CN105727200A - 丹蒌方的新用途及用于治疗肺原性i型肺心病的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明提供了丹蒌方在制备治疗肺纤维化和/或肺损伤疾病的药物中的新用途，为丹蒌方的进一步药理研究提供了新的依据，利用该新用途研发的用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，由黄芪、薤白、丹参、葛根、川芎、赤芍、泽泻、郁金、骨碎补、半夏、桂枝、甘草、麦门冬、五味子和当归组成，各组分协同作用，治疗肺原性I型肺心病效果显著，具有重要的临床应用价值。

Description

丹蒌方的新用途及用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物

技术领域

本发明涉及药物应用领域，尤其是丹蒌方的新用途及用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物。

背景技术

在医学上是指主要是由于支气管-肺组织或肺动脉血管病变所致肺动脉高压引起的心脏病。大多数肺心病是从慢性支气管炎、阻塞性肺气肿发展而来，少部分与支气管哮喘、肺结核、支气管扩张有关。肺原性I型肺心病包括肺纤维化和/或肺损伤疾病。

肺纤维化是由各种原因造成的肺间质发生纤维化而引起的一系列临床病症，包括组织病变，药物毒性等等，都能造成肺纤维化，是各种肺部疾病的共同结局，据估计大约每10万有20个男性，13个女性幸存两到五年，近年来，人们也对此疾病经行了大量的研究，西药治疗此病大部分采用泼尼松等一些皮质激素用以抑制炎症和免疫反应，从而延缓纤维化的进展，但临床上接受皮质激素治疗的患者,都有不同程度的副作用。中药成分复杂，具有多靶点治疗，从整体出发调整机体的特点，在一定程度上改善患者的生活质量，因此越来越多的人们开始偏向用中药治疗肺纤维化。

丹蒌片是由我国中医经典之方瓜蒌薤白白酒汤演化而来，主要用于治疗心血管类疾病，如心绞痛，急性心肌梗死等。临床和实验动物研究表明，丹蒌片能减少心绞痛的发作次数，改善心电图异常，且能降低高脂血症大鼠的血脂水平，改善血管内皮功能的作用。丹蒌片主要由瓜蒌皮，薤白，丹参，赤芍，葛根，泽泻，黄芪，骨碎补，郁金，川芎十味中药组成，其中瓜蒌皮，薤白宽胸散结化瘀为君药，丹参，赤芍，川芎，郁金活血化瘀通络，协助君药为臣药，再加具有补气作用的黄芪治本，从而气助血行起到化瘀的作用，亦为臣药，君臣结合，集化痰、理气、通滞、养血于一体，葛根升清既助黄芪之力，又引温肾之性上交于心，骨碎补补肾活血，泽泻泻湿降浊，此三药为佐药。郁金辛苦甘寒，可上行心及包络，为气中血药，川芎辛温入心包、肝、胆经，上可行头目，下可行血海，为血中气药，丹参专入心肝二经，皆有引经报使的功效，为了药精力专，此方中不再加使药，如此君、臣、佐、使相结合，攻补兼施，泻实补虚，共奏痰消瘀化，血脉和畅，痹宜痛止，标本兼治的目的。

具体来说，丹蒌片的药理作用如下：

1改善血管内皮功能；

2对心脏功能的影响；

3对高脂血症的作用；

4在治疗冠心病的中的应用；

5对动脉粥样硬化的影响。

由于丹蒌片药味比较多，化学成分复杂，进而决定了其药理作用的广泛性。因此，进一步研究丹蒌片的药理作用将具有重要的临床应用价值。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供丹蒌方的新用途。

本发明所要解决的另一技术问题在于提供用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物。

为解决上述技术问题，本发明的技术方案是：

丹蒌方在制备治疗肺原性I型肺心病的药物中的用途。

优选的，上述丹蒌方的用途，所述肺原性I型肺心病包括肺纤维化和/或肺损伤疾病。

优选的，上述丹蒌方的用途，所述丹蒌方由瓜蒌皮、黄芪、薤白、丹参、葛根、川芎、赤芍、泽泻、郁金和骨碎补组成，按其重量份数计瓜蒌皮30-145份、黄芪50-180份、薤白15-65份、丹参55-220份、葛根55-220份、川芎20-85份、赤芍20-85份、泽泻55-220份、郁金20-85份、骨碎补10-40份。

优选的，上述丹蒌方的新用途，所述丹蒌方为市售丹蒌片。

一种用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，由黄芪、薤白、丹参、葛根、川芎、赤芍、泽泻、郁金、骨碎补、半夏、桂枝、甘草、麦门冬、五味子和当归组成，按其重量份数计瓜蒌皮30-145份、黄芪50-180份、薤白15-65份、丹参55-220份、葛根55-220份、川芎20-85份、赤芍20-85份、泽泻55-220份、郁金20-85份、骨碎补10-40份、半夏20-85份、桂枝20-85份、甘草20-85份、麦门冬55-220份、五味子50-180份、当归55-220份。

优选的，上述用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，按其重量份数计瓜蒌皮75份、黄芪110份、薤白40份、丹参145份、葛根130份、川芎55份、赤芍50份、泽泻130份、郁金60份、骨碎补30份、半夏45份、桂枝50份、甘草50份、麦门冬140份、五味子125份、当归135份。

优选的，上述用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，是由下述方法制备得到的：

(1)取川芎、郁金、泽泻粉碎成细粉，过筛，混匀；

(2)黄芪、赤芍、薤白、骨碎补、半夏、桂枝、甘草、麦门冬、五味子和当归混合后加70％(v/v)乙醇加热回流提取二次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25-1.30；

(3)葛根和丹参，单包，加乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25-1.30；

(4)将步骤(2)、(3)所得浓缩液与步骤(1)所得细粉混合，减压干燥，粉碎，即得。

步骤(4)所得组合物可加入常规辅料，按照常规工艺，制成散剂、片剂、颗粒剂、硬胶囊剂、丸剂等制剂。

本发明的有益效果是：

本发明提供了丹蒌方在制备治疗肺纤维化和/或肺损伤疾病的药物中的新用途，为丹蒌方的进一步药理研究提供了新的依据，利用该新用途研发的用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，各组分协同作用，治疗肺原性I型肺心病效果显著，具有重要的临床应用价值。

附图说明

图1是肺纤维化的评分等级图；

图2是给药前各组小鼠micro-CT影像图，其中，Normal：正常组；Sham：假手术组；Model：模型组；Ros：罗格列酮组；DLL：丹蒌低剂量组；DLM：丹蒌中剂量组；DLH：丹蒌高剂量组；

图3是给药前后小鼠肺纤维化等级变化图，其中，Normal：正常组；Sham：假手术组；Model：模型组；Ros：罗格列酮组；DLL：丹蒌低剂量组；DLM：丹蒌中剂量组；DLH：丹蒌高剂量组；

图4是给药后小鼠肺部的Micro-CT影像及3D模拟图，其中，A：正常组；B：模型组；C：罗格列酮组；D：丹蒌组；

图5是给药后小鼠肺组织的病理切片图，其中，Normal：正常组；Sham：假手术组；Model：模型组；Ros：罗格列酮组；DLL：丹蒌低剂量组；DLM：丹蒌中剂量组；DLH：丹蒌高剂量组。

图6是给药后小鼠肺组织的病理切片图，其中，Normal：正常组；Model：模型组；Ros：罗格列酮组；DL2：实施例2所述药物组合物组。

具体实施方式

为了使本领域的技术人员更好的理解本发明的技术方案，下面结合具体实施方式对本发明所述技术方案作进一步的详细说明。

实施例1

丹蒌方主要由瓜蒌皮，薤白，丹参，赤芍，葛根，泽泻，黄芪，骨碎补，郁金，川芎十味中药组成，具有宽胸散结化瘀，活血通络的作用；丹红注射液只有丹参红花两味药组成，具有活血化瘀的作用。本实验利用气管滴注博来霉素的方法造成C57BL/6小鼠肺纤维化模型，分正常组，模型组，丹蒌高剂量组，丹蒌低剂量组，丹蒌中剂量组，阳性药组，假手术组，七个组，分别利用micro-CT,病理切片等研究丹蒌方对小鼠肺纤维化的影响。

1实验材料

丹蒌方粉末(吉林康乃尔药业有限公司提供，丹蒌片)；

盐酸罗格列酮(ab120762abcam)；

博来霉素(A0130A大连美仑生物技术)。

C57BL/6雄性小鼠，体重25-30g，由那瑞增(天津)生物科技有限公司提供，合格证：SCXK(京)2009-0004。饲养于天津国际生物医药联合研究院，温度19-25℃，相对湿度为40-60％，每笼4只，定时给饲料，自由饮水。

Micro-CTQuantumFXuCTSoftware(PerkinElmer，美国)；

37℃孵育箱(ThermoForma，Boston，MA)。

2实验方法

2.1材料准备

博来霉素按每只老鼠60uL，5U/kg注射，用生理盐水溶解配成1mg/mL；

罗格列酮按5mg/kg剂量配制，先取3.5mg，用DMSO溶解，再用蒸馏水配制；

0.5％羧甲基纤维素钠，用蒸馏水配制。

2.2实验分组

将49只C57BL/6小鼠根据体重大小分为模型组，假手术组(Sham)，阳性药组(Ros)，正常组(Normal)，丹蒌高剂量组(DLH)，丹蒌中剂量组(DLM)，丹蒌低剂量组(DLL)，每组7只。模型组、假手术组和正常组灌胃生理盐水(0.2mL/10g)，阳性药组灌胃罗格列酮(5mg/kg/day)，丹蒌各组分别灌胃丹蒌药液，浓度由低到高依次是177mg/kg，530mg/kg，1590mg/kg

2.3实验步骤

2.3.1动物模型

取C57BL/6小鼠按0.1mL/10g的剂量腹腔注射5％的水合氯醛麻醉，平躺固定在手术架上，颈部用75％的酒精的消毒，沿颈部正中线纵向剪开皮肤约0.8cm，用眼科镊子小心分离皮肤及皮下组织，分离出气管，用无菌留置针插入气管大约2cm左右，在缓慢注入盐酸博来霉素(5U/kg)60uL，注射完后，退出注射器，消毒后缝合伤口，小心将小鼠放在暖床上，密切观察，待苏醒后放回笼内。两周后对滴注了博来霉素的各组进行micro-CT扫描，采集CT图像。

2.3.2给药前采集micro-CT数据

设置参数：电压90kv，电流160mA，FOV40，时间17s；

2.3.3将以上CT图像按0-5纤维化等级进行分等级

将以上CT图像按0-5纤维化等级经行分等级.对达到3级以上的动物视为造模成功，进行并对给药前后的每只小鼠按所在等级的差值作图。

2.3.4给药后micro-CT数据采集及数据处理

2.3.4.1micro-CT数据采集操作

同3.2给药前micro-CT数据采集，这次对全部实验动物进行micro-CT扫描，采集CT图像。

2.4.2肺组织的提取

抽完血后，剪开胸腔，小心分离出肺部组织，将组织置于冰上按左右切开，一部分放入10％的福尔马林中保存，用于组织切片；另一部分放入冻存管中，并置于液氮中速冻，过一段时间后，转移到冻存盒中，置于-80℃冰箱中保存。

2.5病理学观察：采用HE染色

2.6统计学处理

使用SPSS12.0数学统计学软件，计量资料采用均数±标准差(X±S)表示，两组间比较采用t检验。计数资料行秩和检验，以P<0.05为有显著性差异。

3实验结果

3.1肺纤维化给药前的micro-CT图像等级，见图1。

3.2肺纤维化给药后各组的micro-CT图像，见图2。由图2可知，模型组肺纤维化程度与正常组相比明显加重，丹蒌各组及阳性药组肺纤维化程度与模型相比有明显的减轻，假手术组与正常组相比肺纤维化程度没有明显改变。

3.3给药前后CT等级变化，见图3。由图3可知，各组小鼠在给药后，丹蒌各组和阳性组肺纤维化程度等级明显有所下降，模型组肺纤维化程度等级并没有下降，而是有所上升。

3.4各组肺纤维化肺部模拟图，见图4。由图4可知，模型组与正常组相比肺部明显发生了改变，肺部结构明显有所破坏，丹蒌组和阳性组肺部模拟图与模型相比有明显的好转。

3.5各组病理切片，见图5。由图5可知，模型组与正常组相比肺部结构有明显的破坏，丹蒌组和阳性组肺部组织破坏程度与模型相比有明显的好转，假手术组与正常组相比肺部结构没有明显的改变。

4结论

本实施例从肺纤维化模型的制作，到给药并采用一系列仪器、实验等研究丹蒌方及丹红注射液对小鼠肺纤维化的影响，在功能水平上，通过micro-CT仪采集CT图形、并用CT图形分析软件对图像经行分析，评价丹蒌方对肺纤维化的影响；在病理水平上，采用HE染色，评价丹蒌方对肺纤维化肺损伤的影响。

通过以上研究可以得出以下结论：

(1)采用博来霉素造肺纤维化模型是成功的，可以用于以后的实验；

(2)丹蒌方可以明显改善肺纤维化小鼠的肺部损伤；

(3)丹蒌方对肺纤维化小鼠的肺部具有保护作用，可以减缓由纤维化对肺部组织造成的损伤。

实施例2

一种用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，由黄芪、薤白、丹参、葛根、川芎、赤芍、泽泻、郁金、骨碎补、半夏、桂枝、甘草、麦门冬、五味子和当归组成，其中，瓜蒌皮75g、黄芪110g、薤白40g、丹参145g、葛根130g、川芎55g、赤芍50g、泽泻130g、郁金60g、骨碎补30g、半夏45g、桂枝50g、甘草50g、麦门冬140g、五味子125g、当归135g。

上述用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，是由下述方法制备得到的：

(1)取川芎、郁金、泽泻粉碎成细粉，过筛，混匀；

(2)黄芪、赤芍、薤白、骨碎补、半夏、桂枝、甘草、麦门冬、五味子和当归混合后加入该10味药材总量8倍量的70％(v/v)乙醇加热回流提取二次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.28；

(3)葛根和丹参，单包，加药材总量8倍量的70％(v/v)乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.27；

(4)将步骤(2)、(3)所得浓缩液与步骤(1)所得细粉混合，减压干燥，粉碎，即得。

实施例3

一种用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，由黄芪、薤白、丹参、葛根、川芎、赤芍、泽泻、郁金、骨碎补、半夏、桂枝、甘草、麦门冬、五味子和当归组成，其中，瓜蒌皮145g、黄芪50g、薤白65g、丹参55g、葛根220g、川芎85g、赤芍20g、泽泻55g、郁金85g、骨碎补40g、半夏20g、桂枝20g、甘草85g、麦门冬55g、五味子180g、当归220g。

上述用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，是由下述方法制备得到的：

(1)取川芎、郁金、泽泻粉碎成细粉，过筛，混匀；

(2)黄芪、赤芍、薤白、骨碎补、半夏、桂枝、甘草、麦门冬、五味子和当归混合后加入该10味药材总量8倍量的70％(v/v)乙醇加热回流提取二次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30；

(3)葛根和丹参，单包，加药材总量8倍量的70％(v/v)乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.30；

(4)将步骤(2)、(3)所得浓缩液与步骤(1)所得细粉混合，减压干燥，粉碎，即得。

实施例4

一种用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，由黄芪、薤白、丹参、葛根、川芎、赤芍、泽泻、郁金、骨碎补、半夏、桂枝、甘草、麦门冬、五味子和当归组成，其中，瓜蒌皮30g、黄芪180g、薤白15g、丹参220g、葛根55g、川芎20g、赤芍85g、泽泻220g、郁金20g、骨碎补10g、半夏85g、桂枝85g、甘草20g、麦门冬220g、五味子50g、当归55g。

上述用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，是由下述方法制备得到的：

(1)取川芎、郁金、泽泻粉碎成细粉，过筛，混匀；

(2)黄芪、赤芍、薤白、骨碎补、半夏、桂枝、甘草、麦门冬、五味子和当归混合后加入该10味药材总量8倍量的70％(v/v)乙醇加热回流提取二次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25；

(3)葛根和丹参，单包，加药材总量8倍量的70％(v/v)乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25；

(4)将步骤(2)、(3)所得浓缩液与步骤(1)所得细粉混合，减压干燥，粉碎，即得。

实施例5

一种用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，由黄芪、薤白、丹参、葛根、川芎、赤芍、泽泻、郁金、骨碎补、半夏、桂枝、甘草、麦门冬、五味子和当归组成，其中，瓜蒌皮100g、黄芪120g、薤白50g、丹参125g、葛根110g、川芎60g、赤芍35g、泽泻175g、郁金55g、骨碎补30g、半夏50g、桂枝45g、甘草35g、麦门冬180g、五味子130g、当归145g。

上述用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，是由下述方法制备得到的：

(1)取川芎、郁金、泽泻粉碎成细粉，过筛，混匀；

(2)黄芪、赤芍、薤白、骨碎补、半夏、桂枝、甘草、麦门冬、五味子和当归混合后加入该10味药材总量8倍量的70％(v/v)乙醇加热回流提取二次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.27；

(3)葛根和丹参，单包，加药材总量8倍量的70％(v/v)乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.26；

(4)将步骤(2)、(3)所得浓缩液与步骤(1)所得细粉混合，减压干燥，粉碎，即得。

实施例6

将实施例2所述含丹蒌方的药物组合物按实施例1所述方法造模，以同样方式给药，所得结果如下：

各组病理切片，见图6。由图6可知，模型组与正常组相比肺部结构有明显的破坏，丹蒌组和阳性组肺部组织破坏程度与模型相比有明显的好转。结论：与实施例1丹蒌方粉末相比，本发明所述药物组合物治疗效果更加显著。

综上，本发明采用博来霉素诱导肺部纤维化，有研究表明气管滴注博来霉素诱导肺组织损伤，最终导致纤维化其机理可能与博来霉素所引起的炎症反应，氧化损伤，细胞因子的增加有关，以此模拟肺纤维化其病理过程与人类的肺纤维化相似，实施例中采用micro-CT图像，并对其进行分析，依以上四点对CT图像进行评价，以此说明造模成功，而通过对图像的分析可以得出，在滴注了博来霉素以后，小鼠肺部磨玻璃样，肺结构明显不如正常组，由此说明肺纤维化模型是成功的，可以用于后续实验。

本发明通过研究发现，给药丹蒌方一周之后，肺部的毛玻璃样雾状部分明显减少，与模型组相比肺部明显有所好转，几乎接近正常组的水平，说明丹蒌方能够减轻纤维化小鼠肺部的损伤，对纤维化肺具有保护作用；在对CT图像的软件模拟图上也可以看出，丹蒌方组的肺组织几乎接近完整；这一点也可以由病理切片的结果得以佐证，在病理切片上也可以看出，丹蒌方组肺结构与模型组相比有了明显的好转；由此我们可以得出丹蒌方对肺纤维化小鼠的肺损伤具有保护作用。

上述参照具体实施方式对该丹蒌方的新用途及用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物进行的详细描述，是说明性的而不是限定性的，可按照所限定范围列举出若干个实施例，因此在不脱离本发明总体构思下的变化和修改，应属本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.丹蒌方在制备治疗肺原性I型肺心病的药物中的用途。

2.根据权利要求1所述的丹蒌方的用途，其特征在于：所述肺原性I型肺心病包括肺纤维化和/或肺损伤疾病。

3.根据权利要求1或2所述的丹蒌方的用途，其特征在于：所述丹蒌方由瓜蒌皮、黄芪、薤白、丹参、葛根、川芎、赤芍、泽泻、郁金和骨碎补组成，按其重量份数计瓜蒌皮30-145份、黄芪50-180份、薤白15-65份、丹参55-220份、葛根55-220份、川芎20-85份、赤芍20-85份、泽泻55-220份、郁金20-85份、骨碎补10-40份。

4.根据权利要求1或2所述的丹蒌方的用途，其特征在于：所述丹蒌方为市售丹蒌片。

5.一种用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，其特征在于：由黄芪、薤白、丹参、葛根、川芎、赤芍、泽泻、郁金、骨碎补、半夏、桂枝、甘草、麦门冬、五味子和当归组成，按其重量份数计瓜蒌皮30-145份、黄芪50-180份、薤白15-65份、丹参55-220份、葛根55-220份、川芎20-85份、赤芍20-85份、泽泻55-220份、郁金20-85份、骨碎补10-40份、半夏20-85份、桂枝20-85份、甘草20-85份、麦门冬55-220份、五味子50-180份、当归55-220份。

6.根据权利要求5所述的用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，其特征在于：按其重量份数计瓜蒌皮75份、黄芪110份、薤白40份、丹参145份、葛根130份、川芎55份、赤芍50份、泽泻130份、郁金60份、骨碎补30份、半夏45份、桂枝50份、甘草50份、麦门冬140份、五味子125份、当归135份。

7.根据权利要求5所述的用于治疗肺原性I型肺心病的药物组合物，其特征在于：是由下述方法制备得到的：

(1)取川芎、郁金、泽泻粉碎成细粉，过筛，混匀；

(2)黄芪、赤芍、薤白、骨碎补、半夏、桂枝、甘草、麦门冬、五味子和当归混合后加70％(v/v)乙醇加热回流提取二次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25-1.30；

(3)葛根和丹参，单包，加乙醇回流提取三次，每次1小时，合并提取液，滤过，滤液减压回收乙醇，浓缩至相对密度为1.25-1.30；

(4)将步骤(2)、(3)所得浓缩液与步骤(1)所得细粉混合，减压干燥，粉碎，即得。