CH629499A5 - Verfahren zur herstellung neuer cephalosporinderivate. - Google Patents

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung neuer Cephalosporinderivate mit einem neuen Acylrest in der 7-Stellung, welche der Formel:

r2nh n il

(I)

ch2r3

35

40

45

Mikroorganismen unbefriedigend. Von der Anmelderin wurden Cephalosporinderivate der Formel

R

8*

N

R

CHCONH

>3'

R

21

cooh worin R3 Wasserstoff oder den Rest einer nukleophilen Verbindung und R2 NH eine gegebenenfalls geschützte Amino-gruppe darstellen, entsprechen, insbesondere von 7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]cepha-losporinderivaten sowie von pharmazeutisch unbedenkliche Salzen dieser Derivate.

Bisher waren die Untersuchungen über synthetische Cephalosporinderivate auf die Umwandlung der 7-Aminoce-phalosporansäure in verschiedene Acylderivate an der 7-Stel-lung oder in Derivate an der 3-Stellung gerichtet mit dem Ziel, Verbindungen mit breitem antibakteriellem Spektrum oder spezifischem antibakteriellem Spektrum zu synthetisieren. Die bekannten Cephalosporinderivate sind jedoch in ihrer antibakteriellen Wirkung gegen die verschiedensten cooh worin R1' eine gegebenenfalls geschützte Amino- oder Hydroxylgruppe, R2' eine Aminogruppe oder Hydroxylgruppe oder eine in diese Gruppen umwandelbare Gruppe, R3' Wasserstoff oder ein Methoxyrest oder eine in einen Me-thoxyrest um wandelbare Gruppe, R4' Wasserstoff oder ein Rest einer nukleophilen Verbindung und R8' Wasserstoff oder ein Halogenatom ist, und pharmazeutisch unbedenkliche Salze und Ester dieser Derivate entwickelt (DT-OS 25 56 736).

Von der Anmelderin wurde ferner festgestellt, dass von diesen Verbindungen die Verbindungen der Formell äusserst wirksam gegen ein breites Spektrum von gram-positiven und gram-negativen Bakterien einschliesslich Serratia marcescens und Proteus morganii sind und dass ferner die 50 Verbindungen I gegen Bakterien, die ß-Lactamase bilden, wirksam sind. Der Erfindung liegen diese Feststellungen zugrunde.

In den Verbindungen der Formel I ist R3 Wasserstoff oder ein Rest einer nukleophilen Verbindung. Als Beispiele von ss Resten von nukleophilen Verbindungen, für die R3 steht,

seien genannt: Hydroxylgruppen, Mercaptogruppen, Acyl-oxyreste, die von niederen aliphatischen Carbonsäuren mit 2 bis 4 C-Atomen abgeleitet sind und gegebenenfalls mit Oxo-gruppen, Carboxylgruppen oder Äthoxycarbamoylgruppen so substituiert sind (z.B. Acetyloxy, Propionyloxy, 3-Oxobuty-ryloxy, 3-Carboxypropionyloxy, 3-Äthoxycarbamoylpropio-nyloxy und 4-Carboxybutyryloxy); von aromatischen Carbonsäuren abgeleitete Acyloxyreste, die gegebenenfalls mit Hydroxylgruppen, Carboxylgruppen, Carboäthoxycarba-65 moylgruppen oder Carboäthoxysulfamoylgruppen substituiert sind (z.B. Mandelyloxy, 2-Carboxybenzoyloxy, 2-(Car-boäthoxycarbamoyl)benzoyloxy und 2-(Carboäthoxysulfa-moyl)benzoyloxy), Carbamoyloxy, Cyan, Azido, Amino,

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Carbamoylthio, Thiocarbamoyloxy, Carbamoyloxy, dessen Aminogruppe mit einer üblichen Schutzgruppe für die Ami-nofunktion geschützt ist (z.B. N-Mono-, Di- und Trihaloge-noacetylcarbamoyloxygruppen wie N-Chloracetylcarbamo-yloxy, N-Dichloracetylcarbamoyloxy, N-Trichloracetylcar- s bamoyloxy, N-Chlorsulfonylcarbamoyloxy und N-Trime-thylsilylcarbamoyloxy) und Phenylglycyloxy. Diese Reste von nukleophilen Verbindungen können substituiert sein, wobei die Zahl der Substituenten normalerweise 1 bis 2 beträgt. Die Substituenten an den vorstehend genannten Resten können io somit beispielsweise Alkylreste (z.B. niedere Alkylreste mit 1 bis 3 C-Atomen, z.B. Methyl, Äthyl und Propyl) und Acyl-reste (z.B. von niederen aliphatischen Carbonsäuren mit 2 bis 4 C-Atomen abgeleitete Acylreste, z.B. Acetyl, Propionyl und Butyryl, und von aromatischen Carbonsäuren abgeleitete is Acylreste, z.B. Benzoyl, p-Chlorbenzoyl, p-Methylbenzoyl und Mandeloyl) sein. Der Rest der nukleophilen Verbindungen, für den R3 steht, kann auch eine quaternäre Ammoniumgruppe sein. Ferner kann der Rest R3 ein über S (Schwefelatom) gebundener Heterocyclus, d.h. eine heterocyclische 20 Thiogruppe der Formel -S-Heterocyclus sein. Der vorstehend genannte heterocyclische Ring ist ein 5- oder 6-gliedriger Ring mit 1 bis 4 Heteroatomen aus der aus Sauerstoff-, Schwefel- und Stickstoffatomen bestehenden Gruppe. Das Stickstoffatom oder die Stickstoffatome können in Oxyd- 25 form vorliegen. Hieraus folgt, dass die genannte heterocyclische Gruppe (d.h. die von der dem Heterocyclus entsprechenden Verbindung abgeleitete Gruppe) gewöhnlich eine der folgenden Gruppen oder eine andere Gruppe sein kann: Pyridyl, N-Oxidopyridyl, Pyrimidyl, Pyridazinyl, N-Oxido- 30 pyridazinyl, Pyrazolyl, Diazolyl, z.B. Pyrazolyl und Imida-zolyl, Thiazolyl, z.B. 1,2-Thiazolyl und 1,3-Thiazolyl, Thia-diazolyl, z.B. 1,2,3-Thiadiazolyl, 1,2,4-Thiadiazolyl, 1,3,4-Thiadiazolyl und 1,2,5-Thiadiazolyl, Oxadiazolyl, z.B. 1,2,3-Oxadiazolyl, 1,2,4-Oxadiazolyl, 1,3,4-Oxadiazolyl und 1,2,5- 35 Oxadiazolyl, Triazolyl, z.B. 1,2,3-Triazolyl und 1,2,4-Tria-zolyl und Tetrazolyl, z.B. 1 H-Tetrazolyl und 2H-Tetrazolyl. Diese Heterogruppe kann jeweils Substituenten enthalten, z.B. niedere Alkylreste mit 1 bis 3 C-Atomen (z.B. Methyl,

Äthyl und Isopropyl), Allyl, niedere Alkoxyreste mit 1 bis 3 40 C-Atomen (z.B. Methoxy, Äthoxy und Propoxy), Halogenatome (z.B. Chlor und Brom), mit Halogenatomen dreifach substituierte Alkylreste (z.B. Trifluormethyl und Trichlor-äthyl), Hydroxylgruppen, Mercaptogruppen, Amino-gruppen, Carboxylgruppen, Carbamoylgruppen, Di-nieder- ■ 45 alkyl(l-3 C-Atome)aminoniederalkyl(l-3 C-Atome)-Verbin-dungen, z.B. Dimethylaminoäthyl und Dimethylamino-methyl, Carboxymethyl, Carbamoylmethyl, Carboxymethyl-thio, Sulfomethyl und Methoxycarbonylamino.

Die Zahl dieser Substituenten, die an der heterocyclischen 50 Gruppe vorhanden sein können, liegt normalerweise im Bereich von 1 bis 2. Die quaternäre Ammoniumgruppe, für die R3 steht, kann beispielsweise eine Pyridiniumgruppe sein, die gegebenenfalls mit einem Methylrest, Halogenatom,

einer Carbamoylgruppe, N-Hydroxymethylcarbamoyl- ss gruppe, Carbomethoxycarbamoylgruppe, Cyancarbamoyl-gruppe, Carboxymethylgruppe, Hydroxymethylgruppe oder Trifluormethylgruppe substituiert ist, z.B. Pyridinium,

3-Methylpyridinium, 4-Methylpyridinium, 3-Chlorpyridi-nium, 3-Brompyridinium, 3-Jodpyridinium, 4-Carbamoyl- 60 pyridinium, 4-(N-Hydroxymethylcarbamoyl)pyridinium,

4-(N-Carbomethoxycarbamoyl)pyridinium, 4-(N-Cyanocar-bamoyl)pyridinium, 4-(Carboxymethyl)pyridinium,

4-i Hydroxymethyl)pyridinium, 4-(Trifluormethyl)pyridi-niüir-. Chinolinium, Picolinium und Lutidinium. 65

In den Verbindungen der Formel I ist der Rest R3 vorzugsweise ein Wasserstoffatom, eine Carbamoyloxygruppe, ein von einer niederen aliphatischen Carbonsäure mit 2 bis 4

C-Atomen abgeleiteter Acyloxyrest, z.B. Acetyloxy, oder die heterocyclische Thiogruppe, deren heterocyclische Gruppe unsubstituiert oder substituiert ist. Bevorzugt als Substituenten des Heterocyclus der heterocyclischen Thiogruppe werden 1 oder 2 der folgenden Reste: Niedere Alkylreste mit 1-4 C-Atomen, Di(niederalkyl(Ci-C4)aminosubstituiertes niederes Alkyl (C1-C4), Carboxymethyl, Amino, Methoxycarbonylamino, Carbamoylmethyl, Carboxymethylthio und Sulfomethyl. Bevorzugt als Rest R3 werden Carbamoyloxy, 1 -Methyl-1 H-tetrazol-5-ylthio, 2-Methyl-l ,3,4-thiadiazol-5-ylthio, l,2-Dimethyl-l,3,4-triazol-5-ylthiousw.

Wenn R3 eine Carbamoyloxygruppe mit geschützter Aminogruppe, z.B. N-Chloracetylcarbamoyloxy, N-Dichlorace-tylcarbamoyloxy oder N-Trichloracetylcarbamoyloxy ist, kann diese Schutzgruppe für die Aminogruppe nach einem ähnlichen, nachstehend beschriebenen Verfahren entfernt werden, wie es für die Entfernung der Schutzgruppe von der geschützten Aminogruppe der Formel R2NH- angewendet wird. Im allgemeinen wird die Verbindung I mit freier und ungeschützter Amino- und Carbamoyloxygruppe (worin R3 ein Carbamoyloxyrest bedeutet) als aktive Verbindung verwendet. Die Gruppe R2NH ist eine Aminogruppe, die wahlweise geschützt sein kann. R2 ist daher ein Wasserstoffatom oder eine Schutzgruppe für die Aminofunktion, wobei beliebige bekannte Schutzgruppen, die im allgemeinen für den Schutz von Aminogruppen verwendet werden, d.h. übliche Schutzgruppen für die Aminofunktion in Frage kommen. Geeignet als Schutzgruppen sind beispielsweise aromatische Acylreste, z.B. Phthaloyl, Benzoyl, mit Halogenatomen, Nitrogruppen oder niederen Alkylresten mit 1-4 C-Atomen substituierte Benzoylgruppen, (z.B. Chlorbenzoyl, p-Nitro-benzoyl, p-t-Butylbenzoyl und Toluoyl) und Naphthoyl, Phenylacetyl, Phenoxyacetyl, Benzolsulfonyl, mit einem niederen Alkylrest mit 1 bis 4 C-Atomen substituierte Benzolsul-fonylgruppen (z.B. p-t-Butylbenzolsulfonyl und Toluolsul-fonyl), von aliphatischen oder halogenierten aliphatischen Carbonsäuren abgeleitete Acylreste, z.B. Acetyl, Valeryl, Caprylyl, n-Decanoyl, Acryloyl, Pivaloyl und Halogenacetyl (z.B. Monochloracetyl, Monobromacetyl, Dichloracetyl und Trichloracetyl), Campfersulfonyl, Methansulfonyl, ver-esterte Carboxylgruppen, z.B. Äthoxycarbonyl, t-Butyloxy-carbonyl, Isobornyloxycarbonyl, Phenyloxycarbonyl, Tri-chloräthoxycarbonyl und Benzyloxycarbonyl, Carbamoylgruppen, z.B. Methylcarbamoyl, Phenylcarbamoyl und Naphthylcarbamoyl und die entsprechenden Thiocarba-moylgruppen.

Die Cephalosporinderivate der Formel I können die tautomere Form annehmen, d.h. als 2-Aminothiazol-Verbin-dungen und 2-Iminothiazolin-Verbindungen vorliegen, die nachstehend dargestellt sind, jedoch werden sie hier als Thiazol-Verbindungen beschrieben.

r2hn

~üt c-conh—r—<_

ii n

r2N

N

-CONH—,—

H 'I J

n.

uun3 COOH

5

Die Carboxylgruppe in 4-SteIlung der Verbindung der Formel I kann frei sein, jedoch auch mit einem ungiftigen Kation ein Salz bilden, z.B. ein Alkalisalz, beispielsweise ein Natrium- oder Kaliumsalz, eine basische Aminosäure, z.B. Arginin, Ornithin, Lysin oder Histidin, oder ein Polyhydro- s xyalkylamin, z.B. N-Methylglucamin, Diäthanolamin, Tri-äthanolamin oder Trishydroxymethylaminomethan. Die Verbindungen I können Salze mit anorganischen Säuren wie Salzsäure und Schwefelsäure oder mit organischen Säuren, z.B. Toluolsulfonsäure und Benzolsulfonsäure, bilden. Die 10 Herstellung der Salze der Verbindungen I fällt ebenfalls in den Rahmen der Erfindung.

Ferner werden nach einem zweiten erfindungsgemässen Verfahren Ester (I') der Carbonsäuren der Formel I hergestellt, insbesondere biologisch aktive Ester, die beispielsweise 15 den Vorteil einer Erhöhung der Konzentration im Blut und langanhaltender Wirksamkeit haben. Als Beispiele für den alkoholischen oder phenolischen Teil solcher Ester seien genannt:

Niedere Alkoxymethylreste, z.B. Methoxymethyl, Äthoxy- 2(1 methyl, Isopropoxymethyl, a-Methoxyäthyl und a-Äthoxy-äthyl, a-Niederalkoxy-a-substituierte Methylgruppen wie z.B. a-Niederalkoxy(Ci-C4)äthyl, z.B. Methoxymethyl, Ätho-xyäthyl, Propoxyäthyl und Isopropoxyäthyl, niedere Alkyl-thiomethylreste mit 1 - 3 C-Atomen, z.B. Methylthiomethyl, 25 Äthylthiomethyl und Isopropylthiomethyl, Acyloxymethyl-reste, z.B. Pivaloyloxymethyl und a-Acetoxymethyl, Äthoxy-carbonyloxy-l-methylmethyl und a-Acyloxy-a-substituierte Methylreste (z.B. a-Acetoxy-a-methyl-methyl).

Ebenso wie die bekannten Cephalosporine oder Penicilline30 können die Verbindungen I und ihre Ester I' in Form von Arzneimitteln, wie Injektionslösungen, Kapseln, Tabletten und Granulat, verabreicht werden. Die Verbindungen I und ihre Ester I' sind neue Verbindungen, die ausgezeichnete Wirkung gegen ein breites Spektrum von Bakterien ein- 35 schliesslich gram-negativer Bakterien, wie Escherichia coli, Serratia marcescens, Proteus rettgeri, Enterobacter cloacae und Citrobacter freundii zeigen und gegen ß-Lactamase beständig sind. Die Verbindungen I und ihre Ester I' können beispielsweise als Desinfektionsmittel zur Entfernung der 40 vorstehend genannten Mikroorganismen von chirurgischen Instrumenten oder als Mittel zur Bekämpfung von Infektionen verwendet werden. Bei Verwendung als Mittel zur Behandlung von Infektionen, z.B. zur Behandlung von Bauchfellinfektionen, Infektionen der Atmungswege, der 45 Harnwege und anderer Infektionskrankheiten, die durch die vorstehend genannten Mikroorganismen verursacht werden, können sie Warmblütern einschliesslich des Menschen,

Mäusen und Ratten in einer Tagesdosis von 0,5 bis 80 mg, vorzugsweise 1 bis 20 mg/kg Körpergewicht in 3 bis 4 täg- so liehen Teildosen unbedenklich verabreicht werden. Die Verbindungen I und ihre Ester I' können oral oder parenteral in verschiedenen Arzneiformen wie Injektionslösungen, Kapseln, Pulvern, Granulat und Tabletten, die nach bekannten Verfahren hergestellt werden können, verabreicht ss werden. Bei Verwendung der Verbindungen I und ihre Ester I' für Injektionen kann als Träger beispielsweise destilliertes Wasser oder physiologische Kochsalzlösung verwendet werden. Bei Verwendung in Kapseln, Pulver, Granulat oder Tabletten werden sie beispielsweise in Mischung mit pharma-60 kologisch unbedenklichen, an sich bekannten Hilfsstoffen (z.B. Stärke, Lactose, Saccharose, Calciumcarbonat und Cal-ciumphosphat), Bindemitteln (z.B. Stärke, Gummiarabicum, Carboxymethylcellulose, Hydroxypropylcellulose und kristalline Cellulose), Gleitmitteln (z.B. Magnesiumstearat und «s Talkum) und Sprengmitteln (z.B. Carboxymethylcalcium und Talkum) verwendet.

Das Cephalosporinderivat der Formel I wird erfindungs-

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gemäss hergestellt durch Acylierung der 7-Aminogruppe einer 7-Aminocephalosporinverbindung der Formel:

worin R3 die obengenannte Bedeutung hat, mit einer 2-(2-

Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoessigsäureder

Formel:

'yn-a

N U-C-COOH

II (HD

OCH,

D

worin R2NH die obengenannte Bedeutung hat, gegebenenfalls mit anschliessender Entfernung der Schutzgruppe der Aminogruppe.

Bei diesem Verfahren wird die Verbindung (III) entweder in freier Form oder in Form eines reaktionsfähigen Derivats als Acylierungsmittel für die Acylierung der Aminogruppe in 7-Stellung der Verbindung (II) verwendet. So wird die freie Säure (III), ein Alkali- oder Erdalkalisalz der freien Säure (III) (z.B. das Natrium-, Kalium- oder Calciumsalz), ein organisches Aminsalz der freien Säure (III) (z.B. das Tri-methylaminsalz oder Pyridinsalz) oder ein reaktionsfähiges Derivat der Verbindung (z.B. ein Säurehalogenid (z.B. das Säurechlorid oder Säurebromid), ein Säureanhydrid, ein gemischtes Säureanhydrid, ein aktives Amid oder ein aktiver Ester) der vorstehend genannten Acylierungsreaktion unterworfen. Als Beispiele geeigneter aktiver Ester sind der p-Nitrophenylester, 2,4-DinitrophenyIester, Pentachlorphe-nylester, N-Hydroxysuccinimidester und der N-Hydroxy-phthalimidester zu nennen. Als Beispiele gemischter Säureanhydride sind gemischte Säureanhydride mit einem Kohlensäuremonoester (z.B. Kohlensäuremonomethylester oder Kohlensäuremonoisobutylester) und gemischte Säureanhydride mit einer niederen Alkansäure, die mit einem Halogenatom substituiert sein kann (z.B. Pivalinsäure oder Trichlor-essigsäure) zu nennen. Bei Verwendung der Carbonsäure (III) als freie Säure oder in Form eines Salzes wird ein geeignetes Kondensationsmittel verwendet. Als Kondensationsmittel eignen sich beispielsweise N,N'-disubstituierte Carbodiimide, z.B. N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid, Azolide, z.B. N,N'-Carbonylimidazol und N,N'-Thionyldiimidazol, Dehydratisierungsmittel, z.B. N-Äthoxycarbonyl-2-äthoxy-1,2-dihydrochinolin, Phosphoroxychlorid und Alkoxyace-tylen, 2-Halogenpyridiniumsalze (z.B. 2-Chlorpyridinium-methyljodid und 2-Fluorpyridiniummethyljodid). Es wird angenommen, dass bei Verwendung eines solchen Kondensationsmittels die Reaktion über das reaktionsfähige Derivat der Carbonsäure (III) verläuft. Die Reaktion wird im allgemeinen in einem inerten Lösungsmittel durchgeführt. Als Beispiele geeigneter Lösungsmittel seien genannt: Haloge-nierte Kohlenwasserstoffe, z.B. Chloroform und Methylen-dichlorid, Äther, z.B. Tetrahydrofuran und Dioxan, Di-methylformamid, Dimethylacetamid, Aceton, Wasser und Gemische dieser Lösungsmittel. Der Anteil des Acylierungs-mittels liegt normalerweise im Bereich von etwa 1 bis 5, vorzugsweise 1 bis 2 molaren Äquivalenten, bezogen auf die Verbindung (II). Diese Reaktion wird im allgemeinen bei einer Temperatur im Bereich von -50° bis +40°C durchgeführt.

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Die Reaktionsdauer kann zwischen etwa 1 und 10 Stunden variieren, im allgemeinen beträgt sie 1 bis 3 Stunden.

Nach der Acylierungsreaktion kann die Schutzgruppe der Aminofunktion entfernt werden. Die Entfernung der Schutzgruppe für die Aminofunktion kann im allgemeinen nach an sich bekannten Verfahren erfolgen (z.B. nach dem in der japanischen Offenlegungsschrift 52083/1975 und in Pure and Applied Chemistry, 7 (1963), 335 beschriebenen Verfahren) oder einem diesem Verfahren analogen Verfahren. Es ist zu bemerken, dass in Fällen, in denen R2 in der Formel I ein Monohalogenacetylrest (z.B. Monochloracetyl) und R3 eine Carbamoyloxygruppe, deren Aminogruppe geschützt ist, beispielsweise eine N-Monohalogenacetylcarbamoyloxygruppe (z.B. N-Monochloracetylcarbamoyloxy) ist, diese beiden Monohalogenacetylgruppen (z.B. Monochloracetyl) gleichzeitig entfernt werden können. Hierbei ist die Schutzgruppe R2 für die Aminogruppe vorzugsweise eine Monohalogenace-tylgruppe. Die Reaktion zur Entfernung der Monohalogena-cetylgruppe von der Aminogruppe wird durchgeführt, indem die Verbindung der Formel I, deren Aminogruppe oder Ami-nogruppen mit einer Monohalogenacetylgruppe geschützt worden sind, mit Thioharnstoff und einer basischen Substanz umgesetzt wird. Normalerweise wird diese Reaktion in einem Lösungsmittel bei einer Temperatur in der Nähe von Raumtemperatur durchgeführt. In vielen Fällen ist die Reaktion in einer Zeit von 1 bis 10 und mehr Stunden beendet. Beliebige Lösungsmittel, die die Reaktion nicht stören, können verwendet werden. Geeignet sind beispielsweise Äther, z.B. Äthyläther, Tetrahydrofuran und Dioxan, niedere Alkohole, z.B. Methanol und Äthanol, halogenierte Kohlenwasserstoffe, z.B. Chloroform und Methylendichlorid, Ester, z.B. Äthylacetatund Butylacetat, Ketone, z.B. Aceton und Me-thyläthylketon, Wasser und verschiedene Gemische dieser Lösungsmittel.

Diese Reaktion zur Entfernung der N-Halogenacetyl-gruppe von der N-Monohalogenacetylcarbamoyloxymethyl-gruppe in 3-Stellung der Verbindung I verläuft nicht in wesentlichem Umfange, wenn man Thioharnstoff allein auf die Verbindung I einwirken lässt. Wenn jedoch die Verbindung I mit Thioharnstoff und einer basischen Substanz umgesetzt wird, findet die gewünschte Reaktion zur Entfernung der Monohalogenacetylgruppe selektiv und glatt unter Bildung der 3-Carbamoyloxymethylverbindung I statt. Als basische Substanzen eignen sich für die Zwecke der Erfindung beispielsweise Alkali- oder Erdalkalisalze von niederen aliphatischen Carbonsäuren oder anorganische oder organische Basen mit einem pKa-Wert von nicht weniger als 9,5, vorzugsweise im Bereich von 9,8 bis 12,0. Als Beispiele geeigneter Salze von niederen aliphatischen Carbonsäuren sind die Salze von niederen aliphatischen Carbonsäuren mit 1 bis 6 C-Atomen, z.B. Natriumacetat, Kaliumacetat, Calciumacetat, Bariumacetat, Natriumformiat, Natriumpro-pionat und Kaliumhexanoat, zu nennen. Als Beispiele geeigneter anorganischer Basen sind die Alkalisalze von Kohlensäure, z.B. Natriumcarbonatund Kaliumcarbonat, zu nennen. Als organische Basen eignen sich beispielsweise mit niederen Alkylresten einfach, zweifach oder dreifach substituierte Amine mit 1 bis 4 C-Atomen im Alkylrest, z.B. Trimethylamin, Triäthylamin, Äthylamin, Methylamin, Diäthylamin, Dimethylamin, Tributylamin, Dibutylamin und Butylamin, und 5- bis 6-gliedrige cyclische Amine, die in N-Stellung mit niederen Alkylresten mit 1 bis 2 C-Atomen substituiert sind, z.B. N-Methylpyrrolidin, N-Äthylpyrro-lidin, N-Methylpiperazin und N-Äthylpiperazin. Wie vorstehend erwähnt, wird Thioharnstoff bei dieser Reaktion verwendet, jedoch kann die Reaktion auch erfolgreich mit N-oder N,N-substituierten Thioharnstoffen, z.B. Methylthio-

harnstoff, N,N-Diäthylthioharnstoff oder N,N-Hexamethy-lenthioharnstoff durchgeführt werden.

Die nach dem vorstehend beschriebenen Verfahren hergestellten Cephalosporinverbindungen I können nach an sich 5 bekannten Verfahren, z.B. durch Säulenchromatographie, Extraktion, Ausfällung und Umkristallisation, gereinigt werden. Falls erforderlich, kann jede dieser Verbindungen nach an sich bekannten Verfahren in die gewünschten Salze, Ester usw. umgewandelt werden.

1# Eines der Ausgangsmaterialien für das Verfahren gemäss der Erfindung, das 2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-metho-xyiminoessigsäurederivat (III), kann beispielsweise nach verschiedenen Verfahren, die nachstehend ausführlich beschrieben werden, hergestellt werden.

is (I) Zunächst wird ein 4-Halogen-3-oxo-2-oxyiminobutter-säurederivat der Formel (VII)

XCH2COC-COOR7

20

N

e

ORÖ

worin X ein Halogenatom, z.B. Chlor oder Brom, Rö Wasserstoff oder ein Methylrest und R7 ein niederer Alkylrest mit 1 25 bis 3 C-Atomen, z.B. Methyl, Äthyl oder Propyl, ist, mit Thioharnstoff umgesetzt, wobei ein 2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-oxyiminoessigsäurederivat der Formel (VIII)

30

35

H2N-Tf

M-

1

C-COORr

II I

N ?

OR^

(VIII)

worin Rö und R7 die obengenannten Bedeutungen haben, 40 erhalten wird. In den beiden Fällen, in denen Rô Wasserstoff und Methyl ist, fällt die Verbindung (VIII) normalerweise als Gemisch von syn- und anti-Isomeren an. Die Reaktion wird normalerweise durchgeführt, indem eine Verbindung der Formel (VII) mit Thioharnstoff in einem organischen 4S Lösungsmittel, z.B. Äthanol, Methanol oder Tetrahydrofuran, bei Raumtemperatur oder erhöhter Temperatur (0 bis 100°C, vorzugsweise 10 bis 50°C) umgesetzt wird. Die Reaktionsdauer beträgt im allgemeinen 1 bis 30 Stunden, vorzugsweise 1 bis 5 Stunden.

Isomeren aus dem erhaltenen Gemisch der syn- und antiFormen der Verbindung (VIII) kann eines der folgenden Verfahren erfolgreich angewendet werden:

50

55

60

a) Fraktionierte Kristallisation, bei der die unterschiedlichen Kristallisierbarkeiten oder Löslichkeiten der Isomeren der Verbindung (VIII) als solche, eines Salzes der Verbindung (VIII) mit Halogenwasserstoff (HBr- oder HCl-Salz) oder eines Derivates der Verbindung (VIII) mit einer in an sich bekannter Weise eingeführten Schutzgruppe (z.B. Monochloracetyl oder Dichloracetyl) an ihrer 2-Aminogruppe.

b) Isolierung durch Chromatographie und

65 c) ein Verfahren, bei dem die Verbindung (VIII) oder die eine Schutzgruppe an ihrer 2-Aminogruppe enthaltende Verbindung (VIII) an ihrer Ester-Stellung in an sich bekannter Weise zu einem Carbonsäurederivat der Formel (III) hydro-lysiert und das syn-Isomere allein durch Ausnutzung des

Unterschiedes in der Hydrolysengeschwindigkeit zwischen den syn- und anti-Isomeren selektiv isoliert wird.

Beim letztgenannten Verfahren kann auf Grund der Tatsache, dass die Geschwindigkeit der Hydrolyse des anti-Isomeren höher ist als beim syn-Isomeren, das anti-Isomere selektiv hydrolysiert und entfernt werden. Die Reaktion zur Hydrolyse der Esterbindung der Verbindung (VIII) mit oder ohne Substituent an ihrer 2-Aminogruppe wird normalerweise in Gegenwart von 1 bis zu mehreren molaren Äquivalenten eines Alkalihydroxyds, z.B. Kaliumhydroxyd oder Natriumhydroxyd, bei einer Temperatur von 0°C bis Raumtemperatur in Wasser oder in einem Gemisch von Wasser mit einem mit Wasser mischbaren organischen Lösungsmittel, z.B. Methanol, Äthanol, Aceton, Tetrahydrofuran, Dioxan, N,N-Dimethylformamid oder N,N-Dimethylacetamid, durchgeführt. Wenn Re in der Verbindung (VIII) Wasserstoff ist, kann das isolierte syn-Isomere in das syn-Isomere der Verbindung (VIII), worin Re ein Methylrest ist, umgewandelt werden, indem die erstgenannte Verbindung (VIII) methy-liert wird. Diese Methylierungsreaktion wird normalerweise in einem Lösungsmittel unter Kühlen mit Eis oder bei Tem7 629499

peraturen in der Nähe von Raumtemperatur durchgeführt und geht in vielen Fällen in wenigen Minuten bis zu mehreren Stunden bis zur Vollendung. Für diesen Zweck können beliebige Lösungsmittel verwendet werden, vorausgesetzt, s dass sie die Reaktion nicht stören. Geeignet sind beispielsweise Tetrahydrofuran, Dioxan, Methanol, Äthanol, Chloroform, Methylendichlorid, Äthylacetat, Butylacetat, N,N-Dimethylformamid, N,N-Dimethylacetamid und Wasser sowie Gemische dieser Lösungsmittel. Als Methylie-io rungsmittel eignen sich beispielsweise Methylhalogenide, z.B. Methyljodid und Methylbromid, Dimethylsulfat und Diazomethan, um nur einige zu nennen. In allen Fällen, ausgenommen bei Verwendung von Diazomethan, wird die Verbindung (VIII), in der Re Wasserstoff ist, mit dem Methylie-is rungsmittel in Gegenwart einer Base, z.B. einem Alkalicar-bonat (z.B. Natriumcarbonat und Kaliumcarbonat) oder eines Alkalihydroxyds (z.B. Natriumhydroxyd und Kaliumhydroxyd) umgesetzt. Einige physikalische Konstanten der in dieser Weise hergestellten syn-Isomeren der Verbindungen 20 (III) und (VIII) sind nachstehend in Tabelle 1 im Vergleich zu den physikalischen Konstanten der entsprechenden anti-Isomeren genannt.

Tabelle 1

Struktur

NMR-Spektrum (ppm) Schmelzpunkt, °C

syn-Isomeres ^2^

anti-Isomeres

TÛL.

N*—"—C-COOCgHç

li ii oh

HpN

N U- C-

c00coj-ir d s ho

N

In dö-DMSO 6.80s(5-H) 11.6s(OH)

In dö-DMSO

7.50s(5-H)

12.5s(OH)

185.5

145.3

syn-Isomeres

N

S

Ì

c-ccxy^Hr-

xüf'-'h,

In CDCh

6.74s(5-H)

4.02S(OCH3)

163 bis 164

anti-Isomeres syn-Isomeres h~,n

H-

-.c-cü0gohr it 2 ?

n

CILC^

y

"/'-rfS

N C-COü^IL

II

OCH-,

In CDCh

7.43s(5-H)

4.07S(OCH3)

In CDCh

6.74s(5-H),

4.02s(OCHj)

114 bis 115

164.9

629499

Tabelle 1 Fortsetzung

Struktur

NMR-Spektrum (ppm) Schmelzpunkt, °C

anti-Isomeres II pH—,

"'il ij u—c-cooch7

CHzO

D

N /

In CDCh

7.48s(5-H),

4.06s(OCH3)

syn-Isomeres C^CHgCONH—ß >j

KT 11— P-C

N "-C-COOCoHc

II t- J

N

■OCRj anti-Isomeres UCHgCONH —^

N C-C00CoHj-

ii à y

N

syn-Isomeres C <£CH~CONH

CH,0

D .&

2—fj

N—XJ-COOH

»I

N,

'OCH,

In CDCh

7.15s(5-H)

4,OOS(OCH3)

In CDCh

7.94s(5-H)

4.!OS(OCH3)

In d6-DMSO

7.57s(5-H)

3.95S(OCH3)

111 bis 112

81 bis 82

170 bis 171

anti-Isomeres C-fCHgCONH —j-j-

N C-COOH

in de-DMSO

8.00s(5-H)

4,OOS(OCH3)

182 bis 183

syn-Isomeres

CH^O

N /

C^CHgCONH—

M U— r

N C-COOGH,

m ?

N

'OCH-,

In CDCh

7.24s(5-H),

4.02s(OCH3)

130.8

anti-Isomeres C*CH~CONH

2uul,"lf Ì]

11 LL C-GüöCH,

II

II

CH,0'

In CDCh

8.02s(5-H)

4.12s(OCH3)

Bemerkungen: s: Singlett

Die Methoxyimino(Hydroxyimino)-Gruppe im «syn»-Isomeren steht in cis-Stellung zur

Carboxyîfunkdon und im «anti»-Isomeren in trans-Stellung zur Carboxylfunktion.

9

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(II) Das Verfahren zur selektiven Herstellung der Verbindung (III) (syn-Isomeres) wird nachstehend beschrieben. Während die vorstehend genannte Umsetzung der Verbindung (VII) mit Thioharnstoff ein Gemisch von syn- und anti-Isomeren der Verbindung (VIII) ergibt, überwiegt in vielen Fällen das anti-Isomere der Verbindung (VIII). Die Untersuchung der Bedingungen dieser Cyclisierungsreaktion durch die Anmelderin brachte Licht in die Bedingungen, die einer selektiven Bildung des gewünschten syn-Isomeren förderlich sind. So werden bei der Durchführung der Umsetzung der Verbindung (VII) mit Thioharnstoff zur Herstellung der Verbindung (VIII) unter den vorstehend beschriebenen Bedingungen die syn- und anti-Isomeren normalerweise im Verhältnis von 2:98 bis 50:50 gebildet.

Es wurde jedoch gefunden, dass bei Durchführung dieser Cyclisierungsreaktion in Wasser oder einem Gemisch von Wasser mit einem mit Wasser mischbaren Lösungsmittel wie Methanol, Äthanol, Aceton, Tetrahydrofuran, Dioxan, N,N-Dimethylformamid, N,N-Dimethylacetamid oder N-Methylpiperidon und in Gegenwart einer basischen Substanz das syn-Isomere der Verbindung (VIII) selektiv gebildet wird (normalerweise in einem Verhältnis von etwa 85:15 bis 100:0). Als basische Substanzen für die Zwecke dieser Reaktion eignen sich beispielsweise Alkali- oder Erdalkalisalze von niederen aliphatischen Carbonsäuren und anorganische oder organische Basen mit pKa-Werten von nicht weniger als 9,5, vorzugsweise im Bereich von 9,8 bis 12,0. Als Beispiele dieser Salze von niederen aliphatischen Carbonsäuren sind die Salze von niederen aliphatischen Carbonsäuren mit 1 bis 6 C-Atomen, z.B. Natriumacetat, Kalium-acetat, Calciumacetat, Bariumacetat, Natriumformiat, Natri-umpropionat und Kaliumhexanoat zu nennen, während als anorganische Basen, die vorstehend genannt wurden, Alkalisalze von Kohlensäure, z.B. Natriumcarbonat und Kalium-carbonat, in Frage kommen. Als Beispiele geeigneter organischer Basen seien genannt: Trialkylsubstituierte Amine mit einem niederen Ci- C4- Alkylrest, z.B. Trimethylamin, Tri-äthylamin und Tributylamin, und 5- bis 6-gliedrige cyclische Amine, die in N-Stellung mit einem niederen Alkylrest mit 1 bis 2 C-Atomen substituiert sind, z.B. N-Methylpyrrolidin, N-Äthylpyrrolidin, N-Methylpiperazin und N-Äthylpipe-razin. Bei Verwendung von N,N-Dimethylformamid, N,N-Dimethylacetamid oder N-Methylpyrrolidon als Lösungsmittel ist es nicht immer notwendig, die vorstehend genannte basische Substanz zuzusetzen. Die Temperatur wird im allgemeinen zwischen 0 und 50°C, vorzugsweise zwischen etwa 0 und 30°C, gehalten: die Reaktionsdauer beträgt im allgemeinen 1 bis 30 Stunden, vorzugsweise 1 bis 5 Stunden.

(III) Die Verbindung (VIII) (syn-Isomeres) kann auch nach dem nachstehend beschriebenen Verfahren selektiv hergestellt werden. Bei der weiteren Suche nach einem Verfahren zur selektiven Herstellung des syn-Isomeren wurde von der Anmelderin gefunden, dass durch Umsetzung eines 2-Ami-nothiazol-4-ylglyoxylsäurederivats der Formel (IX) mit O-Methylhydroxylamin das syn-Isomere der Methoxyimino-verbindung selektiv hergestellt werden kann:

vh-rf-s

N—"-Jj-COORr, (IX)

Hierin haben Ri und R7 die obengenannten Bedeutungen.

Normalerweise kann diese Reaktion in einem geeigneten Lösungsmittel bei einem pH-Wert von etwa 4,0 bis 9,0 glatt durchgeführt werden. Beliebige Lösungsmittel, die die Reaktion nicht stören, können verwendet werden. Geeignet sind beispielsweise Äther, z.B. Äthyläther, Tetrahydrofuran und Dioxan, niedere Alkohole, z.B. Methanol und Äthanol, halo-genierte Kohlenwasserstoffe, z.B. Chloroform und Methy-lendichlorid, Ester, z.B. Äthylacetat und Butylacetat, Wasser und Gemische dieser Lösungsmittel. Diese Reaktion verläuft in der Nähe von Raumtemperatur, kann jedoch durch Erhitzen beschleunigt werden. Die Temperatur wird im allgemeinen zwischen 0 und 100°C, vorzugsweise zwischen etwa 10 und 50°C gehalten; die Reaktionsdauer beträgt im allgemeinen 1 bis 10 Stunden, vorzugsweise 1 bis 5 Stunden.

Die Ausgangsverbindung (IX) für diese Reaktion kann durch die nachstehend beschriebene Reaktion hergestellt werden. Die Herstellung erfolgt durch Hydrolyse einer Nitroverbindung der Formel (X)

R2NH-f Si|

n k-c-c00r7 (x)

II {

ü-n-ch,

4- ^

worin R2 und R7 die obengenannten Bedeutungen haben. Diese Hydrolysenreaktion findet glatt in Gegenwart einer Mineralsäure statt und wird normalerweise in einem Lösungsmittel durchgeführt. Als Mineralsäuren eignen sich beispielsweise Chlorwasserstoff, Schwefelsäure und Phosphorsäure. Beliebige Lösungsmittel, die die Reaktion nicht stören, können verwendet werden. Geeignet sind beispielsweise Äther, z.B. Tetrahydrofuran und Dioxan, Alkohole, z.B. Methanol und Äthanol, Ketone, z.B. Aceton und Me-thyläthylketon, Wasser und Gemische dieser Lösungsmittel. Normalerweise wird diese Reaktion unter Kühlen mit Eis oder bei Raumtemperatur durchgeführt. Die Ausgangsverbindung (X) kann hergestellt werden, indem eine Verbindung der Formel (VIII), in der R6 Wasserstoff ist und deren Aminogruppe in 2-Stellung geschützt worden ist, der Methylie-rung unterworfen wird.

Die Bedingungen dieser Methylierungsreaktion sind im wesentlichen die gleichen wie die Bedingungen, unter denen die vorstehend genannte Verbindung (VIII), in der Ró Wasserstoffist, methyliert wird (siehe die vorstehend beschriebene Methode I).

Unter den beschriebenen Methylierungsbedingungen ergibt die Methylierung des syn-Isomeren der Verbindung (VIII), worin Rö Wasserstoff ist, keine wesentliche Menge dieser Nitronverbindung (X), jedoch wird durch Methylierung des anti-Isomeren der Verbindung (VIII), in der Rö Wasserstoff ist, die Nitronverbindung (X), als überwiegendes Produkt erhalten.

Die Verbindung der Formel (VII) kann beispielsweise nach den Verfahren, die in Journal of Médicinal Chemistry, 16 (1973), 978, Helvetica Chimica Acta, 49 (1966) 26, Journal of the American Chemical Society, 60 (1938) 1328 und in der DT-OS 25 56 736 beschrieben werden, oder nach ähnlichen Verfahren hergestellt werden. Die für die Zwecke der Erfindung verwendete Verbindung der Formel (II) kann beispielsweise nach einem der in den folgenden Veröffentlichungen beschriebenen Verfahren hergestellt werden: US-PSen 3 875 151 und 3 697 515, DT-OS 2461 478, DT-OS 26 07 064 (niederländische Patentanmeldung 76.01902), DT-OS 26 19 243, japanische Offenlegungsschrift 52083/1975 und DT-OSen 24 60 331 und 24 60 332. Die Herstellung kann auch nach Verfahren, die den vorstehend genannten Verfahren analog sind, erfolgen.

U.a. kann die Verbindung (I), in der R3 eine Carbamoyloxygruppe oder Monohalogenacetylcarbamoyloxygruppe ist, auch beispielsweise nach dem nachstehend beschriebenen Verfahren hergestellt werden:

5

10

15

20

25

•30

35

40

45

50

55

60

65

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10

RoNH—|—r "ì

o^N/-

CHgOH X'CHgCONCO

COOH Monohalogenacetylisocyanat

VH-r-rS. g

CHgOCNHCCHgX'

(A)

COOH (C)

Eliminierung des Acylrestes in 7-Stellung

Eliminierung der Schutzgruppe (COCH2X')

CH0ÓC-NHC-CH0X1 2 II II 2

COOH 0 0 (d)

Acylierung in 7-Stellung

R0NH.

s2m-!cy w LL_-r

COOH

Eliminierung der

Schutzgruppe

(C-CH2X')

CHo0C-NHCCHoX

2 II Ii 2

0 0

CHo0C-NHo

2S 2

Eliminierung des Acylrestes in 7-Stellung

O

(h) C00H

(Acylierung in 7-Stellung s.

«2 °rra2

. 0

-C-CONH—,—

* J1*

\ M

3 COOH

(f)

CHgOCONHg

Hierin ist Ro das Wasserstoffatom oder ein Acylrest, X' ein Halogenatom, z.B. Chlor, Brom oder Jod, während R2NH die bereits genannte Bedeutung hat.

Die Umsetzung des 3-Desacetyl-cephalosporansäurederi-vats der Formel (A) mit einem Monohalogenacetylisocyanat (B) verläuft normalerweise glatt, wenn die beiden Reaktionsteilnehmer in einem geeigneten Lösungsmittel entweder unter Kühlen mit Eis oder bei einer Temperatur in der Nähe von Raumtemperatur zusammengeführt werden. Für diesen Zweck eignen sich beliebige Lösungsmittel, die diese Reaktion nicht stören, z.B. Äther, wie Äthyläther, Tetrahydrofuran und Dioxan, Ketone, z.B. Aceton und Methyläthyl-keton, halogenierte Kohlenwasserstoffe, z.B. Chloroform, Methylendichlorid und Trichloräthan, Ester, z.B. Äthylacetat und Butylacetat, und Gemische dieser Lösungsmittel. Die Menge des Monohalogenacetylisocyanats (B) beträgt etwa 1 bis zu einigen Mol pro Mol der Ausgangsverbindung (A). Das Monohalogenacetylisocyanat (B) kann beispielsweise nach dem Verfahren, das im Journal of Organic Chemistry 27

50 (1962), 3742, beschrieben wird, oder nach einem analogen Verfahren hergestellt werden.

Die Entfernung des 7-Acylrestes von der Verbindung der Formel (C) (oder [g]) kann mit Hilfe beliebiger Reaktionen erfolgen, die im allgemeinen für die Deacylierung von Peni-55 cillinen und Cephalosporinen angewendet werden. Beispielsweise können die Verfahren, die in den DT-OSen 24 60 331 und 24 60 332, in den japanischen Patentveröffentlichungen 13862/1966,40899/1970 und 34387/1972 und in der US-PS 3 632 578 beschrieben werden, erfolgreich angewendet 60 werden. Beispielsweise wird die Verbindung (C) (oder [g]) mit einem imidhalogenidbildenden Mittel behandelt, wobei zunächst das entsprechende Imidhalogenid erhalten wird, das dann mit einem Alkohol behandelt Wird, wobei der entsprechende Imidäther erhalten wird. Dieser Imidäther wird 65 zum entsprechenden 7-Aminoderivat (d) (oder [h]) hydroly-siert.

Als imidhalogenidbildende Mittel eignen sich die von Kohlenstoff, Phosphor und/oder Schwefel abgeleiteten

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Halogenide und die von ihren Oxysäuren abgeleiteten Säurehalogenide (z.B. Phosphoroxy chlorid, Phosphorpenta-chlorid, Phosphortrichlorid, Thionylchlorid, Phosgen, Oxa-lylchlorid, Protocatechuoyl-phosphortrichlorid und p-Tolu-olsulfonylchlorid). Diese Imidbildungsreaktion wird normalerweise vorteilhaft in einem Lösungsmittel durchgeführt. Als Lösungsmittel für diesen Zweck eignen sich nicht nur die gebräuchlichen inerten Lösungsmittel (z.B. Methylendichlo-rid und Chloroform), sondern auch tertiäre Amine (z.B. Triäthylamin, Pyridin und Dimethylanilin) und andere Lösungsmittel sowie Gemische dieser Lösungsmittel. Die Reaktion zur Bildung des Imidäthers wird durchgeführt, indem das Imidhalogenid-Reaktionsgemisch mit einem Alkohol zusammengeführt wird. Als Alkohole können normalerweise beispielsweise niedere Alkanole mit 1 bis 4 C-Atomen, z.B. Methanol, Äthanol und n-Butanol, verwendet werden. Die vorstehend genannte Hydrolyse wird durchgeführt, indem das Reaktionsgemisch, das den als Produkt gebildeten Imidoäther enthält, mit Wasser behandelt wird. Um Nebenreaktionen auszuschliessen, werden die vorstehend genannten Reaktionen vorzugsweise unter Kühlen durchgeführt.

Die Reaktion zur Entfernung der Monohalogenacetylgruppe von der Verbindung (c) (oder [e]) ist im wesentlichen die gleiche Reaktion, die vorstehend für die Entfernung der gleichen Gruppe aus der Verbindung (I) beschrieben wurde.

In den vorstehenden Formeln (A) und (B) können die durch Ro dargestellten Acylreste beliebige Gruppen sein, die nachstehend als Beispiele genannt werden: Von geradkettigen aliphatischen Carbonsäuren mit bis zu 10 C-Atomen abgeleitete Acylreste und von cycloaliphatischen Carbonsäuren mit bis zu 6 C-Atomen abgeleitete Acylreste, z.B. Formyl, Acetyl, Propionyl, Hexanoyl, Butanoyl, Heptanoyl, Octanoyl und Cyclopentanoyl, Acylreste, die von Phenyl-oder phenoxy-substituierten niederen aliphatischen Carbonsäuren mit bis zu 4 C-Atomen abgeleitet sind, z.B. Phenyla-cetyl, Phenoxyacetyl, a-Phenoxypropionyl, a-Phenoxybu-tyryl und p-Nitrophenylacetyl, Acetyl- oder Thioacetyl-gruppen, die mit einer 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Gruppe, die ein Heteroatom aus der Gruppe N, S oder O enthält, oder mit einer wahlweise mit einer Aminogruppe oder Hydroxylgruppe substituierten 5- oder 6-gliedrigen heterocyclischen Gruppe, die das genannte Heteroatom und zusätzlich 1 bis 3 Heteroatome aus der Gruppe N, S und O enthält, oder mit der entsprechenden heterocyclischen Gruppe substituiert sind, z.B. 2-Thienylacetyl, Tetrazolyla-cetyl, Tetrazolylthioacetyl, a-(2-Pyridyloxy)acetyl, a-(3-Pyri-dyloxy)acetyl, a-(4-Pyridyloxy)acetyl, 2-(2-Hydroxythiazol-4-yl)-acetyl, 2-(2-Aminothiazol-4-yl)acetyl, 4-Pyridylthioa-cetyl, 1-Pyrazolylacetyl, 2-Furylacetyl und 6-(2'-Oxo-3'-me-thylpyridazinyl)thioacetyl, von monosubstituierten aliphatischen Carbonsäuren abgeleitete Acylreste, z.B. Cyanacetyl, Acetoacetyl, (o-Halogenacetoacetyl, 4-Methylthio-3-oxobu-tyryl und 4-Carbamoylmethylthio-3-oxo-butyryl, a-substitu-ierte Phenylacetylgruppen, z.B. Mandelyl, a-Carboxyphenyl-acetyl, a-Aminophenylacetyl, a-Sulfophenylacetyl, a-Sulfo-(p-aminophenyl)acetyl und a-(ß-Methylsulfonyläthoxycar-bonyl)aminophenylacetyl, Glycylgruppen, die in a-Stellung mit einem 5- oder 6-gliedrigen Ring, der ein O- oder S-Atom als Heteroatom enthält, oder einem mit einer Aminogruppe oder Hydroxylgruppe substituierten 5- oder 6-gliedrigen Ring, der das genannte Heteroatom und ein N-Atom als zusätzliches Heteroatom enthält, substituiert sind, z.B. Phe-nylglycyl, 1-Cyclohexenylglycyl, Cyclohexadienylglycyl, Thienylglycyl, p-Hydroxyphenylglycyl, Furylglycyl, 2-Ami-nothiazol-4-ylglycyl und 2-Hydroxythiazol-4-ylglycyl, von disubstituierten aliphatischen Carbonsäuren abgeleitete Acylreste, z.B. 5-Amino-5-carboxyvaleryl, und heterocyclische Acylreste, z.B. 5-Methyl-3-phenyl-4-isooxazolylcar-bonyl und 3-(2,6-Dichlorphenyl)-5-methyl-4-isooxazolylcar-bonyl.

Die Verbindung (A) kann allgemein hergestellt werden, 1. s durch Acylierung von 7-Aminocephalosporansäure (7-ACA) mit einem Acylierungsmittel, das dem durch Ro dargestellten Acylrest entspricht, nach an sich bekannten, vorstehend genannten Verfahren zur Acylierung einer Aminogruppe in 7-Stellung von Cephalosporinverbindungen und enzyma-lo tische Entfernung der 3-Acetylgruppe vom gleichen Cephalosporin, das einen 3-Acetoxymethylrest enthält (Biochemical Journal 81 [1961], 591) oder beispielsweise 2. durch fermentative Herstellung von 7-(D-5-Aminoadipinamido)-3-hydroxy-methyl-3-cephem-4-carbonsäure(Cephalosporandesinsäure, is Desacetylcephalosporin O, DCPC) (Nature 246 [1973], 154 und japanische Offenlegungsschrift 491 /1974).

Die Erfindung wird in den folgenden Beispielen weiter erläutert. In diesen Beispielen steht die Abkürzung «DMSO» für Dimethylsulfoxyd. Die Harze der Handelsbezeichnung 20 «Amberlite» sind Produkte der Firma Rohm & Haas Company, USA. Alle Temperaturen sind unkorrigiert. Die Prozentsätze beziehen sich auf das Gewicht, falls nicht anderes angegeben. Die NMR-Spektren wurden mit einem Spektro-meter «Varian Modell HA 100» (100 MHz) oder T60 (60 25 MHz) mit Tetramethylsilan als inneren oder äusseren Bezug aufgenommen. Alle 8-Werte sind in ppm angegeben. Ferner bedeuten s = Singlett, d = Dublett, t = Triplett, q = Quartett, m = Multiplett und J ist eine Kupplungskonstante.

30 Bezugsbeispiel 1

In einer Lösung von 13,3 g Natriumcarbonat in 120 ccm Wasser werden 10 g Äthyl-3-oxo-2-hydroxyiminobutyrat gelöst. Zur Lösung werden 30 ccm Methanol gegeben. Das Gemisch wird eisgekühlt. Unter Rühren werden 15,8 g 35 Dimethylsulfat tropfenweise innerhalb von 3 Minuten zugesetzt. Nach erfolgter Zugabe wird das Eisbad entfernt und das Gemisch 40 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch (pH 8 oder höher) wird zweimal mit Äthyl-acetat extrahiert. Die Extrakte werden zusammengegossen, 40 mit Wasser gewaschen und getrocknet. Das Lösungsmittel wird dann unter vermindertem Druck abgedampft. Der Rückstand wird unter vermindertem Druck destilliert.

Hierbei werden 9 g Äthyl-3-oxo-2-methoxy-iminobutyrat als blassgelbes Öl vom Siedepunkt 56° bis 61°C/0,3 bis 45 0,4 mmHg erhalten.

Elementaranalyse für C7H11NO4

Ber.: C 48,54; H 6,40; N 8,08 so Gef.: C 48,41; H 6,51; N 7,96

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCh):

2,40 ppm (3H, Singlett, CH3CO), 4,10 ppm (3H, Singlett,

= NOCH3)

55

Bezugsbeispiel 2 (1) In 120 ccm Chloroform werden 27,3 g Äthyl-3-oxo-2-methoxyiminobutyrat gelöst. Die Lösung wird auf 40°C erwärmt. Dann wird eine Lösung von 25,3 g Brom in 30 ccm «0 Chloroform tropfenweise in 30 Minuten zugesetzt. Das Gemisch wird gerührt und 1 Stunde der Reaktion bei Raumtemperatur überlassen. Das Reaktionsgemisch wird mit 5%iger wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung und Wasser in dieser Reihenfolge gewaschen. Die organische 65 Schicht wird getrocknet. Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck abdestilliert, wobei 36,2 g Äthyl-4-brom-3-oxo-2-methoxyiminobutyrat als öliges Produkt erhalten werden.

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12

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCb):

4,16 ppm (3H, Singlett, OCEb), 4,36 ppm (2H, Singlett,

BrCH2CO)

(2) In 20 ccm Äthanol werden 5 g des vorstehend genannten Produkts gelöst. Zur Lösung werden 1,8 g Thioharnstoff gegeben. Das Gemisch wird 3 Stunden am Rückflusskühler erhitzt. Nach der Abkühlung wird die Fällung abfiltriert und in 20 ccm Wasser gelöst. Zur Lösung wird Natriumhydrogencarbonat gegeben. Das abgeschiedene Öl wird mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschicht wird gewaschen und getrocknet. Anschliessend wird das Äthylacetat abgedampft, wobei weisse Kristalle erhalten werden. Durch Umkristallisation aus Äthanol werden 2,6 g (57,2%) Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(anti)-methoxyiminoacetat in Form von weissen Kristallen vom Schmelzpunkt 114° bis 115°C erhalten.

Elementaranalyse für CsH 11N3O3S

Ber.: C 41,91; H 4,84; N 18,33 Gef.: C 41,71; H 4,75; N 18,07

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCh):

4,07 ppm (3H, s, OCH3), 5,80 ppm (2H, br s, NH2), 743 ppm

(1H, s, Thiazol 5H)

(3) Das nach Isolierung der ersten Fällungsmenge erhaltene Filtrat wird unter vermindertem Druck eingeengt. Dem Rückstand wird Natriumhydrogencarbonat zugesetzt. Das Gemisch wird mit Äthylacetat extrahiert. Das aus der Äthylacetatschicht erhaltene Öl wird durch Säulenchromatographie an Kieselgel gereinigt. Hierbei werden 59 mg (1,3%) Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat in Form von weissen Kristallen vom Schmelzpunkt 163° bis 164°C erhalten.

Elementaranalyse für CsH 11N3O3S:

Ber.: C 41,91; H 4,84; N 18,33 Gef.: C 41,57; H 4,76; N 18,07

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCh):

4,02 ppm (3H, s, OCH3), 5,80 ppm (2H, br s, NH2), 6,74 ppm

(lH,s, Thiazol 5H)

Bezugsbeispiel 3

Zu 600 ccm Äthanol werden 121 g Äthyl-4-chlor-3-oxo-2-hydroxyiminoacetat zusammen mit 47,6 g Thioharnstoff gegeben. Das Gemisch wird 3 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Äthanol wird dann unter vermindertem Druck abgedampft, worauf 350 ccm Wasser zugesetzt werden. Die Wasserschicht wird mit Äther gewaschen, mit Natriumhydrogencarbonat neutralisiert (bis pH 7,5) und mit Äthylacetat-Tetrahydrofuran (1:1) extrahiert. Die organische Schicht wird mit Wasser gewaschen und getrocknet. Das Lösungsmittel wird dann abdestilliert, wobei 45 g eines kristallinen Produkts erhalten werden.

Eine Probe von 1 g dieses Produkts wird entnommen und durch Säulenchromatographie an Kieselgel gereinigt (Elutionsmittel: Äthylacetat-n-Hexan). Die erste Fraktion ergibt 650 mg des anti-Isomeren von Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoacetat. Aus der zweiten Fraktion werden 150 mg des syn-Isomeren erhalten.

anti-Isomeres: weisse Kristalle, Schmelzpunkt 145,3°C syn-Isomeres: blassgelblich weisse Kristalle, Schmelzpunkt 185,5°C

Elementaranalyse für C7H9N3O3S:

Ber.: C 39,06; H 4,21; N 19,52 Gef.:

(anti-)C 38,81; H 4,20; N 19,62

(syn-) C 39,28; H 4,10; N 19,63

NMR-Spektrum (60 MHz, in ds-DMSO):

anti-Isomeres: 7,10 ppm (2H, br s, NH2), 7,50 ppm (1H, s, Thiazol 5-H), 12,5 ppm (IH, s, OH)

syn-Isomeres: 6,80 ppm (1H, s, Thiazol 5-H), 7,12 ppm (2H, brs, NH2), 11,6 ppm (IH, s, OH)

Bezugsbeispiel 4 In 150 ccm Wasser werden 10,6 g Natriumcarbonat gelöst. Zur Lösung wird eine Lösung von 10,7 g Äthyl-2-(2-amino-thiazol-4-yl)-2-(syn)-hydroxyiminoacetat in einem Gemisch von 150 ccm Tetrahydrofuran und 50 ccm Methanol gegeben. Während mit Eis gekühlt wird, werden 12,6 g Dimethylsulfat tropfenweise in 5 Minuten zugesetzt. Nach erfolgter Zugabe wird das Eisbad entfernt und das Gemisch bei Raumtemperatur gerührt. Während des Rührens beginnen weisse Kristalle sich abzuscheiden. Nach 3 Stunden wird der grösste Teil des organischen Lösungsmittels unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand mit Eis gekühlt. Die hierbei gebildete Fällung wird abfiltriert, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Hierbei werden 5 g Äthyl-2-(2-amino-. thiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat in Form von weissen Kristallen erhalten. Auf Grund des NMR-Spektrums und anderer Eigenschaften wird dieses Produkt als Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat identifiziert.

Bezugsbeispiel 5 In 10 ccm N,N-Dimethylacetamid werden 2,15 g Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat (Schmelzpunkt 163° bis 164°C) gelöst, während mit Eis gekühlt wird. Zur Lösung werden tropfenweise 1,27 Chloracetylchlorid gegeben. Das Gemisch wird 30 Minuten unter Kühlen mit Eis und anschliessend 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit 50 ccm Wasser verdünnt und zweimal mit je 100 ccm Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte werden zusammengegossen, mit 5%iger wässriger Natrium-hydrogencarbonatlösung und gesättigter wässriger Natriumchloridlösung in dieser Reihenfolge gewaschen und abschliessend getrocknet. Das Lösungsmittel wird dann abgedampft, wobei 2,04 g Äthyl-2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat als kristallines Produkt vom Schmelzpunkt 111° bis 112°C erhalten werden.

Elementaranalyse für C10H12N3O4SCI:

Ber.: C 39,29; H 3,96; N 13,74 Gef.: C 39,15; H 3,91; N 13,69

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCb):

4,00 ppm (3H, s, =NOCH3), 4,24 ppm (2H, s, CICH2CO),

7,15 ppm (1H, s, Thiazol 5-H)

Bezugsbeispiel 6 Zu einer Lösung von 9 g Kaliumhydroxyd in einem Gemisch von 85 ccm Wasser und 452 ccm Äthanol werden 9,62 g Äthyl-2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-metho-xyiminoacetat gegeben. Das Gemisch wird 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Äthanol wird unter vermindertem Druck abdestilliert. Nach Zugabe von 85 ccm Wasser wird der Rückstand mit 100 ccm Äthylacetat gewaschen. Die wässrige Schicht wird mit 10%iger Salzsäure auf pH 2 einge5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

13

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stellt und dann zweimal mit je 200 ccm Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte werden vereinigt, mit gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen und getrocknet. Das Lösungsmittel wird abdestilliert, wobei 7,63 g 2-(2-Chloracet-amidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoessigsäure in Form von Kristallen vom Schmelzpunkt 170° bis 171°C erhalten werden.

Elementaranalyse für CsHaNìO+SCl:

Ber.: C 34,60; H 2,90; N 15,13 Gef.: C 34,97; H 3,03; N 14,74

NMR-Spektrum (60 MHz, in dó-DMSO):

3,95 ppm (3H, Singlett, =NOCH3), 4,40 ppm (2H, Singlett,

CICHzCO), 7,57 ppm (1H, Singlett, Thiazol 5-H)

Bezugsbeispiel 7

Auf die in Bezugsbeispiel 5 beschriebene Weise werden 2,38 g eines 7:8-Gemisches der syn- und anti-Isomeren von Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetatmit Chloracetylchlorid chloracetyliert. Zum erhaltenen Gemisch der syn- und anti-Formen von Äthyl-2-(2-chloracetamido-thiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetat werden 30 ccm Äther gegeben. Die hierbei abgeschiedenen Kristalle werden abfiltriert (Produkt [A]). Durch das NMR-Spektrum und andere Eigenschaften wird festgestellt, dass dieses Produkt mit dem gemäss Bezugsbeispiel 5 hergestellten Äthyl-2-(2-chloraceta-midothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat identisch ist. Ausbeute 600 mg.

Das durch Einengen des Filtrâtes erhaltene Öl (2,42 g, Gemisch der syn- und anti-Isomeren) wird zu einer Lösung von 879 mg Kaliumhydroxyd in einem Gemisch von 5 ccm Wasser und 80 ccm Äthanol gegeben, während mit Eis gekühlt wird. Das gesamte Gemisch wird 15 Minuten bei dieser Temperatur gehalten. Das Äthanol wird unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand mit 50 ccm Wasser verdünnt und zweimal mit je 100 ccm Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschicht wird mit Wasser gewaschen und getrocknet. Das Äthylacetat wird abdestilliert, wobei 577 mg Äthyl-2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat (Produkt [B]) erhalten werden. Im NMR-Spektrum und in den anderen Eigenschaften ist dieses Produkt mit dem gemäss Bezugsbeispiel 5 hergestellten syn-Isomeren identisch. Die Produkte (A) und (B) werden in einer Gesamtausbeute von 1076 g entsprechend 96,8% erhalten.

Bezugsbeispiel 8

In 600 ccm 50%igem wässrigem Tetrahydrofuran werden 67,8 g Äthyl-4-chlor-3-oxo-2-hydroxyiminoacetat gelöst. Zur Lösung werden 155 g Natriumacetattrihydrat und 53,2 g Thioharnstoff gegeben. Das Gemisch wird 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Natriumhydrogencarbonat auf pH 7,0 eingestellt. Nach Zugabe von Natriumchlorid wird es zweimal mit 300 ccm Tetrahydrofuran extrahiert. Die Extrakte werden zusammengegeben, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Das Tetrahydrofuran wird dann abdestilliert, wobei 27,5 g Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoacetat in Form von Kristallen erhalten werden. Das NMR-Spektrum und die übrigen Daten ergeben, dass dieses Produkt ein 82:18-Gemisch der syn- und anti-Isomeren ist.

Eine ähnliche Reaktion wird ohne Verwendung von Natnumacetat durchgeführt. Nach den Kennzahlen ist das erhaltene Produkt ein 25:75-Gemisch von syn- und anti-Isomeren

Bezugsbeispiel 9 Die in Bezugsbeispiel 8 beschriebene Reaktion wird wiederholt mit dem Unterschied, dass 50%iges wässriges Äthanol anstelle von 50%igem wässrigem Tetrahydrofuran 5 verwendet wird. Auch in diesem Fall wird bei Verwendung von Natriumacetat ein 83:17-Gemisch der syn- und anti-Isomeren von Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoa-cetat erhalten. Wenn dagegen kein Natriumacetat verwendet wird, ergibt die vorstehend beschriebene Reaktion ein 50:50-10 Gemisch der syn- und anti-Isomeren. Die Anteile der syn-und anti-Isomeren werden durch das NMR-Spektrum und nach anderen Methoden bestimmt.

Bezugsbeispiel 10 15 Die in Bezugsbeispiel 9 beschriebene Reaktion wird wiederholt mit dem Unterschied, dass N,N-Dimethylacet-amid anstelle von 50%igem wässrigem Tetrahydrofuran-Natriumacetat verwendet wird. Hierbei wird ein 85:15-Gemisch der syn- und anti-Isomeren von Äthyl-2-(2-amino-20 thiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoacetat erhalten.

Bezugsbeispiel 11 In 10 ccm 50%igem wässrigem Äthanol werden 200 mg Äthyl-2-aminothiazol-4-yl-glyoxylat gelöst. Der Lösung 25 werden 166mgO-Methylhydroxylaminhydrochloridund anschliessend 168 mg Natriumhydrogencarbonat zugesetzt. Das Gemisch wird in einem geschlossenen Gefäss 5 Stunden bei 70°C gerührt. Das Reaktionsgemisch wird unter vermindertem Druck eingeengt und der Rückstand mit 10 ccm 3« Wasser verdünnt und mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschicht wird mit Wasser gewaschen und getrocknet. Das Äthylacetat wird dann abdestilliert, wobei Äthyl-2-(2-ami-nothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetat in Form von Kristallen erhalten wird. Das NMR-Spektrum und andere 35 Kennzahlen zeigen, dass dieses Produkt ein 83:17-Gemisch der syn- und anti-Isomeren ist.

Bezugsbeispiel 12 In 70 ccm Äthanol, das 10% HCl enthält, werden 2,44 g des 40 Methylnitrons von Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(anti)-hydroxyiminoacetat, d.h. N-(2-aminothiazol-4-yl-äthoxycar-bonyl)methylenmethylamin-N-oxyd, vom Schmelzpunkt 184° bis 185°C suspendiert. Das Gemisch wird 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird 45 unter vermindertem Druck eingeengt. Nach Zugabe von 10 ccm Wasser wird der Rückstand mit 5%iger wässriger Natri-umhydrogencarbonatlösung auf pH 7,5 eingestellt und mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschicht wird mit Wasser gewaschen und getrocknet. Das Äthylacetat wird so dann abdestilliert und der Rückstand aus Äthanol umkristallisiert. Hierbei werden 1,54 g Äthyl-2-aminothiazol-4-ylgly-oxylat in Form von gelben Kristallen vom Schmelzpunkt 143,3°C erhalten.

ss Elementaranalyse für C7H8N2O3S

Ber. C 41.98; H 4.02; N 13.99 Gef. C 41.83; H 4.14; N 13.98

60 Bezugsbeispiel 13

In 50 ccm lN-Salzsäure wird 1 g des gleichen N-(2-Ami-nothiazol-4-yl-äthoxycarbonyl)methylenmethylamin-N-oxyds, das bei dem im Bezugsbeispiel 12 beschriebenen Versuch verwendet wurde, gelöst. Die Lösung wird 5 Stunden es bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit Natriumcarbonat neutralisiert und mit Äthylacetat extrahiert. Die weitere Aufarbeitung auf die im Bezugsbeispiel 12 beschriebene Weise ergibt 0,5 g Äthyl-2-amino-

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1-4

thiazol-4-ylglyoxylat. Das NMR-Spektrum und andere Kennzahlen ergeben, dass dieses Produkt mit dem gemäss Bezugsbeispiel 12 hergestellten Produkt identisch ist.

Bezugsbeispiel 14 In 20 ccm Äthanol, das 10% HCl enthält, werden 1,2 g des Methylnitrons von 2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-hydro-xyiminoacetats, d.h. N-(2-Aminothiazol-4-yl-äthoxycar-bonyl)methylenmethylamin-N-oxyd, vom Schmelzpunkt 111,6°C suspendiert. Die Suspension wird 16 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die weitere Aufarbeitung auf die im Bezugsbeispiel 12 beschriebene Weise ergibt 0,7 g Äthyl-2-aminothiazol-4-ylglyoxylat in Form von gelben Kristallen. Das NMR-Spektrum und andere Eigenschaften ergeben,

dass dieses Produkt mit dem gemäss Bezugsbeispiel 12 hergestellten Produkt identisch ist.

Bezugsbeispiel 15 Zu einem Gemisch von 10 ccm Tetrahydrofuran und 5 ccm Äthylacetat wird 1 g Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(anti)-hydroxyiminoacetat (Schmelzpunkt 145,3°C) gegeben, worauf eine Diazomethan-Äther-Lösung im Überschuss zugesetzt wird. Das Gemisch wird 2 Tage bei Raumtemperatur stehengelassen. Nach Zersetzung des restlichen Diazo-methans mit Essigsäure wird das Reaktionsgemisch unter vermindertem Druck eingeengt und der Rückstand aus Äthylacetat umkristallisiert. Hierbei werden 0,8 g der Methylni-tronverbindung, d.h. N-(2-Aminothiazol-4-yl-äthoxycar-bonyl)methylenmethylamin-N-oxyd, in Form von gelben Kristallen vom Schmelzpunkt 184°C bis 185°C erhalten werden.

Elementaranalyse für CsHi î N3O3S

Ber. C 41.91; H 4.84; N 18.33 Gef.: C 41.86; H 4.75; N 18.35

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCb): 3.82 ppm (3H, singlet, +N-CH3), 5.27 ppm (2H, br. singlet, NH2), 8.49 ppm (1H, singlet, Thiazole 5-H)

Bezugsbeispiel 16 Zu einer Lösung von 23 mg Natrium in 8 ccm Methanol werden 215 mg Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(anti)-hydro-xyiminoacetat (Schmelzpunkt 145,3°C) gegeben. Bei Raumtemperatur werden 280 mg Methyljodid zugesetzt. Das Gemisch wird 45 Minuten gerührt und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Der Rückstand wird mit Wasser verdünnt (pH 7 oder höher) und mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschicht wird mit Wasser gewaschen, getrocknet und eingeengt. Der Rückstand wird aus Tetrahy-drofuran-Äthylacetat umkristallisiert. In dieser Weise werden 160 mg der Methylnitronverbindung in Form von gelben Kristallen erhalten. Dieses Produkt ist mit dem gemäss Bezugsbeispiel 15 hergestellten Produkt vollständig identisch.

Bezugsbeispiel 17 Das Filtrat, das nach der Isolierung des ausgefällten Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetatsaus dem eingeengten Reaktionsgemisch bei dem im Bezugsbeispiel 4 beschriebenen Versuch erhalten wird, wird mit Tetra-hydrofuran-Äthylacetat (1:1) extrahiert. Der Extrakt wird mit Wasser gewaschen, getrocknet und eingeengt. Zu dem als Rückstand verbleibenden braunen Öl werden 20 ccm Tetrahydrofuran gegeben. Das Gemisch wird über Nacht im Kühlschrank gehalten. Die hierbei gebildeten Kristalle werden abfiltriert und aus Äthylacetat umkristallisiert. Hierbei werden 1,3 g der Methylnitronverbindung von Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-hydroxyiminoacetat, d.h. N-(2-Aminothiazol-4-yl-äthoxycarbonyl)methylenmethylamin-N-oxyd, in Form von gelben Kristallen vom Schmelzpunkt 111,6°C erhalten.

Elementaranalyse für C8H11N3O3S

Ber.: C 41.91; H 4.84; N 18.33 Gef.: C 41.89; H 4.91; N 18.44

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCb): 4.14 ppm (3H, singlet, +N-CH3), 5.34 ppm (2H, br. singlet, NH2), 6.62 ppm (2H, singlet, Thiazol 5-H)

Bezugsbeispiel 18 In 10 ccm Tetrahydrofuran werden 1,5 g Äthyl-4-brom-3-oxo-2-methoxyiminobutyrat gelöst. Nach Zugabe von 7 ccm Wasser werden ausserdem 2,4 g Natriumacetattrihydrat und 0,9 g Thioharnstoff zugesetzt. Das Gemisch wird 17 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Das Konzentrat wird mit verdünnter Salzsäure auf pH 1,5 eingestellt und mit Äthylacetat gewaschen. Die wässrige Schicht wird mit Natriumhydrogencarbonat neutralisiert und mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschicht wird mit Wasser gewaschen, getrocknet und unter vermindertem Druck eingeengt, wobei 0,8 g gelbliche Kristalle erhalten werden. Dieses Produkt ist das Äthyl-2-(2-ami-nothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat. Auf Grund des NMR-Spektrums und anderer Kennzahlen wird festgestellt, dass dieses Produkt mit dem gemäss Bezugsbeispiel 2 hergestellten syn-Isomeren identisch ist.

Bezugsbeispiel 19 In 10 ccm Dimethylformamid werden 2 g Äthyl-4-brom-3-oxo-2-methoxyiminobutyrat gelöst. Der Lösung werden 1,2 g Thioharnstoff zugesetzt. Das Gemisch wird 5 Stunden der Reaktion bei Raumtemperatur überlassen. Dem Reaktionsgemisch werden 20 ccm einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung zugesetzt, worauf der pH-Wert des Gemisches mit verdünnter Salzsäure auf etwa 1,5 eingestellt wird. Die weitere Aufarbeitung erfolgt auf die in Bezugsbeispiel 18 beschriebene Weise, wobei 1,1g blassgelbe Kristalle erhalten werden. Auf Grund des NMR-Spektrums und anderer Kennzahlen wird dieses Produkt als 87:13-Gemisch der syn- und anti-Isomeren von Äthyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-metho-xyiminoacetat identifiziert. Durch Waschen des Produkts mit einer geringen Äthermenge wird das syn-Isomere, das im wesentlichen frei vom anti-Isomeren ist, erhalten.

Bezugsbeispiel 20 (1) In 80 ccm wasserfreiem Aceton werden 20 g 7-(5-Car-boxy-5-benzamidovalerylamido)desacetylcephalosporan-säure gelöst. Der Lösung werden 7 g Chloracetylisocyanat zugesetzt. Das Gemisch wird 40 Minuten bei 20°C gerührt, worauf200 ccm Äther zugesetzt werden. Die Fällung wird abfiltriert und mit 50 ccm Äther gewaschen. Hierbei werden 19,6 g 7-(5-Carboxy-5-benzamidovalerylamido)-3-(N-chlor-acetyl)-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure in Form eines weissen Pulvers erhalten.

NMR-Spektrum (60 MHz, in d6-DMSO): 3.54 ppm (2H, quartet, 2-CH2), 4.50 ppm (2H, singlet, -NHCOCH2CI), 4.98 ppm (2H, quartet,

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IS

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5.04 ppm (IH, Dublett, 6-H), 5.77 ppm (IH, Dublett, 7-H)

(2) In 80 ccm Methylendichlorid, das 7,6 ccm N,N-Dime-thylanilin enthält, werden 6 g 7-(5-Carboxy-5-benzamido-valerylamido)-3-(N-chloracetyl)carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure suspendiert. Das Gemisch wird auf -50°C gekühlt. Bei dieser Temperatur werden 2,25 ccm Phosphortrichlorid zugesetzt. Das Gemisch wird dann 1,5 Stunden bei -30°C gerührt, wobei eine klare Lösung gebildet wird. Dieser Lösung werden 4,17 g Phosphorpentachlorid zugesetzt. Das Gemisch wird 2,5 Stunden bei —25°C gerührt und dann auf —40°C gekühlt, worauf sofort 37 ccm kaltes Methanol zugesetzt werden. Das Gemisch wird dann 25 Minuten bei -5°C gerührt. Nach Zugabe von 22 ccm Wasser wird es mit verdünntem wässrigem Ammoniak auf pH 3,5 eingestellt. Das Reaktionsgemisch wird 1 Stunde bei 5°C stehengelassen. Die hierbei gebildete Fällung wird abfiltriert. Hierbei werden 1,76 g 7-Amino-3-(N-chloracetyl)carbamoy-loxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure in Form von farblosen Kristallen erhalten.

Elementaranalyse für Ci 1H12CIN3O6S

Ber. :C 37,78%; H 3,46%; N 12,01%;

Gef.: C 38,02%; H 3,86%; N 11,81%

NMR-Spektrum (60 MHz, in CF3COOH);

3,78 ppm (2H, breites Singulett, 2-CH;),

4,35 ppm (2H, Singulett, -NHCOCH2CI),

5,42 ppm (2H, breites Singulett, 6-H, 7-H),

5,46 ppm (2H, Quartett, -CH2OCONH)

Bezugsbeispiel 21 Zu 200 ccm Wasser werden 38 g Natriumnitrit und 53 g Methylacetoacetat gegeben. Während mit Eis gekühlt und gerührt wird, werden 200 ccm 4n-Schwefelsäure innerhalb einer Zeit von etwa 1 Stunde zugetropft. Während dieser tropfenweisen Zugabe wird die Temperatur des Reaktionsgemisches bei 5° bis 8°C gehalten. Das Gemisch wird innerhalb dieses Temperaturbereiches weitere 2,5 Stunden gerührt und dann zweimal mit je 300 ccm Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte werden zusammengegossen und zweimal mit gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen. Dann wird eine Lösung von 96,7 g Natriumcarbonat in 11 Wasser in drei gleiche Teile geteilt. Hiermit wird 3-Oxo-2-hydroxy-iminobutyrat aus der vorstehend genannten Äthylacetatschicht extrahiert (dreimal). Zur wässrigen Schicht (11) werden 200 ccm Methanol gegeben. Nach Kühlung mit Eis werden 150 g Dimethylsulfat unter Rühren innerhalb von 10 Minuten zugetropft. Nach erfolgter Zugabe wird das Gemisch 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und zweimal mit je 300 ccm Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte werden zusammengegossen, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Das Äthylacetat wird dann abdestilliert und der Rückstand mit Eis gekühlt, wobei er erstarrt. Der feste Rückstand wird abfiltriert und mit einer geringeren Wassermenge gewaschen. Hierbei werden 52,3 g Methyl-3-oxo-2-methoxyi-minobutyrat in Form von weissen Kristallen vom Schmelzpunkt 64,4°C erhalten.

Elementaranalyse für C6H9NO4

Ber.: C 45.28; H 5.70; N 8.80 Gef.: C 44.93; H 5.61; N 8.71

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCb): 2.40 ppm (3H, singlet, -C-CH3)

3.86 ppm (3H, singlet, COOCH3), 4.10 ppm (3H, singlet, =NOCH3)

Bezugsbeispiel 22 In 150 ml Chloroform werden 40 g Methyl-3-oxo-2-metho-xyiminobutyrat gelöst. Die Lösung wird auf 40°C erhitzt. Dann wird eine Lösung von 40 g Brom in 50 ml Chloroform innerhalb einer Stunde zugetropft. Anschliessend wird die Reaktion unter Rühren bei Raumtemperatur eine Stunde fortgesetzt. Das Reaktionsgemisch wird mit 5%iger wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung und Wasser in dieser Reihenfolge gewaschen. Die organische Schicht wird getrocknet. Das Lösungsmittel wird dann abdestilliert, wobei 52,1 g Methyl-4-brom-3-oxo-2-methoxyiminobutyrat in Form eines Öls erhalten werden.

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCb): 3.82 ppm (3H, singlet, COOCHs), 4.09 ppm (3H, singlet, = N-OCH3), 4.27 ppm (2H, singlet, BrCHbCO)

In 350 ml Tetrahydrofuran werden 52 g Methyl-4-brom-3-oxo-2-methoxyiminobutyrat gelöst. Zur Lösung werden 250 ml Wasser und dann 89,1 g Natriumacetattrihydrat und 33,2 g Thioharnstoff gegeben. Das Gemisch wird 18 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Dem Reaktionsgemisch werden 200 ml einer 5%igen wässrigen Natriumhydrogencarbonatlösung zugesetzt, worauf mit Äthylacetat extrahiert wird. Die organische Schicht wird mit Wasser gewaschen, getrocknet und zur Entfernung des Lösungsmittels unter vermindertem Druck eingeengt. Dem Rückstand werden 200 ml Äther zugesetzt. Die hierbei gebildete Fällung wird abfiltriert. Hierbei werden 24,8 g Methyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-meth-oxyiminoacetat in Form von Kristallen vom Schmelzpunkt 164,9°C erhalten.

Elementaranalyse: C7H9N3O3S:

Ber.: C 39,06; H 4,21; N 19,52 Gef.: C 38,78; H 4,15; N 19,33

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCb): 3,84 ppm (3H, singlet, COOCH3), 4.02 ppm (3H, singlet, = NOCH3), 5.74 ppm (2H, br. singlet, NH2), 6.74 ppm (1H, singlet, Thiazol, 5-H)

Bezugsbeispiel 23 In 90 ml N,N-Dimethylacetamid werden 21,5 g Methyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat gelöst. Während mit Eis gekühlt wird, werden 13,6 g Chloracetyl-chlorid tropfenweise zugesetzt. Das Gemisch wird 30 Minuten unter Kühlen mit Eis und dann 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Nach Zugabe von 500 ml Wasser wird das Reaktionsgemisch zweimal mit Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte werden zusammengegossen, mit 5%iger wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung und Wasser in dieser Reihenfolge gewaschen und getrocknet. Das Lösungsmittel wird dann abdestilliert, wobei 25 g Methyl-2-(2-chlor-acetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat in Form von Kristallen vom Schmelzpunkt 130,8°C erhalten werden.

Elementaranalyse: C9H11N3O4SCI

Ber.: C 37.03; H 3.45; N 14.40 Gef.: C 37.30; H 3.40; N 14.35

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCb): 3.90 ppm (3H, singlet, COOCH3), 4.02 ppm (3H, singlet, =NOCH3), 4.26 ppm (2H, singlet, CICH2CO), 7.24 ppm (1H, singlet, Thiazol 5-H)

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Bezugsbeispiel 24

Zu einer Lösung von 19,2 g Kaliumhydroxyd in einem Gemisch von 170 ml Wasser und 900 ml Äthanol werden 20 g Methyl-2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxy-iminoacetat gegeben. Die Lösung wird 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Äthanol wird unter vermindertem Druck abdestilliert. Nach Zugabe von 170 ml Wasser wird der Rückstand mit 200 ml Äthylacetat gewaschen. Die wäss-rige Schicht wird mit 10%iger Salzsäure auf pH 2 eingestellt und zweimal mit je 300 ml Äthylacetat extrahiert.

Die Extrakte werden zusammengegossen, mit gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen und getrocknet. Das Lösungsmittel wird abdestilliert, wobei 16,8 g 2-(2-Chlor-acetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoessigsäurein Form von Kristallen erhalten werden. Das NMR-Spektrum und die übrigen Eigenschaften ergeben, dass dieses Produkt mit dem gemäss Bezugsbeispiel 6 hergestellten Produkt identisch ist.

Bezugsbeispiel 25 1) 6 g 7-(5-Carboxy-5-benzamidovalerylamido)-3-(N-chloracetyl)carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure werden in 80 ml Methylendichlorid, das 7,6 ml N,N-Dime-thylanilin enthält, suspendiert. Während bei -50°C gehalten wird, werden 2,25 ml Phosphortrichlorid zugesetzt. Das Gemisch wird 1,5 Stunden bei -30°C gerührt, bis sich eine klare Lösung gebildet hat. Dieser Lösung werden 4,17 g Phos-phorpentachlorid zugesetzt. Das Gemisch wird 2,5 Stunden bei -25°C gerührt. Es wird dann auf-40°C gekühlt, worauf sofort 37 ml kaltes Methanol zugesetzt werden. Das Gemisch wird 25 Minuten bei —5°C gerührt, dann mit 22 ml Wasser verdünnt und mit verdünntem wässrigem Ammoniak auf pH 3,5 eingestellt. Das Reaktionsgemisch wird eine Stunde bei 5°C stehen gelassen. Die hierbei gebildete Fällung wird abfiltriert. Hierbei werden 1,76 g 7-Amino-3-(N-chloracetyl)-car-bamoyloxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure als farbloses kristallines Produkt erhalten.

Elementaranalyse: C11H12CIN3O6S

Ber.: C 37.78; H 3.46; N 12.01 Gef.: C 38.02; H 3.86; N 11.81

NMR-Spektrum: (60 MHz, in CF3COOH):

3.78 ppm (2H, breit singlet, 2-CH2), 4.35 ppm (2H, singlet, -NHCOCH2CI), 5.42 ppm (2H, breit singlet, 6-H, 7H) 5,46 ppm (2H, quartet, -CH2OCONH)

2) In N,N-Dimethylacetamid werden 1,05 g der gemäss Abschnitt (1) hergestellten 7-Amino-3-(N-chloracetyl)-carba-moyloxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure gelöst. Während mit Eis gekühlt wird, werden 998 mg 2-Chloracetamidothia-zol-4-yl-a-(anti)-methoxyiminoacetylchloridhydrochlorid zugesetzt. Das Gemisch wird 15 Minuten unter Kühlen mit Eis und dann 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach Zugabe von 50 ml Wasser wird das Reaktionsgemisch zweimal mit je 100 ml Äthylacetat extrahiert. Die organischen Schichten werden zusammengegossen, mit gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiums .'ifar z?rocknet. Das Äthylacetat wird dann abdestilliert. H;-j/ 21 .e.den 2,2g7-[(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-a-■ •'.-ineth xyimino3-acetamido-3-(N-chloracetyl)carba-ais;.. \.xym !<?-eeph^ni-4-carbonsäure als weisses Pulver erbauen.

Herstellung von 2-Chloracetamidothiazol-4-yl-a-(anti)-methoxyiminoacetylchlorid

I) In 100 ml Dimethylacetamid werden 10 g Äthyl-a-(anti)-methoxyimino-a-(2-aminothiazol-4-yl)-acetat gelöst. Während mit Eis gekühlt wird, werden 5,91 g Chloracetyl-chlorid tropfenweise zugesetzt. Das Gemisch wird eine Stunde bei Raumtemperatur gerührt und nach dieser Zeit in Eiswasser gegossen. Das Gemisch wird mit Äthylacetat extrahiert und die organische Schicht gewaschen, getrocknet und zur Entfernung des Lösungsmittels destilliert. Hierbei werden 12,66 g Äthyl-a-(anti)-methoxyimino-a-[2-(chloraceta-mido)thiazol-4-yl]-acetat in Form von Kristallen vom Schmelzpunkt 81 -82°C erhalten.

Elementaranalyse für C10H12N3O4SCI

Ber.: C 39.29; H 3.96 Gef.: C 38.74; H 3.58

Das kernmagnetische Resonanzspektrum (60 MHz in CDCh) dieses Produkts zeigt Singletts, und zwar jeweils ein Singlett bei 4,10 ppm, das den Methoxyprotonen zuzuschreiben ist, bei 4,24 ppm, das den Chloracetylprotonen zuzuschreiben ist, und bei 7,94 ppm, das dem Thiazol-5-Wasserstoff zuzuschreiben ist.

II) 12,66 g Äthyl-a-(anti)-methoxyimino-a-[2-(chloraceta-mido)thiazol-4-yl]-acetat werden zu einer Lösung von 11,74 g Kaliumhydroxyd in einem Gemisch von 25 ml Wasser und 500 ml Äthanol gegeben. Das Gemisch wird 20 Minuten bei Raumtemperatur gerührt, worauf das Äthanol unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand mit Wasser verdünnt wird. Das Gemisch wird mit ln-Salzsäure angesäuert und die hierbei gebildete Fällung abfiltriert. Hierbei werden 10,54 g a-(anti)-Methoxyimino-a-[2-(chloraceta-mido)thiazol-4-yl]essigsäure vom Schmelzpunkt 182 bis 183°C erhalten.

Elementaranalyse für CsHsNsOSCl

Ber.: C 34.60; H 2.90; N 15.13 Gef.: C 34.53; H 3.00; N 14.80

Das kernmagnetische Resonanzspektrum (60 MHz, in dö-DMSO) dieses Produkts zeigt Singletts, von denen jeweils eines den Methoxyprotonen bei 400 ppm, den Chloracetylprotonen bei 4,38 ppm und dem Thiazol-5-Wasserstoff bei 8,00 ppm zuzuschreiben ist.

III) In 5 ml Methylenchlorid werden 555,4 mg a-(anti)-Methoxyimino-a-[2-(chloracetamido)thiazol-4-yl]-essigsäure suspendiert. Während mit Eis gekühlt wird, werden 416,3 mg Phosphorpentachlorid zugesetzt. Das Gemisch wird 30 Minuten der Reaktion unter Rühren überlassen. Dem Reaktionsgemisch wird n-Hexan zugesetzt. Die hierbei gebildete Fällung wird abfiltriert. Hierbei werden 620 mg a-(anti)-Me-thoxyimino-a-[2-(chloracetamido)thiazol-4-yl]acetylchlorid-hydrochlorid erhalten.

Elementaranalyse für C8H7N3O3SCI2 • HCl

Ber.: C 28.89; H 2.42; N 12.63 Gef.: C 28.35; H 2.81; N 12.00

3) In 50 ml Tetrahydrofuran werden 2,2 g der gemäss Abschnitt (2) hergestellten 7-[2-(Chloracetamidoihiazoi-4-yl)-a-(anti)-methoxyimino]acetamido-3-(N-ch!oracety!)-e: •-

bamoyloxymethyl-3-cephem-4-car'oonsäure gelöst. Der Lösung werden 913 mg feingepulverter Thioharnstoff und 1,63 g Natriumacetattrihydrat zugesetzt. Das Gemisch wird s

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17 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Fällung wird abfiltriert, mit Äthyläther gewaschen und in 10 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird mit Natriumhydrogencarbonat auf pH 7 eingestellt und durch eine Säule des Ionenaustauscherharzes «Amberlite XAD-2» geleitet. Hierbei werden 360 mg N atrium-7-[2-( Aminothiazol-4-yl)-a-(anti)-methoxyimino]-acetamido-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylat als weisses Pulver erhalten.

Elementaranalyse für Ci5Hi5N607S2Na-2.5H20

Ber.: C 34.42; H 3.85; N 16.05 Gef.: C 34.43; H 3.70; N 15.68

NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O):

3,55 ppm (2H, Quartett, 2-CH2), 4,11 ppm (2H, Singlett, = NOCH3), 4,81 ppm (2H, Quartett, -CH2OCONH2), 5,21 ppm (1H, Dublett, 6-H), 5,82 ppm (IH, Dublett, 7-H), 7,55 ppm (1H, Singlett,

,N

2

Die antibakterielle Aktivität (Mindesthemmkonzentration = MHK) (y/ml) für das gemäss diesem Beispiel hergestellte Natrium-7-[(2-Aminothiazol-4-yl)-a-(anti)-methoxyimino]-acetamido-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylat ist nachstehend genannt.

Mikroorganismus

MHK (y/ml)

Escherichia coli 0-111

0.78

Klebsiella pneumoniae DT

1.56

Klebsiella pneumoniae GN 3835

6.25

Serratia marcescens IFO 12648

12.5

Serratia TN 0024

6.25

Proteus vulgaris IFO 3988

0.39

Proteus mirabilis GN 4359

0.78

Proteus morganii IFO 3168

0.78

Proteus rettgeri 8 TNO 336

<0.2

Proteus rettgeri GN 4733

0.78

Enterobacter cloacae IFO 12937

25

Citrobacter freundii GN 99

1.56

Citrobacter feundii GN 1706

3.13

Beispiel 1

1 ) In 6 ml N,N-Dimethylacetamid werden 290 mg 7-Amino-3-(N-chloracetyl)carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure gelöst. Während mit Eis gekühlt wird, werden 276 mg 2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxy-iminoacetylchloridhydrochlorid zugesetzt. Das Gemisch wird 15 Minuten unter Kühlen mit Eis und 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Anschliessend wird das Reaktions-Çemisch mit 30 ml Wasser verdünnt und zweimal mit je 50 ml Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte werden zusammengegossen, mit 50 ml einer gesättigten wässrigen Natriumchloridlösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Das Äthylacetat wird abdestilliert, wobei 402 fi.g 7-[2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-metho-xyiniiuoj-acetamido-3-(N-chloracetyl)-carbamoyloxy-mcur,,-3-cephem-4-carbonsäurein Form eines viskosen Öls erhalten werden.

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCh): 3.50 ppm (2H, quartet, 2-CH2), 3.99 ppm (3H, singlet, NOCH3), 4.04,4.30 ppm (2Hx2, singlet x 2, CICH2COX2), 5.10 ppm (1H, doublet, 6-H), 5.73 ppm (1H, doublet, 7-H), 7.32 ppm (1H, singlet, Thiazol, 5-H)

2) Die gesamte Menge des vorstehend genannten Produktes wird in 9 ml Tetrahydrofuran gelöst. Zur Lösung werden 168 mg Thioharnstoff und 300 mg Natriumacetattri-hydrat gegeben. Das Gemisch wird 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Fällung wird abfiltriert, mit Äther gewaschen und in 5 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird mit Natriumhydrogencarbonat auf einen pH-Wert von etwa 7 eingestellt und durch Säulenchromatographie am Ionenaustauscherharz «Amberlite XAD-2» gereinigt. Hierbei werden 58 mg Natrium-7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyimi-noacetamido]-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carbo-xylat in Form eines weissen Pulvers erhalten.

Elementaranalyse für Ci5Hi5N607S2Na»3H20

Ber.: C 33.84; H 3.98; N 15.78 Gef.: C 33.94; H 3.82; N 15.42

NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O): 3.47 ppm (2H, quartet, 2-CH2), 3.92 ppm (3H, singlet, =NOCH3), 4.68 ppm (2H, quartet, -CH2OCONH2), 5.27 ppm (1H, doublet, 6-H), 5.72 ppm (1H, doublet, 7-H), 6.95 ppm (1H, singlet, Thiazol 5-H)

Verfahren zur Herstellung von 2-(2-Chloracetamido-thiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetylchlorid

In 5 ml Methylenchlorid werden 278 mg der gemäss Bezugsbeispiel 6 hergestellten 2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoessigsäure suspendiert. Während mit Eis gekühlt wird, werden 208 mg Phosphorpentachlorid zugesetzt. Das Gemisch wird 30 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann mit Petroläther gewaschen. Hierbei werden 276 mg 2-0-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetylchlorid als Pulver erhalten.

Elementaranalyse für CsH7N3SCl2- HCl

Ber.: C 28.89; H 2.42; N 12.63 Gef.: C 28.47; H 2.73; N 12.12

Beispiel 2

1) In 22 ml trockenem Tetrahydrofuran werden 500 mg 2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoes-sigsäure gelöst. Unter Rühren werden 182 mg Triäthylamin zugesetzt. Das Gemisch wird auf — 10°C gekühlt, worauf 245 mg Isobutylchlorformiat zugetropft werden. Das Gemisch wird 2 Stunden bei dieser Temperatur gerührt. Der erhaltenen Lösung des gemischten Säureanhydrids werden 182 mg Triäthylamin zusammen mit einer (eisgekühlten) Lösung von 590 mg 7-Amino-3-(l-methyl-lH-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure in 18 ml 50%igem wässrigem Tetrahydrofuran zugesetzt. Das Gemisch wird unter Kühlen mit Eis eine Stunde und bei Raumtemperatur 2 Stunden gerührt. Anschliessend wird der grösste Teil des Tetrahydrofurans unter vermindertem Druck abdestilliert. Der Rückstand wird mit 100 ml Wasser und 40 ml Äthylacetat verdünnt. Unter Rühren wird die wässrige Schicht mit ln-HCl auf einen pH-Wert von etwa 2 eingestellt. Die Schichten werden getrennt und die wässrige Schicht mit 60 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschichten werden zusammengegossen, mit 50 ml gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen und getrocknet. Das Äthylacetat wird abdestilliert, wobei 700 mg 7-[2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl-2-

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

629499

18

(sy n)-methoxyiminoacetamido]-3-( 1 -methyl-1 H-tetrazol-4-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure in Form eines viskosen Öls erhalten werden.

2) Die gesamte Menge des vorstehend genannten Produkts wird in 15 ml Tetrahydrofuran gelöst, worauf 226 mg Thioharnstoff und 406 mg Natriumacetattrihydrat zugesetzt werden. Das Gemisch wird 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Nach der Reaktion wird die Fällung abfiltriert, mit Äther gewaschen und in 10 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird mit Natriumhydrogencarbonat auf einen pH-Wert von etwa 7,0 eingestellt und durch Säulenchromatographie am Ionenaustauscherharz «Amberlite XAD-2» gereinigt.

Hierbei werden 125 mg Natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)methoxyiminoacetamido]-3-( 1 -methyl-1 H-tetrazol-4-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat in Form eines weissen Pulvers erhalten.

15

Elementaranalyse für

Ber.: C 33.74; Gef.: C 34.18;

H H

3.54; 3.57;

N 22.13 N 21.79

NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O): 3.59 ppm (2H, quartet, 2-CH2), 3.93 ppm (3H, singlet, =NOCH3), 3.98 ppm (3H, singlet, N-CH3), 4.08 ppm (2H, quartet, 3-CH2), 5.12 ppm (1H, doublet, 6-H), 5.72 ppm (1H, doublet, 7-H), 6.93 ppm (1 H, singlet, Thiazol 5-H)

Beispiel 3

1 ) In 15 ml N,N-Dimethylacetamid werden 762 mg 7-Aminocephalosporansäure gelöst. Während mit Eis gekühlt wird, werden 931 mg 2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetylchloridhydrochlorid (hergestellt aus dem syn-Isomeren) zugesetzt. Das Gemisch wird 15 Minuten unter Kühlen mit Eis und 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit 10 ml Wasser verdünnt und mehrmals mit je 100 ml Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte werden zusammengegossen, mit 100 ml gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen und getrocknet. Das Äthylacetat wird abdestilliert, wobei 1,4 g7-[2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyimi-noacetamido]-cephalosporansäure in Form eines Öls erhalten werden.

2) In 30 ml Tetrahydrofuran wird die gesamte Menge des vorstehend genannten Produktes gelöst, worauf 500 mg Thioharnstoff und dann 895 mg Natriumacetattrihydrat zugesetzt werden. Das Gemisch wird 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die hierbei gebildete Fällung wird abfiltriert, mit Äther gewaschen und in 6 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird mit Natriumhydrogencarbonat auf einen pH-Wert von etwa 7,0 eingestellt und durch Säulenchromatographie am Ionenaustauscherharz «Amberlite XAD-2» gereinigt. Hierbei werden 78 mg Natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-cephalosporanat als weisses Pulver erhalten.

Elementaranalyse für Ci6Hi6N5Ö7S2Na'2.5H20

Ber.: C 36.78; Gef.: C 36.93;

H 4.05; H 3.80;

N N

13.40 12.68

NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O): 2.07 ppm (3H, singlet, COCH3), 3.53 ppm (2H, quartet, 2-CH2), 3.98 ppm (3H, singlet, =NOCH3), 4.75 ppm (2H, quartet, 3-CH2), 5.21 ppm (1H, doublet, 6-H), 5.81 (1H, doublet, 7-H), 7.01 ppm (1H, singlet, Thiazol 5-H)

Beispiel 4

Nach derselben Arbeitsweise wie in Beispielen 1 bis 3 beschrieben wurde, wird das Natrium 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-]-3-(2-methyl-1,3,4-oxadiazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat in Form eines weissen Pulvers erhalten.

Elementaranalyse für Ci7Hi6N7S3Na*2H20

Ber.: C 35,85%; Gef.: C 35,73%;

65

H 3,54%; H 3,72%;

N 17,21% N 17,01%

NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O):

8,42 ppm (3H, Singulett, Oxadiazol-2-CH3),

3,55 ppm (2H, Quartett, 2-CH2),

4,02 ppm (3 H, Singulett, =NOCH3),

5,13 ppm (1H, Dublett, 6-H),

5,73 ppm (1 H, Dublett, 7-H),

6,97 ppm (1H, Singulett, Thiazol 5-H).

20

Beispiel 5

1) Zu 10 ml Tetrahydrofuran werden 833 mg 2-(2-Chlora-cetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoessigsäure, 380

25 mg N-Hydroxysuccinimid und 630 mg Dicyclohexylcarbo-diimid gegeben. Das Gemisch wird 45 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Die Fällung wird abfiltriert und das Filtrat auf 5°C gekühlt. Es wird dann zu einer vorher gekühlten Lösung von 650 mg 7-Aminodesacetoxycephalosporansäure 30 und 2 ml Bis(trimethylsilyl)acetamid in Methylenchlorid gegeben. Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur getrocknet, worauf das Lösungsmittel unter vermindertem Druck abdestilliert wird. Dem hierbei erhaltenen Öl werden 50 ml Wasser zusammen mit 50 ml Äthylacetat zugesetzt. Das 35 Gemisch wird mit 1 n-Salzsäure auf einen pH-Wert von etwa 2,5 eingestellt. Die beiden Schichten werden getrennt, worauf zweimal mit je 50 ml Äthylacetat extrahiert wird. Die Äthyla-cetatschichten werden zusammengegossen, mit Wasser gewaschen und getrocknet. Das Äthylacetat wird dann abdestil-40 liert, wobei 1,1 g7-[2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]desacetoxycephalosporansäure in Form eines Öls erhalten werden.

2) Die gesamte Menge des vorstehend genannten Produkts wird in 25 ml Tetrahydrofuran gelöst, worauf Thioharnstoff

45 und dann 632 mg Natriumacetattrihydrat zugesetzt werden. Das Gemisch wird 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Fällung wird abfiltriert, mit Äther gewaschen und in 10 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird mit Natriumhydrogencarbonat auf einen pH-Wert von etwa 7,0 eingestellt und durch 50 Säulenchromatographie am Ionenaustauscherharz «Amberlite XAD-2» gereinigt. Hierbei werden 120 mg Natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-desacetoxycephalosporanat in Form eines weissen Pulvers erhalten.

Elementaranalyse für CwHuNsC^Na- I.5H2O

Ber.: C 37.67; so Gef.: C 37.37;

H 3.84; H 3.98;

N 15.68 N 15.38

NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O): 1.94 ppm (3 H, singlet, 3-CH3), 3.46 ppm (2H, quartet, 2-CH2), 4.00 ppm (3 H, singlet, =NOCH3), 5.17 ppm (1H, doublet, 6-H), 5.76 ppm (1H, doublet, 7-H), 6.99 ppm (1H, singlet, Thiazol 5-H)

Die Mindesthemmkonzentrationen (jig/ml) einiger der gemäss den vorstehenden Beispielen hergestellten Yerbin-• düngen sind nachstehend genannt.

19

629499

Mikroorganismus Verbindung von

Beispiel

13 2 5

E. coli NIHJ

0.10

0.20

0.10

0.78

E. coli 0-111

0.024

0.05

0.024

0.39

E. coli T-7

0.39

0.78

0.78

6.25

K. pneumonia DT

<0.012

0.024

0.024

0.20

K. pneumonia

GN 3835

0.05

0.05

0.20

0.20

Ps. aeruginosa Pd 1

50

25

12.5

>100

Ps. aeruginosa PM 3

3.13

1.56

0.78

25

Ps. aeruginosa P2

25

50

50

>100

Ps. aeruginosa

GN3407

>100

50

50

>100

Serr.marcescens IFO

1.56

3.13

0.78

12.5

12648

Serratia TN 0024

0.20

0.78

0.20

1.56

P. vulgaris IFO 3988 < 0.02

0.024

0.024

0.20

P. vulgaris GN4413

1.56

0.78

0.39

1.56

P. mirabilis GN 4359< 0.02

0.05

0.10

0.10

P. morganii IF03168

0.39

0.20

0.05

12.5

P. rettgeri 8

(TN0336)

£0.012

S).012

<0.012

<N ©

Ö

VII

P. rettgeri 8 GN 4733

0.05

0.20

0.20

0.10

Ent.cloacae TN 128 2

6.25

6.25

1.56

50

Cit. freundii GN 99

0.20

0.20

0.10

3.13

Cit. freundii GN1706

0.39

0.39

0.20

6.25

Acinetobacter

6.25

25

25

12.5

anitratus TN-1140

Die zur Bezeichnung der Mikroorganismen gebrauchten Abkürzungen haben die folgenden Bedeutungen: E: Escherichia, K: Klebsiella, Ps: Pseudomonas, Serr: Serratia, P: Proteus, Ent: Enterobacter, Cit: Citrobacter

Beispiel 6

1) In 20 ml trockenem Tetrahydrofuran werden 500 mg 2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoes-sigsäure gelöst. Während gerührt wird, werden 182 mg Triäthylamin zugesetzt. Das Gemisch wird auf — 10°C gekühlt, worauf 245 mg Isobutylchlorformiat tropfenweise zugesetzt werden. Das Gemisch wird bei dieser Temperatur 2 Stunden gerührt. Der erhaltenen gemischten Säureanhydridlösung wird eine eisgekühlte Lösung von 180 mg Triäthylamin und 492 mg 7-Amino-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-car-bonsäure in 50%igem wässrigem Tetrahydrofuran zugesetzt. Das Gemisch wird eine Stunde unter Kühlen mit Eis und dann 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Der grösste Teil des Tetrahydrofurans wird unter vermindertem Druck abdestilliert. Dem Rückstand werden 100 ml Wasser und 40 ml Äthylacetat zugesetzt. Das Gemisch wird mit ln-Salzsäure auf einen pH-Wert von etwa 2 eingestellt. Die beiden Schichten werden getrennt. Die wässrige Schicht wird zweimal mit je 50 ml Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetat-schichten werden zusammengegossen, mit Wasser gewaschen, getrocknet und eingeengt. Hierbei werden 650 mg 7-[2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoaceta-mido]-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carbonsäurein Form eines Öls erhalten.

2) Die gesamte Menge des vorstehend genannten Produkts wird in 15 ml Tetrahydrofuran gelöst, worauf 226 mg Thioharnstoff und 406 mg Natriumacetattrihydrat zugesetzt werden. Das Gemisch wird 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Fällung wird abfiltriert, in 10 ml Wasser gelöst, mit Natriumhydrogencarbonat auf einen pH-Wert von etwa 7 eingestellt und durch Säulenchromatographie am Ionenaustauscherharz «Amberlite XAD-2» gereinigt. Hierbei werden 120 mg Natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-metho-xyiminoacetamido]-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-car-boxylat in Form eines weissen Pulvers erhalten. Im NMR-Spektrum und in den anderen Eigenschaften erweist sich dieses Produkt als identisch mit dem gemäss Beispiel 1 hergestellten Produkt.

Beispiel 7

1) In 45 ml trockenem Tetrahydrofuran werden 1,11g 2-(2-ChIoracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyimino-essigsäure gelöst. Unter Rühren werden 815 mg Tri-n-butyl-amin zugesetzt. Das Gemisch wird auf - 10°C gekühlt, worauf 544 mg Isobutylchlorformiat tropfenweise zugesetzt werden. Das Gemisch wird 2 Stunden bei — 10°C gerührt, worauf eine kalte Lösung von 741 mg Tri-n-butylamin und

1,4 g 7-Amino-3-(N-chIoracetyl)carbamoyl-oxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure in 40 ml 50%igem wässrigem Tetrahydrofuran zugesetzt wird. Das Gemisch wird 1 Stunde unter Kühlen mit Eis und 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Der grösste Teil des Tetrahydrofurans wird unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand mit 25 ml Wasser verdünnt und mit 40 ml Äthylacetat gewaschen. Die wässrige Schicht wird abgetrennt, mit 50 ml Äthylacetat versetzt und in ln-Salzsäure auf einen pH-Wert von etwa 2,5 eingestellt. Das Gemisch wird in zwei Schichten getrennt. Die wässrige Schicht wird dann zweimal mit je 50 ml Äthylacetat extrahiert. Die Extrakte werden vereinigt, mit 100 ml gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen,

getrocknet und abschliessend eingeengt. Hierbei wird 1 g 7-[2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyimino-acetamido]-3-(N-chloracetyl)carbamoyloxy-methyl-3-cephem-4-carbonsäure in Form eines Öls erhalten.

2) Die gesamte Menge des vorstehend genannten Produkts wird in 22 ml Tetrahydrofuran gelöst. Dann werden 499 mg Thioharnstoff und anschliessend 892 mg Natriumacetattrihydrat zugesetzt. Das Gemisch wird 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Fällung wird abfiltriert, mit Äther gewaschen und in 10 ml Wasser gelöst. Die Lösung wird mit Natriumhydrogencarbonat auf einen pH-Wert von etwa 7 eingestellt und durch Säulenchromatographie am Ionenaustauscherharz «Amberlite XAD-2» gereinigt. Hierbei werden 153 mg Natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyimi-noacetamido]-3-carbamoyloxy-methyl-3-cephem-4-carbo-xylat in Form eines weissen Pulvers erhalten. Das NMR-Spektrum und andere Kennzahlen ergeben, dass dieses Produkt mit der gemäss Beispiel 1 hergestellten Verbindung identisch ist.

Beispiel 8

In 20 ml Tetrahydrofuran werden 277 mg 2-(2-Chloraceta-midothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoessigsäure und 270 mg t-Butyl-7-aminodesacetoxycephalosporansäure gelöst. Zur Lösung werden 206 mg Dicyclohexylcarbodiimid gegeben. Das Gemisch wird 6 Stunden der Reaktion bei Raumtemperatur unter Rühren überlassen. Das ausgefällte Harnstoffderivat wird abfiltriert und das Filtrat in 50 ml Wasser gegossen und mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschicht wird mit 0,5 n-Salzsäure, Wasser und gesättigter wässriger Natriumchloridlösung in dieser Reihenfolge gewaschen, getrocknet und abschliessend eingeengt. Hierbei werden 320 mg t-Butyl-7-[2-(2-chlororacetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-desacetoxycephalospo-ranat in Form eines Öls erhalten.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

629499

20

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCh): 1.53 ppm (9H, singlet, t-C4H9), 2.13 ppm (3H, singlet, 3-CH3), 3.39 ppm (2H, quartet, 2-CH2), 4.06 ppm (3H, singlet, =NOCH3), 4.29 ppm (2H, singlet, CICH2CO). 5.06 ppm (1H, doublet, 6-H), 5.86 ppm (1H, doublet von doublet, 7-H), 7.20 ppm (1H, singlet, Thiazol 5-H), 8.14 ppm (1H, doublet, 7-CONH)

2) Die gesamte Menge des vorstehend genannten Produkts wird in 12 ml Tetrahydrofuran gelöst. Zur Lösung werden 100 mg Thioharnstoff und 200 mg Natriumacetattrihydrat gegeben. Das Gemisch wird 8 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit 30 ml Wasser verdünnt und mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschicht wird mit Wasser gewaschen, getrocknet und eingeengt. Das hierbei erhaltene Öl wird durch Chromatographie an Kieselgel gereinigt. Hierbei werden 128 mg t-Butyl-7-[2-(2-ami-nothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-desaceto-xycephalosporanat in Form eines Pulvers erhalten. NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCh): 1.52 ppm (9H, singlet, t-C4H9), 2.10 ppm (3H, singlet, 3-CH3), 3.40 ppm (2H, quartet, 2-CH2), 4.00 ppm (3H, singlet, =NOCH3), 5.05 ppm (1H, doublet, 6-H), 5.98 ppm (1H, doublet of doublet, 7-H), 6.66 ppm (1H, singlet, Thiazol 5-H), 828 ppm (1H, doublet, 7-CONH)

3) Die gesamte Menge des vorstehend genannten Produkts wird in einem Gemisch von 1 ml Trifluoressigsäure und 0,1 ml Anisol gelöst. Die Lösung wird 1,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, worauf Äther zugesetzt wird. Die hierbei gebildete Fällung wird abfiltriert und mit Äther gewaschen. Hierbei werden 70 mg 7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-desacetoxycephalosporansäuretri-fluoracetat in Form eines Pulvers erhalten.

Im NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O einschliesslich NaHCOs) ist dieses Produkt mit dem gemäss Beispiel 2 hergestellten Produkt identisch.

Beispiel 9

Durch Acetylierung der 7-Aminogruppe der entsprechenden Cephalosporinverbindungen auf die in Beispiel 2 beschriebene Weise werden die folgenden Verbindungen hergestellt:

a) Natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)methoxy-iminoacetamido)-3-(2-methyl-1,3,4-thiadiazol-5-yl)-thio-methyl-3-cephem-4-carboxylat

NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O): 2.57 ppm (3H, singlet, Thiazol 2-CH3), 3.52 ppm (2H, quartet, 2-CH2), 3.95 ppm !3H. singlet, =NOCHs), 5.18 ppm (1H, singlet, 6-H), 5.73 ppm Ç1H, singlet, 6-H), 5.73 ppm (1H, singlet, 7-H), 6.95 ppm * 1H, singlet, Thiazol 5-H)

b) Dinatrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-metho-:yirninoacetamido]-3-(2-carboxymethyl-1,3,4-thiadiazol-5-yl)thiomethyI-3-cephem-4-carboxylat NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O): 3.56 ppm (2H, quartet, 2-CH2), 3.96 ppm (3H, singlet, =NGCH3), 4.18 ppm (2H, singlet, CH:COONa), 5.20 ppm (1H, doublet, 6-H) 5.74 ppm ( 1H, doublet, 7-H), 6.97 ppm ( 1H, singlet, Thiazol 5-H)

c) Natrium-7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxy iminoacetamido]-3-(l,2,3-triazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat

NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O): 3.57 ppm (2H, quartet, 2-CE:;, 3.94 ppm (3H, singlet, =NOCH3), 5.21 ppm (1H, Joüb, 6-H», 5.72 ppm (1H, doublet, 7-H), 6.94 ppm (1H,

"ins--: -. Thiazol 5-H), 7.95 ppm (1H, singlet, Triazol 4-H)

d) Dinatrium-7-[2-t2-am!fiothiazoI-4-yl)-2-(syn)-methoxy-

iminoacetamido]-3-(l-carboxymethyl-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)-

thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat

NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O): 3.55 ppm (2H, quartet,

2-CH2), 3.96 ppm (3H, singlet, =NOCH3), 4.72 ppm (2H,

singlet, -N-CH2COONa), 5.18 ppm (1H, doublet, 6-H), 5.72

ppm (1H, doublet, 7-H), 6.95 ppm (1H, singlet, Thiazol 5-H)

e) 7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoaceta-mido]-3-[l-(2-N,N-dimethylaminoäthyl)-l,2,3,4-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäurebetain

NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O): 3.01 ppm (6H, singlet,

3

—N )

^^CH3

3.50 ppm (2H, quartet, 2-CH2), 3.98 ppm (3H, singlet, = NOCH3), 5.18 ppm ( 1H, doublet, 6-H), 5.74 ppm ( 1H, doublet, 7-H), 6.96 ppm (1H, singlet, Thiazol 5-H)

f) Natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxy-iminoacetamido]-3-(6-methyl-1 -oxopyridazin-3-yl)-thio-methyl-3-cephem-4-carboxylat

NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O):

2,60 ppm (3H, Singulett, Pyridazin 6-CH3),

3,52 (2H, Quartett, 2-CH2),

3,98 ppm (3H, Singulett, =NOCH3),

5,21 ppm (1H, Dublett, 6-H)

5,76 ppm (1H, Dublett, 7-H)

6,95 ppm (1H, Singulett, Thiazol 5-H).

(g) Natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxy-iminoacetamido]-3-(2-methyl-l,3,4-oxadiazol-5-yl)thio-methyl-3-cephem-4-carboxylat, weisses Pulver.

Elementaranalyse für Ci7Hi6N706S3Na- 2H2O

Ber.: C 35.85%; H 3,54%; N 17,21%;

40 Gef: C 35,73%; H 3,72%; N 17,01%.

NMR-Spektrum (60 MHz, in D2O):

8,42 ppm (3H, Singulett, Oxadiazol-2-CH3),

3,55 ppm (2H, Quartett, 2-CH2),

4s 4,02 ppm (3H, Singulett, =NOCH3),

5,13 ppm (1H, Dublett, 6-H),

5,73 ppm (1H, Dublett, 7-H),

6,97 ppm (1H, Singulett, Thiazol-5-H). Die Mindesthemmkonzentration (ug/ml) einiger der in der 50 beschriebenen Weise hergestellten Verbindungen ist nachstehend genannt.

10

15

20

25

30

35

60

Microorganismus

Verbindung (a)

(e)

E. coli NIHJ

0.20

0.20

E. coli 0-111

0.10

0.024

E. coli T-7

1.56

1.56

K. pneumoniae DT

0.05

0.10

K. preumoniae GN 3835

0.39

0.20

Serr. marcescens IFO 12648

0.78

1.56

Serratia TN 0024

0.78

0.78

P. vulgaris IFO 3988

0.10

0.20

P. vulgaris GN 4413

1.56

1.56

P. mirabilis GN 4359

0.20

0.39

P. morganii IFO 3 Î 68

0.10

0.20

P. rettgeri S(TNO 336)

<0.012

0.024

21

629499

Microorganismus

Verbindung (a)

(e)

P. rettgeri GN 4733

0.39

0.78

Ent. cloacae IFO 12937

3.13

6.25

Cit. freundii GN 99

0.20

0.20

Cit. freundii GN 1706

0.78

0.78

g) durch Chromatographie an Kieselgel gereinigt. Hierbei wird 1 g Pivaloyloxymethyl-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-desacetoxycephalosporanat in Form eines weissen Pulvers erhalten.

Elementaranalyse für C20H25N5O7S2

Beispiel 10 1«

1) Zu einer Suspension von 5,54 g 2-(2-Chloracetamido-thiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoessigsäure in 70 ml Methylenchlorid werden 2,42 g Triäthylamin gegeben, wobei eine Lösung gebildet wird. Während mit Eis gekühlt und gerührt wird, werden 4,16 g Phosphorpentachlorid auf einmal der 15 Lösung zugesetzt. Nach 5 Minuten wird das Eisbad entfernt und das Gemisch 20 Minuten bei Raumtemperatur gerührt, worauf es unter vermindertem Druck eingeengt wird. Dem Rückstand werden 150 ml Hexan zugesetzt, worauf zweimal dekantiert wird. Nach Zugabe von 90 ml wasserfreiem Tetra- 20 hydrofuran wird das ausgefällte Triäthylaminhydrochlorid abfiltriert, worauf eine Lösung von 2-(2-Chloracetamido-thiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetylchlorid in Tetrahydrofuran erhalten wird. Zu einer Suspension von 4,28 g 7-Aminodesacetoxycephalosporansäure (7-ADCA) in einem 25 Gemisch von 50 ml Wasser und 50 ml Tetrahydrofuran werden unter Kühlen mit Eis 4,44 g Triäthylamin zugegeben, wobei eine homogene Lösung gebildet wird. Während mit Eis gekühlt wird, wird die in der oben beschriebenen Weise hergestellte Säurechloridlösung tropfenweise dieser Lösung 30 innerhalb von 15 Minuten zugesetzt. Das Gemisch wird 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, worauf eine gesättigte wässrige Natriumchloridlösung zugesetzt wird. Das Gemisch wird mit verdünnter Salzsäure auf einen pH-Wert von etwa 2 eingestellt und mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetat- 35 schicht wird mit gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt, wobei 8 g eines gelblich weissen Pulvers erhalten werden. Das Pulver wird mit 50 ml Methanol gewaschen. Die unlöslichen Bestandteile werden abfiltriert. Hierbei werden 4,6 g 40 7-[2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]desacetoxycephaIosporansäure als weisses Pulver erhalten.

NMR-Spektrum (60 MHz, in dô-DMSO): 2.04 ppm (3H,

singlet, 3-CH3), 3.50 ppm (2H, breit singlet, 2-CH2), 3.92 ppm 45 (3H, singlet, OCH3), 4.40 ppm (2H, singlet, CICH2CO), 5.18 ppm (1H, doublet, 6-H), 5.78 ppm (1H, doubIetx2,7-H), 7.50 ppm (1H, singlet, Thiazol 5-H).

2) Das vorstehend genannte Produkt wird auf die in Beispiel 5(2) beschriebene Weise umgesetzt und aufgearbeitet, 50 wobei 7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyimino-acetamido]desacetoxycephalosporanat in Form eines weissen Pulvers erhalten wird. Im NMR-Spektrum und in den übrigen Eigenschaften ist dieses Produkt mit dem gemäss Beispiel 5 hergestellten Produkt identisch. 55

Beispiel 11

In 25 ml Dimethylformamid wird Natrium-7-[2-(2-Ami-nothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-desaceto-xycephalosporanat gelöst. Während mit Eis gekühlt wird, 60 werden 3,75 g Jodmethylpivalat mit 3 ml Dimethylformamid zugesetzt. Nach 17 Minuten werden 100 ml Äthylacetat dem Reaktionsgemisch zugesetzt, worauf die ungelösten Bestandteile abfiltriert werden. Das Filtrat wird mit Wasser, einer 5"'«igen wässrigen Natriumhydrogencarbonatlösung und 65 gesätn.eter wässriger Natriumchloridlösung in dieser Reihenfolge ^waschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Äthyificetat wird dann abdestilliert und das erhaltene Öl (2,4

Ber.: C 46.95; Gef.: C 46.92;

H 4.92; H 4.88;

N 13.69 N 13.13

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCh): 1.24 ppm (9H, singlet, -C(CH3)3), 2.16 ppm, 3.44 ppm (2H, doublet, 2-CH2), 4.10 ppm (3H, singlet, OCH3), 5.16 ppm (1H, doublet, 6-H), 5.94 ppm (2H, singlet, -OCH2O), 6.86 ppm (1 H, singlet, Thiazol, 5-H)

Beispiel 12

0,7 g der gemäss Beispiel 10(1) erhaltenen 7-[2-(2-Chlora-cetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-desacetoxycephalosporansäure werden in einer eisgekühlten Lösung von 149 mg Triäthylamin in 7 ml Dimethylformamid gelöst. Nach Zugabe von 715 mg Jodmethylpivalat wird das Gemisch 15 Minuten gerührt. Diesem Reaktionsgemisch werden 40 ml Äthylacetat zugesetzt, worauf das Gemisch mit Wasser, 5%iger wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung und gesättigter wässriger Natriumchloridlösung in dieser Reihenfolge gewaschen und dann über Magnesiumsulfat getrocknet wird. Das Äthylacetat wird abdestilliert, wobei 0,8 g rohes Pivaloyloxymethyl-7-[2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]desacetoxycephalospo-ranat in Form eines braunen Öls erhalten wird.

Dieses Produkt wird in 3 ml Dimethylacetamid gelöst, worauf 206 mg Thioharnstoff zugesetzt werden. Das Gemisch wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt.

Nach Zugabe von 40 ml Äthylacetat wird das Gemisch zweimal mit je 30 ml gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Äthylacetat wird abdestilliert und das hierbei erhaltene braune Öl (0,4 g) durch Chromatographie an Kieselgel gereinigt. Hierbei werden 0,2 g Pivaloyloxymethyl-7-[2-(2-amino-thiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]desacetoxyce-phalosporanat in Form eines weissen Pulvers erhalten.

Im NMR-Spektrum und in den übrigen Eigenschaften ist dieses Produkt mit dem gemäss Beispiel 11 hergestellten Produkt identisch.

Beispiel 13

Zu einer Suspension von 831 mg 2-(Chloracetamido-thiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoessigsäure in 10 ml Methylenchlorid werden 360 mg Triäthylamin und 624 mg Phosphorpentachlorid gegeben. Das Gemisch wird 20 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann mit 100 ml Hexan versetzt. Das hierbei abgeschiedene Öl wird durch Dekantieren des Hexans isoliert und in 15 ml Tetrahydrofuran gelöst, wobei eine Lösung von 2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetylchlorid erhalten wird.

984 mg 7-Amino-3-(l-methyl-lH-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure und 660 mg Triäthylamin werden in 15 ml 50%igem wässrigem Tetrahydrofuran gelöst. Während mit Eis gekühlt wird, wird dieser Lösung die zuerst hergestellte Säurechloridlösung tropfenweise zugesetzt. Das Gemisch wird 2 Stunden unter Kühlen mit Eis gerührt, worauf das Reaktionsgemisch mit Wasser verdünnt, mit verdünnter Salzsäure auf einen pH-Wert von etwa 2 eingestellt und mit Äthylacetat extrahiert wird. Die Äthylacetatschicht wird mit gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Äthylacetat wird abdestilliert und der Rückstand mit Äther behan

629499

22

delt. Die hierbei erhaltenen Kristalle werden abfiltriert. Hierbei werden 1,3 g7-[2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-3-(l-methyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiomethyl-4-carbonsäure erhalten.

Dieses Produkt ist mit dem im ersten Teil des in Beispiel 2 beschriebenen Verfahrens erhaltenen Zwischenprodukt identisch. 5,8 g des in der vorstehend beschriebenen Weise erhaltenen Produkts werden in 20 ml Dimethylacetamid gelöst. Während mit Eis gekühlt wird, werden 1,53 g Thioharnstoff zugesetzt. Das Gemisch wird 15 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Reaktionsgemisch wird mit 200 ml Eiswasser versetzt und mit Natriumhydrogencarbonat auf pH 3,5 eingestellt. Die hierbei gebildete Fällung wird abfiltriert und in 10%iger wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung gelöst. Die Lösung wird dann durch eine mit dem Ionenaustauscherharz «Amberlite XAD-2» gefüllte Säule geleitet. Durch diese Reinigung werden 1,58 g Natrium-7-[2-(2-ami-nothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-3-(l-methyl-1 H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat in Form eines weissen Pulvers erhalten.

Im NMR-Spektrum und in den übrigen Eigenschaften ist dieses Produkt mit dem gemäss Beispiel 2 hergestellten Produkt identisch.

Beispiel 14

In 10 ml Dimethylformamid wird 1 g Natrium-7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-3-(l-methyl-1 H-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat gelöst. Während mit Eis gekühlt und gerührt wird, werden 0,85 g Jodmethylpivalat zugesetzt. Das Gemisch wird 15 Minuten gerührt. Nach Zugabe von 40 ml Äthylacetat wird das Reaktionsgemisch mit Wasser, 5%iger wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung und gesättigter wässriger Natriumchloridlösung in dieser Reihenfolge gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Äthylacetat wird unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand in einer geringen Menge Äthylacetat gelöst und filtriert. Das Filtrat wird mit Äther versetzt, worauf gekühlt wird. Die hierbei gebildete Fällung wird abfiltriert. Hierbei werden 0,4 g Piva-loyloxymethyl-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyi-minoacetamido]-3-(l -methyl-1 H-tetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat in Form eines weissen Pulvers erhalten.

Elementaranalyse für C22H27N9O7S3

Ber.: C 42.27; Gef.: C 42.29;

H 4.34 H 4.40

NMR-Spektrum (60 MHz, in CDCb): 1.22 ppm (9H, singlet, -C(CH3)3), 3.80 ppm (2H, breites Singlett, 2-CH2), 3.94,4.06 ppm (3Hx2, singletx2, N-CH3 & OCH3), 5.94 ppm (2H, singlet, -OCH2O), 5.12 ppm (1H, doublet, 6-H), 6.06 ppm (1H, doublet x 2,7-H), 4.44 ppm (2H, doublet, 2-CH2), 6.81 ppm (1H, singlet, Thiazol 5-H)

Beispiel 15

In 20 ml Methylenchlorid werden 2,776 g 2-(2-Chloraceta-midothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoessigsäure und 1,2 g Triäthylamin gelöst. Zur Lösung werden 2,08 g Phosphor-pentachlorid gegeben. Das Gemisch wird 20 Min. bei Raumtemperatur gerührt und dann mit 150 ml Hexan versetzt. Die hierbei gebildete ölige Fällung wird abgetrennt und in 20 ml Tetrahydrofuran gelöst, wobei eine Lösung von 2-(2-Chlora-cetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetyichlorid gebildet wird. Getrennt hiervon werden 3,143 g 7-Amino-3-acetylacetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure und 2,20 g Triäthylamin in 50 ml 50%igem wässrigem Tetrahydrofuran gelöst. Dieser Lösung wird tropfenweise unter Kühlen mit

Eis und Rühren die vorher hergestellte Säurechloridlösung zugesetzt. Das Gemisch wird 2 Stunden gerührt, während mit Eis gekühlt wird, worauf Wasser zugesetzt wird. Das Gemisch wird mit verdünnter Salzsäure auf pH 2 eingestellt 5 und mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschicht wird mit gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen und über Magnesiumsulfat getrocknet. Das Äthylacetat wird abdestilliert und der Rückstand mit Äther versetzt. Das hierbei gebildete kristalline Produkt wird abfiltriert. Hierbei

10 werden 4,168 g 7-[2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-3-acetylacetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure erhalten.

NMR-Spektrum (60 MHz, in dô-DMSO): 2.14 ppm (3 H, singlet,

15 -C-CH3) 3.60 ppm (4H, breit, singlet, -C-CH2-C-&

II II II

O OO

2-CH2)

20 3.86 ppm (3H, singlet, OCH3), 4.34 ppm (2H, singlet, CICH2CO), 4.91 ppm (2H, quartet, 3-CH2), 5.13 ppm (1H, doublet, 6-H), 5.80 ppm (1H, doubletx2,7-H), 7.40 ppm (1H, singlet, Thiazol 5-H)

25

Beispiel 16

In 20 ml Dimethylacetamid werden 4,00 g der gemäss Beispiel 15 hergestellten 7-[2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-3-acetylacetoxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure gelöst. Zur Lösung werden 1,06 g 30 Thioharnstoff gegeben. Das Gemisch wird 17 Stunden bei Raumtemperatur gerührt und dann mit 100 ml Äther versetzt. Die ölige Fällung wird abgetrennt und in 5%iger wässriger Natriumhydrogencarbonatlösung gelöst. Die Lösung wird gefriergetrocknet und das hierbei erhaltene pulverförmige 3S Produkt zu 50 ml Methanol gegeben. Die unlöslichen

Bestandteile werden abfiltriert, und das Filtrat wird zu 300 ml Äther gegeben. Die Fällung wird abfiltriert. Hierbei werden 3,150 g Natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-metho-xyiminoacetamido]-3-acetylacetoxymethyl-3-cephem-4-car-40 boxylat erhalten.

In 10 ml Wasser werden 933 mg des vorstehend genannten Produkts, 350 mg l-(2-N,N-Dimethylaminoäthyl)-lH-tetrazol-5-thiol und 168 mg Natriumhydrogencarbonat gelöst. Das Gemisch wird 1 Std. bei 55°C gerührt. Das Reak-45 tionsgemisch wird dann zur Reinigung unmittelbar durch eine mit dem Ionenaustauscherharz «Amberlite XAD-2» gefüllte Säule geleitet. Hierbei werden 170 mg Natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxy-iminoacetamido]-3-[l-(2-N,N-dimethylaminoäthyl)-lH-tetrazol-5-yl]thiomethyl-s0 3-cephem-4-carboxylat in Form eines weissen Pulvers erhalten. Im NMR-Spektrum und in den übrigen Eigenschaften ist dieses Produkt mit dem gemäss Beispiel 9 erhaltenen Produkt identisch.

Die folgende Tabelle veranschaulicht die Schutzwirkung s5 (EDso*, mg/kg) der gemäss dem vorstehenden Beispiel hergestellten Verbindungen auf infizierte Mäuse.

60

65

Verbindung gemäss Verabreichung Beispiel

ED50*

(mg/kg)

1

subkutan

0.015

(CER-.1.25)

2

subkutan

0.022

(CER:1.25)

3

subkutan

0.018

(CER:1.25)

5

subkutan

0.111

(CER:1.25)

14

oral

0.11

(CEX:2.51)

16

oral

0.27

(CEX:2.51)

*Versuchstiere: männliche Mäuse (ICR/SLC)

23

629 499

5 Mäuse pro Gruppe pro einzelne Dosis

Infektion: intraperitoneal mit E. coli 0-111 Beobachtungszeit: 7 Tage ( ); Kontrolle CER = Cephaloridin

ol choc0nh -,—^'s\j

C00 '

gh~nx

10

0

CEX = Cephalexin o-':" xrl)

im2 o '

- ch-

cooh

20

Beispiel 17

1) Zu einer Suspension von 55,6 g 2-(2-Chloracetamido-thiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoessigsäure in 600 ml Methylenchlorid werden 24,3 Triäthylamin gegeben, wobei eine Lösung gebildet wird. Während mit Eis gekühlt und gerührt wird, werden 41,8 g Phosphorpentachlorid in 2 Portionen der Lösung zugesetzt. Nach 5 Minuten wird das Eisbad entfernt und das Gemisch 20 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann unter vermindertem Druck eingeengt. Dem Rückstand wird 11 Hexan zugesetzt, worauf zweimal dekantiert wird. Nach Zugabe von 600 ml wasserfreiem Tetrahydrofuran wird das ausgefällte Triäthylaminhydrochlorid abfiltriert, wobei eine Lösung von 2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxy-iminoacetylchlorid in Tetrahydrofuran erhalten wird.

Getrennt hiervon werden zu einer Suspension von 54;7 g 7-Amino-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure in einem Gemisch von 400 ml Wasser und 400 ml Tetrahydrofuran 61 g Triäthylamin unter Kühlen mit Eis gegeben, wobei eine homogene Lösung gebildet wird. Unter Kühlen

25

30

r2nh

Y

n-

c-conh tl

W

0

"och-,

mit Eis wird zu dieser Lösung die vorher hergestellte Säurechloridlösung tropfenweise innerhalb von 30 Minuten gegeben. Das Gemisch wird 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, worauf eine gesättigte wässrige Natriumchloridlösung zugesetzt wird. Das Gemisch wird mit verdünnter Salzsäure auf einen pH-Wert von etwa 2 eingestellt und mit Äthylacetat extrahiert. Die Äthylacetatschicht wird mit gesättigter wässriger Natriumchloridlösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt, wobei 97,3 g 7-[2-(2-Chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoaceta-mido]-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carbonsäure erhalten werden. Im NMR-Spektrum und in den übrigen Eigenschaften ist dieses Produkt mit dem gemäss Beispiel 6(1) hergestellten Produkt identisch.

NMR-Spektrum (60 MHz, in dô-DMSO): 3.56 ppm (2H, breit singlet, 2-CH2), 3.93 ppm (3H, singlet, OCH3), 4.35 ppm (2H, singlet, CICH2CO), 4.78 ppm (2H, quartet, 3-CH2), 5.19 ppm (1H, doublet, 6-H), 5.84 ppm (1H, doubletx2,7-H), 6.56 ppm (2H, singlet, OCONH2), 7.46 ppm (1H, singlet, Thiazol 5-H)

2) 97,3 g des gemäss Abschnitt (1) hergestellten Produkts werden in 500 ml N,N-Dimethylacetamid gelöst. Während mit Eis gekühlt wird, werden der Lösung 31,2g Thioharnstoff zugesetzt. Das Gemisch wird 15 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Dem Reaktionsgemisch werden 21 Äther zugesetzt, worauf das ölige Produkt abgetrennt wird. Eine Suspension dieses öligen Produktes in 300 ml Wasser wird mit Natriumhydrogencarbonat auf pH 7 eingestellt. Die so erhaltene Lösung wird durch eine mit dem Ionenaustauscherharz «Amberlite XAD-2» gefüllte Säule geleitet. Durch diese Reinigung werden 20,2 g Natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-3-carbamoyloxy-methyl-3-cephem-4-carboxylat in Form eines weissen Pulvers erhalten. Im NMR-Spektrum und in den übrigen Eigenschaften ist dieses Produkt mit dem gemäss Beispiel 1 oder 6 hergestellen Produkt identisch.

Die Strukturen und Kennzahlen (IR-Spektrum) der nach den vorstehend beschriebenen Verfahren gemäss der Erfindung hergestellten Verbindungen (Nr. 1 bis 33) sind in der folgenden Tabelle genannt. In dieser Tabelle bedeutet das IR-Spektrum (cm-1, KBr) die der ß-Lactamkomponente zuzuschreibende charakteristische Absorptionsbande.

GH2R5

coom

Verbindung Nr.R2

R3

M

IR

(cm-1, KBr)

H

H

H

N II

-6-V

n— h h

ïi - ÌÌ

-sAu-JLch,

Na

Na

Na

1760

1763

1758

3

cil

Nr.

4

5

6

7

8

9

10

11

12

13

14

15

16

1 *7

24

H

H

R.3

H r

■b4 J

m cil

11

.CH,

■s

ä-OL.

cil

M

Na

Na

IR (cm », KBr)

1760

1763

H

n - w

— ca,. ji-NH,

Na

1765

H

H

H

H H

H

H

n -• b

-s4gj- m-icoccHj n - n -s ch2conh2

n - n

-sÀrN

CH2C0NH2

-OH

n - n

-s-^l q JLch N(CH3

cil 5

\\

-N N com,

Na

Na

Na

Na Na

1760

1765

1768

1760 1765

1765

1765

H

H

H

H

n - n i -IL SCH^COONa u

JvJ V/ Ilp\.

n - n II

S —iL HT M

N-

CH2C0CNa n - n Il 11

-s-VN

CHpSO^Na

Na

Na

-OCOCH3

Na CH3

I

-CH2OCOC-CH3

I

CH3

1768

1765

1765

1760

25

629499

Verbindung Nr.R2

18

H

R.3

-OCONHz

M

CHB

I

-CH2OCOC-CH3

CH3

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1763

19

20

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H

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CH3

1760

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24

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27

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CH3

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H

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1763

1763

1765

1768

1765

1760

1763

629499

26

Verbindung Nr. R2

R.3

M

IR

(cm1, KBr)

29

H

-OCONH2

0.

1763

30

H

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1765

31

H

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1763

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1768

B

Claims (15)

1. 629499

   PATENTANSPRÜCHE

   1. Verfahren zur Herstellung von 7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]cephalosporinderivaten der Formel:

   s (i m li- c-comh -,—

   1 ^n^-ch2e5

   xoch^ ccoh worin R3 Wasserstoff oder den Rest einer nucleophilen Verbindung und R2NH eine gegebenenfalls geschützte Amino-gruppe ist, und ihrer pharmazeutisch unbedenklichen Salze, dadurch gekennzeichnet, dass man ein 7-Aminocephalospo-rinderivat der Formel:

   cooh worin R3 die vorstehend genannte Bedeutung hat, mit einer Verbindung der Formel rjnh

   2 " ii (iii)

   n ll c-cooh i!

   N

   nüch2

   7

   worin R2NH die oben genannte Bedeutung hat, acyliert.
2. 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man eine erhaltene Verbindung, in welcher R2NH eine geschützte Aminogruppe darstellt, durch Abspaltung der Schutzgruppe in die entsprechende freie Aminoverbindung überführt.
3. 3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass man die erhaltene Carbonsäure durch Umsetzung mit einer pharmazeutisch unbedenklichen Base in ein entsprechendes Salz überführt.
4. 4. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man Verbindungen der obigen Formel herstellt, in welcher R2 eine Monohalogenacetylgruppe ist.
5. 5. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass man Verbindungen der obigen Formel herstellt, in welcher der durch R3 dargestellte Rest Wasserstoff, Hydroxyl, Mercapto, ein von einer gegebenenfalls substituierten niederen aliphatischen Carbonsäure mit 2 bis 4

   C-Atomen abgeleiteter Acyloxyrest, ein von einer gegebenenfalls substituierten aromatischen Carbonsäure abgeleiteter Acyloxyrest, Carbamoyloxy, Cyano, Azido, Amino, Carba-moylthio, Thiocarbamoyloxy, Carbamoyloxy, dessen Aminogruppe geschützt ist, Phenylglycyloxy, eine quaternäre Ammoniumgruppe oder eine heterocyclische Thiogruppe, deren heterocyclische Gruppe unsubstituiert oder substituiert ist, ist.
6. 6. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass man Verbindungen der obigen Formel herstellt, in welcher R3 Carbamoyloxy, ein von einer niederen aliphatischen Carbonsäure mit 2 bis 4 C-Atomen abgeleiteter Acyloxyrest oder eine heterocyclische Thiogruppe ist, deren heterocyclische Gruppe unsubstituiert oder substituiert ist.
7. 7. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass die heterocyclische Gruppe eine 5- oder 6-gliedrige Gruppe mit 1 bis 4 Heteroatomen aus der aus Sauerstoff-, Schwefel- und Stickstoffatomen bestehenden Gruppe ist, wobei das Stickstoffatom bzw. die Stickstoffatome in Oxydform vorliegen können.
8. 8. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass als heterocylische Gruppe Pyridyl, N-Oxopyridyl, Pyri-midyl, Pyridazinyl, N-Oxopyridazinyl, Pyrazolyl, Diazolyl, Thiazolyl, Thiadiazolyl, Oxadiazolyl, Triazolyl oder Tetra-zolyl enthalten ist.
9. 9. Verfahren nach Anspruch 8, dadurch gekennzeichnet, dass die Thiadiazolylgrappe 1,2,3-Thiadiazolyl, 1,2,4-Thia-diazolyl, 1,3,4-Thiadiazolyl oder 1,2,5-Thiadiazolyl ist, die Oxadiazolylgruppe 1,2,3-Oxadiazolyl, 1,2,4-Oxadiazolyl, 1,3,4-Oxadiazolyl oder 1,2,5-Oxadiazolyl ist, die Triazolyl-gruppe 1,2,3-Triazolyl oder 1,2,4-Triazolyl ist und die Tetra-zolylgruppe lH-Tetrazolyl oder 2H-Tetrazolyl ist.
10. 10. Verfahren nach Anspruch 7, dadurch gekennzeichnet, dass die heterocyclische Gruppe 1,3,4-Thiadiazolyl, 1,3,4-Oxadiazolyl, 1,2,3-Triazolyl, 1,2,4-Triazolyl, lH-Tetrazolyl, Imidazolyl oder Thiazolyl ist.
11. 11. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass man Verbindungen der obigen Formel herstellt, in welcher R3 Carbamoyloxy, Acetoxy, (1-Methyl-1H-tetrazolyl-5-yl)thio oder (2-Methyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)thio ist.
12. 12. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass die heterocyclische Gruppe durch einen oder zwei Reste aus der aus niederem Alkyl, niederem Alkoxy, Halogen, Tri-halogen-niederalkyl, Hydroxyl, Mercapto, Amino, Car-boxyl, Carbamoyl, Diniederalkyl-amino-substituiertem niederem Alkyl, Carboxymethyl, Carbamoylmethyl, Carboxy-methylthio, Sulfomethyl und Methoxycarbonylamino bestehenden Gruppe substituiert ist.
13. 13. Verfahren nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, dass die heterocyclische Gruppe durch einen oder zwei Reste aus der aus niederem Alkyl, niederem Alkoxy, Halogen, Tri-halogen-niederalkyl, Hydroxyl, Mercapto, Amino, Carb-oxyl, Carbamoyl, Diniederalkyl-aminosubstituiertem niederem Alkyl und Carboxymethyl bestehenden Gruppe substituiert ist.
14. 14. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass man folgende Verbindungen herstellt:

    7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacet-

    amido]-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carbonsäureund ihre pharmazeutisch unbedenklichen Salze,

    7-[2-(2-(Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacet-

    amido]-3-(l-methyl-lH-tetrazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-

    4-carbonsäure und ihre pharmazeutisch unbedenklichen

    Salze,

    7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacet-amido]-cephalosporansäure und ihre pharmazeutisch unbedenklichen Salze,

    7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacet-amido]-3-(2-methyl-1,3,4-oxadiazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure und ihre pharmazeutisch unbedenklichen Salze,

    7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacet-amido]desacetoxycephalosporansäure und ihre pharmazeutisch unbedenklichen Salze,

    7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacet-amido]-3-(2-methyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure und ihre pharmazeutisch unbedenkli-

    1

    s

    )

    10

    15

    20

    25

    30

    35

    40

    45

    50

    55

    60

    65

    629 499

    ciien Salze,

    7-[2-(2-Aminotniazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoaceî-umido]-3-(2-carboxymethyM,3,4-thiadiazol-5-yi)-thiome-thyl-3-cephem-4-carbonsäure und ihre pharmazeutisch unbedenklichen Salze,

    7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacet-amido]-3-( 1,2,3-triazol-5-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbon-säure und ihre pharmazeutisch unbedenklichen Salze, 7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacet-amido]-3-( 1 -carboxymethyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure und ihre pharmazeutisch unbedenklichen Salze,

    7-[2-(2-Aminothiazol-4-yi)-2-(syn)-meihoxyiminoacet-amido]-3-[l-(2-N,N-dimethyiaminoäthyl)-l,2,3,4-tetrazol-5-yl]-thiomethyi-3-cephem-4-carbonsäure und ihre pharmazeutisch unbedenklichen Salze und

    57-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacet-amido]-3-(6-methyl-l-oxopyridazin-3-yl)thiomethyl-3-cephem-4-carbonsäure und ihre pharmazeutisch unbedenklichen Salze.

    io 15. Verfahren zur Herstellung von 7-[2-(2-Aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]cephalosporinderi-vaten der Formel:

    r2nh-

    ■c-conh

    «

    \

    OCH.

    (I*)

    coor in welcher R2 und R3 die in Anspruch 1 angegebenen Bedeutungen haben und R bedeutet, dass die Carboxylgruppe in Form eines Esters vorliegt, und ihrer pharmazeutisch unbedenklichen Salze, dadurch gekennzeichnet, dass man nach dem Verfahren gemäss Anspruch 1 eine Verbindung der daselbst gegebenen Formel I herstellt und diese Verbindung verestert.
15. 16. Verfahren nach Anspruch 15, dadurch gekennzeichnet, dass man Pivaloyloxymethyl-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]desacetoxycephalo-sporanat und

    Pivaloyloxymethyl-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-me-t hoxyiminoacetamido]-3-( 1 -methyl-1 H-tetrazol-5-yl)-thio-methyl-3-cephem-4-carboxylat herstellt.

    25