BRPI0510510B1 - Espuma ativada feita de uma borracha natural ou sintética ou de uma resina sintética - Google Patents

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Hiroki Shima
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Abstract

espuma ativada feita de uma borracha natural ou sintética ou de uma resina sintética a presente invenção refere-se a uma espuma ativada feita de uma borracha natural ou sintética ou de uma resina sintética, caracterizada pelo fato de que a espuma contém um composto de zircônio e/ou um composto de germânio e tem uma estrutura de células fechadas, em que a espuma é usada de modo direto ou indireto para fazer contato com um corpo humano quando um agente farmacêutico é administrado. a espuma ativada pode fazer direta ou indiretamente contato com um corpo humano para facilitar a circulação do sangue e estimular a melhoria da condição física e a cura de doenças. também não possui efeito adverso.

Description

ESPUMA ATIVADA FEITA DE UMA BORRACHA NATURAL OU SINTÉTICA OU DE UMA RESINA SINTÉTICA
CAMPO TÉCNICO
A presente invenção refere-se a uma espuma ativada feita de borracha natural ou sintética ou resina sintética e a uma espuma ativada capaz de facilitar a circulação do sangue e de estimular a melhoria da condição física e a cura de doenças tais como câncer.
FUNDAMENTOS DA TÉCNICA
O câncer da próstata é um câncer típico masculino que ocorre na velhice e que tem aumentado também no Japão devido ao envelhecimento da população e à ocidentalização do estilo de vida. Além disso, foi confirmada uma tendência crescente daquele devido a um teste de sangue avançado que utiliza marcadores de tumor (antígeno específico da próstata: PSA) e a um exame médico mais generalizado.
Quando se examina a taxa de incidência ajustada à idade (por 100.000 pessoas) do câncer da próstata no Japão, verifica-se que foi apenas 3,5 em 1956, mas 8,5 em 1990 e estima-se estatisticamente que alcance 20,3 em 2015.
Na América do Norte, a taxa de incidência do câncer da próstata é surpreendentemente elevada e foi de 92,4 em 1990, e a terceira geração de Japoneses nos Estados Unidos tem uma taxa de incidência de câncer da próstata próxima àquela de Caucasianos na América do Norte. Não é demasiado dizer, também a partir deste fato, que a ocidentalização do estilo de vida que inclui uma alimentação com gordura em excesso está ligada ao aumento do câncer da próstata no Japão. Portanto, prevê-se que o câncer de próstata de
80.000 a 100.000 pessoas será acessível a tratamento em
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2/21
2015.
Estatísticas por NCI (Instituto Nacional do Câncer) em 1998 a 2002 mostram que a taxa de incidência ajustada à idade (por 100.000 pessoas) de cânceres de todos os tipos foi de 469,7 nos Estados Unidos. Entre estes cânceres, o câncer da próstata teve a taxa de 76,0, mantendo o primeiro lugar, seguido por câncer da mama (73,3), câncer pulmonar ou brônquico (61,0), câncer do intestino grosso (38,3) e linfoma (21,8), o qual manteve a quinta posição ou acima. O câncer da próstata é caracterizado pelo fato de que o androgênio induz o seu crescimento enquanto que a remoção de androgênio elimina o crescimento. Portanto, com a finalidade de eliminar o crescimento do câncer da próstata, a remoção dos testículos através de cirurgia ou a aplicação de uma terapia antiandrogênio na qual a função do testículo é inibida por um agente farmacêutico é freqüentemente realizada. Contudo, a terapia antiandrogênio resultará na recorrência do câncer da próstata em algum momento no futuro, embora possa eliminar o seu progresso clínico durante um certo período de tempo (tipicamente, 1 a 3 anos) . A terapia hormonal resulta em uma taxa de sobrevivência de dez anos de 10% ou menos quando existem metástases em um órgão distante (freqüentemente no osso).
Para câncer da próstata localizado, a prostatectomia radical total (incluindo a remoção dos nodos regionais linfáticos na pelve) propicia literalmente uma terapia radical. Além da terapia cirúrgica, existe uma ampla escolha de opções desde terapia hormonal a terapia de radiação, incluindo irradiação de partículas pesadas e implantação direta de um material radioativo acicular na
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3/21 próstata e a quimioterapia usando agentes anticâncer, dependendo do grau de malignidade e progresso do câncer da próstata e da presença se suas metástases.
APRESENTAÇÃO DA INVENÇÃO
Problemas a serem Resolvidos pela Invenção
Contudo, qualquer das terapias tem complicações e efeitos adversos embora existam alguns poucos casos nos quais a sua recorrência não pode ser evitada. Portanto, existe a necessidade do desenvolvimento de uma terapia eficaz isenta de efeitos adversos. Além disso, existe a necessidade fundamental de um medicamento preventivo para o câncer da próstata; foi recentemente observado nos Estados Unidos que a ingestão de vitamina E foi eficaz na inibição da incidência de câncer da próstata em testes clínicos em grande-escala. Na verdade, o exame histológico da próstata em casos de autópsia de pessoas que morreram de outras causas leva freqüentemente à descoberta do câncer da próstata, o qual é chamado câncer latente. O câncer latente tem uma incidência elevada e foi encontrado em aproximadamente 30% do grupo de idade acima de 50 anos, embora seja diferente entre relatórios quando são incluídos cânceres que mostram de modo histológico uma invasão. Observa-se que no grupo de idade acima de 80 anos, aproximadamente 60 a 70% dos seus integrantes têm câncer da próstata. Existe a necessidade urgente do desenvolvimento de um método de prevenção tal que o câncer latente não se torne câncer clínico.
Devido aos problemas descritos acima, um objetivo da presente invenção é propiciar uma espuma ativada que não possua efeitos adversos e seja capaz de facilitar a
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4/21 circulação do sangue e de estimular a melhoria da condição física e a cura de doenças tais como câncer.
Meios para Solução do Problema
Como resultado de estudos recentes para solucionar os 5 problemas mencionados acima, é desenvolvida a presente invenção. Especificamente, a invenção refere-se a uma espuma ativada feita de borracha natural ou sintética ou resina sintética, caracterizada pelo fato de que a espuma contém um composto de zircônio e/ou um composto de germânio e tem uma estrutura de célula fechada, onde a espuma é usada de modo a direta ou indiretamente fazer contato com um corpo humano quando é administrado um agente farmacêutico.
A espuma ativada da invenção é usada pelo seu contato
15 direto ou indireto com um corpo humano, a qual é mais
eficaz quando ainda se produz fricção entre a espuma e o
corpo. A espuma ativada pode facilitar a circulação do
sangue e estimular a melhoria da condição física e a cura
de doenças, mas um mecanismo para isto ainda não foi
20 elucidado.
O composto de zircônio e o composto de germânio coletam raios infravermelhos, por exemplo, do sol na espuma ativada. Em seguida, os raios infravermelhos incidem nas paredes de muitas células dentro da espuma ativada para repetir a reflexão difusa e agregação, e são deste modo irradiados para fora da espuma ativada, os raios infravermelhos tendo comprimentos de onda de 4 a 25 micra que exercem uma influência favorável sobre um corpo humano. Especula-se que estes raios infravermelhos entram em ressonância com os comprimentos de onda de um corpo humano
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5/21 para ativar uma molécula de água e moléculas de proteína no corpo para intensificar, através do efeito excitometabólico, o poder de cura natural possuído originalmente por humanos. Portanto, imagina-se que a cura de doenças tais como câncer, hipertensão, diabetes, doenças do coração, rigidez no ombro, lumbago e doenças alérgicas, e a melhoria de condição física, por exemplo, prevenção de envelhecimento ou restauração do cabelo, são facilitadas. Além disso, a espuma ativada pode ser usada repetidamente.
A espuma ativada da invenção pode ser usada, ao administrar um agente farmacêutico, pelo contato direto ou indireto daquela com um corpo humano para aumentar o efeito do agente farmacêutico. Além disso, mesmo um agente farmacêutico que exerça um efeito adverso em uma dosagem elevada, se for combinado com o uso ordinário da espuma ativada, pode reduzir o efeito adverso, uma vez que a sua dosagem pode ser diminuída.
Exemplos não-limitativos do agente farmacêutico incluem um agente injetável, um agente da pele para uso externo, um agente muco-cutâneo, um agente nasal e um agente oral. Exemplos mais específicos incluem um agente anticâncer e um antibiótico, mas não se limitam a estes. O agente farmacêutico é, de preferência, uma substância derivada do ser humano. O termo substância “derivada do ser humano” refere-se a uma substância que um ser humano possui originalmente no seu corpo. No que se refere a isto, a substância derivada do ser humano pode ser extraída de um corpo humano ou sintetizada artificialmente.
Entre as substâncias derivadas do ser humano, uma substância que possua os menores efeitos adversos possíveis
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6/21 é preferivelmente usada, uma vez que não terá efeitos adversos quando usada em uma dosagem normal. Exemplos destes incluem butirato de sódio (doravante denominado SB) e éster butírico, os quais estão presentes no intestino humano. Estas substâncias são inibidoras de cromatina de desativação de histona deacetilase (HDACI ou HDi para abreviar; doravante abreviado como HDACI) e ativam cromatina para expressar um gene supressor de câncer que serve para controlar o ciclo da célula (ciclo de divisão; o ciclo de vida de uma célula desde o término da divisão da célula até a próxima divisão da célula) de uma célula de câncer, isto é, agem como agentes antitumor. SB e um derivado de éster butírico que foi sintetizado são também úteis se forem menos tóxicos. A combinação da ingestão de qualquer destas substâncias e do uso da espuma ativada pode suprimir a função de um oncogene e aumentar o seu efeito de supressão de câncer.
Além disso, as substâncias derivadas de ser humano podem ter diversos fatores de transcrição nuclear (ativador e supressor de DNA) e uma substância de remodelagem de cromatina que age cooperativamente junto com HDACI. Isto é, podem ser qualquer substância que age na região de promotor do DNA do gene supressor do câncer de modo a ativar o gene supressor. Estas substâncias podem também ser combinadas com a espuma ativada para suprimir a função do oncogene para aumentar os seus efeitos de supressão do câncer.
As células contidas na espuma são de preferência formadas a uma densidade de 20 a 30 células/mm2. Muitas células fechadas podem, portanto, estar contidas em alta densidade para gerar raios infravermelhos que exercem uma
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7/21 influência favorável sobre um corpo humano.
A forma da espuma ativada pode ser um triângulo pequeno, portátil e de fácil manejo, na forma do tipo roupa de cama tal como uma manta para deitar ou uma manta para cobrir, ou como uma porção de, ou todo, por exemplo, um terno, mas não está limitada a esta se a forma tornar possível que a espuma direta ou indiretamente faça contato com um corpo humano. Se for desejado conferir tais efeitos como para curar doenças, concentrados localmente em uma porção de um corpo humano, a espuma ativada pode ser formada em um formato de camada com uma espessura entre aproximadamente 8 mm e 5 cm. Quando for usada como um material de vestuário, a formação da espuma em um formato de camada com uma espessura entre aproximadamente 0,3 e 5 mm facilita a sua fabricação dentro do vestuário.
O componente de borracha pode ser borracha natural ou borracha sintética. Exemplos não-limitativos da borracha sintética incluem polímeros de borracha tais como borracha de cloropreno (CR), borracha de estireno-butadieno (SBR), borracha de acrilonitrilo-butadieno (NBR), borracha de acrilonitrilo (NPR), borracha de butadieno (BR) e borracha de isopreno (IR), ou uma mistura de seus diversos tipos.
Exemplos não-limitativos do componente de resina sintética incluem resina de cloreto de vinil (PVC), polipropileno (PP) e polietileno (PE).
Um agente de formação de espuma pode usar um agente de formação de espuma bem conhecido, mas é preferivelmente Celogen OTI (de Uniroyal, U.S.A.) ou Unicell (de Dongjin, Coréia do Sul).
A espuma ativada pode conter ambos ou um dentre o
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8/21 composto de zircônio e o composto de germânio. Para tratamento de câncer, tanto o composto de zircônio como o composto de germânio estão preferivelmente envolvidos, uma vez que o efeito de facilitar a cura de câncer é aumentado.
O composto de zircônio usa de preferência um composto complexo de zircônio. Exemplos do composto complexo de zircônio incluem um complexo de zircônio e flúor ou similar; exemplos específicos destes incluem haxafluorozirconato de potássio (K2ZrF6) e octafluoro10 zirconato de potássio (K2ZrF8), mas não se limitam a estes. O teor do composto de zircônio é de preferência 10 a 80 partes em peso, com base em 100 partes em peso do composto de borracha. Um seu teor menor que o limite resulta em efeito fraco e um seu teor maior que o limite superior é indesejável do ponto de vista econômico, uma vez que não é produzida qualquer diferença significativa no efeito.
O composto de germânio usa de preferência um mineral de germânio ou um composto de complexo de germânio. Exemplos não-limitativos do mineral de germânio incluem argirodita (Ag8GeS9) e renierita ((Cu, ZN)uFe4(Ge, As)2S16). Exemplos não limitativos do composto complexo de germânio incluem um complexo de germânio e ácido dicarboxílico ou amina. O teor do composto de germânio é de preferência 5 a 10 partes em peso, com base em 100 partes em peso de composto de borracha. Um seu teor menor que o limite inferior resulta em efeito fraco e um seu teor maior que o limite superior é indesejável do ponto de vista econômico, uma vez que não é produzida qualquer diferença significativa no efeito.
Além dos componentes descritos acima, a espuma
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9/21 ativada contém de preferência carbono. O fato de conter carbono aumenta a resistência da espuma ativada e permite que mais raios infravermelhos, por exemplo, do sol, sejam coletados. Exemplos não-limitativos do carbono incluem negro-de-fumo que pode ser usado em forma granular. Vantagens da Invenção
De acordo com a invenção, ao administrar um agente farmacêutico, a espuma ativada pode ser usada pelo seu contato direta ou indiretamente com um corpo humano para aumentar o efeito do agente farmacêutico. Além disso, mesmo um agente farmacêutico que exerceria um efeito adverso em uma grande dosagem, se combinado com a espuma ativada, poderá reduzir o efeito adverso, uma vez que a sua dosagem pode ser reduzida.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
A Figura 1 é uma vista em seção longitudinal de uma
espuma ativada de uma modalidade da presente invenção;
a Figura 2 é um gráfico que mostra uma mudança no
fluxo do sangue (ml/min/100 g);
20 a Figura 3 é um gráfico que mostra uma mudança no
volume do sangue;
a Figura 4 é um gráfico que mostra uma mudança na
velocidade do sangue;
a Figura 5 é um gráfico que mostra uma mudança na
25 pressão de contato superficial com o corpo (hPa);
a Figura 6 é um par de micrografias eletrônicas de
células ; (a) grupo experimental, (b) grupo de controle;
a Figura 7 é um resultado da análise de microconjuntos de cDNA em células vivas de Du145 (célula de câncer da próstata humana);
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10/21 a Figura 8 é um par de tabelas com gráficos que mostram mudanças no tempo no número de células vivas de Du145 (célula de câncer da próstata humana); (+) mostra um grupo experimental que usa a espuma ativada da invenção e (-) um grupo de controle;
a Figura 9 é um par de tabelas com gráficos que mostram mudanças no tempo no número de células vivas de LNCap (célula de câncer da próstata humana); (+) mostra um grupo experimental que usa a espuma ativada da invenção e (-) um grupo de controle e a Figura 10 é um par de tabelas com gráficos que mostram mudanças no tempo no número de células vivas de PC3 (célula de câncer da próstata humana); (+) mostra um grupo experimental que usa a espuma ativada da invenção e (-) um grupo de controle.
Descrição de Símbolos
Camada de espuma
Camada de cobertura
MELHOR MODO PARA REALIZAR A INVENÇÃO
Serão descritas abaixo modalidades da invenção baseadas nos desenhos. A Figura 1 é uma vista em seção longitudinal de uma espuma ativada de uma modalidade da presente invenção. Como mostrado na Figura 1, a espuma ativada de uma modalidade da presente invenção é um
25 laminado que consiste em camada de cobertura de borracha 2
laminada sobre ambos os lados de camada de espuma de
borracha 1. Embora a modalidade tome a forma de camada de
cobertura 2 laminada sobre ambos os lados de camada de
borracha 1, a mesma pode tomar a forma de camada de
30 cobertura 2 laminada sobre qualquer lado da camada de
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11/21 borracha 1 ou a forma de apenas camada de espuma 1 sem camada de cobertura laminada 2.
A camada de espuma 1 é uma espuma que compreende principalmente borracha ou resina sintética, contém um composto de zircônio e/ou composto de germânio e carbono, e tem uma estrutura de célula fechada. A célula fechada é formada pela formação de espuma com um agente de formação de espuma. A seção transversal da camada de espuma 1 tem um maior número de células pequenas formadas. A espessura da camada de espuma é ajustada para aproximadamente 1 cm, mas não se destina a ficar limitada a esta.
As camadas de cobertura 2 são fixadas por adesão a ambos os lados da camada de espuma 1, mas a fixação pode ser realizada por outro método desde que possam ser laminadas sobre a camada de espuma 1. Além disso, o material da camada de cobertura 2 é uma camada de borracha que compreende principalmente borracha de cloropreno (CR), a qual não contém células, mas toma uma forma que contém células. Além disso, o material da camada de cobertura 2 não se limita a borracha de cloropreno e pode ser outra borracha sintética, borracha natural ou uma resina sintética tal como polietileno clorossulfonado.
EXEMPLO
Aspectos específicos da invenção serão descritos abaixo em detalhe, baseados em Exemplo. Contudo, esta invenção não se destina a ficar limitada ao Exemplo abaixo e acredita-se que é óbvio que diversas modificações e variações que podem ser realizadas no Exemplo caem dentro do âmbito da invenção.
A camada de espuma 1 é primeiramente preparada.
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12/21
Borracha ou resina sintética é usada como base e a combinação é realizada de acordo com a formulação na Tabela 1, seguida por mistura com um rolo. No que se refere a isto, um método para misturar materiais não é especialmente restritivo e pode ser usado um método convencional de mistura como o utilizado para um composto de borracha ou resina sintética. A matéria misturada resultante é em seguida formada em forma de camadas usando uma extrusora. Esta camada é vulcanizada e expandida usando um ar aquecido (processo de vulcanização). O processo de vulcanização é realizado em duas etapas primária e secundária. A vulcanização de duas etapas leva à formação uniforme de células por toda a camada de espuma. O processo acima resulta na produção de camada de espuma 1.
A camada de cobertura 2 é em seguida grudada em ambos os lados da camada de espuma 1 usando um adesivo à base de borracha ou resina sintética. Subseqüentemente, é aplicada uma alta tensão ao lado que propicia a sua frente. A tensão aplicada é realizada sob as condições de uma corrente de
10.000 a 800.000 A, uma tensão de 200 a 3.300 V e uma duração de 0,1 a 0,3 segundo. No que se refere a isto, uma maior corrente é mais preferível. A espuma ativada gera ondas eletromagnéticas tais como raios infravermelhos. Acredita-se que a alta tensão é aplicada a um lado da espuma ativada para orientar a onda eletromagnética de modo a mostrar diretividade na direção do lado superficial ao qual a tensão foi aplicada, embora o mecanismo não tenha sido elucidado. Conseqüentemente, o contato da superfície com um corpo humano permite que as ondas eletromagnéticas sejam irradiadas de modo concentrado sobre a área de
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13/21 contato, aumentando deste modo o efeito de cura da doença ou similar. O processo acima permite que a espuma ativada seja completada.
Tabela 1
Exemplo Exemplo Exemplo Exemplo Exemplo Exemplo
1 2 3 4 5 6
Borracha natural 100
Borracha de cloropreno 100 100
Polietileno clorossulfonado 100
PVC (resina de vinil cloreto) 100
NRP (borracha de 100
acrilonitrila)
Borracha de nitrila líquida 6
Composto complexo de zircônio 10 20 7 80 30
Zirconita 2 20 30
Composto complexo de germânio 10 10
Estabilizador 3
Óxido de zinco 5 5 5 5 5
Óxido de magnésio 3 3 3 3
Celogen OTI 10 10 10 10 10
Ácido esteárico 3
DOP (plastificante) 25 30
Negro-de-fumo 25 20 20 20
Óleo de processo 30 30 5 30
Enxofre 3 3
Acelerador de vulcanização DM 2 3
Óxido de silício 12 12 20
Condições de vulcanização
Primária 130oCx 132oCx 120oCx 160oCx 100oCx 130oCx
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14/21
10min 19min 8min 5min 10min 10min
Secundária 160oCx 160oCx 150oCx 100oCx 160oCx 160oCx
10min 10min 8min 5min 10min 10min
Gravidade específica aparente 0, 16 0,21 0,35 0,24 0,22 0,2
Dureza 7 8 10 10 9 9
(Unidades: partes em peso)
No exemplo acima, Celogen OTI é p,p'-oxibis (benzenossulfonil)hidrazina (de Uniroyal, U.S.) que é um agente de formação de espuma. Zirconita tipicamente significa zirconita presente na forma de silicato (ZrSiO4) . Acelerador de vulcanização DM refere-se a dibenzotiazol dissulfeto. A dureza foi determinada usando um aparelho de teste de dureza de borracha (tipo C).
Teste 1
A espuma ativada foi em seguida usada para realizar um teste para determinar os seus efeitos sobre a pressão de contato com a superfície do corpo e o fluxo do sangue em um ser humano. Um método para medir a pressão de contato com a superfície do corpo e o fluxo do sangue será primeiramente descrito.
Objeto do teste
Uma mulher com idade na faixa dos cinqüenta anos foi usada como objeto.
Método de teste
O teste foi realizado usando um instrumento para medir o fluxo do sangue e a pressão de contato com a superfície do corpo (AMI3037-2, de AMI Technology) . Um sensor de pressão de contato com a superfície do corpo/fluxo do sangue foi fixado na parte superior da coxa para medição no ambiente de uma temperatura ambiente de
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23oC e umidade de 55%RH sob as seguintes duas condições. Na condição 1, a espuma ativada foi pulverizada sobre uma cadeira, na qual o objeto ficou em seguida sentado na condição de descanso durante 30 minutos, seguido pela medição do fluxo do sangue, volume do sangue, velocidade do sangue e pressão de contato com a superfície do corpo durante 10 minutos. Na condição 2, o objeto sentou-se, para controle, em uma cadeira sobre a qual a espuma ativada não foi pulverizada, durante 30 minutos, seguido pela medição do fluxo do sangue e similares durante 10 minutos. Os resultados são mostrados na Tabela 2 e Figuras 2 a 5. A Tabela 2 mostra os valores médios de medições de fluxo do
sangue e similares durante 10 minutos. As Figuras 2 a 5
mostram mudanças com o tempo no fluxo do sangue e similares
15 durante 10 minutos. No que se refere a isto, “pressão do
sangue” refere-se ao fluxo de sangue por 100 g de tecido de
corpo humano por minuto e é determinado a partir da quantidade de luz refletida por células vermelhas do sangue em vasos capilares. “Volume do sangue” refere-se ao volume de sangue por área em seção transversal de 100 g de tecido de corpo humano, e o produto do volume do sangue e da velocidade do sangue é quase igual ao fluxo do sangue.
Resultados do teste
Tabela 2
Fluxo do sangue (ml/min.100g) Volume do sangue Velocidade do sangue Pressão de contato com a
superfície do
corpo
Condição 1 1,882 172,12 0, 406 40,47
Condição 2 1,232 150,53 0,272 42,74
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Como mostrado na Tabela 2 e Figuras 2 a 5 acima, o uso da espuma ativada melhora a circulação do sangue e reduz a pressão de contato com a superfície do corpo.
Teste 2
Sujeitos do teste
Foram usadas culturas de células de câncer da próstata obtidas do homem do tipo Du145, PC3 e LNCap. LNCap é uma célula de câncer da próstata dependente de hormônio e Du145 e PC3 são células de câncer da próstata independentes de hormônio.
Método de teste
Sobre placas de cultura de 10 cm de diâmetro sobre cada uma das quais foram colocados 15 ml do meio, foram pulverizadas 105 células/placa de cada das células de câncer da próstata (Du145, LNCap e PC3) para cultura sob condições de 37oC e 5% de CO2 durante 7 a 10 dias (período preparatório), seguido pelo início do teste. No que se refere a isto, um tipo de célula de câncer da próstata deve ser pulverizado sobre uma placa de cultura. Além disso, a espuma ativada não é usada durante o período preparatório.
Depois de iniciado o teste, a cultura foi realizada, em um grupo experimental, em uma condição que mantinha cada placa de cultura a partir dos seus lados superior e inferior usando as espumas ativadas. Em um grupo de controle, a cultura foi realizada em uma condição livre da espuma ativada. O meio da cultura foi trocado a cada três dias em média e cada tipo de célula foi sub-cultivado em uma nova placa antes das células se tornarem confluentes. Uma data de sub-cultura foi diferente entre os tipos de células acima, mas a mesma entre os grupos de controle e
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17/21 experimental de cada um dos tipos.
Um dia imediatamente antes do início do teste foi ajustado como dia 0, e as células foram coletadas na 1a, 2a e 3a semanas depois do início do teste. As células na 3a semana de cultura foram fixadas e em seguida observadas por microscópio eletrônico (a).
Além disso, mRNA (ácido ribonucléico mensageiro) foi extraído das células na 3a semana de cultura. O mRNA extraído foi hibridizado para um micro-conjunto humano de
1,2k cDNA (Clontech), seguido por análise dos resultados usando GeneSpider (software de laudo de genes: Silicon Genetics, Redwood, CA, U.S.A.) . A expressão de um gene responsável por apoptose foi determinada usando análise de agrupamento ANOVA (b).
Resultados do teste
Foi observado no grupo experimental que a proliferação de cada tipo de célula de câncer da próstata teve as seguintes características.
(a) Foi observada uma diferença morfológica entre as 20 aparências em microscópio eletrônico na 3a semana nos grupos experimental e de controle. Especificamente, cada célula de câncer que teve contato com a espuma ativada durante 3 semanas teve mais vacúolos citoplásmicos, menos estruturas internas visíveis de mitocôndria e uma membrana nuclear menos limpa (Figura 6(a)) em relação àquela do grupo de controle (Figura 6(b)). Portanto, é mostrado que ocorre apoptose nas células nas quais foi usada a espuma ativada.
O termo apoptose refere-se à morte da célula geneticamente programada, isto é, o suicídio de uma célula.
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Uma célula de câncer significa uma célula que continua proliferação porque a sistema de apoptose está deficiente.
(b) Os resultados com Du145 são mostrados na Figura 7, como um exemplo representativo para os resultados de
5 micro-conjuntos de cDNA na 3 a semana. A cor negra indica
maior expressão de mRNA em relação àquela do grupo de
controle, isto é, a ativação de um gene; o padrão em
treliça indica menor expressão de mRNA em relação àquela do grupo de controle, isto é, a função reduzida de um gene; e a cor cinza indica expressão inalterada de mRNA em relação àquela do grupo de controle.
Para Du145, o grupo experimental mostrou maior regulação em FasL (2,3 vezes), Fas (1,4 vezes), TRADD (1,4 vezes), CASP1, 4 e 10 (1,7, 1,2 e 1,7 vezes) e DFF40 (1,7 vezes) comparada com o grupo de controle. Para PC3, o grupo experimental mostrou maior regulação em CD40 (1,4 vezes) e TNF (1,4 vezes) comparada com o grupo de controle. Para LNCap, o grupo experimental mostrou maior regulação em Fas (1,6 vezes), CASP8 (1,6 vezes) e CASP3 (1,3 vezes) comparada com o grupo de controle. A este respeito, FasL, Fas, TRADD, CASP1, 4 e 10, DFF4 0, CD4 0 e TNF formam um grupo de genes que inicia o circuito de apoptose. Estes resultados mostram que a apoptose é facilitada no grupo experimental usando a espuma ativada comparada com aquela no grupo de controle.
Discussão
O que segue pode ser dito a partir dos resultados do teste descrito acima. A espuma ativada inicia o circuito de apoptose e facilita o efeito de enfraquecimento da função das células de câncer.
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19/21
Teste 3
A espuma ativada e SB como HDACI foram usados contra células de câncer da próstata humana para realizar um teste de supressão de proliferação de células de câncer. Este teste pode ser usado para revelar especificamente um método revolucionário para tratar ou prevenir câncer da próstata e para sugerir que pode ser, em princípio, eficaz contra qualquer câncer. HDACI será agora descrito em detalhe. A acetilação de lisina em histona por HAT (transferase de histona acetil) ativa a cromatina nuclear. A ativação da cromatina leva à aglutinação de um fator de transcrição nuclear, junto com um ativador, para uma região de promotor em DNA, resultando na expressão de um gene estrutural. Além disso, HDAC (histona deacetilase) provoca a desacetilação de lisina para novamente desativar a cromatina.
HDACI tipificado por SB previne a desacetilação por
HDAC para eliminar a inativação da cromatina. Portanto, HDACI ativa um gene supressor de câncer e similares cujas funções são enfraquecidas para agirem de modo a suprimir a proliferação de células de câncer.
Sujeitos de teste
Foram usadas culturas de células de câncer da próstata obtidas do homem do tipo Du145, PC3 e LNCap. LNCap é uma célula de câncer da próstata dependente de hormônio e
Du145 e PC3 são células de câncer da próstata independentes de hormônio.
Método de teste
Cada tipo de célula de câncer da próstata (Du145, LNCap ou PC3) foi cultivada a uma concentração de 103 células/100 pl em um micro-placa de 96 furos. Em um grupo
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20/21 experimental, 6 μΐ de 0, 1, 2 ou 3 mM SB foram adicionados à placa e a placa foi mantida entre os seus lados superior e inferior usando as espumas ativadas. O meio que continha SB foi trocado a cada dois dias. Em um grupo de controle, a cultura foi realizada sem usar a espuma ativada enquanto 6 μl de 0, 1, 2 ou 3 mM SB foram adicionados. O 0 mM SB consistiu na mesma quantidade (6 μ! de PBS (salmoura ompensada com fosfato) . O teste descrito acima foi realizado em quadruplicado para cada concentração.
No 2°, 5° e 8° dias de cultura, células vivas foram determinadas a uma densidade ótica (O.D.) de 450 nm usando Cell Proliferation Kit II (Estojo de Proliferação de Células II) (XTT: de Roche, Manheim, Alemanha) (na qual o valor (650) de um vazio foi subtraído).
O Estojo de Proliferação de Células II (XTT) usa a propriedade de que XTT é um substrato para desidrogenase e reduziu em formazano pela desidrogenase para determinar um corante de formazano gerado por uma mistura de XTT padrão e uma atividade de desidrogenase mitocondrial para quantificar a taxa de células sobreviventes. Portanto, a quantidade de formazano corresponde ao número de células vivas.
Resultados de teste
A espuma ativada suprimiu significativamente a proliferação de cada tipo de célula de câncer da próstata humana independentemente da presença da sua dependência de hormônio na presença de uma concentração mesmo baixa (1 mM) de SB comparada com aquela na presença de uma lata concentração (3 mM) de SB sem a espuma ativada (Figuras 8 a
10). Isto é, a espuma ativada agiu em associação com SB
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21/21 para suprimir de modo distinto a proliferação de células de câncer da próstata humana.
Discussão
O que segue pode ser dito a partir dos resultados do 5 teste descrito acima. Como mostrado nas Figuras 8 a 10, a espuma ativada pode ser usada simultaneamente com HDACI para facilitar o efeito supressivo de HDACI contra a proliferação de células de câncer da próstata humana. Em princípio, acredita-se que este método seja uma terapia eficaz contra qualquer câncer. Além disso, SB é uma substância que está presente no intestino em um corpo humano e não induz reação alérgica. Portanto, a sua concentração de 1 mM demonstrou ser eficaz no atual teste, tem toxicidade extremamente baixa contra um corpo vivo e está isenta de efeitos adversos tal como alergia.
Além disso, excesso de HDAC coopera com o fator de remodelagem de cromatina e similar para metilato citosina e suprime a proliferação de células de câncer.
APLICABILIDADE INDUSTRIAL
A espuma ativada da invenção pode ser usada na administração de um agente farmacêutico pelo seu contato direta ou indiretamente com um corpo humano para aumentar o efeito do agente farmacêutico. Além disso, mesmo um agente farmacêutico que exercesse um efeito adverso em uma dosagem elevada, se combinado com a espuma ativada, poderá reduzir o efeito adverso, uma vez que a sua dosagem pode ser reduzida.

Claims (5)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Espuma ativada feita de uma borracha natural ou sintética ou de uma resina sintética caracterizada pelo fato de que a referida espuma contém um composto de
    5 zircônio e/ou um composto de germânio e tem uma estrutura de células fechadas, e ainda a referida espuma é usada de modo direto ou indireto para fazer contato com um corpo humano quando um agente farmacêutico é administrado.
  2. 2. Espuma ativada, de acordo com a reivindicação 1, 10 caracterizada pelo fato de que a referida espuma também contém carbono.
  3. 3. Espuma ativada, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que o referido agente farmacêutico é um agente anti-câncer.
    15
  4. 4. Espuma ativada, de acordo com a reivindicação 3, caracterizada pelo fato de que o referido agente farmacêutico é uma substância anticarcinogênica derivada do ser humano.
  5. 5. Espuma ativada, de acordo com a reivindicação 4,
    20 caracterizada pelo fato de que a referida substância anticarcinogênica derivada do ser humano é um inibidor de histona deacetilase (HDACI), em que a substância anticarcinogênica é selecionada de butirato de sódio e éster butírico.
    25 6. Espuma ativada, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 2, 3, 4 ou 5, caracterizada pelo fato de que a referida célula é formada com 20 a 30 células/mm2.
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