CN102172363B - 包含强心苷的scf提取物 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了包含强心苷的植物物料的超临界流体(SCF)提取物。所述提取物可以被包括在包含提取物增溶量的增溶剂的药物组合物内。当通过SCF提取来提取包含强心苷的植物如欧洲夹竹桃(Nerium oleander)时，所述提取物内包括夹竹桃苷。所述提取物还可以包含一种或多种其它SCF可提取的药理学活性剂。所述组合物可以用于治疗对强心苷有治疗响应的广泛的病症。

Description

包含强心苷的SCF提取物
本申请是2006年7月26日提交的发明名称为“包含强心苷的SCF提取物”的第200680027549.3号中国专利申请的分案申请。
在先提交申请的交叉参考
本申请是2005年7月28日提交的第11/191,650号美国申请的部分继续申请，该申请的全部内容特此被纳入本文作为参考。
技术领域
本发明涉及包括夹竹桃苷的药物制剂，所述夹竹桃苷作为包括强心苷的超临界流体(SCF)提取物存在。所述制剂包括一种或多种增溶剂(solubilizer)如表面活性剂，当将所述制剂置于水性环境中时，所述增溶剂至少帮助制剂中的强心苷、和任选帮助制剂中提取物的其它药理学活性组分的溶解、分散或乳化。
背景技术
欧洲夹竹桃(Nerium oleander)是广泛分布于亚洲亚热带、美国西南部和地中海的观赏性植物。早已认识到其医学性质和毒物学性质。它被用于治疗例如痔、溃疡、麻疯病、蛇咬、和甚至诱导流产。夹竹桃苷是夹竹桃提取物的重要组分，是人肿瘤细胞生长的强效抑制剂(Afaq F等Toxicol. Appl. Pharmacol.195：361-369，2004)。夹竹桃苷介导的细胞死亡涉及钙流入、细胞色素C从线粒体的释放、半胱天冬酶8和3的蛋白水解过程、聚(ADP-核糖)聚合酶裂解、以及DNA分裂。
已经证实夹竹桃苷是欧洲夹竹桃(Nerium oleander)的主要细胞毒性组分(Newman等，J.Herbal Pharmacotherapy，vol.13，pp.1-15，2001)。夹竹桃苷是外源性强心苷，正常情况下在体内不存在。夹竹桃苷在人肿瘤细胞系但不在鼠科动物肿瘤细胞系内诱导凋亡(Pathak等，Anti-Cancer Drugs，vol.11，pp.455-463，2000)，抑制NF-kB的活化(Manna等，Cancer Res.，vol.60，pp.3838-3847，2000)，并且部分地通过钙介导的细胞色素C的释放介导细胞死亡(McConkey等，Cancer Res.，vol.60，pp.3807-3812，2000)。近期完成了夹竹桃热水提取物的I期实验(Mekhail等，Am.Soc.Clin.Oncol.，vol.20，p.82b，2001)。结论是可以以高至1.2ml/m2/d的剂量安全地给予夹竹桃提取物。没有发现限制剂量的毒性。
除了对于肿瘤细胞的选择性细胞毒性，强心苷还可以增强细胞对离子辐射的细胞毒性作用的响应。毒毛花苷G是身体内源性强心苷，据报道它可增强A549人肺腺癌细胞的体外辐射敏感性，但在改变正常人肺纤维原细胞的辐射响应方面无效(Lawrence，Int.J.Radiat.Oncol.Biol.Phys.，vol.15，pp.953-958，1988)。毒毛花苷G后来显示可辐射敏化不同组织学类型的人肿瘤细胞，包括鳞状细胞癌和黑素瘤(Verheye-Dua等，Strahlenther.Onkol.，vol.176，pp.186-191，2000)。尽管毒毛花苷G诱导的辐射敏化的机理还没有被完全解释，但已经发现抑制从亚致死辐射损伤的修复和提高辐射诱导的凋亡的可能性(Lawrence，2000；Verheye Dua等，2000；Verheye-Dua等，Strahlenther.Onkol.，vol.172，pp.156-161，1996)。强心苷夹竹桃苷还能够增强细胞对离子辐射的细胞毒性作用的敏感性。参见授予Newman等的美国专利No.-10/957,875和Nasu等，Cancer Lett.Vol 185，pp.145-151，2002。
Chen等(Breast Cancer Research and Treatment(2006)，96，1-15)提出强心苷如毒毛花苷G和洋地黄可能可以用于开发同时作为Na+，K+-ATPase抑制剂和ER拮抗剂的抗乳腺癌药物。
Smith等(Biochemical Pharmacology(2000)，62，1-4)报告ANVIRZEL及其关键强心苷组分夹竹桃苷可抑制前列腺癌细胞系PC3和DU145释放纤维原细胞生长因子-2(FGF-2)。
Newman等(J.Experimental Therapeutics and Oncology(2006)，5，167-181)报告用夹竹桃苷温育人恶性黑素瘤BRO细胞导致时间依赖性地形成活性氧物种超氧化物阴离子基团，它们介导线粒体损伤和细胞GSH池的损失。
Newman等的美国授权前(Pregrant)专利申请公开No.-20050112059公开了通过给予夹竹桃苷可增强癌症治疗中的放射疗法。
通常使用沸水从夹竹桃属(Nerium)物种的植物中提取苷。使用沸水作为提取方法以从欧洲夹竹桃(Nerium oleander)中获得活性成分的工艺可获得许多产物。其中包括夹竹桃苷、夹竹桃叶苷和其它强心苷化合物。该植物提取物可用于治疗动物的细胞增殖性疾病。
以商标ANVIRZELTM出售的通过用热水提取欧洲夹竹桃(Nerium oleander)获得的夹竹桃苷提取物可购得，其包含浓缩形式或粉末化形式的欧洲夹竹桃(Neriumoleander)热水提取物。该提取物按照由Dr.Huseyin Ziya Ozel开发的工艺制备。美国专利No.-5,135,745描述了用于在水中制备植物提取物的程序。欧洲夹竹桃(Neriumoleander)植物的提取涉及将叶子切片，将切片的植物叶和茎在水中蒸煮2-3小时，并滤除残余物。将混合物再次加热。所报道的水性提取物包含几种分子量为2KD至30KD的多糖、夹竹桃苷和夹竹桃苷元、奥多诺苷(odoroside)和neritaloside。所报道的多糖包括酸性均聚半乳糖醛酸或阿拉伯糖半乳糖醛酸。
Muller等(Pharmazie.(1991)Sept.46(9)，657-663)公开了关于欧洲夹竹桃(Neriumoleander)的水提取物的分析结果。他们报道存在的多糖主要是半乳糖醛酸。其它多糖包括鼠李糖、阿拉伯糖和半乳糖。Newman等(J.Herbal Pharmacotherapy，(2001)vol1，pp.1-16)还报告了欧洲夹竹桃(Nerium oleander)热水提取物内的多糖含量和多糖的各自的糖组成。
授予Selvaraj等的美国专利No.-5,869,060涉及夹竹桃属(Nerium)物种的提取物和制备的方法。要制备提取物，将植物材料置于水中并煮沸。然后从植物物质中分离粗提物并通过过滤灭菌。然后将所得提取物冻干以制备粉末。
美国专利No.-6,565,897(Selvaraj等的美国授权前公开No.-20020114852和PCT国际公开No.-WO 2000/016793)公开了用于制备基本上无菌的提取物的热水提取工艺。
Erdemoglu等(J.Ethnopharmacol.(2003)Nov.89(1)，123-129)基于其抗疼痛和抗炎活性公开了植物，包括欧洲夹竹桃(Nerium oleander)的水提取物和乙醇提取物的比较结果。
Adome等(Afr.Health Sci.(2003)Aug.3(2)，77-86；乙醇提取物)、el-Shazly等(J.Egypt Soc.Parasitol.(1996)，Aug.26(2)，461-473；乙醇提取物)、Begum等(Phytochemistry(1999)Feb.50(3)，435-438；甲醇提取物)、Zia等(J.Ethnolpharmacol.(1995)Nov.49(1)，33-39；甲醇提取物)、和Vlasenko等(Farmatsiia.(1972)Sept.-Oct.21(5)，46-47；醇提取物)也公开了欧洲夹竹桃(Nerium oleander)的有机溶剂提取物。
超临界流体提取涉及使用超临界流体选择性地提取特定的化合物。超临界流体在大气条件下是液体或气体，但在它被压缩超过其临界压力和被加热超过其临界温度时变成超临界的。超临界流体在其临界区域内具有提高的溶解力。超临界流体的性质介于气体和液体之间，并能够溶解在气态或液态时仅仅微溶或根本不溶的化合物。超临界流体用于提取这些化合物是理想的，因为超临界流体在高密度下具有高溶解力，当压力或温度被改变时在较低密度显示化合物从流体中的良好分馏和分离。Raventos等已经在2002年(M.Raventos等Application and Possibilities of SupercriticalCO2 Extraction in Food Processing Industry：An Overview，Food Sci.Tech.Int.Vol.8(5)(2002)269-284)描述了在食品加工工业中使用超临界二氧化碳提取的一般程序，该文献的全部内容据此被纳入本文作为参考。
Singh等的美国授权前专利申请公开No.-20040247660公开了用于治疗癌症的蛋白质稳定的夹竹桃苷脂质体制剂的制备。
Singh等的美国授权前专利申请公开No.-20050026849公开了包含环糊精的夹竹桃苷的水溶性制剂。‘849公开提出了包含夹竹桃苷的环糊精复合物的固体填充胶囊的制备。夹竹桃苷被作为热水提取物或化学实体提供，然后用环糊精处理以形成复合物。
Singh等的美国授权前专利申请公开No.-20040082521公开了从热水提取物中制备夹竹桃苷的蛋白质稳定纳米粒制剂的方法。通过形成脂质体混合物然后蒸发其中的有机溶剂来制备纳米粒。
因此保证了用于提高来自植物材料的夹竹桃苷的相对含量的方法。尽管欧洲夹竹桃(Nerium oleander)的热水提取物可以以相对低的产率提供夹竹桃苷和相关强心苷，但需要用于获得浓缩形式的强心苷包括夹竹桃苷的改良方法。
夹竹桃苷包含对酸敏感的内酯环，当口服给药时使所述物质易于酸降解，因此在制备液体制剂中必须注意确保溶液内的酸性物质最少化。
已知技术未曾公开包括夹竹桃属(Nerium)物种，尤其是欧洲夹竹桃(Neriumoleander)的提取物的药物制剂。本领域也未曾公开或提示包括强心苷如夹竹桃苷的超临界流体提取物。持续需要更多剂型，以合适地递送夹竹桃属(Nerium)物种的提取物组分以治疗各种疾病和病症。还持续需要通过从植物材料中提取以获得强心苷的改良方法。
发明内容
本发明希望克服本领域的一些或全部固有缺点。本发明提供了包括强心苷的超临界流体(SCF)提取物。所述提取物可以通过包含强心苷的植物物料的超临界流体提取获得。所述植物物料可以是夹竹桃属(Nerium)物种或黄花夹竹桃属(Thevetia)物种植物物料。具体物种包括欧洲夹竹桃(Nerium oleander)或黄花夹竹桃(Thevetianerifolia)。所述超临界流体提取物可以包括至少一种其它药理学活性剂，当将提取物给予受试者时，该药理学活性剂促进强心苷的治疗功效。它可以相加或协同地促进治疗功效。
本发明还提供了包括含有强心苷的SCF提取物的药物组合物。本发明的一些实施方案包括夹竹桃植物(oleander plant)，如夹竹桃属(Nerium)物种，如欧洲夹竹桃(Nerium oleander)，或黄花夹竹桃属(Thevetia)物种，如黄花夹竹桃(Thevetianerifolia)的提取物。可以按照本文所述或2005年7月28日以C.Addington的名义提交的目前未决的美国申请60/653,210和2005年7月28日以C.Addington的名义提交的美国申请11/191,650所述的方法，或通过本文所述的方法，通过超临界流体(SCF)二氧化碳(CO2)提取植物材料如植物物料的干粉末制备所述提取物，这些文献的全部内容据此被纳入本文作为参考。SCF提取可以在改性剂的存在下进行，以提高所需化合物从植物物料中的提取。
因此，本发明还提供了包含强心苷的植物物料的超临界流体提取方法。所述方法包括：
用超临界流体将包含强心苷的植物物料处理足以从植物物料中提取强心苷的一段时间；
从超临界流体中分离植物物料；和
除去超临界流体，从而形成包括强心苷的超临界流体(SCF)提取物。
所述超临界流体还可以包括改性剂。所述SCF提取物还可以包括除强心苷以外的至少一种其它的药理学活性剂。所述其它活性剂可以在将提取物给予受试者时促进强心苷的治疗功效。所述其它活性剂可以相加或协同地促进强心苷的治疗功效。所述包含强心苷的植物物料可以包括夹竹桃属(Nerium)物种或黄花夹竹桃属(Thevetia)物种。
本发明的组合物及其剂型的优点是它能够在口服给予后提供提取物的全部或至少主要部分的溶液，从而当置于水性环境中时，所有组分是溶解的、乳化的或分散的。溶解、分散或乳化可以是简单溶解、胶束形成或自乳化的结果，这取决于组合物所用的赋形剂组合。在一些实施方案中，SCF提取物的溶解是非pH依赖的。另一个优点是所有提取物组分基本上完全溶解在包括所述SCF提取物的液体药物组合物中。
在一些实施方案中，所述制剂包括选自水溶性(混溶的)助溶剂、水不溶性(不混溶的)助溶剂、表面活性剂、抗氧化剂、螯合剂、吸收促进剂的至少两种物质和SCF提取物的组合。
本发明的一个方面提供了药物组合物，其包括：
·夹竹桃植物物料的超临界流体提取物；和
·提取物增溶量的至少一种增溶剂。
在本发明的一些实施方案中，夹竹桃植物物料包括夹竹桃属(Nerium)物种如欧洲夹竹桃(Nerium oleander)、或黄花夹竹桃属(Thevetia)物种如黄花夹竹桃(Thevetia nerifolia)(或被称为黄色夹竹桃)。所述夹竹桃植物物料是包含强心苷的植物物料。所述强心苷可以是夹竹桃苷。
本发明的另一方面提供了包括胶囊壳和本文所述的药物组合物的胶囊制剂。在一些实施方案中，所述胶囊制剂包括：
·胶囊壳；
·通过夹竹桃属(Nerium)物种的超临界流体提取获得的夹竹桃苷提取物；和
·提取物增溶量的至少一种增溶剂。
所述胶囊制剂可以是固体、液体或半固体。所述增溶剂可以包括单种组分或两种、三种、四种、五种或更多种组分的混合物。所述组分可以选自水溶性(混溶的)助溶剂、水不溶性(不混溶的)助溶剂、表面活性剂和抗氧化剂。
本发明的一些实施方案包括SCF提取物和：
·至少一种水混溶的(water miscible)溶剂；
·至少一种抗氧化剂；和
·至少一种表面活性剂。
所述增溶剂为至少单一的表面活性剂，但它也可以是多种物质的组合，例如以下物质的组合：a)表面活性剂和水混溶的溶剂；b)表面活性剂和水不混溶(waterimmiscible)的溶剂；c)表面活性剂、抗氧化剂；d)表面活性剂、抗氧化剂和水混溶的溶剂；e)表面活性剂、抗氧化剂和水不混溶的溶剂；f)表面活性剂、水混溶的溶剂和水不混溶的溶剂；或g)表面活性剂、抗氧化剂、水混溶的溶剂和水不混溶的溶剂。
所述组合物任选地还包括：a)至少一种液体载体；b)至少一种乳化剂；c)至少一种增溶剂；d)至少一种分散剂；e)至少一种其它赋形剂；或f)其组合。
在一些实施方案中，水混溶的溶剂是低分子量(小于6000)的PEG、二醇或醇。在一些实施方案中，所述表面活性剂是PEG化的表面活性剂，即包括聚(乙二醇)官能团的表面活性剂。
在口服给予或暴露至水性溶液前，组合物的一些实施方案是澄清的，另一些是混悬液。在口服给予后或在水性介质中，本发明的一些实施方案在受试者的胃肠(GI)道内形成乳液、胶束分散体或固体分散体(混悬液)。
本发明的剂型适合口服给予受试者并适合治疗恶性瘤性疾病、癌症、肿瘤、病毒感染和对强心苷如夹竹桃苷有治疗响应的其它适应症、病症或症状。在用于本文时，术语“受试者”指恒温动物如哺乳动物，例如猫、狗、小鼠、豚鼠、马、牛(bovinecows)、羊和人。实施例7-9提供了用本发明的SCF提取物治疗各种病症的示例性程序。所述SCF提取物可以用于治疗直肠、肛门、结肠直肠组织、头和颈组织、食道组织、肺(非小细胞和小细胞癌两者)、乳腺、胃、胰腺、前列腺、肝、肾、膀胱、输尿管、卵巢组织的癌，类癌瘤，骨的肉瘤，间皮瘤和中枢神经系统的瘤。
所述液体组合物的一些实施方案是无水的或未向其中添加水。所述组合物可以包含已经存在于一种或多种组合物组分内的内生水(endogenous water)。或者，所述组合物包含作为其独立组分添加的水。
附图说明
下列附图形成本说明书的部分并描述了所要求保护的发明的示例性实施方案。根据这些附图和本文的描述，技术人员将能够实施本发明而无需进行过度的实验。
图1A和1B描绘现有技术的热水提取物与本发明示例性的超临界流体提取物的HPLC色谱图比较。
图2描绘本发明肠溶包衣的液体填充胶囊的溶出曲线。
图3描绘作为用于比较夹竹桃苷、热水提取物和本发明SCF提取物的抑制活性的实验的一部分获得的凝胶电泳的相关带的照片。
具体实施方式
可以在按照2005年2月15日以Addington的名义提交的目前未决美国临时申请60/653,210或2006年1月26日以Addington的名义提交的美国申请11/340,016所述的方法制备的欧洲夹竹桃(Nerium oleander)叶的干燥粉末上实施所述提取方法，这些文献的全部内容据此被纳入本文作为参考。
用于加工夹竹桃叶的方法的重要内容是使用受专利保护的粉碎和脱水系统和方法，所述系统和方法利用空气的涡旋来提取水分并按尺寸分离植物颗粒。合适的粉碎和脱水系统描述于全部授予Frank Rowley，Jr.的美国专利No.-5,236,132、No.-5,598,979、No.-6,517,015和No.-6,715,705，这些文献的全部内容分别据此被纳入本文作为参考。通常，用于加工夹竹桃叶的方法涉及：收集合适的叶和茎，洗涤收集的植物材料，干燥叶和茎，和使叶通过使用空气涡旋来提取水分并按尺寸分离植物颗粒的设备。较大的颗粒被再加工或用作粗材料。最小的颗粒被保留作为夹竹桃细粉，然后可对其进行进一步提取以获得夹竹桃苷和其它药理学活性组分。
通过将气体加热超过其临界温度或将气体压缩超过其临界压力来产生超临界流体。超临界流体提取包括至少两步：提取和分离。示例性的超临界流体提取器包括：流动相，通常为CO2的罐、用于给气体加压的泵、包含提取容器的烘箱、用于在提取线路内保持高压的限流器、和捕集容器。使包含溶质的超临界流体减压进入空瓶内、经过溶剂、或到达固体吸附材料上，由此捕集分析物。提取在动态模式、静态模式或组合模式内完成。在动态提取中，超临界流体连续流过提取容器内的样品并离开限流器到达捕集容器。在静态模式中，超临界流体在包含提取容器的环路内循环一段时间，然后通过限流器释放到捕集容器内。在组合模式中，将静态提取运行一段时间，然后进行动态提取。
通常，将原材料和处于特定压力和温度条件下的超临界流体一起置于提取装置内，以从植物材料中提取所需的组分。在提取后，使流体和化合物经过改变压力和温度的分离器，从而降低超临界流体的溶解力并引起溶解的化合物的分离或分馏。
这样制备SCF提取物：在超临界压力和温度下将夹竹桃植物原材料与二氧化碳混合，使用或不使用化学改性剂，然后降低混合物的压力和温度并分离出提取物。提取物随着混合物的压力和温度降低而分离。优选使用粉状夹竹桃叶作为原材料。粉状叶颗粒保证将最大量的表面和内部叶面积暴露至提取工艺。与目前可用的提取方法相比，这提供了在提取物内回收的活性组分量的指数提高。下表包括可以用作SCF提取溶剂的不同溶剂及其相应的临界温度和临界压力。
  流体  临界温度(K)   临界压力(巴)
  二氧化碳  304.1   73.8
  乙烷  305.4   48.8
  乙烯  282.4   50.4
  丙烷  369.8   42.5
  丙烯  364.9   46.0
  三氟甲烷(氟仿)  299.3   48.6
  氯代三氟甲烷  302.0   38.7
  三氯代氟甲烷  471.2   44.1
  氨  405.5   113.5
  水  647.3   221.2
  环己烷  553.5   40.7
  正戊烷  469.7   33.7
  甲苯  591.8   41.0
二氧化碳是用于从夹竹桃植物中提取活性组分的优选超临界流体。其临界温度为31.06℃，其临界压力为73.83巴，其临界密度为0.460g/cm3。然而，预期其它化合物或其混合物也可以用于夹竹桃苷的SCF提取工艺。
在一些实施方案中，将助溶剂或改性剂包括在超临界流体内。改性剂的挥发性通常介于超临界流体的挥发性与被提取化合物的挥发性之间，它们必须可与超临界流体混溶。在一些实施方案中，所述改性剂在环境条件下是液体。作为非限制性的实例，改性剂可以选自乙醇、甲醇、丙醇、水、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷等(参见上表)。对于从夹竹桃植物中提取药理学活性组分，乙醇是特别合适的改性剂。它可以以每kg生物材料35至75kg乙醇溶剂的比率使用，但优选比率为每kg生物材料55kg溶剂。可以如下或按照实施例1所述进行用于从欧洲夹竹桃(Nerium oleander)中SCF提取夹竹桃苷的示例性提取工艺。将起始粉碎植物材料与二氧化碳在提取装置内合并。将纯CO2或其与一种或多种改性剂的混合物用作超临界溶剂。在约280巴或约270至320巴的压力、和约50℃或约40至60℃的温度下进行提取。按溶剂与原材料二者的重量计，溶剂与粗原料的比率优选为约50∶1或约45∶1至60∶1。
在另一个示例性提取工艺中，超临界二氧化碳还包括作为改性剂被添加到提取装置内的起始植物材料中的乙醇(参见实施例1)。在约280巴(或约270至320巴)的压力、和约50℃或约40至60℃的温度下进行提取。按溶剂和合并的改性剂与原材料二者的重量计，溶剂和改性剂与粗原料的比率优选为约40至约45∶1。
在提取后，进行分离。在一些示例性实施方案中，使包含或不包含改性剂、合并有溶解的原材料的超临界溶剂经过可降低溶剂混合物的压力和温度的分离装置，直到分离和回收了包含活性组分的提取物。
所述提取物是药理学活性化合物如夹竹桃苷或其它强心苷、多糖和其它植物材料的混合物。通过SCF工艺获得的夹竹桃苷富集提取物在环境温度下是基本上不溶于水的粘性半固体。所述SCF提取物包括许多具有各种不同水溶性范围的不同组分。来自超临界流体工艺的夹竹桃苷提取物按重量计包括理论范围为0.9％至2.5％的夹竹桃苷。获得了包括各种量的夹竹桃苷的SCF提取物。在一个实施方案中，所述SCF提取物包括约2重量％夹竹桃苷。剩余的粘性半固体提取物由水不溶性纤维素材料组成。多糖组分与夹竹桃苷的溶解性不同。热水提取物与SCF提取物的性质和组成不同。所述SCF提取物包含比热水提取物浓度高3-10倍的夹竹桃苷。这由HPLC以及LC/MS/MS(串联质谱)分析证实。
将现有技术的热水提取物与本发明的SCF提取物相比。图1A描绘现有技术各热水提取物的HPLC色谱图，图1B描绘本发明各SCF提取物的HPLC色谱图。按照实施例11的详述进行分析。17.6min的峰被鉴定为oleaside A。29.9min的峰被鉴定为夹竹桃苷。通过以10mg提取物/ml HPLC缓冲液的浓度进样提取物的样品获得所述色谱图。热水提取物的数据使用30μl进样体积获得，SCF提取物的数据使用10μl进样体积获得。测定的样品如下：
  提取物   Oleaside(％)   夹竹桃苷(％)
  热水   0.094   0.17
  SCF   0.73   2.68
两种提取物在其夹竹桃苷和oleaside A的浓度及其本文未鉴定的各种其它组分的组成和相对量方面非常不同。夹竹桃苷的浓度由于超临界CO2提取工艺提高了15倍。作为潜在的临床治疗益处，将需要远远更小量的超临界CO2提取物来获得与热水提取物类似的活性和功效。结果是，预期超临界CO2提取物提供最大的治疗功效并克服热水提取物为了获得类似的治疗效果所致的剂量过高(over-dosage)的缺点。
所述提取物在通过对抗几种肿瘤细胞系的功效确定的其相对性能方面也不同(实施例10)。制备了包含夹竹桃苷的样品以包含相同量的夹竹桃苷，尽管各样品内的夹竹桃苷浓度由于在提取物内的浓度不同而变化。下表总结了所得数据。
Figure BSA00000455912200091
*将受试化合物的IC50表示为在那些提取物内的微摩尔(μM)夹竹桃苷浓度。也就是说，该数据表示与未受治疗的细胞相比，抑制50％肿瘤细胞生长或增殖所必须的作为游离化学品或作为提取物一部分的夹竹桃苷的浓度。
如上表所示，超临界CO2提取物在Panc-1和BRO细胞两者中的IC50值仅为单独的夹竹桃苷的50％，这提示在抑制Panc-1或BRO细胞的生长方面，夹竹桃的超临界CO2提取物比单独的夹竹桃苷强至少两倍(更有效)。相比之下，热水提取物在三种受试实体中效能最低。数据证实夹竹桃苷以及具有相关功效的提取物对抗人肿瘤细胞系的有效细胞毒性如下：超临界CO2提取物＞夹竹桃苷＞热水提取物。这些数据暗示，超临界CO2提取物的细胞毒性可能源自除夹竹桃苷外SCF提取物中还存在的至少一种其它药理学活性组分，并且超临界CO2提取物的功效远远比热水提取物的功效更大(7.4倍)。该数据清楚地显示了SCF提取物与热水提取物和甚至单独的夹竹桃相比在功效方面的充分改进。所述功效的改进超出了基于仅提高SCF提取物中夹竹桃苷的浓度可能获得的预期改进。
称为Akt的丝氨酸/苏氨酸激酶的磷酸化为肿瘤细胞提供了增强的存活能力。增强的Akt活性可促进通常应由于凋亡而死亡的肿瘤细胞的存活。此外，pAkt参与细胞增殖、血管发生、染色体组不稳定性以及细胞入侵和迁移(Yoeli-Lerner M和TokerA.Akt/PKB Signaling in Cancer.Cell Cycle 5：603-605，2006)。所有这些响应均有助于引发和发展。关于Akt信号传导在癌症中的重量性的进一步证据来自在广泛的人肿瘤内检测到Akt的过度表达和过度激活(通过磷酸化)的研究，这通常与不良的预后有关。还比较了热水和SCF提取物在人胰腺癌(Panc-1)细胞中的关键细胞信号传导蛋白质的相对活性。数据(图3)证实蛋白质激酶Akt的激活减少(磷酸化形式pAkt的表达浓度依赖性地下降)和MAPK/ERK(促分裂原活化蛋白激酶/胞外信号调节激酶)途径的激活上升(磷酸化形式pERK浓度依赖性地上升)。夹竹桃苷和超临界CO2提取物两者均能够抑制PI3激酶，从而导致Akt在Panc-1细胞内的磷酸化减少，而热水提取物没有显示这种活性。此外，在用夹竹桃苷或超临界CO2提取物治疗的细胞内，pERK的表达显著上升，但在用热水提取物治疗的细胞中并非如此。超临界CO2提取物抑制pAkt表达的相对能力远远大于夹竹桃苷或欧洲夹竹桃(Nerium oleander)热水提取物的抑制能力。考虑到磷酸-Akt与癌细胞存活和癌细胞的药物和放射耐受性上升有关的事实，抑制pAkt将导致抑制癌细胞的增殖。因此，这些结果提示，超临界CO2提取物具有通过压抑pAkt的表达和提高pERK的表达来抑制Panc-1细胞增殖的与单独的夹竹桃苷极为相似的机理，但效果远远更强于单独的夹竹桃苷的效果。我们没有在用热水提取物治疗的细胞中观察到任何类似的变化。因此，本发明提供了通过用有效量的本发明SCF提取物治疗细胞来抑制或减少癌细胞内的Akt磷酸化程度的方法。在一些实施方案中，所述提取物的有效量指相当于包含至少5nM当量的量，但5至50nM的范围均被认为是有用的。该浓度的超临界提取物将可用于抑制肿瘤细胞增殖以及肿瘤细胞迁移和转移。此外，pAkt的抑制将预防血管发生，并因此通过抑制生长的肿瘤的血液和营养供应的发展来抑制肿瘤细胞增殖。
本发明还提供了通过用有效量的本发明SCF提取物治疗细胞来增强癌细胞内的pERK(胞外信号调节激酶；ERK)表达的方法。在一些实施方案中，所述提取物的有效量为至少5nM，但5至50nM的范围均被认为是有用的。通过磷酸化激活ERK是诱导自噬(autophagic)肿瘤细胞死亡所需的，此外还可导致诱导参与细胞周期停滞的蛋白质p21(抑制肿瘤细胞的增殖)。
本发明还提供了通过用有效量的本发明SCF提取物治疗细胞来抑制肿瘤细胞增殖的方法。
在24-小时内评价夹竹桃苷、热水提取物和SCF提取物对用其治疗的PANC-1细胞的细胞周期变化的影响。用25nM单独的夹竹桃苷或相当于25nM夹竹桃苷的夹竹桃热水提取物或超临界CO2提取物将Panc-1细胞治疗24hr。通过流式细胞仪进行细胞周期分析。细胞分化由两个连续的过程组成，其主要特征是DNA复制，然后复制的染色体分裂进入两个独立的细胞。DNA的复制发生在分裂间期的特定部分，被称为S期。S期前面是称为G1的间隙期，在G1期间细胞准备合成DNA。S期后面是称为G2的间隙期，在G2期间细胞准备有丝分裂。然后是有丝分裂相或M期。G1、S、G2和M期是标准细胞周期的常规细分。处于G2/M阻滞(G2/M block)的细胞如由超临界CO2提取物诱导的细胞不能进行分化。下表总结了数据。
 化合物   G1期   S期   G2/M期
 对照   37.0   47.7   15.4
 夹竹桃苷   30.5   43.3   26.2
 热水提取物   33.0   38.8   23.2
 超临界CO2提取物   30.1   40.2   29.7
该数据表示为处于细胞周期给定期内的细胞的相对百分比。
所述数据证实夹竹桃苷以及其它两种夹竹桃提取物均可通过引起细胞停滞在G2/M期来抑制panc-1细胞的增殖。再次，与单独的夹竹桃苷或热水提取物相比，处于相似浓度的超临界CO2提取物导致更强的G2/M相停滞。
基于此处的数据，本发明人已经证实了超临界CO2提取物可以被具体地配制以获得有用的口服生物利用度水平。现有技术热水提取物的口服吸收则没有这样的数据。
由此处的数据证明，所述SCF提取物包括各种组分的混合物。一些所述组分包括夹竹桃苷、oleaside A、夹竹桃苷元(oleandrigenin)、neritaloside和奥多诺苷(odorside)(Wang X，Plomley JB，Newman RA和Cisneros A.LC/MS/MS analyses of anoleander extract for cancer treatment.Alanytical Chem.72：3547-3552，2000)以及其它未鉴定的组分。所述SCF提取物的SCF可提取未鉴定组分似乎包括SCF提取物内能促进夹竹桃苷功效的至少一种其它药理学活性组分。所述至少一种其它SCF可提取的组分与夹竹桃苷相加或协同地发挥作用以提供所观察到的功效。
采用热水提取物治疗方案的患者被要求自己给予每天肌内推注。在临床机构内的本发明执业者(practitioner)可预期当与肌内给予途径相比时患者对治疗方案的依从性提高。执业者还可预期当与通过肌内注射的每日肌内给予途径相比时受试者对长期治疗口服给予途径的接受性(在依从性方面)提高。执业者还可预期与热水提取物相比时SCF提取物的剂量滴定能力的改进，因为热水提取物具有由推注体积确定的限制。据本发明人所知，本发明不存在这样的限制。
本发明的制剂和药物组合物包括夹竹桃属(Nerium)物种的SCF提取物和提取物增溶量的增溶剂。在用于本文时，术语“增溶剂”指在水性环境中帮助SCF提取物的一种或多种组分，至少夹竹桃苷的溶解、乳化或分散的化合物、或化合物的混合物。增溶剂包括选自水溶性(混溶)助溶剂、水不溶性(不混溶)助溶剂、抗氧化剂、液体载体、表面活性剂及其组合的一种、两种、三种或更多种材料。通过举例而非限制，示例性的增溶剂包括美国专利No.-6,451，339公开的那些化合物，该文献的全部内容据此被纳入本文作为参考。在用于本文时，术语“提取物增溶量”指当将药物组合物在水性介质中放置一段足够的时间，例如至少10、至少20或至少30分钟时，足够溶解至少相当部分(至少5重量％或至少25重量％或至少50重量％)提取物的增溶剂的量。所述增溶剂可以包括一种、两种、三种、四种、五种或更多种赋形剂。所述增溶剂可以作为“增溶试剂”(solubilizing agent)，即在水性环境中帮助SCF提取物的一种或多种组分，至少夹竹桃苷或另一种药理学活性剂的溶出的化合物、或化合物的混合物。所述增溶剂还可以作为“乳化剂”，即在水性环境中帮助SCF提取物的一种或多种组分，至少夹竹桃苷或另一种药理学活性剂的乳化的化合物、或化合物的混合物。
应该注意此处的化合物可以在本发明的制剂中具有一种或多种功能。例如，化合物可以既作为表面活性剂又作为水混溶的溶剂或既作为表面活性剂又作为水不混溶的溶剂。
增溶剂中的示例性赋形剂组合包括至少下列：a)至少一种水混溶的溶剂、至少一种抗氧化剂和至少一种表面活性剂；b)至少一种水混溶的溶剂和至少一种表面活性剂；c)至少一种水不混溶的溶剂、至少一种水混溶的溶剂、至少一种抗氧化剂和至少一种表面活性剂；和d)两种、三种、四种、五种或更多种赋形剂的其它组合。
根据增溶剂内的材料组合，当在口服给予后置于水性环境如测定溶液或受试者的GI道中时，所述液体药物组合物可以形成溶液、胶束乳液、分散体、微粒或固体分散体。
所述液体组合物可以包括一种或多种药学可接受的液体载体。所述液体载体可以是水性的、非水性的、极性的、非极性的、和/或有机的载体。通过举例而非限制，液体载体包括水混溶的溶剂、水不混溶的溶剂、水、缓冲液及其混合物。
在用于本文时，术语“水溶性溶剂”或“水混溶的溶剂”可互换使用，指不会与水形成两相混合物或可充分溶于水中以提供包含至少百分之五溶剂而液相不会分离的水性溶剂混合物的有机液体。所述溶剂适合给予人或动物。通过举例而非限制，示例性的水溶性溶剂包括PEG(聚(乙二醇))、PEG400(近似分子量为约400的聚(乙二醇))、乙醇、丙酮、烷醇、醇、醚、丙二醇、丙三醇、三醋精、聚(丙二醇)、PVP(聚(乙烯基吡咯烷酮))、二甲亚砜、N，N-二甲基甲酰胺、甲酰胺、N，N-二甲基乙酰胺、吡啶、丙醇、N-甲基乙酰胺、丁醇、soluphor(2-吡咯烷酮)、pharmasolve(N-甲基-2-吡咯烷酮)。
在用于本文时，术语“水不溶性溶剂”或“水不混溶的溶剂”可互换使用，指可与水形成两相混合物或当溶剂在水中的浓度超过百分之五时提供相分离的有机液体。所述溶剂适合给予人或动物。通过举例而非限制，示例性的水不溶性溶剂包括中链/长链甘油三酯、油、蓖麻油、玉米油、维生素E、维生素E衍生物、油酸、脂肪酸、橄榄油、softisan 645(二甘油辛酸酯/癸酸酯/硬脂酸酯/羟基硬脂酸癸二酸酯)、miglyol、captex(Captex 350：甘油三辛酸酯/癸酸酯/月桂酸甘油三酯；Captex 355：甘油三辛酸酯/癸酸甘油三酯；Captex 355EP/NF：甘油三辛酸酯/癸酸中链甘油三酯)。
合适的溶剂列于“国际人用药品注册技术要求谐调会仪(ICH)关于工业Q3C杂质的指导原则：残余溶剂”(“International Conference on Harmonisation of TechnicalRequirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use(ICH)guidance forindustry Q3C Impurities：Residual Solvents”，1997)，其中推荐了药品中何种量的残余溶剂被认为是安全的。优选的溶剂被列为第2类或第3类溶剂。第3类溶剂包括例如乙酸、丙酮、茴香醚、1-丁醇、2-丁醇、乙酸丁酯、叔丁基甲基醚、枯烯、乙醇、乙基醚、乙酸乙酯、甲酸乙酯、甲酸、庚烷、乙酸异丁酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、甲基-1-丁醇、甲基乙基酮、甲基异丁基酮、2-甲基-1-丙醇、戊烷、1-戊醇、1-丙醇、2-丙醇、或乙酸丙酯。
可用作本发明的水不混溶溶剂的其它材料包括：Captex 100：丙二醇二癸酸酯；Captex 200：丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯；Captex 200P：丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯；丙二醇二辛酸癸酸酯；Captex 300：甘油三辛酸酯/癸酸酯；Captex 300EP/NF：甘油三辛酸酯/癸酸中链甘油三酯；Captex 350：甘油三辛酸酯/癸酸酯/月桂酸酯；Captex355：甘油三辛酸酯/癸酸酯；Captex 355EP/NF：甘油三辛酸酯/癸酸中链甘油三酯；Captex 500：三醋精；Captex 500P：三醋精(药用级)；Captex 800：丙二醇二(2-乙基己酸酯)(2-Ethythexanoate)；Captex 810D：甘油三辛酸酯/癸酸酯/亚油酸酯；Captex1000：甘油三癸酸酯；Captex CA：中链甘油三酯；Captex MCT-170：中链甘油三酯；Capmul GMO：甘油单油酸酯；Capmul GMO-50EP/NF：甘油单油酸酯；Capmul MCM：中链甘油一酯&甘油二酯；Capmul MCM C8：甘油单辛酸酯；Capmul MCM C10：甘油单癸酸酯；Capmul PG-8：丙二醇单辛酸酯；Capmul PG-12：丙二醇单月桂酸酯；Caprol 10G100O：十甘油(decaglycerol)十油酸酯；Caprol 3GO：三甘油单油酸酯；CaprolET：混合脂肪酸的聚甘油酯；Caprol MPGO：六甘油二油酸酯；Caprol PGE 860：十甘油单油酸酯、二油酸酯。
在用于本文时，“表面活性剂”指包括极性或带电亲水部分以及非极性疏水(亲脂)部分的化合物；即表面活性剂是两性的。术语“表面活性剂”可以指一种化合物或化合物的混合物。表面活性剂可以是增溶试剂、乳化剂或分散剂。
通常用于描绘非离子型两性化合物的相对亲水性和亲脂性的经验参数是亲水-亲脂平衡值(“HLB”值)。具有较低HLB值的表面活性剂更疏水，在油中具有更大的溶解度，而具有较高HLB值的表面活性剂更亲水，在水溶液中具有更大的溶解度。使用HLB值作为粗略的向导，一般认为亲水表面活性剂是HLB值大于约10的那些化合物以及HLB尺度通常不适用的阴离子型、阳离子型或两性离子型化合物。类似地，疏水表面活性剂是HLB值小于约10的化合物。
应该理解，表面活性剂的HLB值只是通常用于配制工业、药物和化妆品乳液的粗略向导。对于许多重要的表面活性剂，包括几种聚乙氧基化的表面活性剂，已经报道根据所选择用于确定HLB值的经验方法，HLB值可以相差多至约8个HLB单位(Schott，J.Pharm.Sciences，79(1)，87-88(1990))。类似地，对于某些包含嵌段共聚物的聚环丙烷(PLURONIC表面活性剂，BASF Corp.)，HLB值可能不能精确地反映化合物的真实理化性质。最后，商业表面活性剂产品一般不是纯化合物，而是多种化合物的复杂混合物，为特定化合物报道的HLB值可能更准确地表征以所述化合物作为主要组分的商业产品的特征。具有相同的主要表面活性剂组分的不同商业产品可能、并通常的确具有不同的HLB值。此外，即使对于单一的商业表面活性剂产品，也可预期批次间具有一定量的变异性。注意这些内在的困难，并使用HLB值作为向导，本领域技术人员可以容易地识别具有适合用于本发明的亲水性或疏水性的表面活性剂，如本文所述。
亲水表面活性剂可以是适合用于药物组合物的任何亲水表面活性剂。所述表面活性剂可以是阴离子型的、阳离子型的、两性离子型的或非离子型的，但目前优选非离子型亲水表面活性剂。如上所述，这些非离子型亲水表面活性剂通常将具有大于约10的HLB值。亲水表面活性剂的混合物也在本发明的范围内。
类似地，疏水表面活性剂可以是适合用于药物组合物的任何疏水表面活性剂。通常，合适的疏水表面活性剂将具有小于约10的HLB值。疏水表面活性剂的混合物也在本发明的范围内。
对具体的疏水和亲水表面活性剂的选择应该考虑要用于组合物内的特定疏水治疗剂、和适合所选治疗剂的极性范围，如下面的详述。考虑这些一般原则，非常广泛的表面活性剂适合用于本发明。所述表面活性剂可以分成下文各表中详述的下列一般化学种类。下文表中给出的HLB值通常表示由相应的商业产品供应商报告的HLB值。当列出多于一种商业产品时，表内的HLB值是商业产品之一所报告的值、各报告值的粗略平均值、或据本发明人判断更可靠的值。应该强调本发明不限于下文各表内的表面活性剂，这些表显示代表性、而非排外性的可用表面活性剂列表。
1.聚乙氧基化的脂肪酸
尽管聚乙二醇(PEG)本身不能作为表面活性剂，但各种PEG-脂肪酸酯具有有用的表面活性剂性质。其中PEG-脂肪酸单酯、月桂酸、油酸和硬脂酸的酯是最有用的。在表1的表面活性剂中，优选的亲水表面活性剂包括PEG-8月桂酸酯、PEG-8油酸酯、PEG-8硬脂酸酯、PEG-9油酸酯、PEG-10月桂酸酯、PEG-10油酸酯、PEG-12月桂酸酯、PEG-12油酸酯、PEG-15油酸酯、PEG-20月桂酸酯和PEG-20油酸酯。表1显示市售聚乙氧基化脂肪酸单酯表面活性剂的实例。
表1  PEG-脂肪酸单酯表面活性剂
Figure BSA00000455912200151
Figure BSA00000455912200161
Figure BSA00000455912200171
2.PEG-脂肪酸二酯
聚乙二醇脂肪酸二酯也适合用作本发明组合物内的表面活性剂。在表2的表面活性剂中，优选的亲水表面活性剂包括PEG-20二月桂酸酯、PEG-20二油酸酯、PEG-20二硬脂酸酯、PEG-32二月桂酸酯和PEG-32二油酸酯。表2显示代表性PEG-脂肪酸二酯。
表2  PEG-脂肪酸二酯表面活性剂
Figure BSA00000455912200172
3.PEG-脂肪酸单酯和二酯混合物
通常，表面活性剂的混合物也可用于本发明，包括两种或多种商业表面活性剂产品的混合物。几种PEG-脂肪酸酯在商业上作为单酯和二酯混合物出售。表3显示代表性表面活性剂混合物。
表3  PEG-脂肪酸单酯和二酯混合物
4.聚乙二醇甘油脂肪酸酯
表4显示合适的PEG甘油脂肪酸酯。在表内的表面活性剂中，优选的亲水表面活性剂是PEG-20甘油月桂酸酯、PEG-30甘油月桂酸酯、PEG-40甘油月桂酸酯、PEG-20甘油油酸酯和PEG-30甘油油酸酯。
表4  PEG甘油脂肪酸酯
Figure BSA00000455912200182
5.醇-油酯交换产物
通过醇或多元醇与各种天然和/或氢化油的反应，可以制备许多具有不同的疏水性或亲水性程度的表面活性剂。最常见的是，所用的油是蓖麻油或氢化蓖麻油，或食用植物油如玉米油、橄榄油、花生油、棕榈仁油、杏仁油(apricot kernel oil)或扁桃油(almond oil)。优选的醇包括甘油、山梨醇和季戊四醇。在这些醇-油酯交换表面活性剂中，优选的亲水表面活性剂是PEG-35蓖麻油(Incrocas-35)、PEG-40氢化蓖麻油(Cremophor RH 40)、PEG-25三油酸酯(TAGAT TO)、PEG-60玉米甘油酯(Crovol M70)、PEG-60杏仁油(Crovol A70)、PEG-40棕榈仁油(Crovol PK70)、PEG-50蓖麻油(EmalexC-50)、PEG-50氢化蓖麻油(Emalex HC-50)、PEG-8辛酸/癸酸甘油酯(Labrasol)和PEG-6辛酸/癸酸甘油酯(Softigen 767)。这类中优选的疏水表面活性剂包括PEG-5氢化蓖麻油、PEG-7氢化蓖麻油、PEG-9氢化蓖麻油、PEG-玉米油(Labrifil M 2125 CS)、Peg-6扁桃油(Labrifil M 1944 CS)、PEG-6橄榄油(Labrifil M 1980 CS)、PEG-6花生油(Labrifil M 1969 CS)、PEG-6氢化棕榈仁油(Labrifil M 2130 BS)、PEG-6三油精(Labrifilb M 2735 CS)、PEG-8玉米油(Labrifil WL 2609 BS)、PEG-20玉米甘油酯(Crovel M40)和PEG-20杏仁甘油酯(Crovel A40)。后两种表面活性剂据报道HLB为10，通常认为该值是亲水和疏水表面活性剂之间的近似界限。出于本发明的目的，这两种表面活性剂被认为是疏水的。表5显示适合用于本发明的这类的代表性表面活性剂。
表5油和醇的酯交换产物
Figure BSA00000455912200191
Figure BSA00000455912200201
作为这类表面活性剂内的油还包括油溶性维生素，如维生素A、D、E、K等。因此，这些维生素的衍生物如生育酚PEG-100琥珀酸酯(TPGS，得自Eastman)也是合适的表面活性剂。
6.聚甘油化的脂肪酸
脂肪酸的聚甘油酯也是用于本发明的合适表面活性剂。在聚甘油脂肪酸酯中，优选的疏水表面活性剂包括聚甘油油酸酯(Plurol Oleique)、聚甘油-2二油酸酯(NikkolDGDO)和聚甘油-10三油酸酯。优选的亲水表面活性剂包括聚甘油-10月桂酸酯(Nikkol Decaglyn 1-L)、聚甘油-10油酸酯(Nikkol Decaglyn 1-0)和聚甘油-10单油酸酯、二油酸酯(Caprool PEG 860)。聚甘油聚蓖麻醇酸酯(Polymuls)也是优选的亲水和疏水表面活性剂。表6显示合适的聚甘油酯的实例。
表6聚甘油化的脂肪酸
Figure BSA00000455912200211
7.丙二醇脂肪酸酯
丙二醇与脂肪酸的酯是用于本发明的合适表面活性剂。在该表面活性剂类型中，优选的疏水表面活性剂包括丙二醇单月桂酸酯(Lauroglycol FCC)、丙二醇蓖麻醇酸酯(Propymuls)、丙二醇单油酸酯(Myverol P-06)、丙二醇二辛酸酯/二癸酸酯(Captex 200)和丙二醇二辛酸酯(Captex 800)。表7所示为该类表面活性剂的实例。
表7丙二醇脂肪酸酯
Figure BSA00000455912200221
8.丙二醇酯-甘油酯的混合物
通常，表面活性剂的混合物也适合用于本发明。尤其是，丙二醇脂肪酸酯与甘油脂肪酸酯的混合物是合适的和市售的。一种优选的混合物包括丙二醇和甘油的油酸酯(Arlacel 186)。表8显示这些表面活性剂的实例。
表8  7/26甘油/丙二醇脂肪酸酯
Figure BSA00000455912200222
9.甘油一酯-甘油二酯
一种特别重要的表面活性剂类型是单甘油酯和二甘油酯类型。这些表面活性剂通常是疏水的。这类化合物中优选的疏水表面活性剂包括甘油单油酸酯(Peceol)、甘油蓖麻醇酸酯、甘油月桂酸酯、甘油二月桂酸酯(Capmul GDL)、甘油二油酸酯(CapmulGDO)、甘油单/二油酸酯(Capmul GMO-K)、甘油辛酸酯/癸酸酯(Capmul MCM)、辛酸单/二甘油酯(Imwitor 988)以及单乙酰化-和二乙酰化的单甘油酯(Myvacet 9-45)。表9给出这些表面活性剂的实例。
表9甘油一酯和甘油二酯表面活性剂
Figure BSA00000455912200231
Figure BSA00000455912200241
10.固醇和固醇衍生物
固醇和固醇的衍生物是用于本发明的合适表面活性剂。这些表面活性剂可以是亲水的或疏水的。优选的衍生物包括聚乙二醇衍生物。这类中的优选疏水表面活性剂是胆固醇。这类中的优选亲水表面活性剂是PEG-24胆固醇醚(Solulan C-24)。表10显示这类表面活性剂的实例。
表10固醇和固醇衍生物表面活性剂
Figure BSA00000455912200242
11.聚乙二醇失水山梨醇脂肪酸酯
各种PEG-失水山梨醇脂肪酸酯是可用的并适合用作本发明的表面活性剂。通常，这些表面活性剂是亲水的，尽管可以使用这类的几种疏水表面活性剂。在PEG-失水山梨醇脂肪酸酯中，优选的亲水表面活性剂包括PEG-20失水山梨醇单月桂酸酯(Tween-20)、PEG-20失水山梨醇单硬脂酸酯(Tween-60)和PEG-20失水山梨醇单油酸酯(Twee-80)。表11显示这些表面活性剂的实例。
表11  PEG-失水山梨醇脂肪酸酯
Figure BSA00000455912200251
12.聚乙二醇烷基醚
聚乙二醇和烷基醇的醚是用于本发明的合适表面活性剂。优选的疏水醚包括PEG-3油基醚(Volpo 3)和PEG-4月桂基醚(Brij 30)。表12显示这些表面活性剂的实例。
表12聚乙二醇烷基醚
13.糖酯
糖的酯是用于本发明的合适表面活性剂。这类中优选的亲水表面活性剂包括蔗糖单棕榈酸酯和蔗糖单月桂酸酯。表13显示这些表面活性剂的实例。
表13糖酯表面活性剂
Figure BSA00000455912200262
14.聚乙二醇烷基酚
几种亲水PEG-烷基酚表面活性剂是可用的，并适合用于本发明。表14显示这些表面活性剂的实例。
表14聚乙二醇烷基酚表面活性剂
15.聚氧乙烯-聚氧丙烯嵌段共聚物
POE-POP嵌段共聚物是独特类型的聚合表面活性剂。在表面活性剂的独特结构中，亲水POE和疏水POP部分具有充分限定的比率和位置，这提供了适合用于本发明的广泛表面活性剂。这些表面活性剂可以各种商品名获得，包括Synperonic PE系列(ICI)；Pluronic系列(BASF)、Emkalyx、Lutrol(BASF)、Supronic、Monolan、Pluracare和Plurodac。这些聚合物的总称为“泊洛沙姆”(CAS 9003-11-6)。这些聚合物具有式HO(C2H4O)a(C3H6O)b(C2H4O)aH，其中“a”和“b”分别指示聚氧乙烯和聚氧丙烯单元的数目。这类的优选亲水表面活性剂包括泊洛沙姆108、188、217、238、288、338和407。这类的优选疏水表面活性剂包括泊洛沙姆124、182、183、212、331和335。表15显示这类的合适表面活性剂的实例。由于所述化合物是广泛可用的，所以表内未列出商业来源。按照通用名列出化合物，并给出相应的“a”和“b”值。
表15  POE-POP嵌段共聚物
Figure BSA00000455912200272
Figure BSA00000455912200281
16.失水山梨醇脂肪酸酯
脂肪酸的失水山梨醇酯是用于本发明的合适表面活性剂。在这些酯中，优选的疏水表面活性剂包括失水山梨醇单月桂酸酯(Arlacel 20)、失水山梨醇单棕榈酸酯(Span-40)、失水山梨醇单油酸酯(Span-80)、失水山梨醇单硬脂酸酯和失水山梨醇三硬脂酸酯。表16显示这些表面活性剂的实例。
表16失水山梨醇脂肪酸酯表面活性剂
Figure BSA00000455912200282
17.低级醇脂肪酸酯
低级醇(C2至C4)和脂肪酸(C8至C18)的酯是用于本发明的合适表面活性剂。在这些酯中，优选的疏水表面活性剂包括油酸乙酯(Crodamol EO)、肉豆蔻酸异丙酯(Crodamol IPM)和棕榈酸异丙酯(Crodamol IPP)。表17显示这些表面活性剂的实例。
表17低级醇脂肪酸酯
Figure BSA00000455912200291
18.离子型表面活性剂
离子型表面活性剂，包括阳离子型、阴离子型和两性离子型表面活性剂，是用于本发明的合适亲水表面活性剂。优选的阴离子型表面活性剂包括脂肪酸盐和胆汁盐。具体地，优选的离子型表面活性剂包括油酸钠、十二烷基硫酸钠、十二烷基肌氨酸钠、二辛基磺化琥珀酸钠、胆酸钠和牛磺胆酸钠。下面表18显示这些表面活性剂的实例。为了简化，表内按条目显示典型的抗衡离子。然而，本领域技术人员将理解，可以使用任何生物可接受的抗衡离子。例如，尽管将脂肪酸显示为钠盐，但也可以使用其它阳离子抗衡离子，例如碱金属阳离子或铵。不像典型的非离子型表面活性剂，这些离子型表面活性剂通常可作为纯化合物而不是商业(专利)混合物获得。因为这些化合物易于从各种商业供应商如Aldrich Sigma等处获得，所以表内一般未列出商业来源。
表18离子型表面活性剂
Figure BSA00000455912200301
Figure BSA00000455912200311
乙氧基化的胺：
聚氧乙烯-15椰油胺
其它合适的增溶剂的实例包括：醇和多元醇如乙醇、异丙醇、丁醇、苯甲醇、乙二醇、丙二醇、丁二醇及其异构体、甘油、季戊四醇、山梨醇、甘露醇、二乙二醇单乙基醚(transcutol)、异山梨醇二甲醚、聚乙二醇、聚丙二醇、聚乙烯醇、羟丙基甲基纤维素和其它纤维素衍生物、环糊精和环糊精衍生物；平均分子量为约200至约6000的聚乙二醇的醚，例如四氢糠醇PEG醚(glycofurol，以商品名Tetraglycol购自BASF)或甲氧基PEG(Union Carbide)；酰胺，例如2-吡咯烷酮、2-哌啶酮、己内酰胺、N-烷基吡咯烷酮、N-羟基烷基吡咯烷酮、N-烷基哌啶酮、N-烷基己内酰胺、二甲基乙酰胺和聚乙烯基吡咯烷酮；酯，例如丙酸乙酯、柠檬酸三丁酯、乙酰基柠檬酸三乙酯、乙酰基柠檬酸三丁酯、柠檬酸三乙酯、油酸乙酯、辛酸乙酯、丁酸乙酯、三醋精、丙二醇单乙酸酯、丙二醇二乙酸酯、己内酯及其异构体、戊内酯及其异构体、丁内酯及其异构体；和本领域已知的其它增溶剂，例如二甲基乙酰胺、异山梨醇二甲醚(Arlasolve DMI(ICI))、N-甲基吡咯烷酮(Pharmasolve(ISP))、单辛精、二乙二醇单乙基醚(以商品名Transcutol获自Gattefosse)和水。增溶剂的混合物也在本发明的范围内。
除上述以外，本文所述的化合物易于从标准商业来源获得。
通过举例而非限制，特别合适的水混溶溶剂包括乙醇或异丙醇、聚(乙二醇)。通过举例而非限制，特别合适的乳化剂为甘油单油酸酯、维生素E TPGS、Gelucire、Cremophor、Labrafil、泊洛沙姆和Labrasol。通过举例而非限制，特别合适的水不混溶溶剂包括中链甘油三酯和油酸。通过举例而非限制，特别合适的抗氧化剂包括维生素E、BHT或维生素C棕榈酸酯。
按照实施例4方法A选择适合用于增溶剂的赋形剂。一些合适的赋形剂包括不饱和脂肪酸的甘油三酯。这些化合物对氧化敏感，因此本发明的组合物优选包括抗氧化剂。要注意即使增溶剂(作为赋形剂)可能不适合单独增溶SCF提取物，但所述赋形剂可作为与一种或多种可增溶SCF提取物的其它赋形剂的混合物而用于组合物中。
本发明的液体药物组合物可以是澄清的或混悬液。使用实施例5的方法，用裸眼或用显微镜视觉确定液体组合物的澄清度。澄清的液体组合物对于裸眼是视觉澄清的，因为按组合物的总重计，它将包含小于5％、小于3％或小于1重量％的悬浮固体。本发明的具体实施方案包括可以用作胶囊的填充组合物从而形成液体填充的胶囊制剂的澄清液体药物组合物。通过任选地在热的存在下将SCF提取物与本发明的增溶剂混合来制备澄清的液体组合物，其中增溶剂的含量足够溶解提取物。
实施例3描述本发明的示例性液体组合物。实施例3方法A的组合物是cremophor基递药系统。实施例3方法B的组合物是GMO(甘油单油酸酯)/cremophor基递药系统。实施例3方法C的组合物是labrasol基胶束形成系统。这些制剂分别包括抗氧化剂，因为作为增溶试剂的表面活性剂赋形剂包含不饱和脂肪酸。它们还包括乙醇作为水溶性(混溶的)溶剂。
在用于本文时，术语“胶束形成系统”指当置于水性介质中时形成胶束分散体或乳液的组合物。在用于本文时，术语“自乳化系统”指当置于水性介质中时形成乳液的组合物。
实施例3方法D的组合物是维生素E TPGS基递药系统。
按照实施例4方法C评价当置于水性介质中时制剂的溶出性质。当将实施例3方法A的组合物置于磷酸盐缓冲液(pH 6.8)中时，形成了胶束，组合物溶于缓冲液中。当将实施例3方法B的组合物置于磷酸盐缓冲液(pH 6.8)中时，组合物分散在缓冲液中。当将实施例3方法C的液体组合物组合物置于磷酸盐缓冲液(pH 6.8)中时，观察到在缓冲液中形成了细颗粒。当将实施例3方法D的组合物置于磷酸盐缓冲液(pH 6.8)中时，形成了胶束分散体。
如果期望，可以通过下列方法将液体组合物灭菌：1)通过孔径大小为约0.22μm或更小的过滤介质将填充组合物无菌过滤；2)照射填充组合物；3)用环氧乙烷处理填充组合物；4)用惰性气体冲洗填充组合物以减少其中溶解的氧量；和/或5)加热填充组合物。
胶囊制剂包括壳、液体填充药物组合物和任选的肠溶衣。本发明的胶囊将具有不小于一周、三周、一个月、三个月、六个月、或一年的贮存期。例如，对于贮存期为至少六个月的胶囊，胶囊壳将通过贮存期为至少六个月的贮存稳定性实验。按照给定胶囊产品的需要建立可接受贮存期的标准及其贮存稳定性要求。应该注意小至一周的贮存期适合由药剂师配制并出售给药店顾客的产品。
可以通过用于制备液体、凝胶、半固体或固体熔融填充胶囊的任何已知方法将液体组合物装载或填充到胶囊内。尤其是，可以使用由R.P.Scherer公司、Alza或MW Encap Ltd.描述的方法。Bowtle描述了一种示例性方法(PharmaceuticalTechnology Europe(1998)，10(10)，84，86，88-90)。
在用于本文时，术语“壳”指用于包封由颗粒制成的填充组合物的胶囊剂型的壳或套或包封材料。适合用于形成胶囊壳或包封另一种组合物的任何材料均可用于本发明。
壳可以是适合制备可以用于本发明胶囊的所述壳的硬材料或软材料和任何材料。适合制备胶囊壳的材料包括软明胶、硬明胶、羟丙基甲基纤维素、淀粉、动物明胶、琼脂、鱼(鱼的)明胶或其组合。其它合适的材料包括：聚乙烯醇/聚醋酸乙烯酯共聚物(美国专利No.-3,300,546)；羟丁基甲基纤维素与羟丙基甲基纤维素的共混物(美国专利No.-4,765,916)；聚乙酸乙烯酯(美国专利No.-2,560,649、No.-3,346,502)；水溶性明胶(美国专利No.-3,525,426)；聚乙烯醇(美国专利No.-3,528,921、No.-3,534,851、No.-3,556,765、No.-3,634,260、No.-3,671,439、No.-3,706,670、No.-3,857,195、No.-3,877,928、No.-4,367,156、No.-4,747,976、No.-5,270,054)；源自这样的单体如氯乙烯、乙烯醇、乙烯基吡咯烷酮、呋喃、丙烯腈、乙酸乙烯酯、丙烯酸甲酯、甲基丙烯酸甲酯、苯乙烯、乙烯基乙基醚、乙烯基丙基醚、丙烯酰胺、乙烯、丙烯、丙烯酸、甲基丙烯酸、马来酸酐的聚合物、上述任何酸的盐及其混合物；聚氯乙烯；聚丙烯；丙烯酸/马来酸共聚物；聚丙烯酸钠；聚乙烯基吡咯烷酮；葡甘露聚糖和任选的另一种天然多糖与多羟基醇如丙三醇(美国专利No.-4,851,394)；塑料和聚交酯/聚乙交酯(Elanco Animal Health Co.)；HPMC(Shionogi Qualicaps Co.Ltd(Nara Japan)；SUHEUNG CAPSULES CO.LTD.(KYUNGGI-DO，KOREA)和Capsugel)；或其组合。基本上本领域普通技术人员已知可用于制备胶囊壳的任何材料均可用于本发明的胶囊。合适的淀粉胶囊可以按照Vilivalam等(PharmaceuticalScience & Technology Today(2000)，3(2)，64-69)制备和使用。用于结肠递药的壳聚糖胶囊可以按照Yamamoto(Kobunshi(1999)，48(8)，595)或Tozaki等(Drug DeliverySystem(1997)，12(5)，311-320)制备和使用。其它合适的壳材料公开于授予R.P.Scherer Technologies Inc.(Cardinal Health，Inc.)的美国专利申请公开No.-2002/0081331，该文献公开了包括改性淀粉和ι-角叉菜胶的成膜组合物。
本发明的胶囊还可以用肠溶衣包衣以延迟其内容物的释放，直到它在口服给予后处于胃区域的下游或直到它暴露到pH为至少约5的水性介质。肠溶包衣的胶囊可以用于在十二指肠、空肠、回肠、小肠或大肠内释放液体组合物。
所述肠溶衣(延迟释放包衣)位于胶囊壳外部并包围着(遮蔽或盖住)胶囊壳。所述衣料在第一使用环境的流体如胃液、酸性流体中是不溶的，在第二使用环境的流体如肠液、基本上pH中性或碱性的流体或微酸性(pH为5或更大)的流体中是溶解或可溶蚀的。已知许多聚合材料具有这些各种溶解性，并能够被包括在肠溶衣内。通过举例而非限制，所述其它聚合材料包括乙酸纤维素邻苯二甲酸酯(CAP)、乙酸纤维素-1，2，4-苯三酸酯(CAT)、聚(乙酸乙烯酯)邻苯二甲酸酯(PVAP)、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯(HP)、聚(甲基丙烯酸酯-乙基丙烯酸酯)(1∶1)共聚物(MA-EA)、聚(甲基丙烯酸酯-甲基丙烯酸甲酯)(1∶1)共聚物(MA-MMA)、聚(甲基丙烯酸酯-甲基丙烯酸甲酯)(1∶2)共聚物、Eudragit L-30-DTM(MA-EA，1∶1)、Eudragit L-100-55TM(MA-EA，1∶1)、羟丙基甲基纤维素乙酸琥珀酸酯(HPMCAS)、CoatericTM(PVAP)、AquatericTM(CAP)、AQOATTM(HPMCAS)及其组合。
当期望肠溶衣在结肠中溶解、溶蚀或变得从胶囊中分裂时，材料如羟丙基纤维素、微晶纤维素(MCC，AvicelTM，来自FMC Corp.)、聚(乙烯-乙酸乙烯酯)(60∶40)共聚物(EVAC，来自Aldrich Chemical Co.)、2-羟乙基甲基丙烯酸酯(HEMA)、MMA、在N，N′-二(甲基丙烯酰氧基乙氧基羰基氨基)-偶氮苯的存在下合成的HEMA:MMA:MA的三聚物、偶氮聚合物、肠溶包衣的定时释放系统(
Figure BSA00000455912200341
来自Pharmaceutical Profiles，Ltd.，UK)和果胶酸钙可以被包括在衣料中。
肠溶衣可以包括在胃内和在胶囊停留于胃内期间不溶解、不崩解或不溶蚀的一种或多种材料。易于符合这类要求的材料是聚(乙烯基吡咯烷酮)-乙酸乙烯酯共聚物，例如由BASF以其Kollidon VA64商标供应的材料。所述肠溶衣还可以包括由BASF以其Kollidon K 30商标供应的聚维酮，和由Dow以其Methocel E-15商标供应的羟丙基甲基纤维素。
所述肠溶衣还可以包括充分耐受胃液并将促进肠或结肠释放的其它合适的材料。在胃内保持其完整性的代表性材料可以包括选自下列的成员：(a)角蛋白、角蛋白山达脂-妥鲁香脂、萨罗(水杨酸苯酯)、萨罗苯甲酸β-萘酯和acetotannin、具有秘鲁香脂的萨罗、具有妥鲁香脂的萨罗、具有乳香橡胶的萨罗、萨罗和硬脂酸、以及萨罗和虫胶；(b)选自缩甲醛化的(formalized)蛋白质、缩甲醛化的明胶和缩甲醛化的交联明胶和交换树脂的成员；(c)选自肉豆蔻酸-氢化蓖麻油-胆固醇、硬脂酸-羊脂、硬脂酸-妥鲁香脂和硬脂酸-蓖麻油的成员；(d)选自虫胶、氨化虫胶、氨化虫胶-萨罗、虫胶-羊毛脂、虫胶-乙酰醇、虫胶-硬脂酸-妥鲁香脂和虫胶硬脂酸正丁酯的成员；(e)选自枞酸、枞酸甲酯、苯偶姻、妥鲁香脂、山达脂、具有妥鲁香脂的乳香、和具有妥鲁香脂的乳香、和具有乙酰醇的乳香的成员；(f)作为由甲基丙烯酸和甲基丙烯酸甲酯合成的阴离子型聚合物代表的丙烯酸树脂、甲基丙烯酸和甲基丙烯酸与甲基丙烯酸烷基酯的共聚丙烯酸树脂、烷基丙烯酸与烷基丙烯酸烷基酯的共聚物、丙烯酸树脂如分子量为150,000的甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯-甲基丙烯酸丁酯-甲基丙烯酸甲酯共聚物、分子量为135,000的甲基丙烯酸-甲基丙烯酸甲酯50∶50共聚物、分子量为135,000的甲基丙烯酸-甲基丙烯酸甲酯30∶70共聚物、分子量为750,000的甲基丙烯酸-甲基丙烯酸二甲基氨基乙酯-丙烯酸乙酯、分子量为1,000,000的甲基丙烯酸-甲基丙烯酸甲酯-丙烯酸乙酯、和分子量为550,000的丙烯酸乙酯-甲基丙烯酸甲酯-丙烯酸乙酯，和(g)肠溶组合物，包括选自下列的成员：乙酰纤维素邻苯二甲酸酯、二乙酰纤维素邻苯二甲酸酯、三乙酰纤维素邻苯二甲酸酯、乙酸纤维素邻苯二甲酸酯、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯、乙酸纤维素邻苯二甲酸钠、纤维素酯邻苯二甲酸酯、纤维素醚邻苯二甲酸酯、甲基纤维素邻苯二甲酸酯、纤维素酯-醚邻苯二甲酸酯、羟丙基纤维素邻苯二甲酸酯、乙酸纤维素邻苯二甲酸酯的碱金属盐、乙酸纤维素邻苯二甲酸酯的碱土金属盐、乙酸纤维素邻苯二甲酸酯的钙盐、羟丙基甲基纤维素邻苯二甲酸酯的铵盐、乙酸纤维素六氢邻苯二甲酸酯、羟丙基甲基纤维素六氢邻苯二甲酸酯、聚乙酸乙烯酯邻苯二甲酸酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸二丁酯、其中烷基包含1至7个直链和支链烷基的邻苯二甲酸二烷基酯、邻苯二甲酸芳基酯、和本领域普通技术人员已知的其它材料。
可以用于胶囊的衣料，例如肠溶衣料或抛光衣料内的增塑剂包括通常被掺入递药装置的聚合衣料内的所有材料。增塑剂通常可改善聚合薄膜的机械性质并提高柔韧性。增塑剂通常可减少聚合物链的分子间内聚力并提高活动性，从而减少聚合物-聚合物相互作用。这种作用引起聚合物及其薄膜的性质变化如Tg(玻璃化转变温度)或软化温度和弹性模量减少，提高聚合物柔韧性，从而促进膜或薄膜的形成过程。优选的药用增塑剂是无毒和无刺激的；具有减少的迁移、挤压或挥发趋势；并与薄膜内的聚合物具有良好的混溶性。可以用于衣料的增塑剂包括例如但不限于乙酰基柠檬酸三乙酯、乙酰基柠檬酸三丁酯、柠檬酸三乙酯、乙酰化的甘油一酯、甘油、聚乙二醇、三醋精、丙二醇、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸二乙酯、邻苯二甲酸异丙酯、邻苯二甲酸二甲酯、dactyl phthalate、癸二酸二丁酯、癸二酸二甲酯、蓖麻油、甘油单硬脂酸酯、分馏的椰子油、聚(乙二醇)(PEG)、其它材料或其组合。在一些实施方案中，所述增塑剂是分子量为200至8000的PEG、柠檬酸的酯、邻苯二甲酸的酯。具体的增塑剂包括分子量为200至8000的PEG、柠檬酸三乙酯、柠檬酸三丁酯、邻苯二甲酸二乙酯和癸二酸二丁酯。
通过举例而非限制，合适的增塑剂还包括低分子量聚合物、低聚物、共聚物、油、小的有机分子、具有脂族羟基的低分子量多元醇、酯型增塑剂、二醇酯、聚(丙二醇)、多嵌段聚合物、单嵌段聚合物、低分子量聚(乙二醇)、柠檬酸酯型增塑剂、三醋精、丙二醇和丙三醇。所述增塑剂还可以包括乙二醇、1，2-丁二醇、2，3-丁二醇、苯乙二醇、二乙二醇、三乙二醇、四乙二醇和其它聚(乙二醇)化合物、单丙二醇单异丙基醚、丙二醇单乙基醚、乙二醇单乙基醚、二乙二醇单乙基醚、乳酸山梨酯、乳酸乙酯、乳酸丁酯、乙醇酸乙酯、癸二酸二丁酯、乙酰基柠檬酸三丁酯、柠檬酸三乙酯、乙酰基柠檬酸三乙酯、柠檬酸三丁酯和乙醇酸烯丙酯。所有这些增塑剂均可获自商业来源如Aldrich或Sigma Chemical Co.。增塑剂的组合也可以用于本制剂。PEG基增塑剂是市售的，或者可以通过各种方法，例如在Poly(ethylene glycol)Chemistry：Biotechnical and Biomedical Applications(J.M.Harris，Ed.；Plenum Press，NY)中公开的方法制备，该文献的内容据此被纳入本文作为参考。
在用于本文时，术语“抗氧化剂”用于指抑制氧化并因此用于防止制剂被氧化过程破坏的物质。通过举例而非限制，所述化合物包括抗坏血酸、抗坏血酸柠檬酸酯、维生素E、维生素E衍生物、丁基化的羟基茴香醚、丁基化的羟基甲苯、次磷酸、一硫代甘油、没食子酸丙酯、抗坏血酸钠、亚硫酸氢钠、甲醛次硫酸钠、偏亚硫酸氢钠和本领域普通技术人员已知的其它这些材料。
尽管不必需，但本发明的剂型可以包括螯合剂、防腐剂、吸附剂、酸化剂、碱化剂、消泡剂、缓冲剂、着色剂、电解质、调料、抛光剂、盐、稳定剂、甜味剂、张力调节剂、抗粘剂、粘合剂、稀释剂、直接压片赋形剂、崩解剂、助流剂、润滑剂、遮光剂、抛光剂、增塑剂、其它药用赋形剂、或其组合。
在用于本文时，术语“螯合剂”用于指可螯合溶液中的金属离子的化合物。示例性的螯合剂包括EDTA(乙二胺四乙酸四钠)、DTPA(二亚乙基三胺五乙酸五钠)、HEDTA(N-(羟基乙基)-乙二胺三乙酸的三钠盐)、NTA(次氮基三乙酸三钠)、乙醇二甘氨酸二钠(Na2EDG)、二乙醇甘氨酸钠(DEGNa)、柠檬酸和本领域普通技术人员已知的其它化合物。
在用于本文时，术语“吸附剂”用于指能够通过物理或化学(化学吸附)方式将其它分子保持在其自身表面上的试剂。通过举例而非限制，所述化合物包括粉末化和活化的炭和本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“碱化剂”用于指用于提供碱性介质的化合物。通过举例而非限制，所述化合物包括氨溶液、碳酸铵、二乙醇胺、单乙醇胺、氢氧化钾、硼酸钠、碳酸钠、碳酸氢钠、氢氧化钠、三乙醇胺(triethanolamine)、和三乙醇胺(trolamine)以及本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“酸化剂”用于指用于提供酸性介质的化合物。通过举例而非限制，所述化合物包括乙酸、氨基酸、柠檬酸、富马酸和其它α-羟基酸、氢氯酸、抗坏血酸和硝酸以及本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“抗粘剂”用于指在制备过程中防止片剂组成成分粘着到压片机的冲头和模具上的物质。通过举例而非限制，所述化合物包括硬脂酸镁、滑石、硬脂酸钙、山嵛酸甘油酯、聚乙二醇(PEG)、氢化植物油、矿物油、硬脂酸和本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“粘合剂”用于指用于引起制粒中粉末颗粒粘合的物质。通过举例而非限制，所述化合物包括阿拉伯胶、藻酸、羧甲基纤维素钠、聚(乙烯基吡咯烷酮)、可压的糖(例如NuTab)、乙基纤维素、明胶、液体葡萄糖、甲基纤维素、聚维酮和预胶化淀粉以及本领域普通技术人员已知的其它材料。
示例性的粘合剂包括阿拉伯胶、黄芪胶、明胶、淀粉、纤维素材料如甲基纤维素和羧甲基纤维素钠、藻酸及其盐、聚乙二醇、瓜尔胶、多糖、斑脱土、糖、转化的糖、泊洛沙姆(PLURONICTM F68、PLURONICTM F127)、胶原、白蛋白、明胶、非水溶剂内的纤维质、其组合等。其它粘合剂包括例如聚丙二醇、聚氧乙烯-聚丙烯共聚物、聚乙烯酯、聚乙烯失水山梨醇酯、聚环氧乙烷、其组合和本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“消泡剂”用于指防止或减少在填充组合物表面上形成的泡沫量的化合物或多种化合物。通过举例而非限制，合适的消泡剂包括二甲硅油、SIMETHICONE、octoxynol和本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“缓冲剂”用于指用于在稀释或添加酸或碱时抵抗pH变化的化合物。通过举例而非限制，所述化合物包括偏磷酸钾、磷酸钾、一碱价乙酸钠(monobasic sodium acetate)以及无水和脱水的柠檬酸钠和本领域普通技术人员已知的其它这些材料。
在用于本文时，术语“稀释剂”或“填充剂”用于指被用作填充剂以在制备片剂和胶囊时产生期望的体积、流动性和压缩性的惰性物质。通过举例而非限制，所述化合物包括磷酸氢钠、高岭土、乳糖、蔗糖、甘露醇、微晶纤维素、粉末化的纤维素、沉淀的碳酸钙、山梨醇、和淀粉以及本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“直接压片赋形剂”用于指被用于直接压片制剂内的化合物。通过举例而非限制，所述化合物包括磷酸氢钙(例如Ditab)和本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“助流剂”用于指被用于片剂和胶囊制剂以促进颗粒流动性的物质。通过举例而非限制，所述化合物包括胶态硅石、玉米淀粉、滑石、硅酸钙、硅酸镁、胶态硅、硅水凝胶和本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“润滑剂”用于指被用于本制剂以减少压缩或其它加工过程中的摩擦的物质。通过举例而非限制，所述化合物包括硬脂酸钙、硬脂酸镁、矿物油、硬脂酸、和硬脂酸锌以及本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“遮光剂”用于指被用于赋予胶囊或片剂衣料不透明性的化合物。遮光剂可以单独使用或与着色剂组合。通过举例而非限制，所述化合物包括二氧化钛、滑石和本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“崩解剂”用于指被用于固体剂型以促进将固体团块分裂成更易于分散或溶解的较小颗粒的化合物。通过举例而非限制，示例性的崩解剂包括淀粉如玉米淀粉、马铃薯淀粉、其预胶化和改性的淀粉、甜味剂、粘土，例如斑脱土、微晶纤维素(例如Avicel)、羧甲基纤维素钙、纤维素polyacrilin钾(例如Amberlite)、藻酸盐、淀粉羟乙酸钠、树胶如琼脂、瓜尔胶、槐豆胶、刺梧桐树胶、果胶、黄芪胶；交联聚维酮和本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“防腐剂”用于指用于防止微生物生长的化合物。通过举例而非限制，所述化合物包括苯扎氯铵、苄索氯铵、苯甲酸、苯甲醇、西吡氯铵、三氯叔丁醇、苯酚、苯乙醇、硝酸苯汞、醋酸苯汞、硫柳汞、间甲酚、氯甲十四烷基吡啶、苯甲酸钾、山梨酸钾、苯甲酸钠、丙酸钠、山梨酸、麝香草酚、和对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯或丁酯以及本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“抛光剂”用于指用于赋予剂型表面亮度的化合物。通过举例而非限制，所述化合物包括巴西棕榈蜡、白蜡、其组合和本领域普通技术人员已知的其它这些材料。
在用于本文时，术语“着色剂”用于指用于赋予药物制剂颜色的化合物。通过举例而非限制，所述化合物包括FD&C红No.3、FD&C红No.20、FD&C黄No.6、FD&C蓝No.2、FD&C绿No.5、FD&C橙No.5、FD&C红No.8、焦糖和氧化铁(黑色、红色、黄色)、其它FD&C染料和天然着色剂如葡萄皮提取物、甜菜红粉末、β-胡萝卜素、胭脂树红、胭脂红、姜黄、红辣椒、其组合和本领域普通技术人员已知的其它这些材料。
在用于本文时，术语“调料”用于指用于赋予药物制剂令人愉悦的味道并且通常是香味的化合物。示例性的调味剂或调料包括合成调味油和调味香料和/或天然油、来自植物、叶、花、果实等的提取物及其组合。这些化合物还可以包括肉桂油、冬青油、薄荷油、丁香油、月桂油、茴香油、桉树油、麝香草油、香柏叶油、肉豆蔻油、鼠尾草油、苦杏油和肉桂油。其它有用的调料包括香草、柑橘类的油，包括柠檬、橙、葡萄、酸橙和柚子、和果实精华，包括苹果、梨、桃、草莓、悬钩子、樱桃、李子、菠萝、杏等。发现特别有用的调料包括市售的橙、葡萄、樱桃和树胶调料及其混合物。调味剂的量可以取决于许多因素，包括期望的感官效果。调料将以本领域普通技工期望的任何量存在。特别优选的调料是葡萄和樱桃调料以及柑橘类调料如橙。
在用于本文时，术语“稳定剂”用于指用于稳定活性剂避免物理、化学或生化过程的化合物，否则这些过程将减少活性剂的治疗活性。通过举例而非限制，合适的稳定剂包括白蛋白、唾液酸、肌酐、甘氨酸和其它氨基酸、烟酰胺、乙酰基色氨酸钠、氧化锌、蔗糖、葡萄糖、乳糖、山梨醇、甘露醇、甘油、聚乙二醇、辛酸钠和糖精钠以及本领域普通技术人员已知的其它材料。
在用于本文时，术语“甜味剂”用于指用于赋予制剂甜味的化合物。通过举例而非限制，所述化合物包括阿司帕坦、右旋糖、丙三醇、甘露醇、糖精钠、山梨醇、蔗糖、果糖、糖替代物、人造甜味剂、和本领域普通技术人员已知的其它这些材料。
在用于本文时，术语“张力调节剂”用于指能够用于调整液体制剂的张力的化合物或多种化合物。合适的张力调节剂包括丙三醇、乳糖、甘露醇、右旋糖、氯化钠、硫酸钠、山梨醇、海藻糖和本领域普通技术人员已知的其它材料。
还能够包括增塑剂以修改用于药物剂型内的聚合物的性质和特征。在用于本文时，术语“增塑剂”包括能够增塑或软化用于本发明的聚合物或粘合剂的所有化合物。所述增塑剂应该能够降低聚合物或粘合剂的熔化温度或玻璃化转变温度(软化点温度)。增塑剂如低分子量PEG通常扩宽它们被包括在内的聚合物的平均分子量，从而降低其玻璃化转变温度或软化点。增塑剂通常还降低聚合物的粘度。增塑剂将可能赋予本发明的渗透装置一些特别有益的物理性质。
通过举例而非限制，可用于本发明的增塑剂可以包括低分子量聚合物、低聚物、共聚物、油、小的有机分子、具有脂族羟基的低分子量多元醇、酯型增塑剂、二醇醚、聚(丙二醇)、多嵌段聚合物、单嵌段聚合物、低分子量聚(乙二醇)、柠檬酸酯型增塑剂、三醋精、丙二醇和丙三醇。所述增塑剂还可以包括乙二醇、1，2-丁二醇、2，3-丁二醇、苯乙二醇、二乙二醇、三乙二醇、四乙二醇和其它聚(乙二醇)化合物、单丙二醇单异丙基醚、丙二醇单乙基醚、乙二醇单乙基醚、二乙二醇单乙基醚、乳酸山梨酯、乳酸乙酯、乳酸丁酯、乙醇酸乙酯、癸二酸二丁酯、乙酰基柠檬酸三丁酯、柠檬酸三乙酯、乙酰基柠檬酸三乙酯、柠檬酸三丁酯和乙醇酸烯丙酯。所有这些增塑剂均可获自商业来源如Aldrich或Sigma Chemical Co.。还预期并处于本发明范围内的是，增塑剂的组合也可以用于本制剂。PEG基增塑剂是市售的，或者可以通过各种方法，例如在Poly(ethylene glycol)Chemistry：Biotechnical and BiomedicalApplications(J.M.Harris，Ed.；Plenum Press，NY)中公开的方法制备，该文献的内容据此被纳入本文作为参考。
本发明的组合物可以被包括在任何剂型中。具体的剂型包括固体或液体剂型。示例性的合适剂型包括片剂、胶囊、丸剂、囊片、锭剂、药囊、和药剂科学领域的普通技工已知的其它这些剂型。
实施例3和6描述了示例性的胶囊剂型。实施例12描述了示例性的片剂剂型。
本发明的组合物还可以被包括在油中，例如不挥发性油、花生油、芝麻油、棉籽油、玉米油和橄榄油：脂肪酸如油酸、硬脂酸和异硬脂酸；和脂肪酸酯如油酸乙酯、肉豆蔻酸异丙酯、脂肪酸甘油酯和乙酰化的脂肪酸甘油酯。所述组合物还可以被包括在醇中，例如乙醇、异丙醇、十六醇、甘油和丙二醇；甘油缩酮如2，2-二甲基-1，3-二氧戊环-4-甲醇；醚如聚(乙二醇)450；石油烃如矿物油和矿脂；水；药学合适的表面活性剂、助悬剂或乳化剂；或其混合物。
应该理解可用于药剂领域的化合物通常可起到各种功能或目的。因此，如果本文所称的化合物只被提及一次或被用于定义多于一个本文的术语，则其目的和功能不应被理解为仅限于该所称的目的或功能。
在用于本文时，除非另有说明，术语“夹竹桃苷”用于指夹竹桃苷的所有已知形式。夹竹桃苷可以以外消旋的、旋光纯的或旋光富集的形式出现。欧洲夹竹桃(Nerium oleander)植物材料可以获自商业植物供应商如Aldridge Nursery，Atascosa，Texas。
所述制剂的一种或多种组分可以以其游离碱或药学可接受的盐形式出现。在用于本文时，术语“药学可接受的盐”指已经通过使其与需要的酸反应以形成离子结合对而改性的化合物。药学可接受的盐的实例包括例如由无毒无机酸或有机酸形成的常规无毒盐。合适的无毒盐包括源自无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、磺酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸的那些盐和本领域普通技术人员已知的其它盐。所述盐由有机酸如氨基酸、乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、扑酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、葡糖酸、苯甲酸、水杨酸、磺胺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羟乙磺酸和本领域普通技术人员已知的其它酸制得。其它合适的盐的列表可以在Remington′s Pharmaceutical Sciences，17th.ed.，Mack Publishing Company，Easton，PA，1985，p.1418中找到，该文献的相关内容被据此纳入本文作为参考。
短语“药学可接受的”在本文中用于指在合理医学判断的范围内，适合用于与人类和动物组织接触而没有过度毒性、刺激、过敏反应或任何其它问题或并发症的、具有合理的利益/风险比的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
掺入本发明单位剂量中的夹竹桃苷的量将是至少一个或多个剂型并可以根据药学领域的已知原则选择。治疗化合物的有效量是明确预期的。术语“有效的量”关于例如药品被理解为，药学有效的量是预期的。药学有效的量是足以产生需要或期望的治疗响应的夹竹桃苷量或数量，或者换句话说，所述量在给予患者时足够引起可感知的生物学响应。所述可感知的生物学响应可以作为给予活性物质的单个或多个单位剂量的结果发生。单位剂量可以包括一个或多个剂型，例如胶囊。应该理解对于任何患者，具体的剂量水平将取决于各种因素，包括所治疗的适应症、所述适应症的严重性、患者健康、年龄、性别、重量、饮食、药理学响应、所用的具体剂型和其它这些因素。
口服给予的期望剂量是高至5个剂型，尽管可以给予少至一个和多至十个剂型。对于每个剂量为总共38.5至385mg(1至10个剂型)，示例性剂型的每个剂型包含38.5mg SCF提取物。
夹竹桃苷在剂型中的含量足够为受试者提供0.5至5mg夹竹桃苷的起始剂量。所述剂型的一些实施方案没有进行肠溶包衣并在0.5至1小时或更少时间内释放它们负载的夹竹桃苷。所述剂型的一些实施方案经过肠溶包衣并在胃的下游如空肠、回肠、小肠和/或大肠(结肠)释放它们负载的夹竹桃苷。来自肠溶包衣剂型的夹竹桃苷将在口服给予2-3小时后释放进入全身循环。基于初期动物给药数据，预期50至75％所给予的夹竹桃提取物剂量将是可口服利用的，因此每个剂型可提供0.25至0.4mg夹竹桃苷。如果成人的平均血液容量为5升，则预期的夹竹桃苷血浆浓度将为0.05至2μg/ml。
存在于SCF提取物中的夹竹桃苷的推荐每日剂量通常为每天两次或约每12小时约0.9至5mg，其中最大剂量为约1.8至10mg/天。
如果期望，本发明的剂型可以用抛光衣料包衣，这在本领域中通常用于提供期望的光泽、颜色、味道或其它美学特征。适合制备抛光衣料的材料对本领域普通技术人员是公知的。
根据用于肠溶衣剂型的USP溶出度方法，评价包含制剂#2或制剂#3的肠溶衣胶囊(根据实施例6包衣)的体外释放曲线。图2描绘溶出度曲线。USP浆法被用于溶出度实验，其中浆速设置为50rpm。在最初两小时内，使用750mL 0.1N盐酸溶液作为溶出介质。在2小时后，将250mM磷酸钠溶液添加到750mL 0.1N盐酸溶液中，以将pH调整至6.8。结果暗示小于5％的药物在酸阶段释放，大于75％的药物在调整溶出介质后一小时内释放。
实施例
通过上面的描述和下面的实施例，本领域普通技术人员将能够实施所要求保护的发明而无需进行过度的实验。参考下面的实施例将会更好地理解上面的描述，这些实施例详述了用于制备本发明实施方案的某些程序。对这些实施例的所有参考都是为了说明。下面的实施例不应被认为是穷举的，而仅仅说明本发明预期的许多实施方案中的极少数。
实施例1粉末化夹竹桃叶的超临界流体提取
方法A.用二氧化碳提取
通过收获、洗涤和干燥夹竹桃叶材料，然后使夹竹桃叶材料通过粉碎和脱水设备如美国专利No.-5,236,132、No.-5,598,979、No.-6,517,015和No.-6,715,705所述的那些，制备了粉末化的夹竹桃叶。所用起始材料的重量为3.94kg。
在提取装置内，在300巴(30MPa，4351psi)的压力和50℃(122°F)的温度下，将起始材料与纯CO2合并。总共使用了197kg CO2，以使溶剂与原材料比率为50∶1。然后使CO2和原材料的混合物通过分离装置，该装置改变混合物的压力和温度并从二氧化碳中分离提取物。
所得的提取物(65g)为褐色、粘稠的粘性材料，具有美好的香气。颜色可能是由叶绿素和复杂的多糖引起的。对于确切的产率确定，用丙酮漂洗各管和分离器并将丙酮蒸发以得到另外9g提取物。提取物总量为74g。基于起始材料的重量，提取物的产率为1.88％。使用高压液相色谱法和质谱法计算，夹竹桃苷在提取物内的含量为560.1mg，或产率为0.76％。
方法B.用二氧化碳和乙醇的混合物提取
通过收获、洗涤和干燥夹竹桃叶材料，然后使夹竹桃叶材料通过粉碎和脱水设备如美国专利No.-5,236,132、No.-5,598,979、No.-6,517,015和No.-6,715,705所述的那些，制备了粉末化的夹竹桃叶。所用原材料的重量为3.85kg。
在提取装置内，在280巴(28MPa，4061psi)的压力和50℃(122°F)的温度下，将起始材料与纯CO2和作为改性剂的5％乙醇合并。总共使用了160kg CO2和8kg乙醇，以使溶剂与原材料的比率为43.6∶1。然后使CO2、乙醇和原材料的混合物通过分离装置，该装置改变混合物的压力和温度并从二氧化碳中分离提取物。
在除去乙醇后，所得的提取物(207g)为暗绿色、粘稠的粘性团块，明显包含一些叶绿素。基于起始材料的重量，提取物的产率为5.38％。使用高压液相色谱法和质谱法计算，夹竹桃苷在提取物内的含量为1.89g，或产率为0.91％。
实施例2粉末化夹竹桃叶的热水提取(比较例)
通常使用热水提取来从夹竹桃叶中提取夹竹桃苷和其它活性组分。热水提取方法的实例可以在美国专利No.-5,135,745和No.-5,869,060中找到。
使用5g粉末化夹竹桃叶进行热水提取。将十倍体积的沸水(按夹竹桃起始材料的重量计)添加到粉末化夹竹桃叶中并将混合物持续搅拌6小时。然后将混合物过滤，收集叶残余物并在相同的条件下再提取。将滤液合并和冻干。提取物的外观为棕色。干燥的提取物材料重量为约1.44g。将34.21mg提取物材料溶于水中并使用高压液相色谱法和质谱法进行夹竹桃苷含量分析。夹竹桃苷的量确定为3.68mg。按提取物的量计，夹竹桃苷产率计算为0.26％。下面的表1显示来自实施例1的两种超临界二氧化碳提取和所述热水提取的夹竹桃苷产率之间的比较。
表1.产率的比较
Figure BSA00000455912200431
实施例3药物组合物的制备
在下列各方法中，SCF提取物在每克提取物中包含约25mg夹竹桃苷。
方法A.Cremophor基递药系统
以所示的量提供下列成分。
  试剂名   功能   占制剂的百分比(重量％)
  SCF提取物   活性剂   3.7
  维生素E   抗氧化剂   0.1
  Labrasol   表面活性剂   9.2
  乙醇   助溶剂   9.6
  Cremophor EL   表面活性剂   62.6
  Cremophor RH40   表面活性剂   14.7
将赋形剂分散到广口瓶中，在60℃下在New Brunswick Scientific C24KC冷冻温育振摇机中摇动24小时以保证均匀。然后将样品倒出并视觉检查溶解性。对于所有制剂，API和剩余的提取物在24小时后均完全溶解。
方法B.GMO/Cremophor基递药系统
以所示量提供下列成分。
  试剂名   功能   占制剂的百分比(重量％)
  SCF提取物   活性剂   4.7
  维生素E   抗氧化剂   0.1
  Labrasol   表面活性剂   8.5
  乙醇   助溶剂   7.6
  Cremophor EL   表面活性剂   56.1
  甘油单油酸酯   表面活性剂   23.2
采用方法A的程序。
方法C.Labrasol基递药系统
按所示量提供下列成分。
 试剂名   功能   占制剂的百分比(重量％)
 SCF提取物   活性剂   3.7
 维生素E   抗氧化剂   0.1
 Labrasol   表面活性剂   86.6
 乙醇   助溶剂   9.6
采用方法A的程序。
方法D.维生素E-TPGS基胶束形成系统
按所示量提供下列成分。
  组分 功能       重量％(w/w)
  维生素E 抗氧化剂   1.0
  维生素E TPGS 表面活性剂 95.2
  SCF提取物 活性剂     3.8
采用方法A的程序。
方法E.多组分递药系统
按所示量提供下列成分。
  组分  重量(g)   重量％(w/w)
  维生素E  10.0   1.0
  Cremophor ELP  580.4   55.9
  Labrasol  89.0   8.6
  甘油单油酸酯  241.0   23.2
  乙醇  80.0   7.7
  SCF提取物  38.5   3.7
  总计  1038.9   100
采用方法A的程序。
实施例4体外溶出度测定
方法A.用于鉴别适用作增溶剂的材料的筛选研究
进行筛选测定以确定哪些材料可能适合用于液体组合物。通过制备包含赋形剂和SCF提取物的二元混合物进行初期溶解性研究。合适的单一赋形剂可增溶大部分的提取物所含的夹竹桃苷和其它组分。
在20mL闪烁瓶中，将SCF提取物以每mL赋形剂77mg SCF提取物的浓度置于增溶剂中。在称量瓶内的增溶剂和提取物后，使用涡旋混合器混合样品。将在环境条件下涡旋后仍未溶解的那些样品在100℃的热水浴中加热15分钟，涡旋，超声10分钟，然后在100℃再加热15分钟。然后将样品冷却至环境条件24小时，并视觉检查颗粒的存在。
示例性的合适水溶性溶剂包括：乙醇、Lauroglycol 90、Pharmasolve、Soluphor P和三醋精。
示例性的水不溶性溶剂包括：Captex 350、Captex 355、甘油单油酸酯、Miglyol810、橄榄油、芝麻油和Softisan 645。
示例性的表面活性剂包括：Cremophor EL、Cremophor RH40、Gelucire 33/01、Gelucire 43/01、Gelucire 44/14、Gelucire 50/13、labrafil M 1944、labrafil M 2125、labrasol、lutrol L44NF、plurol oleique、span 20、span 80和Tween 80。
方法B.用于鉴别适合用于液体组合物的增溶剂的筛选研究
进行筛选测定以确定哪些材料可能适合用作液体组合物中的增溶剂。合适的增溶剂能够溶解SCF提取物以制备澄清的液体组合物。
方法C.用于评价增溶剂的性能的溶出度测定
在搅拌和环境温度下，将包含SCF提取物和增溶剂的液体组合物等分试样(1滴到几滴)置于200ml磷酸盐缓冲液(pH 6.8，50mM)中。然后确定溶液的澄清度。
实施例5澄清度的确定
方法A.用裸眼视觉检察
将包含待分析样品的小瓶举到光源下。视觉确定悬浮固体的存在。
方法B.用显微镜视觉检察
将等分试样的液体组合物置于显微镜载玻片上并在1000×放大率下观察。视觉确定悬浮固体的存在。
实施例6肠溶包衣胶囊的制备
步骤I：液体填充胶囊的制备
用实施例3的液体组合物填充硬明胶胶囊(50个，00号)。给这些胶囊人工填充800mg制剂，然后用50％乙醇/50％水溶液手工密封。然后用包含所示量的下列成分的22％明胶溶液手工包箍(band)胶囊。
  成分   Wt.(g)
  明胶   140.0
  聚山梨醇酯80   6.0
  水   454.0
  总计   650.0
将明胶溶液充分混合并使之膨胀1-2小时。在膨胀期后，将溶液牢牢盖住，置于55℃的烘箱中并使之液化。一旦整个明胶溶液为液体，就进行包箍。
使用带尖的圆3/0画笔将明胶溶液刷到胶囊上。使用由Shionogi提供的包箍试剂盒(banding kit)。在包箍后，将胶囊在环境条件下保持12小时使包箍固化。
步骤II：液体填充胶囊的包衣
由下表所列的成分制备包衣分散体：
 成分   重量％   固体％  固体(g)   g/批
 Eudragit L30D55   40.4   60.5  76.5   254.9
 TEC   1.8   9.0  11.4   11.4
 AlTalc 500V   6.1   30.5  38.5   38.5
 水   51.7   na  Na   326.2
 总计   100.0   100.0  126.4   631.0
如果使用步骤I的已包箍胶囊，则将分散体在胶囊上应用到20.0mg/cm2的包衣水平。使用下列条件将胶囊包衣。
 参数   设置
 包衣装置   Vector LDCS-3
 批量   500g
 入口空气温度   40℃
 出口空气温度   27-30℃
 入口空气体积   20-25CFM
 锅速   20rpm
 泵速   9rpm(3.5至4.0g/min)
 喷嘴压力   15psi
 喷嘴直径   1.0mm
 距片床的距离*   2-3in
*喷嘴的设置使得喷嘴和喷雾路径均处于入口空气的流路下。
实施例7皮肤相关疾病如癌症的治疗，包括但不限于黑素瘤、基底细胞癌和鳞状细胞癌以及非癌性炎性皮肤疾病包括但不限于光化性角化病、银屑病和湿疹的预防和治疗
将所述SCF提取物给予患有恶性或非恶性增殖性皮肤疾病如上述那些的受试者。所述SCF提取物作为乳膏或油膏或被包含在每单位剂量含有0.01mg至10mgSCF提取物的皮肤贴片内给予。所述受试者在1至14天期间被给予高至每天三次的单位剂量，或者直到皮肤疾病好转。期望所述治疗将明显减轻或消除导致疾病进程的炎症和恶性病进程。所述受试者应该经历皮肤损伤严重性的减轻和皮肤疾病本身的最终解决。应该期望恶性疾病的生长速率降低或抑制疾病的严重性增加。可以期望已有恶性损伤的真实消退。
实施例8皮肤相关疾病如皮肤癌的预防
将所述SCF提取物给予易形成皮肤癌的受试者如经常暴露于紫外线(来自日光)或化学品致癌物质的那些人。所述SCF提取物作为乳膏或油膏或被包含在每单位剂量含有0.01mg至10mg SCF提取物的皮肤贴片内给予。在每次暴露至致癌促进事件前(暴露于日光)，给予所述受试者高至每日三次的单位剂量。所述给予能例如作为防晒剂以阻断日光UV暴露，且SCF提取物预防皮肤组织内的肿瘤诱导。可期望SCF在皮肤产品中的这种应用将阻断形成和/或促进其中增殖会导致疾病过程恶化的恶性皮肤疾病或非恶性皮肤病症(例如光化性角化病、银屑病和/或湿疹)。
实施例9人或其它脊椎动物的实体瘤的治疗
SCF提取物能够用于治疗直肠、肛门、结肠直肠组织、头和颈组织、食道组织、肺(非小细胞和小细胞癌)、乳腺、胃、胰腺、前列腺、肝、肾、膀胱、输尿管、卵巢组织的癌，类癌瘤，骨的肉瘤，间皮瘤和中枢神经系统的肿瘤。
将所述SCF提取物给予患有实体恶性疾病如上述那些的受试者。所述SCF提取物作为每单位剂量包含1至50mg SCF提取物的口服剂型给予。在28天/治疗周期内，以高至每天两次给予受试者单位剂量。可能需要高至三个治疗周期。所述受试者应该经历肿瘤生长的增殖速率减慢或衰退。可能发生肿瘤的完全消除。用SCF提取物治疗可以被用作单一的药物或与细胞毒性化疗或放疗组合，或者可以与合适的免疫疗法组合而不会引起对常规疗法的期望抗肿瘤效果的有害干扰。
实施例10在两种人肿瘤细胞系内比较欧洲夹竹桃(Nerium oleander)的热水提取物与使用超临界CO2制备的SCF提取物的细胞毒性
将两种提取物的潜在细胞毒性直接与夹竹桃苷的潜在细胞毒性进行比较。所述样品包含相同量的夹竹桃苷，即使它们的夹竹桃苷浓度由于提取物所含的夹竹桃苷浓度而不同。
将BRO(人黑素瘤)和Panc-1(人胰腺癌)细胞(8×103/孔)铺在96孔平板上并使其附着过夜。然后将药物或提取物添加到细胞中。在72小时的温育后，通过结晶紫染色法评价相对细胞增殖(相对于未治疗的对照细胞)。
实施例11包含夹竹桃苷的溶液的HPLC分析
使用下列条件在HPLC(Waters)上分析样品(夹竹桃苷标准品、SCF提取物和热水提取物)：Symmetry C18柱(5.0μm，150×4.6mm I.D.；Waters)；MeOH∶水流动相＝54∶46(v/v)，流速为1.0ml/min。检测波长设置为217nm。如下制备样品：将化合物或提取物溶于固定量的HPLC溶剂中以获得夹竹桃苷的近似目标浓度。
实施例12SCF提取物的抗病毒活性的评价
该试验由在人外周血单核细胞(PBMC)内确定夹竹桃提取物或阳性对照(AZT)抑制HIV-1的ROJO毒株增殖的相对能力组成。将受感染的细胞对药物或提取物暴露48小时。该试验用于确定夹竹桃提取物的IC50(产生50％病毒增殖抑制的提取物浓度)相对于能够杀灭人PBMC的提取物浓度。事实上，这是确定提取物的治疗指数。这实质上是确定提取物是否能够杀灭HIV-1而不会杀灭PBMC细胞本身。
应该观察到对抗病毒增殖的IC50为约5.0μg/ml或更小，而即使在高至100μg/ml的浓度下也不应达到杀灭细胞所需的浓度。所得的数据提示夹竹桃提取物在抑制聚藏于PMBC细胞内的HIV-1病毒增殖方面应该是有用的。
实施例13包括SCF提取物的片剂的制备
将3％Syloid 244FP和97％微晶纤维素(MCC)的初始压片混合物混合。然后，通过湿法制粒将按照实施例3制备的已有组合物批料掺入Syloid/MCC混合物中。该混合物在下表中标记为“初始压片混合物”。在颗粒外添加额外的MCC以提高可压性。这种对初始压片混合物的添加被标记为“颗粒外添加”(Extra-granular Addition)。来自颗粒外添加的所得混合物的组成与“最终压片混合物”相同。
  组分   重量(g)   重量％(w/w)
  初始压片混合物
  微晶纤维素   48.5   74.2
  胶态二氧化硅/Syloid 244FP   1.5   2.3
  来自实施例3的uiji   15.351   23.5
  总计   65.351   100.0
颗粒外添加
  组分  重量(g)   重量％(w/w)
  初始压片混合物  2.5   50.0
  微晶纤维素  2.5   50.0
  总计  5   100.0
最终压片混合物：简化的
  组分  重量(g)   重量％(w/w)
  微晶纤维素  4.36   87.11
  胶态二氧化硅/Syloid 244FP  0.06   1.15
  来自实施例3的制剂  0.59   11.75
  总计  5.00   100
最终压片混合物：详细的
  组分  重量(g)  重量％(w/w)
  微晶纤维素  4.36  87.11
  胶态二氧化硅/Syloid 244FP  0.06  1.15
  维生素E  0.01  0.11
  Cremophor ELP  0.33  6.56
  Labrasol  0.05  1.01
  甘油单油酸酯  0.14  2.72
  乙醇  0.05  0.90
  SCF提取物  0.02  0.44
  总计  5.00  100.00
Syloid 244FP是由Grace Davison制造的胶态二氧化硅。胶态二氧化硅通常被用于提供几种功能，例如作为吸附剂、助流剂和片剂崩解剂。由于它能够吸附其重量3倍的油且具有5.5微米的粒度而选择Syloid 244FP。
上面是本发明具体实施方案的详述。应该理解，尽管本文为了说明的目的已经描述了本发明的具体实施方案，但在不背离本发明精神和范围的情况下可以进行各种修改。因此，本发明只受所附权利要求书的限制。可以根据本公开进行和执行本文公开和要求保护的所有实施方案而无需进行过度的实验。

Claims (25)

1.一种超临界流体提取方法，包括：
用超临界流体将包含夹竹桃苷的植物物料处理足以从所述植物物料中提取强心苷的一段时间，其中所述包含夹竹桃苷的植物物料为夹竹桃属（Nerium）物种或黄花夹竹桃属（Thevetia）物种；
从所述超临界流体中分离所述植物物料；和
除去所述超临界流体，从而形成包括夹竹桃苷的超临界流体提取物；
其中所述方法在270巴至320巴的压力和40℃至60℃的温度下进行，
其中所述超临界流体与所述植物物料的比例按重量计为45:1至60:1，
并且其中所述超临界流体包括二氧化碳。
2.权利要求1的方法，其中所述提取物还包括至少一种其它超临界流体可提取的药理学活性剂。
3.权利要求2的方法，其中当将所述提取物给予受试者时，所述至少一种其它超临界流体可提取的药理学活性剂促进强心苷的治疗功效。
4.权利要求3的方法，其中当将所述提取物给予受试者时，所述至少一种其它超临界流体可提取的药理学活性剂相加或协同地促进强心苷的治疗功效。
5.权利要求2的方法，其中所述超临界流体还包括改性剂。
6.权利要求5的方法，其中所述改性剂选自乙醇、丙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮和二氯甲烷。
7.权利要求1的方法，其中所述夹竹桃属（Nerium）物种为欧洲夹竹桃（Neriumoleander）。
8.权利要求1的方法，其中所述黄花夹竹桃属（Thevetia）物种为黄花夹竹桃（Thevetia nerifolia）。
9.权利要求1的方法，包括用于从粉状夹竹桃叶提取用于治疗细胞增殖性疾病的包含药理学活性强心苷的提取物的方法，所述方法包括：
将所述粉状夹竹桃叶与不包含改性剂的超临界二氧化碳混合以得到超临界溶剂混合物，其中所述超临界二氧化碳初始处于高于其临界压力的压力和高于其临界温度的温度下；
降低所述超临界溶剂混合物的压力和温度以得到分离的提取物混合物；和
从所述分离的提取物混合物中回收药理学活性提取物，以得到所述用于治疗细胞增殖性疾病的包含药理学活性强心苷的提取物。
10.权利要求1的方法，包括用于从粉状夹竹桃叶提取用于治疗细胞增殖性疾病的包含药理学活性强心苷的提取物的方法，所述方法包括：
将所述粉状夹竹桃叶与包含改性剂的超临界二氧化碳混合以得到超临界溶剂混合物，其中所述超临界二氧化碳初始处于高于其临界压力的压力和高于其临界温度的温度下；
降低所述超临界溶剂混合物的压力和温度以得到分离的提取物混合物；和
从所述分离的提取物混合物中回收药理学活性提取物，以得到所述用于治疗细胞增殖性疾病的包含药理学活性强心苷的提取物。
11.权利要求10的方法，其中所述改性剂为乙醇。
12.权利要求11的方法，其中所述超临界二氧化碳和乙醇初始处于280巴的压力和50℃的温度下。
13.权利要求1的方法，包括用于从粉状夹竹桃叶提取用于治疗细胞增殖性疾病的药理学活性提取物的方法，所述方法包括：
将所述粉状夹竹桃叶与不包含改性剂的超临界二氧化碳混合以得到超临界溶剂混合物，其中所述超临界二氧化碳初始处于300巴的压力和50℃的温度下；
降低所述超临界溶剂混合物的压力和温度以得到分离的提取物混合物；和
从所述分离的提取物混合物中回收药理学活性提取物，以得到所述用于治疗细胞增殖性疾病的药理学活性提取物。
14.权利要求1的方法，包括用于从粉状夹竹桃叶提取用于治疗细胞增殖性疾病的药理学活性提取物的方法，所述方法包括：
将所述粉状夹竹桃叶与包含改性剂的超临界二氧化碳混合以得到超临界溶剂混合物，其中所述超临界二氧化碳初始处于300巴的压力和50℃的温度下；
降低所述超临界溶剂混合物的压力和温度以得到分离的提取物混合物；和
从所述分离的提取物混合物中回收药理学活性提取物，以得到所述用于治疗细胞增殖性疾病的药理学活性提取物。
15.权利要求1的方法，包括用于从粉状夹竹桃叶提取用于治疗细胞增殖性疾病的药理学活性提取物的方法，所述方法包括：
将所述粉状夹竹桃叶与超临界二氧化碳混合以得到超临界溶剂混合物，其中所述超临界二氧化碳还包含乙醇，并且其中所述超临界二氧化碳初始处于300巴的压力和50℃的温度下；
降低所述超临界溶剂混合物的压力和温度以得到分离的提取物混合物；和
从所述分离的提取物混合物中回收所述药理学活性提取物，以得到所述用于治疗细胞增殖性疾病的药理学活性提取物。
16.权利要求10的方法，其中所述改性剂为醇和/或水。
17.权利要求9或10的方法，其中所述药理学活性提取物包括夹竹桃苷。
18.权利要求9或10的方法，其中所述夹竹桃叶为欧洲夹竹桃（Neriumoleander）。
19.权利要求10的方法，其中所述超临界二氧化碳和改性剂与夹竹桃植物原料的比率为40:1至45:1。
20.权利要求9或10的方法，还包括在与超临界二氧化碳混合前，干燥所述夹竹桃叶。
21.权利要求9或10的方法，其中所述降低的步骤用分离器进行。
22.权利要求15的方法，其中所述超临界二氧化碳与夹竹桃叶的比率为50:1。
23.权利要求13或14的方法，其中所述超临界二氧化碳与夹竹桃叶的比率为50:1。
24.权利要求9或10的方法，其中所述超临界溶剂与夹竹桃叶的比率为50:1。
25.权利要求10的方法，其中所述超临界二氧化碳和改性剂与夹竹桃叶的比率为40:1至45:1。
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Families Citing this family (141)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7402325B2 (en) 2005-07-28 2008-07-22 Phoenix Biotechnology, Inc. Supercritical carbon dioxide extract of pharmacologically active components from Nerium oleander
JP5484735B2 (ja) * 2006-01-31 2014-05-07 ザ、ユニバーシティー、オブ、トレド Ｎａ／Ｋ−ＡＴＰアーゼリガンド
KR101556797B1 (ko) * 2006-08-18 2015-10-01 에보니크 룀 게엠베하 양호한 수용해도를 가지는 활성 성분을 위한 활성 성분 전달이 제어되는 제약 조성물
CA2667251C (en) 2006-10-31 2018-05-29 University Of Toledo Na+/k+-atpase-specific peptide inhibitors/activators of src and src family kinases
US8486465B1 (en) 2007-07-09 2013-07-16 Douglas CRAWFORD Therapeutic nerium oleander extract compositions and methods of using
MX2010005081A (es) * 2007-11-13 2010-06-23 Phoenix Biotechnology Inc Metodo para determinar la probabilidad de una respuesta terapeutica en la quimioterapia para el cancer con un glicosido cardiaco.
EP2320729B1 (en) 2008-08-07 2015-04-22 Centrose, Llc Glycoside compounds and pharmaceutical compositions thereof
CA2739029C (en) * 2008-10-14 2018-07-10 Nerium Biotechnology, Inc. Process for extracting cardiac glycosides from plants and compositions comprising cardiac glycosides from nerium oleander
TR200900312A2 (tr) * 2009-01-15 2010-08-23 Levent Baş Ahmet Nerium oleander'in tip II diyabet, obezite, yüksek kolesterol ve trigliserid düzeyi ile seyreden hastalıklar ve kardiovasküler hastalıklarda kullanımı@
ES2555252T3 (es) 2009-09-16 2015-12-30 The University Of Toledo Ligandos de Na/K-ATPasa, antagonistas de ouabaína, ensayos y uso de los mismos
US10307450B2 (en) 2010-01-11 2019-06-04 Phoenix Biotechnology, Inc. Method of treating neurological conditions with extract of Nerium species or Thevetia species
US9011937B2 (en) 2010-11-22 2015-04-21 Phoenix Biotechnology, Inc. Method of treating neurological conditions with extract of Nerium species or Thevetia species
WO2011085307A1 (en) * 2010-01-11 2011-07-14 Phoenix Biotechnology, Inc. Method of treating neurological conditions with cardiac glycosides
US10383886B2 (en) 2010-01-11 2019-08-20 Phoenix Biotechnology, Inc. Method of treating neurological conditions with oleandrin
WO2011088210A1 (en) 2010-01-13 2011-07-21 The University Of Toledo Materials and methods related to sodium/potassium adenosine triphosphatase and src
US9066974B1 (en) 2010-11-13 2015-06-30 Sirbal Ltd. Molecular and herbal combinations for treating psoriasis
US8541382B2 (en) 2010-11-13 2013-09-24 Sirbal Ltd. Cardiac glycoside analogs in combination with emodin for cancer therapy
US9095606B1 (en) 2010-11-13 2015-08-04 Sirbal Ltd. Molecular and herbal combinations for treating psoriasis
KR20170049623A (ko) * 2010-11-22 2017-05-10 피닉스 바이오테크놀러지 인코포레이티드. 네리움 종 또는 테베티아 종의 추출물로 신경학적 병태를 치료하는 방법
MY153035A (en) * 2011-03-15 2014-12-31 Univ Sains Malaysia A plant-based cancer chemopreventive agent
WO2012176215A1 (en) * 2011-06-20 2012-12-27 Pundaleekappa Shinhasan Manohar A plant based antiviral composition for the treatment of hiv and hiv related acquired immuno deficiency syndrome
JP6255346B2 (ja) 2011-10-20 2017-12-27 ネリウム バイオテクノロジー，インコーポレーテッド 癌治療のための治療用組合せ
FR2985187B1 (fr) * 2012-01-04 2015-11-20 Lvmh Rech Extrait de graines de kniphofia uvaria, composition cosmetique ou dermatologique en contenant, et ses utilisations.
US9561245B2 (en) 2012-09-06 2017-02-07 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Combination treatments for melanoma
US9125841B2 (en) * 2013-02-26 2015-09-08 Johnson & Johnson Consumer Inc. Oral care compositions
US9572828B2 (en) * 2013-07-18 2017-02-21 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Treatment for melanoma
JP6526065B2 (ja) 2014-02-28 2019-06-05 ニンバス ラクシュミ， インコーポレイテッド Ｔｙｋ２阻害剤およびその使用
CN117088931A (zh) 2014-08-12 2023-11-21 莫纳什大学 定向淋巴的前药
TWI788655B (zh) 2015-02-27 2023-01-01 美商林伯士拉克許米公司 酪胺酸蛋白質激酶2(tyk2)抑制劑及其用途
US10063316B2 (en) * 2016-04-30 2018-08-28 Nanoprecision Products, Inc. Wall plate having a built-in modem for performing electrical-to-optical conversion, optical-to-electrical conversion and protocol-to-protocol conversion
WO2017004134A1 (en) 2015-06-29 2017-01-05 Nimbus Iris, Inc. Irak inhibitors and uses thereof
JP6802263B2 (ja) 2015-09-02 2020-12-16 ニンバス ラクシュミ， インコーポレイテッド Ｔｙｋ２阻害剤およびその使用
CN118063537A (zh) 2015-09-08 2024-05-24 莫纳什大学 定向淋巴的前药
WO2017044720A1 (en) 2015-09-11 2017-03-16 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Rapamycin analogs and uses thereof
LT3364958T (lt) 2015-10-23 2023-06-12 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Sestrin-gator2 sąveikos moduliatoriai ir jų panaudojimas
EP3389664A4 (en) 2015-12-14 2020-01-08 Raze Therapeutics Inc. MTHFD2 CAFFEIN INHIBITORS AND USES THEREOF
ES2965264T3 (es) 2016-03-09 2024-04-11 Raze Therapeutics Inc Inhibidores de la 3-fosfoglicerato deshidrogenasa y sus usos
WO2017156179A1 (en) 2016-03-09 2017-09-14 Raze Therapeutics, Inc. 3-phosphoglycerate dehydrogenase inhibitors and uses thereof
WO2017177230A1 (en) 2016-04-08 2017-10-12 X4 Pharmaceuticals, Inc. Methods for treating cancer
WO2017223243A1 (en) 2016-06-21 2017-12-28 X4 Pharmaceuticals, Inc. Cxcr4 inhibitors and uses thereof
CA3027495A1 (en) 2016-06-21 2017-12-28 X4 Pharmaceuticals, Inc. Cxcr4 inhibitors and uses thereof
CN109562106B (zh) 2016-06-21 2023-03-21 X4 制药有限公司 Cxcr4抑制剂及其用途
IT201600080802A1 (it) * 2016-08-01 2018-02-01 Gionas S R L Medicamento per il trattamento e/o la prevenzione dell’endometriosi.
US10729735B1 (en) 2016-09-14 2020-08-04 Phoenix Biotechnology, Inc. Method and compostitions for treating coronavirus infection
EP3512524B1 (en) 2016-09-14 2021-04-07 Phoenix Biotechnology, Inc. Method and compositions for treating viral infection
US10702567B2 (en) 2016-09-14 2020-07-07 Phoenix Biotechnology, Inc. Method and compositions for treating viral infection
US10596186B2 (en) 2016-09-14 2020-03-24 Phoenix Biotechnology, Inc. Method and compositions for treating viral infections
JP7082130B2 (ja) 2016-10-14 2022-06-07 ニンバス ラクシュミ， インコーポレイテッド Ｔｙｋ２阻害剤およびその使用
AU2017345736B2 (en) 2016-10-21 2022-04-07 Takeda Pharmaceutical Company Limited TYK2 inhibitors and uses thereof
WO2018089499A1 (en) 2016-11-08 2018-05-17 Navitor Pharmaceuticals, Inc. PHENYL AMINO PIPERIDINE mTORC INHIBITORS AND USES THEREOF
EP3548005A4 (en) 2016-11-29 2020-06-17 Puretech Health LLC EXOSOMES FOR THE ADMINISTRATION OF THERAPEUTIC AGENTS
WO2018106636A1 (en) 2016-12-05 2018-06-14 Raze Therapeutics, Inc. Shmt inhibitors and uses thereof
CN110603261A (zh) 2016-12-23 2019-12-20 拜斯科阿迪有限公司 具有新型键结构的肽衍生物
EP3565638B8 (en) 2017-01-06 2024-04-10 BicycleRD Limited Bicycle conjugate for treating cancer
CN106924720B (zh) * 2017-02-21 2020-08-28 中山大学 罗布麻酸性多糖穿膜肽口服胰岛素纳米复合物的制备方法
IL269036B2 (en) 2017-03-08 2023-03-01 Nimbus Lakshmi Inc tyk2 inhibitors, uses and methods for their production
EP3375784A1 (en) 2017-03-14 2018-09-19 Artax Biopharma Inc. Aza-dihydro-acridone derivatives
EP3375778A1 (en) 2017-03-14 2018-09-19 Artax Biopharma Inc. Aryl-piperidine derivatives
WO2018191146A1 (en) 2017-04-10 2018-10-18 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Heteroaryl rheb inhibitors and uses thereof
AU2018258355B2 (en) 2017-04-26 2024-05-30 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Modulators of sestrin-gator2 interaction and uses thereof
WO2018197893A1 (en) 2017-04-27 2018-11-01 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligands and uses thereof
WO2019002842A1 (en) 2017-06-26 2019-01-03 Bicyclerd Limited BICYCLIC PEPTIDE LIGANDS WITH DETECTABLE FRACTIONS AND USES THEREOF
EP3424493A1 (en) 2017-07-07 2019-01-09 SolMic Research GmbH Stable cannabinoid compositions
CN111194317A (zh) 2017-07-28 2020-05-22 林伯士拉克许米公司 Tyk2抑制剂与其用途
US20200291096A1 (en) 2017-08-14 2020-09-17 Bicyclerd Limited Bicyclic peptide ligand sting conjugates and uses thereof
US20200283482A1 (en) 2017-08-14 2020-09-10 Bicyclerd Limited Bicyclic peptide ligand prr-a conjugates and uses thereof
US11883497B2 (en) 2017-08-29 2024-01-30 Puretech Lyt, Inc. Lymphatic system-directing lipid prodrugs
EP3675838A4 (en) 2017-08-29 2021-04-21 PureTech LYT, Inc. LIPID PRODUCTS DIRECTED TO THE LYMPHATIC SYSTEM
KR102295179B1 (ko) * 2017-09-14 2021-08-30 피닉스 바이오테크놀러지 인코포레이티드. 바이러스 감염 치료를 위한 방법 및 조성물
US11331291B2 (en) 2017-09-14 2022-05-17 Phoenix Biotechnology, Inc. Method of and improved composition for treating triterpene-responsive conditions, diseases or disorders
RU2758376C2 (ru) 2017-09-14 2021-10-28 Феникс Байотекнолоджи, Инк. Способ и улучшенная нейропротекторная композиция для лечения неврологических патологических состояний
WO2019060693A1 (en) 2017-09-22 2019-03-28 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN LIGANDS AND USES THEREOF
IL273432B (en) 2017-09-22 2022-09-01 Kymera Therapeutics Inc Protein compounds and their uses
GB201721265D0 (en) 2017-12-19 2018-01-31 Bicyclerd Ltd Bicyclic peptide ligands specific for EphA2
TWI825046B (zh) 2017-12-19 2023-12-11 英商拜西可泰克斯有限公司 Epha2特用之雙環胜肽配位基
EP3727362A4 (en) 2017-12-19 2021-10-06 PureTech LYT, Inc. MYCOPHENOLIC ACID LIPID MEDICINAL PRODUCTS AND THEIR USES
US11608345B1 (en) 2017-12-19 2023-03-21 Puretech Lyt, Inc. Lipid prodrugs of rapamycin and its analogs and uses thereof
US11304954B2 (en) 2017-12-19 2022-04-19 Puretech Lyt, Inc. Lipid prodrugs of mycophenolic acid and uses thereof
WO2019133531A1 (en) 2017-12-26 2019-07-04 Kymera Therapeutics, Inc. Irak degraders and uses thereof
EP3737675A4 (en) 2018-01-12 2022-01-05 Kymera Therapeutics, Inc. CRBN LIGANDS AND THEIR USES
EP3737666A4 (en) 2018-01-12 2022-01-05 Kymera Therapeutics, Inc. PROTEIN DEGRADANTS AND USES THEREOF
SG11202006832YA (en) 2018-01-29 2020-08-28 Merck Patent Gmbh Gcn2 inhibitors and uses thereof
IL301089A (en) 2018-01-29 2023-05-01 Vertex Pharma GCN2 inhibitors and their uses
US10696663B2 (en) 2018-02-27 2020-06-30 Artax Biopharma Inc. Chromene derivatives as inhibitors of TCR-NCK interaction
IL301501B1 (en) 2018-04-24 2024-06-01 Vertex Pharma Antiproliferative compounds and their uses
AR114828A1 (es) 2018-04-24 2020-10-21 Vertex Pharma Compuestos de pteridinona y sus usos
CN117843659A (zh) 2018-06-15 2024-04-09 詹森药业有限公司 雷帕霉素类似物和其用途
US11180531B2 (en) 2018-06-22 2021-11-23 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligands specific for Nectin-4
GB201810316D0 (en) 2018-06-22 2018-08-08 Bicyclerd Ltd Peptide ligands for binding to EphA2
EP3817748A4 (en) 2018-07-06 2022-08-24 Kymera Therapeutics, Inc. TRICYCLIC CRBN LIGANDS AND USES THEREOF
US10548889B1 (en) 2018-08-31 2020-02-04 X4 Pharmaceuticals, Inc. Compositions of CXCR4 inhibitors and methods of preparation and use
US20220089587A1 (en) 2018-09-07 2022-03-24 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof
CN113271940A (zh) 2018-10-15 2021-08-17 林伯士拉克许米公司 Tyk2抑制剂和其用途
EP3870597A1 (en) 2018-10-23 2021-09-01 BicycleTx Limited Bicyclic peptide ligands and uses thereof
US11345654B2 (en) 2018-10-24 2022-05-31 Navitor Pharmaceuticals, Inc. Polymorphic compounds and uses thereof
JP2022516401A (ja) 2018-11-30 2022-02-28 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｉｒａｋ分解剤およびそれらの使用
JP2022509260A (ja) 2018-11-30 2022-01-20 ニンバス ラクシュミ， インコーポレイテッド Ｔｙｋ２阻害剤およびその使用
EP3670659A1 (en) 2018-12-20 2020-06-24 Abivax Biomarkers, and uses in treatment of viral infections, inflammations, or cancer
JP2022518505A (ja) 2019-01-23 2022-03-15 ニンバス ラクシュミ， インコーポレイテッド Ｔｙｋ２阻害剤およびその使用
WO2020165600A1 (en) 2019-02-14 2020-08-20 Bicycletx Limited Bicyclic peptide ligand sting conjugates and uses thereof
CN109832597B (zh) * 2019-03-25 2022-04-12 郑州雪麦龙食品香料有限公司 一种提高花椒麻素回收率的提取工艺
JP2022528887A (ja) 2019-04-02 2022-06-16 バイスクルテクス・リミテッド バイシクルトキシンコンジュゲートおよびその使用
SG11202110829YA (en) 2019-04-05 2021-10-28 Kymera Therapeutics Inc Stat degraders and uses thereof
AU2020282759A1 (en) 2019-05-31 2021-12-23 Ikena Oncology, Inc. TEAD inhibitors and uses thereof
TW202118770A (zh) 2019-07-30 2021-05-16 英商拜西可泰克斯有限公司 異質雙環肽複合物
JP2022548594A (ja) 2019-09-11 2022-11-21 ビンシア・バイオサイエンシーズ・インコーポレイテッド Ｕｓｐ３０阻害剤及びその使用
KR20220105631A (ko) 2019-09-13 2022-07-27 님버스 새턴 인코포레이티드 Hpk1 길항제 및 이의 용도
BR112022008287A2 (pt) 2019-11-01 2022-07-26 Navitor Pharm Inc Métodos de tratamento usando um modulador de mtorc1
TW202134234A (zh) 2019-12-05 2021-09-16 美商奈維特製藥公司 雷帕黴素類似物及其用途
BR112022011651A2 (pt) 2019-12-17 2022-08-23 Kymera Therapeutics Inc Degradadores de irak e usos dos mesmos
US11591332B2 (en) 2019-12-17 2023-02-28 Kymera Therapeutics, Inc. IRAK degraders and uses thereof
JP2023509394A (ja) 2019-12-23 2023-03-08 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｓｍａｒｃａ分解剤およびそれらの使用
EP4100017A4 (en) 2020-02-05 2024-04-10 PureTech LYT, Inc. LIPID PRODRUGS OF NEUROSTEROIDS
AR121506A1 (es) 2020-03-03 2022-06-08 Pic Therapeutics Inc Inhibidores del eif4e y sus usos
JP2023518423A (ja) 2020-03-19 2023-05-01 カイメラ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｍｄｍ２分解剤およびそれらの使用
US11806359B2 (en) 2020-03-31 2023-11-07 Phoenix Biotechnology, Inc. Method and compositions for treating Coronavirus infection
JP7153083B2 (ja) 2020-03-31 2022-10-13 フェニックス・バイオテクノロジー・インコーポレイテッド コロナウイルス感染を治療するための方法および組成物
EP4295854A3 (en) 2020-03-31 2024-04-03 Phoenix Biotechnology, Inc. Method and compositions for treating coronavirus infection
TW202210483A (zh) 2020-06-03 2022-03-16 美商凱麥拉醫療公司 Irak降解劑之結晶型
WO2022038158A1 (en) 2020-08-17 2022-02-24 Bicycletx Limited Bicycle conjugates specific for nectin-4 and uses thereof
CN111875662B (zh) * 2020-08-19 2022-08-16 中国人民解放军空军军医大学 一种美花铁线莲茎化学提取物的提取方法和应用
EP4255895A1 (en) 2020-12-02 2023-10-11 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
WO2022120353A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
CN112704074B (zh) * 2021-01-05 2022-11-25 广东省田园农业生物科技有限公司 一种天然植物内源成分的提取方法
BR112023015590A2 (pt) 2021-02-02 2023-10-17 Liminal Biosciences Ltd Antagonistas de gpr84 e usos dos mesmos
BR112023015584A2 (pt) 2021-02-02 2023-10-24 Liminal Biosciences Ltd Antagonistas de gpr84 e usos dos mesmos
CN117295737A (zh) 2021-03-05 2023-12-26 林伯士萨顿公司 Hpk1拮抗剂和其用途
IL307673A (en) 2021-04-16 2023-12-01 Ikena Oncology Inc MEK inhibitors and their use
CN113321696B (zh) * 2021-06-30 2022-05-31 广西师范大学 一种强心苷的制备方法及其在制备抗肿瘤药物中的应用
CN118019739A (zh) 2021-08-25 2024-05-10 皮克医疗公司 Eif4e抑制剂及其用途
TW202315621A (zh) 2021-08-25 2023-04-16 美商皮克醫療公司 Ｅｉｆ４ｅ抑制劑及其用途
CN114181051B (zh) * 2021-12-14 2024-05-07 广州杨森药业有限公司 一种桃柁酚的制备方法及其应用
WO2023114984A1 (en) 2021-12-17 2023-06-22 Ikena Oncology, Inc. Tead inhibitors and uses thereof
WO2023173053A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023173057A1 (en) 2022-03-10 2023-09-14 Ikena Oncology, Inc. Mek inhibitors and uses thereof
WO2023211889A1 (en) 2022-04-25 2023-11-02 Ikena Oncology, Inc. Polymorphic compounds and uses thereof
TW202404581A (zh) 2022-05-25 2024-02-01 美商醫肯納腫瘤學公司 Ｍｅｋ抑制劑及其用途
WO2024028365A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Substituted pyridone gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024028364A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Aryl-triazolyl and related gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024028363A1 (en) 2022-08-02 2024-02-08 Liminal Biosciences Limited Heteroaryl carboxamide and related gpr84 antagonists and uses thereof
WO2024112894A1 (en) 2022-11-22 2024-05-30 PIC Therapeutics, Inc. Eif4e inhibitors and uses thereof

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6565897B2 (en) * 1998-09-24 2003-05-20 Ozelle Pharmaceuticals, Inc. Extract of nerium species, pharmaceutical composition thereof and methods for preparation thereof
US6737552B1 (en) * 2003-03-27 2004-05-18 Lance B. Crombie Method for extracting lutein from green plant materials

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1394196A (en) * 1971-10-03 1975-05-14 Hisamitsu Pharmaceutical Co Process for isolating oleandrin from nerium odorum
BE896610A (fr) * 1982-05-06 1983-08-16 Hop Developments Ltd Extraction d'une matiere vegetale en utilisant de l'anhydride carbonique
JPS62496A (ja) 1985-06-27 1987-01-06 Mitsui Petrochem Ind Ltd 配糖体の抽出方法
FI872106A (fi) * 1986-05-13 1987-11-14 Huseyin Ziya Ozel Extrakt av nerium-arter, foerfarande foer framstaellning av dem och deras anvaendning.
JPS6333341A (ja) * 1986-07-28 1988-02-13 Seitetsu Kagaku Co Ltd 配糖体の処理方法
US4816259A (en) * 1987-02-12 1989-03-28 Chase Chemical Company, L.P. Process for coating gelatin capsules
US5236132A (en) * 1992-01-03 1993-08-17 Vortec, Inc. Gradient-force comminuter/dehydrator apparatus and method
US5598979A (en) * 1995-04-20 1997-02-04 Vortec, Inc. Closed loop gradient force comminuting and dehydrating system
DE19535031A1 (de) * 1995-09-21 1997-03-27 Goldschmidt Ag Th Verfahren zur Auftrennung von Alkylglycosiden
CA2191923C (en) 1996-12-03 2000-10-24 Ji-Won Yoon Portulaca oleracea and tumor cell growth
US6294192B1 (en) * 1999-02-26 2001-09-25 Lipocine, Inc. Triglyceride-free compositions and methods for improved delivery of hydrophobic therapeutic agents
US6517015B2 (en) * 2000-03-21 2003-02-11 Frank F. Rowley, Jr. Two-stage comminuting and dehydrating system and method
US6715705B2 (en) * 2001-03-16 2004-04-06 Frank F. Rowley, Jr. Two-stage comminuting and dehydrating system and method
US20040082521A1 (en) 2002-03-29 2004-04-29 Azaya Therapeutics Inc. Novel formulations of digitalis glycosides for treating cell-proliferative and other diseases
AU2003287526A1 (en) 2002-11-06 2004-06-03 Protein-stabilized liposomal formulations of pharmaceutical agents
WO2004087121A2 (en) 2003-03-28 2004-10-14 Azaya Therapeutics, Inc. Water soluble formulations of digitalis glycosides for treating cell-proliferative and other diseases
US20050112059A1 (en) * 2003-10-06 2005-05-26 Phoenix Biotechnology, Inc. Enhancement of radiotherapy by an exogenous cardiac glycoside
GB0411703D0 (en) * 2004-05-25 2004-06-30 Phytopharm Plc Selective separation or extraction of steroidal glycosides
DE102004061669A1 (de) 2004-12-22 2006-07-13 Man Roland Druckmaschinen Ag Druckmaschinenwalze sowie Druckmaschinenzylinder
US7402325B2 (en) 2005-07-28 2008-07-22 Phoenix Biotechnology, Inc. Supercritical carbon dioxide extract of pharmacologically active components from Nerium oleander

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6565897B2 (en) * 1998-09-24 2003-05-20 Ozelle Pharmaceuticals, Inc. Extract of nerium species, pharmaceutical composition thereof and methods for preparation thereof
US6737552B1 (en) * 2003-03-27 2004-05-18 Lance B. Crombie Method for extracting lutein from green plant materials

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Xiaomin Wang,等.LC/MS/MS Analyses of an Oleander Extract for Cancer Treatment.《Anal. Chem.》.2000,(第72期),第3547-3552页. *

Also Published As

Publication number Publication date
RU2398591C2 (ru) 2010-09-10
EP1909807B1 (en) 2012-05-16
GT200600338A (es) 2007-02-12
US8187644B2 (en) 2012-05-29
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US8394434B2 (en) 2013-03-12
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MX2008001261A (es) 2008-03-25
KR20110092360A (ko) 2011-08-17
RU2008107585A (ru) 2009-09-10
JP6058920B2 (ja) 2017-01-11
AR055358A1 (es) 2007-08-22
WO2007016176A2 (en) 2007-02-08
US20080200401A1 (en) 2008-08-21
JP2009502942A (ja) 2009-01-29
CN101400358B (zh) 2013-06-05
BRPI0614484A2 (pt) 2011-03-29
CA2609808C (en) 2016-08-30
JP6113205B2 (ja) 2017-04-12
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CN101400358A (zh) 2009-04-01
HK1159475A1 (en) 2012-08-03
US7402325B2 (en) 2008-07-22
JP2015096546A (ja) 2015-05-21
AU2006275891A1 (en) 2007-02-08
JP5081152B2 (ja) 2012-11-21
US20070026092A1 (en) 2007-02-01
CN102172363A (zh) 2011-09-07
EP1909807A2 (en) 2008-04-16
JP2012197298A (ja) 2012-10-18

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