KR100871643B1

KR100871643B1 - 활성 발포체

Info

Publication number: KR100871643B1
Application number: KR1020067011826A
Authority: KR
Inventors: 토미조 야마모토
Original assignee: 토미조 야마모토; 시마 히로키
Priority date: 2005-04-29
Filing date: 2005-05-16
Publication date: 2008-12-02
Also published as: HK1111891A1; AU2005330574A1; ZA200605814B; RU2006140873A; EP1902718A4; CA2567807C; RU2343901C2; US20100316718A1; WO2006117881A1; JPWO2006117881A1; NZ548087A; CN1953758A; JP5932194B2; UA84762C2; JP5977009B2; JP2012021018A; EP1902718B1; AU2005330574B2; CN100589795C; AU2005330574B8

Abstract

본 발명은, 지르코늄 화합물 및/또는 게르마늄 화합물을 함유하는 천연 혹은 합성고무 또는 합성수지제의 활성 발포체로서, 독립기포구조를 갖고, 약물투여시에 인체에 직접 또는 간접적으로 접촉시켜서 사용하는 것을 특징으로 하는 활성 발포체이다. 본 활성 발포체를 인체에 직접 또는 간접적으로 접촉시킴으로써, 혈행을 촉진하고, 체질개선이나 병의 치유를 촉진할 수 있다. 또한, 부작용이 없다.

Description

활성 발포체{ACTIVE FOAM}

본 발명은 천연 혹은 합성고무 또는 합성수지제 활성 발포체에 관한 것이고, 혈행을 촉진하고, 체질개선이나 암 등의 병의 치유를 촉진할 수 있는 활성 발포체에 관한 것이다.

전립선암은 고령에서 발생하는 대표적인 남성의 암이며, 인구의 고령화, 라이프 스타일의 서양화에 의해 일본에서도 증가하고 있다. 또, 종양 마커(전립선 특이항원:PSA:prostate specific antigen)에 의한 혈액검사의 발달, 검진의 보급화에 의해 증가경향이 확인되고 있다. 일본의 전립선암의 연령조절 이환율(罹患率)(10만명 대상)을 봐보면, 1956년에서는 3.5이지만, 1990년은 8.5이며, 2015년에는 추계학적으로 20.3으로 된다고 예측된다.

북미에서는 전립선암의 이환율은 두드러지게 높아, 1990년에는 92.4이며, 미국의 일본계 3세의 전립선암 이환율은 북미 백인의 이환율에 근사하고 있다. 이 사실로부터도, 지방과다의 식사를 포함한 라이프 스타일의 서양화가 일본에서의 전립선암의 증가로 연결되고 있다고 해도 과언이 아니다. 이 때문에 2015년에는 8~10 만명의 전립선암이 치료의 대상으로 된다고 예측되고 있다.

1998~2002년에 있어서의 국립암연구소(NCL:National Cancer Institute)의 통 계에 의한 미국의 암의 연령조절 이환율(10만명 대상)을 보면, 전체 부위에서 469.7이다. 이중, 전립선암은 76.0으로 1위이다. 계속해서 유방암(73.3), 폐암 및 기관지암(61.0), 대장암(38.3), 림프종(21.8)이 5위까지 들어간다. 전립선암은 남성 호르몬에 의해 증식되고, 남성 호르몬을 제거하면 그 증식이 억제되는 특징을 가진다. 이 때문에 전립선암의 증식억제에는 정소를 수술에 의해 제거하거나, 정소가 기능하지 않도록 약으로 억제하는 항안드로겐 치료방법이 적용되는 일이 많다. 그러나 항안드로겐 치료방법에 의해, 전립선암은 어떤 일정 기간(통상 1~3년) 임상적인 진행을 억제할 수 있지만, 결국 재발한다. 원격장기로 전이(뼈로의 전이가 많음)가 있을 경우에는, 호르몬 요법으로는 10년 생존율은 10%이하이다.

국한된 전립선암에 대해서는, 근치적 전립선 전적제술(골반 내의 영역 림프절 곽청을 포함)이 문자 그대로 근치적인 치료법으로 된다. 또 수술요법 뿐만 아니라, 전립선암의 악성도와 진전도, 그리고 전이의 유무에 따라, 호르몬 요법으로부터 중입자선 조사나 바늘형상의 방사성 물질을 직접 전립선에 찔러 넣는 방법을 포함하는 방사선 요법이나, 항암제를 사용하는 화학요법까지의 폭넓은 선택방법이 있다.

그러나, 어떤 치료법에도 합병증, 부작용이 있음과 동시에 재발을 피할 수 없는 경우가 적지 않게 존재한다. 이 때문에 현재, 부작용이 없는 유효한 치료법의 개발이 요구되고 있다. 또, 근본적으로는 전립선암의 예방적 치료가 요구되고 있고, 미국에서는 대대적인 임상치험에 의해 비타민E의 복용이 전립선암 발생의 억제에 유효하다는 것이 최근 보고되고 있다. 실제, 다른 원인으로 사망한 사람의 전립선을 부검해서 조직학적으로 조사하면 전립선암이 발견되는 일이 많고, 이것을 잠재성 암이라고 표현하고 있다. 잠재성 암의 빈도는 높고, 조직학적으로 침윤상을 나타내는 암도 포함하면 보고에 따라 차이는 있지만, 50세이상에서는 약 3할의 사람에게 발견된다. 80세이상에서는 약 6할에서 7할의 사람에게 전립선암이 확인된다. 이 잠재성 암이 임상적인 암으로 되지 않도록 예방방법을 개발하는 것은 초미의 문제이다.

본 발명은 상기 과제를 감안하여, 부작용이 없고, 혈행을 촉진하며, 체질개선이나 암 등의 병의 치유를 촉진할 수 있는 활성 발포체를 제공하는 것을 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위해 예의 연구한 결과, 본 발명을 완성시켰다. 즉, 본 발명은 지르코늄 화합물 및/또는 게르마늄 화합물을 함유하는 천연 혹은 합성고무 또는 합성수지제 활성 발포체로서, 독립기포구조를 갖고, 약물투여시에 인체에 직접 또는 간접적으로 접촉시켜서 사용하는 것을 특징으로 하는 활성 발포체이다.

본 활성 발포체는, 인체에 직접 또는 간접적으로 접촉시켜서 사용하지만, 또한 활성 발포체와 인체 사이에서 마찰을 일으키면 보다 효과적이다. 본 활성 발포체는 혈행을 촉진시키고, 체질개선이나 병의 치유를 촉진시키지만, 그 메커니즘은 해명되어 있지 않다.

지르코늄 화합물 및 게르마늄 화합물은 활성 기포체 내에 태양 등으로부터의 적외선을 모은다. 그리고, 적외선이 활성 발포체 내부의 다수의 기포의 벽에 부딪쳐 난반사와 집약을 반복함으로써, 인체에 좋은 영향을 주는 파장 4~25미크론의 적외선을 활성 기포체 밖으로 발생시킨다. 이 적외선과 인체의 파장이 공진함으로써, 몸속의 물 분자나 단백질 분자가 활성화되어, 대사 촉진작용에 의해 인간이 본래 갖고 있는 자연의 치유력이 증진된다고 추측된다. 따라서 암, 고혈압, 당뇨병, 심장병, 어깨결림, 요통, 알레르기성 질환 등의 병의 치유나, 노화방지, 육모(育毛) 등의 체질개선이 촉진되는 것이라고 추측된다. 또, 본 활성 발포체는 반복하여 사용할 수 있다.

본 활성 발포체는 약제투여시에 인체에 직접 또는 간접적으로 접촉시켜서 사용하면, 그 약제의 효과를 높일 수 있다. 또, 대량으로 사용하면 부작용이 있는 약제라도, 본 활성 발포체를 병용하면 소량으로도 되므로, 부작용을 억제할 수 있다.

약제의 종류로서는, 예를 들면 주사용제, 피부외용제, 경점피용제, 경비강용제 또는 경구제 등이 예시되지만, 이들에 한정되는 것은 아니다. 더욱 구체적으로는 항암제, 항생물질 등이 예시되지만, 이들에 한정되는 것은 아니다. 또, 약제는 인간유래의 물질인 것이 바람직하다. 인간유래란, 인간이 원래 체내에 갖고 있는 물질이다. 또한, 인간유래의 물질은, 인체로부터 추출한 것이라도 좋고, 인공적으로 합성한 것이라도 좋다.

인간유래의 물질 중에서도 독성이 가능한 적은 물질을 사용하면, 통상량으로의 사용에서는 부작용이 없으므로 바람직하다. 예를 들면, 그 예로서 인간의 장관 내에 있는 낙산 나트륨(sodium butyrate 이하, SB라고 칭함), 낙산 에스테르나트륨이 예시된다. 이들 물질은, 크로마틴을 비활성화하는 히스톤 탈아세틸화 효소저해물질(histone deacetylase inhibitor. HDACI 또는 HDi로 약칭된다. 이하, HDACI로 칭함)이고, 크로마틴을 활성화하여, 암억제 유전자를 일으켜, 암세포의 세포주기(분열주기. 세포분열을 완료하고나서 다음 세포분열에 이르기까지의, 세포의 생활고리)를 멈추게 하는 기능, 즉, 항종양제로서의 작용이 있다. 합성된 SB, 낙산 에스테르나트륨 유도체라도 독성이 적으면 유용하다. 이들 물질의 복용과 본 활성 발포체의 사용을 조합하면, 암유전자의 작용을 억제하여 암억제효과를 높일 수 있다.

또한, 인간유래의 물질로서는, HDACI가 작용할 때에 공익으로서 작용하는 각종 핵내 전사인자(DNA 활성화 인자나 억제인자)나 크로마틴 리모델링 물질이라도 좋다. 즉, 암억제 유전자를 활성화하도록 그 DNA의 프로모터 영역에 작용하는 물질이면 된다. 이들 물질도 본 활성 발포체와의 조합에 의해 암유전자의 작용을 억제하여, 암억제효과를 높일 수 있다.

내부에 함유되는 기포는, 20~30개/㎟ 형성하는 것이 바람직하다. 이렇게, 다수의 독립기포를 고밀도로 내부에 함유시킴으로써, 인체에 좋은 영향을 주는 적외선을 발생시킬 수 있다.

활성 발포체의 형태로서는, 예를 들면 운반하기 쉬운 소형 삼각형상 핸디타입, 깔개 매트, 덮개 매트 등의 침구형상 형태, 의복 등의 일부분 또는 전부에 사용하는 형태로 해도 좋지만, 인체에 직접 또는 간접적으로 접촉할 수 있는 것이면, 이들에 한정되는 것은 아니다. 또, 활성 발포체는, 인체의 일부에 국부적으로 집중해서 병 치유 등의 효과를 주고 싶을 경우는, 두께 약 8㎜~5㎝의 시트형상으로 형성하면 된다. 또한, 의복의 소재로 할 경우에는 두께 약 0.3~5㎜의 시트형상으로 형성하면 의복으로 제조하기 쉽다.

고무성분으로서는, 천연고무 또는 합성고무 중 어느 것이라도 좋다. 합성고무로서는 클로로프렌 고무(CR), 스티렌부타디엔 고무(SBR), 아크릴로니트릴부타디엔 고무(NBR), 아크릴니트릴 고무(NRP), 부타디엔 고무(BR), 이소프렌 고무(IR) 등의 고무계 고분자, 또는 이들을 복수종 혼합한 것이 예시되지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.

또한, 합성수지성분으로서는 염화비닐 수지(PVC), 폴리프로필렌(PP), 폴리에틸렌(PE) 등이 예시되지만, 이들에 한정되는 것은 아니다.

발포제로서는 공지의 발포제를 사용할 수 있지만, 셀로겐 OTI(유니로이열사제, 미국) 또는 유니셀(동진사제, 한국)이 바람직하다.

지르코늄 화합물 및 게르마늄 화합물은 양쪽을 함유시키는 형태로 해도 좋고, 어느 한쪽만을 함유시키는 형태로 해도 좋다. 암치료에는 지르코늄 화합물 및 게르마늄 화합물의 양쪽을 함유시키면, 암의 치유를 촉진시키는 효과가 향상되므로 바람직하다.

지르코늄 화합물로서는 지르코늄 착화합물을 사용하는 것이 바람직하다. 지르코늄 착화합물로서는 지르코늄과 불소 등의 착체가 예시되고, 구체적으로는 헥사플루오로지르코늄산 칼리(K₂ZrF₆) 또는 옥타플루오로지르코늄산 칼리(K₂ZrF₈)가 예시되지만, 이것에 한정되는 것은 아니다. 지르코늄 화합물의 함유량은, 고무성분 100중량부에 대해서 10~80중량부 함유시키는 것이 바람직하다. 모두 하한값보다 적으면 효과가 부족하고, 상한값보다 많게 해도 효과에 현저한 차이는 보여지지 않으므로 경제성의 점에서 바람직하지 않다.

또한, 게르마늄 화합물로서는, 게르마늄 광물 또는 게르마늄 착화합물을 사용하는 것이 바람직하다. 게르마늄 광물로서는 황게르마늄 은광(Ag₈GeS₉, Argyrodite)이나, 레니엘광((CU,Zn)₁₁Fe₄(Ge,As)₂S₁₆, Renierite) 등이 예시되지만, 이것에 한정되는 것은 아니다. 또, 게르마늄 착화합물로서는 게르마늄과 디카르복실산 또는 아민 등과의 착체가 예시되지만, 이것에 한정되는 것은 아니다. 게르마늄 화합물의 함유량은, 고무성분 100중량부에 대해서 5~10중량부 함유시키는 것이 바람직하다. 모두 하한값보다 적으면 효과가 부족하고, 상한값보다 많게 해도 효과에 현저한 차이는 보여지지 않으므로 경제성의 점에서 바람직하지 않다.

또한, 본 활성 발포체는 상기 구성에 더해서 카본을 함유시키는 것이 바람직하다. 카본을 함유함으로써 활성 발포체의 강도가 상승하고, 또, 태양 등으로부터의 적외선을 보다 많이 모을 수 있다. 카본으로서는, 예를 들면 카본블랙이 있고, 분립체인 것을 사용하면 좋지만, 이것에 한정되는 것은 아니다.

<발명의 효과>

본 발명에 의하면, 본 활성 발포체는 약제투여시에 인체에 직접 또는 간접적으로 접촉시켜서 사용하면 그 약제의 효과를 높일 수 있다. 또, 대량으로 사용하면 부작용이 있는 약제라도, 본 활성 발포체를 병용하면 소량으로도 되므로 부작용을 억제할 수 있다.

도 1은, 본 실시형태의 활성 발포체의 종단면도이다.

도 2는, 혈류량(ml/min/100g)의 변화를 나타내는 그래프이다.

도 3은, 혈액량의 변화를 나타내는 그래프이다.

도 4는, 혈류속도의 변화를 나타내는 그래프이다.

도 5는, 체압(hPa)의 변화를 나타내는 그래프이다.

도 6은, 세포의 전자현미경 사진으로서, (a)는 실험군, (b)는 대조군을 나타낸다.

도 7은, Du145(인간 전립선암 세포)의 생세포의 cDNA 마이크로어레이의 결과이다.

도 8은, Du145(인간 전립선암 세포)의 생세포의 수의 추이를 나타내는 표 및 그래프로서, (+)는 본 활성 발포체를 사용한 실험군, (-)는 대조군을 나타낸다.

도 9는, LNCap(인간 전립선암 세포)의 생세포의 수의 추이를 나타내는 표 및 그래프로서, (+)는 본 활성 발포체를 사용한 실험군, (-)는 대조군을 나타낸다.

도 10은, PC3(인간 전립선암 세포)의 생세포의 수의 추이를 나타내는 표 및 그래프로서, (+)는 본 활성 발포체를 사용한 실험군, (-)는 대조군을 나타낸다.

<도면의 주요부분에 대한 부호의 설명>

1 기포시트

2 커버시트

이하, 본 발명의 실시형태를 도면에 기초해서 설명한다. 도 1은 본 실시형태의 활성 발포체의 종단면도이다. 도 1에 나타내는 바와 같이, 본 실시형태의 활성 발포체는 고무제 기포시트(1)의 표리면에, 고무제 커버시트(2)를 적층한 적층체이다. 또, 본 실시형태에 있어서는, 커버시트(2)를 고무시트(1)의 표리면에 적층한 형태로 하고 있지만, 표면과 이면 중 어느 한면에 커버시트(2)를 적층시킨 형태로 해도 좋고, 커버시트(2)를 적층시키지 않고 기포시트(1)만의 형태로 해도 좋다.

기포시트(1)는 고무 또는 합성수지를 주성분으로 하고, 지르코늄 화합물 및/또는 게르마늄 화합물과 카본을 함유하며, 독립기포구조를 갖는 발포체이다. 독립기포의 형성은 발포제에 의해 발포시켜서 형성된다. 기포시트(1)의 단면형상은 다수의 미세한 기포가 형성되어 있다. 또, 기포시트(1)의 두께는 약 1㎝로 되지만, 이것에 한정되는 것은 아니다.

표면과 이면의 커버시트(2)는 기포시트(1)의 표리면에 접착에 의해 고정되지만, 기포시트(1)에 적층 가능하면 다른 방법에 의해 고정해도 된다. 또, 커버시트(2)의 재료는 클로로프렌 고무(CR)를 주성분으로 한 고무시트로서, 기포를 함유하고 있지 않지만, 기포를 함유시킨 형태로 해도 된다. 또한, 커버시트(2)의 재료는 클로로프렌 고무에 한정되는 것이 아니라, 그 외의 합성고무, 천연고무 또는 클로로술폰화 폴리에틸렌 등의 합성수지로 해도 된다.

<실시예>

이하에 실시예를 이용해서 본 발명의 구체적 실시형태를 보다 상세하게 설명하지만, 본 발명은 이하의 실시예에 한정되는 것은 아니고, 본 발명의 범위 내에서 실시예에 많은 수정 및 변경을 가할 수 있는 것은 물론이다.

우선, 기포시트(1)를 작성한다. 고무 또는 합성수지를 베이스로 하고, 표 1의 배합에 따라 배합하여, 롤로 혼련한다. 또, 재료를 혼합하는 방법은 특별히 제한되지 않고, 일반적인 고무 또는 합성수지의 배합물에 대해서 사용되는 혼합방법을 채용할 수 있다. 다음에, 얻어진 혼련물을 압출기에 의해 시트형상으로 성형한다. 이 시트를 가열공기로 가황 및 발포한다(가황공정). 이 가황공정은 1차와 2차의 2단계로 나누어서 행한다. 2단계로 가황을 행함으로써, 기포가 기포시트 전체에 균일하게 형성된다. 이상의 공정에 의해 기포시트(1)가 제조된다.

그리고, 기포시트(1)의 표리면에 커버시트(2)를 고무계 또는 합성수지계 접착제로 점착한다. 다음에, 표면으로 되는 측에 고전압을 인가한다. 전류가 1만 암페어~80만 암페어, 전압이 200~3300V, 0.1~0.3초의 시간의 조건으로 전압을 인가한다. 또, 전류는 높을수록 바람직하다. 활성 발포체는, 적외선 등의 전자파를 발생시키고 있다. 메커니즘은 해명되어 있지 않지만, 활성 발포체의 한면에 고전압을 인가함으로써, 전자파의 방향이 전압을 인가한 면측으로 지향성을 나타내도록 방향이 정해진다고 추측된다. 따라서, 그 면을 인체에 접촉시키면, 그 접촉시킨 면에 집중적으로 전자파를 접촉시킬 수 있어, 보다 병의 치유효과 등을 높일 수 있다. 이상의 공정에 의해 본 활성 발포체가 완성된다.

상기 실시예에 있어서의 셀로겐 OTI는 P,P'-옥시비스벤젠술포닐히드라진(유니로이열사제, 미국)이며, 발포제이다. 지르콘은 통상 규산염으로서 존재하고 있는 것을 말한다(ZrSiO₄). 또, 가황촉진제 DM은 디벤조티아졸디술파이트를 가리킨다. 경도는, 고무 경도계 C타입을 사용했다.

<시험1>

다음에, 활성 발포체를 사용해서 그것이 인간의 체압 및 혈류에 주는 영향에 대해서 측정시험을 행했다. 우선, 체압 및 혈류 측정의 시험방법에 대해서 설명한다.

[시험대상]

50대 여성 1명을 피험자로 한다.

[시험방법]

혈류 및 체압측정기기(AMI3037-2, 가부시키가이샤 에이엠아이테크노제)를 사용해서 시험을 행했다. 체압 및 혈류센서를 대퇴상부에 붙이고, 실온 23℃, 습도 55%RH의 환경에서 이하의 2가지의 조건하에서 측정을 행했다. 조건1에서는, 의자 위에 활성 발포체를 깔고, 그 위에 30분간 정지상태로 앉은 후에, 혈류량(blood flow), 혈액량(blood volume), 혈류속도(blood velocity) 및 체압(body surface contact pressure)을 10분간 측정했다. 조건2에서는, 대조예로서 활성 발포체를 깔지 않은 의자 위에 30분간 정지상태로 앉은 후, 혈류량 등을 10분간 측정했다. 그 결과를 표 2, 도 2~도 5에 나타낸다. 표 2는, 10분간의 혈류량 등의 측정 값의 평균값을 나타낸다. 도 2~도 5는, 10분간의 혈류량 등의 측정값의 추이를 나타낸다. 또, 혈류량은 인체조직 100g중당 1분동안에 흐르는 혈류량이며, 모세혈관 속의 적혈구에 반사된 광량으로부터 계측된다. 혈액량은 인체조직 100g의 단면적당의 혈액량이며, 혈액량과 혈류속도의 곱이 대략 혈류량으로 되는 관계에 있다.

[시험결과]

상기 표 2, 도 2~도 5로부터, 본 활성 발포체를 사용하면 혈행이 좋아지고, 체압이 내려가는 것을 알 수 있다.

<시험2>

[시험대상]

인간유래의 배양 전립선암 세포(Du145, PC3, LNCap)를 사용했다. LNCap는 호르몬 의존성 전립선암 세포이며, Du145와 PC3는 호르몬 비의존성 전립선암 세포이다.

[시험방법]

배양액 15ml가 넣어진 지름 10㎝의 배양접시에, 각 전립선암 세포(Du145, LNCap, PC3)를 10⁵cell/plate씩 산포하고, 37℃, 5% CO₂의 조건하에서 7~10일간 배양한 후에(준비기간), 시험을 시작했다. 또, 1개의 배양접시에 1종류의 전립선암 세포를 산포하는 것으로 한다. 또한, 이 준비기간에 있어서는, 활성 발포체를 사용하지 않는다.

그리고, 시험개시 후, 실험군은 각 배양접시를 상하에서 활성 발포체 사이에 끼운 상태에서 배양했다. 대조군은 활성 발포체가 없는 상태에서 배양했다. 배양액은 평균하여 3일에 한번 교환하고, 각 세포가 포화상태로 되기 전에 새로운 배양접시에 계대(繼代)했다. 계대하는 날은 각 세포에 따라 달랐지만, 각 세포의 대조군과 실험군에서는 같은 날에 계대했다.

시험개시 직전을 0일로 하고, 개시 후 1, 2, 3주째에 세포를 회수하여, 배양 3주째의 세포를 고정한 후에 전자현미경으로 관찰했다(a).

또한, 배양 3주째의 세포로부터 mRNA(messenger ribonucleic acid 메신저-RNA)를 추출했다. 추출된 mRNA는, human 1.2K cDNA microarray(Clontech)에 하이브리다이즈하고, 그 결과를 GeneSpider(유전자 해석 소프트:Silicon Genetics,Redwood,CA,U.S.A)를 이용해서 해석했다. 아포토시스 책임 유전자의 표현에 대해서는 ANOVA 클러스터 해석을 이용했다(b).

[시험결과]

각 전립선암 세포의 증식은, 다음과 같은 특징이 실험군에 확인되었다.

(a) 실험군과 대조군의 3주째의 전자현미경상에서는, 형태적인 차이가 확인되었다. 즉, 활성 발포체에 3주간 접촉되어 있었던 각 암세포에서는, 대조군(도 6(b))에 비교해서 세포질의 공포(空胞)가 많고, 미토콘드리아의 내부구조의 불선명화, 핵막의 불명료화가 발생되어 있었다(도 6(a)). 즉, 활성 발포체를 사용한 세포에서는, 아포토시스(apoptosis)가 일어난 것을 알 수 있다.

또한, 아포토시스란, 유전자에 프로그램된 세포사, 즉, 세포의 자살을 말한다. 이 아포토시스의 시스템이 고장나서, 계속 증식되는 것이 암세포이다.

(b) 또한, cDNA 마이크로어레이의 3주째의 결과에 대해서, 대표예로서 DU145의 결과를 도 7에 나타낸다. mRNA 발현이 대조군과 비교해서 항진, 즉 유전자가 활성화되어 있는 것을 흑색으로 나타내고, mRNA의 발현이 대조군과 비교해서 저하, 즉 유전자의 활동이 저하되어 있는 것을 격자모양을 사용해서 나타내고, mRNA 발현이 대조군과 비교해서 변화가 없었던 것을 회색으로 나타낸다.

Du145에서는, 실험군은 대조군과 비교해서 FasL(2.3배), Fas(1.4배), TRADD(1.4배), CASP1, 4, 10(1.7, 1.2, 1.7배), DFF40(1.7배)에 up-regulation(증가)이 확인되었다. PC3에서는, 실험군은 대조군과 비교해서 CD40(1.4배), TNF(1.4배)에 up-regulation이 확인되었다. LNCap에서는, 실험군은 대조군과 비교해서 Fas(1.6배), CASP8(1.6배), CASP3(1.3배)에 up-regulation이 확인되었다. 또, FasL, Fas, TRADD, CASP1, 4, 10, DFF40, CD40, TNF는 아포토시스의 회로를 개시하는 유전자군이다. 이상으로부터, 활성 발포체를 사용한 실험군에서는, 대조군과 비교해서 아포토시스가 촉진되어 있는 것을 알 수 있다.

[고찰]

상기의 시험으로부터 다음의 것을 말할 수 있다. 활성 발포체는, 암세포의 아포토시스 회로를 개시하여, 암세포의 활동을 약체화하는 작용을 촉진한다.

<시험3>

인간 전립선암 세포에 대해서, 활성 발포체와 HDACI인 SB를 사용하여 암세포 증식억제 시험을 행했다. 이 시험은, 혁명적인 전립선암의 치료방법, 예방방법을 구체적으로 나타내는 것임과 아울러, 원리적으로 모든 암에 유효할 가능성을 시사하는 것이다. 여기서, HDACI에 대해서 상세하게 설명한다. HAT(히스톤 아세틸기 전이효소:hlstone acetyl transferase)가 히스톤의 리신(lysine)을 아세틸화하면, 핵내에서 크로마틴이 활성화된다. 크로마틴이 활성화되면, 핵내 전사인자가 DNA의 프로모터(promoter) 영역에 액티베이터(activator)와 함께 결합되어, 구조유전자가 발생한다. 또, HDAC(histone deacetylase)는 리신의 탈아세틸화를 일으켜, 크로마틴을 다시 불활성화로 한다.

SB를 대표로 하는 HDACI는 이 HDAC에 의한 탈아세틸화를 막아서, 크로마틴을 불활성화하지 않는다. 이 때문에, HDACI는 기능이 약체화되어 있는 암 억제 유전자 등이 활성화되어, 암세포의 증식을 억제하도록 작용하는 것이다.

[시험대상]

[시험방법]

각각 10³cell/100μl의 농도의 각 전립선암 세포(Du145, LNCap, PC3)를 96구멍 마이크로 플레이트(96well Plate)에서 배양했다. 활성 발포체를 사용하는 실험군에서는, 플레이트에 0, 1, 2, 3mM의 SB를 6μl 첨가하고, 플레이트를 활성 발포체에 의해 상하로부터 끼웠다. 이 SB가 첨가된 배양액은 2일마다 배양액을 교환했다. 대조군에서는, 활성 발포체를 사용하지 않고 배양하고, 0, 1, 2, 3mM의 SB를 6μl 첨가했다. 0mM의 SB에는, PBS(Phosphate buffer saline 인산 완충 식염수)가 동량(6μl) 첨가되어 있다. 상기 시험은 각 농도에 대해서 4계열로 행했다.

배양 2, 5, 8일째에 세포증식 키트(Cell Proliferation Kit Ⅱ(XTT:Roche, Manheim, Germany))에 의해, 생세포를 광학밀도(O.D.:opitical density) 450㎚로 측정했다(또한, 괄호의 650을 뺐다).

또한, Cell proliferation Kit Ⅱ(XTT)는 XTT가 탈수소효소의 기질이며, XTT가 탈수소효소에 의해 포르마잔으로 환원되는 성질을 이용한 것으로서, XTT 표준 혼합액과 미토콘드리아 탈수소효소 활성에 의해 만들어진 포르마잔 색소를 측정하여, 세포의 생존율을 정량화하는 것이다. 따라서, 포르마잔량은 생세포수에 대응한다.

[시험결과]

활성 발포체를 사용하면, 각 인간 전립선암 세포에서는 호르몬 의존성의 유무에 관계없이, 활성 발포체를 사용한 군에서는 SB가 저농도(1mM)라도, 활성 발포체를 사용하지 않은 고농도(3mM)의 SB이상으로, 유의하게 전립선암 세포의 증식을 억제했다(도 8~도 10). 즉, 활성 발포체는 SB와 공동으로 작용하여, 인간 전립선암 세포의 증식을 명확하게 억제했다.

[고찰]

상기의 시험으로부터 다음의 것을 말할 수 있다. 도 8~도 10으로부터, 활성 발포체와 HDACI를 동시에 사용함으로써, 활성 발포체는 HDACI의 인간 전립선암 세포의 증식억제 효과를 촉진시킬 수 있다. 원리적으로는, 이 방법은 모든 암에 유효한 치료법이라고 생각된다. 또, SB는 원래 인간 체내의 장관 내에 존재하는 것으로서, 알레르기 반응 등을 일으키지 않는 물질이다. 따라서, 본 시험에서 유효성이 증명된 1mM의 농도에서는 생체에 대한 독성이 매우 적고, 알레르기 등의 부작용이 없다.

또한, 잉여의 HDAC는 크로마틴 리모델링 팩터(chromatin remodeling factor) 등과 공동으로 작용하여, 시토신(cytosine)을 메틸화하고, 암세포의 증식을 억제하는 방향으로 작용한다.

본 활성 발포체는, 약제투여시에 인체에 직접 또는 간접적으로 접촉시켜서 사용하면, 그 약제의 효과를 높일 수 있다. 또, 대량으로 사용하면 부작용이 있는 약제라도, 본 활성 발포체를 병용하면 소량으로도 가능하므로, 부작용을 억제할 수 있다.

Claims

지르코늄 화합물 및 게르마늄 화합물 중 하나 이상을 함유하는 천연 혹은 합성고무 또는 합성수지제의 활성 발포체로서, 독립기포구조를 갖고, 약제투여시에 인체에 직접 또는 간접적으로 접촉시켜서 사용하는 것을 특징으로 하는 활성 발포체.
지르코늄 화합물 및 게르마늄 화합물 중 하나 이상과 카본을 함유하는 천연 혹은 합성고무 또는 합성수지제의 활성 발포체로서, 독립기포구조를 갖고, 약제투여시에 인체에 직접 또는 간접적으로 접촉시켜서 사용하는 것을 특징으로 하는 활성 발포체.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 약제는 항암제인 것을 특징으로 하는 활성 발포체.
제3항에 있어서, 상기 약제는 인간유래의 항암효과를 갖는 물질인 것을 특징으로 하는 활성 발포체.
제4항에 있어서, 상기 인간유래의 항암효과를 갖는 물질은 히스톤 탈아세틸화 효소저해제(HDACI)인 것을 특징으로 하는 활성 발포체.
제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 기포는 20~30개/㎟ 형성되어 있는 것을 특징으로 하는 활성 발포체.