JP5539225B2 - Ａｋｔタンパク質キナーゼ阻害剤としての水酸化されたピリミジルシクロペンタン - Google Patents

Description

本発明は、セリン／スレオニンタンパク質キナーゼ（例えば、ＡＫＴおよび関連キナーゼ）の新規阻害剤、該阻害剤を含有する医薬組成物、および本阻害剤を調製するための方法に関する。該阻害剤は、例えば、哺乳動物において、癌および炎症のような過剰増殖性疾患の治療のために有用である。

先行技術の説明
タンパク質キナーゼ（ＰＫ）は、ＡＴＰから末端（ガンマ）リン酸の移行によって、タンパク質の、チロシン、セリンおよびトレオニン残基上におけるヒドロキシ基のリン酸化を触媒する酵素である。シグナル変換経路を介して、これらの酵素は、細胞成長、分化および増殖を調節する、すなわち、細胞寿命の事実上すべての態様は、何らかの形でＰＫ活性に依存する（Ｈａｒｄｉｅ，Ｇ．ａｎｄ Ｈａｎｋｓ，Ｓ．（１９９５）Ｔｈｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｋｉｎａｓｅ Ｆａｃｔｓ Ｂｏｏｋ． Ｉ ａｎｄ ＩＩ，Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）。さらに、異常なＰＫ活性は、乾癬のような比較的生命を脅かさない疾患から膠芽細胞腫（脳腫瘍）のような極めて悪性の疾患にわたる多数の障害に関連している。タンパク質キナーゼは、治療的調節のための重要な標的クラスである（Ｃｏｈｅｎ，Ｐ．（２００２）Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖ．Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ １：３０９）。

重大なことに、非定型タンパク質リン酸化および／または発現は、癌における異常な細胞増殖、転移および細胞生存の原因となる影響の１つとして報告されることが多い。多数ある中でもＡｋｔ、ＶＥＧＦ、ＩＬＫ、ＲＯＣＫ、ｐ７０Ｓ６Ｋ、Ｂｃｌ、ＰＫＡ、ＰＫＣ、Ｒａｆ、Ｓｒｃ、ＰＤＫ１、ＥｒｂＢ２、ＭＥＫ、ＩＫＫ、Ｃｄｋ、ＥＧＦＲ、ＢＡＤ、ＣＨＫ１、ＣＨＫ２およびＧＳＫ３を含む種々のキナーゼの異常制御および／または発現が、癌に特異的に関与している。

タンパク質キナーゼは、２つの分類、タンパク質チロシンキナーゼ（ＰＴＫ）およびセリン−トレオニンキナーゼ（ＳＴＫ）を含む。タンパク質キナーゼＢ／Ａｋｔ酵素は、多種多様なヒト腫瘍において過剰発現するセリン／トレオニンキナーゼの群である。ＰＩ３Ｋ脂質生成物の最もよく特徴がわかっている標的の１つは、シグナル変換経路内のＰＩ３Ｋの下流の５７ＫＤセリン／トレオニンタンパク質キナーゼＡｋｔである（Ｈｅｍｍｉｎｇｓ，Ｂ．Ａ．（１９９７）Ｓｃｉｅｎｃｅ ２７５：６２８、Ｈａｙ Ｎ．（２００５）Ｃａｎｃｅｒ Ｃｅｌｌ ８：１７９−１８３）。Ａｋｔは、急性形質転換レトロウイルスＡＫＴ８のプロトオンコジーンｖ−ａｋｔのヒト相同体である。タンパク質キナーゼＡおよびＣに対するその高い配列相同性により、Ａｋｔはタンパク質キナーゼＢ（ＰＫＢ）ならびにＡおよびＣに関連するキナーゼ（ＲＡＣ）とも呼ばれる。Ａｋｔの３つのアイソフォーム、すなわちＡｋｔ１、Ａｋｔ２およびＡｋｔ３が存在することが知られており、これらは８０％の全体的相同性を呈する（Ｓｔａａｌ，Ｓ．Ｐ．（１９８７）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．８４：５０３４、Ｎａｋａｔａｎｉ，Ｋ．（１９９９）Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍｕｎ．２５７：９０６、Ｌｉ ｅｔ ａｌ（２００２）ＣｕｒｒｅｎｔＴｏｐｉｃｓ ｉｎ Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．２：９３９−９７１、国際公開第ＷＯ２００５／１１３７６２号）。これらのＡｋｔアイソフォームは、Ｎ末端側のプレクストリン相同ドメイン、キナーゼ触媒ドメインおよびＣ末端側の短い調節領域からなる共通のドメイン構成を共有する。さらに、Ａｋｔ２およびＡｋｔ３はいずれも、スプライス変異を呈する。ＰｔｄＩｎｄ（３，４，５）Ｐ_３による細胞膜への補給時、Ａｋｔは、アイソフォームＡｋｔ１（ＰＫＢα）、Ａｋｔ２（ＰＫＢβ）およびＡｋｔ３（ＰＫＢγ）についてはそれぞれＴ３０８、Ｔ３０９およびＴ３０５において、ならびにアイソフォームＡｋｔ１、Ａｋｔ２およびＡｋｔ３についてはそれぞれＳ４７３、Ｓ４７４およびＳ４７２において、ＰＤＫ１によりリン酸化（活性化）される。このようなリン酸化は、未知のキナーゼ（推定的にＰＤＫ２と命名される）により起こるが、ＰＤＫ１（Ｂａｌｅｎｄｒａｎ，Ａ．，（１９９９）Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．９：３９３）、自己リン酸化（Ｔｏｋｅｒ，Ａ．（２０００）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７５：８２７１）およびインテグリン結合キナーゼ（ＩＬＫ）（Ｄｅｌｃｏｍｍｅｎｎｅ，Ｍ．（１９９８）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９５：１１２１１）は、このプロセスに関与している。Ａｋｔ活性化は、Ｃ末端疎水性モチーフ内の残基Ｓｅｒ４７３におけるそのリン酸化を必要とする（Ｂｒｏｄｂｅｃｋ ｅｔ ａｌ（１９９９）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７４：９１３３−９１３６、Ｃｏｆｆｅｒ ｅｔ ａｌ（１９９１）Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．２０１：４７５−４８１、Ａｌｅｓｓｉ ｅｔ ａｌ（１９９７）Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．７：２６１−２６９）。Ａｋｔのモノリン酸化は、該キナーゼを活性化するが、最大キナーゼ活性にはビス（リン酸化）が必要である。

Ａｋｔは、アポトーシスを抑制し、血管形成および増殖の両方を強化することにより、癌に対するその影響を行使すると考えられている（Ｔｏｋｅｒ ｅｔ ａｌ． （２００６）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．６６（８）：３９６３−３９６６）。Ａｋｔは、結腸癌（Ｚｉｎｄａ ｅｔ ａｌ（２００１）Ｃｌｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ７：２４７５）、卵巣癌（Ｃｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ（１９９２）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８９：９２６７）、脳癌（Ｈａａｓ Ｋｏｇａｎ ｅｔ ａｌ（１９９８）Ｃｕｒｒ．Ｂｉｏｌ．８：１１９５）、肺癌（Ｂｒｏｇｎａｒｄ ｅｔ ａｌ（２００１）Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ． ６１：３９８６）、膵臓癌（Ｂｅｌｌａｃｏｓａ ｅｔ ａｌ（１９９５）Ｉｎｔ．Ｊ．Ｃａｎｃｅｒ ６４：２８０−２８５、Ｃｈｅｎｇ ｅｔ ａｌ（１９９６）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．９３：３６３６−３６４１）、前立腺癌（Ｇｒａｆｆ ｅｔ ａｌ（２０００）Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．２７５：２４５００）および胃癌（Ｓｔａａｌ ｅｔ ａｌ（１９８７）Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８４：５０３４−５０３７）を含むが、これらに限定されない多数の形態のヒト癌で過剰発現する。

標的小分子阻害剤療法のために、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ／哺乳類のラパマイシン標的タンパク質（ｍＴＯＲ）の経路が調査されている（Ｇｅｏｒｇａｋｉｓ，Ｇ．ａｎｄ Ｙｏｕｎｅｓ，Ａ．（２００６）Ｅｘｐｅｒｔ Ｒｅｖ．Ａｎｔｉｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ． ６（１）：１３１−１４０、Ｇｒａｎｖｉｌｌｅ ｅｔ ａｌ（２００６）Ｃｌｉｎ． Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．１２（３）：６７９−６８９）。ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔシグナル伝達の阻害は、アポトーシスを誘発し、Ａｋｔレベルを上昇させた腫瘍細胞の成長を阻害する（Ｋｉｍ ｅｔ ａｌ（２００５）Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎｉｏｎ ｉｎ Ｉｎｖｅｓｔｉｇ． Ｄｒｕｇｓ ６（１２）：１２５０−１２５８、Ｌｕｏ ｅｔ ａｌ（２００５）Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃａｎｃｅｒ Ｔｈｅｒ．４（６）：９７７−９８６）。

異常制御経路を標的とし、最終的に疾患をもたらすキナーゼ阻害剤の開発は、医学および薬学界の大きな倫理的および商業的関心を引くものである。（１）Ａｋｔの細胞膜への補給、（２）ＰＤＫ１またはＰＤＫ２による活性化、（３）基質のリン酸化、または（４）Ａｋｔの下流標的、のうちの１つを阻害する化合物は、独立療法として、または他の許容される手順と併用して、有益な抗癌剤となる場合がある。

特許文献１は、とりわけ、ＡＫＴ阻害剤として作用する多種多様な化合物を開示している。これらの化合物は、癌のような過剰増殖性疾患の治療において有用であると言われている。

米国特許出願公開第２００５／０１３０９５４号明細書

本発明は、ＡＫＴタンパク質キナーゼを阻害する新規化合物を提供する。本発明の化合物は、ＡＫＴタンパク質キナーゼの阻害により治療することができる疾患および病状の治療剤として実用的である。

より具体的には、本発明は、式Ｉを有する化合物、

およびその薬剤として許容可能な塩を含む。

本発明はまた、式Ｉの化合物を含む医薬組成物またはその薬剤として許容可能な塩も提供する。

さらなる態様において、本発明は、哺乳動物において、ＡＫＴタンパク質キナーゼにより媒介される疾患または病状を治療する方法を提供し、これには、前記障害を治療または予防するために有効な量において、前記哺乳動物に、式Ｉの化合物またはその薬剤として許容可能な塩を投与するステップを含む。本発明の方法により治療され得るＡＫＴタンパク質キナーゼ媒介病状としては、炎症性、過剰増殖性、心臓血管、神経変性、婦人科、または皮膚科疾患もしくは障害が挙げられるが、これらに限定されない。

さらなる態様において、本発明は、哺乳動物において、ＡＫＴタンパク質キナーゼの産生を阻害する方法を提供し、これには、ＡＫＴタンパク質キナーゼの産生を阻害するための有効な量において、前記哺乳動物に、式Ｉの化合物またはその薬剤として許容可能な塩を投与するステップを含む。

さらなる態様において、本発明は、ＡＫＴタンパク質キナーゼの活性を阻害する方法を提供し、これには、前記キナーゼを、式Ｉの化合物と接触させるステップが含まれる。

本発明化合物は、他の既知の治療剤と併用して、有利に使用され得る。したがって、本発明はまた、第２の治療剤と併用して、式Ｉの化合物またはその薬剤として許容可能な塩を含む医薬組成物も提供する。

本発明はまた、ＡＫＴタンパク質キナーゼ媒介病状の治療における、薬剤として用いるための式Ｉの化合物またはその薬剤として許容可能な塩も提供する。

本発明のさらなる態様は、療法用の式Ｉの化合物またはその薬剤として許容可能な塩の使用である。一実施形態において、該療法は、ＡＫＴタンパク質キナーゼ媒介病状の治療を含む。

本発明は、ＡＫＴタンパク質キナーゼ媒介疾患もしくは障害の治療のためのキットをさらに提供し、前記キットは、式Ｉの化合物またはその薬剤として許容可能な塩、容器、および任意に、治療法を示す添付文書もしくはラベルを含む。該キットは、前記疾患もしくは障害を治療するために有用な第２の医薬剤を含む第２の化合物つまり製剤をさらに含み得る。

本発明のさらなる態様は、過剰増殖性疾患の治療における、式Ｉの化合物の使用を提供する。本発明のさらなる態様において、該過剰増殖性疾患は、癌である。

本発明は、本発明の化合物を調製する方法、分離する方法、および精製する方法をさらに含む。

本発明のさらなる利点および新規機能は、以下の説明において、部分的に記述され得、以下の明細書の検討によって、当業者には部分的に明らかになり得、または本発明の実践により習得され得る。本発明の利点は、添付の特許請求内で具体的に指摘される、手段、組み合わせ、組成物、および方法によって、実現され、達成され得る。
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
（項目１）
式Ｉの化合物。

（項目２）
（Ｓ）−２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−１−（４−（（５Ｒ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（（１ｒ，４Ｓ）−４−メトキシシクロヘキシルアミノ）プロパン−１−オン。
（項目３）
項目１または２に記載の化合物を含む医薬組成物。
（項目４）
哺乳動物において、ＡＫＴ媒介疾患もしくは障害を治療する方法であって、前記哺乳動物に、治療有効量の項目１または２に記載の化合物を投与するステップを含む、方法。
（項目５）
前記疾患もしくは障害は、炎症性、過剰増殖性、心臓血管、神経変性、婦人科、または皮膚科疾患もしくは障害である、項目４に記載の方法。
（項目６）
哺乳動物において、ＡＫＴタンパク質キナーゼの産生を阻害する方法であって、前記哺乳動物に、有効量の項目１または２に記載の化合物を投与するステップを含む、方法。
（項目７）
哺乳動物において、ＡＫＴタンパク質キナーゼの活性を阻害する方法であって、前記キナーゼを、項目１または２に記載の化合物と接触させるステップを含む、方法。
（項目８）
ＡＫＴタンパク質キナーゼ媒介病状の治療における、薬剤として使用のための項目１または２に記載の化合物。
（項目９）
療法のための薬剤の製造における、項目１または２に記載の化合物の使用。
（項目１０）
過剰増殖性疾患の治療における、項目１または２に記載の化合物の使用。
（項目１１）
癌の治療における、項目１または２に記載の化合物の使用。
（項目１２）
ＡＫＴタンパク質キナーゼ媒介病状を治療するためのキットであって、
ａ）項目１または２に記載の化合物を含む第１の医薬組成物と、
ｂ）任意に、使用説明書と、
を含む、キット。

以下、本発明のある実施形態を詳細に参照するが、これらの実施例は、添付の構造および式に図示される。本発明は、列挙された実施形態と共に説明されるが、それらは、本発明をこれらの実施形態に限定することを意図するものではないことが理解されるであろう。対照的に、本発明は、特許請求の範囲に定義される本発明の範囲内に含まれ得るすべての改変、修正および等価物を網羅することを意図する。当業者は、本発明の実践で用いることができる、本明細書中に記載されたものと同様のまたは同等な多くの方法および材料を認識するであろう。本発明は、記載された方法および材料に断じて限定されない。定義された用語、用語の用法、記載された技術等を含むが、これらに限定されない、組み込まれた文献および同様の資料の１つもしくは複数が本出願とは異なる、または矛盾する場合には、本出願が優先する。

定義
本明細書において使用する「一つの（ａ）」という用語は、１つもしくは複数を意味する。

本明細書において使用する際、「本発明の化合物」、「この発明の化合物」および「式Ｉの化合物」という用語は、式Ｉの化合物およびその薬剤として許容可能な塩を含む。

「有効量」という語句は、このような治療を必要とする哺乳動物に投与する際、（ｉ）１つもしくは複数のＡＫＴタンパク質キナーゼ、チロシンキナーゼ、追加のセリン／スレオニンキナーゼ、および／もしくは二重特異性キナーゼの活性により媒介される特定の疾患、病状、もしくは障害を治療するもしくは予防する、（ｉｉ）特定の疾患、病状、もしくは障害の１つもしくは複数の症状を軽減する、改善する、もしくは解消する、または（ｉｉｉ）本明細書に記載の特定の疾患、病状、もしくは障害の１つもしくは複数の症状の発症を予防するもしくは遅延するのに十分な化合物の量を意味する。癌の場合、有効量の薬物は、癌細胞数を減少させる、腫瘍の大きさを減少させ、末梢器官への癌細胞浸潤を阻害する（すなわち、ある程度緩徐し、好ましくは停止させる）、腫瘍転移を阻害する（すなわち、ある程度緩徐し、好ましくは停止させる）、腫瘍増殖をある程度阻害する、ならびに／または癌に関連する１つもしくは複数の症状をある程度軽減し得る。薬物が、増殖を予防し、および／または存在する癌細胞を死滅させ得る程度に、薬物は細胞増殖抑制性および／または細胞毒性であり得る。癌療法に関しては、有効性は、例えば、無増悪期間（ＴＴＰ）を評価する、および／または反応速度（ＲＲ）を決定することにより、測定され得る。

「治療している（Ｔｒｅａｔｉｎｇ）」とは、罹患しているヒト等の哺乳動物において、１つもしくは複数のＡＫＴタンパク質キナーゼ、チロシンキナーゼ、追加のセリン／スレオニンキナーゼ、および／もしくは二重特異性キナーゼの活性により、少なくともある程度、少なくとも病状の緩和を意味することを意図する。「治療する（ｔｒｅａｔ）」および「治療（ｔｒｅａｔｍｅｎｔ）」という用語は、治療的処置と予防もしくは再発防止措置の両方を指し、その目的は、望ましくない生理的変化または障害を予防するまたは抑制する（軽減する）ことである。本発明の目的では、便宜なまたは所望の臨床的結果は、検出可能であるかまたは検出不可能であるかを問わず、兆候の軽減、疾患の程度の低下、疾患の安定化された（すなわち、悪くならない）病状、疾患進行の遅延または遅らせること、疾患病状の緩和または軽減、および（部分的または全体的を問わず）寛解が挙げられるが、これらに限定されない。「治療」はまた、治療を受けない場合の予測される生存と比較した生存の延長を意味することもできる。治療を必要とする者としては、既に病状または障害を持つ者、ならびに病状を有する傾向があるが、それを有すると診断されていない者が挙げられ、該治療は病状を調節および／もしくは阻害するものである。「治療している」、「治療する」、または「治療」という用語は、再発防止、すなわち、予防と、緩和的処置を共に包含する。

本明細書に使用する際、「哺乳動物」という用語は、本明細書に記載される疾患に罹患した、または発症する危険性がある温血動物を指し、モルモット、イヌ、ネコ、ラット、マウス、ハムスター、および霊長類（ヒトを含む）が挙げられるが、これらに限定されない。

「化学療法剤」は、作用機序にかかわらず、癌の治療に有用な化学的化合物である。化学療法剤には、「標的療法」および従来の化学療法に使用される化合物が含まれる。

化学療法剤の例としては、エルロチニブ（ＴＡＲＣＥＶＡ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／ＯＳＩ Ｐｈａｒｍ．）、ボルテゾミブ（ＶＥＬＣＡＤＥ（登録商標）、Ｍｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍ．）、フルベストラント（ＦＡＳＬＯＤＥＸ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、スーテント（ＳＵ１１２４８、Ｐｆｉｚｅｒ）、レトロゾール（ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、メシル酸イマチニブ（ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標）、Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、ＰＴＫ７８７／ＺＫ ２２２５８４（Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、オキサリプラチン（Ｅｌｏｘａｔｉｎ（登録商標）、Ｓａｎｏｆｉ）、５−ＦＵ（５−フルオロウラシル）、ロイコボリン、ラパマイシン（シロリムス、ＲＡＰＡＭＵＮＥ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）、ラパチニブ（ＴＹＫＥＲＢ（登録商標）、ＧＳＫ５７２０１６、Ｇｌａｘｏ Ｓｍｉｔｈ Ｋｌｉｎｅ）、ロナファミブ（ＳＣＨ ６６３３６）、ソラフェニブ（ＢＡＹ４３−９００６、Ｂａｙｅｒ Ｌａｂｓ）、イリノテカン（ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標）、Ｐｆｉｚｅｒ）およびゲフィチニブ（ＩＲＥＳＳＡ（登録商標）、ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）、ＡＧ１４７８、ＡＧ１５７１（ＳＵ ５２７１、Ｓｕｇｅｎ）、チオテパおよびＣＹＴＯＸＡＮ（登録商標）シクロスフォスファミドのようなアルキル化剤；ブスルファン、インプロスルファンおよびピポスルファンのようなスルホン酸アルキル；ベンゾドパ、カルボコン、メツレドパ（ｍｅｔｕｒｅｄｏｐａ）、およびウレドパ（ｕｒｅｄｏｐａ）のようなアジリジン；アルトレタミン、トリエチレンメラミン、トリエチレンホスホラミド、トリエチレンチオホスホラミドおよびトリメチロールメラミンを含むエチレンイミンおよびメチルアメラミン（ｍｅｔｈｙｌａｍｅｌａｍｉｎｅ）；アセトゲニン（特には、ブラタシンおよびブラタシノン）；カンプトテシン（合成類似体トポテカンを含む）；ブリオスタチン；カリスタチン；ＣＣ−１０６５（そのアドゼレシン、カルゼレシンおよびビゼレシン合成類似体を含む）；クリプトフィシン（特には、クリプトフィシン１およびクリプトフィシン８）；ドラスタチン；デュオカルマイシン（合成類似体、ＫＷ−２１８９およびＣＢ１−ＴＭ１を含む）；エロイテロビン；パンクラチスタチン；サルコジクチイン；スポンギスタチン；クロラムブシル、クロマファジン、クロロホスファミド、エストラムスチン、イホスファミド、メクロレタミン、塩酸メクロレタミンオキシド、メルファラン、ノベムビシン、フェネステリン、プレドニムスチン、トロホスファミド、ウラシルマスタードのような窒素マスタード；カルムスチン、クロロゾトシン、ホテムスチン、ロムスチン、ニムスチンおよびラニムスチンのようなニトロスレア；抗生物質、例えば、エネジイン抗生物質（例えば、カリケアミシン、特には、カリケアミシンガンマ１ＩおよびカリケアミシンオメガＩ１（Ａｎｇｅｗ Ｃｈｅｍ． Ｉｎｔｌ．Ｅｄ．Ｅｎｇｌ．（１９９４）３３：１８３−１８６）；ジネミシンＡを含むジネミシン；クロドロネートのようなビスホスホネート；エスペラマイシン；加えて、ネオカルジノスタチン発色団および関連色素タンパク質エネジイン抗生物質発色団）、アクラシノマイシン、アクチノマイシン、アウトラマイシン、アザセリン、ブレオマイシン、カクチノマイシン、カラビシン、カルミノマイシン、カルジノフィリン、クロモマイシニス、ダクチノマイシン、ダウノルビシン、デトルビシン、６−ジアゾ−５−オキソ−Ｌ−ノルロイシン、ＡＤＲＩＡＭＹＣＩＮ（登録商標）（ドキソルビシン）、モルホリノ−ドキソルビシン、シアノモルホリノ−ドキソルビシン、２−ピロリノ−ドキソルビシンおよびデオキシドキソルビシン）、エピルビシン、エソルビシン、イダルビシン、マルセロマイシン、ミトマイシンＣのようなミトマイシン、ミコフェノール酸、ノガラマイシン、オリボマイシン、ペプロマイシン、ポルフィロマイシン、プロマイシン、ケラマイシン、ロドルビシン、ストレプトニグリン、ストレプトゾシン、ツベルシジン、ウベニメクス、ジノスタチン、ゾルビシン；メトトレキセートおよび５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）のような代謝拮抗剤；デノプテリン、メトトレキセート、プテロプテリン、トリメトレキセートのような葉酸類似体；フルダラビン、６−メルカプトプリン、チアミプリン、チオグアニンのようなプリン類似体；アンシタビン、アザシチジン、６−アザウリジン、カルモフル、シタラビン、ジデオキシウリジン、ドキシフルリジン、エノシタビン、フロクスウリジンのようなピリミジン類似体；カルステロン、ドロモスタノロンプロピオネート、エピチオスタノール、メピチオスタン、テストラクトンのようなアンドロゲン；アミノグルテチミド、ミトタン、トリロスタンのような抗副腎剤；フロリン酸（ｆｒｏｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）のような葉酸補給剤；アセグラトン；アルドホスファミドグリコシド；アミノレブリン酸；エニルウラシル；アムサクリン；ベストラブシル；ビサントレン；エダトラキセート；デホファミン；デメコルシン；ジアジコン；エルホルニチン；エリプチニウムアセテート；エポチロン；エトグルシド；硝酸ガリウム；ヒドロキシ尿素；レンチナン；ロニダイニン；メイタンシンおよびアンサミトシンのようなメイタンシノイド；ミトガゾン；ミトキサントロン；モピダンモール；ニトラエリン；ペントスタチン；フェナメト；ピラルビシン；ロソキサントロン；ポドフィリン酸（ｐｏｄｏｐｈｙｌｌｉｎｉｃ ａｃｉｄ）；２−エチルヒドラジド；プロカルバジン；ＰＳＫ（登録商標）多糖複合体（ＪＨＳ Ｎａｔｕｒａｌ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｅｕｇｅｎｅ、ＯＲ）；ラゾキサン；リゾキシン；シゾフィラン；スピロゲルマニウム；テヌアゾン酸；トリアジコン；２，２’，２”−トリクロロトリエチルアミン；トリコテセン（特には、Ｔ−２トキシン、ベラクリンＡ、ロリジンＡおよびアンギジン）；ウレタン；ビンデシン；ダカルバジン；マンノムスチン；ミトブロニトール；ミトラクトール；ピポブロマン；ガシトシン；アラビノシド（「Ａｒａ−Ｃ」）；シクロホスファミド；チオテパ；タキソイド、例えば、ＴＡＸＯＬ（登録商標）（パクリタキセル；Ｂｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ、Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ、Ｎ．Ｊ．）、ＡＢＲＡＸＡＮＥ（商標）（Ｃｒｅｍｏｐｈｏｒ非含有）、パクリタキセルのアルブミン加工ナノ粒子配合物（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｐａｒｔｎｅｒｓ、Ｓｃｈａｕｍｂｅｒｇ、Ｉｌｌｉｎｏｉｓ）、およびＴＡＸＯＴＥＲＥ（登録商標）（ドキセタキセル；Ｒｈｏｎｅ−Ｐｏｕｌｅｎｃ Ｒｏｒｅｒ、Ａｎｔｏｎｙ、Ｆｒａｎｃｅ）；クロラムブシル；ＧＥＭＺＡＲ（登録商標）（ゲムシタビン）；６−チオグアニン；メルカプトプリン；メトトレキセート；シスプラチンおよびカルボプラチンのような白金類似体；ビンブラスチン；エトポシド（ＶＰ−１６）；イホスファミド；ミトキサントロン；ビンクリスチン；ＮＡＶＥＬＢＩＮＥ（登録商標）（ビノレルビン）；ノバントロン；テニポシド；エダトレキセート；ダウノマイシン；アミノプテリン；カペシタビン（ＸＥＬＯＤＡ（登録商標））；イバンドロネート；ＣＰＴ−１１；トポイソメラーゼ阻害剤ＲＦＳ ２０００；ジフルオロメチルオルニチン（ＤＭＦＯ）；レチノイン酸のようなレチノイド；ならびに上記のいずれかの薬剤として許容可能な塩、酸および誘導体が含まれる。

「化学療法剤」の定義にさらに含まれるものは、（ｉ）タモキシフェン（ＮＯＬＶＡＤＥＸ（登録商標）；タモキシフェンシトレートを含む）、ラロキシフェン、ドロロキシフェン、４−ヒドロキシタモキシフェン、トリオキシフェン、ケオキシフェン、ＬＹ１１７０１８、オナプリストン、およびＦＡＲＥＳＴＯＮ（登録商標）（トレミフィンシトレート）を含む、抗エストロゲン剤および選択的エストロゲン受容体調節剤（ＳＥＲＭ）のような、腫瘍に対するホルモン作用を調節もしくは阻害するように作用する抗ホルモン剤；（ｉｉ）例えば、４（５）−イミダゾール、アミノグルテチミド、ＭＥＧＡＳＥ（登録商標）（メゲストロールアセテート）、ＡＲＯＭＡＳＩＮ（登録商標）（エキセメスタン；Ｐｆｉｚｅｒ）、ホルメスタニー、ファドロゾール、ＲＩＶＩＳＯＲ（登録商標）（ボロゾール）、ＦＥＭＡＲＡ（登録商標）（レトロゾール；Ｎｏｖａｒｔｉｓ）、およびＡＲＩＭＩＤＥＸ（登録商標）（アナストロゾール；ＡｓｔｒａＺｅｎｅｃａ）のような、副腎におけるエストロゲン産生を調節する、酵素アロマターゼを阻害するアロマターゼ阻害剤；（ｉｉｉ）フルタミド、ニルタミド、ビカルタミド、ロイプロリド、およびゴセレリンのような抗アンドロゲン剤；それらに加えて、トロキサシタビン（１，３−ジオキソランヌクレオシドシトシン類似体）；（ｉｖ）プロテインキナーゼ阻害剤；（ｖ）脂質キナーゼ阻害剤；（ｖｉ）アンチセンスオリゴヌクレオチド、特には、異常細胞増殖に関与するシグナル伝達経路における遺伝子の発現を阻害するもの、例えば、ＰＫＣ−アルファ、ＲａｌｆおよびＨ−Ｒａｓ；（ｖｉｉ）ＶＥＧＦ発現阻害剤（例えば、ＡＮＧＩＯＺＹＭＥ（登録商標））およびＨＥＲ２発現阻害剤のようなリボザイム；（ｖｉｉｉ）遺伝子療法ワクチンのようなワクチン、例えば、ＡＬＬＯＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、ＬＥＵＶＥＣＴＩＮ（登録商標）、およびＶＡＸＩＤ（登録商標）；ＰＲＯＬＥＵＫＩＮ（登録商標）ｒＩＬ−２；ＬＵＲＴＯＴＥＣＡＮ（登録商標）のようなトポイソメラーゼ１阻害剤；ＡＢＡＲＥＬＩＸ（登録商標）ｒｍＲＨ；（ｉｘ）ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）のような抗血管新生剤；ならびに（ｘ）上記のいずれかの薬剤として許容可能な塩、酸および誘導体である。

アレムツズマブ（Ｃａｍｐａｔｈ）、ベバシズマブ（ＡＶＡＳＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）；セテュキマブ（ＥＲＢＩＴＵＸ（登録商標）、Ｉｍｃｌｏｎｅ）；パニツムマブ（ＶＥＣＴＩＢＩＸ（登録商標）、Ａｍｇｅｎ）、リツキシマブ（ＲＩＴＵＸＡＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ／Ｂｉｏｇｅｎ Ｉｄｅｃ）、パーツズマブ（ＯＭＮＩＴＡＲＧ（登録商標）、２Ｃ４、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トラスツズマブ（ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）、Ｇｅｎｅｎｔｅｃｈ）、トシツモマブ（Ｂｅｘｘａｒ、Ｃｏｒｉｘｉａ）のような治療抗体、ならびに抗体薬物複合体である、ゲムツズマブオゾガマイシン（ＭＹＬＯＴＡＲＧ（登録商標）、Ｗｙｅｔｈ）も、「化学療法剤」の定義に含まれる。

本発明のＰＩ３Ｋ阻害剤と併用して化学治療剤として治療可能性があるヒト化モノクローナル抗体としては、アレムツズマブ、アポリズマブ、アセリズマブ（ａｓｅｌｉｚｕｍａｂ）、アトリズマブ、バピネオズマブ、ベバシズマブ、ビバツズマブメルタンシン、カンツズマブメルタンシン、セデリズマブ、セルトリズマブペゴール、シドフシツズマブ（ｃｉｄｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、シドツズマブ（ｃｉｄｔｕｚｕｍａｂ）、ダクリズマブ、エクリズマブ、エファリズマブ、エプラツズマブ、エルリズマブ、フェルビズマブ、フォントリズマブ、ゲムツズマブオゾガマイシン、イノツズマブオゾガマイシン、イピリムマブ、ラベツズマブ、リンツズマブ、マツズマブ、メポリズマブ、モタビズマブ、モトビズマブ（ｍｏｔｏｖｉｚｕｍａｂ）、ナタリズマブ、ニモツズマブ、ノロビズマブ（ｎｏｌｏｖｉｚｕｍａｂ）、ヌマビズマブ（ｎｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、オクレリズマブ、オマリズマブ、パリビズマブ、パソコリズマブ、ペクフシツズマブ（ｐｅｃｆｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、ペクツズマブ（ｐｅｃｔｕｚｕｍａｂ）、ペルツズマブ、パキセリズマブ、ラリビズマブ（ｒａｌｉｖｉｚｕｍａｂ）、ラニビズマブ、レスリビズマブ（ｒｅｓｌｉｖｉｚｕｍａｂ）、レスリズマブ、レシービズマブ（ｒｅｓｙｖｉｚｕｍａｂ）、ロベリズマブ（ｒｏｖｅｌｉｚｕｍａｂ）、ルプリズマブ（ｒｕｐｌｉｚｕｍａｂ）、シブロツズマブ、シプリズマブ、ソンツズマブ（ｓｏｎｔｕｚｕｍａｂ）、タカツズマブテトラキセタン、タドシズマブ（ｔａｄｏｃｉｚｕｍａｂ）、タリズマブ、テフィバズマブ（ｔｅｆｉｂａｚｕｍａｂ）、トシリズマブ、トラリズマブ、トラスツズマブ、ツコツズマブセルモロイキン（ｔｕｃｏｔｕｚｕｍａｂ ｃｅｌｍｏｌｅｕｋｉｎ）、ツクシツズマブ（ｔｕｃｕｓｉｔｕｚｕｍａｂ）、ウマビズマブ（ｕｍａｖｉｚｕｍａｂ）、ウルトキサズマブ、およびビジリズマブが含まれる。

ＡＫＴ阻害剤
式Ｉの本発明化合物は、ＡＫＴタンパク質キナーゼを阻害するために有用である。本化合物は、ＡＫＴタンパク質キナーゼシグナル伝達経路ならびにチロシンおよびセリン／トレオニンキナーゼ受容体経路の阻害により治療され得る疾患に対する治療剤として実用的である。

特に、シクロペンタ［ｄ］ピリミジン上に７−ヒドロキシを有する式Ｉの化合物は、タンパク質キナーゼＡ（ＰＫＡ）と比べてＡＫＴに対して少なくとも５０倍超の選択性があることがわかった。ＰＫＡと比べてＡＫＴに対して、例えば、少なくとも１００倍、さらなる例として、少なくとも１５０倍超の選択性がある。ＰＫＡを超える選択性は、ＰＫＡが、多くの細胞型の正常な機能および生理機能に対して重要である多くの細胞プロセスに関与するため、望ましい。さらに、ＰＫＡの阻害は、ＡＫＴ阻害の抗増殖性およびアポトーシス促進効果の一因になるとは考えられていない。したがって、ＰＫＡの阻害は、ＡＫＴ阻害の疾患修飾性利点に寄与することなく、ＡＫＴ阻害に関連しない副作用をもたらし得た。

式Ｉの化合物はまた、ＡＫＴに加えて、チロシンキナーゼ、ならびにセリンおよびトレオニンキナーゼの阻害剤としても有用であり得る。

一般に、本発明の一態様は、式Ｉの化合物：

およびその薬剤として許容可能な塩を含む。

式Ｉの化合物は、当該化合物の薬剤として許容可能な塩を含む。

「薬剤として許容可能な」という語句は、物質または組成物が、製剤を含む他の成分と、および／もしくはそれで治療される哺乳動物と、化学的に、および／もしくは毒物学的に適合することを示す。

さらに、本発明の化合物は、塩を形成し得る。塩の例としては、無機もしくは有機酸または無機塩基と、本発明の化合物の反応により調製されるこれらの塩が挙げられ、このような塩としては、硫酸塩、ピロ硫酸塩、重硫酸塩、亜硫酸塩、重亜硫酸塩、リン酸塩、リン酸一水素塩（ｍｏｎｏｈｙｄｒｏｇｅｎｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、リン酸二水素塩（ｄｉｈｙｄｒｏｇｅｎｐｈｏｓｐｈａｔｅ）、メタリン酸塩、ピロリン酸塩、塩化物塩（ｃｈｌｏｒｉｄｅ）、臭化物塩（ｂｒｏｍｉｄｅ）、ヨウ化物塩（ｉｏｄｉｄｅ）、酢酸塩、プロピオン酸塩、デカン酸塩、カプリル酸塩、アクリル酸塩、ギ酸塩、イソ酪酸塩、カプリン酸塩、ヘプタン酸塩、プロピオル酸塩、シュウ酸塩、マロン酸塩、コハク酸塩、スベリン酸塩、セバシン酸塩、フマル酸塩、ブチン−１，４−ジオアート、ヘキシン−１，６−ジオアート、安息香酸塩、クロロ安息香酸塩、メチル安息香酸塩、ジニトロ安息香酸塩、ヒドロキシ安息香酸塩、メトキシ安息香酸塩、フタル酸塩、スルホン酸塩、キシレンスルホン酸塩、フェニル酢酸塩、フェニルプロピオン酸塩、フェニル酪酸塩、クエン酸塩、乳酸塩、γ−ヒドロキシ酪酸塩、グリコール酸塩、酒石酸塩、メタンスルホン酸塩、プロパンスルホン酸塩、ナフタレン−１−スルホン酸塩、ナフタレン−２−スルホン酸塩、およびマンデル酸塩が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の単一化合物が、２つ以上の酸性または塩基性部分を含み得るため、本発明の化合物は、単一化合物中に、単塩、二重塩、三重塩を含み得る。

ある実施形態において、当該塩は、「薬剤として許容可能な塩」であり、別途示されない限り、特定の化合物の対応する遊離酸または塩基の生理学的効果を保有し、生物学的ではない、そうでなければ、望ましくない塩を含む。

式Ｉの化合物はまた、必ずしも薬剤として許容可能な塩ではない他の塩も含み、式Ｉの化合物を調製および／もしくは精製するため、ならびに／または式Ｉの化合物を分離するための中間体として有用であり得る。

本発明はまた、本発明の同位体標識化合物も包含し、１つもしくは複数の原子が、通常自然に見られる原子質量もしくは質量数と異なる原子質量もしくは質量数を有する原子により置き換えられるという事実がなかったら、本明細書に参照されたものと全く一致している。特記されたいずれかの特定の原子または元素のすべての同位体は、本発明の化合物、およびそれらの使用の範囲内に、企図される。本発明の化合物に組み込むことができる例となる同位体としては、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、塩素およびヨウ素の同位体、例えば、^２Ｈ、^３Ｈ、^１１Ｃ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１３Ｎ、^１５Ｎ、^１５Ｏ、^１７Ｏ、^１８Ｏ、^３２Ｐ、^３３Ｐ、^３５Ｓ、^１８Ｆ、^３６Ｃｌ、^１２３Ｉおよび^１２５Ｉが挙げられる。本発明のある同位体標識化合物（例えば、^３Ｈおよび^１４Ｃで標識されたもの）は、化合物および／または基質組織分布アッセイにおいて有用である。トリチウム化（すなわち、^３Ｈ）および炭素１４（すなわち、^１４Ｃ）同位体は、それらの調製の容易さ、および検出能のために有用である。さらに、重水素（すなわち、^２Ｈ）のような重同位体による置換は、より優れた代謝安定性に起因する治療的利点（例えば、生体内半減期の増加、または必要用量の低減）を提供し得、したがって、一部の状況において好ましい場合がある。^１５Ｏ、^１３Ｎ、^１１Ｃおよび^１８Ｆのような陽電子放出同位体は、基質受容体占有度を調べるための陽電子放出断層撮影（ＰＥＴ）研究において有用である。本発明の同位体標識化合物は、概して、本明細書の以下のスキームおよび／または実施例に開示されるものに類似の手順に従って、同位体標識試薬を非同位体標識試薬の代用とすることにより、調製することができる。

式Ｉの化合物の合成
本発明の化合物は、化学分野において公知の、特に、本明細書に含まれる説明を考慮に入れたものに類似のプロセスを含む、合成経路により合成され得る。出発材料は、概して、Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ，ＷＩ）のような商業的供給元より入手可能であり、または、当業者には公知の方法を用いて容易に調製される（例えば、Ｌｏｕｉｓ Ｆ．Ｆｉｅｓｅｒ ａｎｄ Ｍａｒｙ Ｆｉｅｓｅｒ，Ｒｅａｇｅｎｔｓ ｆｏｒ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｖ．１−１９，Ｗｉｌｅｙ，Ｎ．Ｙ．（１９６７−１９９９ ｅｄ．）、またはＢｅｉｌｓｔｅｉｎｓ Ｈａｎｄｂｕｃｈ ｄｅｒ ｏｒｇａｎｉｓｃｈｅｎ Ｃｈｅｍｉｅ，４，Ａｕｆｌ．ｅｄ．Ｓｐｒｉｎｇｅｒ−Ｖｅｒｌａｇ，Ｂｅｒｌｉｎに一般的に説明される（追加を含む）方法により調製される）。

別個の反応ステップのさらなる詳細に関しては、以下の実施例の項を参照のこと。当業者は、他の合成経路が、本発明化合物を合成するために使用され得ることを理解するであろう。特定の出発材料および試薬が、実施例において示され、以下に論じられているが、他の出発材料および試薬は、多種多様な誘導体および／または反応条件を得るために容易に代用され得る。加えて、以下に説明される方法により調製される多くの化合物は、当業者に公知の従来の化学的性質を用いて、本開示を考慮してさらに修正することができる。

式Ｉの化合物の調製において、中間体の離れた官能基（例えば、１級または２級アミン等）の保護が必要となる場合がある。そのような保護の必要性は、離れた官能基の性質や調製法の条件に依存して変動するものである。好適なアミノ保護基（ＮＨ−Ｐｇ）には、アセチル、トリフルオロアセチル、ｔ−ブトキシカルボニル（ＢＯＣ）、ベンジルオキシカルボニル（ＣＢｚ）および９−フルオレニルメチレンオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）が含まれる。そのような保護の必要性は、当業者により容易に決定される。保護基とその使用についての一般的な記載に関しては、Ｔ．Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９１を参照のこと。

分離方法
式Ｉの化合物を調製するための合成方法のあらゆる方法において、その合成方法は、互いに、および／または出発材料から反応生成物を分離するために有利であり得る。各ステップまたは一連のステップの所望の生成物は、当技術分野においてよく見られる技法により所望の均質度に分離および／または精製される。典型的には、このような分離には、多相抽出、溶媒もしくは溶媒混合物からの結晶化、蒸留、昇華、またはクロマトグラフィを含む。クロマトグラフィは、例えば、逆相および正常相；サイズ排除；イオン交換；高、中および低圧液体クロマトグラフィ方法および装置；小規模分析；シミュレートされた移動床（「ＳＭＢ」）および分取薄または厚層クロマトグラフィ、ならびに小規模薄層およびフラッシュクロマトグラフィを含めた複数の方法を含むことができる。

もう１つのクラスの分離方法は、選択された試薬で反応混合物を処理して、所望の生成物、未反応の出発材料、反応副産物に結合させ、またはそうでなければ分離可能とすることを含む。このような試薬は、活性炭、モレキュラーシーブ、イオン交換媒体のような吸着剤または吸収剤を含む。代替として、該試薬は、塩基性材料の場合における酸、酸性材料の場合における塩基、抗体のような結合試薬、結合タンパク質、クラウンエーテルのような選択的キレーター、液体／液体イオン抽出試薬（「ＬＩＸ」）等であり得る。

適当な分離方法の選択は、関与する材料の性質に依存する。例えば、蒸留および昇華における沸点および分子量、クロマトグラフィにおける極性官能基の存在または不存在、多相抽出における酸性および塩基性媒体中での材料の安定性等。当業者は、所望の分離を最も達成するような技術を適用する。

ジアステレオマー混合物は、クロマトグラフィおよび／または分別結晶化等による、当業者に公知の方法により、それらの物理化学的差に基づいて、それらの個々のジアステレオマーに分離することができる。エナンチオマーは、適当な光学活性化合物（例えば、キラルアルコールまたはＭｏｓｈｅｒ酸塩化物のようなキラル補助基）との反応により、エナンチオマー混合物をジアステレオマー混合物に変換し、ジアステレオマーを分離し、個々のジアステレオ異性体を対応する純粋なエナンチオマーに変換（例えば、加水分解）することにより分離することができる。また、本発明の化合物のいくつかは、アトロプ異性体（例えば、置換されたビアリール）であってよく、本発明の一部と考えられる。エナンチオマーはまた、キラルＨＰＬＣカラムの使用により分離することもできる。

その立体異性体を実質的に含まない単一の立体異性体、例えば、エナンチオマーは、光学的に活性な分離剤を用い、ジアステレオマーの形成のような方法を用いるラセミ混合物の分離により得ることができる（Ｅｌｉｅｌ，Ｅ． ａｎｄ Ｗｉｌｅｎ，Ｓ． “Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，” Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ，１９９４、Ｌｏｃｈｍｕｌｌｅｒ，Ｃ．Ｈ．，Ｊ．Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，（１９７５）１１３（３）：２８３−３０２）。本発明のキラル化合物のラセミ混合物は、（１）キラル化合物とのイオン性ジアステレオマー塩の形成、および分別結晶化または他の方法による分離、（２）キラル誘導体化試薬でのジアステレオマー化合物の形成、ジアステレオマーの分離、および純粋な立体異性体への変換、ならびに（３）キラル条件下での実質的に純粋なまたは豊富化された立体異性体の直接的分離を含めた、いずれかの好適な方法により分離し、単離することができる。“Ｄｒｕｇ Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ ａｎｄ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，” Ｉｒｖｉｎｇ Ｗ．Ｗａｉｎｅｒ，Ｅｄ．，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ（１９９３）を参照のこと。

方法（１）の下では、ジアステレオマー塩は、ブルシン、キニン、エフェドリン、ストリキニン、α−メチル−β−フェニルエチルアミン（アンフェタミン）のようなエナンチオマー的に純粋なキラル塩基と、カルボン酸およびスルホン酸のような酸性官能基を有する不斉化合物との反応により形成することができる。当該ジアステレオマー塩は、分別結晶化またはイオンクロマトグラフィにより分離するように誘導することができる。アミノ化合物の光学異性体の分離では、カンファースルホン酸、酒石酸、マンデル酸、または乳酸のようなキラルカルボン酸またはスルホン酸の添加により、ジアステレオマー塩の形成をもたらすことができる。

代替として、方法（２）により、分割すべき基質を、キラル化合物の１つのエナンチオマーと反応させて、ジアステレオマー対を形成する（Ｅ．ａｎｄ Ｗｉｌｅｎ，Ｓ．”Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ”，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９４，ｐ．３２２）。ジアステレオマー化合物は、不斉化合物を、メンチル誘導体のようなエナンチオマー的に純粋なキラル誘導体化試薬と反応させ、続いて、ジアステレオマーを分離し、加水分解して、純粋なまたは豊富化されたエナンチオマーを得ることにより形成することができる。光学的純度を決定する方法は、ラセミ混合物の塩基、またはＭｏｓｈｅｒエステル、α−メトキシ−α−（トリフルオロメチル）フェニルアセテート（Ｊａｃｏｂ ＩＩＩ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，（１９８２）４７：４１６５）の存在下で、メンチルエステル、例えば、（−）メンチルクロロホルメートのようなキラルエステルを作成し、２つのアトロプ異性体エナンチオマーまたはジアステレオマーの存在について^１Ｈ ＮＭＲスペクトルを分析することを含む。アトロプ異性体化合物の安定なジアステレオマーは、アトロプ異性体ナフチル−イソキノリンの分離のための方法に従って、正常相および逆相クロマトグラフィにより分離し、単離することができる（第ＷＯ９６／１５１１１号）。方法（３）により、２つのエナンチオマーのラセミ混合物は、キラル固定相を用いるクロマトグラフィにより分離することができる（“Ｃｈｉｒａｌ Ｌｉｑｕｉｄ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ”（１９８９）Ｗ．Ｊ．Ｌｏｕｇｈ，Ｅｄ．，Ｃｈａｐｍａｎ ａｎｄ Ｈａｌｌ，Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、Ｏｋａｍｏｔｏ，Ｊ．ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，（１９９０）５１３：３７５−３７８）。豊富化されたまたは精製されたエナンチオマーは、光学的回転および円二色性のような不斉炭素原子を持つ他のキラル分子を識別するのに用いる方法によって識別することができる。

式Ｉの化合物による治療方法
本発明の化合物は、ＡＫＴタンパク質キナーゼ、チロシンキナーゼ、追加のセリン／トレオニンキナーゼ、および／または二重特異性キナーゼの調節もしくは制御により媒介される疾患もしくは障害を治療するための予防もしくは治療剤として使用することができる。本発明の方法により治療され得るＡＫＴタンパク質キナーゼ媒介病状としては、炎症性、過剰増殖性、心臓血管、神経変性、婦人科、または皮膚科疾患もしくは障害が挙げられるが、これらに限定されない。

一実施形態において、前記医薬組成物は、以下のカテゴリーの癌を含む、過剰増殖性疾患の治療のものである。（１）心臓：肉腫（血管肉腫、線維肉腫、横紋筋肉腫、脂肪肉腫）、粘液腫、横紋筋腫、線維腫、脂肪腫および奇形腫；（２）肺：気管支癌（有棘細胞、未分化小細胞、未分化大細胞、腺癌）、肺胞（細気管支肺胞）上皮癌、気管支腺腫、肉腫、リンパ腫、軟骨性過誤腫、中皮腫、非小細胞肺癌、小細胞肺癌；（３）胃腸：食道（有棘細胞癌、腺癌、平滑筋肉腫、リンパ腫）、胃（癌腫、リンパ腫、平滑筋肉腫）、膵臓（導管腺癌、インスリノーマ、グルカゴン産生腫瘍、ガストリノーマ、カルチノイド腫瘍、ビポーマ）、小腸（腺癌、リンパ腫、カルチノイド腫瘍、カポジ肉腫、平滑筋腫、血管腫、脂肪腫、神経線維腫、線維腫）、大腸（腺癌、管状腺腫、絨毛腺腫、過誤腫、平滑筋腫）；（４）尿生殖器：腎臓（腺癌、ウィルムス腫瘍［腎芽細胞腫］、リンパ腫、白血病）、膀胱および尿道（有棘細胞癌、移行上皮癌、腺癌）、前立腺（腺癌、肉腫）、精巣（セシノーマ、奇形腫、胎児性癌、テラトカルシノーマ、絨毛癌、肉腫、間質細胞癌腫、線維腫、線維腺腫、類腺腫瘍、脂肪腫）；（５）肝臓：ヘパトーマ（肝細胞癌）、胆管癌、胚芽腫、血管肉腫、肝細胞腺腫、血管腫；（６）骨：骨原性肉腫（骨肉腫）、線維肉腫、悪性線維性組織球腫、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性リンパ腫（細網肉腫）、多発性骨髄腫、悪性巨細胞腫脊索腫（ｍａｌｉｇｎａｎｔ ｇｉａｎｔ ｃｅｌｌ ｔｕｍｏｒ ｃｈｏｒｄｏｍａ）、骨軟骨腫（ｏｓｔｅｏｃｈｒｏｎｆｒｏｍａ）（骨軟骨外骨腫症）、良性軟骨種、軟骨芽細胞腫、軟骨粘液線維腫、類骨骨腫および巨細胞腫；（７）神経系：頭蓋（骨腫、血管腫、肉芽腫、黄色腫、変形性骨炎）、髄膜（髄膜腫、髄膜肉腫（ｍｅｎｉｎｇｉｏｓａｒｃｏｍａ）、神経膠腫症）、脳（星状細胞腫、髄芽細胞腫、神経膠腫、上衣腫、胚細胞腫［松果体腫］、多形性グリア芽細胞腫、希突起膠腫、神経鞘腫、網膜芽腫、先天性腫瘍）、脊髄神経線維腫、髄膜腫、神経膠腫、肉腫）；（８）婦人科性：子宮（子宮内膜癌腫）、頚（子宮頚癌、前腫瘍（ｐｒｅ−ｔｕｍｏｒ）子宮頚部形成異常）、卵巣（卵巣癌腫［漿液性嚢胞腺癌、ムチン性嚢胞腺癌、未分類の癌腫（ｕｎｃｌａｓｓｉｆｉｅｄ ｃａｒｃｉｎｏｍａ）］、顆粒膜細胞−包膜細胞腫、セルトーリ−ライディッヒ細胞腫、未分化胚細胞腫、悪性奇形腫）、外陰（有棘細胞癌、表皮内癌、腺癌、線維肉腫、黒色腫）、膣（明細胞癌、有棘細胞癌、ブドウ状肉腫（胎児性横紋筋肉腫）、ファローピウス管（癌腫）；（９）血液性：血液（骨髄性白血病［急性および慢性］、急性リンパ芽球性白血病、慢性リンパ性白血病、骨髄増殖性疾患、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群）、ホジキン病、非ホジキンリンパ腫［悪性リンパ腫］；（１０）皮膚：進行性黒色腫、悪性黒色腫、基底細胞癌腫、有棘細胞癌、カポジ肉腫、モールディスプラスティックニーバス（ｍｏｌｅ ｄｙｓｐｌａｓｔｉｃ ｎｅｖｉ）、脂肪腫、血管腫、皮膚線維腫、ケロイド、乾癬；（１１）副腎：神経芽腫；（１２）胸部：転移性乳癌；胸腺癌；（１３）結腸；（１４）口腔；（１５）ヘアリー細胞白血病；（１６）頭頸部；（１７）および不応性転移性疾患を含むその他；カポジ肉腫；バンナヤンゾーナーナ症候群（Ｂａｎｎａｙａｎ−Ｚｏｎａｎａ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）；およびカウデン病またはレルミットデュクロス病（Ｌｈｅｒｍｉｔｔｅ−Ｄｕｃｌｏｓ ｄｉｓｅａｓｅ）、とりわけ、過剰増殖性疾患の種類。

本発明の化合物および方法はまた、関節リウマチ、変形性関節症、クローン病、血管線維腫、眼疾患（例えば、網膜血管新生、糖尿病性網膜症、加齢性黄斑変性症、黄斑変性症等）、多発性硬化症、肥満症、アルツハイマー病、再狭窄、自己免疫疾患、アレルギー、喘息、子宮内膜症、アテローム性動脈硬化症、血管移植のグラフト狭窄（ｖｅｉｎ ｇｒａｆｔ ｓｔｅｎｏｓｉｓ）、人工器官吻合周囲の再狭窄（ｐｅｒｉ−ａｎａｓｔｏｍａｔｉｃ ｐｒｏｔｈｅｔｉｃ ｇｒａｆｔ ｓｔｅｎｏｓｉｓ）、前立腺肥大、慢性閉塞性肺疾患、乾癬、組織修復による神経障害の阻害、瘢痕組織形成（および創傷治癒に役立ち得る）、多発性硬化症、炎症性腸疾患、感染、特に、細菌、ウイルス、レトロウイルスまたは寄生生物による感染症（アポトーシスを増加させることにより）、肺疾患、腫瘍、パーキンソン病、移植片拒絶反応（免疫抑制剤として）、敗血症ショック等のような疾患および病状を治療するために使用することができる。

したがって、本発明の別の態様は、哺乳動物において、ＡＫＴタンパク質キナーゼにより媒介される疾患または病状を治療する方法を提供し、これには、前記障害を治療または予防するための有効な量で、前記哺乳動物に、式Ｉの化合物またはその薬剤として許容可能な塩を投与するステップを含まれる。

このような量に対応するであろう式Ｉの化合物の量は、特定の化合物、疾患病状およびその重症度、治療を必要とする哺乳動物の固有性（例えば、体重）のような要因に依存して異なるが、当業者により定期的に決定され得る。

本発明はまた、ＡＫＴタンパク質キナーゼ媒介病状の治療で用いる式Ｉの化合物も提供する。

本発明の追加の態様は、ＡＫＴタンパク質キナーゼ媒介病状の治療または予防のためのような、治療法のための薬剤の調製における、式Ｉの化合物の使用である。

併用療法
本発明の化合物は、下記のような１つもしくは複数の追加の薬物と併用して、使用することができる。第２の薬物の用量は、臨床的に採用された用量に基づいて適切に選択することができる。本発明の化合物と第２の薬物の割合は、投与被験体、投与経路、標的疾患、臨床的病状、組み合わせ、および他の要因により、適切に決定することができる。投与被験体がヒトである場合、例えば、第２の薬物は、本発明の化合物の重量部あたり０．０１〜１００重量部の量で使用され得る。

医薬併用製剤または投与計画の第２の化合物は、好ましくは、これらの化合物が互いに悪影響を及ぼさないような本発明の化合物に対して補完活性を有する。このような化合物は、意図する目的に有効な量で組み合わせて存在させることが好適である。したがって、本発明の別の態様は、本明細書に記載のような第２の薬物と併用して、本発明の化合物を含む組成物を提供する。

本発明の化合物および追加の医薬的活性薬物は、単一の医薬組成物において共に、または別個に投与され得、別個に投与する場合、これは、同時に、またはいずれの順序においても逐次行われ得る。このような逐次投与は、時間的に近いか、または時間的に離れていてもよい。所望の組み合わせ治療効果を達成するために、本発明の化合物および第２の薬物の量および投与の相対的タイミングが選択される。

併用療法は、「相乗効果」を供し、「相乗的」であることが判明し得るのであり、すなわち、一緒に用いる有効成分が、別々に化合物を使用して生じる効果の総和よりも大きい場合に該効果は達成される。有効成分が、（１）組み合わされた単位用量製剤において同時に共製剤化され、かつ投与され、もしくは送達される、（２）交互に、あるいは別々の製剤として平行に送達され、または（３）いくつかの他の養生法による場合に、相乗効果を達成することができる。代替療法で送達される場合、化合物が、例えば、別々の注射器中の異なる注射により投与されるか、または逐次送達される場合に、相乗効果を達成することができる。一般に、代替療法の間に、各有効成分の有効用量を逐次に、すなわち、系列的に投与し、他方、併用療法においては、有効用量の２つ以上の有効成分を一緒に投与する。

投与経路
本発明の化合物は、治療すべき病状に適切なあらゆる経路により投与することができる。好適な経路は、経口、非経口（皮下、筋肉内、静脈内、動脈内、皮内、クモ膜下内および硬膜外を含む）、経皮、直腸、鼻、局所（口腔および舌下を含む）、膣、腹腔内、肺内および鼻腔内を含む。好ましい経路は、例えば、受容者の病状により変化し得る。当該化合物を経口投与する場合、それは、薬剤として許容可能な担体または賦形剤とともに丸剤、カプセル、錠剤等として製剤化することができる。当該化合物を非経口投与する場合、それは、下に詳述されるように、薬剤として許容可能な非経口ビヒクルを用いて、単位用量注射形態に製剤化することができる。

医薬製剤
ヒトを含む哺乳動物の治療上の処置（予防的治療を含む）のために本発明の化合物を使用するために、それは、通常、標準薬務に従って医薬組成物として製剤化される。本発明の本態様により、本発明の化合物を含む医薬組成物を提供する。ある実施形態において、医薬組成物は、薬剤として許容可能な希釈剤または担体に関連して式Ｉの化合物を含む。

本発明の医薬組成物が、良好な医薬業務に合致した様式、すなわち、量、濃度、スケジュール、コース、ビヒクルおよび投与経路にて製剤化され、投薬され、および投与される。この文脈での考慮のための要因は、治療すべき特定の障害、治療すべき特定の哺乳動物、個々の患者の臨床的病状、障害の原因、薬剤の送達の部位、投与の方法、投与のスケジュール、および医薬実践者に知られた他の要因を含む。投与されるべき化合物の治療有効量は、このような考慮により左右され、これは、障害を予防し、改善し、または治療するのに必要な最小量である。本発明の化合物は、典型的には、薬物の容易に制御可能な用量を提供し、所定の養生法に対する患者コンプライアンスを可能にする医薬用量形態に製剤化される。

本明細書に使用される組成物は、好ましくは滅菌されている。特に、生体内投与で用いるべき製剤は、滅菌されていなければならない。このような滅菌は、例えば、滅菌濾過膜を通して濾過することにより容易に達成される。該化合物は、通常、固体組成物、凍結乾燥された製剤、または水溶液として貯蔵することができる。

本発明の化合物の医薬製剤は、種々の投与経路および投与タイプのために調製され得る。例えば、所望の程度の純度を有する本発明の化合物は、凍結乾燥された製剤、粉砕された粉末、または水溶液の形態にて、薬剤として許容可能な希釈剤、担体、賦形剤または安定化剤と任意に混合してもよい（Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（１９８０）１６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．）。製剤化は、周囲温度で、適切なｐＨにおいて、かつ所望の程度の純度にて、生理学的に許容可能な担体、すなわち、採用する用量および濃度にて受容者に非毒性である担体と混合することにより行うことができる。製剤のｐＨは、主として、特定の使用および化合物の濃度に依存するが、約３〜約８の範囲とすることができる。ｐＨ５の酢酸緩衝液中の製剤は、好適な実施形態である。製剤は、従来の溶解および混合手順を用いて、調製され得る。例えば、バルク薬剤物質（すなわち、本発明の化合物または化合物の安定化された形態（例えば、シクロデキストリン誘導体、もしくは他の既知の複合体化剤との複合体）を、１つもしくは複数の賦形剤の存在下で、好適な溶媒中に溶解させる。

使用される特定の担体、希釈剤または賦形剤は、本発明の化合物を適用する手段および目的に依存する。溶媒は、概して、哺乳動物に投与するのに安全（ＧＲＡＳ）であると当業者により認識される溶媒に基づいて選択される。一般的には、安全な溶媒は、水、および水に可溶性、または混和性である他の非毒性溶媒のような非毒性水性溶媒である。好適な水性溶媒は、水、エタノール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール（例えば、ＰＥＧ４００、ＰＥＴ３００）等、およびそれらの混合物を含む。許容可能な希釈剤、担体、賦形剤および安定化剤は、採用される用量および濃度において受容者に対して非毒性であり、それらは、リン酸塩、クエン酸塩および他の有機酸のような緩衝液；アルコルビン酸およびメチオニンを含む抗酸化剤；（塩化オクダデシルジメチルベンジルアンモニウム；塩化ヘキサメトニウム；塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム；フェノール、ブチルまたはベンジルアルコール；メチルまたはプロピルパラベンのようなアルキルパラベン；カテコール；レゾルシノール；シクロヘキサノール；３−ペンタノール；およびｍ−クレゾールのようなアルキルパラベンのような）保存剤；低分子量（約１０残基未満）ポリペプチド；血清アルブミン、ゼラチンまたは免疫グロブリンのようなタンパク質；ポリビニルピロリドンのような親水性ポリマー；グリシン、グルタミン、アスパラギン、ヒスチジン、アルギニン、またはリシンのようなアミノ酸；グルコース、マンノース、またはデキストリンを含む単糖、二糖および他の炭水化物；ＥＤＴＡのようなキレート化剤；スクロース、マンニトール、トレハロースまたはソルビトールのような糖類；ナトリウムのような塩−形成対イオン；金属錯体（例えば、Ｚｎ−タンパク質錯体）；および／またはＴＷＥＥＮ（商標）、ＰＬＵＲＯＮＩＣＳ（商標）またはポリエチレングリコール（ＰＥＧ）のような非−イオン性界面活性剤を含む。これらの製剤はまた、薬物（すなわち、本発明の化合物、またはその医薬組成物）をエレガントに提示させ、または医薬生成物（すなわち、薬剤）の製造を助けるために、１つもしくは複数の安定化剤、界面活性剤、湿潤剤、滑沢剤、乳化剤、懸濁化剤、保存剤、抗酸化剤、不透明化剤、グライダント、加工助剤、着色剤、甘味剤、香料剤、矯味矯臭剤、および他の既知の添加剤を含むこともできる。活性な医薬成分は、例えば、コアセルベーション技術によって、または界面重合によって調製されたマイクロカプセル、例えば、コロイド状薬物送達系（例えば、リポソーム、アルブミンマイクロスフィア、マイクロエマルジョン、ナノ粒子およびナノカプセル）における、またはマイクロエマルジョンにおける、各々、ヒドロキシメチルセルロースまたはゼラチン−マイクロカプセルおよびポリ−（メチルメタクリレート）マイクロカプセルに捕獲することもできる。このような技術は、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ １６ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，Ｏｓｏｌ，Ａ．Ｅｄ．（１９８０）に開示されている。「リポソーム」は、薬物（式Ｉの化合物、任意に、追加の化学療法剤のような）の哺乳動物への送達に有用な種々のタイプの脂質、リン脂質および／または界面活性剤から構成される小胞である。リポソームの成分は、通常、生物学的膜の脂質配置と同様な、二層形成で配置される。

本発明の化合物の徐放製剤を調製することができる。徐放製剤の好適な例は、式Ｉの化合物を含有する固体疎水性ポリマーの半透性マトリクスを含み、そのマトリクスは成型された製品、例えば、フィルム、またはマイクロカプセルの形態である。徐放性マトリクスの例は、ポリエステル、ヒドロゲル（例えば、ポリ（２−ヒドロキシエチル−メタクリレート）、またはポリ（ビニルアルコール）、ポリラクチド（米国特許第３，７７３，９１９号）、Ｌ−グルタミン酸およびガンマ−エチル−Ｌ−グルタメートのコポリマー、非−分解性エチレン−酢酸ビニル、ＬＵＰＲＯＮ ＤＥＰＯＴ（商標）（乳酸−グリコール酸コポリマーおよび酢酸リュープロリドから構成される注射可能なマイクロスフェア）およびポリ−Ｄ−（−）−３−ヒドロキシ酪酸のような分解性乳酸−グリコール酸コポリマーを含む。

本発明の化合物の医薬組成物は、滅菌注射水性または油性懸濁液のような滅菌注射製剤の形態とし得る。この懸濁液は、前記した好適な分散または湿潤剤および懸濁化剤を用いて公知の技術に従って製剤化され得る。滅菌注射製剤は、１，３−ブタンジオール中の溶液のような、または凍結乾燥された粉末として調製された、非毒性の非経口的に許容可能な希釈剤または溶媒中の滅菌注射溶液または懸濁液であってもよい。採用され得る許容可能なビヒクルおよび溶媒の中には、水、リンゲル液および等張塩化ナトリウム溶液がある。加えて、滅菌不揮発油を、便宜には、溶媒または懸濁化媒体として採用し得る。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含むあらゆる無刺激不揮発性油が採用され得る。加えて、オレイン酸のような脂肪酸が、同様に、注射可能製剤の調製で使用され得る。

非経口投与に適した製剤は、該製剤を、意図した受容者の血液と等張性にする抗酸化剤、緩衝液、静菌剤および溶出を含有し得る水性および非水性滅菌注射溶液；および懸濁化剤および増粘剤を含み得る水性および非水性滅菌懸濁液を含む。

本発明の組成物はまた、経口使用（例えば、錠剤、ロゼンジ、ハードもしくはソフトカプセル、水性または油性懸濁液、エマルジョン、分散可能な粉末もしくは顆粒、シロップまたはエリキシル剤として）、局所使用（例えば、クリーム、軟膏、ゲル、水性もしくは油性溶液または懸濁液として）、吸入による投与用（例えば、微粉または液体エアロゾルとして）、吹送による投与用（例えば、微粉として）に適している形態であってもよい。

錠剤製剤として好適な薬剤として許容可能な賦形剤は、例えば、ラクトース、炭酸ナトリウム、リン酸カルシウムもしくは炭酸カルシウムのような不活性希釈剤、トウモロコシデンプンもしくはアルゲン酸のような造粒剤および崩壊剤；デンプンのような結合剤；ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸もしくはタルクのような平滑剤；エチルもしくはプロピルｐ−ヒドロキシベンゾアートのような防腐剤、ならびにアスコルビン酸のような抗酸化剤を含む。錠剤製剤は、胃腸管中での有効成分の崩壊およびそれに続く吸収を修正する、あるいは、それらの安定性および／または外観を改善するために、被覆しなくても、または被覆されてもよく、いずれの場合にも、従来のコーティング剤および当技術分野において公知の手順を用いる。

経口使用の組成物は、有効成分が、不活性固体希釈剤、例えば、炭酸カルシウム、リン酸カルシウムもしくはカオリンと混合されるハードゼラチンカプセル、または有効成分が水もしくはピーナッツ油、液体パラフィンもしくはオリーブ油等の油と混合されるソフトゼラチンカプセルの形状であり得る。

水性懸濁液は、概して、ナトリウムカルボキシメチルセルロース、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニルピロリドン、トララカントガムおよびアカシアガムのような１つもしくは複数の懸濁化剤；レシチンのような分散もしくは湿潤剤、またはアルキレノオキシドと脂肪酸との縮合生成物（例えば、ポリエキシエチレンステアレート）、またはエチレンオキシドと、長鎖脂肪アルコールとの縮合生成物（例えば、ヘプタデカエチレンオキシセタノール）、エチレンオキシドと、脂肪酸およびヘキシトール無水物に由来する部分エステルとの縮合生成物（例えば、ポリオキシエチレンソルビタンモノオレート）と共に微粉状で有効成分を含有する。水性懸濁液はまた、１つもしくは複数の防腐剤（エチルまたはプロピルｐ−ヒドロキシベンゾアート等）、抗酸化剤（アスコルビン酸等）、着色剤、矯味矯臭剤、および／または甘味剤（スクロース、サッカリンもしくはアスパルタム等）を含み得る。

油性懸濁液は、有効成分を植物油（ラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油もしくはココヤシ油等）に、または鉱物油（液体パラフィン等）に懸濁させることにより製剤化され得る。該油性懸濁液はまた、蜜蝋、ハードパラフィンもしくはセチルアルコールのような濃厚剤を含有し得る。上述のもののような甘味料、および矯味矯臭剤を添加して、口当たりの良い経口調製品を提供することができる。これらの組成物は、アスコルビン酸のような酸化防止剤の添加により保存することができる。

水の添加による水性懸濁液の調製に適する分散性粉末および顆粒は、概して、分散剤もしくは湿潤剤、懸濁剤および１つもしくは複数の防腐剤と一緒に有効成分を含有する。好適な分散剤もしくは湿潤剤および懸濁剤は、既に上述されるものにより例示される。甘味剤、矯味矯臭剤および着色剤のような、さらなる賦形剤が存在していてもよい。

本発明の医薬組成物は、水中油エマルジョンの形態であってもよい。油相は、オリーブ油もしくはラッカセイ油のような植物油、または液体パラフィンのような鉱物油、またはこれらのいずれかの混合物であり得る。好適な乳化剤は、例えば、アラビアゴムもしくはトラガカントゴムのような天然ゴム、ダイズ、レシチンのような天然ホスファチド、脂肪酸およびヘキシトール無水物から誘導されるエステルもしくは部分エステル（例えば、ソルビタンモノオレエート）、およびポリオキシエチレンソルビタンモノオレエートのような前記部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物であり得る。これらのエマルジョンはまた、甘味剤、矯味矯臭剤および防腐剤を含有し得る。

シロップおよびエリキシルは、グリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、アスパルタムもしくはスクロースのような甘味剤と共に製剤化され得、粘滑剤、防腐剤、矯味矯臭剤および／または着色剤も含有し得る。

坐剤製剤は、有効成分と、常温で固体であるが、直腸温で液体である好適な刺激性のない賦形剤を混合することにより調製され得、それ故に、直腸内で溶解し、薬物を放出する。好適な賦形剤は、例えば、カカオバターおよびポリエチレングリコールを含む。膣内投与に適した製剤は、当該分野において適切であることが知られているような担体を、有効成分に加えて含有するペッサリー、タンポン、クリーム、ゲル、ペースト、フォームまたはスプレー製剤として供することができる。

クリーム、軟膏、ゲル、水溶液もしくは油性溶液または懸濁液のような局所用製剤は、概して、当技術分野において公知の従来の手順を用いて、従来の局所的に許容可能なビヒクルまたは希釈剤と有効成分を製剤化することにより得られ得る。

経皮投与のための組成物は、当業者には公知であるこれらの経皮皮膚パッチの形態であってもよい。

肺内または鼻投与に適した製剤は、０．１〜５００ミクロンの範囲の粒子サイズ（０．５、１、３０ミクロン、３５ミクロン等のようなミクロン増分の０．１から５００ミクロンの間の範囲の粒子サイズを含む）を有し、それは、肺胞嚢に到達するように鼻通路を通っての迅速な吸入により、または口からの吸入により投与される。好適な製剤は、有効成分の水性または油性溶液を含む。エアロゾルまたは乾燥粉末投与に適した製剤は、従来の方法に従って調製され得、下に記載されるように治療または予防障害でこれまでに使用された化合物のような他の治療剤と共に送達することができる。

適用のための医薬組成物（つまり製剤）は、薬物を投与するために使用される方法に依存して多種多様な方法でパッケージ化され得る。例えば、流通のための製品は、適当な形態の医薬製剤をその中に保管した容器を含むことができる。好適な容器は、当業者には公知であり、瓶（プラスチックおよびガラス）、サシェ、アンプル、プラスチックバッグ、金属シリンダ等のような材料を含む。該容器はまた、パッケージの内容物に対する分別のないアクセスを防止するために改ざんの恐れがない組み立てを含むこともできる。加えて、該容器には、容器の内容物を記載するラベルがその上に配置される。該ラベルはまた、適当な警告を含むこともできる。これらの製剤はまた、単位用量または複数回用量容器、例えば、密封アンプルおよびバイアルにパッケージ化してもよく、使用直前に、滅菌液体担体、例えば、注射用水の添加のみを必要とする凍結し乾燥させた（凍結乾燥）条件で保存され得る。即時注射用溶液および懸濁液は、先に記載された種類の滅菌粉剤、顆粒剤および錠剤から調製される。好ましい単位用量製剤は、本明細書の上で言及したような、有効成分の、１日の用量または１日の単位副用量、またはその適切な一部を含有する製剤である。

本発明は、したがって、獣医学的担体と一緒に、上で定義した少なくとも１つの有効成分を含む獣医学的組成物をさらに提供する。獣医学的担体は、組成物を投与するために有用である材料であり、そうでなければ、獣医学分野において、不活性または許容可能である固体、液体または気体材料であり得る。これらの獣医学的組成物は、非経口で、経口で、またはいかなる他の所望の経路によっても投与され得る。

単回投与形態を生成するために１つもしくは複数の賦形剤と混合する本発明の化合物の量は、治療される被験体、障害または病状の重症度、投与速度、化合物の性質および処方医の裁量に依存して必然的に異なる。一実施形態において、本発明の化合物の好適な量は、それを必要とする哺乳動物に投与される。一実施形態において、投与は、１日あたり約０．００１ｍｇ／体重ｋｇ〜約６０ｍｇ／体重ｋｇである。別に実施形態において、投与は、１日あたり０．５ｍｇ／体重ｋｇ〜４０ｍｇ／体重ｋｇの間の量である。場合によっては、前述の範囲の低限を下回る用量レベルが、十分に適切である場合もあり、一方、別の場合では、さらに多量の用量が、有害な副作用を生じることなく採用されてもよい（但し、このような多量の用量は、まず、１日を通して数回の少用量に分割すること）。投与の経路および用量レジメの詳細に関しては、Ｃｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙの第５巻、第２５．３章（Ｃｏｒｗｉｎ Ｈａｎｓｃｈ、編集局長（Ｃｈａｉｒｍａｎ ｏｆ Ｅｄｉｔｏｒｉａｌ Ｂｏａｒｄ））、Ｐｅｒｇａｍｏｎ Ｐｒｅｓｓ １９９０を参照されたく、これは、参照により本明細書に具体的に組み込まれる。

製造製品
本発明の別の実施形態において、上記の障害の治療に有用な材料を含有する製造製品、つまり「キット」を提供する。一実施形態において、該キットは、本発明の化合物を含む容器を含む。好適な容器は、例えば、瓶、バイアル、注射器、ブリスターパック等を含む。該容器は、ガラスまたはプラスチックのような多種多様の材料から形成され得る。該容器は、本発明の化合物またはその製剤を保持し得、それは、病状を治療するために有効であり、滅菌アクセスポートを有する容器（例えば、該容器は、皮下用注射針により穿孔可能なストッパ付きの静脈内溶液バッグまたはバイアルであり得る）を有し得る。

該キットは、容器または容器上に貼り付けてあるラベルまたは添付文書をさらに含み得る。「添付文書」という用語は、治療用生成物の市販用パッケージに慣用的に包含される説明書を指し、このような治療用生成物の使用に関する効能、用途、用量、投与、禁忌および／または警告を含む。一実施形態において、該ラベルまたは添付文書は、該組成物を、例えば、ＡＫＴキナーゼにより、媒介される障害を治療するために使用することができることを示す。該ラベルまたは添付文書はまた、該組成物を、他の障害を治療するために使用することができることも示し得る。

ある実施形態において、該キットは、錠剤またはカプセルのような本発明の化合物の固体経口形態の送達に適する。このようなキットは、好ましくは、いくつかの単位用量を含む。このようなキットは、それらの意図された使用の順序の向きにした用量を有するカードを含むことができる。このようなキットの例は、「ブリスターパック」である。ブリスターパックは、包装業界で公知であり、医薬単位用量形態をパッケージ化するのに広く用いられている。所望であれば、例えば、該用量を投与することができる治療スケジュール中に日を示す、数字、文字、または他のマーキングの形態で、またはカレンダーインサートにて記憶補助を提供することができる。

別の実施形態によると、キットは、（ａ）第１の容器の中に含有された本発明の化合物を含む第１の容器と、（ｂ）第２の容器の中に含有された第２の医薬製剤を含む第２の容器とを含み得、第２の医薬製剤は、ＡＫＴキナーゼにより媒介される障害を治療するために有用な第２の化合物を含む。代替として、または加えて、該キットは、注射用の静菌水（ＢＷＦＩ）、リン酸−緩衝化生理食塩水、リンゲル液およびデキストロース溶液のような薬剤として許容可能な緩衝液を含む第３の容器をさらに含み得る。それは、他の緩衝液、希釈剤、濾紙、針および注射器を含む、商業的および使用者の視点から望ましい他の物質をさらに含み得る。

該キットは、本発明の化合物、および、もしあれば、第２の医薬製剤の投与用の指示書をさらに含み得る。例えば、該キットが、本発明の化合物を含む第１の組成物および第２の医薬製剤を含む場合、該キットは、それを必要とする患者に、第１および第２の医薬組成物を、同時に、連続または別々に投与するための指示書をさらに含み得る。

ある他の実施形態において、該キットが、本発明の組成物および第２の治療剤を含む場合、該キットは、分割された瓶または分割されたホイルパケットのような別々の組成物を含有するための容器を含み得るが、別々の組成物を単一の分割されていない容器内に含有することもできる。ある実施形態において、該キットは、別々の成分の投与用の指示書を含む。該キットの形態は、別々の成分が、好ましくは、異なる用量形態（例えば、経口および非経口）で投与され、異なる投与間隔で投与される場合、あるいは組み合わせの個々の成分の滴定が処方医によって望まれる場合に特に有利である。

したがって、本発明のさらなる態様は、ＡＫＴキナーゼにより媒介される障害もしくは疾患を治療するためのキットを提供し、ここで、該キットは、ａ）本発明の化合物またはその薬剤として許容可能な塩を含む第１の医薬組成物と、ｂ）使用説明書とを含む。

ある実施形態において、該キットは、（ｃ）第２の医薬組成物をさらに含み、ここで、該第２の医薬組成物は、ＡＫＴキナーゼにより媒介される障害もしくは疾患を治療するために適する第２の化合物を含む。第２の医薬組成物を含むある実施形態において、該キットは、それを必要とする患者に、前記第１および第２の医薬組成物を、同時に、連続または別々に投与するための使用説明書をさらに含む。ある実施形態において、前記第１および第２の医薬組成物は、別々の容器に含有される。他の実施形態において、前記第１および第２の医薬組成物は、同一の容器に含有される。

式Ｉの化合物が、主に、哺乳動物に用いる治療剤として価値のあるものであるが、それがまた、ＡＫＴタンパク質キナーゼ、チロシンキナーゼ、追加のセリン／トレオニンキナーゼ、および／または二重特異性キナーゼを制御するために必要とされる時は、有用である。したがって、それは、新規の生物学的試験の開発に用いる、および新規の薬理学的薬剤の研究に用いる薬理学的標準として有用である。

本発明の化合物の活性が、体外、生体内、または細胞株において、ＡＫＴタンパク質キナーゼ、チロシンキナーゼ、追加のセリン／トレオニンキナーゼ、および／または二重特異性キナーゼに対して測定され得る。体外アッセイは、キナーゼ活性の阻害を決定するアッセイである。代替の体外アッセイは、キナーゼに結合する阻害剤の能力を定量し、結合前に阻害剤を放射性標識し、阻害剤／キナーゼ複合体を単離し、放射性標識結合の量を決定することにより、あるいは、新規の阻害剤を既知の放射性リガンドでインキュベートする競合的実験を実行することにより、測定され得る。これらのアッセイ、およびその他の有用な体外および細胞培養アッセイが、当業者には公知である。

本発明を、ある程度の具体性を持って説明および図示してきたが、本開示は、単に例示目的であり、当業者であれば、以降に特許請求される本発明の精神および範囲を逸脱することなく、部分の組み合わせおよび配置において幾多の変更が行われ得ることが理解される。

生物学的実施例
ＡＫＴ−１キナーゼアッセイ
本発明に記載の化合物の活性は、以下のキナーゼアッセイにより判定され得るが、該キナーゼアッセイは市販のＩＭＡＰキットを用いる蛍光偏光により、全長ヒト組み換え活性ＡＫＴ−１による蛍光標識されたペプチドのリン酸化を測定する。

該アッセイ材料は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＣＡからのＩＭＡＰ ＡＫＴアッセイバルクキット、生成物番号＃Ｒ８０５９より得られる。該キット材料は、ＩＭＡＰ反応緩衝液（５×）を含む。希釈された１×ＩＭＡＰ反応緩衝液は、１０ｍＭ Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ７．２、１０ｍＭ ＭｇＣｌ_２、０．１％ ＢＳＡ、０．０５％ ＮａＮ_３を含有する。使用直前に、１ｍＭの最終濃度にＤＴＴを定期的に添加する。ＩＭＡＰ反応緩衝液（５×）、およびＩＭＡＰ結合試薬も含まれる。該結合溶液を、１×ＩＭＡＰ結合緩衝液に、１：４００のＩＭＡＰ結合試薬の希釈物として調製する。

フルオレセイン標識ＡＫＴ基質（Ｃｒｏｓｓｔｉｄｅ）は、配列（Ｆｌ）−ＧＲＰＲＴＳＳＦＡＥＧを有する。２０μＭの原液を、１×ＩＭＡＰ反応緩衝液中に作製する。

使用したプレートは、化合物を希釈し、化合物−ＡＴＰの混合物を調製するために使用される、Ｃｏｓｔａｒ ３６５７（ポリプロピレン製の白色のＶ型底を有する３８２ウェル）を含む。当該アッセイプレートは、Ｐａｃｋａｒｄ ＰｒｏｘｙＰｌａｔｅ（商標）−３８４Ｆである。

使用されるＡＫＴ−１は、ＰＤＫ１およびＭＡＰキナーゼ２で活性化される全長ヒト組み換えＡＫＴ−１から作製される。

当該アッセイを行うために、ジメチルスルホキシド（「ＤＭＳＯ」）中の１０ｍＭの化合物の原液を調製する。原液および対照化合物を、１：２のＤＭＳＯ（１０μＬの化合物＋１０μＬのＤＭＳＯ）に、９回、連続希釈し、所望の用量範囲にわたり５０×希釈系列を得る。次に、ＤＭＳＯ中の２．１μＬアリコートの該化合物を、１ｍＭ ＤＴＴを含有する１×ＩＭＡＰ反応緩衝液中の５０μＬの１０．４μＭ ＡＴＰを含有するＣｏｓｔａｒ ３６５７プレートに移す。完全に混合した後、２．５μＬアリコートを、ＰｒｏｘｙＰｌａｔｅ（商標）−３８４Ｆプレートに移す。

２００ｎＭの蛍光標識されたペプチド基質および４ｎＭ ＡＫＴ−１を含有する２．５μＬアリコートの溶液を添加することにより、当該アッセイを開始する。該プレートを、１０００ｇにて１分間遠心分離し、周囲温度で６０分間インキュベートする。その後、反応物を、１５μＬの結合溶液を添加することにより反応停止し、蛍光偏光を測定するように設定されたＶｉｃｔｏｒ １４２０ Ｍｕｌｔｉｌａｂｅｌ ＨＴＳ Ｃｏｕｎｔｅｒ上で読み込むまえに、再度遠心分離し、周囲温度でさらに３０分間インキュベートする。

実施例１の化合物を、上記のアッセイにおいて試験し、実施例１の化合物が５００ｎＭ未満のＩＣ_５０を有することが見出された。

調製実施例
本発明を例示するために、以下の実施例を含む。しかしながら、本実施例は、本発明を限定するものではなく、本発明を実践する方法を示唆することのみを意図することを理解するべきである。当業者は、記載の化学反応物は、本発明の化合物を調製するための代替方法に容易に適合し、本発明の範囲内であると見なされることを認識されよう。例えば、本発明の化合物の合成を、例えば、干渉基を適切に保護することにより、記載されるもの以外の当技術分野において既知の他の好適な試薬を利用することにより、および／または反応条件の通常の修正を行なうことによるような、当業者には明らかな修正により、成功裏に調製し得る。代替として、当技術分野において既知の他の反応物は、本発明の化合物を調製するための適用性を有するものとして認識される。

下記の実施例において、別途示されない限り、すべての温度は、摂氏で記述される。試薬は、Ａｌｄｒｉｃｈ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｃｏｍｐａｎｙ， Ｌａｎｃａｓｔｅｒ， ＴＣＩまたはＭａｙｂｒｉｄｇｅのような商業的供給元より購入し、別途示されない限り、さらに精製することなく使用した。テトラヒドロフラン（「ＴＨＦ」）、ジクロロメタン（「ＤＣＭ」）、トルエン、およびジオキサンは、Ｓｕｒｅ ｓｅａｌ（登録商標）瓶中でＡｌｄｒｉｃｈより購入され、入荷した状態で使用した。

下に記述される反応は、概して、窒素またはアルゴンの陽圧下で、無水溶媒中で、乾燥管（別途規定されない限り）を用いて行われ、反応フラスコを、典型的には、注射器を介して、基質および試薬を導入するために、ゴム隔膜を用いて固定した。ガラス製品を、オーブン乾燥させた、および／または加熱乾燥させた。

^１Ｈ ＮＭＲスペクトルは、４００ＭＨｚで作動するＶａｒｉａｎ装置で記録された。^１Ｈ−ＮＭＲスペクトルは、参考標準として、テトラメチルシラン（０．００ｐｐｍ）または残渣溶媒（ＣＤＣｌ_３：７．２５ｐｐｍ、ＣＤ_３ＯＤ：３．３１ｐｐｍ、Ｄ_２Ｏ：４．７９ｐｐｍ、ｄ_６−ＤＭＳＯ：２．５０ｐｐｍ）を用いて、ＣＤＣｌ_３、ＣＤ_３ＯＤ、Ｄ_２Ｏまたはｄ_６−ＤＭＳＯ溶液（ｐｐｍで報告）として得られた。ピーク多重度を報告する際、以下の略語を使用する。ｓ（１重項）、ｄ（２重項）、ｔ（３重項）、ｍ（多重項）、ｂｒ（広範）、ｄｄ（２重項の２重項）、ｄｔ（３重項の２重項）。与えられる場合、カップリング定数を、Ｈｅｒｔｚ（Ｈｚ）で報告する。

実施例１

（Ｓ）−２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−１−（４−（（５Ｒ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（（１ｒ，４Ｓ）−４−メトキシシクロヘキシルアミノ）プロパン−１−オン

ステップ１：酢酸エチル（「ＥｔＯＡｃ」、９００ｍＬ）中のエチルプレゲネート（Ｅｔｈｙｌ ｐｕｌｅｇｅｎａｔｅ）（１３０ｇ、６６２ｍｍｏｌ）を、ドライアイスのイソプロパノール槽を用いて、−７８℃に冷却した。反応物が、紫色に変わるまで、本混合物を、オゾン分解に供した。この時点で、オゾン発生が停止し、該反応物を、該ドライアイス槽から除去した。反応混合物が黄色に変わるまで、酸素を、反応混合物に吹き込んだ。反応混合物を、真空下で濃縮し、得られた残渣物を、氷酢酸（４００ｍＬ）中に溶解した。この溶液を、０℃に冷却し、亜鉛末（６５ｇ、９９３ｍｍｏｌ）を、３０分間にわたり、数回に分けて添加した。その後、該反応物を、２時間撹拌し、この時点で、該反応混合物をセライトのパッドを通して濾過し、亜鉛末を除去した。当該酢酸を、ＮａＯＨおよびＮａＨＣＯ_３水溶液を用いて、ｐＨ７まで中和し、エーテル（３×８００ｍＬ）で抽出した。混合した有機物を、食塩水、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濃縮し、液体として、（２Ｒ）−エチル２−メチル−５−オキソシクロペンタンカルボキシレート（１０７ｇ、９５％）を得た。

ステップ２：水（６０ｍＬ）中のＫＯＨ（８．３ｇ、１４７．９ｍｍｏｌ）を、エタノール（１００ｍＬ）中の（２Ｒ）−エチル２−メチル−５−オキソシクロペンタンカルボキシレート（２０ｇ、１１７．５ｍｍｏｌ）とチオ尿素（９．２ｇ、１２０．９ｍｍｏｌ）との混合物の溶液に添加した。該混合物を、１０時間還流した。冷却した後、溶媒を除去した。得られた残渣物を、０℃の濃縮ＨＣｌ（１２ｍＬ）を用いて中和し、その後、ＤＣＭ（３×１５０ｍＬ）で抽出した。溶媒を除去し、得られた残渣物を、ヘキサン／酢酸エチル（２：１）で溶出する、シリカゲルクロマトグラフィにより精製し、（Ｒ）−２−メルカプト−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−オール（１２ｇ、５６％）を得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋＋１８３。

ステップ３：ラネーニッケル（１５ｇ）およびＮＨ_４ＯＨ（２０ｍＬ）を、蒸留水（１００ｍＬ）中の（Ｒ）−２−メルカプト−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−オール（１２ｇ、６５．８ｍｍｏｌ）の懸濁液に添加した。混合物を、３時間還流し、その後、濾過した。濾液を濃縮し、（Ｒ）−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−オール（９．８９ｇ、９９％）を得た。ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）［Ｍ＋Ｈ］＋１５１。

ステップ４および５は、（Ｒ）−エチル２−メチル−５−オキソシクロペンタンカルボキシレートから開始する、（Ｒ）−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−オールの代替合成を説明する。

ステップ４：酢酸アンモニウム（２４０ｇ、３１１４ｍｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（１．２Ｌ）中の（Ｒ）−エチル２−メチル−５−オキソシクロペンタンカルボキシレート（１０６．０ｇ、６２２．８ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を、窒素下で、室温で２０時間撹拌し、ＴＬＣおよびＨＰＬＣによる判定により、反応を完了させた。該反応混合物を濃縮し、ＭｅＯＨを除去した。得られた残渣物を、ＤＣＭ中に溶解し、Ｈ_２Ｏ（２×）、食塩水（１×）で順次洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮し、油として、（Ｒ）−エチル２−アミノ−５−メチルシクロペント−１−エンカルボン酸（１０２ｇ、収率９７％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ１７０．１［Ｍ＋Ｈ］＋。

ステップ５：ホルムアミド（３０３．５ｍＬ、７６４０ｍｍｏｌ）中の（Ｒ）−エチル２−アミノ−５−メチルシクロペント−１−エンカルボン酸（１６１．６ｇ、９５５ｍｍｏｌ）およびギ酸アンモニウム（９０．３ｇ、１４３３ｍｍｏｌ）を含有する溶液を、１５０℃の内部温度まで加熱し、１７時間撹拌した。反応混合物を冷却し、２Ｌの１口フラスコに移した。その後、高真空蒸留により、過剰のホルムアミジンを除去した。ホルムアミジンの発生がやむとすぐに、蒸留器中の残りの油を、ＤＣＭ中に溶解し、食塩水（３×２００ｍＬ）で洗浄した。混合した洗浄水溶液を、ＤＣＭで抽出した。混合した有機抽出物を、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。得られた油を、最少量のＤＣＭ中に溶解し、本溶液を、分液漏斗を用いて、エーテル（ＤＣＭ溶液に対して約５容積のエーテル）の撹拌溶液に添加し、いくつかの沈殿物を形成させた。本沈殿物を、中型フリット漏斗に通して濾過することにより除去し、これをエーテルですすぎ、処分した。濾液を、濃縮し、エーテルによる粉砕を、さらに２回繰り返した。その後、生成物を、高真空ライン上で乾燥させ、ペースト状の固体として、（Ｒ）−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−オール（９３．２３ｇ、収率６５．０％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ−）ｍ／ｚ１４９．２。

ステップ６：純ＰＯＣｌ_３（４６３．９ｍＬ、５０６７ｍｍｏｌ）を、添加用漏斗により、０℃のＤＣＥ（１．２Ｌ）中の（Ｒ）−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−オール（１５２．２ｇ、１０１３ｍｍｏｌ）の溶液に、ゆっくりと添加した。添加が完了した後、反応混合物を室温まで温め、その後、７０分間撹拌しながら、加熱還流した。ＨＰＬＣによる判定により、反応を完了させた。該反応混合物を、室温まで冷却し、過剰なＰＯＣｌ_３を、以下のように、４回に分けて反応停止した。反応混合物を、分液漏斗に移し、氷および飽和ＮａＨＣＯ_３溶液の入ったビーカーに滴下し、氷浴中で冷却した。該反応混合物の各分量の添加が完了したらすぐに、反応停止した混合物を、３０分間撹拌し、分液漏斗に移す前に、ＰＯＣｌ_３の完全な消失を確認した。該混合物を、分液漏斗に移し、ＤＣＭ（２×）で抽出した。混合した抽出物を、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。粗物を、以下のように、シリカゲルで精製した。シリカゲル（１ｋｇ）を、３Ｌのフリット漏斗上で、９：１のヘキサン：酢酸エチル中にスラリー化し、シリカを真空下で固定し、砂をかぶせた。該粗物を、ＤＣＭ／ヘキサンの混合物で負荷し、真空下で、１Ｌの枝付きフラスコを用いて、化合物を溶出した。まず、高Ｒｆの副生成物を溶出し、その後、油として、（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン（１０４．４ｇ、収率６１．０９％）を得た。トリエチルアミン（９３．０ｍＬ、５３４ｍｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルピペラジン−１−カルボン酸（３４．８ｇ、１８７ｍｍｏｌ）を、ｎ−ＢｕＯＨ（２５０ｍＬ）中の（Ｒ）−４−クロロ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン（３０．０ｇ、１７８ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。該反応混合物を、窒素下で、加熱還流し、一晩（１７時間）撹拌し、その後、ロータバップで濃縮した。得られた油を、ＤＣＭ中に溶解し、Ｈ_２Ｏで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。得られた油を、生成物がきれいに溶出するまで、まず、２：１のヘキサン：酢酸エチル、次いで、勾配１：１〜１：５のＤＣＭ：酢酸エチルで溶出するシリカゲルで精製し、粉末として、（Ｒ）−ｔｅｒｔブチル４−（５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（４２．０ｇ、収率７４．１％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ３１９．１．１［Ｍ＋Ｈ］＋。

ステップ７：固体７７％（最大）ｍ−クロロ過安息香酸（「ｍ−ＣＰＢＡ」、２３．９ｇ、１０７ｍｍｏｌ）を、０°ＣのＣＨＣｌ_３（３１０ｍＬ）中の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（２０．０ｇ、６２．８ｍｍｏｌ）の溶液に、数回に分けて添加した。反応混合物を、５分間撹拌し、その後、室温まで温め、さらに９０分間撹拌した。７．５時間後、ＨＰＬＣは類似していた。該反応混合物を、０℃まで冷却し、その後、ＮａＨＣＯ_３（１３．２ｇ、１５７ｍｍｏｌ）および別の０．５当量のｍ−ＣＰＢＡを添加した。該反応混合物を、一晩（１４時間）撹拌した。該反応混合物を、０℃まで冷却し、Ｈ_２Ｏ（５０ｍＬ）中のＮａ_２Ｓ_２Ｏ_３（２９．８ｇ、１８８ｍｍｏｌ）の溶液を、添加用漏斗により滴下した。これに続き、添加用漏斗により、Ｈ_２Ｏ（７０ｍＬ）中のＮａ_２ＣＯ_３（２４．６ｇ、２３２ｍｍｏｌ）の溶液を添加した（混合物は、均質になる）。該反応混合物を、３０分間撹拌し、その後、該混合物を、ＣＨＣｌ_３（３×１５０ｍＬ）で抽出した。混合した抽出物を、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮し、（Ｒ）−４−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン１−酸化物（２１．０ｇ、１００％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ３３５．１．１［Ｍ＋Ｈ］＋。

ステップ８：Ａｃ_２Ｏ（７７．０ｍＬ、８１６ｍｍｏｌ）を、（Ｒ）−４−（４−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）ピペラジン−１−イル）−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン１−酸化物（２１．０ｇ、６２．８ｍｍｏｌ）に添加した。反応混合物を、窒素下で、９０℃の砂槽中で加熱し、１００分間撹拌した。反応混合物を、室温まで冷却し、過剰の無水酢酸を、回転蒸発により除去した。得られた油を、ＤＣＭ中に溶解し、これを、その後、氷飽和Ｎａ_２ＣＯ_３に、慎重に注いだ。該混合物を、ＤＣＭで抽出し、混合した抽出物を、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮し、泡状物質として、（５Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（７−アセトキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（２３．６ｇ、１００％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ３７７．１［Ｍ＋Ｈ］＋。

ステップ９：ＬｉＯＨ−Ｈ_２Ｏ（６．５８ｇ、１５７ｍｍｏｌ）を、０℃の２：１のＴＨＦ：Ｈ_２Ｏ（３２０ｍＬ）中の（５Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（７−アセトキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（２３．６ｇ、６２．６９ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を、１０分間撹拌し、その後、室温まで温めた。ＬＣ／ＭＳは、３時間および４．５時間で、同一であるように見えた。該反応混合物を、０℃まで冷却し、その後、飽和ＮＨ_４Ｃｌを、該混合物に添加した。該混合物を、５分間撹拌し、ほとんどのＴＨＦを、回転蒸発により除去した。該混合物を、ＥｔＯＡｃ（３×２５０ｍＬ）で抽出し、混合した抽出物を、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。粗物を、Ｂｉｏｔａｇｅ ６５Ｍフラッシュクロマトグラフィ（４：１のＤＣＭ：酢酸エチル、次いで、勾配１：１〜１：４のＤＣＭ：酢酸エチル）で精製した。生成物を溶出するとすぐに、酢酸エチルで該カラムを洗浄した。その後、３０：１のＤＣＭ：ＭｅＯＨで、生成物の残り（８．８３ｇ）を溶出した。混合した画分を、同一の条件下で、Ｂｉｏｔａｇｅ ４０Ｍフラッシュクロマトグラフィを用いて、再び精製し、別の分量（２．９９ｇ）を得、泡状物質として、混合した収量の（５Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸塩（１１．８２ｇ、収率５６．３８％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ３３５．１．１［Ｍ＋Ｈ］＋。

ステップ１０：ＤＣＭ（５０ｍＬ）中のＤＭＳＯ（５．４５ｍＬ、７６．８ｍｍｏｌ）の溶液を、添加用漏斗により、−７８℃のＤＣＭ（１５０ｍＬ）中の塩化オキサリル（３．３５ｍＬ、３８．４ｍｍｏｌ）の溶液に滴下した。反応混合物を、３５分間撹拌し、その後、ＤＣＭ（８０ｍＬ）中の（５Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸塩（９．１７ｇ、２７．４ｍｍｏｌ）の溶液を、添加用漏斗により、ゆっくりと添加した。該反応混合物を、−７８℃でさらに１時間撹拌し、この後、純トリエチルアミン（１８．０ｍＬ、１２９ｍｍｏｌ）を、該混合物に添加した。その後、該反応混合物を、室温まで温め、その後、それを、３０分間撹拌した。Ｈ_２Ｏを添加した。該混合物を、ＤＣＭ（３×２００ｍＬ）で抽出し、混合した抽出物を、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、真空中で濃縮した。粗物を、シリカゲル（Ｂｉｏｔａｇｅ６５Ｍ）で精製し、触媒８００ｍＬの４：１のＤＣＭ：ＥｔＯＡｃを用いて、その後、生成物が溶出するまで、勾配１：１のＤＣＭ：酢酸エチル、次いで、１：４のＤＣＭ：ＥｔＯＡｃで溶出する生成物を用いて、カラムを洗浄し、泡状物質として、（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−メチル−７−オキソ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（７．５ｇ、収率８２．３％）を得た。該泡状物質を、ＤＣＭ／ヘキサン（３×）から濃縮し、泡状物質も得た。ＨＰＬＣ＞９５％領域。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ３３３．１［Ｍ＋Ｈ］＋。

ステップ１１：トリエチルアミン（４．３３ｍＬ、３１．１ｍｍｏｌ、使用前の３０分間、窒素で脱気）およびギ酸（１．３６ｍＬ、３６．１ｍｍｏｌ、使用前の３０分間、窒素で脱気）を、ＤＣＭ（２１０ｍＬ、使用前の３０分間、窒素で脱気）中の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（５−メチル−７−オキソ−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（９．７５ｇ、２９．３ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。混合物を、５分間撹拌し、その後、Ｒｕ触媒（０．０９３３ｇ、０．１４７ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を、正の窒素圧下で、一晩（１８時間）撹拌した。該反応混合物を濃縮乾燥し、高真空で乾燥させた。不純物質を、５００ｍＬの１：１のＤＣＭ：酢酸エチルで洗浄したＢｉｏｔａｇｅ ６５Ｍフラッシュクロマトグラフィで精製したが、次いで、生成物（第２のスポット）が溶出されるまで１：４のＤＣＭ：酢酸エチルを使用し、次いで、その勾配を純酢酸エチルにし、次いで、２５：１のＤＣＭ：ＭｅＯＨで生成物の残りを溶出した。画分を混合し、回転蒸発器で濃縮した。残渣物を、ＤＣＭ／ヘキサンから再度濃縮し、泡状物質として、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（主要）とｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｓ）−７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（副）との混合物（９．３５ｇ、収率９５．３％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ３３５．１［Ｍ＋Ｈ］＋。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）は、カルビノールメチン（ｃａｒｂｉｎｏｌ ｍｅｔｈｉｎｅ）の統合によって、８８％のジアステレオ選択性を示した。

ステップ１２：４−塩化ニトロベンゾイル（４．２７ｇ、２３．０ｍｍｏｌ）を、０℃のＤＣＭ（１１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（７．０ｇ、２０．９ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（４．３８ｍＬ、３１．４ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を、一晩室温し、この後、飽和ＮａＨＣＯ_３を添加した。該混合物を、１０分間撹拌し、その後、ＤＣＭで抽出した。混合した抽出物を、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。粗物を、Ｂｉｏｔａｇｅ ６５Ｍフラッシュクロマトグラフィ（３：１のヘキサン：酢酸エチルをロードした粗物、次いで、２：１のヘキサン：酢酸エチルがｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｒ）−５−メチル−７−（４−ニトロベンゾイルオキシ）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸、および少量の混合した画分を溶出した）で精製した。その後、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｓ）−５−メチル−７−（４−ニトロベンゾイルオキシ）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸を、１：２のヘキサン：酢酸エチルを用いて、溶出した。生成物を有する画分を、回転蒸発により濃縮し、泡状物質として、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｒ）−５−メチル−７−（４−ニトロベンゾイルオキシ）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（８．５５ｇ、収率８４．５％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ４８４．１［Ｍ＋Ｈ］＋。^１Ｈ ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３）は、単一のジアステレオマーを示す）。他のジアステレオマーを有する画分を、回転蒸発により濃縮し、泡状物質として、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｓ）−５−メチル−７−（４−ニトロベンゾイルオキシ）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（０．３５６ｇ、収率３．５２％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ４８４．１［Ｍ＋Ｈ］＋。

ステップ１３は、（５Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（ステップ９）からのｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｓ）−５−メチル−７−（４−ニトロベンゾイルオキシ）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸およびｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｒ）−５−メチル−７−（４−ニトロベンゾイルオキシ）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸の代替調製を説明する。

ステップ１３：４−塩化ニトロベンゾイル（１５．７８ｇ、８５．０３ｍｍｏｌ）を、０℃のＤＣＭ（４００ｍＬ）中の（Ｒ）−ｔｅｒｔ−ブチル４−（７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（２５．８５ｇ、７７．３０ｍｍｏｌ）およびＮＥｔ_３（１１．７３ｇ、１６．１６ｍＬ、１１５．９ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を、５分間撹拌した。その後、混合物を、室温まで温め、一晩（１７時間）撹拌し、この後、飽和ＮａＨＣＯ_３を添加した。該反応混合物を、１０分間撹拌し、分液漏斗に移した。有機層を収集し、水性抽出物を、ＤＣＭ（２×）で洗浄した。混合した有機抽出物を、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮した。粗物を、７：１のヘキサン：酢酸エチルをロードしたフラッシュシリカゲルカラムクロマトグラフィで精製した（勾配は、５：１のヘキサン：酢酸エチル―＞２：１のヘキサン：酢酸エチル―＞１：１のヘキサン：酢酸エチル）。一部のきれいなｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｒ）−５−メチル−７−（４−ニトロベンゾイルオキシ）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸、一部のきれいなｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｓ）−５−メチル−７−（４−ニトロベンゾイルオキシ）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸および一部の混合した画分が単離された。混合した画分を、再度カラムにかけ、予め単離した物質と混合し、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｒ）−５−メチル−７−（４−ニトロベンゾイルオキシ）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（１４．２７ｇ、３８％）およびｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｓ）−５−メチル−７−（４−ニトロベンゾイルオキシ）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（１２．５８ｇ、３４％）を得た。４−塩化ブロモベンゾイルの使用が、異性体のわずかに良好な分離をもたらすことを示している。

ステップ１４：ＬｉＯＨ−Ｈ_２Ｏ（０．４９９ｇ、１１．９ｍｍｏｌ）を、０℃の２：１のＴＨＦ：Ｈ_２Ｏ（４０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｒ）−５−メチル−７−（４−ニトロベンゾイルオキシ）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（２．３０ｇ、４．７６ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を、室温まで温め、１時間撹拌した。ＴＨＦを、回転蒸発により除去した。その後、飽和ＮａＨＣＯ_３を添加し、該混合物を、酢酸エチルで抽出した。混合した抽出物を、飽和ＮａＨＣＯ_３で洗浄（１×）し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、濃縮し、泡状物質として、ｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（１．５９ｇ、収率１００．０％）を得た。処理後、ＨＰＬＣにより、純度が９８％の領域を超える生成物を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ３３５．１［Ｍ＋Ｈ］＋。

ステップ１５：４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１１．２ｍＬ、４４．９ｍｍｏｌ）を、ジオキサン（１５ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル４−（（５Ｒ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−カルボン酸（０．６００ｇ、１．７９ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。反応混合物を、窒素下で、室温で一晩（２０時間）撹拌した。該混合物を、乾燥するまで濃縮し、高真空ライン上で乾燥させた。粗物を、エーテル中に懸濁し、超音波処理し、５分間撹拌した。固体を、窒素圧を用いて、中型フリット漏斗に通して濾過することにより単離し、エーテルですすぎ、窒素圧下で乾燥させ、高真空ライン上でさらに乾燥させ、粉末として、（５Ｒ，７Ｒ）−５−メチル−４−（ピペラジン−１−イル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−７−オール二塩酸塩（０．４４０ｇ、収率７９．８％）を得た。ＬＣ／ＭＳ（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ２３５。

ステップ１６：塩化トリメチルアセチル（１．６８ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）を、０℃の乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）酢酸（２．５０ｇ、１３．３ｍｍｏｌ）およびＴＥＡ（ｄ．０．７２６、２．００ｍＬ、１４．３ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、室温で撹拌した。別個のフラスコ中で、ｎ−ＢｕＬｉ（６．４２４ｍＬ、１４．５８ｍｍｏｌ）を、−７８℃の乾燥ＴＨＦ（１００ｍＬ）中の（Ｒ）−４−ベンジルオキサゾリジン−２−オン（２．４７ｇ、１３．９ｍｍｏｌ）に添加した。反応物を、−７８℃で２０分間撹拌し、その後、（Ｒ）−４−ベンジルオキサゾリジン−２−オン溶液を、０℃の混合した無水溶液に滴下した。該反応物を、室温で一晩撹拌した。該反応物を、水（１００ｍＬ）で反応停止させ、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。層を分離し、有機物を、食塩水で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、残渣物を得るまで濃縮した。得られた残渣物を、フラッシュクロマトグラフィで精製し、（Ｒ）−４−ベンジル−３−（２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）アセチル）オキサゾリジン−２−オン（２．７９ｇ、８．０２ｍｍｏｌ、収率６０．５％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）７．３７（ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．３３−７．２６（ｍ，３Ｈ），７．１８−７．１２（ｍ，３Ｈ），７．０７（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），４．７３−４．６５（ｍ，１Ｈ），４．３３−４．１８（ｍ，４Ｈ），３．２７（ｄｄ，Ｊ１＝３．５Ｈｚ，Ｊ２＝１３．３Ｈｚ，１Ｈ），２．７７（ｄｄ，Ｊ１＝９．４Ｈｚ，Ｊ２＝１３．７Ｈｚ，１Ｈ）。

ステップ１７：（１ｒ，４ｒ）−４−アミノシクロヘキサノール塩酸塩（６．６７ｇ、４４ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中に懸濁した。その後、ヒューニッヒ塩基（Ｈｕｎｉｎｇ’ｓ ｂａｓｅ）（１５ｍＬ）を添加し、それに続いて、触媒の４−ジメチルアミノピリジン（「ＤＭＡＰ」）を添加した。反応物を、５分間添加し、その後、Ｂｏｃ_２Ｏ（１０．２ｇ、４７ｍｍｏｌ）を、１０分間にわたり、数回に分けて添加した。その後、該反応物を、室温で一晩撹拌した。該反応物を、１Ｎ ＨＣｌの添加により反応停止し、１０分間撹拌した。有機層を分離し、水層を、ＤＣＭ（２×）で洗浄した。その後、混合した有機物を、食塩水およびＭｇＳＯ_４を用いて乾燥させ、濃縮した。得られた残渣物を、ヘキサン（過剰なＢｏｃ_２Ｏをすべて除去）に懸濁し、濾過した。所望の物質を、固体であるｔｅｒｔ−ブチル（１ｒ，４ｒ）−４−ヒドロキシシクロヘキシルカルバメート（５．１ｇ、収率５４％）として得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）４．３５（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．６５−３．５２（ｍ，１Ｈ），３．４３（ｂｒ ｓ，１Ｈ），１．９９（見かけの３重項，Ｊ１＝１７．２Ｈｚ，Ｊ２＝１２．１Ｈｚ，４Ｈ），１．４９−１．３０（ｍ，１２Ｈ），１．４−１．０８（ｍ，２Ｈ）。

ステップ１８：ＮＥｔ_３（ｄ． ０．７２６、４．９５ｍＬ、３５．５ｍｍｏｌ）を、室温で、ＤＣＭ（１００ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（１ｒ，４ｒ）−４−ヒドロキシシクロヘキシルカルバメート（５．１ｇ、２３．７ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、懸濁液として撹拌した。反応物を、１０分間撹拌し、それに続いて、ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホン酸（６．５２ｍＬ、２６．１ｍｍｏｌ）を添加し、その際、該反応物は、均質溶液になり、２時間撹拌した。該反応物を、水（５０ｍＬ）で希釈し、層を分離した。有機物を、１Ｎ ＨＣｌ（２×５０ｍＬ）で洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、固体を得るまで濃縮した。固体をフラッシュクロマトグラフィ（５％酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、ｔｅｒｔ−ブチル（１ｒ，４ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）シクロヘキシルカルバメート（６．５４ｇ、１９．８ｍｍｏｌ、収率８３．８％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）４．３４（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．６１−３．５０（ｍ，１Ｈ），３．４（ｂｒ ｓ，１Ｈ），１．９７（ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ，２Ｈ），１．８２（ｄ，Ｊ＝１３．７Ｈｚ，２Ｈ），１．４４（ｓ，９Ｈ），１．４３−１．３０（ｍ，２Ｈ），１．２１−１．０５（ｍ，２Ｈ），０．８７（ｓ，９Ｈ），０．０４（ｓ，６Ｈ）。

ステップ１９：乾燥ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（１ｒ，４ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）シクロヘキシルカルバメート（１．００ｇ、３．０３ｍｍｏｌ）の溶液を、−７８℃まで冷却した。その後、ｎ−ＢｕＬｉ（１．２７ｍＬ、３．１９ｍｍｏｌ）を添加した。反応物を、−４０℃まで温めながら、２０分間撹拌した。これに続いて、クロロメチルメチルエーテル（ｄ＝１．０６０、０．２５４ｍＬ、３．３４ｍｍｏｌ）を迅速に滴下した。冷浴を除去し、窒素下で、反応物を、温めながら撹拌した。該反応物を、水で反応停止し、フラッシュクロマトグラフィ（５％ 酢酸エチル／ヘキサン）による抽出処理および精製により、ｔｅｒｔ−ブチル（１ｒ，４ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）シクロヘキシル（メトキシメチル）カルバメート（０．９５７ｇ、２．３６ｍｍｏｌ、収率８４％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）４．６９（ｂｒ ｓ，１Ｈ），３．８５−３．４７（ｍ，１Ｈ），３．２７（ｓ，３Ｈ），１．９０（ｄ，Ｊ＝１０．５Ｈｚ，２Ｈ），１．７９（ｄ，Ｊ＝１２．９Ｈｚ，２Ｈ），１．６７−１．５０（ｍ，２Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ），１．４６−１．３０（ｍ，４Ｈ），０．８８（ｓ，９Ｈ），０．０４（ｓ，６Ｈ）。

ステップ２０：フッ化テトラブチルアンモニウム（８．９４ｍＬ、８．９４ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（１ｒ，４ｒ）−４−（ｔｅｒｔ−ブチルジメチルシリルオキシ）シクロヘキシルカルバメート（１．９７ｇ、５．９６ｍｍｏｌ）の溶液に、添加し、一晩４０℃まで加熱した。反応物を、水（１００ｍＬ）および酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。その後、層を分離し、有機物を、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、油を得るまで濃縮した。該油を、フラッシュクロマトグラフィ（２５％酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、ｔｅｒｔ−ブチル（１ｒ，４ｒ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル（メトキシメチル）カルバメート（１．３２ｇ、５．０９ｍｍｏｌ、収率８５％）を得た。

ステップ２１：ＮａＨ（油中で６０％、０．５６３ｇ、１４．０７ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（１ｒ，４ｒ）−４−ヒドロキシシクロヘキシル（メトキシメチル）カルバメート（３．６５ｇ、１４．０７ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、４０℃まで加熱した。ヨウ化メチル（０．８７８ｍＬ、１４．０７ｍｍｏｌ）を、温めた撹拌溶液に添加し、一晩６０℃まで加熱した。反応物を、水（１００ｍＬ）で反応停止させ、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈した。その後、層を分離した。有機物を、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濃縮した。得られた残渣物を、フラッシュクロマトグラフィ（１０％酢酸エチル／ヘキサン）で精製し、ｔｅｒｔ−ブチル（１ｒ，４ｒ）−４−メトキシシクロヘキシル（メトキシメチル）カルバメート（３．５１ｇ、１２．８ｍｍｏｌ、収率９１％）を得た。

ステップ２２：ＴｉＣｌ_４（０．２０７ｇ、１．０９ｍｍｏｌ）を、−７８℃まで冷却した乾燥ＤＣＭ（２０ｍＬ）中の（Ｒ）−４−ベンジル−３−（２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）アセチル）オキサゾリジン−２−オン（０．３６２ｇ、１．０４ｍｍｏｌ）および（１ｒ，４ｒ）−４−メトキシシクロヘキシル（メトキシメチル）カルバメート（０．５５ｇ、２．０１ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。ジイソプロピルエチルアミン（「ＤＩＥＡ」、ｄ ０．７４２、０．１９９ｍＬ、１．１５ｍｍｏｌ）を、この冷却撹拌溶液に添加した。反応物を、−７８℃で１５分間撹拌し、その後、−１０℃まで温め、３時間撹拌した。該反応物をＮＨ_４Ｃｌで反応停止した。該反応物を、ＤＣＭ（５０ｍＬ）および水（５０ｍＬ）で希釈した。その後、層を分離した。水層を、ＤＣＭ（２５ｍＬ）で抽出し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、油を得るまで濃縮した。該油を、カラムクロマトグラフィ（１０％ Ｅｔ_２Ｏ／ヘキサン〜３０％ Ｅｔ_２Ｏ／ヘキサン）で精製し、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（（Ｒ）−４−ベンジル−２−オキソオキサゾリジン−３−イル）−２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−３−オキソプロピル（（１ｒ，４Ｓ）−４−メトキシシクロヘキシル）カルバメート（０．６１０ｇ、１．０４ｍｍｏｌ、収率９９．５％）を得た。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）７．３８−７．２８（ｍ，４Ｈ），７．２５−７．１５（ｍ，３Ｈ），７．１０（ｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，１Ｈ），４．６５−４．５６（ｍ，１Ｈ），４．１５−４．０３（ｍ，２Ｈ），３．６０−３．３６（ｍ，２Ｈ），３．３１（ｓ，３Ｈ），３．１５−２．９５（ｍ，１Ｈ），２．１２−１．９７（ｍ，３Ｈ），１．６９−１．５７（ｍ，２Ｈ），１．４７（ｓ，９Ｈ），１．４６−１．３７（ｍ，３Ｈ），１．３７−１．０７（ｍ，４Ｈ）。

ステップ２３：Ｈ_２Ｏ_２（０．２９４ｍＬ、３．０６ｍｍｏｌ）を、ＴＨＦ／水（２：１、８３ｍＬ）中のＬｉＯＨ−Ｈ_２Ｏ（０．０８５５ｇ、２．０４ｍｍｏｌ）の溶液に添加した。該溶液を、室温で１０分間撹拌した。該溶液を、０℃まで冷却し、ＴＨＦ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−３−（（Ｒ）−４−ベンジル−２−オキソオキサゾリジン−３−イル）−２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−３−オキソプロピル（（１ｒ，４Ｓ）−４−メトキシシクロヘキシル）カルバメート（０．６００ｇ、１．０１９ｍｍｏｌ）の溶液で処置した。反応物を、０℃で２時間撹拌し、その後、室温まで温め、一晩撹拌した。該反応物を、０℃まで冷却し、１Ｍ Ｎａ_２ＳＯ_３（１０ｍＬ）で処置し、１０分間撹拌した。その後、反応物を、室温まで温め、１０分間撹拌した。該反応物を、濃縮し、酢酸エチル（２×２０ｍＬ）で抽出した。水性部分を、ＨＳＯ_４で酸性化し、ｐＨを約１〜約２にし、その後、ＤＣＭ（２×２０ｍＬ）で抽出した。有機物を混合し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濃縮した。得られた残渣物により、（Ｓ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（（１ｒ，４Ｓ）−４−メトキシシクロヘキシル）アミノ）−２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）プロパン酸（０．３１２ｇ、０．７２６ｍｍｏｌ、収率７１％）を得た。ＬＣ／ＭＳ＞純度９５％、ｒ．ｔ．＝３．２５分間、（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ＝４３０［Ｍ＋Ｈ］＋。

ステップ２４：（５Ｒ，７Ｒ）−５−メチル−４−（ピペラジン−１−イル）−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−７−オール二塩酸塩（０．２３６ｇ、０．７６８ｍｍｏｌ）、Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾール−１−イル）−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスファート（「ＨＡＴＵ」、０．２６５ｇ、０．６９８ｍｍｏｌ）およびコリジン（０．３６９ｍＬ、２．７９ｍｍｏｌ）を、ＤＣＭ／ＤＭＦ（１５ｍＬ、２：１）中の（Ｓ）−３−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル（（１ｒ，４Ｓ）−４−メトキシシクロヘキシル）アミノ）−２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）プロパン酸（０．３００ｇ、０．６９８ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、反応物を、室温で一晩撹拌した。該反応物を、水（２０ｍＬ）とＤＣＭ（５０ｍＬ）とに分け、層を分離した。有機層を、水（２×１０ｍＬ）で洗浄した。水層を、ＤＣＭ（２５ｍＬ）で逆抽出し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、油を得るまで濃縮した。該油を、カラムクロマトグラフィ（５％ ＭｅＯＨ／ＤＣＭ）で精製し、ｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−３−（４−（（５Ｒ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロピル（（１ｒ，４Ｓ）−４−メトキシシクロヘキシル）カルバメート（０．３９４ｇ、０．６１０ｍｍｏｌ、収率８７．４％）を得た。ＬＣ／ＭＳ＞純度９５％、ｒ．ｔ．＝３．８３分間、（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ＝６４６。

ステップ２５：ジオキサン（４ｍＬ、１６ｍｍｏｌ）中の４Ｎ ＨＣｌを、ＤＣＭ（１０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル（Ｓ）−２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−３−（４−（（５Ｒ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）−３−オキソプロピル（（１ｒ，４Ｓ）−４−メトキシシクロヘキシル）カルバメート（０．３７０ｇ、０．５７３ｍｍｏｌ）の溶液に添加し、反応物を、室温で３時間撹拌した。反応内容物を、Ｅｔ_２Ｏ／ヘキサン（７５ｍＬ、３：１）の激しく撹拌した混合物に滴下し、微粒子として、固体を得た。該粒子を濾過し、乾燥させ、（Ｓ）−２−（４−クロロ−３−フルオロフェニル）−１−（４−（（５Ｒ，７Ｒ）−７−ヒドロキシ−５−メチル−６，７−ジヒドロ−５Ｈ−シクロペンタ［ｄ］ピリミジン−４−イル）ピペラジン−１−イル）−３−（（１ｒ，４Ｓ）−４−メトキシシクロヘキシルアミノ）プロパン−１−オン二塩酸塩（０．３２５ｇ、０．５２５ｍｍｏｌ、収率９１．７％）を得た。ＬＣ／ＭＳ＞純度９５％、ｒ．ｔ．＝２．５２分間、（ＡＰＣＩ＋）ｍ／ｚ＝５４６。

先述の説明は、本発明の原理のみを例示するものとして見なされる。さらに、多くの修正および変更が、当業者には容易に明らかであるため、上記のように示される正確な構造およびプロセスに本発明を限定することは望ましくない。したがって、すべての好適な修正および等価物は、以下の特許請求により定義される本発明の範囲内に含まれることが考慮され得る。

「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「包含している（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、「包含する（ｉｎｃｌｕｄｅ（ｓ））」という用語は、本明細書内、および以下の特許請求の範囲内で使用される際、規定された機能、整数、成分、またはステップの存在を特定することを意図するが、それらは、１つもしくは複数の他の機能、整数、成分、ステップ、または群の存在または付加を除外しない。

Claims (11)

1. 式Ｉの化合物。
   

   
2. 請求項１に記載の化合物を含む医薬組成物。
3. 哺乳動物において、ＡＫＴ媒介疾患もしくは障害を治療するための組成物であって、治療有効量の請求項１に記載の化合物を含む、組成物。
4. 前記疾患もしくは障害は、炎症性、過剰増殖性、心臓血管、神経変性、婦人科、または皮膚科の疾患もしくは障害である、請求項３に記載の組成物。
5. 哺乳動物において、ＡＫＴタンパク質キナーゼの産生を阻害するための組成物であって、有効量の請求項１に記載の化合物を含む、組成物。
6. 哺乳動物において、ＡＫＴタンパク質キナーゼの活性を阻害するための組成物であって、請求項１に記載の化合物を含む、組成物。
7. ＡＫＴタンパク質キナーゼ媒介病状の治療における、薬剤として使用のための請求項１に記載の化合物を含む組成物。
8. 療法のための薬剤の製造における、請求項１に記載の化合物の使用。
9. 過剰増殖性疾患の治療における使用のための、請求項１に記載の化合物を含む組成物。
10. 癌の治療における使用のための、請求項１に記載の化合物を含む組成物。
11. ＡＫＴタンパク質キナーゼ媒介病状を治療するためのキットであって、
    ａ）請求項１に記載の化合物を含む第１の医薬組成物と、
    ｂ）任意に、使用説明書と、
    を含む、キット。