WO2004096249A1

WO2004096249A1 - Composition contenant radix codonopsis pilosulae et radix astragali et hedysari, sa methode de production et d'utilisation

Info

Publication number: WO2004096249A1
Application number: PCT/CN2004/000056
Authority: WO
Inventors: Weihong Xie; Chunhan Zhi; Desheng Tao
Original assignee: Li Min Pharmaceutical Factory Of Livzon Pharmaceutical
Priority date: 2003-04-29
Filing date: 2004-01-16
Publication date: 2004-11-11
Also published as: JP2011052005A; HK1072374A1; JP2006524639A; US20080206375A1; US20090169660A1; US20060110473A1; ATE401904T1; US20080206374A1; EP1523988A1; EP1523988B1; EP1523988A4; DE602004015219D1

Description

一种含有党参黄芪的组合物、其制备方法及用途技术领域

本发明涉及一种党参和黄芪的药物组合物，其主要成分由党参、黄芪按一定重量配比配制而成。本发明还公开了所述药物组合物的制备方法以及其用于制备免疫调节剂、治疗缺血性心脏病以及急性肺损伤的药物中的用途。背景技术

消化道恶性肿瘤为我国的高发肿瘤。由于难于及时发现，故早诊率较低，这不仅使该人群失去了宝贵的手术机会，而且由于机体邪盛正衰，气虚血瘀而致使机体免疫功能低下，不能耐受有效的化学药物治疗，近年来已成为临床上非常棘手的问题。

目前，恶性肿瘤的治疗方法有许多种。众所周知，由于西药的治疗如环磷酰胺、氨甲喋吟、 5-氟尿嘧啶、顺铂或阿霉素等主要通过抑制肿瘤细胞的核酸或蛋白质的合成而抑制肿瘤细胞的生长，因此对正常机体细胞也有明显的毒副作用，从而导致机体出现一些症状如恶心、呕吐、骨髓抑制等等，使很多病人不能耐受化疗而中断治疗，严重者甚至会危及生命。另外，由于肿瘤的发生与发展与人体的免疫功能有十分密切的关系，尤其是细胞免疫功能有着明显的关系，因此，在临床医学上一直希望寻找一种理想的免疫调节剂，用于提高全身的应激能力，维护化疗过程中机体的免疫活性，减少毒副作用，延长患者的生存期。

目前也有关于中药免疫调节剂的研究。如谢岩等在 ZL94101456. 8 中报道了一种含有人参和黄芪成分的注射液，用于提高人体免疫功能，抑制肿瘤的发生和发展。但在该专利中没有提供任何能够证明药物效果的实验数据，而且人参作为药物成份价格昂贵，长期服用对肿瘤病人来说负担较重，也容易造成病人因经济原因放弃治疗。针对该问题本发明的发明人在系统研究所述的药物组合物在免疫调节中的作用机制时意外的发现本发明公开的党参黄芪组合物还有其它的一些用途，如本申请人还意外地发现，党参黄芪组合物在治疗缺血性心脏病中具有确切的治疗效果，并且在急性肺损伤的预防与治疗中也有明显的作用，并已经实验证实。发明内容

本发明涉及一种从中药党参、黄芪中提取出的具有药用价值的组合物。

本发明还涉及一种该药物组合物的制备方法。

根据本发明的免疫调节剂，主要是由党参和黄芪为原料制成。所述的党参和黄芪的重量比范围优选为 0. 5 : 1至 1 : 0. 5，更优选为 1 - 1。

根据本发明的免疫调节剂的原料药中还可以含有补气、补血类中药，如当归、熟地、何首乌、白术、山药等。

本发明的免疫调节剂的制备方法包括下列步骤- a) 将党参、黄芪除杂质，加工成饮片；

b ) 按一定重量比称取党参和黄芪，用去离子水将其冲洗干净； c ) 根据称取的党参和黄芪的重量分次加入一定量的去离子水，加热提取 1〜3次，得到药物提取物；

d) 将药物提取物浓缩，得浓缩液；

e) 加入适量乙醇，常规沉淀，过滤，回收滤液中的乙醇并浓缩至干，即得党参、黄芪提取组合物。

在步骤 c ) 中将药物加水提取时，优选第一次加水 8倍量，煎煮 1 小时，第二次加水 6倍量，煎煮 0. 5小时。

在步骤 e)中将药物加乙醇沉淀时，优选第一次乙醇含量占总重量的 65%— 80%, 第二次乙醇含量不少于总重量的 80%。

本发明所述的中药党参为桔梗科植物 Codonopsis Pilosula (Franch. ) Nannf 的干燥根；中药黄芪（膜荚黄芪 Astragalus membranaceus (Fisch. ) Bge.或蒙古黄 Astragalus membranaceus (Fisch. ) Bge. Var. mongholicus (Bge. ) Hsiao ) 的干燥根。

本发明提供的免疫调节剂中，每 1克中含总固体物不少于 0. 325克，其主要成分为糖类物质（包括多糖、单糖)、有机酸、皂苷、香豆精（少量）、黄酮苷、生物碱、醇类、烷烃类物质等。其中主要活性成分为多糖类、皂苷类、香豆精类以及黄酮类物质。

本发明还涉及所述的党参黄芪组合物在制备调节免疫的药物中的用途。其中所述的党参黄芪组合物可以与化疗药、放射治疗或其他肿瘤抑制方法结合使用。

本发明进一步涉及所述的党参黄芪组合物在制备治疗缺血性心脏病的药物中的用途。所述的缺血性心脏病包括冠心病、心肌梗塞、心肌炎和由心肌缺血、心肌缺氧导致的其它心脏病。所述的缺血性心脏病包括由血小板粘稠度增加导致血小板聚集和 /或血栓形成引起的心脏病。所述的缺血性心脏病包括由缺血再灌注性损伤引起的心脏病。

本发明进一步涉及所述的党参黄芪组合物在制备由血小板过度聚集引起的疾病的药物中的用途。所述的由血小板聚集引起的疾病包括脑中风、动脉粥样硬化以及外周血管性疾病。

本发明进一步涉及所述的党参黄芪组合物在制备预防与治疗急性肺损伤的药物中的用途。

所述组合物可以以注射剂、片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、溶液、悬浮剂、乳剂的形式使用。所述组合物的有效剂量范围为 58〜70mg/kg 体重 /天。

在应用时，本发明的药物可以根据需要加入一种或多种药学上可以接受的载体，如稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等，制备成需要的剂型。

本发明提供的药物，根据实际需要，可进一步加工制成口服液、片剂、胶囊剂、颗粒剂以及注射剂等多种剂型。上述剂型均可按照药学领域的常规方法制备。附图说明

图 1为中药党参、黄芪的提取工艺。具体实施方式

以下通过实施例与试验例来进一步阐述本发明的免疫调节剂、其制备方法及其用途。实施例 1:党参、黄芪的提取与分离，以获得党参和黄芪的组合物。分别将党参、黄芪除杂质，加工成饮片。准确称定党参与黄芪各 400克用去离子水冲洗干净，加入 3200ml去离子水，加热提取 1小时后，放出提取液；再加入 2400ml去离子水，加热提取 1小时后，放出提取液；再加入 2400ml去离子水，加热提取 0. 5小时后，放出提取液。三次提取液过滤后合并，浓缩至 600 ml , 再加入浓度为 95 %的乙醇使含醇量为 60 %，沉淀 24小时，过滤；滤液回收至 400 ml, 加入浓度为 95 %的乙醇使含醇量为 80%，沉淀，过滤，回收乙醇并浓缩至 400 g，即得党参和黄芪提取组合物。

对本发明的药物可加适量乙醇冷藏保存，也可烘干后室温保存。在本发明的药物中，每 1克中含总固体物不少于 0. 325克，其主要成分为糖类物质（包括多糖、单糖）、有机酸、皂苷、香豆精（少量）、黄酮苷、生物碱、醇类、垸烃类物质等。其中主要活性成分为多糖类、皂苷类、香豆精类以及黄酮类物质。

以下通过试验例来进一步阐述本发明所述药物的有益效果，这些试验例包括本发明免疫调节剂组合物的动物实验和临床疗效观察实验。

试验例 1 : 党参、黄芪提取组合物的抗肿瘤作用及对氨甲喋呤致死作用的影响

1实验药物

党参、黄芪提取组合物：按上述实施例 1制备的党参、黄芪提取组合物，其中每 20ml中含等量党参、黄芪提取物 3. 25g，实验时将之水浴浓缩 2ml至 lml，流通蒸汽消毒 40分钟灭菌。

氨甲喋吟：上海第二制药厂，批号为 870615。实验时配成 lmg/ml 水溶液。

2实验动物：昆明杂种小鼠，雌性，体重 18〜22g，由中研院动物房提供。

3实验方法：

1 ) 将小鼠随机分为大剂量组、小剂量组和对照组。瘤株选用小鼠肉瘤 180，选取新鲜瘤组织在无菌条件下制成细胞匀浆，以 1 : 4稀释，每只小鼠右腋皮下接种 0. 15ml ,于接种后 24小时开始给药。大剂量组给党参、黄芪提取组合物浓缩液 0. 4ml/只；小剂量组 0. 2ml/只，对照组给生理盐水 0. 4ml/只，均为腹腔注射，每日一次，连续给药 14天，第 15天处死动物，称取瘤重，求瘤重抑制率，用 t检验法进行统计学处理。

2 ) 小鼠分为两组，接种瘤细胞方法同前，于接种前三天开始给药组与对照组分别腹腔注射党参、黄芪提取物组合物和生理盐水 0. 2ml/ 只，每日一次，连续八次，于给药第四天接种瘤细胞，接种六小时后，腹腔内一次注射氨甲喋呤水溶液 22mg/kg，观察给氨甲喋呤后 10天内动物死亡情况，比较两组动物生存率。

4实验结果：

1 ) 党参、黄芪提取组合物对小鼠肉瘤 180的影响，结果见表 1、表 2。

表 1 党参、黄芪提取组合物（大剂量组）对小鼠肉瘤 180的影响

表 2 党参、黄芪提取组合物（小剂量组）对小鼠肉瘤 180的影响

从表 1、表 2中可以看出，给药 14天后两用药组平均瘤重均小于对照组，提取物 6. 50g/kg组抑瘤率三次实验分别为 36. 7%、 55. 28%, 33. 84%，经统计学处理与对照组具有显著性差异。提取物 3. 25g/kg抑瘤率三次实验分别为 20. 86%、 23. 40%、 19. 69%，说明党参、黄芪提取组合物对小鼠肉瘤 180有抑制作用。 2)党参、黄芪提取组合物对氨甲喋呤致死作用的影响，结果见表

3。

表 3 党参、黄芪提取组合物对氨甲喋呤致死作用的影响

※经直接计算概率法检验 0. 01<P<0. 05

从表 3可以看出，参芪组十天生存率明显高于对照组。经卡方检验 Ρ<0. 05，统计学处理有显著差异。实验提示党参、黄芪提取组合物对氨甲喋呤的致死作用具有保护性减毒作用，即可延长生存期。

上述两项实验表明党参、黄芪提取组合物对小鼠 180有抑制作用，能够降低氨甲喋呤对小鼠的死亡率，延长动物生存期。

试验例 2: 参芪注射液对造血系统的影响

1 实验药物：参芪注射液溶液，每支 20ml，含等量党参、黄芪提取物 3. 25g，实验时每只小鼠腹腔注射 0. 2ml (合每公斤体重 10ml)。

2实验动物：昆明种小鼠，体重 18-22g，接种 sl80瘤株，接种瘤细胞 24小时后，实验组腹腔注入参芪注射液 0. 2ml (约含生药 0. 2_g)，对照组注射同量水直至实验结束。实验中分两次腹腔注入环磷酰胺，每只 1. 5mg。

3实验结果：

1 ) 参芪注射液对小鼠骨髓细胞总数的影响

表 4 参芪注射液对小鼠骨髓细胞总数的影响

表 4结果说明环磷酰胺可造成小鼠骨髓细胞总数下降，合并参芪注射液后，骨髓细胞总细胞总数比对照组升高。

2)参芪注射液对小鼠骨髓有核细胞的影响

表 5 参芪注射液对小鼠骨髓有核细胞的影响

动物数 *107 (M±SD) 股骨 P值环磷酰胺对照组 10 5. 06 ± 1. 38 <0. 01 环磷酰胺加参芪组 14 8. 45 ± 5. 06

骨髓有核细胞代表有造血功能的细胞。表 5结果说明，合并参芪注射液，骨髓有核细胞计数明显高于单纯环磷酰胺对照组。

3) 参芪注射液对小鼠骨髓细胞体积的影响

表 6 参芪注射液对小鼠骨髓细胞体积的影响

骨髓细胞体积大小反映细胞的成熟程度，越幼稚，细胞体积越大，幼稚多代表造血母细胞。表 6 的结果说明合并参芪注射液比单纯环磷酰胺对照组平均体积大。（P 〈0. 01〉

4)参芪注射液对小鼠骨髓细胞压积的影响

表 7 参芪注射液对小鼠骨髓细胞压积的影响

骨髓细胞压积的高低代表细胞的大小和多少，表 7 结果说明合并芪注射液比单纯环磷酰胺对照组压积增多。（P〈0. 01 )

试验例 3: 参芪注射液具有协同的抑瘤作用

本试验例所用的实验药物与实验动物同试验例 2。参芪注射液合并环磷酰胺对瘤体的影响

参芪注射液能减轻化疗药对小鼠骨髓的抑制，但是否破坏化疗药的抗癌效果。关于这一点，以下实验进行了验证。 ·

表 8 参芪注射液合并化疗药对瘤体的影响

△环磷酰胺对照组与空白组对照比较

※环磷酰胺对照组与环磷酰胺 +参芪组比较

表 8 的结果说明本发明的党参、黄芪免疫调节剂组合物不但没有破坏化疗药的抗癌效果，相反，合并后参芪注射液比单纯化疗提高抑瘤率。参芪一组为人用量 4倍，参芪二组为人用量 2倍。

实验例 4

党参黄芪组合物对麻醉犬心肌缺血、心肌梗塞及相关冠脉血流量心肌耗氧量和血液生化指标的影响

健康成年犬 30只，雌雄兼用，体重 14. 02 ± 1. 90kg，由北京市通利实验动物养殖厂提供 [京动许字（2000 ) 第 010号] 。

实验药物党参黄芪组合物浓液： 5ml/支， 2g生药 /ml ; 合贝爽注射剂 (盐酸地尔硫注射剂）： lOmg/支，天津田边制药有限公司生产 (批号： 0003003)； 0. 9%氯化钠注射液：北京双鹤药业股分有限公司生产（批号： 000320332 ); 丹参注射液： 10ml/支， 1. 5g/ml，浙江杭州市正大青春宝药业有限公司生产（批号： 0003132 ); 硝基蓝四唑（N- BT) : 解放军军事医学科学院药材供应站（批号： 971120); 内皮素（ET)放免药盒，北京福瑞生物工程公司（批号： 0102); 血浆血栓素 (TXB₂)和 6-酮-前列腺素 Fl。 (6- eto-PGFl J放免药盒，北京福瑞生物工程公司 (批号: 0102)。

实验分组 (1)空白对照组， 3ml/kg， n-5 ; (2)合贝爽注射剂组， 0. 5mg/kg， n=5 ; (3)丹参注射液 0. 6g/kg剂量组， n=5 ; (4)党参黄芪组合物 0. 6g/kg剂量组， n=5 ; (5)党参黄芪组合物 1. 2g/kg剂量组， n=5 ; (6)党参黄芪组合物 2. 4_g/kg剂量组， n二 5。

实验药物用生理盐水配制成同体积（50ml )，电脑微量注射泵 (AJ- 5803型，上海）以 5ml/min的速度经股静脉给入所试药物。

实验方法:动物经戊巴比妥钠（30m_g/kg)静脉麻醉，气管插管，连接 SC-3型电动呼吸机；左侧第四肋间开胸，暴露心脏，剪开心包，做心包床；分离冠状动脉左旋支，放置电磁流量计（MF- 1100 型，）探头，测定心脏冠脉血流量；分离冠状动脉前降支中段，穿线以备结扎，造成急性实验性心肌缺血模型；缝置多点固定式心外膜电极，连接多道生理记录仪（RM- 6100型，日本光电），描记心外膜电图 ^σ>。结扎冠脉 15min，进行记录，作为给药前对照值，经股静脉给予实验药物或生理盐水，于药后 5、 15、 30、 45、 60、 90、 120、 180min记录 30个标测点心外膜电图，以 S-T段升高大于 2mv为判断标准，计算心肌缺血程度（S- T段升高总 m_V数∑- ST) 及心肌缺血范围（S-T段升高总点数 N-ST)。经颈外静脉插管至冠状静脉窦，于缺血前、缺血 15min (药前）、药后 15、 30、 60、 120、 180min取血，以血氧仪（AVL912型，瑞士）测定冠状静脉血氧含量；颈总动脉插管，测定动脉血氧含量，与冠脉血流量共同计算心肌耗氧量：心肌耗氧量 = (动脉血氧含量-冠状静脉血氧含量） X冠脉血流量 /100。按上述时间点取血以全自动生化分析仪（RA-1000 型，美国）测定血清肌酸磷酸激酶（CK)、乳酸脱氢酶（LDH) ; 全自动 Y记数仪（FT-630G型，北京）放免法测定 ET、TXB₂和 6-Keto-PGF,. 药后 180min记录完毕，立即取下心脏，生理盐水冲洗，称量全心重，在心脏结扎线以下，平行冠状沟均匀地将心室部分横切 5 片，置于 N- BT染液中，常温染色 15min。以多媒体彩色病理图象分析系统（MPIAS-500型，北京）测量每片心肌双侧的梗塞区（N-BT 非染色区）与非梗塞区（N-BT染色区），计算每片心肌的面积，心室总面积和梗塞区总面积。计算梗塞区占心室及占全心脏的百分比。

实验结果进行统计学处理，以 t检验判断其显著性。

实验结果

对犬心肌缺血 (心外膜电图标测）的影响

对犬心肌缺血程度（∑-ST ) 的影响，经十二指肠给药，党参黄芪组合物 1. 2g生药 /kg剂量组、 2. 4g生药 /kg剂量组均有减轻心肌缺血程度（Σ -ST)的作用，且 6g生药 /kg剂量组优于 3g生药 /kg剂量组。党参黄芪组合物 2. 4g生药 /kg剂量组动物药前∑ -ST 为 293. 80 ±97. 91mv，药后 5min即发挥作用， 15imn~180min，心肌缺血程度逐渐下降， 180min时∑- ST为 151. 40 ± 59. 54mv，下降了 45. 70 ± 26. 23 %，与药前及与对照组比较均差异显著（P〈0. 05 和 P<0. 01)； 1. 2g生药 /kg剂量组动物∑ -ST从给药后 30rain起开始下降，药物作用随给药时的延长而增加， ISOmin时，动物∑-ST 由 366. 80± 144. 99mv 降至前 212. 40±92. 77mv，下降了 40. 00士 18. 60 % , 与药前及与对照组比较均差异显著 (P<0. 05和 P〈0. 01)。

对犬心肌缺血范围 (NST)的影响

对照组给入生理盐水后，心肌缺血范围（N-ST)无明显改变。党参黄芪组合物 2.4g生药 /kg剂量组有明显减小心肌缺血范围 (N-ST)的作用，药后 120min、 180min， N- ST分别由药前 29.40 ±0.89个标测点，降至 26.60 ±2.70和 26.20 ±2.28个标测点，分别下降了 9.62±7.52%和 10.33±6.51%, 与给药前及对照组相比有明显差异（P<0.05)。

以上结果表明，党参黄芪组合物对实验性急性犬心肌缺血有明显的改善作用，可显著减轻心肌缺血程度（Σ-ST)及缺血范围

对犬急性心肌梗塞范围 (N - BT染色法测定)的影响

见表 9

表 9. 各给药组对犬急性心肌梗塞范围的影响 (n= 5, ±SD)

组别剂量 /kg 心脏面积 mm² 心室面积 mm² 梗塞区面积 mm² 梗塞区 /心梗塞区 /心室 nrt- 生理盐水 3ml 13185.9± 1947.7 4455.2±985.1 919.80±224.7 6.94±1.20 21.53±2.98 合贝爽 0.5mg 11838.0±2981.1 3883.1±859.8 281.30±159.9*** 2.27 ±0.73*** 7.44 ±2.61*** 丹参注射

0.6g 11309.1±1882.3 4622.8±582.2 487.50±158.0** 4.54±2.14 10.99±3.58** 液

参芪扶正 1.5g 11777.1±2011.7 4188.2±234·0 '556.80±180.1* 4.73 + 1.43* 11.13 ±4.24** 参芪扶正 3.0g 12042.9± 1735.3 4042.1±528.1 478.21 ±106.1** 3.94±0.45*** 12.32±2.60** 参芪扶正 6.0g 13561.6±3297.9 4994.0±691.8 484.30±113.2** 3.65 ±0.85*** 10.43 ±2.14*** 注：与对照组比较： *P<0.05， **:P<0.01， ***:P〈0.001。

对犬急性心肌梗塞范围 (N-BT染色法测定）的影响，见表 9。以定量组织学 N-BT染色法显示心肌梗塞范围，生理盐水对照组动物心肌梗塞区分别占心脏及心室的 6.94±1.20%和 21.53±2.98%；党参黄芪组合物三个剂量组可减少动物心肌梗塞区面积，其中 2.4g 生药 /kg 组心肌梗塞区面积分别占心脏及心室的 3.65±0.85%、 10.43±2.14%，分别较生理盐水对照组降低 47.40%和 51.55%，与生理盐水对照组比较均有非常显著性差异（均 P〈0.001)。合贝爽注射剂组梗塞区占心脏及占心室的百分比亦有显著缩小。

对实验性心肌缺血犬冠脉血流量的影响

结扎麻醉犬冠状动脉形成心肌缺血后，冠脉血流量有短时间代偿性增加，增加幅度 15%左右。合贝爽和党参黄芪组合物药后有显著增加缺血心脏冠脉血流量的作用， 2.4g 生药 /kg 剂量组药后 15〜180min冠脉血流量均有增加，其中 180min冠脉血流量增加了 23. 13 ± 23. 22°/。，与生理盐水组比较，有明显差异（P〈0. 05 )。

对实验性心肌缺血犬动、静脉血氧含量及心肌耗氧量的影响对照组生理盐水给药前后动脉、冠状静脉窦血氧含量及心肌耗氧量均无显著变化；合贝爽和党参黄芪组合物药后有不同程度的增加静脉窦血氧含量的作用趋势，而无统计学意义。党参黄芪组合物三个剂量组动物心肌耗氧量亦未见明显变化，硫氮革酮药后 15min则显著降低心肌耗氧量。

对实验性心肌缺血犬血液生化学指标的影响

1.对犬血清肌酸激酶 (CK)及乳酸脱氢酶 (LDH)活性的影响

心肌缺血前血清 CK：、 LDH 含量分别为 491. 70±20L 29u/L 和 86. 73±30. 01 u/L(n=25) ，结扎冠脉形成急性心肌缺血后，血中 CK、 LDH含量明显升高，分别为 669. 37+239. 09u/L和 100. 30±31. 29u/L。与缺血前比较 CK含量增加了 43. 98 %, LDH含量增加了 25. 55% , CK、 LDH 活性随着冠脉结扎时间的延长进一步增加；合贝爽和党参黄芪组合物 2. 4g生药 /kg剂量组能明显抑制心肌缺血、心肌梗塞引起的 CK、 LDH 活性升高，与对照组生理盐水比较有显著性差异（P〈0. 05)。

2.对犬血浆内皮素（ET)、血栓素（TXB2)及 6-酮-前列腺素 (6-Keto-PGFla)活性的影响

持续结扎犬冠状动脉过程中，生理盐水对照组动物血浆内皮素 (ET)、血栓素 B2 (TXB2)含量明显升高； 6-酮-前列腺素 (6- Keto-PGFla) 及 6-酮-前列腺素 /血栓素 B2比值明显下降。合贝爽和党参黄芪组合物对心肌缺血、心肌梗塞引起的血浆内皮素 (ET)活性有明显抑制作用，与对照组生理盐水比较有显著性差异，同时可明显升高 6-酮- 前列腺素 (6- Keto-PGF_ia)及 6-酮-前列腺素 /血栓素 B₂的比值。

本实验采用心外膜电图标测心肌缺血范围及程度，定量组织学 (N-BT染色法)测定心肌梗塞范围，同时测定冠脉血流量、心肌耗氧量及血清 CK、 LDH和血浆 ET、 TXB₂、 6- Keto- PGF_{l a}活性的变化，研究了党参黄芪组合物消化道给药对实验性犬急性心肌缺血、心肌梗塞及相关指标的影响。

实验结果证实，党参黄芪组合物具有明显改善犬急性心肌缺血

11

更正页（细则第 91条）和心肌梗塞的作用，减轻由心外膜电图标测的心肌缺血程度（∑

-ST) , 减小通过 N-BT染色所显示的梗塞区。

由不同病因造成局部冠状动脉狭窄或冠状动脉闭塞形成心肌缺血或心肌梗塞时，其它冠状动脉分支代偿性扩张和开放，可使心肌缺血或心肌梗塞得到缓解。当心肌发生大面积缺血和广泛性梗塞、这种代偿能力 "得不偿失" 时，则造成心肌坏死和不可逆损伤，发生生命危险。实验观察到党参黄芪组合物可明显增加心肌缺血和心肌梗塞时的冠脉血流量，表明其可促进侧支循环开放和建立，同时增加心肌的供氧。

肌酸磷酸激酶（CK)广泛存在于胞浆中，尤以心肌细胞为多。当心肌细胞损伤时 CK溢出，使其在血清中活性提高，血清 CK活性越高，反映心肌损伤越重。乳酸脱氢酶（LDH)在心肌梗塞时从组织细胞内大量释放于体液中，测定冠状静脉窦血中其活性，亦反映心肌损伤的程度。本实验观察到持续结扎犬冠状动脉 CK和 LDH 活性持续增加。实验证明党参黄芪组合物可部分抑制犬实验性心肌损伤时血清 CK、 LDH的溢出，降低血清 CPK、 LDH的活性。

前列环素（prostacyclin, PGI₂)、内皮素 ( endothelin, ET)、血栓素 A2 (thromboxane A₂， TXA₂)均为内皮细胞分泌的血管活性物质，其中 PGI₂为舒血管物质， ET和 TXA₂为縮血管物质。本实验通过测定 ET、PGI^ 终末代谢产物 6-酮-前列腺素 F_la( 6- keto- PGF_la ) 及 TXA₂的代谢产物 TXB₂等活性物质，观察持续结扎犬冠状动脉形成心肌缺血和心肌梗塞过程中的变化以及观察药物对其影响。结果表明，党参黄芪组合物对心肌缺血、心肌梗塞引起的血浆血栓素 (TXB₂) 活性升高有明显抑制作用，同时可提高血浆 6-酮-前列腺素 (6-Keto- PGF_ia)的水平。

上述结果表明，党参黄芪组合物可明显改善犬急性心肌缺血和心肌梗塞的病理表现，减轻心肌缺血的程度，减小心肌梗的范围。

试验例 5

党参黄芪组合物对缺血再灌注所致心肌梗塞的影响

Wistar种大鼠 56只，雄性，体重 260〜280g，北京医科大学动物部提供，合格证号：医动字第 01- 3056号。药物：党参黄芪组合物： 5ml/支， 2g生药 /ml ; 合贝爽注射剂 (盐酸地尔硫注射剂）： 10mg/支，天津田边制药有限公司生产（批号： 0003003) ; 丹参注射液： 10ml/支， 1. 5g/ml，浙江杭州市正大青春宝药业有限公司生产（批号： 0003132); 硝基蓝四唑（N-BT) : 解放军军事医学科学院药材供应站 (批号: 971120)。

实验方法: 动物随机分为 6组: 假手术组（取血清作正常对照），模型组，合贝爽 1. 0mg/k_g组，丹参注射液 1. 6g/kg组，党参黄芪组合物 8、 4、 2g生药 /kg组。药物以生理盐水稀释至所需浓度，给药体积为 4ml/kg，给药途径为左股静脉。

动物以戊巴比妥钠腹腔麻醉（45mg/kg)，仰位固定，心电图机

(ECG-6511型 CardiofaxX, 上海）以标准 II导联监测动物心电图；切开气管，插入气管插管，接呼吸机 (SC- 3型，上海)行人工呼吸 (32次 / 分，呼吸比值 1 : 3) ; 开胸，断 5肋，打开心包膜，暴露心脏，于冠状动脉左前降支根部穿线 (0号缝合线），备结扎用；穿线后稳定 10分钟，将一塑料凹管与血管并列，结扎 (无 ST段及 T波改变者淘汰），给入受试药物； 40分钟后，沿凹槽剪断结扎线，使前降支实现再灌注；缝合胸壁，恢复自主呼吸。

打开结扎 2小时后，腹主动脉取血，测定血清 SOD 、 MDA含量；心脏结扎线以下横切 5片， N- BT染色，采用多媒体彩色病理图文分析系统 (MPIAS- 500型，北京）以固定取象距离测量正常心肌及梗塞心肌面积，观察心肌梗塞程度；结果进行统计学处理 (t检验）。对心肌梗塞程度的影响 H 10

表 10. 党参黄芪组合物对心肌梗塞程度的影响 ( 士 s ) 正常心肌面积梗塞心肌面梗塞区占梗塞区占分组 N剂量 /kg

ram² 积誦 ² g 心室％心脏％模型组 8 293. 42+20. 87 92. 49+11. 09 0. 242+0. 048 31. 5±2. 8 25. 3+3. 9 合贝爽组 8 l. Omg 287. 98+23. 54 61. 72+9. 68** 0. 154±0. 027** 21. 6+4. 3**16. 6+2. 6** 丹参组 8 1. 6g 301. 72+41. 84 66. 20土 10. 96** 0. 165+0. 022** 22. 2+4. 2**17. 8±2. 9** 参芪扶正组 8 8g 298. 31+30. 99 66. 59+8. 97** 0. 186+0. 020** 22. 3+1. 5**18. 9+1. 6** 参芪扶正组 8 4g 303. 12±17. 23 66. 93+7. 66** 0. 179+0. 029** 22. 1+2. 5=κ* 17. 6+2. 7** 参芪扶正组 8 2g 308. 18+32. 31 74. 44+8. 73** 0. 206+0. 027 25. 1+2. 1**20. 86+2. 3*

*、 **: 与模型组比较 P<0. 05、 OTOL

实验结果证实，模型组梗塞区占心室及心脏百分比分别为 31. 5及 25. 3%；对照药合贝爽及丹参注射液组梗塞面积明显减小，梗塞区重量减轻，梗塞区占心室及心脏百分比降低，与模型组比较均有显著性差异 (P<0. 01、 )；党参黄芪组合物 8、 4g/kg组梗塞面积减小，梗塞区重量减轻，梗塞区占心室及心脏 g百分比降低，与模型组比较有显著性差异 (P<0. 01)； 2g/kg组梗塞面积减小，梗塞区占心室及心脏百分比降低，与模型组比较有显著性差异 (P<0. 05、 P<0. 01)。

对血清 SOD及 MDA含量的影响见表 11

表 11. 党参黄芪组合物对血清 SOD及 MDA_含量的影响（X土 s) 分组剂量 /kg MDA tnol/L)

假手术组 643. 2+167. 7 1. 93±0. 41

模型组 492. 8±53. m 2. 95+0. 46##

合贝爽组 1. Omg 660. 9±159. 7* 2. 35+0. 07**

丹参组 1. 6ml/kg 586. 3+92. 2* 3. 55±1. 91

参芪扶正组 8g/kg 508. 0+89. 4 2. 31+0. 37*

参芪扶正组 4g/kg 553. 5+87. 5 2. 33+0. 35**

参芪扶正组 2g/kg 520. 3+82. 7 2. 47+0. 91

注：与正常对照组比较 P<0. 01 ; *、 **与模型组比较 P〈0. 05、 P<0. 01.

实验结果证实，模型组 S0D值明显降低， MDA值明显增加，与假手术组比较均有显著性差异 (P<0. 05， P<0. 01)；阳性对照药合贝爽 SOD 值增加， MDA值降低；丹参注射液组 S0D值明显增加，与模型组比较均有显著性差异 (P<0. 05〜P<0. 01)，党参黄芪组合物 8. 0及 4. 0g/kg组 MDA值明显降低，与模型组比较有显著性差异 (P<0. 05， P〈0. 01)。

研究证实，心肌缺血后一定时间造成心肌损伤后，再灌注可加重缺血性损伤，从而导致心肌梗塞。

本实验以大鼠心肌缺血再灌注损伤模型观察药物作用。实验观察到，缺血再灌注导致心肌细胞膜损伤，模型组血清 S0D活性明显降低， MDA含量明显增高，间接反映了氧自由基的产生对心肌损伤的进一步加重。

党参黄芪组合物明显缩小心肌梗塞面积，梗塞区重量减轻，与对照药合贝爽及丹参注射液作用相似， MDA含量明显降低，对心肌缺血再灌注损伤有明显的保护作用。

试验例 6

党参黄芪组合物对犬心脏血流动力学及心耗氧量的影响健康成年犬 30只，雌雄兼用，体重 14. 10 ± 0. 22kg，由北京市通利实验动物养殖厂提供 [京动许字 ( 2000 ) 第 010号] 。

实验药物党参黄芪组合物： 5ml/支， 2g生药 /ml ; 合贝爽注射剂 (盐酸地尔硫注射剂）： 10mg/支，天津田边制药有限公司生产 (批号: 0003003)； 0. 9%氯化钠注射液：北京双鹤药业股分有限公司生产（批号： 000320332); 丹参注射液： 10ml/支， 1. 5g/ml，浙江杭州市正大青春宝药业有限公司生产（批号： 0003132)。

实验分组 (1)空白对照组，生理盐水 3ml/kg， n=5 ; (2)合贝爽注射剂组， 0. 5mg/kg, n=5 ; (3)丹参注射液 0. 6g/kg剂量组， n=5 _; (4)党参黄芪组合物 0. 6g/kg剂量组， n=5 ; (5)党参黄芪组合物 1. 2g/kg剂量组， n=5 ; (6)党参黄芪组合物 2. 4g/kg剂量组， n=5。

实验药物用生理盐水配制成同体积（50ml )，电脑微量注射泵 (AJ-5803型，上海）以 5ml /min的速度经股静脉给入所试药物。

实验方法实验动物用戊巴比妥钠（30mg/kg)静脉麻醉，气管插管，连接电动人工呼吸机（SC- 3型，上海）。施左侧第四肋间开胸术，暴露心脏，剪开心包，做心包床，分离冠状动脉左旋支及主动脉根部，放置电磁流量计（MF- 1100型，日本光电）探头，分别测量冠脉血流量及心输出量。左心室尖部插管，连接压力换能器 (MPU-0. 5A) , 经载波放大器（AP- 601G)测定左室内压，再经微分器 (ED- 601G)计算左室内压上升最大速率（dp/dt_max )。颈外静脉插管至冠状静脉窦，颈动脉插管，以血氧仪（AVL912型，瑞士）分别测定冠状静脉窦血氧含量及动脉血氧含量，计算心肌耗氧量。股动脉插管测定动脉血压，以肢体导联观测标准 II导心电图计算心率及相关心电图参数。公式计算其它血流动力学指标：心搏出量、耗氧指数、心脏指数、冠脉阻力、总外周阻力及氧利用率等。将上述各项指标同步记录于多道生理记录仪（RM- 6000型，日本光电）。

手术完毕，待所观察指标稳定后，记录药前值，给入所试药物。并于药中 5min、药后即刻、药后 1、 3、 5、 10、 15、 30、 60min 进行记录。将各项观测指标及推导参数进行统计学处理，以不同观察时间的实测值进行给药前后自身比较，其变化百分率进行组间比较，以 t检验判断其显著性。

实验结果

对犬动脉血压、心率及心电图的影响

合贝爽注射剂药后有明显降低血压和减慢心率的作用；党参黄芪组合物 1. 2g生药 /kg和 2. 4g生药 /kg两个剂量组药中及药后短时间内（lmin ) 均可降低动脉血压；党参黄芪组合物也可减慢心率。药后动物标准 II心电图 PR间期、 QRS间期、 QT间期及 T波等参数均无明显变化。

对犬冠脉血流量及冠脉阻力的影响

生理盐水给药前后冠脉血流量、冠脉阻力均无明显变化。党参黄芪组合物 0. 6g生药 /kg组药后冠脉血流量有所增加，其余两组作用不明显。党参黄芪组合物三个剂量组均可降低冠脉阻力，给药过程中冠脉阻力降低并持续至药后 60min，幅度在 15%左右。钙拮抗剂合贝爽注射剂亦可明显增加冠脉血流量和降低冠脉阻力。

对左室收缩力、左室作功的影响

各实验组药后动物左室收缩力和左室作功未见明显变化。

对犬左室内压、左室内压最大上升速率的影响

党参黄芪组合物三个剂量组药后左室内压、左室内压最大上升速率（dp/dt_max )与对照组比较均无显著性差异。

对犬心输出量、心搏出量及总外周阻力的影响 ■

党参黄芪组合物 2. 4g生药 /kg剂量组药后，心输出量逐渐增加， 5min时作用最明显，与药前及与生理盐水组比较有显著性差异（P<0. 05〜0. 01 ) ；同时可明显降低外周阻力；硫氮蕈酮则明显增加心搏出量，减少外周阻力。

对犬动脉血氧含量、静脉血氧含量的影响

16

更正页（细则第 91条）党参黄芪组合物 2. 4g/kg剂量组动物药后 5至 15min，冠状静脉窦血氧含量明显增加，与药前及生理盐水对照组比较均有明显差异（P<0. 05- 0. 001)。

对犬心肌耗氧量、耗氧指数及氧利用率的影响

党参黄芪组合物组心肌耗氧量和氧利用率无明显改变；给药过程中和药后短时间内可明显降低心肌耗氧指数。

本实验观察了党参黄芪组合物对正常麻醉犬心脏血流动力学、心肌耗氧量的影响，用合贝爽注射剂做为阳性对照药，证实实验方法及所取指标的可靠及灵敏性。

实验结果显示，党参黄芪组合物有扩张冠脉血管、增加冠状静脉窦血氧含量的作用，从而改善心肌的供血供氧；同时改善左室作功，增加心输出量，调整心脏血管的顺应性，对心血管系统起到一定的调整和改善作用，为临床治疗缺血性心脏病提供了实验依据。 ·

试验例 7

党参黄芪组合物对大鼠体外血栓形成及血液粘度的影响

^^党参黄芪组合物： 5ml/支， 2g生药 /ml ;丹参注射液： 10ml/ 支， 1. 5g/ml，浙江杭州市正大青春宝药业有限公司生产（批号： 0003132)；注射用赖氨匹林 (0. 9g/瓶，相当于阿司匹林 0. 5g) : 安徽省蚌埠来比林制药厂生产（批号： 000116 ); 0. 9%氯化钠注射液：北京双鹤药业股分有限公司生产（批号： 000320332)。

健康雄性 Wis tar大鼠 60只，体重 248. 9± 16. 9g，由中国中医研究院医学实验动物中心提供，合格证号：医动字第 01-3067号。体外血栓形成仪， SDZ- 型，江苏无锡县电子仪器厂产品。血液粘度测定仪， LG-R- 20型，北京世帝科学仪器公司产品。

实验方法' 60只大鼠随机分为 6组 (每组 10只）：①对照组（0. 9% 氯化钠注射液， 4ml/kg)， ②党参黄芪组合物大剂量组 (8g生药 /kg)， ③党参黄芪组合物中剂量组 (4g生药 /kg) ,④党参黄芪组合物小剂量组（2g 生药 /kg)， ⑤丹参注射液组（1. 6g 生药 /kg)， ⑥赖氨匹林组 (90mg/kg)。各组动物按所述剂量以 4ml/kg的注射量经尾静脉注射给药，每日一次，连续给药 3 日，末次给药后 30min，用戊巴比妥钠 (30. 0mg/kg)麻醉，从腹主动脉取血 2ml用于体外血栓形成测定，取血 3ml (肝素抗凝)用于血液粘度测定。

体外血栓形成测定：按照 Chandler体外法，立刻将血注入旋转环内，注入的血量充满旋转环 1/2以下（1. 8ml)，迅速密封，置血栓形成仪上，旋转 lOmin (实验温度为 37°C)，倾出血栓，生理盐水洗涤，测量长度，称量湿重，将血栓条置 80°C烘箱 3h，恒重后称其干重。

血液粘度测定：从 3 ml血 (肝素抗凝）中取 0. 8 ml用于全血粘度测定，余血于 650 X g离心 10 min，取上清 0. 8 ml用于血浆粘度测定。对体外血栓形成的影响见表 12

表 12.党参黄芪组合物对大

动物血栓

剂量

组别数

(/kg) 长度 (ram) 湿重 (mg) 干重 (mg)

(n)

对照组 10 22. 0+1. 2 118. 7+11. 9 21. 6+1. 3 党参黄芪组合物 8g 10 18. 6+1. 2*** 98. 0+11. 8** 19. 1+2. 2** 党参黄芪组合物 4g 10 20. 2±1. 5** 109. 1+12. 2 20. 5+1. 8 党参黄芪组合物 2g 10 21. 3±1. 4 119. 0±12. 9 21. 8+1. 4 丹参注射液 1. 6g 10 20. 4+1. 2** 106. 1+7. 8* 20. 1+1. 2* 赖氨匹林 90mg 10 18. 8+1. 5*** 100. 1+12. 5** 18. 9+1. 4*** 注：与对照组比较 * P〈0. 05， **P〈0. 01， ***P<0. 001

由表 12可见，与对照组比较，党参黄芪组合物大剂量组的血栓长度显著缩短 (P〈0. 001)、血栓湿重及干重均显著减轻 (P〈0. 01) ; 中剂量组的血栓长度明显缩短 (P〈0. 01)，血栓湿重及干重有减轻趋势；小剂量组的血栓长度、湿重及干重与对照组比较均无明显差异。与对照组比较，丹参注射液组的血栓长度显著缩短 (P〈0. 01)、血栓湿重及干重均明显减轻 (P〈0. 05)；赖氨匹林组的血栓长度显著缩短 (P<0. 001)，血栓湿重及干重均显著减轻 (Ρ〈0. 0Γ0. 001)。

对血液粘度的影响见表 13

表 13 .党参黄芪组合物对大鼠血液粘度的影响 (η=10，土 SD) 动物全血粘度 (CP)

剂量血浆粘度组别中切

(jng kg) 高切（200S 中切（30S— ') 低切（5S— ') (100S-)

(n) (100S—

对照组 10 4. 23+0. 86 5. 41±1. 64 6. 68±2. 26 9. 90+4. 21 2. 69+1. 33 党参黄芪组合物 8g 10 3. 65±0. 39 4. 08+0. 42* 5. 11+0. 68* 6. 89±1. 13* 2. 41+1. 18 党参黄芪组合物 4g 10 3. 69+0. 64 4, 19+0. 95 5. 54+1. 94 8. 13+ 4. 14 2. 60+1. 47 党参黄芪组合物 2g 10 4. 16+0. 80 4. 67±0. 94 6. 00 ±1. 33 8. 48+2. 11 1. 98+1. 21

3. 72+0. 38*

丹参注射液 1. 6g 10 3. 35+0. 32** 4. 68±0. 55* 6. 43+0. 88* 2. 12+1. 20

*

赖氨匹林 90mg 10 3. 81+0. 91* 4. 71+0. 95* 6. 35+1. 03* 2. 38+1. 12 注：与对照组比较 * P<0. 05, ** P〈0. 01。

由表 13可见，党参黄芪组合物大剂量组大鼠的全血粘度在切变率 30S— ¹及 5S— ¹下均明显低于对照组 (P<0. 05)，在切变率 200S— ¹时有下降趋势；党参黄芪组合 o物中剂量组大鼠的全血粘度在切变率为 100S— ¹下有下降趋势，在高切与低切时与对照组比较无明显差异；党参黄芪组合物小剂量组的全血粘度在各切变率下与对照组比较无明显差异。丹参注射液组大鼠的全血粘度在各切变率下均明显低于对照组

(P<0. 05〜0. 01)。赖氨匹林组大鼠的全血粘度在各切变率下均明显低于对照组 (P〈0. 05)。各给药组大鼠的血浆粘度与对照组比较均无明显差异。

上述结果表明：给大鼠连续 3天静脉注射给药，党参黄芪组合物 8g生药 /kg显著缩短血栓长度 (P<0. 001)、明显减轻血栓湿重和干重 (P<0. 01)；明显降低切变率 100s— 30s— 5s— ¹下的全血粘度（P〈0. 05)。提示党参黄芪组合物具有抑制血栓形成、降低血液粘度的作用。

试验例 8

党参黄芪组合物对家兔血小板聚集的影响

党参黄芪组合物： 5ml/支， 2g生药 /ml ; 丹参注射液： 10ml/ 支， 1. 5g/ml，浙江杭州市正大青春宝药业有限公司生产（批号： 0003132) 0. 9%氯化钠注射液：北京双鹤药业股分有限公司生产 (批号： 000320332)；注射用赖氨匹林 (0. 9g/瓶，相当于阿司匹林 0. 5g)：安徽省蚌埠来比林制药厂生产（批号： 000116)。二磷酸腺苷 (ADP)二钠盐：中国科学院上海生物化学研究所生产（批号： 9209258)，用生理盐水配制成 1. 0mM/L的溶液， 4°C保存备用。花生四烯酸 (AA) : Fluka AG 产品，临用时用 Ι. ΟΜ/L NaOH配制成钠盐，浓度为 5. 0 g/L。胶原（100 μ g/ml)： K0KEN公司产品。

动物 48只健康雄性日本大耳白家兔，体重 2. 75±0. 15 kg, 由中国兽药监察所实验动物中心提供，合格证号：京动管质字 (1999) 第 004号。血小板聚集仪， BS634型，北京生化仪器厂产品。

实验法: 给药前穿刺耳中动脉取血测定血小板聚集率，根据血小板聚集率水平及体重将 48只家兔随机分为 6组 (每组 8只）: ①对照组 (0.9%氯化钠注射液， 2.5ml/kg)，②党参黄芪组合物大剂量组 ( (5 g生药 /kg) , ③党参黄芪组合物中剂量组 (2.5g生药 /kg)， ④党参黄芪组合物小剂量组 (1.25g生药 /kg)， ⑤丹参注射液组 (lg生药 /kg)， ⑥赖氨匹林组 (45mg/kg)。给药组按所述剂量经耳缘静脉注射给药，对照组注射等体积 0.9%氯化钠注射液，每日一次，连续给药 3日，末次给药后 30min，穿剌耳中动脉取血，测定血小板聚集率。

血小板聚集率测定方法：用硅化注射器穿刺耳中动脉取血， 3.8% 枸櫞酸钠溶液抗凝 (血：抗凝剂 =9： 1)， 200 Xg离心 8分钟，取上清部分即富血小板血桨 (PRP)，剩余部分 2200 Xg离心 10分钟，取上清部分即贫血小板血浆 (PPP)。 PRP中血小板计数为 4.0X10⁵ /mm³左右。按照 Born氏比浊法，将盛有 200ulPRP及 1小磁棒的比浊管置于血小板聚集仪中， 37Ό保温 1分钟，经 PPP标定后，在搅拌情况下加入诱导剂诱导聚集。所用诱导剂的终浓度为： ADP (47.6 μ M/L)、 ΑΑ (782.0 u M/L) , 胶原 (4.8mg/L)。根据仪器自动打印出来的聚集曲线及最大聚集率分析药物对血小板聚集的影响。最大聚集率计算公式如下：

聚集后 PRP透光度一聚集前 PRP透光度

最大聚集率 = X100%

PPP透光度一聚集前 PRP透光度

其实验结果见表 14 表 14. 党参黄芪组合物对家兔血小板聚集率的影响

剂量动物聚集率（ %, X士 SD)

诱导剂组别

/kg 数药前药后差值

ADP 对照组 8 65.23±8.76 66.42 ±8.64 1.19±7.09 参芪扶正 5g 8 66.56±6.56 59.08±6.26 -7.48±8.18* 参芪扶正 2.5g 8 65.23±8.36 60.90±6.93 - 4.33±11.95 参芪扶正 1.25g 8 65.26±7.98 61.13±3·82 -4.13 ±8.67 丹参注射液 lg 8 65.72±10.96 57.57±6.43 —8.15±9.48* 赖氨匹林 45mg 8 66.62±7.09 57.78±6.01 —8.85±6.37** 对照组 8 65.67±8.63 67.28±10.06 1.61±9.61 参芪扶正 5g 8 68.00±5.42 55.46±6.94 -12.54±6.01** 参芪扶正 2.5g 8 67.19±9.24 57.95±4.75 -9.25±9.57*

ΛΛ

参芪扶正 1.25g 8 64.62±7.22 63.13±9.46 -1.50±10.58 丹参注射液 lg 8 63.99 ±5, 46 54.86±4.60 - 9.12 ±8.29* 赖氨匹林 45mg 8 63.90±7.06 0.24±0.69 -63.65±7· 05*** 对照组 8 68.82±6.79 68.00±10.27 - 0.82 ±9.95 参芪扶正 5g 8 68.11±5.88 64.84±9.19 - 3.26±10.61 参芪扶正 2.5g 8 69.36±7.04 66.74士 6.58 - 2·62±6·41 参芪扶正 1.25g 8 68.01±6.40 66.05±7.89 -1.96±5.77 丹参注射液 lg 8 67.06±7.67 63.44±3.95 - 3.61±9, 69 赖氨匹林 45rag 8 66.49 ±3.83 45.29±5.72 -21.19+4.24*** 注： 1.与对照组比较: * Ρ<0.05， **Ρ<0·01, ***Ρ<0.001 =

2.差值 =给药后聚集率 -给药前聚集率

由表 14可见： ①当 ADP诱导聚集时，给药前各组间血小板聚集率无明显差异；给药后党参黄芪组合物大剂量组和丹参注射液组的血小板聚集率均明显低于对照组 (Ρ<0.05)，赖氨匹林组的血小板聚集率明显低于对照组 (Ρ〈0.01)，党参黄芪组合物中剂量组和小剂量组的血小板聚集率与对照组比较有下降趋势。②当 ΑΑ诱导聚集时，给药前各组间血小板聚集率无明显差异；给药后党参黄芪组合物大剂量组和中剂量组的血小板聚集率均明显低于对照组 (Ρ〈0.05〜0.01)，党参黄芪组合物小剂量组的血小板聚集率与对照组比较无明显差异；丹参注射液组的血小板聚集率明显低于对照组 (Ρ〈0.05)；赖氨匹林组的血小板聚集率显著低于对照组 (Ρ<0.001)。③当胶原诱导聚集时，给药前各组间血小板聚集率无明显差异，给药后赖氨匹林组的血小板聚集率显著低于对照组 (Ρ<0.001)，其它各组的血小板聚集率与对照组比较均无明显差。

上述结果表明：连续 3天静脉注射给药，党参黄芪组合物 5g生药 /kg明显降低二磷酸腺苷 (ADP)和花生四烯酸 (AA)诱导的家兔血小板聚集率 (P<0.05〜0.01)，党参黄芪组合物 2.5g生药 Zkg明显降低 AA诱导的家兔血小板聚集率 (P<0.05)。提示党参黄芪组合物具有抑制血小板聚集的作用。

实验例 9

1实验药物党参、黄芪提取组合物：按上述实施例制备的党参、黄芪提取组合物，其中每 20ml中含等量党参、黄芪提取物 3. 25g，实验时将之水浴浓缩 2ml至 lml，流通蒸汽消毒 40分钟灭菌。

LPS: (美国 Sigma公司，粉剂，使用前用无菌生理盐水稀释）。地塞米松：（成都第一制药厂）

2实验动物： Wistar大鼠 (四川大学华西校区动物中心提供，微生物控制等级二级）

3实验方法：

分组：

将 60只大鼠随机分为正常对照组、造模组（LPS+NS组)、地塞米松干预（治疗）组（LPS+DEX组）以及参芪扶正注射液干预（治疗）组 (LPS+SQ组）四组，其中造模组、 LPS+DEX组和 LPS+SQ组每组分为 1 小时、 2小时、 4小时 3个时相小组，共 10小组，每小组 6只大鼠用于实验。

实验方法：

1、准备工作

实验前三天对实验中所需器械、容器及移液等均高温高压消毒，烘干待用；部分涉及提取总 R A的实验用品予 DEPC水浸泡过夜后消毒烘干。

2、 ALI模型制备及给药方法

LPS+SQ组共 18只大鼠于造模前 1周每天腹腔注射党参、黄芪提取组合物 2ml进行预处理； LPS+DEX组 18只大鼠于造模前 2 小时腹腔注射地塞米松 50mg/kg; LPS+NS组 18只大鼠于造模前 2 小时注射生理盐水。除正常对照组外，上述三组均在实验时尾静脉注射 LPS (4mg/kg)。

3、标本采集

所有动物均于设定时相点，予水合氯醛腹腔注射麻醉后，经颈动脉釆血 2ml， 800gr/min离心 8分钟，吸取上清液置零下 20度冰箱备用；开胸取右肺下叶置于经 DEPC水处理后的 EP管中，立即放入零下 70度低温冰箱冻存供提取总 RNA; 取右肺上叶于 10°/。甲醛液中浸泡固定；取左肺测肺湿干重比值。 4、于相应定时点，取动物肺组织进行肉眼观察和 HE染色方法光镜下观察，同时测量其湿 /干重比例。

实验结果：

所有实验动物尾静脉注射 LPS后，均出现呼吸急促，口唇发绀，精神萎靡，少动少食，尤以 LPS+NS组各时相点明显，而 LPS+DEX组和 LPS+SQ 组表现相对较轻，持续时间较短。在实验所设定的各时相点所有动物均存活。

大体观察

正常对照组肺组织呈白色略红，组织柔软有弹性； LPS+NS lh组肺上即观察到充血、水肿，表面偶见散在瘀点； 2h组见肺表面呈暗红色，明显充血水肿，可见片状瘀斑及出血灶； 4h组肺大体情况与 2h相似。 LPS+DEX组及 LPS+SQ组大体观察较 LPS+NS组同时相点有不同程度减轻。

光镜观察

与大体观察结果基本一致。正常对照组肺组织结构清晰，肺泡壁薄，肺间质水肿、增宽，炎性细胞浸润，急性肺损伤病理程度分级多为轻度； 2h组肺细胞损伤最明显，可见肺间质明显增宽、渗出、水肿，透明膜形成，肺泡出血，大量炎性细胞浸润， ALI病理程度分级为中到重度； 4h组肺细胞损伤程度与 2h组基本相同， ALI病理程度分级多为中度; LPS+NS组相同点均有不同程度减轻。各组肺损伤病理程度分级见表 15。

各组肺损伤程度病理分级

秩和捡验显示：在造模组与各干预组间 lh时点病理变化差异不明显（p〉0. 05)， 2h及 4h时点病理改变差异有显著性（p<0. 05) ；各干预组内不同时点比较， LPS+NS组差异明显（p<0. 05), LPS+DEX组和 LPS+SQ 组内差别无统计学意义（p〉0. 05 )。

肺湿 /干比值 (W/D)变化

LPS+NS 组各时相点肺 W/D 均明显高于正常对照组 (p<0. 05)； LPS+DEX组及 LPS+SQ组同一时相点降低（P<0. 05)。见表 16。

表 16 各组肺 W/D变化

注： *: 与正常对照组比较 ρ 〈0. 05; Δ: 同时相点 LPS+NS组比较 p<0. 05 干预组内各时相点与 lh时相点比较 p〈0. 05

工业实用性

经动物试验和临床试验表明，本发明的免疫调节剂具有以下作用：

1.可以补脾益肾，治疗一切气虚、气损病人。

2.改善临床症状，延长胂瘤患者生存期，具有扶正固本作用。

3.维护造血功能，减轻放疗及化疗药物的毒副作用，减少放、化疗过程中白细胞下降。

4.增加巨噬细胞吞噬功能，提高淋巴细胞转化能力等，是一种理想的免疫调节剂。 .

5.有一定的抑瘤作用。

通过动物实验证明党参黄芪组合物有如下治疗缺血性心脏病的作用：

1、党参黄芪组合物具有明显改善犬急性心肌缺血和心肌梗塞的作用，明显减轻由心外膜电图标测的心肌缺血程度（Σ -ST) ; 縮小由心外膜电图标测的电图标测的心肌缺血范围（N- ST); 经 N- BT染色所显示的梗塞区；显著增加缺血心脏的冠脉血流量；对心肌缺血及心肌梗塞引起的血清乳酸脱氢酶（LDH) 的释放、肌酸激酶 CK)活性升高有明显的作用，同时升高心肌缺血时血浆 6-酮-前列腺素 F_la(6- Keto- PGF_la) 和 6- Keto- PGF JXB2的比值。

2、党参黄芪组合物能够减轻心肌损伤程度，心肌梗塞面积明显缩小，梗塞区重量明显减轻；降低血清丙二醛（MDA) 含量。

3、党参黄芪组合物可降低正常麻醉犬的动脉血压，减慢心率，扩张动脉血管，降低动脉阻力，增加心输出量和心捕出量，降低心肌耗氧指数，改善心肌的供血供氧，并能降低总外周阻力，对心血管系统起到调整和改善的作用。

4、党参黄芪组合物可以明显縮短大鼠外周血栓长度（pZ0. 001 )，明显减轻血栓湿重和干重（pZO. 01 ); 明显降低变率 100s— 30s-\ 5s— ¹下的全血粘度（pZO. 05)。说明党参黄芪组合物具有抑制血栓形成、降低血液粘度的作用。

5、党参黄芪组合物可明显降低二磷酸腺苷（ADP) 和花生四烯酸 (AA)诱导的家兔血小板聚集率（p Z0. 05~0. 01 )。表明党参黄芪组合物具有抑制血小板聚集的作用。

通过进一步的动物实验证实本发明参芪组合物可以明显减轻急性肺损伤期间的病理改变，即由脂多糖引起的急性肺损伤的病理改变，肺组织水肿明显减轻，与未处理组比较，肺组织湿 /干重比明显降低，单独使用本发明的参芪组合物对急性肺损伤的治疗作用几乎相当于单独使用地塞米松对急性肺损伤的治疗作用。

本发明对传统的中药党参、黄芪进行了全面的、系统的研究，明确了它们的有效部位，阐明了该药物的作用机制。并且有针对性地设计提取工艺，在保证药物有效性的同时，尽可能地去除杂质，以降低使用剂量，减小毒副作用。方法简单，实用性强，并且很有创造性和启发性，为中药现代化奠定了坚实的基础。

以上以实施例的方式对本发明进行了说明。但应该理解的是，上述实施例仅仅是为了阐明本发明，而非限制本发明，在本发明所附的权利要求范围内可以作多种修改和变动，而这些修改和变动也在本发明的范围之内。

Claims

权利要求书

1. 一种药物组合物，其特征在于它主要是由党参和黄芪为原料制成。

2. 根据权利要求 1所述的药物组合物，其特征在于所述的党参和黄芪的重量比范围为 0. 5: 1至 1 : 0. 5。

3. 根据权利要求 1或 2任一项所述的药物组合物，其特征在于所述的党参和黄芪的重量比为 1 : 1。

4. 根据权利要求 1所述的药物组合物，其特征在于所述的原料药还可以含有补气、补血类中药。

5. 根据权利要求 4所述的药物组合物，其特征在于所述的补气、补血类中药是当归、熟地、何首乌、白术、山药或其结合。

6. 一种含有权利要求 1所述的药物组合物的制备方法，它包括下列步骤：

a) 将党参、黄芪除杂质，加工成饮片；

b ) 按一定重量比称取党参和黄芪，用去离子水将其冲洗干净； c) 根据称取的党参和黄芪的重量分次加入一定量的去离子水，加热提取 1〜3次，得到药物提取物；

d) 将药物提取物浓缩，得浓縮液；

7. 根据权利要求 6所述的方法，其中在步骤 c )中将药物加水提取时，第一次加水 8倍量，煎煮 1小时，第二次加水 6倍量，煎煮 0. 5小时。

8. 根据权利要求 6所述的方法，其中在步骤 e ) 中将药物加乙醇沉淀时，第一次乙醇含量应占总重量的 65%— 80%，第二次乙醇含量不少于总重量的 80%。

9. 如权利要求 1-5所述的党参黄芪组合物在制备调节免疫的药物中的用途。

10.如权利要求 9所述的用途，其中所述的党参黄芪组合物可以与化疗药、放射治疗或其他肿瘤抑制方法结合使用。

11.如权利要求 1-5所述的党参黄芪组合物在制备治疗缺血性心脏病的药物中的用途。

12.根据权利要求 9所述的用途，其特征在于所述的缺血性心脏病包括冠心病、心肌梗塞、心肌炎和由心肌缺血、心肌缺氧导致的其它心脏病。

13.根据权利要求 9所述的用途，其特征在于所述的缺血性心脏病包括由血小板粘稠度增加导致血小板聚集和 /或血栓形成引起的心脏病。

14.根据权利要求 9所述的用途，其特征在于所述的缺血性心脏病包括由缺血再灌注性损伤引起的心脏病。

15.如权利要求 1-5所述的党参黄芪组合物在制备由血小板过度聚集引起的疾病的药物中的用途。

16.根据权利要求 13所述的用途，其特征在于所述的由血小板聚集引起的疾病包括中风、动脉粥样硬化以及外周血管性疾病。

17.如权利要求 1-5所述的党参黄芪组合物在制备预防与治疗急性肺损伤的药物中的用途。

18.根据权利要求 9-15任一项所述的用途，其特征在所述组合物是以注射剂、片剂、丸剂、胶囊剂、颗粒剂、溶液、悬浮剂、乳剂的形式使用。

19.根据权利要求 9-15任一项所述的用途，其特征在于使用所述组合物的有效剂量范围为 58〜70mg/kg体重 /天。