WO1984002921A3 - cADN GLUCOAMYLASE - Google Patents

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Abstract

Un gène possédant une séquence d'ADN complémentaire à celle du polypeptide mARN glucoamylase à partir d'une espèce fongique, de préférence d'Aspergillus awamori, est préparé. Le mARN est un poly A ARN d'approximativement 2,2 kilobases obtenu à partir de cellules fongiques cultivées dans des conditions d'induction de glucoamylase. La transcription inverse du mARN permet d'obtenir une sonde de glucoamylase utilisée pour identifier des fragments de digestion génomiques contenant des régions de gènes de glucoamylase, qui sont séquencées pour situer les introns et les exons. Les fragments génomiques sont collés ensemble pour former un gène possédant une séquence d'ADN possédant des introns altérés ou effacés, fournissant un codage de la protéine de glucoamylase fongique et pouvant, lorsqu'elle est combinée correctement avec un vecteur d'expression d'ADN clivé, exprimer une protéine non-native possédant une activité enzymatique de glucoamylase lors de la transformation d'un organisme hôte par le vecteur. L'hôte est de préférence une bactérie ou une levure. La levure hôte transformée peut être utilisée pour produire de l'éthanol.
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