CN102908583B - 一种治疗胸痹心痛的中药组合物及其制备方法、检测方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种胸痹心痛的中药组合物及其制备方法、质量检测方法和用途，其原料药组成为：瓜蒌皮30-145重量份、薤白15-65重量份、葛根55-220重量份、川芎20-85重量份、丹参55-220重量份、赤芍20-85重量份、泽泻55-220重量份、黄芪50-180重量份、骨碎补10-40重量份、郁金20-85重量份。本品以日服用剂量为单位含葛根以葛根素（C₂₁H₂₀O₉）计，不得少于20.7mg。本发明中药组合物具有宽胸通阳，化痰散结，活血化瘀的功能。用于痰瘀互结所致的胸痹心痛，症见胸闷胸痛，憋气，舌质紫暗，苔白腻；冠心病心绞痛见上述证候者。

Description

一种治疗胸痹心痛的中药组合物及其制备方法、检测方法和用途

技术领域

本发明涉及一种中药组合物及其制备方法、质量检测方法和用途，特别涉及一种胸痹心痛的中药组合物及其制备方法、质量检测方法和用途，属中药制药领域。 

背景技术

冠心病心绞痛是指由冠状动脉供血不足而导致的以心肌急剧的、暂时的缺血、缺氧为特征的临床综合征，属于祖国医学“胸痹”“心痛”范畴。 

祖国医学对冠心病心绞痛的认识由来已久，对此病的记载首见于《内经》，如《素问·标本病传论》“心病先心痛”。《金匮要略》记载其典型症状为“胸痹之病，喘息咳唾，胸背痛，短气”。大多数医家认为本病病机为本虚标实。本虚主要包括气、血、阴、阳之虚，标实则为瘀血、寒凝、痰浊、气滞诸证。其病位在心，但与脾、肝、肾关系密切。张治祥等认为肾虚是冠心病发病的病机核心。探析其理，冠心病多见于40岁以上的中老年人，说明该病的发生与衰老有关。而人体的衰老过程也就是肾精不断亏虚的过程，如《素问·上古天真论篇》曰：“五八，肾气衰，发堕齿槁……七八，肝气衰，筋不能动，天癸竭，精少，肾藏衰，形体皆极。八八，则齿发去。”倪量等认为随着社会的发展，人们生活习惯改变，多进膏粱厚味，嗜食油腻醇酒，损伤脾胃，变生痰浊，影响气机，使胸阳不展而发为胸痹，因此诊治冠心病应从沿袭多年的注重瘀血病机转为“治痰为先”的思路上来。 

由于众多临床医师对冠心病辨证分型认识有不同见解，且病情相兼出现，相互转化，故在临床上的具体治法和用药呈现多变性。目前常用的治法包括以下几种：1活血化瘀；2益气活血；3理气化瘀；4活血祛痰：痰瘀学说起始于《黄帝内经》。自张仲景把胸痹心痛的病因病机归纳为“阳微阴弦”，创立了瓜蒌薤白白酒汤、瓜蒌薤白半夏汤等化痰通阳宣痹的方剂，就为后世从痰瘀论治冠心病心绞痛奠定了基础；5.益气温阳；6.益气养阴。 

综观近年来中医药对冠心病心绞痛的治疗特别是专方、专药治疗有其独特优势，极大地方便了病人长期用药。 

发明内容

本发明目的在于公开一种治疗胸痹心痛的中药组合物及其制备方法、质量检测方法和用途。 

本发明目的是通过如下技术方案实现的。 

本发明中药组合物的原料药组成为： 

瓜蒌皮30-145重量份、薤白15-65重量份、葛根55-220重量份、川芎20-85重量份、丹参55-220重量份、赤芍20-85重量份、泽泻55-220重量份、黄芪50-180重量份、 骨碎补10-40重量份、郁金20-85重量份。 

本发明中药组合物的原料药组成优选为： 

瓜蒌皮86重量份、薤白40重量份、葛根138重量份、川芎52重量份、丹参138重量份、赤芍52重量份、泽泻138重量份、黄芪114重量份、骨碎补26重量份、郁金52重量份。 

本发明中药组合物的原料药组成优选为： 

瓜蒌皮137重量份、薤白20重量份、葛根216重量份、川芎22重量份、丹参216重量份、赤芍22重量份、泽泻216重量份、黄芪60重量份、骨碎补39重量份、郁金22重量份。 

本发明中药组合物的原料药组成优选为： 

瓜蒌皮35重量份、薤白60重量份、葛根60重量份、川芎82重量份、丹参60重量份、赤芍82重量份、泽泻60重量份、黄芪168重量份、骨碎补13重量份、郁金82重量份。 

本发明中药组合物的原料药组成优选为： 

瓜蒌皮117重量份、薤白28重量份、葛根186重量份、川芎32重量份、丹参186重量份、赤芍32重量份、泽泻186重量份、黄芪80重量份、骨碎补34重量份、郁金32重量份。 

本发明中药组合物的原料药组成优选为： 

瓜蒌皮55重量份、薤白52重量份、葛根90重量份、川芎72重量份、丹参90重量份、赤芍72重量份、泽泻90重量份、黄芪148重量份、骨碎补18重量份、郁金72重量份。 

本发明中药组合物的原料药组成优选为： 

瓜蒌皮97重量份、薤白35重量份、葛根156重量份、川芎42重量份、丹参156重量份、赤芍42重量份、泽泻156重量份、黄芪100重量份、骨碎补30重量份、郁金42重量份。 

本发明中药组合物的原料药组成优选为： 

瓜蒌皮75重量份、薤白45重量份、葛根120重量份、川芎62重量份、丹参120重量份、赤芍62重量份、泽泻120重量份、黄芪128重量份、骨碎补22重量份、郁金62重量份。 

本发明的原料药均为中药药材，可在市场上购得。 

本发明中药组合物加入常规辅料，按照常规工艺，制成散剂、片剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、滴丸、丸剂、蜜丸、颗粒剂、蜜炼膏剂、缓释制剂、控释制剂、速释制剂、口服液体制剂或注射制剂。 

本发明药物组合物可按如下方法制备： 

取原料药，川芎、郁金、泽泻粉碎成细粉，过筛，混匀；赤芍、瓜蒌皮、薤白加70% 乙醇加热回流提取1-3次，每次1-2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30（65℃）；葛根和丹参，单包，加乙醇回流提取2-4次，每次0.5-2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30（65℃）；黄芪、骨碎补及丹参醇提后的药渣，加水煎煮1-3次，每次1-2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.25～1.30（65℃）；将三种浓缩液与上述细粉混合，减压干燥，粉碎，加入常规辅料，按照常规工艺，制成散剂、片剂、颗粒剂、硬胶囊剂、丸剂。 

本发明药物组合物优选如下制备方法： 

取原料药，川芎、郁金、泽泻粉碎成细粉，过筛，混匀；赤芍、瓜蒌皮、薤白加70%乙醇加热回流提取二次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30（65℃）；葛根和丹参（单包），加乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30（65℃）；黄芪、骨碎补及丹参醇提后的药渣，加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.25～1.30（65℃）。将三种浓缩液与上述细粉混合，减压干燥，粉碎，加入常规辅料，按照常规工艺，制成散剂、片剂、颗粒剂、硬胶囊剂、丸剂。 

本发明质量检测方法包括如下鉴别和/或含量测定方法中任意一种或几种： 

【鉴别】： 

A.取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，研细，加乙醚50-70ml，密塞，浸渍3-5小时，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.5g，加乙醚10-20ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以7-9：3-1的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； 

B.取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，研细，加甲醇50-70ml，加热回流0.5-1.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20-40ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2-4次，每次20-40ml，合并正丁醇液，用水10-30ml洗涤，弃去水液，正丁醇液浓缩至1ml，加200目中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，蒸干，装在预先填装好的中性氧化铝柱（200目，2g，内径20mm）上，用4-6：6-4的乙酸乙酯-甲醇混合液50-70ml洗脱，收集初洗脱液5～7ml备用，其余洗脱液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以30-50：4-6：9-11：0.1-0.3的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 

C.取【鉴别】B项下的初洗脱液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以15-25：1的甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 

D.取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，研细，加乙醚50-70ml，浸渍0.5-1.5小时，滤过，弃去滤液，药渣挥去乙醚，加甲醇50-70ml回流提取0.5-1.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20-40ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3-5次，每次用量为15-20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2-4次，每次10-30ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水10-30ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径1.5cm，柱高15cm），以水30-50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30-50ml洗脱，弃去40%乙醇洗脱液，续用70%乙醇40-60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以10-15：5-9：1-3三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 

【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥD）测定； 

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以10-20：70-90：2-4的甲醇-水-冰醋酸为流动相；检测波长为249nm；理论板数按葛根素峰计算应不低于2000； 

对照品溶液的制备：取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml中含葛根素0.1mg的对照品溶液； 

供试品溶液的制备：取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，精密称定，研细，精密称取约0.4g，加甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得； 

本品以日服用剂量为单位含葛根以葛根素（C₂₁H₂₀O₉）计，不得少于20.7mg。 

本发明质量检测方法优选如下鉴别和/或含量测定方法中的一种或几种： 

【鉴别】： 

A.取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，研细，加乙醚60ml，密塞，浸渍4小时，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.5g，加乙醚15ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上， 以8：2的石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； 

B.取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，研细，加甲醇60ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用水20ml洗涤，弃去水液，正丁醇液浓缩至1ml，加200目中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，蒸干，装在预先填装好的中性氧化铝柱（200目，2g，内径20mm）上，用1：1的乙酸乙酯-甲醇混合液60ml洗脱，收集初洗脱液5～7ml备用，其余洗脱液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以40：5：10：0.2的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 

C.取【鉴别】B项下的初洗脱液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以19：1的甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 

D.取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，加乙醚60ml，浸渍1小时，滤过，弃去滤液，药渣挥去乙醚，加甲醇60ml回流提取1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，依次为20ml、20ml、15ml、15ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤3次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水20ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径1.5cm，柱高15cm），以水40ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇40ml洗脱，弃去40%乙醇洗脱液，续用70%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以13：7：2三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 

【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥD）测定； 

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以15：82：3的甲醇-水-冰醋酸为流动相；检测波长为249nm；理论板数按葛根素峰计算应不低于2000； 

对照品溶液的制备：取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml中含葛根素0.1mg的对照品溶液； 

供试品溶液的制备：取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，精密称定，研细，精密称取约0.4g，加甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μｌ，注入液相色谱仪，测定，即得； 

本品以日服用剂量为单位含葛根以葛根素（C₂₁H₂₀O₉）计，不得少于20.7mg。 

本发明中药组合物具有宽胸通阳，化痰散结，活血化瘀的功能。用于痰瘀互结所致的胸痹心痛，症见胸闷胸痛，憋气，舌质紫暗，苔白腻；冠心病心绞痛见上述证候者。 

主要药效学试验证明，本发明中药组合物能明显减轻犬心肌缺血程度，随着给药时间延长，作用愈加明显，缩小心肌缺血范围，同时明显抑制心肌缺血，心肌梗塞所引起的CPK、LDH活性升高。本发明中药组合物能明显改善犬心脏血液动力学指标，增加冠脉流量和降低血管阻力，降低心肌耗氧量。本发明中药组合物对异丙基肾上腺素引起大鼠心肌损伤有改善作用。本发明中药组合物能明显延长小鼠在常压缺氧下生存时间，同时能对抗大鼠血栓形成，抑制体外血小板聚集，降低高血脂家兔的血清总胆固醇含量和明显减少动脉粥样斑块的形成。上述结果说明，本发明中药组合物能明显改善实验动物的心肌缺血，心肌血液动力学、血脂变化、这为在临床上治疗胸痹心痛（冠心病心绞痛）提供了药理学基础。 

下述实验例和实施例用于进一步说明但不限于本发明。 

实验例1．本发明中药组合物制剂对麻醉犬心肌缺血、心肌梗塞及相关血液生化指标的影响 

一、试验材料 

1.实验动物：健康成年犬20只，雌雄兼用，体重12.39±1.97kg,由北京市实验动物养殖调剂中心提供，合格证号：京动管犬字（96）第030号。 

2.实验药物：本发明中药组合物片剂（药品名称：丹蒌片）按实施例1方法制备，硫氮 

酮片30mg/片，0.9%氯化钠注射液;EDTAK2。 

实验共分为四组：（1）空白对照组，生理盐水3ml/kg,n=5;(2)丹蒌片2.5g生药/kg剂量组，n=5;（3）丹蒌片5g生药/kg剂量组，n=5;(4)阳性对照药组，硫氮 

酮片，5mg/kg,n=5。 

上述试验药物，均在实验前用生理盐水配制成等体积（3ml/kg），经十二指肠给药。 

二、试验方法 

动物经戊巴比妥钠（30mg/kg）静脉麻醉，气管插管，连接SC-3型电动呼吸机；左侧第四肋间开胸，暴露心脏，剪开心包，做心包床；分离冠状动脉左前降支中段，穿线以备结扎，造成成急性实验心肌缺血模型；缝置多点固定式心外膜电极，连接RM-6100型多道生理记录仪，描记心外膜电图。结扎冠脉15分钟，进行记录，作为给药前对照值，经十二指肠给予实验药物或生理盐水，于药后15、30、45、60、90、120、180分钟记录 30个标测点心外膜电讯图，以S-T段升高大于2mv为判断标准，计算心肌缺血程度（S-T段升高总mv数∑-ST）及心肌缺血范围（S-T段升高总点数N-ST）。经颈外静脉插管至冠状静脉窦，于冠脉结扎15分钟（药前）、药后30、60、90、120、180分钟抽血，以SECOMAMS。500P生化分析仪(法国产)测定冠状脉结扎15分钟(药前)、药后30、60、90、120、180分钟时血清肌酸磷酸激酶（CPK）、乳酸脱氢酶（LDH）含量。 

药后180分钟记录完毕，立即取下心脏，生理盐水冲洗，称量全心重，在心脏结扎线以下，平行于冠状沟均匀地将心室部分横断切成5片，然后，置于硝基四氮唑兰（N-BT）染液中，常温染色15分钟，用落点求积法（36点/cm²）测量每片心肌双侧的梗塞区（N-BT非染色区）与非梗塞区（N-BT染色区），计算每片心肌的总面积，心室总面积和梗塞区总面积，计算梗塞区占心室及占全心脏面积的百分比。 

实验结果进行统计学处理，以t检验判断共显著性。 

三、试验结果 

（一）对犬心肌缺血（心外膜电图标测）的影响。 

1．对犬心肌缺血程度（∑-ST）的影响（见表1） 

结果见表1。经十二脂肠给药，丹蒌片2.5g生药/kg剂量组、5g生药/kg剂量组均有明显减轻心肌缺血的程度（∑-ST）的作用。药后60分钟，丹蒌片2.5g生药/kg、5g生药/kg两个剂量组（∑-ST）明显下降，与药前和对照组比较均有显著差异（均P∠0.05）。随给药时间的延长，作用愈加显著，药后180分钟大、小两个剂量组∑-ST分别由药前304.40±24.74mv、297.60±20.38mv降至192.80±16.36mv、161.20±24.77mv,下降了36.42±6.31%、45.71±8.50%。与药前及对照组比较均有非常显著差异（均P∠0.001）。阳性对照药硫氮 

酮亦有相同作用。 

2．对犬心肌缺血范围（N-ST）的影响（见表2） 

结果见表2。对照组给入生理盐水后,心肌缺血范围(N-ST)无明显改变，硫氮 

酮及丹蒌片大剂量组有明显减小心肌缺血范围(N-ST)的作用，药后180分钟，丹蒌片5g生药/kg剂量组(N-ST)由药前30.00±0.00个示测点,降至27.20±1.92个标测点,下降9.33±6.41%,与药前比较（P∠0.01）及对照比较（P∠0.05）均有明显差异。 

以上结果表明，丹蒌片对实验性急性犬心肌缺血有明显的改善作用，可显著减轻心肌缺血程度（∑-ST），减小心肌缺血范围（N-ST）。 

表1各给药组对犬急性心肌缺血程度（∑ST）影响（心外膜电图标测） 

注：与对照组比较：*：P﹤0.05；**：P﹤0.01；***：P﹤0.001与药前自身比较：#：P﹤0.05；##：P﹤0.01；###：P﹤0.001 

表2各给药组对犬急性心肌缺血程度（N-ST）影响（心外膜电图标测） 

注：与对照组比较：*：P﹤0.05；**：P﹤0.01；***：P﹤0.001与药前自身比较：#：P﹤0.05；##：P﹤0.01；###：P﹤0.001 

(二）对犬急性心肌梗塞范围（N-BT染色法测定）的影响 

结果见表3。以定量组织学N-BT染色法显示心肌梗塞范围,生理盐水对照组梗塞区分别占心脏及心室的5.73±1.75%和14.28±3.60%.丹蒌片5g生药/kg剂量组及硫氮 

酮组梗塞区分别占心脏2.14±0.47%、1.81±0.36%。与生理盐水对照组比较均有非常显著性差异（均P﹤0.01），丹蒌片5g生药/kg剂量组及硫氮 

酮组梗塞区分别占心室5.18±1.11%、4.01±1.09%。与对照组比较均有非常显著性差异（均P﹤0.001）。 

表3各给药组对犬急性肌梗塞范围的影响（N-BT染色定量组织学测定）（n=5,x±SD） 

注:与对照组比较：*：P﹤0.05**:P﹤0.01***:P﹤0.001 

(三)对实验性心肌缺血、心肌梗塞犬血清肌酸激酶（CK）及血清乳酸脱氢酶（LDH）活性的影响。 

结果见表4。结扎冠脉形成心肌缺血前血清CPK、LDH含量分别为292.45±64.90u/l、204.10±55.42u/l(n=20),结扎冠脉形成心肌缺血后，血中CPK、LDH含量明显升高，分别为471.45±110.70u/l、282.75±72.74u/l。与缺血前相比较，CPK含量增加了64.31±35.87%,LDH含量增加了48.97±35.26%.丹蒌片两个剂量组及硫氮 

酮均能明显抑制心肌缺血、心肌梗塞时引起的CPK、LDH活性升高，其相对变化率明显低于盐水对照组。 

表4各给药组对犬血清CK（U/L）、LDH（U/L）的比较 

注：与对照组比较：*：P﹤0.05；**：P﹤0.01；***：P﹤0.001 

四、小结 

本实验以结扎冠状动脉左前降支，造成急性实验心肌缺血模型，采用心外膜电图标测心肌缺血范围及程度，定量组织学（N-BT染色法）测定心肌梗塞范围，观察了丹蒌片消化道给药对实验性犬急性心肌缺血的影响。同时测定了实验性犬急性心肌缺血、心肌梗塞时血清CPK、LDH等指标的变化。 

实验结果证实，丹蒌片具有明显改善犬急性心肌缺血和心肌梗塞的作用，减轻由心外膜电图标测的心肌缺血程度（∑-ST）;减小心肌缺血范围（N-ST）；减小通过N-BT染色所显示的梗塞区。 

肌酸磷酸激酶（CPK）广泛存在于胞浆中，尤以心肌细胞为多。当心肌细胞损伤时CPK溢出，使其在血清中活性提高，血清CPK，活性越高，反映心肌损伤越重。乳酸脱氢酶（LDH）在心肌梗塞时从组织细胞内，大量释放于体液中，测定冠状静脉窦血中其活性，亦反映心肌损伤的程度。本实验观察到持继结扎犬冠状动脉CPK活性持继增加，120分钟达高峰，180分钟有所回落；而LDH在心肌缺血后迅速增加，随后逐渐回落，实验证明丹蒌片可明显抑制犬实验性心肌损伤时血清CPK、LDH的溢出，降低血清CPK、LDH的活性。 

实验例2.本发明中药组合物制剂对麻醉犬心脏血液动力学的影响 

一、实验材料与方法： 

1.实验动物：健康成年杂种犬21只，体重12±2kg左右，雌雄兼用。由中国中医药研究院西苑医院实验动物室提供。 

2.实验药物： 

本发明中药组合物片剂（药品名称：丹蒌片）按实施例1方法制备，异博定 

3.实验方法： 

实验动物用巴比妥钠（30mg/kg）静脉麻醉，气管插管连接电动人工呼吸机（SC-3型，上海医用仪器厂）。沿左侧第四肋间开胸，暴露心脏，作心包床；分离升主动脉根部和左冠状动脉旋支。放置MF-1100型电磁流量计，日本光电公司探头，分别测定心输出量及冠脉血流量。颈外静脉插管至冠状静脉窦，另作颈总动脉插管，分别取冠状窦和颈动脉血，以血氧测定仪（Unistat Oxmeter，美国AO公司）分别测定冠状静脉窦血氧含量及动脉血氧含量计算心肌耗氧量。股动脉插管连多导生理记录仪。描记血压，以肢体导联观测标准Ⅱ导心电图并计算心率。股静脉输液及给药，实验结束后，称心脏重量，以1/3心重作为左旋支供血区心肌重量，按公式计算出各项血流动力学参数，进行给药前后自身及组间比较。 

实验共分四组：①空白对照组，生理盐水（n=6），②阳性对照药组，异博定0.2mg/kg，（n=5），③丹蒌片1g/kg剂量组（n=5），④丹蒌片2g/kg剂量组（n=5）。受试药均自股静脉注入，药物于1min内注完，给药顺序随机进行，于给药后1、3、5、10、15、20和30分钟观测各项指标。待各项指标完全恢复正常后，30分钟至1小时，再进行第二次给药实验。 

二、试验结果 

1.对犬冠脉流量及冠脉阻力的影响： 

生理盐水对照组给药组后冠脉血流量、冠脉阻力均无明显变化。丹蒌片1g生药/kg静注后，冠脉流量及冠脉阻力均无明显变化。丹蒌片2g生药/kg静注，给药1分钟后冠脉流量明显增加，血管阻力相应下降，作用维持5-10分钟，冠脉血流量由药前77.35±40.8ml/min/100g心肌升至146.7±38.44ml/min/100g心肌，增加89.06%，与给药前及对照组比较有明显差异（P＜0.05及P＜0.01）。2g生药/kg剂量组冠脉阻力由1.94±1.02mmHg/ml/100g.min下降1.02±0.45mmHg/ml/100g.min与药前及对照组比较有明显差异（P＜0.05），异博定0.2mg/kg对冠脉流量略有增加，但对血管阻力明显降低（P＜0.05），维持10分钟。见表5、6。 

表5丹蒌片对实验性犬冠脉血流量的影响（ml/100g心肌/min） 

及其变化率（%） 

组间比较：*P﹤0.05**P﹤0.01 

自身比较：△P﹤0.05 

表6丹蒌片（1-2gkgiv）对犬冠脉阻力的影响 

及其变化率（%） 

组间比较：*P﹤0.05 

自身比较：△P﹤0.05 

2.对心机耗氧量的影响： 

丹蒌片1g/kg静注后，1-3分钟内心肌耗氧量明显的下降，由5.51±2.44降至4.57±2.67ml/100g心肌/分，降低18.26±6.10%，与药前自身对比及对照组比较均有明显的差异（P＜0.05）。冠状窦血氧含量升高，药后3分钟较明显（P＜0.05）。丹蒌片2g生药/kg静注后，药后5分钟，心肌耗氧量明显下降，维持30分钟以上，由9.87±2.02降至6.03±3.34ml/100g心肌/分，减少40.8±8.23%，与药前及对照组比较均有明显的差异（P＜0.05），冠状窦血中的氧含量明显的升高。药后1、3、5、10分钟作用明显，维持30分钟以上。异博定0.2mg/kg能明显的降低心肌耗氧量，从6.63±1.43降至3.70±0.64ml/100g心肌/分，减少43.5±6.99%，与药前及对照组相差非常显著（P＜0.01）.冠状窦血中氧含量则显著的升高，均有显著性（P＜0.05）。静注等容量生理盐水后上述指标无变化。见表7、8、9。 

表7丹蒌片（1-2gg/kgiv）对犬心肌耗氧量的影响（ml/100g心肌/分） 

及其变化（%） 

组间比较：*P﹤0.05**P﹤0.01 

自身比较：△P﹤0.05 

表8丹蒌片（1-2g/kgiv）对犬氧利用率的影响 及其变化率（%） 

组间比较：*P﹤0.05**P﹤0.01 

自身比较：△P﹤0.05△△P﹤0.01 

表9丹蒌片（1-2g/kgiv）对犬心肌耗氧指数的影响 

及其变化率（%） 

组间比较：*P﹤0.05**P﹤0.01 

自身比较：△P﹤0.05△△P﹤0.01 

3.对心输出量及左室作功的影响： 

丹蒌片1-2g生药/kg及异博定0.2mg/kg对心输出量均无明显影响。丹蒌片显示了不同程度的降低左室作功的作用。1g生药/kg在1分钟内较明显（P＜0.05）。2g生药/kg在药后15、20分钟都明显降低左室作功率与前自身比较P＜0.05。异博定能明显的降低左室作功，维持30分钟以上，与药前及对照组相差显著（P＜0.05及P＜0.01）。见表10、11。 

表10丹蒌片（1-2gkgiv）对犬心输出量的影响（L/min） 

及其变化率（%） 

表11丹蒌片（1-2g/kgiv）对犬左心作功的影响 

及其变化率（%） 

组间比较：*P﹤0.05**P﹤0.01 

自身比较：△P﹤0.05 

4.对心率、血压、总外周阻力的影响： 

丹蒌片1-2g/kg对麻醉犬心率均有不同程度的减慢，但无显著性差异。异博定0.2mg/kg可使心率减慢，与药前及对照组比差异非常显著（P＜0.05及P＜0.01）。丹蒌片1-2g/kgiv后，血压有轻度下降。血管总外周阻力相应下降，仅2g/kg在15分钟时，血压降低10.15±5.69%，异博定0.2mg/kgiv，1-3分钟时血压迅速下降，分别降低27.26±3.05%，19.2±5.31%（P＜0.01），在10、15分钟时血压分别降低为15.24±9.85，8.66±7.05%，同时使血管总外周阻力明显降低，与药前及对照组相比差异显著（P＜0.01）。见表12、13、14。 

表12丹蒌片（1-2gkgiv）对犬心率的影响 

及其变化率（%） 

组间比较：*P﹤0.05**P﹤0.01 

自身比较：△P﹤0.05△△P﹤0.05 

表13丹蒌片（1-2g/kgiv）对犬血压的影响 

及其变化率（%） 

组间比较：*P﹤0.05**P﹤0.01 

自身比较：△P﹤0.05△△P﹤0.01 

表14丹蒌片（1-2g/kgiv）对犬外周阻力的影响 及其变化率（%） 

组间比较：*P﹤0.05**P﹤0.01 

自身比较：△P﹤0.05△△P﹤0.0 

5.对其他指标的影响： 

丹蒌片1-2g/kg对心脏指数，心搏指数等指标的影响不甚明显。对心肌耗氧量指数均有不同程度的减低。1g/kg在药后1分钟较明显（P＜0.05），2g/kg在药后3-20分钟较显著（P＜0.05及P＜0.01）。异博定对心肌耗氧指数在30分钟内均有明显的降低，与药前及对照组相比都有显著差异（P＜0.05）；对心脏指数在10、20分钟分别降低9.86±3.87%、10.49±7.54%；药后5、10、15分钟，心搏指数明显增加，分别增加14.78±8.11%、11.28±5.19%、10.74±9.48%（P＜0.05）。 

以上结果表明：丹蒌片可明显增加冠脉流量，降低冠脉血管阻力，减少心肌耗氧量，使心肌耗氧指数降低，降低左室作功。心率略慢，降低血压作用表现明显的剂量相关性。对心输出量、心搏指数、心脏指数等指标均无明显的影响。丹蒌片对心脏血流动力学的作用与异博定颇相似。 

根据犬心脏血流动力学及心肌氧代谢的实验结果表明：丹蒌片在增加冠脉流量的同时，减少心肌耗氧量，以能减少左室作功，心肌工作效率提高，这些作用对调整心肌对氧的供求平衡有利，对缓解冠心病、心绞痛和改善缺血性心脏病症状是有利的，为临床提供药理数据。 

实验例3.本发明中药组合物制剂对大鼠实验性心肌坏死防治作用研究 

一、材料和方法: 

1.实验动物：健康大鼠Wistar种，体重200-290g，雄性，由陕西省中医药研究院动物中心提供。 

2.实验药物：本发明中药组合物片剂（药品名称：丹蒌片，按实施例1制备），异丙基肾上腺素。 

3.实验方法： 

心肌收缩性能测定：实验大鼠用20%乌拉坦1g/kg腹腔注射麻醉，尾静脉注射肝素（300u）抗凝，分离出右颈总动脉后，从右颈总动脉插入自制心导管，导管另一端连接MPU0.5A型压力传感器，并接于RM-6000型生理记录仪，描记主动脉压力波形后，将导管插入左心室腔内，稳定5分钟，测取左室收缩性能各指标，并同步描记心电图。左室内压峰值：定标灵敏度100mmHg/10mm，纸速100mm/s。左室内及舒张末2（LVEDP）：以10mmHg/10mm敏度描记曲线基部。左室内压变化速率（dp/dt）曲线，正相最大（dp/dtmax），负相最大值-dp/dtmax 及心室开始收缩至发生dp/dtmax时间（t-dp/dtmax）：定标敏度为2000mmHg/s/5mm，纸速100mm/s，微分器时间常数为1.0ms，高频50Hz，同步描记左室内压曲线。 

心泵功能测定：大鼠在正压人工呼吸下（频率60次/分，潮气量0.9ml）沿胸骨正中线开胸，剪开心包，分离出主动脉并安置内径2mm的电磁流量计探头，探头连接MF-27电磁流量计和RM-6000型生理记录仪，全部操作结束后，稳定10分钟，同步记录并计算各项心泵功能指标，包括心输出量（CO）、心指数（CI）、心率（HR）、每搏量（SV）及每搏量指数（SVI）。实验大鼠随机分为心肌舒缩性能及心脏泵功能两大组，每组再分①正常对照组，蒸馏水10ml/kg,②丹蒌片2.4g/kg剂量组，③丹蒌片4.9g/kg剂量组，④异丙基肾上腺素组，4mg/kg(ip)，⑤丹蒌片2.4，4.9kg/kg剂量防治组，同时腹腔注射异丙基肾上腺素，连续灌胃给药7日。 

实验结果进行统计学处理，以t检验判断其显著性。 

二、试验结果： 

（一）丹蒌片对心肌舒缩性能的影响： 

丹蒌片对正常大鼠血液动力学的影响：丹蒌片4.9g/kg、2.4g/kg给药后，对血液动力学各参数均无明显变化，各值均在正常范围内。（见表15） 

表15丹蒌片对正常大鼠左心室功能的影响 

各组动物数8只 

丹蒌片对异丙基肾上腺所致大鼠心肌坏死防治作用：异丙基肾上腺素使心率加快，左室收缩压及舒张压升高与对照组相比有明显差异。收缩压升高，射血时间缩短，与对照组相比差别不显著。丹蒌片与空白对照比较，看不出显著的差异，但与病理模型相比，有显著差异，丹蒌片使心率变慢，收缩压、舒张压都下降，左室内压峰值降低，左室舒张末压升高，对等容期室内压下降的时间无显著影响，结果表明丹蒌片能预防和加速修复大鼠受损害的心肌接近正常。（见表16） 

表16丹蒌片对异丙基肾上腺素所致心肌坏死的左室功能的影响 

*对照与造型组相比P﹤0.05              △造型与治疗组相比P﹤0.05 

**对照与造型组相比P﹤0.01             △△造型与治疗组相比P﹤0.01 

各组动物数为10只 

（二）丹蒌片对异丙基肾上腺素所致大鼠心肌坏死的心泵功能的影响： 

异丙基肾上腺素使心率变快，心输出量增加，心指数、每搏量及每搏指数都增加，造型组与空白对照之间，SV、SVI、CO、CI都有显著差异；丹蒌片较造型组各项指标有明显好转，结果表明丹蒌片确有改善受损害后心泵功能的作用。（见表17） 

表17丹蒌片对实验性心肌坏死心泵功能的影响 

*对照与造型组相比P﹤0.05 

△造型与治疗组相比P﹤0.05 

各组动物数为8只 

实验例4.本发明中药组合物制剂对小白鼠常压耐缺氧的作用 

一、实验材料： 

1.实验动物：小鼠ICR种，体重22±2g，雌雄各半，由陕西省中医药研究院动物中心提供（医动字第08-24号）。 

2.实验药物：本发明中药组合物片剂（药品名称：丹蒌片，按实施例1制备） 

二、实验方法和结果： 

小鼠ICR种，体重22±2g，雌雄各半，按体重、性别随机分成4组，丹蒌片分三个剂量组即1.2g/kg、2.4g/kg、4.9g/kg,对照组给予自来水，每日灌胃给药1次，连续给药7天，于末次给后1小时将每只小鼠放入一个125毫升广口瓶内，封闭，记录小鼠存活时间。见表18。实验结果表明丹蒌片能明显延长小鼠常压耐缺氧的作用。 

表18丹蒌片对小鼠常压耐缺氧的作用 

**与对照组比P﹤0.01    ***与对照组比P﹤0.001 

实验例5.本发明中药组合物制剂体外家兔血小板聚集的作用 

1.实验动物： 

新西兰家兔体重2-3kg，陕西省中医药研究院动物中心提供。 

2.实验药物： 

本发明中药组合物片剂（药品名称：丹蒌片，按实施例1制备），二磷酸腺苷（ADP）；硝苯地平；肝素注射液（12500μ/2ml）。 

3.实验方法： 

家兔颈动脉插管取血，3.8%枸橼酸钠抗凝，离心，制备富血小板血浆（PRP）和贫血小板血浆（PPP），以PPP调PRP使血小板数为20万/mm，以ADP、胶原作血小板聚集诱导剂，按照born氏比浊法⁽¹⁾，测定血小板聚集性。于比浊管内加入PRP0.2ml，蒸馏水0.03ml或丹蒌片不同剂量（0.005、0.01、0.015、0.02、0.03g）以相同等容积的药液，37℃温育5min，以PPP的透光度为100%，以PRP的透光度为0%，在连续搅拌下加入促聚集剂0.012ml，记录5min血小板聚集曲线测量聚集强度，以此计算聚集抑制率、5min解聚率、聚集斜度、到达最大聚集时间、最大聚集维持时间及聚集面积，聚集潜伏期。 

聚集面积：以矩距法即梯形法。 

聚集潜伏期：从加入诱导剂后到开始聚集所需时间。 

4.结果:健康家兔8只，分别采取制备PRP，用阈浓度的ADP（12ml）诱导血小板聚集，以蒸馏水作对照，结果表明：不同剂量丹蒌片对ADP诱发的血小板聚集有明显抑制作用，存在剂量依赖关系，随着剂量加大，聚集抑制逐渐增强，50%抑制浓度（IC₅₀）为0.042g/ml，同时可见聚集速度减慢，5min有效解聚率增加，聚集面积与聚集抑制率呈负相关，r＝–0.96。 

丹蒌片对胶原诱导的家兔血小板聚集性的影响：健康家兔8只，用阈浓度胶原（10μl）诱导血小板聚集，以蒸馏水作为对照，实验结果丹蒌片也明显抑制胶原诱导的血小板聚集；其剂量与反应之间呈量效关系，IC50为0.038g/ml，聚集潜伏期明显延长，聚集速度减慢，均与剂量存在依赖关系，抑制率与聚集面积呈负相关，r=-0.98。 

实验例6.本发明中药组合物制剂（药品名称：丹蒌片，按实施例1制备）对家兔血小板膜微黏度及膜流动性的影响 

1.实验方法：健康新西兰家兔，颈动脉取血，以2%EDTA溶液1：9抗凝，血样本1000rpm离心8min，制备富血小板血浆（PRP），PRP以3000rpm离心10min，弃上清。血小板沉 淀用EDTA洗涤液（氯化钠148mM，葡萄糖：5mM，乙胺四乙酸二钠：0.6mM；三羟甲基氨甲烷：20mM pH7.4）洗涤两次，洗涤后的血小板悬浮于含盐磷酸缓冲液中（0.01M，氯化钠150mM，pH7.2），调整血小板数使其终浓度为2×10ml，取3ml血小板悬浮液加2×10M的1.6—二苯—1，3，5—已三烯溶液，使其浓度力2×10ml，充分混匀，37℃水浴温育30min后，3000rmp离心10min，沉淀用等量含盐磷酸缓冲液同法洗涤一次，血小板沉淀用等量磷酸缓冲液吹打混匀后，加入不同计量的丹蒌片，37℃温育5min，用日本岛津RF—510型分光光度计上测定荧光偏振度，测试条件：光源为150w氙灯，激发光和发射光的狭缝均为5nm，增益20/20，血小板发光波长为365nm，发射光波长为428nm，测试系统和温育控制在37℃，测试结果按公式（1）、（2）、（3）计算荧光偏振度P，式（4）和（5）分别计算膜的微光流动脂区的微黏度n和流动度LFu。 

F=Ivv+2Ivh            (1) 

$C=\frac{\mathrm{IHV}}{\mathrm{IHH}}---\left(2\right)$

$P=\frac{\mathrm{IVV}-\mathrm{GIVH}}{\mathrm{IVV}+\mathrm{GIVH}}---\left(3\right)$

$n=\frac{2p}{0.46-p}---\left(4\right)$

$\mathrm{LFu}=\frac{\frac{P\max }{\mathrm{Pr}}}{\mathrm{Pr}}---\left(5\right)$

Ivv：表示起偏器，检偏器的学光轴均为垂直方向测得的荧光强度。 

IvH：起偏器光轴为垂直方向，检偏器光轴为水平方向测得的荧光强度。 

IHV：起偏器光轴为水平方向，检偏器光轴为垂直方向测得的荧光强度。 

IHH：起偏器，检偏器均为水平方向测得的荧光强度。 

Pmax：荧光偏振度的理论极限值。（Pmax=0.5） 

Pr：荧光偏振度的测定值。 

2实验结果：丹蒌片剂量65-520μg/ml范围内，对膜流动性及微黏度均无明显影响，当剂量增加到1.04mg/ml血小板悬液时，血小板荧光偏振度下降，提示膜流动性增高，微黏度下降，流动度增加。 

实验例7.本发明中药组合物制剂（药品名称：丹蒌片，按实施例1制备）对大鼠实验性血栓形成影响 

1.对大鼠实验性血栓形成影响： 

健康SD大鼠。随机分成四组，每组10只。口服给药后1小时，以10%乌拉坦（1kg/kgip）麻醉。按Hiadovec法稍加改良，剥离左颈总动脉15mm长，然后用BT87-2型实验性体 内血栓形成测定仪（包头医学院心血管研究室）的刺激电极和温度探头钩于动脉血管，用1.5mA直流电持续刺激5min。当动脉内因血栓形成阻塞血流时，血管远端温度降低，从刺激开始至温度突降所需时间称为堵塞时间（OT），以OT长短判断药效指标。 

结果表明丹蒌片2.4g/kg和4.6g/kg的OT值比对照组有明显延长，说明丹蒌片有预防血栓形成的作用。见表19。 

表19丹蒌片对实验性血栓形成的影响 

注：与对照组比较，*P<0.05，**P<0.01 

2.对大鼠体外血栓形成的影响： 

健康SD大鼠，随机分成四组，每组15只，口服给药后一小时，以乌拉坦（1kg/kgip）麻醉，仰卧位固定分离右颈总动脉及左颈外静脉，在硅胶管中段放入一根6cm丝线，以肝素生理盐水（50μ/ml）充满硅胶管内，其一端插入左颈外静脉，另一端插入右颈总动脉。开放血流动15min后中断血流，迅速取出丝线称湿重，总重量减去丝线重即血栓湿重，对照组和给药组血栓湿重进行显著性测验。 

结果表明：丹蒌片2.4g/kg和4.9g/kg组大鼠血栓湿重均较对照组为轻，丹蒌片有抗实验性血栓形成的作用。见表20。 

表20药物对体外血栓形成的影响 

注：与对照组比较，**P<0.01 

实验例8.本发明中药组合物制剂（药品名称：丹蒌片，按实施例1制备）对家兔血脂及动脉粥斑块形成的影响 

1.实验材料与方法： 

白色家兔，按给药前血清总胆固醇水平随机分成六组： 

①正常对照组；②高脂造型组；③阳性对照药月见草油组1g/kg；④丹蒌片1.2g/kg剂量组；⑤丹蒌片2.4g/kg剂量组；⑥丹蒌片4.9g/kg剂量组。除空白对照组外，其余各组家兔每天喂服胆固醇0.5g/kg及猪油，同时喂服药物，连续2个月，末次给药后、晚上禁食，隔日取血测血脂，同时取出主动脉，纵行切开，肉眼观察主动脉斑块，按病变分级，取心脏做冠状动脉病变分级。 

2.结果： 

丹蒌片4.9g/kg剂量组能明显降低因高脂饲料所致血清总胆固醇的升高（P<0.05），而2.4g/kg剂量组则能明显减轻动脉粥样斑块的形成（P<0.05）。见表21、22。 

表21药物对实验性高脂血症家兔值的影响 

注：与对照组比较，△P<0.05，△△P<0.01 

与造型组比较，*P<0.05 

表22药物对家兔动脉粥样硬化的影响 

注：与对照组比较，△△P<0.01 

与造型组比较，*P<0.05 

实验例9.本发明中药组合物制剂（药品名称：丹蒌片，按实施例1制备）临床试验研究 

试验共观察病人400例，其中治疗组200例，对照组100例，采用随机双盲对照，其余100例为开放治疗组。观察结果：采用随机双盲对照组的300例患者中，治疗组丹蒌片对心绞痛的显效率50%，总有效率为86%；对心电图的显效率为25.5%,总有效率为57%。对中医证候的显效率为50%，总有效率91.5%。对照组舒心宁对心绞痛的显效率为32%,总有效率为69%；对心电图的显效率为15%,总有效率为43%，对中医证候的显效率为36%,总有效率为73%。治疗组与对照组心绞痛疗效、心电图疗效、中医证候疗效的比较，丹蒌片治疗组优于舒心宁对照组P<0.01）。 

丹蒌片治疗组治疗后，患者心绞痛发作次数明显减少，治疗前后发作次数的自身比较P<0.01，有非常显著性差异。服用丹蒌片治疗后，心绞痛发作次数减少，部分患者可停用或减少速效扩冠药物的使用，其停减率可达80%。 

同时丹蒌片对胸闷、憋气、脘痞、肢体沉重症状也有较好的疗效。治疗后患者上述症状均明显减轻，治疗前后自身前后比较P<0.01有非常显著的差异。 

安全性方面：在临床试验中，治疗组300例患者中，共有10人出现各种不良反应。其中8人为服药后大便不成形，二人感口干，但均未影响继续服药治疗。通过对治疗组300例患者前后进行血、尿、便三常规、肝功能（GPT）、肾功能（BUN、Cr）等安全性检查,未见到明显毒副作用。 

实验例10.本发明中药组合物制剂（药品名称：丹蒌片，按实施例1制备）临床试验研究 

试验共观察病人422例，其中试验组316例，对照组106例，采用随机双盲双模拟、阳性药物平行对照的研究方法。观察结果： 

1、治疗期末与导入期末心绞痛发作频率的变化比较 

对心绞痛发作频率的比较（组间比较和组内前后分析）。结果表明：丹蒌片组经用药后心绞痛每日发作频率显著减少（P<0.05）,对照组经用药后心绞痛每日发作频率显著减少（P<0.05），2组组间比较差别有显著意义，试验组明显优于对照组（P<0.05）。 

2、心电图疗效判定标准 

对心绞痛症状心电图疗效判定：丹蒌片组313例在用药后显效23例（7.35%），有效190例（60.7%），总有效率68.5%。对照组103例显效2例（1.94%），有效42例（40.78%），总有效率42.72%，试验组和对照组的有效率差别具有统计学意义，试验组明显优于对照组（P<0.05）。 

3、中医症候疗效分析 

对心绞痛症状中医症候痰瘀互结型胸痹心痛证，丹蒌片组313例在用药后显效21例（6.71%），有效272例（86.90%），总有效率93.61%。对照组103例显效2例（1.94%），有效67例（65.05%），总有效率66.99%，试验组和对照组的有效率差别具有统计学意义，试验组明显优于对照组（P<0.05）。 

4、两组患者运动平板试验结果比较 

对心绞痛运动平板试验，丹蒌片组45例在用药后显效13例（28.89%），有效率28例（62.22%），总有效率91.11%。对照组15例，显效2例（13.33%），有效8例（53.33%），总有效率66.67%，试验组和对照组的有效率差别具有统计学意义，试验组明显优于对照组（P<0.05）。 

5、硝酸甘油停减情况 

对硝酸甘油日消耗量（片/d）的影响：丹蒌片组用量明显减少（P<0.05），对照组用量明显减少（P<0.05），2组组间比较，差别有显著意义，试验组优于对照组（P<0.05）。 

6、心绞痛持续发作时间 

对心绞痛发作持续时间的影响：丹蒌片组用量明显减少（P<0.05），对照组用量明显减少（P<0.05），2组组间比较，差别有显著意义，试验组优于对照组（P<0.05）。 

提示试验药物（丹蒌片）能良好治疗痰瘀互结型胸痹心痛证（冠心病、心绞痛），试验药物的疗效明显优于对照药。 

具体实施方式

下述实施例均能实现上述实验例所述效果。 

实施例1本发明片剂 

【处方】瓜蒌皮86g、薤白40g、葛根138g、川芎52g、丹参138g、赤芍52g、泽泻138g、黄芪114g、骨碎补26g、郁金52g。 

【制法】以上十味，川芎、郁金、泽泻粉碎成细粉，过筛，混匀；赤芍、瓜蒌皮、薤白加70%乙醇加热回流提取二次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30（65℃）；葛根和丹参（单包），加乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30（65℃）；黄芪、骨碎补及丹参醇提后的药渣，加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.25～1.30（65℃）。将三种浓缩液与上述细粉混合，减压干燥，粉碎，制粒，压制成1000片，包薄膜衣或糖衣，即得。 

【用法与用量】口服。一次5片，一日3次，饭后服用。 

【规格】每片（基片）重0.3g 

实施例2本发明散剂 

瓜蒌皮137g、薤白20g、葛根216g、川芎22g、丹参216g、赤芍22g、泽泻216g、黄芪60g、骨碎补39g、郁金22g。 

将上述重量配比的药物加入常规辅料，按照常规工艺，制备成散剂， 

实施例3本发明颗粒剂 

瓜蒌皮35g、薤白60g、葛根60g、川芎82g、丹参60g、赤芍82g、泽泻60g、黄芪168g、骨碎补13g、郁金82g。 

取原料药，川芎、郁金、泽泻粉碎成细粉，过筛，混匀；赤芍、瓜蒌皮、薤白加70%乙醇加热回流提取2次，每次2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至 相对密度为1.25～1.30(65℃)；葛根和丹参(单包)，加乙醇回流提取2次，每次0.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30(65℃)；黄芪、骨碎补及丹参醇提后的药渣，加水煎煮3次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.25～1.30(65℃)；将三种浓缩液与上述细粉混合，减压干燥，粉碎，制粒，包装成200袋，即得。 

【用法与用量】口服。一次1袋，一日3次，饭后服用。 

实施例4本发明胶囊剂 

瓜蒌皮117g、薤白28g、葛根186g、川芎32g、丹参186g、赤芍32g、泽泻186g、黄芪80g、骨碎补34g、郁金32g。 

取原料药，川芎、郁金、泽泻粉碎成细粉，过筛，混匀；赤芍、瓜蒌皮、薤白加70%乙醇加热回流提取3次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30(65℃)；葛根和丹参(单包)，加乙醇回流提取3次，每次0.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30(65℃)；黄芪、骨碎补及丹参醇提后的药渣，加水煎煮3次，每次0.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.25～1.30(65℃)；将三种浓缩液与上述细粉混合，减压干燥，粉碎，制粒，装胶囊1000粒，即得。 

【用法与用量】口服。一次5粒，一日3次，饭后服用。 

实施例5本发明蜜丸 

瓜蒌皮55g、薤白52g、葛根90g、川芎72g、丹参90g、赤芍72g、泽泻90g、黄芪148g、骨碎补18g、郁金72g。 

将上述重量配比的药物加入常规辅料，按照常规工艺，制备成蜜丸剂， 

实施例6本发明口服液体制剂 

瓜蒌皮97g、薤白35g、葛根156g、川芎42g、丹参156g、赤芍42g、泽泻156g、黄芪100g、骨碎补30g、郁金42g。 

将上述重量配比的药物加入常规辅料，按照常规工艺，制备成口服液体制剂， 

实施例7本发明蜜炼膏剂 

瓜蒌皮75g、薤白45g、葛根120g、川芎62g、丹参120g、赤芍62g、泽泻120g、黄芪128g、骨碎补22g、郁金62g。 

将上述重量配比的药物加入常规辅料，按照常规工艺，制备成蜜炼膏剂. 

实施例8本发明片剂的质量检测方法 

按实施例1的配方、工艺制成片剂； 

【鉴别】（1）取本品，置显微镜下观察：木栓细胞淡棕黄色，呈多角形或长方形，多层重迭，壁薄，微波状弯曲，薄壁细胞类圆形，有椭圆形纹孔，集成纹孔群。含糊化淀粉团块的薄壁细胞，无色透明或半透明。 

（2）取本品20片，除去薄膜衣，研细，加乙醚60ml，密塞，浸渍4小时，滤过， 滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液。另取川芎对照药材0.5g，加乙醚15ml，同法制成对照药材溶液。 

照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯（8：2）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。 

（3）取本品20片，除去薄膜衣，研细，加甲醇60ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用水20ml洗涤，弃去水液，正丁醇液浓缩至1ml，加中性氧化铝（200目）2g，置水浴上拌匀，蒸干，装在预先填装好的中性氧化铝柱（200目，2g，内径20mm）上，用乙酸乙酯-甲醇（1：1）混合液60ml洗脱，收集初洗脱液5～7ml备用，其余洗脱液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：10：0.2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 

（4）取【鉴别】（3）项下的初洗脱液浓缩至1ml，作为供试品溶液。另取丹参酮IIA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以甲苯-乙酸乙酯（19：1）为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 

（5）取本品20片，除去薄膜衣，研细，加乙醚60ml，浸渍1小时，滤过，弃去滤液，药渣挥去乙醚，加甲醇60ml回流提取1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，依次为20ml、20ml、15ml、15ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤3次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水20ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径1.5cm，柱高15cm），以水40ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇40ml洗脱，弃去40%乙醇洗脱液，续用70%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13：7：2）的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 

【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥD）测定。 

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸（15：82：3）为流动相；检测波长为249nm。理论板数按葛根素峰计算应不低于2000。 

对照品溶液的制备取葛根素对照品10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含葛根素0.1mg）。 

供试品溶液的制备取本品20片，精密称定，研细，精密称取约0.4g，加甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μｌ，注入液相色谱仪，测定，即得。 

本品每片含葛根以葛根素（C₂₁H₂₀O₉）计，不得少于1.38mg。 

实施例9本发明颗粒剂的质量检测方法 

按实施例3的配方、工艺制成颗粒剂； 

【鉴别】： 

A.取本品5袋，研细，加乙醚60ml，密塞，浸渍4小时，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.5g，加乙醚15ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以8：2的石油醚（60-90℃）-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； 

B.取本品5袋，研细，加甲醇60ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用水20ml洗涤，弃去水液，正丁醇液浓缩至1ml，加200目中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，蒸干，装在预先填装好的中性氧化铝柱（200目，2g，内径20mm）上，用1：1的乙酸乙酯-甲醇混合液60ml洗脱，收集初洗脱液5～7ml备用，其余洗脱液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以40：5：10：0.2的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 

C.取【鉴别】B项下的初洗脱液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取丹参酮IIA对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以19：1的甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 

D.取本品5袋，研细，加乙醚60ml，浸渍1小时，滤过，弃去滤液，药渣挥去乙醚，加甲醇60ml回流提取1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，依次为20ml、20ml、15ml、15ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤3次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水20ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱（内径1.5cm，柱高15cm），以水40ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇40ml洗脱，弃去40%乙醇洗脱液，续用70%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以13：7：2三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 

实施例10本发明胶囊剂的质量检测方法 

按实施例4的配方、工艺制成胶囊剂； 

【含量测定】照高效液相色谱法（中国药典2010年版一部附录ⅥD）测定。 

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水-冰醋酸（15：82：3）为流动相；检测波长为249nm。理论板数按葛根素峰计算应不低于2000。 

对照品溶液的制备取葛根素对照品10mg，精密称定，置100ml量瓶中，加甲醇适量使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得（每1ml中含葛根素0.1mg）。 

供试品溶液的制备取本品20粒，精密称定，研细，精密称取约0.4g，加甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μｌ，注入液相色谱仪，测定，即得。 

本品每粒含葛根以葛根素（C₂₁H₂₀O₉）计，不得少于1.38mg。 

Claims (9)

1.一种治疗胸痹心痛的中药组合物，其特征在于该中药组合物的原料药组成为：

瓜蒌皮86重量份、薤白40重量份、葛根138重量份、川芎52重量份、丹参138重量份、赤芍52重量份、泽泻138重量份、黄芪114重量份、骨碎补26重量份、郁金52重量份。

2.如权利要求1所述的中药组合物，其特征在于取原料药，加入常规辅料，按照常规工艺，制成散剂、片剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、滴丸、丸剂、颗粒剂、蜜炼膏剂、缓释制剂、控释制剂、速释制剂、口服液体制剂或注射制剂。

3.如权利要求2所述的中药组合物，其特征在于其中的丸剂为蜜丸剂。

4.如权利要求2所述的中药组合物的制备方法，其特征于该方法为：

取原料药，川芎、郁金、泽泻粉碎成细粉，过筛，混匀；赤芍、瓜蒌皮、薤白加70%乙醇加热回流提取1-3次，每次1-2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30,65℃测；葛根和丹参，单包，加乙醇回流提取2-4次，每次0.5-2小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30，65℃测；黄芪、骨碎补及丹参醇提后的药渣，加水煎煮1-3次，每次1-2小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.25～1.30，65℃测；将三种浓缩液与上述细粉混合，减压干燥，粉碎，加入常规辅料，按照常规工艺，制成散剂、片剂、颗粒剂、硬胶囊剂、丸剂。

5.如权利要求4所述的中药组合物的制备方法，其特征于该方法为：

取原料药，川芎、郁金、泽泻粉碎成细粉，过筛，混匀；赤芍、瓜蒌皮、薤白加70%乙醇加热回流提取二次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30，65℃测；葛根和丹参，单包，加乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25～1.30，65℃测；黄芪、骨碎补及丹参醇提后的药渣，加水煎煮二次，每次1.5小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至相对密度为1.25～1.30，65℃测；将三种浓缩液与上述细粉混合，减压干燥，粉碎，加入常规辅料，按照常规工艺，制成散剂、片剂、颗粒剂、硬胶囊剂、丸剂。

6.如权利要求1所述的中药组合物的检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别和/或含量测定方法中的任意一种或几种：

【鉴别】：

A.取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，研细，加乙醚50-70ml，密塞，浸渍3-5小时，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.5g，加乙醚10-20ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以7-9：3-1的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

B.取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，研细，加甲醇50-70ml，加热回流0.5-1.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20-40ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取2-4次，每次20-40ml，合并正丁醇液，用水10-30ml洗涤，弃去水液，正丁醇液浓缩至1ml，加200目中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，蒸干，装在预先填装好的中性氧化铝柱上，用4-6：6-4的乙酸乙酯-甲醇混合液50-70ml洗脱，收集初洗脱液5～7ml备用，其余洗脱液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以30-50：4-6：9-11：0.1-0.3的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

C.取【鉴别】B项下的初洗脱液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取丹参酮II A对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以15-25：1的甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

D.取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，研细，加乙醚50-70ml，浸渍0.5-1.5小时，滤过，弃去滤液，药渣挥去乙醚，加甲醇50-70ml回流提取0.5-1.5小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水20-40ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3-5次，每次用量为15-20ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2-4次，每次10-30ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水10-30ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，以水30-50ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇30-50ml洗脱，弃去40%乙醇洗脱液，续用70%乙醇40-60ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以10-15：5-9：1-3三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

【含量测定】照高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以10-20：70-90：2-4的甲醇-水-冰醋酸为流动相；检测波长为249nm；理论板数按葛根素峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备：取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml中含葛根素0.1mg的对照品溶液；

供试品溶液的制备：取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，精密称定，研细，精密称取约0.4g，加甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得；

本品以日服用剂量为单位含葛根以葛根素C₂₁H₂₀O₉计，不得少于20.7mg。

7.如权利要求6所述的中药组合物的检测方法，其特征在于该方法包括如下鉴别和/或含量测定方法中的任意一种或几种：

【鉴别】：

A.取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，研细，加乙醚60ml，密塞，浸渍4小时，滤过，滤液浓缩至2ml，作为供试品溶液；另取川芎对照药材0.5g，加乙醚15ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以8：2的60-90℃石油醚-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；

B.取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，研细，加甲醇60ml，加热回流1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用水20ml洗涤，弃去水液，正丁醇液浓缩至1ml，加200目中性氧化铝2g，置水浴上拌匀，蒸干，装在预先填装好的中性氧化铝柱上，用1：1的乙酸乙酯-甲醇混合液60ml洗脱，收集初洗脱液5～7ml备用，其余洗脱液蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液；另取芍药苷对照品，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5～10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以40：5：10：0.2的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

C.取【鉴别】B项下的初洗脱液浓缩至1ml，作为供试品溶液；另取丹参酮II A对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以19：1的甲苯-乙酸乙酯为展开剂，展开，取出，晾干；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

D.取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，加乙醚60ml，浸渍1小时，滤过，弃去滤液，药渣挥去乙醚，加甲醇60ml回流提取1小时，滤过，滤液蒸干，残渣加水30ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，依次为20ml、20ml、15ml、15ml，合并正丁醇液，用氨试液洗涤3次，每次20ml，弃去氨液，正丁醇液蒸干，残渣加水20ml使溶解，放冷，通过D101型大孔吸附树脂柱，以水40ml洗脱，弃去水液，再用40%乙醇40ml洗脱，弃去40%乙醇洗脱液，续用70%乙醇50ml洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以13：7：2三氯甲烷-甲醇-水的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；

【含量测定】照高效液相色谱法测定；

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以15：82：3的甲醇-水-冰醋酸为流动相；检测波长为249nm；理论板数按葛根素峰计算应不低于2000；

对照品溶液的制备：取葛根素对照品，加甲醇制成每1ml中含葛根素0.1mg的对照品溶液；

供试品溶液的制备：取本发明中药组合物制剂日服用剂量的4/3，精密称定，研细，精密称取约0.4g，加甲醇25ml，称定重量，超声处理1小时，放冷，再称定重量，加甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μｌ，注入液相色谱仪，测定，即得；

本品以日服用剂量为单位含葛根以葛根素C₂₁H₂₀O₉计，不得少于20.7mg。

8.如权利要求1所述的中药组合物在制备治疗胸痹心痛的药物中的应用。

9.如权利要求8所述的应用,其特征在于所述胸痹心痛是指冠心病心绞痛。