EA002855B1 - ЗАМЕЩЕННЫЕ, АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ ГЕТЕРОЦИКЛЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ПРОТЕИНКИНАЗЫ р38 - Google Patents

ЗАМЕЩЕННЫЕ, АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ ГЕТЕРОЦИКЛЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ПРОТЕИНКИНАЗЫ р38 Download PDF

Info

Publication number
EA002855B1
EA002855B1 EA199900559A EA199900559A EA002855B1 EA 002855 B1 EA002855 B1 EA 002855B1 EA 199900559 A EA199900559 A EA 199900559A EA 199900559 A EA199900559 A EA 199900559A EA 002855 B1 EA002855 B1 EA 002855B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compound
compound according
substituents
formula
independently selected
Prior art date
Application number
EA199900559A
Other languages
English (en)
Other versions
EA199900559A1 (ru
Inventor
Гай В. Бемис
Франческо Джеральд Салитуро
Джон Патрик Даффи
Джон Е. Кочран
Эдмунд Мартин Харрингтон
Марк А. Мёрко
Кейт П. Уилсон
Майкл Су
Винсент П. Галулло
Original Assignee
Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/822,373 external-priority patent/US5945418A/en
Application filed by Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед filed Critical Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед
Publication of EA199900559A1 publication Critical patent/EA199900559A1/ru
Publication of EA002855B1 publication Critical patent/EA002855B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/70—Sulfur atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P23/00—Anaesthetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/56—Amides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/75—Amino or imino radicals, acylated by carboxylic or carbonic acids, or by sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D237/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings
    • C07D237/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D237/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D237/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D237/18—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/12—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/20—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic System
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Abstract

Данное изобретение касается ингибиторов р38 протеинкиназы млекопитающих, вовлеченной в процесс пролиферации клеток, клеточной гибели и в ответную реакцию на внеклеточный раздражитель. Изобретение касается способов получения этих ингибиторов. Изобретение касается также фармацевтических композиций, содержащих ингибиторы согласно изобретению, и способов применения этих композиций в лечении и профилактике различных заболеваний.

Description

Данное изобретение касается ингибиторов р38, протеинкиназы млекопитающих, вовлечённой в патологический процесс пролиферации клеток, клеточную гибель и ответную реакцию на внеклеточный раздражитель. Изобретение также связано со способами получения этих ингибиторов. К тому же, изобретение касается фармацевтических композиций, включающих в себя ингибиторы согласно изобретению, и способов применения этих композиций в лечении и профилактике различных болезней.
Протеинкиназы вовлекаются в различные ответные реакции клеток на внеклеточные сигналы. Недавно было открыто семейство азотактивированных протеинкиназ (МАРК). Членами этого ряда являются 8ег/ТБг-киназы, активирующие субстраты путём фосфорилирования [В. 81еш е! а1., Апп. Вер. Мей. СБет., 31, рр. 28998 (1996)]. МАРКк самоактивируются под воздействием различных сигналов, включающих в себя факторы роста, цитокины, УФ-облучение и вызывающие стресс агенты.
Одним из особенно интересных МАРК является р38. р38, известная также как цитокинподавляющий белок (С8ВР), связывающий противовоспалительные лекарственные средства, и ВК, была выделена из мышиных пре-В-клеток, трансфицированных липополисахаридным (ЬР8) рецептором СИ 14 и индуцированных ЬР8. Позднее р38 была выделена и секвенирована, и было установлено, что у людей и мышей она кодируется кДНК. Активация р38 наблюдалась в клетках, стимулированных стрессами, такими как обработка липополисахаридами (ЬР8), УФ, анизомицином или осмотическим шоком, и цитокинами, такими как 1Ь-1 и ΤΝΡ.
Ингибирование р38-киназы ведёт к блокированию продуцирования как 1Ь-1, так и ΤΝΡ. 1Ь-1 и ΤΝΡ стимулируют продуцирование других провоспалительных цитокинов, таких как 1Ь-6 и 1Ь-8, и вовлечены в острые и хронические воспалительные заболевания и в постклимактерический остеопороз [В.В. К1тБ1е е! а1., ЕпйосппоБ, 136, рр. 3054-61, 1995].
На основании этих данных полагают, что р38, наряду с другими МАРКк, играет роль в опосредовании клеточной реакции на воспалительные раздражители, такой как аккумуляция лейкоцитов, активация макрофагов моноцитов, резорбция ткани, лихорадка, ответ в острой фазе и нейтрофилия. Вдобавок МАРКк, такие как р38, вовлечены в нарушения, связанные с раком, тромбин-индуцируемой агрегацией тромбоцитов, иммунодефицитными расстройствами, аутоиммунными заболеваниями, клеточной гибелью, аллергиями, остеопорозом и нейродегенеративными расстройствами. Ингибиторы р38 также вовлечены в процесс регуляции боли через ингибирование индукции простагландинэндопероксидсинтазы-2. Другие болезни, связанные с повышенной продукцией 1Ь-1, 1Ь-6, 1Ь-8 или ΤΝΡ, описаны в \УО 96/21654.
Уже предпринимались попытки разработать лекарственные средства, специфически ингибирующие МАРКк. К примеру, в РСТпубликации XV О 95/31451 описаны соединения пиразола, ингибирующие МАРКк, и, в частности, р38. Однако эффективность этих ингибиторов ш νίνο всё ещё исследуется.
Поэтому по-прежнему существует большая потребность в разработке других сильных, р38 специфических ингибиторов, полезных в лечении различных состояний, связанных с активацией р38.
Краткое описание изобретения
В настоящем изобретении эта проблема решается с помощью соединений, обнаруживающих способность к сильному и специфическому ингибированию р38.
Эти соединения имеют общую формулу
или
где каждый из Οι и О2 независимо выбирают из систем 5-6-членных ароматических карбоцик лических или гетероциклических колец или систем 8-10-членных бициклических колец, состоящих из ароматических карбоциклических колец, ароматических гетероциклических колец или сочетания ароматического карбоцикличе ского кольца и ароматического гетероцикличе ского кольца.
Циклы, составляющие р1, замещены 1-4 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, включающей в себя галоген, С1-С3-алкил, возможно, замещённый ΝΒ'2, ОВ', СО2В' или ΟΟΝΒ'ν О-(С1-С3)-алкил, возможно, замещённый ИВ'2, ОВ', СО2В' или СОИВ'2; ИВ'2; ОСР3; СР3; ΝΟ< СО2В'; СОИВ'; 8В'; 8(О2)И(В,)2; 8СР3; СИ; И(В')С(О)В4;
И(В')С(О)ОВ4; И(В')С(О)С(О)В4; И(В')8(О2)В4; И(В')В4; И(В4)2; ОВ4; ОС(О)В4; ОР(О)3Н2 или И=С-И(В')2.
Циклы, составляющие р2, могут содержать до 4 заместителей, каждый из которых независимо выбирают из группы, включающей в себя галоген, С1-С3-линейный или разветвлённый алкил, возможно, замещённый ИВ'2, ОВ', СО2В', 8(О2)И(В')2; И=С-И(В')2, В3 или СОИВ2; О-(С1С3)алкил; О-(С1-С3)алкил, возможно замещенный ИВ'2, ОВ', СО2В', 8(О2)И(В')2; И=С-И(В')2, В3 или СОИВ'2; ИВ'2; ОСР3; СР3; ИО2; СО2В'; СОИВ'; В3; ОВ3; ИВ3; 8В3; С(О)В3; С(О)И(В')В3; С(О)ОВ3; 8В'; 8(О2)И(В')2; 8СР3; И=С-И(В')2 или СИ.
В' выбирают из группы, включающей в себя водород, (С1-С3)алкил; (С2-С3)алкенил или алкинил; фенил или фенил, замещённый 1-3 заместителями, которые независимо выбирают из галогена, метокси, циано, нитро, амино, гидрокси, метила или этила.
В3 выбирают из систем 5-6-членных ароматических карбоциклических или гетероциклических колец.
В4 означает (С1-С4)алкил, возможно, замещённый Ν(Β')2, ОВ', СО2В', СОЫ(В')2 или 8Θ2Ν(Β2)2; или систему 5-6-членных карбоциклических или гетероциклических колец, возможно, замещенных МВ')2. ОВ', СО2В', СО^В'Ц или 8О2^В2)2.
X выбирают из -8-, -О-, -8(О2)-, -8(О)-, -8(О2)-ЖВ2)-, ^(В2)-8(О2)-, -^В2)-С(О)О-, -ОС(О)-^В2)-, -С(О)-, -С(О)О-, -О-С(О)-, -С(О)МВ2)-, -^В2)-С(О)-, -^В2)-, -С(В2)2- или
-С(ОВ2)2-.
Каждый В независимо выбирают из водорода, -В2, -ВДВ2)2, -ОВ2, 8В2, -С(ОЖВ2Ц-, -8(О2)-^В2)2- или -С(О)-ОВ2, где два смежных В возможно связаны друг с другом, и вместе с каждым Υ, с которым они соответственно связаны, образуют 4-8-членное карбоциклическое или гетероциклическое кольцо;
В2 выбирают из группы, включающей водород, (С1-С3)алкил или (С1-С3)алкенил; каждый член группы возможно замещён -^В')2, -ОВ', 8В', -С(ОЖВ')2, -8(О2ЖВ')2, -С(О)-ОВ' или В3;
Υ означает Ν или С;
А, если присутствует, означает N или СВ'; η означает 0 или 1;
В1 выбирают из группы, включающей в себя водород, (С1-С3)-алкил, ОН или О-(С1-С3)алкил.
В другом варианте воплощения изобретение даёт фармацевтические композиции, содержащие ингибиторы р38 согласно изобретению. Эти композиции могут быть использованы в способах лечения или профилактики различных заболеваний, таких как раковые, воспалительные заболевания, аутоиммунные расстройства, деструктивные заболевания кости, пролиферативные заболевания, инфекционные болезни, вирусные болезни и нейродегенеративные расстройства. Эти композиции также полезны в способах профилактики клеточной гибели и гиперплазии и, следовательно, могут быть использованы для лечения или профилактики реперфузии/ ишемии при мозговом ударе, сердечных приступов, гипоксии органов. Композиции могут также быть полезны для профилактики тромбин-индуцируемой агрегации тромбоцитов. Каждый из вышеуказанных способов также является составной частью данного изобретения.
Данное изобретение касается ингибиторов р38, имеющих общую формулу:
где каждый из Οι и О2 независимо выбирают из систем 5-6-членных ароматических карбоциклических или гетероциклических колец или систем 8-10-членных бициклических колец, содержащих ароматические карбоциклические кольца, ароматические гетероциклические кольца или сочетание ароматического карбоциклического кольца и ароматического гетероциклического кольца.
Циклы, составляющие р1, замещены 1-4 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, включающей в себя галоген, С1-С3-алкил, возможно, замещённый NΒ'2, ОВ', СО2В' или СО№'2; О-(С1-С3)-алкил, возможно, замещённый NΒ'2, ОВ', СО2В' или СО\В'2; Ν^; ОСР3; СР3; ХО2; СО2В'; СО№'; 8В'; 8СР3; ΌΝ; ^В')С(О)В4;
^В')С(О)ОВ4; ^В')С(О)С(О)В4; Ν( В')8(О2)К'; МВ')В4; МВ4)2; ОВ4; ОС(О)В4; ОР(О)3Н2 или ^С^(В')2.
Циклы, составляющие р2, могут содержать до 4 заместителей, каждый из которых независимо выбирают из группы, включающей в себя галоген, С1-С3- линейный или разветвлённый алкил, возможно, замещённый NΒ'2, ОВ', СО2В', 8(О2ЖВ')2; ^С-^В')2, В3 или СО№'2, О-(С1С3)алкил; О-(С1-С3)алкил, возможно, замещённый Ν^, ОВ', СО2В', 8(О2МВ')2; ^С^(В')2, В3 или СО\В'2; Ν^; ОСР3; СР3; ХО2; СО2В'; СО1МВ'; В3; ОВ3; ΝΊ1; 8В3; С(О)В3; С(ОМВ')В3; С(О)ОВ3; 8В'; 8(О2)ЖВ'Ц; 8Р3; ^С^(В'Ц или ΟΝ.
В' выбирают из группы, включающей в себя водород, (С1-С3)алкил; (С2-С3)алкенил или алкинил; фенил или фенил, замещённый 1-3 заместителями, которые независимо выбирают из галогена, метокси, циано, нитро, амино, гидрокси, метила или этила.
В3 выбирают из систем 5-6-членных ароматических карбоциклических или гетероциклических колец.
В4 означает (С1-С4)алкил, возможно, замещённый ^В')2, ОВ', СО2В', СОМВ')2 или 8О2МВ2)2; или систему 5-6-членных карбоциклических или гетероциклических колец, возможно, замещенную ЖВ')2, ОВ', СО2В', СО^В')2 или 8О2МВ2)2.
X выбирают из -8-, -О-, -8(О2)-, -8(О)-, -8(О2)-^В2)-, -^В2)-8(О2)-, -^В2)-С(О)О-, -ОС(О)-^В2)-, -С(О)-, -С(О)О-, -О-С(О)-, -С(О)
Ν(Κ2)-, -Ы(К2)-С(О)-, -Ы(К2)-, -С(К2)2- или -С(ОК2)2-.
Каждый К независимо выбирают из водорода, -К2, -Ν(Κ2)2, -ОК2, 8К2, -С(О)-Ы(К2)2-, -8(Ο2)-Ν(Κ2)2- или -С(О)-ОК2, где два смежных К, возможно, связаны друг с другом, и вместе с каждым Υ, с которым они соответственно связаны, образуют 4-8-членное карбоциклическое или гетероциклическое кольцо.
Специалисту в соответствующей области очевидно, что когда 2 К-компонента образуют циклическую структуру вместе с Υкомпонентами, с которыми они соответственно связаны, концевой водород каждого неконденсированного К-компонента будет теряться. К примеру, если циклическая структура образуется путём связывания этих двух К-компонентов вместе, при этом один является -ΝΗ-СНз, другой является -СН2-СН3, будет теряться по одному концевому водороду на каждом Ккомпоненте (выделены жирным шрифтом). Поэтому образующаяся часть циклической структуры будет иметь формулу -НН-СН2-СН2-СН2-.
К2 выбирают из группы, включающей в себя водород, (С,-С3)-алкил или (С,-С3)алкенил; каждый член группы, возможно, замещён -Ν(Κ')2, -ОК', 8К', -С(О)-Ы(К')2, -8(О2)Ν(Κ')2, -С(О)-ОК' или К3.
Υ означает Ν или С;
А, если присутствует, означает Ν или СК'; η означает 0 или 1;
К, выбирают из группы, включающей в себя водород, (С,-С3)-алкил, ОН или О-(С,-С3)алкил. Для специалиста в соответствующей области очевидно, что если К, обозначает ОН, получаемый ингибитор может подвергнуться таутомеризации, превращаясь в соединение формулы
или
которые также являются ингибиторами р38 согласно изобретению.
Согласно другому предпочтительному варианту воплощения, О, выбирают из фенила или пиридила, содержащего от 1 до 3 заместителей, где, по меньшей мере, один из указанных заместителей находится в орто- положении и где указанные заместители независимо выбирают из группы, включающей в себя хлор, фтор, бром, -СН3, -ОСН3, -ОН, -СЕ3, -ОСЕ3, -О(СН2)2СН3, ΝΗ2, 3,4-метилендиокси, -Ν(ί.Ή3);. -ЫН-8(О)2фенил, -ЫН-С(О)О-СН2-4-пиридин, -ХН-С(О) СН2-морфолин, -ХН-С(О)СН2-Ы(СН3)2, -Ν4С(О)СН2-пиперазин, -ХН-С(О)СН2-пирролидин, -]МН-С(О)С(О)-морфолин, -ЫН-С(О)С(О)-пи перазин, -ХН-С(О)С(О)-пирролидин, -О-С(О) СН2-И(СН3)2 или, -О-(СН2)2-ЖСЩ)2.
Ещё более предпочтительны фенил или пиридил, содержащие, по меньшей мере, 2 из вышеуказанных заместителей, из которых оба находятся в орто-положении.
Некоторыми конкретными примерами
Наиболее предпочтительно, чтобы О1 был выбран из группы, включающей в себя 2-фтор6-трифторметилфенил, 2,6-дифторфенил, 2,6дихлорфенил, 2-хлор-4-гидроксифенил, 2-хлор4-аминофенил, 2,6-дихлор-4-аминофенил, 2,6дихлор-3 -аминофенил, 2,6-диметил-4-гидроксифенил, 2-метокси-3,5-дихлор-4-пиридил, 2хлор-4,5-метилендиоксифенил или 2-хлор-4-(Ы2-морфолиноацетамидо)фенил.
Согласно предпочтительному варианту воплощения, О_2 означает фенил или пиридил, содержащий от 0 до 3 заместителей, где каждый заместитель независимо выбирают из группы, включающей в себя хлор, фтор, бром, метил, этил, изопропил, -ОСН3, -ОН, -ΝΗ2, -СР3, -ОСР3, -8СН3, -ОСНз, -С(О)ОН, -С(О)ОСНз, -ΟΗΝΗ, -Ы(СН3)2, -СН2-пирролидин и -СН2ОН.
Некоторыми конкретными примерами предпочтительных О2 являются:
незамещённый 2-пиридил или незамещённый фенил.
Наиболее предпочтительными являются соединения, где О2 выбирают из группы, включающей в себя фенил, 2-изопропилфенил, 3,4диметилфенил, 2-этилфенил, 3-фторфенил, 2метилфенил, 3-хлор-4-фторфенил, 3-хлорфенил, 2-карбометоксифенил, 2-карбоксифенил, 2-метил-4-хлорфенил, 2-бромфенил, 2-пиридил, 2метилен-гидроксифенил, 4-фторфенил, 2-метил4-фторфенил, 2-хлор-4-фторфенил, 2,4-дифторфенил, 2-гидрокси-4-фторфенил или 2-метиленгидрокси-4-фторфенил.
Согласно ещё одному предпочтительному варианту, Х означает -8-, -О-, -8(О)2-, -8(О)-, -ΝΒ-, -С(В2)- или -С(О)-. Наиболее предпочтительно, когда Х означает 8.
Согласно другому предпочтительному варианту воплощения, η означает 1, а А означает Ν.
Согласно другому предпочтительному варианту воплощения, каждый Υ означает С.
Согласно ещё более предпочтительному варианту воплощения, каждый Υ означает С, а В, связанный с этими Υ-компонентами, выбирают из водорода или метила.
Некоторые конкретные ингибиторы согласно изобретению приведены ниже в таблице.
Таблица 1. Соединения формулы 1а и 1Ь
Согласно другому варианту воплощения, данное изобретение описывает способы получения ингибиторов р38 формулы (1а), изображённой выше. Эти способы включают в себя реакцию соединения формулы II:
где каждая из переменных в вышеуказанной формуле является такой, как указано выше для ингибиторов согласно изобретению, с содержащим уходящую группу реагентом формулы 11а ίί--Ьз
1-2 (На) , где Я' имеет вышеуказанные значения, или с содержащим уходящую группу реагентом формулы 1ГЬ о
где каждый из Ь2 и Ь3 независимо означает уходящую группу.
Применяемый в данной реакции реагент с уходящей группой используют в избытке, либо чистый, либо с совместным растворителем, таким как толуол. Реакцию проводят при температуре между 25 и 150°С.
Содержащие уходящую группу реагенты формулы 11а, используемые в получении ингибиторов р38 по данному изобретению, включают в себя диметилацеталь диметилформамида, диметилацеталь диметилацетамида, триметилортоформиат, диэтилацеталь диметилформамида и другие родственные соединения. Предпочтительно содержащим уходящую группу реагентом формулы 11а, используемым для получения ингибиторов по данному изобретению, является диметилацеталь диметилформамида.
Содержащие уходящую группу реагенты формулы ГГЬ, используемые в получении ингибиторов р38 согласно изобретению, включают в себя фосген, карбонилдиимидазол, диэтилкарбонат и трифосген.
В более предпочтительных способах получения соединений согласно изобретению используются соединения формулы II, где каждая из переменных определяется из соображений более предпочтительного и наиболее предпочтительного выбора, как сформулировано выше для соединений согласно изобретению.
Поскольку источником Я1 является содержащий уходящую группу реагент (С-Я или С=О), его особенности, конечно, сказываются на структуре этого реагента. Поэтому для соединений, в которых Я1 означает ОН, используемым реагентом должен быть 1ГЬ. Подобным образом, когда Я1 означает Н или (С1-С3)-алкил, используемым реагентом должен быть ГГа. Для получения ингибиторов, где Я1 означает О-(С1С3)алкил, сначала получают соединение, где Я1 означает ОН, с последующим алкилированием этой гидроксильной группы по стандартным методикам, таким как обработка гидридом Να в ДМФ, йодистом метиле и йодистом этиле.
Непосредственные предшественники ингибиторов согласно изобретению формулы Га (т.е., соединения формулы II) сами могут быть синтезированы по одной из указанных ниже схем синтеза:
Схема 1
мн2 выше для ингибиторов согласно изобретению, с содержащим уходящую формулы:
группу соединением
или
В схеме 1 порядок стадий 1) и 2) можно поменять. Также исходный нитрил может быть заменён на соответствующие кислоту или сложный эфир. Либо вместо нитрила могут быть использованы другие хорошо известные латентные карбоксильные или карбоксамидные фрагменты (см. схему 2). Такие варианты как карбоновые кислоты, эфиры карбоновых кислот, оксазолины или оксизолидиноны могут быть включены в эту схему при последовательном применении способов снятия защиты и функционализации, хорошо известных в соответствующей области.
Используемое в первой стадии схемы 1 (и схемы 2, см. ниже) основание выбирают из группы, включающей гидрид натрия, амид натрия, ЬЭЛ, литийгексаметилдисилазид, натрийгексаметилдисилазид или любой ряд других ненуклеофильных оснований, которые будут депротонировать положение альфа до нитрила.
Также добавление НХ-О2 в одну стадию, указанное выше, может быть заменено двумя стадиями - добавлением защищённого или не защищённого Х-производного с последующим добавлением 02-производного на следующей стадии.
Схема 2
10СМОвшшв + НХ---02
ΝΗ,
В схеме 2 Ζ выбирают из СООН, СООК', СС)\(К')2, оксазолина, оксазолидинона или СХ. К' имеет вышеуказанные значения.
Согласно другому варианту воплощения, данное изобретение даёт способы получения ингибиторов р38 формулы (1Ь), указанной выше. Эти способы включают в себя получение соединения формулы III
где каждый из возможных вариантов приведенной выше формулы является таким, как указано как указано выше.
Две полных схемы синтеза ингибиторов р38 формулы (1Ь) приведены ниже.
Схема 3
По схеме 3,
01-замещённое производное может быть обработано основанием, таким как гидрид натрия, амид натрия, ЬЭЛ, литийгексаметилдисилазид, натрийгексаметилдисилазид или любой ряд других ненуклеофильных оснований, депротонирующих положение альфа до Ζ-группы, обозначающей замаскированный амидный радикал. Либо Ζ обозначает карбоновую кислоту, эфир карбоновой кислоты, оксазолин или оксазолидинон. Образующийся после депротонирования анион связывается с азотнесущим гетероциклическим соединением, содержащим две уходящие группы или латентные уходящие группы, в присутствии палладиевого катализатора. Одним из примеров такого соединения может быть 2,6-дихлорпиридин.
На второй стадии вводится кольцевой фрагмент 02. Это может быть выполнено путём применения многих хорошо известных в соответствующей области реакций, приводящих к получению диарильных соединений. Одним из примеров может служить реакция ариллитиевого соединения с промежуточным пиридиновым соединением, полученным на стадии 1. Либо арилметаллическое соединение, такое как арилстаннан или арилбороновая кислота, может реагировать с галоидарильной частью промежу точного пиридинового соединения в присутствии катализатора Ρά8.
На стадии 3 снимают защиту с Ζ-группы и/или функционализируют до образования амидного соединения. Когда Ζ обозначает карбоновую кислоту, эфир карбоновой кислоты, оксазолин или оксазолидинон, различные варианты способов снятия защиты и функционализации, хорошо известные из соответствующей области, используют для получения амида. Наконец, на стадии 4 амидное соединение цикли зуется до конечного продукта с применением реагентов, таких как ДМФ-ацеталь или подобные реагенты, либо в чистом виде, либо в органическом растворителе.
Схема 4
Схема 4 является аналогичной, за тем исключением, что сначала, перед реакцией с Ц£исходным соединением, получают диарильное промежуточное соединение.
Согласно другому варианту воплощения, изобретение описывает ингибиторы р38, аналогичные ингибиторам формул 1а и 1Ь, но в которых цикл, несущий Οι заместитель, является восстановленным. Эти ингибиторы имеют формулу:
или
где А, О2, К, К', X, Υ и η имеют значения, указанные для соединений формул 1а и 1Ь. Эти определения содержат все варианты воплощения каждой из этих переменных (т.е., основной, предпочтительный, более желательный и наиболее предпочтительный). К5 выбирают из водорода, -СК'2ОН, -С(О)К4, -С(О)ОК4, -СК'2ОРО3Н2, -РО3Н2 и солей -РО3Н2.
Когда К5 не является водородом, предполагается, что образующиеся соединения служат пролекарственными формами, которые должны расщепляться ίη νίνο с образованием соединения, где К5 является водородом.
Согласно другим предпочтительным вариантам воплощения, в соединениях формулы 1с, А предпочтительно означает азот, η предпочтительно означает 1, а Х предпочтительно является серой. В соединениях формул 1с или Ιά, Οι и О2 предпочтительно являются такими же радикалами, как указано выше для этих переменных в соединениях формул 1а и 1Ь.
Соединения формул 1с или Ιά могут быть получены непосредственно из соединений формул 1а и 1Ь, которые содержат водород, С1-С3алкил или С1-С3-алкенил или алкинил в К1положении (т.е., когда К1=К'). Схемы синтеза этих соединений приведены на схемах 5 и 6, ниже.
В этих схемах соединения формул 1а и 1Ь восстанавливают по реакции с избытком диизобутилалюминий гидрида или с эквивалентным количеством реагента до получения соединений с восстановленным циклом формул 1с или Ιά, соответственно.
Присоединение К5-компонента, не являющегося водородом, к азоту цикла достигается реакцией соединений формул 1с или Ιά, указанных выше, с соответствующим реагентом (реагентами). Примеры таких модификаций приведены ниже в экспериментальном разделе.
Некоторые конкретные ингибиторы согласно изобретению формулы 1с приведены ниже в таблице.
Таблица 2. Соединения формулы 1с
структура # Д структура
101 С1— о^о £ 110 0 - X
102 хсир сн3 111 0 I ΐι Хи
103 СГЧ'*р''‘С1 ф Р 112 топ 0 сн.
104 сг'''у?>с 113 сХ^С1 сн3
Согласно ещё одному варианту воплощения, изобретение описывает ингибиторы р38 формул:
где А, Оз, К, X, Υ и η имеют значения, указанные выше для соединений формул 1а и 1Ъ. Эти определения содержат все варианты воплощения каждой из этих переменных (т.е., основной, предпочтительный, более желательный и наиболее предпочтительный). Более предпочтительно, чтобы 0_2 в соединениях формулы 1е означал незамещённый фенил.
С)3 означает систему 5-6-членных ароматических карбоциклических или гетероциклических колец, или систему 8-10-членных бициклических колец, содержащую ароматические карбоциклические кольца, ароматические гетероциклические кольца или сочетание ароматического карбоциклического кольца и ароматического гетероциклического кольца. Циклы, содержащие С)3, замещены 1-4 заместителями, каждый из которых независимо выбирают из группы, включающей в себя галоген, С1-С3алкил, возможно, замещённый ΝΒ'2, ОК', СО2К' или СОПВ2; О-(С1-С3)-алкил, возможно, замещённый ΝΒ'2, Ок', СО2К' или СОЖк; ΝΒ2; ОСБз; СБз; ΝΟ2; СО2В; СОЫВ; 8В; 8(Ο2)Ν(Β')2; 8СБз; СК; К(В')С(О)В4; К(В')С(О) ОК4;
К(В')С(О)с(о)В4; Ν(Β')8(Ο2)Β4; Ν(Βχ4; Ν(Κ4)2; ОК4; ОС(О)К4; ОР(О)зН2 или К=С-К (К')2.
Согласно одному из предпочтительных вариантов воплощения, С)3 является замещённым 2-4 заместителями, где, по меньшей мере, один из указанных заместителей присутствует в ортоположении относительно точки присоединения С)3 к остатку ингибитора. Когда О3 означает бициклическое кольцо, 2 заместителя в ортоположении, присутствующие на кольце, являются расположенными близко (т.е., непосредственно присоединёнными) к остатку молекулы ингибитора. Другие два необязательных заместителя могут присутствовать на одном из циклов. Более предпочтительно, когда оба таких орто-положения заняты одним из указанных заместителей.
Согласно другому предпочтительному варианту воплощения, С)3 означает моноциклическое карбоциклическое кольцо, где каждый орто-заместитель независимо выбирают из галогена или метила. Согласно иному предпочтительному варианту воплощения, С)3 содержит 1 или 2 дополнительных заместителя, которые независимо выбирают из ΝΚ'2, ОК', СО2К' , СК, К(К')С(О)К4; Ν(Β')ΟΌ)ΟΒ4; Ν(Β)^Ο)^Ο)Κ4; Ν(Κ')8(Ο2)Κ4; Ν(Κ')Κ4; Ν(Κ4)2; ОК4; Ос(о)к4; ОР(О)3Н2 или Ν=^Ν(Β)2.
Предпочтительно О3 выбирают из любых (Д-фрагментов, присутствующих в соединениях 1е, приведенных ниже в таблице 3, или из любых (Д-фрагментов, присутствующих в соединениях 1д, приведенных в табл. 4.
Соединения формулы 1е будут восприняты специалистами как непосредственные предшественники некоторых формул 1а и 1с ингибиторов р38 согласно изобретению (т.е., тех, где Ω1=Ω3). Специалисты воспримут также соеди нения формулы 1д как предшественники некоторых формул 1Ъ и Ιά ингибиторов р38 согласно изобретению (т.е. тех, где р1=р3). Следовательно, синтез ингибиторов формулы 1е описывается вышеуказанными схемами 1 и 2, где (Д замещён на С)3. Подобным образом, синтез ингибиторов формулы 1д описывается вышеуказанными схемами 3 и 4, где О1 замещён на С)3.
Синтезы ингибиторов формул И’ и ΙΙ1 описаны ниже в схемах 7 и 8.
Ациттиро ва ние
Схема 8
Οί-ΝΗ;
Основание
Схема 7 а,—νη2
Основание
? ?
Вг
Ог-бор^кислота 4
Палладий (0)./1
Схема 8 описывает синтез соединений типа ΙΙ1. К примеру, обработка исходного дибромпроизводного, такого как 2,6-дибромпиридин, амином в присутствии основания, такого как гидрид натрия, даёт 2-амино-6-бром-производное. Обработка этого промежуточного соединения аналогом фенилбороновой кислоты (Сфбороновой кислотой), таким как фенилбороно вая кислота в присутствии палладиевого катализатора, даёт дизамещённое производное, которое может быть затем ацилировано до конечного продукта. Порядок первых двух стадий мож но поменять.
Не вдаваясь в теоретические подробности, заявители считают, что ди-орто-замещение в цикле О3 ингибиторов формулы 1е и 1д и наличие азота, непосредственно связанного с циклом С)| в ингибиторах формулы 1е и 1д, вызывает сплющивание соединения, что позволяет ему эффективно ингибировать р38.
Предпочтительным ингибитором формулы 1е согласно изобретению является ингибитор, в котором А означает углерод, η равен 1, Х означает серу, каждый из Υ означает углерод, каждый из К означает водород, С)3 означает 2,6дихлорфенил и (А означает фенил, указанное соединение упоминается как соединение 201. Предпочтительным ингибитором формулы 1д согласно изобретению является ингибитор, в котором означает 2,6-дихлорфенил, О2 означает фенил, каждый из Υ означает углерод и каждый из Я означает водород. Это соединение упоминается здесь как соединение 202. Другими предпочтительными соединениями формулы 1д согласно изобретению являются соединения, перечисленные ниже в таблице 4.
Предпочтительными соединениями 111 согласно изобретению являются соединения, приведенные ниже в таблице 5. Другими предпочтительными соединениями Ш являются соединения, в которых Οι означает фенил, независимо замещённый в положениях 2 и 6 хлором или фтором; каждый из Υ означает углерод; каждый из Я означает водород и О2 означает 2метилфенил, 4-фторфенил, 2,4-дифторфенил, 2метиленгидрокси-4-фторфенил или 2-метил-4фторфенил.
Некоторые конкретные ингибиторы формул 1е, 1д и 111 приведены ниже в таблицах.
Таблица 3. Ингибиторы формулы 1е.
СО ед. структура соед структура
201 О οι 206 с х [X
5Ό Iх ОН, X
203 МуЧД X1 207 ΝΗ, N. /~\ ст
204 20В С1 N
205 ό ...Α' 209 С| ^Дч г 0
Таблица 4. Ингибиторы формулы 1д
соед. # структура # структура
/с г °ΧΊι
χ Ν' χχ
202/ 301 С1 г* 'Ν 310 С!'' Хч^ у С1 Η,Ν ^Ο
Ι<4^
^,С! Х'' ч, ΟχΧΧ Η г Η
X X у Хч X N ХЭ
302 С1 г' ,ОН N 311 Η,С 1| н хХч С1 Ν ΧΟ
ιΓί
χ
-С1 0 ч. С1ч || ΤΑ
χ ιΐ II ΑΊ
303 С! ..Ν. Ν < СН, 312 4¾. у ч. С1 Ό
ΙίΊ СН,
_^,С| 0 χ °'ΎΊ
304 X С1 X· 9>ο 313 X Е П НзН Χν хХч 01
ιίΊ С!
X
^,οι 0 ί\ С‘\х5?\
X >4'ΝΗ! А-М
305 С1 Ν СН, 314 н,с„ 'δ^ н X οι Η,ΚΓ 4Ο
Ύη
X
структура соед структура
п -С Ο С\Х XX)
306 Р 4Ν 315 НО Ν γ^ γ^ Χχ, С1 Η;Ν^Ο
II ΧΑ о
X
-С1 ο 'ιΓΎΊι
χ 'ΊίΗ, Χ^Ν ΑΑΊ
307 С! Чх \=Ζ / ο 316 °<ч 9ч/ хХч οι ,Ν ^Ο
ΠαΎΊ Ч С1ч, II χΊ
308 9 Ν'” 'Ύ'' '“У' Η,Ν^Ο 317 СТ 'Ν η2ν*^ 4 οι 0
о-^с
ХП ч. СК Ά
309 V 318 6χΧ
Р η,ν χο 3 0
ρΧΧΊι \ р' п ΎΑι
319 Е>ч_/ р-'5] р [X4 Г XI η2ν ^·ο 328 0 у II η2ν -X -4 01 Ό
XX С|хх> Х1 ΧΊ
320 о ΑΊΧΧ 329 ιΓ к 1 χχ
Υ η.ν χ'ο ' р·^ η2ν Χο с
С!
Таблица 5. Ингибиторы соединений П1.
соед. * структура соед. # структура
х 0 ' Ъ
9 ΧΝ'ζ^ΚΝΗί φ 1 X ^·Ν/^ΝΗ2
С!
401 407
Ап.
и
.С1
Iх” 0 < о
9 Г А ή^νη2 9 ^ν^χνη2
402 С1 Ιΐ^Ν СНЭ 408 С1
Ап
и гХС1
со ед структура # д структура
403 ох 409 αι с|
ςχ. ох
405 ςχ 411 С|
406 ОХ С' 412 ох с| Λνη> X3
Активность ингибиторов р38 согласно изобретению может быть исследована ίη νίίτο, ίη νίνο или на линии клеток. Испытания ίη νίίτο включают в себя исследования по определению ингибирования либо киназной активности, либо АТФазной активности активированного р38. Альтернативные испытания ίη νίίτο количественно оценивают способность ингибитора связываться с р38, которая может быть измерена либо путём введения в ингибитор радиоактивной метки перед образованием связи, выделения комплекса ингибитор/р38 и определения количества связанной радиоактивной метки, либо путём проведения конкурентного эксперимента, где новые ингибиторы инкубируют с р38, связанным с известными радиоактивными лигандами.
Исследованиями на культуре клеток ингибирующего действия соединений согласно изобретению можно определить количества ΤΝΕ 1Ь-1, 1Ь-б или 1Ь-8, продуцированных в цельной крови, или её клеточных фракциях в клетках, обработанных ингибитором, в сравнении с клетками, обработанными отрицательными контролями. Доля этих цитокинов может быть определена с применением промышленно выпускаемых ЕЬ18Ак.
Испытания ίη νίνο, пригодные для определения ингибиторной активности р38-ингибиторов согласно изобретению, состоят в подавлении отёка задних лап крыс при индуцированном МусοЬасίе^шт ЬШупсит адъювантном артрите. Они описаны в ЕС. Βοοίιιη οί а1., 1. Меб. СИет., 39, рр. 3929-37 (1996), упоминаемом здесь в качестве ссылки. Ингибиторы р38 согласно изобретению могут также быть испытаны на моделях животных с артритом, резорбцией костей, эндотоксиновым бактериально-токсическим шоком и иммунной функцией, как описано в А.М. Вабдег еί а1., Е Ρίκπηκκοΐ. ЕхрептеоЦб Тйегареибск, 279, рр. 1453-61 (1996), упоминаемом здесь в качестве ссылки.
Ингибиторы р38 или их фармацевтические соли могут быть сформулированы в фармацевтические композиции для введения животным или человеку. Эти фармацевтические составы, включающие в себя количество р38-ингибитора, эффективное для лечения или профилактики р38-опосредованного состояния, и фармацевтически приемлемый носитель, являются другим вариантом воплощения настоящего изобретения.
Термин р38-опосредованное состояние, здесь используемый, означает любую болезнь или вредно воздействующее обстоятельство, при которых, как известно, играет роль р38. Он включает в себя состояния, которые известны как вызываемые избыточным продуцированием 1Ь-1, ΤΝΡ, 1Ь-б и 1Ь-8. Такие состояния включают в себя все без ограничения воспалительные болезни, аутоиммунные нарушения, деструктивные процессы кости, пролиферативные нарушения, инфекционные болезни, нейродегенеративные расстройства, реперфузию/ишемию при мозговом ударе, сердечные приступы, ангиогенные нарушения, гипоксию органов, васкулярную (сосудистую) гиперплазию, сердечную гипертрофию, тромбин-индуцируемую агрегацию тромбоцитов и состояния, связанные с простагландин-эндопероксидаза-синтазой-2.
Воспалительные заболевания, которые могут быть излечены или предупреждены, включают в себя, но не в порядке ограничения, острый панкреатит, хронический панкреатит, астму, аллергию и респираторный дистресссиндром у взрослых.
Аутоиммунные нарушения, которые могут быть излечены или предупреждены, включают в себя, но не в порядке ограничения, гломерулонефрит, ревматоидный артрит, системную красную волчанку, склеродермию, хронический тиреоидит, болезнь Грейвса (диффузный токсический зоб), аутоиммунный гастрит, диабет, аутоиммунную гемолитическую анемию, аутоиммунную нейтропению, тромбоцитопению, атопический дерматит, хронический активный гепатит, туакШеша дгаущ, рассеянный склероз, воспалительное заболевание кишечника, неспецифический язвенный колит, болезнь Крона (гранулематозную болезнь), псориаз или болезнь трансплантат против хозяина.
Деструктивные процессы кости, которые могут быть излечены или предупреждены, включают в себя, но не в порядке ограничения, остеопороз, остеоартрит и нарушения кости, связанные с множественной миеломой.
Пролиферативные нарушения, которые могут быть излечены или предупреждены, включают в себя, но не в порядке ограничения, острый миелогенный лейкоз, хронический миелогенный лейкоз, метастатическую меланому, саркому Капоши и множественную миелому.
Ангиогенные нарушения, которые могут быть излечены или предупреждены, включают в себя солидные опухоли, глазную неоваскуляризацию, детские гемангиомы.
Инфекционные болезни, которые могут быть излечены или предупреждены, включают в себя, но не в порядке ограничения, сепсис, септический шок и шигеллёз.
Вирусные болезни, которые могут быть излечены или предупреждены, включают в себя, но не в порядке ограничения, острые инфекционные гепатиты (включая гепатит А, гепатит В и гепатит С), ВИЧ-инфекцию и СМУ-ретинит.
Нейродегенеративные расстройства, которые могут быть излечены или предупреждены с помощью соединений согласно изобретению, включают в себя, но не в порядке ограничения, болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, церебральную ишемию или нейродегенеративные расстройства, вызванные травматическим повреждением.
р38-опосредованные состояния, включают в себя также, реперфузию/ишемию при мозговом ударе, сердечные приступы, миокардиальную ишемию, гипоксию органов, васкулярную гиперплазию, сердечную гипертрофию и тромбин-индуцируемую агрегацию тромбоцитов.
Вдобавок ингибиторы р38 согласно изобретению способны также к ингибированию экспрессии индуцируемых провоспалительных белков, таких как простагландин-эндопероксидсинтаза-2 (РСН8-2), упоминаемая также как циклооксигеназа-2 (СОХ-2). Поэтому другими р38-опосредованными состояниями являются отёк, анальгезия, лихорадочное состояние и боль, такая как нервно-мышечная боль, головная боль, боль при раке, зубная боль и боль при артрите.
Болезни, которые могут быть излечены или предупреждены с помощью ингибиторов р38 согласно изобретению, могут также быть обычно сгруппированы по цитокину (1Ь-1, ΤΝΡ, 1Ь-6, 1Ь-8), который, как предполагается, отвечает за заболевание.
Так, 1Ь-1-опосредованная болезнь или состояние включает в себя ревматоидный артрит, остеоартрит, мозговой удар, эндотоксемию (наличие в крови эндотоксинов) и/или синдром токсического шока, вызванную эндотоксином воспалительную реакцию, воспалительное заболевание кишечника, туберкулез, атеросклероз, дегенерацию мышц, кахексию, псориатический артрит, синдром Рейтера, подагру, травматический артрит, артрит при коревой краснухе, острый синовит, диабет, болезнь β-клеток поджелудочной железы и болезнь Альцгеймера.
ΤΝΡ-опосредованная болезнь или состояние включает в себя ревматоидный артрит, рев матоидный спондилит, остеоартрит, подагрический артрит и другие артритные состояния, сепсис, септический шок, эндотоксиновый бактериально-токсический шок, грамотрицательный сепсис, синдром токсического шока, респираторный дистресс-синдром у взрослых, церебральную малярию, хроническое воспаление лёгких, силикоз, лёгочный саркоидоз, резорбцию костей, реперфузионное нарушение, реакцию трансплантат против хозяина, отторжения аллотрансплантата, обусловленные инфекцией жар и миалгию, вторичную от инфекции кахексию, СПИД, АВС (СПИД-связанный комплекс) или злокачественность, келоидное образование, образование рубцовой ткани, болезнь Крона, неспецифический язвенный колит или лихорадка. ΤΝΡ-опосредованные болезни также включают в себя вирусные инфекции, такие как ВИЧ, СМУ (цитомегаловирус), грипп и герпес; и ветеринарные вирусные инфекции, такие как лентивирусные инфекции, включающие в себя, но не в порядке ограничения, вирус конской инфекционной анемии, вирус козьего артрита, У1киа-вирус и шаебБвирус или ретровирусные инфекции, включающие в себя кошачий вирус иммунодефицита, бычий вирус иммунодефицита или собачий вирус иммунодефицита.
1Ь-8-опосредованная болезнь или состояние включает в себя болезни, характеризуемые массовой инфильтрацией нейтрофильных гранулоцитов, такие как псориаз, воспалительное заболевание кишечника, астму, сердечное или почечное реперфузионное нарушение, респираторный дистресс-синдром у взрослых, тромбоз и гломерулонефрит.
Вдобавок соединения согласно изобретению могут быть использованы местно для лечения или профилактики состояний, вызванных или обострённых 1Ь-1 или ΤΝΡ (фактор некроза опухоли). Такие состояния включают в себя воспаление суставов, экзему, псориаз, воспалительные состояния кожи, такие как солнечную эритему, воспалительные состояния глаз, такие как конъюнктивит, лихорадку, боль и другие состояния, связанные с воспалением.
Кроме соединений согласно изобретению в композициях для лечения или профилактики вышеуказанных болезней могут также быть использованы фармацевтически приемлемые соли соединений согласно изобретению.
Фармацевтически приемлемые соли соединений согласно изобретению включают в себя соли, полученные из фармацевтически приемлемых неорганических или органических кислот и оснований. Примеры подходящих кислотных солей включают в себя ацетат, адипинат, альгинат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, цитрат, камфорат, камфорсульфонат, циклопентанпропионат, диглюконат, додецилсульфат, этансульфонат, формиат, фумарат, глюкогептаноат, глицерофосфат, гликолят, полусульфат, гептаноат, гексаноат, гидрохлорид, гидробромид, гидроиодид, 2гидроксиэтансульфонат, лактат, малеат, малонат, метансульфонат, 2-нафталинсульфонат, никотинат, нитрат, оксалат, пальмоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, фосфат, пикрат, пивалат, пропионат, салицилат, сукцинат, сульфат, тартрат, тиоцианат, тозилат и ундеканоат. Другие кислоты, такие как щавелевая кислота, хотя сами по себе не являются фармацевтически приемлемыми, могут быть использованы в получении солей, пригодных в качестве промежуточных соединений в синтезе соединений согласно изобретению и их фармацевтически приемлемых кислотных аддитивных солей. Соли, полученные из подходящих оснований, включают в себя соли щелочного металла (к примеру, натрия и калия), щелочно-земельного металла (к примеру, магния), аммония и N-(0-4 алкил)4+. Изобретение также предусматривает кватернизацию любой из основных азотсодержащих групп указанных здесь соединений. Путём такой кватернизации могут быть получены водо- или маслорастворимые, или диспергируемые продукты.
Фармацевтически приемлемые носители, которые могут быть использованы в этих фармацевтических композициях, включают в себя, но не в порядке ограничения, иониты (ионообменники), окись алюминия, стеарат алюминия, лецитин, сывороточный белок, такой как сывороточный альбумин человека, буферные вещества, такие как фосфаты, глицин, сорбиновую кислоту, сорбат калия, смеси неполных глицеридов насыщенных растительных жирных кислот, воду, соли или электролиты, такие как протамин сульфат, вторичный кислый фосфорнокислый натрий, кислый (орто)фосфат калия, хлористый натрий, соли цинка, коллоидная двуокись кремния, трисиликат магния, поливинилпирролидон, вещества на основании целлюлозы, полиэтиленгликоль, карбоксиметилцеллюлоза, полиакрилаты, воски, полиэтиленполиоксипропилен-блоксополимеры, полиэтиленгликоль и ланолин.
Композиции согласно изобретению могут быть введены перорально, парентерально, в виде распыляемого раствора для ингаляции, местно, ректально, через нос, трансбуккально, вагинально или через имплантированный резервуар. Термин “парентерально” здесь включает в себя подкожный, внутривенный, внутримышечный, интраартикулярный, внутрисуставной, интрастернальный, подоболочечный, внутрипечёночный, интралезиональный или внутричерепной инъекционный или инфузионный способы введения. Предпочтительно композиции вводят перорально, внутрибрюшинно или внутривенно.
Стерильные инъецируемые формы композиций согласно изобретению могут быть водной или маслянистой суспензией. Эти суспензии могут быть получены известными в соответствующей области способами с применением под ходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов. Стерильный инъецируемый препарат может также быть стерильным инъецируемым раствором или суспензией в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, к примеру, в виде раствора в 1,3-бутандиоле. В число приемлемых наполнителей и растворителей входят вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлористого натрия. Кроме того, в качестве растворителя или суспензионной среды обычно применяются стерильные, нелетучие масла. Для этой цели может быть использовано любое лёгкое нелетучее масло, в том числе моно- или диглицериды. Жирные кислоты, такие как олеиновая кислота и её глицеридные производные, применимы, особенно в полиоксиэтилированном виде, при получении растворов для инъекций, поскольку являются природными фармацевтически приемлемыми маслами, такими как оливковое масло или касторовое масло. Эти масляные растворы или суспензии могут также содержать длинноцепочечный спиртовый разбавитель или диспергатор, такой как карбоксиметилцеллюлоза или похожие диспергирующие средства, обычно используемые при составлении фармацевтически приемлемых лекарственных форм, включая эмульсии и суспензии. Другие обычно используемые сурфактанты, такие как твины, сланы и прочие эмульгирующие средства или усилители биологической доступности, обычно используемые при получении фармацевтически приемлемых твёрдых, жидких или иных лекарственных форм, также могут быть использованы в целях получения композиции.
Фармацевтические композиции согласно изобретению могут вводиться перорально в любой перорально приемлемой лекарственной форме, включая в себя, но не в порядке ограничения, капсулы, таблетки, водные суспензии или растворы. В случае таблеток для перорального применения обычно используемые носители включают в себя лактозу и кукурузный крахмал. Как правило, также добавляют смазывающие вещества, такие как стеарат магния. Для перорального введения в форме капсул пригодные разбавители включают в себя лактозу и сухой кукурузный крахмал. Когда водные суспензии требуются для перорального введения, активный ингредиент смешивают с эмульгирующими и суспендирующими веществами. При желании могут также быть добавлены некоторые подсластители, ароматизаторы и красители.
Или же фармацевтические композиции согласно изобретению могут быть введены в форме суппозиториев для ректального введения. Они могут быть получены смешиванием агента с нераздражающим эксципиентом, который является твердым при комнатной температуре, но жидким при ректальной температуре и поэтому плавится в прямой кишке, высвобождая лекарственное средство. Такие вещества включают в себя масло какао, пчелиный воск и полиэтиленгликоли.
Фармацевтические композиции согласно изобретению могут также вводиться местно, особенно когда объект лечения включает в себя участки или органы, легко доступные для местного прикладывания, включая болезни глаз, кожи или нижний кишечный тракт. Легко получить подходящие композиции для местного применения для каждого из этих участков или органов.
Местное применение в случае нижнего кишечного тракта может осуществляться путём разработки ректального суппозитория (смотри выше) или пригодного для клизмы состава. Могут также использоваться местные трансдермальные пластыри.
Для местного применения фармацевтические композиции могут быть сформулированы в виде соответствующей мази, содержащей активный компонент, суспендированный или растворённый в одном или более носителях. Носители для местного применения соединений согласно изобретению включают в себя, но не в порядке ограничения, минеральное масло, вазелиновое масло, белый вазелин, пропиленгликоль, производное полиоксиэтилена и полиоксипропилена, эмульгирующий воск и воду. Либо фармацевтические композиции могут быть сформулированы в подходящий лосьон или крем, содержащий активные компоненты, суспендированные или растворённые в одном или более фармацевтически приемлемых носителях. Подходящие носители включают в себя, но не в порядке ограничения, минеральное масло, сорбитанмоностеарат, полисорбат 60, цетиловые сложные эфиры воска, цетеариловый спирт, 2октилдодеканол, бензиловый спирт и воду.
Для офтальмологического применения фармацевтические композиции могут быть сформулированы в виде микронизированных суспензий в изотоническом, рН-отрегулированном стерильном растворе соли или, предпочтительно, в виде растворов в изотоническом, рН-отрегулированном стерильном растворе соли, содержащих или не содержащих консервант, такой как бензилалкониумхлорид. Либо для офтальмологического применения фармацевтические композиции могут быть сформулированы в виде мази, такой как петролатум.
Фармацевтические композиции согласно изобретению могут также быть введены с помощью назального аэрозоля или ингаляции. Такие составы получают способами, хорошо известными в области технологий приготовления лекарственных средств, и выпускают в форме растворов в физиологическом растворе, используя бензиловый спирт или другие подходящие консерванты, промоторы абсорбции для повышения биологической доступности, фторугле роды и/или другие общепринятые солюбилизирующие или диспергирующие средства.
Количество ингибитора р38, которое может быть смешано с веществами-носителями для получения разовой дозы лекарственной формы будет варьироваться в зависимости от обрабатываемого организма-хозяина, конкретного способа введения.
Предпочтительно композиции должны быть сформулированы так, чтобы пациенту, принимающему эти составы, могла быть введена доза ингибитора в пределах 0,01-100 мг/кг веса тела/день.
Следует также понимать, что специфическая дозировка и лечебная схема для каждого конкретного пациента будет зависеть от различных факторов, включающих в себя активность используемого конкретного соединения, возраст, вес тела, общее состояние здоровья, пол, рацион, время введения, скорость выведения из организма, сочетание лекарственных средств и тяжести конкретного заболевания, требующего лечения. Количество ингибитора также будет зависеть от конкретного соединения в композиции.
Согласно другому варианту воплощения, изобретение даёт способ лечения или профилактики р38-опосредованного состояния, включающий в себя стадию введения пациенту одного из вышеуказанных фармацевтических составов. Термин пациент, как он здесь использован, подразумевает животное, преимущественно человека.
Предпочтительно этот способ используют, чтобы вылечить или предупредить состояние, отобранное из группы, включающей в себя воспалительные болезни, аутоиммунные нарушения, деструктивные процессы кости, пролиферативные нарушения, инфекционные болезни, дегенеративные расстройства, аллергию, реперфузию/ишемию при мозговом ударе, сердечные приступы, ангиогенные нарушения, гипоксию органов, васкулярную гиперплазию, сердечную гипертрофию и тромбин-индуцируемую агрегацию тромбоцитов.
Согласно другому варианту воплощения, ингибиторы согласно изобретению используют, чтобы вылечить или предупредить 1Ь-1, 1Ь-6, 1Ь-8 или ΤΝΕ-опосредованные болезнь или состояние. Такие состояния описаны выше.
В зависимости от конкретного р38опосредованного состояния, которое лечат или предупреждают, дополнительные лекарственные средства, которые обычно вводят для лечения или профилактики этого состояния, могут быть введены вместе с ингибиторами согласно изобретению. К примеру, при лечении пролиферативных нарушений химиотерапевтические средства или другие антипролиферативные средства можно сочетать с р38-ингибиторами согласно изобретению.
Эти дополнительные средства можно вводить отдельно от содержащего р3 8-ингибитор состава, в рамках схемы приёма многих лекарственных средств. Или же эти средства могут входить в разовую дозу лекарственной формы, смешанные вместе с р38-ингибитором в один состав.
Последующие примеры приведены с целью более полного понимания описанного здесь изобретения. Следует понимать, что эти примеры даются только в иллюстративных целях и не предусматриваются как ограничивающие каким-либо образом данное изобретение.
Пример 1. Синтез соединения 1, ингибитора р38.
В последующих 4 примерах приведены примеры синтеза некоторых соединений формулы Га.
А.
К суспензии амида натрия, 90% (1,17 г, 30 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (20 мл), добавляли раствор бензилцианида (2,92 г, 25,0 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (10 мл) при комнатной температуре. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли раствор 3,6дихлорпиридазина (3,70 г, 25,0 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (10 мл). После перемешивания в течение 30 мин реакционную смесь разбавляли насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Затем реакционную смесь экстрагировали этилацетатом. Слои разделяли, и органический слой промывали водой, раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме.
Остаток хроматографически очищали на силикагеле (элюент: 30% этилацетат в нгексане), получая 3,71 г (16,20 ммоль, ~ 54%) продукта в виде белого твёрдого вещества.
К суспензии гидрида натрия, 95% (0,14 г, 6,0 ммоль) в сухом тетрагидрофуране (10 мл) добавляли тиофенол (0,66 г, 6,0 мл) при комнатной температуре. Затем реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин. К реакционной смеси добавляли раствор продукта из стадии А., см. выше (1,31 г, 5,72 ммоль) в абсолютном этаноле (20 мл). Затем реакционную смесь доводили до температуры кипения с обратным холо дильником и перемешивали в течение одного часа. Охлаждённую реакционную смесь концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли 1н. раствором гидроокиси натрия (10 мл), затем экстрагировали метиленхлоридом. Органическую фазу промывали водой, раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме.
Остаток хроматографически очищали на силикагеле (элюент: 20% этилацетат в нгексане), получая 0,66 г (2,19 мысль, ~ 40%) продукта в виде белого твёрдого вещества.
С.
Смесь продукта стадии В. (0,17 г, 0,69 ммоль) и концентрированной серной кислоты (5 мл) нагревали до 100°С в течение одного часа. Раствор охлаждали, и рН доводили до 8,0 с помощью насыщенного раствора бикарбоната натрия. Реакционную смесь экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали водой, раствором соли, сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме, получая 0,22 г (0,69 ммоль, ~ 100%) соединения пре-1 в виде оранжевого масла.
!Н-ЯМР (500 МГц, ί.Ό3ΟΌ) 6 7,7 (д), 7,5 (д), 7,4 (м), 7,3-7,2 (м).
О.
Раствор пре-1 из стадии С (0,22 г, 0,69 ммоль) и диметилацеталя Ν,Ν-диметилформамида (0,18 г, 1,5 ммоль) в толуоле (5 мл) нагревали при 100°С в течение одного часа. После охлаждения полученный твердый продукт отфильтровывали и растворяли в тёплом этилацетате. Продукт осаждали, добавляя по каплям диэтиловый эфир. Затем продукт отфильтровывали и промывали диэтиловым эфиром, получая 0,038 г соединения 1 (приведенного в таблице 1) в виде жёлтого твёрдого вещества.
'Н-ЯМР (500МГц, СПСй) 6 8,63 (с), 7,637,21 (м), 6,44 (д).
Пример 2. Синтез соединения 2, ингибитора р38.
Первый промежуточный продукт, представленный выше, получали способом, аналогичным описанному в примере 1А, используя 4фторфенилацетонитрил, что даёт 1,4 г (5,7
Вышеуказанный промежуточный продукт получали способом, аналогичным описанному в примере 1В. Это даёт 0,49 г (1,5 ммоль, ~ 56%) продукта.
Вышеуказанный промежуточный продукт получали способом, аналогичным описанному в примере 1С. Это даёт 0,10 г (0,29 ммоль, ~ 45%) соединения пре-2.
'Н-ЯМР (500 МГц, СЭС13) Д 7,65-7,48 (м), 7,47-7,30 (м), 7,29-7,11 (м), 7,06-6,91 (м), 5,85 (с, ушир.).
Соединение 2 (приведенное в таблице 1) получали из пре-2 способом, аналогичным описанному в примере ГО. Это даёт 0,066 г продукта.
’Н-ЯМР (500 МГц, СЭС13) Д 8,60 (с), 7,627,03 (м), 6,44 (д).
Пример 3. Синтез соединения 6, ингибитора р38.
Первый промежуточный продукт в синтезе соединения 6 получали способом, аналогичным описанному в примере 1А, используя 2,6дихлорфенилацетонитрил, что даёт 2,49 г (8,38, 28%) продукта.
Следующую стадию в синтезе соединения 6 выполняли способом, аналогичным описанному в примере 1В. Это даёт 2,89 г (7,6 ммоль, 91%) продукта.
Конечный промежуточный продукт, пре-6, получали способом, аналогичным описанному в примере 1С. Это даёт 0,89 г (2,3 ммоль, 85%) продукта.
1Н-ЯМР (500 МГц, СЭ3ОЭ) Д 7,5-7,4 (дд), 7,4 (м), 7,3 (д), 7,2 (м), 7,05 (д).
Конечную стадию синтеза соединения 6 (приведенного в таблице 1) проводили, как описано в примере 1Ό. Это даёт 0,06 г продукта.
'Н-ЯМР (500 МГц, СЭС13) Д 8,69 (с), 7,657,59 (д), 7,58-7,36 (м), 7,32-7,22 (м), 6,79 (д), 6,53 (д).
Пример 4. Получение соединения 5, ингибитора р38.
Первый промежуточный продукт в синтезе соединения 5 получали способом, аналогичным описанному в примере 1А, используя 2, 4дихлорфенилацетонитрил, что даёт 3,67 г (12,36 ммоль, 49%) продукта.
Второй промежуточный продукт получали способом, аналогичным описанному в примере 1В. Это даёт 3,82 г (9,92 ммоль, 92%) продукта.
Конечный промежуточный продукт, пре-5, получали способом, аналогичным описанному в примере 1С. Это даёт 0,10 г (0,24 ммоль, 92%) продукта.
'Н-ЯМР (500 МГц, СЭ3ОЭ) Д 7,9 (д), 7,7 (д), 7,6-7,5 (дд), 7,4-7,3 (м), 2,4 (с).
Конечную стадию синтеза соединения 5 (приведенного в таблице 1) проводили способом, аналогичным описанному в примере ГО. Это даёт 0,06 г продукта.
'Н-ЯМР (500 МГц, СЭС1) Д 8,64 (с), 7,517,42 (м), 7,32-7,21 (м), 6,85 (д), 6,51 (д), 2,42 (с).
Другие соединения формулы 1а согласно изобретению могут быть синтезированы аналогичным способом с применением соответствующих исходных материалов.
Пример 5. Получение соединения формулы 1Ь, ингибитора А р38.
Пример синтеза ингибитора р38 формулы 1Ь согласно изобретению представлен ниже.
К суспензии амида натрия, 90% (1,1 экв.) в сухом тетрагидрофуране, добавляли раствор 2,6-дихлорбензилцианида (1,0 экв.) в сухом тетрагидрофуране при комнатной температуре.
Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли раствор 2,6-дихлорпиридина (1 экв.) в сухом тетрагидрофуране. Реакцию контролировали ТСХ, и после её завершения реакционную смесь разбавляли насыщенным водным раствором бикарбоната натрия. Затем реакци онную смесь экстрагировали этилацетатом. Слои разделяли и органический слой промывали водой, раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток хроматографически очищали на силикагеле, получая чистый продукт.
К раствору 4-фтор-бромбензола (1 экв.) в сухом тетрагидрофуране при -78°С добавляли трет-бутиллитий (2 экв., раствор в гексане). Ре акционную смесь перемешивали в течение 30 мин. К реакционной смеси добавляли раствор продукта стадии А (1 экв.) в сухом ТГФ. Затем проводили контроль реакционной смеси и мед ленно приводили реакционную смесь к комнатной температуре. Реакционную смесь разбавляли водой для остановки реакции и затем экстрагировали метиленхлоридом. Органическую фазу промывали водой, раствором соли, сушили над сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Остаток хроматографически очищали на силикагеле, получая продукт.
Смесь продукта стадии В и концентрированной серной кислоты нагревали до 100°С в течение одного часа. Раствор охлаждали и рН доводили до 8,0 с помощью насыщенного раствора бикарбоната натрия. Реакционную смесь экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали водой, раствором соли, сушили над сульфатом магния и концентриро вали в вакууме, получая продукт. Конечный продукт флэш-хроматографически очищали на силикагеле.
Ό.
Соединение, ингибитор р38
Раствор продукта стадии С (1 экв.) и диметилацеталя Ν,Ν-диметилформамида (2 экв.) в толуоле нагревали при 1 00°С в течение одного часа. После охлаждения реакционную смесь фильтровали и растворяли в тёплом этилацетате. Продукт осаждали, добавляя по каплям диэтиловый эфир. Затем продукт отфильтровывали и промывали диэтиловым эфиром, получая ингибитор р38 формулы 1Ь. Конечный продукт дополнительно очищали с помощью гельхроматографии на силикагеле.
Другие соединения формулы 1Ь согласно изобретению синтезировали аналогичным способом, используя соответствующие исходные материалы.
Пример 6. Синтез соединения 103, ингибитора р38
Соединение 12-' Соединение 103 В этом примере представлен типичный синтез соединения формулы 1с.
A. Соединение 12, ингибитор р38, получали в основном, как описано в примере 4, за тем исключением, что на стадии В применяли 4фтортиофенил.
B. Соединение 12 растворяли в сухом ТГФ (5 мл) при комнатной температуре. К этому раствору добавляли гидрид диизобутилалюминия (1М раствор в толуоле, 5 мл, 5 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Затем реакционную смесь разбавляли этилацетатом, и реакцию останавливали добавлением сегнетовой соли. Слои разделяли, и органический слой отделяли, промывали водой, раствором соли, сушили над сульфатом магния и фильтровали, получая неочищенное соединение 103. Сырой продукт подвергали хроматографии на силикагеле, элюируя 2% метанолом в метиленхлориде. Таким образом получали чистое соединение 103 (210 мг, 50% выход):
’Н-ЯМР (500 МГц, СИС13) 7,51 (м, 1Н), 7,38 (д, 2Н), 7,20 (т, 2Н), 7,08 (т, 2Н), 6,70 (ушир.с, 1Н), 6,30 (дд, 2Н), 5,20 (с, 2Н).
Пример 7. Синтез соединения 201, ингибитора р38.
Р6(РРп3)4
Исходный нитрил, изображённый выше (5,9 г, 31,8 ммоль), растворяли в ДМФ (20 мл) при комнатной температуре. Затем добавляли гидрид натрия (763 мг, 31,8 ммоль), что приводило к окрашиванию раствора в ярко-жёлтый цвет. Через 15 мин добавляли раствор 2,5дибромпиридина (5,0 г, 21,1 ммоль) в ДМФ (10 мл) с последующим добавлением палладийтетракис(трифенилфосфин)а (3 ммоль). Затем раствор кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом. После этого органический слой отделяли, промывали водой и затем раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и упаривали в вакууме, получая неочищенное масло. Элюирование с флэш-хроматографической колонки с помощью 10% этилацетата в н-гексане даёт продукт (5,8 г, 84%) в виде не совсем белого твёрдого вещества.
В.
Полученный на стадии А бромид (194,8 мг, 0,57 ммоль) растворяли в ксилоле (15 мл). К этому раствору добавляли тиофенилстаннан (200 мкл, 587 ммоль) и палладий-тетракис (трифенилфосфин) (25 мг). Раствор кипятили с обратным холодильником в течение ночи, охлаждали, фильтровали и упаривали в вакууме. Сырой продукт хроматографировали на силикагеле, элюируя метиленхлоридом, получая чистый продукт (152 мг, 72%) в виде жёлтого масла.
соединение 201
Полученный на стадии В нитрил (1,2 г, 3,37 ммоль) растворяли в ледяной уксусной кислоте (30 мл). К этому раствору добавляли воду (120 мкл, 6,67 ммоль) и впоследствии четырёххлористый титан (760 мкл, 6,91 ммоль), что приводило к экзотермической реакции. Затем раствор кипятили с обратным холодильником в течение двух часов, охлаждали и выливали в 1н. НС1. Водный слой экстрагировали метиленхлоридом. Органический слой промывали обратной струёй 1н. \аОН, сушили над сульфатом магния и фильтровали через слой силикагеля. Силикагель сначала промывали метиленхлоридом для удаления не прореагировавших исходных соединений, а затем этилацетатом, получая соединение 201. Этилацетат упаривали, получая чистое соединение 201 (1,0 г, 77%).
Пример 8. Синтез соединения 110, ингиби-
Исходный нитрил (3,76 г, 11,1 ммоль) сначала растворяли в ледяной уксусной кислоте (20 мл). К этому раствору добавляли четыреххлористый титан (22,2 ммоль) и воду (22,2 ммоль) и кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч. Затем реакционную смесь охлаждали и разбавляли водой/этилацетатом. Затем отделяли органический слой, промывали раствором соли и сушили над сульфатом магния. После чего органический слой отфильтровывали и упаривали в вакууме. Полученный сырой продукт хроматографировали на силикагеле, элюируя 5% метанолом в метиленхлориде, получая чистый продукт в виде желтой пены (2,77 г, 70%).
Полученный на стадии А амид (1,54 г, 4,3 ммоль) растворяли в толуоле (20 мл). Затем добавляли диметилацеталь \,\-диметилформамида (1,53 г, 12,9 ммоль), нагревали полученный раствор в течение 10 мин и потом оставляли охлаждаться до комнатной температуры. Затем реакционную смесь упаривали в вакууме, и остаток хроматографировали на силикагеле, элюируя 2-5% метанолом в метиленхлориде. Выделенный продукт затем растворяли в горячем этилацетате. Раствор оставляли охлаждаться, при этом происходила кристаллизация чистого продукта в виде жёлтого твёрдого вещества (600 мг, 40%). Дополнительное количество вещества (~800 мг) выделяли из маточного раствора.
с.
Бромид из стадии В (369 мг, 1 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл). Затем добавляли диизобутилалюмогидрид (1,0М раствор, 4 ммоль), перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 10 мин и потом останавливали реакцию добавлением метанола (1 мл). После чего добавляли насыщенный раствор сегнетовой соли и смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом магния, упаривали и остаток хроматографировали на силикагеле, элюируя 13% метанолом в метиленхлориде, получая яркооранжевый твёрдый продукт (85 мг, 23% выход).
соединение 1Ю
Полученный на стадии С бромид (35,2 мг, 0,1 ммоль) растворяли в ксилоле (12 мл). К этому раствору добавляли тиофенол (0,19 ммоль) и впоследствии метилат трибутилолова (0,19 ммоль). Полученный раствор кипятили с обратным холодильником в течение 10 мин с последующим добавлением палладий-тетракис (трифенилфосфина) (0,020 ммоль). Реакционную смесь нагревали и контролировали расходова ние (исчезновение) исходного бромидного вещества. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и пропускали через слой силикагеля. Силикагель сначала промывали метиленхлоридом для удаления избытка олово-реагента и затем 5% метанолом в этилацетате для извлечения ингибитора р38. Фильтрат концентрировали и затем повторно хроматографировали на силикагеле, используя в качестве элюента 5% метанол в этилацетате и получая при этом чистое соединение 110 (20 мг, 52%).
Пример 9. Синтез соединения 202, ингибитора р38.
Вг Вг
М(Р₽Ь3>4
Исходный нитрил (2,32 г, 12 ммоль) растворяли в ДМФ (10 мл) при комнатной температуре. Затем добавляли гидрид натрия (12 ммоль), что приводило к получению раствора, окрашенного в ярко-жёлтый цвет. Через 15 мин добавляли раствор 2,6-дибромпиридина (2,36 г, 10 ммоль) в ДМФ (5 мл) с последующим добавлением палладий-тетракис(трифенилфосфин)а (1,0 ммоль). Затем раствор кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. Потом реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом. Органический слой отделяли, промывали водой и раствором соли, сушили над сульфатом магния, фильтровали и упаривали в вакууме, получая неочищенное масло. Элюирование с флэш-хроматографической колонки с помощью 10% этилацетата в н-гексане даёт продукт (1,45 г, 42%) в виде белого твёрдого вещества.
в.
Полученное на стадии А бромосоединение (1,77 г, 5,2 ммоль) растворяли в толуоле (20 мл), и образовавшийся раствор дегазировали. В атмосфере азота добавляли раствор фенилборной кислоты (950 мг, 7,8 ммоль) в этаноле (4 мл) и раствор карбоната натрия (1,73 г, 14 ммоль) в воде (4 мл). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение одного часа и затем охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали водой и раствором соли. Затем органический слой сушили над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали на силикагеле, элюируя 30% этилацетатом в гексане, получая продукт в виде белого твердого вещества (1,56 г, 88%).
соединение 202
Нитрил, полученный на стадии В (700 мг, 2,07 ммоль), растворяли в концентрированной серной кислоте (10 мл) и нагревали до 80°С в течение 1 ч. Затем реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и рН доводили до 8,0, используя 6н гидроокись натрия. После чего смесь экстрагировали этилацетатом. Органический слой отделяли, сушили над сульфатом магния и упаривали в вакууме, получая соединение 202 в виде жёлтой пены (618 мг, 84%).
Пример 10. Синтез соединения 410.
А.
В высушенной над пламенем 100 мл круглодонной колбе к 50 мл безводного тетрагидрофурана добавляли 2,28 г (93,8 ммоль) магниевой стружки. Добавляли один кристалл йода, дающий светло-коричневый цвет. К раствору добавляли 1,5 мл из 10,0 мл (79,1 ммоль) образца 2-бром-5-фтортолуола. Раствор кипятили с обратным холодильником. Коричневый цвет блекнул, а кипение продолжалось после удаления внешнего источника нагрева, свидетельствуя об образовании реактива Гриньяра. Как только кипение затихало, добавляли другую 1,0-1,5 мл порцию бромида, вызывающую энергичное кипение. Процедуру повторяли до тех пор, пока был добавлен весь бромид. Коричневатозелёный раствор нагревали снаружи до температуры кипения с обратным холодильником в течение одного часа для уверенности в завершении реакции. Раствор охлаждали в ледяной бане и шприцом добавляли к раствору 9,3 мл (81,9 ммоль) триметилбората в 100 мл тетрагидрофурана при -78°С. После добавления реактива Гриньяра колбу удаляли из охлаждающей бани и раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Серовато-белую суспензию выливали в 300 мл Н2О и летучие продукты упаривали в вакууме. Добавляли НС1 (400 мл 2 н. раствора) и молочно-белую смесь перемешивали в течение одного часа при комнатной температуре. В результате осаждается белый твёрдый продукт. Смесь экстрагировали диэтиловым эфиром, и органический экстракт сушили (Мд§О4) и упаривали в вакууме, получая 11,44 г (94%) бороновой кислоты в виде белого твёрдого вещества.
В 100 мл круглодонной колбе 7,92 г (33,4 ммоль) 2,6-дибромпиридина растворяли в 50 мл безводного толуола, получая прозрачный, бесцветный раствор. Добавляли 4-фтор-2-метилбензолбороновую кислоту (5,09 г, 33,1 ммоль), полученную на стадии А, что приводило к образованию белой суспензии. Добавляли карбонат таллия (17,45 г, 37,2 ммоль) и впоследствии каталитическое количество (150 мг) Рб(РРй3)4. Смесь нагревали до температуры кипения с обратным холодильником в течение ночи, охлаждали и фильтровали через слой силикагеля. Кремнезём промывали СН2С12, и фильтрат упаривали, получая белое твёрдое вещество. Твёрдый продукт растворяли в минимальном количестве 50% СН2С12/гексана и хроматографировали на короткой колонке с силикагелем, используя 30% СН2С12/гексан, и получали 6,55 г (74%) 2-бром-6-(4-фтор-2-метилфенил)пиридина в виде белого твёрдого вещества.
В 50 мл круглодонной колбе 550 мг (2,07 ммоль) 2-бром-6-(4-фтор-2-метилфенил)пиридина, полученного на стадии В, растворяли в 30 мл безводного тетрагидрофурана, получая прозрачный, бесцветный раствор. Добавляли 2,6дифторанилин (2,14 мл, 2,14 ммоль) и впоследствии - 112 мг (2,79 ммоль) 60% суспензии ΝαΗ в минеральном масле. Наблюдается выделение газа наряду с умеренной экзотермической реакцией. Раствор кипятили в течение ночи и затем охлаждали. Реакционную смесь выливали в 10% ΝΗ·|ΟΊ и экстрагировали СН2С12. Органический экстракт сушили (Мд§О4) и упаривали в вакууме, получая коричневое масло, являющееся смесью продукта и исходного вещества. Вещество хроматографировали на короткой колонке с силикагелем, используя 50% СН2С12/гексан, и получали 262 мг (40%) 2-(2,6-дифторфенил)-6-(4фтор-2-метилфенил)пиридина в виде бесцветно-
ммоль) 2-(2,6-дифторфенил)-6-(4-фтор-2-метилфенил)пиридина, полученного на стадии С, растворяли в 30 мл безводного СНС13, получая прозрачный, бесцветный раствор. Добавляли хлорсульфонилизоцианат (1,0 мл, 11,5 ммоль) и светло-жёлтый раствор перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Добавляли воду (~ 30 мл), вызывающую умеренную экзотермическую реакцию и энергичное выделение газа. После перемешивания в течение ночи органический слой отделяли, сушили (Мд8О4) и упаривали в вакууме, получая коричневое масло, являющееся смесью продукта и исходного вещества. Вещество хроматографировали на короткой колонке с силикагелем, используя 10% ЕЮАс/СН2С12. Полученный обратно исходный материал аналогичным образом вновь обрабатывали в условиях реакции и очищали, получая в общей сложности 205 мг (69%) карбамида в виде белого твёрдого вещества.
Пример 11. Синтез соединения 138.
соединение юз соединение |38
Соединение 103 (106 мг, 0,25 ммоль) растворяли в ТГФ (0,5 мл), и к этому раствору добавляли триэтиламин (35 мкл, 0,25 ммоль) и, впоследствии, избыток формальдегида (37% водный раствор, 45 мг). Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение ночи. Затем реакционную смесь упаривали на роторном испарителе при пониженном давлении, и остаток растворяли в метиленхлориде и переносили во флэш-колонку с силикагелем. Колонку элюировали 2% метанолом в метиленхлориде, получая чистый продукт (78 мг, 70% выход).
Пример 12. Синтез соединения 103.
Соединение 138 (1 эквивалент) растворяли в метиленхлориде, и к раствору добавляли триэтиламин (1 эквивалент) и, впоследствии, хлористый дибензилфосфонил (1 эквивалент). Раствор перемешивали при комнатной температуре и контролировали ТСХ расход исходного соединения. Затем слой метиленхлорида разбавляли этилацетатом и промывали 1н. НС1, насыщенным бикарбонатом натрия и насыщенным №С1. Затем органический слой сушили, упаривали на роторном испарителе, и сырой продукт чистили на силикагеле. Потом чистый продукт растворяли в метаноле и снимали защиту с дибензилового эфира с применением 10% палладия на углероде в атмосфере водорода. Когда контроль реакции свидетельствовал о её завершении, катализатор отфильтровывали через целит, и фильтрат упаривали на роторном испарителе, получая фосфатный продукт.
Соединение 103 (210 мг, 1,05 ммоль) растворяли в ТГФ (2 мл) и охлаждали до -50°С в атмосфере азота. К этому раствору добавляли литийгексаметилдисилазан (1,1 ммоль) и впоследствии - хлористый хлорацетил (1,13 ммоль). Реакционную смесь убирали из охлаждающей бани, давая нагреться до комнатной температуры; по прошествии этого времени реакционную смесь разбавляли этилацетатом, и реакцию останавливали добавлением воды. Органический слой промывали раствором соли, сушили и упаривали досуха на роторном испарителе. Сырой продукт флэш-хроматографировали на силикагеле, используя 25% этилацетат в гексане в качестве элюента, получая 172 мг (70%) чистого целевого продукта, который в таком виде использовали в следующих реакциях.
Соединение хлорацетила растворяли в метиленхлориде и обрабатывали избытком диметиламина. Реакцию контролировали ТСХ, и по завершении реакции все летучие продукты удаляли, получая целевой продукт.
Пример 13. Синтез соединений 34 и 117.
Нитрил из примера 5, стадии А, (300 мг, 1,0 ммоль) растворяли в этаноле (10 мл), и к этому раствору добавляли тиокарбамид (80,3 мг, 1,05 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч: к этому времени ТСХ показывает, что все исходное соединение израсходовалось. Реакционную смесь охлаждали, и все летучие вещества удаляли при пониженном давлении, а остаток растворяли в ацетоне (10 мл).
Затем к этому раствору добавляли 2,5дифторнитробензол (110 мкл, 1,01 ммоль) и, впоследствии, карбонат калия (200 мг, 1,45 ммоль) и воду (400 мкл). Реакционную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в течение ночи. Затем реакционную смесь разбавляли метиленхлоридом (25 мл) и фильтровали через слой ваты. Все летучие продукты удаляли при пониженном давлении, и остаток подвергали флэш-хроматографии на силикагеле, элюируя этилацетатом в гексане в градиенте 10-25%, что даёт целевой продукт
Нитрилсодержащий продукт из стадии А (142 мг, 0,33 ммоль) смешивали с концентрированной серной кислотой (2 мл), кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч и затем оставляли охлаждаться до комнатной температуры. После этого смесь разбавляли этилацетатом и осторожно нейтрализовали насыщенным раствором бикарбоната натрия (водным). Слои разделяли, и органический слой промывали водой, раствором соли и сушили над сульфатом магния. Смесь фильтровали и упаривали досуха. Остаток использовали в следующей стадии без дополнительной очистки (127 мг, 85% выход).
Амид, полученный на стадии В (127 мг, 0,28 ммоль), растворяли в ТГФ (3 мл), и к этому раствору добавляли диметилацеталь диметилформамида (110 мкл, 0,83 ммоль). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 5 мин, затем охлаждали до комнатной температуры. Все летучие продукты удаляли в вакууме, и остаток подвергали флэшхроматографии на силикагеле, элюируя 2,5% метанолом в метиленхлориде, что даёт чистое целевое соединение 34 (118 мг, 92%).
Раствор гексагидрата дихлорида никеля (103 мг, 0,44 ммоль) в смеси бензола/метанола (0,84 мл/0,84 мл) добавляли к раствору соединения 34 (100,8 мг, 0,22 ммоль) в бензоле (3,4 мл), и этот раствор охлаждали до 0°С. Затем к этому раствору добавляли боргидрид натрия (49 мг, 1,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали, давая при этом нагреться до комнатной температуры. Реакционную смесь упаривали в вакууме, и остаток подвергали флэш-хроматографии, элюируя 2% метанолом в метиленхлориде, что даёт чистый целевой продукт, соединение 117 (21 мг, 25% выход).
Пример 14. Синтез соединений 53 и 142.
Продукт вышеуказанной реакции синтезировали, используя способ примера 1, стадии В, применяя хлорпиридазин (359 мг, 1,21 ммоль) и 2,4-дифтортиофенол (176 мг, 1,21 ммоль). Продукт получали после флэш-хроматографии на
Вышеуказанную реакцию проводили, как описано в примере 1, стадии С, используя 451 мг исходного соединения и 5 мл концентрированной серной кислоты, что даёт указанный
Вышеуказанную реакцию проводили, как описано в примере 1, стадии Ό, используя исходный амид (410 мг, 0,96 ммоль) и диметилацеталь диметилформамида (3 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 50°С в течение 30 мин и обрабатывали, как описано ранее. Получали соединение 53 (313 мг, 75%).
Соединение 34 (213, 0,49 ммоль) растворяли в ТГФ (10 мл), охлаждали до 0°С, и к этому раствору добавляли боран в ТГФ (1М, 0,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 30 мин, реакцию обрывали добавлением воды, и реакционную смесь разбавляли этилацетатом. Органический слой промывали водой и раствором соли, сушили и упаривали на роторном испарителе. Остаток очищали на силикагеле, элюируя метанолом в метиленхлориде при градиенте от 1 до 5%, что даёт соединение 142 (125 мг, 57%).
Пример 15. Клонирование р38-киназы в клетках насекомых.
Идентифицировали два сплайсинговых варианта человеческой р38-киназы, С8ВР1 и С8ВР2. Используют специфические олигонуклеотидные затравки для амплификации кодирующего участка кДНК С8ВР2, применяя в качестве матрицы библиотеку Не1а-клеток (81га1адепе). Продукт полимеразной цепной реакции клонировали вектор рЕТ-15Ь (Хоуадеп). Бакуловирусный вектор переноса, рУЪ-(Н18)6 р38, создавали путём субклонирования ХЬа1ВатН1-фрагмента рЕТ-15Ь-(Н1к)6-р38 в комплементарные сайты плазмиды рУЪ1392 (РНатипдеп).
Плазмида рУЬ-(Н15)6-р38 направляет синтез рекомбинантного белка, содержащего пептид из 23 остатков (МС88НННННН88С ЕУРКС8НМЕЕ, где ЬУРКС8 обозначает сайт расщепления тромбина), гибридизованный со скелетом Ν-конца р38, как подтверждено методами секвенирования ДНК и секвенирования \конца экспрессируемого белка. Монослойную культуру клеток насекомого 8ройор1ега £гид1регйа (8£9) (АТСС) поддерживали в среде ТХМ-ЕН (61Ьсо ВРЬ), обогащенный 10% эмбриональной бычьей сывороткой, в Т-колбе при 27°С. Клетки 8£9 в логарифмической фазе котрансфицировали линейной вирусной ДНК вируса ядерного полиэдроза Аи1одгарЬа са11£оп1са (РНатипдеп) и вектором переноса рУЪ(Н18) 6-р38, используя липофектин (1пуйгодеп). Индивидуальные рекомбинантные бакуловирусные клоны отбирали с помощью анализа бляшек, применяя 1% низкоплавкую агарозу.
Пример 16. Экспрессия и очистка рекомбинантной р38-киназы.
Клетки (1пуйгодеп) ТпсНорЬыа ш (Тп-368) Н1дЬ-Е1уе™ выращивали в суспензии в среде Ехсе1-405, не содержащей белка (ШН Вюкаепсе) во встряхиваемой колбе при 27°С. Клетки при плотности 1,5х106 клеток/мл заражали вышеуказанным рекомбинантным бакуловирусом при множественности заражения 5. Уровень экспрессии рекомбинантного р38 контролировали путём иммуноблоттинга, используя анти-р38-антитело кролика (8аПа Сгпх В1о1ес11по1оду). Клеточную массу собирали через 72 ч после заражения, когда уровень экспрессии р38 достигал максимума.
Замороженную клеточную пасту из клеток, экспрессирующих (Н18)6-меченый р38, размораживали в 5 объёмах буфера А (50 мМ \аН2РО4 рН 8,0, 200 мМ \аС1, 2 мМ β-маркаптоэтанола, 10% глицерина и 0,2 мМ РМ8Е). После механического разрушения клеток в микрофлюидизаторе лизат центрифугировали при 30 000 об/мин в течение 30 мин. Супернатант инкубировали партиями в течение 3-5 ч при 4°С с Та1оп™смолой, имеющей сродство к металлам, при соотношении 1 мл смолы к 2-4 мг ожидаемого р38. Смолу осаждали центрифугированием при 500 об/мин в течение 5 мин и осторожно промывали порциями буфера А. Смолу суспендировали и выливали в колонку (приблизительно 2,6 х 5,0 см) и затем промывали буфером А + 5 мМ имидазола.
(Нщ)6-р38 элюировали буфером А + 100 мМ имидазола и затем диализовали в течение ночи при 4°С против 2 л буфера В, (50 мМ НЕРЕ8, рН 7,5, 25 мМ β-глицерофосфата, 5% глицерина, 2 мМ ОТТ). (Нщ)6-метку удаляли добавлением 1,5 единиц тромбина (Са1Ьюе11ст) на 1 мг р38 и инкубированием при 20°С в течение 2-3 ч. Тромбин разрушали добавлением 0,2 мМ РМ8Б, и затем весь образец загружали в 2 мл колонку с бензамидин-агарозой (Лшспеап 1п1сгпа)1опа1 Οΐιοιηίοαΐ).
При непрерывном потоке фракции непосредственно загружали в 2,6 х 5,0 см колонку с О-сефарозой (Рйагтас1а), предварительно уравновешенную буфером В + 0,2 мМ РМ8Б. р38 элюировали 0,6М №01 в буфере В 20 объемами колонки в линейном градиенте. Элюированный пик белка собирали и диализовали в течение ночи при 4°С против буфера С (50 мМ НЕРЕ8 рН 7,5, 5% глицерина, 50 мМ ΝαΟΙ, 2 мМ ΌΤΤ, 0,2 мМ РМ8Б).
Диализованный белок концентрировали в Ссгйпргср (Лт1 соп) до 3-4 мл и вносили в 2,6 х 100 см колонку с сефакрилом 8-100НК (РБагтас1а). Белок элюировали при скорости потока 35 мл/час. Фракцию основного пика собирали, доводили до 20 мМ ΌΤΤ, концентрировали до 1080 мг/мл и замораживали в аликвотах при -70°С или использовали непосредственно.
Пример 17. Активация р38.
Р38 активировали, объединяя 0,5 мг/мл р38 с 0,005 мг/мл с ΌΌ-двойным мутантом МКК6 в буфере В + 10 мМ МдС12, 2 мМ АТФ, 0,2 мМ, №-ьУО4. в течение 30 мин при 20°С. Затем активированную смесь загружали на 1,0 х 10 см колонку МопоЦ (РБагтас1а) и элюировали 1,0М ΝαΟ1 в буфере В 20 объёмами колонки в линейном градиенте. Активированный р38 элюировали затем АДФ и АТФ. Фракцию активированного р38 пика собирали и диализировали против буфера В + 0,2 мМ Να2νθ4 для удаления ΝαΟ1. Диализованный белок доводили до 1,1М фосфата калия добавлением 4,0М основного раствора и загружали на 1,0 х 10 см колонку с Н1С (Еаййп Нубгороге). Предварительно уравновешенную буфером Ό (10% глицерина, 20 мМ βглицерофосфата, 2,0 мМ ΌΤΤ) + 1,1 М К2НРО4. Белок элюировали буфером Ό + 50 мМ К2НРО4 20 объёмами колонки при линейном градиенте. Дважды фосфорилированный р38 элюировали как фракцию основного пика и собирали для диализа против буфера В + 0,2 мМ Να2νθ4. Активированный р38 хранили при -70°С.
Пример 18. Испытания на р38ингибирование.
А. Ингибирование фосфорилирования ЕСБ-рецепторного пептида.
Это испытание проводили в присутствии 10 мМ МдС12, 25 мМ β-глицерофосфата, 10% глицерина и 100 мМ НЕРЕ8-буфора при рН 7,6. При типичном определении 1С50 получали основной раствор, содержащий все вышеуказанные компоненты и активированный р38 (5 нМ). В пробирки отбирали аликвоты основного раствора. В каждую пробирку вносили фиксированный объём ДМСО или ингибитора в ДМСО (конечная концентрация ДМСО в реакционной смеси составляла 5%), перемешивали и инкубировали в течение 15 мин при комнатной температуре. К каждой пробирке добавляли Е6Брецепторный пептид, ΚКΕ^VΕР^ΤР86ΕΑРNОЛБЕК. фосфорил-акцептор в реакции (1) р-38 катализированной киназы, до конечной концентрации 200 мкМ. Реакцию киназы инициировали АТФ (100 мкМ) и пробирки инкубировали при 30°С. Через 30 мин реакцию останавливали добавлением равного объёма 10% трифторуксусной кислоты (ТФУ).
Фосфорилированный пептид количественно определяли с помощью ВЭЖХ. Отделение фосфорилированного пептида от нефосфорилированного пептида осуществляли на колонке с обращённой фазой (ОеЙарак, 5 мкм С18 100Ό, рай. по. 011795) при двойном градиенте воды и ацетонитрила, каждый из которых содержал 0,1% ТФУ. 1С50 (концентрацию ингибитора, дающую 50% ингибирование) определяли по графику зависимости % остаточной активности от концентрации ингибитора.
В. Ингибирование АТФазной активности.
Данное испытание проводили в присутствии 10 мМ МдС12, 25 мМ β-глицерофосфата, 10% глицерина и 100 мМ НЕРЕ8-буфера при рН 7,6. При типичном определении Κι величину Кт для АТФ в АТФазной активности реакции активированного р38 определяли в отсутствие ингибитора и в присутствии двух концентраций ингибитора. Получали основной раствор, содержащий все вышеуказанные компоненты и активированный р38 (60 нМ). В пробирки отбирали аликвоты основного раствора. В каждую пробирку вносили фиксированный объем ДМСО или ингибитора в ДМСО (конечная концентрация ДМСО в реакционной смеси составляла 2,5%), перемешивали и инкубировали в течение 15 мин при комнатной температуре. Реакцию инициировали, добавляя различные концентрации АТФ, и затем инкубировали при 30°С. Через 30 мин реакцию останавливали добавлением 50 мкл ΕΌΤΑ (0,1М, конечная концентрация), рН 8,0. Продукт активности р38 АТФазы, АЦФ, определяли количественно ВЭЖХ-анализом.
Отделение АДФ от АТФ осуществляли на колонке с обращённой фазой (8ире1со511, ЬС-18, 3 мкм, рай. по. 5-8985), используя двойной градиент растворителя следующего состава: растворитель А - 0,1М фосфатный буфер, содержащий 8 мМ бисульфата тетрабутиламмония (81дта Сйет1са1 Со., каталоговый по. Т-7158), растворитель В - растворитель А с 30% метанолом.
Κί определяли из данных о скорости реакции как функцию ингибитора и концентраций АТФ. Результаты для некоторых ингибиторов согласно изобретению приведены ниже в таблице 6.
Таблица 6
Соединение Κι (мкМ) > 20
215
35,0
52,9
60,4
Другие ингибиторы р38 согласно изобретению также ингибируют АТФазную активность р38.
С. Ингибирование продуцирования 1Ь-1, ΤΝΕ, 1Ь-6 и 1Ь-8 в ЕР8-стимулированных РВМСк.
Ингибиторы последовательно разбавляли ДМСО, исходя из 20 мМ исходного продукта. Готовили, по меньшей мере, 6 последовательных разбавлений. Затем получали четырехкратные маточные растворы ингибитора, добавляя 4 мкл ингибитора к 1 мл КРМ11640 среды/10% эмбриональной бычьей сыворотки. Четырехкратные маточные растворы ингибитора содержали ингибитор в концентрациях 80 мкМ, 32 мкМ, 12,8 мкМ, 5,12 мкМ, 2,048 мкМ, 0,819 мкМ, 0,328 мкМ, 0,131 мкМ, 0,052 мкМ, 0,021 мкМ и т.д. Перед применением четырехкратные маточные растворы ингибитора предварительно нагревали до 37°С.
Свежие человеческие светлые клетки крови отделяли от других клеток в Уаси1а1пег СРТ от Вес1ои & Иккткоп (содержащем 4 мл крови и ЭРВ8 без Мд2+/Са2+ в достаточном для заполнения пробирки количестве) путём центрифугирования при 1500 об/мин в течение 15 мин. Периферийные мононуклеарные клетки крови (РВМСк), расположенные на вершине градиента в Уаси1атег, удаляли и дважды промывали КРМ11640 средой/10% эмбриональной бычьей сыворотки. РВМСк собирали центрифугированием при 500 об/мин в течение 10 мин. Общее число клеток определяли, используя камеру для подсчёта клеток крови №иЬаиег'а и клетки доводили до концентрации 4,8 х 106 клетки/мл в клеточной культуральной среде (КРМ11640, дополненной 10% эмбриональной бычьей сывороткой).
Либо цельную, содержащую антикоагулянт, кровь использовали непосредственно в испытании.
В каждую ячейку 96-ячеечной пластины для клеточных культур вносили по 100 мкл суспензии клеток или цельной крови. Затем к клеткам добавляли по 50 мкл четырехкратных маточных растворов ингибитора. Наконец, добавляли 50 мкл основного рабочего раствора липополисахарида (ЕР8) (16 нг/мл в клеточной культуральной среде), чтобы обеспечить конечную концентрацию ЬР8 4 нг/мл. Общий объём контрольной пробы также доводили до 200 мкл добавлением 50 мкл клеточной культуральной среды. Затем РВМС-клетки или цельную кровь инкубировали в течение ночи (12-15 ч) при 37°С/5% СО2 в увлажнённой атмосфере.
На следующий день клетки перемешивали на качалке в течение 3-5 мин перед центрифугированием при 500 об/мин в течение 5 мин. Супернатанты культуры клеток собирали и анализировали методом ЕЫ8А на содержание 1Ь-1Ь (К & Ό 8у51ет5, ОнапЦкте кбк, #ПВЬ50), ΤΝΕα (В1о8оигсе, #КНС3012), 1Ь-6 (Епбодеп, #ЕН21Ь6) и 1Ь-8 (Епбодеп, #ЕН2-1Ь8) согласно инструкциям изготовителя. Данные ЕЫ8А использовали для построения кривых доза-ответ, из которых получали значения 1С50.
Результаты исследования киназы (киназа; подраздел А, см. выше), 1Ь-1 и ΤΝΕ в ЬР8стимулированных РВМСк (клетка) и 1Ь-1, ΤΝΕ и 1Ь-6 в цельной крови (\УВ) для различных р38-ингибиторов согласно данному изобретению приведены в таблице 7 ниже:
| соед.#^ киназа· я клетка’^·· клетка”! Τ№ И/В Ιί-1 ΪΜΒΤΝΕ ]Λ/Β 11.-6
/С50 /С50 1С50 1С50 1С50 1С50
2 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
3 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
5 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
6 ++ ++ + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
7 + + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
8 + + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
9 + + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
10 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
11 + + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
12 ++ ++ ++ + + +
соед.# киназа клетка 11-1 клетк ΤΝΕ
/С50 1С50 1С50 1С50 1С50 1С50
13 + + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
14 + ++ + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
15 + ++ ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
16 ++ + ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
17 + + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
18 + + + ΝΌ: ΝΌ. ΝΌ.
19 + + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
20 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
21 ++ ++ + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
22 + + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
23 ++ ++ + + + +
24 ++ ++ ++ + + ΝΌ.
25 ++ ++ + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
26 + +++ ++ + + +
27 ++ + + + + +
28 ++ ++ ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
29 ++ ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
30 + + · + + ΝΌ. ΝΌ.
31 + + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
32 ++ + · ++ + + +
33 ++ ++ 1-+ + + +
34 + + · ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
35 ++ ++ + + + +
36 + + · + + + +
37 ++ ++ + + + +
38 +++ +++ · ++ ++ ++ ++
39 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
40 ++ ++ · + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
41 +++ +++ +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
^соед.# , киназа клетка 11,-1 клеткЕ Ι/ИВ ΤΝΡ ΙΨΒ Η--6
1С50 1С50 1С50 1С50 1С50 1С50
42 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
43 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
44 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
45 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
46 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
47 ++ ++ + ΝΌ: ΝΌ. ΝΌ.
48 ++ ++ + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
49 ++ +++ + + + +
50 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
51 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
52 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
53 +++ +++ +++ +++ +++ +++
101 ++ +++ +++ + + ++
102 +++ +++ +++ + ++ ++
103 +++ +++ +++ + ++ ++
104 ++ ++ ++ + + +
105 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
106 +++ +++ +++ + ++ ++
107 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
109 +++ +++ +++ + + ++
108 +++ ++ +++ ++ +++ +++
110 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
111 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
112 ++ ++ + + + +
113 +++ +++ ++ + + +
114 +++ +++ +++ ++ ++ +++
115 +++ +++ +++ + + +
116 +++ +++ ++ + + +
117 +++ +++ +++ ++ ++ +++
соед.# ^киназа клетка ΪΙι-1 кле1 ΊΊΠΓ Ц ι4Ζβ/δ-7 ишш - ΙΛ/Β Η.-6
1С50 1С50 1С50 1С50 1С50 1С50
203 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
204 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
205 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
206 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
207 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
208 ΝΌ. ++ ΝΌ. ΝΌ; ΝΌ. ΝΌ.
209 ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
202/ +++ ++ ++ + + +
301
302 +++ +++ ++ + + +
303 + + + + + +
304 + + + + + +
305 +++ +++ + + + +
306 ++ ++ + + + +
307 +++ ++ + + + +
308 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
309 ++ ++ ++ + + +
310 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
311 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
312 +++ ++ + + + +
313 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
314 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
315 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
316 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
317 + + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
318 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
319 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
320 +++ ++ ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
321 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
соед.# киназа клетка 1Ь-1 клетка ШТ-ЯПЯ тот И/В ΤΝΡ 1/УВ Ι1--6
/С50 1С50 1С50 1С50 1С50 1С50
118 ++ ++ ++ + + +
119 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
120 ΝΌ. ++ + + + +
121 +++ +++ ++ + + +
122 ++ ++ + + + +
123 ++ ++ ++ + · + +
124 + + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
125 +++ +++ +++ + + +
126 + ++ + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
127 +++ +++ +++ ++ ++ +++
128 + + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
129 +++ +++ +++ ++ + ++
130 +++ ++ + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
131 +++ +++ +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
132 +++ +++ ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
133 +++ +++ +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
134 +++ ++ + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
135 +++ ++ + + + +
136 +++ +++ +++ + + ++
137 +++ +++ ++ + + ++
138 ++ +++ ++ + + +++
139 +++ +++ + + + +
140 +++ +++ +++ ++ + ++
141 +++ +++ +++ + + +
142 +++ +++ +++ +++ +++ +++
143 +++ +++ ++ + + +
144 +++ +++ ++ + + ++
145 +++ +++ +++ +++ +++ +++
201 ++ + + + +++ +
соед. # 'КИ1 наэа клетка 11-1 клетк; ΠίΕ ШВ ΤΝΡ ννΒ Н.-6
1С50 1С50 1С50 1С50 1С50 1С50
322 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
323 ++ ++ ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
324 ++ ++ + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
325 +++ +++ ++ + + +
326 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. Ν.Ο.
327 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
328 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
329 ++ ++ + + + +
330 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
331 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
332 ++ ++ + + + +
333 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
334 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
335 ++ + + + + +
336 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
337 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
338 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
339 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
340 + ΝΌ. ΝΌ- ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
341 ++ ++ ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
342 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
343 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
344 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
345 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
346 ++ + + + + +
347 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
348 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
349 + ++ + + + +
350 + ++ + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
соед.# г .кинаэа клетка 1Ь-1 клетк Τ№ И/Β ΤΝΡ 1/УВ /1-6
1С50 1С50 1С50 1С50 1С50 1С50
351 + + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
352 + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
353 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
354 + νό. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
355 + ΝΌ. Ы.Ц. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
356 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ: ΝΌ. ΝΌ.
357 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
358 ++ + + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
359 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
360 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
361 ++ ++ + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
362 +++ ++ ++ + + +
363 +++ +++ ++ + + +
364 +++ +++ ++ + + +
365 ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
366 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
367 νό. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
368 ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
369 νό. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
370 ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
371 ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
372 ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
373 ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
374 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
375 +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
376 +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
377 +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
378 +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
379 +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
соед. # . кинаэа клетка ΙΙι-1 клетк УУВ ΤΝΡ ШВ /1.-6
1С50 1С50 1С50 1С50 1С50 1С50
380 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
381 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
382 +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
383 +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
384 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
385 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ: ΝΌ. ΝΌ.
386 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
387 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
388 +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
389 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
390 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
391 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
392 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
393 ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
394 +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
395 +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
396 +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
397 + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
398 ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
399 +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
1301 +++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
401 +++ ++ ++ + + +
402 +++ +++ +++ + + +
403 +++ +++ +++ + + ++
404 +++ +++ +++ + + +
405 +++ +++ ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
406 ++ ++ + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
407 ++ ++ + ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
408 +++ +++ ++ ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
409 +++ +++ +++ + + ++
410 +++ +++ +++ ++ ++ ++
411 +++ +++ +++ + + +
412 ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ. ΝΌ.
Для значений 1С50 киназы +++ означает <0,1 мкМ, ++ означает между 0,1 и 1,0 мкМ и + означает >1,0 мкМ. Для клеточных 1Ь-1 и ΤΝΡ значений +++ означает <0,1 мкМ, ++ означает между 0,1 и 0,5 мкМ и + означает >0,5 мкМ. Для всех значений в испытании цельной крови (\¥В) +++ означает <0,25 мкМ, ++ означает между 0,25 и 0,5 мкМ и + означает >0,5 мкМ. Во всех указанных испытаниях в приведенной выше таблице Ν.Ό. означает, что значение не установлено.
Другие рЗ 8-ингибиторы согласно изобретению также будут ингибировать фосфорилирование ЕСР-рецеторного пептида и продуцирование 1Ь-1, ΤΝΡ и 1Ь-6, равно как 1Ь-8 в ЬР8стимулированных РВМСк или в цельной крови.
Ό. Ингибирование продуцирования 1Ь-6 и 1Ь-8 в ΙΕ-1-стимулированных РВМСк.
Данное исследование проводили на РВМСк точно так же, как указано выше, за тем исключением, что 50 мкл 1Ь-1Ь-основного рабочего раствора (2 нг/мл в клеточной культуральной среде) добавляли к пробе вместо маточного рабочего раствора ЬР8.
Супернатанты клеточных культур собирали, как описано выше и анализировали с помощью ЕЬ18А на содержание 1Ь-6 (Еийодеи, #ЕН2-1Ь6) и 1Ь-8 (Еийодеи, #ЕН2-1Ь8) согласно инструкциям изготовителя. Данные ЕЬ18А использовали для построения кривых доза-ответ, из которых получали значения 1С50.
Результаты для соединения 6 - р38ингибитора приведены в таблице 8 ниже.
Таблица 8
Исследуемый цитокин 1С50 (мкМ)
1Ь-6 0,60
1Ь-8 0,85
Е. Ингибирование ЕР8-индуцированной простагландин-эндопероксидсинтазы-2 (РСН8-2 или СОХ-2) индукции в РВМСк.
Мононуклеарные клетки периферической крови человека (РВМСк) выделяли из светлого слоя свежих кровяных сгустков человека путём центрифугирования в Уаси1ашег СРТ (Вес1ои & Όίοΐίίηδοη).
Нами высеяны 15 х 106 клетки в 6ячеечную чашку для культивирования ткани, содержащую ΒΡΜΙ 1640, дополненную 10% эмбриональной бычьей сывороткой, 50 ед/мл пенициллина, 50 мкг/мл стрептомицина и 2 мМ Ь-глутамина. Добавляли соединение 6 (см. выше) при 0,2, 2,0 и 20 мкМ конечных концентрациях в ДМСО. Затем добавляли ЬР8 при конечной концентрации 4 нг/мл, чтобы вызвать экспрессию энзима. Конечный культуральный объём составлял 10 мл/ячейку.
После инкубирования в течение ночи при 37°С, 5% СО2, клетки собирали механически и затем центрифугировали, после чего супернатант удаляли, и клетки дважды промывали охлаждённым на льду ΌΡΒ8 (фосфатным буфер ным раствором соли ОЫЬсеео'а. В1о\У11Шакег), клетки лизировали на льду в течение 10 минут в 50 мкл охлаждённого лизисного буфера (20 мМ ТП8-НС1, рН 7,2, 150 мМ №С1, 1% Тритон-Х100, 1% дезоксихолевая кислота, 0,1% 8Ό8, 1 мМ ΕΌΤΑ, 2% апротинин (81дта), 10 мкг/мл пепстатин, 10 мкг/мл лейпептин, 2 мМ РМ8Е, 1 мМ бензамидин, 1 мМ дитиотрейтол), содержащем 1 мкл бензоназы (ДНКаза от Мегск). Концентрацию белка в каждом образце определяли, используя метод ВСА (Р1егсе) и бычий сывороточный альбумин в качестве стандарта.
Затем концентрацию каждого образца доводили до 1 мг/мл с помощью охлаждённого лизисного буфера. К 100 мкл лизата добавляли равный объём загружающего буфера 2χ8Ό8 РАСЕ, и образец кипятили в течение 5 мин. Белки (30 мкг/ряд) фракционировали по размерам в 4-20% градиенте при СДС электрофорезе в полиакриламидном геле (8Ό8 РАСЕ) (Νο\\υ.χ) и впоследствии переносили на нитроцеллюлозную мембрану электрофоретическим способом за 2 ч при 100 мА в буфере Το\\Βίη (25 мМ Трис, 192 мМ глицин), содержащем 20% метанола. Мембрану предварительно обрабатывали в течение 1 ч при комнатной температуре блокирующим буфером (5% обезжиренное сухое молоко в ОРВ8, дополненном 0,1% Твин-20) и промывали 3 раза в ОРВ8/0,1% Твин-20. Мембрану инкубировали в течение ночи при 4°С разбавленным 1:250 моноклональным антителом анти-СОХ-2 (Τπ-ιιΜικΙίοη ЬаЬога1ог1ек) в блокирующем буфере. После 3 промывок в ОРВ8/0,1% Твин-20 мембрану инкубировали с разбавленной 1:1000 пероксидазой хрена, конъюгированной с овечьей антисывороткой против мышиных иммуноглобулинов (1д) (Атегкйат) в блокирующем буфере в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем мембрану снова промывали 3 раза в ОРВ8/0,1% Твин-20 и применяли систему детектирования ЕСЬ (8ирег81дпа1™ СЬНВР 8иЬк1га1е 8ук1ет, Р1егсе) для определения уровней экспрессии СОХ-2.
Результаты вышеуказанного испытания показывают, что соединение 6 ингибирует ЬР8индуцированную экспрессию РСН8-2 в РВМСк.
Хотя выше представлен ряд вариантов практического воплощения изобретения, очевидно, что основные варианты исполнения могут быть видоизменены, что обеспечит другие варианты воплощения с применением способа согласно изобретению.

Claims (42)

1. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль, где каждый из 01 и О2 независимо выбран из систем 5-6-членных ароматических карбоциклических или гетероциклических колец или систем 8-10-членных бициклических колец, состоящих из ароматических карбоциклических колец, ароматических гетероциклических колец или сочетания ароматического карбоциклического кольца и ароматического гетероциклического кольца;
где 01 замещен 1-4 заместителями, которые независимо выбраны из галогена; С1-С3алкила, возможно замещенного ΝΒ'2, ОВ', СО2В' или ΟΟΝΒ'2: О-(С1-С3)-алкила, возможно замещенного νβ'2, ов', со2в' или сояву νβ'2; осе3; се3; ΝΟ2: СО2В': сонв': 8В': 8(Ο2)νβ'2: 8СЕ3; сн ^в')С(О)в4: ^В')С(О)ОВ4: НВ')С(О) С(О)В4: Ν(Β')δ(θ2)Β4: ν(Β')β4: ν(β4)2: ов4: ОС(О)В4: ор(О)3н2 или ν=^νβ'2, и
О2 возможно замещен 1-4 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена; С1-С3-линейного или разветвленного алкила, возможно замещенного ΝΒ'2, ОВ', СО2В', 8(Ο2)ΝΒ'2, Ν=^ΝΒ'2, В3 или СО\1Г: О-(С1-С3)алкила, возможно замещенного ΝΒ'2, ОВ', СО2В', 8(Ο2)ΝΒ'2, Ν=^ΝΒ'2, В3 или СО\В'< νβ'2: оср3; ср3: νο2: со2в': οονβ': в3: ов3: νβ3: 8В3: С(О)В3: С(ОМВ')В3: С(О)ОВ3: 8В': 8(Ο2)ΝΒ'2: 8СЕ3: Ν=^ΝΒ'2 или сн где В' выбран из водорода, (С1-С3)-алкила; (С2-С3)-алкенила или алкинила; фенила или фенила, замещенного 1-3 заместителями, независимо выбираемыми из галогена, метокси, циано, нитро, амино, гидрокси, метила или этила;
В3 выбран из системы 5-6-членных ароматических карбоциклических или гетероциклических колец; и
В4 означает (С£-С4)-алкил, возможно замещенный ΝΒ'2, ОВ', СО2В', С(О)ЯВ'2 или 8Ο2ΝΒ22: или систему 5-6-членных карбоциклических или гетероциклических колец, возможно замещенную ΝΒ'2, ОВ', СО2В', С(О)ЯВ'2 или 8(Ο2)ΝΒ22,
Х выбран из -8-, -О-, -8(О2)-, -8(О)-, 8(О2)Ν(Β2)-, -Ν(Β2)-8(Ο2)-, -Н(В2)-С(О)О-, -О-С(О)Ν(Β2)-, -С(О)-, -С(О)О-, -О-С(О)-, -С(О)-Н(В2)-, - Н(В2)-С(О)-, -Ν(Β2)-, -С(В2)2- или -С(ОВ2)2-: каждый В независимо выбран из водорода, -В2, -Ν(Β2)2, -ОВ2, 8В2, -С(О)-НВ22, -8(Ο2)-ΝΒ22 или -С(О)-ОВ2, где два смежных В возможно связаны друг с другом и вместе с каждым Υ, с которым они соответственно связаны, образуют 4-8 членное карбоциклическое или гетероциклическое кольцо, или когда Υ означает Ν, В, присоединенный к нему, означает неподеленную электронную пару;
В2 выбран из водорода, (С1-С3)-алкила или (С1-С3)-алкенила; каждый возможно замещен -Ν(Β')2, -ОВ', -8В', -С(О)-НВ'2, -8(Ο2)-ΝΒ'2, С(О)-ОВ' или В3,
Υ выбран из Ν или С;
А, если присутствует, выбран из N или СВ';
η равно 0 или 1, причем, когда η равно 0, связь между атомом азота в кольце и атомом углерода, связанным с группой Х-<^2, означает простую связь; и
В1 выбран из водорода, (С1-С3)-алкила, ОН или О-(С1-С3)-алкила.
2. Соединение формулы к к или его фармацевтически приемлемая соль, где Ω£, 0_2, В1, В и Υ имеют значения, указанные в п. 1.
3. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль, где А, Ωι, Ω2, В, В', X, Υ и η имеют значения, указанные для соединений формул 1а и 1Ь; и В5 выбран из водорода, -СВ'2Он, -С(О)В4, -С(О)ОВ4, -СВ'2ОРО3Н2 и -РО3Н2.
4. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль, где А, Ωι, Ω2, В, В', В5, X, Υ и η имеют значения, указанные в п.3.
5. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль, где О3 означает систему 5-6-членных ароматических карбоциклических или гетероциклических колец или систему 8-10-членных бициклических колец, включающую в себя ароматические карбоциклические кольца, ароматические гетероциклические кольца или сочетание ароматического карбоциклического кольца и ароматического гетероциклического кольца, где О3 замещен 1-4 заместителями, каждый из которых независимо выбран из галогена, (С1-С3)алкила, возможно замещенного Ν(Κ')2, ОВ', СО2В' или ί.ΌΝΚ'3; О-(С1-С3)-алкила, возможно замещенного Ν(Κ')2, ОВ', СО2В' или ί.ΌΝΚ'3; ΝΚ'2; ОСЕ3; СЕ3; А'О3; СО2В'; СО1МВ'; 8В'; 8(О2)1МВ'2; 8СЕз; ΟΝ; ^В')С(О)В4; ^В')С(О)ОВ4; ^В')С(О)С(О)В4; ^В')8(О2)В4; ^В')В4; ΝΚ42; ОВ4; ОС(О)В4; ОР(О)3Н2 или Ν^-ΝΚ/, и А, О2. В, В', X, Υ и η имеют значения, указанные в п. 1 .
6. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль, где Ω£, Ω2, В, Υ, X, А и η имеют значения, указанные в п. 1 .
7. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль, где Ω2, Ω3, В, Υ и η имеют значения, указанные в п.5.
8. Соединение формулы или его фармацевтически приемлемая соль, где Ωι Ω2 В, Υ, X, А и η имеют значения, указанные в п. 6.
9. Соединение по любому из пп.1-8, где Οι выбран из фенила или пиридила, содержащего от 1 до 3 заместителей, независимо выбираемых из хлора, фтора, брома, -СН3, -ОСН3, -ОН, -СЕ3, -ОСЕ3, -О(СН2)2СН3, ΝΗ2, 3,4-метилендиокси, -Ν(ΟΗ3)2, -ИН-8(О)2-фенила, -1МН-С(О)О-СН2-4пиридина, -NΗ-С(О)Сн2-морфолина, АН-С(О) СН2-^СН3)2, -1МН-С(О)СН2-пиперазина, -ΝΗС(О)СН2-пирролидина, -NΗ-С(О)С(О)-морфолина, ^Н-С(О)С(О)-пиперазина, -NΗ-С(О)С (О)-пирролидина, -О-С(О)СН2^(СН3)2 или -О(СН2)^(СН3)2, и где, по меньшей мере, один из указанных заместителей находится в ортоположении.
10. Соединение по п.9, где 01 содержит, по меньшей мере, два заместителя, оба из которых находятся в ортоположении.
11. Соединение по п.9, где 01 выбран из
12. Соединение по п.11, где О1 выбран из
2-фтор-6-трифторметилфенила, 2,6-дифторфенила, 2,6-дихлорфенила, 2-хлор-4-гидроксифенила, 2-хлор-4-аминофенила, 2,6-дихлор-4аминофенила, 2,6-дихлор-3-аминофенила, 2,6диметил-4-гидроксифенила, 2-метокси-3,5дихлор-4-пиридил, 2-хлор-4,5-метилендиоксифенила, или 2-хлор-4-(Ы-2-морфолинацетамид) фенила.
13. Соединение по любому из пп.1-8, где О; выбран из фенила или пиридила и где возможно, содержит до 3 заместителей, каждый из которых независимо выбран из хлора, фтора, брома, метила, этила, изопропила, -ОСН3, -ОН, -ΝΗ2, -СЕ3, -ОСЕ3, -8СН3, -ОСН3, -С(О)ОН, -С(О)ОСН3, -ΌΗΝ^ -N(№3)2, -СН2-пирролидина и -СН2ОН.
14. Соединение по п. 13, где О2 выбран из незамещенного 2-пиридила или незамещенного фенила.
15. Соединение по п.14, где О2 выбран из фенила, 2-изопропилфенила, 3,4-диметилфенила, 2-этилфенила, 3-фторфенила, 2-метилфенила, 3-хлор-4-фторфенила, 3-хлорфенила, 2карбометоксифенила, 2-карбоксифенила, 2-метил-4-хлорфенила, 2-бромфенила, 2-пиридила, 2-метиленгидроксифенила, 4-фторфенила, 2метил-4-фторфенила, 2-хлор-4-фторфенила, 2,4дифторфенила, 2-гидрокси-4-фторфенила или 2метиленгидрокси-4-фторфенила.
16. Соединение по любому из пп. 1-8, где Х выбран из -8-, -О-, -8(О2)-, -8(О)-, -ΝΚ-, -С(Я2) - или -С(О)-.
17. Соединение по п.15, где Х означает 8.
18. Соединение по любому из пп.1-8, где η означает 1 и А означает Ν.
19. Соединение по любому из пп.1-8, где каждый Υ означает С.
20. Соединение по п. 19, где каждый Я, связанный с Υ, независимо выбран из водорода или метила.
21. Соединение по п. 1 , где указанное соединение выбрано из любого из соединений 2-3, или 5-53, приведенных в табл. 1.
22. Соединение по п.3, где указанное соединение выбрано из любого из соединений 101-145, приведенных в табл. 2.
23. Соединение по любому из пп.5-7, где О3 замещен 2-4 заместителями, где, по меньшей мере, один из указанных заместителей присутствует в ортоположении относительно точки присоединения О3 к остатку ингибитора.
24. Соединение по п.23, где оба ортоположения заняты одним из указанных, независимо выбираемых заместителей.
25. Соединение по п.24, где О3 означает моноциклическое карбоциклическое кольцо; и каждый из указанных ортозаместителей на О,3 независимо выбран из галогена или метила.
26. Соединение по п.24, где О,3 содержит от 1 до 2 заместителей в дополнение к указанным ортозаместителям, причем указанные дополнительные заместители независимо выбраны из ΝΚ'2, ОЯ', СО2Я' ΌΝ, ^Я')С(О)Я4; Ν(Κ')€(Θ) ОЯ4; ^Я')С(О)С(О)Я4; ^Я')8(О2)Я4; ^Я')Я4; Ν(Κ4)2; ОЯ4; ОС(О)Я4; ОР(О)3Н2 или N СΝ(Κ%.
27. Соединение по п.5, где указанное соединение является соединением формулы Ге и выбрано из соединений 201 или 203-209, приведенных в табл. 3.
28. Соединение по п.7, где указанное соединение является соединением формулы Гд и выбрано из соединений 202/301, 302-399 или 1301, приведенных в табл. 4.
29. Соединение по п.8, где указанное соединение является соединением формулы П1 и выбрано из соединений 401-412, приведенных в табл. 5.
30. Фармацевтическая композиция, содержащая эффективное для ингибирования р38 количество соединения по любому из пп. 1-8 и фармацевтически приемлемый носитель.
31. Способ лечения или предупреждения воспалительных заболеваний, аутоиммунных заболеваний, деструктивных заболеваний кости, пролиферативных нарушений, инфекционных заболеваний, нейродегенеративных заболеваний, аллергии, реперфузии/ишемии при мозговом ударе, сердечных приступов, ангиогенных нарушений, гипоксии органов, васкулярной гиперплазии, сердечной гипертрофии, тромбининдуцируемой агрегации тромбоцитов или состояний, связанных с простагландин-эндопероксидазасинтазой-2 у пациентов, причем ука занный способ включает в себя введение указанному пациенту композиции по п.30.
32. Способ по п.31, где указанный способ применяют для лечения или профилактики воспалительного заболевания, выбираемого из острого панкреатита, хронического панкреатита, астмы, аллергии или респираторного дистресссиндрома у взрослых.
33. Способ по п.31, где указанный способ применяют для лечения или профилактики аутоимунного заболевания, выбираемого из гломерулонефрита, ревматоидного артрита, системной красной волчанки, склеродермии, хронического тиреоидита, болезни Грейвса, аутоиммунного гастрита, диабета, аутоиммунной гемолитической анемии, аутоиммунной нейтропении, тромбоцитопении, атопического дерматита, хронического активного гепатита, миастении дгаук, рассеянного склероза, воспалительного заболевания кишечника, неспецифического язвенного колита, болезни Крона, псориаза или реакции «трансплантат против хозяина».
34. Способ по п.31, где указанный способ применяют для лечения или профилактики деструктивных заболеваний кости, выбираемых из остеоартрита, остеопороза или заболевания кости, связанного с множественной миеломой.
35. Способ по п.31, где указанный способ применяют для лечения или профилактики пролиферативных заболеваний, выбираемых из острого миелогенного лейкоза, хронического миелогенного лейкоза, метастатической меланомы, саркомы Капоши или множественной миеломы.
36. Способ по п.31, где указанный способ применяют для лечения или профилактики ин фекционных заболеваний, выбираемых из сепсиса, септического шока или шигеллеза.
37. Способ по п.31, где указанный способ применяют для лечения или профилактики вирусных заболеваний, выбираемых из острого инфекционного гепатита, ВИЧ-инфекции или СМУ ретинита.
38. Способ по п.31, где указанный способ применяют для лечения или профилактики нейродегенеративных заболеваний, выбираемых из болезни Альцгеймера, болезни Паркинсона, церебральной ишемии или нейродегенеративного заболевания, вызванного травматическим повреждением.
39. Способ по п.31, где указанный способ применяют для лечения или профилактики реперфузии/ишемии при мозговом ударе или миокардиальной ишемии, почечной ишемии, сердечных приступов, гипоксии органов или тромбининдуцируемой агрегации тромбоцитов.
40. Способ по п.31, где указанный способ применяют для лечения или профилактики состояний, связанных с простагландин-эндопероксидсинтазой-2, выбираемых из отека, лихорадочного состояния, аналгезии или боли.
41. Способ по п. 40, где указанная боль выбрана из нервно-мышечной боли, головной боли, боли при раке, зубной боли или боли при артрите.
42. Способ по п.31, где указанный способ применяют для лечения или профилактики ангиогенных нарушений, выбираемых из твердых опухолей, глазной неоваскуляризации или детских гемангиом.
EA199900559A 1996-12-18 1997-12-17 ЗАМЕЩЕННЫЕ, АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ ГЕТЕРОЦИКЛЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ПРОТЕИНКИНАЗЫ р38 EA002855B1 (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US3428896P 1996-12-18 1996-12-18
US08/822,373 US5945418A (en) 1996-12-18 1997-03-20 Inhibitors of p38
US08/862,925 US6147080A (en) 1996-12-18 1997-06-10 Inhibitors of p38
PCT/US1997/023392 WO1998027098A1 (en) 1996-12-18 1997-12-17 SUBSTITUTED NITROGEN CONTAINING HETEROCYCLES AS INHIBITORS OF p38 PROTEIN KINASE

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA199900559A1 EA199900559A1 (ru) 2000-02-28
EA002855B1 true EA002855B1 (ru) 2002-10-31

Family

ID=27364615

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA199900559A EA002855B1 (ru) 1996-12-18 1997-12-17 ЗАМЕЩЕННЫЕ, АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ ГЕТЕРОЦИКЛЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ПРОТЕИНКИНАЗЫ р38

Country Status (29)

Country Link
US (1) US6147080A (ru)
EP (1) EP0951467B1 (ru)
JP (1) JP4171072B2 (ru)
CN (2) CN1284783C (ru)
AP (1) AP1136A (ru)
AT (1) ATE236165T1 (ru)
AU (1) AU738000B2 (ru)
BG (1) BG64533B1 (ru)
BR (1) BR9714415A (ru)
CA (1) CA2274825C (ru)
CZ (1) CZ299600B6 (ru)
DE (1) DE69720522T2 (ru)
DK (1) DK0951467T3 (ru)
EA (1) EA002855B1 (ru)
EE (1) EE04191B1 (ru)
ES (1) ES2202658T3 (ru)
HK (1) HK1023340A1 (ru)
HU (1) HUP0001125A3 (ru)
ID (1) ID21919A (ru)
IL (1) IL130349A0 (ru)
IS (1) IS5069A (ru)
NO (1) NO315047B1 (ru)
NZ (1) NZ336146A (ru)
PL (1) PL202464B1 (ru)
PT (1) PT951467E (ru)
SK (1) SK284578B6 (ru)
TR (1) TR199902194T2 (ru)
TW (1) TW521071B (ru)
WO (1) WO1998027098A1 (ru)

Families Citing this family (126)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7091181B2 (en) 1994-12-12 2006-08-15 Omeros Corporation Method of inhibition of pain and inflammation during surgery comprising administration of soluble TNF receptors
US6608060B1 (en) * 1996-12-18 2003-08-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38
US6657104B1 (en) 1997-10-16 2003-12-02 Texas Systems, University Of The Board Of The Regents Transgenic mouse model for cardiac hypertrophy and methods of use thereof
WO1999032121A1 (en) 1997-12-19 1999-07-01 Smithkline Beecham Corporation Compounds of heteroaryl substituted imidazole, their pharmaceutical compositions and uses
MY132496A (en) * 1998-05-11 2007-10-31 Vertex Pharma Inhibitors of p38
WO1999061039A2 (en) * 1998-05-22 1999-12-02 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Novel composition for modulating ischemic cell death
US6858617B2 (en) 1998-05-26 2005-02-22 Smithkline Beecham Corporation Substituted imidazole compounds
EP1277740A1 (en) * 1998-06-12 2003-01-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38
JP2002517486A (ja) 1998-06-12 2002-06-18 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ｐ３８のインヒビター
US6184226B1 (en) 1998-08-28 2001-02-06 Scios Inc. Quinazoline derivatives as inhibitors of P-38 α
AR023659A1 (es) 1998-09-18 2002-09-04 Vertex Pharma Un compuesto inhibidor de p38, una composicion farmaceutica que lo comprende y el uso de dicha composicion en el tratamiento y prevencion de estados patologicos
JP2002526482A (ja) * 1998-09-18 2002-08-20 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ｐ３８のインヒビター
AU1127700A (en) * 1998-10-20 2000-05-08 Omeros Medical Systems, Inc. Irrigation solution containing mapk inhibitors and their use for treating pain and inflammation
AU1909200A (en) 1998-11-04 2000-05-22 Smithkline Beecham Corporation Pyridin-4-yl or pyrimidin-4-yl substituted pyrazines
UA73492C2 (en) 1999-01-19 2005-08-15 Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
EP1157026A1 (en) 1999-02-22 2001-11-28 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Polycyclo heterocyclic derivatives as antiinflammatory agents
DE60014603T2 (de) 1999-03-12 2006-02-16 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc., Ridgefield Heterocyklischer harnstoff und verwandte verbindungen als entzündungshemmende mittel
DE60023853T2 (de) 1999-03-12 2006-05-24 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc., Ridgefield Aromatische heterozyklische verbindungen als antientzündungwirkstoffe
JP2000281588A (ja) * 1999-03-30 2000-10-10 Sankyo Co Ltd ガンの予防又は治療薬及びそのスクリーニング方法
WO2001001986A1 (en) * 1999-07-02 2001-01-11 Lipton Stuart A Method of reducing neuronal injury or apoptosis
DE60024830T2 (de) 1999-07-09 2006-06-14 Boehringer Ingelheim Pharma Verfahren zur herstellung heteroarylsubstituierter ureaverbindungen
CN1156477C (zh) * 1999-10-21 2004-07-07 霍夫曼-拉罗奇有限公司 作为p38蛋白激酶的抑制剂的烷基氨基-取代的双环氮杂环类化合物
ATE353329T1 (de) * 1999-10-21 2007-02-15 Hoffmann La Roche Heteroalkylamino-substituierte bicyclische stickstoffheterocyclen
DE60020595T2 (de) * 1999-11-23 2006-03-16 Smithkline Beecham Corp. 3,4-dihydro-(1h)chinazolin-2-on-verbindungen als csbp/p38-kinase-inhibitoren
ATE305787T1 (de) 1999-11-23 2005-10-15 Smithkline Beecham Corp 3,4-dihydro-(1h)chinazolin-2-on-verbindungen als csbp/p39-kinase-inhibitoren
US6759410B1 (en) 1999-11-23 2004-07-06 Smithline Beecham Corporation 3,4-dihydro-(1H)-quinazolin-2-ones and their use as CSBP/p38 kinase inhibitors
US6525046B1 (en) 2000-01-18 2003-02-25 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
US6608052B2 (en) 2000-02-16 2003-08-19 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as anti-inflammatory agents
US7235551B2 (en) 2000-03-02 2007-06-26 Smithkline Beecham Corporation 1,5-disubstituted-3,4-dihydro-1h-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-one compounds and their use in treating csbp/p38 kinase mediated diseases
MXPA02009319A (es) * 2000-03-22 2003-03-12 Vertex Pharma Inhibidores de p38.
AU2001283237B2 (en) * 2000-08-11 2007-09-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyridine derivatives as inhibitors of p38
PE20020506A1 (es) * 2000-08-22 2002-07-09 Glaxo Group Ltd Derivados de pirazol fusionados como inhibidores de la proteina cinasa
US7998507B2 (en) * 2000-09-21 2011-08-16 Elan Pharma International Ltd. Nanoparticulate compositions of mitogen-activated protein (MAP) kinase inhibitors
CZ20031125A3 (cs) 2000-10-23 2003-10-15 Smithkline Beecham Corporation Nové sloučeniny
US6867300B2 (en) * 2000-11-17 2005-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Methods for the preparation of pyrrolotriazine compounds useful as kinase inhibitors
US6670357B2 (en) * 2000-11-17 2003-12-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating p38 kinase-associated conditions and pyrrolotriazine compounds useful as kinase inhibitors
CA2431904A1 (en) 2000-12-20 2002-08-01 Merck & Co., Inc. (halo-benzo carbonyl)heterocyclo fused phenyl p38 kinase inhibiting agents
HU229604B1 (en) * 2001-02-12 2014-02-28 Hoffmann La Roche 6-substituted pyrido-pyrimidines, process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
GB0112348D0 (en) * 2001-05-19 2001-07-11 Smithkline Beecham Plc Compounds
GB2375771A (en) * 2001-05-24 2002-11-27 Univ Leeds Decellularisation of tissue implant material
EP2036891A3 (en) 2001-06-11 2009-03-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Isoquinoline inhibitors of P38
US6794265B2 (en) 2001-08-02 2004-09-21 Ultradots, Inc. Methods of forming quantum dots of Group IV semiconductor materials
US7005669B1 (en) 2001-08-02 2006-02-28 Ultradots, Inc. Quantum dots, nanocomposite materials with quantum dots, devices with quantum dots, and related fabrication methods
US6819845B2 (en) 2001-08-02 2004-11-16 Ultradots, Inc. Optical devices with engineered nonlinear nanocomposite materials
US6710366B1 (en) 2001-08-02 2004-03-23 Ultradots, Inc. Nanocomposite materials with engineered properties
US20030066998A1 (en) 2001-08-02 2003-04-10 Lee Howard Wing Hoon Quantum dots of Group IV semiconductor materials
GB0124941D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124933D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124934D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124936D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124932D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124939D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124931D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124938D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
EP1476840A4 (en) * 2002-01-11 2007-05-09 Vertex Pharma CRYSTALLINE STRUCTURES OF JNK INHIBITION COMPLEXES AND BINDING POCKETS THEREOF
US20040142932A1 (en) * 2002-01-18 2004-07-22 Michael Hepperle Substituted pyridazinones
MXPA04007838A (es) 2002-02-12 2004-10-15 Smithkline Beecham Corp Derivados de nicotamida utiles como inhibidores p38.
ATE386030T1 (de) 2002-02-25 2008-03-15 Boehringer Ingelheim Pharma 1,4-disubstituierte benzokondensierte cycloalkyl- harnstoffverbindungen zur behandlung von zytokinvermittelten erkrankungen
EP1494664A2 (en) * 2002-04-18 2005-01-12 Pharmacia Corporation Combinations of cox-2 inhibitors and other agents for the treatment of parkinson's disease
PL373339A1 (en) 2002-04-19 2005-08-22 Smithkline Beecham Corporation Novel compounds
WO2003091229A1 (en) * 2002-04-23 2003-11-06 Bristol-Myers Squibb Company Aryl ketone pyrrolo-triazine compounds useful as kinase inhibitors
EP2289894A3 (en) * 2002-04-23 2011-07-20 Bristol-Myers Squibb Company Pyrrolo-triazine compounds useful as kinase inhibitors
US7388009B2 (en) * 2002-04-23 2008-06-17 Bristol-Myers Squibb Company Heteroaryl-substituted pyrrolo-triazine compounds useful as kinase inhibitors
TW200400034A (en) * 2002-05-20 2004-01-01 Bristol Myers Squibb Co Pyrazolo-pyrimidine aniline compounds useful as kinase inhibitors
CN100558715C (zh) * 2002-05-23 2009-11-11 西托匹亚有限公司 蛋白激酶抑制剂
WO2004004725A2 (en) 2002-07-09 2004-01-15 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Pharmaceutical compositions of anticholinergics and p38 kinase inhibitors in the treatment of respiratory diseases
GB0217757D0 (en) 2002-07-31 2002-09-11 Glaxo Group Ltd Novel compounds
NZ574520A (en) 2002-11-27 2011-02-25 Dmi Biosciences Inc Use of casein which is at least 10% dephosphorylated for the treatment of diseases and conditions mediated by increased phosphorylation
GB0308185D0 (en) * 2003-04-09 2003-05-14 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
GB0308186D0 (en) * 2003-04-09 2003-05-14 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
GB0308201D0 (en) * 2003-04-09 2003-05-14 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
WO2004098528A2 (en) 2003-05-01 2004-11-18 Bristol-Myers Squibb Company Pyrazole-amine compounds useful as kinase inhibitors
MXPA05012377A (es) 2003-05-15 2006-05-25 Arqule Inc Derivados de imidazotiazoles e imidazoxazol como inhibidores de p38.
ATE439837T1 (de) * 2003-06-03 2009-09-15 Novartis Ag 5-gliedrige heterocyclische p-38 inhibitoren
TWI452035B (zh) 2003-06-26 2014-09-11 Novartis Ag 以５員雜環為主之ｐ３８激酶抑制劑
WO2005007632A1 (en) * 2003-07-18 2005-01-27 Pharmacia Corporation Substituted pyridazinones as inhibitors of p38
CA2534990A1 (en) * 2003-07-25 2005-02-10 Novartis Ag P-38 kinase inhibitors
GB0318814D0 (en) * 2003-08-11 2003-09-10 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
US7419978B2 (en) * 2003-10-22 2008-09-02 Bristol-Myers Squibb Company Phenyl-aniline substituted bicyclic compounds useful as kinase inhibitors
NZ546057A (en) 2003-12-03 2010-04-30 Ym Bioscience Australia Pty Lt Tubulin inhibitors
GB0402143D0 (en) * 2004-01-30 2004-03-03 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
US7829560B2 (en) 2004-07-08 2010-11-09 Arqule, Inc. 1,4-disubstituted naphthalenes as inhibitors of P38 MAP kinase
US7504521B2 (en) * 2004-08-05 2009-03-17 Bristol-Myers Squibb Co. Methods for the preparation of pyrrolotriazine compounds
US20060035893A1 (en) 2004-08-07 2006-02-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical compositions for treatment of respiratory and gastrointestinal disorders
US7148348B2 (en) 2004-08-12 2006-12-12 Bristol-Myers Squibb Company Process for preparing pyrrolotriazine aniline compounds useful as kinase inhibitors
WO2006021848A1 (en) * 2004-08-27 2006-03-02 Ranbaxy Laboratories Limited Anti-inflammatory agents
US20080051416A1 (en) * 2004-10-05 2008-02-28 Smithkline Beecham Corporation Novel Compounds
JP2008517064A (ja) 2004-10-19 2008-05-22 アークル インコーポレイテッド Ｐ３８ｍａｐキナーゼのイミダゾオキサゾールおよびイミダゾチアゾール阻害剤の合成
PE20060777A1 (es) 2004-12-24 2006-10-06 Boehringer Ingelheim Int Derivados de indolinona para el tratamiento o la prevencion de enfermedades fibroticas
US20060178388A1 (en) * 2005-02-04 2006-08-10 Wrobleski Stephen T Phenyl-substituted pyrimidine compounds useful as kinase inhibitors
PE20100741A1 (es) 2005-03-25 2010-11-25 Glaxo Group Ltd COMPUESTOS DERIVADOS DE 3,4-DIHIDROPIRIMIDO[4,5-d]PIRIMIDIN-2(1H)-ONA COMO INHIBIDORES DE QUINASA p38
PE20100737A1 (es) 2005-03-25 2010-11-27 Glaxo Group Ltd Nuevos compuestos
US7479558B2 (en) 2005-03-25 2009-01-20 Glaxo Group Limited Process for preparing pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-one and 3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1H)-one derivatives
EP1868612A4 (en) 2005-03-25 2010-03-24 Glaxo Group Ltd NOVEL CONNECTIONS
US20060235020A1 (en) * 2005-04-18 2006-10-19 Soojin Kim Process for preparing salts of 4-[[5-[(cyclopropylamino)carbonyl]-2-methylphenyl]amino]-5-methyl-N-propylpyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazine-6-carboxamide and novel stable forms produced therein
GB0512429D0 (en) * 2005-06-17 2005-07-27 Smithkline Beecham Corp Novel compound
US7473784B2 (en) * 2005-08-01 2009-01-06 Bristol-Myers Squibb Company Benzothiazole and azabenzothiazole compounds useful as kinase inhibitors
CN101273039A (zh) * 2005-08-12 2008-09-24 默克公司 可用作p38激酶抑制剂的杂二环化合物
CA2627497C (en) 2005-10-28 2014-10-14 Takeda Pharmaceutical Company Limited Heterocyclic amide compound and use thereof
KR20080107408A (ko) * 2006-03-07 2008-12-10 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 키나제 억제제로서 유용한 피롤로트리아진 아닐린 전구약물화합물
EP2468717B1 (en) 2006-10-27 2013-11-20 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic Amide Compounds Useful as Kinase Inhibitors
US7943617B2 (en) 2006-11-27 2011-05-17 Bristol-Myers Squibb Company Heterobicyclic compounds useful as kinase inhibitors
WO2008114119A2 (en) * 2007-03-20 2008-09-25 Cadila Pharmaceuticals Limited P38 inhibitors
EP1992344A1 (en) 2007-05-18 2008-11-19 Institut Curie P38 alpha as a therapeutic target in pathologies linked to FGFR3 mutation
EP2108641A1 (en) * 2008-04-11 2009-10-14 Laboratorios Almirall, S.A. New substituted spiro[cycloalkyl-1,3'-indo]-2'(1'H)-one derivatives and their use as p38 mitogen-activated kinase inhibitors
EP2111861A1 (en) 2008-04-21 2009-10-28 Ranbaxy Laboratories Limited Compositions of phosphodiesterase type IV inhibitors
EP2300466B1 (en) 2008-06-20 2014-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Imidazopyridine and imidazopyrazine compounds useful as kinase inhibitors
US8410128B2 (en) * 2008-06-20 2013-04-02 Bristol-Myers Squibb Company Triazolopyridine compounds useful as kinase inhibitors
WO2010038428A1 (ja) * 2008-09-30 2010-04-08 武田薬品工業株式会社 タキサン系抗がん剤の置き換え薬
AU2010210426B2 (en) 2009-02-06 2015-06-11 Imago Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of Jun N-terminal kinase
GB0902648D0 (en) 2009-02-17 2009-04-01 Argenta Discovery Ltd Pharmaceutical compounds and compositions
GB0908317D0 (en) * 2009-05-14 2009-06-24 Argenta Discovery Ltd Pharmaceutical compounds and compositions
WO2012031057A1 (en) 2010-09-01 2012-03-08 Bristol-Myers Squibb Company Bms- 582949 for the treatment of resistant rheumatic disease
CN103842362B (zh) * 2011-05-09 2017-05-24 爱普制药有限责任公司 用于治疗阿尔茨海默氏病的组合物和方法
EP2799537B1 (en) 2011-12-28 2021-09-22 Kyoto Prefectural Public University Corporation Normalization of culture of corneal endothelial cells
CN103772392A (zh) * 2012-10-23 2014-05-07 杨子娇 一类治疗房角狭窄的化合物及其用途
US10813920B2 (en) 2013-11-14 2020-10-27 The Doshisha Drug for treating corneal endothelium by promoting cell proliferation or inhibiting cell damage
CN113018300A (zh) 2014-07-09 2021-06-25 爱普制药有限责任公司 用于治疗神经病症的方法
CA3003433A1 (en) 2015-10-27 2017-05-04 Children's Hospital Medical Center Use of mapk inhibitors to reduce loss of hematopoietic stem cells during ex vivo culture and/or genetic manipulation
US20190060286A1 (en) 2016-02-29 2019-02-28 University Of Florida Research Foundation, Incorpo Chemotherapeutic Methods
WO2019056003A1 (en) 2017-09-18 2019-03-21 Eip Pharma, Llc CO-CRYSTALS FROM NEFLAMAPIMOD (VX -745)
US10342786B2 (en) 2017-10-05 2019-07-09 Fulcrum Therapeutics, Inc. P38 kinase inhibitors reduce DUX4 and downstream gene expression for the treatment of FSHD
CA3128468A1 (en) 2017-10-05 2019-04-11 Fulcrum Therapeutics, Inc. P38 kinase inhibitors reduce dux4 and downstream gene expression for the treatment of fshd
IL277071B1 (en) 2018-03-08 2024-03-01 Incyte Corp Aminopyrizine diol compounds as PI3K–y inhibitors
US11046658B2 (en) 2018-07-02 2021-06-29 Incyte Corporation Aminopyrazine derivatives as PI3K-γ inhibitors
JP2022509271A (ja) * 2018-11-30 2022-01-20 シャンハイ ファーマシューティカルズ ホールディング カンパニー，リミティド 窒素含有ヘテロシクリル系化合物及びその組成物、製造方法並びに使用

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5716972A (en) * 1993-01-13 1998-02-10 Smithkline Beecham Corporation Pyridyl substituted imidazoles
IL110296A (en) * 1993-07-16 1999-12-31 Smithkline Beecham Corp Imidazole compounds process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
AU6691994A (en) * 1994-02-10 1995-08-29 Vladimir Ivanovich Ivanov Device for phono-electrophoresis
US5559137A (en) * 1994-05-16 1996-09-24 Smithkline Beecham Corp. Compounds
MX9705296A (es) * 1995-01-12 1997-10-31 Smithkline Beecham Corp Compuestos novedosos de imidazol 1,4,5-susbtituidos y el uso de los mismos para preparar composiciones para uso en terapia.
IL123950A (en) * 1995-10-06 2001-04-30 Merck & Co Inc Transformed imidazoles with anti-cancer and cytokine-inhibiting activity and pharmaceutical preparations containing them
US5717100A (en) * 1995-10-06 1998-02-10 Merck & Co., Inc. Substituted imidazoles having anti-cancer and cytokine inhibitory activity
GB9523675D0 (en) * 1995-11-20 1996-01-24 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
ZA97175B (en) * 1996-01-11 1997-11-04 Smithkline Beecham Corp Novel substituted imidazole compounds.
AU736316B2 (en) * 1996-05-20 2001-07-26 Signal Pharmaceuticals, Inc. Mitogen-activated protein kinase p38-2 and methods of use therefor
WO1997047618A1 (en) * 1996-06-10 1997-12-18 Merck & Co., Inc. Substituted imidazoles having cytokine inhibitory activity
GB9613021D0 (en) * 1996-06-21 1996-08-28 Pharmacia Spa Bicyclic 4-aralkylaminopyrimidine derivatives as tyrosine kinase inhibitors
AU3044197A (en) * 1996-07-11 1998-02-09 Pfizer Inc. Pyridylpyrrole compounds useful as interleukin- and tnf antagonists
JP2001506230A (ja) * 1996-08-09 2001-05-15 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 新規ピペラジン含有化合物
US5945418A (en) * 1996-12-18 1999-08-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38

Also Published As

Publication number Publication date
NO992960D0 (no) 1999-06-17
TR199902194T2 (xx) 2000-06-21
NO992960L (no) 1999-08-17
ID21919A (id) 1999-08-12
HUP0001125A2 (hu) 2000-10-28
IL130349A0 (en) 2000-06-01
WO1998027098A1 (en) 1998-06-25
CN1284783C (zh) 2006-11-15
HK1023340A1 (en) 2000-09-08
BR9714415A (pt) 2000-04-18
JP2001506266A (ja) 2001-05-15
BG103575A (en) 2000-06-30
CN1519240A (zh) 2004-08-11
DE69720522D1 (de) 2003-05-08
AP9901565A0 (en) 1999-06-30
CA2274825A1 (en) 1998-06-25
ES2202658T3 (es) 2004-04-01
ATE236165T1 (de) 2003-04-15
PL202464B1 (pl) 2009-06-30
EP0951467B1 (en) 2003-04-02
PT951467E (pt) 2003-08-29
CZ216399A3 (cs) 1999-09-15
SK284578B6 (sk) 2005-07-01
NO315047B1 (no) 2003-06-30
PL334133A1 (en) 2000-02-14
TW521071B (en) 2003-02-21
IS5069A (is) 1999-06-07
US6147080A (en) 2000-11-14
AU738000B2 (en) 2001-09-06
DK0951467T3 (da) 2003-07-21
BG64533B1 (bg) 2005-06-30
JP4171072B2 (ja) 2008-10-22
AP1136A (en) 2003-01-31
CN1153770C (zh) 2004-06-16
CA2274825C (en) 2008-08-26
EP0951467A1 (en) 1999-10-27
CN1244867A (zh) 2000-02-16
DE69720522T2 (de) 2003-11-27
HUP0001125A3 (en) 2002-01-28
CZ299600B6 (cs) 2008-09-17
EA199900559A1 (ru) 2000-02-28
SK80599A3 (en) 2000-01-18
AU5610598A (en) 1998-07-15
EE9900252A (et) 1999-12-15
EE04191B1 (et) 2003-12-15
NZ336146A (en) 2000-09-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA002855B1 (ru) ЗАМЕЩЕННЫЕ, АЗОТСОДЕРЖАЩИЕ ГЕТЕРОЦИКЛЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ ПРОТЕИНКИНАЗЫ р38
US5945418A (en) Inhibitors of p38
JP4704560B2 (ja) ｐ３８の複素環式インヒビター
JP2012149085A (ja) Ｐ３８のインヒビターとしてのピリジン誘導体
US7951809B2 (en) Inhibitors of p38
AU6251499A (en) Inhibitors of p38
KR20110067029A (ko) 안드로겐 수용체 조절제로서 신규의 이미다졸리딘 화합물
JP2004536057A (ja) ｐ３８インヒビターとして使用する２，５−二置換ピリジン、ピリミジン、ピリダジンおよび１，２，４−トリアジンの誘導体
AU2001283237A1 (en) Pyridine derivatives as inhibitors of p38
JP2004506042A5 (ru)
KR100559917B1 (ko) ｐ38 프로테인 키나아제의 저해제로서 치환된 질소를 함유하는헤테로사이클
AU2007200477B2 (en) Inhibitors of p38
MXPA00011076A (en) Heterocyclic inhibitors of p38

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG MD TJ TM

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU

NF4A Restoration of lapsed right to a eurasian patent

Designated state(s): RU

MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): RU