,1H),7.40(br d,J＝7.2Hz,1H),7.33-7.23(m,3H),7.21-7.15(m,2H),6.80(br s,1H),6.66(s,1H),5.77-5.69(m,2H),3.49-3.40(m,1H),3.34-3.24(m,1H),2.75(s,3H),2.69(s,3H),2.58(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+407.1。
实施例128
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(6-苯基哒嗪-3-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(233)
向3-氯-6-苯基哒嗪(1.00g，5.25mmol)的EtOH(20mL)溶液中加入N2H4.H2O(2.63g，52.46mmol，2.55mL)。在78℃下搅拌10小时后，将所得混合物减压浓缩，以去除溶剂。将残余物用石油醚30mL稀释，搅拌30分钟，然后过滤，得到粗制中间产物233A，为灰色残余物。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)：δ7.96(d,J＝7.2Hz,1H),7.85(d,J＝9.6Hz,1H),7.47–7.43(m,2H),7.39–7.35(m,1H),7.09(d,J＝9.2Hz,1H)。
向化合物233A(1.30g，6.98mmol)的CH3COOH(12mL)溶液中加入2,4-二氧代戊酸乙酯(1.10g，6.98mmol，985.61μL)，然后将混合物在120℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，以去除溶剂。将残余物用溶剂乙酸乙酯(70mL)稀释，用溶剂饱和NaHCO3水溶液(20mL×3)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝30/1至10/1)纯化残余物，得到残余物。通过制备型HPLC(酸性条件)进一步分离粗产物。得到化合物233B，为白色固体(270.00mg，875.69μmol，12.55％收率)。
向化合物233B(180.0mg，583.79μmol)在MeOH(6mL)和H2O(3.00mL)中的混合物中一次性加入LiOH.H2O(73.5mg，1.75mmol)，并将混合物在25℃下搅拌6小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。将残余物用H2O(20mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，然后用EtOAc(60mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物233D(160.00mg，97.78％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.52(d,J＝9.2Hz,1H),8.27–8.22(m,2H),7.63–7.56(m,2H),6.85(s,1H),2.73(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物233D制备化合物233(67.0mg，63.93％收率，白色固体)。化合物233：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(d,J＝9.2Hz,1H),8.13–8.11(m,2H),8.03(d,J＝9.2Hz,1H),7.59–7.54(m,3H),7.42(d,J＝7.2Hz,1H),7.32-7.27(m,3H),7.20–7.18(m,1H),6.77(s,1H),6.75(d,J＝0.4Hz,1H),5.76–5.71(m,1H),5.55(s,1H),3.49–3.44(m,1H),3.32–3.27(m,1H),2.85(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+455.1。
实施例129
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(6-甲基-4-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(234)
向2-肼基-6-甲基-4-(三氟甲基)吡啶(400mg，2.09mmol)的CH3COOH(4mL)溶液中加入2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(391mg，2.09mmol)，然后将混合物在120℃下搅拌2小时。将混合物用CH2Cl2(70mL)稀释，并用饱和碳酸氢钠(20mL×2)和饱和盐水(20mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过快速柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝10：1至3：1)纯化残余物，得到所推荐的化合物3(150mg，22.91％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.08(s,1H),7.32(s,1H),6.72(s,1H),4.46–4.36(m,2H),2.72(s,3H),2.65(s,3H),1.44–1.41(m,3H)。
向化合物234A(100mg，319.21μmol)在MeOH(4mL)和H2O(2mL)中的溶液中加入LiOH·H2O(53mg，1.28mmol)，然后将混合物在25℃下搅拌4小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。将残余物用H2O(10mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，并用EtOAc(40mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物234B(80mg，87.87％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ7.79(s,1H),7.72(s,1H),6.79(s,1H),2.56(s,3H),2.28(s,3H)。
如实施例5，由相应的羧酸——化合物234B制备化合物234(24.1mg，34.58％收率，白色固体)。化合物234：1H NMR(400MHz,DMSO-d6,t＝80℃)δ8.81(d,J＝6.4Hz,1H),7.75(brs,1H),7.67(s,1H),7.59(br,s,1H),7.52(s,1H),7.27-7.19(m,5H),6.53(s,1H),5.43-5.35(m,1H),3.23-3.16(m,1H),2.96-2.87(m,1H),2.39(s,3H),2.30(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+460.1。
实施例130
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(苯并[D]噁唑-2-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(238)
将2-氯苯并[d]噁唑(2.5g，16.3mmol)的二噁烷(4mL)溶液滴加到N2H4.H2O(4.07g，81.4mmol)的二噁烷(20mL)溶液中，保持反应温度在30℃以下。将反应混合物在20℃下搅拌1小时。蒸发溶剂。加入水(50mL)，并将混合物搅拌10分钟。通过过滤收集固体，滤饼用水(50mL)洗涤。将滤饼干燥，得到纯产物238A(2g，收率：82.4％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.76(br s,1H),7.31(d,J＝7.7Hz,1H),7.22(d,J＝7.3Hz,1H),7.09(dt,J＝1.0,7.7Hz,1H),6.95(dt,J＝1.1,7.7Hz,1H),4.47(br s,2H)。
将化合物238A(1g，6.70mmol)和2,4-二氧代戊酸甲酯(966mg，6.70mmol)在AcOH(5mL)中的混合物在120℃下搅拌16小时。蒸发溶剂。通过硅胶柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝20：1～3：1)纯化粗产物，得到化合物238B(900mg，粗品)，为类白色固体。
向化合物238B(200mg，777μmol)的甲苯(5mL)溶液中加入TMSOK(199mg，1.55mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌5小时。将反应混合物倒入饱和NH4Cl(5mL)中。用EtOAc(10mL×3)萃取产物。将合并的有机层通过制备型HPLC(HCOOH)纯化，得到化合物238C(30mg，收率：15.9％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.30(br s,1H),7.80(td,J＝4.2,8.4Hz,2H),7.52-7.37(m,2H),6.83(s,1H),5.72(s,1H),2.69(s,3H)。
如实施例5，由相应的羧酸——化合物238C制备化合物238(21mg，收率：70％，白色固体)。2DNMR无法确认可能的异构体。化合物238：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.78-7.69(m,1H),7.61(dd,J＝3.2,5.8Hz,1H),7.51(br d,J＝7.1Hz,1H),7.43-7.35(m,2H),7.32-7.16(m,6H),6.80-6.70(m,2H),5.81-5.71(m,1H),5.55(br s,1H),3.45(dd,J＝5.4,14.0Hz,1H),3.22(dd,J＝7.3,14.1Hz,1H),2.75(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+418.1。
实施例131
化合物239-242、469-474
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-乙基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(239)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-异丙基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(242)
在0℃下，向p-TsOH.H2O(61.3g，322.27mmol)的H2O(20mL)溶液中加入化合物1(20.0g，128.91mmol)的CH3CN(400mL)悬浮液。混合物变澄清。将混合物在0℃下搅拌30分钟。然后在0℃下，向混合物中滴加NaNO2(13.3g，193.4mmol)和KI(32.1g，193.4mmol)的H2O(20mL)溶液。添加后，将混合物在20℃下搅拌1小时。在0℃下通过加入饱和Na2SO3(～100mL)淬灭混合物。黑色混合物变为黄色。将混合物浓缩至200mL，然后用DCM(75mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(75mL×2)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。将残余物用100mL乙酸乙酯处理。通过过滤除去不溶物质。浓缩滤液并通过FCC(PE/EA＝1/1)纯化，得到化合物239A(17.50g，收率48.4％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ13.01-12.65(m,1H),8.13-8.11(m,1H),4.38–4.32(m,2H),1.41–1.37(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+266.8。
将Cs2CO3(7.35g，22.56mmol)加入到化合物239A(2.0g，7.52mmol)的DMF(15mL)溶液中。然后加入EtI(1.50mL，18.8mmol)。将混合物在25℃下搅拌2.5小时。将混合物用EA(50mL)和H2O(50mL)处理。分离有机层，水层用EA(25mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL×3)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过FCC(PE/EA＝8/1)纯化残余物，得到化合物239B(1.31g，收率59.2％)，为无色油状物。化合物239B(Rf＝0.24,PE/EA＝8/1)：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.28(s,1H),4.21-4.12(m,4H),1.34(t,J＝7.3Hz,3H),1.25(t,J＝7.1Hz,3H)。
向化合物239B(500mg，1.7mmol)和苯基硼酸(311mg，2.6mmol)的二噁烷(10mL)溶液中加入Na2CO3(360mg，3.4mmol)。然后加入H2O(2mL)，然后加入Pd(dppf)Cl2(124mg，0.17mmol)。将混合物脱气3次并加热至80℃并在80℃下搅拌22小时。将混合物通过硅藻土垫过滤，将固体用EA(25mL×3)洗涤。将有机层与滤液分离，然后用盐水(30mL×2)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过FCC(PE/EA＝10/1)纯化残余物，得到化合物239D(380mg，收率91.5％)，为淡黄色油状物。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.99(s,1H),7.76(dd,J＝1.5,7.9Hz,2H),7.44-7.32(m,3H),4.28-4.17(m,4H),1.55(t,J＝7.3Hz,3H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物239D(380mg，1.56mmol)的MeOH(15mL)溶液中加入KOH(875mg，15.6mmol)的H2O(3mL)溶液。将混合物在70℃下搅拌2小时。将混合物用H2O(15mL)稀释，然后蒸发除去挥发性溶剂。用1N HCl将残余物酸化至pH约2。通过过滤收集沉淀物并在真空中干燥，得到化合物239E(250mg，收率74.1％)，为白色固体，将其直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ12.19(br.s.,1H),8.32(s,1H),7.72(dd,J＝1.4,7.8Hz,2H),7.41-7.24(m,3H),4.17(q,J＝7.3Hz,2H),1.39(t,J＝7.3Hz,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物239E制备化合物239(80mg，收率51.3％，白色固体)。化合物239：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.32(d,J＝7.2Hz,1H),8.07(s,1H),8.05(br.s.,1H),7.79(br.s.,1H),7.62-7.51(m,2H),7.32-7.17(m,8H),5.32-5.22(m,1H),4.16(q,J＝7.2Hz,2H),3.14(dd,J＝4.0,14.0Hz,1H),2.81(dd,J＝10.0,14.0Hz,1H),1.40(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+391.1。
按照化合物239所用的步骤，依次制备中间体化合物242A、242C和242D。化合物242A(1.41g，收率60.9％，无色油状物)：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.31(s,1H),4.60-4.53(m,1H),4.22(q,J＝7.2Hz,2H),1.41(d,J＝6.4Hz,6H),1.28(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物242C(318mg，收率76.0％，无色液体)：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.39(s,1H),7.73-7.67(m,2H),7.42-7.34(m,3H),4.64-4.52(m,1H),4.16(q,J＝7.0Hz,2H),1.46(d,J＝6.8Hz,6H),1.21(t,J＝7.2Hz,3H)。化合物242D(119mg，粗品，白色固体)：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ12.19(s,1H),8.33(s,1H),7.76-7.71(m,2H),7.41-7.32(m,3H),4.61-4.51(m,1H),1.46(d,J＝6.8Hz,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物242D制备化合物242(47mg，收率46.7％，白色固体)。化合物242：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.99(s,1H),7.55-7.49(m,2H),7.47-7.37(m,3H),7.23-7.14(m,3H),6.85-6.78(m,2H),6.73(s,1H),6.13-6.05(m,J＝6.2Hz,1H),5.57-5.42(m,2H),4.51(spt,J＝6.7Hz,1H),3.25(dd,J＝4.7,14.0Hz,1H),2.90(dd,J＝8.0,14.2Hz,1H),1.53(d,J＝6.6Hz,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+405.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-乙基-3-(2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(469)
如化合物12由相应的中间体羧酸——1-乙基-3-(2-氟苯基)-1H-吡唑-4-羧酸(其使用类似于化合物239E的步骤制备)制备化合物469(130mg，收率49％，白色固体)。化合物469：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.21(s,1H),7.89-7.45(m,3H),7.43-7.31(m,2H),7.30-7.10(m,7H),5.33-5.22(m,1H),4.20(q,J＝7.1Hz,2H),3.22-3.15(m,1H),2.92-2.82(m,1H),1.45(br t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+409.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-乙基-3-(3-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(470)
如化合物12由相应的中间体羧酸——1-乙基-3-(3-氟苯基)-1H-吡唑-4-羧酸(其使用类似于化合物239E的步骤制备)制备化合物470(140mg，收率66.8％，白色固体)。化合物470：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.44(d,J＝7.5Hz,1H),8.11(s,1H),8.04(s,1H),7.78(s,1H),7.47-7.39(m,2H),7.36-7.29(m,1H),7.28-7.23(m,4H),7.22-7.16(m,1H),7.14-7.07(m,1H),5.35-5.25(m,1H),4.21-4.11(m,2H),3.15(dd,J＝3.9,14.0Hz,1H),2.81(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H),1.40(t,J＝7.3Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+409.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-乙基-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(471)
如化合物12由相应的中间体羧酸——1-乙基-3-(4-氟苯基)-1H-吡唑-4-羧酸(其使用类似于化合物239E的步骤制备)制备化合物471(90mg，收率32.9％，白色固体)。化合物471：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.37(d,J＝7.5Hz,1H),8.08(s,1H),8.05-7.96(m,1H),7.77(s,1H),7.63-7.52(m,2H),7.31-7.14(m,5H),7.13-7.01(m,2H),5.31-5.16(m,1H),4.24-4.03(m,2H),3.18-3.06(m,1H),2.87-2.75(m,1H),1.38(t,J＝7.3Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+409.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2-氟苯基)-1-异丙基-1H-吡唑-4-甲酰胺(472)
如化合物12由相应的中间体羧酸——3-(2-氟苯基)-1-异丙基-1H-吡唑-4-羧酸(其使用类似于化合物242D的步骤制备)制备化合物472(88mg，收率45.8％，白色固体)。化合物472：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.25(s,1H),8.17(d,J＝7.5Hz,1H),7.96(s,1H),7.73(s,1H),7.40-7.05(m,9H),5.26-5.16(m,1H),4.52(td,J＝6.8,13.2Hz,1H),3.09(br,dd,J＝3.9,14.2Hz,1H),2.78(br.dd,J＝9.7,13.9Hz,1H),1.48-1.39(m,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+423.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-氟苯基)-1-异丙基-1H-吡唑-4-甲酰胺(473)
如化合物12由相应的中间体羧酸——3-(3-氟苯基)-1-异丙基-1H-吡唑-4-羧酸(其使用类似于化合物242D的步骤制备)制备化合物473(51mg，收率41.2％，淡黄色固体)。化合物473：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.42(d,J＝7.3Hz,1H),8.14(s,1H),8.07-8.01(m,1H),7.78(s,1H),7.51-7.42(m,2H),7.36-7.29(m,1H),7.28-7.24(m,4H),7.22-7.16(m,1H),7.14-7.05(m,1H),5.34-5.25(m,1H),4.60-4.48(m,1H),3.15(dd,J＝4.0,14.1Hz,1H),2.82(dd,J＝9.8,14.0Hz,1H),1.44(d,J＝6.4Hz,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+423.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(4-氟苯基)-1-异丙基-1H-吡唑-4-甲酰胺(474)
如化合物12由相应的中间体羧酸——3-(4-氟苯基)-1-异丙基-1H-吡唑-4-羧酸(其使用类似于化合物242D的步骤制备)制备化合物474(80mg，收率52.6％，白色固体)。化合物474：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.10(s,1H),7.97(s,1H),7.85-7.39(m,4H),7.34-7.17(m,5H),7.15-7.03(m,2H),5.37-5.27(m,1H),4.59-4.47(m,1H),3.26-3.16(m,1H),2.97-2.87(m,1H),1.49(d,J＝6.8Hz,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+423.2。
实施例132
化合物240-241
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-乙基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(240)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-4-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(241)
在0℃和N2下，向4-溴-1H-吡唑-3-羧酸甲酯(15.0g，73.2mmol)和Cs2CO3(59.6g，182.9mmol)在DMF(150mL)中的混合物中滴加MeI(14.7mL，236.0mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，滤饼用乙酸乙酯(200mL×2)洗涤。滤液用水(70mL×4)洗涤，水相用乙酸乙酯(150mL)萃取。将合并的有机萃取液用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩至干燥。通过FCC(梯度洗脱液：石油醚/乙酸乙酯从100/0至50/50)纯化粗品产物，得到标题化合物240A(8.3g，收率51.8％)，为白色固体，和标题化合物240B(7.0g，收率43.7％)，为白色固体。化合物240A：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.48(s,1H),4.15(s,3H),3.93(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+219.0。化合物240B：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.47(s,1H),3.95(s,3H),3.92(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+219.0。
将化合物240A(2.0g，9.1mmol)、苯基硼酸(1.3g，11.0mmol)、Cs2CO3(8.9g，27.4mmol)和Pd(PPh3)4(211mg，183μmol)的DMF(30mL)溶液脱气，然后在N2下加热至80℃保持16小时。将反应混合物过滤，滤饼用乙酸乙酯(30mL×2)洗涤。滤液用水(20mL×4)洗涤，水相用乙酸乙酯(50mL)萃取。将合并的有机萃取液用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩至干燥。通过FCC(梯度洗脱液：石油醚/乙酸乙酯从100/0至50/50)纯化粗产物，得到标题化合物240C(1.0g，收率47.3％)，为浅黄色固体。化合物240C：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.52(s,1H),7.40-7.36(m,4H),7.35-7.31(m,1H),4.20(s,3H),3.76(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+217.0。
在25℃下，将NaOH(370mg，9.2mmol)的H2O(10mL)溶液加入到化合物240C(1.0g，4.6mmol)在THF(10mL)和MeOH(10mL)中的溶液中。将混合物在25℃下搅拌16小时。在25℃下用1N HCl(10mL)将混合物调节至pH约6，并用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。将合并的有机萃取液经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到化合物240D(900mg，收率94.1％)，为浅黄色固体。化合物240D：1H NMR(400MHz,CD3OD)：δ7.54-7.49(m,1H),7.44-7.38(m,2H),7.37-7.27(m,3H),4.14(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+202.9。
如实施例12，由相应的中间体羧酸——化合物240D制备化合物240(68.6mg，收率41.4％)。化合物240：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ7.46-7.39(m,4H),7.39-7.34(m,2H),7.20-7.13(m,3H),6.73-6.68(m,2H),6.14-6.07(m,1H),5.57-5.46(m,2H),4.09(s,3H),3.19(dd,J＝4.8,14.0Hz,1H),2.80(dd,J＝8.0,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
按照化合物240所用的步骤，由中间体化合物241B制备化合物241(90mg，收率58.5％，白色固体)。化合物241：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.53-7.47(m,2H),7.41(s,1H),7.37-7.27(m,6H),7.19-7.13(m,2H),6.72(br s,1H),5.69-5.62(m,1H),5.43(br s,1H),3.94(s,3H),3.42(dd,J＝5.2,14.0Hz,1H),3.20(dd,J＝7.6,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
实施例133
化合物244-245
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(2-甲基嘧啶-4-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(244)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(嘧啶-4-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(245)
将4-氯-2-甲基嘧啶(5.00g，38.89mmol)和N2H4.H2O(22.91g，388.90mmol，22.24mL，85％纯度)在EtOH(100mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在N2气氛下将混合物在70℃下搅拌2小时。减压浓缩混合物，得到粗品，粗品用PE(50mL)洗涤，过滤，残余物用柱色谱(DCM：CH3OH＝10：1)纯化，得到化合物244A(1.60g，33.14％收率)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.21(s,1H),7.99(d,J＝5.6Hz,1H),6.48(br s,1H),4.31(br s,2H),2.30(s,3H)。
向化合物244A(900.0mg，7.25mmol)的CH3COOH(12mL)溶液中加入2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸乙酯(1.36g，7.25mmol)，然后将混合物在120℃下搅拌2小时。将残余物用溶剂EtOAc(70mL)稀释，用溶剂饱和NaHCO3溶液(20mL×3)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(PE：EA＝30/1至10/1)纯化残余物，得到粗品。通过制备型HPLC(碱性条件)进一步分离粗产物，得到化合物244B(158.0mg，8.85％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.66(d,J＝5.6Hz,1H),7.53(d,J＝3.6Hz,1H),6.59(s,1H),4.39–4.33(m,2H),2.66(s,3H),2.35(s,3H),1.35–1.32(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+247.1。
向化合物244B(130.0mg，527.90μmol)在MeOH(8mL)和H2O(4mL)中的混合物中一次性加入LiOH.H2O(88.6mg，2.11mmol)，并将混合物在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。将残余物用H2O(10mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，然后用EtOAc(40mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物244D(110.00mg，95.49％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.77(d,J＝5.6Hz,1H),7.56(d,J＝3.6Hz,1H),6.76(s,1H),2.65(s,3H),2.27(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+219.1。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物244D制备化合物244(40.0mg，33.17％收率，白色固体)。化合物244：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.48(d,J＝5.2Hz,1H),8.66(d,J＝4.8Hz,1H),7.70(d,J＝5.2Hz,1H),7.26–7.20(m,3H),7.10(s,2H),6.84(s,1H),6.78(s,1H),5.81(d,J＝6.0Hz,1H),5.58(s,1H),3.47–3.38(m,1H),3.39–3.34(m,1H),2.37(s,3H),2.34(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+393.1。
按照化合物244A所用的步骤，由4-氯嘧啶和NH2NH2.H2O获得化合物245A(1.80g，49.37％收率，棕色固体)。化合物245A：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.32(s,2H),8.06(d,J＝5.2Hz,1H),6.65(s,1H),4.32(m,2H)。
按照化合物244B所用的步骤，获得化合物245B(586.0mg，2.52mmol，17.39％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.92(s,1H),8.71(d,J＝5.6Hz,1H),7.70–7.69(m,1H),6.56(s,1H),4.34–4.38(m,2H),2.29(s,1H),1.31–1.24(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+233.1。
按照化合物244D的步骤，获得化合物245D(476.0mg，2.33mmol，93.30％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.04(s,1H),8.90(d,J＝5.2Hz,1H),7.81(d,J＝5.6Hz,1H),6.79(s,1H),2.27(s,3H)。
如实施例5，由相应的羧酸——化合物245D制备化合物245(35.0mg，28.33％收率，白色固体)。化合物245：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.18(d,J＝7.2Hz,1H),8.83(d,J＝5.6Hz,1H),8.74(s,1H),8.11(s,1H),7.87(s,1H),7.73(d,J＝4.8Hz,1H),7.28–7.23(m,5H),6.50(s,1H),5.38(s,1H),3.19–3.16(m,1H),2.88–2.82(m,1H),2.29(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+379.1。
实施例134
化合物246、431-437、448
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(246)
在0～5℃下，向2,4-二氯嘧啶(10g，67.12mmol)和Et3N(10.2mL，73.83mmol)的EtOH(120mL)溶液中加入NH2NH2.H2O(4.6mL，80.54mmol)。将混合物在5℃下搅拌1.5小时。将混合物浓缩。将残余物在EtOH(15mL)和水(15mL)中研磨，得到化合物246A(4g，41.22％收率)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.00-8.79(m,1H),8.09-7.63(m,1H),6.82-6.59(m,1H),4.82-4.30(m,2H)。
将2,4-二氧代戊酸乙酯(4.38g，27.67mmol)、化合物246A(4g，27.67mmol)在AcOH(60mL)中的混合物在118℃下搅拌1小时。混合物在DCM(50mL)中。将有机层用水(10mL)、NaHCO3洗涤至pH约8～9，用Na2SO4干燥并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5：1)纯化残余物。得到化合物246B(650mg，8.81％收率)，为白色固体。得到化合物246C(240mg，3.25％收率)，为白色固体。化合物246B：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.87(d,J＝5.6Hz,1H),7.98(d,J＝5.6Hz,1H),6.89(s,1H),4.34(q,J＝7.2Hz,2H),2.71(s,3H),1.32(t,J＝7.2Hz,3H)。化合物246C：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84(d,J＝5.6Hz,1H),7.86(d,J＝5.6Hz,1H),6.91(s,1H),4.32(q,J＝7.2Hz,2H),2.31(s,3H),1.30-1.20(m,3H)。
向化合物246B(300mg，1.12mmol)在THF(36mL)和H2O(12mL)中的混合物中加入LiOH.H2O(27.1mg，645.87μmol)。将混合物在31℃下搅拌1小时。将混合物浓缩并用1M HCl酸化至pH～5，然后用氯仿：异丙醇＝10：1(10ml×2)萃取。将合并的有机相用饱和NaCl水溶液洗涤，用Na2SO4干燥，过滤，真空除去溶剂，得到化合物246D(200mg，74.83％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ14.19-13.39(m,1H),8.83(d,J＝5.4Hz,1H),7.83(d,J＝5.6Hz,1H),6.84(s,1H),2.28(s,3H)。
如实施例5，由相应的羧酸——化合物246D制备化合物246(2.7mg，收率，12.35％，白色固体)。化合物246：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.16-9.11(m,1H),8.77-8.72(m,1H),8.03(br s,1H),7.80(br s,1H),7.73-7.68(m,1H),7.23(br s,4H),7.21-7.17(m,1H),6.53(s,1H),5.42(br s,1H),3.17-3.13(m,1H),2.88-2.84(m,1H),2.27(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+413.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2-异丙基嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(431)
化合物431(65mg，收率，87.0％，白色固体)使用中间体246B制备，使用4,4,5,5-四甲基-2-(丙-1-烯-2-基)-1,3,2-二氧杂环戊硼烷使中间体246B进行Suzuki偶联，然后使用如化合物12的步骤进行酯水解，并氢化，并如化合物12中与中间体274D偶联，得到化合物431。化合物431：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.11(d,J＝7.5Hz,1H),8.74(d,J＝5.5Hz,1H),8.12(s,1H),7.87(s,1H),7.52(d,J＝5.5Hz,1H),7.32-7.20(m,5H),6.47(s,1H),5.52-5.41(m,1H),3.16(dd,J＝3.6,13.8Hz,1H),2.80-2.75(m,1H),2.29(s,3H),1.04(dd,J＝6.9,12.2Hz,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+421.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2-乙炔基嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(432)
化合物432(35mg，收率，43.5％，白色固体)使用中间体246B制备，使其与4乙炔基三甲基硅烷进行偶联，然后去除三甲基甲硅烷基基团，然后用化合物12所用的步骤进行酯水解，并如化合物12中与中间体274D偶联，得到化合物432。化合物432：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.14(d,J＝7.0Hz,1H),8.82(d,J＝5.5Hz,1H),8.02(s,1H),7.80(s,1H),7.70(d,J＝5.5Hz,1H),7.31-7.17(m,5H),6.55(s,1H),5.46-5.35(m,1H),4.39(s,1H),3.19(dd,J＝4.8,14.1Hz,1H),2.93(dd,J＝9.0,14.1Hz,1H),2.29(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+403.1。(S)-1-(2-乙炔基嘧啶-4-基)-N-(4-氟-3-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(433)
化合物433(35mg，收率，43.5％，白色固体)使用中间体246B制备，使其与4乙炔基三甲基硅烷进行偶联，然后去除三甲基甲硅烷基基团，然后用化合物12所用的步骤进行酯水解，并使用如化合物12中的步骤与(2S,3S)-3-氨基-1-氟-4-苯基丁烷-2-醇盐酸盐偶联，得到化合物433。化合物433：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.24(d,J＝7.8Hz,1H),8.85(d,J＝5.5Hz,1H),7.78(d,J＝5.5Hz,1H),7.34-7.29(m,2H),7.29-7.21(m,3H),6.38s,1H),5.50-5.21(m,2H),4.73-4.64(m,1H),4.45(s,1H),3.19(dd,J＝4.9,13.9Hz,1H),2.93(dd,J＝9.8,14.1Hz,1H),2.28(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+392.1。
N-(4-氨基-3-羟基-4-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2-氯嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(434)
化合物434(80mg，收率，15.2％，白色固体)使用中间体246B制备，使用如化合物12中的步骤使中间体246B与中间体274D偶联，以得到化合物434。化合物434：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.76(t,J＝5.6Hz,1H),8.63(d,J＝8.8Hz,1H),8.36(d,J＝9.0Hz,1H),7.68(dd,J＝5.5,19.6Hz,1H),7.39-7.14(m,7H),6.55-6.41(m,1H),4.57-4.31(m,1H),4.19(d,J＝3.3Hz,1H),3.85(d,J＝2.4Hz,1H),3.04-2.66(m,2H),2.28(d,J＝5.5Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+415.0。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2-氯嘧啶-4-基)-5-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺(435)
化合物435(160mg，收率，46.02％，白色固体)使用中间体246C制备，使用如化合物12中的步骤使中间体246C与中间体12G偶联，以得到化合物435。化合物435：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.88(d,J＝5.7Hz,1H),8.09(d,J＝5.5Hz,1H),7.82(d,J＝9.3Hz,1H),7.42(s,1H),7.27(d,J＝4.4Hz,4H),7.23-7.13(m,1H),6.72(s,1H),6.21(s,1H),4.49(d,J＝7.3Hz,1H),3.88(d,J＝2.4Hz,1H),3.02-2.87(m,1H),2.86-2.74(m,1H),2.68(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+415.0。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2-甲氧基嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(436)
化合物436(25mg，收率，57.7％，白色固体)使用中间体246D制备，用甲醇钠处理中间体246D，并使用如化合物12中的步骤，使其与中间体274D偶联，以得到化合物436。化合物436：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.14(d,J＝7.5Hz,1H),8.60(d,J＝5.3Hz,1H),8.15(s,1H),7.91(s,1H),7.34(d,J＝5.3Hz,1H),7.30-7.19(m,5H),6.50(s,1H),5.45-5.36(m,1H),3.48(s,3H),3.16(dd,J＝3.3,13.9Hz,1H),2.77(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H),2.29(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+409.2。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2-氰基嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(437)
化合物437(30mg，收率，81.32％，白色固体)使用中间体246D制备，使用钯催化的偶联条件用氰化锌处理中间体246D，然后使用如化合物12中的步骤与中间体274D偶联，以得到化合物437。化合物437：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.13(d,J＝7.3Hz,1H),8.96(d,J＝5.5Hz,1H),8.05-7.93(m,2H),7.84(s,1H),7.27-7.15(m,5H),6.57(s,1H),5.51-5.31(m,1H),3.15(dd,J＝4.2,13.9Hz,1H),2.79(dd,J＝9.4,14.0Hz,1H),2.30-2.24(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+404.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2-氰基嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(448)
在0℃向，向化合物246D(400mg，1.68mmol)在2-甲基丙烷-2-醇(6.2g，83.65mmol，8.00mL)和THF(10mL)中的溶液中一次性加入吡啶(928mg，11.73mmol，947μL)然后加入p-TsCl(799mg，4.19mmol)。将混合物在25℃下搅拌48小时。在0℃下用饱和NaHCO3淬灭反应，用EA(20mL×2)萃取混合物，用Na2SO4干燥，过滤，浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱(24g Silica Flash Column，洗脱液为0～10％～20％乙酸乙酯/石油醚梯度@35mL/min)纯化残余物。得到化合物448A(400mg，收率81.0％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.63(d,J＝5.3Hz,1H),7.80-7.63(m,1H),6.59(s,1H),2.34(m,3H),1.59(m,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+295.1。
向化合物448A(400mg，1.36mmol)的DMF(13mL)溶液中加入KF(788mg，13.57mmol)和二环己烷并-18-冠-6(51mg，135.71μmol)。在N2下将混合物在120℃下搅拌3小时。将反应冷却至室温并加入冰水(80mL)，形成白色沉淀。过滤收集固体。通过制备型HPLC(HCl条件)纯化残余物。柱子：YMC-Actus Triart C18 100*30mm*5um；流动相：[水(0.05％HCl)-ACN]；B％：55％-85％，9.5min。得到化合物448B(130mg，收率：34.4％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.63(dd,J＝2.0,5.3Hz,1H),7.72(dd,J＝3.2,5.4Hz,1H),6.57(s,1H),2.36(s,3H),1.59(s,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+279.1。
向化合物448B(130mg，467.15μmol)的DCM(15mL)溶液中加入TFA(2.31g，20.26mmol，1.5mL)。将混合物在25℃下搅拌5小时。将反应物浓缩，得到残余物。残余物不经纯化用于下一步。得到化合物448C(105mg，粗品)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.84(dd,J＝2.1,5.4Hz,1H),7.81(dd,J＝3.5,5.5Hz,1H),6.89-6.78(m,1H),2.25(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+222.9。
使用中间体246D和448C，使用如化合物12中的步骤制备化合物448(35mg，收率，69.7％，白色固体)，以得到化合物448。化合物448：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ9.14(d,J＝7.3Hz,1H),8.76(dd,J＝2.0,5.5Hz,1H),8.06(s,1H),7.83(s,1H),7.70(dd,J＝3.5,5.5Hz,1H),7.27-7.17(m,5H),6.53(s,1H),5.42-5.37(m,1H),3.14(dd,J＝4.0,14.1Hz,1H),2.82(dd,J＝9.3,14.1Hz,1H),2.28(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+397.1。
实施例135
(S)-N-(3,4-二氧代-1-苯基-4-((4-(三氟甲氧基)苄基)氨基)丁-2-基)-3-甲基-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺(247)
向化合物101E(500.0mg，1.31mmol)的DMF(10mL)溶液中加入[4-(三氟甲氧基)苯基]甲胺(250.4mg，1.31mmol，200μL)、DIEA(507.9mg，3.93mmol，690μL)、HOBt(53.1mg，393.00μmol)和EDCI(301.4mg，1.57mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将混合物用H2O(100mL)稀释，用EA(30mL)萃取，用HCl(1M，30mL)、饱和NaHCO3(水溶液，30mL)、盐水(30mL)洗涤，经Na2SO4干燥并浓缩。通过制备型HPLC(碱性条件)纯化残余物。得到化合物247A(80.0mg，粗品)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.46-8.20(m,1H),7.57-7.11(m,15H),5.90-5.64(m,1H),4.71-4.56(m,1H),4.10-3.90(m,2H),2.99-2.89(m,1H),2.86-2.74(m,1H),2.11-2.01(m,3H)。
向化合物247A(80.0mg，144.53μmol)在DCM(10mL)和DMSO(1mL)中的溶液中加入DMP(183.9mg，433.59μmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物用10％Na2S2O3(水溶液)：饱和NaHCO3(水溶液)(1：1，20mL)淬灭，用DCM(10mL)萃取并用盐水(20mL×3)洗涤。将合并的有机层用Na2SO4干燥并浓缩。将粗产物用CH3CN(5mL)研磨并过滤。得到化合物247(20.0mg，收率25.1％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50-9.43(m,1H),9.12-9.06(m,1H),7.66-7.57(m,2H),7.51-7.36(m,5H),7.34-7.19(m,7H),5.53-5.45(m,1H),4.41-4.16(m,2H),3.27-3.20(m,1H),2.82-2.72(m,1H),2.10-2.01(m,1H),2.05(s,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+552.1。
实施例136
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(4-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺(248)
将3-(4-氟苯基)-3-氧代丙酸乙酯(8g，38.06mmol)和NH4OAc(5.87g，76.12mmol)在EtOH(450mL)中的混合物在78℃下搅拌16小时。将反应混合物减压浓缩，将残余物用水(60mL)稀释，然后用EtOAc(100mL×3)萃取。将合并的有机相用饱和NaHCO3(50mL×3)和盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂，得到残余物，将其通过柱色谱纯化(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100：1至10：1)得到化合物248A(7.10g，89.16％收率)，为浅黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.56-7.48(m,2H),7.12-7.04(m,2H),4.90(s,1H),4.16(q,J＝7.2Hz,2H),1.32-1.24(m,3H)。
在0℃和N2下，向化合物248A(9g，43.02mmol)在DCE(90mL)中的混合物中分三份加入PhI(OAc)2(18.0g，55.93mmol)，将混合物在0℃下搅拌3小时，然后缓慢升温至25℃。然后将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(200mL)淬灭，并用DCM(200mL×3)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20：1至5：1)纯化残余物，得到化合物248B(6.0g，52.19％收率)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.49-7.35(m,2H),7.12-7.00(m,2H),4.27-4.16(m,2H),1.93(s,3H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H)。
将乙基化合物248B(6.0g，22.45mmol)在DCE(30mL)和AcOH(15mL)中的混合物在90℃下搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温，然后减压浓缩至干燥，得到残余物，将其通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100：10至0：1)纯化，得到化合物248C(2.80g，50.04％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.10-8.00(m,2H),7.11(t,J＝8.4Hz,2H),4.38(q,J＝7.2Hz,2H),2.57(s,3H),1.37(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物248C(1g，4.01mmol)在MeOH(30mL)和H2O(15mL)中的混合物中一次性加入LiOH·H2O(505.1mg，12.03mmol)，并将混合物在25℃下搅拌1.5小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。用1N HCl将残余物调节至pH约3，用水(30mL)稀释，然后用EtOAc(100mL×4)萃取。将合并的有机层用盐水(80mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物248D(820mg，92.45％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.10-8.00(m,2H),7.17-7.07(m,2H),2.60(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物248D制备化合物248(36.1mg，24.19％收率，白色固体)。化合物248：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.19-8.12(m,2H),7.34-7.26(m,3H),7.17-7.11(m,2H),7.10-7.03(m,2H),6.80-6.71(m,2H),5.74-5.68(m,1H),5.58(br s,1H),3.48-3.40(m,1H),3.28-3.19(m,1H),2.53(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+396.0。
实施例137
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-苯基苯并呋喃-3-甲酰胺(249)
在氮气和25℃下，向3-氧代-3-苯基丙酸乙酯(2g，10.41mmol，1.8mL)、苯酚(2.94g，31.23mmol，2.75mL)和FeCl3.6H2O(281mg，1.04mmol)的混合物中加入DCE(70mL)。然后在氮气下向混合物中加入二叔丁基过氧化物(3.04g，20.82mmol，3.85mL)。将反应温度升至100℃并保持3小时。将反应温度冷却至室温。将所得反应溶液用30mL饱和NaHCO3淬灭，并用DCM(20mL×3)萃取。萃取液用100mL饱和NaHCO3和100mL 10％Na2S2O3洗涤。萃取液用Na2SO4干燥。将溶剂真空蒸发，得到粗产物。通过柱色谱(SiO2，PE～石油醚/乙酸乙酯＝10/1)纯化残余物，得到化合物249A(1.5g，收率：54.08％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.09-7.99(m,3H),7.57-7.45(m,4H),7.39-7.32(m,2H),4.41(q,J＝7.1Hz,2H),1.43-1.39(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+267.0。
向化合物249A(600mg，2.25mmol)在MeOH(30mL)和H2O(15mL)中的溶液中加入NaOH(270mg，6.75mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩并加入20mL水，用MTBE(10mL×2)萃取混合物，在0℃下用1N HCl将水层酸化至pH约2～3，并用EtOAc(20mL×2)萃取，将有机相用Na2SO4干燥，浓缩，得到残余物。得到化合物249B(330mg，收率：61.78％)，为白色固体，将其不经纯化用于下一步骤。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.10(brs,1H),8.05-7.92(m,3H),7.72-7.62(m,1H),7.57-7.47(m,3H),7.41-7.34(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+239.0。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物249B制备化合物249(65mg，收率：60.09％，白色固体)。化合物249：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08(d,J＝7.3Hz,1H),8.23(brs,1H),7.94(br s,1H),7.69(br s,2H),7.63(d,J＝7.9Hz,1H),7.40(br s,3H),7.39-7.20(m,8H),5.56(br s,1H),3.26(br s,1H),2.79(t,J＝12.2Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+413.1。
实施例138
化合物250-251
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-环丙基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(250)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(环丙基甲基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(251)
在25℃和O2(15psi)下，向化合物239A(2.0g，7.5mmol)和环丙基硼酸(1.29g，15.0mmol)在DMF(40mL)中的混合物中加入Cu(OAc)2(2.05g，11.28mmol)、4A°MS(20g)和吡啶(1.2mL 15.0mmol)。将混合物在25℃下搅拌38小时。向混合物中加入另外的环丙基硼酸(1.29g，15.04mmol)，将其在70-80℃下搅拌20小时。向反应混合物中加入Cu(OAc)2(2.05g，11.28mmol)并在70-80℃下搅拌22小时。过滤混合物，滤液用H2O(200mL)稀释，用EA(150mL×3)萃取，将合并的有机相用盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩，得到残余物。通过FCC(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1:0至10:1)纯化残余物，得到化合物250A(552mg，收率24.0％)，为白色固体。化合物250A：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.32(s,1H),4.20(q,J＝7.1Hz,2H),3.82(tt,J＝3.8,7.4Hz,1H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H),1.12-1.07(m,2H),1.00-0.94(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+307.0。
在25℃和N2下，向化合物250A(544mg，1.7mmol)和苯基硼酸(434mg，3.5mmol)在二噁烷(50mL)和H2O(10mL)的混合物中加入Pd(dppf)Cl2(130mg，0.18mmol)和Na2CO3(377mg，3.5mmol)。将混合物在80℃下搅拌12小时。将混合物用硅藻土过滤。向滤液中加入EA(150mL)，然后用H2O(100mL×3)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩。通过FCC(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1:0至5:1)纯化残余物，得到化合物250C(431mg，收率94.5％)，为淡黄色液体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.42(s,1H),7.71-7.65(m,2H),7.42-7.36(m,3H),4.16(q,J＝7.1Hz,2H),3.85(tt,J＝3.8,7.4Hz,1H),1.21(t,J＝7.1Hz,3H),1.18-1.13(m,2H),1.04-0.96(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+257.0。
在25℃下，向化合物250C(425mg，1.7mmol)在MeOH(10mL)中的混合物中一次性加入KOH(931mg，16.6mmol)和H2O(2mL)的混合物。将混合物在70℃下搅拌1小时40分钟。将反应混合物减压浓缩以去除MeOH，将水相用HCl水溶液(0.5M)酸化至pH约4-5。过滤沉淀物并干燥，得到化合物250D(333mg，粗品)，为白色固体，将其不经纯化直接用于下一步骤。1HNMR(DMSO-d6,400MHz)：δ12.24(s,1H),8.35(s,1H),7.73-7.69(m,2H),7.41-7.34(m,3H),3.83(tt,J＝3.7,7.5Hz,1H),1.17-1.12(m,2H),1.02-0.97(m,2H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物250D制备化合物250(70.0mg，收率46.3％，黄色固体)。化合物250：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.09(s,1H),7.95-7.86(m,1H),7.81-7.46(m,4H),7.42-7.12(m,8H),5.33(s,1H),3.79(s,1H),3.25-3.16(m,1H),2.96-2.84(m,1H),1.16-0.97(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+403.1。
按照化合物250D所用的步骤，由相应的起始物料——化合物239A和溴甲基环丙烷制备化合物251D(150mg，收率95.64％，白色固体)。化合物251D：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.33(s,1H),7.73(dd,J＝1.5,7.9Hz,2H),7.40-7.34(m,3H),4.01(d,J＝7.1Hz,2H),1.31(br d,J＝7.7Hz,1H),0.57-0.52(m,2H),0.42-0.37(m,2H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物251D制备化合物251(70mg，收率43.27％，白色固体)。化合物251：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.40(br d,J＝7.3Hz,1H),8.15-8.05(m,2H),7.82(br s,1H),7.62-7.52(m,2H),7.30(br s,4H),7.28-7.20(m,4H),5.33-5.24(m,1H),4.06-3.95(m,2H),3.17(br dd,J＝3.5,13.9Hz,1H),2.84(br dd,J＝9.9,13.7Hz,1H),1.34-1.18(m,1H),0.58(br d,J＝6.8Hz,2H),0.42(br d,J＝4.4Hz,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+417.2。
实施例139
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(PHENYL乙炔基)-1H-吲哚-3-甲酰胺(252)
向1H-吲哚-3-羧酸甲酯(5.0g，28.55mmol)的甲苯(50mL)溶液中加入Na2CO3(1.2g，11.42mmol)、CuCl2(153mg，1.14mmol)、吡啶(922μL，11.42mmol)，然后向混合物中加入乙炔基苯(627μL，5.71mmol)。将混合物加热至70℃并在O2气氛下搅拌4小时。将反应用H2O(15mL)和EA(15mL)稀释，过滤。用EA(15mL×2)萃取混合物，收集有机层并用NaHCO3(25mL×2)洗涤，用盐水(20mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩。通过FCC(PE/EA：0至10/1)纯化产物，得到化合物252A(630mg，收率40.08％)，为淡红色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.46(s,1H),8.09(d,J＝7.7Hz,1H),7.75(d,J＝7.9Hz,1H),7.68-7.65(m,2H),7.49-7.44(m,4H),7.43-7.38(m,1H),3.86(s,3H)。
向化合物252A(300mg，1.09mmol)的MeOH(10mL)溶液中加入KOH(611mg，10.90mmol)，然后将混合物在70℃下搅拌3小时。将反应物用H2O(5mL)稀释并在减压下蒸发，水相用TBME(5mL)萃取，然后用HCl(1M)处理水相直至pH约4。用EA(10mL×3)萃取混合物，收集有机层，用盐水(10mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。得到化合物252B(240mg，收率84.27％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.37(s,1H),8.11(d,J＝7.5Hz,1H),7.75(d,J＝7.9Hz,1H),7.69-7.65(m,2H),7.50-7.45(m,4H),7.45-7.36(m,2H)。
如实施例5，由中间体化合物252B制备化合物252(70mg，收率24.39％，黄色固体)。化合物252：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.61(d,J＝7.5Hz,1H),8.45(s,1H),8.14-8.05(m,2H),7.85(s,1H),7.73(d,J＝8.2Hz,1H),7.67(dd,J＝2.4,7.3Hz,2H),7.50-7.46(m,3H),7.42(t,J＝7.7Hz,1H),7.38-7.35(m,2H),7.33-7.29(m,3H),7.23-7.19(m,1H),5.47-5.36(m,1H),3.23(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.91(dd,J＝10.0,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+436.1。
实施例140
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(3-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺(254)
向3-(3-氟苯基)-3-氧代丙酸乙酯(3.00g，14.27mmol)的EtOH(40mL)溶液中加入CH3COONH4(2.20g，28.54mmol)，然后将混合物在78℃下搅拌9小时。将反应混合物减压浓缩，以去除溶剂。将残余物用EA(100mL)稀释并用饱和NaHCO3溶液(30mL×3)和饱和NaCl水溶液(30mL×3)洗涤。将有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过快速柱色谱(PE：EA＝20/1至10:1)纯化残余物。得到化合物254A(2.40g，80.39％收率)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.38–7.35(m,1H),7.35–7.32(m,1H),7.22(d,J＝9.6Hz,1H),7.13–7.09(m,1H),4.93(s,1H),4.19–4.13(m,2H),1.29–1.26(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+210.1。
在0℃和N2下，向化合物254A(2.00g，9.56mmol)在DCE(25mL)中的混合物中分五份加入PhI(OAc)2(4.00g，12.43mmol)，将混合物在0℃下搅拌3小时，然后缓慢升温至25℃。然后将混合物在25℃下搅拌0.5小时。在0℃下，将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(150mL)淬灭，慢慢升温至25℃，并用DCM(70mL×3)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝20：1至10：1)纯化残余物。得到化合物254B(1.24g，48.53％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ7.37–7.34(m,1H),7.22–7.00(m,1H),7.17–7.13(m,1H),7.12–7.09(m,1H),4.23–4.18(m,2H),1.94(s,3H),1.29–1.26(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+268.1。
将化合物254B(1.20g，4.49mmol)在DCE(20mL)和CH3COOH(10mL)中的混合物在90℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，以去除溶剂，得到残余物。通过快速柱色谱(PE：EA＝20/1至10/1)纯化残余物。得到化合物544(360.0mg，32.07％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.87–7.86(m,1H),7.83–7.80(m,1H),7.41–7.39(m,1H),7.13–7.09(m,1H),4.43–4.37(m,2H),2.58(s,3H),1.40–1.37(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+250.1。
向乙基化合物544(350.0mg，1.40mmol)在MeOH(10mL)和H2O(5mL)中的混合物中一次性加入LiOH·H2O(235.0mg，5.60mmol)，并将混合物在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。将残余物用H2O(20mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，然后用EtOAc(50mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物254D(300.0mg，96.88％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.92–7.87(m,1H),7.52–7.46(m,1H),7.29–7.24(m,1H),2.51(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物254D制备化合物254(90.3mg，58.91％收率，白色固体)。化合物254：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.98–7.95(m,1H),7.94–7.91(m,1H),7.39–7.35(m,1H),7.33–7.30(m,1H),7.29–7.26(m,2H),7.15–7.13(m,2H),7.09–7.04(m,1H),6.79(d,J＝7.2Hz,1H),6.76(s,1H),5.74–5.69(m,1H),5.53(s,1H),3.47–3.42(m,1H),3.27–3.22(m,1H),2.54(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+396.1。
实施例141
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-苯基-2-(三氟甲基)噁唑-5-甲酰胺(255)
在45℃和N2下，向(E)-3-氨基-3-苯基丙烯酸乙酯(1.5g，7.84mmol)在DCE(400mL)中的混合物中分三份加入苯基碘双(2,2,2-三氟乙酸酯)(4.38g，10.19mmol)，将混合物在45℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至25℃，并减压浓缩，得到残余物，将其通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝100：10至0：1)纯化，得到化合物255A(650mg，28.43％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.11-8.05(m,2H),7.50-7.45(m,3H),4.44(q,J＝7.2Hz,2H),1.40(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+285.9。
如实施例85，由化合物255A制备化合物255B(200mg，51.2％纯度，黄色油状物)。化合物255B：MS(ESI)m/z(M+H)+258.0。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物255B制备化合物255(7.0mg，9.89％收率，类白色固体)。化合物255：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.17-8.08(m,2H),7.48-7.41(m,3H),7.34-7.28(m,3H),7.17-7.10(m,2H),6.88-6.80(m,1H),6.77(br s,1H),5.78-5.71(m,1H),5.55(br s,1H),3.50-3.42(m,1H),3.27-3.20(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+432.2。
实施例142
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(苯并[d]噁唑-2-基)-5-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺(256)
将2-肼基苯并[d]噁唑(320mg，2.15mmol)和(E)-2-(甲氧基亚氨基)-4-氧代戊酸甲酯(447mg，2.58mmol)在二噁烷(10mL)中的混合物加热至110℃保持12小时。将混合物浓缩，通过制备型TLC(石油醚：乙酸乙酯＝2：1)纯化残余物，得到化合物256A(0.12g，收率：16.6％)，为黄色油状物。
将化合物256A(120mg，466μmol)和LiOH.H2O(17.6mg，420μmol)在THF(5mL)、H2O(1mL)中的混合物在25℃下搅拌20分钟。减压除去有机溶剂，水层用乙酸乙酯(2mL)萃取，然后用1N HCl调节至pH约6，得到沉淀，过滤固体，干燥，得到化合物256B(90mg，收率：79.3％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.02-7.87(m,2H),7.61(dq,J＝1.4,7.7Hz,2H),7.11(s,1H),2.43(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物256B制备化合物256(22.2mg，收率：44.6％，白色固体)。化合物256：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.97(s,1H),7.82(br s,1H),7.64(br s,1H),7.55-7.44(m,2H),7.30-7.21(m,2H),6.94(q,J＝7.9Hz,4H),6.90-6.83(m,1H),6.64(s,1H),5.37(dd,J＝4.1,8.0Hz,1H),3.39(dd,J＝4.1,14.2Hz,1H),2.83(dd,J＝8.4,14.1Hz,1H),2.24(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+418.1。
实施例143
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-5-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(257)
向3-氧代丁酸乙酯(20.0g，153.7mmol)的THF(150mL)溶液中加入DMF-DMA(19.2g，161.4mmol)。将混合物在70℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。向溶解在EtOH(150mL)中的粗产物溶液中滴加NH2NH2.H2O(9.2g，184.4mmol)。将混合物在80℃下搅拌16小时。将反应混合物减压浓缩，以去除EtOH。将残余物用盐水80mL稀释，并用乙酸乙酯(200mL×2)萃取。将合并的有机层用MgSO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物257A(21.0g，收率87.8％)，为浅绿色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.96(s,1H),4.29(q,J＝7.2Hz,2H),2.55(s,3H),1.34(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+154.8。
在25℃下，向化合物257A(12.0g，77.8mmol)的AcOH(120mL)溶液中加入NaOAc(19.2g，233.5mmol)和Br2(12mL，233.5mmol)。在N2下将混合物在100℃下搅拌16小时。将反应混合物减压浓缩，以去除溶剂。将残余物用水150mL稀释，并用乙酸乙酯(200mL×2)萃取。将合并的有机萃取液用饱和NaHCO3水溶液(80mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩至干燥。通过快速柱(梯度洗脱液：石油醚/乙酸乙酯从100/0至50/50)纯化粗产物，得到化合物257B(8.2g，收率43.3％)，为浅黄色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ10.89(br s,1H),4.34(q,J＝7.2Hz,2H),2.64(s,3H),1.38(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+235.1
在0℃下，向化合物257B(5.0g，21.5mmol)的THF(50mL)溶液中加入NaH(944mg，23.6mmol，60％纯度)，并将反应物搅拌30分钟。加入SEM-Cl(3.9g，23.6mmol)，并将反应在25℃下搅拌16小时。用水(30ml)淬灭反应，并用乙酸乙酯(50mL×3)萃取。将有机萃取物用MgSO4干燥并真空浓缩。化合物257C(6.2g，收率78.1％，无色油状物)：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ5.52-5.39(m,2H),4.35(q,J＝7.2Hz,2H),3.62(td,J＝8.4,17.2Hz,2H),2.66-2.44(m,3H),1.40(dt,J＝2.4,7.2Hz,3H),0.92(td,J＝8.4,13.6Hz,2H),0.08--0.05(m,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+364.9。
在25℃下，向由1,4-二噁烷(20mL)和H2O(4mL)中的化合物257C(2.0g，5.5mmol)、苯基硼酸(871.8mg，7.2mmol)、Na2CO3(1.8g，16.5mmol)组成的溶液中加入Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(89.9mg，110.0μmol)并将反应混合物搅拌10分钟。在N2下将反应混合物加热至80℃保持16小时。将混合物在40℃下减压浓缩。将反应混合物用盐水(40mL)淬灭，并用乙酸乙酯(30mL×3)萃取。将合并的有机萃取液用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩至干燥。通过快速柱(石油醚：乙酸乙酯＝100：0～1：1)纯化粗产物，得到化合物257D(1.6g，收率79.4％)，为淡黄色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.62-7.53(m,1H),7.48-7.34(m,4H),5.48(s,1H),5.18(s,1H),4.25-4.06(m,2H),3.62(td,J＝8.0,15.6Hz,2H),2.67-2.50(m,3H),1.23-1.03(m,3H),0.96-0.83(m,2H),0.03-0.07(m,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+361.1。
向由化合物257D(1.6g，4.4mmol)、THF(10mL)、H2O(5mL)和MeOH(10mL)组成的溶液中加入KOH(2.5g，44.4mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将所得混合物在75℃下搅拌48小时。将反应溶液减压浓缩。加入2N HCl(30mL)，并用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的EtOAc萃取液用盐水(20mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过快速柱(石油醚：乙酸乙酯＝100：0～3：2)纯化粗产物，得到化合物257E(1.0g，收率62.8％)，为无色油状物。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.63-7.58(m,1H),7.48-7.36(m,4H),5.49(s,1H),5.17(s,1H),3.62(td,J＝8.4,18.4Hz,2H),2.66(s,1.5H),2.52(s,1.5H),0.95-0.83(m,2H),0.00--0.06(m,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+333.2。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物257E制备中间体化合物257G(150mg，粗品，白色固体)。化合物257G：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ8.68-8.61(m,0.1H),8.26-7.88(m,1H),7.59-7.09(m,10H),5.52-5.41(m,1H),5.24(s,1H),3.69-3.52(m,1H),2.42-2.28(m,1H),2.27-2.19(m,2H),0.96-0.79(m,2H),0.08-0.02(m,4.4H),0.02--0.06(m,4.3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+507.2。
在25℃下，向由EA(20mL)中的化合物257G(100mg，0.20mmol)组成的溶液中加入HCl/EtOAc(4M，2mL)。将混合物在25℃和N2下搅拌16小时。将反应溶液减压浓缩，得到粗产物。通过制备型HPLC(0.05％氢氧化铵)纯化粗产物，得到257(15mg，产率19.3％)，为白色固体。化合物257：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ12.67(br.s.,1H),7.85-7.72(m,2H),7.64-7.57(m,1H),7.57-7.49(m,2H),7.38-7.17(m,8H),5.45-5.32(m,1H),3.21(dd,J＝4.0,14.0Hz,1H),2.85(dd,J＝9.2,14.0Hz,1H),2.19(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
实施例144
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-氟-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(258)
向1H-吡唑-5-羧酸乙酯(5.00g，35.68mmol)、苯基硼酸(6.53g，53.52mmol)、Py(3.10g，39.25mmol，3.17mL)在DCM(70mL)中的混合物中加入4A°MS(20.0g)和Cu(OAc)2(7.13g，39.25mmol)，将混合物在30℃下搅拌20小时。过滤反应混合物，真空浓缩滤液。通过快速硅胶色谱(PE：EA＝1：0至0：1)纯化残余物，得到化合物258A(1.10g，收率：14.3％)，为红褐色(rofous)油状物。化合物258A：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.81(d,J＝2.0Hz,1H),7.53-7.40(m,5H),7.09(d,J＝2.0Hz,1H),4.17(q,J＝7.0Hz,2H),1.15(t,J＝7.0Hz,3H)。
向化合物258A(1.00g，4.62mmol)的MeCN(60mL)溶液中加入CH3COOH(20mL)，然后在混合物中加入Select F(4.91g，13.86mmol)。在N2气氛下，将混合物在105℃下搅拌21小时。将混合物冷却至室温，真空除去挥发物。通过快速硅胶色谱(PE：EA＝1：0至10：1)纯化残余物，得到化合物258C(194mg，收率：17.9％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.71-7.56(m,1H),7.51-7.36(m,5H),4.29(q,J＝7.2Hz,2H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H)。
向化合物258C(190mg，811.17μmol)的THF(15mL)溶液中加入LiOH.H2O(170mg，4.06mmol)的H2O(5mL)溶液。将混合物在25℃下搅拌20.3小时。将反应混合物用MTBE(15mL)稀释，并用H2O(15mL×3)萃取。通过添加1N HCl将合并的水层调节至pH约3，然后用EA(20mL×3)萃取水层。将合并的有机层用盐水(15mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物258D(160mg，收率：95.7％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.76-7.60(m,1H),7.55-7.33(m,5H)。
如实施例5，由相应的起始物料——化合物258D和12G制备化合物258(25mg，收率：44.3％，淡黄色固体)。化合物258：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.33(d,J＝7.7Hz,1H),8.18(s,1H),8.00-7.85(m,2H),7.39-7.36(m,2H),7.33-7.27(m,5H),7.26-7.19(m,3H),5.42-5.28(m,1H),3.22(br dd,J＝3.3,14.1Hz,1H),2.82(br dd,J＝10.5,13.8Hz,1H)。
实施例145
化合物259-261
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-5-苯基-2H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(259)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-5-苯基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(260)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-4-苯基-1H-1,2,3-三唑-5-甲酰胺(261)
向苯甲醛(5g，47.12mmol，4.76mL)的DMF(100mL)溶液中加入N,N-二乙基乙胺；盐酸盐(19.46g，141.36mmol)NaN3(9.19g，141.36mmol)和2-氰基乙酸乙酯(5.33g，47.12mmol，5.03mL)。在氮气保护下将反应混合物在70℃加热18小时。反应完成后，将混合物倒入水(500mL)中并用CHCl3：i-PrOH＝3:1(50mL×4)萃取。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过色谱(PE：EA＝5：1)纯化残余物。得到化合物259A(4g，收率：38.3％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.81(dd,J＝2.9,6.4Hz,2H),7.49-7.38(m,3H),4.38(q,J＝7.2Hz,2H),1.43-1.26(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+217.9。
向化合物259A(4g，18.41mmol)和K2CO3(5.09g，36.82mmol)在CH3CN(50mL)和DMF(50mL)中的溶液中加入MeI(6.53g，46.03mmol，2.86mL)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物过滤，向滤液中加入H2O(200mL)，用EA(50mL×3)萃取。将有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝PE～10/1至2：1)纯化残余物。
化合物259B(1.8g，收率：41.9％，白色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.83-7.77(m,2H),7.45-7.36(m,3H),4.45-4.35(m,2H),4.27(s,3H),1.40-1.31(m,3H)。化合物259C(1.2g，收率：27.9％，白色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.75-7.67(m,2H),7.48-7.38(m,3H),4.37-4.30(m,5H),1.27(t,J＝7.1Hz,3H)。化合物259D(700mg，收率：16.3％，白色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.55-7.48(m,3H),7.40-7.35(m,2H),4.36-4.25(m,2H),3.95(s,3H),1.31-1.23(m,3H)。
向化合物259B(400mg，1.73mmol)在MeOH(15mL)和H2O(15mL)中的溶液中加入NaOH(345.95mg，8.65mmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。在0℃下，将反应混合物用1N HCl酸化至pH约2～3，形成白色沉淀。通过过滤收集固体，将滤液用EtOAc(20mL×2)萃取，将有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物，将残余物与固体合并，得到化合物259E(337mg，收率：95.9％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.82-7.69(m,2H),7.46-7.34(m,3H),4.22(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+204.0。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物259E制备化合物259(78mg，收率：77.2％，白色固体)。化合物259：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.81(brd,J＝7.5Hz,1H),8.13(br s,1H),7.87(br s,1H),7.70(br s,2H),7.38(br s,3H),7.29(br d,J＝4.0Hz,4H),7.23(br d,J＝4.3Hz,1H),5.47(br s,1H),4.25(s,3H),3.21(br d,J＝10.8Hz,1H),3.04-2.91(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
按照化合物259E所用的步骤，分别由化合物259C和259D制备中间体化合物261A和260A。化合物261A(240mg，收率：91.6％，白色固体)：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.69-7.63(m,2H),7.38-7.29(m,3H),4.26(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+203.9。化合物260A(260mg，收率：98.5％，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.81(br s,1H),7.60-7.42(m,5H),4.02-3.74(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+204.0。
按照化合物259所用的步骤，分别由相应的中间体羧酸——化合物261A和260A制备化合物261和260。化合物260(75mg，收率：72.4％，白色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.63(d,J＝7.5Hz,1H),8.09(s,1H),7.84(s,1H),7.51-7.41(m,5H),7.32-7.20(m,5H),5.45-5.33(m,1H),3.91(s,3H),3.23-3.14(m,1H),3.11-2.97(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
化合物261(52mg，收率：59.5％，黄色固体)：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.54(dd,J＝7.9Hz,1H),8.26(s,1H),7.99(s,1H),7.60(dd,J＝3.0,6.5Hz,2H),7.36-7.25(m,8H),5.58(dd,J＝3.3,7.7,10.9Hz,1H),3.83(s,3H),3.29(dd,J＝3.3Hz,1H),2.77(dd,J＝10.9,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
实施例146
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-苯基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酰胺(262)
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物204A制备化合物262(8.1mg，20.36％收率，白色固体)。化合物262：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.38-7.89(m,2H),7.87-7.69(m,2H),7.63-7.34(m,4H),7.31-7.06(m,6H),5.55-5.42(m,1H),3.32-3.24(m,1H),3.12-3.06(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+364.1。
实施例147
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-苯基-1H-1,2,3-三唑-5-甲酰胺(263)
向叠氮基苯(0.5M，11.8mL)的甲苯(20mL)溶液中加入3-(三甲基甲硅烷基)丙炔酸乙酯(1g，5.87mmol)。将混合物在100℃下搅拌12小时。真空除去溶剂，得到化合物263A和263B(1.7g，粗品)的混合物，为黄色油状物，将其不经纯化直接用于下一步骤。MS(ESI)m/z(M+H)+290.1。
向263A和263B(1.7g，5.87mmol)在THF(20mL)中的混合物中加入TBAF(1M，8.8mL)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应用H2O(40mL)洗涤，用EtOAc(20mL×3)萃取。收集有机物并浓缩。通过柱子(PE：EA＝5：1)纯化残余物，得到化合物263C(400mg，收率：31.37％)，为黄色油状物；1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.26(s,1H),7.56-7.47(m,5H),4.29(q,J＝7.2Hz,2H),1.28(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物263C(400mg，1.84mmol)在H2O(5mL)和THF(5mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(386mg，9.20mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应物用1N HCl酸化至pH约3。用EtOAc(20mL×2)萃取混合物。收集有机物，用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到化合物263E(340mg，收率：97.68％)，为黄色固体。MS(ESI)m/z(M+1)+189.9。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物263E制备化合物263(6.5mg，收率：6.10％，白色固体)。化合物263：MS(ESI)m/z(M+1)+364.1。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ9.39(d,J＝8.0Hz,1H),8.16(s,1H),8.12(br.s,1H),7.87(br.s,1H),7.53-7.43(m,3H),7.34-7.20(m,7H),5.35-5.26(m,1H),3.23-3.14(m,1H),2.85-2.75(m,1H)。
实施例148
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-4-(吡啶-2-基)噁唑-5-甲酰胺(266)
向3-氧代-3-(吡啶-2-基)丙酸乙酯(5g，25.88mmol)在EtOH(50mL)中的混合物中加入NH4OAc(3.99g，51.76mmol)，并用N2吹扫3次，然后在N2气氛下将混合物在80℃下搅拌15小时。除去溶剂后，将残余物溶于水(50mL)中，用EtOAc(100mL×2)萃取。将该合并的有机相用饱和NaHCO3水溶液(50mL×2)和盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空除去溶剂。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝0：1至10：1)纯化残余物，得到化合物266A(3.80g，69.23％收率)，为黄色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.62(d,J＝4.4Hz,1H),7.78-7.71(m,2H),7.37-7.29(m,1H),5.33(s,1H),4.20(q,J＝7.2Hz,2H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+193.1。
在0℃和N2下，向碘代苯二乙酸酯(2g，10.41mmol)在DCE(21mL)中的混合物中分六次加入化合物266A(4.36g，13.53mmol)，将混合物在0℃下搅拌3小时，然后缓慢升温至25℃。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(60mL)淬灭，并用DCM(60mL×3)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩，得到残余物，将其通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20：0至0：1)纯化，得到化合物266B(1.30g，49.90％收率)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.72-8.61(m,1H),7.81-7.69(m,2H),7.36-7.29(m,1H),4.24(q,J＝7.2Hz,2H),2.13(s,3H),1.29(t,J＝7.2Hz,3H)。
将化合物266B(1.30g，5.19mmol)在DCE(20mL)和AcOH(10mL)中的溶液在90℃下搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温，并将混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10：0至0：1)纯化，得到化合物266C(300mg，23.06％收率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.78-8.73(m,1H),8.13-8.08(m,1H),7.80-7.74(m,1H),7.33-7.28(m,1H),4.40-4.34(m,2H),2.60(s,3H),1.37-1.33(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+233.1。
向化合物266C(300mg，1.29mmol)在MeOH(10mL)和H2O(5mL)中的混合物中一次性加入LiOH·H2O(162.4mg，3.87mmol)，并将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。用1N HCl将残余物调节至pH约3，用水(20mL)稀释，然后用EtOAc(50mL×4)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物266D(170mg，64.54％收率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3：δ8.59(d,J＝4.8Hz,1H),8.31(d,J＝8.0Hz,1H),8.11-8.03(m,1H),7.54-7.49(m,1H),2.61(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+204.8。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物266D制备化合物266(15.3mg，14.91％收率，淡黄色固体)。化合物266：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ12.79(d,J＝6.0Hz,1H),8.17(d,J＝8.0Hz,1H),8.00(d,J＝4.4Hz,1H),7.82(t,J＝7.6Hz,1H),7.23-7.19(m,1H),7.14-7.04(m,5H),6.76(br s,1H),5.89(q,J＝6.0Hz,1H),5.56(br s,1H),3.47-3.30(m,2H),2.59-2.54(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.1。
实施例149
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺(267)
向3-氧代-3-(吡啶-2-基)丙酸乙酯(5g，25.88mmol)在EtOH(50mL)中的混合物中加入NH4OAc(3.99g，51.76mmol)，并用N2吹扫3次，然后在N2气氛下将混合物在80℃下搅拌15小时。除去溶剂后，将残余物溶于水(50mL)中，用EtOAc(100mL×2)萃取。将该合并的有机相用饱和NaHCO3水溶液(50mL×2)和盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空除去溶剂。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝0：1至10：1)纯化残余物，得到化合物266A(3.80g，69.23％收率)，为黄色固体。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ8.62(d,J＝4.4Hz,1H),7.78-7.71(m,2H),7.37-7.29(m,1H),5.33(s,1H),4.20(q,J＝7.2Hz,2H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+193.1。
在0℃和N2下，向碘代苯二乙酸酯(2g，10.41mmol)在DCE(21mL)中的混合物中分六次加入化合物266A(4.36g，13.53mmol)，将混合物在0℃下搅拌3小时，然后缓慢升温至25℃。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(60mL)淬灭，并用DCM(60mL×3)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤，并减压浓缩，得到残余物，将其通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20：0至1：1)纯化，得到化合物266B(1.30g，49.90％收率)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.72-8.61(m,1H),7.81-7.69(m,2H),7.36-7.29(m,1H),4.24(q,J＝7.2Hz,2H),2.13(s,3H),1.29(t,J＝7.2Hz,3H)。
将化合物266B(1.30g，5.19mmol)在DCE(20mL)和AcOH(10mL)中的溶液在90℃下搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温，并将混合物减压浓缩，得到残余物，将其通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10：0至0：1)纯化，得到化合物266C(300mg，23.06％收率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.78-8.73(m,1H),8.13-8.08(m,1H),7.80-7.74(m,1H),7.33-7.28(m,1H),4.40-4.34(m,2H),2.60(s,3H),1.37-1.33(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+233.1。
向化合物266C(300mg，1.29mmol)在MeOH(10mL)和H2O(5mL)中的混合物中一次性加入LiOH·H2O(162.4mg，3.87mmol)，并将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。用1N HCl将残余物调节至pH约3，用水(20mL)稀释，然后用EtOAc(50mL×4)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物266D(170mg，64.54％收率)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3：δ8.59(d,J＝4.8Hz,1H),8.31(d,J＝8.0Hz,1H),8.11-8.03(m,1H),7.54-7.49(m,1H),2.61(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+204.8。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物267D制备化合物267(15.3mg，14.91％收率，淡黄色固体)。化合物267：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ12.79(d,J＝6.0Hz,1H),8.17(d,J＝8.0Hz,1H),8.00(d,J＝4.4Hz,1H),7.82(t,J＝7.6Hz,1H),7.23-7.19(m,1H),7.14-7.04(m,5H),6.76(br s,1H),5.89(q,J＝6.0Hz,1H),5.56(br s,1H),3.47-3.30(m,2H),2.59-2.54(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.1。
实施例150
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-苯基噻吩-3-甲酰胺(270)
将2-溴噻吩-3-羧酸乙酯(2g，8.51mmol)、苯基硼酸(1.35g，11.1mmol)、K2CO3(2.35g，17mmol)和Pd(dppf)Cl2(622mg，851μmol)在二噁烷(30mL)、H2O(3mL)中的溶液脱气，然后在N2下加热至100℃保持6小时。将混合物浓缩，通过硅胶色谱(石油醚至石油醚：乙酸乙酯＝25：1)纯化残余物，得到化合物270A(1.9g，收率：96.11％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ7.53(d,J＝5.4Hz,1H),7.52-7.47(m,2H),7.44-7.38(m,3H),7.25(d,J＝5.4Hz,1H),4.20(q,J＝7.1Hz,2H),1.19(t,J＝7.1Hz,3H)。
将270A(150mg，646μmol)和NaOH(51.7mg，1.29mmol)在THF(5mL)、EtOH(3mL)、H2O(2mL)中的混合物在15℃下搅拌12小时。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝10：1)显示未反应的起始物料，然后将混合物加热至60℃再保持3小时。减压除去有机溶剂，用1N HCl将水层调节至pH约6，得到沉淀，过滤固体，干燥，得到270B(100mg，收率：75.8％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.63(br s,1H),7.55(d,J＝5.3Hz,1H),7.49-7.41(m,2H),7.41-7.31(m,4H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物270B制备化合物270(16.00mg，收率：20.1％，白色固体)。化合物270：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73(d,J＝7.5Hz,1H),8.12(s,1H),7.87(s,1H),7.58(d,J＝5.3Hz,1H),7.36-7.20(m,10H),7.09(d,J＝5.3Hz,1H),5.29(ddd,J＝3.6,7.3,10.4Hz,1H),3.17(dd,J＝3.6,13.8Hz,1H),2.80(dd,J＝10.4,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.1。
实施例151
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-氯-2-苯基噻吩-3-甲酰胺(271)
在80℃下，向270A(300mg，1.29mmol)的DMF(5mL)溶液中加入NCS(345mg，2.58mmol)，并将混合物在80℃下搅拌1.5小时。将混合物倒入水(20mL)中并用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱(石油醚至石油醚：乙酸乙酯＝20：1)纯化残余物，得到271A(0.38g，收率：82.8％)，为白色固体(与第158页合并)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.50-7.44(m,2H),7.43-7.37(m,3H),7.34(s,1H),4.19(q,J＝7.1Hz,2H),1.18(t,J＝7.2Hz,3H)。
将271A(380mg，1.42mmol)和NaOH(114mg，2.84mmol)在THF(5mL)、EtOH(3mL)、H2O(2mL)中的混合物在15℃下搅拌12小时。真空除去有机溶剂，用1N HCl将水层调节至pH约3，用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，用盐水(10mL)洗涤有机层，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到271B(330mg，收率：97.4％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ7.43-7.36(m,2H),7.36-7.29(m,3H),7.28(s,1H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物271B制备化合物271(28.2mg，收率：30.4％，白色固体)。化合物271：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.40(br s,5H),7.19(br s,4H),6.76(br s,2H),6.66(br s,1H),5.93(br s,1H),5.44(br d,J＝19.3Hz,2H),3.18(br d,J＝16.7Hz,1H),2.94-2.81(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+413.0,415.0。
实施例152
化合物272-273
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-氰基-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(272)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-氰基-1-苯基-1H-吡唑-3-甲酰胺(273)
向丙炔酸乙酯(4.30g，43.83mmol)和2-氨基乙腈盐酸盐(8.11g，87.67mmol，HCl)在CHCl3(250mL)和H2O(10mL)中的溶液中加入NaNO2(9.07g，131.50mmol)。将混合物在25℃下搅拌14小时。然后将反应混合物用DCM(50mL)稀释并过滤。将滤液用H2O(20mL)和盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱(20g Silica Flash Column，洗脱液为0～30％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化残余物，得到化合物272A(1.40g收率：19.34％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ12.19(br s,1H),7.21(s,1H),4.45(q,J＝7.2Hz,2H),1.41(t,J＝7.2Hz,3H)。
向272A(1.40g，8.48mmol)、苯基硼酸(1.55g，12.72mmol)、吡啶(737.60mg，9.32mmol)在DCM(50mL)中的混合物中加入4A°MS(20g)(活化的4A°MS)和Cu(OAc)2(1.69g，9.32mmol)。之后，在O2气氛(15psi)下将混合物在40℃下搅拌72小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱法(20g Silica FlashColumn，洗脱液为0～30％乙酸乙酯/石油醚梯度)，然后通过制备型HPLC(HCl条件)纯化残余物，得到272B(170mg，收率：8.23％)和272C(264mg，收率：12.78％)，为白色固体。
化合物272B：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.73(dd,J＝1.3,8.3Hz,2H),7.64-7.46(m,4H),4.46(q,J＝7.2Hz,2H),1.42(t,J＝7.0Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+241.9。
化合物272C：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.55-7.47(m,3H),7.45-7.39(m,2H),7.37(s,1H),4.27(q,J＝7.0Hz,2H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+241.9。
在0℃下，向272B(170mg，704.69μmol)在THF(5mL)和MeOH(5mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(148mg，3.52mmol)的H2O(5mL)溶液。添加后，将反应混合物在25℃下搅拌3小时，然后用H2O(10mL)稀释，并用MTBE(30mL)萃取。将水相用1N HCl中和至pH约4，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。化合物272D(98mg，收率：64.58％，白色固体)：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.76-7.74(m,2H),7.61-7.52(m,4H),2.83(br s,1H)。
如实施例6，由相应的起始物料——化合物272D和12G制备化合物272(40mg，收率：53.56％，白色固体)。化合物272：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.88(br d,J＝7.8Hz,1H),8.12(br s,1H),7.91-7.74(m,4H),7.71-7.57(m,3H),7.31-7.15(m,5H),5.47(br s,1H),3.25-2.96(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+388.1。
按照化合物274所用的步骤，由相应的中间体羧酸——化合物273A制备化合物273(19mg，收率：44.44％，白色固体)。化合物273A(201mg，收率：55.94％，白色固体)：1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.58-7.53(m,1H),7.46-7.42(m,5H),4.05(br s,1H)。化合物273：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(br d,J＝7.8Hz,1H),8.15(br s,1H),7.90(br s,1H),7.44(br d,J＝8.5Hz,4H),7.36-7.25(m,7H),5.42-5.22(m,1H),3.21(br d,J＝11.5Hz,1H),2.90-2.75(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+388.1。
实施例153
化合物274、320
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-溴-5-氯-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(274)
搅拌3-溴-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(500mg，2.15mmol)和NCS(574mg，4.30mmol)的溶液。在N2下，将混合物在160℃下搅拌3小时。向反应混合物中加入CCl4(20mL)，然后用NaHCO3(30mL)稀释。用DCM(20mL×3)萃取混合物。将合并的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过制备型TLC(SiO2，PE：EA＝5：1)纯化残余物。得到化合物274A(180mg，收率：31.30％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.34(q,J＝7.1Hz,2H),3.85(s,3H),1.46-1.24(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+266.9。
向化合物274A(300mg，1.12mmol)在MeOH(10mL)和H2O(10mL)中的溶液中加入NaOH(134mg，3.36mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物浓缩并加入20mL水，用MTBE(10mL×2)萃取混合物，在0℃下用1N HCl将水层酸化至pH约2～3，并用EtOAc(20mL×2)萃取，将有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物。得到化合物274B(250mg，收率：93.22％)，为白色固体，将其不经纯化用于下一步骤。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.02-3.72(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+238.9。
如实施例5，由相应的起始物料——化合物274B和3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺(274D)制备化合物274(70mg，收率：66.75％，淡黄色固体)。化合物274：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.41-8.27(m,1H),8.12(s,1H),7.87(s,1H),7.29(dd,J＝4.0Hz,4H),7.22(dd,J＝4.0Hz,1H),5.36(s,1H),3.78(s,3H),3.20(dd,J＝10.4Hz,1H),2.90-2.81(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+415.0。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-2-(3-苯基-1H-吡唑-1-基)噻吩-3-甲酰胺(320)
如实施例153，由相应的羧酸——化合物320A和3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺(274D)制备化合物320(33.7mg，收率：51.5％，白色固体)。化合物320：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.88(d,J＝7.6Hz,1H),8.12(s,1H),7.97(d,J＝2.6Hz,1H),7.85(br d,J＝7.1Hz,3H),7.50-7.42(m,2H),7.41-7.34(m,1H),7.33-7.19(m,5H),6.92(d,J＝2.6Hz,1H),6.84(d,J＝1.0Hz,1H),5.40-5.31(m,1H),3.19(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.80(dd,J＝10.3,13.8Hz,1H),2.44(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+459.1。
实施例154
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(276)
在25℃下，向苯肼(50g，462.3mmol)和2,4-二氧代戊酸乙酯(76.8g，485.5mmol)在AcOH(600mL)中的混合物。将混合物在100℃下搅拌16小时。将反应混合物减压浓缩，以去除AcOH。向残余物中加入H2O(200mL)和EA(200mL)，然后将混合物用饱和NaHCO3水溶液碱化至水相pH～7-8。将分离的水层用EA(150mL×3)萃取，将合并的有机层用饱和NaHCO3水溶液(200mL)、饱和NaCl水溶液(200mL)洗涤，用Na2SO4干燥，减压过滤，得到粗产物。通过FCC(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：0～3：1)纯化粗产物。化合物276A(39.0g，收率：36.7％，黄色固体)：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ7.50-7.37(m,5H),6.88(s,1H),4.16(q,J＝7.0Hz,2H),2.26(s,3H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。
在25℃下，向化合物276A(250mg，1.1mmol)在MeOH(10mL)中的混合物中一次性加入NaOH(2M，3mL)。将混合物在25℃下搅拌2小时。减压浓缩反应混合物以除去MeOH。向混合物中加入H2O(10mL)，用HCl水溶液(1M)酸化至pH～3-4。用EA(10mL×3)萃取水相。将合并的有机相用饱和NaCl水溶液(15mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥并在减压下过滤，得到化合物276C(170mg，粗品)，为黄色固体，其不经纯化直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ7.49-7.37(m,5H),6.82(s,1H),2.25(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物276C制备化合物276(100mg，收率：65.68％，白色固体)。化合物276：1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ9.14-9.00(m,1H),8.09(s,1H),7.85(s,1H),7.44-7.11(m,10H),6.56(s,1H),5.28(s,1H),3.26-3.16(m,1H),2.91-2.76(m,1H),2.26(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
实施例155
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2-氟苯基)异噁唑-4-甲酰胺(277)
向2-氟苯甲醛(10g，80.6mmol)和NH2OH.HCl(6.2g，88.6mmol)在EtOH(10mL)和H2O(20mL)中的悬浮液中加入冰(50g)。然后在10分钟的时间内逐滴加入NaOH(8g，201mmol)的H2O(25mL)水溶液，此时大部分固体溶解。然后将混合物在16℃下搅拌2小时。然后将所得混合物用HCl(5N)酸化。然后将混合物用二氯甲烷(100mL)萃取两次。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：0至200：1)纯化残余物，得到化合物277A(10g，收率：89.2％)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.68(s,1H),8.39(s,1H),7.74(br t,J＝7.5Hz,1H),7.39(q,J＝6.8Hz,1H),7.18(t,J＝7.4Hz,1H),7.14-7.06(m,1H)。
向化合物277A(5g，35.9mmol)的DMF(20mL)溶液中加入1-氯吡咯烷-2,5-二酮(5.3g，39.5mmol)，然后在20℃下搅拌3小时。将反应混合物用H2O(60mL)稀释，并用乙酸乙酯(100mL×2)萃取。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物277B(5g，收率80.2％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.15(s,1H),7.68(br t,J＝7.5Hz,1H),7.50-7.39(m,1H),7.23(t,J＝7.6Hz,1H),7.20-7.13(m,1H)。
在30分钟内向3-(二甲基氨基)丙烯酸乙酯(165mg，1.2mmol)和TEA(233mg，2.3mmol)的THF(15mL)溶液中滴加化合物277B(400mg，2.3mmol)的THF溶液(5mL)。将混合物在20℃下搅拌12小时。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。通过制备型TLC(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：1)纯化残余物，得到化合物277C(240mg，收率：44.4％)，为淡黄色油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.94(s,1H),7.51-7.36(m,2H),7.21-7.14(m,1H),7.13-7.04(m,1H),4.17(q,J＝7.1Hz,2H),1.15(t,J＝7.2Hz,3H)。
将化合物277C(230mg，977.9μmol)在H2O(2.00mL)、HOAc(1.5mL)和HCl(3mL)中的混合物加热至130℃并搅拌12小时。将反应混合物减压浓缩，得到化合物277D(120mg，收率：59.2％)，为棕色固体。产物不经进一步纯化用于下一步。MS(ESI)m/z(M+H)+208.1。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物277D制备化合物277(33mg，收率：37.7％，白色固体)。化合物277：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.43(brs,1H),8.94(br d,J＝6.8Hz,1H),8.09(br s,1H),7.83(br s,1H),7.54(br d,J＝5.3Hz,1H),7.47-7.40(m,1H),7.36-7.16(m,9H),5.31(br s,1H),3.17(br d,J＝13.5Hz,1H),2.89-2.75(m,1H),2.89-2.75(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+382.1。
实施例156
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-苯基-5-(三氟甲基)异噁唑-4-甲酰胺(278)
在25℃下，向N-羟基苯亚氨酰氯(1g，6.43mmol)和4,4,4-三氟丁-2-炔酸乙酯(1.28g，7.71mmol)在THF(10mL)中的混合物中加入TEA(1.3g，12.9mmol)。将混合物在25℃搅拌1小时，向混合物中加入H2O(10mL)，用乙酸乙酯(10mL×2)萃取。将合并的有机相用盐水(10mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过制备型TLC纯化残余物，得到化合物278A(1g，收率：54.5％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.68(dd,J＝1.3,7.9Hz,2H),7.56-7.47(m,3H),4.39-4.31(m,2H),1.34-1.28(m,3H)。
向化合物278A(750mg，2.63mmol)在HOAc(2mL)中的混合物中加入HCl(12M，939μL)。将混合物在130℃下搅拌48小时。TLC(二氯甲烷：甲醇＝10：1，Rf～0.09)显示所需的点。将混合物浓缩，得到粗产物化合物278B(450mg，粗品)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.68(br d,J＝7.9Hz,2H),7.62-7.50(m,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物278B制备化合物278(15mg，收率：12.6％，白色固体)。化合物278：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.17(brd,J＝9.2Hz,1H),7.55-7.48(m,3H),7.43-7.36(m,4H),7.28-7.14(m,5H),5.88(d,J＝5.3Hz,1H),4.60(br s,1H),4.04(br s,1H),3.31(s,12H),2.73-2.61(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+432.1。
实施例157
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-氯-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(280)
向1H-吡唑-5-羧酸乙酯(10.00g，71.36mmol)、苯基硼酸(13.05g，107.04mmol)、Py(8.82g，111.50mmol，9.0mL)在DCM(120mL)中的混合物中加入4A°MS(40.00g)和Cu(OAc)2(14.26g，78.50mmol)，将混合物在30℃下搅拌154小时。过滤反应混合物，真空浓缩滤液。通过快速硅胶色谱(PE：EA＝1：0至10：1)纯化残余物，得到化合物280A(3.10g，收率：19.1％)，为黄色油状物。化合物280A：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.81(d,J＝2.0Hz,1H),7.57-7.37(m,5H),7.09(d,J＝2.0Hz,1H),4.17(q,J＝7.0Hz,2H),1.15(t,J＝7.0Hz,3H)。
向化合物280A(1.0g，4.62mmol)的CH3COOH(15mL)溶液中加入NaClO(24.2g，47.12mmol，20.00mL，14.5％纯度)。在N2气氛下，将混合物在25℃下搅拌21小时。通过加入H2O(25mL)淬灭反应混合物，并用EA(20mL)稀释并搅拌30分钟，然后用EA(25mL)萃取。将合并的有机层用H2O(20mL×2)洗涤，然后用NaHCO3(20mL×2)洗涤，然后用盐水(15mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱(PE：EA＝1：0至1：1)纯化残余物，得到化合物280C(327mg，收率：28.1％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,氯仿-d)δ7.69(s,1H),7.53-7.31(m,5H),4.27(q,J＝7.1Hz,2H),1.22(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物280C(300mg，1.20mmol)的MeOH(15mL)溶液中加入NaOH(240mg，6.00mmol)的H2O(5mL)溶液。将混合物在20℃下搅拌2小时。将反应混合物用MTBE(15mL)和H2O(15mL)稀释，然后搅拌10分钟。分离水层，用H2O(15mL×2)萃取有机层。通过添加1N HCl将合并的水层调节至pH约3，然后用EA(20mL×3)萃取水层。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物280D(252mg，收率：94.1％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,甲醇-d4)δ7.76(s,1H),7.52-7.38(m,5H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物280D制备化合物280(61mg，收率61.2％，淡黄色固体)。化合物280：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(d,J＝7.5Hz,1H),8.20(s,1H),7.97-7.86(m,2H),7.41-7.24(m,10H),5.48-5.35(m,1H),3.21(br dd,J＝3.2,14.0Hz,1H),2.80(dd,J＝10.5,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+397.1。
实施例158
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-氯-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(281)
在20℃下向EtOH(40mL)中加入Na(470mg，20.34mmol)。在所有钠反应完后，将混合物加热至78℃并加入苯肼(2.0g，18.49mmol，1.82mL)，搅拌0.1小时，然后滴加马来酸二乙酯(3.5g，20.34mmol，3.27mL)。将混合物在78℃下搅拌4小时。冷却至65℃后，将反应混合物用AcOH(2.0g，33.28mmol，1.9mL)处理。将反应混合物减压浓缩，以去除溶剂。将残余物用H2O(80mL)稀释，并用EtOAc(80mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1至1/1)纯化残余物，得到化合物281A(2.72g，收率：58.40％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.24(s,1H),7.34-7.24(m,2H),7.02-6.92(m,3H),4.59(dd,J＝2.0,9.7Hz,1H),4.24-4.13(m,2H),3.00-2.86(m,1H),2.46-2.39(m,1H),1.23(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+235.0。
向化合物281A(2.7g，11.53mmol)的MeCN(50mL)溶液中加入POCl3(2.15g，14.02mmol)。将混合物在85℃下搅拌5小时。将反应混合物减压浓缩，以去除溶剂。将残余物用饱和NaHCO3中和至pH约8，然后用DCM(50mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1至5/1)纯化残余物，得到化合物281B(1.9g，收率：65.21％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.31-7.17(m,2H),6.98(br d,J＝7.3Hz,2H),6.89(br t,J＝7.2Hz,1H),4.86-4.60(m,1H),4.34-4.14(m,2H),3.62-3.37(m,1H),3.33-3.17(m,1H),1.37-1.11(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+252.9。
向化合物281B(800mg，3.17mmol)的MeCN(20mL)溶液中加入H2SO4(620mg，6.34mmol，337.95μL)和K2S2O8(1.29g，4.76mmol)。将混合物在80℃下搅拌6小时。将反应混合物减压浓缩，以去除大部分溶剂。将残余物滴加到H2O(30mL)中，过滤并减压浓缩，得到残余物。将残余物用30％MeCN(5mL×2)洗涤。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至15/1)纯化残余物，得到化合物281C(190mg，收率：21.52％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.47(d,J＝1.3Hz,4H),7.23-7.14(m,1H),4.15(q,J＝7.1Hz,2H),1.12(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+250.9。
向化合物281C(150mg，598.37μmol)的THF/H2O(5mL/5mL)溶液中加入NaOH(120mg，2.99mmol)。将混合物在25℃下搅拌4小时。将反应混合物用H2O(20mL)稀释，然后将混合物减压浓缩以除去THF，并用MTBE(15mL×2)萃取。将水层用1N HCl中和至pH约3，然后用DCM(20mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物281D(120mg，收率：90.08％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.50-7.34(m,5H),6.97(s,1H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物281D制备化合物281(20mg，收率：40.20％，白色固体)。化合物281：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(d,J＝7.7Hz,1H),8.11(s,1H),7.87(s,1H),7.41-7.34(m,3H),7.30(br d,J＝7.1Hz,2H),7.28-7.23(m,3H),7.21-7.16(m,2H),6.80(s,1H),5.31-5.19(m,1H),3.24–3。
实施例159
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3,5-二氯-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺(282)
向1H-吡唑-4-羧酸乙酯(5g，35.68mmol)和Cs2CO3(23.25g，71.36mmol)的DMF(100mL)溶液中加入MeI(10.13g，71.36mmol，4.44mL)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物过滤，滤液用H2O(500mL)稀释，用EA(50mL×3)萃取，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化残余物。得到化合物282A(4.5g，收率：81.81％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.84(d,J＝8.5Hz,2H),4.24(q,J＝7.3Hz,2H),4.03-3.70(m,3H),1.30(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+155.0。
在N2下，向化合物282A(1.5g，9.73mmol)的溶液中加入NCS(2.6g，19.46mmol)。将混合物在160℃下搅拌3小时。向反应混合物中加入CCl4(10mL)和饱和NaHCO3水溶液(10mL)。将混合物用DCM(20mL×2)萃取，然后将有机层合并，将有机相用Na2SO4干燥，过滤并将滤液真空浓缩。得到化合物282B(1.84g，粗品)，为棕色油状物，将其直接用于下一步骤。MS(ESI)m/z(M+H)+188.9。
在N2下，向化合物282B(1.84g，9.76mmol)的溶液中加入NCS(2.61g，19.52mmol)，在N2下将混合物在160℃下搅拌4小时。向反应混合物中加入CCl4(10mL)和饱和NaHCO3水溶液(10mL)，将混合物用DCM(20mL×2)萃取，然后将有机层合并，将有机相用Na2SO4干燥，过滤并将滤液真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝5/1)纯化残余物。得到化合物282C(482mg，收率：22.14％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ4.35(q,J＝7.1Hz,2H),3.84(s,3H),1.38(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+222.9。
在20℃下，向化合物282C(480mg，2.15mmol)在H2O(5mL)和MeOH(10mL)中的混合物中分批加入NaOH(258mg，6.45mmol)，并搅拌2小时。将混合物浓缩以除去MeOH，然后将混合物用H2O(20mL)稀释，并用MTBE(50mL×2)萃取。用1N HCl将水层酸化至pH约2，然后用EA(50mL×3)萃取溶液。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩，得到中间体化合物282D(390mg，收率：93.02％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.27(s,1H),3.77(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+194.8&196.8。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物282D制备化合物282(50mg，收率：46.25％，类白色固体)。化合物282：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.32(dd,J＝7.7Hz,1H),8.21-8.07(m,1H),7.87(s,1H),7.36-7.16(m,5H),5.33(s,1H),3.82-3.69(m,3H),3.19(dd,J＝13.2Hz,1H),2.95-2.78(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+369.1&371.1。
实施例160
化合物283-284
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-苄基-1H-吡唑-5-甲酰胺(283)
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-苄基-1H-吡唑-3-甲酰胺(284)
在25℃下，向1H-吡唑-5-羧酸乙酯(1g，7.14mmol)和苄基溴(0.93mL，7.8mmol)在DMF(30mL)中的混合物中一次性加入K2CO3(1.18g，8.6mmol)。将混合物在25℃下搅拌14小时。向反应混合物中加入H2O(80mL)并通过EA(50mL×3)萃取。将合并的有机相用饱和NaCl(50mL×2)洗涤。将有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过FCC(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至3/1)纯化残余物，得到化合物283A(523mg，收率31.7％)，为无色液体，和化合物283B(989mg，收率60.1％)，为白色固体。
化合物283A：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.65(d,J＝2.0Hz,1H),7.36-7.23(m,3H),7.13(d,J＝7.0Hz,2H),6.95(d,J＝2.0Hz,1H),5.72(s,2H),4.27(q,J＝7.2Hz,2H),1.26(t,J＝7.0Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+231.0。
化合物283B：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.99(d,J＝2.5Hz,1H),7.40-7.29(m,3H),7.28-7.23(m,2H),6.77(d,J＝2.3Hz,1H),5.43(s,2H),4.25(q,J＝7.0Hz,2H),1.27(t,J＝7.0Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+231.0。
在25℃下，向化合物283A(517mg，2.2mmol)在MeOH(10mL)中的混合物中一次性加入NaOH(2M，6mL，12.0mmol)。在25℃下搅拌2小时后，将反应混合物减压浓缩以去除MeOH，将水相用HCl水溶液(1M)酸化至pH约4-5。过滤沉淀物并干燥，得到化合物283C(389mg，粗品)，为白色固体，将其不经纯化直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.60(d,J＝2.0Hz,1H),7.34-7.22(m,3H),7.15-7.08(m,2H),6.88(d,J＝2.0Hz,1H),5.73(s,2H)。
如实施例12，由相应的中间体羧酸——化合物283C制备化合物283(177mg，收率89.0％)。化合物283：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.91(d,J＝7.1Hz,1H),8.11(s,1H),7.84(s,1H),7.52(s,1H),7.26(s,8H),7.14-7.01(m,2H),6.89(s,1H),5.60(s,2H),5.40-5.24(m,1H),3.27-3.13(m,1H),2.95-2.80(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
按照化合物283所用的相同步骤，由相应的中间体羧酸——化合物284A制备化合物284(35mg，收率35.7％，白色固体)。化合物284：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.18(br d,J＝7.5Hz,1H),8.05(br s,1H),7.94-7.79(m,2H),7.40-7.30(m,3H),7.28-7.18(m,7H),6.64(s,1H),5.40(s,3H),3.19(br dd,J＝3.7,13.7Hz,1H),3.04(br dd,J＝8.9,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
实施例161
(S)-3-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(285)
将2-肼基吡嗪(2g，18.16mmol)和2,4-二氧代戊酸乙酯(2.87g，18.16mmol)在AcOH(40mL)中的混合物在118℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩，以去除AcOH。将残余物用H2O(8mL)稀释，用Na2CO3调节至pH约7，然后用DCM(200mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗产物。通过快速硅胶色谱(40g Silica Flash Column，洗脱液为0～20％乙酸乙酯/石油醚梯度@40mL/min)纯化残余物。得到化合物285A(1.5g，35.57％收率)，为白色固体。化合物285A：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.98-8.93(m,1H),8.60-8.54(m,1H),8.46-8.41(m,1H),6.78(s,1H),4.34-4.25(m,2H),2.38(s,3H),1.27(t,J＝7.2Hz,3H)。
如实施例85，由化合物285A将中间体化合物285C(1.2g，92.84％收率，白色固体)脱保护。化合物285C：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)：δ8.96-8.92(m,1H),8.70-8.66(m,1H),8.58-8.54(m,1H),6.84(s,1H),2.25-2.24(m,1H),2.26(s,2H)。
如实施例6，由相应的中间体化合物285C和21G((S)-2-氨基-3-苯基丙烷-1-醇)制备化合物285(143.0mg，53.28％收率，白色固体)。化合物285：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.74(s,1H),9.19-9.16(m,1H),9.03-8.96(m,1H),8.48-8.43(m,1H),8.06-8.03(m,1H),7.27-7.25(m,1H),7.24-7.20(m,3H),7.17-7.12(m,2H),6.80(s,1H),5.00-4.91(m,1H),3.39-3.31(m,1H),3.30-3.23(m,1H),2.37(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H2O+H)+354.2。
实施例162
(S)-3-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(286)
在80℃下，向化合物270A(1g，4.30mmol)的DMF(20mL)溶液中加入NBS(1.53g，8.60mmol)，并将混合物在80℃下搅拌1.5小时。将混合物倒入水(40mL)中并用乙酸乙酯(20mL×2)萃取，将合并的有机层用饱和NaHCO3(20mL)、盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱(石油醚至石油醚：乙酸乙酯＝20：1)纯化残余物，得到化合物286A(1.3g，收率：97.2％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.49-7.41(m,3H),7.40-7.34(m,3H),4.16(q,J＝7.2Hz,2H),1.16(t,J＝7.1Hz,3H)。
将化合物286A(1g，3.21mmol)、CuI(1.22g，6.42mmol)和2,2,2-三氟乙酸钠(4.37g，32.1mmol)在DMA(20mL)中的混合物加热至160℃保持5小时。向混合物中加入乙酸乙酯(30mL)、水(50mL)、1N HCl(50mL)，将混合物过滤，分离滤液。将有机溶剂用水(30mL)、盐水(30mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过MPLC(石油醚至石油醚：乙酸乙酯＝30：1)纯化残余物，得到化合物286B(210mg，收率：21.8％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.85(d,J＝1.1Hz,1H),7.53-7.47(m,2H),7.47-7.37(m,3H),4.21(q,J＝7.2Hz,2H),1.20(t,J＝7.1Hz,3H)。
将化合物286B(210mg，699μmol)和NaOH(55.9mg，1.40mmol)在THF(5mL)、EtOH(3mL)、H2O(2mL)中的混合物在10℃下搅拌12小时。真空除去有机溶剂，用1N HCl将水层调节至pH约5，用乙酸乙酯(20mL)萃取，有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到化合物286C(160mg，收率：84％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.81(d,J＝1.1Hz,1H),7.46-7.41(m,2H),7.40-7.31(m,3H)。
如实施例5，由相应的起始物料——化合物286C和3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺(274D)制备化合物286(28.3mg，收率：45.5％，白色固体)。化合物286：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.76(s,1H),7.61-7.38(m,5H),7.26-7.16(m,3H),6.80(br d,J＝5.6Hz,2H),6.70(br s,1H),6.01(br d,J＝5.9Hz,1H),5.61-5.47(m,2H),3.24(dd,J＝5.0,14.2Hz,1H),2.93(dd,J＝7.6,14.2Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+447.1。
实施例163
(S)-3-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(287)
向6-(三氟甲基)吡啶甲酸(10g，52.33mmol)的MeOH(150mL)溶液中滴加H2SO4(1.03g，10.47mmol，557.88μL)。在65℃下搅拌10小时后，将混合物冷却至室温，用饱和NaHCO3水溶液中和，用CH2Cl2(70mL×3)萃取。将有机相合并，用无水Na2SO4干燥，蒸发，得到粗中间体化合物287A(9.20g，85.71％收率)，为白色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.32(d,J＝8.0Hz,1H),8.09–8.05(m,1H),7.88(d,J＝8.0Hz,1H),4.03(s,3H)。
向化合物287A(4.5g，21.94mmol)的CH3COOC2H5(150mL)溶液中加入t-BuOK(3.20g，28.52mmol)。将混合物在25℃下搅拌0.25小时。将混合物用H2O(150mL)淬灭。分离有机层，水层用EA(70mL×3)萃取。将有机相合并，用无水Na2SO4干燥，过滤并蒸发，得到中间体化合物287B(3.95g，66.86％收率)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.24(d,J＝8.0Hz,1H),8.09–8.06(m,1H),7.87(d,J＝7.2Hz,1H),4.22–4.16(m,4H),1.26–1.23(m,3H)。
向化合物287B(3.90g，14.93mmol)的EtOH(80mL)溶液中加入NH4OAc(5.75g，74.65mmol)，然后将混合物在78℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，以去除溶剂。将残余物用EA(500mL)稀释，并用饱和NaHCO3水溶液(30mL×3)和盐水(30mL×3)洗涤。将有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过快速柱色谱(PE：EA＝30/1至10/1)纯化残余物，得到化合物287C(2.52g，64.87％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.94–7.93(m,2H),7.73–7.71(m,1H),5.38(s,1H),4.23–4.18(m,2H),1.33–1.29(m,3H)。
在0℃和N2下，向化合物287C(2.5g，9.61mmol)在DCE(60.00mL)中的混合物中分四次加入PhI(OAc)2(4.02g，12.49mmol)，将混合物在0℃下搅拌6小时，然后缓慢升温至25℃。然后将混合物在25℃下搅拌0.5小时。在0℃下，将反应混合物用饱和NaHCO3水溶液(150mL)淬灭，慢慢升温至25℃，并用DCM(100mL×3)萃取。将合并的有机层用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过快速柱色谱(PE：EA＝20/1至10/1)纯化残余物，得到化合物287D(650mg，21.23％收率)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.34–8.18(m,1H),8.16–8.13(s,1H),7.96–7.90(m,1H),4.28–4.23(m,2H),2.13(s,3H),1.28–1.23(m,3H)。
将化合物287D(600mg，1.89mmol)在DCE(5mL)和CH3COOH(10mL)中的混合物在90℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，以去除溶剂，得到残余物。通过快速柱色谱(PE：EA＝30/1至10/1)纯化残余物，得到化合物287E(120mg，221.31μmol，11.71％收率，55.37％纯度)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.42–8.33(m,1H),8.17–8.15(m,1H),7.99–7.26(m,1H),4.40–4.37(m,2H),2.62(s,3H),1.35–1.32(m,3H)。
向化合物287E(110mg，366.39μmol)在MeOH(6mL)和H2O(3mL)中的溶液中加入LiOH·H2O(61mg，1.47mmol)，然后将混合物在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH。将残余物用H2O(20mL)稀释，用1N HCl调节至pH约3，然后用EtOAc(30mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到中间体化合物287F(86mg，59.17％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.45–8.26(m,2H),8.10–8.07(m,1H),2.58(s,3H)。
如实施例5，由相应的起始物料——化合物287F和3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺(274D)制备化合物287(12.1mg，20.26％收率，类白色固体)。化合物287：1H NMR(400MHz,CDCl3)：δ11.10(d,J＝7.2Hz,1H),8.46(d,J＝8.0Hz,1H),8.18–7.99(m,1H),7.72(d,J＝8.0Hz,1H),7.23-7.04(m,5H),6.70(br s,1H),5.64-5.52(m,1H),5.45(br s,1H),3.57-3.47(m,1H),3.10–2.94(m,1H),2.55(d,J＝0.80Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+447.2。
实施例164
化合物288-289
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(吡啶-2-基)异噁唑-4-甲酰胺(288)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(4-氟苯基)异噁唑-4-甲酰胺(289)
在吡啶甲醛(200mg，1.87mmol)的EtOH(15mL)溶液中加入NH2OH.HCl(156mg，2.24mmol)和NaOAc(184mg，2.24mmol)。将混合物在60℃下加热2小时。将反应混合物浓缩。加入二氯甲烷(50mL)。将有机相用H2O(10mL)和盐水(10mL)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到中间体化合物288A(180mg，收率：78.8％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.47(br s,1H),8.57(br d,J＝4.2Hz,1H),8.50(br d,J＝4.4Hz,1H),8.26(s,1H),7.85(t,J＝7.7Hz,1H),7.76(d,J＝7.9Hz,1H),7.69-7.62(m,1H),7.40-7.32(m,1H),7.26-7.17(m,1H)。
在20℃下，向化合物288A(180mg，1.47mmol)在DMF(2mL)中的混合物中一次性加入NCS(216mg，1.62mmol)。将混合物在20℃下搅拌12小时。将反应混合物浓缩。将残余物倒入水(20mL)中。用乙酸乙酯(50mL×3)萃取水相。将合并的有机相用盐水(20mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到中间体化合物288B(200mg，收率：87.1％)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.79(br s,1H),8.72(d,J＝4.2Hz,1H),7.94(d,J＝8.2Hz,1H),7.80(dt,J＝1.7,7.8Hz,1H),7.39(ddd,J＝0.8,5.0,7.4Hz,1H),2.79(s,1H)。
在20分钟的时间内，向3-(二甲基氨基)丙烯酸乙酯(92mg，639μmol)、TEA(129mg，1.28mmol)在THF(10mL)中的混合物中加入化合物288B(200mg，1.28mmol)的THF(10mL)溶液。将混合物在20℃下搅拌并搅拌12小时。将反应混合物浓缩。通过制备型TLC(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：1)纯化残余物，得到化合物288C(150mg，收率：53.8％)，为黄色油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3-d)δ9.02-8.97(m,1H),8.75(d,J＝4.6Hz,1H),7.87-7.76(m,2H),7.45-7.36(m,1H),4.27(q,J＝7.3Hz,2H),1.26(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物288C(150mg，687μmol)在THF(5mL)和H2O(1mL)中的混合物中加入LiOH.H2O(58mg，1.4mmol)。将混合物在15℃下搅拌12小时。将混合物浓缩，以去除溶剂。用HCl水溶液(1M)将混合物调节至pH约5，并浓缩，得到中间体化合物288D(130mg，收率：99.5％)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(s,1H),8.76(d,J＝4.9Hz,1H),8.11-8.05(m,2H),7.65(dt,J＝3.1,5.3Hz,1H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物288D制备化合物288(73.8mg，收率：81.7％，黄色固体)。化合物288：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.10(br d,J＝7.0Hz,1H),9.44(s,1H),8.46(d,J＝4.4Hz,1H),8.11-8.01(m,2H),7.81(br s,1H),7.65-7.51(m,2H),7.17-7.08(m,5H),5.62-5.52(m,1H),3.27(dd,J＝5.0,13.8Hz,1H),3.13-3.06(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+365.1。
按照化合物288所用的步骤，由相应的中间体羧酸——化合物289D制备化合物289(83.1mg，收率：70.9％，白色固体)。中间体化合物289D(100mg，收率：56.8％，白色固体)：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.55(s,1H),7.89-7.81(m,2H),7.39-7.28(m,2H)。化合物289：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.32(s,1H),9.10(d,J＝7.6Hz,1H),8.11(s,1H),7.86(s,1H),7.65-7.56(m,2H),7.33-7.21(m,7H),5.40-5.29(m,1H),3.19(dd,J＝3.9,13.9Hz,1H),2.84(dd,J＝10.0,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+382.1。
实施例165
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-甲基-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酰胺(290)
将高压釜中的2-氯-3-氧代丁酸乙酯(16g，97.2mmol)、甲酰胺(43.8g，972mmol)、H2O(3.50g，194mmol)的混合物在180℃下搅拌3.5小时。将反应混合物过滤，将滤饼溶于DCM(200mL)中。将混合物过滤，减压浓缩滤液，得到残余物。得到化合物290A(2g，粗品)，为黄色固体。MS(ESI)m/z(M+H)+154.8。
将290A(1.8g，11.7mmol)、苯基硼酸(2.85g，23.4mmol)、Cu(OAc)2(3.18g，17.5mmol)、吡啶(1.85g，23.4mmol)和4A°MS(2g)在DCE(60mL)中的混合物脱气并用O2吹扫3次，然后在O2气氛下将混合物在60℃下搅拌12小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝50：1至2：1)纯化残余物。得到化合物290B(1.15g，收率：42.7％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.53(s,1H),7.45-7.35(m,3H),7.27-7.16(m,2H),4.18-4.05(m,2H),2.53(s,3H),1.10(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+231.0。
将290B(300mg，1.30mmol)、LiOH.H2O(109mg，2.60mmol)在THF(10mL)、H2O(10mL)中的混合物在15℃下搅拌12小时。LCMS显示大部分290B仍存在。向混合物中加入NaOH(416mg，10.4mmol)，并将混合物在70℃下搅拌12小时。向反应混合物中加入HCl水溶液以调节pH约5。然后将混合物过滤，浓缩滤饼，得到产物。得到化合物290C(300mg，粗品)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.90(s,1H),7.50-7.37(m,3H),7.36-7.28(m,2H),2.39(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+203.1。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物290C制备化合物290(15.3mg，收率：11.5％，白色固体)。化合物290：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.23(br d,J＝7.0Hz,1H),7.73(s,1H),7.80-7.56(m,1H),7.41-7.13(m,11H),5.31(br s,1H),3.20(dd,J＝3.7,13.8Hz,1H),2.92-2.80(m,1H),2.18-2.13(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.2。
实施例166
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-氯-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酰胺(291)
将1H-咪唑-5-羧酸乙酯(10g，71.4mmol)、苯基硼酸(13.1g，107mmol)、Cu(OAc)2(19.4g，107mmol)、吡啶(11.3g，142.72mmol)和4A MS(4.0g)在DCE(200mL)中的混合物脱气并用O2吹扫3次，然后在O2气氛下将混合物在60℃下搅拌12小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝20：1至5：1)纯化残余物。得到化合物291A(2.8g，收率：18.2％)，为黄色固体。(注意：由NOE确认结构)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.79(s,1H),7.63(s,1H),7.47-7.33(m,3H),7.32-7.22(m,2H),4.14(q,J＝7.2Hz,2H),1.16(t,J＝7.1Hz,3H)。
在80℃下，向291A(1g，4.62mmol)的CH3CN(20mL)溶液中加入NCS(925mg，6.93mmol)。将混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。将残余物溶于DCM(50mL)中，过滤，并将滤液减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝80：1至50：1)纯化残余物，然后通过制备型TLC(石油醚：乙酸乙酯＝3：1)纯化。得到化合物291B(150mg，收率：13.0％)，为黄色油状物。(注意：结构由HMBC确认)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.77-7.62(m,1H),7.54-7.37(m,3H),7.29-7.10(m,2H),4.09(q,J＝7.1Hz,2H),1.11(t,J＝7.2Hz,3H)。
将291B(150mg，598μmol)、LiOH.H2O(50.2mg，1.20mmol)在THF(5mL)、H2O(5mL)中的混合物在15℃下搅拌12小时。向反应混合物中加入HCl水溶液以调节pH约5。然后将混合物过滤，浓缩滤饼，得到产物。得到化合物291C(130mg，粗品)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.45(br d,J＝2.2Hz,4H),7.29(br s,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+222.8。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物291C制备化合物291(47.1mg，收率：47.6％，棕色固体)。化合物291：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(br d,J＝7.7Hz,1H),8.02(br s,1H),7.79(br s,1H),7.66(s,1H),7.43(br d,J＝4.0Hz,3H),7.37-7.10(m,7H),5.16(br t,J＝6.8Hz,1H),3.13(br d,J＝10.8Hz,1H),2.86-2.68(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+397.1。
实施例167
(2S,4R)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-甲基-1-苯基吡咯烷-2-甲酰胺(292)
在25℃下，向1-(叔丁基)2-乙基(2S,4R)-4-甲基吡咯烷-1,2-二羧酸酯(2g，7.77mmol)在EtOAc(5mL)中的混合物中加入HCl/EtOAc(4M，20mL)。将混合物在25℃下搅拌10小时。将混合物浓缩得到残余物，向残余物中加入饱和Na2CO3水溶液(1.5mL)，然后加入DCM(200mL)。然后将混合物用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗化合物292A(1.9g，粗品)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.76(br s,2H),5.29(s,1H),4.48(dd,J＝4.1,9.2Hz,1H),4.27(q,J＝7.2Hz,2H),3.73(dd,J＝7.4,11.3Hz,1H),2.95(dd,J＝9.1,11.3Hz,1H),2.48-2.28(m,2H),2.05-1.95(m,1H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H),1.13(d,J＝6.6Hz,3H)。
在25℃下，向化合物292A(1.9g，12.1mmol)和苯基硼酸(2.95g，24.2mmol)在DCE(15mL)中的混合物中一次性加入4A°MS(4g)、吡啶(1.91g，24.2mmol)、Cu(OAc)2(3.29g，18.1mmol)。在O2(15psi)下将混合物在60℃下搅拌10小时。将反应物过滤，并将滤液真空浓缩。通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝100/1，50/1)纯化残余物，得到化合物292B(900mg，收率：31.9％)为浅色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.42-7.32(m,2H),7.29-7.17(m,3H),4.28-4.08(m,3H),3.67(t,J＝8.0Hz,1H),2.90(t,J＝8.7Hz,1H),2.69-2.55(m,1H),2.24-2.14(m,1H),1.96-1.83(m,1H),1.24(t,J＝7.1Hz,3H),1.12(d,J＝6.6Hz,3H)。
在25℃下，向化合物292B(300mg，1.29mmol)在EtOH(5mL)和H2O(1mL)中的混合物中加入NaOH(129mg，3.23mmol)。将混合物在25℃下搅拌10小时。将反应物浓缩，水相用乙酸乙酯(15mL×2)萃取。然后向水相中加入HCl(1M)直至pH约3。用乙酸乙酯(15mL×2)萃取所需产物。将合并的有机相用盐水(20mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到粗化合物292C(100mg，粗品)，为黄色油状物。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物292C制备化合物292(12.7mg，收率：25.5％，类白色固体)。化合物292：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.30-7.19(m,4H),7.16-7.09(m,1H),7.09-6.97(m,3H),6.88-6.77(m,2H),6.73(brs,1H),6.55(dd,J＝8.2,18.3Hz,2H),5.75-5.61(m,1H),5.61-5.36(m,1H),4.04-3.92(m,1H),3.65-3.47(m,1H),3.42(dd,J＝5.0,14.0Hz,1H),3.23-3.02(m,1H),2.90(dd,J＝8.9,14.0Hz,1H),2.82-2.68(m,1H),2.41-2.29(m,1H),2.28-2.04(m,1H),2.03-1.89(m,1H),1.88-1.70(m,1H),1.13-1.00(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+380.2。
实施例168
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-苯基-1,2,5-噁二唑-3-甲酰胺(293)
在0℃下，向肉桂酸甲酯(1g，1当量)的吡啶(20mL)溶液中加入NOBF4(2.34g，3.2当量)。将反应混合物在0℃下搅拌2天。将溶液倒入冰水中并用EtOAc萃取(3次)。将合并的有机相用水洗涤，用NaSO4干燥并减压浓缩。将残余物在ISCO上纯化，得到化合物293A。
将化合物293A(0.5g)在亚磷酸三甲酯(5mL)中的溶液在N2下在100℃下加热过夜。将反应冷却至室温并用1N HCl(10mL)淬灭。将混合物用EtOAc萃取(3次)。将合并的有机相用水洗涤，用NaSO4干燥并减压浓缩。将残余物在ISCO上纯化，得到化合物293B。
如实施例5，由相应的酸——中间体化合物293C制备化合物293，中间体化合物293C通过在MeOH和水中用LiOH处理化合物293B(720mg)而获得。1H NMR(400MHz,DMSO):δ9.81(d,1H),8.22(s,1H),7.95(s,1H),7.6-7.2(m,10H),5.53(m,1H),3.25(dd,1H),2.83(dd,1H)ppm。MS(ESI)m/z(M+Na)+387.2。
实施例169
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(294)
向2-氯-1H-苯并[d]咪唑(5.0g，32.8mmol)和K2CO3(13.6g，98.3mmol)在DMF(20mL)中的混合物中加入MeI(6.1mL，98.3mmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。过滤除去不溶物质，滤液用EA(50mL)、H2O(50mL)处理。分离有机层，水层用EA(35mL×3)萃取。将合并的有机层用H2O(35mL×2)、盐水(35mL×2)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。将残余物用TBME/PE(v/v＝1/1，～20mL)研磨，得到化合物294A(3.3g，收率60.38％)，为淡黄色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.60-7.56(m,2H),7.31-7.24(m,2H),3.80(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+167.0。
向化合物294A(3.3g，19.8mmol)在EtOH(10mL)中的混合物中一次性加入N2H4.H2O(5.8g，99.1mmol，85％纯度)。将混合物在110℃下搅拌12小时。将反应混合物减压浓缩。将残余物用MTBE(20mL)研磨，过滤沉淀物并真空干燥，得到化合物294B(2.4g，收率73.1％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.25-7.21(m,1H),7.17-7.13(m,1H),6.98-6.89(m,2H),3.45(s,3H)。
将化合物294B(1.0g，6.17mmol)和2,4-二氧代戊酸乙酯(1.0g，6.48mmol)在AcOH(20mL)中的混合物在110℃下搅拌5小时。将反应混合物减压浓缩，以去除AcOH。向残余物中加入H2O(50mL)和EA(50mL)，然后将混合物用饱和NaHCO3水溶液酸化至水相pH约7-8。将分离的水层用EA(100mL×3)萃取，将合并的有机层用饱和NaCl水溶液(150mL)洗涤，用Na2SO4干燥，减压过滤，得到粗产物。通过FCC(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1:0～3:1)纯化粗产物，得到化合物294C(494mg，收率27.9％)，为黄色液体。
化合物294C：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.69-7.63(m,2H),7.41-7.35(m,1H),7.33-7.28(m,1H),7.05(s,1H),4.10(q,J＝7.1Hz,2H),3.55(s,3H),2.32(s,3H),0.99(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+285.1。
在25℃下，向化合物294C(645mg，2.3mmol)在MeOH(10mL)中的混合物中一次性加入NaOH(2M，5.7mL)。将混合物在25℃下搅拌1.5小时。将反应混合物减压浓缩以去除MeOH，向残余物中加入H2O(10mL)并用1N HCl溶液酸化至水相pH约6-7。分离固体并在减压下过滤，得到化合物294E(482mg，粗品)，为白色固体，将其不经纯化直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ13.58(s,1H),7.69-7.61(m,2H),7.40-7.34(m,1H),7.33-7.26(m,1H),6.96(s,1H),3.54(s,3H),2.31(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+257.0。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物294E制备化合物294(27mg，收率57.7％，白色固体)。化合物294：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ9.98(d,J＝6.0Hz,1H),7.63(d,J＝7.9Hz,1H),7.44-7.29(m,4H),7.04(m,3H),6.99(m,2H),6.90-6.85(m,1H),6.78-6.71(m,1H),5.74-5.65(m,1H),3.81(s,3H),3.36(m,1H),3.09(m,1H),2.37(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+431.1。
实施例170
(S)-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(295)
如实施例20，由相应的中间体羧酸——化合物294E制备化合物295(50.0mg，收率：50.16％，白色固体)。化合物295：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ9.89-9.76(m,1H),7.66-7.62(m,1H),7.43-7.37(m,2H),7.36-7.30(m,1H),7.06-7.00(m,3H),7.00-6.94(m,2H),6.92-6.85(m,2H),5.77-5.65(m,1H),3.79(s,3H),3.43-3.32(m,1H),3.13-3.02(m,1H),2.86-2.73(m,1H),2.37(s,3H),0.91-0.81(m,2H),0.65-0.52(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+471.1。
实施例171
化合物296-297
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)-5-甲基-1H-吡唑-3-甲酰胺(296)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺(297)
在0-5℃下，在搅拌下向NH2NH2.H2O(6.9mL，120mmol)中加入HCl(12M，5.50mL)，然后加入乙二醇(30mL)。然后分批加入6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-胺(3.6g，20.0mmol)。将混合物加热至125℃并搅拌3小时。冷却至室温后，通过过滤收集沉淀物。将滤饼用EtOH(5mL×3)洗涤，得到化合物296A(3.0g，15.37mmol，收率76.8％)，浅绿色固体。
将化合物296A(1.0g，5.1mmol)和2,4-二氧代戊酸乙酯(0.7mL，5.1mmol)在HOAc(20mL)中的混合物加热至120℃并搅拌3小时。将混合物浓缩。将残余物用MeOH(15mL)处理。通过过滤除去不溶物质。将滤液浓缩，并通过制备型HPLC纯化残余物，得到化合物296C(670mg，收率41.2％)，为淡黄色固体，和化合物296B(74mg，收率4.6％)，为粉色固体。用DCM(50mL)处理的不溶物质(为粉色固体)(0.5g，不纯)。通过过滤除去不溶物质。将滤液用饱和NaHCO3(15mL×3)、盐水(15mL×2)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到化合物296B(0.35g，收率21.5％)，为粉红色固体。
化合物296B：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.80(d,J＝9.2Hz,1H),7.30(d,J＝2.4Hz,1H),7.06(dd,J＝2.4,8.8Hz,1H),6.72(s,1H),4.42(q,J＝6.8Hz,2H),3.89(s,3H),2.82(s,3H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+317.9。
化合物296C：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.80(d,J＝8.8Hz,1H),7.30(d,J＝2.4Hz,1H),7.80(dd,J＝2.0,8.8Hz,1H)6.71(s,1H),4.37(q,J＝7.2Hz,2H),3.88(s,3H),2.37(s,3H),1.30(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+317.9。
6C(400mg，1.26mmol)的MeOH(15mL)溶液中加入NaOH(2M，3.15mL，6.3mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将混合物用H2O(50mL)稀释，蒸发除去挥发性溶剂。用1N HCl将所得水溶液酸化至pH约3。收集沉淀物并与甲苯共沸，得到化合物296D(320mg，收率87.8％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ7.78(d,J＝9.0Hz,1H),7.70(d,J＝2.6Hz,1H),7.11(dd,J＝2.5,8.9Hz,1H),6.86(s,1H),3.82(s,3H),2.28(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物296D制备化合物296(100mg，收率43.9％，淡黄色固体)。化合物296：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ10.20(brd,J＝7.3Hz,1H),8.12(s,1H),7.86(br s,1H),7.64(d,J＝2.4Hz,1H),7.56(d,J＝9.0Hz,1H),7.18(q,J＝7.8Hz,4H),7.12(br d,J＝6.8Hz,1H),7.05(dd,J＝2.6,9.0Hz,1H),6.73(s,1H),5.59-5.49(m,1H),3.81(s,3H),3.22(br dd,J＝4.5,14.0Hz,1H),3.02(br dd,J＝8.5,14.4Hz,1H),2.27(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+464.1。
按照化合物296所用的相同步骤，由相应的中间体羧酸——化合物297A制备化合物297(30mg，收率54.3％，白色固体)。化合物297：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.55(br d,J＝7.5Hz,1H),8.12(s,1H),7.88-7.80(m,2H),7.72(d,J＝2.6Hz,1H),7.31-7.25(m,4H),7.22-7.17(m,1H),7.11(dd,J＝2.6,8.8Hz,1H),6.76(s,1H),5.45-5.35(m,1H),3.83(s,3H),3.22(br dd,J＝4.1,13.8Hz,1H),3.04(dd,J＝9.4,13.8Hz,1H),2.73(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+464.1。
实施例172
化合物298-299
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺(298)
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-1-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺(299)
向4-甲基苯并[d]噻唑-2-胺(5.0g，30.5mmol)和NH2NH2.H2O(19.2mL，335mmol)在乙二醇(30mL)中的混合物中加入HCl(12M，2.5mL)。将混合物加热至120℃并搅拌5小时。冷却至室温后，观察到沉淀。通过过滤收集沉淀物，并用EtOH(15mL)洗涤，得到化合物298A(2.3g，收率41.7％)，为白色针状晶体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.98(br.s.,1H),7.46(d,J＝8.0Hz,1H),7.00(d,J＝7.6Hz,1H),6.88-6.84(m,2H),4.98(s,2H),2.38(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+179.8。
将化合物298A(1.7g，9.5mmol)和2,4-二氧代戊酸乙酯(1.5g，9.5mmol)在AcOH(30mL)中的混合物加热至125℃并搅拌3小时。将混合物浓缩。将残余物用MeOH(15mL)处理。通过过滤除去不溶物质。将滤液浓缩，并通过制备型HPLC(FA)纯化残余物，得到化合物298B(260mg，9.1％收率)，为黄色固体，和化合物298C(1.12g，收率39.2％)。用DCM(50mL)和饱和NaHCO3水溶液(15mL)处理不溶物质(1.4g，不纯)。分离有机层，然后用饱和NaHCO3(15mL×2)、盐水(15mL×3)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过FCC(PE/EA＝10/1)纯化残余物，得到化合物298B(620mg，21.7％收率)，为黄色固体。
化合物298B：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.71-7.65(m,1H),7.28(d,J＝5.3Hz,2H),6.74(d,J＝0.9Hz,1H),4.43(q,J＝7.3Hz,2H),2.87(d,J＝0.9Hz,3H),2.69(s,3H),1.43(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+302.0。
化合物298C：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.681-7.66(m,1H),7.30-7.26(m,2H),6.66(s,1H),4.39(q,J＝7.2Hz,2H),2.65(s,3H),2.38(s,3H),1.30(t,J＝6.8Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+301.9。
向乙基化合物298B(300mg，1.0mmol)的MeOH(10mL)溶液中加入NaOH(2M，2.5mL，5.0mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。观察到厚的白色沉淀物。将混合物用H2O(30mL)稀释。并通过蒸发除去挥发性溶剂。用1N HCl将残余物酸化至pH约3。收集沉淀物并与甲苯共沸，得到化合物298D(190mg，收率69.8％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ13.32(brs,1H),7.93-7.87(m,1H),7.37-7.31(m,2H),6.83(s,1H),2.79(s,3H),2.62(s,3H)。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物298D制备化合物298(35mg，收率42.1％，白色固体)。化合物298：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.60(br d,J＝7.0Hz,1H),8.14(br s,1H),7.94(br s,1H),7.88(br s,1H),7.41-7.17(m,8H),6.81(s,1H),5.44(br s,1H),3.23(br s,1H),3.27-3.23(m,1H),3.13-3.02(m,1H),2.81(br s,3H),2.65(br s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+448.1。
按照化合物298所用的相同步骤，由相应的中间体羧酸——化合物299A制备化合物299(30mg，收率25.0％，白色固体)。化合物299：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ11.49(d,J＝6.8Hz,1H),7.68-7.62(m,1H),7.32-7.28(m,1H),7.26-7.21(m,1H),7.20-7.04(m,6H),6.73(s,1H),5.56-5.43(m,2H),3.55-3.47(m,1H),3.25-3.16(m,1H),2.39(s,3H),2.36(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+448.1。
实施例173
化合物306-307
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-环丙基-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺(306)
如实施例5，由相应的起始物料——化合物306A和12G制备化合物306(25mg，24％，白色固体)。化合物306：MS(ESI)m/z(M+H)+403。
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-苯基-1H-吲哚-2-甲酰胺(307)
使用与前面对化合物306所述相同的步骤，由相应的起始物料合成化合物307。
实施例174
化合物314、494
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-5-(吡啶-2-基)噁唑-4-甲酰胺(314)
将Na(29.55mg，1.29mmol)溶解在MeOH(90mg)中。在0-5℃下将溶液加入到MeOH(10mL)和DCM(90mL)的混合物中，5分钟后，加入2-氯乙腈(10.2mL，160.7mmol)，并将混合物在0-5℃下搅拌1.5小时。然后在0-5℃下加入乙酰亚胺酸乙酯盐酸盐(20g，128.55mmol，HCl盐)。将浆液温热至20℃并搅拌18小时。向混合物中加入H2O(50mL)并将混合物搅拌15分钟以确保沉淀物溶解。分离有机层，用盐水(30mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到化合物314A(20.2g，产率88.5％)，为透明油状物，将其直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ4.87-4.82(m,1H),4.55-4.46(m,2H),4.39(s,2H),3.71(s,3H)。
将DBU(17.2mL，113.75mmol)缓慢加入到化合物314A(20.2g，113.75mmol)的DCM(100mL)溶液中。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物用2N HCl(40mL)处理。分离有机层，然后用H2O(30mL)、盐水(30mL)洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，得到化合物314B(13.5g，产率84.1％)，为白色固体，将其直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.68(s,1H),3.76(s,3H),2.42(s,3H)。
将Cs2CO3(4.6g，14.2mmol)加入到化合物314B(1.0g，7.1mmol)和2-碘吡啶(2.9g，14.2mmol)在甲苯(20.00mL)中的混合物中。然后加入P(邻甲苯基)3(216mg，0.71mmol)和Pd(OAc)2(80mg，0.35mmol)。将混合物脱气3次。然后将混合物加热至110℃并搅拌18小时。将混合物通过硅藻土过滤；用EA(15mL×2)洗涤滤饼。将合并的滤液浓缩。通过快速柱色谱法(PE/EA＝10/1至1/1)纯化残余物，得到化合物314C(1.0g，产率64.6％)，为浅黄色固体。1HNMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.69-8.67(m,1H),8.08-8.06(m,1H),7.96-7.91(m,1H),7.48-7.45(m,1H),3.77(s,3H),2.50(s,3H)。
在25℃下，向化合物314C(500mg，2.3mmol)的THF(10mL)和H2O(2mL)的混合物中一次性加入KOH(1.28g，22.9mmol)。将混合物在25℃下搅拌1.5小时。将反应混合物减压浓缩以去除THF。将水相用HCl水溶液(1M)酸化至pH约4-5，然后用DCM(20mL×5)萃取。将合并的有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到化合物314D(600mg，粗品)，为浅黄色固体，将其不经纯化直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.84-8.75(m,1H),8.25-8.19(m,1H),8.06(d,J＝8.2Hz,1H),7.71-7.66(m,1H),2.56(s,3H)。
如化合物12，由相应的起始物料——化合物314D和3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺(274D)制备化合物314(30mg，收率26.2％，白色固体)。化合物314：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ11.59(d,J＝6.2Hz,1H),8.14-8.09(m,1H),8.03-7.98(m,1H),7.87-7.80(m,1H),7.26-7.22(m,1H),7.18-7.05(m,5H),6.81(s,1H),5.86-5.78(m,1H),5.64(s,1H),3.50-3.41(m,1H),3.37-3.29(m,1H),2.58(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.1。
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-5-苯基噁唑-4-甲酰胺(494)
化合物494(40mg，收率25.1％，白色固体)如化合物314，由相应的起始物料——化合物314B和碘苯制备，然后使用如化合物12中的步骤，得到化合物494。化合物494：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ8.20-7.97(m,3H),7.80(br s,1H),7.61(br d,J＝10.0Hz,1H),7.49-7.34(m,3H),7.31-7.04(m,5H),6.22(br s,0.22H),6.09(br s,0.22H),5.46(dt,J＝4.8,8.0Hz,0.75H),4.59(dt,J＝3.0,10.3Hz,0.28H),3.27(dd,J＝5.0,14.1Hz,1H),3.11(brdd,J＝8.3,14.1Hz,1H),2.54-2.50(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
实施例175
(S)-1-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺(317)
在25℃下，向3-碘-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(30g，112.7mmol)在DMF(200mL)中的混合物中一次性加入Cs2CO3(110.22g，338.28mmol)。然后加入碘甲烷(18.83mL，302.45mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物减压浓缩，以去除大部分DMF。将混合物用EA(100mL)和H2O(100mL)处理。分离有机层，水层用EA(50mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过FCC(SiO2，PE：EA＝1：0-5：1)纯化残余物，得到化合物317B(17.24g，收率54.59％)，为白色固体。化合物317B：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.25(s,1H),4.20(q,J＝7.1Hz,2H),3.87(s,3H),1.29-1.23(m,3H)。
向化合物317B(10.0g，35.7mmol)和苯基硼酸(8.71g，71.4mmol)在1,4-二噁烷(300mL)和H2O(80mL)的混合物中加入K2CO3(9.87g，71.4mmol)和Pd(dppf)Cl2(2.61g，3.57mmol)。将混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在80℃下搅拌18小时。将反应混合物减压浓缩，以去除1,4-二噁烷。向混合物中加入EA(150mL)，然后用H2O(100mL×3)洗涤。将有机层用Na2SO4干燥并浓缩。通过快速柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：0至3：1)纯化残余物，得到化合物317C(8.30g，粗品)，为淡红色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.34(s,1H),7.71-7.64(m,2H),7.41-7.33(m,3H),4.20-4.06(m,2H),3.88(s,3H),1.26-1.12(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+231.0。
在25℃下，向化合物317C(8.29g，36.0mmol)的THF(15mL)和MeOH(10mL)混合物中加入KOH(20.20g，360.0mmol)和H2O(10mL)的混合物。将混合物在70℃下搅拌1.5小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH和THF，水相用浓HCl(36-38％)酸化至pH约3-4，过滤沉淀的固体并干燥，得到化合物317D(5.95g，收率81.72％)，为白色固体，将其不经纯化直接用于下一步。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.29(s,1H),7.75-7.70(m,2H),7.42-7.30(m,3H),3.89(s,3H)。
如实施例6，由相应的中间体化合物317D和21G((S)-2-氨基-3-苯基丙烷-1-醇)制备化合物317(1.29g，收率63.83％)。化合物317：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ9.56(s,1H),8.38(d,J＝7.5Hz,1H),8.05(s,1H),7.60-7.48(m,2H),7.34-7.13(m,8H),4.51-4.37(m,1H),3.87(s,3H),3.26-3.15(m,1H),2.90-2.76(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+334.1。
实施例176
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-1-苯基-1H-咪唑-5-甲酰胺(318)
将N'-羟基乙酰亚胺(5g，67.5mmol)和丙-2-炔酸乙酯(8.94g，91.1mmol)在MeOH(50mL)中的混合物在65℃下搅拌4小时。然后蒸发溶剂并加入Ph2O(25mL)。将反应混合物在250℃下搅拌4小时。将混合物冷却至70℃并分批倒入MTBE(100mL)中。将混合物搅拌10分钟。过滤并收集滤饼。将固体溶于EtOAc(200mL)和MeOH(50mL)中。过滤并收集滤液。浓缩滤液，得到粗产物，为棕色油状物。将残余物悬浮在MTBE(100mL)中并搅拌10分钟。过滤并收集滤饼，得到化合物318A(2g，收率：19.2％)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.32(brs,1H),7.72-7.49(m,1H),4.25-4.10(m,2H),3.33(br d,J＝8.8Hz,1H),2.33-2.23(m,3H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物318A(2g，13.0mmol)、苯基硼酸(3.16g，25.9mmol)、吡啶(2.05g，25.9mmol)和4A°分子筛(2g)在DCE(50mL)中的混合物中加入Cu(OAc)2(3.53g，19.5mmol)。在O2(15psi)下，将混合物在60℃下搅拌12小时。过滤并将滤液通过硅胶色谱纯化，用石油醚：乙酸乙酯＝4：1洗脱，得到粗产物。然后通过制备型TLC(EtOAc，Rf～0.5)再次纯化粗产物两次，得到化合物318B(160mg，产率：5.36％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.77(s,1H),7.53-7.48(m,3H),7.26-7.20(m,2H),4.15(q,J＝7.2Hz,2H),2.24(s,3H),1.19(t,J＝7.1Hz,3H)。
向化合物318B(100mg，434μmol)在THF(6mL)和H2O(2mL)中的溶液中加入LiOH.H2O(36.5mg，869μmol)。将混合物在15℃下搅拌24小时。TLC(EtOAc，Rf～0)显示反应完成。使用1N HCl将混合物的pH调节至约7.0。然后真空除去溶剂，得到粗化合物318C(87.0mg，粗品)，为黄色油状物。
如实施例5，由相应的起始物料——化合物318C和3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺(274D)制备化合物318(30.3mg，收率：28.0％，白色固体)。化合物318：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.57-7.39(m,5H),7.30(br s,2H),7.24-7.17(m,2H),7.11-6.96(m,2H),6.70(brs,1H),6.13(br s,1H),5.63-5.46(m,2H),3.34(dd,J＝5.5,14.2Hz,1H),3.12(dd,J＝6.8,14.1Hz,1H),2.22(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
实施例177
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-甲基-1-苯基-1H-咪唑-2-甲酰胺(319)
在0℃下，向4-甲基-1H-咪唑(5g，60.9mmol)的THF(100mL)溶液中缓慢加入NaH(2.68g，67mmol)。将悬浮液在0℃下搅拌30分钟，然后加入SEM-Cl(12.2g，73.1mmol)。将反应混合物在20℃下搅拌12小时。将混合物用饱和NaHCO2水溶液(200mL)淬灭，并用EtOAc(300mL×2)萃取。将合并的有机物用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱纯化粗产物，用EtOAc洗脱，得到化合物319A和319B(10g，粗品)的混合物，为黄色油状物。
在-78℃下，向化合物319A和319B(10g，47.1mmol)的THF(40mL)溶液中加入n-BuLi(2.5M，28.3mL)。将混合物在-78℃下搅拌1小时。向溶液中加入氯甲酸乙酯(7.67g，70.6mmol)，并在20℃下搅拌12小时。将混合物用NH4Cl(水溶液；200ml)淬灭，用EtOAc(300mL×2)萃取。将合并的有机物用Na2SO4干燥，浓缩，得到粗产物，为橙色油状物。通过硅胶色谱法纯化粗产物，用石油醚：乙酸乙酯＝5：1洗脱，得到化合物319C和319D(2.9g，粗品)的混合物，为黄色油状物。
将319C和319D(2g，7.03mmol)的HCl/EtOAc(50mL)溶液在20℃下搅拌24小时。LCMS显示大部分319C和319D被消耗。除去溶剂，残余物用EtOAc(50ml)和水(50mL)萃取。然后使用饱和NaHCO3水溶液将水层的pH调节至约8.0并将残余物用EtOAc(50ml×6)萃取。将合并的有机物用Na2SO4干燥，浓缩，得到319E(900mg，粗品)，为棕色固体。粗产物直接用于下一步骤。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ10.42(br s,1H),10.62-10.25(m,1H),6.96(s,1H),4.42(q,J＝7.3Hz,2H),2.33(s,3H),1.41(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物319E(405mg，2.63mmol)、苯基硼酸(480mg，3.94mmol)、吡啶(416mg，5.25mmol)和4A°分子筛(500mg)在DCE(30mL)中的混合物中加入Cu(OAc)2(716mg，3.94mmol)。在O2(15psi)下，将混合物在60℃下搅拌12小时。过滤并将残余物通过硅胶色谱纯化，用石油醚：乙酸乙酯＝5：1洗脱，得到化合物319F(400mg，粗品)，为透明油状物。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.49-7.44(m,3H),7.33-7.28(m,2H),6.93(s,1H),4.30(q,J＝7.1Hz,2H),2.35(s,3H),1.31(t,J＝7.1Hz,4H)。
将化合物319F(75mg，326μmol)和LiOH.H2O(13.7mg，326μmol)在THF(3mL)和H2O(1mL)中的溶液在15℃下搅拌12小时。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝1：1，Rf～0.01)和LCMS显示反应完成。将混合物的pH调节至约7.0并通过N2除去THF。然后将残余物冻干，得到粗品化合物319G(130mg，粗品)，为白色固体。粗产物直接用于下一步。MS(ESI)m/z(M+H)+202.8。
如实施例5，由相应的中间体羧酸——化合物319G制备化合物319(38.3mg，收率：42.3％，类白色固体)。化合物319：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.80(br s,1H),7.41(br s,3H),7.33-7.28(m,2H),7.21(br d,J＝7.2Hz,4H),6.85(s,1H),6.70(br s,1H),5.69-5.57(m,1H),5.42(br s,1H),3.39(br dd,J＝5.0,14.2Hz,1H),3.15(br dd,J＝7.6,14.1Hz,1H),2.28(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.2。
实施例178
化合物321、519-520
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(3-氟苯基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺(321)
向(E)-2-氰基-2-(羟基亚氨基)乙酸乙酯(25g，1.76mol)在EtOH(100mL)中的混合物中加入PtO2(2g，8.8mmol)。在H2(50psi)下，将混合物在25℃下搅拌12小时。过滤，浓缩滤液，得到化合物321A(44g，粗品)，为红色油状物。粗产物直接用于下一步。
向化合物321A(22g，172mmol)的DMF(500mL)溶液中加入氯硫烷基硫代次氯酸盐(69.6g，515mmol)。将混合物在20℃下搅拌12小时。将混合物倒入冰水(1000mL)中，用EtOAc(500mL×3)萃取。将合并的有机层用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩。通过硅胶柱色谱法纯化粗品产物，用石油醚：乙酸乙酯＝30：1洗脱。化合物321B(12g，收率：18.1％，黄色透明油状物)：1HNMR(400MHz,CDCl3)δ4.50(q,J＝7.1Hz,2H),1.46(t,J＝7.2Hz,3H)。
在N2下，向化合物321B(1g，5.19mmol)和(3-氟苯基)硼酸(1.09g，7.79mmol)在H2O(2mL)和甲苯(20mL)中的混合物中加入KF(603mg，10.38mmol)和Pd(PPh3)4(300mg，260μmol)。然后在N2下，将反应混合物在100℃下搅拌16小时。蒸发溶剂。通过制备型TLC(石油醚：乙酸乙酯＝5：1，Rf＝0.69)纯化粗产物，得到化合物321C(100mg，收率：7.64％)，为白色固体。
向化合物321C(120mg，476μmol)在THF(4mL)和H2O(2mL)中的混合物中加入LiOH.H2O(39.9mg，951μmol)。然后将反应混合物在20℃下搅拌16小时。向反应混合物中加入1M HCl直至pH约6。真空除去溶剂，得到粗化合物321D(100mg，粗品)，为白色固体。粗产物不经纯化用于下一步。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.70-7.50(m,3H),7.36-7.33(m,1H)。
如实施例6，由相应的起始物料——化合物321D和3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺(274D)制备化合物321(43.8mg，收率：61.6％，白色固体)。化合物321：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.39(d,J＝7.7Hz,1H),8.16(s,1H),7.91(s,1H),7.48-7.17(m,8H),5.73(s,1H),5.55-5.43(m,1H),3.21(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.85(dd,J＝10.0,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+399.1。
3-(2-氟苯基)-1-甲基-N-(2-氧代-1-(2-(三氟甲基)苯基)乙基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(519)
如化合物21，由相应的起始物料——3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸和2-氨基-2-(2-(三氟甲基)苯基)乙烷-1-醇制备化合物519(50mg，收率：17.5％，白色固体)。化合物519：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(s,1H),8.98(d,J＝6.8Hz,1H),8.37(s,1H),7.80(d,J＝8.0Hz,1H),7.75-7.70(m,1H),7.62-7.56(m,2H),7.49-7.40(m,2H),7.26-7.17(m,2H),5.77(d,J＝6.8Hz,1H),3.95(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+406.1。
3-(2-氟苯基)-1-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺(520)
如化合物21，由相应的起始物料——3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸和3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺(274D)制备化合物520(60mg，收率：39.6％，淡黄色固体)。化合物520：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(s,1H),7.93(s,1H),7.47-7.33(m,2H),7.23-7.08(m,5H),6.95(dd,J＝2.9,6.6Hz,2H),6.00(d,J＝6.2Hz,1H),4.70(q,J＝6.7Hz,1H),3.96(s,3H),3.07(d,J＝6.4Hz,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+392.0。
实施例179
(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-氟苯基)异噁唑-4-甲酰胺(323)
向3-氟苯甲醛(10g，80.6mmol)和NH2OH.HCl(6.2g，88.6mmol)在EtOH(10mL)和H2O(20mL)中的悬浮液中加入冰(50g)。然后在10分钟的时间内滴加NaOH(8.1g，201.4mmol)的H2O(20mL)溶液，此时大部分固体溶解。然后将混合物在16℃下搅拌2小时。然后将所得混合物用HCl(5N)酸化。然后将混合物用二氯甲烷(80mL)萃取三次，得到化合物323A(10g，收率：89.2％)，为浅黄色固体。产物不经进一步纯化用于下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(s,1H),7.95(br s,1H),7.39-7.30(m,3H),7.13-7.06(m,1H)。
向化合物323A(5g，35.9mmol)的DMF(20mL)溶液中加入NCS(5.3g，39.5mmol)，然后在20℃下搅拌3小时。将反应混合物用H2O(60mL)稀释，并用乙酸乙酯(100mL×2)萃取。将有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物323B(5.7g，收率91.4％)，为黄色固体。产物不经进一步纯化用于下一步。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.21(s,1H),7.66(d,J＝7.9Hz,1H),7.57(br d,J＝10.1Hz,1H),7.43-7.33(m,1H),7.16(tt,J＝1.1,8.3Hz,1H)。
在30分钟的时间内，向3-(二甲基氨基)丙烯酸乙酯(825mg，5.8mmol)和TEA(583mg，5.8mmol)的THF(15mL)溶液中滴加化合物323B(1g，5.8mmol)的THF(35mL)溶液。将混合物在16℃下搅拌12小时。将反应混合物减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：0至30：1)纯化残余物，得到化合物323C(800mg，收率：59％)，为淡黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.03(s,1H),7.62-7.51(m,2H),7.45(dt,J＝5.8,8.0Hz,1H),7.25-7.17(m,1H),4.32(q,J＝7.1Hz,2H),1.33(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物323C(224mg，952μmol)在THF(5mL)和H2O(1mL)中的混合物中加入LiOH.H2O(80mg，1.90mmol)。将混合物在15℃下搅拌12小时。将混合物浓缩以除去溶剂并用HCl水溶液(1M)调节至pH约5。将混合物过滤，用H2O(3mL)洗涤固体，得到中间体化合物323D(200mg，粗品)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.40(s,1H),7.74(td,J＝1.9,10.3Hz,1H),7.66(d,J＝7.7Hz,1H),7.52(dt,J＝6.2,7.9Hz,1H),7.34(dt,J＝2.2,8.4Hz,1H)。
如实施例5，由相应的起始物料——化合物323D和12G制备化合物323(68.9mg，收率：66.0％，白色固体)。化合物323：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.31(s,1H),9.05(br d,J＝7.5Hz,1H),8.13(br s,1H),7.87(br s,1H),7.54-7.17(m,9H),5.38(br s,1H),3.26-3.15(m,1H),2.81(br dd,J＝10.6,13.2Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+382.1。
实施例180
N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(嘧啶-2-基)异噁唑-4-甲酰胺(324)
将嘧啶-2-腈(10g，95.2mmol)、NH2OH.HCl(6.94g，99.9mmol)和CH3ONa(5.40g，99.9mmol)在MeOH(100mL)中的混合物加热至70℃保持2小时。将混合物浓缩，向残余物中加入水(50mL)，得到沉淀，过滤固体，用水(5mL×2)、MTBE(10mL)洗涤，得到化合物324A(10.4g，收率：79.1％)为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.18(s,1H),8.84(d,J＝4.9Hz,2H),7.51(t,J＝4.9Hz,1H),5.84(br s,2H)。
在0℃下，向化合物324A(2g，14.5mmol)的HCl(40mL)溶液中加入NaNO2(1.25g，18.1mmol)的H2O(7mL)溶液，将混合物在0℃下搅拌2小时。用饱和NaHCO3水溶液将混合物调节至pH约6，得到沉淀物。过滤固体，用水(5mL×2)洗涤并干燥，得到化合物324B(1.40g，收率：61.4％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.95(s,1H),8.92(d,J＝4.9Hz,2H),7.60(t,J＝5.0Hz,1H)。
向3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺(454mg，3.17mmol)和TEA(321mg，3.17mmol)在THF(6mL)中的混合物中分批加入化合物324B(500mg，3.17mmol)在THF(4mL)中的悬浮液，将混合物在10℃下搅拌12小时。将混合物过滤，浓缩滤液，通过制备型TLC(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)纯化残余物，得到化合物324C(300mg，收率：43.2％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.46-7.39(m,1H),7.39-7.32(m,2H),7.30-7.27(m,1H),7.25-7.19(m,4H),7.05-7.00(m,2H),6.87(br s,1H),5.92-5.85(m,2H),5.40(br s,1H),4.22(dd,J＝1.3,4.9Hz,1H),4.17-4.09(m,1H),2.92-2.81(m,2H)。
将化合物324C(150mg，684μmol)和LiOH.H2O(43.1mg，1.03mmol)在THF(5mL)、EtOH(3mL)、H2O(2mL)中的混合物在10℃下搅拌12小时。LCMS显示所需的MS，真空除去有机溶剂，用MTBE(5mL)萃取水层，然后用1N HCl调节至pH约4，将混合物浓缩，得到粗品化合物324D(130mg，粗品)，为黑色固体。
如实施例6，由相应的起始物料——化合物324D和3-氨基-2-羟基-4-苯基-丁酰胺(274D)制备化合物324(27.9mg，收率：62.3％，黄色固体)。化合物324：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.16(d,J＝7.3Hz,1H),9.56(s,1H),8.84(d,J＝5.1Hz,2H),8.13(s,1H),7.88(s,1H),7.66(t,J＝5.0Hz,1H),7.27-7.05(m,5H),5.51(dt,J＝5.0,7.6Hz,1H),3.21(dd,J＝4.9,14.1Hz,1H),3.00(dd,J＝7.8,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+366.1。
实施例181
(S)-N-((S)-4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-苯基吡咯烷-2-甲酰胺(308)
在N2气氛下，将L-脯氨酸(1.15g，1当量)和碘苯(2.04g，1当量)、K2CO3(2.07g，1.5当量)和CuI(0.19g，0.1当量)在DMA(15mL)中的混合物加热至90℃保持48小时。冷却至室温后，将反应混合物用乙酸乙酯和水稀释，用HCl调节pH至约3。分离有机层，水层用乙酸乙酯萃取(5次)。将合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。将残余物在ISCO上纯化，得到化合物酸308A。
如实施例5，由酸——中间体化合物308A制备化合物308。1H NMR(400MHz,DMSO)：1HNMR(400MHz,DMSO)：δ8.3-7.5(m,2H),7.38-7(m,7H),6.7-6.2(m,4H),5.2(m,0.5H),4.35(m,0.5H),3.9-3.3(m,3H),3.2-2.8(m,2H)2.2-1.7(m,4H)ppm。MS(ESI)m/z(M+H)+356.9。
实施例182
化合物325-327
使用与前面对化合物321所述相同的步骤，由相应的起始物料合成化合物325-327。
化合物325：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(间甲苯基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.42(br d,J＝7.3Hz,1H),8.17(br s,1H),7.92(br s,1H),7.49(s,1H),7.39-7.13(m,8H),5.55-5.43(m,1H),3.20(br dd,J＝3.0,14.2Hz,1H),2.85(br dd,J＝10.0,14.0Hz,1H),2.30(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+395.1。
化合物326：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(邻甲苯基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.52(br d,J＝7.7Hz,1H),7.39-7.32(m,1H),7.31-7.19(m,6H),7.13(br d,J＝6.6Hz,2H),6.71(br s,1H),5.66(dt,J＝5.3,7.5Hz,1H),5.59(br s,1H),3.41(dd,J＝5.1,14.1Hz,1H),3.18(dd,J＝7.3,14.1Hz,1H),2.17-2.01(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+395.1。
化合物327：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2-氟苯基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.58-7.41(m,3H),7.33-7.21(m,4H),7.19-7.08(m,3H),6.74(br s,1H),5.79-5.68(m,1H),5.65(br s,1H),3.50-3.37(m,1H),3.36-3.23(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+399.1。
实施例183
化合物328-329
使用与前面对化合物317所述相同的步骤，由相应的起始物料合成化合物328-329。
使用与化合物317中相同的步骤，使用3-溴-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯和(3-氟苯基)硼酸经由中间体545和589合成化合物328。化合物328：(S)-3-(3-氟苯基)-1-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.57(s,1H),8.51(d,J＝8.0Hz,1H),8.08(s,1H),7.48-7.41(m,2H),7.37-7.29(m,1H),7.29-7.21(m,4H),7.21-7.09(m,2H),4.50-4.42(m,1H),3.88(s,3H),3.24-3.18(m,1H),2.85-2.77(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+352.1。
化合物329：(S)-1-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-3-(间甲苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.56(s,1H),8.35(d,J＝7.2Hz,1H),8.03(s,1H),7.42(s,1H),7.32(d,J＝7.6Hz,1H),7.29-7.18(m,5H),7.17-7.14(m,1H),7.12-7.07(m,1H),4.47-4.40(m,1H),3.86(s,3H),3.22-3.16(m,1H),2.85-2.78(m,1H),2.29-2.25(m,1H),2.27(s,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+348.1。
实施例184
化合物330
使用与前面对化合物317所述相同的步骤，由中间体250D合成化合物330。
化合物330：(S)-1-环丙基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CD3CN)δ9.59(s,1H),7.92(s,1H),7.56-7.08(m,10H),6.65(s,1H),4.58-4.44(m,1H),3.77-3.58(m,1H),3.30-3.15(m,1H),2.95-2.86(m,1H),1.15-0.99(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+360.1。
实施例185
化合物331-333、415-424
使用与前面对化合物168所述相同的步骤，由中间体32F合成化合物331-333。
化合物331：(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-(间甲苯基)丁-2-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.25(d,J＝7.3Hz,1H),8.09-8.01(m,2H),7.80(s,1H),7.61-7.56(m,2H),7.40-7.22(m,3H),6.85(s,3H),5.28(br s,1H),3.90(s,3H),3.11-3.04(m,1H),2.77-2.68(m,1H),2.22(s,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+405.2。
化合物332：(S)-N-(1-氨基-1,2-二氧代戊烷-3-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.26(br d,J＝6.8Hz,1H),8.19(s,1H),8.02(br s,1H),7.76(br s,1H),7.69(br d,J＝7.0Hz,2H),7.39-7.28(m,3H),4.95(br t,J＝10.0Hz,1H),3.91(s,3H),1.90-1.75(m,1H),1.66-1.50(m,1H),0.94(t,J＝7.3Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+315.1。
化合物333：N-((3S,4R)-1-氨基-4-甲基-1,2-二氧代己烷-3-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.19(s,1H),8.07-7.94(m,2H),7.75-7.59(m,3H),7.43-7.27(m,3H),5.06(t,J＝6.9Hz,1H),3.90(s,3H),2.11-1.88(m,1H),1.36(ddd,J＝3.9,7.3,13.7Hz,1H),1.20-1.04(m,1H),0.91-0.79(m,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+343.2。
化合物415(45mg，收率：60.98％)：(S)-N-(1-氨基-5-甲基-1,2-二氧代己烷-3-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.24(d,J＝6.8Hz,1H),8.14(s,1H),8.00(s,1H),7.73(s,1H),7.66(d,J＝7.4Hz,2H),7.35-7.26(m,3H),5.13-5.07(m,1H),3.88(s,3H),1.75-1.65(m,1H),1.51-1.42(m,2H),0.88(d,J＝6.6Hz,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+343.1。
化合物416(25mg，收率：34.6％)：(S)-N-(1-氨基-5,5-二甲基-1,2-二氧代己烷-3-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.26(d,J＝7.5Hz,1H),8.13-8.09(m,1H),8.04(s,1H),7.78-7.66(m,3H),7.38-7.28(m,3H),5.19(br t,J＝6.9Hz,1H),3.93-3.87(m,3H),1.61-1.46(m,2H),0.95(s,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+357.2。
化合物417(25mg，收率：71.7％)：N-(1-氨基-1,2-二氧代-5-苯基戊烷-3-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.44(d,J＝6.8Hz,1H),8.19(s,1H),8.00(s,1H),7.74(s,1H),7.68(d,J＝6.8Hz,2H),7.36-7.23(m,5H),7.22-7.14(m,3H),4.99-4.91(m,1H),3.90(s,3H),2.79-2.69(m,1H),2.67-2.59(m,1H),2.10-1.99(m,1H),1.87-1.76(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+391.2。
化合物418(25.1mg，收率：22.25％)：N-(4-氨基-1-(3,5-二氯苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47(d,J＝7.6Hz,1H),8.05(br.s,1H),7.98(s,1H),7.79(br.s,1H),7.55-7.44(m,3H),7.32-7.21(m,5H),5.25-5.17(m,1H),3.87(s,3H),3.19-3.11(m,1H),2.88-2.77(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+445.0。
化合物419(10mg，收率：17.6％)：(S)-N-(1-氨基-1,2-二氧代庚-3-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.23(br d,J＝6.6Hz,1H),8.15(s,1H),8.00(s,1H),7.74(s,1H),7.65(br d,J＝6.6Hz,2H),7.36-7.25(m,3H),5.07-4.93(m,1H),3.88(s,3H),1.79-1.67(m,1H),1.57-1.44(m,1H),1.37-1.20(m,4H),0.84(br t,J＝6.9Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+343.2。
化合物420(25mg，收率：38.7％)：(S)-N-(4-氨基-1-(4-甲氧基苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.04(s,1H),7.85-7.67(m,2H),7.66-7.46(m,3H),7.37-7.29(m,3H),7.17-7.09(m,2H),6.89-6.77(m,2H),5.33-5.24(m,1H),3.94-3.85(m,3H),3.76-3.71(m,3H),3.16-3.10(m,1H),2.88-2.80(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+407.1。
化合物421(10mg，收率：28.2％)：(S)-N-(4-氨基-1-(4-羟苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.25(br d,J＝7.3Hz,1H),8.06(s,2H),7.80(s,1H),7.60-7.52(m,2H),7.36-7.26(m,3H),7.03(d,J＝8.6Hz,2H),6.67(d,J＝8.6Hz,2H),5.28-5.17(m,1H),3.92-3.85(m,3H),3.03(dd,J＝4.1,13.8Hz,1H),2.73-2.68(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+393.1。
化合物422(20.3mg，收率：27.2％)：N-(1-氨基-6,6,6-三氟-1,2-二氧代己烷-3-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.54(brd,J＝6.8Hz,1H),8.20(s,1H),8.03(br s,1H),7.78(br s,1H),7.68(br d,J＝7.6Hz,2H),7.39-7.27(m,3H),5.00-4.90(m,1H),3.91(s,3H),2.43-2.36(m,2H),2.12-1.98(m,1H),1.87-1.72(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+1)+383.1。
化合物423(23mg，收率：35.5％)：(S)-N-(4-氨基-1-(1H-吲哚-3-基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.81(s,1H),8.18(d,J＝6.8Hz,1H),8.11-8.01(m,2H),7.80(s,1H),7.62(d,J＝7.6Hz,1H),7.56-7.46(m,2H),7.32(d,J＝7.6Hz,1H),7.28-7.21(m,3H),7.14-7.08(m,1H),7.08-7.02(m,1H),6.99-6.93(m,1H),5.39-5.31(m,1H),3.85(s,3H),3.30-3.23(m,1H),2.96-2.87(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+416.2。
化合物424(23.6mg，收率：24.48％)：N-(5-氨基-1,1,1-三氟-4,5-二氧代戊烷-3-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.78(d,J＝7.2Hz,1H),8.14-8.02(m,2H),7.81(s,1H),7.70-7.63(m,2H),7.39-7.29(m,3H),5.20-5.13(m,1H),3.91(s,3H),2.97-2.80(m,1H),2.74-2.60(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+1)+369.1。
实施例186
化合物334-340
使化合物317进行如将中间体98C转化为98D所用的反应条件，得到中间体334A(1.82g，收率89.9％)，为白色固体，将其不经纯化直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ8.17-8.05(m,1H),8.03-7.89(m,1H),7.51-7.40(m,2H),7.29-7.13(m,8H),6.89-6.76(m,1H),4.69-4.42(m,1H),4.40-4.26(m,1H),3.85(s,3H),3.10-2.94(m,1H),2.84-2.60(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+361.1。
在25℃下，向化合物334A(1.82g，5.1mmol)在MeOH(20mL)中的混合物中加入HCl/MeOH(20mL)。将混合物在25℃下搅拌15小时。在减压下除去反应混合物的溶剂后，加入MeOH(25mL)和H2O(25mL)，然后将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩以除去溶剂，得到化合物334B(2g，粗品)，为白色固体，将其不经纯化直接用于下一步骤。
在25℃下，向化合物334B(2g，5.1mmol)在THF(15mL)和MeOH(15mL)中的混合物中加入NaOH水溶液(2M，13mL)。将混合物在25℃下搅拌6小时。将反应混合物减压浓缩，以去除MeOH和THF。向混合物中加入H2O(10mL)，将混合物用TBME(10mL×2)洗涤，然后将水相用HCl水溶液(1M)酸化至pH约4-5。过滤沉淀物并干燥，得到化合物334C(1.33g，收率69.1％)，为白色固体，将其不经纯化直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ12.55(s,1H),8.03-7.93(m,1H),7.90-7.39(m,3H),7.32-7.14(m,8H),5.74-5.25(m,1H),4.54-4.36(m,1H),4.10-3.94(m,1H),3.85(d,J＝4.9Hz,3H),2.92-2.71(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+380.1。
使用与前面对化合物168所述相同的步骤，由中间体334C和相应的胺合成化合物334-340。
化合物334：(S)-1-甲基-N-(4-((噁唑-2-基甲基)氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.90(s,1H),7.64(s,1H),7.54-7.33(m,6H),7.22-7.12(m,3H),7.10(s,1H),6.84-6.77(m,2H),6.10(d,J＝6.0Hz,1H),5.60-5.46(m,1H),4.76-4.53(m,2H),3.92(s,3H),3.33-3.22(m,1H),2.96-2.87(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+458.2。
化合物335：(S)-N-(4-((2-(2-甲氧基乙氧基)乙基)氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.89(s,1H),7.53-7.45(m,2H),7.44-7.29(m,4H),7.18(s,3H),6.80(s,2H),6.09(d,J＝4.5Hz,1H),5.58(d,J＝4.8Hz,1H),3.91(s,3H),3.68-3.48(m,8H),3.38(s,3H),3.28(d,J＝10.3Hz,1H),2.97-2.84(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+479.2。
化合物336：(S)-1-甲基-N-(4-((2-(甲基氨基)-2-氧代乙基)氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.83(s,1H),7.58-7.32(m,6H),7.18(s,3H),6.82(s,2H),6.32(s,1H),6.11(s,1H),5.31(s,1H),4.15-3.80(m,5H),3.28-3.08(m,1H),2.93-2.64(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+448.2。
化合物337：(S)-N-(4-((2-(二甲基氨基)-2-氧代乙基)氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.92-7.79(m,2H),7.52-7.44(m,2H),7.44-7.33(m,3H),7.21-7.11(m,3H),6.85-6.74(m,2H),6.09(d,J＝6.3Hz,1H),5.62(q,J＝6.5Hz,1H),4.18-3.99(m,2H),3.91(s,3H),3.31-3.22(m,1H),3.01(d,J＝3.3Hz,6H),2.95-2.86(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+462.2。
化合物338：(S)-N-(4-((3-氨基-3-氧代丙基)氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.86(s,1H),7.52-7.46(m,2H),7.45-7.35(m,4H),7.21-7.13(m,3H),6.86-6.74(m,2H),6.08(d,J＝5.8Hz,1H),5.71(s,1H),5.58-5.46(m,1H),5.34(s,1H),3.91(s,3H),3.73-3.51(m,2H),3.24(dd,J＝4.8,14.1Hz,1H),2.86(dd,J＝7.8,14.3Hz,1H),2.49(t,J＝5.9Hz,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+448.2。
化合物339：(S)-N-(4-((2-氨基-2-氧代乙基)氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.83(s,1H),7.55-7.34(m,6H),7.22-7.14(m,3H),6.89-6.77(m,2H),6.33(s,1H),6.14(d,J＝4.6Hz,1H),5.52(s,1H),5.37-5.19(m,1H),4.12-4.02(m,1H),3.99-3.94(m,1H),3.90(s,3H),3.28-3.13(m,1H),2.99-2.77(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+434.2。
化合物340：(S)-(2-(3-(1-甲基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺基)-2-氧代-4-苯基丁酰氨基)乙基)氨基甲酰叔丁基酯：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.89(s,1H),7.50-7.35(m,5H),7.26-7.23(m,1H),7.20-7.13(m,3H),6.86-6.70(m,2H),6.09(d,J＝6.0Hz,1H),5.58-5.42(m,1H),4.97-4.82(m,1H),3.91(s,3H),3.48-3.39(m,2H),3.35-3.20(m,3H),2.93-2.85(m,1H),1.44(s,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+520.3。
实施例187
化合物341
使用与前面对化合物38所述相同的步骤，由2-肼基嘧啶合成化合物341C。
使用与前面对化合物317所述相同的步骤，由341C合成化合物341。化合物341：(S)-3-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1-(嘧啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.75(d,J＝1.8Hz,1H),8.70-8.60(m,3H),7.28-7.26(m,1H),7.25-7.16(m,5H),6.74(s,1H),5.00-4.94(m,1H),3.40-3.33(m,1H),3.32-3.24(m,1H),2.42-2.39(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H2O+H)+354.2。
实施例188
化合物342
使用与前面对化合物272所述相同的步骤，由2,2,3,3,3-五氟丙烷-1-胺盐酸盐合成化合物342。
化合物342：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(全氟乙基)-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.36(d,J＝7.7Hz,1H),8.10(s,1H),7.85(s,1H),7.48-7.34(m,4H),7.32-7.18(m,9H),5.31-5.24(m,1H),3.24-3.13(m,1H),2.85-2.69(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+481.1。
实施例189
化合物343
使用与前面对化合物153所述相同的步骤，由1-(3-(氨基甲基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯盐酸盐(343A)合成化合物343。化合物343：(S)-(3-(5-((4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)氨基甲酰基)-3-甲基-1H-吡唑-1-基)苄基)氨基甲酸苄基酯：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.14-9.05(m,0.4H),8.16-8.00(m,0.9H),7.93-7.82(m,1.3H),7.59-7.06(m,14.2H),7.00-6.87(m,0.5H),6.77-6.64(m,0.5H),6.31-6.50(m,0.9H),6.49-6.40(m,0.4H),6.29-6.17(m,0.4H),5.34-5.23(m,0.4H),5.04(s,1.9H),4.53-4.34(m,0.5H),4.31-4.09(m,1.9H),3.24-2.99(m,0.8H),2.90-2.63(m,1.4H),2.30-2.16(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+540.2。
实施例190
化合物344
使用与前面对化合物162所述相同的步骤，由1-(3-(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)苯基)-3-甲基-1H-吡唑-5-羧酸乙酯344A合成化合物344。化合物344：(S)-(3-(5-((4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)氨基甲酰基)-3-甲基-1H-吡唑-1-基)苄基)氨基甲酸苯基酯：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.14–9.08(m,1H),8.40-8.33(m,1H),8.13-8.04(m,1H),7.87(s,1H),7.45-7.09(m,13H),6.99-6.71(m,1H),6.60-6.20(m,1H),5.31-5.23(m,1H),4.46-3.97(m,2H),3.26-3.01(m,1H),2.90-2.68(m,1H),2.31-2.19(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+526.2。
实施例191
化合物345-346
使用化合物38和317的步骤，由2-肼基-3-甲基吡啶和2,4-二氧代戊酸甲酯制备化合物345和346。
化合物345：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(3-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.36(br d,J＝4.0Hz,1H),7.67(br d,J＝7.6Hz,1H),7.33-7.24(m,2H),7.18-7.05(m,5H),6.67(br s,1H),6.62(s,1H),5.69-5.60(m,1H),5.46(br s,1H),3.35(dd,J＝5.3,14.0Hz,1H),3.13(dd,J＝7.2,14.0Hz,1H),2.19(s,3H),2.12(s,3H)。
化合物346：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-1-(3-甲基吡啶-2-基)-1H-吡唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.23(br d,J＝4.6Hz,1H),7.67(d,J＝7.5Hz,1H),7.33(br d,J＝7.3Hz,1H),7.26-7.18(m,4H),7.01(br d,J＝3.7Hz,2H),6.68(br s,1H),6.57(s,1H),5.62(q,J＝6.5Hz,1H),5.50(br s,1H),3.34(dd,J＝5.3,14.1Hz,1H),3.17(dd,J＝6.5,14.2Hz,1H),2.34(s,3H),2.17(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+392.2。
实施例192
化合物347
将2-氯嘧啶(10g，87.3mmol)、1H-吡唑(7.73g，114mmol)和K2CO3(24.1g，175mmol)在DMF(150mL)中的混合物加热至120℃保持12小时。LCMS显示所需的MS。TLC(石油醚：乙酸乙酯＝3：1，Rf～0)显示新的点，冷却后，将混合物过滤，浓缩滤液，通过MPLC(石油醚：乙酸乙酯＝1：1)纯化残余物，得到化合物347A(10.4g，收率：81.5％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.76(d,J＝4.8Hz,2H),8.60(d,J＝2.4Hz,1H),7.84(s,1H),7.21(t,J＝4.8Hz,1H),6.51(s,1H)。
在-70℃下，向化合物347A(500mg，3.42mmol)的THF(10mL)溶液中滴加LDA(1M，4.45mL)，并搅拌10分钟，然后将二氧化碳鼓泡通入混合物30分钟，将混合物缓慢温热至15℃保持20分钟。向混合物中加入MTBE(20mL)和H2O(20mL)，用1N HCl将水层调节至pH约4并用乙酸乙酯(20mL×4)萃取，将有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到化合物347B(480mg，收率：73.8％)，为棕色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.49(br s,1H),8.94(d,J＝4.9Hz,2H),7.83(d,J＝1.8Hz,1H),7.63(t,J＝4.9Hz,1H),6.98(d,J＝1.8Hz,1H)。
将化合物347B(200mg，1.05mmol)和NCS(154mg，1.16mmol)在DMF(3mL)中的混合物加热至90℃保持4小时。LCMS显示所需的MS，通过制备型HPLC(TFA)纯化混合物，得到化合物347C(0.2g，收率：56.5％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ14.05(br s,1H),8.96(d,J＝4.9Hz,2H),8.07(s,1H),7.66(t,J＝4.9Hz,1H)。
使用前面描述的用于将化合物321D转化为化合物321的相同步骤，由347C合成化合物394。化合物347：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-氯-1-(嘧啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(d,J＝7.3Hz,1H),8.67(d,J＝4.9Hz,2H),8.12(s,1H),7.96(s,1H),7.86(s,1H),7.46(t,J＝4.9Hz,1H),7.32-7.15(m,5H),5.50-5.38(m,1H),3.13(dd,J＝3.6,14.2Hz,1H),2.77(dd,J＝9.9,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+399.1。
实施例193
化合物348
使用与前面对实施例313所述相同的步骤，由2,3-二氟吡啶合成化合物348。化合物348：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(3-氟吡啶-2-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.97(d,J＝7.5Hz,1H),8.29(d,J＝4.6Hz,1H),8.07(s,1H),7.92-7.80(m,2H),7.57(td,J＝4.2,8.4Hz,1H),7.32-7.25(m,4H),7.21(dt,J＝2.5,6.1Hz,1H),6.91(s,1H),5.26-5.17(m,1H),3.16(dd,J＝3.3,13.9Hz,1H),2.91-2.79(m,1H),2.27(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+396.1。
实施例194
化合物349
使用与化合物347B所述相同的步骤，由3-(三氟甲基)-1H-吡唑制备化合物349B。
使用前面描述的用于将化合物347C转化为化合物347的相同步骤，由349B合成化合物394。化合物349：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(嘧啶-2-基)-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.69(br s,2H),8.11(br s,1H),7.33(br s,1H),7.38-7.31(m,1H),7.24(br s,4H),7.15-7.08(m,1H),7.15-7.08(m,1H),7.15-7.01(m,1H),6.77(br s,1H),5.82(br s,1H),5.63(br s,1H),3.47(br s,1H),3.35(br s,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+433.1。
实施例195
化合物350、457
将2-氯嘧啶(15g，131mmol)、NH2NH2.H2O(30mL)、K2CO3(15g，109mmol)的混合物在100℃下搅拌30分钟。将混合物用冰冷却，过滤收集得到的粗结晶。用冷水洗涤晶体，空气干燥，并从石油醚(15mL)中重结晶，得到化合物350A(14.4g，131mmol，收率：99.8％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.30(d,J＝4.8Hz,2H),8.12(br s,1H),6.59(t,J＝4.7Hz,1H),4.13(s,2H)。
在15℃下，向化合物350A(2g，18.2mmol)和Na(1.46g，63.6mmol)在EtOH(60mL)中的混合物中加入马来酸二乙酯(3.75g，21.8mmol)。将混合物在60℃下搅拌3小时。将反应冷却至15℃并用乙酸淬灭至pH约7。将混合物浓缩，得到残余物。通过制备型HPLC(TFA条件)纯化残余物，得到化合物350B(3.5g，14.8mmol，收率：81.6％)，为棕色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.49(d,J＝4.9Hz,2H),6.85(t,J＝5.0Hz,1H),5.23(dd,J＝4.2,11.0Hz,1H),4.33-4.20(m,2H),3.41-3.28(m,1H),3.01(dd,J＝4.2,17.6Hz,1H),2.05-1.96(m,1H),1.32-1.21(m,3H)。
向化合物350B(3.5g，14.8mmol)在MeCN(40mL)中的混合物中加入POCl3(2.73g，17.8mmol，1.65mL)。将混合物在80℃下搅拌12小时。将反应混合物浓缩。将残余物倒入饱和NaHCO3(30mL)中并搅拌10分钟。用乙酸乙酯(50mL×4)萃取水相。将合并的有机相用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝0：1至1：1)纯化残余物，得到化合物350C(900mg，收率：23.9％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.44(d,J＝4.9Hz,2H),6.75(t,J＝4.9Hz,1H),5.11(dd,J＝6.5,12.7Hz,1H),4.27-4.16(m,2H),3.56(dd,J＝12.7,18.0Hz,1H),3.21(dd,J＝6.6,18.1Hz,1H),1.23(t,J＝7.2Hz,3H)。
向化合物350C(900mg，3.53mmol)在MeCN(15mL)中的混合物中加入MnO2(3.07g，35.3mmol)。将混合物在80℃下搅拌12小时。过滤反应混合物，浓缩滤液。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：0至0：1)纯化残余物，得到化合物350D(215mg，收率：24.1％)，为棕色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.81(d,J＝4.9Hz,2H),7.36(t,J＝4.9Hz,1H),6.80(s,1H),4.35(q,J＝7.2Hz,2H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H)。
使用前面描述的用于将化合物38B转化为化合物38的相同步骤，由中间体350D合成化合物350。化合物350：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-氯-1-(嘧啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.23(d,J＝7.3Hz,1H),8.78(d,J＝4.9Hz,2H),8.09(s,1H),7.85(s,1H),7.55(t,J＝4.9Hz,1H),7.33-7.19(m,5H),6.84(s,1H),5.35-5.25(m,1H),3.16(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.82(dd,J＝10.0,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+399.1。
使用与前面对化合物350所述相同的步骤，由中间体350E和3-氨基-N-环丙基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐合成化合物457。化合物457(70.21g，收率：70.32％)：3-氯-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(嘧啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.29(d,J＝7.5Hz,1H),8.84(d,J＝5.1Hz,1H),8.77(d,J＝4.9Hz,2H),7.56(t,J＝4.7Hz,1H),7.32-7.20(m,5H),6.90(s,1H),5.36-5.29(m,1H),3.16(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.83(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H),2.79-2.72(m,1H),0.71-0.56(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+439.1。
实施例196
化合物351
使用前面描述的用于将化合物321D转化为化合物321的相同步骤，由341C合成化合物351。化合物341：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲基-1-(嘧啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.05(d,J＝7.2Hz,1H),8.71(d,J＝4.8Hz,2H),8.07(s,1H),7.83(s,1H),7.47-7.42(m,1H),7.32-7.17(m,5H),6.56(s,1H),5.29-5.21(m,1H),3.16-3.08(m,1H),2.85-2.77(m,1H),2.25(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+379.0。
实施例197
化合物352
使用化合物345和321的步骤，由2-氯-4-肼基嘧啶和2,4-二氧代戊酸乙酯制备化合物352。化合物352：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2-环丙基嘧啶-4-基)-3-甲基-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.10(brd,J＝7.0Hz,1H),8.62(d,J＝5.5Hz,1H),8.12(br s,1H),7.87(br s,1H),7.45(d,J＝5.5Hz,1H),7.35-7.19(m,5H),6.44(s,1H),5.56-5.48(m,1H),3.18(br dd,J＝3.8,13.8Hz,1H),2.81(br dd,J＝9.8,13.8Hz,1H),2.28(s,3H),2.00-1.90(m,1H),0.94-0.67(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+419.2。
实施例198
化合物353
使用与前面描述的用于合成化合物322的相同步骤，由254D合成化合物353。化合物353：(S)-4-(3-氟苯基)-2-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.71(s,1H),8.05-7.94(m,2H),7.43-7.27(m,4H),7.21(br d,J＝6.8Hz,2H),7.13-7.05(m,1H),6.89-6.84(m,1H),4.98-4.90(m,1H),3.37-3.31(m,1H),3.29-3.20(m,1H),2.55(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H2O+H)+353.1。
实施例199
化合物354
使用化合物213D的步骤制备化合物354D。在0℃和N2气氛下，向化合物354D(2.50g，6.82mmol)和2,6-二甲基吡啶(6.36mL，54.56mmol)的DCM(25mL)溶液中加入三甲基甲硅烷基三氟甲磺酸酯(7.40mL，40.92mmol)。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌0.25小时，然后在20℃下搅拌3小时。将反应混合物冷却至0℃并加入冷却的饱和NH4Cl(50mL)中，然后用EtOAc(100mL×2)萃取混合物，将合并的萃取液用饱和NaHCO3(100mL)洗涤，然后将混合物用Na2SO4干燥并过滤，将滤液真空浓缩，得到化合物354E(2.50g，粗品)，为红色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+339.1。
在0℃下，向化合物354E(2.50g，7.39mmol)的MeOH(40mL)溶液中加入TMSCl(1.50mL，11.87mmol)。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌0.5小时。将TEA加入到反应混合物中至pH约8，然后将混合物真空浓缩，得到粗化合物354F(2.50g，粗品)，为红色固体。MS(ESI)m/z(M+H)+266.9。
在0-10℃下，向化合物107B(700mg，3.45mmol)、化合物354F(1.01g，3.80mmol)和HBTU(1.57g，4.13mmol)的DMF(40mL)溶液中加入DIEA(2.41mL，13.78mmol)。添加后，将反应混合物在20℃下搅拌2小时。向反应混合物中加入5mL水，将混合物真空浓缩，除去大部分DMF。然后向混合物中加入100mL水和80mL EtOAc并搅拌2分钟。分离混合物，水层用EtOAc(80mL)萃取。将合并的萃取液用0.3N HCl(80mL×2)、饱和NaHCO3(80mL×2)和盐水(80mL)洗涤。然后将混合物用Na2SO4干燥并过滤，将混合物真空浓缩，得到粗产物。通过制备型HPLC(中性条件)纯化残余物，得到化合物354G(1.0g，收率63.55％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.12-7.55(m,3H),7.45-7.25(m,5H),7.22-7.05(m,2H),6.91-6.77(m,2H),6.10-5.84(m,1H),4.64-4.46(m,1H),4.11-3.99(m,1H),2.94-2.80(m,1H),2.79-2.61(m,1H),2.56-2.52(m,3H),1.23-1.17(m,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+452.1。
在0℃和N2气氛下，向化合物354G(863.1mg，1.91mmol)的DCM(200mL)溶液中加入DMP(3.24g，7.65mmol)。添加后，将反应混合物在10℃下搅拌1小时。向反应混合物中加入50mL的饱和Na2S2O3和50mL的NaHCO3，将混合物搅拌20分钟。然后分离混合物，用50mL饱和Na2S2O3和50mL NaHCO3洗涤有机层，然后用水(80mL)、盐水(80mL)洗涤。将混合物经Na2SO4干燥并过滤，然后将混合物真空浓缩，得到化合物354H(640mg，收率74.45％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.77(d,J＝7.5Hz,1H),8.17-7.94(m,3H),7.87-7.74(m,1H),7.45-7.31(m,3H),7.16(d,J＝8.4Hz,2H),6.88-6.81(m,2H),5.45-5.31(m,1H),3.18-3.05(m,1H),2.99-2.86(m,1H),2.55-2.49(m,3H),1.23-1.18(m,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+448.2。
在0℃下，向化合物354H(440mg，978.87μmol)的DCM(30mL)溶液中加入HCl/EtOAc(4M，22mL)。添加后，将反应混合物在10℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩，将残余物溶于80mL EtOAc中，将混合物用水(80mL)、0.1％NaHCO3(80mL)和盐水(80mL)洗涤。然后将混合物用Na2SO4干燥并过滤，然后真空浓缩，得到化合物354。将化合物354(650mg，1.49mmol)溶解于3mL CH3CN中，并将15mL的2-异丙氧基丙烷加入到搅拌的混合物中。之后，将混合物过滤，得到纯的化合物354(450mg，收率71.40％)，为浅黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.25(s,1H),8.70(d,J＝7.5Hz,1H),8.11(s,1H),8.07-8.00(m,2H),7.84(s,1H),7.42-7.36(m,3H),7.08(d,J＝8.5Hz,2H),6.67(d,J＝8.5Hz,2H),5.45-5.29(m,1H),3.13-3.05(m,1H),2.93-2.84(m,1H),2.56(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+394.1。
实施例200
化合物355
在0℃和N2气氛下，向化合物354(40mg，101.68μmol)和吡啶(19mg，233.86μmol)的DCM(2mL)溶液中加入Tf2O(34mg，122.02μmol)的DCM(0.5mL)溶液。添加后，将反应混合物在0℃下搅拌4小时。将反应混合物用EtOAc(50mL)稀释，将混合物用0.2N HCl(20mL)、NaHCO3(20mL)和盐水(20mL)洗涤，然后将混合物用Na2SO4干燥并过滤，将混合物真空浓缩，得到化合物355(40mg，收率63.64％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.89(d,J＝7.5Hz,1H),8.09(s,1H),8.01-7.95(m,2H),7.82(s,1H),7.47-7.42(m,2H),7.42-7.38(m,2H),7.37-7.32(m,3H),5.44-5.28(m,1H),3.26-3.21(m,1H),3.06-2.96(m,1H),2.52(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+526.1。
实施例201
化合物356
向喹喔啉-2-羧酸(6g，34.45mmol)的MeOH(80mL)溶液中滴加浓H2SO4(675.8mg，6.89mmol)，然后将混合物在65℃下搅拌10小时。冷却至室温后，将混合物用饱和NaHCO3中和，并用DCM(60mL×3)萃取。将有机相合并，用无水Na2SO4干燥，蒸发，得到化合物356A(5.80g，收率：89.47％)，为棕色固体。粗产物不经进一步纯化直接用于下一步。1H NMR(CDCl3,400MHz)δ9.56(s,1H),8.31(d,J＝7.6Hz,1H),8.20(d,J＝8.0Hz,1H),7.97-7.84(m,2H),4.13(s,3H)。
向化合物356A(2.5g，13.29mmol)的CH3COOC2H5(60mL)溶液中加入t-BuOK(1.94g，17.28mmol)。将混合物在25℃下搅拌0.25小时。将混合物用H2O(50mL)淬灭。分离有机层，水层用EA(50mL×3)萃取。将有机相合并，用无水Na2SO4干燥，过滤并蒸发。通过快速色谱(PE：EA＝20/1至10/1)纯化残余物，得到化合物356B(2.45g，75.48％收率)，为淡黄色固体。1HNMR(CDCl3,400MHz)δ9.57-9.33(m,1H),8.19-8.06(m,2H),7.96-7.74(m,2H),4.35-4.26(m,2H),4.24-4.13(m,2H),1.28-1.18(m,3H)。
在N2气氛下，向2,4-二硝基苯磺酸(7.83g，29.41mmol，H2O)和碘苯(5g，24.51mmol)在CHCl3(20mL)中的混合物中加入m-CPBA(4.23g，24.51mmol)，将混合物在25℃下搅拌2小时。反应后，向反应混合物中加入MTBE(20mL)，将所得混合物过滤，用MTBE(30mL)洗涤固体。将所得混合物过滤，用MTBE(30mL)洗涤固体，得到化合物356C(8.7g，75.82％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.60(br s,1H),8.53(d,J＝2.0Hz,1H),8.39-8.36(m,1H),8.18(d,J＝7.6Hz,2H),8.07(d,J＝8.8Hz,1H),7.71-7.64(m,1H),7.63-7.55(m,2H)。
将化合物356C(3.49g，7.45mmol)和化合物356B(1.4g，5.73mmol)的混合物在80℃下搅拌1小时，并向混合物中加入乙酰胺(4.06g，68.76mmol)，然后在微波辐射下将混合物在120℃下搅拌1小时。将反应混合物减压浓缩以除去溶剂，减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至0：1)纯化残余物，得到化合物356D(300mg，粗品)，为暗红色固体。MS(ESI)m/z(M+H)+284.1。
使用前面描述的用于将化合物321C转化为化合物321的相同步骤，由356D合成化合物356。化合物356：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-4-(喹喔啉-2-基)噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.39(d,J＝8.4Hz,1H),9.58(s,1H),8.24(br s,1H),8.12(d,J＝8.0Hz,1H),7.95(br s,1H),7.89(t,J＝7.6Hz,1H),7.76(t,J＝7.6Hz,1H),7.60(d,J＝8.4Hz,1H),6.98-6.86(m,4H),6.85-6.78(m,1H),5.90-5.78(m,1H),3.27-3.19(m,2H),2.59(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+430.1。
实施例202
化合物357
使用前面描述的用于将化合物321D转化为化合物321的相同步骤，由107B合成化合物357。化合物357：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.12-8.05(m,2H),7.43-7.37(m,3H),7.32-7.26(m,3H),7.15-7.10(m,2H),6.78-6.71(m,2H),5.75-5.68(m,1H),5.54(br s,1H),3..50–3.38(m,1H),3.29-3.18(m,1H),2.55(s,3H)。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.82(d,J＝7.2Hz,1H),8.15-7.92(m,3H),7.86(s,1H),7.41-7.35(m,3H),7.32-7.26(m,4H),7.25-7.17(m,1H),5.48-5.38(m,1H),3.27-3.15(m,1H),3.06-2.93(m,1H),2.55(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+378.1。
实施例203
化合物358-359
使用与前面对化合物255所述相同的步骤合成化合物358和359。化合物358：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2-氟苯基)-2-(三氟甲基)噁唑-5-甲酰胺：1HNMR(CDCl3,400MHz)δ7.52(t,J＝7.6Hz,1H),7.45-7.35(m,1H),7.28-7.20(m,3H),7.19-7.07(m,2H),7.02(d,J＝7.6Hz,2H),6.68(d,J＝4.8Hz,2H),5.70-5.60(m,1H),5.49(br s,1H),3.42-3.32(m,1H),3.24-3.14(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+450.1。化合物359：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(邻甲苯基)-2-(三氟甲基)噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.43-7.34(m,1H),7.33-7.26(m,2H),7.25-7.19(m,4H),6.92(br s,2H),6.69(br s,1H),6.44(d,J＝6.4Hz,1H),5.66-5.58(m,1H),5.50(br s,1H),3.41-3.28(m,1H),3.08-2.97(m,1H),2.21(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+446.1。
实施例204
化合物360
使用与前面对化合物26所述相同的步骤合成化合物360。化合物360：N-((2S)-4-氨基-3-羟基-4-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.19-7.58(m,3H),7.47-7.34(m,5H),7.32-7.26(m,2H),7.25-7.06(m,3H),6.16-5.82(m,1H),4.73-4.39(m,1H),4.06-3.88(m,1H),3.04-2.65(m,2H),2.59-2.53(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+380.0。
实施例205
化合物361
使用与前面对化合物267所述相同的步骤，由3-(2,3-二氟苯基)-3-氧代丙酸乙酯合成化合物361。化合物361：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2,3-二氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(CDCl3,400MHz)δ7.36-7.27(m,3H),7.26-7.17(m,2H),7.15-7.06(m,3H),6.78-6.63(m,2H),5.74-5.62(m,1H),5.55(br s,1H),3.42(dd,J＝5.5,14.3Hz,1H),3.25(dd,J＝6.6,14.3Hz,1H),2.57(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+414.1。
实施例206
化合物362-377、462-468
使用与前面对化合物321所述相同的步骤，由相应中间体或中间体321B合成化合物362-377、462-468。
化合物362(35.2mg，47.49％收率，94％纯度，EE％：97％)：(S)-N-(4-氟-3-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(4-((丙-2-炔-1-基氧基)甲基)苯基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.50-9.40(m,1H),9.45(d,J＝7.7Hz,1H),7.50(d,J＝8.2Hz,2H),7.38-7.22(m,7H),5.44-5.14(m,2H),4.99-4.88(m,1H),4.58(s,2H),4.23(d,J＝2.4Hz,2H),3.53(t,J＝2.3Hz,1H),3.21(dd,J＝4.1,14.2Hz,1H),2.89(dd,J＝10.5,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+438.1,(M+Na)+460.0。
化合物363(39.2mg，36.85％收率，94％纯度)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(4-((4-氟苯甲酰氨基)甲基)苯基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.44(d,J＝7.7Hz,1H),9.14(t,J＝6.0Hz,1H),8.21(s,1H),8.06-7.97(m,2H),7.93(s,1H),7.51(d,J＝8.2Hz,2H),7.37-7.23(m,8H),7.20-7.12(m,1H),5.60-5.44(m,1H),4.52(d,J＝6.0Hz,2H),3.24(dd,J＝3.2,14.0Hz,1H),2.85(dd,J＝10.3,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+532.2。
化合物364(27.5mg，26.56％收率，96％纯度)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-氯-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(d,J＝7.5Hz,1H),8.19(s,1H),7.92(s,1H),7.49-7.19(m,5H),5.47(ddd,J＝3.9,7.7,9.6Hz,1H),3.24(dd,J＝3.9,14.0Hz,1H),2.95(dd,J＝9.8,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+339.0。
化合物365(60mg，39.4％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(吡嗪-2-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.23(d,J＝7.3Hz,1H),9.06(d,J＝1.5Hz,1H),8.69(d,J＝2.4Hz,1H),8.51(dd,J＝1.5,2.4Hz,1H),8.13(s,1H),7.87(s,1H),7.29-7.14(m,6H),5.47(ddd,J＝4.1,7.6,9.3Hz,1H),3.16(dd,J＝4.0,14.1Hz,1H),2.87(dd,J＝9.3,14.3Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+383.1。
化合物366(50mg，36.9％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-溴-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.23(d,J＝7.5Hz,1H),8.18(s,1H),7.91(s,1H),7.35-7.17(m,4H),5.54-5.41(m,1H),3.23(dd,J＝3.9,14.2Hz,1H),2.95(dd,J＝9.7,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+383.0。
化合物367(50mg，18.43％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.92(d,J＝8.0Hz,1H),7.94-7.52(m,2H),7.36-7.18(m,5H),7.08-6.93(m,2H),6.92-6.79(m,1H),5.87(d,J＝10.0Hz,2H),5.55-5.38(m,1H),3.23(dd,J＝3.5,14.1Hz,1H),3.03-2.97(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+425.1。
化合物368(130mg，60.3％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2-氟-3-甲基苯基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(d,J＝7.7Hz,1H),8.12(s,1H),7.87(s,1H),7.39(t,J＝6.9Hz,1H),7.31-7.19(m,6H),7.17-7.10(m,1H),5.42(ddd,J＝3.7,7.7,9.7Hz,1H),3.19(dd,J＝3.7,14.1Hz,1H),2.96(dd,J＝9.7,13.9Hz,1H),2.22(d,J＝2.0Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+413.1。
化合物369(55mg，27.8％收率)：N-(4-氨基-3-羟基-4-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(4-((苄氧基)甲基)苯基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45(d,J＝7.5Hz,1H),8.21(s,1H),7.94(s,1H),7.63-7.52(m,2H),7.44-7.16(m,12H),5.54-5.49(m,1H),4.62-4.56(m,4H),3.24(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.86(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+501.1。
化合物370(55mg，20.1％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(3-((苄氧基)甲基)苯基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.42(d,J＝7.7Hz,1H),8.18(s,1H),7.93(s,1H),7.71(s,1H),7.49-7.43(m,2H),7.42-7.33(m,5H),7.32-7.24(m,5H),7.24-7.19(m,1H),6.49-6.39(m,1H),5.55-5.48(m,1H),4.55(d,J＝5.7Hz,4H),3.22(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.88(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H2O)+518.2。
化合物371(90mg，63.2％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(吡啶-4-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.47(d,J＝7.8Hz,1H),8.65-8.55(m,2H),8.21(s,1H),7.95(s,1H),7.52-7.38(m,2H),7.33-7.22(m,5H),6.53-6.39(m,1H),5.55-5.47(m,1H),3.28-3.22(m,1H),2.92-2.83(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+382.1。
化合物372(50mg，22.8％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2,3-二氟苯基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.24(d,J＝7.6Hz,1H),8.12(s,1H),7.86(s,1H),7.59-7.50(m,1H),7.29-7.16(m,7H),5.44-5.37(m,1H),3.21-3.14(m,1H),2.98-2.90(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+417.1。
化合物373(85mg，44.6％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(吡啶-2-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.36(d,J＝7.1Hz,1H),8.42(d,J＝5.6Hz,1H),8.10(s,1H),7.97-7.79(m,3H),7.50-7.34(m,1H),7.21(s,5H),5.54-5.46(m,1H),3.20-3.11(m,1H),2.90(dd,J＝8.8,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+382.1。
化合物374(100mg，49.9％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(嘧啶-4-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.27(d,J＝7.5Hz,1H),9.05(d,J＝1.3Hz,1H),8.94(d,J＝5.1Hz,1H),8.14(s,1H),7.94-7.83(m,2H),7.28-7.16(m,5H),5.50(ddd,J＝4.2,7.5,9.3Hz,1H),3.18(dd,J＝4.1,14.2Hz,1H),2.88(dd,J＝9.5,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+383.1。
化合物375(60mg，28.5％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(3-氟-2-甲基苯基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.19(d,J＝8.0Hz,1H),8.10(s,1H),7.84(s,1H),7.27-7.15(m,7H),6.98-6.94(m,1H),5.39-5.31(m,1H),3.18-3.12(m,1H),2.93-2.85(m,1H),1.87-1.83(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+413.1。
化合物376(300mg，47.9％收率)：(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.46(d,J＝8.0Hz,1H),8.22(s,1H),7.95(s,1H),7.58(d,J＝6.8Hz,2H),7.50-7.45(m,1H),7.44-7.38(m,2H),7.35-7.24(m,5H),5.56-5.49(m,1H),3.29-3.21(m,1H),2.93-2.83(m,1H).(ESI)m/z(M+H)+381.1。
化合物377(80mg，39.9％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(吡啶-3-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.39(d,J＝7.7Hz,1H),8.82(d,J＝2.2Hz,1H),8.65(dd,J＝1.5,4.9Hz,1H),8.19(s,1H),7.96-7.82(m,2H),7.43(dd,J＝4.9,7.9Hz,1H),7.33-7.20(m,5H),5.53-5.45(m,1H),3.23(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.90(dd,J＝10.0,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+382.1。
化合物462(150mg，73.8％收率)：N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45(d,J＝7.7Hz,1H),8.91(br d,J＝5.1Hz,1H),7.57(d,J＝7.1Hz,2H),7.50-7.43(m,1H),7.42-7.34(m,2H),7.34-7.25(m,5H),5.59-5.48(m,1H),3.24(dd,J＝3.1,13.9Hz,1H),2.93-2.76(m,2H),0.72-0.59(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+421.1。
使用与化合物321相同的步骤，由相应的中间体——4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-羧酸和3-氨基-2-羟基-5-苯基戊酰胺盐酸盐制备化合物463。化合物463(120mg，35％收率)：N-(1-氨基-1,2-二氧代-5-苯基戊烷-3-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.49(br d,J＝7.1Hz,1H),8.14(br s,1H),7.91-7.78(m,3H),7.56-7.45(m,3H),7.33-7.25(m,2H),7.22-7.15(m,3H),5.15(brt,J＝6.6Hz,1H),2.77-2.58(m,2H),2.21-2.08(m,1H),1.96-1.81(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+395.1。
使用与化合物321相同的步骤，由相应的中间体——4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-羧酸和3-氨基-4-(4-氟苯基)-2-羟基丁酰胺盐酸盐制备化合物464。化合物464(120mg，47％收率)：N-(4-氨基-1-(4-氟苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.45(d,J＝6.4Hz,1H),8.20(s,1H),7.94(s,1H),7.56(d,J＝7.1Hz,2H),7.50-7.37(m,3H),7.31(s,2H),7.18-7.05(m,2H),5.47(s,1H),3.29-3.15(m,1H),2.91-2.78(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+399.0。
使用与化合物321相同的步骤，由相应的中间体——4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-羧酸和3-氨基-2-羟基-5-甲基已酰胺盐酸盐制备化合物465。化合物465(110mg，38.2％收率)：N-(1-氨基-5-甲基-1,2-二氧代己烷-3-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.32(d,J＝6.6Hz,1H),8.14(s,1H),7.95-7.69(m,3H),7.51(s,3H),5.30(s,1H),1.78-1.39(m,3H),0.90(dd,J＝5.8,15.3Hz,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+347.1。
使用与化合物321相同的步骤，由相应的中间体——4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-羧酸和3-氨基-4-(3,5-二甲基苯基)-2-羟基丁酰胺盐酸盐制备化合物466。化合物466(70mg，39.2％收率)：N-(4-氨基-1-(3,5-二甲基苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.40(d,J＝7.5Hz,1H),8.19(s,1H),7.92(s,1H),7.62(d,J＝7.3Hz,2H),7.53-7.35(m,3H),6.89(s,3H),5.56-5.40(m,1H),3.20-3.08(m,1H),2.85-2.71(m,1H),2.21(s,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+409.1。
使用与化合物321相同的步骤，由相应的中间体——4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-羧酸和3-氨基-2-羟基庚酰胺盐酸盐制备化合物467。化合物467(80mg，73％收率)：N-(1-氨基-1,2-二氧代庚-3-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.31(br d,J＝7.0Hz,1H),8.14(br s,1H),7.94-7.69(m,3H),7.58-7.43(m,3H),5.30-5.15(m,1H),1.82(br d,J＝7.5Hz,1H),1.57(br d,J＝4.8Hz,1H),1.40-1.39(m,1H),1.36-1.22(m,1H),1.36-1.20(m,3H),0.88-0.81(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+347.1。
使用与化合物321相同的步骤，由相应的中间体——4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-羧酸和3-氨基-2-羟基丁酰胺盐酸盐制备化合物468。化合物468(70mg，54.2％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代丁烷-2-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.40(d,J＝6.4Hz,1H),8.12(br s,1H),7.92-7.75(m,3H),7.58-7.43(m,3H),5.25-5.18(m,1H),1.36(d,J＝7.3Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+305.1。
实施例207
化合物378、578、599
向6-溴异吲哚啉-1-酮(0.5g，2.36mmol)的丙酮(20mL)溶液中加入BnBr(605mg，3.54mmol，0.420mL)、Cs2CO3(1.92g，5.90mmol)和18-冠-6(62mg，235.80μmol)，然后将混合物在70℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩以除去溶剂，然后用水(50mL)稀释，用EA(40mL×2)萃取，有机层用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱(12g Silica Flash Column，洗脱液为0～20％乙酸乙酯/石油醚梯度@30mL/min)纯化残余物。得到化合物378A(0.46g，收率59.5％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.02(d,J＝1.8Hz,1H),7.63(dd,J＝1.9,8.0Hz,1H),7.39-7.16(m,6H),4.79(s,2H),4.21(s,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+302.0。
向化合物378A(0.46g，1.52mmol)和4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧杂环戊硼烷)(580mg，2.28mmol)的二噁烷(20mL)溶液中加入KOAc(299mg，3.04mmol)，然后在N2气氛下加入Pd(dppf)Cl2(111mg，152.23μmol)，将混合物在85℃下搅拌16小时。将反应混合物用EA(20mL)稀释，然后过滤并用EA(20mL×3)洗涤，将滤液浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱(12g Silica Flash Column，洗脱液为0～30％乙酸乙酯/石油醚梯度@30mL/min)纯化残余物。然后通过制备型TLC(PE：EA＝2：1)进一步纯化。得到化合物378B(0.35g，收率：46.1％)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.98(t,J＝0.9Hz,1H),7.86(dd,J＝1.1,7.5Hz,1H),7.57(dd,J＝0.9,7.5Hz,1H),7.38-7.32(m,2H),7.31-7.23(m,3H),4.77-4.69(m,2H),4.39(s,2H),1.31(s,12H)。MS(ESI)m/z(M+H)+349.9。
向4-溴-1,2,5-噻二唑-3-羧酸甲酯(186mg，835.17μmol)和化合物378B(0.35g，1.00mmol)在二噁烷(20mL)和H2O(2mL)中的溶液中加入K2CO3(231mg，1.67mmol)，加入在N2气氛下加入Pd(dppf)Cl2(61mg，83.52μmol)，然后在N2气氛下将混合物在85℃下搅拌16小时。将反应混合物用EA(30mL)稀释，然后过滤并浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱(12g Silica Flash Column，洗脱液为0～30％乙酸乙酯/石油醚梯度@30mL/min)纯化残余物。得到化合物378C(0.13g，收率：37.3％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.20(d,J＝1.8Hz,1H),7.87(dd,J＝1.8,7.9Hz,1H),7.51(d,J＝7.7Hz,1H),7.41-7.28(m,5H),4.84(s,2H),4.35(s,2H),4.03-3.95(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+366.0。
使用与前面对化合物321所述相同的步骤，由378C合成化合物378。化合物378(20mg，13.5％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2-苄基-3-氧代异吲哚啉-5-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.07(br s,1H),8.20-8.00(m,1H),7.96-7.48(m,4H),7.42-7.12(m,10H),5.58-5.38(m,1H),4.78(s,2H),4.45(s,2H),3.26(dd,J＝3.8,14.3Hz,1H),2.98(d,J＝14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+526.1。
通过4-溴-1,2,5-噻二唑-3-羧酸甲酯和(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)硼酸的偶联，然后使产物进行与前面对化合物321所述的相同步骤来合成化合物578。化合物578(100mg，57.9％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.36-9.32(m,1H),8.12(s,1H),7.88(s,1H),7.52-7.49(m,1H),7.28-7.17(m,7H),5.50-5.43(m,1H),3.22-3.15(m,1H),2.94-2.86(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+461.0。
通过4-溴-1,2,5-噻二唑-3-羧酸甲酯和(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)硼酸的偶联，然后使产物进行与前面对化合物321所述的相同步骤来合成化合物599。化合物599(140mg，69.6％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-5-基)-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.40(d,J＝7.7Hz,1H),8.19(s,1H),7.93(s,1H),7.59(s,1H),7.42(d,J＝0.9Hz,2H),7.29-7.18(m,5H),5.55-5.41(m,1H),3.23(dd,J＝3.5,13.9Hz,1H),2.86(dd,J＝10.1,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+461.0。
实施例208
化合物379-380
使用与前面对实施例5所述相同的步骤，由相应的中间体1-(二氟甲基)-3-苯基-1H-吡唑-4-羧酸合成化合物379-380。
化合物379(240mg，76.2％收率)：(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.79(d,J＝7.5Hz,1H),8.48(s,1H),8.14-7.72(m,3H),7.55(dd,J＝2.0,7.3Hz,2H),7.37-7.20(m,8H),5.40-5.26(m,1H),3.18(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.80(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+413.1。
化合物380(50mg，61.7％收率)：(R)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.79(d,J＝7.3Hz,1H),8.47(s,1H),8.15-7.71(m,3H),7.60-7.48(m,2H),7.39-7.21(m,8H),5.40-5.25(m,1H),3.17(dd,J＝3.7,13.9Hz,1H),2.80(dd,J＝10.0,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+413.1。
实施例209
化合物381-384、403、522-524、546-547、550-552、554-555、575-577、588、596、598、608、610、622、630
向3-碘-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(20g，75.18mmol)的DMF(100mL)溶液中加入2-氯-2,2-二氟乙酸钠(22.92g，150.36mmol)和Cs2CO3(48.99g，150.36mmol)。将混合物在100℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩，将残余物用H2O(200mL)稀释，并用EtOAc(100mL×3)萃取。将合并的有机层用盐水(200mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。通过快速硅胶色谱(X g Silica Flash Column，洗脱液为0％～10％～20％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化残余物。得到化合物381A(9.1g，收率：38.30％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.47-7.95(m,1H),7.44-6.95(m,1H),4.53-4.17(m,2H),1.54-1.17(m,3H)。
使用与前面对化合物242所述相同的步骤，由相应的中间体1-(二氟甲基)-3-碘-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(381A)合成化合物381-384、403、522-524、546-547、550-552、554-555、561、563-566、575-577、581-582、586、588、596、598、608、610、622和630。
化合物381(125mg，43.5％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(3-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.87(br d,J＝7.3Hz,1H),8.56(s,1H),8.18-8.04(m,1H),7.99-7.75(m,2H),7.51-7.36(m,3H),7.33-7.18(m,6H),5.35(br s,1H),3.20(br dd,J＝3.0,13.8Hz,1H),2.89-2.76(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+431.1.。
化合物382(70mg，40.9％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(邻甲苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(s,1H),8.35(br d,J＝7.3Hz,1H),8.06(br s,1H),7.95-7.75(m,2H),7.27(br d,J＝6.8Hz,3H),7.25-7.10(m,6H),5.26(br s,1H),3.19-3.10(m,1H),2.81-2.70(m,1H),2.02(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+427.1。
化合物383(150mg，58.2％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(2-氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.77-8.62(m,2H),8.16-7.76(m,3H),7.50-7.17(m,9H),5.36-5.23(m,1H),3.17(dd,J＝3.9,14.0Hz,1H),2.82(dd,J＝10.0,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+431.1。
化合物384(130mg，39.4％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(3-甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.54-8.35(m,2H),8.03-7.51(m,3H),7.35-7.14(m,8H),6.96(d,J＝7.8Hz,1H),5.37(br s,1H),3.76(s,3H),3.22(d,J＝14.3Hz,1H),2.97-2.83(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+443.1。
化合物403(3.1g，49.74％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.80(d,J＝7.5Hz,1H),8.58-8.37(m,1H),8.10(s,1H),8.05-7.69(m,2H),7.58-7.47(m,2H),7.36-7.19(m,8H),5.47-5.19(m,1H),3.19-3.14(m,1H),2.82-2.75(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+413.2。
化合物522(25mg，16.6％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(4-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.77(s,1H),8.65(d,J＝7.3Hz,1H),8.39(d,J＝5.1Hz,1H),8.24(s,1H),8.09-8.02(m,1H),7.93(s,1H),7.78(d,J＝6.2Hz,1H),7.29-7.13(m,7H),5.27-5.19(m,1H),3.13(dd,J＝3.7,13.9Hz,1H),2.76(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H),1.99(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.1。
化合物523(63mg，63.6％收率；淡黄色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(3,5-二氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.89(d,J＝7.5Hz,1H),8.62(s,1H),8.14-8.08(m,1H),7.97-7.79(m,2H),7.39-7.25(m,7H),7.23-7.19(m,1H),5.42-5.33(m,1H),3.20(dd,J＝3.7,13.9Hz,1H),2.82(dd,J＝10.3,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+449.0。
化合物524(50mg，31.5％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(2,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69(s,1H),8.23(d,J＝7.3Hz,1H),8.05(s,1H),7.92-7.73(m,2H),7.31-7.24(m,2H),7.24-7.15(m,3H),7.13-7.09(m,2H),6.97(s,1H),5.28-5.24(m,1H),3.14(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.75(dd,J＝9.7,14.1Hz,1H),2.25(s,3H),1.96(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+441.1。
化合物546(120mg，47.9％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δδ8.87(d,J＝7.5Hz,1H),8.72(s,1H),8.19-7.79(m,3H),7.44(d,J＝7.7Hz,1H),7.32-7.17(m,7H),5.42-5.24(m,1H),3.17(dd,J＝3.5,13.7Hz,1H),2.81(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+493.1。
化合物547(140mg，67.0％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(萘-1-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.79(s,1H),8.46(d,J＝7.5Hz,1H),8.15-7.71(m,5H),7.62(d,J＝7.9Hz,1H),7.54-7.45(m,2H),7.44-7.35(m,2H),7.28-7.13(m,5H),5.19-5.15(m,1H),3.08(dd,J＝3.7,13.9Hz,1H),2.72(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+463.1。
化合物550(25mg，30.3％收率；淡黄色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.78(s,1H),8.71(s,1H),8.40(d,J＝4.5Hz,1H),8.15(d,J＝8.0Hz,1H),8.03-7.99(m,1H),7.91-7.56(m,3H),7.55-7.46(m,1H),7.23-7.08(m,5H),5.67-5.53(m,1H),3.31(dd,J＝5.0,14.3Hz,1H),3.18-3.11(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+414.1。
化合物551(65mg，82.3％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(萘-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.90(d,J＝7.3Hz,1H),8.53(s,1H),8.16(d,J＝9.9Hz,2H),8.09-7.79(m,5H),7.67(dd,J＝1.7,8.5Hz,1H),7.56-7.50(m,2H),7.30-7.25(m,4H),7.23-7.18(m,1H),5.39-5.29(m,1H),3.18(dd,J＝3.9,13.8Hz,1H),2.82(dd,J＝10.3,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+463.1。
化合物552(60mg，53.6％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(2,5-二氟苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.75-8.67(m,2H),8.09-7.76(m,3H),7.32-7.15(m,8H),5.30-5.22(m,1H),3.16-3.09(m,1H),2.82-2.73(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+449.1。
化合物554(174mg，86.6％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(3-氟-5-甲基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.83(d,J＝7.3Hz,1H),8.53(s,1H),8.21-7.72(m,3H),7.34-7.23(m,5H),7.21(br dd,J＝2.5,8.5Hz,2H),7.06(br d,J＝9.9Hz,1H),5.46-5.22(m,1H),3.17(dd,J＝3.9,14.0Hz,1H),2.80(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H),2.31(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+445.1。
化合物555(85mg，57.0％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(s,1H),7.57-7.27(m,1H),7.24(br s,3H),7.05-6.97(m,4H),6.96-6.92(m,1H),6.90(t,J＝6.9Hz,1H),6.71(d,J＝6.6Hz,1H),6.26(br s,1H),5.55-5.42(m,1H),4.16(br s,2H),4.11-4.05(m,1H),4.11-4.05(m,1H),4.00-3.92(m,1H),3.22(m,J＝4.7,14.2Hz,1H),2.93-2.82(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+471.1。
化合物561(100mg，46.4％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(异喹啉-4-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.35(s,1H),8.89(s,1H),8.73(d,J＝7.5Hz,1H),8.39(s,1H),8.24-7.88(s,3H),7.78(s,1H),7.74-7.66(m,2H),7.66-7.59(m,1H),7.33-7.15(m,5H),5.25-5.14(m,1H),3.21-3.05(m,1H),2.83-2.72(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+464.1。
化合物563(110mg，84.1％收率；淡黄色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1HNMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.67(d,J＝7.3Hz,1H),8.53(s,1H),8.08(s,1H),7.97-7.76(m,2H),7.34-7.19(m,5H),6.97-6.91(m,1H),6.90-6.80(m,2H),5.90(s,1H),5.78(s,1H),5.33-5.23(m,1H),3.15(dd,J＝3.9,14.0Hz,1H),2.81(dd,J＝9.7,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+457.1。
化合物564(128mg，79.3％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(2-氟-5-甲基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71-8.60(m,2H),8.11-8.02(m,1H),7.97-7.76(m,2H),7.33-7.16(m,7H),7.11-7.02(m,1H),5.32-5.23(m,1H),3.15(dd,J＝3.9,14.0Hz,1H),2.81(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H),2.29(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+445.1。
化合物565(75mg，80.2％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(3,5-二甲基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.42(s,1H),8.34-8.23(m,1H),7.98-7.47(m,3H),7.28-7.20(m,7H),7.03(s,1H),5.39-5.33(m,1H),3.23-3.19(m,1H),2.90(dd,J＝9.2,13.9Hz,1H),2.29(s,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+441.1。
化合物566(135mg，78.7％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(5-氟-2-甲基苯基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(s,1H),8.49(d,J＝7.7Hz,1H),8.10-7.77(m,3H),7.31-7.18(m,6H),7.17-7.10(m,1H),6.96(dd,J＝2.9,9.5Hz,1H),5.32-5.23(m,1H),3.15(dd,J＝3.7,13.9Hz,1H),2.78(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H),1.97(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+445.1。
化合物575(20mg，66.9％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(喹啉-7-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.94(dd,J＝1.6,4.1Hz,1H),8.67-8.48(m,2H),8.43-8.33(m,2H),7.98-7.71(m,4H),7.58-7.53(m,1H),7.31-7.17(m,6H),5.48-5.28(m,1H),3.24(dd,J＝4.5,14.1Hz,1H),2.93(dd,J＝9.3,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+464.1。
化合物576(125mg，66.2％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(喹啉-5-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.94-8.82(m,2H),8.66(br d,J＝7.5Hz,1H),8.20-7.98(m,4H),7.87-7.72(m,2H),7.55-7.40(m,2H),7.32-7.17(m,5H),5.27-5.14(m,1H),3.13(br dd,J＝3.5,13.9Hz,1H),2.78(brdd,J＝10.0,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+471.1。
化合物577(110mg，47.2％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(异喹啉-6-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.31(s,1H),8.93(d,J＝7.5Hz,1H),8.58(s,1H),8.51(d,J＝5.7Hz,1H),8.23-8.17(m,1H),8.15-7.81(m,6H),7.31-7.25(m,4H),7.24-7.17(m,1H),5.45-5.26(m,1H),3.19(dd,J＝4.0,13.9Hz,1H),2.90-2.77(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+471.1。
化合物581(30mg，37.5％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(吡嗪-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.55(d,J＝7.0Hz,1H),9.40-9.27(m,1H),8.91-8.83(m,2H),8.73-8.15(m,1H),8.06-7.67(m,3H),7.30-7.23(m,5H),5.75-5.62(m,1H),3.28-3.16(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+415.1。
化合物582(11.4mg，13.6％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(5-甲基吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.83(d,J＝7.5Hz,1H),8.62(s,1H),8.55(d,J＝2.0Hz,1H),8.40(d,J＝1.3Hz,1H),8.08-7.79(m,3H),7.76(s,1H),7.30-7.25(m,4H),7.21(td,J＝4.5,8.8Hz,1H),5.36-5.27(m,1H),3.17(dd,J＝3.7,13.7Hz,1H),2.81(dd,J＝10.0,14.0Hz,1H),2.29(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+428.1。
化合物586(56mg，32.4％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(5-氟吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.94-8.86(m,1H),8.74(s,1H),8.69-8.58(m,2H),8.15-8.08(m,1H),8.01-7.81(m,3H),7.29(br d,J＝4.2Hz,4H),7.21(br d,J＝4.4Hz,1H),5.36(br s,1H),3.23-3.14(m,1H),2.87-2.77(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+431.0。
化合物588(95mg，63.0％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(喹啉-2-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.90(d,J＝8.2Hz,1H),8.87(s,1H),8.59(d,J＝8.6Hz,1H),8.27(d,J＝8.6Hz,1H),8.20-8.04(m,2H),7.98-7.79(m,2H),7.76-7.64(m,3H),7.02-6.91(m,5H),5.78-5.70(m,1H),3.32-3.27(m,1H),3.14(dd,J＝8.0,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+464.1。
化合物596(110mg，58.1％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(喹啉-4-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.94-8.77(m,3H),8.19-7.86(m,3H),7.83-7.69(m,3H),7.55-7.51(m,1H),7.41-7.20(m,6H),5.28-5.12(m,1H),3.14(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.79(dd,J＝9.9,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+464.1。
化合物598(85mg，53.3％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(异喹啉-5-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.35(s,1H),8.90-8.63(m,2H),8.41(d,J＝6.0Hz,1H),8.30-7.94(m,3H),7.90-7.64(m,3H),7.51(d,J＝6.0Hz,1H),7.32-7.17(m,5H),5.29-5.12(m,1H),3.13(dd,J＝3.9,14.0Hz,1H),2.77(dd,J＝10.0,13.8Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+464.1。
化合物608(25mg，37.2％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(异喹啉-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ11.96(d,J＝7.1Hz,1H),9.03(s,1H),8.78(s,1H),8.60(s,1H),8.22-7.84(m,6H),7.80-7.75(m,1H),7.12-7.05(m,4H),7.03-6.96(m,1H),5.69-5.55(m,1H),3.30-3.24(m,1H),3.12(dd,J＝7.6,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+464.1。
化合物610(42mg，15.5％收率；淡黄色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(喹啉-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.12(s,1H),8.73-8.55(m,3H),8.13-7.89(m,3H),7.79(d,J＝8.8Hz,2H),7.65(d,J＝7.0Hz,2H),7.28(s,5H),5.39(s,1H),3.00-2.82(m,1H),3.3-3.15(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+464.1。
化合物622(25mg，22.7％收率；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(喹啉-6-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺盐酸盐：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.13(d,J＝3.7Hz,1H),8.99(d,J＝7.5Hz,1H),8.86-8.75(m,1H),8.67(s,1H),8.44(s,1H),8.19-8.12(m,2H),8.12-8.07(m,1H),8.00-7.80(m,3H),7.32-7.25(m,4H),7.24-7.18(m,1H),5.43-5.26(m,1H),3.26-3.12(m,1H),2.90-2.80(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+464.1。
化合物630(20mg，42.58％收率；淡黄色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(二氟甲基)-3-(异喹啉-7-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.31(s,1H),8.68-8.48(m,3H),8.41(s,1H),8.08-7.71(m,5H),7.60(br s,1H),7.31-7.16(m,5H),5.39(br t,J＝10.5Hz,1H),3.24(br dd,J＝4.3,14.1Hz,1H),2.99-2.86(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+464.2。
实施例210
化合物385-391,532
使用与前面对化合物265所述相同的步骤，由相应的起始物料合成化合物385-391、532。
化合物385(25mg，38.7％收率)：(S)-N-(4-氨基-1-(4-甲氧基苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.74(br d,J＝7.6Hz,1H),8.10(br s,1H),8.06-7.95(m,2H),7.83(s,1H),7.43-7.29(m,3H),7.18(br d,J＝8.4Hz,2H),6.83(br d,J＝8.4Hz,2H),5.40-5.29(m,1H),3.73-3.62(m,3H),3.15-3.06(m,1H),2.97-2.86(m,1H),2.53(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+408.1。
化合物386(14mg，22.8％收率)：(S)-N-(1-氨基-1,2-二氧代-5-苯基戊烷-3-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.87(br d,J＝7.2Hz,1H),8.13-8.04(m,3H),7.77(br s,1H),7.43-7.34(m,3H),7.30-7.13(m,5H),5.09(br s,1H),2.81-2.70(m,1H),2.67-2.61(m,1H),2.56(s,3H),2.15-1.90(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+392.1。
化合物387(18mg，29.4％收率)：N-((3S,4R)-1-氨基-4-甲基-1,2-二氧代己烷-3-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.48(br d,J＝7.2Hz,1H),8.09-8.03(m,3H),7.77(br s,1H),7.43-7.32(m,3H),5.17-5.09(m,1H),2.53(s,3H),2.04(br s,1H),1.41(br s,1H),1.24-1.13(m,1H),0.91-0.78(m,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+344.2。
化合物388(35mg，47.8％收率)：(S)-N-(4-氨基-1-(3,5-二甲基苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(d,J＝7.2Hz,1H),8.10(s,1H),8.06-7.98(m,2H),7.82(s,1H),7.42-7.32(m,3H),6.87(s,2H),6.81(s,1H),5.41-5.35(m,1H),3.13-3.06(m,1H),2.92-2.84(m,1H),2.52(s,3H),2.18(s,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+406.1。
化合物389(55mg，15.9％收率)：(S)-N-(4-氨基-1-(1H-吲哚-3-基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.83(s,1H),8.60(d,J＝7.2Hz,1H),8.11(s,1H),8.04-7.99(m,2H),7.85(s,1H),7.66(d,J＝8.0Hz,1H),7.38-7.28(m,4H),7.19-7.16(m,1H),7.08-7.01(m,1H),7.00-6.94(m,1H),5.51-5.44(m,1H),3.36-3.32(m,1H),3.15-3.06(m,1H),2.50(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+417.1。
化合物390(50.1mg，83.9％收率)：N-(4-氨基-1-(3,5-二氯苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.93(d,J＝7.6Hz,1H),8.09(br.s,1H),8.02-7.92(m,2H),7.81(br.s,1H),7.46-7.29(m,6H),5.38-5.26(m,1H),3.25-3.17(m,1H),3.02-2.88(m,1H),2.52(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+446.0。
化合物391(60mg，45.63％收率)：(S)-N-(1-氨基-5,5-二甲基-1,2-二氧代己烷-3-基)-2-甲基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.06(br.s,0.23H),7.78(br.s,0.23H),7.65(d,J＝10.0Hz,0.73H),7.43-7.33(m,3H),7.32-7.26(m,1.4H),6.39-6.14(m,1H),5.31-5.24(m,0.25H),4.35-4.28(m,0.74H),2.55-2.50(m,3H),1.74-1.66(m,0.3H),1.62-1.50(m,1H),1.33-1.24(m,0.79H),0.95-0.82(m,9H)。MS(ESI)m/z(M+H)+358.1。
化合物532(65mg，27.6％收率；淡黄色固体)：N-(4-氨基-1-(1H-吲哚-3-基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.67(brs,1H),9.00(br d,J＝7.3Hz,1H),7.87(br s,1H),7.73-7.58(m,4H),7.46-7.39(m,1H),7.34(q,J＝7.5Hz,3H),7.15(d,J＝2.3Hz,1H),7.09(t,J＝7.2Hz,1H),7.02-6.96(m,1H),5.59(ddd,J＝4.3,7.3,9.0Hz,1H),3.40(dd,J＝4.1,14.7Hz,1H),3.16-3.10(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+420.1。
实施例211
化合物392
在0℃下，用苯肼(4L，40.6mol)小心地处理丁基-2-炔二酸二甲酯(5.4mL，44.7mmol)在甲苯(35mL)和AcOH(35mL，612.0mmol)中的搅拌溶液。将混合物在20℃下搅拌1小时。然后将混合物加热至115℃并搅拌4小时。将反应在20℃下静置12小时。过滤反应物，滤饼用EtOH(30mL×3)洗涤。将滤饼在减压下干燥，得到化合物392A(2.2g，收率24.7％)，为白色固体，将其直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ12.16(br s,1H),7.77-7.70(m,2H),7.54-7.47(m,2H),7.40-7.37(m,1H),5.97(s,1H),3.80(s,3H)。
向化合物392A(1g，4.5mmol)的DMF(20mL)溶液中加入K2CO3(1.2g，9.1mmol)和MeI(855μL,13.7mmol)。然后将混合物在15℃下搅拌12小时。将混合物过滤，残余物用EtOH(20mL×2)洗涤。向混合物中加入H2O(20mL)，分离有机层，用EA(20mL×2)萃取水层。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤，减压浓缩，得到化合物392B(0.515g，收率48.3％)，为白色固体，将其直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ7.67(d,J＝7.9Hz,2H),7.51(t,J＝7.8Hz,2H),7.44-7.37(m,1H),6.41(s,1H),3.98(s,3H),3.83(s,3H)。
使用与前面对化合物66所述相同的步骤，由392B合成化合物392。化合物392(40mg，21.8％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-甲氧基-1-苯基-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.38(br d,J＝7.8Hz,1H),8.11(br s,1H),7.86(br s,1H),7.71(br d,J＝8.0Hz,2H),7.53(br t,J＝7.7Hz,2H),7.44-7.35(m,1H),7.32-7.15(m,5H),6.26(s,1H),5.44(br d,J＝3.3Hz,1H),3.96(s,3H),3.21(br dd,J＝3.8,14.1Hz,1H),3.11-3.00(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+393.1。
实施例212
化合物393
向2,4-二硝基苯磺酸(10.0g，31.05mmol)的CH3CN(150mL)溶液中加入苯基碘代苯二乙酸酯(15.4g，62.09mmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。向混合物中加入MTBE(400mL)，用冰水冷却10分钟。然后将混合物过滤并收集过滤器。得到化合物393A(11g，粗品)，为黄色固体。粗产物直接用于下一步。
向化合物393A(11.3g，24.14mmol)的CH3CN(100mL)溶液中加入3-氧代-3-苯基丙酸乙酯(4.23g，21.98mmol)。将混合物在90℃下搅拌1小时。反应混合物直接用于下一步。
向化合物393B(9.69g，21.95mmol)的CH3CN(100mL)溶液中加入环丙烷甲酰胺(2.24g，26.34mmol)。将混合物在90℃下搅拌12小时。将混合物浓缩。通过柱色谱SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝10/1纯化残余物。得到化合物393C(800.0mg，粗品)，为无色油状物。粗产物直接用于下一步。
使用与前面对化合物66所述相同的步骤，由393C合成化合物393。化合物393(60mg，29.0％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-环丙基-4-苯基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.71(d,J＝7.6Hz,1H),8.11(s,1H),8.04-7.96(m,2H),7.84(s,1H),7.40-7.14(m,8H),5.39-5.31(m,1H),3.23-3.15(m,1H),2.99-2.91(m,1H),2.24-2.14(m,1H),1.23-1.03(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+404.1。
实施例213
化合物394
将2-((二苯基亚甲基)氨基)乙酸乙酯(5.00g，18.70mmol)在THF(100mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，并在-78℃下加入LiHMDS(1M，22mL)，然后将混合物搅拌0.5小时，然后在-78℃下加入苯甲酰氯(22.44mmol，2.61mL)，并在N2气氛下将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物用HCl(2N，240mL)淬灭，搅拌1小时，然后用EA(50mL)洗涤。收集水相，加入NaHCO3(水溶液)至pH约9，然后用EA(100mL)萃取。将有机层用盐水(100mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。得到化合物394A(2.6g，粗品)，为黄色油状物。粗产物直接用于下一步。
向化合物394A(1.30g，6.27mmol)的DMF(20mL)溶液中加入DIEA(25.09mmol，4.4mL)、环丙烷羧酸(648.1mg，7.53mmol)和HBTU(2.62g，6.90mmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物浓缩，用EA(200mL)稀释，用HCl(1M，200mL)、NaHCO3(水溶液，200mL)、盐水(200mL)洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。通过制备型HPLC(TFA条件)纯化残余物。得到化合物394B(400.0mg，1.45mmol，23.2％收率)，为白色固体。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.13(d,J＝8.0Hz,1H),7.98-7.92(m,2H),7.71-7.64(m,1H),7.58-7.50(m,2H),6.17(d,J＝8.0Hz,1H),4.16-4.05(m,2H),1.83-1.74(m,1H),1.11-1.04(m,3H),0.74-0.60(m,4H)。
向化合物394B(400.0mg，1.45mmol)的DCM(15mL)溶液中加入Et3N(5.96mmol，800μL)、I2(737.6mg，2.91mmol)和PPh3(762.2mg，2.91mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝5/1至0：1)纯化残余物。得到化合物394C(300.0mg，粗品)，为黄色油状物。粗产物不经进一步纯化用于下一步。
使用与前面对化合物66所述相同的步骤，由394C合成化合物394。化合物394(50mg，31.4％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-2-环丙基-5-苯基噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31(d,J＝7.6Hz,1H),8.11(s,1H),8.05-7.99(m,2H),7.86(s,1H),7.45-7.36(m,3H),7.29-7.16(m,5H),5.45-5.38(m,1H),3.23-3.16(m,1H),3.11-3.03(m,1H),2.22-2.13(m,1H),1.13-1.04(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+404.2。
实施例214
化合物395
在15℃和N2下，向3-溴-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(1g，4.29mmol)、2-苄基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷(1.12g，5.15mmol)、K2CO3(1.19g，8.58mmol)在二噁烷(15mL)和H2O(5mL)中的混合物中分批加入Pd(dppf)Cl2(314mg，429.07μmol)。将混合物在90℃下搅拌16小时。将反应物用H2O(20mL)稀释，用EtOAc(40mL×2)萃取，将有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝5：1至3：1)纯化残余物，得到化合物395A(1g，收率：35.4％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.82(s,1H),7.82(s,1H),7.38-7.10(m,5H),4.25-4.19(m,2H),3.89(s,3H),3.85(s,2H),1.34(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+245.0。
在15℃下，向化合物395A(0.85g，3.48mmol)在CHCl3(30mL)中的混合物中一次性加入MnO2(4.54g，52.19mmol)。将混合物在70℃下搅拌36小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝5：1至1：1)纯化残余物，得到化合物395B(0.25g，收率：24.12％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.97(s,1H),7.95-7.91(m,2H),7.59(t,J＝6.9Hz,1H),7.46(t,J＝7.2Hz,2H),4.12-4.06(m,2H),4.01(s,3H),1.03(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+258.9。
使用与前面对化合物66所述相同的步骤，由395B合成化合物395。化合物395(20mg，18.61％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-苯甲酰基-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CD3CN)δ9.77(d,J＝5.3Hz,1H),8.13(s,1H),8.02(d,J＝7.9Hz,2H),7.75-7.62(m,1H),7.52(t,J＝7.3Hz,2H),7.24-7.16(m,5H),7.07-6.95(m,1H),6.22(s,1H),5.62-5.44(m,1H),3.92(s,3H),3.33(dd,J＝4.5,13.8Hz,1H),3.03(dd,J＝8.4,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+405.1。
实施例215
化合物396-402
使用与前面对化合物21所述相同的步骤，由相应的起始物料合成化合物396-402。
化合物396(260mg，81.12％收率)：1-(二氟甲基)-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CD3CN)δ9.61(s,1H),8.27(s,1H),7.59-7.51(m,2H),7.44-7.35(m,3H),7.33-7.23(m,3H),7.22-7.16(m,2H),6.93(d,J＝7.7Hz,1H),4.60(ddd,J＝5.0,7.6,9.1Hz,1H),3.26(dd,J＝5.1,14.1Hz,1H),2.92(dd,J＝9.0,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+370.0。
化合物397(153mg，50.5％收率)：N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-5-苯基异噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.61(s,1H),8.96(d,J＝7.3Hz,1H),8.83(s,1H),7.82(d,J＝7.3Hz,2H),7.57-7.39(m,3H),7.31-7.13(m,5H),4.55(s,1H),3.28-3.19(m,1H),2.92-2.76(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+321.0。
化合物398(180mg，52.4％收率)：3-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1-(吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CD3CN)δ9.59(s,1H),9.17(d,J＝7.2Hz,1H),8.29-8.24(m,1H),7.94-7.87(m,1H),7.61(d,J＝8.0Hz,1H),7.34-7.23(m,5H),7.22-7.16(m,1H),6.46(s,1H),4.37-4.29(m,1H),3.20-3.12(m,1H),2.89-2.80(m,1H),2.24(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+375.0。
化合物399(580mg，85.67％收率)：3-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1-(5-(三氟甲基)吡啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CD3CN)δ9.69(s,1H),8.52-8.40(m,1H),8.16(dd,J＝2.4,8.6Hz,1H),7.99(br d,J＝6.2Hz,1H),7.89(d,J＝8.6Hz,1H),7.34-7.16(m,5H),6.55(s,1H),4.57(ddd,J＝5.1,7.2,8.9Hz,1H),3.28(dd,J＝5.1,14.3Hz,1H),3.01(dd,J＝8.9,14.2Hz,1H),2.31(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+403.1。
化合物400(135mg，46.3％收率)：1-(3-((苄氧基)甲基)苯基)-3-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ9.60(s,1H),7.45(s,1H),7.42-7.28(m,10H),7.09-7.04(m,2H),6.51(s,1H),6.32(d,J＝6.0Hz,1H),4.78(q,J＝6.6Hz,1H),4.59(d,J＝14.3Hz,5H),3.22-3.10(m,2H),2.35(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+454.2。
化合物401(180mg，37.0％收率)：N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)-4-苯基-1,2,5-噻二唑-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.64(s,1H),9.35(br d,J＝8.0Hz,1H),7.57-7.53(m,2H),7.47-7.41(m,1H),7.40-7.34(m,2H),7.29-7.18(m,5H),4.75-4.68(m,1H),3.29-3.25(m,1H),2.89-2.81(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+338.0。
化合物402(250mg，35.9％收率)：4-(2-氟苯基)-2-甲基-N-(1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.53(s,1H),8.85(d,J＝7.6Hz,1H),7.49-7.40(m,2H),7.28-7.14(m,7H),4.50-4.44(m,1H),3.25-3.18(m,1H),2.94-2.86(m,1H),2.52(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+353.1。
实施例216
化合物404-405、609、618
使用与前面对实施例254所述相同的步骤，由相应的起始物料合成化合物404-405、609和618。
化合物404(3.69g，85.6％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(3-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.02-7.89(m,2H),7.44-7.26(m,4H),7.21-7.01(m,3H),6.88-6.69(m,2H),5.79-5.70(m,1H),5.66(br s,1H),3.53-3.39(m,1H),3.35-3.18(m,1H),2.56(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+1)+396.1。
通过使用与将中间体12H氧化至12的相同条件，将N-(4-氨基-3-羟基-4-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺氧化来制备化合物405。化合物405(3.97g，34.6％收率)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.78(d,J＝7.2Hz,1H),8.07(br.s,1H),7.82(br.s,1H),7.48-7.38(m,2H),7.31-7.14(m,7H),5.38-5.29(m,1H),3.17-3.09(m,1H),2.98-2.88(m,1H),2.53(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+396.1。
或者，如下所示使用EDC和二氯乙酸将N-(4-氨基-3-羟基-4-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺氧化来产生化合物405。
在室温下，将N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳二亚胺盐酸盐(351.5mg，2.3mmol，9当量)加入到化合物N-(4-氨基-3-羟基-4-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺(100mg，0.25mmol，1.0当量)的DMSO(5mL)溶液中。搅拌10分钟后，加入二氯乙酸(0.083mL，1mmol，4当量)。将反应在室温下搅拌1小时，此时LC-MS表明反应完成。将混合物用二氯甲烷(10mL)稀释，并依次用饱和碳酸氢钠(2×10mL)、1N HCl(2×10mL)和饱和盐水(10mL)洗涤。将有机层用硫酸钠干燥并减压浓缩。将所得固体在室温下用乙酸乙酯(2×1mL)研磨2小时，并在45℃下真空干燥过夜，得到化合物405，为白色固体(69mg，70％收率；(M+H)+396.1。
化合物609(70mg，35.13％收率，白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31-8.18(m,1H),7.80(br.s,1H),7.61(br.s,1H),7.33-7.14(m,5H),7.06-6.98(m,1H),6.94-6.79(m,2H),5.96-5.85(m,2H),5.45-5.34(m,1H),3.27-3.18(m,1H),3.05-2.95(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+422.1。
化合物618(80mg，39.73％收率，白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2,2-二氟苯并[d][1,3]二氧杂环戊烯-4-基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.52-7.45(m,1H),7.32-7.26(m,2H),7.25-7.18(m,1H),7.13-7.05(m,4H),6.79-6.68(m,2H),5.71-5.63(m,1H),5.56(br.s,1H),3.48-3.40(m,1H),3.30-3.21(m,1H),2.57(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+458.1。
实施例217
化合物406
使用与前面对实施例306所述相同的步骤，由相应的起始中间体274D和250D合成化合物406。化合物406(3.3g)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-环丙基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.34(brd,J＝7.1Hz,1H),8.12(s,1H),8.06(br s,1H),7.80(br.s.,1H),7.53(br d,J＝3.1Hz,2H),7.35-7.09(m,8H),5.26(brs,1H),3.78(br s,1H),3.14(br d,J＝11.5Hz,1H),2.87-2.73(m,1H),2.05(s,1H),1.11-0.92(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+403.4。
实施例218
化合物410
将4-(三氟甲基)-1H-吡唑化合物(1g，7.35mmol)、2-氯嘧啶(926mg，8.09mmol)和K2CO3(2.03g，14.7mmol)在DMF(15mL)中的混合物加热至110℃保持12小时。向混合物中加入H2O(20mL)，用乙酸乙酯(20mLx 2)萃取，将有机相用盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过MTBE将残余物重结晶，得到化合物410A(800mg，收率：50.8％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.94(s,1H),8.83(d,J＝4.8Hz,2H),8.03(s,1H),7.34(t,J＝4.8Hz,1H)。
在-78℃下向化合物410A(350mg，1.63mmol)的THF(10mL)溶液中逐滴加入LDA(2M，1.06mL)并搅拌10分钟，然后将CO2鼓入混合物中20分钟。在-78℃下，然后缓慢升温至15℃保持1小时。向混合物中加入水(20mL)，用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，用1N HCl将水层调节至pH约3，用乙酸乙酯(10mL×2)萃取，干燥有机相，浓缩，得到化合物410B(140mg，收率：33.3％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.79(d,J＝4.9Hz,2H),7.93(s,1H),7.34(t,J＝4.7Hz,1H)。
使用与前面对实施例305所述相同的步骤，由相应的起始中间体274D和410B合成化合物410。化合物410(3.3g)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(嘧啶-2-基)-4-(三氟甲基)-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68(d,J＝4.6Hz,2H),7.94(s,1H),7.32-7.26(m,2H),7.24-7.14(m,4H),6.81(br d,J＝7.1Hz,1H),6.71(br s,1H),5.85(q,J＝6.4Hz,1H),5.51(br s,1H),3.49-3.40(m,1H),3.39-3.29(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+433.1。
实施例219
化合物411
将(S)-5-(叔丁氧基羰基)-5-氮杂螺[2.4]庚烷-6-羧酸(2g，8.29mmol)在MeOH(5mL)、HCl/MeOH(50mL)中的混合物在1℃下搅拌12小时。将所得混合物减压浓缩，得到残余物。得到化合物411A(1.3g，粗品)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ11.09(br s,1H),9.14(br s,1H),4.64(br s,1H),3.85(s,3H),3.55-3.33(m,3H),2.87-2.64(m,2H),2.38(br dd,J＝8.2,13.0Hz,1H),2.10(brdd,J＝5.3,13.0Hz,1H),0.87-0.71(m,3H),0.71-0.61(m,1H)。
将化合物411A(1g，6.44mmol)、碘苯(5.26g，25.8mmol)、Cs2CO3(6.30g，19.3mmol)、CuI(981.76mg，5.15mmol)在DMF(40mL)中的混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在N2气氛下将混合物在110℃下搅拌12小时。将反应混合物过滤并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝95：1至90：1)纯化残余物。然后通过制备型HPLC(TFA条件)纯化残余物。得到化合物411B(120mg，收率：8.06％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.32-7.12(m,2H),6.72(t,J＝7.3Hz,1H),6.50(d,J＝7.9Hz,2H),4.40(dd,J＝2.4,8.6Hz,1H),3.80-3.62(m,3H),3.48(d,J＝8.6Hz,1H),3.29(d,J＝8.6Hz,1H),2.50(dd,J＝8.8,12.6Hz,1H),1.87(dd,J＝2.4,12.6Hz,1H),0.79-0.51(m,4H)。
使用与前面对实施例321所述相同的步骤，由相应的起始中间体274D和411B合成化合物411。化合物411(53.2mg，收率：50.5％)：(6S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-苯基-5-氮杂螺[2.4]庚烷-6-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.16-7.06(m,4H),7.04-6.87(m,3H),6.77-6.66(m,2H),6.60(br s,1H),6.54-6.38(m,2H),5.58-5.21(m,2H),4.05-3.93(m,1H),3.39-3.22(m,1H),3.09-2.90(m,2H),2.82-2.69(m,1H),2.45-2.30(m,1H),1.68-1.53(m,1H),0.56-0.34(m,3H),0.17-0.05(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+392.2。
实施例220
2-(1,1-二氧代-1,2-噻嗪-2-基)-3-甲基-N-(4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)丁酰胺(412)
向L-缬氨酸甲酯(2.63g，15.7mmol，HCl)的DCM(50mL)混合物中一次性加入TEA(4.4g，32.3mmol)。在0℃下滴加4-氯丁烷-1-磺酰氯(2.5g，13.1mmol)后，将混合物在0℃下搅拌30分钟，然后在15℃下搅拌1.5小时。将反应混合物用0.5N HCl(20mL)、饱和NaHCO3(20mL)和饱和NaCl(20mL)洗涤。将分离的有机层用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物412A(2.26g，收率60.4％)，为浅黄色粘性油状物，将其不经纯化直接用于下一步骤。MS(ESI)m/z(M+H)+286.1。
向化合物412A(3.16g，11.1mmol)在DMF(150mL)中的混合物中一次性加入K2CO3(3.82g，27.6mmol)。将混合物在15℃下搅拌18小时。向混合物中加入H2O(200mL)，用EA(150mL×3)萃取。将合并的有机相用饱和NaCl(200mL×2)洗涤，并用Na2SO4干燥。减压蒸发溶剂，得到化合物412B(2.7g，粗品)，为浅黄色液体，将其不经纯化直接用于下一步骤。1HNMR(DMSO-d6,400MHz)：δ3.94(d,J＝10.6Hz,1H),3.69-3.64(m,3H),3.40-3.34(m,0.72H),3.33-3.30(m,0.24H),3.29-3.20(m,1H),3.16-3.07(m,1H),3.06-2.97(m,1H),2.11-1.95(m,3H),1.61-1.47(m,2H),0.87(dd,J＝6.7,14.0Hz,6H)。MS(ESI)m/z(M+H)+250.1。
向化合物412B(1g，4.0mmol)在THF(10mL)和MeOH(10mL)中的混合物中一次性加入NaOH(802.1mg，20.0mmol)的H2O(2mL)溶液。将混合物在55℃下搅拌1小时。向反应混合物中加入H2O(15mL)，然后减压浓缩以去除MeOH。用TBME(10mL)洗涤水相。将分离的水相用HCl水溶液(1M)酸化至pH约5-6，然后用EA(15mL×5)萃取。然后将有机相经无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到化合物412C(88.6mg，粗品)，为黄色固体，将其不经纯化直接用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ12.83(s,1H),3.82(d,J＝10.4Hz,1H),3.29-3.23(m,2H),3.14-2.90(m,2H),2.10-1.89(m,3H),1.65-1.44(m,2H),0.85(dd,J＝4.2,6.6Hz,6H)。
在0℃下，向化合物412C(88.5mg，3.7mmol)在THF(20mL)中的混合物中一次性加入1-羟基吡咯烷-2,5-二酮(HOSu)(432.9mg，3.8mmol)，然后加入DCC(776.0mg，3.7mmol)。将混合物在15℃下搅拌12小时。通过过滤除去不溶物质。真空浓缩滤液。将残余物用异丙醇(10mL)研磨。收集固体并真空干燥，得到化合物412D(95.8mg，收率76.6％)，为无色液体。1HNMR(DMSO-d6,400MHz)：δ4.26(d,J＝11.0Hz,1H),3.45-3.37(m,2H),3.28-3.22(m,1H),3.15-3.05(m,1H),2.81(s,4H),2.19-2.09(m,1H),2.08-2.02(m,2H),1.58-1.45(m,2H),0.93(dd,J＝6.6,18.7Hz,6H)。
向化合物412D(950mg，2.9mmol)在EA(25mL)中的混合物中一次性加入(S)-2-氨基-4-甲基戊烷-1-醇(40.2mg，3.4mmol)。将混合物在15℃下搅拌12小时。将混合物用HCl水溶液(0.5N，10mL)、饱和NaHCO3(10mL)、饱和NaCl(10mL)洗涤。将分离的有机相用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过制备型HPLC(碱性条件)纯化残余物，得到化合物412E(220mg，收率23.0％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ7.78(d,J＝8.8Hz,1H),4.57(t,J＝5.5Hz,1H),3.85-3.70(m,2H),3.55-3.44(m,1H),3.41-3.37(m,0.52H),3.32-3.25(m,1.45H),3.20-3.06(m,2H),2.88-2.75(m,1H),2.08-1.88(m,3H),1.73-1.61(m,1H),1.60-1.41(m,2H),1.38-1.21(m,2H),0.84(td,J＝6.6,17.4Hz,12H)。
向化合物412E(0.1g，299μmol)在DCM(15mL)中的混合物中一次性加入DMP(380.4mg，896.93μmol)，将混合物在15℃下搅拌1.5小时。通过30mL的10％Na2S2O3溶液和30mL的饱和NaHCO3溶液淬灭反应，并搅拌10分钟。淬灭反应后，将反应混合物倒入分液漏斗中并分离。用DCM(20ml×3)萃取分离的水相。将合并的有机相用盐水(30mL×2)洗涤，用无水Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将残余物用CH3CN：i-丙醚(1：8，2mL)研磨。收集固体并真空干燥，得到化合物412(45mg，收率45.1％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ9.39(s,1H),8.64(d,J＝6.5Hz,1H),4.06(s,1H),3.88(d,J＝10.8Hz,1H),3.50-3.37(m,2H),3.19-3.06(m,1H),2.96-2.83(m,1H),2.03(s,3H),1.77-1.38(m,5H),0.97-0.79(m,12H)。MS(ESI)m/z(M+H)+333.1。
实施例221
化合物413-414、525-529
使用与前面对实施例250所述相同的步骤，由相应的起始中间体274D和250A合成化合物413-414。
化合物413(55mg，收率：53.4％)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(6-氰基吡啶-3-基)-1-环丙基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.04-8.86(m,1H),8.36-8.06(m,3H),7.95-7.86(m,1H),7.76(s,1H),7.62-7.43(m,1H),7.35-7.04(m,5H),5.40-5.24(m,1H),3.94-3.73(m,1H),3.26-3.18(m,1H),2.95-2.86(m,1H),1.19-1.02(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+429.1。
化合物414(42mg，收率：26.9％)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-环丙基-3-(6-(三氟甲基)吡啶-3-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.98(s,1H),8.34-8.11(m,3H),7.82(d,J＝8.0Hz,1H),7.78-7.66(m,1H),7.54(s,1H),7.34-7.06(m,5H),5.39-5.24(m,1H),3.94-3.57(m,1H),3.28-3.16(m,1H),2.97-2.84(m,1H),1.18-1.04(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+472.1。
化合物525-526由相应的起始中间体250A和相应的烷基化剂合成，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，以获得最终化合物。
化合物525(13mg，收率：5.84％；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-环戊基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.33(d,J＝7.3Hz,1H),8.09(s,1H),8.05(s,1H),7.79(s,1H),7.59-7.54(m,2H),7.33-7.18(m,8H),5.27(ddd,J＝4.0,7.4,9.8Hz,1H),4.73(quin,J＝6.8Hz,1H),3.16(dd,J＝4.1,14.0Hz,1H),2.82(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H),2.16-2.06(m,2H),1.94(td,J＝6.1,12.2Hz,2H),1.85-1.77(m,2H),1.72-1.60(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+431.2。
化合物526(69.7mg，收率：22.7％；淡黄色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-环丁基-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(d,J＝7.3Hz,1H),8.15(s,1H),8.06(s,1H),7.80(s,1H),7.60-7.54(m,2H),7.33-7.17(m,8H),5.29(ddd,J＝4.0,7.4,9.8Hz,1H),4.92-4.84(m,1H),3.16(dd,J＝4.0,13.9Hz,1H),2.82(dd,J＝9.7,13.9Hz,1H),2.48-2.30(m,4H),1.86-1.75(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+Na)+441.1。
化合物527-529如化合物250由相应的起始中间体250A和相应的硼酸剂合成，然后使所得中间体进行如化合物12中的步骤，以获得最终化合物。
化合物527(69.9mg，收率：23.4％；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(2-氟苯基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.70(d,J＝7.5Hz,1H),8.53(d,J＝2.2Hz,1H),8.09(s,1H),7.91(dt,J＝1.7,8.0Hz,1H),7.83(s,1H),7.68-7.63(m,2H),7.58-7.46(m,2H),7.43-7.33(m,4H),7.31-7.27(m,4H),7.25-7.20(m,1H),5.33(ddd,J＝4.2,7.4,10.0Hz,1H),3.20(dd,J＝4.0,13.9Hz,1H),2.85(dd,J＝10.1,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+457.1。
化合物528(50mg，收率：16.2％；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(3-氟苯基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.87(s,1H),8.59(d,J＝7.3Hz,1H),8.10(s,1H),7.84(s,1H),7.80-7.72(m,2H),7.70-7.57(m,3H),7.40-7.20(m,9H),5.49-5.31(m,1H),3.24-3.16(m,1H),2.91-2.82(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+457.2。
化合物529(17.5mg，收率：10％；白色固体)：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-(4-氟苯基)-3-苯基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.76(s,1H),8.54(d,J＝7.3Hz,1H),8.09(s,1H),7.95-7.81(m,3H),7.67(dd,J＝3.0,6.5Hz,2H),7.46-7.21(m,10H),5.43-5.31(m,1H),3.20(dd,J＝4.0,14.1Hz,1H),2.90-2.82(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+457.2。
实施例222
化合物425-427
将D-谷氨酸(15.0g，101.9mmol)溶解在NaOH水溶液(2M，100mL)中并搅拌15分钟。向混合物中加入苯甲醛(11mL，108.8mmol)的EtOH(30mL)溶液，并在15℃下搅拌30分钟。将混合物冷却至0℃。向混合物中加入NaBH4(1.16g，30.6mmol)，将混合物在3小时内在搅拌下温热至15℃。将混合物用TBME(30mL×2)洗涤，然后用浓盐酸酸化至pH约4-5。滤出所得沉淀物并干燥，得到化合物425A(10.26g，粗品)，为白色固体，将其不经纯化直接用于下一步骤。MS(ESI)m/z(M+H)+238.0。
将化合物425A(4.2g，17.7mmol)在EtOH(400mL)中的悬浮液在95℃下加热回流10小时。将反应混合物减压浓缩，以除去EtOH。通过制备型HPLC(TFA条件：柱：PhenomenexSynergi Max-RP 250×50mm×10μm；流动相：[水(0.1％TFA)-ACN]；B％：2％-30％，20分钟)纯化残余物，得到化合物3(2.7g，收率69.44％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ7.36-7.24(m,3H),7.22-7.16(m,2H),4.88(d,J＝15.2Hz,1H),3.96-3.81(m,2H),2.41-2.21(m,3H),2.01-1.89(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+219.9。
化合物425使用与前面对化合物65所述相同的步骤，由相应的起始中间体3-氨基-N-环丙基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐和425B合成，然后通过SFC分离，产生化合物426和427。
化合物425：(2R)-1-苄基-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-氧代吡咯烷-2-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.83(s,1H),8.66(s,1H),7.38-7.18(m,8H),7.17-6.97(m,2H),5.18(s,1H),4.90-4.67(m,1H),3.87(s,1H),3.56-3.41(m,1H),3.26-3.13(m,1H),2.85-2.65(m,2H),2.30-1.97(m,3H),1.77-1.45(m,1H),0.73-0.52(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+434.2。
化合物426(129mg，收率：49.5％)：(2R)-1-苄基-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-氧代吡咯烷-2-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.85(d,J＝5.1Hz,1H),8.68(d,J＝7.5Hz,1H),7.36-7.18(m,8H),7.13(d,J＝7.1Hz,2H),5.24-5.11(m,1H),4.84(d,J＝15.0Hz,1H),3.92-3.83(m,1H),3.49(d,J＝15.0Hz,1H),3.18(dd,J＝3.5,13.9Hz,1H),2.84-2.69(m,2H),2.22(t,J＝7.9Hz,2H),2.12-1.97(m,1H),1.59-1.47(m,1H),0.73-0.56(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+434.2。
化合物427(63.2mg，收率：25.2％)：(2R)-1-苄基-N-(4-(环丙基氨基)-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-氧代吡咯烷-2-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.83(d,J＝5.1Hz,1H),8.67(d,J＝7.5Hz,1H),7.34-7.21(m,8H),7.02(d,J＝6.6Hz,2H),5.27-5.16(m,1H),4.75(d,J＝15.0Hz,1H),3.86(dd,J＝3.3,8.8Hz,1H),3.33(s,1H),3.19(dd,J＝4.0,14.1Hz,1H),2.83-2.69(m,2H),2.32-2.06(m,3H),1.77-1.61(m,1H),0.73-0.50(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+434.2。
实施例223
化合物430
向3-苯基丙-2-炔-1-醇(2g，15.13mmol)和丙炔酸乙酯(1.48g，15.13mmol)的DCM(20mL)溶液中滴加n-Bu3P(307mg，1.51mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。真空去除溶剂。通过柱子(PE：EA＝10：1)纯化残余物，得到化合物425A(3.4g，粗品)，为浅黄色油状物。MS(ESI)m/z(M+H)+231.0。
向化合物425A(500mg，2.17mmol)的甲苯(10mL)溶液中加入(PPh3)AuCl(22mg，43.40μmol)和AgBF4(9mg，43.40μmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。真空去除溶剂。通过柱子(PE：EA＝10：1)纯化残余物，得到化合物425B(120mg，收率：24.02％)，为无色油状物。1H NMR(CDCl3,400MHz)：δ7.95(s,1H),7.45-7.29(m,5H),4.20-4.14(m,2H),2.26(s,3H),1.22-1.17(m,3H)。
使用与前面对化合物65所述相同的步骤，由中间体430B合成化合物430，以得到化合物430。
化合物430(35mg，收率：33.25％)(S)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-4-苯基呋喃-3-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.82(s,1H),7.38-7.14(m,11H),7.04-6.94(m,2H),6.35(s,1H),6.11(s,1H),4.43-4.30(m,1H),3.04-2.85(m,1H),2.61-2.53(m,1H),2.21(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
实施例224
化合物449
在0℃和N2下，向(S)-2-氨基-3-(4-氟苯基)丙酸(1g，5.46mmol)在MeOH(10mL)中的混合物中分批加入SOCl2(2.60g，21.84mmol，1.6mL)。将混合物在60℃下搅拌1.5小时。真空除去溶剂，得到化合物449A(1.2g，收率：94.1％，HCl)，为白色固体，将其不经进一步纯化直接用于下一步。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.59(s,3H),7.29(t,J＝5.9Hz,2H),7.17(t,J＝8.2Hz,2H),4.28(s,1H),3.68(s,3H),3.19-3.07(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+197.9。
在0℃和N2下，向化合物449A(1.2g，5.46mmol，HCl)和氯代乙酸乙酯(712mg，6.56mmol，0.6mL)在DCM(20mL)中的混合物中一次性加入吡啶(1.30g，16.39mmol，1.3mL)。将混合物在20℃下搅拌2小时。将反应混合物用DCM(30mL)处理，用0.5N HCl(50mL×2)和盐水(50mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝10：1至4：1)纯化残余物，得到化合物449(1.2g，收率：80.6％)，为无色油状物。(S)-2-((乙氧基羰基)氨基)-3-(4-氟苯基)丙酸甲酯：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.64(d,J＝8.0Hz,1H),7.27(dd,J＝5.8,8.3Hz,2H),7.10(t,J＝8.8Hz,2H),4.24-4.07(m,1H),3.92(dd,J＝4.0,7.0Hz,2H),3.61(s,3H),3.00(dd,J＝5.0,14.1Hz,1H),2.83(dd,J＝10.5,13.6Hz,1H),1.14-0.97(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+269.9。
实施例225
化合物450
使用如化合物449中的步骤，由(S)-2-氨基-3-(4-碘苯基)丙酸制备化合物450A。
将NaBO3(1.63g，10.61mmol)分批加入到化合物450A(400mg，1.06mmol)的AcOH(8.5mL)溶液中，并加热至50℃。将反应混合物在50℃下搅拌6小时。将反应混合物冷却至室温，用DCM(20mL)稀释，过滤，将滤液用水(30mL)稀释，用DCM(10mL×2)萃取。将合并的有机萃取液用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物在DCM：PE＝1：10(10mL×2)中研磨以诱导沉淀，收集固体。得到化合物450B(380mg，收率：72.4％)，为白色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.99(d,J＝8.4Hz,2H),7.29-7.23(m,2H),5.20(d,J＝7.7Hz,1H),4.72-4.64(m,1H),4.11(q,J＝6.9Hz,2H),3.76-3.72(m,3H),3.25-3.08(m,2H),2.00(s,6H),1.23(t,J＝7.1Hz,3H)。
向化合物450B(380mg，767.27μmol)在Na2CO3(243.97mg，2.30mmol)在H2O(3mL)中的溶液中加入EtOH(3mL)，然后快速加入6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-7,9-二酮(130.56mg，767.27μmol)。将反应混合物在18℃下剧烈搅拌4小时。然后将反应混合物用水(10mL)稀释，并用DCM(10mL×3)萃取。将合并的有机萃取液用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。向残余物中加入DCM(1mL)和PE(15mL)以诱导沉淀，收集固体。得到化合物450(300mg，收率：71.7％)，为白色固体。(S)-3-(4-((7,9-二氧代-6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基亚基)-λ3-碘代烷基)苯基)-2-((乙氧基羰基)氨基)丙酸甲酯((S)-3-(4-((7,9-dioxo-6,10-dioxaspiro[4.5]decan-8-ylidene)-λ3-iodanyl)phenyl)-2-((ethoxycarbonyl)amino)propanoate)1HNMR(400MHz,CDCl3)δ7.78(d,J＝8.4Hz,2H),7.18(d,J＝8.4Hz,2H),5.18(d,J＝7.7Hz,1H),4.67-4.55(m,1H),4.12-4.02(m,2H),3.71(s,3H),3.26-3.13(m,1H),3.11-2.99(m,1H),2.13(t,J＝7.4Hz,4H),1.84-1.74(m,4H),1.21(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M-H)+544.0。
实施例226
化合物451-453、533-540
将过硼酸钠四水合物(8.99g，58.46mmol)分批加入到3-(4-碘苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸甲酯(2g，5.85mmol)的AcOH(40mL)溶液中，并加热至50℃。将反应混合物在50℃下搅拌8小时，冷却至室温，用DCM(50mL)稀释，过滤，将滤液用水(100mL)稀释，用二氯甲烷(30mL×2)萃取。将合并的有机萃取液用无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残余物在DCM：PE(1：20)(100mL)中研磨，过滤，得到化合物451A(2.1g，收率：78.1％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.30-8.01(m,2H),7.98-7.84(m,3H),4.10-3.90(m,3H),3.86-3.70(m,3H),2.17-1.83(m,6H)。
向化合物451A(2.1g，4.56mmol)的EtOH(60mL)溶液中加入Na2CO3(1.93g，18.25mmol)的H2O(30mL)溶液和6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-7,9-二酮(932mg，5.48mmol)。将混合物在25℃下搅拌4小时。然后将反应混合物用水(50mL)稀释，并用DCM(20mL×3)萃取。将合并的有机萃取液用无水Na2SO4干燥，过滤并浓缩。向残余物中加入DCM(5mL)和PE(50mL)以诱导沉淀。收集固体，得到化合物451B(1.6g，收率：68.7％)，为白色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.95(s,1H),7.90-7.80(m,4H),3.94(s,3H),3.79-3.72(m,3H),2.14(t,J＝7.5Hz,4H),1.81-1.75(m,4H)。
化合物451-453使用与前面对化合物12所述相同的步骤，由中间体451B合成，以得到化合物451-453。
化合物451(220mg，收率：58.1％)3-(4-((7,9-二氧代-6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基亚基)-λ3-碘代烷基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.31(br s,1H),8.35-8.28(m,1H),7.82-7.73(m,4H),3.88(s,3H),2.02-1.93(m,4H),1.70-1.62(m,4H)。MS(ESI)m/z(M-H)+495.01。
化合物452(250mg，收率：35.1％)N-(4-氨基-3-羟基-4-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(4-((7,9-二氧代-6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基亚基)-λ3-碘代烷基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.13-7.98(m,1H),7.93-7.78(m,1H),7.72-7.62(m,2H),7.59-7.46(m,2H),7.33(d,J＝7.8Hz,2H),7.28-7.17(m,6H),5.87-5.73(m,1H),4.49(d,J＝9.5Hz,1H),4.02(br s,1H),3.89(s,3H),2.84-2.65(m,2H),2.01(br s,4H),1.70(br s,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+673.11。
化合物453(32mg，收率：64.2％)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(4-((7,9-二氧代-6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基亚基)-λ3-碘代烷基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.52(d,J＝7.5Hz,1H),8.11-8.02(m,2H),7.81-7.76(m,1H),7.72-7.65(m,2H),7.56(d,J＝8.6Hz,2H),7.29-7.24(m,4H),7.21(dd,J＝4.5,8.7Hz,1H),5.34-5.19(m,1H),3.91-3.86(m,3H),3.18-3.14(m,1H),2.79(dd,J＝10.3,13.8Hz,1H),1.97(t,J＝7.3Hz,4H),1.68-1.64(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+671.09。
化合物533-536使用与前面对化合物451B和451-453所述相同的步骤，由相应中间体3-(3-碘苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯合成，以得到化合物533-536。
化合物533(1.3g，收率：67.8％；黄色固体)3-(3-((7,9-二氧代-6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基亚基)-λ3-碘代烷基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸乙酯：1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.35(s,1H),8.07(d,J＝8.2Hz,1H),7.94(s,1H),7.85(dd,J＝0.9,8.2Hz,1H),7.43(t,J＝7.9Hz,1H),4.24(q,J＝7.1Hz,2H),3.94(s,3H),2.14(t,J＝7.5Hz,4H),1.83-1.70(m,4H),1.28(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物534(78mg；白色固体)3-(3-((7,9-二氧代-6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基亚基)-λ3-碘代烷基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ12.46-12.28(m,1H),8.31(s,1H),8.11(t,J＝1.7Hz,1H),7.94(d,J＝8.2Hz,1H),7.75(d,J＝8.8Hz,1H),7.46(t,J＝7.9Hz,1H),3.88(s,3H),2.01-1.94(m,4H),1.69-1.63(m,4H)。MS(ESI)m/z(M-H)+495.0。
化合物535(250mg，收率：48％；白色固体)N-(4-氨基-3-羟基-4-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-((7,9-二氧代-6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基亚基)-λ3-碘代烷基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.14-8.00(m,2H),7.87(d,J＝8.8Hz,0.5H),7.66(d,J＝7.9Hz,1H),7.60-7.55(m,1H),7.53(d,J＝9.3Hz,0.5H),7.35-7.10(m,8H),5.86-5.68(m,1H),4.49-4.33(m,1H),4.02-3.98(m,0.5H),3.88-3.81(m,3.5H),2.90-2.83(m,0.5H),2.79-2.71(m,1H),2.67-2.62(m,0.5H),2.00-1.94(m,4H),1.69-1.62(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+673.1。
化合物536(200mg，收率：69.8％；淡黄色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-(3-((7,9-二氧代-6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基亚基)-λ3-碘代烷基)苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.49(d,J＝7.5Hz,1H),8.16-7.92(m,3H),7.82-7.72(m,1H),7.71-7.54(m,2H),7.33(t,J＝7.7Hz,1H),7.29-7.21(m,4H),7.19(d,J＝3.7Hz,1H),5.24(br s,1H),3.95-3.80(m,3H),3.21-3.07(m,1H),2.80(dd,J＝10.0,13.8Hz,1H),2.02-1.91(m,4H),1.65(br s,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+671.1。
化合物537-540由相应的中间体——3-(3-碘苯基)-3-氧代丙酸乙酯合成，使用化合物248C所用的步骤将其转化为4-(3-碘苯基)-2-甲基噁唑-5-羧酸乙酯，然后使用前面对化合物451B和451-453所述的相同步骤将4-(3-碘苯基)-2-甲基噁唑-5-羧酸乙酯转化为化合物537-540。
化合物537(1.3g，收率：41.5％；白色固体)4-(3-((7,9-二氧代-6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基亚基)-λ3-碘代烷基)苯基)-2-甲基噁唑-5-羧酸乙酯：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.64(t,J＝1.7Hz,1H),8.42-8.35(m,1H),7.98-7.80(m,1H),7.50(t,J＝7.9Hz,1H),4.42(q,J＝7.1Hz,2H),2.59(s,3H),2.21-2.14(m,4H),1.83-1.76(m,4H),1.41(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物538(300mg；收率：63.1％白色固体)4-(3-((7,9-二氧代-6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基亚基)-λ3-碘代烷基)苯基)-2-甲基噁唑-5-羧酸：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.37(t,J＝1.7Hz,1H),8.28-8.23(m,1H),7.85-7.78(m,1H),7.53(t,J＝7.9Hz,1H),2.52(s,3H),2.00-1.96(m,4H),1.69-1.64(m,4H)。MS(ESI)m/z(M-H)+495.99。
化合物539(360mg，收率：68.7％；淡黄色固体)N-(4-氨基-3-羟基-4-氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(3-((7,9-二氧代-6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基亚基)-λ3-碘代烷基)苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47-8.38(m,1H),8.29(d,J＝8.2Hz,0.5H),8.22(t,J＝8.8Hz,1H),7.83-7.68(m,1.5H),7.44(td,J＝7.9,13.0Hz,1H),7.34(d,J＝9.3Hz,1H),7.27-7.08(m,6H),6.03(d,J＝6.0Hz,0.5H),5.87(d,J＝5.7Hz,0.5H),4.69-4.41(m,1H),4.03(t,J＝4.6Hz,0.5H),3.90-3.83(m,0.5H),2.98-2.85(m,1H),2.82-2.71(m,1H),2.52(d,J＝3.7Hz,3H),2.01-1.96(m,4H),1.69-1.64(m,4H)。MS(ESI)m/z(M-H)+672.0。
化合物540(150mg，收率：65.2％；白色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(3-((7,9-二氧代-6,10-二氧杂螺[4.5]癸烷-8-基亚基)-λ3-碘代烷基)苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.56(br s,1H),8.50-8.42(m,1H),8.33-8.21(m,1H),7.92-7.73(m,2H),7.63(br s,1H),7.50-7.41(m,1H),7.30-7.20(m,5H),5.50-5.39(m,1H),3.28(dd,J＝4.4,14.2Hz,1H),3.08-3.02(m,1H),2.56-2.54(m,3H),2.02(t,J＝7.4Hz,4H),1.75-1.67(m,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+672.0。
实施例227
化合物489
在0℃下，向3-碘-1H-吡唑-4-羧酸乙酯(4.3g，16.16mmol)的DMF(50mL)溶液中加入NaH(1.29g，32.32mmol，60％纯度)，将混合物在15℃下搅拌30分钟，然后在0℃下加入二溴(二氟)甲烷(10.17g，48.48mmol，4.5mL)。将混合物在15℃下搅拌16小时。将混合物用NH4Cl(15mL)淬灭，用H2O(30mL)稀释，用EA(50mL×3)萃取，将有机相合并，用NaCl(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：0至10：1)纯化残余物，得到化合物489A(4.4g，收率：61.15％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.25-8.08(m,1H),4.42-4.31(m,2H),1.39(t,J＝3.3,7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+394.9。
在-78℃和N2下，向化合物489A(2.6g，6.58mmol)的DCM(30mL)混合物中分批加入AgBF4(3.84g，19.74mmol)。将混合物在15℃下搅拌16小时。将反应混合物用DCM(50mL)稀释，然后将混合物用H2O(60mL)和盐水(60ml)洗涤，将有机物用Na2SO4干燥，并减压浓缩，得到残余物。通过柱色谱(SiO2，石油醚：乙酸乙酯＝1：0至10：1)纯化残余物，得到化合物489B(1.7g，收率：45.17％)，为无色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.24-8.03(m,1H),4.44-4.31(m,2H),1.46-1.34(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+334.9。
在15℃和N2下，向化合物489B(200mg，598.75μmol)、苯基硼酸(110mg，898.13μmol)、K2CO3(166mg，1.20mmol)在二噁烷(10mL)和H2O(0.5mL)中的混合物中分批加入Pd(dppf)Cl2(44mg，59.88μmol)。将混合物在90℃下搅拌16小时。将反应混合物浓缩。通过制备型TLC(SiO2，PE：EA＝15：1)纯化残余物，得到化合物489D(40mg，收率：9.31％)，为黄色油状物，和化合物489C(40mg，收率：20.97％)，为黄色油状物。化合物489D：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.43(s,1H),7.83-7.77(m,2H),7.48-7.43(m,3H),4.30(q,J＝7.1Hz,2H),1.31(t,J＝7.2Hz,4H)。MS(ESI)m/z(M+H)+285.0。化合物489C：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.16(s,1H),7.55-7.44(m,3H),7.38(d,J＝7.3Hz,2H),4.15(q,J＝7.2Hz,2H),1.14(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+285.0。
化合物489使用与前面对化合物12所述相同的步骤，由中间体489D合成，以得到化合物489。化合物489(55mg，收率：73.01％)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-苯基-1-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.93(dd,J＝7.3Hz,1H),8.76(s,1H),8.11(s,1H),7.85(s,1H),7.54(dd,J＝7.1Hz,2H),7.41-7.31(m,3H),7.29-7.20(m,5H),5.39-5.32(m,1H),3.17(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.82(dd,J＝10.0,14.0Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+431.1。
实施例228
化合物490
向4-甲基-1H-咪唑-2-羧酸乙酯(800mg，5.19mmol)的MeCN(20mL)溶液中加入NBS(970mg，5.45mmol)。将反应混合物在20℃下搅拌5小时。真空蒸发溶剂。通过硅胶柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝20：1～3：1)纯化粗产物，得到化合物490A(1.50g，粗品)，为黄色固体。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ4.42(q,J＝7.2Hz,2H),2.32(s,3H),1.40(t,J＝7.1Hz,3H)。
在70℃在O2下，将化合物490A(1.5g，6.44mmol)、苯基硼酸(1.57g，12.9mmol)、Cu(OAc)2(2.34g，12.9mmol)、吡啶(1.53g，19.3mmol)和4A°MS在DCE(20mL)中的混合物搅拌12小时。将混合物过滤，浓缩滤液，通过FCC(石油醚：乙酸乙酯＝15：1)纯化残余物，得到化合物490B(300mg，收率：15.1％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.57-7.47(m,3H),7.23-7.17(m,2H),4.24(q,J＝7.1Hz,2H),2.02(s,3H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H)。
在N2下，向化合物490B(50mg，162μmol)的EtOH(10mL)溶液中加入Pd-C(0.1g)。将悬浮液在真空下脱气并用H2吹扫几次。将混合物在H2(15psi)和15℃下搅拌12小时。将混合物过滤，浓缩滤液，得到化合物490C(40mg，粗品)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.72-7.56(m,4H),7.33(br d,J＝7.1Hz,2H),4.40(q,J＝7.1Hz,2H),1.40(t,J＝7.2Hz,3H)。
化合物490使用与前面对化合物12所述相同的步骤，由中间体490C合成，以得到化合物490。化合物490(26mg，收率：52.3％)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-甲基-1-苯基-1H-咪唑-2-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ7.74(br d,J＝7.9Hz,1H),7.55-7.45(m,3H),7.35-7.29(m,1H),7.27-7.14(m,6H),6.93(d,J＝0.9Hz,1H),6.70(br s,1H),5.63(dt,J＝5.2,7.7Hz,1H),5.44(br s,1H),3.38(dd,J＝5.3,14.1Hz,1H),3.17(dd,J＝7.3,14.1Hz,1H),2.02(d,J＝0.9Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+377.1。
实施例229
化合物491
将3-氧代-4-苯基丁酸甲酯(1g，5.20mmol)和DMF-DMA(682mg，5.72mmol)的混合物在20℃下搅拌1小时。通过硅胶柱色谱(石油醚：乙酸乙酯＝20：1至5：1)纯化粗产物，得到化合物491A(900mg，收率：70.0％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.70(s,1H),7.37-7.16(m,5H),4.06(s,2H),3.75(s,3H),3.33-2.57(m,6H)。
向化合物491A(900mg，3.64mmol)的MeOH(20mL)溶液中加入NH2OH.HCl(253mg，3.64mmol)。将反应混合物在65℃下搅拌1小时。蒸发溶剂。通过制备型TLC(石油醚：乙酸乙酯＝3：1)纯化粗残余物，得到化合物491B(500mg，收率：63.2％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.50(s,1H),7.35-7.27(m,5H),4.48(s,2H),3.90(s,3H)。
化合物491使用与前面对化合物12所述相同的步骤，由中间体491B合成，以得到化合物491。化合物491(20.4mg，收率：41.0％)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-苄基异噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.30(s,1H),7.39-7.23(m,9H),7.14-7.03(m,2H),6.78(br s,1H),6.21(br d,J＝7.0Hz,1H),5.72-5.66(m,1H),5.59(br s,1H),4.41(s,2H),3.43(dd,J＝5.5,14.2Hz,1H),3.21(dd,J＝6.8,14.2Hz,1H)。
实施例230
化合物497
向5-氧代-2-(嘧啶-2-基)吡唑烷-3-羧酸乙酯(300mg，1.27mmol)的CH3CN(10mL)溶液中加入POBr3(291.26mg，1.02mmol)。将混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物减压浓缩，以去除CH3CN。将残余物用H2O(10mL)稀释，并用DCM(10mL×2)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到残余物。残余物不经纯化用于下一步。得到化合物497A(300mg，粗品)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.42(d,J＝4.9Hz,2H),6.74(t,J＝4.9Hz,1H),5.03(dd,J＝6.6,12.6Hz,1H),4.27-4.10(m,2H),3.60(dd,J＝12.7,18.0Hz,1H),3.25(dd,J＝6.6,18.1Hz,1H),1.20(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+298.7。
向化合物497A(300mg，1.00mmol)的CH3CN(10mL)溶液中加入MnO2(871.92mg，10.03mmol)。将混合物在80℃下搅拌48小时。将混合物过滤。将滤液浓缩，得到残余物。通过制备型TLC(SiO2，PE：EA＝2：1)纯化残余物。得到化合物497B(150mg，收率50.3％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.79(d,J＝4.9Hz,2H),7.34(t,J＝4.9Hz,1H),6.95-6.78(m,1H),4.33(q,J＝7.1Hz,2H),1.28(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+296.8。
使用与前面对化合物12所述相同的步骤，由中间体497B和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐合成化合物497，以得到化合物497。化合物497(6mg，收率：41.0％)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-3-溴-1-(嘧啶-2-基)-1H-吡唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.72(d,J＝4.8Hz,2H),7.70(br.d,J＝7.3Hz,1H),7.42(t,J＝4.8Hz,1H),7.35-7.20(m,5H),7.03(br.s,1H),6.76(s,1H),6.27(br s,1H),5.50(dt,J＝4.8,8.0Hz,1H),3.31(dd,J＝4.9,13.9Hz,1H),2.99(dd,J＝8.5,14.1Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+443.0。
实施例231
化合物549、556-560、584、594、595、600、619
在圆底烧瓶中，向2-氟-5-甲基苯甲酸(10g，64.9mmol)的CH3CN(40mL)溶液中加入CDI(11.8g，72.7mmol)。将混合物在25℃下搅拌4小时。在另一个烧瓶中，在15分钟内向3-乙氧基-3-氧代丙酸钾(14.6g，85.6mmol)的CH3CN(130mL)溶液中分批加入MgCl2(6.2g，64.9mmol)。将混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后加入TEA(27mL，194.0mmol)并将浆液搅拌0.5小时。将第一个圆底烧瓶中的溶液转移到第二个烧瓶的浆液中。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应混合物用HCl(3N，180mL)淬灭，并将溶液减压浓缩。用MTBE(200mL×2)萃取所得物。将有机层用H2O(200mL)、饱和NaHCO3(200mL×2)、饱和NaCl(200mL)洗涤，经无水Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩，得到化合物549A(6.7g，收率45.5％)，为无色液体，将其不经进一步纯化即用于下一步骤。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ7.68-7.63(m,1H),7.53-7.46(m,1H),7.28-7.19(m,1H),4.11(q,J＝7.1Hz,2H),4.03(d,J＝3.1Hz,2H),2.33(s,3H),1.16(t,J＝7.1Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+224.9。
将化合物549A(6.7g，29.9mmol)和DMF-DMA(16mL，120.4mmol)在DMF(60mL)中的混合物在80℃下搅拌12小时。将混合物真空浓缩，得到化合物549B(8.4g，收率97.6％)，为红色液体，将其不经进一步纯化用于下一步骤。MS(ESI)m/z(M+H)+280.1
向化合物549B(8.4g，30.1mmol)和羟胺盐酸盐(4.2g，60.2mmol)在MTBE(70mL)和MeOH(70mL)中的混合物中一次性加入NaOAc(4.9g，60.2mmol)。将混合物在25℃下搅拌12小时。将反应混合物过滤，通过真空浓缩从滤液中除去溶剂。通过快速硅胶色谱(洗脱液为0～10％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化残余物，得到化合物549C(3.6g，收率46.7％)，为无色液体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ9.11(s,1H),7.60-7.54(m,1H),7.52-7.44(m,1H),7.37-7.28(m,1H),4.20(q,J＝7.2Hz,2H),2.36(s,3H),1.17(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+250.1。
化合物549使用与前面对化合物12所述相同的步骤，由中间体549C和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐合成，以得到化合物549。化合物549(100mg，收率：68.0％，白色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-(2-氟-5-甲基苯基)异噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.96(s,1H),8.92-8.81(m,1H),8.08(s,1H),7.83(s,1H),7.40(s,2H),7.33-7.11(m,6H),5.33(s,1H),3.24-3.05(m,1H),2.93-2.75(m,1H),2.31(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+396.1。
化合物556使用如化合物549中的步骤，由3-(2-氟苯基)-3-氧代丙酸乙酯合成，然后使用如前面对化合物12描述的相同步骤，以得到化合物556。化合物556(60mg，收率：39.8％，白色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-(2-氟苯基)异噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.00-8.89(m,2H),8.11(s,1H),7.85(s,1H),7.65-7.55(m,2H),7.38-7.19(m,7H),5.37-5.28(m,1H),3.18(dd,J＝3.6,14.0Hz,1H),2.91-2.63(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+382.1。
化合物557使用如化合物549中的步骤，由3-氧代-3-(邻甲苯基)丙酸乙酯合成，然后使用如前面对化合物12描述的相同步骤，以得到化合物557。化合物557(80mg，收率：52.5％，白色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-(邻甲苯基)异噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.99(s,1H),8.73(d,J＝7.3Hz,1H),8.10(s,1H),7.84(s,1H),7.45-7.39(m,1H),7.34-7.19(m,8H),5.33-5.26(m,1H),3.17(dd,J＝3.7,13.9Hz,1H),2.80(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H),2.08(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
化合物558使用如化合物549中的步骤，由3-(5-氟-2-甲基苯基)-3-氧代丙酸乙酯合成，然后使用如前面对化合物12描述的相同步骤，以得到化合物558。化合物558(100mg，收率：48.0％，白色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-(5-氟-2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.04(s,1H),8.79(d,J＝7.5Hz,1H),8.10(s,1H),7.84(s,1H),7.39-7.33(m,1H),7.39-7.19(m,7H),5.38-5.27(m,1H),3.18(dd,J＝3.9,13.9Hz,1H),2.91-2.72(m,1H),2.04(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+396.1。
化合物559使用如化合物549中的步骤，由3-(3-氟苯基)-3-氧代丙酸乙酯合成，然后使用如前面对化合物12描述的相同步骤，以得到化合物559。化合物559(150mg，收率：74.3％，白色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-(3-氟苯基)异噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.04(d,J＝7.3Hz,1H),8.88(s,1H),8.14(s,1H),7.86(s,1H),7.76(d,J＝9.8Hz,1H),7.70(d,J＝7.8Hz,1H),7.59-7.48(m,1H),7.46-7.37(m,1H),7.36-7.25(m,4H),7.25-7.17(m,1H),5.46-5.32(m,1H),3.27-3.15(m,1H),2.92-2.77(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+382.1。
化合物560使用如化合物549中的步骤，由3-氧代-3-(间甲苯基)丙酸乙酯合成，然后使用如前面对化合物12描述的相同步骤，以得到化合物560。化合物560(160mg，收率：61.3％，白色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-(间甲苯基)异噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.08-8.88(m,1H),8.80(s,1H),8.15(s,1H),7.88(s,1H),7.73-7.52(m,2H),7.43-7.11(m,7H),5.43-5.29(m,1H),3.27-3.15(m,1H),2.91-2.78(m,1H),2.34(br s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+378.1。
化合物584使用如化合物549中的步骤，由3-(2-氟-3-甲基苯基)-3-氧代丙酸乙酯合成，然后使用如前面对化合物12描述的相同步骤，以得到化合物584。化合物584(130mg，收率：60.1％，白色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-(2-氟-3-甲基苯基)异噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.93(s,1H),8.84(d,J＝7.5Hz,1H),8.06(s,1H),7.81(s,1H),7.46(t,J＝7.1Hz,1H),7.40-7.33(m,1H),7.30-7.15(m,6H),5.31(ddd,J＝4.0,7.4,9.8Hz,1H),3.15(dd,J＝4.0,13.9Hz,1H),2.80(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H),2.23(d,J＝1.8Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+396.1。
化合物594使用如化合物549中的步骤，由3-(3-氟-2-甲基苯基)-3-氧代丙酸乙酯合成，然后使用如前面对化合物12描述的相同步骤，以得到化合物594。化合物594(30mg，收率：18.1％，白色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-(3-氟-2-甲基苯基)异噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.00(s,1H),8.77(d,J＝7.3Hz,1H),8.06(s,1H),7.80(s,1H),7.36-7.13(m,8H),5.32-5.24(m,1H),3.16(dd,J＝4.1,14.0Hz,1H),2.79(br dd,J＝10.0,13.6Hz,1H),1.93(d,J＝2.2Hz,3H)。19F NMR(400MHz,DMSO-d6)δ-115.508--115.531(s,1F)。MS(ESI)m/z(M+H)+396.0。
化合物595使用如化合物549中的步骤，由3-(2-氟-3-甲氧基苯基)-3-氧代丙酸乙酯合成，然后使用如前面对化合物12描述的相同步骤，以得到化合物595。化合物595(86mg，收率：68.2％，淡黄色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-(2-氟-3-甲氧基苯基)异噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.97(s,1H),8.89(d,J＝7.5Hz,1H),8.09(s,1H),7.84(s,1H),7.40-7.33(m,1H),7.32-7.17(m,6H),7.12-7.04(m,1H),5.43-5.25(m,1H),3.87(s,3H),3.22-3.13(m,1H),2.89-2.75(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+412.1。
化合物600使用如化合物549中的步骤，由3-(5-甲基吡啶-3-基)-3-氧代丙酸乙酯合成，然后使用如前面对化合物12描述的相同步骤，以得到化合物600。化合物600(90mg，收率：49.1％，黄色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-(5-甲基吡啶-3-基)异噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.04(d,J＝7.5Hz,1H),8.96(s,1H),8.81(d,J＝1.8Hz,1H),8.56(d,J＝1.5Hz,1H),8.15(s,1H),8.06(s,1H),7.86(s,1H),7.29(d,J＝4.3Hz,3H),7.27-7.17(m,2H),5.42-5.34(m,1H),3.21(dd,J＝3.8,13.8Hz,1H),2.85(dd,J＝10.0,14.1Hz,1H),2.35(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+412.1。
化合物619使用如化合物549中的步骤，由3-(2-氟-5-甲氧基苯基)-3-氧代丙酸乙酯合成，然后使用如前面对化合物12描述的相同步骤，以得到化合物619。化合物619(72mg，收率：71.5％，白色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-5-(2-氟-5-甲氧基苯基)异噁唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.97(s,1H),8.88(d,J＝7.5Hz,1H),8.08(s,1H),7.83(s,1H),7.31-7.12(m,8H),5.38-5.30(m,1H),3.75(s,3H),3.17(dd,J＝3.8,14.1Hz,1H),2.83(dd,J＝9.9,13.9Hz,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+412.1。
实施例232
化合物553、574、579、580、592、623
化合物553、574、579、580、592、623通过使相应的中间体(其分别使用中间体62F和32F所用的步骤合成)偶联来合成，然后用化合物107中的条件对偶联产物进行处理，得到最终产物。
化合物553(100mg，66.9％收率，白色固体)由中间体(3S)-3-氨基-3-(2,3-二氢-1H-茚-2-基)-2-羟基丙酰胺和3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸合成。化合物553：(S)-N-(3-氨基-1-(2,3-二氢-1H-茚-2-基)-2,3-二氧代丙基)-3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.24-8.19(m,2H),7.97-7.91(m,1H),7.70(s,1H),7.40-7.33(m,2H),7.19-7.05(m,6H),5.16-5.10(m,1H),3.87(s,3H),2.89-2.67(m,5H)。MS(ESI)m/z(M+H)+421.1。
化合物574(100mg，45.0％收率，淡黄色固体)由中间体(3S)-3-氨基-2-羟基己-5-炔酰胺和3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸合成。化合物574：(S)-N-(1-氨基-1,2-二氧代己-5-炔-3-基)-3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31-8.24(m,2H),7.97(s,1H),7.74(s,1H),7.44-7.37(m,2H),7.23-7.15(m,2H),5.11-5.02(m,1H),3.92(s,3H),2.88(t,J＝2.5Hz,1H),2.75-2.57(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+343.1。
化合物579(52mg，33.85％收率，白色固体)由中间体3-氨基-2-羟基-3-(萘-2-基)丙酰胺盐酸盐和3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸合成。化合物579：N-(3-氨基-1-(萘-2-基)-2,3-二氧代丙基)-3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.53(d,J＝6.0Hz,1H),8.34(s,1H),8.01(br.s,1H),7.93-7.85(m,3H),7.81(s,1H),7.68(br.s,1H),7.55-7.36(m,5H),7.23-7.13(m,2H),6.45(d,J＝6.0Hz,1H),3.87(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+431.1。
化合物580(60mg，40.15％收率，白色固体)由中间体(3S)-3-氨基-4-(3,5-二氟苯基)-2-羟基丁酰胺盐酸盐和3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸合成。化合物580：N-(4-氨基-1-(3,5-二氟苯基)-3,4-二氧代丁烷-2-基)-3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.31(d,J＝7.6Hz,1H),8.13(s,1H),7.95(br.s,1H),7.72(br.s,1H),7.39-7.27(m,2H),7.17-7.00(m,3H),6.96-6.87(m,2H),5.20-5.11(m,1H),3.88(s,3H),3.17-3.09(m,1H),2.89-2.79(m,1H)。MS(ESI)m/z(M+H)+431.1。
化合物592(320mg，60.69％收率，白色固体)由中间体(3R)-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐和3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸合成。化合物592：(R)-N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-4-(2-氟苯基)-2-甲基噁唑-5-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.78(d,J＝7.6Hz,1H),8.06(br.s,1H),7.81(br.s,1H),7.47-7.37(m,2H),7.30-7.13(m,7H),5.37-5.28(m,1H),3.16-3.09(m,1H),2.97-2.88(m,1H),2.52(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+396.1。
化合物623(60mg，59.9％收率，白色固体)由中间体3-氨基-2-羟基-4-(3-(三氟甲基)苯基)丁酰胺盐酸盐和3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-羧酸合成。化合物623：N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-(3-(三氟甲基)苯基)丁-2-基)-3-(2-氟苯基)-1-甲基-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.35(br d,J＝6.6Hz,1H),8.15(s,1H),8.00(br s,1H),7.76(br s,1H),7.64-7.48(m,4H),7.33(br dd,J＝7.3,15.4Hz,2H),7.20-7.08(m,2H),5.22(br s,1H),3.90(s,3H),3.28-2.84(m,2H)。MS(ESI)m/z(M+H)+363.1。
实施例233
化合物562
向3-碘-1H-吡唑-4-羧酸乙酯化合物(1g，3.8mmol)和苯基硼酸(504.1mg，4.1mmol)在吡啶(20mL)中的混合物中加入Cu(OAc)2(751mg，4.1mmol，1.1当量)和4A°分子筛(1g)。在O2气氛(～15psi)下，将混合物在80℃下搅拌12小时。将混合物用EA(40mL)稀释，通过硅藻土过滤。将滤液减压浓缩以去除溶剂，然后加入H2O(60mL)和EA(50mL)。分离出黑色不溶物质，通过硅藻土过滤两次。将滤饼用EA(40mL×2)洗涤。分离合并的滤液，用EA(40mL×2)萃取水相。将合并的有机相用盐水(50mL×2)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱(SiO2，石油醚/乙酸乙酯＝20/1至5/1)纯化粗产物，然后收集级分并浓缩。将残余物用PE(40mL)研磨。收集固体并真空干燥，得到化合物2(0.8g，收率61.4％)，为白色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)δ9.01(s,1H),7.89(d,J＝8.4Hz,2H),7.58-7.49(m,2H),7.44-7.36(m,1H),4.28(q,J＝7.2Hz,2H),1.35-1.27(m,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+342.9。
向化合物562A(0.3g，876.9μmol)和丙-1-炔(1M，在DMF中，1.8mL，1.8mmol)在DMF(6mL)中的混合物中加入TEA(2mL)、CuI(33.4mg，175.4μmol)，然后加入Pd(PPh3)4(101mg，87.7μmol)。将混合物脱气并用N2吹扫3次，然后在55℃下搅拌12小时。将反应混合物与ES5524-401-P1页上的反应混合物合并，用于减压浓缩。通过快速硅胶色谱(洗脱液为0～15％乙酸乙酯/石油醚梯度)纯化残余物，得到化合物562B(204.2mg，收率91.5％)，为浅黄色固体。1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ9.07(s,1H),7.98-7.85(m,2H),7.59-7.47(m,2H),7.45-7.33(m,1H),4.26(q,J＝7.0Hz,2H),2.11(s,3H),1.31(t,J＝7.2Hz,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+255.1
化合物562由中间体562B合成，通过将其转化为562C并用(3S)-3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐处理，并使用与前面对化合物12所述相同的步骤，以得到化合物562。化合物549(100mg，收率：35.7％，白色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-苯基-3-(丙-1-炔-1-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.85(s,1H),7.92-7.76(m,4H),7.66(s,1H),7.57-7.48(m,2H),7.43-7.36(m,1H),7.33-7.26(m,2H),7.26-7.17(m,3H),5.63-5.48(m,1H),3.34-3.26(m,1H),3.15-3.09(m,1H),2.03(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+401.2。
实施例234
化合物583
将3-氧代丁酸乙酯(5g，38.42mmol)和MgCl2(4.39g，46.10mmol)和吡啶(6.8mL，84.52mmol)在DCM(100mL)中的混合物在0℃下搅拌30分钟。然后缓慢加入苯甲酰氯(4.9mL，42.26mmol)的DCM(20mL)溶液。将混合物在25℃下搅拌10小时。通过加入6N HCl(～20mL)淬灭反应。然后将混合物用H2O(60mL)稀释。分离有机层，水溶液用DCM(35mL×2)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3(50mL)、盐水(50mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝8：1)纯化残余物，得到化合物583A(6.2g，收率68.9％)，为无色油状物。
向甲基肼(14.6g，101.6mmol，H2SO4盐)在DMF(15mL)中的悬浮液中加入DIEA(35.3mL，203.2mmol)。将混合物在25℃下搅拌15分钟。然后将混合物加入到化合物583A(11.9g，50.8mmol)在HOAc(150mL)中的混合物中。将混合物在25℃下搅拌8小时。将混合物浓缩。将残余物用H2O(300mL)和EA(100mL)处理。分离有机层，水层用EA(100mL)萃取。将合并的有机层用饱和NaHCO3(100mL)、盐水(100mL)洗涤，用MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶柱色谱(石油醚/乙酸乙酯＝10:1至5：1)纯化残余物，得到化合物583B(2.3g，收率18.5％)，为无色油状物，和化合物583C(6g，收率48.3％)，为浅黄色油状物。化合物583B：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ7.49-7.43(m,3H),7.39-7.34(m,2H),3.95(q,J＝7.1Hz,2H),3.56-3.51(m,3H),2.34(s,3H),0.96(t,J＝7.1Hz,3H)。化合物583C：1H NMR(DMSO-d6,400MHz)：δ7.51-7.47(m,2H),7.38-7.31(m,3H),4.09(q,J＝7.1Hz,2H),3.78(s,3H),2.47(br s,3H),1.11(t,J＝7.1Hz,3H)。
化合物583使用与前面对化合物12所述相同的步骤，由中间体583C和3-氨基-2-羟基-4-苯基丁酰胺盐酸盐合成，以得到化合物583。化合物583(100mg，收率：46.2％，白色固体)N-(4-氨基-3,4-二氧代-1-苯基丁烷-2-基)-1-苯基-3-(丙-1-炔-1-基)-1H-吡唑-4-甲酰胺：1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.38(d,J＝7.5Hz,1H),8.12(s,1H),7.86(s,1H),7.47-7.41(m,2H),7.31-7.21(m,8H),5.38(ddd,J＝3.6,7.4,10.6Hz,1H),3.72(s,3H),3.19(dd,J＝3.4,14.0Hz,1H),2.74(dd,J＝10.6,13.9Hz,1H),2.12(s,3H)。MS(ESI)m/z(M+H)+391.1。
生物数据
实施例235
通过连续荧光测定法来评估钙蛋白酶1、2和9的活性及其抑制。对SensoLyte520钙蛋白酶底物(Anaspec Inc)进行了优化用于检测钙蛋白酶活性。该底物包含内部淬火的5-FAM/QXLTM 520FRET对。钙蛋白酶1、2和9将FRET底物切割成两个独立的片段，导致5-FAM荧光增加，其与钙蛋白酶活性成正比。
测定通常使用如下自动化液体处理在黑色384孔板中设置。钙蛋白酶测定碱性缓冲液通常含有50mM Tris，pH 7.5、100mM NaCl和1mM DTT。将抑制剂在DMSO中连续稀释，并用于在上述缓冲液中与钙蛋白酶一起建立2x混合物。在环境温度(25℃)孵育后，通过在相同缓冲液中加入荧光肽底物和CaCl2(原位钙蛋白酶活化所需)的2x混合物来引发反应。通常在SpectraMax i3x或FLIPR-Tetra读板器(Molecular Devices Inc)上使用490nm/520nm的激发/发射波长来收集10分钟的反应进程曲线数据。通常从1-5分钟内的进程曲线斜率来计算反应速率。通常将剂量响应曲线(速率对log抑制剂浓度)拟合为4参数逻辑函数以提取IC50值。
通过使用细胞渗透性和前荧光钙蛋白酶底物Suc-LLVY-AMC(Sigma-Aldrich Inc)的均相荧光测定法来评估SH-SY5Y细胞中的钙蛋白酶活性及其抑制。在细胞内钙蛋白酶切割Suc-LLVY-AMC后，荧光氨基-甲基-香豆素(AMC)被释放到培养基中，导致荧光信号的连续增加，其与细胞内钙蛋白酶活性成正比。
测定通常通过如下方法设置：在含有1％血清的RPMI-1640中以40k/孔在黑色384孔板中接种SH-SY5Y细胞，然后37℃过夜孵育。第二天早上，将细胞与连续稀释的化合物一起预孵育30分钟，然后加入100μM的Suc-LLVY-AMC底物。使用FLIPR Tetra平板读数器(Molecular Devices Inc)监测AMC荧光的连续增加，并测量斜率以报告钙蛋白酶活性。通常将剂量响应曲线(速率对log抑制剂浓度)拟合为4参数逻辑函数以提取IC50值。
还通过基于蛋白质印迹的测定法来评估SH-SY5Y细胞中的钙蛋白酶活性及其抑制，该基于蛋白质印迹的测定法测量非红细胞血影蛋白(SBDP-150)的α链的钙蛋白酶特异性分解产物。添加钙离子载体A23187用于诱导钙蛋白酶活性和SBDP-150形成。
这些测定通常通过如下方法设置：在含有10％血清的DMEM中以150k/孔在96孔板中接种SH-SY5Y细胞，然后37℃孵育24小时。然后将细胞与连续稀释的化合物一起预孵育60分钟，然后加入25μM A23187并进一步孵育90分钟。在RIPA缓冲液中提取总细胞蛋白，在凝胶上样缓冲液中煮沸并在SDS-PAGE凝胶上电泳。通过蛋白质印迹(干转移)处理凝胶以定量SBDP-150(AA6抗体，Enzo Inc)和GAPDH或HSP90(作为上样对照)。将标准化的SBDP-150水平对log抑制剂浓度作图，得到剂量响应曲线，通常将其拟合为4参数逻辑函数以提取IC50值。
钙蛋白酶抑制
表2.钙蛋白酶抑制测定
A栏：人钙蛋白酶1/NS1IC50
B栏：人钙蛋白酶2/NS1IC50
C栏：人钙蛋白酶9/NS1IC50
D栏：SH-SY5Y Spectrin IC50
E栏：SH-SY5Y+AMC IC50
A：<3μM；
B：3-10μM；
C：>10μM；
D：<10μM；
E：10-25μM；
F：>25μM
ND：未测定
实施例236：动物模型和研究
博莱霉素诱导的小鼠或大鼠肺纤维化
用于在小鼠中诱导肺纤维化的方法描述于Current Protocols inPharmacology:5.46.1中，标题为“博来霉素诱导的肺纤维化的小鼠模型”。为了诱导肺纤维化，向6-8周龄的C57Bl/6小鼠或Wistar大鼠口咽灌注一次约1.5U/kg的硫酸博来霉素(Calbiochem，Billerica，MA)。简而言之，对于博来霉素的口咽施用而言，用异氟烷麻醉小鼠或大鼠，然后将其背部以约60度的角度悬挂在倾斜的表面上，在上切牙下方有橡皮筋。打开气道同时用带有衬垫的镊子的一个臂固定舌头，并用注射器将博来霉素施用到口腔后部。将动物的舌头和嘴巴保持打开，直到液体从口腔中消失。然后将动物放回其笼中并监测直至从麻醉中完全恢复。该研究在小鼠和大鼠中口咽施用博来霉素的第14-28天终止。
体内有效数据
表3.博来霉素诱导的小鼠肺纤维化(14天)
化合物ID 与溶媒相比的下降％
60 -24％
72 -35％
403 -29％
484 -35％
357 -13％
485 -41％
406 -25％
404 -24％
405 -33％
495 -27％
吡非尼酮 -14％
或者，对于通过渗透泵在小鼠中全身施用博来霉素而言，如Lee，Am J PhysiolLung Cell Mol Physiol，2014所述，在异氟烷麻醉下将泵装载博来霉素并皮下植入。简而言之，通过渗透泵向小鼠全身施用约50-100U/kg博来霉素(Blenoxane；Teva Pharma，NorthWales，PA)，持续7天。在第10天，移除渗透泵，并且研究持续到第35天。
所有动物在研究结束时通过颈脱位安乐死，用于进行肉眼尸检(grossnecropsy)，并通过心脏穿刺收集血液。从动物切下每只动物的肺并称重。通过用0.5mlHanks平衡盐溶液(HBSS；VWR，Radnor，PA)将肺灌洗两次来收集BAL细胞和液体。在收集BAL细胞和液体后，解剖肺并从每只动物中取出。用10％NBF使全肺充气，然后在10％NBF中固定用于组织学。使用改良的Ashcroft评分(Hubner，Biotechniques，2008)和主观纤维化评分来评估肺中纤维化的严重程度。通过将20X下的5个显微镜视野在Ashcroft量表上平均来对肺切片进行分级，如下所示：0级＝正常肺；1级＝肺泡壁最小可检测到的增厚；2级＝肺泡壁轻度增厚。3级＝有纤维结节的壁的中度连续增厚；4级＝小于10％的显微镜视野有增厚的中隔(septae)和汇合的纤维化块。5级＝在10％至50％的显微镜视野内纤维化增加，肺结构明显受损，形成纤维带或小纤维块；6级＝超过50％的显微镜视野有大的连续纤维化块实变(consolidating)。7级＝结构严重变形和大纤维区域；8级＝显微镜视野内肺的完全纤维闭塞。在20X放大率下检查每个载玻片，并对每只动物的5个独立代表性区域的得分取平均值。在2X放大率下评估主观评分(H&E和三色染色的载玻片)以进行病理变化的总体评估。得分为0＝无可检测结果，至5＝完全参与实变(complete involvement of consolidation)。将每组中的得分取平均值，并使用Excel 2010计算标准误差。将致密、有组织的炎性渗出物评分为纤维化。用显微镜评估其他组织并常规评分。
四氯化碳诱导的小鼠或大鼠肝纤维化
四氯化碳诱导的肝纤维化是用于评估新型抗纤维化疗法广泛使用和接受的模型。在Lee,J Clin Invest,1995和Tsukamoto,Semin Liver Dis,1990中描述了通过四氯化碳施用来诱导肝纤维化的方法。简言之，通过每周两次持续4周腹膜内注射施用1mg/kg四氯化碳(Sigma Aldrich，在玉米油或橄榄油中1:7稀释)攻击雄性C57BL/6小鼠。在第28天对小鼠实施安乐死。在另一种实施方案中，通过每周三次持续8-12周腹膜内注射向Wistar大鼠施用四氯化碳。在研究开始后8-12，在实验结束时对大鼠实施安乐死。
在整个研究的几个时间点和研究结束时，通过心脏穿刺收集血液并将其加工成血清，用于评估肝酶(包括ALT、AST、ALP等)。收集所有动物的肝组织并通过浸入10％中性缓冲福尔马林中固定、处理、石蜡包埋、切片、封片，并使用标准组织学方法用Masson'sTrichrome(Tri)或Picrosirius Red(PSR)染色以评估纤维化严重程度。
小鼠单侧输尿管梗阻肾纤维化模型
在测试开始前，雌性C57BL/6小鼠(Harlan，4-6周龄)将自由获取食物和水，并使其适应环境至少7天。适应后，将小鼠麻醉并进行单侧输尿管梗阻(UUO)手术或对左肾进行假手术。简而言之，进行纵向左上切口以使左肾暴露。定位肾动脉并在动脉和输尿管之间穿过6/0丝线。将线绕在输尿管周围并打结3次，确保输尿管完全结扎。将肾脏放回至腹部，缝合腹部肌肉并将皮肤缝合。在UUO手术后4、8、14、21或28天对所有动物实施安乐死。处死后，通过心脏穿刺收集血液，收集肾脏，并将一半肾脏在-80℃冷冻，另一半在10％中性缓冲福尔马林中固定，用于肾脏纤维化的组织病理学评估。
博莱霉素皮肤纤维化模型
将博来霉素(Calbiochem，Billerica MA)以10μg/ml溶解于磷酸盐缓冲盐水(PBS)中，并通过过滤灭菌。在异氟醚麻醉下(5％在100％O2中)，每日一次，持续28天，在C57/BL6或S129小鼠(Charles River/Harlan Labs，20-25g)的剃毛背上的两个位置皮下注射博来霉素或PBS对照。28天后，对小鼠实施安乐死，并从每个注射部位获得6mm全厚度的穿孔活组织检查。通过标准组织病理学和羟脯氨酸生化测定评估皮肤纤维化。
实施例237：靶向钙蛋白酶
EpMT的抑制
为了评估体外EMT，使NMuMG细胞(ATCC)在10％血清(胎牛血清)生长培养基(Dubecco's Modified Eagles培养基，补充有10μg/mL胰岛素)中生长至汇合，然后在0.5％血清培养基+/-药物抑制剂中饥饿24小时。然后用0.5％血清培养基中的重组人TGFb1(R&DSystems 5ng/mL)+/-药物抑制剂处理细胞。对于大于24小时的时间点，上述培养基每24小时更新一次。通过蛋白质印迹分析细胞裂解物的aSMA蛋白质表达。
Miettinen等人(1994).―TGF-beta induced transdifferentiation ofmammary epithelial cells to mesenchymal cells:involvement of type Ireceptors.”J Cell Biol127(6Pt 2):2021-36。
Lamouille等人(2014).―Molecular mechanisms of epithelial-mesenchymaltransition.”Nat Rev Mol Cell Biol 15(3):178-96。
为了评估体外FMT，使正常人肺成纤维细胞(NHLF)细胞(Lonza)在成纤维细胞生长培养基-2(Lonza CC-3131/含CC-4126子弹试剂盒)中生长，然后在无血清/生长因子的成纤维细胞基础培养基-2(Lonza CC-3131)+/-药物抑制剂中饥饿24小时。然后用TGFb1(5ng/mL)成纤维细胞基础培养基+/-药物抑制剂处理细胞。通过蛋白质印迹分析细胞裂解物的aSMA蛋白质表达。
进一步的细节可见于Pegorier等人(2010).―Bone Morphogenetic Protein(BMP)-4and BMP-7regulate differentially Transforming Growth Factor(TGF)-B1innormal human lung fibroblasts(NHLF)”Respir Res 11:85，其通过引用整体并入本文。
实施例238：人体治疗
评估了用优选实施方案的化合物相比用安慰剂治疗特发性肺纤维化(IPF)患者的疗效，和用优选实施方案的化合物相比用安慰剂治疗IPF患者的安全性。主要结果变量是预测的用力肺活量(forced vital capacity，FVC)自基线至第52周的百分比绝对变化。其他可能的终点包括但不限于：死亡率、无进展生存率、FVC下降率的变化、SpO2的变化以及生物标志物(HRCT图像分析；疾病活动的分子和细胞标志物)的变化。次要结果测量包括：重要的IPF相关事件的综合结果；无进展生存率；任何原因造成的死亡率；IPF造成的死亡率；预测的FVC自基线至第52周的百分比绝对变化的分类评估；呼吸急促自基线至第52周的变化；预测的血红蛋白(Hb)校正的肺一氧化碳扩散能力(DLco)自基线至第52周的百分比变化；在6分钟步行测试(6MWT)期间的氧饱和度自基线至第52周的变化；高分辨率计算机断层扫描(HRCT)评估自基线至第52周的变化；在6MWT中行走的距离自基线至第52周的变化。符合此项研究资格的患者包括但不限于：那些满足以下入选标准的患者：IPF的诊断；40至80岁；FVC≥50％预测值；DLco≧35％预测值；FVC或DLco≤90％预测值；过去一年没有改善；1秒钟用力呼气量(FEV1)与FVC之比为0.80或更高；能够在6分钟内行走150米并保持饱和度≥83％，同时补充氧气不超过6升/分钟。如果患者满足以下任何标准，则将其从本研究中剔除：不能进行肺功能检查；有证据表明有严重阻塞性肺病或气道高反应性；在研究者的临床意见中，预计患者在随机化后52周内需要并有资格进行肺移植；活动性感染；肝病；癌症或其他可能在2年内导致死亡的疾病；糖尿病；怀孕或哺乳期；药物滥用；有长QT综合征个人史或家族史；其他IPF治疗；无法服用研究药物；从其他IPF试验退出。给患者口服给予安慰剂或一定量的优选实施方案的化合物(1mg/天-1000mg/天)。主要结果变量是预测FVC自基线至第52周的百分比绝对变化。患者将从随机化时间开始接受盲法研究治疗，直到最后一名随机患者接受治疗52周。在治疗期间定期进行物理和临床实验室评估，例如第2、4、8、13、26、39和52周。将在治疗期间定期评估肺功能、运动耐受性和呼吸短促，例如在第13、26、39和52周。数据监测委员会(DMC)将定期审查安全性和有效性数据，以确保患者安全。
SSc中的示例试验
评估了用优选实施方案的化合物相比用安慰剂治疗系统性硬化症(SSc)患者的疗效，和用优选实施方案的化合物相比用安慰剂治疗SSc患者的安全性。主要结果变量是改良Rodnan皮肤评分(mRSS)自基线至第48周的绝对变化。其他可能的终点包括但不限于：死亡率、有治疗紧急不良事件(AE)和严重不良事件(SAE)的患者百分比、疾病进展的综合测量以及生物标志物(疾病活动的分子和细胞标志物，如C-反应蛋白)的变化。次要结果测量包括但不限于：硬皮病健康评估问卷(SHAQ)评分；健康评估问卷残疾指数(HAQ-DI)；慢性病治疗功能评估-疲劳(Functional Assessment of Chronic Illness Therapy-Fatigue，FACIT)评分；通过标准化量表测量的瘙痒严重程度，如5-D瘙痒量表；圣乔治呼吸问卷(St.George’s Respiratory Questionnaire，SGRQ)评分；关节压痛指数28(TCJ28)；肺功能参数；标准生命体征(包括血压、心率和体温)；心电图测量(ECG)；实验室测试(临床化学、血液学和尿液分析)；药代动力学(PK)测量。此外包括在这些测量中的临床和生物标记样品，例如皮肤活组织检查和血液(或血清和/或血浆)也将在开始治疗之前收集。此外，符合本研究资格的患者包括但不限于满足以下标准的患者：至少18岁的患者；根据美国风湿病学会(ACR)和欧洲抗风湿病联盟(EULAR)标准诊断为SSc，符合活动性疾病的标准，总病程小于或等于60个月；10≤mRSS≤35。如果患者满足以下任何标准，则将其从本研究中剔除：筛查前8周内进行大手术；硬皮病局限于肘部或膝盖远端区域；除SSc外的风湿性自身免疫性疾病；在筛选后4周内使用任何研究、生物或免疫抑制疗法，包括关节内或肠道外皮质类固醇。给患者口服给予安慰剂或一定量的优选实施方案的化合物(1mg/天-1000mg/天)。主要结果变量是mRSS\自基线至第48周的绝对变化。患者将从随机化时间开始接受盲法研究治疗，直到最后一名随机患者接受治疗48周。在治疗期间定期进行物理和临床实验室评估，例如第2、4、8、12、24、36和48周。临床和生物标志物样品也将在第48周收集。数据监测委员会(DMC)将定期审查安全性和有效性数据，以确保患者安全。
实施例239：钙蛋白酶结合
钙蛋白酶9蛋白质制备：使N-末端六组氨酸标记的人钙蛋白酶9(残基27-347)在大肠杆菌BL21(DE3)中过表达，并通过Ni-NTA和尺寸排阻色谱纯化，收率>10mg/升培养物且>99％纯度。钙蛋白酶9序列在uniprot.org登录号为O14815。
钙蛋白酶9结晶：在50mM tris(pH 8)、0.5M NaCl、1mM EDTA、1mMCaCl2和针对MCSG1筛选条件C2的1mMβ-巯基乙醇(Anatrace，Maumee，OH)(含有0.2M LiSO4、0.1M bis-tris(pH 5.5)和25％PEG 3350)中制备大鼠钙蛋白酶1或人钙蛋白酶9(如上所述获得)的10mg/ml溶液。该溶液含有2.5mM试验化合物，补充有20％乙二醇作为低温保护剂。结合的蛋白质使用蒸汽扩散，坐滴，在289°K结晶。空间组为P 41 21 2，晶胞尺寸为
Calpain 9晶体学数据收集和改进：在APS同步加速器、光束线21-ID-F在100°K下收集数据。在之间收集反射，完整性为100％。使用XDS和Xscale(Heidelberg，Germany)分析反射数据。使用分子置换解析结构，并用PHENIX(Berkeley，CA)改善至R值为0.168，Rfree＝0.210。
Calpain 9建模：用钙蛋白酶9结合的计算模型补充从晶体结构测量的实验距离。将钙蛋白酶9/测试化合物晶体结构用于初始坐标。使用标准quickprep方案和Amber10：EHT力场，在MOE 2016.08(CCG，Montreal)中将其除去溶剂并最小化。然后使各种测试化合物的活性部位最小化。距离与可用的晶体数据表现出良好的一致性。
钙蛋白酶1的制备、结晶和数据收集：先前已经建立了用于表达大鼠钙蛋白酶1的合适构建体。根据先前建立的方案进行表达。建立纯化方案并以制备量生产同源蛋白质。纯化钙蛋白酶1蛋白，包括亲和色谱和凝胶过滤色谱步骤。从考马斯染色的SDS-PAGE判断，该方法产生纯度大于95％的同源蛋白质。纯化的蛋白质用于结晶试验，试验化合物使用具有约1200种不同条件的标准筛选，以及使用文献数据鉴定的结晶条件。使用标准策略对最初获得的条件进行优化，系统地改变严格影响结晶的参数，例如温度、蛋白质浓度、下滴比(drop ratio)等。还通过系统地改变pH或沉淀剂浓度来改善这些条件。将晶体快速冷冻并在100K的温度下测量。使用低温条件在同步加速器源下从复杂晶体配体收集X射线衍射数据。使用软件程序XDS和XSCALE处理数据。
测试化合物部分(参考式II的变量)和钙蛋白酶1或钙蛋白酶9残基之间的关键相互作用如下表4-7中所示测定。
表4.与人类钙蛋白酶9的极性相互作用
表5.与大鼠钙蛋白酶1的极性相互作用
表6.与人钙蛋白酶9的非极性相互作用
*基于计算建模
表7.与大鼠钙蛋白酶1的非极性相互作用
虽然已经说明并描述了一些实施方案，但是本领域普通技术人员在阅读前述说明书后，可以对本文所述的本技术的化合物或其盐、药物组合物、衍生物、前药、代谢物、互变异构体或外消旋混合物进行改变、等同替换和其他类型的变化。上面描述的每个方面和实施方案也可以包括或结合关于任何或所有其他方面和实施方案公开的这些变化或方面。
本技术也不限于本文描述的特定方面，它们旨在作为本技术的各个方面的单个说明。在不脱离本技术的精神和范围的情况下，可以对本技术进行许多修改和变化，这对本领域技术人员来说是显而易见的。除了本文列举的那些之外，本技术范围内的功能等同方法对于本领域技术人员而言从前面的描述中是显而易见的。这些修改和变化旨在落入所附权利要求的范围内。应理解，本技术不限于特定的方法、试剂、化合物、组合物、标记的化合物或生物系统，它们当然可以变化。还应理解，本文使用的术语仅用于描述特定方面的目的，而不是限制性的。因此，本说明书仅被认为是示例性的，本技术的广度、范围和精神仅由所附权利要求、其中的定义及其任何等同物表示。
本文说明性描述的实施方案可适当地在缺少本文未具体公开的任何要素、一种或多种限制的情况下实施。因此，例如，术语“包括”、“包含”、“含有”(“comprising”、“including”、“containing”)等应当被广泛地理解而不受限制。另外，本文使用的术语和表达已被用作描述的术语而非限制的术语，并且无意使用这些术语和表达来排除所示和所述特征或其部分的任何等同物，但是我们认识到，在要求保护的技术的范围内可以进行多种修改。另外，短语“基本上由......组成”将被理解为包括具体叙述的那些元素和那些不会实质上影响所要求保护的技术的基本特征和新颖特征的那些另外的元素。短语“由......组成”不包括未指定的任何元素。
此外，在根据马库什群组描述本公开的特征或方面的情况下，本领域技术人员将认识到，本公开也因此以马库什群组的任意个体成员或成员子群的形式描述。落入一般公开内容的每个较窄种类和亚属群组也构成本技术的一部分。这包括本技术的一般描述，附带条件或否定限制从该属中去除任意主题，无论是否在本文中具体叙述了所删除的材料。
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在以下权利要求中阐述了其他实施方案，以及这些权利要求所赋予的等同物的全部范围。
尽管已经参考优选实施方案和各种替换实施方案具体示出和描述了本发明，但是相关领域的技术人员将理解，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，可以在形式和细节上进行各种改变。
出于所有目的，在本说明书的主体内引用的所有参考文献、授权专利和专利申请均通过引用整体并入本文。
尽管已经参考实施方案和实施例描述了本发明，但是应该理解，在不脱离本发明的精神的情况下，可以进行许多和各种修改。因此，本发明仅受以下权利要求的限制。
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Claims (183)

1.一种化合物，其具有式I的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
A1选自由以下组成的组：任选取代的5-10元杂环基，条件是6-10元杂环基不被氧代取代；任选取代的5元、8元或9元杂芳基；和任选取代的C3-10碳环基；
A2选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的C3-10碳环基、-CR2-、-S-、-S(＝O)-、-SO2-、-O-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-C≡C-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-和单键；
A4选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-4烷基、-(CR2)n-S-(CR2)n-、-(CR2)n-S(＝O)-(CR2)n-、-(CR2)n-SO2-(CR2)n-、-(CR2)n-O-(CR2)n-、-(CR2)n-C(＝S)-(CR2)n-、-(CR2)n-C(＝O)-(CR2)n-、-(CR2)n-NR-(CR2)n-、-(CR2)n-CH＝CH-(CR2)n-、-(CR2)n-OC(O)NH-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(O)NH-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(O)O-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(O)-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(S)NH-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(S)O-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(S)-(CR2)n-和单键；
当A2和A4为单键时，A3直接与A8连接；
A3选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基和任选取代的C3-10碳环基，或者如果A2选自任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基和任选取代的C3-10碳环基，那么A3选自由以下组成的组：氢、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、-C≡CH和任选取代的2元至5元聚乙二醇；
A5选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-8烷基、-S-、-S(＝O)-、-SO2-、-O-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-和单键；
A6选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-8烷基、任选取代的C2-8烯基、任选取代的-O-C1-6烷基、任选取代的-O C2-6烯基、-OSO2CF3和任意天然或非天然氨基酸侧链；
A7选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-8烷基、-S-、S(＝O)-、-SO2-、-O-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-和单键；
当A5和A7为单键时，A6直接与R8所连接的碳连接；
A8是A1的环成员，并且选自由C和N组成的组；
R8选自由以下组成的组：-COR1、-CN、-CH＝CHSO2R和-CH2NO2；
R1选自由以下组成的组：H、-OH、C1-4卤代烷基、-COOH、-CH2NO2、-C(＝O)NOR、-NH2、-CONR2R3、-CH(CH3)＝CH2、-CH(CF3)NR2R3、-C(F)＝CHCH2CH3、
R14是卤素；
每个R、R2和R3独立地选自-H、任选取代的C1-4烷基、任选取代的C1-8烷氧基烷基、任选取代的2元至5元聚乙二醇、任选取代的C3-7碳环基、任选取代的5-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C6-10芳基(C1-C6)烷基和任选取代的5-10元杂芳基；
R6独立地选自-H和任选取代的C1-4烷基；并且
每个n独立地选择为0至3的整数。
2.根据权利要求1所述的化合物，条件是所述化合物不选自由以下组成的组：
3.根据权利要求1或2所述的化合物，其中：
A1选自由以下组成的组：任选取代的6-10元杂环基，条件是6-10元杂环基不被氧代取代；任选取代的5元、8元或9元杂芳基；和任选取代的C3-10碳环基；
A2选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的C3-10碳环基、-CR2-、-S-、-S(＝O)-、-SO2-、-O-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-和单键；
A4选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-4烷基、-S-、S(＝O)-、-SO2-、-O-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-和单键；
A3选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基和任选取代的C3-10碳环基；
A6选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-8烷基、任选取代的-O-C1-6烷基、任选取代的-O C2-6烯基和任意天然或非天然氨基酸侧链；并且
每个R、R2和R3独立地选自-H、任选取代的C1-4烷基、任选取代的C3-7碳环基、任选取代的5-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基和任选取代的5-10元杂芳基。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-a的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
A、B和D各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；并且
每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组。
5.根据权利要求4所述的化合物，其中A、B和D独立地选自由CH和N组成的组。
6.根据权利要求5所述的化合物，其中A是N，B是CH，并且D是CH。
7.根据权利要求5所述的化合物，其中A是CH，B是N，并且D是CH。
8.根据权利要求5所述的化合物，其中A是N，B是N，并且D是N。
9.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-b的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
A、B和D各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；并且
每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组。
10.根据权利要求9所述的化合物，其中A、B和D独立地选自由CH和N组成的组。
11.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-c的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；
X和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；
每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且
R5选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基和C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)组成的组。
12.根据权利要求11所述的化合物，其中X和Z独立地选自由CH和N组成的组。
13.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-d的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；
X和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；
每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且
R5选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基和C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)组成的组。
14.根据权利要求13所述的化合物，其中X和Z独立地选自由CH和N组成的组。
15.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-e的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；
X和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；
每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且
R5选自由以下组成的组：-H、C1-4烷基、C1-C4卤代烷基和C3-7碳环基(任选被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)。
16.根据权利要求15所述的化合物，其中X和Z独立地选自由CH和N组成的组。
17.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-f的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；
X和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；
每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且
R5选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基和C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)组成的组。
18.根据权利要求17所述的化合物，其中Z是N，Y是NR5，并且X是CH。
19.根据权利要求18所述的化合物，其中R5选自由-H、C1-4烷基、C1-C4卤代烷基和环丙基组成的组。
20.根据权利要求17所述的化合物，其中Z是N，Y是O，并且X是C(R4)。
21.根据权利要求17所述的化合物，其中Z是N，Y是S，并且X是C(R4)。
22.根据权利要求17所述的化合物，其中Z是C(R4)，Y是S，并且X是C(R4)。
23.根据权利要求17所述的化合物，其中Z是C(R4)，Y是O，并且X是C(R4)。
24.根据权利要求17所述的化合物，其中Z是N，Y是S，并且X是N。
25.根据权利要求17所述的化合物，其中Z是N，Y是O，并且X是N。
26.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-g的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；
X和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；
每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且
R5选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基和C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)组成的组。
27.根据权利要求26所述的化合物，其中X和Z独立地选自由CH和N组成的组。
28.根据权利要求26所述的化合物，其中Y是NR5，Z是N，并且X是CH。
29.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-h的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；
X和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；
每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且
R5选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基和C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)组成的组。
30.根据权利要求29所述的化合物，其中X和Z独立地选自由CH和N组成的组。
31.根据权利要求29所述的化合物，其中X是CH，Z是N，并且Y是NR5。
32.根据权利要求29所述的化合物，其中X是N，Z是C(R4)，并且Y是O。
33.根据权利要求32所述的化合物，其中R4选自–H和C1-4烷基。
34.根据权利要求29所述的化合物，其中X是N，Z是C(R4)，并且Y是S。
35.根据权利要求29所述的化合物，其中X是N，Z是N，并且Y是S。
36.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-j的结构：
或其药学上可接受的盐。
37.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-k的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
X选自由C(OR5)、C(R4)和N组成的组；
R4选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；并且
R5选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基和C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)组成的组。
38.根据权利要求37所述的化合物，其中X独立地选自由CH和N组成的组。
39.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-m的结构：
或其药学上可接受的盐，其中X和Z独立地选自由C(R4)和N组成的组；
E选自由任选取代的C5-6碳环基和任选取代的5元至6元杂环基组成的组；并且
每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组。
40.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-n的结构：
或其药学上可接受的盐，其中A选自由C(R4)和N组成的组；
E选自由以下组成的组：任选取代的C5-6碳环基、任选取代的5元至6元杂环基、任选取代的5元至6元杂芳基和任选取代的苯基；并且
每个R4独立地选自由以下组成的组：-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基、卤素、羟基和C1-C6烷氧基。
41.一种化合物，其具有式III的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
A1选自由以下组成的组：任选取代的5-10元杂环基，条件是6-10元杂环基不被氧代取代；任选取代的5元、8元或9元杂芳基；和任选取代的C3-10碳环基；
A2选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的C3-10碳环基、-CR2-、-S-、-S(＝O)-、-SO2-、-O-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-C≡C-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(O)-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-、-NHC(S)-和单键；
A4选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-4烷基、-(CR2)n-S-(CR2)n-、-(CR2)n-S(＝O)-(CR2)n-、-(CR2)n-SO2-(CR2)n-、-(CR2)n-O-(CR2)n-、-(CR2)n-C(＝S)-(CR2)n-、-(CR2)n-C(＝O)-(CR2)n-、-(CR2)n-NR-(CR2)n-、-(CR2)n-CH＝CH-(CR2)n-、-(CR2)n-OC(O)NH-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(O)NH-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(O)O-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(O)-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(S)NH-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(S)O-(CR2)n-、-(CR2)n-NHC(S)-(CR2)n-和单键；
当A2和A4为单键时，A3直接与A8连接；
A3选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基和任选取代的C3-10碳环基，或者如果A2选自任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基和任选取代的C3-10碳环基，那么A3选自由以下组成的组：氢、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、-C≡CH和任选取代的2元至5元聚乙二醇；
G是任选取代的C3至C7碳环基或任选取代的4元至7元杂环基；
A8是A1的环成员，并且选自由C和N组成的组；
R8选自由以下组成的组：-COR1、-CN、-CH＝CHSO2R、-CH2NO2；
R1选自由以下组成的组：H、-OH、C1-4卤代烷基、-COOH、-CH2NO2、-C(＝O)NOR、-NH2、-CONR2R3、-CH(CH3)＝CH2、-CH(CF3)NR2R3、-C(F)＝CHCH2CH3、
R14是卤素；并且
每个R、R2和R3独立地选自-H、任选取代的C1-4烷基、任选取代的C1-8烷氧基烷基、任选取代的2元至5元聚乙二醇、任选取代的C3-7碳环基、任选取代的5-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C6-10芳基(C1-C6)烷基和任选取代的5-10元杂芳基；
R6独立地选自-H和任选取代的C1-4烷基；并且每个n独立地选择为0至3的整数。
42.根据权利要求41所述的化合物，其具有式(III-a)的结构：
或其药学上可接受的盐。
43.根据权利要求1-42中任一项所述的化合物，其中A2、A4和A3的任选取代的部分中的至少一个被18F取代。
44.根据权利要求1-43中任一项所述的化合物，其中A2、A4和A3的任选取代的部分中的至少一个被含有一个或多个11C的C1-C6烷基取代。
45.根据权利要求1-44中任一项所述的化合物，其中A3选自由以下组成的组： 并且
A9选自由以下组成的组：H、C6-10芳基、5-10元杂芳基、3-10元杂环基和C3-10碳环基、C1-4烷基；
X2、X1和Z各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；
Y1选自由NR5、O和S组成的组；
J、L、M1和M2各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；
R4选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；
R5选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基和C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)组成的组。
46.根据权利要求1-44中任一项所述的化合物，其中A3是任选取代的C6-10芳基。
47.根据权利要求46所述的化合物，其中A3是苯基。
48.根据权利要求46所述的化合物，其中A3选自由 组成的组。
49.根据权利要求1-44中任一项所述的化合物，其中A3是任选取代的5-10元杂芳基。
50.根据权利要求49所述的化合物，其中A3选自由 组成的组。
51.根据权利要求1-50中任一项所述的化合物，其中A2是单键。
52.根据权利要求1-50中任一项所述的化合物，其中A2是–CH2-。
53.根据权利要求1-50中任一项所述的化合物，其中A2是–CH＝CH-。
54.根据权利要求1-50中任一项所述的化合物，其中A2是–O-。
55.根据权利要求1-50中任一项所述的化合物，其中A2是–S-。
56.根据权利要求1-50中任一项所述的化合物，其中A2是苯基。
57.根据权利要求1-50中任一项所述的化合物，其中A2选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5元或7-10元杂芳基、任选取代的C3-10碳环基、-S-、-S(＝O)-、-SO2-、-C(＝S)-、-C(＝O)-、-NR-、-CH＝CH-、-C≡C-、-OC(O)NH-、-NHC(O)NH-、-NHC(O)O-、-NHC(S)NH-、-NHC(S)O-和-NHC(S)-。
58.根据权利要求1-50中任一项所述的化合物，其中A2选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的C3-10碳环基和-C≡C-。
59.根据权利要求1-50中任一项所述的化合物，其中A2选自由以下组成的组：任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基和任选取代的C3-10碳环基。
60.根据权利要求1-59中任一项所述的化合物，其中A4是单键。
61.根据权利要求1-44中任一项所述的化合物，其中A2是单键，A4是单键，并且A3是任选取代的C6-10芳基或任选取代的5-10元杂芳基。
62.根据权利要求61所述的化合物，其中A3具有以下结构：
其中
J、L、M1、M2、和M3各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；并且
每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组。
63.根据权利要求62所述的化合物，其中J、L、M1、M2、和M3中的每一个是C(R4)。
64.根据权利要求63所述的化合物，其中每个R4独立地选自–H和卤素。
65.根据权利要求62所述的化合物，其中M1是卤素，并且J、L、M2和M3中的每一个是CH。
66.根据权利要求62所述的化合物，其中L是卤素，并且J、M1、M2和M3中的每一个是CH。
67.根据权利要求61所述的化合物，其中A3具有选自由以下组成的组的结构：
其中
J、L、M1、M2、M3、M4和M5各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；并且
每个R4独立地选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组。
68.根据权利要求61所述的化合物，其中A3具有以下结构：
其中
X选自由C(R4)和N组成的组；
Y选自O和S；并且
R4选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组。
69.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-o的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
Y选自由NR5、O、S和SO2组成的组；
X1选自由C(R4)和N组成的组；
J、L、M1、M2和M3各自独立地选自由C(R4)和N组成的组；
R4选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基、C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)、卤素、羟基和C1-C6烷氧基组成的组；
R5选自由-H、C1-4烷基、C1-4卤代烷基和C3-7碳环基(任选地被卤素、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C1-C6卤代烷基和C1-C6卤代烷氧基取代)组成的组。
70.根据权利要求69所述的化合物，其中J、L、M1、M2和M3独立地选自由CH和N组成的组。
71.根据权利要求1-40和43-70中任一项所述的化合物，其中A5、A7和A6的任选取代的部分中的至少一个被18F取代。
72.根据权利要求1-40和43-70中任一项所述的化合物，其中A5、A7和A6的任选取代的部分中的至少一个被含有一个或多个11C的C1-C6烷基取代。
73.根据权利要求1-40和43-70中任一项所述的化合物，其中A6是苯基。
74.根据权利要求1-40和43-70中任一项所述的化合物，其中A6选自由以下组成的组：任选取代的C6-10芳基、任选取代的5-10元杂芳基、任选取代的3-10元杂环基、任选取代的C3-10碳环基、任选取代的C1-8烷基、任选取代的-O-C1-6烷基和任选取代的-O C2-6烯基。
75.根据权利要求1-40和43-70中任一项所述的化合物，其中A7是-CH2-。
76.根据权利要求1-40和43-70中任一项所述的化合物，其中A7是O。
77.根据权利要求1-40和43-70中任一项所述的化合物，其中A7是-CH＝CH-。
78.根据权利要求1-40和43-70中任一项所述的化合物，其中A7是S。
79.根据权利要求1-40和43-70中任一项所述的化合物，其中A7是单键。
80.根据权利要求1-40和43-70中任一项所述的化合物，其中A7是任选取代的C6-10芳基。
81.根据权利要求80所述的化合物，其中A7是苯基。
82.根据权利要求1-81中任一项所述的化合物，其中A5是-CH2-。
83.根据权利要求1-40和43-70中任一项所述的化合物，其中A5是-CH2-或-CH2CH2-；A7是单键；并且A6选自由以下组成的组：C1-C4烷基、任选取代的苯基、任选取代的5-10元杂芳基。
84.根据权利要求83所述的化合物，其中A6是任选取代的苯基。
85.根据权利要求83所述的化合物，其中A6是未取代的苯基。
86.根据权利要求83所述的化合物，其中A6是任选被一个或多个C1-4烷基、C3-7碳环基、卤素、羟基和C1-C6烷氧基取代的苯基。
87.根据权利要求83所述的化合物，其中A6具有以下结构：
88.根据权利要求1-40和43-70中任一项所述的化合物，其中A5是单键，A7是单键；并且A6是C1-C5烷基。
89.根据权利要求88所述的化合物，其中A6选自由以下组成的组：乙基、正丙基、异丙基、异丁基、2,2-二甲基丙基和1,2-二甲基丙基。
90.根据权利要求1-89中任一项所述的化合物，其中R1是CONR2R3。
91.根据权利要求90所述的化合物，其中R2是-H并且R3是任选取代的C1-4烷基。
92.根据权利要求90所述的化合物，其中R2是-H，并且R3选自由以下组成的组：-H、任选被C-酰氨基取代的C1-C4烷基和C3-C6环烷基。
93.根据权利要求92所述的化合物，其中R3选自乙基或环丙基。
94.根据权利要求92所述的化合物，其中R3是被C-酰氨基取代的甲基。
95.根据权利要求92所述的化合物，其中R3是–H。
96.根据权利要求90所述的化合物，其中R3是任选取代的C1-4烷基。
97.根据权利要求90所述的化合物，其中R3是苄基。
98.根据权利要求1-40和43-97中任一项所述的化合物，其中R6是-H和任选取代的C1-4烷基。
99.根据权利要求98所述的化合物，其中R6是任选取代的C1-4烷基。
100.根据权利要求99所述的化合物，其中R6是甲基。
101.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其中A1选自由以下组成的组：任选取代的6-10元杂环基；任选被一个或多个C1-4烷基、C3-7碳环基、卤素、羟基或C1-C6烷氧基取代的5元杂环基；任选取代的5元、8元或9元杂芳基；和任选取代的C3-10碳环基。
102.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其中A1选自由以下组成的组：任选被一个或多个C1-4烷基、C3-7碳环基、卤素、羟基或C1-C6烷氧基取代的5元杂环基和任选取代的5元杂芳基。
103.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其中A1是任选取代的5元杂芳基。
104.根据权利要求1-3中任一项所述的化合物，其具有式I-p的结构：
或其药学上可接受的盐。
105.根据权利要求1所述的化合物，其具有选自由以下组成的组的结构：化合物1至90、化合物92-94、化合物195、化合物197至235、化合物238至273、化合物276至281、化合物283至299、化合物303至309、化合物313至363、化合物365、化合物367-410、化合物413-424、化合物428-445、化合物447-448、化合物454-532、化合物540、化合物546-588、化合物591-605、化合物607-611、化合物613-630，及其药学上可接受的盐。
106.一种化合物，其具有选自由以下组成的组的结构：化合物91、196、274、282、310至312、364、366、411、541，及其药学上可接受的盐。
107.一种化合物，其具有式II的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
P2是任选取代的环状部分，其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶9 P2口袋部分形成非极性相互作用并且在所述至少一个钙蛋白酶9 P2口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶9 P2口袋部分选自由Gly190、Phe233、Gly253、His254和Ala255组成的组；
L1是键或由1至25个原子组成的部分，所述原子选自由碳、氧、氮、氢和硫组成的组；
P3是由L1定位的任选取代的环状部分，并且其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶9P3口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶9 P3口袋部分的 或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶9 P3口袋部分选自由Gly189、Gly190、Ser191、Thr236和Gly253组成的组；
R10是氧代并且由P2定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R10与钙蛋白酶9Gly190酰胺形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶9 Gly190酰胺的 或更近之内；
R11是氮，并且由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R11与钙蛋白酶9 Gly253羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶9 Gly253羰基的或更近之内；
L2是键或由1至25个原子组成的部分，所述原子选自由碳、氧、氮、氢和硫组成的组；
P1是由L2定位的部分，并且其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶9 P1口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶9 P1口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶9 P1口袋部分选自由Gly95、Lys188、Gly189和Ser242组成的组；
R9是由与其连接的碳定位的部分，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶9部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶9部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶9部分选自由Gln91、Cys97和His254组成的组；并且
R6选自-H和任选取代的C1-4烷基。
108.根据权利要求107所述的化合物，其中：
R9是–(C＝R12)(C＝R13)NR2R3；
R12是氧代并且其被定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R12与钙蛋白酶9His254咪唑形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶9 His254咪唑的或更近之内；
R13是氧代并且其被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R13与至少一个钙蛋白酶9部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶9部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶9部分选自由Gln91侧链羧酰胺和Cys97骨架酰胺组成的组；并且
R2和R3独立地选自-H、任选取代的C1-4烷基、任选取代的C3-7碳环基、任选取代的5-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C6-10芳基(C1-C6)烷基和任选取代的5-10元杂芳基。
109.根据权利要求108所述的化合物，其中R12被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R12在钙蛋白酶9 His254咪唑的2.6至或更近之内。
110.根据权利要求109所述的化合物，其中R12被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R12在钙蛋白酶9 His254咪唑的2.6至或更近之内。
111.根据权利要求108至110中任一项所述的化合物，其中R13被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R13在包括Gln91侧链甲酰胺和Cys97骨架酰胺的钙蛋白酶9部分的2.6至之内。
112.根据权利要求111所述的化合物，其中R13被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R13在包括Gln91侧链甲酰胺和Cys97骨架酰胺的钙蛋白酶9部分的2.6至之内。
113.根据权利要求107所述的化合物，其中，R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶9部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶9部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶9部分选自由Gln91、Cys97和His254组成的组。
114.根据权利要求113所述的化合物，其中R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R9的至少一个原子在包括Gln91侧链甲酰胺和Cys97骨架酰胺的钙蛋白酶9部分的2.6至之内。
115.根据权利要求114所述的化合物，其中R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R9的至少一个原子在包括Gln91侧链甲酰胺和Cys97骨架酰胺的钙蛋白酶9部分的2.9至之内。
116.根据权利要求107所述的化合物，其中R9中在其连接点的碳原子与Cys97形成共价键。
117.根据权利要求79所述的化合物，其中共价键长度在1.7和之间。
118.根据权利要求107至117中任一项所述的化合物，其中P2是任选取代的5元杂芳基。
119.根据权利要求107至118中任一项所述的化合物，其中R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R11与钙蛋白酶9 Gly253羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶9 Gly253羰基的或更近之内。
120.根据权利要求107至119中任一项所述的化合物，其中：
P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，P2的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1 P2口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1 P2口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1 P2口袋部分选自由Gly208、Ser251、Gly271、His272和Ala273组成的组；
P3由L1定位，并具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，P3的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1 P3口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1 P3口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1 P3口袋部分选自由Gly207、Gly208、Ser209、Ile254和Gly271组成的组；
R10由P2定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R10与钙蛋白酶1Gly208酰胺形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶1 Gly208酰胺的或更近之内；
R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R11与钙蛋白酶1Gly271羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶1 Gly271羰基的或更近之内；
P1由L2定位，并具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，P1的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1 P1口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1 P1口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1 P1口袋部分选自由Gly113、Ser206、Gly207和Met260组成的组；并且
R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1部分选自由Gln109、Cys115和His272组成的组。
121.根据权利要求107至120中任一项所述的化合物，其中：
P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，P2的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2 P2口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2 P2口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2 P2口袋部分选自由Gly198、Ser241、Gly261、His262、和Ala263组成的组；
P3由L1定位，并具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，P3的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2 P3口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2 P3口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2 P3口袋部分选自由Gly197、Gly198、Ala199、Ile244、和Gly261组成的组；
R10由P2定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R10与钙蛋白酶2Gly198酰胺形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶2 Gly198酰胺的或更近之内；
R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R11与钙蛋白酶2Gly261羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶2 Gly261羰基的或更近之内；
P1由L2定位，并具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，P1的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2 P1口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2 P1口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2 P1口袋部分选自由Gly103、Ser196、Gly197、和Ser250组成的组；并且
R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2部分选自由Gln99、Cys105、和His262组成的组。
122.根据权利要求68至121中任一项所述的化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Gly190羰基氧的2.6至之内。
123.根据权利要求122所述的化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Gly190羰基氧的2.9至之内。
124.根据权利要求68至123中任一项所述的化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Phe233中的碳原子的2.8到之内。
125.根据权利要求124所述的化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Phe233中的碳原子的2.9至之内。
126.根据权利要求68至125中任一项所述的化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Gly253羰基氧的2.6至之内。
127.根据权利要求126所述的化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Gly253羰基氧的2.9至之内。
128.根据权利要求68至127中任一项所述的化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Ala255氮的2.9至之内。
129.根据权利要求128所述的化合物，其中P2具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P2的至少一个原子在Ala255氮的3.2至之内。
130.根据权利要求68至129中任一项所述的化合物，其中P3具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子在Gly189 C-阿尔法的3.1至之内。
131.根据权利要求130所述的化合物，其中P3具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子在Gly189 C-阿尔法的3.2至之内。
132.根据权利要求68至131中任一项所述的化合物，其中P3具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子在Gly190羰基氧的3.0至之内。
133.根据权利要求132所述的化合物，其中P3具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子在Gly190羰基氧的3.2至之内。
134.根据权利要求68至133中任一项所述的化合物，其中P3具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子在Ser191氮的3.2至之内。
135.根据权利要求134所述的化合物，其中P3具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P3的至少一个原子在Ser191氮的3.2至之内。
136.根据权利要求1至135中任一项所述的化合物，其中R10由P2定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R10在钙蛋白酶9 Gly190酰胺的2.6至之内。
137.根据权利要求136所述的化合物，其中R10由P2定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R10在钙蛋白酶9 Gly190酰胺的2.9至之内。
138.根据权利要求68至137中任一项所述的化合物，其中R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R11在钙蛋白酶9 Gly253羰基的2.6至或更近之内。
139.根据权利要求138所述的化合物，其中R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶9结合时，R11在钙蛋白酶9 Gly253羰基的2.9至 或更近之内。
140.根据权利要求68至139中任一项所述的化合物，其中P1由L2定位，并且具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子在Gly95羰基氧的3.2至之内。
141.根据权利要求140所述的化合物，其中P1由L2定位，并且具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子在Gly95羰基氧的3.2至之内。
142.根据权利要求68至141中任一项所述的化合物，其中P1由L2定位，并且具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子在Lys188羰基碳的3.2至之内。
143.根据权利要求142所述的化合物，其中P1由L2定位，并且具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子在Lys188羰基碳的2.6至之内。
144.根据权利要求68至143中任一项所述的化合物，其中P1由L2定位，并且具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子在Gly189 C-阿尔法的3.0至之内。
145.根据权利要求144所述的化合物，其中P1由L2定位，并且具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶9结合时，P1的至少一个原子在Gly189 C-阿尔法的3.2至之内。
146.一种化合物，其具有式II的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
P2是任选取代的环状部分，其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，P2的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1 P2口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1 P2口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1 P2口袋部分选自由Gly208、Ser251、Gly271、His272、和Ala273组成的组；
L1是键或由1至25个原子组成的部分，所述原子选自由碳、氧、氮、氢和硫组成的组；
P3是由L1定位的任选取代的环状部分，并且其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，P3的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1P3口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1 P3口袋部分的 或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1 P3口袋部分选自由Gly207、Gly208、Ser209、Ile254、和Gly271组成的组；
R10是氧代并且由P2定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R10与钙蛋白酶1Gly208酰胺形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶1 Gly208酰胺的或更近之内；
R11是氮并且由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R11与钙蛋白酶1 Gly271羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶1 Gly271羰基的或更近之内；
L2是键或由1至25个原子组成的部分，所述原子选自由碳、氧、氮、氢和硫组成的组；
P1是由L2定位的部分，并且其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，P1的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1 P1口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1 P1口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1 P1口袋部分选自由Gly113、Ser206、Gly207和Met260组成的组；
R9是由与其连接的碳定位的部分，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1部分选自由Gln109、Cys115、和His272组成的组；并且
R6选自-H和任选取代的C1-4烷基。
147.根据权利要求146所述的化合物，其中：
R9是–(C＝R12)(C＝R13)NR2R3；
R12是氧代并且其被定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R12与钙蛋白酶1His272咪唑形成极性相互作用并且在所述钙蛋白酶1 His272咪唑的或更近之内；
R13是氧代并且其被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R13与至少一个钙蛋白酶1部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1部分选自由Gln109侧链羧酰胺和Cys115骨架酰胺组成的组；并且
R2和R3独立地选自-H、任选取代的C1-4烷基、任选取代的C3-7碳环基、任选取代的5-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C6-10芳基(C1-C6)烷基和任选取代的5-10元杂芳基。
148.根据权利要求146所述的化合物，其中，R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶1部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶1部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶1部分选自由Gln109、Cys115、和His272组成的组。
149.根据权利要求146所述的化合物，其中R9中在其连接点的碳原子与Cys115形成共价键。
150.根据权利要求149所述的化合物，其中共价键长度在1.7和之间。
151.根据权利要求146或150所述的化合物，其中P2是任选取代的5元杂芳基。
152.根据权利要求146至151中任一项所述的化合物，其中R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶1结合时，R11与钙蛋白酶1 Gly271羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶1 Gly271羰基的或更近之内。
153.一种化合物，其具有式II的结构：
或其药学上可接受的盐，其中：
P2是任选取代的环状部分，其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，P2的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2 P2口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2 P2口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2 P2口袋部分选自由Gly198、Ser241、Gly261、His262、和Ala263组成的组；
L1是键或由1至25个原子组成的部分，所述原子选自由碳、氧、氮、氢和硫组成的组；
P3是由L1定位的任选取代的环状部分，并且其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，P3的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2P3口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2 P3口袋部分的 或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2 P3口袋部分选自由Gly197、Gly198、Ala199、Ile244和Gly261组成的组；
R10是氧代并且由P2定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R10与钙蛋白酶2Gly198酰胺形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶2 Gly198酰胺的或更近之内；
R11是氮，并且由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R11与钙蛋白酶2 Gly261羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶2 Gly261羰基的或更近之内；
L2是键或由1至25个原子组成的部分，所述原子选自由碳、氧、氮、氢和硫组成的组；
P1是由L2定位的部分，并且其具有一定的大小和构型，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，P1的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2 P1口袋部分形成非极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2 P1口袋部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2 P1口袋部分选自由Gly103、Ser196、Gly197、和Ser250组成的组；
R9是由与其连接的碳定位的部分，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2部分形成极性相互作用并且在所述至少一个钙蛋白酶2部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2部分选自由Gln99、Cys105和His262组成的组；并且
R6选自-H和任选取代的C1-4烷基。
154.根据权利要求153所述的化合物，其中：
R9是–(C＝R12)(C＝R13)NR2R3；
R12是氧代并且其被定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R12与钙蛋白酶2His262咪唑形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶2 His262咪唑的或更近之内；
R13是氧代并且其被定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R13与至少一个钙蛋白酶2部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2部分选自由Gln99侧链羧酰胺和Cys105骨架酰胺组成的组；并且
R2和R3独立地选自-H、任选取代的C1-4烷基、任选取代的C3-7碳环基、任选取代的5-10元杂环基、任选取代的C6-10芳基、任选取代的C6-10芳基(C1-C6)烷基和任选取代的5-10元杂芳基。
155.根据权利要求153所述的化合物，其中，R9由与其连接的碳定位，使得在所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R9的至少一个原子与至少一个钙蛋白酶2部分形成极性相互作用并在所述至少一个钙蛋白酶2部分的或更近之内，所述至少一个钙蛋白酶2部分选自由Gln99、Cys105和His262组成的组。
156.根据权利要求153所述的化合物，其中R9中在其连接点的碳原子与Cys195形成共价键。
157.根据权利要求119所述的化合物，其中共价键长度在1.7和之间。
158.根据权利要求153至157中任一项所述的化合物，其中P2是任选取代的5元杂芳基。
159.根据权利要求153至158中任一项所述的化合物，其中R11由与其键合的碳定位，使得当所述化合物与钙蛋白酶2结合时，R11与钙蛋白酶2 Gly261羰基形成极性相互作用并在所述钙蛋白酶2 Gly261羰基的或更近之内。
160.一种药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1-159中任一项的化合物和药学上可接受的赋形剂。
161.一种治疗纤维变性疾病或其继发疾病状态或病况的方法，其包括向有此需要的受试者施用权利要求1-159中任一项的化合物。
162.根据权利要求161所述的方法，其中所述疾病选自由以下组成的组：肝纤维化、肾纤维化、肺纤维化、过敏性肺炎、间质纤维化、系统性硬皮病、黄斑变性、胰腺纤维化、脾纤维化、心肌纤维化、纵隔纤维化、骨髓纤维化、心内膜心肌纤维化、腹膜后纤维化、进行性大块纤维化、肾源性系统性纤维化、手术纤维化并发症、慢性移植物血管病变和/或移植器官慢性排斥反应、缺血再灌注损伤相关纤维化、注射纤维化、肝硬化、弥漫性实质性肺病、输精管切除术后疼痛综合征和类风湿性关节炎。
163.根据权利要求161所述的方法，其中所述治疗降低钙蛋白酶的表达水平和/或活性。
164.根据权利要求163所述的方法，其中钙蛋白酶是CAPN1、CAPN2或CAPN9。
165.根据权利要求161所述的方法，其中所述治疗抑制肌成纤维细胞分化或治疗与肌成纤维细胞分化相关的疾病。
166.根据权利要求161所述的方法，其中所述治疗抑制成纤维细胞向肌成纤维细胞转化(FMT)。
167.根据权利要求161所述的方法，其中所述治疗抑制上皮细胞向间充质细胞转化或内皮细胞向间充质细胞转化。
168.根据权利要求167所述的方法，其中所述肌成纤维细胞分化是TGFβ介导的肌成纤维细胞分化。
169.根据权利要求161所述的方法，其中所述纤维化疾病是癌症。
170.根据权利要求169所述的方法，其中所述癌症是上皮来源的癌症。
171.根据权利要求170所述的方法，其中上皮来源的癌症选自由以下组成的组：乳腺癌、基底细胞癌、腺癌、胃肠癌、唇癌、口腔癌、食道癌、小肠癌、胃癌、结肠癌、肝癌、脑癌、膀胱癌、胰腺癌、卵巢癌、宫颈癌、肺癌、皮肤癌、前列腺癌和肾细胞癌。
172.根据权利要求161所述的方法，其中所述纤维化疾病是僵硬皮肤综合症(SKS)。
173.根据权利要求161所述的方法，其中所述化合物是式I的化合物。
174.根据权利要求161所述的方法，其中所述受试者是哺乳动物。
175.根据权利要求161所述的方法，其中所述受试者是人类。
176.根据权利要求161所述的方法，其中施用途径选自由以下组成的组：肠内、静脉内、口服、关节内、肌肉内、皮下、腹膜内、硬膜外、透皮和经粘膜。
177.根据权利要求161所述的方法，其中施用是静脉内施用。
178.一种抑制肌成纤维细胞分化的方法，其包括使细胞与权利要求1-159中任一项的化合物接触。
179.根据权利要求178所述的方法，其中所述细胞处于纤维化组织中。
180.根据权利要求178所述的方法，其中所述细胞处于癌组织中。
181.根据权利要求178所述的方法，其中所述细胞处于TGFβ信号传导高的组织中。
182.一种抑制钙蛋白酶的方法，所述方法包括使权利要求1-159中任一项的化合物与存在于受试者体内的CAPN1、CAPN2和/或CAPN9酶接触。
183.一种与钙蛋白酶抑制剂(CAST)竞争性结合的方法，所述方法包括使权利要求1-159中任一项的化合物与存在于受试者体内的CAPN1、CAPN2和/或CAPN9酶接触。
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