BG61515B2 - Нови състави,съдържащи асоциати на хиалуроновата киселина и метод за получаването им - Google Patents

Нови състави,съдържащи асоциати на хиалуроновата киселина и метод за получаването им Download PDF

Info

Publication number
BG61515B2
BG61515B2 BG098631A BG9863194A BG61515B2 BG 61515 B2 BG61515 B2 BG 61515B2 BG 098631 A BG098631 A BG 098631A BG 9863194 A BG9863194 A BG 9863194A BG 61515 B2 BG61515 B2 BG 61515B2
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
zinc
hyaluronate
solution
sodium
complex
Prior art date
Application number
BG098631A
Other languages
English (en)
Inventor
Kalman Burger
Geza Nagy
Ivan Rethey
Janos Illes
Bela Stefko
Erzsebet Neszmelyi
Istvan Gebhardt
Istvan Racz
Arpadne Kiraly
Viktoria Varkonyi
Original Assignee
Chemical Works Of Gedeon Richter Ltd.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Chemical Works Of Gedeon Richter Ltd. filed Critical Chemical Works Of Gedeon Richter Ltd.
Publication of BG61515B2 publication Critical patent/BG61515B2/bg

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/0006—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid
    • C08B37/0024—Homoglycans, i.e. polysaccharides having a main chain consisting of one single sugar, e.g. colominic acid beta-D-Glucans; (beta-1,3)-D-Glucans, e.g. paramylon, coriolan, sclerotan, pachyman, callose, scleroglucan, schizophyllan, laminaran, lentinan or curdlan; (beta-1,6)-D-Glucans, e.g. pustulan; (beta-1,4)-D-Glucans; (beta-1,3)(beta-1,4)-D-Glucans, e.g. lichenan; Derivatives thereof
    • C08B37/0027—2-Acetamido-2-deoxy-beta-glucans; Derivatives thereof
    • C08B37/003—Chitin, i.e. 2-acetamido-2-deoxy-(beta-1,4)-D-glucan or N-acetyl-beta-1,4-D-glucosamine; Chitosan, i.e. deacetylated product of chitin or (beta-1,4)-D-glucosamine; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
    • A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/19—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing inorganic ingredients
    • A61K8/27—Zinc; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A61K8/735—Mucopolysaccharides, e.g. hyaluronic acid; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
    • C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
    • C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
    • C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
    • C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2800/00—Properties of cosmetic compositions or active ingredients thereof or formulation aids used therein and process related aspects
    • A61K2800/40—Chemical, physico-chemical or functional or structural properties of particular ingredients
    • A61K2800/58—Metal complex; Coordination compounds

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Birds (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)

Abstract

1. Комплекс на депротонирана хиалуронова киселина и цинков или кобалтов йон.8 претенции

Description

Област на техниката
Настоящото изобретение се отнася до нови асоциати (комплекси) на депротонирана хиалуронова киселина с 3d метални йони от четвърти период на периодичната таблица и състави, съдържащи тези асоциати (комплекси) като активни ингредиенти.
Изобретението се отнася освен това до метод за получаването на тези нови асоциати (комплекси) и състави, съдържащи ги като активни ингредиенти.
Съгласно предпочитана особеност на посочения метод воден разтвор, съдържащ новите асоциати на депротонирана хиалуронова киселина с 3d метални йони от четвърти период на периодичната таблица, се получават директно от воден разтвор на натриев хиалуронат.
Новите асоциати съгласно изобретението включват главно цинков и кобалтов хиалуронат. Съставите, съдържащи въпросните асоциати, могат да бъдат фармацевтични (терапевтични) или козметични и възможно също така други състави. Съставите, съдържащи новите асоциати съгласно изобретението, се прилагат например, при ускоряване на епителизацията при затруднено епителизиране на повърхности от тялото; за лечение на бедрена язва, декубитус (язва от залежаване), първични незаздравяващи рани, изгаряния, радиационни или термично индуцирани рани, вулгарно акне, комглобетично акне, а също и при други заболявания.
Предшестващо състояние на техниката
Хиалуроновата киселина има макромолекула, известна повече от петдесет години, която за пръв път е открита от Meyer et al [J. Biol. Chem. 107, 629 (1954); J.Biol.Chem. 114, 689 (1936)]. Хиалуроновата киселина представлява силно вискозен природен глюкозаминогликан, съдържащ алтернирана β13 глюкуронова киселина и β] глюкозаминови единици; нейната молекулна маса е между 50 000 и няколко (8 до 13) милиона. Извличането на хиалуроновата киселина е стара задача за разделяне10 то и приложението на съвсем чиста хиалуронова киселина и това е описано, например в US 4 141 973 и US 4 303 676 и ЕР 0 144 019. В последно време хиалуроновата киселина се използва под формата на натриева сол, например в терапията, главно в офталмолога ята, хирургията и козметиката. Солите на хиалуроновата киселина с алкалните, алкалоземните, магнезиевите, алуминиевите, амониевите или заместените амониеви йони могат да се използват като носител за ускоряване на абсорбцията на лекарства /вж. BE 904 541/. Солите на хиалуроновата киселина с тежки метали (където “тежки метали” означава елементите от 5-ти, 6-ти и 7-ми период на периодичната таблица, както и лантанидите и актинидите, между които и сребърната сол, се използват като фунгицидни агенти, като златната сол се използва за лечение на артрит /вж. WO 87/05517/.
Чрез различни методи е доказано, че вторичната структура, т.е. конформацията на хиалуроновата киселина се променя при свързване с метални йони [W. Т. Winter and A. Sruther: J. Mol. Byol. 517, 761 (1977); J. K. Sheehan and E. D. Atkins: Ind. J. Byol. Macromol. 5, 215 (1983); и N. Figueroa and B. Chakrabarti: Biopolimers 17, 2415 (1978)]. Значителни разнообразни ефекти върху молекулната структура може да бъдат упражнени дори от метални йони с подобен характер, както е показано чрез сравнителни Х-лъчи изследвания на калиев и натриев хиалуронат (А. К. Mitra et al: J. Macromol. Sci. Phys. 824, 1 and 21 (1985)]. Това в още по-голяма степен е валидно за съединенията на хиалуроновата киселина, образувани с металните йони от различни видове, имащи различен заряд.
В литературата не са описани асоциати (комплекси) на хиалуроновата киселина с 3d метални йони от 4-ти период на периодичната таблица; в действителност съгласно изследванията с гелфилтрираща хроматография, хиалуроновата киселина, противоположно на хепарина, е неспособна да свързва цинкови йони (R. F. Parish and W. R. Fair; Biochem. J. 193, 407 - 410 (1981)].
Техническа същност на изобретението
Въпреки, че съгласно литературните данни хиалуроновата киселина (или нейната натриева сол) е неспособна да свързва цинкови йони, авторите на настоящото изобретение си поставиха за задача да изследват координационната химия на взаимодействието между хиалуроновата киселина и 3d метални йони от 4-ти период на периодичната система и между тях най-вече цинковите и кобалтовите йони. Доколкото хиалуроновата киселина е напоследък комерсиализирана под формата на натриевата си сол, бидейки базово вещество за всички системи, съдържащи хиалуронати, изследванията започнаха с взаимодействието между натриевите йони и хиалуроната. За тази цел се измери свободната активност на натриевия йон във воден разтвор на натриев хиалуронат при използването на селективен стъклен електрод. От тези изследвания недвусмислено следва, че не повече от 60 % от въведените натриеви йони като еквивалент заедно с карбоксилатните групи на хиалуроната присъстват като свободни йони във водните разтвори, а остатъкът от 40 % е във форма, свързана с хиалуроната.
Съгласно нашите измервания, намалявайки концентрацията на натриевия йон, количеството на свързаните натриеви йони може да се повиши до 50 - 55 %, изчислено за всички налични карбоксилатни групи. По този начин се доказва, че за разлика от общоприетите свойства на солите, натриевият хиалуронат недисоциира изцяло във воден разтвор.
В следващия етап от изследванията воден разтвор на натриев хиалуронат се титрува с разтвор на цинков хлорид при използване на посочения йонно селективен електрон така, че да се проследи зарядът на активността на свободните натриеви йони в системата. Характеристичните криви, отразяващи процеса, са показани на фиг. 1. Вижда се, че нормално свързаните с хиалуроната натриеви йони се освобождават под действието на цинковите йони. На базата на тези измервания общата концентрация на натриеви йони се освобождава от еквивалентно количество цинк, което недвусмислено доказва, че цинковите йони са по-силно свързани с хиалуроната, отколкото натриевите йони. Така, старото становище, че хиалуроновата киселина е неспособна да свързва цинкови йони [R. F. Parrish and W. R. Fair: Biochem. J. 193, 407 (1981)] е експериментално отхвърлено.
По такъв начин известното на специалистите, което беше валидно до момента, бе ше опровергано.
От горните изследвания става ясно, че при взаимодействието на еквивалентни количества натриев хиалуронат и цинкови йони (цинков хлорид) във воден разтвор се образува асоциат на цинковия хиалуронат със стехиометричен състав. След подходящо изотонизиране, полученият разтвор може директно да се използва за терапевтични цели, като не е необходимо цинковото съединение да бъде получавано в твърдо състояние в отделен процес. Предварителните изпитания, проведени при използването на кобалтов йон и други 3d метални йони, води до подобни резултати.
Въпреки това комплексът се получава в твърдо състояние с цел характеризиране и директната среда на цинковия йон се определя при използването на “Extended X-ray Absorbtion Fine Structure” (EXAFS) метод. Установи се, че цинкът е обкръжен от 4 кислородни атома в първата координационна сфера. Дължината на Ζη-0 връзката е 199 pm, докато въглеродните атоми присъстват на по-голямо разстояние от 241 pm от цинковия атом.
Съгласно нашите изследвания цинковият хиалуронат се отличава значително от аналогичния меден комплекс, който съдържа 4 екваториални и 2 аксиални Си-0 връзки със стойности 194 и 234 pm съответно. Разстоянието между медния атом и следващите два въглеродни атома е 258 pm. Структурата на кобалтовия комплекс е подобна на цинковия комплекс, но не и на медния комплекс.
Така настоящото изобретение се отнася до асоциати (комплекси) на депротонирана хиалуронова киселина с 3d метални йони от 4-ти период на периодичната таблица.
Изобретението се отнася освен това до състав, съдържащ като активен ингредиент или носител асоциат (комплекс) на хиалуроновата киселина с 3d метални йони от 4-ти период на периодичната таблица, възможно също в смес с друг активен ингредиент (и) и/или адитиви.
Съгласно друг аспект на настоящото изобретение се предлага метод за получаване на нови асоциати (комплекси) съгласно изобретението, който включва:
а) добавяне на воден разтвор, съдържащ еквивалентно количество сол, за предпочитане хлорид на 3d метални йони от 4-ти период на периодичната таблица към воден разтвор на натриев хиалуронат или към друга сол (сол
на алкален или алкалоземен метал, възможно сребърна сол) на хиалуроната; или
б) разтваряне на асоциата, образуван от хиалуронова киселина с кватернерна амониева сол във водна суспензия на смесен разтворител, съдържащ воден разтвор на 3d метален йон от 4-ти период на периодичната таблица и разтворител, който е частично съвместим с водата, за предпочитане n-бутанол; и след това
- утаяване на асоциата (комплекса), получен от хиалуроновата киселина с 3d метален йон от 4-ти период на периодичната таблица с алканол или алканон по познат начин или
- отделяне на утайката от разтвора и след това, ако се желае
- сушене при меки условия.
На базата на посоченото е разработен метод за получаването на водни разтвори, съдържащи като активен ингредиент асоциат (комплекс) на цинков хиалуронат или подобен асоциат на 3d метален йон от 4-ти период на периодичната таблица. Тези разтвори се получават във всеки от случаите чрез директно взаимодействие на метален йон с хиалуронатния компонент. Този метод за получаване прави ненужно предварителното отделяне на посочените активни ингредиенти в твърдо състояние. В разтвора, получен при прилагането на метода съгласно изобретението, количеството на свободния (металнонесвързан) хиалуронат е незначително дори в присъствие на еквивалентно количество цинк. Под действието на излишък на цинкови йони, образуването на асоциат (комплекс) на цинков хиалуронат става количествено.
В процеса на получаването на металните асоциата по начина, описан по-горе pH се запазва около 5. Когато става въпрос за 0,2 % тегл./обем разтвор на хиалуронат pH достига стойност 5,4, докато при 0,5 % тегл./обем pH е 5. Когато е необходимо pH на последната система може да бъде установено на стойност 5,5 до 5,6 чрез добавянето на няколко капки изотоничен разтвор на натриев ацетат.
Прилагайки метода, описан по-горе, се получават два типа разтвори, съдържащи цинков хиалуронат като активен ингредиент.
1. Разтвор на цинков хиалуронат, направен изотоничен с излишък на цинков хлорид:
Имайки предвид, че свободният цинков хлорид самостоятелно може също да бъде използван в дерматологията, осмотичното наля10 гане на разтвора на цинковия хиалуронат се установява на изотонична стойност при използването на излишък от цинков хлорид. Така полученият разтвор не съдържа свободен (несвързан цинк) хиалуронат, но излишък на цинков хлорид присъства в системата заедно с цинковия хиалуронат.
2. Разтвор на цинков хиалуронат, превърнат в изотоничен с монозахарид или захарен алкохол.
За терапевтично приложение, при което присъствието на цинкови йони, несвързани с хиалуроната, е нежелателно, разтворът, съдържащ цинкови йони в количество еквивалентно на хиалуроната, се превръща в изотоничен при използването на полиалкохол (захарен алкохол, за предпочитане сорбитол) или моноили дизахарид (за предпочитане глюкоза). Съдържанието на свободен цинков йон и свободен хиалуронат в тези системи недостига 5 % от общото съдържание на цинк или от общото съдържание на хиалуроната съответно.
При прилагането на асоциатите съгласно изобретението може да се наложи получаването на състави, свободни от йони. А именно, асоциатите, получени съгласно горния метод на изобретението, обикновено съдържат натриев хлорид или друга сол, получена от изходния хиалуронатен катион и анион на 3d метална сол.
За получаването на асоциат на хиалуроновата киселина, свободен от сол и получен с 3 d метален йон, могат да бъдат приложени два различни варианта на метода, а те са следните:
а) Разтвор на кватернерна амониева сол се добавя на части към разтвор на познат хиалуронат, за предпочитане натриев хиалуронат. След задоволително пречистване новият кватернерен амониев хиалуронатен асоциат се утаява, разтваря се при интензивно разбъркване в двоен разтворител, състоящ се от воден разтвор на 3d метален йон от 4-ти период на периодичната таблица и разтворител, който е частично смесваем с водата, за предпочитане n-бутанол. Двете фази се оставят да се разделят, след това хиалуронатният асоциат се утаява чрез добавянето на алканол или алканон към водната фаза, утайката се отделя и промива; или
б) След добавянето на два до три обема С] 3 алканол или С3 4 алканон при разбърква4 не към разтвор на цинков хиалуронат, подходящо към неизотоничен разтвор, съдържащ цинков хлорид в еквивалентно количество по отношение на хиалуроната, цинковият хиалуронат се утаява, филтрира се и се промива с 5 алканол или алканон респективно, използван при утаяването. Ако е необходимо, цинковият хиалуронат се разтваря в свободна от йони вода и утаяването се повтаря.
Когато е необходимо получаването на твърд свободен от йони цинков хиалуронат, утайката се суши при понижено налягане и меки условия. Когато се изисква получаването на разтвор на свободен от йони цинков хиалуронат, се предпочита разтварянето на свободен от разтворител цинков хиалуронат. Съгласно който и да е от двата варианта на метода се получава свободен от йони твърд или разтворен продукт с различна чистота в зависимост от качеството на изходния цинков хиалуронат.
Резултатите от клиничните фармакологични изследвания на състава (пример 13), съдържащи като активен ингредиент цинков хиалуронат съгласно изобретението, са показани за лечение на бедрена язва за ускоряване на епителизацията на недостатъчно епителизирани повърхности. Като контрола се използва състав, съдържащ натриев хиалуронат.
Тези изследвания се провеждат върху 12 или 14 язви, съответно на 8 или 12 пациента, страдащи от бедрена язва. Разпределението на пациентите от двете групи според пола и възрастта, както и по природата на заболяването, е следното:
Активен ингредиент Брой на пациентите Жени Мъже Средна възраст Брой на обработените язви Характер на язвата*
А В С
Цинков хиалуронат 12 10 2 63,9 14 2 9 1
Натриев хиалуронат 8 6 2 65,7 12 - 7 1
* А - артериална, В - венозна, С - смесена
Лечението се осъществява по такъв начин, че преди започването му се провежда почистваща терапия съгласно действителното клинично състояние на язвата. Лечението с цинков или натриев хиалуронат съответно, започва върху почти почистени язви или в случаите, когато се наблюдава значително намаляване на замърсяванията. Лечението се провежда веднъж дневно по такъв начин, че съставът се накапва върху повърхността на по чистената язва в количество, което да омокри повърхността на раната с тънък слой.
Съставът се прилага четири седмици. В началото на лечението и веднъж седмично се попълва болничен лист и язвите на пациентите се документират фотографски. Взимат се проби за бактериологични изпитания.
Характеристиките, както и остротата на епителните поражения, се отбелязват със следните символи и резултати.
Характеристики
Повърхност (а)
Под 10 cm2
Между 10 cm2 и 25 cm2
Над 25 cm2
Острота
Характеристики
Острота
Инфекция (б)
Клинично чиста0
Покритие 50 %1
Покритие 100 %2
Некроза (в) (само в случай на артериална язва)
Отрицателна0
Под 10 %1
Между 10 % и 15 %2
100 %3
Без некроза4
Изчисление.
За изчислението се определят стойностите на отделните характеристики и общата острота се изчислява при използване на след- 20 ната формула:
s = а х b х с
Резултатите от клиничните фармакологични изследвания са илюстрирани в таблица 2. Резултатите от третирането с цинков хи- 25 алуронат са показани с кривите с кръстчета, докато тези от третирането с натриев хиалуронат са илюстрирани с кривата с квадратчета, като функция на броя на седмиците, включващи третирането. Стойностите на резултатите зо по ординатата представляват индекса на об щата острота, изчислен по горната формула.
За по-коректно сравнение на цинковия хиалуронат с натриевия хиалуронат, използван като контрола, на фиг. 3 са илюстрирани относителните коректни стойности по отношение на изходните стойности, приети за 100 %.
Изменението на относителните точни стойности се изчислява статистически като функция на броя (1 - 4) на седмиците. При третирането с цинков и натриев хиалуронат броят на язвите намалява под относителни стойности от 90 %, 80 %, 70 % и 60 %, съответно, след 1, 2, 3, 4 седмици на изследване. Резултатите са представени в таблица 1.
Таблица 1.
Активен ингреди- I седмица II седмица III седмица IV седмица
Разпределение на стойността на относителния резултат
90 % 80 % 70 % 60 %
под 1 над под 1 над под 1 над под 1 над
Цинков 1 I 1 I 1 I — I
хиалуронат 12 2 11 | 3 11 | 3 11 3
Натриев ] | 1 I 1 |
хиалуронат 4 1 8 7 1 5 6 | 6 3
От таблица 1 се вижда, че третирането с цинков хиалуронат е по-добро с всяка измината седмица в сравнение с резултатите, получени с натриев хиалуронат, използван като кон трола.
Статистическият анализ на получените резултати от въпросната хипотеза доказва, че предимството на състава, съдържащ цинков хиалуронат, е значително по-високо (р 99 %) в сравнение с натриевия хиалуронат.
При следващите статистически обработки се извършва детайлно описание на относи телните резултати в зависимост от времето на третиране. Получените резултати са сумирани в таблица 2.
Таблица 2.
Активен ингредиент в състава Брой и стойност на резултата при язвите
над 90% между 90 и 70% между 70 и 50% под 50%
I седмица Цинков хиалуронат 2 7 5 0
Натриев хиалуронат 8 3 0 1
II седмица Цинков хиалуронат 0 6 7 1
Натриев хиалуронат 4 3 5 0
III седмица Цинков хиалуронат 0 1 8 2
Натриев хиалуронат 2 5 5 1
IV седмица Цинков хиалуронат 2 1 7 3
Натриев хиалуронат 1 5 3 3
Данните от таблица 2 също подкрепят предимствата на цинковия хиалуронат. Детайлното статистическо изследване показва значителното понижение в зависимост от времето на третиране.
Следователно: от изчисленията на клинично-фармакологичните изследвания се доказва по-високата ефикасност на цинковия хиалуронат при по-малък брой язви; това предимство е особено изразено в началния период на третирането.
Изобретението се илюстрира, без да се ограничава, от следващите по-долу примери.
Съдържанието на протеин в хиалуроната (ХК) се определя по метода, описан от О. Н. Lowry [J. Biol. Chem. 193 (1951)]; вискозитетът на хиалуроната се измерва с вискозиметър на Освалд във физиологичен салинов разтвор при 25°С. Стойността на характеристичния вискозитет, екстраполирана към “О” концентрация, т.е.
НЪаГ е дадена по-долу. Съдържанието на ХК се определя при използването на метод, описан от Bitter [Anal. Biochem. 4, 330 (1962)].
Примерно изпълнение на изобретението
Пример 1. Получаване на разтвор на цинков хиалуронат
40,18 mg натриев хиалуронат се разтварят в 20,0 ml двойно дестилирана вода. По този начин изходната концентрация на хиалуроновата киселина е 2,009 mg/ml, еквивалентната концентрация на разтвора е 4,241 х 10’3 mol/1 (Na+ или димерни единици на хиалуроновата киселина). В процеса на измерването с микробюрета към реакционната смес се добавя разтвор на цинков хлорид с концентрация
0,05154 mol/1. Отначало разтворът се добавя на малки порции (0,05 ml), а след това на големи порции (0,1 до 0,2 ml). Изменението на потенциала на разтвора се измерва чрез прецизен потенциометър с цифров дисплей и се- 5 лективен към натриеви йони стъклен електрод и сребро/сребърен хлорид електрод. Титруването продължава до момента, в който потенциалът не се изменя от добавянето на допълнителна порция от титруващия разтвор. (Измерителната 10 система е калибрирана при условия, аналогични на практическото измерване).
Селективността на селективния към натриеви йони електрод се наблюдава също в присъствие на Zn2+ йони с цел да се контролира, 15 че изменението на потенциала при практическото измерване е предизвикано от освободените Na+ йони, а не от Zn2+ йони, въведени в разтвора. Разтворът на натриев хлорид с концентрация 2,00 х 10 3М се титрува с титруващ 20 разтвор на цинков хлорид при условия, подобни на описаните. С повишаването на концентрацията на Zn2+ йоните от 0 до 4.10'3 mol/Ι се наблюдава нарастване на потенциала до около 2 mV, докато практическото измерване показ- 25 ва изменение до около 20 mV при подобни условия. По този начин изчислението не се затруднява. В процеса на измерването нарастването на активността на натриевия йон, изчислено на базата на данните от измерването, 30 потвърждава количественото образуване на цинков асоциат.
Получаване на разтвор на цинков хлорид
Тъй като разтвор на цинков хлорид с точ- 35 на концентрация не може да бъде получен чрез претегляне, най-напред се приготвя разтвор с близка до желаната концентрация. При приготвянето му не трябва да се използва киселина, тъй като е възможно да настъпи непълно разт- 40 варяне на претегления цинков хлорид. След утаяване на неразтворимата утайка (около 30 min), мерителната колба се напълва до Марката и разтворът се филтрира през филтърна хартия. 45
Точната концентрация на филтрата се определя чрез комплексометрично титруване при използването на буфер 10 и индикатор ериохром черно Т. Разтворът на цинковия хлорид с точна концентрация 0,100 mol/Ι се получава 50 чрез прецизно разреждане на този разтвор.
Характеристиките на натриевия хиалу ронат, използван за получаването на разтвора, са следните:
Молекулно тегло
Съдържание на протеин
UV абсорбция А1^
А1% ЛМ0
Вискозитет [η]^°*
Съдържание на ХК* : 1850000 Далтона : 0,07 % тегл.
: 0,133 : 0,075 : 13,7 dl/g : 98,12 % тегл.
♦ХК = хиалуронова киселина
Пример 2. Получаване на разтвор за дерматологично и козметично приложение
12,5 ml разтвор на цинков хлорид с концентрация 0,100 mol/Ι, получен със свободна от йони вода, се добавя към 0,50 g натриев хиалуронат, претеглен в мерителна колба от 100 ml. (Може да бъде използвана също друга концентрация на цинковия хлорид, но количеството на цинковия хлорид трябва да бъде същото). Оставя се да набъбне натриевият хиалуронат (в продължение на 12 h) в напълнената до марката със свободна от йони вода колба, при което се получава разтвор на цинков хиалуронат с концентрация 0,5 % тегл./об.
Характеристиките на използвания за по лучаването на горния разтвор натриев хиалуронат са следните:
Вискозитет [η]^.0* ' 16,5 dl/g
Съдържание на протеин : 0,8 % тегл.
Пример 3. Получаване на разтвор на цинков хиалуронат за инжекционни разтвори
Описаните в този пример операции се провеждат в стерилни условия.
0,5 ml разтвор на цинков хлорид с концентрация 0,100 mol/Ι, получен при използването на двойно дестилирана вода (вода за инжекционно приложение, апирогенна, стерилна) се добавя към 0,20 g натриев хиалуронат (с качество чист прах), претеглени в мерителна колба от 100 ml и след това обемът се запълва до 50 ml с двойно дестилирана вода. Натриевият хиалуронат се оставя да набъбне една нощ, след това се разтваря при разклащане и колбата се допълва до марката с двойно дестилирана вода. Полученият разтвор се филтрира през мембранен филтър (размер на порите 0,45 μ), при което се получава разтвор на цинков хиалуронат с концентрация 0,2 % тегл./об.
Характеристиките на натриевия хиалуронат, използван за получаването на разтвора, са следните:
Качество
Молекулно тегло
Съдържание на протеин
UV абсорбция А^·
А'% м°
Вискозитет [η]^.
Съдържание на ХК чист, апирогенен стерилен прах : 1850000Далтона : 0,07 % тегл.
: 0,133 5 : 0,075 : 13,7 dl/g : 98,12 % тегл.
Пример 4. Получаване на разтвор на цинков хиалуронат, свободен от йони 10
600 ml етанол за анализ се добавят при разбъркване към 200 ml 0,50 % тегл./об. разтвор на цинков хиалуронат, получен съгласно при мер 2, утаеният цинков хиалуронат се филтрира през стъклен филтър, промива се двукратно 15 с по 50 ml етанол със същото качество и след това се суши при понижено налягане. По този начин се получават 0,88 g цинков хиалуронат, който се използва за получаването на 0,50 % тегл./об. разтвор на цинков хиалуронат, по 20 начина, описан в пример 2. Полученият разтвор на цинков хиалуронат не съдържа натриев хлорид, произлизащ от реакцията между натриевия хиалуронат и цинковия хлорид, така че той е практически свободен от йони. 25
Пример 5. Получаване на свободен от йони цинков хиалуронат или негов разтвор за терапевтично приложение
Операциите, описани в този пример, се провеждат в стерилни условия. 30
1500 ml етанол (химически чист) се добавят при разбъркване на порции към 500 ml разтвор на цинков хиалуронат, получен съгласно пример 3. След като прибавянето завърши, системата се разбърква още 30 min, утаеният 35 цинков хиалуронат се филтрира през стъклен филтър, промива се трикратно с по 100 ml етанол (химически чист) и се суши при понижено налягане при меки и стерилни условия.
Пример 6. Получаване на свободен от 40 йони цинков хиалуронат
200 ml 10 % тегл. разтвор на Hyamine* 1622 (puriss) (бензилдиметил/-2-/2-р-(1,1,3,3тетраметилбутил) фенокси/етокси/етил/амониев хлорид) се добавят при разбъркване към 45 разтвор, съдържащ 1 g натриев хиалуронат в 400 ml двойно дестилирана вода. Утайката, т.е. получената кватернерна амониева сол на хиалуроновата киселина, се отделя чрез центрофугиране, промива се двукратно с по 100 ml 50 двойно дестилирана вода и отново се центрофугира. Промитата утайка се разтваря в смесен разтворител, състоящ се от 400 ml 2 % тегл./ об. цинков хлорид във вода (pH 5,0 до 5,4) и 400 ml н-бутанол. След като се остави да се разделят двете фази, водният слой, съдържащ разтворения цинков хиалуронат, се филтрира през мембранен филтър (размер на порите 0,45 μ), цинковият хиалуронат се утаява чрез добавяне на 3 об. етанол, филтрира се върху стъклен филтър, промива се с етанол и се суши в азотна атмосфера при меки условия, при което се получават 0,82 g цинков хиалуронат.
Ако е необходимо, от получения цинков хиалуронат се получава 0,50 % тегл./об. разтвор, който след това се пречиства, както е описано в пример 4. Характеристиките на използвания като изходен материал натриев хиалуронат са следните:
Вискозитет : 16,5 dl/g
Съдържание на протеин: 0,18 тегл./об.
Цинковият хиалуронат може да бъде получен, както е описан по-горе, но като се излиза от асоциати, образувани от други кватернерни амониеви соли. За тази цел са подходящи амониевите соли като например:
а) карботетрадецилоксиметилтриметиламониев хлорид /вж. HU 188 537/;
б) хексадецилпиридинов хлорид;
в) цетилпиридинов хлорид;
г) триметиламониев хлорид и други такива.
Пример 7. Получаване на кобалтов хиалуронат
Изпълнява се процедурата, описана в пример 6, с тази разлика, че кватернерният амониев асоциат на хиалуроновата киселина се разтваря в смесен разтворител, състоящ се от 2 % тегл./об. воден разтвор на кобалтов (II) хлорид . 6Н2О и н-бутанол.
Пример 8. Получаване на воден разтвор, съдържащ 0,50 % тегл./об. цинков хиалуронат, превърнат в изотоничен с цинков хлорид
Около 50 ml разтвор на цинков хлорид с концентрация 0,110 mol/ί се добавят към 0,50 g натриев хиалуронат в мерителна колба от 100 ml и се оставя да набъбне в продължение на една нощ. След това натриевият хиалуронат се разтваря при разклащане и колбата се допълва до мярката с разтвор на цинков хлорид с концентрация 0,110 mol/1.
Осмотичното налягане на получения разтвор е 0,1491 mol/ί, изразено чрез еквивалентната концентрация на натриевия хлорид, pH е 5,0. Ако е необходимо, стойността на pH се установява между 5,5 и 5,6 чрез добавянето на 2,00 ml разтвор на натриев ацетат с концентрация 0,150 mol/Ι. След установяване на стойността на pH осмотичното налягане на сместа 5 е 0,1489, изразено чрез еквивалентната кон центрация на натриевия хлорид.
Приготвя се разтвор на цинков хиалуронат от особено чист натриев хиалуронат по начина, описан в пример 3, с двойно дестили- 10 рана вода в асептични условия и след това разтворът се филтрира през мембранен филтър (размер на порите 0,45 μ).
Полученият разтвор може да бъде използван също в инжекционни състави. 15
Пример 9. Получаване на воден разтвор, съдържащ 0,2 % тегл./об. цинков хиалуронат, превърнат в изотоничен с цинков хлорид
За краен обем от 100 ml, 0,20 g натриев хиалуронат се претеглят и се разтварят в разтвор 20 на цинков хлорид с концентрация 0,120 mol/1.
Разтварянето и получаването на разтвора на цинков хлорид с точна концентрация 0,120 mol/l се провежда по начина, описан в пример 1 (по усет чрез променяне на количес- 25 твото на цинковия хлорид).
Осмотичното налягане на разтвора е 0,154 mol/Ι, изразено чрез еквивалентната концентрация на натриевия хлорид; pH има стойност от 5,3 до 5,4. 30
Съдържание на ХК
Вискозитет
Съдържание на протеин : 1,96 mg/ml;
: 15,9 dl/g;
: 0,015 mg/ml;
Чистота на разтвора* : А1^ “ 0,015 ♦На базата на абсорбцията, измерена при
600 nm в кювета от 1 cm.
Разтворът се получава при използването на натриев хиалуронат с качество, характеризирано в пример 2, и използван най-вече за получаването на дерматологични и козметич- 40 ни състави.
Пример 10. Получаване на воден разтвор, съдържащ 0,50 % тегл./об. цинков хиалуронат, превърнат в изотоничен с глюкоза
Разтворът съгласно този пример съдър- 45 жа натриев хиалуронат и изчислено еквивалентно количество цинков хлорид.
12,50 ml разтвор на цинков хлорид с концентрация 0,100 mol/Ι се добавят към 0,50 g натриев хиалуронат, претеглен в мерителна 50 колба от 100 ml. (Може да бъде използвана и друга концентрация на цинков хлорид, но ко личеството на цинков хлорид трябва да бъде същото). Натриевият хиалуронат се оставя да набъбне в продължение на 12 h в разтвор на цинков хлорид, допълнен до 50 ml с вода, свободна от йони, и след това се разтваря чрез разклащане. След това се добавят 24,50 ml глюкозен разтвор с концентрация 1,00 mol/Ι и колбата се допълва до марката със свободна от йони вода.
Осмотичното налягане на разтвора е 0,1495 mol/Ι, изразено чрез еквивалентната концентрация на натриевия хлорид. pH има стойност 5,4. Общата концентрация на цинка е равна на 1,25 х 10'2 mol/1.
Разтворът се получава при използването на натриев хиалуронат с качествата, дадени в пример 2, и се използва най-вече за получаването на дерматологични и козметични състави.
Пример 11. Получаване на воден разтвор, съдържащ 0,2 % тегл./об. цинков хиалуронат, превърнат в изотоничен с глюкоза
Разтворът съгласно този пример съдържа натриев хиалуронат и изчислено еквивалентно количество цинков хлорид.
5,0 ml разтвор на цинков хлорид с концентрация 0,100 mol/1 се добавят към 0,20 g натриев хиалуронат, претеглен в мерителна колба от 100 ml и след това обемът се допълва до 50 ml с дейонизирана вода. Оставя се да набъбне в продължение на една нощ, натриевият хиалуронат се разтваря чрез разклащане, добавят се 27,0 ml глюкозен разтвор с концентрация 1,00 mol/Ι и колбата се допълва до марката със свободна от йони вода.
Осмотичното налягане на разтвора е 0,151 mol/1, изразено чрез еквивалентната концентрация на натриевия хлорид. pH има стойности 5,6 до 5,7. Общата концентрация на цинка е равна на 5 х 10 ’ mol/1.
Пример 12. Получаване на воден разтвор, съдържащ 0,5 % тегл./об. цинков хиалуронат, превърнат в изотоничен със сорбитол
Описаният по-долу разтвор на цинков хиалуронат се получава в асептични условия от натриев хиалуронат с изключително висока чистота, описан в пример 3, и дестилирана вода. Разтворът съдържа цинков хлорид в еквивалентно количество, изчислено спрямо натриевия хиалуронат.
Изпълнява се методът, описан в пример 10, с тази разлика, че вместо разтвор на глюкоза към разтвора на цинковия хиалуронат се добавят 23,50 ml разтвор на сорбитол с концентрация 1,00 mol/1 (182,19 g D-сорбитол в 1 1).
Така полученият разтвор се филтрира през мембранен филтър (размер на порите 0,45 μ). Този разтвор може да бъде използван за различни цели, включително и инжекционни състави.
Осмотичното налягане на разтвора е 0,1520 mol/Ι, изразено чрез еквивалентната концентрация на натриевия хлорид. pH има стойност 5,5. Общата концентрация на цинка е равна на 1,25 х 102 mol/1.
Пример 13. Получаване на воден разтвор, съдържащ 0,2 % тегл./об. цинков хиалуронат, превърнат в изотоничен със сорбитол
Описаният в този пример разтвор съдържа цинков хлорид в еквивалентно количество, изчислено по отношение на натриевия хиалуронат.
Описаният по-долу разтвор на цинков хиалуронат се получава в асептични условия от натриев хиалуронат с изключително висока чистота, описан в пример 3, и двойно дестилирана вода.
Изпълнява се методът, описан в пример 12, с тази разлика, че 0,2 g натриев хиалуронат се разтварят, прибавят се 5 ml разтвор на цинковия хлорид с концентрация 0,100 mol/1 и след това се добавят 26,50 ml разтвор на сорбитол с концентрация 1,00 mol/Ι и накрая разтворът се допълва до 100 ml. Така полученият разтвор се филтрира през мембранен филтър (размер на порите 0,45 μ). Този разтвор може да бъде използван за различни цели, включително и инжекционни състави.
Осмотичното налягане на разтвора е 0,1501 mol/Ι, изразено чрез еквивалентната концентрация на натриевия хлорид. pH има стойност 5,6. Общата концентрация на цинка е равна на 5 х 103 mol/1.
Съдържание на хиалуронат : 2,03 mg/ml
Вискозитет : 16,1 dl/g
Съдържание на протеин : 0,016 mg/1
Чистота на разтвора· : А’^ - 0,010 •На базата на абсорбцията, измерена при 600 ши в кювета от 1 cm.
Примери 14 до 26. В следващите по-долу примери компонентите на различните състави (фармацевтични и козметични състави) са дадени съгласно подбрани от нас рецептури.
Получаването на разтворите на цинковия хиалуронат се превръщат в изотонични по начин, описан в предишните примери. Тук “дестилирана вода за инжекционно приложение” означава двойно дестилирана вода, получена в асептични условия.
I. Инжекционни разтвори.
Съставите съгласно примери от 14 до 17 се използват за вътрешно кожно администриране, докато този от пример 18 се използва за интраокуларно приложение. Активният ингредиент, използван в тези примери, е с посоченото качество в пример 3.
Пример 14.
Активен ингредиент цинков хиалуронат 2,0 mg
Сорбитол 48,3 mg
Краен обем на водния разтвор, получен с дестилирана вода за инжекционно приложение 1,0 ml Пример 15.
Активен ингредиент цинков хиалуронат 5,0 mg
Сорбитол 42,8 mg
Краен обем на водния разтвор, получен с дестилирана вода за инжекционно приложение 1,0 ml Пример 16.
Активен ингредиент цинков хиалуронат 2,0 mg
Пропил р-хидроксибензоат 0,05 mg
Метил р-хидроксибензоат 0,5 mg
Глюкоза 48,6 mg
Краен обем на водния разтвор, получен с дестилирана вода за инжекционно приложение 1,0 ml Пример 17.
Активен ингредиент цинков хиалуронат 5,0 mg
Пропил р-хидроксибензоат 0,05 mg
Метил р-хидроксибензоат 0,5 mg
Глюкоза 44,1 mg
Краен обем на водния разтвор, получен с дестилирана вода за инжекционно приложение 1,8 ml Пример 18.
Активен ингредиент цинков хиалуронат 10,0 mg
Калиев сорбат 1,0 mg
Сорбитол 41,0 mg
Краен обем на водния разтвор, получен с дестилирана вода
за инжекционно приложение Съставите, описани в примери : 1,0 ml 20 до 28, Активен ингредиент кобалтов хиалуронат 50,0 mg
намират главно дерматологични и козметични Калиев сорбат 10 mg
приложения. Активният ингредиснт, използван Мек бял пчелен восък 125 mg
в тези примери, е с качеството, описано в при- 5 Сорбитан олеат 150 mg
мер 2. Цетилстеарилов алкохол 840 mg
II. Разтвори за локално приложение Глицерил моностеарат 1100 mg
Пример 19. Пропиленгликол 4750 mg
Активен ингредиент цинков Дестилирана вода ДО 10,0 g
хиалуронат 5,0 mg 10 Пример 25.
Калиев сорбат 1,0 mg Активен ингредиент цинков
Натриев ацетат 24,6 mg хиалуронат 50,0 mg
Краен обем на водния разтвор, 2-феноксиетанол 100 mg
получен с дестилирана вода 1,0 ml Натриев лаурилсулфат 100 mg
Пример 20. 15 Цетилпалмитат 400 mg
Активен ингредиент цинков Стеарин 400 mg
хиалуронат 2,0 mg Стеарилов алкохол 450 mg
Калиев сорбат 1,0 mg Цетилов алкохол 450 mg
Сорбитол 48,3 mg Бял вазелин 500 mg
Краен обем на водния разтвор, 20 Пропиленгликол 550 mg
получен с дестилирана вода 1,0 ml Глицерол 600 mg
III. Гелове за локално приложение Дестилирана вода до 10,0 g
Пример 21. Пример 26.
Активен ингредиент цинков Активен ингредиент кобалтов
хиалуронат 20,0 mg 25 хиалуронат 50 mg
Полиакрилова киселина 200 mg 2-феноксиетанол 100 mg
Натриев хидроокис с Натриев лаурилсулфат 100 mg
концентрация 30 % 50 mg Цетилпалмитат 400 mg
Калиев сорбат 10 mg Стеарин 400 mg
Дестилирана вода до 10,0 mg 30 Стеарилов алкохол 450 mg
Пример 22. Цетилов алкохол 450 mg
Активен ингредиент цинков Бял вазелин 500 mg
хиалуронат 20,0 mg Пропиленгликол 550 mg
Полиакрилова киселина 50 mg Глицерол 600 mg
Натриев хидроокис с 35 Дестилирана вода до 10,0 g
концентрация 30 % 40 mg Пример 27.
Пропиленгликол 1500 mg Активен ингредиент цинков
Калиев сорбат 10 mg хиалуронат 50,0 mg
Дестилирана вода дс * 10,0 mg Микрокристален восък 250 mg
IV. Кремове и мехлеми за локално при- 40 Пропиленгликол 500 mg
ложение Сорбитол 400 mg
Пример 23. Восък от вълна (ацетилиран) 500 mg
Активен ингредиент цинков Бял вазелин до 10 g
хиалуронат 50,0 mg V. Състави за почистване и зарастване
Калиев сорбат 10 mg 45 на гнойни рани и изгаряния.
Мек бял пчелен восък 125 mg Пример 28.
Сорбитан олеат 150 mg Активен ингредиент цинков
Цетилстеарилов алкохол 840 mg хиалуронат 10,0 mg
Глицерил моностеарат 1100 mg Калиев сорбат 1,0 mg
Пропиленгликол 4750 mg 50 Хидрофилен колоиден
Дестилирана вода ; цо 10,0 g силициев двуокис 50 mg
Пример 24. Сорбитол до 1 g

Claims (8)

1. Комплекс на депротонирана хиалуронова киселина и цинков или кобалтов йон.
2. Комплекс съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че като метален йон съдържа цинков йон.
3. Комплекс съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че като метален йон съдържа кобалтов йон.
4. Фармацевтичен състав, характеризиращ се с това, че съдържа комплекс съгласно която и да е от предишните претенции в смес с един или повече носители и/или адитиви, за предпочитане тези, които обикновено се използват във фармацевтичната индустрия и, съдържащи, евентуално също така, един или повече допълнителни терапевтично активни агенти.
5. Козметичен състав, характеризирища се с това, че съдържа комплекс, дефиниран в която и да е от претенции 1 до 3, евентуално заедно с адитиви.
6. Приложение на комплекс, дефиниран в която и да е от претенции 1 до 3 за производство на медикамент, ускоряващ епителизацията на части от тялото с епителна недостатъчност, и по-специално бедрена язва, декубитус, хронични рани, изгаряния, радиационни и термични рани, вулгарно акне и/или комглобе- тично акне.
7. Метод за получаване на комплекс, дефиниран в която и да е от претенции 1 до 3, характеризиращ се с това, че включва:
5 а) добавяне на воден разтвор, съдържащ еквивалентно количество сол, за предпочитане хлорид, на метал към воден разтвор на хиалуронат, възможно сол на алкален, алкалоземен метал или сребърна сол, за предпочитане натриева сол; или
б) разтваряне на комплекс, образуван от хиалуронова киселина и кватернерна амониева сол във водна суспензия в смесен разтворител, съдържащ воден разтвор на метален йон и разтворител, който е частично съвместим с водата, за предпочитане н-бутанол; след това утаяване на получения комплекс с алканол или алканон по познатия начин, или отделяне на утайката от разтвора и след това, ако се желае, сушене при меки условия.
8. Метод за директно получаване на воден състав, характеризиращ се с това, че съдържа цинков хиалуронат, който метод се състои в добавяне към разтвор на натриев хиалуронат на воден разтвор, съдържащ поне стехиометрично количество цинков хлорид, необходимо за достигане на изотонично състояние.
BG098631A 1989-02-24 1994-03-01 Нови състави,съдържащи асоциати на хиалуроновата киселина и метод за получаването им BG61515B2 (bg)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
HU89891A HU203372B (en) 1989-02-24 1989-02-24 Process for producing hyaluronic associates and pharmaceutical compositions and cosmetics comprising such active ingredient

Publications (1)

Publication Number Publication Date
BG61515B2 true BG61515B2 (bg) 1997-10-31

Family

ID=10951903

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG098631A BG61515B2 (bg) 1989-02-24 1994-03-01 Нови състави,съдържащи асоциати на хиалуроновата киселина и метод за получаването им

Country Status (33)

Country Link
US (1) US5554598A (bg)
EP (1) EP0413016B1 (bg)
JP (1) JP2571312B2 (bg)
KR (1) KR960015624B1 (bg)
CN (2) CN1024557C (bg)
AR (1) AR243538A1 (bg)
AT (1) ATE98964T1 (bg)
AU (1) AU623232B2 (bg)
BG (1) BG61515B2 (bg)
CA (1) CA2027596C (bg)
CZ (1) CZ281000B6 (bg)
DD (1) DD292263A5 (bg)
DE (1) DE69005394T2 (bg)
DK (1) DK0413016T3 (bg)
ES (1) ES2061016T3 (bg)
FI (1) FI101707B (bg)
GE (2) GEP19981358B (bg)
GR (1) GR1000869B (bg)
HK (1) HK1003003A1 (bg)
HU (2) HU203372B (bg)
IE (1) IE62408B1 (bg)
IL (1) IL93489A (bg)
LT (2) LT3806B (bg)
LV (2) LV10112B (bg)
MY (1) MY105168A (bg)
NO (1) NO301169B1 (bg)
PL (1) PL163417B1 (bg)
PT (1) PT93237B (bg)
RU (2) RU2099350C1 (bg)
SK (1) SK279530B6 (bg)
UA (2) UA26324A (bg)
WO (1) WO1990010020A1 (bg)
ZA (1) ZA901357B (bg)

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GR920100122A (el) * 1991-04-05 1993-03-16 Ethicon Inc Πολυσακχαρίτες οι οποίοι περιέχουν καρβοξύλιο με σταυροειδείς δεσμούς δια την πρόληψιν της προσφύσεως.
DE4115454A1 (de) * 1991-05-11 1992-11-12 Basf Ag Eisen-(iii)-hyaluronate
US5531716A (en) * 1993-09-29 1996-07-02 Hercules Incorporated Medical devices subject to triggered disintegration
IT1273742B (it) * 1994-08-01 1997-07-09 Lifegroup Spa Composizioni ad elevata bioadesivita' e mucoadesivita' utili per il trattamento di epitali e mucose
CN1064372C (zh) * 1994-08-26 2001-04-11 顾其胜 透明质酸钠制剂的制备方法
US6368356B1 (en) 1996-07-11 2002-04-09 Scimed Life Systems, Inc. Medical devices comprising hydrogel polymers having improved mechanical properties
HU225329B1 (en) * 1996-09-12 2006-09-28 Richter Gedeon Vegyeszet Use of zinc or cobalt hyaluronate associate for the manufacture of pharmaceutical compositions of antimicrobial activity
HU225991B1 (en) * 1997-04-29 2008-02-28 Richter Gedeon Nyrt Use of the zinc hyaluronate associate (complex) for the preparation of pharmaceutical compositions for oral use against peptic ulcer
US5906997A (en) * 1997-06-17 1999-05-25 Fzio Med, Inc. Bioresorbable compositions of carboxypolysaccharide polyether intermacromolecular complexes and methods for their use in reducing surgical adhesions
US7192984B2 (en) 1997-06-17 2007-03-20 Fziomed, Inc. Compositions of polyacids and polyethers and methods for their use as dermal fillers
US6869938B1 (en) 1997-06-17 2005-03-22 Fziomed, Inc. Compositions of polyacids and polyethers and methods for their use in reducing adhesions
JP2003089647A (ja) 1999-03-10 2003-03-28 Takada Seiyaku Kk 関節性疾患治療剤
US6566345B2 (en) 2000-04-28 2003-05-20 Fziomed, Inc. Polyacid/polyalkylene oxide foams and gels and methods for their delivery
US6913765B2 (en) 2001-03-21 2005-07-05 Scimed Life Systems, Inc. Controlling resorption of bioresorbable medical implant material
CZ12015U1 (cs) * 2002-01-18 2002-02-25 Cpn Spol. S R.O. Přípravek pro prevenci adheze bandáľe na ránu
GB2392913B (en) * 2002-09-11 2007-04-04 Johnson & Johnson Medical Ltd Wound dressings comprising complexes of oxidised celluloses with silver
WO2004024197A1 (en) 2002-09-11 2004-03-25 Johnson & Johnson Medical Limited Wound dressing materials comprising complexes of anionic polysaccharides with silver
HUP0303779A2 (en) * 2003-11-20 2006-02-28 Richter Gedeon Vegyeszet Pharmaceutical compositions containing hyaluronan complex for the treatment of sclerosis multiplex
JPWO2006121209A1 (ja) * 2005-05-13 2008-12-18 高田製薬株式会社 湿疹・皮膚炎群治療剤
WO2006121210A1 (ja) * 2005-05-13 2006-11-16 Takata Seiyaku Co., Ltd. 皮膚状態改善剤
JP4220513B2 (ja) * 2005-12-01 2009-02-04 株式会社資生堂 カチオン化ヒアルロン酸
CN100348621C (zh) 2005-12-02 2007-11-14 凌沛学 透明质酸铋及其制备方法和应用
CN1329414C (zh) * 2005-12-02 2007-08-01 凌沛学 透明质酸铋钾及其制备方法和应用
FR2918565B1 (fr) * 2007-07-12 2009-10-30 Biopharmex Holding Sa Hydrogel de carboxyalkylamide de chitosan, sa preparation et son utilisation cosmetique et dermatologique
ES2326721B1 (es) * 2008-01-04 2010-07-16 Endor Nanotechnologies, S.L. Conjugado de acido hialuronico para el tratamiento cosmetico y procedimiento de preparacion.
TWI383796B (zh) 2009-08-14 2013-02-01 Holy Stone Healthcare Co Ltd Use of hyaluronic acid mixture for the treatment and prevention of peptic ulcer and duodenal ulcer
TWI516269B (zh) 2009-08-14 2016-01-11 禾伸堂生技股份有限公司 使用於炎症性腸疾病（ｉｂｄ）治療和預防之透明質酸混合物
HUP0900717A3 (en) 2009-11-18 2012-02-28 Richter Gedeon Nyrt Pharmaceutical composition for urological use containing zinc hyaluronate
WO2011129370A1 (ja) 2010-04-14 2011-10-20 キユーピー株式会社 ヒアルロン酸金属塩の製造方法、ヒアルロン酸金属塩を含む化粧品の製造方法、ならびにヒアルロン酸亜鉛およびその製造方法
ES2376680B8 (es) 2010-08-16 2013-04-30 Nylstar, S.A. Fibra textil cosmética, procedimiento de obtención y su empleo.
CN102552309B (zh) * 2010-12-15 2013-06-05 北京理工大学 一种透明质酸金的用途及其制备方法
JP5763953B2 (ja) * 2011-03-31 2015-08-12 ロート製薬株式会社 外用組成物
CN102961396A (zh) * 2012-12-17 2013-03-13 程玉李 透明质酸金属盐在制备治疗皮肤病药物中的应用、其药物组合物及其制备方法
JP2016535781A (ja) 2013-11-03 2016-11-17 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 経皮薬物送達のためのイオン性液体
JP7179354B2 (ja) * 2016-08-29 2022-11-29 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 皮膚処置のためのイオン種に基づく局所処方物
EP3515511A1 (en) 2016-09-21 2019-07-31 Nestlé Skin Health SA Hyaluronic acid gel with a divalent zinc cation
WO2019001784A1 (en) 2017-06-28 2019-01-03 Nestlé Skin Health Sa HYALURONIC ACID GEL WITH A DIVALENT CATION
KR102665710B1 (ko) 2017-08-24 2024-05-14 노보 노르디스크 에이/에스 Glp-1 조성물 및 그 용도
US20230082544A1 (en) 2020-02-18 2023-03-16 Novo Nordisk A/S Pharmaceutical formulations
CN111647100B (zh) * 2020-07-14 2022-03-01 山东华熙海御生物医药有限公司 一种高分子量透明质酸锌的制备方法

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US441973A (en) 1890-12-02 rapieff
US3074927A (en) * 1960-04-12 1963-01-22 Paul D Saltman Metallic complexes of reducing sugars
US4141973A (en) * 1975-10-17 1979-02-27 Biotrics, Inc. Ultrapure hyaluronic acid and the use thereof
HU172831B (hu) * 1976-03-31 1978-12-28 Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar Sposob poluchenija kompleksov oligo- i poligalakturonnyk kislot s ionami zhiznenno vazhnykh metallov
US4303676A (en) 1980-03-21 1981-12-01 Balazs Endre A Hyaluronate based compositions and cosmetic formulations containing same
IT1229075B (it) 1985-04-05 1991-07-17 Fidia Farmaceutici Medicamenti per uso topico, ottenuti tramite l'impiego dell'acido ialuronico
US4623539A (en) 1983-02-04 1986-11-18 Tunc Deger C Nutrient barrier polysaccharide compositions and method of use
NO161573C (no) 1983-11-25 1989-08-30 Miles Inc Fremgangsmaate til fremstilling av hyaluronsyre.
JPS61286310A (ja) * 1985-06-10 1986-12-16 Kanebo Ltd メ−クアツプ化粧料
US4746504A (en) * 1986-03-14 1988-05-24 Bio-Technology General Corp. Heavy metal salts of hyaluronic acid and their use as antimicrobial agents
WO1987005517A1 (en) * 1986-03-14 1987-09-24 Bio-Technology General Corp. Heavy metal salts of hyaluronic acid useful as antimicrobial agents
US4742215A (en) * 1986-05-07 1988-05-03 Personal Computer Card Corporation IC card system
JP2511829B2 (ja) * 1987-03-19 1996-07-03 アースロファーム ピーティーワイ．リミティッド 抗炎症作用のある化合物および組成物

Also Published As

Publication number Publication date
AR243538A1 (es) 1993-08-31
CA2027596C (en) 2001-01-02
JP2571312B2 (ja) 1997-01-16
PL283942A1 (en) 1991-01-28
LV10965A (lv) 1995-12-20
US5554598A (en) 1996-09-10
DK0413016T3 (da) 1994-02-14
CN1086422A (zh) 1994-05-11
KR920700231A (ko) 1992-02-19
LT3873B (en) 1996-04-25
LTIP1474A (en) 1995-06-26
AU623232B2 (en) 1992-05-07
MY105168A (en) 1994-08-30
FI101707B1 (fi) 1998-08-14
DE69005394D1 (de) 1994-02-03
HU203372B (en) 1991-07-29
KR960015624B1 (ko) 1996-11-18
LV10112B (en) 1995-02-20
UA39174C2 (uk) 2001-06-15
RU2021304C1 (ru) 1994-10-15
ES2061016T3 (es) 1994-12-01
FI101707B (fi) 1998-08-14
GEP19981358B (en) 1998-08-25
FI905109A0 (fi) 1990-10-17
IL93489A (en) 1994-05-30
NO904584D0 (no) 1990-10-23
WO1990010020A1 (en) 1990-09-07
GR900100137A (en) 1991-06-28
IE900637L (en) 1990-08-24
CZ85790A3 (en) 1995-02-15
HU211465A9 (en) 1995-11-28
JPH03505231A (ja) 1991-11-14
HUT53128A (en) 1990-09-28
PL163417B1 (pl) 1994-03-31
ATE98964T1 (de) 1994-01-15
CA2027596A1 (en) 1990-08-25
LV10965B (en) 1996-08-20
DE69005394T2 (de) 1994-07-28
ZA901357B (en) 1990-11-28
UA26324A (uk) 1999-08-30
CZ281000B6 (cs) 1996-05-15
DD292263A5 (de) 1991-07-25
PT93237A (pt) 1990-08-31
SK85790A3 (en) 1998-12-02
IE62408B1 (en) 1995-01-25
GEP19971015B (en) 1997-05-30
NO301169B1 (no) 1997-09-22
CN1045394A (zh) 1990-09-19
LT3806B (en) 1996-03-25
EP0413016B1 (en) 1993-12-22
EP0413016A1 (en) 1991-02-20
PT93237B (pt) 1996-01-31
AU5108890A (en) 1990-09-26
SK279530B6 (sk) 1998-12-02
CN1024557C (zh) 1994-05-18
LV10112A (lv) 1994-05-10
GR1000869B (el) 1993-03-16
NO904584L (no) 1990-12-21
CN1051228C (zh) 2000-04-12
RU2099350C1 (ru) 1997-12-20
HK1003003A1 (en) 1998-09-30
LTIP1418A (en) 1995-05-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BG61515B2 (bg) Нови състави,съдържащи асоциати на хиалуроновата киселина и метод за получаването им
NL192917C (nl) Stabiele farmaceutische bereiding die granulocytkolonie-stimulerende factor bevat.
JP2613605B2 (ja) 抗菌物質として有効なヒアルロン酸の重金属塩
HU225967B1 (en) Process for producing of pharmaceutical compositions for the topical treatment of analgetic drug
EP0160071B1 (en) Eye drops composition
JPH06192130A (ja) ムコ接着性ポリマー
JPH05503700A (ja) 改良されたシクロデキストリンに基づくエリスロポイエチンの組成物
DE10161149A1 (de) Heparin-haltiges Ophthalmikum
US6458774B1 (en) Compositions containing hyaluronic acid associates and a process for preparing same
US5472950A (en) Compositions containing cobalt hyaluronic acid complex
DE602004006024T2 (de) Pharmazeutische zusammensetzung mit einem zink/hyaluronat-komplex zur behandlung von multipler sklerose
Campbell et al. Stability of amiodarone hydrochloride in admixtures with other injectable drugs
JP2000256196A (ja) 抗炎症，抗アレルギー剤
HRP930063A2 (en) Novel compositions containing hyaluronic acid associates and a process for preparing the same
SI9010671A (en) Novel compositions containing complexes of the hyaluronic acid and the procedure for their preparation
RU2813197C1 (ru) Лекарственная форма для подавления бактериальных инфекций, способ её организации
DE3441835A1 (de) Blutstillungsmittel
JP2001278791A (ja) 皮膚疾患処置用ゲル組成物
JPS6340166B2 (bg)