FI66618C - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt verkande 7-(2-(2-aminotiazol-4-yl)-2-(syn)-metoxi-iminoacetamido-cefalosporinderivat - Google Patents

Description

----_·Ί r_, Μ.. KUULUTUSJULKAISU , ^ , . η W C11) utlAggningssmmft 6661 8 C(45J Pstenttl tn runno Ky 12 11 1904 ~ ^ f (51) Κν.«ίpm.a? C 07 D 501/20 SUOMI —FINLAND (21) — PMuttwMuOni 771176 (22) HafcmhpiM—AimOkningid^ 14.01(.77 (23) AltapMvi-GIWi14.04.77 (41) M» )>iflcli»lrri — MMt dwd|g ^ jq 77

Patentti- Ja rekisterihallitus /Aft------------ h ________

Patent· och rflsterstyrslsan 1 * Amaimi «»«SStoiitJ 31.07.84 (32)(33)(31) *rr»**rrtortcc 14.04.76, 08.Ό9.76 Japani-Japan(JP) 42885/76, 108102/76 Toteennäytetty-Styrkt (71) Takeda Chemical Industries, L(d., 27, Doshomachi 2-chome, Higashi-ku,

Osaka, Japani-Japan(JP) (72) Michihiko Ochiai, Suita, Osaka, Akira Morimoto, Ikeda, Osaka, Yoshi-hiro Matsushita, Nishinomiya,'Hyogo, Japani-Japan(JP) (74) Oy Borenius £ Co Ab (54) Menetelmä terapeuttisesti vaikuttavien 7~(2-(2-am?not iatsol-4-yyl?)-2-(syn)--metoksi-iminoasetamido)-kefalQsporiinijohdannaisten valmistamiseksi - Förfa-rande för framställning av terapeutiskt verkande 7-(2-(2-aminotiazol-4-yl)-2-(syn)-metoxi-iminoacetamido)-oefalosporinderivat

Keksinnön kohteena on menetelmä uusien kefalosporiinijohdannaisten valmistamiseksi, joissa on uusi 7-asyyliryhmä. Erikoisesti keksinnön kohteena on menetelmä seuraavan kaavan mukaisen terapeuttisesti vaikuttavan 7- (2-1 (2-aminotiatsol-4-yyli) -2- (syn) -me- toksi-iminoasetamido)-kefalosporiinijohdannaisen tai sen farma- * seuttisesti hyväksyttävän suolan tai esterin valmistamiseksi jyra-rS : s N—U- C-CONH η-f N 0<^~Nv>^_CH2R3 (1)

XOCHx COOH

jossa kaavassa R3 tarkoittaa 'vetyä, hydroksyyliä, C2_4-asyyliok-sia, 3-oksobutyryylioksia, karbamoyylioksia tai substituoitua tai substituoimatonta yhdistettä, joka voi olla pyridiini, N-ok-sidopyridatsinyylitio, diatsolyylitio, tiatsolyylitio, tiadiat-solyylitio, oksadiatsolyyliti!o, triatsolyylitio tai tetratsolyy-litio, ja substituenttina voi· olla Ci_3-alkyyli, amino, karbamo-yyli , di-C^-alkyy 1 iamino-C j_3-alkyyl i , karboks i-C1_3-alkyyl i , 2 66618 karbamoyyli-Ci_3-alkyyli, karboksi-Ci_3~alkyylitio, sulfo-Ci_3~ alkyyli tai Ci_3-alkoksikarbonyyliamino, R2NH tarkoittaa amino-ryhmää, joka mahdollisesti voi olla suojattu.

Synteettisiin kefalosporiinijohdannaisiin kohdistetut tutkimukset ovat koskeneet tähän asti 7-aminokefalosporaanihapon muuttamista erilaisiksi asyylijohdannaisiksi 7-aseman luona tai johdannaisiksi 3-aseman luona tarkoituksella synteettisesti valmistaa yhdisteitä, joilla on joko laaja bakteereja vastustava spektri tai spesifinen bakteereja vastustava spektri. Tunnetut kefalospor iini johdannaiset eivät kuitenkaan ole tyydyttäviä bakteereja vastustavan vaikutuksensa suhteen lukuisiin mikro-organis-meihin nähden.

Näissä olosuhteissa ovat keksijät ja kumppanit todenneet, että seuraavan kaavan mukaisilla kefalosporiinijohdannaisilla r1,~vy*8’ f

UL CHOONH

oTU-CH^·

000H

jossa kaavassa R1' tarkoittaa amino- tai hydroksyyliryhmää, joka voi olla suojattu, R^' tarkoittaa amino- tai hydroksyyliryhmää tai näiksi ryhmiksi muutettavissa olevaa ryhmää, R®' tarkoittaa vetyä tai metoksiryhmää, tai metoksiryhmäksi muutettavissa olevaa ryhmää, R4 ' tarkoittaa vetyä tai nukleofii1isen yhdisteen jäännöstä, ja R®' tarkoittaa vetyä tai halogeenia tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävää suolaa tai esteriä. (Länsi-Saksalainen kuulutusjulkaisu nro 2.556.736.) Näiden yhdisteiden joukosta ovat keksijät edelleen todenneet, että kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat erittäin aktiivisia gram-positiivisten ja gram-ne-gatiivisten bakteerien laajaa spektriä vastaan, mukaanluettuna Serratia marcescens, Proteus morganii, ja edelleen, että yhdisteet (I) ovat tehokkaita β-laktamaasia kehittäviin bakteereihin nähden. Tämä keksintö perustuu näihin toteamuksiin.

6661 8

Keksinnön mukaan uudet kaavan I mukaiset yhdisteet valmistetaan siten, että a) saatetaan 7-aminokefalosporiinijohdannainen, jonka kaava on H2NWS^

COOH

jossa kaavassa R3 tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty, tai kun R3 tarkoittaa karbamoyylioksiryhmää tämä mahdollisesti on suojatussa muodossa, reagoimaan yhdisteen tai sen reaktiivisen johdannaisen kanssa, jonka yhdisteen kaava on *2™-Λ

N-IL C-COCH

" (III)

N

VOCH, jossa kaavassa R2NH tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty, ja tarpeen vaatiessa tämän jälkeen poistetaan suojaryhmä, b) saatetaan yhdiste, jonka kaava on

Η2®-ιΓβΊΐ B

N-IL C-CONH -r—f A

jj 2¾ (IV)

NOCH^ COOH

jossa kaavassa R2NH tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty, ja R4 tarkoittaa asetoksi- tai 3-oksobutyryylioksiryhmää, reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on R3' - H (V) tai pyridiinin kanssa, joka voi olla substituoitu karbamoyylil-lä, jolloin R3' tarkoittaa substituoitua tai substituoimatonta yhdistettä, joka voi olla N-oksidopyridatsinyylitio, diatsolyy-litio, tiatsolyylitio, tiadiatsolyylitio, oksadiatsolyylitio, triatsolyylitio tai tetratsolyylitio, ja substituenttina voi olla Ci_3-alkyyli, amino, karbamoyyli, di-C^_3-alkyyliamino-Ci_3-alkyyli, karboksi-C3_3-alkyyli, karbamoyyli-C1_3-alkyyli, 6661 8 karboksi-Ci_3-alkyylitiö, sulfo-Ci_3-alkyyli tai Ci_3-alkoksi-karbonyyliamino, minkä jälkeen tarpeen vaatiessa suojaryhmä poistetaan, tai c) kohdistetaan metyloimisreaktio yhdisteeseen, jonka kaava on R2MH'^iTS|

1 JLc-oonh^_.A

f*OH ^Q-C«2R}

000H

jossa kaavassa R3 ja R2NH tarkoittavat samaa kuin edellä on määritelty, ja että näin saatu kaavan I mukainen yhdiste haluttaessa sinänsä tunnetulla tavalla muutetaan sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi tai esteriksi.

Kaavan (I) mukaisissa yhdisteissä on symbolin R3 edustamana ryhmänä edyllisesti vety, karbamoyylioksi, asyylioksi, joka on johdettu alemmasta alifaattisesta karboksyylihaposta, jossa on 2...4 hiiliatomia, esim. asetyylioksi, tai heterosyklinen tio-ryhmä, jonka heterosyklinen ryhmä on substituoitu tai substitu-oimaton.

Näiden joukosta R3 sopivasti on karbamoyylioksi, 1-metyyli-lH-tetratsoli-5-yylitio, 2-metyyli-l,3,4-tiadiatsol-5-yylitio, 1,2-dimetyyli-1,3,4-triatsoli-5-yylitioryhmä, jne.

Siinä tapauksessa, että R3 on karbamoyylioksiryhma, jonka amino-ryhmä on suojattu, esim. N-klooriasetyylikarbamoyylioksi, N-di-klooriasetyylikarbamoyylioksi tai N-triklooriasetyylikarbamoyylioksi, voidaan aminoryhmän suojaryhmä poistaa soveltamalla samankaltaista menetelmää kuin käytetään suojaryhmän poistamiseksi suojatusta aminoryhmästä, jota edustaa R2NH-, joka seuraa-vassa selitetään. Yhdistettä (I) käytetään aktiivisena yhdisteenä yleensä siten, että sen amino-ja karbamoyylioksiryhmät (joissa Ri on karbamoyylioksimetyyli) ovat vapaat ja suojaamattomat. R2NH osoittaa aminoryhmää, joka mahdollisesti voi olla suojattu. Näin ollen R2 tarkoittaa vetyä tai aminofunktion suojaryhmää, 6 661 8 ϊ> joka suojaryhmä on mikä taliansa sinänsä tunnettu suojaryhmä, jota yleensä käytetään aminon suojaamiseksi, toisin sanoen aminofunktion tavanomainen suojaryhmä. Näistä suojaryhmistä mainittakoon täten mm. aromaattiset asyyliryhmät, ftaloyyli, bentsoyyli, joka on substatuoitu halogeenilla, nitrolla tai alemmalla alkyylillä, jossa on 1..,4 hiiliatomia (esim. klooribentsoyyli, p-nitrobentsoyyli, p-tert.butyyli-bentsoyyli, toluoyyli), naftolyyli, fenyyliasetyyli, fenoksiasetyyli, bentseenisulfonyyli, bentseenisulfonyyli, joka on substituoitu alemmalla alkyylillä, jossa on 1...4 hiiliatomia, (esim. p-tert.butyylibentseeni-sulfonyyli, tolueenisulfonyyli), asyyli, joka on johdettu alifaattises-tai halogenoidusta alifaattisesta karboksyylihaposta, esim. asetyyli, valeryyli, kaprylyyli, n-dekanoyyli, akryloyyli, pivaloyyli, halogeeni-asetyyli, (esim. monoklooriaetyyli, monobromiasetyyli, diklooriasetyyli, triklooriasetyyli), kamferisulfonyyli, metaanisulfonyyli, esteröidyt karboksyyliryhmät, esim. etoksikarbonyyli, tert. butyylioksikarbonyyli, isobornyylioksikarbonyyli, fehyylioksikarbonyyli, trikloorietoksikarbo-nyyli, bentsyylioksikarbonyyli, jne., karbamoyyliryhmät, kuten metyyli-karbamoyyli, fenyylikarbamoyyli, naftyylikarbamoyyli, jne., ja vastaavat ti okarbamoyyliryhmät.

Kaavan (I) mukaisella kefalosporiinijohdannaisella luullaan olevan tautomeerinen muoto, esim. 2-aminotiatsolyyliyhdiste ja 2-iminotiatso-lyyliyhdiste, kuten alla on näytetty, vaikka johdannainen tässä hakemuksessa kauttaaltaan selitetään tiatsoliyhdisteenä.

r2hn | JLc-CONH ^

5 000H

R2N . 2 il -ie- OONH ^ f3 H \ch3 ο^γλ 0ΗΛ

COOH

Vaikka kaavan (i) yhdisteen 4-asemassa oleva karboksyyliryhmä voi olla vapaa, voi se muodostaa suolan, esim. myrkyttömän kationin kanssa, joista mainittakoon alkalimetallien, esiin, natriumin tai kaliumin kationit, emäksinen amino, esim. arginiini, ornitiini, lysiini, tai histidiini, tai polyhydroksialkyyliamiini, esim. N-metyyliglykamiini, 6 66618 dietanoliamiini, trietanoliamiini tai trishydroksimetyyliaminornetaani. Yhdiste (I) voi muodostaa happamen suolan epäorgaanisen hapon kanssa, joista mainittakoon kloorivetyhappo, rikkihappo, jne. tai orgaanisen hapon kanssa, joista mainittakoon tolueenisulfonihappo, bentseenisulfo-nihappo, jne. 4-Karboksyyliryhmä voi myös olla jokin niistä biologisesti aktiivisista esterimuodoista, jo-tka johtavat esim. kohonneisiin veritasoihin ja pidentyneeseen vaikutukseen. Näistä esterijätteistä mainittakoon alemmat alkoksimetyyliryhmät, esim. metoksimetyyli, etoksimetyyli, isopropoksimetyyli, Oi-met oks ie tyyli, oi -etoksietyyli, jne., ιχ -alempi alkoksi-CX- suisti tuoi dut metyyliryhmät, esim. ιχ-alempi alhoksi (), etyyli (esim. metoksietyyli, etoksietyyli, propoksi-etyyli, i-propoksietyyli), jne., alemmat alkyylitiometyyliryhmät, joissa on 1...3 hiiliatomia, esim. metyylitiometyyli, etyylitiometyyli, isopropyylitiometyyli, jne., asyylioksimetyyliryhmät, esim. pivaloyyli-oksimetyyli, o( -asetoksimetyyli, jne., etoksikarbonyylioksi-1-metyyli-metyyli, tai Oi.-asyylioksi- 0/-substituoidut metyyliryhmät (esim. Cx,-asetoksi-o^-metyylimetyyli). Yhdisteen (i) nämä suolat ja esterit lankeavat myös tämän keksinnön puitteisiin.

Kuten tunnettuja kefalosporiineja tai penisilliinejä voidaan tämän keksinnön kaavan (I) mukaisia yhdisteitä antaa sellaisina annosmuotoina kuin ruiskeina, kapseleinä, tabletteina tai rakeina. Yhdisteet (l) ovat näin ollen uusia yhdisteitä, joilla on erinomainen vaikutus bakteerien, mukaanluettuina gram-negatiivisten bakteerien laajaa valikoimaa, joista bakteereista mainittakoon Escherichia coli, Serratia marcescens, Proteus rettgeri, Enterobacter cloacae ja Citrobacter freundii, ja nämä yhdisteet ovat kestäviä β-laktamaasiin nähden.

Kaavan (I) mukaista yhdistettä voidaan käyttää esim. sterilointiaineena edellä mainittujen mikro-organismien poistamiseksi kirurgisista kojeista, tai tartuntaa estävänä aineena. Kaavan (l) mukaista yhdistettä käytettäessä tartuntaa estävänä aineena, esim. vatsaontelon sisäisten tartuntojen, hengityselinten tartuntojen virtsatiehyetartuntojen ja muiden tartuntasairausten hoidossa, jotka sairaudet aiheutuvat edellä mainituista mikro-organismeista, voidaan yhdistettä turvallisesti antaa nisäkkäille, ihmiset, hiiret, ja rotat mukaanluettuina, päivittäisenä annoksena, joka on lsuruusluokkaa noin 0,5...80 mg/kg kehon painoa, sopivasti 1...20 mg/kg, 3 tai 4 antona päivittäin. Kaavan (I) mukaista yhdistettä voidaan antaa suun kautta tai vatsaontelon sisäisesti erilaisina annosmuotoina, kuten ruiskeina, kapseleina, jauheina, rakeina tai tabletteina, joita voidaan valmistaa soveltamalla ennestään tunnettuja 1 66618 menetelmiä. Siinä tapauksessa, että yhdistettä (I) käytetään ruiskeena, voi kantoaineena olla esim. tislattu vesi tai fysiologinen suolaliuos. Tässä tapauksessa yhdistettä (I) käytetään kapselina, jauheena, rakeena tai tablettina, jolloin tätä yhdistettä annetaan esim. seoksena farmakologisesti hyväksyttävien, sinänsä tunnettujen laimentimien kanssa, joista mainittakoon tärkkelys, laktoosi, sokeri, kalsiumkarbonaatti, kalsiumfosfaat-ti, ja edelleen voidaan käyttää sideaineita (tärkkelystä, arabi-kumia, karboksimetyyliselluloosäa, hydroksipropyyliselluloosaa, kiteistä selluloosaa, jne), voiteluaineita (esim. magnesiumstea-raattia, talkkia, jne), ja hienontavia aineita (esim. karboksi-metyylikalsiumia, talkkia jne).:

Seuraavassa on esitetty eräiden keksinnön mukaan valmistettujen yhdisteiden farmaseuttisia vaikutuksia.

Yhdisteet: - natr ium-7-(2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imino-asetamido)-3-karbamoyylioksimetyyli-3-kefeemi-4-karboksy-laatti (Esim. 1); natrium- 7-(2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido)-3-(l-metyyli-lH-tetratsol-4-yyli)-tiometyyli- 3-kefem-4-karboksylaatti (Esim. 2); natrium- 7-(2-(2-aminotiatsol-4-yvli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido)-kefalosporanaatti (Esim. 3); - natrium- 7-(2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido)-desasetoksikefalosporanaatti (Esim. 5); - natrium- 7-(2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido)-3-(2-metyylisi,3,4-tiadiatsol-4-yyli)-tiometyyli-3-kefeemi-4-karboksylaatti (Esim. 9a); 7-(2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetami-do)-3-(1-(2-N,N-dimetyyliaminoetyyli)-1,2,3,4-tetratsol-5-yyli)-tiometyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappobetaiini (Esim. 9e); - pivaloyylioksimetyyli-7-(2-(2-aminotiatsol-4-vyli)-2-(syn)-metoksi-iminoa se tamido) -3- (l-rmetyyli-lH-tetratsol-5-yyli) -tiometyyli-3-kefeemi-4-karboksylaatti (Esim. 15); natrium 7- (2- (2-aminotiatsolM-yyli) -2- (syn) -metoksi-iminoasetamido)-3-(1-(2-N,N-dimetyyliaminoetyyli)-lH-tetrat-sol-5-yyli)-tiometyyli-3-kefeemi-4-karboksylaatti (Esim. 17).

Taulukko I e ; 66618

Yhdisteiden minimikonsentraatio (f*g/mL), joka Kykenee estämään mikro-organismien kasvua Yhdiste

Mikro-organismi yhdiste yhdiste yhdiste yhdiste ..........—..... fifiim. l- __esim. 3 esim. 2 esim. 5 E. coli NIHJ 0.10 0,20 0.10 0.78 E. coli 0-111 0.024 o.05 . 0.024 0.39 E. coli T-7 0.39 0.78 0.78 6.25 K.pneumonia DT <0.012 0.024 0.024 0.20 K.pneumonia GN 3835 0.05 0.05 0.20 0.20

Ps. aeruginosa Pd 1 50 25 12.5 M00

Ps. aeruginosa PM 3 3.13 1.56 0.78 28

Ps. aeruginosa P2 25 '50 '50 > 100

Ps. aeruginosa GN3407 > 100 50 50 > ICO

Serr.marcescens IFO 12648 1,56 *13 O 78 12 c

Serratia TN 0024 0.20 0.78 ' C.20 1 =>f.

P. vulgaris IFO 3988 < 0.02 0.024 . 0.024 0.20 P. vulgaris GN 4413 1.36 0.78 . 0.39 1.56 P. mirabilis GN 4359 <0.02 0.05 0.10 0.10 P. morganii IF03168 0.39 0.20 , 0.05 12.= P.rettgeri 8(TN0336) <0.012 <0.012 <0.012 % 0.C12 P.rettgeri 8 GN 4733 0.05 0.20 ' 0.20 0.10

Ent.cloacae TN1282 6.25 6.25 1.56 80

Cit. freundii GN 99 0.20 0,20 : 0.10 3.13

Cit. freundii GN1706 0.39 0.39 0.20 6.25

Acinetobacter anitratus 6,25 25 25 12.5 TN-1140

Huom. käytetyistä mikro-organismeista käytetään seuraa via lyhenteitä: E: Escherichia K: Klebsiella Ps: Pseudomonas

Serr: Serratia P: Proteus Ent: Enterobacter

Cit: Citrobacter 9 6C618

Taulukko II

Yhdisteiden minimikonsentraatio (yrg/ml) , joka kykenee estämään mikro-organismien kasvua

Yhdiste

Mikro-organismi Esim. 9a Esim. 9e E. coli NIHJ 0,20 0,20 E. coli 0-111 0,10 0,024 E. coli T-7 1,56 1,56 K. pneumoniae DT 0,05 0,10 K. pneumoniae GN 3855 0,39 0,20

Serr. marcescens IFO 12648 0,78 1,56

Serratia TN 0024 0,78 0,78 P. vulgaris IFO 3988 0,10 0,20 P. vulgaris GN 4413 1,56 1,56 P. mirabilisGN4359 0,20 0,39 P. morganii IFO 3168 0,10 0,20 P. rettgeri 8 (TNO 336) 0,012 0,024 P. rettgeri GN 4733 0,39 0,78

Ent. cloacae IFO 12937 3,13 6,25

Cit. freundii GN 99 0,20 0,20

Cit. freundii GN 1706 0,78 0,78

Taulukko III

Yhdisteiden vaikutus tartunnan saaneisiin hiiriin (EÖ5o+, mg/kg)

Esimerkin numero Antotapa ED50* (mg/kg) 1 ihonalaisesti 0,015 (kefaloridiini: 1,25) 2 " 0,022 (kefaloridiini:l,25) 3 " 0,018 (kefaloridiini: 1,25) 5 " 0,111 (kefaloridiini: 1,25) 15 suun kautta 0,11 (kefaleksiini: 2,51) 17 " 0,27 (kefaleksiini: 2,51) *Koe-eläimina käytettiin koiraspuolisia hiiriä (ICR/SLC) ίο 6661 8

Koe-eläinryhmää kohden käytettiin 5 hiirtä yksinkertaista annosta kohden. Tartunta tehtiin vatsaontelonsisäisesti mikro-organismilla E. coli 0-111. Havaintojen pituus: 7 vuorokautta.

Suluissa on osoitettu vertailuyhdiateiden kefaloridiinin ja kefaleksiinin vastaavat arvot.

Kefaloridiini Φ- CHjCOtffi + _ coc

Kefaleksiini ^"^-CBCO

HHg

COOH

Seuraavassa on esitetty vertailukokeiden tuloksia mikro-organismien kasvua vastustavasta vaikutuksesta hakemuksen mukaisten yhdisteiden sekä DE-hakemusjulkaisusta 2 461 478 tunnettujen läheisten yhdisteiden välillä. Vertailussa on käytetty myös kefaloridiiniä sekä kefatsoliinia, joista viimeksi mainittu oli hakemuksen tekemishetkellä paras tunnettu kaupallinen kefalo-yhdiste.

Vertailutulokset osoittavat selvästi, että keksinnön mukaan valmistetuilla yhdisteillä on huomattavasti edullisempi anti-bakteerinen vaikutus kuin DE-julkaisun 2 461 478 mukaisilla yhdisteillä sekä myös parempi vaikutus kuin sekä kefaloridii-nilla että kefatsoliinilla.

1λ 6661 8

_ Ο 9C

* » M ► © > Λ © *

Hi H» ro n m tl μι © © H- ft H* Λ. 3 c » O on | rt i i_.

0 H m O O: C

H H· t ϊ Π S· h· o* x* ro / χ* H- H- I w O I o

3 H· 00 W O

H- 3 H· “ |_| H- 3 U) < P1 · n h- ro 3 • «_i.

© 5S ft μ> H · aj h· on on O μ· O S to • · · λ · t_ o a» 01 N »-I. VJ M O / ^ oi © VO O -μ* / S " Ή {Λ

c r —z~_J

M θ> O O · « · · · * o» ►- ro O t-> r. > o ro ro c oi * ►* t-* i

Ui· n o a uu Γ Ή H* VJ C O Ό • · · * CJ 3

Ui μ* μ- O μ; Λ 2-·.

on ro ro C / \ U« *· S / \ 2 c'-\\ w

i i V

o ro“ *c en h * t

M I

on ro o o c < Λ= a ♦ · · · c / ro oi vj O vj h* '

Ui nc ro vd o»; o- a £ oo © a > 00 1 VJ \ _ H- 2-2 • H · V C B 1* 0 v! mi- vj o vj *i g O O « · w K μ CO H O On © iw" ro vn oo a VH H· r* 12 6661 8

Taulukko V

H’Yl .s N-LL— A - CONH—-S ^

COOH

( /lg/nil) E. co‘li K. pneumoniae

NIHJ DT

Aa — C — " 0.20 0.02¾

N

^OCH3

Keksintö, Esim. 3 ia 10 A=- CII2 - 1.56 <0.78 DE 2 461 478 Esim. 10_

Kefaloridiini 6-25 3.125

Kefatsoliini 1,56 1,56 13 6 661 8 Ό ρς X X Μ ► (!) ► £ π> π> ** 5!

t-ti Η> to * « M C

A) Α| μ. Η

It Η <> 3 I £

tn ο σι » rt _ „ E

Ο Μ μ Λ Ο: 5δ * O

h-* H* Cl *· / O

H· Oi Jfc Ä ' I

H- H· Ό »V> tt O <

3 H- 00 W O H

H* 3 I H- ts h- g vj w tn M· 3 vo

^ 2 W

t—1 fu H · Ξι- O CD H* ^ o S ro ... . t_ o 2

Ui N i_J. UI fO o .

o· ui fu os o h- / - “ f=\ VO \

W

=/ o w r-* VJ o O | .... |μ

Ui H* VJ M ^ O

On M '3 O ^ O I

UI ^ M

O

o 2 o s V-t *

>- U C O Ό S'-L

i. ·- u -o SS / \

On Γ0 VO Ui C Ω - i\ {/) I i yv φ o ro" in *0 ·-2; H · / .

H· **i tn I

r ? ? ? c ^ \_ I

to UI -O >-* VJ M — z

UI 00 O NC CV} I

oo p o

00 E

H· VJ

<e w T) v H · o o vj o o a ,c o o · * o c H· M VJ n on vj o <— cq \ o {u g 00 3 m H· H· 14 6661 8 • * § > S > H> Πι n X „ O» 0) M " (O " M O Λ. ^ 3 » ° O: /**° g

i-*· q, w - * C

H· H· Λ I S 1 3 M· -J 1 M £ £ H· 3 cc in, r 5

H. p.-J

M 3 w · ^ m < H- VD ΓΊ

3 H

Li 2 ” r S n % • υ ϊ o ° /

Sm h- 2_V

f· \ en N> / 00 f op: O - O O · >

• · · »I

-Ί Ui JO O e» t oo σ' m — o tr — — ^

- M· O

°Yi

— u: — I

y» g · I n s: —.

O O — ui O / \ -J T- -vj — / \ r\_/

* I

c IA ^ ^ >A 3 en

H* — O 0 0¾ I

• * * · H C y.....— z ui ui N) — 3 /--

On On O 0 /

3 O- Z

3 ΛΓ '

Φ O Z—“Z

N- ··· N> z •3 / \

*3 O O

On on O C o < ES

• · · · C UJ uJ

Λ) W -U i\) LJM

ui ui oo o x cm 00 3 30 1

UI

*Ö V »A 3 * — — O O O 3

O O · O

O o ro fO U) Ί O -0¾

On 3 00 3 H· H* 6661 8 15

Keksinnön menetelmävaihtoehdon a) asyloimisreaktio voidaan suorittaa vapaalla hapolla (III), tämän vapaan hapon (III) alkali- tai maa-alkali-metallisuolalla (esim. natrium-, kalium- tai kalsiumsuolalla) vapaan hapon (lii) orgaanisella amiinisuolalla (esim. trimetyyliamiinisuolalla tai pyri-diinisuolalla), tai sen reaktiivisella johdannaisella (esim. happohaloi-dilla, esim. happokloridillä tai happobromidilla), happoanhydridillä, sekahappoanhydridillä, aktiivisella amidilla, aktiivisella esterillä tai senkaltaisella. Tämän aktiivisen esterin esimerkkinä mainittakoon p-nitrofenyyliesteri, 2,4-dinitrofenyyliesteri, pentakloorifenyyli-esteri, N-hydroksisukkinimidiesteri ja N-hydroksiftalinimidiesteri. Seka-happoanhydridin esimerkkeinä mainittakoon happoanhydridin ja karboksyylihapon monoesterin seokset (esim. hiilihapon monometyyli-esteri tai hiilihapon monoisobutyyliesteri), ja happoanhydridin ja alemman alkanolihapon seos, joka voi olla substituoitu halogeenilla (esim. pivaliinihappo tai trikloorietikkahappo). Siinä tapauksessa, että karboksyylihappoa (lii) käytetään vapaana happona tai suolana, käytetään sopivaa kondensoimisainetta. Tällaisen kondensoimisaineen esimerkkeinä mainittakoon N,N'-di-substituoitu-karbodi-imidit, esim. N,N’pdisykloheksyyli-karbodi-imidi, atsolidit, esim. Ν,Ν'-karbonyyli-imidatsoli ja N,N'-tionyyli-di-imidatsoli, vedenpoistoaineet, esim. N-etoksikarbonyyli-2-etoksi-1,2-dihydrokinoliini, fosforioksikloridi ja alkoksiasetyleeni, 2-halogeenipyridiinisuolat (esim. 2-klooripyri-diinimetyyli-jodidi, 2-fluoripyridiinimetyyli-jodidi) jne. Tällaista kondensoimisainetta käytettäessä oletetaan reaktion tapahtuvan karboksyylihapon (lii) reaktiivisen johdannaisen kautta. Reaktio suoritetaan yleensä sopivassa inertissä liuottimessa, joista esimerkkeinä mainittakoon halogenoidut hiilivedyt, esim. kloroformi, metyleenidi-kloridi, jne, eetterit, esim. tetrahydrofuraani, dioksaani, jne., dimetyyliformamidi, dimetyyliasetamidi, asetoni, vesi ja tällaisten liuottimien seokset. Mainitun asyloimisaineen määrä on normaalisti rajoissa noin 1...5, sopivasti noin 1...2 mooliekvivalenttia, yhdisteestä (II) laskettuna. Tämä reaktio suoristetaan yleensä -50...+40 °C:ssa, jolloin reaktioaika valitaan rajoissa 1...10 tuntia ja sopivasti on 1...3 tuntia. Asyloimisreaktion jälkeen amiinifunktion suojaryhmä voidaan poistaa tarpeen vaatiessa. Aminofunktion suojaryhmän poistaminen voidaan yleensä suorittaa soveltamalla sinänsä tunnettuja menetelmiä, esim. kuulutetussa japanilaisessa patenttihakemuksessa no 52083/ 1975 ja julkaisussa Pure and Applied Chemistry, 7, 335 (1963) selitettyä menetelmää tai jotain vastaavanlaista menetelmää. On ymmärrettävä, että symbolin R2 tarkoittaessa kaavassa (i) monohalogenoitua asetyyliä 16 6661 8 (esim. monoklooriasetyyliä), ja symbolin tarkoittaessa karbamo-yylioksiryhmää, jonka aminoryhmä on suojattu, voidaan samanaikaisesti poistaa tällainen N-monohalogenoitu asetyylikarbamoyylioksiryhmä (esim. N-monoklooriasetyylikarbamoyylioksiryhmä), voidaan nämä molemmat monohalogenoidut asetyyliryhmät (esim. monoklooriasetyyliryhmä) poistaa samanaikaisesti. Tässä suhteessa on symbolin R2 kuvaamana aminofunk-tion suojaryhmänä sopivasti monohalogeeniasetyyliryhmä. Reaktio tämän monohalogeeniasetyyliryhmän poistamiseksi aminoryhmästä suoritetaan saattamalla kaavan (I) mukainen yhdiste, jonka yksi tai useampi aminoryhmä on suojattu monohalogeeniasetyyliryhmällä, reagoimaan tiokarbami-din ja emäksisen aineen kanssa. Tämä reaktio suoritetaan normaalisti liuottimessa, joka on lähellä huoneenlämpöä ja joka usein sujuu loppuun ajassa, joka vaihtelee rajoissa 1...10 tuntia. Liuottimena voi olla mikä tahansa liuotin, joka ei vaikuta haitallisesti keksinnön mukaiseen reaktioon. Niinpä liuottimista mainittakoon eetterit, esim. etyyli-eetteri, tetrahydrofuraani, tioksaani, jne., alemmat alkoholit, esim. metanoli, etanoli, jne., halogenoidut hiilivedyt, esim. kloroformi, metyleenidikloridi, jne., esterit, esim. etyyliasetaatti, butyyli-asetaatti, ketonit, esim. asetoni, metyylietyyliketoni, jne., vesi ja näiden liuottimien erilaiset seokset.

Tämä reaktio N-halogeeniasetyyliryhmän poistamiseksi yhdisteen (I) 3-asemassa olevasta N-monohalogeeniasetyylikarbamoyylioksimetyyli-ryhmästä ei edisty sanottavasti siinä tapauksessa, että tiokarbamidin annetaan yksistään reagoida yhdisteen (I) kanssa. Jos sen sijaan yhdiste (i) saatetaan reagoimaan tiokarbamidin ja emäksisen aineen kanssa, tapahtuu haluttu reaktio monohalogeeniasetyyliryhmän poistamiseksi selektiivisesti ja yksinkertaisesti siten, että saadaan 3-karbamo-.jylioksimetyyliyhdiste (I). Tässä reaktiossa voidaan emäksisenä aineena käyttää alemman alifaattisen karboksyylihapon alkali- tai maa-alkali-metallisuolaa, tai orgaanista emästä, jonka pK-arvo on vähintään 9,5, sopivasti rajoissa plCa 9,0...12,0. Tällaisen alemman alifaattisen karboksyylihapon mainitun suolan esimerkkinä mainittakoon 1...6 hiili-atomia sisältävien alempien alifaattisten karboksyylihappojen suolat, esim. natriumasetaatti, kaliumasetaatti, kalsiumasetaatti, bariumase-taatti, natriumformiaatti, natriumpropionaatti, kaliumheksanoaatti, jne. Mainitun epäorgaanisen emäksen esimerkkinä mainittakoon hiili-hapon alkalirne talli suolat, kuten natriumkarbonaatti, kaliumkarbonaatti, jne. Orgaanisena emäksenä voi olla esim. jokin mono-, di- tai tri- V* 6661 8 substituoitu alempi alkyyliamiini, jonka alemmassa alkyylissä on 1...4 hiiliatomia, esim. trimetyyliamiini, trietyyliamiini, etyyliamiini, metyyliamiini, dietyyliamiini, dimetyyliamiini, tributyyliamiini, dibutyyliamiini, butyyliamiini, jne., ja 5-...6-osaiset sykliset amiinit, jotka N-asemassa on substituoitu 1...2 hiiliatomia sisältävillä alemmilla alkyyleillä, joista esimerkkeinä mainittakoon N-metyylipyrrolidiini, N-etyylipyrrolidiini, N-metyylipiperatsiini, N-etyylipiperatsiini, jne. Vaikka, kuten edellä mainittiin, tässä reaktiossa käytetään tiokarbamidia, voidaan reaktio myös menestyksellisesti suorittaa käyttämällä N-tai Ν,Ν-substituoituja tiokarbamideja, esim. metyylitiokarba-midia, N,N-dietyylitiokarbamidia tai N,N-heksametyleenitiokarba-midia.

Keksinnön mukaisessa menetelmävaihtoehdossa b) asyylioksiryhmänä, jota R4 edustaa kaavassa (IV) voi esim. olla asyylioksiryhmä, joka on johdettu 2...4 hiiliatomia sisältävästä alemmasta alifaattises-ta karboksyvlihaposta, joista mainittakoon asetyylioksi, propio-nyylioksi ja 3-oksobutyylioksi. Tämän reaktion kannalta on kuitenkin yleensä edullista käyttää sellaista yhdistettä (IV), jossa on alemmasta alifaattisesta karboksyylihaposta johdettu asyylioksiryhmä, esim. asetyylioksiryhmä. Tässä reaktiossa käytettynä nukleofiilisena yhdisteenä on yhdiste, joka vastaa kaavan (V) symbolin R3' edustaman nukleofiilisen yhdisteen jäännöstä. Erikoisen edullisesti käytetään heterosyklisiä tioliyhdisteitä, esim. merkaptoyhdisteitä, jotka voivat sisältää substituentin. Symbolin R3' edustamana nukleofiilisena yhdisteenä, joka vastaa tätä jäännöstä, voidaan merkaptoyhdisteitä käyttää niiden vapaana muotona, vaikka sopivasti käytetään niitä alkalimetallisuoloina, esim. natrium- tai kaliumsuoloina. Tämä reaktio suoritetaan sopivasti liuottimessa.

Niinpä voidaan käyttää vettä, deuteriumia tai jotain orgaanista liuotinta, joka helposti sekoittuu veteen eikä reagoi reaktio-komponenttien kanssa, joista liuottimista esimerkkeinä mainittakoon dimetyyliformamidi, dimetyyliasetamidi, dioksaani, asetoni, alkoholi, asetonitriili, dimetyylisulfoksidi ja tetrahydrofuraani. Vaikka reaktiolämpötila ja -aika voivat vaihdella sellaisten tekijöiden, kuin kulloinkin käytetyn lähtömateriaalin ja liuottimen 18 6661 8 mukaan, on lämpötila sopivasti rajoissa 0...100 °C, varsinkin 30... 70 °C, ja reaktion pituus on 2...48 tuntia, sopivasti 3...15 tuntia. Reaktio suoritetaan sopivasti likimain neutraaleissa olosuhteissa, mutta edullisia tuloksia voidaan saavuttaa pH-alueella noin 2...8, sopivasti 5...8. Reaktion edistymistä voidaan välistä tasoittaa lisäämällä pinta-aktiivista, kvaternääristä ammonium-suolaa, joista esimerkkeinä mainittakoon trimetyylibentsyyliammo-niumbromidi tai trietyylibentsyyliammoniumbromidi tai trietyyli-bentsyyliammoniumhydroksyyli. Enemmän tyydyttäviä tuloksia saavutetaan kuitenkin suorittamalla reaktio inertissä kaasuväliainees-sa, esim. typessä, merkaptoyhdisteen (III) hapettumisen estämiseksi, ilmastollisen hapen vaikutuksesta.

Keksinnön mukaisen menetelmävaihtoehdon c) O-metylointireaktio suoritetaan normaalisti liuottimessa ja jään avulla jäähdyttäen tai noin huoneenlämmössä (0...40 °C, sopivasti 5...30 °C), ja monissa tapauksissa reaktio sujuu loppuun 5 minuutissa...5 tunnissa, sopivasti 5 minuutissa...2 tunnissa. Liuottimena voi olla mikä tahansa liuotin, joka ei vaikuta haitallisesti reaktioon, ja näistä liuottimista mainittakoon eetterit, esim. tetrahydrofuraani, dioksaani, jne., alemmat alkoholit, esim. metanoli, etanoli, jne., halogenoidut hiilivedyt, esim. kloroformi, metyleenikloridi, jne., esterit, esim. etyyliasetaatti, butyyliasetaatti, jne., amidit, esim. N,N-dimetw-liformamidi, Ν,Ν-dimetyyliasetamidi, jne., vesi ja näiden liuottimien seokset. MetyloimiSaineina voidaan käyttää orgaanisessa kemiassa yleisesti käytettyä metyloimisainetta, joista esimerkkeinä mainittakoon metyylihaloidi (esim. metyylijodidi, metyylibromidi), dimetyylisulfaatti, diatsometaani, jne.

Tämä reaktio voi sujua tasaisemmin siinä tapauksessa, että läsnä on jotain sopivaa emästä, lukuunottamatta tapausta, jossa käytetään diatsometaania. Tällaisena emäksenä käytetään tavallisesti epäorgaanista emästä, esim. hiilihapon alkalimetallisuoloja (esim. natriumkarbonaattia, kaliumkarbonaattia), alkalimetallihydroksi-deja (esim. natriumhydroksidia, kaliumhydroksidia). Siinä tapauksessa, että on otettava huomioon yhdisteen (VI) stabiliteetti, käytetään sopivasti natriumkarbonaattia, kaliumkarbonaattia, jne. Tämä reaktio voidaan myös suorittaa puskuriliuoksessa, jonka pH-arvo on noin 7,5...8,5.

19 66618

Niitä kefalosporiiniyhdisteitä (i), joita valmistetaan soveltamalla edellä selitettyjä useita valmistusmenetelmiä, voidaan puhdistaa sinänsä tunnettujen menetelmien avulla, joista esimerkkeinä mainittakoon pylväskromatografointi, uuttaminen, saostaminen, uudelleen kiteyttäminen, jne. Tarpeen vaatiessa voidaan jokaista näistä yhdisteistä käsitellä sinänsä tunnetulla tavalla halutun suolan, esterin, jne. saamiseksi.

Erästä tämän keksinnön lähtömateriaaleista, nimittäin 2-(2-aminotiatso-li-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoetikkahappojohdannaista (lii) voidaan valmistaa soveltamalla useita eri menetelmiä, jotka seuraavassa selitetään yksityiskohtaisesti.

(I) Ensi sijassa saatetaan 4-halogeeni-3-okso-2-oksi-imino-voihappo-johdannainen, jonka kaava (VII) on seuraava: XCHgOOC-OOOI^ N (VII) or6 jossa X tarkoittaa halogeenia, esim. klooria tai bromia, Rg tarkoittaa vetyä tai metyyliä, Ry tarkoittaa alempaa alkyyliä, jossa on 1...3 hiiliatomia, esim. metyyliä, etyyliä, tai propyyliä, reagoimaan tio-karbamidin kanssa siten, että saadaan 2-(2-aminotiatsoli-4-yyli)-2-oksi-iminoetikkahappojohdannainen, jonka kaava (VIII) on “2._ ^ N —Ο-ΟΟΟΕη

N

Ϊ (VIII) or6 jossa kaavassa Rg ja R^ tarkoittavat samaa kuin edellä on määritelty. Molemmissa niissä tapauksissa, joissa Rg tarkoittaa vastaavasti vetyä tai metyyliä, saadaan yhdiste (VIII) normaalisti syn- ja anti-isomeerien seoksena. Tämä reaktio suoritetaan normaalisti saattamalla kaavan (VII) mukainen yhdiste reagoimaan tiokarbamidin kanssa orgaanisessa liuottimessa, esim. etanolissa, metanolissa, tai tetrahydrofuraanissa ja käyttämällä huoneenlämpöä tai korotettua lämpötilaa (O...100 °C, 6661 8 20 sopivasti 10...50 °G). Reaktioaika on rajoissa 1...30 tuntia, sopivasti 1...5 tuntia. Halutun syn-isomeerin eristämiseksi yhdisteen (VIII) syn- ja anti-muotojen seoksesta voidaan menestyksellisesti soveltaa jotain seuraavaa menetelmää. Näistä menetelmistä mainittakoon fraktio-noiva kiteyttäminen, jossa käytetään eduksi yhdisteen (Vili) isomeerien eri kiteytymiskykyjä tai liukoisuuksia sellaisinaan, voidaan muodostaa yhdisteen (Vili) vetyhaloidin suola (hromivetyhapon tai kloorivetyhapon suola) tai yhdisteen (VIII) johdannainen, joka on 2-aminoryhmän luona ja sisältää suojaryhmän, jolloin suojaryhmä (esim. monoklooriasetyyli tai diklooriasetyyli) on sisällytetty sinänsä tunnetun menetelmän avulla, ja edelleen voidaan käyttää eristämistä kromatografoimalla, tai sellaista menetelmää, että yhdiste (VIII) tai sellainen yhdiste (VIII), jonka 2-aminoryhmään on liitetty suojaryhmä, hydrolysoidaan sen esteriaseman luona sinänsä tunnetun menetelmän avulla kaavan (III) mukaiseksi karboksyylihappojohdannaiseksi, jolloin ainoastaan syn-iso-meeri eristetään selektiivisesti käyttämällä syn- ja anti-isomeerien erilaista hydrolysoitumisnopeutta hyödyksi.

Viimeksi mainittua menetelmää sovellettaessa ja ottaen huomioon anti-isomeerin suurempi hydrolysoitumisnopeus syn-isomeeriin verrattuna, voidaan anti-isomeeri hydrolysoida selektiivisesti ja poistaa. Reaktio, jossa yhdisteen (Vili) esterisidos hydrolysoidaan, jolloin tämän yhdisteen ('VIII) 2-aminoryhmän luona on substituentti tai ei, suoritetaan normaalisti siten, että läsnä on 1...useita mooliekvivalentteja alkali-metallihydroksidia, esim. kaliumhydroksidia tai natriumhydroksidia, jolloin lämpötila on rajoissa 0 °C...hupneenlämpö, ja reaktio suoritetaan vedessä tai veden ja veteen sekoittuvan orgaanisen liuottimen seoksessa, joista liuottimista mainittakoon esimerkkeinä metanoli, etanoli, asetoni, tetrahydrofuraani, dioksaani, N,Ν-dimetyyliformamidi tai N,N-dimetyyliasetamidi.

3iinä tapauksessa, että yhdisteen (VIII) symboli Rg tarkoittaa vetyä, voidaan eristetty syn-isomeeri muuttaa yhdisteen (Vili) syn-isomeeriksi. jossa R^ on metyyli, kohdistamalla edellä mainittuun yhdisteeseen (VIII) metylointi. Tämä metylointireaktio suoritetaan normaalisti liuottimes-sa, jota jäähdytetään jään avulla, jolloin lämpötila on lähellä huoneenlämpöä, jolloin reaktio monissa tapauksissa sujuu loppuun ajassa, joka on rajoissa 5 minuuttia...useita tunteja. Tähän tarkoitukseen voidaan käyttää mitä tahansa liuotinta, edellyttäen kuitenkin, että se ei vaikuta haitallisesti reaktioon. Niinpä voidaan käyttää esim. tetrahydro- 21 6661 8 furaania, dioksaania, metanolia, etanolia, kloroformia, metyleenidi-kloridia, etyyliasetaattia, butyyliasetaattia, N,N-diraetyyliformamidia, Ν,Ν-dimetyyliasetamidia ja vettä, samoin kuin näiden liuottimien seoksia. Metyloimisaineina voidaan käyttää esim. metyylihaloideja, esim. metyyli3odidia tai raetyylibromidia, dimetyylisulfaattia 3a diatsometaa-nia, muutamia harvoja mainitaksemme. Kaikissa näissä tapauksissa, lukuunottamatta tapausta, jossa käytetään diatsometaania, saatetaan yhdiste (VIII), jossa tarkoittaa vetyä, reagoimaan mainitun metyloi-misaineen kanssa siten, että läsnä on emästä, esim. alkalimetalli-karbonaattia (esim. natriumkarbonaattia, kaliumkarbonaattia, jne.) tai alkalimetallihydroksidia (esim. natriumhydroksidia, kaliumhydroksi-dia, jne.).

deuraavissa taulukoissa on esitetty täten saatujen, yhdisteiden (III) ja (VIII) syn-isomeerien fysikaalisia vakioita.

taulukko 1

Rakenne NMR-spektri Sulamispiste __ifiES}___β_0__ syn- H2N - d6-EMSO:ssa isomeeri J H r.nnnn^ 6.80s(5-H) 185.5 5 11.6s(0H)

' OH

syn- CDCl,:ssa ιιιβ41 H N S i isomeeri 2 ~ lf 'ϊ 6.74s(5-H) 165. ..164 N“JL ^°00°2¾ 4.02s(0CH7) N ^ \ βχη- H2M S CDCl3:ssa isomeeri J (j Q-QOOCH·. 6.74s(5-H), 164.9 5 4.02s(OOH3) xoch3 syn- S CDC1, C1CH«CÖNH>\ 3 isomeeri 2 Έ 1 C-C00CoHc 7.15s(5-H) 111...112 N 4.00s (00H3) noch5 6661 8 . 22 taul. 1 jatkuu_____________

Rakenne HMR-spektri sulamispiste

(ppm) C

C1CH900NH d6-IMSO

isomeeri i | q-OOOH 7»57s(5-H) 170... 171 N S 3.95s(OCH3) noch3 CICHpOONH _ ^ CDC13 isomeeri jj Il C-000CE» 7.24e(5-H), 130.8 5 4.02s (0CH3) _^ OCH^_

Iiuom. s : singletti

Metoksi-imino-(hydroksi-imino)-ryhmä on syn-isomeerissä cis-asemassa karboksyylifunktioon nähden ja on anti-isomeerissä trans-asemassa karboksyylifunktioon nähden.

(II) Oeuraavassa selitetään menetelmä, jonka avulla selektiivisesti voidaan valmistaa yhdisteen (lii) syn-isomeeriä. kun taas yhdisteen (VII) edellä mainittu reaktio tiokarbamidin kanssa antaa tulokseksi yhdisteen (Vili) syn- ja anti-isomeerien seosta, jolloin monissa tapauksissa yhdisteen (VIII) anti-isomeeriä muodostuu pääasiallisesti. Keksijöiden tähän syklisointireaktioon kohdistamat tutkimukset ovat valaisseet niitä olosuhteita, joiden vallitessa voidaan saada selektiivisesti muodostumaan haluttua syn-isomeeriä. Jos näin ollen kaavan (VII) reaktio tiokarbamidin kanssa kaavan (VIII) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi suoritetaan edellä selitetyissä olosuhteissa, saadaan syn- ja anti-isomeerejä normaalisti muodostumaan suhteessa 2:98...

50:50.

On kuitenkin todettu, että jos tämä syklisointireaktio suoritetaan vedessä tai veden ja veteen sekoittuvan liuottimen seoksessa, joista liuottimista mainittakoon esimerkkeinä metanoli, etanoli, asetoni, tetrahydrofuraani, dioksaani, Ν,Ν-dimetyyliformamidi, N,N-dimetyyli-asetamidi tai N-metyylipiperidoni, ja läsnä on emäksistä yhdistettä, saadaan yhdisteen (Vili) syn-isomeeriä selektiivisesti muodostumaan normaalisti suhteessa noin 85:15...100:0. Esimerkkeinä emäksisistä yhdisteistä, joita voidaan käyttää tässä reaktiossa, mainittakoon alkali- tai maa-alkalimetallien ja alempien alifaattisten karboksyyli-happojen suolat, ja epäorgaaniset tai orgaaniset emäkset, joiden pH-arvot ovat vähintään 9,5 ja sopivasti ovat rajoissa 9,8...12,0. Esimerkkeinä mainittujen alempien alifaattisten karboksyylihappojen suoloista mainittakoon 1...6 hiiliatomia sisältävien alempien alifaat- 23 6 661 8 tisten karboksyylihappojen suolat, joista mainittakoon natriumasetaat-ti, kaliumasetaatti, kalsiumasetaatti, bariumasetaatti, natriumformi-aatti, natriumpropionaatti, kaliumheksanoaatti, jne., kun taas esimerkkeinä epäorgaanisista emäksistä mainittakoon hiilihapon alkalimetalli-suolat, kuten natriumkarbonaatti, kaliumkarbonaatti, jne. Mainittuina orgaanisina emäksinä esitettäköön esimerkkeinä tri-alempi-alkyyli-substituoidut amiinit, joiden alemmassa alkyylissä on 1...4 hiili-atomia, esim. trimetyyliamiini, trietyyliamiini, tributyyliamiini, jne., ja 5...6-osaiset sykliset amiinit, jotka on N-asemassa substitu-oitu 1...2 hiiliatomia sisältävillä alemmilla alkyyleiliä, joista mainittakoon N-metyylipyrrolidiini, N-etyylipyrrolidiini, N-metyyli-piperatsiini, N-etyylipiperatsiini, jne. Siinä tapauksessa, että liuottimena käytetään Ν,Ν-dimetyyliformamidia, N,N-dimetyyliasetami-dia tai N-metyylipyrrolidonia, ei aina ole välttämätöntä lisätä edellä mainittua emäksistä yhdistettä. Reaktiolämpötila ja -aika valitaan yleensä rajoissa 0...50 °C (sopivasti 0...30 °C), ja 1...30 tuntia (sopivasti 1...5 tuntia).

(III) Yhdisteen (Vili) syn-isomeeriä voidaan myös selektiivisesti valmistaa seuraavalla tavalla. Pyrittäessä kehittämään menetelmä syn-isomeerin selektiiviseksi valmistamiseksi on todettu, että saattamalla kaavan (IX) mukainen 2-amino-tiatsoli-4-yyli-glyoksyylihappojohdannainen reagoimaan O-metyylihydroksyyliamiinin kanssa, voidaan selektiivisesti saada metoksi-iminoyhdisteen syn-isomeeriä.

*»“ fi «-<*», <"» 8 jossa kaavassa Rg ja R^ tarkoittavat samaa kuin edellä on määritelty.

Tämä reaktio voidaan mukavasti suorittaa sopivassa liuottimessa, jonka pH-arvo on rajoissa noin 4,0...9»0. Mainittuna liuottimena voidaan käyttää mitä tahansa liuotinta, joka ei vaikuta haitallisesti reaktioon. Esimerkkeinä mainittakoon eetterit, kuten etyylieetteri, tetrahydro-furaani, dioksaani, jne., alemmat alkoholit, esim. metanoli, etanoli, jne., halogenoidut hiilivedyt, kuten kloroformi, metyleenidikloridi, jne. esterit, kuten etyyliasetaatti, butyyliasetaatti, jne., vettä ja \ näiden liuottimien seokset. Vaikka tämä reaktio edistyy suunnilleen 24 6 661 8 huoneenlämmössä, voidaan sitä nopeuttaa lämmittämällä. Reaktiolämpö-tila ja -aika valitaan yleensä rajoissa O...100 °C (sopivasti 0...50 °C), ja rajoissa 1...10 tuntia (sopivasti 1...5 tuntia).

Tämän reaktion lähtöyhdistettä (IX) voidaan valmistaa seuraavassa selitettävän reaktion avulla. Niinpä voidaan hydrolysoida kaavan (X) mukainen nitroyhdiste: R9NH . .

li 1 0-0Q0R7 x Ö-N-CH^ jossa kaavassa R^ ja R^ tarkoittavat samaa kuin edellä on määritelty, jolloin saadaan yhdistettä (IX). Tämä hydrolysointireaktio tapahtuu sopivasti mineraalihapon ollessa läsnä, ja suoritetaan yleensä liuottimena. Ilineraalihapon esimerkkeinä mainittakoon kloorivetyhappo, rikki-ho.ppo, fosforihappo, jne. Liuottimena voidaan käyttää mitä tahansa sopivaa liuotinta, joka ei haittaa reaktiota. Liuottimen esimerkkeinä mainittakoon eetterit, esim. tetrahydrofuraani, dioksaani, jne., alkoholit, esim. etanoli, metanoli, jne., ketonit, esim. asetoni, metyylietyyliketoni, vesi, ja näiden liuottimien seokset. Tämä reaktio voidaan normaalisti suorittaa jään avulla jäähdyttäen tai huoneenlämmössä. Lähtöyhdistettä (X) voidaan valmistaa kohdistamalla mety-lointireaktio kaavan (VIII) mukaiseen yhdisteeseen, jossa tarkoittaa vetyä, ja jonka amiiniryhmä on 2-asemassa suojattu.

Tämän metyloimisreaktion olosuhteet ovat pääasiallisesti samat kuin ne olosuhteet, joissa edellä mainittu yhdiste (VIII), jossa Rg tarkoittaa vetyä, metyloidaan (vrt. edellä mainittua menetelmää I).

Ldellä mainituissa metyloimisolosuhteissa yhdisteen (VIII) syn-isomeerin metylointi, jossa Rg tarkoittaa vetyä, ei anna tulokseksi mitään sanottavaa määrää tätä nitroniyhdistettä (X), mutta yhdisteen (VIII) anti-isomeerin metylointi, jolloin Rg tarkoittaa vetyä, antaa tätä nitroniyhdistettä (X) pääasiallisena tuotteena.

Kaavan (VII) mukaista yhdistettä voidaan valmistaa esim. soveltamalla menetelmää, joka on selitetty julkaisussa Journal of Medicinal Chemistry 16,1·‘978(1973), Helvetica Chimica Acta, 49, 26 (1966), Journal of the 6661 8 25

American Chemical Society, 60, 1328(1938) ja Iän si-sales alaisessa kuulutusjulkaisussa no 2556736 tai soveltamalla muuta tämänkaltaista menetelmää. Keksinnön mukaan käytettävää kaavan (II) mukaista yhdistettä voidaan valmistaa esim. soveltamalla jotain sopivaa menetelmää niiden menetelmien joukosta, jotka on selitetty US-patenteissa no 3875151 ja 3697515, länsi-saksalaisessa kuulutusjulkaisussa no 2461478, länsi-saksalaisessa kuulutusjulkaisussa no 2607064 (hollantilainen patenttihakemus no 7601902), länsi-saksalaisessa kuulutusjulkaisussa no 2619243, japanilaisessa kuulutusjulkaisussa no 52083/1975, länsisaksalaisissa kuulutusjulkaisuissa no 2460331 ja 2460332, tai soveltamalla näiden menetelmien analogisia menetelmiä.

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä, joissa R^ tarkoittaa karbamoyylioksi-tai monohaloasetyylikarbamoyylioksiryhmää, voidaan myös valmistaa esim. soveltamalla seuraavassa selitettyä menetelmää: CHpOH X' ΟΗ2°°Νσο 0H20CNHCCH2X' 0 I monohalogeeni- 0, /Ax 000H as e tyyli -is syanaatti (0) (b) 7-asemassa olevan asyyli- suojaryhmän (C0CH2X') ryhmän poistaminen poistaminen I ' 'y '' OH^C-NHO-OI^X· COOH ° (d° R0SH ___r3.

I 0H2OO-NH2 asylointi 7-asemaan. u _T 0

X / „ \ 000H

R2NH

tr 11 n muv o 7-asemassa olevan 'η—asyyliryhmän poista- ^ \ -CHpOC-NHCGHpX1 minen ogh3 gdoh 8 8 *

h2N—I—f'S

n. CH20C-NH2

suojaryhmän 0 S

(C-CHpX·) pois-^ y °°0H

taminSn R UH s asylointi 7-asemaan

0 2 H-if-CONH

^0CH3 O^Ny^- CH2000NH2 COOH

6661 8 26 joissa kaavoissa Rq tarkoittaa vetyä tai asyyliryhmää, X‘ on halogeeni, kuten kloori, bromi tai jodi, ja i^NH tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty.

Kaavan (a) mukaisen 3-desasetyyli-kefalosporiinihappojohdannaisen reaktio monohalogeeniasetyyli-isosyanaatin (B) kanssa suoritetaan normaalisti saattamalla molemmat reaktiokomponentit kosketukseen sopivassa liuottimessa, joko jään avulla jäähdyttäen tai lähellä huoneenlämpöä olevassa lämpötilassa. Liuottimena voidaan käyttää mitä tahansa liuotinta, joka ei vaikuta haitallisesti reaktioon. Esimerkkeinä mainittakoon eetterit, kuten etyylieetteri, tetrahydrofuraani, dioksaani, jne., ketonit esim. asetoni, metyylietyyliketoni, jne., halogenoidut hiilivedyt, esim. kloroformi, metyleenidikloridi, tri-kloorietaani, jne., esterit, esim. etyyliasetaatti, butyyliasetaatti, jne., ja näiden liuottimien seokset. Monohalogeeniasetyyli-isosyanaa-tin (B) määrä on noin 1...useita moolia lähtöyhdisteen (A) moolia kohden. Monohalogeeniasetyyli-isosyanaattia (B) voidaan valmistaa esim. soveltamalla menetelmää, joka on selitetty julkaisussa Journal of Organic Chemistry, 27» 3742 (1962), tai jotain analogista menetelmää.

Reaktio 7-asyyliryhmän poistamiseksi kaavan (C) tai (g) mukaisesta yhdisteestä voi olla mikä tahansa reaktio, jota yleisesti käytetään penisilliinien ja kefalosporiinien deasyloimiseksi. Esimerkkeinä mainittakoon menetelmät, jotka on selitetty länsi-saksalaisessa kuulutusjulkaisussa no 2460331 ja 2460332, japanilaisissa patenttijulkaisuissa no 13862/1966, 40899/1970 ja 34387/1972 ja US-patenteissa no 3632578. Esimerkkinä mainittakoon, että yhdistettä (G) tai (g) ) käsitellään imidihaloidia muodostavan aineen kanssa vastaavan imidi-haloidin saamiseksi ensivaiheessa, ja viimeksi mainittua yhdistettä käsitellään sitten alkoholilla vastaavan imidieetterin saamiseksi.

Tämä imidieetteri hydrolysoidaan vastaavaksi 7-aminojohdannaiseksi (d) tai((h) ).

Tällaisena imidihaloidin muodostavana aineena voidaan käyttää jotain sellaista haloidia,joka on johdettu hiilestä, fosforista ja/tai rikistä, ja happohaloidia, joka on johdettu niiden oksihapoista (esim. fosfori-oksikloridi, fosforipentakloridi, fosforitrikloridi, tionyylikloridi, fosgeeni, oksalyylikloridi, protokatekoyyli-fosforitrikloridi, p-tolueenisulfonyylikloridi, jne.). Tämä imidihaloidia muodostava reaktio 27 6 6 6 1 8 suoritetaan normaalisti sopivasti liuottimessa. Liuottimena voidaan tähän tarkoitukseen käyttää sekä tavanomaisia inerttejä liuottimia (esim. metyleenidikloridia, kloroformia jne) että myös tertiäärisiä amiineja (esim. trietyyliamiinia, pyridiiniä, dimetyylianiliinia, jne), ja muita liuottimia, samoin kuin näiden liuottimien seoksia. Reaktio imidieetterin muodostamiseksi suoritetaan saattamalla imidihaloidin reaktiokomponentit kosketukseen alkoholin kanssa. Alkoholeina voidaan normaalisti käyttää 1...4 hiiliatomia sisältäviä alkanoleja, esim. metanolia, etanolia, ja n-butanolia. Edellä mainittu hydrolyysi suoritetaan saattamalla imidoeetteriä sisältävä reaktioseos kosketukseen veden kanssa. Sivureaktioiden välttämiseksi edellä mainitut reaktiot sopivasti suoritetaan jäähdyttäen.

Reaktio monohaloasetyyliryhmän poistamiseksi yhdisteestä (c) (tai (e) ) suoritetaan pääasiallisesti samalla tavalla kuin edellä on selitetty, kun sama ryhmä on poistetava yhdisteestä (I).

Edellä mainittuihin kaavoihin (a) ja (B) viitaten voi symbolin Rq edustamana asyyliryhmänä olla jokin seuraavista esimerkkeinä mainituista ryhmistä, nimittäin asyyliryhmät, jotka on johdettu suoraketjuisesta alifaattisesta karboksyylihaposta, joka sisältää enintään 10 hiili-atomia, ja asyyliryhmät, jotka on johdettu sykloalifaattisista karbok-syylihapoista, joissa on enintään 6 hiiliatomia, esim. formyyli, asetyyli, propionyyli, helcsanoyyli, butanoyyli, heptanoyyli, oktano-yyli, syklopentanoyyli, jne., asyyliryhmät, jotka on johdettu fenyyli-tai fenoksi-substituoiduista enintään 4 hiiliatomia sisältävistä alemmista alifaattisista karboksyylihapoista, esim. fenyyliasetyyli, fenoksiasetyyli, <X -fenoksipropionyyli, o<-fenoksibutyryyli, p-nitro-fenyyliasetyyli, jne., asetyyli- tai tioasetyyliryhmät, jotka on substituoitu 5- tai 6-osaisella heterosyklisellä ryhmällä, jossa on yksi N-, E- tai O-heteroatomi, taikka yksi 5- tai 6-osainen hetero-syklinen ryhmä, jossa on tämä heteroatorai ja lisäksi 1...3 hetero-atomia N, E ja O, joka viimeksi mainittu heterosyklinen ryhmä puolestaan voi valinnanvaraisesti olla substituoitu amino- tai hydroksyyli-ryhmällä, tai vastaavalla heterosyklisellä okoiryhmällä, joista esimerkkeinä mainittakoon 2-tienyyliasetyyli, tetratsolyyliasetyyli, tetratsolyylitioasetyyli, Ci -(2-pyridyylioksi)-asetyyli, <X-(3-pyri-dyylioksi)-asetyyli, o( -(4-pyridyylioksi)-asetyyli, 2-(2-hydroksitio-atsoli-4-yyli)-asetyyli, 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-asetyyli·,· 4-pyri- 28 6 661 8 dyylitioasetyyli, 1-pyratsolyyliasetyyli, 2-furyyliasetyyli, 6-(2’-okso-3'-metyylipyridatsinyyli)-tioasetyyli, jne., asyyliryhmät, jotka on johdettu monosubstituoiduista alifaattisista karboksyylihapoista, esim. syaanoasetyyli, asetoasetyyli, U>-halogeeniasetoasetyyli, 4- metyylitio-3-oksobutyryyli, 4-karbamoyylimetyylitio-3-okso-butyryyli, jne., oi-substituoidut fenyyliasetyyliryhmät, esim. mandelyyli, c\-karboksifenyyliasetyyli, oi-aminofenyyliase tyyli, oi^-sulfofenyyliase-tyyli, oi-sulfo-(p-aminofenyyli)-asetyyli, ci-(p>-metyylisulfonyyli-etoksikarbonyyli)-aminofenyyliasetyyli, jne., glysyyliryhmät, jotka on 0(-asemassa substituoitu 5- tai 6-osaisella renkaalla, jossa on yksi O- tai S-atomi heteroatomina, tai 5- tai 6-osaisella renkaalla, johon sisältyy mainittu heteroatomi ja yksi N-atomi ylimääräisenä heteroatomina, joka viimeksi mainittu rengas voi olla substituoitu amino- tai hydroksyyliryhmällä, ja joista esimerkkeinä mainittakoon fenyyliglysyyli, 1-sykloheksenyyliglysyyli, sykloheksadienyyliglysyyli, tienyyliglysyyli, p-hydroksifenyyliglysyyli, furyyliglysyyli, 2-amino-tiatsol-4-yyli-glysyyli, 2-hydroksitiatsol-4-yyli-glysyyli, jne., asyyliryhmät, jotka on johdettu di-substituoiduista alifaattisista karboksyylihapoista, ja joista esimerkkeinä mainittakoon 5-amino-5-karboksivaleryyli, jne., ja heterosykliset asyyliryhmät, esim. 5-metyyli-3-fenyyli-4-iso-oksatsolyylikarbonyyli, 3-(2,6-dikloorifenyyli)- 5- metyyli-4-iso-oksatsolyylikarbonyyli, jne.

Yhdistettä (a) voidaan yleisesti valmistaa (1) asyloimalla 7-amino-kefalosporiinihappo (7-ACA) asyloimisaineella, joka vastaa symbolin RQ edustamaa asyyliryhmää, ja soveltamalla sinänsä tunnettua menetelmää kefalosproriiniyhdisteen 7-asemassa olevan aminoryhmän asyloimi-seksi, kuten edellä on mainittu, ja poistamalla 3-asetyyliryhmä entsymaattisesti tästä samasta kefalosporiinista, jossa on 3-asetoksi-metyyliryhmä ( Biochemical Journal 81.» 591 (1961) ) tai (2) valmistamalla käymismenetelmän avulla 7-(D-5-aminoadipiiniamido)-3-hydroksi-metyyli-3-kefeeni-4-karboksyylihappo, deasetyylikefalosporiini O, DCPC) (Nature 246. 154 (1973); japanilainen kuulutusjulkaisu no 491/1974).

Mahdollisesti substituoitu heterosyklinen tioliyhdiste R^dH, jossa R^ tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty, ja jota käytetään nukleo-fiilisenä yhdisteenä keksinnön mukaan, voidaan valmistaa synteettisesti esim. soveltamalla menetelmää, joka on selitetty julkaisuissa Journal fiir praktische Chemie, NF 133 (1932), Heterocyclic compounds, 8, 29 6661 8 julkaissut Robert C. Elderfeld (John Wiley & Sons) ja Advances in Heterocyclic Chemistry, julkaissut A.R. Katritaky, A.J. Boulton (Academic Press), tai soveltamalla analogisia menetelmiä.

yhdistettä (IV) voidaan valmistaa esim. soveltamalla menetelmää, joka on selitetty belgialaisessa patentissa nro 719710 tai jollain vastaavalla tavalla. Vaihtoehtoisesti tätä yhdistettä voidaan valmistaa soveltamalla edellä mainittua menetelmää (1) yhdisteeseen (III) ja yhdisteeseen (IV), jossa -0¾¾ on -CH2R4, ja joka voidaan saada soveltamalla jotain edellä mainittua menetelmää, esim. menetelmää yhdisteen (II) valmistamiseksi, tai jotain vastaavaa menetelmää. Yhdistettä (VI) voidaan valmistaa esim. soveltamalla menetelmää, joka vastaa länsi-saksalaisessa kuulutusjulkaisussa nro 2556736 selitettyä mentelmää, tai saattamalla yhdiste (II) reagoimaan yhdisteen (VIII) syn-isomeerin kanssa, jossa Rg tarkoittaa vetyä.

Keksintö havainnollistetaan seuraavassa yksityiskohtaisesti eräiden esimerkkien avulla. nAmberlitel1-nimisiä hartseja valmistaa toiminimi Rohm & Haas Co, USA. Kaikki lämpötilat ovat korjaamattomia arvoja, ja prosenttimäärät tarkoittavat painoa, ellei nimenomaan muuta sanota. Ydinmagneettisesta resonanssi spektristä käytetään lyhennettä NMR, ja mitataan käyttämällä "Varian Model HA100"-tyyppistä (100 MHz) tai T60-tyyppistä (60 MHz) spektrometriä ja käyttämällä tetrametyyli-silaania sisäpuolisena tai ulkopuolisena vertailuna, jolloin kaikki δ-arvot on lausuttu miljoonaosina (ppm). Symboli s tarkoittaa singlettiä, d dublettia, t triplettiä, q kvartettia, m multiplettia ja J kytkentävakiota.

Seuraavat viite-esimerkit havainnollistavat lähtöaineiden valmistusta.

Viite-esimerkki 1

Liuokseen, jossa on 13,3 g natriumkarbonaattia 120 ml:ssa vettä, liuotetaan 10 g etyyli-3-okso-2-hydroksi-imino-butyraattia, minkä jälkeen lisätään 30 ml meta-nolia. Seos jäähdytetään jään avulla ja lisätään tiputtaen 15,8 g dimeteyyli-sulfaattia 3 minuutin kuluessa, jolloin samalla sekoitetaan. Lisäyksen päätyttyä jääkylpy poistetaan ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 40 minuuttia. Reaktio-seos, jonka pH-arvo on 8 tai suurempi, uutetaan kahdesti etyyliasetaatilla, uutokset yhdistetään, pestään vedellä ja kuivataan. Tämän jälkeen liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa, ja jäännös tislataan, myös alennetussa 30 6 6 6 1 8 paineessa. Edellä selitetyn menetelmän avulla saadaan 9 g etyyli-3-okso-2-metoksi-iminobutyraattia vaaleankeltaisena öljynä, joka kiehuu 56...61 °C/0.3...0.4 mm Hgissa.

Yhdisteen C^H^NO^ alkuaineanalyysi Laskettu C 48.54; H 6.40; N 8.08

Todettu C 48.41; H 6.51; N 7.96 NMR-spektri (60 MHz GDCl^;ssa): 2.40 ppm (3H, singletti, CH^OO), 4.10 ppm (3H, singletti, = NOCH^) Viite-esimerkki 2 (1) Liuotetaan 120 mljaan kloroformia 27,3 g etyyli-3-okso-2-metoksi-imino-butyraattia ja liuos lämmitetään 40 °C:een. Tämän jälkeen lisätään 30 minuutin kuluessa liuos, jossa on 25,3 g bromia 30 ml:ssa kloroformia. Seosta sekoitetaan, ja annetaan sen reagoida huoneenlämmössä tunnin ajan. Tämän jälkeen reaktioseos pestään natriumbikarbonaatin 5% vesiliuoksella ja vedellä tässä järjestyksessä, minkä jälkeen orgaaninen kerros kuivataan. Liuotin poistetaan tislaamalla alennetussa paineessa, jolloin saadaan 36,2 g etyyli-4-bromi-3-okso-2-metoksi-iminobutyraattia öljymäisenä tuotteena.

NMR spektri (60 MHz, CDCl^jssa): 4.16 ppm (3H, singletti, OCH^), 4.36 ppm (2H, singletti, BrC^CO).

(2) Liuotetaan 20 mljaan etanolia 5 g edellä mainittua yhdistettä, minkä jälkeen lisätään 1,8 g tiokarbamidia. Seosta keitetään 3 tuntia palautustislausta soveltaen. Reaktioseoksen jäähdyttyä muodostunut sakka otetaan talteen suodattamalla ja liuotetaan 20 mljaan vettä, johon on lisätty natriumbikarbonaattia. Erottunut öljy uutetaan etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerros pestään vedellä ja kuivataan. Tämän jälkeen etyyliasetaatti haihdutetaan, jolloin saadaan valkoisia kiteitä. Etanolista uudelleen kiteyttämällä saadaan 2,6 g (57,2%) etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(anti)-metoksi-iminoasetaattia valkoisina kiteinä, sulamispiste 114...115 °C.

Yhdisteen CgH^N^O^S alkuaineanalyysij Laskettu C 41.91; H 4.84; N 18.33

Todettu C 41.71; H 4.75; H 18.07 NMR-spektri (60 MHz CDCl^JSsa)j 4.07 ppm (3H, s., OCH^), 5.80 ppm (2H, br. s., NHg), 7.43 ppm (1H, s., tiatsoli 5 H).

31 6661 8 (3) Suodos, joka saadaan otettaessa talteen ensimmäinen osa sakasta, konsentroidaan alennetussa paineessa, ja jäännökseen lisätään natriumbikarbonaattia. Seos uutetaan etyyliasetaatilla, ja etyyliasetaatti-kerroksesta saatu öljy puhdistetaan pylväskromatografoimalla piihappo-geelin avulla. Edellä mainitun menetelmän avulla saadaan 59 mg (1,3%) etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetaattia valkoisina kiteinä, sulamispiste 163...164 °C.

Yhdisteen CgH^N^O^S alkuaineanalyysi: laskettu C 41.91; H 4.84; N 18.33

Todettu C 41.37; H 4.76; N 18.07 NMR spektri (60 MHz CDCl^issa) 4.02 ppm (3H, s., OCH^), 5.80 ppm (2H, br. s., NH2), 6.74 ppm (1H, s., tiatsoli 5H).

Viite-esimerkki 3

Lisätään 600 mljaan etanolia 121 g etyyli-4-kloori-3-okso-2-hydroksi-iminoasetaattia ja 47,6 g tiokarbamidia, ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 3 tuntia. Tämän jälkeen etanoli haihdutetaan pois alennetussa paineessa, ja lisätään 350 ml vettä. Vesikerros pestään eetterillä, neutraloidaan natriumbikarbonaatin avulla pH-arvoon =7,5, ja uutetaan etyyliasetaatin ja tetrahydrofuraanin 1:1 seoksella. Orgaaninen kerros pestään vedellä ja kuivataan. Tämän jälkeen liuotin poistetaan tislaamalla, jolloin saadaan 45 g kiteistä tuotetta.

Otetaan 1 g tätä tuotetta ja puhdistetaan pylväskromatografoimalla piihappogeelin avulla, jolloin eluointiliuottimena käytetään etyyliasetaatin ja n-heksaanin seosta. Ensimmäisestä fraktiosta saadaan 650 mg etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-hydroksi-imino-asetaatin anti-isomeeriä ja toisesta fraktiosta saadaan 150 mg syn-isomeeriä. Anti-isomeeri on valkoisia kiteitä, sulamispiste 145,3 °C.

Syn-isomeeri on vaaleankellertäviä valkoisia kiteitä, sulamispiste 185,5 °C.

Yhdisteen C^H^NjO^S alkuaineanalyysi:

Laskettu 0 39.06; H 4.21; N 19.52

Todettu (Anti-) C 38.81; H 4.20; N 19.62 (Syn-) C 39.28; H 4.10; N 19.63.

NMB.-spektri (60 MHz, dg-IMSO:ssa):

Anti-isomeeri: 7.10 ppm(2H, br. s., NH2), 7.50 ppm (1H, s., tiatsoli 5-H), 12.5 ppm (1H, s., OH).

32 6 6 6 1 8

Syn-isomeeri: 6.80 ppm (1H, s., tiatsoli 5-H), 7.12 ppm (2H, br. s., NH2), 11.6 ppm (1H, s., OH).

Viite-esimerkki 4

Liuotetaan 150 ml:aan vettä 10,6 g natriumkarbonaattia, minkä jälkeen lisätään liuos, jossa on 10,7 g etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-hydroksi-iminoasetaattia seoksessa, jossa on 150 ml tetrahydro-furaania ja 50 ml metanolia. Jääkylvyssä jäähdyttäen lisätään tiputtaen 5 minuutin kuluessa 12,6 g dimetyylisulfaattia. Lisäyksen päätyttyä jääkylpy poistetaan ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä. Sekoittamisen aikana alkaa valkoisten kiteiden kiteytyminen. 3 tunnin kuluttua poistetaan suurin osa orgaanisesta liuottimesta tislaamalla alennetussa paineessa, ja jäännöstä jäähdytetään jään avulla. Muodostunut sakka otetaan talteen suodattamalla, pestään vedellä ja kuivataan.

Täten saadaan 5 g etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetaattia valkoisina kiteinä. NMR-spketrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tuotteen todetaan olevan etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetaattia.

Viite-esimerkki 5

Liuotetaan 10 ml:aan N,N-dimetyyliasetamidia 2,15 g etyyli-2-(2-amino-tiatsoli-4-yyli)-2-^yn)-metoksl-iminoasetaattia (sulamispiste 163...

164 °C) ja lisätään tiputtaen 1,27 g klooriasetyylikloridia, jolloin jäähdytetään jääkylvyssä. Seosta sekoitetaan 30 minuuttia jääkylvyssä jäähdyttäen, ja tämän jälkeen 30 minuuttia huoneenlämmössä. Saatu seos laimennetaan 50 ml:aan vettä ja uutetaan kahdesti 100 ml:n määrillä etyyliasetaattia. Uutokset kootaan, pestään natriumbikarbonaatin 5% vesiliuoksella ja natriumkloridin kyllästyneellä vesiliuoksella tässä mainitussa järjestyksessä, minkä jälkeen kuivataan. Tämän jälkeen liuotin haihdutetaan, jolloin saadaan 2,04 g etyyli-2-(2-klooriasetami-do-tiatsol-4-yyli)-2-(syn)-Ecboksi-iminoasetaattla kiteisenä tuotteena, jonka sulamispiste on 111...112 °C.

Yhdisteen C^H^N^O^SCl alkuaineanalyysi:

Laskettu C 39.29; H 3.96; N 13.74

Todettu C 39.15; H 3.91; N 13.69 NMR spektri (60 MHz, CDCl^issa): 4.00 ppm (3H, s., e NOCH^), 4.24 ppm (2H, s, CICHgOO), 7.15 ppm (1H, s., tiatsoli 5-H).

V : ' 33

Viite-esimerkki 6 6661 8

Liuokseen, jossa on 9 g kaliumhydroksidia seoksessa, jossa on 85 ml vettä ja 452 ml etanolia, lisätään 9,62 g etyyli-2-(2-kloori-asetamido-tiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetaattia. ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 2 tuntia. Tämän jälkeen etanoli poistetaan tislaamalla alennetussa paineessa, minkä jälkeen lisätään 85 ml vettä, ja jäännös pestään 100 ml:11a etyyliasetaattia. Vesikerroksen pH säädetään arvoon 2 kloorivetyhapon 10% liuoksella ja uutetaan kahdesti 200 ml:n erällä etyyliasetaattia. Uutokset yhdistetään, pestään natriumklori-din kyllästyneellä vesiliuoksella ja kuivataan. Tämän jälkeen liuotin poistetaan tislaamalla, jolloin saadaan 7,63 g 2-(2-klooriasetamido-tiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metokBi-imino-etikkahappoa kiteinä, jotka sulavat 170...171 °C:ssa.

Yhdisteen GgHgN^O^SCl alkuaineanalyysi laskettu C 34.60, H 2.90, N 15.15

Todettu C 34.97, H 3.03, N 14.74 NMR spektri (60 MHz d^-IMS0:ssa): 3.95 ppm (3H, singletti, · NOCH^), 4.40 ppm (2H, singletti, CICHgOO), 7.57 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H).

Viite-esimerkki 7

Klooriasetyloidaan 2,38 g etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetaatin syn- ja anti-isomeerien 7:8-seosta klooriasetyyliklori-dilla, kuten viite-esimerkissä 5, ja etyyli-2-(2-klooriasetamido-tiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetaatin syn- ja anti-muotojen saatuun seokseen lisätään 30 ml eetteriä. Erottuneet kiteet otetaan talteen suodattamalla (tuote (A) ). NMR-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tämän tuotteen todetaan olevan samaa kuin viite-esimerkin 5 mukaan saatu etyyli-2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetaatti. Tuotos 600 mg.

öljy, joka saadaan konsentroimalla suodos (2,42 g syn- ja an/ti-·isomeerien seosta) lisätään liuokseen, jossa on 879 ml kaliumhydroksidia seoksessa, jossa on 5 ml vettä ja 80 ml etanolia, jääkylvyssä jäähdyttäen, ja koko seosta sekoitetaan tässä lämpötilassa 15 minuuttia.

Tämän jälkeen etanoli tislataan pois alennetussa paineessa, ja jäännös laimennetaan 50 ml:11a vettä ja uutetaan kahdesti 100 ml:n erillä etyyliasetaattia. Etyyliasetaattikerros pestään vedellä ja kuivataan. Tämän jälkeen etyyliasetaatti tislataan pois, jolloin saadaan 577 mg etyyli-2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoase- 34 6661 8 taattia (tuote (B) ). NMR-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tämän tuotteen todetaan olevan samaa kuin viite-esimerkin 5 mukaan valmistettu syn-isomeeri. Tuotteista (A) ja (B) saadaan yhteensä 1076 g suuruinen tuotos, eli prosentteina 96,8%.

Viite-esimerkki 8

Liuotetaan 600 ml:aan 50% tetrahydrofuraanin vesiliuosta 67,8 g etyyli-4-kloori-3-okso-2-hydroksi-iminoasetaattia, minkä jälkeen lisätään 155 g natriumasetaattitrihydraattia ja 53,2 g tiokarbamidia.

Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 4 tuntia. Tämän jälkeen reaktio-seoksen pH säädetään arvoon 7,0 natriumbikarbonaatin avulla, lisätään natriumkloridia, minkä jälkeen uutetaan kahdesti 300 ml:11a tetrahydro-furaania. Uutokset yhdistetään, pestään vedellä ja kuivataan. Tämän jälkeen tetrahydrofuraani tislataan pois, jolloin saadaan 27,5 g etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-hydroksi-iminoasetaattia kiteinä. HMR-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tämän tuotteen todetaan olevan syn- ja anti-isomeerien 82:18 seosta.

Samankaltainen reaktio suoritetaan ilman natriumasetaattia. Samojen ominaisuuksien perusteella todetaan saadun tuotteen olevan syn- ja anti-isomeerien 25:75 seosta.

Viite-esimerkki 9

Toistetaan viite-esimerkin 8 reaktio, lukuunottamatta että käytetään etanolin 50% vesiliuosta tetrahydrofuraanin 50% liuoksen asemesta. Tässäkin tapauksessa saadaan käyttämällä natriumasetaattia etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-hydroksi-iminoasetaatin syn- ja anti-isomee-rien 83:17 seosta. Jos sen sijaan ei käytetä natriumasetaattia, saadaan tämän reaktion tuloksena syn- ja anti-isomeerien 50:50 seosta. Syn- ja anti-isomeerien osamäärät määritetään NMR-spektrin ja muiden menetelmien avulla.

Viite-esimerkki 10

Toistetaan viite-esimerkin 9 mukainen reaktio, paitsi, että käytetään Ν,Ν-dimetyyliasetamidia tetrahydrofuraanin ja natriumasetaatin 50% vesiliuoksen asemesta. Täten saadaan etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-hydroksi-iminoasetaatin syn- ja anti-isomeerien 85:15 seosta.

35

Viite-esimerkki 11 6 6 61 8 1.1. Seokseen, jossa on 10 ml tetrahydrofuraania ja 5 ml etyyliasetaattia, lisätään 1 g etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(anti)-hydroksi-imino-asetaattia (sulamispiste 145,3 °C), minkä jälkeen lisätään ylimäärin diatsometaanin eetteriliuosta. Seoksen annetaan olla huoneenlämmössä 2 vuorokautta. Sen jälkeen, kun jäljellä oleva diatso-metaani on hajotettu etikkahapon avulla, konsentroidaan reaktioseos alennetussa paineessa, ja jäännös kiteytetään uudelleen etyyliasetaatista. Täten saadaan 0,8 g metyylinitroniyhdistettä, toisin sanoen N-(2-aminotiatsol-4-yyli-etoksikarbonyyli)-metyleenimetyyliamiinin N-oksidia, keltaisina kiteinä, jotka sulavat 184...185 ^Cissa. Yhdisteen C8H32N3O3S alkuaineanalyysi C(%) H (%) N(%)

Laskettu 41,91 4,84 18,33

Todettu 41,86 4,75 18,35 + NMR-spektri (60 MHz CDCl3:ssa): 3,82 ppm(3H,singletti, N-CH3), 5,27 ppm(2H,br. sing-letti,NH2), 8,49 ppm(lH,singletti, tiatsoli 5-H).

1.2 Liuokseen, jossa on 25 mg natriumia 8 ml:ssa metanolia, lisätään 215 mg etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(anti)-hydroksi-iminoasetaattia (sulamispiste 145,3 °C), ja lisätään huoneenlämmössä 280 mg metyylijodidia. Seosta sekoitetaan 45 minuuttia, minkä jälkeen se konsentroidaan alennetussa paineessa. Jäännös laimennetaan vedellä (pH = 7 tai suurempi) ja uutetaan etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerros pestään vedellä, kuivataan ja konsentroidaan. Jäännös kiteytetään uudelleen tetrahydrofuraanin ja etyyliasetaatin seoksesta. Täten saadaan 160 mg metyylinitroniyhdistettä keltaisina kiteinä. Tämä tuote on täydellisesti sanaa kuin kohdan 1.1. mukaan saatu tuote.

1.3 Suodos, joka saadaan sen jälkeen, kun on otettu talteen saostunut etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2- (syn)-metoksi-iminoasetaatti viite-esimerkin 4 mukaisessa menetelmässä saadusta konsentroidusta reaktioseoksesta, uutetaan tetrahydrofuraanin ja etyyliasetaatin 1:1 seoksella, ja uutos pestään vedellä, kuivataan ja konsentroidaan. Jäännöksenä saatuun ruskeanväriseen öljyyn lisätään 20 ml tetrahydrofuraania ja seoksen annetaan seistä yli yön jääkaapissa. Muodostuneet kiteet otetaan talteen suodattamalla ja kiteytetään uudelleen etyyliasetaatista. Täten saadaan 1,3 g etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yy 1 i) -2- (syn) -hydroksi-iminoasetaatin metyylinitronia, toisin sanoen N-(2-aminotiatsol-4-yyli-etoksikarbonyyli)-metyleenimetyyliamiinin N-oksidia keltaisina kiteinä, jotka sulavat 111,6 %:ssa.

Yhdisteen C8H11N3°3S alkuaineanalyysi C(%) H(%) N(%)

Laskettu 41,91 4,84 18,33

Todettu 41,89 4,91 18,44 36 6661 8 2.1 Suspendoidaan 70 ml:aan etanolia, jossa on 10% HCl:a, 2,44 g osan 1.1 tai 1.2 mukaan valmistettua etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(anti)-hydroksi-iminoasetaatin metyylinitronia, joka on N-(2-aminotiatsol-4-yyli-etoksikarbonyyli)-metyleeni-metyyli-amiinin N-oksidia, joka sulaa 184...185 %:ssa. Seosta sekoitetaan 16 tuntia huoneenlämmössä. Tämän jälkeen reaktioseos konsentroidaan alennetussa paineessa, lisätään 10 ml vettä, säädetään jäännöksen pH arvoon 7,5 natriumbikarbonaatin 5% vesiliuoksella, ja uutetaan etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerros pestään vedellä ja kuivataan. Tämän jälkeen etyyliasetaatti tislataan pois ja jäännös kiteytetään uudelleen etanolista. Täten saadaan 1,54 g etyyli-2-aminotiatsol-4-yyliglyoksilaattia keltaisina kiteinä, jotka sulavat 143,3 %:ssa.

Alkuaineanalyysi: C7H8N2P3S

C(%) H{%) N (%)

Laskettu 41,98 4,02 13,99

Todettu 41,83 4,14 13,98 2.2 Liuotetaan 50 ml:aan 1 N kloorivetyhappoa 1 g osan 1.1 tai 1.2 mukaan valmistettua N-(2-aminotiatsol-4-yyli-etoksikarbonyyli)-metyleenimetyyliamiinin N-oksidia, ja liuosta sekoitetaan 5 tuntia huoneenlämmössä. Tämän jälkeen reaktioseos neutraloidaan natriumkarbonaatilla ja uutetaan etyyliasetaatilla. Tämän jälkeen toistetaan kohdan 2.1. mukainen menettely, jolloin saadaan 0,5 g etyyli-2-aminotiatsol-4-yyliglyoksi-laattia. »©-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tämän tuotteen todetaan olevan samaa kuin edellisen osan 2.1 mukaan saatu tuote.

2.3 Suspendoidaan 20 ml:aan etanolia, jossa on 10% HCl:a, 1,2 g osan 1.3 mukaan valmistettua 2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2- (syn) -hydroksi-iminoasetaatin metyylinitronia, toisin sanoen N-(2-aminotiatsol-4-yyli-etoksikarbonyyli) -metyleeni-metyyliamiinin N-oksidia, sulamispiste 111,6 ^C, ja suspensiota sekoitetaan 16 tuntia huoneenlämmössä. Tämän jälkeen toistetaan kohdan 2.1 mukainen käsittely, jolloin saadaan 0,7 g etyyli-2-aminotiatsol-4-yyliglyoksilaattia keltaisina kiteinä. NMR-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tämän tuotteen todettiin olevan samaa kuin edellisten osien 2.1 ja 2.2 mukaan valmistettu tuote.

3. Liuotetaan 10 ml:aan etanolin 50% vesiliuosta 200 mg etyyli-2-aminotiatsol-4-yyli-glyoksilaattia, minkä jälkeen lisätään 166 mg O-metyylihydroksyyliamiinihydrokloridia ja sitten 168 mg hapanta natriumbikarbonaattia. Seosta sekoitetaan suljetussa astiassa 5 tuntia 70 OC:ssa. Reaktioseos konsentroidaan alennetussa paineessa, ja jäännös laimennetaan 10 ml:11a vettä ja uutetaan etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerros pestään vedellä ja kuivataan. Tämän jälkeen etyyliasetaatti tislataan pois, jolloin saadaan etyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetaattia kiteinä. tWR-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tämän tuotteen todetaan olevan syn- ja anti-isomeerien 83:17 seosta.

37

Viite-esimerkki 12 6661 8

Liuotetaan 10 mljaan dimetyyliformamidia 2 g etyyli-4-bromi-3-okso-2-metoksi-iminobutyraattia ja tämän jälkeen lisätään 1,2 g tiokarbamidia. Seoksen annetaan reagoida 5 tuntia huoneenlämmössä. Reaktioseokseen lisätään 20 ml natriumkloridin kyllästynyttä vesiliuosta, minkä jälkeen seoksen pH säädetään arvoon noin 1,5 laimean kloorivetyhapon avulla.

Tämän jälkeen seurataan viite-esimerkin 18 mukaista menetelmää, jolloin saadaan 1,1 g vaaleankeltaisia kiteitä. NMR-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tämän tuotteen todetaan olevan etyyli-2-(2-amino-tiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetaatin syn- ja anti-isomeerien 87:13 seosta. Pesemällä tämä tuote pienellä määrällä eetteriä saadaan syn-isomeeri pääasiallisesti vapaana anti-isomeeristä.

Viite-esimerkki 13 (1) liuotetaan 80 mljaan vedetöntä asetonia 20 g 7-(5-karboksi-5-bentsamidovaleryyliamido)-desasetyylikefalosporaanihappoa ja tämän jälkeen lisätään 7 g klooriasetyyli-isosyanaattia. Seosta sekoitetaan 40 minuuttia 20 °C:ssa, minkä jälkeen lisätään 200 ml eetteriä. Sakka otetaan talteen suodattamalla ja pestään 50 ml:11a eetteriä. Täten saadaan 19,6 g 7-(5-karboksi-5-bentsamidovaleryyliamido)-3-(N-kloori-asetyyli)-karbamoyylioksi-metyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappoa valkoisena jauheena.

NMR-spektri (60 MHz, dg-IMSO:ssa): 3.54 ppm(2H, kvartetti, 2-CH2), 4.50 ppm(2H, singletti, -NHOOCHgCl), 4.98 ppm (2H, kvartetti, ® ), 5.04 ppm (1H, dubletti, 6-H),

-CH20C-NH

5.77 ppm(1H, dubletti, 7-H).

(2) Suspendoidaan 80 ml:aan metyleenidikloridia, jossa on 7,6 ml N,N-dimetyylianiliinia, 6 g 7-(5-karboksi-5-bentsamidovaleryyliamido)-3“(N-klooriasetyyli)-karbamoyylioksi-metyyli-3-kefeemi-4-karboksyyli-happoa. Seos jäähdytetään -50 °C;een, ja tässä lämpötilassa lisätään 2,25 ml fosforitrikloridia. Tämän jälkeen sekoitetaan -30 °C:ssa 1,5 tuntia kirkkaan liuoksen saamiseksi. Tähän liuokseen lisätään 4,17 g fosforipentakloridia, ja seosta sekoitetaan -25 °C:ssa 2,5 tuntia, minkä jälkeen reaktioseos jäähdytetään -40 °C:een ja heti lisätään 37 ml kylmää metanolia. Seosta sekoitetaan sitten -5 °C:ssa 25 minuuttia, ja tämän jälkeen lisätään 22 ml vettä, ja säädetään reaktioseoksen pH arvoon 3,5 ammoniakin laimealla vesiliuoksella.

38 6 661 8

Reaktioseoksen annetaan olla tunnin ajan 5 °C:ssa, ja muodostunut sakka erotetaan suodattamalla. Täten saadaan 1,76 g 7-*amino-3-(H-klooriaeetyyli)-karbamoyylioksimetyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappoa värittöminä kiteinä.

Yhdisteen G-j -jH^ClNjOgS alkuaineanalyysi Laskettu C 37.78, H 3.46, N 12.01

Todettu C 38.02, H 3.86, N 11.81 NMR-spektri (60 MHz, CP^OOOHjssa): 3.78 ppm (2H, br. singletti, 2-CH2), 4.35 ppm (2H, singletti, -NHCOCI^Cl), 5.42 ppm (2H, br. singletti, 6-H, 7-H), 5.46 ppm (2H, kvartetti, -CHgOOONHjssa).

Viite-esimerkki 14

Keitetään natriumatsidin, etanolin ja veden seosta palautustislausta soveltaen ja lisätään tiputtaen N,N-dimetyyliaminoetyyli-isotiosyanaa-tin etanoliliuosta. Seosta keitetään edelleen palautustislausta soveltaen 45 minuuttia, minkä jälkeen etanoli poistetaan tislaamalla alennetussa paineessa. Jäännösliuos tehdään happameksi 1N-kloorivety-hapolla ja uutetaan etyyliasetaatilla. Uutos kuivataan ja konsentroidaan kuiviin ja kiteistä jäännöstä sekoitetaan n-heksaanissa, otetaan kiteet talteen suodattamalla ja kiteytetään uudelleen tolueenista.

Täten saadaan 1-(2-N,N-dimetyyliaminoetyyli)-lH-tetratsoli-5-tiolia. Sulamispiste 217...219 °C (etanolin vesiliuoksesta uudelleen kiteytettynä).

NMR spektri (60 MHz, I>20+NaHC05:ssa)s 6 3.03(s, N(CH5)2), 3.58 (t, CH2), 4.70 (t, CH2).

Viite-esimerkki 15 (1) Sekoitetaan seosta, jossa on glysiini-N,N-dimetyyliamidia, tri-etyyliamiinia ja metyleenikloridia, ja lisätään ensin hiilidisulfidia ja sitten metyylijodidia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä tunnin ajan, minkä jälkeen lisätään fosforihapon 5% vesiliuosta ja ravistetaan voimakkaasti. Orgaaninen kerros otetaan talteen, pestään se vedellä, kuivataan ja konsentroidaan kuiviin alennetussa paineessa. Kiteiseen jäännökseen lisätään n-heksaania ja sekoitetaan, minkä jälkeen kiteet otetaan talteen suodattamalla ja kuivataan. Täten saadaan metyyli-2-(N,N-dimetyylikarbamoyylimetyyli)-ditiokarbamaattia. IR-spektri (KBr, cm"1): 1626, 1543 NMR-spektri (60 MHz, d6-DMS0): 6 2.62(s, CH3S), 3.02 (s, N(CH3)2), 4.42 (d, J=4Hz, CH2), 8.30 (br. s., NH) 39 6 661 8 (2) Sekoitetaan 80 °G;ssa lämmittäen 6,5 tuntia seosta, jossa on metyyli-2-(N,N-dimetyylikarbamoyylimetyyli)-ditiokarbamaattia, natrium-atsidia ja etanolia. Reaktioseoksen pH säädetään arvoon 2,5 kloori-vetyhapon W/o liuoksella, minkä jälkeen konsentroidaan kuiviin alennetussa paineessa. Jäännös uutetaan 100 ml:aan metanolia ja metanoli-uutosta käsitellään aktiivihiilellä ja kuivataan. Jäännöksenä saatu jauhe kiteytetään uudelleen vedestä. Täten saadaan 1-N,N-dimetyyli-karbamoyylimetyyli-1H-tetratsoli-5-tiolia, joka sulaa 195...198 °C:ssa (hajoaa).

MR (60 MHz, d6-MS0:ssa) b : 2.87 & 3.07 (jokainen s, H(CH3)2), 5.21(s, CH200:ssa).

(3) Käyttämällä liuosta,jossa on natriumhydroksidia, hydrolysoidaan 1- N,N-dimetyylikarbamoyylimetyyli-1H-tetratsoli-4-tiolia, jolloin saadaan 1-karboksimetyyli-1H-tetratsoli-5-tiolia, sulamispiste 156... 160 °G (hajoaa).

IR-spektri (KBr, cm"1): 1713 NMR-spektri (60 MHz, d6-MS0:ssa) 6: 5.03 (s, CH200), 12.09 (br., s, NH & -C00H).

Viite-esimerkki 16

Lisätään 200 ml:aan vettä 38 g natriumnitriittiä ja 53 g metyyliaseto-asetaattia, sekoitetaan jääkylvyssä jäähdyttäen ja lisätään tiputtaen 200 ml 4N-rikkihappoa noin tunnin kuluessa. Tämän tiputtaen suoritetun lisäyksen aikana reaktioseoksen lämpötila pysytetään 5...8 °C:ssa. Seosta sekoitetaan edelleen tällä lämpötila-alueella 2,5 tuntia, minkä jälkeen uutetaan kahdesti 300 ml:n erillä etyyliasetaattia. Uutokset yhdistetään ja pestään kahdesti natriumkloridin kyllästetyllä vesi-liuoksella. Tämän jälkeen jaetaan liuos, jossa on 96,7 g natrium-karbonaattia 1 l:ssa vettä, kolmeen yhtä suureen osaan, joilla 3-okso- 2- hydroksi-iminobutyraatti uutetaan edellä muodostuneesta etyyli-asetaattikerroksesta (3 kertaa). Vesikerrokseen (1 1) lisätään 200 ml metanolia, jäähdytetään jääkylvyssä, ja lisätään 10 minuutin kuluessa tiputtaen 150 g dimetyylisulfaattia, jolloin sekoitetaan. Tiputtaen suoritetun lisäämisen päätyttyä reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä 1,5 tuntia ja uutetaan kahdesti 300 ml:n erillä etyyliasetaattia. Uutokset kootaan, pestään vedellä ja kuivataan. Tämän jälkeen etyyliasetaatti tislataan pois ja jäännös jäähdytetään jääkylvyssä, jolloin se jähmettyy. Kiinteä jäännös otetaan talteen « 66618 suodattamalla ja pestään pienellä määrällä vettä. Täten saadaan 52,3 g metyyli-3-okso-2-metoksi-iminobutyraattia valkoisina kiteinä, jotka sulavat 64,4 °C:ssa.

Yhdisteen CgHgNO^ alkuaineanalyysi:

Laskettu C 45.28, H 5.70, H 8.80

Todettu C 44.93, H 5.61, N 8.71 NMR-spektri (60 MHz, CDCl^.ssa): 2.40 ppm (3H, singletti, "irCH3), 0 3.86 ppm(3H, singletti, OOOCH^), 4.10 ppm (3H, singletti, * N0CH3).

Viite-esimerkki 17

Liuotetaan 150 ml:aan kloroformia 40 g metyyli-3-okso-2-metoksi-imino-butyraattia, ja liuos lämmitetään 40 °C;een. Tämän jälkeen lisätään tiputtaen tunnin kuluessa liuos, jossa on 40 g bromia 50 ml:ssa kloroformia. Tämän jälkeen reaktion annetaan edistyä sekoittaen huoneenlämmössä tunnin ajan. Reaktioseos pestään natriumbikarbonaatin 5% vesiliuoksella ja sitten vedellä, ja orgaaninen kerros kuivataan.

Tämän jälkeen liuotin tislataan pois, jolloin saadaan 52,1 g metyyli- 4-bromi-3-okso-2-metoksi-iminobutyraattia öljynä.

NMR-spektri (60 MHz, CDCl^ssa): 3.82 ppm(3H, singletti, OOOCH^), 4.09 ppm(3H, singletti, =N-OCH3), 4.27 ppm (2H, singletti, BrCH2CO).

Liuotetaan 350 ml:aan tetrahydrofuraania 52 g metyyli-3-bromi-3-okso-2-metoksi-iminobutyraattia ja tämän jälkeen 250 ml vettä ja edelleen 89,1 g natriumasetaattitrihydraattia ja 33,2 g tiokarbamidia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 18 tuntia. Reaktioseokseen lisätään 200 ml natriumbikarbonaatin 5% vesiliuosta, minkä jälkeen uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros pestään vedellä, kuivataan ja liuotin haihdutetaan alennetussa paineessa tislaamalla. Konsentraattiin lisätään 200 ml eetteriä, ja muodostunut sakka otetaan talteen suodattamalla. Täten saadaan 24,8 g metyyli-2-(2-aminotiatsol-4-yyll)-2-(syn)-metoksi-iminoasetaattia kiteinä, jotka sulavat 164,9 °C:ssa.

Yhdisteen C^H^N^O^S alkuaineanalyysi

Laskettu C 39.06, H 4.21, N 19.52

Todettu C 38.78, H 4.15, N 19.33 NMR-spektri (60 MHz, CDCl^ssa): 3.84 ppm (3H, singletti, OOOGH^), 4.02 ppm (3H, singletti, = NOCH,), 5.74 ppm (2H, br. singletti, NHg), 6.74 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H) 6661 8 41

Viite-esimerkki 18

Liuotetaan 90 ml:aan N,N-dimetyyliasetamidia 21,5 g metyyli-2-(2-amino-tiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetaattia ja lisätään tiputtaen ja jääkylvyssä jäähdyttäen 15,6 g klooriasetyylikloridia. Seosta sekoitetaan jääkylvyssä jäähdyttäen 30 minuuttia, ja tämän jälkeen huoneenlämmössä 30 minuuttia. Lisätään 500 ml vettä, minkä jälkeen reaktioseos uutetaan kahdesti etyyliasetaatilla. Uutokset yhdistetään, pestään natriumbikarbonaatin 3% vesiliuoksella ja sitten vedellä ja kuivataan. Tämän jälkeen liuotin tislataan pois, jolloin saadaan 25 g metyyli-2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imino-asetaattia kiteinä, jotka sulavat 130,8 °C:ssa.

Yhdisteen ^N^O^SCl alkuaineanalyysi:

Laskettu G 37.03, H 3.45, N 14.40

Todettu C 37.30, H 3.40, N 14.35 NMR-spektri (60 MHz, CDGl^:ssa): 3.90 ppm(3H, singletti, COOCH^), 4.02 ppm (3H, singletti, =N0CH^), 4.26 ppm (2H, singletti, CIC^OO), 7.24 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H).

Viite-esimerkki 19

Lisätään liuokseen, jossa on 19,2 g kaliumhydroksidia seoksessa, jossa on 170 ml vettä ja 900 ml etanolia, 20 g metyyli-2-(2-kloori-asetamido-tiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetaattia ja liuosta sekoitetaan huoneenlämmössä 2 tuntia. Tämän jälkeen etanoli tislataan pois alennetussa paineessa, ja lisätään 170 ml vettä, minkä jälkeen jäännös pestään 200 ml:11a etyyliasetaattia. Vesikerroksen pH säädetään arvoon 2 kloorivetyhapon 10% liuoksella ja uutetaan kahdesti 300 ml:n erillä etyyliasetaattia.

Uutokset yhdistetään, pestään natriumkloridin kyllästetyllä vesi-liuoksella ja kuivataan. Liuotin poistetaan haihduttamalla, jolloin saadaan 16,8 g 2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoetikkahappoa kiteinä. NMR-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tämän tuotteen todetaan olevan samaa kuin viite-esimerkin 6 mukaan saatu tuote.

Viite-esimerkki 2Q

(1) Suspendoidaan 6 g 7-(5-karboksi-5-bentsamidovaleryyliamido)-3-(N-klooriasetyyli)-karbamoyylioksiraetyyli-3-kefeemi-4-karboksyyli-happoa 80 ml:aan metyleenidikloridia, jossa on 7,6 ml N,N-dimetyyli- 6661 8 42 aniliinia ja lisätään -50 °C:ssa jäähdyttäen 2,25 ml fosforitri-kloridia. Seosta sekoitetaan -30 °C:ssa 1,5 tuntia, kunnes saadaan kirkas liuos. Tähän liuokseen lisätään 4,17 g fosforipenta-kloridia, ja seosta sekoitetaan -25 °C:ssa 2,5 tuntia. Tämän jälkeen seos jäähdytetään -40 °C:een ja lisätään heti 37 ml kylmää metanolia. Seosta sekoitetaan -5 °C:ssa 25 minuuttia, minkä jälkeen seos laimennetaan 22 ml:11a vettä ja pH säädetään arvoon 3,5 ammoniakin laimealla vesiliuoksella. Reaktioseoksen annetaan olla 5 °C:ssa tunnin ajan, minkä jälkeen muodostunut sakka otetaan talteen suodattamalla. Täten saadaan 1,76 g 7-ami-no-3-(N-klooriasetyyli)-karbamoyylioksimetyyli-3-kefeemi-

4-karboksyylihappoa värittömänä kiteisenä tuotteena. Alkuaineanalyysi: C11H12CIN3O5S

C(%) H(%) N (%)

Laskettu 37,78 3,46 12,01

Todettu 38,02 3,86 11,81 43

Esimerkki 1 6 661 8 (1) Liuotetaan 6 ml:aan N,N-dimetyyliasetamidia 290 mg 7-amino-3-(N-klooriasetyyli)-karbamoyylioksimetyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappoa ja lisätään jääkylvyssä jäähdyttäen 276 mg 2-(2-klooriasetamidotiatsol- 4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetyylikloridin hydrokloridia. Seosta sekoitetaan jääkylvyssä jäähdyttäen 15 minuuttia ja huoneenlämmössä 2 tuntia. Tämän jälkeen reaktioseos laimennetaan 30 ml:11a vettä ja uutetaan kahdesti 50 ml:n erillä etyyliasetaattia. Uutokset yhdistetään, pestään 50 ml:11a natriumkloridin kyllästettyä vesiliuosta ja kuivataan vedettömän magnesiumsulfaatin avulla. Etyyliasetaatti poistetaan tislaamalla, jolloin saadaan 402 mg 7-/~2-(2-klooriasetamidotiat-sol-4-yyli)-(syn)-metoksi-imino 7-asetamido-5-(N-klooriasetyyli)-karbamoyylioksimetyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappoa viskoosisena öljynä.

NMR-spektri (60 MHz, CDClj:ssa): 3.50 ppm(2H, kvartetti, 2-CH2), 3.99 ppm (3H, singletti, NOCHj), 4.04, 4.30 ppm (2Hx2, singlettix 2, CICH2OOX2), 5.10 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5.73 ppm (1H, dublet-ti, 7-H), 7.32 ppm (1H, singletti, tiatsoli, 5-H).

(2) Koko edellä mainittu yhdistemäärä liuotetaan 9 ml:aan tetrahydro-furaania, minkä jälkeen lisätään 168 mg tiokarbamidia ja 300 mg natrium-ase taat ti trihydraattia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 4 tuntia. Sakka otetaan talteen suodattamalla, pestään eetterillä ja liuotetaan 5 ml:aan vettä. Liuoksen pH säädetään noin arvoon 7 natriumbikarbonaatin avulla ja puhdistetaan pylväskromatografoimalla hartsin "Amber-lite XAL-2" avulla. Täten saadaan 58 mg natrium-7-^”2-(2-aminotiatsol- 4-yyli)-2-(syn)-metoksi-lmlnoasetamido 7-3-karbamoyylioksimetyyli-3-kefeemi-4-karboksylaattia valkoisena jauheena.

Yhdisteen 0^ 5H15N6° ^S2Na.3H20 alkuaineanalyysi

Laskettu C 33.84, H 3.98, N 15.78

Todettu C 33.94, H 3.82, N 15.42 NMR-spektri (60 MHz, D20:ssa): 3.47 ppm (2H, kvartetti, 2-CH2),

3.92 ppm(3H, singletti, - NOCHj), 4.68 ppm (2H, kvartetti, -CH2000NH2), 5.27 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5,72 ppm (1HT

dubletti, ?-H), 6.95 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H).

Menetelmä 2-(2klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imino-apetyylikloridin valmistamiseksi:

Suspendoidaan 5 ml:aan metyleenikloridia 278 mg viite-esimerkin 6 6661 8 44 mukaan valmistettua 2-(2-kloorlasetamidoHatsol-4-Yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoetikkahappoa, ja lisätään jääkylvyssä jäähdyttäen 208 mg fosfori-pentakloridia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 30 minuuttia, minkä jälkeen se pestään petrolieetterillä. Täten saadaan 276 mg 2-(2-kloori-asetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetyylikloridia jauheena. Yhdisteen CqH^N^0^SC12*HC1 alkuaineanalyysi Laskettu C 28.89, H 2.42, N 12.65

Todettu C 28.47, H 2.73, N 12.12.

Esimerkki 2 (1) Liuotetaan 22 ml:aan kuivaa tetrahydrofuraania 500 mg 2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imlnoetikkahappoa ja sekoittaen lisätään 182 mg trietyyliamiinia. Seos jäähdytetään -10 °C: een ja lisätään tiputtaen 245 mg isobutyyli-kloroformiaattia. Seosta sekoitetaan tässä lämpötilassa 2 tuntia. Täten saatuiin sekahappo-anhydridien liuokseen lisätään 182 mg trietyyliamiinia ja jääkylvyssä jäähdyttäen liuos, jossa on 590 mg 7-amino-3-(1-metyyli-1H-tetratsol- 5-yyli)-tiometyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappoa 18 ml:ssa tetrahydro-furaanin 30% vesiliuosta. Seosta sekoitetaan jääkylvyssä jäähdyttäen tunnin ajan, ja tämän jälkeen huoneenlämmössä 2 tuntia. Tämän jälkeen suurin osa tetrahydrofuraanista tislataan pois alennetussa paineessa, ja jäännös laimennetaan 100 ml:lla vettä ja 40 ml:lla etyyliasetaattia. Tämän jälkeen vesikerroksen pH säädetään sekoittaen noin arvoon 2 1N-suolahapolla. Kerrokset erotetaan ja vesikerros uutetaan 60 ml:11a etyyliasetaattia. Etyyliasetaattikerrokset yhdistetään, pestään 50 ml: 11a natriumkloridin kyllästettyä vesiliuosta ja kuivataan. Etyyliasetaatti tislataan pois, jolloin saadaan 700 mg 7-/“2-(2-kloori-asetamidotiatsol-4-yyli)-2-(Byn)-metoksi-iminoasetamido 7-5-(1-metyyli-1H-tetratsol-5-yyli)-tiometyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappoa viskoosi-sena öljynä.

(2) Koko edellä valmistettu yhdistemäärä liuotetaan 15 ml:aan tetrahydrofuraania, minkä jälkeen lisätään 226 mg tiokarbamidia ja 406 mg natriumasetaattitrihydraattia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 4 tuntia. Tämän reaktioajan kuluttua muodostunut sakka otetaan talteen suodattamalla, pestään eetterillä ja liuotetaan 10 ml:aan vettä. Liuoksen pH säädetään arvoon noin 7,0 natriumbikarbonaatin avulla ja puhdistetaan pylväskromatografoimalla, jolloin käytetään hartsia "Amberlite . Täten saadaan 125 mg natrium-7-/“ 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)- 45 6661 8 2«feyn)-metoksi-iminoasetamido 7-3-(1-metyyli-1H-tetratsol-5-yyli)-tiometyyli*-3-kefeemi-4-karboksylaattia valkoisena jauheena.

Yhdisteen gO g Sa·2H20 alkuaine analyys i: laskettu C 33.74, H 3.54, N 22.13

Todettu C 34.18, H 3.57, H 21.79 NMR-spektri (60 MHz, DgOjssa); 3.59 ppm (2H, kvartetti, 2-CH2), 3.93 ppm (3H, singletti, * NOCH^), 3.98 ppm (3H, singletti, N-CHj), 4.08 ppm (2H, kvartetti, 3-0Η2), 5.12 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5.72 ppm (1H, dubletti, 7-H), 6.93 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H).

Esimerkki 3 (1) liuotetaan 15 mljaan N,N-dimetyyliasetamidia 762 mg 7-amino-kefalo-sporiinihappoa ja lisätään jääkylvyssä jäädhyttäen 931 mg 2-(2-kloori-asetamidotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetyylikloridin hydrokloridia (valmistettu syn-isomeeristä). Seosta sekoitetaan jääkylvyssä jäähdyttäen 15 minuuttia ja tämän jälkeen huoneenlämmössä 2 tuntia. Reaktio-seos laimennetaan 10 mljlla vettä ja uutetaan 100 ml:n erillä etyyliasetaattia, Uutokset yhdistetään, pestään 100 ml:lla natriumkloridin kyllästynyttä vesiliuosta ja kuivataan. Etyyliasetaatti poistetaan tislaamalla, jolloin saadaan 1,4 g 7-^”2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido 7-kefalosporiinihappoa öljynä.

(2) liuotetaan 30 mljaan tetrahydrofuraania koko edellä valmistettu yhdistemäärä, minkä jälkeen lisätään 500 mg tiokarbamidia, ja tämän jälkeen 895 mg natriumasetaattitrihydraattia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 4 tuntia. Muodostunut sakka otetaan talteen suodattamalla, pestään eetterillä ja liuotetaan 6 ml:aan vettä, liuoksen pH säädetään noin arvoon 7,0 natriumbikarbonaatin avulla ja puhdistetaan pylväskromatografoimalla, jolloin käytetään hartsia "Amberlite XAD-2”. Täten saadaan 78 mg natrium-7-/’"2- (2-aminotiatsol-4-yyli)-2- (syn)-metoksi-iminoasetamido_7-kefalosporanaattia valkoisena jauheena.

Yhdisteen C^H^N^OySgNa^.SHgO alkuaineanalyysi laskettu 0 36.78, H 4.05, N 13.40

Todettu C 36.93, H 3.80, N 12.68 NMR-spektri (60 MHz, Dg0!8881)1 2.07 PPra (3H, singletti, GOCH^), 3.53 ppm (2H, kvartetti, 2-CH2), 3.98 ppm (3H, singletti, “ N0CH3), 4.75 ppm (2H, kvartetti, 3-CH2), 5.21 ppm(1H,dubletti, ;.yi .¾ 5.81 (1H, dubletti, 7-H), 7.01 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H).

46

Esimerkki 4 6661 8

Lisätään 10 mitään vettä 1 g esimerkin 3 mukaan saatua natrium-7-/”2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imlnoasetamldo 7-kefalospora-naattia, 270 mg 2-metyyli-1,3,4-oksadiatsoli-5-tiolin kaliumsuolaa ja 7 mg trietyylibentsyyliammoniumbromidia. Seosta sekoitetaan typpi-kaasuvirrassa 6 tuntia 60 °C:ssa. Reaktioseoksen jäähdyttyä se puhdistetaan pylväskromatografoimalla, jolloin käytetään hartsia "Amberlite XAD-2". Täten saadaan 110 mg natrium-7-/""2- (2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imino-asetamido 7-3-(2-metyyli-1,3,4-oksadiatsol-5-yyli)-tiometyyli-3-kefeemi-4-karboksylaattia valkoisena jauheena. Yhdisteen C^H^N^OgS^Na^HgO alkuaineanalyysi laskettu C 35.85, H 3.54, N 17.21

Todettu C 35.73, H 3.72, N 17.01 NMR-spektri (60 MHz, DgOjssa): 8.42 ppm(3H, singletti, oksadiatsoli 2-GHj), 3.55 ppm (2H, kvartetti, 2-CH2), 4.02 ppm (3H, singletti, «NOCH^), 5.13 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5.73 ppm (1H, dubletti, 7-H), 6.97 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H).

Esimerkki 5 (1) Lisätään 10 mljaan tetrahydrofuraania 833 mg 2-(2-klooriasetamido-tiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imino-etikkahappoa. 380 mg N-hydroksi-sukkinimidia ja 630 g disykloheksyylikarbodi-imidiä, ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 45 minuuttia. Sakka poistetaan suodattamalla ja suodos jäähdytetään 5 °C:een. Tämän jälkeen suodos lisätään sekoittaen liuokseen, jossa on 650 mg 7-aminodesasetoksikefalosporaanihappoa ja 2 ml bis-(trimetyylisilyyli)-asetamidia metyleenikloridissa, joka on ennalta jäähdytetty. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yli yön ja tämän jälkeen liuotin poistetaan alennetussa paineessa tislaamalla. Saatuun öljyyn lisätään 50 ml vettä ja 50 ml etyyliasetaattia, ja seoksen pH säädetään arvoon noin 2,5 1N-kloorivetyhapon avulla. Molemmat kerrokset erotetaan, minkä jälkeen uutetaan kahdella 50 ml:n erällä etyyliasetaattia. Etyyliasetaattikerrokset yhdistetään, pestään vedellä ja kuivataan. Tämän jälkeen etyyliasetaatti tislataan pois, jolloin saadaan 1,1 g 7-/~2-(2-kloorlasetamldotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-met oksi-iminoase tamido_7-de sase toksikefalosporaanihappoa öljynä.

(2) Koko edellä valmistettu yhdistemäärä liuotetaan 25 mljaan tetra-hy&rofuraania, minkä jälkeen lisätään tiokarbamidia ja tämän jälkeen 47 66618 632 mg natriumasetaattitrihydraattia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 4 tuntia. Sakka otetaan talteen suodattamalla, pestään eetterillä ja liuotetaan 10 mlsaan vettä. Liuoksen pH säädetään arvoon noin 7,0 natriumbikarbonaatin avulla ja puhdistetaan pylväs-kromatografoimalla, jolloin käytetään hartsia "Amberlite XAL-2". Täten saadaan 120 mg natrium-7-/""2- (2-aminotiatsol-4-yyli- )2- (syn)-metoksi-iminoasetamido_7-desasetoksikefalosporanaattia valkoisena jauheena.

Yhdisteen °HH14N5°5 SgNa. 1.5H20 alkuaineanalyysi C 37.67, H 3.84, N 15.68 laskettu C 37.37, H 3.98, N 15.38 todettu HMR-spektri (60 MHz, DgOsssa) 6 s 1-94 ppm (3H, singletti, 3-0^), 3.46 ppm (2H, kvartetti, 2pCH2), 4.00 ppm (3H, singletti, = NOCHj), 5.17 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5.76 ppm (1H, dubletti, 7-H), 6.99 ppm (1H, singletti, tiatsoli, 5-H).

Esimerkki 6 (1) Liuotetaan 20 mitään tetrahydrofuraania 500 mg 2-(2-kloori-asetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imino-etikkahappoa ja lisätään sekoittaen 182 mg trietyyliamiinia. Seos jäähdytetään -10 °C:een, minkä jälkeen siihen lisätään tiputtaen 245 mg iso-butyylikloroformiaattia. Seosta sekoitetaan tässä lämpötilassa 2 tuntia. Täten saatuun sekahappoanhydridiliuokseen lisätään jää-kylvyssä jäähdyttäen liuos, jossa on 180 mg trietyyliamiinia ja 492 mg 7-amino-3-karbamoyylioksi-metyyli-3-kefeemi-4-karboksyY-lihappoa tetrahydrofuraanin 50% vesiliuoksessa. Seosta sekoitetaan jääkylvyssä jäähdyttäen tunnin ajan ja tämän jälkeen huoneenlämmössä 2 tuntia. Suurin osa tetrahydrofuraanista poistetaan alennetussa paineessa tislaamalla, ja jäännökseen lisä- 4β 6661 8 tään 100 ai vettä ja 40 ml etyyliasetaattia. Seoksen pH säädetään arvoon noin 1 1N-kloorivetyhapolla. Molemmat kerrokset erotetaan toisistaan ja vesikerros uutetaan kahdesti 50 ml;n erillä etyyliasetaattia. Etyyliasetaattikerrokset yhdistetään, pestään vedellä, kuivataan ja konsentroidaan. Täten saadaan 650 mg 7-^“2-(2-kloori-asetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metokBi-iminoasetamido 7-3-karbamo-yylioksimetyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappoa öljynä.

(2) Koko edellisen kohdan mukaan valmistettu yhdistemäärä liuotetaan 15 ml:aan tetrahydrofuraania, minkä jälkeen lisätään 226 mg tiokarba-midia ja 406 mg natriumasetaattitrihydraattia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 4 tuntia. Sakka otetaan talteen suodattamalla, liuotetaan 10 ml:aan vettä, säädetään pH arvoon noin 7 natriumbikarbonaatin avulla ja puhdistetaan pylväskromatografoimalla, jolloin käytetään hartsia "Amberlite XAD-21. Täten saadaan 120 mg natrium-7-/”2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imino-asetamido 7-5-karbamovvli-oksimetyyli-3-kefeemi-4-karboksylaattia valkoisena jauheena. NMR-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tämän tuotteen todetaan olevan samaa kuin esimerkin 1 mukaan valmistettu tuote.

Esimerkki 7 (1) Liuotetaan 45 ml:aan kuivaa tetrahydrofuraania 1,11 g 2-(2-kloori-asetamidotiat3Ql-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoetikkahappoa ja lisätään sekoittaen 815 mg tri-n-butyyliamiinia. Seos jäähdytetään -10 °C:een ja lisätään tiputtaen 544 mg isobutyyliklooriformiaattia. Seosta sekoitetaan -10 °C:ssa 2 tuntia, minkä jälkeen lisätään kylmä liuos, jossa on 741 mg tri-n-butyyliamiinia ja 1,4 g 7-amino-3-(N-kloori-asetyyli)-karbamoyylioksimetyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappoa 40 ml: ssa tetrahydrofuraanin 50% vesiliuosta. Seosta sekoitetaan jäässä jäähdyttäen tunnin ajan ja huoneenlämmössä 2 tuntia. Suurin osa tetra-hydrofuraanista poistetaan alennetussa paineessa tislaamalla ja jäännös laimennetaan 25 ml:11a vettä ja pestään 40 ml:11a etyyliasetaattia. Vesikerros erotetaan, lisätään 50 ml etyyliasetaattia, ja säädetään pH arvoon noin 2,5 1N-kloorivetyhapolla. Seos erottuu kahdeksi kerrokseksi. Vesikerros uutetaan edelleen kahdesti 50 ml:11a etyyliasetaattia, 50 ml kukin. Uutokset yhdistetään, pestään 100 ml:11a natrium-kloridin kyllästynyttä vesiliuosta, kuivataan ja konsentroidaan.

49 6661 8 Täten saadaan 1 g 7-/~2-(2-klooriasetamidotriatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido_7“3-(N-klooriasetyyli)-karbamoyylioksimetyyli- 3- kefeemi-4-karboksyylihappoa öljynä.

(2) Koko siellä valmistettu yhdistemäärä liuotetaan 22 ml:aan tetra-hydrofuraania, minkä jälkeen lisätään 499 mg tiokarbamidia ja tämän jälkeen 892 mg natriumasetaattitrihydraattia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 4 tuntia. Sakka otetaan talteen suodattamalla, pestään eetterillä ja liuotetaan 10 ml:aan vettä. Liuoksen pH säädetään arvoon noin 7 natriumbikarbonaatin avulla ja puhdistetaan pylväskroma-tografoimalla, jolloin käytetään hartsia "Amberlite XAD-2”. Täten saadaan 153 mg natrium-7-/~2-(2-aminotiatsol-4-yyll)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido_7-3-karbamoyylioksimetyyli~3-kefeemi-4-karboksilaattia valkoisena jauheena. NMR-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tämän tuotteen todetaan olevan samaa kuin esimerkin 1 mukaan valmistettu yhdiste.

Esimerkki 8 (1) Liuotetaan 20 ml:aan tetrahydrofuraania 277 mg 2-(2-klooriaseta-midotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoetikkahappoa ja 270 mg t-butyyli-7-aminodesasetoksikefalosporaanihappoa, minkä jälkeen lisätään 206 mg disykloheksyylikarbodi-imidiä. Seoksen annetaan reagoida sitä huoneenlämmössä 6 tuntia sekoittaan. Saostunut karbamidijohdannainen poistetaan suodattamalla, ja suodos kaadetaan 50 ml:aan vettä, ja uutetaan etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerros pestään 0,5 N-kloorivetyhapolla, vedellä ja natriumkloridin kyllästetyllä vesi-liuoksella tässä mainitussa järjestyksessä, kuivataan ja konsentroidaan. Täten saadaan 320 mg t-butyyli-7-^”2-(2-klooriasetamidotiatsol- 4- yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido_7-desasetoksikefalosporanaattia öljynä.

NMR-spektri (60 MHz, CDCl^issa): 1.53 ppm (9H, singletti, t-C^H^), 2.13 ppm (3H, singletti, 3-CH^), 3.39 ppm (2H, kvartetti, 2-CH2), 4.06 ppm (3H, singletti, » NOCH^), 4.29 ppm (2H, singletti, CICHgOO). 5.06 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5.86 ppm (1H, dubletti dubletista, 7-H), 7.20 ppm (1H,singletti, tiatsoli 5-H), 8.14 ppm (1H, dubletti, 7-CONH).

(2) Koko edellä valmistettu yhdistemäärä liuotetaan 12 ml:aan tetra-h^drofuraania, minkä jälkeen lisätään 100 mg tiokarbamidia ja 200 mg natriumasetaattitrihydraattia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä so 6661 8 8 tuntia. Reaktioseos laimennetaan 30 ml:11a vettä, minkä jälkeen seos uutetaan etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerros pestään vedellä, kuivataan ja konsentroidaan. Muodostunut öljy puhdistetaan kromato-grafoimalla piihappogeelin avulla. Täten saadaan 128 mg t-butyyli-7-1^2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido 7-desasetoksi-kefalosporanaattia jauheena.

NMR-spektri (60 MHz, CDCLjissa): 1.52 ppm (9H, singletti, t-C^H^), 2.10 ppm (3H, singletti, 3-CEj), 3.40 ppm (2H, kvartetti, 2-CH2), 4.00 ppm (3H, singletti, *=N0CH^), 5.05 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5.98 (1H, dubletin dubletti, 7-H), 6.66 ppm (1H, singletti, tiatsoli, 5-H), 8.28 ppm (1H, dubletti, 7-00NH).

(3) Koko edellä valmistettu yhdistemäärä liuotetaan seokseen, jossa on 1 ml trifluorietikkahappoa ja 0,1 ml anisolia, ja liuosta sekoitetaan huoneenlämmössä 1,5 tuntia, minkä jälkeen lisätään eetteriä. Muodostunut sakka otetaan talteen suodattamalla ja pestään eetterillä. Täten saadaan 70 mg 7-/~2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamidojf-desasetoksikefalosporaanihapon trifluoriasetaattia jauheena. NMR-spektrin (60 MHz, l>20:ssa, jossa on NaHOO^a) perusteella tämän tuotteen todetaan olevan samaa kuin esimerkin 5 mukaan valmistettu tuote.

Esimerkki 9

Asyloimalla vastaavan kefalosporiiniyhdisteen 7-aminoryhmä samankaltaisella tavalla kuin on selitetty esimerkissä 2 (menetelmä a) ja käyttämällä natrium-/“2-(2-amlnotlatsol-4-yyli)~2-(syn)-metoksi-iminoa3eta-mido_7-kefalosporanaattia ja heterosyklistä tioliyhdistettä samankaltaisella tavalla kuin on selitetty esimerkissä 4 (menetelmä b), saadaan valmistetuksi seuraavia yhdisteitä: (a) Natrium-7-/”2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoaseto-amido_7-3-(2-metyyli-1,3,4-tiadiatsol-5-yyli)-tiometyyli-3-kefeemi-4-karboksylaattia (menetelmä b).

NMR-spektri (60 MHz, I>20:ssa): 2.57 ppm (3H, singletti, tiatsoli 2-CH^), 3.52 ppm (2H, kvartetti, 2-CH2), 3.95 ppm (3H, singlet ti, »NOCH^), 5.18 ppm (1H, singletti, 6-H), 5.73 ppm (1H, singletti, 6-H), 5.73 ppm (1H, singletti, 7-H), 6.95 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H).

(b) Dinatrium-7-/" 2-(2-aminotiatsol-4-yyll)-2-(syn)-metoksi-imino- si 6661 8 asetamido_7-3-(2-karboksime tyyli-1,3,4-tiadiatsol-5-yyli)-tiometyyli- 3-kefeemi-4-karboksylaattia (menetelmä b).

NMR-spektri (60 MHz, DgOsssa): 3.56 ppm (2H, kvartetti, 2-CH2), 3.96 ppm (3H, singletti, =N0CHj), 4.18 ppm (2H, singletti, CH2000Ha), 5.20 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5.74 ppm (1H, dubletti, 7-H), 6.97 ppm (1H, singletti, tiatsoli, 5-H).

(c) Natrium-7-/** 2- (2-amino tiatsol-4-yyli )-2- (ayn )-metoksi-iminoaset-amido_7-3-(1,2,3-triatsol-5-yyli)-tiometyyli-3-kefeemi-4-karboksy-laattia (menetelmä b).

NMR-spektri (60 MHz, D20:ssa): 3.57 ppm (2H, kvartetti, 2-CH2), 3.94 ppm (3H, singletti, »NOCH^), 5.21 ppm (1H, dubletti, 6- H), 5.72 ppm (1H, dubletti, 7-H), 6.94 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H), 7.95 ppm (1H, singletti, triatsoli 4-H).

(d) Dinatrium-7-/** 2- (2-aminotiatsol-4-yyli )-2- (syn)-metoksi-imino-asetamido_7-3-(1-karboksimetyyli-1,2,3,4-tetratsol-5-yyli)-tiometyyli- 3-kefeemi-4-karboks.y.laattia (menetelmä b).

NMR-spektri (60 MHz, D20jssa): 3.55 ppm (2H, kvartetti, 2-CH2), 3.96 ppm (3H, singletti, »NOCH^), 4.72 ppm (2H, singletti, -N-CH2C00Na), 5.18 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5.72 ppm (1H, dubletti, 7-H), 6.95 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H).

(e) 7-/~2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido 7-

3- /“1-(2-N,N-dimetyyliaminoetyyli)-1 ^^^-tetratsol-S-yyl^Z-tio-DBbyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappobetaiinia (menetelmät a, b).CH

NMR-spektri (60 MHz, D90:ssa); 3.01 ppm (6H, singletti, ^ ), ^CH, 3.50 ppm (2H, kvartetti, 2-CH2), 3.98 ppm (3H, singletti, =N0CH^), 5.18 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5.74 ppm (1H, dubletti, 7- H), 6.96 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H) (f) Natrium-7-/~2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imino-asetamido_>7-3-(6-metyyli-l-oksidopyridatsin-3-yyli)-tiometyyli-3-kefeemi- 4- karboksylaattia (menetelmä b).

NMR-spektri (60 MHz, DgOsssa): 2.60 ppm (3H, singletti, pyridatsiini 6- CHj), 3.52 (2H, kvartetti, 2-0Η2)# 3.98 ppm (3H, singletti, =N0CH5), 5.21 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5.76 ppm (1H, dubletti, 7- H), 6.95 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H).

Esimerkki 10 52 6661 8

Liuotetaan seokseen, jossa on 20 ml vettä ja 10 ml metanolia, 280 mg natriumkarbonaattia, minkä jälkeen lisätään 477 mg 7-(2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-hydroksi-iminoasetamido)-kefalos-poraanihappoa. Tätä liuosta sekoitetaan, ja siihen lisätään tiputtaen 300 mg dimetyylisulfaattia jääkylvyssä jäähdyttäen. 25 minuutin kuluttua lisätään 300 mg kaliumkarbonaattia ja 300 mg dimetyylisulfaattia. Vielä 25 minuutin kuluttua reaktioseos konsentroidaan alennetussa paineessa ja suoritetaan pylväskroma-tografointi käyttämällä hartsia "Amberlite XAD-2" ja eluoimalla veden avulla. Täten saadaan natrium-7-(2-(2-aminotiatsol-4-yyli)~ 2-(syn)-metoksi-imino-asetamido)-kefalosporanaattia. NMR-spektrin jne. avulla tuotteen todetaan olevan samaa kuin esimerkin 3 mukaan valmistettu yhdiste.

Esimerkki 11 (1) Suspensioon, jossa on 5,54 9 2-(2-klooriasetami4otiatsol-4-yyli)- 2- (syrO-metoksi-imlnoetlkkahappoa 70 mlissa metyleenikloridia, lisätään 2,42 g trietyyliamiinia liukenemisen aikaansaamiseksi. Jääkylvyssä jäähdyttäen ja sekoittaen lisätään tähän liuokseen 4,16 g fosforipenta-kloridia yhtenä annoksena. Jääkylpy poistetaan 5 minuutin kuluttua, ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 20 minuuttia, minkä jälkeen konsentroidaan alennetussa paineessa. Saatuun jäännökseen lisätään 150 ml heksaania, minkä jälkeen dekantoidaan kahdesti. Lisätään 90 ml vedetöntä tetrahydrofuraania, minkä jälkeen saostunut trietyyliamiini-hydrokloridi poistetaan suodattamalla, ja saadaan 2-(2-klooriasetamido-tiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetyylikloridia tetrahydrofuraani-liuoksena.

Toisaalta lisätään suspensioon, jossa on 4.28 g 7-aminodesasetoksi-kefalosporaanihappoa (7-ADCA) seoksessa, jossa on 50 ml vettä ja 50 ml tetrahydrofuraania, jääkylvyssä jäähdyttäen 4,44 g trietyyliamiinia homogeenisen liuoksen saamiseksi. Jääkylvyssä jäähdyttäen edellä 53 6661 8 valmistettu happokloridiliuos lisätään tiputtaen 15 minuutin kuluessa edellä mainittuun liuokseen. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 2 tuntia, minkä jälkeen lisätään natriumkloridin kyllästynyttä vesiliuosta. Liuoksen pH säädetään arvoon noin 2 laimealla kloorivetyhapolla, ja uutetaan etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerros pestään natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella, kuivataan magnesiumsulfaatin avulla ja konsentroidaan, jolloin saadaan 8 g kellertävänvalkoista jauhetta, joka pestään 50 ml:11a metanolia ja otetaan sakka talteen suodattamalla. Täten saadaan 4,6 g 7-^”2-(2-klooriasetamidotiatsol- 4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imlnoasetamido 7-desasetoksikefalosporaani-happoa valkoisena jauheena.

NMR-spektri (60 MHz, dg-MSOissa): 2.04 ppm (3H, singletti, 5-CH^), 3.50 ppm (2H, leveä singletti, 2-CH2), 3.92 ppm (3H, singletti, OCHj), 4.40 ppm (2H, singletti, CICHgOO), 5.18 ppm (1H, dublet-ti, 6-H), 5.78 ppm (1H, dublettix2, 7-H), 7.50 ppm (1H, singlet ti, tiatsoli, 5-H).

(2) Edellä valmistettu yhdiste saatetaan reagoimaan samalla tavoin kuin esimerkissä 5-(2) on selitetty, jolloin saadaan natrium-7-/"2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido 7-desasetoksi-kefalosporanaattia valkoisena jauheena. NMR-spektrin ja muiden ominai-sjruksien perusteella tämän yhdisteen todetaan olevan samaa kuin esimerkin 5 mukaan valmistettu yhdiste.

Esimerkki 12

Suspendoidaan 25 ml:aan dimetyyliformamidia natrium-7-^”2-(2-amino-tiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido 7-desasetoksikefalo-sporanaattia ja lisätään jääkylvyssä jäähdyttäen 3,75 g jodimetyyli-pivalaattia ja 3 ml dimetyyliformamidia. Reaktioseokseen lisätään 17 minuutin kuluttua 100 ml etyyliasetaattia, ja sakka poistetaan suodattamalla. Suodos pestään vedellä ja tämän jälkeen natriumbikarbonaatin 5% vesiliuoksella, ja lopuksi natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella, minkä jälkeen kuivataan magnesiumsulfaatin avulla.

Tämän jälkeen etyyliasetaatti poistetaan tislaamalla, jolloin saadaan 2,4 g öljyä, joka puhdistetaan kromatografoimalla piihappogeelin avulla. Täten saadaan 1 g pivaloyylioksimetyyli-7^“2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-^-^(syn)-metoksi-iminoasetamldo 7-desasetoksikefalosporanaattia valkoisena jauheena.

6661 8 54

Yhdisteen C20H25N5°7S2 alkuaineaxialyysi

Laskettu C 46.95, H 4.92, K 13.69

Todettu C 46.92, H 4.88, H 13.13 NMR-spektri (60 MHz, CDCl^:ssa): 1.24 ppm (9H, singletti, -C(CH^)^), 2.16 ppm, 3.44 ppm (2H, dubletti, 2-CH2), 4.10 ppm (3H, singletti, OCHj), 5.16 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5.94 ppm (2H, singletti, -0CH20), 6.86 ppm (1H, singletti, tiatsoli, 5-H).

Esimerkki 13

Liuotetaan 0,7 g esimerkin 11-(1) mukaan valmistettua 7-^”2-(2-kloori-asetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido 7-desasetoksi-kefalosporaanihappoa jääkylvyssä jäähdytettyyn liuokseen, jossa on 149 mg trietyyliamiinia 7 ml:ssa dimetyyliformamidia. Tämän jälkeen lisätään 715 g jodimetyylipivalaattia, ja seosta sekoitetaan 13 minuuttia, Tähän reaktioseokseen lisätään 40 ml etyyliasetaattia, ja liuos pestään vedellä, natriumbikarbonaatin 5% vesiliuoksella ja lopuksi natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella, minkä jälkeen kuivataan magnesiumsulfaatin avulla. Etyyliasetaatti poistetaan alennetussa paineessa tislaamalla, jolloin saadaan 0,8 g raakaa pivaloyylioksi-metyyli-7-/~2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-(svn)-metoksi-imlno-asetamido_7-desasetoksikefalosporanaattia ruskeana öljynä.

Tämä öljy liuotetaan 3 ml:aan dimetyyliasetamidia, minkä jälkeen lisätään 206 mg tiokarbamidia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä yli yön, minkä jälkeen siihen lisätään 40 ml etyyliasetaattia, ja seos pestään kahdesti 30 ml:n erillä natriumkloridin kyllästettyä vesi-liuosta, ja lopuksi kuivataan magnesiumsulfaatin avulla. Etyyliasetaatti poistetaan tislaamalla, jolloin saadaan 0,4 g ruskean väristä öljyä, joka puhdistetaan kromatografoimalla piihappogeelin avulla.

Täten saadaan 0,2 g pivaloyylioksimetyyli-7-^~2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido_7-desasetoksikefalosporanaattia valkoisena jauheena.

NMR-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tämän yhdisteen todetaan olevan samaa kuin esimerkin 12 mukaan valmistettu yhdiste.

Esiaeflcki 14 6661 8 55

Suspensioon, jossa on 831 mg 2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imlnoetikkahappoa 10 ml:ssa metyleenikloridia, lisätään 360 mg trietyyliamiinia ja 624- mg fosforipentakloridia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 20 minuuttia, minkä jälkeen lisätään 100 ml heksaa-nia. Erottunut öljy otetaan talteen dekantoimalla heksaani ja liuotetaan 15 mliaan tetrahydrofuraania, jolloin saadaan 2-(2-klooriasetami-dotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetyylikloridiliuosta.

Toisaalta liuotetaan 984 mg 7-amino-3-(1-metyyli-1H-tetratsol-5-yyli)-tiometyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappoa ja 660 mg trietyyliamiinia 15 ml:aan tetrahydrofuraanin 50% vesiliuosta, ja tähän liuokseen lisätään tiputtaen ja jääkylvyssä jäähdyttäen edellisen kohdan mukaan valmistettu happokloridiliuos. Seosta sekoitetaan jääkylvyssä jäähdyttäen 2 tuntia, minkä jälkeen reaktioseos laimennetaan vedellä ja sen pH säädetään arvoon noin 2 laimealla kloorivetyhapolla, ja uutetaan etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerros pestään natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella ja kuivataan magnesiumsulfaatin avulla. Etyyliasetaatti poistetaan tislaamalla ja jäännöstä käsitellään eetterillä. Muodostuneet kiteet otetaan talteen suodattamalla. Täten saadaan 1,3 g 7»/"2-(2-klooriasetamldotiatsol-4~yyli)~2-(syn)-metoksi-iminoasetamido_7-3-(1-metyyli-1H-tetratsol-5-yyli)-tiometyyli-4-karhok-syylihappoa.

Tämä yhdiste on samaa kuin esimerkin 2 ensimmäisen osan valmistettu välituote, liuotetaan 5,8 g täten valmistettua yhdistettä 20 ml:aan dimetyyliasetamidia ja lisätään jääkylvyssä jäähdyttäen 1,53 g tiokarba-midia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 15 tuntia. Tähän reaktio-seokseen lisätään 200 ml jäävettä ja seoksen pH säädetään arvoon 3,5 natriumbikarbonaatin avulla. Muodostunut sakka otetaan talteen suodattamalla ja liuotetaan natriumbikarbonaatin 10% vesiliuokseen. Tämän jälkeen liuos puhdistetaan kaatamalla se hartsia "Amberlite XAD-2" sisältävän pylvään läpi. Täten saadaan 1,58 g natrium-7-^”2-(2-amino-tiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido_7-3-(1-metyyli-1H-tetratsol-5-yyli)-tiometyyli-3-kefeemi-4-karboksylaattia valkoisena jauheena.

NMR-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tämän yhdisteen todetaan olevan samaa kuin esimerkin 2 mukaan valmistettu yhdiste.

66618

Esimerkki 15 56

Liuotetaan 10 mljaan dimetyyliformamidia 1 g natrium-7-^_2-(2-amino-tiatsol-4-yyli)-2-(Byn)-metoksi-iminoasetamido 7-3-(1-metyyli-1H-tetratsol-5-yyli)-tiometyyli-3-kefeemi-4-karboksylaattia 3a lisätään jääkylvyssä jäähdyttäen ja sekoittaen 0,85 g jodimetyylipivalaattia. Seosta sekoitetaan 15 minuuttia, minkä jälkeen lisätään 40 ml etyyliasetaattia, ja pestään reaktioseos vedellä, sitten natriumbikarbonaatin 5/o vesiliuoksella ja lopuksi natriumkloridin kyllästyneellä vesiliuoksella, minkä jälkeen reaktioseos kuivataan magnesiumsulfaatin avulla. Etyyliasetaatti poistetaan tislaamalla alennetussa paineessa, ja jäännös liuotetaan pieneen määrään etyyliasetaattia ja suodatetaan. Suodokseen lisätään eetteriä, minkä jälkeen jäähdytetään. Muodostunut sakka otetaan talteen suodattsimalla. Täten saadaan 0.4 g pivaloyyli-oksimetyyli-7-/”2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoaseta-mido_7-3-(1-metyyli-1H-tetratsol-5-yyli)-tiometyyli-3-kefeemi-4-karboksylaattia valkoisena jauheena.

Yhdisteen alkuaineanalyysi

Laskettu C 42.27, H 4.34

Todettu C 42.29, H 4.40 NMR-spektri (60 MHz, CDC15): 1.22 ppm (9H, singletti, 3.80 ppm (2H, leveä singletti, 2-CH2), 3.94, 4.06 ppm (3Hx2, singlettix2, N-CH^ & OCH^), 5.94 ppm (2H, singletti, -OCHgO), 5.12 ppm (1H, dubletti, 6-H), 6.06 ppm (1H, dublettix2, 7-H), 4.44 ppm (2H, dubletti, 3-CH2), 6.81 ppm (1H, singletti, tiat- soli 5-H).

Esimerkki 16

Liuotetaan 20 mljaan metyleenikloridia 2.776 g 2-(2-klooriasetamido-tiatsol-4-yyli)-2-(syn)-met oksi-iminoetikkadiappoa ja 1,2 g trietyyli-amiinia, minkä jälkeen lisätään 2,08 g fosforipentakloridia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 20 minuuttia, minkä jälkeen lisätään 150 ml heksaania. Muodostunut öljymäinen sakka erotetaan ja liuotetaan 20 mlj aan tetrahydrofuraania, jolloin saadaan 2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetyylikloridiliuoBta.

5·> 6661 8

Toisaalta liuotetaan 3,143 g 7-amino-3-asetyyliasetoksimetyyli-3-kefeemi-4-karbok-syylihappoa ja 2,20 g trietyyliamiinia 50 mitään tetrahydrofuraanin 50% vesiliuosta. Tähän lisätään tiputtaen ja jääkylvyssä jäähdyttäen ja sekoittaen edellisen kohdan mukaan valmistettu happokloridiliuos. Seosta sekoitetaan jääkylvyssä 2 tuntia, minkä jälkeen lisätään vettä. Seoksen pH säädetään arvoon 2,0 laimealla kloorivetyhapolla, ja seos uutetaan etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerros pestään natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella ja kuivataan magnesitmsulfaatin avulla. Tämän jälkeen etyyliasetaatti tislataan pois ja jäännökseen lisätään eetteriä. Muodostunut kiteinen tuote otetaan talteen suodattamalla. Täten saadaan 4,168 g l-£2-(2-klooriasetamido-tiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoaseta midoj7-3-asetyyliasetoksimetyyli-3-kefwi-4-karbok«yyHha|ipoa.

SMB-apektri (60 MBs, d6-H430:*e*): 2.14 ppm (3H, singletti, -0-CHj) 0 3.60 ppm (4H, leveä singletti, -C-CI^-C- & 2-0^), 3.86 ppm 0 0 (3H, singlettl, 0CH?), 4.34 pp· (2B, singletti, C1CH200), 4.91 ppm (2H, kvartetti, 3-(¾). 5.13 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5.80 ppm (1H, dublettlx2, 7-H), 7-40 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H).

Esimerkki 17

Liuotetaan 20 ml:aan dimetyyliasetamidia 4,00 g esimerkin 16 mukaan valmistettua l-£2-{2-klooriasetamidotiatsoi-4-yyli)-2-(syn) -metoksi-iminoaseta^mido_7-3-asetyyli-asetoksimetyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappoa, minkä jälkeen lisätään 1,06 g tio-karbamidia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 17 tuntia, minkä jälkeen lisätään 100 ml eetteriä, öljymäinen sakka erotetaan ja liuotetaan natriumkarbonaatin 5% vesiliuokseen. Liuos lyofiloidaan, ja muodostunut jauhemainen tuote lisätään 50 mitään metanolia. Sakka poistetaan suodattamalla, ja suodos lisätään 300 ml:aan eetteriä. Sakka otetaan talteen suodattamalla. Täten saadaan 3,150 g natrium-7-(2-(2-aminotiatsol-4-yyli) -2- (syn) -metoksi-iminoasetamido) -3-asetyyliasetoks imetyyl i-3-kefeemi-4-karboksylaattia.

Liuotetaan 10 mitään vettä 933 mg edellisen kohdan mukaan valmistettua yhdistettä, 350 mg l-(2-N,N-dimetyyliaminoetyyli)-lH-tetratsoli-5-tiolia ja 168 mg natriumbikarbonaattia. Seosta sekoitetaan 55 ^Ctssa tunnin ajan, ja tämän jälkeen reaktioseos puhdistetaan pylväskromatografoimalla ja käyttämällä hartsia "Amberlite XAD-2". Täten saadaan 170 mg natr ium-7-(2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-imino-asetamido)- 3-(l-(2-N,N-dimetyyliaminoetyyli)-lH-tetratsol-5-yYli)-tiometyyli-3-kefeenii-4-karbok-sylaattia valkoisena jauheena. NMR-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tänän yhdisteen todetaan olevan samaa kuin esimerkin 9 mukaan valmistettu yhdiste.

Esimerkki 18 se 6 661 8 (1) Suspensioon, jossa on 55,6 g 2-(2-klooriasetamidotiatsol-4-yyli)- 2-(syn)-metoksi-iminoetikkahappoa 600 ml:ssa metyleenikloridia, lisätään 24.5 g trietyyliamiinia siten, että saadaan liuos. Jäässä jäähdyttäen ja sekoittaen lisätään tähän liuokseen 41,8 g fosforipentaklori-dia kahtena eränä. 5 minuutin kuluttua jääkylpy poistetaan ja seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 20 minuuttia, minkä jälkeen seos konsentroidaan alennetussa paineessa. Tähän jäännökseen lisätään 1 1 heksaania, minkä jälkeen dekantoidaan kahdesti. Lisätään 600 ml vedetöntä tetra-hydrofuraania, minkä jälkeen saostunut trietyyliasetaattihydrokloridi poistetaan suodattamalla, jolloin saadaan 2-(2-klooriasetamidotiatsol- 4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetyylikloridin tetrahydrofuraaniliuos.

Toisaalta lisätään jääkylvyssä jäähdyttäen, jossa on 54,7 g 7-amino-3-karbamoyylioksimetyyli-3-kefeemi-4-karboksyylihappoa seoksessa, jossa on 400 ml vettä ja 400 ml tetrahydrofuraania, 61 g trietyyliamiinia homogeenisen liuoksen saamiseksi. Jääkylvyssä edelleen jäähdyttäen lisätään tiputtaen 50 minuutin kuluessa edellisen kohdan mukaan valmistettu happokloridiliuos viimeksi mainittuun liuokseen. Reaktioseosta sekoitetaan huoneenlämmössä 2 tuntia, minkä jälkeen lisätään natrium-kloridin kyllästynyttä vesiliuosta. Liuoksen pH säädetään arvoon noin 2 laimealla kloorivetyhapolla, minkä jälkeen seos uutetaan etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattikerros pestään natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella, kuivataan magnesiumsulfaatin avulla ja konsentroidaan, jolloin saadaan 97,3 g 7-*/”2-(2-klooriasetamidotiatsol-4--yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido 7-3-karbamoyylioksimetyyli-3-kefeemi- 4-karboksyylihappoa. NMR-spektrin ja· muiden ominaisuuksien perusteella tämän yhdisteen todetaan olevan samaa kuin esimerkin 6 kohdan (1) mukaan valmistettu yhdiste.

HMR-spektri (60 MHz, d^-XMSOjssa): 3.56 ppm(2H, leveä singik&tti, 2-CH2), 3.93 ppm (3H, singletti, OCHj), 4.35 ppm (2H, singletti, CICHgOO), 4.78 ppm (2H, kvartetti, 5-CH2), 5.19 ppm (1H, dubletti, 6-H), 5.84 ppm (1H, dublettix2, 7-H), 6.56 ppm (2H, singletti, 0C0NH2), 7.46 ppm (1H, singletti, tiatsoli 5-H).

59 6661 8 (2) liuotetaan 97,3 g edellisen kohdan (1) mukaan valmistettua yhdistettä 500 mljaan Ν,Ν-dimetyyliasetamidia ja lisätään jääkylvyssä jäähdyttäen tähän liuokseen 31,2 g tiokarbamidia. Seosta sekoitetaan huoneenlämmössä 15 tuntia. Reaktioseokseen lisätään 2 1 eetteriä, minkä jälkeen öljymäinen tuote erotetaan. Tämä öljymäinen tuote suspen-doidaan 300 ml:aan vettä ja suspension pH säädetään arvoon 7,0 natriumbikarbonaatilla. Täten saatu liuos pylväskromatografoidaan käyttämällä hartsia "Amberlite XAD-2". Täten saadaan 20,2 g natrium-7-1“2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido 7-3-karbarnoyylioksimetyyli-3-kefeemi-4-karboksylaattia valkoisena jauheena. NMR-spektrin ja muiden ominaisuuksien perusteella tämän yhdisteen todetaan olevan samaa kuin esimerkkien 1 tai 6 mukaan valmistettu yhdiste.

Yhdisteiden n: 1...33 rakenteet ja ominaisuudet (infrapunaspektri) on lueteltu seuraavassa taulukossa. Infrapunaspektrissä (cnf\ KBr) tarkoittaa β-laktamiosasta johtuvaa tunnusomaista absorptionauhaa.

60 6661 8

Taulukko R0NH , Y 1 s N-U_C-C0NH _ N 0 J^N^*-CE2R5 0CH3 0001Ί

Yhdiste R R ^ IR Valmistus- __f__l__(cm'1 ,KBr) ssr*a« 1 H _ J " i Na 1760 2, 4 S"^S- 2 h |ί “ j? Na 1763 2, 4 -s-lj

H

3 H -S|;Ich3 Na 1756 CH? 4 H ί Π Na 1760 2, 4 ____h.____ w . CH, 5 H XX * Na 1763 2'4 S S CH^ 6 H ~ ? Na 1763 2, 4 -sAs>-nh2 7 H ” n Na 1760 2, 4 — S -4. NHC00CH, c 7 61 6661 8

Yhdiste IR Valmistusko R0 K, n , menetelmä __f______(cm 1,KBr) Esim. No 8 H S “ m Na 1765 2, 4 -sAs>CH2CONH2 9 H ? " n Na 1768 2, 4

-SArN

CH2C0NH2 10 H ? “ ? Na 1768 2, 4 -sAn> nh2 CH, 11 H -OH Na 1760 3 12 H if “ f? CH, Na 1765 2> 4 -sA<,>CH2Ni: 5 S CHj 15 H 9 1765 4 14 H -nQ-OONH, f) 1765 4 15 H “ F Na 1768 2, 4 -SΛ g >- SCH2C00Na 16 H n " F Na 1765 2, 4 CHgCOONa 62 6 6 6 1 8

Yhdiste _ _ , ir Valmistus-

No 2 3 / -1 νΏ n menetelmä _ ^cm >KBr) Esim. No 17 H m " n Na 1765 2, 4 -sAjjj CH2SO^Na _ 18 H -OCOCHj -CH2OCOC-CH5 1760 12 CH, __ 7 ch5 19 H -0C0NH2 -CH2OCOC-CH5 176? 12 ____6h3 ch5 2° H JJ” J? -CH^COC-CIL 1765 12 -S-^rN ' ___H__* ch3 21 H ? " j? -CHo0C0C-CH, 1768 12

"V CH, V

ch5ch0n< 5 ___* ^ CH^____ 22 H H -CH0C00CoHc 1760 12 ch3 23 H -OCOCHj -CHOCOOCgH^ 1763 12 ch5 ?H3 24 H -0C0NHo -CHOCOC-CH, 1763 12 ^ t i 5 CHj CHj

N - N

25 H _ J|^ Jj -CHOCOOCgH^ 1765 12 i CH, CH, 5 _I_ 63 6 6 61 8

» g- ---- r - ----------1-------- —...... ..... I..... — --------- I

Yhdiste c ό m IR Valmistus- „ Rp Ra M , menetelmä

No (cm 1,KBr) Esim. No 26 H I] 1? -CHOC0000HC 1768 12 _s—ti N I C p CH, H 3 N - N C^ 27 H -sA^ -CH0C0C-CH, 1765 12 iW<CHS CH, * ch3 28 H H °wO 1760 12 11 o 29 H -0C0CH5 1763 12 tl o 30 H -0C0NH2 1765 12 (1 o 31 H Λΐϊ vO ^ 0¾__o___

32 H -sJCl °0D

«W tt H 0 33 H -AJ <0 • >H3 0 C^CHgNC 3 υ CH^

Claims (1)

1. 64 Patenttivaatimus 6 6 618 Menetelmä seuraavan kaavan mukaisen terapeuttisesti vaikuttavan 7-(2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamido)-kefalo-sporiinijohdannaisen tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan tai esterin valmistamiseksi s H—IL C-CONH -j—^ SN h (I) VOCH5 cooh jossa kaavassa R3 tarkoittaa vetyä, hydroksyyliä, C2-4-asyylioksia, 3-oksobutyryylioksia, karbamoyylioksia, tai substituoitua tai substituoimatonta yhdistettä joka voi olla pyridiini, N-oksidopyri-datsinyvlitio, diatsolyylitio, tiatsolyylitio, tiadiatsolyvlitio, oksadiatsolyylitio, triatsolyylitio tai tetratsolyylitio, ja substi-tuenttina voi olla Ci„3-alkyyli, amino, karbamoyyli, di-C^_3-alkyyliamino-Ci„3-alkyyli, karboksi-Ci_3-alkyyli, karbamoyyli-Ci_3-alkyyli, karboksi-Ci_3-alkyylitio, sulfo-Ci_3-alkyyli tai C^_3-alkoksikarbonyyliamino, R2NH tarkoittaa aminoryhmää, joka mahdollisesti voi olla suojattu, tunnettu siitä, että (a) saatetaan 7-aminokefalosporiinijohdannainen, jonka kaava on ¥tt'S1 0^νΥ^οη2η3 (ii) COOH jossa kaavassa R3 tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty, tai kun R3 tarkoittaa karbamoyylioksiryhmää tämä mahdollisesti on suojatussa muodossa, reaqoimaan yhdisteen tai sen reaktiivisen johdannaisen kanssa, jonka yhdisteen kaava on N-LL C-COCH " (III) N noch? 65 6661 8 jossa kaavassa R2NH tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty, ja tarpeen vaatiessa tämän jälkeen poistetaan suojaryhmä, (b) saatetaan yhdiste, jonka kaava on g N-U- C-CONH n (IV) SOCHj COOH jossa kaavassa R2NH tarkoittaa samaa kuin edellä on määritelty, ja R4 tarkoittaa asetoksi- tai 3-oksobutyryylioksiryhmää, reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on R3' - H (V) tai pyridiinin kanssa, joka voi olla substituoitu karbamoyylillä, jolloin R3' tarkoittaa substituoitua tai substituoimatonta yhdistettä joka voi olla N-oksidopyridatsinyylitio, diatsolyylitio, tiatsolyylitio, tiadiatsolyylitio, oksadiatsolyylitio, triatsolyyli-tio tai tetratsolyylitio, ja substituenttina voi olla Ci_3~alkyyli, amino, karbamoyyli, di-C3_3-alkyyliamino-Ci_3-alkyyli, karboksi-Ci«3~alkyyli, karbamoyyli-Ci_3-alkyyli, karboksi-Ci_3-alkyylitio, sulfo-Cx_3-alkyyli tai Cj^-a Ikoksikarbonyyliamino, minkä jälkeen tarpeen vaatiessa suojaryhmä poistetaan, tai (c) kohdistetaan metyloimisreaktio yhdisteeseen, jonka kaava on - B N C-CONH % ; JV»* 0H COOH jossa kaavassa R3 ja R2NH tarkoittavat samaa kuin edellä on määritelty, 66 6 661 8 ja että näin saatu kaavan I mukainen yhdiste haluttaessa sinänsä tunnetulla tavalla muutetaan sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi tai esteriksi. Förfarande för framställning av terapeutiskt verkande 7-(2-(2-aminotiazol-4-yl)-2-(syn)-metoxi-iminoacetamido)-cefalosporinder ivat eller dess farmaceutiskt acceptable salt eller ester med formeln N-N- C-COHH —f N 0JlHNf^-CH2R5 U) ^OCHj COOH i vilken formel R3 betecknar väte, hydroxyl, C2-4-acyloxi, 3-oxo-butyryloxi, karbamoyloxi eller en substituerad eller osubstituerad förening som kan vara pyridin, N-oxidopyridazinyltio, diazolyltio, tiazolyltio, tiadiazolyltio, oxadiatsolyltio, triazolyltio eller tetrazolyltio, och substituenten kan vara Ci-3-alkyl, amino, karba-moyl, di-Ci-3-alkylamino-Ci_3~alkyl, karboxi-Ci_3-alkyl, karbamoyl-Ci_3~alkyl, karboxi-Ci_3-alkyltio, sulfo-Ci_3~alkyl eller C}_3-alkoxikarbonylamino, R2NH betecknar en aminogrupp, som eventuellt kan vara skyddad, kännetecknatav att a) man bringar ett 7-aminocefalosporinderivat med formeln H2* T-Y Sv] (II) 0^n/ch2r3 COOH ” 6661 8 i vilken forme1 R3 betecknar samma som ovan definierats, eller dä R3 betecknar en karbamoyloxigrupp denna eventuellt är i skyddad form, att reagera med en förening med formeln N-IL C-COOH « (III) ir OCH^ i vilken formel R2NH betecknar samma som ovan definierats, eller med dess reaktiva der ivat, och vid behov därefter avlägsnar skydds-gruppen, b) bringar en förening med formeln e N-C-CONH -r-γ H (IV) ^OCHj cooh i vilken formel R2NH betecknar samma som ovan definierats, och R4 betecknar acetoxi- eller 3-oxobutyryloxigrupp att reagera med en förening med formeln R3' - H (V) eller pyridin, som kan vara substituerad med karbamoyl, varvid R3' betecknar en substituerad eller osubstituerad förening som kan vara N-oxidopyridazinyltio, diazolyltio, tiazolyltio, tiadiazolyltio, oxadiazolyltio, triazolyltio eller tetrazolyltio, och substituenten kan vara Ci„3-alkyl, amino, karbamoyl, di-Ci_3-alkylamino-Ci_3-alkyl, karboxi-Ci_3-alkyl, karbamoyl-Ci_3-alkyl, karboxi-Ci_3-alkyl-tio, sulfo-Ci_3-alkyl eller Ci„3-alkoxikarbonylamino, varefter vid behov skyddsgruppen avlägsnas, eller c) utför metyleringsreaktion med en förening med formeln