RU2413520C2 - Вакцинная композиция, содержащая иммуностимулирующие олигодезоксинуклеотиды - Google Patents
Вакцинная композиция, содержащая иммуностимулирующие олигодезоксинуклеотиды Download PDFInfo
- Publication number
- RU2413520C2 RU2413520C2 RU2007103151A RU2007103151A RU2413520C2 RU 2413520 C2 RU2413520 C2 RU 2413520C2 RU 2007103151 A RU2007103151 A RU 2007103151A RU 2007103151 A RU2007103151 A RU 2007103151A RU 2413520 C2 RU2413520 C2 RU 2413520C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- monothiophosphate
- monophosphate
- odn
- vaccine composition
- composition according
- Prior art date
Links
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 45
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 title claims abstract description 36
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 54
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 54
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 54
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims abstract description 27
- VGONTNSXDCQUGY-RRKCRQDMSA-N 2'-deoxyinosine Chemical group C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(N=CNC2=O)=C2N=C1 VGONTNSXDCQUGY-RRKCRQDMSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 7
- 101500027983 Rattus norvegicus Octadecaneuropeptide Proteins 0.000 claims abstract 3
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 61
- 229940046166 oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 claims description 58
- 229920000724 poly(L-arginine) polymer Polymers 0.000 claims description 27
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N Thiophosphoric acid Chemical compound OP(O)(S)=O RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 claims description 22
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 claims description 17
- VGONTNSXDCQUGY-UHFFFAOYSA-N desoxyinosine Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 VGONTNSXDCQUGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 150000004712 monophosphates Chemical class 0.000 claims description 12
- GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N dTMP Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 GYOZYWVXFNDGLU-XLPZGREQSA-N 0.000 claims description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 9
- -1 nucleoside monothiophosphate Chemical class 0.000 claims description 8
- 108010093488 His-His-His-His-His-His Proteins 0.000 claims description 7
- WKKCYLSCLQVWFD-UHFFFAOYSA-N 1,2-dihydropyrimidin-4-amine Chemical compound N=C1NCNC=C1 WKKCYLSCLQVWFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- YKBGVTZYEHREMT-KVQBGUIXSA-N 2'-deoxyguanosine Chemical compound C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 YKBGVTZYEHREMT-KVQBGUIXSA-N 0.000 claims description 6
- PHNGFPPXDJJADG-RRKCRQDMSA-N 2'-deoxyinosine-5'-monophosphate Chemical compound O1[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C[C@@H]1N1C(N=CNC2=O)=C2N=C1 PHNGFPPXDJJADG-RRKCRQDMSA-N 0.000 claims description 6
- 229920002851 polycationic polymer Polymers 0.000 claims description 6
- 108700042778 Antimicrobial Peptides Proteins 0.000 claims description 5
- 102000044503 Antimicrobial Peptides Human genes 0.000 claims description 5
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 claims description 5
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 claims description 5
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 claims description 4
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 claims description 4
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 108010039918 Polylysine Proteins 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 108060001132 cathelicidin Proteins 0.000 claims description 3
- 102000014509 cathelicidin Human genes 0.000 claims description 3
- POIUWJQBRNEFGX-XAMSXPGMSA-N cathelicidin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC(C)C)C1=CC=CC=C1 POIUWJQBRNEFGX-XAMSXPGMSA-N 0.000 claims description 3
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 3
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 3
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 3
- 108010011110 polyarginine Proteins 0.000 claims description 3
- 229920000656 polylysine Polymers 0.000 claims description 3
- 239000003910 polypeptide antibiotic agent Substances 0.000 claims description 3
- KHWCHTKSEGGWEX-RRKCRQDMSA-N 2'-deoxyadenosine 5'-monophosphate Chemical group C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 KHWCHTKSEGGWEX-RRKCRQDMSA-N 0.000 claims description 2
- LTFMZDNNPPEQNG-KVQBGUIXSA-N 2'-deoxyguanosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 LTFMZDNNPPEQNG-KVQBGUIXSA-N 0.000 claims description 2
- MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 2'-deoxyuridine Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-SHYZEUOFSA-N 0.000 claims description 2
- RPFPNGBGDKGFRI-XLPZGREQSA-N 9-[(2r,4s,5r)-4-hydroxy-5-(hydroxymethyl)oxolan-2-yl]-2-methyl-3h-purin-6-one Chemical compound C12=NC(C)=NC(O)=C2N=CN1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 RPFPNGBGDKGFRI-XLPZGREQSA-N 0.000 claims description 2
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 claims description 2
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 claims description 2
- COVHWGAKPGOZBI-QJPTWQEYSA-N [(2r,3s,5r)-3-hydroxy-5-[6-(3-methylbut-3-enylamino)purin-9-yl]oxolan-2-yl]methyl dihydrogen phosphate Chemical compound C1=NC=2C(NCCC(=C)C)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](COP(O)(O)=O)O1 COVHWGAKPGOZBI-QJPTWQEYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 claims description 2
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 claims description 2
- MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N desoxyuridine Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 MXHRCPNRJAMMIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 claims description 2
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 claims description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims description 2
- RVUPEZHWLRDMDM-FIXISWKDSA-N (2r,3s,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)-5-(3-methylbut-3-enyl)oxolan-3-ol Chemical compound C1=NC2=C(N)N=CN=C2N1[C@@]1(CCC(=C)C)C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 RVUPEZHWLRDMDM-FIXISWKDSA-N 0.000 claims 1
- ZWQNEFFHBSGFHV-HKMNZKMDSA-N (E)-3-[(7S)-7-amino-8-oxo-5,6,7,9-tetrahydropyrido[2,3-b]azepin-3-yl]-N-methyl-N-[(3-methyl-1-benzofuran-2-yl)methyl]prop-2-enamide Chemical compound N[C@H]1CCC2=C(NC1=O)N=CC(=C2)/C=C/C(=O)N(CC=1OC2=C(C=1C)C=CC=C2)C ZWQNEFFHBSGFHV-HKMNZKMDSA-N 0.000 claims 1
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 claims 1
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 claims 1
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 claims 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 abstract description 18
- 230000006698 induction Effects 0.000 abstract description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 7
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 206010067484 Adverse reaction Diseases 0.000 abstract description 2
- 230000006838 adverse reaction Effects 0.000 abstract description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 53
- JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-4-amino-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2-azaniumyl-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-carboxylatobutanoyl]amino]-6-azaniumy Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JVJGCCBAOOWGEO-RUTPOYCXSA-N 0.000 description 39
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 31
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 31
- 229940046168 CpG oligodeoxynucleotide Drugs 0.000 description 29
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 28
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 28
- 108010058846 Ovalbumin Proteins 0.000 description 24
- 229940092253 ovalbumin Drugs 0.000 description 24
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 24
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 23
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 17
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 16
- 108010062580 Concanavalin A Proteins 0.000 description 15
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 15
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 14
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 14
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 description 13
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 11
- 238000012705 nitroxide-mediated radical polymerization Methods 0.000 description 11
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 11
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 10
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 10
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 10
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 10
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 10
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 10
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 9
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 9
- 102100031413 L-dopachrome tautomerase Human genes 0.000 description 8
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 8
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 8
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical group [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 7
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 6
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 6
- 210000005006 adaptive immune system Anatomy 0.000 description 6
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 108010007004 cathelin Proteins 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 6
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 6
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 6
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 6
- LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 3-Amino-1-methyl-5H-pyrido[4,3-b]indole Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C=C(N)N=C2C LKKMLIBUAXYLOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 5
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 5
- 101710093778 L-dopachrome tautomerase Proteins 0.000 description 5
- 101710173694 Short transient receptor potential channel 2 Proteins 0.000 description 5
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 5
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 5
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 5
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 5
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 5
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 5
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 4
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 4
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 4
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 230000009471 action Effects 0.000 description 4
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 4
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 4
- 108010051081 dopachrome isomerase Proteins 0.000 description 4
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 4
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 4
- NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N Guanosine Chemical group C1=NC=2C(=O)NC(N)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O NYHBQMYGNKIUIF-UUOKFMHZSA-N 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 3
- 241000725303 Human immunodeficiency virus Species 0.000 description 3
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 3
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 3
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical class NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 3
- 238000001212 derivatisation Methods 0.000 description 3
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 3
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 3
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 3
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 3
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 3
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 3
- 125000000548 ribosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 3
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 description 3
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 2
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 101000609762 Gallus gallus Ovalbumin Proteins 0.000 description 2
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 2
- 241000701044 Human gammaherpesvirus 4 Species 0.000 description 2
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 2
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 2
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 241000224016 Plasmodium Species 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical group O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 2
- 230000034994 death Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 2
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 2
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 2
- 125000003835 nucleoside group Chemical group 0.000 description 2
- 244000045947 parasite Species 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 2
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 2
- FERYXNKLCFJNMG-QJPTWQEYSA-N (2r,3s,5r)-2-(hydroxymethyl)-5-[6-(3-methylbut-3-enylamino)purin-9-yl]oxolan-3-ol Chemical compound C1=NC=2C(NCCC(=C)C)=NC=NC=2N1[C@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O1 FERYXNKLCFJNMG-QJPTWQEYSA-N 0.000 description 1
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WDRISBUVHBMJEF-MROZADKFSA-N 5-deoxy-D-ribose Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O WDRISBUVHBMJEF-MROZADKFSA-N 0.000 description 1
- 208000030507 AIDS Diseases 0.000 description 1
- 108700031308 Antennapedia Homeodomain Proteins 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 229920002101 Chitin Polymers 0.000 description 1
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 1
- 201000005019 Chlamydia pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 241000606153 Chlamydia trachomatis Species 0.000 description 1
- MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N Crotonoside Natural products C1=NC2=C(N)NC(=O)N=C2N1[C@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O MIKUYHXYGGJMLM-GIMIYPNGSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N D-guanosine Natural products C1=2NC(N)=NC(=O)C=2N=CN1C1OC(CO)C(O)C1O NYHBQMYGNKIUIF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N D-ribofuranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H]1O HMFHBZSHGGEWLO-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 1
- 229920000057 Mannan Polymers 0.000 description 1
- 201000005505 Measles Diseases 0.000 description 1
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 1
- 108091081548 Palindromic sequence Proteins 0.000 description 1
- 201000005702 Pertussis Diseases 0.000 description 1
- 102100029251 Phagocytosis-stimulating peptide Human genes 0.000 description 1
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 1
- 108091036414 Polyinosinic:polycytidylic acid Proteins 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 241000702670 Rotavirus Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 206010040070 Septic Shock Diseases 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 201000005010 Streptococcus pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- 210000000447 Th1 cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010044248 Toxic shock syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000650 Toxic shock syndrome Toxicity 0.000 description 1
- 108010084754 Tuftsin Proteins 0.000 description 1
- 102000003425 Tyrosinase Human genes 0.000 description 1
- 108060008724 Tyrosinase Proteins 0.000 description 1
- 241000607626 Vibrio cholerae Species 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 1
- 229940065181 bacillus anthracis Drugs 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 1
- 238000009566 cancer vaccine Methods 0.000 description 1
- 229940022399 cancer vaccine Drugs 0.000 description 1
- 229940095731 candida albicans Drugs 0.000 description 1
- 201000011529 cardiovascular cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000002975 chemoattractant Substances 0.000 description 1
- 230000003399 chemotactic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000991 chicken egg Anatomy 0.000 description 1
- 229940038705 chlamydia trachomatis Drugs 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000002498 deadly effect Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 206010013023 diphtheria Diseases 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 102000035122 glycosylated proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005608 glycosylated proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229940029575 guanosine Drugs 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 208000005252 hepatitis A Diseases 0.000 description 1
- 208000002672 hepatitis B Diseases 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 239000012642 immune effector Substances 0.000 description 1
- 230000008105 immune reaction Effects 0.000 description 1
- 230000000899 immune system response Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 230000005923 long-lasting effect Effects 0.000 description 1
- LUEWUZLMQUOBSB-GFVSVBBRSA-N mannan Chemical class O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@@H](O[C@@H]2[C@H](O[C@@H](O[C@H]3[C@H](O[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H]3O)CO)[C@@H](O)[C@H]2O)CO)[C@H](O)[C@H]1O LUEWUZLMQUOBSB-GFVSVBBRSA-N 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N methylphosphonic acid Chemical class CP(O)(O)=O YACKEPLHDIMKIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- CGPPXVAUDMUIPK-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid trihydroxy(sulfanylidene)-lambda5-phosphane Chemical compound OP(O)(O)=O.OP(O)(O)=S CGPPXVAUDMUIPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004437 phosphorous atom Chemical group 0.000 description 1
- 208000030773 pneumonia caused by chlamydia Diseases 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000037452 priming Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-L thiosulfate(2-) Chemical group [O-]S([S-])(=O)=O DHCDFWKWKRSZHF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 1
- 229940035670 tuftsin Drugs 0.000 description 1
- IESDGNYHXIOKRW-LEOABGAYSA-N tuftsin Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O IESDGNYHXIOKRW-LEOABGAYSA-N 0.000 description 1
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- 229940118696 vibrio cholerae Drugs 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- 244000052613 viral pathogen Species 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
- C07H21/04—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids with deoxyribosyl as saccharide radical
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/0005—Vertebrate antigens
- A61K39/0011—Cancer antigens
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/24—Heterocyclic radicals containing oxygen or sulfur as ring hetero atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/117—Nucleic acids having immunomodulatory properties, e.g. containing CpG-motifs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55516—Proteins; Peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55561—CpG containing adjuvants; Oligonucleotide containing adjuvants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/18—Type of nucleic acid acting by a non-sequence specific mechanism
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/31—Chemical structure of the backbone
- C12N2310/315—Phosphorothioates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/30—Chemical structure
- C12N2310/33—Chemical structure of the base
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Abstract
Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и медицины. Предложена вакцинная композиция, содержащая иммуностимулирующую олигодезоксинуклеиновую кислоту, содержащую дезоксиинозиновые остатки (I-ODN) и антигены. Такие вакцинные композиции вызывают более эффективный иммунный ответ по сравнению с ODN на основе последовательности CpG и снижают индукцию побочных реакций. 12 з.п. ф-лы, 9 ил.
Description
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к области биотехнологии и медицины и, в частности к иммуностимулирующим олигодезоксинуклеотидам (ODN) и фармацевтическим композициям, содержащим такие ODN.
Уровень техники
Вакцины могут спасти больше жизней (и ресурсов), чем любое другое медицинское вмешательство (Nossal, 1998). Благодаря всемирным программам вакцинации частота заболеваний многими смертельными болезнями резко сократилась. Хотя такое представление действительно для целого ряда болезней, например, туберкулеза, дифтерии, коклюша, кори и столбняка, не существует эффективных вакцин для многих инфекционных болезней, в том числе большинства вирусных инфекций, таких как СПИД. Также не существует эффективных вакцин для других болезней, инфекционных или неинфекционных, посягающих на миллионы жизней миллионов пациентов в год, включая малярию или рак. Кроме того, быстрое появление бактерий и микроорганизмов, устойчивых к антибиотикам, вызывает к жизни альтернативные способы лечения вакцинами, что является логичным выбором. Наконец, большая потребность в вакцинах также иллюстрируется тем фактом, что инфекционные болезни, а не сердечно-сосудистые нарушения или рак или травмы, остаются самой основной причиной смерти и потери трудоспособности в мире (Bloom and Widdus, 1998).
С иммунологической точки зрения, одна из основных проблем в области вакцин на сегодняшний день состоит в том, что традиционные вакцины (и/или иммуномодулирующие соединения, содержащиеся в таких препаратах) создаются для индукции высокого уровня антител (Harrow and Lane, 1988). Однако свои собственные антитела неэффективны при предупреждении большого ряда заболеваний, включая большинство болезней, вызываемых вирусами, внутриклеточными бактериями, некоторыми паразитами, и рак. Примерами таких болезней являются, но не ограничиваются перечисленным, болезни, вызванные вышеуказанным вирусом ВИЧ или видом Plasmodium в случае малярии. На многих экспериментальных системах показано, что в случае таких показаний важна клеточная ветвь иммунной системы, включая Т-клетки, а не гуморальная ветвь. Следовательно, требуются новые передовые технологии для преодоления ограничений традиционных вакцин. Необходимо сосредоточиться на технологиях, которые надежно индуцируют клеточную иммунную систему, включая антигенспецифические Т-клетки, узнающие молекулы, экспрессированные в клетках, зараженных патогенными микроорганизмами. В идеале, создаются вакцины, индуцирующие как Т-клетки, отличающие заболевшие и/или инфицированные клетки от здоровых клеток, так и одновременно антитела, секретированные В-клетками, узнающими патогенные микроорганизмы во внеклеточных компартментах.
Некоторые созданные вакцины состоят из живых аттенюированных организмов, где существует опасность реверсии к вирулентному штамму дикого типа. В частности, у хозяев с ослабленным иммунитетом это обстоятельство может стать сценарием с угрозой для жизни. С другой стороны, вакцины вводят в виде сочетания антигенов, происходящих от патогенного микроорганизма, и соединений, индуцирующих или усиливающих иммунные реакции против таких антигенов (такие соединения обычно называют адъювантами), так как субъединичные вакцины сами по себе, как правило, неэффективны.
Хотя нет сомнения в том, что вышеописанные вакцины важны для консервативного лечения, существует такой недостаток, что из-за своей сложности они могут вызывать серьезное побочное действие, например, на антигены, содержащиеся в вакцинах, что отражает перекрестную активность в отношении молекул, экспрессированных клетками вакцинированных индивидуумов. Кроме того, трудно удовлетворить существующие требования регулирующих органов, например, Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), Управления по санитарному надзору за пищевыми продуктами и медикаментами (FDA) и аналогичных европейских учреждений, в отношении строгих технических условий на состав вакцины и механизмы индукции иммунитета.
Антигенпрезентирующие клетки принадлежат к врожденной иммунной системе, развивающейся как первая линия защиты хозяина, которая своевременно ограничивает инфекцию после воздействия микроорганизмов (Hoffman et al., 1999). Клетки врожденной иммунной системы узнают конфигурации или относительно неспецифические структуры, экспрессированные на их клетках-мишенях, вероятнее, чем более сложные специфические структуры, которые узнает адаптивная иммунная система (Hoffman et al., 1999). Примерами клеток врожденной иммунной системы являются макрофаги и дендритные клетки, а также гранулоциты (например нейтрофилы), природные киллерные клетки и другие клетки. Напротив, клетки адаптивной иммунной системы узнают специфические антигенные структуры, включая пептиды, в случае Т-клеток, и пептиды, а также трехмерные структуры в случае В-клеток. Адаптивная иммунная система значительно специфичнее и сложнее, чем врожденная иммунная система, и улучшается после повторного воздействия данного патогенного микроорганизма/антигена. Филогенетически врожденная иммунная система значительно старше и может быть обнаружена уже в очень примитивных организмах. Тем не менее врожденная иммунная система является критическим фактором во время начальной фазы антигенного воздействия, так как кроме ограничения патогенных микроорганизмов, клетки врожденной иммунной системы, т.е. АПК (АРС), примируют клетки адаптивной иммунной системы и таким образом стимулируют специфические иммунные реакции, приводящие к клиренсу "незваных гостей". В итоге клетки врожденной иммунной системы, и в частности АПК, играют критическую роль во время фазы индукции иммунных реакций путем а) сдерживания заражения с помощью системы узнавания примитивных структур и b) примирования клеток адаптивной иммунной системы, приводящего к специфическим иммунным реакциям и запоминанию, результатом которых является клиренс вторгающихся патогенных микроорганизмов или других клеток-мишеней (Roitt et al., 1998). Указанные механизмы также могут быть важными для выведения или сдерживания опухолевых клеток.
Как указывалось выше, клетки врожденной иммунной системы узнают структуры, экспрессированные на их соответствующих мишенях. Примерами являются липополисахариды (ЛПС) в случае грамотрицательных бактерий, микобактериальные гликолипиды, липотейхоевые кислоты грамположительных бактерий, маннаны дрожжей и двухцепочечные РНК вирусов (Hoffman et al., 1999). Кроме того, они могут узнавать такие структуры, как с измененными гликозилированиями белков на опухолевых клетках.
Полученные в последнее время данные описывают ДНК простейших или низших эукариотов как дополнительную структуру, узнаваемую врожденной (но возможно, также адаптивной) иммунной системой млекопитающих (и, вероятно, большинства, если не всех, позвоночных) (Kreig, 1996; Lipford et al., 1998).
Иммунная система узнает низшие организмы, включая бактерии, из-за обычных структурных различий и различий в последовательностях между патогенным микроорганизмом и ДНК хозяина. В частности, мишенями являются короткие нити ДНК, образующиеся у беспозвоночных, или в форме коротких синтетических ODN, содержащих неметилированные динуклеотиды цитозин-гуанин (CpG) в контексте определенных оснований (Kreig et al., 1995). Мотивы CpG обнаруживаются с ожидаемой частотой в бактериальной ДНК, но со значительно меньшей частотой в ДНК позвоночных (Lipford et al., 1998; Pisetsky, 1999). Кроме того, мотивы CpG беспозвоночных (т.е. бактериальные) являются неметилированными, в то время как последовательности CpG позвоночных метилированы. Такие различия между бактериальной ДНК и ДНК позвоночных позволяют позвоночным узнавать ДНК беспозвоночного как сигнал опасности.
Природные ODN, содержащие CpG ДНК, а также тиофосфатзамещенные (с заменой фосфатных остатков на тиофосфатные) ODN, содержащие мотивы CpG (CpG-ODN), являются не только сильными активаторами пролиферации иммунных клеток и гуморальных иммунных реакций (Krieg et al., 1995), но также стимулируют сильные клеточные иммунные реакции (обзор в Lipford et al., 1998). ДНК/ODN, содержащие неметилированные мотивы CpG, могут непосредственно активировать моноциты (дендритные клетки, макрофаги) и В-клетки. Подобным образом, природные киллерные (NK) клетки непосредственно не активируются, но реагируют на EI-12 (интерлейкин 12), образованный моноцитами, с заметным повышением продуцирования ими IFN-γ (Chace et al., 1997). В результате индукция моноцитов и NK-клеток CpG-ДНК промотирует индукцию ответов типа Th-1 и рост цитотоксических Т-клеток.
Известно, что рибонуклеиновая кислота на основе инозина и цитозина, подобно полиинозиновой-полицитидиловой кислоте (поли-I:С), промотирует Th-1-специфические иммунные реакции. Известно, что она стимулирует продукцию цитокинов в макрофагах, таких как IL-1α и IL-12 (Manetti et al., 1995), она также известна как сильный индуктор интерферона типа 1 (Manetti et al., 1995) и как сильный стимулятор NK-клеток (Cavanaugh et al., 1996).
Однако такое действие строго ограничено рибонуклеиновой кислотой, содержащей инозиновые и цитидиновые остатки (WO 98/16247).
Раскрытие изобретения
Исследования авторов настоящего изобретения показали, что ODN, содержащие неметилированные мотивы CpG, хотя и эффективны при стимулировании иммунной системы, имеют существенные недостатки, особенно в отношении специфичности (высокий фон) и индукции побочного действия, такого как высокое системное образование TNF-α. Известно, что значительное системное высвобождение TNF-α вызывает токсический шок, который может вызвать смерть больного.
Поэтому целью настоящего изобретения являются подходящие новые ODN, не оказывающие такого сильного побочного действия как ODN на основе последовательностей CpG. Другой целью является снижение побочного действия фармацевтических композиций, содержащих известные ODN, и безопасные и эффективные хорошо переносимые фармацевтические композиции с эффективными иммуностимулирующими свойствами, подходящие для вакцинации животных, в частности млекопитающих, включая людей.
Такая цель достигается с помощью иммуностимулирующих олигодезоксинуклеиновых кислот (ODN), имеющих строение, согласно формуле (I)
где любой Х представляет собой О или S,
и где
любой NMP представляет собой монофосфат или монотиофосфат дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин-, дезоксиинозин-, дезоксицитозин-, дезоксиуридин-, дезокситимидин-, 2-метилдезоксиинозин-, 5-метилдезоксицитозин-, дезоксипсевдоуридин-, дезоксирибозопурин-, 2-аминодезоксирибозопурин-, 6-S-дезоксигуанин-, 2-диметилдезоксигуанозин- или N-изопентенилдезоксиаденозин-монофосфата или -монотиофосфата,
NUC представляет собой 2'-дезоксинуклеозид, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин-, дезоксиинозин-, дезоксицитозин-, дезоксиуридин-, дезокситимидин-, 2-метилдезоксиинозин-, 5-метилдезоксицитозин-, дезоксипсевдоуридин-, дезоксирибозопурин-, 2-аминодезоксирибозопурин-, 6-S-дезоксигуанин-, 2-диметилдезоксигуанозин- или N-изопентенил-дезоксиаденозина,
а и b являются целыми числами от 0 до 100, при условии, что а+b равно величине от 4 до 150,
В и Е являются группами, обычными для 5'- или 3'-концов молекул нуклеиновых кислот.
Неожиданно оказалось, что ODN, содержащие дезоксиинозиновые остатки (I-ODN), показывают иммуностимулирующее действие, сравнимое с действием ODN, содержащих мотивы CpG, или во многих случаях даже его превосходящее. Кроме того, ODN, по настоящему изобретению, вызывают более специфические иммунные реакции на данный антиген или фрагмент антигена, чем CpG-ODN. Кроме того, ODN по настоящему изобретению, снижают индукцию вредных побочных реакций, в частности, индукцию системного TNF-α или IL-6.
В то время как описано определенное иммуностимулирующее действие инозинсодержащих молекул РНК, таких как поли-IC, или молекул, указанных в WO 98/16247, неожиданно оказалось, что хорошими иммуностимулирующими ODN могут быть молекулы дезоксинуклеиновых кислот, содержащие дезоксиинозиновые остатки.
Кроме того, I-ODN по настоящему изобретению, в отличие от ODN на основе специфического мотива CpG, не зависят от специфического мотива или палиндромной последовательности, как это описывается для CpG-олигонуклеотидов (см., например, ЕР 0468520А2, WO 96/02555, WO 98/18810, WO 98/37919, WO 98/52581, WO 99/51259 и WO 99/56755, включенные в данное описание в качестве ссылок). Следовательно, одна группа I-ODN, по настоящему изобретению, может, предпочтительно, содержать мотив CI (и, следовательно, ODN, описанные в указанных ссылках, где один или несколько остатков гуанозина заменены остатками дезоксиинозина, являются предпочтительными вариантами ODN настоящего изобретения). Это не является необходимостью для основного свойства иммуностимулирования, так как проявление иммуностимулирующих свойств I-ODN с инозином также не определяется связью с местоположением CI или IC.
Следовательно, I-ODN, по настоящему изобретению, представляет собой молекулу ДНК, содержащую остаток дезоксиинозина, находящийся, предпочтительно, в одноцепочечной форме.
I-ODN, по настоящему изобретению, можно выделить с помощью рекомбинантных методов или синтезировать химически. В последнем случае I-ODN, по настоящему изобретению, также может содержать модифицированные олигонуклеотиды, которые можно синтезировать с использованием стандартных химических трансформаций, такие как метилфосфонаты или другие модифицированные по фосфору олигонуклеотиды, такие как фосфотриэфиры, фосфоамидаты и фосфородитиораты. Также можно использовать другие модифицированные не по фосфору олигонуклеотиды (Stirchak et al., MAR, 17 (1989), 6129-6141), однако, предпочтительным из монофосфатов или монотиофосфатов для применения в настоящем изобретения является монофосфат 2'-дезоксинуклеозида.
NMP I-ODN, по настоящему изобретению, выбирают, предпочтительно, из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин-, дезоксиинозин-, дезоксицитозин-, дезоксиуридин-, дезокситимидин-, 2-метилдезоксиинозин-, 5-метилдезоксицитозин-монофосфата или -монотиофосфата (как правило, фосфатная или тиофосфатная группа находится в 5' дезоксирибозы). В то время как для ODN на основе мотива CpG существенно, что указанный мотив не метилирован, неожиданно, это несущественно в случае ODN, по настоящему изобретению, где, например, 2-метилдезоксиинозиновый или 5-метилдезоксицитозиновый остатки не оказывают отрицательного действия на иммуностимулирующие свойства ODN по настоящему изобретению. С другой стороны, в позиции 2 рибозогруппы вместо 2-дезоксиформ NMP могут присутствовать также другие, в особенности, инертные, группы, такие как, например, -F, -NH2, -СН3, в особенности, -СН3. Конечно, для ODN, по настоящему изобретению, исключается наличие групп -ОН и SH в позиции 2 рибозы, в особенности, для остатка рибозы в случае NMP, содержащего инозин.
Длина ODN, по настоящему изобретению, находится в интервале стандартных ODN, используемых согласно существующему уровню техники. Поэтому молекулы с общей длиной до 4 и свыше 150 показывают постепенное падение иммуностимулирующего потенциала. Предпочтительные ODN содержат от 10 до 60, в частности от 15 до 40, оснований (нуклеозидов), причем предполагается, что в таких предпочтительных вариантах a+b в формуле I составляет от 10 до 60, предпочтительно - от 15 до 40.
В то время как молекулы рибонуклеиновой кислоты, содержащие инозин и цитидин, описанные в уровне техники как иммуностимуляторы, являются крупными и относительно неидентифицированными полинуклеиновыми кислотами с молекулярной массой значительно более 200000 (коммерчески доступная полиинозиновая-полицитидиловая кислота от Sigma Chemicals имеет молекулярную массу, колеблющуюся от 220000 до 460000 (по меньшей мере 500-1000 остатков C+I), молекулы по настоящему изобретению являются молекулами ДНК значительно меньшей длины и установленной длины и состава, причем хорошо воспроизводятся в продуктах.
Также предпочтительно, когда содержащий дезоксиинозин NMP I-ODN, соответствующего формуле I, является монофосфатной группой с одним-четырьмя атомами серы, и когда также другие NMP, в частности - все другие NMP, присутствуют в виде монотиофосфатов нуклеозидов, поскольку такие ODN проявляют более высокую устойчивость к нуклеазам (в случае настоящего изобретения ясно, что "моно" в "монотиофосфат" относится к фосфату, т.е., что в каждом NMP присутствует одна фосфатная группа (один атом фосфора)). Предпочтительно, чтобы в NMP, согласно настоящему изобретению, по меньшей мере один из X1 и X2 представлял собой S, и по меньшей мере один из Х3 и Х4 представлял собой О. Предпочтительно, когда Х3 и Х4 представляют собой О. (Х3 может быть образован (из-за синтеза NMP) от фосфатной группы или от 3'-группы NMP-рибозы.)
Предпочтительно, ODN, по настоящему изобретению, содержат последовательность
hhh wdi dhh h
nhh hhh wdi nhh hhh hhh wn,
nhh wdi din hhh hdi ndi nh,
nhh hhh wdi dhh hhh hhh wn или
nhh wdi did hhh hdi ddi dh,
где
любой n представляет собой монофосфат или монотиофосфат 2'-дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин-, дезоксицитозин- или дезокситимидин-монофосфата или монотиофосфата,
любой h представляет собой монофосфат или монотиофосфат 2'-дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксицитозин- или дезокситимидин-монофосфата или -монотиофосфата,
i представляет собой дезоксиинозинмонофосфат или -монотиофосфат,
любой w представляет собой монофосфат или монотиофосфат 2'-дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин- или дезокситимидин-монофосфата или -монотиофосфата, и
любой d представляет собой монофосфат или монотиофосфат 2'-дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин- или дезокситимидин-монофосфата или -монотиофосфата.
Как описано выше, специфический мотив (такой как CpG или палиндром) не является необходимым для I-ODN по настоящему изобретению. Однако ODN, содержащие мотив CI, предпочтительны, так что в предпочтительном варианте воплощения изобретения ODN, соответствующий формуле I, содержит по меньше мере один 2'-дезоксицитозин-монофосфат или -монотиофосфат, 3'-соседний с 2'-дезоксиинозин-монофосфатом или -монотиофосфатом, для образования такого 5'-СI 3'-мотива.
Предпочтительные ODN, по настоящему изобретению, содержат одну или несколько последовательностей
gacitt,
iacitt,
gaictt,
iaictt,
где
а представляет собой дезоксиаденозин-монофосфат или -монотиофосфат,
g представляет собой дезоксигуанозин-монофосфат или -монотиофосфат,
i представляет собой дезоксиинозин-монофосфат или -монотиофосфат,
с представляет собой дезоксицитозин-монофосфат или -монотиофосфат, и
t представляет собой дезокситимидин-монофосфат или -монотиофосфат.
ODN, по настоящему изобретению, являются особенно подходящими для применения в области фармацевтики, например, для применения в качестве лекарства для животного или для человека. Они специфически адаптированы для того, чтобы действовать как иммуностимулирующее средство, в частности, вместе с вакцинами.
Следовательно, настоящее изобретение также относится к фармацевтической композиции, содержащей ODN по настоящему изобретению.
Так как предпочтительной фармацевтической композицией по настоящему изобретению является вакцина, такая композиция, кроме ODN, по настоящему изобретению, должна содержать антиген. Потенциал такого антигена для возникновения защитной/иммунной реакции у вакцинированного индивидуума сильно возрастает за счет сочетания его с ODN, по настоящему изобретению, в частности, из-за их иммуностимулирующей активности.
Вакцина может содержать самые разные антигены. Примерами таких антигенов являются полностью убитые организмы, такие как инактивированные вирусы или бактерии, грибы, простейшие или даже раковые клетки. Антигены также могут состоять из субфракций таких организмов/тканей, белков или, в их самой простой форме, из пептидов. Антигены также могут распознаваться иммунной системой в форме гликозилированных белков или пептидов, и также могут представлять собой или содержать полисахариды или липиды. Можно использовать короткие пептиды, так как, например, Т-цитотоксичные клетки (CTL) узнают антигены в форме коротких пептидов, как правило, длиной в 8-11 аминокислот, в сочетании с главным комплексом гистосовместимости (ГКГС, МНС) (Rammensee et al., Immunogenetics, 41 (1995), 178-228). В-Клетки узнают более длинные пептиды, длиной начиная примерно с 15 аминокислот (Harrow et al., Cold Spring Harbor: Cold Spring Harbor Laboratory (1988)). В отличие от Т-клеточных эпитопов, трехмерная структура В-клеточных антигенов также может быть важна для узнавания антителами. Для того, чтобы получить длительные антигенспецифические иммунные реакции, полезны адъюванты для запуска каскадов иммунных реакций, в которые, по необходимости, вовлекаются все клетки иммунной системы. В первую очередь адъюванты действуют, но не ограничиваются по способу такого своего действия, на так называемые антигенпрезентирующие клетки (АПК). Такие клетки, как правило, сначала сталкиваются с антигеном(-ами) с последующим представлением процессированного или немодифицированного антигена иммунному эффектору. Также могут участвовать промежуточные типы клеток. Только эффекторные клетки с соответствующей специфичностью активируются при мощной иммунной реакции. Адъювант также может локально удерживать антигены и другие привнесенные совместно факторы. Кроме того, адъювант может действовать как хемоатрактант для других иммунных клеток, или может действовать локально и/или системно как стимулятор для иммунной системы.
Согласно предпочтительному варианту воплощения изобретения, в качестве антигенов используют Т-клеточные эпитопы. С другой стороны, также предпочтительным может быть сочетание Т-клеточных эпитопов и В-клеточных эпитопов.
Антигены, используемые в настоящем изобретении, не являются критичным фактором. Конечно, согласно настоящему изобретению, также возможно использование смесей различных антигенов. Предпочтительно, в качестве таких антигенов используют белки или пептиды, полученные от вирусных или бактериальных патогенных микроорганизмов, или от грибов или паразитов (включая дериватизированные антигены или гликозилированные или липидированные антигены, или полисахариды или липиды). Другим предпочтительным источником антигенов являются опухолевые антигены. Предпочтительные патогенные микроорганизмы выбирают из числа вируса иммунодефицита человека (ВИЧ), вирусов гепатита А и В, вируса гепатита С (HCV), вируса саркомы Рауса (RSV), вируса Эпштейна-Барр (EBV), вируса гриппа, ротавируса, Staphylococcus aureus, Chlamydia pneumonias, Chlamydia trachomatis, Mycobacterium tuberculosis, Streptococcus pneumonias, Bacillus anthracis, Vibrio cholerae, вида Plasmodium (Pl. falciparum, Pl. vivax, и т.п.), вида Aspergillus или Candida albicans. Антигены также могут представлять собой молекулы, экспрессированные раковыми клетками (опухолевые антигены). Способ дериватизации может включать выделение белков в чистом виде из патогенных микроорганизмов/раковых клеток, инактивацию патогенного микроорганизма, а также протеолитическую или химическую дериватизацию или стабилизацию такого белка. На тех же условиях в фармацевтической композиции, по настоящему изобретению, также можно использовать опухолевые антигены (вакцины против рака) или аутоиммунные антигены. С такими композициями можно осуществлять вакцинацию против опухолей или лечение аутоиммунных заболеваний.
В случае пептидных антигенов в настоящее изобретение включают применение пептидных мимитопов/агонистов/ сверхагонистов/антагонистов или пептидов, измененных в некоторых позициях без воздействия на иммунологические свойства, или непептидных мимитопов/агонистов/ сверхагонистов/антагонистов (обзор в Sparbier and Walden, 1999). Пептидные антигены также могут содержать элонгации или по карбокси- или по аминоконцу пептидного антигена, облегчающие взаимодействие с поликатионным(и) соединением(ями) или иммуностимулирующим(и) соединением(ями). Для лечения аутоиммунных заболеваний можно применять пептидные антагонисты.
Антигены также можно дериватизировать с целью включения молекул, усиливающих презентацию антигена и направление антигена к антигенпрезентирующим клеткам.
В одном из вариантов воплощения изобретения фармацевтическая композиция служит для придания толерантности к белкам или белковым фрагментам и пептидам, которые принимают участие в аутоиммунных заболеваниях. Антигены, используемые в таких вариантах, служат для того, чтобы вызвать толерантность иммунной системы или иммунные реакции по типу отрицательной связи против эпитопов, принимающих участие в аутоиммунных заболеваниях.
Предпочтительно, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению, в частности, в форме вакцины, также содержит поликатионный полимер, предпочтительно, поликатионный пептид, в частности, полиаргинин, полилизин, или антимикробный пептид.
Поликатионное(ые) соединение(я) для применения, согласно настоящему изобретению, могут представлять собой любое поликатионное соединение, демонстрирующее характерное действие согласно WO 97/30721. Предпочтительные поликатионные соединения выбирают из числа основных полипептидов, органических поликатионных соединений, основных полиаминокислот или их смесей. Такие полиаминокислоты должны иметь цепь длиной по меньшей мере в 4 аминокислотных остатка (см., тафтсин, как описывается в Goldman et al. (1983)). Особенно предпочтительными являются вещества, содержащие пептидные связи, подобные полилизину, полиаргинину, и полипептиды, содержащие свыше 20%, в частности, свыше 50%, основных аминокислот в ряду из более 8, в частности, более 20, аминокислотных остатков или их смеси. Другие предпочтительные поликатионные соединения и содержащие их фармацевтические композиции описываются в WO 97/30721 (например, полиэтиленимин) и WO 99/38528. Предпочтительно, такие полипептиды содержат от 20 до 50 аминокислотных остатков, в частности, от 30 до 200 остатков.
Такие поликатионные соединения можно получить химически или рекомбинантно, или их можно выделить из природных источников.
Катионные (поли)пептиды также могут представлять собой антибактериальные(микробные) пептиды со свойствами, рассматриваемыми в Ganz and Lehrer, 1999; Hancock, 1999. Такие (поли)пептиды могут быть прокариотического, животного или растительного происхождения, или могут быть получены химическими или рекомбинантными методами (Andreu and Rivas, 1998; Ganz and Lehrer, 1999; Simmaco et al., 1998). Пептиды также могут принадлежать к классу дефинзинов (Ganz, 1999; Ganz and Lehrer, 1999). Последовательности таких пептидов можно найти, например, в базе данных антимикробных последовательностей по адресу в Интернете http://www.bbcm.univ.trieste.it/~tossi/pagl.html.
Такие защитные пептиды хозяина или дефензивы также являются предпочтительной формой поликатионного полимера, согласно настоящему изобретению. Как правило, в качестве поликатионного полимера используют соединение, допускающее в качестве конечного продукта активацию (или регуляцию по типу отрицательной связи) адаптивной иммунной системы, предпочтительно, опосредуемую АПК (включая дендритные клетки).
Особенно предпочтительными для применения в качестве поликатионных веществ в настоящем изобретении являются антимикробные пептиды, образованные кателицидином, или их производные (А 1416/2000, включен в данное описание в качестве ссылки), в частности, антимикробные пептиды, образованные от кателицидина млекопитающих, предпочтительно - человека, коровы или мыши, или нейроактивные соединения, такие как гормон роста (человека).
Поликатионные соединения, полученные из природных источников, включают ВИЧ-REV или ВИЧ-ТАТ (дериватизированные катионные пептиды, пептиды antennapedia, хитозан или другие производные хитина) или другие пептиды, полученные из таких пептидов или белков биохимическими или рекомбинантными способами. Другими предпочтительными поликатионными соединениями являются кателин или родственные или образованные из кателина вещества. Например, мышиный кателин представляет собой пептид с аминокислотной последовательностью NH2-RLAGLLRKGGEKIGEKLKKIGOKIKNFFQKLVPQPE-СООН. Родственные кателину вещества или его производные содержат всю последовательность кателина или ее части с, по меньшей мере, 15-20 аминокислотными остатками. Дериватизация может включать замещение или модификацию природных аминокислот аминокислотами, которые не входят в число стандартных аминокислот. Кроме того, в такие молекулы кателина можно ввести дополнительные катионные остатки. Такие молекулы кателина предпочтительны для сочетания с антигеном и иммуномодулирующим ODN по настоящему изобретению. Однако неожиданно такие молекулы кателина оказались также эффективными в качестве адъюванта для антигена без добавления других адъювантов. Поэтому возможно применение таких молекул кателина как эффективных адъювантов в композициях вакцин без других иммуноактивирующих веществ или с ними.
Другим предпочтительным поликатионным веществом для применения, согласно настоящему изобретению, является синтетический пептид, содержащий по меньшей мере 2 мотива KLK, разделенных линкером из 3-7 гидрофобных аминокислот (А 1789/2000, включен в данное описание в качестве ссылки).
Стало неожиданностью, что иммуностимулирующее действие фармацевтической композиции, по настоящему изобретению, оказалось существенно выше, чем можно было ожидать от сложения действия каждого из отдельных компонентов или даже сложения действия ODN или поликатионного соединения с действием антигена.
В и Е в формуле I представляют собой группы, обычные для 5'- и/или 3'-концов молекул нуклеиновых кислот. Примеры таких групп хорошо известны специалистам в данной области техники (см., например, "Oligonucleotides and Analogues - A Practical Approach" (1991), ed. Eckstein, Oxford University Press). В случае I-ODN по настоящему изобретению В и/или Е выбирают, предпочтительно, из числа -Н, -СН3, -СОСН3, -ОН, -СНО, фосфатной, тиофосфатной, сульфатной или тиосульфатной группы, или фосфоалкильной группы, в частности, с алкилом C1-C6, и/или концевой аминогруппы (аминогруппу можно использовать, например, для дополнительного мечения I-ODN по настоящему изобретению, например, -PO4-(CH2)n-NH2 или -РO4-(СН2)n-NН-метка). Особенно предпочтительно, когда В являются нуклеозидами, в частности, 2'-дезоксинуклеотидами, указанными выше (т.е. без фосфатной или тиофосфатной группы). С другой стороны, такие группы также могут содержать линкерные группы для других молекул, в частности молекул носителя или меток. В таких формах ODN, где ODN связываются с твердыми поверхностями или частицами или метками, такие поверхности, частицы или метки, и т.п., затем также являются частью групп В и/или Е.
Конечно, любая ионизованная форма (соль) или таутомерные формы молекул формулы I охватываются данной формулой I.
Фармацевтическая композиция, по настоящему изобретению, также может содержать другие активные ингредиенты (фармацевтически активные вещества), в частности, вещества, полезные в связи с вакциной. Предпочтительными вариантами таких других активных ингредиентов являются цитокины, противовоспалительные вещества, антимикробные вещества или их сочетания.
Конечно, фармацевтическая композиция, по настоящему изобретению, также может содержать вспомогательные вещества, в частности, фармацевтически приемлемый носитель, буферные вещества, стабилизаторы или их сочетания.
Относительные количества ингредиентов в фармацевтической композиции по настоящему изобретению весьма зависят от потребностей в отдельном антигене и от животного/человека, к которому должна применяться данная композиция. Поэтому фармацевтическая композиция, по настоящему изобретению, содержит, предпочтительно, один или несколько ODN предпочтительно, в количестве от 1 пг до 10 г, предпочтительно - от 1 нг до 1 г, предпочтительнее - от 100 нг до 10 мг, в частности - от 10 мкг до 1 мг. Антиген, как и поликатионный полимер, можно применять в подобных дозах, предпочтителен интервал от 1 до 10000 мг антигена и от 0,1 до 1000 мг поликатионного соединения на вакцинацию.
Композиции настоящего изобретения можно применять к пациенту, например, кандидату на вакцинацию, в эффективных количествах, например, с интервалами в одну неделю, в две недели или в месяц. Пациенты, которых лечат композициями настоящего изобретения, также могут быть вакцинированы повторно или только один раз. Предпочтительным применением настоящего изобретения является активная иммунизация, в частности, людей или животных, без защиты от специфического антигена.
Способ введения композиции настоящего изобретения не является критичным фактором, например, подходящим является подкожное, внутримышечное, интрадермальное или трансдермальное введение, а также оральное введение.
Композицию настоящего изобретения также можно применять раздельно, например, инъецируя иммуностимулирующее вещество отдельно от антигенной/поликатионной композиции. Следовательно, настоящее изобретение также относится к набору, содержащему в качестве одного компонента композицию, содержащую антиген и поликатионный полимер, и в качестве второго компонента - композицию, содержащую иммуностимулятор или хемотактическое вещество.
Компоненты можно применять в одном и том же месте или в одно и то же время, однако, также возможно применение в разных местах или в разное время, или в течение разного периода времени. Также возможны варианты системного или местного применения композиций или компонентов, соответственно.
Детали настоящего изобретения описываются с помощью приведенных далее примеров и фигур, но изобретение, естественно, данными примерами не ограничивается.
Перечень фигур
Фиг.1 показывает иммунную реакцию против полученного из овальбумина пептида OVA257-264 после инъекции OVA257-264, поли-L-аргинина (pR 60) и содержащих дезоксиинозин I олигодезоксинуклеотидов (I-ODN) или CpG 1668. Мышам делают инъекции в подушечки задних лап указанными смесями. Через четыре дня дренирование клеток лимфоузлов стимулируют OVA257-264 ex vivo. Через 24 часа с использованием анализа методом ELISPOT определяют число клеток, продуцирующих IFN-γ. Результаты выражают в числе пятен/1×106 клеток лимфоузлов.
Фиг.2 показывает индукцию системного продуцирования TNF-α после инъекции OVA257-264, поли-L-аргинина (pR 60) и I-содержащих олигодезоксинуклеотидов (I-ODN) или CpG 1668. Мышам делают инъекции в подушечки задних лап указанными смесями. Через час после инъекции берут кровь из хвостовой вены и получают сыворотку. Концентрацию TNF-α в сыворотке определяют с использованием метода ELISA.
Фиг.3 показывает иммунную реакцию против полученного из овальбумина пептида OVA257-264 после инъекции OVA257-264, поли-L-аргинина (pR 60) и содержащих дезоксиинозин олигодезоксинуклеотидов (I-ODN), CpG 1668 или GpC. Мышам делают инъекции в подушечки задних лап указанными смесями. Через четыре дня стимулируют ex vivo дренирование клеток лимфоузлов OVA257-264, несоответствующим пептидом mTRP2181-188 (родственный мышиной тирозиназе протеин-2, VYDFFVWL) или pR 60. Через 24 часа с использованием анализа методом ELISPOT определяют число клеток, продуцирующих IFN-γ. Результаты выражают в числе пятен/1×106 клеток лимфоузлов со стандартным отклонением при трехкратном повторе.
Фиг.4 показывает индукцию системного продуцирования TNF-(после инъекции OVA257-264, поли-L-аргинина (pR 60) и I-содержащих олигодезоксинуклеотидов (I-ODN), GpC или CpG 1668. Мышам делают инъекции в подушечки задних лап указанными смесями. Через час после инъекции берут кровь из хвостовой вены и получают сыворотку. С использованием цитокинспецифического ELISA в сыворотке определяют концентрацию TNF-α и IL-6.
Фиг.5 показывает иммунную реакцию против полученного из овальбумина пептида OVA257-264 после инъекции TRP-2, поли-L-аргинина, CpG 1668 или случайных 20-мерных последовательностей, содержащих дезоксиинозин. Мышам делают инъекции в подушечки задних лап указанными смесями. Через четыре дня стимулируют ех vivo дренирование клеток лимфоузлов TRP-2, OVA257-264 или pR 60. Через 24 часа с использованием анализа методом ELISPOT определяют число клеток, продуцирующих IFN-γ. Результаты выражают в числе пятен/1×106 клеток лимфоузлов со стандартным отклонением при трехкратном повторе.
Фиг.6 показывает комбинированную инъекцию I-ODN и поли-L-аргинина (pR 60) вместе с пептидом, полученным из меланомы.
Фиг.7 показывает, что комбинированная инъекция I-ODN и pR 60 вместе с пептидом, полученным из меланомы, снижает индукцию системного продуцирования TNF-α и IL-6.
Фиг.8 показывает комбинированную инъекцию случайного 10-мерного I-ODN и pR 60 вместе с пептидом, полученным из меланомы.
Фиг.9 показывает, что комбинированное применение овальбумина (OVA) с олиго-dIC26-мер и pR усиливает продуцирование OVA-специфических IgG-антител. Мышам подкожно в подушечки лап делают инъекции указанными смесями. В дни 24 и 115 после инъекции собирают сыворотки и подвергают скринингу методом ELISA на OVA-специфические антитела IgG2a (А) и IgG1 (В). Результаты приводятся в виде титра антител.
Осуществление изобретения
Во всех экспериментах используют тиофосфатзамещенные ODN (с заменой фосфатных остатков тиофосфатными остатками, называемые далее "тиофосфатзамещенными олигодезоксинуклеотидами"), так как такие ODN показывают более высокую устойчивость к нуклеазам (Ballas et al., 1996; Krieg et al., 1995; Parronchi et al., 1999).
Пример 1
Комбинированная инъекция различных I-ODN и поли-L-аргинина (pR 60) синергично усиливает иммунную реакцию против пептида, полученного из овальбумина
| Мыши | C57B1/6 (Harlan/Olac) |
| Пептид | Пептид OVA257-264, (SIINFEKL), эпитоп куриного овальбумина, ограниченный классом I ГКГС (Н-2Кb) (Rotzschke et al., 1991), синтезирован с использованием стандартного твердофазного пептидного синтеза (химия F-moc), очищен ВЭЖХ и проанализирован на чистоту методом масс-спектрометрии. |
| Доза 300 мг/мышь. | |
| Поли-L-аргинин (pR60) | Поли-L-аргинин со средней степенью полимеризации 60 остатков аргинина; SIGMA Chemicals. |
| Доза 100 мг/мышь. | |
| CpG-ODN 1668 | Тиофосфатзамещенные ODN, содержащие мотив CpG tcc atg acg ttc ctg atg ct, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. | |
| I-ODN 1 | Тиофосфатзамещенные ODN, содержащие дезоксиинозин tcc ati aci ttc ctg atg ct, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. | |
| I-ODN 2 | Тиофосфатзамещенные ODN, содержащие дезоксиинозин tcc atg aci ttc ctg atg ct, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. | |
| I-ODN 3 | Тиофосфатзамещенные ODN, содержащие дезоксиинозин tcc ati aci ttc cti ati ct, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. |
Экспериментальные группы (5 мышей на группу)
1. OVA257-264
2. OVA257-264+pR 60
3. OVA257-264+CpG 1668
4. OVA257-264+I-ODN 1
5. OVA257-264+I-ODN 2
6. OVA257-264+I-ODN 3
7. OVA257-264+CpG 1668+pR 60
8. OVA257-264+I-ODN 1+pR 60
9. OVA257-264+I-ODN 2+pR 60
10. OVA257-264+I-ODN 3+pR 60
В день 0 мышам в каждую подушечку задних лап делают инъекцию 100 мл (общий объем, 50 мл на подушечку) композиций, содержащих вышеуказанные соединения. Животных умерщвляют через 4 дня после инъекции и собирают подколенные лимфатические узлы. Лимфатические узлы пропускают через 70-мм клеточный фильтр и дважды промывают средой DMEM (GEBCO BRL), содержащей 5% фетальной телячьей сыворотки (FCS, SIGMA chemicals). Клетки разводят средой DMEM/5% FCS до 3×106 клеток/мл. IFN-γ определяют методом ELISPOT при трехкратном повторе, как описано ранее (Miyahira et al., 1995). Такой способ является широко используемой процедурой, позволяющей количественно определить антигенспецифические Т-клетки. Лимфоциты стимулируют ex vivo контрольной фоновой средой, пептидом OVA257-264 или конканавалином A (Con А). Подсчитывают пятна, представляющие отдельные продуцирующие IFN-γ Т-клетки, и из результатов для всех образцов вычитают фоновые пятна. Большое число пятен, обнаруживаемых после стимуляции Con А (данные не приводятся), указывает на хорошее состояние используемых лимфоцитов. Для каждой экспериментальной группы мышей на фигуре 1 приводится число пятен/1×106 клеток.
Через один час после инъекции берут кровь из хвостовой вены и получают сыворотку для определения с помощью ELISA индукции системного продуцирования TNF-α (фигура 2).
Пример 2
Замена гуанозина на дезоксиинозин превращает неиммуногенную GpC-последовательность в высокоиммуногенную последовательность, особенно при сочетании с поли-L-аргинином (pR 60)
| Мыши | C57B1/6 (Harlan/Olac) |
| Пептид | Пептид OVA257-264, (SIINFEKL), эпитоп куриного овальбумина, ограниченный классом I ГКГС (Н-2Kb) (Rotzschke et al., 1991), синтезирован с использованием стандартного твердофазного пептидного синтеза (химия F-moc), очищен ВЭЖХ и проанализирован на чистоту методом масс-спектрометрии. |
| Доза 300 мкг/мышь. | |
| Поли-L-аргинин (pR60) | Поли-L-аргинин со средней степенью полимеризации 60 остатков аргинина; SIGMA Chemicals. |
| Доза 100 мкг/мышь. | |
| CpG-ODN 1668 | Тиофосфатзамещенные ODN, содержащие мотив CpG tcc atg асg ttc ctg atg ct, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. | |
| I-ODN 9 | Тиофосфатзамещенные ODN, содержащие дезоксиинозин tcc atg aic ttc ctg atg ct, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. | |
| I-ODN 10 | Тиофосфатзамещенные ODN, содержащие дезоксиинозин tcc ati aic ttc cti ati ct, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. |
Экспериментальные группы (5 мышей на группу)
OVA257-264
OVA257-264+PR 60
OVA257-264+CpG 1668
OVA257-264+GpC
OVA257-264+I-ODN 9
OVA257-264+I-ODN 10
OVA257-264+CpG 1668+pR 60
OVA257-264+GpC+pR 60
OVA257-264+I-ODN 9+pR 60
OVA257-264+I-ODN 10+pR 60
В день 0 мышам в каждую подушечку задних лап делают инъекцию 100 мкл (общий объем, 50 мкл на подушечку) композиций, содержащих вышеуказанные соединения. Животных умерщвляют через 4 дня после инъекции и собирают подколенные лимфатические узлы. Лимфатические узлы пропускают через 70-мм клеточный фильтр и дважды промывают средой DMEM (GIBCO BRL), содержащей 5% фетальной телячьей сыворотки (FCS, SIGMA chemicals). Клетки разводят средой DMEM/5% FCS до 3×106 клеток/мл. IFN-γ определяют методом ELISPOT при трехкратном повторе, как описано ранее (Miyahira et al., 1995). Такой способ является широко используемой процедурой, позволяющей количественно определить антигенспецифические Т-клетки. Лимфоциты стимулируют ex vivo при трехкратном повторе средой (фон), пептидом OVA257-264, несоответствующим пептидом mTRP-2181-188 (родственный мышиной тирозиназе протеин-2, VYDFFVWL), pR 60 и конканавалином A (Con А). Подсчитывают пятна, представляющие отдельные продуцирующие IFN-γ Т-клетки, и из результатов для всех образцов вычитают фоновые пятна. Большое число пятен, обнаруживаемых после стимуляции Con А (данные не приводятся), указывает на хорошее состояние используемых лимфоцитов. Для каждой экспериментальной группы мышей на фигуре 3 приводится число пятен/1×106 клеток и стандартное отклонение при трехкратном повторе стимуляции ex vivo. Через один час после инъекции берут кровь из хвостовой вены, и получают сыворотку для определения с использованием цитокин-специфического ELISA индукции системного продуцирования TNF-α и EL-6 (фигура 4).
Пример 3
Комбинированная инъекция случайных 20-мерных последовательностей, содержащих дезоксиинозин, и пептида, полученного из меланомы, вызывает сильную иммунную реакцию против пептида, которая может быть даже усилена совместным применением поли-L-аргинина (pR 60)
| Мыши | С57В1/6 (Harlan/Olac) |
| Пептид | Пептид TRP-2 (VYDFFVWL), эпитоп родственного мышиной тирозиназе протеина-2, ограниченный классом I ГКГС (Н-2Кb) (Bloom et al., 1997), синтезирован с использованием стандартного твердофазного пептидного синтеза (химия F-moc), очищен ВЭЖХ и проанализирован на чистоту методом масс-спектрометрии. |
| Доза 300 мкг/мышь. | |
| Поли-L-аргинин (pR60) | Поли-L-аргинин со средней степенью полимеризации 60 остатков аргинина; SIGMA Chemicals. |
| Доза 100 мкг/мышь. | |
| CpG-ODN 1668 | Тиофосфатзамещенные ODN, содержащие мотив CpG tcc atg acg ttc ctg atg ct, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. | |
| wdi | Тиофосфатзамещенные ODN nhh hhh wdi nhh hhh hhh wn, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. | |
| wdidin | Тиофосфатзамещенные ODN nhh hhh wdi nhh hhh hhh wn, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. | |
| wdid | Тиофосфатзамещенные ODN nhh hhh wdi dhh hhh hhh wn, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. | |
| wdidid | Тиофосфатзамещенные ODN nhh wdi did hhh hdi ddi dh, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. |
Экспериментальные группы (5 мышей на группу)
1. TPR-2
2. TPR-2+pR 60
3. TPR-2+CpG 1668
4. TPR-2+wdi
5. TPR-2+wdidin
6. TPR-2+wdid
7. TPR-2+wdidid
8. TPR-2+CpG 1668+pR 60
9. TPR-2+wdi+pR 60
10. TPR-2+wdidin+pR 60
11. TPR-2+wdid+pR 60
12. TPR-2+wdidid+pR 60
В день 0 мышам в каждую подушечку задних лап делают инъекцию 100 мкл (общий объем, 50 мкл на подушечку) композиций, содержащих вышеуказанные соединения. Животных умерщвляют через 4 дня после инъекции и собирают подколенные лимфатические узлы. Лимфатические узлы пропускают через 70-мм клеточный фильтр и дважды промывают средой DMEM (GIBCO BRL), содержащей 5% фетальной телячьей сыворотки (FCS, SIGMA chemicals). Клетки разводят средой DMEM/5% FCS до 3×106 клеток/мл. IFN-γ определяют методом ELISPOT при трехкратном повторе, как описано ранее (Miyahira et al., 1995). Такой способ является широко используемой процедурой, позволяющей количественно определить антигенспецифические Т-клетки. Лимфоциты стимулируют ex vivo при трехкратном повторе средой (фон), пептидом TPR-2, несоответствующим пептидом OVA257-264, pR 60 и конканавалином A (Con А). Подсчитывают пятна, представляющие отдельные продуцирующие IFN-γ Т-клетки, и из результатов для всех образцов вычитают фоновые пятна. Большое число пятен, обнаруживаемых после стимуляции Con А (данные не приводятся), указывает на хорошее состояние используемых лимфоцитов. Для каждой экспериментальной группы мышей на фигуре 5 приводится число пятен/1×106 клеток, приводится стандартное отклонение при трехкратном повторе стимуляции ех vivo.
Пример 4
Комбинированная инъекция I-ODN и поли-L-аргинина (pR 60) синергично усиливает иммунную реакцию против пептида, полученного из меланомы
Экспериментальные группы (5 мышей на группу)
1. TPR-2181-188
2. TPR-2181-188+pR 60
3. TPR-2181-188+CpG 1668
4. TPR-2181-188+I-ODN 2
5. TPR-2181-188+CpG 1668+pR 60
6. TPR-2181-188+I-ODN 2+pR 60
В день 0 мышам в каждую подушечку задних лап делают инъекцию 100 мкл (общий объем, 50 мкл на подушечку) композиций, содержащих вышеуказанные соединения. Животных умерщвляют через 4 дня после инъекции, и собирают подколенные лимфатические узлы. Лимфатические узлы пропускают через 70-мм клеточный фильтр и дважды промывают средой DMEM (GIBCO BRL), содержащей 5% фетальной телячьей сыворотки (FCS, SIGMA chemicals). Клетки разводят средой DMEM/5% FCS до 3×106 клеток/мл. IFN-γ определяют методом ELISPOT при трехкратном повторе, как описано ранее (Miyahira et al., 1995). Такой способ является широко используемой процедурой, позволяющей количественно определить антигенспецифические Т-клетки. Лимфоциты стимулируют ex vivo при трехкратном повторе контрольной фоновой средой, пептидом TPR-2181-186, несоответствующим пептидом OVA257-264 и конканавалином A (Con А). Подсчитывают пятна, представляющие отдельные продуцирующие IFN-γ Т-клетки и из результатов для всех образцов вычитают фоновые пятна. Большое число пятен, обнаруживаемых после стимуляции Con А (данные не приводятся), указывает на хорошее состояние используемых лимфоцитов. Для каждой экспериментальной группы мышей на фигуре 6 приводится число пятен/1×106 клеток, приводится стандартное отклонение при трехкратном повторе стимуляции ех vivo.
Через один час после инъекции берут кровь из хвостовой вены и получают сыворотку для определения с использованием специфического ELISA индукции системного продуцирования TNF-α и IL-6 (фигура 7).
Пример 5
Комбинированная инъекция случайного 10-мерного I-ODN и поли-L-аргинина (pR 60) синергично усиливает иммунную реакцию против пептида, полученного из меланомы.
Экспериментальные группы (5 мышей на группу)
1. TPR-2181-188
2. TPR-2181-188+pR60
3. TPR-2181-188+CpG 1668
4. TPR-2181-188+ODN 17
5. TPR-2181-188+CpG 1668+pR 60
6. TPR-2181-188+ODN 17+pR 60
В день 0 мышам в каждую подушечку задних лап делают инъекцию 100 мкл (общий объем, 50 мкл на подушечку) композиций, содержащих вышеуказанные соединения. Животных умерщвляют через 4 дня после инъекции и собирают подколенные лимфатические узлы. Лимфатические узлы пропускают через 70-мм клеточный фильтр и дважды промывают средой DMEM (GIBCO BRL), содержащей 5% фетальной телячьей сыворотки (FCS, SIGMA chemicals). Клетки разводят средой DMEM/5% FCS до 3×106 клеток/мл. IFN-γ определяют методом ELISPOT при трехкратном повторе, как описано ранее (Miyahira et al., 1995). Такой способ является широко используемой процедурой, позволяющей количественно определить антигенспецифические Т-клетки. Лимфоциты стимулируют ex vivo при трехкратном повторе контрольной фоновой средой, пептидом TPR-2181-188, несоответствующим пептидом OVA257-264 и конканавалином A (Con А). Подсчитывают пятна, представляющие отдельные продуцирующие IFN-γ Т-клетки, и из результатов для всех образцов вычитают фоновые пятна. Большое число пятен, обнаруживаемых после стимуляции Con А (данные не приводятся), указывает на хорошее состояние используемых лимфоцитов. Для каждой экспериментальной группы мышей на фигуре 8 приводится число пятен/1×106 клеток и стандартное отклонение при трехкратном повторе стимуляции ех vivo.
| Мыши | C57B1/6 (Harlan/Olac) |
| Пептид | Пептид TRP-2 (VYDFFVWL), эпитоп родственного мышиной тирозиназе протеина-2, ограниченный классом I ГКГС (Н-2Кb) (Bloom et al., 1997), синтезирован с использованием стандартного твердофазного пептидного синтеза (химия F-moc), очищен ВЭЖХ и проанализирован на чистоту методом масс-спектрометрии. |
| Доза 100 мкг/мышь. | |
| Поли-L-аргинин (pR60) | Поли-L-аргинин со средней степенью полимеризации 60 остатков аргинина; SIGMA Chemicals. |
| Доза 100 мкг/мышь. | |
| CpG-ODN 1668 | Тиофосфатзамещенные ODN, содержащие мотив CpG tcc atg acg ttc ctg atg ct, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. | |
| ODN17 | Тиофосфатзамещенные ODN, содержащие дезоксиинозин nhh wdi dhh h, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen (h=CAT, w=At, d=GAT). |
| Доза 10 нмоль/мышь. | |
| Мыши | C57BV6 (Harlan/Olac) |
| Пептид | Пептид TRP-2 (VYDFFVWL), эпитоп родственного мышиной тирозиназе протеина-2, ограниченный классом I ГКГС (Н-2Rb) (Bloom et al., 1997). синтезирован с использованием стандартного твердофазного пептидного синтеза (химия F-moc), очищен ВЭЖХ и проанализирован на чистоту методом масс-спектрометрии. |
| Доза 100 мкг/мышь. | |
| Поли-L-аргинин (pR60) | Поли-L-аргинин со средней степенью полимеризации 60 остатков аргинина; SIGMA Chemicals. |
| Доза 100 мкг/мышь. | |
| CpG-ODN 1668 | Тиофосфатзамещенные ODN, содержащие мотив CpG tcc atg acg ttc ctg atg ct, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. | |
| I-ODN 2 | Тиофосфатзамещенные ODN, содержащие дезоксиинозин tcc atg aci ttc ctg atg ct, синтезированы NAPS GmbH, G ttingen. |
| Доза 5 нмоль/мышь. |
Пример 6
Комбинированное применение олигодезокси-IC26-мер и поли-L-аргинина (pR) усиливает овальбумин(ОVА)-специфическую гуморальную реакцию
| Мыши | С57В1/6 (Harlan/Olac) |
| Овальбумин | Овальбумин из куриного яйца, сорт V, SIGMA Chemicals, A-5503, партия 54Н7070. |
| Доза 50 мкг/мышь. | |
| Поли-L-аргинин (pR60) | Поли-L-аргинин со средней степенью полимеризации 60 остатков аргинина; SIGMA Chemicals, P-4663, партия 68Н5903. |
| Доза 100 мкг/мышь. | |
| Олигодезокси IC, 26-мер(олиго-dIC26-мер) | Олиго-dIC26-мер синтезирован стандартными методами химии фосфоамидидов в масштабе 4 мкмоль и очищен ВЭЖХ (NAPS GmbH, G ttingen, Германия). |
| Доза 5 нмоль/мышь. |
Экспериментальные группы (4 мыши на группу)
1. OVA+олиго-dIC26-мер+PR
2. OVA+олиго-dIC26-мер
3. OVA+pR
4. OVA
В день 0 мышам в каждую подушечку задних лап делают инъекцию 100 мкл (общий объем, 50 мкл на подушечку) композиций, содержащих вышеуказанные соединения. На 24 день после инъекции собирают сыворотку и подвергают скринингу методом ELISA на присутствие OVA-специфических антител. Полученные результаты показывают, что инъекция OVA в сочетании с олиго-dIC и pR усиливает продуцирование OVA-специфических антител IgG по сравнению с инъекцией OVA с каждым одним из указанных веществ (фигура 13А, В). Представляет интерес тот факт, что титры как IgG2a, так и IgG1 повышаются после одной инъекции OVA с олиго-dIC/pR, что предполагает, что вовлекаются как клетки Тh1, так и Th2. Однако через 115 дней в сыворотках мышей, инъецированных OVA и олиго-dIC, все еще обнаруживаются только повышенные уровни IgG2a.
Полученные результаты показывают, что комбинированная инъекция OVA с олиго-dIC и pR усиливает OVA-специфическую гуморальную реакцию. Такая реакция характеризуется продуцированием на ранней фазе как Тh1-, так и Th2-индуцированных изотипов антител, но позднее - только Тh1-индуцированных антител.
Источники информации
Andreu, D., and Rivas, L. (1998). Animal antimicrobial peptides: an overview. Biopolymers 47, 415-433.
Ballas, Z.K., Rasmussen, W.L., and Krieg, A.M. (1996). Induction of NK activity in murine and human cells by CpG motif in oligodeoxynucleotides and bacterial DNA. J Immunol 157, 1840-1845.
Bloom, В.R., and Widdus, R. (1998). Vaccine visions and their global impact. Nat Med 4, 480-484.
Bloom, M.В., Perry-Lalley, D., Robbins, P.F., Li, Y., el-Gamil, M., Rosenberg, S.A., and Yang, J.C. (1997). Identification of tyrosinase-related protein 2 as a tumor rejection antigen for the В 16 melanoma. J Exp Med 185, 453-459.
Buschle, M., Schmidt, W., Berger, M., Schaffner, G., Kurzbauer, R., Killisch, 1., Tiedemarm, J.K., Trska, В., Kirlappos, H., Mechtler, K., Schilcher, F., Gabler, C., and Birntsiel, M.L. (1998). Chemically defined, cell-free cancer vaccines: use of tumor antigen-derived peptides or polyepitope proteins for vaccination. Gene Ther. Mol. Biol. 1, 309-321.
Buschle, M., Schmidt, W., Zauner, W., Mechtler, K., Trska, В., Kirlappos, H., and Birnstiel, M.L. (1997). Transloading of tumor antigen-derived peptides into antigen-presenting cells. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94, 3256-3261.
Cavanaugh, P.F., Jr., Но, Y-К, and Bardos, T.J. (1996). The activation of murine macrophages and natural killer cells by the Partially thiolated double stranded RNA poly (1). mercapto poly(C). Res. Comm. Mol. Pathol. Pharmacol. 91, 131-147.
Chace, J.H., Hooker, N.A., Mildenstein, K.L., Krieg, A.M., and Cowdery, J.S. (1997). Bacterial DNA-induced NK cell IFN-gamma production is dependent on macrophage secretion of IL-12. Clin Immunol Immunopathol 84, 185-193.
Davis, H.L., Weeranta, R., Waldschmidt, T.J., Tygrett, L., Schorr, J., and Krieg, A. M. (1998). CpG DNA is a potent enhancer of specific immunity in mice immunized with recombinant hepatitis В surface antigen. J Immunol 160, 870-876.
Deng, G.M., Nilsson, l.M., Verdrengh, M., Collins, L.V., and Tarkowski, A. (1999). Intra-articularly localized bacterial DNA containing CpG motifs induces arthritis. Nat Med 5, 702-705.
Ganz, Т. (1999). Defensins and host defense [comment]. Science 286, 420-421.
Ganz, Т., and Lehrer, R.l. (1999). Antibiotic peptides from higher eukaryotes: biology and applications. Mol Med Today 5, 292-297.
Hancock, R.E. (1999). Host defence (cationic) peptides: what is their future clinical potential? Drugs 57, 469-473.
Harlow, E., and Lane, D. (1988). Antibodies: a laboratory manual (Cold Spring Harbor: Cold Spring Harbor Laboratory).
Hartmann, G., Weiner, G.J., and Krieg, A.M. (1999). CpG DNA: A potent signal for growth, activation, and maturation of human dendritic cells. Proc Hatl Acad Sci USA 96, 9305-9310.
Hoffmann, J.A., Kafatos, F.C., Janeway, C.A., and Ezekowitz, R.A. (1999). Phylogenetic perspectives in innate immunity. Science 284, 1313-1318.
Klinman, D.M., Yi, A.K., Beaucage, S.L., Conover, J., and Krieg, A.M. (1996). CpG motifs present in bacteria DNA rapidly induce Iymphocytes to secrete interleukin 6, interleukin 12, and interferon gamma. Proc Natl Acad Sci USA 93, 2879-2883.
Krieg, A.M. (1999). CpG DNA: a novel immunomodulator [letter]. Trends Microbiol 7, 64-5.
Krieg, A.M. (1996). An innate immune defense mechanism based on the recognition of CpG motifs in microbial DNA. J Lab Clin Med 128, 128-133.
Krieg, A.M., Yi, A.K., Matson, S., Waldschmidt, T.J., Bishop, G.A., Teasdale, R., Koretzky. G.A., and Klinman, D.M. (1995). CpG motifs in bacterial DNA trigger direct B-cell activation. Nature 374, 546-549.
Krieg. A.M., Yi, A.K., Schorr, J., and Davis, H.L. (1998). The role of CpG dinucleotides in DNA vaccines. Trends Microbiol 6, 23-27.
Lethe, В., van den Eynde, В., van Pel, A., Corradin, G., and Boon, T. (1992). Mouse tumor rejection antigens P815A and P815B: two epitopes carried by a single peptide. Eur J Immunol 22, 2283-2288.
Liljeqvist, S., and Stahl, S. (1999). Production of recombinant subunit vaccines: protein immunogens, live delivery systems and nucleic acid vaccines. J Biotechnol 73, 1-33.
Lipford, G.В., Heeg, K., and Wagner, H. (1998). Bacterial DNA as immune cell activator. Trends Microbiol 6, 496-500.
Manetti, R., Annunziato, F., Tomasevic, L., Gianno, V., Parronchi. P., Romagnani, S. and Maggi, E. (1995). Polyinosinic acid: polycytidylic acid promotes T helper type 1-specific immune responses by stimulating macrophage production of interferon-a and interleukin-12. Eur. J. Immunol. 25, 2656-2660.
Mosmann, T.R., Cherwinski, H., Bond, M.W., Giedlin, M.A., and Coffman, R.L. (1986). Two types of murine helper T cell clone. 1. Definition according to profiles of Iymphokine activities and secreted proteins. J Immunol 136, 2348-2357.
Nossal, G. (1998). Living up to the legacy. Nat Med 4, 475-476.
Oxenius, A., Martinic, M M., Hengartner, H., and Klenerman, P. (1999). CpG-containing oligonucleotides are efficient adjuvants for induction of protective antiviral immune responses with T-cell peptide vaccines. J Virol 73, 4120-4126.
Paillard, F. (1999). CpG: the double-edged sword [comment]. Hum Gene Ther 10, 2089-2090.
Pamer, E.G., Harty, J.Т., and Bevan, M.J. (1991). Precise prediction of a dominant class I MHC-restricted epitope of Listeria monocytogenes. Nature 353, 852-855.
Parronchi, P., Brugnolo, F., Annunziato, F., Manuelli, C., Sampognaro, S., Mavilia, C., Romagnani, S., and Maggi, E. (1999). Phosphorothioate oligodeoxynucleotides promote the in vitro development of human allergen-specific CD4+Т cells into Thl effectors. J Immunol 163. 5946-5953.
Pisetsky, D.S. (1997). Immunostimulatory DNA: a clear and present danger? Nat Med 3, 829-831.
Pisetsky, D.S. (1999). The influence of base sequence on the immunostimulatory properties of DNA. Immunol Res 19, 35-46.
Rammensee, H.G., Friede, Т., Stevanoviic S. (1995), MHC ligands and peptide motifs: first listing. Immunogenetics 41, 178-228.
Rodrigues, M., Nussenzweig, R.S., Romero, P., and Zavala, F. (1992). The in vivo cytotoxic activity of CD8+Т cell clones correlates with their levels of expression of adhesion molecules. J Exp Med 175, 895-905.
Roitt. l., Brostoff, J., and Male, D. (1998). Immunology (London: Mosby International Ltd).
Rotzschke, O., Falk, K., Stevanovic, S., Jung, G., Walden, P., and Rammensee, H.G. (1991). Exact prediction of a natural Т cell epitope. Eur J Immunol 21, 2891-2894.
Schmidt, W., Buschle, M., Zauner, W., Kirlappos, H., Mechtler, K., Trska, В., and Bimstiel, M.L. (1997). Cell-free tumor antigen peptide-based cancer vaccines. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94, 3262-3267.
Schwartz, D.A., Quinn, T.J., Thorne, P.S., Sayeed, S., Yi, A. K., and Krieg, A.M. (1997). CpG motifs in bacterial DNA cause inflammation in the lower respiratory tract, J Clin Invest 100, 68-73.
Shimonkevitz, R., Colon, S., Kappler, J.W., Marrack, P., and Grey, H.M. (1984). Antigen recognition by H2-resctricted Т cells 11. A tryptic ovalbumin peptide that substitutes for processed antigen. J Immunol 133, 2067-2074.
Simmaco, M., Mignogna, G., and Barra, D. (1998). Antimicrobial peptides from amphibian skin; what do they tell us? Biopolymers 47, 435-450.
Sparbier, K., and Walden, P. (1999). Т cell receptor specificity and mimotopes. Curr Opin Immunol 11, 214-218.
Sparwasser, Т., Koch, E.S., Vabulas, R.M., Heeg, K., Lipford, G.В., Ellwart, J.W., and Wagner, H. (1998). Bacterial DNA and Immunostimulatory CpG oligonucleotides trigger maturation and activation of murine dendritic cells. Eur J Immunol 28, 2045-2054.
Sparwasser, Т., Miethke, Т., Lipford, G., Borschert, K., Hacker, H., Heeg, K., and Wagner, H. (1997). Bacterial DNA causes septic shock [letter]. Nature 386, 336-337.
Sparwasser, Т., Miethke, Т., Lipford, G., Erdmann, A., Hacker, H., Heeg, K., and Wagner, H. (1997). Macrophages sense pathogens via DNA mot)&: induction of tumor necrosis factor-alpha-mediated shock. Eur J Immunol 27, 1671-1679.
Weiner, G.J., Liu, H.M., Wooldridge, J.E., Dahle, С.E., and Krieg, A.M. (1997). Immunostimulatory oligodeoxynucleotides containing the CpG motif are effective as immune adjuvants in tumor antigen immunization. Proc Natl Acad Sci USA 94, 10833-10837.
Yew, N.S., Wang, K.X., Przybylska, M., Bagley, R.G., Stedman, M., Marshall, J., Scheule, R.K., and Cheng, S.H. (1999). Contribution of plasmid DNA to inflammation in the lung after administration of cationic lipid: pDNA complexes. Hum Gene Ther 10, 223-234.
Claims (13)
1. Вакцинная композиция, содержащая
иммуностимулируюшую олигодезоксинуклеиновую кислоту (ODN), имеющую строение согласно формуле (I)
где любой Х представляет собой О или S,
и где любой NMP представляет собой монофосфат или монотиофосфат дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин-, дезоксиинозин-, дезоксицитозин-, дезоксиуридин-, дезокситимидин-, 2-метилдезоксиинозин-, 5-метилдезоксицитозин-, дезоксипсевдоуридин-, дезоксирибозопурин-, 2-аминодезоксирибозопурин-, 6-S-дезоксигуанин-, 2-диметилдезоксигуанозин- или N-изопентенилдезоксиаденозин-монофосфата или -монотиофосфата, NUC представляет собой 2'-дезоксинуклеозид, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин-, дезоксиинозин-, дезоксицитозин-, дезоксиуридин-, дезокситимидин-, 2-метилдезоксиинозин-, 5-метилдезоксицитозин-, дезоксипсевдоуридин-, дезоксирибозопурин-, 2-аминодезоксирибозопурин-, 6-S-дезоксигуанин-, 2-диметилдезоксигуанозин- или N-изопентенил-дезоксиаденозина,
а и b являются целыми числами от 0 до 100, при условии, что а+b равно величине от 4 до 150,
В и Е являются группами, обычными для 5'- или 3'-концов молекул нуклеиновых кислот,
и антиген.
иммуностимулируюшую олигодезоксинуклеиновую кислоту (ODN), имеющую строение согласно формуле (I)
где любой Х представляет собой О или S,
и где любой NMP представляет собой монофосфат или монотиофосфат дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин-, дезоксиинозин-, дезоксицитозин-, дезоксиуридин-, дезокситимидин-, 2-метилдезоксиинозин-, 5-метилдезоксицитозин-, дезоксипсевдоуридин-, дезоксирибозопурин-, 2-аминодезоксирибозопурин-, 6-S-дезоксигуанин-, 2-диметилдезоксигуанозин- или N-изопентенилдезоксиаденозин-монофосфата или -монотиофосфата, NUC представляет собой 2'-дезоксинуклеозид, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин-, дезоксиинозин-, дезоксицитозин-, дезоксиуридин-, дезокситимидин-, 2-метилдезоксиинозин-, 5-метилдезоксицитозин-, дезоксипсевдоуридин-, дезоксирибозопурин-, 2-аминодезоксирибозопурин-, 6-S-дезоксигуанин-, 2-диметилдезоксигуанозин- или N-изопентенил-дезоксиаденозина,
а и b являются целыми числами от 0 до 100, при условии, что а+b равно величине от 4 до 150,
В и Е являются группами, обычными для 5'- или 3'-концов молекул нуклеиновых кислот,
и антиген.
2. Вакцинная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что в указанном ODN любой NMP выбирают из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин-, дезоксиинозин-, дезоксицитозин-, дезоксиуридин-, дезокситимидин-, 2-метилдезоксиинозин-, 5-метилдезоксицитозин-монофосфата или -монотиофосфата.
3. Вакцинная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что в указанном ODN a+b равно величине от 10 до 60, предпочтительно от 15 до 40.
4. Вакцинная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что в указанном ODN по меньшей мере один из X1 и Х2 представляет собой S, и, по меньшей мере, один из Х3 и Х4 представляет собой О и, предпочтительно, любой NMP представляет собой монотиофосфат нуклеозида.
5. Вакцинная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что указанный
ODN содержит последовательность
hhh wdi dhh h
nhh hhh wdi nhh hhh hhh wn,
nhh wdi din hhh hdi ndi nh,
nhh hhh wdi dhh hhh hhh wn или
nhh wdi did hhh hdi ddi dh,
где любой n представляет собой монофосфат или монотиофосфат 2'-дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин-, дезоксицитозин- или дезокситимидин-монофосфата или монотиофосфата,
любой h представляет собой монофосфат или монотиофосфат 2'-дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксицитозин- или дезокситимидин-монофосфата или -монотиофосфата, i представляет собой дезоксиинозинмонофосфат или -монотиофосфат, любой w представляет собой монофосфат или монотиофосфат 2'-дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин- или дезокситимидин-монофосфата или -монотиофосфата, и
любой d представляет собой монофосфат или монотиофосфат 2'-дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин- или дезокситимидин-монофосфата или монотиофосфата.
ODN содержит последовательность
hhh wdi dhh h
nhh hhh wdi nhh hhh hhh wn,
nhh wdi din hhh hdi ndi nh,
nhh hhh wdi dhh hhh hhh wn или
nhh wdi did hhh hdi ddi dh,
где любой n представляет собой монофосфат или монотиофосфат 2'-дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин-, дезоксицитозин- или дезокситимидин-монофосфата или монотиофосфата,
любой h представляет собой монофосфат или монотиофосфат 2'-дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксицитозин- или дезокситимидин-монофосфата или -монотиофосфата, i представляет собой дезоксиинозинмонофосфат или -монотиофосфат, любой w представляет собой монофосфат или монотиофосфат 2'-дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин- или дезокситимидин-монофосфата или -монотиофосфата, и
любой d представляет собой монофосфат или монотиофосфат 2'-дезоксинуклеозида, выбранный из группы, состоящей из дезоксиаденозин-, дезоксигуанозин- или дезокситимидин-монофосфата или монотиофосфата.
6. Вакцинная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что указанный ODN содержит, по меньше мере, один 2'-дезоксицитозин-монофосфат или -монотиофосфат, 3'-соседний с 2'-дезоксиинозин-монофосфатом или -монотиофосфатом, в особенности 26-мер дезоксиинозин-дезоксицитозин.
7. Вакцинная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что указанный ODN содержит последовательность
gacitt, в особенности tcc atg aci ttc ctg atg ct,
iacitt,
gaictt,
iaictt,
где а представляет собой дезоксиаденозин-монофосфат или -монотиофосфат,
g представляет собой дезоксигуанозин-монофосфат или -монотиофосфат,
i представляет собой дезоксиинозин-монофосфат или -монотиофосфат,
с представляет собой дезоксицитозин-монофосфат или -монотиофосфат, и
t представляет собой дезокситимидин-монофосфат или -монотиофосфат.
gacitt, в особенности tcc atg aci ttc ctg atg ct,
iacitt,
gaictt,
iaictt,
где а представляет собой дезоксиаденозин-монофосфат или -монотиофосфат,
g представляет собой дезоксигуанозин-монофосфат или -монотиофосфат,
i представляет собой дезоксиинозин-монофосфат или -монотиофосфат,
с представляет собой дезоксицитозин-монофосфат или -монотиофосфат, и
t представляет собой дезокситимидин-монофосфат или -монотиофосфат.
8. Вакцинная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что указанный ODN содержит последовательность
wdi,
wdid,
wdidin или
wdidid,
где w, d, i и n имеют значения, указанные выше.
wdi,
wdid,
wdidin или
wdidid,
где w, d, i и n имеют значения, указанные выше.
9. Вакцинная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что в указанном ODN В и Е выбирают независимо из группы, состоящей из -Н, -СН3, -СОН, -СОСН3, -ОН, -СНО, -РO4, -PSO3, -PS2O2, -РS3O, -PS4, -SO3, -PO4-(CH2)1-6-NH2 или -PO4-(CH2)1-6-NH-метка.
10. Вакцинная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что она дополнительно содержит поликатионный полимер, предпочтительно, поликатионный пептид, в частности полиаргинин, полилизин, или антимикробный пептид, в особенности антимикробный пептид, происходящий из кателицидина, синтетический пептид, содержащий два мотива KLK, разделенных линкером из 3-7 гидрофобных аминокислот, или гормон роста, в частности гормон роста человека.
11. Вакцинная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что она дополнительно содержит другие активные ингредиенты, в частности цитокины, противовоспалительные вещества, антимикробные вещества или их сочетания.
12. Вакцинная композиция по п.1, характеризующаяся тем, что она дополнительно содержит вспомогательные вещества, в частности фармацевтически приемлемый носитель, буферные вещества, стабилизаторы или их сочетания.
13. Вакцинная композиция по любому из предыдущих пунктов, характеризующаяся тем, что она содержит от 1 нг до 1 г, предпочтительно
от 100 нг до 10 мг, в частности - от 10 мкг до 1 мг одного или нескольких ODN.
от 100 нг до 10 мг, в частности - от 10 мкг до 1 мг одного или нескольких ODN.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT0100000A AT410173B (de) | 2000-06-08 | 2000-06-08 | Antigene zusammensetzung |
| AT?1000/2000 | 2000-06-08 | ||
| AT19732000 | 2000-11-23 | ||
| AT?1973/2000 | 2000-11-23 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2003100409A Division RU2293573C2 (ru) | 2000-06-08 | 2001-06-07 | Иммуностимулирующие олигодезоксинуклеотиды |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2007103151A RU2007103151A (ru) | 2008-08-20 |
| RU2413520C2 true RU2413520C2 (ru) | 2011-03-10 |
Family
ID=25608484
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2003100409A RU2293573C2 (ru) | 2000-06-08 | 2001-06-07 | Иммуностимулирующие олигодезоксинуклеотиды |
| RU2007103151A RU2413520C2 (ru) | 2000-06-08 | 2001-06-07 | Вакцинная композиция, содержащая иммуностимулирующие олигодезоксинуклеотиды |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2003100409A RU2293573C2 (ru) | 2000-06-08 | 2001-06-07 | Иммуностимулирующие олигодезоксинуклеотиды |
Country Status (26)
| Country | Link |
|---|---|
| US (3) | US8568742B2 (ru) |
| EP (1) | EP1296713B1 (ru) |
| JP (2) | JP5271471B2 (ru) |
| KR (1) | KR100799788B1 (ru) |
| CN (1) | CN1309418C (ru) |
| AT (1) | ATE249839T1 (ru) |
| AU (2) | AU2001281812B2 (ru) |
| BR (1) | BRPI0111639B8 (ru) |
| CA (1) | CA2411575C (ru) |
| CZ (1) | CZ304195B6 (ru) |
| DE (1) | DE60100814T2 (ru) |
| DK (1) | DK1296713T3 (ru) |
| ES (1) | ES2206424T3 (ru) |
| HK (1) | HK1056678A1 (ru) |
| HU (1) | HU228264B1 (ru) |
| IL (2) | IL152959A0 (ru) |
| IS (1) | IS1993B (ru) |
| MX (1) | MXPA02012010A (ru) |
| NO (1) | NO329492B1 (ru) |
| PL (1) | PL211036B1 (ru) |
| PT (1) | PT1296713E (ru) |
| RU (2) | RU2293573C2 (ru) |
| SI (1) | SI1296713T1 (ru) |
| SK (1) | SK287689B6 (ru) |
| TR (1) | TR200302015T4 (ru) |
| WO (1) | WO2001093905A1 (ru) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2584588C2 (ru) * | 2011-05-26 | 2016-05-20 | Интервет Интернэшнл Б.В. | Иммуностимулирующие олигодезоксинуклеотиды |
| RU2587633C2 (ru) * | 2011-05-26 | 2016-06-20 | Интервет Интернэшнл Б.В. | Иммуностимулирующие олигодезоксинуклеотиды |
| RU2726124C2 (ru) * | 2014-05-09 | 2020-07-09 | Юниверситейт Утрехт Холдинг Б.В. | Новые производные сатн2 |
Families Citing this family (85)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6977245B2 (en) | 1999-04-12 | 2005-12-20 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Oligodeoxynucleotide and its use to induce an immune response |
| PT1296713E (pt) * | 2000-06-08 | 2004-02-27 | Intercell Biomediz Forschungs | Oligodesoxinucleotidos imunoestimuladores |
| EP1350262B8 (en) * | 2000-12-08 | 2008-08-13 | Coley Pharmaceuticals GmbH | Cpg-like nucleic acids and methods of use thereof |
| CA2433967A1 (en) * | 2001-01-05 | 2002-07-11 | Intercell Ag | Anti-inflammatory use of polycationic compounds |
| EP1347775B1 (en) * | 2001-01-05 | 2016-11-30 | Valneva Austria GmbH | Uses for polycationic compounds as vaccine adjuvants |
| US7244438B2 (en) | 2001-01-05 | 2007-07-17 | Intercell Ag | Uses for polycationic compounds |
| WO2002053185A2 (en) * | 2001-01-05 | 2002-07-11 | Intercell Ag | Anti-inflammatory use of polycationic compounds |
| AT410798B (de) | 2001-01-26 | 2003-07-25 | Cistem Biotechnologies Gmbh | Verfahren zur identifizierung, isolierung und herstellung von antigenen gegen ein spezifisches pathogen |
| EP1390494A2 (en) * | 2001-05-21 | 2004-02-25 | Intercell AG | Method for stabilising of nucleic acids |
| WO2003035695A2 (en) * | 2001-07-26 | 2003-05-01 | Tanox, Inc. | Agents that activate or inhibit toll-like receptor 9 |
| US7666674B2 (en) | 2001-07-27 | 2010-02-23 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Use of sterically stabilized cationic liposomes to efficiently deliver CPG oligonucleotides in vivo |
| WO2003020884A2 (en) | 2001-08-14 | 2003-03-13 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of Health And Human Services | Method for rapid generation of mature dendritic cells |
| MX339524B (es) | 2001-10-11 | 2016-05-30 | Wyeth Corp | Composiciones inmunogenicas novedosas para la prevencion y tratamiento de enfermedad meningococica. |
| US20050250716A1 (en) * | 2001-12-07 | 2005-11-10 | Intercell Ag | Immunostimulatory oligodeoxynucleotides |
| AU2002366710A1 (en) | 2001-12-20 | 2003-07-09 | The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of | USE OF CpG OLIGODEOXYNUCLEOTIDES TO INDUCE ANGIOGENESIS |
| US8466116B2 (en) | 2001-12-20 | 2013-06-18 | The Unites States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Use of CpG oligodeoxynucleotides to induce epithelial cell growth |
| US8088388B2 (en) * | 2002-02-14 | 2012-01-03 | United Biomedical, Inc. | Stabilized synthetic immunogen delivery system |
| CA2388049A1 (en) | 2002-05-30 | 2003-11-30 | Immunotech S.A. | Immunostimulatory oligonucleotides and uses thereof |
| JP2005533855A (ja) | 2002-07-24 | 2005-11-10 | インターツェル・アクチェンゲゼルシャフト | 病原性ウイルスからの別のリーディングフレームによりコードされる抗原 |
| AR040996A1 (es) | 2002-08-19 | 2005-04-27 | Coley Pharm Group Inc | Acidos nucleicos inmunoestimuladores |
| US7785608B2 (en) | 2002-08-30 | 2010-08-31 | Wyeth Holdings Corporation | Immunogenic compositions for the prevention and treatment of meningococcal disease |
| JP2006504687A (ja) | 2002-09-13 | 2006-02-09 | インターツェル・アクチェンゲゼルシャフト | Ｃ型肝炎ウイルスペプチドの単離方法 |
| US8263091B2 (en) | 2002-09-18 | 2012-09-11 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services | Method of treating and preventing infections in immunocompromised subjects with immunostimulatory CpG oligonucleotides |
| JP5116971B2 (ja) | 2002-10-15 | 2013-01-09 | インターセル アーゲー | Ｂ群連鎖球菌の接着因子をコードする核酸、ｂ群連鎖球菌の接着因子、およびその使用 |
| JP2006520202A (ja) | 2003-03-04 | 2006-09-07 | インターツェル・アクチェンゲゼルシャフト | ストレプトコッカス・ピオゲネス抗原 |
| CA2517673C (en) | 2003-03-24 | 2013-08-13 | Intercell Ag | Improved vaccines for preventing viral infection |
| US20070041998A1 (en) * | 2003-03-24 | 2007-02-22 | Intercell Ag | Use of alum and a th1 immune response inducing adjuvant for enhancing immune responses |
| US7628994B2 (en) | 2003-03-31 | 2009-12-08 | Intercell Ag | S. epidermidis antigens |
| EP2336357A1 (en) | 2003-04-15 | 2011-06-22 | Intercell AG | S. pneumoniae antigens |
| WO2004099242A2 (en) | 2003-05-07 | 2004-11-18 | Intercell Ag | Streptococcus agalactiae antigens i + ii |
| CA2525540A1 (en) | 2003-05-30 | 2004-12-09 | Intercell Ag | Enterococcus antigens |
| EP1648502B1 (en) * | 2003-07-11 | 2010-12-01 | Intercell AG | Hcv vaccines |
| JP4817599B2 (ja) * | 2003-12-25 | 2011-11-16 | 独立行政法人科学技術振興機構 | 免疫活性増強剤とこれを用いた免疫活性の増強方法 |
| KR100721928B1 (ko) | 2004-11-05 | 2007-05-28 | 주식회사 바이오씨에스 | ＣｐＧ 올리고데옥시뉴클레오티드를 함유하는 피부질환의치료 또는 예방용 약학적 조성물 |
| DK1931379T3 (da) | 2005-10-07 | 2013-08-19 | Sec Dep For Health | Proteiner med forbedret opløselighed samt fremgangsmåder til frembringelse og anvendelse af samme |
| TW200806315A (en) | 2006-04-26 | 2008-02-01 | Wyeth Corp | Novel formulations which stabilize and inhibit precipitation of immunogenic compositions |
| EP2402023A1 (en) | 2006-06-28 | 2012-01-04 | Statens Serum Institut | Expanding the t cell repertoire to include subdominant epitopes by vaccination with antigens delivered as protein fragments or peptide cocktails |
| AU2007271350B2 (en) | 2006-07-07 | 2013-03-21 | Intercell Ag | Small Streptococcus pyogenes antigens and their use |
| EP2289906A1 (en) | 2006-09-15 | 2011-03-02 | Intercell AG | Borrelia antigens |
| EP1923069A1 (en) | 2006-11-20 | 2008-05-21 | Intercell AG | Peptides protective against S. pneumoniae and compositions, methods and uses relating thereto |
| AR064642A1 (es) | 2006-12-22 | 2009-04-15 | Wyeth Corp | Polinucleotido vector que lo comprende celula recombinante que comprende el vector polipeptido , anticuerpo , composicion que comprende el polinucleotido , vector , celula recombinante polipeptido o anticuerpo , uso de la composicion y metodo para preparar la composicion misma y preparar una composi |
| CA2675379A1 (en) | 2007-01-12 | 2008-07-17 | Intercell Ag | Protective proteins of s. agalactiae, combinations thereof and methods of using the same |
| CN102015754A (zh) | 2007-05-02 | 2011-04-13 | 英特塞尔股份公司 | 克雷伯菌（Klebsiella）抗原 |
| EP2158211B1 (en) | 2007-05-31 | 2016-08-10 | Medigene AG | Mutated structural protein of a parvovirus |
| EP2012122A1 (en) | 2007-07-06 | 2009-01-07 | Medigene AG | Mutated parvovirus structural proteins as vaccines |
| EP2511291A3 (en) | 2007-06-18 | 2012-11-07 | Intercell AG | Chlamydia antigens |
| BRPI0909664A2 (pt) | 2008-03-17 | 2019-09-24 | Intercell Ag | peptídios protetores contra s. pneumoniae e composições, métodos e usos relacionados com os mesmos |
| EP2303318A2 (en) | 2008-06-20 | 2011-04-06 | Wyeth LLC | Compositions and methods of use of orf1358 from beta-hemolytic streptococcal strains |
| WO2010089340A2 (en) | 2009-02-05 | 2010-08-12 | Intercell Ag | Peptides protective against e. faecalis, methods and uses relating thereto |
| EP2405938A2 (en) | 2009-02-13 | 2012-01-18 | Intercell AG | Nontypable haemophilus influenzae antigens |
| AU2010301043B2 (en) | 2009-06-22 | 2014-01-09 | Wyeth Llc | Compositions and methods for preparing Staphylococcus aureus serotype 5 and 8 capsular polysaccharide conjugate immunogenic compositions |
| PL2445522T3 (pl) | 2009-06-22 | 2018-01-31 | Wyeth Llc | Kompozycje immunogenne antygenów Staphylococcus aureus |
| BR112012004276A2 (pt) | 2009-08-27 | 2017-10-24 | Novartis Ag | adjuvante compreendendo alumínio, oligonucleotídeo e policátion |
| EP2319871A1 (en) | 2009-11-05 | 2011-05-11 | Sanofi-aventis | Polypeptides for binding to the "receptor for advanced glycation endproducts" as well as compositions and methods involving the same |
| EP2308896A1 (en) | 2009-10-09 | 2011-04-13 | Sanofi-aventis | Polypeptides for binding to the "receptor for advanced glycation endproducts" as well as compositions and methods involving the same |
| BR112012007821A2 (pt) | 2009-10-09 | 2017-05-30 | Sanofi Sa | polipeptídeos para ligação ao "receptor de produtos finais de glicação avançada" bem como composições e métodos envolvendo os mesmos |
| US8765148B2 (en) | 2010-02-19 | 2014-07-01 | Valneva Austria Gmbh | 1C31 nanoparticles |
| EP2547357A1 (en) | 2010-03-18 | 2013-01-23 | Novartis AG | Adjuvanted vaccines for serogroup b meningococcus |
| SI3170508T1 (sl) | 2010-06-04 | 2020-01-31 | Wyeth Llc | Formulacije cepiva |
| HUE052850T2 (hu) | 2010-08-23 | 2021-05-28 | Wyeth Llc | Neisseria meningitidis RLP2086 antigéneket tartalmazó stabil készítmények |
| KR101907434B1 (ko) | 2010-09-03 | 2018-10-12 | 발네바 오스트리아 게엠베하 | C. 디피실의 a 독소 및 b 독소 단백질의 분리된 폴리펩타이드 및 이의 용도 |
| WO2012031760A1 (en) | 2010-09-08 | 2012-03-15 | Medigene Ag | Parvovirus mutated structural proteins comprising cross - protective b - cell epitopes of a hpv l2 protein as well as products and methods relating thereto |
| ES2585328T5 (es) | 2010-09-10 | 2022-12-14 | Wyeth Llc | Variantes no lipidadas de antígenos ORF2086 de Neisseria meningitidis |
| PL3150222T3 (pl) | 2010-12-22 | 2020-05-18 | Wyeth Llc | Stabilne immunogenne kompozycje antygenów staphylococcus aureus |
| ITMI20111182A1 (it) | 2011-06-28 | 2012-12-29 | Canio Buonavoglia | Vaccino per coronavirus canino |
| SA115360586B1 (ar) | 2012-03-09 | 2017-04-12 | فايزر انك | تركيبات لعلاج الالتهاب السحائي البكتيري وطرق لتحضيرها |
| MY167723A (en) | 2012-03-09 | 2018-09-21 | Pfizer | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| FI3363806T3 (fi) | 2012-12-20 | 2023-01-31 | Glykokonjugaatiomenetelmä | |
| JP6446377B2 (ja) | 2013-03-08 | 2018-12-26 | ファイザー・インク | 免疫原性融合ポリペプチド |
| CA2923129C (en) | 2013-09-08 | 2020-06-09 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| WO2016130569A1 (en) | 2015-02-09 | 2016-08-18 | Mj Biologics, Inc. | A composition comprising pedv antigens and methods for making and using the composition |
| BR112017017460A2 (pt) | 2015-02-19 | 2018-04-10 | Pfizer Inc. | composições de neisseria meningitidis e métodos das mesmas |
| TWI718144B (zh) | 2015-05-04 | 2021-02-11 | 美商輝瑞股份有限公司 | Ｂ型鏈球菌多醣－蛋白質軛合物、製造軛合物之方法、含軛合物之免疫原性組成物、及其用途 |
| US10751402B2 (en) | 2016-11-09 | 2020-08-25 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions and uses thereof |
| US10183070B2 (en) | 2017-01-31 | 2019-01-22 | Pfizer Inc. | Neisseria meningitidis compositions and methods thereof |
| EP3527223A1 (en) | 2018-02-16 | 2019-08-21 | 2A Pharma AB | Mutated parvovirus structural protein |
| AU2019220386A1 (en) | 2018-02-16 | 2020-08-20 | 2A Pharma Ab | Parvovirus structural protein for the treatment of autoimmune diseases |
| SG11202110646PA (en) | 2019-05-20 | 2021-10-28 | Valneva Se | A subunit vaccine for treatment or prevention of a respiratory tract infection |
| US20220233672A1 (en) | 2019-05-31 | 2022-07-28 | Universidad De Chile | An immunogenic formulation that induces protection against shiga toxin-producing escherichia coli (stec) |
| WO2021211279A1 (en) | 2020-04-17 | 2021-10-21 | Regents Of The University Of Minnesota | SARS-CoV-2 SPIKE RECEPTOR BINDING DOMAIN AND COMPOSITIONS AND METHODS THEREOF |
| US20230321212A1 (en) | 2020-08-26 | 2023-10-12 | Pfizer Inc. | Group b streptococcus polysaccharide-protein conjugates, methods for producing conjugates, immunogenic compositions comprising conjugates, and uses thereof |
| EP4058056A1 (en) | 2020-10-07 | 2022-09-21 | Valneva Sweden AB | Cholera vaccine formulation |
| WO2023083964A1 (en) | 2021-11-11 | 2023-05-19 | 2A Pharma Ab | Parvovirus structural protein against beta- and gamma-hpv |
| WO2023232901A1 (en) | 2022-06-01 | 2023-12-07 | Valneva Austria Gmbh | Clostridium difficile vaccine |
| WO2024069420A2 (en) | 2022-09-29 | 2024-04-04 | Pfizer Inc. | Immunogenic compositions comprising an rsv f protein trimer |
Family Cites Families (25)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3725545A (en) * | 1971-02-03 | 1973-04-03 | R Maes | Enhancement of antibody production by nucleic acid-polycation complexes |
| US3906092A (en) * | 1971-11-26 | 1975-09-16 | Merck & Co Inc | Stimulation of antibody response |
| CA2016841C (en) * | 1989-05-16 | 1999-09-21 | William D. Huse | A method for producing polymers having a preselected activity |
| ZA908001B (en) | 1989-10-11 | 1991-08-28 | Merrell Dow Pharma | Inosine/guanosine derivatives as immunosuppressive agents |
| US5514577A (en) * | 1990-02-26 | 1996-05-07 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotide therapies for modulating the effects of herpes viruses |
| EP0515660B1 (en) * | 1990-12-21 | 1997-03-26 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Hla dqbeta dna typing |
| US5098437A (en) * | 1991-02-13 | 1992-03-24 | Pfizer Hospital Products Group, Inc. | Acetabular cup positioning insert |
| CA2121696C (en) | 1991-10-23 | 2003-07-08 | James R. Lupski | Fingerprinting bacterial strains using repetitive dna sequence amplification |
| US5646262A (en) * | 1994-07-28 | 1997-07-08 | Georgetown University | Antisense oligonucleotides against hepatitis B viral replication |
| US20020081577A1 (en) * | 1995-06-06 | 2002-06-27 | Robert L. Kilkuskie | Oligonucleotides speciific for hepatitis c virus |
| ZA964446B (en) * | 1995-06-06 | 1996-12-06 | Hoffmann La Roche | Oligonucleotides specific for hepatitis c virus |
| CA2223061C (en) * | 1995-06-06 | 2008-04-22 | Jan Vijg | Method of and apparatus for diagnostic dna testing |
| ATE229571T1 (de) * | 1996-10-02 | 2002-12-15 | Us Gov Health & Human Serv | Nachweis und identifizierung von nicht-polio enteroviren |
| CA2268825C (en) | 1996-10-11 | 2006-04-18 | The Regents Of The University Of California | Immunostimulatory polynucleotide/immunomodulatory molecule conjugates |
| JP4101888B2 (ja) | 1997-06-06 | 2008-06-18 | ダイナバックス テクノロジーズ コーポレイション | 免疫刺激オリゴヌクレオチド、その組成物およびその使用方法 |
| US5955443A (en) * | 1998-03-19 | 1999-09-21 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Antisense modulation of PECAM-1 |
| US6001651A (en) * | 1998-03-20 | 1999-12-14 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Antisense modulation of LFA-3 |
| IL126919A0 (en) * | 1998-11-05 | 1999-09-22 | Univ Ben Gurion | Antisense oligomer |
| CN1313864A (zh) * | 1998-06-24 | 2001-09-19 | 基因创新有限公司 | Hcv包膜蛋白颗粒∶用于疫苗接种的用途 |
| KR100863630B1 (ko) * | 1999-09-25 | 2008-10-15 | 유니버시티 오브 아이오와 리써치 파운데이션 | 면역자극성 핵산 |
| WO2001083503A2 (en) | 2000-05-01 | 2001-11-08 | Hybridon, Inc. | MODULATION OF OLIGONUCLEOTIDE CpG-MEDIATED IMMUNE STIMULATION BY POSITIONAL MODIFICATION OF NUCLEOSIDES |
| AT410173B (de) * | 2000-06-08 | 2003-02-25 | Cistem Biotechnologies Gmbh | Antigene zusammensetzung |
| PT1296713E (pt) * | 2000-06-08 | 2004-02-27 | Intercell Biomediz Forschungs | Oligodesoxinucleotidos imunoestimuladores |
| CA2517673C (en) * | 2003-03-24 | 2013-08-13 | Intercell Ag | Improved vaccines for preventing viral infection |
| US7951845B2 (en) * | 2006-01-19 | 2011-05-31 | The Regents Of The University Of Michigan | Composition and method of treating hearing loss |
-
2001
- 2001-06-07 PT PT01960277T patent/PT1296713E/pt unknown
- 2001-06-07 DK DK01960277T patent/DK1296713T3/da active
- 2001-06-07 ES ES01960277T patent/ES2206424T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 HU HU0301229A patent/HU228264B1/hu unknown
- 2001-06-07 KR KR20027016711A patent/KR100799788B1/ko active IP Right Grant
- 2001-06-07 CZ CZ2002-4168A patent/CZ304195B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2001-06-07 CA CA2411575A patent/CA2411575C/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 AT AT01960277T patent/ATE249839T1/de active
- 2001-06-07 WO PCT/EP2001/006433 patent/WO2001093905A1/en active IP Right Grant
- 2001-06-07 SI SI200130047T patent/SI1296713T1/xx unknown
- 2001-06-07 IL IL15295901A patent/IL152959A0/xx active IP Right Grant
- 2001-06-07 PL PL358982A patent/PL211036B1/pl unknown
- 2001-06-07 EP EP20010960277 patent/EP1296713B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 SK SK1815-2002A patent/SK287689B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2001-06-07 MX MXPA02012010A patent/MXPA02012010A/es active IP Right Grant
- 2001-06-07 CN CNB018107974A patent/CN1309418C/zh not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 BR BRPI0111639A patent/BRPI0111639B8/pt not_active IP Right Cessation
- 2001-06-07 DE DE2001600814 patent/DE60100814T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 TR TR200302015T patent/TR200302015T4/xx unknown
- 2001-06-07 JP JP2002501476A patent/JP5271471B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2001-06-07 RU RU2003100409A patent/RU2293573C2/ru active
- 2001-06-07 RU RU2007103151A patent/RU2413520C2/ru active
- 2001-06-07 US US10/297,555 patent/US8568742B2/en active Active
- 2001-06-07 AU AU2001281812A patent/AU2001281812B2/en not_active Expired
- 2001-06-07 AU AU8181201A patent/AU8181201A/xx active Pending
-
2002
- 2002-11-18 IS IS6627A patent/IS1993B/is unknown
- 2002-11-20 IL IL152959A patent/IL152959A/en unknown
- 2002-12-04 NO NO20025835A patent/NO329492B1/no not_active IP Right Cessation
-
2003
- 2003-12-11 HK HK03109011A patent/HK1056678A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2013
- 2013-01-10 JP JP2013002571A patent/JP5908851B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2013-03-06 US US13/786,815 patent/US8945591B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2014
- 2014-12-30 US US14/585,740 patent/US9492537B2/en not_active Expired - Lifetime
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| JINSUK WOO et al., G/C - modified oligodeoxynucleotides with selective complementarity: syntesis and hybridization properties, Nucleic Acids Res., 1996, Vol. 24, No 13, p.2470-2475. ГОЛЬДФАРБ Д.М. и др. Иммунология нуклеиновых кислот. - М.: Наука, с.145-153. * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2584588C2 (ru) * | 2011-05-26 | 2016-05-20 | Интервет Интернэшнл Б.В. | Иммуностимулирующие олигодезоксинуклеотиды |
| RU2587633C2 (ru) * | 2011-05-26 | 2016-06-20 | Интервет Интернэшнл Б.В. | Иммуностимулирующие олигодезоксинуклеотиды |
| RU2726124C2 (ru) * | 2014-05-09 | 2020-07-09 | Юниверситейт Утрехт Холдинг Б.В. | Новые производные сатн2 |
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2413520C2 (ru) | Вакцинная композиция, содержащая иммуностимулирующие олигодезоксинуклеотиды | |
| US7858588B2 (en) | Immunostimulatory oligodeoxynucleic molecules | |
| AU784403B2 (en) | Pharmaceutical composition for immunomodulation and preparation of vaccines comprising an antigen and an immunogenic oligodeoxynucleotide and a polycationic polymer as adjuvants | |
| ZA200209479B (en) | Immunostimulatory oligodeoxynucleotides. | |
| AU2001281812A1 (en) | Immunostimulatory oligodeoxynucleotides | |
| AU2002320762A1 (en) | Immunostimulatory oligodeoxynucleic molecules |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20151022 |
|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20151029 |