SK287689B6 - Použitie molekuly oligodeoxynukleovej kyseliny na výrobu imunostimulačnej farmaceutickej kompozície a farmaceutický prípravok - Google Patents
Použitie molekuly oligodeoxynukleovej kyseliny na výrobu imunostimulačnej farmaceutickej kompozície a farmaceutický prípravok Download PDFInfo
- Publication number
- SK287689B6 SK287689B6 SK1815-2002A SK18152002A SK287689B6 SK 287689 B6 SK287689 B6 SK 287689B6 SK 18152002 A SK18152002 A SK 18152002A SK 287689 B6 SK287689 B6 SK 287689B6
- Authority
- SK
- Slovakia
- Prior art keywords
- monothiophosphate
- monophosphate
- odn
- deoxyinosine
- deoxycytosine
- Prior art date
Links
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 title claims abstract description 20
- 229940046166 oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 title claims description 67
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract description 18
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical compound OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 150000004712 monophosphates Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- RPFPNGBGDKGFRI-XLPZGREQSA-N 9-[(2r,4s,5r)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-2-methyl-3h-purin-6-one Chemical compound C12=NC(C)=NC(O)=C2N=CN1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 RPFPNGBGDKGFRI-XLPZGREQSA-N 0.000 claims abstract description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 9
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims abstract description 5
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 4
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 4
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- FERYXNKLCFJNMG-QJPTWQEYSA-N (2r,3s,5r)-2-(hydroxymethyl)-5-[6-(3-methylbut-3-enylamino)purin-9-yl]oxolan-3-ol Chemical compound C1=NC=2C(NCCC(=C)C)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 FERYXNKLCFJNMG-QJPTWQEYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- COVHWGAKPGOZBI-QJPTWQEYSA-N [(2r,3s,5r)-3-hydroxy-5-[6-(3-methylbut-3-enylamino)purin-9-yl]oxolan-2-yl]methyl dihydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(NCCC(=C)C)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 COVHWGAKPGOZBI-QJPTWQEYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 61
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 50
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 50
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 50
- 101500027983 Rattus norvegicus Octadecaneuropeptide Proteins 0.000 claims description 28
- 229920000724 poly(L-arginine) polymer Polymers 0.000 claims description 27
- VGONTNSXDCQUGY-RRKCRQDMSA-N 2'-deoxyinosine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(N=CNC2=O)=C2N=C1 VGONTNSXDCQUGY-RRKCRQDMSA-N 0.000 claims description 21
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 21
- VGONTNSXDCQUGY-UHFFFAOYSA-N desoxyinosine Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 VGONTNSXDCQUGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 claims description 10
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 9
- GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N dTMP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N 0.000 claims description 8
- 108010093488 His-His-His-His-His-His Proteins 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 6
- PHNGFPPXDJJADG-RRKCRQDMSA-N 2'-deoxyinosine-5'-monophosphate Chemical compound O1[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C[C@@H]1N1C(N=CNC2=O)=C2N=C1 PHNGFPPXDJJADG-RRKCRQDMSA-N 0.000 claims description 5
- -1 nucleoside monothiophosphate Chemical class 0.000 claims description 5
- 229920002851 polycationic polymer Polymers 0.000 claims description 5
- 108700042778 Antimicrobial Peptides Proteins 0.000 claims description 4
- 102000044503 Antimicrobial Peptides Human genes 0.000 claims description 4
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 4
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 4
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 claims description 4
- WKKCYLSCLQVWFD-UHFFFAOYSA-N 1,2-dihydropyrimidin-4-amine Chemical compound N=C1NCNC=C1 WKKCYLSCLQVWFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- KHWCHTKSEGGWEX-RRKCRQDMSA-N 2'-deoxyadenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 KHWCHTKSEGGWEX-RRKCRQDMSA-N 0.000 claims description 3
- YKBGVTZYEHREMT-KVQBGUIXSA-N 2'-deoxyguanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 YKBGVTZYEHREMT-KVQBGUIXSA-N 0.000 claims description 3
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 108010011110 polyarginine Proteins 0.000 claims description 3
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 claims description 3
- LTFMZDNNPPEQNG-KVQBGUIXSA-N 2'-deoxyguanosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 LTFMZDNNPPEQNG-KVQBGUIXSA-N 0.000 claims description 2
- MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 2'-deoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 0.000 claims description 2
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 claims description 2
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 claims description 2
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 claims description 2
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 claims description 2
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 claims description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 claims description 2
- MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N desoxyuridine Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 claims description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 claims description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 2
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 claims description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 2
- ZWQNEFFHBSGFHV-HKMNZKMDSA-N (E)-3-[(7S)-7-amino-8-oxo-5,6,7,9-tetrahydropyrido[2,3-b]azepin-3-yl]-N-methyl-N-[(3-methyl-1-benzofuran-2-yl)methyl]prop-2-enamide Chemical compound N[C@H]1CCC2=C(NC1=O)N=CC(=C2)/C=C/C(=O)N(CC=1OC2=C(C=1C)C=CC=C2)C ZWQNEFFHBSGFHV-HKMNZKMDSA-N 0.000 claims 1
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 claims 1
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 claims 1
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 claims 1
- POIUWJQBRNEFGX-XAMSXPGMSA-N cathelicidin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C1=CC=CC=C1 POIUWJQBRNEFGX-XAMSXPGMSA-N 0.000 claims 1
- 102000014509 cathelicidin Human genes 0.000 claims 1
- 108060001132 cathelicidin Proteins 0.000 claims 1
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 51
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 47
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 46
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 30
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 30
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 30
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 29
- 229940046168 CpG oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 27
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 24
- 102100031413 L-dopachrome tautomerase Human genes 0.000 description 22
- LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 3-Amino-1-methyl-5H-pyrido[4,3-b]indole Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C=C(N)N=C2C LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 101710093778 L-dopachrome tautomerase Proteins 0.000 description 21
- 101710173694 Short transient receptor potential channel 2 Proteins 0.000 description 21
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 20
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical group [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 18
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 17
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 17
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 16
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 13
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 12
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 11
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 10
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 10
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 10
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 10
- 238000012705 nitroxide-mediated radical polymerization Methods 0.000 description 10
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 10
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 10
- JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-4-amino-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-azaniumyl-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-carboxylatobutanoyl]amino]-6-azaniumy Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N 0.000 description 9
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 9
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 9
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 9
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 9
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 9
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 8
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 8
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 8
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 8
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 8
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 8
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 8
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 7
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 7
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 7
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 6
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 6
- 210000005006 adaptive immune system Anatomy 0.000 description 6
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 6
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 6
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 210000002683 foot Anatomy 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 6
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 6
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 6
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 6
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 5
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 5
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 5
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 5
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 5
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 5
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 5
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 4
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 4
- 101000608782 Mus musculus Tyrosinase Proteins 0.000 description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 4
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 4
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 4
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 4
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 3
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 3
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 3
- 238000011510 Elispot assay Methods 0.000 description 3
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical group C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 3
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 3
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 3
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 3
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 3
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 3
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 3
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 3
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 101000609762 Gallus gallus Ovalbumin Proteins 0.000 description 2
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 2
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 2
- 101150106931 IFNG gene Proteins 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 2
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical group O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 125000000548 ribosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 2
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 2
- 230000002483 superagonistic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDRISBUVHBMJEF-MROZADKFSA-N 5-deoxy-D-ribose Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O WDRISBUVHBMJEF-MROZADKFSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 108700031308 Antennapedia Homeodomain Proteins 0.000 description 1
- 102000014133 Antimicrobial Cationic Peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010050820 Antimicrobial Cationic Peptides Proteins 0.000 description 1
- 241000228257 Aspergillus sp. Species 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 102000000541 Defensins Human genes 0.000 description 1
- 108010002069 Defensins Proteins 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 102000002227 Interferon Type I Human genes 0.000 description 1
- 108010014726 Interferon Type I Proteins 0.000 description 1
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 1
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 1
- 229920000057 Mannan Polymers 0.000 description 1
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 description 1
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 1
- 108091081548 Palindromic sequence Proteins 0.000 description 1
- 201000005702 Pertussis Diseases 0.000 description 1
- 102100029251 Phagocytosis-stimulating peptide Human genes 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000224016 Plasmodium Species 0.000 description 1
- 241001442539 Plasmodium sp. Species 0.000 description 1
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 1
- 108091036414 Polyinosinic:polycytidylic acid Proteins 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- 241000714474 Rous sarcoma virus Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- 206010044248 Toxic shock syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000650 Toxic shock syndrome Toxicity 0.000 description 1
- 108010084754 Tuftsin Proteins 0.000 description 1
- 241000607626 Vibrio cholerae Species 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 201000011529 cardiovascular cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000002975 chemoattractant Substances 0.000 description 1
- 230000003399 chemotactic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000991 chicken egg Anatomy 0.000 description 1
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 1
- 229940028617 conventional vaccine Drugs 0.000 description 1
- 230000009260 cross reactivity Effects 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 108010051081 dopachrome isomerase Proteins 0.000 description 1
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 230000006054 immunological memory Effects 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical class CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 1
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 1
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 238000003909 pattern recognition Methods 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 125000004437 phosphorous atom Chemical group 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical group 0.000 description 1
- 238000007086 side reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004611 spectroscopical analysis Methods 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-L thiosulfate(2-) Chemical group [O-]S([S-])(=O)=O DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 229940035670 tuftsin Drugs 0.000 description 1
- IESDGNYHXIOKRW-LEOABGAYSA-N tuftsin Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O IESDGNYHXIOKRW-LEOABGAYSA-N 0.000 description 1
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 229940125575 vaccine candidate Drugs 0.000 description 1
- 229940118696 vibrio cholerae Drugs 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 244000052613 viral pathogen Species 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/04—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/24—Heterocyclic radicals containing oxygen or sulfur as ring hetero atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/117—Nucleic acids having immunomodulatory properties, e.g. containing CpG-motifs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55516—Proteins; Peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55561—CpG containing adjuvants; Oligonucleotide containing adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/18—Type of nucleic acid acting by a non-sequence specific mechanism
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/315—Phosphorothioates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/33—Chemical structure of the base
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Použitie molekuly oligodeoxynukleovej kyseliny (ODN) majúcej štruktúru definovanú vzorcom (I), kde ktorýkoľvek substituent X je O alebo S; ktorýkoľvek zo zvyškov NMP je 2'- deoxynukleosid- monofosfát alebo -monotiofosfát vybraný z deoxyadenosín-, deoxyguanosín-, deoxyinosín-, deoxycytosín-, deoxyuridín-, deoxytymidín-, 2- -metyldeoxyinosín-, 5-metyldeoxycytosín-, deoxypseudouridín-, deoxyribosapurín-, 2- -aminodeoxyribosapurín- , 6-S-deoxyguanín-, 2-dimetyldeoxyguanosín- alebo N- -izopentenyldeoxyadenosín-monofosfátu, alebo -monotiofosfátu; NUC je 2'-deoxynukleosid vybraný z deoxyadenosín-, deoxyguanosín-, deoxyinosín-, deoxycytosín-, deoxyuridín-, eoxytymidín-, 2-metyldeoxyinosín-, 5-metyldeoxycytosín-, deoxypseudouridín-, deoxyribosapurín-, 2-aminodeoxyribosapurín-, 6-S-deoxyguanín-, 2-dimetyldeoxyguanosín- alebo N-izopentenyldeoxyadenosínu; a a b sú celé čísla od 0 do 100 s výhradou, že a + b je číslo medzi 4 a 150; B a E sú bežné skupiny pre 5' alebo 3' konce molekúl nukleovej kyseliny, na výrobu imunostimulačnej farmaceutickej kompozície. Imunostimulačný farmaceutický prípravok, ktorý takú ODN obsahuje.
Description
Oblasť techniky
Predkladaný vynález sa týka použitia molekuly oligodeoxynukleovej kyseliny (ODN) na výrobu imunostimulačnej farmaceutickej kompozície a farmaceutického prípravku, ktorý také molekuly ODN obsahuje.
Doterajší stav techniky
Vakcíny môžu zachrániť viac životov (a zdrojov) ako akákoľvek iná lekárska intervencia (Nossal, 1998). Vďaka celosvetovým očkovacím programom sa drasticky znížila incidencia mnohých smrteľných ochorení. Aj keď toto platí pre celý rad ochorení, napríklad tuberkulózu, záškrt, čierny kašeľ, osýpky a tetanus, pre mnoho infekčných ochorení zahŕňajúcich väčšinu vírusových infekcií, ako je napríklad AIDS, neexistujú účinné vakcíny. Neexistujú účinné vakcíny pre ďalšie ochorenia, infekčné alebo neinfekčné, vyžadujúce si každým rokom životy miliónov pacientov, ktoré zahŕňajú maláriu a nádorové ochorenia. Nanajvýš rýchlo sa vyvíjajúce baktérie a mikroorganizmy rezistentné na antibiotiká volajú po alternatívnych liečebných postupoch, kde vakcíny sú logickou voľbou. Veľká potreba vakcín je konečne tiež ilustrovaná faktom, že infekčné ochorenia, skôr ako kardiovaskulárne choroby alebo nádorové ochorenia, alebo poranenia, zostávajú najväčšou príčinou úmrtia a neschopnosti na svete (Bloom a Widdus, 1998).
Z imunologického pohľadu je dnes na poli vakcín najväčším problémom fakt, že tradičné vakcíny (a/alebo imunomodulačné zlúčeniny obsiahnuté v týchto prípravkoc)h sú navrhnuté, aby indukovali vysoké hladiny protilátok (Harrow a Lane (1988). Ale protilátky samy osebe nie sú účinné v prevencii veľkého množstva ochorení zahŕňajúcich väčšinu chorôb spôsobených vírusmi, intracelulámymi baktériami, určitými parazitmi a nádormi. Príklady takých ochorení sú, ale nie sú obmedzené na uvedený vírus HIV alebo Plasmodium spec. v prípade malárie. V počerných experimentálnych systémoch bolo preukázané, že v týchto prípadoch je zodpovedná bunková časť imunitného systému, zahŕňajúca T bunky, skôr ako časť protilátková. Preto sú potrebné nové inovačné technológie, aby sa prekonali obmedzenia konvenčných vakcín. Stred pozornosti musí byť položený na technológiách, ktoré spoľahlivo indukujú bunkový imunitný systém, vrátane antigén špecifických T buniek, ktoré rozpoznávajú molekuly na bunkách infikovaných patogénmi. Vakcíny sú ideálne navrhované tak, aby indukovali T bunky rozpoznávajúce choré a/alebo infikované bunky od buniek normálnych a súčasne protilátky sekrétované B bunkami rozpoznávajúcimi patogény v extracelulámych kompartmentoch.
Niektoré zavedené vakcíny obsahujú živé atenuované organizmy, kde existuje riziko zvratu k virulentnému divokému kmeňu. Toto môže mať životu ohrozujúce následky najmä pre imunnosuprimovaných hostiteľov. Vakcíny sú alternatívne podávané ako kombinácie antigénov odvodených od patogénov spolu so zlúčeninami, ktoré indukujú alebo zvyšujú imunitné odpovede proti týmto antigénom (tieto zlúčeniny sú bežne nazývané adjuvantné látky), pretože tieto podjednotkové vakcíny nie sú samy osebe všeobecne účinné.
Zatiaľ čo nie sú pochybnosti, že uvedené vakcíny sú cennými lekárskymi liečebnými prostriedkami, je nevýhodou, že vplyvom ich komplexity môžu byť vyvolané závažné vedľajšie účinky, napríklad k antigénom, ktoré sú obsiahnuté vo vakcíne vykazujúcej skríženú reaktivitu s molekulami exprimovanými bunkami očkovaných jedincov. Navyše je problematické splniť existujúce požiadavky regulačných autorít, napríklad Svetovej zdravotníckej organizácie (WHO), amerického Food and Drug Administration (FDA) a ich európskych náprotivkov, ktoré sa týkajú presnej špecifikácie zloženia vakcíny a mechanizmov indukcie imunity.
Bunky prezentujúce antigén patria k vrodenému imunitnému systému, ktorý sa vyvinul ako prvá obranná línia hostiteľa, a ktorý obmedzuje infekciu skoro po expozícii mikroorganizmom (Hofmann et al., 1999). Bunky vrodeného imunitného systému rozpoznávajú vzory alebo relatívne nešpecifické štruktúry exprimované na ich cieľoch, skôr ako sofistikovanejšie, špecifické štruktúry, ktoré sú rozpoznávané adaptívnym imunitným systémom (Hoffmann et al., 1999). Príklady buniek vrodeného imunitného systému sú makrofágy a dendritické bunky, ale tiež granulocyty (napríklad neutrofily), prirodzené zabíjačské bunky a ďalšie bunky. Oproti tomu bunky adaptívneho imunitného systému rozpoznávajú špecifické antigénne štruktúry zahŕňajúce peptidy v prípade T buniek a peptidy rovnako tak ako trojrozmerné štruktúry v prípade B buniek. Adaptívny imunitný systém je špecifickejší a sofistikovanejší ako vrodený imunitný systém a zlepšuje sa po opakovanej expozícii danému patogénu/antigénu. Fylogenetický je vrodený imunitný systém oveľa starší a môže byť nájdený už pri veľmi primitívnych organizmoch. Ale vrodený imunitný systém je kritický počas iniciálnej fázy antigénnej expozície, pretože navyše k tomu, že bunky vrodeného imunitného systému (bunky APC) zadržujú patogény, tiež vybavujú bunky adaptívneho imunitného systému informáciami a teda spúšťajú špecifické imunitné odpovede vedúce na zbavenie sa votrelcov. Celkovo povedané majú bunky vrodeného imunitného systému a obzvlášť APC bunky kritickú úlohu počas indukčnej fázy imunitných odpovedí prostredníctvom a) zadržením pôvodcov infekcií pomocou rozpoznávacieho systému primitívnych vzorov, a
b) vybavením buniek adaptívneho imunitného systému informáciami, čo vedie na špecifické imunitné odpovede a pamäte majúce za následok zbavenie sa vnikajúcich patogénov alebo ďalších cieľov (Roitt et al., 1998). Tieto mechanizmy môžu byť tiež dôležité na zbavenie sa alebo na zadržanie nádorových buniek.
Ako je zmienené, rozpoznávajú bunky vrodeného imunitného systému vzory exprimované na ich príslušných cieľoch. Príklady sú lipopolysacharidy (LPS) v prípade Gram negatívnych baktérií, mykobakteriálne glykolipidy, lipoteichoové kyseliny Gram pozitívnych baktérií, manany kvasníc a dvjvláknové RNA vírusov (Hoffmann et al., 1999). Navyše môžu rozpoznávať štruktúry, ako sú napríklad narušené glykozylácie proteínov na nádorových bunkách.
Nedávne nálezy opisujú DNA prvokov alebo nižších eukaryot ako ďalšie štruktúry rozpoznávané vrodeným (ale možno tiež adaptívnym) imunitným systémom cicavcov (a pravdepodobne väčšinou, ak nie všetkými stavovcami) (Krieg, 1966; Lipford et al., 1998).
Imunitný systém rozpoznáva nižšie organizmy zahŕňajúce baktérie pravdepodobne vďaka štrukturálnym a sekvenčným rozdielom medzi patogénom a hostiteľskou DNA. Cieľom sú obzvlášť krátke úseky DNA odvodené od non-stavovcov, alebo vo forme krátkych syntetických ODN obsahujúcich nemetylované cytozín-guanín dinukleotidy (CpG) v určitom kontexte báz (Krieg et al., 1995). Motívy CpG sa nachádzajú v očakávanej frekvencii v bakteriálnej DNA, ale sú oveľa menej časté v DNA stavovcov (LipLord et al., 1998; Pisetsky, 1998). Motívy CpG non-stavovcov (to je bakteriálne) nie sú navyše metylované, zatiaľ čo CpG sekvencie stavovcov metylované sú. Tieto rozdiely medzi bakteriálnou DNA a DNA stavovcov umožňujú stavovcom rozpoznávať DNA non-stavovcov ako nebezpečný signál.
Prirodzené DNA obsahujúce CpG, ODN, rovnako tak ako tiofosfátom substituované (zámena tiofosfátových rezíduí za fosfát) ODN obsahujúci CpG motívy (CpG-ODN) nie sú len silnými aktivátormi prolyferácie imunitných buniek a humorálnych imunitných odpovedí (Krieg et al., 1995), ale tiež stimulujú silné bunkové imunitné odpovede (prehľad v Lipford et al., 1998). DNA/ODN obsahujúce nemetylované CpG motívy môžu priamo aktivovať monocytové bunky (dendritické bunky, makrofágy) a B bunky. Prirodzené zabíjačské bunky nie sú pravdepodobne priamo aktivované, ale zodpovedajú na IL-12 odvodený z monocytov (interleukín 12) s veľkým zvýšením ich produkcie IFN-y (Chace et al., 1997). V dôsledku toho podporuje indukcia monocytov a NK buniek pomocou CpG DNA indukciu odpovedí Thl typu a rozvoj cytotoxických T buniek.
Je známe, že ribonukleová kyselina založená na inozíne a cytozíne, ako je polyinozínová-poylcytidylová kyselina (poly I : C), podporuje Thl-špecifické imunitné odpovede. Je známe, že stimuluje makrofágy na produkciu cytokínov, ako sú IL-Ια a IL-12 (Manetti et al., 1995), je známa tiež ako účinný induktor interferónu prvého typu (Manetti et al., 1995) a účinný stimulátor NK buniek (Cavanauah et al.. 1996).
Tento účinok bol ale prísne obmedzený na ribonukleovú kyselinu obsahujúcu inozínové a cytidínové rezíduá (W098/16247).
Skúmania výskumníkov predkladaného vynálezu ukázali, že ODN obsahujúce nemetylované CpG motívy, ktoré aj keď účinne stimulujú imunitný systém, majú základné nevýhody, obzvlášť s ohľadom na špecifitu (vysoké pozadie) a indukciu vedľajších účinkov, ako je napríklad vysoká systemická tvorba TNF-a. Je známe, že vysoké systemické uvoľňovanie TNF-a spôsobuje syndróm toxického šoku, ktorý môže spôsobiť smrť postihnutých pacientov.
Preto je cieľom predkladaného vynálezu poskytnúť vhodné nové ODN, ktoré nemajú takéto drastické vedľajšie účinky ako ODN založené na CpG sekvenciách. Je preto ďalším cieľom znížiť vedľajšie účinky farmaceutických preparátov obsahujúcich známe ODN a poskytnúť bezpečné a účinné dobre tolerované farmaceutické preparáty s účinnými imunostimulačnými vlastnosťami, ktoré sú vhodné na vakcináciu živočíchov, obzvlášť cicavcov, vrátane človeka.
Podstata vynálezu
V súlade s tým je predmetom vynálezu použitie molekuly oligodeoxynukleovej kyseliny (ODN) majúcej štruktúru definovanú vzorcom (I)
kde ktorýkoľvek substituent X je O alebo S;
ktorýkoľvek zo zvyškov NMP je 2'-deoxynukleozid-monofosfát alebo -monotiofosfát vybraný z deoxyadenozín-, deoxyguanozín-, deoxyinozín-, deoxycytozín-, deoxyuridín-, deoxytymidín-, 2-metyl-deoxyinozín-, 5-metyl-deoxycytozín-, deoxypseudouridín-, deoxyribosapurín-, 2-aminodeoxyribosapurín-, 6-S-deoxyguanín-, 2-dimetyldeoxyguanozín- alebo N-izopentenyldeoxyadenozín-monofosfátu alebo -monotiofosfátu,
NUC je 2'-deoxynukleozid vybraný z deoxyadenozín-, deoxyguanozín-, deoxyinozín-, deoxycytozín-, deoxyuridín-, deoxytymidín-, 2-metyldeoxyinozín-, 5-metyldeoxycytozín-, deoxypseudouridín-, deoxyribosapurín-, 2-aminodeoxyribosapurín-, 6-S-deoxyguanín-, 2-dimetyldeoxyguanozín- alebo N-izopentenyldeoxyadenozínu, a a b sú celé čísla od 0 do 100 výhradne, že a + b je číslo medzi 4 a 150,
B a E sú bežné skupiny pre 5' alebo 3' konce molekúl nukleovej kyseliny, na výrobu imunostimulačnej farmaceutickej kompozície.
Prekvapivo sa ukázalo, že ODN obsahujúce deoxyinozínové rezíduá (i-ODN) majú imunnostimulačný účinok porovnateľný, alebo v mnohých prípadoch dokonca lepší, ako ODN obsahujúce motívy CpG. Navyše ODN podľa predkladaného vynálezu produkujú špecifickejšie imunitné odpovede k danému antigénu alebo antigénnemu fragmentu ako CpG ODN. Navyše ODN podľa predkladaného vynálezu znížili indukciu nežiaducich vedľajších reakcií, obzvlášť, indukciu systémového TNF-α alebo IL-6.
Zatiaľ čo určité imunnostimulačné účinky boli opísané pre RNA molekuly obsahujúce RNA molekuly, ako sú napríklad poly-IC alebo molekuly zmienené vo W098/16247, ukázalo sa prekvapivo, že molekuly deoxynukleovej kyseliny obsahujúcej rezíduá deoxyinozínu môžu byť dobrými imunnostimulačnými ODN.
Navyše I-ODN podľa predkladaného vynálezu sú oproti ODN založených na špecifických motívoch CpG nezávislé od špecifického motívu alebo palindromickej sekvencie opísanej pre CpG oligonukleotidy (pozri napríklad EP 0 468 520 A2, W096/02555, W098/18810, W098/37919, WO 98/40100, W098/52581, W099/51259 a W099/56755, všetky začlenené tu ako referencie). Preto jedna skupina I-ODN podľa predkladaného vynálezu môže prednostne obsahovať Cl motív (a preto sú preferované formy predkladaných ODN opísané v týchto začlenených referenciách, kde jedno alebo viacero guanozínových rezíduí sú nahradené deoxyinozínovými rezíduami). Tento motív nie je potrebný pre svoju hlavnú imunnostimulačnú vlastnosť, pretože I-ODN s inozínom neumiestneným v Cl alebo IC kontexte majú imunnostimulačné vlastnosti tiež.
I-ODN podľa predkladaného vynálezu je preto molekula DNA obsahujúca rezíduum deoxyinozínu, ktorá je prednostne poskytnutá v jednovláknovej forme.
I-ODN podľa predkladaného vynálezu môže byť izolovaná prostredníctvom rekombinantných metód alebo môže byť chemicky syntetizovaná, v druhom prípade môže I-ODN podľa predkladaného vynálezu obsahovať modifikované oligonukleotidy, ktoré môžu byť syntetizované s použitím štandardných chemických transformácií, ako sú napríklad metylfosfonáty alebo iné modifikované oligonukleotidy založené na fosfore, ako sú napríklad fosfotriestery, fosfoamidáty a fosforditioráty. Ďalšie modifikované oligonukleotidy bez fosforu môžu byť tiež použité (Stirchak et al., marec 17 (1989), 6139-6141), ale monofosfáty a monotiofosfáty sú prednostným 2' deoxynukleozid monofofátom na použitie v predkladanom vynáleze.
NMP z I-ODN podľa predkladaného vynálezu sú prednostne vybrané zo skupiny obsahujúcej deoxyadenozín-, deoxyguanozín-, deoxyinozín-, deoxycytozín-, deoxyuridín-, deoxytymidín-, 2-metyl-deoxyinozín-, 5-metyl-deoxycytozín-monofosfát alebo -monotiofosfát (ako je obvykle fosfátová alebo tiofosfátová skupina 5' deoxyribózy). Zatiaľ čo pre ODN založených na CpG motívoch je základom, že tento motív je nemetylovaný, toto nie je prekvapivo prípad ODN podľa predkladaného vynálezu, kde napríklad 2-metyl-deoxyinozínové alebo 5-metyl-deoxycytozínové rezíduá nemajú všeobecne žiadny negatívny účinok na imunnostimulačné vlastnosti ODN podľa predkladaného vynálezu. Alternatívne môžu byť prítomné na 2-pozícii ribózovej skupiny miesto 2-deoxyforom NMP tiež ďalšie obzvlášť inertné skupiny, ako sú napríklad -F, -NH2, -CH3, obzvlášť -CH3. -OH a SH skupiny sú ale vylúčené pre I-ODN podľa predkladaného vynálezu z umiestnenia v pozícii 2'-ribózy, obzvlášť ribózového rezídua pre inozín NMP.
DÍžka ODN podľa predkladaného vynálezu je v rozmedzí štandardných ODN použitých podľa doterajších znalostí. Preto molekuly s celkovou dĺžkou pod 4 a nad 150 báz majú postupne sa znižujúci imunnostimulačný potenciál. Prednostné ODN obsahujú medzi 10 a 60 bázami, obzvlášť, medzi 15 a 40 bázami (nukleotidy), z čoho vyplýva a + b vo vzorci (I) je v týchto prednostných formách medzi 10 a 60 bázami, prednostne medzi 15 a 40 bázami.
Zatiaľ čo molekuly ribonukleovej kyseliny obsahujúcej inozín a cytidín, ktoré sú v predchádzajúcich prácach opísané ako imunnostimulačné molekuly, sú veľké a relatívne nedefinované polynukleové kyseliny s molekulovými váhami oveľa nad 200 000 (komerčne dostupná polyinozínová-polycytidylová kyselina od spoločnosti Sigma Chemicals, má molekulovú váhu v rozmedzí 220 000 až 460 000 (aspoň 500 - 1 000 C+I rezíduí)). Molekuly podľa predkladaného vynálezu sú molekuly DNA, ktoré sú oveľa kratšie s dobre definovanou dĺžkou a zložením, a sú v produktoch vysoko reprodukovateľné.
Ďalej je preferované, že deoxyinozín obsahujúci NMP z I-ODN podľa vzorca (I) je monotiofosfát s jedným alebo štyrmi atómami síry, a tiež že ďalšie NMP, obzvlášť všetky ďalšie NMP, sú prítomné ako nukleo4 zid monotiofosfáty, pretože takéto ODN majú vyššiu rezistenciu k nukleázam (je jasné pre predkladaný vynález, že termín „mono“ vo výraze „monotiofosfáty“ sa týka fosfátu, to je, že jedna fosfátová skupina (jeden atóm fosforu) je prítomná v každom NMP). Prednostne aspoň jeden atóm z Xi a X2 je S a aspoň jeden atóm z X3 a X4 je O v NMP podľa predkladaného vynálezu. X3 a X4 sú prednostne O. X3 môže byť (v dôsledku syntézy NMP) odvodené napríklad z fosfátovej skupiny alebo z 3-skupiny NMP ribózy).
ODN podľa predkladaného vynálezu prednostne obsahujú sekvenciu hhh wdi dhh h, nhh hhh wdi nhh hhh hhh wn, nhh wdi din hhh hdi ndi nh, nhh hhh wdi dhh hhh hhh wn alebo nhh wdi did hhh hdi ddi dh, kde akékoľvek n je 2' deoxynukleozid monofosfát alebo monotiofosfát vybraný zo skupiny obsahujúcej deoxyadenozín-, deoxyguanozín-, deoxyinozín-, deoxycytozín- alebo deoxytymidín-monofosfát, alebo -monotiofosfát, akékoľvek h je 2' deoxynukleozid monofosfát alebo monotiofosfát vybraný zo skupiny obsahujúcej deoxyadenozín-, deoxycytozín- alebo deoxytymidín-monofosfát, alebo monotiofosfát, i je deoxyinozín-monofosfát alebo -monotiofosfát, akékoľvek w je 2' deoxynukleozid monofosfát alebo monotiofosfát vybraný zo skupiny obsahujúcej deoxyadenozín- alebo deoxytymidín-monofosfát, alebo -monotiofosfát, a akékoľvek d je 2' deoxynukleozid monofosfát alebo monotiofosfát vybraný zo skupiny obsahujúcej deoxyadenozín-, deoxyguanozín- alebo deoxytymidín-monofosfát, alebo monotiofosfát.
Ako je uvedené, nie je pre I-ODN podľa predkladaného vynálezu potrebný špecifický motív (ako je napríklad CpG alebo palindróm). ODN obsahujúce Cl motív sú ale preferované, takže v prednostnej forme obsahuje ODN podľa vzorca (I) aspoň jeden 2' deoxycytozín-monofosfát alebo monotiofosfát, 3'-priľahlý k 2' deoxyinozín-monofosfátu alebo -monotiofosfátu za vzniku 5'-CI 3'- motívu.
Prednostné ODN podľa predkladaného vynálezu obsahujú jednu alebo viacej zo sekvencii gacitt, iacitt, gaictt, iaictt, kde a je deoxyadenozín-monofosfát alebo -monotiofosfát, g je deoxyguanozín-monofosfát alebo -monotiofosfát, a je deoxyinozín-monofosfát alebo -monotiofosfát, c je deoxycytozín-monofosfát alebo -monotiofosfát a t je deoxytymidín-monofosfát alebo -monotiofosfát.
I-ODN podľa predkladaného vynálezu sú obzvlášť vhodné na aplikáciu na farmaceutickom poli, napríklad na aplikáciu ako liek zvieraťu alebo človeku. Sú špecificky prispôsobené, aby účinkovali ako imunnostimulačná látka, obzvlášť vo vakcínovom prípravku alebo spolu s ním.
Preto sa predkladaný vynález tiež týka farmaceutického prípravku obsahujúceho ODN podľa predkladaného vynálezu.
Pretože prednostný farmaceutický prípravok podľa predkladaného vynálezu je vakcínou, mal by tento prípravok obsahovať antigén namiesto ODN podľa predkladaného vynálezu. Potenciál tohto antigénu zvýšiť ochranu/imunitnú odpoveď očkovaného jedinca je silne zvýšený jeho kombináciou s ODN podľa predkladaného vynálezu, obzvlášť vplyvom ich imunnostimulačnej aktivity.
Vakcína môže obsahovať celý rad rôznych antigénov. Príklady antigénov sú usmrtené celé organizmy, ako sú napríklad inaktivované vírusy alebo baktérie, plesne, prvoky alebo dokonca nádorové bunky. Antigény sa môžu tiež skladať zo subfrakcií týchto organizmov/tkanív z proteínov, alebo v ich jednoduchšej forme z peptidov. Antigény môžu byť tiež rozpoznávané imunitným systémom vo forme glykozylovaných proteínov alebo peptidov a môžu tiež byť alebo obsahovať polysacharidy alebo lipidy. Môžu byť použité krátke peptidy, pretože napríklad cytotoxické T bunky (CTL) rozpoznávajú antigény vo forme krátkych obvykle 8-11 aminokyselín dlhých peptidov v spojení s hlavným histokompatibilným komplexom (MHC) (Rammensee et al., Immunogenetics 41, (1995), 178-228). B bunky rozpoznávajú dlhšie peptidy od zhruba 15 aminokyselín (Harrow et al., Cold Spring Harbor: Cold Spring Harbor Laboratory, (1988)). Na rozdiel od epitopov T buniek môžu byť trojrozmerné štruktúry antigénov B buniek tiež dôležité na rozpoznávanie protilátkami. Na získanie trvalých antigén špecifických imunitných odpovedí sú užitočné na spustenie imunitných kaskád, ktoré zahŕňajú všetky potrebné bunky imunitného systému, adjuvantné látky. Adjuvantné látky primáme účinkujú, ale nie sú obmedzené na ich spôsob účinku, na takzvané antigén prezentujúce bunky (APC). Tieto bunky sa obvykle prvé stretávajú s antigénom(-énmi) s nasledujúcou prezentáciou spracovaného alebo nemodifikovaného antigénu imunitnému efektom. Úlohu môžu hrať tiež prechodné bunkové typy. Len efekto5 rové bunky s príslušnou špecifitou sú aktivované v produktívnej imunitnej odpovedi. Adjuvantná látka môže tiež lokálne zadržovať antigény a spolu injekčné podané ďalšie faktory. Navyše môže adjuvantná látka účinkovať ako chemoatraktant pre ďalšie imunitné bunky, alebo môže účinkovať lokálne a/alebo systematicky ako stimulujúca látka pre imunitný systém.
Podľa prednostnej formy sú ako antigény použité epitopy T buniek. Alternatívne môže byť preferovaná kombinácia epitopov T buniek a B buniek.
Antigény, ktoré majú byť použité v predkladaných prípravkoch, nie sú kritické. Podľa predkladaného vynálezu je možné samozrejme použiť tiež zmesi rôznych antigénov. Proteíny alebo peptidy odvodené z vírusového alebo bakteriálneho patogénu, alebo z plesní, alebo parazitov sú prednostne použité ako takéto antigény (zahŕňajúce derivatizované antigény alebo glykozylované, alebo lipidové antigény, polysacharidy alebo lipidy). Ďalším prednostným zdrojom antigénov sú nádorové antigény. Prednostné patogény sú vybrané zo skupiny obsahujúcej vírus ľudskej imunnodeficiencie (HIV), vírusy hepatitídy A a B, vírus hepatitídy C (HCV), vírus Rousovho sarkómu (RSV, vírus Epsteina Barrovej (EBV), vírus chrípky, rotavírus, Stafylokokus aureus, Chlamidia pneumoniae, Chalmydia trachomatis, Mycobaktérium tuberculosis, Streptokokus pneumoniae, Bacillus antracis, Vibrio cholerae, Plasmodium sp. (Pl. falciparum, Pl. vivax, etc./ Aspergillus sp. alebo Candida albicans. Antigény môžu byť tiež molekuly exprimované nádorovými bunkami (nádorové antigény). Derivačný proces môže zahŕňať purifikáciu špecifického proteínu z patogénnych/nádorových buniek, inaktiváciu patogénu, rovnako tak ako proteolytickú alebo chemickú derivatizáciu alebo stabilizáciu takého proteínu. Rovnakým spôsobom môžu byť tiež použité vo farmaceutickom prípravku podľa predkladaného vynálezu nádorové antigény (nádorové vakcíny) alebo autoimúnne antigény. S takými prípravkami môže byť uskutočnená nádorová vakcinácia alebo liečba autoimúnnych ochorení.
V prípade peptidových antigénov je v predkladanom vynáleze zahrnuté použitie peptidových mimitopov/agonistov/superagonistov/antagonistov alebo peptidov zmenených v určitých pozíciách bez ovplyvnenia imunologických vlastností non-peptidových mimitopov/agonistov/superagonistov/antagonistov (prehľadom v Sparbier a Walden, 1999). Peptidové antigény môžu tiež obsahovať predĺženie buď na karboxy, alebo na amino konci peptidového antigénu zjednodušujúce interakciu s polykationickou zlúčeninou(ami), alebo imunnostimulačnou zlúčeninou(ami). Na liečbu autoimúnnych ochorení môžu byť použité antagonisty na báze peptidov.
Antigény môžu byť tiež derivatizované, aby obsahovali molekuly zvyšujúce prezentáciu antigénu a zacielenie antigénov k antigén prezentujúcim bunkám.
V jednej forme vynálezu slúži farmaceutický prípravok na získanie tolerancie k proteínom alebo proteínovým fragmentom a peptidom, ktoré majú úlohu v autoimúnnych ochoreniach. Antigény použité v týchto formách slúžia na umožnenie tolerancie imunitného systému alebo na zníženie imunitných odpovedí proti epitopom majúcich úlohu v autoimúnnych procesoch.
Prednostne farmaceutický prípravok podľa predkladaného vynálezu, obzvlášť vo forme vakcíny, ďalej obsahuje polykationický polymér, prednostne polykationický peptid, obzvlášť polyarginín, polylyzin alebo antimikrobiálny peptid.
Polykationická zlúčenina(y), ktorá má byť použitá podľa predkladaného vynálezu, môže byť akákoľvek polykationická zlúčenina, ktorá má charakteristický účinok podľa WO 97/30721. Prednostné polykationické zlúčeniny sú vybrané z bázických polypeptidov, organických polykatiónov, bázických polyaminokyselín alebo ich zmesí. Tieto polyaminokyseliny by mali mať dĺžku reťazca aspoň 4 aminokyselinové rezíduá (pozri: Tuftsin, ako je opísané v Goldman et al (1983)). Obzvlášť prednostné sú látky obsahujúce peptidické väzby, ako sú polylyzin, polyarginín a polypeptidy obsahujúce viac ako 20 %, obzvlášť viac ako 50 % bázických aminokyselín v rozmedzí viac ako 8, obzvlášť viac ako 20 aminokyselinových rezíduí alebo ich zmesí. Ďalšie prednostné polykatióny a ich farmaceutické prípravky sú opísané vo WO 97/30721 (napríklad polyetylénimíny) a WO 99/38528. Prednostne obsahujú tieto polypeptidy medzi 20 a 500 aminokyselinovými rezíduami, obzvlášť medzi 30 a 200 rezíduami.
Tieto polykationické zlúčeniny môžu byť produkované chemicky alebo rekombinantne, alebo môžu byť odvodené z prirodzených zdrojov.
Kationické (poly)peptidy môžu byť tiež polykationické antibakteriálne mikrobiálne peptidy s vlastnosťami, ktoré sú prehľadne zhrnuté (Ganz a Lehrer, 1999; Hancock, 1999). Tieto (poly)peptidy môžu byť prokaryotického alebo rastlinného pôvodu, alebo môžu byť produkované chemicky alebo rekombinantne (Andreu a Rivas, 1998; Ganz a Lehrer, 1999; Simmaco et al., 1998). Peptidy môžu tiež patriť do triedy defenzínov (Ganz, 1999; Ganz a Lehrer, 1999). Sekvencie takých peptidov môžu byť napríklad nájdené v Antimikrobial Sequence Database na nasledujúcej intemetovej adrese:
http://www.bbcm.univ.trieste.it/~tossi/pagl.html
Takéto obranné peptidy hostiteľa, alebo tiež defenzívy, sú tiež prednostnou formou polykationického polyméru podľa predkladaného vynálezu. Všeobecne je ako polykationický polymér použitá zlúčenina umožňujúca ako koncový produkt aktiváciu (alebo zníženú reguláciu) adaptívneho imunitného systému prednostne sprostredkovanú pomocou APC (zahŕňajúcich dendritické bunky).
Obzvlášť preferované na použitie ako polykationická látka v predkladanom vynáleze sú od catelicidínu odvodené antimikrobiálne peptidy alebo jeho deriváty (A 1416/2000, začlenené tu ako referencia), obzvlášť antimikrobiálne peptidy odvodené od cicavčieho catelicidínu, prednostne od ľudského, hovädzieho alebo myšacieho catelicidínu, alebo neuroaktívne zlúčeniny, ako je napríklad (ľudský) rastový hormón.
Polykationické zlúčeniny odvodené z prirodzených zdrojov zahŕňajú HIV-REV alebo HIV-TAT (odvodené kationické peptidy, antennapedia peptidy, chitosán alebo iné deriváty chitínu), alebo iné peptidy odvodené z týchto peptidov alebo proteínov biochemickou alebo rekombinantnou produkciou. Ďalšie prednostné polykationické zlúčeniny sú catelín alebo príbuzné, alebo odvodené látky od catelínu. Napríklad myšací catelín je peptid, ktorý má aminokyselinovú sekvenciu NH2-RLAGLLRKGGEKIGEKLKKIGOKIKNFFQKLVPQPECOOH. Príbuzné látky odvodené od catelínu obsahujú celú, alebo časti sekvencie catelínu aspoň s 15 - 20 aminokyselinovými rezíduami. Derivácie môžu zahŕňať substitúciu alebo modifikáciu prirodzených aminokyselín, ktoré nie sú medzi 20 štandardnými aminokyselinami. Navyše môžu byť do takých catelínových molekúl vložené ďalšie kationické rezíduá. Je preferované, aby tieto catelínové molekuly boli skombinované s antigénom a imunogénom ODN podľa predkladaného vynálezu. Prekvapivo sa ale ukázalo, že tieto catelínové molekuly sú účinné tiež ako adjuvantné látky pre antigén bez pridania ďalších adjuvantných látok. Je preto možné použiť takéto catelínové molekuly ako účinné adjuvantné látky v očkovacích prípravkoch s alebo bez ďalších imunnoaktivačných látok.
Ďalšia prednostná polykationická látka na použitie podľa predkladaného vynálezu je syntetický peptid obsahujúci aspoň 2 KLK motívy oddelené spájacou časťou zo 3 až 7 hydrofóbnych aminokyselín (A 1789/2000, začlenené tu ako referencia).
Je veľmi prekvapivé, že imunostimulačný účinok farmaceutického prípravku podľa predkladaného vynálezu bol významne vyšší, ako mohlo byť očakávané zo súčtu účinkov každej jednotlivej zložky alebo dokonca súčtu účinkov ODN alebo polykatiónu s antigénom.
B a E vo vzorci (I) sú bežné skupiny pre 5' a/alebo 3' konce molekúl nukleovej kyseliny. Príklady takých skupín sú jednoducho dostupné pre osoby pohybujúce sa v odbore (pozri napríklad „Oligonucleotides and Analogues - A Practical Approach“ (1991), ed. Eckstein, Oxford University Press). Pre I-ODN podľa predkladaného vynálezu B a/alebo E sú prednostne vybrané nezávisle z -H, -CH3, -COCH3, -OH, -CHO, fosfátové, tifosfátové, sulfátové alebo tiosulfátové skupiny, alebo fosfoalkylové skupiny, obzvlášť s dĺžkou alkylu C]-C6 a/alebo s terminálnou aminoskupinou (aminoskupina môže byť napríklad použitá na ďalšie označenie I-ODN podľa predkladaného vynálezu, napríklad -PO4(CH2)n-NH2 alebo -PO4-(CH2)n-NH-značka). Obzvlášť preferované ako B sú nukleozidy, obzvlášť zmienené 2'deoxynukleotidy (to je bez fosfátovej alebo tiofosfátovej skupiny). Alternatívne môžu tieto skupiny tiež obsahovať väzbové skupiny k iným molekulám, obzvlášť nosičské molekuly alebo značky. V takých formách ODN, kde ODN sú naviazané na pevné povrchy alebo častice, alebo značky, sú tieto povrchy, častice, značky atď. tiež časťou B a/alebo E skupín.
Samozrejme akákoľvek (soľ) forma alebo tautoméme formy molekúl podľa vzorca (I) sú zahrnuté v tomto vzorci (I).
Farmaceutický prípravok podľa predkladaného vynálezu môže ďalej zahŕňať ďalšie aktívne zložky, farmaceutický aktívne látky, obzvlášť látky, ktoré sú použiteľné v spojení s vakcínami. Prednostné formy takých ďalších aktívnych zložiek sú cytokíny, protizápalové látky, antimikrobiálne látky alebo ich kombinácie.
Farmaceutický prípravok podľa predkladaného vynálezu môže samozrejme ďalej obsahovať pomocné látky, obzvlášť farmaceutický prijateľný nosič, pufŕačné látky, stabilizačné látky alebo ich kombinácie.
Relatívne množstvo zložiek v predkladanom farmaceutickom prípravku je vysoko závislé od nutnosti jednotlivého antigénu a od zvieraťa/človeka, ktorému by mal byť prípravok aplikovaný. Preto farmaceutický prípravok podľa predkladaného vynálezu prednostne obsahuje jeden alebo viacej ODN podľa predkladaného vynálezu, prednostne 1 pg až 10 g, prednostne 1 ng až 1 g, prednostnejšie 1 000 ng až 10 mg, obzvlášť 10 mg až 1 mg. Antigén, rovnako tak ako polykationický polymér môžu byť aplikované v podobných dávkach, preferované je rozmedzie 1 až 10 000 mg antigénu a 0,1 až 1 000 mg polykatiónu na očkovanie.
Predkladané prípravky môžu byť aplikované pacientovi, napríklad kandidátovi očkovania, v účinných množstvách, napríklad týždne, dvakrát týždne, alebo v mesačných intervaloch. Pacienti, ktorí majú byť liečení predkladanými prípravkami, môžu byť tiež očkovaní opakovane alebo len raz. Prednostné použitie predkladaného vynálezu je aktívna imunizácia, obzvlášť človeka alebo zvierat bez ochrany proti špecifickému antigénu.
Spôsob aplikácie predkladaného prípravku nie je kriticky dôležitý, vhodná je napríklad podkožná, intramuskuláma, intradermálna alebo transdermálna injekcia, rovnako tak ako perorálna aplikácia.
Je tiež možné aplikovať predkladaný prípravok oddelene, napríklad injekciou imunostimulujúcej látky oddelene od prípravku s antigénom/polykatiónom. Predkladaný vynález preto tiež zahŕňa súpravu obsahujúcu prípravok obsahujúci antigén a polykationický polymér ako jednu zložku a prípravok obsahujúci imunostimulačnú a chemotaktickú látku ako druhú zložku.
Zložky môžu byť aplikované na rovnaké miesto alebo v rovnaký čas, ale aplikácie na rôzne miesta alebo v rôznych časoch počas rôzne časové obdobia sú tiež možné. Je tiež možné meniť systémové a lokálne aplikácie prípravku alebo zložiek.
Detaily predkladaného vynálezu sú opísané nasledujúcimi príkladmi uskutočnenia vynálezu a obrázkami, ale vynález nimi nie je samozrejme obmedzený.
Obr. 1 ukazuje imunitnú odpoveď proti peptidu OVA257.2M, odvodenému od ovalbumínu po injekcii OVA257.264, poly-L-arginínu (pR 60) a deoxyinozín I obsahujúcich oligonukleotidov (I-ODN) alebo CpG 1668. Myšiam boli do zadných labiek injekčné aplikované zmesi, ako je uvedené. O štyri dni neskôr boli bunky drénujúcich lymfatických uzlín ex vivo stimulované pomocou OVA257.264. Počet IFN-g produkujúcich buniek bol určený o 24 hodín neskôr s použitím stanovenia ELISPOT. Výsledky sú vyjadrené ako počet škvŕn/106 buniek lymfatických uzlín.
Obr. 2 ukazuje indukciu systémovej tvorby TNF-a po injekcii OVA257-264, poly-L-argininu (pR 60) a deoxyinozín I obsahujúcich oligonukleotidov (I-ODN) alebo CpG 1668. Myšiam boli do zadných labiek injekčné aplikované zmesi, ako je uvedené. O jednu hodinu po injekcii bola odobraná krv zo žily chvosta a z krvi bolo pripravené sérum. Koncentrácia TNF-a v sére bola určená stanovením ELISA.
Obr. 3 ukazuje imunitnú odpoveď proti peptidu OVA257_264 odvodenému od ovalbumínu po injekcii OVA257-264, poly-L-arginínu (pR 60) a deoxyinozín I obsahujúcich oligonukleotidov (I-ODN) alebo CpG 1668, alebo CpC. Myšiam boli do zadných labiek injekčné aplikované zmesi, ako je uvedené. O štyri dni neskôr boli bunky drénujúcich lymfatických uzlín ex vivo stimulované pomocou OVA257.264 irelevantným peptidom mTRP2181.i88 (protein 2 príbuzný myšacej tyrozináze, VYDFFVWL) alebo pR 60. Počet IFN-g produkujúcich buniek bol určený o 24 hodín neskôr s použitím stanovenia ELISPOT. Výsledky sú vyjadrené ako počet škvŕn/106 buniek lymfatických uzlín so štandardnou odchýlkou tripletov.
Obr. 4 ukazuje indukciu systémovej tvorby TNF-a po injekcii OVA257_264, poly-L-arginínu (pR 60) a deoxyinozín I obsahujúcich oligonukleotidov (I-ODN) CpC alebo CpG 1668. Myšiam boli do zadných labiek injekčné aplikované zmesi, ako je uvedené. O jednu hodinu po injekcii bola odobraná krv zo žily chvosta a z krvi bolo pripravené sérum. Koncentrácia TNF-a IL-6 v sére bola určená cytokín špecifickými stanoveniami ELISA.
Obr. 5 ukazuje imunitnú odpoveď proti peptidu OVA257.264 odvodenému od ovalbumínu po injekcii TRP-2, poly-L-arginínu, CpG 1668 alebo 20-mer sekvencií obsahujúcich deoxyinozín. Myšiam boli do zadných labiek injekčné aplikované zmesi, ako je uvedené. O štyri dni neskôr boli bunky drénujúcich lymfatických uzlín ex vivo stimulované pomocou TRP-2, irelevantným peptidom OVA257.264 alebo pR60. Počet IFN-g produkujúcich buniek bol určený o 24 hodín neskôr s použitím stanovenia ELISPOT. Výsledky sú vyjadrené ako počet škvŕn/106 buniek lymfatických uzlín so štandardnou odchýlkou tripletov.
Obr. 6 ukazuje kombinovanú injekciu I-ODN a poly-L-arginínu (pR 60) spolu s peptidom odvodeným od melanómu.
Obr. 7 ukazuje, že kombinovaná injekcia I-ODN a (pR 60) spolu s peptidom odvodeným od melanómu znižuje indukciu systémového TNF-a a IL-6.
Obr. 8 ukazuje kombinovanú injekciu náhodného 10-mer I-ODN a (pR 60) spolu s peptidom odvodeným od melanómu.
Obr. 9 ukazuje, že kombinovaná aplikácia ovalbumínu (OVA) s oligo-dIC26-mer a pR zvyšuje produkciu OVA špecifických IgG protilátok. Myšiam boli do zadných labiek injekčné aplikované zmesi, ako je uvedené. 24. a 115. deň po injekcii boli odobrané séra, v ktorých boli stanovené ELISA stanovením OVA špecifické IgG2a (A) a IgGl (B) protilátky. Výsledky sú uvedené ako titer protilátok.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Vo všetkých experimentoch boli použité tiofosfátom substituované ODN (s tiofosfátovými rezíduami substituujúcimi fosfát, odtiaľto nazývané „tiofosfátom substituované oligonukleotidy“), pretože takéto ODN majú vyššiu nukleázovú rezistenciu (Ballas et al., 1996; Krieg et al., 1995; Parronchi et al., 1999).
Príklad 1
Kombinovaná injekcia rôznych I-ODN a poly-L-argininu (pR 60) synergicky zvyšuje imunitnú odpoveď proti peptidu odvodenému od ovalbumínu Myši C57BI/6 (Harlan/Olac)
Peptid Peptid OVA257.264 (SIINFEKL) , MHC 1. triedy (H-2Kb) obmedzený epitop kuracieho ovalbumínu (Rotzschke et al., 1991), bol syntetizovaný s použitím štandardnej chemickej syntézy F-moc na pevnej fáze, purifikovaný pomocou HPLC a analyzovaný pomocou hmotovej spektroskopie kvôli čistote. Dávka: 300 mg/myš
Poly-L-arginín60 CpG-ODN 1668
I-ODN 1
I-ODN 2
I-ODN 3 (pR60) Poly-L-arginín s priemerným stupňom polymerácie 60 arginínových rezíduí; spoločnosť Sigma. Dávka 100 mg/myš tiofosfátom substituované ODN obsahujúce CpG motív: tcc atg acg ttc ctg atg ct boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš tiofosfátom substituované ODN obsahujúce deoxyinozín: tcc ati aci ttc ctg atg ct boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš tiofosfátom substituované ODN obsahujúce deoxyinozín: tcc atg aci ttc ctg atg ct boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš tiofosfátom substituované ODN obsahujúce deoxyinozín: tcc ati aci ttc cti ati ct boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš
Experimentálne skupiny (5 myší na skupinu)
1. OVA257-264
2. OVA257-264 + pR 60
3. OVA257_264 + CpG 1668
4. OVA257_264 + I-ODN 1
5. OVA257-264 + I-ODN 2
6. OVA2 57-264+ I-ODN 3
7. OVA257_264 + CpG 1668 + pR 60
8. OVA257_264 + I-ODN 1 + pR 60
9. OVA257-264 + I-ODN 2 + pR 60
10. OVA257_264 + I-ODN 3 + pR 60
V deň 0 bol myšiam injekčné aplikovaný do každej zadnej labky celkový objem 100 ml (50 ml na labku) obsahujúci zmienené zlúčeniny. Zvieratá boli usmrtené 4 dni po injekcii a boli odobrané popliteálne lymfatické uzliny. Lymfatické uzliny boli pretlačené cez 70 mm bunkové sito a premyté dvakrát médiom DMEM (Gibco BRL) obsahujúcim 5 % fetálne teľacie sérum (FCS, spoločnosť Sigma). Bunky boli upravené na 3 x 106 buniek/ml v DMEM/5 %/FCS. Analýza ELISPOT IFNg bola uskutočnená v triplete, ako bolo opísané (Miyahira et al., 1995). Táto metóda je široko používaným postupom umožňujúcim kvantifikáciu antigén špecifických T buniek. Lymfocyty boli stimulované ex vivo s médiom slúžiacim ako kontrola, peptidom OVA257.264 alebo Concavalínom A (Con A). Škvrny reprezentujúce jednotlivé IFN-g produkujúce T bunky boli spočítané a počet škvŕn pozadia bol odčítaný zo všetkých vzoriek. Vysoký počet detekovaných škvŕn po stimulácii s Con A (dáta nie sú uvedené) ukazujú na dobrý stav použitých lymfocytov. Pre každú experimentálnu skupinu myší sú počty škvŕn/106 buniek ilustrované na obrázku 1.
Jednu hodinu po injekcii bola odobraná krv zo žily chvosta a bolo pripravené sérum na určenie indukcie systémového TNF-a s použitím stanovenia ELISA (obrázok 2).
Príklad 2
Výmena guanozínu desoxy-inozínom mení neimunogénnu GpC-sekvenciu na vysoko imunogénnu, obzvlášť v kombinácii s poly-L-arginínom (pR60).
Myši
Peptid
Poly-L-arginín60 CpG-ODN 1668 CpG-ODN
I-ODN 9
I-ODN 10
C57BI/6 (Harlan/Olac)
Peptid OVA257-264 (SIINFEKL) , MHC 1. triedy (H-2Kb) obmedzený epitop kuracieho ovalbumínu (Rotzschke et al., 1991) bol syntetizovaný s použitím štandardnej chemickej syntézy F-moc na pevnej fáze, purifikovaný pomocou HPLC a analyzovaný pomocou hmotovej spektroskopie kvôli čistote. Dávka: 300 ug/myš (pR60) Poly-L-arginín s priemerným stupňom polymerácie 60 arginínových rezíduí; spoločnosť Sigma. Dávka 100 ug/myš tiofosfátom substituované ODN obsahujúce CpG motív: tcc atg acg ttc ctg atg ct boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš tiofosfátom substituované ODN obsahujúce neimunogénne GpC motív: tcc atg agc ttc ctg atg ct boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš tiofosfátom substituované ODN obsahujúce deoxyinozín: tcc atg aic ttc ctg atg ct boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš tiofosfátom substituované ODN obsahujúce deoxyinozín: tcc ati aic ttc cti ati ct boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš
Experimentálne skupiny (5 myší na skupinu)
OVA257_264
OVA257_264 + pR 60
OVA257_264+ CpG 1668
OVA257_264 + GpC
OVA257-264+I-ODN 9
OVA257-264+I-ODN 10
OVA257.264 + CpG 1668 + pR 60
OVA257_264+ GpC + pR 60
OVA257.264 + I-ODN 9 + pR 60
OVA257.264 + I-ODN 10 + pR 60
V deň 0 bol myšiam injekčné aplikovaný do každej zadnej labky celkový objem 100 ul (50 ul na labku) obsahujúci zmienené zlúčeniny. Zvieratá boli usmrtené 4 dni po injekcii a boli odobrané popliteálne lymfatické uzliny. Lymfatické uzliny boli pretlačené cez 70 um bunkové sito a premyté dvakrát médiom DMEM (Gibco BRL) obsahujúcim 5 % fetálne teľacie sérum (FCS, spoločnosť Sigma). Bunky boli upravené na 3 x 106 buniek/ml v DMEM/5%/FCS. Analýza ELISPOT IFNg bola uskutočnená v triplete, ako bolo opísané (Miyahira et al., 1995). Táto metóda je široko používaným postupom umožňujúcim kvantifikáciu antigén špecifických T buniek. Lymfocyty boli stimulované ex vivo s médiom slúžiacim ako kontrola, peptidom ÓVA257_264/irelevantným peptidom mTRP-2lgi_i88 (proteín-2 príbuzný myšacej tyrozináze, VYDFFVWL), pR 60 a Concavalínom A (Con A). Škvrny reprezentujúce jednotlivé IFN-g produkujúce T bunky boli spočítané a počet škvŕn pozadia bol odčítaný zo všetkých vzoriek. Vysoký počet detekovaných škvŕn po stimulácii s Con A (dáta nie sú uvedené) ukazujú na dobrý stav použitých lymfocytov. Pre každú experimentálnu skupinu myší sú počty škvŕn/106 buniek ilustrované na obrázku 3, sú uvedené štandardné odchýlky ex vivo stimulovaných tripletov. Jednu hodinu po injekcii bola odobraná krv zo žily chvosta a bolo pripravené sérum na určenie indukcie systémového TNF-a a IL-6 s použitím stanovenia ELISA (obrázok 4).
Príklad 3
Kombinovaná injekcia náhodných 20-mer sekvencii obsahujúcich desoxyinozín a peptidu odvodeného od melanómu indukuje silnú imunitnú odpoveď proti peptidu, ktorá môže byť ďalej zvýšená ko-aplikáciou poly-L-arginínu (pR 60).
Myši C57BI/6 (Harlan/Olac)
Peptid Peptid TRP-2 (VYDFFVWL), MHC 1. triedy (H-2Kb) obmedzený epitop proteínu-2 príbuzného myšacej tyrosináze (Bllom et al., 1997), bol syntetizovaný s použitím štandardnej chemickej syntézy F-moc na pevnej fáze, purifikovaný pomocou HPLC a analyzovaný pomocou hmotovej spektroskopie kvôli čistote. Dávka: 300 ug/myš
Poly-L-arginín 60 (pR60) Poly-L-arginín s priemerným stupňom polymerácie 60 arginínových rezíduí; spoločnosť Sigma. Dávka 100 ug/myš
CpG-ODN 1668 tiofosfátom substituované ODN obsahujúce CpG motív: tcc atg acg ttc ctg atg ct boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš wdi tiofosfátom substituované ODN: nhh hhh wdi nhh hhh hhh wn boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš wdidin tiofosfátom substituované ODN: nhh hhh wdi nhh hhh hhh wn boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš wdid tiofosfátom substituované ODN: nhh hhh wdi dhh hhh hhh wn boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš wdidid tiofosfátom substituované ODN: nhh wdi did hhh hdi ddi dh boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš
Experimentálne skupiny (5 myší na skupinu)
1. TRP-2
2. TRP-2+ pR 60
3. TRP-2 + CpG 1668
4. TRP-2 + wdi
5. TRP-2 + wdidin
6. TRP-2 + wdid
7. TRP-2 + wdidid
8. TRP-2 + CpG 1668+pR 60
9. TRP-2 + wdi + pR 60
10. TRP-2 + wdidin + pR 60
11. TRP-2 + wdid+ pR 60
12. TRP-2 + wdidid + pR 60
V deň 0 bol myšiam injekčné aplikovaný do každej zadnej labky celkový objem 100 ul (50 ul na labku) obsahujúci zmienené zlúčeniny. Zvieratá boli usmrtené 4 dni po injekcii a boli odobrané popliteálne lymfatické uzliny. Lymfatické uzliny boli pretlačené cez 70 um bunkové sito a premyté dvakrát médiom DMEM (Gibco BRL) obsahujúcim 5 % fetálne teľacie sérum (FCS, spoločnosti Sigma). Bunky boli upravené na 3 x
106 buniek/ml v DMEM/5 %/FCS. Analýza ELISPOT IFN-g bola uskutočnená v triplete, ako bolo opísané (Miyahira et al., 1995). Táto metóda je široko používaným postupom umožňujúcim kvantifikáciu antigén špecifických T buniek. Lymfocyty boli stimulované ex vivo s médiom slúžiacim ako kontrola, peptidom TRP-2, irelevantným peptidom OVA257.264, pR 60 a Concavalínom A (Con A). Škvrny reprezentujúce jednotlivé IFN-g produkujúce T bunky boli spočítané a počet škvŕn pozadia bol odčítaný zo všetkých vzoriek. Vysoký počet detekovaných škvŕn po stimulácii s Con A (dáta nie sú uvedené) ukazujú na dobrý stav použitých lymfocytov. Pre každú experimentálnu skupinu myší sú počty škvŕn/106 buniek ilustrované na obrázku 5, sú uvedené štandardné odchýlky ex vivo stimulovaných tripletov.
Príklad 4
Kombinovaná injekcia I-ODN a poly-L-arginínu (pR 60) synergicky zvyšuje imunitnú odpoveď proti peptidu odvodenému od melanómu.
Experimentálne skupiny (5 myší na skupinu)
1. TRP-2)81-188
2. TRP-2,81.188 + PR 60
3. TRP-2,81.188+ CpG 1668
4. TRP-2,s,.,ss + I-ODN 2
5. TRP-2,81-188 + CpG 1668 +pR 60 6. TRP-2i8M88 + I-ODN 2 + pR 60
V deň 0 bol myšiam injekčné aplikovaný do každej zadnej labky celkový objem 100 ul (50 ul na labku) obsahujúci zmienené zlúčeniny. Zvieratá boli usmrtené 4 dni po injekcii a boli odobrané popliteálne lymfatické uzliny. Lymfatické uzliny boli pretlačené cez 70 um bunkové sito a premyté dvakrát médiom DMEM (Gibco BRL) obsahujúcim 5 % fetálne teľacie sérum (FCS, spoločnosť Sigma). Bunky boli upravené na 3 x 106 buniek/ml v DMEM/5 %/FCS. Analýza ELISPOT IFN-γ bola uskutočnená v triplete, ako bolo opísané (Miyahira et al., 1995). Táto metóda je široko používaným postupom umožňujúcim kvantifikáciu antigén špecifických T buniek. Lymfocyty boli stimulované ex vivo s médiom slúžiacim ako kontrola, peptidom TRP-2,81-188, irelevantným peptidom OVA257.264 a Concavalínom A (Con A). Škvrny reprezentujúce jednotlivé IFN-γ produkujúce T bunky boli spočítané a počet škvŕn pozadia bol odčítaný zo všetkých vzoriek. Vysoký počet detekovaných škvŕn po stimulácii s Con A (dáta nie sú uvedené) ukazujú na dobrý stav použitých lymfocytov. Pre každú experimentálnu skupinu myší sú počty škvŕn/106 buniek ilustrované na obrázku 6, sú uvedené štandardné odchýlky ex vivo stimulovaných tripletov.
Jednu hodinu po injekcii bola odobraná krv zo žily chvosta a bolo pripravené sérum na určenie indukcie systémového TNF-a a IL-6 s použitím špecifických ELISA stanovení (obrázok 7).
Príklad 5
Kombinovaná injekcia náhodných 10-mer I-ODN a poly-L-arginínu (pR 60) synergicky zvyšuje imunitnú odpoveď proti peptidu odvodenému od melanómu.
Experimentálne skupiny (5 myší na skupinu) . TRP-2,81-188 . TRP-2i8i-i88 + pR 60
3. TRP-2,81-188 + CpG 1668
4. TRP-2,s,-188 + ODN 17
5. TRP-2,81-188 + CpG 1668 + pR 60
6. TRP-2,81-188 + ODN 17 + pR 60
V deň 0 bol myšiam injekčné aplikovaný do každej zadnej labky celkový objem 100 ul (50 ul na labku) obsahujúci zmienené zlúčeniny. Zvieratá boli usmrtené 4 dni po injekcii a boli odobrané popliteálne lymfatické uzliny. Lymfatické uzliny boli pretlačené cez 70 um bunkové sito a premyté dvakrát médiom DMEM (Gibco BRL) obsahujúcim 5 % fetálne teľacie sérum (FCS, spoločnosť Sigma). Bunky boli upravené na 3 x 106 buniek/ml v DMEM/5 %/FCS. Analýza ELISPOT IFN-γ bola uskutočnená v triplete, ako bolo opísané (Miyahira et al., 1995). Táto metóda je široko používaným postupom umožňujúcim kvantifikáciu antigén špecifických T buniek. Lymfocyty boli stimulované ex vivo s médiom slúžiacim ako kontrola, peptidom TRP-2,8i.i88> irelevantným peptidom OVA257-264 a Concavalínom A (Con A). Škvrny reprezentujúce jednotlivé IFN-γ produkujúce T bunky boli spočítané a počet škvŕn pozadia bol odčítaný zo všetkých vzoriek. Vysoký počet detekovaných škvŕn po stimulácii s Con A (dáta nie sú uvedené) ukazujú na dobrý stav použitých lymfocytov. Pre každú experimentálnu skupinu myší sú počty škvŕn/106 buniek ilustrované na obrázku 8, sú uvedené štandardné odchýlky ex vivo stimulovaných tripletov.
Myši C57BI/6 (Harlan/Olac)
Peptid Peptid TRP-2 (VYDFFVWL), MHC 1. triedy (H-2Kb) obmedzený epitop proteínu-2 príbuzného myšacej tyrosináze (Bllom et al., 1997), bol syntetizovaný s použitím štandard11
Poly-L-arginínóO CpG-ODN 1668
ODN 17
Myši
Peptid
Poly-L-arginín60 CpG-ODN 1668
I-ODN 2 nej chemickej syntézy F-moc na pevnej fáze, purifikovaný pomocou HPLC a analyzovaný pomocou hmotovej spektroskopie kvôli čistote. Dávka: 100 ug/myš (pR60) Poly-L-arginín s priemerným stupňom polymerácie 60 arginínových rezíduí; spoločnosť Sigma. Dávka 100 ug/myš tiofosfátom substituované ODN obsahujúce CpG motív: tcc atg acg ttc ctg atg ct boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš tiofosfátom substituované ODN obsahujúce deoxyinozín: hhh wdi dhh h boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen, (h = CAT, w = AT, d = GAT). Dávka: 10 nmol/myš
C57BI/6 (Harlan/Olac)
Peptid TRP-2 (VYDFFVWL), MHC 1. triedy (H-2Kb) obmedzený epitop proteínu-2 príbuzného myšacej tyrosináze (Bllom et al., 1997), bol syntetizovaný s použitím štandardnej chemickej syntézy F-moc na pevnej fáze, purifikovaný pomocou HPLC a analyzovaný pomocou hmotovej spektroskopie kvôli čistote. Dávka: 100 ug/myš (pR60) Poly-L-arginín s priemerným stupňom polymerácie 60 arginínových rezíduí; spoločnosť Sigma. Dávka 100 ug/myš tiofosfátom substituované ODN obsahujúce CpG motív: tcc atg acg ttc ctg atg ct boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka 5 nmol/myš tiofosfátom substituované ODN obsahujúce deoxyinozín: tcc atg aci ttc ctg atg ct boli syntetizované spoločnosťou NAPS GmbH, Gôttingen. Dávka: 5 nmol/myš
Príklad 6
Kombinovaná aplikácia oligo-deoxyIC26.mer a poly-L-arginínu (pR) zvyšuje na ovalbumín (OVA) špecifickú humorálnu odpoveď.
Myši C57BI/6 (Harlan/Olac)
Ovalbumín (OVA) Ovalbumín z kuracích vajec, stupeň V, spoločnosť SIGMA Chemicals, A-5503, šarža 54H7070. Dávka 50 ug/myš
Poly-L-arginín 60 (pR60) Poly-L-arginín s priemerným stupňom polymerácie 60 arginínových rezíduí; spoločnosť Sigma Chemicals, P-4663, šarže 68H5903. Dávka 100 ug/myš Oligo-deoxy IC, 26-mer (oligo-dIC26.raer) oligo-dIC26.mer bol syntetizovaný štandardnou fosfoamididovou chémiou v 4 umol mierke a purifikovaný pomocou HPLC (spoločnosť NAPS, Nemecko).
Experimentálne skupiny (4 myši na skupinu)
1. OVA + 0líg0-dIC26-mer + PR
2. OVA + 0lÍg0-dIC26-mer
3. OVA + pR
4. OVA
V deň 0 bol myšiam injekčné aplikovaný do každej zadnej labky celkový objem 100 ul (50 ul na labku) obsahujúci zmienené zlúčeniny. 24 dní po injekcii bolo odobrané sérum, ktoré bolo vyšetrené stanovením ELISA na prítomnosť OVA špecifických protilátok. Tieto výsledky ukazujú, že injekcia OVA v kombinácii s oligo-dlC a pR zvyšuje produkciu OVA špecifických IgG protilátok v porovnaní s injekciou OVA s každou so substancií samotnou (obrázok 13A, B). Zaujímavé je, že titre IgG2a aj IgGl boli zvýšené po jedinej injekcii OVA s oligo-dIC/pR, čo ukazuje na podiel Thl aj Th2 buniek. Ale po 115 dňoch boli stále ešte detekovateľné len zvýšené hladiny IgG2 v sére myší po injekcii OVA a oligo-dIC/pR.
Tieto dáta demonštrujú, že kombinovaná injekcia OVA s oligo-dlC a pR zvyšuje OVA špecifickú humorálnu odpoveď. Táto odpoveď je charakterizovaná produkciou izotypov protilátok indukovaných Thl aj Th2 bunkami v časnej fáze, ale neskôr hlavne protilátkami indukovanými Thl bunkami.
Referencie
Andreu, D., a Rivas, L. (1998). Animal antimicrobial peptides: an overview. Biopolymers 47, 415 - 433. Ballas, Z. K., Rasmussen, W. L., a Krieg, A. M. (1996). Induction of NK activity in murine and human cells by CpG motif in oligodeoxynucleotides and bacterial DNA. J Immunol 157, 1840 - 1845.
Bloom, B. R., a Widdus, R. (1998). Vaccine visions and their global impact. Nat Med 4, 480 - 484.
Bloom, M. B., Perry-Lalley, D., Robbins, P. F., Li, Y., el-Gamil, M., Rosenberg, S. A., a Yang, J. C. (1997). Identification of tyrosinase-related proteín 2 as a tumor rejection antigén for the B 16 melanoma. J Exp Med 185,453 -459.
Buschle, M., Schmidt, W., Berger, M., Schaffner, G., Kurzbauer, R., Killisch, L, Tiedemarm, J. K., Trska,
B., Kirlappos, H., Mechtler, K., Schilcher, F., Gabler, C., a Bimtsiel, M. L. (1998). Chemically defined, cellfree cancer vaccines: use of tumor antigen-derived peptides or polyepitope proteins for vaccination. Gene Ther. Mol. Biol. 1, 309 - 321.
Buschle, M., Schmidt, W., Zauner, W., Mechtler, K., Trska, B., Kirlappos, H., a Bimstiel, M. L. (1997). Transloading of tumor antigen-derived peptides into antigen-presenting cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94, 3256-3261.
Cavanaugh, P. F., Jr., Ho, Y-K, a Bardos, to je (1996). The activation of murine macrophages and natural killer cells by the partially tiolated double stranded RNA poly (1). mercapto poly(C). Res. Comm. Mol. Pathol. Pharmacol. 91, 131 -147.
Chace, J. H., Hooker, N. A., Mildenstein, K. L., Krieg, A. M., a Cowdery, J. S. (1997). Bacterial DNA-induced NK celí IFN- gamma production is dependent on macrophage secretion of IL-12. Clin Immunol Immunopathol 84, 185- 193.
Davis, H. L., Weeranta, R., Waldschmidt, T. J., Tygrett, L., Schorr, J., a Krieg, A. M. (1998). CpG DNA is a potent enhancer of specific immunity in mice immunized with recombinant hepatitis B surface antigén. J Immunol 160, 870 - 876.
Deng, G. M., Nilsson, 1. M., Verdrengh, M., Collins, L. V., and Tarkowski, A. (1999). Intra-articularly localized bacterial DNA containing CpG motifs induces arthritis. Nat Med 5, 702 - 705.
Ganz, T. (1999). Defensins and host defense [comment], Science 286, 420 - 421.
Ganz, T., a Lehrer, R. 1. (1999). Antibiotic peptides from higher eukaryotes: biology and applications. Mol Med Today 5, 292 - 297.
Hancock, R. E. (1999). Host defence (cationic) peptides: what is their future clinical potential? Drugs 57, 469 až 473.
Harlow, E., a Lane, D. (1988). Antibodies: a laboratory manual (Cold Spring Harbor: Cold Spring Harbor Laboratory).
Hartmann, G., Weiner, G. J., a Krieg, A. M. (1999). CpG DNA: A potent signál for growth, activation, and maturation of human dendritic cells. Proc Natl Acad Sci USA 96, 9305 - 9310.
Hoffmann, J. A., Kafatos, F. C., Janeway, C. A., a Ezekowitz, R. A. (1999). Phylogenetic perspectives in innate immunity. Science 284, 1313 - 1318.
Klinman, D. M., Yi, A. K., Beaucage, S. L., Conover, J., a Krieg, A. M. (1996). CpG motifs present in bacteria DNA rapidly induce lymphocytes to secrete interleukin 6, interleukin 12, and interferon gamma. Proc Natl Acad Sci USA 93, 2879 - 2883.
Krieg, A. M. (1999). CpG DNA: a novel immunomodulator [letter]. Trends Microbiol 7, 64 - 5.
Krieg, A. M. (1996). An innate immune defense mechanism based on the recognition of CpG motifs in microbial DNA. J Lab Clin Med 128, 128 - 133.
Krieg, A. M., Yi, A. K., Matson, S., Waldschmidt, T. J., Bishop, G. A., Teasdale, R., Koretzky, G. A., a Klinman, D. M. (1995). CpG motifs in bacterial DNA trigger direct B-cell activation. Náture 374, 546 - 549. Krieg, A. M., Yi, A. K., Schorr, J., a Davis, H. L. (1998). The role of CpG dinucleotides in DNA vaccines. Trends Microbiol 6, 23 - 27.
Lethe, B., van den Eynde, B., van Pel, A., Corradin, G., a Boon, T. (1992). Mouse tumor rejection antigens P815A and P815B: two epitopes carried by a single peptide. Eur J Immunol 22, 2283 - 2288.
Liljeqvist, S., a Stahl, S. (1999). Production of recombinant subunit vaccines: proteín immunogens, live delivery systems and nucleic acid vaccines. J Biotchnol 73, 1 - 33.
Lipford, G. B., Heeg, K., a Wagner, H. (1998). Bacterial DNA as immune celí activator. Trends Microbiol 6, 496 - 500.
Manetti, R., Annunziato, F., Tomasevic, L., Gianno, V., Parronchi, P., Romagnani, S. a Maggi, E. (1995). Polyinosinic acid: polycytidylic acid promotes T helper type 1-specific immune responses by stimulating macrophage production of interferon-a and interleukin-12. Eur. J. Immunol. 25, 2656 - 2660.
Mosmann, T. R., Cherwinski, H., Bond, M. W., Giedlin, M. A., a Coffman, R. L. (1986). Two types of murine helper T celí clone. 1. Definition according to profiles of lymphokine activities and secreted proteins. J Immunol 136, 2348 - 2357.
Nossal, G. (1998). Living up to the legacy. Nat Med 4, 475 - 476.
Oxenius, A., Martinic, M M., Hengartner, H., a Klenerman, P. (1999). CpG-containing oligonucleotides are efficient adjuvants for induction of protective antiviral immune responses with T-cell peptide vaccines. J Virol 73,4120-4126.
Paillard, F. (1999). CpG: the double-edged sword [comment]. Hum Gene Ther 10,2089 - 2090.
Pamer, E. G., Harty, J. T, a Bevan, M. J. (1991). Precise prediction of a dominánt class I MHC-restricted epitope of Listeria monocytogenes. Náture 353, 852 - 855.
Parronchi, P., Brugnolo, F., Annunziato, F., Manuelli, C., Sampognaro, S., Mavilia, C., Romagnani, S., a Maggi, E. (1999). Phosphorotioate oligodeoxynucleotides promote the in vitro development of human allergen-specific CD4+ T cells into Thl effectors. J Immunol 163, 5946 - 5953.
Pisetsky, D. S. (1997). Immunostimulatory DNA; a clear and present danger? Nat Med 3, 829 - 831.
Pisetsky, D. S. (1999). The influence of base sequence on the imunostimulatory properties of DNA. Immunol Res 19, 35 - 46.
Rammensee, H. G., Friede, T., Stevanoviic S. (1995). MHC ligands and peptide motifs: first listing. Immunogenetics 41, 178 - 228.
Rodrigues, M., Nussenzweig, R. S., Romero, P., a Zavala, F. (1992). The in vivo cytotoxic activity of CD8+ T celí clones cor-relates with their levels of expression of adhesion molecules. J Exp Med 175, 895 - 905. Roitt, 1., Brostoff, J., a Malé, D. (1998). Immunology (London: Mosby International Ltd).
Rotzschke, O., Falk, K., Stevanovic, S., Jung, G., Walden, P., a Rammensee, H. G. (1991). Exact prediction of a natural T celí epitope. Eur J Immunol 21, 2891 - 2894.
Schmidt, W., Buschle, M., Zauner, W., Kirlappos, H., Mechtler, K., Trska, B., a Bimstiel, M. L. (1997). Cellfree tumor antigén peptide-based cancer vaccines. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94, 3262 - 3267.
Schwartz) D. A., Quinn, T. J., Thome, P. S., Sayeed, S., Yi, A. K. , a Krieg, A. M. (1997). CpG motifs in bacterial DNA cause inflammation in the lower respirátory tract, J Clin Invest 100, 68-73.
Shimonkevitz, R., Colon, S., Kappler, J. W., Marrack, P., a Grey, H. M, (1984). Antigén recognition by H2-resctricted T cells 11. A tryptic ovalbumin peptide that substitutes for processed antigén. J Immunol 133, 2067 - 2074.
Simmaco, M., Mignogna, G, a Barra, D. (1998). Antimicrobial peptides ftom amphibian skin: what do they telí us? Biopolymers 47, 435 - 450.
Sparbier, K., a Walden, P. (1999). T celí receptor specificity and mimotopes. Curr Opin Immunol 11, 214 218.
Sparwasser, T., Koch, E. S., Vabulas, R. M., Heeg, K., Lipford, G. B., Ellwart, J. W., a Wagner, H. (1998). Bacterial DNA and immunostimulatory CpG oligonucleotides trigger maturation and activation of murine dendritic cells. Eur J Immunol 28, 2045 - 2054.
Sparwasser, T., Mietlike, T., Lipford, G., Borschert, K., Hacker., H., Heeg, K., a Wagner, H. (1997). Bacterial DNA causes septic shock [letter]. Náture 386, 336 - 337.
Sparwasser, T., Miethke, T., Lipford, G., Erdmann, A., Hacker, H., Heeg, K., a Wagner, H. (1997). Macrophages sense pathogens via DNA motif: induction of tumor necrosis factor-alpha-mediated shock. Eur J Immunol 27, 1671 - 1679.
Weiner, G. J., Liu, H. M., Wooldridge, J. E., Dahle, C. E., a Krieg, A. M. (1997). Immunostimulatory oligodeoxynucleotides containing the CpG motif are effective as immune adjuvants in tumor antigén immunization. Proc Natl Acad Sci USA 94, 10833 - 10837.
Yew, N. S., Wang, K. X., Przybylska, M., Bagley, R. G., Stedman, M., Marshali, J., Scheule, R. K., a Cheng,
S. H. (1999). Con-tribution of plasmid DNA to inflammation in the lung after ad-ministration of cationic lipid:pDNA complexes. Hum Gene Ther 10, 223 - 234.
Claims (10)
1. Použitie molekuly oligodeoxynukleovej kyseliny (ODN) majúcej štruktúru definovanú vzorcom (I)
NMPb-E (X), kde ktorýkoľvek substituent X je O alebo S;
ktorýkoľvek zo zvyškov NMP je 2'-deoxynukleozid-monofosfát alebo -monotiofosfát vybraný z deoxyadenozín-, deoxyguanozín-, deoxyinozín-, deoxycytozín-, deoxyuridín-, deoxytymidín-, 2-metyldeoxyinozín-, 5-metyl-deoxycytozín-, deoxypseudouridín-, deoxyribosapurín-, 2-aminodeoxyribosapurín-, 6-S-deoxyguanín-, 2-dimetyldeoxyguanozín- alebo N-izopentenyldeoxyadenozín-monofosfátu alebo -monotiofosfátu,
NUC je 2'-deoxynukleozid vybraný z deoxyadenozín-, deoxyguanozín-, deoxyinozín-, deoxycytozín-, deoxyuridín-, deoxytymidín-, 2-metyldeoxyinozín-, 5-metyldeoxycytozín-, deoxypseudouridín-, deoxyribosapurín-, 2-aminodeoxyribosapurín-, 6-S-deoxyguanín-, 2-dimetyldeoxyguanozín- alebo N-izopentenyldeoxyadenozínu, a a b sú celé čísla od 0 do 100 s výhradou, že a + b je číslo medzi 4 a 150,
B a E sú bežné skupiny pre 5' alebo 3' konce molekúl nukleovej kyseliny, na výrobu imunostimulačnej farmaceutickej kompozície.
2. Použitie podľa nároku 1, kde ktorýkoľvek NMP je vybraný z deoxyadenozín-, deoxyguanozín-, deoxyinozín-, deoxycytozín-, deoxyuridín-, deoxytymidín-, 2-metyldeoxyinozín-, 5-metyl-deoxycytozín-monofosfátu alebo -monotiofosfátu.
3. Použitie podľa nároku 1 alebo 2, kde a + b je medzi 10 a 60, prednostne medzi 15 a 40.
4. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3, kde aspoň jeden z Xj a X2 je S a aspoň jeden z X3 a X4 je O a prednostne ktorýkoľvek z NMP je nukleozidmonotiofosfát.
5 tým, že ďalej obsahuje ďalšie aktívne zložky, obzvlášť cytokíny, protizápalové látky, antimikrobiálne látky alebo ich kombinácie.
15. Farmaceutický prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 11 až 14, vyznačujúci sa tým, že ďalej obsahuje pomocné látky, obzvlášť farmaceutický prijateľný nosič, pufračné látky, stabilizačné látky alebo ich kombinácie.
5. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 4, kde ODN obsahuje sekvenciu hhh wdi dhh h, nhh hhh wdi nhh hhh hhh wn, nhh wdi din hhh hdi ndi nh, nhh hhh wdi dhh hhh hhh wn alebo nhh wdi did hhh hdi ddi dh, kde ktorýkoľvek z n je 2'-deoxynukleozid-monofosfát alebo -monotiofosfát vybraný z deoxyadenozín-, deoxyguanozín- deoxyinozín-, deoxycytozín- alebo deoxytymidín-monofosfátu, alebo -monotiofosfátu, ktorýkoľvek z h je 2'-deoxynukleozidmonofosfát alebo monotiofosfát vybraný z deoxyadenozín-, deoxycytozín- alebo deoxytymidm-monofosfátu, alebo -monotiofosfátu, i je deoxyinozín-monofosfát alebo -monotiofosfát, ktorýkoľvek z h w je 2'-deoxynukleozid-monofosfát alebo
-monotiofosfát vybraný z deoxyadenozín-, alebo deoxytymidín-monofosfátu, alebo -monotiofosfátu, a ktorýkoľvek z d je 2'-deoxynukleozid-monofosfát alebo -monotiofosfát vybraný z deoxyadenozín-, deoxyguanozín- alebo deoxytymidín-monofosfátu, alebo -monotiofosfátu.
6. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 5, kde zmienená ODN obsahuje aspoň jeden 2'-deoxycytozín-monofosfát alebo -monotiofosfát, 3'-priľahlý k 2'-deoxyinozín-monofosfátu alebo -monotiofosfátu, najmä deoxyinozín-deoxycytozín 26-mér.
7. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 7, kde zmienená ODN obsahuje sekvenciu wdi, wdid, wdidin alebo wdidid, kde w, d, i a n sú definované.
7. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 6, kde zmienená ODN obsahuje sekvenciu gacitt, najmä tcc atg aci ttc ctg atg ct, iacitt, gaictt, iaictt, kde a je deoxyadenozín-monofosfát alebo -monotiofosfát, g je deoxyguanozín-monofosfát alebo -monotiofosfát, i je deoxyinozín-monofosfát alebo -monotiofosfát, c je deoxycytozín-monofosfát alebo -monotiofosfát a t je deoxytymidín-monofosfát alebo -monotiofosfát.
8. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 8, kde B a E sú nezávisle vybrané z -H, -CH3, -COH, -COCH3, -OH, -CHO, -PO4, -PSO3, -PS2O2, -PS3O, -PS4, -SO3, -PO4 (CH2)^-NH2 alebo -PO4(CH2),.6-NHznačka.
9. Použitie podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 9, kde zmienený imunostimulačný farmaceutický prípravok je vakcína.
10. Farmaceutický príprav romkoľvek z nárokov 1 až 9.
11. Farmaceutický príprav romkoľvek z nárokov 1 až 9.
12. Farmaceutický príprav romkoľvek z nárokov 1 až 9 a antigén.
13. Farmaceutický prípravok podľa nároku 11 alebo 12, vyznačujúci sa tým, že ďalej obsahuje polykatiónový polymér, prednostne polykatiónový peptid, obzvlášť polyarginín, polylyzín alebo anti-
mikrobiálny peptid, obzvlášť antimikrobiálny peptid odvodený od cicavčieho katelicidínu, syntetický peptid obsahujúci 2 KLK-motívy oddelené linkerom s 3 až 7 hydrofóbnymi aminokyselinami alebo rastový hormón, obzvlášť ľudský rastový hormón.
14. Farmaceutický prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 11 až 13, vyznačujúci sa
10 16. Farmaceutický prípravok podľa ktoréhokoľvek z nárokov 11 až 15, vyznačujúci sa tým, že obsahuje 1 ng až 1 g, prednostne 100 ng až 10 mg, obzvlášť 10 mg až 1 mg jednej alebo viacej ODN podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 9.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT0100000A AT410173B (de) | 2000-06-08 | 2000-06-08 | Antigene zusammensetzung |
| AT19732000 | 2000-11-23 | ||
| PCT/EP2001/006433 WO2001093905A1 (en) | 2000-06-08 | 2001-06-07 | Immunostimulatory oligodeoxynucleotides |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SK18152002A3 SK18152002A3 (sk) | 2003-08-05 |
| SK287689B6 true SK287689B6 (sk) | 2011-06-06 |
Family
ID=25608484
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SK1815-2002A SK287689B6 (sk) | 2000-06-08 | 2001-06-07 | Použitie molekuly oligodeoxynukleovej kyseliny na výrobu imunostimulačnej farmaceutickej kompozície a farmaceutický prípravok |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US8568742B2 (sk) |
| EP (1) | EP1296713B1 (sk) |
| JP (2) | JP5271471B2 (sk) |
| KR (1) | KR100799788B1 (sk) |
| CN (1) | CN1309418C (sk) |
| AT (1) | ATE249839T1 (sk) |
| AU (2) | AU8181201A (sk) |
| BR (1) | BRPI0111639B8 (sk) |
| CA (1) | CA2411575C (sk) |
| CZ (1) | CZ304195B6 (sk) |
| DE (1) | DE60100814T2 (sk) |
| DK (1) | DK1296713T3 (sk) |
| ES (1) | ES2206424T3 (sk) |
| HK (1) | HK1056678A1 (sk) |
| HU (1) | HU228264B1 (sk) |
| IL (2) | IL152959A0 (sk) |
| IS (1) | IS1993B (sk) |
| MX (1) | MXPA02012010A (sk) |
| NO (1) | NO329492B1 (sk) |
| PL (1) | PL211036B1 (sk) |
| PT (1) | PT1296713E (sk) |
| RU (2) | RU2413520C2 (sk) |
| SI (1) | SI1296713T1 (sk) |
| SK (1) | SK287689B6 (sk) |
| TR (1) | TR200302015T4 (sk) |
| WO (1) | WO2001093905A1 (sk) |
Families Citing this family (88)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6977245B2 (en) | 1999-04-12 | 2005-12-20 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Oligodeoxynucleotide and its use to induce an immune response |
| SK287689B6 (sk) * | 2000-06-08 | 2011-06-06 | Intercell Ag | Použitie molekuly oligodeoxynukleovej kyseliny na výrobu imunostimulačnej farmaceutickej kompozície a farmaceutický prípravok |
| AU2001297693A1 (en) * | 2000-12-08 | 2002-09-12 | Coley Pharmaceutical Gmbh | Cpg-like nucleic acids and methods of use thereof |
| JP2004519453A (ja) * | 2001-01-05 | 2004-07-02 | インターツェル・アクチェンゲゼルシャフト | ポリカチオン性化合物の用途 |
| CA2433967A1 (en) * | 2001-01-05 | 2002-07-11 | Intercell Ag | Anti-inflammatory use of polycationic compounds |
| US7244438B2 (en) | 2001-01-05 | 2007-07-17 | Intercell Ag | Uses for polycationic compounds |
| JP2004519452A (ja) * | 2001-01-05 | 2004-07-02 | インターツェル・アクチェンゲゼルシャフト | ポリカチオン性化合物の用途 |
| AT410798B (de) | 2001-01-26 | 2003-07-25 | Cistem Biotechnologies Gmbh | Verfahren zur identifizierung, isolierung und herstellung von antigenen gegen ein spezifisches pathogen |
| EP1390495B1 (en) * | 2001-05-21 | 2007-07-04 | Intercell AG | Immunostimulatory oligodeoxynucleic molecules |
| EP1412390A2 (en) * | 2001-07-26 | 2004-04-28 | Tanox, Inc. | Agents that activate or inhibit toll-like receptor 9 |
| US7666674B2 (en) | 2001-07-27 | 2010-02-23 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Use of sterically stabilized cationic liposomes to efficiently deliver CPG oligonucleotides in vivo |
| US7354909B2 (en) * | 2001-08-14 | 2008-04-08 | The United States Of America As Represented By Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Method for rapid generation of mature dendritic cells |
| MX339524B (es) | 2001-10-11 | 2016-05-30 | Wyeth Corp | Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica. |
| CA2452909A1 (en) * | 2001-12-07 | 2003-06-13 | Intercell Ag | Immunostimulatory oligodeoxynucleotides |
| US8466116B2 (en) | 2001-12-20 | 2013-06-18 | The Unites States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Use of CpG oligodeoxynucleotides to induce epithelial cell growth |
| WO2003054161A2 (en) | 2001-12-20 | 2003-07-03 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | USE OF CpG OLIGODEOXYNUCLEOTIDES TO INDUCE ANGIOGENESIS |
| US8088388B2 (en) | 2002-02-14 | 2012-01-03 | United Biomedical, Inc. | Stabilized synthetic immunogen delivery system |
| CA2388049A1 (en) | 2002-05-30 | 2003-11-30 | Immunotech S.A. | Immunostimulatory oligonucleotides and uses thereof |
| JP2005533855A (ja) | 2002-07-24 | 2005-11-10 | インターツェル・アクチェンゲゼルシャフト | 病原性ウイルスからの別のリーディングフレームによりコードされる抗原 |
| AR040996A1 (es) | 2002-08-19 | 2005-04-27 | Coley Pharm Group Inc | Acidos nucleicos inmunoestimuladores |
| US7785608B2 (en) | 2002-08-30 | 2010-08-31 | Wyeth Holdings Corporation | Immunogenic compositions for the prevention and treatment of meningococcal disease |
| AU2003258672B2 (en) | 2002-09-13 | 2008-10-30 | Intercell Ag | Method for isolating hepatitis C virus peptides |
| US8263091B2 (en) | 2002-09-18 | 2012-09-11 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Method of treating and preventing infections in immunocompromised subjects with immunostimulatory CpG oligonucleotides |
| WO2004035618A2 (en) | 2002-10-15 | 2004-04-29 | Intercell Ag | Nucleic acids coding for adhesion factor of group b streptococcus, adhesion factors of group b streptococcus and further uses thereof |
| CN1756843B (zh) | 2003-03-04 | 2012-03-21 | 英特塞尔股份公司 | 化脓链球菌抗原 |
| EP1608402B1 (en) | 2003-03-24 | 2010-10-20 | Intercell AG | Improved vaccines |
| AU2004224747A1 (en) * | 2003-03-24 | 2004-10-07 | Intercell Ag | Use of Alum and a th1 immune response inducing adjuvant for enhancing immune responses |
| WO2004087746A2 (en) | 2003-03-31 | 2004-10-14 | Intercell Ag | Staphylococcus epidermidis antigens |
| CA2522238A1 (en) | 2003-04-15 | 2004-10-28 | Intercell Ag | S. pneumoniae antigens |
| AU2004235952A1 (en) | 2003-05-07 | 2004-11-18 | Intercell Ag | Streptococcus agalactiae antigens I + II |
| CN102304527A (zh) | 2003-05-30 | 2012-01-04 | 英特塞尔股份公司 | 肠球菌抗原 |
| ATE489967T1 (de) * | 2003-07-11 | 2010-12-15 | Intercell Ag | Hcv-vakzin |
| JP4817599B2 (ja) * | 2003-12-25 | 2011-11-16 | 独立行政法人科学技術振興機構 | 免疫活性増強剤とこれを用いた免疫活性の増強方法 |
| KR100721928B1 (ko) | 2004-11-05 | 2007-05-28 | 주식회사 바이오씨에스 | ＣｐＧ 올리고데옥시뉴클레오티드를 함유하는 피부질환의치료 또는 예방용 약학적 조성물 |
| US20090269358A1 (en) | 2005-10-07 | 2009-10-29 | Shone Clifford C | Proteins with Improved Solubility and Methods for Producing and Using Same |
| TW200806315A (en) | 2006-04-26 | 2008-02-01 | Wyeth Corp | Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions |
| DK2040745T3 (da) | 2006-06-28 | 2013-03-18 | Statens Seruminstitut | Udvidelse af T-celle repertoiret til at omfatter subdominante epitoper ved vacci-nation med antigener leveret som proteinfragmenter eller peptidblandinger |
| EP2292645A3 (en) | 2006-07-07 | 2011-05-25 | Intercell AG | Small Streptococcus pyogenes antigens and their use |
| EP2059526A2 (en) | 2006-09-15 | 2009-05-20 | Intercell AG | Borrelia antigens |
| EP1923069A1 (en) | 2006-11-20 | 2008-05-21 | Intercell AG | Peptides protective against S. pneumoniae and compositions, methods and uses relating thereto |
| AR064642A1 (es) | 2006-12-22 | 2009-04-15 | Wyeth Corp | Polinucleotido vector que lo comprende celula recombinante que comprende el vector polipeptido , anticuerpo , composicion que comprende el polinucleotido , vector , celula recombinante polipeptido o anticuerpo , uso de la composicion y metodo para preparar la composicion misma y preparar una composi |
| EP2269624A3 (en) | 2007-01-12 | 2012-08-08 | Intercell AG | Protective proteins of S. agalactiae, combinations thereof and methods of using the same |
| CA2685805A1 (en) | 2007-05-02 | 2008-11-13 | Intercell Ag | Klebsiella antigens |
| DK2158211T3 (en) | 2007-05-31 | 2016-12-05 | Medigene Ag | Mutated structural protein of a parvovirus |
| EP2012122A1 (en) | 2007-07-06 | 2009-01-07 | Medigene AG | Mutated parvovirus structural proteins as vaccines |
| EP2511291A3 (en) | 2007-06-18 | 2012-11-07 | Intercell AG | Chlamydia antigens |
| US8241643B2 (en) | 2008-03-17 | 2012-08-14 | Intercell Ag | Peptides protective against S. pneumoniae and compositions, methods and uses relating thereto |
| RU2010151562A (ru) | 2008-06-20 | 2012-07-27 | ВАЙЕТ ЭлЭлСи (US) | Композиции и способы применения orf1358 из бета-гемолитических стрептококковых штаммов |
| EP2424882A2 (en) | 2009-02-05 | 2012-03-07 | Intercell AG | Peptides protective against e. faecalis, methods and uses relating thereto |
| US8617574B2 (en) | 2009-02-13 | 2013-12-31 | Valneva Austria Gmbh | Nontypable Haemophilus influenzae antigens |
| JP5395264B2 (ja) | 2009-06-22 | 2014-01-22 | ワイス・エルエルシー | 黄色ブドウ球菌（ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）抗原の免疫原性組成物 |
| CA2766418C (en) | 2009-06-22 | 2016-03-29 | Wyeth Llc | Compositions and methods for preparing staphylococcus aureus serotype 5 and 8 capsular polysaccharide conjugate immunogenic compositions |
| EP2470205A1 (en) | 2009-08-27 | 2012-07-04 | Novartis AG | Adjuvant comprising aluminium, oligonucleotide and polycation |
| EP2319871A1 (en) | 2009-11-05 | 2011-05-11 | Sanofi-aventis | Polypeptides for binding to the "receptor for advanced glycation endproducts" as well as compositions and methods involving the same |
| EP2308896A1 (en) | 2009-10-09 | 2011-04-13 | Sanofi-aventis | Polypeptides for binding to the "receptor for advanced glycation endproducts" as well as compositions and methods involving the same |
| KR20120089863A (ko) | 2009-10-09 | 2012-08-14 | 사노피 | “개선된 당화반응 최종 생성물에 대한 수용체”에 결합하기 위한 폴리펩타이드 및 이를 포함하는 조성물 및 방법 |
| WO2011101465A1 (en) | 2010-02-19 | 2011-08-25 | Intercell Ag | Ic31 nanoparticles |
| JP2013522287A (ja) | 2010-03-18 | 2013-06-13 | ノバルティス アーゲー | 血清群ｂ髄膜炎菌のためのアジュバント添加ワクチン |
| PL3170508T3 (pl) | 2010-06-04 | 2020-04-30 | Wyeth Llc | Preparaty szczepionek |
| FI3831406T3 (fi) | 2010-08-23 | 2024-08-06 | Wyeth Llc | Neisseria meningitidis rlp2086 -antigeenien stabiileja formulaatioita |
| KR101907434B1 (ko) | 2010-09-03 | 2018-10-12 | 발네바 오스트리아 게엠베하 | C. 디피실의 a 독소 및 b 독소 단백질의 분리된 폴리펩타이드 및 이의 용도 |
| AR082925A1 (es) | 2010-09-08 | 2013-01-16 | Medigene Ag | Proteinas estructurales mutadas por parvovirus con epitopo de celulas b de proteccion cruzada, producto y metodos relacionados |
| ES2864635T3 (es) | 2010-09-10 | 2021-10-14 | Wyeth Llc | Variantes no lipidadas de antígenos ORF2086 de Neisseria meningitidis |
| KR101808398B1 (ko) | 2010-12-22 | 2017-12-12 | 와이어쓰 엘엘씨 | 스타필로코커스 아우레우스 항원의 안정한 면역원성 조성물 |
| MX346596B (es) * | 2011-05-26 | 2017-03-23 | Intervet Int Bv | Oligodesoxinucleotidos inmunoestimuladores. |
| JP5872685B2 (ja) * | 2011-05-26 | 2016-03-01 | インターベット インターナショナル ベー． フェー． | 免疫刺激性オリゴデオキシヌクレオチド |
| ITMI20111182A1 (it) | 2011-06-28 | 2012-12-29 | Canio Buonavoglia | Vaccino per coronavirus canino |
| WO2013132452A2 (en) | 2012-03-09 | 2013-09-12 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| SA115360586B1 (ar) | 2012-03-09 | 2017-04-12 | فايزر انك | تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها |
| SI3363806T1 (sl) | 2012-12-20 | 2023-04-28 | Pfizer Inc. | Postopek glikokonjugacije |
| EP2964665B1 (en) | 2013-03-08 | 2018-08-01 | Pfizer Inc | Immunogenic fusion polypeptides |
| CA2923129C (en) | 2013-09-08 | 2020-06-09 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| WO2016130569A1 (en) | 2015-02-09 | 2016-08-18 | Mj Biologics, Inc. | A composition comprising pedv antigens and methods for making and using the composition |
| US10829524B2 (en) | 2014-05-09 | 2020-11-10 | Universiteit Utrecht Holding B.V. | CATH2 derivatives |
| WO2016132294A1 (en) | 2015-02-19 | 2016-08-25 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| MX368897B (es) | 2015-05-04 | 2019-10-21 | Pfizer | Conjugados proteina-polisacarido de estreptococo grupo b, metodos para producir conjugados, composiciones inmunogenas que comprenden conjugados y sus usos. |
| US10751402B2 (en) | 2016-11-09 | 2020-08-25 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions and uses thereof |
| PE20191107A1 (es) | 2017-01-31 | 2019-08-26 | Pfizer | Composiciones de neisseria meningitidis y metodos respectivos |
| EP3527223A1 (en) | 2018-02-16 | 2019-08-21 | 2A Pharma AB | Mutated parvovirus structural protein |
| WO2019158636A1 (en) | 2018-02-16 | 2019-08-22 | 2A Pharma Ab | Parvovirus structural protein for the treatment of autoimmune diseases |
| GB2598494B (en) | 2019-05-20 | 2024-07-24 | Valneva Se | A subunit vaccine for treatment or prevention of a respiratory tract infection |
| WO2020240268A1 (en) | 2019-05-31 | 2020-12-03 | Universidad De Chile | An immunogenic formulation that induces protection against shiga toxin-producing escherichia coli (stec) |
| US20230146256A1 (en) | 2020-04-17 | 2023-05-11 | Regents Of The University Of Minnesota | SARS-CoV-2 SPIKE RECEPTOR BINDING DOMAIN AND COMPOSITIONS AND METHODS THEREOF |
| EP4203995A1 (en) | 2020-08-26 | 2023-07-05 | Pfizer Inc. | Group b streptococcus polysaccharide-protein conjugates, methods for producing conjugates, immunogenic compositions comprising conjugates, and uses thereof |
| EP4058056A1 (en) | 2020-10-07 | 2022-09-21 | Valneva Sweden AB | Cholera vaccine formulation |
| WO2023083964A1 (en) | 2021-11-11 | 2023-05-19 | 2A Pharma Ab | Parvovirus structural protein against beta- and gamma-hpv |
| WO2023232901A1 (en) | 2022-06-01 | 2023-12-07 | Valneva Austria Gmbh | Clostridium difficile vaccine |
| WO2024069420A2 (en) | 2022-09-29 | 2024-04-04 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising an rsv f protein trimer |
Family Cites Families (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3725545A (en) | 1971-02-03 | 1973-04-03 | R Maes | Enhancement of antibody production by nucleic acid-polycation complexes |
| US3906092A (en) | 1971-11-26 | 1975-09-16 | Merck & Co Inc | Stimulation of antibody response |
| CA2016841C (en) * | 1989-05-16 | 1999-09-21 | William D. Huse | A method for producing polymers having a preselected activity |
| AU635339B2 (en) * | 1989-10-11 | 1993-03-18 | Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. | Inosine/guanosine derivatives as immunosuppressive agents |
| US5514577A (en) | 1990-02-26 | 1996-05-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide therapies for modulating the effects of herpes viruses |
| JP3228738B2 (ja) * | 1990-12-21 | 2001-11-12 | エフ，ホフマン ― ラ ロシュ アーゲー | Ｈｌａ ｄｑベータｄｎａタイピング |
| US5098437A (en) * | 1991-02-13 | 1992-03-24 | Pfizer Hospital Products Group, Inc. | Acetabular cup positioning insert |
| ATE198773T1 (de) * | 1991-10-23 | 2001-02-15 | Baylor College Medicine | Fingerabdruckartige identifikation von bakterienstämmen mittels amplifikation repetitiver dna-sequenzen |
| US5646262A (en) * | 1994-07-28 | 1997-07-08 | Georgetown University | Antisense oligonucleotides against hepatitis B viral replication |
| ZA964446B (en) * | 1995-06-06 | 1996-12-06 | Hoffmann La Roche | Oligonucleotides specific for hepatitis c virus |
| DE69617274T2 (de) * | 1995-06-06 | 2002-08-08 | Beth Israel Deaconess Medical Center, Boston | Verfahren und vorrichtung für diagnostischen dns-test |
| US20020081577A1 (en) * | 1995-06-06 | 2002-06-27 | Robert L. Kilkuskie | Oligonucleotides speciific for hepatitis c virus |
| AU736785B2 (en) | 1996-10-02 | 2001-08-02 | Government Of The United States Of America, As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services, The | Detection and identification of non-polio enteroviruses |
| ES2241042T3 (es) * | 1996-10-11 | 2005-10-16 | The Regents Of The University Of California | Conjugados de polinucleotido inmunoestimulador/ molecula inmunomoduladora. |
| DE69819150T3 (de) | 1997-06-06 | 2007-12-20 | Dynavax Technologies Corp., San Diego | Immunstimulierende oligonucleotide, zusammensetzungen davon, und verfahren zur verwendung davon |
| US5955443A (en) * | 1998-03-19 | 1999-09-21 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Antisense modulation of PECAM-1 |
| US6001651A (en) * | 1998-03-20 | 1999-12-14 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Antisense modulation of LFA-3 |
| IL126919A0 (en) * | 1998-11-05 | 1999-09-22 | Univ Ben Gurion | Antisense oligomer |
| WO1999067285A1 (en) * | 1998-06-24 | 1999-12-29 | Innogenetics N.V. | Particles of hcv envelope proteins: use for vaccination |
| JP2003510282A (ja) * | 1999-09-25 | 2003-03-18 | ユニバーシティ オブ アイオワ リサーチ ファウンデーション | 免疫刺激核酸 |
| AU2001257366B2 (en) | 2000-05-01 | 2006-03-16 | Idera Pharmaceuticals, Inc. | Modulation of oligonucleotide CpG-mediated immune stimulation by positional modification of nucleosides |
| SK287689B6 (sk) * | 2000-06-08 | 2011-06-06 | Intercell Ag | Použitie molekuly oligodeoxynukleovej kyseliny na výrobu imunostimulačnej farmaceutickej kompozície a farmaceutický prípravok |
| AT410173B (de) * | 2000-06-08 | 2003-02-25 | Cistem Biotechnologies Gmbh | Antigene zusammensetzung |
| EP1608402B1 (en) * | 2003-03-24 | 2010-10-20 | Intercell AG | Improved vaccines |
| US7951845B2 (en) * | 2006-01-19 | 2011-05-31 | The Regents Of The University Of Michigan | Composition and method of treating hearing loss |
-
2001
- 2001-06-07 SK SK1815-2002A patent/SK287689B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2001-06-07 SI SI200130047T patent/SI1296713T1/xx unknown
- 2001-06-07 CZ CZ2002-4168A patent/CZ304195B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-06-07 DK DK01960277T patent/DK1296713T3/da active
- 2001-06-07 JP JP2002501476A patent/JP5271471B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 KR KR20027016711A patent/KR100799788B1/ko active IP Right Grant
- 2001-06-07 AT AT01960277T patent/ATE249839T1/de active
- 2001-06-07 AU AU8181201A patent/AU8181201A/xx active Pending
- 2001-06-07 PL PL358982A patent/PL211036B1/pl unknown
- 2001-06-07 US US10/297,555 patent/US8568742B2/en active Active
- 2001-06-07 MX MXPA02012010A patent/MXPA02012010A/es active IP Right Grant
- 2001-06-07 CN CNB018107974A patent/CN1309418C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 AU AU2001281812A patent/AU2001281812B2/en not_active Expired
- 2001-06-07 HU HU0301229A patent/HU228264B1/hu unknown
- 2001-06-07 EP EP20010960277 patent/EP1296713B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 RU RU2007103151A patent/RU2413520C2/ru active
- 2001-06-07 ES ES01960277T patent/ES2206424T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 TR TR200302015T patent/TR200302015T4/xx unknown
- 2001-06-07 PT PT01960277T patent/PT1296713E/pt unknown
- 2001-06-07 DE DE2001600814 patent/DE60100814T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 IL IL15295901A patent/IL152959A0/xx active IP Right Grant
- 2001-06-07 RU RU2003100409A patent/RU2293573C2/ru active
- 2001-06-07 BR BRPI0111639A patent/BRPI0111639B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-06-07 CA CA2411575A patent/CA2411575C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 WO PCT/EP2001/006433 patent/WO2001093905A1/en active IP Right Grant
-
2002
- 2002-11-18 IS IS6627A patent/IS1993B/is unknown
- 2002-11-20 IL IL152959A patent/IL152959A/en unknown
- 2002-12-04 NO NO20025835A patent/NO329492B1/no not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-12-11 HK HK03109011A patent/HK1056678A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2013
- 2013-01-10 JP JP2013002571A patent/JP5908851B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2013-03-06 US US13/786,815 patent/US8945591B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2014
- 2014-12-30 US US14/585,740 patent/US9492537B2/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US9492537B2 (en) | Methods and compositions involving immunostimulatory oligodeoxynucleotides | |
| US7858588B2 (en) | Immunostimulatory oligodeoxynucleic molecules | |
| AU784403B2 (en) | Pharmaceutical composition for immunomodulation and preparation of vaccines comprising an antigen and an immunogenic oligodeoxynucleotide and a polycationic polymer as adjuvants | |
| AU2001281812A1 (en) | Immunostimulatory oligodeoxynucleotides | |
| ZA200209479B (en) | Immunostimulatory oligodeoxynucleotides. | |
| AU2002320762A1 (en) | Immunostimulatory oligodeoxynucleic molecules |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC4A | Assignment and transfer of rights |
Owner name: INTERCELL AUSTRIA AG, VIENNA, AT Free format text: FORMER OWNER: INTERCELL AG, WIEN, AT Effective date: 20130515 |
|
| TC4A | Change of owner's name |
Owner name: VALNEVA AUSTRIA GMBH, VIENNA, AT Effective date: 20141024 |
|
| MK4A | Patent expired |
Expiry date: 20210607 |