BR122019020833B1

BR122019020833B1 - Agente antiviral [1s-(1alfa, 3alfa, 4beta)]-2-amino-1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetil)-2-metilenociclopentil]-6h-purin-6-ona

Info

Publication number: BR122019020833B1
Application number: BR122019020833-6A
Authority: BR
Inventors: Amit Banerjee; David J. Kucera; Yadagiri Pendri; Chung-Pin Chen; Sunil S. Patel; Jeffrey M. Evans; Jing Liang; David R. Kronenthal; Gerald L. Powers; Siva Josyula Prasad; Jeffrey T. Bien; Zhongping Shi; Ramesh N. Patel; Yeung Y. Chan; Sushil K. Rijhwani; Ambarish K. Singh; Shaopeng Wang; Milan Stojanovic; Richard Polniaszek; Charles Lewis
Original assignee: Bristol-Myers Squibb Holdings Ireland Unlimited Company
Priority date: 2002-12-11
Filing date: 2003-12-10
Publication date: 2020-09-01
Also published as: EP1644384B1; CN102675355B; BRPI0317255B8; TWI327568B; KR101096830B1; KR100944063B1; CA2735485A1; PT1644384E; IL168691A; JP2006509800A; IN2012DN00606A; US7034152B2; EP1644384A4; IN2012DN00605A; CN101899063B; PL377263A1; EP2433941A1; AU2003300884B2; CN102675355A; US20060106216A1

Abstract

a presente invenção refere-se a processos para preparar o agente antiviral entecavir. também é revelado um processo de adsorção de resina para o isolamento e a purificação de entecavir. também são revelados vários intermediários úteis na preparação de entecavir.

Description

Pedidos Relacionados

[1] Este pedido reivindica o benefício da prioridade do pedido Provisório dos Estados Unidos No. 60/432.549 arquivado em 11 de dezembro de 2002, cuja revelação é incorporada a este relatório por meio de referência em sua totalidade.

Antecedentes da Invenção

[2] O Entecavir, [1S-(1α, 3α, 4β)]-2-amino-1,9-diidro-9-[4- hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H-purin-6-ona, está sendo avaliado atualmente como uma droga para aplicação no tratamento de infecções virais por hepatite B.

[3] O Entecavir e sua aplicação como um agente antiviral são descritos na Patente dos Estados Unidos No. 5.206.244 para Zahler et al., atribuído ao presente procurador. Processos aperfeiçoados para a preparação de entecavir são descritos por Bisacchi et al,. em WO 98/09964, também para o presente procurador.

[4] Colonno, et al. em WO 01/64221 descrevem composições contendo uma baixa dose de entecavir administrada diariamente para tratar infecção e/ou co-infecções pelo vírus da hepatite B.

Sumário da Invenção

[5] Esta invenção se refere a vários métodos para preparar entecavir conforme mencionado nas reivindicações anexadas à mesma. Entecavir (o composto de fórmula 21) tem a fórmula estrutural apresentada abaixo:

[6] Esta invenção também se refere a vários intermediários úteis na preparação de entecavir e aos métodos para preparar os intermediários referidos.

[7] Esta invenção também se refere a um processo de adsor- ção de resina para isolamento e purificação de entecavir e intermediários do mesmo.

Descrição Detalhada Da Invenção Abreviações

[8] Para facilidade de referência, as abreviações seguintes são usadas neste pedido e têm os significados dados abaixo:

[9] Ac = acila;

[10] AP= percentagem de área de HPLC;

[11] Bn = benzila;

[12] BHT = 2,6-di-terc-butila-4-metilfenol;

[13] CHP = hidroperóxido de cumeno, ou α,α-dimetilbenzilhi- droperóxido;

[14] DCM = diclorometano;

[15] de = excesso diastereométrico;

[16] DBU = 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno;

[17] DEAD = dietilazodicarboxilato;

[18] DEMA = acetato de dietoximetila;

[19] DIPT = tartarato de (-)-diisopropila;

[20] DMAP = 4-/V,/V-dimetilaminopiridina;

[21] DMF = /V,/V-dimetilformamida;

[22] DiPMA = acetato de di-isopropiloximetila; [(jpr_ O)2CHOAC];

[23] DMSO = dimetila sulfóxido;

[24] ee = excesso enantiomérico;

[25] Et = etila;

[26] EtOAc = acetato de etila;

[27] Et3N = trietilamina;

[28] FMSA = ácido sulfônico de fluorometano;

[29] HCl = ácido clorídrico

[30] IPA = isopropanol;

[31] K2CO3 = carbonato de potássio;

[32] KF = fluoreto de potássio;

[33] KHCO3 = bicarbonato de potássio;

[34] EtOAc = acetato de etila; tássio bis(trimetilsilila)amida;

[35] KOH = hidróxido de potássio;

[36] KOtBu = terc-butóxido de potássio;

[37] LAH = hidreto de alumínio de lítio;

[38] LiOH = hidróxido de lítio;

[39] m-CPBA = ácido meta-cloroperbenzóico;

[40] MeOH = metanol

[41] MOP = 2-metóxi-2-propóxi-acetal;

[42] MSA = ácido metanossulfônico;

[43] MTBE = éter metila terc-butílico;

[44] NaBH4 = boroidreto de sódio;

[45] Na2CO3 = carbonato de sódio;

[46] NaHCO3 = bicarbonato de sódio;

[47] NaH = hidreto de sódio;

[48] NaOH = hidróxido de sódio;

[49] NaOtBu = terc-butóxido de sódio;

[50] NMP = N-metila-2-pirrolidinona;

[51] TMS = trimetilsilila;

[52] PPTS = 4-toluenossulfonato de piridínio ou p- toluenossulfonato de piridinio;

[53] PTSA = ácido pára-tolueno sulfônico;

[54] Red-AI® or

[55] RED-AL® = hidreto de sódio bis(2-metoxietóxi)alumínio;

[56] TBAH = hidróxido de n-tetrabutila amónio;

[57] TBHP = terc-butilhidroperóxido;

[58] TEOF = trietilortoformiato;

[59] TFA = ácido trifluoroacético;

[60] THF = tetraidrofurano;

[61] Ti(O-iPr)4 = isopropóxido de titânio (IV);

[62] TiPOF = trisopropilortoformiato;

[63] TMOF = trimetilortoformiato.

DEFINIÇÕES

[64] Os termos seguintes terão, para os fins deste requerimento, inclusive as reivindicações anexadas ao mesmo, os significados respectivos determinados abaixo. Deve ser entendido que quando é feita referência neste relatório a um termo geral, tal como ácido, base, agente oxidante, e etc., uma pessoa versada na técnica pode fazer as seleções apropriadas para os reagentes referidos entre as dadas nas definições abaixo, bem como entre reagentes adicionais mencionados na especificação que se segue, ou entre os encontrados nas referências na literatura no campo.

[65] "Anidrido" se refere de modo geral a compostos que reagirão com água ou solvente para formar um ácido, por exemplo, inclusive anidridos de ácido carboxilico tendo a fórmula R-C(=O)-O-C(=O)R', em que R e R' são selecionados entre grupos alquila ou arila, conforme definido abaixo, mais preferencialmente, em que R e R' são selecionados entre metila e etila.

[66] "Ácido" se refere a qualquer composto que contém hidrogênio e dissocia em água ou solvente para produzir íons hidrogênio positivo, bem como ácidos de Lewis, inclusive porém não limitado a ácidos tais como ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido acético, ácido trihaloacético (por exemplo, TFA), brometo de hidrogênio, ácido maléico, ácidos sulfônicos tais como ácidos toluenossulfôni- cos e ácidos canforsulfônicos, ácidos propiônicos tais como ácido (R)- cloropropiônico, ácidos ftalâmicos ácidos tais como ácido N-[(R)-1-(1- naftila) etila] ftalâmico, ácidos tartáricos tais como ácido L-tartárico e ácido dibenzila-L-tartárico, ácidos lácticos, ácidos canfóricos, ácidos aspárticos, ácidos citronélicos, BCh, BBrs, e assim por diante. Deste modo, o termo inclui ácidos fracos tais como ácido etanóico e sulfeto de hidrogênio; ácidos orgânicos fortes tais como ácido metanossulfô- nico, ácido trifluoroacético, e etc.; e assim por diante.

[67] "Reagente de ácido metila carbônico ativado" significa um reagente eficaz para preparar um éster de carbonato de metila a partir de um álcool. Exemplos não-limitantes incluem cloroformiato de metila, pirocarbonato de dimetila, e semelhantes.

[68] "Alquila" conforme usado neste relatório inclui grupos alquila lineares ou ramificados tendo a partir de um até doze átomos de carbono, mais preferencialmente a partir de um até oito átomos de carbono, e ainda mais preferencialmente, a partir de um até quatro átomos de carbono, a menos que especificamente descrito de outro modo. O termo alquila inclui grupos semelhantes opcionalmente tendo até quatro (mais preferencialmente 0 a 2), substituintes selecionados entre o grupo de substituintes não-interferentes mencionados abaixo. O termo alquila inferior se refere a grupos alquila tendo a partir de um até quatro átomos de carbono. Quando um subscrito é usado com referência a um grupo alquila ou outro grupo, o subscrito se refere ao número de átomos de carbono que o grupo pode conter. Por exemplo, o termo "CM alquila" se refere a grupos alquila de 1 a 4 átomos de carbono. Porções alquila incorporadas em outros radicais também são lineares ou ramificadas, a menos que especificamente descrito de outro modo. Quando o termo alquila é usado como um prefixo em conjunto com outro grupo, como em alquilarila, isto significa que a alquila conforme definida acima está presente como uma porção divalente (isto é, alquileno), criando uma ligação ao outro, grupo nomeado. Deste modo, alquilarila inclui benzila e semelhantes.

[69] "Alcoxi" conforme usado neste relatório inclui grupos alquila conforme definidos acima, ligados através de um átomo de oxigênio, isto é, -O-alquila.

[70] "Sal de metal alcalino" se refere a sais formados com metais de álcali, preferencialmente sais de sódio, litio ou potássio.

[71] "Alila" se refere ao grupo -CH2-CH=CH2, bem como grupos semelhantes opcionalmente tendo um ou mais (preferencialmente 0 a 1) substituintes não-interferentes conforme definido abaixo.

[72] "Antioxidante" se refere a um composto ou complexo químico que é eficaz para retardar ou inibir o índice de uma reação de oxidação. Antioxidantes típicos podem incluir, sem limitação, β- caroteno, ZrÜ2, ácido ascórbico, aminas aromáticas, fenóis, quinonas inclusive BHT, ácido cítrico, ácido ascórbico, vitamina E, ácido benzói- co, ácido fosfórico, e assim por diante.

[73] "Arila" inclui grupos aromáticos monocíclicos ou bicíclicos tendo 6 a 12 átomos de carbono na porção do anel, isto é, fenila e naf- tila, bem como grupos heteroarila, por exemplo, sistemas de anéis aromáticos de 4 a 7 membros monocíclicos, de 7 a 11 membros bicíclicos, ou de 10 a 15 membros tricíclicos, os quais têm no mínimo um heteroátomo e no mínimo um anel contendo átomo de carbono. Grupos heteroarila monocíclicos típicos incluem pirrolila, pirazolila, pirazo- linila, imidazolila, oxazolila, isoxazolila, tiazolila, tiadiazolila, isotiazolila, furanila, tienila, oxadiazolila, piridyl, pirazinila, pirimidinila, piridazinila, triazinila e semelhantes. Grupos heteroarila bicíclicos típicos incluem indolila, benzotiazolila, benzodioxolila, benzoxaxolila, benzotienila, qui- nolinila, tetraidroisoquinolinila, isoquinolinila, e semelhantes. O termo "arila" inclui grupos arila opcionalmente tendo até quatro (preferenci-almente 0 a 2) substituintes não-interferentes.

[74] "Base" quando usada neste relatório inclui hidróxidos ou alcóxidos, hidretos, ou compostos tais como amónia, que aceitam prótons em água ou solvente. Deste modo, bases típicas incluem, porém não estão limitadas a, hidróxidos de metais de álcali e alcóxidos (isto é, MOR, em que M é um metal alcalino tal como potássio, lítio, ou sódio, e R é hidrogênio ou alquila, conforme definido acima, mais preferencialmente onde R é C1-5 alquila de cadeia reta ou ramificada, deste modo incluindo, sem limitação, hidróxido de potássio, ferc-butóxido de potássio, terc-pentóxido de potássio, hidróxido de sódio, terc-butóxido de sódio, hidróxido de lítio, e etc.); outros hidróxidos tais como hidróxido de magnésio (Mg(OH)2) ou hidróxido de cálcio (Ca(OH)2), ou hidróxido de bário (Ba(OH)2); hidretos de metais de álcali (isto é, MH, em que M é conforme definido acima, deste modo incluindo, sem limitação, hidretos de sódio, potássio, e lítio); dissilazidas alquiladas, tais como, por exemplo, hexametildissilazida de potássio e hexametildissi- lazida de lítio; carbonatos tais como carbonato de potássio (K2CO3), carbonato de sódio (toCOa), bicarbonato de potássio (KHCO3), e bicarbonato de sódio (NaHCOa); hidróxidos de alquila amónio tais como hidróxido de n-tetrabutila amónio (TBAH); e assim por diante.

[75] "Benzila" inclui 0 grupo -CH2-fenila, bem como grupos se-melhantes opcionalmente contendo substituintes não-interferentes nas porções metila ou fenila da benzila, a menos que indicado de outro modo.

[76] "Haleto de benzila" se refere a um grupo de benzila tendo um substituinte haleto na porção alquila do grupo de benzila, isto é, Ph-CH2-X, em que X é haleto, e Ph denota um anel fenila conforme definido abaixo.

[77] "Benzilóxi" se refere ao grupo-O-benzila, em que a porção benzila é conforme descrito imediatamente acima.

[78] "Resina à base de estireno brominado" se refere a uma ou mais resinas à base de estireno tendo um ou mais substituintes bromo, e inclui sem limitação, SP207 Sepabeads, SP700 Sepabeads, Diaion HP20, Diaion SP70, Diaion SP825, Diaion SP850, Diaion HP2MG me- tacrilato, AMBERLITE XAD4, AMBERLITE XAD7HP, AMBERLITE XAD16, e AMBERLITE XAD1600.

[79] "Amina quiral" ou "CA" conforme usado neste relatório se refere a uma amina ou mistura de aminas que é oticamente ativa inclusive formas dextrorrotatórias ou levorrotatórias de aminas. Preferencialmente, a amina quiral compreende uma forma pura ou substancialmente pura de um isômero ótico, porém também são contempladas misturas oticamente ativas (isto é, misturas que não são equimolares). Se for feita referência neste relatório a uma "amina homoquiral," pretende englobar o conceito mais amplo de "amina quiral" também. Por exemplo, estas aminas incluem, sem limitação, (1R,2R)-(+)-1,2- difeniletilenodiamina, (R)-(-)-1 -cicloexiletilamina, D-treo-2-amino-1-(4- nitrofenila)-1,3-propanodiol, (1 S,2S)-(+)-1,2-diaminociclohexano, dehi- droabietilamina, (1R,2R)-1,2-diaminometilciclohexano, cinchonidina e cinchonina

[80] "Epoxidação diastereosseletiva" se refere a uma reação em que se forma preferencialmente um epóxido diastereomérico. O termo "epoxidação diastereosseletiva" inclui portanto epoxidações de Sharpless em que a epoxidação de um álcool alílico preferencialmente dá um enantiômero. No entanto, o termo "epoxidação diastereosseletiva" conforme usado neste relatório também cobre mais amplamente a epoxidação de um composto diastereomérico, ou a epoxidação de um composto não racêmico de outro modo. O termo "epoxidação diaste- reosseletiva" pretende incluir oxidação enantiosseletiva de olefinas conforme descrito em Bonini e Righi, "A Criticai Outlook And Comparison of Enantioselective Oxidation Methodologies of Olefins", Tetrahedron, Vol. 58 (2002), às páginas 4981-5021, incorporado a este relatório por meio de referência.

[81] "Haleto" ou "halo" se refere a F, Cl, Br, ou I, preferencialmente Cl ou I.

[82] "Reagente hidreto" se refere a reagentes que são capazes de liberar íons H-. Reagentes hidreto típicos incluem, porém não estão limitados a, hidreto de alumínio de litio (LÍAIH4), boroidreto de sódio (NaBHzi), Red-AI® (sódio bis[2-metoxietoxialumínio] hidreto), boroidreto de zinco, hidreto de diisobutilalumínio, boroidreto de sódio- cloreto de cério, trietilboroidreto de litio, 9-BBN hidreto de litio, 9-BBN piridina, complexo de borano-sulfeto, 5,5-difenila-2-metila-3,4-propan-1,3,2- oxazaborolidina (Corey Reagent), litio tri-terc-butoxialumínio hidreto, cianoboroidreto de sódio, litio tri-sec-butila boroidreto (L-Selectride®), cloreto de diisobutilalumínio, complexo de borano-tetraidrofurano, e semelhantes.

[83] "Hidroperóxido" significa um composto ou complexo com-preendendo a porção hidroperóxido HO2-, tal como compostos tendo a fórmula (RPOOH), em que Rp pode ser hidrogênio (por exemplo, peróxido de hidrogênio H2O2), ou pode ser uma porção alquila, alquila substituída, arila, alquilarila, arila substituída, ou alquilarila substituída ou outra porção (inclusive sem limitação compostos em que a porção metila do grupo benzila é opcionalmente substituída). Hidroperóxidos portanto incluem α,α-dimetilbenzila hidroperóxido, terc-butila hidroperóxido, e semelhantes.

[84] "Grupos de proteção hidróxi" significa os grupos que uma pessoa versada na técnica reconhecerá como sendo adequado para proteger 0 substituinte -OH em uma alquila ou sistema de anel con- forme descrito neste relatório e o qual pode ser removido sob condições de desproteção de conhecimento daqueles versados na técnica conforme determinado, por exemplo, na última edição de Greene e Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, incorporada a este relatório. Como uma ilustração, exemplos não-limitantes de grupos de proteção hidróxi incluem grupos de proteção éter (por exemplo, éteres benzílicos, éteres silílicos tais como éter ferc-butildimetilsilílico), ésteres (por exemplo, benzoato, acetato), e acetais (por exemplo, MOP).

[85] "Diéster homoquiral de ácido tartárico" conforme usado neste relatório inclui diastereômeros únicos de alquila tartaratos de alquila inclusive tartarato de dietila e tartarato de diisopropila.

[86] "Catalisador de metal" se refere a compostos e complexos inclusive elementos metálicos que são eficazes como catalisadores e engloba, sem limitação, "catalisadores de metal de transição." Catalisadores de metal incluem, sem limitação, isopropóxido de titânio (IV), sais de paládio tais como catalisador de paládio (0), por exemplo, te- tracis(trifenilfosfina)paládio, triflato de cobre(l), acetato de ródio (II), Rhe(CO)i6, e assim por diante.

[87] "Substituinte não-interferente" se refere a um substituinte que é ligado a um composto ou complexo identificado neste relatório que não torna o composto ou complexo inoperável, com relação à funcionalidade ou objetivo a ser atingido com o composto ou complexo em particular, e o qual é compatível com as seqüências de reações detalhadas neste relatório. Os substituintes referidos podem ser selecionados por uma pessoa versada na técnica dependendo da etapa de reação em particular e função a ser obtida. Substituintes não- interferentes típicos podem incluir sem limitação grupos tais como alquila, halogênio, ciano, nitro, trifluorometila, trifluorometóxi, -OR, -SR, - C(=O)R, -CO2R, arila, alquilarila, C3-7 cicloalquila, -NRR'2,-NRC(=O)R', -SO(q)R", -NRSO(q)R", -SO(q)R", -C(=O)NRR', e semelhantes; e gru- pos alquila substituídas com um a quatro (preferencialmente 1 a 2) en-tre halogênio, ciano, nitro, trifluorometila, trifluorometóxi, -OR, -SR, - C(=O)R, -CO2R, ariia, alquilarila, Cs-ycicloalquila, -NRR'2, -NR-C(=O)R', —SO(q)R", -NRSO(q)R", —SO(q)R", -C(=O)NRR', e semelhantes, em que R e R' são hidrogênio, alquila, benzila, ou arila, conforme definido acima, R" é alquila, benzila, ou arila, conforme definido acima, e q é 1, 2 ou 3.

[88] "Derivados de ortoformiato" significa reagentes eficazes para a preparação de dioxolanos a partir de porções diol vicinais, ou para a preparação de anéis imidazol a partir de diaminas vicinais sobre, por exemplo derivados de 5,6-diaminopirimidina. Exemplos não-limitantes incluem trietilortoformiato, trimetilortoformiato, triisopropilortoformiato, acetato de dietoximetila, e acetato de diisopropiloximetila.

[89] "Agente oxidante," ou "fonte oxidante" se refere a qualquer composto ou complexo que é conhecido na técnica por seus efeitos na conversão de um grupo funcional em uma molécula de um estado de oxidação inferior para um estado de oxidação superior. Por exemplo, agentes oxidantes podem incluir, sem limitação, n?-CPBA, peróxido de hidrogênio, AcOOH em AcOH, peroximonossulfato de potássio, periodate de sódio, percarbonato de sódio, permanganate de potássio, óxido de rutênio, e semelhantes. Agentes oxidantes podem ser usados na presença de um ou mais aditivos, tais como KF, KHCO3, NEts, AcONa, e semelhantes. Como uma pessoa versada na técnica reconhecerá, podem ser selecionados aditivos dependendo dos agentes oxidantes em particular usados e das condições de reação.

[90] "Per-ácido" conforme usado neste relatório inclui sem limitação, monoperoxiftalato de magnésio (MPPA), ácidos perbenzóicos, e ácido peracético.

[91] "Fenila" inclui anéis fenila opcionalmente substituídos com até quatro (preferencialmente 0 a 2) substituintes não-interferentes conforme definido acima. Quando o termo fenila é usado como um sufixo depois de outro termo, como em alquilfenila, ou alcoxi fenila, isto significa que o grupo fenila está conectado através de uma porção di- valente do outro, grupo especificamente nomeado. Deste modo, alquilfenila inclui benzila, feniletila, e semelhantes.

[92] "Grupo protetor" inclui sem limitação grupos semelhantes conforme determinado, por exemplo, na última edição de Greene e Wuts, Protecting Groups in Organic Synthesis, incorporada a este relatório por meio de referência.

[93] "Reagente redutor" se refere a qualquer composto ou complexo que é conhecido na técnica por seus efeitos na conversão de um grupo funcional em uma molécula de um estado de oxidação para um estado de oxidação inferior. Reagentes redutores típicos incluem, sem limitação, NaBH4, LAH, boroidreto de litio, hidreto de diisobutila alumínio, sódio bis(2-metoxietoxialumínio) hidreto de sódio, e semelhantes. O termo "reagente redutor" incluirá "reagentes hidreto" conforme mencionado acima.

[94] "Base forte não-nucleofílica" significa uma base não-aquosa que não age como um nucleófila, tal como bistrimetilsililamida de sódio ou potássio, diisopropilamida de litio, bistrimetilsililamida de sódio, hidreto de potássio, litio, ou sódio.

[95] "Base de amina terciária" significa uma trialquilamina, tal como trietilamina, N,N-dimetiletilamina, diisopropiletilamina (base de Hunig) ou tetrametilenodiamina (TMEDA), ou um heterociclo contendo nitrogênio, tal como piridina.

[96] "Reagente trimetilsililante" significa um reagente eficaz para preparar um éter trimetilsilílico a partir de um álcool. Exemplos não- limitantes incluem clorotrimetilsilano, trifluorometanossulfonato de tri- metilsilila, e semelhantes.

[97] Adicionalmente, deve ser entendido nos métodos de preparação e nas reivindicações neste relatório, que a palavra "um/uma", quando usada para se referir a um reagente, tal como "uma base", "um catalisador de metal", "um hidroperóxido" e assim por diante, pretende significar "no mínimo um" e portanto, inclui, onde adequado, reagentes únicos bem como misturas de reagentes. Deste modo, por exemplo, uma etapa de reação envolvendo aplicação de "uma base", ou por exemplo, envolvendo aplicação de "uma base selecionada entre um entre hidróxido de potássio, ferc-butóxido de potássio, ferc-pentóxido de potássio, hidróxido de sódio, ferc-butóxido de sódio, hidróxido de litio," engloba a aplicação de hidróxido de potássio como uma base, ou, quando apropriado, misturas de hidróxido de potássio mais uma ou mais bases adicionais determinadas no grupo entre o qual pode ser feita uma seleção. Uma pessoa versada na técnica pode fazer seleções apropriadas dadas as condições e etapas da reação e o resultado a ser obtido.

Métodos de Preparação

[98] O composto entecavir e novos intermediários do mesmo podem ser preparados por meio dos processos típicos descritos nos Esquemas de reação seguintes. Reagentes e procedimentos típicos para estas reações aparecem nas partes que se seguem ou são descritos acima. Os materiais de partida estão disponíveis comercialmente ou podem ser prontamente preparados por uma pessoa versada na técnica. Solventes, temperaturas, pressões, materiais de partida tendo os grupos desejados, e outras condições de reação, podem ser prontamente selecionados conforme apropriado por uma pessoa versadas na técnica. PROCESSO A ESQUEMA 1

[99] O Processo A da invenção compreende a preparação do éster de fórmula 66, um intermediário ou material de partida preferenciais para preparar entecavir 21. No éster de fórmula 66, R é um Ci a C4 alquila ou benzila, preferencialmente metila; Ra é alila, fenila, Ci a C6 alquilfenila ou Ci a Ce alcoxifenila, mais preferencialmente Ra é selecionado entre fenila, Ci a C3 alquilfenila, e Ci a C3 alcoxifenila; e Rb é Ci a Ce alquila, preferencialmente metila. O éster pode ser preparado por meio de qualquer método que proporcione 0 éster em alta pureza diastereomérica e enantiomérica. Um procedimento preferencial é apresentado no Esquema 1, em que ciclopentadieneto de sódio 62 é tratado com um reagente de sililação, por exemplo, Ra(Rb)2SiY, em que Y é um grupo de saída, por exemplo, fenildimetilclorossilano em que Ra é fenila, Rb é metila, e Y é Cl. A reação pode ser realizada em um solvente tal como MTBE e/ou THF. A porção de silano resultante serve como um grupo hidróxi mascarado que pode ser revelado posteriormente no processo sintético. O produto da reação de sililação pode ser em seguida elaborado usando uma reação de cicloadição 2+2 com ceteno, por exemplo, produzido a partir de cloreto de dicloroacetila e uma base apropriada (por exemplo, EtsN, NaOH, KOH, NaHCOs, KHCO3, Na2CO3, K2CO3, TBAH, e etc.), para dar a ciclobutanona de fórmula 63. A ciclobutanona pode ser em seguida aberta com uma base adequada (por exemplo, EtsN, NaOH, KOH, NaHCOs, KHCO3, Na2Cθ3, K2CO3, TBAH, e etc.), e 0 intermediário resultante reduzido com um agente redutor adequado, por exemplo, NaBH4, para proporcionar 0 ácido carboxilico de fórmula 64.

[100] A resolução dos enantiômeros do ácido carboxilico 64 pode ser realizada por formação de sal com aminas quirais (CAs) e separação dos sais diastereoméricos resultantes. Uma mistura diastereomé- rica de sais de amónio do ácido carboxilico de fórmula 64 é preferencialmente preparada usando R,R-(-)-2-amino-1-(4-nitrofenila)-1,3- propanodiol. As pessoas versadas na técnica reconhecerão que podem ser usadas outras aminas quirais para obter a resolução dos enantiômeros do ácido carboxilico de fórmula 64. Estas aminas incluem, por exemplo, (1R,2R)-(+)-1,2-difeniletilenodiamina, (R)-(-)-1- cicloexiletilamina, D-treo-2-amino-1 -(4-n itrofen i la)-1,3-propanodiol, (1 S,2S)-(+)-1,2-diaminociclohexano, dedroabietiiamina, (1 R,2R)-1,2- diaminometilciclohexano, cinchonidina e cinchonina.

[101] A separação dos sais diastereoméricos resultantes pode ser realizada por meio de qualquer procedimento de separação de conhecimento daqueles versadas na técnica, tal como cromatografia ou cristalização. A separação dos sais diastereoméricos é preferencialmente realizada por meio de cristalização. Por exemplo, 0 sal de amónio diastereomericamente enriquecido de fórmula 65A (onde a amina quiral usada é R,R-(-)-2-amino-1-(4-nitrofenila)-1,3-propanodiol) pode ser isolado por meio de cristalização de EtOH. O sal de amónio de fórmula 65A isolado por meio deste procedimento pode ter uma pureza química de 98% e 98% de. A conversão do sal de amónio de fórmula 65A para 0 éster de fórmula 66 (R é alquila) pode ser realizada aquecendo em uma solução acidífera, por exemplo, MeOH e um ácido apropriado, tal como ácido sulfúrico ou ácido p-toluenossulfônico, ou HCI em cloreto de metileno. Alternativamente, 0 composto 65A pode ser convertido em um ácido livre 0 qual é submetido à esterificação com álcool, por exemplo, MeOH, na presença de PTSA, em condições de refluxo, para proporcionar o composto 66. PROCESSO B ESQUEMA 2

[102] O Processo B da invenção compreende preparar entecavir 21, através da ligação de um epóxido de fórmula 72, com um derivado de guanina substituído para preparar um nucleosídeo carbocíclico, o composto de fórmula 73, o qual é em seguida elaborado para o composto 21. Uma modalidade do Processo B é representada no Esquema 2. Neste processo, um material de partida preferencial para o epóxido de fórmula 72 é um éster de fórmula 66 (o qual pode ser prepara- do conforme descrito no Esquema 1). O composto de fórmula 66 pode ser epoxidado e o grupo éster pode ser reduzido para fornecer o epó- xido de ciclopentano de fórmula 72 em alta pureza diastereomérica. Por exemplo, o composto de fórmula 66 pode servir como material de partida para uma reação de epoxidação diastereosseletiva. Em uma modalidade, o epóxido de ciclopentano de fórmula 72 é formado de-pois das etapas de epoxidação e redução em no mínimo 96% de. A epoxidação diastereosseletiva é realizada com um diéster homoquiral de ácido tartárico, um hidroperóxido, e um catalisador de metal, tal como um catalisador de metal de transição. Preferencialmente, o éster homoquiral é DIPT, o hidroperóxido é TBHP ou CHP, e o catalisador de metal é isopropóxido de titânio (IV). Preferencialmente, a reação é realizada em um solvente inerte tal como DCM seco ou tolueno. Os métodos adequados para realizar as reações de epoxidação catalítica são descritos nas Patentes dos Estados Unidos Nos. 4.471.130; 4.594.439; e 4.900.847, incorporados a este relatório por meio de referência. Depois da elaboração, o produto bruto pode ser carregado na síntese sem purificação adicional.

[103] O produto bruto da reação de epoxidação é tratado com um reagente redutor que reduz seletivamente o grupo éster para um álcool, tal como, por exemplo, NaBH4, LAH, borooidreto de lítio, hidreto de diisobutilalumínio, sódio bis(2-metoxietoxialumínio) hidreto, e semelhantes. Em uma modalidade, o agente redutor usado na reação é NaBH4 em IPA. A redução proporciona o epóxido de ciclopentano tendo a fórmula 72.

[104] O epóxido de ciclopentano de fórmula 72 pode ser em seguida aquecido, por exemplo, até cerca de 80°C com um sal de metal alcalino, por exemplo, um sal de lítio, do composto de purina de fórmula 28, em que X é Cl, I, ou benzilóxi (BnO) em um solvente aprótico dipolar tal como DMF para preparar o composto de fórmula 73. Por exemplo, o sal de lítio de 2-amino-6-O-benziloxipurina é preparado por meio de tratamento com base tal como LiOH ou LiH. Esta reação de ligação para preparar o nucleosídeo carbocíclico é vantajosa pelo fato de que proporciona uma alta proporção de N-9 para N-7 (por exemplo, N-9:N-7 >20:1), possibilita procedimentos de elaboração e purificação convenientes, e proporciona rendimentos úteis do composto de fórmula 73. Por exemplo, depois de elaboração aquosa, o produto bruto da reação de ligação do composto de purina de fórmula 28 em que X é BnO, e o epóxido de ciclopentano de fórmula 72, pode ser purificado por simples recristalização de uma solução de EtOAc-hexanos para proporcionar o composto de fórmula 73 em 65% de rendimento.

[105] O composto de fórmula 73, em que X é BnO, pode ser em seguida convertido para o composto de fórmula 71 convertendo a porção diol vicinal para um alqueno. De modo análogo, o composto de fórmula 73, em que X é Cl ou I, pode ser convertido para o composto 92 convertendo a porção diol vicinal para um alqueno. Em uma modalidade, o diol vicinal do composto de fórmula 73 é convertido para um alqueno como nos compostos 71 e 92, por meio de um procedimento de duas etapas. Na primeira etapa, o composto de fórmula 73 é tratado com um derivado de ortoformiato, tal como DEMA, DiPMA, TiPOF, TEOF, ou TMOF, na presença de um ácido tal como PPTS ou TFA. A reação é preferencialmente realizada em um solvente inerte tal como DCM, tolueno, ou éter ferc-butila metílico, em temperatura ambiente por uma quantidade de tempo suficiente para formar um produto compreendendo uma mistura diastereomérica de dioxolanos. Na segunda etapa, a mistura diastereomérica de dioxolanos é aquecida com ani- drido acético, preferencialmente na presença de ácido acético e um antioxidante, por exemplo, BHT, para formar o alqueno. Nas modalidades em que X é BnO, o produto bruto do tratamento com anidrido acético pode ser em seguida aquecido com ácido tal como ácido mine- ral aquoso ou ácido orgânico aquoso, por exemplo, HCI ou MSA, para hidrolisar o grupo 6-benzilóxi (bem como um grupo 2-N-acetila formado no tratamento com anidrido acético) para proporcionar o composto de metileno de fórmula 71, ou seus sais (por exemplo, sais de MSA ou HCI). O intermediários de fórmulas 71 e 92 pode ser isolado sob a forma de um sal por meio de tratamento com um ácido tal como HCI, MSA, ácido (1S)-(+)-10-canforsulfônico, ácido (R)-cloropropiônico, ácido N-[(R)-1-(1-naftila) etila] ftalâmico, ácido L-tartárico, ácido dibenzila- L-tartárico, ácido L-láctico, ácido (1R, 3S)-canfórico, ácido L-aspártico, ácido (S)-citronélico, e etc.

[106] A preparação do composto final 21 a partir do composto 71 pode ser em seguida realizada convertendo a porção silano para uma porção hidróxi. Esta conversão pode ser realizada através de proto- dessililação da porção silano seguida por oxidação com uma fonte oxi- dante, tal como, por exemplo, peróxido de hidrogênio. A etapa de pro- todessililação pode ser realizada através de reação com complexo de trifluoreto de boro-ácido acético, ou um ácido de Bronsted tal como TFA, MSA, FMSA, ou ácido tetrafluorobórico em um solvente inerte, por exemplo, DCM. Alternativamente, a protodessililação pode ser realizada com uma base ou ácido conforme descrito abaixo no Esquema 6. Na debenzilação (a qual, em algumas modalidades, pode ser realizada na etapa de protodessililação (por exemplo, quando são usados MSA ou FMSA), é proporcionado o intermediário protodessililado de fórmula 91

[107] O intermediário protodessililado 91 pode ser em seguida oxidado. O um ou mais agentes oxidantes podem ser selecionados em vista do reagente usado para obter a protodessililação. Por exemplo, quando se usa complexo de trifluoreto de boro-ácido acético, o composto pode ser oxidado com peróxido de hidrogênio e KHCO3, para proporcionar 0 composto alvo de fórmula 21, e quando se usa um ácido de Bronsted, 0 composto 91 pode ser oxidado com peróxido de hidrogênio, KHCO3, e KF. Outros ácidos e agentes oxidantes que podem ser úteis podem ser mencionados acima. Alternativamente, a conversão da porção silila para um grupo hidróxi pode ser realizada conforme descrito no Esquema 6, abaixo, e métodos adicionais que podem ser úteis para a transformação do grupo silila no grupo hidróxi são descritos em Fleming, I. (Chemtracts-Organic Chemistry 1996, 9, 1-64) e Jones, G.R. et al. (Tetrahedron, 1996, 52, 7599-7662), ambos os quais são incorporados a este relatório por meio de referência. O composto de fórmula 21 pode ser adicionalmente purificado, por exemplo, por meio de recristalização de água, e/ou através de purificação por resina conforme descrito abaixo no Processo K.

[108] Em modalidades alternativas do Processo B, a purina 28, ligada com epóxido de ciclopentano 72 para dar 0 composto 73, é diferente de 2-amino-6-benziloxipurina, al como 2-amino-6-cloropurina ou 2-amino-6-iodopurina. Nesta modalidade, 0 composto 73 é, no tratamento com 0 ortoformiato, ácido, etc., convertido para 0 composto 92, 0 qual na protodessililação e oxidação é convertido para 0 composto 93. Neste caso, em que se usa 2-amino-6-cloropurina ou 2-amino-6- iodopurina, pode ser utilizado um tratamento adicional com ácido ou base aquosos (preferencialmente base aquosa) para converter 0 grupo halo do composto 93 na porção 6-oxo. Por exemplo, pode ser usada solução aquosa de NaOH para converter 0 composto de fórmula 93 no composto de fórmula 21. PROCESSO C ESQUEMA 3

[109] O éster de fórmula 66 também pode ser convertido para o composto de fórmula 21 por meio dos métodos do Processo C. Uma modalidade do Processo é representada no Esquema 3. Em contraste com o Processo B, a reação de epoxidação do ciclopentano no Processo C é realizada depois da porção éster ter sido reduzida. No Processo C, a porção de álcool primário do éster de fórmula 66 (R= alquila) é protegida com um grupo protetor tal como um MOP por meio de tratamento com 2-metoxipropeno e uma quantidade catalítica de um ácido, tal como PPTS, em um solvente adicional tal como tolueno, para produzir o composto de fórmula 74. A porção de éster carboxílico de 74 pode ser reduzida com um reagente hidreto, preferencialmente Red-AI® ou LAH. Em uma modalidade, a porção éster de 74 é reduzida, preferencialmente depois da adição de uma base adequada, tal como com uma base de amina terciária, por exemplo, EtsN, no mesmo vaso de reação para dar o composto de fórmula 75. Em outra modalidade, a porção éster de 74 é reduzida com um reagente hidreto depois da elaboração, para dar o composto 75. A porção álcool resultante do composto de fórmula 75 é primeiro protegido com um grupo protetor que é resistente a condições de hidrólise que são em seguida usadas para remover o grupo MOP. Por exemplo, a porção alcoólica do composto de fórmula 74 pode ser tratada com uma base (por exemplo, KOtBu, KHMDS, NaH, condições catalisadoras de transferência de fase usando NaOH a 50%), e um haleto de benzila, por exemplo, brometo de benzila ou cloreto de benzila, preferencialmente em solvente tal como tolueno ou THF, para proteger a porção alcoólica como um éter benzílico. O acetal MOP pode ser em seguida hidrolisado por adição de ácido aquoso, tal como HCI a 1 N, para dar o álcool alílico de fórmula 76. Outros grupos protetores conhecidos na técnica podem ser encontrados na literatura, tal como Greene and Wuts, citados acima nas definições gerais neste relatório.

[110] O álcool alílico de fórmula 76 serve como material de partida para uma reação de epoxidação diastereosseletiva, em que o produto, o epóxido de ciclopentano de fórmula 77, se forma em alta pureza diastereomérica. Por exemplo, a epoxidação pode ser realizada usando um diéster homoquiral de ácido tartárico, um hidroperóxido, e um catalisador de metal, tal como um catalisador de metal de transição. Alternativamente, a epoxidação diastereosseletiva pode ser realizada com um perácido, tal como MPPA, conforme descrito no Esquema 14 e no Exemplo 12. Preferencialmente, a diastereoepoxidação é realizada com o éster homoquiral DIPT, o hidroperóxido TBHP ou CHP, e o catalisador de metal Ti(O-iPr)4. Preferencialmente, a reação é realizada em um solvente inerte tal como tolueno, cloreto de metile- no, e etc. Em uma modalidade, o epóxido de ciclopentano de fórmula 77 é formado em no mínimo 96% de.

[111] O epóxido de ciclopentano de fórmula 77 pode ser em seguida reagido (por exemplo, em temperatura elevada, por exemplo, preferencialmente em cerca de 80°C) com um sal de metal alcalino do composto de purina de fórmula 28, em que X é Cl, I ou BnO, em um solvente aprótico dipolar tal como DMF para preparar o composto de fórmula 78. Preferencialmente, o composto de purina de fórmula 28 é 2-amino-6-benziloxipurina. A 2-amino-6-benziloxipurina está disponível comercialmente ou pode ser preparada a partir de 6-cloroguanina e o sal de sódio de álcool benzílico (por exemplo, no tratamento com NaOH em álcool benzílico, tolueno, e MeOH, ou no tratamento com o sal de sódio de álcool benzílico, álcool benzílico, em EtOH/água.). O sal de metal alcalino pode ser produzido in situ por meio de reação de 2- amino-6-O-benziloxipurina com, por exemplo, LiH ou LiOH. O composto bruto de fórmula 78, em que X é benzilóxi, pode ser isolado e purificado. Por exemplo, o composto bruto 78 pode ser isolado na adição de IPA e água, e em seguida purificado por meio de recristalização com solventes ou misturas de solvente conhecidos na técnica.

[112] O composto de fórmula 78 pode ser em seguida convertido para o composto de fórmula 21 usando várias seqüências de reações análogas às usadas para converter o composto de fórmula 73 para o composto de fórmula 21 no Processo B, as quais são adicionalmente descritas nos Esquemas 4, 5 e 6, abaixo. PROCESSO C(a) ESQUEMA 4

[113] O Esquema 4 descreve um processo para converter o composto 78A (composto 78 em que X é OBn), para o composto de fórmula 21. O composto 78A pode ser tratado com um derivado de or- toformiato, tal como DEMA, DiPMA, TMOF, TiPOF, TEOF, e etc., preferencialmente em um solvente inerte tal como tolueno, DCM, MTBE e etc., conforme descrito no Esquema 2, na presença de uma quantidade catalítica de um ácido tal como TFA ou PTSA, ou um catalisador ácido tal como PPTS, e etc., para formar um produto compreendendo uma mistura diastereomérica de dioxolanos, por exemplo, os compostos 101 e 103. A mistura diastereomérica de dioxolanos 101 e 103 pode ser aquecida com anidrido acético preferencialmente na presença de ácido acético e um anti-oxidante, tal como BHT, para formar alqueno tendo a fórmula 105. O produto bruto 105 pode ser em seguida aquecido com ácido, tal como com HCI aquoso ou MSA, em um solvente apropriado tal como MeOH e água, para hidrolisar os grupos 6- benzilóxi e N-acetila e proporcionar o composto de metileno de fórmula 79. O intermediário 79 pode ser isolado sob a forma de um sal por meio de tratamento com um ácido tal como HCI, MSA, ácido (1 S)-(+)-10- canforsulfônico, ácido (R)-cloropropiônico ácido, N-[(R)-1 -(1-naftila) etila] ftalâmico, ácido L-tartárico, ácido dibenzila-L-tartárico, ácido L-láctico, ácido (1R, 3S)-canfórico, ácido L-aspártico, ácido (S)-citronélico, e etc. Em uma modalidade, o intermediário 79 ou sais do mesmo são adicionalmente purificados por meio de recristalização, por exemplo, intermediário 79 sais do mesmo são tratados com NaOH em um solvente orgânico e cristalizados antes de prosseguir para a próxima etapa.

[114] A preparação do composto final de fórmula 21 a partir do composto 79, ou sais do mesmo, pode ser em seguida realizada convertendo a porção silano para uma porção hidróxi. Esta conversão pode ser realizada através de protodessililação da porção silano com reagente ou reagentes selecionados para proporcionar o composto intermediário 91, seguido por oxidação. A protodessililação pode ser realizada com complexo de trifluoreto de boro-ácido acético ou um ácido de Bronsted em solvente inerte, por exemplo, MSA em cloreto de metileno. A oxidação pode ser realizada conforme descrito no Esquema 2, usando agentes oxidantes e aditivos selecionados de modo apropriado, isto é, dependendo do reagente usado para protodessililação e o agente oxidante, por exemplo, no caso de um ácido de Bronsted, peróxido de hidrogênio na presença de KHCO3 e KF pode ser usado, para proporcionar 0 composto 21. O composto 21 pode ser adicionalmente purificado, por exemplo, por meio de recristalização de água, e/ou através de purificação por resina conforme descrito abaixo no Processo K. PROCESSO C(b) ESQUEMA 5

[115] O Esquema 5 descreve um processo alternativo para preparar o composto 21, em que a purina 28 do Esquema 3 é 2-amino-6- cloropurina ou 2-amino-6-iodopurina, de tal mo do que a ligação com epóxido de ciclopentano 77, produz 0 composto 78B (composto 78 em que X é Cl ou I). Como no Esquema 4, 0 composto 78B pode ser tratado com um derivado de ortoformiato para formar um produto compreendendo uma mistura diastereomérica de dioxolanos 102 e 104, a qual pode ser aquecida com anidrido acético, preferencialmente na presença de ácido acético e um anti-oxidante, por exemplo, BHT, para formar 0 alqueno 106. O produto 106 pode ser em seguida aquecido com ácido, tal como HCI ou MSA, conforme descrito no Esquema 4, para hidrolisar 0 grupo acila e proporcionar 0 composto 94, ou sais do mesmo, 0 qual retêm 0 grupo X da posição 6. A protodessililação, de- benzilação, e oxidação conforme descrito no Esquema 4, proporcionam 0 composto intermediário 95. Os compostos 94 e 95 podem ser isolados sob a forma de seus sais por meio de tratamento com um ou mais ácidos conforme previamente descrito para o composto 79. O composto 95 pode ser em seguida tratado com ácido ou base aquosos (preferencialmente, uma base aquosa) para converter o grupo halo do composto 95 na porção 6-oxo do composto 21. Conforme pode ser reconhecido, com o Processo C(b) pode ser usada uma etapa adicional para a conversão do composto 78 em 21, comparado com o Processo C(a). PROCESSO C(c) ESQUEMA 6

[116] O Esquema 6 mostra um processo alternativo para preparar o composto 21 a partir do composto de fórmula 79, o qual é apresentado no Esquema 4. Comparado com o Esquema 4, neste esquema se usa uma base ou ácido diferente para obter a protodessilila- ção, seguida por oxidação e debenzilação para converter o composto 79 no composto 21. O composto 79 é tratado com uma base tal como um hidróxido, por exemplo, NaOH ou KOH, ou alcóxido tal como KOt- Bu, em um solvente aprótico polar tal como DMF, DMSO, ou NMP, ou com um ácido forte tal como TFA, e aquecido em um tempo e temperatura suficientes para obter a conversão para o intermediário 110. O composto 110 pode ser em seguida oxidado com peróxido de hidrogênio na presença de KHCO3 e KF em um solvente tal como MeOH, para proporcionar 0 intermediário 114. O intermediário 114 pode ser deben- zilado no tratamento com um ácido de Lewis tai como BCh, BBra, e etc., ou um ácido de Bronsted tai como MSA, TFMSA, e etc., em solvente tai como DCM, e a mistura da reação pode ser neutralizada com base tai como NaOH, para proporcionar 0 composto 21. O composto 21 pode ser adicionalmente purificado por meio de recristalização a partir de água e/ou purificação por resina conforme descrito abaixo. PROCESSO D ESQUEMA 7

[117] No Processo D da invenção, 0 éster da fórmula 66 (Esquema 1) pode ser convertido para 0 composto de fórmula 21 usando diferentes mé-todos sintéticos. No Processo D, 0 éster de fórmula 66 é aminohidroxilado para proporcionar uma oxazolidinona quiral da fórmula 67. Depois de uma série de etapas sintéticas, um nucleosídeo carbocíclico pirimidina é prepa-rado 0 composto de fórmula 70. O nucleosídeo carbocíclico pirimidina pode ser elaborado para um composto contendo purina, 0 composto de metileno de fórmula 71 o qual é subseqüentemente convertido para o composto de fórmula 21, por exemplo, por meio do procedimento de oxidação descrito nas etapas finais dos Processos B e C. Uma modalidade do Processo D é representada no Esquema 7.

[118] São usadas condições de aminohidroxilação para converter o éster de fórmula 66 para a oxazolidinona de fórmula 67. Os procedimentos de amino hidroxilação são análogos aos procedimentos descritos no Li, G.; Angert, H.; Sharpless, K.B. Angew. Chem. Int. Ed., (1996), em 2813. Preferencialmente, as condições de aminohidroxilação compreendem tratamento com: o reagente preparado a partir do tratamento de carbamato de metila com hipoclorito de terc-butila e hidróxido de sódio [isto é, MeOC(O)N(CI)Na]; e osmato de potássio em um solvente inerte tal como DCM. Reagentes alternativos incluem EtOC(O)N(CI)Na e BnOC(O)N(CI)Na. Preferencialmente, a oxazolidinona quiral de fórmula 67 é formada em no mínimo 96% de.

[119] A porção de álcool primário da oxazolidinona de fórmula 67 pode ser em seguida convertida para um iodeto. Por exemplo, em um procedimento preferencial, o composto de fórmula 67 é tratado com ani- drido trifluorometanossulfônico (TÍ2O) na presença de uma base de amina terciária tal como piridina, e subseqüentemente tratado com um sal de iodeto, por exemplo, iodeto de lítio. O iodeto resultante da fórmula 68 pode ser em seguida convertido para um composto de metileno de fórmula 69 por meio de um procedimento de duas etapas. Na primeira etapa o iodeto de fórmula 68 é tratado com pó de zinco e ácido acético. A porção éster do intermediário resultante pode ser em seguida reduzida para um álcool primário na segunda etapa por um reagente hidreto tal como hidreto de sódio bis[2-metoxietoxialumínio] para dar a amina da fórmula 69.

[120] A amina da fórmula 69 é subseqüentemente reagida com uma cloropirimidina substituída. A amina pode ser condensada, por exemplo, com 2-amino-6-cloro-5-nitro-4-(3H)-pirimidinona na presença de uma base de amina terciária, preferencialmente trietilamina, em n- butanol em refluxo para dar um composto de pirimidina de fórmula 70. O composto de pirimidina de fórmula 70 pode ser em seguida convertido para um derivado de purina por meio de um procedimento de duas etapas. Na primeira etapa, a porção nitro da pirimidina é reduzida com, por exemplo, ditionito de sódio, para dar um intermediário de triaminopirimi- dina. Agentes redutores alternativos e condições que também podem reduzir com sucesso o grupo nitro incluem NaBH4/THF, NaBH4-BiCh, Sn/HCI, SnCh, Mg/(NH4)2SO4/MeOH, CuBr-SMe2, TiCI2(Cp)2/Sm, ferro e procedimentos catalisados por níquel. Na segunda etapa, o tratamento do intermediário de triaminopirimidina com ácido fórmico, ácido clorídrico, e um derivado de ortoformiato, por exemplo, trietilortoformiato, realiza ciclização e proporciona o composto de metileno de fórmula 71. O composto de metileno de fórmula 71 pode ser convertido para o composto de fórmula 21 por meio do procedimento de oxidação descrito nas etapas finais dos Processos B e C. PROCESSO E ESQUEMA 8

[121] O Processo E da invenção compreende usar um precursor de açúcar carbocíclico alternativo, um álcool alílico da fórmula 16, para preparar o composto de fórmula 21. O Processo E é semelhante aos Processos B e C uma vez que todos os três processos usam intermediários de epóxido de ciclopentano para realizar uma reação de ligação com um precursor de guanina. Em uma primeira modalidade do Processo E, o grupo protetor que serve para proteger o álcool secundário do anel ciclopentano de 16 é uma benzila/éter benzílico substituído, ao passo que em uma segunda modalidade um grupo protetor de éter silílico (RcRd2Si) protege o mesmo álcool secundária. (Neste caso, Rc é Ci a C4 alquila linear ou ramificado, ou fenila, e Rd é Ci a C3 alquila linear ou ramificada.) Um grupo protetor de éter benzílico preferencial é éter benzílico, per se, ao passo que um éter silílico preferencial é éter ferc-butildimetila silílico. A diferença nestes grupos protetores muda a identidade dos intermediários para as diferentes modalidades do Processo E. Algumas modalidades do Processo E são representadas no Esquema 8.

[122] Em uma modalidade do Processo E, 0 álcool alílico de fórmula 16 é obtido através de uma redução do éster da fórmula 7. O éster da fórmula 7, em que R e R' são conforme definidos acima, pode ser obtido por meio dos Processos E(a)-E(d) que são descritos abaixo. O éster de fórmula 7 pode ser reduzido com reagentes hidreto que realizam seletivamente 1,2-redução do éster. Por exemplo, em uma modalidade, hidreto de diisobutilalumínio reduz 0 grupo éster e proporciona 0 álcool alílico da fórmula 16.

[123] O álcool alílico de fórmula 16 pode ser em seguida diaste- reosseletivamente epoxidado. Por exemplo, a epoxidação pode ser realizada usando um diéster homoquiral de ácido ácido tartárico, um hidroperóxido, e um catalisador de metal, tal como um catalisador de metal de transição, para produzir um epóxido de ciclopentano da fórmula 17. Em uma modalidade, 0 diéster homoquiral é (-)-dietila tartara- to [(-)-DET], o hidroperóxido é TBHP ou CHP, e o catalisador de metal é isopropóxido de titânio (IV). Preferencialmente, a reação é realizada em um solvente inerte tal como DCM.

[124] O epóxido de fórmula 17 pode ser subseqüentemente ligado a um sal de metal alcalino (por exemplo, lítio) de um composto de purina de fórmula 28, em que X é Cl, I ou BnO, em um solvente apróti- co dipolar tal como DMF para proporcionar o composto de fórmula 18. Preferencialmente a ligação do epóxido de ciclopentano da fórmula 17 é conduzida com o sal de lítio de 2-amino-6-benziloxipurina. O composto de fórmula 18, em que X é benzilóxi, pode ser purificado por meio de cristalização a partir de solventes tais como acetato de etila e hexanos. Tipicamene o rendimento da etapa de ligação depois da purificação é de no mínimo 75%.

[125] A porção diol vicinal do composto de fórmula 18 pode ser em seguida convertida para uma porção alqueno. Por exemplo, a porção diol pode ser convertida para um alqueno por meio de procedimentos que são análogos aos usados nos Processos B e C. Por conseguinte, em um modalidade, o composto de fórmula 18 pode ser tratado com um derivado de ortoformiato, por exemplo, ortoformiato de trimetila, na presença de uma quantidade catalítica de um ácido tal como TFA ou PTSA, ou catalisador ácido tal como PPTS. A mistura de dioxolanos resultante (preferencialmente como uma mistura bruta) é aquecida com uma mistura de anidrido acético e opcionalmente ácido acético para proporcionar o composto de metileno de fórmula 19. Alternativamente, esta reação pode ser realizada na presença de antio- xidante tal como BHT conforme descrito previamente. No caso da se-gunda modalidade do Processo E (onde o álcool secundário de 18 é protegido por um grupo de éter silílico), o grupo protetor de éter silílico é simultaneamente hidrolisado durante a etapa de tratamento com anidrido acético/ ácido acético (isto é, R' é H no composto de metileno de fórmula 19).

[126] Em modalidades do Processo E, em que X é OBn, o grupo 6-O-benzilóxi pode ser hidrolisado (bem como qualquer grupo 2- acetamida pendente formado a partir da acetilação do grupo 2-amino da purina durante a etapa de tratamento com anidrido acético) aquecendo o composto de fórmula 19 com ácido mineral aquoso, tal como HCI a 2 N para dar o composto de metileno de fórmula 20. Em modalidades do Processo E, em que X é Cl ou I, o grupo 6-halo pode ser hidrolisado por meio de tratamento com ácido ou base aquosos (por exemplo, solução de hidróxido aquoso). A remoção do um ou mais grupos protetores de éter benzílico remanescente no anel ciclopentano, por meio de tratamento com tricloreto de boro em um solvente inerte, por exemplo, DCM, proporciona o composto de fórmula 21. PROCESSO E(a) ESQUEMA 9

[127] O éster de fórmula 7 pode ser preparado por meio de métodos que produzem quantidades escaláveis de éster enantiomerica- mente puro. No Processo E(a), o éster de fórmula 7 pode ser preparado a partir de um diol da fórmula 1, o qual é preparado de acordo com os procedimentos descritos no J. Am. Chem. Soc. 1989, 3456 e J. Am. Chem. Soc. 1996, 9526. Uma modalidade do Processo E(a) é representada no Esquema 9.

[128] O diol de fórmula 1 pode ser acetilado com, por exemplo, anidrido acético e piridina para proporcionar um diacetato da fórmula 2. Hidrólise enzimática seletiva de uma das funções acetato proquiral do diacetato proporciona monoacetato enantiomericamente puro da fórmula 3. Preferencialmente a enzima usada é uma hidrolase tal como Lipase PS-30 de Pseudomonas cepacia ou Pancreatina. Preferencialmente o excesso enantiomérico do produto monoacetato de fórmula 3 é no mínimo 96% ee, mais preferencialmente no mínimo 98% ee. Em algumas modalidades a enzima é imobilizada sobre um suporte, por exemplo, polipropileno, para auxiliar na recuperação da enzima e facilitar a elaboração da reação. A reação é tipicamente realizada em uma mistura de um tampão e um solvente orgânico, preferencialmente tendo uma proporção de tampão /solvente orgânico de cerca de 3/1 até cerca de 20/1, preferencialmente cerca de 9:1. O tampão é seleci-onado para ter uma faixa de tamponamento eficaz para manter o pH da mistura da reação em uma faixa eficaz para suportar catálise enzimática, tal como em cerca de pH=7. Por exemplo, pode ser usado tampão de fosfato de potássio a 25 mM. Em uma modalidade o solvente orgânico é tolueno.

[129] O monoacetato de fórmula 3 pode ser ligado a fenilsulfoni- Initrometano para proporcionar um composto de fórmula 4. A ligação é preferencialmente catalisada por um catalisador de paládio (0) tal como tetracis(trifenilfosfina)paládio em THF com uma base de amina terciária, tal como trietilamina. O grupo hidroxila secundário do composto de fórmula 4 é protegido usando um haleto de benzila e uma base forte não-nucleofílica tal como hidreto de sódio para dar o composto de dibenzila de fórmula 5. O composto de dibenzila de fórmula 5 pode ser oxidado, tal como com peroximonossulfato de potássio : tetrabutila amónio, preferencialmente em uma mistura de solventes de DCM e MeOH. O ácido carboxilico intermediário pode ser esterificado, por exemplo, aquecendo diretamente com um álcool (ROH), preferencialmente MeOH, e ácido sulfúrico no mesmo vaso da reação para proporcionar o éster de fórmula 6.

[130] A isomerização da ligação dupla proporciona o éster desejado de fórmula 7. A isomerização pode ser realizada aquecendo o éster bruto de fórmula 6 sob condições básicas. Preferencialmente as condições básicas compreendem aquecer o éster com uma mistura de alcóxido de sódio/ álcool. Conforme será evidente para os versados na técnica, a mistura de alcóxido e álcool são preferencialmente selecionados de modo que a transesterificação da porção éster durante a isomerização é minimizada ou eliminada. A título de exemplo, se for desejado um éster metílico para o composto de fórmula 7 (isto é, R=metila) então as condições básicas escolhidas para a isomerização são preferencialmente metóxido de sódio /MeOH. O éster de fórmula 7 pode ser purificado por meio de recristalização a partir de uma mistura de solventes tal como hexanos e éter ferc-butila metílico. PROCESSO E(b) ESQUEMA 10

[131] No Processo E(b), o éster de fórmula 7 é preparado usando métodos sintéticos alternativos. Uma modalidade do Processo E(b) é representada no Esquema 10. O diol de fórmula 1 é seletivamente acetilado usando uma enzima hidrolase, tal como Lipase PS-30 ou Pancreatina para produzir o composto de monoacetato enantiomeri- camente enriquecido de fórmula 13. Aqui novamente, a enzima pode ser imobilizada sobre um suporte. A reação de acetilação pode ser realizada em um solvente orgânico tal como mistura de heptano: éter metila terc-butílico. Preferencialmente, o excesso enantiomérico do produto, o monoacetato de fórmula 13, é no mínimo 96% ee, mais preferencialmente no mínimo 98% ee.

[132] O monoacetato de fórmula 13 pode ser convertido para o alquila carbonato da fórmula 14, em que R4 é preferencialmente Ci a CG alquila, benzila, fenila, ou fenila substituída por Ci a Ce alquila, por exemplo, por meio de tratamento com um derivado de ácido alquila carbônico ativado, tal como metila cloroformato, dimetila carbonato, e etc. Preferencialmente, a conversão é realizada com metila cloroformato e uma base de amina terciária, por exemplo, piridina, em um solvente inerte, preferencialmente DCM.

[133] O alquila carbonato de fórmula 14 pode ser em seguida ligado com fenilsulfonilnitrometano para proporcionar um composto de fórmula 15. A ligação é preferencialmente catalisada por um catalisador de Pd(0), por exemplo, tetrakis(trifenilfosfina)paládio, tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0), bis(dibenzilidenoacetona)- paládio(0)-CHCh, em um solvente, por exemplo, THF, com uma base de amina terciária, tal como trietilamina. O composto de fórmula 15 é tratado com uma base, por exemplo, carbonato de potássio em MeOH, para remover o grupo acetato e proporcionar o composto de fórmula 4. A porção álcool secundário pode ser protegida como um grupo de éter benzílico reagindo o composto de fórmula 4 com um haleto de benzila, por exemplo, benzila brometo, preferencialmente na presença de uma base forte não-nucleofílica, por exemplo, hidreto de sódio, para dar o composto de fórmula 5. O composto de fórmula 5 pode ser convertido para o éster de fórmula 7 por meio dos métodos já descritos no Processo E(a). PROCESSO E(c) ESQUEMA 11

[134] Alternativamente, o Processo E(c) pode ser usado para preparar 0 éster de fórmula 7 (onde R é benzila). Uma modalidade do Processo E(c) é representada no Esquema 11. Um epóxido de ciclopentano da fórmula 8 serve como a material de partida quiral. O epóxido de ciclopentano de fórmula 8 pode ser preparado de acordo com 0 procedimento descrito na Patente dos Estados Unidos No. 5.206.244, cuja revelação é incorporada por meio de referência como se totalmente estabelecida neste relatório. Um álcool alílico de fórmula 9 é preparado aquecendo 0 epóxido de fórmula 8 com uma base forte não-nucleofílica, por exemplo, hexametildissilazida de lítio em THF. Depois da elaboração aquosa, 0 álcool alílico de fórmula 9 pode ser usado sem purificação adicional. Aqui novamente, a porção de álcool alílico pode ser convertida para 0 grupo de carbonato de alquila, em que R4 é preferencialmente Ci a Ce alquila, benzila, fenila, ou fenila substituída por Ci a Ce alquila, por exemplo, por meio de tratamento com um derivado de ácido alquila carbônico ativado, tal como metila cloroformato, dimetila carbonato, etc para dar o alquila carbonato da fórmula 10. Em uma modalidade, o álcool alílico de fórmula 9 é agitado com metila cloroformato e uma base de amina terciária, preferencialmente piridina, em um solvente inerte, por exemplo, DCM, para dar um carbonato de metila. O carbonato de alquila bruto pode ser ligado diretamente a fenilsulfonilnitrometa- no em THF para proporcionar um composto de fórmula 5. A ligação do composto de alquila carbonato é preferencialmente catalisada por um catalisador de paládio (0) tal como tetra- kis(trifenilfosfina)paládio em THF com uma base de amina terciária, por exemplo, trietilamina. O composto de fórmula 5 pode ser convertido para o éster de fórmula 7 por meio dos métodos descritos no Processo E(a). PROCESSO E(d) ESQUEMA 12

[135] O Processo E(d) também pode ser usado para preparar o éster de fórmula 7, em que R' é benzila ou silila. Modalidades do Processo E(d) são representadas no Esquema 12. No processo, o álcool alílico de fórmula 9 é oxidado com um reagente oxidante tal como dicromato de piridínio (PDC), clorocromato de piridínio, dióxido de manganês, e semelhantes, em um solvente inerte, preferencialmente DCM, para proporcionar o ciclopen- tenona de fórmula 80. A ciclopentenona é reduzida com reagentes hidreto que realizam seletivamente uma adição de 1,4-hidreto. Condições redutoras adequadas incluem, por exemplo, tratamento com tri-sec-butilboroidreto de litio em THF. O intermediário da redução é capturado com um derivado de ácido trifluorometanossulfônico ativado tal como N-feniltriflimida para pro-porcionar o triflato da fórmula 81. Um grupo alquiloxicarbonila é em seguida inserido sobre o anel usando, por exemplo, uma reação de inserção de carbonila catalisada por paládio para preparar o éster de fórmula 7. Preferencialmente, a reação de inserção é realizada em uma mistura de DMF e um álcool, preferencialmente MeOH, com uma quantidade em excesso de uma base de amina terciária, tal como trietilamina. Um catalisador preferencial para a reação é um catalisador de paládio (0), por exemplo, tetracis(trifenilfosfina)paládio.

[136] Em modalidades do Processo E(d) em que R' é um grupo benzila ou benzila substituída, o álcool alílico 9 pode ser preparado conforme descrito no Processo E(c) a partir do epóxido de ciclopenta- no de fórmula 8. Em modalidades do Processo E(d) em que R' é um grupo protetor de éter silílico, o álcool alílico pode ser preparado em um procedimento de duas etapas a partir do monoacetato de fórmula 3 (o qual pode ser preparado conforme descrito no Processo E(a)). A porção de álcool secundário do monoacetato de fórmula 3 é reagida com um reagente de sililação RcRd2SiY, em que Y é um grupo de saí-da adequado, por exemplo, cloreto, triflato, e semelhantes. Em uma modalidade, o álcool secundário é protegido como um éter terc- butildimetilsilílico usando cloreto de terc-butildimetilsilila (TBSCI) na presença de piridina em um solvente inerte tal como DCM para dar um composto de fórmula 22. O grupo acetila do composto de fórmula 22 é hidrolisado usando uma base por exemplo, carbonato de potássio em um álcool solvente, para dar o álcool alílico de fórmula 9. PROCESSO F ESQUEMA 13

[137] O Processo F da invenção inclui preparação de um ciclo- pentanol convenientemente substituído de fórmula 37, e ligação do ciclopentanol com um precursor de guanina, tal como 2-amino-6- iodopurina sob condições de Mitsonobu para dar um nucleosídeo carbocíclico, o composto de metileno de fórmula 38. O composto de metileno de fórmula 38 pode ser em seguida elaborado para o composto de fórmula 21. Uma modalidade do Processo F é representada no Esquema 13.

[138] A ciclopentenona de fórmula 32 (também conhecida como 4-(S)-hidróxi-2-ciclopenten-1-ona) serve como material de partida para o Processo F. A ciclopentenona pode ser obtida de acordo com os procedimentos descritos no Khanapure, S.; Najafi, N.; Manna, S.; Yang, J.; Rokash. J. J. Org. Chem., 1995, 60, 7448. A porção de álcool da ciclopentenona de fórmula 32 pode ser protegida como um éter silílico usando o reagente de sililação da fórmula RcRd2SiY (em que Rc, Rd e Y são conforme definidos no Processo E e E(d)). Por exemplo, a porção alcoólica da ciclopentenona de fórmula 32 pode ser protegida como um éter ferc-butildimetilsilílico usando cloreto terc- butildimetilsilílico (TBSCI), uma base de amina terciária tal como N,N- dimetiletilamina, e uma quantidade catalítica de 4-N,N- dimetilaminopiridina em um solvente inerte tal como DCM para dar a ciclopentenona de fórmula 33. A ciclopentenona de fórmula 33 pode ser em seguida tratada com um reagente de Grignard preparado a partir de um (halometila)dialquilfenilsilano da fórmula RaRb2SiCH2X' (em que Ra e Rb são conforme descritos acima para o Processo A, e X' é Cl, Br, ou I) e magnésio, na presença de sal de cobre (I) tal como complexo de dimetilsulfeto de brometo de Cu (I). Em uma modalidade, (clorometila)-dimetilfenilsilano é usado para preparar o reagente de Grignard. Um reagente de trimetilsililação tal como clorotrimetilsilano (TMSCI) pode ser usado para tratar o enolato intermediário para formar o éter silila enólico de fórmula 34. O éter silila enólico resultante é hidroximetilado, por exemplo, usando formaldeído aquoso na presença de um ácido de Lewis, por exemplo, Yb(OTf)3, La(OTf)3, Pr(OTf)s, Nd(OTf)3, Sm(OTf)3, Eu(OTf)3, Eu(OTf)3, Gd(OTf)3, Dy(OTf)3, Ho(OTf)3, ou Er(OTf)3 em THF para dar o composto de fórmula 35.

[139] O composto de fórmula 35 pode ser desidratado reagindo o composto com um agente de sulfonilação da fórmula R3SO2CI, em que R3 é Ci a Ce alquila, trifluorometila, fenila, ou fenila substituída (substituída por Ci a Ce alquila e/ou Ci a Ce alcoxi) na presença de uma base de amina terciária, por exemplo, trietilamina, e em seguida eliminando o sulfonato intermediário por adição de uma base forte, preferencialmente DBU, para dar o composto de metileno de fórmula 36. Preferencialmente, o agente de sulfonilação usado é cloreto de metanossul- fonila. A porção carbonila do composto de metileno de fórmula 36 pode ser reduzida por reagentes hidreto que realizam seletivamente 1,2 - redução do grupo carbonila e proporcionam o álcool alílico com alta diastereosseletividade. Estes reagentes hidreto incluem boroidreto de sódio, boroidreto de zinco, hidreto de alumínio de litio, hidreto de diisobutilalumínio, boroidreto de sódio-cloreto de cério, trietilboroidreto de litio, 9-BBN hidreto de litio, 9-BBN piridina, complexo de borano- sulfeto, 5,5-difenila-2-metila-3,4-propan-1,3,2-oxazaborolidina (Reagente de Corey), tri-terc-butoxialumínio hidreto de litio, cianoboroidreto de sódio, tri-sec-butila boroidreto de litio (L-Selectride®), sódio bis(2- metoxietóxi) alumínio hidreto (Red-AI®), cloreto de diisobutilalumínio e complexo de borano-tetraidrofurano. O grupo carbonila pode ser reduzido, por exemplo, com trietilboroidreto de litio em THF para dar o álcool alílico bruto de fórmula 37 em rendimento de 95% em uma proporção diastereomérica a 8:1. O produto bruto é purificado, por exemplo, usando cromatografia por sílica-gel para isolar o diastereômero desejado do álcool alílico da fórmula 37.

[140] O álcool alílico de fórmula 37 é condensado com 2-amino- 6-iodopurina (composto de purina de fórmula 28, em que X é I) sob condições de Mitsonobu. Alternativamente, outros precursores de guanina, tais como 2-amino-6-cloropurina e 2-amino-6-O- benziloxipurina podem ser usados na condensação. As condições de Mitsonobu preferenciais incluem tratamento do álcool alílico com cerca de 1,3 equivalentes molares cada de trifenilfosfina, DEAD, e 2-amino- 6-iodopurina em THF. O produto da reação de Mitsonobu, o composto de metileno de fórmula 38, pode ser adicionalmente purificado, por exemplo, por cromatografia por sílica-gel.

[141] O composto de metileno de fórmula 38 pode ser convertido para o composto de fórmula 21. Em um método de conversão, a porção de dialquilfenilsilano do composto de metileno de fórmula 38 pode ser convertida para uma porção hidróxi por meio de procedimentos de oxidação análogos aos usados nos Processos B e C. O grupo protetor de éter silílico é simultaneamente hidrolisado durante estes procedimentos. Por exemplo, o composto de metileno de fórmula 38 pode ser tratado com complexo de ácido tetrafluorobórico-éter dimetílico em DCM. Depois da adição de bicarbonato de potássio e fluoreto de potássio, o intermediário silanol desta reação é oxidado com peróxido de hidrogênio para proporcionar o composto de fórmula 39. As duas reações podem ser realizadas convenientemente usando um procedimen-to de um pote. O grupo 6-iodo pode ser hidrolisado aquecendo o composto de fórmula 39 com base aquosa tal como uma solução a 2 N de hidróxido de sódio. Depois de neutralização, a solução aquosa pode ser aquecida com carbono de descoloração e ser deixada para cristalizar para fornecer o composto purificado de fórmula 21. PROCESSO G ESQUEMA 14

[142] O Processo G inclui preparação de um epóxido de ciclopentano da fórmula 45, e ligação do epóxido de ciclopentano com um precursor de guanina para dar um nucleosídeo carbocíclico, o composto de fórmula 46. O composto de fórmula 46 pode ser em seguida convertido por uma série de etapas sintéticas para o composto de fórmula 21. Uma modalidade do Processo G é representada no Esquema 14.

[143] No Processo G, a ciclopentenona de fórmula 33 (preparada conforme descrito no Processo F) pode ser iodada, por exemplo, por meio de tratamento com solução de iodo. Preferencialmente, o solvente da reação é uma mistura de DCM e piridina. O intermediário de iodo ciclopentenona resultante é reduzido, com um reagente hidreto, por exemplo, boroidreto de sódio em MeOH, para formar o composto de iodo de fórmula 40 em >98% de. O composto de iodo de fórmula 40 pode ser em seguida submetido a uma reação de inserção de carbonila. Por exemplo, o álcool alílico de fórmula 40 é reagido com monóxido de carbono e um álcool ROH em que R é Ci a C4 alquila ou benzila para formar 0 éster de fórmula 41. Preferencialmente, a reação de inserção é conduzida com monóxido de carbono e MeOH na presença de uma base de amina terciária, por exemplo, trietilamina, em um vaso de reação selado e pressurizado. A reação é preferencialmente catalisada por um catalisador de paládio, por exemplo, dicloro bis(trifenilfos- fina)paládio. O produto bruto da reação de inserção pode ser purificado por meio de cromatografia de coluna para proporcionar 0 composto puro de fórmula 41.

[144] O álcool secundário do composto de fórmula 41 é acila- do por meio de tratamento com um derivado ácido ativado da fórmula R2C(O)-Y, e uma base, preferencialmente hexametildissila- zida de lítio. Apesar de poder ser usado outros derivados ácidos ativados (inclusive derivados ácidos alquila e arila) para formar 0 intermediário acila 42, preferencialmente se usa cloreto de adamantane carbonila (isto é, R2=adamantano). Com este reagente preferencial, é obtido um intermediário mais cristalino que é mais facilmente purificado e manuseado. O intermediário de fórmula 42 é submetido a deslocamento alílico por meio de tratamento com 0 reagente de Grignard preparado a partir de um (halometi- la)dialquilfenilsilano da fórmula RaRb2SiCH2X' (em que Ra e Rb são conforme descritos acima para 0 Processo A, e X' é Cl, Br, ou I) e magnésio, na presença de sal de cobre (I) tal como iodeto de Cu (I). Em uma modalidade, se usa (clorometila)-dimetilfenilsilano pa-ra preparar 0 reagente de Grignard. O produto da reação, 0 composto de fórmula 43, pode ser usado na etapa sintética seguinte sem purificação adicional.

[145] O composto de fórmula 43 pode ser reduzido com um reagente hidreto, tal como hidreto de diisobutilalumínio em tolue- no, para proporcionar o álcool alílico de fórmula 44. A epoxidação do álcool alílico bruto da fórmula 44 proporciona o epóxido de ci- clopentano tendo a fórmula 45. Por exemplo, em um método de epoxidação, o álcool alílico é tratado com um perácido, por exemplo, monoperoxiftalato de magnésio (MPPA) em MeOH, para preparar o epóxido de ciclopentano. Usando este método, o epóxido de ciclopentano de fórmula 45 é de pureza diastereomérica suficiente para ser usado na etapa sintética seguinte sem purificação adicional.

[146] Na próxima etapa do Processo G, o epóxido de ciclopentano de fórmula 45 é convertido para o composto de fórmula 46 por meio de condensação com um sal de metal alcalino, por exemplo, sal de litio, de 2-amino-6-O-benziloxipurina em um solvente aprótico dipolar, por exemplo, DMF. O sal de litio, por exemplo, pode ser produzido por meio de reação de 2-amino-6- benziloxipurina com hidreto de litio. O produto bruto da reação de condensação pode ser purificado por meio de recristalização a partir de um solvente adequado, por exemplo, MeOH, para proporcionar o composto puro de fórmula 46. Aqui novamente de modo semelhante aos Processos B e C, sais de metal alcalino de outros precursores de guanina, por exemplo, 2-amino-6-cloropurina, 2-amino-6-iodopurina, podem ser usados ao invés de 2-amino-6- benziloxipurina para ligar com o epóxido de ciclopentano da fórmula 45.

[147] A porção diol do composto de fórmula 46 é em seguida convertida para um alqueno. Por exemplo, a conversão para o composto de metileno de fórmula 47 pode ser realizada usando um procedimento de duas etapas. O composto de fórmula 46 é tratado com um derivado de ortoformiato, preferencialmente trime- tilortoformiato, e uma quantidade catalítica de um ácido tal como TFA ou PTSA, ou catalisador ácido tai como PPTS. O excesso de reagente de ortoformiato é evaporado, e a mistura de dioxolanos resultante é aquecida com acético anidrido. O composto de metileno de fórmula 47 é obtido depois de evaporação do anidrido acético e elaboração de ácido, cujo tratamento também hidrolisa o grupo 6-O-benzilóxi. Em modalidades do Processo G, em que X é Cl ou I, o grupo 6-halo na the purina pode ser hidrolisado usando solução de hidróxido, por exemplo, NaOH.

[148] O grupo fenildimetilsililmetila do composto de metileno de fórmula 47 pode ser convertido para uma porção hidroximetila, por exemplo, por meio dos procedimentos descritos nos Processos B, C, e F. Por exemplo, em um modalidade, o composto de metileno de fórmula 47 pode ser tratado com complexo de ácido tetrafluorobórico-éter dimetílico em DCM para proporcionar o intermediário silanol. O tratamento do intermediário silanol com bicarbonato de potássio, fluoreto de potássio, e peróxido de hidrogênio proporciona o composto de fórmula 21. PROCESSO H ESQUEMA 15

[149] No Processo H da invenção, uma lactona bicíclica, o composto de fórmula 52, é convertida para um composto de metileno de fórmula 56. O composto de metileno de fórmula 56 é ligado com um precursor de guanina tai como 2-amino-6-cloropurina (purina composto de fórmula 28, X=CI) para dar um nucleosídeo carbocíclico, o composto de metileno de fórmula 57. O composto de metileno de fórmula 57 é subseqüentemente convertido para o composto de fórmula 21 por meio de etapas de desproteção e hidrólise. Modalidades do Processo H são representadas no Esquema 15.

[150] O composto de fórmula 52 pode ser tratado com o reagente oxaziridina, por exemplo, (1S)-(+)-(10-Canforsulfonila)oxaziridina, e uma base forte não-nucleofílica, preferencialmente bis[trimetilsilila]amida de sódio (NaHMDS) em THF, para produzir um composto de fórmula 53. Depois de resfriar bruscamente a reação com, por exemplo, MeOH, o composto de fórmula 53 pode ser diretamente reduzido por meio de tratamento com um reagente hidreto adequado tal como boroidreto de sódio em MeOH, para reduzir a porção lactona e proporcionar o composto de fórmula 53A. O diol vicinal do composto de fórmula 53A pode ser clivado oxidativamente por meio de tratamento com um agente oxidante tal como periodato de sódio, per-manganate de potássio, ou óxido de rutênio. O aldeído resultante contendo o intermediário 53B pode ser em seguida reduzido com um reagente hidreto adequado, por exemplo, boroidreto de sódio, para produzir o diol da fórmula 54.

[151] A porção de álcool primário do diol de fórmula 54 pode ser seletivamente convertida para um grupo de saída adequado, preferen-cialmente usando um reagente de sulfonilação tendo a fórmula R3SO2CI, em que R3 é Ci a Ce alquila, trifluorometila, fenila, ou fenila substituída (substituído por Ci a Ce alquila ou Ci a Ce alcoxi). Por exemplo, o diol de fórmula 54 é tratado com p-toluenossulfonila cloreto (TsCI), uma base de amina terciária tal como piridina, e uma quantidade catalítica de 4-N,N-dimetilaminopiridina para converter o álcool primário para um grupo tosilato. O álcool secundário é protegido como um éster por meio de acilação com um agente de acilação para proporcionar o composto de fórmula 55. Preferencialmente, o álcool secundário é protegido por um grupo acila da fórmula R2C(=O)-, em que R2 é alquila, arila, arilalquila, qualquer um dos quais pode ser substituído. Ainda mais preferencialmente, R2 é metila de modo que o grupo protetor acila no composto de fórmula 55 é acetila. Um agente de acilação preferencial é um agente de acilação da fórmula R2C(O)Y, em que Y é um grupo de saída. Por exemplo, o agente de acilação pode ser um anidrido, cloreto ácido, e semelhantes.

[152] O composto de fórmula 55 é tratado com um sal de iodeto, por exemplo, iodeto de litio, e uma base forte tal como DBU para realizar a eliminação do iodeto intermediário. A hidrólise do éster acílico é realizada por meio de adição direta de MeOH à mistura da reação básica, proporcionando o composto de metileno de fórmula 56. O composto de metileno de fórmula 56 pode ser adicionalmente purificado, por exemplo, por meio de cromatografia por sílica-gel.

[153] O composto de metileno de fórmula 56 serve como um composto adequado para ligação com um precursor de guanina (composto de purina de fórmula 28, em que X é Cl, Br ou benzilóxi). Por exemplo, o composto de metileno de fórmula 56 é tratado sob condições de Mitsonobu com 2-amino-6-cloropurina para dar o composto de metileno de fórmula 57. Preferencialmente as condições de Mitsonobu compreendem tratamento com DEAD e trifenilfosfina. O composto de metileno de fórmula 57 pode ser adicionalmente purificado, por exemplo, por meio de cromatografia por sílica-gel.

[154] A conversão do composto de metileno de fórmula 57 para o composto de fórmula 21 pode ser completada por desproteção das porções de éter silílico e hidrólise do grupo 6-X na porção de purina. As duas porções de éter silílico são clivadas por meio de tratamento com íon fluoreto (por exemplo, reagente de fluoreto de tetralquilamônio tal como fluoreto de tetrabutilamônio em THF) para dar o composto de fórmula 39. Em modalidades do processo em que a porção purina tem um grupo 6-cloro ou iodo, o grupo 6-halo é hidrolisado aquecendo o composto de fórmula 39 com base ou ácido aquosos, preferencialmente base aquosa, por exemplo, solução a 2 N de hidróxido de sódio, para dar o composto de fórmula 21. Em modalidades do processo onde X é um grupo 6-O-benzilóxi, a conversão para o grupo 6-oxo pode ser realizada usando condições acidícas, por exemplo, HCI a 2 N. O composto de fórmula 21 pode ser adicionalmente purificado, por exemplo, por meio de cromatografia por sílica-gel.

[155] No Processo H, a lactona bicíclica homoquiral de fórmula 49 pode ser usada como material de partida para a preparação do composto de fórmula 52, e pode ser preparada conforme descrito em Miyaji, Lx. e outros, TETRAHEDRON LETT, 1991, 4557. A lactona bicíclica de fórmula 49 pode ser tratada com paraformaldeído em uma mistura de ácido acético glacial e ácido sulfúrico para adicionar for- maldeído através da ligação dupla. Este tratamento produz um diace- tato de fórmula 50. O diacetato de fórmula 50 é subseqüentemente agitado com uma base tal como carbonato de potássio em um solvente alcoólico, por exemplo, MeOH, para hidrolisar as porções acetato e proporcionar o diol da fórmula 51. As porções de álcool do diol de fórmula 51 podem ser protegidas como grupos de éter silílico tratando o diol com um reagente de sililação da fórmula RcRd2SiY (em que Rc, Rd e Y são conforme descritos acima na descrição do Processo E) para proporcionar o composto de fórmula 52. Em uma modalidade do Processo H, o reagente de sililação é cloreto de ferc-butildimetila (TBSCI). PROCESSO I ESQUEMA 16

[156] De mode similar ao Processo H da invenção, o Processo I da invenção compreende a preparação de um composto de metileno de fórmula 56 a partir do intermediário de lactona bicíclica homoquiral, o composto de fórmula 52. A ligação do composto de metileno de fórmula 56 a urn precursor de guanina (composto de purina de fórmula 28), e subseqüente conversão do nucleosídeo carbocíclico resultante no composto de fórmula 21 são análogas aos métodos usados no Processo H também. A preparação do composto de metileno de fórmula 56 a partir do composto de fórmula 52, no entanto, é realizada por meio de métodos sintéticos diferentes dos usados no Processo H. Uma modalidade do Processo I é representada no Esquema 16.

[157] No Processo I, a porção de lactona do composto de fórmula 52 é reduzida sob condições de reação controladas para proporcionar o lactol de fórmula 59. Por exemplo, o composto de fórmula 52 pode ser tratado com um reagente hidreto, por exemplo, hidreto de diisobutilalumínio em tolueno a 25°C para realizar a redução para o estado de oxidação de lactol. O produto da redução, o lactol de fórmula 59, é subseqüentemente clivado usando um agente oxidante, tal como dia- cetato de iodobenzeno sob irradiação UV (lâmpada de luz solar) em DCM para dar o composto de iodeto de fórmula 60. O composto de iodeto de fórmula 60 pode ser tratado com uma base forte tal como DBU para realizar a eliminação da porção iodeto com remoção do éster de formiato na elaboração com água para produzir o composto de metileno de fórmula 56.

[158] O composto de metileno de fórmula 56 pode ser ligado a um precursor de guanina, tal como 2-amino-6-iodopurina (composto de purina de fórmula 28 em que X é I), sob condições de reação tais como as descritas para a conversão do composto de metileno de fórmula 56 no composto de fórmula 57 descrito acima no Processo H. O nucleosídeo carbocíclico resultante, o composto de fórmula 39, pode ser convertido para o composto de fórmula 21 por meio de métodos tais como os usados no Processo H. PROCESSO J ESQUEMA 17

[159] O Processo J da invenção representa outra abordagem para a preparação do composto de fórmula 21 (Esquema 17). O Processo J inclui a formação de um composto de metileno de fórmula 89, e subseqüente ligação do composto de metileno com um precursor de guanina, por exemplo, 2-amino-6-iodopurina, usando condições de Mitsonobu para produzir um intermediário de nucleosídeo carbocíclico, o composto de metileno de fórmula 90. Os grupos protetores de 90 são removidos e o grupo X é hidrolisado para proporcionar o composto de fórmula 21.

[160] O composto de metileno de fórmula 89 é preparado a partir do epóxido de ciclopentano de fórmula 82, preparado conforme descrito no Exemplo 1 da Patente dos Estados Unidos No. 5.206.244. A porção de álcool secundário de 82 é protegida como um éter silílico tendo a fórmula RcRd2SiO- em que Rc e Rd são conforme descritos acima na descrição do Processo E. Em uma modalidade, o álcool secundário de 82 é protegido como um éter terc-butila dimetilsilílico. O álcool primário é desmascarado por redução catalítica do grupo benzila de 83 com, por exemplo, paládio sobre carbono para dar o composto de fórmula 84. O composto de fórmula 86 é preparado por meio de um procedimento de eliminação catalisado por base. Na primeira etapa do procedimento, o álcool primário de 84 é convertido em um grupo de saída adequado, preferencialmente usando um reagente de sulfo- nação tendo a fórmula R3SO2CI, em que R3 é conforme descrito acima no Processo F, para dar o composto tendo a fórmula 85. Uma base forte, por exemplo, t-butóxido de potássio, em um solvente adequado, por exemplo, THF, é em seguida usada para realizar a eliminação do alquila ou ácido (substituído) fenilsulfônico para proporcionar a porção de metileno exocíclico no composto de fórmula 86.

[161] Uma porção hidroximetila é em seguida instalada sobre o anel ciclopentano adjacente à porção metileno exocíclico no composto de fórmula 86 para dar o composto de fórmula 87. Para realizar de modo eficiente esta transformação, é preferencialmente conduzida uma 1,2-adição regiosseletiva de um nucleófila de carbono ao epóxido do composto de fórmula 86. Preferencialmente, nucleófila de carbono é um carbânion de 1,3-ditiano, por exemplo, sal de lítio de 1,3-ditiano, que adiciona à posição alílica para proporcionar o composto de fórmula 87. O sal de lítio de 1,3-ditiano pode ser produzido com uma base forte não-nucleofílica, por exemplo, n-butila lítio, diisopropilamida de lítio, hexametilsilazida de lítio, e semelhantes em um solvente etéreo, por exemplo, THF. Um agente quelante tal como 1,4- diazabiciclo[2.2.2]octano (DABCO) é preferencialmente adicionado para reforçar a eficiência do processo. A reação é preferencialmente realizada abaixo de 25°C, mais preferencialmente abaixo de cerca de - 15°C para assegurar alta regiosseletividade. Preferencialmente, a re- giosseletividade da adição é >10:1, mais preferencialmente >15:1.

[162] O grupo ditianilmetila do composto de fórmula 87 é prontamente convertido para um álcool por uma reação de hidrólise seguida por uma reação de redução. A hidrólise para um aldeído intermediário é realizada, por exemplo, agitando uma mistura do composto de fórmula 87 com carbonato de cálcio e iodometano em acetonitrila aquoso. Outros métodos para hidrolisar ditioacetais são de conhecimento geral na técnica e incluem métodos mencionados em Greene, T.W.; Wuts, P.G.M. Protecting Groups in Organic Synthesis 2nd Edition, Wiley e Sons: New York, 1991, pp. 199-201. O aldeído intermediário pode ser reduzido com um reagente hidreto adequado, por exemplo, boroidreto de sódio, para proporcionar o composto de fórmula 88.

[163] O composto de fórmula 88 é convertido para um composto adequado para ligação com um derivado de guanina protegido, por meio de acilação dos grupos de álcool. Os grupos acila da fórmula R2C(=O)- em que R2 é conforme descrito acima para o Processo H podem servir como grupos protetores. Preferencialmente, R2 é metila de modo que o grupo acila é acetila. O grupo de éter silílico é em seguida clivafa usando íon fluoreto, por exemplo, fluoreto de tetrabutila- mônio, para dar o composto de metileno de fórmula 89.

[164] O composto de fórmula 89 é ligado a um precursor de guanina adequado, por exemplo, 2-amino-6-iodopurina, para proporcionar um intermediário de nucleosídeo carbocíclico, o composto de metileno de fórmula 90. Em modalidades alternativas, 2-amino-6-cloropurina ou 2-amino-6-benziloxipurina podem ser usadas como o precursor de guanina. O composto de metileno de fórmula 90, pode ser convertido para o composto de fórmula 21 por meio de métodos de hidrólise adequados. Por exemplo, os grupos éster podem ser clivados por meio de tratamento com um alcóxido de metal alcalino, por exemplo, metóxido de sódio, e o grupo 6-halo pode ser hidrolisado aquecendo em base aquosa. Em modalidades do processo em que 2-amino-benziloxipurina é usada como um precursor de guanina, o grupo 6-benzilóxi é hidrolisado usando ácido, por exemplo, HCI.

PROCESSO K PURIFICAÇÃO POR RESINA

[165] Outro aspecto desta invenção é a aplicação de um processo de adsorção de resina para isolamento e purificação do composto de fórmula 21 ou intermediários do mesmo. Este processo emprega uma mistura bruta compreendendo o composto 21 ou uma mistura compreendendo um ou mais intermediários de entacavir e outros reagentes, tais como, por exemplo, uma mistura oxidativa resultante do tratamento de um intermediário para o composto 21 com peróxido de hidrogênio em uma reação de dessililação oxidativa na presença de KF e KHCO3. O composto 21 é solúvel em água a 2,2 mg/mL e mais preferencialmente abaixo de 1,5 mg/mL. O composto 21 e compostos relacionados são adsorvidos sobre a resina especificamente enquanto sais inorgânicos passam através. O leito de resina é em seguida lavado com água para remover quaisquer sais adicionais e 0 composto 21 ou um composto relacionado com 0 mesmo (por exemplo, tal como um intermediário ou precursor) é eluído da resina lavando com um solvente orgânico. Em uma modalidade, 0 solvente orgânico compreende uma mistura de MeOH e água, preferencialmente 40-60% de MeOH:40-60% de água, mais preferencialmente 45-55% de MeOH:45- 55% de água, ainda mais preferencialmente 50:50 de MeOH e água, uma vez que 50% de MeOH proporciona ótima separação do composto 21 ou composto relacionado com 0 mesmo 0 qual é em seguida concentrado e cristalizado para obter um composto puro. Conforme usado neste relatório, por "puro" se indica um composto tendo pureza maior do que ou igual a 97%, ou mais preferencialmente 99%. Mais preferencial é um composto em que todos os picos de impurezas são menores do que 0,1 de área por cento determinado por cromatografia líquida de alta performance (HPLC).

[166] Resinas adequadas para aplicação no processo de adsor- ção são resinas hidrofóbicas com seletividade para moléculas não polares. Em uma modalidade, a resina é à base de estireno. Mais preferencialmente, as resinas à base de estireno são brominadas para proporcionar maior força e resistência à abrasão. Resinas típicas com propriedades semelhantes incluem, porém não estão limitadas a, SP207 Sepabeads, SP700 Sepabeads, Diaion HP20, Diaion SP70, Diaion SP825, Diaion SP850, Diaion HP2MG metacrilato, AMBERLITE XAD4, AMBERLITE XAD7HP, AMBERLITE XAD16, e AMBERLITE XAD1600. Em uma modalidade preferencial, SP207 é usado como a resina uma vez que esta resina apresenta resistência à abrasão, utili-zação de reciclagem de longa duração, e a capacidade para suportar extremas condições de solvente orgânico, temperaturas, e pH, para ser particularmente útila na purificação do composto 21 e compostos relacionados com o mesmo.

[167] Os exemplos seguintes ilustram adicionalmente a presente invenção, mas logicamente, não devem ser considerados de modo algum como limitantes a seu âmbito.

EXEMPLO 1 PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)]-2-Amino- 1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DE (1a, 4a, 5a)-7,7-Dicloro-4-(dimetilfenilsilila) bici- clo[3.2.0]hept-2-en-6-ona (63)

[168] Uma frasco de 3 litros de três gargalos equipado com um agitador mecânico, um funila de adição de 500 mL, um termômetro e uma entrada de argônio foi carregado com fenildimetilclorosilano (153,6 g, 0,90 mol) e THF anidrico (320 mL). O frasco foi em seguida resfriado até -78°C. A esta solução em agitação, foi adicionado ciclo- pentadieneto de sódio (441 mL, 2,04 M em THF, 0,90 mol) durante um período de uma hora. A mistura da reação foi agitada durante cerca de duas horas e em seguida foi deixada para aquecer até cerca de 0°C durante um período de duas horas. Neste momento se presumiu que a reação estava completa. A reação foi resfriada bruscamente por adição de água fria (-150 mL) e foi deixada para aquecer até ~15°C. A mistura foi diluída com hexanos (-100 mL) e transferida para um funila separador. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com hexanos (200 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (200 mL), seca sobre sulfato de magnésio anidrico, filtrada, e concentrada a vácuo para dar o dieno bruto como óleo marrom-escuro (177 g, -98% de rendimento). O dieno bruto foi usado sem purificação adicional na próxima reação.

[169] Uma frasco de 3 litros de três gargalos equipado com um agitador mecânico, funila de adição de 500 mL, termômetro, e entrada de argônio foi carregado com dieno da reação acima (176,5 g, 0,88 mol) e hexanos (600 mL). A mistura foi resfriada até cerca de -10°C e cloreto de dicloroacetila (173 mL, 1,80 mol) foi adicionado durante o curso de cinco minutos. A esta mistura agitada uma solução de EtsN (251 mL, 1,80 mol) em hexanos (400 mL) foi adicionada durante um período de uma hora. A mistura resultante foi agitada durante cerca de três horas a 0-4°C e em seguida em temperatura ambiente durante cerca de dez horas até completar a reação. A reação foi resfriada bruscamente por adição de água (400 mL). Depois de agitar durante cerca de 30 minutos em temperatura ambiente, a solução foi transferida para um funila separador e a camada orgânica foi separada. A ca-mada aquosa foi extraída com hexanos (300 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com água (250 mL), bicarbonato de sódio (5%, 250 mL) e água (500 mL). O filtrado combinado foi concentrado a vácuo. O óleo escuro resultante foi adicionalmente seco sob alto vácuo para dar 307 g do composto do título bruto.

PREPARAÇÃO DE ácido trans-5-(Dimetilfenilsilila)-2-(hidroximetila)-2- ciclopenteno-1-carboxilico (64)

[170] Uma frasco de 3 litros de três gargalos equipado com um agitador mecânico, um funila de adição de 500 mL, um termômetro e uma entrada de argônio foi carregado com o 63 obtido acima (211 g, 0,68 mol), ferc-butanol (348 g), água (710 mL), e EtsN (343 g, 3,39 moles). A mistura da reação foi aquecida até o refluxo durante 3 horas. A mistura da reação foi resfriada até ~10°C e carbonato de potássio (300 g, 2,17 moles) foi adicionado durante 30 minutos. Depois de 30 minutos, boroidreto de sódio (13,6 g, 0,359 mol) foi adicionado em porções. Depois de 1 hora, o banho refrigerante foi removido e a mistura da reação foi deixada para aquecer lentamente. A mistura da reação foi cuidadosamente resfriada bruscamente com água (800 mL). O pH foi ajustado para ~3,0 e a mistura resultante foi extraída com EtOAc (800 mL). O extrato orgânico foi concentrado a vácuo. O óleo escuro resultante foi adicionalmente seco sob alto vácuo para dar 185 g do composto do título racêmico.

PREPARAÇÃO DE ácido (1R, 5S)-5-(Dimetilfenilsilila)-2- (hidroximetila)-2-ciclopenteno-1-carboxilico, sal de (1R, 2S)-2-amino-1- (4-nitrofenila)-1,3-propanodiol (1:1) (65A)

[171] Uma frasco de 3 litros de três gargalos equipado com um agitador mecânico, funila de adição, termômetro e entrada de argônio foi carregado com 64 (185 g, 0,67 mol), etanol absoluto (925 g) e R,R- (-)-2-amino-1-(4-nitrofenila)-1,3-propanodiol (102 g, 0,483 mol), e aquecido até 50°C. A solução foi semeada com o sal 65A e deixada a 40°C durante 5 horas. Os cristais resultantes foram filtrados sobre um funila de Buchner e lavados com etanol. O sólido foi seco para dar o composto do título em ~28,3% de rendimento (94 g) a partir de ciclo- pentadieneto de sódio. O produto tem uma pureza de 98 AP e 99% ee.

PREPARAÇÃO DE éster metílico de ácido (1R, 5S)-5- (dimetilfenilsilila)-2-(hidroximetila)-2-ciclopenteno-1-carboxílico (66)

[172] A um frasco de dois litros de fundo redondo e três gargalos equipado com um agitador mecânico, um funila de adição e um termômetro, foi carregado 65A (390 g, 0,8 mol) e MeOH (800 mL). A mistura da reação foi resfriada até cerca de 0°C. Ácido sulfúrico concentrado (123 g, 1,2 mol) foi lentamente adicionado ao frasco da reação com agitação. Depois da adição do ácido, a mistura da reação foi agitada durante cerca de 12 horas em temperatura ambiente para completar a reação. Depois do completamento da reação, a mistura da reação foi concentrada a vácuo para remover cerca de 500 mL de MeOH. O resíduo foi diluído com EtOAc (600 mL) e água (1000 mL). A mistura foi transferida para um funila separador e a camada orgânica foi separada. A camada aquosa foi extraída com EtOAc (600 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com bicarbonato de sódio saturado (500 mL), água (500 mL), salmoura (500 mL) e concentrado a vácuo para proporcionar o composto do título bruto (224 g) como um óleo marrom.

PREPARAÇÃO DE [1R-(1α, 2α, 3β, 5α)]-3-(Dimetilfenilsilila)-6- oxabiciclo[3.1 .Olhexano-1,2-dimetanol (72)

[173] A um frasco de cinco litros de fundo redondo e três gargalos equipado com um agitador mecânico, um funila de adição e um termômetro, foram carregada peneiras moleculares ativadas (224 g) e DCM (1000 mL) sob uma atmosfera de argônio. A solução foi resfriada até cerca de -30°C. DIPT (18 g, 0,08 mol) foi adicionado à solução e a mistura foi agitada a -30°C durante cerca de 20 minutos. Isopropóxido de titânio (IV) (18,2 mL, 0,064 mol) foi em seguida adicionado à mistura da reação. A mistura da reação foi agitada a -30°C durante cerca de 20 minutos.

[174] O composto 66 (224 g, 0,8 moles) em DCM (500 mL) foi carregado à mistura da reação através de seringa a -30°C. A mistura da reação foi agitada a -30°C durante cerca de 20 minutos. TBHP (308 mL, 5 M/decano, 1,6 mol) foi adicionado à mistura da reação usando um funila de adição, mantendo a temperatura da reação ente -20°C a - 30°C. Depois de completa adição de TBHP, a mistura da reação foi agitada entre -20°C a -30°C durante cerca de 2 horas. Depois da reação estar completa, o excesso de peróxido foi resfriado bruscamente por adição de bissulfito de sódio aquoso (250 g de bissulfito de sódio em 500 mL de água). Depois da adição de bissulfito de sódio, a mistura foi agitada durante cerca de 30 minutos e filtrada através de uma almofada de terra diatomácea (CeliteHyflo®). O filtrado foi transferido para um funila separador e a camada aquosa foi separada. A camada orgânica foi lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (1000 mL) e em seguida água (500 mL). A camada orgânica foi concentrada a vácuo para dar o epóxido bruto (276 g) como um óleo.

[175] A um frasco de três litros de fundo redondo e três gargalos equipado com um agitador mecânico e um termômetro foi carregado o epóxido obtido acima (276 g, 0,8 moles) e IPA (800 mL) sob uma atmosfera de argônio. A solução resultante foi resfriada até cerca de 0°C em um banho de gelo e foi adicionado boroidreto de sódio sólido (68 g, 1,6 mol) em porões. Depois da adição estar completa, o banho refrigerante foi removido e a mistura da reação foi agitada durante cerca de 16 horas para completar a reação. Depois do completamento da reação, o excesso de boroidreto foi resfriado bruscamente adicionando a mistura da reação a uma solução saturada de amónio cloreto (2000 mL). Depois do boroidreto estar completamente resfriado bruscamente, a mistura da reação foi extraída com EtOAc (1200 mL). A camada orgânica foi lavada com água (500 mL), salmoura (500 mL), e concen- trada a vácuo para proporcionar o composto do título (251 g) como óleo amarelo-claro.

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 2β, 3α, 4β)]-1-[2-Amino-6-(fenilmetoxi)-9H- purin-9-ilal-4-(dimetilfenilsilila)-2-hidróxi-2,3-ciclopentanodimetanol (73, X=BnO)

[176] A um frasco de três litros de fundo redondo e três gargalos equipado com um agitador mecânico e um termômetro, foi carregado 2-amino-6-benziloxipurina (193 g, 0,8 moles), monoidrato de hidróxido de lítio (33,6 g, 0,64 mol) e 72 (251 g, 0,8 moles) em DMF (800 mL). A mistura foi aquecida até 80°C e agitada durante cerca de 20 horas. Depois do completamento da reação, a mistura da reação foi resfriada até a temperatura ambiente e extraída com EtOAc (3000 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (1500 mL). A camada orgânica foi lavada com ácido cítrico (1000 mL), salmoura (1000 mL) e concentrada a vácuo para fornecer triol bruto (330 g) como um óleo marrom espesso. O produto foi cristalizado a partir de EtOAc-hexanos para dar o composto do título (~225 g) como um material critalino sólido. PREPARAÇÃO DE [1S- (1α, 3α, 4β)]-2-Amino-9-[4-(dimetilfenilsilila)-3- (hidroximetila)-2-metilenociclopentilal-1,9-diidro-6H-purin-6-ona (71)

[177] Um frasco de fundo redondo de 2,0 L e 3 gargalos, seco em forno e equipado com um agitador mecânico, um funila de adição, uma sonda de temperatura, e entrada de argônio, foi carregado com 73 (77,5 g, 0,1493 moles), p-toluenossulfonato de piridínio (1,875 g, 0,007465 mol), e DCM (371 mL) son uma atmosfera de argônio. A pasta fluida resultante foi agitada e resfriada até 0°C. Dietoximetila acetato (122 mL, 0,7465 moles) foi adicionado lentamente durante um período de cerca de 15 minutos. A mistura da reação foi aquecida até a temperatura ambiente durante um período de uma hora. Depois do completo consumo do material de partida, a mistura da reação marrom resultante foi lentamente adicionada a uma solução saturada em agitação de bicarbonato de sódio (775 mL). A mistura resultante foi extra-ída com EtOAc (1000 mL). A camada orgânica foi concentrada a vácuo para proporcionar uma mistura de dioxolanos como um óleo marrom viscoso (~125 g) o qual foi transferido para um frasco de fundo redondo de 2 L e 3 gargalos. O frasco foi adicionalmente carregado com anidrido acético (279 mL, 2,96 moles) e aquecido em cerca de 120°C durante 30 horas. Depois do completo consumo do material de partida, a mistura da reação foi resfriada ~65°C, e MeOH (745 mL) foi adicionado. A mistura da reação foi agitada ao mesmo tempo que mantendo a temperatura a 65°C durante 40 minutos. Água (5-10 mL) foi adicionada à mistura da reação, e a mistura da reação foi resfriada até cerca de 45°C. HCI concentrado (220 mL) foi adicionado e a mistura foi reaquecida a 65°C durante 4 horas. A mistura foi resfriada até ~20°C, e extraída com uma mistura de éter hexano-ferc-butila metílico (9:1) (1500 mL). O extrato orgânico foi concentrado a vácuo. O resíduo foi transferido para um frasco de 3 L e 3 gargalos e aquecido até 55°C e nesta temperatura, NaOH a 10 N (413 mL) foi adicionado para ajustar o pH da solução até cerca de 12,8. A mistura da reação foi aquecida até 75°C e agitada nesta temperatura durante ~4 horas. HCI concentrado (30 mL) foi lentamente adicionado à mistura da reação para ajustar o pH para 7 e a mistura da reação foi deixada para esfriar a 20°C durante um período de 4 horas. A pasta fluida foi filtrada e a torta foi lavada com uma mistura de MeOH frio-água (3:7) (200 mL), seguida por água (800 mL), e éter terc-butila metílico (150 mL). O produto bruto de cor marrom clara foi seco para proporcionar o composto do título (37,7 g, 64%).

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4B)]-2-Amino-1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3- (hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H-purin-6-ona (21)

[178] Um frasco de fundo redondo de 2,0 L e 3 gargalos, seco em forno e equipado com um agitador mecânico, um funila de adição, sonda de temperatura, e entrada de argônio, foi carregado com composto 71 (34,1 g, 86,2 moles), ácido acético (40,4 mL, 8 eq) e complexo de ácido acético -trifluoreto de boro (38 mL). A mistura da reação foi aquecida até 95°C, agitada durante 4 horas e em seguida resfriada até a temperatura ambiente. A mistura da reação foi diluída com MeOH (200 mL) e resfriada bruscamente com KOH aquoso (10 N, ~220 mL) para ajustar o pH até cerca de 9,5. Bicarbonato de potássio (17,9 g) seguido por peróxido de hidrogênio aquoso (30 % em peso, 39 g) foi adicionado à solução. A solução resultante foi aquecida até 70°C e agitada durante 10 horas. A reação foi resfriada até 5-10°C. Bissulfito de sódio (16,2 g) foi adicionado em porções durante 30 minutos. A mistura da reação foi concentrada a vácuo para remover a maior parte do MeOH. O semi-sólido amarelo resultante foi resfriado até -5°C e HCI concentrado (~55 mL) foi adicionado para ajustar o pH para 0,15. A solução resultante foi extraída com EtOAc (500 mL) e KOH aquoso (10 N, ~48 mL) foi adicionado para ajustar o pH para ~11. A solução foi agitada durante 1 hora e em seguida o pH foi ajustado para ~7 com HCI (4 mL). A mistura da reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora e a ~5°C durante 3 horas. O sólido foi colhido por filtração e seco sob alto vácuo durante 16 horas. O sólido foi redissolvido em água (600 mL) a 90°C. A solução clara foi resfriada até ~60-55°C e semeada com 21. A solução foi deixada para resfriar até a temperatura ambiente durante 5 horas. O sólid critalino branco resultante foi coletado por filtração e seco a vácuo a 50°C durante 16 horas para proporcionar o composto do título (12,9 g).

EXEMPLO 2 PROCESSO FOR A PREPARAÇÃO DE [1S-(1a, 3cc, 4β)]-2-Amino- 1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DE (1R, 5S)-5-(Dimetilfenilsilila)-2-[(1-metóxi-1- metiletóxi)metila]-2-ciclopenteno-1 -metanol (75)

[179] A um frasco de um litro de fundo redondo e três gargalos equipado com um agitador mecânico e um termômetro foi carregado 66 (29,6 g, 0,1 mol, obtido conforme descrito no Exemplo 1) e tolueno (50 mL) sob uma atmosfera de argônio. A solução resultante foi resfriada até ~0°C em um banho de gelo e 2-metoxipropeno (95 mL, 1,0 mole) foi adicionado. p-Toluenossulfonato de piridínio (0,5 g, 0,002 mol) foi adicionado a 0°C e a mistura resultante foi agitada a 0°C durante 10 minutos. O banho refrigerante foi removido e a mistura da reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois do completamento da reação, a mistura da reação foi resfriada até - 78°C. Trietilamina (27 mL, 0,2 moles) foi adicionada para manter a mistura da reação em um ambiente básico. LAH (1 M em THF, 0,1 mol) foi adicionado a -78°C. O banho refrigerante foi removido depois 30 minutos e a reação foi deixada para aquecer até a temperatura ambiente. A mistura da reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1-2 horas. A mistura da reação foi resfriada até 0°C e NaOH a 2 N (20 mL) foi adicionado. Depois desta adição, a mistura da reação foi agitada durante 30 minutos e filtrada. A almofada foi lavado com DCM (400 mL). O orgânico filtrado foi lavado com salmoura (100 mL) e concentrado a vácuo para proporcionar o composto do título (35 g) como um óleo amarelo-claro.

PREPARAÇÃO DE (4S, 5R)-4-(Dimetilfenilsilila)-5-[(fenilmetóxi)metila]- 1-ciclopenteno-1-metanol (76)

[180] A um frasco de 250 mL de fundo redondo e três gargalos equipado com um agitador mecânico e um termômetro foi carregado 75 (35 g, 0,1 moles) e THF (60 mL) sob uma atmosfera de argônio. NaH (6 g, 60%, suspensão de óleo mineral, 0,15 mol) foi adicionado à solução. A mistura foi aquecida a 60°C durante 1 hora e em seguida resfriada até a temperatura ambiente. Brometo de benzila (23,8 mL, 0,2 moles) e tetrabutilamônio brometo (10 g, 0,03 mol) foram adicionado à suspensão. A mistura da reação foi aquecida a 70°C durante 6 horas e em seguida a mistura da reação foi resfriada até a temperatura ambiente. 1,9-diazabiciclo[5.4.0]undecen-7-eno (45 mL, 0,2 moles) foi adicionado e aquecido a 50°C durante 45 min. A mistura da reação foi resfriada até a temperatura ambiente, resfriada bruscamente com HCI a 1N para pH ~1 e extraída com uma mistura de EtOAc-hexano (250 mL). A camada orgânica foi lavada com água (500 mL), salmoura (100 mL) e concentrada a vácuo para proporcionar o composto do título (42 g) como um óleo marrom.

PREPARAÇÃO DE [1R-(1α, 2α, 3β, 5α)l-3-(Dimetilfenilsilila)-2- ((fenilmetóxi)metila]-6-oxabiciclo[3.1 .Olhexano-1-metanol (77)

[181] A um frasco de fundo redondo de 1 L e 3 gargalos, seco a forno, equipado com um agitador mecânico, uma sonda de temperatura, e uma linha de argônio foram carregada peneiras moleculares ativadas (35 g) e DCM (160 mL) sob uma atmosfera de argônio. A solução foi resfriada até cerca de -30°C. DIPT (2,34 g, 0,01 mol) seguido por isopropóxido de titânio (IV) (2,36 mL, 0,008 mol) foi adicionado à mistura da reação. A mistura da reação foi agitada a -30°C durante cerca de 20 minutos. 76 bruto (42 g, ~0,1 moles) em DCM (40 mL) foi adicionado à mistura da reação e agitado durante cerca de 30 minutos. TBHP (40 mL, 0,2 moles) foi adicionado à mistura da reação a -30°C. Depois de completa adição de TBHP, a mistura da reação foi agitada a -30°C durante cerca de 5 horas para completar a reação. O excesso de peróxido foi resfriado bruscamente com bissulfito de sódio aquoso (20 g). A mistura foi filtrada através de um Funila de Buchner com uma almofada de terra diatomácea (Hyflo Celite®). O filtrado foi lavado com solução saturada de NaHCOs, (100 mL) e salmoura (100 mL). A ca-mada orgânica foi concentrada a vácuo para dar o composto do título bruto (60 g, >100% de equilíbrio material) como um óleo.

PREPARAÇÃO DE [1R-(1α, 2α, 3β, 5a)]-5-[2-Amino-6-(fenilmetóxi)- 9H-purin-9-ila]-3-(dimetilfenilsilila)-1-hidróxi-2- [(fenilmetóxi)metilalciclopentanometanol (78A, X=BnO)

[182] A um frasco de um litro de fundo redondo e três gargalos equipado com um agitador mecânico e um termômetro, foi carregado 2-amino-6-benziloxipurina (24 g, 0,1 moles), hidreto de lítio (0,48 g, 0,06 mol) e DMF (40 mL). A mistura foi aquecida a 60°C durante cerca de 1 hora sob uma atmosfera de argônio. 77 (60 g, 0,1 moles) em 20 mL DMF foi adicionado. A temperatura da reação foi aquecida a 105°C durante 5 horas, resfriada até a temperatura ambiente e diluída com EtOAc (600 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (300 mL), ácido cítrico a 1 M (150 mL), e solução de NaHCOs (100 mL). A camada orgânica foi concentrada a vácuo para fornecer o produto do título bruto (60 g) como um óleo. Foi cristalizado a partir de EtOAc e hexano para dar 23 g de o composto do título como um sólido cristalino.

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 5β)]-2-Amino-9-[4-(dimetilfenilsilila)-2- metileno-3-[(fenilmetóxi)metila1ciclopentila]-1,9-diidro-6H-purin-6-ona Í79)

[183] Um frasco de fundo redondo de 100 mL de 3 gargalos, seco em forno e equipado com um agitador mecânico, um funila de adição, uma sonda de temperatura, e uma entrada de argônio foi carregado com 78A (12,2 g, 0,02 mol), p-toluenossulfonato de piridínio (0,25 g, 0,001 mol) e DCM (20 mL) sob atmosfera de argônio. A solução resultante foi agitada em temperatura ambiente e DEMA (16 mL, 0,1 mol) foi adicionado. A mistura da reação foi agitada em temperatura ambiente durante uma hora. Depois do consumo completo do material de partida, a mistura da reação resultante foi resfriada bruscamente com uma solução saturada de NaHCOs (100 mL) e extraída com EtOAc (100 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (2 x 50 mL) e concentrada a vácuo para proporcionar a mistura de dioxalanos como um óleo viscoso o qual foi transferido para um frasco de fundo redondo de 250 mL de 3 gargalos, equipado com um agitador mecânico, um condensador, uma sonda de temperatura, e um banho de óleo. Anidri- do acético (20 mL, 0,2 moles) foi adicionado a este frasco e a mistura resultante foi aquecida a 120°C durante 15 horas. Depois do consumo completo do material de partida, a mistura da reação foi resfriada ~60°C e MeOH (50 mL) foi adicionado. Uma solução de HCI (50 mL, 6 N) foi adicionada à mistura da reação e a temperatura foi aumentada para 70°C e agitada durante um total de 6 horas. Durante este período, foi adicionada uma solução a 50% de MeOH/água (50 mL). A mistura da reação foi concentrada para remover o excesso de MeOH (150 mL de MeOH) em um evaporador giratório. A mistura resultante foi aquecida a ~50-55°C. NaOH (10 N) foi adicionado para ajustar o pH da solução a ~6,5. A suspensão resultante foi agitada a ~50°C durante 1 hora, e em seguida resfriada a 28°C durante o curso de 2 horas. O sólido foi filtrado, lavado com 1:2 de MeOH/água (80 mL), água (100 mL), e seco para proporcionar o composto do título (7,65 g).

CONVERSÃO ALTERNATIVA DE 78A TO 79

[184] 78A (5 kg) foi dissolvido em tolueno (17 L) e tratado com p- toluenossulfonato de pirídio (110 g, 0,05 mole) e DEMA (5,33 kg, 4 moles) em temperatura ambiente, proporcionando uma mistura dias- tereomérica de ortoésteres. A reação foi resfriada bruscamente com NaOH aquoso ao mesmo tempo que mantendo o pH acima de 7,5. Foi adicionado éter ferc-butila metílico (70 L) e as camadas foram separadas. A camada orgânica rica em produto foi seca por destilação aze- trópica para um teor de umidade de menos de 0,1%. Hidroxitolueno butilado (10 kg) e ácido acético glacial (0,99 kg, 2 equiv) e anidrido acético (10,9 kg, 13,2 equiv) foram adicionados à mistura da reação de tolueno, e a mistura foi aquecido até 120 a 125°C durante várias ho- ras.

[185] Ao final da reação de olefinação, a mistura da reação foi adicionada a MeOH (80 L) e HCI aquoso (6 N, 21,6 L) ao mesmo tempo que mantendo a temperatura a menos de 35°C. A mistura da reação foi aquecida até 60 a 65°C para realizar a deacetilação. A mistura da reação foi resfriada até a temperatura ambiente e lavada com hep- tano (2 x 35 L) para remover o hidroxitolueno butilado. As camadas foram separadas e a camada metanólica aquosa rica em produto foi aquecida até 55 a 65°C. Foi adicionada água (14,2 L), seguida por resfriamento até a temperatura ambiente durante 2 a 5 horas para realizar cristalização do sal de cloridrato de 79. A pasta fluida cristalina foi filtrada e lavada com água (2 x 20,2 L) e heptano (2 x 30 L). A torta do filtrado foi seca até 60 a 65°C para um teor de umidade de menos de 3,5% (3,64 kg, 85,6% de rendimento).

[186] O sal de cloridrato de 79 (1,26 kg) acima foi suspendido em MeOH (13 L) e aquecido até 55 a 65°C para obter completa dissolução. O pH aparente da solução foi ajustado para 5,4 a 6,4 com NaOH a 1 N (cerca de 1,5 L) ao mesmo tempo que mantendo a temperatura em 50 a 65°C. A pasta fluida de base livre foi mantida em 50 a 65°C durante um adicional de 60 a 90 minutos e em seguida foi lentamente resfriada até a temperatura ambiente durante 90 a 120 minutos. Mais água (cerca de 1,5 L) foi adicionada durante 45 a 60 minutos, e o pH foi reajustado para 5,5 a 6,4 com 1 N de HCI ou NaOH. A pasta fluida cristalina foi filtrada e lavada com 1:1 de MeOH:água (2,6 L), seguido por água (2,8 L) e finalmente heptano (4 L). A torta foi seca em um forno a vácuo a 60-65°C para um teor de umidade de menos de 1% (1,03 kg, 85%).

[187] A base livre pode ser reprecipitada do tolueno/heptano para proporcionar 79 altamente purificado em 90-93% de rendimento, 99% AP, 99,0 + % de potência.

CONVERSÃO ALTERNATIVA DE 78A PARA SAL METANOSSUL- FONATO DE 79

[188] Sob nitrogênio, uma solução de 78A (50,0 g, 82,06 mmol), triisopropila ortoformiato (46,85 g, 246,2 mmol) e TFA (7,02 g, 61,57 mmol) em tolueno (300 ml) foi agitada durante uma hora em temperatura ambiente. A esta solução foram adicionados hidroxitolueno butila- do (50 g), anidrido acético (100 ml) e ácido acético glacial (4,93 g, 82,10 mmol) e a solução foi aquecida até 120°C. Depois de manter a solução da reação a 120°C durante 12,5 horas, a solução escura foi resfriada até a temperatura ambiente e adicionada a uma solução fria (4°C) de ácido metanossulfônico (63,40 g, 659,70 mmol) em água (300 ml) em um índice para manter a temperatura em 5 a 10°C. A mistura da reação foi agitada durante 15 minutos a 5-10°C e MeOH (600 ml) foi adicionado em um índice para manter a temperatura em 5 a 10°C. Depois de agitar em 5 a 10°C durante 15 minutos, a mistura da reação foi aquecida até 65°C e mantida por 12 horas. Depois de resfriar até a temperatura ambiente, a mistura da reação bruta foi lavada com heptane (300 ml) e as camadas foram separadas. MeOH adicional (200 ml) foi acrescentado à camada aquosa rica em produto, e foi novamente extraída com heptano (300 ml). A mistura da reação foi aquecida até 65°C e foi adicionada água (500 ml) de modo a manter a temperatura em 65 a 55°C para iniciar a cristalização do sal de metanos- sulfonato. A solução da reação foi resfriada até 10°C e os sólidos foram filtrados, lavados com água (200 ml), e secos a 50°C sob vácuo para proporcionar 39,5 g do sal de metanossulfonato de 79 com AP de 99,6 e pureza de 86,4%.

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)l-2-Amino-1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3- (hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H-purin-6-ona (21)

[189] A um frasco de 500 mL de fundo redondo, equipado com um agitador magnético, uma entrada de nitrogênio, um banho de óleo, e uma sonda de temperatura foi carregado 79 (7,2 g, 4,7 mmoles) e complexo de trifluoreto de boro-ácido acético (12,3 mL, 88,2 mmoles). A mistura da reação foi aquecida a ~70°C durante 3,5 horas, resfriada até a temperatura ambiente, e diluída com MeOH (80 mL)/H2O (4 mL). A mistura foi neutralizada com KOH (10 N, ~40 mL) para pH ~9,6. Bicarbonato de potássio (4,45 g, 44,1 mmoles) foi adicionado à solução e a suspensão resultante foi aquecida até ~60°C. Peróxido de hidrogênio (30 % em peso em água, 7,49 g, 73 mmoles) foi adicionado, e em seguida a mistura da reação foi aquecida a 65°C durante 11 horas. A mistura resultante foi resfriada até 0°C e bissulfito de sódio (4,42 g) foi adicionado. MeOH foi removido da mistura da reação. A mistura resultante foi diluída com água (50 mL) e acidificada com HCI para pH ~0,5. A mistura foi lavada com éter metila terc-butílico (100 mL) e neu-tralizada com NaOH (10 N) para pH ~6,7. A solução resultante foi resfriada até a temperatura ambiente e agitada durante 6 horas para cristalizar o produto. O sólido cristalino branco foi coletado por filtração para proporcionar 2,05 g do composto do título.

CONVERSÃO ALTERNATIVA DE 79 PARA 21 COM SAL DE METANOSSULFÔNICO

[190] Uma solução de 79 (30 g, 61,77 mmol) em cloreto de metileno (90 mL) foi resfriada e tratada com ácido metanossulfônico (90 mL). A solução escura resultante foi agitada a 18-25°C até a reação ser considerada completa por uma análise por HPLC. A mistura da reação foi em seguida resfriada bruscamente em uma mistura de KOH aquoso a 45% (155 mL) e MeOH (1,8 L) em 10 a 15°C. O sal de meta- nossulfonato de potássio resultante que se formou foi removido por filtração. O filtrado foi concentrado, o pH ajustado para 7,5 a 8,8 com ácido acético glacial (17 mL) e em seguida tratado com KHCO3 aquoso (18,6 g em 82 mL de água, 3 equiv), KF aquoso (9,1 g em 25 mL de água, 2,5 equiv), e peróxido de hidrogênio aquoso a 30% (19,8 mL, 3,1 equiv). A mistura da reação foi em seguida mantida em 60 a 70°C até a formação de 21 estar completa determinada por análise por HPLC.

CONVERSÃO ALTERNATIVA DE 79 PARA 21 ATRAVÉS DOS COMPOSTOS 110 E 114 PREPARAÇÃO DE dS-da.3a.4β)]-2-Amino-1,9-diidro-9-[4- (dimetilhvdroxylsilila)-2-metileno-3-[(fenilmetoximetila]ciclopentila]-6H- purin-6-ona (110)

[191] Uma solução aquosa de KOH (45% em peso, 5,1 mL) foi carregada para uma solução do composto 79 (4,85 g, 10 mmol) em NMP (49 mL). A mistura foi aquecida a 50°C durante 12 horas. A reação foi resfriada até a temperatura ambiente. Água (75 mL) foi carregada ao mesmo tempo que mantendo a temperatura da reação abaixo de 35°C. A mistura da reação foi resfriada até 5 a 10°C, neutralizada com HCI aquoso (6 N, ~ 10 mL) para pH~7, e em seguida agitada a 0 a 5°C durante 0,5 hora. O sólido foi coletado por filtração, e a torta úmida foi lavada com água (3 x 50 mL). O sólido foi seco sob vácuo a (50°C) durante 24 horas para proporcionar o composto do título 110 (3,66 g em 87% de rendimento).

PREPARAÇÃO DE dS-da, 3a, 4β)l-2-Amino-1,9-diidro-9-[4-hidróxi-2- metileno-3-[(fenilmetoximetila]ciclopentilal-6H-purin-6-ona (114)

[192] Uma solução de KF (0,14 g, 0,23 mmol) em MeOH (1,4 mL) foi adicionado à suspensão do composto 110 (1,0 g, 2,3 mmol) em MeOH (8,4 mL) em temperatura ambiente. Bicarbonato de potássio (0,47 g, 2,3 mmol) foi carregado à suspensão resultante. A mistura foi agitada a 45°C durante 0,5 hora para formar uma solução transparente e peróxido de hidrogênio aquoso (30% em peso, 1,6 mL) foi adicionado. A reação foi aquecida a 45°C durante 3 horas, e em seguida resfriada até 0 a 5°C. Uma solução aquosa de bissulfito de sódio (10% em peso, 5,0 mL) foi adicionada em porções em 0,5 hora. A mistura foi lentamente acidificada com HCI aquoso (6 N, ~ 8 mL) para pH=0,45. O sólido resultante foi filtrado e o filtrado foi neutralizado com NaOH aquoso (4 N, ~ 10 mL) para pH~8. A mistura foi agitada a 0 - 5°C du-rante 1 hora. O sólido foi coletado por filtração e seco sob vácuo a 40°C durante 24 horas para proporcionar o composto do título 114 (0,66 g em 77% de rendimento).

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)1-2-Amino-1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3- (hidroximetila)-2-metilenociclopentila1-6H-purin-6-ona (21)

[193] A uma solução de 114 (2,0 g, 5,44 mmoles) em cloreto de metileno (20 mL), resfriada até -20°C, foi adicionada a solução de cloreto de metileno de tricloreto de boro (1M, solução, 22 mL, 22 mmoles, 4,04 equivalentes) durante um período de ~30 minutos. Durante a adição, a temperatura foi mantida em -19° a -23°C. Depois de agitar por um adicional de 3 horas a -20°C, metanol (14 mL) foi adicionado para resfriar bruscamente a reação. A mistura da reação foi agitada até HPLC não apresentar éster de borano (~4 horas). MTBE (30 mL) foi adicionado, e a mistura da reação foi agitada de um dia para o outro em temperatura ambiente. O sólido obtido foi filtrado, lavado com MTBE (~5 mL), e seco sob vácuo em temperatura ambiente para obter 1,66 g do sal de cloridrato de 21. O sal de HCI (0,72 g, 2,29 mmoles) foi absorvido em ~13 mL de água e aquecido até ~40°C. O pH foi ajustado para ~7 com NaOH a 2 N. A pasta fluida delgada obtida foi aque-cida até 80 - 85°C e tratada com carbono ativado (0,12 g). Depois de 30 minutos em refluxo, a mistura a quente foi filtrada sobre um pequeno almofada Hyflo. O filtrado foi resfriado até a temperatura ambiente durante 3 horas e adicionalmente agitado a 0°C durante 2 horas. Os cristais obtidos foram filtrados, lavados com água, e secos sob vácuo para obter o composto de fórmula 21 (0,32g, 44% de rendimento total de 114)

ISOLAMENTO E PURIFICAÇÃO DO COMPOSTO 21

[194] Isolamento de 21 foi realizado por meio de um procedimen- to de adsorção de resina no qual a mistura da oxidação foi diluída cerca de 20 vezes com água (cerca de 1 mg de 21 por mL de fluxo diluído) e carregada sobre resina SP207 (1 kg). O leito de resina foi primeiro lavado com água para remover o sal, e o composto 21 foi elutriado da resina usando solução a 50:50 de MeOH:água (cerca de 20 L). O eluente, depois de um filtro de polimento, foi concentrado por destilação sob vácuo em uma temperatura menor ou igual a 55°C para um volume em batelada de cerca de 25 mL/g de 21. A pasta fluida resultante foi aquecida até 90°C para formar uma solução transparente. A solução transparente foi em seguida lentamente trazida para a temperatura ambiente para cristalizar 21. Depois de agitar a pasta fluida durante várias horas em temperatura ambiente, 21 foi filtrado e seco sob vácuo em temperatura ambiente até o teor de umidade do produto estar entre 6 e 7% em peso. Este procedimento deu 21 em um rendimento médio de 75% do composto 79 e uma % de área de HPLC de mais de 99,9.

EXEMPLO 3 PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)]-2-Amino- 1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DE éster metílico de ácido [3aS-(3aα, 5α, 6β, 6aa)l-5- (Dimetilfenilsilila)hexahidro-6a-(hidroximetila)-2-oxo-2H- ciclopentoxazol-6-carboxílico (67)

[195] A um frasco de 500 mL de fundo redondo equipado com um agitador magnético e um termômetro foi carregado carbamato de metila (4,5 g, 60 mmol) e MeOH (40 mL) sob uma atmosfera de argônio. A solução resultante foi resfriada até ~0°C em um banho de gelo. Terc- butila hipoclorito (6,52 g, 60 mmol) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada a 0°C durante 15 minutos. Uma solução metanólica de hidróxido de sódio (2,44 g de hidróxido de sódio (60 mmol em 40 mL MeOH) foi adicionada a esta solução e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura foi diretamente concentrada a vácuo para dar um reagente pulverizado branco. A este reagente, isopropanol (53 mL), e água (26 mL) foram adicionados. A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente até a mistura se tornar uma solução transparente. Esta mistura foi resfriada até ~0°C e em seguida 66 (5,8 g, 20 mmol, obtido conforme descrito no Exemplo 1) foi adicionado. A mistura foi agitada durante 10 minutos e em seguida foi adicionado osmato hidrato de potássio (280 mg). A mistura foi agitada a 0°C durante 1,5 horas seguido por 12 horas em temperatura ambiente para completar a reação. A reação foi resfriada bruscamente por adição de tiossulfato de sódio (4 g) e agitada durante 1 hora em temperatura ambiente. A mistura foi filtrada através de um leito de terra diatomácea (Celite®), e o filtrado foi diluído com água (100 mL) e extraído com acetato de etila (3 x 50 mL). A camada orgânica foi lavada com água (3 x 50 mL), salmoura (50 mL) e seca sobre sulfato de magnésio. A camada orgânica foi concentrada a vácuo para proporcionar o composto do título (5,9 g em 85% de rendimento).

PREPARAÇÃO DE éster metílico de ácido [3aS-(3aα, 5α, 6B, 6aa)l-5- (Dimetilfenilsilila)hexahidro-6a-(iodometila)-2-oxo-2H-ciclopentoxazol- 6-carboxílico (68)

[196] A um frasco de 500 mL de fundo redondo e três gargalos equipado com um agitador magnético e um termômetro foi carregado 67 (33,75 g, 96,7 mmol), DCM (100 mL) seguido por piridina (9,4 mL, 116 mmol) sob uma atmosfera de argônio. A mistura resultante foi resfriada até 0°C. A esta mistura em agitação, anidrido trifluorometanos- sulfônico (19,5 mL, 116 mmol) foi lentamente adicionado durante um período de 10 minutos mantendo a temperatura abaixo de 5°C. A mistura foi agitada na mesma temperatura durante 2 horas para completar a reação. A mistura foi lavada com HCI (1 N, 2 x 50 mL), água (3 x 50 mL), seca sobre sulfato de magnésio, e concentrada a vácuo para proporcionar o triflato que foi usado sem purificação adicional na etapa seguinte.

[197] O triflato acima foi posto em um frasco de fundo redondo de 500 mL o qual foi carregado com acetona (100 mL) e em seguida resfriado até 0°C. A esta solução, iodeto de litio (25 g, 193 mmol) foi adicionado em porções durante um período de 30 minutos. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 3 horas para completar a reação. A mistura foi diretamente concentrada a vácuo para remover a acetona. O resíduo resultante foi dissolvido em DCM (100 mL). A solução foi lavada com solução aquosa de tiossulfato de sódio (2 x 100 mL), água (2x 100 mL), e seca sobre sulfato de magnésio. A camada orgânica foi concentrada a vácuo para dar o composto do título (51,5 g) como um óleo.

PREPARAÇÃO DE cloridrato de [1R-(1a,3a.,5β)l-3-Amino-3- (dimetilfenilsilila)-2-metileno-1-ciclopentanometanol (2:1) (69)

[198] A um frasco de fundo redondo foi misturado 68 bruto (10,9 g, 20,5 mmol) sólido de zinco (2,68 g, 2 eq, 41 mmol) em ácido acético (20 mL). A mistura da reação foi aquecida a 100°C durante 1 h e em seguida resfriada até a temperatura ambiente. A mistura bruta foi misturada com éter ferc-butila metílico (30 mL) e filtrada e a torta foi enxaguada com éter ferc-butila metílico (70 mL) em temperatura ambiente. O filtrado combinado foi neutralizado para pH 7 com solução de NaOH (1 N). A camada orgânica foi lavada com salmoura (30 mL), seca (MgSO4) e concentrado a vácuo para proporcionar um óleo bruto amarelo claro. Este óleo bruto foi usado para a próxima etapa sem purificação adicional. O óleo bruto foi dissolvido em tolueno (20 mL) e resfriado até -65°C. Sódio Bis(2-metoxietóxi)alumínio hidreto (Red-AI®, 65 % em peso em tolueno, d=1,036, 12,3 mL) foi adicionado na solução durante ~20 min. A mistura da reação foi deixada para aquecer até -20°C e foi agitada a -20°C durante 1 h. A reação foi resfriada bruscamente com NaOH (1 N, 20 mL) a 0°C e aquecida até a temperatura ambiente. Depois de agitar em temperatura ambiente durante 1,5 h, a mistura foi filtrada através de uma almofada de terra diatomácea (Celi- te®) e a torta foi enxaguada com éter ferc-butila metílico (100 mL). O filtrado foi seco (MgSÜ4) e uma solução de HCI em éter (1 N, 22 mL) foi adicionada em temperatura ambiente para precipitação do sal de HCI. Depois de agitar durante 1 h em temperatura ambiente, o sal de HCI foi coletado por filtração e seco sob vácuo para proporcionar 69 (sal de HCI, 4,4 g, 72% durante 3 etapas) como um sólido de cor bege.

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)]-2-Amino-6-[[4-(dimetilfenilsilila)-3- (hidroximetila)-2-metilenociclopentila1amino1-5-nitro-4(3H)-pirimidinona Í70)

[199] Um frasco de fundo redondo de 3 gargalos de 500 mL equipado com agitador, sonda de temperatura e condensador de refluxo foi carregado com a amina 69 (1,49 g, 5 mmol), 2,4-diamino-5- nitropirimidin-6-ona (1,56 g, 5,35 mmol) e n-butanol (20 mL). A pasta fluida delgada resultante foi submetida para aquecer a 40-45°C durante 15 minutos. Trietilamina (0,71 mL, 5,1 mmol) foi adicionada lentamente durante um período de 2 minutos. A mistura da reação foi agitada em cerca de 70°C durante 1 h. Os dados da HPLC mostraram que a reação foi quase completa. Neste ponto, foram dadas cinco lavagens de 25 mL de água à mistura da reação a 70°C. A última lavagem foi quase incolor. O produto bruto, 70, em n-butanol foi usado sem purificação adicional na próxima reação.

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)]-2-Amino-9-[4-(dimetilfenilsilila)-3- (hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-1,9-diidro-6H-purin-6-ona (71)

[200] Na2S2θ4 sólido (2 g, 12 mmol) foi carregado para dentro do frasco contendo 70 bruto e a pasta fluida resultante foi aquecida até ~60°C, durante 20 minutos. Ácido fórmico (9,5 mL, 250 mmol) foi adi- cionado lentamente durante o curso de 10 minutos a 65°C. A mistura resultante foi agitada durante 5 min e aquecida até ~70°C durante 1 hora. A mistura foi resfriada até 25°C e neutralizada com solução a 6 N de NaOH para realizar a pH=7,04. A camada aquosa foi separada e extraída com n-BuOH (5 mL). A camada orgânica combinada foi filtrada através de uma almofada de terra diatomácea e transferida para dentro de um frasco de reação de 3 gargalos de 50 mL equipado com agitador superior, sonda de temperatura e cabeça de destilação. A solução resultante foi destilada a vácuo para remover água e excesso de n-butanol para proporcionar o intermediário de pirimidina

[201] A pasta fluida resultante contendo o intermediário foi aquecida até 40-50°C e trietilortoformiato (8 mL, 48 mmol) foi adicionado durante 3 minutos, seguido por HCI conc. (0,2 mL) durante 1 min. A mistura da reação foi aquecida a ~85°C durante 3 h. A mistura da reação foi resfriada até a temperatura ambiente e agitada em temperatura ambiente durante 12 h. A mistura da reação foi neutralizaad para um pH de ~7,2 com solução aquosa de NaOH. O produto bruto resultante sobre uma coluna de permuta de íon para dar o produto 71 (1,25 g) em ~65% de rendimento.

[202] O composto de fórmula 70 pode ser em seguida convertido para o composto de fórmula 21 conforme descrito no Exemplo 1.

EXEMPLO 4 PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3oc, 4β)]-2-Amino- 1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DE (4S, 5R)-4-(Fenilmetóxi)-5-[(fenilmetóxi)metila]-1- ciclopenteno-1-metanol (16)

[203] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio, agitador magnético e banho refrigerante foi dissolvido éster metílico de ácido (4S, 5R)-4-(Fenilmetóxi)-5-[(fenilmetóxi)metila]-1- ciclopenteno-1-carboxilico 7 (3,62 g, 10,2 mmol) em DCM (40 mL). A solução foi resfriada até -78°C e hidreto de diisobutilalumínio (1 M em tolueno, 22,4 mL, 22,4 mmol) foi adicionado na solução durante o curso de 10 minutos. Depois de agitar a -78°C durante 1 hora a mistura da reação foi resfriada bruscamente com uma solução saturada de potássio sódio tartarato (sal de Rochelle, 50 mL) e agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A camada orgânica foi diluída com acetato de etila, separada, seca (sulfato de sódio) e concentrada a vácuo para proporcionar o álcool alílico bruto como óleo incolor (3,06 g, 90%). Depois de descansar em temperatura ambiente o composto do título cristalizadou como um sólido branco.

PREPARAÇÃO DE [1R-(1oc,2a,3β, 5a)]-3-(Fenilmetóxi)-2- í(fenilmetóxi)metila]-6-oxabiciclo[3.1 .Olhexano-1-metanol (17)

[204] A um frasco de fundo redondo seco a chama equipado com uma entrada de argônio, agitador magnético e banho refrigerante foi adicionado (-)-(D)-dietiltartrato (188 mg, 0,91 mmol) e peneiras moleculares 4A (secas a chama, 1,45 g) em DCM (10 mL). A suspensão da reação foi resfriada até -25°C e isopropóxido de titânio (IV) (0,20 mL, 0,69 mmol) foi adicionado na suspensão. A mistura da reação foi agitada a -25°C durante 1 hora e em seguida ferc-butila hidroperóxido (3 M em octano, 1,52 mL, 4,5 mmol) foi adicionado. Depois de agitar a mistura durante cerca de 1,5 horas a -25°C, 16 (0,73 g, 2,28 mmol em 4 mL de DCM) foi adicionado na solução durante o curso de 10 minutos. A mistura da reação foi agitada a -25°C durante 3 a 4 horas e resfriada bruscamente com hidróxido de sódio (5 N, 2 mL). A mistura foi agitada durante 1 hora em temperatura ambiente e filtrada através de um leito de terra diatomácea (Celite®). O leito foi enxaguado com DCM (2x10 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (20 mL), seca (sulfato de sódio) e concentrada a vácuo para proporcionar (0,76 g, -100%) um óleo incolor. Cromatografia de coluna flash (2:1 a 1:1 de hexano/acetato de etila) deu 0,55 g do composto do título (73%) como um sólido amarelo claro (ponto de fusão 60-62°C). PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 2β, 3α, 5β)l-5-[2-Amino-6-(fenilmetoxi)-9H- purin-9-ila1-1-hidróxi-3-(fenilmetóxi)-2-(fenilmetóxi)metila1 ciclopenta- nometanol (18, X=BnO)

[205] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio, um agitador magnético e um condensador de refluxo foram carregados 2-amino-6-O-benziloxipurina (1,66 g, 6,87 mmol) com di- metilformamida (20 mL). Hidreto de lítio (32,7 mg, 4,13 mmol)) foi adicionado na suspensão, e a mistura resultante foi agitada durante 1 hora. Uma solução de 17 (2,13 g em 2 mL de dimetilformamida, 6,25 mmol) foi adicionada na solução. A solução foi aquecida até 120 a 130°C durante 1 hora. A solução resultante foi elaborada extinguindo com hidróxido de sódio (1 N, 20 mL), e extraindo com acetato de etila (2 x 150 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com solução saturada de cloreto de amónio (200 mL) e salmoura (100 mL), seca (sulfato de sódio), e concentrada a vácuo para proporcionar um sólido marrom claro. Este sólido foi dissolvido em acetato de etila/DCM e passado através de uma almofada de sílica-gel flash (eluído com acetato de etila) para proporcionar 3,1 g do composto do título (85%) como sólido amarelo claro. Recristalização (acetato de etila/hexanos) deu 2,81 g do composto do título em ~78% de rendimento como um sólido esbranquiçado.

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)l-2-Amino-1,9-diidro-9-[2-metileno- 4-(fenilmetóxi)-3-[(fenilmetóxi)metila]ciclopentilal-6H-purin-6-ona (20)

[206] Um frasco de fundo redondo de 1 L equipado com uma entrada de argônio, e um agitador magnético foi carregado com 18 (2,6 g, 4,4 mmol), trimetila ortoformiato (2,38 mL, 21,8 mmol), p- toluenossulfonato de piridínio (0,56 g, 2,22 mmol), e DCM (20 mL). A mistura da reação foi agitada durante cerca de 16 horas em tempera- tura ambiente. Depois do completamento da reação, a mistura da reação foi resfriada bruscamente com solução de bicarbonato de sódio (50 mL). A mistura resultante foi extraída com acetato de etila (2 x 50 mL) e a camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (50 mL), seca (sulfato de sódio), e concentrada a vácuo para proporcionar o intermediário de ortoformiato. O produto bruto foi dissolvido com ácido acético/anidrido acético (1,5 mL/30 mL) em um frasco de fundo redondo. A solução foi aquecido até o refluxo durante cerca de 5 horas e em seguida resfriada até a temperatura ambiente. O ácido acético/anidrido acético foi removido por destilação a vácuo para proporcionar uma mistura intermediária (2,34 g). A mistura intermediária acima (2,2 g, 3,7 mmol) foi dissolvida em acetonitrila (60 mL) e HCI a 2 N (30 mL), e em seguida aquecida até o refluxo para completar a reação. A mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e neutralizada por adição de trietilamina. A mistura foi diretamente concentrada a vácuo para remover a maior parte do acetonitrila. Etanol foi adicionado ao resíduo sólido resultante e a suspensão foi agitada durante 1 hora. O sólido foi coletado por filtração, enxaguado com etanol, e seco sob alto vácuo para proporcionar 1,57 g do composto do título em 93% de ren-dimento.

[207] A um frasco de fundo redondo equipado com agitador magnético e entrada-saída de nitrogênio foram misturados 20 (2,7 g, 5,9 mmol) com CH2CI2 (10 mL). A mistura foi resfriada até -78°C e BCh (1 M, 35,4 mL, 35,4 mmol) foi adicionado na suspensão da reação em um índice tal que a temperatura da reação não excedeu -65°C. A mistura da reação foi agitada a -78°C durante 0,5 h e em seguida foi aquecida até -20°C. Depois de agitar a -20°C durante 1 h, a mistura da reação foi resfriada até -78°C e MeOH (30 mL) foi adicionado na mistura da reação e aquecido até a temperatura ambiente. A mistura da reação foi concentrada a vácuo para remover MeOH para proporcionar um óleo amarelo claro. Este óleo foi re dissolvido em MeOH (30 mL); Carbono de descoloração (2,7 g) foi adicionado na solução e agitado em temperatura ambiente durante 0,5 h. A suspensão foi filtrada através de terra diatomácea e a torta foi enxaguada com MeOH (10 mL). O filtrado combinado foi concentrado a vácuo para proporcionar um óleo transparente. Este óleo foi dissolvido em água (20 mL) e extraído com acetato de etila (2 x 30 mL). A camada aquosa foi neutralizada por adição de NaOH para realizar um pH ~7,2. O sólido da suspensão foi coletado por filtração e recristalizado com água (30 mL) para proporcionar 1,36 g de 21.

EXEMPLO 5 PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)]-2-Amino- 1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DO COMPOSTO éster de (1a,2β, 3a)-2- [(Fenilmetóxi)metila]-4-ciclopenteno-1,3-diol diacetato (2)

[208] A um frasco de fundo redondo equipado com agitador magnético foi dissolvido 1 (2,2 g, 10 mmol) em anidrido acético (4 mL) e piridina (2,5 mL). Depois de agitar em temperatura ambiente de um dia para o outro, o excesso de anidrido acético e piridina foi removido por destilação a vácuo, o óleo bruto foi cromatografado (sílica, 2:1 de He- xano/EtOAc) para proporcionar 2,8 g (92%) de 2 como um óleo amarelo claro.

PREPARAÇÃO DE éster de (+)-(1α, 2β, 3a)-2-[(Fenilmetóxi)metila]-4- ciclopenteno-1,3-diol monoacetato (3) (sem imobilização da enzima)

[209] Hidrólise enantiosseletiva assimétrica do diacetato 2 foi realizada usando a enzima Pancreatina ou Lipase PS-30 de Pseudomonas cepacia. A mistura da reação continha 25 mM de tampão de fosfa- to de potássio (36 mL, pH 7,0), tolueno (4 mL) e o diacetato 2 (2 mg/mL) e Lipase PS-30 ou Pancreatina (50 mg/mL). A reação foi realizada a 25°C, mantendo o pH a 7,0 por adição de NaOH a 1 N conforme requerido. O progresso da reação foi monitorado por meio de cro- matografia líquida de alta pressão. A reação foi terminada quando a concentração do substrato remanescente 2 caiu abaixo de 0,05 mg/mL. A mistura da reação foi concentrada sob pressão reduzida para obter (+)-monoacetato 3. Depois de 16 h de tempo da reação, foi obtido o rendimento da reação de 80 M% e um ee de 98% usando Lipase PS-30. Foi obtido um rendimento da reação de 75% e um ee de 98,5% usando Pancreatina.

PREPARAÇÃO DE éster de (+)-(1α, 2β, 3a)-2-[(Fenilmetóxi)metila]-4- ciclopenteno-1,3-diol monoacetato (3) (usando Lipase PS-30 imobilizada)

[210] Hidrólise enantiosseletiva assimétrica do diacetato 2 foi realizada usando Lipase PS-30 imobilizada. Lipase PS-30 bruta de Pseudomonas cepacia foi imobilizada sobre polipropileno (Accurel Systems International Corp.) e foi usada enzima imobilizada. A reação continha 25 mM de tampão de fosfato de potássio (1,8 L, pH 7,0), tolueno (200 mL), diacetato 2 (52 g), e Lipase PS-30 imobilizada (180 g). Depois de 18 h de tempo da reação, a reação de 80 M% (32,5 g) e ee de 98% foram obtidos para o (+)-monoacetato 3. Ao final da reação, a enzima imobilizada foi filtrada e o sobrenadante transparente obtido foi extraído com dois volumes de acetato de etila. A fase orgânica separada foi concentrada sob pressão reduzida para obter o produto 3 desejado.

PREPARAÇÃO DE [1S-(lα, 4α, 5β)]1-4-[Nitro(fenilsulfonila)metila]-5- [(fenilmetóxi)metila]-2-ciclopenten-1 -ol (4)

[211] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio, agitador magnético, funila de adição e condensador de refluxo foi adicionado o composto 3 (0,98 g, 3,74 mmol), fenilsulfonilni- trometano (0,91 g, 4,5 mmol) e tetracis[trifenilfosfina]-paládio (43 mg, 0,037 mmol) em THF (7 mL) a 0°C. A mistura da reação foi degaseifi- cada usando argônio durante uns poucos minutos. Trietilamina (1,1 g, 1,6 mL, 11,4 mmol) foi adicionada na mistura da reação durante o curso de 2 minutos a 0°C. A mistura da reação foi agitada a 0°C durante 1 hora e foi deixada para aquecer até a temperatura ambiente. A mistura da reação foi em seguida agitada em temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura da reação foi resfriada bruscamente com HCI a 1 N a 0°C (15 mL) e extraída com hexano/acetato de etila (1:1; 2 x 20 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (30 mL), seca (sulfato de sódio) e concentrada a vácuo para proporcionar um resíduo oleoso de cor vermelha (2,2 g). Foi realizada filtração por almofada de sílica para remover os materiais da linha basal para dar o composto do título (1,36 g).

PREPARAÇÃO DE [1R-(1a,4σ,5β)l-[[Nitro[4-(fenilmetoxi)-5- í(fenilmetóxi)metila-2-ciclopenten-1-ila1metila]sulfonila1benzeno (5)

[212] A um frasco de fundo redondo com uma entrada de argônio, um agitador magnético e um banho refrigerante foi carregado 4 (3,0 g, 7,43 mmol) em THF a 0°C. Hidreto de sódio (suspensão a 60% em óleo mineral, 0,68 g, 17 mmol) foi adicionado na mistura da reação em porções durante o curso de 10 minutos com agitação. A suspensão resultante foi agitada a 0o durante 30 minutos, aquecida até a temperatura ambiente, e agitada durante 1 hora em temperatura ambiente. Brometo de benzila (1,52 g, 1,06 mL, 8,91 mmol) foi adicionado e a mistura da reação foi aquecida a 45°C durante 3 horas para completar a reação. A reação foi resfriada bruscamente com HCI frio (1 N, 30 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 30 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (30 mL), seca (sulfato de sódio), e concentrada a vácuo para proporcionar o composto do título como um óleo marrom claro (3,98 g). O produto bruto foi usado sem purificação adicional na próxima etapa.

PREPARAÇÃO DE éster metílico de ácido (4S, 5R)-4-(Fenilmetóxi)-5- [(fenilmetóxi)metilal-l -ciclopenteno-1 -carboxilico (7)

[213] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio, um agitador magnético, um funila de adição e um condensador de refluxo foi adicionado 5 (2,7 g, 5,47 mmol) e carbonato de sódio (2,58 g, 46 mmol) em uma mistura de DCM/MeOH (3:1, 10 mL) em temperatura ambiente. A mistura da reação foi aquecida até o refluxo e uma solução de peroximonossulfato de potássio:sal de tetrabu- tila amónio (2,3% de oxigênio ativo, 11 g em 15 mL de DCM, 7,9 mmol) em DCM foi adicionada na suspensão da reação gota a gota durante um período de 10 horas. Depois de refluxo durante cerca de 14 horas, a mistura da reação foi resfriada até a temperatura ambiente e diluída com MeOH (50 mL). A mistura resultante foi resfriada até - 40°C. Ácido sulfúrico concentrado foi adicionado para neutralizar o meio da reação para pH ácido (foi usado 1,2 mL). A mistura da reação foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada em temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura da reação foi resfriada bruscamente com água/salmoura (1:1; 40 mL) e extraída com hexano/acetato de etila (2:1, 2 x 200 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio (100 mL) e salmoura (100 mL), seca (sulfato de sódio) e concentrada a vácuo para proporcionar o intermediário bruto (1,88 g, >100% de material restante) o qual foi usado na próxima etapa sem qualquer purificação adicional.

[214] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio e um agitador magnético foi dissolvido o intermediário obtido acima (2,95 g, 8,1 mmol) em MeOH seco (10 mL). Uma solução de metóxido de sódio em solução de MeOH (25% em peso, 0,34 g, 1,6 mmol) foi adicionada em temperatura ambiente. A mistura da reação foi agitada em temperatura ambiente durante 2 horas. Depois do com- pletamento, a mistura da reação foi neutralizada com HCI (10 mL) a 0°C, e extraída com acetato de etila/hexano (1:1; 2 x 100 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura, seca (sulfato de sódio), e concentrada a vácuo para proporcionar um sólido. Recristali- zação com hexano/éter ferc-butila metílico (10:1) a -20 a -30°C deu 1,83 g do composto do título em 64% de rendimento como um sólido amarelo claro.

EXEMPLO 6 PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE HS-(1α, 3α, 4β)]-2-Amino- 1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DE éster de (-)-dα, 2β, 3a)-2-[(Fenilmetóxi) metilal-4- ciclopenteno-1,3-diol monoacetato (13) (sem imobilização da enzima)

[215] Acetilação enantiosseletiva do diol 1 foi realizada usando Lipase PS-30 imobilizada de Pseudomonas cepacia. A mistura da reação continha heptano/éter t-butila metílico (10/1 v/v, 1 L), diol 1 (5 g), Lipase PS-30 imobilizada (25 g), e isopropenila acetato (2 eq) como o agente de acilação. A reação foi realizada a 33°C. O progresso da reação foi monitorado por meio de cromatografia líquida de alta pressão. A reação foi terminada quando a concentração do substrato remanescente 1 caiu abaixo de 0,1 mg/mL. Depois de 4 h, foi obtido um rendimento da reação de 80% e um ee de 98% para o (-)-monoacetato 13.

PREPARAÇÃO DE ácido [1R-(1α, 4α, 5B)]-Carbõnico, éster metila 4- (acetóxi)-5-[(fenilmetóxi)metila]-2-ciclopenten-1-ílico (10)

[216] A um frasco de fundo redondo equipado com agitador magnético e entrada-saída de N2 foram misturados 13 (2,62 g, 10 mmol), piridina (1,18 g, 12 mmol) com CH2CI2 (5 mL). A mistura foi resfriada até -5°C e metila cloroformato (1,134 g, 12 mmol) foi adicionado na suspensão da reação em umn índice tal que a temperatura da reação não excedeu 0°C. A mistura da reação foi agitada a 0°C durante 1 h e aquecida até a temperatura ambiente durante 1 h. A mistura resultante foi resfriada bruscamente com solução saturada de cloreto de amónio a 0°C. A solução resfriada bruscamente foi extraída com 1:2 de EtO- Ac/hexano (30 mL x 2). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (30 mL); seca (Na2SO4); concentrada a vácuo, e seca sob alto vácuo para proporcionar 14 bruto (3,32 g, 100%) como óleo marrom claro. Este foi usado na próxima reação sem purificação adicional.

PREPARAÇÃO DE [1R-(1a, 4a, 53)]-[[Nitro[4-(acetóxi)-5-[(fenilmetóxi)metilal-2-ciclopenten-1-ila]metilalsulfonilalbenzeno (15)

[217] A um frasco de fundo redondo equipado com agitador magnético foi dissolvido fenilsufonilnitrometano (2,41 g, 12 mmol) em THF seco (25 mL). A 0°C, hidreto de sódio (0,46 g, dispersão de óleo mineral a 60%, 12 mmol) foi adicionado durante 5 min. Depois de aquecer até a temperatura ambiente e agitar em temperatura ambiente durante 1 h, 14 bruto (3,3 g, 10 mmol em 5 mL de THF) foi adicionado durante ~10 min. A reação foi agitada em temperatura ambiente durante 30 min e em 50°C durante 1 h. A mistura da reação foi elaborada por meio da adição de solução saturada de cloreto de amónio (30 mL) seguida por extração com acetato de etila (2 x 40 mL). A fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (30 mL); seca (Na2SO4) e concentrada a vácuo para proporcionar 15 como um óleo marrom bruto (5,12 g, >100%) o qual foi usado na próxima etapa sem purificação.

PREPARAÇÃO DE [1R-(1a, 4a, 53)]-[[Nitro[4-(hidróxi)-5- í(fenilmetóxi)metilal-2-ciclopenten-1-ilalmetilalsulfonilalbenzeno (4)

[218] A um frasco de fundo redondo equipado com agitador magnético foi dissolvido 15 bruto (5,12 g, 10 mmol) em 25 mL de MeOH. Carbonato de potássio (140 mg, 1 mmol) foi adicionado no frasco em temperatura ambiente e a mistura resultante foi agitada de um dia para o outro. A mistura da reação foi concentrada a vácuo para remover MeOH. O concentrado foi extraído com acetato de etila (2 x 30 mL) e solução saturada de cloreto de amónio (30 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (20 mL); seca (Na2SO4) e concentrada a vácuo para proporcionar um óleo marrom claro. Cromatografia de coluna flash (1:2 a 1:1 de EtOAc/hexano) proporciona 2,92 g de 4 (73%) como um óleo incolor.

EXEMPLO 7 PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)]-2-Amino- 1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DE [1R-(1a, 4a, 5B)]-4-(Fenilmetóxi)-5- [(fenilmetóxi)metila]-2-ciclopenten-1-ol (9) (R'=Bn)

[219] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio, um agitador magnético, um condensador refrigerante, e um banho de óleo foi carregado [1S-(1α, 2α, 3β, 5a)]1-3-(Fenilmetóxi)- 2-[(fenilmetóxi)metila]-6-oxabiciclo[3.1.0]hexano 8 (20,19 g, 65 mmol, conforme preparado na Patente dos Estados Unidos No. 5.206.244, incorporada a este relatório por meio de referência) em THF (150 mL). Hexametildissilazida de litio (1 M em hexano, 190 mL, 190 mmol) foi adicionada na solução em temperatura ambiente. A mistura da reação foi aquecida a 60°C durante 1,5 horas. A solução resultante foi resfriada até a temperatura ambiente e diluída com MeOH (200 mL). Depois de agitar durante 20 minutos em temperatura ambiente, a mistura da reação foi resfriada bruscamente com HCI (1 N, 300 mL), e extraída com acetato de etila (3 x 300 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (2 x 200 mL), seca (sulfato de sódio), e concentrada a vácuo para proporcionar 22,7 g do composto do título (>100% do material restante) o qual foi usado na próxima etapa sem qualquer purificação adicional.

PREPARAÇÃO DE ácido [1R-(1a, 4a, 5B)]-Carbônico, éster metila 4- (fenilmetóxi)-5-[(fenilmetóxi)metila]-2-ciclopenten-1 -ílico (10)

[220] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio, um agitador magnético e um banho refrigerante foi carregado 9 bruto (12,3 g, 39,6 mmol) e piridina (9,7 mL, 120 mmol) em DCM (100 mL). A solução foi resfriada até -20 a -15°C e metila cloroformato (4,2 g, 3,41 mL, 44 mmol) foi adicionado na solução durante o curso de 20 minutos. A mistura da reação foi agitada a -15°C durante 0,5 hora e em seguida lentamente aquecida até a temperatura ambiente para completar a reação. A mistura resultante foi resfriada bruscamente com HCI (2 N, 120 mL) a 0°C e extraída com acetato de etila (2 x 300 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (200 mL), seca (sulfato de sódio), concentrada a vácuo, e seca sob alto vácuo para proporcionar o composto do título bruto como um óleo marrom o qual foi usado na próxima etapa sem qualquer purificação adicional.

PREPARAÇÃO DE [1R-(1a,4σ,5β)]-[[Nitro[4-(fenilmetoxi)-5- [(fenilmetóxi)metilal-2-ciclopenten-1-ila]metilalsulfonilalbenzeno (5)

[221] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio, um agitador magnético e um banho refrigerante foi dissolvido 10 bruto (9,8 g, 26,5 mmol), fenilsulfonilnitrometano (5,4 g, 26,8 mmol) e tetrakis(trifenilfosfina)paládio (0,6 g, 0,52 mmol) em THF (80 mL) a 0°C. A mistura da reação foi degaseificada usando argônio durante uns poucos minutos. Trietilamina (8,4 g, 11,1 mL, 79,5 mmol) foi adicionada à mistura da reação durante o curso de 10 minutos a 0°C. A mistura da reação foi agitada a 0°C durante 1 hora e foi deixada pa-ra aquecer até temperatura ambiente. A mistura da reação foi agitada em temperatura ambiente durante 3 horas. A mistura da reação foi em seguida resfriada bruscamente com HCI a 2 N a 0°C (100 mL) e extraída com hexano/acetato de etila (1:1; 2 x 30 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (100 mL), seca (sulfato de sódio), e concentrada a vácuo para proporcionar um resíduo oleoso de cor vermelha. Foi conduzida filtração por almofada de sílica usando acetato de etila para remover os materiais da linha basal e dar o composto do título (14,2 g crude, >100%) como um óleo marrom claro o qual foi usado na próxima etapa sem qualquer purificação adicional.

[222] A conversão do composto de fórmula 5 para o éster de fórmula 7 é descrita no Exemplo 5.

EXEMPLO 8 PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3oc, 4β)]-2-Amino- 1.9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DE (4S, 5R)-4-(Fenilmetóxi)-5-[(fenilmetóxi) metilal-2- ciclopenten-1-ona (80)

[223] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio, agitador magnético foram misturados com peneiras moleculares (4 g); dicromato de piridínio (4,16 g, 20 mmol) e HOAc (0,60 g, 10 mmol) com CH2CI2 (25 mL) a 0°C e agitados durante 1 h. Álcool alílico 9 (3,11 g, 10 mmol, preparado de acordo com 0 Exemplo 7) em CH2CI2 (5 mL) foi adicionado no frasco durante ~5 min. Depois de agitar durante 2,5 h a 0°C, a mistura da reação foi filtrada através de uma almofada de sílica-gel e a torta foi enxaguada com 1:3 de CFLCh/EtOAc. O resultante filtrado foi extraído com HCI (1 N, 40 mL)/ EtOAc (50 mL). A camada orgânica foi seca (Na2SO4) e concentrada a vácuo para proporcionar um óleo marrom. Este óleo marrom foi cromatografado com 1:2 de EtOAc/Hexane para proporcionar 80 (2,85 g, 92%) de óleo amarelo claro

PREPARAÇÃO DE éster 4-(fenilmetóxi)-5-[(fenilmetóxi)metila]-1- ciclopenten-1-ílico de ácido (4S, 5R)-Trifluorometanossulfõnico (81)

[224] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio, agitador magnético foram misturados com 80 (1,7 g, 5,5 mmol) com THF (15 mL) e resfriados até -78°C. Tri-sec-butilboroidreto de litio (L-Selectride®) (1 M em THF, 5,5 mL, 5,5 mmol) foi adicionado durante ~20 min. a -78°C. A mistura da reação foi agitada a -78°C durante 1,5 h e N-feniltrifluorometanossulfonimida (1,98 g, 5,5 mmol) foi adicionada a -78°C. Depois de agitar a -78°C durante 1 h, a mistura da reação foi deixada para aquecer lentamente até a temperatura ambiente e foi agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura resultante foi elaborada com solução saturada de NH4CI (30 mL) e extraída com EtOAc (52 mL). A emulsão foi filtrada através de uma almofada de terra diatomácea e lavada com EtOAc (20 mL) a camada orgânica combinada foi seca (Na2SO4) e concentrada a vácuo para proporcionar um óleo marrom (3,2 g, 100%). Este óleo marrom foi usado na próxima reação sem purificação adicional.

PREPARAÇÃO DE éster metílico de ácido (4S, 5R)-4-(Fenilmetóxi)-5- [(fenilmetóxi)metilal-l-ciclopenteno-1 -carboxilico (7)

[225] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio, agitador magnético foram misturados 81 bruto (3,2 g, 5,5 mmol) DMF (25 mL); MeOH (10 mL) e trietilamina (1,54 mL, 11 mmol). Pd(Ph3)4 (635 mg, 0,55 mmol) foi adicionado na solução e a mistura resultante foi degaseificada 3 vezes com gás CO. A reação foi agitada a 1 atmosfera de gás CO em temperatura ambiente durante 2 h. TLC não mostrou ausência de material de partida. A reação foi elaborada com NaOH (0,5 N, 100 mL) em temperatura ambiente e extraída com EtOAc (2 x 50 mL). A camada de EtOAc combinada foi lavada com salmoura (50 mL); seca (Na2SO4) e concentrada a vácuo para proporcionar um óleo amarelo claro. Cromatografia de coluna flash (1:2 de hexano/EtOAc) deu 7 (1,36 g, 70% durante 4 etapas).

EXEMPLO 9 PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)]-2-Amino- 1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DE éster de [1R-(1α,4a.5β)]-4-[[(1,1- Dimetiletila)dimetilsililalóxi]-5-[(fenilmetóxi)metilal-2-ciclopenten-1-ol acetato (22)

[226] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de nitrogênio foi dissolvido o composto 3 (1,85 g, 7,05 mmol) em CH2CI2 (10 mL), e a solução resultante foi resfriada até 0°C. À mistura da reação foi adicionado trietilamina (1,43 g, 2 mL, 14,1 mmol), 4-N,N- dimetilaminopiridina (DMAP, ~100 mg) e ferc-butildimetila clorosilano (1,17 g, 7,75 mmol) a 0°C. A mistura resultante foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada de um dia para 0 outro. A mistura resultante foi elaborada por adição de solução de NaOH (0,5 N, 20 mL) a 10°C e extraída com uma solução de acetato de etila/hexanos (1:2 v/v, 2 x 30 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (30 mL), seca (Na2SO4), e concentrada a vácuo para 0 composto 22 como um óleo leve bruto.

PREPARAÇÃO DE [1R-(1α, 4α, 5β)l-4-[[(1,1-Dimetiletila) dimetilsili- la]óxi]-5-[(fenilmetóxi)metilal-2-ciclopenten-1 -ol (9)

[227] O composto 22 obtido acima foi dissolvido em MeOH (30 mL), e carbonato de potássio (150 mg) foi adicionado em temperatura ambiente. Depois de agitar em temperatura ambiente durante 5 h, 0 MeOH foi removido concentrando a mistura da reação a vácuo. A mistura resultante foi extraída com acetato de etila/hexanos (1:2 v/v, 2 x 30 mL) e solução saturada de NH4CI (20 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (30 mL), seca (Na2SO4), e concentrada a vácuo para proporcionar um óleo amarelo claro. O óleo foi adicionalmente purificado por meio de cromatografia de coluna flash (hexanos/acetato de etila 8:1 a 3:1) para proporcionar 0 composto 9 (2,28 g, 97% total do composto 3).

PREPARAÇÃO DE (4S, 5R)-4-[[(1,1-Dimetiletila)dimetilsilila]óxi]-5- [(fenilmetóxi)metila]-2-ciclopenten-1 -ona (80)

[228] A um frasco de 250 mL de três gargalos, seco a forno e equipado com um agitador mecânico foi carregado com dicromato de piridínio (20,24 g, 53,80 mmol), peneiras moleculares (secas em forno) e DCM (40 mL). A pasta fluida resultante foi resfriada até 0°C e a esta pasta fluida, foi carregado ácido acético (o qual tinha sido seco sobre peneiras moleculares, 1,61 g, 26,90 mmol). A mistura resultante foi agitada durante 30 minutos a 0°C. 9 (10 g, 29,89 mmol) em DCM (10 mL) foi adicionado à mistura da reação durante um período de 10 minutos. A mistura da reação de cor avermelhada resultante foi agitada durante 2 horas a 0°C. Depois da reação ser completada, acetato de etila (100 mL), acetonitrila (5 mL), e terra diatomácea (Celite®, 5 g) foram adicionados seqüencialmente, e a mistura resultante foi agitada durante 10 minutos. A pasta fluida foi filtrada sobre um leito de terra diatomácea (Celite®) para dar um filtrado de cor escura. O filtrado foi lavado com 5% de NaHSOs aquoso (2 x 250 mL) seguido por água (100 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio e o solvente foi concentrado a vácuo para dar 9,5 g do composto do título como um óleo marrom escuro e transparente.

PREPARAÇÃO DE éster 4-[[(1,1-dimetiletila)dimetilsilila]óxi]-5- [(fenilmetóxi)metila]-1-ciclopenten-1-ílico de ácido (4S, 5R)-Trifluoro- metanossulfônico (81)

[229] Um frasco de fundo redondo de 250 mL de 3 gargalos seco a forno, equipado com um agitador mecânico e uma entrada de argônio, foi carregado com 80 (9,5 g, 29,89 mmol) e THF (10 mL). A mistura resultante foi resfriada até -78°C. Tri-sec-butilboroidreto de lítio (L- Selectride®) (1 M, 6,25g, 32,88mmol) em THF (20 mL) foi adicionado durante um período de 20 minutos. A esta mistura da reação, N- feniltriflimida (10,46 g, 29,29 mmol) em THF (20 mL) foi adicionada durante um período de 5 minutos, mantendo a temperatura da reação abaixo de -78°C. A mistura da reação foi agitada de um dia para o outro ao mesmo tempo que deixando aquecer até a temperatura ambiente. Éter ferc-butila metílico (100 mL) foi adicionado à mistura da reação e a camada orgânica resultante foi lavada com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (2 x 75 mL) seguida por salmoura (5 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio e concentrada a vácuo para dar o composto do título (27 g) como um óleo amarelo.

PREPARAÇÃO DE éster metílico de ácido (4S, 5R)-4-[[(1,1- Dimetiletila)dimetilsililalóxi]-5-[(fenilmetóxi)metilal-1-ciclopenteno-1- carboxílico (7)

[230] Um frasco de fundo redondo de 250 mL e 3 gargalos equipado com um agitador mecânico foi carregado com 81 (27,0 g, 29,89 mmol), dimetilformamida (20 mL), MeOH (20 mL) e trietilamina (20,74 mL, 149,45 mmol). A mistura da reação foi lavada abundantemente três vezes com jato de argônio. A esta mistura foi adicionada tetra- kis(trifenilfosfina) (1,762 g, 1,49 mmol). A mistura da reação foi lavada abundantemente três vezes com jato de monóxido de carbono. A mistura da reação foi agitada em temperatura ambiente durante 18 horas sob uma atmosfera de monóxido de carbono. A mistura da reação foi extraída com éter ferc-butila metílico (200 mL) e a mistura avermelhada foi filtrada sobre um leito de terra diatomácea (Celite®). O filtrado foi concentrado a vácuo para dar 30 g de um óleo de cor enegrecida o qual na purificação por cromatografia de coluna deu o composto do título como um óleo (4,5 g, 40% de rendimento total de 23).

EXEMPLO 10 PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE [1S-(1a, 3α, 4β)]-2-Amino- 1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DO COMPOSTO (4S, 5R)-4-[[(1,1-Dimetiletila) dimetil- silila]óxil-5-[(fenilmetóxi)metilal-1 -ciclopenteno-1 -metanol (16)

[231] Um frasco de fundo redondo de 500 mL e 3 gargalos, equipado com uma entrada de argônio, uma sonda de temperatura, e um agitador mecânico, foi carregado com éster metílico de ácido (4S, R)- 4-[[(1,1 -Dimetiletila)dimetilsilila]óxi]-5-[(fenilmetóxi)metila]-1 - ciclopenteno-1-carboxílico (7) (10 g, 26,55 mmoles, conforme preparado no Exemplo 9) em DCM (200 mL). A solução foi resfriada até -78°C e a esta solução hidreto de diisobutilalumínio (1 M, 66,39 mL, 66,375 mmol em tolueno) foi adicionado lentamente. A mistura da reação foi agitada a -78°C durante 2 horas para completar a reação. A mistura da reação foi vertida em solução saturada de potássio sódio tartarato (400 mL). A mistura foi agitada durante 2 horas. A camada orgânica foi separada e a camada aquosa foi extraída com n-hexano (200 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com água (50 mL), seca sobre sulfato de magnésio, e concentrado a vácuo para dar o composto do título (9,3 g) como um óleo amarelado.

PREPARAÇÃO DE [1R-(1α, 2α, 3β, 5a)]-3-[[(1,1-Dimetiletila) dimetilsi- lila]óxil-2-[(fenilmetóxi)metilal-6-oxabiciclo[3.1 .Olhexano-1 -metanol (17)

[232] Um frasco de fundo redondo de 250 mL e três gargalos seco em forno foi equipado com uma barra de agitação magnética, entrada de argônio, e sonda de temperatura carregado com peneiras moleculares pulverizadas secas a forno de 4A° (9,0 g). DCM (30 mL) foi adicionado ao frasco e a suspensão resultante foi agitada temperatura ambiente durante 5 minutos. Dietila D-tartarato (2,13 g, 10,32 mmol) em DCM (18 mL) foi adicionado em temperatura ambiente e a mistura foi resfriada até -30°C. Mantendo a temperature em ~-30°C, foi adicionado titânio (IV) isopropóxido (2,665 mL, 9,03 mmol). A mistura da reação foi agitada a -30°C durante 30 minutos seguidos por 15 minutos a -15°C. A mistura foi resfriada até -30°C. A esta mistura, foi adicionada uma solução do composto 16 (4,5 g, 12,9 mmol) em DCM (18 mL). A mistura foi agitada durante 30 minutos a -30°C seguidos por adição de uma solução de terc-butila hidroperóxido (5,0-6,0 M; 9,40 mL, 5,176 mmol). A mistura da reação foi agitada entre -30°C a -20°C durante 3 horas para completar a reação. A reação foi resfriada bruscamente por adição de água (45 mL). A mistura da reação foi agitada com vigorosa misturação e foi deixada para aquecer até a temperatura ambiente (15 a 20°C). Quando a temperatura atingiu ~15°C, solução a 30% de hidróxido de sódio (10 mL) foi lentamente adicionada para dar uma pasta fluida branca leitosa. Esta pasta fluida foi adicionada a um frasco de 3,0 L Erlenmeyer contendo éter terc-butila metílico (1100 mL). A mistura foi agitada durante 30 minutos e em seguida filtrada sobre um leito de terra diatomácea (Celite®). A camada aquosa foi separada do filtrado e descartada. A camada orgânica foi lavada com tiossulfato de sódio aquoso a 10% (100 mL) e água (2 x 160 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com água (100 mL), salmoura (50 mL), e seca sobre sulfato de magnésio. A camada orgânica foi concentrado a vácuo para dar o composto do título em rendimento quantitativo (5,47 g) como um óleo.

PREPARAÇÃO DO COMPOSTO [1S-(1α, 2α, 4β, 5α)]-5-[2-Amino-6- (fenilmetóxi)-9H-purin-9-ila]-3-[[(1,1 -dimetiletila)dimetilsilila]óxi]-1 - hidróxi-2-[(fenilmetóxi)metila]ciclopentanometanol (18)

[233] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio, agitador magnético e condenser de refluxo foram carregados O-benzilóxi guanina (1,66 g, 6,87 mmol) com DMF (20 mL). LiH (32,7 mg, 4,13 mmol)) foi adicionado à suspensão e foi agitado durante 1 h. Uma solução de 17 (2,13 g em 2 mL DMF, 6,25 mmol) foi adicionada na solução e aquecida até 120-130°C durante 1 h. A solução resultante foi elaborada extinguindo com NaOH (1 N, 20 mL) e extraída com EtOAc (2 x 150 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com NH4CI saturado (200 mL), salmoura (100 mL), seca (Na2SO4) e concentrada a vácuo para proporcionar um sólido marrom claro. Este sólido foi dissolvido em EtOAc/CH2Cl2 e passado através de uma almofada de sílica-gel flash (elutriado com EtOAc) para proporcionar 3,102 g de 18 (85%) como sólido amarelo claro. Recristalização (EtO- Ac/Hex.) deu 2,6 g (1st crop, 72%) e 0,21 g (2nd crop, 5,8%) de 18 como um sólido branco esbranquiçado.

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 2β, 4β)l-4-[2-Amino-6-(fenilmetoxi)-9H- purin-9-ila1-3-metileno-2-[(fenilmetóxi)metila]ciclopentanol (19)

[234] Um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio, agitador magnético foi carregado 18 (2,6 g, 4,4 mmol), trimeti- lortoformiato (2,38 mL, 21,8 mmol), piridínio p-toluenossulfonato (0,56 g, 2,22 mmol) e CH2CI2 (20 mL). A mistura da reação foi agitada durante cerca de 16 h em temperatura ambiente. Depois do completa- mento da reação, a mistura da reação foi resfriada bruscamente com NaHCOs (50 mL). A mistura resultante foi extraída com EtOAc (2 x 50 mL) e a camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (50 mL), seca (Na2SO4) e concentrada a vácuo para proporcionar 0 orto- formiato. O produto bruto foi dissolvido com HOAC/AC2O (1,5 mL/30 mL) em um frasco de fundo redondo e aquecido até 0 refluxo durante cerca de 5 h. A mistura foi em seguida resfriada até temperatura ambiente. O HOAC/AC2O foi removido por destilação a vácuo para proporcionar um óleo marrom claro. O produto bruto foi purificado por filtração por uma almofada de sílica para proporcionar 2,34 g de uma mistura.

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3oc, 4β)1-2-Amino-1,9-diidro-9-[4-hidróxi-2- metileno-3-[(fenilmetóxi)metilalciclopentila]-6H-purin-6-ona (20)

[235] A mistura acima (2,2 g, 3,7 mmol) foi dissolvida em CH3CN (60 mL) e HCI a 2 N (30 mL) e a solução resultante foi aquecida até 0 refluxo. A mistura da reação foi monitorada por HPLC. Depois do com- pletamento da reação, a mistura foi resfriada até a temperatura ambiente e neutralizada por adição de trietilamina. A mistura foi diretamente concentrada a vácuo para remover a maior parte do CH3CN. Etanol foi adicionado ao resíduo sólido resultante, e a suspensão foi agitada durante 1 h. O sólido resultante foi coletado por filtração. O sólido foi enxaguado com EtOH e seco sob alto vácuo para proporcionar 1,57 g de 20.

[236] O composto de fórmula 20 foi em seguida convertido para o composto de fórmula 21 de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 4.

EXEMPLO 11 PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)]-2-Amino- 1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DE (4S)-4-[[(1,1-Dimetiletila)dimetilsilila]óxi1-2- ciclopenten-1-ona (33)

[237] A um frasco de 1 litro de fundo redondo foi carregado (4S)- 4-hidróxi-2-ciclopenten-1-ona (32) (20 g, 204 mmol, preparado descrito em Khanapure, S.; Najafi, N.; Manna, S.; Yang, J.; Rokash. J. J. Org. Chem., 1995, 60, 7448) em DCM (200 mL) seguido por N,N- dimetiletilamina (47,7 g, 653 mmol), ferc-butildimetilsilila cloreto (46,1 g, 306 mmol) e uma quantidade catalítica de 4-N,N- dimetilaminopiridina (1 g). A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 24 horas. A mistura da reação foi vertida em acetato de etila (200 mL) e a camada orgânica foi lavada com água (200 mL), HCI aquoso (1 N, 2 x 100 mL), salmoura (100 mL) e solução saturada de bicarbonato de sódio (100 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio e concentrada a vácuo para proporcionar o composto do título como um produto bruto (42 g, ~98% de rendimento).

PREPARAÇÃO DE (3S, 4S)-4-[[(1,1-Dimetiletila)dimetilsilila]óxi]-3- [(dimetilfenilsilila)metila]-1-[(trimetilsilila)óxi]ciclopentano (34)

[238] A uma suspensão de magnésio (1,18 g, 48,5 mmol) em THF (15 mL) em temperatura ambiente em frasco de fundo redondo de 100 mL foi adicionado (clorometila)-dimetilfenilsilano (8,86 g, 48,5 mmol). A mistura resultante foi agitada durante ~1 hora para formar o reagente de Grignard. A esta solução, complexo de brometo de cobre (I) - dimetilsulfeto (2,13 g, 10,4 mmol) foi adicionado, e a mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos. A solução resultante foi resfriada até -78°C, e a esta foi adicionado lentamente cloro- trimetilsilano (1,2 g, 11,3 mmol), seguido por uma solução de 33 (2 g, 9,4 mmol) em THF (2 mL). A mistura da reação foi agitada a -78°C durante 1 hora e a 0°C durante 3 horas para completar a reação. A mistura da reação foi vertida em um frasco contendo hexanos (200 mL) e foi agitada durante 10 minutos. A mistura foi filtrada através de um leito de terra diatomácea (Celite®) e o filtrado resultante foi concentrado a vácuo para secagem para proporcionar o composto do título bruto.

PREPARAÇÃO DE [3S-(3α, 4β)l-4-[[(1,1-Dimetiletila) dimetilsililalóxil- 3-[(dimetilfenilsilila)metila]-2-(hidroximetila)ciclopentanona (35)

[239] O resíduo contendo 34 foi dissolvido em THF (80 mL) e transferido para um frasco de fundo redondo de 500 mL. A esta solução foi adicionado trifluorometanossulfonato de ítrio (5,84 g) e formal- deído aquoso (18,5 mL, solução a 37% em peso). A mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 12 horas para completar a reação. A reação foi resfriada bruscamente por lenta adição de água (30 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 50 mL). A camada orgânica combinada foi lavada com salmoura (200 mL), seca sobre sulfato de magnésio, e concentrada a vácuo até a secagem para dar o composto do título bruto (2,12 g, 57% de rendimento).

PREPARAÇÃO DE (3S, 4S)-4-[[(1,1-Dimetiletila)dimetilsilila]óxi]-3- [(dimetilfenilsilila)metila]-2-metilenociclopentanona (36)

[240] A uma solução de 35 (1,2 g, 3,06 mmol) em DCM (20 mL) foi adicionado trietilamina (0,554 mL, 3,97 mmol) a -0°C lentamente seguido por metanossulfonila cloreto (0,284 mL, 3,67 mmol). A mistura resultante foi agitada durante 2 horas em temperatura ambiente para completar a reação e formar o mesilato. 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7- eno (0,685 mL, 4,58 mmol) foi adicionado à mistura da reação e a mistura da reação foi agitada durante 3 horas em temperatura ambiente para completar a reação. A mistura da reação foi vertida em uma mistura de agitação contendo solução aquosa de cloreto de amónio (10%, 25 mL) e DCM (25 mL). A camada orgânica foi separada e lavada com água, salmoura, e seca sobre sulfato de magnésio. A concentração da camada orgânica a vácuo deu o composto do título bruto, 1,1 g em 96% de rendimento.

PREPARAÇÃO DE [1R-(1α, 3β, 4α)l-4-[[(1,1-Dimetiletila) dimetilsili- lalóxil-3-[(dimetilfenilsilila)metila]-2-metilenociclopentanol (37)

[241] A uma solução resfriada (-78°C) e agitada de 36 (4,8 g, 12,81 mmol) em THF (25 mL) em um frasco de fundo redondo de 100 mL equipado com uma entrada de argônio foi adicionado trietilboroidreto de litio (super hidreto®, 24,4 mL, 24,4 mmol, solução a 1,0 M de THF) durante um período de 15 minutos. A mistura da reação foi agitada na mesma temperatura durante 1 hora e lentamente aquecida até a temperatura ambiente para completar a reação. A mistura da reação foi resfriada bruscamente com solução de hidróxido de sódio (10%, 25 mL) e extraída com acetato de etila (2 x 25 mL). A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura (50 mL), e seca sobre sulfato de magnésio. A concentração da camada orgânica a vácuo deu o composto do título bruto, 4,58 g em 95% de rendimento em uma proporção diastereomérica a 8:1. O composto do título foi purificado usando cromatografia flash por silica gel acetato de etila/hexanos (1:4 v/v) para proporcionar o diastereômero desejado, 4 g em 83% de rendimento.

PREPARAÇÃO DE [1S-(1a.3a.4β)l-9-[4-[[(1,1-DimetÍI- etila)dimetilsilila]óxil-3-[(dimetilfenilsilila)metilal-2-metilenociclopentilal- 6-iodo-9H-purin-2-amina (38, X=l)

[242] A uma solução de 37 (1,6 g, 4,24 mmol) em THF (20 mL) em um frasco de fundo redondo de 100 mL foi adicionado seqüencial- mente trifenilfosfina (1,49 g, 5,7 mmol), iodo guanina (1,49 g, 5,7 mmol) e dietilazodicarboxilato (0,91 mL, 5,7 mmol) a -78°C. A mistura da reação foi agitada a -78°C durante 2 horas, em seguida aquecida lentamente até a temperatura ambiente durante um período de 1 hora, e agitada em temperatura ambiente durante 12 horas para completar a reação. A reação foi resfriada bruscamente por adição de solução saturada de cloreto de amónio (50 mL) e a mistura resultante foi extraída com uma mistura de éter terc-butila metílico e heptano (1:4; 2 x 25 mL). A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio e concentrada a vácuo para dar produto bruto o qual foi purificado por meio de cromatografia sobre sílica-gel para proporcionar o composto do título em 71% de rendimento (1,87 g).

PREPARAÇÃO DE [1R-(1α, 3α, 5β)]-3-(2-Amino-6-iodo-9H-purin-9- ila)-5-hidróxi-2-metilenociclopentanometanol (39)

[243] A uma solução de 38 (1,8 g, 2,9 mmol) em DCM (25 mL) foi adicionado complexo de ácido tetrafluorobórico-éter dimetílico (3,53 mL, 29 mmol) em temperatura ambiente. A mistura resultante foi agitada durante 4 horas. MeOH (25 mL) foi adicionado à mistura da reação para torná-lo homogêneo. Bicarbonato de potássio sólido (4,35 g, 43,5 mmol) foi lentamente adicionado e a mistura resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 1,5 horas. Fluoreto de potássio (0,85 g, 14,6 mmol) foi adicionado, seguido por peróxido de hidrogênio aquoso (solução a 30% em, peso, 3 mL). A mistura da reação foi agitada em temperatura ambiente durante 4 horas. A mistura da reação foi concentrada a vácuo até a secagem para dar um resíduo. O resíduo foi triturado com DCM (3 x 25 mL). A camada orgânica combinada foi concentrada a vácuo para dar o composto do título como um sólido (0,96 g, 85% de rendimento).

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α,3a.4β)1-1,9-Diidro-9-[4-hidróxi-3- (hidroximetila)-2-metilenociclopentilal-6H-purin-6-ona (21)

[244] Uma mistura de 39 (0,5 g, 1,29 mmol) em hidróxido de sódio (2 N, 10 mL) foi aquecida a 70°C sob uma atmosfera de argônio durante 1 hora para completar a reação. A mistura da reação foi resfriada até 0°C e neutralizada lentamente por adição de HCI a 3 N. Carbono de descoloração (0,5 g) foi adicionado. Esta mistura foi aquecida a ~90°C durante 1 hora. A mistura a quente foi filtrada através de um leito de terra diatomácea (Celite®). O filtrado claro resultante foi resfriado e semeado com 21 para realizar cristalização. O produto foi coletado por filtração e seco a vácuo para proporcionar o composto do título como um sólido cristalino branco (0,21 g, 60% de rendimento). EXEMPLO 12

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)]-2-Amino- 1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DE (1R, 4S)-4-[[(1,1-Dimetiletila)dimetilsilila]óxi]-2- iodo-2-ciclopenten-1-ol (40)

[245] A uma solução de 33 (40 g, 188 mmol, conforme preparado no Exemplo 11) em THF (100 mL) em um frasco de fundo redondo de 1 L foi adicionada uma solução de iodo (105 g, 414 mmol) em DCM (100 mL). A solução resultante foi agitada a 0°C. A esta solução, piri- dina (36 mL) foi lentamente adicionada através de um funila de gote- jamento durante um período de 20 minutos. A mistura foi em seguida agitada na mesma temperatura durante 3 horas para completar a reação. A mistura da reação foi diluída com éter ferc-butila metílico (300 mL) e lavada com solução de bissulfito de sódio (600 mL), HCI (0,5 N, 500 mL), salmoura (200 mL) e seca sobre sulfato de magnésio. A camada orgânica foi concentrada a vácuo até a secagem para dar o intermediário iodo-cetona como um óleo amarelo (56 g) em 89% de ren- dimento.

[246] A um frasco de fundo redondo equipado com uma entrada de argônio, agitador magnético foi carregado cério cloreto heptahidrato (30,8 g, 82,75 mmol) e MeOH (150 mL) e foi agitado em temperatura ambiente durante 30 minutos. A esta solução agitada, a iodo-cetona (56 g, 165,5 mmol) em MeOH (60 mL) foi adicionada e resfriada até - 60°C. A esta solução resfriada, boroidreto de sódio (6,25 g, 165,5 mmol) foi adicionado em porções. Depois de agitar a mistura da reação a -50°C durante 20 minutos, a reação foi aquecida até -30°C e agitada durante outros 30 minutos para completar a reação conforme julgado por TLC. A mistura da reação foi diluída com éter ferc-butila metílico (400 mL) e lavada com bicarbonato de sódio saturado e salmoura. A camada orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio e filtrada em um funila sinterizado. O filtrado foi concentrado em um evaporador giratório para proporcionar o produto desejado 40 como óleo amarelo (51 g, 91% de rendimento).

PREPARAÇÃO DE éster metílico de ácido (3S, 5R)-3-[[(1,1- Dimetiletila)dimetilsilila]óxi]-5-hidróxi-1 -ciclopenteno-1 -carboxílico (41)

[247] A uma solução de 40 (18 g, 52,89 mmol) em MeOH (100 mL) em um reator vedado (reator de Parr) foi adicionado trietilamina (36 mL, 264,5 mmol) e diclorobis(trifenilfosfina)paládio II [PdCl2(Píi3P)2] (2% em mol). O reator foi lavado com jatos de nitrogênio durante cerca de 5 minutos. O reator foi aquecido até cerca de 50°C e pressurizado até cerca de 103,4 KPa (15 psi). A reação foi continuada ao mesmo tempo que agitando na mesma pressão e temperatura durante 5 horas para completar a reação. A mistura da reação foi concentrada, diluída com acetato de etila (50 mL) e filtrada. A camada orgânica foi lavada com água, salmoura e seca sobre sulfato de magnésio. A camada orgânica foi concentrada a vácuo até a secagem para dar produto bruto o qual foi purificado por cromatografia de coluna para dar o composto do título (11,6 g) em -81 % de rendimento.

PREPARAÇÃO DE éster metílico de ácido (3S, 5R)-5-(Benzoilóxi)-4- [[(1,1-dimetiletila) dimetilsilila]óxi1-1-ciclopenteno-1-carboxilico (42)

[248] A uma solução de 41 (0,55 g, 2 mmol) em THF (2 mL) a - 78°C foi adicionado hexametildissilazida de litio (3 mL, 1 M, 3 mmol) e a solução resultante foi agitada durante 1 hora. A esta solução, 1- adamantanocarbonila cloreto (596 mg, 3 mmol) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada durante 15 minutos a -78°C seguidos por 30 minutos em temperatura ambiente para completar a reação. A mistura da reação foi diluída com acetato de etila (25 mL) e lavada com solução de bicarbonato de sódio, água, e salmoura. A camada orgânica foi concentrada a vácuo até a secagem para dar o produto bruto. O produto bruto foi cristalizados a partir de MeOH-água para dar o composto do título (0,57 g) em -75% de rendimento.

PREPARAÇÃO DE éster metílico de ácido (4S, 5S)-4-[[(1,1- Dimetiletila)dimetilsilila]óxi]-5-[(dimetilfenilsilila)metilal-1-ciclopenteno- 1-carboxilico (43)

[249] A uma suspensão de magnésio (1,18 g, 48,5 mmol) em THF (15 mL) em temperatura ambiente foi adicionado fenildimetilcloro- silano (8,86 g, 48,5 mmol). A mistura resultante foi agitada durante -1 hora para formar o reagente de Grignard. A esta solução, iodeto de cobre (I) (0,3 g, 5%) foi adicionado e a solução resultante foi agitada em temperatura ambiente durante 30 minutos. A solução resultante foi resfriada até -78°C e foi adicionada lentamente uma solução de 42 (14 g, 32,33 mmol) em THF (20 mL). A mistura da reação foi agitada a - 78°C durante 7 horas para completar a reação. A reação foi resfriada bruscamente por lenta adição de MeOH (10 mL) e aquecendo até a temperatura ambiente. A mistura foi diluída com acetato de etila (300 mL) e lavada com cloreto de amónio saturado (200 mL), hidróxido de sódio (1 N, 2 x 150 mL), água (100 mL) e salmoura (100 mL). A cama- da orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio e concentrada a vácuo para dar o composto do título bruto, 13 g em 100% de rendimento.

PREPARAÇÃO DE (4S, 5S)-4-[[(1,1-Dimetiletila)dimetilsilila]óxi]-5- [(dimetilfenilsilila)metilal-1-ciclopenteno-1-metanol (44)

[250] A uma solução de 43 (15 g, 37,13 mmol) em hexanos (100 mL) foi adicionado hidreto de diisobutilalumínio (113 mL, 113,4 mmol, 1 N em hexanos) a -78°C lentamente durante um período de 30 minutos mantendo a temperatura abaixo de -60°C. A mistura resultante foi agitada durante 2 horas na mesma temperatura para completar a reação. A mistura da reação foi resfriada bruscamente por adição de hidróxido de sódio (2 N, 200 mL). A camada orgânica foi separada e lavada com água, salmoura, e seca sobre sulfato de magnésio. A camada orgânica foi concentrada a vácuo até a secagem para dar o composto do título bruto (13 g, 100% de rendimento).

PREPARAÇÃO DE (1R, 2R, 3S, 5R)-3-[[(1,1-Dimetiletila) dimetilsili- lalóxi]-2-[(dimetilfenilsilila)metilal-6-oxabiciclo[3.1 .Olhexano-1 -metanol (45)

[251] Uma solução resfriada (0°C) e agitada de 44 (14 g, 37,23 mmol) em MeOH (50 mL) foi adicionado monoperoxiftalato de magnésio (MPPA, 80% puro, 27,62 g, 44,68 mmol) em seis porções durante um período de 1 hora, mantendo a temperatura <0°C. A mistura da reação foi agitada na mesma temperatura durante 4 horas para completar a reação. A mistura da reação foi diluída com acetato de etila (300 mL) e lavada com bissulfito de sódio saturado (200 mL), hidróxido de sódio (0,5 N, 2 x 150 mL), salmoura (150 mL) e seca sobre sulfato de magnésio. A camada orgânica foi concentrada a vácuo até a secagem para dar o composto do título bruto (13,5 g, 92%)

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 2B, 3a, 5B)]-5-[2-Amino-6-(benzoilóxi)-9H- purin-9-ila]-3-[[(1,1-Dimetiletila)dimetilsilila]óxi]-2-[(dimetilfenilsilila)metilal-l-hidroxiciclopentanometanol (46, X=BnO)

[252] A uma solução de 2-amino-6-O-benziloxipurina (20 g, 84 mmol) em dimetilformamida (50 mL) em temperatura ambiente foi adicionado hidreto de lítio (0,4 g, 50,4 mmol) como um sólido em uma porção. A suspensão foi agitada em temperatura ambiente durante 4 horas ponto no qual foi observada uma solução clara. A esta solução foi adicionada uma solução de 45 (13,2 g, 33,6 mmol) em dimetilformamida (20 mL). A mistura da reação foi aquecida a 80°C durante 4 horas para completar a reação. A mistura da reação foi diluída com acetato de etila (200 mL) e lavada com hidróxido de sódio (1 N, 200 mL), água (100 mL) e salmoura (100 mL). A camada orgânica foi agitada com carvão vegetal (20 g) durante 1 hora e filtrada. O filtrado foi concentrado a vácuo até a secagem para dar produto bruto (20,4 g). O produto bruto foi cristalizado a partir de MeOH para dar o composto do título como sólido banco (8,8 g, 41% de rendimento).

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3cc, 4β)l-2-amino-9-[4-[[(1,1-dimetiletila) dimetilsilila]óxi]-3-[(dimetilfenilsilila)metila]-2-metilenociclopentila]-9H- purin-6-ona (47)

[253] A um frasco de fundo redondo equipado com um agitador magnético e entrada/saída de nitrogênio foi carregado o composto 46 (1,27 g, 2 mmol), trimetilortoformiato (2,12 g, 20 mmol) e CH2CI2 em temperatura ambiente. A mistura da reação foi resfriada até 0°C e p- toluenossulfonato de piridínio (5 mg) foi adicionado à solução. A mistura da reação foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada de um dia para 0 outro. A mistura da reação foi concentrada a vácuo até a secagem, e 0 concentrado resultante foi extraído com acetato de etila (100 mL) e solução saturada de NaHCOs (50 mL). A camada orgânica foi separada, seca (Na2SO4), e concentrada a vácuo para proporcionar um óleo amarelo claro espesso. O óleo foi misturado com excesso de anidrido acético (25 mL) e uma quantidade catalítica de ácido acético (2 gotas), e a mistura resultante foi aquecido até 0 refluxo durante 10 horas. Depois de resfriar até a temperatura ambiente, o excesso de anidrido acético foi removido por destilação a vácuo, e o óleo marrom resultante foi misturado com MeOH (30 mL) e solução a 4 N de HCI (10 mL). A solução foi aquecida até o refluxo sob uma atmosfera de nitroênio de um dia para o outro. O MeOH foi removido por destilação e a solução foi neutralizada para um pH de ~7,2 com NaOH (10 N, ~4,5 mL). A suspensão resultante foi extraída com CH2CI2 (2 x 100 mL). A camada orgânica combinada foi seca (Na2SO4) e concentrada a vácuo para proporcionar um óleo semi-sólido espesso (composto 47). O composto bruto 47 pode ser usado na próxima reação sem purificação adicional.

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)1-2-Amino-1,9-diidro-9-[4-hidróxi- 3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila1-6H-purin-6-ona (21)

[254] A uma solução do composto 47 (1 g, 1,67 mmol) em DCM (10 mL) foi adicionado complexo de ácido tetrafluorobórico-éter dimetí- lico (0,45 g, 3,34 mmol) a 0°C. A solução foi agitada durante 2 horas a 0°C seguida por 14 horas em temperatura ambiente. A esta solução foi adicionado seqüencialmente, bicarbonato de potássio (10 g, 10 mmol), fluoreto de potássio (0,58 g, 10 mmol), e peróxido de hidrogênio aquoso (solução a 30% em peso, 1,2 mL, 10,6 mmol). A mistura da reação foi agitada em temperatura ambiente durante 14 horas. A mistura da reação foi concentrada a vácuo. O resíduo foi recristalizado a partir de água para proporcionar 0 composto do título (180 mg, 39% de rendimento).

EXEMPLO 13 PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE HS-dα, 3a, 4β)]-2-Amino- 1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DE [3aS-(3aa, 4a, 5β, 6aa)l-5-(Acetylóxi)-4- [(acetilóxi)metilalhexahidro-2H-ciclopenta[b]furan-2-ona (50)

[255] A um frasco de 100 mL de fundo redondo foi carregado (3aS, 6aR)-3, 3a, 6, 6a-tetrahidro-2H-ciclopenta[b]furan-2-ona 49 (3,85 g, 31 mmol, preparado conforme descrito no Corey etal. J. Med Chem. 1993, 36, 243), paraformaldeído (3,0 g), ácido acético glacial (30 mL), e ácido sulfúrico concentrado (1 mL). A mistura foi aquecida até 74°C durante 24 horas. À solução foi adicionado acetato de sódio (4 g). A solução foi concentrada a vácuo e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila (200 mL). A solução foi lavada com solução saturada de bicarbonato de sódio até não ser observada evolução gasosa. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de sódio e concentrada a vácuo para dar o produto bruto (4,1 g). O produto bruto foi purificado por meio de croma- tografia de coluna por sílica-gel para proporcionar o composto do título (3,1 g, 39%).

PREPARAÇÃO DE [3aS-(3aα, 4α, 5β, 6aa)]-Hexahidro-5-hidróxi-4- (hidroximetila)-2H-ciclopenta[b]furan-2-ona (51)

[256] A uma solução de 50 (10,0 g, 39 mmol) em MeOH (100 mL) foi adicionado carbonato de potássio (15 g). A suspensão foi agitada em temperatura ambiente durante 3 horas. À suspensão foi adicionado acetato de etila (60 mL). A suspensão resultante foi filtrada através de uma almofada de terra diatomácea (Celite®). O filtrado foi concentrado a vácuo para dar o produto bruto. O produto bruto foi dissolvido em MeOH (15 mL) e foi adicionado éter dietílico (100 mL). A suspensão resultante foi agitada durante 2 horas em temperatura ambiente. O sólido foi filtrado para dar o composto do título (3,62 g, 54%).

PREPARAÇÃO DE (3aS-(3aα, 4α, 5B, 6aa)]-5-[((1,1-Dimetiletila) dime- tilsilila]óxi]-4-[[[( 1,1 -dimetiletila)dimetilsilila]óxi]metila]hexahidro-2H- ciclopenta[blfuran-2-ona (52)

[257] A uma suspensão de 51 (4,1 g, 23,8 mmol) em DCM (40 mL) foi adicionado N,N-diisopropiletilamina (9,44 g, 71,4 mmol), 4-N,N- dimetilaminopiridina (0,41 g), e ferc-butildimetilsilila cloreto (10,8 g, 71,4 mmol). A mistura da reação foi agitada em temperatura ambiente durante 14 horas. A reação foi elaborada lavando com HCI a 1,0 N, hidróxido de sódio a 1,0 N, e salmoura. A solução orgânica foi concentrada a vácuo para dar o produto bruto. Cromatografia de coluna sobre sílica-gel usando acetato de etila/hexanos (1/2 v/v) para dar o composto do título (7,8 g, 82%).

PREPARAÇÃO DE [1R-(1a, 2β, 3α, 5a)l-3-[[(1,1-Dimetiletila) dimetilsi- lila]óxi]-2-[[[(1,1 -dimetiletila)dimetilsilila]óxi]metilal-5- hidroxiciclopentanometanol (54)

[258] A uma suspensão de 52 (1,0 g, 2,5 mmol) e (1 S)-(+)-(10- canforsulfonila) oxaziridina (0,86 g, 7,75 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado hexametildissilazida de sódio (5 mL de solução a 1 M em THF) a -78°C. A mistura da reação foi agitada durante 1,5 horas. Em seguida foi resfriada bruscamente com MeOH (15 mL) a -78°C e à mistura foi adicionado boroidreto de sódio, (0,34 g, 9,0 mmol). A mistura da reação foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada durante 1 hora. Foi vertida em acetato de etila (100 mL), lavada com hidróxido de sódio a 1,0 N (3 x 50 mL), seca sobre sulfato de sódio, e concentrada a vácuo para dar o intermediário triol bruto 53A (1,1 g). O intermediário 53A foi dissolvido em MeOH (10 mL) e água (5 mL). À solução resultante foi adicionado periodato de sódio (2,14 g, 10,0 mmol) e a mistura resultante foi agitada durante 1 hora em temperatura am-biente. A mistura foi vertida em acetato de etila (100 mL), lavada com água (50 mL), seca sobre sulfato de sódio, e concentrada a vácuo para dar o intermediário aldeído bruto 53B. O resíduo foi dissolvido em MeOH (10 mL), e a este foi adicionado boroidreto de sódio (0,227 g, 6,0 mmol) a 0°C. A mistura da reação foi agitada durante 1 hora. Purificação de coluna do produto bruto sobre sílica-gel usando acetato de etila/hexanos (1/2 v/v) deu o composto do título (0,68 g, 70%).

PREPARAÇÃO DE [1R-(1α, 2α, 3β, 4α)l-4-[[(1,1-Dimetiletila) dimetilsi- lila]óxil-3-[[[( 1,1 -dimetiletila)dimetilsililalóxilmetilal-2-[[[(4- metilfenila)sulfonila]óxilmetilal-ciclopentanol acetato éster (55)

[259] A uma solução de 54 (0,7 g, 1,79 mmol) em DCM (3 mL) foi adicionado piridina (1 mL), e p-toluenosulfonila cloreto (0,34 g, 1,79 mmol) a 0°C. A mistura da reação foi aquecida até a temperatura ambiente e agitada durante 20 horas. À mistura da reação foi adicionado piridina (1 mL), e anidrido acético (1 mL) em temperatura ambiente. A mistura da reação foi agitada durante 18 horas. Foi vertida em acetato de etila (50 mL), lavada com hidróxido de sódio a 1,0 N (2 x 20 mL), salmoura (20 mL), seca sobre sulfato de sódio, e concentrada a vácuo para proporcionar o composto do título (0,86 g, 77%).

PREPARAÇÃO DE [1R-(1α, 3β, 4α)]-4-[[(1,1-Dimetiletila)dimetil- silila]óxi]-3-[[[(1,1 -dimetiletila)dimetilsilila]óxi]metilal-2- metilenociclopentanol (56)

[260] A uma solução de 55 (0,585 g, 0,88 mmol) em dimetilformamida (4 mL) foi adicionado iodeto de lítio (0,236 g, 1,76 mmol), e 1,8-diazabiciclo[5,4.0]undec-7-eno (10 eq). A mistura resultante foi aquecida até 100°C durante 2 horas. A mistura foi resfriada até temperatura ambiente e a esta foi adicionado MeOH (4 mL). A mistura foi agitada durante 14 horas em temperatura ambiente. Foi vertida em acetato de etila (100 mL), lavada com HCI a 1,0 N (3 x 20 mL), salmoura (20 mL), seca sobre sulfato de sódio, e concentrada a vácuo. Purificação através de cromatografia sobre sílica-gel usando acetato de etila/hexanos (1:2, v/v) deu o composto do título (0,18 g, 52%).

PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)]-6-Cloro-9-[4-[[(1,1-dimetiletila) dimetilsilila]óxi]-3-[[[(1,1 -dimetiletila)dimetilsilila]óxi]metila]-2-metileno- ciclopentila]-9H-purin-2-amina (57)

[261] A uma suspensão de 56 (120 mg, 0,32 mmol), trifenilfosfina (84,5 mg, 0,64 mmol), e 2-amino-6-cloropurina (108 mg, 0,64 mmol) em THF (10 mL) foi adicionado dietila azodicarboxilato (111 mg, 0,64 mmol) a -20°C. A mistura da reação foi agitada a -20°C durante 1 hora. Foi vertida em DCM (50 mL), lavada com hidróxido de sódio a 0,5 N (3 x 10 mL), seca sobre sulfato de sódio, e concentrada a vácuo. Purificação através de cromatografia sobre sílica-gel deu o composto do título (0,11 g, 63%).

PREPARAÇÃO DE [1S-(1a, 3a, 43)]-6-Cloro-9-[4-hidróxi-3- (hidroximetila)-2-metilenociclopentila1-9H-purin-2-amina (39)

[262] A uma solução de 57 (180 mg, 0,344 mmol) em THF (2 mL) foi adicionado fluoreto de tetrabutilamônio (2 mL de solução a 1 M em THF). A mistura da reação foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora. Foi vertida em DCM (50 mL), lavada com água (3x10 mL), seca sobre sulfato de sódio, e concentrada a vácuo para dar o composto do título (55 mg, 54%).

[263] 39 foi convertido para 21 por meio do procedimento descrito no Exemplo 11.

EXEMPLO 14 PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE [1S-(1α, 3α, 4β)]-2-Amino- 1,9-diidro-9-[4-hidróxi-3-(hidroximetila)-2-metilenociclopentila]-6H- purin-6-ona (21) PREPARAÇÃO DE (2-Benziloximetila-6-oxa-biciclo[3.1.Olhex-3-ilóxi)- terc-butila-dimetilsilano (83) (Rc=terc-butila, Rd=CH3)

[264] Uma solução de t-butildimetila clorosilano (3,58 g, 23,8 mmol) em DMF (10 mL) foi lentamente adicionada a uma solução de DMAP (0,25 g, 2,0 mmol), imidazol (3,24 g, 48 mmol), e 2-benilóxi-6- oxa-biciclo [3.1.0]hexan-3-ol 82 (3,5 g, 15,9 mmol) em DMF (20 mL) em temperatura ambiente. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 16 h. A reação foi resfriada bruscamente com água (50 mL) e extraída com acetato de etila-hexano (1:1, 180 mL). A camada orgânica foi separada, lavada com água (80 mL) e salmoura semi saturada (80 mL), e seca (Na2SO4). A concentração seguida por purificação com cromatografia sobre sílica-gel deu 4,85 g (91%) do produto desejado 83 como um óleo.

PREPARAÇÃO DE[3-(terc-Butila-dimetila-silanilóxi)-6-oxa- biciclo[3.1.0]hex-2-ilal-metanol (84) (Rc=terc-butila, Rd=CH3)

[265] Uma mistura de éter 83 (2,0 g), e 10% Pd/C (0,5 g) em MeOH (45 mL) foi agitada em temperatura ambiente sob hidrogênio (1 atm) durante 3,5 h. A mistura foi tratada com acetato de etila (60 mL) durante 10 min. O catalisador foi removido por filtração sobre terra dia- tomácea (Celite®) e lavado com acetato de etila (40 mL). A concentração do filtrado sob vácuo seguido por purificação do produto sobre uma almofada de sílica-gel proporcionou 1,39 g (95%) do álcool 84 como um óleo.

PREPARAÇÃO DE éster 3-(terc-butila-dimetila-silanilóxi)-6-oxa- biciclo[3.1.0]hex-2-ilmetila de ácido tolueno-4-sulfõnico (85) (Rc=terc- butila, Rd=CH3, R3=p-metilfenila)

[266] Uma solução de p-toluenosulfonila cloreto (1,12 g, 5,9 mmol) em DCM (10 mL) foi lentamente adicionada a uma solução de álcool 84, trietilamina (2,1 g, 21 mmol), e DMAP (0,12 g, 1,0 mmol) em DCM (25 mL) em temperatura ambiente. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas, tratada com hexano (60 mL), lavada com água (25 mL x 3) e salmoura (20 mL), e seca (Na2SO4). A concentração de a solução seguida por purificação com cromatografia sobre sílica-gel deu 1,91 g (96%) de tosilato 85 como um solido branco.

PREPARAÇÃO DE terc-Butila-dimetila-(2-metilen-6-oxa-biciclo 3.1.0]hex-3-ilóxi)-silano (86) (Rc=terc-butila, Rd=CH3)

[267] t-Butóxido de potássio (1,9 g, 15,6 mmol) foi adicionado a uma solução de tosilato 85 (5,2 g, 13,0 mmol) em THF (100 mL) a 0°C. Depois de agitar at 0°C durante 1,5 h, a mistura foi tratada com hexa- no (200 mL), lavada com água (100 mL x 2) e salmoura (80 mL x 2), seca (N32SO4). A concentração de a solução deu 2,75 g (93%) de alqueno 86 como um óleo.

PREPARAÇÃO DE 4-(terc-Butila-dimetila-silanilóxi)-2-[1,3]ditian-2-ila- 3-metileno-ciclopentanol (87) (Rc=terc-butila, Rd=CH3)

[268] Uma solução de butillítio (2,5 M em hexano, 4,8 mL, 12 mmol) foi adicionada a uma solução de 1,3-ditiano (1,5 g, 12 mmol) em THF (22 mL) a 0°C sob nitrogênio. A mistura foi agitada em temperatura ambiente durante 1 hora e em seguida resfriada até 0°C. A solução acima foi lentamente adicionadaq a uma solução de vinilepóxido 86 (2,3 g, 10 mmol) em THF (40 mL) a -30°C. A mistura foi agitada a - 30°C durante 3 horas e em seguida aquecida até a temperatura ambiente. A reação foi resfriada bruscamente por adição de hexano (80 mL) e solução aquosa a 5% de KH2PO4 (70 mL). A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura (60 mL x 2), e seca (Na2SO4). A concentração da solução seguida por purificação com cromatografia sobre sílica-gel deu 3,06 g (88%) de ditiano 87 como um sólido branco. PREPARAÇÃO DE 4-(terc-Butila-dimetila-silanilóxi)-2-hidroximetila-3- metileno-ciclopentanol (88) (Rc=terc-butila, Rd=CHs)

[269] Uma mistura de ditiano 87 (0,60 g, 1,7 mmol), carbonato de cálcio (1,3 g, 13 mmol), e iodometano (2,4 g, 16,4 mmol) em acetonitri- la-água (94:6, 8 mL) foi agitada em temperatura ambiente durante 16 horas. Acetato de etila (10 mL) e hexano (10 mL) foram adicionados à mistura da reação a qual foi em seguida seca sobre sulfato de sódio. O sólido foi removido por filtração. A concentração do filtrado proporcionou um aldeído bruto 0 qual foi em seguida dissolvido em etanol e resfriado até 0°C. Boroidreto de sódio (120 mg, 3,2 mmol) foi adicionado a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C durante 1 h. A reação foi resfriada bruscamente com uma solução aquosa saturada de KH2PO4 (5 mL) e água (5 mL). Etanol foi removido por meio de evaporação sob vácuo. A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (15 mL x 2). As camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2SO4). A concentração da solução seguida por purificação com cromatografia sobre sílica- gel deu 301 mg (67%) do diol 88.

PREPARAÇÃO DE éster 2-acetoximetila-4-hidróxi-3-metileno- ciclopentílico de ácido acético (89) (R2=CH3)

[270] Anidrido acético (250 mg, 2,5 mmol) foi adicionado a uma mistura de diol 88, DMAP (10 mg, 0,08 mmol), e trietilamina (360 mg, 3,6 mmol) em DCM (5 mL) sob nitrogênio em temperatura ambiente. Depois de 3 horas em temperatura ambiente, a mistura da reação foi tratada com hexano (10 mL), acetato de etila (5 mL), e salmoura meio saturada (10 mL). A camada orgânica foi separada, lavada com salmoura meio saturada (10 mL), e seca (Na2SO4). A concentração da solução deu um bis-acetato bruto o qual foi dissolvido em THF (10 mL). Fluoreto de tetrabutilamônio (TBAF»3H2O, 400 mg, 1,3 mmol) foi adicionado à solução em temperatura ambiente. Depois de 1 h, a mistura da reação foi tratada com acetato de etila (20 mL) e em seguida lavada com salmoura (15 mL x 2). As camadas aquosas foram extraídas de novo com acetato de etila (15 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2SO4). A concentração da solução seguida por purificação com cromatografia sobre sílica-gel deu 255 mg (96%) do álcool desejado 89 como um óleo.

PREPARAÇÃO DE éster 2-acetoximetila-4-(2-amino-6-iodopurin-9-ila)- 3-metileno-ciclopentílico de ácido acético (90) (R2=CH3, X=l)

[271] Uma mistura de álcool 89 (100 mg, 0,44 mmol), trifenilfosfi- na (137 mg, 0,52 mmol), e 6-iodo-2-aminopurina (115 mg, 0,44 mmol) em THF foi resfriada até 0°C. DEAD (87 mg, 0,50 mmol) foi lentamente adicionado à mistura a qual foi agitada a 0°C durante 3 horas e em seguida aquecida até a temperatura ambiente durante 16 horas. A mistura foi tratada com acetato de etila (9 mL) e filtrada sobre terra diatomá- cea (Celite®). A concentração do filtrado proporcionou um resíduo o qual foi tratado com acetato de etila (3 mL), HCI a 2 N (4 mL), e hexano (6 mL). A camada aquosa foi separada. A camada orgânica foi extraída com HCI a 2 N (4 mL x 3). As camadas aquosas combinadas foram neutralizadas com K2HPO4 para pH ~7 e extraídas com acetato de etila (25 mL, 10 mL). As camadas orgânicas combinadas foram secas (Na2SO4) e concentradas para dar um produto bruto 0 qual foi purificado por meio de cromatografia por sílica-gel para proporcionar 175 mg (85%) de 90 contendo algum óxido de trifenilfosfina. A cristalização do produto bruto a partir de etanol deu 132 mg (64%) do 90 desejado.

[272] O composto de fórmula 90 pode ser convertido para 0 composto de fórmula 21 por meio de hidrólise do grupo éster usando, por exemplo, tratamento com um alcóxido de metal alcalino. O grupo 6- iodo pode ser hidrolisado para proporcionar 0 composto de fórmula 21, de acordo com 0 procedimento descrito para a preparação do composto de fórmula 21 no Exemplo 11.

[273] Onde mencionado acima, publicações e referências, inclusive porém não limitadas a patentes e pedidos de patentes, citadas neste relatório descritivo são incorporadas a este relatório por meio de referência em sua totalidade na porção inteira citada como se cada publicação ou referência individual fosse especificamente e individualmente indicada para ser incorporada por meio de referência a este relatório como sendo totalmente determinadas.

[274] Apesar desta invenção ter sido descrita com ênfase em modalidades preferenciais, será óbvio para as pessoas versadas na técnica que podem ser usadas variações nos dispositivos e métodos preferencais e que se pretende que a invenção possa ser praticada de modo diferente do especificamente descrito neste relatório. Por conseguinte, esta invenção inclui todas as modificações englobadas dentro do espírito e do âmbito da invenção conforme definido pelas reivindicações que se seguem. Por exemplo, deve ser entendido que as etapas das reações determinadas nas reivindicações anexadas não precisam ser necessariamente realizadas na ordem na qual aparecem, e uma pessoa versada na técnica pode ter a capacidade de variar a ordem das etapas das reações. Adicionalmente, algumas seqüências de reações podem ser realizadas simultaneamente, tais como, por exemplo, protodessililação e debenzilação, ou estas reações podem ser realizadas em etapas separadas, sem se afastar do espírito e do âmbito da invenção. Deve ser entendido que todas as modificações referidas são englobadas dentro do âmbito das reivindicações anexadas.

Claims

1. Composto, caracterizado pelo fato de apresentar a fórmula

0U um sal do mesmo, em que: Ra é alila, fenila, Ci a Ce alquilfenila ou Ci a Ce alcoxifenila; Rb é Ci a Ce alquila; Rm é -CO2R6 ou -CH2OR6; R5 é hidrogênio ou um grupo protetor hidróxi; e R6 é hidrogênio, Ci a C4 alquila, ou benzila.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: Rm é -CO2R6: e R5 e R6 são ambos hidrogênio.

3. Composto de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que: Ra é fenila; e Rb é metila.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser como um sal com uma amina quiral selecionada entre 0 grupo consistindo em R,R-(-)-2-amino-1-(4-nitrofenil)-1,3-propanodiol, (1 R,2R)-(+)-1,2-difeniletilenodiamina, (R)-(-)-1-cicloexiletilamina; D-treo-2- amino-1-(4-nitrofenil)-1,3-propanodiol, (1 S,2S)-(+)-1, 2- diaminociclohexano, desidroabietiamina, (1R,2R)-1, 2- diaminometilciclohexano, cinchonidina, e cinchonina.

5. Composto de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de que: Rm é -CO2R6: R5 e R6 são ambos hidrogênio; Ra é fenila; Rb é metila; e a amina quiral é R,R-(-)-2-amino-1-(4-nitrofenil)-1,3- propanodiol.

6. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que: Rm é -CH2OR6 ; R5 é hidrogênio; e R6 é benzila.

7. Composto de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que: Ra é fenila; e Rb é metila.