BRPI0714062A2 - n-fenil-metil-5-oxo-prolina-2-amidas substituìdas como antagonistas do receptor da p2x, e os seus métodos de uso - Google Patents

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Abstract

N-FEN 1 L-METI L-5-OXO-PROLI NA-2-AMIDAS SUBSTITUIDAS COMO ANTAGONISTAS DO RECEPTOR DA P2X~ 7~ E OS SEUS MéTODOS DE USO A presente invenção se refere à novela oxo-prolinamida derivados da Fórmula (1) que modulam a função do receptor da P2X~ 7~ e são capazes de antagonizar os efeitos do ATP no receptor da P2X~ 7~ e o uso de tais compostos ou composições farmacêuticas do mesmo para o tratamento de distúrbios mediados pelo receptor da P2X~ 7~, por exemplo, a dor, a inflamação e a neuro-degeneração.

Description

" A/-F E NIL- M ETIL-5-0X0- PRO LIN Α-2-ΑΜI DAS SUBSTITUÍDAS COMO ANTAGONISTAS DO RECEPTOR DA P2X7 E OS SEUS MÉTODOS DE USO"
A presente invenção se refere aos derivados de amida heterocíclica que modulam a função do receptor da P2X7 e são capazes de antagonizar os efeitos do ATP no receptor da P2X7 (antagonistas do receptor da P2X7); aos processos para sua preparação; a composi- ções farmacêuticas contendo os mesmos; e ao uso de tais compostos em terapias.
O receptor da P2X7 é um canal de íon dependente de Iigante que é expresso em células de linhagem hematopoiética, por Exemplo, macrófagos, micróglia, células tronco, e linfócitos (T e B) (ver, por Exemplo, Collo, et al., Neuropharmacology, Volume 36, págs 1277-1283 (1997)), e é ativado por nucleotídios extracelulares, particularmente trifosfato de adenosina (ATP). Agitação de receptores da P2X7 foi implicada na formação da célula gi- gante, desgranulação, morte citolítica da célula, redução da CD62L, regulação da prolifera- ção celular, e liberação de citoquinas pró-inflamatórias, tal como a interleucina 1 beta (IL-1/?) (por Exemplo, Ferrari, et al., J. Immunoi, Volume 176, págs 3877-3883 (2006)) e fator alfa de necrose tumoral (TNFa) (por Exemplo, Hide, et ai, Jornal de Neurochemistry, Volume 75, págs 965-972 (2000)). Os receptores da P2X7 também estão localizados em células de a- presentação de antígeno, queratinócitos, células parótidas, hepatócitos, eritrócitos, células eritroleucêmicas, monócitos, fibroblastos, células da medula óssea, neurônios, e células mesangiais renais. Além disso, o receptor da P2X7 é expresso por terminais pré-sinápticos no sistema nervoso central e no periférico e foi mostrado como mediando a liberação de glutamato nas células da glia (Anderson, C. et ai, Drug. Dev. Res., Volume 50, pág 92 (2000)).
A localização do receptor da P2X7 para as células-chave do sistema imune, ligado com a sua capacidade de liberar mediadores inflamatórios importantes dessas células suge- re um papel potencial dos antagonistas do receptor da P2X7 no tratamento de uma grande variedade de doenças incluindo a dor e distúrbios neurodegenerativos. Recentes estudos pré-clínicos in vivo implicaram diretamente o receptor da P2X7 tanto na dor inflamatória quanto na dor neuropática (Dell"Antonio et al., Neurosci. Lett., Volume 327, págs 87-90 (2002). Chessell, IP., et al., Pain, Volume 114, págs 386-396 (2005), Honore et ai, J. Phar- macol. Exp. Ther., Volume 319, págs. 1376-1385 (2006)) embora haja evidências in vitro de que os receptores da P2X7 medeiam a morte induzida de célula micróglia de neurônios cor- ticais (Skaper, S.D., et ai, Glia, Volume 54, págs. 234-242 (2006)). Além disso, a regulação do receptor da P2X7 foi observada em volta da placas /?-amiloides em um modelo de rato transgênico do mal de Alzheimer (Parvathenani, L. et ai, J. Biol. Chem., Volume 278 (15), págs 13309 - 13317 (2003)).
A presente invenção fornece compostos que modulam a função do receptor da P2X7 e são capazes de antagonizar os efeitos do ATP no receptor da P2X7 (antagonistas do receptor da P2X7). Em um primeiro aspecto, é fornecido um composto de acordo com a fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:
C3_6 ou metil-piridinil C3^1 alguns dos quais são opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; ou fenil ou benzil não substituídos;
R2 e R3 representam independentemente hidrogênio, halogênio, alquil Ci_6, metil-aril Cí-6, alquenil C2-6, alquinil C2-6 ou metil-cicloalquil C3.6; e qualquer um dos ditos alquil C^6, metil-aril C1-6, alquenil C2.6, alquinil C2-6 ou metil-cicloalquil C3^ é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio;
R41 R5 e R6 representam independentemente hidrogênio, flúor ou metil; e R71 R81 R91 R10 e R11 representam independentemente hidrogênio, halogênio, ciano, alquil C1^, alquenil C2^, alquinil C2^, cicloalquil C3.6 ou fenil, e qualquer um dos ditos alquil C1^, alquenil C2^, alquinil C2.6, cicloalquil C3^ ou fenil é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; ou R10 e R11 em conjunto com os átomos de carbono aos quais eles estão ligados formam um anel benzênico que é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio;
Com a condição de que quando R7 e R11 forem ambos selecionados de hidrogênio ou flúor, pelo menos um dos R8, R9 e R10 é um átomo de halogênio, ou R8, R9 e R10 são se- lecionados do grupo consistindo de hidrogênio e CF3 e um, mas não mais do que um, dos
Em uma modalidade, é fornecido um composto de acordo com a fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:
cicloalquil C3^1 qualquer um dos quais podendo ser opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3
R8, R9 e R10 é CF3.
25 átomos de halogênio; ou fenil ou benzil não substituídos;
R2 e R3 representam independentemente hidrogênio, halogênio, alquil C1-6, arilmetil, alquenil C2-6, alquinil C2-6 ou metil-cicloalquil C3^; e qualquer um dos ditos alquil C^6, arilme- til, alquenil C2,6, alquinil C2-6 ou metil-cicloalquil C3_6 podem ser opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio;
R41 R5 e R6 representam independentemente hidrogênio ou flúor; e
R7, R8, R91 R10 e R11 representam independentemente hidrogênio, halogênio, ciano, alquil C1-6, alquenil C2.6, alquinil C2.6, cicloalquil C3^, ou fenil; e qualquer um dos ditos alquil Cv6, alquenil C2^, alquinil C2.6, cicloalquil C3^ ou fenil pode ser opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; com a condição de que quando R7 e R11 representam independentemente hidrogênio ou flúor, pelo menos um dos R8, R9 e R10 é um átomo de halogênio.
Em uma modalidade, é fornecido um composto de acordo com a fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo:
(!)
Em que:
R1 representa alquil C1^, alquenil C2^1 alquinil C2^, cicloalquil C3.6, metil-cicloalquil C3.6 ou metil-piridinil C3^, alguns dos quais são opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; ou fenil ou benzil não substituídos;
R2 e R3 representam independentemente hidrogênio, halogênio, alquil C^1 metil-aril C1 .6, alquenil C2_6, alquinil C2_6 ou metil-cicloalquil C3_6; e qualquer um dos ditos alquil C-i-6, metil-aril C1^, alquenil C2.6, alquinil C2^ ou metil-cicloalquil C3.6 são opcionalmente substituí- dos com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio;
R4, R5 e R6 representam independentemente hidrogênio, flúor ou metil; e R7, R8, R9, R10 e R11 representam independentemente hidrogênio, halogênio, ciano, alquil C1^, alquenil C2^, alquinil C2^, cicloalquil C3.6 ou fenil, e qualquer um dos ditos alquil Ci_6, alquenil C2^1 alquinil C2.6, cicloalquil C3^ ou fenil é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; ou R10 e R11 em conjunto com os átomos de carbono aos quais eles estão ligados formam um anel benzênico que é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; com a condição de que quando R7 e R11 forem ambos selecionados de hidrogênio ou flúor, pelo menos um dos R8, R9 e R10 é um átomo de halogênio, ou não mais do que um dos R8, R9 e R10 é um grupo CF3.
Tal como aqui utilizado, o termo "alquil" (quando usado como um grupo ou como parte de um grupo) se refere a uma cadeia de hidrocarboneto reta ou ramificada contendo o número especificado de átomos de carbono. Por Exemplo, alquil C1^ significa uma cadeia de hidrocarboneto reta ou ramificada contendo pelo menos 1 e no máximo 6 átomos de car- bono. Exemplos de alquil incluem, mas não estão limitados a, metil (Me), etil (Et), A/-propil, i- propil, N-hexil e i-hexil.
Tal como aqui utilizado, o termo "alquenil" se refere a uma cadeia de hidrocarbone- to reta ou ramificada contendo o número especificado de átomos de carbono em que pelo menos uma ligação carbono a carbono é uma dupla ligação. Exemplos de alquenil incluem, mas não estão limitados a etenil, propenil, A/-butenil, i-butenil, A/-pentenil e i-pentenil. Tal como aqui utilizado, o termo "alquinil" se refere a uma cadeia de hidrocarboneto
reta ou ramificada contendo o número especificado de átomos de carbono em que pelo me- nos uma ligação carbono a carbono é uma tripla ligação. Exemplos de alquinil incluem, mas não estão limitados a etinil, propinil, butinil, i-pentinil, /V-pentinil, i-hexinil e A/-hexinil.
O termo "cicloalquil" a menos que de outro modo seja declarado significa um anel fechado não aromático de 3 a 6 membros, por Exemplo ciclopropil, ciclobutil, ciclopentil ou cicloexil.
O termo "aril" tal como aqui utilizado se refere a um anel C6.io de hidrocarboneto monocíclico ou bicíclico em que pelo menos um anel é aromático. Exemplos de tais grupos incluem fenil e naftil.
O termo "halogênio" é aqui utilizado para descrever, a menos que de outro modo
seja declarado, um grupo selecionado de flúor, cloro, bromo ou iodo.
Em certas modalidades de acordo com a presente invenção, R1 representa alquil Ci_6, alquenil C2^, alquinil C2-6, cicloalquil C3^ ou metil-piridinil C3^1 alguns dos quais são opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; ou fenil ou benzil não subs- tituídos. Em uma modalidade, R1 representa alquil Ci_6 não substituído, alquenil C2-e, alquinil C2-6, cicloalquil C3^1 metil-piridinil C3.6, fenil ou benzil. Em outra modalidade, R1 representa alquil C1-4 não substituído, cicloalquil C3.5l metil-piridinil C3.5, fenil ou benzil. Em ainda outra modalidade, R1 representa metil ou etil.
Em certas modalidades de acordo com a presente invenção, R2 e R3 representam independentemente hidrogênio, halogênio, alquil Ci_6, benzil, alquenil C2-6, alquinil C2-e ou metil-cicloalquil C3^; e qualquer um dos ditos alquil Ci_6, benzil, alquenil C2-6, alquinil C2-e ou metil-cicloalquil C3^pode ser opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio.
Em uma modalidade, R2 e R3 representam independentemente o hidrogênio ou o halogênio; alquil C1^ não substituído, benzil, alquenil C2^, alquinil C2^ ou metil-cicloalquil C3. 6.
Em outra modalidade, R2 e R3 representam independentemente hidrogênio, flúor ou metil. Em uma modalidade adicional, R2 e R3 representam ambos hidrogênio. Em uma modalidade de acordo com a presente invenção, R4 e R5 representam in- dependentemente hidrogênio ou metil. Em outra modalidade, R6 representa hidrogênio ou metil. Em uma modalidade adicional, R4, R5 e R6 todos representam o hidrogênio.
Em outra modalidade de acordo com a presente invenção, R7, R8, R91 R10 e R11 re- presentam independentemente hidrogênio, halogênio, ciano, trifluorometil ou alquil C1^ não substituído; ou R10 e R11 em conjunto com os átomos de carbono aos quais eles estão liga- dos formam um anel benzênico não substituído. Em uma modalidade adicional, R71 R8, R9, R10 e R11 representam independentemente hidrogênio, halogênio, ciano, metil ou trifluorome- til; ou R10 e R11 em conjunto com os átomos de carbono aos quais eles estão ligados formam um anel benzênico não substituído. Em ainda outra modalidade, R7, R8, R91 R10 e R11 repre- sentam independentemente hidrogênio, cloro, flúor, bromo, metil ou trifluorometil.
Em uma modalidade de acordo com a presente invenção, é fornecido um composto de acordo com a fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que:
R1 representa alquil C1^ não substituído, alquenil C2-4, cicloalquil C3.5, metil-piridinil C3.5, fenil ou benzil;
R2 e R3 representam ambos hidrogênio;
R41 R5 e R6 representam independentemente hidrogênio ou metil; e
R7, R8, R9, R10 e R11 representam independentemente hidrogênio, cloro, flúor, bro- mo, metil ou trifluorometil; Com a condição de que quando R7 e R11 forem ambos selecionados de hidrogênio
ou flúor, pelo menos um dos R81 R9 e R10 é um átomo de halogênio, ou R8, R9 e R10 são se- lecionados do grupo consistindo de hidrogênio e CF3 e um, mas não mais do que um, dos R8, R9 e R10 é CF3.
Determinados compostos de acordo a presente invenção incluem os compostos dos Exemplos 1 a 136, tal como mostrado abaixo, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
Os antagonistas da P2X7 podem ser úteis em prevenção, trato, ou melhorar vários estados de dor (por Exemplo, dor neuropática, dor inflamatória crônica e dor visceral), infla- mação e neurodegeneração, em particular no mal de Alzheimer. Os antagonistas da P2X7 também podem constituir agentes terapêuticos úteis para o manejo da artrite reumatóide e da doença inflamatória do intestino.
Os compostos de acordo com a presente invenção que modulam a função do re- ceptor da P2X7 e são capazes de antagonizar os efeitos do ATP no receptor da P2X7 (anta- gonistas do receptor da P2X7) pode ser antagonistas competitivos, agonistas inversos, mo- duladores alostéricos negativos ou moduladores indiretos da função de receptor.
Certos compostos de acordo com a fórmula (I) podem sob algumas circunstâncias formar sais de adição ácida dos mesmos. Será apreciado que para o uso em medicina, os compostos de acordo com a fórmula (I) podem ser usados como sais, em cada caso os sais devendo ser farmaceuticamente aceitáveis. Os sais farmaceuticamente aceitáveis incluem os descritos por Berge, Bighley e Monkhouse1 J. Pharm. Sei, 1977, 66, 1-19. Os compostos básicos de acordo com a fórmula (I) podem formar sais com ácidos farmaceuticamente acei- táveis incluindo ácidos inorgânicos e orgânicos. Tais ácidos incluem acético, benzenossulfô- nico, benzóico, canforssulfônico, cítrico, etanossulfônico, fumárico, glucônico, glutâmico, bromídrico, clorídrico, isotiônico, lático, maleico, málico, mandélico, metanossulfônico, múci- co, nítrico, pamóico, pantotênico, fosfórico, succínico sulfúrico, tartárico, ácido p- toluenossulfônico, e assim por diante. Exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem os formados dos ácidos
maleico, fumárico, benzóico, ascórbico, pamóico, succínico, clorídrico, sulfúrico, bismetileno salicílico, metanossulfônico, etanodissulfônico, propiônico, tartárico, salicílico, cítrico, glucô- nico, aspártico, esteárico, palmítico, itacônico, glicólico, p-aminobenzóico, glutâmico, benze- nossulfônico, cicloexilsulfâmico, fosfórico e nítrico. Os compostos de acordo com a fórmula (I) podem ser preparados na forma cristali-
na ou não-cristalina, e, se cristalinos, podem opcionalmente estar sotvatados, por Exemplo, como o hidrato. A presente invenção inclui em seu alcance os compostos estequiometrica- mente solvatados (por Exemplo, hidratos) bem como compostos contendo quantidades vari- áveis de solvente (por Exemplo, água). Os compostos de acordo com a fórmula (I) são capazes de existir na forma de éste-
reoisômeros (por Exemplo, diastereoisômeros e enanciômeros) e a presente invenção a- brange cada uma dessas formas de éstereoisômeros e as misturas dos mesmos incluindo os racematos. As diferentes formas éstereoísoméricas podem ser separadas umas das ou- tras pelos métodos usuais, ou qualquer isômero específico pode ser obtido por síntese éste- reoespecífica ou síntese assimétrica. Nos Exemplos onde a composição éstereoquímica do produto final foi determinada por HPLC quiral (mais especificamente pelos métodos (A)1 (B), (C) ou (D) tal como estabelecido nos Exemplos), a nomenclatura e a estrutura éstereoespe- cíficas correspondentes foram determinadas para o produto final onde o excesso do dito produto enanciomérico era maior do que 70 %. A atribuição da éstereoquímica absoluta está baseada na quiralidade conhecida do material de partida. Nos Exemplos onde a composição do produto final não foi caracterizada por HPLC quiral, a éstereoquímica do produto final não foi indicada. Entretanto, será esperado que a quiralidade do componente principal da mistu- ra produzida reflita aquela do material de partida e o excesso enanciomérico dependerá do método de síntese usado e será provavelmente semelhante a aquele medido para um E- xemplo análogo (onde tal Exemplo exista). Assim espera-se que compostos mostrados em uma forma de quiral sejam capazes de ser preparado na forma quiral alternativa usando o material de partida adequado. Alternativamente, se os materiais de partida fossem racêmi- cos, se esperaria que um produto racêmico fosse produzido e o único enanciômero poderia ser separado pelos métodos usuais. A presente invenção também engloba qualquer forma tautomérica e misturas das mesmas.
O objetivo de acordo com a presente invenção também inclui compostos isotopica- mente marcados, que são idênticos aos relatados pela fórmula (I) e seguintes, mas para o fato de que um ou mais átomos são substituídos por um átomo possuindo uma massa atô- mica ou um número de massa diferente da massa atômica ou do número de massa mais comumente encontrado na natureza. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos de acordo com a presente invenção incluem isótopos de hidrogênio, carbo- no, nitrogênio, oxigênio, fosforoso, flúor, iodo, e cloro, tal como 3H, 11C, 14C, 18F, 123I e 125I.
Os compostos de acordo com a presente invenção e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos ditos compostos contendo os isótopos acima mencionados e/ou outros isóto- pos de outros átomos estão dentro do alcance da presente invenção. Os compostos isotopi- camente marcados de acordo com a presente invenção, por Exemplo, aqueles nos quais os isótopos radioativos tal como 3H, 14C são incorporados, são úteis em drogas e/ou ensaios de distribuição de substrato em tecidos. Os isótopos trítio, isto é, 3H, e carbono 14, isto é, 14C, são particularmente preferidos devido as suas facilidades de preparação e de detectabilida- de. Os isótopos 11C e 8F são especialmente úteis na TEP (tomografia de emissão de pósi- trons), e os isótopos do 125I são especialmente úteis em SPECT (tomografia computadoriza- da de emissão de um único fóton). A TEP e a SPECT são úteis na geração de imagens ce- rebrais. Além disso, a substituição com isótopos mais pesados, tais como deutério, isto é 2H, pode permitir certas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica, por Exemplo meia-vida aumentada in vivo ou exigências reduzidas de dosagem e, desse modo, pode ser preferido em algumas circunstâncias, compostos isotopicamente marcados de acordo com a fórmula (I) e depois de acordo com a presente invenção pode ser geral- mente preparados realizando os procedimentos divulgados nos Esquemas e/ou nos Exem- plos abaixo, substituindo um reagente prontamente disponível isotopicamente marcado por um reagente isotopicamente não marcado.
Adicionalmente, os compostos de acordo com a fórmula (I) podem ser administra- dos como prodrogas. Tal como aqui utilizado, uma "prodroga" de um composto de acordo com a fórmula (I) é um derivado funcional do composto que, quando administrado a um pa- ciente, libera eventualmente o composto de acordo com a fórmula (I) in vivo. A administra- ção de um composto de acordo com a fórmula (I) como uma prodroga pode permitir ao téc- nico experiente fazer um ou mais dos seguintes: (a) modificar o ataque do composto in vivo; (b) modificar a duração da ação do composto in vivo; (c) modificar o transporte ou a distribu- ição do composto in vivo; (d) modificar a solubilidade do composto in vivo; e (e) superar ou superar um efeito de lado ou outra dificuldade encontrada com o composto. Os derivados funcionais típicos utilizados para preparar as prodrogas incluem modificações do composto que são quimicamente ou enzimaticamente clivados in vivo. Tais modificações são bem co- nhecidas daqueles experientes na técnica.
Os compostos de acordo com a fórmula (I), em que as variáveis são como definidos acima, e sais e solvatos dos mesmos podem ser preparados pela metodologia descrita da- qui por diante, constituindo em um aspecto adicional de acordo com a presente invenção.
Um processo de acordo com a presente invenção para preparar um composto de acordo com a fórmula (I) compreendendo:
(a) A ligação de um ácido carboxílico de acordo com a fórmula (2) (ou um derivado ativado do mesmo) com uma amina de acordo com a fórmula (3) (ver o Esquema 1), em que R1, R21 R3, R4, R5, R61 R7, R81 R91 R10 e R11 são como definidos acima. Os compostos (2) e (3) são opcionalmente protegidos;
(b) A reação de um composto de dicarbonila de acordo com a fórmula (4), um isoci- anato de acordo com a fórmula (5) e uma amina de acordo com a fórmula (6) em um solven- te adequado, tal como metanol e em uma temperatura adequada tal como 100 0C (ver o Esquema 2), em que R1, R21 R31 R41 R51 R7, R8, R9, R10 e R11 são como definidos acima e R6 = H ou metila. Os compostos (4), (5) e (6) são opcionalmente protegidos. Os processos des- se tipo foram descritos anteriormente na literatura química (por Exemplo, H.Tye, e M.Whittaker, Org. Biomoi Chem., 2004, 2, 813-815; G. C. B. Harriman WO 9900362 A1);
(c) Desproteção de um composto de acordo com a fórmula (I) que está protegido. Exemplos de grupos protetores e os meios para sua remoção podem ser encontrados em T.W. Greene e P.G.M. Wuts "Grupos Protetores em Síntese Orgânica" (J.Wiley e Sons, 3°
edição 1999); QU
(d) Interconversão de compostos de acordo com a fórmula (I) em outros compostos de acordo com a fórmula (I). Exemplos convencionais de procedimentos de interconversão incluem epimerisation, oxidação, redução, alquilation, substituição aromática, substituição nucleofílica, ligação amida e hidrólise éster.
Esquema 1.
Preparação dos Compostos.
,7
R
(!) <2)
CD
A ligação de um ácido acordo com a fórmula (2) e uma amina de acordo com a fór- mula (3) tipicamente compreende o uso de agentes ativadores, tais como o cloridrato de N- (3-dimetil amino propil)-N'-etil-carbodiimida ou carbodiimida suportada em polímero, 1- hidroxi benzotriazol (HOBT) ou 1-hidroxi-7-azobenzotriazol (HOAt), e opcionalmente uma base adequada, tal como uma alquilamina terciária (por Exemplo, diisopropil etil amina, N- etil morfolina, trietilamina) ou piridina, em um solvente adequado, tal como DMF e/ou dicloro metano e em uma temperatura adequada por Exemplo, entre O 0C e a temperatura ambien- te. Alternativamente a ligação entre (2) e (3) pode ser realizada pelo tratamento com hexa- fluorofosfato de o-(7-azobenzotriazolil-1)-N,N,N',N'-tetrametilurônio e uma alquilamina terciá- ria adequada, tal como diisopropil etil amina em um solvente adequado, tal como dimetilfor- mamida em uma temperatura adequada, tal como a temperatura ambiente. Alternativamen- te, o composto de acordo com a fórmula (2) pode ser empregado como um derivado ativado (por Exemplo, ácido clorídrico, anidridos variados, éster ativo (por Exemplo, o-acil-isouréia)), e sob tais circunstâncias de processo (a) tipicamente compreende o tratamento do dito deri- vado ativado com uma amina (Ogliaruso, M.A.; Wolfe, J. F. The Chemistry of Functional Groups (Ed. Patai, S.) Suppl. B: The Chemistry of Acids Derivatives, Pt. 1 (John Wiley & Sons, 1979), págs 442-8; Beckwith, A.L.J, The Chemistry of Functional Groups (Ed. Patai, S.) Suppl. B: The Chemistry of Amides (Ed. Zabricky, J.j (John Wiley & Sons, 1970), páginas 73 e seg). Esquema 2. Os métodos representativos para a preparação de compostos de acordo com a fórmula (2) são mostrados nos Esquemas 3 a 9, abaixo: Esquema 3.
HCI4H2I
QP2-^O
(7)
OP2-x^O (8)
Em que R11 R21 R31 R4 e R5 são como definidos acima, R6 = H ou F, e P1 e P2 repre- sentam grupos de proteção adequados, tal como alquil Ci^ ou P1 e P2 = H.
Os processos análogos aos descritos abaixo para as transformações esquematiza- das no Esquema 3 foram descritos anteriormente na literatura química (por Exemplo, G. Verardo, P. Geatti, E. Pol1 e A.G. Giumanini, Can.J.Chem., 80: 779-788 (2002); T. Godet, et al„ Organic Letters, (2004), 6(19), 3281-3284) A etapa (i) tipicamente compreende o tratamento inicial de (7) com uma base, tal
como hidróxido de sódio em um solvente adequado, tal como metanol em uma temperatura adequada, tal como 0 0C seguido por alquilação redutora que tipicamente compreende o tratamento subseqüente com um aldeído ou cetona e um ácido, tal como ácido acético, e depois a adição de um agente de redução, tal como boroidreto de sódio em uma temperatu- ra adequada tal como entre 0 0C e a temperatura ambiente.
A etapa (ii) pode ocorrer espontaneamente, em tal caso (9) é isolado diretamente da reação de (7) como descrito na etapa (i) acima, porém mais tipicamente o composto (8) é aquecido em uma temperatura adequada, tal como 110 0C1 em um solvente adequado, tal como tolueno, para produzir o composto (9). A etapa de desproteção (iii) tipicamente compreende um procedimento padrão de
conversão de um éster carboxílico a um ácido, tal como o uso de um sal hidróxido adequado (por Exemplo, hidróxido de sódio) em um solvente adequado, tal como metanol em uma temperatura adequada tal como entre 0 0C e a temperatura ambiente.
Esquema 4.
R1-
Etapa (f) O'
(10)
Etapa(Ii) O Em que R11 R21 R31 R4 e R5 são como definidos acima, R6 = H ou F1 L1 é um grupo adequado, tal como halogênio (por Exemplo, cloro ou bromo) ou um ácido borônico ou éster borônico e P representa grupos protetores adequados, tal como alquil C1-6.
Os processos análogos aos descritos abaixo para as transformações esquematiza- das no Esquema 4 foram descritos anteriormente na literatura química (por Exemplo, T. Itoh, et.al., Tetrahedron., 59 (2003), 3527-3536; T. Simandan e Μ. B. Smith1 Synthetic Communi- cations, 26(9), 1827-1838 (1996)).
A etapa (i) tipicamente compreende o tratamento de (10) com uma base, tal como hidreto de sódio e um agente de alquilação, tal como um haleto de alquila em um solvente adequado, tal como o tetraidrofurano em uma temperatura adequada tal como entre 0 0C e a temperatura ambiente ou alternativamente ela pode compreender o tratamento de (10) com um haleto de alquila ou de arila ou ácido (ou éster) alquenil borônico em um solvente ade- quado, tal como tolueno na presença de um catalisador adequado, tal como uma mistura de tris (dibenzilideno acetona) dipaládio(O) e Xantphos® (9,9-dimetil-4,5-bis (difenil fosfina) xan- teno) e uma base adequada, tal como carbonato de césio em uma temperatura adequada tal como 120 0C.
A desproteção (ii) tipicamente compreende um procedimento padrão de conversão de um éter a um ácido carboxílico, tal como o uso de um sal de hidróxido adequado (por Exemplo, hidróxido de sódio) em um solvente adequado, tal como metanol em uma tempe- ratura adequada tal como entre 0 0C e a temperatura ambiente; ou uso de um ácido ade- quado (por Exemplo, ácido trifluoroacético) em um solvente adequado, tal como diclorome- tano em uma temperatura adequada tal como entre 0 0C e a temperatura ambiente.
Esquema 5.
R1 s O
h^oh
R3
R'
JYf
R4 Etapa (i) O
(12)
Em que R1, R2, R3, R4 e R5 são como definidos acima e R6 = H ou F. Os processos análogos aos descritos abaixo para a transformação esquematizada
no Esquema 5 foram descritos anteriormente na literatura química (por Exemplo, S. Aoki, et.al., Tetrahedron, 60 (2004) 7053-7059).
A etapa (i) tipicamente compreende o aquecimento (12) em um autoclave ou tubo selado em um solvente adequado, tal como água, e em uma temperatura adequada tal co- mo de 100 0C a 140 0C com ou sem irradiação de microondas.
Esquema 6. Em que R11 R4 e R5 são como definidos acima, R2 representa um grupo como defi- nido acima diferente de hidrogênio ou halogênio, R6 = H ou F1 L1 é um grupo de partida ade- quado, tal como halogênio (por Exemplo, cloro ou bromo), e P4 e P5 representam grupos de proteção adequados, tal como alquil C1^ e alcoxicarbonil C^ respectivamente.
Os processos análogos aos descritos abaixo para as transformações esquematiza-
das no Esquema 6 foram descritos anteriormente na literatura química (por Exemplo, A. Bassoli, et.al., Eur. J. Org. Chem., 2005, 2518-2525).
A etapa (i) tipicamente compreende a proteção de (13) por protocolos padrão, tal como o tratamento com um anidrido alcoxicarbonila, tal como o di-tertbutil dicarbonato, e uma base, tal como trietilamina e um catalisador tal como 4-dimetil amino piridina em um solvente adequado, tal como diclorometano, em uma temperatura adequada, tal como a temperatura ambiente.
A etapa (ii) tipicamente compreende o tratamento de (14) com uma base, tal como bis (trimetil silil) amida de lítio e um agente de alquilação, tal como um haleto de alquila em um solvente adequado, tal como o tetraidrofurano em uma temperatura adequada tal como entre -78 °C.e a temperatura ambiente.
A etapa (iii) tipicamente compreende desproteção de (15) por protocolos padrão tal como, para o caso quando P5 é um grupo terbutoxi carbonila, o tratamento com o cloreto de hidrogênio em um solvente adequado, tal como dioxano e em uma temperatura adequada, tal como a temperatura ambiente.
A etapa (iv) tipicamente compreende o processo descrito acima para as etapas mostradas no Esquema 4.
Esquema 7. 10
15
P
I
HN
R
-X
k λ
Μ
OP8 R1-Lt
Etapa (i)
OP
(17)
Em que R11 R21 R31 R4 e R5 são como definidos acima e R6 = H ou F. P51 P6 e P7 re- presentam grupos de proteção adequados, por Exemplo P5 pode ser um alcoxicarbonil C1^ e P6 e P7 podem ser alquil C^6 (P6 e P7 não tem que ser os mesmos). L1 é um grupo de par- tida adequado, tal como um halogênio (por Exemplo, cloro ou bromo).
A etapa (i) tipicamente compreende o tratamento de (17) com uma base adequada, tal como hexametil dissilazida de potássio, e um agente de alquilação, tal como um haleto de alquila em um solvente adequado, tal como o tetraidrofurano em uma temperatura ade- quada tal como entre -78 °C.e a temperatura ambiente.
A etapa (ii) tipicamente compreende um procedimento padrão da conversão de um éter a um ácido carboxílico, tal como o tratamento com um ácido adequado (por Exemplo, ácido trifluoroacético) em um solvente adequado, tal como diclorometano em uma tempera- tura adequada, tal como a temperatura ambiente.
Esquema 8.
H2N
O (19)
0P°
Etapa (i)
O
kA
Ic
(21)
P10 .O Il R8
Ns
OP8
OPc
(20)
Etapa (íi) R OP
R2-VcR5
O
(22)
H2N
6 v^ R6JI
Etapa
OPs
OP
R Etapa (iv)
O (23)
O EtapaV Ver esquema 4
Em que R1, R2, R3, R4 e R5 são como definidos acima e R6 = H ou F. P8, P9 e P10 representam grupos de proteção adequados, tal como alquil Ci^ nos casos de P8 e P9 (P8 e P9 não precisam ser os mesmos) e um grupo derivado de uma cetona acíclica ou cíclica adequada no caso de P10.
Os processos análogos aos descritos abaixo para as transformações esquematiza- das nas etapas de (i) a (iii) do Esquema 8 foram descritos anteriormente na literatura quími- ca (por Exemplo, J. Wehbe, et.al., Tetrahedron: Asymmetry., 14 ( 2003), 1123-1126).
A etapa (i) tipicamente compreende o tratamento de (19) com uma cetona adequa- da, tal como a (íf?,2R,5ft)-2-hidroxipinanona-3, e um ácido Lewis, tal como eterato de triflu- oreto de boro em um solvente adequado, tal como tolueno, em uma temperatura adequada, tal como 110 0C.
A etapa (ii) tipicamente compreende o tratamento de (20) com um reagente de
Grignard, tal como brometo de metil magnésio, e uma base, tal como 1,8-diazobiciclo [5,4.0] undeceno-7, seguido pelo tratamento com um éster não saturado (21), tal como crotonato de etila em um solvente adequado, tal como o tetraidrofurano, em uma temperatura ade- quada, tal como -30 0C.
A etapa (iii) tipicamente compreende um procedimento padrão da conversão de
uma imina a uma amina, tal como o tratamento com um ácido adequado (por Exemplo, áci- do cítrico aquoso a 15 %) em um solvente adequado, tal como o tetraidrofurano, em uma temperatura adequada, tal como a temperatura ambiente.
A etapa (iv) tipicamente compreende o aquecimento de (23) em um solvente ade- • 20 quado, tal como tolueno, em uma temperatura adequada tal como entre a temperatura am- biente e 120 0C.
A etapa (v) tipicamente compreende o processo descrito acima para as etapas mostradas no Esquema 4.
Esquema 9.
Em que R1, R4, R5 e R6 são como definidos acima, R2 e R3 cada um representa um
grupo como definido acima diferente do halogênio, L1 e L2 são grupos de partida adequados, tal como halogênio (por Exemplo, cloro ou bromo), e P11 representa um grupo de proteção adequado, tal como tritila.
A etapa (i) tipicamente compreende o tratamento de (25) com uma base, tal como hidreto de sódio e um agente de alquilação, tal como um haleto de alquila em um solvente adequado, tal como dimetilformamida, em uma temperatura adequada tal como entre 0 0C e a temperatura ambiente.
A etapa (ii) tipicamente compreende o tratamento de (26) com uma base, tal como diisopropilamida de lítio e um agente de alquilação, tal como um haleto de alquila em um solvente adequado, tal como o tetraidrofurano, em uma temperatura adequada tal como en- tre -78 0C e a temperatura ambiente.
A etapa (iii) tipicamente compreende o tratamento de (27) com uma base, tal como diisopropilamida de lítio e um agente de alquilação, tal como um haleto de alquila em um solvente adequado, tal como o tetraidrofurano em uma temperatura adequada tal como en- tre -78 0C e a temperatura ambiente. A etapa (iv) tipicamente compreende um procedimento padrão de desproteção de
um álcool. Por Exemplo, quando P11 é um grupo tritil, o tratamento de (28) com um ácido adequado, tal como Amberlyst 15® em um solvente adequado, tal como metanol e em uma temperatura adequada, tal como a temperatura ambiente.
A etapa (v) tipicamente compreende um protocolo padrão da oxidação de um álcool ao ácido carboxílico correspondente, tal como o tratamento do álcool (29) com um agente de oxidação, tal como uma combinação de cloreto de sódio, TEMPO (radical livre 2,2,6,6- tetrametil-1-piperidiniloxi) e alvejante (solução de hipoclorito de sódio) em um solvente ade- quado, tal como uma mistura de solução tampão aquosa de fosfato monobásico de sódio e acetonitrila em uma temperatura adequada, tal como 40 0C. A etapa (ii) ou a etapa (iii) podem ser omitidas conforme seja necessário para pre-
parar compostos onde R2 = H ou R3 = H respectivamente.
Os compostos das fórmulas gerais (3), (4), (5), (6), (7), (10), (12), (13), (17), (19), (21) e (25) estão tipicamente disponíveis de fontes comerciais ou podem ser preparados por uma pessoa experiente na técnica de utilização dos métodos descritos na literatura química (ou pela utilização de métodos análogos).
Onde relevante, os sais farmaceuticamente aceitáveis podem ser preparados con- vencionalmente pela reação com o ácido ou o derivado ácido adequados.
Indicações Clínicas.
Acredita-se que como os compostos de acordo com a presente invenção modulam a função de receptor da P2X7 e são capazes de antagonizar os efeitos do ATP no receptor da P2X7, eles podem ser úteis no tratamento da dor, incluindo a dor aguda, a dor crônica, a dor articular crônica, dor músculo esquelética, dor neuropática, dor inflamatória, dor visceral, dor associada com o câncer, dor associada com enxaqueca, dor de cabeça devido a tensão e dores de cabeça aglomeradas, dor associada com distúrbios funcionais do intestino, dor lombar e cervical, dor associada com distensões e luxações, dor mantida pelo sistema sim- pátio; a miosite, dor associada com a influenza ou outras infecções virais, tal como o resfria- do, dor associada com a febre reumática, dor associada com a isquemia do miocárdio, dor pós-operatória, quimioterapia de câncer, dor de cabeça, dor de dentes e dismenorréia.
As condições de dores articulares crônicas incluem a artrite reumatóide, osteroartri- te, espondilite reumatóide, a artrite gotosa e a artrite juvenil.
A dor associada com distúrbios funcionais do intestino inclui a dispepsia não ulcera- tiva, dor toráxica não cardíaca e síndrome do intestino irritável.
As síndromes das dores neuropáticas incluem: neuropatia diabética, a dor do nervo ciático, dor lombar não-específica, nevralgia do trigêmeo, dor da esclerose múltipla, fibromi- algia, neuropatia associada com HIV, nevralgia pós-herpética, nevralgia do trigêmeo, e dor resultante de ferimento físico, amputação, síndrome da dor de membro ilusório, cirurgia da espinha, câncer, toxinas ou condições inflamatórias crônicas. Além disso, as condições neu- ropáticas da dor incluem a dor associada com sensações normalmente não-dolorosas, tal como "alfinetadas e agulhadas" (parestesias e disestesias), sensibilidade aumentada ao toque (hiperestesia), sensação dolorosa depois de estimulação inócua (aloidina dinâmica, estática, térmica ou fria), sensibilidade aumentada a estímulos nocivos (hiperalgesia térmica, fria, mecânica), sensação contínua de dor após remoção de estímulo (hiperpatia) ou uma ausência de, ou na deficiência de caminhos sensoriais seletivos (hipoalgesia).
Outras condições que podem ser potencialmente tratadas pelos compostos de a - cordo com a presente invenção incluem febre, inflamação, doenças imunológicas, doenças das funções anormais das plaquetas (doenças vasculares por Exemplo, oclusivas), impo- tência ou disfunção erétil; doenças dos ossos caracterizada por metabolismo anormal ou reabsorção dos ossos; efeitos colaterais hemodinâmicos de drogas anti-inflamatórias não esteroidais (NSAID"S) e ciclooxigenase-2 (COX-2) os inibidores, doenças cardiovasculares; doenças neurodegenerativas e neurodegeneração, neurodegeneração seguida de trauma, zumbido no ouvido, dependência de um agente indutor de dependência, tais como opióides (por Exemplo, morfina), depressores de SNC (por Exemplo, etanol), psicoestimulantes (por Exemplo, cocaína) e nicotina; complicações da diabete do tipo I, disfunção renal, disfunção hepática (por Exemplo, hepatite, cirrose), disfunção gastrintestinal (por Exemplo, diarréia), câncer do cólon, bexiga demasiadamente ativa e incontinência de urgência. A depressão e o alcoolismo também podem ser potencialmente tratados por compostos de acordo com a presente invenção.
A inflamação e as condições inflamatórias associadas com a dita inflamação inclu- em condições da pele (por Exemplo, queimadura de sol, queimaduras, eczema, dermatites, dermatite alérgica, psoríase), meningite, doenças oftálmicas, tal como glaucoma, retinite, retinopatias, uveíte e com a lesão aguda do tecido ocular (por Exemplo, conjuntivite), distúr- bios pulmonares inflamatórios (por Exemplo, asma, bronquite, enfisema, rinite alérgica, sín- drome da aflição respiratória, doença do peito de pombo, pulmão de agricultor, doença pul- monar obstrutiva crônica (COPD), hipersensibilidade das vias aéreas); distúrbios do trato gastrintestinal (úlcera por Exemplo, aftosa, a doença de Crohn, gastrite atópica, gastrite va- rialoforme, colite ulcerativa, doença celíaca, ileíte regional, síndrome de intestino irritável, doença inflamatória do intestino, doença do refluxo gastrintestinal); transplante de órgãos e outras condições contendo um componente inflamatório, tal como a doença vascular, a en- xaqueca, periarterite nodosa, tiroidite, anemia aplásica, a doença de Hodgkin, esclerodoma, miastenia grave, esclerose múltipla, sarcoidose, síndrome nefrótica, síndrome de Bechet, gengivite, isquemia do miocárdio, pirexia, Iupus eritematoso sistêmico, polimiosite, tendinite, bursite e a síndrome de Sjogren.
As doenças imunológicas incluem doenças autoimunes, doenças de deficiência i- munológicas ou transplante de órgãos.
As doenças dos ossos caracterizadas pelo metabolismo anormal ou a reabsorção dos ossos incluindo osteoporose (especialmente a osteoporose pós-menopausa), hiper- calcemia, hiperparathyroidism, as doenças dos ossos de Paget, osteolysis, hipercalcemia da malignidade com ou sem metástases dos ossos, artrite reumatóide, periodontite, osteroartri- te, ostealgia, osteopenia, caquexia do câncer, cálculos, litíase (especialmente urolitíase), carcinoma sólido, gota e espondilite anquilosante, tendinite e bursite.
As doenças cardiovasculares incluem a hipertensão ou isquemia do miocárdio; ate- rosclerose; insuficiência venosa funcional ou orgânica; terapia varicosa; hemorróida; e os estados de choque associados com uma marcante queda na pressão arterial (por Exemplo, choque séptico).
As doenças neurodegenerativas incluindo a demência, particularmente a demência degenerativa (incluindo a demência senil, demência com corpos de Lewy, mal de Alzheimer, doença de Pick, coréia de Huntingdon, doença de Parkinson e doença de Creutzfeldt-Jakob, esclerose amiotrófica lateral (ALS) e doença motora de neurônio); demência vascular (inclu- indo a demência de multi-enfarte); bem como a demência associada com lesões de ocupa- ção do espaço intracraniano; feridas; infecções e condições relacioanadas (incluindo a in- fecção por HIV, a meningite e a herpes zoster); com o metabolismo; com toxinas; com anó- xia e com deficiência vitamínica; e ad eterioração cognitiva branda associada com o enve- lhecimento, particularmente a deterioração da memória associada coma idade. Os compostos de acordo com a fórmula (I) também podem ser úteis para neuropro-
teção e no tratamento da neurodegeneração pós-traumática, tal como após acidente vascu- lar, parada cardíaca, desvio pulmonar, ferimento traumático cerebral, trauma da medula es- pinhal ou semelhantes.
Os compostos de acordo com a presente invenção também podem ser úteis no tra- tamento do crescimento de células malignas e/ou na metástase, e na leucemia mioblástica.
As complicações da diabete do tipo 1 incluem microangiopatia diabética, retinopatia diabética, nefropatia diabética, degeneração macular, glaucoma, síndrome nefrótica, anemia aplásica, uveíte, doença de Kawasaki e sarcoidose.
A disfunção renal inclui a nefrite, glomerulonefrite, particularmente glomerulonefrite mesangial proliferativa e a síndrome nefrítica.
Deve ser compreendido que a referência para o tratamento inclui tanto o tratamento dos sintomas estabelecidos quanto o tratamento profilático, a menos que explicitamente seja afirmado de modo diferente.
De acordo com um aspecto adicional da presente invenção, é fornecido desse mo- do um composto de acordo com a fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para o uso medicinal humano ou veterinário. De acordo com outro aspecto da presente invenção, é fornecido um composto de
acordo com a fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso no tratamento de uma condição que seja mediada por receptores da P2X7.
De acordo com um aspecto adicional da presente invenção, é fornecido um método para o tratamento de um paciente humano ou animal que esteja sofrendo de uma condição que seja mediada por receptores da P2X7 que compreendem a administração ao dito paci- ente de uma quantidade eficaz de um composto de acordo com a fórmula (I) ou um sal far- maceuticamente aceitável do mesmo.
De acordo com um aspecto adicional da presente invenção é fornecido um método para o tratamento de um paciente humano ou animal que esteja sofrendo de dor, inflamação ou de uma doença neurodegenerativa, cujo método compreende a administração ao dito paciente de uma quantidade eficaz de um composto de acordo com a fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
De acordo ainda com um aspecto adicional da presente invenção é fornecido um método para o tratamento de um paciente humano ou animal que esteja sofrendo de dor inflamatória, dor neuropática ou dor visceral cujo método compreende a administração ao dito paciente de uma quantidade eficaz de um composto de acordo com a fórmula (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
De acordo com um aspecto adicional da presente invenção é fornecido um método para tratar um paciente, por Exemplo um paciente humano, que esteja sofrendo do mal de Alzheimer cujo método compreende a administração ao dito paciente de uma quantidade eficaz de um composto de acordo com a fórmula (I) ou de um sal farmaceuticamente aceitá- vel do mesmo. De acordo com outro aspecto da presente invenção, é fornecido o uso de um com- posto de acordo com a fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para a fabricação de um medicamento para o tratamento de uma condição que seja mediada pela ação de receptores da PlX7.
De acordo com outro aspecto da presente invenção é fornecido o uso de um com- posto de acordo com a fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para a fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção da dor, da inflama- ção ou de uma doença neurodegenerativa.
De acordo com outro aspecto da presente invenção é fornecido o uso de um com- posto de acordo com a fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para a fabricação de um medicamento para o tratamento ou a prevenção da dor inflamató- ria, dor neuropática ou dor visceral.
Em um aspecto de acordo com a presente invenção é fornecido o uso de um com- posto de acordo com a fórmula (I), ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para a fabricação de um medicamento para o tratamento ou a prevenção do mal de Alzhei- mer.
Para o uso de um composto de acordo com a fórmula (I), ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo, para o tratamento de seres humanos e outros mamíferos tal composto é normalmente formulado de acordo com a prática farmacêutica padrão como uma composição farmacêutica. Por isso, em outro aspecto de acordo com a presente inven- ção é fornecido uma composição farmacêutica compreendendo um composto de acordo com a fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, adaptado ao uso me- dicinal humano ou veterinário.
Para o uso dos compostos de acordo com a fórmula (I) em terapias, eles serão normalmente formulados em uma composição farmacêutica de acordo com a prática farma- cêutica padrão. A presente invenção também fornece uma composição farmacêutica, com- preendendo um composto de acordo com a fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo, e opcionalmente um veículo farmaceuticamente aceitável.
Uma composição farmacêutica de acordo com a presente invenção, que pode ser preparada pela mistura, apropriadamente na temperatura ambiente e na pressão atmosféri- ca, é normalmente adaptada à administração oral, parenteral ou retal e, como tal, pode estar na forma de pílulas, cápsulas, preparações líquidas orais, pó, grânulos, drágeas, pó recons- tituível, soluções injetáveis ou para infusão ou suspensão ou supositórios. As composições para administração oral são geralmente as preferidas.
As pílulas e as cápsulas para administração oral podem estar na forma de dose Cí- nica, e podem conter excipientes convencionais, tais como agentes de ligação, agentes de carga, lubrificantes para tabletagem, desintegrantes e agentes umectantes aceitáveis. As pílulas podem ser cobertas de acordo com os métodos bem conhecidos da prática farma- cêutica normal.
As preparações líquidas orais podem estar na forma de, por Exemplo, suspensões aquosas ou oleosas, soluções, emulsões, xaropes ou elixires, ou podem estar na forma de um produto seco para reconstituição com a água, ou outro veículo adequado, antes do uso. Tais preparações líquidas podem conter aditivos convencionais, tal como agentes de sus- pensão, agentes emulsionantes, veículos não-aquosos (que podem incluir óleos comestí- veis), preservativos e, se desejado, aromatizantes e corantes convencionais.
Para a administração parenteral, as formas fluidas de dosagem única são prepara- das utilizando um composto de acordo com a presente invenção, ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, e um veículo estéril. O composto, dependendo do veículo e da concen- tração usada, pode ser ou suspenso ou dissolvido no veículo. Na preparação de soluções, o composto pode ser dissolvido para injeção e esterilizado por filtragem antes de ser cheio em um frasco ou ampola adequados e selado. Vantajosamente, os adjuvantes, tal como um anestético local, preservativos e agentes de tamponamento são dissolvidos no veículo. Para melhorar a estabilidade, a composição pode ser congelada depois de preenchida no frasco e a água retirada sob vácuo. A suspensão parenteral é preparada substancialmente da mesma maneira, exceto que o composto é suspenso no veículo em vez de ser dissolvido, e a ésterilização não pode ser realizada por filtração. O composto pode ser ésterilizado pela exposição ao óxido de etileno antes de ser feita a suspensão em um veículo estéril. Vanta- josamente, um tensoativo ou um agente umectante estão incluídos na composição para faci- litar a distribuição uniforme do composto.
A composição pode conter de 0,1 % em peso a 99 % em peso, preferível mente de % em peso a 60 % em peso, do material ativo, dependendo do método de administração. A dose do composto usado no tratamento dos distúrbios acima mencionados varia-
rá em relação ao modo habitual dependendo da gravidade dos distúrbios, do peso do paci- ente, e de outros fatores semelhantes. Entretanto, como um guia geral as doses unitárias adequadas podem ser de 0,05 mg a 1000 mg, mais apropriadamente de 0,05 mg a 200 mg, por Exemplo, de 20 mg a 40 mg; e tais doses unitárias serão preferivelmente administradas uma vez por dia, embora a administração de mais do que uma vez por dia possa ser neces- sária; e tal terapia pode se estender por diversas semanas ou meses.
Todas as publicações, incluindo mas não se limitando às Patentes e aos Pedidos de Patente citados no presente Relatório Descritivo, são aqui incorporadas pela referência como se cada publicação individual fosse especificamente e individualmente indicada para ser aqui incorporada pela referência como se fosse completamente descrita.
As seguintes Descrições e Exemplos ilustram a preparação de compostos de acor- do com a presente invenção mas não são destinados a serem limitantes. Exemplos:
Os métodos gerais de (a) a (d), juntamente com os métodos de síntese esquemati- zados nos Esquemas de 1 a 9 acima, para a preparação dos compostos de acordo com a presente invenção, são também ilustrados pelos seguintes Exemplos.
A 5-oxo-l-(fenil metil)-prolina (0,176 g, 0,80 mmol, preparado tal como descrito a- baixo) foi dissolvida em diclorometano (3 ml) e à mesma foi acrescentado 1- hidroxibenzotriazol (0,119 g, 0,88 mmol), trietilamina (0,113 ml, 0,81 mmol), [(2-cloro-4- fluorofenil) metil] amina (0,134 g, 0,84 mmol) e cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'- etilcarbodiimida (0,169 g, 0,88 mmol) sob uma atmosfera de argônio. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com diclorometano e lavada em seqüência com solução aquosa de ácido clorídrico 2M e solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. A camada orgânica foi filtrada por um separador de fase e depois e- vaporada para fornecer o produto bruto. O material bruto foi purificado por HPLC automati- zado por direcionamento de massa para produzir /\/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-5-oxo-1- (fenil metil) - prolinamida (0,112 g) pura como um sólido branco. LC/MS [M+H] + = 361,2, tempo de retenção = 2,55 minutos.
rada como se segue:
(i) O cloridrato de dimetil L-glutamato (0,500 g, 2,37 mmol) foi dissolvido em meta- nol (10 ml) e resfriado a 0 0C. A mistura foi então tratada com hidróxido de sódio (0,099 g, 2,49 mmol) seguido pelo ácido acético (0,136 ml, 2,37 mmol) e benzaldeído (0,361 ml, 3,55 mmol). Depois de misturado durante 10 minutos a 0 0C, o boroidreto de sódio (0,088 g, 2,37 mmol) foi acrescentado e deixou-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente e agitada durante a noite. A mistura foi novamente resfriada a 0 0C e tratada com uma nova quantidade de boroidreto de sódio (0,044 g, 1,18 mmol). Deixou-se novamente que a mistu- ra se aquecesse à temperatura ambiente e agitada durante a noite. A evaporação do meta- nol produziu um resíduo que foi solubilizado em acetato de etila e filtrado. O filtrado foi então lavado com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio, filtrado por um separa- dor de fase (com agitação) e evaporada para produzir um óleo claro (0,56 g). O óleo foi dis- solvido em metanol e aquecido em um tubo selado em um reator de microonda a 120 0C durante 10 minutos e depois durante 15 minutos a 140 0C (a LC/MS indicou que esta fase
5
Exemplo 1.
A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-5-oxo-1-(fenil metil)-prolinamida (E1).
A 5-oxo-1-(fenil metil)-prolina usada no procedimento acima mencionado foi prepa- de aquecimento não tinha alterado significativamente a composição da mistura). O solvente foi evaporado e o resíduo purificado por cromatografia em flash em uma coluna de sílica, eluindo com um gradiente de 15 % a 20 % de acetato de etila em hexano, para produzir me- til 5-oxo-l-(fenil metil)-prolinato (0,212 g) puro como um óleo claro. LC/MS [M+H] + = 234, tempo de retenção = 2,15 minutos.
(ii) O metil 5-oxo-l-(fenil metil)-prolinato (0,212 g, 0,91 mmol) foi dissolvido em água (3 ml) e metanol (0,5 ml) e tratado com hidróxido de sódio aquoso 2M (0,682 ml, 1,36 mmol). A mistura foi agitada durante a noite na temperatura ambiente e depois lavada com dicloro- metano. A camada aquosa foi evaporada e o resíduo tratado com um excesso de ácido clo- rídrico 1 M em éter (aproximadamente 5 ml). A mistura foi evaporada mais uma vez e o re- síduo foi triturado com diclorometano. O material sólido foi descartado e as frações de diclo- rometano combinadas foram evaporadas para produzir 5-oxo-1-(fenil metil)-prolina (0,182 g) como um óleo amarelo que foi usado sem purificação adicional.
A 1 -(1-metil etil)-5-oxo-prolina (0,060 g, 0,35 mmol, preparada como descrito abai- xo) foi dissolvida em diclorometano (3 ml) e dimetilformamida (1 ml) e à mesma foi acres- centado 1-hidroxibenzotriazol (0,052 g, 0,39 mmol), [(2-cloro-4-fluorofenil) metil] amina (0,061 g, 0,39 mmol) e cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,074 g, 0,39 mmol) sob uma atmosfera de argônio. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com diclorometano e lavada em seqüência com uma solução aquosa de ácido clorídrico 2M e uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. A camada orgânica foi filtrada por um separador de fase e depois evaporada para fornecer o produto bruto. O material bruto foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir /\/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-(1-metil etil)-5-oxo- prolinamida (0,032 g) pura como um sólido branco. LC/MS [M+H]+ = 313,1, tempo de reten- ção = 2,26 minutos.
rada como se segue:
(i) O cloridrato de dimetil L-glutamato (0,500 g, 2,37 mmol) foi dissolvido em meta- nol (4 ml) e tetraidrofurano (8 ml) e a mistura depois foi tratada com o hidróxido de sódio moído (0,099 g, 2,49 mmol) durante 10 minutos. Nesta etapa o ácido acético (0,136 ml, 2,37 mmol) e a acetona (0,261 ml, 3,55 mmol) foram acrescenteados em conjunto à mistura co-
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LC/MS [M+H]+ = 220, tempo de retenção = 1,72 minutos. Exemplo 2.
/\/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1 - (1-metil etil)-5-oxo-prolinamida (E2).
A 1-(1-metil etil)-5-oxo-prolina usada no procedimento acima mencionado foi prepa- mo uma solução em tetraidrofurano (1 ml). Depois de agitar durante 10 minutos a mistura foi resfriada a 0 0C e tratada com pastilhas de boroidreto de sódio (0,088 g, 2,37 mmol). Então deixou-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente e fosse agitada durante a noite. A evaporação do metanol produziu um resíduo que foi solubilizado em acetato de etila e filtrado. O filtrado depois foi lavado com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio, filtrado por um separador de fase (com agitação) e evaporado para produzir um óleo claro (0,217 g). O óleo foi purificado por cromatografia em flash em uma coluna de sílica para produzir dimetil A/-glutamato (1-metil etil) (0,200 g) puro.
aquecido em um tubo selado em um reator de microonda a 140 0C durante 20 minutos. A cromatografia em camada fina indicou que o material de partida permaneceu intacto de mo- do que o solvente foi evaporado e substituído pelo tolueno. A mistura foi aquecida na tempe- ratura de refluxo por aproximadamente 3 horas e depois evaporada para produzir o 1-(1- metil etil)-5-oxo-prolinato de metila (0,152 g) como um óleo amarelo claro que foi usado na etapa subseqüente sem purificação adicional.
(iii) O 1-( 1-metil etil)-5-oxo-prolinato de metila (0,152 g, 0,82 mmol) foi dissolvido em água (3 ml) e metanol (0,5 ml) e tratado com hidróxido de sódio aquoso 2M (0,682 ml, 1,36 mmol). A mistura foi agitada por aproximadamente 4 horas na temperatura ambiente e de- pois lavada com diclorometano. A camada aquosa foi evaporada e o resíduo tratado com um excesso do ácido clorídrico 1 M em éter (aproximadamente 5 ml). A mistura foi evapora- da mais uma vez e o resíduo foi triturado com diclorometano. O material sólido foi descarta- do e as frações de diclorometano combinadas foram evaporadas para produzir 1-(1-metil etil)-5-oxo-prolina (0,060 g) como um óleo amarelo que se cristalizou em repouso.
O 1-etil-5-oxo-prolinato de metila (0,135 g, 0,79 mmol, preparado tal como descrito abaixo) foi dissolvido em metanol (4 ml) e tratado com hidróxido de sódio aquoso 2M (0,592 ml, 1,18 mmol). A mistura foi agitada por aproximadamente 4 horas na temperatura ambien- te e depois evaporada para produzir um resíduo que depois foi tratado com um excesso de ácido clorídrico 1M em éter (aproximadamente 5 ml) durante 10 minutos. A mistura foi eva- porada mais uma vez e o resíduo foi dissolvido em diclorometano (4 ml) e dimetilformamida (2 ml) e filtrado para remoção dos sólidos. A solução resultante foi transferida para um tubo de reação e então foram acrescentados 1-hidroxibenzotriazol (0,117 g, 0,87 mmol), [(2- cloro-4-fluorofenil) metil] amina (0,138 g, 0,87 mmol) e cloridrato de N-{3-dimetil amino pro-
(ii) O dimetil /V-glutamato (1-metil etil) (0,200 g) foi dissolvido em metanol e
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Exemplo 3.
A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-etil-5-oxo-prolinamida (E3).
F pil)-N'-etilcarbodiimida (0,167 g, 0,87 mmol). A mistura foi borbulhada com argônio e depois agitada na temperatura ambiente durante o fim de semana. A mistura foi então diluída com diclorometano e lavada em seqüência com uma solução aquosa de ácido clorídrico 2M e uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. A camada orgânica foi filtrada por um separador de fase e depois evaporada para fornecer o produto bruto. O material bruto foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir a N-[(2-cloro- 4-fluorofenil) metil]-1-etil-5-oxo-prolinamida (0,086 g) como um sólido branco. LC/MS [M+H]+ = 299,1, tempo de retenção = 2,13 minutos.
Excesso Enanciomérico = 100,0 %, tal como determinado por cromatografia quiral, método B, indicativo da /\/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-etil-5-oxo-L-prolinamida, tempo de retenção = 8,05 minutos.
O 1-etil-5-oxo-prolinato de metila usado no procedimento acima mencionado foi preparado como se segue:
(i) O cloridrato de dimetil L-glutamato (0,500 g, 2,37 mmol) foi dissolvido em meta- nol (4 ml) e tetraidrofurano (8 ml) e a mistura foi então tratada com o hidróxido de sódio mo- ído (0,099 g, 2,49 mmol) durante 10 minutos. Nesta etapa o ácido acético (0,136 ml, 2,37 mmol) e o acetaldeído (0,199 ml, 3,55 mmol) foram acrescentados em conjunto à mistura como uma solução em tetraidrofurano (1 ml). Depois de agitar durante 10 minutos a mistura foi resfriada a 0 0C e tratada com pastilhas de boroidreto de sódio (0,088 g, 2,37 mmol). En- tão deixou-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente. Uma vez que a mistura tinha atingido a temperatura ambiente ela foi diluída com o acetato de etila (30 ml) e lavada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio, filtrada por um separador de fase (com agitação) e evaporada para produzir um resíduo oleoso. O óleo foi dissolvido em tolueno e aquecido sob refluxo de 4 horas. Para assegurar a reação completa a mistura foi então aquecida durante a noite sob refluxo. O solvente foi então evaporado e o resíduo re- sultante foi purificado por cromatografia em flash em uma coluna de sílica, eluindo com um gradiente de acetato de etila de 30 % a 50 % em hexano, para produzir 1-etil-5-oxo-prolinato de metila bruto (0,135 g) como um óleo claro que foi usado sem purificação adicional.
Exemplos 4 a 8.
De uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 3 acima, os compostos tabelados abaixo (Tabela 1) foram preparados substituindo o aldeído (ou cetona) adequado pelo acetaldeído usado no procedimento acima mencionado. Todos dos aldeídos e cetonas usados para fazer os compostos mostrados na Tabela 1 ou estão disponíveis de fontes co- merciais ou podem ser preparados usando vias anteriormente descritas na literatura quími- ca.
Tabela 1.
Exemplo Nome Químico [M+H]+ Tempo de N0 retenção (min) E4 η=/"""! H [ || ^ o a N-[(2 -cloro -4 - fluorofenil) metil] -5 - oxo -1 - propil - prolinamida 313,1 2,30 E5 I H Ij O Cl N-[(2 -cloro -4 - fluorofenil) metil] -1- (2- metil propil) -5 -oxo - prolinamida 327,1 2,46 E6 O 0 ° N-[(2 -cloro -4 - fluorofenil) metil] -1- ciclopentil - 5 -oxo - prolinamida 339,1 2,47 E7 6 ° a N-[(2 -cloro -4 - fluorofenil) metil] -1- ciclobutil - 5 -oxo - prolinamida 325 2,37 E8 0 Cl N-[(2 -cloro -4 - fluorofenil) metil] -1- (1- metil propil) -5 -oxo -prolinamida 327 2,43
Exemplo 9.
A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-5-oxo-1 -fenil-prolinamida (E9).
o ca
A 5-oxo-1-fenil-prolina (0,047 g, 0,23 mmol, preparado tal como descrito abaixo) foi dissolvida em diclorometano (aproximadamente 2 ml) e dimetilformamida (1 ml) e à mesma foram acrescentados 1-hidroxibenzotriazol (0,034 g, 0,25 mmol), [(2-cloro-4-fluorofenil) metil] amina (0,040 g, 0,25 mmol), N-etil morfolina (0,032 ml, 0,25 mmol) e cloridrato de N-(3- dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,048 g, 0,25 mmol). A mistura foi agitada na tem- peratura ambiente por 4,5 horas. A mistura foi diluída com mais diclorometano e lavada em seqüência com solução aquosa de ácido clorídrico 2M e solução aquosa saturada de bicar- bonato de sódio. A camada orgânica foi filtrada por um separador de fase e depois evaporada para fornecer o produto bruto. O material bruto foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir /\/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-5- oxo-1-fenil-prolinamida (0,032 g) como um sólido branco. LC/MS [M+H]+ = 347,1, tempo de retenção = 2,51 minutos.
A 5-oxo-1-fenil-prolina usada no procedimento acima mencionado foi preparada como se segue:
(i) O 5-oxo-L-prolinato de metila (0,204 ml, 1,75 mmol) foi dissolvido em tolueno (5 ml) e tratado com tris (dibenzilideno acetona) dipaládio(O) (0,024 g, 0,03 mmol), bromoben- zeno (0,184 ml, 1,75 mmol), carbonato de césio (0,795 g, 2,45 mmol) e Xantphos® (0,040 g, 0,07 mmol). A mistura resultante foi aquecida a 120 0C por aproximadamente 18 horas e depois deixada resfriar à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com o acetato de etila e lavada em seqüência com solução aquosa de ácido clorídrico 2M, solução aquosa satura- da de bicarbonato de sódio, e salmoura. A filtração por um separador de fase seguido pela evaporação produziu um óleo amarelo/marrom (aproximadamente 0,200 g). O material bruto foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir 5-oxo-1- fenilprolinato de metila puro (0,054 g) como um óleo que se cristalizou em repouso. LC/MS [M+H]+ = 220, tempo de retenção = 2,03 minutos. (ii) O 5-oxo-1-fenilprolinato de metila (0,054 g, 0,25 mmol) foi combinado com hidró-
xido de sódio aquoso 2M (0,160 ml, 0,32 mmol) em metanol (1 ml) e agitado durante a noite na temperatura ambiente. O solvente foi então evaporado e o resíduo solubilizado em aceta- to de etila e lavado com solução aquosa de ácido clorídrico 2M. A camada aquosa foi sepa- rada e lavada duas vezes mais com o acetato de etila e depois as camadas de acetato de etila combinadas foram secas usando um separador de fase e evaporadas para produzir a 5-oxo-1-fenil-prolina (0,047 g) como um óleo claro.
Exemplo 10.
/V-[(2,4-diclorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-prolinamida (E10).
o-
o ei
A 1-metil-5-oxo-prolina (0,057 g, 0,4 mmol, preparada tal como descrito abaixo) foi dissolvida em diclorometano anidro (6 ml) e à mesma foram acrescentados 1- hidroxibenzotriazol (0,060 g, 0,4 mmol), [(2,4-dicloro-fenil) metil] amina (0,055 ml, 0,4 mmol), diisopropilamina (0,140 ml, 0,8 mmol) e hexafluorofosfato de o-(7-azobenzotriazolil-1) - Ν,Ν,Ν',Ν'-tetrametilurônio (0,152 g, 0,4 mmol). A mistura foi agitada na temperatura ambien- te (20 0C) sob argônio por 3 horas e depois durante a noite. A mistura foi diluída com mais diclorometano (25 ml) e lavada em seqüência com solução aquosa de ácido clorídrico 2M (20 ml), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (20 ml), carbonato de sódio a- quoso a 10 % (20 ml) e salmoura (20 ml). A camada orgânica foi filtrada por cerâmica hidro- fóbica sinterizada e depois evaporada para fornecer o produto bruto. O material bruto foi dissolvido em uma mistura de dimetilsulfóxido (0,9 ml) e acetonitrila (0,9 ml) e depois purifi- cado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir N-[(2,4- diclorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-prolinamida (0,085 g) como um sólido branco. LC/MS [M+H] + = 301, tempo de retenção = 2,16 minutos.
O 1-metil-5-oxo-prolina usado no procedimento acima mencionado foi preparado como se segue:
(i) o ácido A/-metil-L-glutâmico (0,500 g, 3,1 mmol) foi dissolvido em água (1 ml) e aquecido em um tubo selado a 140 0C durante 30 minutos em um reator de microondas. A água foi então evaporada e o resíduo triturado com éter para fornecer, depois da secagem, 1-metil-5-oxo-prolina (0,298 g) como um sólido branco. A A/-[(2,4-diclorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-prolinamida também pode ser preparada
como descrito abaixo:
A 1- metil-5-oxo-prolina (36,79 g, 0,257 moles, preparado como descrito acima) foi suspensa em DCM (diclorometano) (500ml). EEDQ (2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2- diidroquinolina, 66,7 g, 0,27 moles, 1,05 eq) foi acrescentada em uma única porção. Todo o material pareceu dissolver-se para produzir uma mistura opaca e a temperatura caiu de 21 0C a 10 0C. A solução foi agitada durante 20 minutos sob argônio e depois uma solução de 2,4-diclorobenzilamina (36 ml, 0,27 moles, 1,05 eq) em DCM (100 ml) foi acrescentada gota a gota durante um período de 40 minutos. Durante a adição, um precipitado branco foi for- mado no funil de decantação. A mistura gerou bolhas suavemente e um banho de gelo/de água foi usado para manter a temperatura entre 15 0C e 20 0C. Depois da adição completa de amina, o funil de decantação foi enxaguado com DCM (50ml) adicional para enxaguar todo o precipitado na mistura de reação. Então permitiu-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente e agitada durante aproximadamente 18 horas. Uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (200ml) foi acrescentada à mistura e agitado durante 5 minutos. A camada orgânica foi então separada e lavada com HCI (3 χ 250 ml) 2N. Durante as lavagens ácidas, os cristais começaram a se formar na camada orgânica, de modo que foram diluídos com a adição de mais DCM (200ml). A camada orgânica foi seca passando por cerâmica hidrofóbica sinterizada e depois concentrada sob vácuo para produzir 65 g de sólidos cor de rosa. Os sólidos tinham formado grandes pedaços portanto o material bruto foi moído em gral com pistilo. Eles foram então triturado com o éter dietílico (400 ml) e os sólidos retirados por filtração e lavados com mais Et2O (2 χ 200ml). A secagem então produ- ziu 52,96 g de sólidos cor de rosa pálidos. Este material foi combinado com 2 novas batela- das, preparadas do mesmo modo, (141,42 g no total) e depois foi suspenso em etanol (430 ml) e água (715 ml) e gradualmente aquecido a 65 0C (temperatura da solução). A mistura produziu uma solução quase clara (cor de rosa profundo), exceto por uma suspensão sólida muito fina. Depois de aquecido a 65 0C durante 20 minutos, o frasco foi retirado do calor e deixado atingir a temperatura ambiente durante a noite. Depois deste tempo, agulhas bran- cas tinham se precipitado da solução. A mistura foi resfriada em um banho de gelo durante minutos para assegurar que todos os sólidos tinham precipitado. Os sólidos brancos en- tão foram filtrados da solução cor de rosa e lavados com porções de 3:5 Et0H/H20 (2 χ 400 ml), resfriadas em um banho de gelo. Os sólidos foram secos em um forno a vácuo (40 °C) para um total de 5 dias para produzir a A/-[(2,4-diclorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-prolinamida (125,37 g) como cristais incolores. LC/MS [M+H]+ = 301, tempo de retenção = 2,34 minutos.
1H RMN (CDCI3, 500MHz) δ 2,01 (m, 1H), 2,34 (m, 1H), 2,37 (m, 1H), 2,46 (m, 1H), 2,80 (s, 3H), 3,99 (dd, 1 H, J = 9,1, 4,2 Hz), 4,49 (dd, 1 H, J = 14,9, 5,9 Hz), 4,55 (dd, 1 H, J = 14,8, 6,1 Hz), 6,56 (largo t, 1 H, J = 5,7 Hz), 7,24 (dd, 1H, J = 8,2, 2,1 Hz), 7,33 (d, 1 H, J = 8,2 Hz), 7,40 (d, 1 H1J = 2,1 Hz);
13C NMR δ 175,9, 171,3, 134,5, 134,3, 133,7, 131,5, 129,6, 127,5, 63,8, 41,2, 29,4, 29,2, 23,4.
Excesso Enanciomérico = 99,5 %, como determinado por cromatografia quiral mé- todo A1 indicativo de A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-L-prolinamida, tempo de retenção = 9,89 minutos
[σ] o = -2,1 ° (c = 1, MeOH), Temperatura = 29,3 °C, comprimento de onda = 589 nm, ponto de fusão = 144,0 0C a 144,8 0C.
dissolvida em diclorometano anidro (aprox 7 ml) e à mesma foram acrescentados 1- hidroxibenzotriazol (0,047 g, 0,42 mmol), [(2-cloro-4-fluorofenil) metil] amina (0,056 ml, 0,42 mmol), N-etil morfolina (0,166 ml, 1,04 mmol) e cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'- etilcarbodiimida (0,067 g, 0,42 mmol). A mistura foi agitada na temperatura ambiente duran- te a noite. Uma alíquota adicional de [(2-cloro-4-fluorofenil) metil] amina (0,100 ml, 0,8 mmol)
Exemplo 11:
/V-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-prolinamida (E11).
30
A 1 -metil-5-oxo-prolina (0,050 g, 0,35 mmol, preparado tal como descrito abaixo) foi foi acrescentada à mistura e a agitação continuou durante mais algum tempo mas a HPLC indicou que nenhum produto adicional se formou. A mistura foi lavada em seqüência com solução aquosa de ácido clorídrico 2M (5 ml) e solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (5 ml). A camada orgânica foi reunida e evaporada para fornecer o produto bruto. O material bruto foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-prolinamida (0,015 g) como um sólido branco. LC/MS [M+H]+ = 285, tempo de retenção = 2,04 minutos.
A 1-metil-5-oxo-prolina usado no procedimento acima mencionado foi preparada como se segue:
(i) o éster metílico do ácido (L)-piroglutâmico (1 g, 6,99 mmol) foi dissolvi- do/misturado com tetraidrofurano (10 ml) e resfriado a 0 0C usando o banho de gelo. O hi- dreto de sódio (0,201 g de uma suspensão de 60 % emleo, 8,38 mmol) foi acrescentado à mistura. Depois de terminada a produção de borbulhas, iodeto de metila (0,522 ml, 8,38 mmol) foi acrescentado e permitiu-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente e depois agitada durante 1 hora. O solvente foi evaporado e a água foi acrescentada (1 ml). A camada aquosa foi então extraída com diclorometano. A evaporação do diclorometano pro- duziu o 1-metil - 5-oxo-prolinato de metila bruto (0,308 g) que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional.
(ii) O 1-metil-5-oxo-prolinato de metila (0,308 g, 1,96 mmol) foi dissolvido em meta- nol (aprox. 10 ml) e ao mesmo foi acrescentada uma solução de hidróxido de sódio (0,157 g, 3,92 mmol) em água (aproximadamente 10 ml). A mistura foi aquecida sob refluxo de 3 ho- ras, depois resfriada e evaporada para deixar de uma quantidade mínima de água. Ela foi acidificada ao pH 1 com a utilização solução aquosa de ácido clorídrico 2M. A camada a- quosa foi lavada com diclorometano e depois separada e evaporada para produzir 1-metil-5- oxo-prolina como um sólido branco (0,300 g).
Exemplo 12.
1 -etiΙ-5-οχο-Λ/-[(2,3,4-trifIuorofeηiI) metil]-prolinamida (E12).
1-etil-5-oxo-prolina (0,050 g, 0,32 mmol) foi dissolvida em diclorometano anidro (aproximadamente 7 ml) e dimetilformamida (1 ml) e à mesma foram acrescentados 1- hidroxibenzotriazol (0,052 g, 0,38 mmol), [(2,3,4-trifluorofenil) metil] amina (0,103 g, 0,64 mmol), N-etil morfolina (0,151 ml, 0,95 mmol) e Cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'- etilcarbodiimida (0,073 g, 0,38 mmol). A mistura foi agitada na temperatura ambiente duran- te o fim de semana. Uma alíquota adicional de [(2,3,4-trifluorofenil) metil] amina (0,051 g, 0,32 mmol) foi acrescentada à mistura e a agitação continuou durante mais algum tempo até que a HPLC indicasse que nenhum produto adicional se formou. A mistura foi diluída com solução aquosa de ácido clorídrico 2M (5 ml) e depois filtrada por um separador de fase. A camada orgânica foi então lavada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio e novamente filtrada por um separador de fase. A camada orgânica foi então evapora- da para fornecer o produto bruto. O material bruto foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir a 1 etil- 5-oxo-A/-[(2,3,4-trifluorofenil) metil]- prolinamida (0,032 g) pura.
LC/MS [M+H]+ = 301, tempo de retenção = 2,03 minutos.
A 1-etil-5-oxo-prolina usada no procedimento acima mencionado foi preparada co- mo se segue (Método A): (i) O cloridrato de dimetil L-glutamato (5,0 g, 23,7 mmol) foi dissolvido em metanol
(100 ml) e a mistura foi então tratada com o hidróxido de sódio moído (1,0 g, 24,9 mmol) sob argônio na temperatura ambiente. Depois de 5 minutos, acetaldeído (1,99 ml, 35,5 mmol) foi acrescentado e a agitação continuou durante 10 minutos. A mistura foi resfriada a 0 0C e tratada com o boroidreto de sódio em grânulos (0,701 g, 18,95 mmol). A agitação foi conti- nuada durante 1 hora a 0 0C e depois o metanol foi evaporado e o resíduo foi solubilizado em acetato de etila e filtrado. O filtrado foi então lavado com a salmoura e a lavagem de salmoura foi extraída com o acetato de etila. As frações de acetato de etila combinadas fo- ram filtradas por cerâmica hidrofóbica sinterizada e evaporadas para produzir um óleo claro (3,2 g). O óleo foi dissolvido em tolueno (30 ml) e aquecido sob refluxo durante a noite. O tolueno foi então evaporado para produzir um resíduo cor de laranja claro que foi purificado por cromatografia em flash em uma coluna de sílica, eluindo com um gradiente de acetato de etila de 20 % a 60 % em hexano, para produzir 1-etil-5-oxo-prolinato de metila parcial- mente puro (1,9 g) como um óleo claro. Que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional.
(ii) 1-etil-5-oxo-prolinato de metila (1,91 g, 11,17 mmol) foi dissolvido em metanol
(25 ml) e tratado com hidróxido de sódio aquoso 2M (7,3 ml, 14,52 mmol). A mistura foi agi- tada por 4 horas na temperatura ambiente e depois lavada com diclorometano. A camada aquosa foi evaporada e o resíduo tratado com um excesso do ácido clorídrico 1 M em éter (aproximadamente 5 ml). A mistura foi evaporada mais uma vez e o resíduo foi triturado com diclorometano. O material sólido foi descartado e as frações de diclorometano combinadas foram evaporadas para produzir um óleo claro que se cristalizou em repouso. A trituração com hexano e éter e a secagem produziu 1-etil-5-oxo-prolina puro (0,271 g) como um sólido branco.
Alternativamente, o 1-etil-5-oxo-prolina pode ser preparado como se segue (Método
B):
(i) 1,1-dimetil etil 5-oxo-L-prolinato (2,7 g, 12 mmol, preparado tal como descrito no Synth. Comm., 2005, 35 (8), 1129) foi acrescentado a uma suspensão de hidreto de sódio (0,428 g (suspensão de 60 % em óleo), 10,7 mmol) em tetraidrofurano (6 ml) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 5 minutos. O iodeto de etila (1,67 g, 10,7 mmol) então foram acrescentados e a mistura foi aquecida a 40 0C por 2 horas. Uma nova quanti- dade de hidreto de sódio (0,24 g) foi acrescentada e a agitação continuou durante a noite na temperatura ambiente. Uma quantidade adicional de iodeto de etila (0,86 ml) foi acrescenta- da à mistura nesta etapa e deixou-se que a mistura atingisse a temperatura ambiente duran- te o fim de semana. A água (aproximadamente 10 ml) foi acrescentada à mistura e ela foi agitada durante 15 minutos. O tetraidrofurano foi evaporado e a camada aquosa restante foi extraída com diclorometano (2 χ 50 ml) e uma mistura 3:1 de clorofórmio e isopropanol (50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram filtradas por cerâmica hidrofóbica sinterizada e evaporadas para produzir um óleo amarelo. O tolueno foi acrescentado à mistura e depois evaporada a um óleo amarelo mais uma vez. Este material foi purificado por cromatografia flash automatizada em coluna de sílica-gel (Biotage SP4), eluindo com um gradiente de 15% a 100 % de acetato de etila em hexano, para produzir 1,1-dimetil etil 1-etil-5-oxo-prolinato puro.
(ii) O 1,1-dimetil etil 1-etil-5-oxo-prolinato (0,965 g) foi dissolvido em diclorometano (aproximadamente 5 ml) e tratado com o ácido trifluoroacético (1 ml). A mistura foi agitada na temperatura ambiente por 1,5 horas e depois evaporada. O material resultante foi em grande parte o material de partida e assim uma nova quantidade de ácido trifluoroacético (1 ml) e diclorometano (aproximadamente 5 ml) foi acrescentada e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 36 horas. A mistura foi evaporada e depois o tolueno foi acres- centado ao resíduo e o mesmo foi por sua vez também evaporado. Depois de repetir este processo mais uma vez, o 1-etil-5-oxo-prolina bruto foi obtido como um óleo amarelo escuro que foi usado sem purificação adicional.
Alternativamente, a 1-etil-5-oxo-prolina pode ser preparada como se segue (Método
C):
(i) cloridrato de 1-( 1,1-dimetil etil) 5-metil-L-glutamato (5,0 g, 19,71 mmol) foi dissol- vido em uma mistura do metanol (30 ml) e tetraidrofurano (60 ml) e a mistura foi então trata- da com hidróxido de sódio moído em pó (0,828 g, 20,69 mmol) sob argônio na temperatura ambiente. Depois de agitar durante 10 minutos, acetaldeído (1,11 ml, 19,71 mmol) e ácido acético (1,13 ml, 19,71 mmol) foram acrescentados e a agitação continuou durante 10 a 15 minutos. A mistura foi resfriada a 0 0C em banho de gelo e tratada com pastilhas de boroi- dreto de sódio (0,746 g, 19,71 mmol). A agitação foi continuada durante-1 hora a 0 0C sob argônio. Permitiu-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente para produzir uma suspensão espessa. Os sólidos brancos finos foram extraídos por filtração e depois o meta- nol foi evaporado e o resíduo foi tomado em diclorometano (aproximadamente 50 ml) e la- vado com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (aproximadamente 25 ml). A camada orgânica foi separada usando um separador de fase e depois a camada aquosa foi extraída novamente com mais diclorometano (2 χ 20 ml). As camadas orgânicas combi- nadas foram evaporadas para produzir um óleo inclolor (aproximadamente 4 g). O óleo (3g, assumido 14,8 mmol) foi dissolvido em tolueno (30 ml) e aquecido sob refluxo de aproxima- damente16 horas durante a noite para produzir uma solução cor de laranja. O tolueno foi então evaporado para produzir um óleo cor de laranja (2,6 g). Isto foi combinado com um novo lote de óleo (0,850 g) que foi obtido na mesma maneira e depois purificado por croma- tografia flash automatizada em coluna de sílica-gel (Biotage SP4), eluindo com um gradiente de acetato de etila de 20 % a 80 % em hexano, para produzir 1,1-dimetil etil 1 -etil-5- oxoprolinato puro (2,14 g).
(ii) 1,1-dimetil etil 1-etil-5-oxoprolinato (0,933 g) foi dissolvido em diclorometano (a- proximadamente 5 ml) e tratado com o ácido trifluoroacético (1 ml). A mistura foi agitada por 3 horas na temperatura ambiente e depois evaporada. O resíduo foi solubilizado em tolueno e evaporada mais uma vez. Isto produziu parcialmente puro (> 95 %) 1 oxo-prolina-etil-5- como um óleo cor de laranja/amarelo (0,914 g) que foi usado sem purificação adicional.
Exemplos de 13 a 36.
De uma maneira análoga àquela decrita para o Exemplo 12 acima, os compostos tabelados abaixo (Tabela 2) foram preparados substituindo a amina adequado (ou o sal da mesma) pela [(2,3,4-trifluorofenil) metil] amina usada no procedimento acima mencionado. Todas as aminas usadas para fazer os compostos mostrados na Tabela 2 estão disponíveis de fontes comerciais ou podem ser preparadas usando as vias anteriormente descritas na literatura química ou por métodos análogos aos mesmos. A 1-etil-5-oxo-prolina usada na reação foi preparada, em cada caso, pelo método indicado. Onde determinado (por HPLC quiral), o excesso enanciomérico (e.e). do isômero mostrado também é listado junto com o seu nome estereospecífico, o método de separação quiral usado em parantheses e o tempo de retenção correspondente (t.r.). para o dito método.
Tabela 2.
Exemplo Nome Químico [M+H]+ Tempo Método e.e. N0 de re- tenção (min) usado para preparar a 1-etil- 5-oxo- prolina E13 ^O Br N_ 327 2,04 A t(2- bromo fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo - prolinamida Ε14 H Jo a N_ [(2- cloro-6-fluoro fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo - pro- linamida 299 2,03 A Ε15 Jl N-[(2- cloro fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo - prolinamida 281 2,13 A Ε16 N-[(4- cloro fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo - prolinamida 281 2,07 A Ε17 J o α N-[(2,4- dicloro fenil) me- til]-1 - etil -5 -oxo - proli- namida 315 2,39 A 96,9 % (c) N- [(2,4- dicloro fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo -L- prolinamida, t.r.=8,78 min Ε18 n—a/^1 H Γ I ,J O CF, 1 - etil -5 -oxo - Λ/-{[2- (tri- fluoro metil) fenil] metil}- prolinamida 315 2,29 B Ε19 0KPy Ογ^ N-[(4- cloro -2- metil fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo - pro- linamida 295 2,37 B Ε20 S ο α Λ/-[(2- cloro -3,6- difluoro fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo - prolinamida 317 2,15 B Ε21 ^ O d Λ/-[(2- cloro fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo - prolinamida 281 2,10 B Ε22 J O A/-[(3,4-dicloro fenil) metil]- 1 -etil-5-oxo-prolinamida 315 2,36 B 82,8% (C) N- [(3,4- diclorofenil) metil]-1-etil-5- oxo-L- prolinamida t.r.=5,37 min Ε23 1 - etil - N-{[4- fluoro -2- (trifluoro metil) fenil] metil} -5 -oxo -prolinamida 333 2,33 B Ε24 J O 1 Λ/-[(2,4- dimetil fenil) me- til]-1 - etil -5 -oxo - proli- namida 275 2,24 B Ε25 N-[(2- cloro -6- metil fenil) metil]- 1- etil-5-οχο- prolinamida 295 2,28 B 79,0 % (C) N- [(2-cloro-6-metil fenil) metil]-1- etil-5-oxo-L- prolinamida t.r.=6,91 min Ε26 J O F Ν-[(2- cloro -6- metil fenil) metil]- 1- etil-5-οχο- prolinamida 313 2,31 B Ε27 O^ÇI^íj JXJX^ J 0 F N-[(6- cloro -2- fluoro - 3 - metil fenil) metil]- 1- etil-5- oxo-prolinamida 313 2,20 B Ε28 J o α N-[(2,3 - dicloro fenil) me- til]· 1- etil-5-οχο- prolinamida 315 2,29 C Ε29 •-cyjç^ > o J Λ/-[(3- cloro -2- metil fenil) metil]- 1- etil-5-οχο- prolinamida 295 2,30 C Ε30 J o o N-[(2,6- dicloro fenil) me- til]- 1- etil-5-οχο- prolinamida 315 2,19 C Ε31 J O 1- etil- N-{[4- fluoro -3- (trifluoro metil) fenil] metil}- 5-oxo-prolinamida 333 2,35 C E32 O==S Jk. -N^ .J^^iL J O N-{[4- cloro -3- (trifluoro metil) fenil] metil}- 1- etil- 5-oxo-prolinamida 349 2,49 C 99,1 % (C) N- {[4- cloro -3- (trifluoro metil) fenil] metil}- 1- etil- 5-oxo-L- prolinamida, t.r.= 5,44 min E33 N-[(4- bromo -2- fluorofe- nil) metil]- 1- etil-5-οχο- prolinamida 245 2,24 C E34 O^XrJiJp 1- etil-A/-[(2- metil fenil) metil]- 5-oxo-prolinamida 261 2,00 C E35 0^Ok JL jC JL S o α Λ/-{[2- cloro -3- (trifluoro metil) fenil] metil}- 1- etil- 5-oxo-prolinamida 349 2,45 C 100,0 % (A) N- {[2- cloro -3- (trifluoro metil) fenil] metil}- 1- etil- 5-oxo-L- prolinamida, t.r. =5,51 min E36 ο-Π jj jCX ^J 0 Cl N-[(2- cloro -3,4- difluoro fenil) metil]- 1- etil-5-οχο- prolinamida 317 2,22 C
O cloridrato de [(2-cloro-3,4-difluorofenil) metil] amina necessário para a síntese de /V-[(2-cloiO-3,4-difluorofenil) metil]-1-etil-5-oxo-prolinamida (Exemplo 36) foi preparado da seguinte maneira:
(i) uma solução de Ν,Ν,Ν',Ν'-tetrametil etileno diamina (39,6 ml, 264 mmol) em te- traidrofurano (170 ml) foi resfriada sob argônio a -70 0C antes da adição do sec-butil lítio (205 ml, 288 mmol). À mistura foi acrescentado então o ácido 3,4-difluorobenzóico (19 g, 120 mmol) como uma solução em tetraidrofurano (80 ml) durante o período de 40 minutos assegurando que a temperatura da mistura não aumentou acima de -60 °C. A mistura foi então agitada em uma temperatura de -68 0C a -70 0C durante 1 hora antes de acrescentar uma solução de hexacloroetano (100 g, 422 mmol) em tetraidrofurano (170 ml) durante o período de 35 minutos mantendo a temperatura da mistura abaixo de -60 0C. A mistura foi agitada em uma temperatura de -65 0C a -70 0C por 2 horas. Permitiu-se que a mistura se aquecesse a -10 0C e depois foi acrescentada água (500 ml) para extinguir a reação. A mis- tura foi diluída com o éter dietílico (250 ml) e duas camadas resultantes foram separadas. A camada aquosa foi acidificada a pH=1 usando solução aquosa de ácido clorídrico concen- trado e depois extraída com alíquotas 2 χ 500 ml de éter dietílico. Os extratos orgânicos combinados foram passados por cerâmica hidrofóbica sinterizada e reduzidos sob vácuo para produzir um sólido amarelo. Que foi recristalizado do acetato de etila para produzir du- as retiradas (8,35 g e 4,47 g) do ácido 2-cloro-3,4-difluorobenzóico puro.
(ii) O ácido 2-cloro-3,4-difluorobenzóico (2 g, 10,4 mmol) foi tratado com o cloreto de tionila (3,04 ml) e a mistura foi aquecida a 80 0C durante 90 minutos. A mistura foi então
resfriada e reduzida sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em 1 anidro, 4-dioxano (10 ml) e a mistura foi então resfriada em um banho de gelo e de água. Amônia 0,88 (aquoso, 25 ml) foi acrescentada gota a gota à mistura que foi posteriormente deixada aquecer-se a 22 0C du- rante o período de 2 horas. Este processo foi repetido usando 10,8 g de ácido 2-cloro-3,4- difluorobenzóico, 8,2 ml do cloreto de tionila, e 45 ml de amônia 0,88 e depois ambas as misturas foram combinadas e partilhadas entre acetato de etila (150 ml) e água (100 ml). A camada aquosa foi separada e extraída com 2 χ 150 ml alíquotas de acetato de etila. Os extratos orgânicos combinados então foram lavados com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (100 ml), secos usando cerâmica hidrofóbica sinterizada, e reduzidos sob vácuo para produzir 2-cloro-3,4-difluorobenzamida (11,86 g) como um sólido branco.
LC/MS [M+H]+ = 192/194, tempo de retenção = 1,69 minutos.
(iii) O 2-cloro -3,4-difluoro benzamida (11,85 g, 62 mmol) foi dissolvido em tetraidro- furano (200 ml) e tratado com tetraidrofurano borano 1M (247 ml, 247 mmol). A mistura foi aquecida a 70 0C e agitada por 18 horas. A mistura foi então resfriada em um banho de gelo
e de água e a solução aquosa de ácido clorídrico concentrado (150 ml) foi acrescentada gota a gota. Aqueceu-se, com agitação, a 70 0C e então continuou por mais 2 horas. Permi- tiu-se então que a mistura resfriasse e o solvente foi evaporado sob vácuo. O resíduo foi partilhado entre o acetato de etila (200 ml) e solução aquosa de ácido clorídrico 2N (200 ml). A camada aquosa foi separada e o pH foi ajustado de 8 a 9 por adição gota a gota de hi- dróxido de sódio aquoso 5N. A suspensão turva resultante foi extraída com o acetato de etila (4 χ 200 ml) e os extratos orgânicos combinados então foram passados por cerâmica hidrofóbica sinterizada e reduzidos no volume a aproximadamente 200 ml. A mistura foi en- tão acidificada pela adição de ácido clorídrico 1M em éter (100 ml) resultando na formação de um precipitado. O solvente foi evaporado sob vácuo para produzir um sólido branco. O sólido foi recristalizado a partir do extrato metilado (60 ml) para produzir três coletas de clo- ridrato de [(2-cloro-3,4-difluorofenil) metil] amina puro (massa combinada = 4,46 g) como um sólido branco.
Exemplo 37.
A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-etil-5-oxo-4-(fenil metil) - prolinamida (E37).
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A 1-etil-5-oxo-4-(fenil metil)-prolina bruta (0,052 g, 0,09 mmol, preparado tal como descrito abaixo) foi suspensa em uma mistura de diclorometano (0,5 ml) e dimetilformamida (0,5 ml) e à mesma foi acrescentada a N-etil morfolina (0,034 ml, 0,27 mmol) fazendo a mai- or parte do material se dissolver. 1-hidroxibenzotriazol (0,016 g, 0,12 mmol) e cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,022 g, 0,12 mmol) então foram acrescenta- dos e a mistura foi agitada durante 10 minutos antes de acrescentar [(2-cloro-4-fluorofenil) metil] amina (0,019 g, 0,12 mmol). Então deixou-se que a mistura atingisse a temperatura ambiente durante a noite. Uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (aproxi- madamente 2 ml) foi acrescentada à mistura e agitada durante 10 minutos. A camada orgâ- nica foi isolada filtrando por um separador de fase e depois lavada com solução aquosa de ácido clorídrico 2M. A camada orgânica foi separada novamente e evaporada para produzir um óleo amarelo que foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-etil-5-oxo-4-(fenil metil)-prolinamida (0,004 g) como um óleo inclolor.
LC/MS [M+H]+ = 389, tempo de retenção = 2,90 minutos.
A 1-etil-5-oxo-4-(fenil metil)-prolina usada no procedimento acima mencionado foi preparada como se segue (Método A): (i) Metil (S)-(+)-2-pirrolidinona-5-carboxilato (0,85 g, 5,94 mmol) foi dissolvido em
diclorometano (5 ml) e tratado com trietilamina (0,869 ml, 6,24 mmol) e 4- dimetilaminopiridina (0,010 g). À mistura foi acrescentado di-tertbutil dicarbonato (1,36 g, 6,24 mmol) e a solução cor de laranja resultante se misturasse durante a noite. A mistura tornou-se azul/cinzenta e a evaporação do solvente produziu um óleo acinzentado (1,4 g). Que foi purificado por cromatografia flash automatizada em coluna de sílica-gel (Biotage SP4), eluindo com um gradiente de 0 % a 60 % de acetato de etila em hexano, para produzir 1- (1,1-dimetil etil) 2-metil-5-oxo-1,2-pirrolidina dicarboxilato (1,37 g) como o óleo inclolor que se cristalizou em repouso. (ii) 1- (1,1-dimetil etil) 2-metil-5-oxo-1,2-pirrolidina dicarboxilato (0,324 g, 1,33 mmol) foi dissolvido em tetraidrofurano (3 ml) e a mistura foi resfriada a -78 0C1 usando um banho de acetona/gelo-seco, sob uma atmosfera de argônio. Uma solução a 1 M de bis (trimetil silil) amida de lítio em tetraidrofurano (1,4 ml, 1,40 mmol) foi acrescentada gota a gota e agi-
tada sob argônio durante 1 hora. A mesma então foram acrescentados o brometo benzila (0,174 ml, 1,46 mmol) e a mistura foi agitada a -78 0C por mais 2,5 horas. A mistura foi então deixada aquecer-se à temperatura ambiente e extinta pela adição do cloreto de amônio a- quoso saturado (aproximadamente 5 ml) e depois deixada em repouso durante a noite na temperatura ambiente. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi diluída com mais água (5 ml) e extraída com o acetato de etila (3x10 ml). As camadas orgânicas com- binadas foram secas sobre sulfato de sódio anidro e depois filtradas e concentradas para produzir um óleo amarelo (0,700 g). Que foi purificado por cromatografia flash automatizada em coluna de sílica-gel (Biotage SP4), eluindo com um gradiente de 0 % a 35 % de acetato de etila em hexano, para produzir 1 - (1,1-dimetil etil) 2-metil-5-oxo-4-(fenil metil)-1,2- pirrolidina dicarboxilato como um sólido branco (0,418 g) depois da evaporação do solvente.
(iii) 1-( 1,1-dimetil etil)- 2-metil-5-oxo-4-(fenil metil)-1,2-pirrolidina dicarboxilato (0,415 g, 1,24 mmol) foi dissolvido em ácido clorídrico 4M em dioxano (2 ml) e misturarados na temperatura ambiente por 2 horas. O solvente foi evaporado para produzir um óleo inclolor que se cristalizou em repouso para produzir metil-5-oxo-4-(fenil metil)-prolinato como um
sólido cremoso/branco (0,205 g). Que foi usado sem purificação adicional na etapa seguinte.
(iv) O metil-5-oxo-4-(fenil metil)-prolinato (0,205 g, 0,88 mmol) foi dissolvido em te- traidrofurano (2,5 ml) e tratado com o iodeto de etila (0,077 ml, 0,97 mmol). A mistura foi então resfriada a 0 0C e tratada com o hidreto de sódio (0,037 g de uma suspensão de 60 % em óleo, 0,92 mmol). Depois de agitar a 0 0C durante 10 a 15 minutos a solução foi aqueci-
da à temperatura ambiente e agitada por mais 3,5 horas. A mistura foi então tratada com a solução de cloreto de amônio aquoso saturada (aproximadamente 2 ml) e posteriormente diluída com diclorometano (5 ml). A camada orgânica foi separada filtrando por cerâmica hidrofóbica sinterizada (lavagem com mais alíquotas de diclorometano aquoso (2x5 ml)). A evaporação das fases orgânicas combinadas produziu um óleo marrom (aproximadamente 0,100 g). Que foi purificado por cromatografia flash automatizada em coluna de sílica-gel, eluindo com um gradiente de 0 % a 100 % de acetato de etila em hexano, para produzir par- cialmente purificado (aproximadamente 90 % puro) 1-etil-5-oxo-4-(fenil metil)-prolinato de metila (0,024 g) como um óleo amarelo que foi usado na etapa subseqüente sem purificação adicional.
(v) 1-etil-5-oxo-4-(fenil metil)-prolinato de metila (0,024 g, 0,09 mmol) foi dissolvido
em metanol (0,5 ml) e resfriado a 0 0C em banho de gelo. Hidróxido de sódio aquoso 2M (0,137 ml, 0,27 mmol) foi acrescentado à mistura e a agitação continuou a 0 0C por 3 horas. O solvente foi evaporado e o resíduo foi acidificado pelo tratamento com solução aquosa de ácido clorídrico 2M (aproximadamente 0,2 ml) para produzir uma solução turva. A evapora- ção então produziu a 1-etil-5-oxo-4-(fenil metil)-prolina bruta (0,052 g) como uma mistura de sólidos brancos e resíduos oleosos amarelos. Que foi usado sem purificação adicional.
Alternativamente a 1-etil-5-oxo-4-(fenil metil)-prolina também pode ser preparada da
seguinte maneira (Método B):
(i) (S)-(+)-L-5-tritiloximetil-2-pirrolidinona (1,88 g, 20 mmol) foi dissolvida em dimetil- formamida (9 ml) a 0 0C e tratada com o hidreto de sódio (suspensão de 60 % em óleo, 0,220 g, 5,5 mmol). A mistura foi agitada a 0 0C por 30 min e depois tratada com o iodeto de
etila (0,444 ml, 5,5 mmol). Permitiu-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente e depois foi agitada durante a noite. A mistura foi então partilhada entre o acetato de etila e cloreto de amônio aquoso saturado e extraída com o acetato de etila (x3). Os extratos orgâ- nicos combinados foram lavados em seqüência com a água, a solução aquosa (x2) de clore- to de sódio a 50 %, e solução aquosa saturada de cloreto de sódio, e depois seca sobre sulfato de sódio. A concentração produziu um sólido bege que foi purificado por cromatogra- fia flash automatizada em coluna de sílica-gel (Biotage SP4), eluindo com um gradiente de 0 % a 100 % de acetato de etila em hexano, para produzir 1 -etil-5- {[(trifenil metil) oxi] metil} - 2-pirrolidinona pura (1,78 g).
(ii) Uma solução 2M de diisopropilamina de lítio em tetraidrofurano (1,050 ml, 2,1 mmol) foi acrescentada, a -78 0C, a uma solução de 1-etil-5-{[(trifenil metil) oxi] metil}-2-
pirrolidinona (0,771 g, 2 mmol) em tetraidrofurano (10 ml) e a mistura resultante foi agitada durante 1 hora a -78 0C. O brometo de benzila (0,262 ml, 2,2 mmol) então foi acrescentado e depois de agitar durante por mais 1 hora a -78 0C permitiu-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi extinta com o cloreto de amônio aquoso saturado e depois extraída com o acetato de etila (x3). Os extratos orgânicos combinados então foram lavados com a água e depois com a solução (x2) de cloreto de sódio aquosa saturada, secas sobre sulfato de magnésio anidro, e concentradas a um óleo bruto (1,27 g). O sólido bruto foi purificado por cromatografia flash automatizada em coluna de sílica-gel (Biotage SP4), eluindo com um gradiente de 0 % a 100 % de acetato de etila em hexano, para produzir o produto desejado (isto é 1-etil-3-(fenil metil)-5-{[(trifenil metil) oxi] metil} - 2- pirrolidinona (0,561 g)) que foi usado na etapa seguinte, bem como material de partida não reagido e o produto da dialquilação, 1-etil-3,3-bis (fenil metil)-5-{[(trifenil metil) oxi] metil} - 2- pirrolidinona (0,053 g).
(iii) 1-etil-3-(fenil metil)-5-{[(trifenil metil) oxi] metil} - 2-pirrolidinona (0,561 g, 1,1 mmol) foi agitada por 24 horas na temperatura ambiente em uma mistura de acetonitrila (21
ml) e ácido fórmico (3 ml). A reação não foi completa nesta etapa portanto o solvente foi evaporado e substituído pelo ácido fórmico (10 ml) e agitação foi continuada por 3 horas. A reação não foi ainda completa portanto a mistura foi concentrada sob vácuo (azeótropo com o metanol para retirar todo do ácido fórmico) e depois dissolvido em metanol (20 ml). Amber- Iyst 15® foi então acrescentada à mistura e a agitação foi continuada na temperatura ambi- ente durante a noite. A resina foi filtrada de, Iavanda com mais metanol, e o filtrado foi con- centrado a uma goma (0,625 g). A goma foi purificada por cromatografia flash automatizada em coluna de sílica-gel (Biotage SP4), eluinda com um gradiente de 0 % a 100 % de acetato de etila em hexano, para produzir 1-etil-5-(hidroximetil)-3-(fenil metil) - 2-pirrolidinona (0,170 g) que foi usada na etapa seguinte.
(iv) A 1-etil-5-(hidroximetil)-3-(fenil metil) - 2-pirrolidinona (0,748 g, 3,21 mmol) foi dissolvida em acetonitrila (5 ml) e uma solução tampão aquosa de fosfato monobásico de sódio a 1M (3,69 ml, 3,69 mmol), alguns cristais de TEMPO (radical livre 2,2,6,6-tetrametiM- piperidiniloxi), e cloreto de sódio (0,580 g, 6,41 mmol) foram acrescentados e a mistura foi aquecida a 40 °C. Aproximadamente 1 gota de alvejante (solução de hipoclorito de sódio, cloro disponível >12 %) foi então acrescentada à mistura e a agitação continuou a 40 0C por 3 horas. A mistura foi então vazada sobre água e gelo contendo sulfito de sódio 1% p/p e a mistura resultante foi ajustada ao pH=2 usando solução aquosa de ácido clorídrico 5N e depois extraída com o acetato de etila (x3). Os extratos orgânicos combinados foram lava- dos com o cloreto de sódio aquoso saturado e depois secos sobre sulfato de magnésio e concentrados para produzir 1-etil-5-oxo-4-(fenil metil) prolina (0,807 g) como um sólido que foi usado sem purificação adicional.
Exemplo 38.
A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1 - (2-metil-2-propenil-1)-5-oxo-prolinamida (E38).
A 1-(2-metil-2-propenil-1)-5-oxoprolina bruta (aproximadamente 0,075 g, aproxima- damente 0,41 mmol, preparado tal como descrito abaixo) foi dissolvida em diclorometano (5 ml) e à mesma foram acrescentados 1-hidroxibenzotriazol (0,061 g, 0,45 mmol), [(2-cloro-4- fluorofenil) metil] amina (0,068 g, 0,43 mmol), e cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'- etilcarbodiimida (0,087 g, 0,45 mmol). A mistura foi então agitada na temperatura ambiente por 24 horas. A mistura foi diluída com mais diclorometano e depois lavada em seqüência com solução aquosa de ácido clorídrico 2M e solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. A camada orgânica foi filtrada por um separador de fase e evaporada para produzir um resíduo marrom que foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-(2-metil-2-propenil-1) - 5-oxo-prolinamida (0,018 g) como um sólido branco. LC/MS [M+H]+ = 325,1, tempo de retenção = 2,40 minutos.
A 1-(2-metil-2-propenil-1)- 5-oxoprolina usada no procedimento acima mencionado foi preparada como se segue:
(i) O metanol (55 ml) foi resfriado a -10 0C (usando um banho de gelo- seco/tetracloreto de carbono) com agitação e depois cloreto de tionila foi acrescentado gota
a gota por mais de 45 minutos. O ácido (D) -glutâmico (10 g, 67,96 mmol) então foi acres- centado em três porções por aproximadamente 5 minutos e depois a reação foi agitada por 3 horas aquecendo-se a 21 0C. Os solventes foram evaporados sob vácuo para produzir um óleo claro (15 g) que foi dissolvido em uma mistura de água (150 ml) e dioxano (150 ml). O carbonato de sódio (46 g, 340 mmol) foi então lentamente acrescentado com agitação. O cloroformato de benzila (9,64 ml, 68 mmol) foi acrescentado e a agitação continuou durante a noite. A mistura foi cautelosamente tratada com solução aquosa de ácido clorídrico 2N (250 ml) e depois extraída com o acetato de etila (2 χ 250 ml). As frações orgânicas combi- nadas foram lavadas com salmoura e depois secas e evaporadas para produzir um óleo claro (18,7 g). Que foi dissolvido em diclorometano (400ml) e tratado com o ácido sulfúrico concentrado (1 ml). Um grande excesso de isobutileno foi então condensado na mistura e depois agitado durante a noite a 21 0C. Uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (aproximadamente 400 ml) então foi acrescentada cuidadosamente à mistura e de- pois a fase orgânica foi separada, lavada com salmoura, seca e evaporada sob vácuo para produzir um óleo claro (21,9 g). Que foi purificado por cromatografia em coluna de sílica-gel, eluindo com uma mistura 3:1 de cicloexano e acetato de etila, para produzir 1-(1,1-dimetil etil) -5- metil-/V/-{[(fenil metil) oxi] carbonil} glutamato (4,87 g), puro.
(ii) A uma solução de hexametil dissilazida de potássio (10 ml de uma solução 0,6M no tolueno, 6 mmol) em tetraidrofurano (25 ml) a -70 0C, foi acrescentada gota a gota uma
solução de 1-(1,1-dimetil etil) -5- metil-N-{[(fenil metil) oxi] carbonil} glutamato (1,05 g, 3 mmol) em tetraidrofurano (10 ml) por aproximadamente 5 minutos. A mistura foi agitada a - 70 0C durante 1 hora e depois tratada com iodeto de metila (2,18 g, 12 mmol) em tetraidrofu- rano (10 ml). A agitação foi continuada a -78 0C por 2 horas e depois aquecido a 21 0C. De- pois de agitar durante por mais 1 hora a mistura foi vazada sobre uma solução aquosa de ácido clorídrico 1N e extraída com o acetato de etila (2 χ 50 ml). As partes orgânicas combi- nadas foram lavadas com salmoura, secas, e evaporadas sob vácuo, para produzir um óleo amarelo (1,03 g). Que foi purificado por cromatografia em coluna de sílica, eluindo com um a mistura 4:1 de cicloexano e acetato de etila, para produzir 1,1-dimetil etil 1-(2-metil-2- propenil-1 )-5-oxo-prolinato puro como um óleo claro (0,322 g). (iii) 1,1-dimetil etil 1-(2-metil-2-propenil-1) - 5-oxo-prolinato (0,099 g, 0,41 mmol) foi
dissolvido em uma mistura de diclorometano (2 ml) e ácido trifluoroacético (2 ml) e agitado durante a noite na temperatura ambiente. O solvente foi evaporado (azeótropo com o tolue- no para retirar traços de ácido trifluoroacético) para produzir a 1-(2-metil-2-propenil-1) - 5- oxoprolina bruta como um óleo marrom que foi usado sem purificação adicional. Exemplo 39.
1-ciclopropil-A/-[(2,4-diclorofenil) metil] - 5-oxo-prolinamida (E39).
A uma solução de isocianato de (2,4-diclorofenil) metila (0,047 g, 0,25 mmol) e áci-
do 4-oxobutanóico (15 % em água, 0,26 ml, 0,4 mmol) em metanol (1,75 ml) foi acrescenta- da ciclopropilamina (0,042 ml, 0,6 mmol). A mistura foi aquecida a 100 0C durante 30 minutos em um reator de microondas. O solvente foi retirado sob vácuo e o resíduo foi puri- ficado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir 1-ciclopropil-A/- [(2,4-diclorofenil) metil] - 5-oxo-prolinamida (0,072 g) como um sólido branco.
LC/MS [M+H]+ = 326/328, tempo de retenção = 2,29 minutos.
Exemplo 40.
A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-ciclopropil-5-oxo-prolinamida (E40).
A uma solução de isocianato de [2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metila (0,088 g, 0,4 mmol) e semialdeído succínico (15 % em água, 0,26 ml, 0,4 mmol) em metanol (1,75 ml) foi acrescentada ciclopropil amina (0,042 ml, 0,6 mmol). A mistura foi aquecida a 100 0C duran- te 30 minutos em um reator de microondas. O solvente foi retirado sob vácuo e o resíduo foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir A/-{[2-cloro-3- (trifluoro metil) fenil] metil} -1- ciclopropil -5- oxo- prolinamida (0,076 g) como um sólido branco. LC/MS [M+H]+ = 361/363, tempo de retenção = 2,39 minutos.
O isocianato de [2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metila usado no procedimento acima mencionado foi preparado como se segue:
(i) Uma solução de {[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina (1,05 g, 5 mmol) em tetraidrofurano anidro (10 ml) foi acrescentada gota a gota a uma solução de A/-formil benzo- triazol (0,772 g, 5,25 mmol) em tetraidrofurano anidro (10 ml). A reação foi agitada a 22 0C por 18 horas e depois reduzida sob vácuo e o resíduo partilhado entre diclorometano (75 ml) e hidróxido de sódio aquoso 2N (40 ml). A camada orgânica foi separada e extraída com hidróxido de sódio aquoso 2N (40 ml). A camada orgânica foi passada por cerâmica hidrofó- bica sinterizada e reduzida sob vácuo para produzir um sólido branco. O produto bruto foi purificado por cromatografia flash automatizada em coluna de sílica-gel (Biotage SP4), elu- indo com um gradiente solvente de acetato de etila de 0 % a 10 % em diclorometano, para produzir {[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil} formamida como um sólido branco.
(ii) Uma solução de {[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil} formamida (0,67 g, 2,82 mmol) em diclorometano anidro (20 ml) foi resfriada sob argônio em um banho de gelo e de água antes da adição de diisopropilamina (1,78 ml, 12,7 mmol) seguido pelo oxicloreto de fósforo (0,393 ml, 4,23 mmol). A reação foi agitada em entre 2 0C a 5 0C por 2 horas. A mis- tura foi então reduzida sob vácuo e o resíduo tratado com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (20 ml) e extraída com diclorometano (20 ml). A camada orgânica foi passada por cerâmica hidrofóbica sinterizada e reduzida sob vácuo para produzir um sólido amarelo. Uma secagem sob vácuo adicional produziu o isocianato de [2-cloro-3- (trifluorometil) fenil] metila como uma goma cor de laranja (0,66 g) que foi usado sem purifi- cação adicional.
Exemplo 41.
A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-ciclopropil-5-oxo-prolinamida (E41).
A uma solução dmetil [2-cloro-4-fluoro-fenil] isocianato (0,068 g, 0,4 mmol) e semi- aldeído succínico (15 % em água, 0,26 ml, 0,4 mmol) em metanol (1,75 ml) foi acrescentado ciclopropilamina (0,042 ml, 0,6 mmol). A mistura foi aquecida a 100 0C durante 30 minutos em um reator de microondas. O solvente foi retirado sob vácuo e o resíduo foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir uma goma inclolor que foi triturado com o éter dietílico para produzir A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-ciclopropil-5-oxo- prolinamida como um sólido de creme pálido (0,058 g). LC/MS [M+H]+ = 310, tempo de re- tenção = 2,16 minutos.
O isocianato de [2-cloro-4-fluoro-fenil] metila usado como o material de partida foi preparado de uma maneira análoga àquela descrita para a preparação de isocianato de [2- cloro-3-(trifluorometil) fenil] metila no Exemplo 40 mas usando 2-cloro-4-fluorofenil] metil} amina no lugar de 2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina.
Exemplo 42.
A/-[(2,4-diclorofenil) metil]-1-etil-4,4-dimetil-5-oxo-prolinamida (E42).
Isocianato de (2,4-diclorofenil) metila (0,075 g, 0,4 mmol) e ácido 2,2-dimetil-4- oxobutanóico bruto (0,115 g, 0,6 mmol) foi dissolvido em metanol (2 ml). Foi acrescentada a solução de etilamina (2M em água, 0,3 ml, 0,6 mmol) e a mistura foi aquecida em um vaso selado em 100 0C durante 30 minutos em um reator de microondas. Deixou-se a mistura em repouso durante o fim de semana e depois o solvente foi retirado sob vácuo e o óleo cor de laranja resultante foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir uma goma oleosa clara que foi triturado com o éter dietílico para produzir N-[(2,4- diclorofenil) metil]-1-etil-4,4-dimetil-5-oxo-prolinamida como um sólido branco (0,024 g). LC/MS [M+H]+ = 343, tempo de retenção = 2,57 minutos.
O ácido 2,2-dimetil-4-oxobutanóico usado como o material de partida no procedi- mento acima mencionado foi preparado como se segue:
(i) O ácido 2,2-dimetil-4-pentenóico foi dissolvido em diclorometano (25 ml) e resfri- ado a -78 0C em um banho C02/acetona e o oxigênio foi borbulhado na mistura durante 5 minutos. O gerador de ozônio foi ligado e o ozônio foi borbulhado na mistura durante 15 mi- nutos. O fluxo do ozônio foi então parado e a mistura foi esgotada com oxigênio durante 5 minutos e depois com o argônio durante 2 minutos. TLC indicou que a reação não tinha pro- gredido significativamente portanto o ozônio foi borbulhado através da mistura durante uns 15 minutos adicionais após o que persistiu uma cor azul pálida e uma suspensão foi forma- da. O fluxo de ozônio foi desligado e a mistura foi esgotada com o oxigênio durante 5 minu- tos e depois com o argônio durante 10 minutos (até que o gás de escape desse uma respos- ta negativa ao papel molhado de amido/iodo). O sulfeto de dimetila (1,72 ml, 23,41 mmol) então foi acrescentado à mistura e permitiu-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente. Depois de agitar na temperatura ambiente por 2 horas a mistura foi concentrada para produzir um óleo inclolor (1,5 g). 1,4 g deste material foram purificados por cromatogra- fia flash em coluna de sílica, eluindo com um gradiente de acetato de etila de 0 % a 50 % em diclorometano, para produzir o ácido 2,2-dimetil-4-oxobutanóico como um óleo inclolor (0,649 g). Exemplo 43.
A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1 - (1-metil etil)-5-oxo-prolinamida (E43).
A 1-(1-metil etil) - 5-oxoprolina (0,100 g, 0,58 mmol) foi dissolvida em diclorometano (20 ml) e à mesma foram acrescentados cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'- etilcarbodiimida (0,111 g, 0,58 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (0,078 g, 0,58 mmol), e N-et\\ morfolina (0,223 ml, 1:75 mmol). Finalmente {[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina foi acrescentada à mistura e a agitação continuou por aproximadamente 48 horas. A mistura foi então tratada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (20 ml) e agitada energicamente. A camada aquosa foi retirada usando o separador de fase e depois o sol- vente foi retirado da camada orgânica usando uma unidade de sopro de argônio. O resíduo resultante foi tratado com uma mistura de água e acetato de etila (25 ml, 1:1) e a camada aquosa foi posteriormente descartada. A camada orgânica foi filtrada por um separador de fase e evaporada para produzir um óleo. Que foi triturado com o éter dietílico para produzir um sólido e que foi posteriormente purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-(1-metil etil) - 5-oxo- prolinamida (0,097 g) como um sólido branco. LC/MS [M+H] + = 363, tempo de retenção = 2,48 minutos.
A 1-(1-metil etil) - 5-oxoprolina usada no procedimento acima mencionado foi prepa- rada de uma maneira análoga àquela descrita anteriormente para a síntese do 1-etil-5-οχο- prolinato de metila (ver o Exemplo 3) mas usando a acetona no lugar de acetaldeído e com a adição de um éster subseqüente à etapa de desproteção (usando condições padrão, isto é hidróxido de sódio em metanol) sendo realizada (ao contrário do a desproteção combinada e da ligação amida descrita no Exemplo 3).
Exemplos 44 a 49.
De uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 43 acima, os compostos
tabelados abaixo (Tabela 3) foram preparados substituindo a amina adequada (ou sal da mesma) pelo {[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina usado no procedimento acima mencionado. Todas as aminas usadas para fazer os compostos mostrados na Tabela 3 es- tão disponíveis de fontes comerciais ou podem ser preparados usando as vias anteriormen- te descritas na literatura química a menos que seja declarado de modo diferente.
Tabela 3.
Exemplo N0 Nome Químico [M+H]+ Tempo de retenção (min) E45 o^fx iL jCX Λ o α Λ/-[(2,3 -dicloro fenil) metil] -1-(1-metil etil) -5 - oxo - prolinamida 329 2,35 E46 Oc=N 1 κ L JL -A. o Cl N-[(2 -cloro -3,4 - difluorofenil) metil] -1- (1- metil etil) -5 -oxo - prolinamida 331 2,26 E47 nssa^l H Γ li 0—\ A^NvAs/ ^Xs o α 329 2,4 N-[(2,4 -dicloro -fenil) metil] -1- (1-metil etil) - 5 -oxo - prolinamida E48 O==K Jv Ji JLJL O Cl N-[(2,3 -dicloro -4 - fluorofenil) metil] -1- (1- metil etil) - 5 -oxo - L -prolinamida 346,9 2,41 E49 Η XX N-[(3 -cloro -2 - metil fenil) metil] -1- (1- metil etil) -5 -oxo -prolinamida 309 2,34
O cloridrato de [(2,3-dicloro-4-fluorofenil) metil] amina necessário para a síntese de A/-[(2,3-dicloro-4-fluorofenil) metil]-1-(1-metil etil)-5-oxo-L-prolinamida (Exemplo 48) foi pre- parado na seguinte maneira:
(i) Nitrito de sódio (0,172 g, 2,5 mmol) foi acrescentado a uma solução agitada de 2- cloro-6-fluoro-3-metil-fenilamina (0,400 g, 2,5 mmol) em água (20 ml) e solução aquosa de ácido clorídrico a 37 % (5 ml) a -5 °C. A mistura foi agitada a -5 0C durante 5 minutos e de- pois acrescentada em um pote em uma solução de cloreto de cobre (I) (0,742 g, 7,5 mmol) em solução aquosa de ácido clorídrico a 37 % (5 ml) mantendo a temperatura de -5 0C a 0 0C. A mistura de reação foi aquecida a 38 0C e agitada durante 1 hora então a mistura foi resfriada e o éter dietílico (20 ml) foi acrescentado. A fase orgânica foi separada e lavada com solução aquosa de ácido clorídrico 1N e depois com a água. A camada orgânica foi então seca sobre sulfato de sódio e concentrada sob vácuo. O resíduo bruto foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica, eluindo com o éter de petróleo, para produzir 2,3-dicloro-1-fluoro-4-metilbenzeno (0,090 g, 0,5 mmol) como um sólido branco, (ii) 2,3-dicloro-1-fluoro-4-metilbenzeno (0,090 g, 0,5 mmol) foi acrescentado a uma
mistura agitada de dicromato de potássio (0,284 g, 1 mmol) em ácido acético (1 ml). O ácido sulfúrico a 97 % (0,5 ml) foi então acrescentado lentamente à mistura que foi posteriormente aquecida a 100 0C por 2 horas. Depois de resfriar à temperatura ambiente, a água e o gelo foram acrescentados e o sólido verde assim obtido foi filtrado e lavado com a água fria para produzir o ácido 2,3-dicloro-4-fluorobenzóico (0,056 g, 0,27 mmol) como um sólido branco,
(iii) Uma solução de ácido 2,3-dicloro-4-fluorobenzóico (0,200 g, 0,92 mmol) em di- clorometano (aproximadamente 4 ml) foi tratada com 1-hidroxibenzotriazol (0,162 g, 1,2 mmol), o cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,230 g, 1,2 mmol), e trietilamina (0,56 ml, 4,0 mmol) sob argônio na temperatura ambiente. A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 40 minutos e depois tratada com hidróxido de amônio a- quoso a 32 % (0,088 ml) e agitada durante a noite na temperatura ambiente. A mistura foi diluída com diclorometano e lavada em seqüência com a água e depois com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. A camada orgânica foi separada e seca sobre sulfato de sódio e depois concentrada para produzir 2,3-dicloro-4-fluorobenzamida (0,156 g) como um sólido branco que foi usado sem purificação adicional.
(iv) Uma solução de 2,3-dicloro-4-fluorobenzamida (0,750 g, 3,62 mmol) em tetrai- drofurano seco (2 ml) foi aquecida a 90 0C sob nitrogênio. Uma solução a 10M do complexo hidreto de boro sulfeto de dimetila em tetraidrofurano (1,05 ml, 5,43 mmol) foi acrescentada à solução quente e a agitação foi continuada por 4 horas. A mistura foi então tratada com um solução aquosa de ácido clorídrico 6N e aquecimento contínuo durante 30 minutos. Os solventes foram evaporados e o resíduo bruto foi purificado por cartucho SCX e subsequen- te cromatografia flash em coluna de sílica eluindo com metanol a 5 % em diclorometano. A amina obtida foi tratada com ácido clorídrico em éter para produzir o cloridrato de [(2,3- dicloro-4-fluorofenil) metil] amina (0,360 g) como um sólido branco.
Exemplo 50.
A/-[metil (2,3-dimetilfenil)]-1-etil-5-oxo-prolinamida (E50).
O-
A 1-etil-5-oxoprolina (0,080 g, 0,51 mmol, preparada de uma maneira análoga à- quela descrita no Exemplo 12, método A) foi dissolvida em diclorometano (5 ml) e à mesma foram acrescentados cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'-etilrarbodiimida (0,117 g, 0,61 mmol), N-et\\ morfolina (0,195 ml, 1,53 mmol), e 2,3-dimetil benzilamina (0,082 g, 0,61 mmol). A mistura foi agitada por aproximadamente 17 horas e depois deixada em repouso durante o fim de semana. A mistura foi então tratada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (aproximadamente 3 ml) e agitado energicamente durante aproxima- damente 10 minutos. A camada orgânica foi separada usando cerâmica hidrofóbica sinteri- zada e a camada aquosa foi extraída com mais diclorometano (aproximadamente 2 ml). As camadas orgânicas combinadas foram concentradas para produzir um óleo amarelo (apro- ximadamente 0,2 g). Que foi purificado também por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir A/-[metil (2,3-dimetilfenil)]-1-etil-5-oxo-prolinamida (0,072 g) como sólido branco. LC/MS [M+H]+ = 275, tempo de retenção = 2,12 minutos.
Exemplo 51.
A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-prolinamida (E51). O Cl
O 1-metil-5-oxoprolina (2,27 g, 15,88 mmol, preparado tal como descrito abaixo) foi dissolvido em diclorometano (150 ml) e à mesma foram acrescentados Cloridrato de N-(3- dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (3,35 g, 17,47 mmol), e 1-hidroxibenzotriazol (2,36 g, 17,47 mmol). A mistura foi agitada durante-10 minutos e depois trietilamina (2,21 ml, 15,88 mmol) e {[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina (3,66 ml, 17,47 mmol) foram a- crescentados e a mistura foi deixada misturando-se na temperatura ambiente noturna (apro- ximadamente 17 horas). Um precipitado branco formado durante este tempo. A mistura foi então tratada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (aproximadamen- te 100 ml) e agitado durante 10 minutos. A camada orgânica foi separada usando cerâmica hidrofóbica sinterizada e depois 2N o solução aquosa de ácido clorídrico foi acrescentado e misturado e separou-se novamente. A camada orgânica foi concentrada para produzir sóli- dos brancos (aproximadamente 2,5 g). O sólido foi dissolvido em acetato de etila (aproxima- damente 200 ml) e lavado com água (4 χ 50 ml) seguido por salmoura (50 ml). A camada orgânica foi então seca passando por um separador de fase e concentrada para produzir N- {[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-L-prolinamida como um sólido branco fino (2,48 g).
LC/MS [M+H]+ = 335, tempo de retenção = 2,24 minutos.
1H RMN (CDCI3, 500MHz) δ 2,02 (m, 1 Η) , 2,35 (m, 1 H), 2,39 (m, 1H), 2,47 (m, 1H), 2,81 (s, 3H), 4,00 (dd, 1H, J = 8,9, 4,2 Hz), 4,60 (dd, 1 H, J = 15,1, 6,2 Hz), 4,65 (dd, 1 H, J = 15,1, 6,2 Hz), 6,56 (largo t, 1 H, J = 5,8 Hz), 7,38 (t, 1H, J = 7,7 Hz) τ 7,60 (dd, 1 H, J = 7,6, 1,0 Hz), 7,68 (dd, 1 H, J = 7,9, 1,2 Hz);
13C NMR δ 176,0, 171,5, 137,5, 133,9, 131,7, 129,3, 127,4, 127,0, 122,8, 63,8, 41,8, 29,4, 29,2, 23,4.
A 1-metil-5-oxoprolina usada como o material de partida foi preparado na seguinte
maneira:
(i) o ácido /V-metil-L-glutâmico (9,81 g, 60,87 mmol) foi partido em dois lotes iguais e cada um foi suspenso em água (15 ml) e aquecido em um tubo selado em 140 0C durante minutos em um reator de microondas para produzir uma solução clara. Os dois lotes en- tão foram combinados e a água foi evaporada e secou sob vácuo para produzir um sólido branco. O sólido foi triturado com o éter então filtrado e lavado com mais éter para fornecer, depois da secagem, 1-metil-5-oxo-prolina (7,47 g) como um sólido branco.
/S/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-prolinamida também pode ser preparado tal como descrito abaixo:
A 1-metil-5-oxoprolina (49,0 g, 0,342 mol, preparada tal como descrito acima) foi suspensa em DCM (600ml) (temperatura interna cai de 20 0C a 13,7 0C). EEDQ (2-etoxi-1- etoxicarbonil-1,2-diidroquinolina, 75,26 g, 0,359 mol, 1,05eq)foi acrescentada em uma única porção e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 15 minutos. Uma solução de 1-[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] methanamina (88,77 g, 0,359 mol, 1,05eq) em DCM (250ml) foi então acrescentada gota a gota à mistura por mais de 20 minutos (exotérmica leve até 19 0C) e qualquer sólido restante então foi lavado da mistura usando DCM adicional (150 ml). A mistura foi então agitada na temperatura ambiente durante a noite.
Uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (300 ml) foi acrescentada e a mistura foi agitada durante 5 minutos na temperatura ambiente. A camada orgânica foi separada, e lavada em seqüência com a água (300 ml), solução aquosa de ácido clorídrico 2N (3 χ 300 ml), água (300 ml) e solução aquosa saturada de cloreto de sódio (300 ml). A solução orgânica foi seca sobre sulfato de sódio anidro, filtrada e evaporada sob vácuo. O sólido resultante foi então triturado com o éter (aproximadamente 500 ml) e o sólido foi cole- tado, lavado com o éter e secou (30 0C, forno a vácuo durante o fim de semana) para produ- zir um sólido inclolor (91,1 g, 80 %). Este material foi combinado com um lote semelhante, preparado de uma maneira análoga, e o material combinado (o total de 178 g) foi dissolvido em acetato de etila (2,75 I) com aquecimento (refluxo suave, agitação superiro). A solução clara quente resultante foi suavemente agitada e resfriada à temperatura ambiente durante a noite. O sólido foi coletado, lavado com o acetato de etila frio (500 ml) e seco (50 0C no forno de vácuo, aprox. 3 dias) para produzir a /V-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5- oxo-prolinamida, como agulhas inclolores (148,4 g).
LC/MS [M+H] + = 335/337, tempo de retenção = 2,26 minutos.
1H RMN (CDCI3, 500MHz) δ 1,86 (m, 1 H), 2,21 (m, 1 H), 2,24 (m, 1 H), 2,28 (m, 1 H), 2,64 (s, 3H), 4,12 (dd, 1H, J = 8,3, 3,5 Hz), 4,47 (d, 2o, J = 5,8 Hz), 7,58 (t, 1 H1 J = 7,8 Hz), 7,65 (dd, 1H, J = 7,8, 1,0 Hz) τ 7,80 (dd, 1 H1 J = 7,8, 1,2 Hz) τ 8,81 (largo t, 1 H, J = 5,7 Hz);
13C NMR δ 174,4, 171,4, 138,8, 133,1, 129,8, 127,5, 127,1, 126,6, 122,9,61,6, 40,2, 29,1, 28,0, 22,5.
Excesso Enanciomérico = 99,1 %, como determinado por cromatografia quiral mé- todo A, indicativo de A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-L-prolinamida, tempo de retenção = 6,99 minutos.
[a] d =-0,8 0 (c = 1, MeOH), Temperatura = 29,3 °C, comprimento de onda = 589nm ponto de fusão = 173 0C.
Exemplo 52.
A/-[(2,3-dicloro-4-fluorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-prolinamida (E52). A l-metil-5-oxoprolina (0,060 g, 0,42 mmol, preparada tal como descrito acima no Exemplo 51) foi dissolvida em diclorometano (5 ml) e à mesma foram acrescentados clori- drato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,096 g, 0,5 mmol), 1- hidroxibenzotriazol (0,068 g, 0,5 mmol), e A/-etil morfolina (0,160 ml, 1,26 mmol). A mistura foi agitada durante aprox. 10 minutos e depois cloridrato de [(2,3-dicloro-4-fluorofenil) metil] amina (0,081 g, 0,42 mmol, preparado tal como descrito anteriormente no Exemplo 48), foi acrescentado e deixou-se que a mistura se misturasse noturno (aproximadamente 17 horas) e depois durante o fim de semana. A mistura foi então tratada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (aproximadamente 3 ml) e agitada energicamente durante minutos.
A camada orgânica foi separada usando cerâmica hidrofóbica sinterizada, lavada com diclorometano aquoso adicional (aproximadamente 2 ml). As frações orgânicas combi- nadas foram concentradas para produzir o sólido colorido cremoso. O sólido foi partilhado entre acetato de etila (aproximadamente 20 ml) e água (aproximadamente 10 ml) e a cama- da orgânica foi então seperada passando por um separador de fase e concentrada para produzir [(2,3-icloro-4-fluorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-prolinamida pura como um sólido bran- co-s uj o.
LC/MS [M+H]+ = 319, tempo de retenção = 2,2 minutos.
Exemplos 53 a 64.
De uma maneira análoga àquela descrita no Exemplo 52 acima dos compostos ta- belados abaixo (Tabela 4) foram preparados substituindo a amina adequada (ou sal da mesma) pelo cloridrato de [(2,3-dicloro-4-fluorofenil) metil] amina usado no procedimento acima mencionado. Todas as aminas usadas para fazer os compostos mostrados na Tabela 4 estão disponíveis de fontes comerciais ou podem ser preparados usando vias anterior- mente descritas na literatura química ou usando métodos análogos.
Tabela 4.
Exemplo N0 Nome Químico [M+H]+ Tempo de retenção (min) E53 N γ n^ J F I O O A/-[(2-cloro 3,4- difluoro fenil) metil] -1-metil -5 - oxo - prolinamida 303 2,04 Ε54 _ Cl I ο 281 2,29 Λ/-[(4 -cloro -2 - metil fenil) metil] -1- metil -5 - oxo - prolinamida Ε55 | O hF 319 2,29 Λ/-{[4 -fluoro -2- (trifluoro metil) fenil] metil} -1- metil - 5 -oxo - prolinamida Ε56 l o N-[(2,3 -dicloro - fenil) metil] -1- metil - 5 -oxo - prolinamida 301 2,28 Ε57 JJ^Ç I o N-[(2,6 dicloro fenil) metil] -1- metil -5 -oxo - prolinamida 301 2,15 Ε58 N-[(2,6 dicloro fenil) metil] -1- metil -5 -oxo - prolinamida 281 2,27 Ε59 I o Λ/-{[2 - fluro -3 - (trifluoro metil) fenil] metil} -1- metil -5 -oxo -prolinamida 319 2,32 Ε60 I o N-[(3 -cloro -2- fluoro fenil) metil] -1- metil -5 - oxo -prolinamida 285 2,14 E61 I o N-[(2,4 dicloro -6- metil fenil) metil] -1- metil -5 -oxo -prolinamida 315 2,3 E62 1- metil -A/-{[2-metil-3-(trifluoro metil) fenil] me- til} -5 -oxo -prolinamida 315,1 2,26 E63 A/-[(2-bromo -4- fluoro fenil) metil] -1- metil -5 - oxo -prolinamida 330,9 2,0 E64 f « Λ/-{[3 - fluoro - 2 - (trifluoro metil) fenil] metil} - 1- metil -5 -oxo -prolinamida 319 2,1
As aminas necessárias para as sínteses dos Exemplos 62 a 64 foram preparadas de acordo com os procedimentos descritos, respectivamente, abaixo:
1) Cloridrato de {[2-metil-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina (Amina usada para pre- parar o Exemplo 62).
O borano tetraidrofurano (1 M, 39,4 ml, 39,4 mmol) foi acrescentado a uma solução
de 2-metil-3-trifluorometil benzamida (2 g, 9,85 mmol) em tetraidrofurano (75 ml) e mistura- dos a 70 0C por 5 horas. LCMS mostrou uma reação incompleta então o aquecimento a 70 0C sob argônio foi continuado durante a noite e depois por mais 5 horas adicionais. A mistu- ra da reação foi tratada com solução aquosa de ácido clorídrico 2N e agitada a 100 0C por 4 horas e depois deixada resfriar durante o fim de semana. A mistura foi reduzida à secura sob vácuo e depois partilhada entre diclorometano e hidróxido de sódio aquoso 2N. A ca- mada orgânica foi separada usando cerâmica hidrofóbica sinterizada e reduzida para produ- zir um resíduo que foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica (eluindo com 0 % a 5 % 2N amônia/metanol em diclorometano). O solvente foi evaporado e o resíduo solu- bilizado em éter dietílico e tratado com ácido clorídrico em éter a 1 Μ. O sólido que precipi- tou foi coletado por filtração e foi então triturado com diclorometano e depois da filtração o cloridrato de 2-metil-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina (1,4 g) foi obtido como um sólido branco.
LC/MS [M+H]+ = 173, tempo de retenção = 1,30 minutos.
2) Cloridrato de [(2-bromo-4-fluorofenil) metil] amina (Amina usada para preparar o Exemplo 63).
(i) O brometo de 2-bromo-4-fluorobenzil (5g 18,8 mmol) e ftalimida de potássio (4g, 21,6 mmol) foram combinados em dimetilformamida (200 ml) e agitados a 80 0C por 18 ho-
ras durante a noite. A mistura foi reduzida sob vácuo e o resíduo foi partilhado entre éter dietílico e água. Os sólidos foram filtrados e a camada aquosa foi lavada com mais éter (2 χ 50 ml). As camadas etéreas foram combinadas e secaram sobre sulfato de sódio depois filtradas e evaporadas para produzir um sólido branco-sujo (3,36 g). O sólido foi triturado com o metanol e a filtração produziu 2-[(2-bromo-4-fluorofenil) metil]-1 H-isoindole-1,3 (2H)- diona como um sólido (2,06 g) que foi usado sem purificação adicional na etapa seguinte.
LC/MS [M+H]+ = 334, tempo de retenção = 3,30 minutos.
(ii) O hidrato de hidrazina (0,655 ml, 21 mmol) foi acrescentado a uma suspensão de 2-[(2-bromo-4-fluorofenil) metil]-1 H-isoindole-1,3 (2H)-diona (2 g, 6 mmol) em etanol (60 ml) e agitado na temperatura ambiente durante a noite. A reação não foi ao final nesta etapa
portanto a mistura foi aquecida a 100 0C por um total de 2 horas (a mistura empalideceu e turvou durante este tempo). A mistura foi filtrada para remoção dos sólidos ,depois resfriada e filtrada novamente. Os sólidos foram lavados com o etanol frio e depois as frações de eta- nol combinadas foram evaporadas à secura sob vácuo. O resíduo resultante foi partilhado entre solução aquosa de ácido clorídrico 2N e diclorometano. A fase orgânica foi separada usando cerâmica hidrofóbica sinterizada. A camada aquosa foi lavada com mais diclorome- tano e separou-se novamente. A camada aquosa foi então reduzida sob vácuo para deixar um sólido amarelo pálido (0,876 g). O sólido foi tomado na solução aquosa saturada de bi- carbonato de sódio e extraído com diclorometano. A separação por cerâmica hidrofóbica sinterizada e a evaporação produziram um resíduo que foi dissolvido em éter dietílico e tra- tado com ácido clorídrico em éter. Um sólido amarelo pálido precipitou da mistura. A evapo- ração e a secagem produziram o cloridrato de [(2-bromo-4-fluorofenil) metil] amina, (0,789 g).
LC/MS [M+H]+ = 203, tempo de retenção = 1,08 minutos.
3) Cloridrato de {[3-fluoro-2-(trifluorometil) fenil] metil} amina (Amina usada para preparar o Exemplo 64).
O borano tetraidrofurano (1M, 19,2 ml, 19,2 mmol) foi acrescentado gota a gota a uma solução de 3-fluoro-2-(trifluorometil) benzamida (1 g, 4,8 mmol) em tetraidrofurano (40 ml) sob argônio na temperatura ambiente. A mistura foi aquecida a 70 0C e depois uma alí- quota adicional de borano tetraidrofurano (10 ml, 10 mmol) foi acrescentada e o aquecimen- to a 70 0C foi continuado durante o fim de semana. A mistura de reação foi resfriada à tem- peratura ambiente e depois tratada com solução aquosa de ácido clorídrico 2M (15 ml) e agitado na temperatura ambiente durante 15 minutos. A solução aquosa de hidróxido de sódio foi acrescentada até que o pH da mistura estivesse entre 8 e 9 e depois a mistura foi extraída com o acetato de etila (3 χ 30 ml). As camadas orgânicas combinadas foram filtra- das por cerâmica hidrofóbica sinterizada e depois evaporadas sob vácuo. O resíduo foi re- dissolvido em diclorometano, filtrado por cerâmica hidrofóbica sinterizada e evaporada para produzir um óleo amarelo. O óleo foi dissolvido em solução aquosa de ácido clorídrico 2M. Um precipitado branco formou-se e foi coletado por filtração de vácuo e depois carregado igualmente para 4x10 colunas SCX g. As colunas foram lavadas com água com metanol e água e depois amônia aquosa foi usada para lavar o produto. Estas últimas frações foram reduzidas sob vácuo para produzir um óleo amarelo (0,4 g). O óleo foi dissolvido em éter dietílico e tratado com ácido clorídrico em éter a 1 M até não mais precipitado formado. A mistura foi reduzida sob vácuo para produzir cloridrato de {[3-fluoro-2-(trifluorometil) fenil] metil} amina como um sólido branco.
LC/MS [M+H]+ = 193, tempo de retenção = 1,15 minutos.
Exemplos 65 a 69.
Exemplos tabelados abaixo (Tabela 5) foram preparados de uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 12 substituindo a amina adequado (ou sal da mesma) pela [(2,3,4-trifluorofenil) metil] amina usada no procedimento descrito no Exemplo 12. Todas as aminas usadas para fabricar os compostos mostrados na Tabela 5 estão disponíveis de fon- tes comerciais ou podem ser preparados usando vias anteriormente descritas na literatura química a menos que seja afirmado de modo diferente. A 1-etil-5-oxo-prolina usada para preparar esses Exemplos foi por sua vez preparada usando o método C tal como descrito para o Exemplo 12, diferentemente do caso do Exemplo 65, onde o método A foi usado.
Tabela 5.
Exemplo N0 Nome Químico [M+H]+ Tempo de retenção (min) E65 ^O O A/-[(2,3-dicloro -4- fluoro fenil) metil] -1-etil -5 - oxo - prolinamida 333 2,31 E66 1- metil -5 -oxo - N-[(2,4,6 trimetil fenil) metil] - prolinamida 288 2,41 E67 ^ O F Λ/-{[2,3 -difluoro fenil) metil} -1- etil - 5 -oxo - prolinamida 283 1,96 E68 Cl J 0 A/-[(3,5-dicloro - fenil) metil] -1- etil - 5 -oxo - prolinamida 315 2,39 E69 J ° N-[(3 cloro 2 -fluorofenil) metil] -1- etil -5 -oxo - prolinamida 299 2,22
Exemplo 70.
/V-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1 -etil-5-oxo-prolinamida (E70).
O 1-etil-5-oxoprolina (0,100 g, 0,64 mmol) foi dissolvido em uma mistura de diclo- rometano (3 ml) e dimetilformamida (0,5 ml) e à mesma foram acrescentados cloridrato de N-(3-dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,147 g, 0,77 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (0,104 g, 0,77 mmol), e A/-etil morfolina (0,244 ml, 1,92 mmol). A mistura foi agitada durante minutos e depois 2-cloro-4-fluorobenzilamina foi acrescentado à mistura e a agitação continuou noturna (aproximadamente 16 horas) na temperatura ambiente. A mistura foi en- tão tratada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (aproximadamente 2 ml) e agitada energicamente durante aprox. 10 minutos. A camada aquosa foi retirada usan- do um separador de fase e extraída com mais diclorometano (2x1 ml). As camadas orgâni- cas combinadas foram concentradas para produzir um óleo amarelo e que foi posteriormen- te purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir N-[(2- cloro-4-fluorofenil) metil]-1-etil-5-oxo-D-prolinamida (0,065 g) como um sólido branco. LC/MS [M+H]+ = 299, tempo de retenção = 2,16 minutos.
Excesso Enanciomérico = 80,9 %, como determinado por cromatografia quiral mé- todo B, indicativo de A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-etil-5-oxo-D-prolinamida, tempo de retenção = 5,91 minutos
O 1-etil-5-oxoprolina usado no procedimento acima mencionado foi preparado como descrito abaixo:
(i) O éster etílico do ácido D-piroglutâmico (4,17 g, 26,53 mmol) foi dissolvido em te- traidrofurano (30 ml) e o iodeto de etila (2,23 ml, 27,86 mmol) foi acrescentado para produzir uma solução amarela pálida. Que foi resfriado a 0 0C e o hidreto de sódio (60 % em óleo, 1,11g, 27,86 mmol) foi acrescentado em partes. Depois da adição de todo o hidreto de sódio a mistura foi agitada a 0 0C durante uns 20 minutos adicionais até que a maior parte das borbulhas tenha acabado. A mistura foi então aquecida à temperatura ambiente e agitado durante a noite sob argônio. A mistura foi então tratada com a solução de cloreto de amônio aquosa saturada (aproximadamente 5 ml). A camada orgânica foi separada e a camada a- quosa foi extraída com mais diclorometano (3 χ 20 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas passando por um separador de fase e depois concentradas a um óleo ver- de/marrom (3,2 g). Que foi purificado por cromatografia flash automatizada em coluna de sílica-gel (Biotage SP4), eluindo com um gradiente de 0 % a 100 % de acetato de etila em hexano, para produzir o 1-etil-5-oxoprolinato de etila como um óleo amarelo (1,33 g) que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional.
(ii) O 1-etil-5-oxoprolinato de etila (1,33 g, 7,18 mmol) foi dissolvido em etanol (10 ml) e resfriado a 0 0C em um banho de gelo. Ao qual foi acrescentado a solução de hidróxido de sódio aquosa (1,72 ml, 21,53 mmol) 12,5 Mea mistura foi agitada durante aprox. 4 horas a 0 0C. O etanol foi evaporado sob vácuo e o resíduo aquoso foi acidificado com solução aquosa de ácido clorídrico 2N a pH = 1. O volume da fase aquosa foi reduzido a aprox. 3 ml sob vácuo e depois extraído com uma mistura 3:1 de clorofórmio e isopropanol usando um separador de fase. As camadas orgânicas combinadas foram concentradas a um óleo ama- relo pálido que na secagem sob vácuo se cristalizou para produzir 1-etil-5-oxoprolina como um sólido branco (1,12 g).
Exemplos 71 a 82.
De uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 70 acima, dos compostos tabelados abaixo (Tabela 6) foi preparada substituindo a amina adequada (ou sal do mes- mo) pelo 2-cloro-4-fluorobenzilamina usado no procedimento acima mencionado. Todas as aminas usadas para fazer os compostos mostrados na Tabela 6 estão disponíveis de fontes comerciais ou podem ser preparados usando as vias anteriormente descritas na literatura química, a menos que seja afirmado de modo diferente. Onde determinado (por HPLC qui- ral), o excesso enanciomérico (e.e.) do isômero mostrado também é listado junto com o seu nome estereoespecífico, o método de separação quiral usado em parantheses e o tempo de retenção correspondente (r.t). daquele método.
Tabela 6.
Exemplo N0 Nome Químico [M+H]+ Tempo de re- tenção (min) e.e. E71 A/-[(2,4-dicloro fenil) me- til]- 1- etil -5-oxo- prolinamida 315 2,36 75,6 % (C) Λ/-[(2,4- dicloro fenil) me- til]- 1- etil -5- oxo-D- prolinamida, t.r. = 6,18 min E 72 Λ/-[( 2- cloro-3- (trifluoro metil) fenil) metil]-1 - etil - 5 -oxo - prolinamida 349 2,44 76,4 % (A) Λ/-[( 2- cloro-3- (trifluoro metil) fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo -D- prolinamida. t.r. = 4,44 min E73 J q f N-{{4- cloro - 3- (trifluo metil) fenil] metil}-1 - etil - 5 -oxo - prolinamida 349 2,5 77,3 % (A) N-{(4- cloro - 3- (trifluo metil) fenil] metil}-1 - etil -5 -oxo -D- prolinamida t.r. = 4,45 min E74 N-[(2- cloro 6-metil fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo - prolinamida 295 2,23 77,6 % (C) N-[(2- cloro 6-metil fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo -D- prolinamida t.r. = 5,08 min Ε75 J 8 Λ/-[(3,4- dicloro fenil) me- til]-1 - etil -5 -oxo - proli- namida 315 2,38 76,3 % (C) Λ/-[(3,4- dicloro fenil) me- til]-1 - etil -5 -oxo - D - prolinamida, t.r.=8,78 min Ε76 N-[(2- cloro fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo - prolinamida 281 2,06 Ε77 o ca N-[(2,6- dicloro fenil) me- til]- 1- etil -5 -oxo - proli- namida 315 2,11 Ε78 —o N-[(2- cloro -3,46- difluoro fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo - prolinamida 317 2,13 Ε79 J I N-[(4- cloro -2-metil fenil) metil]-1 - etil -5 -oxo - prolinamida 295 2,24 Ε80 oΛ A^OU o N-[(2,3 -dicloro fenil) me- til]- 1- etil -5- oxo- prolinamida 315 2,36 E81 1 - etil - N-{[4- fluoro -2- (trifluoro metil) fenil] metil} -5 -oxo -prolinamida 333 2,25 E82 S O 1 N-[(3- cloro -2-fluorofenil) metil]-1 - etil -5 -oxo - prolinamida 299 2,1
Exemplo 83.
A/-{[4-fluoro-2-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-prolinamida (E83).
o^Y»
1 o
A A/-{[4-fluoro-2-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-prolinamida foi preparada de uma maneira análoga àquela descrita acima para a síntese da A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-etil-5-oxo-prolinamida (Exemplo 70) porém a 1-metil-5-oxoprolina (preparada como descrito abaixo) foi substituída por 1-etil-5-oxoprolina e a {[4-fluoro-2-(trifluorometil) fenil] metil} amina foi substituída por 2-cloro-4-fluorobenzil amina.
LC/MS [M+H]+ = 319, tempo de retenção = 2,14 minutos.
A 1-metil-5-oxoprolina usada no procedimento acima mencionado foi preparada como descrito abaixo:
(i) O éster etílico do ácido D-piroglutâmico (4,0 g, 25,5 mmol) foi dissolvido em te- traidrofurano (25 ml) e resfriado a 0 0C. Iodeto de metila (1,66 ml, 26,7 mmol) foi acrescen- tado e a agitação continuou durante 10 minutos sob argônio a 0 0C. O hidreto de sódio (60 % em óleo, 1,6 g, 26,7 mmol) então foi acrescentado em partes (permitindo que cada porção reagisse). Depois da adição de todo o hidreto de sódio a mistura foi deixada aquecer à tem- peratura ambiente e agitada durante a noite sob argônio. A mistura foi então tratada com a solução aquosa saturada de cloreto de amônio (aproximadamente 15 ml) e agitada por 4 horas. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com mais dicloro- metano. As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre sulfato de magnésio e de- pois concentradas a um óleo escuro. Que foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica, eluindo com um gradiente de 0 % a 75 % de acetato de etila em hexano, para pro- duzir o 1-metil-5-oxoprolinato de etila como um óleo inclolor (0,27 g) que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional.
(ii) O 1 -metil-5-oxoprolinato de etila (0,27 g, 1,58 mmol) foi dissolvido em etanol (5 ml) e resfriado a 0 0C em um banho de gelo. Ao qual foi acrescentada a solução de hidróxi- do de sódio aquosa (3 ml) a 2M e a mistura foi agitada durante aproximadamente 4 horas a 0 0C. O etanol foi evaporado sob vácuo e o resíduo aquoso foi acidificado com solução a- quosa de ácido clorídrico 2N a pH=1. O volume da fase aquosa foi reduzido a aprox. 3 ml sob vácuo e depois extraído com uma mistura 3:1 de clorofórmio e isopropanol usando um separador de fase. As camadas orgânicas combinadas foram concentradas para produzir 1- metil-5-oxoprolina que foi usado sem purificação adicional.
Exemplos 84 a 90.
Além disso, e também de uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 70 acima, os compostos tabelados abaixo (Tabela 7) foram preparados substituindo a amina adequada (ou sal da mesma) pela 2-cloro-4-fluorobenzilamina usada no Exemplo 70. Todas as aminas usadas para fazer os compostos mostrados na Tabela 7 estão disponíveis de fontes comerciais ou podem ser preparados usando vias anteriormente descritas na literatu- ra química a menos que de modo diferente seja afirmado. A 1-metil-5-oxoprolina (preparada como descrito acima para o Exemplo 81) foi substituída pela 1-etil-5-oxoprolina usada no Exemplo 70. Onde determinado (por HPLC quiral), o excesso enanciomérico (e.e). do isô- mero mostrado, também é listado junto com o seu nome estereoespecífico, o método de separação quiral usado está entre parênteses e o tempo de retenção correspondente (t.r.) para aquele método.
Tabela 7.
Exemplo N0 Nome Químico [M+H]+ Tempo de re- tenção (min) e.e. E84 A/-[(2,3-dicloro fenil) me- til]- 1- etil -5-oxo- prolinamida 301 2,11 E85 ^O Cl F F A/-{[2- cloro-3- (trifluoro metil) fenil] metil}-1 - metil 335 2,27 94,1 % (A) Λ/-{[ 2- cloro-3- (trifluoro metil) fenil] metil}-1 - metil -5 -oxo -D- prolinamida. -5 -oxo - prolinamida t.r. = 5,17 min E86 /"""Ί aNisisS 0 N^NsXj ° a N-[(2,6- dicloro fenil) me- til]-1 - metil -5 -oxo - pro- linamida 301 1,98 E87 N-[(3- cloro 2-metil fenil) metil]-1 - metil -5 -oxo - prolinamida 281 2,11 E88 Λ/-{[2- fluoro -3- (trifluoro metil) fenil] metil}-1 - metil -5 -oxo - prolinamida 319 2,16 E89 o^YA3 Λ/-[(5- cloro -2-metil fenil) metil]-1 - metil -5 -oxo - prolinamida 281 2,1 E90 ' O F Λ/-[(3- cloro -2- fluorofenil) metil]- 1- metil -5 -oxo - prolinamida 285 1,98
Exemplo 91. A 5-οχο-1 -fenil-prolina (0,072 g, 0,35 mmol, preparada tal como descrito abaixo) foi dissolvida em diclorometano (aproximadamente 2 ml) e dimetilformamida (0,5 ml) e à mes- ma foram acrescentados cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,081 g, 0,42 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (0,057 g, 0,42 mmol), e N-etil morfolina (0,134 ml, 1,05 mmol). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 30 minutos e depois a [(2- cloro-4-fluorofenil) metil] amina (0,067 g, 0,42 mmol) foi acrescentada.
A agitação foi continuada durante a noite na temperatura ambiente e depois a mis- tura foi diluída com mais diclorometano e solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. A camada aquosa foi separada e extraída com mais diclorometano (3 alíquotas). As cama- das orgânicas combinadas então foram lavadas com a salmoura antes da secagem sobre sulfato de magnésio. A evaporação do solvente então produziu um óleo amarelo que foi pu- rificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa. Finalmente a trituração do material assim obtido com uma mistura 1:1 de diclorometano e éter dietílico forneceu, depois de filtração e secagem, a A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-5-oxo-1-fenil-prolinamida (0,031 g) como um sólido branco. LC/MS [M+H] + = 347, tempo de retenção = 2,46 minutos.
A 5-oxo-1 -fenil-prolina usada no procedimento acima mencionado foi preparada como se segue:
(i) O éster etílico do ácido D-piroglutâmico (0,200 g, 1,27 mmol) foi dissolvido em dioxano (5 ml) e tratado com tris (dibenzilideno acetona) dipaládio (0) (0,058 g, 0,06 mmol),
bromobenzeno (0,351 ml, 1,53 mmol), carbonato de césio (0,621 g, 1,91 mmol) e Xant- phos® (0,110 g, 0,19 mmol). A mistura resultante foi aquecida sob refluxo durante a noite e depois deixada resfriar à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com o metanol e filtra- da. O filtrado foi evaporado sob vácuo e depois partilhado entre diclorometano e solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. A camada aquosa foi extraída com mais dicloro- metano (3 alíquotas) e depois as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com a sal- moura e secas sobre sulfato de magnésio. A evaporação do solvente produziu um resíduo amarelo brilhante que foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica, eluindo com um gradiente de acetato de etila de 0 % a 50 % em hexano, para produzir metil 5-oxo-1- fenilprolinato (0,078 g) como um óleo amarelo. Que foi usado na etapa seguinte sem purifi- cação adicional.
(ii) O 5-oxo-1-fenilprolinato de metila (0,078 g, 0,36 mmol) foi combinado com hidró- xido de sódio aquoso 2N (2 ml) em etanol (2 ml) a 0 0C. A mistura foi agitada entre -10 0C e 0 0C durante 5 horas. O solvente foi então evaporado sob vácuo e o resíduo foi acidificado a pH=1 pela adição de solução aquosa de ácido clorídrico 2M. A qual foi acrescentado diclo-
rometano e a mistura foi passada por um separador de fase. A camada aquosa foi lavada com mais diclorometano e depois as camadas de diclorometano combinadas foram evapo- radas para produzir a 5-oxo-1-fenil-prolina (0,072 g) como uma goma amarela que foi usada sem purificação adicional na etapa seguinte. Exemplo 92.
A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-5-oxo-1-(fenil metil) - prolinamida (E92).
A 5-ΟΧΟ-1 - (fenil metil) prolina (0,100 g, 0,46 mmol, preparado tal como descrito abaixo) foi dissolvida em uma mistura de diclorometano (2,5 ml) e dimetilformamida (0,5 ml) e à mesma foram acrescentados cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,105 g, 0,55 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (0,074 g, 0,55 mmol), e N-et\\ morfolina (0,143 ml, 1,37 mmol). A mistura foi agitada durante 10 minutos e depois a {[2-cloro-3- (trifluorometil) fenil] metil} amina (0,115 g, 0,55 mmol) foi acrescentada e a mistura foi agita- da durante 1 hora. Uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (10 ml) foi acres- centada e a mistura foi agitada energicamente durante 15 minutos. A fase orgânica foi sepa- rada com um separador de fase e a fase aquosa foi lavada com novas alíquotas de dicloro- metano (3x10 ml). As frações orgânicas foram combinadas e secas sobre sulfato de mag- nésio. O solvente foi então evaporado e o resíduo foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir a A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-5-oxo-1- (fenil metil)-D-prolinamida.
LC/MS [M+H] + = 411, tempo de retenção = 2,77 minutos.
Excesso Enanciomérico = 100,0 %, como determinado por cromatografia quiral mé- todo D, indicativo de A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-5-oxo-1 - (fenil metil)-D- prolinamida, tempo de retenção = 10,58 minutos.
A 5-oxo-1 - (fenil metil) prolina usada no método descrito acima foi preparada como se segue:
O ácido D-glutâmico (1,47 g, 10 mmol) foi dissolvido em hidróxido de sódio aquoso 2N (10 ml, 20 mmol) e agitado durante 15 minutos. A mistura foi então tratada com uma so- lução de benzaldeído (1,1 ml, 10 mmol) em etanol (3 ml) e agitada na temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura foi resfriada a 0 0C e tratada com boroidreto de sódio (0,030 g). A mistura foi deixada aquecer até a temperatura ambiente com mais de 4 horas de agita- ção e depois lavada com o éter dietílico (três vezes) antes de ser acidificada com o ácido clorídrico concentrado a pH=2. O precipitado resultante foi filtrado e lavado com o éter dietí- Iico antes slurrying em etanol e formação de azeótropo três vezes com mais etanol. Final- mente o material restante foi tornado em lama com etanol (50 ml) e aquecido sob refluxo de 16 horas. A mistura foi então resfriada à temperatura ambiente e evaporada sob vácuo. A secagem produziu a 5-oxo-1-puro (fenil metil) prolina.
Exemplo 93. A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-5-oxo-1-(fenil metil) prolinamida (E93).
•F
A A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-5-oxo-1 - (fenil metil) prolinamida foi preparada de uma maneira análoga àquela descrita para a síntese da A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-5-oxo-1 - (fenil metil) prolinamida (Exemplo 92) acima, mas usando a [(2-cloro-4- fluorofenil) metil] amina no lugar de {[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina.
xo) foi dissolvida em uma mistura de diclorometano (2,5 ml) e dimetilformamida (0,5 ml) e à mesma foram acrescentados cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,117 g, 0,61 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (0,082 g, 0,61 mmol), e N-eW\ morfolina (0,2 ml, 1,52 mmol). A mistura foi agitada durante 10 minutos e depois foi acrescentada [(2-cloro-4- fluorofenil) metil] amina (0,097 g, 0,61 mmol) e a mistura foi agitada durante a noite. Uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (10 ml) foi acrescentada e a mistura agi- tada energicamente durante 15 minutos. A fase orgânica foi separada com um separador de fase e a fase aquosa foi lavada com novas partes alíquotas de diclorometano (3x10 ml). As frações orgânicas foram combinadas e secaram sobre sulfato de magnésio. O solvente foi então evaporado e o resíduo foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir a A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-ciclopentil-5-oxo-prolinamida.
LC/MS [M+H]+ = 339, tempo de retenção = 2,4 minutos.
A 1-ciclopentil-5-oxoprolina usada no procedimento acima mencionado foi prepara- da como se segue:
(i) O cloridrato de dimetil D-glutamato (2,1 g, 10,00 mmol) foi dissolvido em metanol (7,5 ml) e tetraidrofurano (15 ml) e a mistura foi então tratada com o hidróxido de sódio moí- do (0,402 g, 10,05 mmol) durante 20 minutos sob argônio. Nesta etapa o ácido acético (0,575 ml, 10,05 mmol) e a ciclopentanona (0,889 ml, 10,05 mmol) foram acrescentados à mistura. Depois de agitar durante 10 a 15 minutos a mistura foi resfriada a 0 0C em banho de gelo e tratada com pastilhas de boroidreto de sódio (0,380 g, 10,05 mmol). A mistura foi agi- tada por 3 horas sob argônio e deixada aquecer-se à temperatura ambiente. Uma vez que a mistura tinha atingido a temperatura ambiente, o metanol foi evaporado da mesma e o resí-
LC/MS [M+H]+ = 361, tempo de retenção = 2,54 minutos. Exemplo 94.
A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1 -ciclopentil-5-oxo-prolinamida (E94).
A 1-ciclopentil-5-oxoprolina (0,100 g, 0,51 mmol, preparado tal como descrito abai- duo foi diluído com diclorometano (20 ml) e lavado com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (aproximadamente 25 ml). A camada orgânica foi separada e a cama- da aquosa foi extraída novamente com mais diclorometano (2 χ 20 ml). As camadas orgâni- cas combinadas foram concentradas sob vácuo para produzir um óleo. O óleo foi dissolvido em tolueno (10 ml) e aquecido sob refluxo durante a noite. O solvente foi então evaporado e o resíduo resultante foi purificado por cromatografia em flash em uma coluna de sílica, elu- indo com um gradiente de metanol de 0 % a 10 % em diclorometano, para produzir o 1- ciclopentil-5-oxoprolinato de metila bruto que foi usado sem purificação adicional na etapa seguinte.
(ii) 1-ciclopentil-5-oxoprolinato de metila (0,560 g, 2,65 mmol) foi dissolvido em eta-
nol (10 ml) e resfriado a 0 0C em banho de gelo. O hidróxido de sódio aquoso 2M (5 ml) foi acrescentado e a mistura foi agitada na temperatura de gelo de 4 horas. O etanol foi então evaporado sob vácuo e o resíduo aquoso foi acidificado a pH=1 pela adição de solução a- quosa de ácido clorídrico 2N. O volume de mistura aquosa resultante foi reduzido sob vácuo a aprox. 3 ml que foi então extraído com uma mistura 3:1 de clorofórmio e isopropanol res- pectivamente usando um separador de fase. A camada aquosa foi lavada com mais diclo- rometano e depois as frações orgânicas combinadas foram evaporadas para produzir a 1- ciclopentil-5-oxoprolina bruta que foi usada nas reações subseqüentes sem purificação adi- cional.
Exemplos 95 a 99.
De uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 94 acima dos compostos tabelados abaixo (Tabela 8), foi preparada substituindo a amina adequada (ou sal da mes- ma) pela [(2-cloro-4-fluorofenil) metil] amina usado no procedimento acima mencionado e/ou substituindo o aldeído adequado ou a cetona da ciclopentanona usada no procedimento acima mencionado. Todas as aminas usadas para produzir os compostos mostrados na Ta- bela 8 estão disponíveis de fontes comerciais ou podem ser preparados usando vias anteri- ormente descritas na literatura química a menos que seja afirmado de modo diferente.
Tabela 8.
Exemplo N0 Nome Químico [M+H]+ Tempo de retenção (min) E95 ° /ITnn^TVf γΛ o J A N-{[2-dicloro 3- (trifluoro metil) fenil] metil}-1- etil -5-oxo-prolinamida 389 2,66 E96 N-[(2- cloro- 4- fluoro fenil) metil] -1- ciclobutil -5 -oxo - prolinamida 325 2,35 E97 N-[(2- cloro - 4 - fluorofenil) metil]-1 - (1-metil etil) -5 -oxo - prolinamida 313 2,19 E98 N-[(2- cloro - 4 - fluorofenil) metil]-1 - (1-metil propil) -5 -oxo - prolinamida 327 2,35 E99 —o a F 1 N-{[2- cloro - 3- (trifluoro metil) fenil] metil}-1 - (1- metil propil) -5 -oxo - prolinamida 377 2,6
Exemplo 100.
A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-(2,2-dimetil propil) -5- oxo-prolinamida
(E100).
V I
A 1-(2,2-dimetil propil) - 5- oxoprolina (0,100 g, 0,5 mmol, preparado tal como des- crito abaixo) foi dissolvido em diclorometano (5 ml) e à mesma foi acrescentado cloridrato de /\/-(3-dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,191 g, 1 mmol), e 1-hidroxibenzotriazol (0,135 g, 1 mmol). A mistura foi agitada durante 30 minutos na temperatura ambiente e de- pois a {[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina (0,209 g, 1 mmol) foi acrescentada e a mistura foi agitada durante a noite na temperatura ambiente. A mistura foi então lavada em seqüência com a água, ácido cítrico aquoso 3N, e mais três vezes com a água e depois se- ca por filtragem em um cartucho hidromatrix (Varian 5 g). O solvente foi então evaporado e o resíduo foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir a A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-(2,2-dimetil propil) - 5-oxo-prolinamida. LC/MS [M+H]+ = 391/393, tempo de retenção = 2,78 minutos. As 1-(2,2-dimetil propil) - 5- oxoprolina usada no método descrito acima foi prepara- da como se segue:
2N (10 ml, 20 mmol) e tratado com uma solução de trimetilacetaldeído (1,09 ml, 10 mmol) em etanol (5 ml) e depois agitado na temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura foi resfriada a 0 0C e tratada com o boroidreto de sódio (0,130 g). Permitiu-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente com mais de 4 horas de agitação e depois acidificado ao pH neutro. A concentração sob vácuo foi seguida por formação de lama em etanol e for- mação de azeótropo três vezes com mais etanol. Finalmente o material restante foi suspen- so em etanol (50 ml) e aquecido sob refluxo de 48 horas. A mistura foi então resfriada à temperatura ambiente, os sais foram filtrados e o solvente foi evaporado sob vácuo para produzir uma goma. A trituração com o éter dietílico seguido da secagem forneceu a 1-(2,2- dimetil propil) - 5-oxo-prolina sólida pura (1,1 g).
A /\/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}- 5-oxo-1 -(fenil metil)-D-prolinamida foi preparada de uma maneira análoga àquela descrita para a síntese de A/-{[2-cloro-3- (trifluorometil) fenil] metil}-1-(2,2-dimetil propil) - 5-oxo-prolinamida (exemplo 100) acima mas usando 5-oxo-1-(fenil metil) prolina em vez de 1-(2,2-dimetil propil) - 5-oxo-prolina.
LC/MS [M+H] + = 411/413, tempo de retenção = 2,77 minutos.
Excesso Enanciomérico = 100,0 %, como determinado por cromatografia quiral mé- todo D, indicativo de /\/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-5-oxo-1 - (fenil metil)-D- prolinamida, tempo de retenção = 8,09 minutos.
A 5-ΟΧΟ-1- (fenil metil) prolina foi preparada de uma maneira análoga àquela descri- ta acima para a síntese da 1-(2,2-dimetil propil) - 5-oxoprolina (Exemplo 100) mas usando benzaldeído no lugar de trimetil acetaldeído.
5
O ácido L-glutâmico (1,47 g, 10 mmol) foi dissolvido em hidróxido de sódio aquoso
Exemplo 101.
/\/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-5-oxo-1-(fenil metil) - prolinamida (E101).
F
30
Exemplo 102.
A/-[(2,4-diclorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-prolinamida (E102). A A/-[(2,4-diclorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-prolinamida foi preparada de uma maneira análoga àquela descrita acima para a síntese da A/-{[4-fluoro-2-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-prolinamida (Exemplo 83) mas a [(2,4-diclorofenil) metil] amina foi subs- tituída pela {[4-fluoro-2- (trifluorometil) fenil] rnetil} amina.
LC/MS [M+H]+ = 300,9, tempo de retenção = 2,13 minutos.
Excesso Enanciomérico = 97,8 %, como determinado por cromatografia quiral mé- todo A, indicativo de A/-[(2,4-diclorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-D-prolinamida.
Tempo de retenção = 6,25 minutos.
Exemplo 103.
A 1 - etil - A/-{[2-fluoro-3-(trifluorometil) fenil] metil} - 5-oxo-prolinamida foi preparada de uma maneira análoga ao descrito acima (ver o Exemplo 70) para a A/-[(2-cloro-4- fluorofenil) metil]-1-etil-5-oxo-D-prolinamida mas usando a 2- fluoro- 3-trifluorometil benzilamina no lugar de 2-cloro-4-fluorobenzilamina. LC/MS [M+H]+ = 333, tempo de retenção = 2,24 minutos.
Exemplos 104-109.
Os exemplos tabelados abaixo (Tabela 9) foram preparados de uma maneira aná- loga àquela descrita para o Exemplo 12 substituindo a amina adequada (ou sal da mesma) pela [(2,3,4-trifluorofenil) metil] amina usada no procedimento descrito no Exemplo 12. To- das as aminas usadas para fazer os compostos mostrados na Tabela 9 estão disponíveis de fontes comerciais ou podem ser preparadas usando vias anteriormente descritas na literatu- ra química a menos que seja afirmado de modo diferente. A 1-etil-5-oxo- prolina usada para preparar esses Exemplos foram por sua vez preparados usando o método C, tal como des- crito para o Exemplo 12. Tabela 9.
Exemplo N0 Nome Químico [M+H]+ Tempo de retenção (min) E104 N N-[(2- ciano fenil) metil] -1- etil -5 -oxo - prolinamida 272 1,63 E105 0 IlI H N-{[2- ciano -3-(trifluoro metil) fenil] metil} -1- etil -5 -oxo - prolinamida 340 2,11 E106 O 1^Xj 1 -etil - N-[( 1- naftalenil metil]- 5 -oxo - prolinamida 297 2,17 E107 *=C\ /YCFl 0 1 -etil - 5 -oxo -N-{[4- (trifluoro metil) fenil] metil}- prolinamida 315 2,30 E108 ^O F 1 -etil-Λ/—{[2- fluoro -3- (trifluoro metil) fenil] metil}-5 -oxo - prolinamida 333 2,39 E109 N^Y V^-^N^ CF3 ^J O 1 -etil -5 - oxo- N-{[3- (trifluoro metil) fenil] metil}- prolinamida 315 2,34
O trifluoroacetato de 2-(aminometil)-6-(trifluorometil) benzonitrila necessário para a síntese do Exemplo 105 foi preparado como se segue:
(i) {[2-fluoro-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina (1,93 g, 10 mmol) foi dissolvido em diclorometano (40 ml) e tratado com uma solução de dicarbonato de bis (1,1-dimetil etil) (2,18 g, 10 mmol) em diclorometano (10 ml). Depois de agitar na temperatura ambiente por 2 horas o solvente foi evaporado para produzir um sólido amarelo pálido que foi purificado pela coluna de cromatografia em silica-gel, eluindo com um gradiente 1:10 a 1:5 de acetato de etila em hexanos, para produzir 1,1-dimetil etil {[2-fluoro-3-(trifluorometil) fenil] metil} car- bamato puro (2 g).
(ii) 1,1-dimetil etil {[2-fluoro-3-(trifluorometil) fenil] metil} carbamato (1,17 g, 4 mmol)
foi dissolvido em dimetil sulfóxido (5 ml) e tratado com o cianeto de potássio (0,260 g, 4 mmol). A mistura foi então aquecida am 80 0C sob argônio por 1,5 horas e depois a 120 0C por uma noite (16 horas). Cianeto de potássio adicional (0,260 g, 4 mmol) então foi acres- centado e o aquecimento continuou a 120 0C por 24 horas adicionais. A mistura foi então resfriada à temperatura ambiente, extinta com água, e diluída com o acetato de etila. Os extratos orgânicos foram separados e lavados três vezes com água e depois com a solução aquosa saturada de cloreto de sódio. A secagem e a evaporação produziram uma goma marrom que foi purificada em coluna de cromatografia em silica-gel, eluindo com um gradiente de 1:10 a 1:5 de acetato de etila em hexanos, para produzir 1,1-dimetil etil {[2- ciano-3-(trifluorometi) fenil] metil} carbamato parcialmente puro como um sólido/semi-sólido escuro que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. LC/MS [M-BOC+H] + = 201, tempo de retenção = 1,19 minutos.
(iii) 1,1-dimetil etil {[2-ciano-3-(trifluorometil) fenil] metil} carbamato (0,190 g, 0,63 mmol) foi dissolvido em diclorometano (4 ml) e tratado com o ácido trifluoroacético (4 ml). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 1 hora e depois evaporada. O resíduo foi tomado duas vezes em diclorometano e evaporado novamente para produzir o trifluoroa- cetato 2-(aminometil)-6-(trifluorometil) benzonitrila bruta que foi usada sem purificação adi- cional.
Exemplo 110.
1 metil - /V-(l-naftalenilmetil) - 5-oxo-prolinamida (E110).
O 1-metil-5-oxoprolina (0,050 g, 0,35 mmol, preparados de uma maneira análoga àquela descrita acima para o Exemplo 51), cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'-etil - carbodiimida (0,081 g, 0,42 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (0,057 g, 0,42 mmol), etil N- morfolina (0,166 ml, 1,05 mmol) e (1-naftalenil metil) amina foram combinados com dicloro- metano (aproximadamente 8 ml) e a mistura foi agitada por aprox. 20 horas na temperatura ambiente. A mistura foi então lavada com solução aquosa de ácido clorídrico 2M (5 ml) e a camada orgânica foi separada usando um separador de fase. A camada orgânica foi lavada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio, separada como antes, e depois evaporada. O resíduo foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir a 1 metil - A/-(1-naftalenilmetil) - 5-oxo-prolinamida pura como um sólido bran- co (0,062 g).
LC/MS [M+H]+ = 283, tempo de retenção = 2,1 minutos.
Exemplo 111.
A/-{[2-cloro-4-fluoro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-prolinamida (E111). O Cl
A 1-metil-5-oxoprolina (0,057 g, 0,4 mmol, preparados de uma maneira análoga à- quela descrita acima para o Exemplo 51) foi dissolvida em diclorometano (4 ml) e tratada com 2-etoxi-1-etoxicarbonil-1,2-diidroquinolina (0,104 g, 0,42 mmol). Cloridrato de {[2-cloro- 4-fluoro-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina (0,105 g, 0,4 mmol, preparado tal como descrito abaixo) então foi acrescentado e a mistura foi agitada na temperatura ambiente por 4 horas. A mistura foi tratada com uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (10 ml) e agitada durante 5 minutos. A fase orgânica foi separada usando cerâmica hidrofóbica sinte- rizada e depois lavada com solução aquosa de ácido clorídrico 2N (2 χ 10 ml). A evaporação da fase orgânica então produziu /V-{[2-cloro-4-fluoro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5- oxo-prolinamida (0,106 g).
LC/MS [M+H]+ = 353, tempo de retenção = 2,49 minutos.
O cloridrato de {[2-cloro-4-fluoro-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina usado no méto- do descrito acima foi preparado como se segue:
(i) O 1-cloro-3-fluoro-2-(trifluorometil) benzeno (10 g, 50 mmol) foi dissolvido em te- traidrofurano (100 ml), resfriado a -70 0C sob argônio, e tratado com uma solução de sec- butil lítio 1,4M em cicloexano (37,5 ml, 52,5 mmol). A agitação foi continuada por 2 horas e depois o cloreto trimetil silila (6,7 ml, 52,5 mmol) foi acrescentado e a agitação continuou, ainda a -70 °C, por mais 1 hora. Permitiu-se que a mistura se aquecesse à temperatura am- biente e o tetraidrofurano foi então retirado sob vácuo. O resíduo foi partilhado entre éter dietílico e água e depois a camada orgânica foi separada e lavada com solução aquosa de ácido clorídrico 2N. A fase orgânica foi separada e concentrada para fornecer o produto bru- to que foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica-gel, eluindo com hexano, para produzir o [4-cloro-2-fluoro-3-(trifluorometil) fenil] (trimetil) silano puro como um óleo claro (10,35 g).
(ii) 2,2,6,6-tetrametil piperidine (3,3 ml, 19,44 mmol) foi acrescentada lentamente a
uma solução de n-butil lítio (2,5M em tolueno, 7,7 ml, 19,44 mmol) em tetraidrofurano (75 ml) a - 75 0C sob argônio e agitado durante 15 minutos. Uma solução de [4-cloro-2-fluoro-3- (trifluorometil) fenil] (trimetil) silano (5 g, 18,5 mmol) em tetraidrofurano (10 ml) foi então a- crescentada gota a gota à mistura, assegurando que a temperatura da mistura fosse manti- da abaixo de -65 0C1 e a agitação foi continuada por 2 horas. Um excesso de dióxido de car- bono sólido, que tinha sido anteriormente lavado com tetraidrofurano a -65 0C, foi acrescen- tado em pedaços e permitiu-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente por mais de 2 horas. A mistura foi reduzida sob vácuo para produzir um sólido amarelo pálido. Este material foi partilhado entre a água acidificada a pH=1 (200 ml) e éter dietílico (200 ml). A camada orgânica foi separada e seca sobre sulfato de sódio anidro. A evaporação produ- ziu um sólido marrom pálido que foi recristalizado do tolueno para produzir o ácido 2-cloro-4- fluoro-3-(trifluorometil)-5-(trimetil silil) benzóico puro (3,85 g, em 3 lotes) como agulhas bran- cas.
LC/MS [M-H] "= 312, tempo de retenção = 3,29 minutos.
(Ni) Uma solução do fluoreto de potássio (0,367 g, 9,55 mmol) em água (15 ml) foi acrescentada a uma solução de ácido 2-cloro-4-fluoro-3-(trifluorometil)-5-(trimetil silil) ben- zóico (1 g, 3,18 mmol) em tetraidrofurano (50 ml) e a mistura foi agitada a 100 0C durante a noite. Uma alíquota adicional de água (15 ml) e fluoreto de potássio (0,370 g, 9,62 mmol) foram acrescentados e o aquecimento a 100 0C foi continuado por mais 4 horas. O tetraidro- furano foi evaporado sob vácuo e substituído com dimetilformamida suficiente para dissolver todos os sólidos. A mistura foi aquecida durante a noite a 100 0C mas ainda continha o ma- terial de partida e portanto mais fluoreto de potássio (0,367 g, 9,55 mmol) foi acrescentado e o aquecimento a 100 0C continuou durante 7 dias. Nesta etapa quase todo do material de partida tinha desaparecido e assim a reação foi evaporada à secura sob vácuo e tomada em solução aquosa de ácido clorídrico 2N (75 ml) e éter dietílico (50 ml). A camada aquosa foi separada e extraída com mais éter dietílico (2 χ 50 ml) e depois as frações orgânicas combi- nadas foram secas sobre sulfato de sódio e evaporadas para fornecer o produto bruto como um sólido branco. Que foi purificado por recristalização a partir do tolueno para produzir o ácido 2-cloro-4-fluoro-3- (trifluorometil) benzóico puro (0,566 g) como um sólido branco.
(iv) O ácido 2-cloro-4-fluoro-3-(trifluorometil) benzóico (0,560 g, 2,31 mmol), 1H- 1,2,3-benzotriazolato-1 de amônio (0,534 g, 3,47 mmol, preparado tal como descrito abaixo), cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,643 g, 3,47 mmol), e N-etil mor- folina (0,594 ml, 4,62 mmol) foram agitados em conjunto em diclorometano (30 ml) por um total de 3 horas. Uma solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (30 ml) foi acres- centada e a mistura foi agitada durante 15 minutos. A camada orgânica foi separada usando cerâmica hidrofóbica sinterizada e depois lavada com solução aquosa de ácido clorídrico 2N (2 χ 50 ml). Separação da camada orgânica, novamente usando cerâmica hidrofóbica sinte- rizada, e evaporação sob vácuo produziu a 2-cloro-4-fluoro-3-(trifluorometil) benzamida (0,493 g) como um sólido branco-sujo que foi usado sem purificação adicional na etapa sub- seqüente.
O 1H-1,2,3-benzotriazolato-1 de amônio usado na etapa descrita acima foi prepara- do como se segue:
O hidróxido de amônio (4,15 ml, 75 mmol) foi acrescentado lentamente a uma solu- ção de 1-hidroxibenzotriazol (10 g, 74 mmol) em tetraidrofurano (100 ml) a 0 0C (banho de gelo) e agitado por 2 horas. A filtração e a lavagem com tetraidrofurano produziu o amônio 1H-1,2,3-benzotriazolato-1 (10,57 g) como um sólido branco. (ν) A 2-cloro-4-fluoro-3-(trifluorometil) benzamida (0,490 g, 2,03 mmol) foi tratada com borano 1 M em tetraidrofurano (20,33 ml, 20,33 mmol) e agitada a 60 0C durante a noi- te. A mistura foi então tratada com solução aquosa de ácido clorídrico 2N até que a evolu- ção de gás cessasse e depois foi agitada a 100 0C por 2 horas. A mistura foi reduzida sob vácuo e o resíduo foi tomado em um mínimo de água e lavado com diclorometano (30 ml). O pH da camada aquosa foi ajustado a pH=11 pela adição de solução aquosa de hidróxido de sódio 2N e depois extraído com diclorometano (2 χ 25 ml). As camadas de diclorometano foram separadas usando cerâmica hidrofóbica sinterizada, combinadas e evaporadas sob vácuo para deixar um óleo amarelo pálido. Uma solução de ácido clorídrico 1 M em éter die- tílico (3 ml, 3 mmol) foi acrescentada e o sólido branco resultante foi filtrado de dar puro {[2- cloro-4-fluoro-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina cloridrato (0,210 g) que foi usado sem puri- ficação adicional.
Exemplo 112.
A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-ciclobutil-5-oxo-prolinamida (E112).
A 1-ciclobutil-5-oxoprolina (0,238 g, 0,82 mmol) foi suspensa em diclorometano (3
ml) e à mesma foram acrescentados cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'- etilcarbodiimida (0,188 g, 0,98 mmol), 1-hidroxibenzotriazol (0,132 g, 0,98 mmol), e A/-etil morfolina (0,313 ml, 2,46 mmol). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 30 minutos e depois {[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina (0,205 g, 0,98 mmol) foi acres- centada à mistura e a agitação continuou por aprox. 20 horas na temperatura ambiente. A mistura foi então diluída com mais diclorometano e tratado com uma solução aquosa satu- rada de bicarbonato de sódio. A camada de diclorometano foi separada e a camada aquosa foi extraída com 3 alíquotas adicionais de diclorometano. Os extratos orgânicos combinados foram lavados com a água e depois com a salmoura, secos sobre sulfato de magnésio ani- dro e evaporados sob vácuo para fornecer o produto bruto. Que foi também purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir a A/-{[2-cloro-3- (trifluorometil) fenil] metil}-1-ciclobutil-5-oxo-prolinamida (0,105 g) como um sólido branco. LC/MS [M+H]+ = 375, tempo de retenção = 2,53 minutos.
A 1-ciclobutil-5-oxoprolina usada no procedimento acima mencionado foi preparada de uma maneira análoga àquela descrita anteriormente para a síntese do 1-etil-5-oxo- prolinato de metila (ver o Exemplo 3) mas usando ciclobutanona no lugar de acetaldeído e com a adição de um éster subseqüente à etapa de desproteção (usando condições padrão, isto é hidróxido de sódio em metanol) realizada (ao contrário da desproteção combinada e a ligação amida descrita no Exemplo 3).
Exemplos 113-117.
De uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 112 acima, os compostos tabelados abaixo (Tabela 10) foram preparados substituindo a amina adequada (ou sal da mesma) pela {[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil} amina usada no procedimento acima mencionado. Todas as aminas usadas para fazer os compostos mostrados na Tabela 10 estão disponíveis de fontes comerciais ou podem ser preparadas usando vias anteriormente descritas na literatura química a menos que seja afirmado de modo diferente.
Tabela 10.
Exemplo N0 Nome Químico [M+H]+ Tempo de retenção (min) E113 ò ° N-[(3 -cloro-2-metil fenil) metil] -1- ci- clobutil -5 -oxo- prolinamida 321 2,39 E114 ^ o α 1- ciclobutil -Λ/-[(2,4- dicloro fenil) me- til] -5 -oxo- prolinamida 341 2,46 E115 KX-UpC ό 0 a A/-[(2-cloro-3,4- difluoro fenil) metil] -1- ciclobutil -5-oxo- prolinamida 343 2,32 E116 OssK, JL tí JUs. JL ó 0 " 1- ciclobutil -N-[(2,3- dicloro fenil) me- til] -5 -oxo- prolinamida 341 2,38 O cloridrato de [(2-cloro-3,4-difluorofenil) metil] amina necessário para a síntese da A/-[(2-cloro-3,4-difluorofenil) metil]-1-ciclobutil-5-oxo-prolinamida (Exemplo 115) foi prepara- do como descrito acima no Exemplo 36.
Exemplo 118.
/V-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-5-(2,2-dimetil propil) oxo-prolinamida
(E118).
r °
A A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-5-(2,2-dimetil propil) oxo-prolinamida foi preparada de uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 100 mas utilizando a 1- (2,2-dimetil propil) - 5-oxoprolina preparada como descrito abaixo. LC/MS [M+H]+ = 391/393, tempo de retenção = 2,76 minutos.
A 1-(2,2-dimetil propil) - 5-oxo-prolina usada no método descrito acima foi prepara- da como se segue:
O ácido D-glutâmico (2,21 g, 15 mmol) foi dissolvido em hidróxido de sódio aquoso 2N (15 ml, 30 mmol), resfriado a 0 0C, e tratado com uma solução de trimetil acetaldeído (1,63 ml, 15 mmol) em etanol (3 ml) e depois agitado na temperatura ambiente durante 45 minutos. A mistura foi novamente resfriada a 0 0C e tratada com o boroidreto de sódio (0,189 g, 5 mmol). Permitiu-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente por mais de 4 horas com agitação então depois de lavar com o éter dietílico a mistura foi acidificada a a- proxim. pH=4 usando o ácido clorídrico concentrado. O precipitado resultante foi coletado por filtração, lavado com o éter dietílico e depois seco em um forno de vácuo durante a noi- te. O sólido foi então suspenso em etanol (50 ml) e a mistura foi aquecida sob refluxo por 24 horas. A concentração e a trituração com hexano então produziram 1-(2,2-dimetil propil) - 5- oxoprolina (1,51 g) como um sólido que foi usado sem purificação adicional.
Exemplo 119.
A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-5-oxo-1 - (2-piridinil metil) prolinamida
(E119). F^ -F
0γγ'
ο
A 5-οχο-1 - (2-piridinil metil) prolina (0,220 g, 1 mmol, preparado como descrito a- baixo), cloridrato de N-{3-dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,384 g, 2 mmol), e 1- hidroxibenzotriazol (0,308 g, 2 mmol) foram agitados juntos em diclorometano (10 ml) na temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura foi então tratada com {[2-cloro-3- (trifluorometil) fenil] metil} amina (0,314 g, 1,5 mmol) e a mistura foi agitada durante a noite na temperatura ambiente. A mistura foi concentrada e partilhada entre o acetato de etila e solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. A camada aquosa foi separada e extraí- da com o acetato de etila e depois as frações de acetato de etila combinadas foram lavadas com 3 porções de água e depois com a solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Seca sobre sulfato de sódio e a concentração produziu um resíduo sólido que foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}- 5- oxo-1- (2-piridinil metil) prolinamida (0,263 g) como um sólido amarelo claro.
-15 como se segue:
O ácido D-glutâmico (2,21 g, 15 mmol) foi dissolvido em hidróxido de sódio aquoso 2N (15 ml, 30 mmol) a 0 0C e depois tratado com piridina-2-carboxi aldeído (1,43 ml, 15 mmol). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 45 minutos e depois resfriada a 0 0C e tratada com o boroidreto de sódio (0,189 g, 5 mmol). Permitiu-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente com mais de 4 horas de agitação então depois de lavar duas vezes com éter dietílico foi acidificada a pH= 5 a 6. A camada aquosa foi concentrada e depois destilada como azeótropo três vezes com o tolueno e depois com uma mistura 1:1 etanoktoliueno e finalmente com o etanol. O resíduo foi então solubilizado em etanol (50 ml) e refluxado por 8 horas. A concentração produziu um óleo que quando seco sob vácuo pro- duziu a 5-oxo-1- (2-piridinil metil) prolina (2,60 g) como uma espuma que foi usada sem qualquer purificação adicional.
/\/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-5-oxo-1 - (3-piridinil metil) prolinamida
(E120).
LC/MS [M+H]+ = 412/414, tempo de retenção = 2,15 minutos. A 5-oxo-1 - (2-piridinil metil) prolina usada no método descrito acima foi preparada
Exemplo 120. N A 5-οχο-1 - (3-piridinil metil) prolina (0,210 g, 1 mmol, preparado como descrito a-
baixo),
o cloridrato de A/-(3-dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,383 g, 2 mmol), e 1- hidroxibenzotriazol (0,306 g, 2 mmol) foram agitados em conjunto em diclorometano (10 ml) na temperatura ambiente durante 30 minutos. A mistura foi então tratada com {[2-cloro-3- (trifluorometil) fenil] metil} amina (0,314 g, 1,5 mmol) e a mistura foi agitada durante a noite na temperatura ambiente. A mistura foi concentrada e partilhada entre acetato de etila e so- lução aquosa saturada de bicarbonato de sódio. A camada aquosa foi separada e extraída com mais acetato de etila e depois as frações de acetato de etila combinadas foram lavadas em seqüência com 3 porções de água e depois com a solução aquosa saturada de cloreto de sódio. Secagem sobre sulfato de magnésio e a concentração produziram um resíduo sólido que foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir N- {[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-5-oxo-1 -(3-piridinil metil) prolinamida pura (0,031 g).
LC/MS [M+H]+ = 412/414, tempo de retenção = 1,83 minutos. A 5-oxo-1 - a (3-piridinil metil) prolina usada no método descrito acima foi preparada
como se segue:
O ácido D-glutâmico (2,21 g, 15 mmol) foi dissolvido em hidróxido de sódio aquoso 2N (15 ml, 30 mmol) a 0 0C e depois tratado com piridina-3-carboxaldeído (1,41 ml, 15 mmol) em etanol (3 ml). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 30 minutos e depois resfriada a 0 0C e tratada parceladamente com boroidreto de sódio (0,189 g, 5 mmol). Permitiu-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente com mais de 4 horas de agitação então depois de lavar com o éter dietílico, a solução foi acidificada a pH= 5 a 6 utili- zando ácido clorídrico concentrado. O precipitado resultante foi coletado por filtração, lavado com o éter dietílico, e seco sob vácuo. Este material foi então solubilizado em etanol (50 ml) e refluxado durante a noite. Os sólidos finos foram retirados pela filtração e depois a concen- tração produziu a 5-oxo-1-a (3-piridinil metil) prolina (2,04 g) como um sólido branco que foi usado sem qualquer purificação adicional.
Exemplo 121.
A/-[(2,4-diclorofenil) metil]-5-oxo-1 - (3-piridinil metil) prolinamida (E121). A A/-[(2,4-diclorofenil) metil]-5-oxo-1-(3-piridinil metil) prolinamida foi preparada de uma maneira análoga àquela descrita acima para a síntese da A/-{[2-cloro-3- (trifluorometil) fenil] metil}-5-oxo-1 -(3-piridinil metil) prolinamida (E120), mas usando a [(2,4-diclorofenil) metil] amina no lugar da {[2-cloro-3- (trifluorometil) fenil] metil} amina.
LC/MS [M+H] + = 378/380/382, tempo de retenção = 1,70 minutos.
Exemplo 122.
1 -ciclopropil-A/-[(2,4-diclorofenil) metil]-2-metil-5-oxo-prolinamida (E122).
A uma solução de isocianato de (2,4-diclorofenil) metila (0,047 g, 0,25 mmol) e áci- do levulínico (0,041 ml, 0,4 mmol) em metanol (2 ml) foi acrescentada ciclopropil amina (0,042 ml, 0,6 mmol). A mistura foi aquecida a 100 0C durante 30 minutos em um reator de microondas. O solvente foi retirado sob vácuo e o resíduo foi purificado por HPLC automati- zado por direcionamento de massa para produzira 1-ciclopropil-A/-[(2,4-diclorofenil) metil]-2- metil-5-oxo-prolinamida (0,054 g) como um sólido branco.
LC/MS [M+H]+ = 341/343, tempo de retenção = 2,57 minutos. Exemplos 123-126.
De uma maneira análoga àquela descrita para o Exemplo 122 acima dos compos- tos tabelados abaixo (Tabela 11) foram preparados substituindo a amina adequada pela ciclopropilamina usada no procedimento acima mencionado. Todas as aminas usadas para fazer os compostos mostrados na Tabela 11 estão disponíveis de fontes comerciais ou po- dem ser preparadas usando as vias anteriormente descritas na literatura química.
Tabela 11.
Exemplo N0 Nome Químico [M+H]+ Tempo de retenção (min) E123 ^o α Λ/-[(2,4 -dicloro fenil) metil] -1- etil -2- metil -5 -oxo- prolinamida 329 2,49 E124 o ^Ck^^^ 6 0 ct 1- ciclobutil- N-[(2,4 -dicloro fenil) me- til] -2-metil -5 -oxo- prolinamida 355/357 2,78 E125 ^Ss o Cl N-[(2,4 -dicloro fenil) metil] -2-metil -1- (1-metil etil)-5 -oxo- prolinamida 343/345 2,64 E126 ^ o α N-[(2,4 -dicloro fenil) metil] -1,2-dimetil -5 -oxo- prolinamida 315 2,39
Exemplo 127.
/V-[(2,4-diclorofenil) metil]-1,3,3-trimetil-5-oxo-prolinamida (E127).
A uma solução de isocianato de (2,4-diclorofenil) metila (0,094 g, 0,5 mmol) e ácido 3,3- dimetil-4-oxobutanóico (0,065 mg, 0,5 mmol, preparado tal como descrito abaixo) em metanol (2 ml) foi acrescentada metil amina (0,080 ml, solução de 33 % em etanol). A mistu- ra foi aquecida a 100 0C durante 30 minutos em um reator de microondas. O solvente foi retirado sob vácuo e o resíduo foi purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir uma goma inclolor que foi triturada com o éter dietílico para produzir N- [(2,4-diclorofenil) metil]-1,3,3-trimetil-5-oxo-prolinamida (0,043 g) como um sólido branco pegajoso.
LC/MS [M+H]+ = 329/331, tempo de retenção = 2,42 minutos. O ácido 3,3-dimetil-4-oxobutanóico usado no procedimento descrito acima foi pre- parado como se segue:
O ácido 3,3-dimetil-4-pentenóico (1,3 g, 10,14 mmol) foi dissolvido em diclorometa- no (25 ml) e resfriado a -78 0C em um banho C02/acetona. O oxigênio foi borbulhado na mistura durante 5 minutos seguidos pelo ozônio durante 25 minutos (produzindo uma solu- ção azul). O oxigênio foi borbulhado na mistura durante uns 5 minutos adicionais seguidos pelo argônio durante 10 minutos. Dimetil sulfito (2,23 ml, 30,4 mmol) então foram acrescen- tados à mistura e a mistura foi retirada do banho de resfriamento e agitada por 2,5 horas. A solução inclolor resultante foi reduzida sob vácuo para produzir o ácido 3,3-dimetil-4- oxobutanóico como um óleo inclolor que foi usado sem purificação adicional.
Exemplo 128.
A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1,3,3-trimetil-5-oxo-prolinamida (E128).
A A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1,3,3-trimetil-5-oxo-prolinamida foi preparada de uma maneira análoga àquela descrita acima para a síntese da Λ/-[(2,4- diclorofenil) metil]-1,3,3-trimetil-5-oxo-prolinamida (E127) mas usando isocianato de [2-cloro- 3-(trifluorometil) fenil] metila (preparado como descrito no Exemplo 40) em lugar do isociana- to de (2,4-diclorofenil) metila.
LC/MS [M+H]+ = 363/365, tempo de retenção = 2,49 minutos.
Exemplo 129.
A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1,3-dimetil-5-oxo-prolinamida (E129)
1,3-dimetil-5-oxoprolina (0,620 g, 3,6 mmol, preparado tal como descrito abaixo),
cloridrato de N-(3-dimetil amino propil)-N'-etilcarbodiimida (0,822 g, 4,3 mmol), 1-hidroxi benzotriazol (0,581 g, 4,3 mmol), A/-etil morfolina (1,4 ml, 10,8 mmol), e {[2-cloro-3- (trifluorometil) fenil] metil} amina (0,828 g, 3,96 mmol) foram combinados em uma mistura de diclorometano (10 ml) e dimetilformamida (5 ml) e agitada sob argônio durante a noite. A mistura foi então lavada em seqüência com a água (50 ml), solução aquosa de ácido clorí- drico 0,5 N (50 ml), água (50 ml), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (50 ml) e água (50 ml). A camada diclorometano foi passada por cerâmica hidrofóbica sinterizada e evaporada sob vácuo para fornecer o produto bruto. Que foi também purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa (injeções de 10 χ 0,100 g) para produzir Λ/-{[2- cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1,3-dimetil-5-oxo-prolinamida (0,613 g).
LC/MS [IvRH]+ = 349, tempo de retenção = 2,31 e 2,38 minutos (dois diastereoisô-
meros).
A 1,3-dimetil-5-oxoprolina usada no procedimento acima mencionado foi preparada como se segue:
(i) (R,R,R)-2-hidroxipinenona-3 (10,9 g, 64,8 mmol) e glycine-t-butil éster (13 g, 97,2
mmol) no tolueno anidro (200 ml) foi tratado com o boro trifluoride-dietil eterate (0,460 g, 3,24 mmol) e depois aquecido, sob argônio, para 6 horas sob refluxo. A mistura foi então resfriada à temperatura ambiente e agitado durante a noite. A filtração por vidro sinterizado seguido pela evaporação produziu uma goma amarela que foi purificada por cromatografia flash automatizada em coluna de sílica-gel (utilização de um Biotage SP4), eluindo com uma mistura de acetato de etila a 25 % em hexano, para produzir a algum 1,1-dimetil etil-N- [(1 R,2R,5R) -2-hidroxi-2,6,6-trimetiI biciclo [3.1.1] heptilideno-3] glicinato puro, (3,68 g) e algumas frações misturadas. O material impuro foi também purificado, novamente usando cromatografia flash automatizada em coluna de sílica-gel (Biotage SP4), mas eluindo com um gradiente de acetato de etila de O % a 25 % em hexano (O % a 15 % acima de 10 volu- mes de coluna e 15 % a 25 % acima de 5 volumes de coluna), para produzir uma nova coleta de 1,1-dimetil etil-A/-[(1 R.2R.5R) -2-hidroxi-2,6,6-trimetil biciclo [3.1.1] heptilideno-3] glicinato puro (1,73 g). Os dois lotes de 1,1-dimetil etil-A/-[(1 R,2R,5R) -2-hidroxi-2,6,6-trimetil biciclo [3.1.1] heptilideno-3] glicinato foram combinados (5,41 g) e este material foi usado na etapa seguinte.
(Nota: o éster tert-butil glicina usado acima também pode ser substituído com clori-
drato do glycine-t-butil éster e um equivalente molar do carbonato de potássio).
(ii) uma solução de 1,1-dimetil etil-/V-[(1R,2R,5R) -2-hidroxi-2,6,6-trimetil biciclo [3.1.1] heptilideno-3] glicinato (11,05 g, 39,3 mmol) em tetraidrofurano anidro (100 ml) foi resfriada a -30 0C e tratada com uma solução 3M do brometo metilmagnésio em éter dietílico
(17,1 ml, 51,1 mmol). 1,8-diazobiciclo [5,4,0] undeceno-7 (7,78 g, 51,1 mmol) então foram acrescentados e a mistura foi agitada durante uns 20 minutos adicionais a -30 0C. A mistura foi então tratada com crotonato de etila e a agitação continuou durante 1 hora. A mistura foi extinta pela adição da solução aquosa saturada de cloreto de amônio (35 ml) e depois extra- ído com acetato de etila (3 χ 100 ml). Os extratos orgânicos combinados foram secos sobre sulfato de sódio, filtrados e evaporados para produzir um óleo amarelo. Este material foi pu- rificado por cromatografia flash automatizada em coluna de sílica-gel (utilização de um Bio- tage SP4), eluindo com um gradiente de 0 % a 20 % (mais de 5 volumes de coluna) e de- pois 20 % a 35 % (mais de 14 volumes de coluna) de acetato de etila em hexano, para pro- duzir 1-(1,1-dimetil etil)-5-etil N-[( 1R,2R,5R) -2-hidroxi-2,6,6-trimetil biciclo [3.1.1] heptilideno- 3]-3-metilglutamato (4,2 g) que foi usado na etapa seguinte.
(iii) Uma solução aquosa de 10 % de ácido cítrico (11 ml, 5,6 mmol) foi acrescenta- da a uma solução de 1-( 1,1-dimetil etil)-5-etil A/-[(1R,2R,5R) -2-hidroxi-2,6,6-trimetil biciclo [3.1.1] heptilideno-3]-3-metilglutamato (2g) em tetraidrofurano (10 ml) e a mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 4 dias. A mistura foi o evaporada e o resíduo suspendido
em água (50 ml) e lavado com o éter dietílico (100 ml). A fase aquosa foi então ajustada a pH de aprox. 7 usando solução de carbonato de hidrogênio de sódio aquosa e depois extra- ída com o éter dietílico (3 χ 100 ml). As frações orgânicas foram combinadas, secas sobre sulfato de sódio, filtradas e evaporadas para produzir 1-( 1,1-dimetil etil)-5-etil 3- metilglutamato (1,1 g) como um óleo amarelo que foi usado na etapa seguinte sem purifica- ção adicional,
(iv) 1-(1,1-dimetil etil)-5-etil 3-metilglutamato (1,1 g, 4,5 mmol) foi deixado em re- pouso, ligado a uma alta linha de vácuo, durante a noite e depois durante um fim de sema- na. O material de partida ainda estava presente nesta etapa e portanto o tolueno (30 ml) foi acrescentado e a mistura resultante foi aquecida a 110 0C durante a noite. A evaporação produziu 1,1 -dimetil etil 3-metil-5-oxoprolinato (0,79 g) que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional,
(v) 1,1-dimetil etil 3-metil-5-oxoprolinato (0,79 g, 3,96 mmol) foi dissolvido em tetrai-
drofurano (8 ml) e tratado com iodeto de metila (0,27 ml, 4,36 mmol). A mistura foi então resfriada a 0 0C e tratada em parcelas com o hidreto de sódio (60 % em óleo, 0,170 g, 4,36 mmol). A mistura parou de fazer bolhas depois de 30 minutos a 0 0C e foi então deixada aquecer à temperatura ambiente e agitada durante a noite. A mistura foi extinta pela adição da solução aquosa saturada de cloreto de amônio (10 ml) e a camada orgânica foi separada e deixada de lado. A camada aquosa foi extraída com diclorometano (3 χ 20 ml) e os extra- tos combinados foram secos usando cerâmica hidrofóbica sinterizada. Todas das frações orgânicas (incluindo aquela deixada de lado) foram combinadas e evaporadas para produzir 1,1-dimetil etil 3-metil-5-oxoprolinato bruto (0,770 g) como uma goma amarela que foi usada sem purificação adicional.
(vi) 1,1-dimetil etil 1,3-dimetil-5-oxoprolinato (0,770 g, 3,62 mmol) foi suspenso em diclorometano (5 ml) e tratado com o ácido trifluoroacético (0,4 ml, 5,4 mmol). A mistura foi agitada por 5 horas e depois evaporada. Formação de azeótropo do resíduo resultante com o tolueno forneceu então o material de partida não reagido (0,600 g). Que foi novamente tomado em diclorometano (2 ml) e tratado com o ácido trifluoroacético (2 ml) mais uma vez. Depois de agitar por 2 horas a mistura foi evaporada e o resíduo novamente extraído como azeótropo com o tolueno (10 ml) para produzir 1,3-dimetil-5-oxoprolina bruto (0,760 g) que foi usado sem qualquer purificação adicional.
Os 1-etil-4,4-dimetil-5-oxoprolina (0,130 g, 0,702 mmol, preparado tal como descrito abaixo), 1-hidroxibenzotriazol (0,161 g, 1,053 mmol), e cloridrato de A/-(3-dimetil amino pro- pil)-N'-etilcarbodiimida (0,202 g, 1,053 mmol) foram dissolvidos em diclorometano (5 ml) e misturados durante 15 minutos na temperatura ambiente. [(2-cloro-4-fluorofenil) metil] amina
30
Exemplo 130.
A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-etil-4,4-dimetil-5-oxo-prolinamida (E130). (0,134 g, 0,842 mmol) e diisopropil etilamina (0,184 ml, 1,053 mmol) então foram acrescen- tados à mistura e a agitação continuou durante a noite na temperatura ambiente. A mistura foi então concentrada sob vácuo e o resíduo partilhado entre acetato de etila e água e extra- ído com o acetato de etila. As camadas orgânicas combinadas foram lavadas em seqüência com ácido cítrico 3N, água, carbonato de sódio aquoso saturado, água (x3), e depois sal- moura e secas sobre sulfato de sódio anidro. A concentração produziu um sólido bruto que foi posteriormente purificado por HPLC automatizado por direcionamento de massa para produzir A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-etil-4,4-dimetil-5-oxo-prolinamida (0,146 g) como um sólido.
LC/MS [M+H]+ = 327/329, tempo de retenção = 2,35 minutos.
A 1-etil-4,4-dimetil-5-oxoprolina usada no procedimento acima mencionado foi pre- parada como descrito abaixo:
(i) (S)-(+)-L-5-tritiloximetil-2-pirrolidinona (7,51 g, 20 mmol) foi dissolvida em dimetil- formamida (25 ml) a 0 0C e tratada em partes com o hidreto de sódio (suspensão de 60 %
em óleo, 0,880 g, 22 mmol). A mistura foi agitada a 0 0C durante 1 hora e depois tratada com o iodeto de etila (1,78 ml, 22 mmol). Permitiu-se que a mistura se aquecesse à tempe- ratura ambiente e depois agitada durante a noite. A mistura foi então vazada sobre o gelo e extraída com o acetato de etila (x3). Os extratos orgânicos combinados foram lavados em seqüência com a água, (3x) a solução aquosa de cloreto de sódio a 50 %, e a solução a - quosa saturada de cloreto de sódio, e depois seca sobre sulfato de sódio. A concentração produziu um sólido bruto que foi purificado por cromatografia flash automatizada em coluna de sílica-gel (Biotage SP4), eluindo com um gradiente de 0 % a 100 % de acetato de etila em hexano, para produzir 1-etil-5- {[(trifenil metil) oxi] metil}-2-pirrolidinona (7,09 g) puro.
(ii) A uma solução 2M de diisopropilamida de lítio em tetraidrofurano (1,912 ml, 3,82 mmol) a -78 0C foi acrescentada, gota a gota, uma solução de 1-etil-5-{[(trifenil metil) oxi]
metil} - 2-pirrolidinona (1,34 g, 3,48 mmol) em tetraidrofurano (10 ml) e a mistura resultante foi agitada durante 1 hora a -78 0C. O iodo metano (0,239 ml, 3,82 mmol) então foi acrescen- tado e depois de agitar durante mais de 1 hora a -78 0C permitiu-se que a mistura aqueces- se à temperatura ambiente por mais de 3 horas. A mistura foi então re-esfriada a -78 0C e tratada, gota a gota, com uma alíquota adicional de um solução de diisopropilamida de lítio 2M em tetraidrofurano (1,912 ml, 3,82 mmol). Depois de agitar durante uma 1 hora adicional a -78 0C a mistura foi novamente tratada com iodo metano (0,239 ml, 3,82 mmol) e depois permitiu-se que a mistura se aquecesse à temperatura ambiente e fosse agitada durante a noite. A mistura foi extinta com o cloreto de amônio aquoso saturado e depois extraída com o acetato de etila (2x). Os extratos orgânicos combinados então foram lavados com a água (3x) e depois com a solução aquosa saturada de cloreto de sódio, seca sobre sulfato de só- dio anidro, e concentradas a um sólido oleoso bruto (1,7 g). O sólido bruto foi purificado por cromatografia flash automatizada em coluna de sílica-gel (Biotage SP4), eluindo com um gradiente de 0 % a 100 % de acetato de etila em hexano, para produzir frações de produto puras (isto é 1-etil-3,3-dimetil-5-{[(trifenil metil) oxi] metil} - 2-pirrolidinona (0,468 g)) bem como o material monoalquilado puro (isto é 1-etil-3-metil-5-{[(trifenil metil) oxi] metil}-2- pirrolidinona (0,524 g)) e uma mistura destes dois (0,240 g). O produto desejado foi deixado de lado enquanto o 1-etil-3-metil-5-{[(trifenil metil) oxi] metil}-2-pirrolidinona e o material mis- turado foram combinados e se dissolveram em tetraidrofurano (20 ml). Esta solução foi en- tão acrescentada gota a gota a uma solução 2M de diisopropilamida de lítio em tetraidrofu- rano (1,912 ml, 3,82 mmol) a -78 0C e a agitação nessa temperatura continuou durante 1 hora. O Iodometano (0,239 ml, 3,82 mmol) então foi acrescentado à mistura e permitiu-se que a mistura aquecesse à temperatura ambiente por mais de 4 horas. O desenvolvimento como descrito acima produziu um lote adicional de 1-etil-3,3-dimetil-5-{[(trifenil metil) oxi] metil} - 2-pirrolidinona (0,846 g) como um óleo que foi combinado com o material anterior- mente deixado de lado (massa total = 1,08 g) e usado na etapa seguinte sem purificação adicional.
(iii) A Amberlyst 15® (5,56 g, 26,1 mmol) foi lavada três vezes com metanol e de- pois foi acrescentada uma solução de 1-etil-3,3-dimetil-5-{[(trifenil metil) oxi] metil}-2- pirroli- dinona (1,08 g, 2,61 mmol) em metanol (50 ml). Deixou-se que a mistura ficasse durante 4 dias na temperatura ambiente e depois a resina foi retirada por filtração (lavando com meta- nol). As frações de metanol combinadas foram concentradas para produzir um óleo bruto (1,62 g) que foi purificado por cromatografia flash em coluna de sílica gel (Biotage SP4), eluindo com um gradiente de 0 % a 100 % de acetato de etila em hexano, para produzir 1- etil-5-puro (hidroximetil)-3,3-dimetil-2-pirrolidinona (0,376 g) como um óleo que solidificou em repouso.
(iv) 1-etil-5-(hidroximetil)-3,3-dimetil-2-pirrolidinona (0,366 g, 2,1 mmol), cloreto de
sódio (0,387 g, 4,3 mmol), e uma solução tampão aquosa de fosfato monobásico de sódio a 1M (2,46 ml, 2,46 mmol) foram combinados em acetonitrila (3 ml) e aquecidos a 40 0C. Al- guns cristais de TEMPO (radical livre 2,2,6,6-tetrametil-1-piperidiniloxi) e aproximadamente 1 gota de alvejante (solução de hipoclorito de sódio, cloro disponível > 12 %) então foram acrescentados à mistura e a agitação continuou a 40 0C por 4 horas. A mistura foi então vazada sobre o gelo contendo sulfito de sódio 1% p/p e a mistura resultante foi extraída com o acetato de etila (x3). Os extratos orgânicos combinados foram lavados com o cloreto de sódio aquoso saturado e depois secos sobre sulfato de magnésio e concentradas para pro- duzir 1-etil-4,4-dimetil-5-oxoprolina (0,392 g) como um sólido branco que foi usado sem puri- ficação adicional.
LC/MS [M+H] + = 186.
Exemplo 131. /V-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-etil-4,4-dimetil-5-oxo-prolinamida (E131).
O
y) O Cl F
F
A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-etil-4,4-dimetil-5-oxo-prolinamida foi pre- parado de uma maneira análoga àquela descrita acima para a síntese de A/-[(2-cloro-4- fluorofenil) metil]-1-etil-4,4-dimetil-5-oxo-prolinamida (E130) mas usando {[2-cloro-3- (trifluorometil) fenil] metil} amina no lugar de [(2-cloro-4-fluorofenil) metil] amina.
LC/MS [M+H]+ = 377/379, tempo de retenção = 2,63 minutos.
Exemplo 132.
/\/-[(2-cloro-3,4-difluorofenil) metil]-1 -etil-4,4-dimetil-5-oxo-prolinamida (E132).
A/-[(2-cloro-3,4-difluorofenil) metil] -1-etil -4,4- dimetil-5-oxo-prolinamida foi preparado de uma maneira análoga àquela descrita acima para a síntese de A/-[(2-cloro-4- fluorofenil) metil]-1-etil-4,4-dimetil-5-oxo-prolinamida (E130) mas usando cloridrato de [(2- cloro-3,4-difluorofenil) metil] amina (preparado como descrito acima por Exemplo 36) em vez de [(2-cloro-4-fluorofenil) metil] amina.
LC/MS [M+H] + = 345/347, tempo de retenção = 2,43 minutos.
Exemplo 133.
A/-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-etil-5-oxo-4,4-bis (fenil metil) prolinamida (E133).
/V-[(2-cloro-4-fluorofenil) metil]-1-etil-5-oxo-4,4-bis (fenil metil) prolinamida foi preparado de uma maneira análoga àquela descrita acima para a síntese de N-[(2-cloro-4- fluorofenil) metil]-1-etil-4,4-dimetil-5-oxo-prolinamida (E130) mas usando 1-etil-5-oxo-4,4-bis (fenil metil) prolina no lugar de 1-etil-4,4-dimetil-5-oxoprolina. O 1-etil-5-oxo-4,4-bis (fenil metil) prolina foi preparado de uma maneira análoga àquela descrita para 1-etil-4,4-dimetil-5- oxoprolina no Exemplo 130 acima mas usando 1-etil-3,3-bis (fenil metil)-5-{[(trifenil metil) oxi] metil}-2-pirrolidinona (isolado como um produto secundário no método B, Exemplo 37) em vez da 1-etil-3,3-dimetil-5-{[(trifenil metil) oxi] metil} - 2-pirrolidinona.
LC/MS [M+H]+ = 479/481, tempo de retenção = 3,32 minutos.
Exemplo 134. A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-etil-5-oxo-4-(fenil metil) prolinamida
(E134).
Ph
A A/-{[2-cloro-3-(trifIuorometiI) fenil] metil}-1-etil-5-oxo-4-(fenil metil) prolinamida foi preparada de uma maneira análoga àquela descrita acima para a síntese da A/-[(2-cloro-4- fluorofenil) metil]-1-etil-5-oxo-4-(fenil metil)-prolinamida (E37), mas usando {[2-cloro-3- (trifluoro metil) fenil] metil} amina no lugar de [(2-cloro-4-fluorofenil) metil] amina. O Método B1 como descrito no Exemplo 37, foi usado para preparar o 1-etil-5-oxo-4-(fenil metil)-prolina. LC/MS [M+H]+ = 439/441, tempo de retenção = 2,99 minutos. Exemplo 135.
A/-{[2-Ciano-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1 -metil-5-oxo-prolinamida (E135).
A/-{[2-Ciano-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-prolinamida foi preparada de uma maneira análoga àquela descrita acima para a síntese de A/-{[2-ciano-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-etil-5-oxo-prolinamida (E105) mas utilizando a 1-metil-5-oxo-prolina no Iugarda 1-etil-5-oxo-prolina. LC/MS [M+H]+ = 326, tempo de retenção = 2,02 minutos.
Exemplo 136.
A/-1-etil-5-oxo-prolinamida (2-bifenilylmetil) (E136).
àquela descrita acima para a síntese de A/-[(2,3-dimetilfenil) metil]-1-etil-5-oxo-prolinamida (E50) mas usando (2-bifenilylmetil) amina no lugar de 2,3-dimetil benzilamina. LC/MS [M+H]+ = 323, tempo de retenção = 2,38 minutos. Reator de microondas.
Onde indicado nos Exemplos acima mencionados, o reator de microondas usado foi um Biotage Initiator®. As reações foram executadas usando a potência normal de uso, a menos que seja especificado de modo diferente. HPLC de direcionamento de massa.
Onde indicado nos Exemplos acima mencionados, a purificação por HPLC automa- tizado por direcionamento de massa foi executado usando os seguintes Materiais e Méto- dos:
Materiais.
Waters 2525 Módulo de Gradiente Binário Waters 515 Bomba de Maquilagem Waters Módulo de Controle de Bomba Waters 2767 Coleta de Injeção Waters Coluna de Manejo de Fluidos Waters 2996 Fotodiodo de Matriz de Detecção Waters ZQ Espectrômetro de massa Gilson 202 coletor de fração Gilson Aspec coletor de resíduo Software.
Waters MassLynx versão 4 SP2 Coluna.
As colunas usadas são da marca Waters Atlantis, as dimensões das mesmas sen- do 19 mm χ 100 mm (pequena escala) e 30 mm χ 100 mm (grande escala). O tamanho de partícula da fase estacionária sendo 5 μπ\. Solventes.
A: Solvente aquoso = Água + Ácido Fórmico a 0,1 % B: Solvente orgânico = Acetonitrila + Ácido Fórmico a 0,1 % Solvente de reposição = Metanol: Água 80:20 Solvente para enxágüe de agulha = Metanol Métodos.
Há cinco métodos usados dependendo do tempo de retenção analítico do composto de interesse. Esses métodos possuem um tempo de execução de 13,5 minutos, compreen- dendo um gradiente de 10 minutos seguido por um flash de coluna de 3,5 minutos e uma etapa de re-equilíbrio.
Grande/Pequena Escala 1,0-1,5 = 5-30 % B Grande/Pequena Escala 1,5-2,2 = 15-55 % B Grande/Pequena Escala 2,2-2,9 = 30-85 % B Grande/Pequena Escala 2,9-3,6 = 50-99 % B
Grande/Pequena Escala 3,6-5,0 = 80-99 % B (durante 6 minutos seguidos por flash de 7,5 minutos e re-equilíbrio) Taxa de fluxo. Todos os métodos acima mencionados possuem uma taxa de fluxo ou de 20 ml/min (Pequena Escala) ou de 40ml/min (Grande Escala). HPLC auiral.
Os materiais e métodos usados para caracterizar a pureza enanciomérica de amos- tras selecionadas foram como se segue: Método (A).
Instrumento: Agilent Série 1100 para Cromatogramas Líquidos
Coluna: Chiralpak AD (250 mm χ 4,6 mm; tamanho de partícula de 10 μιη)
Fase móvel: Heptane:etanol absoluto (70:30) v/v misturado com a bomba
Taxa de fluxo: 1 ml/min
Temperatura: Ambiente.
U.V. comprimento de onda: 215 nm
Método (B).
Instrumento: Agilent Série 1100 para Cromatogramas Líquidos
Coluna: Chiralpak AD (250 mm χ 4,6 mm; tamanho de partícula de 10 pm)
Fase móvel: Heptane:etanol absoluto (50:50) v/v misturado com a bomba
Taxa de fluxo: 1 ml/min
Temperatura: Ambiente.
U.V. comprimento de onda: 215 nm
Método (C).
Instrumento: Agilent Série 1100 para Cromatogramas Líquidos
Coluna: Chiralpak AD (250 mm χ 4,6 mm; tamanho de partícula de 10 pm)
Fase móvel: Heptane:etanol absoluto (80:20) v/v misturado com a bomba
Taxa de fluxo: 1 ml/min
Temperatura: Ambiente.
U.V. comprimento de onda: 215 nm
Método (D):
Instrumento: Agilent Série 1100 para Cromatogramas Líquidos
Coluna: Chiralpak AD (250 mm χ 4,6 mm; tamanho de partícula de 10 μιτι)
Fase móvel: Heptane:etanol absoluto (80:20) v/v misturado com a bomba
Taxa de fluxo: 1 ml/min
Temperatura: Ambiente.
U.V. comprimento de onda: 215 nm
Cromatoqrafia Líquida / Espectrometria de Massa.
A análise dos Exemplos acima mencionados por Cromatografia Líquida / Espectro- metria de Massa (LC/MS) foi realizada usando os seguintes Materiais e Métodos: Hardware. Agilent 1100 Bomba para Gradiente Agilent 1100 Auto-amostragem Agilent 1100 Detector DAD Agilent 1100 Degaseificador Agilent 1100 Forno
Agilent 1100 Controlador Waters ZQ Espectrômetro de Massa Sedere Sedex 85 Software.
Waters MassLynx versão 4,0 SP2
Colunas.
A coluna usada foi uma Waters Atlantis, com a dimensões de 4,6 mm χ 50 mm.
O tamanho de partícula de fase estacionária sendo de 3 //m.
Solventes.
A: Solvente aquoso = Água + Ácido Fórmico a 0,05 %.
B: Solvente orgânico = Acetonitrila + Ácido Fórmico a 0,05 %. Métodos.
O Método genérico usado tem um tempo de execução de 5 minutos.
Tempo / min %B 0 3 0,1 3 4 97 4,8 97 4,9 3 5,0 3
O método acima mencionado tem uma taxa de fluxo de 3 ml/min. O volume de injeção do método genérico é de 5 μΙ.
A temperatura de coluna é de 30 0C.
A faixa de variação de detecção do UV é de 220 nm a 330nm. Dados Farmacolóaicos.
Os compostos de acordo com a presente invenção podem ser testados para ativi- dade biológica in vitro no receptor da P2X7 de acordo com os seguintes estudos: Ensaio de Acúmulo de Etídio.
Os estudos foram executados usando o tampão de ensaio de NaCI com a seguinte composição (em mM): 140 mM NaCI, HEPES 10, /V-metil-D-glucamina 5, KCI 5,6, D-glicose 10, CaCI2 0,5 (pH 7,4). As células HEK293, expressando receptores P2X7 recombinantes humanos, foram cultivadas em poli-L-lisina pré-tratada em microplaca de 96 poços por 18 h a 24 h. (A clonagem do receptor humano da P2X7 é descrita na Patente US 6.133.434). As células fo- ram lavadas duas vezes com 350 μ\ do tampão de ensaio antes da adição de 50 μ\ do composto de teste. As células então foram incubadas na temperatura ambiente (19 0C a 21 0C) por 30 minutos antes da adição do ATP e do etídio (100 μΜ concentração de ensaio final). A concentração do ATP foi escolhida como estando próxima do EC8O para o tipo de receptor e foi de 1 mM para os estudos sobre o receptor humano da P2X7. A incubação foi continuada para 8 ou 16 minutos e foi terminada pela adição de 25 μ\ de sacarose 1,3 M contendo 5 mM do reagente preto 5 (AIdrich) antagonista do receptor da P2X7. O acúmulo celular de etídio foi determinado medindo a fluorescência (comprimento de onda de excita- ção de 530 nm e comprimento de onda de emissão de 620 nm) a partir do fundo da chapa com um contador de fluorescência Canberra Packard Fluorocount (Pangboume, UK) ou um Flexstation Il (da Molecular Devices). Os valores antagonistas plC50 para bloquear as res- postas do ATP foram determinados usando técnicas de ajuste iterativo de curvas.
Leitora de Microplaca de Visualização Fluorescente (FLIPR) Análise Ca.
Os estudos foram realizados usando o tampão de ensaio de NaCI com a seguinte composição (em mM) para o P2X7 humano: 137 NaCI; 20 HEPES; 5,37 KCI; 4,17 NaHCO3; 1 CaCI2; 0,5 MgO4; e 1g/L de D-glicose (pH 7,4). As células HEK293, expressando receptores P2X7 recombinantes humanos, foram
cultivadas em poli-L-lisina pré-tratada em microplaca de 96 poços por 42 h a 48 h. (A clonagem do receptor de ser P2X7 humano é descrita nos EU 6,133,434). As células foram lavadas três vezes com 80μΙ do tampão de ensaio, carregadas por 1 h a 37 0C com Fluo4 2 μΜ (Teflabs), lavadas três vezes novamente, e deixadas em 30 μ\ tampão antes da adição de 10 μ\ do composto de teste concentrado 4x. As células então foram incubadas na tempe- ratura ambiente por 30 min antes da adição (online, pelo instrumento FLIPR384 ou o instru- mento FLIPR3 (da Molecular Devices)) com concentração de ensaio final de benzoil benzoil- ATP (BzATP) de 60 μΜ. A concentração de BzATP foi escolhida por estar próxima do EC8O para o tipo de receptor. A incubação e a leitura foram continuadas por 90 segundos, e o au- mento de cálcio intracelular foi determinado pela medição da fluorescência (comprimento de onda de excitação de 488 nm e comprimento de onda de emissão de 516 nm) a partir do fundo da microplaca, com uma câmera FLIPR CCD. Os valores do antagonista plC50 para bloquear as respostas de BzATP foi determinado usando técnicas de ajuste iterativo de cur- vas.
Os compostos dos Exemplos de 1 a 136 foram testados pelo ensaio de Ca FLIPR
e/ou pelo ensaio de Acúmulo de Etídio para a atividade de antagonista do receptor da P2X7 humana e encontrou-se que possui valores de plC50 > 4,7 no ensaio de Ca FLIPR e/ou valo- res de plC50 > 5,5 no Ensaio de Acúmulo de Etídio. Dados in vivo.
Modelo de Rato para Dor Neuropática.
Pela colocação de ligaduras restritivas em volta do nervo ciático comum, pode ser produzida uma mononeuropatia periférica, que desse modo fornece um modelo de rato para a dor neuropática, Bennet et al., Pain, Volume 33, págs 87-107 (1988). Ratos machos adul- tos Hooded aleatórios (180 g a 200 g) da Charles River, UK, foram anestesiados com o iso- flurane (3 %). O nervo ciático na perna esquerda foi exposto na parte mediana da coxa e 4 ligaduras soltas da Chromic 4,0 tipo fio gut foram atadas em volta do nervo tal como descrito por Bennet et al, Pain, Volume 33, págs 87-107 (1988). A ferida foi fechada e suturada com grampos. Os ratos para teste em branco sofreram o mesmo procedimento mas as ligaduras soltas não foram aplicadas. A presença de alodínia mecânica (por estímulo tátil) foi avaliada usando a aplicação manual de monofilamentos de Von Frey. Os monofilamentos foram apli- cados na ordem ascendente para a região plantar da pata traseira (variedade: 1,4 g a 26 g). Cada filamento foi aplicado por aproximadamente. 3 a 5 segundos até que fosse observada uma resposta de retirada da pata. Depois da confirmação pela reaplicação dos filamentos inferiores e/ou superiores, o filamento mais inferior a produzir uma retirada de pata foi regis- trado como a resposta limite (g). Quando foi estabelecida a alodínia estável os ratos recebe- ram doses orais com o composto de 26 a 33 dias após a cirurgia duas vezes por dia durante 8 dias com medições da alodínia sendo registradas pelo menos três vezes durante o perío- do de dosagem. A A/-[(2,4-diclorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-prolinamida (E10) e a A/-{[2-cloro- 3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-prolinamida (E51) reverteram significativamente a alodínia mecânica induzida por CCI em comparação com a resposta do veículo.
Modelo de Rato para Dor nas Juntas.
Pela medição da hipersensibilidade pós injeção intra-articular de FCA no joelho, a eficácia de um analgésico potencial para a reversão da hipersensibilidade induzida por FCA pôde ser avaliada em um modelo de dor das juntas conjunto da dor inflamatória crônica. Ratos machos adultos Hooded aleatórios (180 g a 200 g) da Charles River, UK1 foram leve- mente anestesiados com o isoflurane (3 %). Os ratos então foram injetados com 150 μ\ de adjuvante completo de Freund (FCA) na junta de joelho esquerdo (intra-articularmente, i.art). A capacidade de carregar peso de cada membro traseiro (carregamento de peso, g) foi me- dida antes e depois da cirurgia usando um Calculador de Peso Médio de Duplo Canal (da Linton Instruments). Quando uma diferença estável no carregamento de peso foi estabelecida entre as patas injetada e a contralateral, os ratos foram tipicamente dosados oralmente (normalmente de 13 a 17 dias após a cirurgia) com o composto duas vezes por dia durante 5 dias com as medições do peso carregado registradas diariamente. A Λ/-[(2,4- diclorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-prolinamida (E10) e a /V-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-prolinamida (E51) reverteram significativamente a diferença de carre- gamento de peso induzida pela FCA (i.art) em comparação com a resposta do veículo e as ED50 < 20 mg/kg obtidas da Área Abaixo dos cálculos da Curva (AUC).
Modelo de Rato para Dor Inflamatória Aguda.
Um modelo animal útil para a dor inflamatória aguda é o modelo de inflamação in- duzido pelo Adjuvant Completo do Freund (FCA). Um modelo semelhante usando carragena em vez de FCA é descrito por Clayton em Br. J. Pharmacol. 1997; 120, 219P. Ratos machos adultos Hooded aleatórios (180 g a 200 g) da Charles River, UK recebeu uma injeção intra- plantar (i.pl) de 100 μ\ de FCA na superfície plantar da pata traseira esquerda. A capacidade de carregar o peso de cada membro traseiro (peso de carga, g) foi medida antes de e 24 horas depois da injeção de FCA usando um medidor de média de peso de canal duplo (da Linton linstruments). Depois da leitura pós-FCA, os ratos foram tipicamente dosados oral- mente com o composto depois que as medições do peso carregado fossem registrados. A A/-[(2,4-diclorofenil) metil]-1-metil-5-oxo-prolinamida (E10) e a A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-prolinamida (E51) reverteram significativamente a diferença de carregamento de peso induzida pela FCA (i.pl) em comparação com a resposta do veículo e produziram uma ED50 < 20 mg/kg obtido de curvas de resposta de dose.

Claims (13)

1. Composto da Fórmula (I)1 ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: <formula>formula see original document page 95</formula> CARACTERIZADO pelo fato de que: R1 representa alquil C1^1 alquenil C2-e, alquinil C2-6, cicloalquil C3.6, metil-cicloalquil C3_6 ou metil-piridinil C3.6, alguns dos quais são opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; ou fenil ou benzil não substituídos; R2 e R3 representam independentemente hidrogênio, halogênio, alquil C1^1 metil-aril Ci-6l alquenil C2-6, alquinil C2-6 ou metil-cicloalquil C3.6; e qualquer um dos ditos alquil C1^1 metil-aril C1^1 alquenil C2-6, alquinil C2.6 ou metil-cicloalquil C3^ é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; R4, R5 e R6 representam independentemente hidrogênio, flúor ou metil; e R71 R81 R9, R10 e R11 representam independentemente hidrogênio, halogênio, ciano, alquil Ci-6, alquenil C2_6, alquinil C2.6, cicloalquil C3.6 ou fenil, e qualquer um dos ditos alquil C1^, alquenil C2^1 alquinil C2.6, cicloalquil C3^ ou fenil é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; ou R10 e R11 em conjunto com os átomos de carbono aos quais eles estão ligados formam um anel benzênico que é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; com a condição de que quando R7 e R11 forem ambos selecionados de hidrogênio ou flúor, pelo menos um dos R8, R9 e R10 é um átomo de halogênio, ou R8, R9 e R10 são selecionados do grupo consistindo de hidrogênio e CF3 e um, mas não mais do que um, dos R8, R9 e R10 é CF3.
2. Composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: <formula>formula see original document page 95</formula> CARACTERIZADO pelo fato de que: R1 representa alquil C1^, alquenil C2^, alquinil C2^1 cicloalquil C3_6, metil-cicloalquil C3.6 ou metil-piridinil C3^1 alguns dos quais são opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; ou fenil ou benzil não substituídos; R2 e R3 representam independentemente hidrogênio, halogênio, alquil C1^1 metil-aril (I) Ci_6, alquenil C2-6, alquinil C2.6 ou metil-cicloalquil C3^; e qualquer um dos ditos alquil C1^1 metil-aril C1^1 alquenil C2-6, alquinil C2-6 ou metil-cicloalquil C3.6 são opcionalmente substituí- dos com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; R41 R5 e R6 representam independentemente hidrogênio, flúor ou metil; e R71 R81 R91 R10 e R11 representam independentemente hidrogênio, halogênio, ciano, alquil C1^1 alquenil C2-6, alquinil C2^1 cicloalquil C3.6 ou fenil, e qualquer um dos ditos alquil Ci_6, alquenil C2^1 alquinil C2-6, cicloalquil C3^ ou fenil é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; ou R10 e R11 em conjunto com os átomos de carbono aos quais eles estão ligados formam um anel benzênico que é opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; com a condição de que quando R7 e R11 forem ambos selecionados de hidrogênio ou flúor, pelo menos um dos R81 R9 e R10 é um átomo de halogênio, ou não mais do que um dos R8, R9 e R10 é um grupo CF3.
3. Composto da Fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo: <formula>formula see original document page 96</formula> CARACTERIZADO pelo fato de que: R1 representa alquil C1^, alquenil C2^, alquinil C2.6, cicloalquil C3.6 ou metil- cicloalquil C3-6, qualquer um dos quais podendo ser opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; ou fenil ou benzil não substituídos; R2 e R3 representam independentemente hidrogênio, halogênio, alquil C1-6, arilmetil, alquenil C2_6, alquinil C2.6 ou metil-cicloalquil C3-6; e qualquer um dos ditos alquil C-i-6, arilme- til, alquenil C2,6, alquinil C2.6 ou metil-cicloalquil C3.6 podem ser opcionalmente substituídos com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; R4, R5 e R6 representam independentemente hidrogênio ou flúor; e R7, R8, R9, R10 e R11 representam independentemente hidrogênio, halogênio, ciano, alquil C1-6, alquenil C2-6, alquinil C2.6, cicloalquil C3^, ou fenil; e qualquer um dos ditos alquil C1 .6, alquenil C2_6, alquinil C2-6, cicloalquil C3^ ou fenil pode ser opcionalmente substituído com 1, 2 ou 3 átomos de halogênio; com a condição de que quando R7 e R11 representam independentemente hidrogênio ou flúor, pelo menos um dos R8, R9 e R10 é um átomo de halogênio.
4. Composto da Fórmula (I), de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que R1 representa alquil C1^, alquenil C2^, alquinil C2^, cicloalquil C3^1 metil- piridinil C3^, fenil ou benzil não substituídos.
5. Composto da Fórmula (I), de acordo com as reivindicações 1 ou 4, CARACTERIZADO pelo fato de que R2 e R3 representam independentemente hidrogênio, flúor ou metila.
6. Composto da Fórmula (I)1 de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 4 ou 5, CARACTERIZADO pelo fato de que R41 R5 e R6 representam independentemente hi- drogênio ou metila.
7. Composto da Fórmula (I), de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 4, 5 ou 6, CARACTERIZADO pelo fato de que R71 R81 R91 R10 e R11 representam independente- mente hidrogênio, halogênio, ciano, trifluorometil, alquil C1^ não substituído; ou R10 e R11 em conjunto com os átomos de carbono aos quais eles estão ligados formam um anel benzêni- co não substituído.
8. Composto da Fórmula (I), de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que é um composto dos Exemplos de 1 a 136, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
9. Composto da Fórmula (I), de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO 15 pelo fato de que é a A/-{[2-cloro-3-(trifluorometil) fenil] metil}-1-metil-5-oxo-prolinamida.
10. Composição farmacêutica, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende um composto de Fórmula (I), conforme definido em qualquer uma das reivindicações prece- dentes e um veículo ou um excipiente farmaceuticamente aceitável.
11. Composto, ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com qual- quer uma das reivindicações de 1 a 9, CARACTERIZADO pelo fato de ser para uso em te- rapia.
12. Método para o tratamento de um paciente humano ou animal que esteja sofren- do de dor, inflamação ou de uma doença neuro-degenerativa, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende a administração ao dito paciente de uma quantidade eficaz de um com- posto de Fórmula (I), conforme definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 9.
13. Uso de um composto, conforme definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 9, CARACTERIZADO pelo fato de ser para a fabricação de um medicamento para o tratamento da dor, da inflamação ou de uma doença neuro-degenerativa.
BRPI0714062-2A 2006-07-06 2007-07-03 n-fenil-metil-5-oxo-prolina-2-amidas substituìdas como antagonistas do receptor da p2x, e os seus métodos de uso BRPI0714062A2 (pt)

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B07D Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette]
B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B08F Application dismissed because of non-payment of annual fees [chapter 8.6 patent gazette]
B08K Patent lapsed as no evidence of payment of the annual fee has been furnished to inpi [chapter 8.11 patent gazette]