CN103565787B

CN103565787B - 一种含蓬莪术环二烯的药物组合物及其制药用途

Info

Publication number: CN103565787B
Application number: CN201310310831.4A
Authority: CN
Inventors: 孟昭珂; 郭殿武; 吴耀东
Original assignee: HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL RESEARCH INSTITUTE Co Ltd; Hangzhou Minsheng Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: HANGZHOU MINSHENG PHARMACEUTICAL RESEARCH INSTITUTE Co Ltd; Hangzhou Minsheng Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2009-07-29
Filing date: 2009-07-29
Publication date: 2016-02-17
Anticipated expiration: 2029-07-29
Also published as: CN101984961B; CN103405396B; CN103405396A; CN103565787A; CN101984961A

Abstract

本发明提供了一种含有蓬莪术环二烯的药物组合物的口服给药制剂，其为口服固体片剂或胶囊，该口服固体片剂或者胶囊采用低温粉碎技术，将蓬莪术环二烯进行微粉化处理，使其粒径达到200目，改善了药物的流动性，增加了口服制剂的生物利用度，同时降低了口服固体制剂中药物的含量，间接地降低了成本。

Description

一种含蓬莪术环二烯的药物组合物及其制药用途

本申请是申请号为200910101005.2，申请日为2009年7月29日，发明名称为“含蓬莪术环二烯的药物组合物、其制剂制备工艺及其医药用途”的分案申请。

技术领域

本发明涉及中药有效成分、药物组合物以及制备方法和医药用途，具体地说，本发明涉及一种含蓬莪术环二烯的药物组合物及其制药用途。

背景技术

蓬莪术环二烯为莪术油中一主要成分，首次于日本的Hikiw,H等人于1968年报道的。其化学名称为(5E,9Z)-3,6,10-三甲基－4，7，8，11－四氢化芳癸并【b】呋喃。

化学结构式为：

分子式为：C₁₅H₂₀O分子量为：216.15

目前已有报道蓬莪术环二烯在治疗肿瘤疾病方面的应用，但尚未有关于有效剂量的研究报道和系统的制剂处方研究报道。另外，由于该化合物水溶性极小，按照常规方法制备的水溶性注射液，非常容易析出，稳定性不能够得到保证，这大大增加了水溶性制剂研究的困难。鉴于此，本发明提供一种稳定且有效的含蓬莪术环二烯的药物组合物及其制剂的制备方法。

虽然该化合物在油性介质中溶解性较大，但用常规方法制得的乳剂或油剂具有放置容易析出，稳定性差，尤其是进入体内油相与体内不能混溶，药物吸收困难，生物利用度低的缺点。因此需要对其药物制剂进行研究，来获得稳定性好、吸收及药效较好的含有蓬莪术环二烯的药物组合物的药物制剂，以满足医院市场不同病患的安全、合理用药的需要。

发明内容

本发明旨在通过处方筛选和不同于常规工艺的特殊工艺，提供制备工艺简单、稳定性好和药效较好的含蓬莪术环二烯的药物组合物及其多种药物制剂以及它们的制备方法，以及应用于治疗或辅助治疗恶性肿瘤的药物的制备。其药物制剂的给药方式为注射给药或口服给药。给药次数为每日给药一次或隔几天给药一次。每次给药剂量为一定值。

本发明提供一种给药频率一天一次或少于一次用于治疗或辅助治疗恶性肿瘤的含蓬莪术环二烯的药物组合物，采用注射给药制剂或口服给药制剂，其中所述的药物组合物中蓬莪术环二烯的含量为48mg～2430mg。注射制剂优选注射液、注射乳和冻干剂，口服制剂优选口服乳、片剂、硬胶囊和软胶囊。

本发明提供一种含有48～800mg蓬莪术环二烯的药物组合物注射给药制剂，该组合物每日给药一次用于治疗肿瘤。优选的药物组合物含有240～580mg的蓬莪术环二烯，最优选的药物组合物含有490mg的蓬莪术环二烯。本发明还涉及一种含有蓬莪术环二烯的口服给药的药物组合物，该组合物每日给药一次用于治疗肿瘤，组合物中含蓬莪术环二烯480～2430mg，优选含量约为608～1940mg，再优选约970～1600mg，最优选1460mg。

本发明提供一种含有蓬莪术环二烯的药物组合物的水溶性注射给药制剂。由于该化合物在水和常规非水介质中溶解性小这一特殊性，需添加特定的增溶剂。试验中发现本发明所选的增溶剂和有机相的组合用量在一定范围内能很好的增加其水溶性。根据药理试验数据得以水为介质的注射剂药效较好和副作用小，我们选择注射液中介质为注射用水。

含有蓬莪术环二烯的药物组合物的水溶性注射给药制剂为注射液，其中包含：约48mg～约800mg的蓬莪术环二烯；占所述组合物的量为4％～10％v/v的有机相；占所述组合物的量为1％～5％v/v的增溶剂；注射用水定容至80ml。其中所述的有机相为丙二醇、PEG400、甘油和乙醇中一种或几种的混合物，优选乙醇。其中所述的增溶剂选自聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、聚山梨酯-80中一种或几种的混合物。

制成的蓬莪术环二烯水性注射液具有以下优点：

1、该注射液创造性的加入适宜的增溶剂和人体可接受的有机溶剂，该组合比例合适，大大增加了蓬莪术环二烯在水中的溶解度和稳定性，解决了放置容易析出的问题。制得的注射液是完全澄明的水性注射液，较注射用乳剂，注射用油溶液等剂型，人体更容易接受，避免了脂溶性溶剂对人体的刺激和毒副作用。

2、该注射液可以通过静脉注射或静脉滴注的形式输入人体，没有吸收过程，可以快速起效，有利于临床应用。因而极难溶的药物选择做成水溶剂而非脂溶性剂。

本发明还提供一种含有蓬莪术环二烯的药物组合物的口服给药制剂，其为口服固体制剂——片剂或胶囊，其中包括：a)10g～20g的蓬莪术环二烯，b)10g～50g的填充剂，所述的填充剂为环糊精、微晶纤维素、可压性淀粉、乳糖中的一种，优选可压性淀粉；c)0～30g的崩解剂，所述的崩解剂为交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠、预明胶化淀粉中的一种，优选交联羧甲基纤维素钠；d)0～2g润滑剂，所述的润滑剂为硬脂酸镁、二氧化硅中的一种；制成100片或者胶囊。

口服固体药物制剂——片剂或胶囊采用独特的制备工艺制备：

1、采用低温粉碎技术，将蓬莪术环二烯进行微粉化处理，使其粒径达到200目。改善了药物的流动性，增加口服制剂的生物利用度，降低口服固体制剂中药物的含量，间接的降低了成本，更有利于患者使用和服用。

2、创造性的采用药物与适宜的赋型剂充分混合均匀后，不经制粒过程直接压片或灌装胶囊。该工艺避免了湿法制粒必须经过干燥，通常的干燥过程都需要加热，本品对热不稳定，制剂过程会增加药物分解几率。采用粉末直接压片，可以大大提高药物的稳定性和工艺的成熟度。

本发明还提供一种含有蓬莪术环二烯的药物组合物的口服给药制剂为口服固体制剂——软胶囊，单位总体积24ml，其中包含：480～2430mg的蓬莪术环二烯，0.024～0.24mg的表面活性剂；0.024～0.24mg的防腐剂，加入适当的载体基质定容到24ml。其中所述的载体基质选自大豆油、玉米油、花生油等植物油中的一种或几种的混合物。其中所述的表面活性剂选自大豆磷脂、卵磷脂、聚山梨酯-80。进一步包含组分防腐剂。其中所述的防腐剂选自对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸钠、山梨酸钾和其任意组合。更进一步还可添加抗氧化剂，比如叔丁基对羟基茴香醚（BHA）、2,6-二叔丁基化羟基甲苯（BHT）、维生素E、抗坏血酸棕榈酸酯等。

采用以上处方工艺制成的口服软胶囊具有以下优势和优点：

1、结合蓬莪术环二烯脂溶性强的性质，采用均一的油溶解制成可口服的软胶囊，解决了其在水性溶剂中容易析出的问题，大大提高该制剂的稳定性。采用人体可接受的油脂作溶剂，得到的蓬莪术环二烯油内容物性状均一，制备方法简便，有利于产业化生产。

2、在此基础上，与传统的软胶囊剂中加入W/O型表面活性剂不同，我们创造性加入几种特定的O/W型表面活性剂（大豆磷脂、卵磷脂、聚山梨酯-80），其目的并不是增加蓬莪术环二烯在油脂中的溶解性，而是在软胶囊进入人体胃液后，促进油脂和体内水性体液的融合，改善蓬莪术环二烯的油水分配性质，大大促进蓬莪术环二烯透过细胞膜的速度和程度，提高制剂的生物利用度。

3、用该处方工艺制备的软胶囊进入体内吸收具有独特的吸收机制：在体温环境下，遇到液体后可在胃肠道蠕动的促使下自发形成水包油型乳剂。提高药物溶出度，改善吸收。微乳界面积大，表面张力低，易于通过胃肠壁的水化层，可以增加穿透性，促进吸收。微乳可经淋巴管吸收，从而克服首过效应以及大分子通过胃肠道上皮时的障碍。微乳的分散相粒径细小且均匀，利于药物在体内的吸收，从而提高药物的生物利用度。

4、在具备了特殊的处方工艺和独特的吸收机制的前提下，经过药理学验证，该软胶囊制剂的毒性较乳剂明显降低，其药理学性质得到改善。

5、此外，该软胶囊还具有服用方便，易于生产，对保存条件无特殊要求，适合运输和临床使用的优点。

适合本发明的含有蓬莪术环二烯的药物组合物的制剂还可以是口服液体制剂，如口服乳剂，可包含油相（如大豆油、玉米油、花生油），乳化剂（如大豆磷脂、卵磷脂），可进一步包含但不限于下述一种或多种的组分:防腐剂、pH调节剂、药学可接受溶剂、除蓬莪术环二烯外的药学活性剂，或其任意组合。其中所述的防腐剂为对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯甲酸钠、山梨酸钾和其任意组合，且其存在量为0.01％到1.0％w/v。其中所述的pH调节剂为稀酸、稀碱或其任意组合，且以调节所述组合物pH值到4至8的量存在。其中所述的药学可接受溶剂为注射用水、PEG400、丙二醇、乙醇、甘油及其任意组合，优选注射用水。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明并不局限于此。

制备蓬莪术环二烯乳注射液实施例1-8

实施例1：1g蓬莪术环二烯

50g大豆油

10g大豆磷脂

加注射用水至刻度共1000ml

制备：先将乳化剂(大豆磷脂)溶解在油相(大豆油)中，加入主药蓬莪术环二烯，搅拌使其溶解，在搅拌均匀后，孔径0.22μm的微孔滤膜过滤备用，加入注射用水至处方量，均浆机制成初乳，通过匀质机使达到注射乳剂粒径大小。通过孔径0.22μm的微孔滤膜进行无菌过滤，最后灌封于1ml的干燥的灭菌安瓿中。制成每支安瓿1ml含蓬莪术环二烯1mg的乳剂注射液。

实施例2：10g蓬莪术环二烯、50g大豆油、20g大豆磷脂、加注射用水至刻度共1000ml。

制备蓬莪术环二烯乳注射液的方法同实施例1，制成每支安瓿1ml含蓬莪术环二烯10mg的乳剂注射液。

实施例3：40g蓬莪术环二烯、100g玉米油、20g蛋黄卵磷脂、加注射用水至刻度共1000ml。

制备蓬莪术环二烯乳注射液的方法同实施例1，制成每支安瓿1ml含蓬莪术环二烯40mg的乳剂注射液。

实施例4：12g蓬莪术环二烯、100g花生油、20g氢化大豆磷脂、加注射用水至刻度共1000ml。

制备蓬莪术环二烯乳注射液的方法同实施例1，制成每支安瓿1ml含蓬莪术环二烯12mg的乳剂注射液。

实施例5：1g蓬莪术环二烯、50g大豆油、10g合成磷脂、加注射用水至刻度共1000ml。

制备蓬莪术环二烯乳注射液的方法同实施例1，制成每支安瓿1ml含蓬莪术环二烯1mg的乳剂注射液。

实施例6：1g蓬莪术环二烯、50g大豆油、20g聚氧乙烯蓖麻油、加注射用水至刻度共1000ml。制备蓬莪术环二烯乳注射液的方法同实施例1，制成每支安瓿1ml含蓬莪术环二烯1mg的乳剂注射液。

实施例7：10g蓬莪术环二烯、100g大豆油、20g聚氧乙烯氢化蓖麻油、加注射用水至刻度共1000ml。制备蓬莪术环二烯乳注射液的方法同实施例1，制成每支安瓿1ml含蓬莪术环二烯10mg的乳剂注射液。

实施例8：2.5g蓬莪术环二烯、100g大豆油和玉米油组合物、10g聚山梨酯-80、加注射用水至刻度共1000ml。制备蓬莪术环二烯乳注射液的方法同实施例1，制成每支安瓿1ml含蓬莪术环二烯2.5mg的乳剂注射液。

制备蓬莪术环二烯注射液实施例9-12

实施例9：0.8g蓬莪术环二烯

8ml乙醇

4ml聚氧乙烯蓖麻油

加注射用水至刻度共80ml。

制备：先将增溶剂（聚氧乙烯蓖麻油，其他实施例为相应的增溶剂）溶解在有机相（乙醇，其他实施例为相应的有机相）中，加入主药蓬莪术环二烯，搅拌使其溶解，在搅拌均匀后，加入注射用水至处方量，通过孔径0.22μm的微孔滤膜进行无菌过滤，最后灌装到20ml的干燥的灭菌安瓿中，制成每1ml含蓬莪术环二烯10mg的注射剂。

实施例10：0.048g蓬莪术环二烯、3.8ml乙醇、0.8ml氢化聚氧乙烯蓖麻油、加注射用水至刻度共80ml。制备方法同实施例9，制成每1ml含蓬莪术环二烯0.6mg的注射剂。

实施例11：0.4g蓬莪术环二烯、5ml乙醇、2ml聚山梨酯-80、加注射用水至刻度共80ml。制备方法同实施例9，制成每1ml含蓬莪术环二烯5mg的注射剂。

实施例12：0.8g蓬莪术环二烯、6ml乙醇、4ml聚氧乙烯氢化蓖麻油、加注射用水至刻度共80ml。制备方法同实施例9，制成每1ml含蓬莪术环二烯10mg的注射剂。

制备蓬莪术环二烯口服乳实施例13——21

实施例13：1g蓬莪术环二烯

50g大豆油

10g大豆磷脂

0.1g对羟基苯甲酸甲酯

加注射用水至刻度

共1000ml

制备：先将乳化剂（大豆磷脂）溶解在油相（大豆油）中，加入主药蓬莪术环二烯，搅拌使其溶解，再加入防腐剂（对羟基苯甲酸甲酯）搅拌均匀后，孔径0.22μm的微孔滤膜过滤备用，加入注射用水至处方量，均浆机制成初乳，通过匀质机使达到注射乳剂粒径大小。通过孔径0.22μm的微孔滤膜进行无菌过滤，最后灌装于20ml灭菌玻璃瓶中，加塞，扎盖。制成每1ml含蓬莪术环二烯1mg的口服乳剂。

实施例14：100g蓬莪术环二烯、100g大豆油、50g大豆磷脂、5g对羟基苯甲酸甲酯、加注射用水至刻度共1000ml。制备方法同实施例13，制成每1ml含蓬莪术环二烯100mg的口服乳剂。

实施例15：50g蓬莪术环二烯、100g玉米油、20g蛋黄卵磷脂、10g对羟基苯甲酸丙酯加注射用水至刻度共1000ml。制备方法同实施例13，制成每1ml含蓬莪术环二烯50mg的口服乳剂。

实施例16：10g蓬莪术环二烯、100g花生油、20g氢化大豆磷脂、0.1g对羟基苯甲酸丙酯加注射用水至刻度共1000ml。制备方法同实施例13，制成每1ml含蓬莪术环二烯10mg的口服乳剂。

实施例17：1g蓬莪术环二烯、100g大豆油、10g合成磷脂、0.1g苯甲酸钠、加注射用水至刻度共1000ml。制备方法同实施例13，制成每1ml含蓬莪术环二烯1mg的口服乳剂。

实施例18：1g蓬莪术环二烯、50g大豆油、20g聚氧乙烯蓖麻油、0.1g山梨酸钾、加注射用水至刻度共1000ml。制备方法同实施例13，制成每1ml含蓬莪术环二烯1mg的口服乳剂。

实施例19：1g蓬莪术环二烯、50g大豆油、20g聚氧乙烯氢化蓖麻油、0.1g山梨酸钾加注射用水至刻度共1000ml。制备方法同实施例13，制成每1ml含蓬莪术环二烯1mg的口服乳剂。

实施例20：1g蓬莪术环二烯、100g大豆油和玉米油组合物、10g聚山梨酯-80、0.1g对羟基苯甲酸甲酯、加注射用水至刻度共1000ml。制备蓬莪术环二烯口服乳的方法同实施例13，制成每1ml含蓬莪术环二烯1mg的口服乳剂。

实施例21：1g蓬莪术环二烯、100g大豆油和花生油组合物、10g聚山梨酯-80、0.1g对羟基苯甲酸甲酯、加注射用水至刻度共1000ml。制备方法同实施例13，制成每1ml含蓬莪术环二烯1mg的口服乳剂。

制备蓬莪术环二烯胶囊实施22，24-25

实施例22：20g蓬莪术环二烯

50g可压性淀粉

2g硬脂酸镁

灌装胶囊100粒

制备：将处方量的蓬莪术环二烯放入低温粉碎机中，在温度-10～0℃下，进行粉碎，使粉末可以顺利通过200目筛网，再与处方量的填充剂、崩解剂和润滑剂混合均匀，直接灌装胶囊，制成每粒中含蓬莪术环二烯200mg的胶囊。

实施例24：15g蓬莪术环二烯、50g可溶性淀粉、5g交联聚维酮、1g硬脂酸镁，灌装胶囊100粒。制备蓬莪术环二烯口服胶囊同实施例22，制成每粒中含蓬莪术环二烯150mg的胶囊。

实施例25：20g蓬莪术环二烯、10g微晶纤维素、30g预明胶化淀粉、2g二氧化硅，灌装胶囊100粒。制备蓬莪术环二烯口服胶囊同实施例22，每粒中含蓬莪术环二烯200mg的胶囊。

制备蓬莪术环二烯片剂实施例23：10g蓬莪术环二烯

50g乳糖

10g交联羧甲基纤维素钠

1g二氧化硅

直接压片共得100片

制备同实施例22灌装前步骤，将混合均匀的粉末直接压片，制成每片中含蓬莪术环二烯100mg的片剂。

制备蓬莪术环二烯口服软胶囊实施例26-28

实施例26：2.4g蓬莪术环二烯

0.24mg大豆磷脂

0.24mg对羟基苯甲酸甲酯

加入注射用大豆油溶解上述组分并定容至24ml

制备：取注射用大豆油1000ml，在150℃干热灭菌1小时，放冷至25℃，取出部分油液加入上述主药和辅料，搅拌使其完全溶解，最后定容至24ml，用干燥的6号垂溶漏斗过滤，灌封于软胶囊中，紫外灭菌60分钟，制成每粒中含蓬莪术环二烯200mg的软胶囊。

实施例27：0.48g蓬莪术环二烯、0.1mg卵磷酯、0.1mg对羟基苯甲酸丙酯，加入注射用花生油溶解上述组分并定容至24ml。制备蓬莪术环二烯口服软胶囊的方法同实施例26，制成每粒中含蓬莪术环二烯20mg的软胶囊。

实施例28：1.2g蓬莪术环二烯、0.024mg聚山梨酯-80、0.024mg苯甲酸钠，加入注射用玉米油溶解上述组分并定容至24ml。制备蓬莪术环二烯口服软胶囊同实施例26，制成每粒中含蓬莪术环二烯50mg的软胶囊。

为了更好地说明本发明，以下为影响因素实验及结果：

影响因素：光照、高温、高湿

表1蓬莪术环二烯制剂影响因素（光照）试验结果

表2蓬莪术环二烯制剂影响因素（高温）试验结果

表3蓬莪术环二烯制剂影响因素（高湿）试验结果

实验结果表明上述药物制剂具有较高的稳定性，但由于蓬莪术环二烯本身不耐热性质的影响，所有制剂均需要较低温度保存。

为了更好地了解本发明的实质，以下将蓬莪术环二烯的药理毒理试验及结果来说明其在恶性肿瘤的治疗或辅助治疗上的应用。

一、蓬莪术环二烯的动物药理药效学试验

1、蓬莪术环二烯对人肝癌裸小鼠移植瘤Bel-7402肝癌的治疗作用

实验1：

采用蓬莪术环二烯注射剂25，50和100mg/kg于肿瘤接种后每天各静脉给药一次。肿瘤接种后第22日处死动物取肿瘤称重，25，50和100mg/kg组抑瘤率分别为38.9，48.6和55.5%

动物的给药剂量与成人的给药剂量换算：按成人的标准体重为60kg计算，

查表，小鼠a行，成人b列的R_ab=0.081，

1-1小鼠给药剂量为25mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=2.03mg.kg^-1

成人每次的给药量=成人剂量*成人的标准体重=9.72mg.kg^-1*60kg=583.2mg

1-2小鼠给药剂量为50mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=4.05mg.kg^-1

成人每次的给药量=成人剂量*成人的标准体重=4.05mg.kg^-1*60kg=243mg

1-3小鼠给药剂量为100mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=8.10mg.kg^-1

成人每次的给药量=成人剂量*成人的标准体重=8.10mg.kg^-1*60kg=486mg

具体试验方法和结果如下：

实验动物：裸小鼠：Balb/c品系，雄，36只，体重19.1±1.0g。由上海斯莱克实验

动物有限责任公司提供。

接种肿瘤细胞：在SPF级的动物实验中心内，剖取荷Bel-7402种鼠的肿瘤，切成1.0mm³大小瘤块，种植于试验裸小鼠的腋下，待肿瘤平均体积生长至45mm³左右，将动物随机分组开始给药。

实验方法：阴性对照组每天腹腔注射注射用水0.1ml/10g，CTX组（给药前新鲜配置于生理盐水中）隔天尾静脉注射3mg/ml的CTX0.1ml/10g，蓬莪术环二烯25mg/kg组每天尾静脉注射2.5mg/ml的蓬莪术环二烯0.1ml/10g，蓬莪术环二烯50mg/kg组每天尾静脉注射5mg/ml的蓬莪术环二烯0.1ml/10g，蓬莪术环二烯100mg/kg组每天尾静脉注射10mg/ml蓬莪术环二烯0.1ml/10g，每3天称重并测定肿瘤体积，连续给药21天，于第22天处死小鼠，称体重，测定瘤块体积，计算相对肿瘤体积（RTV）、相对肿瘤增值率（T/C）和肿瘤抑制百分率，做统计学检测。

分组：36只接种Bel-7402肿瘤细胞裸小鼠随机分成6组，1）阴性对照组12只，2）CTX30mg/kg组6只，3）蓬莪术环二烯25mg/kg组6只，4）蓬莪术环二烯50mg/kg组6只，5）蓬莪术环二烯100mg/kg组6只

阳性药物：顺铂（德州德药有限公司）。

供试品制备：制备蓬莪术环二烯注射液

先将聚氧乙烯蓖麻油溶解在乙醇中，加入主药蓬莪术环二烯，搅拌使其溶解，在搅拌均匀后，加入注射用水至处方量，通过孔径0.22μm的微孔滤膜进行无菌过滤，最后灌装到20ml的干燥的灭菌安瓿中，分别制成每1ml含蓬莪术环二烯2.5mg，5mg和10mg的供注射的注射剂。

给药剂量：根据预实验结果，采用25、50、100mg/kg三个剂量，溶剂对照采用相应溶剂。阳性药组顺铂给药剂量为30mg/kg。

给药途径：溶剂对照组及蓬莪术环二烯三个剂量组采用i.v形式给药，顺铂组采用i.p形式给药。

给药体积：0.1ml/10g

给药时间：溶剂对照组及蓬莪术环二烯三个剂量组分组当日起连续给药21天，（其中有2天发现裸鼠状态不好，当日停药）。顺铂组分组当日起连续给药4天，然后停药15天，再连续给药4天。

观察时间：每3日称重1次。

统计方法：SPSS10.0统计软件包，单因素方差分析法。

实验结果:

阴性对照组裸小鼠体重在实验治疗前后均无显著变化，CTX30mg/kg、蓬莪术环二烯50mg/kg和蓬莪术环二烯100mg/kg组裸小鼠体重明显下降0.05)。各组均无一动物死亡。与相应天数的阴性对照组比较，蓬莪术环二烯100mg/kg和CTX30mg/kg组人Bel-7402肝癌裸小鼠移植瘤体积从给药后第10天开始显著减小（P<0.05）。阴性对照组相对瘤体积（RTV）为24.4，CTX30mg/kg，蓬莪术环二烯25mg/kg，蓬莪术环二烯50mg/kg和蓬莪术环二烯100mg/kg组RTV值分别为5.6，11.2，8.0和6.9，相应的相对肿瘤增值率（T/C）分别为21.7%，43.4%，31.0%和26.7%。给药22天后剖杀取瘤块称重，蓬莪术环二烯低剂量25mg/kg，蓬莪术环二烯中剂量50mg/kg和蓬莪术环二烯高剂量100mg/kg组人Bel-7402肝癌裸小鼠移植瘤平均重量分别为0.46g，0.40和0.32g，其抑瘤率（％）分别为36.1、44.4和55.6，而CTX30mg/kg组裸鼠移植瘤平均重量为0.25g，抑瘤率（％）为65.3。治疗组小鼠移植瘤平均重量与阴性对照组比均有显著性下降（P<0.001）。（见表4，表5）。蓬莪术环二烯100mg/kg组的裸小鼠给药15天以后行动迟缓，活动减少。

表4.蓬莪术环二烯对人癌裸小鼠移植瘤Bel-7402肝癌的实验治疗作用。

对照组比：***:P<0.001，*:P<0.05.

d1:分笼给药时间。TV:肿瘤体积，计算公式为：TV=(长×宽²)/2。RTV:相对肿瘤体积，计算公式为：RTV=V_t/V₀.T/C(%)=T_RTV/C_RTVX100.T_RTV:为治疗组RTV;C_RTV:为阴性对照组RTV.

疗效评价标准:T/C(%)>40为无效;T/C(%)≤40,并经统计学处理P<0.05为有效.

表5.蓬莪术环二烯对人癌裸小鼠移植瘤Bel-7402肝癌瘤重量的影响

对照组比：***:P<0.001。

实验2：

采用蓬莪术环二烯注射乳50，100，120和165mg/kg于肿瘤接种后每天各静脉给药一次。肿瘤接种后第22日处死动物取肿瘤称重，50，100，120和165mg/kg组抑瘤率分别为36.2，46.4，55.1%和58%。

查表，小鼠a行，成人b列的R_ab=0.081，

1-1小鼠给药剂量为50mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=4.05mg.kg^-1

1-2小鼠给药剂量为100mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=8.10mg.kg^-1

1-3小鼠给药剂量为120mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=9.72mg.kg^-1

1-4小鼠给药剂量为165mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=13.37mg.kg^-1

成人每次的给药量=成人剂量*成人的标准体重=13.37mg.kg^-1*60kg=802mg

具体试验方法和结果如下：

实验动物：裸小鼠：Balb/c品系，雄，42只，体重19.1±1.0g。由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。

实验方法：阴性对照组每天腹腔注射注射用水0.1ml/10g，CTX组（给药前新鲜配置于生理盐水中）隔天尾静脉注射3mg/ml的CTX0.1ml/10g，蓬莪术环二烯50mg/kg组每天尾静脉注射5.0mg/ml的蓬莪术环二烯0.1ml/10g，蓬莪术环二烯100mg/kg组每天尾静脉注射10mg/ml的蓬莪术环二烯0.1ml/10g，蓬莪术环二烯120mg/kg组每天尾静脉注射12mg/ml蓬莪术环二烯0.1ml/10g，蓬莪术环二烯165mg/kg组每天尾静脉注射16.5mg/ml蓬莪术环二烯0.1ml/10g。每3天称重并测定肿瘤体积，连续给药21天，于第22天处死小鼠，称体重，测定瘤块体积，计算相对肿瘤体积（RTV）、相对肿瘤增值率（T/C）和肿瘤抑制百分率，做统计学检测。

分组：42只接种Bel-7402肿瘤细胞裸小鼠随机分成6组，1）阴性对照组12只，2）CTX30mg/kg组6只，3）蓬莪术环二烯50mg/kg组6只，4）蓬莪术环二烯100mg/kg组6只，5）蓬莪术环二烯120mg/kg组6只6）蓬莪术环二烯165mg/kg组6只。

阳性药物：顺铂（德州德药有限公司）。

供试品制备：蓬莪术环二烯注射乳

先将大豆磷脂溶解在大豆油中，加入主药蓬莪术环二烯，搅拌使其溶解均匀后，孔径0.22μm的微孔滤膜过滤备用，加入注射用水至处方量，均浆机制成初乳，通过匀质机使达到乳剂粒径大小。通过孔径0.22μm的微孔滤膜进行无菌过滤，最后灌封到20ml的干燥的安瓿。分别制成每支安瓿1ml含蓬莪术环二烯5mg的注每支安瓿1ml含蓬莪术环二烯10mg的注射乳、每支安瓿1ml含蓬莪术环二烯12mg的注射乳、每支安瓿1ml含蓬莪术环二烯16.5mg的注射乳。

给药剂量：根据预实验结果，采用50、100、120、165mg/kg三个剂量，溶剂对照采用相应溶剂。阳性药组顺铂给药剂量为30mg/kg。

给药途径：溶剂对照组及蓬莪术环二烯四个剂量组采用i.v形式给药，顺铂组采用i.p形式给药。

给药体积：0.1ml/10g

给药时间：溶剂对照组及蓬莪术环二烯四个剂量组分组当日起连续给药21天，（其中有2天发现裸鼠状态不好，当日停药）。顺铂组分组当日起连续给药4天，然后停药15天，再连续给药4天。

观察时间：每3日称重1次。

统计方法：SPSS10.0统计软件包，单因素方差分析法。

实验结果:见表6和表7。

表6.蓬莪术环二烯对人癌裸小鼠移植瘤Bel-7402肝癌的实验治疗作用。

与对照组比：***:P<0.001。

疗效评价标准:T/C(%)>40为无效;T/C(%)≤40,并经统计学处理P<0.05为有效.与相应天数的对照组比：***:P<0.001，*:P<0.05.

表7.蓬莪术环二烯对人癌裸小鼠移植瘤Bel-7402肝癌瘤重量的影响

实验结果说明100mg/kg、120mg/kg和165mg/kg三个动物给药剂量均有较好的治疗效果，但较之120mg/kg和165mg/kg两个动物给药剂量，100mg/kg的动物给药剂量下毒副作用较小。所以相应成人的每次给药量优选为490mg。

实验3：

采用蓬莪术环二烯混悬口服液100，200和400mg/kg于肿瘤接种后第天各灌胃给药一次。肿瘤接种后第22日处死动物取肿瘤称重。

动物的给药剂量与成人的给药剂量换算：假定成人的标准体重为60kg

查表，小鼠a行，成人b列的R_ab=0.081，

1-1小鼠给药剂量为100mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=8.10mg.kg^-1

成人每次的给药剂量=成人剂量*成人的标准体重=8.10mg.kg^-1*60kg=486mg

1-2小鼠给药剂量为200mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=16.2mg.kg^-1

成人每次的给药剂量=成人剂量*成人的标准体重=16.2mg.kg^-1*60kg=972mg

1-3小鼠给药剂量为400mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=3.24mg.kg^-1

成人每次的给药剂量=成人剂量*成人的标准体重=3.24mg.kg^-1*60kg=1944mg

具体试验方法和结果如下：实验动物：裸小鼠：Balb/c品系，雄，36只，体重19.1±1.0g。由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。

实验方法：阴性对照组每天灌胃注射用水0.1ml/10g，CTX组（给药前新鲜配置于生理盐水中）隔天灌胃3mg/ml的CTX0.1ml/10g，蓬莪术环二烯100mg/kg组每天灌胃10mg/ml的蓬莪术环二烯0.1ml/10g，蓬莪术环二烯200mg/kg组每天灌胃20mg/ml的蓬莪术环二烯0.1ml/10g，蓬莪术环二烯400mg/kg组每天灌胃40mg/ml蓬莪术环二烯0.1ml/10g。每3天称重并测定肿瘤体积，连续给药21天，于第22天处死小鼠，称体重，测定瘤块体积，计算相对肿瘤体积（RTV）、相对肿瘤增值率（T/C）和肿瘤抑制百分率，做统计学检测。

分组：36只接种Bel-7402肿瘤细胞裸小鼠随机分成5组，1）阴性对照组12只，2）CTX30mg/kg组6只，3）蓬莪术环二烯25mg/kg组6只，4）蓬莪术环二烯50mg/kg组6只，5）蓬莪术环二烯100mg/kg组6只。

阳性药物：顺铂（德州德药有限公司）。

供试品制备：蓬莪术环二烯混悬口服液称取处方量的蓬莪术环二烯，加入处方量的吐温80，再加入0.5％CMC-Na水溶液(即：羧甲基纤维素钠水溶液)至处方量，再用超声粉碎机超声15分钟，至达到混悬液的要求。最后灌装到10ml的干燥的灭菌玻璃瓶中，加塞，扎盖。分别制成每1ml含蓬莪术环二烯10mg的供口服的混悬液，每1ml含蓬莪术环二烯20mg的供口服的混悬液和每1ml含蓬莪术环二烯40mg的供口服的混悬液。

统计方法：SPSS10.0统计软件包，单因素方差分析法。

实验结果:见表8和表9

表8蓬莪术环二烯对人癌裸小鼠移植瘤Bel-7402肝癌的实验治疗作用。

对照组比：**:P<0.001，*:P<0.05.

疗效评价标准:T/C(%)>40为无效;T/C(%)≤40,并经统计学处理P<0.05为有效.与相应天数的

表9.蓬莪术环二烯对人癌裸小鼠移植瘤Bel-7402肝癌瘤重量的影响

与对照组比：**:P<0.001。

实验4：

采用蓬莪术环二烯油溶液100，200和400mg/kg于肿瘤接种后第天各灌胃给药一次。肿瘤接种后第22处死动物取肿瘤称重。

查表，小鼠a行，成人b列的R_ab=0.081，

1-1小鼠给药剂量为100mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=8.10mg.kg^-1

1-2小鼠给药剂量为200mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=16.2mg.kg^-1

1-3小鼠给药剂量为400mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=3.24mg.kg^-1

具体试验方法和结果如下：

实验动物：裸小鼠：Balb/c品系，雄，36只，体重19.1±1.0g。由上海斯莱克实验动物有限责任公司提供。

阳性药物：顺铂（德州德药有限公司）。

供试品制备：蓬莪术环二烯油溶液取注射用植物油（茶油，大豆油等）1000ml，在150℃干热灭菌1小时，放冷至25℃，取出部分油液加入20g蓬莪术环二烯，搅拌使溶解，最后添加溶媒至全量，用干燥的6号垂溶漏斗过滤，最后灌装到10ml的干燥的灭菌玻璃瓶中，加塞，扎盖。分别制成每1ml含蓬莪术环二烯10mg的供口服的油溶液，每1ml含蓬莪术环二烯20mg的供口服的油溶液和每1ml含蓬莪术环二烯40mg的供口服的油溶液。

给药剂量：根据预实验结果，（采用蓬莪术环二烯400、200及100mg/kg，阴性对照采用相应体积溶剂。统计方法：SPSS10.0统计软件包，单因素方差分析法。

实验结果：见表10

表10.蓬莪术环二烯对人癌裸小鼠移植瘤Bel-7402肝癌的实验治疗作用。

对照组比：**:P<0.001，*:P<0.05.

实验结果说明200mg/kg和400mg/kg三个动物给药剂量均有较好的治疗效果，但较之400mg/kg两个动物给药剂量，200mg/kg的动物给药剂量下毒副作用较小。所以相应成人的每次给药量优选为970mg。

2、蓬莪术环二烯对BGC-823裸鼠移植瘤生长影响的实验研究

实验一：采用蓬莪术环二烯油溶液125，250和500mg/kg于肿瘤接种后每天各灌胃给药一次。肿瘤接种后第22日处死动物取肿瘤称重，125，250和500mg/kg组中、高剂量有一定抑制作用。

查表，小鼠a行，成人b列的R_ab=0.081，

1-1小鼠给药剂量为125mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=10.12mg.kg^-1

成人每次的给药剂量=成人剂量*成人的标准体重=10.12mg.kg^-1*60kg=607.5mg

1-2小鼠给药剂量为250mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=20.25mg.kg^-1

成人每次的给药剂量=成人剂量*成人的标准体重=20.25mg.kg^-1*60kg=1215mg

1-3小鼠给药剂量为500mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=40.50mg.kg^-1

成人每次的给药剂量=成人剂量*成人的标准体重=40.05mg.kg^-1*60kg=2430mg

具体试验方法和结果如下：

实验动物：BALB/c裸鼠，雌，4-5周龄，40只；由上海斯莱克实验动物中心提供，饲养于产品开发部临床药理动物实验室，室温25℃，自由摄食饮水。

BGC-823瘤株：中科院上海细胞库提供，本公司临床药理研究室常规培养传代。

造模：取体外培养BGC-823瘤株，用生理盐水稀释至1×10⁷/ml，按每只动物2×10⁶接种于右腋下。详见《细胞毒类抗肿瘤药物研究技术指导原则》。

分组：观察肿瘤生长状态，当肿瘤生长至100-300mm³时，将动物按肿瘤体积随机分为5组，分别为溶剂对照组、阳性药组、低剂量组（125mg/kg）、中剂量组（250mg/kg）、高剂量组（500mg/kg）。

阳性药物：顺铂（德州德药有限公司）。

供试品制备：蓬莪术环二烯油溶液

取注射用植物油（茶油，大豆油等）1000ml，在150℃干热灭菌1小时，放冷至25℃，取出部分油液加入20g蓬莪术环二烯，搅拌使溶解，最后添加溶媒至全量，用干燥的6号垂溶漏斗过滤，最后灌装到10ml的干燥的灭菌玻璃瓶中，加塞，扎盖。分别制成每1ml含蓬莪术环二烯12.5mg的供口服的油溶液，每1ml含蓬莪术环二烯25mg的供口服的油溶液和每1ml含蓬莪术环二烯50mg的供口服的油溶液。

给药剂量：采用125、250、500mg/kg低中高三个剂量，溶剂对照组采用相应溶剂。

给药途径：i.p.

给药体积：0.1ml/10g。

给药次数：溶剂对照组及蓬莪术环二烯三个剂量组分组当日起每天给药，连续给药14天（其中有2天发现裸鼠状态不好，当日停药）。顺铂组分组当日开始连续给药4天，停药一周，再给药3天。

观察时间：每2-4日称重1次，采用游标卡尺测量肿瘤体积大小。实验结束后，处死动物，取肿瘤，称重，拍照。

统计方法：SPSS10.0统计软件包，Mann-WhitneyTest。

实验结果：见表11、12。

表11蓬莪术环二烯对BGC-823裸鼠移植瘤生长影响的实验研究

与阴性对照相比：^▲p＜0.01；﹡p＜0.05

表12蓬莪术环二烯对BGC-823裸鼠移植瘤生长影响的实验研究

与Control组相比：^▲p＜0.01

3、含蓬莪术环二烯的联合给药组合物对Ho-8910裸鼠移植瘤生长影响的实验研究

材料和方法：

供试样品：蓬莪术环二烯混悬口服液

称取处方量的蓬莪术环二烯，加入处方量的吐温80，再加入0.5％CMC-Na水溶液(即：羧甲基纤维素钠水溶液)至处方量，再用超声粉碎机超声15分钟，至达到混悬液的要求。最后灌装到10ml的干燥的灭菌玻璃瓶中，加塞，扎盖。分别制成每1ml含蓬莪术环二烯5mg的供口服的混悬液，每1ml含蓬莪术环二烯10mg的供口服的混悬液和每1ml含蓬莪术环二烯20mg的供口服的混悬液。

实验动物：BALB/c裸鼠，雌，4-5周龄，38只；由上海斯莱克实验动物中心提供，饲养于产品开发部临床药理动物实验室，室温25℃，自由摄食饮水。

Ho-8910瘤株：中科院上海细胞库提供，本公司临床药理研究室常规培养传代。

造模：取体外培养Ho-8910瘤株，用生理盐水稀释至1×10⁷/ml，按每只动物2×10⁶接种于右腋下。详见《细胞毒类抗肿瘤药物研究技术指导原则》。

分组：观察肿瘤生长状态，当肿瘤生长至100-300mm³时，将动物按肿瘤体积随机分为4组，分别为模型组、低剂量组（50mg/kg）、中剂量组（100mg/kg）、高剂量组（200mg/kg），阳性组和联合给药组。

阳性药物：顺铂（云南个旧生物制药）。

给药剂量：根据预实验结果，采用50、100、200mg/kg三个剂量，阴性对照采用相应溶剂。联合给药组为顺铂和蓬莪术环二烯，200mg/kg联合给药，给药频率同阳性组。

给药途径：ig.

给药体积：0.1ml/10g

给药次数：分组后当日起连续给药3天，停药一天，共给药15次（其中有2天发现裸鼠状态不好，当日停药）。

统计方法：SPSS10.0统计软件包，Mann-WhitneyTest。

查表，小鼠a行，成人b列的R_ab=0.081，

1-1小鼠给药剂量为50mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=4.05mg.kg^-1

成人每次的给药剂量=成人剂量*成人的标准体重=4.05mg.kg^-1*60kg=243mg

1-2小鼠给药剂量为100mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=8.10mg.kg^-1

成人每次的给药剂量=成人剂量*成人的标准体重=8.1mg.kg^-1*60kg=486mg

1-3小鼠给药剂量为200mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=16.2mg.kg^-1

实验结果：见表13

表13蓬莪术环二烯对Ho-8910裸鼠移植瘤生长影响的实验研究

与阴性对照组比较：^▲p＜0.05

注：T&D为阳性药和中剂量的蓬莪术环二烯组联合给药组

实验结果说明口服给药的组合物中100mg/kg的动物给药剂量单独给药药效一般，而联合给药药效要优于单独给药，有较好的药效。相对应的成人每次给药剂量为490mg。

4、蓬莪术环二烯（代号蓬莪术环二烯）对S180小鼠移植瘤生长影响的实验研究（联合给药有效，辅助抗肿瘤）

实验一

材料和方法：供试样品：蓬莪术环二烯油溶液

取注射用植物油（茶油，大豆油等）1000ml，在150℃干热灭菌1小时，放冷至25℃，取出部分油液加入20g蓬莪术环二烯，搅拌使溶解，最后添加溶媒至全量，用干燥的6号垂溶漏斗过滤，最后灌装到10ml的干燥的灭菌玻璃瓶中，加塞，扎盖。分别制成每1ml含蓬莪术环二烯10mg的供口服的油溶液，每1ml含蓬莪术环二烯20mg的供口服的油溶液和每1ml含蓬莪术环二烯30mg的供口服的油溶液。

实验动物：ICR小鼠，单一性别雌，18-22g，45只；由浙江省实验动物中心提供，饲养于产品开发部临床药理动物实验室，室温25℃，自由摄食饮水。

S180瘤株：浙江省医学科学研究院提供，每7-9天腹腔传代一次。

造模：取S180小鼠荷瘤动物腹水，用生理盐水稀释至1×10⁷/ml，按每只动物2×10⁶接种于右腋下。

分组：随机分四组，模型组动物10只，环磷酰胺组、蓬莪术环二烯组、联合用药组，各组动物5只。

给药方式：环磷酰胺皮下注射，蓬莪术环二烯灌胃给药。

给药体积：0.1ml/10g

给药次数：造模后次日起，连续7日

观察时间：造模后连续观察7日。实验结束后，处死动物，取肿瘤，称重，拍照。

统计方法：SPSS10.0统计软件包，单因素方差分析法。

查表，小鼠a行，成人b列的R_ab=0.081，

1-1小鼠给药剂量为100mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=8.10mg.kg^-1

1-2小鼠给药剂量为200mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=16.2mg.kg^-1

1-3小鼠给药剂量为300mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=24.3mg.kg^-1

成人每次的给药剂量=成人剂量*成人的标准体重=24.3mg.kg^-1*60kg=1458mg

实验结果：见表14

表14蓬莪术环二烯对S180小鼠移植瘤生长影响的实验研究

与模型对照组比较：﹡p＜0.05﹡﹡p＜0.01

实验二：

材料和方法：

供试样品：蓬莪术环二烯注射液

先将聚氧乙烯蓖麻油溶解在乙醇中，加入主药蓬莪术环二烯，搅拌使其溶解，在搅拌均匀后，加入注射用水至处方量，通过孔径0.22μm的微孔滤膜进行无菌过滤，最后灌装到20ml的干燥的灭菌玻璃瓶中，加塞，扎盖。制成每1ml含蓬莪术环二烯1mg，每1ml含蓬莪术环二烯2.5mg，每1ml含蓬莪术环二烯5mg的供注射的注射剂。

给药方式：环磷酰胺组腹腔注射，蓬莪术环二烯给药组静脉注射。

给药体积：0.1ml/10g

给药次数：造模后次日起，连续7日

统计方法：SPSS10.0统计软件包，单因素方差分析法。

查表，小鼠a行，成人b列的R_ab=0.081，

1-1小鼠给药剂量为10mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=0.81mg.kg^-1

成人每次的给药剂量=成人剂量*成人的标准体重=0.81mg.kg^-1*60kg=48.6mg

1-2小鼠给药剂量为25mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=2.02mg.kg-¹

成人每次的给药剂量=成人剂量*成人的标准体重=2.02mg.kg^-1*60kg=121.5mg

1-3小鼠给药剂量为50mg/kg

成人的剂量=D_b.R_ab=d*0.081=4.05mg.kg^-1

成人每次的给药剂量=成人剂量*成人的标准体重=24.3mg.kg^-1*60kg=243mg

实验结果：见表15

表15蓬莪术环二烯对S180小鼠移植瘤生长影响的实验研究

与模型对照组比较：﹡p＜0.05﹡﹡p＜0.01

实验结果说明口服给药的组合物中300mg/kg的动物给药剂量药效较好，而副作用小。因而相应成人的每次给药量更优选为1460mg/kg。

口服给药的组合物中100mg/kg、200mg/kg和300mg/kg的动物给药剂量在联合给药时药效均优于在单独给药时。

根据文献<<中国临床药理学与治疗学>>2004年第9卷第09期，进行药理试验中动物间和动物与人体间的等效剂量换算。

二、蓬莪术环二烯的急性毒性试验

NIH小鼠分别皮下注射（sc）蓬莪术环二烯注射液与口服灌胃蓬莪术环二烯蓬莪术环二烯软胶囊和蓬莪术环二烯乳剂、各设5个剂量组，每组10只（雌雄各半），观察14天内的死亡数，按Bliss氏法计算LD₅₀。结果分别为：皮下注射LD₅₀=380mg/kg；口服灌胃软胶囊LD₅₀=954mg/kg，口服乳剂LD₅₀=527mg/kg。

三、蓬莪术环二烯的药代动力学研究

为了解释本发明的蓬莪术环二软胶囊、蓬莪术环二烯乳剂以及蓬莪术环二烯混悬溶液在动物体内药效上的差异，对三者开展了动物体内药物代谢动力学试验研究。

本试验选用SD大鼠进行药动学研究，采用高效液相色谱法检测蓬莪术环二烯在体内的血药浓度动态变化，以化学药物非临床药代动力学研究技术指导原则（CDE）为实验依据，并以中国药理学会3P87程序在电脑上拟合曲线，计算药动学参数。

供试品：蓬莪术环二烯晶体A混悬液；蓬莪术环二烯产品混悬液。给药方式：灌胃；给药剂量：100mg/kg给药体积：1.0ml/200g取样时长：2880min统计软件：EXCEL

实验结论：通过梯形法计算AUC，然后计算相对生物利用度，蓬莪术环二烯软胶囊相对于蓬莪术环二烯混悬液的相对生物利用度F（0～48h）＝78615.39/52561.64×100%=149.6％，蓬莪术环二烯软胶囊相对于蓬莪术环二烯乳剂的相对生物利用度F（0～48h）＝63569.79/49113.25×100%=129.4％，蓬莪术环二烯软胶囊进入体内的吸收好于乳剂和混悬溶液。

Claims

1.一种含蓬莪术环二烯的药物组合物，该组合物的制剂形式为口服固体胶囊，其中100粒胶囊中包括：20g蓬莪术环二烯、50g可压性淀粉、2g硬脂酸镁；

所述含蓬莪术环二烯的药物组合物通过以下方法制备：将处方量的蓬莪术环二烯放入低温粉碎机中，在温度-10～0℃下，进行粉碎，使粉末顺利通过200目筛网，再与处方量的可压性淀粉和硬脂酸镁混合均匀，直接灌装胶囊,制成每粒中含蓬莪术环二烯200mg的胶囊。

2.一种含蓬莪术环二烯的药物组合物，该组合物的制剂形式为口服片剂，其中100片中包括：10g蓬莪术环二烯、50g乳糖、10g交联羧甲基纤维素钠、1g二氧化硅；

所述含蓬莪术环二烯的药物组合物通过以下方法制备：将处方量的蓬莪术环二烯放入低温粉碎机中，在温度-10～0℃下，进行粉碎，使粉末顺利通过200目筛网，再与处方量的乳糖、交联羧甲基纤维素钠和二氧化硅混合均匀，直接压片,制成每片中含蓬莪术环二烯100mg的片剂。

3.一种含蓬莪术环二烯的药物组合物，该组合物的制剂形式为口服固体胶囊，其中100粒胶囊中包括：15g蓬莪术环二烯、50g可溶性淀粉、5g交联聚维酮、1g硬脂酸镁；

所述含蓬莪术环二烯的药物组合物通过以下方法制备：将处方量的蓬莪术环二烯放入低温粉碎机中，在温度-10～0℃下，进行粉碎，使粉末顺利通过200目筛网，再与处方量的可溶性淀粉、交联聚维酮和硬脂酸镁混合均匀，直接灌装胶囊,制成每粒中含蓬莪术环二烯150mg的胶囊。

4.一种含蓬莪术环二烯的药物组合物，该组合物的制剂形式为口服固体胶囊，其中100粒胶囊中包括：20g蓬莪术环二烯、10g微晶纤维素、30g预明胶化淀粉、2g二氧化硅；

所述含蓬莪术环二烯的药物组合物通过以下方法制备：将处方量的蓬莪术环二烯放入低温粉碎机中，在温度-10～0℃下，进行粉碎，使粉末顺利通过200目筛网，再与处方量的微晶纤维素、预明胶化淀粉和二氧化硅混合均匀，直接灌装胶囊,制成每粒中含蓬莪术环二烯200mg的胶囊。

5.权利要求1-4任一项所述的含蓬莪术环二烯的药物组合物在制备治疗或辅助治疗恶性肿瘤的药物中的用途。