SK284578B6 - Heterocyklické zlúčeniny obsahujúce dusík, farmaceutický prostriedok obsahujúci tieto zlúčeniny a ich použitie - Google Patents

Heterocyklické zlúčeniny obsahujúce dusík, farmaceutický prostriedok obsahujúci tieto zlúčeniny a ich použitie Download PDF

Info

Publication number
SK284578B6
SK284578B6 SK805-99A SK80599A SK284578B6 SK 284578 B6 SK284578 B6 SK 284578B6 SK 80599 A SK80599 A SK 80599A SK 284578 B6 SK284578 B6 SK 284578B6
Authority
SK
Slovakia
Prior art keywords
group
compound
alkyl
substituents
diseases
Prior art date
Application number
SK805-99A
Other languages
English (en)
Other versions
SK80599A3 (en
Inventor
Guy W. Bemis
Francesco Gerald Salituro
John Patrick Duffy
John E. Cochran
Edmund Martin Harrington
Mark A. Murcko
Keith P. Wilson
Michael Su
Vincent P. Galullo
Original Assignee
Vertex Pharmaceuticals Incorporated
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/822,373 external-priority patent/US5945418A/en
Application filed by Vertex Pharmaceuticals Incorporated filed Critical Vertex Pharmaceuticals Incorporated
Publication of SK80599A3 publication Critical patent/SK80599A3/sk
Publication of SK284578B6 publication Critical patent/SK284578B6/sk

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/70—Sulfur atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P23/00—Anaesthetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/56—Amides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/75—Amino or imino radicals, acylated by carboxylic or carbonic acids, or by sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D237/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings
    • C07D237/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D237/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D237/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D237/18—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/12—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/20—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Abstract

Opísané sú inhibítory p38, cicavčej proteínkinázy spôsobujúcej bunkovú proliferáciu, zánik buniek a reakciu na extracelulárne stimuly, spôsob prípravy týchto inhibítorov, farmaceutické prostriedky s ich obsahom a ich použitie na prípravu prostriedkov na ošetrovanie a prevenciu rôznych ochorení.ŕ

Description

Oblasť techniky
Vynález sa týka inhibítorov p38, cicavčej proteínkinázy zapojenej do procesov ako bunková proliferácia, bunková smrť a odpoveď na extraceluláme stimuly. Vynález sa tiež týka spôsobov prípravy týchto inhibítorov. Vynález sa ďalej týka farmaceutických prostriedkov obsahujúcich inhibítory podľa vynálezu a použitia týchto prostriedkov na ošetrovanie a prevenciu rôznych ochorení.
Doterajší stav techniky
Proteínkinázy sú zapojené v rôznych bunkových reakciách na extraceluláme signály. Nedávno bola objavená rodina mitogénom aktivovaných proteínových kináz (MAPK). Členmi tejto rodiny sú Ser/Thr kinázy, ktoré aktivujú svoje substráty fosforyláciou [B. Stein a kol., Ann. Rep. Med. Chem., 31, str. 289 až 298 (1966)]. MAPK sú samotné aktivované rôznymi signálmi vrátane rastových faktorov, cytokínov, UV žiarenia a faktorov vyvolávajúcich stres.
Zvlášť zaujímavou MAPK je p38. p38, tiež známa ako proteín viažuci cytokin potláčajúcu protizápalovú látku (CSBP - „cytokine suppresive anti-inílammatory drug binding proteín“) a RK, bola izolovaná z myších pre-B buniek, ktoré sa transfekovali receptorom CD 14 lipopolysacharidu (LPS) a indukovali LPS. p38 sa izolovala a sekvenovala ako jej cDNA u ľudí a myši. Aktivácia p38 sa pozorovala v bunkách stimulovaných stresmi, ako sú reakcie na lipopolysacharidy (LPS), UV žiarenie, anisomycin alebo osmotický šok, a cytokínmi, ako sú IL-1 a TNF.
Inhibícia p38 kinázy vedie k blokáde tvorby tak IL-1, ako aj TNF. IL-1 a TNF stimulujú tvorbu ostatných prezápalových cytokínov, ako sú IL-6 a IL-8 a bola dokázaná ich účasť na akútnych a chronických zápalových ochoreniach a postmenopauzálnej osteoporóze [R. B. Kimblc a kol., Endocrinol., 136, str. 3054 až 3061 (1995)].
Na základe toho sa predpokladá, že p3 8 spolu s ďalšími MAPK zohrávajú úlohu pri sprostredkovaní bunkovej reakcie na zápalové stimuly, ako sú akumulácia leukocytov, aktivácia makrofág/monocyt, resorpcia tkaniva, horúčka, akútne fázové odozvy a neutrotília. Okrem toho bola dokázaná účasť MAPK, ako je p38, pri rakovine, trombínom vyvolanej agregácii doštičiek, poruchách imunity, autoimúnnych poruchách, bunkovej smrti, alergii, osteoporóze a neurodegeneratívnych ochoreniach. Inhibítory p38 tiež pôsobia v oblasti liečby bolesti inhibíciou indukcie prostaglandinendoperoxidsyntázy-2. Ďalšie ochorenia spojené s nadprodukciou IL-1, IL-6, IL-8 alebo TNF sú uvedené vo WO 96/21654.
Začalo sa už s vývojom liekov, ktoré špecificky inhibujú MAPK. Napríklad PCT publikácia WO 95/31451 opisuje zlúčeniny pyrazolu, ktoré inhibujú MAPK a najmä p38. Ale účinnosť týchto inhibítorov in vivo sa stále skúma.
Stále je veľký dopyt po vývoji ďalších silných p38 špecifických inhibítorov, ktoré sú použiteľné pri ošetrovaní rôznych stavov spojených s aktiváciou p38.
Podstata vynálezu
Predložený vynález rieši tento problém prípravou zlúčenín, ktoré vykazujú silnú a špecifickú inhibíciu p38.
Podstatou vynálezu sú zlúčeniny všeobecných vzorcov (la) alebo (Ib)
kde každý zo substituentov Q1 a Q2 je nezávisle vybraný zo skupiny zahŕňajúcej päťčlenné až šesťčlenné aromatické karbocyklické alebo heterocyklické kruhové systémy alebo osemčlenné až desaťčlenné bicyklické kruhové systémy obsahujúce aromatické karbocyklické kruhy, aromatické heterocyklické kruhy alebo kombináciu aromatického karbocyklického kruhu a aromatického heterocyklického kruhu.
Kruhy, ktoré tvoria Q1, sú substituované 1 až 4 substituentmi, z ktorých každý je nezávisle vybraný zo skupiny zahŕňajúcej atóm halogénu, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka, prípadne substituovanú skupinami NR'2 OR', CO2R' alebo CONR'2, skupinu O-alkyl, kde alkylová časť má 1 až 3 atómy uhlíka, prípadne substituovanú skupinami NR'2, OR’, CO2R’ alebo CONR'2, ďalej skupiny NR'2, OCF3, CF3, NO2, CO2R', CONHR', SR', S(O2)N(R')2, SCF3, CN, N(R')C(O)R4, N(R')C(O)OR4, N(R')C(O)C(O)R4, N(R')S(O2)R4, N(R')R4, N(R4)2, OR4, OC(O)R4, OP(O)3H2 alebo N=CH-N(R')2.
Kruhy, ktoré tvoria Q2, sú prípadne substituované až 4 substituentmi, z ktorých každý je nezávisle vybraný zo skupiny zahŕňajúcej atóm halogénu, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka s priamym alebo rozvetveným reťazcom, prípadne substituovanú skupinami NR2, OR’, CO2R', S(O2)N(R')2, N=CH-N(R')2, R3 alebo CONR',, skupinu O-alkyl, kde alkylová časť má 1 až 3 atómy uhlíka, skupinu O-alkyl, kde alkylová časť má 1 až 3 atómy uhlíka, prípadne substituovanú skupinami NR'2, OR', CO2R', S(O2)N(R')2, N=CH-N(R')2, R3 alebo CONR'2, ďalej skupiny NR'2, OCF3, CF3, NO2, CO2R’, CONHR', R3, OR3, NHR3, SR3, C(O)R3, C(O)N(R')R3, C(O)OR3, SR', S(O2)N(R')2, SCF3, N=CH-N(R'),, alebo CN.
R' je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka, alkenylovú skupinu s 2 až 3 atómami uhlíka alebo alkinylovú skupinu, fenylovú skupinu alebo fenylovú skupinu, prípadne substituovanú 1 až 3 substituentmi nezávisle vybranými zo skupiny zahŕňajúcej atóm halogénu, metoxyskupinu, kyanoskupínu, nitroskupinu, aminoskupinu, hydroxyskupinu, metyl ovú skupinu alebo ctylovú skupinu.
R3 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej päťčlenné až šesťčlenné aromatické karbocyklické alebo heterocyklické kruhové systémy.
R4 je alkylová skupina s 1 až 4 atómami uhlíka, prípadne substituovaná skupinami N(R')2, OR', CO2R', CON(R')2 alebo SO2N(R2)2, alebo päťčlenný až šesťčlenný karbocyklický alebo heterocyklický kruhový systém, prípadne substituovaný skupinami N(R')2, OR', CO2R', CON(R')2 alebo SO2N(R2)2.
X je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej -S-, -0-, -S(O2)-, -S(O)-, -S(O2)-N(R2)-, N(R2)-S(O2)-, -N(R2)-C(O)O-, -O-C(O)-N(R2)-, -C(O)-, -C(O)O-, -O-C(O)-, -C(O)-N(R2)-, -N(R2)-C(O)-, -N(R2)-, -C(R2)2- alebo -C(OR2)2-.
Každé R je nezávisle vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, -R2, -N(R2)2, -OR2, -SR2, -C(O)-N(R2)2, -S(O2)-N(R2)2 alebo -C(O)-OR2, pričom dve priľahlé R sú prípadne viazané jedno na druhé a spolu s každým Y, ku ktorým sú viazané, tvoria štvorčlenný až osemčlenný karbocyklický alebo heterocyklický kruh,
R2 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka alebo alkenylovú sku pinu s 2 až 3 atómami uhlíka, ktoré sú obidve prípadne substituované skupinami -N(R')2, -OR', -SR', -C(O)-N(R')2, S(O2)-N(R')2, -C(O)-OR', alebo R3.
Y je N alebo C,
A, ak je prítomné, je N alebo CR', n je 0 alebo 1,
R1 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka, OH, alebo -O-alkyl, kde alkylovú časť má 1 až 3 atómy uhlíka.
Ďalej sú podstatou vynálezu farmaceutické prostriedky, ktoré obsahujú inhibítory p38 podľa vynálezu. Tieto prostriedky je možné použiť pri liečení alebo prevencii rôznych ochorení, ako sú rakovina, zápalové ochorenia, autoimúnne ochorenia, deštruktívne poruchy kostí, proliferačné poruchy, infekčné ochorenia, vírusové ochorenia a neurodegeneratívne ochorenia. Tieto prostriedky je možné tiež použiť na prevenciu zániku buniek a hyperplázie, a preto sa môžu použiť na ošetrenie alebo prevenciu reperfúzie alebo ischémie pri mŕtvici, srdcovom záchvate a hypoxii orgánov. Tieto prostriedky je tiež možné použiť na prevenciu trombínom vyvolanej agregácie doštičiek. Všetky tieto použitia sú tiež súčasťou predloženého vynálezu.
Podstatou vynálezu sú inhibítory p38 všeobecných vzorcov (la) alebo (Ib)
<Ib , kde každý zo substituentov Q1 a Q2 je nezávisle vybraný zo skupiny zahŕňajúcej päťčlenné až šesťčlenné aromatické karbocyklické alebo heterocyklické kruhové systémy alebo osemčlenné až desaťčlenné bicyklické kruhové systémy obsahujúce aromatické karbocyklické kruhy, aromatické heterocyklické kruhy alebo kombináciu aromatického karbocyklickcho kruhu a aromatického heterocyklického kruhu.
Kruhy, ktoré tvoria Q1, sú substituované 1 až 4 substituentmi, z ktorých každý je nezávisle vybraný zo skupiny zahŕňajúcej atóm halogénu, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka, prípadne substituovanú skupinami NR'2, OR', CO2R' alebo CONR'2, skupinu O-alkyl, kde alkylová časť má 1 až 3 atómy uhlíka, prípadne substituovanú skupinami NR'2, OR', CO2R' alebo CONR'2) ďalej skupiny NR'2, OCFj, CF3, NO2, CO2R', CONHR', SR', S(O2)N(R')2, SCF3, CN, N(R')C(O)R4, N(R')C(O)OR4, N(R')C(O)C(O)R4, N(R')S(O2)R4, N(R')R4, N(R4)2, OR4, OC(O)R4, OP(O)3H2, alebo N=CH-N(R')2.
Kruhy, ktoré tvoria Q2, sú prípadne substituované až 4 substituentmi, z ktorých každý je nezávisle vybraný zo skupiny zahŕňajúcej atóm halogénu, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka s priamym alebo rozvetveným reťazcom, prípadne substituovanú skupinami NR'2, OR', CO2R', S(O2)N(R')2, N=CH-N(R')2, R3 alebo CONR'2, skupinu O-alkyl, kde alkylová časť má 1 až 3 atómy uhlíka, skupinu O-alkyl, kde alkylová časť má 1 až 3 atómy uhlíka, prípadne substituovanú skupinami NR'2, OR’, CO2R', S(O2)N(R')2, N=CH-N(R')2, R3 alebo CONR'2, ďalej skupiny NR'2) ocf3, cf3, NO2, CO2R', CONR', R3, OR3, NHR3, SR3, C(O)R3, C(O)N(R')R3, C(O)OR3, SR', S(O2)N(R’)2, SCF3, N=CH-N(R’)2, alebo CN.
R' je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka, alkenylovú skupinu s 2 až 3 atómami uhlíka alebo alkinylovú skupinu, fenylovú skupinu alebo fenylovú skupinu, prípadne substituovanú 1 až 3 substituentmi nezávisle vybranými zo skupiny zahŕňajúcej atóm halogénu, metoxyskupinu, kyanoskupinu, nitroskupinu, aminoskupinu, hydroxyskupinu, metylovú skupinu alebo etylovú skupinu.
R3 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej päťčlenné až šesťčlenné aromatické karbocyklické alebo heterocyklické kruhové systémy.
R4 je alkylová skupina s 1 až 4 atómami uhlíka, prípadne substituovaná skupinami N(R')2, OR', CO2R', CON(R')2 alebo SO2N(R2)2, alebo päťčlenný až šesťčlenný karbocyklický alebo heterocyklický kruhový systém, prípadne substituovaný skupinami N(R')2, OR1, CO2R', CON(R')2 alebo SO2N(R2)2.
X je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej -S-, -O-, -S(O2)-, -S(O)-, -S(O2)-N(R2)-, -N(R2)-S(O2)-, -N(R2)-C(O)O-, -o-C(O)-N(R2)-, -C(O)-, -C(O)O-, -O-C(O)-, -C(O)-N(R2)-, -N(R2)-C(O)-, -N(R2)-, -C(R2)2- alebo -C(OR2)2-.
Každé R je nezávisle vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, -R2, -N(R2)2, -OR2, -SR2, -C(O)-N(R2)2, -S(O2)-N(R2)j alebo -C(O)-OR2, pričom dve priľahlé R sú prípadne viazané jedno na druhé a spolu s každým Y, ku ktorým sú viazané, tvoria štvorčlenný až osemčlenný karbocyklický alebo heterocyklický kruh.
Ak obidve R tvoria spolu so skupinami Y, ku ktorým sú pripojené, kruh, je odborníkovi zrejmé, že z každého nekondenzovaného R sa stratí atóm vodíka. Napríklad, ak je kruhová štruktúra tvorená väzbou obidvoch R spolu, keď jedna je -NH-CH3 a druhá je -CH2CH3, jeden koncový atóm vodíka sa z každého R stratí (je vyznačené hrubo). Preto vzniknutá časť kruhovej štruktúry má vzorec -NH-CH2-CH2-CH2-.
R2 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka alebo alkenylovú skupinu s 2 až 3 atómami uhlíka, pričom každá táto skupina je pripadne substituovaná skupinami -N(R')2, -OR', -SR', -C(O)-N(R’)2, -S(O2)-N(R’)j, -C(O)-OR’, alebo R3.
Y je N alebo C,
A, ak je prítomné, je N alebo CR', n je 0 alebo 1,
R1 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka, OH, alebo -O-alkyl, kde alkylová časť má 1 až 3 atómy uhlíka. Odborníkovi je zrejmé, že ak R1 je OH, vzniknutý inhibitor sa môže tautomerizovať na zlúčeninu vzorca
čo sú tiež inhibítory p38 podľa tohto vynálezu.
Podľa ďalšieho výhodného uskutočnenia vynálezu je Q1 vybrané zo skupiny zahŕňajúcej fenylovú alebo pyridylovú skupinu obsahujúcu 1 až 3 substituenty, kde aspoň jeden z týchto substituentov je v orto polohe a tieto substituenty sú nezávisle vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm chlóru, atóm fluóru, atóm brómu, skupiny -CH3, -OCH3, -OH, -CFS, -OCF3,-O(CH2)2CH3, NH2, 3,4-metyléndioxyskupinu, -N(CH3)2, -NH-S(O2)-fcnyl, -NH-C(O)O-CH2-4-pyridín, -NH-C(0)CH2-morfolin, -NH-C(O)CH2-N(CH3)2, -NH-C(O)CH2-piperazín, -NH-C(0)CH2-pyrolidin, -NH-C(O)C(O)-morfolín, -NH-C(O)C(O)-piperazin, -NH-C(O)C(O)-pyrolidín, -O-C(O)CH2-N(CH3)2 alebo -O-(CH2)2-N(CHj)2.
Ešte výhodnejšie Q1 je fenylová alebo pyridylová skupina obsahujúca aspoň dva z uvedených substituentov, pričom obidva sú v polohe orto.
Určitými špecifickými príkladmi výhodného Q1 sú:
Najvýhodnejšie je Q1 vybrané zo skupiny zahŕňajúcej 2-fluór-6-trifluórmetylfenyl, 2,6-difluórfenyl, 2,6-dichlórfenyl, 2-chlór-4-hydroxyfenyl, 2-chlór-4-aminofenyl, 2,6-dichlór-4-aminofenyl, 2,6-dichlór-3-aminofenyl, 2,6-dimetyl-4-hydroxyfenyl, 2-metoxy-3,5-dichlór-4-pyridyl, 2-chlór-4,5-metyléndioxyfenyl alebo 2-chlór-4-(N-2-morfolinoacetamidojfenyl.
Podľa výhodného uskutočnenia vynálezu je Q2 fenylová alebo pyridylová skupina obsahujúca 0 až 3 substituenty, kde každý substituent je nezávisle vybraný zo skupiny zahŕňajúcej atóm chlóru, atóm fluóru, atóm brómu, metylovú skupinu, etylovú skupinu, izopropylovú skupinu, skupiny -OCH3, -OH, -NH2, -CF3, -OCF3, -SCH3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -CH2NH2, -N(CH3)2, -CH2-pyrolidín a -CH2OH.
Určitými špecifickými príkladmi výhodného Q2 sú:
nesubstituovaný 2-pyridyl alebo nesubstituovaný fenyl.
Najvýhodnejšie sú zlúčeniny, kde Q2 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej fenyl, 2-izopropylfenyl, 3,4-dimetylfenyl, 2-etyl- fenyl, 3-fluórfenyl, 2-metylfenyl, 3-chlór-4-fluórfenyl, 3-chlórfenyl, 2-metoxykarbonylfenyl, 2-karboxyfenyl, 2-mctyl-4-chlórfenyl, 2-brómfenyl, 2-pyridyl, 2-metylénhydroxyfenyl, 4-fluórfenyl, 2-metyl-4-fluórfenyl, 2-chlór-4-fluórfenyl, 2,4-difluórfenyl, 2-hydroxy-4-fluórfenyl alebo 2-metylénhydroxy-4-fluórfenyl.
Podľa ďalšieho výhodného uskutočnenia je X -S-, -0-, -S(02)-, -S(0)-, -NR-, -C(R2)- alebo -C(0)-. Najvýhodnejšie je X -S-.
Podľa ďalšieho výhodného uskutočnenia je n 1 a A je N.
Podľa ďalšieho výhodného uskutočnenia je každé Y C.
Podľa ešte výhodnejšieho uskutočnenia je každé Y C a R pripojené k týmto skupinám, Y je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka alebo metylovú skupinu.
Určité špecifické inhibítory podľa vynálezu sú zhrnuté v tabuľke 1 ďalej.
Tabuľka 1 Zlúčeniny všeobecných vzorcov (la) a (Ib)
Zl. štruktúra Zl. štruktúra
2 F ŕjj 9 L· <j)
3 o 10 υυί jfl
5 C1 ry· 11 Υί*ι [O
6 12 Φ F
7 Yl) Yj] 13 CIZy^CH 1
8 YCuO 14 Φ CH.
15 cr'?ŕ!ŕxi ÓL, 21
Zl. štruktúra Zl. štruktúra
16 ά. Cl 22 XA; 'Αζχ.-Ο
17 23 VVJ1 υί ^n„AsAJ
18 C^Y^Cl H.C^^CH, 24 cr'^'N^X n^%A. F
19 °γ4>Γ^1 << CH, 25 .¼ Vyx n<au x>
20 XX c: d ch, xxxxo 26 i YJ f55^ oA CH,
27 CiA^ŕ^cl °Yn\ fA (ΑόΗ 33 Υγΐ jf) OH
28 τΧχτ 34 TO τχλ
29 Br 35 Y t
Zl. štruktúra Zl. štruktúra
íl
30 cry^ 36 Y^CI
uXO
=xx
31 uxo A^ CH, 37 cr^p'a yyj ^γ
Ιί^Ί n
cAAa οΐ'Ί^α
32 XiX ^A<M CH, 38 ww
1^0
A?° ΐΓη0
JU eAA
39 ΟΚ'γ 45 ]
° τΎΥ ΓΎ* VXQT Cl
p.
HHt
_LJ
40 H<>/A A L i g. F 46 vA rrF
ΪΧ Xh· A
41 CrY^O CH, oYAA Af 47 A
a xxxxr'
h^h'ch’
Ύ Δ ‘‘
42 Os!!rzAx^i r^Z 48 °γΑγγ
»^-sAsAJ _ΛΛ_Γ yj c/
^CH, -Α>°~0Η, «ji
43 □AJ 49 C|A^
VťJ γγ AX-o-
n^Z“’
A=r'CH’ Λ-
Jl
44 ΫίΙ fnfF 50
Zl. štruktúra Zl. štruktúra
51 HjC^NH JĎ 53 F
52 cu. 'I'·.,-.
Ďalej sú podstatou vynálezu spôsoby prípravy inhibítorov p38 všeobecného vzorca (la), uvedeného skôr. Tieto spôsoby spočívajú v reakcii zlúčeniny všeobecného vzorca (II)
nh2 kde každý substitucnt v tomto vzorci má význam uvedený už skôr pre inhibítory podľa vynálezu, s reakčným činidlom s odstupujúcou skupinou všeobecného vzorca (Ha)
R' ,1. I ,3 !IIa),
L2 kde R1 má skôr uvedený význam, alebo s reakčným činidlom s odstupujúcou skupinou všeobecného vzorca (Ilb)
kde každá zo skupín L1, L2 a L3 nezávisle znamená odstupujúcu skupinu.
Činidlo s odstupujúcou skupinou sa v tejto reakcii pridáva v nadbytku, buď čisté alebo s korozpúšťadlom, ako je toluén. Reakcia sa uskutočňuje pri teplote v rozsahu 25 °C al50°C.
Ako činidlá s odstupujúcou skupinou všeobecného vzorca (Ha), ktoré je možné použiť pri príprave inhibítorov p38 podľa vynálezu, je možné uviesť dimetylacetál dimetylformamidu, dimetylacetál dimetylacetamidu, trimetylortoformiát, dietylacetál dimetylformamidu a ďalšie príbuzné činidlá. Výhodným činidlom s odstupujúcou skupinou všeobecného vzorca (Ha) pri príprave inhibítorov podľa vynálezu je dimetylacetál dimetylformamidu.
Ako činidlá s odstupujúcou skupinou všeobecného vzorca (Ilb), ktoré je možné použiť pri príprave inhibítorov p38 podľa vynálezu, je možné uviesť fosgén, karbonyldiimidazol, dietylkarbonát a trifosgén.
Ešte výhodnejšie spôsoby prípravy zlúčenín podľa vynálezu používajú zlúčeniny všeobecného vzorca (II), kde každý z uvedených substituentov má významy uvedené pri skôr uvedených výhodných a najvýhodnejších zlúčeninách podľa vynálezu.
Pretože zdrojom R1 je činidlo s odstupujúcou skupinou (C-R' alebo C=O), jeho identita samozrejme závisí od štruktúry tohto činidla. Preto pri zlúčeninách, kde R1 je OH, musí byť týmto činidlom zlúčenina vzorca (Ilb). Podobne, ak je R1 atóm vodíka alebo alkylová skupina s 1 až 3 atómami uhlíka, použitým činidlom musí byť zlúčenina vzorca (Ha). Na získanie inhibítorov, kde R1 je O-alkyl, kde alkylová časť má 1 až 3 atómy uhlíka, sa najskôr pripraví zlú čenina, kde R1 je OH a potom sa táto hydroxyskupina alkyluje štandardnými technikami, ako je reakcia s hydridom sodným v DMF, s metyljodidom a etyljodidom.
Bezprostredných predchodcov inhibítorov podľa vynálezu všeobecného vzorca (la) (to je zlúčeniny všeobecného vzorca (II)) je možné pripraviť podľa obidvoch schém syntézy opísaných ďalej:
Schéma 1
Tiež východiskový nitril je možné nahradiť zodpovedajúcou kyselinou alebo esterom. Alternatívne je možné použiť tiež namiesto nitrilu iné známe latentné karboxylové skupiny alebo karboxamidové skupiny (pozri schému 2). Do tejto schémy je možné začleniť obmeny, ako sú karboxylové kyseliny, estery karboxylových kyselín, oxazolíny alebo oxazolidinóny, s použitím následného odstránenia ochranných skupín a zavedenia ochranných skupín, čo sú metódy známe zo stavu techniky.
Ako zásady sa v prvom stupni schémy 1 (a v schéme 2 ďalej) používajú hydrid sodný, amid sodný, LDA, lítiumhexametyldisilazid, hexametyldisilazid sodný lebo akákoľvek z ostatných nenukleofilných zásad, ktoré deprotonujú polohu d na nitril.
Tiež pridanie HX-Q2 v jednom stupni, ako je už skôr naznačené, je možné nahradiť dvoma stupňami - pridaním chráneného alebo nechráneného X derivátu a potom adíciou Q2 derivátu v nasledujúcom stupni.
Schéma 2
V schéme 2 je Z vybrané zo skupiny zahŕňajúcej COOH, COOR', CON(R')2, oxazolín, oxazolidinón alebo CN. R' má výhodne už skôr uvedený význam.
Ďalej sa vynález týka spôsobov prípravy inhibítorov p38 všeobecného vzorca (Ib), ako je uvedený skôr. Tieto spôsoby spočívajú v reakcii zlúčeniny všeobecného vzorca (III)
kde rôzne substituenty majú významy uvedené už skôr pre inhibítory podľa vynálezu, s činidlom obsahujúcim odstupujúcu skupinu všeobecného vzorca (Ha) alebo (Ilb)
R· ,2 (ľla)
-ľb', ako sú skôr opísané.
Ďalej sú uvedené dve schémy úplnej syntézy inhibítorov p38 všeobecného vzorca (lb) podľa vynálezu.
Schéma 3
(lb)
V schéme 3 je možné Q1 substituovaný derivát nechať reagovať so zásadou, ako je hydrid sodný, amid sodný, LDA, lítiumhexametyldisilazid, hexametyldisilazid sodný alebo akákoľvek iná nenukleofilná zásada, ktorá deprotonuje polohu d na Z skupine, čo je maskovaná amidová skupina. Alternatívne je Z karboxylová kyselina, ester karboxylovej kyseliny, oxazolin alebo oxazolidinón. Anión vzniknutý z deprotonácie sa potom uvedie do styku s dusíkatou heterocyklickou zlúčeninou, ktorá obsahuje dve odstupujúce skupiny alebo latentnou odstupujúcou skupinou, v prítomnosti paládiového katalyzátora. Ako príklad takejto zlúčeniny je možné uviesť 2,6-dichlórpyridín.
V stupni 2 sa zavádza Q2 kruhová časť. Je to možné uskutočňovať s použitím mnohých reakcii známych zo stavu techniky, ktoré vedú k tvorbe diarylových zlúčenín. Jedným príkladom môže byť reakcia arylovej lítiovej zlúčeniny s pyridínovým medziproduktom vzniknutým v stupni 1. Alternatívne sa arylkovová zlúčenina, ako je arylstanán alebo arylboritá kyselina, nechá reagovať s arylhalogenidovou časťou pyridínového medziproduktu v prítomnosti kovového paládiového katalyzátora.
V stupni 3 sa zo skupiny Z odštiepi ochranná skupina a/alebo sa táto skupina funkcionalizuje, pričom vzniká amidová zlúčenina. Ak je Z karboxylová kyselina, ester karboxylovej kyseliny, oxazolin alebo oxazolidín, jc možné na prípravu amidu použiť rôzne spôsoby odštiepenia ochrannej skupiny a funkcionalizácie, ktoré sú známe zo stavu techniky. Nakoniec sa v stupni 4 amidová zlúčenina cyklizuje na konečný produkt s použitím reakčných činidiel, ako sú acetál DMF alebo podobné činidlá, buď v čistej forme alebo v organickom rozpúšťadle.
Schéma 4
Schéma 4 je podobná s výnimkou, že diarylový medziprodukt sa najskôr uvoľní pred reakciou s Q1 východiskovou látkou.
Podstatou vynálezu sú ďalej inhibítory p38 podobné inhibítorom všeobecných vzorcov (la) a (lb) už skôr uvedených, ale kde C=N v kruhu nesúcom substitucnt Q1 jc redukovaná. Tieto inhibítory majú všeobecné vzorce (Ic) alebo (Id)
kde A, Q1, Q2, R, R1, X, Y a n majú skôr uvedený význam pre zlúčeniny všeobecných vzorcov (la) a (lb). Tieto definície platia pre všetky uskutočnenia každej z týchto možností (to je pre významy základné, výhodné, výhodnejšie a najvýhodnejšie). R5je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, skupiny -CR'2OH, -C(O)R4, -C(O)OR4, -CR'2OPO3H2, -PO3H2 a soli -PO3H2.
Keď R5 nie je atóm vodíka, očakáva sa, že vzniknuté zlúčeniny budú vo forme profarmák, ktoré môžu byť štiepené in vivo, čim vzniká zlúčenina, kde R5 je atóm vodíka.
V ďalšom výhodnom uskutočnení v zlúčeninách všeobecného vzorca (Ic) je A výhodne atóm dusíka, n je výhodne 1 a X je výhodne atóm síry. V zlúčeninách všeobecného vzorca (Ic) alebo (Id) sú Q1 a Q2 výhodne také isté substituenty uvedené skôr pri zlúčeninách všeobecných vzorcov (la) a (lb).
Zlúčeniny všeobecných vzorcov (Ic) a (Id) je možné pripraviť priamo zo zlúčenín všeobecného vzorca (la) alebo (lb), ktoré obsahujú atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómy uhlíka alebo alkenylovú skupinu s 2 až 3 atómami uhlíka alebo alkinylovú skupinu v polohe substituenta R1 (tzn., kde R1 = R'). Schémy syntézy týchto zlúčenín sú znázornené v schémach 5 a 6.
Schéma 5
Q1 R
R'
Schéma 6 redukcia
Ic redukcia
Id
V týchto schémach sa zlúčeniny všeobecného vzorca (la) alebo (lb) redukujú reakciou s nadbytkom diizobutylalumíniumhydridu alebo s ekvivalentným činidlom, čím sa získa kruhová redukovaná zlúčenina všeobecného vzorca (Ic) alebo (Id).
Zavedenie inej skupiny R5, ako je atóm vodíka na kruhový atóm dusíka, sa uskutočňuje reakciou zlúčenín vzorca (Ic) alebo (Id) uvedených skôr, s príslušným činidlom alebo s príslušnými činidlami. Príklady týchto modifikácií sú uvedené ďalej v príkladoch uskutočnenia vynálezu.
Určité špecifické inhibítory podľa vynálezu všeobecného vzorca (Ic) sú zhrnuté v tabuľke 2.
lb
Tabuľka 2 Zlúčeniny všeobecného vzorca (Ic)
zl. štruktúra zl. štruktúra
101 XX 110 v,s %
102 XX 0x9 111 0
103 cryXi Hli Á Á N 112 XXX
104 XX xox oAjh 113 xx χόγ~
105 xx ώχο CT'NHj 114 XxXsJp OH
106 xx wx 115 wh2
107 ,-'X xxo 116 HNsJl^ /UL J NS.
108 117 X^NHi T
109 XX MXp Br 118 w
zl. štruktúra zl. štruktúra
119 XX υλ 128 xx χχχχ NHj
120 ^χσΛ 129 X w.o'
121 130 hn. Jx J
122 πχχχχρ nh2 131 αχ^γ*^α χαχ CH,
123 αΧΧ, °XXXjO ^NH *ó 132 Η!Ύχ a/y<xF xxxrr
124 XIX mr 133 αΧγΧα _ “ώχσ C1
125 XX xxxx 134 ci-^y^ xOXf
126 w, (Jr 135 ✓CH» /\z0H
127 Cľ^V*^ci xcco' 136 Cl
zl. štruktúra zl. štruktúra
137 ťl 142 VyS Z··/'
w
138 143
Y
xCHj
139 CKY 144 x
’ώχο·’
n A
140 °YY> 145 ciAz
Cl
cyAnm i
141 X
Podstatou vynálezu sú ďalej inhibítory p38 všeobecných vzorcov (Ie), (If), (Ig) alebo (Ih)
kde A, Q1, Q2, R, X, Y a n majú význam uvedený už skôr pri všeobecných vzorcoch (la) a (Ib). Tieto definície platia pre všetky uskutočnenia každého z premenných významov (tzn. pre základné, výhodné, ešte výhodnejšie a najvýhodnejšie významy). Ešte výhodnejšie je v zlúčeninách všeobecného vzorca (Ie) Q2 nesubstituovaná fenylová skupina.
Q3 je päťčlenný až šesťčlenný aromatický karbocyklický alebo heterocyklický kruhový systém alebo osemčlenný až desaťčlenný bicyklický kruhový systém obsahujúci aromatické karbocyklické kruhy, aromatické heterocyklické kruhy alebo kombináciu aromatického karbocyklického kruhu a aromatického heterocyklického kruhu. Kruhy Q3 sú substituované 1 až 4 substituentmi, ktoré sú nezávisle vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm halogénu, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka, prípadne substituovanú skupinami NR'2, OR', CO2R' alebo CONR'2, skupinu O-alkyl, kde alkylová časť má 1 až 3 atómy uhlíka, prípadne substituovanú skupinami NR'2, OR’, CO2R' alebo CONR'2, ďalej skupiny NR'2, OCF3, CF3, NO2, CO2R', CONHR', SR', S(O2)N(R')2, SCF3, CN, N(R')C(O)R4, N(R’)C(O)OR4, N(R')C(O)C(O)R4, N(R')S(O2)R4, N(R')R4, N(R4)2, OR4, OC(O)R4, OP(O)3H2 alebo N=CH-N(R’)2.
Podľa jedného výhodného uskutočnenia je Q3 substituované 2 až 4 substituentmi, kde aspoň jeden z týchto substituentov je prítomný v polohe orto vzhľadom na miesto pripojenia Q3 na zvyšok inhibítora. Keď Q3 je bicyklický kruh, sú prítomné dva substituenty v polohe orto na kruhu, ktorý je najbližšie (tzn., ktorý je priamo pripojený) k zvyšku molekuly inhibítora. Ďalšie dva prípadné substituenty môžu byť prítomné na každom kruhu. Ešte výhodnejšie sú obidve orto polohy substituované jedným z týchto substituentov.
Podľa ďalšieho výhodného uskutočnenia je Q3 monocyklický karbocyklický kruh, kde každý orto substituent je nezávisle vybraný zo skupiny zahŕňajúcej atóm halogénu alebo metylovú skupinu. Podľa ďalšieho výhodného uskutočnenia Q3 obsahuje 1 alebo 2 ďalšie substituenty nezávisle vybrané zo skupiny zahŕňajúcej skupiny NR'2, OR', CO2R', CN, N(R')C(O)R4, N(R')C(O)OR4, N(R jC(O)C(O)R4, N(R')S(O2)R4, N(R')R4, N(R4)2, OR4, OC(O)R4, OP(O)3H2 alebo N=CH-N(R’)2.
Výhodne je Q3 vybrané z akýchkoľvek významov Q3, prítomných v zlúčeninách vzorca (Ie) zhrnutých v tabuľke 3 ďalej alebo z akýchkoľvek významov Q3 prítomných v zlúčeninách vzorca (Ig) zhrnutých v tabuľke 4.
Pracovníkom v odbore je zrejmé, že zlúčeniny všeobecného vzorca (Ie) sú priamymi prekurzormi určitých inhibítorov p38 podľa vynálezu všeobecného vzorca (la) a (Ic) (tzn., kde Q’= Q3). Ďalej je tiež zrejmé, že zlúčeniny všeobecného vzorca (Ig) sú prekurzormi určitých inhibítorov p38 podľa vynálezu všeobecných vzorcov (Ib) a (Id) (tzn., kde Q1 = Q3). Preto syntéza inhibítorov všeobecného vzorca (Ie) je znázornená už skôr v schémach 1 a 2, kde Q1 sa nahradí za Q3. Podobne syntéza inhibítorov všeobecného vzorca (Ig) je znázornená v schémach 3 a 4, kde Q1 sa nahradí za Q3.
Syntéza inhibítorov všeobecného vzorca (If) a (Ih) je znázornená v schémach 7 a 8.
Schéma 7
(tf) y-»»,
R—Srt·
I
R q’ r acyláe | |
Schéma 8
Br
(h)
Schéma 8 zobrazuje syntézu zlúčenín typu Ih. Napríklad reakciou východiskového dibrómderivátu, ako je 2,6-dibrómpyridín, s amínom v prítomnosti zásady, ako je hydrid sodný, sa získa 2-amino-6-brómderivát. Reakciou tohto medziproduktu s analógom fenylboritej kyseliny (Q2boritá kyselina), ako je fenylboritá kyselina, v prítomnosti paládiového katalyzátora sa získa disubstituovaný derivát, ktorý sa potom môže acylovať na výsledný produkt. Poradie prvých dvoch stupňov tejto syntézy sa môže obrátiť.
Vynálezcovia predpokladajú bez toho, aby boli viazaní na teóriu, že diortosubstitúcia v Q3 kruhu inhibítorov všeobecných vzorcov (Ie) a (Ig) a prítomnosť dusíka priamo pripojeného na Q1 kruh v inhibítoroch všeobecných vzorcov (If) a (Ih) spôsobujú „sploštenie“ zlúčeniny, čo umožňuje účinne inhibovať p3 8.
Výhodným inhibítorom podľa vynálezu všeobecného vzorca (Ie) je zlúčenina, kde A je atóm uhlíka, n je 1, X je atóm síry, každé Y je atóm uhlíka, každé R je atóm vodíka, Q3 je 2,6-di- chlórfenyl a Q2 je fenyl, pričom táto zlúčenina je tu označená ako zlúčenina 201. Výhodným inhibítorom podľa vynálezu všeobecného vzorca (Ig) je zlúčenina, kde Q3 jc 2,6-dichlórfcnyl, Q2 je fenyl, každé Y je atóm uhlíka a každé R je atóm vodíka. Táto zlúčenina je tu označená ako zlúčenina 202. Ďalšie výhodné zlúčeniny podľa vynálezu všeobecného vzorca (Ig) sú ďalej zhrnuté v tabuľke 4.
Výhodné zlúčeniny podľa vynálezu všeobecného vzorca (Ih) sú zhrnuté v tabuľke 5. Ďalšími výhodnými zlúčeninami všeobecného vzorca (lh) sú zlúčeniny, kde Q1 je fenyl nezávisle substituovaný v polohách 2 a 6 atómom chlóru alebo fluóru, každé Y je atóm uhlíka, každé R je atóm vodíka a Q2 je 2-metylfenyl, 4-fluórfenyl, 2,4-difluórfenyl, 2-metylénhydroxy-4-fluórfenyl alebo 2-metyl-4-fluórfenyl.
Určité špecifické inhibítory všeobecných vzorcov (Ie), (Ig) a (Ih) sú zhrnuté v tabuľkách ďalej.
Tabuľka 3 Inhibítory všeobecného vzorca (Ie)
zl. štruktúra zl. štruktúra
201 ci 206 M V yM‘
U
N H.
203 ΊΧζΤΌ 1 N 207
NKľ s-O~‘ Cí
204 .·..·.·····' 208 αχ I ( ! ~ X'N V I
Tabuľka 4 Inhibítory všeobecného vzorca (Ig)
zl. štruktúra zl. štruktúra
.Cl
íl
II /JA
202 /301 Cl ίμη2 N II 310 X X JL JU -O Cl
U,
M
n XCI A VYi
A £ II XJ
302 Cl .OH 311 hX ϊ> c: '0
LA
LA
A
H ^A . JU
303 a 312 Cl
V H/X 0
CH,
''►H A* /U
304 313 n £1 Αγ x Cl v 0
F
Cl
xi
í Ί
ιψ ’SNHJ fOi “ΎΊ1
UUk UU
305 Cl L I f”’ 314 J X, Cl ^0
u
.Cl
íl 0
1X1 CIYX
OJ
306 F N 315 T xX. Cl
Η,Ν
Xx 0
M
_,CI
' 0
LA
ΛΧ po
307 Cl .MOH 316 ojO Ci
LA xS
M
zl. štruktúra zl. štruktúra
x^ Cl
A T il <Ίι Ά
x £. xk. AJ A A AJ
308 U 1 c: 317 C JL,
-A H,N so H.U
0 0
Aj \A Ac:' Ά
309 X) -X AA χΑ. C< H.N 0 318 Au 5 K.N XO
A ΥΊ Xa ?YJ x xA A
x N
319 !l 328 U
fA”” NX” x'o 1 H:N
0 )
AA
Xs xA AsJ 1 II II
320 Γ Y N J 329 N Sx'AsxJ
1 H2N^ S Ci SO A A X^. Cl HX ^0
Cl
A ΎΊι A ΎΊι
337 Α,Α í AJ 346 x£Jl n ** JJ
♦k, Cl xkx h x4x Cl
cr '^Cl Hjh í XO
a F' n ΎΊ
JL JU AJJ -AJ
338 N Y 347
V-s x Cl xk_ a
0 a HjhT xo
AF' A n ΑΊ
U jy 348 n A A „AJ
339 /Y
\ II Aj· Ί1 A ci
A '0 0
0
A
A Fn crA
xAA AJ ,0
340 J ' hX zL Cl 349 |f aa
F-J F |l NH,
rii
U
A Al
X 9
rA •y
341 JT ζJA y Cl 350 Cl T Γλ Ak
Cl A 0 AA 1 Ί
[ U
A T n
£ £ JA
H
342 u •x Cl 351 a «“Ύ r
¥ SO _ £ 1
0
zl. štruktúra zl. štruktúra
x-χχ -Cl
fY í?
A ΎΊ
A. J Ϊ1 N <aj « xAx 11
343 ksx IJ Ax a 352
HX 0 JA
xO H,C ΊΑ
a
CH,
AJ
A LA Λ
AJt aj Ύ^ Ma
344 O H-N Cl 353 ' A II f F
1 F IÍX ‘Z^*F
Ά
£1 A 9a
345 O X' Ύ H.N 354 0 Αν
1 AJ
CH} AJ
ja N H. A
355 r « 364 C' JY rH>
AA A MA Y
Ua (1
lí^ .Cl < Q /K yd ιΓΎ í?
•A nh2 NH 2
356 Cl A 365 C' x-£ Γ II lí A.
AA rA AAU
AA
^XX. ζ A
í AJF i?
w\a ''MHj Ml
357 F Ah 11 366 A
AA Xj Uy II ^s
H
0
x-'x xF
íiY 9
íA A JA JJ.
U „A NH
T
358 i A J 367 F [An UL· il CH, Ί
n A
iAtA
Q yy-u
T AM
359 \ J r 368 F ŕ£
L. JA
£ J LA
F
zl. štruktúra zl. štruktúra
*F
AT 0
a x Ϊ JL ^nh2
360 y^NKj H OH 369 F r N CH,
M A^z 1 JL τη
Ak
A rrF
γ'^ΝΗ, ιψΑ ^nh2
361 d CH, Π 1 370 F r Pl
KJLx
Us M
A T 0 (X
L· ^NH2
362 0 A [íA 371 f Á iľ 1
A^ L JL ΤΊ
u v>
^<3 zx“
Γ íl 1 J i
ηΤ*^ΝΗ3 TI ^nh2
363 a ľ n ?H’ 372 c ‘ro
H
Λ -Cl
^ci [ΓΎ 0
íl LA X^NH,
HA Cl >
373 a ľ ľ ifA 382 r j[
UsJU ΤΡί
I J xLA
H,C^X Cl y'
Cl
Aj .a X^an
Y> A,
U _
J^NHi 1 Al A XN y
374 383 ci 1. XN F
As A ÍL 1 AfA
U
ίΐΊ i? 0
íl A A LA, A,
γ NH I i
375 Cl ľ II ľ 384 a 'N
AX *Xz
u
.Cl
r 0 rv n
U ll A Λ
AA
376 Cl r ff fH· 385 Cl A. N o-^a-CH·
JL I j-h A
U
zl. štruktúra zl. štruktúra
^Cl
iŕx
fY !?
γΧΛ<Η, ^NHj
377 c: Js, /CH. r 386 ci A N OH 1 T M
AX
_ et xs. -Cl
P] B líi ?
vr.
η^’ηρ^ΝΗϊ oh la •t
378 C ľ í 1 387 kA O, F A/A
o
F F
0 0 Cl la F OX 0 'NH,
cf Jx
379 388 II
UyA W
Azx AA
^Y F
F
/x
^ci AA 0
í T n
^P^Y^NK, Y^Y^NHj rr-CH4
380 Cl r N 389 α A o-J
Ak A
kx>* d
\X A
Ap -a ΓΥ H
L -oL JL Ua Άκ.
J ] NH2
381 C”*[Tn 390 Cl A OH
kA-. LsX· yS
II J Ak
\x^ ^F
^Cl
0 zx -ci
II fiX ?
APA^XX
Akx Y.
f i .A.
391 ľ N 396 α A
UAx II 1 U A
T xA
1
Cl
irV’í A
UIa VS 0
γγ ΝΗ ; L.^A z k
n A N H
392 ľ' 397 I ci A
AkpX N II AA
Q kx
/X./CI í] 0 CH} ιΤΎΊ
k JL -0 Akx A
γ γ NH: f T | ci A
393 Cl lx /0 ľ N í 398 Cl
AAA kA kí
[1 I AAf
XS^ A
Tabuľka 5 Inhibítory všeobecného vzorca (Ih)
zl. štruktúra zl. štruktúra
Cl cu,
ς U.
401 Cl 407 CH, A, N
AAp.
I | L
L/ •SZ· 'p
A Cl, ΛΑ
L X^kA-nh,
402 Cl 408 Cl N
Άχ,
M
U^CI
-F >CI
A Pf P
Q U,
403 F [|‘N CHJ 409 Cl J\ CH3
AAA A\A
M
S 0 íUA p
9 '''νΆη, ΧαΑνη,
404 r A. 410 r Χχ ľ lľ |H’
ux CL
,CH,
< p
u ΙΛ ίΛ í
1 N NM, A-xA
405 CH, {'Ή CH, CU. 411 1 Ϊ J
° Oaa
LA
/x .Cl
'a 0
Q U.A
T N NM, X NH,
406 Cl í U 412 Cl ι/γΝΗ>
CH, u
Účinnosť inhibítorov p38 podľa vynálezu sa skúšala in vitro, in vivo alebo v bunkovej línii. Testy in vitro zahŕňajú testy, ktoré stanovia inhibíciu buď účinnosti kinázy alebo účinnosti ATPázy aktivovaného p38. Alternatívne testy in vitro stanovujú schopnosť inhibítora viazať sa na p38 aje to možné merať buď rádioaktívnym značením inhibítora pred viazaním, izolovaním komplexu inhibítor/p3 8 a stanovením množstva rádioaktívne značenej väzby, alebo uskutočnením pokusu, keď sa nové inhibítory inkubujú s p38 väzbou na známe rádioligandy.
Testy bunkovej kultúry na inhibičnú účinnosť zlúčenín podľa vynálezu môžu stanoviť množstvo TNF, IL-1, IL-6 alebo IL-8 produkovanej v čistej krvi alebo v jej bunko vých frakciách v bunkách ošetrených inhibítorom v porovnaní s bunkami ošetrenými negatívnymi kontrolami. Hladina týchto cytokínov sa môže stanoviť použitím komerčne dostupných látok ELISA.
In vivo testom použiteľným na stanovenie inhibičnej účinnosti inhibítorov p38 podľa vynálezu je potlačenie opuchu zadnej labky u krýs pri artritíde vyvolanej pomocnou látkou Mycobacterium butyricum. Opísané je to v práci J. C. Boehm a kol., J. Med. Chem., 39, str. 3929 až 3937 (1996), čo je tu uvádzané ako odkaz. Inhibítory p38 podľa vynálezu je možné tiež testovať na zvieracích modeloch artritídy, resorpcie kostí, endotoxínového šoku a funkcie imunity, ako je opísané v práci A. M. Badger a kol., J. Pharmacol. Experimental Therapeutics, 279, str. 1453 až 1461 (1996), čo sa tu uvádza ako odkaz.
Inhibítory p38 alebo ich farmaceutické soli je možné formulovať do farmaceutických prostriedkov na podávanie zvieratám alebo ľuďom. Tieto farmaceutické prostriedky, ktoré obsahujú množstvo inhibítora p38 účinné na ošetrenie alebo prevenciu stavu spôsobeného p38 a farmaceutický prijateľný nosič, tvoria tiež súčasť predloženého vynálezu.
Výraz „stav spôsobený p38“, ako sa tu používa, znamená akékoľvek ochorenie alebo iný škodlivý stav, o ktorom je známe, že pri ňom p38 hrá úlohu. Ide o stavy, o ktorých je známe, že sú spôsobené nadprodukciou IL-1, THF, IL-6 alebo IL-8. Týmito stavmi sú, bez obmedzenia, zápalové ochorenia, autoimúnne ochorenia, deštruktívne choroby kostí, proliferačné ochorenia, infekčné ochorenia, neurodegeneratívnc ochorenia, alergie, reperfúzia/ischémia pri mŕtvici, srdcové záchvaty, angiogénne ochorenia, hypoxie orgánov, vaskuláme hyperplázie, srdcové hypertrofie, trombínom vyvolané agregácie doštičiek a stavy spojené s prostaglandínovou endoperoxidsyntázou-2.
Ako zápalové ochorenia, ktoré je možné ošetrovať alebo pred ktorými je možné sa chrániť bez toho, aby sa to obmedzilo len na ne, je možné uviesť akútnu pankreatitídu, chronickú pankreatitídu, astmu, alergiu a syndróm respiračnej úzkosti u dospelých.
Ako autoimúnne ochorenia, ktoré je možné ošetrovať alebo pred ktorými je možné sa chrániť bez toho, aby sa to obmedzilo len na ne, je možné uviesť glomerulonefritídu, reumatickú artritídu, systémový lupus erythematodes, sklerodermiu, chronickú tyreoiditídu, Gravesove ochorenie, autoimúnnu gastritídu, diabetes, autoímúnnu hemolytickú anémiu, autoimúnnu neutropéniu, trombocytopéniu, atopickú dermatitídu, chronickú aktívnu hepatitídu, ťažkú myasténiu, sklerózu multiplex, zápalové črevné ochorenia, vredovú kolitídu, Crohnove ochorenie, psoriázu alebo ochorenie spôsobené reakciou štep-hostiteľ.
Ako deštruktívne poruchy kostí, ktoré je možné ošetrovať alebo pred ktorými je možné sa chrániť bez toho, aby sa to obmedzilo len na ne, je možné uviesť osteoporózu, osteoartritídu a mnohopočetný myelóm spôsobený poruchou kostí.
Ako proliťeračné ochorenia, ktoré je možné ošetrovať alebo pred ktorými je možné sa chrániť bez toho, aby sa to obmedzilo len na ne, je možné uviesť akútnu myelogénnu leukémiu, chronickú myelogénnu leukémiu, metastatický melanóm, Kaposiho sarkóm a mnohopočetný myelóm.
Ako angiogénne ochorenia, ktoré je možné ošetrovať alebo pred ktorými je možné sa chrániť, je možné uviesť pevné nádory, očnú neovaskulitídu, infantilné gemangiómy.
Ako infekčné ochorenia, ktoré je možné ošetrovať alebo pred ktorými je možné sa chrániť bez toho, aby sa to obmedzilo len na ne, je možné uviesť sepsu, septický šok a Shigellosu.
Ako vírusové ochorenia, ktoré je možné ošetrovať alebo pred ktorými je možné sa chrániť bez toho, aby sa to obmedzilo len na ne, je možné uviesť akútnu hepatitídovú infekciu (vrátane hepatitídy A, hepatitídy B a hepatitídy C), HIV infekciu a CMV retinitídu.
Ako neurodegeneratívne ochorenia, ktoré je možné ošetrovať alebo pred ktorými saje možné pomocou zlúčenín podľa vynálezu chrániť bez toho, aby sa to obmedzilo len na ne, je možné uviesť Alzheimerovu chorobu, Parkinsonovu chorobu, cerebrálnu ischémiu alebo neurodegeneratívne ochorenie spôsobené poranením pri úraze.
„Stavy spôsobené p38“ tiež zahŕňajú ischémiu/reperfúziu pri mŕtvici, srdcové záchvaty, myokardiálnu ischémiu, hypoxiu orgánov, vaskulámu hyperpláziu, kardiálnu hypertrofiu a trombínom vyvolanú agregáciu doštičiek.
Okrem toho sú inhibítory p38 podľa vynálezu tiež schopné inhibovať expresiu vyvolanú prezápalovými proteínmi, ako je prostaglandínová endoperoxid syntáza-2 (PGHS-2), tiež označovaná ako cyklooxygenáza-2 (COX-2). Preto ďalšími „stavmi spôsobenými p38“ sú opuchy, analgézie, horúčka a bolesti, ako sú neuromuskuláme bolesti, bolesti hlavy, rakovinové bolesti, bolesti zubov a bolesti pri artritíde.
Ochorenia, ktoré je možné ošetrovať alebo proti ktorým je možné sa chrániť inhibítormi p38 podľa vynálezu, je možné tiež vhodne zaradiť do skupiny cytokínov (IL-1, TNF, IL-6, IL-8), o ktorých sa predpokladá, žc spôsobujú tieto ochorenia.
Ochorenia alebo stavy spôsobené IL-1 zahŕňajú reumatickú artritídu, osteoartritídu, mŕtvicu, syndróm endotoxémie a/alebo toxického šoku, zápalovú reakciu vyvolanú endotoxínom, zápalové črevné ochorenia, tuberkulózu, aterosklerózu, degeneráciu svalov, kachexiu, psoriatickú artritídu, Reiterov syndróm, dnu, traumatickú artritídu, rubeolovú artritídu, akútnu synovitídu, diabetes, pankreatické ochorenie (3-buniek a Alzheimerovu chorobu.
Ochorenia alebo stavy spôsobené TNF zahŕňajú reumatickú artritídu, reumatickú spondylitídu, osteoartritídu, dnovú artritídu a ďalšie artrické stavy, sepsu, septický šok, endotoxický šok, gramnegatívnu sepsu, toxický šokový syndróm, syndróm respiračných chorôb dospelých, cerebrálnu maláriu, chronické pulmonálne zápalové ochorenia, silikózu, pulmonálnu sarkoidózu, choroby resorpcie kostí, reperfuzne poranenia, reakcie štep-hostiteľ, odmietanie aloimplantátu, horúčku a myalgiu spôsobenú infekciou, kachexiu sekundárnu na infekciu, AIDS, ARC alebo zhubné bujnenie, keloidné formácie, tvorbu zjazveného tkaniva, Crohnovu chorobu, ulceratívnu kolitídu alebo pyrexiu. Ochorenia spôsobené TNF tiež zahŕňajú vírusové infekcie, ako je HIV, CMV, chrípka a herpes, a veterinárne vírusové infekcie ako sú lentivírusové infekcie vrátane, ale nie iba, konského infekčného vírusu anémie, vírusu kozej artritídy, vírusu visna alebo vírusu maedi, alebo retrovírusové infekcie, vrátane vírusu mačacieho deficitu imunity, vírusu hovädzieho deficitu imunity alebo vírusu psieho deficitu imunity.
Ochorenia a stavy spôsobené IL-8 zahŕňajú ochorenia charakterizované masívnou neurofilnou infiltráciou, ako je psoriáza, zápalové črevné ochorenie, astma, srdcové a ľadvinové reperfuzne poranenie, syndróm respiračných chorôb dospelých, trombóza a glomerulonefritída.
Okrem toho je možné zlúčeniny podľa vynálezu použiť topicky na ošetrenie alebo na prevenciu stavov spôsobených alebo exacerbovaných IL-1 alebo TNF. Týmito stavmi sú zapálené kĺby, ekzém, psoriáza, zápalové stavy kože, ako je spálenie slnkom, zápalové očné stavy, ako je konjunktivitída, pyrexia, bolesť a ďalšie stavy spojené so zápalom.
Okrem toho je tiež možné zlúčeniny podľa vynálezu a ich farmaceutický prijateľné soli použiť v prostriedkoch na ošetrovanie alebo prevenciu už uvedených ochorení.
Farmaceutický prijateľnými soľami zlúčenín podľa vynálezu sú soli odvodené od farmaceutický prijateľných anorganických a organických kyselín a zásad. Ako príklady vhodných solí s kyselinami je možné uviesť acetát, adipát, alginát, aspartát, benzoát, benzénsulfonát, hydrogensíran, butyrát, citrát, gáfrát, gáforsulfonát, cyklopentánpropionát, diglukonát, dodecylsulfát, etánsulfonát, formiát, fumarát, glukoheptanoát, glycerofosfát, glukolát, hemisulfát, heptanoát, hexanoát, hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, 2-hydroxyetánsulfonát, laktát, maleinát, malonát, metánsulfonát, 2-naftalénsulfonát, nikotinát, nitrát, oxalát, palmoát, pektinát, persulfát, 3-fenylpropionát, fosfát, pikrát, pivalát, propionát, salicylát, sukcinát, sulfát, tartarát, tiokyanát, tozylát a undekanoát. Ďalšie kyseliny, ako je kyselina oxalová, aj keď nie sú samy osebe farmaceutický prijateľné, je možné použiť pri príprave solí použiteľných ako medziprodukty na prípravu zlúčenín podľa vynálezu a ich farmaceutický prijateľných solí s kyselinami. Soli odvodené od príslušných zásad zahŕňajú soli s alkalickými kovmi (napríklad sodné a draselné), s kovmi alkalických zemín (napríklad horečnaté) a amóniové soli a soli N-(alkyl)41 soli, kde alkylové časti majú 1 až 4 atómy uhlíka. Vynález tiež predpokladá kvartemizáciu akýchkoľvek zásaditých dusík obsahujúcich skupín v opísaných zlúčeninách. Touto kvarternizáciou je možné získať vo vode alebo v oleji rozpustné alebo dispergovateľné produkty.
Ako farmaceutický prijateľné nosiče, ktoré sa môžu použiť v týchto farmaceutických prostriedkoch, je možné uviesť bez toho, aby to znamenalo obmedzenie len na ne, vymieňače iónov, oxid hlinitý, stearát hlinitý, lecitín, sérové proteíny, ako je albumín ľudského séra, pufrovacie látky, ako sú fosfáty, glycín, kyselinu sorbovú, sorbát draselný, zmesi parciálnych glyceridov nasýtených rastlinných mastných kyselín, vodu, soli alebo elektrolyty, ako je protamínsulfát, sekundárny hydrogenfosforečnan sodný, hydrogenfosforečnan draselný, chlorid sodný, soli zinku, koloidný oxid kremičitý, trisilikát horečnatý, polyvinylpyrolidón, látky na báze celulózy, polyetylénglykol, sodnú soľ karboxymetylcelulózy, polyakryláty, vosky, blokové polyméry polyetylénu a polyoxypropylénu, polyetylénglykol a tuk z vlny.
Prostriedky podľa vynálezu sa môžu podávať orálne, parenterálne, inhalovaním spreja, topicky, rektálne, nazálne, bukálne, vaginálne alebo cez implantovaný rezervoár. Výrazom „parenterálne“ sa myslia podkožné, intravenózne, intramuskuláme, intraartikuláme, intrasynoviálne, intrastemálne, intratekálne, intrahepatálne, intralezionálne a intrakraniálne injekcie alebo infúzie. Výhodne sa prostriedky podľa vynálezu podávajú orálne, intraperitoneálne alebo intravenózne.
Sterilnými injikovateľnými formami prostriedkov podľa vynálezu môžu byť vodné alebo olejovité suspenzie. Tieto suspenzie je možné pripravovať známymi spôsobmi s použitím vhodných dispergačných alebo zmáčateľných činidiel a suspendačných činidiel. Sterilnými injikovateľnými prípravkami môžu byť tiež sterilné injikovateľné roztoky alebo suspenzie v netoxickom parenterálne prijateľnom riedidle alebo rozpúšťadle, napríklad ako roztok v 1,3-butándiole. Z týchto prijateľných nosičov a rozpúšťadiel, ktoré je možné používať, je možné uviesť vodu, Ringerov roztok a izotonický roztok chloridu sodného. Okrem toho sa bežne používajú sterilné stále oleje ako rozpúšťadlové alebo suspendačné prostredie. Na tento cieľ je možné použiť akýkoľvek nedráždivý stály olej vrátane syntetických monoglyceridov alebo diglyceridov. Pri príprave injikovateľných prípravkov, ako sú prírodné farmaceutický prijateľné oleje, ako je olivový olej alebo ricínový olej, najmä v ich polyoxyetylovaných formách, je možné použiť mastné kyseliny, ako je kyselina olejová a jej glyceridové deriváty. Tieto olejové roztoky alebo suspenzie môžu tiež obsahovať riedidlo alebo dispergačné činidlo s dlhým alkoholovým reťazcom, ako je karboxymetylcelulóza alebo podobné dispergačné činidlá, ktoré sa bežne používajú pri príprave farmaceutický prijateľných dávkových foriem vrátane emulzií alebo suspenzií. Na ciele prípravy týchto prostriedkov je možné použiť tiež ďalšie bežne používané povrchovo aktívne látky, ako sú Tweeny, Spany a iné emulgačné činidlá alebo činidlá zvyšujúce biologickú znášateľnosť bežne používané pri príprave farmaceutický prijateľných pevných, kvapalných alebo iných dávkových foriem.
Farmaceutické prostriedky podľa vynálezu je možné podávať orálne v akejkoľvek orálne prijateľnej forme vrátane, ale nie len takto, kapsúl, tabliet, vodných suspenzií alebo roztokov. V prípade tabliet na orálne použitie sa ako nosiče obvykle používajú laktóza a kukuričný škrob. Typicky sa tiež pridávajú mazadlá, ako je stearát horečnatý. Na orálne podávanie vo forme kapsúl sú použiteľnými riedidlami laktóza a vysušený kukuričný škrob. Ak sú na orálne podávanie požadované vodné suspenzie, účinná látka sa kombinuje s emulgačnými alebo suspendačnými činidlami. V prípade potreby je možné pridávať tiež určité sladiace, chuťové alebo farbiace činidlá.
Alternatívne je možné podávať farmaceutické prostriedky podľa vynálezu vo forme čapíkov na rektálne podávanie. Čapíky je možné pripraviť zmiešaním účinnej látky s vhodnou nedráždivou pomocnou látkou, ktorá je pevná pri teplote miestnosti, ale je kvapalná pri rektálnej teplote a preto sa roztápa v konečníku, čím sa uvoľňuje liečivá látka. Pomocnými látkami môžu byť kakaové maslo, včelí vosk a polyetylénglykoly.
Farmaceutické prostriedky podľa vynálezu je možné tiež podávať topicky, najmä ak sú plochy alebo orgány vyžadujúce toto ošetrenie prístupné topickou aplikáciou vrátane ochorení očí, kože alebo nižšieho intestinálneho traktu. Na každú z týchto plôch alebo na každý orgán sa vhodné topické prípravky ľahko pripravia.
Topická aplikácia na nižší intestinálny trakt sa uskutočňuje pomocou rektáinych čapíkových prípravkov (pozri skôr uvedené) alebo vhodným prípravkom vo forme črevného nálevu. Je tiež možné použiť topické transdermálne náplasti.
Na topické aplikácie sa farmaceutické prostriedky môžu formulovať vo forme vhodnej masti, ktorá obsahuje účinnú zložku suspendovanú alebo rozpustenú v jednom alebo viacerých nosičoch. Nosiče na topické podávanie zlúčenín podľa vynálezu zahŕňajú, ale nie sú obmedzené len na ne, minerálny olej, kvapalnú technickú vazelínu, bielu vazelínu, propylénglykol, polyoxyetylén, polyoxypropylénovú zlúčeninu, emulgačný vosk a vodu. Alternatívne je možné farmaceutické prostriedky formulovať vo vhodnej tekutej liekovej forme alebo vo forme krému, ktoré obsahujú účinnú zložku suspendovanú alebo rozpustenú v jednom alebo viacerých farmaceutický prijateľných nosičoch. Nosiče vhodne zahŕňajú, ale nie sú obmedzené len na ne, minerálny olej, sorbitanmonostearát, polysorbát 60, voskové cctylestery, cetearylalkohol, 2-oktyldodekanol, benzylalkohol a vodu.
Na oftalmické použitie sa farmaceutické prostriedky môžu formulovať ako mikronizované suspenzie v izotonickom sterilnom soľnom roztoku s upraveným pH alebo výhodne ako roztoky v izotonickom soľnom roztoku s upraveným pH, buď s ochrannými látkami, ako je benzylalkóniumchlorid, alebo bez nich. Alternatívne sa na oftalmické použitie môžu farmaceutické prostriedky formulovať vo forme mastí, ako je vazelína.
Farmaceutické prostriedky podľa vynálezu je tiež možné podávať formou nazálneho aerosólu alebo inhaláciou. Tieto prostriedky sa pripravujú podľa známych techník prípravy farmaceutických prípravkov a je možné ich pripraviť ako roztoky v soľnom roztoku, s použitím benzylalkoholu alebo iných vhodných ochranných prísad, absorpčných promótorov na zvyšovanie bioznášateľnosti, fluorovaných uhľovodíkov a/alebo ďalších bežných solubilizačnýcb alebo dispergačných činidiel.
Množstvo inhibítora p38, ktoré sa má spojiť s nosičovými materiálmi, čím vznikajú jednotkové dávkové formy, sa mení v závislosti od ošetrovaného hostiteľa a od zvláštneho spôsobu podávania. Výhodne sa tieto prostriedky formulujú tak, že sa pacientovi, ktorý prijíma tieto prípravky, podáva dávka inhibítora medzi 0,01 a 100 mg/kg telesnej hmotnosti na deň.
Je samozrejmé, že špecifická dávka a ošetrovací režim pre jednotlivých pacientov závisia od viacerých faktorov vrátane účinnosti špecifickej podávanej zlúčeniny, od veku, telesnej hmotnosti, celkového zdravotného stavu, pohlavia, diéty, času podávania, rýchlosti vylučovania, kombinácií liečiv a od názoru ošetrujúceho lekára a od vážnosti konkrétneho ochorenia, ktoré má byť ošetrené. Množstvo inhibítora závisí tiež od špecifickej zlúčeniny v prostriedku.
Ďalej sa vynález týka spôsobov ošetrovania alebo prevencie stavov spôsobených p38, ktorý spočíva v tom, že sa pacientovi podáva jeden z opísaných farmaceutických prostriedkov. Výrazom „pacient“ sa tu myslí živočích, výhodne človek.
Výhodne sa tento spôsob používa na ošetrovanie alebo na prevenciu stavov zahŕňajúcich zápalové ochorenia, autoimúnne ochorenia, deštruktívne poruchy kosti, proliferačné poruchy, infekčné ochorenia, degenerativne ochorenia, alergie, reperfúziu/ischémiu pri mŕtvici, srdcové záchvaty, angiogénne poruchy, hypoxiu orgánov, vaskulámu hyperpláziu, srdcovú hypertrofiu a trombinom vyvolanú agregáciu doštičiek.
Ďalej sa vynález týka inhibítorov podľa vynálezu na použitie na ošetrovanie alebo na prevenciu ochorení a stavov spôsobených IL-1, IL-6, IL-8 alebo TNF. Tieto stavy sú skôr opísané.
V závislosti od jednotlivých stavov sprostredkovaných p38, ktoré majú byť ošetrené alebo ktorým sa má predchádzať, je možné obvykle podávať ďalšie liečivá, ktoré sa obvykle podávajú pri ošetrovaní alebo prevencii týchto stavov, spolu s inhibítormi podľa vynálezu. Napríklad na ošetrovanie proliferačných ochorení je možné kombinovať chemoterapeutické látky alebo ďalšie antiproliferačné látky s inhibítormi p38 podľa vynálezu.
Tieto ďalšie látky je možné podávať oddelene od prostriedkov obsahujúcich inhibítory p38 ako súčasť zmiešaného dávkového režimu. Alternatívne môžu byť tieto látky súčasťou jednotlivých dávkových foriem zmiešaných s inhibitorom p38 do jedného prostriedku.
Na objasnenie vynálezu slúžia nasledujúce príklady uskutočnenia vynálezu. Tieto príklady slúžia len na ilustráciu predloženého vynálezu a nie na akékoľvek jeho obmedzenie.
Príklady uskutočnenia vynálezu
Príklad 1
Príprava inhibítora p3 8 - zlúčeniny 1
Príklady prípravy niekoľkých zlúčenín všeobecného vzorca (la) sú uvedené ďalej v nasledujúcich 4 príkladoch.
A.
zlúčenina
K suspenzii amidu sodného, 90 % (1,17 g, 30 mmol) v bezvodom tetrahydrofuráne (20 ml) sa pri teplote miestnosti pridá roztok benzylkyanidu (2,92 g, 25,0 mmol) v bezvodom tetrahydrofuráne (10 ml). Zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 30 minút. K reakčnej zmesi sa pridá roztok 3,6-dichlórpyridazínu (3,70 g, 25,0 mmol) v bezvodom tetrahydrofuráne (10 ml). Reakčná zmes sa mieša počas 30 minút a potom sa zriedi nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného. Potom sa reakčná zmes extrahuje etylacetátom. Vrstvy sa oddelia a organická vrstva sa premyje vodou, roztokom chloridu sodného, vysuší sa nad síranom horečnatým, prefiltruje sa a zahustí za zníženého tlaku.
Zvyšok sa čistí chromatografíou na silikagéli (elučné činidlo: 30% etylacetát v n-hexáne), čím sa získa 3,71 g (16,20 mmol - 54 %) produktu vo forme bielej pevnej látky.
B.
K suspenzii hydridu sodného, 95 % (0,14 g, 6,0 mmol) v bezvodom tetrahydrofuráne (10 ml) sa pri teplote miestnosti pridá tiofenol (0,66 g, 6,0 ml). Reakčná zmes sa potom mieša počas 10 minút. K reakčnej zmesi sa pridá roztok produktu zo stupňa A (1,31 g, 5,72 mmol) v absolútnom etanole (20 ml). Reakčná zmes sa potom zohrieva a mieša pod spätným chladičom počas 1 hodiny. Ochladená reakčná zmes sa zahustí za zníženého tlaku. Zvyšok sa zriedi roztokom 1 N hydroxidu sodného (10 ml), potom sa extrahuje metylénchloridom. Organická fáza sa premyje vodou, roztokom chloridu sodného, vysuší sa nad síranom horečnatým a zahustí sa za zníženého tlaku.
Zvyšok sa čistí chromatografíou na silikagéli (elučné činidlo: 20 % etylacetát v n-hexáne), čím sa získa 0,66 g (2,19 mmol ~ 40 %) produktu vo forme bielej pevnej látky.
C.
prekurzor zlúčeniny 1
Roztok prekurzora zlúčeniny 1 zo stupňa C (0,22 g, 0,69 mmol) a dimetylacetálu Ν,Ν-dimetylformamidu (0,18 g, 1,5 mmol) v toluéne (5 ml) sa zohrieva na teplotu 100 °C počas 1 hodiny. Po ochladení sa vzniknutá pevná látka odfiltruje a rozpustí sa v teplom etylacetáte. Produkt sa vyzráža pridávaním dietyléteru po kvapkách. Potom sa produkt odfiltruje a premyje sa dietyléterom, čím sa získa 0,038 g zlúčeniny 1 (ktorá je uvedená v tabuľke 1) vo forme žltej pevnej látky. 'H NMR (500 MHz, CDClj) d 8,63 (s), 7,63-7,21 (m), 6,44 (d).
Príklad 2
Príprava inhibítora p3 8 - zlúčeniny 2
A.
Prvý medziprodukt uvedený už skôr sa pripraví podobným spôsobom ako v príklade 1A s použitím 4-fluórfenylacetonitrilu, čím sa získa 1,4 g (5,7 mmol ~ 15 %) produktu.
Medziprodukt uvedený už skôr sa pripraví podobným spôsobom ako v príklade 1B. Získa sa 0,49 g (1,5 mmol, 56 %) produktu.
C.
prekurzor zlúčeniny 2
N
Medziprodukt uvedený už skôr sa pripraví podobným spôsobom ako v príklade 1C. Získa sa 0,10 g (0,29 mmol, 45 %) prekurzora zlúčeniny 2. ’H NMR (500 MHz, CDC13) d 7,65-7,48 (m), 7,47-7,30 (m), 7,29-7,11 (m), 7,06-6,91 (m), 5,85 (s, široký).
prekurzor zlúčeniny 1
Zmes produktu zo stupňa B (0,17 g, 0,69 mmol) a koncentrovanej kyseliny sírovej (5 ml) sa zohrieva na teplotu 100 °C počas 1 hodiny. Roztok sa ochladí a upraví sa na pH 8 nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného. Reakčná zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje vodou, roztokom chloridu sodného, vysuší sa nad síranom horečnatým a zahusti sa za zníženého tlaku, čim sa získa 0,22 g (0,69 mmol ~ 100%) prekurzora zlúčeniny 1 vo forme oranžového oleja. 'H NMR (500 MHz, CD3OD) d 7,7 (d), 7,5 (d), 7,4 (m), 7,3-7,2 (m).
zlúčenina 2 prekurzor zlúčeniny 2
Zlúčenina 2 (ktorá je uvedená v tabuľke 1) sa pripraví z prekurzora zlúčeniny 2 podobným spôsobom ako v príklade ID. Získa sa 0,066 g produktu. 'H NMR (500 MHz, CDC13) d 8,60 (s), 7,62-7,03 (m), 6,44 (d).
Príklad 3
Príprava inhibítora p38 - zlúčeniny 6
A.
Prvý medziprodukt pri príprave zlúčeniny 6 sa pripraví podobným spôsobom, ako je opísané v príklade 1A, s použitím 2,6-dichlórfenylacetonitrilu, čím sa získa 2,49 g (8,38 mmol, 28 %) produktu.
B.
N N
Nasledujúci stupeň prípravy zlúčeniny 6 sa uskutočňuje podobným spôsobom, ako je opísané v príklade 1B. Získa sa 2,82 g (7,6 mmol, 91 %) produktu.
C.
Konečný medziprodukt, prekurzor zlúčeniny 6, sa pripraví podobným spôsobom, ako je opísané v príklade 1C. Získa sa 0,89 g (2,3 mmol, 85 %) produktu. 'H NMR (500 MHz, CD3OD) d 7,5-7,4 (dd), 7,4 (m), 7,3 (d), 7,2 (m), 7,05 (d).
D.
prekurzor zlúčeniny 6
Konečný stupeň prípravy zlúčeniny 6 (ktorá je uvedená v tabuľke 1) sa uskutočňuje podobne, ako je opísané v príklade ID. Získa sa 0,06 g produktu. 'H NMR (500 MHz, CDC13) d 8,69 (s), 7,65-7,59 (d), 7,58-7,36 (m), 7,32-7,22 (m), 6,79 (d), 6,53 (d).
Príklad 4
Príprava inhibítora p38 - zlúčeniny 5
A.
Prvý medziprodukt pri príprave zlúčeniny 5 sa pripraví podobným spôsobom, ako je opísaný v príklade 1 A, s použitím 2,4-dichlórfenylacetonitrilu, čim sa získa 3,67 g (12,36 mmol, 49 %) produktu.
B.
Druhý medziprodukt sa pripraví podobným spôsobom, ako je opísaný v príklade 1B. Získa sa 3,82 g (9,92 mmol, 92 %) produktu.
C.
prekurzor zlúčeniny S
Konečný medziprodukt, prekurzor zlúčeniny 5, sa pripraví podobným spôsobom, ako je opísaný v príklade 1 C. Získa sa 0,10 g (0,24 mmol, 92%) produktu. 'H NMR (500 MHz, CDjOD) d 7,9 (d), 7,7 (d), 7,6-7,5 (dd), 7,4-7,3 (m), 2,4 (s).
D.
prekurzor zlúčeniny 5
Konečný stupeň pri príprave zlúčeniny 5 (ktorá je uvedená v tabuľke 1) sa uskutočňuje podobným spôsobom, ako je opísaný v príklade ID. Získa sa 0,06 g produktu. 'H NMR (500 MHz, CDCI3) d 8,64 (s), 7,51-7,42 (m), 7,32-7,21 (m), 6,85 (d), 6,51 (d), 2,42 (s).
Ďalšie zlúčeniny všeobecného vzorca (la) podľa vynálezu sa môžu pripraviť podobným spôsobom s použitím príslušných východiskových zlúčenín.
Príklad 5
Príprava inhibítora A p38 - zlúčeniny všeobecného vzorca (lb)
Príklad prípravy inhibítora p38 podľa vynálezu všeobecného vzorca (lb) je uvedený ďalej.
A.
K suspenzii amidu sodného, 90 % (1,1 ekv.) v bezvodom tetrahydrofuráne sa pri teplote miestnosti pridá roztok 2,6-dichlórbenzylkyanidu (1,0 ekv.) v bezvodom tetrahydrofuráne. Zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 30 minút. K reakčnej zmesi sa pridá roztok 2,6-dichlórpyridínu (1 ekv.) v bezvodom tetrahydrofuráne. Reakcia sa sleduje pomocou TLC a keď je skončená, reakčná zmes sa zriedi nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného. Potom sa reakčná zmes extrahuje etylacetátom. Vrstvy sa oddelia a organická vrstva sa premyje vodou, roztokom chloridu sodného, vysuší sa nad síranom horečnatým, prefiltruje sa a zahustí sa za zníženého tlaku. Zvyšok sa čistí chromatografiou na silikagéli, čím sa získa čistý produkt.
III
Príklad 6
Príprava inhibítora p38 - zlúčeniny 103
K roztoku 4-fluórbrómbenzénu (1 ekv.) v bezvodom tetrahydrofuráne sa pri teplote -78 °C pridá terc-butyllítium (2 ekv., roztok v hexánoch). Reakčná zmes sa potom mieša počas 30 minút. K reakčnej zmesi sa pridá roztok produktu zo stupňa A (1 ekv.) v bezvodom THF. Reakčná zmes sa potom sleduje a pomaly sa nechá zohriať na teplotu miestnosti. Reakčná zmes sa ochladí vodou a potom sa extrahuje metylénchloridom. Organická fáza sa premyje vodou, roztokom chloridu sodného, vysuší sa nad síranom horečnatým a zahustí sa za zníženého tlaku. Zvyšok sa chromatografuje na silikagéli, čim sa získa produkt.
C.
Zmes produktu zo stupňa B a koncentrovanej kyseliny sírovej sa zohrieva na teplotu 100 °C počas 1 hodiny. Roztok sa ochladí a upraví sa na pH 8 nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného. Reakčná zmes sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa premyje vodou, roztokom chloridu sodného, vysuší sa nad síranom horečnatým a zahustí sa za zníženého tlaku, čím sa získa produkt. Výsledný produkt sa čistí rýchlou chromatografiou na silikagéli.
D.
inhibítor p38
Roztok produktu zo stupňa C (1 ekv.) a dimetylacetálu N,N-dimetylformamidu (2 ekv.) v toluéne sa zohrieva na teplotu 100 °C počas 1 hodiny. Po ochladení sa vzniknutá zmes prefiltruje a rozpustí sa v teplom etylacetáte. Produkt sa vyzráža pridávaním dietyléteru po kvapkách. Produkt sa potom odfiltruje a premyje sa dietyléterom, čim sa získa inhibítor p38 všeobecného vzorca (lb). Výsledný produkt sa čistí chromatografiou na silikagéli.
Ďalšie zlúčeniny všeobecného vzorca (lb) podľa vynálezu sa môžu pripraviť podobným spôsobom s použitím príslušných východiskových zlúčenín.
zlúčenina 12 zlúčenina 103
Tento príklad opisuje typickú prípravu zlúčeniny všeobecného vzorca (Ic).
A.
Inhibítor p38, zlúčenina 12, sa pripraví podobne ako v príklade 4 s výnimkou toho, že sa v stupni B použije 4-fluórtiofenyl.
B.
Zlúčenina 12 sa rozpustí v bezvodom THF (5 ml) pri teplote miestnosti. K tomuto roztoku sa pridá diizohutylaluminiumhydrid (1 M roztok v toluéne, 5 ml, 5 mmol) a reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 1 hodiny. Reakčná zmes sa potom zriedi etylacetátom a ochladí sa pridaním Rochellovej soli. Vrstvy sa oddelia a organická vrstva sa izoluje, premyje sa vodou, roztokom chloridu sodného, vysuší sa nad síranom horečnatým a prefiltruje sa, čím sa získa surová zlúčenina 103. Surový produkt sa chromatografuje na silikagéli elúciou 2 % metanolom v metylénchloride. Takto sa získa čistá zlúčenina 103 (210 mg, výťažok 50 %): 'H NMR (500 MHz, CDC13) 7,51 (m, 1H), 7,38 (d, 2H), 7,20 (t, 2H), 7,08 (t, 2H), 6,70 (široký s, 1H), 6,30 (dd, 2H), 5,20 (s, 2H).
Príklad 7
Príprava inhibítora p38 - zlúčeniny 201
A.
Ph = fenyl
Východiskový nitril uvedený už skôr (5,9 g, 31,8 mmol) sa rozpustí pri teplote miestnosti v DMF (20 ml). Potom sa pridá hydrid sodný (763 mg, 31,8 mmol) a vznikne svetložlto sfarbený roztok. Po 15 minútach sa pridá roztok 2,5-dibrómpyridínu (5,0 g, 21,1 mmol) v DMF (10 ml) a potom paládiumtetrakis(trifenylfosfin) (3 mmol). Roztok sa potom zohrieva do varu pod spätným chladičom počas 3 hodín. Reakčná zmes sa ochladí na teplota miestnosti a zriedi sa etylacetátom. Organická vrstva sa potom izoluje, premyje sa vodou a potom roztokom chloridu sodného, vysuší sa nad síranom horečnatým, prefiltruje sa a odparí sa za zníženého tlaku na surový olej. Flash chromatografiou na kolóne s 10 % etylacetátom v hexáne sa eluuje požadovaný produkt (5,8 g, 84 %) vo forme špinavobielej pevnej látky.
Bromid pripravený v stupni A (194,8 mg, 0,57 mmol) sa rozpustí v xyléne (15 ml). K tomuto roztoku sa pridá tiofenylstanán (200 μΐ, 587 mmol) a paládiumtetrakis(trifenylfosfín) (25 mg). Roztok sa zohrieva do varu pod spätným chladičom cez noc, ochladí sa, prefíltruje sa a odparí za zníženého tlaku. Surový produkt sa chromatografuje na silikagéli a eluuje sa metylénchloridom, čím sa získa čistý produkt (152 mg, 72 %) vo forme žltého oleja.
C.
zlúčenina 201
Nitril pripravený v stupni B (1,2 g, 3,37 mmol) sa rozpustí v ľadovej kyseline octovej (30 ml). K tomuto roztoku sa pridá voda (120 μΐ, 6,67 mmol) a potom chlorid titaničitý (760 μΐ, 6,91 mmol), čím sa zmes stane exotermnou. Roztok sa potom zohrieva do varu pod spätným chladičom počas 2 hodín, ochladí sa a naleje sa do IN HC1. Vodná vrstva sa extrahuje metylénchloridom. Organická vrstva sa znova premyje 1 N NaOH, vysuší sa nad síranom horečnatým a prefíltruje sa cez upchávku silikagélu. Upchávka sa najskôr eluuje metylénchloridom, čím sa odstráni nezreagovaná východisková látka, a potom etylacetátom, čím sa získa zlúčenina 201. Etylacetát sa odparí, čím sa získa čistá zlúčenina 201 (1,0 g, 77 %).
Príklad 8
Príprava inhibítora p38 - zlúčeniny 110
A.
Východiskový nitril (3,76 g, 11,1 mmol) sa najskôr rozpustí v ľadovej kyseline octovej (20 ml). K tomuto roztoku sa pridá chlorid titaničitý (22,2 mmol) a voda (22,2 mmol) a zmes sa zohrieva do varu pod spätným chladičom počas 1 hodiny. Reakčná zmes sa potom ochladí a zriedi sa zmesou vody a etylacetátu. Organická vrstva sa potom izoluje, premyje sa roztokom chloridu sodného a vysuší sa nad síranom horečnatým. Organická vrstva sa potom odfiltruje a odparí sa za zníženého tlaku. Vzniknutý surový produkt sa chromatografuje na silikagéli a eluuje sa 5 % metanolom v metylénchloride, čím sa získa čistý produkt vo forme žltej peny (2,77 g, 70 %).
B.
Amid pripravený v stupni A (1,54 g, 4,3 mmol) sa rozpustí v toluéne (20 ml). Potom sa pridá dimetylacetal N,N-dimetylformamidu (1,53 g, 12,9 mmol), vzniknutý roztok sa zohrieva počas 10 minút, potom sa nechá ochladiť na teplotu miestnosti. Reakčná zmes sa potom odparí za zníženého tlaku a zvyšok sa chromatografuje na silikagéli a eluuje sa 2 až 5 % metanolom v metylénchloride. Získaná látka sa potom rozpustí v horúcom etylacetáte. Roztok sa nechá vychladnúť, čím vykryštalizuje čistý produkt vo forme žltej pevnej látky (600 mg, 40 %). Ďalší produkt (~ 800 mg) sa získa z materského lúhu.
C.
DiBAL
Br
Bromid zo stupňa B (369 mg, 1 mmol) sa rozpustí v THF (10 ml). Potom sa pridá diizobutylalumíniumhydrid (1,0 M roztok, 4 mmol), reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 10 minút a potom sa zmes ochladí metanolom (1 ml). Potom sa pridá nasýtený roztok Rochellovej soli a zmes sa extrahuje etylacetátom. Organická vrstva sa izoluje, vysuší sa nad síranom horečnatým, odparí sa a zvyšok sa chromatografuje na silikagéli a eluuje sa 1 až 3 % metanolom v metylénchloride, čím sa získa jasne oranžová pevná látka (85 mg, výťažok 23 %).
PhSSnfnBu) 3
Pc(PPhj).
zlúčenina 110
Bromid pripravený v stupni C (35,2 mg, 0,1 mmol) sa rozpusti v xyléne (12 ml). K tomuto roztoku sa pridá tiofenol (0,19 mmol) a potom tributylcínmetoxid (0,19 mmol). Vzniknutý roztok sa zohrieva do varu pod spätným chladičom počas 10 minút, potom sa pridá paládiumtetrakis(trifenylfosfín) (0,020 mmol). Reakčná zmes sa zohrieva a sleduje sa až do vymiznutia bromidovej východiskovej látky. Potom sa reakčná zmes ochladí na teplotu miestnosti a preleje sa upchávkou silikagélu. Upchávka sa eluuje najskôr metylénchloridom, čím sa odstráni nadbytok cínového reakčného činidla a potom 5 % metanolom v etylacetáte, čim sa eluuje inhibítor p38. Filtrát sa zahustí a potom sa znova chromatografuje na silikagéli s použitím 5 % metanolu v etylacetáte ako elučného činidla, čím sa získa čistá zlúčenina 110 (20 mg, 52 %).
Príklad 9
Príprava inhibítora p3 8 - zlúčeniny 202
A.
Pd(PPh:)4
Východiskový nitril (2,32 g, 12 mmol) sa pri teplote miestnosti rozpustí v DMF (10 ml). Potom sa pridá hydrid sodný (12 mmol) a vznikne jasnožlto sfarbený roztok. Po 15 minútach sa pridá roztok 2,6-dibrómpyridínu (2,36 g, 10 mmol) v DMF (5 ml) a potom paládiumtetrakis(trifenylfosfín) (1,0 mmol). Roztok sa potom zohrieva do varu pod spätným chladičom počas 3 hodín. Potom sa reakčná zmes ochladí na teplotu miestnosti a zriedi sa etylacetátom. Organická vrstva sa izoluje, premyje sa vodou a roztokom chloridu sodného, vysuší sa nad síranom horečnatým, prefiltruje sa a odparí sa za zníženého tlaku, čím sa získa surový olej. Flash chromatografiou na kolóne sa eluuje 10% etylacetátom v hexáne produkt (1,45 g, 42%) vo forme bielej pevnej látky.
B.
gfenylboritá kyselina
Ph(P3)4 >
Brómová zlúčenina pripravená v stupni A (1,77 g, 5,2 mmol) sa rozpustí v toluéne (20 ml) a vzniknutý roztok sa odplyní. V atmosfére dusíka sa pridá roztok fenylboritej kyseliny (950 mg, 7,8 mmol) v etanole (4 ml) a roztok uhličitanu sodného (1,73 g, 14 mmol) vo vode (4 ml). Reakčná zmes sa zohrieva do varu pod spätným chladičom počas 1 hodiny a potom sa ochladí na teplotu miestnosti. Reakčná zmes sa zriedi etylacetátom a premyje sa vodou a roztokom chloridu sodného. Organická vrstva sa potom vysuší síranom horečnatým, prefiltruje sa a zahustí sa za zníženého tlaku. Zvyšok sa čistí na silikagéli a eluuje sa 30 % etylacetátom v hexáne, čím sa získa produkt vo forme bielej
zlúčenina 202
Nitril zo stupňa B (700 mg, 2,07 mmol) sa rozpustí v koncentrovanej kyseline sírovej (10 ml) a zohrieva sa na teplotu 80 °C počas 1 hodiny. Reakčná zmes sa potom ochladí na teplotu miestnosti a pH sa upraví na 8 s použitím 6 N hydroxidu sodného. Zmes sa potom extrahuje etylacetátom. Organická vrstva sa izoluje, vysuší sa síranom horečnatým a odparí sa za zníženého tlaku, čím sa získa zlúčenina 202 vo forme žltej peny (618 mg, 84 %).
Príklad 10
Príprava zlúčeniny 410 A.
>·
r
Plameňom vysušená 100 ml banka s okrúhlym dnom sa naplní 2,28 g (93,8 mmol) kúskov horčíka a 50 ml bezvo dého tetrahydrofuránu. Pridá sa jeden kryštál jódu, čim vznikne svetlohnedé sfarbenie. K tomuto roztoku sa pridá 1,5 ml z 10,0 ml (79,1 mmol) vzorky 2-bróm-5-fluórtoluénu. Roztok sa zohrieva do varu pod spätným chladičom. Hnedé sfarbenie zoslabne a var sa udržiava až pokiaľ sa vonkajší zdroj tepla odstráni, čo ukazuje tvorbu Grignardovho činidla. Keď var skončí, pridá sa ďalšia 1,0 až 1,5 ml dávka bromidu, čím vznikne prudký var. Postup sa opakuje, až sa pridá všetok bromid. Olivovozelený roztok sa zvonka zohrieva do varu počas 1 hodiny, čím sa zaistí skončenie reakcie. Roztok sa ochladí v kúpeli s ľadom a injekčnou striekačkou sa k nemu pridá 9,3 ml (81,9 mmol) trimetylborátu v 100 ml tetrahydrofuránu pri teplote -78 °C. Po pridaní Grignardovho činidla sa banka odstráni z chladiaceho kúpeľa a roztok sa mieša cez noc pri teplote miestnosti. Sivobiela suspenzia sa naleje do 300 ml vody a prchavé látky sa odparia za zníženého tlaku. Pridá sa HC1 (400 ml 2 N roztoku) a mliečnobiela zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 1 hodiny. Vyzráža sa biela pevná látka. Zmes sa extrahuje dietyléterom a organický extrakt sa vysuší (MgSO4) a odparí sa za zníženého tlaku, čím sa získa 11,44 g (94 %) boritej kyseliny vo forme bielej pevnej látky.
B.
V 100 ml banke s okrúhlym dnom sa rozpustí 7,92 g (33,4 mmol) 2,6-dibrómpyridínu v 50 ml bezvodého toluénu, čím vznikne číry bezfarebný roztok. Pridá sa 4-fluór-2-metylbenzénboritá kyselina (5,09 g, 33,1 mmol) pripravená v stupni A, čím vznikne biela suspenzia. Potom sa pridá uhličitan tália (17,45 g, 37,2 mmol) a potom katalytické množstvo (150 mg) Pd(PPh3)4. Zmes sa zohrieva do varu pod spätným chladičom cez noc, ochladí sa a prefiltruje sa cez stĺpec silikagélu. Silikagél sa premyje CH2C12 a filtrát sa odparí, čím sa získa biela pevná látka. Látka sa rozpustí v minimálnom množstve 50 % CH2C12 v hexáne a chromatografuje sa na krátkej kolóne silikagélu s použitím 30 % CH2C12 v hexáne, čím sa získa 6,55 g (74 %) 2-bróm-6-(4-fluór-2-metylfenyl)pyridínu vo forme bielej pevnej látky.
C.
V 50 ml banke s okrúhlym dnom sa rozpustí 550 mg (2,07 mmol) 2-bróm-6-(4-fluór-2-metylfenyl)pyridínu pripraveného v stupni B v 30 ml bezvodého tetrahydrofuránu, pričom sa vytvorí číry bezfarebný roztok. Pridá sa 2,6-difluóranilín (2,14 ml, 2,14 mmol) a potom 112 mg (2,79 mmol) 60 % NaH suspenzie v minerálnom oleji. V priebehu mierne exotermnej reakcie sa pozoruje vývin plynu. Roztok sa zohrieva do varu pod spätným chladičom cez noc a potom sa ochladí. Reakčná zmes sa naleje do 10 % NH4C1 a extrahuje sa CH2C12. Organický extrakt sa vysuší (MgSO4) a odparí sa za zníženého tlaku, čím sa získa hnedý olej, ktorý je zmesou produktu a východiskovej látky.
Zmes sa chromatografuje na krátkej kolóne silikagélu s použitím 50 % CH2C12 v hexáne, čím sa získa 262 mg (40 %) 2-(2,6-difluórfenyl)-6-(4-fluór-2-metylfenyl)pyridínu vo forme bezfarebného oleja.
(834 mmol) 2-(2,6-difluórfenyl)-6-(4-fluór-2-metylfenyl)pyridínu pripraveného v stupni C v 30 ml bezvodého CHC13 a vznikne číry bezfarebný roztok. Pridá sa chlórsulfonylizokyanát (1, 0 ml, 11,5 mmol) a svetložltý roztok sa mieša pri teplote miestnosti cez noc. Pridá sa voda (~ 30 ml), čím sa reakcia stane mierne exotermnou a vyvíja sa intenzívne plyn. Po miešaní cez noc sa organická vrstva oddelí, vysuší sa (MgSO4) a odparí sa za zníženého tlaku, čím sa získa hnedý olej, ktorý je zmesou produktu a východiskovej látky. Táto zmes sa chromatografuje na krátkej kolóne silikagélu s použitím 10 % EtOAc v CH2C12. Izolovaná východisková látka sa znova podrobí reakčným podmienkam a vyčistí sa takým istým spôsobom, čím sa získa celkovo 205 mg (69 %) močoviny vo forme bielej pevnej látky.
Príklad 11
Príprava zlúčeniny 138
zlúčenina 103 zlúčenina 138
Zlúčenina 103 (106 mg, 0,25 mmol) sa rozpustí v THF (0,5 ml) a k tomuto roztoku sa pridá trietylamín (35 μΐ, 0,25 mmol) a potom nadbytok formaldehydu (37 % vodný roztok, 45 mg). Reakčná zmes sa nechá miešať pri teplote miestnosti cez noc. Reakčná zmes sa potom odparí na rotačnej odparke za zníženého tlaku a zvyšok sa rozpustí v metylénchloride a aplikuje sa na rýchlu kolónu so silikagélom. Kolóna sa eluuje 2 % metanolom v metylénchloride, čím sa získa čistý produkt (78 mg, výťažok 70 %).
Príklad 12
Príprava profarmaka zlúčeniny 103
zlúčenina 13 B fosfátové profarmakum zlúčeniny 103
Zlúčenina 138(1 ekvivalent) sa rozpustí v metylénchloride a k roztoku sa pridá trietylamín (1 ekvivalent) a potom dibenzylfosfonylchlorid (1 ekvivalent). Roztok sa mieša pri teplote miestnosti a sleduje sa pomocou TLC na spotrebu východiskovej látky. Metylénchloridová vrstva sa potom zriedi etylacetátom a premyje sa 1 N HC1, nasýteným roztokom hydrogenuhličitanu sodného a nasýteným roztokom NaCl. Organická vrstva sa potom vysuší, odparí sa na rotačnej odparke a surový produkt sa čistí na silikagéli. Čistý produkt sa potom rozpusti v metanole a dibenzylesterové ochranné skupiny sa odstránia 10 % paládiom na uhlí v atmosfére vodíka. Keď je reakcia skončená, katalyzátor sa odfiltruje cez celit a filtrát sa odparí, čím sa získa fosfátový produkt.
B.
zlúčenina 103
Zlúčenina 103 (210 mg, 1,05 mmol) sa rozpustí v THF (2 ml) a ochladí sa v atmosfére dusíka na -50 °C. K tomuto roztoku sa pridá lítiumhexametyldisilazán (1,1 mmol) a potom chlóracetylchlorid (1,13 mmol). Reakčná zmes sa odstráni z chladiaceho kúpeľa a nechá sa zohriať na teplotu miestnosti, potom sa zriedi etylacetátom a ochladí sa vodou. Organická vrstva sa premyje roztokom chloridu sodného, vysuší sa a odparí na rotačnej odparke do sucha. Surový produkt sa čistí rýchlou chromatograflou na silikagéli s použitím 25 % etylacetátu v hexáne ako elučného činidla, čím sa získa 172 mg (70%) čistého požadovaného produktu, ktorý sa použije taký, aký je, v nasledujúcich reakciách.
C.
Chlóracetylová zlúčenina sa rozpustí v metylénchloride a nechá sa reagovať s nadbytkom dimetylamínu. Reakcia sa monitoruje pomocou TLC a keď je skončená, všetky prchavé látky sa odstránia, čím sa získa požadovaný produkt.
Príklad 13
Príprava zlúčenín 34 a 117
Nitril z príkladu 5 stupňa A (300 mg, 1,0 mmol) sa rozpustí v etanole (10 ml) a k tomuto roztoku sa pridá tiomočovina (80,3 mg, 1,05 mmol). Reakčná zmes sa zohrieva do varu pod spätným chladičom počas 4 hodín a potom TLC ukazuje, že všetka východisková látka je spotrebovaná. Reakčná zmes sa ochladí a všetky prchavé látky sa odstránia za zníženého tlaku a zvyšok sa rozpustí v acetóne (10 ml).
K roztoku sa potom pridá 2,5-difluómitrobenzén (110 μΐ, 1,01 mmol) a potom uhličitan draselný (200 mg, 1,45 mmol) a voda (400 μΐ). Reakčná zmes sa nechá miešať pri teplote miestnosti cez noc. Potom sa reakčná zmes zriedi metylénchloridom (25 ml) a prefiltruje sa cez vatovú upchávku. Všetky prchavé látky sa odstránia za zníženého tlaku a zvy šok sa čistí rýchlou chromatografiou na silikagéli elúciou gradientom od 10 % až 25 % etylacetátu v hexáne, čím sa získa požadovaný produkt (142 mg, 33 %).
B.
NOj NOj
Nitrilový produkt zo stupňa A (142 mg, 0,33 mmol) sa zmieša s koncentrovanou kyselinou sírovou (2 ml), zohrieva sa do varu pod spätným chladičom počas 1 hodiny a potom sa nechá ochladiť na teplotu miestnosti. Potom sa zmes zriedi etylacetátom a opatrne sa neutralizuje nasýteným vodným roztokom uhličitanu draselného. Vrstvy sa rozdelia a organická vrstva sa premyje vodou, roztokom chloridu sodného a vysuší sa nad síranom horečnatým. Zmes sa prefíltruje a odparí sa do sucha. Zvyšok sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho čistenia (127 mg, výťažok 85 %).
C.
zlúčenina 34
Amid zo stupňa B (127 mg, 0,28 mmol) sa rozpustí v THF (3 ml) a k tomuto roztoku sa pridá dimetylacetál dimetylformamidu (llOgl, 0,83 mmol). Reakčná zmes sa zohrieva do varu pod spätným chladičom počas 5 minút a potom sa ochladí na teplotu miestnosti. Všetky prchavé látky sa odstránia za zníženého tlaku a zvyšok sa čistí rýchlou chromatografiou na silikagéli elúciou 2,5 % metanolom v metylénchloride, čím sa získa čistá požadovaná zlúčenina 34 (118 mg, 92 %).
D.
zlúčenina 34 zlúčenina 117
K roztoku zlúčeniny 34 (100,8 mg, 0,22 mmol) v benzéne (3,4 ml) sa pridá roztok chloridu nikelnatého hexahydrátu (103 mg, 0,44 mmol) v zmesi benzénu a metanolu (0,84 ml/ /0,84 ml) a vzniknutý roztok sa ochladí na 0 °C. K tomuto roztoku sa potom pridá borohydrid sodný (49 mg, 1,3 mmol). Reakčná zmes sa mieša, pričom sa nechá zohriať na teplotu miestnosti. Potom sa reakčná zmes odparí za zníženého tlaku a zvyšok sa čistí rýchlou chromatografiou elúciou 2 % metanolom v metylénchloride, čím sa získa čistý požadovaný produkt, zlúčenina 117, (21 mg, výťažok 25 %).
Príklad 14
Príprava zlúčenín 53 a 142 A.
Produkt naznačený v skôr uvedenej reakcii sa syntetizuje s použitím postupu podľa príkladu 1 stupňa B s použitím chlórpyridazínu (359 mg, 1,21 mmol) a 2,4-difluórtiofenolu (176 mg, 1,21 mmol). Produkt sa získa po rýchlej chromatografii na silikagéli (451 mg, 92 %). B.
Reakcia uvedená už skôr sa uskutočňuje postupom opísaným v príklade 1 stupni C s použitím 451 mg východiskovej látky a 5 ml koncentrovanej kyseliny sírovej, čím sa získa uvedený produkt (425 mg, 90 %).
zlúčenina 53
Reakcia uvedená skôr sa uskutočňuje postupom opísaným v príklade 1 stupni D s použitím východiskového amidu (410 mg, 0,96 mmol) a dimetylacetálu dimetylformamidu (3 mmol). Reakčná zmes sa zohrieva na teplotu 50 °C počas 30 minút a potom sa spracuje skôr opísaným spôsobom. Získa sa zlúčenina 53 (313 mg, 75 %).
D.
zlúčenina 53 zlúčenina 142
Zlúčenina 34 (213 mg, 0,49 mmol) sa rozpustí v THF (10 ml), ochladí sa na 0 °C a k tomuto roztoku sa pridá borán v THF (1 M, 0,6 mmol). Reakčná zmes sa mieša počas 30 minút, potom sa ochladí vodou a zriedi sa etylacetátom. Organická vrstva sa premyje vodou a roztokom chloridu sodného, vysuší sa a odparí na rotačnej odparke. Zvyšok sa čistí na silikagéli elúciou gradientom 1 % až 5 % metanolom v metylénchloride, čím sa získa zlúčenina 142 (125 mg, 57 %).
Príklad 15
Klonovanie p38 kinázy v bunkách hmyzu
Identifikovali sa dva zostrihové varianty ľudskej p38 kinázy, CSBP1 a CSBP2. Na amplifikáciu kódujúcej oblasti CSBP2 cDNA s použitím HeLa bunkovej zbierky (Strategene) ako templátu sa použili špecifické oligonukleotidové priméry. Produkt polymerázovej reťazovej reakcie sa klonoval do vektora pET-15b (Novagen). Bakulovírusový prenosový vektor, pVL-(His)6-p38 sa skonštruoval subklonovaním Xbal-BamHI fragmentu pETl5b-(His)6-p38 do komplementárnych miest v plazmide pVL1392 (Pharmingen).
Plazmid pVL-(His)6-p38 riadil syntézu rekombinantného proteinu pozostávajúceho z 23-aminokyselinového peptidu (MGSSHHHHHHSSGLVPRGSHMLE. kde LVPRGS znamená štiepiace miesto trombinu) spojeného v čítaciom rámci s N-koncom p38, ako sa potvrdilo sekvenovanímm DNA a N-koncovým sekvenovam'm exprimovaného proteínu. Jednovrstvová kultúra hmyzích buniek Spodoptera frugiperda (Sf9) (ATCC) sa udržiavala v TNM-FH prostredí (Gibco BRL) doplnenom 10 % fetálnym hovädzím sérom v T-banke pri teplote 27 °C. Bunky Sf9 v logaritmickej fáze sa kotransfekovali lineárnou vírusovou DNA nukleárneho mnohostenného vírusu Autographa californica (Pharmingen) a prenosovým vektorom pVL-(His)6-p38 s použitím Lipofectínu (Invitrogen). Jednotlivé rekombinantné bakulovírusové klony sa čistili plakovým testom s použitím 1 % nízkotopiacej agarózy.
Príklad 16
Expresia a čistenie rekombinantnej p38 kinázy
Bunky Trichoplusia ni (Tn-368) High-Five™ (Invitrogen) sa pestujú v suspenzii v Excel-405 médiu bez proteínov (JRH Bioscience) v trepacej banke pri teplote 27 °C. Bunky pri hustote 1,5 x 106 buniek/ml sa infikujú rekombinantným bakulovírusom opísaným skôr pri multiplicite infekcie 5. Expresná hladina rekombinantu p38 sa monitoruje imunoznačením s použitím králičej antilátky anti-p38 (Šanta Cruz Biotechnology). Hmota buniek sa zoberie za 72 hodín po infekcii, keď expresná hladina p38 dosiahne svoje maximum.
Zmrazená pasta buniek z buniek exprimujúcich (His)6označený p38 sa rozmrazí v 5 objemoch pufra A (50 mM NaH2PO4 pH 8,0, 200 mM NaCl, 2 mM /3-merkaptoetanol, 10 % glycerol a 0,2 mM PMSF). Po mechanickom rozbití buniek v mikrofluidizén sa lyzát centrifuguje pri 30 000 x g počas 30 minút. Supematant sa inkubuje po dávkach počas 3 až 5 hodín pri teplote 4 °C Talón™ (Clontech) živicou s afinitou na kov v pomere 1 ml živice na 2 až 4 mg očakávaného p38. Živica sedimentuje centrifugáciou pri 500 x g počas 5 minút a jemne sa premyje po dávkach pufrom A. Živica sa suspenduje a naleje sa na kolónu (asi 2,6 x 5,0 cm) a premyje sa pufrom A + 5 mM imidazolom.
(His)6-p38 sa eluuje pufrom A + 100 mM imidazolom a následne sa dialyzuje cez noc pri teplote 4 °C proti 2 litrom pufra B (50 mM HEPES, pH 7,5, 25 mM 0-glycerofosfát, 5 % glycerol, 2 mM DTT). His6 značenie sa odstráni pridaním 1,5 jednotiek trombínu (Calbiochem) na mg p38 a inkubáciou pri teplote 20 °C počas 2 až 3 hodín. Trombín sa ochladí pridaním 0,2 mM PMSF a potom sa celá vzorka naplní do 2 ml benzamidínagarózovej (Američan Intemational Chcmical) kolóny.
Priebežná prietoková frakcia sa naplní do 2,6 x 5,0 cm kolóny Q-Sepharose (Pharmacia) vopred ekvilibrovanej v pufri B + 0,2 MM PMSF. p38 sa eluuje lineárnym gradientom 20 kolónovým objemom na 0,6 M NaCl v pufri B. Eluovaný proteínový pík sa spoji a dialyzuje sa cez noc pri teplote 4 °C proti pufru C (50 mM HEPES pH 7,5, 5 % glycerol, 50 mM NaCl, 2 mM DTT, 0,2 mM PMSF).
Dialyzovaný proteín sa zahustí v Centriprep (Amicon) na 3 až 4 ml a aplikuje sa na 2,6 x 100 cm kolónu Sephacryl S-100HR (Pharmacia). Proteín sa eluuje rýchlosťou 35 ml/hodina. Hlavný pík sa spojí, upraví sa na 20 mM DTT, zahustí sa na 10 až 80 mg/ml a zmrazí sa na alikvotné podiely pri teplote -70 °C alebo sa ihneď použije.
Príklad 17
Aktiváciap38
P38 sa aktivuje zlučovaním 0,5 mg/ml p38 s 0,005 mg/ml DD-dvojitý mutant MKK6 v pufri B + 10 mM MgCl2, 2 mM ATP, 0,2 mM Na2VO4 počas 30 minút pri teplote 20 °C. Aktivačná zmes sa potom naplní do 1,0 x 10 cm MonoQ kolóny (Pharmacia) a eluuje sa lineárnym gradientom 20 kolónovým objemom na 1,0 M NaCl v pufri B. Aktivovaný p38 sa eluuje po ADP a ATP. Aktivovaný pík p38 sa spojí a dialyzuje sa proti pufru B + 0,2 mM Na2VO4, čím sa odstráni NaCl. Dialyzovaný proteín sa upraví na koncentráciu 1,1 M fosforečnanu draselného pridaním 4,0 M zásobného roztoku a naplní sa do 1,0 x 10 cm HIC kolóny (Rainin Hydropore) dopredu ekvilibrovanej v pufri D (10% glycerol, 20 mM β-glycerofosfát, 2,0 mM DTT) + 1,1 M K2HPO4. Proteín sa eluuje lineárnym gradientom 20 kolónovým objemom na pufer D + 50 mM K2HPO4. Dvojito fosforylovaný p38 sa eluuje ako hlavný pík a spoji sa na dialýzu proti pufru B + 0,2 mM Na2VO4. Aktivovaný p3 8 sa skladuje pri teplote -70 °C.
Príklad 18
Testy inhibície p38
A. Inhibícia fosforylácie EGF peptidového receptora
Test sa uskutočňuje v prítomnosti 10 mM MgCl2, 25 mM (3-glyccrofosfátu, 10% glycerolu a 100 mM HEPES pufra pri pH 7,6. Na typické stanovenie IC50 sa pripraví zásobný roztok obsahujúci všetky už skôr uvedené zložky a aktivovaný p38 (5 nM). Alikvotné podiely zásobného roztoku sa naplnia do fľaštičiek. Do každej fľaštičky sa vloží stanovený objem DMSO alebo inhibítora v DMSO (výsledná koncentrácia DMSO pri reakcii je 5 %), zmieša sa a inkubuje sa pri teplote miestnosti počas 15 minút. Do každej fľaštičky sa pridá EGF peptidový receptor, KRELVEPLTPSGEAPNQALLR, fosforylový akceptor reakcie p38 katalyzovanej kinázy (1), na výslednú koncentráciu 200 μΜ. Reakcia kinázy sa iniciuje ATP (100 μΜ) a obsah fľaštičiek sa inkubujú pri teplote 30 °C. Po 30 minútach sa reakcia zastaví takým istým objemom 10 % trifluóroctovej kyseliny (TFA).
Fosforylovaný peptid sa stanoví HPLC analýzou. Oddelenie fosforylovaného peptidu od nefosforylovaného peptidu sa uskutočňuje na kolóne s obrátenými fázami (Deltapak, 5 μπι, C18 100 D, diel č. 011795) s binárnym gradientom vody a acetonitrilu, každý s obsahom 0,1 % TFA. IC50 (koncentrácia inhibítora poskytujúca 50 % inhibíciu) sa stanoví vynesením % zvyšnej účinnosti proti koncentrácii inhibítora.
B. Inhibícia účinnosti ATPázy
Tento test sa uskutočňuje v prítomností 10 mM MgCl2, 25 mM β-glycerofosfátu, 10% glycerolu a 100 mM HEPES pufra pri pH 7,6. Na typické stanovenia Ki, sa Km pre ATP účinnosti ATPázy aktivovanej reakciou p38 stanoví bez prítomnosti inhibítora a v prítomnosti dvoch koncentrácií inhibítora. Pripraví sa zásobný roztok obsahujúci všetky už skôr uvedené zložky a aktivovaný p38 (60 nM). Alikvotné podiely zásobného roztoku sa naplnia do fľaštičiek. Do každej fľaštičky sa vloží stanovený objem DMSO alebo inhibítora v DMSO (výsledná koncentrácia DMSO pri reakcii je 2,5 %), zmieša sa a inkubuje sa pri teplote miestnosti počas 15 minút. Reakcia sa iniciuje pridaním rôznych koncentrácií ATP a potom sa inkubuje pri teplote 30 °C. Po 30 minútach sa reakcia zastaví 50 μΐ EDTA (0,1 M, výsledná koncentrácia), pH 8,0. Produkt pôsobenia p38 ATPázy, ADP, sa stanoví HPLC analýzou.
Oddelenie ADP od ATP sa uskutočňuje na kolóne s obrátenými fázami (Supelcosil, LC-18, 3 μτη, diel č. 5-8985) s použitím binárneho rozpúšťadlového gradientu nasledujúceho zloženia: rozpúšťadlo A - 0,1 M fosfátový pufer obsahujúci 8 mM tetrabutylamóniumhydrogensíranu (Sigma Chemical Co., katalóg č. T-7158), rozpúšťadlo B - rozpúšťadlo A s 30 % metanolu.
Ki sa stanoví z rýchlostných údajov ako funkcia inhibítora a koncentrácii ATP. Výsledky pre niekoľko inhibítorov podľa vynálezu sú zhrnuté v tabuľke 6.
Tabuľka 6
Zlúčenina Κί (μΜ)
1 >20
2 15
3 5
5 2,9
6 0,4
Ďalšie inhibítory p38 podľa vynálezu tiež inhibujú účinnosť ATPázy p38.
C. Inhibícia IL-1, TNF, IL-6 a IL-8
Produkcia v LP S-stimulovaných PBMC
Inhibítory sa sériovo zriedia v DMSO z 20 mM zásobného roztoku. Pripraví sa aspoň 6 sériových zriedení. Potom sa pripravia 4x inhibítorové zásobné roztoky pridaním 4 μΐ inhibitorového zriedenia na 1 ml RPMI1640 média/10 % fetálne hovädzie sérum. 4x inhibítorové zásobné roztoky obsahujú inhibítor v koncentráciách 80 μΜ, 32 μΜ, 12,8 μΜ, 5,12 μΜ, 2,048 μΜ, 0,819 μΜ, 0,328 μΜ, 0,131 μΜ, 0,052 μΜ, 0,021 μΜ atď. 4χ inhibítorové zásobné roztoky sa pred použitím predhrejú na 37 °C.
Bunky zo zrazených leukocytov z ľudskej čerstvej krvi sa oddelia od ostatných buniek vo Vacutaineri CPT od firmy Becton & Dickinson (obsahujúce 4 ml krvi a dostatok DPBS bez Mg2+/Ca2+ na naplnenie rúrky) centrifugáciou pri 1500 x g počas 15 minút. Periférne krvné mononukleárne bunky (PBMC) umiestnené na vrchole gradientu vo Vacutaineri sa odstránia a premyjú sa dvakrát RPMI1640 médiom/10 % fetálnym hovädzím sérom. PBMC sa zhromaždí centrifugáciou pri 500 x g počas 10 minút. Celkový počet buniek sa stanoví s použitím Neubauerovej komory buniek a bunky sa upravia na koncentráciu 4,8 x 106 buniek/ml v médiu kultúry buniek (RPMI1640 doplnenom 10 % fetálnym hovädzím sérom).
Alternatívne sa pri teste použije priamo celá krv obsahujúca antikoagulačné činidlo.
Do každej jamky 96-jamkovej dosky na bunkovú kultúru sa umiestni 100 μΐ bunkovej suspenzie alebo kompletná krv. Potom sa k bunkám pridá 50 μΐ 4x inhibitorového zásobného roztoku. Nakoniec sa pridá 50 μΐ lipopolysacharidového (LPS) pracovného zásobného roztoku (16 ng/ml v médiu bunkovej kultúry), čím sa získa výsledná koncentrácia 4 ng/ml LPS v teste. Celkový testovací objem nosičovej kontroly sa tak upraví na 200 μΐ pridaním 50 μΐ média bunkovej kultúry. PBMC bunky alebo celá krv sa potom inkubuje cez noc (počas 12 až 15 hodín) pri teplote 37 °C s 5 % CO2 vo vlhkej atmosfére.
Nasledujúci deň sa bunky miešajú v trepačke počas 3 až 5 minút pred centrifugáciou pri 500 x g počas 5 minút. Zoberú sa supematanty bunkovej kultúry a analyzujú sa pomocou ELISA pre hladiny IL-lb (R & D Systems, Quantikine kits, .DBL50), THN-d (BioSource, .KHC3012), IL-6 (Endogen, .EH2-IL6) a IL-8 (Endogen, .EH2-IL8) podľa inštrukcií výrobcu. ELISA údaje sa použijú na vytvorenie kriviek dávka-reakcia, z ktorých sa odvodia hodnoty IC50.
Výsledky testu pre kinázu („kináza“, pododsek A uvedený skôr), IL-1 a TNF v LPS-stimulovaných PBMC („bunky“) a IL-1, TNF a IL-6 v celej krvi („WB“) pre rôzne p38 inhibítory podľa vynálezu sú uvedené v tabuľke 7:
Tabuľka 7
Zl. kináza bunka IL-1 bunka TNF WBIL-1 WB TNF WB IL-6
č. ICao ICso ICW IC!0 IC«, ICM
2 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
3 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
5 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
6 ++ ++ + N. D. N. D. N. D.
7 + + + N. D. N. D. N. D.
8 + 4- + N. D. N. D. N. D.
9 + + + N. D. N. D. N. D.
10 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
11 + + + N. D. N. D. N. D.
12 +4- ++ ++ + + +
13 4- + + N. D. N. D. N. D,
14 4- ++ + N. D. N. D. N. D,
15 + ++ ++ N. D. N. D. N. D,
16 4-4- + ++ N. D. N. D. N. D.
17 4- + + N. D. N. D. N. D.
18 4- + + N. D. N. D. N. D.
19 4- + + N. D. N. D. N. D.
20 4-4- + + N. D. N. D. N. D.
21 4-4- ++ + N. D. N. D. N. D.
22 4- + + N. D. N. D. N. D.
23 4-4- ++ + + + +
24 4-4- ++ ++ + + N. D.
25 4-4- ++ + N. D. N. D. N. D.
26 4- +++ ++ + + +
27 4-4- + + + + +
28 4-4- ++ ++ N. D. N. D. N. D.
29 4-4- ++ ++ N. D. N. D. N. D.
30 -F + + + N. D. N. D.
31 F + + N. D. N. D. N. D.
32 4+ + ++ + + +
33 4 + ++ ++ + + +
34 4- + + N. D. N. D. N. D.
35 4-4- ++ + + + +
36 4- + + + + +
37 4-4- ++ + + + +
38 +4-4- +++ ++ ++ ++ ++
39 ++ + + N. D. N. D. N. D.
40 ++ ++ + N. D. N. D. N. D.
41 +++ +++ +++ N. D. N. D. N. D.
42 + N. D. N. D, N. D. N. D. N. D.
43 ++ + + N. D. N. D. N. D.
44 ++ + + N. D. N. D. N. D.
45 ++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
46 ++ + + N. D. N. D. N. D.
47 ++ ++ + N. D. N. D. N. D.
48 ++ ++ + N. D, N, D, N. D.
49 ++ ++ + + + +
50 + N. D. N. D. N, D. N. D. N. D.
51 ++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
52 ++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
53 +++ +++ +++ +++ +++ +++
101 ++ +++ +++ + + ++
102 +++ +++ +++ + ++ ++
103 +++ +++ +++ + ++ ++
104 ++ ++ ++ + + +
105 ++ + + N. D. N. D. N. D.
106 4-4-1- 4-4-+ +++ -F ++ ++
107 +4- + + N. D. N. D. N. D.
109 +++ +++ +++ + + ++
108 +4-4- ++ +++ -H- +++ +++
110 ++ + + N. D. N. D. N. D.
111 +4- + + N. D. N. D. N. D.
112 ++ ++ + + +
113 +++ +++ ++ + + +
114 +++ +++ +++ ++ ++ +++
115 +++ +++ +++ + + +
116 +++ +++ ++ + + +
117 +++ +++ +++ ++ ++ +++
118 ++ ++ ++ + + +
119 ++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
120 N. D. ++ + + + +
121 +++ +++ ++ -r + +
122 ++ ++ + + + +
123 ++ ++ ++ + + +
124 + + + N. D. N. D. N. D.
125 +++ +++ +++ + + +
126 + ++ + N. D. N. D. N. D.
127 +++ +++ +++ ++ ++ +++
Zl. kináza bunkaIL-1 bunka TNF WBIL-1 WBTNF WB IL-6
č. IC50 ICJO IC5« IC50 IC!0 IC50
128 + + + N. D. N. D. N. D.
129 +++ +++ +++ ++ + 44-
130 +++ ++ + N. D. N. D. N. D.
131 +++ +++ +++ N. D. N. D. N. D.
132 +++ +++ ++ N. D. N. D. N. D.
133 +++ +++ +++ N. D. N. D. N. D.
134 +++ ++ + N. D. N. D. N. D.
135 +++ ++ + + + +
136 +++ +++ +++ + + ++
137 +++ +++ ++ + + ++
138 ++ +++ ++ + + -++
139 +++ +++ + + + +
140 +++ +++ +++ ++ + ++
141 + ++ +++ +++ + + +
142 +++ +++ +++ +++ +++ -++
143 +++ +++ 1 + + + +
144 +++ +++ ++ + + ++
145 +++ +++ +++ +4 4- +++ +++
201 -H- + + + +++ +
203 + N, D. N. D. N. D. N. D. N. D.
204 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
205 + N. D, N. D. N. D. N. D. N. D.
206 ++ + + N. D. N. D. N. D.
207 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
208 N. D. ++ N. D. N. D. N. D. N. D.
209 N. D. + N. D. N. D. N. D. N. D.
202 +++ ++ ++ + + +
301
302 +++ +++ ++ + + +
303 + + + + + +
304 + + + + + +
305 +++ +4-4- + + + +
306 ++ ++ + + + +
307 4-++ -<-+ + + + +
308 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
309 4-4- ++ ++ + + +
310 4-4- + + N. D. N. D. N. D.
311 4-4- + + N. D. N, D. N. D.
312 +-H- ++ + + + +
313 ++ + + N. D, N. D. N. D.
314 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
315 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
316 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
317 + + - N. D. N. D. N. D.
318 4-4- N. D. N. D. N. D. N. D. N, D.
319 4- N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
320 +4-4- ++ ++ N. D. N. D. N. D.
321 + N. D. N. D. N. D. N. D. N, D.
322 ++ + + N. D. N. D. N. D.
323 ++ ++ ++ N. D. N. D. N. D.
324 ++ ++ + N. D. N, D. N. D.
325 +++ +++ ++ + + +
326 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
327 ++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
328 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
329 ++ ++ + + + +
330 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
331 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
332 ++ ++ + + + +
333 ++ + + N. D. N. D. N. D.
334 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
335 ++ + + + + +
336 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
337 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
338 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
339 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
340 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
341 ++ ++ ++ N. D. N. D. N. D.
342 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
343 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
344 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
345 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
346 ++ + + + + +
347 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
348 + N. D. N. D. N. D. N, D, N. D.
349 + ++ + + + 4
350 + ++ + N. D. N, D. N. D.
351 + + + N. D. N. D. N. D.
352 + 4- N. D. N. D. N. D. N. D.
ZL kináza bunka IL-1 bunka TNF WB IL-1 WBTNF WB IL-6
č. 1C5„ IC50 IC50 IC5„ IC50 IC!0
353 -H- + + N. D. N. D. N. D.
354 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
355 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
356 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
357 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
358 -H- + + N. D. N. D. N. D.
359 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
360 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
361 ++ ++ + N. D. N. D. N. D.
362 -++ ++ 4-+ + + +
363 -^++ +++ 4-+ + + +
364 +++ +++ ++ + + +
365 N. D. N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
366 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
367 N. D. N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
368 N. D. N. D. N. D. N. D. N. D. N, D.
369 N. D. N. D. N. D. N. D. N. D. N, D.
370 N. D. N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
371 N. D, N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
372 N. D. N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
373 N. D. N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
374 ++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
375 +++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
376 +44 N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
377 +++ N, D. N. D. N. D. N. D. N. D.
378 +++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
379 +++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
380 ++ N. D. N. D. N. D. N. D. N, D.
381 ++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
382 +++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
383 +++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
384 ++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
385 ++ N. D. N. D. N.D: N. D. N. D.
386 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
387 + N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
388 +++ N. D. N. D, N. D. N. D. N. D.
389 ++ N. D. N. D, N. D. N. D. N. D.
390 + N. D. N. D, N. D. N. D. N. D.
391 ++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
392 ++ N. D. N. D. N. D. N, D. N. D.
393 ++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
394 +++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
395 +++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
396 +++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
397 + N. D. N- D. N. D. N. D. N. D.
398 N. D. N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
399 +++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
1301 +++ N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
401 +++ ++ ++ + + +
402 +++ +++ +++ + + +
403 +++ +++ +++ + + ++
404 +++ +++ +++ + + +
405 +4-+ +++ ++ N. D. N. D. N. D.
406 ++ ++ + N. D. N. D. N. D.
407 ++ -H- + N. D. N. D. N. D.
408 +++ +++ +- N. D. N. D. N. D.
409 +++ +++ +++ + + ++
410 +++ -++ +++ ++ ++ ++
411 +++ +++ +++ + + 4
412 N. D. N. D. N. D. N. D. N. D. N. D.
IC50 hodnoty pre kinázu, „+++“ znamená <0,1 μΜ, „++“ znamená medzi 0,1 a 1,0 μΜ a „+“ znamená >1,0 μΜ. Pre bunkový IL-1 a TNF hodnoty, „+++“ znamená <0,1 μΜ, „++“ znamená medzi 0,1 a 0,5 μΜ a „+“ znamená >0,5 μΜ. Pre celú krv („WB“) hodnoty, „+++“ znamená <0,25 μΜ, „++“ znamená medzi 0,25 a 0,5 μΜ a „+“ znamená >0,5 μΜ. Vo všetkých testoch uvedených v tabuľke „N. D.“ znamená, že hodnoty sa nestanovili.
Ďalšie p38 inhibítory podľa vynálezu inhibujú tiež fosforyláciu EGF peptidového receptora a produkciu IL-1, TNF a IL-6, ako aj IL-8 v LPS-stimulovaných PBMC alebo v celej krvi.
D. Inhibícia IL-6 a IL-8
Produkcia v IL-1-stimulovaných PBMC
Tento test sa uskutočňuje na PBMC presne takých, ako bolo uvedené už skôr, okrem toho, že sa k testu pridá 50 pl IL-lb pracovného zásobného roztoku (2 ng/ml média bunkovej kultúry) namiesto LPS pracovného zásobného roztoku.
Supematanty bunkovej kultúry sa zoberú, ako je opísané skôr a analyzujú sa pomocou ELISA na hladiny IL-6 (Endogen, .EH2-IL6), a IL-8 (Endogen, .EH2-IL8) podľa inštrukcií výrobcu. ELISA údaje sa použijú na vytvorenie kriviek dávka-reakcia, z ktorých sa odvodia hodnoty IC50.
Výsledky p38 inhibítora, zlúčeniny 6, sú uvedené v tabuľke 8:
Tabuľka 8
testovaný cytokín Κ50(μΜ)
IL-6 0,6
IL-8 0,85
E. Inhibícia LPS vyvolanej prostaglandinovej endoperoxid syntázy-2 (PGHS-2 alebo COX-2) Indukcia PBMS
Ľudské periférne mononukleáme bunky sa izolujú zo zrazených leukocytov čerstvej ľudskej krvi centrifugáciou vo Vacutainer CPT (Becton & Dickinson). 15 x 106 buniek sa naočkuje do 6-jamkovej dosky na tkanivovú kultúru obsahujúcu RPMI 1640 doplnený 10 % fetálnym hovädzím sérom, 50 U/ml penicilínu, 50 pg/ml streptomycínu a 2 mM L-glutamínom. Pridá sa zlúčenina 6 na 0,2, 2,0 a 20 μΜ výslednej koncentrácie v DMSO. Potom sa pridá LPS na výslednú koncentráciu 4 ng/ml, čím sa vyvolá expresia enzýmu. Výsledný objem kultúry je 10 ml na jamku.
Po inkubácii pri teplote 37 °C a 5 % CO2 cez noc sa zoberú bunky zoškriabaním a následnou centrifugáciou, potom sa odstráni supematant a bunky sa premyjú dvakrát ľadovo studeným DPBS (Dulbecco fosfátom pufrovaný soľný roztok, BioWhittaker). Bunky sa lyžujú na ľade počas 10 minút v 50 μΐ studeného lýzového pufŕa (20 mM Tris-HCl, pH 7,2, 150 mM NaCl, 1 % Triton-X-100, 1 % deoxycholová kyselina, 0,1 % SDS, 1 mM EDTA, 2 % aprotinín (Sigma), 10gg/ml pepstatín, 10pg/ml leupeptín, 2 mM PMSF, 1 mM benzamidín, 1 mM DTT) obsahujúcom 1 μΐ Benzonázy (DNAáza od firmy Merck). Koncentrácia proteínu v každej vzorke sa stanoví s použitím BCA testu (Pierce) a albumínu hovädzieho séra ako štandardu. Potom sa koncentrácia proteínu v každej vzorke upraví na 1 mg/ml studeným lýzovým pufrom. K 100 μΐ lyzátu sa pridá rovnaký objem 2xSDS PAGE pufra a vzorka sa varí počas 5 minút. Proteíny (30 mg/prúžok) sa frakcionujú podľa veľkosti na 4 až 20 % SDS PAGE gradientových géloch (Novex) a potom sa elektroforeticky prenášajú na nitrocelulózovú membránu počas 2 hodín pri 100 mA v Towbinovom prenosovom pufri (25 mM Tris, 192 mM glycín) obsahujúcom 20 % metanolu. Membrána sa vopred spracováva počas 1 hodiny pri teplote miestnosti blokovacím pufrom (5 % netučné sušené mlieko v DPBS doplnené 0,1 % Tweenom-20) a premyje sa trikrát v DPBS/0,1 % Tween-20. Membrána sa inkubuje cez noc pri teplote 4 °C s 1:250 riedenou monoklonálnou protilátkou anti-COX-2 (Transduction Laboratories) v blokovacom pufri. Po 3 premytiach v DPBS/0,1 % Tween-20 sa membrána inkubuje 1 : 1000 riedenou chrenovou peroxidázou spojenou s ovčím antisérom na myši Ig (Amersham) v blokovacom pufri počas 1 hodiny pri teplote miestnosti. Potom sa membrána premyje trikrát v DPBS/0,1 % Tween-20 a na stanovenie hladiny expresie COX-2 sa použije ECL detekčný systém (SuperSignal™ CL-HRP Substráte Systém, Pierce).
Výsledky už skôr uvedeného testu naznačujú, že zlúčenina 6 inhibuje LPS vyvolanú PGHS-2 expresiou v PBMC.
Aj keď je tu uvedený rad uskutočnení podľa vynálezu, je samozrejmé, že základný zmysel je možné meniť, čím sa získajú ďalšie uskutočnenia použiteľné pri spôsobe podľa vynálezu.

Claims (37)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Zlúčenina všeobecného vzorca (la) alebo (Ib) alebo jej farmaceutický prijateľná soľ, kde každý zo substituentov Q1 a Q2 je nezávisle vybraný zo skupiny zahŕňajúcej päťčlenné až šesťčlenné aromatické karbocyklické alebo heterocyklické kruhové systémy alebo osemčlenné až desaťčlenné bicyklické kruhové systémy obsahujúce aromatické karbocyklické kruhy, aromatické heterocyklické kruhy alebo kombináciu aromatického karbocyklického kruhu a aromatického heterocyklického kruhu,
    Q1 je substituované 1 až 4 substituentmi nezávisle vybranými zo skupiny zahŕňajúcej atóm halogénu, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka, prípadne substituovanú skupinami NR'2 OR', CO2R' alebo CONR'2, skupinu O-alkyl, kde alkylová časť má 1 až 3 atómy uhlíka, prípadne substituovanú skupinami NR'2, OR', CO2R' alebo CONR'2, ďalej skupiny NR'2, OCF3, CF3, NO2, CO2R', CONHR', SR', S(O2)N(R')2, SCFj, CN, N(R')C(O)R4, N(R')C(O)OR4, N(R')C(O)C(O)R4, N(R')S(O2)R4, N(R')R4, N(R4)2, OR4, OC(O)R4, OP(O)3H2 alebo N=CH-N(R')2 a
    Q2 je prípadne substituované až 4 substituentmi nezávisle vybranými zo skupiny zahŕňajúcej atóm halogénu, alkylovú skupinu s l až 3 atómami uhlíka s priamym alebo rozvetveným reťazcom, prípadne substituovanú skupinami NR'2, OR', CO2R', S(O2)N(R')2, N=CH-N(R')2, R3 alebo CONR'2, skupinu O-alkyl, kde alkylová časť má 1 až 3 atómy uhlíka, prípadne substituovanú skupinami NR'2, OR', CO2R’, S(O2)N(R’)2, N=CH-N(R')2, R3 alebo CONR'2, ďalej skupiny NR'2, OCF3, CF3> NO2, CO2R', CONHR', R3, OR3, NHR3, SR3, C(O)R3, C(O)N(R')R3, C(O)OR3, SR', S(O2)N(R')2, SCF3, N=CH-N(R')2, alebo CN;
    kde R' je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka, alkenylovú skupinu s 2 až 3 atómami uhlíka alebo alkinylovú skupinu, fenylovú skupinu alebo fenylovú skupinu substituovanú 1 až 3 substituentmi nezávisle vybranými zo skupiny zahŕňajúcej atóm halogénu, metoxyskupinu, kyanoskupinu, nitroskupinu, aminoskupinu, hydroxyskupinu, metylovú skupinu alebo etylovú skupinu,
    R3 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej päťčlenné až šesťčlenné aromatické karbocyklické alebo heterocyklické kruhové systémy, a
    R4 je alkylová skupina s 1 až 4 atómami uhlíka, prípadne substituovaná skupinami N(R')2, OR', CO2R', CON(R')2 alebo SO2N(R2)2, alebo päťčlenný až šesťčlenný karbocyklický alebo heterocyklický kruhový systém, prípadne substituovaný skupinami N(R')2, OR', CO2R', CON(R')2 alebo SO2N(R2)2,
    X je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej -S-, -O-, -S(O2)-, -S(O)-, -S(O2)-N(R2)-, N(R2)-S(O2)-, -N(R2)-C(O)O-, -O-C(O)-N(R2)-, -C(O)-, -C(O)O-, -O-C(O)-, -C(O)-N(R2)-, -N(R2)-C(O)-, -N(R2)-, -C(R2)2- alebo -C(OR2)2-, každé R je nezávisle vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, -R2, -N(R2)2, -OR2, -SR2, -C(O)-N(R2)2, -S(O2)-N(R2)2 alebo -C(O)-OR2, pričom dve priľahlé R sú prípadne viazané jedno na druhé a spolu s každým Y, ku ktorým sú viazané, tvoria štvorčlenný až osemčlenný karbocyklický alebo heterocyklický kruh, alebo ak Y je N, naviazané R predstavuje voľný elektrónový pár,
    R2 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka alebo alkenylovú skupinu s 2 až 3 atómami uhlíka, ktoré sú obidve prípadne substituované skupinami -N(R’)2, -OR', -SR', -C(O)-N(R')2, -S(O2)-N(R')2, -C(O)-OR’, alebo R3,
    Y je N alebo C,
    A, ak je prítomné, je N alebo CR', n je 0 alebo 1, pričom ak n je 0, väzba medzi dusíkom v kruhu a uhlíkom nesúcim X-Q2 je jednoduchá väzba, a
    R1 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka, OH, alebo -O-alkyl, kde alkylová časť má 1 až 3 atómy uhlíka.
  2. 2. Zlúčenina všeobecného vzorca (Ic) alebo (Id) alebo jej farmaceutický prijatelna soľ, kde A, Q1, Q2, R, R', X, Y a n majú význam uvedený pri zlúčeninách všeobecných vzorcov (la) a (lb), a
    R5 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka, skupiny -CR'20H, -C(O)R4, -C(O)OR4, -CR'2OPO3H2 a PO3H2.
  3. 3. Zlúčenina všeobecného vzorca (Ie), (If), (Ig) alebo alebo jej farmaceutický prijateľná soľ, kde
    Q3 je päťčlenný až šesťčlenný aromatický karbocyklický alebo heterocyklický kruhový systém alebo osemčlenný až desaťčlenný bicyklický kruhový systém obsahujúci aromatické karbocyklické kruhy, aromatické heterocyklické kruhy alebo kombináciu aromatického karbocyklického kruhu a aromatického heterocyklického kruhu, kde Q3 sú substituované 1 až 4 substituentmi, z ktorých každý je nezávisle vybraný zo skupiny zahŕňajúcej atóm halogénu, alkylovú skupinu s 1 až 3 atómami uhlíka, prípadne substituovanú skupinami NR'2, OR', CO2R' alebo CONR'2, skupinu O-alkyl, kde alkylová časť má 1 až 3 atómy uhlíka, prípadne substituovanú skupinami NR'2, OR', CO2R' alebo CONR'2, ďalej skupiny NR'2, OCF3, CF3, NO2, CO2R', CONHR’, SR', S(O2)N(R')2, SCF3j CN, N(R’)C(O)R4, N(R')C(O)OR4, N(R')C(O)C(O)R4, N(R')S(O2)R4, N(R’)R4, N(R4)2, OR4, OC(O)R4, OP(O)3H2 alebo N=CH-N(R’)2 a A, Q1, Q2, R, R', X, Y a n majú význam uvedený v nároku 1.
  4. 4. Zlúčenina podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3, kde Q1 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej fenylovú alebo pyridylovú skupinu obsahujúcu 1 až 3 substituenty nezávisle vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm chlóru, atóm fluóru, atóm brómu, -CH3, -OCH3, -OH, -CF3, -OCF3, -O(CH2)2CH3, NH2, 3,4-metyléndioxyskupinu, -N(CH3)2, -NH-S(O2)-fenyl, -NH-C(O)O-CH2-4-pyridín, -NH-C(O)CH2-morfolín, -NH-C(O)CH2-N(CH3)2, -NH-C(O)CH2-piperazín, -NH-C(O)CH2-pyrolidín, -NH-C(O)C(O)-morfolín, -NH-C(O)C(O)-piperazín, -NH-C(O)C(O)-pyrolidín, -O-C(O)CH2-N(CH3)2 alebo -O-(CH2)2-N(CH3)2 a kde aspoň jeden z týchto substituentov je v polohe orto.
  5. 5. Zlúčenina podľa nároku 4, kde Q1 obsahuje aspoň dva substituenty, pričom obidva sú v polohe orto.
  6. 6. Zlúčenina podľa nároku 4, kde Q1 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej:
    ΗΝΑ/θ ΗΝ^γΟ
  7. 7. Zlúčenina podľa nároku 6, kde Q1 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej 2-íluór-6-trifluórmetylfenyl, 2,6-difluórfenyl, 2,6-dichlórfenyl, 2-chlór-4-hydroxyfenyl, 2-chlór-4-aminofenyl, 2,6-dichlór-4-aminofenyl, 2,6-dichlór-3-aminofenyl, 2,6-dimetyl-4-hydroxyfenyl, 2-metoxy-3,5-dichlór-4-pyridyl, 2-chlór-4,5-metyléndioxyfenyl alebo 2-chlór-4-(N-2-morfolinoacetamido)fenyl.
  8. 8. Zlúčenina podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3, kde Q2 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej fenylovú alebo pyridylovú skupinu a kde Q2 prípadne obsahuje až do 3 substituentov, z ktorých každý je nezávisle vybraný zo skupiny zahŕňajúcej atóm chlóru, atóm fluóru, atóm brómu, metylovú skupinu, etylovú skupinu, izopropylovú skupinu, -OCH3, -OH-, -NH2, -CF3j -OCF3, -SCH3, -C(O)OH, -C(O)0CH3j -CH2NH2, -N(CH3)2, -CH2-pyrolidín a -CH2OH.
  9. 9. Zlúčenina podľa nároku 8, kde Q2 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej:
    ch, a r oh nesubstituovanú 2-pyridylovú skupinu alebo nesubstituovanú fenylovú skupinu.
  10. 10. Zlúčenina podľa nároku 9, kde Q2 je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej fenyl, 2-izopropylfenyl, 3,4-dimetylfenyl, 2-etylfenyl, 3-fluórfenyl, 2-metylfenyl, 3-chlór-4-fluórfenyl, 3-chlórfenyl, 2-metoxykarbonylfenyl, 2-karboxyfenyl, 2-metyl-4-chlórfenyl, 2-brómfenyl, 2-pyridyl, 2-metylénhydroxyfenyl, 4-fluórfenyl, 2-metyl-4-fluórfenyl, 2-chlór-4-fluórfenyl, 2,4-difluórfenyl, 2-hydroxy-4-fluórfenyl alebo 2-metylénhydroxy-4-fluórfenyl.
  11. 11. Zlúčenina podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3, kde X je vybrané zo skupiny zahŕňajúcej -S-, -0-, -S(02)-, -S(0)-, -NR2-, -C(R2)2- alebo -C(0)-.
  12. 12. Zlúčenina podľa nároku 10, kde X je S.
  13. 13. Zlúčenina podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3, kde n je 1 a A je N.
  14. 14. Zlúčenina podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3, kde každé Y je C.
  15. 15. Zlúčenina podľa nároku 14, kde každé R pripojené na Y je nezávisle vybrané zo skupiny zahŕňajúcej atóm vodíka alebo metylovú skupinu.
  16. 16. Zlúčenina podľa nároku 1, kde zlúčenina je vybraná zo skupiny zahŕňajúcej ktorúkoľvek zo zlúčenín 2 až 3 alebo 5 až 53, ako sú uvedené v tabuľke 1.
  17. 17. Zlúčenina podľa nároku 2, kde zlúčenina je vybraná zo skupiny zahŕňajúcej ktorúkoľvek zo zlúčenín 101 až 145, ako sú uvedené v tabuľke 2.
  18. 18. Zlúčenina podľa nároku 3, kde Q3 je substituované 2 až 4 substituentmi, pričom aspoň jeden z týchto substituentov je prítomný v polohe orto vzhľadom na miesto pripojenia Q3, na zvyšok inhibítora.
  19. 19. Zlúčenina podľa nároku 18, kde obidve polohy orto sú obsadené jedným z uvedených nezávisle vybraných substituentov.
  20. 20. Zlúčenina podľa nároku 19, kde Q3 je monocyklický karbocyklický kruh a každý z uvedených ortosubstituentov na Q3 je nezávisle vybraný zo skupiny zahŕňajúcej atóm halogénu alebo metylovú skupinu.
  21. 21. Zlúčenina podľa nároku 19, kde Q3 obsahuje 1 až 2 substituenty popri uvedených ortosubstituentoch, pričom tieto ďalšie substituenty sú nezávisle vybrané zo skupiny zahŕňajúcej NR'2, OR', CO2R', CN, N(R')C(O)R4, N(R')C(O)OR4,
    N(R’)C(O)C(O)R4, N(R')S(O2)R4, N(R')R4, N(R4)2, OR4, OC(O)R4, OP(O)3H2 alebo N=CH-N(R’)2.
  22. 22. Zlúčenina podľa nároku 3, kde touto zlúčeninou je zlúčenina všeobecného vzorca (Ie) a je vybraná z akejkoľvek zlúčeniny 201 alebo 203 až 209, ako sú uvedené v tabuľke 3.
  23. 23. Zlúčenina podľa nároku 3, kde touto zlúčeninou je zlúčenina všeobecného vzorca (Ig) a je vybraná z akejkoľvek zlúčeniny 202/301, 302 až 399 alebo 1301, ako sú uvedené v tabuľke 4.
  24. 24. Zlúčenina podľa nároku 3, kde touto zlúčeninou je zlúčenina všeobecného vzorca (Ih) a je vybraná z akejkoľvek zlúčeniny 401 až 412, ako sú uvedené v tabuľke 5.
  25. 25. Farmaceutický prostriedok, vyznačujúci sa tým, že obsahuje množstvo zlúčeniny podľa ktoréhokoľvek z nárokov 1 až 3, ktoré účinne inhibuje p38, a farmaceutický prijateľný nosič.
  26. 26. Použitie zlúčeniny podľa nárokov 1 až 24 na prípravu farmaceutickej kompozície na liečenie alebo prevenciu zápalových ochorení, autoimúnnych ochorení, vírusových ochorení, deštruktívnych porúch kostí, proliferačných porúch, infekčných ochorení, neurodegeneratívnych ochorení, alergií, reperfúzie/ ischémie pri mŕtvici alebo myokardiálnej ischémie, renálnej ischémie, srdcových záchvatov, angiogénnych porúch, hypoxie orgánov, vaskulámej hyperplázie, srdcovej hypertrofie, trombínom vyvolanej agregácie doštičiek alebo stavov spojených s prostaglandínovou endoperoxidsyntázou-2.
  27. 27. Použitie podľa nároku 26, pričom použitie je na liečenie alebo prevenciu zápalových ochorení vybraných zo skupiny zahŕňajúcej akútnu pankreatitídu, chronickú pankreatitídu, astmu, alergiu alebo syndróm respiračnej úzkosti u dospelých.
  28. 28. Použitie podľa nároku 26, pričom použitie je na liečenie alebo prevenciu autoimúnnych ochorení vybraných zo skupiny zahŕňajúcej glomerulonefritídu, reumatickú artritídu, systémový lupus erythematosus, sklerodermiu, chronickú tyroiditídu, Gravesove ochorenie, autoimúnnu gastritídu, diabetes, autoimúnnu hemolytickú anémiu, autoimúnnu neutropéniu, trombocytopéniu, atopickú dermatitídu, chronickú aktívnu hepatitídu, myasténiu gravis, roztrúsenú sklerózu, zápalové črevné ochorenie, vredovú kolitídu, Crohnove ochorenie, psoriázu alebo ochorenie štep verzus hostiteľ.
  29. 29. Použitie podľa nároku 26, pričom použitie je na liečenie alebo prevenciu deštruktívnej choroby kostí vybranej zo skupiny zahŕňajúcej osteoartritídu, osteoporózu alebo mnohopočetný myelóm súvisiaci s kosťami.
  30. 30. Použitie podľa nároku 26, pričom použitie je na liečenie alebo prevenciu proliferačných ochorení vybraných zo skupiny zahŕňajúcej akútnu myelogénnu leukémiu, chronickú myelogénnu leukémiu, metastatický melanóm, Kaposiho sarkóm alebo mnohopočetný myelóm.
  31. 31. Použitie podľa nároku 26, pričom použitie je na liečenie alebo prevenciu infekčných ochorení vybraných zo skupiny zahŕňajúcej sepsu, septický šok alebo Shigellosu.
  32. 32. Použitie podľa nároku 26, pričom použitie je na liečenie alebo prevenciu vírusových ochorení vybraných zo skupiny zahŕňajúcej akútnu hepatitickú infekciu, HIV infekciu alebo CMV retinitídu.
  33. 33. Použitie podľa nároku 26, pričom použitie je na liečenie alebo prevenciu neurodegeneratívnych ochorení vybraných zo skupiny zahŕňajúcej Alzheimerovu chorobu, Parkinsonovu chorobu, cerebrálnu ischémiu alebo neurodegeneratívne poruchy spôsobené traumatickým poranením.
  34. 34. Použitie podľa nároku 26, pričom použitie je na liečenie alebo prevenciu ischémie/reperfúzie pri mŕtvici alebo myokardiálnej ischémii, renálnej ischémii, srdcových záchvatov, hypoxie orgánov alebo trombínom vyvolanej agregácie doštičiek.
  35. 35. Použitie podľa nároku 26, pričom použitie je na liečenie alebo prevenciu stavov spojených s prostaglandínovou endoperoxid syntázou-2 vybraných zo skupiny zahŕňajúcej opuch, horúčku, analgéziu alebo bolesť.
  36. 36. Použitie podľa nároku 35, pričom bolesťou je bolesť vybraná zo skupiny zahŕňajúcej neuromuskulámu bolesť, bolesť hlavy, bolesť pri rakovine, bolesť zubov alebo bolesť pri artritíde.
  37. 37. Použitie podľa nároku 26, pričom použitie je na liečenie alebo prevenciu angiogénnych ochorení vybraných zo skupiny zahŕňajúcej pevné nádory, očnú neovaskulizáciu alebo infantilné hemangiómy.
SK805-99A 1996-12-18 1997-12-17 Heterocyklické zlúčeniny obsahujúce dusík, farmaceutický prostriedok obsahujúci tieto zlúčeniny a ich použitie SK284578B6 (sk)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US3428896P 1996-12-18 1996-12-18
US08/822,373 US5945418A (en) 1996-12-18 1997-03-20 Inhibitors of p38
US08/862,925 US6147080A (en) 1996-12-18 1997-06-10 Inhibitors of p38
PCT/US1997/023392 WO1998027098A1 (en) 1996-12-18 1997-12-17 SUBSTITUTED NITROGEN CONTAINING HETEROCYCLES AS INHIBITORS OF p38 PROTEIN KINASE

Publications (2)

Publication Number Publication Date
SK80599A3 SK80599A3 (en) 2000-01-18
SK284578B6 true SK284578B6 (sk) 2005-07-01

Family

ID=27364615

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SK805-99A SK284578B6 (sk) 1996-12-18 1997-12-17 Heterocyklické zlúčeniny obsahujúce dusík, farmaceutický prostriedok obsahujúci tieto zlúčeniny a ich použitie

Country Status (29)

Country Link
US (1) US6147080A (sk)
EP (1) EP0951467B1 (sk)
JP (1) JP4171072B2 (sk)
CN (2) CN1153770C (sk)
AP (1) AP1136A (sk)
AT (1) ATE236165T1 (sk)
AU (1) AU738000B2 (sk)
BG (1) BG64533B1 (sk)
BR (1) BR9714415A (sk)
CA (1) CA2274825C (sk)
CZ (1) CZ299600B6 (sk)
DE (1) DE69720522T2 (sk)
DK (1) DK0951467T3 (sk)
EA (1) EA002855B1 (sk)
EE (1) EE04191B1 (sk)
ES (1) ES2202658T3 (sk)
HK (1) HK1023340A1 (sk)
HU (1) HUP0001125A3 (sk)
ID (1) ID21919A (sk)
IL (1) IL130349A0 (sk)
IS (1) IS5069A (sk)
NO (1) NO315047B1 (sk)
NZ (1) NZ336146A (sk)
PL (1) PL202464B1 (sk)
PT (1) PT951467E (sk)
SK (1) SK284578B6 (sk)
TR (1) TR199902194T2 (sk)
TW (1) TW521071B (sk)
WO (1) WO1998027098A1 (sk)

Families Citing this family (126)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7091181B2 (en) 1994-12-12 2006-08-15 Omeros Corporation Method of inhibition of pain and inflammation during surgery comprising administration of soluble TNF receptors
US6608060B1 (en) 1996-12-18 2003-08-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38
JP2001520170A (ja) 1997-10-16 2001-10-30 ボード・オヴ・リージェンツ，ザ・ユニヴァーシティ・オヴ・テキサス・システム Ｎｆ−ａｔ３機能に関連した心肥大動物モデルと治療法
JP2001526230A (ja) 1997-12-19 2001-12-18 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ヘテロアリール置換イミダゾール化合物、その医薬組成物および使用
MY132496A (en) * 1998-05-11 2007-10-31 Vertex Pharma Inhibitors of p38
WO1999061039A2 (en) * 1998-05-22 1999-12-02 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Novel composition for modulating ischemic cell death
US6858617B2 (en) 1998-05-26 2005-02-22 Smithkline Beecham Corporation Substituted imidazole compounds
JP2002517486A (ja) 1998-06-12 2002-06-18 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ｐ３８のインヒビター
EP1277740A1 (en) * 1998-06-12 2003-01-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38
US6184226B1 (en) 1998-08-28 2001-02-06 Scios Inc. Quinazoline derivatives as inhibitors of P-38 α
AR023659A1 (es) 1998-09-18 2002-09-04 Vertex Pharma Un compuesto inhibidor de p38, una composicion farmaceutica que lo comprende y el uso de dicha composicion en el tratamiento y prevencion de estados patologicos
CA2337755C (en) 1998-09-18 2008-07-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38
AU1127700A (en) * 1998-10-20 2000-05-08 Omeros Medical Systems, Inc. Irrigation solution containing mapk inhibitors and their use for treating pain and inflammation
AU1909200A (en) 1998-11-04 2000-05-22 Smithkline Beecham Corporation Pyridin-4-yl or pyrimidin-4-yl substituted pyrazines
UA73492C2 (en) * 1999-01-19 2005-08-15 Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
CA2360934A1 (en) 1999-02-22 2000-08-31 Lin-Hua Zhang Polycyclo heterocyclic derivatives as antiinflammatory agents
CN1511830A (zh) 1999-03-12 2004-07-14 ���ָ��.Ӣ��ķҩ�﹫˾ 作为消炎剂的化合物
DE60023853T2 (de) 1999-03-12 2006-05-24 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc., Ridgefield Aromatische heterozyklische verbindungen als antientzündungwirkstoffe
JP2000281588A (ja) * 1999-03-30 2000-10-10 Sankyo Co Ltd ガンの予防又は治療薬及びそのスクリーニング方法
ATE323482T1 (de) * 1999-07-02 2006-05-15 Stuart A Lipton Verwendung von p38 mapk inhibitoren in der behandlung von augenkrankheiten
CA2374737C (en) 1999-07-09 2008-02-12 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Novel process for synthesis of heteroaryl-substituted urea compounds
CZ20021743A3 (cs) * 1999-10-21 2002-08-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyklické dusíkové heterocykly substituované alkylaminoskupinou jako inhibitory P38 proteinkinázy
KR100523120B1 (ko) * 1999-10-21 2005-10-20 에프. 호프만-라 로슈 아게 Ｐ38 단백질 키나제 저해제로서 헤테로알킬아미노-치환된이환 질소 헤테로환
ATE296809T1 (de) 1999-11-23 2005-06-15 Smithkline Beecham Corp 3,4-dihydro-(1h)chinazolin-2-on-verbindungen als csbp/p38-kinase-inhibitoren
US6759410B1 (en) 1999-11-23 2004-07-06 Smithline Beecham Corporation 3,4-dihydro-(1H)-quinazolin-2-ones and their use as CSBP/p38 kinase inhibitors
EP1233950B1 (en) 1999-11-23 2005-10-05 Smithkline Beecham Corporation 3,4-DIHYDRO-(1H)QUINAZOLIN-2-ONE COMPOUNDS AS CSBP/P39 kINASE INHIBITORS
US6525046B1 (en) 2000-01-18 2003-02-25 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
US6608052B2 (en) 2000-02-16 2003-08-19 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as anti-inflammatory agents
US7235551B2 (en) 2000-03-02 2007-06-26 Smithkline Beecham Corporation 1,5-disubstituted-3,4-dihydro-1h-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-one compounds and their use in treating csbp/p38 kinase mediated diseases
CA2403828A1 (en) * 2000-03-22 2001-09-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38
MXPA03001256A (es) * 2000-08-11 2004-12-06 Vertex Pharma Inhibidores de p38.
PE20020506A1 (es) * 2000-08-22 2002-07-09 Glaxo Group Ltd Derivados de pirazol fusionados como inhibidores de la proteina cinasa
US7998507B2 (en) * 2000-09-21 2011-08-16 Elan Pharma International Ltd. Nanoparticulate compositions of mitogen-activated protein (MAP) kinase inhibitors
CZ20031125A3 (cs) 2000-10-23 2003-10-15 Smithkline Beecham Corporation Nové sloučeniny
US6867300B2 (en) * 2000-11-17 2005-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Methods for the preparation of pyrrolotriazine compounds useful as kinase inhibitors
US6670357B2 (en) 2000-11-17 2003-12-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating p38 kinase-associated conditions and pyrrolotriazine compounds useful as kinase inhibitors
EP1345603A4 (en) * 2000-12-20 2004-09-08 Merck & Co Inc P38 KINASE INHIBITORS (HALO-BENZO CARBONYL) HETEROCYCLO- FUSIONNES PHENYL
ATE305303T1 (de) * 2001-02-12 2005-10-15 Hoffmann La Roche 6-substituierte pyridopyrimidine
GB0112348D0 (en) * 2001-05-19 2001-07-11 Smithkline Beecham Plc Compounds
GB2375771A (en) * 2001-05-24 2002-11-27 Univ Leeds Decellularisation of tissue implant material
WO2002100405A1 (en) 2001-06-11 2002-12-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Isoquinoline inhibitors of p38
US6794265B2 (en) 2001-08-02 2004-09-21 Ultradots, Inc. Methods of forming quantum dots of Group IV semiconductor materials
US6710366B1 (en) 2001-08-02 2004-03-23 Ultradots, Inc. Nanocomposite materials with engineered properties
US7005669B1 (en) 2001-08-02 2006-02-28 Ultradots, Inc. Quantum dots, nanocomposite materials with quantum dots, devices with quantum dots, and related fabrication methods
US20030066998A1 (en) 2001-08-02 2003-04-10 Lee Howard Wing Hoon Quantum dots of Group IV semiconductor materials
US6819845B2 (en) 2001-08-02 2004-11-16 Ultradots, Inc. Optical devices with engineered nonlinear nanocomposite materials
GB0124939D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124934D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124938D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124932D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124933D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124941D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124931D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124936D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
WO2003060102A2 (en) * 2002-01-11 2003-07-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystal structures of jnk-inhibitor complexes and binding pockets thereof
EP1470112A1 (en) * 2002-01-18 2004-10-27 Pharmacia Corporation Substituted pyridazinones as inhibitors of p38
CA2474192C (en) * 2002-02-12 2011-06-21 Smithkline Beecham Corporation Nicotinamide derivates useful as p38 inhibitors
ES2299689T3 (es) 2002-02-25 2008-06-01 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Compuestos de cicloalquil-uera fusionada con benzo 1,4-disustituido, utiles para el tratamiento de enfermedades por citoquinas.
EP1494664A2 (en) * 2002-04-18 2005-01-12 Pharmacia Corporation Combinations of cox-2 inhibitors and other agents for the treatment of parkinson's disease
PL373339A1 (en) 2002-04-19 2005-08-22 Smithkline Beecham Corporation Novel compounds
CA2483164C (en) * 2002-04-23 2011-06-07 Bristol-Myers Squibb Company Pyrrolo-triazine aniline compounds useful as kinase inhibitors
ES2318122T3 (es) * 2002-04-23 2009-05-01 Bristol-Myers Squibb Company Compuestos de aril cetona pirrolo-triazina utiles como inhibidores de quinasa.
US7388009B2 (en) * 2002-04-23 2008-06-17 Bristol-Myers Squibb Company Heteroaryl-substituted pyrrolo-triazine compounds useful as kinase inhibitors
TW200400034A (en) * 2002-05-20 2004-01-01 Bristol Myers Squibb Co Pyrazolo-pyrimidine aniline compounds useful as kinase inhibitors
IL165264A0 (en) * 2002-05-23 2005-12-18 Cytopia Pty Ltd Protein kinase inhibitors
DE60310730T2 (de) 2002-07-09 2007-05-16 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Pharmazeutische zusammensetzungen aus anticholinergica und p38 kinase hemmern zur behandlung von erkrankungen der atemwege
GB0217757D0 (en) 2002-07-31 2002-09-11 Glaxo Group Ltd Novel compounds
NZ540767A (en) 2002-11-27 2009-03-31 Dmi Biosciences Inc Treatment of diseases and conditions mediated by increased phosphorylation
GB0308186D0 (en) * 2003-04-09 2003-05-14 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
GB0308201D0 (en) * 2003-04-09 2003-05-14 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
GB0308185D0 (en) * 2003-04-09 2003-05-14 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
ES2350837T3 (es) 2003-05-01 2011-01-27 Bristol-Myers Squibb Company Compuestos de pirazol-amida sustituidos con arilo útiles como inhibidores de quinasas.
AU2004247626B8 (en) 2003-05-15 2011-05-19 Arqule, Inc. Imidazothiazoles and imidazoxazole derivatives as inhibitors of p38
BRPI0410905A (pt) * 2003-06-03 2006-06-27 Novartis Ag inibidores de p-38
JP4838121B2 (ja) 2003-06-26 2011-12-14 ノバルティス アーゲー ５員ヘテロ環を基礎とするｐ３８キナーゼ阻害剤
WO2005007632A1 (en) * 2003-07-18 2005-01-27 Pharmacia Corporation Substituted pyridazinones as inhibitors of p38
BRPI0412918A (pt) 2003-07-25 2006-09-26 Novartis Ag inibidores de quinases p38
GB0318814D0 (en) * 2003-08-11 2003-09-10 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
US7419978B2 (en) * 2003-10-22 2008-09-02 Bristol-Myers Squibb Company Phenyl-aniline substituted bicyclic compounds useful as kinase inhibitors
NZ546057A (en) 2003-12-03 2010-04-30 Ym Bioscience Australia Pty Lt Tubulin inhibitors
GB0402143D0 (en) * 2004-01-30 2004-03-03 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
US7829560B2 (en) 2004-07-08 2010-11-09 Arqule, Inc. 1,4-disubstituted naphthalenes as inhibitors of P38 MAP kinase
US7504521B2 (en) * 2004-08-05 2009-03-17 Bristol-Myers Squibb Co. Methods for the preparation of pyrrolotriazine compounds
US20060035893A1 (en) 2004-08-07 2006-02-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical compositions for treatment of respiratory and gastrointestinal disorders
PE20060421A1 (es) 2004-08-12 2006-06-01 Bristol Myers Squibb Co Procedimiento para preparar un compuesto de pirrolotriazina anilina como inhibidores de cinasa
WO2006021848A1 (en) * 2004-08-27 2006-03-02 Ranbaxy Laboratories Limited Anti-inflammatory agents
US20080051416A1 (en) * 2004-10-05 2008-02-28 Smithkline Beecham Corporation Novel Compounds
US8178672B2 (en) 2004-10-19 2012-05-15 Arqule, Inc. Synthesis of imidazooxazole and imidazothiazole inhibitors of p38 MAP kinase
PE20060777A1 (es) 2004-12-24 2006-10-06 Boehringer Ingelheim Int Derivados de indolinona para el tratamiento o la prevencion de enfermedades fibroticas
US20060178388A1 (en) * 2005-02-04 2006-08-10 Wrobleski Stephen T Phenyl-substituted pyrimidine compounds useful as kinase inhibitors
JP2008535822A (ja) 2005-03-25 2008-09-04 グラクソ グループ リミテッド 新規化合物
EA200702073A1 (ru) 2005-03-25 2008-12-30 Глэксо Груп Лимитед Способ получения пиридо[2,3-d]пиримидин-7-оновых и 3,4-дигидропиримидо[4,5-d]пиримидин-2(1н)-оновых производных
UY29439A1 (es) 2005-03-25 2006-10-02 Glaxo Group Ltd Nuevos compuestos
AR053346A1 (es) 2005-03-25 2007-05-02 Glaxo Group Ltd Compuesto derivado de 8h -pirido (2,3-d) pirimidin -7 ona 2,4,8- trisustituida composicion farmaceutica y uso para preparar una composicion para tratamiento y profilxis de una enfermedad mediada por la quinasa csbp/ rk/p38
US20060235020A1 (en) * 2005-04-18 2006-10-19 Soojin Kim Process for preparing salts of 4-[[5-[(cyclopropylamino)carbonyl]-2-methylphenyl]amino]-5-methyl-N-propylpyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazine-6-carboxamide and novel stable forms produced therein
GB0512429D0 (en) * 2005-06-17 2005-07-27 Smithkline Beecham Corp Novel compound
US7473784B2 (en) * 2005-08-01 2009-01-06 Bristol-Myers Squibb Company Benzothiazole and azabenzothiazole compounds useful as kinase inhibitors
WO2007021710A1 (en) * 2005-08-12 2007-02-22 Merck & Co., Inc. Heterobicyclic compounds useful as p38 kinase inhibiting agents
AU2006306991A1 (en) 2005-10-28 2007-05-03 Takeda Pharmaceutical Company Limited Heterocyclic amide compound and use thereof
CN101395158A (zh) * 2006-03-07 2009-03-25 百时美施贵宝公司 可作为激酶抑制剂的吡咯并三嗪苯胺前体药物化合物
EP2083816A2 (en) * 2006-10-27 2009-08-05 Brystol-Myers Squibb Company Heterocyclic amide compounds useful as kinase inhibitors
US7943617B2 (en) * 2006-11-27 2011-05-17 Bristol-Myers Squibb Company Heterobicyclic compounds useful as kinase inhibitors
JP2010522155A (ja) * 2007-03-20 2010-07-01 カディラ ファーマシューティカルズ リミテッド Ｐ３８阻害剤
EP1992344A1 (en) 2007-05-18 2008-11-19 Institut Curie P38 alpha as a therapeutic target in pathologies linked to FGFR3 mutation
EP2108641A1 (en) * 2008-04-11 2009-10-14 Laboratorios Almirall, S.A. New substituted spiro[cycloalkyl-1,3'-indo]-2'(1'H)-one derivatives and their use as p38 mitogen-activated kinase inhibitors
EP2111861A1 (en) 2008-04-21 2009-10-28 Ranbaxy Laboratories Limited Compositions of phosphodiesterase type IV inhibitors
US8338604B2 (en) 2008-06-20 2012-12-25 Bristol-Myers Squibb Company Imidazopyridine and imidazopyrazine compounds useful as kinase inhibitors
EP2307411B1 (en) * 2008-06-20 2014-01-01 Bristol-Myers Squibb Company Triazolopyridine compounds useful as kinase inhibitors
WO2010038428A1 (ja) * 2008-09-30 2010-04-08 武田薬品工業株式会社 タキサン系抗がん剤の置き換え薬
BRPI1007923A2 (pt) 2009-02-06 2020-08-25 Elan Pharmaceuticals, Inc composto, composição farmacêutica, métodos para tratar uma doença neurodegenerativa, e para reduzir a concentração de p-cjun em tecido cerebral de um indivíduo em necessidade do mesmo, uso de um composto, e, método in vitro
GB0902648D0 (en) 2009-02-17 2009-04-01 Argenta Discovery Ltd Pharmaceutical compounds and compositions
GB0908317D0 (en) * 2009-05-14 2009-06-24 Argenta Discovery Ltd Pharmaceutical compounds and compositions
WO2012031057A1 (en) 2010-09-01 2012-03-08 Bristol-Myers Squibb Company Bms- 582949 for the treatment of resistant rheumatic disease
CN103842362B (zh) * 2011-05-09 2017-05-24 爱普制药有限责任公司 用于治疗阿尔茨海默氏病的组合物和方法
WO2013100208A1 (ja) 2011-12-28 2013-07-04 京都府公立大学法人 角膜内皮細胞の培養正常化
CN103772392A (zh) * 2012-10-23 2014-05-07 杨子娇 一类治疗房角狭窄的化合物及其用途
WO2015072580A1 (ja) 2013-11-14 2015-05-21 学校法人同志社 細胞増殖促進または細胞障害抑制による角膜内皮治療薬
JP6660369B2 (ja) 2014-07-09 2020-03-11 イーアイピー ファーマ， エルエルシー 神経障害を治療する方法
WO2017075274A1 (en) 2015-10-27 2017-05-04 Children's Hospital Medical Center Use of mapk inhibitors to reduce loss of hematopoietic stem cells during ex vivo culture and/or genetic manipulation
US20190060286A1 (en) 2016-02-29 2019-02-28 University Of Florida Research Foundation, Incorpo Chemotherapeutic Methods
US11466008B2 (en) 2017-09-18 2022-10-11 Eip Pharma, Llc Co-crystals of neflamapimod (VX-745)
CN114732910A (zh) 2017-10-05 2022-07-12 弗尔康医疗公司 P38激酶抑制剂降低dux4和下游基因表达以用于治疗fshd
US10342786B2 (en) 2017-10-05 2019-07-09 Fulcrum Therapeutics, Inc. P38 kinase inhibitors reduce DUX4 and downstream gene expression for the treatment of FSHD
PL3762368T3 (pl) 2018-03-08 2022-06-06 Incyte Corporation ZWIĄZKI AMINOPIRAZYNODIOLOWE JAKO INHIBITORY PI3K-γ
WO2020010003A1 (en) 2018-07-02 2020-01-09 Incyte Corporation AMINOPYRAZINE DERIVATIVES AS PI3K-γ INHIBITORS
CN111253404B (zh) * 2018-11-30 2023-05-23 上海医药集团股份有限公司 含氮杂环类化合物及其组合物、制备方法和应用

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5716972A (en) * 1993-01-13 1998-02-10 Smithkline Beecham Corporation Pyridyl substituted imidazoles
IL110296A (en) * 1993-07-16 1999-12-31 Smithkline Beecham Corp Imidazole compounds process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
WO1995021654A1 (en) * 1994-02-10 1995-08-17 Vladimir Ivanovich Ivanov Device for phono-electrophoresis
US5559137A (en) * 1994-05-16 1996-09-24 Smithkline Beecham Corp. Compounds
NZ302117A (en) * 1995-01-12 1999-10-28 Smithkline Beecham Corp 1-cycloalkyl or cycloalkylalkyl 4,5-trisubstituted imidazole derivatives and medicaments
US5717100A (en) * 1995-10-06 1998-02-10 Merck & Co., Inc. Substituted imidazoles having anti-cancer and cytokine inhibitory activity
EP0854870B1 (en) * 1995-10-06 2009-06-10 Merck & Co., Inc. Substituted imidazoles having anti-cancer and cytokine inhibitory activity
GB9523675D0 (en) * 1995-11-20 1996-01-24 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
ZA97175B (en) * 1996-01-11 1997-11-04 Smithkline Beecham Corp Novel substituted imidazole compounds.
WO1997044467A1 (en) * 1996-05-20 1997-11-27 Signal Pharmaceuticals, Inc. MITOGEN-ACTIVATED PROTEIN KINASE p38-2 AND METHODS OF USE THEREFOR
AU708883B2 (en) * 1996-06-10 1999-08-12 Merck & Co., Inc. Substituted imidazoles having cytokine inhibitory activity
GB9613021D0 (en) * 1996-06-21 1996-08-28 Pharmacia Spa Bicyclic 4-aralkylaminopyrimidine derivatives as tyrosine kinase inhibitors
EP0912548A1 (en) * 1996-07-11 1999-05-06 Pfizer Inc. Pyridylpyrrole compounds useful as interleukin- and tnf antagonists
WO1998006715A1 (en) * 1996-08-09 1998-02-19 Smithkline Beecham Corporation Novel piperazine containing compounds
US5945418A (en) * 1996-12-18 1999-08-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38

Also Published As

Publication number Publication date
ATE236165T1 (de) 2003-04-15
PT951467E (pt) 2003-08-29
PL202464B1 (pl) 2009-06-30
EA002855B1 (ru) 2002-10-31
SK80599A3 (en) 2000-01-18
WO1998027098A1 (en) 1998-06-25
EE04191B1 (et) 2003-12-15
US6147080A (en) 2000-11-14
AP1136A (en) 2003-01-31
BG103575A (en) 2000-06-30
CN1153770C (zh) 2004-06-16
CN1244867A (zh) 2000-02-16
CA2274825C (en) 2008-08-26
DE69720522D1 (de) 2003-05-08
BG64533B1 (bg) 2005-06-30
DK0951467T3 (da) 2003-07-21
HUP0001125A3 (en) 2002-01-28
EP0951467B1 (en) 2003-04-02
JP2001506266A (ja) 2001-05-15
TW521071B (en) 2003-02-21
NO992960D0 (no) 1999-06-17
TR199902194T2 (xx) 2000-06-21
AU5610598A (en) 1998-07-15
EE9900252A (et) 1999-12-15
NO992960L (no) 1999-08-17
EA199900559A1 (ru) 2000-02-28
DE69720522T2 (de) 2003-11-27
EP0951467A1 (en) 1999-10-27
IL130349A0 (en) 2000-06-01
CN1284783C (zh) 2006-11-15
CA2274825A1 (en) 1998-06-25
NZ336146A (en) 2000-09-29
CZ216399A3 (cs) 1999-09-15
HK1023340A1 (en) 2000-09-08
NO315047B1 (no) 2003-06-30
ES2202658T3 (es) 2004-04-01
AP9901565A0 (en) 1999-06-30
ID21919A (id) 1999-08-12
JP4171072B2 (ja) 2008-10-22
PL334133A1 (en) 2000-02-14
CN1519240A (zh) 2004-08-11
IS5069A (is) 1999-06-07
HUP0001125A2 (hu) 2000-10-28
AU738000B2 (en) 2001-09-06
BR9714415A (pt) 2000-04-18
CZ299600B6 (cs) 2008-09-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
SK284578B6 (sk) Heterocyklické zlúčeniny obsahujúce dusík, farmaceutický prostriedok obsahujúci tieto zlúčeniny a ich použitie
US6632945B2 (en) Inhibitors of P38
US20110160163A1 (en) INHIBITORS OF p38
US8338412B2 (en) Inhibitors of P38
AU2001283237A1 (en) Pyridine derivatives as inhibitors of p38
KR100559917B1 (ko) ｐ38 프로테인 키나아제의 저해제로서 치환된 질소를 함유하는헤테로사이클

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Patent lapsed due to non-payment of maintenance fees

Effective date: 20101217