PL202464B1 - Podstawione związki heterocykliczne zawierające azot jako inhibitory kinazy białkowej p38, zawierająca je kompozycja farmaceutyczna i ich zastosowanie - Google Patents

Podstawione związki heterocykliczne zawierające azot jako inhibitory kinazy białkowej p38, zawierająca je kompozycja farmaceutyczna i ich zastosowanie

Info

Publication number
PL202464B1
PL202464B1 PL334133A PL33413397A PL202464B1 PL 202464 B1 PL202464 B1 PL 202464B1 PL 334133 A PL334133 A PL 334133A PL 33413397 A PL33413397 A PL 33413397A PL 202464 B1 PL202464 B1 PL 202464B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
compound
alkyl
cont
formula
group
Prior art date
Application number
PL334133A
Other languages
English (en)
Other versions
PL334133A1 (en
Inventor
Guy W. Bemis
Francesco Gerald Salituro
John Patrick Duffy
John E. Cochran
Edmund Martin Harrington
Mark A. Murcko
Keith P. Wilson
Michael Su
Vincent P. Galullo
Original Assignee
Vertex Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from US08/822,373 external-priority patent/US5945418A/en
Application filed by Vertex Pharma filed Critical Vertex Pharma
Publication of PL334133A1 publication Critical patent/PL334133A1/xx
Publication of PL202464B1 publication Critical patent/PL202464B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/70—Sulfur atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P23/00—Anaesthetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/56—Amides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/75—Amino or imino radicals, acylated by carboxylic or carbonic acids, or by sulfur or nitrogen analogues thereof, e.g. carbamates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D237/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings
    • C07D237/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D237/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D237/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazine or hydrogenated 1,2-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D237/18—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/12—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/10—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D241/14—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D241/20—Nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/04—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D409/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/6561—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom containing systems of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring or ring system, with or without other non-condensed hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Abstract

Wynalazek dotyczy inhibitorów p38, ssaczej kinazy bia lkowej zwi azanej z proliferacj a komórek, smierci a komórek i odpowiedzi a na bod zce pozakomórkowe. Wynalazek dotyczy równie z sposobów wytwarzania takich inhibitorów. Przedmiotem wynalazku s a tak ze kompozycje farmaceutyczne zawie- rajace takie inhibitory oraz sposoby stosowania takich kompozycji do leczenia i zapobiegania ró znym zaburzeniom. PL PL PL PL PL PL PL PL

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są podstawione związki heterocykliczne zawierające azot jako inhibitory kinazy białkowej p38, zawierająca je kompozycja farmaceutyczna i ich zastosowanie.
Wynalazek niniejszy dotyczy inhibitorów p38, ssaczej kinazy białkowej związanej z proliferacją komórek, śmiercią komórek i odpowiedzią na bodźce pozakomórkowe. Przedmiotem wynalazku są także kompozycje farmaceutyczne zawierające inhibitory według wynalazku oraz zastosowania takich inhibitorów do wytwarzania leków do leczenia i zapobiegania różnym zaburzeniom.
Kinazy białkowe biorą udział w różnych odpowiedziach komórek na sygnały pozakomórkowe.
Odkryto ostatnio rodzinę aktywowanych mitogenem kinaz białkowych (MAPK). Członkami tej rodziny są kinazy Ser/Thr, które aktywują swoje substraty przez fosforylację [B. Stein i in., Ann. Rep. Med. Chem., 31, str. 289-98 (1996)]. MAPK są aktywowane przez różne sygnały obejmujące czynniki wzrostowe, cytokiny, promieniowanie UV i czynniki wywołujące wstrząs.
Jedną ze szczególnie interesujących MAPK jest p38. p38, znane również jako białko wiążące przeciwzapalne leki hamujące cytokiny (CSPB) i RK, zostało wyizolowane z mysich limfocytów pre-B, transfekowanych receptorem CD14 lipopolisacharydu (LPSC) i indukowanych LPS. Wyizolowano i zsekwencjonowano cDNA kodujący p38 u ludzi i myszy. Aktywację p38 zaobserwowano w komórkach stymulowanych przez wstrząsy, takie jak działanie lipopolisacharydami (LPS), UV, anizomycyną lub przez wstrząs osmotyczny albo przez cytokiny, takie jak IL-1 i TNF.
Zahamowanie kinazy p38 prowadzi do blokady wytwarzania zarówno IL-1, jak i TNF. IL-1 i TNF stymulują wytwarzanie innych cytokin prozapalnych, takich jak IL-6 i IL-8, które są związane z ostrymi i przewlekłymi chorobami zapalnymi i z osteoporozą postmenopauzalną [R.B. Kimble i in., Endocrinol., 136, str. 3054-61 (1995)].
W oparciu o to odkrycie, uważa się, że p38, wraz z innymi MAPK, odgrywa rolę w pośredniczeniu w odpowiedzi komórek na bodźce zapalne, takiej jak akumulacja leukocytów, aktywacja makrofagów/monocytów, resorpcja tkanki, gorączka, odpowiedzi fazy ostrej i neutrofilia. Ponadto MAPK, takie jak p38, są związane z nowotworem, agregacją płytek wywołaną trombiną, zaburzeniami związanymi z niedoborem odporności, chorobami autoimmunizacyjnymi, śmiercią komórek, alergiami, osteoporozą i zaburzeniami neurodegeneracyjnymi. Inhibitory p38 są również związane z dziedziną leczenia bólu poprzez zahamowanie indukcji syntazy-2 endonadtlenku prostaglandyny. W WO 96/21654 podano inne choroby związane z nadprodukcją IL-1, IL-6 lub IL-8 lub TNF.
Rozpoczęto już próby opracowania leków, które specyficznie hamują MAPK. Przykładowo, w publikacji zgłoszenia PCT nr WO 96/31451 opisano związki pirazolowe, które hamują MAPK, a zwłaszcza p38. Jednakże nadal bada się skuteczność tych inhibitorów in vivo.
Tak więc, nadal istnieje potrzeba opracowania innych silnych inhibitorów, specyficznych wobec p38, które są użyteczne w leczeniu różnych stanów związanych z aktywacją p38.
Niniejszy wynalazek rozwiązuje powyższy problem przez dostarczenie związków, które wykazują silne i specyficzne hamowanie p38.
Związki według wynalazku są przedstawione ogólnym wzorem:
W którym Q1 oznacza fenyl podstawiony 1 do 3 podstawnikami, niezależnie wybranymi z grupy obejmującej fluorowiec; C1-C3 alkil; O-(C1-C3)-alkil; NH2; CF3; NHC(O) ((C1-C3)-alkil) ewentualnie podstawiony fluorowcem; -N=CH-N ((C1-C3)-alkil)2; 3,4-metylenodioksy lub -NH-C(O)CH2-morfolinę;
PL 202 464 B1
Q2 oznacza fenyl lub pirydynyl ewentualnie podstawiony podstawnikami w ilości do 3, niezależnie wybranymi z grupy obejmującej fluorowiec; prosty lub rozgałęziony C1-C3 alkil; NH2; CF3; NO2; OH; CO2H; CO2 ((C1-C3)-alkil) lub CON((C1-C3)-alkil)2;
X oznacza -S-;
każdy R oznacza niezależnie wodór lub -CH3;
Y oznacza C;
A oznacza N; n oznacza 1; a R1 oznacza wodór i obejmuj ą też ich farmaceutycznie dopuszczalne sole.
Korzystnie, Q1 oznacza fenyl zawierający 1 do 3 podstawników, z których co najmniej jeden jest w pozycji orto.
Jeszcze bardziej korzystny jest fenyl zawierający co najmniej 2 ze wskazanych wyżej podstawników i obydwa w pozycji orto.
Konkretnymi przykładami korzystnych podstawników Q1 są:
PL 202 464 B1
PL 202 464 B1
Najkorzystniej, Q1 jest wybrany z grupy obejmującej 2-fluoro-6-trifluorometylofenyl, 2,6-difluorofenyl, 2,6-dichlorofenyl, 2-chloro-4-hydroksyfenyl, 2-chloro-4-aminofenyl, 2,6-dichloro-4-aminofenyl, 2,6-dichloro-3-aminofenyl, 2,6-dimetylo-4-hydroksyfenyl, 2-chloro-4,5-metylenodioksyfenyl i 2-chloro-4-(N-2-morfolinoacetamido)fenyl.
Zgodnie z korzystnym wykonaniem Q2 oznacza fenyl lub pirydyl zawierający 0 do 3 podstawników, z których każdy jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej chlor, fluor, brom, metyl, etyl, izopropyl, -OCH3, -OH, -NH2, -CF3, -SCH3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -CH2NH2, -N(CH3)2, -CH2-pirolidynę i -CH2OH, -CH2-piperazynę, -NH-C(=NH)-NH2 i -CH2-NH-imidazol.
Niektóre konkretne przykłady korzystnych podstawników Q2 stanowią:
PL 202 464 B1
PL 202 464 B1
niepodstawiony 2-pirydyl lub niepodstawiony fenyl.
Najbardziej korzystne są związki, w których Q2 jest wybrany z grupy obejmującej fenyl, 2-izopropylofenyl, 3,4-dimetylofenyl, 2-etylofenyl, 3-fluorofenyl, 2-metylofenyl, 3-chloro-4-fluorofenyl, 3-chlorofenyl, 2-karbometoksyfenyl, 2-karboksyfenyl, 2-metylo-4-chlorofenyl, 2-bromofenyl, 2-pirydyl, 2-metylenohydroksyfenyl, 4-fluorofenyl, 2-metylo-4-fluorofenyl, 2-chloro-4-fluorofenyl, 2,4-difluorofenyl, 2-hydroksy-4-fluorofenyl lub 2-metylenohydroksy-4-fluorofenyl.
W poniższej tablicy zestawiono niektóre konkretne inhibitory według wynalazku.
PL 202 464 B1
T a b l i c a 1 Związki o wzorach Ia
Nr zw. Struktura Nr zw. Struktura
1 2 3 3
F if>
/A Η 1 y^cH3
2 8 0, A
Ος A N^”xnA SXJ
ν^ά» s-Aa
Cl Cl
ίιΊ Az li 1
3 M-c. 9 o
0. 0; A
N-^N^N<k s-W ν<^ν.νΛ
Cl o-CH’
(ί —A
5 -Mc, 10 o
c< at· 0, <γΑγ-<5>| nn
Ν A\As' .SJM
rfn
6 Cl' --M-ci 11 r a xch 3
c A 0; nV^, A
N -SJU n^a-M •Λ^
(f^l [Ρί
H Jl —γ—'Cl Cl'——n—'Cl
0, A
7 “Α/’Ά 's-^M 12 N s
(Al
V
F
PL 202 464 B1 cd. tablicy 1
1 2 3 3
fT*i
JLA Cl 11 i
CIX CH, F' VF
13 0, ^5-, ΓΆ 17 °< ιΠι
<> N n^nXn^X -sxJ*
iT^
cr jr Ci i 1
CIX Λ^χΛ.
Cl
14 N\ s 18 0.Χ ι^Ίι
1 N<^Nx _χίί<, 'ς A^jj
ΓΊΐ N
V Η,Ο^ΟΗ,
CH,
(Pi rfA
ci- II
c< Cl ^Cl
°< 0
15 Ν<5^Ν^ N ''S 19 N<^N hT S
r Λ A
l
CH, Y^CH,
CH,
lf>
er 0, AA 'Cl Pi
cr ΛζΧ ^Cl CH,
16 N^/NX ^\ς 20 o. L ’
1 r>i
rii N<s A
Ν s
η< ci
Cl
PL 202 464 B1 cd. tablicy 1
PL 202 464 B1 cd. tablicy 1
1 2 3 3
31 ?v\AAJ cAn-=«.. I CH 3 35 Ci'^^ri:i>^ci N<s>/N^ N S φτ· F
32 GV^Y^ H 3 CH 3 36 o-CH3 ιΓ^ίΓ0''0”3 Cl Ύί^^Ί
33 CI-^Y^CI vVi n OH 37 CI-^Y^CI sY^i
34 c^y^ci 0<Υί^^ι n^%As V F 38 Cl »^<bAsXJ
PL 202 464 B1 cd. tablicy 1
1 2 3 3
39 ΡΛο 44 CH3 Αγοκ, °yy^i jfjTF
40 n-^/n-n^s “ χ. F 45 ΓΑ Ja rrF «^•SAeAyil Cl
41 Νς^Ν^ A. JJ N·^ Cl 46 NHj °<γΧγ^ϊ,
42 c,xJ\^\F YYJ ^γ 47 >ch: o vVi j^JTF ^V\AA/
43 o-CH· xA^^°~-CH3 ΟΙ-'^Α °vVi jOr ^\ASA> 48 n<^n^CH’ A. CH, ν<^ν^ <A /^χ N s~y_# F
PL 202 464 B1 cd. tablicy 1
1 2 3 3
49 0 /^\ N S~V# 53 CkA„ N<^-rK /==\ N S-ά Λ-F
50 N^I<CH· CH, CI>zX^p °<γΛγ^ N<.?Nx /-\ N S-\_/~F CI-^S^CI Tyr F
51 0 u H3C n s v# F
Inhibitory p38 o przedstawionym powyżej wzorze (Ia) wytwarza się sposobami opisanymi poniżej. Sposoby te obejmują reakcję związku o wzorze II:
w którym każ dy z podstawników ma znaczenie, jak podano w odniesieniu do inhibitorów wedł ug wynalazku, z reagentem zawierającym grupę opuszczającą, o wzorze Ila:
PL 202 464 B1
w którym R' ma wyżej podane znaczenie, a każdy L1, L2 i L3 niezależnie oznacza grupę opuszczającą.
Stosowany w tej reakcji reagent z grupą opuszczającą dodaje się w nadmiarze, albo nierozcieńczony lub z korozpuszczalnikiem, takim jak toluen. Reakcję prowadzi się w temperaturze w zakresie 25°C do 150°C.
Reagenty z grupami opuszczającymi o wzorze Ila, które są użyteczne w wytwarzaniu inhibitorów p38 według wynalazku, obejmują dimetyloacetal dimetyloformamidu, dimetyloacetal dimetyloacetamidu, ortomrówczan trimetylu, dietyloacetal dimetyloformamidu i inne pokrewne związki. Korzystnym reagentem z grupą opuszczającą o wzorze Ila do stosowania w wytwarzaniu inhibitorów według wynalazku jest dimetyloacetal dimetyloformamidu.
W bardziej korzystnych sposobach wytwarzania związków o wzorze la według wynalazku stosuje się związki o wzorze II, w którym każdy z podstawników ma znaczenie określone dla związków według wynalazku w odniesieniu do korzystnych i bardziej korzystnych przypadków.
Ponieważ źródłem podstawnika R1 jest reagent z grupą opuszczającą (C-R'), jego charakter, oczywiście, zależy od struktury tego reagenta. Ponieważ R1 oznacza H, stosowanym reagentem musi być związek o wzorze Ila.
Bezpośrednie prekursory inhibitorów o wzorze la według wynalazku (tj. związki o wzorze II) można zsyntetyzować sposobem przedstawionym na poniższym schemacie syntezy:
SCHEMAT 1
Kolejność etapów 1) i 2) na schemacie 1 można odwrócić. Również wyjściowe nitryle można zastąpić odpowiednim kwasem lub estrem. Alternatywnie, zamiast nitryli można stosować inne dobrze znane utajone reszty karboksylowe lub karboksamidowe (patrz schemat 2). Do schematu tego wprowadzić również można inne związki, takie jak kwasy karboksylowe, estry kwasów karboksylowych, oksazoliny lub oksazolidynony, usuwając później grupy ochronne lub stosując sposoby funkcjonalizowania dobrze znane specjalistom w tej dziedzinie techniki.
Zasada stosowana w pierwszym etapie sposobu według schematu 1 (i według poniższego schematu 2) jest wybrana spośród wodorku sodu, amidku sodu, LDA, heksametylodisilazydku litu, heksametylodisilazydku sodu i spośród wielu innych nienukleofilowych zasad, które odprotonują pozycję alfa w stosunku do nitrylu.
PL 202 464 B1
Również dodanie HX-Q2 w przedstawionym powyżej pojedynczym etapie można zastąpić dwoma etapami, a mianowicie etapem dodania chronionej lub niechronionej pochodnej X, po którym następuje etap dodania pochodnej Q2.
SCHEMAT 2
Na schemacie 2, Z jest wybrany z grupy obejmującej COOH, COOR', CON(R')2, oksazolinę, oksazolidynon lub CN, a R' ma wyżej podane znaczenie.
Poniżej przedstawiono dwa całkowite schematy syntezy dla związków pokrewnych.
SCHEMAT 3
Na schemacie 3, podstawioną pochodną Q1 można potraktować zasadą, taką jak wodorek sodu, amidek sodu, LDA, heksametylodisilazydek litu, heksametylodisilazydek sodu, lub dowolną spośród wielu innych nienukleofilowych zasad, w celu deprotonowania pozycji alfa w stosunku do grupy Z, która oznacza zablokowaną resztę amidową. Alternatywnie, Z oznacza kwas karboksylowy, ester kwasu
PL 202 464 B1 karboksylowego, oksazolinę lub oksazolidynon. Anion otrzymany w wyniku deprotonowania kontaktuje się następnie z zawierającym azot związkiem heterocyklicznym, który zawiera dwie grupy opuszczające lub utajone grupy opuszczające, w obecności katalizatora palladowego. Jednym z przykładów takiego związku może być 2,6-dichloropirydyna.
W drugim etapie wprowadza się pierścieniową resztę Q2. Dokonać tego można stosując wiele znanych specjalistom w tej dziedzinie reakcji, w wyniku których uzyskuje się związki biarylowe. Jednym z przykładów może być reakcja związku arylolitowego z pirydynowym związkiem przejściowym wytworzonym w etapie 1. Alternatywnie, związek arylometalu, taki jak arylocynian lub kwas aryloboronowy można poddać reakcji z częścią pirydynowego związku przejściowego, którą stanowi halogenek arylu, w obecności Pd0 jako katalizatora.
W etapie 3 grupę Z odblokowuje się i/lub funkcjonalizuje z wytworzeniem zwią zku amidowego. Gdy Z oznacza kwas karboksylowy, ester kwasu karboksylowego, oksazolinę lub oksazolidynon, do wytworzenia amidu można stosować wiele znanych w technice sposobów odblokowania i funkcjonalizowania. W ostatnim etapie 4 amid cyklizuje się z wytworzeniem produktu końcowego, przy użyciu reagentów takich jak acetal DMF lub podobnych, nierozcieńczonych lub w organicznym rozpuszczalniku.
SCHEMAT 4
Sposób według schematu 4 jest podobny, z tą różnicą, że przed reakcją z wyjściowym materiałem Q1, najpierw wytwarza się przejściowy związek biarylowy.
W zakres wynalazku wchodzą też inhibitory p38, podobne do przedstawionych powyż szym wzorem la, ale w których C=N w pierścieniu zawierającym podstawnik Q1 jest zredukowana oraz ich farmaceutycznie dopuszczalne sole. Inhibitory te są przedstawione wzorem:
w którym Q1, Q2, R, R1, X, Y i n mają znaczenia podane uprzednio dla zwią zków o wzorze la.
PL 202 464 B1
Takie definicje obowiązują dla każdego z tych podstawników we wszystkich wykonaniach (tj. podstawowym, korzystnym, bardziej korzystnym i najkorzystniejszym). A oznacza N lub CH. R5 jest wybrany z grupy obejmują cej wodór i -CH2OH.
Gdy R5 ma znaczenie inne niż wodór, należy oczekiwać, że wytworzone związki będą w postaci proleków, które powinny ulec rozszczepieniu in vivo z wytworzeniem związku, w którym R5 oznacza wodór.
Korzystnie, w związkach o wzorze Ic A oznacza azot.
Związki o wzorze Ic można wytworzyć bezpośrednio ze związków o wzorze la. Sposób syntezy tych związków przedstawiono na poniższym schemacie 5.
SCHEMAT 5
Na powyższym schemacie, związki o wzorze la redukuje się przez reakcję z nadmiarem wodorku diizobutyloglinu, lub równoważnego reagenta, z wytworzeniem zredukowanych związków pierścieniowych o wzorze Ic.
Dodanie R5 innego niż wodór do azotu pierścieniowego uzyskuje się przez reakcję związku o wzorze Ic z odpowiednim(i) reagentem(ami). Modyfikacje takie zilustrowano w części zawierają cej przykłady.
W poniż szej tablicy zamieszczono niektóre korzystne inhibitory o wzorze Ic wedł ug niniejszego wynalazku.
T a b l i c a 2 Związki o wzorze Ic
Nr zw. Struktura Nr zw. Struktura
1 2 3 4
ff
Cl^^ ''Cl ί
0-\ γ Cl
101 jD 102 O
N s ΊΓ N<
''' N S
O^O | ch3
CH3
PL 202 464 B1 cd. tablicy 2
1 2 3 4
103 g p2 T| —(fj 108 CrY^C. YY^ jYj) n^n-as>Y ^OH
104 C urin ‘ Λ O-^^OH 109 C, Y^CI ΥίΥ J^jJ Br
105 τίχρχ) CT^NH, 110 0 i, 1 j “Ό
106 θγΑγ^Η,ΟγΓγα N^-hNXsAJ 111 θ ci |PLp 'XX,
107 ΥίΡ Y) N S ^N 112 CIZyXI τσ<9 Νγ°γ^3 0 CH,
PL 202 464 B1 cd. tablicy 2
1 2 3 4
113 °vVa nr· ch3 118 vva n N^AsAa ^NH?
114 ΎίΑ AA N\^r< <*< J1 N \z^ OH 119 °Vi^ ń F
115 c.-^Aci ^ÓęxsjQ nh2 120 C^^Y^CI o °tYA AA’^0 CH,
116 vn fA N^zN^ <>< Λ-/ N S CN 121 o-CH· Ay CH· °vS^i fY N^zN^ O< zX^>
117 CI^S^CI °'VZS/^ Nk /k -Αχ N S φτ' . F 122 Ο,ΑΑθ, -AA, A n^^nx Ά 1 N^s—1<IJ nh2
PL 202 464 B1 cd. tablicy 2
1 2 3 4
123 C, νΛν \=/ 127 CI^^Y^CI YV^[ 'Ί^Υ' Y/Νχ <>Y /%
124 °YY^ n.Jl N S /VNYNH· f^Y^1 nh F 128 CY^Y^CI VYj -ν-^-Α'Ι Νγ^θ nh2
125 H’NV^j ci-^^Y^ci τχχ,χτ 129 r^O° ci-^Y^ τ5ζγχχ
126 θγ^γγγ Ν\χ^Ν'-Ν·ί>Χ Jy , !?’^'F 130 θγζΧ,
PL 202 464 B1 cd. tablicy 2
PL 202 464 B1 cd. tablicy 2
1 2 3 4
141 0 Ν 5 F 144 Ο'^Α ο CtxN
142 C|7xA<c| 0<γ<γ^ ί^Ά F 145 χ5^° cx JL __ 3XXX>r F
143 Ο Π H3C Ί» Ν.___„Ν^ Ν ^S—Λ //?
W zakres wynalazku wchodzą też inhibitory p38 o wzorze (Ie) i ich farmaceutycznie dopuszczalne sole:
w którym to wzorze X, Y i n mają znaczenia podane uprzednio dla związków o wzorze la i Ic. Takie definicje obowiązują dla każdego z tych podstawników we wszystkich wykonaniach (tj. podstawowym, korzystnym, bardziej korzystnym i najkorzystniejszym). Q2 oznacza fenyl ewentualnie podstawiony jednym lub dwoma podstawnikami niezależnie wybranymi spośród fluorowców i C1-C3-alkilu;
Q3 oznacza fenyl podstawiony jednym lub dwoma podstawnikami niezależnie wybranymi spośród fluorowców i NH2;
PL 202 464 B1 każdy R oznacza wodór.
Bardziej korzystnie, w związkach o wzorze Ie Q2 oznacza niepodstawiony fenyl. W zakres wynalazku wchodzą też związki o wzorze Ig:
i ich farmaceutycznie dopuszczalne sole, w którym to wzorze:
Q2 oznacza fenyl, tiofen, naftyl, benzofuran, benzotiofen lub furan, ewentualnie podstawiony podstawnikami w ilości do 3, niezależnie wybranymi z grupy obejmującej fluorowce; (C1-C3)-alkil ewentualnie podstawiony przez OH, NH-(C1-C3)-alkil, NH-(C1-C3)-alkilo-OH, NH-(C1-C3)-alkilo-NH2 lub NH-fenyl; O-(C1-C3)-alkil ewentualnie podstawiony przez OCH3; OH; NH2; CF3; CHO; COOH; SCH3; NO2; CH=N-OH; -CH2-pirolidynę; i -CH2-piperazynę;
Q3 oznacza fenyl podstawiony podstawnikami w ilości do 3, niezależnie wybranymi spośród fluorowców, NH2, (C1-C3)-alkilu i 3,4-metylenodioksy;
każdy R oznacza wodór; a Y oznacza C.
Wynalazek obejmuje też związki o wzorze Ih:
i ich farmaceutycznie dopuszczalna sole, w którym to wzorze:
Q1 oznacza fenyl podstawiony podstawnikami w ilości do 2, niezależnie wybranymi spośród fluorowców, (C1-C3)-alkilu i 3,4-metylenodioksy;
Q2 oznacza fenyl podstawiony podstawnikami w ilości do 2, niezależnie wybranymi spośród fluorowców i (C1-C3)-alkilu;
każdy R oznacza wodór; a
Y oznacza C.
Zgodnie z jednym z korzystnych wykonań, Q3 jest podstawiony 2 (Ie, Ig) lub 3 (Ig) podstawnikami, z których co najmniej jeden jest w pozycji orto względem punktu przyłączenia Q3 do pozostałej części inhibitora. Bardziej korzystnie, oby dwie takie pozycje orto są zajęte przez jeden z tych podstawników .
Zgodnie z następnym korzystnym wykonaniem, Q3 we wzorze Ig oznacza fenyl, w którym każdy podstawnik orto jest niezależnie wybrany spośród fluorowca i metylu.
Korzystnie, Q3 jest wybrany spośród reszt Q3 występujących w związkach o wzorze Ie przedstawionych w tablicy 3, lub spośród reszt Q3 występujących w związkach o wzorze Ig zestawionych w tablicy 4.
Dla specjalisty w tej dziedzinie oczywiste będzie, że związki o wzorze Ie są bezpośrednimi prekursorami dla niektórych inhibitorów p38 o wzorze la i o wzorze Ic według wynalazku (tj. dla tych, w których Q1 = Q3). Syntezę inhibitorów o wzorze Ie przedstawiają powyż sze schematy 1 i 2, na których Qi należy zastąpić przez Q3. Podobnie, syntezę inhibitorów o wzorze Ig przedstawiają powyższe
Schematy 3 i 4, na których Q1 należy zastąpić przez Q3.
PL 202 464 B1
Na Schemacie 7 poniżej przedstawiono syntezę inhibitorów o wzorze Ih.
SCHEMAT 7
Schemat 7 przedstawia syntezę związków o wzorze Ih. Przykładowo, w wyniku działania na początkową pochodną dibromową, taką jak 2,6-dibromopirydyna, aminą w obecności zasady, takiej jak wodorek sodu, otrzymuje się pochodną 2-amino-6-bromową. Ten produkt przejściowy traktuje się analogiem kwasu fenyloboronowego (kwasem Q2-boronowym), takim jak kwas fenyloboronowy, w obecności katalizatora palladowego, i uzyskuje się dipodstawioną pochodną, którą następnie można acylować, z wytworzeniem końcowego produktu. Kolejność dwóch pierwszych etapów opisanej syntezy można odwrócić.
Bez wiązania się z teorią, zgłaszający uważają, że podstawienie di-orto w pierścieniu Q3 w inhibitorach o wzorze Ie i Ig oraz obecność azotu bezpośrednio związanego z pierścieniem Q1 w inhibitorach o wzorze Ih powoduje „spłaszczenie związku, co zapewnia skuteczne hamowanie p38.
Jednym z korzystnych inhibitorów o wzorze Ie jest związek, w którym A oznacza węgiel, n oznacza 1, X oznacza siarkę , każ dy Y oznacza w ę giel, każ dy R oznacza wodór, Q3 oznacza 2,6-dichlorofenyl, a Q2 oznacza fenyl. Inhibitor ten jest oznaczony jako związek 201. Jednym z korzystnych inhibitorów o wzorze Ig jest związek, w którym Q3 oznacza 2,6-dichlorofenyl, Q2 oznacza fenyl, każdy Y oznacza węgiel, a każdy R oznacza wodór. Związek ten jest oznaczony jako związek 202. W poniższej tablicy 4 zamieszczono inne korzystne związki o wzorze Ig.
Poniżej, w tablicy 5 zamieszczono korzystne związki o wzorze Ih według niniejszego wynalazku. Innymi korzystnymi związkami o wzorze Ih są związki, w których Q1 oznacza fenyl niezależnie podstawiony w pozycjach 2 i 6 przez chlor lub fluor; każdy Y oznacza węgiel; każdy R oznacza wodór; a Q2 oznacza 2-metylofenyl, 4-fluorofenyl, 2,4-difluorofenyl, 2-metylenohydroksy-4-fluorofenyl lub 2-metylo-4-fluorofenyl.
PL 202 464 B1
Nr zw.
Struktura
Nr zw.
Struktura
W poniższych tablicach zamieszczono niektóre konkretne inhibitory o wzorach Ie, Ig i Ih. T a b l i c a 3
Inhibitory o wzorze Ie
201
206
203
207
204
208
205
209
PL 202 464 B1
Nr zw.
Struktura
Nr zw.
Struktura
202/301
302
303
304
T a b l i c a 4 Inhibitory o wzorze Ig.
306
307
308
309
305
310
PL 202 464 B1 cd. tablicy 4
311
317
312
318
313
319
314
320
315
321
316
322
PL 202 464 B1 cd. tablicy 4
1 2 3 4
ty CK Yii FiF YY
323 tyr X Λ Ν 329 YYr Y> A N ty A
Cl 1
HjN' o tyty ts Cl
F Fx h2nf x0
tyty Cl\ -ty\ F
1 ril tyty
A A -AJ 1
324 N Cl 330 A zA· N ty AtyA
0 HjN o CK tyj 5s Cl
HjhT x0
CH,
Y Cl 1 YY YY FXA
325 tyA A- [ N AJ 331 YY ΑΛ ty N AJ
5^ Cl HjC AJ k Cl
cr Tl Hj l< T HjN'””””
YY C1\ ΎΥ ty F YY
jjt a k A/ N tyty YJ
326 ęr N 332 H
HjN Cl 0 H2n'^> Cl 0
Cl CH,
YY d\ YY A F YY
327 ΛΛ N yj 333 tyr AA n tyr AJ
‘o*. JJk Cl jj < Cl
X H2N 0 F HjN-^ k
0 Cl
ΥΎ Fs ΥΑ F.
Γ H tyAty
328 Ar aa 334 Y' A-A Ίι N JO
AA < Cl
h2n “0 H,CX „A, A. Cl
HjN' 0
0 x0
PL 202 464 B1 cd. tablicy 4
1 2 3 4
F> AA
A ΤΊ XI AJ
335 V JA ν γ- aj < Cl 341 O Ν γ \ Cl
A 'CH3H2N—— HjN'— s 0
'0 Cl
AA 'Ύ<ϊ A F
»J<^- Jr Ίι N JJ AAr 00 JO N | AJ
336 ΗΟχ Js. Cl 342 V Cl
u H2N —
HjN ^0 — 0
0
0
P — AA Fyj
aa l 1
337 x i ip JO 343 c ,»Ά JA I N JaA
Asx O Cl
-A. Cl h2n o
h2n' -o ^0
H3C
AA F JA
AA I H T H
338 Ν γ^ JO 344 A A JO Ν γ xAxJJ
ę oa s. θι
-s h2n——5 Cl H,N -o
0
F
F. AA F' —AA
ΆΑ
339 tJ ν γ·^ JO 345 A A JO Ν γ -AsJ
Jf OJ Ą h2n-^ \ Cl
s- Cl x0
h2A—1 0 1 2
CH,
A FxA AJ) i u.
340 JO A li N MM 346 s^X· Jo γ N A
F. F-·5* <5^ η h2n' x-O Cl ^0 M II ^Cl HjN^ Ό Cl
PL 202 464 B1 cd. tablicy 4
1 2 3 4
347 Cl . 352 0 |Γ]!Νη2 Cl CH,
348 0 353 NH2 F Ć^-~=jJkF
349 \^>N NH2 354 ι^^<εΐ 0 γγΑκ2 Cl
350 r^A^0' o τγ'™- r\ Cl a-ucj 356 r^A^01 ° 01 Γΐ s <3
351 I ll ° 357 (Xx γ γ nh2 F AN
PL 202 464 B1 cd. tablicy 4
1 2 3 4
\ ^Cl ιΤ P rrcl 0
II ''NHj AA ”^nh2
358 Cl xJ ^*N /L Άι 363 c A n ?H>
H yS u ^χχ II 1 ΗΊ
UJ AA 'χχ- ^-F
s^CI 0 Η=Ν\χ-^χ- II 1 Cl 0
1 A nh2 LA ^^NHj
359 Cl ν' SN Η .N___ '^'xnh2 364 ci s' π ?Hj
A- II Ai II | ŁiTn
A LA
A ^xd iTVcl 0
a ^nh2 oh AA ^NH,
360 Cl N Α^χΟΗ 365 ć> A II A
A Ti LAJ Η 1
κ LAf
Γ*Ί .F 0 rvF 0
A ^^NHj LA '^x'nh2
361 Cl N CH, II 1 366 F r Ά
II 1 Ύ* γ II TiA
A T M
A x»CI 0 rrF
A 'x^'nh2 LA '''^NH2
362 Cl Ά Ίΐ f 367 F r
II II H II 1 1ΪΊ
A A
PL 202 464 B1 cd. tablicy 4
368
373
369
374
370
375
371
376
372
377
PL 202 464 B1 cd. tablicy 4
PL 202 464 B1 cd. tablicy 4
PL 202 464 B1 cd. tablicy 4
2 3 4
398
399
T a b l i c a 5
Inhibitory, związki o wzorze Ih
Nr zw. Struktura Nr zw. Struktura
1 2 3 4
401 404 QCl,
402 ęcx, Cl X 405 OK CH3zJ\
403 on 406 ęCk
PL 202 464 B1 cd. tablicy 4
1 2 3 4
407 ίγΛ... CH3^k 410 9X F χγΧ
408 ęCd, Cl ^k 411 Ya., 1
409 ęG„„, ci 412 ΓΤ°'° Cl ΧγΝΗ’ cX
Aktywność inhibitorów p38 według wynalazku można ocenić w badaniach in vitro, in vivo lub w badaniach na liniach komórkowych. Testy in vitro obejmują badania, które określają hamowanie aktywności kinazy lub aktywności ATPazy aktywowanego p38. Alternatywne badania in vitro określają zdolność inhibitora do wiązania się z p38, którą można zmierzyć przez radioznakowanie inhibitora przed związaniem, wyizolowanie kompleksu inhibitor/p38 i oznaczenie ilości radioznakowanego wiązania lub prowadząc badania kompetycyjne, w których nowe inhibitory inkubuje się z p38 związanym ze znanymi radioligandami.
W badaniach działania hamują cego zwią zków wedł ug wynalazku na hodowli komórek okreś lić można ilość TNF, IL-1, IL-6 lub IL-8 wytworzonych w pełnej krwi lub w jej frakcjach komórkowych traktowanej inhibitorem w porównaniu z komórkami traktowanymi ujemnymi związkami kontrolnymi. Poziom tych cytokin określić można stosując dostępne na rynku ELISA.
W badaniach in vivo dział anie hamują ce inhibitorów p38 według wynalazku okreś la się poprzez zmniejszenie obrzęku tylnej łapy szczura towarzyszącego zapaleniu stawów wywołanemu przez Mycobacterium butyricum. Badanie to opisali J.C. Boehm i in., w J. Med. Chem., 39, str. 3929-37 (1996), którą to publikację powołuje się tutaj jako stan techniki. Inhibitory p38 według wynalazku można również badać na zwierzęcych modelach zapalenia stawów, resorpcji kości, wstrząsu endotoksycznego i czynności
PL 202 464 B1 układu odpornościowego, jak opisali A.M. Badger i in., w J. Pharmacol. Experimental Therapeutics, 279, str. 1453-61 (1996), którą to publikację powołuje się tutaj jako stan techniki.
Inhibitory p38 lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole można sporządzać w postaci kompozycji farmaceutycznych do podawania zwierzętom lub ludziom. Takie kompozycje farmaceutyczne, które zawierają inhibitor p38 według wynalazku w ilości skutecznej do leczenia lub zapobiegania chorobom związanym z p38, oraz farmaceutycznie dopuszczalny nośnik, są następnym przedmiotem niniejszego wynalazku.
Stosowane tu określenie „choroba związana z p38 odnosi się do wielu chorób lub szkodliwych stanów, w których znana jest rola p38. Obejmują one stany chorobowe spowodowane nadprodukcją IL-1, TNF, IL-6 lub IL-8, takie jak, ale nie wyłącznie, choroby zapalne, choroby autoimmunizacyjne, choroby zwyrodnieniowe kości, choroby proliferacyjne, choroby zakaźne, choroby neurodegeneracyjne, alergie, reperfuzję/niedokrwienie przy udarze, ataki serca, choroby naczyniotwórcze, niedotlenienie narządów, rozrost naczyń, hipertrofia serca, agregacja płytek związana z trombiną oraz stany związane z syntazą-2 endonadtlenku prostaglandyny.
W zakres wynalazku wchodzi też zastosowanie związku według wynalazku do wytwarzania kompozycji farmaceutycznej do leczenia lub zapobiegania chorobom zapalnym, chorobom autoimmunizacyjnym, chorobom wirusowym, zwyrodnieniowym chorobom kości, chorobom proliferacyjnym, chorobom zakaźnym, chorobom neurodegeneracyjnym, alergiom, reperfuzji/niedokrwieniu przy udarze, niedokrwienia mięśnia sercowego, niedokrwienia nerek, atakom serca, chorobom naczyniotwórczym, niedotlenieniu narządów, rozrostowi naczyń, hipertrofii serca lub agregacji płytek związanej z trombiną, albo stanom związanym z syntazą-2 endonadtlenku prostaglandyny.
Choroby zapalne, które korzystnie można leczyć lub którym można zapobiegać, stosując kompozycję wytworzoną zgodnie z zastosowaniem według wynalazku, obejmują ostre zapalenie trzustki, przewlekłe zapalenie trzustki, astmę, alergie i zespół niewydolnych oddechowej u dorosłych.
Choroby autoimmunizacyjne, które korzystnie można leczyć lub którym można zapobiegać, stosując kompozycję wytworzoną zgodnie z zastosowaniem według wynalazku, obejmują zapalenie kłębuszków nerkowych, reumatoidalne zapalenie stawów, układowy toczeń rumieniowaty, twardzinę skóry, przewlekłe zapalenie tarczycy, chorobę Gravesa, autoimmunizacyjne zapalenie żołądka, cukrzycę, autoimmunizacyjną białaczkę hemolityczną, neutropenię autoimmunizacyjną, trombocytopenię, atopowe zapalenie skóry, przewlekłe aktywne zapalenie wątroby, miastenia gravis, stwardnienie rozsiane, chorobę zapalną jelita grubego, wrzodziejące zapalenie okrężnicy, chorobę Crohna, łuszczycę i chorobę przeszczepu przeciwko gospodarzowi.
Zwyrodnieniowe choroby kości, które korzystnie można leczyć lub którym można zapobiegać, stosując kompozycję wytworzoną zgodnie z zastosowaniem według wynalazku, obejmują osteoporozę, zapalenie kostno-stawowe i choroby kości związane ze szpiczakiem mnogim.
Choroby proliferacyjne, które korzystnie można leczyć lub którym można zapobiegać, stosując kompozycję wytworzoną zgodnie z zastosowaniem według wynalazku, obejmują ostrą białaczkę pochodzenia szpikowego, przewlekłą białaczkę pochodzenia szpikowego, czerniak przerzutowy, mięsak Kaposiego oraz szpiczak mnogi.
Choroby naczyniotwórcze, które korzystnie można leczyć lub którym można zapobiegać, stosując kompozycję wytworzoną zgodnie z zastosowaniem według wynalazku, obejmują guzy lite, zapalenie naczyń oka, naczyniaki dziecięce, neowaskularyzację oka.
Choroby zakaźne, które korzystnie można leczyć lub którym można zapobiegać, stosując kompozycję wytworzoną zgodnie z zastosowaniem według wynalazku, obejmują posocznicę, wstrząs septyczny i zakażenie pałeczkami Shigella.
Choroby wirusowe, które korzystnie można leczyć lub którym można zapobiegać, stosując kompozycję wytworzoną zgodnie z zastosowaniem według wynalazku, obejmują ostre zapalenie wątroby (obejmujące zapalenie wątroby A, zapalenie wątroby B i zapalenie wątroby C), zakażenia HIV i zapalenie spojówek wywołane przez wirus cytomegalii.
Choroby neurodegeneracyjne, które korzystnie można leczyć lub którym można zapobiegać, stosując kompozycję wytworzoną zgodnie z zastosowaniem według wynalazku, obejmują chorobę Alzheimera, chorobę Parkinsona, niedokrwienie mózgu lub choroby neurodegeneracyjne spowodowane uszkodzeniami i urazami.
„Stany chorobowe związane z p38, do leczenia lub zapobiegania którym przeznaczona jest kompozycja wytworzona zgodnie z zastosowaniem według wynalazku, obejmują również niedo38
PL 202 464 B1 krwienie/reperfuzję przy udarze, ataki serca, niedokrwienie mięśnia sercowego, niedotlenienie narządów, rozrost naczyń, przerost mięśnia sercowego oraz agregację płytek związaną z trombiną.
Ponadto, inhibitory p38 według wynalazku są również zdolne do hamowania ekspresji indukowalnych białek prozapalnych, takich jak syntaza-2 endonadtlenku prostaglandyny (PGHS-2), określana również jako cyklooksygenaza-2 (COX-2). Tak więc, inne „stany chorobowe związane z p38 obejmują obrzęk, analgezję, gorączkę i bóle, takie jak ból nerwowo-mięśniowy, ból głowy, bóle nowotworowe, ból zęba i ból stawów.
Choroby, które można leczyć lub którym można zapobiegać stosując inhibitory p38 według wynalazku w postaci kompozycji wytworzonych zgodnie z zastosowaniem według wynalazku, można również pogrupować według cytokin (IL-1, TNF, IL-6, IL-8), które za daną chorobę są odpowiedzialne.
Tak więc, choroby lub stany chorobowe związane z IL-1, obejmują reumatoidalne zapalenie stawów, zapalenie kostno-stawowe, udar, endotoksemię i/lub zespół wstrząsu toksycznego, reakcję zapalną wywołaną przez endotoksyny, chorobę zapalna jelita grubego, gruźlicę, miażdżycę tętnic, zwyrodnienie mięśni, kacheksję, zapalenie stawów spowodowane łuszczycą, zespół Reitera, dnę, pourazowe zapalenie stawów, zapalenie stawów spowodowane różyczką, ostre zapalenie błony maziowej, cukrzycę, chorobę trzustki związana z komórkami P i chorobę Alzheimera.
Choroby lub stany chorobowe związane z TNF obejmują reu matoidalne zapalenie stawów, zesztywniające zapalenie stawów kręgosłupa, zapalenie kostno-stawowe, ostre dnawe zapalenie stawów i inne stany artretyczne, posocznicę, wstrząs septyczny, wstrząs endotoksyczne, posocznicę gram ujemną, zespół wstrząsu toksycznego, zespół niewydolności oddechowej dorosłych, malarię mózgową, przewlekłą zapalną chorobę płuc, pylicę krzemową, sarkoidozę płucną, choroby związane z resorpcją kości, odrzucenie przeszczepu, gorączkę i ból mięśni spowodowany zakażeniem, kacheksję w następstwie zakażenia, AIDS, ARC lub nowotwory złośliwe, tworzenie bliznowców, bliznowce tkankowe, chorobę Crohna, wrzodziejące zapalenie okrężnicy lub stany gorączkowe. Choroby związane z TNF obejmują również zakażenie wirusowe, takie jak HIV, CMV, grupę i opryszczkę; oraz weterynaryjne zakażenia wirusowe, takie jak zakażenia wirusowym zapaleniem soczewek, zakażenia końskim wirusem białaczki, zakażenia kozim wirusem zapalenia stawów, zakażenia wirusami maedi i visna; lub zakażenia retrowirusami, obejmujące koci wirus niedoboru odporności, bydlęcy wirus niedoboru odporności lub psi wirus niedoboru odporności.
Choroby lub stany chorobowe związane z IL-8 obejmują choroby charakteryzujące się intensywnym naciekaniem obojętnochłonnych krwinek białych, takie jak łuszczyca, choroba zapalna jelita grubego, astma, reperfuzja serca i nerek związana z uszkodzeniami, zespół niewydolności oddechowej dorosłych, zakrzepica i zapalenie kłębuszków nerkowych.
Ponadto, związki według wynalazku można stosować miejscowo do leczenia i zapobiegania stanom spowodowanym lub zaostrzonym przez IL-1 lub TNF. Stany takie obejmują zapalenie stawów, egzemę, łuszczycę, zapalenia skóry, takie jak porażenia słoneczne, zapalenia oka, takie jak zapalenia spojówek, stany gorączkowe, bóle i inne stany związane z zapaleniami.
Związki według wynalazku oraz farmaceutycznie dopuszczalne sole związków według wynalazku można ponadto stosować w kompozycjach do leczenia lub zapobiegania wymienionym powyżej chorobom.
Farmaceutycznie dopuszczalne sole związków według wynalazku obejmują sole utworzone z farmaceutycznie dopuszczalnymi kwasami nieorganicznymi i organicznymi oraz z zasadami. Przykłady odpowiednich soli z kwasami obejmują octan, adypinian, alginian, asparaginian, benzoesan, benzenosulfonian, wodorosiarczan, maślan, cytrynian, kamforan, kamforosulfonian, cyklopentanopropionian, diglikonian, dodecylosiarczan, etanosulfonian, mrówczan, fumaran, glukoheptanian, glicerofosforan, glikolan, hemisiarczan, heptanian, heksanian, chlorowodorek, bromowodorek, jodowodorek, 2-hydroksyetanosulfonian, mleczan, maleinian, malonian, metanosulfonian, 2-naftalenosulfonian, nikotynian, azotan, szczawian, palmitynian, pektynian, nadsiarczan, 3-fenylopropionian, fosforan, pikrynian, piwalinian, propionian, salicylan, bursztynian, siarczan, winian, tiocyjanian, tosylan i undekanian. Inne kwasy, takie jak szczawiowy, aczkolwiek same nie są farmaceutycznie dopuszczalne, mogą być stosowane do wytwarzania soli użytecznych jako produkty przejściowe w wytwarzaniu związków według wynalazku oraz ich farmaceutycznie dopuszczalnych soli addycyjnych z kwasami.
Sole utworzone z odpowiednimi zasadami obejmują sole metali alkalicznych (np. z sodem i potasem), metali ziem alkalicznych (np. z magnezem), sole amonowe i sole N-(C1-C4alkil)4+. Wynalazek przewiduje również czwartorzędowanie dowolnych grup zawierających zasadowy atom azotu
PL 202 464 B1 w związkach według wynalazku. W wyniku takiego czwartorzędowania wytworzyć można produkty rozpuszczalne lub dyspergowalne w wodzie lub w oleju.
Farmaceutycznie dopuszczalne nośniki, które można stosować w kompozycjach farmaceutycznych według wynalazku obejmują, ale nie wyłącznie, wymieniacze jonowe, tlenek glinu, stearynian glinu, lecytynę, białka surowicy, takie jak ludzka albumina surowicza, substancje buforowe, takie jak fosforany, glicynę, kwas sorbinowy, sorbinian potasu, mieszaniny częściowych glicerydów nasyconych roślinnych kwasów tłuszczowych, wodę, sole i elektrolity, takie jak siarczan protaminy, wodorofosforan disodu, wodorofosforan potasu, chlorek sodu, sole cynku, krzemionkę koloidalną, trikrzemian magnezu, poliwinylopirolidon, substancje oparte na celulozie, glikol polietylenowy, sól sodową karboksymetylocelulozy, poliakrylany, woski, polimery blokowe polietylen-polioksypropylen, glikol polietylenowy i lanolinę.
Kompozycje farmaceutyczne według wynalazku można podawać doustnie, pozajelitowo, przez wdmuchiwanie do nosa, miejscowo, doodbytniczo, donosowo, dopoliczkowo, dopochwowo lub z wszczepionego zbiornika. Stosowany tu termin „pozajelitowo obejmuje wstrzykiwanie podskórne, dożylne, domięśniowe, dostawowe, domaziówkowe, domostkowe, dokomorowe, dowątrobowe, do miejsca chorobowo zmienionego i doczaszkowe, oraz podawanie technikami wlewów. Korzystnie, kompozycje podaje się doustnie, dootrzewnowo lub dożylnie.
Sterylne preparaty do wstrzyknięć według wynalazku mogą być w postaci wodnych lub olejowych zawiesin. Zawiesiny takie wytwarza się znanymi w technice sposobami przy użyciu odpowiednich środków dyspergujących lub zwilżających i środków zawieszających. Sterylne preparaty do wstrzyknięć mogą być również w postaci sterylnego nadającego się do wstrzyknięć roztworu lub zawiesiny w nietoksycznym dopuszczalnym do stosowania pozajelitowego rozcieńczalniku lub rozpuszczalniku, na przykład jako roztwór w 1,3-butanodiolu. Jako dopuszczalne rozcieńczalniki i rozpuszczalniki można stosować wodę, roztwór Ringera i izotoniczny roztwór chlorku sodu. Ponadto, jako rozcieńczalnik lub środek zawieszający korzystnie stosuje się również sterylne, ciekłe oleje. Do tych celów stosować można dowolną mieszankę ciekłych olejów, łącznie z syntetycznymi mono- lub diglicerydami. Do wytwarzania preparatów do wstrzyknięć przydatne są także kwasy tłuszczowe, takie jak kwas oleinowy, i jego glicerydowe pochodne, oraz naturalne farmaceutycznie dopuszczalne oleje, takie jak olej z oliwek lub olej rycynowy, szczególnie w ich polietoksylowanych wersjach. Takie olejowe roztwory lub zawiesiny mogą również zawierać jako rozcieńczalnik długołańcuchowy alkohol, lub czynnik dyspergujący, taki jak karboksymetyloceluloza lub podobne środki dyspergujące, które są zwyczajowo stosowane do wytwarzania farmaceutycznie dopuszczalnych postaci użytkowych, takich jak emulsje i zawiesiny. Do wytwarzania kompozycji farmaceutycznych w postaci stałej, ciekłej lub w innej formie, można również stosować inne stosowane zwykle środki powierzchniowo czynne, takie jak Tween lub Span oraz inne podobne środki emulgujące lub zwiększające biodostępność.
Kompozycje farmaceutyczne według wynalazku wynalazku można podawać doustnie w dowolnej postaci użytkowej odpowiedniej do takiego podawania, obejmującej, ale nie wyłącznie, kapsułki, tabletki, wodne zawiesiny i roztwory. W przypadku tabletek do podawania doustnego jako nośniki stosuje się zwykle laktozę i skrobię kukurydzianą. Zazwyczaj dodaje się również środki poślizgowe, takie jak stearynian magnezu. W kapsułkach do podawania doustnego użyteczne nośniki obejmują laktozę i suchą skrobię kukurydzianą. W wodnych zawiesinach do podawania doustnego składnik czynny łączy się ze środkami emulgującymi lub zawieszającymi. W razie potrzeby, można również dodawać substancje słodzące smakowo-zapachowe lub barwniki.
Alternatywnie, kompozycje farmaceutyczne według wynalazku można również podawać w postaci czopków do podawania doodbytniczego. Preparaty takie wytwarza się przez zmieszanie związku według wynalazku z odpowiednim niedrażniącym nośnikiem, który jest stały w temperaturze pokojowej, ale ciekły w temperaturze odbytu, a zatem topi się w odbycie, uwalniając lek. Substancje takie obejmują, ale nie wyłącznie, masło kakaowe, wosk pszczeli i glikole polietylenowe.
Kompozycje farmaceutyczne według wynalazku można również podawać miejscowo, szczególnie, gdy żądane leczenie obejmuje obszary lub narządy łatwo dostępne przy takim podawaniu, takie jak oczy, skóra lub dolne odcinki przewodu pokarmowego. Odpowiednie kompozycje do podawania miejscowego na takie obszary lub narządy wytwarza się znanymi sposobami.
Kompozycje do podawania miejscowego do dolnych odcinków przewodu pokarmowego mogą mieć postać czopków lub odpowiednich wlewów doodbytniczych. Można również stosować plastry do podawania przezskórnego.
PL 202 464 B1
Do zastosowania miejscowego kompozycje farmaceutyczne sporządza się w postaci odpowiedniej maści zawierającej składnik czynny zawieszony lub rozpuszczony w jednym lub więcej niż jednym nośniku. Nośniki do podawania miejscowego związków według wynalazku obejmują, ale nie wyłącznie, olej mineralny, parafinę ciekłą, wazelinę białą, glikol propylenowy, polioksyetylen, polioksypropylen, wosk emulgujący i wodę. Alternatywnie, kompozycje farmaceutyczne mogą być w postaci lotionu lub kremu zawierającego składniki czynne zawieszone lub rozpuszczone w jednym lub więcej farmaceutycznie dopuszczalnym nośniku. Do odpowiednich nośników należą, ale nie wyłącznie, olej mineralny, monostearynian sorbitanu, polysorbate 60, woski oparte na estrach cetylowych, alkohol cetearylowy, 2-oktylododekanol, alkohol benzylowy i woda.
Do zastosowania w okulistyce, kompozycje farmaceutyczne sporządza się w postaci mikronizowanych zawiesin w izotonicznych, sterylnych roztworach soli fizjologicznej o ustalonym pH, lub, korzystnie w postaci roztworów w izotonicznych, sterylnych roztworach soli fizjologicznej o ustalonym pH, bez lub z substancjami konserwującymi, takimi jak chlorek benzalkoniowy. Alternatywnie, kompozycje do zastosowania w preparatach do oczu można mogą mieć postać maści, takich jak wazelina.
Kompozycje farmaceutyczne według wynalazku można również podawać przez rozpylanie do nosa lub inhalację. Kompozycje takie wytwarza się technikami znanymi w farmacji i mogą być one sporządzone jako roztwory w soli fizjologicznej, z zastosowaniem alkoholu benzylowego lub innych odpowiednich środków konserwujących, promotorów absorpcji zwiększających biodostępność, fluorowęglowodorów i/lub innych znanych w technice środków solubilizujących lub dyspergujących.
Ilość inhibitora p38, którą można połączyć z nośnikami, uzyskując dawkę jednostkową, będzie zmieniać się w zależności od leczonego pacjenta i konkretnej drogi podawania. Korzystnie, kompozycję wytwarza się tak, aby można było podać pacjentowi inhibitor w dawce w zakresie 0,01 - 100 mg/kg wagi ciała/dzień.
Należy podkreślić, że konkretne dawki i sposób leczenia dla danego pacjenta zależeć będzie od wielu czynników, obejmujących działanie konkretnego stosowanego związku, wiek, ciężar ciała, ogólny stan zdrowia, płeć, dietę, czas podawania, szybkość wydalania, połączenie z innymi lekami, ocenę lekarza prowadzącego i zaawansowanie konkretnej leczonej choroby. Ilość inhibitora zależna również będzie od konkretnego związku zawartego w kompozycji.
Sposoby leczenia lub zapobiegania chorobom związanym z p38 obejmują etap podawania pacjentowi jednej z opisanych powyżej kompozycji farmaceutycznych. Stosowane tu określenie „pacjent oznacza zwierzę, a korzystnie człowieka.
W zależ noś ci od konkretnego stanu zwią zanego z p38, który ma być leczony lub któremu należy zapobiec, razem z inhibitorami według wynalazku można również podawać dodatkowe leki, które zazwyczaj podaje się do leczenie lub zapobiegania takim chorobom. Przykładowo, w leczeniu chorób proliferacyjnych z inhibitorami p38 według wynalazku można łączyć środki chemioterapeutyczne lub inne środki przeciwproliferacyjne.
Takie dodatkowe środki można podawać oddzielne, jako część wielokrotnego schematu dawkowania, niezależnie od kompozycji zawierającej inhibitor p38. Alternatywnie, środki te można podawać jako dawkę jednostkową, zmieszaną w formie jednej kompozycji z inhibitorem p38.
W celu peł niejszego zrozumienia wynalazku zamieszczono nastę pują ce przykł ady. Mają one jednak charakter wyłącznie ilustracyjny i w żaden sposób nie ograniczają zakresu wynalazku.
P r z y k ł a d 1
Synteza inhibitora p38, związku 1
W nastę pują cych 4 przykł adach podano przykł ady syntezy kilku zwią zków o wzorze la.
A.
Do zawiesiny amidku sodu, 90% (1,17 g, 30 mmoli) w suchym tetrahydrofuranie (20 ml) dodano w temperaturze pokojowej roztworu cyjanku benzylu (2,92 g, 25,0 mmola) w suchym tetrahydrofuranie (10 ml).
PL 202 464 B1
Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 30 minut. Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztworu 3,6-dichloropirydazyny (3,70 g, 25,0 mmola) w suchym tetrahydrofuranie. Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 30 minut, po czym rozcieńczono nasyconym wodnym roztworem wodorowęglanu sodu. Następnie mieszaninę reakcyjną ekstrahowano octanem etylu. Rozdzielono warstwy i warstwę organiczną przemyto wodą, solanką, wysuszono nad siarczanem magnezu, przesączono i zatężono pod próżnią.
Pozostałość oczyszczono metodą chromatografii na żelu krzemionkowym (eluent: 30% octan etylu w n-heksanie) i otrzymano 3,71 g (16,20 mmola ~54%) produktu w postaci białej substancji stałej.
B.
Do zawiesiny wodorku sodu, 95% (0,14 g, 6,0 mmola) w suchym tetrahydrofuranie (10 ml) w temperaturze pokojowej dodano tiofenolu (0,66 g, 6,0 ml), po czym mieszaninę reakcyjną mieszano przez 10 minut. Do mieszaniny reakcyjnej dodano roztworu produktu z etapu A (1,31 g, 5,72 mmola) w absolutnym etanolu (20 ml). Nastę pnie mieszaninę reakcyjną ogrzewano do wrzenia pod ch ł odnicą zwrotną przez 1 godzinę. Oziębioną mieszaninę reakcyjną zatężono pod próżnią. Pozostałość rozcieńczono 1N roztworem wodorotlenku sodu (10 ml), a następnie ekstrahowano chlorkiem metylenu. Fazę organiczną przemyto wodą, solanką, wysuszono nad siarczanem magnezu i zatężono pod próżnią.
Pozostałość oczyszczono metodą chromatografii na żelu krzemionkowym (eluent: 20% octan etylu w n-heksanie) i otrzymano 0,66 g (2,19 mmola -40%) produktu w postaci białej substancji stałej.
C.
N pre-1
Mieszaninę produktu z etapu B (0,17 g, 0,69 mmola) i stężonego kwasu siarkowego (5 ml) ogrzewano do temperatury 100°C przez 1 godzinę. Roztwór oziębiono i pH doprowadzono do wartości 8 dodatkiem nasyconego roztworu wodorowęglanu sodu. Mieszaninę reakcyjną ekstrahowano chlorkiem metylenu. Warstwę organiczną przemyto wodą, solanką, wysuszono nad siarczanem magnezu i zatężono pod próżnią, uzyskując 0,22 g (0,69 mmola -100%) związku pre-1 w postaci pomarańczowego oleju.
1H NMR (500 MHz, CD3OD) d 7,7 (d), 7,5 (d), 7,4 (m), 7,3-7,2 (m).
D.
PL 202 464 B1
Roztwór prekursora związku 1 z etapu C (0,22 g, 0,69 mmola) i dimetyloacetalu N,N-dimetyloformamidu (0,18 g, 1,5 mmola) w toluenie (5 ml) ogrzewano w temperaturze 100°C przez 1 godzinę. Po oziębieniu wytworzoną substancję stałą przesączono i rozpuszczono w gorącym octanie etylu. Produkt wytrącono przez wkroplenie eteru dietylowego, a następnie przesączono i przemyto eterem dietylowym. Otrzymano 0,038 g związku 1 w postaci żółtej substancji.
1H NMR (500 MHz, CDCl3) d 8,63 (s), 7,63-7,21 (m), 6,44 (d).
P r z y k ł a d 2
Synteza inhibitora p38, związku 2
A.
Przedstawiony powyżej pierwszy związek przejściowy wytworzono w sposób podobny do opisanego w przykładzie 1A, stosując 4-fluorofenyloacetonitryl, i otrzymano 1,4 g (5,7 mmola, -15%) produktu.
Powyższy związek przejściowy wytworzono w sposób podobny do opisanego w przykładzie 1B. Otrzymano 0,49 g (1,5 mmola, 56%) produktu.
C.
U O' NH2
N pre-2
Powyższy związek przejściowy wytworzono w sposób podobny do opisanego w przykładzie 1C. Otrzymano 0,10 g (0,29 mmola, 45%) prekursora związku 2. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) d 7,65-7,48 (m),
7,47-7, 30 (m), 7,29-7,11 (m), 7,06-6,91 (m), 5,85 (s, br).
D.
PL 202 464 B1
Związek 2 (zamieszczony w tablicy 1) wytworzono z prekursora związku 2 w sposób podobny do opisanego w przykładzie 1D. Otrzymano 0,66 g produktu. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) d 8,60 (s), 7,62-7,03 (m), 6,44 (d)).
P r z y k ł a d 3
Synteza inhibitora p38, związku 6
A.
Ν N
Pierwszy produkt przejściowy do wytwarzania związku 6 otrzymano w sposób podobny do opisanego w przykładzie 1A, stosując 2,6-dichlorofenyloacetonitryl. Uzyskano 2,49 g (8,3 g, 28%) produktu.
B.
Następny etap w syntezie związku 6 prowadzono w sposób podobny do opisanego w przykładzie 1B. Otrzymano 2,82 g (7,6 mmola, 91%) produktu.
C.
Ostatni produkt przejściowy, prekursor związku 6, wytworzono w sposób podobny do opisanego w przykładzie 1C. Otrzymano 0,89 g (2,3 mmola, 85%) produktu. 1H NMR (500 MHz, CD3OD) d 7,5-7,4 (dd), 7,4 (m), 7,3 (d), 7,2 (m), 7,05 (d).
D.
PL 202 464 B1
Końcowy etap syntezy związku 6 (zamieszczonego w tablicy 1) prowadzono, jak opisano w przykładzie 1D. Otrzymano 0,06 g produktu. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) d 8,69 (s), 7, 65-7,59 (d), 7,58-7,36 (m), 7,32-7,22 (m), 6,79 (d), 6,53 (d).
P r z y k ł a d 4
Wytwarzanie inhibitora p38, związku 5
A.
Pierwszy produkt przejściowy w syntezie związku 5 wytworzono w sposób podobny do opisanego w przykładzie 1A, stosując 2,4-dichlorofenyloacetonitryl. Otrzymano 3,67 g (12,36 mmola, 49%) produktu.
B.
Drugi związek przejściowy wytworzono w sposób podobny do opisanego w przykładzie 1B.
Otrzymano 3,82 g (9,92 mmola, 92%) produktu.
Końcowy związek przejściowy, prekursor związku 5, wytworzono w sposób podobny do opisanego w przykładzie 1C. Otrzymano 0,10 g (0,24 mmola, 92%) produktu. 1H NMR (500 MHz, CD3OD) d 7,9 (d), 7,7 (d), 7,6-7,5 (dd), 7,4-7,3 (m), 2,4 (s).
D.
PL 202 464 B1
Końcowy etap w syntezie związku 5 (zamieszczonego w tablicy 1) prowadzono w sposób podobny do opisanego w przykładzie 1D. Otrzymano 0,06 g produktu. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) d 8,64 (s), 7,51-7,42 (m), 7,32-7,21 (m), 6,85 (d), 6,51 (d), 2,42 (s).
W podobny sposób moż na zsyntetyzować inne zwią zki o wzorze la, stosują c odpowiednie substancje wyjściowe.
P r z y k ł a d 5
Synteza inhibitora p38, związku 103
W przykładzie tym opisano typową syntezę związku o wzorze Ic.
A.
Inhibitor p38, związek 12, wytworzono zasadniczo jak opisano w przykładzie 4, z tą różnicą, że w etapie B stosowano 4-fluorotiofenyl.
B.
Związek 12 w temperaturze pokojowej rozpuszczono w suchym THF (5 ml). Do roztworu tego dano wodorku diizobutyloglinu (1M roztwór w toluenie, 5 ml, 5 mmoli) i mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 1 godzinę. Następnie mieszaninę reakcyjną rozcieńczono octanem etylu i reakcję przerwano dodatkiem soli Rochelle'a. Rozdzielono warstwy i warstwę organiczną wyodrębniono, przemyto wodą i solanką, wysuszono nad siarczanem magnezu i przesączono. Otrzymano surowy związek 103. Surowy produkt poddano chromatografii na żelu krzemionkowym, eluując 2% metanolem w chlorku metylenu. W ten sposób otrzymano czysty związek 103 (210 mg, 50% wydajności). 1H NMR (500 MHz, CDCl3) 7,51 (m, 1H), 7,38 (d, 2H), 7,20 (t, 2H), 7,08 (t, 2H), 6,70 (szeroki s, 1H), 6,30 (dd, 2H), 5,20 (s, 2H).
P r z y k ł a d 6
Synteza inhibitora p38, związku 201
A.
Przedstawiony powyżej wyjściowy nitryl (5,9 g, 31,8 mmola) w temperaturze pokojowej rozpuszczono w DMF (20 ml). Następnie dodano wodorku sodu (763 mg, 31,8 mmola), co spowodowało wytworzenie zabarwionego na jasnożółty kolor roztworu. Po 15 minutach dodano roztworu 2,5-dibromopirydyny (5,0 g, 21,1 mola) w DMF (10 ml), a następnie tetrakis(trifenylofosfino)palladu (3 mmole),
PL 202 464 B1 po czym roztwór ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 3 godziny. Mieszaninę reakcyjną oziębiono do temperatury pokojowej i rozcieńczono octanem etylu. Oddzielono warstwę organiczną, przemyto wodą, a następnie solanką, wysuszono nad siarczanem magnezu, przesączono i odparowano pod próżnią, uzyskując surowy olej. Po szybkiej chromatografii kolumnowej z eluowaniem 10% octanem etylu w heksanie, otrzymano produkt (5,8 g, 84%) w postaci białawej substancji stałej.
B.
Wytworzony w etapie A bromek (194,8 mg, 0,57 mmola) rozpuszczono w ksylenie (15 ml).
Do roztworu tego dodano cynianu tiofenylu (200 μI , 587 mmoli) i tetrakis (trifenylofosfino)palladu (25 mg).
Roztwór ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez noc, oziębiono, przesączono i odparowano pod próżnią. Surowy produkt poddano chromatografii na żelu krzemionkowym, eluując chlorkiem metylenu i otrzymano czysty produkt (152 mg, 72%) w postaci żółtego oleju.
C.
Wytworzony w etapie B związek nitrylowy (1,2 g, 3,37 mmola) rozpuszczono w lodowatym kwasie octowym (30 ml). Do roztworu tego dodano wody (120 gl, 6,67 mmola), a następnie tetrachlorku tytanu (760 gl, 6,91 mmola), w wyniku czego reakcja stała się egzotermiczna. Następnie roztwór ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez dwie godziny, oziębiono i przelano do 1N HCl. Warstwę wodną ekstrahowano chlorkiem metylenu. Warstwę organiczną ponownie przemyto 1N roztworem Na-OH, wysuszono nad siarczanem magnezu i przesączono przez wkładką z żelem krzemionkowym. Wkładkę eluowano najpierw chlorkiem metylenu aby usunąć nieprzereagowane substancje wyjściowe, a następnie octanem etylu i otrzymano związek 201. Octan etylu odparowano i otrzymano czysty związek 201 (1,0 g, 77%).
P r z y k ł a d 7
Synteza inhibitora p38, związku 110
A.
Wyjściowy nitryl (3,76 g, 11,1 mmola) najpierw rozpuszczono w lodowatym kwasie octowym (20 ml).
Do roztworu tego dodano tetrachlorku tytanu (22,2 ml) i wody (22,2 mmola) i roztwór ogrzewano do
PL 202 464 B1 wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 1 godzinę. Mieszaninę reakcyjną oziębiono i rozcieńczono w mieszaninie woda/octan etylu. Oddzielono warstwę organiczną, przemyto solanką i wysuszono nad siarczanem magnezu. Warstwę organiczną następnie przesączono i odparowano pod próżnią. Wytworzony surowy produkt poddano chromatografii na żelu krzemionkowym, eluując 5% metanolem w chlorku metylenu i otrzymano czysty produkt w postaci żółtej piany (2,77 g, 70%).
B.
Wytworzony w etapie A amid (1,54 g, 4,3 mmola) rozpuszczono w toluenie (20 ml). Następnie dodano dimetyloacetalu N,N-dimetyloformamidu (1,53 g, 12,9 mmola), wytworzony roztwór ogrzewano przez 10 minut, po czym oziębiono do temperatury pokojowej. Następnie mieszaninę reakcyjną odparowano pod próżnią i pozostałość poddano chromatografii na żelu krzemionkowym, eluując 2-5% metanolem w chlorku metylenu. Odzyskaną substancję rozpuszczono w gorącym octanie etylu. Roztwór pozostawiono, aby oziębił się, w wyniku czego wykrystalizował czysty produkt w postaci żółtej substancji stałej (600 mg, 40%). Dodatkową ilość substancji (około 800 mg) otrzymano z roztworu macierzystego.
C.
Bromek z etapu B (369 mg, 1 mmola) rozpuszczono w THF (10 ml). Następnie dodano wodorku diizobutyloglinu (1,0 M roztwór, 4 mmole), mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez 10 minut, po czym reakcję przerwano dodatkiem metanolu (1 ml). Następnie dodano nasyconego roztworu soli Rochelle i mieszaninę ekstrahowano octanem etylu. Oddzielono warstwę organiczną, wysuszono nad siarczanem magnezu, odparowano i pozostałość poddano chromatografii na żelu krzemionkowym, eluując 1-3% metanolem w chlorku metylenu. Otrzymano jasnopomarańczową substancję stałą (85 mg, 23% wydajności).
D.
Wytworzony w etapie C bromek (35,2 mg, 0,1 mmola) rozpuszczono w ksylenie (12 ml). Do roztworu tego dodano tiofenolu (0,19 mmola), a następnie metanolanu tributylocyny (0,19 mmola). Wytworzony roztwór ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 10 minut, po czym dodano te48
PL 202 464 B1 trakis(trifenylofosfino)palladu (0,020 mmola). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano i reakcję monitorowano aż do zniknięcia wyjściowego bromku. Następnie mieszaninę reakcyjną oziębiono do temperatury pokojowej i przepuszczono przez wkładkę z żelem krzemionkowym. Wkładkę eluowano najpierw chlorkiem metylenu, aby usunąć nadmiar reagenta cynowego, a następnie 5% metanolem w octanie etylu w celu wyeluowania inhibitora p38. Przesącz zatężono i poddano chromatografii na żelu krzemionkowym, stosując 5% metanol w octanie etylu jako eluent. Otrzymano czysty związek 110 (20 mg, 52%).
P r z y k ł a d 8
Synteza inhibitora p38, związku 202
A.
Pd(PPh3)4
Wyjściowy nitryl (2,32 g, 12 mmola) w temperaturze pokojowej rozpuszczono w DMF (10 ml). Po dodaniu wodorku sodu (12 mmoli) otrzymano roztwór zabarwiony na jasnożółty kolor. Po 15 minutach dodano roztworu 2,6-dibromopirydyny (2,36 g, 10 mmola) w DMF (5 ml), a następnie tetrakis(trifenylofosfino)palladu (1,0 mmola). Roztwór ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 3 godziny. Następnie mieszaninę reakcyjną oziębiono do temperatury pokojowej i rozcieńczono octanem etylu. Warstwę organiczną oddzielono i przemyto wodą i solanką, wysuszono nad siarczanem magnezu, przesączono i odparowano pod próżnią, uzyskując olej. Po szybkiej chromatografii kolumnowej z eluowaniem 10% octanem etylu w heksanie otrzymano produkt (1,45 g, 42%) w postaci białej substancji stałej.
B.
Wytworzony w etapie A związek bromowy (1,77 g, 5,2 mmola) rozpuszczono w toluenie (20 ml) i otrzymany roztwór odgazowano. W atmosferze azotu dodano roztworu kwasu fenyloboronowego (950 mg, 7,8 mmola) w etanolu (4 ml) i roztworu węglanu sodu (1,73 g, 14 mmola) w wodzie (4 ml). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 1 godzinę, po czym oziębiono do temperatury pokojowej, rozcieńczono octanem etylu i przemyto wodą i solanką. Następnie warstwę organiczną wysuszono nad siarczanem magnezu, przesączono i zatężono pod próżnią. Pozostałość oczyszczono na żelu krzemionkowym, eluując 30% octanem etylu w heksanie. Otrzymano produkt w postaci białej substancji stałej (1,56 g, 88%).
PL 202 464 B1
C.
Nitryl z etapu B (700 mg, 2,07 mmola) rozpuszczono w stężonym kwasie solnym (10 ml) i ogrzewano do temperatury 80°C przez 1 godzinę. Następnie mieszaninę reakcyjną oziębiono do temperatury pokojowej i pH doprowadzono do wartości 8 dodatkiem 6N roztworu wodorotlenku sodu, po czym mieszaninę ekstrahowano octanem etylu. Oddzielono warstwę organiczną, wysuszono nad siarczanem magnezu i odparowano pod próżnią, uzyskując związek 202 w postaci żółtej piany (618 mg, 84%).
P r z y k ł a d 9
Synteza związku 410
A.
W wysuszonej nad płomieniem, 100 ml okrągłodennej kolbie do 50 ml bezwodnego tetrahydrofuranu dodano 2,28 g (93,8 mmola) wiórków magnezowych. Dodano jeden kryształek jodu, co spowodowało wytworzenie jasnobrązowego roztworu. Do roztworu tego dodano 1,5 ml 10,0 ml próbki (79,1 mmola) 2-bromo-5-fluorotoluenu. Roztwór ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną. Brązowy kolor wypłowiał i temperaturę wrzenia pod chłodnicą zwrotną utrzymywano, a gdy zaobserwowano wytworzenie się reagenta Grignarda, zewnętrzne źródło ciepła usunięto. Gdy mieszanina przestała wrzeć dodano następną 1,0-1,5 ml porcję bromku, co spowodowało gwałtowne wrzenie. Czynność tę powtórzono, aż dodano całość bromku. W celu zakończenia reakcji oliwkowo-zielony roztwór ogrzewano zewnętrznie do wrzenia przez 1 godzinę. Roztwór oziębiono w łaźni lodowej i w temperaturze -78°C strzykawką dodano do roztworu 9,3 ml (81,9 mmola) boranu trimetylu w 100 ml tetrahydrofuranu. Po dodaniu reagenta Grignarda kolbę usunięto z łaźni oziębiającej i roztwór mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Szarawo-białą zawiesinę przelano do 300 ml H2O i substancje lotne usunięto pod próżnią. Dodano HCl (400 ml 2N roztworu) i mleczno-białą mieszaninę mieszano przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Wytrącił się biały osad. Mieszaninę ekstrahowano eterem dietylowym i ekstrakt organiczny wysuszono (MgSO4) i odparowano pod próżnią, uzyskując 11,44 g (94%) kwasu boronowego w postaci białej substancji stałej.
B.
PL 202 464 B1
W 100 ml okrągłodennej kolbie 7,92 g (33,4 mmola) 2,6-dibromopirydyny rozpuszczono w 50 ml bezwodnego toluenu i o-trzymano przezroczysty, bezbarwny roztwór. Dodano wytworzonego w etapie A kwasu 4-fluoro-2-metylobenzenoboronowego (5,09 g, 33,1 mmola) i otrzymano białą zawiesinę. Dodano węglanu talu (17,45 g, 37,2 mmola), a następnie katalityczną ilość (150 mg) Pd(PPh3)4. Mieszaninę ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez noc, oziębiono i przesączono przez wkładkę z żelem krzemionkowym. Wkładkę przemyto CH2Cl2 i przesącz odparowano, uzyskują c białą substancję stałą. Substancję tę rozpuszczono w minimalnej ilości mieszaniny 50% CH2Cl2/heksan i poddano chromatografii na krótkiej kolumnie z żelem krzemionkowym, stosując mieszaninę 30% CH2Cl2/heksan. Otrzymano 6,55 g (74%) 2-bromo-6-(4-fluoro-2-metylofenylo)pirydyny w postaci białej substancji stałej.
C.
W 50 ml okrągłodennej kolbie 550 mg (2,07 mmola) wytworzonej w etapie B 2-bromo-6-(4-fluoro-2-metylofenylo)pirydyny rozpuszczono w 30 ml bezwodnego tetrahydrofuranu, w wyniku czego wytworzył się przezroczysty, bezbarwny roztwór. Dodano 2,6-difluoroaniliny (2,14 ml, 2,14 mmola), a nastę pnie 112 mg (2,79 mmola) 60% zawiesiny NaH w oleju mineralnym. Wraz z ł agodnym wydzielaniem się ciepła zaobserwowano wydzielanie się gazu. Roztwór ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez noc, po czym oziębiono. Mieszaninę reakcyjną przelano do 10% roztworu NH4Cl i ekstrahowano CH2Cl2. Ekstrakt organiczny wysuszono (MgSO4) i odparowano pod próżnią, uzyskując brązowy olej, który stanowił mieszaninę produktu i substancji wyjściowej. Materiał ten poddano chromatografii na krótkiej kolumnie z żelem krzemionkowym, stosując mieszaninę 50% CH2Cl2/heksan. Otrzymano 262 mg (40%) 2-(2,6-difluorofenylo)-6-(4-fluoro-2-metylofenylo)pirydyny w postaci bezbarwnego oleju.
D.
W 100 ml okrągłodennej kolbie 262 mg (834 mmola) wytworzonej w etapie C 2-(2,6-difluorofenylo)-6-(4-fluoro-2-metylofenylo)pirydyny rozpuszczono w 30 ml bezwodnego CHCl3, w wyniku czego wytworzył się przezroczysty, bezbarwny roztwór. Dodano izocyjanianu chlorosulfonylu (1,0 ml, 11,5 mmola) i jasnożółty roztwór mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Dodano wody (~ 30 ml), co spowodowało nieznaczne wydzielanie się ciepła i gwałtowne wydzielanie się gazu. Po mieszaniu przez noc warstwę organiczną oddzielono, wysuszono (MgSO4) i odparowano pod próżnią, uzyskując brązowy olej, który stanowił mieszaninę produktu i substancji wyjściowej. Materiał ten poddano chromatografii na krótkiej kolumnie z żelem krzemionkowym, stosując mieszaninę 10% EtOAc/CH2Cl2. Odzyskany materiał wyjściowy ponownie poddano warunkom reakcji i oczyszczono w ten san sposób. Otrzymano łącznie 205 mg (69%) mocznika w postaci białej substancji stałej.
PL 202 464 B1
P r z y k ł a d 10
Synteza związku 138
Związek 103 (106 mg, 0,25 mmola) rozpuszczono w THF (0,5 ml) i do otrzymanego roztworu dodano trietyloaminy (35 0,25 mmola), a następnie nadmiaru formaldehydu (37% roztwór wodny, 45 mg).
Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc. Mieszaninę reakcyjną odparowano na wyparce obrotowej pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w chlorku metylenu, a następnie poddano szybkiej chromatografii na kolumnie z żelem krzemionkowym. Kolumnę eluowano mieszaniną 2% metanol w chlorku metylenu i otrzymano czysty produkt (78 mg, 70% wydajności).
P r z y k ł a d 11
Synteza proleków związku 103
A.
Związek 138 (1 równoważnik) rozpuszczono w chlorku metylenu i do roztworu tego dodano trietyloaminy (1 równoważnik), a następnie chlorku dibenzylofosfonylu (1 równoważnik). Roztwór mieszano w temperaturze pokojowej i metodą TLC śledzono zużycie materiału wyjściowego. Następnie warstwę z chlorkiem metylenu rozcieńczono octanem etylu i przemyto 1N HCl, nasyconym roztworem wodorowęglanu sodu i nasyconym roztworem NaCl, po czym warstwę organiczną wysuszono, odparowano na wyparce obrotowej i surowy produkt oczyszczono na żelu krzemionkowym. Następnie czysty produkt rozpuszczono w metanolu i estry dibenzylowe odblokowano stosując 10% pallad na węglu drzewnym w atmosferze wodoru. Gdy stwierdzono zakończenie reakcji, katalizator przesączono przez celite i przesącz odparowano na wyparce obrotowej, z wytworzeniem fosforanu.
B.
PL 202 464 B1
Związek 103 (210 mg, 1,05 mmola) rozpuszczono w THF (2 ml) i oziębiono do temperatury -50°C w atmosferze azotu. Do roztworu tego dodano heksametylodisilazanu litu (1,1 mmola), a następnie chlorku chloroacetylu (1,13 mmola). Usunięto łaźnię oziębiającą i mieszaninę reakcyjną pozostawiono, aby ogrzała się do temperatury pokojowej, a następnie rozcieńczono octanem etylu i reakcję przerwano dodatkiem wody. Warstwę organiczną przemyto solanką, wysuszono i odparowano na wyparce obrotowej do suchości. Surowy produkt poddano szybkiej chromatografii na żelu krzemionkowym, stosując jako eluent mieszaninę 25% octan etylu w heksanie i otrzymano 172 mg (70%) czystego, żądanego produktu, który stosowano w następnych reakcjach.
C.
dimetyloaminóacetylowy prolek związku 103
Związek chloroacetylowy rozpuszczono w chlorku metylenu i potraktowano nadmiarem dimetyloaminy. Przebieg reakcji śledzono metodą TLC, a gdy się zakończyła, substancje lotne usunięto i otrzymano żądany produkt.
P r z y k ł a d 12
Synteza związków 34 i 117
A.
Nitryl z etapu A przykładu 5 (300 mg, 1,0 mmola) rozpuszczono w etanolu (10 ml) i do roztworu tego dodano tiomocznika (80,3 mg, 1,05 mmola). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 4 godziny, po upływie których TLC wykazała zużycie wszystkich materiałów wyjściowych. Mieszaninę reakcyjną oziębiono, wszystkie substancje lotne usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość rozpuszczono w acetonie (10 ml).
Do otrzymanego roztworu dodano następnie 2,5-difluoronitrobenzenu (110 gl, 1,01 mmola), a potem węglanu potasu (200 mg, 1,45 mmola) i wody (400 gl). Następnie mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez noc, po czym rozcieńczono chlorkiem metylenu (25 ml) i przesączono przez wkładkę bawełnianą. Wszystkie substancje lotne usunięto pod zmniejszonym ciśnieniem i pozostałość poddano szybkiej chromatografii na żelu krzemionkowym, eluując gradientem 10%-25% octanu etylu w heksanie. Otrzymano żądany produkt (142 mg, 33%).
PL 202 464 B1
Produkt nitrylowy z etapu A (142 mg, 0,33 mmola) zmieszano ze stężonym kwasem siarkowym (2 ml), ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 1 godzinę, po czym pozostawiono, aby oziębił się do temperatury pokojowej. Następnie mieszaninę rozcieńczono octanem etylu i ostrożnie zobojętniono nasyconym roztworem węglanu potasu (wodnym). Rozdzielono warstwy i warstwę organiczną przemyto wodą, solanką i wysuszono nad siarczanem magnezu. Mieszaninę przesączono i odparowano do suchoś ci. Pozostał o ść stosowano w nastę pnym etapie bez dalszego oczyszczania (127 mg, 85% wydajności).
Amid z etapu B (127 mg, 0,28 mmola) rozpuszczono w THF (3 ml) i do roztworu tego dodano dimetyloacetalu dimetyloformamidu (110 pl, 0,83 mmola). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano do wrzenia pod chłodnicą zwrotną przez 5 minut, po czym oziębiono do temperatury pokojowej. Wszystkie substancje lotne usunięto pod próżnią i pozostałość poddano szybkiej chromatografii na żelu krzemionkowym, eluując mieszaniną 2,5% metanolu w chlorku metylenu. Otrzymano czysty żądany związek 34 (118 mg, 92%).
Do roztworu związku 34 (100,8 mg, 0,22 mmola) w benzenie (3,4 ml) dodano heksahydratu dichlorku niklu (103 mg, 0,44 mola) w mieszaninie benzen/metanol (0,84 ml/0,84 ml) i roztwór oziębiono do temperatury 0°C. Następnie do roztworu dodano borowodorku sodu (49 mg, 1,3 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano, aby ogrzała się do temperatury pokojowej, odparowano pod próżnią i pozostałość poddano szybkiej chromatografii eluując mieszaniną 2% metanolu w chlorku metylenu. 0trzymano czysty żądany produkt, związek 117 (21 mg, 25% wydajności).
PL 202 464 B1
P r z y k ł a d 13
Synteza związków 53 i 142
A.
Produkt wskazany w powyższej reakcji zsyntetyzowano stosując procedurę z etapu B przykładu 1, chloropirydazynę (359 mg, 1,21 mmola) i 2, 4-difluorotiofenol (176 mg, 1,21 mmola).
Po szybkiej chromatografii na żelu krzemionkowym otrzymano żądany produkt (451 mg, 92%).
B.
Powyższą reakcję prowadzono sposobem opisanym w etapie C przykładu 1, stosując 451 mg materiału wyjściowego i 5 ml stężonego kwasu siarkowego. Otrzymano wskazany produkt (425 mg, 90%).
C.
Powyższą reakcję prowadzono sposobem opisanym w etapie D przykładu 1, stosując wyjściowy amid (410 mg, 0,96 mmola) i dimetyloacetal dimetyloformamidu (3 ramole). Mieszaninę reakcyjną ogrzewano do temperatury 50°C przez 30 minut, po czym poddano obróbce, jak opisano uprzednio.
Otrzymano związek 53 (313 mg, 75%).
D.
PL 202 464 B1
Związek 34 (213 mg, 0,49 mmola) rozpuszczono w THF (10 ml), oziębiono do temperatury 0°C do roztworu dodano roztworu boranu w THF (1 M, 0,6 mmola). Mieszaninę reakcyjną mieszano przez 30 minut, reakcję przerwano dodatkiem wody i całość rozcieńczono octanem etylu. Warstwę organiczną przemyto wodą i solanką, wysuszono i odparowano na wyparce obrotowej. Pozostałość oczyszczono na żelu krzemionkowym, eluując gradientem 1% do 5% metanolu w chlorku metylenu. Otrzymano związek 142 (125 mg, 57%).
P r z y k ł a d 14
Klonowanie kinazy p38 w komórkach owadzich
Zidentyfikowano dwie połączone odmiany ludzkiej kinazy p38, CSBP1 i CSBP2. Do amplifikacji regionu kodującego cDNA CSBP2 stosowano swoiste startery oligonukleotydowe przy użyciu jako matrycy biblioteki komórek HeLa (Stratagene). Produkt łańcuchowej reakcji polimerazy wklonowano do wektora pET-15b (Novagen). Skonstruowano bakulowirusowy wektor przenoszący pVL-(His)6-p38 przez subklonowanie fragmentu Xbal-BamHI z pET15b-(His)6-p38 do komplementarnych miejsc w plazmidzie pVL1392 (Pharmingen).
Plazmid pVL-(His)6-38 kieruje syntezą rekombinantowego białka składającego się z 23 reszt peptydowych (MGSSHHHHHHSSGLYPRGSHMLE, gdzie LVPRGS oznacza miejsce rozszczepienia trombiny) połączonych w ramce z N-końcem p38, co potwierdzono przez sekwencjonowanie DNA i sekwencjonowanie N końca wyrażanego białka.
Monowarstwową hodowlę komórek owadzich Spodoptera frugiperda (Sf9) (ATCC) utrzymywano w pożywce TNM-FH (Gibco BRL) wzbogaconej 10% płodową surowicą bydlęcą w T-kolbie w temperaturze 27°C. Komórki Sf9 w fazie logarytmicznej kotransfekowano liniowym wirusowym DNA wirusa jądrowej poliedrozy Autographa califonica (Pharmigen) i wektorem przenoszącym pVL-(His)6-p38 stosując Lipofectin (Invitrogen). Poszczególne rekombinantowe klony bakulowirusa oczyszczono w próbie łysinek stosując 1% niskotopliwą agarozę.
P r z y k ł a d 15
Ekspresja i oczyszczanie rekombinantowej kinazy p38
Komórki Trichoplusia ni (Tn-368) High-Five™ (Invitrogen) hodowano w zawiesinie w pożywce Excel-405 wolnej od białka (JRH Bioscience) w kolbie do wytrząsarki w temperaturze 27°C. Przy gęstości 1,5 x 106 komórek/ml komórki zakażono rekombinantowym bakulowirusem, jak opisany powyżej, przy wielokrotności zakażenia 5. Stopień ekspresji rekombinantowego p38 monitorowano przez immunoblotting, stosując królicze przeciwciało przeciw-p38 (Santa Cruz Biotechnology). Masę komórkową zebrano po 72 godzinach od zakażenia, w którym to czasie stopień ekspresji p38 osiągnął swoją maksymalną wartość.
Zamrożoną pastę komórkową wyrażającą p38 znakowane (His)6 rozmrożono w 5 objętościach Buforu A (50 mM NaH2PO4, pH 8, 200 mM NaCl, 2 mM β-merkaptoetanol, 10% gliceryna i 0,2 mM PMSF). Po mechanicznym rozerwaniu komórek w mikrofluidyzerze, lizat odwirowano przy 30 000 x g przez 30 minut. Supernatant inkubowano okresowo przez 3-5 godzin w temperaturze 4°C, stosując żywicę z powinowactwem do metalu Talon™ (Clontech) przy stosunku 1 ml żywicy na 2-4 mg oczekiwanego p38. Żywicę osadzono przez odwirowanie przy 500 x g przez 5 minut i delikatnie przemywano okresowo Buforem A. Żywicę zawieszono i przelano do kolumny (ok. 2,5 x 5,0 m) i przemyto mieszaniną Bufor A + 5 mM imidazolu.
(His)6-p38 eluowano Buforem A + 100 mM imidazolu, a następnie dializowano przez noc w temperaturze 4°C do 2 litrów Buforu B (50 mM HEPES, pH 7,5, 25 mM β-glicerofosforan, 5% gliceryna, 2 mM DTT). Marker His6 usunięto przez dodanie 1,5 jednostki trombiny (Calbiochem) na mg p38 inkubowanie w temperaturze 20°C przez 2-3 godziny. Reakcję z trombiną przerwano dodatkiem 0,2 mM PMSF i następnie całą próbkę wprowadzono do 2 ml kolumny z benzamidynoagarozą (American International Chemical).
Przepływ przez frakcję wprowadzono bezpośrednio do kolumny Q-Sepharose o wymiarach 2,6 x 5,0 (Pharmacia) zrównoważonej uprzednio Buforem B + 0,2 mM PMSF. p38 eluowano liniowym gradientem od 20 objętości kolumny do 0,6 M NaCl w Buforze B. Pik wyeluowanego białka zebrano i dializowano przez noc w temperaturze 4°C do Buforu C (50 mM HEPES, pH 7,5, 5% gliceryna, 50 mM NaCl, mM DTT, 0,2 mM PBSF).
Dializowane białko zatężono w Centiprep (Amicon) do objętości 3-4 ml i wprowadzono do kolumny Sephacryl S-100HR (Pharmacia) o wymiarach 2,6 x 100 cm. Białko eluowano przy szybkości przepływu 35 ml/godz. Zebrano główny pik, doprowadzono do 20 mM DTT, zatężono do 10-80 mg/ml i zamrożono w porcjach w temperaturze -70°C lub stosowano bezpośrednio.
PL 202 464 B1
P r z y k ł a d 16
Aktywowanie p38 p38 aktywowano przez połączenie 0,5 mg/ml p38 z 0,005 mg/ml DD-double mutant MKK6 w Buforze B + 10 mM MgCl2, 2 mM AT, 0,2 mM Na2VO4 przez 30 minut w temperaturze 20°C. Następnie mieszaninę do aktywacji wprowadzono do kolumny MonoQ o wymiarach 1,0 x 10 cm (Pharmacia) i eluowano liniowym gradientem od 20 objętości kolumny do 1,0 M NaCl w Buforze B. Aktywowane p38 wyeluowano po ADP i ATP. Pik aktywowanego p38 zebrano i dializowano do Buforu B + 0,2 mM Na2VO4 w celu usunięcia NaCl. Dializowane białko doprowadzono do 1,1 M fosforanu potasu przez dodanie 0,4M roztworu podstawowego i załadowano do kolumny HIC (Rainin Hydropore) o wymiarach 1,0 x 10 cm, zrównoważonej uprzednio Buforem D (10% gliceryna, 20 mM β-glicerofosforan, 2,0 mM DTT) + 1,1M K2HPO4. Białko eluowano liniowym gradientem od 20 objętości kolumny do Buforu D + 50 mM K2HPO4. Jako główny pik wyeluowano podwójnie fosforylowane p38 i zebrano do dializy do Buforu B + 0,2 mM Na2VO4. Aktywowane p38 przechowywano w temperaturze -70°C.
P r z y k ł a d 17
Badania na hamowanie p38
A. Zahamowanie fosforylacji peptydu receptora EGF
Badanie prowadzono w obecności 10 mM MgCl2, 25 mM β-glicerofosforanu, 10% gliceryny i 100 mM HEPES przy pH 7,6. W celu typowego określenie IC50 przygotowano roztwór podstawowy zawierający wszystkie powyższe składniki i aktywowane p38 (5 nM). Roztwór podstawowy rozporcjowano do fiolek. Do każdej fiolki wprowadzono określoną objętość DMSO lub inhibitora w DMSO (końcowe stężenie DMSO w reakcji wynosiło 5%), zmieszano i inkubowano przez 15 minut w temperaturze pokojowej. Do każdej fiolki dodano peptyd receptora EGF, KRELVEPLTPSGEAPNQALLR, akceptor fosforytowy w reakcji kinazy katalizowanej p38 (1) do końcowego stężenia 200 μM. Reakcję kinazy zapoczątkowano dodatkiem ATP (100 μM) i fiolki inkubowano w temperaturze 30°C. Po 30 minutach reakcję przerwano dodatkiem równych objętości 10% kwasu trifluorooctowego (TFA).
Określono ilość fosforylowanego peptydu metodą analizy HPLC. Fosforylowany peptyd oddzielono od niefosforylowanego peptydu na kolumnie z odwróconymi fazami (Deltapak, 5 μm, C18 100D, część nr 011795) z binarnym gradientem wody i acetonitrylu, z dodatkiem do każdego z nich 0,1% TFA. IC50 (stężenie inhibitora dające 50% zahamowania) określono za pomocą wykresu % aktywności pozostającej w funkcji stężenia inhibitora.
B. Zahamowanie aktywności ATPazy
Badanie prowadzono w obecności 10 mM MgCl2, 25 mM β-glicerofosforanu, 10% gliceryny i 10 mM buforu HEPES przy pH 7,6. W celu typowego określenia wartości Ki, wyznaczono wartość Km dla ATP w aktywności ATPazy w reakcji aktywowanego p38 przy nieobecności inhibitora i w obecności dwóch stężeń inhibitora. Przygotowano roztwór podstawowy zawierający wszystkie powyższe składniki i aktywowane p38 (60 nM). Roztwór podstawowy rozporcjowano do fiolek. Do każdej fiolki wprowadzono określoną objętość DMSO lub inhibitora w DMSO (końcowe stężenie DMSO w reakcji wynosiło 2,5%), zmieszano i inkubowano przez 15 minut w temperaturze pokojowej. Reakcję zapoczątkowano przez dodanie różnych stężeń ATP, a następnie inkubowano w temperaturze 30°C. Po 30 minutach reakcję przerwano dodatkiem 50 μl EDTA (końcowe stężenie 0,1 M), pH 8,0. Ilość produktu aktywności ATPazy p38, ADP, określono metodą analizy HPLC.
Oddzielenie ADP od ATP prowadzono na kolumnie z odwróconymi fazami (Supelcosil, LC-18, 3 nm, część nr 5-8985), stosując binarny gradient rozpuszczalników o następującym składzie: Rozpuszczalnik A - 0,1 M bufor fosforanowy zawierający 0,8 mM wodorosiarczanu tetrabutyloamoniowego (Sigma Chemical Co., nr katalogowy T-7158), Rozpuszczalnik B - Rozpuszczalnik A z 30% metanolu.
Wartości Ki wyznaczono na podstawie danych dotyczących szybkości w funkcji stężenia inhibitora i ATP. W poniższej tablicy 6 przedstawiono wyniki dla kilku inhibitorów według wynalazku.
T a b l i c a 6
Związek Ki (ąm)
1 >20
2 15
3 5,0
5 2,9
6 0,4
PL 202 464 B1
Inne inhibitory p38 według wynalazku również hamują aktywność ATPazy p38.
C. Zahamowanie IL-1, TNF, IL-6 i IL-8
Wytwarzanie w PBMC stymulowanych LPS
Inhibitory rozcieńczano seryjnie w DMS od stężenia podstawowego 20 mM. Przygotowano co najmniej 6 różnych rozcieńczeń. Następnie przygotowano 4 x roztwory inhibitor przez dodanie 4 pl rozcieńczenia inhibitora do 1 ml pożywki RPMI 1640/10% płodową surowicą bydlęcą. Roztwory podstawowe inhibitora 4 x zawierały inhibitor w stężeniach 80 pM, 32 pM, 12,8 pM, 5,12 pM, 2,048 pM, 0,819 pM, 0,328 pM, 0,131 pM, 0,052 pM, 0,021 pM itd. Przed użyciem roztwory podstawowe inhibitora 4x inhibitor ogrzewano w temperaturze 37°C.
Komórki kożuszka leukocytarnego świeżej krwi ludzkiej oddzielono od innych komórek, stosując urządzenie Vacutainer CPT z firmy Becton & Dickinson (zawierające 4 ml krwi i DBBS bez Mg2+/Ca2+ w ilości wystarczającej do wypełnienia rurki) przez odwirowanie przy 1500 x g przez 15 minut. Jednojądrzaste komórki krwi obwodowej (PBMC) umieszczone na górze gradientu w urządzeniu Vacutainer usunięto i przemyto dwa razy pożywkę RPMI1640/10% płodowa surowica bydlęca. PBMC zebrano przez odwirowanie przy 500 x g przez 10 minut. Łączną ilość komórek określono stosując urządzenie Neubauer Cell Chamber i stężenie komórek doprowadzono do wartości 4,8 x 106 komórek/ml w pożywce do hodowli (RPMI1640 uzupełniona 10% płodową surowicą bydlęcą).
Alternatywnie, bezpośrednio w badaniu stosowano pełną krew zawierającą antykoagulant.
W każdej studzience 96-studzienkowej płytki do hodowli komórek umieszczono 100 pl zawiesiny komórek lub całą krew. Następnie do komórek dodano 50 pl roztworu inhibitora 4x. Na koniec dodano 50 pl roztworu lipopolisacharydu (LPS) (16 ng/ml w pożywce do hodowli komórek) do końcowego stężenia 4 ng/ml LPS w badaniu. Całkowitą objętość nośnika w badaniu kontrolnym doprowadzono również do 200 ul dodatkiem 50 pl pożywki do hodowli komórek. Następnie komórki PBMC lub pełną krew inkubowano przez noc (przez 12-15 godzin) w temperaturze 37°C/5% CO2 w wilgotnej atmosferze.
Następnego dnia komórki wymieszano w mieszarce przez 3-5 minut, po czym odwirowano przy 500 x g przez 5 minut. Supernatanty hodowli komórek zebrano i poddano analizie metodą
ELISA na zawartość IL-1b (zestaw R & D Systems kits, #DBL50), TNF-α (BioSource, #KHC3012), IL-6 (Endogen, #EH2-IL6) i IL-8 (Endogen, #EH2-IL8), zgodnie z instrukcjami producenta. Dane badania ELISA stosowano do wykreślenia krzywych dawka-odpowiedź, z których wyprowadzono wartości IC50.
Wyniki testu na kinazę („kinaza, podrozdział A, powyżej), IL-1, TNF i IL-6 w całej krwi („WB) dla różnych inhibitorów p38 według wynalazku zestawiono w poniższej tablicy 7:
T a b l i c a 7
Nr związku Kinaza IC50 Komórki IL-1 IC50 Komórki TNF IC50 IL-1 WB IC50 TNF WB IC50 IL-6 WB IC50
1 2 3 4 5 6 7
2 + N. D. N. D. N. D. N.D. N.D.
3 + N. D. N. D. N. D. N.D. N.D.
5 + N. D. N. D. N.D. N.D. N.D.
6 + + + + + N. D. N.D. N.D.
7 + + + N.D. N.D. N.D.
8 + + + N.D. N.D. N.D.
9 + + + N.D. N.D. N.D.
10 + N. D. N. D. N.D. N.D. N.D.
11 + + + N.D. N.D. N.D.
12 ++ + + + + + + +
13 + + + N.D. N.D. N.D.
14 + + + + N.D. N.D. N.D.
15 + + + + + N.D. N.D. N.D.
16 ++ + + + N.D. N.D. N.D.
PL 202 464 B1 cd. tablicy 7
1 2 3 4 5 6 7
17 + + + N.D. N.D. N.D.
18 + + + N.D. N.D. N.D.
19 + + + N.D. N.D. N.D.
20 ++ + + N.D. N.D. N.D.
21 ++ + + + N.D. N.D. N.D.
22 + + + N.D. N.D. N.D.
23 ++ + + + + + +
24 ++ + + + + + + N.D.
25 ++ + + + N.D. N.D. N.D.
26 + + + + + + + + +
27 ++ + + + + +
28 ++ + + + + N.D. N.D. N.D.
29 ++ + + + + N.D. N.D. N.D.
30 + + + + N.D. N.D.
31 + + + + N.D. N.D.
32 + + + + + + + +
33 + + + + + + + + +
34 + + + N.D. N.D. N.D.
35 + + + + + + + +
36 + + + + + +
37 + + ++ + + + +
38 + + + + + + + + + + + + + +
39 + + + + N.D. N.D. N.D.
40 + + + + + N.D. N.D. N.D.
41 + + + + + + + + + N.D. N.D. N.D.
42 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
43 + + + + N.D. N.D. N.D.
44 + + + + N.D. N.D. N.D.
45 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
46 + + + + N.D. N.D. N.D.
47 + + + + + N.D. N.D. N.D.
48 + + + + + N.D. N.D. N.D.
49 + + + + + + + + +
50 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
51 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
52 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
53 + + + + + + + + + + + + + + + + + +
PL 202 464 B1 cd. tablicy 7
1 2 3 4 5 6 7
101 + + + + + + + + + + + +
102 + + + + + + + + + + + + + +
103 + + + + + + + + + + + + + +
104 + + + + + + + + +
105 + + + + N.D. N.D. N.D.
106 + + + + + + + + + + + + + +
107 + + + + N.D. N.D. N.D.
109 + + + + + + + + + + + + +
108 + + + + + + + + + + + + + + + +
110 + + + + N.D. N.D. N.D.
111 + + + + N.D. N.D. N.D.
112 + + + + + + + +
113 + + + + + + + + + + +
114 + + + + + + + + + + + + + + + +
115 + + + + + + + + + + + +
116 + + + + + + + + + + +
117 + + + + + + + + + + + + + + + +
118 + + + + + + + + +
119 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
120 N.D. + + + + + +
121 + + + + + + + + + + +
122 + + + + + + + +
123 + + + + + + + + +
124 + + + N.D. N.D. N.D.
125 + + + + + + + + + + + +
126 + + + + N.D. N.D. N.D.
127 + + + + + + + + + + + + + + + +
128 + + + N.D. N.D. N.D.
129 + + + + + + + + + + + + + +
130 + + + + + + N.D. N.D. N.D.
131 + + + + + + + + + N.D. N.D. N.D.
132 + + + + + + + + N.D. N.D. N.D.
133 + + + + + + + + + N.D. N.D. N.D.
134 + + + ++ + N.D. N.D. N.D.
135 + + + ++ + + + +
136 + + + +++ + + + + + + +
137 + + + +++ + + + + + +
PL 202 464 B1 cd. tablicy 7
1 2 3 4 5 6 7
138 + + +++ + + + + + + +
139 + + + +++ + + + +
140 +++ ++ + + + + + + + + +
141 +++ + + + + + + + + +
142 + + + + + + + + + + + + + + + + + +
143 ++ + +++ + + + + +
144 + + + +++ + + + + + +
145 + + + +++ + + + + + + + + + + + +
201 + + + + + + + + +
203 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
204 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
205 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
206 + + + + N.D. N.D. N.D.
207 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
208 N.D. + + N.D. N.D. N.D. N.D.
209 N.D. + N.D. N.D. N.D. N.D.
202/301 + + + + + + + + + +
302 + + + + + + + + + + +
303 + + + + + +
304 + + + + + +
305 + + + + + + + + + +
306 + + + + + + + +
307 + + + + + + + + +
308 + N.D. ND N.D. N.D. N.D.
309 + + + + + + + + +
310 + + + + N.D. N.D. N.D.
311 + + + + N.D. N.D. N.D.
312 + + + + + + + + +
313 + + + + N.D. N.D. N.D.
314 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
315 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
316 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
317 + + + N.D. N.D. N.D.
318 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
319 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
320 + + + + + + + N.D. N.D. N.D.
321 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
PL 202 464 B1 cd. tablicy 7
1 2 3 4 5 6 7
322 + + + + N.D. N.D. N.D.
323 + + + + + + N.D. N.D. N.D.
324 + + + + + N.D. N.D. N.D.
325 + + + + + + + + + + +
326 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
327 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
328 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
329 + + ++ + + + +
330 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
331 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
332 + + + + + + + +
333 + + + + N.D. N.D. N.D.
334 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
335 + + + + + + +
336 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
337 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
338 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
339 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
340 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
341 + + + + + + N.D. N.D. N.D.
342 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
343 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
344 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
345 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
346 + + + + + + +
347 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
348 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
349 + + + + + + +
350 + + + + N.D. N.D. N.D.
351 + + + N.D. N.D. N.D.
352 + + N.D. N.D. N.D. N.D.
353 + + + + N.D. N.D. N.D.
354 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
355 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
356 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
357 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
358 + + + + N.D. N.D. N.D.
PL 202 464 B1 cd. tablicy 7
1 2 3 4 5 6 7
359 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
360 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
361 + + + + + N.D. N.D. N.D.
362 + + + + + + + + + +
363 + + + + + + ++ + + +
364 + + + + + + + + + + +
365 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
366 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
367 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
368 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
369 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
370 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
371 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
372 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
373 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
374 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
375 + + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
376 + + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
377 + + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
378 + + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
379 + + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
380 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
381 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
382 + + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
383 + + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
384 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
385 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
386 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
387 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
388 + + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
389 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
390 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
391 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
392 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
393 + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
394 + + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
395 + + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
PL 202 464 B1 cd. tablicy 7
1 2 3 4 5 6 7
396 + + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
397 + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
398 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
399 + + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
1301 + + + N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
401 + + + + + + + + + +
402 + + + + + + + + + + + +
403 + + + + + + + + + + + + +
404 + + + + + + + + + + + +
405 + + + + + + + + N.D. N.D. N.D.
406 + + + + + N.D. N.D. N.D.
407 + + + + + N.D. N.D. N.D.
408 + + + + + + + + N.D. N.D. N.D.
409 + + + + + + + + + + + + +
410 + + + + + + + + + + + + + + +
411 + + + + + + + + + + + +
412 N.D. N.D. N.D. N.D. N.D. N.D.
Wartości IC50 dla kinazy: „+++ oznacza < 0,1 μΜ, „ + +” oznacza pomiędzy 0,1 i 1,0 μΜ, a „+ oznacza > 1,0 μM. Wartości dla komórkowej IL-1 i TNF: „+++ oznacza < 0,1 μM, „++ oznacza pomiędzy 0,1 i 0,5 μΜ, a „+ oznacza > 0,5 μΜ. Wartości w badaniu pełnej krwi („WB): „+++ oznacza < 0,25 μΜ, „++ oznacza pomiędzy 0,25 i 0,5 μΜ, a „+ oznacza > 0,5 μΜ. We wszystkich badaniach wskazanych w powyższej tablicy „N.D. oznacza, że wartość nie była oznaczona.
Inne inhibitory p38 według wynalazku również hamują fosforylowanie peptydu receptora EGF oraz wytwarzanie IL-1, TNF i IL-6, a także IL-8 w PBMS stymulowanych LPS lub w całej krwi.
D. Zahamowanie IL-6 i IL-8
Wytwarzanie w PBMC stymulowane IL-1
Badanie prowadzono na komórkach PBMC, sposobem dokładnie opisanym powyżej, z tym wyjątkiem, że zamiast podstawowego roztworu roboczego (LPS) dodano 50 μl roztworu roboczego IL-lbb (2 ng/ml w pożywce do hodowli komórek).
Supernatanty z hodowli komórek zebrano, jak opisano powyżej, i poddano analizie metodą ELISA na poziomy IL-6 (Endogen, #EH2-IL6) i IL-8 (Endogen, #EH2-IL8), zgodnie z instrukcjami producenta. Dane z badania ELISA służyły do określenia krzywych dawka-odpowiedź, z których wyprowadzono wartości IC50.
Wyniki dla inhibitora p38, związku 6, przedstawiono w poniższej tablicy 8:
T a b l i c a 8
Badania cytokiny IC50 (gM)
IL-6 0,60
IL-8 0,85
E. Zahamowanie syntazy-2 endonadtlenku prostaglandyny wywołanej LPS (PGH-2 lub COX-2).
Indukcja w PBMC
Jednojądrzaste komórki ludzkiej krwi obwodowej (PBMC) oddzielono od świeżego kożuszka leukocytarnego przez odwirowanie w urządzeniu Vacutainer CPT (Becton & Dickinson). Na 6-studzienkowej płytce do hodowli tkanek, zawierającej RPMI 1640 wzbogaconą 10% płodową surowicą bydlęcą, 50 U/ml penicyliny, 50 μg/ml streptomycyny i 2 mM L-glutaminy wysiano 15 x 106 komórek.
PL 202 464 B1
Dodano związku 6 (powyżej) w stężeniach 0,2, 2,0 i końcowym 20 pM w DMSO. Następnie dodano LPS przy końcowym stężeniu 4 mg/ml w celu zaindukowania ekspresji enzymu. Końcowa objętość hodowli wynosiła 10 ml/studzienkę.
Po całonocnej inkubacji w warunkach 37°C i 5% CO2, komórki zebrano przez zdrapanie i odwirowanie, następnie supernatant usunięto i komórki dwukrotnie przemyto oziębioną lodem DPBS (sól fizjologiczna buforowana fosforanem Dulbecco's, BioWhittaker). Komórki poddano lizie na lodzie przez 10 minut w 50 pl zimnego buforu do lizy (20 mM Tris-HCl, pH 7,2, 150 mM NaCl, 1% Triton-X-100, 1% kwas dezoksycholowy, 0,1% SDS, 1 mM EDTA, 2% aprotynina (Sigma), 10 ng/ml pepstatyna, 10 pg/ml leupeptyna, 2 mM PMSF, 1 mM benzamidyna, 1 mM DTT), zawierającym 1 pl benzonazę (DNAza z firmy Merck). Stężenie białka w każdej próbce określano stosując test BCA (Pierce) i bydlęcą albuminę surowiczą jako wzorzec. Następnie stężenie białka w każdej próbce doprowadzono do 1 mg/ml dodatkiem zimnego buforu do lizy. Do 100 pl lizatu dodano równą objętość buforu 2 x SDS PAGE i próbkę gotowano przez 5 minut. Białka (30 pg/pasmo) pofrakcjonowano pod względem wielkości na 4-20% gradientach żeli SDS PAGE (Novex) i przeniesiono następnie na błonę nitrocelulozową za pomocą środków do elektroforezy na 2 godziny w 100 mA buforu Towbin (25 mM Tris, 192 mM glicyny) zawierającym 20% metanolu. Błonę poddano obróbce wstępnej przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej buforem blokującym (5% nietłustego suchego mleka w DPBS uzupełnionej 0,1% Tween-20) i przemyto 3 razy w DPBS/0,1% Tween-20. Błonę inkubowano w temperaturze 4°C z 1:250 rozcieńczeniem przeciwciała monoklonalnego przeciw-COX-2 (Transduction Laboratories) w buforze blokującym. Po trzykrotnym przemyciu DPBS/0,1% Tween-2, błonę inkubowano z 1:1000 rozcieńczeniem peroksydazy chrzanowej sprzężonej z owczą surowicą odpornościową przeciw mysim 1g (Amersham) w buforze blokującym przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Następnie błonę przemyto 3 razy w DPBS/0,1% Tween-20 i do określenia poziomów ekspresji COX-2 stosowano układ detekcji ECL (SuperSignal™ CL-HRP Substrate System, Pierce).
Wyniki powyższego badania wykazują, że związek 6 hamuje wyrażanie PGHS-2 wywołane LPS w PBMC.
Aczkolwiek zaprezentowano tu wiele wykonań niniejszego wynalazku, oczywiste jest, że tę podstawową konstrukcję można zmieniać, uzyskując inne wykonania z zastosowaniem rozwiązań według wynalazku.

Claims (33)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Podstawione związki heterocykliczne zawierające azot jako inhibitory kinazy białkowej p38 o wzorze lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole, w którym to wzorze:
    Q1 oznacza fenyl podstawiony 1 do 3 podstawnikami, niezależnie wybranymi z grupy obejmującej fluorowiec; C1-C3 alkil; O-(C1-C3)-alkil; NH2; CF3; NHC(O) ((C1-C3)-alkil) ewentualnie podstawiony fluorowcem; -N=CH-N ((C1-C3)-alkil)2; 3,4-metylenodioksy lub -NH-C(O)CH2-morfolinę;
    Q2 oznacza fenyl lub pirydynyl ewentualnie podstawiony podstawnikami w ilości do 3, niezależnie wybranymi z grupy obejmującej fluorowiec; prosty lub rozgałęziony C1-C3 alkil; NH2; CF3; NO2; OH;
    CO2H; CO2 ((C1-C3)-alkil) lub CON((C1-C3)-alkil)2;
    PL 202 464 B1
    X oznacza -S-;
    każdy R oznacza niezależnie wodór lub -CH3;
    Y oznacza C;
    A oznacza N; n oznacza 1; a R1 oznacza wodór.
  2. 2. Podstawione związki heterocykliczne zawierające azot jako inhibitory kinazy białkowej p38 o wzorze:
    lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole, w którym to wzorze:
    Q1 oznacza fenyl podstawiony 1 do 3 podstawnikami, niezależnie wybranymi z grupy obejmującej fluorowiec; O-(C1-C3)-alkil; OH, NH2; -N=CH-N ((C1-C3)-alkil)2 ; NHC (O) ((C1-C3)-alkil) ewentualnie podstawiony fluorowcem; 3,4-metylenodioksy i -NH-C(O)CH2-morfolinę;
    Q2 oznacza fenyl lub pirydynyl ewentualnie podstawiony podstawnikami w ilości do 3, niezależnie wybranymi z grupy obejmującej fluorowiec; prosty lub rozgałęziony C1-C3-alkil ewentualnie podstawiony przez OH, NH2, albo -C(O)O(C1-C3)-alkil; NH2; CF3; OH; CO2H; CO2 ((C1-C3)-alkil); C0NH2; -NHC(O)O-(C1-C4)-alkil; -NH-C(=NH)-NH2; -CH2-NH-imidazol; i -NHC(O)-NH;
    R5 jest wybrany spośród wodoru i -CH2OH; każdy R oznacza wodór;
    A oznacza N lub CH;
    R1 oznacza wodór;
    X oznacza -SY oznacza C; a n oznacza 1.
  3. 3. Podstawione związki heterocykliczne zawierające azot jako inhibitory kinazy białkowej p38 o wzorze:
    lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole, w którym to wzorze:
    Q2 oznacza fenyl ewentualnie podstawiony jednym lub dwoma podstawnikami niezależnie wybranymi spośród fluorowców i C1-C3-alkilu;
    Q3 oznacza fenyl podstawiony jednym lub dwoma podstawnikami niezależnie wybranymi spośród fluorowców i NH2;
    każdy R oznacza wodór;
    A oznacza N lub CH;
    R1 oznacza wodór;
    X oznacza -S66
    PL 202 464 B1
    Y oznacza C; a n oznacza 1.
  4. 4. Podstawione związki heterocykliczne zawierające azot jako inhibitory kinazy białkowej p38 o wzorze:
    lub ich farmaceutycznie dopuszczalne sole, w którym to wzorze:
    Q2 oznacza fenyl, tiofen, naftyl, benzofuran, benzotiofen lub furan, ewentualnie podstawiony podstawnikami w ilości do 3, niezależnie wybranymi z grupy obejmującej fluorowce; (C1-C3)-alkil ewentualnie podstawiony przez OH, NH-(C1-C3)-alkil, NH-(C1-C3)-alkilo-OH, NH-(C1-C3)-alkilo-NH2 lub NH-fenyl; O-(C1-C3)-alkil ewentualnie podstawiony przez OCH3; OH; NH2; CF3; CHO; COOH; SCH3; NO2; CH=N-OH; -CH2-pirolidynę; i -CH2-piperazynę;
    Q3 oznacza fenyl podstawiony podstawnikami w ilości do 3, niezależnie wybranymi spośród fluorowców, NH2, (C1-C3)-alkilu i 3,4-metylenodioksy;
    każdy R oznacza wodór; a
    Y oznacza C.
  5. 5. Podstawione związki heterocykliczne zawierające azot jako inhibitory kinazy białkowej p38 o wzorze:
    lub ich farmaceutycznie dopuszczalna sole, w którym to wzorze:
    Q1 oznacza fenyl podstawiony podstawnikami w ilości do 2, niezależnie wybranymi spośród fluorowców, (C1-C3)-alkilu i 3,4-metylenodioksy;
    Q2 oznacza fenyl podstawiony podstawnikami w ilości do 2, niezależnie wybranymi spośród fluorowców i (C1-C3)-alkilu;
    każdy R oznacza wodór; a Y oznacza C.
  6. 6. Związek według jednego z zastrz. 1, 2 albo 5, w którym przynajmniej jeden z podstawników w Q1 jest w pozycji orto.
  7. 7. Związek według zastrz. 6, w którym Q1 zawiera co najmniej dwa podstawniki, oba w pozycji orto.
  8. 8. Związek według zastrz. 6, w którym Q1 jest wybrany spośród:
    PL 202 464 B1
    PL 202 464 B1
    PL 202 464 B1
  9. 9. Związek według zastrz. 8, w którym Q1 jest wybrany z grupy obejmującej 2-fluoro-6-trifluorometylofenyl, 2,6-difluorofenyl, 2,6-dichlorofenyl, 2-chloro-4-hydroksyfenyl, 2-chloro-4-aminofenyl, 2,6-dichloro-4-aminofenyl, 2,6-dichloro-3-aminofenyl, 2,6-dimetylo-4-hydroksyfenyl, 2-chloro-4,5-metylenodioksyfenyl i 2-chloro-4-(N-2-morfolinocetamido)fenyl.
  10. 10. Związek według zastrz. 1 - 5, w którym Q2 ewentualnie zawiera do 3 podstawników, z których każdy niezależnie jest wybrany z grupy obejmującej chlor, fluor, brom, metyl, etyl, izopropyl, -OCH3, -OH, -NH2, -CF3, -SCH3, -C(O)OH, -C(O)OCH3, -CH2NH2, -CH2-pirolidynę, -CH2OH, -CH2piperazynę, -NH-C(=NH)-NH2, i -CH2-NH-imidazol.
  11. 11. Związek według zastrz. 10, w którym Q2 jest wybrany z grupy obejmującej:
    PL 202 464 B1
    PL 202 464 B1 niepodstawiony 2-pirydyl lub niepodstawiony fenyl.
  12. 12. Związek według zastrz. 11, w którym Q2 jest wybrany z grupy obejmującej fenyl, 2-izopropylofenyl, 3,4-dimetylofenyl, 2-etylofenyl, 3-fluorofenyl, 2-metylofenyl, 3-chloro-4-fluorofenyl, 3-chlorofenyl, 2-karbometoksyfenyl, 2-karboksyfenyl, 2-metylo-4-chlorofenyl, 2-bromofenyl, 2-pirydyl, 2-metylenohydroksyfenyl, 4-fluorofenyl, 2-metylo-4-fluorofenyl, 2-chloro-4-fluorofenyl, 2,4-difluorofenyl, 2-hydroksy-4-fluorofenyl lub 2-metylenohydroksy-4-fluorofenyl.
    PL 202 464 B1
  13. 13. Związek według zastrz. 1, który jest wybrany z grupy następujących związków:
    Nr zw. Wzór Nr zw. Wzór 1 2 3 4 F if> Η 1 2 8 0, ι-Ίι Ος π Ν^χν·Α .sAj Cl CI ίιΊ <MC| II 1 3 M-c. 9 Μ 0. ΑΊ 0; Π AU Cl 0^Η3 (ί 5 Mc. 10 ο c< rr 0, νΑ^ Ν •^n-n^s AA 's-M^ ίίΥ 6 Cl' A^CI 11 ΎΑ\ xch 3 c Α 0; Αϋ Ν<ν^-Ν^ Ν <SJU ΑΑ [Ρί Cl'——γ—'CI Η —γ—'CI ΟγΚγ 7 0, Υ'Ύ'''—Α Α 12 Ν S 1 ν^/ν?Α Α V F
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 M AM Cl 11 i ΎΡ ci- <Α F' VF 13 0. Αγ Ά ΑΆ 17 γ—0γ A Ai N kro -JO A^ iAA cr ί Ci i 1 ci—’ ΟΛ Χγ—Ο ./s A. Cl 14 A —N s 18 A n—a A, A 1 NA^NX ✓A, A N S V η,Λη, CH, ιΡί M AM ci- < AY ci— Cl —ci °< γ-0γ A 0 ΑΑΑγ -—o 15 X N —S I 19 nA/n A X r A M l jArw oJA —CH, -y-CH, ch3 iiM er 0, AM 'Cl A γΥ Cl- JOa ^Cl 16 N-^/N ^\ς 20 o. OM 1 ^Αί -A Mil XkA \ AJ N s 000 η< ci Cl
    PL 202 464 B1 cd. tablicyi 1 2 3 4 21 θγζρ. A 26 0^0 1 ch3 22 ’'a/-,asAa 27 Q^^XsjO ζγ'Όη 23 28 Ζ'Γ^Ύ'^'' Cl °<γΛγ^Η =c \ζ^γ Ci N N x N<iks 24 Ν<χχΝχ AA N S A F 29 °<γΧ^ Br 25 cAs^ci N<^N-n^S jó 30 εΐ'-'^^η^ ci γη n
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 31 °ΥίΥ yy A -CH, 1 CH 3 35 CI-^YY^CI N<5ŁX-N^ <ί=Υ N S φτ' F 32 εγγΎ YY^C H 3 CH 3 36 o-CH3 flY0''0*3 Cl YVX ΥΎ^ 33 vVi n OH 37 ΥίΥΥ Υγ< νΥαν^ν<<5><^ 34 C!/\Y\Ci °γγγ n^%As Υ^ΉΟ2 V F 38 ci^^k^k C1 C,Y^<Y^F n^n'N<AsJ^J
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 39 ΡΛο AA ^VXAS>A 44 CH, [jACH’ 0aA jfjT' 40 n-^/n-n^s “ A F 45 ΓΑ A rrF «^•SAeAyil Cl 41 Νς^Ν^ A. X. JJ N·^ Cl 46 NH, °<γΧγ^ϊ, 42 Ci/LAF TAJ AA 1<V\A£AA 47 >ch: o vVi j^JTF ^v\AA/ 43 o-CH· βΑψ'θ^ΟΗ, ci-^A^ °vVi jOr ^\AsA> 48 n<^n^CH’ A. CH, cr^ę °γγ^ n<^n^ A /^χ N s F
    PL 202 464 B1 cd. tablicy
  14. 14. Związek według zastrz. 2, który jest wybrany z grupy następujących związków:
    Nr zw. Wzór Nr zw. Wzór 1 2 3 4 101 Jpe, Αί A a J oA) CHj 102 ci ΧΑΧΑ® ch3
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 103 ci ΑγΑοι HN. Jl A Ν T 108 C|AJ\C| χχααο TH 104 Ycuo οΑη 109 ciY-Ati xxaad Br 105 Ct^K^CI Ycuo oY^NHj 110 (Xl t Aj V SO 106 Cl ΥγΑα °YpXH3CYty/Ci ™AnAsAJ 111 OA i I ,j u.
    107 οιΑγΑΟι yA n HN\/k A A J 112 C|YtyYCl ΧΑΑΑ) CHa HN^/°\^-CH3 0 ch3
    PL 202 464 B1 cd. tablicy
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 |ί Y ci-^ γΑ, Y °\x 1 HN_ Ί^Υ fY ci-^' γΑι 123 x^Nx. A X· T 127 C, ύΥ Cl\ rvf ^NH ΗΝχ xY A \ / A hnAn Ν s \=7 r Y Υ ci A, X Ci. Cl^^ HN ίΥ /\ γ ΥΎ XXX 124 128 i ¥ N S H ΗΝχ X Λ Ν fAY /N NH2 Y NH 1 HN^O NH2 F 0-Λ H2N Ύ Ο cr γΑ ci-A 125 129 Υ<γ p i ¥ χ/χ Ζγ HN \Y Y. χ AJ HNX A Α O ifA Cl' AA Ύ v\/x F^ HKL Jl xl 'Χ 126 v N X/NH2 130 Ck π ζ y HN χ/χ Ν Χ -AJ A '•F
    PL 202 464 B1 cd. tablicy
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 141 0 TłH hŁ ζ·νχ zn z N s Y/~F 144 zn o ''•''-t-O 142 ci^n^ci xłxxxjx 145 n °YTl ^yF F 143 0 Ϊ h3cz Amh c, AJ vA Αί. A /“χ N AZ
  15. 15. Związek według zastrz. 3 albo 4, w którym Q3 jest podstawiony 2 lub 3 podstawnikami, z których co najmniej jeden jest w pozycji orto w stosunku do punktu przyłączenia Q3 do reszty inhibitora.
  16. 16. Związek według zastrz. 15, w którym w obydwu pozycjach orto znajduje się jeden z wymienionych niezależnie wybrany podstawnik.
  17. 17. Związek według zastrz. 16, w którym każdy z podstawników orto znajdujących się w Q3 jest niezależnie wybrany z grupy obejmującej fluorowiec i metyl.
    PL 202 464 B1
  18. 18. Związek według zastrz. 3, który jest wybrany z stępujących związków:
    Nr zw.
    Wzór
    Nr zw.
    Wzór
    201
    205
    203
    206
    204
    207
    PL 202 464 B1
  19. 19. Związek według zastrz. 4, który jest wybrany z następujących związków:
    Nr zw. Wzór Nr zw. Wzór 1 2 3 4 202/301 ci aY 306 Cl θ γίίίηΥχΝΗ2 302 αΑα°ι o 7?ί;ΥρΧ ΝΗ2 Cl -OH 307 ΑΥ-ΑCl o γί:ίηχ><ΝΗ2 Cl /Y /Nx \aYJC °H 303 AY-A0' ll ° ^NH2 1 H Cl A\ >k γγ^Ι CHj 308 Y JJ -Y Cl HjN ^0 -Νφ 0 x0 304 /^-ci θ γ^ΝΗ 01 aY aY J γΥγί 309 /Y A /Y Cl F HjN ^0 305 A^A Cl θ γγ%Η, Cl aY r^N CH, Ύ 310
    PL 202 464 B1 cd. tablicy
    311
    317
    312
    318
    313
    319
    314
    320
    315
    321
    316
    322
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 fA A YY FYYi 323 ΠΓ AAA/ AA 329 ty AffJ AA F HjlA Cl 0 A zA Cl HjN T AY A YY FYY 324 ΥΎ AJY AA 330 YY ffJU AAT 'O HtyA ch3 Cl 0 cf u xA Cl Hty ^0 nc A ff 325 Al Ar 331 YY xAjAAkY C,AJ ^Cl Hty A Cl h3c AJ /A ci HjN T fA YY F F VX 326 AJY AA 332 YY AJAJ /s Cl Hty Cl 0 h3cx V xk Cl HjN ^0 nf YY A ΡΎΊ 327 ΥΎ A Ax Aa 333 ΥΎ AJ^AkA AY 'ii Cl 0 V AA zA Cl Hty ^0 0 Cl 328 YY AA -A o xo Aa HjlY55 Y . Cl 0 334 h3c. s Y^ /ty η Y) .ftyftyftyf Γ ΧΪ H2N 0
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 Fx AA fVA π A i 1 T y JAA^A 335 =¼ ιΆ aa 341 Πτ V , Cl AJ As Cl A HjN ^0 ΧΗ,Η,Α Ό Cl AA Fvi Π A .Χχ' AA ΑΛΛΧ 336 ll ΎΑ 342 ΗΟΧ A JJ As. ci AA As Cl HjN ^0 0 <A 0 F ΡΥΊ n rAi rA^· A JAJ 337 343 As Cl Jl A Cl Ύ HjN ^0 hX .0 H3c AA fJA A A Γ η T y Ag AAA 338 Λ- >k . ν -AA 344 fy £ Cl 0 AA As Cl -S F HjN ^0 /K F. AA FVAi A A XAJj 339 y -A JA =- N γ^ AA 345 - A ci s- Cl O HjN ^0 0 CH3 Ax FA aa FVAi 340 J£ AA 346 A^ sAJUaJ Fx J) As Cl Ja A> c| ΈΙ HjN 0 F- F H/i ^0 α-Χ^
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 347 zA Cl Γ HjN Cl 352 z<XzC| γγ\Η., Cl zJx ch3 348 JL Αχ ci || HjN 0 353 F 349 ery Ja nh2 354 Avci o γγ\Η2 Cl 350 ζ-χ.α Q γΥ^ΝΗ, p-Ą 355 z^zCI o γ^γ^ΝΗ, Cl A J I 351 rrc'° υΑΆη 1 H Cl A χΝ. Z\ 0H 356 z<^zC! Q AYAA^NH;, Cl m s a3
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 (AY LA' Cl 0 —-nh2 /7\/CI GG ΊΓ nh2 357 r G/1 N L/O\ Yg 362 Cl A Ul n 0 /Cl r ? /i\ /Cl rr ° γ II H NH2 μ AGG/A Yp —f nh2 358 Cl (1 N rNY > 363 Cl G- r N II ch3 GG |T GG II Ύ ( Ί [1 Mf /Cl 1 0 HAs/^C, o A— nh2 2 H ULA nh2 359 Cl il /N^/' ^nh2 364 ci G\ r/ N II ch3 LA Ί| LA yS ll G VAf GG /Cl 0 360 Cl I —f—nh2 —L OH Η 1 /'N'^Ax JCH 365 f| <γρ 0 ifV i? [1 A? c 1 ^nh2 ULA nh2 361 || ęH3 366 F An G. li vS LA YY Ti LA F U
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 374 /Cl li ° —A—V—— NH Cl X F\J/F 379 ci Q —A]—— nh2 Cl 375 Xvci o γγ-γ ci Α» 380 AO—CI o γίίγ-ν' Nh2 Cl A l i 'oh 376 AO-CI o —A—T-—NH2 Cl ίιΐ f3 0AyA/CH3 381 XVCHb ——nh2 ch3 X 377 XV' o —A—XAh2 Cl X—N ΡΗ3 382 XVC1 o ^-A—γ—nh2 ci A ci 378 ίι Xr c γγ-ΝΗ2 oh α A. J 383 />< /Ci ii 0 γΧΑΧ\ΝΗ2 θ· Α»
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 385 ΧΤ^χθΙ Q |ίί]Χ^ΝΗ2 Cl χίΚ χ-\„χθΗ, 390 χχΧ1 θ Cl Υχ 386 ^Y><Anh2 Cl xk \xAA\ 391 x<^xCI 0 Τ:ίΊΓΧ’ΝΗ2 Cl A> Zf 387 Υγ01 ° y:;jpxNH2 A 392 Χ^^χΟΙ Y?;:Yx>k'NH2 Cl A. A N LY^r^/CI Cl 388 X^ XCI Q γγ\Η2 ci A F 393 x^/CI il 1 H ?Hs \A\xA χθ γ γ nh2 < Cl A χθ 389 Yx<CI o γγΥ o--CH3 α 1 394 χ-^χθ1 0 γγ Y Cl χΟΗ LJ\A\
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 /X x Ci ίΐΊ Ρ Α zCI ΑαΑΑ νη2 Α 'νη2 395 α Υ. ν 399 CI ν' 'Ν F AAch3 Tl Τ Αχ- II Υί LA \ζ-^ Χρ F' Λ^Λ Ά η ? Α 0 ^νη2 ψ νη2 396 Cl Α γ Ν II F 1301 CI γ' tf <?η3 ΑΛ ΊΓί Αχ Η Υτ xCI LAf υ <~°\ q Α Ύί 0 397 LA 01 > 'ίμη., > Α> II IlA Μ
  20. 20. Związek według zastrz. 5, który jest wybrany z na stępujących związków:
    Nr zw. Wzór Nr zw. Wzór 1 2 3 4 401 AA θ' 403 ĄA F χΑ-Α^ 402 z\ A' Aa ci Λχ 404 A’a, Ά \ΧΑρ
    PL 202 464 B1 cd. tablicy 1 2 3 4 407 ęX, Cl 409 A\/Cl li A 0 ΥλνΗ! 01 aY 408 ιΑ» ęc.A~. CH3 γγ 410 ęX
  21. 21. Kompozycja farmaceutyczna, zawierająca substancję czynną i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik, znamienna tym, że jako substancję czynną zawiera związek według zastrz. 1 do 5 w ilości skutecznej do hamowania p38.
  22. 22. Zastosowanie związku określonego w zastrzeżeniach 1-20 do wytwarzania kompozycji farmaceutycznej do leczenia lub zapobiegania chorobom zapalnym, chorobom autoimmunizacyjnym, chorobom wirusowym, zwyrodnieniowym chorobom kości, chorobom proliferacyjnym, chorobom zakaźnym, chorobom neurodegeneracyjnym, alergiom, reperfuzji/niedokrwieniu przy udarze, niedokrwienia mięśnia sercowego, niedokrwienia nerek, atakom serca, chorobom naczyniotwórczym, niedotlenieniu narządów, rozrostowi naczyń, hipertrofii serca lub agregacji płytek związanej z trombiną, albo stanom związanym z syntazą-2 endonadtlenku prostaglandyny.
  23. 23. Zastosowanie według zastrz. 22, znamienne tym, że kompozycja jest przeznaczona do leczenia lub zapobiegania chorobom zapalnym wybranym z grupy obejmującej ostre zapalenie trzustki, przewlekle zapalenie trzustki, astmę, alergie lub zespół niewydolności oddechowej u dorosłych.
  24. 24. Zastosowanie według zastrz. 22, znamienne tym, że kompozycja jest przeznaczona do leczenia lub zapobiegania chorobom autoimmunizacyjnym wybrany z grupy obejmującej zapalenie kłębuszków nerkowych, reumatoidalne zapalenie stawów, układowy toczeń rumieniowaty, twardzinę skóry, przewlekłe zapalenie tarczycy, chorobę Gravesa, autoimmunizacyjne zapalenie żołądka, cukrzycę, autoimmunizacyjną białaczkę hemolityczną, neutropenię autoimmunizacyjną, trombocytopenię, atopowe zapalenie skóry, przewlekłe aktywne zapalenie wątroby, miastenia gravis, stwardnienie rozsiane, chorobę zapalną jelita grubego, wrzodziejące zapalenie okrężnicy, chorobę Crohna, łuszczycę lub chorobę przeszczep przeciwko gospodarzowi.
  25. 25. Zastosowanie według zastrz. 22, znamienne tym, że kompozycja jest przeznaczona do leczenia lub zapobiegania chorobom zwyrodnieniowym kości wybranym z grupy obejmującej zapalenie kostno-stawowe, osteoporozę lub choroby kości związane ze szpiczakiem mnogim.
  26. 26. Zastosowanie według zastrz. 22, znamienne tym, że kompozycja jest przeznaczona do leczenia lub zapobiegania chorobom proliferacyjnym wybranym z grupy obejmującej ostrą białaczkę pochodzenia szpikowego, przewlekłą białaczkę pochodzenia szpikowego, czerniak przerzutowy, mięsak Kaposiego lub szpiczak mnogi.
  27. 27. Zastosowanie według zastrz. 22, znamienne tym, że kompozycja jest przeznaczona do leczenia lub zapobiegania chorobom zakaźnym wybranym z grupy obejmującej posocznicę, wstrząs septyczny i zakażenie pałeczkami Shigella.
    PL 202 464 B1
  28. 28. Zastosowanie według zastrz. 22, znamienne tym, że kompozycja jest przeznaczona do leczenia lub zapobiegania chorobom wirusowym wybranym z grupy obejmującej ostre zapalenie wątroby, zakażenie HIV i zapalenie spojówek wywołane przez wirus cytomegalii.
  29. 29. Zastosowanie według zastrz. 22, znamienne tym, że kompozycja jest przeznaczona do leczenia lub zapobiegania chorobom neurodegeneracyjnym wybranym z grupy obejmującej chorobę Alzheimera, chorobę Parkinsona, niedokrwienie mózgu lub choroby neurodegeneracyjne spowodowane uszkodzeniami i urazami.
  30. 30. Zastosowanie według zastrz. 22, znamienne tym, że kompozycja jest przeznaczona do leczenia lub zapobiegania niedokrwieniu/reperfuzji przy udarze lub niedokrwieniu mięśnia sercowego, niedokrwieniu nerek, atakom serca, niedotlenieniu narządów lub agregacji płytek związanej z trombiną.
  31. 31. Zastosowanie według zastrz. 22, znamienne tym, że kompozycja jest przeznaczona do leczenia lub zapobiegania stanom związanym z syntazą-2 endonadtlenku prostaglandyny wybranym z grupy obejmującej obrzęk, gorączkę, analgezję lub ból.
  32. 32. Zastosowanie według zastrz. 31, znamienne tym, że ból jest wybrany z grupy obejmującej ból nerwowo-mięśniowy, ból głowy, bóle związane z nowotworami, ból zęba lub ból stawów.
  33. 33. Zastosowanie według zastrz. 22, znamienne tym, że kompozycja jest przeznaczona do leczenia lub zapobiegania chorobom naczyniotwórczym wybranym z grupy obejmującej guzy lite, neowaskularyzację oka, zapalenie naczyń oka lub naczyniaki dziecięce.
PL334133A 1996-12-18 1997-12-17 Podstawione związki heterocykliczne zawierające azot jako inhibitory kinazy białkowej p38, zawierająca je kompozycja farmaceutyczna i ich zastosowanie PL202464B1 (pl)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US3428896P 1996-12-18 1996-12-18
US08/822,373 US5945418A (en) 1996-12-18 1997-03-20 Inhibitors of p38
US08/862,925 US6147080A (en) 1996-12-18 1997-06-10 Inhibitors of p38

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL334133A1 PL334133A1 (en) 2000-02-14
PL202464B1 true PL202464B1 (pl) 2009-06-30

Family

ID=27364615

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL334133A PL202464B1 (pl) 1996-12-18 1997-12-17 Podstawione związki heterocykliczne zawierające azot jako inhibitory kinazy białkowej p38, zawierająca je kompozycja farmaceutyczna i ich zastosowanie

Country Status (29)

Country Link
US (1) US6147080A (pl)
EP (1) EP0951467B1 (pl)
JP (1) JP4171072B2 (pl)
CN (2) CN1153770C (pl)
AP (1) AP1136A (pl)
AT (1) ATE236165T1 (pl)
AU (1) AU738000B2 (pl)
BG (1) BG64533B1 (pl)
BR (1) BR9714415A (pl)
CA (1) CA2274825C (pl)
CZ (1) CZ299600B6 (pl)
DE (1) DE69720522T2 (pl)
DK (1) DK0951467T3 (pl)
EA (1) EA002855B1 (pl)
EE (1) EE04191B1 (pl)
ES (1) ES2202658T3 (pl)
HK (1) HK1023340A1 (pl)
HU (1) HUP0001125A3 (pl)
ID (1) ID21919A (pl)
IL (1) IL130349A0 (pl)
IS (1) IS5069A (pl)
NO (1) NO315047B1 (pl)
NZ (1) NZ336146A (pl)
PL (1) PL202464B1 (pl)
PT (1) PT951467E (pl)
SK (1) SK284578B6 (pl)
TR (1) TR199902194T2 (pl)
TW (1) TW521071B (pl)
WO (1) WO1998027098A1 (pl)

Families Citing this family (126)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000023072A1 (en) * 1998-10-20 2000-04-27 Omeros Medical Systems, Inc. Irrigation solution containing mapk inhibitors and their use for treating pain and inflammation
US7091181B2 (en) 1994-12-12 2006-08-15 Omeros Corporation Method of inhibition of pain and inflammation during surgery comprising administration of soluble TNF receptors
US6608060B1 (en) * 1996-12-18 2003-08-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38
AU748334B2 (en) 1997-10-16 2002-05-30 Board Of Regents, The University Of Texas System Models and treatments for cardiac hypertrophy in relation with NF-AT3 function
WO1999032121A1 (en) 1997-12-19 1999-07-01 Smithkline Beecham Corporation Compounds of heteroaryl substituted imidazole, their pharmaceutical compositions and uses
MY132496A (en) 1998-05-11 2007-10-31 Vertex Pharma Inhibitors of p38
WO1999061039A2 (en) * 1998-05-22 1999-12-02 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Novel composition for modulating ischemic cell death
US6858617B2 (en) 1998-05-26 2005-02-22 Smithkline Beecham Corporation Substituted imidazole compounds
EP1277740A1 (en) * 1998-06-12 2003-01-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38
EP1086085A1 (en) 1998-06-12 2001-03-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated INHIBITORS OF p38
US6184226B1 (en) 1998-08-28 2001-02-06 Scios Inc. Quinazoline derivatives as inhibitors of P-38 α
JP2002526482A (ja) * 1998-09-18 2002-08-20 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ｐ３８のインヒビター
AR023659A1 (es) 1998-09-18 2002-09-04 Vertex Pharma Un compuesto inhibidor de p38, una composicion farmaceutica que lo comprende y el uso de dicha composicion en el tratamiento y prevencion de estados patologicos
DE69914357T2 (de) 1998-11-04 2004-11-11 Smithkline Beecham Corp. Pyridin-4-yl oder pyrimidin-4-yl substituierte pyrazine
UA73492C2 (en) * 1999-01-19 2005-08-15 Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
EP1157026A1 (en) 1999-02-22 2001-11-28 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals Inc. Polycyclo heterocyclic derivatives as antiinflammatory agents
JP2002539206A (ja) 1999-03-12 2002-11-19 ベーリンガー インゲルハイム ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 抗炎症剤としての芳香族複素環化合物
KR100709497B1 (ko) 1999-03-12 2007-04-20 베링거 인겔하임 파마슈티칼즈, 인코포레이티드 소염제로서 유용한 화합물 및 이의 제조방법
JP2000281588A (ja) * 1999-03-30 2000-10-10 Sankyo Co Ltd ガンの予防又は治療薬及びそのスクリーニング方法
ATE323482T1 (de) * 1999-07-02 2006-05-15 Stuart A Lipton Verwendung von p38 mapk inhibitoren in der behandlung von augenkrankheiten
DE60024830T2 (de) 1999-07-09 2006-06-14 Boehringer Ingelheim Pharma Verfahren zur herstellung heteroarylsubstituierter ureaverbindungen
IL149230A0 (en) * 1999-10-21 2002-11-10 Hoffmann La Roche Alkylamino substituted bicyclic nitrogen heterocycles as inhibitors of p38 protein kinase
ES2280247T3 (es) * 1999-10-21 2007-09-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Heterociclos de nitrogeno biciclicos heteroalquilamino sustituidos como inhibidores de proteinas de quinasa p38.
JP2003514900A (ja) 1999-11-23 2003-04-22 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション ＣＳＢＰ／ｐ３８キナーゼ阻害剤としての３，４−ジヒドロ−（１Ｈ）−キナゾリン−２−オン化合物
WO2001038313A1 (en) 1999-11-23 2001-05-31 Smithkline Beecham Corporation 3,4-DIHYDRO-(1H)QUINAZOLIN-2-ONE COMPOUNDS AS CSBP/p39 kINASE INHIBITORS
US6759410B1 (en) 1999-11-23 2004-07-06 Smithline Beecham Corporation 3,4-dihydro-(1H)-quinazolin-2-ones and their use as CSBP/p38 kinase inhibitors
US6525046B1 (en) 2000-01-18 2003-02-25 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Aromatic heterocyclic compounds as antiinflammatory agents
US6608052B2 (en) 2000-02-16 2003-08-19 Boehringer Ingelheim Pharmaceuticals, Inc. Compounds useful as anti-inflammatory agents
US7235551B2 (en) 2000-03-02 2007-06-26 Smithkline Beecham Corporation 1,5-disubstituted-3,4-dihydro-1h-pyrimido[4,5-d]pyrimidin-2-one compounds and their use in treating csbp/p38 kinase mediated diseases
JP2003528084A (ja) * 2000-03-22 2003-09-24 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド ｐ３８のインヒビター
AU2001283237B2 (en) * 2000-08-11 2007-09-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyridine derivatives as inhibitors of p38
PE20020506A1 (es) * 2000-08-22 2002-07-09 Glaxo Group Ltd Derivados de pirazol fusionados como inhibidores de la proteina cinasa
US7998507B2 (en) * 2000-09-21 2011-08-16 Elan Pharma International Ltd. Nanoparticulate compositions of mitogen-activated protein (MAP) kinase inhibitors
NZ524806A (en) 2000-10-23 2006-03-31 Smithkline Beecham Corp Tri-substituted 8H-pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-one compounds
US6670357B2 (en) * 2000-11-17 2003-12-30 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating p38 kinase-associated conditions and pyrrolotriazine compounds useful as kinase inhibitors
US6867300B2 (en) * 2000-11-17 2005-03-15 Bristol-Myers Squibb Company Methods for the preparation of pyrrolotriazine compounds useful as kinase inhibitors
CA2431904A1 (en) * 2000-12-20 2002-08-01 Merck & Co., Inc. (halo-benzo carbonyl)heterocyclo fused phenyl p38 kinase inhibiting agents
DK1361880T3 (da) * 2001-02-12 2006-01-23 Hoffmann La Roche 6-substituerede pyrido-pyrimidiner
GB0112348D0 (en) * 2001-05-19 2001-07-11 Smithkline Beecham Plc Compounds
GB2375771A (en) * 2001-05-24 2002-11-27 Univ Leeds Decellularisation of tissue implant material
JP2005500284A (ja) * 2001-06-11 2005-01-06 バーテックス　ファーマシューティカルズ　インコーポレイテッド Ｐ３８のイソキノリンインヒビター
US6710366B1 (en) 2001-08-02 2004-03-23 Ultradots, Inc. Nanocomposite materials with engineered properties
US6819845B2 (en) 2001-08-02 2004-11-16 Ultradots, Inc. Optical devices with engineered nonlinear nanocomposite materials
US6794265B2 (en) 2001-08-02 2004-09-21 Ultradots, Inc. Methods of forming quantum dots of Group IV semiconductor materials
US20030066998A1 (en) 2001-08-02 2003-04-10 Lee Howard Wing Hoon Quantum dots of Group IV semiconductor materials
US7005669B1 (en) 2001-08-02 2006-02-28 Ultradots, Inc. Quantum dots, nanocomposite materials with quantum dots, devices with quantum dots, and related fabrication methods
GB0124931D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124938D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124941D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124936D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124934D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124939D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124932D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB0124933D0 (en) * 2001-10-17 2001-12-05 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
AU2003212796A1 (en) * 2002-01-11 2003-07-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystal structures of jnk-inhibitor complexes and binding pockets thereof
BR0306988A (pt) * 2002-01-18 2004-11-23 Pharmacia Corp Piridazinonas substituìdas como inibidores de p38
EP1474395B1 (en) 2002-02-12 2007-10-17 Smithkline Beecham Corporation Nicotinamide derivates useful as p38 inhibitors
ATE386030T1 (de) 2002-02-25 2008-03-15 Boehringer Ingelheim Pharma 1,4-disubstituierte benzokondensierte cycloalkyl- harnstoffverbindungen zur behandlung von zytokinvermittelten erkrankungen
MXPA04009352A (es) * 2002-04-18 2005-01-25 Pharmacia Corp Terapia de combinacion para el tratamiento de la enfermedad de parkinson con inhibidores de ciclooxigenasa-2 (cox2).
RU2004133811A (ru) 2002-04-19 2005-04-20 Смитклайн Бичам Корпорейшн (US) Новые соединения
KR101025675B1 (ko) * 2002-04-23 2011-03-30 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 키나제 억제제로서 유용한 피롤로-트리아진 아닐린 화합물
ATE418546T1 (de) * 2002-04-23 2009-01-15 Bristol Myers Squibb Co Als kinase inhibitoren geeignete arylketonpyrrolotriazin-verbindungen
US7388009B2 (en) * 2002-04-23 2008-06-17 Bristol-Myers Squibb Company Heteroaryl-substituted pyrrolo-triazine compounds useful as kinase inhibitors
TW200400034A (en) * 2002-05-20 2004-01-01 Bristol Myers Squibb Co Pyrazolo-pyrimidine aniline compounds useful as kinase inhibitors
ATE377004T1 (de) * 2002-05-23 2007-11-15 Cytopia Pty Ltd Proteinkinaseinhibitoren
EP1707205A2 (en) 2002-07-09 2006-10-04 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co. KG Pharmaceutical compositions of anticholinergics and p38 kinase inhibitors in the treatment of respiratory diseases
GB0217757D0 (en) 2002-07-31 2002-09-11 Glaxo Group Ltd Novel compounds
EP1572115B1 (en) 2002-11-27 2015-01-21 Ampio Pharmaceuticals, Inc. Treatment of diseases and conditions mediated by increased phosphorylation
GB0308201D0 (en) * 2003-04-09 2003-05-14 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
GB0308185D0 (en) * 2003-04-09 2003-05-14 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
GB0308186D0 (en) * 2003-04-09 2003-05-14 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
EP2385041B1 (en) * 2003-05-01 2013-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Pyrazole-amine compounds useful as kinase inhibitors
CA2526285A1 (en) 2003-05-15 2004-12-23 Arqule, Inc. Inhibitors of p38 and methods of using the same
PT1635824E (pt) * 2003-06-03 2009-11-24 Novartis Ag Inibidores de p-38 à base de heterociclos de 5 membros
CN1832928B (zh) 2003-06-26 2012-07-04 诺瓦提斯公司 以5元杂环为基础的p38激酶抑制剂
WO2005007632A1 (en) * 2003-07-18 2005-01-27 Pharmacia Corporation Substituted pyridazinones as inhibitors of p38
BRPI0412918A (pt) * 2003-07-25 2006-09-26 Novartis Ag inibidores de quinases p38
GB0318814D0 (en) * 2003-08-11 2003-09-10 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
US7419978B2 (en) * 2003-10-22 2008-09-02 Bristol-Myers Squibb Company Phenyl-aniline substituted bicyclic compounds useful as kinase inhibitors
ES2360703T3 (es) 2003-12-03 2011-06-08 Ym Biosciences Australia Pty Ltd Inhibidores de la tubulina.
GB0402143D0 (en) * 2004-01-30 2004-03-03 Smithkline Beecham Corp Novel compounds
US7829560B2 (en) 2004-07-08 2010-11-09 Arqule, Inc. 1,4-disubstituted naphthalenes as inhibitors of P38 MAP kinase
US7504521B2 (en) * 2004-08-05 2009-03-17 Bristol-Myers Squibb Co. Methods for the preparation of pyrrolotriazine compounds
US20060035893A1 (en) 2004-08-07 2006-02-16 Boehringer Ingelheim International Gmbh Pharmaceutical compositions for treatment of respiratory and gastrointestinal disorders
US7148348B2 (en) 2004-08-12 2006-12-12 Bristol-Myers Squibb Company Process for preparing pyrrolotriazine aniline compounds useful as kinase inhibitors
WO2006021848A1 (en) * 2004-08-27 2006-03-02 Ranbaxy Laboratories Limited Anti-inflammatory agents
US20080051416A1 (en) * 2004-10-05 2008-02-28 Smithkline Beecham Corporation Novel Compounds
EP1809636A1 (en) 2004-10-19 2007-07-25 Arqule, Inc. Synthesis of imidazooxazole and imidazothiazole inhibitors of p38 map kinase
PE20060777A1 (es) 2004-12-24 2006-10-06 Boehringer Ingelheim Int Derivados de indolinona para el tratamiento o la prevencion de enfermedades fibroticas
US20060178388A1 (en) * 2005-02-04 2006-08-10 Wrobleski Stephen T Phenyl-substituted pyrimidine compounds useful as kinase inhibitors
PE20061193A1 (es) 2005-03-25 2006-12-02 Glaxo Group Ltd DERIVADOS DE 3,4-DIHIDROPIRIMIDO[4,5-d]PIRIMIDIN-2-[1H]-0NA COMO INHIBIDORES DE QUINASA p38
JP2008535822A (ja) 2005-03-25 2008-09-04 グラクソ グループ リミテッド 新規化合物
WO2006104917A2 (en) 2005-03-25 2006-10-05 Glaxo Group Limited Process for preparing pyrido[2,3-d]pyrimidin-7-one and 3,4-dihydropyrimido[4,5-d]pyrimidin-2(1h)-one derivatives
UY29440A1 (es) 2005-03-25 2006-10-02 Glaxo Group Ltd Nuevos compuestos
US20060235020A1 (en) * 2005-04-18 2006-10-19 Soojin Kim Process for preparing salts of 4-[[5-[(cyclopropylamino)carbonyl]-2-methylphenyl]amino]-5-methyl-N-propylpyrrolo[2,1-f][1,2,4]triazine-6-carboxamide and novel stable forms produced therein
GB0512429D0 (en) * 2005-06-17 2005-07-27 Smithkline Beecham Corp Novel compound
US7473784B2 (en) 2005-08-01 2009-01-06 Bristol-Myers Squibb Company Benzothiazole and azabenzothiazole compounds useful as kinase inhibitors
EP1915373B1 (en) * 2005-08-12 2013-05-22 Merck Sharp & Dohme Corp. Heterobicyclic compounds useful as p38 kinase inhibiting agents
US7915267B2 (en) 2005-10-28 2011-03-29 Takeda Pharmaceutical Company Limited Heterocyclic amide compound and use thereof
CN101395158A (zh) * 2006-03-07 2009-03-25 百时美施贵宝公司 可作为激酶抑制剂的吡咯并三嗪苯胺前体药物化合物
WO2008057775A2 (en) * 2006-10-27 2008-05-15 Bristol-Myers Squibb Company Heterocyclic amide compounds useful as kinase inhibitors
US7943617B2 (en) * 2006-11-27 2011-05-17 Bristol-Myers Squibb Company Heterobicyclic compounds useful as kinase inhibitors
WO2008114119A2 (en) * 2007-03-20 2008-09-25 Cadila Pharmaceuticals Limited P38 inhibitors
EP1992344A1 (en) 2007-05-18 2008-11-19 Institut Curie P38 alpha as a therapeutic target in pathologies linked to FGFR3 mutation
EP2108641A1 (en) * 2008-04-11 2009-10-14 Laboratorios Almirall, S.A. New substituted spiro[cycloalkyl-1,3'-indo]-2'(1'H)-one derivatives and their use as p38 mitogen-activated kinase inhibitors
EP2111861A1 (en) 2008-04-21 2009-10-28 Ranbaxy Laboratories Limited Compositions of phosphodiesterase type IV inhibitors
WO2009155388A1 (en) 2008-06-20 2009-12-23 Bristol-Myers Squibb Company Imidazopyridine and imidazopyrazine compounds useful as kinase inhibitors
CN102131806A (zh) * 2008-06-20 2011-07-20 百时美施贵宝公司 用作激酶抑制剂的三唑并吡啶化合物
WO2010038428A1 (ja) * 2008-09-30 2010-04-08 武田薬品工業株式会社 タキサン系抗がん剤の置き換え薬
CN102365277B (zh) 2009-02-06 2015-11-25 伊兰药品公司 Jun n-末端激酶抑制剂
GB0902648D0 (en) 2009-02-17 2009-04-01 Argenta Discovery Ltd Pharmaceutical compounds and compositions
GB0908317D0 (en) * 2009-05-14 2009-06-24 Argenta Discovery Ltd Pharmaceutical compounds and compositions
WO2012031057A1 (en) 2010-09-01 2012-03-08 Bristol-Myers Squibb Company Bms- 582949 for the treatment of resistant rheumatic disease
AU2012253615B2 (en) * 2011-05-09 2017-03-02 Eip Pharma, Llc Compositions and methods for treating Alzheimer's disease
EP2799537B1 (en) 2011-12-28 2021-09-22 Kyoto Prefectural Public University Corporation Normalization of culture of corneal endothelial cells
CN103772392A (zh) * 2012-10-23 2014-05-07 杨子娇 一类治疗房角狭窄的化合物及其用途
CA2928626C (en) 2013-11-14 2023-03-14 The Doshisha Drug for treating corneal endothelium by promoting cell proliferation or inhibiting cell damage
CN114010641A (zh) 2014-07-09 2022-02-08 爱普制药有限责任公司 用于治疗神经病症的方法
WO2017075274A1 (en) 2015-10-27 2017-05-04 Children's Hospital Medical Center Use of mapk inhibitors to reduce loss of hematopoietic stem cells during ex vivo culture and/or genetic manipulation
WO2017151409A1 (en) 2016-02-29 2017-09-08 University Of Florida Research Foundation, Incorporated Chemotherapeutic methods
US11466008B2 (en) 2017-09-18 2022-10-11 Eip Pharma, Llc Co-crystals of neflamapimod (VX-745)
US10342786B2 (en) 2017-10-05 2019-07-09 Fulcrum Therapeutics, Inc. P38 kinase inhibitors reduce DUX4 and downstream gene expression for the treatment of FSHD
WO2019071147A1 (en) 2017-10-05 2019-04-11 Fulcrum Therapeutics, Inc. INHIBITORS OF KINASE P38 REDUCING EXPRESSION OF DUX4 GENE AND DOWNSTREAM GENES FOR THE TREATMENT OF FSHD
PT3762368T (pt) 2018-03-08 2022-05-06 Incyte Corp Compostos de aminopirazina diol como inibidores de pi3k-y
WO2020010003A1 (en) 2018-07-02 2020-01-09 Incyte Corporation AMINOPYRAZINE DERIVATIVES AS PI3K-γ INHIBITORS
US20220048915A1 (en) 2018-11-30 2022-02-17 Shanghai Pharmaceuticals Holding Co., Ltd. Nitrogen-containing Heterocyclic Compound and Composition Thereof, Preparation Method Therefor, and Application Thereof

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5716972A (en) * 1993-01-13 1998-02-10 Smithkline Beecham Corporation Pyridyl substituted imidazoles
IL110296A (en) * 1993-07-16 1999-12-31 Smithkline Beecham Corp Imidazole compounds process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
WO1995021654A1 (en) * 1994-02-10 1995-08-17 Vladimir Ivanovich Ivanov Device for phono-electrophoresis
US5559137A (en) * 1994-05-16 1996-09-24 Smithkline Beecham Corp. Compounds
NZ302117A (en) * 1995-01-12 1999-10-28 Smithkline Beecham Corp 1-cycloalkyl or cycloalkylalkyl 4,5-trisubstituted imidazole derivatives and medicaments
DE69637948D1 (de) * 1995-10-06 2009-07-23 Merck & Co Inc Substituierte imidazole mit krebsremmender und cytokininhibierender wirkung
US5717100A (en) * 1995-10-06 1998-02-10 Merck & Co., Inc. Substituted imidazoles having anti-cancer and cytokine inhibitory activity
GB9523675D0 (en) * 1995-11-20 1996-01-24 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
ZA97175B (en) * 1996-01-11 1997-11-04 Smithkline Beecham Corp Novel substituted imidazole compounds.
JP2002515744A (ja) * 1996-05-20 2002-05-28 シグナル ファーマシュウティカルズ，インコーポレイテッド マイトジェン活性化プロテインキナーゼｐ３８―２およびその使用方法
JP3418624B2 (ja) * 1996-06-10 2003-06-23 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド サイトカイン阻害活性を有する置換イミダゾール類
GB9613021D0 (en) * 1996-06-21 1996-08-28 Pharmacia Spa Bicyclic 4-aralkylaminopyrimidine derivatives as tyrosine kinase inhibitors
CA2260213C (en) * 1996-07-11 2005-03-29 Pfizer Inc. Pyridylpyrrole compounds useful as interleukin- and tnf antagonists
WO1998006715A1 (en) * 1996-08-09 1998-02-19 Smithkline Beecham Corporation Novel piperazine containing compounds
US5945418A (en) * 1996-12-18 1999-08-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Inhibitors of p38

Also Published As

Publication number Publication date
EP0951467A1 (en) 1999-10-27
EA002855B1 (ru) 2002-10-31
AP9901565A0 (en) 1999-06-30
SK284578B6 (sk) 2005-07-01
AU5610598A (en) 1998-07-15
EE9900252A (et) 1999-12-15
CN1519240A (zh) 2004-08-11
ATE236165T1 (de) 2003-04-15
CA2274825C (en) 2008-08-26
PT951467E (pt) 2003-08-29
BG103575A (en) 2000-06-30
ID21919A (id) 1999-08-12
WO1998027098A1 (en) 1998-06-25
CZ216399A3 (cs) 1999-09-15
PL334133A1 (en) 2000-02-14
DK0951467T3 (da) 2003-07-21
SK80599A3 (en) 2000-01-18
AP1136A (en) 2003-01-31
US6147080A (en) 2000-11-14
TW521071B (en) 2003-02-21
HUP0001125A2 (hu) 2000-10-28
DE69720522T2 (de) 2003-11-27
ES2202658T3 (es) 2004-04-01
NZ336146A (en) 2000-09-29
CA2274825A1 (en) 1998-06-25
CZ299600B6 (cs) 2008-09-17
EP0951467B1 (en) 2003-04-02
HK1023340A1 (en) 2000-09-08
DE69720522D1 (de) 2003-05-08
BG64533B1 (bg) 2005-06-30
HUP0001125A3 (en) 2002-01-28
CN1153770C (zh) 2004-06-16
CN1284783C (zh) 2006-11-15
AU738000B2 (en) 2001-09-06
JP4171072B2 (ja) 2008-10-22
CN1244867A (zh) 2000-02-16
EA199900559A1 (ru) 2000-02-28
NO992960D0 (no) 1999-06-17
TR199902194T2 (xx) 2000-06-21
BR9714415A (pt) 2000-04-18
IS5069A (is) 1999-06-07
EE04191B1 (et) 2003-12-15
JP2001506266A (ja) 2001-05-15
NO315047B1 (no) 2003-06-30
NO992960L (no) 1999-08-17
IL130349A0 (en) 2000-06-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
PL202464B1 (pl) Podstawione związki heterocykliczne zawierające azot jako inhibitory kinazy białkowej p38, zawierająca je kompozycja farmaceutyczna i ich zastosowanie
PL198352B1 (pl) Heterocykliczne inhibitory p38, kompozycja farmaceutyczna i zastosowanie heterocyklicznych inhibitorów p38
US7598277B2 (en) Inhibitors of p38
US8338412B2 (en) Inhibitors of P38
AU2001283237A1 (en) Pyridine derivatives as inhibitors of p38
KR100559917B1 (ko) ｐ38 프로테인 키나아제의 저해제로서 치환된 질소를 함유하는헤테로사이클
MXPA00011076A (en) Heterocyclic inhibitors of p38

Legal Events

Date Code Title Description
LAPS Decisions on the lapse of the protection rights

Effective date: 20091217