UA122212C2 - Вид комбінованої терапії з застосуванням антитіла до cd38 - Google Patents

Вид комбінованої терапії з застосуванням антитіла до cd38 Download PDF

Info

Publication number
UA122212C2
UA122212C2 UAA201703276A UAA201703276A UA122212C2 UA 122212 C2 UA122212 C2 UA 122212C2 UA A201703276 A UAA201703276 A UA A201703276A UA A201703276 A UAA201703276 A UA A201703276A UA 122212 C2 UA122212 C2 UA 122212C2
Authority
UA
Ukraine
Prior art keywords
dara
ptrk
antibody
daratumumab
sni
Prior art date
Application number
UAA201703276A
Other languages
English (en)
Inventor
Генк М. Локгорст
Туна Мутис
Інґер С. Нейгоф
Ингер С. Нейгоф
де Донк Нілс В. Ван
де Донк Нилс В. Ван
Original Assignee
Янссен Байотек, Інк.
Янссен Байотек, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=55436472&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=UA122212(C2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Янссен Байотек, Інк., Янссен Байотек, Инк. filed Critical Янссен Байотек, Інк.
Publication of UA122212C2 publication Critical patent/UA122212C2/uk

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/20—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having a carboxyl group bound to a chain of seven or more carbon atoms, e.g. stearic, palmitic, arachidic acids
    • A61K31/203—Retinoic acids ; Salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/40—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Abstract

Винахід стосується видів комбінованої терапії з застосуванням антитіл до CD38 і повністю транс-ретиноєвої кислоти.

Description

ГАЛУЗЬ ТЕХНІКИ, ДО ЯКОЇ ВІДНОСИТЬСЯ ВИНАХІД
Цей винахід стосується видів комбінованої терапії з застосуванням антитіл до СОЗ38 і повністю транс-ретиноєвої кислоти.
РІВЕНЬ ТЕХНІКИ
В-клітинні злоякісні новоутворення включають В-клітинний хронічний лімфоцитарний лейкоз, лімфому з клітин зони мантії, лімфому бБеркітта, фолікулярну лімфому, дифузну В- великоклітинну лімфому, множинну мієлому, ходжкінську лімфому, волосатоклітинний лейкоз, первинну ексудативну лімфому й неходжкінську лімфому, пов'язану зі СНІД. В-клітинні злоякісні новоутворення становлять більш ніж 85 95 від діагностованих лімфом.
Множинна мієлома (ММ) являє собою В-клітинне злоякісне новоутворення, яке характеризується латентним накопиченням секреторних плазматичних клітин у кістковому мозку з низьким індексом проліферації й подовженою тривалістю життя. Захворювання врешті вражає кістки й кістковий мозок, призводячи до появи множинних пухлин і уражень по всій скелетній системі. Приблизно 1 95 усіх ракових захворювань і трохи більш ніж 10 95 усіх злоякісних гематологічних новоутворень можна віднести до ММ. Захворюваність на ММ зростає серед людей похилого віку, при цьому медіана віку на момент діагностування становить приблизно 61 рік.
СО38 являє собою мембранний білок І типу, який виконує функцію в опосередкованій рецепторами адгезії й передачі сигналів, а також опосередковує мобілізацію кальцію через його ектоферментативну активність, каталізуючи утворення циклічної АДФ-рибози (цАДФР) із НАД" і гідролізуючи ЦАДФР до АДФ-рибози (АДФР). СОЗ38 опосередковує секрецію цитокінів, активацію й проліферацію лімфоцитів (Рипаго еї аї., У Іттипоіоду 145:2390-6, 1990; Тегногзі еї аї., Сеї 771-80, 1981; Сиве вї аї., Маїиге 398:70-3, 1999) і за допомогою своєї глікогідролазної активності щодо НАД регулює позаклітинні рівні НАД", залучені до модулювання компартменту регуляторних Т-клітин (Аагіоисн еї аї., 14:1284-92, 2012; СНіагиді єї а!., Майте Вемівемв 12:741-52, 2012).
СОрЗ38 експресується на злоякісних плазматичних клітинах ММ і присутній у різноманітних злоякісних гематологічних новоутвореннях.
Доступні сьогодні види терапії ММ включають хіміотерапію, трансплантацію стовбурових клітин, лікування препаратами ТпаіютійтФ (талідомід), Кеміїтій (леналідомід), МеїсадеФ (бортезоміб), Агедіа? (памідронат) і 2отеїа?Ж (золедронова кислота). Чинні протоколи лікування, які включають комбінування хіміотерапевтичних агентів, таких як вінкристин, кармустин (ВСМІЮ), мелфалан, циклофосфамід, адріаміцин і преднізон або дексаметазон, забезпечують повну ремісію лише в приблизно 5 95 пацієнтів. Медіана виживаності становить приблизно 36-48 місяців з моменту діагностування. Останні досягнення в галузі високодозової хіміотерапії з подальшою трансплантацією аутологічних мононуклеарних клітин кісткового мозку (МНККМ) або периферичної крові (МНКПК) підвищили відсоток повної ремісії й тривалість ремісії, хоча загальна виживаність подовжилася лише незначно й не було отримано доказів вилікування. Зрештою, в усіх хворих на ММ трапляються рецидиви, навіть під час підтримувальної терапії тільки інтерфероном-альфа (ІЕМ-а) або його комбінацією зі стероїдами.
Таким чином, існує потреба в додаткових видах терапії для лікування множинної мієломи й інших В-клітинних злоякісних новоутворень.
СУТЬ ВИНАХОДУ
Одним варіантом втілення винаходу є спосіб лікування суб'єкта, що має СЮОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, який включає введення пацієнтові, який цього потребує, антитіла до СОЗ38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де антитіло до СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СО38, іп мйго шляхом антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АЗКЦ) або комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ).
КОРОТКИЙ ОПИС РИСУНКІВ
На Фіг. ТА продемонстровано, що повністю транс-ретиноєва кислота (ПТРК) підвищує експресію СОЗ8 на клітинних лініях множинної мієломи (ММ) дозозалежним чином. Клітинні лінії
ММ КРМІВ8226, МО ї ХО1 інкубували в середовищі КЕРМІ-1640 окремо або разом з 0-25 нм
ПТРК протягом 48 годин і після цього збирали для визначення експресії СО38 шляхом проточної цитометрії. На графіку показано результати одного репрезентативного експерименту.
По вісі М відкладено кратність підвищення середньої інтенсивності флуоресценції (СІФ) поверхневої експресії СОЗ8.
На Фіг. 18 продемонстровано, що ПТРК підвищує експресію СОЗ8 на клітинних лініях ММ часозалежним чином. Клітинні лінії ММ ЕРМІ8226, ОМО ї ХО1 інкубували в середовищі КРМІ- 60 1640 окремо або разом з 10 нМ ПТРК протягом 24, 48, 72 або 96 годин і після цього збирали для визначення експресії СО3З8 шляхом проточної цитометрії. На графіку показано результати одного репрезентативного експерименту. По вісі М відкладено кратність підвищення середньої інтенсивності флуоресценції (СІФ) поверхневої експресії СОЗ8.
На Фіг. 2 продемонстровано, що ПТРК підвищує експресію СО38 на мононуклеарних клітинах кісткового мозку (МНККМ), взятих у хворих на ММ, ех мімо. МНККМ від 26 хворих на ММ інкубували в середовищі КРМІ-1640 окремо або разом з 10 нМ ПТРК протягом 48 годин і після цього збирали для визначення експресії СО38 шляхом проточної цитометрії. По вісі МУ відкладено значення СІФ поверхневої експресії СОЗ8. "Середовище" -- середовище в 0 годин; "нз"-- незначна; "р «0,001; и777р « 0,0001.
На Фіг. ЗА показана індукована даратумумабом комплементзалежна цитотоксичність (КЗЦ) (верхній графік) і антитілозалежна клітинноопосередкована цитотоксичність (АЗКЦ) (нижній графік) у клітинній лінії ММ ХО1, яка проходила попередню обробку з використанням або без використання 10 нМ ПТРК протягом 48 годин перед індукуванням КЗЦ або АЗКЦ у присутності 10 мкг/мл даратумумабу. По вісі М відкладено відсоток (95) КЗЦ або АЗКЦ. Дані демонструють середні значення й стандартну помилку середнього (ЗЕМ) принаймні трьох експериментів. Р- значення між вказаними групами обчислювали з використанням і-критерію Стьюдента для залежних вибірок. "Дара" -- даратумумаб;"р«0,05;ра«о,01.
На Фіг. ЗВ показана індукована даратумумабом КЗЦ (верхній графік) і АЗКЦ (нижній графік) у клітинній лінії ММ КРМІ8226, яка проходила попередню обробку з використанням або без використання 10 нМ ПТРК протягом 48 годин перед індукуванням КЗЦ або АЗКЦ у присутності 10 мкг/мл даратумумабу. По вісі М відкладено відсоток (95) КЗЦ або АЗКЦ. Дані демонструють середні значення й 5ЕМ принаймні трьох експериментів. Р-значення між вказаними групами обчислювали з використанням і-критерію Стьюдента для залежних вибірок. "Дара" -- даратумумаб; "нз" -- незначна.
На Фіг. ЗС показана індукована даратумумабом КЗЦ (верхній графік) і АЗКЦ (нижній графік) у клітинній лінії ММ ШОМУ, яка проходила попередню обробку з використанням або без використання 10 нМ ПТРК протягом 48 годин перед індукуванням КЗЦ або АЗКЦ у присутності 10 мкг/мл даратумумабу. По вісі М відкладено відсоток (95) КЗЦ або АЗКЦ. Дані демонструють середні значення й 5ЕМ принаймні трьох експериментів. Р-значення між вказаними групами
Зо обчислювали з використанням і-критерію Стьюдента для залежних вибірок. "Дара" -- даратумумаб; " р « 0,05; "нз" -- незначна.
На Фіг. 4А продемонстровано, що попередня обробка первинних клітин ММ протягом 48 годин із використанням 10 нМ ПТРК посилює опосередковану даратумумабом КЗЦ первинних клітин ММ. Клітини ММ попередньо обробляли протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нМ ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 0- 10 мкг/мл. На графіку показано об'єднані результати для зразків 16 хворих. 7" р« 0001, их рк 0,0001. "ДАРА" -- даратумумаб.
На Фіг. 4В8 продемонстровано, що попередня обробка первинних клітин ММ протягом 48 годин із використанням 10 нМ ПТРК посилює опосередковану даратумумабом АЗКЦ первинних клітин ММ. Клітини ММ попередньо обробляли протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нМ ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 0- 10 мкг/мл. На графіку показано об'єднані результати для зразків 13 хворих. 7 р « 0,05. "ДАРА" -- даратумумаб.
На Фіг. 5А показані результати КЗЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого 1 і хворого 2, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нм
ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1-10 мкг/мл.
На Фіг. 58 показані результати КЗЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого З і хворого 4, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нм
ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1-10 мкг/мл.
На Фіг. 5С показані результати КЗЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого 5 і хворого 6, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нМ ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1- 10 мкг/мл.
На Фіг. 50 показані результати КЗЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого 7 і хворого 8, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нМ ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1- 10 мкг/мл.
На Фіг. 5Е показані результати КЗЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого 9 і хворого 10, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нм бо ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1-10 мкг/мл.
На Фіг. 5Е показані результати КЗЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого 11 і хворого 12, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нМ ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1- 10 мкг/мл.
На Фіг. 50 показані результати КЗЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого 13 і хворого 14, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нМ ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1- мкг/мл.
На Фіг. 5Н показані результати КЗЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого 15 і 10 хворого 16, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нМ ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1- 10 мкг/мл.
На Фіг. бА показані результати АЗКЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого З і хворого 4, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нМ ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1- 10 мкг/мл.
На Фіг. 6В показані результати АЗКЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого 7 і хворого 8, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нМ ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1- 10 мкг/мл.
На Фіг. 6С показані результати АЗКЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого 9 і хворого 10, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нМ ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1- 10 мкг/мл.
На Фіг. 60 показані результати АЗКЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого 14 і хворого 15, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нМ ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1- 10 мкг/мл.
На Фіг. 6Е показані результати АЗКЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого 16 і хворого 17, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нМ ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1- 10 мкг/мл.
На Фіг. 6Е показані результати АЗКЦ іп міго первинних клітин ММ, взятих у хворого 18, попередньо оброблюваних протягом 48 годин із використанням або без використання 10 нм
ПТРК, як зазначено на фігурі, за концентрацій даратумумабу в діапазоні 1-10 мкг/мл.
На Фіг. 7 показані рівні експресії СОЗ3З8 на МНККМ, взятих у хворих на ММ, до й після інкубування клітин у присутності (чорні смуги) або у відсутності (білі смуги) 10 нМ ПТРК. Зразки від того самого пацієнта використовували в аналізах АЗКЦ й КЗЦ, як показано на Фіг. 4А, 48, 5 і б.
На Фіг. вА показане індуковане ПТРК зниження експресії СО55, СО59 і СО46 на клітинах
ЕРМІВ8226 після 48-годинного інкубування клітин з використанням 0-25 нМ ПТРК. СІФ -- середня інтенсивність флуоресценції. Експресію СО55, СО59 і 2046 оцінювали з використанням проточної цитометрії. Верхній графік: СІФ -- нижній графік: кратність зміни СІФ у порівнянні з контролем.
На Фіг. 88 показане індуковане ПТРК зниження експресії СО55, СО59 і СО46 на клітинах
МО після 48-годинного інкубування клітин з використанням 0-25 нМ ПТРК. СІФ -- середня інтенсивність флуоресценції. Експресію СО55, СО59 і СО46 оцінювали з використанням проточної цитометрії. Верхній графік: СІФ -- нижній графік: кратність зміни СІФ у порівнянні з контролем.
На Фіг. 8С показане індуковане ПТРК зниження експресії СО55, СО59 і СО046 на клітинах
ХО1 після 48-годинного інкубування клітин з використанням 0-25 нМ ПТРК. СІФ -- середня інтенсивність флуоресценції. Експресію СО55, СО59 і СО46 оцінювали з використанням проточної цитометрії. Верхній графік: СІФ -- нижній графік: кратність зміни СІФ у порівнянні з контролем.
На Фіг. 9А показане індуковане ПТРК зниження експресії СО55 на первинних клітинах ММ після 48-годинного інкубування клітин з використанням (сірі смуги) або без використання (чорні смуги) 10 нМ ПТРК, як зазначено. " р-0,019.
На Фіг. 98 показане індуковане ПТРК зниження експресії СО59 на первинних клітинах ММ після 48-годинного інкубування клітин з використанням (сірі смуги) або без використання (чорні бо смуги) 10 нМ ПТРК, як зазначено. 7" р-0,0047.
На Фіг. 9С показаний вплив ПТРК на експресію СО46б на первинних клітинах ММ після 48- годинного інкубування клітин з використанням (сірі смуги) або без використання (чорні смуги) 10
НМ ПТРК, як зазначено; "нз" -- незначний.
На Фіг. 10А показана експресія СО55 на первинних клітинах ММ, взятих у 16 хворих на ММ, після 48-годинного інкубування клітин з використанням (чорні смуги) або без використання (білі смуги) 10 нМ ПТРК. Зразки від тих самих пацієнтів використовували в аналізах КЗЦ, як показано на Фіг. 5.
На Фіг. 108 показана експресія СО59 на первинних клітинах ММ, взятих у 16 хворих на ММ, після 48-годинного інкубування клітин з використанням (чорні смуги) або без використання (білі смуги) 10 нМ ПТРК. Зразки від тих самих пацієнтів використовували в аналізах КЗЦ, як показано на Фіг. 5.
На Фіг. 10С показана експресія СО46 на первинних клітинах ММ, взятих у 16 хворих на ММ, після 48-годинного інкубування клітин з використанням (чорні смуги) або без використання (білі смуги) 10 нМ ПТРК. Зразки від тих самих пацієнтів використовували в аналізах КЗЦ, як показано на Фіг. 5.
На Фіг. 11 продемонстровано, що ПТРК покращує відповідь на даратумумаб у мишачій моделі гуманізованої множинної мієломи. Мишам Кад2г "ус", які були носіями каркасів, вкритих мезенхімальними стовбуровими клітинами (МОСК), проводили інокуляцію трансдукованих люциферазою клітин ХО1. Миші отримували лікування контролем, ПТРК плюс без-Т-клітинними
МНКІПК (МНКІК-Т) у якості ефекторних клітин, даратумумабом плюс МНКПК-Т або даратумумабом плюс ПТРК плюс МНКПК-Т, їі ріст трансдукованих клітин ХО1 відстежували кожного тижня шляхом біолюмінесцентної візуалізації (ВІЇ). На фігурі показане пухлинне навантаження на групу лікування, по 4 миші в групі, і кожна з мишей має 4 каркаси. Статистичні відмінності між мишами, які отримували лікування даратумумабом, і мишами, які отримували лікування даратумумабом плюс ПТРК, обчислювали з використанням О-критерію Манна-Уітні. х
Р«005, Р «001, Р «0,001; "нз"-- незначна.
ДЕТАЛЬНИЙ ОПИС ВИНАХОДУ
"СО38" відноситься до білка СО38 людини (синоніми: АДФ-рибозилциклаза 1, цАДФР- гідролаза 1, циклічна АДФ-рибоза-гідролаза 1). СО38 людини має амінокислотну послідовність,
Ко) наведену в 5ЕО ІЮ МО: 1
У контексті цього документа термін "антитіла" використовується в широкому значенні й включає молекули імуноглобуліну, у тому числі моноклональні антитіла, у тому числі мищшачі, людські, адаптовані до людини, гуманізовані й химерні моноклональні антитіла, фрагменти антитіл, біспецифічні або мультиспецифічні антитіла, димерні, тетрамерні або мультимерні антитіла й одноланцюгові антитіла.
Імуноглобуліни можна віднести до п'яти основних класів, а саме ІдА, дО, ЧЕ, дос і ДМ, залежно від амінокислотної послідовності константного домену важких ланцюгів. ДА і до додатково поділяють на ізотипи ІдА:, ІдАг, даси, ІДС», ІдСз ії дя. Легкі ланцюги антитіл будь- якого виду хребетних можна віднести до одного з двох чітко відмінних типів, а саме каппа (к) і лямбда (ХА), на основі амінокислотних послідовностей їхніх константних доменів.
У контексті цього документа термін "фрагменти антитіл" стосується частини молекули імуноглобуліну, яка зберігає антигензв'язуючий сайт важких ланцюгів і/або легких ланцюгів, наприклад областей, що визначають комплементарність, важких ланцюгів (НСОК) 1, 2 ії 3, областей, що визначають комплементарність, легких ланцюгів (СОР) 1, 2 і 3, варіабельної області важких ланцюгів (МН) або варіабельної області легких ланцюгів (МІ). Фрагменти антитіла включають фрагмент Раб; одновалентний фрагмент, що складається з доменів МІ, МН,
СІ ї СНІ; фрагмент К(ар)г; двовалентний фрагмент, що містить два фрагменти Раб, зв'язані дисульфідним містком у шарнірній ділянці; фрагмент Га, що складається з доменів МН і СНІ; фрагмент Ем, що складається з доменів одного плеча антитіла; фрагмент доменного антитіла (аАБ) (Улага еї аї., Маште 341:544-546, 1989), що складається з домену УН. Домени МН і м. можуть бути сконструйовані й зв'язані один з одним за допомогою синтетичного лінкера з утворенням різних типів конструкцій одноланцюгових антитіл, де домени МН//. паруються внутрішньомолекулярно або міжмолекулярно в тих випадках, коли домени МН і м експресуються окремими конструкціями одноланцюгових антитіл з утворенням одновалентного антигензв'язуючого сайту, наприклад одноланцюговим Ем (ЗсЕм) або діатілом; описані, наприклад, у міжнародних патентних публікаціях МоМо УУО1998/44001, УУО1988/01649,
УО1994/13804 і М/01992/01047. Ці фрагменти антитіл отримують з використанням добре відомих фахівцям у цій галузі способів, і проводять скринінг цих фрагментів на корисність у такий самий спосіб, що й для повнорозмірних антитіл.
У контексті цього документа термін "виділене антитіло" означає антитіло або фрагмент антитіла, який по суті не містить інших антитіл, що мають відмінні антигенні властивості (наприклад, антитіло, яке специфічно зв'язується з СЮОЗ38). Однак виділене антитіло, яке специфічно зв'язується з СОЗ38, може мати перехресну реактивність до інших антигенів, таких як ортологи людського СОЗ8, наприклад СОЗ8 Масаса їазсісціагі5 (яванського макака). Крім того, виділене антитіло може по суті не містити іншого клітинного матеріалу й/або хімічних речовин.
Варіабельна область антитіла складається з області "каркаса", що переривається трьома "антигензв'язуючими сайтами". Антигензв'язуючі сайти визначаються з використанням різних термінів: області, що визначають комплементарність (СОК), три у МН (НСОМКІ, НСОМК2, НСОКЗ) і три у М. (СОКІ1, І СОК2, І СО), на основі варіабельності послідовностей (Уми апа Кабаї у
Ехр Мей 132:211-50, 1970; Кабаї єї а! бЗедиепсевз ої Ргоївїн5 ої Іттипоіодіса! Іпіегеві, Бій Еа.
Рибріїс Неакйп Зегмісе, Маїйопа! Іпбійшев ої Неанй, ВеШезаа, Ма., 1991); "Гіперваріабельні області", "НМЕ" або "НУ", три у МН (НІ, Н2, НЗ) і три у МІ (І1, 12, І 3), відносяться до областей варіабельних доменів антитіл, які мають гіперваріабельну структуру за визначенням Споїпіа апа
І езКк (Споїйіа апа І е5К Мої! Віо! 196:901-17, 1987). Інші терміни включають ІМОТ-СОВ (І еїтапс єї а, Оєем Сотрагаї Іттипо! 27:55-77, 2003) і "використання залишку, який визначає специфічність" (ЗОРІ) (АІтадго, Мої! Кесодпй 17:132-43, 2004). Міжнародна база даних
ІпМипосСепетТісз (Мет) (пЕр/Люимилми ітуї огу) пропонує стандартизовану нумерацію й визначення антигензв'язуючих сайтів. Відповідність між визначеннями СОК, НМ і ІМОТ описана в публікації І еїгапс еї аіІ., Оем Сотрагаї Іттипої! 27:55-77, 2003.
У контексті цього документа "залишки Споїйіа" є залишками Мі і МН антитіл, пронумерованих відповідно до А!Г-І агікапі (А!-І агікапі еї аї., У Мої Віої! 273:927-48, 1997). "Каркас" або "каркасні послідовності" -- це інші послідовності варіабельної області, крім тих, які визначено як антигензв'язуючі сайти. "Гуманізоване антитіло" стосується антитіла, у якому антигензв'язуючі сайти отримані з видів не людського походження, а каркаси варіабельної області отримано з послідовностей імуноглобуліну людини. Гуманізовані антитіла можуть включати заміщення в каркасі, так що каркас може не бути точною копією експресованого людського імуноглобуліну або генних послідовностей зародкової лінії. "Адаптовані до людини" антитіла або "адаптовані до каркаса людського походження" антитіла (НЕА) стосуються гуманізованих антитіл, адаптованих згідно зі способами, описаними в публікації патенту США Ме 052009/0118127. Адаптовані до людини антитіла гуманізують шляхом відбору акцепторних каркасів людини на основі максимальної схожості СОК і ЕК, сумісності довжини й схожості послідовностей петель СОКІ і СОКО2 і частини петель СОКЗ легкого ланцюга.
Термін "людське антитіло" означає антитіло, що має варіабельні області важкого й легкого ланцюгів, у яких каркас і антигензв'язуючі сайти отримані з послідовностей людського походження. Якщо антитіло містить константну область, цю константну область також отримують із послідовностей людського походження.
Людське антитіло містить варіабельні області важкого або легкого ланцюга, які "отримані з" послідовностей людського походження, якщо варіабельні області антитіла отримують із системи, у якій використовуються гени імуноглобулінів зародкової лінії людини або перебудованих імуноглобулінів. Такі системи включають бібліотеки генів імуноглобулінів людини, продемонстровані на фагові, і трансгенних тварин не людського походження, наприклад мишей з локусами імуноглобуліну людини, як описано в цьому документі. Людське антитіло може містити амінокислотні відмінності порівняно з послідовностями імуноглобуліну зародкової лінії або перебудованого імуноглобуліну внаслідок, наприклад, природних соматичних мутацій або навмисного введення заміщень у каркасні або антигензв'язуючі сайти.
Зазвичай амінокислотна послідовність людського антитіла принаймні приблизно на 80 95, 81 95, 82 У, 83 95, 84 Фо, 85 95, 86 о, 87 95, 88 9Уо, 89 9, 90 У, 91 Ус, 92 У, 93 Ус, 94 У, 95 Ус, 96 9, 97 У, 9895, 9995 або 10095 ідентична амінокислотній послідовності, що кодується геном імуноглобуліну зародкової лінії або перебудованого імуноглобуліну. У деяких випадках людське антитіло може містити консенсусні каркасні послідовності, отримані з аналізу людської каркасної послідовності, наприклад як описано в публікації Кпаррік еї аї., У Мої Віо! 296:57-86, 2000), або синтетичну НСОКЗ, введену в бібліотеки генів імуноглобулінів людини, продемонстровані на фагові, наприклад як описано в публікації ЗпПі еї аї., У Мої Віо!ї 397:385-96, 2010 ії міжнародній патентній публікації Ме УМО2009/085462). Антитіла, у яких антигензв'язуючі сайти отримано з видів не людського походження, не включені у визначення терміну "людське антитіло".
Виділені гуманізовані антитіла можуть бути синтетичними. Людські антитіла можуть бути бо отримані з використанням систем, таких як фаговий дисплей, що включає синтетичні СОК. і/або синтетичні каркаси, або можуть піддаватись мутагенезу іп міго для покращення властивостей антитіл.
У контексті цього документа термін "рекомбінантне антитіло" включає всі антитіла, які отримані, експресовані, створені або виділені заснованими на рекомбінації способами, такі як антитіла, виділені з організму тварини (наприклад, миші або щура), що є трансгенною або трансхромосомною для генів імуноглобуліну людини, або з гібридоми, отриманої від неї (додатково описано нижче), антитіла, виділені з клітини-хазяїна, трансформованої для експресії антитіла, антитіла, виділені з рекомбінантної комбінаторної бібліотеки антитіл, і антитіла, отримані, експресовані, створені або виділені будь-якими іншими способами, які включають сплайсинг послідовностей генів імуноглобуліну людини з іншими послідовностями ДНК, або антитіла, отримані іп міго з використанням обміну Рар-фрагментів, наприклад біспецифічні антитіла.
У контексті цього документа термін "моноклональне антитіло" стосується препарату молекул антитіл єдиної молекулярної композиції. Композиція моноклонального антитіла демонструє єдину специфічність зв'язування, реалізовану через його пару МН, МІ. і/або МНЛ/І, і афінність зв'язування з конкретним епітопом або, у разі біспецифічного моноклонального антитіла, подвійну специфічність зв'язування з двома різними епітопами.
У контексті цього документа термін "епітоп" означає частину антигена, з якою специфічно зв'язується антитіло. Епітопи, як правило, складаються з хімічно активних (наприклад, полярних, неполярних і гідрофобних) поверхневих скупчень функціональних груп, таких як амінокислоти або бічні ланцюги полісахаридів, і можуть мати специфічні тривимірні структурні характеристики, а також специфічні характеристики зарядів. Епітоп може складатися з суміжних іМабо несуміжних амінокислот, які утворюють конформаційну просторову одиницю. Для несуміжного епітопа амінокислоти з різних частин лінійної послідовності антигена опиняються в безпосередній близькості в З-вимірному просторі в результаті складання білкової молекули.
Термін "різновид" у цьому документі стосується поліпептиду або полінуклеотиду, який відрізняється від еталонного поліпептиду або еталонного полінуклеотиду однією або більшою кількістю модифікацій, наприклад заміщення, інсерції або делеції.
Термін "синергія", "синергізм" або "синергічний" означає, що спостерігається більший ефект,
Зо ніж очікуваний адитивний ефект комбінації.
У контексті цього документа "у комбінації з" означає, що два або більше терапевтичних засобів можна вводити суб'єктові разом у вигляді суміші, одночасно у вигляді окремих агентів або послідовно у вигляді окремих агентів у будь-якому порядку.
Терміни "лікувати" або "лікування" стосуються терапевтичного лікування, метою якого є сповільнення (зменшення) небажаної фізіологічної зміни або захворювання, наприклад росту, розвитку або поширення пухлини або пухлинних клітин, або забезпечення сприятливого або бажаного клінічного результату під час лікування. Сприятливі або бажані клінічні результати включають полегшення симптомів, зменшення ступеня захворювання, стабілізацію (тобто відсутність погіршення) стану захворювання, затримку або вповільнення прогресування захворювання, покращення або тимчасове полегшення стану захворювання й ремісію (часткову або повну), які можна виявити або не можна виявити. "Лікування" також може означати збільшення тривалості життя у порівнянні з очікуваною тривалістю життя суб'єкта за відсутності лікування. Суб'єкти, які потребують лікування, включають тих, хто вже має небажану фізіологічну зміну або захворювання, а також тих, хто схильний до такої фізіологічної зміни або захворювання. "Інгібує ріст" (наприклад, стосовно клітин, таких як пухлинні клітини) означає вимірне зменшення росту клітин іп міго або іп мімо після контактування з терапевтичним засобом або комбінацією терапевтичних або лікарських засобів порівняно з ростом тих самих клітин у відповідних контрольних умовах, добре відомих фахівцям у цій галузі. Інгібування росту клітин
БО іп міго або іп мімо може становити принаймні приблизно 10 95, 20 95, 30 95, 40 95, 50 95, 60 Ор, 70 95, 80 96, 90 9Уо, 99 95 або 100 95. Інгібування росту клітин може відбуватися за допомогою різних механізмів, наприклад шляхом антитілозалежної клітинноопосередкованої токсичності (АЗКЦ), антитілозалежного клітинного фагоцитозу (АЗКФ), комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ), апоптозу, некрозу або інгібування проліферації клітин.
Термін "терапевтично ефективна кількість" стосується кількості, ефективної в дозах і протягом періодів часу, необхідних для досягнення бажаного терапевтичного результату.
Терапевтично ефективна кількість може змінюватися залежно від таких факторів, як стан захворювання, вік, стать, маса тіла пацієнта й здатність терапевтичного засобу або комбінації терапевтичних засобів викликати бажану відповідь у індивідуума. Ілюстративні показники 60 ефективного терапевтичного засобу або комбінації терапевтичних засобів включають,
наприклад, покращення стану здоров'я пацієнта, зниження пухлинного навантаження, зупинку або вповільнення росту пухлини й/або відсутність метастазування ракових клітин у інші місця в організмі.
У винаході запропоновані способи лікування хворих, які мають СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, комбінацією антитіла до СОЗ8 і повністю транс-ретиноєвої кислоти (ПТРК). Винахід грунтується, принаймні частково, на виявленні того факту, що ПТРК посилює опосередковану даратумумабом лізисну активність антитіл до СОЗ8, яка реалізується через АЗКЦ й/або КЗЦ первинних клітин ММ із низьким, середнім або високим рівнем експресії
СО38, шляхом посилення експресії СОЗ8 на клітинах ММ. ПТРК також може індукувати опосередковану даратумумабом АЗКЦ й/або КЗЦ у зразках первинної ММ, які були резистентними до опосередкованої даратумумабом КЗЦ й/або АЗКЦ іп міїго або були отримані від хворих на множинну мієлому, які попередньо отримували інтенсивне лікування й мають форму захворювання з подвійною рефрактерністю (до леналідоміду й до бортезомібу). ПТРК більшою мірою посилює опосередковану даратумумабом КЗЦ, ніж АЗКЦ, що можна пояснити виявленням того факту, що ПТРК також пригнічує експресію комплемент-інгібуючих білків СО55 і 059.
ПТРК (САБ5 Мо 302-79-4) має добре відому молекулярну структуру.
Одним варіантом втілення винаходу, розкритим у цьому документі, включеним У перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, є спосіб лікування суб'єкта, що має
СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, який включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ8 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК).
Одним варіантом втілення винаходу, розкритим у цьому документі, включеним У перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, є спосіб лікування суб'єкта, що має
СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, який включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де антитіло до СОЗ3З8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ38, іп міго шляхом антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АЗКЦ) або комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ).
Способи цього винаходу можна використовувати для лікування тварин, які належать до
Зо будь-якої класифікації. Приклади таких тварин включають ссавців, таких як люди, гризуни, собаки, коти й свійські тварини.
У деяких варіантах втілення винаходу, розкритих у цьому документі, включених у перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, антитіло до СОЗ38 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ8, шляхом КЗЦ іп міїго. "СбО38-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення" означає злоякісне гематологічне новоутворення, яке характеризується наявністю пухлинних клітин, що експресують СОЗ38, включаючи лейкози, лімфоми й мієлому. Прикладами таких СОЗ8-позитивних злоякісних гематологічних новоутворень є В-клітинний лімфобластний лейкоз/лімфома з клітин- попередників і В-клітинна неходжкінська лімфома, гострий промієлоцитарний лейкоз, гострий лімфобластний лейкоз і В-клітинні новоутворення зі зрілих клітин, такі як В-клітинний хронічний лімфоцитарний лейкоз (ХЛЛ)/дрібноклітинна лімфоцитарна лімфома (ДЛЛ), В-клітинний гострий лімфоцитарний лейкоз, В-клітинний пролімфоцитарний лейкоз, лімфоплазматична лімфома, лімфома з клітин зони мантії (ЛКМ), фолікулярна лімфома (ФЛ), включаючи низькодиференційовану, средньодиференційовану й високодиференційовану ФЛ, шкірна лімфома з клітин фолікулярного центра, В-клітинна лімфома з клітин маргінальної зони (МАГ Т- тип, вузловий і селезінковий тип), волосатоклітинний лейкоз, дифузна В-великоклітинна лімфома (ДВВКЛ), лімфома Беркітта (ЛБ), плазмоцитома, множинна мієлома (ММ), плазмоклітинний лейкоз, посттрансплантаційне лімфопроліферативне порушення, макроглобулінемія Вальденстрема, плазмоклітинні лейкози й анапластична великоклітинна лімфома (АВКЛ).
СОЗ38 експресується під час різних злоякісних гематологічних захворювань, включаючи множинну мієлому, лейкози й лімфоми, такі як В-клітинний хронічний лімфоцитарний лейкоз, Т- і
В-клітинний гострий лімфоцитарний лейкоз, макроглобулінемію Вальденстрема, первинний системний амілоїдоз, лімфому з клітин зони мантії, пролімфоцитарний/промієлоцитарний лейкоз, гострий мієлоїдний лейкоз, хронічний мієлоїдний лейкоз, фолікулярну лімфому, лімфому Беркітта, лейкоз із великих гранулярних лімфоцитів (ВГЛ), лейкоз із МК-клітин і лейкоз із плазматичних клітин. Експресія СОЗ8 описана для епітеліальних/«ендотеліальних клітин різного походження, включаючи залозистий епітелій передміхурової залози, острівцеві клітини підшлункової залози, епітелій проток у залозах, включаючи привушну залозу, клітини 60 бронхіального епітелію, клітини яєчка, яєчників і епітелію пухлин аденокарциноми ободової й прямої кишки. Інші захворювання, де може бути залучена експресія СО38, включають, наприклад, бронхоепітеліальні карциноми легенів, рак молочної залози (що розвинувся зі злоякісної проліферації епітеліальної вистилки проток і часточок молочної залози), пухлини підшлункової залози, що розвинулися з ВДВ-клітин (інсуліноми), пухлини, що розвинулися з епітелію кишечнику (наприклад, аденокарцинома й карцинома лускових клітин), карциному передміхурової залози, семіноми в яєчках і ракові захворювання яєчників. У центральній нервовій системі СОЗ38 експресуються нейробластомами.
В одному варіанті втілення винаходу, розкритому в цьому документі, включеному в перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою множинну мієлому.
В одному варіанті втілення винаходу, розкритому в цьому документі, включеному в перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою дифузну В-великоклітинну лімфому (ДВВКЛ).
В одному варіанті втілення винаходу, розкритому в цьому документі, включеному в перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою неходжкінську лімфому.
В одному варіанті втілення винаходу, розкритому в цьому документі, включеному в перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою гострий лімфобластний лейкоз (ГЛЛ).
В одному варіанті втілення винаходу, розкритому в цьому документі, включеному в перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою фолікулярну лімфому (ФЛ).
В одному варіанті втілення винаходу, розкритому в цьому документі, включеному в перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою лімфому Беркітта (ЛБ).
В одному варіанті втілення винаходу, розкритому в цьому документі, включеному в перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою лімфому з клітин зони мантії (ЛКМ).
В одному варіанті втілення винаходу, розкритому в цьому документі, включеному в
Зо перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою множинну мієлому, гострий лімфобластний лейкоз (ГЛЛ), неходжкінську лімфому, дифузну В-великоклітинну лімфому (ДВВКЛ), лімфому Беркітта (ЛБ), фолікулярну лімфому (ФЛ) або лімфому з клітин зони мантії (ЛКМ).
Прикладами В-клітинних неходжкінських лімфом є лімфоматоїдний гранульоматоз, первинна ексудативна лімфома, внутрішньосудинна В-великоклітинна лімфома, медіастинальна В-великоклітинна лімфома, хвороби важких ланцюгів (включаючи у, иі а- хвороби), лімфоми, викликані терапією імунодепресантами, такі як лімфома, викликана циклоспорином, і лімфома, викликана метотрексатом.
В одному варіанті втілення цього винаходу, включеному в перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, порушення за участю клітин, що експресують СОЗ8, являє собою неходжкінську лімфому.
Інші приклади порушень за участю клітин, що експресують СОЗ38, включають злоякісні новоутворення, що походять із Т- і МК-клітин, включаючи неоплазми зі зрілих Т- і МК-клітин, включно з Т-клітинним пролімфоцитарним лейкозом, Т-клітинним лейкозом із великих гранулярних лімфоцитів, агресивним МК-клітинним лейкозом, Т-клітинним лейкозом/лімфомою дорослих, екстранодальною МК/І-клітинною лімфомою назального типу, Т-клітинною лімфомою ентеропатичного типу, печінково-селезінковою Т-клітинною лімфомою, підшкірною панікулітоподібною Т-клітинною лімфомою, бластною МК-клітинною лімфомою, грибоподібним мікозом/синдромом Сезарі, первинними шкірними СОЗО-позитивними // Т-клітинними лімфопроліферативними порушеннями (первинною шкірною анапластичною великоклітинною лімфомою Ш-АВКЛ, лімфоматоїдним папульозом, пограничними ураженнями), ангіомунобластною Т-клітинною лімфомою, периферичною неуточненою Т-клітинною лімфомою й анапластичною великоклітинною лімфомою.
Приклади злоякісних новоутворень, що походять із мієлоїдних клітин, включають гострий мієлоїдний лейкоз, включаючи гострий промієлоцитарний лейкоз, і хронічні мієлопроліферативні захворювання включно з хронічним мієлоїдним лейкозом.
У способах винаходу, розкритих у цьому документі, включених у перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, можна використовувати будь-яке антитіло до СЮОЗ8.
У деяких варіантах втілення антитіло до СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують
СОЗ38, іп міго шляхом антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АЗКЦ) і/або комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ).
Варіабельні області антитіл до СО38 можна отримати з існуючих антитіл до СОЗ38 і клонувати як повнорозмірні антитіла або в складі різноманітних форматів і фрагментів антитіл із використанням стандартних способів. Ілюстративні варіабельні області, що зв'язуються з СОЗ8, які можна використовувати, описані в міжнародних патентних публікаціях Мо УУМО05/103083,
УМО06/125640, ММО07/042309, УМО08/047242, ММО12/092612, ММО06/099875 і УМО11/154453А1.
Ілюстративне антитіло до СЮОЗ38, яке можна використовувати, являє собою даратумумаб.
Даратумумаб містить амінокислотні послідовності варіабельної області важкого ланцюга (МН) і варіабельної області легкого ланцюга (М), продемонстровані в 5ЕО ІЮ МО: 4 і 5 відповідно,
СОК важкого ланцюга НСОКІ1, НСОК2 ї НСОКЗ із БЕО ІЮ МО: 6, 7 і 8 відповідно і СОК легкого ланцюга ЇСОКІ, І СОК2 і СОКЗ із БЕО ІЮО МО: 9, 10 ї 11 відповідно, і належить до підтипу
ІЧОе1/к ії описаний у патенті США Мо 7,829,693. Амінокислотна послідовність важкого ланцюга даратумумабу продемонстрована в ЗЕО ІЮ МО: 12, а амінокислотна послідовність легкого ланцюга продемонстрована в 5ЕО ІЮ МО: 13.
ЗЕОІЮО МО: 1
МАМСЕЕРЗРУЗИОКРОСВІ ЗАВАОІ СІ СУБ МП ММ АММУРАМУ ВОСОМУЗаРОТТКАЕРЕТМІ.
АВСУКУТЕІНРЕМАНУВССОЗУМСАЕКОСАРІЗКНРОМІТЕЕОМОРІ МК атТОТУуРОМКІ С М/ЗВІКОЇ А
НОЕТОМОВОМЕТІ ЕОТИ СМ АВОГТМУССЕЄМТЗКІММОВСР ОМ АВКОСЗММРУБМЕМУКТУЗАВЕАЕ
ААСОУУНУМІ МаЗАЗКІРЄОКМЗТРОаЗМЕМНМІ ОРЕКМОТІ ЕАМ/МІНСОСАВЕОЗАОІ СОЮРТІКЕЇ ЕБІЇ
ЗКАМОБЕЗСКМІМАРОКЕ ОСУКМРЕОЗЗСТ5ЕЇ
ЗЕОІЮ МО: 2
ЗКАМОБЗСКМ МА
ЗЕОІЮ МО: З
ЕКМОТІ ЕАМУМІНОС
ЗЕО ІЮ МО: 4
ЕМО ГЕЗССИЇ МОРССБІ ВІ БСАУЗИЕТЕМЗЕАМОУУВОАРИаКагЕММА
ІЗОАЗасТтуУМАрЗУКаТвВЕТтІЗВОМ5КМТІ М'ОММ5І ВАЕОТАУУЕСАКОКИІ МУ ГСЕРУМЕЮ УМС,О
Коо) сті УТУ55
ЗЕОІЮО МО: 5
ЕІММГТО5РАТІ 5І 5РОЕВАТІ БСВАБОБЗУЗБЗУ АМУУООКРООАРАІ ПУИВАЗМААТтТаІРАВЕбЗИа5 аеБатТОвеТІТІЗЗЕРЕОРАМУМСООВЗМУ РРТРОСТКМБЇїІК
ЗЕОІЮ МО: 6
ЗЕАМ5
ЗЕО ІЮ МО: 7 діІБазасатТУАрУКОа
ЗЕО ІЮ МО: 8
КІ М РСЕРМЕОСУ
ЗЕОІЮО МО: 9
ВАБОБУЗЗМІ А
ЗЕО ІЮ МО: 10 рАБМВАТ
ЗЕО ІЮО МО: 11
ОСООВЗМУУРРТЕ
ЗЕО ІЮ МО: 12
ЕМО ГЕЗСОСИЇ МОРОСБІ ВІ БСАУЗИЕТЕМЗЕАМЗУУУВОАРСОаКаігЕММУЗАІЗОЯаЗОСИТУМАр
УКОаВЕТІЗВОМ5КМТІ МІ ОММ5І ВАЕОТАУУЕСАКОКІ МУ ЕСЕРУМЕО УМУСОСТІ МТУ55АЗТКОаРОМ
ЕРГАРБЗКОТЗОаСТААГаСІ МКОМЕРЕРУТУБМ МСА Та УНТЕРАМІ О55ОЦ01 51 55ММ ТУРБО
ГатОогМміСМУМНкКРЗМТКМОКАМЕРКЗСОКТНТСРРОРАРЕЇТЇ СОС РЗМУБІ ЕРРКРКОТІ МІЗАТРЕМТ
СУУМОУЗНЕОРЕУКЕМУ УУрамЕУНМАКТКРАЕЕОУМЗТУВУМУМІ ТМ НОМ МЕОКЕУКСКУБМ
КАЇ РАРІЕКТІЗКАКИОРАЕЕРОММУТІ РРОВЕЕМТКМОМ5І ТОЇ УКИЕМРЗОІАМЕМЕЗМСООРЕММУКТ
ТРРМ ОБразЕРІ КІ ТОК АМООСММЕЗСЗУМНЕАЇ НМНУТОКБІ БІ Рак
ЗЕО ІЮ МО: 13
ЕІММГТО5РАТІ 5І 5РОЕВАТІ БСВАБОБЗУЗБЗУ АМУУООКРООАРАІ ПУИВАЗМААТтТаІРАВЕбЗИа5 сеБатТоОгТІТІЗЗЕРЕОРАМУУСООВЗММ РРТЕОСТКМЕІКАТМААРЗМУРІРРРБЗОБОЇ КЗатАБУМ
СГ ММЕМРАЕАКМОУМУКМОМАГОБЕМЗОЕЗУТЕООЗКОБЗТУБІ 55ТІ ТІ ЗКАОМЕКНКУМАСЕМУТНО
СІ 55РУТКЗЕМВИаЕС
Інше ілюстративне антитіло до СЮОЗ38, яке можна використовувати, являє собою тАбрООЗ, яке містить послідовності МН і Мі їз БЕО ІЮ МО: 14 ї 15 відповідно й описане в патенті США Мо 7,829,693. МН їі МІ тАБООЗ можуть експресуватися як ІдДс1/к.
ЗЕО ІО МО: 14
ОМОЇ МОБСАЕУККРИаББЗУКУВСКАБИСТЕ5О5МАєЗМУВОАРООСЇ ЕМ МаИавМмІРЕЇ СПИАМЗАОК
ЕОСАМТІТАОКОТЗТАММОІ 551 АВА5БЕОТАМУМСАВОВІААЇ аРЕВЮУМСОСТІ МТУ5БА5
ЗЕОІЮО МО: 15
РІОМТО5РБОБІ БАБМООВМТІТ СВАБОСІЗБОУ АММООКРЕКАРКБІ ІМААБЗБОІ ОБаМРОНЕБОа5 аБОТОгЕТІТІЗБІ ОРЕОБАТУМСООУМЗУРАТРаОСТКМЕК
Інше ілюстративне антитіло до СЮОЗ38, яке можна використовувати, являє собою тАбог24, яке містить послідовності МН і МІ із БЕО ІЮ МО: 16 і 17 відповідно, описане в патенті США Мо 7,829,693. МН їі МІ. тАбБО24 можуть експресуватися як ІдДс1/к.
ЗЕОІЮО МО: 16
ЕМОЇ МОБОАЕМККРОЕБІ КІЗЄСКаБаУЗЕеЕЗМУУМИУМУВОМРаТкаТагЕММапиРНОЗОАВУБРБЕ
ОСОМТЕБАОК5БІЗТАМІ ОМ/55І КАБОТАМУМСАВНнУСУМаЗАУМУгОрІ МуавстІ МТУ55
ЗЕО ІО МО: 17
ЕІМГТО5РАТІ 5І 5РОЕВАТІ БСВАБОБУЗБЗУЇ АММООКРИООСОАРВ ІМОАЗМААТаІРАВЕбИа5 аБОТОгЕТІТІЗ5І ЕРЕОЕАМУМСООВОММ РРТЕСОСТКМЕЇїІК
Інше ілюстративне антитіло до СОЗ38, яке можна використовувати, являє собою МОК-202 (МОВ-03087), яке містить послідовності МН і МІ із ЗЕО ІЮ МО: 18 ії 19 відповідно, описане в патенті США Мо 8,088,896. МН і М МОК-202 можуть експресуватися як Іде1/к.
ЗЕОІЮ МО: 18
ОМОЇ МЕЗО СОЇ МОРОСБІ ВІ БСААЗИаєТЕ55УУММУМУНОАРОаКаИТг ЕМУБаіваОРБМТ ММА
ЗУКОаВЕТІЗАОМ5КМТІ МІ ОММ5І ВАЕОТАМУМСАВОІ РІ УМТАБАУМ СХОСТІ МТУ55
ЗЕОІЮО МО: 19
ПІЕСТОРРОУМБМАРСОТАНІЗСЗИаОмМІ ВНУ МООКРООСАРМІ МІМАСЗКАРБИІРЕВЕБО ЗМ
ЗОМТАТІ ТІЗИТОАЕОЕАВУУСОТУТасАБІ МЕСОССТКІ ТМ СО
Інше ілюстративне антитіло до СОЗ38, яке можна використовувати, являє собою ізатуксимаб, що містить послідовності МН і МІ із БЕО ІЮ МО: 20 ї 21 відповідно, описане в патенті США Мо
Зо 8,153,765. МН і МІ ізатуксимабу можуть експресуватися як ІдсС1/к.
ЗЕО ІЮ МО 20:
ОМОЇ МОБСАЕМАКРИаИТ5УКІ БСКАЗО У ТЕТО МУ МОМУУКОВРООСІ ЕММІСТІМРОДССОЮТамАо
КЕРОСКАТІ ТАОКО5КТУУМНІ 55І АБЕОЗБАМУУСАнарумавмМмоі ОУМуаоат5УТУ5
ЗЕО ІЮ МО: 21:
РІММТО5НІ 5М5Т5І ОРУБІТСКАБОВУЗТУМАМ МООКРООБРАВІ ІМ5АБУВМІСМРОНЕТОа5
САСТОЕТЕТІБ5МОАЕОЇ АМУМСООНУЗРРУТРОаСИТКІ БІК
Інші приклади антитіл до СОЗ8, які можна використовувати у способах винаходу, описані в міжнародній патентній публікації Мо У/005/103083, міжнародній патентній публікації Мо
ММО06/125640, міжнародній патентній публікації Ме УУО07/042309, міжнародній патентній публікації Мо УУО08/047242 або міжнародній патентній публікації Мо УУО14/178820.
Антитіла до СОЗ38, які використовують у способах винаходу, розкритих у цьому документі, включених у перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, також можуть бути вибрані де помо із бібліотеки фагового дисплея, де фаг сконструйований для експресії людських імуноглобулінів або їх частин, таких як Раб, одноланцюгові антитіла (5СЕм), непарні або парні варіабельні області антитіла (Кпаррік еї аї., У Мої Віо! 296:57-86, 2000; Ктерз вї аї., У Іттипо)
Меїй 254:67-84, 2001; Мацшднап еї аї., Майшге ВіотесппоЇоду 14:309-314, 1996; ЗНпевів вї а!., РІТА5 (О5А) 95:6157-6162, 1998; Ноодепроот апа УМіпієг, / Мої Віо! 227:381, 1991; Мак: еї аї., ) Мої
Віо!ї 222:581, 1991). Варіабельні домени, що зв'язуються з СО38 можуть бути виділені, наприклад, із бібліотек фагового дисплея, що експресують варіабельні області важкого й легкого ланцюгів антитіла як гібридні білки з білком оболонки ріхХ бактеріофага, як описано в Зі еї аї., У. Мої. Віої. 397:385-96, 2010 і міжнародній публікації РСТ Мо МУО09/085462). Бібліотеки антитіл можна піддавати скринінгу на зв'язування з позаклітинним доменом людського СОЗ8, отримані позитивні клони можна додатково характеризувати, виділяти з лізатів клонів Раб, а потім клонувати як повнорозмірні антитіла. Такі способи з використанням способів фагового дисплея для виділення людських антитіл визнані в цій галузі. Див., наприклад: патент США Мо 5,223,409; патент США Мо 5,403,484; і патент США Мо 5,571,698, патент США Мо 5,427,908, патент США Мо 5,580,717, патент США Мо 5,969,108, патент США Мо 6,172,197, патент США Мо 5,885,793; патент США Ме 6,521,404: патент США Ме 6,544,731; патент США Ме 6,555,313; патент
США Мо 6,582,915; і патент США Мо 6,593,081.
Ес-фрагмент антитіла може опосередковувати ефекторні функції антитіла, такі як антитілозалежна клітинноопосередкована цитотоксичність (АЗКЦ), антитілозалежний клітинний фагоцитоз (АЗКФ) або комплементзалежна цитотоксичність (КЗЦ). Такі функції можуть бути опосередковані зв'язуванням ефекторного (-их) домену (-ів) Ес із Ес-рецептором на імунній клітині з фагоцитарною або літичною активністю або зв'язуванням ефекторного (-их) домену (- іву Ес з компонентами системи комплементу. Зазвичай ефект (-и), опосередкований (-ї). Ес- зв'язуючими клітинами або компонентами комплементу, призводить (-ять) до інгібування й/або виснаження клітин-мішеней, наприклад клітин, що експресують СОЗ8. Ізотипи ЇДо людини ІДС1,
ІЧ9е2, ІдОоЗ і Ід054 проявляють різну здатність до здійснення ефекторних функцій. АЗКЦ може бути опосередкована Ідс1 і (903, АЗКФ може бути опосередкований Ідс1, Ідс2, доз і Ідся,а
КЗЦ може бути опосередкована Ідс1 і дв.
В описаних у цьому документі способах і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 має ізотип ІдС1,
ІЧО2, ІдДЗ або Ідса4.
В описаних у цьому документі способах і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 має ізотип Ідс1 або
ІДИ.
В описаних у цьому документі способах і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ8, іп міго шляхом АЗКЦ.
В описаних у цьому документі способах і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення, антитіло до СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ8, іп міго шляхом КЗЦ.
В описаних у цьому документі способах і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ8, шляхом АЗКЦ і КЗЦ іп міїго. "Антитілозалежна клітинна цитотоксичність", або "антитілозалежна клітинноопосередкована цитотоксичність", або "АЗКЦ" є механізмом індукції загибелі клітин, який залежить від взаємодії покритих антитілами клітин-мішеней з ефекторними клітинами, які мають літичну активність,
Зо такими як природні клітини-кілери, моноцити, макрофаги й нейтрофіли, через Ес-гамма- рецептори (сук), що експресуються на ефекторних клітинах. Наприклад, МкК-клітини експресують рецептор ЕсукКІШа, тоді як моноцити експресують рецептори ЕсукКІ, ЕсуКІ! і
ЕсукШа. Загибель покритої антитілами клітини-мішені, наприклад клітин, що експресують СОЗ8, відбувається в результаті активності ефекторних клітин внаслідок секреції мембранних пороформуючих білків і протеаз. Для оцінки АЗКЦ-активності антитіла до СОЗ8 іп міго антитіло можна додавати до клітин, що експресують СО38, у комбінації з імунними ефекторними клітинами, які можуть бути активовані комплексами антиген-антитіло, що призводить до цитолізу клітини-мішені. Зазвичай цитоліз виявляють за вивільненням із лізованих клітин мітки (наприклад, радіоактивних субстратів, флуоресцентних барвників або природних внутрішньоклітинних білків). Наприклад, для аналізу можна використовувати первинні МНККМ, взяті у хворих з В-клітинним злоякісним новоутворенням, таким як ММ. В ілюстративному аналізі МНККМ можна обробляти протягом 1 години антитілом до СОЗ38 у концентрації 0,3-10 мкг/мл, а виживаність первинних клітин СО138- ММ можна визначати шляхом проточної цитометрії з використанням методик, описаних у публікації мап дег Меег еї а!., Наетаїйоіодіса 96:284-290, 2001 або в публікації мап дег Меег еї аї., Віосй Сапсег У 1(10):е41, 2011. Відсоток лізису клітин ММ можна визначати відносно ізотипного контролю, як описано в цьому документі.
Антитіла до СОЗ38, які використовуються в способах винаходу, можуть індукувати АЗКЦ за приблизно 20 то, 25 то, Зо то, 35 то, 40 то, 45 то, 50 Зо, 55 Уо, 6о0 то, 65 то, 70 Зо, 7 о, 80 то, 85 то, 90 Фо, 95 95 або 100 95 порівняно з контролем. "Комплементзалежна цитотоксичність" або "КЗЦ" відноситься до механізму індукції загибелі клітин, у якому Ес-ефекторний домен антитіла, зв'язаного з мішенню, зв'язується з компонентом
С14 комплементу й активує його, що, у свою чергу, активує каскад комплементу, призводячи до загибелі клітини-мішені. Активація комплементу може також призвести до відкладення компонентів комплементу на поверхні клітини-мішені, що полегшує АЗКЦ шляхом зв'язування рецепторів комплементу (наприклад, СКЗ) на лейкоцитах. В ілюстративному аналізі первинні
МНККМ, взяті у хворих з В-клітинним злоякісним новоутворенням, можна обробляти протягом 1 години антитілом до СОЗ8 і комплементом, отриманим з 10 95 змішаної людської сироватки, у концентрації 0,3-10 мкг/мл, а виживаність первинних клітин СО138- ММ можна визначати шляхом проточної цитометрії з використанням методик, описаних у публікації мап дег Меег еї аї., 60 Наетайцйоіодіса 96:284-290, 2011; мап аег Меег еї аї., Віососа Сапсег У 1(10):641, 2011. Відсоток лізису клітин ММ можна визначати відносно ізотипного контролю, як описано в цьому документі.
Антитіла до СОЗ38, які використовуються в способах винаходу, можуть індукувати КЗЦ на приблизно 20 то, 25 то, Зо то, 35 то, 40 то, 45 то, 50 Зо, 55 Уо, 6о0 то, 65 то, 70 Зо, 7 о, 80 то, 85 то, 90 о, 95 9 або 100 9.
Здатність моноклональних антитіл індукувати АЗКЦ може бути підвищена шляхом конструювання їхнього олігосахаридного компонента. дес! або ідсЗз людини є М- глікозильованими на Азп297 із більшістю гліканів у добре відомих біантенарних формах С0,
СОБГ, 1, С1Е, 52 або С2Р. Антитіла, отримані за допомогою несконструйованих клітин СНО, як правило, мають вміст фукози гліканів приблизно принаймні 85 95. Видалення корової фукози з олігосахаридів типу біантенарних комплексів, приєднаних до Ес-областей, підвищує АЗКЦ антитіл через покращення зв'язування ЕсукІПШа без впливу на зв'язування антигена або активність КЗЦ. Такі антитіла можна отримати з використанням різних способів, описаних як такі, що призводять до експресії антитіл із відносно високим рівнем дефукозилювання, які несуть Ес-олігосахариди типу біантенарного комплексу, наприклад контролю осмоляльності культури (Коппо еї аї., Суютесппоіоду 64:249-65, 2012), застосування варіанта І ес13 клітинної лінії СНО як клітинної лінії-хазяїна (опієїаз еї аї.,.) Віої Спет 277:26733-40, 2002), застосування варіанта ЕВбб клітинної лінії СНО як клітинної лінії-хазяїна (Оїїміег еї аїЇ., МАбБ5;2(4), 2010; електронна публікація до виходу з друку; РМІЮ:20562582), застосування щурячої гібридомної клітинної лінії УВ2/0 як клітинної лінії-хазяїна (5піпКама еї аї., у Віої Спет 278:3466-3473, 2003), введення малих інтерферуючих РНК, зокрема проти генаса 1,6-фукозилтрансферази (РОТВ) (Могі вї а!., Віоїеснпо! Віоепа88:901-908, 2004) або коекспресії В-1,4-М- ацетилглюкозамінілтрансферази ПП і с-манозидази ІЇ комплексу Гольджи або ефективного інгібітора альфа-манозидази І кіфунезину (Регїтага еї аї., У Віої Спет281:5032-5036, 2006, Регтага еї а!ї., Віотесппо! Віоєпу 93:851-861, 2006; Хпои еї аї., Віоїтесппо! Віоепд 99:652-65, 2008). АЗКЦ, викликану антитілами до СОЗ8, які використовуються в способах винаходу й у деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення, можна посилювати шляхом певних заміщень у Ес-фрагментах антитіл. Прикладами заміщень є, наприклад, заміщення в позиціях амінокислот 256, 290, 298, 312, 356, 330, 333, 334, 360, 378 або 430 (нумерація залишків згідно з індексом ЕМ), як описано в патенті США Мо 6,737,056. КЗЦ,
Зо викликану антитілами до СОЗ8, які використовуються в способах винаходу й у деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення, можна посилювати шляхом певних заміщень у Ес-фрагментах антитіл. Прикладами заміщень є, наприклад, заміщення в позиціях амінокислот 423, 268, 267 і/або 113 (нумерація залишків згідно з індексом ЕМ), як описано в публікації Мооге еї аї., Мабз 2:181-189, 2010.
У деяких описаних у цьому документі способах і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіла до СОЗ8 містять заміщення у Ес-фрагментах антитіл.
У деяких описаних у цьому документі способах і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіла до СОЗ8 містять заміщення у Ес-фрагментах антитіл у позиціях амінокислот 256, 290, 298, 312, 356, 330, 333, 334, 360, 378 і/або 430 (нумерація залишків згідно з індексом ЕМ).
У деяких описаних у цьому документі способах і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіла до СОЗ8 містять заміщення у Ес-фрагментах антитіл у позиціях амінокислот 113, 267, 268 і/або 423 (нумерація залишків згідно з індексом ЕМ).
Іншим варіантом втілення винаходу, включеним у перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, є спосіб лікування суб'єкта, що має СОЗ38-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, який включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ8 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де антитіло до СЮОЗ8 конкурує за зв'язування з СОЗ38 з антитілом, яке містить варіабельну область важкого ланцюга (МН) із ЗЕО
ІО МО: 4 і варіабельну область легкого ланцюга (МІ) із ЗЕО ІЮ МО: 5 (даратумумаб).
Іншим варіантом втілення винаходу, включеним у перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, є спосіб лікування суб'єкта який має СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, що включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до сСО38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де антитіло до СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ38, іп міго шляхом антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АЗКЦ) або комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ), де антитіло до СОЗ8 конкурує за зв'язування з СОЗ38 з антитілом, яке містить варіабельну область важкого ланцюга (МН) із ЗЕО ІЮО МО: 4 і варіабельну область легкого ланцюга (МІ) із 60 ЗЕО ІЮ МО: 5 (даратумумаб).
Антитіла можна оцінювати щодо їхньої конкуренції з даратумумабом, що має МН із 5ЕО ІЮ
МО: 4 і МІ із БЕО ІО МО: 5, за зв'язування з СОЗ38 з використанням відомих способів іп міго. В ілюстративному способі клітини СНО, які рекомбінантно експресують СОЗ38, можна інкубувати з неміченим даратумумабом протягом 15 хв за 4 С із подальшою інкубацією з надлишком флуоресцентно-міченого досліджуваного антитіла протягом 45 хв за 4 "С. Після промивання у
ФСОСБ/БСА флуоресценцію можна виміряти за допомогою проточної цитометрії з використанням стандартних способів. В іншому ілюстративному способі позаклітинну частину людського СОЗ8 можна нанести як покриття на планшет для аналізу ЕГІ5А. Протягом приблизно 15 хвилин можна додавати надлишок неміченого даратумумабу, після чого можна додати біотинільовані досліджувані антитіла. Після промивання у ФСБ/тгвіні зв'язування досліджуваних біотинільованих антитіл можна виявити з використанням стрептавідину, кон'югованого з пероксидазою хрону (НЕР), і провести детекцію сигналу з використанням стандартних способів.
Цілком очевидно, що в конкурентних аналізах даратумумаб може бути міченим, а досліджуване антитіло -- неміченим. Досліджуване антитіло конкурує з даратумумабом, якщо даратумумаб інгібує зв'язування досліджуваного антитіла або досліджуване антитіло інгібує зв'язування даратумумабу на 80 95, 85 95, 90 95, 9595 або 100 95. Епітоп досліджуваного антитіла можна визначити додатково, наприклад, шляхом пептидного картування або аналізів захисту від обміну водню/дейтерію з використанням відомих способів.
Іншим варіантом втілення винаходу, розкритим у цьому документі, включеним У перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, є спосіб лікування суб'єкта, який має
СОЗ38-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, що включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ8, яке зв'язується з областю ЗКЕМОЕЗСКМІМЕ (ЗЕО ІЮ МО: 2) і областю ЕКМОТІ ЕАМУМІНОС (ЗЕО ІЮО МО: 3) людського СО38 (5ЕО ІО МО: 1) у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК).
Іншим варіантом втілення винаходу, розкритим у цьому документі, включеним у перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, є спосіб лікування суб'єкта, який має
СОЗ38-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, що включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ8, яке зв'язується з областю ЗКЕМОЕЗСКМІМЕ (ЗЕО ІЮ МО: 2) і областю ЕКМОТІ ЕАУУМІНОС (5ЗЕО ІЮО МО: 3) людського СОЗ8 (ЗЕО ІЮО МО: 1) у комбінації з
Зо повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де антитіло до СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ8, іп міго шляхом антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АЗКЦ) або комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ). Антитіло "зв'язується з областю
ЗКАМОРЗСКМІМ (ЗЕО ІЮ МО: 2) і областю ЕКМОТІ ЕАМ//ЛІНОС (ЗЕБО ІЮО МО: 3)», коли антитіло зв'язує принаймні один амінокислотний залишок в межах кожної області. Антитіло може зв'язувати, наприклад, 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 або 14 амінокислотних залишків в межах області з ЗЕО ІО МО: 2 і ЗЕО ІЮ МО: 3. Антитіло також може необов'язково зв'язувати один або більше залишків поза межами областей з ЗЕО ІЮО МО: 2 і 5ЕО ІЮО МО: 3. Зв'язування можна оцінити за допомогою відомих способів, таких як дослідження мутагенезу, або шляхом визначення кристалічної структури СОЗ8 в комплексі з антитілом. У деяких варіантах втілення, розкритих у цьому документі, включених у перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, епітоп антитіла містить принаймні одну амінокислоту в області ЗКЕМОБЗСКМІУК (ЗЕО ІО МО: 2) і принаймні одну амінокислоту в області ЕКМОТІ ЕАУУМІНОС (ЗЕО ІО МО: 3) людського СОЗ8 (5ЕО ІЮО МО: 1). У деяких варіантах втілення, розкритих у цьому документі, включених у перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, епітоп антитіла містить принаймні дві амінокислоти в області ЗКЕМІОЄЗСКМІМА (ЗЕО ІЮО МО: 2) і принаймні дві амінокислоти в області ЕКМОТІ ЕАУУМІНОС (ЗЕО ІО МО: 3) людського СЮОЗ8 (ЗЕО ІЮ МО: 1). У деяких варіантах втілення, розкритих у цьому документі, включених у перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, епітоп антитіла містить принаймні три амінокислоти в області
ЗКАМОРГЗСКМІМЕ (ЗЕО ІЮО МО: 2) і принаймні три амінокислоти в області ЕКМОТІ ЕАММ/ЛІНОС (ЗЕО ІЮО МО: 3) людського СОЗ8 (5ЕО ІО МО: 1). У деяких варіантах втілення, розкритих у цьому документі, включених у перераховані нижче пронумеровані варіанти втілення, антитіло до СОЗ8 зв'язується з епітопом, який містить принаймні КЕМ у області ЗКЕМІОРЗСКМІМА (5ЕО ІО МО: 2) і містить принаймні МОЇ Т (5ЕБЕО ІО МО: 22) у області ЕКМОТІ ЕАМУМІНОЄС (5ЕО ІО МО: 3) людського СОЗ8 (5ЕО ІЮ МО: 1).
У деяких варіантах втілення винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 зв'язується з епітопом, який містить принаймні КЕКМ у області ХКЕМОЕЗСКМІМЕ (5ЕО
ІО МО: 2) і містить принаймні МОЇ Т (ЗЕО ІО МО: 22) у області ЕКМОТІ ЕАМУМІНОС (ЗЕО ІЮО МО: 3) людського СОЗ8 (5ЕО ІЮ МО: 1).
Прикладом антитіла, що зв'язується з областю ЗКЕМОБЗСКМІМЕ (ЗЕО ІЮ МО: 2) і областю
ЕКМОТІ ЕАМУМІНОС (ЗЕО ІЮ МО: 3) людського СО38 (ЗЕО ІЮ МО: 1) або мінімально із залишками КАМ і МОЇ Т (ЗЕО ІЮО МО: 22), як показано вище, є даратумумаб, який має певні послідовності МН, Мі ії СОК, описані вище. Антитіла, що зв'язуються з областю ЗКеЕМОЕЗСКМІМУК (ЗЕО ІЮО МО: 2) і областю ЕКМОТІ ЕАМ/Л/ІНОС (ЗЕО ІО МО: 3) людського
СО38 (5ЕО ІЮО МО: 1) можуть бути отримані, наприклад, шляхом імунізації мишей пептидами, які мають амінокислотні послідовності, представлені в 5ЕО ІО МО: 2 і 3, з використанням стандартних способів і як описано в цьому документі. Антитіла можна додатково оцінювати, наприклад, шляхом аналізу конкуренції між даратумумабом і досліджуваним антитілом за зв'язування з СЮОЗ8, як описано вище.
В описаних у цьому документі способах і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 може зв'язуватися з
СО38 людини з різними афінностями (Ко). В одному варіанті втілення відповідно до винаходу і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 зв'язується з СЮОЗ8 із високою афінністю, наприклад із Ко, що дорівнює або є меншою ніж приблизно 10-7 М, наприклад приблизно 1, 2, 3, 4,5,6,7,8 або 9 х 108 М, 1 х 109 М, приблизно 1 х 1079 М, приблизно 1 х 10-77 М, приблизно 1 х 1072 М, приблизно 1 х 10-33 М, приблизно 1 х 107: М, приблизно 1 х 10-75 М або будь-який діапазон або значення в цьому діапазоні, як визначено за допомогою поверхневого плазмонного резонансу або способом КіпЕхА, який використовують фахівці в цій галузі Один приклад афінності дорівнює або є меншим ніж 1 х 108 М. Інший приклад афінності дорівнює або є меншим ніж 1 х 109 М.
У деяких описаних у цьому документі способах і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СО38 має біантенарну гліканову структуру з умістом фукози від приблизно 0 95 до приблизно 15 95, наприклад 1595,1495,13905, 12 96,11 95 10 90, 9 90, 8 У, 7 Уо, б о, 5 Уо, 4 Зо, З Зо, 2 о, 1 9 або
О Ор.
У деяких описаних у цьому документі способах і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СО38 має біантенарну гліканову структуру з умістом фукози приблизно 50 95, 40 95, 4595, 40 95, 35 9,
ЗО бю, 2595, 20 Ую, 15 95,14 95, 1396, 12 95,11 9610 95,9 90, 8 У, 7 о, б У, 5 о, 4 9, З У, 2 о, 1 9 або 0 95
Заміщення у Ес і зниження вмісту фукози можуть підвищувати активність АЗКЦ антитіла до
СОЗз8. "Вміст фукози" стосується кількості моносахариду фукози в ланцюзі цукрів у Азп297.
Відносна кількість фукози являє собою відсоток фукозовмісних структур, пов'язаних з усіма глікоструктурами. Глікоструктури можна охарактеризувати й визначити кількісно декількома способами, наприклад: 1) з використанням часопролітної матрично-активованої лазерної десорбції/онізації (МА! 0І-ТОЕ) зразків, оброблених М-глікозидазою Е (наприклад, комплексних, гібридних і оліго- й високоманозних структур), як описано в міжнародній патентній публікації Мо
ММО2008/077546; 2) шляхом ферментативного вивільнення гліканів Аб5п297 із подальшою дериватизацією й виявленням/кількісним визначенням за допомогою високоефективної рідинної хроматографії (ВЕРХ) або надпродуктивної рідинної хроматографії (НПРХ) з флуоресцентною детекцією й/(або ВЕРХ-МС (НПРХ-МС); 3) аналізом інтактних білків нативних або ослаблених тАб з обробкою або без обробки гліканів Аєп297 ферментом Епдо 5 або іншим ферментом, що розщеплює зв'язок між першим і другим моносахаридами (ІСМАс, залишаючи фукозу прикріпленою до першого сІСМАс; 4) розщепленням тАбБ на складові пептиди за допомогою ферментативного розщеплення (наприклад, трипсином або ендопептидазою І у5-С) і наступним розділенням, виявленням і кількісним визначенням за допомогою ВЕРХ-МС (НПРХ-МС); або 5) відділенням олігосахаридів тАб від білка тАр за допомогою специфічного ферментативного деглікозилювання з використанням РМСазе Е на Азп 297. Олігосахариди, вивільнені в такий спосіб, можуть бути мічені флуорофором, розділені й ідентифіковані з використанням різних взаємодоповнюючих способів, які забезпечують: точну характеристику гліканових структур за допомогою матрично-активованої лазерної десорбції/онізації (МАО) мас-спектрометрії шляхом порівняння експериментальних мас з теоретичними масами, визначення ступеня сіалування шляхом іонообмінної ВЕРХ (Сіусозер С), розділення й кількісного визначення форм олігосахаридів згідно з критеріями гідрофільності за допомогою нормофазної ВЕРХ (СіІусозер
М) і розділення й кількісного визначення олігосахаридів способом високоефективного капілярного електрофорезу з лазерно-індукованою флуоресценцією (НРСЕ-ПІРЕ).
У контексті цієї заявки "низький рівень фукози" або "низький вміст фукози" стосується антитіл з умістом фукози в діапазоні приблизно 0 95-15 95.
У контексті цього документа "нормальний рівень фукози" або "нормальний вміст фукози" стосується антитіл з умістом фукози приблизно вище 50 95, як правило, приблизно вище 60 95, 70 Ус, 80 95 або вище 85 95.
У деяких способах винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 містить послідовності областей, що визначають комплементарність, важкого ланцюга (НСОК) 1 (НСОНТ), 2 (НСОКЗ) і З (НСОКЗ) із ЗЕО ІЮ МО: 6, 7 і 8 відповідно.
У деяких способах винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 містить послідовності областей, що визначають комплементарність, легкого ланцюга (ІСОК) 1 (СО), 2 С СОК2) і З (С СОКЗ) із БЕО ІО МО: 9, 10 ії 11 відповідно.
У деяких способах винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СЮОЗ8 містить послідовності областей, що визначають комплементарність, важкого ланцюга (НСОК) 1 (НСОКТ), 2 (НСОКЗ) і З (НСОКЗ) із ЗЕО ІЮ МО: 6, 7 і 8 відповідно й послідовності областей, що визначають комплементарність, легкого ланцюга (СОК) 1 (І СОК1), 2 І СО) і з (І СОКЗ) із
ЗЕОІЮ МО: 9, 10 і 11 відповідно.
У деяких способах винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 містить варіабельну область важкого ланцюга (МН) із БЕО ІЮО МО: 4 і варіабельну область легкого ланцюга (МІ) із ЗЕО ІЮ МО: 5.
У деяких способах винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 містить важкий ланцюг із БЕО ІЮ МО: 12 ії легкий ланцюг із БЕО ІЮ МО: 13.
У деяких способах винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 містить варіабельну область важкого ланцюга (МН) із БЗЕО ІЮ МО: 14 і варіабельну область
Зо легкого ланцюга (МІ) із ЗЕО ІЮ МО: 15.
У деяких способах винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 містить варіабельну область важкого ланцюга (МН) із БЗЕО ІЮ МО: 16 і варіабельну область легкого ланцюга (МІ) із ЗЕО ІЮ МО: 17.
У деяких способах винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 містить варіабельну область важкого ланцюга (МН) із БЗЕО ІЮ МО: 18 і варіабельну область легкого ланцюга (МІ) із ЗЕО ІЮ МО: 19.
У деяких способах винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ38 містить варіабельну область важкого ланцюга (МН) із БЕО ІЮ МО: 20 і варіабельну область легкого ланцюга (МІ) із ЗЕО ІЮ МО: 21.
У деяких способах винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 містить важкий ланцюг, який містить амінокислотну послідовність, що на 95 95, 96 Фо, 97 Фо, 98 90 або 99 95 ідентична послідовності з зХЕО ІЮО МО: 12, і легкий ланцюг, який містить амінокислотну послідовність, що на 95 95, 96 9, 97 У», 98 95 або 99 95 ідентична послідовності з ЗЕО ІЮ МО: 13.
Антитіла, які по суті є ідентичними антитілу, що містить важкий ланцюг із БЕО ІО МО: 12 і легкий ланцюг із ЗЕО ІЮО МО: 13, можна використовувати в способах винаходу й у деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення.
У контексті цього документа термін "по суті ідентичні" означає, що дві амінокислотні послідовності важкого ланцюга або легкого ланцюга антитіла, які порівнюють, є однаковими або мають "несуттєві відмінності". Несуттєві відмінності -- це заміщення 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 або 15 амінокислот у послідовності важкого ланцюга або легкого ланцюга антитіла, які не мають негативного впливу на властивості антитіла. Відсоток ідентичності можна визначити, наприклад, шляхом попарного вирівнювання з використанням налаштувань за замовчуванням модуля АїЇїдпХ Месіог МТ! м.9.0.0 (Іпмігодеп, м. Карлобад, штат Каліфорнія,
США). Послідовності білка згідно з цим винаходом можна використати як послідовність запиту для здійснення пошуку в публічно доступних або патентних базах даних, наприклад, для бо визначення споріднених послідовностей. Типовими програмами, які використовують для здійснення таких пошуків, є програми ХВГА5Т або ВІ А5ЗТР (пір /Лим/лм/ псбрі піт/піпй дом) або комплект СепотесОицевбі"м ((зепотеОцеві, м. Уестборо, штат Массачусетс, США) з використанням налаштувань за замовчуванням. Приклади заміщень, які можуть бути виконані в антитілах до СОЗ38, які використовуються в способах винаходу, являють собою, наприклад, консервативні заміщення амінокислотою, яка має аналогічний заряд, гідрофобні або стереохімічні характеристики. Для покращення властивостей антитіл, наприклад стабільності або афінності, або для покращення ефекторних функцій антитіл можуть також бути виконані консервативні заміщення. Можуть бути виконані 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 або 15 амінокислотних заміщень, наприклад, у важкому або легкому ланцюзі антитіла до СОЗ38. Крім того, будь-який нативний залишок у важкому або легкому ланцюзі може бути також заміщений аланіном, як було описано раніше для аланінскануючого мутагенезу (Масі еппап еї аї., Асіа
Рпузіої Зсапа зиррі 643:55-67, 1998; Зазакі еї а!., Адм Віорпув 35:1-24, 1998). Фахівці в цій галузі можуть визначити бажані заміщення амінокислот на момент, коли такі заміщення є бажаними.
Амінокислотні заміщення можна провести, наприклад, за допомогою ПЛР -мутагенезу (патент
США Мо 4,683,195). Бібліотеки різновидів можна отримувати з використанням добре відомих способів, наприклад з використанням випадкових (ММК) або невипадкових кодонів, наприклад рУК-кодонів, які кодують 11 амінокислот (Аа, Суб, А5р, Сім, Су, Гу5, Азп, Аго, зег, Туг, Тгр), і скринінгу бібліотек на різновиди з бажаними властивостями. Отримані варіанти можуть бути протестовані на їхнє зв'язування з СОЗ8, їхню здатність індукувати АЗКЦ, АЗКФ або апоптоз іп міїго із використанням способів, описаних у цьому документі.
У деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 є біспецифічним антитілом. Області МІ. і/або МН існуючого антитіла до СЮОЗ38 або області МІ. і МН, ідентифіковані де помо, як описано вище, можуть бути сконструйовані в біспецифічні повнорозмірні антитіла. Такі біспецифічні антитіла можна створити шляхом модуляції взаємодій СНЗ між важкими ланцюгами двох моноспецифічних антитіл з отриманням біспецифічних антитіл із використанням методик, таких як ті, що описані в патенті США Мо 7,695,936; міжнародній патентній публікації Мо М/О04/111233; публікації патенту
США Мо О0О52010/0015133; публікації патенту США Ме 052007/0287170; міжнародній патентній публікації Мо ММО2008/119353; публікації патенту США Ме 052009/0182127; публікації патенту
Зо США Мо О0О52010/0286374; публікації патенту США Ме 0О52011/0123532; міжнародній патентній публікації Ме УУО2011/131746; міжнародній патентній публікації Ме УМО2011/143545; або публікації патенту США Мо 0О52012/0149876. Додатковими біспецифічними структурами, у які можна вбудувати області МІ. і/або МН антитіл згідно з винаходом, є, наприклад, імуноглобуліни з подвійним варіабельним доменом (міжнародна патентна публікація Мо УУО2009/134776) або структури, які включають різноманітні димеризаційні домени для поєднання двох плечей антитіла з відмінною специфічністю, такі як "лейцинова застібка" або колагенові димеризаційні домени (міжнародна патентна публікація Мо М/ЛО2012/022811, патент США Мо 5,932,448; патент
США Мо 6,833,441).
Іншим варіантом втілення цього винаходу є спосіб лікування суб'єкта, який має СОЗ38- позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, що включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де
СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою множинну мієлому (ММ), гострий лімфобластний лейкоз (ГЛЛ), неходжкінську лімфому, дифузну В-великоклітинну лімфому (ДВВКЛ), лімфому Беркітта (ЛБ), фолікулярну лімфому (ФЛ) або лімфому з клітин зони мантії (ЛКМ).
Іншим варіантом втілення цього винаходу є спосіб лікування суб'єкта, який має СОЗ38- позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, що включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де антитіло до СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СО38, іп мйго шляхом антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АЗКЦ) або комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ), де СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою множинну мієлому (ММ), гострий лімфобластний лейкоз (ГЛЛ), неходжкінську лімфому, дифузну
В-великоклітинну лімфому (ДВВКЛ), лімфому Беркітта (ЛБ), фолікулярну лімфому (ФЛ) або лімфому з клітин зони мантії (ЛКМ).
Іншим варіантом втілення цього винаходу є спосіб лікування суб'єкта, який має СОЗ38- позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, що включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де
СОрЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою множинну мієлому (ММ).
Іншим варіантом втілення винаходу є спосіб лікування суб'єкта, що має СОЗ8-позитивне бо злоякісне гематологічне новоутворення, який включає введення суб'єкту, який цього потребує,
антитіла до СОЗ38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де антитіло до
СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ38, іп міго шляхом антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АЗКЦ) або комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ), де СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою множинну мієлому (ММ).
У винаході також запропоновано спосіб лікування суб'єкта, який має СОЗ38-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, що включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де суб'єкт має резистентність або набув резистентності до лікування антитілом до СОЗ38.
У винаході також запропоновано спосіб лікування суб'єкта що має СОЗ38-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, який включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де антитіло до
СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ38, іп мйго шляхом антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АЗКЦ) або комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ), де суб'єкт має резистентність або набув резистентності до лікування антитілом до СЮОЗ8.
У винаході також запропоновано спосіб лікування суб'єкта, який має СОЗ38-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, що включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де суб'єкт має резистентність або набув резистентності до лікування принаймні одним хіміотерапевтичним агентом.
У винаході також запропоновано спосіб лікування суб'єкта що має СО38-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, який включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де антитіло до
СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ38, іп мйго шляхом антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АЗКЦ) або комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ), де суб'єкт має резистентність або набув резистентності до лікування принаймні одним хіміотерапевтичним агентом.
У винаході також запропоновано спосіб лікування суб'єкта, який має множинну мієлому, що включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ8 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де суб'єкт має резистентність або набув резистентності до лікування принаймні одним хіміотерапевтичним агентом.
У винаході також запропоновано спосіб лікування суб'єкта, що має множинну мієлому, який включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ8 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де антитіло до СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ8, іп міго шляхом антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АЗКЦ) або комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ), де суб'єкт має резистентність або набув резистентності до лікування принаймні одним хіміотерапевтичним агентом.
У деяких варіантах втілення винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення суб'єкт має резистентність або набув резистентності до лікування принаймні одним хіміотерапевтичним агентом, де принаймні один хіміотерапевтичний агент являє собою леналідомід, бортезоміб, мелфалан, дексаметазон або талідомід.
У деяких варіантах втілення винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення суб'єкт має резистентність або набув резистентності до лікування принаймні одним хіміотерапевтичним агентом, де принаймні один хіміотерапевтичний агент являє собою леналідомід, бортезоміб, мелфалан, дексаметазон, талідомід, циклофосфамід, гідроксидаунорубіцин (доксорубіцин), вінкристин або преднізон.
У деяких варіантах втілення винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення суб'єкт має резистентність або набув резистентності до лікування принаймні одним хіміотерапевтичним агентом, де принаймні один хіміотерапевтичний агент являє собою леналідомід і/або бортезоміб.
Для визначення того, чи є суб'єкт резистентним, чи розвинулась у нього резистентність, або чи є він схильним до розвитку резистентності до лікування антитілом до СО38 або іншим терапевтичним агентом, можна застосовувати різноманітні якісні й/або кількісні способи.
Симптоми, які можуть бути пов'язані з резистентністю, включають, наприклад, погіршення або відсутність покращення стану здоров'я пацієнта, збільшення розміру пухлини, підвищення кількості ракових клітин, зупинення або сповільнення зниження росту пухлини або пухлинних бо клітин і/або розповсюдження ракових клітин у організмі з однієї локалізації в інші органи,
тканини або клітини. Повернення або погіршення різних симптомів, пов'язаних із пухлиною, також може бути ознакою того, що в суб'єкта розвинулася резистентність або він є схильним до розвитку резистентності до антитіла до СО38 або іншого терапевтичного агента. Симптоми, пов'язані з раком, можуть варіюватися залежно від типу раку. Наприклад, симптоми, пов'язані з
В-клітинними злоякісними новоутвореннями, можуть включати збільшення лімфовузлів на шиї, у паху або в пахвах, гарячку, нічну пітливість, кашель, біль у грудях, безпричинну втрату маси тіла, здуття або біль у животі або почуття повноти. Ремісію злоякісних лімфом стандартизовано з використанням критеріїв Спезоп (Спезоп еї аїЇ.,, У Сійп Опсоіоду 25:579-586, 2007), чиї рекомендації можна використовувати для визначення того, чи розвинулась у суб'єкта резистентність до антитіла до СОЗ8 або іншого терапевтичного агента.
У деяких варіантах втілення винаходу, описаних у цьому документі, і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення суб'єкт, який має СОЗ38-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, є гомозиготним за фенілаланіном у позиції 158 СО16 (генотип ЕсукПШа-158Е/Е) або гетерозиготним за валіном і фенілаланіном у позиції 158 СО16 (генотип ЕсукШа-158Е/М). СО16 також відомий як рецептор
Ес гамма Ша (Есум Ша) або ізоформа ПІ-А рецептора Ес-області низькоафінного імуноглобуліну гамма. Було продемонстровано, що поліморфізм валіну/фенілаланіну (М/Е) у позиції залишку 158 білка ЕсукКІШа впливає на афінність ЕсуКІШа до дб людини. Рецептор з поліморфізмом
ЕсукШа-158Р/Е або ЕсукПШа-158Е// демонструє знижене залучення Ес і, таким чином, знижену
АЗКЦ порівняно з ЕсукШа-158М/У. Відсутність або низька кількість фукози в людських М- зв'язаних олігосахаридах покращує здатність антитіл індукувати АЗКЦ за рахунок покращеного зв'язування антитіл з людським ЕсукКШа (СО16) (Зпієїа5 еї аї!., У Віої Спет 277:26733-40, 2002).
Пацієнтам можна виконати аналіз на поліморфізм ЕсукПШа з використанням звичайних способів.
У винаході також запропоновано спосіб лікування суб'єкта, який має СОЗ38-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, що включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СО38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де суб'єкт є гомозиготним за фенілаланіном у позиції 158 СО16 або гетерозиготним за валіном і фенілаланіном у позиції 158 СО16.
У винаході також запропоновано спосіб лікування суб'єкта, який має СОЗ8-позитивне
Зо злоякісне гематологічне новоутворення, що включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де антитіло до
СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ38, іп міго шляхом антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АЗКЦ) або комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ), де суб'єкт є гомозиготним за фенілаланіном у позиції 158 СО16 або гетерозиготним за валіном і фенілаланіном у позиції 158 СО16.
Введення/фармацевтичні композиції
У способах винаходу й у деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіла до СОЗ8 можуть бути забезпечені у відповідних фармацевтичних композиціях, які містять антитіло до СОЗ8 і фармацевтично прийнятний носій.
Носій може являти собою розріджувач, ад'ювант, наповнювач або носій, з яким уводять антитіло до СОЗ8. Такі носії можуть бути рідинами, такими як вода й олії, у тому числі олії з нафти, тваринного, рослинного або синтетичного походження, такі як арахісова олія, соєва олія, мінеральна олія, кунжутна олія тощо. Наприклад, можна використовувати 0,4 9о фізіологічний розчин і 0,3 95 гліцин. Ці розчини повинні бути стерильними й не містити жодних твердих частинок. Їх можна стерилізувати за допомогою загальноприйнятих, добре відомих способів стерилізації (наприклад, фільтрації). Композиції можуть містити фармацевтично прийнятні допоміжні речовини, необхідні для наближення до фізіологічних умов, такі як агенти, що коригують рн, і буферні агенти, стабілізуючі агенти, загущувачі, ковзні агенти й барвники тощо.
Концентрація молекул або антитіл згідно з цим винаходом у такій фармацевтичній композиції може змінюватися в широких межах, тобто від менш ніж приблизно 0,595, звичайно до принаймні приблизно 1 95, до 15 або 20 95 за масою, і буде вибрана в першу чергу виходячи з необхідної дози, об'ємів рідини, в'язкості тощо залежно від вибраного конкретного способу введення. Відповідні носії й композиції включно з іншими білками людини, наприклад сироватковим альбуміном людини, описані, наприклад, у публікації Кетіпдіоп: Те Зсіепсе апа
Ргасіїсе ої Рпаптасу, 211 Єайіоп, Тиоу, О.В. ей., Ііріпсоїї УМШатвь апа УМіКін5, РпіПаде!рніа, РА 2006, Рап 5, Рпаптасешійса! Мапигасіигіпд рр 691-1092, див. особливо рр. 958-989.
Спосіб введення антитіла до СОЗ8 у способах винаходу може бути будь-яким відповідним способом, таким як парентеральне введення, наприклад внутрішньошкірне, внутрішньом'язове, внутрішньоочеревинне, внутрішньовенне або підшкірне, легеневе, через слизові оболонки
(пероральне, інтраназальне, інтравагінальне, ректальне), або іншими засобами, визнаними фахівцями й добре відомими в цій галузі.
Антитіло до СО3З8 у способах винаходу й у деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення можна вводити пацієнтові будь-яким відповідним способом, наприклад парентерально шляхом внутрішньовенної (в/в) інфузії або болюсної ін'єкції внутрішньом'язово, або підшкірно, або внутрішньоочеревинно.
Внутрішньовенну (в/в) інфузію можна, наприклад, вводити протягом 15, 30, 60, 90, 120, 180 або 240 хвилин або впродовж 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 або 12 годин.
Доза, яку вводять пацієнтові з СОЗ8-позитивним злоякісним гематологічним новоутворенням, є достатньою, щоб полегшити або принаймні частково зупинити захворювання, що підлягає лікуванню ("терапевтично ефективна кількість"), і може іноді становити від 0,005 мг/кг до приблизно 100 мг/кг, наприклад від приблизно 0,05 мг/кг до приблизно 30 мг/кг або від приблизно 5 мг до приблизно 25 мг/кг, або приблизно 4 мг/кг, приблизно 8 мг/кг, приблизно 16 мг/кг або приблизно 24 мг/кг, або, наприклад, приблизно 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, 8, 9 або 10 мг/кг, але може бути навіть вищою, наприклад, приблизно 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90 або 100 мг/кг.
Можна також уводити фіксовану одиничну дозу, наприклад 50, 100, 200, 500 або 1000 мг, або доза може грунтуватися на площі поверхні тіла пацієнта, наприклад 500, 400, 300, 250, 200 або 100 мг/м". Зазвичай для лікування СОЗ38-позитивного В-клітинного злоякісного новоутворення можна вводити від 1 до 8 доз (наприклад, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 або 8), але можна вводити 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20 або більше доз.
Введення антитіла до СОЗ38 у способах винаходу й у деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення можна повторювати через один день, два дні, три дні, чотири дні, п'ять днів, шість днів, один тиждень, два тижні, три тижні, один місяць, п'ять тижнів, шість тижнів, сім тижнів, два місяці, три місяці, чотири місяці, п'ять місяців, шість місяців або довше. Повторні курси лікування також можливі як довготривале введення. Повторне введення може бути в тій самій дозі або в іншій дозі. Наприклад, антитіло до СО38 у способах винаходу можна вводити в дозі 8 мг/кг або 16 мг/кг з інтервалом один тиждень протягом 8 тижнів з наступним уведенням у дозі 8 мг/кг або 16 мг/кг кожні два тижні
Зо протягом додаткових 16 тижнів з наступним уведенням у дозі 8 мг/кг або 16 мг/кг кожні чотири тижні шляхом внутрішньовенної інфузії.
У способах винаходу й у деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіла до СОЗ8 можна вводити як підтримуючу терапію, наприклад, один раз на тиждень протягом періоду 6 місяців або більше.
Наприклад, антитіла до СОЗ38 у способах винаходу й у деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення можуть бути забезпечені у вигляді добової дози в кількості приблизно 0,1-100 мг/кг, наприклад 0,5, 0,9, 1,0, 1,1, 1,5,2, 3,4, 5,6, 7,8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90 або 100 мг/кг на добу принаймні в один із днів 1, 2, 3, 4, 5,6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 або 40 або, альтернативно, принаймні в один із тижнів 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 або 20 після початку лікування (або в будь-якій комбінації перерахованого) із використанням однократних або розділених доз кожні 24, 12, 8, 6, 4 або 2 години (або будь-якої комбінації перерахованого).
У способах винаходу й у деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіла до СО3З8 також можна вводити профілактично з метою зниження ризику розвитку раку, затримки початку наступного виникнення події прогресування раку й/або зменшення ризику рецидиву на стадії ремісії раку. Це може бути особливо корисним у пацієнтів, у яких важко визначити місце знаходження пухлини, присутність якої відома відповідно до інших біологічних факторів.
У способах винаходу й у деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення антитіло до СОЗ8 можна ліофілізувати для зберігання, а безпосередньо перед використанням розводити у відповідному носії. Доведено, що ця методика є ефективною при використанні звичайних білкових препаратів, і можна використовувати добре відомі методики ліофілізації й відновлення.
Антитіло до СО3З8 у способах винаходу й у деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення можна вводити в комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК).
ПТРК може бути запропонована в дозі 45 мг/м на добу перорально або 25 мг/м на добу (516) перорально.
Антитіло до СО3З8 у способах винаходу й у деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення можна вводити в комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК) і третім терапевтичним агентом.
У способах за цим винаходом і в деяких варіантах втілення з усіх без винятку перерахованих нижче пронумерованих варіантів втілення третім терапевтичним агентом може бути мелфалан, мехлоретамін, тіоепа, хлорамбуцил, кармустин (В5МШ), ломустин (ССМ), циклофосфамід, бусульфан, дибромоманніт, стрептозоцин, дакарбазин (ОТІС), прокарбазин, мітоміцин С, цисплатин і інші похідні платини, такі як карбоплатин, талідомід або аналог талідоміду, леналідомід або СС4047, протеасомний інгібітор, такий як бортезоміб, або алкалоїд барвінку, такий як вінкристин, або антрациклін, такий як доксорубіцин.
Хоча винахід описано в загальних рисах, варіанти втілення винаходу будуть додатково описані в наведених нижче прикладах, які не слід розглядати як такі, що обмежують обсяг формули винаходу.
Додаткові варіанти втілення винаходу
Нижче наведені деякі додаткові варіанти втілення винаходу відповідно до розкриття, наведеного в іншому місці цього опису. Наведені вище особливості варіантів втілення винаходу, які описані як такі, що відносяться до винаходу, розкритого в цьому документі, також відносяться до всіх без винятку цих додаткових пронумерованих варіантів втілення. 1. Антитіло до СОЗ38 для застосування в лікуванні суб'єкта, який має СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК). 2. ПТРК для застосування в лікуванні суб'єкта, який має СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення, у комбінації з антитілом до СЮОЗ8. 3. Комбінація антитіла до СОЗ38 і ПТРК для застосування в лікуванні суб'єкта, який має
СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення. 4. Антитіло до СОЗ8 для застосування відповідно до варіанта втілення 1, ПТРК для застосування відповідно до варіанта втілення 2 або комбінація для застосування відповідно до варіанта втілення З, де антитіло до СОЗ3З8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ8, шляхом
Зо а. антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АЗКЦ); р. комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ); або с. як АЗКЦ, так і КЗЦ, іп міїго. 5. Антитіло до СОЗ38 для застосування відповідно до варіанта втілення 1, ПТРК для застосування відповідно до варіанта втілення 2 або комбінація для застосування відповідно до варіанта втілення 3, де антитіло до СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ8, іп міго шляхом АЗКЦ. 6. Антитіло до СЮОЗ38 для застосування відповідно до варіанта втілення 1, 4 або 5, ПТРК для застосування відповідно до варіанта втілення 2, 4 або 5 або комбінація для застосування відповідно до варіантів втілення 3-5, де СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою множинну мієлому (ММ), гострий лімфобластний лейкоз (ГЛЛ), неходжкінську лімфому (НХЛ), дифузну В-великоклітинну лімфому (ДВВКЛ), лімфому бБеркітта (ЛБ), фолікулярну лімфому (ФЛ) або лімфому з клітин зони мантії (ЛКМ). 7. Антитіло до СЮОЗ8 для застосування відповідно до варіантів втілення 1, 4-6, ПТРК для застосування відповідно до варіантів втілення 2, 4-6 або комбінація для застосування відповідно до варіантів втілення 3-6, де СОЗ8-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення являє собою ММ. 8. Антитіло до СЮОЗ8 для застосування відповідно до варіантів втілення 1, 4-7, ПТРК для застосування відповідно до варіантів втілення 2, 4-7 або комбінація для застосування відповідно до варіантів втілення 3-7, де суб'єкт має резистентність або набув резистентності до лікування принаймні одним хіміотерапевтичним агентом і антитілом до СОЗ8 або комбінацією принаймні одного хіміотерапевтичного агента й антитіла до СОЗ8. 9. Антитіло до СЮОЗ8 для застосування відповідно до варіантів втілення 1, 4-8, ПТРК для застосування відповідно до варіантів втілення 2, 4-8 або комбінація для застосування відповідно до варіантів втілення 3-8, де принаймні один хіміотерапевтичний агент являє собою леналідомід, бортезоміб, мелфалан, дексаметазон або талідомід. 10. Антитіло до СОЗ8 для застосування відповідно до варіантів втілення 1, 4-9, ПТРК для застосування відповідно до варіантів втілення 2, 4-9 або комбінація для застосування відповідно до варіантів втілення 3-9, де принаймні один хіміотерапевтичний агент являє собою леналідомід або бортезоміб.
11. Антитіло до СОЗ38 для застосування відповідно до варіантів втілення 1, 4-10, ПТРК для застосування відповідно до варіантів втілення 2, 4-10 або комбінація для застосування відповідно до варіантів втілення 3-10, де а. антитіло до СОЗ8 має ізотип ЇдС1, Ідс2, ДОЗ або Ідса; р. антитіло до СЮОЗ8 конкурує за зв'язування з СОЗ38 з антитілом, яке містить варіабельну область важкого ланцюга (МН) із ЗЕО ІЮО МО: 4 і варіабельну область легкого ланцюга (МІ) із
ЗЕОІЮ МО: 5; с. антитіло до СОЗ8 зв'язується з областю 5КЕМІОРЗСКМІМК (ЗЕО ІЮ МО: 2) і областю
ЕКМОТІ ЕАМУМІНОС (ЗЕО І МО: 3) людського СОЗ8 (ЗЕО ІО МО: 1); а. антитіло до СОЗ8 містить послідовності областей, що визначають комплементарність, важкого ланцюга (НСОК) 1 (НСОКТ), 2 (НСОКЗ) і З (НСОКЗ) із ЗЕО ІЮ МО: 6, 7 і 8 відповідно; е. антитіло до СОЗ8 містить послідовності областей, що визначають комплементарність, легкого ланцюга (СОМ) 1 (І СОМ), 2 (1 СО) і З (І СОМ) із ЗЕО ІЮ МО: 9, 10 і 11 відповідно;
І. антитіло до СОЗ38 містить варіабельну область важкого ланцюга (МН) із ЗЕО ІЮО МО: 4 і варіабельну область легкого ланцюга (МІ) із «ЕО ІЮО МО: 5; 9. антитіло до СЮОЗ8 містить важкий ланцюг, який містить амінокислотну послідовність, що на 95 9, 96 Фо, 97 Фо, 98 95 або 99 95 ідентична послідовності з ЗЕО ІЮО МО: 12, і легкий ланцюг, який містить амінокислотну послідовність, що на 95 95, 9695, 97 95, 9895 або 9995 ідентична послідовності з БЕО ІЮ МО: 13; п. антитіло до СОЗ8 містить важкий ланцюг із БЕО ІО МО: 12 і легкий ланцюг із БЕО ІЮ МО: 13; і. антитіло до СОЗ8 містить МН із БЕО ІЮ МО: 14 їі МІ із БЕО ІЮ МО: 15;. ). антитіло до СОЗ8 містить МН із БЕО ІЮ МО: 16 і МІ. із БЕО ІЮО МО: 17;
К. антитіло до СОЗ8 містить МН із БЕО ІЮ МО: 18 і МІ. із БЕО ІЮО МО: 19; або
І. антитіло до СОЗ8 містить МН із БЕО ІЮ МО: 20 ї МІ із БЕО ІЮ МО: 21. т.
Приклад 1. Загальні способи
Антитіла й реагенти
Людське моноклональне антитіло (тАбБ) до нешкідливого антигена (НІМ-1 ар120)
Зо використовували як ізотипний контроль, як описано раніше (мап адег Меегз5 еї аїЇ.,, Наетай!одіса 96:284-290, 2011; мап дег Меегз еї а!., Віоса Сапсег У 1:е41, 2011). Повністю транс-ретиноєву кислоту (ПТРК) купували в компанії 5ідта-Айагісй ії розводили в диметилсульфоксиді (ДМСО).
Аналізи АЗКЦ она основі біолюмінесцентної візуалізації (ВІ) з використанням трансдукованих люциферазою (І С) клітинних ліній ММ
ГОб-трансдуковані клітинні лінії ММ культивували спільно з ефекторними клітинами (свіжовиділеними МНКПК від здорових донорів) у співвідношенні ефекторних клітин і клітин- мішеней 1: 25 у білих непрозорих 96-ямкових планшетах із пласким дном (Созіаг) у присутності даратумумабу (0,001; 0,01; 0,1 ї 1,0 мкг/мл) протягом чотирьох годин. Виживаність ГОС--клітин
ММ визначали шляхом ВІЇ через 10 хвилин після додавання субстрату люциферину (125 мкг/мл; Рготеда). Лізис клітин ММ визначали за такою формулою: 9о лізису - 1 - (середній сигнал ВІЇ у присутності ефекторних клітин і даратумумабу / середній сигнал ВІ у присутності ефекторних клітин і контрольного антитіла) х 100 95.
Аналізи КЗЦ на основі ВІ І з використанням ГОС-трансдукованих клітинних ліній ММ
Даратумумаб (0; 0,03; 0,1; 0,3; 1,0 ї 3,0 мкг/мл) додавали до клітинних ліній ММ у середовищі, доповненому змішаною людською сироваткою (1095; Запдиіп) або термічно інактивованою людською сироваткою. Після інкубування протягом 1 години за 37 "С визначали лізис клітин за допомогою ВІ! через 10 хвилин після додавання люциферину (125 мкг/мл) і обчислювали за такою формулою: 9о лізису - 1 - (середній сигнал ВІЇ у присутності нативної людської сироватки / середній сигнал ВІЇ у присутності термічно інактивованої сироватки) х 100 95.
Аналізи АЗКЦ і КЗЦ ех мімо на основі проточної цитометрії в МНККМ
Свіжовиділені МНККМ, які містять 2-57 96 злоякісних плазматичних клітин, як визначено за результатами проточної цитометрії, негайно використовували в експериментах ех мімо. Для експериментів з АЗКЦ МНККМ, які містять злоякісні плазматичні клітини, а також власні ефекторні клітини хворого інкубували в середовищі ЕРМІ10 95 фетальної бичачої сироватки з даратумумабом (0,01-140 мкг/мл) у 9б-ямкових планшетах із пласким дном у повністю зволожених інкубаторах за 37 "С у суміші 5 95 СО» з повітрям протягом 48 год. Життєздатність зразка під час інкубування становила більш ніж 98 95, як визначено з використанням барвника
ТоРго-3 (Іпиігодеп/молекулярні зонди). Для аналізів КЗЦ МНККМ обробляли даратумумабом бо (0,39-10 мкг/мл) і комплементом протягом 1 години перед проточною цитометрією. Змішану людську сироватку (10 95) використовували як джерело комплементу. Виживаність первинних клітин СЮО138- ММ у МНККМ визначали шляхом проточної цитометрії, як описано раніше (мап дег Меегз евї а!., Наетаїйоіодіса 96:284-290, 2011; мап дег Меегз еї аї., Віоса Сапсег У 1:641, 2011).
Клітини ММ, що вижили, рахували шляхом одноплатформенної проточної цитометрії клітин
Ср138: (з використанням антитіла СО138-РЕ (ВесКктап СоциМег, м. Майамі, штат Флорида,
США)) у присутності флуоросфер РіІом-Соципі (ВесКтап СоцшНег) для визначення абсолютної кількості клітин. Відсоток лізису клітин ММ за різних умов обробки визначали відносно виживаності клітин ММ у ямках планшета, оброблених контрольним антитілом (1901-6012 як контрольне антитіло ЇД1 для даратумумабу) за такою формулою: 95 лізованих клітин - 1 - (абсолютна кількість клітин СО1387, що вижили, у оброблених ямках планшета / абсолютна кількість клітин СО1387, що вижили, у контрольних ямках) х 100 95.
Імунофенотипування шляхом проточної цитометрії
Експресію декількох білків клітинної поверхні визначали шляхом проточної цитометрії з використанням РІТС-, РЕ-, Рег-СР- або АРС-кон'югованих моноклональних антитіл. Антитіла до
СОрз38, антитіла до СО138 і антитіла до СО56 купували в компанії ВесКтап СошцКег; антитіла до
СО3, антитіла до СО16, антитіла до СО55, антитіла до СО59 -- у компанії ВО Віозсіепсеб5; і антитіла до СО46 -- у компанії Віоїедепа. Проточну цитометрію виконували з використанням пристрою ЕАСсС5-Саїїриг (Весіоп бісКіп5оп); дані аналізували з використанням програмного забезпечення СепОиеві.
Статистика
Статистичні аналізи виконували з використанням програмного забезпечення Ргієт (Сгарпрай Зоїймаге пс, версія 5). Порівняння змінних виконували з використанням двостороннього і-критерію Стьюдента для залежних вибірок. Кореляцію між змінними встановлювали з використанням коефіцієнта рангової кореляції Спірмена. Значимими вважали р-значення нижчі за 0,05.
Приклад 2. ПТРК підвищує експресію СОЗ8 на клітинних лініях ММ і первинних клітинах ММ
Підвищення рівнів експресії СОЗ8 може посилювати ефективність даратумумабу в знищенні клітин ММ через АЗКЦ і КЗЦ. Взаємодія ПТРК з ядерними рецепторами ретиноєвої кислоти призводить до зміни експресії генів-мішеней, у тому числі до індукції експресії СОЗ8 (Маїамаві Р.
Ко) У Геикос Віо! 90:217-219, 2011; Огасп єї аЇ., Сапсег Неб5 54:1746-1752, 1994). Отже, досліджувався вплив ПТРК на клітинні лінії ММ КРМІ8226, ОМО їі ХО1. Клітини ММ інкубували в середовищі ЕРМІ-1640 окремо або разом із ПТРК у концентрації 0-25 нМ протягом 48 годин (Фіг. 1А) або інкубували разом із 10 нМ ПТРК протягом 24, 48, 72 або 96 годин (Фіг. 18), а потім збирали для визначення експресії СО38 шляхом проточної цитометрії з використанням пристрою ЕБАС5-Саїйриг (Весіоп ОісКіпбоп) і антитіла до СОЗ38 (ВесКтап СошПег). Дані аналізували з використанням програмного забезпечення СеПОиеві.
Мінімальна концентрація 10 нМ ПТРК була достатньою для індукування 1,9-4,4-кратного підвищення експресії СОЗ8 на клітинних лініях ММ КРМІ8226, ОМ9О ї ХО1. Вищі дози ПТРК не посилювали додатково експресію СОЗ38 (Фіг. ТА). Максимальне посилення експресії СОЗ8 відбувалося через 48 годин (Фіг. 18). Отже, у всіх подальших експериментах використовували 10 нМ ПТРК протягом 48 годин.
Також досліджували вплив ПТРК (10 нМ, 48 годин) на первинні клітини ММ, взяті у 26 пацієнтів, за обробки ех мімо. У цих експериментах МНККМ від 26 пацієнтів на ММ інкубували в середовищі КРМІ-1640 окремо або спільно з 10 нМ ПТРК протягом 48 годин, інкубували за 4 "С протягом 20 хв спільно з РІТС-кон'югованим антитіллом до СОЗ8 (ВесКтап СошиПег), а потім збирали для визначення експресії СО38 шляхом проточної цитометрії. Проточну цитометрію аналізували з використанням пристрою ЕАСсС5З-Саїїриг (Весіоп ОісКіп5оп); дані аналізували з використанням програмного забезпечення СеПОиеві.
Індукована ПТРК експресія СОЗ8 (медіана підвищення: 1,7-кратна, діапазон: 1,0-26,5- кратний) (Фіг. 2). Також спостерігалася значна стимуляція експресії СО138 (медіана підвищення: 2,0 кратна), що характерно для диференціації клітин ММ. Навпаки, значних змін у експресії інших антигенів плазматичних клітин, таких як антигени НА А/В/С або СО56, у відповідь на
ПТРК не спостерігалося.
Приклад 3. Опосередкована ПТРК стимуляція експресії СОЗ38 посилює опосередковану даратумумабом АЗКЦ і КЗЦ проти клітин ММ
Можливий вплив ПТРК-індукованої стимуляції експресії СОЗ8 на індуковану даратумумабом
АЗКЦ і КЗЦ досліджували на клітинних лініях ММ ХО-1, КРМІ8226 ї ОМО і на первинних клітинах
ММ.
Стосовно клітинних ліній ММ КЗЦ і АЗКЦ оцінювали з використанням аналізів АЗКЦ і КЗЦ на бо основі біолюмінесцентної візуалізації (ВІ І), як описано вище. Стосовно первинних клітин ММ
КЗЦ ї АЗКЦ оцінювали з використанням аналізів АЗКЦ ї КЗЦ на основі проточної цитометрії ех мімо у МНККМ, як описано вище. У цих аналізах клітини попередньо обробляли 10 нМ ПТРК або контрольним розчинником протягом 48 годин, після цього інкубували з використанням або без використання даратумумабу в присутності МНКПК як ефекторних клітин для оцінки АЗКЦ або в присутності людської сироватки як джерела комплементу для оцінки КЗЦ. Ізотипний контроль додавали в концентрації 10 мкг/мл, а 10 95 термічно інактивованої сироватки використовували як контроль для КЗЦ.
На Фіг. ЗА, Фіг. ЗВ й Фіг. ЗС показані результати індукованої даратумумабом КЗЦ ії АЗКЦ у клітинних лініях ХО1, ЕРМІВ8226 ії ОМО відповідно.
Використання тільки 10 нМ ПТРК не індукувало лізис клітин ММ. Попередня обробка клітинних ліній ММ за допомогою 10 нМ ПТРК істотно підвищувала опосередковану даратумумабом КЗЦ у клітинах ХО-1 (Фіг. ЗА) і АЗКЦ у клітинах ХО-1 (Фіг. ЗА) і ОМО (Фіг. ЗС) порівняно з контрольним розчинником (Фіг. ЗА). У клітинах КРМІ8226 не відзначалося істотного посилення опосередкованої даратумумабом АЗКЦ і КЗЦ. Такі відмінності в чутливості ПТРК можна частково пояснити тим фактом, що ПТРК посилювала експресію СОЗ8 2,9-кратно в клітинах ХО-1 і 4,4-кратно в клітинах ШОМУ, у той час як у клітинах КРМІ8226б експресія підвищувалася лише 1,9-кратно (Фіг. ТА й 18).
Приклад 4. Опосередкована ПТРК стимуляція експресії СОЗ38 посилює опосередковану даратумумабом АЗКЦ і КЗЦ проти первинних клітин ММ
Первинні клітини ММ оцінювали для подальшого дослідження впливу опосередкованої
ПТРК індукції експресії СОЗ8 на чутливість даратумумабу.
На Фіг. 4А і Фіг. 4В8 показані результати індукованої даратумумабом КЗЦ і АЗКЦ відповідно в первинних клітинах ММ, попередньо оброблюваних протягом 48 годин з використанням або без використання 10 нМ ПТРК. На графіках з Фіг. 4А і Фіг. 4В представлені об'єднані результати для зразків від 16 або 13 пацієнтів відповідно.
Попередня обробка первинних клітин ММ за допомогою ПТРК протягом 48 годин призвела до істотного підвищення їхньої чутливості до опосередкованої даратумумабом КЗЦ у 13 з 16 пацієнтів (дані не показані) і до опосередкованої даратумумабом АЗКЦ у 8 з 11 пацієнтів (дані не показані). Об'єднані результати для цих пацієнтів показали, що ПТРК підвищила медіану
Зо КЗЦ, опосередкованої 10 мкг/мл даратумумабу, з 16,1 95 до 43,9 95 (Р « 0,0001) (Фіг. 4А) і підвищила медіану АЗКЦ, опосередкованої 10 мкг/мл даратумумабу, з 25,1 95 до 39,5 95 (Р-0,0315) (Фіг. 4В).
На Фіг. 5 показані результати індукованої даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від кожного пацієнта. На Фіг. БА показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від пацієнта 1 і пацієнта 2. На фіг. 58 показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від пацієнта З і пацієнта 4. На Фіг. 5С показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від пацієнта 5 і пацієнта б. На Фіг. 50 показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від пацієнта 7 і пацієнта 8. На Фіг. БЕ показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від пацієнта 9 і пацієнта 10. На Фіг. 5Е показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від пацієнта 11 і пацієнта 12.
На Фіг. 50 показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від пацієнта 13 і пацієнта 14. На фіг. 5Н показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від пацієнта 15 і пацієнта 16. ПТРК індукувала опосередковану даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ, які не реагували на лише даратумумаб іп міїго (наприклад, у випадку пацієнтів 1, 4, 8, 12, 13, 15 і 16). Ці первинні клітини ММ брали в пацієнтів із рефрактерністю або подвійною рефрактерністю, як зазначено в таблиці 1. У зразках первинних клітин ММ від деяких пацієнтів
ПТРК не показала додаткового підвищення опосередкованої даратумумабом КЗЦ (наприклад, у пацієнтів 6, 7 і 14).
На Фіг. 6 показані результати індукованої даратумумабом АЗКЦ у первинних клітинах ММ від кожного пацієнта. На фіг. бА показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах
ММ від пацієнта З і пацієнта 4. На Фіг. 68 показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від пацієнта 7 і пацієнта 8. На Фіг. 6С показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від пацієнта 9 і пацієнта 10. На Фіг. 60 показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від пацієнта 14 і пацієнта 15. На Фіг. 6Е показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від пацієнта 16 і пацієнта 17. На Фіг. 6Е показана індукована даратумумабом КЗЦ у первинних клітинах ММ від пацієнта 18. ПТРК індукувала опосередковану даратумумабом АЗКЦ у більшості досліджуваних первинних клітин
ММ. Ці первинні клітини ММ обрали в пацієнтів із рефрактерністю або подвійною рефрактерністю, як зазначено в таблиці 1.
Також оцінювали поверхневу експресію СОЗ8 у всіх цих досліджуваних первинних клітинах
ММ у МНККМ, інкубованих у середовищі ЕРМІ-1640 окремо або спільно з 10 нМ ПТРК протягом 48 годин (Фіг. 7).
Загальні результати свідчать про те, що використання ПТРК є привабливою стратегією для підвищення експресії СОЗ38 і активності даратумумабу в клітинних лініях ММ і первинних клітинах ММ, включаючи клітини ММ, що є рефрактерними до опосередкованої даратумумабом
КЗЦ і/або АЗКЦ.
У таблиці 1 показані вихідні характеристики МНККМ від 19 досліджуваних хворих на ММ. У таблиці " рефрактерне захворювання до леналідоміду й/(або бортезомібу визначається як прогресування захворювання під час лікування леналідомідом і бортезомібом, відсутність відповіді (менш ніж часткова відповідь) на лікування леналідомідом і бортезомібом або прогресування захворювання раніше ніж через 60 діб після припинення лікування за схемою, що включає використання леналідоміду й бортезомібу, відповідно до Єдиних міжнародних критеріїв оцінки відповіді на лікування для множинної мієломи.
Таблиця 1 11111111 пацієєтру/:/З3ОССССССССССС1С ни
Я 1 2 З 4 5
Вік (років)
Тип важкого ланцюга зонолональноянтитта ОП ю6 ою
Попередня терапія
Попередні лінії терапії (кількіст?| 10 | 4 | 4 | 6 | з | 0 / пед, жо фо ко 1 (кон . так так так так так стовбурових клітин
Аугологчна.ї 7777 |тако тако тако (тако так/ні
Алогеннаї/////777777777711111111Їні///Їні// сні |ні/ Інні леналідомідом леналідоміду
Попереднє лікування . так так так так так бортезомібом наявність рефрактерності" до так так так так так бортезомібу с Соз8 наклітинах ММ | 258. | 1346 1275.| 2642.) 1134
Експресія СО59 на клітинах ММ 235 во 228 108 7 (СІФ) нн 11111110 0Пацєнт 11111111 ни - 7 10 11 12
Вік (років)
Ко сінсННЙ ССУННИ НЕННЯ ПЕН С ЗАНО С-ЗННО НОЕНЯ моноклонального антитіла
Попередня терапія
Попередні лінії терапії(кількістю| 2 | 2 | 5 | 6 | 2 | 4 /
перен (ж Те |і (6 Ще . так так так так так стовбурових клітин
Аутологчна.ї 777777 |тако о Їтако сні (тако так-так
Алогеннаї 77777771 Їні///ТЇні сні Іні/ Інні ес СТИ СНО СУС СН СУЯ . й так так так так так леналідомідом оно СНИ СНО СУС СТИ СУЯ леналідоміду
Попереднє лікування . так так так так так бортезомібом наявність рефрактерності" до так так так бортезомібу снів НЕ НЕСТИ НЕ ЗНИК НІС ВІСН сисовеетн ше / ет тю ве зо сві СВО НЕ ЗА НСЕИ НОЕЧН НСЗИ СТН
Експресія СО59 на клітинах ММ до 151 241 7 74 47 (СІФ) нн 11111110 0Пацєнт 11111111 ни - 13 14 15 16 17 18
Вік (років)
Тип важкого ланцюга зонолонально яння (7007000
Попередня терапія
Попередні лінії терапії (кількість) несе нййоніШН СУНННЯ СНИ СТИ СУ СНИ СУЯ . так так так так стовбурових клітин
Аутологчна.ї 77777771 Їтако ні сні (тако так-так
Алогеннаї 77777771 Їні///ТЇні сні Іні/ Інні ес СНИ СНО СУС СН СУЯ . й так так так так так леналідомідом ей СНИ СНО СУ СУННИ СТННН СУЯ леналідоміду сто СНИ СНИ СНИ УНН СН СУЯ . так так так так так так бортезомібом тс іййьнвй В СНИ СНИ СЛИНИ СНИ СТИ СУЯ бортезомібу співав ШЕСТИ НЕТНО БСТНВЗ НСЗ ВАЕСТНЯ ссовеетя зе я зе ве сві ШЕСТИ НЕСЛА НОСИ ПОС НЄ НИ ВАЄ
Експресія СО59 на клітинах ММ 188 75 107 70 Бо (СІФ)
МНККМ -- мононуклеарні клітини кісткового мозку. ММ -- множинна мієлома. Ч -- чоловік.
Ж -- жінка. К -- каппа. ЇЇ -- лямбда.
Приклад 5. ПТРК пригнічує експресію СО55 і СО59 у первинних клітинах ММ
Проведені експерименти показали, що попередня обробка клітин ММ за допомогою ПТРК зробила ці клітини більш чутливими до опосередкованої даратумумабом АЗКЦ і КЗЦ.
Підвищення КЗЦ було більш вираженим, ніж підвищення АЗКЦ. Було досліджено підгрунтя для цього спостереження на молекулярному рівні.
Було оцінено вплив ПТРК на ефекторні клітини. ПТРК не впливала взагалі або чинила мінімальний вплив на здатність МНКПК від здорових донорів індукувати АЗКЦ на людських клітинних лініях ММ І363-С038, І МЕ-1, КРМІ8226 і ОМО (дані не показані). У протилежність цьому, ПТРК знижувала рівні експресії комплемент-інгібуючих білків СО55, СО59 і С046 на клітинних лініях ММ і первинних клітинах ММ. У клітинах КРМІВ8226 (Фіг. вА), І 363 (Фіг. 88) і ХО- 1 (Фіг. 8С) ПТРК знижувала рівні експресії СО55, СО59 і СО46. У первинних клітинах ММ, отриманих від 16 пацієнтів, ПТРК істотно знижувала експресію СО55 (середнє зниження: 21,3 95; Р-0,019) (Фіг. 9А) ії СО59 (середнє зниження: 37,5 95, Р-0,0047) (Фіг. 98), але ПТРК не чинила значного впливу на рівні експресії СО46 (дані не показані). Рівні експресії СО46, СО55 і
СО59 у досліджуваних зразках від 16 пацієнтів показані на Фіг. 10А (СО55), Фіг. 108 (СО559) і Фіг. 100 (2046). В експериментах клітини культивували за 37 "С у середовищі КРМІ-1640 з використанням або без використання 10 нМ ПТРК, 10 нМ протягом 48 год. Клітини інкубували за 4 "С протягом 20 хв разом із відповідною панеллю кон'югованих антитіл. Проточну цитометрію аналізували з використанням пристрою ЕАСсС5З-Саїїриг (Весіоп ОісКіп5оп); дані аналізували з використанням програмного забезпечення СеПОиеві.
Приклад 6. Ефективність іп мімо комбінації ПТРК і даратумумабу проти росту пухлин ММ у гуманізованому мікросередовищі
Гібридні каркаси, що складаються з трьох двофазних частинок із фосфату кальцію розміром 2-3 мм вкривали іп міго людськими мезенхімальними стромальними клітинами (МОСК; 2 х 105 клітин/каркас). Через тиждень культивування іп міго в остеогенному середовищі гуманізовані каркаси імплантували підшкірно мишам КАС2-- ус", як описано раніше (Сгоеп еї аї., Віоса. 197120:69-е16, 2012; де Наан еї а!., Сіп.Сапсег Нез. 19:5591-5601, 2013).
Через вісім тижнів після імплантації миші отримували сублетальну дозу опромінення (З Гр, 200 кВ, 4 мА) і трансдуковані люциферазою клітини ХО1 були введені безпосередньо в каркас (1 х 105 клітин/каркас). Через три тижні після інокуляції, коли ріст пухлини в каркасах можна було виявити шляхом біолюмінесцентної візуалізації (ВІ), різні групи мишей отримували лікування 1) носієм, 2) ПТРК плюс без-Т-клітинні МНКПК (МНКПК-Т) у якості ефекторних клітин, 3) даратумумабом плюс МНКПК-Т і 4) даратумумабом плюс ПТРК плюс МНКПК-Т. Даратумумаб (8 мг/кг) вводили внутрішньоочеревинно в дні 23, 30 і 37; МНКПК-Т (8 х 109 клітин/миша) вводили внутрішньовенно в дні 24, 31 і 38; ії ПТРК (10 мг/кг) вводили шляхом внутрішньоочеревинної ін'єкції в дні 21-24, 28-31 і 35-38. МНКПК-Тї отримували шляхом центрифугування лейкоцитарної плівки за градієнтом щільності в суміші РісоП-Нурадие з подальшим усуненням Т-клітин за допомогою СОЗ-гранул з використанням технології
Еазубзер'"м (БТЕМСЕЇ ЇЇ. Тесппоіодіе5). За ростом пухлини спостерігали шляхом щотижневих вимірювань ВГ, як описано раніше (Огоеп еї аї!., Віоса. 19;120:69-е16, 2012). Усі експерименти на тваринах проводилися після отримання дозволу від місцевого комітету з етики на проведення експериментів на тваринах і відповідали Акту про експерименти на тваринах, прийнятому в Нідерландах. Статистичні відмінності між різними групами лікування в експериментах на мишах обчислювали з використанням критерію Манна-Уїтні. Значимими вважали р-значення нижчі за 0,05.
У мишей з імунодефіцитом КАС2 у 27 трансдуковані люциферазою клітини множинної мієломи ХО1 розвинулися в агресивні пухлини в гуманізованому мікросередовищі кістковому мозку, утвореному в результаті підшкірної імплантації керамічних каркасів, укритих МОСК. Для оптимального оцінювання впливів даратумумабу й ПТРК мишам сумісно вводили без-Т-клітинні
МНКПК, збагачені МК-клітинами, від здорового донора в комбінації з даратумумабом і/або
ПТРК, оскільки миші КАС2-- у 27 позбавлені МК-клітин. Для відстежування росту пухлини щотижня виконували ВІ! протягом 5 тижнів. Як показано на Фіг. 11, даратумумаб суттєво сповільняв прогресування пухлини, у той час як ПТРК, за використання її як єдиного агента, не мала жодного впливу. У цій моделі ПТРК також істотно посилювала дію даратумумабу, спрямовану проти ММ.
ПЕРЕЛІК ПОСЛІДОВНОСТЕЙ
«1192 БПоКПогБЕ, Непк М.
Мисів, Топа
МііБоє, Іпдек 5.
Ууап де ропк, Мієїв «1205 Види комбінованої терапії з застосуванням антитіл до СО38 -1305 ВБІБОБ1ІМОРСТ «1405 Перевідступлення прав «1412 2015-09-08 «1505 62/047,877 «151 2014-09-09 «150» 62/087,287 «1515 2014-12-04 «160з 22 17023 РакепсІп, версія 3.5 «2105 1 «211» 300 «212з РЕТ «2132 Ното варієпв «4005 1 мес діа дяп Сув сі Роре бег Ркго Уа! бек біу Авр Пув Ркго Сув Сув 1 5 10 15
Ак теп Бек Аку Агч Аза Сіп цец Сув тей біу Маї бек Ії Тез чаї
Зо
Те 11 Пе Уа! Уаї уаї Пеп А1а Уаї уаї уаї Рко Акд Тгр Акд с1п сб1п Тгр бек сіу Ркго біу Тк Тк Пув АтдЯд Ре Рко сі Тік Ууа1ї гей бо
А1тїа Акч Сув Ма1 був Тух тТПк сії т1е Нів Рко с1іц Мес Аху Нів Ууаї 65 то 75 во
Авр Сув сіп бБег Ууаї Тер АБр Аіїа Рпбе Пув сіу Аіїа Рре ч11е Бек Пув в5 зо ав
Нів Рко Сув Авп о т1е Тіт 01ц бі Авр Тук біп Рко Пецп Мес Ппув Гей 100 105 110 ббіу тТрк біп Так оУаї Рко Сув Авп о Пув І1е це Іеп Ткр Бек Ак І1е 115 120 125 пув Авр Без А1ї1а нів сіп РбБе ТПк б5і1іп Уа1і біп Ак4 Авр Меє Рре Тк 130 135 140 теп бі Авр Тпк пе Пец Сіу Тук теп Аза АБр Авр Пес Тіт Ткр Сув 145 150 155 160 с1і1іу сі Рре Авп Тк бБет Пув І1е Авп Туг бСіп Бек Сув Рко Авр Ттр 165 170 175
Акч Був Авр Сув бБеї Авп Авп Рко Уаіїі бек уа1і БНе Тгр цув Трх чаї
180 185 190
Бек АкЯ Ак Рпе Аза сіц Азї1а Аіїа Сув Авр Уаї Ууаї Нів Уа1 Меє їецй 195 200 205
Авп о сіу бек Ак4 бек Ппув І1е Рпе Авр Пув АБвп бек Тк Рре с1у бекг 210 215 220
Уаї бі Уаї Нів Авп о їецп сіп Рко сій Пув уа1ї З1п Тк Гей січ Аза 225 230 735 840
Тер Уа1 І1е Нів сіу С1у Ах4 сій Авр бек АгЯ Авр Гей Сув сіп Авр 245 250 255
Рко Тк І1е тїув бій теп сій бек І11е І1е Бех цув Акд Авп І1е б1п 260 265 270
Рре бек Сув пув Авп І1е Тук Ак Рко Авр Був РБе Гей сіп Сув Уа1ї 275 280 285 пПув Авп о Ркго сіц Авр бек бек Сув ТПг бек 91ч І1ев 290 295 Зоо «2102 2 «211» 14 «2122 РЕТ -213з Ното варієпв «400» 2
Ззек цув Аку Авп о І1е біп Ре Бех Сув Ппув Авп Т1е Ттух Ахд 1 5 10 «2105 з «2115 14 212» РЕТ -213» Ното варієпв «4003 З сій пПув Уаі сіп Тк Ге бі) А1їа Тер уаї І1е Нів сіу 51у 1 5 10 «21025 4 «211 122 «212з РБНтТ «213» Штучна послідовність «220» «223» МН антитіла до СО38 «1005 а4 бій Уа1ї біп Гец Пец 01 бек біу пі1у с1у їецш уа1 сіп Рко п01у с1У 1 5 10 15 бек Пе Ак Пец Бек Сув А1а Уаї бек біу Ре Тіх Рпе Авп Зет Ре зо
А1їа Мес бек Тер Уа1! Ак4ч с1п Аза Рко біу Ппув біу Гей січ Ттр Чаї -0 45
Бек діа І1е бек бсі1у бЗегт сіу сіу бі1іу ТПк Тук Тух А1а Авр бек Уаї
Зо
5О 55 бо
Іув зіу Акд Рібе ТПх І1є бек АкЯ Авр Авп бек Ппув Авп ТПг Пей Туг 65 70 75 во печ біп Мес Авп Бех Те Акуд А1ї1а бі Авр ТПпк Аза Уаї Тухк Ріе Сув 85 з) з5
А1їа пуг Авр Тув І1е Тей ТкЕр Рпе біу сій Ркго Уа1і Рре Авр Туг Ткр 100 105 110 со1у бір с01у Тпк Пецп Уа1! ТП уаї бек бег 115 120 «2105: 5 «2112 107 «212з РЕТ «213» Штучна послідовність «2205» «223» Мі. антитіла до СОЗ38 «4005 5 сі І1е Ууаї Пе ТпЕк 410 бек Рко А1їа ТПптІ Пем бек Пец бек Рко с1у 1 5 10 15 біч Аку А1а ТБї Ппез бек Сув Аку Аза Бек з1п бек Уаії Бех Бек Тук зо
Печ А1а Ткр Тук сб1іп сіп Пув Рко сіу сіп А1їа Ркго Аку Ппеч Геч Т1е аб тук Авр А1ї1а бБет Авп Ак А1їа ТПк сіу І1е Рхо Аїа Акуд Рре бек щу бо
Бех с1у Бек с01у ТПк Авзр Рре ТПк Пец Тпх І1е Бек бек Івзп с01и рРко 65 то 75 во
Сі Авр Рре Аза Уа! Тук Тук Сув біп біп Агд бек Авп Ткр Рко Ркго 85 зо з5
ТНЕ Рпе сіу біп біу ТБх Ппув Уаї сі І1е Був 100 105 «2102 6 «21122 5 «212з3 РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» НСОВ1 антитіла до СОЗ8 «4005: 6 бек Рре А1іа Меб Бек 1 З «2105 7 «21123 17 й «212» РЕТ «213з Штучна послідовність
«223» НОСОК? антитіла до СО38 «4005 7
А1ї1а 116 бек б1у бек Сіу сі1у біу Тк Тух тук Аї1а Авр бек уаї був 1 5 10 15 сіу «2105 8 «2115 13 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» НСОВЗ антитіла до СО38 «400з 8
Авр цув І1е Гей Тгр Рпе с1у б1ц Рко Уаї Рпе Авр тухг 1 5 10 «2105 З «2115 11 «212з РЕТ «213з3 Штучна послідовність «220 «2233 1СОВ1 антитіла до СО38 «40023 ч
АтЯд А1а бек б1п бек Ууа1і беїг Бек Тук Тем А1а
1 5 10 «21025 10 «2115 7 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223 1СОВ2 антитіла до СО38 «400» 10
АБр Аїа Бек АБп АхтЯ Аїа ТП 1 5 «2105 11 «211» 10 «212з РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» -223» ЦСОВЕЗ3 антитіла до СО38 «4005 11 сіп біп Акгу Бек Авп Тгр Рго Рто Тік Ре 1 5 10 «810з 12 «711» аб52 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «220» «223» важкий ланцюг антитіла до СОЗ38
«-400з3 12 бій Уаі с1п Пей тецп бій Зек с1у сіу сіу пецш уаї сіп Рко с1у (1у 1 5 10 15
Бек Гес АкЯ4 Пец Бех Сув А1їа Уаї бек біу Ре ТПкК РПе АБп Бех РіБе зо
А1їа Ме бек Ткр уа1ї Аку біп Аїа Рко б1іу Був С1у Пец 014 Тер Уа1
Бех Аза І1е Бех Сіу Бек сС1у сСіу сСіу ТНк Тук Тук А1їа Авр Бек Ууаї бо
Тїув с1у АкЯ4 Рпе ТПг І1е бек Аг Авр АБпобех Пув Авп ТК Гей Тук 65 70 75 во теп Сіп Меє Авп бек Гей Аку А1Т1а б1ч Авр Тпх Аіа Уа1ї Тух Рпе Сув 85 зо 35
А1а пує Авр Ппув 112 тес Тур Рре біу сій Рко Уа! Робе Авр Тут Ткр 100 105 110 1у біп біу ТПг Пец уа1ї Тпк Уа1ї Бек Бек А1їа бег ТП Пув с1у Рко 115 120 125 бек уаї Рре Рко цей Аза Рко Бех бек Ппув Бек ТикК бек біу сіу ТЕХ 130 135 140
А1їа Аза Пец сіу Сув Гей Уаї тув Авр Тук Рпе Рго 01 Ркго Ууа1 тік 145 150 155 160 7уаї бек Ткр Авп бек с1у А1їа Пес Тік бЗех с1у Уаї Нів ТіК Ре рРкго 165 170 175
А1іа чмаїії Геп сіп Бек Бек С1іу Гей Тук бек Пез бек бек Уа1ї Ууа1 Тік 159 185 190 уаї Рко Бех Бек бек Пец сіу Тк сіп ТПк Тук Іїе Сув Авп уаії Авп 1935 200 205
Нів пув Рко бек Авп Тк Ппув Уаі! Авр Пув Ак Уа1! сій Рко Пцув бек 210 215 220
Сув Авр Пув Тих Нів ТП Сув Рко Рко Сув Рко А1їа Рго сіц Гей Гей 225 230 235 240 біу с1у Рко бек Уа1 Рпе Ппеп Рібе Рхо Рко Ппув Рко Був Авр Тіт Те 245 250 255
Мес Іїе бек Акд ТіК о Рхко Сі Уа1 Тиг Сув Уаї Уаї уаї Авр Ма1ї бек 260 265 270
Нів с1ї Авр Рго с01ц Уаї Ппув РБе Авп Ттр Тук уУаї Авр біу уа1і сій 2775 280 255
Зб уа1і Нів Авп Азта Ппув ТПК о Ппув Рко Аку січ Сі біп Тук Авп бек ТНК 2930 295 зо
Тук АкЯ Уаї Уаї бек Уаї Пец ТБг Маї Пеп Нів біп АвБвр Ткр їв двп 305 310 315 320 сіу цпув біц Тук пув Сув Ппув уаїі бек АвпоБув Аза Геп Рко Азїа Рко 325 330 335
І1е 51 Був ТНК о І1е бБег пув А1а Був О1у б01п Рхо Аху січ Рко сіп 340 345 в)
Уа1 Тук ТрПх Пец Рго Рко бек Ага 511 бій Мес ТБ Гув АБп обіп Уаї 355 зво зе бек Геч Трх Сув Пец Уаї Ппув са1у Ррбе Тут Рко Бек Авр І1е А1а Уа1ї 370 375 зво
Сі Тур бій бек Авп б1у біп Рко бій Авп о Аеп о Тухг Пув ТПтї ТВг РКО зв5 390 395 400
Рго уаі Гцецп Авр Бек Авр С01іу бек Рре Рре Пец Тук бек Пув Тем ТЕХ 05 410 415
Ууаї Авр цув Бек АкЯ4 Тер сіп біп біу Авп Уаї Рре бек Сув Бек маї1ї 420 425 4зо0
Мес Нів Сіц А1їа те Нів АвпоНів Тук Тк біп пув бек Геп Бехг 1еч 435 440 445
Бек Рко сіу Гув «2210» 13 «2115 214 «212» РЕТ «213з Штучна послідовність «220» «223з легкий ланцюг антитіла до СО38 «4005: 13 бій І1І1е уаї Пец Тк біп бек РКО А1а ТПкК Пейп бек Гей бет Рго С1у 1 Б 10 15 а1з Ак АТа Ту Тез Бек Сув АкЧ А1ї1а Бек сіп бБег Уа1ї бек Бек Тукг реп Аї1а Тктр Тут сіп біп Був Рко бі1іу сіп Аїа Рго Ак Гей Геч Т1е
Тук Авр Аза бег АБп Аг Аза ТБг аїу І1е Рго А1ї1а АкчЧ Рре Бек 01у
БО 55 21) бек бсіу Бек сіу Тпк Авр Рпе ТПк Ппеп ТПт І1їе бек бек Пец сіц Рхко 65 70 75 во біз Авр Рпе А1тїа уаї Тук Тут Сув біп б1п Ак бек Авп о Ттр Рко Рго 85 90 95
Тік РрБе сіу біп 0і1у ТНЕ Ппуз Уаї 0194 І1е пув Аку Тіг Ууаї Аза А1а 100 105 110
Рко Бек УМа1ї Рре І1їе Рпе Рго Рко Бек Авр бі біп гей Пув бех а1у 115 120 125
Тих А1їа Бек Уаї Уаї Сув тей Гей Авп о Авп оре Тук Рго АкЯя 011 Аїа 130 135 140 пув Ммаї С1іп Ткр Був Уаї Авр Авп А1їа тей біп Бек с1у Авп бек сіп 145 150 155 160 січ бек уа1ї Тк сій б1іп Авр бек Ппув Авр бет Тпг Тук Бек Іец Бек 1565 170 175 бек Тіпг теп ТПпК Гец бБехг Пув А1а Авр Тут сій Ппув нів Пцув уУа1ї Тук 180 185 130
А1ї1а Сув б1ц Уаї Тк Нів сіп с1у Пец бек бек Рко уаі Тік ГПув Бек 1985 200 205
РПе Авп Акад с1у СсСіи Сув 710 «-2105 14 -211» 120 «212з3 РЕТ «213» Штучна послідовність
«223» УН актитіла до СОЗ8 «400» 14 біп Уаї біп рей маї б1п Бек б1іу А1а біц уаї Гув пув Рго с1у дек 1 5 10 15
Бек Уа1 ПпувБ Уа1 бек Сув Гув Аїа бек сіу сіу Тік Рпе 5ек Бек Туг
А1а Рпе бек Тгр уаї Ак сіп А1а Рко сіу біп біу Ппецш бі Тхр Мес сі1у Акч Уа! І1їе Рко РБе Гей йіу ті1е А1їа Азп Бек А1їа біп був РБе бо
Сіп б1у АкЧд Уаї Тк І1їе Тіт Аїа Авр Пув бБег Тіт бБеї Тіт А1Та Тук 65 70 75 80
Мес Ар Гей бек бек їецп Акуд бек Сі Авр Тк Аза Уа1ї Тухк Тух Сув 85 зо 25 діа Акад Авр Авр І1е Аза А1а Пеп сіу Рго РрБе Авр Тук Тгр бі1у біп 100 105 110 бі1іу Тпйк пецп Уа1 ТБт Уа1ї Бек Бехг 115 120
«2105 15 «211» 107 «212» РЕтТ -2132 Штучна послідовність «?20з «223» УМ антитіла до СО38 «ай» 15
Авр т1є біп Мес ТртІ Сіп бехг Рко бех бек цеп бек Атїа Бех уаї 01у 1 5 10 15
Авр АкЧ Уа! Тк І1е Трк Сув Агуд Азїа бБег біп С1у ІчІ16 Бек бек Ттр
Зо
Те Аїа Ткр Тут б1п біп Ппув Рко січ Пув А1ї1а Рко Пув бех Гец І1е тук А1а А1їа Бех Бек Пец біп бек с1іу уа1 Рхо бек Агу Рре бек с1У ва 55 60
Зек сіу Бех біу Трг Авр Рре Тіт їец ТБт І1е Бег Бех Геч біп Рго 65 70 75 о біз Авр Рпе А1а тТПх Тук Тук Сув сіп біп Тук Авп бек Тук Рхко Акд 8ь 0 95
Тв Бе сіу сіп сі1у Трг Тув уаі1і біц І11е Гув 100 105 ді
«2105» 16 «211» 122 «212» РЕТ «2135 Штучна послідовність «220» «233» МН антитіла до СО38 «4002 16 бій Уаї біп реп Уаї біп бек с1у А1а 015 Уа! Пув ув Рко сіу а1ц 1 5 10 15
БЗек Пец Був І1е бек Сув Пув с1у бек с1і1у Тук бек Рре бБет АБп Тукг
Ко)
Ткр Ії1е сіу Ткр Уаі Аку сбіп Меє Рко с1у цув с1іу Гей сі Тгр Меє а5 сі1у ї11е їІ1е Тук Рко Нів Авр Бех Авр Аза Аг Тук Бек Рко бек Рпе 60 біп 41у й1п уаї ТБ РБе бек Аї1а Авр МПув бек І1е Зек ТБк А1а Тук е5 7о 75 во
Теза б1іп Тер бек бБег Пец Ппув А1ї1а Бек Авр Тртї АТїа Мес Тух Тук Сув 85 зо з5
А1їа Акач Нів Ууа1 сіу Ткр с1у Бек Акд Тук Ткр Тухк Рібе Авр Теч Ттр 100 105 110
С1у Акд б1і1у Трк Пец уаї ТБІ Ууаї бек вех 115 120 «2105 17 «2115 107 «212» РЕТ «2132 Штучна послідовність 2205 «223» МІ, антитіла до Ср «4005 17 бі І1е уаї Пеп Тих біп бек Рхто А1ї1а ТПкК Ге бек Пец бек Рко а1у 1 5 10 15 сі Ак Аза Тк Пец бек Сує Аку А1їа Бек Сіп Бек уа1і Бек Бек Тук зо
Пеп діа Тер Тухк Сіп біп Ппув Рко С1іу біп Аїа Рко АгЯ Пец Іеч І1е
Тух Авр А1а бек Авп Акд А1а Тік б1іу І1е Рго Аїа Ак Рпе бек п1у
БО БЬ бо бек сп1у Бек с1у Трх Азр Ріе Тік пеп ТПх І1е бек Бек Геї с1ц РкЕо 65 70 75 во бі Авр РБе діа Уаії Тук Тук Сув біп Сіп Аку бек Авп Ткр Рко Рко 85 90 з5
Тпк Ре с1у біп біу тнх Пув Уаї Сі І1е цув 100 105 «2105 18 «211» 120 «212» РрРЕТ «-213з Штучна послідовність «2205 «223» МН антитіла до СОЗ38 «4002: 18 с іп Уаі1і! біп Ге уаї бій Бек с1у С1іу с1у Іец уді бій Рко (1у (1уУ 1 5 10 15 бек теп Акд теп бек Сув А1а Аза бек б1у Рпе ТПх Рре Бех бек Тук го 25 о тук Ме Авп Тур Уаї Атд сіп Аїа Рко біу пув сіу Ппеп сії Ттр Уаї а5 бек біу І1е бек сіу Авр Рко бек АБп Тк Тук Тухг А1а Авр Бет Уаї1ї
І-19) пув с1у АкЯ4 Ре тих І1е бек Акад Авр Авп бек Ппув Авп ТПх Пец Тук 65 то 75 во
Пец біп Мес Авп бек Пес АгЧЯ АТїа Сіц Авр Так Атїа Уаї Туг Тух сСув 85 зо з5
А1а Ак Авр Гей Рко теп Уаї Туг Тк с1у Ре А1їа Туг Тгр с1у сіп 100 105 110 сіу ТЕ Ппеп Уа! ТК уа1ї бек бек 115 120 «21023 19 «211» 109 «212» РЕТ «213» Штучна послідовність «2205 «223» Мі антитіла до СО38 «4005 19
Авр І1е бій Тео Тк обід Рго Рго бек Уа! Бет Уаі Аїа Рко с1у біп 1 5 10 15
Тік А1а АкЧд І11е бек Сув Бех Сіу Авр Авп Пеп Аку Нія Тух Тук Уві зо
Тук Тер Тук сСіп біп Ппув Рко біу біп Ата Рко Уві Пец УМа1ї Т1е Тук а5 с1у Авр бБет Пув Акуд Рко бек Сіу І1е Рхо бій Акд Рре бек с1іу бек
БО 55 во
Авпобек сіу Авп ТПх Аза тру Ппеп Тк т1е Бек сіу ТркК сіп діа 51 65 то 75 во
АБр біц А1їа Авр Тух тук Сув б1іп Тк Тук тн сіу Сіу діа Зек Пец 85 зо 5
Уаї Рпе б1у б1у сіу Так Ппув цей тк Ууаї пеп а1у с1п 100 105 «2710» 20 «2112 120 «212з РЕТ «213» Штучна послідовність «2йй» «223» МН антитіла до СО38 «-4002 20 біп Уаі1! сіп Пец Уа1і! сіп бек сіу Аїа Сіц Уа1ї діа Пув Рко біу Тік 1 5 10 15 бек уаї пув Мец Бек Сув Був Аїа Бег с1у Тук ТПкК Рое Тіг Авр Туг
Зо
Ткр Мес сіп Ткр уаї1ї Гув сіп АкЯд Рго біу біп біу Пе бі Тгр І1е сіу тік т11е Тук Рго б1іу Авр б1у Авр ТіК с1у Тук Аїа біп Гув РБе
БО 55 ва сіп 41у прув А1їа тТПк Пец ТП А1а Авр Пув бек бек МПув Тік Уа1ї Тук 65 то 75 во
Мес Нів Пей бек Бек Гей А1їа бек бій Авр Бек А1а уаї Тух Тук Сув зо 25
А1а Акад сіу Авр Тух Тук Сіу Бек Авп бек Пеп Авр Тук Ткр й1у сіп 100 105 110 с1у ТПпх бег Уа1і Трт Уа1ї бек бек 115 120 «-2105 21 «-211» 107 «212з РЕТ «213» Штучна послідовність Й «2202» «223» МІ антитіла до СОЗ8 «400з: 221
Авр І1е уаї Месє Тік бсіп бек Нів Пец бет Месє бек Тік Бех Те б1у 1 5 10 15
Авр Рко уа1і Бех І1е ТПх Сув ув А1а бек біп Авр Уа1ї бек Тік Уаї зо
Уаї А1а Ткр Тут біп бзіп Пув Рко біу біп бек Рко Акд Акд Пем І1е
Тук Зеїг А1ї1а бек Туг Акд Тух І1е б1у Маї Рко Авр Ак9д Рпе ТНЕ п1уУ
Бо 55 во бек с1у Аїа с1іу Тік Авр Рре Тіт Рре Тих І1е Бек бек Уаії сіп А1а 65 70 75 во січ Авр пей А1їа Ма1! Тук Тук Сув біп біп Нів Тут бек Рко Рко Тук 85 о 5
ТНкЕ Ре с01у п1у с1у Тк Пув Гей б1іц І1е ув 100 105 «2102 22 «211з». й -212з БЕтТ «-213» Ното варієепе «-«400з 22 уаї біп ем Тк

Claims (14)

ФОРМУЛА ВИНАХОДУ
1. Спосіб лікування множинної мієломи (ММ) у суб'єкта, що включає введення суб'єкту, який цього потребує, антитіла до СОЗ38 у комбінації з повністю транс-ретиноєвою кислотою (ПТРК), де суб'єкт стійкий до або має набуту стійкість до лікування антитілом до СОЗ8 або комбінації щонайменше одного хіміотерапевтичного агента і антитіла до СОЗ8, і де антитіло до СОЗ8: а) містить послідовності, які визначають комплементарність областей важкого ланцюга (НСОК) 1 (НСОМТ), 2 (НСОК2) і З (НСОКЗ) з БЕО ІЮО МО: 6, 7 і 8 відповідно; і р) містить послідовності, які визначають комплементарність областей легкого ланцюга (СОМ) 1(с20ОК1),2(1 СОкК2)із І СОКЗ) з БЕО ІЮ МО: 9, 10 ії 11 відповідно.
2. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що антитіло до СЮОЗ8 індукує знищення клітин, які експресують СОЗ8, /пл уйт шляхом антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АЗКЦ) або комплементзалежної цитотоксичності (КЗЦ).
3. Спосіб за п. 2, який відрізняється тим, що антитіло до СОЗ8 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ8, шляхом КЗЦ /л Уго.
4. Спосіб за п. 2, який відрізняється тим, що антитіло до СОЗ38 індукує знищення клітин, що експресують СОЗ8, шляхом АЗКЦ /л уйго.
5. Спосіб за будь-яким із пп. 1-4, який відрізняється тим, що щонайменше один хіміотерапевтичний агент являє собою леналідомід, бортезоміб, мелфалан, дексаметазон або талідомід.
6. Спосіб за п. 5, який відрізняється тим, що щонайменше один хіміотерапевтичний агент являє собою леналідомід або бортезоміюб.
7. Спосіб за пп. 1, 2, З або 4, який відрізняється тим, що антитіло до СОЗ8 має ізотип ІДС, Ід2, ІЧеЗ або Ідсаі.
8. Спосіб за п. 7, який відрізняється тим, що антитіло до СОЗ8 має ізотип ЇдС1.
9. Спосіб за будь-яким із пп. 1-8, який відрізняється тим, що антитіло до СО38 містить варіабельну область важкого ланцюга (МН) із ЗЕО ІО МО: 4 і варіабельну область легкого Зо ланцюга (МІ) із БЕО ІО МО: 5.
10. Спосіб за п. 1, який відрізняється тим, що антитіло до СОЗ8 містить важкий ланцюг із ЗЕО ІЮО МО: 12 і легкий ланцюг із ЗЕО ІО МО: 13.
11. Спосіб за будь-яким із пп. 1-10, в якому антитіло до СОЗ38 і АТЕА вводять: а) разом у суміші; р) одночасно як окремі агенти; або с) послідовно як окремі агенти в будь-якому порядку.
12. Спосіб за п. 1, в якому введення суб'єкту антитіла до СОЗ38 в комбінації з АТКА приводить до індукції залежної від комплементу цитотоксичності (СОС) антитіла до СОЗ8.
13. Спосіб за п. 1, в якому введення суб'єкту антитіла до СОЗ8 у комбінації з АТКА приводить до індукції антитілозалежної клітинноопосередкованої цитотоксичності (АКЗЦ) антитіла до Соз8.
14. Спосіб за п. 1, в якому введення суб'єкту антитіла до СОЗ38 в комбінації з АТКА приводить до уповільнення росту пухлини у суб'єкта. Фіг 1А, б Фо о в о 8 -- КРМІВ8226 я 4 я- Мо 5 -- Хб-1 - і-ї ш а с А 2 В т в с 0 0 2,65 5 10 15 25 ПТРК (НМ)
«ріг, ІВ. Ки в '5 о 8 о 4 е- КРМІВ22б жк я Мо Е- ж Хб-1 б З - г 2 шкі -й б 1 ї (5 5-0 0 24 48 72 96 час (години)
Фіг. 2. я вВ-ЖБЖЖ8ИИ 2000 нЗ жи ее монотонно) со 1560 б. ля сх рн одини шНш О 10со Еш середовище середовище, 48 год ПТРК, 48 год
Фіг.
ЗА. ха жи бо НЕ Ч АЧ Ж -66; - ди я: ДАРА, 10 мкг/мл ДАРА, 10 мкг/мл - ПЛТРК, 10 нм Хо зо Ж А-ЄЗЙ2ИЄИ- 6ЙЩЬ -6 - «10 0. ши о Ел каа ДАРА, 10 мкг/мл ДАРА, 10 мкг/мл ї ПТРК, 10 НМ
Фіг 38, РРМІВ226 нз -- 0 в з ЩІ ДАРА, 10 мкг/мл ДАРА, 10 мкг/мл ПТРК, 10 нм РКРМІВ226 нЗ Ф ДЕ: я - а з 2 її п. о Кох киев ДАРА, 10 мкг/мл ДАРА, 10 мкг/мл ї ПТРК, 10 НМ
Фіг.
ЗС.
МУ 16 І на л- 10 - ДАРА, 10 мкг/мл ДАРА, 10 мг/мл й ПТРК, 10 нм мо 100 Ж мБ--- о Ж во шк я Фо й 29 п о Мене ДАРА, 10 мкг/мл ДАРА, 10 мкг/мл п ПТРК, 10 НМ
Фіг: ЗА. -- ДАРА че. ДАРА ї- ПТРК 16, зав ях ря 4 і х 20 й 0 4 0 0 1 3,3 (10 Даратумумаб (мкг/мл)
Фіг 48. 9 ДАРА ж. ДАРА я ПТРК во ДА 22------ т у -- и «20 й 01 ве: 0 001,01 ДЩ1. 10 Даратумумаб (мкг/мл)
Фіг.
ЗА.
Пацієнт 1 1001 е- ДАРА 8041-ж- ДАРА я ПТРК с 16) - 40 ---- я р"ртт " м 20 й а о ін 003 ; -20 Даратумумаб (мкг/мл) Пацієнт 2 1007. е- ДАРА 801 ДАРА Я ПТРК 0-8... во ух -ї 40 й З л р 0 »1 9031 33 10 й Даратумумаб (мкг/мл)
Фи; 58. Пацієнт З 1001.е- ДАРА 80--в- ДАРА я ПТРК 58 60 де «т то 40 ш-- 7 "че іч) 7 о 20 ри 8,
0. 0,3 1 398 ЖУЖЮо Й Даратумумаб (мкг/мл) Пацієнт 4 1007 в. ДАРА 804-ш- ДАРА я- ПТРК 8 бо - 40 оди 20 и 0 о-- 9) ' ; 10 --0-.. Даратумумаб (мкг/мл)
Фіг. 5С. -- ДАРА Пацієнт 5 1007-ж- ДАРА я ПТРК «2 ---- 80 7 - -- 680 и Я ю й - / 9 20 0 003 1 33 10 -20 Даратумумаб (мкг/мл) Пацієнт 6 100 -4- ДАРА 804-8- ДАРА « ПТРК є 60 - 40 Ще Га -- 20 0 - 003 1 33 10 -20 Даратумумаб (мкг/мл)
Фіг, 50. Пацієнт 7 1001. е- ДАРА 801-4- ДАРА хз ПТРК - 60 сх АНЯ з що 2-40 , 20 4 й 0 0,3 1 3,3 10 -0- Даратумумаб (мкг/мл) Пацієнт 8 1001 Ф- ДАРА 804-ш- ДАРА «4 ПТРК - 650 40 я ощ---- У дав в о - с, 3310 -20 Даратумумаб (мкг/мл)
Фіг: ЗБ.
Пацієнт 9 1901. е- ДАРА 801-- ДАРА я ПТРК З 60 м щ 40 о пл т и "щ-- м 20 М 0 0 0,3 1 3,3 10 -20 Даратумумаб (мкг/мл) Пацієнт 10 -- ДАРА 100ї1- ДАРАЖПТРК -/-...- 80 АТ - 60 й ще ; - 40 ; хм 20 0 003 1 3, 10 -20 Даратумумаб (мкг/мл) бо
Че. ЗЕ. 100 Пацієнт 11 4- ДАРА 9801-й-. ДАРА 5 ПТРК с 60 шрот - 30 ра У 20 ри 0 0 0,3 1 3,3 10 7 Даратумумаб (мкг/мл) Пацієнт 12 1007 4- ДАРА 804-- ДАРА я ПТРК - 60 Є, - 40 м 20 2 ---- в в----ц
0 .- 0 , , -20 Даратумумаб (мкг/мл)
ФЧиг. 50. Пацієнт 13 100 Ф- ДАРА 801-8-. ДАРА 5 ПТРК - 60
-ї У 20 рми ан, й сік З -20 Даратумумаб (мкг/мл) Пацієнт 14 100 -- ДАРА 804-ж- ДАРА я ПТРК - 50 ех, -ї 40 Що У 20 (0, 003 1 3,3 10 -2о Даратумумаб (мкг/мл)
Че ЗН.
Пацієнт 15 100 9- ДАРА 804-- ДАРА я ПТРК - 60 с 40 " - "7 шим БИ О 20 нд ін й ше 003 ДЩщ1 33 10 -20 Даратумумаб (мкг/мл) Пацієнт 16 100 9 ДАРА 804-й- ДАРА 5 ПТРК - 60 дит -- ) й - 40 й ж 20 Я Й в З -20 Даратумумаб (мкг/мл)
Фіг бА, 80 Пацієнт З -- ДАРА 60-- ДАРА я ПТРК де 97, 40 ссс1в---- 86 У сл и « - 0 0 001.0 1. 10 -207 Даратумумаб (мкг/мл) Ф ДАРА Пацієнт 4 801-щ- ДАРА я ПТРК в-во. д -2- 60 и м: и - 40 и с 20 г; « 0 0 001 01. 1 10 --0- Даратумумаб (мкг/мл)
Фіг. 68. Пацієнт 7 804-е- ДАРА з. ДАРА ПТРК .- о. 60 й " 8, 40 ) - 0 ; 2 у с с ди 0 0 0,01 0/1 1 10 -20 Даратумумаб (мкг/мл) 80 Пацієнт 8 4- ДАРА 60-38: ДАРА я ПТРК єв 40 ай --- Й У жи 20 М « и 0 тт 0 091 01 1 10 -20 Даратумумаб (мкг/мл)
Фіг 6. 80 Пацієнт 9 4- ДАРА 60--в- ДАРА я ПТРК Те що. 2, 40 ит ав---- й 2 20 , іх 2 0 о 0,01 0 1 10 -20- Даратумумаб (мкг/мл) во Пацієнт 10 4- ДАРА 604-а- ДАРА я ПТРК 2 40 я со 20 о НЕ. їй 0 081 0-1 10 -20- Даратумумаб (мкг/мл)
«нг 60. 8о Пацієнт 14 - ДАРА 604-- ДАРА 5 ПТРК 2, 40 - ей 20 ж-- тт В со ; -- -щ- « ве ін о їй 0 0,1 1 10 -20 Даратумумаб (мкг/мл) 80 Пацієнт 15 -- ДАРА 6о-43- ДАРА я ПТРК їй 40 од --- й - у 0 4 В) 0,01 0,1 1 10 -20 Даратумумаб (мкг/мл)
«ріг, ОБ. 80 Пацієнт 16 -4- ДАРА 604: ДАРА я ПТРК пить шщ- зо р 0020 її «С р 0 2 о 0,01 01 1 10 -20 Даратумумаб (мкг/мл) 80 Пацієнт 17 Ф- ДАРА 60--йш- ДАРА я ПТРК с ------' 85, 40 ж с 20 р « г о - 0 001 01. 1 10 -20- Даратумумаб (мкг/мл)
Фіг. бЕ. 80 Пацієнт18 9- ДАРА А 604-- ДАРА я ПТРК - о -ьж40 і ---- ж.
З тя о ще 0 001 0 10 -0- Даратумумаб (мкг/мл) Фіг 7. 3000 2000 е о І о | | | "НІ ПТРК: сжок виводом ов ов ов овес Пацієнт: 1 2 3 4 5 6 7 8 8 10 11 12 13 14 15 16 17 18
«ріг.
ЗА,
ЕРМІВ226 -- СОБ5 воо я-к- СО59 700 -- СО46 во БО
8 Об 400 300 200 100 «--т й тк - «ПН ль 0 0 25 5 10 25 ПТРК (нм) ЕРМІВ2?6 БО «- сОББ З як СО59 90 - СО46 о во ш Гея го 5 7 Ся я 8 о 8 ве ОЇ у т т о У- 0 25 5 10 25 ПТРК (НМ)
Фіг, 88. 600 ума -е- СО55 5О0 ж-- СО59 чк СО46 400 о 25 300 200 100 і 5-5. я о 025 5 10 25 ПТРК (нм) х ме з 100 -- СО55 90 як СОБО ш во - СО46 ча о щДф (70 х Бо 5 БО Іс 8 5 - о Ве 0 2,5 5 10 25 ПТРК (НМ)
Фіг ВС. ех 1800 15003 З - 1200 е 900 -- СОББ ОЗ 200 -- СОБО - СО46 100 Єс- 24 0 02,5 5 10. 25 ПТРК (НМ) з хв1 115) 5100 Е 90 о ж во 20 «- СОББ5 : лю СОБО о во - СО46 2 БО 49 б во 40
01. З. - - (--Ф--- 02,55 5 10 25 ПТРК (НМ)
Фіг. ЗА, А- 2 (-- й о з. 9 200 з о п вид контрольний ПТРК, розчинник, 48 год 48 год
Фіг. 98. 150 " ж і о 100 Та о о плаща в щ п контрольний ПТРК, розчинник, 48 год 48 год
Фіг. 9С. в а Я
- я. оо Зо п контрольний ПТРК, розчинник, 48 год 48 год
Фіг. ІА. щі 120 1000 ше 00 У о о вав о 400 ло 0 ПТРК: сжсй сани я пйн сіни сіні св дн зда ія ія Пацієнт: 1 2 З 4 й 6 7 8 9 4013 42 13 44 15 16
Фіг 108.
200 (9 м я яв) о 8 гу 100 І | ' ПТРК: сло ся синю йно тку зн зни ню ши сою дих жижи іа жи дж я Пацієнт: 4 2 3 4 6 й 7 8 9 1011 42 13 14 46 18 біг 10С. водо не ; о 4600 А о ве О 4000 во ШО МНН ПТРК: дес І Пацієнт: 14 2 3 4 Б Я 7 8 9 1011 1213 14 16 16 Фіг 11. 150000 5, т-» Е 5, 100000 Б - КОНТроль з - ПТРК БОООО - ДАРА я ха як ПТРК Я ДАРА Я й о 21 28 35 42 49 56 дні
UAA201703276A 2014-09-09 2015-09-08 Вид комбінованої терапії з застосуванням антитіла до cd38 UA122212C2 (uk)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462047877P 2014-09-09 2014-09-09
US201462087287P 2014-12-04 2014-12-04
PCT/US2015/048899 WO2016040294A2 (en) 2014-09-09 2015-09-08 Combination therapies with anti-cd38 antibodies

Publications (1)

Publication Number Publication Date
UA122212C2 true UA122212C2 (uk) 2020-10-12

Family

ID=55436472

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
UAA201703276A UA122212C2 (uk) 2014-09-09 2015-09-08 Вид комбінованої терапії з застосуванням антитіла до cd38

Country Status (26)

Country Link
US (2) US20160067205A1 (uk)
EP (1) EP3191187B1 (uk)
JP (2) JP6707531B2 (uk)
KR (1) KR102586588B1 (uk)
CN (1) CN108064182B (uk)
AU (1) AU2015315396B2 (uk)
BR (1) BR112017004614A2 (uk)
CA (1) CA2960494C (uk)
CL (1) CL2017000559A1 (uk)
CR (1) CR20170086A (uk)
EA (1) EA035979B1 (uk)
EC (1) ECSP17021175A (uk)
ES (1) ES2890669T3 (uk)
GT (1) GT201700048A (uk)
HK (1) HK1255599A1 (uk)
IL (1) IL251033B (uk)
MA (1) MA40608A (uk)
MX (1) MX2017003115A (uk)
MY (1) MY192918A (uk)
NI (1) NI201700027A (uk)
PE (1) PE20170676A1 (uk)
PH (1) PH12017500442A1 (uk)
SG (1) SG11201701867SA (uk)
UA (1) UA122212C2 (uk)
WO (1) WO2016040294A2 (uk)
ZA (1) ZA201702483B (uk)

Families Citing this family (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RS59399B1 (sr) * 2005-03-23 2019-11-29 Genmab As Antitela protiv cd38 za lečenje multiplog mijeloma
EP1914242A1 (en) * 2006-10-19 2008-04-23 Sanofi-Aventis Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
EP3613774A1 (en) 2010-06-09 2020-02-26 Genmab A/S Antibodies against human cd38
WO2014110601A1 (en) 2013-01-14 2014-07-17 Xencor, Inc. Novel heterodimeric proteins
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US9732154B2 (en) 2014-02-28 2017-08-15 Janssen Biotech, Inc. Anti-CD38 antibodies for treatment of acute lymphoblastic leukemia
US9603927B2 (en) 2014-02-28 2017-03-28 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-CD38 antibodies
CR20160506A (es) 2014-03-28 2017-03-10 Xencor Inc Anticuerpos biespecíficos que se unen a cd38 y cd3
EP3191187B1 (en) 2014-09-09 2021-07-28 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-cd38 antibodies
DK3223845T3 (da) 2014-11-26 2021-08-16 Xencor Inc Heterodimere antistoffer, der binder cd3 og cd20
CA2968878A1 (en) 2014-11-26 2016-06-02 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cd38
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
IL307913A (en) 2014-12-04 2023-12-01 Janssen Biotech Inc Anti-CD38 antibodies for the treatment of acute myeloid leukemia
RS61668B1 (sr) 2015-05-13 2021-04-29 Morphosys Ag Lečenje multiplog mijeloma (mm)
BR112017024877A2 (pt) 2015-05-20 2019-09-17 Janssen Biotech, Inc. anticorpo anti-cd38 e seu uso no tratamento de amiloidose de cadeia leve e outras malignidades hematológicas positivas para cd38
CR20170587A (es) 2015-06-22 2018-04-03 Janssen Biotech Inc Terapias de combinación para enfermedades malignas hematológicas con anticuerpos anti-cd38 e inhibidores de survivina
US20170044265A1 (en) 2015-06-24 2017-02-16 Janssen Biotech, Inc. Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38
US10781261B2 (en) 2015-11-03 2020-09-22 Janssen Biotech, Inc. Subcutaneous formulations of anti-CD38 antibodies and their uses
CN108472369A (zh) 2015-11-03 2018-08-31 詹森生物科技公司 抗cd38抗体的皮下制剂及其用途
CN108699136B (zh) 2015-12-07 2022-03-18 Xencor股份有限公司 结合cd3和psma的异二聚抗体
TWI724046B (zh) * 2016-04-06 2021-04-11 美商健生生物科技公司 以抗ｃｄ３８抗體與生存素抑制劑於血紅素惡性腫瘤之組合治療
WO2017218707A2 (en) 2016-06-14 2017-12-21 Xencor, Inc. Bispecific checkpoint inhibitor antibodies
TWI781108B (zh) 2016-07-20 2022-10-21 比利時商健生藥品公司 抗ｇｐｒｃ５ｄ抗體、結合ｇｐｒｃ５ｄ與ｃｄ３之雙特異性抗原結合分子及其用途
TW201823471A (zh) * 2016-10-06 2018-07-01 美商錫羅斯製藥公司 以視黃酸受體-α促效劑及抗CD38抗體治療病患之方法
EP3434692A1 (en) * 2017-07-24 2019-01-30 Encefa Compounds which specifically binds to cd38 for use in the treatment of neurodegenerative diseases
WO2019035938A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Elstar Therapeutics, Inc. MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF
US11618787B2 (en) 2017-10-31 2023-04-04 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating high risk multiple myeloma
WO2019094626A1 (en) * 2017-11-08 2019-05-16 Fred Hutchinson Cancer Research Center Bispecific antibody compositions and related methods for improved pretargeted radioimunotherapies
EP3706785A4 (en) * 2017-11-10 2021-08-04 Actinium Pharmaceuticals, Inc. COMBINATION THERAPY FOR TREATMENT OF A HEMATOLOGICAL DISEASE
JP2022521773A (ja) 2019-02-27 2022-04-12 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｔｉｇｉｔ抗体と抗ｃｄ２０抗体又は抗ｃｄ３８抗体とによる処置のための投薬
AR120054A1 (es) 2019-06-10 2022-02-02 Takeda Pharmaceuticals Co Politerapias con anticuerpos de cd-38
GB201916150D0 (en) * 2019-11-06 2019-12-18 Univ Of Ireland Galway Treatment of multiple myeloma
US20220389103A1 (en) 2019-11-06 2022-12-08 Genentech, Inc. Diagnostic and therapeutic methods for treatment of hematologic cancers
US11919956B2 (en) 2020-05-14 2024-03-05 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (PSMA) and CD3
AU2021329378A1 (en) 2020-08-19 2023-03-23 Xencor, Inc. Anti-CD28 compositions
WO2022076462A1 (en) 2020-10-05 2022-04-14 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
CN117157319A (zh) 2021-03-09 2023-12-01 Xencor股份有限公司 结合cd3和cldn6的异二聚抗体
WO2022192586A1 (en) 2021-03-10 2022-09-15 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and gpc3
TW202321308A (zh) 2021-09-30 2023-06-01 美商建南德克公司 使用抗ｔｉｇｉｔ抗體、抗ｃｄ３８抗體及ｐｄ—１軸結合拮抗劑治療血液癌症的方法
WO2023191816A1 (en) 2022-04-01 2023-10-05 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2023219613A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2024015897A1 (en) 2022-07-13 2024-01-18 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2024020432A1 (en) 2022-07-19 2024-01-25 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies

Family Cites Families (118)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4683195A (en) 1986-01-30 1987-07-28 Cetus Corporation Process for amplifying, detecting, and/or-cloning nucleic acid sequences
DE3785186T2 (de) 1986-09-02 1993-07-15 Enzon Lab Inc Bindungsmolekuele mit einzelpolypeptidkette.
HUT53672A (en) 1988-02-25 1990-11-28 Gen Hospital Corp Quick immunoselective cloning process
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
US6172197B1 (en) 1991-07-10 2001-01-09 Medical Research Council Methods for producing members of specific binding pairs
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
IE912466A1 (en) 1990-07-13 1992-01-15 Gen Hospital Corp Rapid immunoselection cloning method
US5932448A (en) 1991-11-29 1999-08-03 Protein Design Labs., Inc. Bispecific antibody heterodimers
ATE463573T1 (de) 1991-12-02 2010-04-15 Medimmune Ltd Herstellung von autoantikörpern auf phagenoberflächen ausgehend von antikörpersegmentbibliotheken
EP0672142B1 (en) 1992-12-04 2001-02-28 Medical Research Council Multivalent and multispecific binding proteins, their manufacture and use
AU6123894A (en) 1993-01-29 1994-08-15 Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Modulation of physiological responses of lymphocytes by cd38 or antibodies thereto
GB9424449D0 (en) 1994-12-02 1995-01-18 Wellcome Found Antibodies
US5731168A (en) 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
AUPO591797A0 (en) 1997-03-27 1997-04-24 Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation High avidity polyvalent and polyspecific reagents
WO1998016245A1 (fr) 1996-10-15 1998-04-23 Shionogi & Co., Ltd. Procede de determination d'un auto-anticorps
ES2191827T3 (es) 1996-10-17 2003-09-16 Immunomedics Inc Conjugado de toxina no antigenica y proteina de fusion de un sistema receptor de penetracion intracelular.
WO2000006194A2 (en) 1997-02-05 2000-02-10 Biotransplant, Inc. Depletion of cells responsible for antibody-mediated graft rejection
WO1998050435A1 (en) 1997-05-02 1998-11-12 The Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Immunotoxins, comprising an onc protein, directed against malignant cells
CA2329940A1 (en) 1998-06-05 1999-12-09 Mayo Foundation For Medical Education And Research Use of genetically engineered antibodies to cd38 to treat multiple myeloma
US7223397B1 (en) 1999-01-07 2007-05-29 Research Development Foundation Potentiation of anti-CD38-Immunotoxin cytotoxicity
US7183387B1 (en) 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US6737056B1 (en) 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US7829693B2 (en) 1999-11-24 2010-11-09 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting expression of a target gene
FR2807767B1 (fr) 2000-04-12 2005-01-14 Lab Francais Du Fractionnement Anticorps monoclonaux anti-d
AU6541801A (en) 2000-06-22 2002-01-02 Idec Pharma Corp Bispecific fusion protein and method of use for enhancing effector cell killing of target cells
EP1174440A1 (en) 2000-07-19 2002-01-23 U-BISys B.V. A selectively-expressed epitope on the human CD38 molecule detected by a phage display library-derived human scFv antibody fragment
US6955884B2 (en) 2000-10-17 2005-10-18 Trudeau Institute, Inc. Methods for identifying compounds that inhibit CD38 activity
US20070042436A1 (en) 2000-10-17 2007-02-22 Lund Frances E CD38 modulated chemotaxis
US6833441B2 (en) 2001-08-01 2004-12-21 Abmaxis, Inc. Compositions and methods for generating chimeric heteromultimers
US20040166490A1 (en) 2002-12-17 2004-08-26 Morris David W. Novel therapeutic targets in cancer
CA2489004C (en) * 2002-06-13 2013-01-08 Crucell Holland B.V. Agonistic binding molecules to the human ox40 receptor
EP2405015B1 (en) 2003-03-05 2016-01-06 Halozyme, Inc. Soluble hyaluronidase glycoprotein (sHASEGP), process for preparing the same, uses and pharmaceutical compositions comprising thereof
RS20181002A1 (sr) 2003-05-30 2018-12-31 Genentech Inc Tretman sa anti-vegf antitelima
JP4794301B2 (ja) 2003-06-11 2011-10-19 中外製薬株式会社 抗体の製造方法
US7902338B2 (en) 2003-07-31 2011-03-08 Immunomedics, Inc. Anti-CD19 antibodies
US20070031406A1 (en) 2003-10-22 2007-02-08 Zand Martin S Anti-thymocyte antiserum and use thereof to trigger b cell apoptosis
ES2346978T3 (es) 2003-11-04 2010-10-22 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Uso de anticuerpos monoclonantes anti-cd40 antagonistas para el tratamiento del mieloma multiple.
ES2378767T3 (es) * 2003-12-23 2012-04-17 Crucell Holland B.V. Molécula de unión humana contra CD1a
US8263746B2 (en) 2004-02-06 2012-09-11 Morphosys Ag Anti-CD38 human antibodies and uses thereof
ES2541436T3 (es) 2004-02-06 2015-07-20 Morphosys Ag Anticuerpos humanos anti-CD38 y usos para ellos
RS59399B1 (sr) 2005-03-23 2019-11-29 Genmab As Antitela protiv cd38 za lečenje multiplog mijeloma
AU2006232287B2 (en) 2005-03-31 2011-10-06 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods for producing polypeptides by regulating polypeptide association
EP2799451A1 (en) 2005-05-24 2014-11-05 MorphoSys AG Generation and profiling of fully human HuCAL GOLD®-derived therapeutic antibodies specific for human CD38
JP5362359B2 (ja) 2005-10-12 2013-12-11 モルフォシス アーゲー ヒトＣＤ３８に特異的な完全ヒトＨｕＣＡＬＧＯＬＤ由来の治療抗体の生成とプロファイリング
KR20080079301A (ko) 2005-12-09 2008-08-29 시애틀 지네틱스, 인크. Ｃｄ４０ 결합제를 이용하는 방법
PL1999154T3 (pl) 2006-03-24 2013-03-29 Merck Patent Gmbh Skonstruowane metodami inżynierii heterodimeryczne domeny białkowe
JP2009541275A (ja) 2006-06-22 2009-11-26 ノボ・ノルデイスク・エー／エス 二重特異性抗体の生産
SI2049109T1 (sl) 2006-08-02 2016-04-29 Sunesis Pharmaceuticals, Inc. Kombinirana uporaba(+)-1,4-dihidro-7-((3s,4s)-3-metoksi-4-(metilamino)- 1-pirolidinil)-4-okso-1-(2-tiazolil)-1,8-naftiridin-3-karboksilne kisline in citarabina (ara-c) za zdravljenje levkemije
WO2008073160A2 (en) 2006-08-17 2008-06-19 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Methods for converting or inducing protective immunity
LT2081595T (lt) 2006-09-26 2019-07-10 Genmab A/S Anti-cd38 plius kortikosteroidai, plius nekortikosteroidinis chemoterapinis agentas, skirti vėžio gydymui
EP1914242A1 (en) 2006-10-19 2008-04-23 Sanofi-Aventis Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
US20080226635A1 (en) 2006-12-22 2008-09-18 Hans Koll Antibodies against insulin-like growth factor I receptor and uses thereof
US7618992B2 (en) 2006-12-29 2009-11-17 Astellas Pharma Inc. Method of treating cancer by co-administration of anticancer agents
US9212230B2 (en) 2007-03-29 2015-12-15 Genmab A/S Bispecific antibodies and methods for production thereof
AU2008260445A1 (en) 2007-06-01 2008-12-11 Biogen Idec Ma Inc. Cripto binding molecules
US20090076249A1 (en) * 2007-09-19 2009-03-19 Michel De Weers Antibodies against CD38 for treatment of multiple myeloma
US8748356B2 (en) 2007-10-19 2014-06-10 Janssen Biotech, Inc. Methods for use in human-adapting monoclonal antibodies
MX2010005099A (es) 2007-11-09 2010-05-27 Novartis Ag Usos de anticuerpos anti-cd40.
EP2237798A2 (en) 2007-12-12 2010-10-13 Imperial Innovations Limited Methods
ES2564523T3 (es) 2007-12-19 2016-03-23 Janssen Biotech, Inc. Diseño y generación de bibliotecas de presentación en fago por pIX de novo humanas mediante fusión con pIX o pVII, vectores, anticuerpos y métodos
SI2235064T1 (sl) 2008-01-07 2016-04-29 Amgen Inc. Metoda za izdelavo heterodimernih molekul - protitelesa fc z uporabo elektrostatičnih usmerjevalnih učinkov
JP2011517320A (ja) 2008-03-03 2011-06-02 ダイアックス コーポレーション メタロプロテアーゼ９結合タンパク質およびメタロプロテアーゼ２結合タンパク質
DK2268310T3 (en) 2008-03-25 2016-08-15 Roche Glycart Ag APPLICATION OF A TYPE II ANTI-CD20 ANTIBODY WITH ENHANCED ANTIBODY-DEPENDENT CELLULAR CYTOTOXICITY (ADCC) IN COMBINATION WITH CYCLOPHOSPHAMIDE, VINCRISTIN AND DOXORUBICINE TO TREAT NON-HODGINE
KR101647932B1 (ko) 2008-04-14 2016-08-11 할로자임, 아이엔씨 히알루로난 관련 질환 및 상태 치료용 변형된 히알루로니다제 및 그 용도
EP2282769A4 (en) 2008-04-29 2012-04-25 Abbott Lab DUAL VARIABLE DOMAIN IMMUNOGLOBULINS AND ITS USES
ME02363B (me) 2008-11-07 2016-06-20 Amgen Res Munich Gmbh Liječenje akutne limfoblastične leukemije
EP2191840A1 (en) 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and melphalan
EP2191842A1 (en) 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and cytarabine
EP2191841A1 (en) 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and vincristine
EP2191843A1 (en) 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and cyclophosphamide
CN102459346B (zh) 2009-04-27 2016-10-26 昂考梅德药品有限公司 制造异源多聚体分子的方法
PL2429524T3 (pl) 2009-05-14 2020-08-24 Ambit Biosciences Corporation Suszony rozpyłowo preparat AC220
DK2477603T3 (en) 2009-09-17 2016-06-13 Baxalta Inc STABLE CO-DEVELOPMENT OF hyaluronidase and Immunoglobulin, AND METHODS OF USE THEREOF
JP5898082B2 (ja) 2009-10-07 2016-04-06 マクロジェニクス，インコーポレーテッド フコシル化程度の変更により改良されたエフェクター機能を示すＦｃ領域含有ポリペプチドおよびその使用法
EP2327725A1 (en) 2009-11-26 2011-06-01 InflaRx GmbH Anti-C5a binding moieties with high blocking activity
GB201003701D0 (en) 2010-03-05 2010-04-21 Cilian Ag System for the expression of a protein
US20130137134A1 (en) 2010-03-29 2013-05-30 Ben Gurion University Of The Negev Research And Development Authority Method and system for detecting and monitoring hematological cancer
EA201201435A1 (ru) 2010-04-20 2013-04-30 Генмаб А/С ГЕТЕРОДИМЕРНЫЕ АНТИТЕЛО-Fc-СОДЕРЖАЩИЕ БЕЛКИ И СПОСОБЫ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ
EP2569337A1 (en) 2010-05-14 2013-03-20 Rinat Neuroscience Corp. Heterodimeric proteins and methods for producing and purifying them
EP3613774A1 (en) 2010-06-09 2020-02-26 Genmab A/S Antibodies against human cd38
EP2420253A1 (en) 2010-08-20 2012-02-22 Leadartis, S.L. Engineering multifunctional and multivalent molecules with collagen XV trimerization domain
DK2621531T3 (en) * 2010-09-27 2017-02-27 Morphosys Ag ANTI-CD38 ANTIBODY AND LENALIDOMIDE OR BORTEZOMIB FOR TREATMENT OF MULTIPLE MYELOM AND NHL
MX352929B (es) 2010-11-05 2017-12-13 Zymeworks Inc DISEÑO DE ANTICUERPOS HETERODIMÉRICOS ESTABLES CON MUTACIONES EN EL DOMINIO Fc.
US9358233B2 (en) 2010-11-29 2016-06-07 Boehringer Ingelheim International Gmbh Method for treating acute myeloid leukemia
UA112170C2 (uk) 2010-12-10 2016-08-10 Санофі Протипухлинна комбінація, що містить антитіло, яке специфічно розпізнає cd38, і бортезоміб
CL2013001944A1 (es) 2010-12-30 2014-09-12 Takeda Pharmaceutical Anticuerpo aislado que se une especificamente a cd38 humana y cd38 de cinomolgo; acido nucleico que lo codifica; celula huesped; metodo de produccion; y su uso para tratar una enfermedad autoinmune.
JOP20210044A1 (ar) 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
ES2543569T3 (es) 2011-03-23 2015-08-20 Amgen Inc. Inhibidores duales tricíclicos condensados de CDK 4/6 y FLT3
EP2561868A1 (en) 2011-08-24 2013-02-27 Anton Bernhard Van Oosten Pharmaceutical compositions comprising hydroxychloroquine (HCQ), Curcumin, Piperine/BioPerine and uses thereof in the medical field
JP6184965B2 (ja) 2011-10-28 2017-08-23 テバ・ファーマシューティカルズ・オーストラリア・ピーティワイ・リミテッド ポリペプチド構築物およびその使用
SG11201407190TA (en) 2012-05-15 2014-12-30 Bristol Myers Squibb Co Cancer immunotherapy by disrupting pd-1/pd-l1 signaling
US9682143B2 (en) 2012-08-14 2017-06-20 Ibc Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for inducing immune response to disease
JP6426093B2 (ja) * 2012-09-25 2018-11-28 モルフォシス・アーゲー 組み合わせ及びその使用
EP2914302B1 (en) 2012-11-05 2017-01-04 MorphoSys AG Radiolabelled antibody and uses thereof
WO2014142220A1 (ja) 2013-03-13 2014-09-18 アステラス製薬株式会社 抗腫瘍剤
US20140271644A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Combination/adjuvant therapy for wt-1-positive disease
AU2013388126B2 (en) 2013-04-29 2019-03-07 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd. Anti-CD38 antibodies and fusions to attenuated interferon alpha-2b
US20140356318A1 (en) 2013-05-28 2014-12-04 Israel Barken Adoptive cell therapy with specific regulatory lymphocytes
AU2014290186A1 (en) 2013-07-15 2016-02-04 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Medical uses of CD38 agonists
BR112016009403A2 (pt) 2013-10-31 2017-09-19 Sanofi Sa Anticorpos anti-cd38 específicos para tratamento de cânceres humanos
EP3066125A2 (en) 2013-11-06 2016-09-14 Boehringer Ingelheim International GmbH Pharmaceutical combinations comprising cd33 antibodies and de-methylating agents
US9732154B2 (en) 2014-02-28 2017-08-15 Janssen Biotech, Inc. Anti-CD38 antibodies for treatment of acute lymphoblastic leukemia
US9603927B2 (en) 2014-02-28 2017-03-28 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-CD38 antibodies
US10106620B2 (en) 2014-06-16 2018-10-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Blocking CD38 using anti-CD38 F(ab′)2 to protect NK cells
WO2015195555A1 (en) 2014-06-16 2015-12-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Blocking cd38 using anti-cd38 antibody conjugated to protein g to protect nk cells
US9499514B2 (en) 2014-07-11 2016-11-22 Celgene Corporation Antiproliferative compounds and methods of use thereof
EP3191187B1 (en) 2014-09-09 2021-07-28 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-cd38 antibodies
IL307913A (en) 2014-12-04 2023-12-01 Janssen Biotech Inc Anti-CD38 antibodies for the treatment of acute myeloid leukemia
BR112017024877A2 (pt) 2015-05-20 2019-09-17 Janssen Biotech, Inc. anticorpo anti-cd38 e seu uso no tratamento de amiloidose de cadeia leve e outras malignidades hematológicas positivas para cd38
CR20170587A (es) 2015-06-22 2018-04-03 Janssen Biotech Inc Terapias de combinación para enfermedades malignas hematológicas con anticuerpos anti-cd38 e inhibidores de survivina
US20160376373A1 (en) 2015-06-24 2016-12-29 Janssen Biotech, Inc. Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38
US20170044265A1 (en) 2015-06-24 2017-02-16 Janssen Biotech, Inc. Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38
US20170121417A1 (en) 2015-11-03 2017-05-04 Janssen Biotech, Inc. Subcutaneous Formulations of Anti-CD38 Antibodies and Their Uses
CN108472369A (zh) 2015-11-03 2018-08-31 詹森生物科技公司 抗cd38抗体的皮下制剂及其用途
US20190233533A1 (en) 2016-06-28 2019-08-01 Umc Utrecht Holding B.V. Treatment Of IgE-Mediated Diseases With Antibodies That Specifically Bind CD38
US20180117150A1 (en) 2016-11-01 2018-05-03 Janssen Biotech, Inc. Combination Therapies for CD38-Positive Hematological Malignances with ANTI-CD38 Antibodies and Cyclophosphamide
US11618787B2 (en) 2017-10-31 2023-04-04 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating high risk multiple myeloma

Also Published As

Publication number Publication date
CA2960494C (en) 2022-11-08
CR20170086A (es) 2017-05-22
ECSP17021175A (es) 2018-07-31
KR102586588B1 (ko) 2023-10-06
JP2017528462A (ja) 2017-09-28
MX2017003115A (es) 2017-11-17
HK1255599A1 (zh) 2019-08-23
AU2015315396A1 (en) 2017-03-30
PE20170676A1 (es) 2017-05-22
CA2960494A1 (en) 2016-03-17
WO2016040294A2 (en) 2016-03-17
GT201700048A (es) 2019-08-21
IL251033B (en) 2021-08-31
EP3191187A2 (en) 2017-07-19
BR112017004614A2 (pt) 2018-02-27
JP2020143108A (ja) 2020-09-10
ZA201702483B (en) 2019-09-25
NI201700027A (es) 2017-06-22
EA035979B1 (ru) 2020-09-08
MY192918A (en) 2022-09-15
CN108064182B (zh) 2021-09-03
IL251033A0 (en) 2017-04-30
EP3191187B1 (en) 2021-07-28
PH12017500442A1 (en) 2017-07-31
SG11201701867SA (en) 2017-04-27
US10604580B2 (en) 2020-03-31
KR20170054442A (ko) 2017-05-17
JP6707531B2 (ja) 2020-06-10
EP3191187A4 (en) 2018-04-04
ES2890669T3 (es) 2022-01-21
AU2015315396B2 (en) 2020-10-08
CL2017000559A1 (es) 2018-02-16
US20170107295A1 (en) 2017-04-20
WO2016040294A3 (en) 2016-06-02
EA201790548A1 (ru) 2017-09-29
CN108064182A (zh) 2018-05-22
MA40608A (fr) 2016-03-17
US20160067205A1 (en) 2016-03-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA122212C2 (uk) Вид комбінованої терапії з застосуванням антитіла до cd38
UA122961C2 (uk) Спосіб лікування суб’єкта, який має рецидивуючий або рефрактерний гострий лімфобластний лейкоз
UA125115C2 (uk) Спосіб лікування суб'єкта, який має множинну мієлому (мм)
UA120926C2 (uk) Спосіб лікування суб'єкта, який має cd38-позитивне злоякісне гематологічне новоутворення
UA120102C2 (uk) АНТИТІЛО ДО CD79b І ЙОГО ЗАСТОСУВАННЯ
UA125717C2 (uk) Конструкція антитіла до flt3 і cd3
CN107530402A (zh) 抗lilrb抗体及其在检测和治疗癌症中的用途
UA124143C2 (uk) Антитіла до cd38 для лікування амілоїдозу, викликаного відкладеннями легких ланцюгів імуноглобулінів, і інших cd38-позитивних злоякісних гематологічних новоутворень
UA124799C2 (uk) Спосіб пригнічення імунної відповіді з використанням антитіла, що специфічно зв’язує cd38
UA122395C2 (uk) Антитіло проти tigit
UA120753C2 (uk) Біспецифічне антитіло до сd3 та cd20
UA127888C2 (uk) Композиція, що містить антитіло проти lag3 людини
UA123697C2 (uk) Спосіб лікування гострого мієлоїдного лейкозу шляхом застосування антитіла до cd38
UA121112C2 (uk) Антитіло до ox40 та його застосування
UA118013C2 (uk) Комбінована терапія з використанням антитіла до клаудину 18.2 для лікування раку
CA2743305A1 (en) Anti-cxcr1 compositions and methods
CN102251013A (zh) 一个识别肿瘤起始细胞的抗体和抗原及其应用
CA2644594A1 (en) Diagnosis and treatment of prostate cancer
UA128081C2 (uk) Фармацевтична комбінація, яка містить антитіло до ly75, для лікування дифузної великоклітинної в-клітинної лімфоми
US20230227565A1 (en) Method for Treating CD127-Positive Cancers by Administering an Anti-CD127 Agent
US11891447B2 (en) Method for treating cancer using CD14 antagonists
KR20230025691A (ko) 삼중 음성 유방암을 치료하기 위한 방법과 조성물
WO2022248940A1 (en) Method for treating cd127-positive cancers by administering an anti-cd127 agent
EA040269B1 (ru) Антитела к cd38 для лечения амилоидоза легких цепей и прочих cd38-положительных гематологических злокачественных опухолей