ES2318041T3 - Derivados de arilsulfonamida como inhibidores de c-jun quinasas (jnk) n-terminales. - Google Patents
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Abstract
Un derivado de sulfonamida de acuerdo con la fórmula I así como sus isómeros geométricos, sus formas ópticamente activas como enantiómeros, diastereoisómeros y mezclas de estos, así como sales del mismo, en donde: Ar 1 es un grupo arilo o heteroarilo sustituido o no sustituido; X es O o S; Ar 2 es un grupo arileno o heteroarileno sustituido o no sustituido; R 1 y R 2 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y un grupo alquilo C1-C6; R a , R a '', R b , R b'' se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C 1-C 6; R 3 se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C1-C10, alquenilo C2-C10, alquinilo C2-C10, arilo o heteroarilo, cicloalquilo de 3-8 miembros que contiene opcionalmente 1-3 heteroátomos seleccionados de N, O, S, aril-alquilo (C1-C10) y heteroaril-alquilo (C1-C10); R 4 se selecciona del grupo que consiste en H y -C(H)R 5 R 6 ; R 5 y R 6 se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C1-C10, alquenilo C2-C10, alquinilo C2-C10, arilo o heteroarilo, cicloalquilo de 3-8 miembros que contiene opcionalmente 1-3 heteroátomos seleccionados de N, O, S, aril-alquilo (C 1-C 10) y heteroaril-alquilo (C 1-C 10); m es un número entero de 1 a 5; n es un número entero de 0 a 2; y p es un número entero de 1 a 10; con la condición de que el compuesto de acuerdo con la fórmula I no sea: N-[[5-[[[3-[[4-[(3-aminopropil)amino]butil]amino]-propil]amino]sulfonil]-2-tienil]metil]-benzamida, ni N-[[5-[[[3-[[4-[(3-aminopropil)amino]butil]amino]-propil]amino]sulfonil]-2-tienil]metil]-4-cloro-benzamida, ni N,N''-[1,4-butanodiilbis(imino-3,1-propanodiiliminosulfonil-5,2-tiofenodiilmetilen)]-bis[4-cloro-]benzamida.
Description
Derivados de arilsulfonamida como inhibidores de
c-Jun quinasas (JNK)
N-terminales.
La presente invención se refiere a nuevos
derivados de sulfonamida así como a métodos para su preparación. La
presente invención se refiere además a derivados de sulfonamida para
el uso como compuestos farmacéuticamente activos, así como a
formulaciones farmacéuticas que contienen tales derivados de
sulfonamida. En particular, la presente invención se refiere a
derivados de sulfonamida útiles en el tratamiento y/o la prevención
de trastornos relacionados con la apoptosis y enfermedades
inflamatorias. Por otra parte, la presente invención se refiere a
derivados de sulfonamida que presentan una actividad moduladora,
principalmente inhibidora, de la función o las rutas de
c-Jun quinasas N-terminales (JNKs,
por sus siglas en inglés), respectivamente.
Las células de mamífero responden a algunos
estímulos extracelulares activando cascadas de señalización que
están mediadas por diversas proteína quinasas activadas por
mitógenos (MAPKs, por sus siglas en inglés). A pesar de las
diferencias en su respuesta a estímulos aguas arriba, las cascadas
de MAP quinasas se organizan de un modo similar, consistiendo en
MAP quinasa quinasa quinasas (MAPKKK o MEKK), MAP quinasa quinasas
(MAPKK o MKK) y MAP quinasas (MAPK). Las MAP quinasas son una
amplia familia de quinasas que incluye c-Jun
quinasas N-terminales (JNKs), también conocidas
como "proteína quinasas activadas por estrés" (SAPKs, por sus
siglas en inglés), así como quinasas reguladas por señales
extracelulares (ERKs, por sus siglas en inglés) y MAP quinasas p38.
Cada una de estas tres subfamilias de MAP quinasas está implicada en
al menos tres rutas diferentes pero paralelas que transportan la
información puesta en marcha por estímulos externos. La ruta de
señalización de JNK es activada por la exposición de las células a
estrés ambiental - tal como toxinas químicas, radiación, hipoxia y
choque osmótico -así como por el tratamiento de las células con
factores de crecimiento o citoquinas proinflamatorias- tales como
factor de necrosis tumoral alfa (TNF-\alpha) o
interleuquina-1 beta
(IL-1\beta).
Dos MAP quinasa quinasas (conocidas como MKKs o
MAPKKs), es decir MKK4 (también conocida como JNKK1) y MKK7,
activan JNK mediante una fosforilación doble de residuos de treonina
y tirosina específicos situados dentro de un motivo
Thr-Pro-Tyr durante el ciclo de
activación de la enzima, en respuesta a citoquinas y señales de
estrés. Incluso más aguas arriba en la cascada de señalización, se
sabe que la MKK4 es también activada por una MAP quinasa quinasa
quinasa, MEKK1, a través de fosforilación en los residuos de serina
y treonina.
Una vez activada, la JNK se une a la región
N-terminal de dianas de factores de transcripción y
fosforila los dominios de activación de la transcripción dando como
resultado la regulación al alza de la expresión de diversos
productos génicos, lo que puede conducir a apoptosis, respuestas
inflamatorias o procesos oncogénicos (1-5).
Algunos factores de transcripción que se sabe
que son sustratos de JNK son las proteínas Jun
(c-jun, JunB y JunD), los factores de transcripción
relacionados ATF2 y ATFa, factores de transcripción de Ets tales
como Elk-1 y Sap-1, el supresor
tumoral p53 y una proteína del dominio de muerte celular (DENN, por
sus siglas en inglés).
Tres enzimas JNK distintas se han identificado
como productos de los genes JNK1, JNK2 y JNK3 y a continuación se
han identificado diez isoformas diferentes (3, 6, 7). JNK1 y -2 se
expresan ubicuamente en tejidos humanos, mientras que JNK3 se
expresa selectivamente en el corazón, el pulmón y los testículos (7,
8, 9, 10). Cada isoforma se une a los sustratos con diferentes
afinidades, sugiriendo, in vivo, una regulación específica
para el sustrato de las rutas de señalización por las diferentes
isoformas de JNK.
La activación de la ruta de JNK ha sido
documentada en un número de procesos patológicos, proporcionando así
una razón de ser para dirigirse a esta ruta para el descubrimiento
de fármacos. Además, los sistemas de genética molecular han validado
el papel patógeno de esta ruta en varias enfermedades.
Por ejemplo, las enfermedades autoinmunes e
inflamatorias derivan de la activación inapropiada del sistema
inmunitario. Las células inmunitarias activadas expresan muchos
genes que codifican moléculas inflamatorias, incluyendo citoquinas,
factores de crecimiento, receptores de la superficie celular,
moléculas de adhesión celular y enzimas degradativas. Se sabe que
muchos de estos genes son regulados por la ruta de JNK, a través de
la activación de los factores de transcripción c-Jun
y ATF-2.
La inhibición de la activación de JNK en
macrófagos estimulados con lipopolisacáridos bacterianos modula
eficazmente la producción de la citoquina proinflamatoria clave,
TNF-\alpha (11).
La inhibición de la activación de JNK disminuye
la activación de factores de transcripción responsables de la
expresión inducible de metaloproteinasas de matriz (MMPs, por sus
siglas en inglés) (12), que se sabe que son responsables de la
promoción de la erosión de los cartílagos y huesos en la artritis
reumatoide y de la destrucción tisular generalizada en otras
enfermedades autoinmunes.
\newpage
\global\parskip0.900000\baselineskip
La cascada de JNK también es activada en células
T por la estimulación antigénica y la coestimulación de receptor de
CD28 (13) y regula la producción del promotor de
IL-2 (14). La activación inapropiada de linfocitos T
inicia y perpetúa muchas enfermedades autoinmunes, incluyendo asma,
síndrome del intestino irritable y esclerosis múltiple.
En neuronas vulnerables al daño por enfermedad
de Alzheimer y en neuronas CA1 de pacientes con hipoxia aguda (15),
la proteína JNK3 se expresa altamente. También se encontró que el
gen JNK3 se expresaba en las regiones dañadas de los cerebros de
pacientes con enfermedad de Alzheimer (16). Además, se encontró que
las neuronas de ratones JNK3 KO eran resistentes a la apoptosis
neuronal inducida por ácido caínico en comparación con neuronas de
ratones silvestres (8).
Basándose en estos hallazgos, se cree que la
ruta de señalización de JNK, y especialmente la de JNK2 y JNK3,
está implicada en enfermedades neurodegenerativas conducidas por
apoptosis tales como la enfermedad de Alzheimer, la enfermedad de
Parkinson, la epilepsia y las apoplejías, la enfermedad de
Huntington, las lesiones cerebrales traumáticas, así como los
ataques isquémicos y hemorrágicos.
Las enfermedades cardiovasculares, tales como la
aterosclerosis y la restenosis, resultan de una regulación
defectuosa del crecimiento de la pared de los vasos sanguíneos. La
ruta de JNK es activada por estímulos aterogénicos y regula la
producción local de citoquinas y factores de crecimiento en células
vasculares (17, 18) induciendo el gen proaterosclerótico (19).
La isquemia sola o acoplada con reperfusión en
el corazón, el hígado, el riñón o el cerebro da como resultado
muerte celular y formación de cicatrices, lo que finalmente puede
conducir a fallo cardíaco congestivo, trastornos hepáticos, fallo
renal o disfunción cerebral. La ruta de JNK es activada por isquemia
y reperfusión en el corazón (20), conduciendo a la activación de
genes sensibles a JNK y a daño tisular mediado por leucocitos. La
activación de JNK también se observa en el riñón (21) o el hígado
(22) después de isquemia y reperfusión. Ha resultado que la
regulación a la baja de JNKs mejora la función renal y el resultado
a largo plazo durante el fallo renal nefrítico e isquémico (23).
El cáncer se caracteriza por crecimiento
descontrolado, proliferación y migración de células. En el cáncer
de pulmón temprano, la expresión de c-jun está
alterada y puede mediar en la señalización de factores de
crecimiento en el cáncer de pulmón de células no pequeñas (24).
Además de regular la producción y la actividad de
c-jun, la activación de JNK puede regular la
fosforilación de p53, y así puede modular la progresión del ciclo
celular (25). Por otra parte, el papel de la activación de JNK en
la tumorigénesis mediada por HTLV-1 (virus de
leucemia huma de células T tipo 1, por sus siglas en inglés) (26)
sugiere el uso potencial de inhibidores de JNK en el tratamiento
del cáncer (27). La inhibición selectiva de la activación de JNK por
una proteína inhibidora de JNK presente en la naturaleza, llamada
proteína que interactúa con JNK 1 (JIP1, por sus siglas en inglés),
bloquea la transformación celular (28). Así, los inhibidores de JNK
pueden bloquear la transformación y el crecimiento de células
tumorales.
Se han propuesto varias moléculas pequeñas como
moduladores de la ruta de JNK.
Los derivados de ariloxindol de la fórmula (A)
(documento WO 00/35909; documento WO 00/35906; documento WO
00/35921) y la fórmula (B) (documento WO 00/64872) genéricas,
respectivamente, se han desarrollado para el tratamiento de
enfermedades neurodegenerativas, inflamación y tumores sólidos para
la fórmula (A) y para el tratamiento de una amplia gama de
trastornos, incluyendo enfermedades neurodegenerativas, enfermedades
inflamatorias y autoinmunes, trastornos cardiovasculares y óseos,
para la fórmula (B).
Se ha dado cuenta de que los derivados de
pirazoloantronas de fórmula (C) inhiben JNK para el tratamiento de
enfermedades degenerativas neurológicas, trastornos inflamatorios y
autoinmunes, así como patologías cardiovasculares (documento WO
01/12609).
\global\parskip1.000000\baselineskip
Se dio cuenta de que los derivados de
tetrahidropirimidina de fórmula (D) eran inhibidores de JNK útiles
en el tratamiento de una amplia gama de enfermedades, incluyendo
enfermedades neurodegenerativas, trastornos inflamatorios y
autoinmunes y patologías cardíacas y óseas destructivas (documento
WO 00/75118).
Se ha propuesto que otros compuestos
heterocíclicos de fórmula (E) inhiben proteína quinasas y
especialmente c-jun quinasas
N-terminales (documento WO 01/12621) para tratar
"estados mediados por JNK", incluyendo enfermedades
neurodegenerativas, trastornos inflamatorios y autoinmunes,
trastornos óseos destructivos y enfermedades cardiovasculares e
infecciosas.
Derivados de benzazoles tales como los
representados por la fórmula (F) (documento WO 01/47920) se han
descrito como moduladores de la ruta de JNK y especialmente como
inhibidores selectivos de JNK2 y/o JNK3 para el tratamiento de
trastornos neuronales, enfermedades autoinmunes, cánceres y
enfermedades cardiovasculares.
También se han desarrollado varios derivados de
sulfonamida de fórmula (G) (documento WO 01/23378), derivados de
sulfonilaminoácido de fórmula (H) (documentos WO 01/23379, EP
1088815) y derivados de sulfonilhidrazida de fórmula (J) (documento
WO 01/23382), para inhibir JNKs, especialmente JNK2 y JNK3, para
tratar enfermedades neurodegenerativas, trastornos autoinmunes,
cánceres y enfermedades cardiovasculares.
El documento WO 0/172685 describe análogos de
poliamina citotóxicos, tales como el compuesto análogo 1278 de
fórmula (K),
N,N'-[1,4-butanodiilbis(imino-3,1-propanodiilimino-sulfonil-5,2-tiofenodiilmetilen)]bis[4-cloro-]ben-
zamida, como agentes farmacéuticos útiles para tratar enfermedades en las que se desea inhibir el crecimiento y/o la proliferación celular, por ejemplo cáncer y lesión posangioplástica.
zamida, como agentes farmacéuticos útiles para tratar enfermedades en las que se desea inhibir el crecimiento y/o la proliferación celular, por ejemplo cáncer y lesión posangioplástica.
La gran importancia de la ruta de la JNK en
algunas enfermedades ampliamente extendidas subraya la necesidad de
desarrollar inhibidores, preferentemente selectivos, de JNKs,
incluyendo inhibidores de JNK3.
Un objetivo de la presente invención es
proporcionar moléculas que sean adecuadas para el tratamiento de una
variedad de enfermedades, en particular de trastornos relacionados
con el sistema autoinmune o neuronal, cáncer, estados isquémicos y
enfermedades cardiovasculares.
Notablemente, un objetivo de la presente
invención es proporcionar compuestos químicos que sean capaces de
modular, preferiblemente regular a la baja o inhibir, la ruta de la
JNK (Jun quinasa) a fin de que sean útiles en un método para tratar
enfermedades que implican la ruta de JNK.
Por otra parte, un objetivo de la presente
invención es proporcionar métodos para preparar dichos compuestos
químicos. Además, un objetivo de la presente invención es
proporcionar una nueva categoría de formulaciones farmacéuticas para
el tratamiento de enfermedades, en particular las mediadas por la
función de JNK.
Finalmente, un objetivo de la presente invención
es proporcionar un método para el tratamiento y/o la prevención de
enfermedades que están provocadas por trastornos del sistema
autoinmune y/o neuronal.
En un primer aspecto, la invención proporciona
compuestos de fórmula I:
en la
que
- \bullet
- Ar^{1} se selecciona de grupos arilo o heteroarilo sustituidos o no sustituidos;
- \bullet
- Ar^{2} se selecciona de grupos arileno o heteroarileno sustituidos o no sustituidos;
- \bullet
- X es O o S, preferiblemente O;
- \bullet
- R^{1} y R^{2} se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y un grupo alquilo C_{1}-C_{6};
- \bullet
- R^{a}, R^{a}', R^{b}, R^{b}' se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C_{1}-C_{6};
- \bullet
- R^{3} se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{10}, alquenilo C_{2}-C_{10}, alquinilo C_{2}-C_{10}, arilo o heteroarilo, cicloalquilo de 3-8 miembros que contiene opcionalmente 1-3 heteroátomos seleccionados de N, O, S, aril-alquilo(C_{1}-C_{10}) y heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{10});
- \bullet
- R^{4} se selecciona del grupo que consiste en H y -C(H)R^{5}R^{6};
- \bullet
- R^{5} y R^{6} se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{10}, alquenilo C_{2}-C_{10}, alquinilo C_{2}-C_{10}, arilo o heteroarilo, cicloalquilo de 3-8 miembros que contiene opcionalmente 1-3 heteroátomos seleccionados de N, O, S, aril-alquilo(C_{1}-C_{10}) y heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{10});
- \bullet
- m es un número entero de 1 a 5, preferiblemente entre 1-3 y lo más preferiblemente 1;
- \bullet
- n es un número entero de 0 a 2, preferiblemente 0 ó 1; y
- \bullet
- p es un número entero de 1 a 10, preferiblemente 1 a 6;
con la condición de que el compuesto de acuerdo
con la fórmula I no sea:
- \quad
- N-[[5-[[[3-[[4-[(3-aminopropil)amino]butil]amino]propil]amino]-sulfonil]-2-tienil]metil]-benzamida; ni
- \quad
- N-[[5-[[[3-[[4-[(3-aminopropil)amino]butil]amino]propil]amino]-sulfonil]-2-tienil]metil]-4-cloro]benzamida; ni
- \quad
- N,N'-[1,4-butanodiilbis(imino-3,1-propanodiiliminosulfonil-5,2-tiofenodiilmetilen)]bis[4-cloro]benzamida.
\vskip1.000000\baselineskip
En un segundo aspecto, la invención proporciona
un compuesto de acuerdo con la fórmula I sin condición para el
tratamiento de una enfermedad.
En un tercer aspecto, la invención proporciona
un compuesto de fórmula I, sin condición, para la preparación de una
composición farmacéutica.
En un cuarto aspecto, la invención proporciona
un compuesto de acuerdo con la fórmula I sin condición para la
modulación de la ruta de la JNK.
En un quinto aspecto, la invención proporciona
un método de síntesis de un compuesto de acuerdo con la fórmula I
con condición.
Los siguientes párrafos proporcionan
definiciones de diversos restos y términos químicos, y están
destinados a aplicarse uniformemente a lo largo de la memoria
descriptiva y las reivindicaciones a no ser que una definición
expresamente indicada de otro modo proporcione una definición
diferente.
"Alquilo C_{1}-C_{6}"
se refiere a grupos alquilo monovalentes ramificados o no
ramificados que tienen 1 a 6 átomos de carbono. Esta expresión se
ejemplifica por grupos tales como metilo, etilo,
n-propilo, isopropilo, n-butilo,
isobutilo, terc-butilo, n-hexilo y
similares.
"Cicloalquilo
C_{3}-C_{6}" se refiere a anillos
carbocíclicos saturados o parcialmente insaturados que tienen 3 a 6
átomos de carbono. Ejemplos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo,
ciclopentilo, ciclohexilo, ciclohexenilo y similares.
"Heterocicloalquilo
C_{3}-C_{6}" se refiere a anillos saturados o
parcialmente insaturados que tienen 3 a 5 átomos y que contienen al
menos un heteroátomo seleccionado de N, S y O. Ejemplos incluyen
pirrolidinilo, piperazinilo, morfolinilo y similares.
"Arilo" se refiere a grupos carbocíclicos
aromáticos insaturados de 6 a 14 átomos de carbono que tienen un
anillo sencillo (por ejemplo fenilo) o múltiples anillos condensados
(por ejemplo naftilo). Ejemplos incluyen fenilo, naftilo,
fenantrenilo y similares.
"Aril-alquilo(C_{1}-C_{6})"
se refiere a grupos alquilo C_{1}-C_{6}, según
se define anteriormente, que tienen un sustituyente arilo,
incluyendo bencilo, fenetilo y similares.
"Heteroarilo" se refiere a un grupo
heteroaromático monocíclico o a un grupo heteroaromático de anillos
condensados bicíclico o tricíclico. Ejemplos particulares de grupos
heteroaromáticos incluyen piridilo, pirrolilo, furilo, tienilo,
imidazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo,
pirazolilo, 1,2,3-triazolilo,
1,2,4-triazolilo,
1,2,3-oxadiazolilo,
1,2,4-oxadiazolilo,
1,2,5-oxadiazolilo,
1,3,4-oxadiazolilo,
1,3,4-triazinilo, 1,2,3-triazinilo,
benzofurilo, [2,3-dihidro]benzofurilo,
isobenzofurilo, benzotienilo, benzotriazolilo, isobenzotienilo,
indolilo, isoindolilo, 3H-indolilo,
bencimidazolilo, imidazo[1,2-a] piridilo,
benzotiazolilo, benzoxazolilo, quinolizinilo, quinazolinilo,
ftalazinilo, quinoxalinilo, cinolinilo, naftiridinilo,
pirido[3,4-b]piridilo,
pirido[3,2-b]piridilo,
pirido[4,3-b]piridilo, quinolilo,
isoquinolilo, tetrazolilo,
5,6,7,8-tetrahidroquinolilo,
5,6,7,8-tetrahidroisoquinolilo, purinilo,
pteridinilo, carbazolilo, xantenilo o benzoquinolilo opcionalmente
sustituidos.
"Heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{6})"
se refiere a grupos alquilo C_{1}-C_{6} que
tienen un sustituyente heteroarilo, incluyendo
2-furilmetilo, 2-tienilmetilo,
2-(1H-indol-3-il)etilo
y similares.
"Alquenilo C_{2}-C_{6}"
se refiere a grupos alquenilo que tienen preferiblemente 2 a 6
átomos de carbono y que tienen al menos 1 ó 2 sitios de insaturación
alquenílica. Ejemplos incluyen etenilo (-CH=CH_{2}),
n-2-propenilo (alilo,
-CH_{2}CH=CH_{2}) y similares.
"Alquinilo" se refiere a grupos alquinilo
que tienen de 2 a 6 átomos de carbono y que tienen al menos
1-2 sitios de insaturación alquinílica. Ejemplos
incluyen etinilo (-C\equivCH), propargilo (-CH_{2}C\equivCH) y
similares.
"Acilo" se refiere a un grupo
-C(O)R donde R incluye "alquilo
C_{1}-C_{6}", "arilo",
"heteroarilo",
"aril-alquilo(C_{1}-C_{6})"
o
"heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{6})".
"Aciloxi" se refiere a un grupo
-C(O)R donde R incluye "alquilo
C_{1}-C_{6}", "arilo",
"heteroarilo",
"aril-alquilo(C_{1}-C_{6})"
o
"heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{6})".
"Alcoxi" se refiere a un grupo
-O-R, en el que R incluye "alquilo
C_{1}-C_{6}", "arilo",
"heteroarilo",
"aril-alquilo(C_{1}-C_{6})"
o
"heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{6})".
Los grupos alcoxi preferidos incluyen, a modo de ejemplo, metoxi,
etoxi, fenoxi y similares.
"Alcoxicarbonilo" se refiere a un grupo
-C(O)OR en el que R incluye H, "alquilo
C_{1}-C_{6}" o "arilo" o
"heteroarilo" o
"aril-alquilo(C_{1}-C_{6})"
o
"heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{6})".
"Aminocarbonilo" se refiere a un grupo
-C(O)NRR' en el que cada R, R' es independientemente
hidrógeno o "alquilo C_{1}-C_{6}" o
"arilo" o "heteroarilo" o
"aril-alquilo(C_{1}-C_{6})"
o
"heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{6})".
"Acilamino" se refiere a un grupo
-NR(CO)R' en el que cada R, R' es independientemente
hidrógeno o "alquilo C_{1}-C_{6}" o
"arilo" o "heteroarilo" o
"aril-alquilo(C_{1}-C_{6})"
o
"heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{6})".
"Halógeno" designa átomos de fluoro, cloro,
bromo y yodo.
"Sulfonilo" se refiere a un grupo
"-SO_{2}-R" en el que R se selecciona de H,
"arilo", "heteroarilo", "alquilo
C_{1}-C_{6}", "alquilo
C_{1}-C_{6}" que puede estar sustituido con
halógenos, por ejemplo un grupo -SO_{2}-CF_{3},
"aril-alquilo(C_{1}-C_{6})"
o "heteroaril-
alquilo(C_{1}-C_{6})".
"Sulfoxi" se refiere a un grupo
"-S(O)-R" en el que R se selecciona de
H, "alquilo C_{1}-C_{6}", "alquilo
C_{1}-C_{6}" que puede estar sustituido con
halógenos, por ejemplo un grupo -SO-CF_{3},
"arilo", "heteroarilo",
"aril-(C_{1}-C_{6})" o
"heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{6})".
\newpage
"Tioalcoxi" se refiere a grupos
-S-R en los que R incluye "alquilo
C_{1}-C_{6}" o "arilo" o
"heteroarilo" o
"aril-alquilo(C_{1}-C_{6)}"
o
"heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{6})".
Ejemplos incluyen tiometoxi, tioetoxi y similares.
"Sustituido o sin sustituir": A no ser que
esté restringido de otro modo por la definición del sustituyente
individual, los grupos indicados anteriormente, como los grupos
"alquilo", "alquenilo", "alquinilo", "arilo" y
"heteroarilo", etc. pueden estar sustituidos opcionalmente con
1 a 5 sustituyentes seleccionados del grupo que consiste en
"alquilo C_{1}-C_{6}",
"aril-alquilo(C_{1}-C_{6})",
"heteroaril-alquilo(C_{1}-C_{6})",
"alquenilo C_{2}-C_{6}", "alquinilo
C_{2}-C_{6}", grupos amino primarios,
secundarios o terciarios o restos amonio cuaternario, "acilo",
"aciloxi", "acilamino", "aminocarbonilo",
"alcoxicarbonilo", "arilo", "heteroarilo",
carboxilo, ciano, halógeno, hidroxi, mercapto, nitro, sulfoxi,
sulfonilo, alcoxi, tioalcoxi, trihalometilo y similares.
Alternativamente, dicha sustitución también podría comprender
situaciones en las que sustituyentes adyacentes han experimentando
cierre de anillo, principalmente cuando están implicados
sustituyentes funcionales vecinos, formando así, por ejemplo,
lactamas, lactonas, anhídridos cíclicos, pero también acetales,
tioacetales, aminales formados por cierre de anillo, por ejemplo, en
un esfuerzo por obtener un grupo protector.
"Sales o complejos farmacéuticamente
aceptables" se refiere a sales o complejos de los compuestos de
fórmula I identificados más adelante que retienen la actividad
biológica deseada. Ejemplos de tales sales incluyen, pero no se
restringen a, sales por adición de ácidos formadas con ácidos
inorgánicos (p. ej. ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido
sulfúrico, ácido fosfórico, ácido nítrico y similares) y sales
formadas con ácidos orgánicos tales como ácido acético, ácido
oxálico, ácido tartárico, ácido succínico, ácido málico, ácido
fumárico, ácido maleico, ácido ascórbico, ácido benzoico, ácido
tánico, ácido pamoico, ácido algínico, ácido poliglutámico, ácido
naftalenosulfónico, ácido naftalenodisulfónico y ácido
poligalacturónico. Dichos compuestos también puede administrarse
como sales cuaternarias farmacéuticamente aceptables conocidas por
un experto en la técnica, que incluyen específicamente las sales de
amonio cuaternario de la fórmula -NR,R',R''^{+} Z^{-}, en la
que R, R', R'' es independientemente hidrógeno, alquilo o bencilo, y
Z es un ion conjugado, incluyendo cloruro, bromuro, yoduro,
alcóxido, toluenosulfonato, metilsulfonato, sulfonato, fosfato o
carboxilato (tal como benzoato, succinato, acetato, glicolato,
maleato, malato, fumarato, citrato, tartrato, ascorbato, cinamoato,
mandeloato y difenilacetato).
"Derivado farmacéuticamente activo" designa
cualquier compuesto que, tras la administración al receptor, es
capaz de proporcionar directa o indirectamente la actividad dada a
conocer en la presente memoria.
"Exceso enantiómero" (ee) se refiere a los
productos que se obtienen mediante una síntesis que comprende una
etapa enantioselectiva, con lo que se obtiene un excedente de un
enantiómero del orden de al menos 52% de ee. En ausencia de una
síntesis enantiómera, se obtienen habitualmente productos racémicos
que sin embargo también tienen la actividad indicada de la invención
como inhibidores de JNKs.
La presente invención también incluye los
isómeros geométricos, las formas ópticamente activas, los
enantiómeros, los diastereisómeros de compuestos de acuerdo con la
fórmula I, mezclas de estos, así como sus racematos y también sales
farmacéuticamente aceptables.
Ar^{1} y Ar^{2} preferidos en compuestos de
acuerdo con la fórmula I son aquellos que se seleccionan
independientemente del grupo que consiste en fenilo, tienilo,
furanilo, piridilo, alquilo C_{1}-C_{6}
opcionalmente sustituido o no sustituido, preferiblemente
trihalometilo, alcoxi C_{1}-C_{6} sustituido o
no sustituido, alquenilo C_{2}-C_{6} sustituido
o no sustituido, alquinilo C_{2}-C_{6}
sustituido o no sustituido, amino, acilamino, aminocarbonilo,
alcoxi(C_{1}-C_{6})-carbonilo,
arilo, carboxilo, ciano, halo, hidroxi, nitro, sulfonilo, sulfoxi,
aciloxi y tioalcoxi C_{1}-C_{6}. Lo más
preferiblemente, Ar^{1} es un grupo tienilo o fenilo no sustituido
o sustituido.
Una realización particularmente preferida de la
presente invención es un derivado de sulfonamida de acuerdo con la
fórmula I, en la que Ar^{1} es halogenofenilo, hidroxifenilo,
alcoxifenilo, X es O, R^{1} es hidrógeno, m es 1, n es 0 ó 1, p
es 1 ó 2, Ar^{2} es un grupo tienileno o fenileno, preferiblemente
un grupo tienileno, y R^{a}, R^{a}', R^{b}, R^{b}' son
hidrógeno, R^{3} es H, alquilo inferior o arilo.
Otro grupo preferido de compuestos de la
presente invención incluye aquellos compuestos de fórmula I en la
que Ar^{1} es halogenofenilo, hidroxifenilo, alcoxifenilo, X es O,
R^{1} es hidrógeno, m es 1, n es 0, 1 ó 2, Ar^{2} es un grupo
tienileno o fenileno, preferiblemente un grupo tienileno, y R^{3}
es H, alquilo inferior o arilo.
En un grupo preferido adicional de compuestos de
acuerdo con la fórmula I, Ar^{1} es 4-clorofenilo,
X es O, R^{1} es hidrógeno, m es 1, n es 0, 1 ó 2, Ar^{2} es un
grupo tienileno o fenileno, preferiblemente un grupo tienileno, y
R^{a}, R^{a}', R^{b}, R^{b}' son hidrógeno, R^{3} es H,
alquilo inferior o arilo y R^{4} es H o alquilo
C_{1}-C_{10} o
aril-alquilo(C_{1}-C_{10}),
preferiblemente un grupo hexilo o bencilo.
Dichos grupos arilo o heteroarilo pueden estar
opcionalmente sustituidos por halógeno, hidroxi, nitro, sulfonilo
(por ejemplo grupos trifluorometilsulfonilo), alquilo
C_{1}-C_{6} o fluoroalquilo
C_{1}-C_{6}.
Se cree que los compuestos de fórmula I con
condición son nuevos y forman un aspecto de la invención.
Los compuestos de fórmula I sin condición pueden
usarse para el tratamiento de una enfermedad.
\newpage
Específicamente, los compuestos de fórmula I son
adecuados para el uso en el tratamiento de trastornos del sistema
inmunitario y neuronal de mamíferos, particularmente de seres
humanos.
Tales trastornos del sistema neuronal incluyen,
por ejemplo, enfermedades neurodegenerativas, por ejemplo
enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Huntington, enfermedad de
Parkinson, enfermedades retinales, lesión de la médula espinal,
esclerosis múltiple, trauma de cabeza, epilepsia y ataques,
apoplejías cerebrales isquémicas y hemorrágicas.
Trastornos del sistema inmunitario incluyen, por
ejemplo, asma, rechazo de trasplantes, procesos inflamatorios tales
como enfermedad inflamatoria del intestino (IBD, por sus siglas en
inglés), trastornos erosivos de cartílagos y huesos, artritis
reumatoide, choque séptico.
Los compuestos de acuerdo con la fórmula I son
adecuados para el uso en el tratamiento de cánceres, tales como
cánceres mamarios, colorrectales, pancreáticos, prostáticos,
testiculares, ováricos, pulmonares, hepáticos y renales.
En otra realización, los compuestos de acuerdo
con la fórmula I pueden usarse para tratar enfermedades
cardiovasculares, incluyendo aterosclerosis, restenosis, apoplejía,
isquemia, por ejemplo isquemia cerebral e infarto de miocardio.
En otra realización, los compuestos de acuerdo
con la fórmula I pueden usarse para tratar diversos estados
isquémicos, incluyendo fallos cardíacos y renales, trastornos
hepáticos y lesiones por reperfusión cerebral.
Preferiblemente, los compuestos de acuerdo con
la fórmula I, solos o en la forma de una composición farmacéutica,
son útiles para la modulación de la ruta de JNK, más específicamente
para el tratamiento o la prevención de trastornos asociados con la
expresión o la actividad de JNK, principalmente de
JNK-2 y -3. Habitualmente, dicha modulación implica
preferiblemente la inhibición de las rutas de JNK, principalmente de
la JNK-2 y/o -3. Tal expresión o actividad anormal
de JNK puede ponerse en marcha mediante numerosos estímulos (por
ejemplo estrés, choque séptico, estrés oxidativo, citoquinas) y
puede provocar una cascada de procesos, que conduce a, por ejemplo,
apoptosis descontrolada, respuestas inflamatorias o procesos
oncogénicos. Estos fenómenos están implicados habitualmente en
diversos trastornos, incluyendo los trastornos y estados patológicos
enumerados anteriormente. De ahí que los compuestos de acuerdo con
la invención puedan usarse para el tratamiento de trastornos
modulando la función o las rutas de señalización de JNK. La
modulación de la función o las rutas de JNK puede implicar su
activación, pero preferiblemente implica la regulación a la baja
hasta la inhibición de las rutas de JNK, principalmente de JNK1 y/o
-2 y/o JNK3. Los compuestos de la invención pueden emplearse solos o
en combinación con agentes farmacéuticos adicionales, por ejemplo
con un modulador de JNK adicional.
Cuando se emplean como productos farmacéuticos,
los derivados de sulfonamida de la presente invención se administran
típicamente en la forma de una composición farmacéutica. Las
composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto de fórmula
I y un portador, diluyente o excipiente farmacéuticamente aceptable
también están dentro del alcance de la presente invención. Un
especialista en la técnica posee el conocimiento de una gran
diversidad de estos portadores, diluyentes o excipientes adecuados
para formular una composición farmacéutica.
Los compuestos de acuerdo con la fórmula I,
junto con un adyuvante, portador, diluyente o excipiente empleado
de manera convencional, pueden formularse como composiciones
farmacéuticas y dosificaciones unitarias, y en tal forma pueden
emplearse como sólidos, tales como comprimidos o cápsulas cargadas,
o líquidos, tales como soluciones, suspensiones, emulsiones,
elixires o cápsulas cargadas con los mismos, todos ellos para uso
oral, o en forma de soluciones inyectables estériles para uso
parenteral (incluyendo subcutáneo). Dichas composiciones
farmacéuticas y formas de dosificación unitarias de las mismas
pueden comprender ingredientes en proporciones convencionales, con
o sin compuestos o principios activos adicionales, y dichas formas
de dosificación unitaria pueden contener cualquier cantidad
eficaz adecuada del ingrediente activo compatible con el intervalo de dosificación diario que se pretende emplear.
eficaz adecuada del ingrediente activo compatible con el intervalo de dosificación diario que se pretende emplear.
Cuando se emplean como productos farmacéuticos,
los derivados de sulfonamida de esta invención se administran
típicamente en forma de una composición farmacéutica. Dichas
composiciones pueden prepararse de manera bien conocida en la
técnica farmacéutica y comprenden al menos un compuesto activo.
Generalmente, los compuestos de esta invención se administran en
una cantidad farmacéuticamente eficaz. La cantidad del compuesto
administrada realmente será determinada típicamente por un médico a
la vista de las circunstancias relevantes, incluyendo la afección a
tratar, la vía de administración elegida, el compuesto real
administrado, la edad, peso y respuesta del paciente individual, la
gravedad de los síntomas del paciente y similares.
Las composiciones farmacéuticas de estas
invenciones pueden administrarse por una variedad de vías,
incluyendo oral, rectal, transdérmica, subcutánea, intravenosa,
intramuscular e intranasal. Dependiendo de la vía de administración
deseada, los compuestos se formulan preferiblemente en forma de
composiciones inyectables u orales. Las composiciones para
administración oral pueden tomar la forma de disoluciones o
suspensiones líquidas a granel o polvos a granel. Sin embargo, más
habitualmente, las composiciones se presentan en formas de
dosificación unitarias para facilitar una dosificación exacta. El
término "formas de dosificación unitarias" se refiere a
unidades físicamente discretas adecuadas como dosificaciones
unitarias para sujetos humanos y otros mamíferos, conteniendo cada
unidad una cantidad predeterminada de material activo calculada para
producir el efecto terapéutico deseado, en asociación con un
excipiente farmacéutico adecuado. Formas de dosificación unitaria
típicas incluyen ampollas o jeringuillas precargadas premedidas de
las composiciones líquidas o píldoras, comprimidos, cápsulas o
similares en el caso de composiciones sólidas. En tales
composiciones, el compuesto de sulfonamida es normalmente un
componente minoritario (de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 50%
en peso o preferiblemente de aproximadamente 1 a aproximadamente
40% en peso), siendo el resto diversos vehículos o portadores y
adyuvantes de procesamiento para formar la forma de dosificación
deseada.
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Las formas líquidas adecuadas para
administración oral pueden incluir un vehículo acuoso o no acuoso
con tampones, agentes de suspensión y dispensación, colorantes,
aromas y similares. Las formas sólidas pueden incluir, por ejemplo,
cualquiera de los siguientes ingredientes o compuestos de naturaleza
similar: un aglutinante tal como celulosa microcristalina, goma de
tragacanto o gelatina; un excipiente tal como almidón o lactosa, un
agente disgregante tal como ácido algínico, Primogel o almidón de
maíz; un lubricante tal como estearato de magnesio; un deslizante
tal como dióxido de silicio coloidal; un agente edulcorante tal como
sacarosa o sacarina; o un agente aromatizante tal como menta
piperita, salicilato de metilo o aroma de naranja.
Las composiciones inyectables están basadas
típicamente en solución salina estéril inyectable, solución salina
tamponada con fosfato u otros vehículos inyectables conocidos en la
técnica. Como se ha mencionado anteriormente, el compuesto de
sulfonamida de fórmula I en tales composiciones es típicamente un
componente minoritario, que varía frecuentemente entre 0,05 y 10% en
peso, siendo el resto es el portador inyectable y similares.
Los componentes descritos anteriormente para
composiciones administrables por vía oral o inyectables son
meramente representativos. Materiales así como técnicas de
procesamiento y similares adicionales se indican en la Parte 8 de
(29).
Los compuestos de esta invención pueden
administrarse también en formas de liberación sostenida o a partir
de sistemas de suministro de fármacos de liberación sostenida. Una
descripción de materiales de liberación sostenida representativos
también puede encontrarse en los materiales incorporados en
(29).
Otro objeto adicional de la presente invención
es un procedimiento para preparar los derivados de sulfonamida de
acuerdo con la fórmula I. Las sulfonamidas de esta invención pueden
prepararse a partir de materiales de partida fácilmente disponibles
usando los siguientes métodos y procedimientos generales. Se
apreciará que, aunque se den las condiciones experimentales (es
decir, temperaturas de reacción, tiempo, moles de reactivos,
disolventes, etc.) típicas o preferidas, también pueden usarse otras
condiciones experimentales, a menos que se indique otra cosa. Las
condiciones de reacción óptimas pueden variar con los reactivos o
disolventes particulares usados, aunque estas condiciones pueden
determinarse por un especialista en la técnica mediante
procedimientos de optimización convencionales.
Los nuevos derivados de sulfonamida pueden
prepararse a partir de materiales de partida fácilmente disponibles.
Se describirán tres ejemplos de rutas sintéticas para las
sulfonamidas de fórmula I.
Las siguientes abreviaturas se refieren
respectivamente las siguientes definiciones:
- AMEBA:
- (4-formil-3-metoxifenoximetil)poliestireno
- Boc:
- Terc-butiloxicarbonilo
- DCE:
- Dicloroetano
- DCM:
- Diclorometano
- DMA:
- Dimetilacetamida
- DMF:
- Dimetilformamida
- DMSO:
- Dimetilsulfóxido
- EDTA:
- Ácido etilendiaminotetraacético
- Fmoc:
- Fluorenilmetiloxicarbonilo
- NMP:
- N-metilpirrolidona
- TFA:
- Ácido trifluoroacético
- THF:
- Tetrahidrofurano
- TLC:
- Cromatografía en capa fina
- TMOF:
- Ortoformiato de trimetilo
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Protocolo
I
Una ruta preferida comienza con compuestos de
fórmula II en la que R^{a}, R^{a}', R^{b}, R^{b}', R^{2},
R^{3}, n y p son como se definen para la fórmula I y P es un grupo
protector de amina.
Las diaminas monoprotegidas de fórmula II bien
son compuestos conocidos, bien están disponibles comercialmente o
bien pueden prepararse a partir de compuestos conocidos mediante
procedimientos convencionales. Ejemplos típicos de compuestos de
fórmula II comprenden etilendiamina, propilendiamina, (n- o
t-)-butilendiamina,
1-aminopiperidina, aminometilpiperidina.
En la fórmula II, grupos protectores de amina P
típicos son los siguientes restos: carbobenzoxi (Cbz),
fluorenilmetiloxicarbonilo (fmoc), aliloxicarbonilo,
(2S)-2-([[1-(3,5-dimetoxifenil)-1-metiletoxi]-carbonilo],
bencilo, 1,1,1-trifenilmetilo, lo más
preferiblemente terc-butiloxicarbonilo (Boc). Otros
grupos protectores de amina serán conocidos por los químicos
sintéticos (30).
Generalmente, tales diaminas monoprotegidas se
hacen reaccionar con cloruros de sulfonilo de fórmula III en
presencia de una base como eliminador de acuerdo con el esquema I
para conducir a sulfonamidas que tienen la estructura presentada en
la fórmula IV.
Esquema
I
La reacción anterior puede efectuarse en
presencia de una base no nucleófila tal como trietilamina,
diisopropiletilamina, carbonato potásico y similares, en un
disolvente aprótico tal como N,N-dimetilformamida,
dimetilsulfóxido, N-metilpirrolidona, acetonitrilo,
cloroformo, dicloroetano o diclorometano, a una temperatura de
aproximadamente 0 a aproximadamente 100ºC, preferiblemente
20-60ºC.
Los cloruros de sulfonilo de fórmula III usados
para la preparación de las sulfonamidas de fórmula IV pueden
prepararse usando métodos de sulfonilación convencionales usando
preferiblemente ácido clorosulfónico como reactivo de sulfonación.
Típicamente, la reacción de sulfonilación se realiza tratando la
carboxamida de fórmula V con aproximadamente 5 a aproximadamente 10
equivalentes molares del reactivo de sulfonación en un disolvente
inerte, tal como diclorometano, a una temperatura que varía de
aproximadamente -70ºC a aproximadamente 50ºC.
Preferiblemente, la adición de ácido
clorosulfónico tiene lugar a -70ºC y conduce a la formación del
ácido sulfónico intermedio. Incrementar la temperatura hasta 20ºC
permite la formación del cloruro de sulfonilo de fórmula III. En
los casos en los que se obtiene una mezcla de compuestos de
sulfonato, el cloruro de sulfonilo de fórmula III puede aislarse
mediante técnicas apropiadas tales como cromatografía de desarrollo
rápido o cristalización.
Las carboxamidas de fórmula V (X=O) pueden
prepararse mediante métodos conocidos por un operario experto, por
ejemplo mediante la reacción de una amina (por ejemplo
tien-2-ilmetilamina,
tien-2-iletilamina,
furan-2-ilmetilamina o
piridil-2-ilmetilamina) con un
haluro de aroílo (por ejemplo cloruro de
4-clorobenzoílo, cloruro de piridinilbenzoílo). Las
tiocarboxamidas de fórmula V (X=S) pueden obtenerse mediante métodos
conocidos por un operario experto, por ejemplo mediante el
tratamiento de una carboxamida de fórmula V con reactivo de Lawesson
(31).
Los compuestos de sulfonamida de fórmula IV
también puede obtenerse partiendo de diaminas monoprotegidas de
fórmula II, usando metodologías en fase sólida, por ejemplo usando
reactivos unidos a polímeros, tales como trietilamina,
diisopropiletilamina, N-metilmorfolina, piperidina
unidas a polímeros. Típicamente, el cloruro de sulfonilo de fórmula
III se usa en de 1 a 5 equivalentes en exceso de la diamina
monoprotegida correspondiente de fórmula II. Finalmente, el exceso
restante de cloruro de sulfonilo se atrapa usando aminas primarias
unidas a polímero tales como aminometilpoliestireno o trisamina. La
sulfonamida pura se obtiene al filtrar las resinas.
La retirada subsiguiente del grupo protector P,
en la fórmula IV, usando métodos de desprotección conocidos en la
técnica (30), conduce a las aminas primarias o secundarias de
fórmula VI o a la sal amónica correspondiente, dependiendo del
protocolo de desprotección aplicado.
La sal amónica de la amina de fórmula VI puede
neutralizarse en presencia de una base tal como trietilamina,
diisopropiletilamina o N-metilmorfolina. La
alquilación del resto amínico de fórmula VI hasta una amina de
fórmula I se alcanza a través de la aminación reductiva de un
aldehído o una cetona: la amina de fórmula VI se hace reaccionar
con el aldehído o la cetona deseados de fórmula VII en la que
R^{5} y R^{6} son como se definen para la fórmula I.
Ejemplos típicos de cetonas y aldehídos de
fórmula VII son aldehídos/cetonas C_{1}-C_{10} y
cetonas del tipo
Ph-C(O)-alquilo(C_{1}-C_{6}).
Dependiendo de si la amina de fórmula VI es una
amina primaria o secundaria, se preforma una imina o un ion iminio
correspondiente que puede aislarse o reducirse in situ. En el
caso de aminas primarias como material de partida, la imina
intermedia puede aislarse para evitar una alquilación adicional. El
producto intermedio de imina se reduce con un agente reductor
adecuado tal como borohidruro sódico, cianoborohidruro sódico,
hidrógeno en presencia de Pd. Un agente reductor preferido es el
triacetoxiborohidruro sódico. La reducción de iminas está
favorecida cuando la imina está protonada, de modo que el pH puede
ajustarse durante la reducción, por ejemplo mediante adición de
ácido acético. La aminación reductiva se analiza en (32).
Las sulfonamidas de fórmula I también pueden
obtenerse a partir de aminas de fórmula VI o sus sales amónicas
usando reactivos unidos a polímeros. Puede usarse base unida a
polímero, tal como trietilamina, diisopropiletilamina,
N-metilmorfolina, piperidina unidas a polímero, para
neutralizar la sal amónica de la amina VI. Para la aminación
reductiva, el aldehído o la cetona de fórmula VII apropiado puede
usarse en 0,9 equivalentes. Agentes reductores unidos a polímeros,
tales como borohidruro sódico, cianoborohidruro sódico,
triacetoxiborohidruro sódico unidos a polímero, se usan para
reducir la imina intermedia hasta una amina de fórmula I. La amina
de fórmula VI en exceso puede atraparse usando resina de
AMEBA-aldehído. Las sulfonamidas de fórmula I pueden
obtenerse a continuación al filtrar las resinas.
\vskip1.000000\baselineskip
Protocolo
II
Otra ruta preferida comienza con compuestos de
fórmula VIII en la que R^{a}, R^{a}', R^{b}, R^{b}',
R^{2}, R^{3}, n y p son como se definen para la fórmula I, y P
es un grupo protector de amina.
Las diaminas monoprotegidas de fórmula VIII bien
son compuestos conocidos, bien están disponibles comercialmente o
bien pueden prepararse a partir de compuestos conocidos mediante
procedimientos convencionales.
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En la formula VIII, los grupos protectores de
amina, P, típicos pueden seleccionarse de los siguientes restos:
carbobenzoxi (Cbz), fluorenilmetiloxicarbonilo (fmoc),
aliloxicarbonilo,
(2S)-2-([[1-(3,5-dimetoxifenil)-1-metiletoxi]-carbonilo],
bencilo, 1,1,1-trifenilmetilo, lo más
preferiblemente terc-butiloxicarbonilo (Boc). Otros
grupos protectores de amina serán conocidos por los químicos
sintéticos (30).
La alquilación de la amina de fórmula VIII se
alcanza a través de la reacción con un aldehído o una cetona de
fórmula VII a través de aminación reductiva, conduciendo a una amina
de fórmula IX como sigue:
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Esquema
II
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La amina de fórmula VIII se hace reaccionar con
el aldehído o la cetona de fórmula VII apropiados, si es necesario
en presencia de una base no nucleófila tal como trietilamina,
diisopropiletilamina o N-metilmorfolina, para
asegurar que algo de la amina está desprotonado, en un disolvente
polar tal como DCE, THF, TMOF, DMF, DMA, DCM, metanol, NMP. El
derivado de imina intermedio puede reducirse in situ o
aislarse al evaporar el disolvente, y reducirse en una reacción
separada. En el caso de aminas primarias como material de partida,
la imina intermedia puede aislarse para evitar una alquilación
adicional. La reducción de iminas está favorecida cuando la imina
está protonada, de modo que el pH puede ajustarse durante la
reducción, por ejemplo mediante adición de ácido acético. La
reducción del derivado de imina se realiza con un agente reductor
adecuado tal como borohidruro sódico, cianoborohidruro sódico,
hidrógeno en presencia de Pd, lo más preferiblemente
triacetoxiborohidruro sódico. Disolvente preferidos son DCE, THF,
TMOF, DMF, DMA, DCM, metanol, NMP.
Las aminas de fórmula IX también pueden
obtenerse a través de síntesis en fase sólida usando reactivos
unidos a polímeros. Agentes reductores unidos a polímeros, tales
como borohidruro sódico, cianoborohidruro sódico,
triacetoxiborohidruro sódico unidos a polímero, se usan para reducir
la imina hasta la amina correspondiente de fórmula IX. El exceso de
amina VIII puede retirarse usando resina de
AMEBA-aldehído. Las aminas de fórmula VIII pueden
obtenerse a continuación al filtrar las resinas.
La retirada subsiguiente del grupo protector P
en la fórmula IX, usando métodos de desprotección conocidos para un
operario experto, según se menciona anteriormente, conduce a la
amina X correspondiente.
La amina X puede obtenerse como la sal amónica
correspondiente, dependiendo de la técnica de desprotección aplicada
usada.
Finalmente, tales aminas o sales amónicas se
hacen reaccionar con cloruros de sulfonilo de fórmula III en
presencia de una base como eliminador para obtener las sulfonamidas
mostradas en la fórmula I.
La reacción se efectúa generalmente en presencia
de una base no nucleófila tal como trietilamina,
diisopropiletilamina, carbonato potásico y similares, en un
disolvente aprótico tal como N,N-dimetilformamida,
dimetilsulfóxido, N-metilpirrolidona, acetonitrilo,
cloroformo, dicloroetano o diclorometano, a una temperatura de
aproximadamente 0 a aproximadamente 100ºC, preferiblemente
20-60ºC. En el caso de sales amónicas de fórmula X,
la reacción debe realizarse en exceso de base eliminadora.
La sulfonamida I también puede sintetizarse a
través de una ruta de síntesis en fase sólida usando reactivos
unidos a polímeros, tales como trietilamina, diisopropiletilamina,
metilmorfolina, piperidina y carbonato unidos a polímeros.
Típicamente, el cloruro de sulfonilo III se usa en 1 a 1,5
equivalentes en exceso de la amina VIII correspondiente.
Finalmente, el exceso restante de cloruro de sulfonilo se atrapa
usando aminas primarias unidas a polímero tales como
aminometilpoliestireno o trisamina. La sulfonamida I pura se obtiene
al filtrar las resinas.
En el caso de compuestos de fórmula I en la que
R^{4} es H, el modo de síntesis podría seguir el protocolo I y el
procedimiento se detendría una vez que se formara el compuesto VI.
Los compuestos de fórmula VI representan entonces un subgrupo de los
compuestos de fórmula I.
Para la formación de compuestos de fórmula I en
la que R^{3} es un resto aromático, debe usarse el Protocolo
III.
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Protocolo
III
Un cloruro de sulfonilo de fórmula III se hace
reaccionar con un aminoalcohol de fórmula XI para obtener un alcohol
de fórmula XII. La reacción se efectúa en un disolvente polar tal
como DMF o THF. Cualquier exceso de amina se extrae en un fase
acuosa ácida.
Después de la evaporación del disolvente, el
alcohol de fórmula XII se somete a oxidación con un agente oxidante,
por ejemplo N-óxido de piridina, para dar un aldehído de fórmula
XIII.
\newpage
El aldehído de fórmula XIII se somete a una
aminación reductiva tal como ya se ha descrito en el Protocolo I o
II. En este caso, un aldehído de fórmula XIII se hace reaccionar con
una amina aromática de fórmula XIV en un disolvente polar tal como
DCE, THF, TMOF, DMF, DMA, DCM, metanol, NMP, para conducir a una
amina de fórmula I. La imina intermedia puede reducirse in
situ o aislarse al evaporar el disolvente, y reducirse en una
reacción separada. La formación de la imina puede favorecerse
ajustando el pH hasta de suavemente ácido a neutro, por ejemplo
mediante la adición de ácido acético o, si es necesario, una pequeña
cantidad de base. La reducción del derivado de imina se realiza con
un agente reductor adecuado tal como borohidruro sódico,
cianoborohidruro sódico, hidrógeno en presencia de Pd, lo más
preferiblemente triacetoxiborohidruro sódico. Disolventes preferidos
son DCE, THF, TMOF, DMF, DMA, DCM, metanol, NMP.
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Esquema
III
Si los métodos sintéticos generales indicados
anteriormente no son aplicables para obtener ciertos compuestos de
fórmula I, deben usarse métodos de preparación adecuados conocidos
por una persona experta en la técnica.
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La invención se ilustrará por medio de los
siguientes ejemplos que no pretenden limitar el alcance de la
invención.
Los compuestos de la presente invención pueden
sintetizarse de acuerdo con las diferentes rutas sintéticas
proporcionadas anteriormente. Los siguientes ejemplos ilustran
métodos preferidos para sintetizar los compuestos de acuerdo con la
fórmula I y determinar sus actividades.
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Una solución de cloruro de
4-clorobenzoílo (0,114 mol) en 50 ml de
CH_{2}Cl_{2} seco se añadió durante 30 min a una solución
agitada de 2-aminometiltiofeno (0,137 mol) e
^{i}Pr_{2}NEt (0,25 mol) en CH_{2}Cl_{2} (200 ml) a 0ºC. Se
formó un sólido blanco y la reacción se dejó calentar hasta
temperatura ambiente durante 1 h. La mezcla se diluyó con 200 ml de
CH_{2}Cl_{2}, se lavó dos veces con HCl acuoso (0,1 N) y se secó
sobre MgSO_{4}. La evaporación del disolvente proporcionaba 28 g
(98%) de la benzamida del epígrafe (1a) como un sólido blanco: p.f.
153-54ºC, ^{1}H NMR (CDCl_{3}) \delta 7,9 (d,
J = 8,67 Hz, 2H), 7,58 (d, J = 8,67 Hz, 2H), 7,44 (dd, J = 3,77,
1,13 Hz,1H), 7,22 (d, J = 5,27 Hz,1H), 7,16 (dd, J = 3,39, 5,27 Hz,
1H), 6,62 (d an, 1H), 4,98 (d, J = 5,65 Hz, 2H).
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Ácido clorosulfónico (20,1 ml, 198 mmol) en
CH_{2}Cl_{2} (80 ml) se añadió gota a gota a una solución del
compuesto (la) anterior (10 g, 40 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (500 ml)
a -80ºC. Se dejó que la mezcla alcanzara temperatura ambiente en 5
h. La mezcla de reacción se vertió sobre hielo y se extrajo
rápidamente con CH_{2}Cl_{2}. La capa orgánica se secó sobre
MgSO_{4} y el disolvente se evaporó hasta sequedad, lo que daba
8,8 g (63%) del cloruro de sulfonilo (lb) deseado; pf
133-35ºC, ^{1}H NMR (DMSO-d6)
\delta 9,21 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 8,67 Hz, 2H), 7,53
(d, J = 8,67 Hz,2H), 6,91 (d, J = 3,39 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 3,39
Hz,1H), 4,53 (d, J = 3,77 Hz, 2H).
\newpage
La síntesis del compuesto (2) anterior es una
síntesis en 3 etapas (véase el esquema I).
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Protocolo
I
Etapa
1
La diamina monoprotegida
(+/-)-3-amino-l-N-Boc-piperidina
(compuesto de fórmula II) (0,4g, 2 mmol, 1 eq), cloruro de
5-(4-clorobenzamidometil)tiofeno-2-sulfonilo
(1b) (compuesto de fórmula III) (0,99 g, 2,4 mmol, 1,2 eq) y resina
de piperidina (2 g, 1,5 eq, carga de 1,5 mmol/g) se someten a
turbulencia en THF (50 ml) en un agitador orbital durante la noche.
Se añade aminometilpoliestireno (1,82 g, 1 eq, carga de 1,1 mmol/g)
al matraz y el contenido se somete a turbulencia en un agitador
orbital durante la noche.
Las resinas se filtran y se lavan con 50 ml
adicionales de THF. Los filtrados se combinan y el disolvente se
evapora bajo presión reducida para dar cuantitativamente la
sulfonamida correspondiente (fórmula IV). No se requiere
purificación adicional en esta fase.
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Etapa
2
La sulfonamida procedente de la Etapa 1 se carga
en un matraz de fondo redondo y se disuelve en TFA al 50%/DCM (50
ml). El matraz se somete a turbulencia en un agitador orbital hasta
que se confirma la terminación por TLC.
El disolvente se evapora bajo presión reducida
para dar sal amónica de TFA.
La sal disuelta en metanol (50 ml) y resina de
carbonato (2,67 g, 2 eq, carga de 1,5 mmol/g) se añaden y el
contenido se somete a turbulencia en un agitador orbital durante la
noche.
La resina se filtra y se lava con 50 ml
adicionales de metanol. Los filtrados se combinan y el disolvente se
evapora bajo presión reducida para dar cuantitativamente la amina
libre. No se requiere purificación en esta fase.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
Un matraz de fondo redondo se carga con la amina
libre procedente de la Etapa 2 (0,41 g, 1 mmol, 1 eq), el aldehído
4-(trifluorometil)-benzaldehído (0,16 g, 0,9 mmol,
0,9 eq) y ácido acético glacial (60 \mul, 1 mmol, 1 eq). Se añade
metanol (30 ml) y el matraz se somete a turbulencia en un agitador
orbital durante la noche.
Se añade resina de borohidruro (0,67 g, 2 eq,
carga de 2,5 mmol/g) al matraz y el contenido se somete a
turbulencia en un agitador orbital durante la noche.
Se añade resina de AMEBA (aldehído)(0,46 g, 0.5
eq, carga de 0,9 mmol/g) al matraz y el contenido se somete a
turbulencia en un agitador orbital durante la noche.
Las resinas se separan por filtración y se lavan
con 30 ml adicionales de metanol y los filtrados se combinan y el
disolvente se evapora bajo presión reducida para dar el producto en
bruto.
El producto en bruto se purifica mediante HPLC
preparativa usando acetonitrilo y agua como eluyentes para obtener
la
4-cloro-N-{5-[1-(4-trifluorometilbencil)-piperidin-3-ilsulfamoil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida
(2) pura.
\vskip1.000000\baselineskip
La síntesis del compuesto (3) anterior es una
síntesis en 3 etapas y sigue el protocolo detallado anteriormente
(Protocolo I):
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
1
En este caso, la diamina monoprotegida usada es
la
1-Boc-amino-2,2-dimetil-1,3-propanodiamina.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La sulfonamida obtenida a través de la etapa 1
anterior se desprotege de N-Boc para dar la amina
libre correspondiente.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
La amina libre obtenida a través de la etapa 2
anterior se hace reaccionar en este caso con
4-(trifluorometil)-benzaldehído. El producto final
después de la purificación es
4-cloro-N-{5-[2,2-dimetil-3-(4-trifluorometilbencilamino)-propil-sulfamoil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida
(3).
\newpage
La síntesis del compuesto (4) anterior es una
síntesis en 3 etapas y sigue el protocolo detallado anteriormente
(Protocolo I):
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
1
En este caso, la diamina monoprotegida es el
éster terc-butílico de ácido
N-(3-aminopropil)-metilcarbámico.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La sulfonamida obtenida a través de la etapa 1
anterior se desprotege de N-Boc para dar la amina
libre correspondiente.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
La amina libre obtenida a través de la etapa 2
anterior se hace reaccionar en este caso con
4-(trifluorometil)-benzaldehído. El producto final
después de la purificación es
4-cloro-N-({3-[metil-(4-trifluorometilbencil)-amino]-propil-sulfamoil}-tiofen-2-ilmetil)-benzamida
(4).
\vskip1.000000\baselineskip
La síntesis del compuesto (5) anterior es una
síntesis en 3 etapas y sigue el protocolo detallado anteriormente
(Protocolo I):
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
1
En este caso, la monoBoc-diamina
es el éster terc-butílico de ácido
N-(3-aminopropil)-N-metilcarbámico.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La sulfonamida obtenida a través de la etapa 1
anterior se desprotege de N-Boc para dar la amina
libre correspondiente.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
La amina libre obtenida a través de la etapa 2
anterior se hace reaccionar en este caso con
1-hexanal. El producto final después de la
purificación es
4-cloro-N-({5-[3-(hexilmetilamino)-propilsulfamoil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida
(5).
\vskip1.000000\baselineskip
La síntesis del compuesto (6) anterior es una
síntesis en 3 etapas y sigue el protocolo detallado anteriormente
(Protocolo I):
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
1
En este caso, la diamina monoprotegida es el
1-Boc-amino-2-aminociclohexano.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La sulfonamida obtenida a través de la etapa 1
anterior se desprotege de N-Boc para dar la amina
libre correspondiente.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
La amina libre obtenida a través de la etapa 2
anterior se hace reaccionar en este caso con
4-(trifluorometil)-benzaldehído. El producto final
después de la purificación es la
4-cloro-N-{5-[2-(4-trifluorometilbencilamino)-ciclohexilsulfa-moil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida
(6).
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La síntesis del compuesto (7) anterior es una
síntesis en 3 etapas y sigue el protocolo detallado anteriormente
(Protocolo I):
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
1
En este caso, la diamina monoprotegida es la
1-Boc-aminoetilendiamina.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La sulfonamida obtenida a través de la etapa 1
anterior se desprotege de N-Boc para dar la amina
libre correspondiente.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
La amina libre obtenida a través de la etapa 2
anterior se hace reaccionar en este caso con
1-hexanal. El producto final después de la
purificación es
4-cloro-N-[5-(2-hexilamino-etilsulfamoil)-tiofen-2-ilmetil]-benzamida
(7).
\vskip1.000000\baselineskip
La síntesis del compuesto (8) anterior es una
síntesis en 3 etapas y sigue el protocolo detallado anteriormente
(Protocolo I):
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
1
En este caso, la diamina monoprotegida es la
4-amino-1-Boc-piperidina.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La sulfonamida obtenida a través de la etapa 1
anterior se desprotege de N-Boc para dar la amina
libre correspondiente.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
La amina libre obtenida a través de la etapa 2
anterior se hace reaccionar en este caso con
4-(trifluorometil)-benzaldehído. El producto final
después de la purificación es
4-cloro-N-{5-[1-(4-trifluorometilbencil)-piperidin-4-ilsulfamoil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida
(8).
\vskip1.000000\baselineskip
La síntesis del compuesto (9) anterior es una
síntesis en 3 etapas y sigue el protocolo detallado anteriormente
(Protocolo I):
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
1
En este caso, la diamina monoprotegida usada es
la
1-Boc-amino-2,2-dimetil-1,3-propanodiamina.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La sulfonamida obtenida a través de la etapa 1
anterior se desprotege de N-Boc para dar la amina
libre correspondiente.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
La amina libre obtenida a través de la etapa 2
anterior se hace reaccionar en este caso con
1-hexanal. El producto final después de la
purificación es
4-cloro-N-[5-(3-hexilamino-2,2-dimetilpropilsulfamoil)-tiofen-2-ilmetil]-benzamida
(9).
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La síntesis del compuesto (10) anterior es una
síntesis en 3 etapas y sigue el protocolo detallado anteriormente
(Protocolo I):
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
1
En este caso, la diamina monoprotegida usada es
3-(aminometil)-1-N-Boc-anilina.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La sulfonamida obtenida a través de la etapa 1
anterior se desprotege de N-Boc para dar la amina
libre correspondiente.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
La amina libre obtenida a través de la etapa 2
anterior se hace reaccionar en este caso con
4-(trifluorometil)-benzaldehído. El producto final
después de la purificación es
4-cloro-N-{5-[3-(4-trifluorometil-bencilamino)-bencilsulfamoil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida
(10).
Los siguientes compuestos se prepararon de un
modo paralelo de acuerdo con el procedimiento genérico (Protocolo I)
descrito anteriormente.
\newpage
La siguiente tabla proporciona datos de HPLC y
datos de espectroscopía de masas de los ejemplos
mencio-
nados. ^{1}, ^{2}.
nados. ^{1}, ^{2}.
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La síntesis del compuesto (11) anterior es una
síntesis en 3 etapas y sigue el protocolo detallado anteriormente
(Protocolo I):
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Protocolo
II
Etapa
1
Un matraz de fondo redondo se carga con la
diamina monoprotegida (compuesto de fórmula VIII), éster
terc-butílico de ácido
N-(3-aminopropil)-N-metilcarbámico,
(1 mmol, 1 eq), un aldehído de fórmula VII,
4-(trifluorometil)-benzaldehído (0,9 mmol, 0,9 eq)
y ácido acético glacial (60 \mul, 1 mmol, 1 eq). Se añade metanol
(30 ml) y el matraz se somete a turbulencia en un agitador orbital
durante la noche.
Se añade resina de borohidruro (0,67 g, 2 eq,
carga de 2,5 mmol/g) al matraz y el contenido se somete a
turbulencia en un agitador orbital durante la noche.
Se añade resina de AMEBA (aldehído)(0,46 g, 0,5
eq, carga de 0,9 mmol/g) al matraz y el contenido se somete a
turbulencia en un agitador orbital durante la noche.
Las resinas se filtran y se lavan con 30 ml
adicionales de metanol, los filtrados se combinan y el disolvente se
evapora bajo presión reducida para dar el producto. La amina
alquilada 3-Boc-aminometilpiperidina
(compuesto de fórmula IX) resultante se usa sin purificación para
otras reacciones.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La monoalquildiamina monoprotegida obtenida en
la Etapa 1 se carga en un matraz de fondo redondo de 100 ml y se
disuelve en TFA al 50%/DCM (50 ml). El matraz se somete a
turbulencia en un agitador orbital hasta que la reacción se completa
según se verifica mediante TLC.
El disolvente se evapora bajo presión reducida
para dar la sal amónica de TFA.
La sal se disuelve en metanol (50 ml), se añade
resina de carbonato (2,67 g, 2 eq, carga de 1,5 mmol/g) al matraz y
el contenido se somete a turbulencia en un agitador orbital durante
la noche.
La resina se filtra y se lava con 50 ml
adicionales de metanol. Los filtrados combinados se evaporan bajo
presión reducida para dar la monoalquildiamina (fórmula X) libre. No
se requiere purificación en esta fase.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
Un matraz de fondo redondo se carga con la
monoalquildiamina obtenida de la Etapa 2 (0,25 g, mmol, 1 eq),
cloruro de
5-(4-clorobenzamidometil)tiofeno-2-sulfonilo,
(1b) (0,42 g, 1,2 mmol, 1,2 eq) y resina de piperidina (1 g, 1,5 eq,
carga de 1,5 mmol/g) en THF (50ml). El matraz se somete a
turbulencia en un agitador orbital durante la noche.
Se añade aminometilpoliestireno (0,91 g, 1 eq,
carga de 1,1 mmol/g) al matraz y el contenido se somete a
turbulencia en un agitador orbital durante la noche.
Las resinas se separan por filtración y se lavan
con 50 ml adicionales de THF. Los filtrados se combinan y el
disolvente se evapora bajo presión reducida para dar producto en
bruto. El producto en bruto se purifica mediante HPLC preparativa
usando acetonitrilo y agua como eluyentes, conduciendo al compuesto
(11),
4-cloro-N-{5-[3-(4-trifluorometil-bencilamino)-propilsul-famoil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida.
\vskip1.000000\baselineskip
La síntesis del compuesto (12) anterior es una
síntesis en 3 etapas y consiste en el protocolo detallado
anteriormente (véase el esquema II):
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
1
La diamina monoprotegida usada es
3-Boc-aminometilpiperidina y el
aldehído es 4-(trifluorometil)-benzaldehído.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La monoalquildiamina monoprotegida obtenida en
la Etapa 1 se desprotege para obtener la correspondiente amina
libre.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
La amina libre procedente de la etapa 2 se hace
reaccionar con el compuesto (1b) para dar el compuesto (12),
4-cloro-N-(5-{[1-(4-trifluorometil-bencil)-piperidin-3-ilmetil]-sulfamoil-tiofen-2-ilmetil)-benzamida.
\vskip1.000000\baselineskip
La síntesis del compuesto (12) anterior es una
síntesis en 3 etapas y sigue el protocolo detallado anteriormente
(Protocolo II):
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
1
La diamina monoprotegida usada es
1-Boc-amino-1,3-propanodiamina
y el aldehído es
4-(trifluorometil)-benzaldehído.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La monoalquildiamina monoprotegida obtenida en
la Etapa 1 se desprotege para obtener la correspondiente amina
libre.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
La amina libre procedente de la etapa 2 se hace
reaccionar con el compuesto (lb) para dar
4-cloro-N-({metil-[3-(4-trifluorometil-bencilamino)-propil]-sulfamoil}-tiofen-2-ilmetil)-benzamida
(13).
\newpage
La síntesis del compuesto (14) anterior es una
síntesis en 3 etapas y sigue el protocolo detallado anteriormente
(Protocolo II):
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
1
La diamina monoprotegida usada es éster
terc-butílico de ácido
N-(3-aminopropil)-N-metilcarbámico
y el aldehído es 1-hexanal.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La monoalquildiamina monoprotegida obtenida en
la Etapa 1 se desprotege para obtener la correspondiente amina
libre.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
La amina libre resultante procedente de la etapa
2 se hace reaccionar con el compuesto (1b) para dar
cloro-N-{5-[(3-hexilaminopropil)-metilsulfamoil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida
(14).
\vskip1.000000\baselineskip
La síntesis del compuesto (15) anterior es una
síntesis en 3 etapas y sigue el protocolo detallado anteriormente
(Protocolo II):
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
1
La diamina monoprotegida usada es
2-(N-terc-butoxicarbonilaminometil)-pirrolidina
y el aldehído es
4-(trifluoro-
metil)-benzaldehído.
metil)-benzaldehído.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
La monoalquildiamina monoprotegida obtenida en
la Etapa 1 se desprotege para obtener la correspondiente amina
libre.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
La amina libre resultante procedente de la etapa
2 se hace reaccionar con el compuesto (1b) para dar
4-cloro-N-(5-{[1-(4-trifluorometilbencil)-pirrolidin-2-ilmetil]-sulfamoiltiofen-2-ilmetil)-benzamida
(15).
\vskip1.000000\baselineskip
Los siguientes compuestos se prepararon de
acuerdo con el procedimiento genérico (protocolo II) descrito
anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(Tabla pasa a página
siguiente)
\newpage
La siguiente tabla proporciona datos de HPLC y
datos de espectroscopía de masas de los ejemplos
mencio-
nados. ^{1}, ^{2}.
nados. ^{1}, ^{2}.
\newpage
La síntesis del compuesto (16) anterior es una
síntesis en 3 etapas y consiste en el siguiente protocolo (véase el
esquema III):
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
1
A una solución agitada de 2 equivalentes de
3-amino-2,2-dimetilpropan-1-ol
(1,0 g, 10 mmol) en DMF en presencia 2 equivalentes de DIEA (1,7
ml, 10 mmol) se añade una solución de cloruro de sulfonilo (1b)
(1,75 g, 5 mmol, 1 equivalente) en DMF. La mezcla de reacción se
agita durante 12 h a temperatura ambiente. Se añade DCM y cualquier
exceso de amina se extrae en una solución de HCl 0,1 N. La fase
orgánica se lava con salmuera y se seca sobre MgSO_{4}. Se
obtiene
4-cloro-N-[5-(3-hidroxi-2,2-dimetil-propilsulfamoil)-tiofen-2-ilmetil]-benzamida
(compuesto de fórmula XII) después de la evaporación del
disolvente. El análisis por LC-MS y el análisis por
NMR mostraban que el compuesto era suficientemente puro para llevar
a cabo la etapa siguiente.
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
2
El compuesto de XII (954 mg, 2,3 mmol, 1,0 eq.)
obtenido de la etapa 1 se disolvió en 5 ml de DMSO y se añadió a la
mezcla Et_{3}N (3,0 eq.). A continuación, complejo de trióxido de
azufre-piridina (3,0 eq) disuelto en 10 ml de DMSO
se añadió adicionalmente a la mezcla de reacción, que se agitó a
temperatura ambiente durante 2,5 h (hasta la desaparición completa
del alcohol mediante TLC). Se añadió HCl (1 M) y el producto se
extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con HCl (1
M) y a continuación salmuera y se secó con MgSO_{4}. El
disolvente se evaporó a continuación. El aldehído,
4-cloro-N-[5-(2,2-dimetil-3-oxo-propilsulfamoil)-tiofen-2-ilmetil]-benzamida
(compuesto de fórmula XIII), se purificó a continuación mediante
cromatografía en columna usando acetato de etilo/DCM (1/1).
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa
3
Una solución de
4-cloro-N-[5-(2,2-dimetil-3-oxo-propilsulfamoil)-tiofen-2-ilmetil]-benzamida
(fórmula XIII) obtenida de la etapa 2 (0,41 g, 1 mmol, 1 eq.) y
((trifluorometil)sulfonil)-anilina (0,22 g, 1
mmol, 1 eq.) (fórmula XIV) en tetracloroetileno se calienta a 110ºC
en presencia de tamices moleculares de 4 \ring{A} durante 36 h. Se
deja que la mezcla de reacción se enfríe hasta temperatura ambiente
y se añade cianoborohidruro sódico (0,12 g, 2 mmol, 2 eq.). La
reacción se agita durante 12 h adicionales a temperatura ambiente.
La fase orgánica se lava con salmuera y se seca sobre MgSO_{4}.
Los disolventes se evaporan hasta sequedad. El producto en bruto se
purifica mediante HPLC preparativa usando un gradiente de
acetonitrilo/agua para dar el compuesto (16),
4-cloro-N-{5-[2,2-dimetil-3-(3-trifluorometanosulfonilfenilamino)-propilsulfamoil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida,
puro.
\newpage
La siguiente tabla proporciona datos de HPLC y
datos de espectroscopía de masas de los ejemplos
mencio-
nados. ^{1}, ^{2}.
nados. ^{1}, ^{2}.
\vskip1.000000\baselineskip
Los siguientes ejemplos de formulación ilustran
composiciones farmacéuticas representativas de acuerdo con la
presente invención, que no esta restringida a los mismos.
\vskip1.000000\baselineskip
Formulación
1
Un compuesto de sulfonamida de fórmula I se
mezcla como un polvo seco con un aglutinante de gelatina seco en una
relación en peso aproximada de 1:2. Se añade una cantidad
minoritaria de estearato de magnesio como lubricante. La mezcla se
forma en comprimidos de 240-270 mg
(80-90 mg de compuesto de sulfonamida activo por
comprimido) en una prensa de comprimidos.
\vskip1.000000\baselineskip
Formulación
2
Un compuesto de sulfonamida de fórmula I se
mezcla como un polvo seco con un diluyente de almidón en una
relación en peso aproximada de 1:1. La mezcla se carga en cápsulas
de 250 mg (125 mg de compuesto de sulfonamida activo por
cápsula).
\vskip1.000000\baselineskip
Formulación
3
Un compuesto de sulfonamida de fórmula I (1250
mg), sacarosa (1,75 g) y goma de xantano (4 mg) se combinan, se
hacen pasar a través de un tamiz de EE.UU. de malla Nº 10 y a
continuación se mezclan con una solución preparada previamente de
celulosa microcristalina y carboximetilcelulosa sódica (11:89, 50
mg) en agua. Se diluyen benzoato sódico (10 mg), aromatizante y
colorante y se añaden con agitación. Después, se añade suficiente
agua para producir un volumen total de 5 ml.
\vskip1.000000\baselineskip
Formulación
4
Un compuesto de sulfonamida de fórmula I se
mezcla como un polvo seco con un aglutinante de gelatina seco en una
relación en peso aproximada de 1:2. Se añade una cantidad
minoritaria de estearato de magnesio como lubricante. La mezcla se
forma en comprimidos de 450-900 mg
(150-300 mg de compuesto de sulfonamida activo) en
una prensa de comprimidos.
\vskip1.000000\baselineskip
Formulación
5
Un compuesto de sulfonamida de fórmula I se
disuelve en un medio acuoso inyectable de solución salina estéril
tamponada hasta alcanzar una concentración de aproximadamente 5
mg/ml.
\vskip1.000000\baselineskip
Las actividades de los compuestos de acuerdo con
la fórmula I pueden determinarse usando los siguientes ensayos
biológicos in vitro e in vivo.
\vskip1.000000\baselineskip
La fosforilación de c-jun por
JNK2 o JNK3 puede seguirse controlando la incorporación de ^{33}P
en c-jun siguiendo el procedimiento posterior. La
actividad inhibidora de los compuestos de acuerdo con la fórmula I,
para la fosforilación de c-jun a través de JNK, se
determina calculando la actividad de fosforilación en presencia o
ausencia de compuestos de acuerdo con la fórmula I.
Los ensayos de JNK-3 y/o -2 se
realizan en placas de MTT de 96 pocillos: incubación de 0,5 \mug
de recombinante, GST-JNK3 o
GST-JNK2 preactivadas, con 1 \mug de recombinante,
GST-c-Jun biotinilada y
^{33}\gamma-ATP 2 \muM (2 nCi/\mul), en
presencia o ausencia de compuestos de acuerdo con la fórmula I y en
un volumen de reacción de 50 \mul que contiene
Tris-HCl 50 mM, pH 8.0; MgCl_{2} 10 mM;
ditiotreitol 1 mM y Na_{3}VO_{4} 100 \muM. La incubación se
realiza durante 120 min. a TA y se detiene al añadir 200 \mul de
una solución que contiene 250 \mug de cuentas de SPA revestidas
con estreptavidina (Amersham, Inc.)*, EDTA 5 mM, Triton
X-100 al 0,1% y ATP 50 \muM, en solución salina
tamponada con fosfato.
Después de la incubación durante 60 minutos a
TA, las cuentas se sedimentan mediante centrifugación a 1500 x g
durante 5 minutos, se resuspenden en 200 \mul de PBS que contiene
EDTA 5 mM, Triton X-100 al 0,1% y ATP 50 \muM y
la radiactividad se mide en un contador de centelleo \beta,
después de la sedimentación de las cuentas como se describe
anteriormente. Reemplazando
GST-c-Jun biotinilada por
GST-_{1}ATF_{2} biotinilada o proteína básica
de mielina biotinilada, este ensayo puede usarse para medir la
activación de MAP quinasas p38 y ERK preactivadas,
respectivamente.
Los compuestos de acuerdo con la fórmula I
probados presentan una inhibición (IC_{50}) con respecto a JNK3
de menos de 10 \muM, preferiblemente menos de 1 \muM y más
preferiblemente menos de 0,25 \muM. Por ejemplo, los compuestos
(13) y (14) presentan una inhibición (IC_{50}) con respecto a JNK3
de 188 nM y 184 nM, respectivamente.
\vskip1.000000\baselineskip
La activación de la ruta de JNK pone en marcha
la producción de citoquinas inflamatorias tales como
IL-2. La JNK puede ser activada por estímulos
externos tales como PMA e ionomicina y la producción de
IL-2 puede medirse a través de una prueba de ELISA
de IL-2. Las medidas comparativas con y sin los
compuestos de la invención de acuerdo con el siguiente protocolo
miden la capacidad de los compuestos para prevenir la liberación de
IL-2 mediada por estrés.
Células de Jurkat, una línea celular de leucemia
de células T humana (American Type Culture Collection Nº TIB 152)
se cultivaron en medio RPMI 1640 (Gibco, BRL) complementado con 10%
de suero de ternero fetal (FCS) activado térmicamente, glutamina y
Penstrep. La suspensión de células en el medio se diluye para dar
2.10^{6} células/ml. Las células se cultivaron en placa
(2.10^{5} células/pocillo) en una placa de 96 pocillos que
contenía diferentes concentraciones de un compuesto de acuerdo con
la fórmula I (concentración final de compuestos, 10, 3, 1, 0,3, 0,1
\muM). Esta mezcla se incuba 30 minutos a 37ºC en una atmósfera de
CO_{2} humidificada. Las células se trataron a continuación con
10 \mul de PMA (miristato-13
acetato-12 de forbol) + ionomicina (concentración
final de 0,1 \muM y 1 \muM) en todos los pocillos excepto el
control negativo. En los pocillos sin compuestos, se añaden 10
\mul de RPMI-DMSO al 2% (= 0,1% final). Las
células se incuban 24 horas a 37ºC y a continuación el sobrenadante
se recoge (congélese a -20ºC si no se usa el mismo día) antes de
realizar la prueba de ELISA de IL-2 en el
sobrenadante.
\vskip1.000000\baselineskip
La liberación de IL-2 en el
medio por células de Jurkat estimuladas con (PMA + ionomicina), en
presencia o ausencia de compuestos de prueba, puede ensayarse
mediante ELISA siguiendo el procedimiento descrito
posteriormente.
Se usan anticuerpo anti-(IL-2
humana) monoclonal (MAB602) (captura), anticuerpo
anti-(IL-2 humana) biotinilado (BAF202) (detección)
e IL-2 humana recombinante
(202-IL-010) (patrón) de R & D
Systems.
\vskip1.000000\baselineskip
100 \mul de anticuerpo de captura diluidos en
PBS a 5 \mug/ml (PBS-Tween 0,05%) se transfieren a
una placa de ELISA de 96 pocillos y se incuban durante la noche a
temperatura ambiente.
Cada pocillo se aspira y se lava 3 veces con
tampón de lavado (PBS-Tween 0,05%). Después del
último lavado, la placa se humedece.
\vskip1.000000\baselineskip
- 1.
- Se añaden 100 \mul de muestra o patrón (2000, 1000, 500, 250, 125, 62,5, 31,25 pg/ml) y se incuban 2 horas a temperatura ambiente.
- 2.
- Lavado 3 veces
- 3.
- Se añaden 100 \mul de anti-(IL-2 humana) biotinilado a 12,5 ng/ml y se incuban 2 horas a temperatura ambiente.
- 4.
- Lavado 3 veces
- 5.
- Se añaden 100 \mul de estreptavidina-HRP (Zymed Nº 43-4323) a 1:10'000 y se incuban 30 minutos a temperatura ambiente.
- 6.
- Lavado 3 veces
- 7.
- Se añaden 100 \mul de solución de sustrato (ácido cítrico/Na_{2}HPO_{4} (1:1) + H_{2}O_{2} 1:2000 + OPD) y se incuban 20-30 minutos a temperatura ambiente.
- 8.
- Se añaden a cada pocillo 50 \mul solución de terminación (H_{2}SO_{4} 20%).
- 9.
- La densidad óptica se mide usando una placa de microvaloración graduada a 450 nm con corrección a 570 nm.
\vskip1.000000\baselineskip
La fosforilación del factor de transcripción,
c-jun, por JNK en la ruta de transducción de señales
de MAP quinasas puede seguirse a través de un sistema informador
trans tal como el PathDetect® disponible comercialmente (33).
La inhibición de la fosforilación por compuestos
de acuerdo con la fórmula I puede determinarse a continuación.
Un sistema informador trans permite seguir, a
través de la actividad de la luciferasa, el estado de activación de
una proteína activadora trans de fusión. La proteína activadora
trans consiste en el dominio de activación del factor de
transcripción de interés (c-jun) fusionado con al
menos un activador de transcripción de levadura, dominio de unión a
DNA de GAL4 (dbd, por sus siglas en inglés). El dbd de GAL4 tiene la
ventaja de que no pueden unirse a él factores de transcripción de
mamífero conocidos y por lo tanto el ruido de fondo del ensayo es
muy bajo.
En el presente caso, se usaron líneas celulares
de informador de luciferasa de
Hela-c-Jun
(HLR-c-Jun) que expresan
constitutivamente GAL4-cJun.
\newpage
El gen de MEKK-1 se insertó.
MEKK-1 es una MAPKKK que pone en marcha la
activación de JNK. La expresión de MEKK-1 silvestre
es suficiente para la activación de JNK (34).
Una vez que la JNK se activa, puede inducir la
fosforilación del dominio de c-jun de la proteína
activadora trans de fusión (GAL4dbd-cJun) que forma
un dímero. El dímero es capaz entonces de unirse a una GAL4 aguas
arriba de la secuencia activadora (GAL4 UAS, por sus siglas en
inglés) del informador que activa la expresión de luciferasa.
La expresión de luciferasa se detecta mediante
luminiscencia usando un ensayo simple tal como el sistema de ensayo
de informador Dual-Luciferase® (35) en que se usa
Renilla como un informador de control.
La inhibición de JNK se observa como una
disminución en la expresión de luciferasa y se detecta por una
disminución de la luminiscencia.
\vskip1.000000\baselineskip
Células
HLR-c-Jun se cultivan en DMEM alto
en Glc complementado con FCS (Sigma) al 10%, glutamina 2 mM (Gibco),
P/S, 100 \mug/ml de higromicina b y 250 \mug/ml de G418.
\vskip1.000000\baselineskip
Las células se almacenan congeladas en criotubos
bajo nitrógeno líquido, como volúmenes de 1,8 ml de suspensión
celular en medio de cultivo que contiene 10% de
dimetilsulfóxido.
\vskip1.000000\baselineskip
Cuando es necesario, los viales congelados se
descongelan rápidamente a 37ºC en un baño de agua sometiendo
suavemente a turbulencia hasta la descongelación semicompleta. A
continuación, la suspensión celular se añade a 10 ml de medio de
cultivo y a continuación se centrifuga durante 5 minutos a 1200 rpm.
El sobrenadante se retira y la pella celular se reconstituye en el
medio. Los matraces se incuban a 37ºC en una atmósfera de CO_{2}
al 5%.
\vskip1.000000\baselineskip
Las células se subcultivan en serie (se someten
a "pasadas") cuando se han obtenido monocapas confluentes al
80%.
El medio de cada matraz se retira y la monocapa
se lava con 10-15 ml de solución tamponadora de
fosfato (PBS).
Se añade solución de
tripsina-EDTA a la monocapa celular, se incuba a
37ºC y se golpea suavemente a intervalos para hacer caer las
células. La separación y la desagregación completas de la monocapa
celular se confirman mediante examen microscópico. Las células se
resuspenden a continuación en 10 ml de medio completo y se
centrifugan durante 5 minutos a 1200 rpm.
Los sobrenadantes se descartan, las células se
resuspenden en medio de cultivo y se diluyen 1/5 en matraces de 175
cm^{2}.
\vskip1.000000\baselineskip
Día 0
mañana
Las células de cultivos casi confluentes se
separan y se desagregan mediante tratamiento con tripsima según se
describe anteriormente.
Las células se resuspenden en medio de cultivo y
se cuentan.
Las suspensiones celulares se diluyen con medio
para dar aproximadamente 3.5x10^{6} células/ml y 1 ml de
suspensión celular se puso sobre 2 cápsulas de cultivo de 10 cm que
contenían 9 ml de medio de cultivo.
Las placas se incuban a 37ºC en una atmósfera
humidificada de CO_{2} al 5% en aire.
\newpage
Día 0
tarde
- Control:
- 0,2 \mug de pTK Renilla, 5,8 \mug de pBluescript KS, 500 \mul de OPTIMEM (GIBCO), 18 \mul de Fugene 6.
- Inducido:
- 0,1 \mug de pMEKK1, 0,2 \mug de pTK Renilla, 5,7 \mug de pBluescript KS, 500 \mul de OPTIMEM (GIBCO), 18 \mul de Fugene 6 30 minutos TA.
La mezcla de transfección se añade a las células
cultivadas en placa. Las placas se incuban durante la noche a 37ºC
en una atmósfera humidificada de CO_{2} al 5% en aire.
\vskip1.000000\baselineskip
Día
1
Se prepara una placa de 96 pocillos (100 \mul
de medio de cultivo por pocillo).
Control negativo (vehículo): 2 \mul de DMSO se
añaden a los 100 \mul (por triplicado).
2 \mul de diluciones de reserva de compuesto
de acuerdo con la fórmula I (3, 1 y 0,1 mM en DMSO al 100%) se
añaden a los 100 \mul (por triplicado).
Las células transfectadas se tripsinizan y se
resuspenden en 12 ml de medio de cultivo.
100 \mul de la dilución se añaden a cada uno
de los 96 pocillos de la placa.
La placa se incuba durante la noche a 37ºC en
una atmósfera humidificada de CO_{2} al 5% en aire.
\vskip1.000000\baselineskip
Día
2
El medio se retira de la placa y las células se
lavan dos veces con 100 \mul de PBS. Se aplica reactivo de lisis
(tampón de lisis pasiva, PLB, por sus siglas en inglés). A cada
pocillo de cultivo se aportan 5 \mul de 1X PLB. Las placas de
cultivo se ponen sobre una plataforma giratoria o un agitador
orbital con giro/agitación suaves para asegurar la cobertura
completa de la monocapa celular con 1X PLB. Las placas de cultivo se
hacen girar a temperatura ambiente durante 15 minutos. 20 \mul
del lisado se transfieren a una placa opaca de 96 pocillos. Se
registra la lectura del luminómetro.
- 50 \mul de reactivo de ensayo de luciferasa
II se inyectan y las lecturas se registran a los 5 y 10 minutos.
50 \mul de reactivo Stop & Glo ® se
inyectan y las lecturas se registran a los 5 y 10 minutos.
A continuación, se mide la luminiscencia
relativa: RLU Luciferasa/RLU Renilla.
\vskip1.000000\baselineskip
Las endotoxinas son los constituyentes
lipopolisacáridos (LPS) de la membrana externa de bacterias Gram
negativas. Se ha demostrado que la respuesta a LPS implica la
activación de diferentes poblaciones celulares y conduce a la
expresión de diversas citoquinas inflamatorias que incluyen el
factor de necrosis tumoral alfa (TNF\alpha) y el interferón gamma
(IFN-\gamma).
Como se sabe que el LPS estimula la activación
de diversas rutas de MAP quinasas, incluyendo JNK (36), puede
probarse la capacidad de los inhibidores de JNK después de que la
ruta de señalización de JNK se haya accionado por una inducción con
LPS.
La actividad como inhibidores de JNK de los
compuestos de fórmula I puede determinarse después de una inducción
con LPS usando el siguiente protocolo:
LPS (S. abortus-Galanos Lab.) se
inyecta (200 \mug/kg, i.v.) a ratones C57BL/6 macho para inducir
choque endotóxico. Los compuestos de acuerdo con la fórmula I (0,1,
1, 10 mg/kg) o NaCl (200 uM) se inyectan intravenosamente (10
ml/kg) 15 min antes de la inducción con LPS. Se obtuvo sangre
heparinizada del seno orbital en diferentes puntos temporales
después de la inducción con LPS, y la sangre se centrifugó a 9.000
rpm durante 10 min a 4ºC para recoger el sobrenadante. La medida de
la producción de citoquinas tales como TNF\alpha e IFN\gamma
por el ratón se realiza con un estuche de ELISA tal como Duoset®
DY410 para TNF\alpha y DY 485 para IFN\gamma. Pueden usarse
otros ensayos ELISA tales como los descritos en (37).
\vskip1.000000\baselineskip
La oclusión de la carótida bilateral del jerbo
es un modelo animal bien descrito de apoplejía iquémica aguda e
implica técnicas quirúrgicas relativamente sencillas.
La degeneración neuronal en el hipocampo se
desarrolla durante varios días y a menudo se denomina muerte
neuronal retardada. Además, la neurodegeneración observada
histológica-mente es obvia y se cuantifica
fácilmente (37). Por otra parte, la histopatología observada en el
jerbo es similar a la observada en la región CA1 del hipocampo del
cerebro humano después de un ataque cardíaco. Las observaciones
conductuales, tales como pruebas de memoria, podrían realizarse
incluso en el caso de los jerbos. Este tipo de pruebas para la
apreciación del grado de recuperación no es fácilmente manejable en
otros modelos tales como en la rata, cuyas capacidades de
aprendizaje son mucho más escasas (39).
El efecto de los compuestos de acuerdo con la
fórmula I para proteger puede determinarse usando el modelo de
isquemia global en el jerbo y un protocolo tal:
\vskip1.000000\baselineskip
* Cirugía
- -
- Anestesia con isoflurano (0,5-4%).
- -
- Las arterias carótidas comunes (izquierda y derecha) se liberan de tejido.
- -
- Oclusión de las arterias usando micropinzas Bulldog durante 5 min.
- -
- Retirada de las pinzas (reperfusión)
- -
- Estabulación de los animales bajo una lámpara calentadora hasta que se despiertan.
- -
- Estabulación de los animales en el animalario en jaulas individuales.
\vskip1.000000\baselineskip
* Sacrificio de los animales
- -
- 7 días después de la isquemia (Decapitación o sobredosis de pentobarbital).
- -
- Muestreo del cerebro.
\vskip1.000000\baselineskip
* Parámetros histológicos
- -
- Congelación del cerebro en isopentano (-20ºC)
- -
- Corte en rodajas del hipocampo usando un criomicrotomo (20 \mum).
- -
- Tinción con el método del violeta de cresilo
- -
- Evaluación de las lesiones (en los subcampos CA1/CA2 del hipocampo) mediante una puntuación de Gerhard & Boast modificada (40).
\vskip1.000000\baselineskip
- Administración del compuesto de acuerdo con la
fórmula I o el vehículo: 15 min, 24 horas y 48 horas después de la
reperfusión (5-10 min después de la recuperación de
la anestesia).
- Protocolo estándar
50 animales: 5 grupos de 8 (grupo A: control,
grupos B-D: artículo de prueba en 3 dosis y grupo E:
compuesto de referencia (ácido orótico 3x300 mg/kg, ip).
\newpage
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Claims (26)
1. Un derivado de sulfonamida de acuerdo con la
fórmula I
así como sus isómeros geométricos,
sus formas ópticamente activas como enantiómeros, diastereoisómeros
y mezclas de estos, así como sales del mismo, en
donde:
- \quad
- Ar^{1} es un grupo arilo o heteroarilo sustituido o no sustituido;
- \quad
- X es O o S;
- \quad
- Ar^{2} es un grupo arileno o heteroarileno sustituido o no sustituido;
- \quad
- R^{1} y R^{2} se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y un grupo alquilo C_{1}-C_{6};
- \quad
- R^{a}, R^{a}', R^{b}, R^{b}' se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C_{1}-C_{6};
- \quad
- R^{3} se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{10}, alquenilo C_{2}-C_{10}, alquinilo C_{2}-C_{10}, arilo o heteroarilo, cicloalquilo de 3-8 miembros que contiene opcionalmente 1-3 heteroátomos seleccionados de N, O, S, aril-alquilo (C_{1}-C_{10}) y heteroaril-alquilo (C_{1}-C_{10});
- \quad
- R^{4} se selecciona del grupo que consiste en H y -C(H)R^{5}R^{6};
- \quad
- R^{5} y R^{6} se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{10}, alquenilo C_{2}-C_{10}, alquinilo C_{2}-C_{10}, arilo o heteroarilo, cicloalquilo de 3-8 miembros que contiene opcionalmente 1-3 heteroátomos seleccionados de N, O, S, aril-alquilo (C_{1}-C_{10}) y heteroaril-alquilo (C_{1}-C_{10});
- \quad
- m es un número entero de 1 a 5;
- \quad
- n es un número entero de 0 a 2; y
- \quad
- p es un número entero de 1 a 10;
- \quad
- con la condición de que el compuesto de acuerdo con la fórmula I no sea:
- \quad
- N-[[5-[[[3-[[4-[(3-aminopropil)amino]butil]amino]-propil]amino]sulfonil]-2-tienil]metil]-benzamida, ni
- \quad
- N-[[5-[[[3-[[4-[(3-aminopropil)amino]butil]amino]-propil]amino]sulfonil]-2-tienil]metil]-4-cloro-benzamida, ni
- \quad
- N,N'-[1,4-butanodiilbis(imino-3,1-propanodiiliminosulfonil-5,2-tiofenodiilmetilen)]-bis[4-cloro-]benzamida.
2. Un derivado de sulfonamida de acuerdo con la
reivindicación 1, en el que Ar^{1} se selecciona del grupo que
consiste en fenilo, tienilo, furanilo, piridilo, opcionalmente
sustituido con un grupo seleccionado de alquilo
C_{1}-C_{6}, alcoxi
C_{1}-C_{6}, alquenilo
C_{2}-C_{6}, alquinilo
C_{2}-C_{6}, amino, acilamino, aminocarbonilo,
alcoxi(C_{1}-C_{6})-carbonilo,
arilo, carboxilo, ciano, halógeno, hidroxi, nitro, sulfonilo y
tioalcoxi C_{1}-C_{6}.
3. Un derivado de sulfonamida de acuerdo con
cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que Ar^{1}
es un fenilo no sustituido o sustituido.
4. Un derivado de sulfonamida de acuerdo con la
reivindicación 1, en el que Ar^{2} se selecciona del grupo que
consiste en fenileno, tienileno, piridileno opcionalmente sustituido
con un grupo seleccionado de alquilo
C_{1}-C_{6}, alcoxi
C_{1}-C_{6}, alquenilo
C_{2}-C_{6}, alquinilo
C_{2}-C_{6}, amino, acilamino, aminocarbonilo,
alcoxi(C_{1}-C_{6})-carbonilo,
arilo, carboxilo, ciano, halógeno, hidroxi, nitro, sulfonilo y
tioalcoxi C_{1}-C_{6}.
5. Un derivado de sulfonamida de acuerdo con una
cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que Ar^{2}
es un grupo tienileno o fenileno no sustituido o sustituido.
6. Un derivado de sulfonamida de acuerdo con una
cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que Ar^{1}
se selecciona de un grupo seleccionado de halogenofenilo,
nitrofenilo, hidroxifenilo, alcoxifenilo,
3,4-dihidroxifenilo, X es O, R^{1} es hidrógeno, m
es 1 y Ar^{2} es tienileno o fenileno.
7. Un derivado de sulfonamida de acuerdo con una
cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que:
- \quad
- Ar^{1} es 4-clorofenilo, X es O, R^{1} y R^{2} son ambos hidrógeno; m es 1; n es 0, 1 ó 2;
- \quad
- Ar^{2} es un grupo tienileno o fenileno; R^{a}, R^{a}', R^{b}, R^{b}' son hidrógeno, R^{3} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6} o arilo; R^{4} se selecciona de un grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{10}, aril-alquilo(C_{1}-C_{10}), CH_{2}-cicloalquilo(C_{3}-C_{8}), CH_{2}-heterocicloalquilo(C_{3}-C_{8}), CH_{2}-arilo y un grupo CH_{2}-heteroarilo.
8. Un derivado de sulfonamida de acuerdo con una
cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que:
- \quad
- Ar^{1} es un 4-clorofenilo, X es O, R^{1} y R^{2} son hidrógeno, m es 1; n es 0, 1 ó 2; Ar^{2} es un grupo tienileno o fenileno; R^{3} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{6} o arilo; R^{4} se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{10}, aril-alquilo(C_{1}-C_{10}), CH_{2}-cicloalquilo(C_{3}-C_{8}), CH_{2}-heterocicloalquilo(C_{3}-C_{8}), arilo y un grupo CH_{2}-heteroarilo.
9. Un derivado de sulfonamida de acuerdo con
cualquiera de las reivindicaciones precedentes, seleccionado del
siguiente grupo:
4-cloro-N-5-[2,2-dimetil-3-(4-trifluorometil-bencilamino)-propilsulfamoil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida;
4-cloro-N-(5-{3-[metil-(4-trifluorometil-bencil)amino]-propilsulfamoil}-tiofen-2-ilmetil)-benzamida;
4-cloro-N-{5-[3-(hexil-metil-amino)-propilsulfamoil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida;
4-cloro-N-[5-(2-hexilamino-etilsulfamoil)-tiofen-2-ilmetil]benzamida;
4-cloro-N-[5-(3-hexilamino-2,2-dimetil-propilsulfamoil)-tiofen-2-ilmetil]-benzamida;
4-cloro-N-{5-[3-(4-trifluorometil-bencilamino)-bencil-sulfamoil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida;
4-cloro-N-(5-{metil-[3-(4-trifluorometil-bencilamino)-propil]-sulfamoil}-tiofen-2-ilmetil)-benzamida;
4-cloro-N-{5-[(3-hexilamino-propil)-metil-sulfamoil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida;
y
4-cloro-N-{5-[2,2-dimetil-3-(3-trifluorometanosulfonil-fenilamino)-propilsulfamoil]-tiofen-2-ilmetil}-benzamida.
10. Una sulfonamida de acuerdo con cualquiera de
las reivindicaciones precedentes, para uso como un medicamento.
11. Uso de un derivado de sulfonamida de acuerdo
con la fórmula I
\vskip1.000000\baselineskip
en la
que
- \quad
- Ar^{1} es un grupo arilo o heteroarilo sustituido o no sustituido;
- \quad
- X es O o S, preferiblemente O;
- \quad
- Ar^{2} es un grupo arileno o heteroarileno sustituido o no sustituido;
- \quad
- R^{1} y R^{2} se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y un grupo alquilo C_{1}-C_{6};
- \quad
- R^{a}, R^{a}', R^{b}, R^{b}' se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo C_{1}-C_{6};
- \quad
- R^{3} se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{10}, alquenilo C_{2}-C_{10}, alquinilo C_{2}-C_{10}, arilo o heteroarilo, cicloalquilo de 3-8 miembros que contiene opcionalmente 1-3 heteroátomos seleccionados de N, O, S, aril-alquilo (C_{1}-C_{10}) y heteroaril-alquilo (C_{1}-C_{10});
- \quad
- R^{4} se selecciona del grupo que consiste en H y -C(H)R^{5}R^{6};
- \quad
- R^{5} y R^{6} se seleccionan independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C_{1}-C_{10}, alquenilo C_{2}-C_{10}, alquinilo C_{2}-C_{10}, arilo o heteroarilo, cicloalquilo de 3-8 miembros que contiene opcionalmente 1-3 heteroátomos seleccionados de N, O, S, aril-alquilo (C_{1}-C_{10}) y heteroaril-alquilo (C_{1}-C_{10});
- \quad
- m es un número entero de 1 a 5;
- \quad
- n es un número entero de 0 a 2; y
- \quad
- p es un número entero de 1 a 10;
así como isómeros, formas ópticamente activas
como enantiómeros, diastereoisómeros y mezclas de éstos, así como
sales del mismo, para la preparación de un medicamento para el
tratamiento de un trastorno neuronal seleccionado de epilepsia,
enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, enfermedades
retinales, lesión de la médula espinal, esclerosis múltiple, trauma
e isquemia de cabeza, una enfermedad cardiovascular incluyendo
apoplejía, arterosclerosis, infarto de miocardio, lesión por
reperfusión de miocardio y un estado isquémico incluyendo lesiones
por reperfusión cardíaca, renal y cerebral, y fallo renal.
12. Uso de un derivado de sulfonamida de acuerdo
con cualquiera de las reivindicaciones 1-9, para la
preparación de un medicamento para el tratamiento de un trastorno
neuronal seleccionado de epilepsia, enfermedad de Alzheimer,
enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, enfermedades
retinales, lesión de la médula espinal, esclerosis múltiple, trauma
e isquemia de cabeza, una enfermedad autoinmune seleccionada de
enfermedad inflamatoria del intestino (IBD), artritis reumatoide,
asma, choque séptico, rechazo de trasplantes, un cáncer seleccionado
de cáncer mamario, colorrectal, pancreático, ovárico, prostático,
testicular, hepático, renal y pulmonar, una enfermedad
cardiovascular incluyendo apoplejía,
arteroscle-rosis, infarto de miocardio, lesión por
reperfusión de miocardio y un estado isquémico incluyendo lesiones
por reperfusión cardíaca, renal y cerebral, y fallo renal.
13. Uso de un derivado de sulfonamida de acuerdo
con una cualquiera de las reivindicaciones 1-9 sin
condición, para la modulación de la ruta de JNK.
14. Uso de acuerdo con la reivindicación 13,
para el tratamiento o la prevención de trastornos asociados con la
expresión o la actividad anormal de JNK.
15. Uso de acuerdo con la reivindicación 14,
para el tratamiento o la prevención de trastornos asociados con la
expresión o la actividad anormal de JNK2 y/o JNK3.
16. Una composición farmacéutica que comprende
al menos un derivado de sulfonamida de acuerdo con una cualquiera de
las reivindicaciones 1-9 y uno de sus portadores,
diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.
17. Un procedimiento para la preparación de un
derivado de sulfonamida de acuerdo con las reivindicaciones
1-9, en el que R^{4} no es H, que comprende la
etapa de aminar reductivamente un grupo carbonilo de la fórmula VII,
en la que R^{5} y R^{6} se definen anteriormente, con un
compuesto de fórmula VI, en la que Ar^{1}, X, R^{1}, Ar^{2},
R^{2}, R^{a}, R^{a}', R^{b}, R^{b}', R^{3}, m, n y p se
definen anteriormente.
18. Un procedimiento para la preparación de un
derivado de sulfonamida de acuerdo con las reivindicaciones
1-9, en el que R^{4} es H, que comprende la etapa
de desprotección de un compuesto de fórmula IV.
\vskip1.000000\baselineskip
19. Un procedimiento de acuerdo con la
reivindicación 17, en el que el compuesto de fórmula VI es el
resultado de la etapa de desprotección de un compuesto de fórmula IV
según se define anteriormente.
20. Un procedimiento de acuerdo con las
reivindicaciones 18 ó 19, en el que el compuesto de fórmula IV
resulta de hacer reaccionar un compuesto de fórmula II con un
compuesto de fórmula III.
\vskip1.000000\baselineskip
21. Procedimiento para la preparación de un
derivado de sulfonamida de acuerdo con cualquiera de las
reivindicaciones 1-9, que comprende la etapa de
N-sulfonilación de un compuesto de fórmula X con un
cloruro de sulfonilo de fórmula III, en las que Ar^{1}, X,
R^{1}, Ar^{2}, R^{2}, R^{a}, R^{a}', R^{b}, R^{b}',
R^{3}, R^{4}, m, n y p se definen anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
22. Un procedimiento de acuerdo con la
reivindicación 21, en el que el compuesto de fórmula X es el
resultado de la etapa de desprotección de un compuesto de fórmula
IX.
\vskip1.000000\baselineskip
en la que P es un grupo
protector.
23. Un procedimiento de acuerdo con la
reivindicación 22, en el que el compuesto de fórmula IX resulta de
aminar reductivamente un compuesto de fórmula VII con un compuesto
de fórmula VIII.
\vskip1.000000\baselineskip
en la que P es un grupo
protector.
24. Procedimiento para la preparación de un
compuesto de fórmula I de acuerdo con cualquiera de las
reivindicaciones 1-9, que comprende la etapa de
aminar reductivamente un grupo carbonilo de la fórmula XIII, en la
que Ar^{1}, X, R^{1}, Ar^{2}, R^{2}, R^{a}, R^{a}',
R^{b}, R^{b}', m, n y p se definen anteriormente con una amina
de fórmula XIV en la que R^{3} y R^{4} se definen
anteriormente.
\vskip1.000000\baselineskip
25. Un procedimiento de acuerdo con la
reivindicación 24, en el que el compuesto de fórmula XIII es el
resultado de la oxidación de un compuesto de fórmula XII, en la que
Ar^{1}, X, R^{1}, Ar^{2}, R^{2}, R^{a}, R^{a}', R^{b},
R^{b}', m, n y p se definen anteriormente.
26. Un procedimiento de acuerdo con la
reivindicación 25, en el que el compuesto de fórmula XII es el
resultado de la sulfonación de un compuesto de fórmula XI en la que
R^{2}, R^{a}, R^{a}', R^{b}, R^{b}', n y p se definen
anteriormente mediante un compuesto de fórmula III.
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