ES2347136T3 - Derivados de bencenosulfonamidas farmaceuticamente activos en calidad de inhibidores de proteinas jun-quinasas. - Google Patents

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Abstract

Derivados de benzsulfonamida según la fórmula I **(Ver fórmula)** con sus isómeros geométricos, en una forma ópticamente activa como enantiómeros, diastereómeros, así como en forma de racematos, así como sus sales farmacéuticamente aceptables, en la que Ar1 se selecciona del grupo que consiste en fenilo, tienilo, furilo, piridilo, que pueden estar opcionalmente sustituidos con 1 a 5 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en "alquilo C1-C6", "(alquilo C1-C6)arilo", "(alquilo C1-C6)heteroarilo", "alquenilo C2-C6", "alquinilo C2-C6", grupos amino primarios, secundarios o terciarios, o restos amonio cuaternario, "acilo", "aciloxi", "acilamino", "aminocarbonilo", "alcoxicarbonilo", "arilo", "heteroarilo", carboxilo, ciano, halógeno, hidroxi, mercapto, nitro, sulfoxi, sulfonilo, alcoxi, tioalcoxi y trihalometilo, R1 es hidrógeno o un grupo alquilo C1-C6; R2 es hidrógeno, -COOR3, -CONR3R3', OH, un alquilo C1-C4 sustituido con un grupo OH, un grupo hidrazido carbonilo, un sulfato, un sulfonato, una amina o una sal de amonio; n es 0 ó 1; Y es cualquiera de las aminas cíclicas que tienen las fórmulas generales **(Ver fórmula)** en las que L1 y L2 se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, alquinilo C2-C6, cicloalquilo C4-C8, que contienen opcionalmente 1-3 heteroátomos y que están opcionalmente condensados con arilo o heteroarilo; o L1 y L2 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en arilo, heteroarilo, aril(alquilo C1-C6), heteroaril(alquilo C1-C6), -C(O)-OR3, -C(O)-R3, -C(O)-NR3'R3, -NR3'R3, -NR3'C(O)R3, -NR3'C(O)NR3'R3, -(SO)R3, -(SO2)R3, -NSO2R3, -SO2NR3'R3, con la condición de que cuando Y es piperidilo, L1 y L2 no pueden ser ambos H, siendo R3 R3' sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C1-C6, alquenilo C2-C6, arilo, heteroarilo, aril(alquiilo C1-C6), heteroaril(alquilo C1-C6); en la que arilo se selecciona del grupo que consiste en fenilo, naftilo y fenantrilo, en la que heteroarilo se selecciona del grupo que consiste en piridilo, pirrolilo, furilo, tienilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, pirazolilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, 1,3,4-triazinilo, 1,2,3-triazinilo, benzofurilo, [2,3-dihidro]benzofurilo, isobenzofurilo, benzotienilo, benzotriazolilo, isobenzotienilo, indolilo, isoindolilo, 3H-indolilo, benzimidazolilo, imidazo[1,2-a]piridilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, quinolizinilo, quinazolinilo, ftalazinilo, quinoxalinilo, cinnolinilo, naftiridinilo, pirido[3,4-b]piridilo, pirido[3,2-b]piridilo, pirido[4,3-b]piridilo, quinolilo, isoquinolilo, tetrazolilo, 5,6,7,8-tetrahidroquinolilo, 5,6,7,8-tetra-hidroisoquinolilo, purinilo, pteridinilo, carbazolilo, xantenilo o benzoquinolilo, y o L1 y L2 tomados conjuntamente forman un grupo alquilo o heteroalquilo cíclico saturado de 4-8 miembros; R6 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C1-C6, alcoxi C1-C6) OH, halógeno, nitro, ciano, sulfonilo, oxo (=O), y n' es un número entero de 0 a 4.

Description

Derivados de bencenosulfonamidas farmacéuticamente activos en calidad de inhibidores de proteínas Jun-quinasas.
Campo de la invención
La presente invención se refiere a benzsulfonamidas. Dichos derivados de sulfonamida son para ser utilizados en particular como compuestos farmacéuticamente activos. Además, la presente invención se refiere a formulaciones farmacéuticas que contienen dichos derivados de sulfonamida. En particular, la presente invención se refiere a derivados de sulfonamida que son útiles para el tratamiento y/o la prevención de trastornos del sistema inmunológico y neuronal. De manera específica, los derivados de sulfonamida de la presente invención muestran una actividad moduladora sustancial, en particular una actividad inhibidora de la función JNK (Jun-quinasa) o de las vías de JNK, respectivamente.
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Antecedentes de la invención
La apoptosis es el nombre de las complejas contorsiones de la membranas y los orgánulos de una célula cuando sufre el proceso de la muerte celular programada. Durante dicho proceso, la célula activa un programa de suicidio intrínseco y sistemáticamente se destruye a sí misma. Puede observarse la siguiente serie de acontecimientos:
\bullet
La superficie celular comienza a ampollarse y a expresar señales profagocíticas. La célula apoptótica entera entonces se fragmenta en vesículas unidas a la membrana que son eliminadas de manera rápida y precisa por fagocitosis, de forma que el tejido circundante sufre daños mínimos.
\bullet
La célula entonces se separa de sus vecinas.
El núcleo también sufre un patrón característico de cambios morfológicos cuando comete el suicidio genético, la cromatina se condensa y se rompe específicamente en fragmentos de ADN.
La muerte celular neuronal desempeña un papel importante para asegurar que el sistema nervioso se desarrolle con normalidad. Parece que la muerte de neuronas en desarrollo depende del tamaño de la diana que inervan: es más probable que las células con menos compañeros sinápticos mueran que las que han formado múltiples sinapsis. Esto puede reflejar un proceso que equilibra el número relativo de neuronas pre- a postsinápticas en el sistema nervioso en desarrollo.
Aunque se ha supuesto que la muerte celular neuronal era apoptótica, sólo en fechas recientes se ha demostrado de manera concluyente que las neuronas en el cerebro de roedores en desarrollo sufren apoptosis, clasificada así por la morfología y la fragmentación del ADN. Puesto que la muerte celular durante el desarrollo evidentemente no es un proceso patológico, tiene sentido decir que las células realmente dejan de existir.
La muerte neuronal se produce a través de procesos apoptóticos o necróticos tras lesiones nerviosas traumáticas o durante enfermedades neurodegenerativas. Están surgiendo múltiples componentes como actores clave que desempeñan un papel para dirigir la muerte celular neuronal programada. Entre los componentes que conducen a la apoptosis neuronal se encuentran los miembros de la SAPK/JNK, que son una subfamilia de las MAP quinasas (MAPK).
Las células de mamífero responden a ciertos estímulos extracelulares activando cascadas de señalización que están mediadas por diversas proteína quinasas activadas por mitógenos (MAPK). A pesar de las diferencias en su respuesta a estímulos corriente arriba, las cascadas de MAP quinasas se organizan de una manera similar, que consiste en MAP quinasa quinasa quinasas (MAPKKK o MEKK), MAP quinasa quinasas (MAPKK o MKK) y MAP quinasas (MAPK). Las MAP quinasas son una amplia familia de quinasas que incluyen las c-Jun N-terminal quinasas (JNK), también denominadas "proteína quinasas activadas por estrés" (SAPK), así como quinasas reguladas por señales extracelulares (ERK) y p38 MAP quinasas. Cada una de estas tres subfamilias de MAP quinasas está implicada en al menos tres vías diferentes pero paralelas que transmiten la información activada por los estímulos externos. La vía de señalización de JNK es activada por la exposición de las células a estrés ambiental (como toxinas químicas, radiación, hipoxia y choque osmótico), así como por el tratamiento de las células con factores del crecimiento o citoquinas proinflamatorias (como el factor-alfa de necrosis tumoral (TNF-\alpha) o la interleuquina-1-beta (IL-1\beta).
Dos MAP quinasa quinasas (denominadas MKK o MAPKK), esto es MKK4 (denominada también JNKK1) y MKK7 (denominada también JNKK2), activan la JNK mediante una fosforilación dual de restos treonina y tirosina específicos localizados dentro de un motivo Thr-Pro-Tyr en el bucle de activación de la enzima, en respuesta a citoquinas y señales de estrés. Aún más corriente arriba en la cascada de señalización, se sabe que la MKK4 se activa a sí misma también mediante una MAP quinasa quinasa quinasa, MEKK1, a través de una fosforilación en los restos serina y treonina.
Cuando está activada, la JNK se une a la región N-terminal de dianas de factores de transcripción y fosforila los dominios de activación transcripcional, dando como resultado la sobrerregulación de la expresión de diversos productos génicos, que pueden conducir a la apoptosis, a respuestas inflamatorias o a procesos oncogénicos (1-5).
Las MAPKs (proteína quinasas activadas por mitógenos) son serina/treonina quinasas que son activadas por una fosforilación dual de los restos treonina y tirosina. En células de mamífero, existen al menos tres vías separadas pero paralelas que transmiten información generada por estímulos extracelulares a las MAPK. Dichas vías consisten en cascadas de quinasas que conducen a la activación de las ERK (quinasas reguladas de modo extracelular), las JNK (c-Jun N-terminal quinasas) y las p38/CSBP quinasas. Mientras que ambas vías JNK y p38 están implicadas en la transmisión de señales extramoleculares de tipo estrés, la vía de ERK es principalmente responsable de transducir señales mitogénicas/de diferenciación al núcleo celular.
Las cascadas de SAPK representan una subfamilia de la familia de proteína quinasas activadas por mitógenos, que son activadas por diferentes estímulos externos, incluyendo los daños en el ADN tras irradiación con UV, TNF-\alpha, IL-1\beta, ceramidas, estrés celular y especies de oxígeno reactivo, y tienen especificidades de sustrato diferenciadas. La transducción de señales mediante MKK4/JNK de MKK3/p39 produce la fosforilación de unos factores de transcripción inducibles, c-Jun y ATF2, que entonces actúan como homodímeros o heterodímeros para iniciar la transcripción de efectores corriente abajo.
La c-Jun es una proteína que forma homodímeros y heterodímeros (por ejemplo con c-Fos) para producir el complejo de transactivación AP, que es necesario para la activación de muchos genes (por ejemplo metaloproteinasas de matriz) implicados en la respuesta inflamatoria. Las JNK fueron descubiertas cuando se determinó que varios estímulos diferentes, como la luz UV y el TNF-\alpha, estimulaban la fosforilación de c-Jun en restos serina específicos en el N-terminal de la proteína.
Se han identificado tres enzimas JNK diferenciadas como productos de los genes JNK1, JNK2 y JNK3, y se han identificado diez isoformas diferentes de JNK (3, 6, 7). JNK1 y 2 se expresan de manera ubicua en tejidos humanos, mientras que JNK3 se expresa de manera selectiva en el cerebro, el corazón y los testículos (7, 8, 9, 10). Cada isoforma se une a los sustratos con diferentes afinidades lo cual sugiere, in vivo, una regulación específica del sustrato de las vías de señalización por las diferentes isoformas de JNK.
En una publicación reciente de Xie X. et al. (Structure, 1998, 6(8):983-991) se ha sugerido que es necesaria la activación de vías de transducción de señales activadas por estrés para la apoptosis neuronal inducida por la retirada de NGF en células neuronales simpáticas de ganglios cervicales superiores (SCG) y PC-12 de rata. La inhibición de quinasas específicas, a saber MAP quinasa quinasa 3 (MKK3) y MAP quinasa quinasa 4 (MKK4), c-Jun (parte de la cascada de MKK-4) puede ser suficiente para bloquear la apoptosis (véase también Kumagae Y. et al., en Brain Res. Mol. Brain Res., 1999, 67(1):10-17, y Yang D.D. et al., en Nature, 1997, 389(6653):865-870). A las pocas horas de suprimir el NGF en las neuronas SCG, el c-Jun es altamente fosforilado y aumentan los niveles de proteínas. De forma similar, en células PC-12 de ratas a las que se les retira el NGF, JNK y p38 sufren una activación sostenida mientras que se inhiben las ERK. En coherencia con esto, ratones JNK3 KO son resistentes a la apoptosis inducida por excitotoxicidad en el hipocampo y, de forma más importante, muestran una gran reducción en ataques de tipo epiléptico en respuesta a la excitotoxicidad, comparado con animales normales (Nature, 1997, 389, 865-870). En fechas más recientes, se ha indicado que la vía de señalización de JNK está implicada en la proliferación celular y puede desempeñar un papel importante en las enfermedades autoinmunológicas (Immunity, 1998, 9, 575-585; Current Biology, 1999, 3, 116-125) que estén mediadas por la activación y la proliferación de células T.
La células T auxiliares (Th) CD4^{+} indeferenciadas (precursores) reconocen complejos específicos de MHC-péptido sobre células de presentación de antígenos (APC) mediante el complejo del receptor de células T (TCR). Además de la señal mediada por TCT se proporciona una señal coestimuladora al menos parcialmente mediante el acoplamiento de CD28 expresado sobre células T con proteínas B7 sobre APC. La combinación de estas dos señales induce la expresión clonal de células T.
Después de 4-5 días de proliferación, los precursores de células T CD4^{+} se diferencian en células Th efectoras armadas que median en las funciones del sistema inmunológico. Durante el proceso de diferenciación se produce una reprogramación sustancial de la expresión génica.
Se han definido dos subgrupos de células Th efectoras basándose en su patrón de secreción de citoquinas diferenciado y sus efectos inmunomoduladores: las células Th1 que producen IFN\gamma y LT (TNF-\beta), que son necesarias para las reacciones inflamatorias mediadas por células; y las células Th2, que segregan IL-4, IL-5, IL-6, IL-10 e IL-13, que median en la activación y la diferenciación de células B. Estas células desempeñan un papel central en la respuesta inmunológica. La vía de JNK MAP quinasas es inducida en células efectoras Th1, pero no en Th2, tras la estimulación con antígenos. Además, la diferenciación de células T CD4^{+} precursoras en células efectoras Th1, pero no en Th2, es deficiente en ratones deficientes en JNK2. Por tanto, en estos últimos años se ha comprendido que la vía de JNK quinasas desempeña un papel importante en el equilibrio de la respuesta inmunológica de Th1 y Th2 a través de JNK2.
Algunos factores de transcripción que se sabe que son sustratos de JNK son las proteínas Jun (c-jun, JunB y Jun D), los factores de transcripción relacionados ATF2 y ATFa, los factores de transcripción Ets, como Elk-1 y Sap-1, el supresor tumoral p53 y la proteína de dominio de la muerte celular (DENN).
La activación de la vía de JNK se ha documentado en una serie de procesos de enfermedad, proporcionando con ello una base para fijar como objetivo esta vía para el descubrimiento de fármacos. Además, estrategias de genética molecular han validado el papel patogénico de esta vía en varias enfermedades.
Por ejemplo, las enfermedades autoinmunológicas e inflamatorias se derivan de la activación inapropiada del sistema inmunológico. Las células inmunológicas activadas expresan muchos genes que codifican moléculas inflamatorias, incluyendo citoquinas, factores del crecimiento, receptores de la superficie celular, moléculas de adhesión celular y enzimas degradativas. Se sabe que muchos de estos genes están regulados por la vía de JNK, a través de la activación de los factores de transcripción c-Jun y ATF-2.
La inhibición de la activación de JNK en macrófagos estimulados con lipopolisacáridos bacterianos modula de forma eficaz la producción de la citoquina proinflamatoria clave TNF\alpha (11).
La inhibición de la activación de JNK disminuye la activación del factor de transcripción responsable de la expresión inducible de metaloproteinasas de matriz (MMP) (12), que se sabe que son responsables de la estimulación de la erosión del cartílago y del hueso en la artritis reumatoide y de la destrucción generalizada de tejido en otras enfermedades autoinmunológicas.
La cascada de JNK también es activada en células T por la estimulación de antígenos y la coestimulación del receptor CD28 (13) y regula la producción del promotor de IL-2 (14). La activación inapropiada de linfocitos T inicia y perpetúa muchas enfermedades autoinmunológicas, incluyendo el asma, el síndrome del intestino inflamatorio y la esclerosis múltiple.
En neuronas vulnerables a los daños por la enfermedad de Alzheimer y en neuronas CA1 de pacientes con hipoxia aguda (15), la proteína JNK3 se expresa en gran medida. También se ha descubierto que el gen JNK3 se expresa en las regiones dañadas de los cerebros de pacientes con Alzheimer (16). Además, se ha descubierto que las neuronas de ratones JNK3 KO se hacen resistentes a la apoptosis neuronal inducida por ácido kaínico, comparadas con neuronas de ratones de tipo salvaje (8).
Basándose en estos descubrimientos, se cree que la vía de señalización de JNK y, en especial, la de JNK2 y JNK3, está implicada en enfermedades neurodegenerativas dirigidas por la apoptosis, como la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Parkinson, la epilepsia y los ataques, la enfermedad de Huntington, las lesiones cerebrales traumáticas, así como los ictus isquémicos y hemorrágicos.
Las enfermedades cardiovasculares, como la aterosclerosis y la reestenosis, son el resultado de una regulación defectuosa del crecimiento de las paredes de los vasos sanguíneos. La vía de JNK es activada por estímulos aterogénicos y regula la producción local de citoquinas y de factores del crecimiento en células vasculares (17, 18) induciendo el gen proaterosclerótico (19).
La isquemia por sí sola o unida a la reperfusión en el corazón, el hígado, el riñón o el cerebro produce la muerte celular y la formación de escaras que, en último término, pueden conducir a una insuficiencia cardíaca congestiva, trastornos hepáticos, insuficiencia renal o disfunción cerebral. La vía de JNK es activada por la isquemia y reperfusión en el corazón (20), conduciendo a la activación de los genes que responden a JNK y a daños en tejidos mediados por leucocitos. También se observa la activación de JNK en el riñón (21) o el hígado (22) tras una isquemia y reperfusión. Se ha demostrado que la infrarregulación de JNK mejora la función renal y el resultado a largo plazo durante la insuficiencia nefrítica y renal isquémica (23).
El cáncer se caracteriza por un crecimiento incontrolado, la proliferación y la migración de células. En el cáncer de pulmón temprano, la expresión de c-jun está alterada y puede mediar en la señalización de factores del crecimiento en el cáncer de pulmón no microcítico (24). Además de regular la producción y la actividad de c-jun, la activación de JNK puede regular la fosforilación de p53 y, por tanto, puede modular el avance del ciclo celular (25). Además, el papel de la activación de JNK en la tumorigénesis mediada por HTLV-1 (virus de la leucemia de células T humanas de tipo 1) (26) sugiere que el uso potencial de inhibidores de JNK en el tratamiento del cáncer (27). La inhibición selectiva de la activación de JNK por una proteína inhibidora de JNK natural, denominada proteína-1 de interacción con JNK (JIP1), bloquea la transformación celular (28). Por tanto, los inhibidores de JNK pueden bloquear la transformación y el crecimiento de células tumorales.
Con el objetivo de inhibir la vía de JNK quinasas, el documento WO/9849188 indica el uso de un polipéptido humano, esto es la proteína-1 de interacción con JNK (JIP-1), que es un producto biológico y que también se ha ensayado para solucionar los trastornos relacionados con la apoptosis.
Aunque se ha confirmado que estos polipéptidos humanos tienen un efecto inhibidor de la vía de JNK quinasas, una amplia variedad de inconvenientes está asociada a su uso:
- Los biopéptidos o bioproteínas activos sólo pueden obtenerse mediante biosíntesis bastantes exhaustivas y caras que, por consiguiente, a menudo hacen que los productos resultantes sean bastante caros.
- Se sabe que los péptidos presentan una mala permeación de membranas y pueden no atravesar la membrana hematoencefálica.
- La principal desventaja de utilizar inhibidores o antagonistas peptídicos es el problema de la baja biodisponibilidad oral como resultado de la degradación intestinal. Por tanto, deben administrarse por vía parenteral.
- Y por último, el cuerpo hospedante a menudo considera que los inhibidores o antagonistas peptídicos son un material intruso que debe eliminarse, poniendo en marcha con ello una respuesta autoinmunológica.
La gran importancia de la vía de JNK en algunas enfermedades de amplia distribución enfatiza la necesidad de desarrollar inhibidores, preferiblemente selectivos, de JNK.
Por tanto, un objetivo de la presente invención es proporcionar moléculas que sean adecuadas para el tratamiento de una diversidad de enfermedades, en particular de trastornos relacionados con el sistema neuronal o autoinmunológico, cáncer, trastornos isquémicos y enfermedades cardiovasculares.
Un objetivo particular de la presente invención es proporcionar compuestos químicos que sean capaces de modular, preferiblemente infrarregular o inhibir la vía de JNK (Jun quinasa), para que sean útiles en un método para tratar enfermedades que implican la vía de JNK.
Además, un objetivo de la presente invención es proporcionar métodos para preparar dichos compuestos químicos. Otro objetivo de la presente invención es proporcionar una nueva categoría de formulaciones farmacéuticas para el tratamiento de enfermedades, en particular las mediadas por la función JNK.
Por último, un objetivo de la presente invención es proporcionar un método para el tratamiento y/o la prevención de enfermedades que están provocadas por trastornos del sistema autoinmunológico y/o neuronal.
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Descripción de la invención
Los objetivos mencionados anteriormente se han cumplido según las reivindicaciones independientes. Las realizaciones preferidas se indican dentro de las reivindicaciones dependientes que se incorporan en la presente.
La reivindicación 1 se refiere a derivados de benzsulfonamida según la fórmula I
1
con sus isómeros geométricos, en una forma ópticamente activa como enantiómeros, diastereómeros, así como en forma de racematos, así como sus sales farmacéuticamente aceptables, en la que
Ar^{1} se selecciona del grupo que consiste en fenilo, tienilo, furilo, piridilo, que pueden estar opcionalmente sustituidos con 1 a 5 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en "alquilo C_{1}-C_{6}", "(alquilo C_{1}-C_{6})arilo", "(alquilo C_{1}-C_{6})heteroarilo", "alquenilo C_{2}-C_{6}", "alquinilo C_{2}-C_{6}", grupos amino primarios, secundarios o terciarios, o restos amonio cuaternario, "acilo", "aciloxi", "acilamino", "aminocarbonilo", "alcoxicarbonilo", "arilo", "heteroarilo", carboxilo, ciano, halógeno, hidroxi, mercapto, nitro, sulfoxi, sulfonilo, alcoxi, tioalcoxi y trihalometilo,
R^{1} es hidrógeno o un grupo alquilo C_{1}-C_{6};
R^{2} es hidrógeno, -COOR^{3}, -CONR^{3}R^{3'}, OH, un alquilo C_{1}-C_{4} sustituido con un grupo OH, un grupo hidrazido carbonilo, un sulfato, un sulfonato, una amina o una sal de amonio;
n es 0 ó 1;
Y es cualquiera de las aminas cíclicas que tienen las fórmulas generales
2
200
en las que L^{1} y L^{2} se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, cicloalquilo C_{4}-C_{8}, que contienen opcionalmente 1-3 heteroátomos y que están opcionalmente condensados con arilo o heteroarilo; o L^{1} y L^{2} se seleccionan independientemente del grupo que consiste en arilo, heteroarilo, aril(alquilo C_{1}-C_{6}), heteroaril(alquilo C_{1}-C_{6}), -C(O)-OR^{3}, -C(O)-R^{3}, -C(O)-NR^{3'}R^{3}, -NR^{3'}R^{3}, -NR^{3'}C(O)R^{3}, -NR^{3'}C(O)NR^{3'}R^{3}, -(SO)R^{3}, -(SO_{2})R^{3}, -NSO_{2}R^{3}, -SO_{2}NR^{3'}R^{3},
siendo R^{3} R^{3'} sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, arilo, heteroarilo, aril(alquiilo C_{1}-C_{6}), heteroaril(alquilo C_{1}-C_{6});
o L^{1} y L^{2} tomados conjuntamente forman un grupo alquilo o heteroalquilo cíclico saturado de 4-8 miembros;
en la que arilo se selecciona del grupo que consiste en fenilo, naftilo y fenantrilo,
en la que heteroarilo se selecciona del grupo que consiste en piridilo, pirrolilo, furilo, tienilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, pirazolilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, 1,3,4-triazinilo, 1,2,3-triazinilo, benzofurilo, [2,3-dihidro]benzofurilo, isobenzofurilo, benzotienilo, benzotriazolilo, isobenzotienilo, indolilo, isoindolilo, 3H-indolilo, benzimidazolilo, imidazo[1,2-a]piridilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, quinolizinilo, quinazolinilo, ftalazinilo, quinoxalinilo, cinnolinilo, naftiridinilo, pirido[3,4-b]piridilo, pirido[3,2-b]piridilo, pirido[4,3-b]piridilo, quinolilo, isoquinolilo, tetrazolilo, 5,6,7,8-tetrahidroquinolilo, 5,6,7,8-tetra-hidroisoquinolilo, purinilo, pteridinilo, carbazolilo, xantenilo o benzoquinolilo, y
R^{6} se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, OH, halógeno, nitro, ciano, sulfonilo, oxo (=O), y
n' es un número entero de 0 a 4.
\vskip1.000000\baselineskip
La reivindicación independiente 7 se refiere al anterior derivado para su uso como medicamento.
La reivindicación independiente 8 se refiere al uso del anterior derivado de sulfonamida para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno neuronal seleccionado de epilepsia, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, enfermedades retinianas, lesiones de la médula espinal, esclerosis múltiple, traumatismo craneal e isquemia, una enfermedad autoinmunológica seleccionada de enfermedad del intestino inflamatoria (IBD), artritis reumatoide, asma, choque séptico, rechazo de transplantes, un cáncer seleccionado de cáncer de mama, colorrectal, pancreático, ovárico, de próstata, testicular, hepático, de riñón, de pulmón, una enfermedad cardiovascular que incluye ictus, arteriosclerosis, infarto de miocardio, lesiones por reperfusión miocárdicas, y un trastorno isquémico que incluye lesiones por reperfusión de corazón, renales, de riñón y de cerebro, insuficiencia renal.
\vskip1.000000\baselineskip
La reivindicación independiente 13 se refiere a un proceso para la preparación de un derivado de benzsulfonamida según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que una sulfonamida (XIX)
3
en la que Ar^{1}, R^{1}, R^{2} y n son como se definió anteriormente, e Y es una pirrolidin-3-ona o una piperidin-4-ona, se somete a una aminación reductora utilizando una amina H_{2}N-R^{3}, siendo R^{3} como se definió anteriormente.
\newpage
La reivindicación independiente 17 se refiere a compuestos de sulfonamida (XIX)
4
en la que
Ar^{1} se selecciona del grupo que consiste en fenilo, tienilo, furilo, piridilo;
R^{1} es hidrógeno o un grupo alquilo C_{1}-C_{6};
R^{2} es hidrógeno, -COOR^{3}, -CONR^{3}R^{3'}, OH, un alquilo C_{1}-C_{4} sustituido con un grupo OH, un grupo hidrazido carbonilo, un sulfato, un sulfonato, una amina o una sal de amonio;
n es 0 ó 1; e
Y es una pirrolidin-3-ona o una piperidin-4-ona.
Los siguientes párrafos proporcionan definiciones de los diversos restos químicos que forman los compuestos según la invención y pretenden aplicarse de manera uniforme a lo largo de la memoria descriptiva y las reivindicaciones a menos que otra definición dada expresamente proporcione una definición más amplia.
"Alquilo C_{1}-C_{6}" se refiere a grupos alquilo monovalentes que tienen de 1 a 6 átomos de carbono. Esta expresión se ejemplifica con grupos como metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, terc-butilo, n-hexilo.
"Arilo" se refiere a un grupo carbocíclico aromático insaturado de 6 a 14 átomos de carbono que tienen un único anillo (por ejemplo fenilo) o múltiples anillos condensados (por ejemplo naftilo). Los arilos preferidos incluyen fenilo, naftilo, fenantrilo.
"(Alquil C_{1}-C_{6})arilo" se refiere a grupos alquilo C_{1}-C_{6} que tienen un sustituyente arilo, bencilo, fenetilo.
"Heteroarilo" se refiere a un grupo heteroaromático monocíclico, o un grupo heteroaromático de anillos condensados bicíclico o tricíclico. Los ejemplos concretos de grupos heteroaromáticos incluyen piridilo, pirrolilo, furilo, tienilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, pirazolilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, 1,3,4-triazinilo, 1,2,3-triazinilo, benzofurilo, [2,3-dihidro]benzofurilo, isobenzofurilo, benzotienilo, benzotriazolilo, isobenzotienilo, indolilo, isoindolilo, 3H-indolilo, benzimidazolilo, imidazo[1,2-a]piridilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, quinolizinilo, quinazolinilo, ftalazinilo, quinoxalinilo, cinnolinilo, naftiridinilo, pirido[3,4-b]piridilo, pirido[3,2-b]piridilo, pirido[4,3-b]piridilo, quinolilo, isoquinolilo, tetrazolilo, 5,6,7,8-tetrahidroquinolilo, 5,6,7,8-tetrahidroisoquinolilo, purinilo, pteridinilo, carbazolilo, xantenilo o benzoquinolilo opcionalmente sustituidos. "(Alquil C_{1}-C_{6})heteroarilo" se refiere a grupos alquilo C_{1}-C_{6} que tienen un sustituyente heteroarilo, 2-furilmetilo, 2-tienilmetilo, 2-(1H-indol-3-il)etilo.
"Alquenilo" se refiere a grupos alquenilo que tienen preferiblemente de 2 a 6 átomos de carbono y que tienen al menos 1 ó 2 sitios de insaturación de alquenilo. Los grupos alquenilo preferidos incluyen etenilo (-CH=CH_{2}), n-2-propenilo (alilo, -CH_{2}CH=CH_{2}).
"Alquinilo" se refiere a grupos alquinilo que tienen preferiblemente de 2 a 6 átomos de carbono y que tienen al menos 1-2 sitios de insaturación de alquinilo. Los grupos alquinilo preferidos incluyen etinilo (-C\equivCH), propargilo (-CH_{2}C\equivCH).
"Acilo" se refiere al grupo -C(O)R, en el que R incluye "alquilo C_{1}-C_{6}", "arilo", "heteroarilo", "(alquil C_{1}-C_{6})arilo" o "(alquil C_{1}-C_{6})heteroarilo".
"Aciloxi" se refiere al grupo -OC(O)R, en el que R incluye "alquilo C_{1}-C_{6}", "arilo", "heteroarilo", "(alquil C_{1}-C_{6})arilo" o "(alquil C_{1}-C_{6})heteroarilo".
"Alcoxi" se refiere al grupo -O-R, en el que R incluye "alquilo C_{1}-C_{6}", "arilo", "heteroarilo", "(alquil C_{1}-C_{6})arilo" o "(alquil C_{1}-C_{6})heteroarilo". Los grupos alcoxi preferidos incluyen, por ejemplo, metoxi, etoxi, fenoxi.
"Alcoxicarbonilo" se refiere al grupo -C(O)OR, en el que R incluye "alquilo C_{1}-C_{6}", "arilo", "heteroarilo", "(alquil C_{1}-C_{6})arilo" o "(alquil C_{1}-C_{6})heteroarilo".
"Aminocarbonilo" se refiere al grupo -C(O)NRR', en el que cada R, R' incluye independientemente hidrógeno o "alquilo C_{1}-C_{6}", "arilo", "heteroarilo", "(alquil C_{1}-C_{6})arilo" o "(alquil C_{1}-C_{6})heteroarilo".
"Acilamino" se refiere al grupo -NR(CO)R', en el que cada R, R' es independientemente hidrógeno o "alquilo C_{1}-C_{6}", "arilo", "heteroarilo", "(alquil C_{1}-C_{6})arilo" o "(alquil C_{1}-C_{6})heteroarilo".
"Halógeno" se refiere a átomos de flúor, cloro, bromo y yodo.
"Sulfonilo" se refiere al grupo "-SO_{2}-R", en el que R se selecciona de H, "arilo", "heteroarilo", "alquilo C_{1}-C_{6}", "alquilo C_{1}-C_{6}" sustituido con halógenos, por ejemplo un grupo -SO_{2}-CF_{3}, "(alquil C_{1}-C_{6})arilo" o "(alquil C_{1}-C_{6})heteroarilo".
"Sulfoxi" se refiere al grupo "-S(O)-R", en el que R se selecciona de H, "alquilo C_{1}-C_{6}", "alquilo C_{1}-C_{6}" sustituido con halógenos, por ejemplo un grupo -SO-CF_{3}, "arilo", "heteroarilo", "(alquil C_{1}-C_{6})arilo" o "(alquil C_{1}-C_{6})heteroarilo".
"Tioalcoxi" se refiere al grupo -S-R, en el que R incluye "alquilo C_{1}-C_{6}", "arilo", "heteroarilo", "(alquil C_{1}-C_{6})arilo" o "(alquil C_{1}-C_{6})heteroarilo". Los grupos tioalcoxi preferidos incluyen tiometoxi, tioetoxi.
"Sustituido o no sustituido": A menos que esté constreñido de alguna manera por la definición del sustituyente individual, los anteriores grupos mencionados, como "alquilo", "alquenilo", "alquinilo", "arilo" y "heteroarilo" etc., los grupos pueden estar opcionalmente sustituidos con 1 a 5 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en "alquilo C_{1}-C_{6}", "(alquil C_{1}-C_{6})arilo", "(alquil C_{1}-C_{6})heteroarilo", "alquenilo C_{2}-C_{6}", "alquinilo C_{2}-C_{6}", grupos amino primarios, secundarios o terciarios, o restos amonio cuaternario, "acilo", "aciloxi", "acilamino", "aminocarbonilo", "alcoxicarbonilo", "arilo", "heteroarilo", carboxilo, ciano, halógeno, hidroxi, mercapto, nitro, sulfoxi, sulfonilo, alcoxi, tioalcoxi y trihalometilo. Como alternativa, dicha sustitución también puede comprender situaciones en que los sustituyentes vecinos han sufrido el cierre del anillo, en particular cuando sustituyentes funcionales vecinos están implicados, formando con ello, por ejemplo, lactamas, lactonas, anhídridos cíclicos, pero también acetales, tioacetales, animales formados mediante el cierre del anillo, por ejemplo para intentar obtener un grupo
protector.
Las "sales o complejos farmacéuticamente aceptables" se refieren a sales o complejos de los compuestos de fórmula I identificados a continuación que conservan la actividad biológica deseada. Los ejemplos de dichas sales incluyen, pero no se limitan a sales de adición de ácidos formadas con ácidos inorgánicos (por ejemplo, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico), y sales formadas con ácidos orgánicos, ácido acético, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido succínico, ácido málico, ácido fumárico, ácido maleico, ácido ascórbico, ácido benzoico, ácido tánnico, ácido pamoico, ácido algínico, ácido poliglutámico, ácido naftalensulfónico, ácido naftalendisulfónico y ácido poligalacturónico. Dichos compuestos también pueden administrarse como sales cuaternarias farmacéuticamente aceptables de fórmula -NR,R',R''^{+}Z^{-}, en la que R, R', R'' son independientemente hidrógeno, alquilo o bencilo, y Z es un contraión, cloruro, bromuro, yoduro, -O-alquilo, toluensulfonato, metilsulfonato, sulfonato, fosfato o carboxilato (como benzoato, succinato, acetato, glicolato, maleato, malato, fumarato, citrato, tartrato, ascorbato, cinnamoato, mandeloato y difenilacetato).
Un "derivado farmacéuticamente aceptable" se refiere a cualquier compuesto que, tras su administración al receptor, es capaz de proporcionar directa o indirectamente la actividad descrita en la presente.
Un "resto ionizable" se refiere a grupos funcionales, en los que su característica distribución de electrones confiere a dicho resto su capacidad para transformarse en un grupo iónico o ionizado o, en otras palabras, en una sal. Los restos ionizables preferidos son grupos básicos, como aminas, que están protonados produciendo, con ello, una sal.
Una "cadena lipófila" se refiere a grupos que tienen una pronunciada atracción por grupos, sustituyentes o compuestos hidrófobos, en particular a lípidos o compuestos o resto grasos. En particular incluyen los grupos alquilo C_{4}-C_{18} opcionalmente sustituidos.
Un "grupo hidrófilo" se refiere a grupos funcionales que tienen una pronunciada atracción por grupos, sustituyentes o compuestos hidrófilos o polares, o compuestos o restos grasos. En particular incluyen hidróxidos, sulfatos o sulfonatos o aminas o sales de amonio.
"Enriquecimiento enantiómero" (ee) se refiere a los productos que se obtienen mediante una síntesis esencialmente enantiomérica o una síntesis que comprenda una etapa enantioselectiva, en la que se produce un exceso de un enantiómero de al menos aproximadamente 52% ee. En ausencia de una síntesis enantiomérica normalmente se obtienen productos racémicos que, sin embargo, también tienen la actividad indicada de la invención como inhibidores de JunK.
Un aspecto de la presente invención son los nuevos derivados de benzsulfonamida según la fórmula I. Estos compuestos son agentes farmacéuticamente activos adecuados, porque modulan con eficacia, en particular infrarregulan o inhiben, la acción de los JNK, en particular de JNK 2 y/o 3.
5
Los compuestos de fórmula I según la presente invención adecuados como agentes farmacéuticos son aquellos en que:
Ar^{1} es un grupo arilo o heteroarilo sustituido o no sustituido.
X es O o S, preferiblemente O.
R^{1} es hidrógeno o un grupo alquilo C_{1}-C_{6}, preferiblemente H.
R^{2} es hidrógeno, -COOR^{3}, -CONR^{3}R^{3'}, OH, un alquilo C_{1}-C_{4} sustituido con un grupo OH, un grupo hidrazido carbonilo, un sulfato, un sulfonato, una amina o una sal de amonio.
n es 0 ó 1, preferiblemente 1.
Y es un resto piperidina o piperazina según las siguientes fórmulas
6
En dichos grupos piperidina o piperazina, L^{1} y L^{2} se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, cicloalquilo C_{4}-C_{8} que contienen opcionalmente 1-3 heteroátomos y que están opcionalmente condensados con arilo o heteroarilo; o L^{1} y L^{2} se seleccionan independientemente del grupo que consiste en arilo, heteroarilo, aril(alquilo C_{1}-C_{6}), heteroaril(alquilo C_{1}-C_{6}), -C(O)-OR^{3}, -C(O)-R^{3}, -C(O)-NR^{3'}R^{3}, -NR^{3'}R^{3}, -NR^{3'}C(O)R^{3}, -NR^{3'}C(O)NR^{3'}R^{3}, -(SO)R^{3}, -(SO_{2})R^{3}, -NSO_{2}R^{3}, -SO_{2}NR^{3'}R^{3}, con la condición de que cuando Y es piperidilo, L^{1} y L^{2} no deben ser ambos H.
R^{3}, R^{3'} se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, arilo, heteroarilo, aril(alquilo C_{1}-C_{6}), heteroaril(alquilo C_{1}-C_{6}).
Como alternativa, L^{1} y L^{2} tomados conjuntamente forman un grupo alquilo o heteroalquilo cíclico saturado de 4-8 miembros.
R^{6} se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}, OH, halógeno, nitro, ciano, sulfonilo, oxo (=O). n' es un número entero de 0 a 4, preferiblemente 0.
Y también puede ser un resto pirrolidina, azepán o 1,4-diazepán con las siguientes fórmulas:
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7 
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en las que L^{1}, R^{6} y n' son como se definió anteriormente.
Todos los grupos arilo o heteroarilo mencionados anteriormente pueden estar opcionalmente sustituidos con al menos uno de los grupos seleccionados de alquilo C_{1}-C_{6}, como trihalometilo, alcoxi C_{1}-C_{6}, aciloxi, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, amino, acilamino, aminocarbonilo, (alcoxi C_{1}-C_{6})carbonilo, arilo, carboxilo, ciano, halógeno, hidroxi, nitro, sulfonilo, sulfoxi, tioalcoxi C_{1}-C_{6}.
La presente invención también incluye los isómeros geométricos, las formas ópticas activas, los enantiómeros, los diastereoisómeros de compuestos según la fórmula I, así como sus racematos y también las sales farmacéuticamente aceptables, así como los derivados farmacéuticamente activos de los derivados de benzsulfonamida de fórmula I.
Los Ar^{1} preferidos en la fórmula I son aquellos que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en fenilo, tienilo, furilo, piridilo, opcionalmente sustituidos con alquilo C_{1}-C_{6}, como trihalometilo, alcoxi C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, amino, acilamino, aminocarbonilo, (alcoxi C_{1}-C_{6})carbonilo, arilo, carboxilo, ciano, halógeno, hidroxi, nitro, sulfonilo, sulfoxi, acetoxi, tioalcoxi C_{1}-C_{6}. Los Ar^{1} más preferidos son fenilo sustituido, incluyendo halofenilo, por ejemplo 4-clorofenilo, nitrofenilo, hidroxifenilo, alcoxifenilo, piridilo, 3,4-dihidroxifenilo, tioxodihidropiridina o su tautómero, pirazol.
Cuando Ar^{1} es un grupo 4-clorofenilo, nitrofenilo, hidroxifenilo, alcoxifenilo, piridilo, 3,4-dihidroxifenilo, tioxodihidropiridina o su tautómero, pirazol, X es preferiblemente O, R^{1} es hidrógeno, n es 1.
Una realización particularmente preferida de la presente invención se refiere a los derivados de sulfonamida, en los que Y es un resto piperidina sustituido o no sustituido,
8
en la que R^{6}, n', L^{1} y L^{2} son como se definió anteriormente.
R^{6} es H, L^{2} es H, L^{1} es un resto ionizable al cual está unida una cadena lipófila.
Este resto ionizable L^{1} al cual está unida una cadena lipófila es -NHR^{3}; en el que R^{3} es un alquilo C_{4}-C_{12} lineal o ramificado, preferiblemente alquilo C_{6}-C_{10}, opcionalmente sustituido con un grupo ciclohexilo, o R^{3} es un grupo bencilo.
Como alternativa, Y puede ser
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en la que L^{1} es como se definió anteriormente, pero preferiblemente es un resto ionizable al cual está unida una cadena lipófila. Este resto ionizable puede ser un grupo amino que esté sustituido con un alquilo C_{1}-C_{12} lipófilo, preferiblemente alquilo C_{4}-C_{6}, o un grupo arilo sustituido o no sustituido, preferiblemente el grupo arilo sustituido es un trifluorometilsulfonilfenilo.
Los restos ionizables indicados anteriormente dentro de L^{1} son realmente grupos hidrófilos, con lo que confieren una mejor solubilidad a las moléculas de fórmula I. La mejora de la solubilidad de las moléculas de fórmula I a través de un resto ionizable dentro de L^{1} es de particular interés, en particular para compuestos farmacéuticos. El resto ionizable más preferido es el resto amino secundario. Los compuestos de fórmula I particularmente potentes con respecto a la inhibición de Jun quinasas son aquellos en los que L^{1} también comprende un resto lipófilo. Lo más preferido es un grupo alquilo C_{4}-C_{6} unido a un resto ionizable, como un grupo amino. Se cree que estos grupos lipófilos entran en una cavidad de la enzima que se va a inhibir.
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Los ejemplos específicos de compuestos de fórmula I incluyen los siguientes:
4-cloro-N-(3-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}fenil)benzamida;
4-cloro-N-{4-[(4-{[4-(trifluorometil)bencil]amino}-1-piperidinil)sulfonil]-fenil}benzamida;
4-cloro-N-(4-{[4-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-piperidinil]sulfonil}fenil)-benzamida;
4-cloro-N-(4-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)benzamida;
4-cloro-N-(4-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}fenil)benzamida;
4-cloro-N-(3-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)benzamida;
4-cloro-N-{3-[(4-{[4-(trifluorometil)bencil]amino}-1-piperidinil)sulfonil]-bencil}benzamida;
4-cloro-N-(3-{[4-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)-benzamida;
4-cloro-N-(4-{[4-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)-benzamida;
4-cloro-N-(3-{[3-(hexilamino)-1-pirrolidinil]sulfonil}fenil)benzamida;
4-cloro-N-{4-[(4-{[4-(trifluorometil)bencil]amino}-1-piperidinil)sulfonil]-bencil}benzamida;
4-cloro-N-(3-{[3-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-pirrolidinil]sulfonil}fenil)-benzamida;
N-(4-{[4-(butilamino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)-2-oxo-1,2-dihidro-3-piridincarboxamida;
4-cloro-N-{4-[(3-{[4-(trifluorometil)bencil]amino}-1-pirrolidinil)sulfonil]-fenil}benzamida;
4-cloro-N-{4-[(3-{[2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)}-1-pirrolidinil)sulfonil]-fenil}benzamida;
4-cloro-N-{3-[(4-{[4-(trifluorometil)bencil]amino}-1-piperidinil)sulfonil]-fenil}benzamida;
4-cloro-N-{3-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]-fenil}benzamida;
4-cloro-N-(4-{[3-(hexilamino)-1-pirrolidinil]sulfonil}fenil)benzamida;
4-cloro-N-{4-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]-bencil}benzamida;
4-cloro-N-(4-{[3-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-pirrolidinil]sulfonil}fenil)-benzamida;
N-{3-[(4-anilino-1-piperidinil)sulfonil]fenil}-4-clorobenzamida;
4-cloro-N-(3-{[4-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-piperidinil]sulfonil}fenil)-benzamida;
4-cloro-N-(4-{[3-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-pirrolidinil]sulfonil}fenil)-benzamida;
4-cloro-N-{3-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]-bencil}benzamida;
4-cloro-N-{4-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]-fenil}benzamida;
4-cloro-N-{3-[(3-{4-[(trifluorometil)bencil]amino}-1-pirrolidinil)sulfonil]-bencil}benzamida;
4-cloro-N-(4-{[3-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-pirrolidinil]sulfonil}bencil)-benzamida;
N-(4-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)-2-hidroxinicotinamida;
N-(3-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)-2-hidroxinicotinamida;
2-hidroxi-N-{3-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]-bencil}nicotinamida;
2-hidroxi-N-{4-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]-bencil}nicotinamida.
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Los compuestos de fórmula I son adecuados para su uso para tratar trastornos del sistema inmunológico y del sistema neuronal en mamíferos, en particular en seres humanos. Estos trastornos del sistema neuronal incluyen, por ejemplo, enfermedades neurodegenerativas, por ejemplo enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, enfermedades retinianas, lesiones de la médula espinal, esclerosis múltiple, traumatismo craneal, epilepsia y ataques, ictus isquémicos y hemorrágicos. Los trastornos del sistema inmunológico incluyen, por ejemplo, asma, rechazo de transplantes, procesos inflamatorios, como enfermedad del intestino inflamatoria (IBD), trastornos de erosión de huesos y cartílagos, artritis reumatoide, choque séptico.
\newpage
Los compuestos según la fórmula I también son adecuados para su uso en el tratamiento de cánceres, como cáncer de mama, colorrectal, pancreático, de próstata, testicular, ovárico, de pulmón, hepático y de riñón.
En otra realización, los compuestos según la fórmula I pueden utilizarse para tratar enfermedades cardiovasculares, incluyendo aterosclerosis, reestenosis, ictus, isquemia, por ejemplo isquemia cerebral, infarto de miocardio.
En otra realización, los compuestos según la fórmula I pueden utilizarse para tratar diversos trastornos isquémicos, incluyendo insuficiencias cardíacas y renales, trastornos hepáticos y lesiones por reperfusión cerebrales.
Preferiblemente, los compuestos según la fórmula I, por sí solos o en forma de una composición farmacéutica, son útiles para la modulación de la vía de JNK, de manera más específica para el tratamiento o la prevención de trastornos asociados con la expresión o la actividad de JNK, en particular de JNK2 y 3. Normalmente dicha modulación preferiblemente implica la inhibición de las vías de JNK, en particular de JNK2 y/o 3. Esta expresión o actividad anómalas del JNK puede ser activada por numerosos estímulos (por ejemplo estrés, choque séptico, estrés oxidativo, citoquinas) y puede provocar una cascada de procesos que conducen, por ejemplo, a una apoptosis incontrolada, a respuestas inflamatorias o a procesos oncogénicos. Estos fenómenos están implicados con frecuencia en diversos trastornos, incluyendo los trastornos y estados de enfermedad enumerados anteriormente. Por tanto, los compuestos según la invención pueden utilizarse para el tratamiento de trastornos mediante la modulación de la función JNK o de las vías de señalización de JNK. La modulación de la función o de las vías de JNK puede implicar su activación, pero preferiblemente implica la infrarregulación hasta la inhibición de la vías de JNK, en particular JNK1 y/o 2 y/o JNK3. Los compuestos de la invención pueden emplearse por sí solos o en combinación con otros agentes farmacéuticos, por ejemplo con otro modulador de JNK.
Otro objeto de la presente invención es un proceso para preparar los nuevos derivados de sulfamida según la fórmula I que se han indicado anteriormente.
Los derivados de benzsulfonamida de esta invención pueden prepararse a partir de materiales de partida que pueden obtenerse con facilidad utilizando los siguientes métodos y procedimientos generales.
Se apreciará que cuando se indican condiciones experimentales típicas o preferidas (es decir, temperaturas de reacción, tiempo, moles de reactivos, disolventes, etc.), también pueden utilizarse otras condiciones experimentales, a menos que se indique lo contrario. Las condiciones de reacción óptimas pueden variar según los reactivos o el disolvente concretos utilizados, pero estas condiciones pueden ser determinadas por los expertos en la técnica mediante procedimientos de optimización habituales.
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Los compuestos de fórmula I pueden obtenerse, en general, mediante cualquiera de las estrategias indicadas en los esquemas 1 ó 2:
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Esquema 1
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Esquema 2
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Así, Ar^{1}, R^{1}, R^{2}, L y n son como se definió anteriormente, P es un grupo protector adecuado (R^{1} preferiblemente no es hidrógeno, preferiblemente un grupo protector adecuado).
Los cloruros de sulfonilo de fórmula (V), tal como se emplean en el esquema 1, pueden prepararse según el procedimiento indicado en el esquema 3:
Esquema 3
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Así, Ar^{1}, R^{1}, R^{2}, L y n son como se definió anteriormente.
Las aminas de fórmula II son compuestos conocidos o pueden prepararse a partir de compuestos conocidos mediante procedimientos convencionales. Las aminas preferidas como materiales de partida incluyen anilina y benzometilamina.
Los cloruros de acilo de fórmula III también están disponibles en el mercado o son compuestos previamente descritos. Los cloruros de acilo preferidos incluyen cloruros de halogenobenzoílo, por ejemplo cloruro de 4-clorobenzoílo, cloruro de 4-fluorobenzoílo o cloruro de trifluorometilbenzoílo, cloruro de alcoxibenzoílo, cloruro de piridilcarbonilo. Los haluros de acilo (III) también pueden prepararse haciendo reaccionar el correspondiente ácido carboxílico con un haluro de ácido inorgánico, cloruro de tionilo, tricloruro de fósforo o cloruro de oxalilo, bajo condiciones convencionales. En general, esta reacción se realiza utilizando de 1 a 5 equivalentes molares del haluro de acilo inorgánico o cloruro de oxalilo, en forma pura o en un disolvente inerte, tetracloruro de carbono, a una temperatura en el intervalo de aproximadamente 0ºC a aproximadamente 80ºC, durante aproximadamente 1 a aproximadamente 48 horas. Como catalizador en esta reacción también se puede utilizar N,N-dimetilformamida.
Cuando se emplea un haluro de acilo (III) en la reacción de acoplamiento indicada en el esquema 3, se hace reaccionar de forma típica con una amina (II) en presencia de una base adecuada para captar el ácido generado durante la reacción. Las bases adecuadas incluyen, como ejemplo, trietilamina, diisopropiletilamina, N-metilmorfolina. Como alternativa puede emplearse un exceso de la amina II para captar el ácido generado durante la reacción.
Como alternativa, el ácido carboxílico del compuesto (III) puede emplearse en la reacción de acoplamiento. Los ácidos carboxílicos y los derivados (III) normalmente son reactivos disponibles en el mercado o pueden prepararse mediante procedimientos convencionales.
La reacción de acoplamiento del ácido carboxílico de fórmula III (es decir, el cloruro de acilo) con la amina (II) se realiza, de forma típica, mientras se emplea cualquier reactivo de acoplamiento convencional incluyendo, por ejemplo, carbodiimidas, como diciclohexilcarbodiimida, N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilcarbodiimida y otros agentes estimulantes, como N,N-carbonildiimidazol o PyBOP. Esta reacción puede realizarse con o sin aditivos conocidos, como N-hidroxisuccinimida, 1-hidroxibenzotriazol, etc. que se sabe que facilitan el acoplamiento de ácidos carboxílicos y aminas.
La reacción de acoplamiento utilizando el haluro de acilo (III) o su ácido carboxílico se realiza preferiblemente a una temperatura de aproximadamente 0ºC a aproximadamente 6ºC, durante aproximadamente 1 a aproximadamente 24 horas. De forma típica, la reacción se realiza en un disolvente polar aprótico inerte, como N,N-dimetilformamida, diclorometano, cloroformo, acetonitrilo, tetrahidrofurano, utilizando de aproximadamente 1 a aproximadamente 5 equivalentes molares de la amina, basado en el ácido carboxílico o su haluro de ácido. Tras finalizar la reacción, la carboxamida (IV) se recupera mediante métodos convencionales, incluyendo la precipitación, la cromatografía, la filtración, la destilación.
Los cloruros de sulfonilo de fórmula V necesarios para la preparación de los productos finales de fórmula I, en particular los que son sulfonilpiperidinas, -pirrolidinas o -azepanes, se preparan utilizando métodos de sulfonación convencionales aplicados a las carboxamidas (IV).
Un agente sulfonante preferido para su uso en esta reacción (como se indica en el esquema 3) es el ácido clorosulfónico (HSO_{3}-Cl). De forma típica, la reacción de sulfonación se realiza tratando la carboxamida de fórmula (IV) con aproximadamente 5 a aproximadamente 10 equivalentes molares del reactivo de sulfonación en un disolvente inerte, como diclorometano, a una temperatura que varía de aproximadamente -70ºC a aproximadamente 50ºC. Preferiblemente, la adición del ácido clorosulfónico se realiza a -70ºC y conduce a la formación del ácido sulfónico intermedio. Si se aumenta la temperatura hasta 20ºC se permite la formación del cloruro de sulfonilo de fórmula V.
Los compuestos de fórmula I con X = S pueden obtenerse a partir las correspondientes arilamidas (con X = O), por ejemplo benzamidas, mediante métodos de interconversión de grupos funcionales convencionales conocidos por los expertos en la técnica, por ejemplo mediante un tratamiento con el reactivo de Lawesson u otros (Pedersen, B.S. et al., Bull. Soc. Chim. Belg., 1978, 87, 223).
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Una estrategia alternativa para la preparación de los compuestos de fórmula I se indica en el esquema 2 anterior, e implica las siguientes etapas:
- protección de la función amina de los compuestos de fórmula II;
- clorosulfonilación del grupo benzo produciendo con ello compuestos de fórmula VII;
- formación de la función sulfonamida (produciendo los compuestos IX);
- eliminación del grupo protector P (desprotección) dentro de los compuestos IX;
- acilación de la amina libre generada anteriormente para proporcionar los compuestos (I).
Así, el precursor del cloruro de sulfonilo (VII) puede prepararse mediante la siguientes etapas:
Esquema 4
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Las aminas de fórmula II se protegen con un grupo protector adecuado para un resto amina para proporcionar el intermedio de fórmula VI, en la que P indica el grupo protector. Numerosos grupos protectores P de la función amina, así como su introducción y eliminación se describen en T.W. Green y G.M. Wuts, Protecting groups in Organic Synthesis, 3ª edición, Wiley, Nueva York, 1998, y las referencias allí citadas. Se prefieren los grupos protectores que son ácidos y bases estables, y que puedan eliminarse después utilizando complejos de metal de transición, como complejos de paladio, por ejemplo el grupo alilcarbamato (Alloc) o el grupo N,N'-bisalilo. Otro grupo protector preferido es el grupo maleimida, que es estable en toda la gama de condiciones experimentales.
La introducción de dichos grupos puede realizarse haciendo reaccionar el correspondiente anhídrido de bisalilcarbonato o bromuro de alilo o anhídrido maleico en presencia de una base, trietilamina, diisopropiletilamina, N-metilmorfolina, en un disolvente aprótico, N,N-dimetilformamida, diclorometano, cloroformo, acetonitrilo, tetrahidrofurano, a una temperatura que varía de aproximadamente 0ºC a aproximadamente 80ºC.
Los compuestos de fórmula VI en el esquema 4 entonces se sulfonan utilizando un procedimiento de sulfonación convencional, muy suave, que permite la obtención de cloruro de sulfonilo de fórmula VII. De forma típica, las aminas protegidas VI se tratan con una base, n-butil-litio o terc-butil-litio, bajo una atmósfera inerte, en un disolvente aprótico polar, tetrahidrofurano, éter o dioxano, a una temperatura que varía de -70ºC a 0ºC durante un tiempo que varía de 15 minutos a 4 horas. El anión formado de esta manera entonces se trata con SO_{2}Cl_{2} o más preferiblemente SO_{2} burbujeando el gas hacia la mezcla de reacción a una temperatura que varía de -70ºC a 20ºC durante un tiempo que varía de 5 minutos a 1 hora. El sulfonato obtenido entonces se transforma in situ en el cloruro de sulfonilo de fórmula VII poniéndolo en contacto con N-clorosuccinimida a una temperatura que varía de 0ºC a 70ºC.
Siguiendo cualquiera de los esquemas 1 y 2, los derivados de sulfonamida de fórmula I pueden obtenerse haciendo reaccionar los cloruros de sulfonilo V o VII con una amina cíclica o bicíclica (VIII), es decir un alquilo que contiene un nitrógeno según la anterior definición. Las aminas cíclicas (VIII) preferidas incluyen derivados de pirrolidina o azepán o piperidina de fórmula general (VIII'') o (VIII') o (VIII''')
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140
en las que (R^{6})_{n}, L^{1} y L^{2} son como se definió anteriormente.
Las aminas de fórmula VIII''' o VIII'' o VIII' son compuestos disponibles en el mercado o son compuestos que pueden prepararse utilizando procedimientos conocidos.
La reacción de acoplamiento de los cloruros de sulfonilo (V) y (VII) con las aminas VIII para proporcionar sulfonamidas de fórmula I se realiza poniendo en contacto los cloruros de sulfonilo con una amina de fórmula VIII en presencia de una base adecuada para captar el ácido generado durante la reacción. Las bases adecuadas incluyen, como ejemplo, trietilamina, diisopropiletilamina, N-metilmorfolina. La reacción se realiza preferiblemente en un disolvente, como N,N-dimetilformamida, dimetilsulfóxido, N-metilpirrolidina, etanol, acetonitrilo, de forma típica a una temperatura de aproximadamente 0º a aproximadamente 100ºC.
Según una realización preferida, los derivados de sulfonamida de fórmula I se preparan haciendo reaccionar un cloruro de sulfonilo V o VII con una piperidina de fórmula VIII'''.
Las piperidinas de fórmula VIII''' están disponibles en el mercado o pueden prepararse mediante procedimientos conocidos. Estos métodos convencionales conocidos por los expertos en la técnica se describen, por ejemplo, en J. Pharm. Sci., 1972, 61, 1316; J. Heterocyclic Chem., 1986, 23, 73; Tetrahedron Lett., 1996, 37, 1297, documento US 5106983, documentos WO/9113872 y documento WO/9606609.
Las piperidinosulfonamidas de fórmula I pueden prepararse poniendo en contacto los cloruros de sulfonilo (V) y/o (VII) con una piperidina de fórmula VIII''' en presencia de una base adecuada para captar el ácido generado durante la reacción. Las bases adecuadas incluyen, por ejemplo, trietilamina, diisopropiletilamina, N-metilmorfolina. La reacción se realiza preferiblemente en disolventes, N,N-dimetilformamida, dimetilsulfóxido, N-metilpirrolidina, etanol, acetonitrilo, a una temperatura de aproximadamente 0º a aproximadamente 100ºC.
Las sulfonamidas específicas de fórmula XIV (en la que R^{1} es hidrógeno) se preparan con facilidad a partir de los cloruros de sulfonilo protegidos VII poniendo en contacto dichos cloruros de sulfonilo VII con una amina de fórmula VIII en presencia de una base adecuada para captar el ácido generado durante la reacción. Las bases adecuadas incluyen, por ejemplo, trietilamina, diisopropiletilamina, N-metilmorfolina. La reacción se realiza preferiblemente en disolventes, N,N-dimetilformamida, dimetilsulfóxido, N-metilpirrolidina, etanol, acetonitrilo, a una temperatura de aproximadamente 0º a aproximadamente 100ºC. El uso del cloruro de sulfonilo de tipo VII conduce a aminas que deben desprotegerse utilizando métodos muy conocidos por los expertos en la técnica para producir la amina de fórmula general XIV
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en la que R^{1}, R^{2}, Y y n son como se definió anteriormente.
Los derivados de tipo XIV entonces se acilan según los métodos descritos para la preparación de amidas mediante la condensación de aminas con cloruros de ácido o ácidos carboxílicos en las condiciones preferidas descritas anteriormente que conducen a los compuestos de fórmula general I.
Una estrategia específica y preferida para preparar piperidinosulfonamidas de fórmula I (Y es una piperidina VIII'''), en la que L^{1} es un resto -NHR^{3}, implica las siguientes etapas:
- hacer reaccionar un cloruro de cianobencensulfonilo (XVa) con una piperidin-4-ona protegida;
- reducir el nitrilo (XVIa) a la amina (XVIIa);
- acilar la amina (XVIIa) para producir la benzamida (XVIIIa);
- desproteger el resto piperidin-4-ona de la benzamida (XVIIIa);
- hacer reaccionar la sulfonamida (XIX) que tienen una piperidin-4-ona reactiva con una amina primaria (aminación reductora);
y se especifica en el esquema 5.
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Esquema 5
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Ar^{1}, R^{3} y R^{2} son como se definió anteriormente.
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Para la preparación de las piperidinosulfonamidas de fórmula I, en la que n = 0, se indica un método preferido en el esquema 6.
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Esquema 6
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Una estrategia específica y preferida para preparar las pirrolidinosulfonamidas de fórmula I (Y es una pirrolidina VIII''), en la que L^{1} es un resto -NHR^{3}, se indica en el esquema 7.
Esquema 7
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Para la preparación de las pirrolidinsulfonamidas de fórmula I, en la que n = 0, se realizan las mismas vías indicadas en el esquema 7, aunque se utilizan cloruros de nitrobencensulfonilo en lugar de cloruro de cianobencensulfonilo.
Una estrategia específica para preparar sulfonamidas de fórmula I en las que el grupo benceno central está sustituido con grupos hidrófilos (por ejemplo, R^{2} es un grupo carboxílico) implica las etapas de:
- proporcionar el cloruro de sulfonilo (VII), en el que R^{1} es un grupo protector P;
- hacer reaccionar el cloruro de sulfonilo (VII) con una amina (VIII), por ejemplo una piperidin-4-ona protegida, para proporcionar con ello una sulfonamida (IX);
- someter dicha sulfonamida (IX) a una metalación de Ar^{2} para producir la correspondiente sulfonamida sustituida (IXa);
- eliminar el grupo protector P de dicha sulfonamida (IXa) y acilar la sulfonamida para producir los compuestos de fórmula (IXb);
- desproteger dicha sulfonamida (IXb) y realizar una aminación reductora de la correspondiente cetona para producir compuestos de fórmula I.
Dicha estrategia se especifica en el esquema 8.
Esquema 8
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Si los anteriores métodos sintéticos generales mencionados no son aplicables para la obtención de compuestos de fórmula I deberán utilizarse métodos de preparación adecuados conocidos por los expertos en la técnica. Por ejemplo, se debe comenzar a partir del cloruro de 4-cianobencensulfonilo o cloruro de 4-nitrobencensulfonilo disponibles en el mercado y aplicar métodos convencionales conocidos por los expertos en la técnica para conseguir los derivados de arilsulfonamida de fórmula I.
Otro aspecto de la presente invención son compuestos de sulfonamida que tienen la fórmula general (XIX) que es particularmente útil para la preparación de la sulfonamida según la fórmula (I).
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En dicha fórmula (XIX):
Ar^{1} es un grupo arilo o heteroarilo;
R^{1} es hidrógeno o un grupo alquilo C_{1}-C_{6};
R^{2} es hidrógeno, -COOR^{3}, -CONR^{3}R^{3'}, OH, un alquilo C_{1}-C_{4} sustituido con un grupo OH, un grupo hidrazido carbonilo, un sulfato, un sulfonato, una amina o una sal de amonio;
n es 0 ó 1; e
Y es una pirrolidin-3-ona o una piperidin-4-ona.
Un aspecto final de la presente invención se refiere al uso de los compuestos según la fórmula I para la modulación de la función JNK, o las vías de señalización de JNK, el uso de dichos compuestos para la preparación de composiciones farmacéuticas para la modulación de la vía de JNK, así como formulaciones que contengan los compuestos activos según la fórmula I. Dicha modulación de la vía de JNK se considera una estrategia apropiada para el tratamiento de diversos trastornos. Cuando se emplean como producto farmacéutico, los derivados de benzsulfonamida de la presente invención se administran, de forma típica, en forma de una formulación farmacéutica. Por tanto, las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula I y un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable también están dentro del alcance de la presente invención. Los expertos en la técnica sabrán que existe una amplia variedad de estos compuestos vehículo, diluyentes o excipientes adecuados para formular una composición farmacéutica. Además, la presente invención proporciona compuestos para su uso como medicamentos. En particular, la presente invención proporciona compuestos de fórmula I para su uso como inhibidor de JNK, en particular JNK1 y/o JNK2 y/o 3, para el tratamiento de trastornos del sistema inmunológico, así como del sistema neuronal en mamíferos, en particular de seres humanos, por sí solos o en combinación con otros medicamentos.
Los compuestos de la invención, junto con un adyuvante, vehículo, diluyente o excipiente empleados de manera convencional, pueden estar en forma de composiciones farmacéuticas y sus unidades de dosificación, y en tal forma pueden emplearse en forma de sólidos, como comprimidos o cápsulas rellenas, o de líquidos, como disoluciones, suspensiones, emulsiones, elixires o cápsulas rellenas de éstos, todos para un uso oral, o en forma de disoluciones inyectables estériles para un uso parenteral (incluyendo un uso subcutáneo). Estas composiciones farmacéuticas y sus formas de dosificación unitaria pueden comprender ingredientes en proporciones convencionales, con o sin otros principios o compuestos activos, y estas formas de dosificación unitaria pueden contener cualquier cantidad eficaz adecuada del ingrediente activo que corresponda con el intervalo de dosificación diario previsto que se vaya a emplear.
Cuando se emplean como producto farmacéutico, los derivados de benzsulfonamidas de esta invención se administran, de forma típica, en forma de una composición farmacéutica. Estas composiciones pueden prepararse de una manera conocida en la técnica farmacéutica y comprenden al menos un compuesto activo. En general, los compuestos de esta invención se administran en una cantidad farmacéuticamente eficaz. La cantidad del compuesto que realmente se administra será determinada, de forma típica, por un médico a la luz de las circunstancias pertinentes, incluyendo el trastorno que se va a tratar, la vía de administración elegida, el compuesto concreto que se va a administrar, la edad, el peso y la respuesta del paciente individual, la gravedad de los síntomas del paciente.
Las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden administrarse mediante una diversidad de vías, incluyendo la vía oral, rectal, transdérmica, subcutánea, intravenosa, intramuscular e intranasal. Dependiendo de la vía de administración prevista, los compuestos se formulan preferiblemente como composiciones inyectables u orales. Las composiciones para la administración oral pueden tomar la forma de disolución o suspensiones líquidas a granel o de polvos a granel. Sin embargo, de manera más habitual las composiciones se presentan en formas de dosificación unitarias para facilitar una dosificación precisa. La expresión "forma de dosificación unitaria" se refiere a unidades físicamente discretas adecuadas como dosificación unitaria para sujetos humanos y otros mamíferos, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada de material activo calculada para producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con un excipiente farmacéutico adecuado. Las formas de dosificación unitaria típicas incluyen ampollas o jeringas prerrellenas y premedidas de las composiciones líquidas, o píldoras, comprimidos, cápsulas o similares en el caso de las composiciones sólidas. En estas composiciones, el compuesto de benzsulfonamida normalmente es un componente minoritario (de aproximadamente 0,1% a aproximadamente 50% en peso, o preferiblemente de aproximadamente 1% a aproximadamente 40% en peso), siendo el resto diversos vehículos o portadores y adyuvantes del procesamiento que son útiles para formar la forma de dosificación deseada.
Las formas líquidas adecuadas para la administración oral pueden incluir un vehículo acuoso o no acuoso adecuado con tampones, agentes suspensores y dispensores, colorantes, aromas. Las formas sólidas pueden incluir, por ejemplo, cualquiera de los siguientes ingredientes o compuestos de una naturaleza similar: un ligante, como celulosa microcristalina, goma de tragacanto o gelatina; un excipiente, como almidón o lactosa; un agente disgregante, como ácido algínico, Primogel o almidón de maíz; un lubricante, como estearato de magnesio; un deslizante, como dióxido de silicio coloidal; un agente edulcorante, como sacarosa o sacarina; o un agente aromatizante, como menta, salicilato de metilo o aroma de naranja. Las composiciones inyectables están basadas, de forma típica, en disolución salina o disolución salina tamponada con fosfato estéril inyectable u otros vehículos inyectables conocidos en la técnica. Como se mencionó anteriormente, el compuesto de benzsulfonamida de fórmula I en estas composiciones es, de forma típica, un componente minoritario, que con frecuencia varía del 0,05% al 10% en peso, siendo el resto el vehículo inyectable.
Los componentes descritos anteriormente para las composiciones inyectables o de administración oral son sólo representativos. Otros materiales, así como técnicas de procesamiento, se indican en la parte 8 de Remington's Pharmaceutical Sciences, 17ª edición, 1985, Marck Publishing Company, Easton, Pensilvania, que se incorpora en la presente como referencia. Los compuestos de esta invención también pueden administrarse en formas de liberación sostenida o desde sistemas de administración de fármacos de liberación sostenida. También puede encontrarse una descripción de los materiales de liberación sostenida representativos en los materiales incorporados en Remington's Pharmaceutical Sciences.
A continuación, la presente invención se ilustrará mediante algunos ejemplos.
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Ejemplos
Ejemplo 1
Protocolo A
Preparación de 4-cloro-N-{4-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]bencil}benzamida 1 4-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]benzonitrilo 1a
La N-{3-[(trifluorometil)sulfonil]fenil}-4-piperidina (2,00 g, 6,49 mmol) se disolvió en THF (75 ml), se añadió cloruro de 4-cianobencensulfonilo (1,57 g, 7,78 mmol) y piperidin-PS (6,49 g, 9,73 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El exceso de cloruro de sulfonilo se captó con aminometil-PS (5,9 g, 6,49 mmol) agitando durante 4 h más. Las resinas se separaron mediante filtración, se lavaron con THF (3 x 25 ml) y los filtrados reunidos se evaporaron hasta la sequedad para producir 2,8 g (91%) de la sulfonamida 4-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]benzonitrilo 1a con >90% de pureza (LC-MS).
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Preparación de piperidin-PS
Se suspende clorometil-PS (Merrifield) en 10 volúmenes de DMF anhidra, se añaden 2,5 equivalentes de piperidina y se agita a 65ºC durante 18 h. Se retira del calor y se deja en reposo a temperatura ambiente durante 4 h. Se filtra y se lava la resina con DMF, DCM, DMF, DCM, MeOH, DCM, MeOH, DCM y 3 x THF. La resina se seca en una estufa de vacío durante al menos 4 h. En la resina IPC se realiza un ensayo de cloranilo para determinar la presencia de piperidina libre atrapada en la resina (el resultado debería ser negativo; si es positivo se repite el ciclo de lavado hasta que el ensayo de cloranilo sea negativo). Capacidad: 1,5 mmol/g.
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1-{[4-(aminometil)fenil]sulfonil}-N-{3-[(trifluorometil)sulfonil]fenil}-4-piperidina 1b
Se disolvió 4-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]-benzonitrilo (500 mg, 1,06 mmol) en 1,4-dioxano (20 ml) y agua (5 ml) y se añadió hidróxido de litio monohidrato (160 mg, 3,81 mmol). El matraz de reacción se sometió al vacío y se purgó con nitrógeno (3 veces), se añadió paladio al 10% sobre carbón (100 mg, 0,094 mmol) y níquel-Raney como una suspensión al 50% en agua (100 mg, 0,85 mmol), después el matraz de reacción se sometió al vacío y se purgó con hidrógeno (3 veces). La mezcla se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera de hidrógeno (presión de balón) durante 2 días, se filtró a través de Celite y se lavó con 1,4-dioxano/agua (1:1, 40 ml). El 1,4-dioxano se retiró al vacío, se añadió agua (30 ml) al residuo y la suspensión obtenida se extrajo con acetato de etilo (3 x 25 ml). Las capas orgánicas reunidas se evaporaron hasta la sequedad, produciendo la amina 1-{[4-(aminometil)fenil]sulfonil}-N-{3-[(trifluorometil)sulfonil]fenil}-4-piperidina 1b como un polvo microcristalino de color amarillo claro (400 mg, 79%) con >90% de pureza (LC-MS).
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4-cloro-N-{4-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]bencil}benzamida 1
La 1-{[4-(aminometil)fenil]sulfonil}-N-{3-[(trifluorometil)sulfonil]fenil}-4-piperidina 1b (200 mg, 0,419) se disolvió en DCM (10 ml), se añadió piperidin-PS (300 mg, 0,45 mmol) y cloruro de 4-clorobenzoílo (75 mg, 0,42 mmol) como una disolución en DCM (5 ml) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Se captó el exceso de cloruro de benzoílo como aminometil-PS (50 mg, 0,06 mmol) agitando durante 2 h. El DCM se retiró al vacío y el residuo obtenido se purificó mediante una cromatografía en columna sobre gel de sílice utilizando un gradiente de disolvente de metanol al 1-5% en DCM. Las fracciones con R_{f} = 0,13 (MeOH al 1% en DCM), R_{f} = 0,62 (MeOH al 5% en DCM) se recogieron y se evaporaron hasta la sequedad. El residuo se disolvió en DCM (5 ml) y se añadió HCl 1 N en éter (3 ml). Después de envejecer a temperatura ambiente durante 1 h, el precipitado se retiró mediante filtración, se lavó con éter y se secó al vacío. El clorhidrato de la sulfonamida rematada 4-cloro-N-{4-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]bencil}benzamida 1 se aisló como un polvo blanco (150 mg, 58%) con >95% de pureza.
M/Z APCI 616,3 (M+1), 614,2 (M-1); RMN de ^{1}H (DMSO-d^{6}) \delta 9,36 (t, 1H, H-N5, ^{3}J = 5,92 Hz), 7,95 (d, 2H, ^{3}J = 8,65 Hz, H-C2,3), 7,75-7,64 (m, 4H, H-C7,8,9,10), 7,59 (d, 2H, ^{3}J = 8,65 Hz, H-C1,4), 7,49 (t, 1H, 8,20 Hz, H-C18), 7,20-7,10 (m, 3H, H-C17,19,20), 4,62 (d, 2H, ^{3}J = 5,92 Hz, H-C6), 3,57* (d, 2H, ^{2}J = 11,84 Hz, H_{eq}-C11,15), 3,42 (m, a, 1H, H-C13), 2,57* (m, 2H bajo señal de DMSO, H_{ax}-C12,14), 1,95* (m, 2H, H_{ax}-C11,15), 1,44* (m, 2H, H_{eq}-C12,14), H-N16 intercambiado.
La siguiente tabla proporciona los datos de HPLC y de espectrometría de masas de los ejemplos mencionados.
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Ejemplo 7
(Protocolo B; véanse los esquemas 5 y 6)
Preparación de 4-cloro-N-(4-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)benzamida 7
Esquema para L1 = etilfenilo en lugar de n-hexilo
4-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dec-8-ilsulfonil)benzonitrilo 7a
Se cargó 1,4-dioxa-8-azaspiro(4,5)decano (20,0 g, 0,14 mol), DCM (300 ml) y una disolución de carbonato de sodio acuoso 1 N (200 ml) en un matraz y se enfrió hasta <10ºC. Se añadió gota a gota una disolución de cloruro de 4-cianobencensulfonilo (26,8 g, 0,133 mmol) en DCM (100 ml), manteniendo la temperatura por debajo de 10ºC (de forma típica, la adición tarda 40-50 min). Se retiró el enfriamiento y la agitación a temperatura ambiente continuó durante 2 h. Las capas se separaron, la capa orgánica se lavó con agua (2 x 100 ml) y se concentró al vacío a aproximadamente 100 ml. Se añadió hexano (aproximadamente 300 ml) para iniciar la cristalización. El precipitado se envejeció a 0-5ºC durante 10-30 min, se filtró y se lavó con hexano (2 x 100 ml) para producir 38,2 g (88%) de 4-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dec-8-ilsulfonil)benzonitrilo 7a como un sólido blanco.
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[4-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dec-8-ilsulfonil)fenil]metanamina 7b
Se cargó el catalizador (paladio Aldrich, al 5% en peso (base seca) sobre carbono activado como una suspensión al 50% en peso en agua (Degussa de tipo E101 NO/W), 3,0 g, 0,70 mmol) en un matraz, que se sometió a vacío y se purgó con nitrógeno tres veces. Se añadió una disolución del nitrilo 1a (14,0 g, 45,4 mmol) en etanol (450 ml) y una disolución de hidróxido de amonio acuoso concentrado (al 31% en peso, 40 ml, 620 mmol). El matraz se sometió al vacío y se purgó con nitrógeno tres veces, después se sometió al vacío y se llenó de hidrógeno dos veces. La reacción se agitó a temperatura ambiente bajo una atmósfera de hidrógeno a presión de balón y se controló mediante TLC (metanol al 5% en DCM) hasta que se completó (1-2 días). Tras finalizar, el matraz sometió al vacío y se purgó con nitrógeno tres veces, el catalizador se retiró mediante filtración a través de un papel de filtro de fibra de vidrio y se lavó con etanol caliente (3 x 100 ml). La reacción se trató como sigue: el filtrado se evaporó hasta la sequedad y el residuo se purificó mediante una cromatografía en columna sobre gel de sílice (25 veces en peso de sílice basado en el producto bruto) utilizando un gradiente de elución con metanol al 5-50% en DCM que produjo 90% de [4-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dec-8-ilsulfonil)fenil]metanamina 7b.
En el caso en que se preparen sulfonilfenilbenzamidas, el compuesto de partida cloruro de 4-cianobencensulfonilo se reemplaza por el correspondiente cloruro de 4-nitrobencensulfonilo, conduciendo a los correspondientes análogos de anilina (véase el esquema 6). El tiempo de reacción es de 4-5 h. El tratamiento se realizó como sigue: el filtrado se concentró al vacío hasta aproximadamente 50 ml y se enfrió en un baño de hielo-acetona para iniciar la cristalización (la adición de agua puede ser necesaria en algunos casos). El precipitado se envejeció durante 10-15 min, se filtró y se lavó con etanol enfriado en hielo (2 x 30 ml). Rendimiento = 63-95%.
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4-cloro-N-[4-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dec-8-ilsulfonil)bencil]benzamida 7c
La [4-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dec-8-ilsulfonil)fenil]metanamina 7b (3,00 g, 10,1 mmol) se disolvió en DCM (20 ml), se añadió piridina (976 \mul, 12,1 mmol), cloruro de 4-clorobenzoílo (1,41 ml, 11,1 mmol) y dimetilaminopiridina (cantidad catalítica), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El exceso de cloruro de benzoílo se captó con aminometil-PS (2,0 g, 2,2 mmol) agitando durante 2 h. La resina se separó mediante filtración y se lavó con DCM (20 ml). Los filtrados reunidos se lavaron con ácido cítrico acuoso saturado (20 ml), se secaron sobre sulfato de magnesio y se evaporaron hasta la sequedad para producir 2,7 g (59%) de 4-cloro-N-[4-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dec-8-ilsulfonil)bencil]benzamida 7c con >90% de pureza (LC-MS).
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4-cloro-N-{4-[(4-oxo-1-piperidinil)sulfonil]bencil}benzamida 7d
La 4-cloro-N-[4-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4,5]dec-8-ilsulfonil)bencil]benzamida 7c (2,7 g, 5,99 mmol) se suspendió en HCl 6 N (40 ml) y se añadió THF hasta que se obtuvo una disolución transparente (aproximadamente 40 ml). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche y se eliminó el THF al vacío. La suspensión resultante se diluyó con agua fría (50 ml), se envejeció durante 1 h a temperatura ambiente y se filtró. El residuo del filtro se secó a un vacío elevado durante varias horas para producir 2,0 g (82%) de la cetona 4-cloro-N-{4-[(4-oxo-1-piperidinil)sulfonil]bencil}benzamida 7d como un polvo incoloro con >90% de pureza (LC-MS).
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4-cloro-N-(4-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)benzamida 7
La 4-cloro-N-{4-[(4-oxo-1-piperidinil)sulfonil]bencil}benzamida 7d (500 mg, 1,23 mmol) se suspendió en THF/
metanol (10 ml/20 ml), se añadió N-hexilamina (149 mg, 1,48 mmol) y cianoborohidruro-IRA400 (1,0 g, 3,0 mmol), y la mezcla de reacción se agitó a 50ºC durante la noche. El exceso de amina fue captado por Ameba-PS (415 mg, 0,50 mmol) agitando durante 2 h. Las resinas se retiraron mediante filtración, el disolvente se eliminó al vacío y el residuo obtenido se purificó mediante una cromatografía en columna sobre gel de sílice utilizando un gradiente discontinuo de metanol al 2,5% en DCM y metanol al 5% en DCM. Las fracciones con R_{f} = 0,28 (metanol al 5% en DCM) se recogieron y se evaporaron hasta la sequedad (nota: puede añadirse hasta 1% de NH_{3} concentrado (13,5 M) durante la cromatografía para reducir la pérdida de material). El residuo se disolvió en DMC (10 ml) y se añadió HCl 1 N en éter (3 ml). Después de envejecer a temperatura ambiente durante 1 h, el precipitado se retiró mediante filtración y se secó al vacío. Se aisló la sal clorhídrica de la sulfonamida 4-cloro-N-(4-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)benzamida 7 como un polvo blancuzco (260 mg, 36%) con >95% de pureza.
M/Z APCI 492,0 (M+1), 490,2 (M-1); RMN de ^{1}H (DMSO-d^{6}) (sal HCl) \delta 9,39 (t, 1H, H-N5, ^{3}J = 5,92 Hz), 8,97 (m, a, 2H, H-N16), 7,99 (d, 2H, ^{3}J = 8,65 Hz, H-C2,3), 7,75 (d, 2H, ^{3}J = 8,20 Hz, H-C8,9), 7,61 (m, 4H, H-C1,4,7,10), 4,61 (d, 2H, J^{3} = 5,92 Hz, H-C6), 3,73* (d, 2H, ^{2}J = 11,84 Hz, H_{eq}-C11,15), 3,07 (m, a, 1H, H-C13), 2,83 (m, a, 2H, H-C17), 2,29* (m, 2H, H_{ax}-C12,14), 2,10* (d, a, 2H, J^{2} = 11,90 Hz, H_{ax}-C11,15), 1,71-1,54* (m, 4H, H_{eq}-C12,14 y H-C18), 1,36-1,23 (m, 6H, H-C19,20,21), 0,89 (t, 3H, J^{3} = 6,60 Hz, H-C22).
RMN de ^{1}H (DMSO-d^{6}) (base libre) \delta 9,30 (t, 1H, H-N5, ^{3}J = 5,92 Hz), 7,97 (d, 2H, ^{3}J = 8,65 Hz, H-C2,3), 7,73 (d, 2H, ^{3}J = 8,65 Hz, H-C8,9), 7,61 (d, 2H, J^{3} = 8,65 Hz, H-C1,4), 7,59 (d, 2H, J^{3} = 8,65 Hz, HC7,10), 4,69 (d, 2H, J^{3} = 5,92 Hz, H-C6), 3,51* (d, 2H, ^{2}J = 11,84 Hz, H_{eq}-C11,15), 2,55-2,40* (m, 5H, H-C13,17, H_{ax}-C11,15), 1,95-1,85* (m, 2H, H_{ax}-C12,14), 1,46-1,26* (m, 10H, H_{eq}-C12,14 y H-C18,19,20,21), 0,94 (t, 3H, J^{3} = 7,06 Hz, H-C22).
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Preparación de cianoborohidruro-IRA400
Se preparan 100 ml de una disolución acuosa de cianoborohidruro de sodio (al 8% en peso/vol., ligeramente turbia) y después se hace pasar a través de 10 g de resina de forma cloruro húmeda (Amberlite IRA400) de un embudo sinterizado. La resina se cubre con un volumen de disolución de cianoborohidruro, se agita y después la disolución se retira mediante succión; el proceso se repite aproximadamente 10 veces. La resina resultante se lava a fondo con agua destilada hasta que esté exenta del exceso de cianoborohidruro de sodio (hasta pH neutro), después se seca lavando repetidamente con THF de calidad HPLC. La capacidad media resultante debería ser 2,5-3,0 mmol/g de resina
seca.
Los compuestos listados a continuación (indicados por el número del ejemplo) se prepararon de una manera similar siguiendo los protocolos indicados anteriormente y empleando los correspondientes compuestos de partida.
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Ejemplo 23
(Protocolo C; véase el esquema 7)
Preparación de 4-cloro-N-(4-{[3-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-pirrolidinil]-sulfonil}bencil)benzamida 23 4-[(3-hidroxi-1-pirrolidinil)sulfonil]benzonitrilo 23a
Se cargó 4-hidroxipirrolidina (12 g, 0,14 mmol), DCM (300 ml) y una disolución acuosa de carbonato de sodio 1 N (200 ml) en un matraz y se enfrió hasta <10ºC. Se añadió gota a gota una disolución de cloruro de 4-cianobencensulfonilo (26,8 g, 0,133 mol) en DCM (100 ml), manteniendo la temperatura por debajo de 10ºC (de forma típica, la adición tarda 40-50 min). Se retiró el enfriamiento y se continuó agitando a temperatura ambiente durante 2 h. La capas se separaron, la capa orgánica se lavó con agua (2 x 100 ml) y se concentró al vacío hasta aproximadamente 100 ml. Se añadió hexano (aproximadamente 300 ml) para iniciar la cristalización. El precipitado se envejeció a 0-5ºC durante 10-30 min, se filtró y se lavó con hexano (2 x 100 ml) para producir 30,3 g (86%) de la sulfonamida 4-[(3-hidroxi-1-pirrolidinil)sulfonil]benzonitrilo 23a como un sólido blanco.
4-[(3-oxo-1-pirrolidinil)sulfonil]benzonitrilo 23b
Se disolvió 4-[(3-hidroxi-1-pirrolidinil)sulfonil]benzonitrilo 23a (17,0 g, 67,3 mmol) en DCM (300 ml) y se trató a temperatura ambiente con PS-TEMPO (capacidad 1,17 mmol/g, 400 mg, 0,74 mmol). Después se añadió una disolución de bicarbonato de sodio acuoso al 5% (150 ml) y la mezcla se agitó vigorosamente mientras se enfriaba hasta 10ºC. Se añadió hipoclorito de sodio (valorado a NaOCl* al 70% en peso; 77,6 ml, 93,0 g, 87,5 mmol) a lo largo de 40 min, manteniendo la temperatura por debajo de 10ºC. Se retiró el enfriamiento y la mezcla de reacción se agitó vigorosamente. Una TLC después de 2 h no mostró material de partida, por tanto se detuvo la agitación y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con DCM (2 c 30 ml), y las capas orgánicas reunidas se lavaron con tiosulfato de sodio acuoso saturado (75 ml) y después agua (150 ml). Cada una de estas capas acuosas se retroextrajo con DCM (30 ml) y se reunieron con el extracto orgánico principal, que entonces se filtró a través de un lecho de algodón y se evaporó hasta la sequedad produciendo 14,3 g (85%) de la cetona 4-[(3-oxo-1-pirrolidinil)sulfonil]benzonitrilo 23b.
4-(1,4-dioxa-7-azaspiro[4.4]non-7-ilsulfonil)benzonitrilo 23c
El 4-[(3-oxo-1-pirrolidinil)sulfonil]benzonitrilo 23b (11,6 g, 46,3 mmol) se suspendió en tolueno (110 ml) y se agitó a temperatura ambiente. Se añadió etilenglicol (/6,2 ml, 6,9 g, 111 mmol) y ácido para-toluensulfónico monohidrato (100 mg, 0,53 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo bajo condiciones de Dean-Stark y se controló mediante la recolección de agua y una TLC (metanol al 5% en DCM). Si fue necesario para que la reacción se completase (de forma típica en 3 h) se añadieron más porciones de p-TSA. Cuando terminó, la mezcla de reacción se lavó con una disolución de bicarbonato de sodio saturada (55 ml) y agua (2 x 55 ml). La capa orgánica se filtró a través de algodón y después se concentró al vacío hasta aproximadamente 50 ml o hasta que comenzó la precipitación. Se añadió hexano (150 ml) y la suspensión se agitó a 0-5ºC durante 10-20 min, se filtró y se lavó con hexano (2 x 50 ml). El residuo se secó al aire para producir 13,0 g (96%) del cetal 4-(1,4-dioxa-7-azaspiro[4.4]non-7-ilsulfonil)benzonitrilo 23c.
El 4-(1,4-dioxa-7-azaspiro[4.4]non-7-ilsulfonil)benzonitrilo 23c se trató según el procedimiento descrito para el ejemplo 7b que conduce, por último, a la 4-cloro-N-(4-{[3-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-pirrolidinil]sulfonil}bencil)benzamida 23.
M/Z APCI 566,0 (M+1), 564,2 (M-1); RMN de ^{1}H (DMSO-d^{6}) \delta 9,57 (m, 2H, H-N15), 9,42 (t, 1H, H-N5, ^{3}J = 5,92 Hz), 7,99 (d, 2H, ^{3}J = 8,65 Hz, H-C2,3), 7,82 (d, 2H, H-C8,9), 7,71-7,59 (m, 8H, H-C1,4,7,10,18,19,20,21), 4,62 (d, 2H, ^{3}J = 5,92 Hz, H-C6), 3,75 (m, 1H, H-C12), 3,53-3,33 (m, 2H bajo la señal de DMSO-H_{2}O, H-C16), 3,27-3,03 (m, 6H, H-C11,14,17), 2,17 (m, 1H, H_{a}-C13), 2,04 (m, 1H, H_{b}-C13).
Después de intercambio de D_{2}O:
RMN de ^{1}H (DMSO-d^{6}) \delta 7,99 (d, 2H, ^{3}J = 8,65 Hz, H-C2,3), 7,82 (d, 2H, H-C8,9), 7,71-7,59 (m, 8H, H-C1,4,7,10,18,19,20,21), 4,58 (s, 2H, H-C6), 3,74 (m, 1H, H-C12), 3,47-3,33 (m, 2H, H-C16), 3,32-3,23 (m, 1H, H_{a}-C14), 3,22-3,14 (m, 2H, H-C11), 3,13-3,04 (m, 1H, H_{b}-C14), 3,03-2,94 (m, 2H, H-C17, H-C11,14,17), 2,17 (m, 1H, H_{a}-C13), 1,94 (m, 1H, H_{b}-C13).
Los compuestos listados a continuación (indicados por el número del ejemplo) se prepararon de una manera similar siguiendo los protocolos indicados anteriormente y empleando los correspondientes compuestos de partida.
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Ejemplo 32
Preparación de una formulación farmacéutica
Los siguientes ejemplos de formulación ilustran composiciones farmacéuticas representativas según la presente invención pero no se limitan a éstas.
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Formulación 1
Comprimidos
Un compuesto de benzsulfonamida de fórmula I se mezcla como un polvo seco con un ligante de gelatina seco en una proporción de aproximadamente 1:2 en peso. Se añade una pequeña cantidad de estearato de magnesio como lubricante. La mezcla se forma en comprimidos de 240-270 mg (80-90 mg de compuesto de benzsulfonamida activo por comprimido) en una prensa para comprimidos.
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Formulación 2
Cápsulas
Un compuesto de benzsulfonamida de fórmula I se mezcla como un polvo seco con un diluyente de almidón en una proporción de aproximadamente 1:1 en peso. La mezcla se introduce en cápsulas de 250 mg (125 mg de compuesto de benzsulfonamida activo por cápsula).
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Formulación 3
Líquido
Se mezcla un compuesto de benzsulfonamida de fórmula I (1250 mg), sacarosa (1,75 g) y goma de xantano (4 mg), se hace pasar a través de un tamiz de EEUU de malla nº 10, y después se mezcla con una disolución previamente preparada de celulosa microcristalina y carboximetilcelulosa de sodio (11:89, 50 mg) en agua. Se diluyeron con agua benzoato de sodio (10 mg), aroma y colorante y se añadieron con agitación. Entonces se añade agua suficiente para producir un volumen total de 5 ml.
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Formulación 4
Comprimidos
Un compuesto de benzsulfonamida de fórmula I se mezcla como un polvo seco con un ligante de gelatina seco en una proporción de aproximadamente 1:2 en peso. Se añade una pequeña cantidad de estearato de magnesio como lubricante. La mezcla se forma en comprimidos de 450-900 mg (150-300 mg de compuesto de ácido furansulfónico activo) en una prensa para comprimidos.
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Formulación 5
Inyección
Un compuesto de benzsulfonamida de fórmula I se disuelve en un medio acuoso inyectable de disolución salina tamponada estéril hasta una concentración de aproximadamente 5 mg/ml.
Ejemplo 33
Ensayos biológicos Resultados biológicos
Las actividades biológicas de los compuestos según la fórmula I pueden evaluarse utilizando los siguientes ensayos in vitro e in vivo.
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Ensayos in vitro de JNK2 y 3
Puede seguirse la fosforilación de c-jun por JNK2 o JNK3 controlando la incorporación de ^{33}P en c-jun siguiendo el protocolo que aparece a continuación. La actividad inhibidora de los compuestos según la fórmula I, con respecto a la fosforilación de c-jun mediante JNK, se determina calculando la actividad de fosforilación de un JNK en presencia o ausencia de los compuestos de ensayo según la fórmula I.
Los ensayos JNK3 y/o 2 se realizaron en un placas MTT de 96 pocillos. Se incubaron 0,5 \mug de GST-JNK3 o GST-JNK2 recombinante preactivado con 1 \mug de GST-c-Jun biotinilado recombinante y ^{33}\gamma-ATP 2 \muM (2 nCi/\mul), en presencia o ausencia de compuestos según la fórmula I y en un volumen de reacción de 50 \mul que contiene Tris-HCl 50 mM, pH 8,9, MgCl_{2} 10 mM, ditiotreitol 1 mM, y NaVO_{4} 100 \muM. La incubación se realizó durante 120 min a temperatura ambiente y se detuvo tras la adición de 200 \mul de una disolución que contenía 250 \mug de esferas SPA revestidas de estreptavidina (Amersham, Inc)*, EDTA 5 mM, Triton X-100 al 0,1% y ATP 50 \muM, en tampón de disolución salina con fosfato. Después de una incubación durante 60 minutos a temperatura ambiente las esferas se sedimentaron mediante una centrifugación a 1500 x g durante 5 minutos, se resuspendieron en 200 \mul de PBS que contenía EDTA 5 mM, Triton X-100 al 0,1% y ATP 50 \muM, y la radiactividad se midió en un contador \beta de centelleo, tras la sedimentación de las esferas como se describió anteriormente. Sustituyendo el GST-c-Jun biotinilado por GST-_{1}ATF_{2} biotinilado o proteína básica de mielina biotinilada, este ensayo también puede emplearse para medir la inhibición de p38 y ERK MAP quinasas preactivadas, respectivamente.
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Los valores indicados con respecto a JNK2 y 3 se refieren a la IC_{50} (\mum), es decir la cantidad necesaria para lograr 50% de inhibición de JNK3 o JNK2.
Los compuestos según la fórmula I ensayados muestran una inhibición (IC_{50}) con respecto a JNK3 menor que 0,4 \muM, más preferiblemente igual o menor que 0,2 \muM.
Los compuestos según la fórmula I ensayados muestran una inhibición (IC_{50}) con respecto a JNK2 menor que 0,2 \muM, más preferiblemente igual o menor que 0,02 \muM.
Ensayo de cultivo y supervivencia de neuronas simpáticas
Se evaluó la capacidad de los compuestos según la fórmula I para aumentar la tasa de supervivencia de células neuronales inducidas a la muerte celular utilizando el siguiente protocolo.
Neuronas simpáticas procedentes de ganglios cervicales superiores (SCG) de ratas recién nacidas (p4) se disocian en dispasa, se cultivan en placa a una densidad de 10^{4} células/cm^{2} en placas MTT de 48 pocillos revestidas con colágeno de cola de rata, y se cultivan en medio de Leibowitz que contenía suero de rata al 5%, NGF 7S 0,75 \mug/ml (Boehringer Mannheim Corp., Indianápolis, IN) y arabinósido 10^{5} M. La muerte celular se induce en el día 4 después del comienzo del cultivo en placa exponiendo el cultivo a un medio que contenía 10 \mug/ml de anticuerpo anti-NGF (Boehringer Mannheim Corp., Indianápolis, IN) y sin NGF ni arabinósido, en presencia o en ausencia de inhibidores de sulfonamida. Veinticuatro horas después de la inducción de la muerte celular se realiza la determinación de la viabilidad celular mediante incubación del cultivo durante 1 hora a 37ºC en 0,5 mg/ml de bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio (MTT). Después de la incubación en MTT las células se resuspenden en DMSO, se trasladan a una placa MTT de 96 pocillos y se evalúa la viabilidad celular midiendo la densidad óptica a 590 nm.
Los resultados de este ensayo con diversos compuestos de ensayo demuestran que los compuestos de fórmula I rescatan a las neuronas de la muerte celular (siendo el porcentaje de neuronas vivas entre 10% y 80%).
Ensayo de liberación de IL-2
Se evaluó la capacidad de los compuestos según la fórmula I para modular la respuesta inflamatoria inhibiendo la liberación de IL-2 utilizando el siguiente protocolo.
La activación de la vía de JNK desencadena la producción de citoquinas inflamatorias, como IL-2. El JNK puede ser activado mediante estímulos externos, como PMA e ionomicina, y la producción de IL-2 puede medirse mediante un ensayo ELISA de IL-2. Las mediciones comparativas con y sin los compuestos de la invención según el siguiente protocolo miden la capacidad de los compuestos para evitar la liberación de IL-2 mediada por el estrés.
Células Jurkat, una línea celular de leucemia de células T humana (American Type Culture Collection, nº TIB 152) se cultivaron en medio RPMI 1640 (Gibco, BRL) suplementado con suero de ternera fetal inactivado con calor al 10% (FCS), glutamina y penicilina-estreptomicina. La suspensión celular en el medio se diluye para producir 2.10^{6} células/ml. Las células se cultivaron en placa (2.10^{5} células/pocillo) sobre una placa de 96 pocillos que contenía diferentes concentraciones de un compuesto según la fórmula I (concentración final de los compuestos 10, 3, 1, 0,3, 0,1 \muM). Esta mezcla se incuba durante 30 minutos a 37ºC en una atmósfera de CO_{2} humidificada. Las células entonces se tratan con 10 \mul de PMA (forbolmiristato-13 acetato-12) + ionomicina (concentración final 0,1 \muM y 1 \muM) en todos los pocillos excepto el control negativo. En los pocillos sin compuestos se añaden 10 \mul de RPMI con DMSO al 2% (= 0,1% final). Las células se incuban durante 24 horas a 37ºC y después se recoge el sobrenadante (se congela a -20ºC si no se utiliza el mismo día) antes de realizar el ensayo ELISA de IL-2 con el sobrenadante.
Ensayo ELISA de IL-2
Puede ensayarse mediante ELISA la liberación de IL-2 hacia el medio con células Jurkat estimuladas con PMA + ionomicina, en presencia o en ausencia de compuestos de ensayo siguiendo el procedimiento descrito a continuación.
Se emplea un anticuerpo anti-IL-2 humana monoclonal (MAB602) (captura), un anticuerpo anti-IL-2 humana biotinilado (BAF202) (detección) e IL-2 humana recombinante (202-IL-010) (patrón) de R&D Systems.
Preparación de las placas
Se trasladaron 100 \mul de anticuerpo de captura diluido en PBS a 5 \mug/ml (PBS-Tween al 0,05%) a una placa de ELISA de 96 pocillos y se incubó durante la noche a temperatura ambiente.
Cada pocillo se aspira y se lava 3 veces con tampón de lavado (PBS-Tween al 0,05%). Después del último lavado la placa se humedece.
Procedimiento de ensayo
1. Se añaden 100 \mul de muestra o de patrón (2000, 1000, 500, 250, 125, 62,5, 31,25 pg/ml) y se incuba durante 2 horas a temperatura ambiente.
2. Se lava 3 veces.
3. Se añaden 100 \mul de anti-IL-2 humana biotinilado a 12,5 ng/ml y se incuba durante 2 horas a temperatura ambiente.
4. Se lava 3 veces.
5. Se añaden 100 \mul de estreptavidina-HRP (Zymed nº 43-4323) a 1:10.000 y se incuba durante 30 minutos a temperatura ambiente.
6. Se lava 3 veces.
7. Se añaden 100 \mul de disolución sustrato (ácido cítrico/Na_{2}HPO_{4} (1:1) + H_{2}O_{2} 1:2000 + OPD) y se incuba durante 20-30 minutos a temperatura ambiente.
8. Se añaden 50 \mul de disolución de detención (H_{2}SO_{4} al 20%) a cada pocillo.
9. Se mide la densidad óptica utilizando un lector de placas de microvaloración ajustado a 450 nm con corrección a 570 nm.
El resultado de este ensayo demuestra que diversos compuestos de ensayo disminuyen la producción de IL-2 en más del 30% a 3 \muM.
Ensayo de indicador de c-Jun
La fosforilación del factor de la transcripción c-jun por JNK en la vía de señalización de transducción de señales de MAP quinasas puede seguirse mediante un sistema de transindicación, como PathDetect®, disponible en el mercado (32).
La inhibición de la fosforilación utilizando los compuestos según la fórmula I puede entonces evaluarse.
Un sistema de transindicación permite seguir, a través de la actividad luciferasa, el estado de activación de una proteína transactivadora de fusión. La proteína de transactivación consiste en el dominio de activación del factor de transcripción de interés (c-jun) condensado con un activador de la transcripción de levadura, el dominio de unión al ADN GAL4 (dbd). El GAL4 dbd tiene la ventaja de que ningún factor de transcripción de mamíferos conocido puede unirse a él y, por tanto, el ruido de fondo del ensayo es muy bajo.
En el presente caso, se emplean líneas celulares HeLa con indicador de luciferasa-c-Jun (HLR-c-Jun) que expresan constitutivamente GAL4-cJun.
Se insertó el gen MEKK-1. MEKK-1 es una MAPKKK que desencadena la activación de JNK. La expresión de MEKK-1 de tipo salvaje es suficiente para la activación de JNK (33). Cuando el JNK se activa puede inducir la fosforilación del dominio c-jun de la proteína de transactivación de fusión (GAL4dbd-cJun) que forma un dímero. El dímero entonces es capaz de unirse a una secuencia de activación corriente arriba GAL4 (GAL4 UAS) del indicador, que activa la expresión de luciferasa.
La expresión de luciferasa se detecta mediante luminiscencia utilizando un ensayo sencillo, como en sistema de ensayo de indicador Dual-Luciferase® (34) en el que emplea Renilla como "indicador control".
La inhibición de JNK se observa como una disminución en la expresión de luciferasa y se detecta mediante una disminución en la luminiscencia.
Cultivo celular
Las células HLR-c-Jn se cultivan en DMEM con alto contenido en glucosa suplementado con FCS al 10% (Sigma), glutamina 2 mM (Gibco), penicilina/estreptomicina, higromicina b 100 \mug/ml, y G418 250 \mug/ml.
Preparación de cultivos celulares Bancos de células
Las células se conservan congeladas en criotubos en nitrógeno líquido como volúmenes de 1,8 ml de suspensión celular en medio de cultivo que contenía sulfóxido de dimetilo al 10%.
Descongelación de los cultivos celulares
Cuando resultó necesario, los viales congelados de células se descongelaron con rapidez a 37ºC en un baño de agua agitando con suavidad hasta una descongelación semicompleta. Después la suspensión celular se añade a 10 ml de medio de cultivo y después se centrifugó durante 5 minutos a 1200 rpm. El sobrenadante se retira y el sedimento celular se reconstituye en el medio. Los matraces se incuban a 37ºC en una atmósfera de CO_{2} al 5%.
Transferencia de las células
Las células se subcultivan en serie (se transfieren) cuando se obtuvieron monocapas con 80% de confluencia.
El medio de cada matraz se retira y la monocapa se lava con 10-15 ml de disolución tampón fosfato (PBS).
Se añade tripsina-EDTA a la monocapa celular, se incuba a 37ºC y se dan golpecitos suaves cada cierto tiempo para desprender las células. Se confirma el desprendimiento y la disgregación completa de la monocapa celular mediante examen al microscopio. Las células entonces se resuspenden en 10 ml de medio completo y se centrifugan durante 5 minutos a 1200 rpm. Los sobrenadantes se rechazan, las células se resuspenden en medio de cultivo y se diluyen 1/5 en matraces de 175 cm^{2}.
Día 0 por la mañana
Preparación de las células para las transfecciones
Las células de los cultivos casi confluentes se desprenden y se disgregan mediante un tratamiento con tripsina como se describió anteriormente.
Las células se resuspenden en medio de cultivo y se cuentan.
Las suspensiones celulares se diluyen con medio para producir aproximadamente 3,5 x 10^{6} células/ml, y 1 ml \mul de suspensión celular se coloca en placas de cultivo de 210 cm que contenían 9 ml de medio de cultivo.
Las placas se incuban a 37ºC en una atmósfera humidificada de CO_{2} al 5% en aire.
Día 0 por la tarde
Transfecciones:
Control: 0,2 \mug de pTK Renilla, 5,8 \mug de pBluescript KS, 500 \mul de OPTIMEM (GIBCO), 18 \mul de Fugene 6.
Inducidas: 0,1 \mug de pMEKK1, 0,2 \mug de pTK Renilla, 5,7 \mug de pBluescript KS, 500 \mul de OPTIMEM (GIBCO), 18 \mul de Fugene 6; 30 minutos a temperatura ambiente.
La mezcla de transfección se añade a las células cultivadas en placa. Las placas se incuban durante la noche a 37ºC en una atmósfera humidificada de CO_{2} al 5% en aire.
Día 1
Se prepara una placa de 96 pocillos (100 \mul de medio de cultivo por pocillo).
Control negativo (vehículo): Se añaden 2 \mul de DMSO a los 100 \mul (por triplicado).
Se añaden 2 \mul de compuesto según la fórmula I en forma de diluciones de la disolución madre (3, 1 y 0,1 mM en DMSO al 100%) a los 100 \mul (por triplicado).
Las células transfectadas se tripsinizan y se resuspenden en 12 ml de medio de cultivo. Se añaden 100 \mul de la dilución a cada uno de los pocillos de la placa de 96 pocillos.
La placa se incuba durante la noche a 37ºC en una atmósfera humidificada de CO_{2} al 5% en aire.
Día 2
Procedimiento de ensayo: sistema de ensayo de indicador Dual-Luciferase® (34).
El medio se retira de la placa y las células se lavan dos veces con 100 \mul de PBS. Se aplica un reactivo de lisis (tampón de lisis pasiva, PLB). Cada pocillo de cultivo recibe 5 \mul de IX PLB. Las placas de cultivo se colocan en una plataforma oscilante o agitador orbital con una suave oscilación/agitación para asegurarse de que la monocapa celular quede completamente cubierta por IX PLB. Las placas de cultivo se hacen oscilar a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se trasladan 20 \mul del lisado a una placa de 96 pocillos opaca blanca. Se registra la lectura del luminómetro.
Se inyectan aproximadamente 50 \mul del reactivo II del ensayo de luciferasa y las lecturas se registran a 5 y 10 minutos.
Se inyectan 50 \mul de reactivo Stop&Glo® y las lecturas se registran a 5 y 10 minutos.
Entonces se mide la luminiscencia relativa: RLU de luciferasa/RLU de Renilla.
El resultado de este ensayo muestra que diversos compuestos de ensayo inhiben más del 20% de la actividad JNK a 10 \muM.
Choque endotóxico inducido por LPS en ratones
Se evaluó la capacidad de los inhibidores de JNK descritos en la fórmula I para reducir significativamente el nivel de citoquinas inflamatorias inducidas por una exposición a LPS utilizando el siguiente protocolo.
Las endotoxinas son constituyentes de lipopolisacárido (LPS) de la membrana externa de bacterias Gram negativas. Se ha demostrado que la respuesta a LPS implica la activación de diferencias poblaciones celulares y conduce a la expresión de diversas citoquinas inflamatorias que incluyen el factor-alfa de necrosis tumoral (TNF\alpha) y gamma-interferón (IFN-\gamma). Puesto que se sabe que los LPS estimulan la activación de diversas vías de MAP quinasas, incluyendo JNK (35), puede ensayarse la capacidad de los inhibidores de JNK después de que la vía de señalización de JNK se ha activado mediante una exposición a LPS.
La actividad como inhibidores de JNK de los compuestos de fórmula I puede evaluarse después de una exposición a LPS utilizando el siguiente protocolo.
Se inyecta LPS (S. abortus, Galanos Lab.) (200 \mug/kg, por vía intravenosa) a ratones macho C57BL/6 para inducir el choque endotóxico. Los compuestos según la fórmula I (0,1, 1, 10 mg/kg) o NaCl (200 uM) se inyectan por vía intravenosa (10 ml/kg) 15 min antes de la exposición a LPS. Se obtuvo sangre heparinizada del seno orbital en diferentes momentos después de la exposición a LPS, y la sangre se centrifugó a 9.000 rpm durante 10 min a 4ºC para recoger el sobrenadante. Las mediciones de la producción de citoquinas, como TNF\alpha e IFN\gamma, por los ratones se realizan con un kit ELISA, como Duoset® DY410 para TNF\alpha y DY 485 para IFN\gamma. Pueden utilizarse otros ensayos ELISA como se describen en (36).
Isquemia global en jerbos
Se evaluó la capacidad de los inhibidores de JNK descritos en la fórmula I para proteger frente a la muerte celular durante un acontecimiento de ictus utilizando el siguiente protocolo.
La oclusión de la carótida bilateral en jerbos es un modelo animal bien descrito de ictus isquémico agudo e implica técnicas quirúrgicas relativamente fáciles.
La degeneración neuronal en el hipocampo se desarrolla a lo largo de varios días y a menudo se denomina "muerte neuronal retrasada". Además, la neurodegeneración observada de modo histológico es obvia y se cuantifica con facilidad (37). Además, la histopatología que se observa en el jerbo es similar a la que se observa en la región CA1 del hipocampo en el cerebro humano después de una parada cardíaca. En el caso de los jerbos, incluso pueden realizarse observaciones del comportamiento, como ensayos de memoria. Este tipo de ensayos para apreciar el grado de recuperación no pueden realizarse con facilidad en otros modelos, como en ratas, cuya capacidad de aprendizaje es mucho peor (38).
Puede evaluarse el efecto neuroprotector según la fórmula I para proteger utilizando el modelo de isquemia global en jerbos y el siguiente protocolo.
1. Método
* Cirugía:
-
Se anestesia con isoflurano (al 0,5-4%).
-
Se retiran las arterias carótidas comunes (izquierda y derecha) del tejido.
-
Se bloquean las arterias utilizando micrograpas Bulldog durante 5 min.
-
Se retiran las grapas (reperfusión).
-
Se estabulan los animales bajo una bombilla calentadora hasta que despiertan.
-
Se estabulan los animales en el animalario en jaulas individuales.
* Sacrificio de los animales:
-
Se sacrifican 7 días después de la isquemia (decapitación o sobredosis de pentobarbital).
-
Se toman muestras del cerebro.
* Parámetros histológicos:
-
Se congela el cerebro en isopentano (-20ºC).
-
Se hacen cortes del hipocampo utilizando un criomicrotomo (20 \mum).
-
Se tiñe con el método del violeta de cresilo.
-
Se evalúan las lesiones (en los subcampos CA1/CA2 del hipocampo) mediante una puntuación de Gerhard y Boast modificada (39).
2. Tratamiento
- Se administra el compuesto según la fórmula I o el vehículo: 15 min, 24 horas y 48 horas después de la reperfusión (5-10 min después de la recuperación de la anestesia).
- Se realiza el protocolo convencional.
50 animales: 5 grupos de 8 (grupo A: control, grupos B-D: artículo de ensayo a 3 dosis, y grupo E: compuesto de referencia (ácido orótico 3 x 300 mg/kg, por vía intraperitoneal).
Los compuestos de ensayo muestran una capacidad considerable para proteger frente a la apoptosis neuronal durante una isquemia global inducida.
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Claims (17)

1. Derivados de benzsulfonamida según la fórmula I
27
con sus isómeros geométricos, en una forma ópticamente activa como enantiómeros, diastereómeros, así como en forma de racematos, así como sus sales farmacéuticamente aceptables, en la que
Ar^{1} se selecciona del grupo que consiste en fenilo, tienilo, furilo, piridilo, que pueden estar opcionalmente sustituidos con 1 a 5 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en "alquilo C_{1}-C_{6}", "(alquilo C_{1}-C_{6})arilo", "(alquilo C_{1}-C_{6})heteroarilo", "alquenilo C_{2}-C_{6}", "alquinilo C_{2}-C_{6}", grupos amino primarios, secundarios o terciarios, o restos amonio cuaternario, "acilo", "aciloxi", "acilamino", "aminocarbonilo", "alcoxicarbonilo", "arilo", "heteroarilo", carboxilo, ciano, halógeno, hidroxi, mercapto, nitro, sulfoxi, sulfonilo, alcoxi, tioalcoxi y trihalometilo,
R^{1} es hidrógeno o un grupo alquilo C_{1}-C_{6};
R^{2} es hidrógeno, -COOR^{3}, -CONR^{3}R^{3'}, OH, un alquilo C_{1}-C_{4} sustituido con un grupo OH, un grupo hidrazido carbonilo, un sulfato, un sulfonato, una amina o una sal de amonio;
n es 0 ó 1;
Y es cualquiera de las aminas cíclicas que tienen las fórmulas generales
28
en las que L^{1} y L^{2} se seleccionan independientemente entre sí del grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, alquinilo C_{2}-C_{6}, cicloalquilo C_{4}-C_{8}, que contienen opcionalmente 1-3 heteroátomos y que están opcionalmente condensados con arilo o heteroarilo; o L^{1} y L^{2} se seleccionan independientemente del grupo que consiste en arilo, heteroarilo, aril(alquilo C_{1}-C_{6}), heteroaril(alquilo C_{1}-C_{6}), -C(O)-OR^{3}, -C(O)-R^{3}, -C(O)-NR^{3'}R^{3}, -NR^{3'}R^{3}, -NR^{3'}C(O)R^{3}, -NR^{3'}C(O)NR^{3'}R^{3}, -(SO)R^{3}, -(SO_{2})R^{3}, -NSO_{2}R^{3}, -SO_{2}NR^{3'}R^{3},
con la condición de que cuando Y es piperidilo, L^{1} y L^{2} no pueden ser ambos H,
siendo R^{3} R^{3'} sustituyentes seleccionados independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{6}, alquenilo C_{2}-C_{6}, arilo, heteroarilo, aril(alquiilo C_{1}-C_{6}), heteroaril(alquilo C_{1}-C_{6});
en la que arilo se selecciona del grupo que consiste en fenilo, naftilo y fenantrilo,
en la que heteroarilo se selecciona del grupo que consiste en piridilo, pirrolilo, furilo, tienilo, imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, pirazolilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, 1,3,4-triazinilo, 1,2,3-triazinilo, benzofurilo, [2,3-dihidro]benzofurilo, isobenzofurilo, benzotienilo, benzotriazolilo, isobenzotienilo, indolilo, isoindolilo, 3H-indolilo, benzimidazolilo, imidazo[1,2-a]piridilo, benzotiazolilo, benzoxazolilo, quinolizinilo, quinazolinilo, ftalazinilo, quinoxalinilo, cinnolinilo, naftiridinilo, pirido[3,4-b]piridilo, pirido[3,2-b]piridilo, pirido[4,3-b]piridilo, quinolilo, isoquinolilo, tetrazolilo, 5,6,7,8-tetrahidroquinolilo, 5,6,7,8-tetra-hidroisoquinolilo, purinilo, pteridinilo, carbazolilo, xantenilo o benzoquinolilo, y
o L^{1} y L^{2} tomados conjuntamente forman un grupo alquilo o heteroalquilo cíclico saturado de 4-8 miembros;
R^{6} se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6}, alcoxi C_{1}-C_{6}) OH, halógeno, nitro, ciano, sulfonilo, oxo (=O), y
n' es un número entero de 0 a 4.
2. Un derivado de benzsulfonamida según la reivindicación 1, en el que Ar^{1} es fenilo.
3. Un derivado de benzsulfonamida según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que Ar^{1} se selecciona de un halogenofenilo, nitrofenilo, hidroxifenilo, alcoxifenilo, piridilo, 3,4-dihidroxifenilo, tioxodihidropiridina o su tautómero, pirazol, R^{1} es hidrógeno, n es 1.
4. Un derivado de benzsulfonamida según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que Y es una piperidina
29
siendo (R^{6})_{n}, L^{1} y L^{2} son como se definió anteriormente.
5. Un derivado de benzsulfonamida según la reivindicación 4, en el que R^{6} es H, L^{2} es H, L^{1} es -NHR^{3}, siendo R^{3} un alquilo C_{4}-C_{12} lineal o ramificado, preferiblemente un alquilo C_{6}-C_{10}, opcionalmente sustituido con un grupo ciclohexilo, o R^{3} es un grupo bencilo.
6. Un derivado de benzsulfonamida según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, seleccionado del grupo que consiste en:
4-cloro-N-(3-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}fenil)benzamida;
4-cloro-N-{4-[(4-{[4-(trifluorometil)bencil]amino}-1-piperidinil)sulfonil]-fenil}benzamida;
4-cloro-N-(4-{[4-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-piperidinil]sulfonil}fenil)-benzamida;
4-cloro-N-(4-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)benzamida;
4-cloro-N-(4-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}fenil)benzamida;
4-cloro-N-(3-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)benzamida;
4-cloro-N-{3-[(4-{[4-(trifluorometil)bencil]amino}-1-piperidinil)sulfonil]bencil}-benzamida;
4-cloro-N-(3-{[4-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)-benzamida;
4-cloro-N-(4-{[4-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)-benzamida;
4-cloro-N-(3-{[3-(hexilamino)-1-pirrolidinil]sulfonil}fenil)benzamida;
4-cloro-N-{4-[(4-{[4-(trifluorometil)bencil]amino}-1-piperidinil)sulfonil]- bencil}benzamida;
4-cloro-N-(3-{[3-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-pirrolidinil]sulfonil}fenil)-benzamida;
N-(4-{[4-(butilamino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)-2-oxo-1,2-dihidro-3-piridincarboxamida;
4-cloro-N-{4-[(3-{[4-(trifluorometil)bencil]amino}-1-pirrolidinil)sulfonil]-fenil]benzamida;
4-cloro-N-{4-[(3-{[2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)}-1-pirrolidinil)sulfonil]-fenil}benzamida;
4-cloro-N-{3-[(4-{[4-(trifluorometil)bencil]amino}-1-piperidinil)sulfonil]-fenil]benzamida;
4-cloro-N-{3-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]-fenil}benzamida;
4-cloro-N-(4-{[3-(hexilamino)-1-pirrolidinil]sulfonil}fenil)benzamida;
4-cloro-N-{4-[(4-{3-[{trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]-bencil}benzamida;
4-cloro-N-(4-{[3-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-pirrolidinil]sulfonil}fenil)-benzamida;
N-{3-[(4-anilino-1-piperidinil)sulfonil]fenil}-4-clorobenzamida;
4-cloro-N-(3-{[4-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-piperidinil]sulfonil}fenil)-benzamida;
4-cloro-N-(4-{[3-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-pirrolidinil]sulfonil}fenil)-benzamida;
4-cloro-N-{3-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]-bencil}benzamida;
4-cloro-N-{4-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]-fenil}benzamida;
4-cloro-N-{3-[(3-{4-[(trifluorometil)bencil]amino}-1-pirrolidinil)sulfonil]-bencil]benzamida;
4-cloro-N-(4-{[3-({2-[3-(trifluorometil)fenil]etil}amino)-1-pirrolidinil]sulfonil}bencil)-benzamida;
N-(4-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)-2-hidroxinicotinamida;
N-(3-{[4-(hexilamino)-1-piperidinil]sulfonil}bencil)-2-hidroxinicotinamida;
2-hidroxi-N-{3-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]-bencil}nicotinamida;
2-hidroxi-N-{4-[(4-{3-[(trifluorometil)sulfonil]anilino}-1-piperidinil)sulfonil]-bencil]nicotinamida.
\vskip1.000000\baselineskip
7. Derivado de benzsulfonamida según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, para su uso como medicamento.
8. Uso de un derivado de benzsulfonamida según una cualquiera de las reivindicaciones 1-6 para la preparación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno neuronal seleccionado de epilepsia, enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, enfermedades retinianas, lesiones de la médula espinal, esclerosis múltiple, traumatismo craneal e isquemia, una enfermedad autoinmunológica seleccionada de enfermedad del intestino inflamatoria (IBD), artritis reumatoide, asma, choque séptico, rechazo de transplantes, un cáncer seleccionado de cáncer de mama, colorrectal, pancreático, ovárico, de próstata, testicular, hepático, de riñón, de pulmón, una enfermedad cardiovascular que incluye ictus, arteriosclerosis, infarto de miocardio, lesiones por reperfusión miocárdicas, y un trastorno isquémico que incluye lesiones por reperfusión de corazón, renales, de riñón y de cerebro, insuficiencia renal.
9. Uso de un derivado de sulfonamida según una cualquiera de las reivindicaciones 1-6 para la preparación de un medicamento para la modulación de la vía de JNK, que es adecuado para su uso para tratar la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de Huntington, la enfermedad de Parkinson, las enfermedades retinianas, las lesiones de la médula espinal, la esclerosis múltiple, el traumatismo craneal, la epilepsia y los ataques, los ictus cerebrales isquémicos y hemorrágicos, el asma, el rechazo de transplantes, los procesos inflamatorios, como la enfermedad del intestino inflamatoria (IBD), los trastornos de erosión de cartílagos y huesos, la artritis reumatoide, el choque séptico, los cánceres de mama, colorrectal, pancreático, de próstata, testicular, de ovario, de pulmón, hepático y de riñón, la arteriosclerosis, la reestenosis, el ictus, la isquemia, la isquemia cerebral y el infarto de miocardio.
10. Uso según la reivindicación 9 para el tratamiento o la prevención de trastornos asociados con la expresión o la actividad anómala de JNK.
11. Uso según la reivindicación 10 para el tratamiento o la prevención de trastornos asociados con la expresión o la actividad anómala de JNK2 y/o JNK3.
12. Una composición farmacéutica que contiene un derivado de benzsulfonamida según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, y un vehículo, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable.
13. Proceso para la preparación de un derivado de benzsulfonamida según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en el que una sulfonamida (XIX)
30
en la que Ar^{1}, R^{1}, R^{2} y n son como se definió anteriormente, e Y es una pirrolidin-3-ona o una piperidin-4-ona, se somete a una aminación reductora utilizando una amina H_{2}N-R^{3} con R^{3} como se definió anteriormente.
14. Proceso según la reivindicación 13, en el que se realizan las siguientes etapas:
31
15. Un proceso según la reivindicación 13, en el que se realizan las siguientes etapas:
\vskip1.000000\baselineskip
32 
\newpage
16. Un proceso según la reivindicación 13, en el que se realizan las siguientes etapas:
33
17. Compuestos de sulfonamida (XIX)
34
en la que
Ar^{1} se selecciona del grupo que consiste en fenilo, tienilo, furilo, piridilo;
R^{1} es hidrógeno o un grupo alquilo C_{1}-C_{6};
R^{2} es hidrógeno, -COOR^{3}, -CONR^{3}R^{3'}, OH, un alquilo C_{1}-C_{4} sustituido con un grupo OH, un grupo hidrazido carbonilo, un sulfato, un sulfonato, una amina o una sal de amonio;
n es 0 ó 1; e
Y es una pirrolidin-3-ona o una piperidin-4-ona.
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