DK158671B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 7-oe2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamidoaa-cephalosporinderivater eller fysiologisk acceptable salte eller estere deraf. - Google Patents

Description

DK 158671 B

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)- 2-(syn)-methoxyiminoacetamido ]-cephalosporinderivater med den almene formel Η2Ν"ίΓ% Å N-il -C-CONH- -_/ \ j \ ,0i-O-CH2R3

0CHo I

3. COOH

hvori R3 betyder hydrogen, OCOCH2COCH3, OCOCH3, OCONH2, tetrazo-lylthio substitueret med C(1-3)-alkyl, di-C(l-3)-alkylamino-C(1-3)-alkyl, carboxy-C(1-3)-alkyl, carbamoyl-C(1-3)-alkyl eller sulfo-C(1-3)-alkyl, thiadiazolylthio substitueret med amino, carboxy-C(1-3)-alkyl, C(1-3)-alkoxycarbonylamino, carbamoyl-C(1-3)-alkyl, di-C(1-3)-alkylamino-C(1-3)-alkyl eller carboxy-C(l-3)-alkylthio, oxadiazolylthio substitueret med C(l-3)-alkyl, thiazolylthio substitueret med C(1-3)-alkyl, diazolylthio substitueret med C(1-3)-alkyl, triazolylthio, 1,2-di-C(1-3)-alkyl-1, 3,4-triazolylthio, l-C(l-3)-alkyl-2-amino-l,3,4-triazolylthio, 6-C(1-3)-alkyl-l-oxopyridazinylthio eller pyridinium, som eventuelt er substitueret med carbamoyl, eller fysiologisk acceptable salte eller estere deraf, idet dog forbindelsen foreligger i form af en ester, når R3 er hydrogen, OCOCH3, OCONH2 eller 1-methyltetrazolylthio.

Udviklingen af syntetiske cephalosporinderivater har været rettet mod omdannelsen af 7-aminocephalosporansyre til forskellige acyl-derivater i 7-stillingen eller mod derivater i 3-stillingen for at tlvejebringe forbindelser med et bredt antibakterielt spektrum eller et specifikt antibakterielt spektrum. Imidlertid har de kendte cephalosporinderivater ikke tilfredsstillende antibakteriel virkning.

Fra DE-patentskrift nr. 2.462.736 kendes cephalosporinderivater, som er nært beslægtede med cephalosporinderivaterne med formlen I. Blandt disse kendte cephalosporinderivater kan nævnes handels-

DK 158671 B

2 produktet "CEFOTIAM". Det har vist sig, at de omhandlede cephalo-sporinderivater med formlen I har en overraskende god antibakte-riel virkning i forhold til de kendte, nært beslægtede cephalo-sporinderivater, hvilket illustreres nærmere i det følgende.

Cephalosporinderivatet med formlen I synes at have en tautomer form, dvs. en 2-aminothiazolforbindelse og en 2-iminothiazolin-forbindelse, som vist nedenfor, skønt det beskrives som thiazol-forbindelsen i denne beskrivelse.

Λ /\ N_ϋ-C-CONH-_X \ \ XN\J-CV3 och3 u Y ^

COOH

H2n v 5.

S

N_1 - C- GONH-_/ Y

H \ .11 0H2r3 och3 σ YX ^

COOH

Carboxylgruppen i 4-stillingen i forbindelsen med formlen I kan være fri eller foreligge i form af et salt, f.eks. med en ikke-toksisk kation, såsom et alkalimetal, f.eks. natrium eller kalium, en basisk aminosyre, f.eks. arginin, ornithin, lysin eller histidin, eller en polyhydroxyalkylamin, f.eks. N-methylglucamin, diethanolamin, triethanolamin eller trishydroxymethylaminomethan. Forbindelsen I kan danne et surt salt med en uorganisk syre, såsom saltsyre og svovlsyre, eller med en organisk syre, såsom toluen-sulfonsyre og benzensulfonsyre. 4-Carboxylgruppen kan også indgå i en af de biologisk aktive esterformer, som f.eks. bidrager til forhøjelse af blodniveauet og til forlænget virkning. Sådanne estergrupper omfatter lavalkoxymethylgrupper, f.eks. methoxy-methyl, ethoxymethyl, isopropoxymethyl, or-methoxyethyl og G!-ethoxyethyl, α-lavalkoxy-a-substi tuerede methyl grupper, såsom a-lavalkoxy-(i_4)-ethyl (f.eks. methoxyethyl, ethoxyethyl, 3

DK 158671 B

propoxyethyl og i-propoxyethyl), lavalkylthiomethylgrupper med 1 til 3 carbonatomer, f.eks. methylthiomethyl, ethylthiomethyl og \ isopropylthiomethyl, acyloxymethylgrupper, f.eks. pivaloyloxy-methyl og o;-acetoxymethyl, etaoxy carbonyl -1 -me thylmethyl; eller α-acyloxy-o'-substi tuerede methylgrupper (f.eks. α-acetoxy-a-methylmethyl ).

Ligesom de kendte cephalosporiner eller penicilliner kan de omhandlede forbindelser I administreres i sådanne doseringsformer som injektioner, kapsler, tabletter og granulater. Forbindelserne I er således nye forbindelser, som viser udmærket aktivitet overfor et bredt spektrum af gram-negative bakterier, såsom Escherichia coli, Serratia marcescens, Proteus rettgeri, Entero-bacter cloacae og Citrobacter freundii. Når forbindelsen I anvendes f.eks. til behandling af intraperitoneale infektioner, luftvejsinfektioner, urinvejsinfektioner og andre infektionssygdomme forårsaget af de førnævnte mikroorganismer, kan den uden fare administreres til mennesker og pattedyr, herunder mus og rotter, i en daglig dosis på 0,5 til 80 mg pr. kg legemsvægt, fortrinsvis 1 til 20 mg på samme basis, i 3 til 4 doser dagligt. Forbindelserne I kan administreres oralt eller parenteralt i forskellige doseringsformer, såsom injektioner, kapsler, pulvere, granulater og tabletter, som kan fremstilles ved gængse eller kendte fremgangsmåder. Når forbindelsen I anvendes i form af en injektion, kan bæreren f.eks. være destilleret vand eller fysiologisk saltvand. I dette tilfælde, hvor forbindelsen I anvendes i form af en kapsel, et pulver, et granulat eller en tablet, anvendes forbindelsen I f.eks. i blanding med farmakologisk acceptable, per se kendte excipienser (f.eks. stivelse, lactose, sucrose, calciumcarbonat og calciumphosphat), bindemidler (f.eks. stivelse, gummi arabicum, carboxymethylcellulose, hydroxypropyl-cellulose og krystallinsk cellulose), smøremidler (f.eks. magne-siumstearat og talk) og sprængmidler (f.eks. carboxymethylcal-cium og talk).

Fremgangsmåden ifølge den foreliggende opfindelse er ejendommelig ved, at man a) omsætter et 7-aminocephalosporinderivat med formlen

DK 158671 B

4 h2n- r y\ 0J~\J'CB 2R3 11

COOH

hvori R3 har den ovenfor angivne betydning, eller et fysiologisk acceptabelt salt eller en ester deraf, med en forbindelse med formlen

y-A

N-U-C-COOH III

II

N

\ OCH3 hvori R2NH betyder en aminogruppe, som kan være beskyttet, eller et reaktivt derivat deraf og, om nødvendigt, fjerner beskyttelsesgruppen, b) omsætter en forbindelse med formlen R-NH-f'X o N_!l-C-CONH-|-/ \

OCH3 COOH

hvori R2NH har den ovenfor angivne betydning, og R4 betyder acyloxy, carbamoyloxy eller halogen, eller et fysiologisk acceptabelt salt eller en ester deraf, med en nucleofil forbindelse med formlen H-R3 hvori R3 har den ovenfor angivne betydning med undtagelse af hydrogen, OCOCH3 og OCONH2, eller et salt deraf og fjerner beskyt 5

DK 158671 B

telsesgruppen, c) underkaster en forbindelse med formlen R2NHY% S, N_il -C-CONH-1_j/ \

N J N J-CH„R, VI

\ ✓ Y 23

°H' . COOH

hvori Rø og RøNH har de ovenfor angivne betydninger, eller et fysiologisk acceptabelt salt eller en ester deraf, en methyle-ringsreaktion og fraspalter beskyttelsesgruppen eller d) esterificerer en forbindelse med formlen

r2heY i] A

N J_λ l-CH-R- XI

I 23

OCH-. υ I

COOH

hvori R3 og RøNH har de ovenfor angivne betydninger, eller et fysiologisk acceptabelt salt deraf, og fjerner beskyttelsesgruppen.

Fremgangsmåde a)

Ved denne fremgangsmåde anvendes forbindelsen III enten som en fri forbindelse eller i form af et reaktivt derivat som acyleringsmiddel for acyleringen af aminogruppen i 7-stillingen i forbindelse II. Således underkastes den frie syre III, et alkali- eller jordalkali-metalsalt af den frie syre III (f.eks. et natrium-, kalium- eller calciumsalt), et organisk aminsalt af den frie syre III (f.eks. et trimethylaminsalt eller pyridinsalt) eller et reaktivt derivat deraf, såsom et syrehalogenid (f.eks. syrechlorid eller syrebromid), syre-anhydrid, blandet syreanhydrid, aktivt amid eller en aktiv ester den 6

DK 158671 B

førnævnte acyleringsreaktion. Som eksempler på denne aktive ester kan nævnes p-nitrophenylesteren, 2,4-dinitrophenylesteren, penta-chlorphenylesteren, N-hydroxysuccinimidesteren og N-hydroxyphthal-imidesteren. Som eksempler på det blandede syreanhydrid kan nævnes et blandet syreanhydrid med en kulsyremonoester (f.eks. kulsyre-monomethylester eller kulsyremonoisobutylester) og et blandet syreanhydrid med en lavalkansyre, som kan være substitueret med halogen (f.eks. pivalinsyre eller trichloreddikesyre). Når carboxylsyren III anvendes som den frie syre eller i fom af et salt, anvendes der et passende kondensationsmiddel. Som eksempler på dette kondensationsmiddel kan nævnes N,Ν'-disubstituerede carbodiimider, f.eks. Ν,Ν'-dicyclohexylcarbodiimid, azolider, f.eks. N,N'-carbonylimidazol og N,N'-thionyldiimidazol, dehydreringsmidler, f.eks. N-ethoxycarbonyl-2-ethoxy-1,2-dihydroquinolin, phosphoroxychlorid og alkoxyacetylen og 2-halogenpyridiniumsalte (f.eks. 2-chlorpyridiniummethyliodid og 2-fluorpyridiniummethyliodid). Når et sådant kondensationsmiddel anvendes, antages det, at reaktionen forløber via det reaktive derivat af carboxylsyren III. Reaktionen udføres almindeligvis i et passende inert opløsningsmiddel. Som eksempler på et sådant opløsningsmiddel kan nævnes halogenerede carbonhydrider, f.eks. chloroform og methylendichlorid, ethere, f.eks. tetrahydrofuran og dioxan, dimethylfomamid, dimethylacetamid, acetone, vand og blandinger af sådanne opløsningsmidler. Mængden af det nævnte acyleringsmiddel er normalt - indenfor området fra ca. 1 til 5, fortrinsvis 1 til 2, molækvivalenter, beregnet på forbindelsen II. Denne reaktion udføres almindeligvis ved en temperatur i området på fra -50 til 40°C. Reaktionstiden er fra 1 til 10 timer, fortrinsvis 1 til 3 timer. Efter acyleringsreaktionen kan beskyttelsesgruppen for aminogruppen om nødvendigt fjernes. Fjernelsen af beskyttelsesgruppen for aminogruppen kan almindeligvis udføres ved per se kendte fremgangsmåder (f.eks. den fremgangsmåde, som er beskrevet i det japanske offentliggørelsesskrift nr. 52083/1975 og i Pure and Applied Chemistry, T_, 335 (1963) , eller en dertil analog fremgangsmåde. Det skal for-2 stås, at når R i f oml en I er monohalogenacetyl (f.eks. monochlor- 3 acetyl) og R en carbamoyloxygryppe, hvis aminogruppe er beskyttet, såsom N-monohalogenacetylcarbamoyloxy (f.eks. N-monochloracetyl-carbamoyloxy), kan disse to monohalogenacetylgrupper (f.eks. mono- 7

DK 158671 B

chloracetylgrupper) fjernes samtidigt. I denne betydning er be- 2 skyttelsesgruppen R for aminogruppen fortrinsvis en monohalogen-acetylgruppe. Reaktionen til fjernelse af monohalogenacetylgruppen fra aminogruppen udføres ved omsætning af en forbindelse med formlen I, hvis aminogruppe eller -grupper er beskyttet med monohalo-genacetyl med thiourinstof og et basisk stof. Normalt udføres denne reaktion i et opløsningsmiddel ved en temperatur nær stuetemperatur, og den forløber i mange tilfælde fuldstændigt i løbet af ca. 1 til 10 timer. Opløsningsmidlet kan være ethvert opløsningsmiddel, som ikke interfererer med denne reaktion. Således kan nævnes ethere, f.eks. ethylether, tetrahydrofuran og dioxan, lavere alkoholer, f.eks. methanol og ethanol, halogenerede carbon-hydrider, f.eks. chloroform og methylendichlorid, estere, f.eks. ethylacetat og butylacetat, ketoner, f.eks. acetone og methylethyl-keton, vand og forskellige blandinger af sådanne opløsningsmidler.

Denne reaktion til fjernelse af N-halogenacetylgruppen fra N-mono-halogenacetylcarbamoyloxymethylgruppen i 3-stilling i forbindelsen I forløber ikke i væsentlig udstrækning, hvis man lader thiourinstof alene indvirke på forbindelsen I. Hvis forbindelsen I imidlertid omsættes med thiourinstof og et basisk stof, forløber den ønskede reaktion til fjernelse af monohalogenacetylgruppen selektivt og glat under dannelse af 3-carbamoyloxymethylforbindelsen I. Som basisk stof til anvendelse i denne reaktion kan nævnes et alkali- eller jordalkalimetalsalt af en lavaliphatisk carboxylsyre eller en uorganisk eller organisk base med en pKa-værdi på ikke under 9, ^fortrinsvis indenfor området pKa 9,3 til 12,0. Som eksempler på dette salt af en lavaliphatisk carboxylsyre kan nævnes saltene af 1avaliphatiske carboxylsyrer med 1 til 6 carbonatomer, såsom natriumacetat, kaliumacetat, calciumacetat, bariumacetat, natriumformiat, natriumpropio-nat og kaliumhexanoat. Som eksempler på den uorganiske base kan nævnes alkalimetalsaltene af kulsyre, såsom natriumcarbonat og kalium-carbonat. Den organiske base kan f.eks. være en af de mono-,di-eller 1 lavalkylsubstituerede amine^hvis lavalkyldel har 1 til 4 carbonatomer, f.eks. trimethylamin, triethylamin, ethylamin, methylamin, di-ethylamin, dimethylamin, tributylamin, dibutylamin og butylamin, og 5- til 6-leddede cycliske aminer substitueret i N-stillingen med lavalkyl med 1 til 2 carbonatomer, såsom N-methylpyrrolidin, N- 8

DK 158671 B

ethylpyrrolidon, N-methylpiperazin og N-ethylpiperazin. Medens thiourinstof anvendes i denne reaktion, kan reaktionen også med held gennemføres med N- eller N,N-substitueret thiourinstof, såsom methyl-thiourinstof, Ν,Ν-diethylthiourinstof eller N,N-hexamethylenthiourinstof .

Fremgangsmåde b)

Som acyloxygruppe repræsenteret af R4 i formlen IV kan f.eks. nævnes acyloxy afledt af en lavaliphatisk carboxylsyre med 2-4 carbon-atomer, der om ønsket kan være substitueret med oxo, carboxy eller ethoxycarbamoyl, f.eks. acetyloxy, propionyloxy, 3-oxobutyryloxy, 3-carboxypropionyloxy, 3-ethoxycarbamoylpropionyloxy og 4-carboxy-butyryloxy, og acyloxy afledt af en aromatisk carboxylsyre, der om ønsket kan være substitueret med hydroxy, carboxy, carboethoxy-carbamoyl eller carboethoxysulfamoyl, f.eks. mandelyloxy, 2-earboxy-benzoyloxy, 2-(carboethoxycarbamoylj-benzoyloxy og 2- (carboethoxysulf amoyl)-benzoyloxy. Halogenet repræsenteret af R^ kan f.eks. være chlor, brom eller iod. Gruppen fra en nucleofil forbindelse repræ-senteret af R i formlen V betyder en gruppe fra en nucleofil forbindelse, som svarer til en gruppe fra en nucleofil forbindelse re-præsenteret af R"^ undtagen de acyloxygrupper, som repræsenteres af R^- og carbamoyloxy. Til den foreliggende reaktion er det imidlertid almindeligvis en fordel at anvende en forbindelse IV med en acyloxygruppe afledt af en lavaliphatisk carboxylsyre, såsom acetyloxy. Den nucleofile forbindelse,som anvendes i denne reaktion, er en forbindelse, der svarer til den gruppe fra en nucleofil forbindelse, som be-tegnes med symbolet R' i formlen V. Særligt foretrukne er de hetero-cycliske thiolforbindelser, d.v.s. mercaptoforbindelser, som kan indeholde en substituent. Blandt de nucleofile forbindelser, der sva- 5 rer til gruppen repræsenteret af R , kan mercaptoforbindelser anvendes i deres frie form, skønt det er en fordel at anvende dem i form af alkalimetalsalte, f.eks. natrium- eller kaliumsalte. Denne reaktion udføres fortrinsvis i et opløsningsmiddel. F.eks. anvendes vand, deuterium eller et organisk opløsningsmiddel, som er let blandbart med vand,og som ikke reagerer med reaktanterne, f.eks. dimethyl-formamid, dimethylacetamid, dioxan, acetone, alkohol, acetonitril, dimethylsulfoxid og tetrahydrofuran.

9

DK 158671 B

Medens reaktionstemperaturen og -tiden varierer med sådanne faktorer som det anvendte udgangsmateriale og opløsningsmiddel, vælges de almindeligvis i området . fra 0 til 100°C, fortrinsvis 30 til 70°C, og 2 til 1+8 timer, fortrinsvis 3 til 15 timer. Reaktionen udføres fortrinsvis i nærheden af neutralpunktet og passende indenfor området fra ca. pH 2 til S, fortrinsvis pH 5 til 8. Forløbet af denne reaktion kan undertiden gøres jævnt ved tilsætning af et kvaternært ammoniumsalt med overfladeaktivitet, såsom trimethyl-benzylammoniumbromid eller triethylbenzylammoniumbromid eller tri-ethylbenzylammoniumhydroxid. Desuden opnås mere tilfredsstillende resultater, hvis reaktionen udføres i en inertgasatmosfære, såsom i nitrogen, for at forhindre luftens oxidation af mercaptoforbindelsen.

Fremgangsmåde c)

Denne O-methyleringsreaktion udføres normalt i et opløsningsmiddel under isafkøling eller omkring stuetemperatur (0 til 40°C, fortrinsvis 5 til 30°C) og forløber i mange tilfælde fuldstændigt i løbet af ca. 5 minutter til 5 timer, fortrinsvis 5 minutter til 2 timer. Opløsningsmidlet kan være ethvert opløsningsmiddel, som' ikke påvirker reaktionen, såsom en ether, f.eks. tetrahydrofuran og di-oxan,en lavere alkohol, f.eks. methanol og ethanol, et halogeneret carbonhydrid, f.eks. chloroform og methylenchlorid, en ester, f.eks. ethylacetat og butylacetat, et amid, f.eks. Ν,Ν-dimethylformamid og Ν,Ν-dimethylacetamid, vand og blandinger af sådanne opløsningsmidler. Methyleringsmidlet kan være et methyleringsmiddel, som er almindeligt anvendt i organisk kemi, såsom et methylhalogenid '(f.eks. methyliodid og methylbromid), dimethylsulfat eller diazomethan.

Denne reaktion kan forløbe glat under tilstedeværelse af en egnet base, undtagen for diazomethans vedkommende. Som en sådan base anvendes normalt en uorganisk base, såsom et alkalimetalsalt af kulsyre (f.eks. natriumcarbonat, kaliumcarbonat) eller et alkalimetal-hydroxid (f.eks. natriumhydroxid eller kaliumhydroxid). Hvor stabiliteten af forbindelse VI skal tages i betragtning,anvendes dog fortrinsvis natriumcarbonat, kaliumcarbonat eller lignende. Reaktionen kan også gennemføres i en puffer ved ca. pH 7,5 til 8,5.

10

DK 158671 B

Cephalosporinforbindelser I, som fremstilles ved de beskrevne fremstillingsstillingsprocesser, kan hver især renses ved per se kendte fremgangsmåder, såsom søjlekromatografi, ekstraktion, fældning og omkrystallisation. Om nødvendigt kan hver af disse forbindelser behandles ved per se kendte fremgangsmåder for at opnå de ønskede salte, estere m.m.

Den eventuelt substituerede heterocycliske thiolforbindelse, der anvendes som en nucleofil forbindelse ifølge den foreliggende opfindelse, kan syntetiseres, f.eks. ved de i Journal fur praktische Chemie, NF 133 (1932), Heterocyclic Compounds, 8, redigeret af Robert C. Elderfield (John Wiley & Sons) og Advances in Heterocyclic Chemistry, redigeret af A.R. Katritaky, A.J. Boulton (Academic Press); beskrevne eller dermed analoge fremgangsmåder.

Forbindelsen IV kan f.eks. fremstilles ved den i belgisk patentskrift nr. 719.710 beskrevne eller en dermed analog fremgangsmåde.

Som alternativ kan den fremstilles ved anvendelse af den førnævnte fremgangsmåde a) på forbindelsen III og forbindelsen II, hvori 3 4 -C^R er -CH2R , som er opnåelig ved en af de ovennævnte fremgangsmåder til fremstilling af forbindelsen II eller dermed analoge fremgangsmåder. Forbindelsen VI kan f.eks. fremstilles ved en fremgangsmåde analog med den i tysk offentliggørelsesskrift nr.

2.556.736 beskrevne eller ved omsætning af forbindelsen II med syn-isomeren af forbindelsen Hal-CH0COC-COOalkyl.

Z H

N ~ OH

Nedenfor anføres resultater af sammenligningsforsøg i form af minimale hæmningskoncentrationer opnået med et repræsentativt udvalg af forbindelserne fremstillet ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen og to nært beslægtede handelsprodukter, nemlig "CEFAZOLIN" og "CEFOTIAM". Sidstnævnte produkt er kendt fra DE-patentskrift nr. 2.462.736.

11

DK 158671 B

i S

X -CONH- -^ \ yLN^^J-CHj-x2

COOH

(pg/ml) P. vulgaris E. coli X1_ X2 _ IFO 3988 T-7

S

H0N-X^ \ N-N

2 i i i N.- -C- -S-1 4-CH- 0,1 0,78

Η V

OCH3

" N_N

II 11 -s-{ : n , CH-, 0,2 1,56 \ y 3

ch2chX

Xch3

" N,_N

' -S-f ~N 0,025 1,56 'jr ch2cooh " OCOCH2COCH3 <0,05 0,78 >-Λ Irl

N._!1-CH2 -S-li N

? CH_ 0,78 3,13 I x 3 ch2ch2n'

Xch3 12

DK 158671 B

(Cefotiam)

N=tL N-N

I >-ch2- 0η3 6,25 50 (Cefazolin)

Det fremgår af ovenstående forsøgsresultater, at de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser har en overraskende god antibakteriel virkning mod de klinisk vigtige bakterier P. vulgaris og E. coli.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere nedenfor ved hjælp af eksempel 1-7. I denne beskrivelse er "DMSO" en forkortelse for dimethylsulfoxid. Harpikser benævnt "Amberlite"® er produkter fremstillet af Rohm & Haas Co. i USA. Alle temperaturer er ukorrigerede, og procentangivelser er vægtprocenter, hvis ikke andet er angivet. NMR-Spektrene blev målt med et Varian Model HA 100 (110 MHz) eller T60 (60 MHz) spektrometer med tetramethylsilan som intern eller ekstern reference og alle δ-værdier er i ppm. Symbolet s står for singlet, d for dublet, t for triplet, g for kvartet, m for multiplet og J er en koblingskonstant.

Referenceeksempel 1.

I en opløsning af 13,3 g natriumcarbonat i 120 ml vand opløses 10 g ethyl-3-oxo-2-hydroxyiminobutyrat, hvorefter der tilsættes 30 ml methanol. Blandingen afkøles med is, og der tilsættes dråbevis under omrøring 15,δ g dimethylsulfat i løbet af 3 minutter. Efter endt tilsætning fjernes isbadet, og blandingen omrøres ved stuetemperatur i 40 minutter. Reaktionsblandingen (pH-værdi δ eller højere) ekstrahe-res to gange med ethylacetat,og ekstrakterne samles, vaskes med vand og tørres. Opløsningsmidlet afdampes derefter under reduceret tryk, og remanensen underkastes destillation under reduceret tryk. Ved oven-

DK 158671 B

13 nævnte fremgangsmåde opnås 9 g ethyl-3-oxo-2-methoxyiminobutyrat som en bleggul olie, der koger ved 56-61°C/0,3 til 0,4 mm Hg.

Elementæranalyse af WV

Beregnet: C 4^,54 H 6,40 N 3,0S

Fundet: C 4$, 41 H 6,51 N 7,96 NMR-Spektrum (60 MHz, i CDCl^) : 2,40 ppm (3H, s, CE^CO), 4,1° ppm (3H, s,=N0CH3).

Referenceeksempel 2.

(1) I 120 ml chloroform opløses 27,3 g ethyl-3-oxo-2-methoxyimino-butyrat, og opløsningen opvarmes til 40°C. Derefter tilsættes dråbevis i løbet af 30 minutter en opløsning af 25,3 g brom i 30 ml chloroform. Blandingen omrøres, og reaktionen forløber ved stuetemperatur i en time. Reaktionsblandingen vaskes med en 5$*s vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat og derefter med vand, og det organiske lag tørres. Opløsningsmidlet afdestilleres derefter under reduceret tryk, hvorved der opnås 36,2 g ethyl-4-brom-3-oxo-2-methoxy-iminobutyrat som et olieagtigt produkt.

NMR-Spektrum (60 MHz, i CDCl^): 4,16 ppm (3H, s, OCH^), 4,36 ppm (2H, s, BrCH2C0).

(2) I 20 ml ethanol opløses 5 g af ovennævnte produkt, hvorefter der tilsættes Ι,δ g thiourinstof. Blandingen opvarmes under tilbagesvaling i 3 timer. Efter afkøling opsamles bundfaldet ved filtrering, og det opløses i 20 ml vand, hvortil der sættes natriumhydrogencarbonat. Den udskilte olie ekstraheres med ethylacetat. Ethylacetatlaget vaskes og tørres. Derefter afdampes ethylacetat et, hvorved der opnås hvide krystaller. Omkrystallisation fra ethanol giver 2,6 g (57,2$) ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(anti)-methoxyiminoacetat som hvide krystaller, smeltepunkt 114-115°C.

Elementæranalyse af CgH^N^O^S: 14

DK 158671 B

Beregnet: C 41 *91 H 4,¾ N 16,33

Fundet: C 41,71 H 4,75 N 10,07 NMR-Spektrum (60 MHz, i CDC1 ): 4,07 ppm (3H, s, OCH^), 5,&0 ppm (2H, br. s, NH2), 7,43 ppm (IH, s, thiazol 5H).

(3) Det ved op samling af det første bundfald opnåede filtrat koncentreres under reduceret tryk, og der sættes natriumhydrogencarbonat til remanensen. Blandingen ekstraheres med ethylacetat, og olien,som opnås fra ethylacetatlaget,renses ved søjlekromatografi på silicagel. Ved ovennævnte fremgangsmåde opnås 59 mg (1,3%) ethyl-2-(2-aminothia-zol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat som hvide krystaller, smeltepunkt l63-l64°C.

Elementær analyse af CgH^N^O^S:

Beregnet: C 41,91 Η 4, $4 N 16,33

Fundet: C 41,57 H 4,76 N ld,07 NMR-Spektrum (60 MHz, i CDCl^): 4,02 ppm (3H, s, OCH^), 5,60 ppm (2H, br. s, NHg), 6,74 ppm (IH, s, thiazol 5H).

Referenceeksempel 3.

Til 600 ml ethanol sættes 121 g ethyl-4-chlor-3-oxo-2-hydroxyimino-aeetat sammen med 47,6 g thiourinstof, og blandingen omrøres ved stuetemperatur i 3 timer. Ethanolet afdampes derefter under reduceret tryk, og der tilsættes 350 ml vand. Det vandige lag vaskes med ether, neutraliseres med natriumhydrogencarbonat (til pH-værdi 7,5) og ekstraheres med ethylacetat-tetrahydrofuran (1:1). Det organiske lag vaskes med vand og tørres. Opløsningsmidlet destilleres derefter af, og der opnås 45 g krystallinsk produkt.

1 g af det ovennævnte produkt renses ved søjlekromatografi på silicagel (elueringsmiddel: ethylacetat-n-hexan). Den første fraktion giver 650 mg af anti-isomeren af ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-hydroxy-iminoacetat,og 150 mg af syn-isomeren opnås fra den anden fraktion.

15

DK 158671 B

Anti-isomer: hvide krystaller, smeltepunkt 145,3°C. Syn-isomer: blege gullig-hvide krystaller, smeltepunkt 1$5,5°C.

Elementæranalyse af CyH^M^O^S:

Beregnet: C 39,06 H 4,21 N 19,52

Fundet: (Anti-) C 3d,01 H 4,20 N 19,62 (Syn-) C 39,2d H 4,10 N 19,63 NMR-Spektrum (60 MHz, i d^-DMSO): Anti-isomer: 7,10 ppm (2H, br. s., NH^), 7,50 ppm (IH, s., thiazol 5H), 12,5 ppm (IH, s., OH).

Syn-isomer: 6,£0 ppm (IH, s., thiazol 5H), 7,12 ppm (2H, br. s., NH2), 11,6 ppm (IH, s., OH).

Referenceeksempel 4» I 150 ml vand opløses 10,6 g natriumcarbonat, hvorefter der tilsættes en opløsning af 10,7 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-hydroxy-iminoacetat i en blanding af 150 ml tetrahydrofuran og 50 ml methanol. Under isafkøling tilsættes dråbevis 12,6 g dimethylsulfat i løbet af 5 minutter. Efter endt tilsætning fjernes isbadet, og blandingen omrøres ved stuetemperatur. Under omrøring begynder udskillelse af hvide krystaller. Efter 3 timer afdestilleres hovedparten af det organiske opløsningsmiddel under reduceret tryk,og remanensen afkøles med is. Det resulterende bundfald opsamles ved filtrering, vaskes med vand og tørres. Ved ovennævnte fremgangsmåde opnås 5 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat som hvide krystaller.

Ved MR-spektrum og andre egenskaber identificeres dette produkt som ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat.

Referenceeksempel 5.

I 10 ml Ν,Ν-dimethylacetamid opløses 2,15 g ethyl-2-(2-aminothiazol- 4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat (smeltepunkt l63-l64°C), og der tilsættes dråbevis under isafkøling 1,27 g chloracetylchlorid. Blandingen omrøres under isafkøling i 30 minutter og derefter ved stuetemperatur i 30 minutter. Reaktionsblandingen fortyndes med 50 ml vand 16

DK 158671 B

og ekstraheres to gange, hver gang med 100 ml ethylacetat. Ekstrakterne samles, vaskes med en 5%1s vandig opløsning af natriumhydrogen-carbonat og en mættet vandig opløsning af natriumchlorid i den nævnte rækkefølge, og endelig tørres de. Opløsningsmidlet afdampes derefter, og der opnås 2,04 g ethyl-2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat som et krystallinsk produkt, smeltepunkt 111-112°C.

Elementæranalyse for C10H12N3°4SC1:

Beregnet: C 39,29, H 3,96 N 13,74

Fundet: C 39,15 H 3,91 N 13,69 NMR-Spektrum (60 MHz, i CDCl^) : 4,00 ppm (3H, s.,=N0CH^), 4,24 ppm (2H, s., CICHgCO), 7,15 ppm (IH, s., thiazol 5H).

Referenceeksempel 6.

Til en opløsning af 9 g kaliumhydroxid i en blanding af $5 ml vand og 452 ml ethanol sættes 9,62 g ethyl-2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)- 2-(syn)-methoxyiminoacetat, og blandingen omrøres ved stuetemperatur i 2 timer. Ethanolet destilleres af under reduceret tryk, og efter tilsætning af $5 ml vand vaskes remanensen med 100 ml ethylacetat. Det vandige lag indstilles til pH-værdi 2 med 10%1 s saltsyreopløsning og ekstraheres to gange med 200 ml portioner af ethylacetat. Ekstrakterne samles, vaskes med en mættet vandig opløsning af natriumchlorid og tørres. Opløsningsmidlet afdestilleres derefter, og der opnås 7,63 g 2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoeddikesyre som krystaller, der smelter ved 170-171°C.

Elementæranalyse for CgHgN^O^SCl:

Beregnet: C 34,60 H 2,90 N 15,13

Fundet: C 34,97 H 3,03 H 14,74 NMR-Spektrum (60 MHz, i d^-DMS0) : 3,95 ppm (3H, s.,=N0CH^), 4,40 ppm (2H, ·s., C1GH2C0), 7,57 ppm (IH, s., thiazol 5H).

17

Referenceeksempel 7.

DK 158671 B

2,33 g af en 7:3-blanding af syn- og anti-isomerene af ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetat chloracetyleres med chlor-acetylchlorid som i referenceeksempel 5, og 30 ml ether sættes til den resulterende blanding af syn- og anti-formerne af ethyl-2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-methoxyiniinoacetat. De udskilte krystaller opsamles ved filtrering (produkt A). Ved NMR-spektrum og andre egenskaber identificeres dette produkt med det ethyl-2-(2-chlor-acetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat, der opnåedes i referenceeksempel 5. Udbytte 600 mg.

Olien, som opnås ved koncentration af filtratet (2,42 g, en blanding af syn- og anti-isomere),sættes til en opløsning af 379 mS kaliumhydroxid i en blanding af 5 ml vand og 30 ml ethanol under isafkøling, og hele blandingen omrøres ved denne temperatur i 15 minutter. Ethanolet destilleres af under reduceret tryk,og remanensen fortyndes med 50 ml vand og ekstraheres to gange med 100 ml portioner af ethyl-acetat. Ethylacetatlaget vaskes med vand og tørres. Ethylacetatet destilleres derefter af, og der opnås 577 mg ethyl-2-(2-chloracet-amidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat (produkt B). Ved NMR-spektrum og andre egenskaber identificeres produktet med syn-isomeren ifølge referenceeksempel 5· Produkterne A og B giver et totalt udbytte på IO76 g eller en genudvindingsgrad på 96,3$.

Referenceeksempel 3.

I 600 ml 50$Ts vandig tetrahydrofuranopløsning opløses 67,3 g ethyl- 4-chlor-3-oxo-2-hydroxyiminoacetat, hvorefter der tilsættes 155 g natriumacetattrihydrat og 53,2 g thiourinstof. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 4 timer. Reaktionsblandingen indstilles til pH-værdi 7,0 med natriumhydrogencarbonat og ekstraheres efter tilsætning af natriumchlorid to gange med 300 ml tetrahydrofuran. Ekstrakterne samles, vaskes med vand og tørres. Tetrahydrofuranet destilleres derefter af, og der opnås 27,5 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-hydroxy-iminoacetat som krystaller. Baseret på NMR og andre data ses dette produkt at være en 32:l3-blanding af syn- og anti-isomere.

18

DK 158671 B

En lignende reaktion udføres uden anvendelse af natriumacetat. Baseret på de samme kriterier ses det resulterende produkt at være en 25:75-blanding af syn- og anti-isomere.

Referenceeksempel 9.

Reaktionen i referenceeksempel £ gentages, bortset fra, at en 50$*s vandig ethanolopløsning anvendes i stedet for 50$Ts vandig tetra-hydrofuranopløsning. I dette tilfælde opnås der også, hvis natriumacetat anvendes, en £3:17-blanding af syn- og anti-isomerene af ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoacetat. I modsætning hertil giver ovenstående reaktion, hvis der ikke anvendes natriumacetat, en 50:50-blanding af syn- og anti-isomere. Forholdet mellem syn- og anti-isomerene bestemmes ved NMR-spektrer og andre metoder.

Referenceeksempel 10.

Reaktionen i referenceeksempel 9 gentages, bortset fra, at N,N-di-methylacetamid anvendes i stedet for 50$Ts vandigttetrahydrofurannatriumacetat . Denne fremgangsmåde giver en S5:15-blanding af syn-og anti-isomere af ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-hydroxyiminoacetat.

Referenceeksempel 11.

I 10 ml 50$*s vandig ethanolopløsning opløses 200 mg ethyl-2-amino-thiazol-4-yl-glyoxylat, hvorefter der tilsættes 166 mg 0-methyl-hydroxylamin-hydrochlorid og derefter l6£ mg natriumhydrogencarbonat. Blandingen omrøres i en lukket beholder ved 70°0 i 5 timer. Reaktionsblandingen koncentreres under reduceret tryk, og remanensen fortyndes med 10 ml vand og ekstraheres med ethylacetat. Ethylacetatla-get vaskes med vand og tørres. Ethylacetatet afdestilleres deref ter, og der opnås ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxyiminoacetat som krystaller. Baseret på NMR og andre data ses dette produkt at være en £3:17-blanding af syn- og anti-isomere.

19

Referenceeksempel 12.

DK 158671 B

I 70 ml ethanol indeholdende 10$ HC1 suspenderes 2,44 g methylnitron af ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(anti)-hydroxyiminoacetat, som er N-(2-aminothiazol-4-yl-ethoxycarbonyl)-methylenmethylamin-N-oxid, smeltepunkt l$4-lå5°C. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 16 ti mer. Reaktionsblandingen koncentreres under reduceret tryk, og efter tilsætning af 10 ml vand indstilles remanensen til pH-værdi 7,5 med en 5%1s vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat og ekstraheres med ethylacetat. Ethylacetatlaget vaskes med vand og tørres. Ethyl-acetatet afdestilleres derefter, og remanensen omkrystalliseres fra ethanol. Ved ovennævnte fremgangsmåde opnås 1,54 g ethyl-2-aminothia-zol-4-ylglyoxylat som gule krystaller, der smelter ved 143>3°C*

Elementæranalyse for CyH^N^O^S:

Beregnet: C 41>9$ H 4,02 N 13>99

Fundet: C 41>$3 H 4>14 N 13,9$

Referenceeksempel 13.

I 50 ml 1 N saltsyre opløses 1 g af det samme N-(2-aminothiazol-4-yl-ethoxycarbonyl)-methylenmethylamin-N-oxid, som blev anvendt i referenceeksempel 12,og opløsningen omrøres ved stuetemperatur i 5 timer. Reaktionsblandingen neutraliseres med natriumcarbonat og ekstraheres med ethylacetat. Derefter gentages fremgangsmåden fra referenceeksempel 12, og der opnås 0,5 g ethyl-2-aminothiazol-4-ylglyoxylat. Baseret på NMR og andre data identificeres dette produkt med produktet, som opnåedes i referenceeksempel 12.

Referenceeksempel 14.

I 20 ml ethanol indeholdende 10$ HC1 suspenderes 1,2 g methylnitron af 2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-hydroxyiminoacetat, d.v.s. N-(2-aminothiazol-4-yl-ethoxycarbonyl)-methylenmethylamin-N-oxid, smeltepunkt 111,6°C, og suspensionen omrøres ved stuetemperatur i 16 timer. Derefter gentages fremgangsmåden ifølge referenceeksempel 12, og der i 20

DK 158671 B

opnås 0,7 g ethyl-2-aminothiazol-4-ylglyoxylat som gule krystaller.

Med hensyn til NMR og andre egenskaber er dette produkt identisk med produktet ifølge referenceeksempel 12.

Referenceeksempel 15.

Til en blanding af 10 ml tetrahydrofuran og 5 ml ethylacetat sættes 1 g ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(anti)-hydroxyiminoacetat, smeltepunkt 145,3°G,efterfulgt af tilsætning af et overskud af diazomethan-etheropløsning. Blandingen henstår ved stuetemperatur i 2 dage. Efter at det resterende diazomethan er dekomponeret med eddikesyre, koncentreres reaktionsblandingen under reduceret tryk, og remanensen omkrystalliseres fra ethylacetat. Ved den ovennævnte fremgangsmåde opnås 0,3 g methylnitronforbindelse, d.v.s. N-(2-aminothiazol-4-yl-ethoxycarbonyl)-methylenmethylamin-N-oxid,som gule krystaller, der smelter ved 134-135°C.

Elementæranalyse for CgH-jjN^O^S ·

Beregnet: C 41,91 H 4,34 N 13,33

Fundet: C 41,36 H 4,75 N 13,35 + NMR-Spektrum (60 MHz, i CDCl^): 3,32 ppm (3H, s., N—CH^), 5,27 ppm (2H, br. s., NH2), 3,49 ppm (IH, s., thiazol 5H).

Referenceeksempel l6.

Til en opløsning af 23 mg natrium i 3 ml methanol sættes 215 mg ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(anti)-hydroxyiminoacetat, smeltepunkt 145,3°C, og ved stuetemperatur tilsættes 230 mg methyliodid. Blandingen omrøres i 45 minutter, hvorefter den koncentreres under reduceret tryk. Remanensen fortyndes med vand (pH-værdi 7 eller højere) og ekstraheres med ethylacetat. Ethylacetatlaget vaskes med vand, tørres og koncentreres. Remanensen omkrystalliseres fra tetrahydrofuran- ethylacetat. Ved den ovennævnte fremgangsmåde opnås 160 mg methylnitronforbindelse som gule krystaller. Dette produkt er fuldstændig identisk med produktet,som opnåedes i referenceeksempel 15.

21

Referenceeksempel 17.

DK 158671 B

Filtratet efter opsamling af det bundfældede ethyl-2-(2-aminothiazol- 4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat fra den koncentrerede reaktionsblanding i fremgangsmåden i referenceeksempel 4 ekstraheres med te-trahydrofuran-ethylacetat (1:1),og ekstrakten vaskes med vand, tørres og koncentreres. Til den tilbageblivende brunfarvede olie sættes 20 ml tetrahydrofuran, og blandingen henstår i køleskab i 16 timer.

De resulterende krystaller opsamles ved filtrering og omkrystalliseres fra ethylacetat. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 1,3 g methylnitron af ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-hydroxyimino-acetat, d.v.s. N-(2-aminothiazol-4-yl-ethoxycarbonyl)-methylen-methylamin-N-oxid,som gule krystaller, der smelter ved 111,6°C.

Elementæranalyse for CgH-jjN^O^S:

Beregnet: C 41,91 H 4,^4 N ld,33

Fundet: C 41,$9 H 4,91 N ld,44 NMR-Spektrum (60 MHz, i CDCl^): 4,14 ppm (3H, s., É-CH^), 5,34 ppm (2H, br. s., > 6,62 ppm (IH, s., thiazol 5H).

Referenceeksempel ld.

I 10 ml tetrahydrofuran opløses 1,5 g ethyl-4-brom-3-oxo-2-methoxy-iminobutyrat, og efter at 7 ml vand er tilsat, tilsættes yderligere 2,4 g natriumacetattrihydrat og 0,9 g thiourinstof. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 17 timer, hvorefter den koncentreres under reduceret tryk. Koncentratet indstilles til pH-værdi ca. 1,5 med fortyndet saltsyre og vaskes med ethylacetat. Det vandige lag neutraliseres med natriumhydrogencarbonat og ekstraheres med ethylacetat... .... Ethylacetatlaget vaskes med vand, tørres og koncentreres under reduceret tryk, og der opnås 0,d g gullige krystaller. Dette produkt er ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat. Baseret på NMR og andre data identificeres dette produkt med den syn-isomer, der opnåedes i referenceeks.empel 2.

Referenceeksempel 19.

DK 158671B

22 I 10 ml dimethylformamid opløses 2 g ethyl-4-brom-3-oxo-2-methoxy-iminobutyrat, hvorefter der tilsættes 1,2 g thiourinstof. Blandingen omsættes ved stuetemperatur i 5 timer. Til reaktionsblandingen sættes 20 ml af en mættet vandig opløsning af natriumchlorid, og blandingens pH-værdi indstilles derefter til ca. 1,5 med fortyndet saltsyre. Derefter følges fremgangsmåden ifølge referenceeksempel lå, og der opnås 1,1 g bleggule krystaller. Baseret på NMR og andre data identificeres dette produkt som en å7:13-blanding af syn- og anti-isomere af ethyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-methoxy-iminoacetat. Vaskning af produktet med en lille mængde ether giver syn-isomeren i det væsentlige fri for anti-isomeren.

Referenceeksempel 20.

(1) I SO ml vandfrit acetone opløses 20 g 7-(5-carboxy-5-benzamido-valerylamido)-desacetylcephalosporansyre, hvorefter der tilsættes 7 g chloracetylisocyanat. Blandingen omrøres ved 20°C i 40 minutter, hvorefter der tilsættes 200 ml ether. Bundfaldet opsamles ved filtrering og vaskes med 50 ml ether. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 19,6 g 7-(5-carboxy-5-benzamidovalerylamido)-3-(N-chloracetyl)-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre som et hvidt pulver.

NMR-Spektrum (60 MHz, i d^-DMS0): 3,54 ppm (2H, kvartet, 2-CH2), 4,50 ppm (2H, s., -NHCOCRpCl), 4,9¾ ppm (2H, kvartet, ° ), 5,04 ppm

* -CH20C-NH

(IH, dublet, 6H), 5,77 ppm (IH, dublet, 7H).

(2) I å0 ml methylendichlorid indeholdende 7,6 ml N,N-dimethylanilin suspenderes 6 g 7-(5-carboxy-5-benzamidovalerylamido)-3-(N-chlor-acetyl)-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre. Blandingen afkøles til -50°C, ved hvilken temperatur der tilsættes 2,25 ml phosphortri-chlorid. Den omrøres derefter ved -30°C i 1 l/2 time, hvorved der opnås en klar opløsning. Til denne opløsning sættes 4,17 g phosphor-pentachlorid, og blandingen omrøres ved -25°C i 2 l/2 time, hvorefter den afkøles til -40°C,og der tilsættes hurtigt 37 ml koldt methanol. Blandingen omrøres derefter ved -5°C i 25 minutter og indstilles ef-

DK 158671 B

23 ter tilsætning af 22 ml vand til pH-værdi 3,5 med fortyndet vandig ammoniakopløsning. Reaktionsblandingen henstår ved 5° C i en time, og bundfaldet opsamles ved filtrering. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 1,76 g 7-amino-3-(N-chloracetyl)-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre som farveløse krystaller.

Elementær analyse for

Beregnet: C 37,7# H 3,46 N 12,01

Pundet: C 3$,02 Η 3,&6 N 11,dl NMR-Spektrum (60 MHz, i CF^COOH) : 3,7# ppm (2H, br. s., 2-0¾), 4,35 pprn (2H, s., -NHC0CH2C1), 5,42 ppm (2H, br. s., 6H, 7H), 5,46 ppm (2H, kvartet, -CHgOCONH).

Referenceeksempel 21.

Medens en blanding af natriumazid, ethanol og vand omrøres under tilbagesvaling, tilsættes, der dråbevis en ethanolisk opløsning af N,N-dimethyl-aminoethylisothiocyanat. Blandingen tilbagesvales i yderligere 45 minutter, hvorefter ethanolet destilleres af under reduceret tryk.

Den tilbageblivende opløsning gøres sur med 1 N saltsyre og ekstrahere s med ethylacetat. Ekstrakten tørres og koncentreres til tørhed, og den krystallinske remanens omrøres med n-hexan,genulvmdes ved filtrering og.omkrystalliseres fra toluen. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 1-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-lH-tetrazol-5-thiol. Smeltepunkt 217-219°C (omkrystalliseret fra vandig ethanolopløsning).

NMR-Spektrum (60MHz, i D20+NaHC03):£ 3,03 (s., NCCH^)2), 3,58 (t., ch2), 4,70 (t., ch2).

Referenceeksempel 22.

(1) Medens en blanding af glycin-N,N-dimethylamid, triethylamin og methylenchlorid omrøres, tilsættes carbondisulfid og methyliodid i den nævnte rækkefølge. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i· en time, hvorefter den rystes kraftigt med en 5$Ts vandig opløsning af phosphorsyre. Det organiske lag skilles fra, vaskes med vand, tørres og koncentreres til tørhed under reduceret tryk. Den krystallinske DK 158671 B ; 24 remanens omrøres med n-hexan,genudvindes ved filtrering og tørres.Ved den ovennævnte fremgangsmåde er der opnået methyl-2-(N,N-dimethyl-carbamoylmethyl)-dithiocarbamat.

IR (KBr, cm"1): 1026, 1543 NMR-Spektrum (60 MHz, i d6-DMS0): S 2,62 (s., C^S), 3,02 (s., W(CH3)2), 4,42 (d, J=4Hz, CH2), 6,30 (br. s., NH).

(2) En blanding af methyl-2-(N,N-dimethylcarbamoylmethyl)-dithio-carbamat, natriumazid og ethanol omrøres under opvarmning til 60°C i6l/2 time. Reaktionsblandingen indstilles til pH-værdi 2,5 med 10$fs saltsyre og koncentreres derefter til tørhed under reduceret tryk. Remanensen ekstraheres med 100 ml methanol,og methanolekstrakt-en behandles med aktivt kul og tørres. Det tilbageblivende pulver omkrystalliseres fra vand. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås l-N,N-dimethylcarbamoylmethyl-lH-tetrazol-5-thiol. Smeltepunkt 195-196°C (dekomp.) NMR-Spektrum: (60 MHz, i d^-DMS0): £ 2,67 og 3,07 (hver s., N(CH3)2), 5,21 . (s., CH2C0).

(3) Ved anvendelse af en natriumhydroxidopløsning hydrolyseres 1-N,N-dimethylcarbamoylmethyl-lH-tetrazol-5-thiol, og der opnås 1-carboxymethyl-lH-tetrazol-5-thiol. Smeltepunkt 156-l60°C (dekomp.).

IR (KBr, cm"1): 1713 NMR-Spektrum (60 MHz, i d6-DMS0) £ : 5,03 (s., CHgCO), 12,09 (br., s., NH og-C00H) .

Referenceeksempel 23.

Til 200 ml vand sættes 3& g natriumnitrit og 53 g methylacetoacetat, og under isafkøling og omrøring tilsættes dråbevis i løbet af ca. en time 200 ml 4 N svovlsyre. Under denne dråbevise tilsætning holdes temperaturen af reaktionsblandingen på 5-6°C. Blandingen omrøres indenfor dette temperaturområde i endnu 2 l/2 time, hvorefter den ekstraheres to gange med 300 ml portioner ethylacetat. Ekstrakterne

DK 158671 B

25 samles og vaskes to gange med en mættet vandig opløsning af natrium-chlorid. Derefter deles en opløsning af 96,7 g natriumcarbonat i 1 liter vand i tre lige store portioner, hvormed 3-oxo-2-hydroxyimino-butyrat ekstraheres fra det ovennævnte ethylacetatlag (tre gange).

Til det vandige lag (1 liter) sættes 200 ml methanol, og efter afkøling med is tilsættes dråbevis 150 g dimethylsulfat under.omrøring i løbet af 10 minutter. Efter endt tildrypning omrøres blandingen ved stuetemperatur i 1 1/2 time og ekstraheres to gange med 300 ml portioner af ethylacetat. Ekstrakterne samles, vaskes med vand og tørres. Ethylacetatet afdestilleres derefter, og remanensen afkøles med is, hvorefter den størkner. Den faste remanens opsamles ved filtrering og vaskes med en lille mængde vand. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 52,3 g methyl-3-οχο-2-methoxyiminobutyrat som hvide krystaller, der smelter ved 64,4°C.

Elementæranalyse for C^H^NO^:

Beregnet: C 45,26 H 5,70 N S,S0

Fundet: C 44,93 H 5,6l N δ,71 NMR-Spektrum (60 MHz, i CDC1.J : 2,40 ppm (3H, singlet, -C-CRJ, π i 0 3,66 ppm (3H, s-, COOCH^), 4,10 ppm (3H, s., *N0CHj).

Referenceeksempel 24.

I 150 ml chloroform opløses 40 g methyl-3-oxo-2-methoxyiminobutyrat, og opløsningen opvarmes til 4°°C. Derefter tilsættes dråbevis en opløsning af 50 ml chloroform i løbet af en time. Derefter fortsættes reaktionen under omrøring ved stuetemperatur i en time. Reaktionsblandingen vaskes med en 5$1s vandig opløsning af natriumhydrogen-carbonat og vand i den nævnte rækkefølge, og det organiske lag tørres. Opløsningsmidlet afdestilleres derefter, og der opnås 52,1 g methyl-4-brom-3-oxo-2-methoxyiminobutyrat som en olie.

NMR-Spektrum (60 MHz, i CDCl^): 3,62 ppm (3H, s., COOCH^), 4,09 ppm (3H, s., =N-0CH^), 4,27 ppm (2H, s., BrCH2C0).

26

DK 158671 B

I 350 ml tetrahydrofuran opløses 52 g methyl-4-brom-3-oxo-2-methoxy-iminobutyrat, hvorefter der tilsættes 250 ml vand og yderligere $9,1 g natriumacetattrihydrat og 33»2 g thiourinstof. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 1& timer. Til reaktionsblandingen sættes 200 ml af en 5$*s vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat, hvorefter der ekstraheres med ethylacetat. Det organiske lag vaskes med vand, tørres og koncentreres under reduceret tryk for at fjerne opløsningsmidlet. Til koncentratet sættes 200 ml ether, og det resulterende bundfald opsamles ved filtrering. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 24,δ g methyl-2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat som krystaller, der smelter ved l64,9°C.

Elementæranalyse for CyH^N^O^S:

Beregnet: C 39,06 H 4,21 N 19,52

Fundet: C 3^,7^ H 4,15 N 19,33 NMR-Spektrum (60 MHz, i GDCl^): 3,$4 ppm (3H, s., COOCH^), 4,02 ppm (3H, s., =Ν00Η^),5,74 ppm (2H, br. s., NHg), 6,74 ppm (IH, s., thia-zol 5H).

Referenceeksempel 25.

I 90 ml Ν,Ν-dimethylacetamid opløses 21,5 g methyl-2-(2-aminothia-zol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat,og under isafkøling tilsættes dråbevis 13,6 g ehloracetylchlorid. Blandingen omrøres under isafkøling i 30 minutter og derefter ved stuetemperatur i 30 minutter. Efter tilsætning af 500 ml vand ekstraheres reaktionsblandingen to gange med ethylacetat. Ekstrakterne samles, vaskes med en 5$Ts vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat og vand i nævnte rækkefølge og tørres. Opløsningsmidlet afdestilleres, og der opnås 25 g methyl- 2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat som krystaller, der smelter ved 130,$°C.

Elementæranalyse for G^H^N^O^SCl:

Beregnet: C 37,03 H 3,45 N 14,40

Fundet: C 37,30 H 3,40 N 14,35 27

DK 15867 1 B

MR-Spektrum (60 MHz, i CDCl^) : 3,90 ppm (3H, s., COOCH^, 4,02 ppm (3H, s., =N0CH^), 4,26 ppm (2H, s., CIC^CO), 7,24 ppm (IH, s., thiazol 5H).

Referenceeksempel 26.

Til en opløsning af 19,2 g kaliumhydroxid i en blanding af 170 ml vand og 900 ml ethanol sættes 20 g methyl-2-(2-chloracetamidothiazol- 4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetat, og opløsningen omrøres ved stuetemperatur i 2 timer. Ethanolet afdestilleres under reduceret tryk, og efter tilsætning af 170 ml vand vaskes remanensen med 200 ml ethylacetat. Det vandige lag indstilles til pH-værdi 2 med 10$*s saltsyre og ekstraheres to gange med 300 ml portioner ethylacetat.

Ekstrakterne samles, vaskes med en mættet vandig opløsning af natrium-chlorid og tørres. Opløsningsmidlet afdestilleres, og der opnås 16,8 g 2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)~methoxyiminoeddike-syre som krystaller. Med hensyn til NMR-spektrum og andre egenskaber findes dette produkt at være identisk med produktet opnået i referenceeksempel 6.

Referenceeksempel 27 (1) 6 g 7-(5-carboxy-5-benzamidovalerylamido)-3-(N-chloracetyl)-carbamoyloxymethyl-3~cephem-4-carboxylsyre suspenderes i 80 ml methylendichlorid indeholdende 7,6 ml Ν,Ν-dimethylanilin, og der tilsættes under afkøling ved -50°C 2,25 ml phosphortrichlorid. Blandingen omrøres ved -30°C i 1 l/2 time, indtil en klar opløsning er opnået. Til denne opløsning sættes 4,17 g phosphorpentachlorid, og blandingen omrøres ved -25°C i 2 1/2 time. Derefter afkøles den til -40°C, og 37 ml koldt methanol tilsættes hurtigt. Blandingen omrøres ved -5°C i 25 minutter, hvorefter den fortyndes med 22 ml vand og indstilles til pH-værdi 3,5 med fortyndet vandig ammoniakopløsning. Reaktionsblandingen henstår ved 5°C i en time, og det resulterende bundfald opsamles ved filtrering. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 1,76 g 7-amino-3-(N-chloracetyl)-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-car-boxylsyre som et farveløst krystallinsk produkt.

Elementæranalyse for C11H1201N3°6S:

DK 158671B

28

Beregnet: C 37,7# H 3,46 N 12,01

Fundet: C 3^,02 H 3,36 N 11,Bl NMR-Spektrum (60 MHz, i CF^COOH): 3,73 ppm (2H, bred s., 2-CH2), 4,35 ppm (2H, s., -NHC0CH2C1), 5,42 ppm (2H, bred s., 6H, 7H), 5,46 ppm (2H, kvartet, -CE^OCONH).

(2) I Ν,Ν-dimethylacetamid opløses 1,05 g af den 7-amino-3-(N-chlor-acetyl)-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre, som blev opnået ovenfor (1), og der tilsættes under isafkøling 993 mg 2-chloracetamido-thiazol-4-yl-a-(anti)-methoxyiminoacetylchlorid-hydrochlorid. Blandingen omrøres under isafkøling i 15 minutter og derefter ved stuetemperatur i 2 timer. Efter tilsætning af 50 ml vand ekstraheres reaktionsblandingen to gange med 100 ml portioner ethylacetat. De organiske lag samles, vaskes med en mættet vandig opløsning af natri-umchlorid og tørres over magnesiumsulfat. Ethylacetatet afdestilleres derefter. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 2,2 g 7— C(2— chloracetamidothiazol-4-yl)-a-(anti)-methoxyimino]-acetamido-3-(N-chloracetyl) - carbamoyloxymathyl- 3- cephem-4- carboxyl syre som et hvidt pulver.

Note: Fremstilling af 2-chloracetamidothiazol-4-yl-a-(anti)-methoxy-iminoacetylchlorid.

(i) I 100 ml dimethylaeetamid opløses 10 g ethyl-a-(anti)-methoxy-imino-α-(2-aminothiazol-4-yl)-acetat,og der tilsættes under afkøling med is dråbevis 5,91 g chloracetylchlorid. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i en time, hvorefter den hældes i is-vand. Blandingen ekstraheres med ethylacetat,og det organiske lag vaskes, tørres og destilleres for at fjerne opløsningsmidlet. Ved fremgangsmåden opnås 12,66 g ethyl-a- (anti) -methoxyimino-a- [2- (chloracetamido) -thiazol-4-yll-acetat som krystaller, smeltepunkt £l-32°C.

Elementæranalyse for C10H12N3°4SC1:

Beregnet: C 39,29 H 3,96

Fundet: C 33,74 H 3,53

DK 158671B

29

Det nuclearmagnetiske resonansspektrum (60 MHz, i CDCl^) af dette produkt giver singlets, én ved 4,10 ppm, som kan tilskrives methoxy-protoner, én ved 4» 24 ppm, som kan tilskrives chloracetylprotoner, og én ved 7,94 ppm, som kan tilskrives thiazol-5-hydrogen.

(ii) 12,66 g ethyl-α-(anti)-methoxyimino-a-[2-(2-chloracetamido)-thiazol-4-yl]-acetat sættes til en opløsning af 11,74 g kaliumhydroxid i en blanding af 25 ml vand og 500 ml ethanol. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 20 minutter,og ethanolet afdestilleres under reduceret tryk, og remanensen fortyndes med vand. Blandingen gøres sur med 1 N saltsyre, og det resulterende bundfald opsamles ved filtrering. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 10,54 g a-(anti)-methoxyimino-a-[2-(chloracetamido)-thiazol-4-yl3-eddikesyre, smeltepunkt l62-l63°C.

Elementæranalyse for CgHgN^O^SCl:

Beregnet: C 34,60 H 2,90 N 15,13

Fundet: C 34,53 H 3,00 N 14,60

Det nuclearmagnetiske resonansspektrum (60 MHz, i d^-DMS0) af det ovenstående produkt viser singlets, som kan tilskrives methoxyproto-ner ved 400 ppm, chloracetylprotoner ved 4,36 ppm og thiazol-5-hydrogen ved 6,00 ppm.

(iii) I 5 ml methylenchlorid suspenderes 555,4 mg a-(anti)-methoxy-imino-a-[2-(chloracetamido)-thiazol-4-yl3-eddikesyre, og der tilsættes under isafkøling 416,3 mg phosphorpentachlorid. Blandingen om- · sættes under omrøring i 30 minutter. Til reaktionsblandingen sættes n-hexan, og det resulterende bundfald opsamles ved filtrering. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 620 mg a-(anti)-methoxyimino- a-[2-(chloracetamido)-thiazol-4-yll-acetylchlorid-hydrochlorid.

Elementæranalyse for C^HyN^O^SCl^'HCl:

Beregnet: C 26,69 H 2,42 N 12,63

Fundet: C 26,35 H 2,6l N 12,00

DK 158671 B

30 (3) I 50 ml tetrahydrofuran opløses 2,2 g af den 7-C(2-chloracetamido-thiazol-4-yl) -a- (anti) -methoxyimino ]-acetamido-3- (N-chloracetyl) -carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre, som blev opnået ovenfor (2), hvorefter der tilsættes 913 mg fint pulveriseret thiourinstof og 1,63 g natriumacetattrihydrat. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 17 timer. Bundfaldet opsamles ved filtrering, vaskes med ethyl-ether og opløses i 10 ml vand. Opløsningen indstilles til pH-værdi 7 med natriumhydrogencarbonat og passeres gennem en søjle af Amberlite XAD-2. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 360 mg natrium-7-C(2-aminothiazol-4-yl) -a- (anti) -methoxyimino ]-acetamido- 3- carbamoyloxy-methyl-3~cephem-4-carboxylat som et hvidt pulver.

Elementæranalyse for C15H15N6°7S2Wa’2 * ^¾0:

Beregnet: C 34?42 Η 3,&5 N 16,05

Fundet: C 34,43. H 3,70 N 15,6B

MR-Spektrum (60 MHz, i D20) : 3,55 ppm (2H, kvartet, 2-CH2), 4,11 ppm (3H, s., =N0CH3), 4,Si ppm (2H, kvartet, -CH20C0NH2), 5,21 ppm (IH, dublet, 6H), 5,S2 ppm (IH, dublet, 7H), 7,55 ppm (IH, s., HW ’’ N_!

Den antibakterielle aktivitet (MIC (Y/ml)) af natrium-7-C(2-aminothia-zol-4-yl)-a-(anti)-methoxyimino]-acetamido-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylatet ifølge dette eksenqpel er vist nedenfor.

DK 158671 B

31 _Mikroorganisme___MIC (Y/ml)_

Escherichia coli 0-111 0,73

Klebsiella pneumoniae DT 1,56

Klebsiella pneumoniae GN 3$35 6,25

Serratia marcescens IFO 12643 12,5

Serratia TN0024 6,25

Proteus vulgaris IFO 3933 0,39

Proteus mirabilis GN 4359 0,73

Proteus morganii IFO 3163 0,73

Proteus rettgeri 3 TNO 336 0,2

Proteus rettgeri GN 4733 0,73

Enterobacter cloacae IFO 12937 25

Citrobacter freundii GN 99 1,56

Citrobacter freundii GN 1706 3,13

Referenceeksempel 23.

(1) I 20 ml Ν,Ν-dimethylacetamid opløses 1,05 g 7-amino-3-(N-chlor-acetyl)-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre, og der tilsættes under isafkøling 369 mg 2-chloracetamidothiazol-4-ylacetylchlorid-hydrochlorid. Blandingen omrøres under isafkøling :i 15 minutter og derefter ved stuetemperatur i 2 timer. Efter denne omsætning fortyndes blandingen med 50 ml vand og ekstraheres to gange med 100 ml portioner af ethylacetat. De organiske lag samles, vaskes med en mættet vandig opløsning af natriumchlorid og tørres over magnesiumsulfat. Ethylacetatet afdestilleres derefter, og der -opnås et hvidt pulver af 7-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-acetamido-3-(N-chlorace-tyl)-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre. Udbytte: 1,6 g.

Note: Fremstilling af 2-chloracetamidothiazol-4-ylacetylchlorid.

I 15 ml dimethylacetamid opløses 4 g ethyl-2-aminothiazol-4-ylacetat, og der tilsættes dråbevis under isafkøling. 3>62 g chloracetylchlorid. Blandingen omrøres under isafkøling i 30 minutter og derefter ved stuetemperatur i endnu 30 minutter. Derpå tilsættes 50 ml vand,og blandingen ekstraheres to gange med 100 ml portioner ethylacetat- 32 '

DK 158671 B

tetrahydrofuran. Ekstrakten vaskes med 100 ml af en 5%'s vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat og derefter med 100 ml af en mættet vandig opløsning af natriumchlorid, hvorefter den tørres. Opløsningsmidlet afdestilleres derefter. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 2,95 g ethyl-2-chloracetamidothiazol-4-ylacetat som et olie-agtigt produkt. Hele mængden af denne olie suspenderes i 100 ml methanol,og der tilsættes under isafkøling 12 ml vand indeholdende 761 mg natriumhydroxid. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 30 minutter, hvorefter en større mængde af methanolet afdestilleres under reduceret tryk. Til remanensen sættes 10 ml vand. Det vandige lag vaskes med 50 ml ethylacetat, og efter tilsætning af 20 ml ethyl-acetat indstilles det til pH-værdi 2 med 10fo* s saltsyre. Blandingen omrystes grundigt, og det organiske lag skilles fra, vaskes med en mættet vandig opløsning af natriumchlorid og tørres. Opløsningsmidlet afdestilleres derefter. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 1,51 g 2-chloracetamidothiazøl-4-yl-eddikesyre som farveløse krystaller, smeltepunkt: 202-203°C.

Elementæranalyse for CyHyClNgO^S:

Beregnet: G 35,33 H 3,01 N 11,94

Fundet: C 36,01 H 2,96 N 11,6l I 20 ml methylendichlorid suspenderes 93& Dig af det ovenstående produkt, og der tilsættes under isafkøling 1 g phosphorpentachlorid. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 30 minutter. Efter tilsætning af 50 ml petroleumsether opsamles bundfaldet ved filtrering, og det vaskes med 10 ml petroleumsether. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 1,06 g 2-chloracetamidothiazol-4-ylacetylchlorid-hydro-chlorid som farveløse krystaller.

Elementæranalyse for CyH^C^^OgS * HC1 :

Beregnet: C 29*04 H 2,44 N 9*67

Fundet: C 2β,96 H 2,24 N 9,61 IR-Spektrum (KBr): 1730 cm ^ (-C0C1).

(2) I 40 ml tetrahydrofuran opløses 1,6 g af den 7-(2-chloracetamido- 33 DK 158671 8 ϊ thiazol-4-yl)-acetamido-3-(N-chloracetyl)-carbamoyloxymethyl-3~ cephem-4-carboxylsyre,som blev opnået i ovenstående (1). Til denne opløsning sættes S60 mg thiourinstof, hvorefter der tilsættes natrium-acetattrihydrat. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 16 timer. Bundfaldet opsamles ved filtrering, vaskes med ethylether og opløses i 10 ml vand. Opløsningen indstilles til pH-værdi 7 med natriumhydrogen c ar bo nat og renses ved søjlekromatografi på Amberlite XAD-2. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 152 mg natrium-7-(2-amino-thiazol-4-yl)-acetamido-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylat som et hvidt pulver.

Elementæranalyse for O^H^N^C>£S2Na*2H20:

Beregnet: C 35,67 H 3,$5 N 14,$5

Fundet: C 35,97 H 3,33 N 14,64 NMR-Spektrum (60 MHz, i D^O); 3,52 ppm (2H, kvartet, 2-CH2), 3,61 ppm (2H, øg- 4->73 ppm (2H,. kvartet,,-CH20C0NH-), 5,14 ppm —2 g (IH, dublet, 6H), 5,68 ppm (IH,dublet·, 7H),, 6,52 ppm (IH, s.,n^/V/-;

N_V

Referenceeksempel 29 (1) I 6 ml Ν,Ν-dimethylacetamid opløses 290 mg 7-amino-3-(N-chloracetyl )-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre, og der tilsættes under isafkøling 276 mg 2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetylchlorid-hydrochlorid. Blandingen omrøres under isafkøling i 15 minutter og ved stuetemperatur i 2 timer. Derefter fortyndes reaktionsblandingen med 30 ml vand og ekstraheres to gange med 50 ml portioner ethylacetat. Ekstrakterne samles, vaskes med 50 ml af en mættet vandig opløsning af natriumchlorid og tørres over vandfrit magnesiumsulfat. Ethylacetatet afdestilleres, og der opnås 402 mg 7-C2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyimino]-acet-amido-3-(N-chloracetyl)-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre som en viskos olie.

NMR-Spektrum (60 MHz, i CDCl^): 3,50 ppm (2H, kvartet, 2-CH2),

„ DK 158671B

34 3,99 ppm (3H, s., NOCH^), 4,04 ppm, 4,3° PPm (2Hx2, s. x 2, CICERO x2), 5,10 ppm (IH, dublet, 6H), 5,73 ppm (IH, dublet, 7H), 7,32 ppm (IH, s., thiazol, 5H).

(2) Hele mængden af det ovenstående produkt opløses i 9 ml tetra-hydrofuran, hvorefter der tilsættes 16$ mg thiourinstof og 300 mg natriumacetattrihydrat. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 4 timer. Bundfaldet opsamles ved filtrering, vaskes med ether og opløses i 5 ml vand. Opløsningen indstilles til pH-værdi ca.7 med natrium-hydrogencarbonat og renses ved søjlekromatografi på Amberlite XAD-2. Ved den ovennævnte fremgangsmåde opnås 5$ mg natrium-7-[2-(2-amino-thiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-3-carbamoyloxymethyl- 3-cephem-4-carboxylat som et hvidt pulver.

Elementæranalyse for C^H^N^OySgNa^ILjO:

Beregnet: C 33,$4 H 3,9$ N 15,7$

Fundet: C 33,94 H 3,$2 N 15,42 UMR-Spektrum (60 MHz, i DgO): 3,47 ppm (2H, kvartet, 2—CH^), 3,92 ppm (3H, s., =N0CH^), 4,6$ ppm (2H, kvartet, -CI^OCON^), 5,27 ppm (IH, dublet, 6H), 5,72 ppm (IH, dublet, 7H), 6,95 ppm (IH, s., thiazol 5H).

Fremgangsmåde til fremstilling af 2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)- 2-(syn)-methoxyiminoacetylchlorid.

I 5 ml methylenchlorid suspenderes 27$ mg af den 2-(2-chloracetamido-thiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoeddikesyre,som blev opnået i referenceeksempel 6, og der tilsættes under isafkøling 20$ mg phosphor-pentachlorid. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 30 minutter, hvorefter den vaskes med petroleumsether. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 276 mg 2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)~2-(syn)-methoxyiminoacetylchlorid som et pulver.

Elementæranalyse for CgH^N^O^SC^ * HC1:

Beregnet: C 2$,$9 H 2,42 N 12,63

Fundet: G 2$,47 H 2,73 N 12,12

35 DK 158671 B

Referenceeksempel 30 (1) I 22 ml tørt tetrahydrofuran opløses 500 m£ 2-(2-chloracetamido- thiazol-4-yl)-2-(syn)-raethoxyiminoeddikesyre, og-der tilsættes under omrøring 1$2 mg triethylamin. Denne blanding afkøles til -10°C, og der tilsættes dråbevis 245 mg isobutylchlorformiaf. Blandingen omrøres ved denne temperatur i 2 timer. Til den resulterende opløsning af blandet syreanhydrid sætte.s 1&2 mg triethylamin sammen med en opløsning (isafkølet) af 590 mg 7-amino-3-(l-methyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre i lS ml af en 50$Ts vandig tetra-hydrofuranopløsning. Blandingen omrøres under isafkøling i en time og ved stuetemperatur i 2 timer. Derefter afdestilleres hovedparten af tetrahydrofuranet under reduceret tryk, og remanensen fortyndes med 100 ml vand og med 40 ml ethylacetat. Under omrøring indstilles det vandige lag derefter til pH-værdi 2 med 1 N HG1. Faserne adskilles,og det vandige lag ekstraheres med 60 ml ethylacetat. Ethyl- acetatlagene samles, vaskes med 50 ml af en mættet vandig opløsning af natriumchlorid og tørres. Ethylacetatet afdestilleres, og der opnås 700 mg 7-p-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyimino-acetamido ]-3-(l-methyl-lH-tetrazol-4-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-car-boxylsyre som en viskos olie.

(2) Hele mængden af det ovenstående produkt opløses i 15 ml tetra-hydrofuran, hvorefter der tilsættes 226 mg thiourinstof og 406 mg natriumacetattrihydrat. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 4 timer. Efter denne omsætning opsamles bundfaldet ved filtrering, det vaskes med ether og opløses i 10 ml vand. Opløsningen indstilles til pH-værdi ca. 7,0 med natriumhydrogencarbonat og renses ved søjlekromatografi på Amberlite XAD-2. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 125 mg natrium-7-£2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacet-amido 7]—3- (l-methyl-lH-tetrazol-4-yl) -thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat som et hvidt pulver.

Elementær analyse for C^H^N^O^S^Na/^^O:

Beregnet: C 33>74 H 3,54 N 22,13

Fundet: C 34,12 H 3,57 N 21,79 NMR-Spektrum (60: MHz, i D20) : 3,59 ppm (2H, kvartet, 2-CH2), 3,93 ppm

36 DK 158671 B

(3H, s., =1^00^), 3,9# ppm (3H, s., N-CH^), 4,0S ppm (2H, kvartet, 3-CH2), 5,12 ppm (IH, dublet, 6H), 5,72 ppm (IH, dublet, 7H), 6,93 ppm (IH, s., thiazol 5H).

Referenceeksempel 31 (1) I 15 ml Ν,Ν-dimethylacetamid opløses 762 mg 7-aminocephalospo-ransyre, og der tilsættes under isafkøling 931 mg 2- (2-chloracetamido-thiazol-4-yl) -2-methoxyiminoacetylchlorid-hydrochlorid (fremstillet af syn-isomer). Blandingen omrøres under isafkøling i 15 minutter og ved stuetemperatur i 2 timer. Reaktionsblandingen fortyndes med 10 ml vand og ekstraheres med 100 ml portioner ethylacetat. Ekstrakterne samles, vaskes med 100 ml af en mættet vandig opløsning af natrium-chlorid og tørres. Ethylacetatet afdestilleres, og der opnås 1,4 g 7-[2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-cephalosporansyre som en olie.

(2) I 30 ml tetrahydrofuran opløses hele mængden af det ovenstående produkt, hvorefter der tilsættes 500 mg thiourinstof og derefter $95 mg natriumacetattrihydrat. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 4 timer. Det resulterende bundfald opsamles ved filtrering, vaskes med ether og opløses i 6 ml vand. Opløsningen indstilles til pH-værdi ca. 7,0 med natriumhydrogencarbonat og renses ved søjlekromatografi på Amberli te XAD-2. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 7$ mg natrium-7- C2- (2-aminothiazol-4-yl) -2- (syn) -methoxyiminoacetamido ]-cephalosporanat som et hvidt pulver.

Elementæranalyse for C-^H-^N^OyS^Na^^^O:

Beregnet: C 36,7$ H 4,05 N 13,40

Fundet: C 36,93 H 3,S0 N 12,63 NMR-Spektrum (60 MHz, i D20): 2,07 ppm (3H, s., COCH^), 3,53 ppm (2H, kvartet, 2-CH2), 3,9$ ppm (3H, s., =N0CH^), 4,75 ppm (2H, kvartet, 3-CH2), 5,21 ppm (IH, dublet, 6H), 5,Si ppm (IH, dublet, 7H), 7,01 ppm (IH, s., thiazol 5H).

Referenceeksempel 32 37

DK 158671 B

(1) Til 10 ml tetrahydrofuran sættes $33 mg 2-(2-chloracetamido-thiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoeddikesyre, 3$0 mg N-hydroxysuecin-imid og 63Ο mg dicyclohexylcarbodiimid, og blandingen omrøres ved stuetemperatur i 45 minutter. Bundfaldet filtreres fra, og filtratet afkøles til 5°C. Det sættes derefter til en blandet opløsning af 65Ο mg 7-aminodesacetoxy-cephalosporansyre og 2 ml bis-(trimethyl-silyl)-acetamid i methylenchlorid, som forinden er afkølet. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 16 timer, og derefter afdestilleres opløsningsmidlet under reduceret tryk. Til den resulterende olie sættes 50 ml vand sammen med 50 ml ethylacetat, og blandingen indstilles til pH-værdi ca. 2,5 med 1 N saltsyre. De to lag adskilles efterfulgt af ekstraktioner med to 50 mlTs portioner ethylacetat. Ethyl-acetatlagene samles, vaskes med vand og tørres. Ethylacetatet afde-stilleres derefter, og der opnås 1,1 g 7-[2-(2-chloracetamidothia-zol-4-yl)-2-( syn)-methoxyiminoacetamido]-desacetoxycephalo sporansyre som en olie.

(2) Hele mængden af det ovenstående produkt opløses i 25 ml tetrahydrofuran, hvorefter der tilsættes thiourinstof og derefter 632 mg natriumacetattrihydrat. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 4 timer. Bundfaldet opsamles ved filtrering, vaskes med ether og opløses i 10 ml vand. Opløsningen indstilles til pH-værdi ca. 7,0 med natriumhydrogencarbonat og renses ved søjlekromatografi på Amberlite XAD-2. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 120 mg natrium-7-[2-(2-aminothiazal-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamidoj-desacetoxy- cephalosporanat som et hvidt pulver.

Elementæranalyse for C^H^N^O^S^Na· 1, 5H2O:

Beregnet: C 37,67 H 3,^4 N 15,6$

Fundet: C 37,37 H 3,9$ N 15,3^ NMR-Spektrum (60 MHz, i D^O) δ : 1,94 ppm (3H, s., 3-CH^), 3,46 ppm (2H, kvartet, 2-CH2), 4,00 ppm (3H, s., =N0CH^), 5,17 ppm (IH,dublet, 6H), 5,76 ppm (IH, dublet, 7H), 6,99 ppm (IH, s., thiazol 5H).

Referenceeksempel 33

DK 158671 B

38 (1) I 20 ml tørt tetrahydrofuran opløses 500 mg 2-(2-chloracetamido-thiazol-4-yl)-2-( syn)-methoxyiminoeddikesyre, og der tilsættes under omrøring 182 mg triethylamin. Blandingen afkøles til -10°C, hvorefter der dråbevis tilsættes 245 mg isobutylchlorformiat. Blandingen omrøres ved denne temperatur i 2 timer.Til den resulterende blandede syreanhy-dridopløsning sættes en opløsning (isafkølet) af 180 mg triethylamin og 492 mg 7-amino-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre i en 50fo*s vandig tetrahydrofuranopløsning. Blandingen omrøres under isafkøling i en time og derefter ved stuetemperatur i 2 timer. Hovedparten af tetrahydrofuranet afdestilleres under reduceret tryk, og der sættes 100 ml vand og 40 ml ethylacetat til remanensen. Blandingen indstilles til pH-værdi ca. 2 med 1 N saltsyre. De to lag adskilles, og det vandige lag ekstraheres to gange med 50 ml portioner af ethylacetat. Ethylacetatlagene samles, vaskes med vand, tørres og koncentreres. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 650 mg 7-[2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido3-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre som en olie.

(2) Hele mængden af det ovenstående produkt opløses i 15 ml tetrahydrofuran, hvorefter der tilsættes 226 mg thiourinstof og 406 mg natriumacetattrihydrat. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 4 timer. Bundfaldet opsamles ved filtrering, opløses i 10 ml vand, indstilles til pH-værdi ca. 7 med natriumhydrogencarbonat og renses ved søjlekromatografi på Amberlite XAD-2. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 120 mg natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxy-iminoacetamidoI]-3-earbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylat som et hvidt pulver. Med hensyn til NMR-spektrum og andre egenskaber findes produktet at være identisk med produktet, som blev opnået i referenceeksempel 29.

Referenceeksempel 34 (1) I 45 ml tørt tetrahydrofuran opløses 1,11 g 2-(2-chloracetamido-thiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoeddikesyre, og der tilsættes under omrøring $15 mg tri-n-butylamin. Blandingen afkøles til -10°C,.og der tilsættes dråbevis 544 mg isobutylchlorformiat. Blandingen omrøres ved -10°C i 2 timer, hvorefter der tilsættes en kold opløsning af 741 mg tri-n-butylamin og 1,4 g 7-amino-3-(N-chloracetyl)-carbam- 39

DK 158671 B

oyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre i 40 ml af en 50$Ts vandig tetrahydrofuranopløsning. Blandingen omrøres under isafkøling i en time og ved stuetemperatur i 2 timer. Hovedparten af tetrahydrofu-ranet afdestilleres under reduceret tryk, og remanensen fortyndes med 25 ml vand og vaskes med 40 ml ethylacetat. Det vandige lag skilles fra og indstilles efter tilsætning af 50 ml ethylacetat til pH-værdi ca. 2,5 med 1 N saltsyre. Blandingen adskilles i to lag. Det vandige lag ekstraheres yderligere to gange med 50 ml portioner ethylacetat. Ekstrakterne samles, vaskes med 100 ml af en mættet vandig opløsning af natriumchlorid, tørres og koncentreres. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 1 g 7- [2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)- 2- (syn)-methoxyiminoacetamido]-3-(N-chloracetyl)-carbamoyloxymethyl- 3- cephem-4-carboxylsyre som en olie.

(2) Hele mængden af det ovennævnte produkt opløses i 22 ml tetra-hydrofuran, hvorefter der tilsættes 499 mg thiourinstof og derefter 392 mg natriumacetattrihydrat. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 4 timer. Bundfaldet opsamles ved filtrering, vaskes med ether og opløses i 10 ml vand. Opløsningen indstilles til pH-værdi ca. 7 med natriumhydrogencarbonat og renses ved hjælp af søjlekromatografi på Amberlite XAD-2. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 153 mg natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-3-carbamoy1oxymethyl-3-cephem-4-carboxylat som et hvidt pulver. Baseret på NMR og andre data er dette produkt identisk med .forbindelsen, som blev opnået i referenceeksempel 29.

Referenceeksempel 35 (1) I 20 ml tetrahydrofuran opløses. 277 mg 2-(2-chloracetamidothiazol-Z) yl)-2-(syn)-methoxyiminoeddikesyre og 270 mg tert.butyl-7-aminodes-acetoxycephalosporansyre,hvorefter der tilsættes 206 mg dicyclohexyl-carbodiimid. Blandingen omsættes under omrøring ved stuetemperatur i 6 timer. Det bundfældede urinstofderivat filtreres fra,og filtratet hældes i 50 ml vand og ekstraheres med ethylacetat. Ethylacetatlaget vaskes med 0,5 N saltsyre, vand og en mættet vandig opløsning af natriumchlorid i den nævnte rækkefølge, tørres og koncentreres. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 320 mg tert.butyl-7-[2-(2-chlor-acetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-desacetoxy-cephalosporanat som en olie.

40

DK 158671B

KMR-Spektrum (60 MHz, i CDCl^): 1,53 ppm (9H, s., t-C^H^), 2,13 ppm (3H, s., 3-CH^), 3^39 ppm (2H, kvartet, 2-GH2), 4,06 ppm (3H, s-, =N0CH3), 4,29 ppm (2H, s., CICHgCO), 5,06 ppm (IH, dublet, 6H), 5,S6 ppm (IH, dublet af dublet, 7H), 7,20 ppm (IH, s., thiazol 5H), S,14 ppm (IH, dublet, 7-C0NH).

(2) Hele mængden af det ovenstående produkt opløses i 12 ml tetra-hydrofuran, hvorefter der tilsættes 100 mg thiourinstof og 200 mg natriumacetattrihydrat. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i S timer. Reaktionsblandingen fortyndes med 30 ml vand og ekstraheres med ethylacetat. Ethylacetatlaget vaskes med vand, tørres og koncentreres. Den resulterende olie renses ved kromatografi på silicagel. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 12# mg tert.butyl-7-[2-(2-amino-thiazol-4-yl) -2- (syn) -methoxyiminoacetamido ]-desacetoxycephalospora-nat som et pulver.

NMR-Spektrum (60 MHz, i CDCl^): 1,52 ppm (9H, s., t-C^H^), 2,10 ppm (3H, s., 3-CH^), 3,40 ppm (2H, kvartet, 2-CH2), 4,00 ppm (3H, s., =N0CH3), 5,05 ppm (IH, dublet, 6H), 5,9# ppm (IH, dublet af dublet, 7H), 6,66 ppm (IH, s., thiazol 5H), 6,2# ppm (IH, dublet, 7-C0NH).

(3) Hele mængden af det ovenstående produkt opløses i en blanding af 1 ml trifluoreddikesyre og 0,1 ml anisol, og opløsningen omrøres ved . stuetemperatur i 1 1/2 time, hvorefter der tilsættes ether. Det resulterende bundfald opsamles ved filtrering og vaskes med ether. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 70 mg 7-£2-(2-aminothiazol-4-yl)- 2- (syn) -methoxyiminoacetamido 3-desacetoxycephalosporansyre-trifluor-acetat som et pulver.

Ifølge NMR-spektrum (60 MHz, i D20 indeholdende NaHCO^), er dette produkt identisk med produktet, der blev opnået i referenceeksempel 32.

Referenceeksempel 36 41

DK 158671 B

I en blanding af 20 ml vand og 10 ml methanol oplyses 2#0 mg natrium-carbonat, hvorefter der tilsættes 477 mg 7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)- 2-(syn)-hydroxyiminoacetamido]-cephalosporansyre. Til denne blandede opløsning sættes 300 mg dimethylsulfat dråbevis under isafkøling og omrøring- Efter 25 minutter tilsættes der 300 mg kaliumcarbonat og 300 mg dimethylsulfat. Efter endnu 25 minutter koncentreres reaktionsblandingen under reduceret tryk, og den underkastes søjlekromatografi på Amberlite XAD-2, idet der elueres med vand. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-me-thoxyiminoacetamido]-cephalosporanat. Ifølge MR-spektrum m.m. er dette produkt identisk med forbindelsen, der blev opnået i referenceeksempel 31.

Referenceeksempel 37 (1) Til en suspension af 5,54 g 2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoeddikesyre i 70 ml methylenchlorid sættes 2,42 g triethylamin for at opnå en opløsning. Under isafkøling og omrøring sættes 4,16 g phosphorpentachlorid i en enkelt dosis til ovennævnte opløsning. Efter 5 minutter fjernes isbadet, og blandingen omrøres ved stuetemperatur i 20 minutter, hvorefter den koncentreres under reduceret tryk. Til remanensen sættes 150 ml hexan, hvorefter der dekanteres to gange. Efter tilsætning af 90 ml vandfrit tetrahydro-furan filtreres det udfældede triethylamin-hydrochlorid fra, hvorved der opnås en opløsning af 2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syerne thoxyiminoacetylchlorid i tetrahydrofuran.

På den anden side sættes der til en suspension af 4,2# g 7-aminodes-acetoxycephalosporansyre (7-ADCA) i en blanding af 50 ml vand og 50 ml tetrahydrofuran under isafkøling 4,44 g triethylamin for at danne en homogen opløsning. Under isafkøling sættes den tidligere fremstillede syrechloridopløsning dråbevis til ovenstående opløsning i løbet af 15 minutter. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 2 timer, hvorefter der tilsættes en mættet vandig opløsning af natrium-chlorid. Blandingen indstilles til pH-værdi ca. 2 med fortyndet saltsyre og ekstraheres med ethylacetat. Ethylacetatlaget vaskes med en mættet vandig opløsning af natriumchlorid, tørres over magnesiumsulfat og koncentreres, hvorved der opnås $ g af et gullighvidt pul

DK 158671 B

42 ver. Pulveret vaskes med 50 ml methanol, og de uopløselige bestanddele opsamles ved filtrering. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 4,6 g 7-[2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacet-amido]-desacetoxycephalosporansyre som et hvidt pulver.

NMR-Spektrum (60 MHz, i d^-DMSO): 2,04 ppm (3H, s., 3-CH^) , 3,50 ppm (2Ή, bred singlet, 2-CH2), 3,92 ppm (3H, s., OCH^), 4,40 ppm (2H, s., CICEpCO), 5,Id ppm (IH, dublet, 6H), 5,73 ppm (IH, dubletx2, 7H), 7,50 ppm (IH, s., thiazol 5H).

(2) Det ovenstående produkt omsættes og behandles på samme måde som i eksempel 5, . (2), og der opnås natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)- 2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-desacetoxycephalosporanat som et hvidt pulver. Ifølge NMR-spektrum og andre egenskaber er dette produkt identisk med produktet, som blev opnået i referenceeksempel 32.

Referenceeksempel 38

Til en suspension af &31 mg 2-(2-ehloracetamidothiazol-4--yl)-2-(syn)-methoxyiminoeddikesyre i 10 ml methylenchlorid sættes 360 mg tri-ethylamin og 624 mg phosphorpentachlorid. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 20 minutter, hvorefter der tilsættes 100 ml hexan. Den udskilte olie udvindes ved dekantering af hexanet og opløses i 15 ml tetrahydrofuran, hvorved der opnås en opløsning af 2-(2-chlor-acetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetylchlorid.

På den anden side opløses 9&4 mg 7-amino-3-(l-methyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre og 660 mg triethylamin i 15 ml af en 50$Ts vandig tetrahydrofuranopløsning, og under isafkøling sættes den tidligere fremstillede syrechloridopløsning dråbevis til denne opløsning. Blandingen omrøres under isafkøling i 2 timer, hvor-. efter reaktionsblandingen fortyndes med vand, indstilles til pH-værdi ca. 2 med fortyndet saltsyre og ekstraheres med ethylacetat. Ethyl-acetatlaget vaskes med en mættet vandig opløsning af natriumchlorid og tørres over magnesiumsulfat. Ethylacetatet afdestilleres, og remanensen behandles med ether. De resulterende krystaller opsamles ved filtrering. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 1,3.'g 7-[2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2- (syn) -methoxyiminoacetamido 3-3- (1-me-thyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiomethyl-4-carboxylsyre.

43

DK 158671 B

Dette produkt er identisk med mellemproduktet, som blev opnået ved den første del af den i referenceeksempel 30 beskrevne proces.

5,8 g af produktet fremstillet som ovenfor opløses i 20 ml dimeth-ylacetamid, og under isafkøling tilsættes der 1,53 g thiourinstof. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 15 timer. Til denne reakt tionsblanding sættes 200 ml is-vand, og blandingens pH-værdi indstilles til 3,5 med natriumhydrogencarbonat. Det resulterende bundfald opsamles ved filtrering og opløses i en 10%"s vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat. Opløsningen passeres derefter gennem en søjle pakket med Amberlite XAD-2. Ved denne rensningsprodcedure opnås 1,58 g natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2—(syn)-methoxy-iminoacetamido]-3-(l-methyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem- 4-carboxylat som et hvidt pulver.

Ifølge NMR-spektrum og andre egenskaber er dette .produkt identisk med det produkt, der blev opnået i referenceeksempel 30.

Referenceeksempel 39 (1) Til en suspension af 55,6 g 2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoeddikesyre i 600 ml methylenchlorid sættes 24,3 g triethylamin for at opnå en opløsning. Under isafkøling og omrøring sættes 41,$ g phoshorpentachlorid i to doser til den ovennævnte opløsning. Efter 5 minutter fjernes isbadet, og blandingen omrøres ved stuetemperatur i 20 minutter, hvorefter den koncentreres under reduceret tryk. Til remanensen sættes 1 liter hexan, hvorefter der dekanteres to gange. Efter tilsætning af 600 ml vandfrit tetrahydrofuran frafiltreres det udfældede triethylaminhydrochlorid, hvorved der opnås en opløsning af 2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxy-iminoacetylchlorid i tetrahydrofuran.

På den anden side sættes der til en suspension af 54,7 g 7-amino-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre i en blanding af 400 ml vand og 400 ml tetrahydrofuran 6l g triethylamin under isafkøling for at fremstille en homogen opløsning. Under isafkøling sættes den tidligere fremstillede syrechloridopløsning dråbevis til ovennævnte opløsning i løbet af 30 minutter. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 2 timer, hvorefter der tilsættes en mættet vandig opløsning af natriumehlorid. Blandingen indstilles til pH-værdi 2 med fortyndet saltsyre og ekstraheres med ethylacetat. Ethylacetatlaget vaskes med 44

DK 158671 B

en mættet vandig opløsning af natriumchlorid, tørres over magnesiumsulfat og koncentreres, hvorefter der opnås 97,3 g 7-[2-(2~chloracet-amidothiazol-4-yl)-2- (syn) -methoxyiminoacetamido]-3-carbamoyloxy-methyl-3-cephem-4-carboxylsyre. Ifølge NMR-spektrum og andre egenskaber er dette produkt identisk med det produkt, der blev opnået i referenceeksempel 33 (1) .

MR-Spektrum (60 MHz, i d^-DMSO): 3,56 ppm (2H, bred singlet, 2-CH^), 3,95 ppm (3H, s., OCH^), 4,35 ppm (2H, s., CICHgCO), 4,7# ppm (2H, kvartet, 3-0¾), 5,19 ppm (IH, dublet, 6H), 5,$4 ppm (IH, dubletx2, 7H), 6,56 ppm (2H, s-, OCONHg), 7,46 ppm (IH, s., thiazol 5H).

(2) 97,3 g af produktet fremstillet som ovenfor under (1) opløses i 500 ml Ν,Ν-dimethylacetamid, og der sættes under isafkøling 31,2 g thiourinstof til opløsningen. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 15 timer. Til denne reaktionsblanding sættes 2 liter ether,og derefter fraskilles det olieagtige produkt. En suspension af dette olieagt ige produkt i 300 ml vand indstilles til pH-værdi 7,0 med natrium-hydrogencarbonat. Den således opnåede opløsning passeres gennem en søjle pakket med Amberlite XAD-2. Ved denne rensningsprocedure opnås 20,2 g natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacet-amido j-3-carbamoyloxymethyl-3-cephem-4-carboxylat som et hvidt pulver. Ifølge MMR-spektrum og andre .egenskaber er dette produkt identisk med det produkt, der blev opnået i referenceeksempel 29 eller 33.

Strukturerne og egenskaberne (IR-spektrum) af forbindelser opnået ifølge de ovenstående fremgangsmåder, er opført i den følgende tabel.

I denne tabel betyder IR-spektrum (cm KBr) karakteristiske absorptionsbånd, som skyldes β-lactamdelen.

Tabel.

h2N q V\

Ti s

N_ϋ-C-CONH--/ X

Tf N J-N J-CH9R3 \ 0' y

OCH3 cqqM

45

DK 158671 B

Forbin-. 3 H ^ delse R (cm ,KBr) nr.________ 1 Na 1760 -OH Na 1760

Eksempel 1

Til 10 ml vand sættes 1 g af det natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)- 2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-'Cephalosporanat, som blev opnået i referenceeksempel 31, 270 mg 2-methyl-l,3,4-oxadiazol-5-thiol-kaliumsalt og 7 mg trietbylbenzylammoniumbromid. Blandingen omrøres under en nitroger gasstrøm ved 60°C i 6 timer. Efter afkøling renses reaktionsblandingen ved hjælp af søjlekromatografi på Amberlite XAD-2. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 110 mg natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-3-(2-methyl-l,3,4-oxadiazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat som et hvidt pulver.

Elementæranalyse for C17Hl6N7°6S3Na‘2H20:

Beregnet: C 35,35 H 3,54 N 17,21

Fundet: C 35,73 H 3,72 N 17,01 NMR-Spektrum (60 MHz, i DgO): £,42 ppm (3H, s., oxadiazol 2-CH^), 3,55 ppm (2H, kvartet, 2-CH2), 4,02 ppm (3H, s., =M0CH^), 5,13 ppm (IH, dublet, 6H), 5,73 ppm (IH, dublet, 7H), 6,97 ppm (IH, s., thia-zol 5H).

Eksempel 2

Ved acylering af 7-aminogruppen i de tilsvarende cephalosporinforbin-delser på lignende måde som beskrevet i referenceeksempel 30 (proces A) og ved anvendelse af natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxy-iminoacetamidoj-cephalosporanat og heterocycliske thiolforbindelser på lignende måde som beskrevet i eksempel 1 (proces B) fremstilles følgende forbindelser: 46

DK 158671 B

( a) Dinatrium-7- £2- (2-aminothiazol-4-yl) -2- (syn) -methoxyiminoacet-amido 3-3- (2-carboxymethyl-l,3,4-thiadiazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat (proces B).

NMR-Spektrum (60 MHz, i D^O): 3,56 ppm (2H, kvartet, 2-CH2), 3,96 ppm (3H, s., =N0CH3), 4,1^ PPm (2H, s., CH2C00Na), 5,20 ppm (IH, dublet, 6η), 5,74 ppm (IH, dublet, 7H), 6,97 ppm (IH, s., thiazol 5H).

(b) Natrium-7-£2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacet-amido]-3-(l,2,3-triazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat (proces B).

NMR-Spektrum (60 MHz, i DgO): 3,57 ppm (2H, kvartet, 2-CH2), 3,94 ppm (3H, s., =N0CH3), 5,21 ppm (IH, dublet, 6H), 5,72 ppm (IH, dublet, 7H), 6,94 ppm (IH, s., thiazol 5H), 7,95 ppm (IH, s., triazol 4H).

( c) Dinatrium-7- £2- (2-aminothiazol-4-yl)-2- (syn) -methoxyiminoacet-amido >3- (1- carboxymethyl-1,2,3,4-tetrazol-5-yl) -thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat (proces B).

NMR-Spektrum (60 MHz, i DgO): 3,55 ppm (2H, kvartet, 2-CH2), 3,96 ppm (3H, s., =N0CH3), 4,72 ppm (2H, s., -N-CH2C00Na), 5,lS ppm (IH, dublet, 6H), 5,72 ppm (IH, dublet, 7H), 6,95 ppm (IH, s., thiazol 5H).

(d) 7- [2- (2-Aminothiazol-4-yl)-2- (syn) -methoxyiminoacetamido]-3- [1- (2-N,N-dimethylaminoethyl)-1,2,3,4-tetrazol-5-ylH-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylsyre-betain (proces A, B).

CH

NMR-Spektrum (60 MHz, i D90); 3,01 ppm (6H, s.,-n" ^ ), 3,50 ppm ^ch3 (2H, kvartet, 2-CH2), 3,9$ ppm (3H, s., =N0CH3), 5,1$ ppm (1Η, dublet, 6H), 5,74 ppm (IH, dublet, 7H), 6,96 ppm (IH, s., thiazol 5H).

(e) Natrium-7- £2- (2-aminothiazol-4-yl) -2- (syn) -methoxyiminoacetamidol- 3- (6-methyl-l-oxopyridazin-3-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat (proces B).

47

DK 158671 B

NMR-Spektrum (60 MHz, i D^O): 2,60 ppm (3H, s., pyridazin 6-CH^), 3,52 ppm (2H, kvartet, 2-CH2), 3,96 ppm (3H, s., =N0CH^), 5,21 ppm (IH, dublet, 6H), 5,76 ppm (IH, dublet, 7H), 6,95 ppm (IH, s., thia-zol 5H).

Den minimale inhibitoriske koncentration feg/ml) af den opnåede forbindelse (d) er som følger:

Mikroorganisme ______i , ,_ E. coli NIHJ 0,20 E. coli 0-111 0,024 E. coli T-7 1,56 K. pneumoniae DT 0,10 K. pneumoniae GN 3635 0,20

Serr. marcescens IF0 1264$ 1,56

Serratia TN 0024 0,76 P. vulgaris IF0 39S6 0,20 P. vulgaris GN 4413 1,56 P. mirabilis GN 4359 0,39 P. morganii IF0 3166 0,20 P. rettgeri 6 (ΤΝ0 336) 0,024 P. rettgeri GN 4733 0,76

Ent. cloacae IF0 12937 6,25

Cit. freundii GN 99 0,20

Cit. freundii GN 1706 0,76

Eksempel 3 I 25 ml dimethylformamid suspenderes natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-desacetoxycephalosporanat, og der tilsættes under isafkøling 3,75 g iodmethylpivalat og yderligere 3 ml dimethylformamid. Efter 17 minutter sættes 100 ml ethylacetat til reaktionsblandingen, og de uopløselige bestanddele filtreres fra. Filtratet vaskes med vand, en 5%1s vandig opløsning af natriumhydro-gencarbonat og en mættet vandig opløsning af natriumchlorid i den nævnte rækkefølge og tørres over magnesiumsulfat. Ethylacetatet af-destilleres derefter, og den resulterende olie (2,4 g) renses ved

DK 158671B

48 kromatografi på silicagel. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 1 g pivaloyloxymeth.yl-7- [2-(2-aminothiazol-4-yl) -2- (syn) -methoxyimi-noacetamido]-desacetoxycephalosporanat som et hvidt pulver.

Elementæranalyse for C20H25N5°7S2:

Beregnet: C 46,95 Η 4,92 N 13,69

Fundet: C 46,92 Η 4,&& N 13,13 MR-Spektrum (60 MHz, i CDCl^): 1,24 ppm (9H, s. -CfCH^)^, 2,16 ppm, 3,44 ppm (2H, dublet, 2-CH2), 4,10 ppm (3H, s., OCH^), 5,16 ppm (IH, dublet, 6H), 5,94 ppm (2H, s., -0CH20), 6,S6 ppm (IH, s., thiazol 5H).

Eksempel .4 0,7 g af den 7- [2-(2-chloracetamidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxy-iminoacetamido]-desacetoxycephalosporansyre, som blev opnået ved fremgangsmåden i referenceeksempel 37, (1) opløses i en isafkølet opløsning af 149 mg triethylamin i 7 ml dimethylformamid. Efter tilsætning af 715 mg iodmethylpivalat omrøres blandingen i 15 minutter. Til denne reaktionsblanding sættes 40 ml ethylacetat,og blandingen vaskes med vand, en 5%1s vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat og en mættet vandig opløsning af natriumchlorid i den nævnte rækkefølge, hvorefter den tørres over magnesiumsulfat. Ethylacetatet afdestilleres, og der opnås 0,S g råt pivaloyloxymethyl-7-[2-(2-ehloracetamido-thiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido 1-desacetoxycephalospora-nat som en brun olie.

Dette produkt opløses i 3 ml dimethylacetamid, hvorefter der tilsættes 206 mg thiourinstof. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 16 timer. Hertil sættes 40 ml ethylacetat, og blandingen vaskes to gange med 30 ml portioner af en mættet vandig opløsning af natriumchlorid og tørres over magnesiumsulfat. Ethylacetatet afdestilleres, og den resulterende brunfarvede olie (0,4 g) renses ved kromatografi på silicagel. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 0,2 g pivaloyl-oxymethyl-7- [2-(2-aminothiazol-4-yl) -2-(syn)-methoxyiminoacetamido]-desacetoxycephalosporanat som et hvidt pulver.

Ifølge MR-spektrum og andre egenskaber er dette produkt identisk med produktet, som blev opnået i eksempel 3.

49

DK 158671 B

Eksempel ~5[ I 10 ml dimethylformamid opløses 1 g natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-( syn)-methoxyiminoacetamido]-3-(l-methyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat, og der tilsættes under isafkøling og omrøring 0,B5 g iodmethylpivalat. Blandingen omrøres i 15 minut ter. Efter tilsætning af 40 ml ethylacetat vaskes reaktionsblandingen med vand, en 5$Ts vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat og en mættet vandig opløsning af natriumchlorid i den nævnte rækkefølge og tørres derefter over magnesiumsulfat. Ethylacetatet afdestilleres under reduceret tryk, og remanensen opløses i en lille mængde ethylacetat og filtreres. Til filtratet sættes ether, hvorefter der afkøles. Det resulterende bundfald opsamles ved filtrering. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 0,4 g pivaloyloxymethyl-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl) -2- (syn)-methoxyiminoacetamido;]-3- (1-methyl-lH-tetrazol-5-yl)-thiomethyl-3-cephem-4-carboxylat som et hvidt pulver.

Elementæranalyse for C22H27N9°7S3:

Beregnet: C 42,27 H 4?34

Fundet: C 42,29 H 4,40 NMR-Spektrum (60 MHz, i CDCl^): 1,22 ppm (9H, s., -C(CH^)^), 3,&0 ppm (2H, bred singlet, 2-0¾), 3,94 ppm, 4,06 ppm (3Hx2, s.x2, N-CH3 og 0CH3), 5,94 ppm (2H, s., -0CH20), 5,12 ppm (IH, dublet, 6H), 6,06 ppm (IH, dubl et x2, 7H), 4,44 ppm (2H, dublet, 3-0¾), 6, Bl ppm (IH, s., thiazol 5H).

Eksempel 6, I 20 ml methylenchlorid opløses 2,776 g 2-(2-chloracetamidothiazol- 4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoeddikesyre og 1,2 g triethylamin, hvorefter der tilsættes 2,0B g phosphorpentachlorid. Blandingen omrøres ved stuetemperatur i 20 minutter, hvorefter der tilsættes 150 ml hexan. Det resulterende olieagtige bundfald skilles fra og opløses i 20 ml tetrahydrofuran, hvorved der opnås en opløsning af 2-(2-chloracet-amidothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetylchlorid. På den anden side opløses 3,143 g 7-amino-3-acetylacetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre og 2,20 g triethylamin i 50 ml af en 50$Ts vandig tetra-hydrofuranopløsning- Hertil sættes dråbevis under isafkøling og omrø- 50

DK 158671 B

ring den tidligere fremstillede syrechloridopløsning. Blandingen omrøres under isafkøling i 2 timer, hvorefter der tilsættes vand. Blandingen indstilles til pH-værdi 2,0 med fortyndet saltsyre og ekstra-heres med ethylacetat. Ethylacetatlaget vaskes med en mættet vandig opløsning af natriumchlorid og tørres over magnesiumsulfat. Ethyl-acetatet afdestilleres derefter, og der sættes ether til remanensen. Det resulterende krystallinske produkt opsamles ved filtrering. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 4,l6S g 7-[2-(2-chloracetamido-thiazol-4-yl)-2- (syn) -methoxyiminoacetamido]-3-acetylacetoxymethyl-3-cephem-4-carboxylsyre.

NMR-Spektrum (60 MHz, i dr-DMSO): 2,14 ppm (3H, s., -0-0¾), 3,60 ppm ° tf 5 0 (4H, bred s., -C-CH9-C- og 2-CH9), 3,^6 ppm (3H, s., 0CH.J, 4,34 ppm μ ~ t t ~ 0 0 (2H, s., CICEpCO), 4,91 ppm (2H, kvartet, 3-CH2), 5,13 ppm (IH, dublet, 6H), 5,^0 ppm (IH, dubletx2, 7H), 7,40 ppm (IH, s., thiazol 5H).

Eksempel 7 I 20 ml dimethylacetamid opløses 4,00 g af den 7-[2-(2-chloracet-amidothiazol-14-yl) -2- (syn) -methoxyiminoacetamido]-3-acetylacetoxy-methyl-3-cephem-4-carboxylsyre, som blev opnået i eksempel 6, hvorefter der tilsættes 1,06 g thiourinstof. Blandingen omrøre^ ,red stuetemperatur i 17 timer, hvorefter der tilsættes 100 ml ether. Det olie-agtige bundfald skilles fra og opløses i en 5$Ts vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat. Opløsningen lyofiliseres,og det resulterende pul verf ormige produkt sættes til 50 ml methanol. De uopløselige bestanddele filtreres fra, og filtratet sættes til 300 ml ether. Bundfaldet opsamles ved filtrering. Ved- den ovenstående fremgangsmåde opnås 3,150 g natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyimino-acetamido ]-3-acetylacetoxymethyl-3- cephem-4- carboxylat.

10 ml vand opløses 933 mg af det ovenstående produkt, 350 mg l-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-lH-tetrazol-5-thiol og l6£ mg natriumhydrogencarbonat. Blandingen omrøres ved 55°C i en time,og derefter passeres reaktionsblandingen direkte gennem en søjle pakket med Amberlite XAD-2 til rensning. Ved den ovenstående fremgangsmåde opnås 170 mg 51

DK 158671 B

natrium-7-[2-(2-aminothiazol-4-yl)-2-(syn)-methoxyiminoacetamido]~3~ [l-(2-N,N-dimethylaminoethyl)-lH-tetrazol-5-yl]-thiomethyl-3-cephem- 4-carboxylat som et hvidt pulver. Ifølge NMR-spektrum og andre egenskaber er dette produkt identisk med det produkt, der blev opnået i eksempel 2.

Den følgende tabel viser den beskyttende virkning (ED,^q, mg/kg) af forbindelserne, som er fremstillet ifølge de ovenstående eksempler,på inficerede mus.

Tabel.

Eksempel nr.

for prøven Administration ED^q ('mg/kg) 2 SC 0,022 (CER : 1,25) 3 SC Ο,ΟΙβ (CER : 1,25) 5 SC 0,111 (CER : 1,25) 15 Oral 0,11 (CEX : 2,51) 17 Oral 0,27 (CEX : 2,51) * Forsøgsdyr- : hanmus (ICR/SLC) 5 mus pr. gruppe pr. enkeltdosis. Infektion: intraperitonealt med Escherichia coli 0-111. Observationsperiode: 7 dage.

( ): kontrol SC = subkutan CER = cephaloridin lgj-CH2C0NH-|-A + οΑγ-οΗ<Ι> coo" CEX = cephalexin </ -CHCO__ NH2 o/—0"CH3

COOH

DK 158671B

52

Strukturerne og egenskaberne (IR-spektrum) af forbindelser opnået ifølge de ovenstående omhandlede fremgangsmåder, er opført i den følgende tabel. I denne tabel betyder IR-spektrum (cm KBr) karakteristiske absorptionsbånd, som skyldes β-lactamdelen.

Tabel.

h2n o V\ II | s

N-1-C-CONH--/ N

N 1-i J-CHoR3 \ o^Y ^

0CH3 COOM

Forbin-, . . jp delse H .

nr._ _______(cm , KBr) 2 Ϊ “ ? Na 1765 - H __ 3 m " if Ha 1758 -8ΛΝΛθΗ3 CH, 5 __ 4 · _sJ^ Ha 1760

CEL

___2_______ w CEL.

5 -s-CX Na 1765 6 1765 -s-Xs>nh2 7 I * ,Ψ Na 1760 “S~^S^"WHC00CH3 _ i 1 53

DK 158671 B

- Forbin- o t-d

delse RJ M

nr._|_ ___(cm ,KBr) 8 if " i. Na 1765 -SAg> CH2C0NH2 9 Π “ il Na 1768 -sAfn CH2CONH2 10 f. “ ?, Na 1768 -sAn>nh2 CH, b _ 12 m ‘ j? CH, Ha 1765 -sA„>ch2h< 5 S CHj ____J___ 15 V7) 3 1765 14 -N^J>—C0NHp 0 1765 15 · i “ if Na 1768 -S·Λ s>- SCH2C00Na 16 π “ f Na 1765 CHgCOONa 54

DK 15867 1 B

!°rbin~ 3 M IR

del se RJ ™ nr. ' (cm ,KBr) 17 f, " i? Na 1765 -sAri CH2S0^Na — 18 -OCOCH, -CHo0C0C-CH, 1760 2 2 i 3 CH, 2 ch3 19 -ocom2 -ch2ococ-ch3 1763 CH, 2 CH, „ ivr i 2 20 JT~ ti -CHgOCOC-CH^ 1765 CH^ ch3 21 i ~ j? -CH20C0C-CH5 1768 -S-kj^N CH,* » OH, 3 CHo0HoF< 5 CH, ----,-----2--- 22 H -CHOCOOC^ 1760 CH, 2 23 -OCOCH3 -CHOCOOCgB^ 1763 CH, 2 ch3 24 ' -0C0NHo -CHOCOC-CH, 1763 H t i 2 ch3 Ci^

N - N

25 J j* -CHOCOOCÆ 1765 1 CH, CH, 2 2 55

DK 158671 B

Fortin- . ^ M IR

delse RJ 11 , -1 _ ^ nr> (cm ,KBr) 26 11-f -CH0C00CoHc 1768 _q_l t\j ,25 H 3 N - N CH-, || H ' « o 27 -CHOCOC-CH, 1765 1ST prr i t 3 CHpCHpH< 3 CH3 CH3 CH-, 3 23 Η °φθ 1760 tt

O

29 -ococh5 1763 tt o 30 -0C0MH2 1763 tt o 51 Λΐϊ vO 1765 , I! CH, o ____3___ 32 π- ? 1765

-sArN

H O

~ <0 T /Η δ CHpCHpNC 0 CH, 3

Claims (2)

1. 3, COOH hvori Rg betyder hydrogen, OCOCH2COCH3, OCOCH3, 0C0NH2, tetrazo-lylthio substitueret med C(1-3)-alkyl, di-C(l-3)-alkylamino-C(l-3)-alkyl, carboxy-C(1-3)-alkyl, carbamoyl-C(1-3)-alkyl eller sulfo-C(1-3)-alkyl, thiadiazolylthio substitueret med amino, carboxy-C(1-3)-alkyl, C(l-3)-alkoxycarbonylamino, carbamoyl-C(1-3)-alkyl, di-C(l-3)-alkylamino-C(l-3)-alkyl eller carboxy-C(1-3)-alkylthio, oxadiazolylthio substitueret med C(l-3)-alkyl, thiazolylthio substitueret med C(1-3)-alkyl, diazolylthio substitueret med C(1-3)-alkyl, triazolylthio, l,2-di-C(l-3)-alkyl-1,3,4-triazolylthio, 1-C(1-3)-alkyl-2-amino-l,3,4-triazolylthio,
2. 6-C(1-3)-alkyl-l-oxopyridazinylthio eller pyridinium, som eventuelt er substitueret med carbamoyl, eller fysiologisk acceptable salte eller estere deraf, idet dog forbindelsen foreligger i form af en ester, når R3 er hydrogen, OCOCH3, OCONH2 eller 1-methyltetrazolylthio, kendetegnet ved, at man a) omsætter et 7-aminocephalosporinderivat med formlen ¥-p/\ o^\J-CH2R3 11 COOH hvori R3 har den ovenfor angivne betydning, eller et fysiologisk acceptabelt salt eller en ester deraf, med en forbindelse med formlen DK 158671 B R2NH~{ N_!1 -C-COOH IH It N \ OCH3 hvori R2NH betyder en aminogruppe, som kan være beskyttet, eller et reaktivt derivat deraf og, om nødvendigt, fjerner beskyttelsesgruppen, b) omsætter en forbindelse med formlen N_j-C-CONH-j-/ \ Ψ IV OCH3 COOH hvori R2NH har den ovenfor angivne betydning, og R4 betyder acyloxy, carbamoyloxy eller halogen, eller et fysiologisk acceptabelt salt eller en ester deraf, med en nucleofil forbindelse med formlen H-R3 hvori R3 har den ovenfor angivne betydning med undtagelse af hydrogen, OCOCH3 og OCONH2, eller et salt deraf og fjerner beskyttelsesgruppen, c) underkaster en forbindelse med formlen S R9NH- / \ N_0 -C-CONH- *_\ N J S J-CH0R, VI \ J Y 23 0H COOH DK 158671 B hvori R3 og R2NH har de ovenfor angivne betydninger, eller et fysiologisk acceptabelt salt eller en ester deraf, en methyle-ringsreaktion og fraspalter beskyttelsesgruppen eller d) esterificerer en forbindelse med formlen Λ S N U-C-CONH-j-f \ N J Nv l-CH-R- XI I 2 3 OCHq υ I J COOH hvori R3 og R2NH har de ovenfor angivne betydninger, eller et fysiologisk acceptabelt salt deraf, og fjerner beskyttelsesgruppen.