RU2539983C2 - Способ получения (r)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты - Google Patents

Способ получения (r)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты Download PDF

Info

Publication number
RU2539983C2
RU2539983C2 RU2012119801/04A RU2012119801A RU2539983C2 RU 2539983 C2 RU2539983 C2 RU 2539983C2 RU 2012119801/04 A RU2012119801/04 A RU 2012119801/04A RU 2012119801 A RU2012119801 A RU 2012119801A RU 2539983 C2 RU2539983 C2 RU 2539983C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
seq
chemical formula
oxidoreductase
carbon atoms
represented
Prior art date
Application number
RU2012119801/04A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2012119801A (ru
Inventor
Санг Чул ЛИМ
Моо Ионг УХМ
Дае Вон ЛИ
Хои Хо КИМ
Донг Хо Ли
Хиун Сеок ЛИ
Original Assignee
ЭсКей БАЙОФАРМАСЬЮТИКАЛЗ КО., ЛТД.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ЭсКей БАЙОФАРМАСЬЮТИКАЛЗ КО., ЛТД. filed Critical ЭсКей БАЙОФАРМАСЬЮТИКАЛЗ КО., ЛТД.
Publication of RU2012119801A publication Critical patent/RU2012119801A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2539983C2 publication Critical patent/RU2539983C2/ru

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • C07D257/06—Five-membered rings with nitrogen atoms directly attached to the ring carbon atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
    • C12P17/12—Nitrogen as only ring hetero atom containing a six-membered hetero ring

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

Изобретение относится к способу получения (R)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты, включающий энантиоселективное ферментативное восстановление арилкетона в реакционной смеси, содержащей оксидоредуктазу, и карбаминирование полученного спирта. 2 н. и 17 з.п. ф-лы, 1 табл., 5 пр.

Description

Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к способу получения (R)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты. Точнее, настоящее изобретение относится к способу получения (R)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты, включающему энантиоселективное ферментативное восстановление арилкетона.
Уровень техники
Как описано в Публикации Заявки на Патент США 2006/0258718 A1, (R)-1-арил-2-тетразолилэтиловые эфиры карбаминовой кислоты (далее в описании определены как «карбаминовые соединения») с противосудорожной активностью применимы в лечении расстройств центральной нервной системы, включающих, в частности, тревогу, депрессию, судороги, эпилепсию, мигрень, биполярное расстройство, токсикоманию, курение, СДВГ, ожирение, расстройства сна, невропатическую боль, инсульты, когнитивные нарушения, нейродегенеративные расстройства, инсульты и мышечные спазмы.
В зависимости от положения N в тетразольном фрагменте карбаматные соединения подразделяют на две группы изомеров положения: тетразол-1-ил (далее в описании определенный как «1N тетразол») и тетразол-2-ил (далее в описании определенный как «2N тетразол»). Введение тетразола для получения карбаматных соединений приводит к получению смеси 1:1 двух изомеров положения, которые при фармацевтическом применении необходимо разделить на индивидуальные изомеры.
Карбаматные соединения, обладающие хиральностью, должны иметь высокую оптическую чистоту, а также химическую чистоту при применении в качестве лекарственных средств.
Поэтому в Публикации Заявки на Патент США № 2006/0258718 A1 в качестве исходного вещества используется чистый энантиомерный (R)-арилоксиран, который подвергается превращению в промежуточный спирт через реакцию раскрытия цикла с помощью тетразола в присутствии подходящего основания в растворителе с последующим введением карбамоильной группы в промежуточный спирт. Для выделения и очистки полученных таким образом 1N- и 2N-изомеров положения после образования промежуточного спирта или карбамата проводят колоночную хроматографию.
Для применения в способе получения (R)-2-арилоксиран может синтезироваться из оптически активного вещества, такого как замещенное производное (R)-миндальной кислоты, различными путями или может быть получен асимметрическим восстановлением-реакцией образования цикла α-галогенарилкетона или разделением рацемической смеси 2-арилоксирана на отдельные энантиомеры. Сам по себе (R)-2-арилоксиран является дорогостоящим соединением.
Кроме того, реакция раскрытия цикла (R)-арилоксирана с тетразолом проводится при относительно высоких температурах вследствие низкой нуклеофильности тетразола. Однако реакция раскрытия цикла включает весьма вероятный риск неконтролируемой реакции, поскольку тетразолы начинают самопроизвольно разлагаться при 110~120°C.
С точки зрения выбора реакции, поскольку в каждом из (R)-2-арилоксиране и тетразоле есть два реакционноспособных сайта, реакция раскрытия цикла между ними приводит к замещению 1N- или 2N-тетразола в бензильном или концевом положении, что приводит к получению смеси 4 изомеров положения. Поэтому выход отдельных изомеров положения является низким, и индивидуальные изомеры трудно выделить и очистить.
Описание изобретения
Техническая задача
Один аспект настоящего изобретения предоставляет новый способ получения (R)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира.
Решение задачи
Для достижения указанного выше аспекта настоящее изобретение предоставляет способ получения (R)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты, представленного химической формулой 1, который включает энантиоселективное ферментативное восстановление алкилкетона, представленного химической формулой 2; и карбаминирование спирта (R)-конфигурации, представленного химической формулой 3:
Химическая формула 1
Figure 00000001
Химическая формула 2
Figure 00000002
Химическая формула 3
Figure 00000003
где
R1 и R2 независимо выбраны из группы, включающей водород, галоген, перфторалкил, алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, тиоалкоксигрупу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода, и алкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода;
один из А1 и А2 представляет собой СН, а другой представляет собой N.
Полезные эффекты изобретения
В соответствии с одним аспектом настоящего изобретения карбаматное соединение высокой оптической чистоты и высокой химической чистоты может производиться экономически выгодным образом.
Наилучший вариант осуществления изобретения
Другой аспект настоящего изобретения предоставляет новый способ получения спирта, представленного приведенной далее химической формулой 3, посредством энантиоселективного ферментативного восстановления арилкетона, представленного приведенной далее химической формулой 2
Химическая формула 2
Figure 00000004
Химическая формула 3
Figure 00000005
где
R1 и R2 независимо выбраны из группы, включающей водород, галоген, перфторалкил, алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, тиоалкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода, и алкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода;
один из А1 и А2 представляет собой СН, а другой представляет собой N; и
указанное восстановление проводится в реакционной смеси, включающей указанное соединение химической формулы 2, оксидоредуктазу, имеющую по меньшей мере 60% гомологию с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 4, NADH или NADPH в качестве кофактора, который окисляется в процессе восстановления и постоянно регенерируется, косубстрат, включающий вторичный спирт, представленный формулой RxRyCHOH, где Rx представляет собой углерод и х представляет собой целое число от 1 до 10, Ry представляет собой водород и у представляет собой целое число, равное удвоенному значению х плюс два, и подходящий буфер.
В соответствии с вариантом осуществления настоящего изобретения, способ, включающий энантиоселективное ферментативное восстановление арилкетона, представленного приведенной далее химической формулой 2, и карбаминирование спирта, представленного приведенной далее химической формулой 3, предоставлен для получения (R)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты, представленного приведенной далее химической формулой 1.
Химическая формула 1
Figure 00000006
Химическая формула 2
Figure 00000007
Химическая формула 3
Figure 00000008
где
R1 и R2 независимо выбраны из группы, включающей водород, галоген, перфторалкил, алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, тиоалкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода, и алкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода;
один из А1 и А2 представляет собой СН, а другой представляет собой N.
Алкилкетон химической формулы 2, применимый в качестве исходного вещества в способе получения, согласно настоящему изобретению может синтезироваться, например, реакцией замещения между алкилкетоном химической формулы 4 и тетразолом химической формулы 5:
Химическая формула 4
Figure 00000009
Химическая формула 5
Figure 00000010
где
R1 и R2 принимают значения, определенные выше; и
Х представляет собой удаляемую группу, такую как галогенид или сульфонат.
Синтез арилкетона химической формулы 2 из соединений, представленных химическими формулами 4 и 5, является экономически выгодным, поскольку указанные соединения являются коммерчески доступными, недорогими соединениями. Кроме того, реакция замещения может проводиться в относительно мягких условиях по сравнению с реакцией раскрытия цикла между (R)-2-арилоксираном и тетразолом. Таким образом, способ согласно настоящему изобретению представляет собой в определенной степени безопасный способ, несмотря на применение потенциально взрывоопасного тетразола, и гарантирует высокий производственный выход и легкую очистку без получения нежелательных изомеров в бензильных положениях.
Арилкетон, представленный химической формулой 2, который может быть синтезирован реакцией замещения с тетразолом, может представлять собой смесь изомеров положения, включая 1N арилкетон представленной далее химической формулы 2а и 2N арилкетон представленной далее химической формулы 2b, которые могут разделяться и очищаться с помощью коммерчески доступной кристаллизации.
Химическая формула 2а
Figure 00000011
Химическая формула 2b
Figure 00000012
Кристаллизация, применимая в данном изобретении, может включать добавление солюбилизирующего агента к продукту реакции замещения, то есть к смеси изомеров положения, и затем добавление осаждающего вещества. Необязательно, кристаллизация может после осаждения дополнительно включать выделение осадка фильтрацией, концентрирование фильтрата и добавление дополнительного осаждающего вещества.
Иллюстративные примеры солюбилизирующего агента согласно настоящему изобретению включают, но без ограничения, ацетон, ацетонитрил, тетрагидрофуран, этилацетат, дихлорметан, хлороформ, 1,4-диоксан и низшие спирты, содержащие от 1 до 4 атомов углерода, или их комбинации. Солюбилизирующий агент может применяться в количестве от 0 до 20 мл (об./масс.) из расчета на массу (г) смеси изомеров положения. Подразумевается, что выражение «добавление солюбилизирующего агента в количестве, равном нулю мл (об./масс.)», когда используется в данном описании означает немедленное добавление следующего осаждающего вещества без разбавления фильтрата.
Примеры осаждающего вещества согласно изобретению включают, но без ограничения, воду, С1-С4 низший спирт, диэтилэфир, пентан, гексан, циклогексан, гептан или их комбинации. Осаждающее вещество может медленно добавляться в количестве от нуля до 40 мл (об./масс.) из расчета на массу (г) смеси изомеров положения. Подразумевается, что выражение «добавление осаждающего вещества в количестве, равном нулю мл», когда используется в данном описании, означает оставление или охлаждение для получения осадка без добавления осаждающего вещества.
Выделение осадка, полученного в результате добавления осаждающего вещества, фильтрацией приводит к получению 1N алкилкетона химической формулы 2а в виде кристаллического вещества высокой чистоты.
С другой стороны, фильтрат, полученный таким образом после стадии фильтрации, может подвергаться концентрированию для повышения доли осаждающего вещества относительно солюбилизирующего вещества, что приводит к получению 2N арилкетона химической формулы 2b высокой чистоты. Доля концентрирования фильтрата может подходящим образом определяться специалистом данной области техники. Например, концентрация проводится до тех пор, пока растворитель не удалится полностью. Затем добавляются солюбилизирующий агент и осаждающее вещество, как описано выше.
В отличие от колоночной хроматографии описанная кристаллизация может коммерчески применяться без особого труда.
Энантиоселективное фенментативное восстановление позволяет превращать арилкетон химической формулы 2 в спиртовое производное (R)-конфигурации, представленное химической формулой 3.
Химическая формула 2
Figure 00000013
Химическая формула 3
Figure 00000014
где
R1 и R2 независимо выбраны из группы, включающей водород, галоген, перфторалкил, алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, тиоалкоксигрупу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода, и алкоксигруппу, включающую от 1 до 8 атомов углерода;
один из А1 и А2 представляет собой СН, а другой представляет собой N.
Энантиоселективное ферментативное восстановление может проводиться с использованием оксидоредуктазного фермента, суспендированного в реакционной смеси или иммобилизованного подходящим образом. Фермент может применяться в полностью очищенном состоянии, в частично очищенном состоянии или в клетках микроорганизмов, где он экспрессирован. Сами клетки могут быть в нативном состоянии, в состоянии с нарушенной проницаемостью мембраны или в лизированном состоянии. Специалист данной области техники по достоинству оценит, что применение этого фермента в клетках является предпочтительным для практики способа изобретения, поскольку оно обеспечивает значительную экономию затрат. Наиболее предпочтительно, фермент экспрессирован в E. coli и используется в виде суспензии нативных клеток.
Способ ферментативного восстановления арилкетоновых соединений формулы 2 может выполняться в реакционной смеси, включающей указанное соединение формулы 2, оксидоредуктазу, NADH или NADPH в качестве кофактора, ко-субстрат и подходящий буфер, где оксидоредуктаза включает аминокислотную последовательность, содержащую по меньшей мере 60% аминокислот, идентичных с одной из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 4.
Было установлено, что полипептиды, включающие одну из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 4, или полипептиды, включающие аминокислотную последовательность, которая идентична по меньшей мере на 60%, предпочтительно по меньшей мере на 90%, одной из аминокислотных последовательностей SEQ ID NO: 1, SEQ ID NO: 2, SEQ ID NO: 3 или SEQ ID NO: 4 и обладает оксидоредуктазной активностью, может применяться для восстановления соединения формулы 2 до соединения формулы 3 (R-конфигурации) с высокой степенью конверсии и высокой энантиомерной селективностью. Энантиомерный избыток R-спирта, полученного в результате энантиоселективного ферментативного синтеза, составляет по меньшей мере примерно 89%, предпочтительно по меньшей мере примерно 95% и наиболее предпочтительно по меньшей мере примерно 99%.
Организм, продуцирующий оксидоредуктазные полипептиды, применимые в энантиоселективном ферментативном восстановлении, может представлять собой дикий штамм или вариант и предпочтительно выбран из Candida magnolia, Candida vaccinii и Oryctolagus cuniculus. Дрожжи рода Candida предпочтительны для получения оксиредуктазных ферментов, применимых в данном способе. Производные полипептидов представляют собой производные, имеющие по меньшей мере шестидесятипроцентную гомологию с указанными выше последовательностями SEQ ID и обладающие оксидоредуктазной активностью. Специалистам данной области техники известно, что существуют системы и технологии для точного определения гомологии последовательностей.
Полипептид, включающий SEQ ID NO: 1, может кодироваться ДНК последовательностью SEQ ID NO: 5, которая может быть получена, например, из организма Oryctolagus cuniculus, хранимого в соответствии с условиями Будапештского договора с Deutsche Sammlung fur Mikroorganismen und Zellkulturen, Mascheroder Weg 1b, 38124 под номером 22167 DSMZ, в частности, из DSMZ 22167 кролика, или последовательностью нуклеиновых кислот, которая гибридизуется с ней. Полипептид, включающей SEQ ID NO: 2, может кодироваться ДНК последовательностью SEQ ID NO: 6, которую можно получить, например, из организма Candida magnoliae DSMZ 22052, или последовательностью нуклеиновых кислот, которая гибридизуется с ней.
Полипептид, включающий SEQ ID NO: 3, может кодироваться ДНК последовательностью SEQ ID NO: 7, которая может быть получена, например, из организма Candida vaccinii CBS7318 или последовательностью нуклеиновых кислот, которая гибридизуется с ней. Полипептид, включающий SEQ ID NO: 4, может кодироваться ДНК последовательностью SEQ ID NO: 8, которая может быть получена, например, из организма Candida magnoliae CBS6396, или последовательностью нуклеиновых кислот, которая гибридизуется с ней.
Оксидоредуктазу, содержащую одну из полипептидных последовательностей, указанных выше, получают в применимых количествах стандартными методами, известными специалистам данной области техники. Полинуклеотид, кодирующий аминокислотную последовательность, клонируется в подходящий вектор, после чего вводится в организм-хозяин, способный экспрессировать ген, кодирующий последовательность. Микроорганизмы, чувствительные к трансформированию, для того, чтобы стать способными экспрессировать такой пептид, хорошо известны в данной области техники. Предпочтительным микроорганизмом является Escherichia coli. Как заявлено выше, оксидоредуктаза, экспрессированная трансформированным E. coli, может экстрагироваться из клеток E. Coli и подвергаться частичной или полной очистке для применения в способе или может применяться в самих клетках, которые могут представлять собой клетки в природном состоянии, клети с нарушенной проницаемостью мембраны или клетки в лизированном состоянии. В предпочтительном варианте осуществления энантиоселективного ферментативного восстановления используется суспензия оксидоредуктазы в виде клеток в природном состоянии. Любая из этих форм может применяться в свободной или иммобилизованной форме.
Реакция восстановления может проводиться в однофазной системе, содержащей клетки, включающие фермент, суспендированный в них. Альтернативно, реакция может проводиться в двухфазной системе «водный растворитель/органический растворитель», как описано в Заявке на Патент США № 2009/0017510 и в Патенте США № 7371903. Реакция может проводиться как стандартная периодическая реакция или как непрерывный процесс. Следует иметь в виду, что одним из существенных преимуществ энантиоселективного ферментативного восстановления для коммерческого применения является то, что оно может осуществляться в виде непрерывного процесса.
Реакционная смесь предпочтительно включает примерно от 35 г до 350 г клеток на кг добавленного реагента. Суспензия представляет собой водную часть реакционной смеси, которая также содержит буфер, например, ТЭА (триэтаноламин), фосфат, Tris/HCl или глициновый буфер. Буфер может дополнительно включать ионы для стабилизации фермента, например, источник ионов магния. Дополнительные добавки, которые могут присутствовать в буфере для стабилизации ферментов, могут включать многоатомный спирт, такой как глицерин, сорбиты и т.п., серосодержащие соединения, такие как 1,4-DL-дитиотреитол, глютатион, цистеин или т.п., аминокислоты и пептиды или детергенты, такие как ДМСО. Предпочтительным стабилизатором для фермента является многоатомный спирт, в частности глицерин, который может присутствовать в количестве примерно от 10% до 80% по массе, предпочтительно примерно 50% по массе, из расчета на массу клеточной суспензии.
Способ энантиоселективного ферментативного восстановления преимущественно проводится с использованием принципа связанного субстрата, где в реакционной смеси используется косубстрат для регенерации кофактора или кофермента, который функционирует для обеспечения водорода для восстановления арилкетонового субстрата. Кофактор предпочтительно представляет собой никотиоамидадениндинуклеотидфосфат (nicotineamide adenine dinucleotide phosphate - NADP) или никотинамидадениндинуклеотид (nicotineamide adenine dinucleotide - NAD), которые применяются в восстановленном состоянии, т.е. NADPH или NADH, соответственно. Кофактор присутствует в реакционной смеси в концентрации от примерно 0,01 мМ до 5 мМ, предпочтительно от 0,05 мМ до 0,5 мМ. В реакции косубстрат функционирует, подвергаясь окислению при регенерации в NADPH или NADH кофакторе. Косубстрат представляет собой вторичный спирт, представленный формулой RxRyCHOH, где Rx представляет собой углерод, х представляет собой целое число от 1 до 10, Ry представляет собой водород и y представляет собой целое число, равное удвоенному значению х плюс два. Примеры подходящих косубстратов включают 2-пропанол, 2-бутанол, 4-метил-2-пентанол, 2-пентанол, 2-гептанол, 2-октанол и т.п. Предпочтительным косубстратом является 2-бутанол. Косубстрат присутствует в реакционной смеси в количестве, составляющей примерно от 10% до 80% по объему, предпочтительно от примерно 40% до 60% по объему, наиболее предпочтительно примерно 50% по объему.
Окисленный кофактор, образованный в процессе восстановления арилкетона, регенерируется окислением косубстрата, которое также может катализироваться оксидоредуктазой. Таким образом, особое экономическое преимущество данного способа состоит в том, что оксидоредуктаза влияет как на восстановление алкилкетона формулы 1, так и на окисление косубстрата, следовательно, дополнительный фермент не нужно применять для регенерации кофактора. Кроме того, к настоящему изобретению относится добавление еще одного фермента в реакционную смесь для регенерации кофактора для повышения скорости восстановления арилкетона.
В еще одном дополнительном варианте осуществления изобретения органический растворитель, который не вовлечен в регенерацию кофактора, может добавляться в реакционную смесь, и процесс восстановления может проводится в двухфазной водно-органической системе. Примеры таких растворителей включают, но без ограничения, диэтиловый эфир, трет-бутилметиловый эфир, диизопропиловый эфир, дибутиловый эфир, этилацетат, бутилацетат, гептан, гексан или циклогексан. Такой растворитель может составлять от примерно 1% до 50% по объему из расчета на объем реакционной смеси.
Количество арилкетонового субстрата в реакционной смеси предпочтительно составляет более примерно 0,1% по массе и может повышаться до примерно 50% по массе, причем предпочтительная концентрация составляет от примерно 5 до 30% по массе. Количество субстрата будет изменяться в зависимости от его чистоты, поскольку способ может проводиться с субстратом в очищенном состоянии или в виде сырого продукта, содержащего различные количества и типы примесей. Значение рН реакционной смеси после добавления всех компонентов будет находиться в интервале от 5 до 10, предпочтительно от 7 до 9, оптимально равно примерно 8. Ферментативное восстановление согласно настоящему изобретению проводится при температуре примерно 10-45°С, предпочтительно примерно 20-40°С, наиболее предпочтительно примерно 25-35°С.
Помимо того, что способ энантиоселективного восстановления приводит к получению спиртов формулы 3 с высоким выходом и очень высокой энантиоселективностью, он является экономически эффективным и экологичным. Таким образом, спиртовое производное (R)-конфигурации высокой оптической чистоты может быть получено в присутствии фермента в описанных выше условиях реакции в течение от примерно 12 до 96 часов, предпочтительно от примерно 24 до 48 часов. В течение инкубационного периода значение рН смеси поддерживается в интервалах, указанных выше, посредством периодического тестирования и добавления стандартного кислотного или основного реагента, например, карбоната натрия и гидроксида натрия, соответственно. Эффективность энантиоселективного ферментативного восстановления может выражаться общим числом оборотов (total turnover number - TTN), которое равно числу молей хирального спирта формулы 2, полученных на моль первоначально добавленного кофактора. TTN энантиоселективного ферментативного восстановления составляет от примерно 102 до 105, предпочтительно ≥103.
Когда спиртовое производное, полученное посредством энантиоселективного ферментативного восстановления, представлено в виде смеси изомеров положения 1N спирта химической формулы 3а и 2N спирта химической формулы 3b, он может выделяться и разделяться на отдельные изомеры положения высокой чистоты посредством кристаллизации:
Химическая формула 3а
Figure 00000015
[87] Химическая формула 3b
Figure 00000016
[89] Кристаллизация может включать добавление солюбилизирующего агента к смеси изомеров положения, полученной в результате восстановления; добавление осаждающего вещества и, необязательно, выделение осадка фильтрацией; концентрирование фильтрата и добавление дополнительного осаждающего вещества.
[90] Примеры солюбилизирующего агента, применимого в кристаллизации, включают, но не ограничиваются только ими, ацетон, ацетонитрил, тетрагидрофуран, этилацетат, дихлорметан, хлороформ, 1,4-диоксан, низший спирт, содержащий от 1 до 4 атомов углерода, и их смеси. Солюбилизирующий агент может добавляться в количестве от нуля до 20 мл (об./масс.) из расчета на массу (г) смеси изомеров положения.
Примеры осаждающего вещества включают, но без ограничения, низший спирт, содержащий от 1 до 4 атомов углерода, диэтиловый эфир, пентан, гексан, циклогексан, гептан и их смеси. Осаждающее вещество может медленно добавляться в количестве от нуля до 40 мл (об./масс.) из расчета на массу (г) смеси изомеров положения.
После добавления осаждающего вещества фильтрация может приводить к получению 1N спирта (3а) в виде осадка высокой чистоты.
Кроме того, 2N спирт (3b) может быть получен в кристаллической форме очень высокой чистоты посредством концентрирования фильтрата и повышения соотношения осаждающего вещества к солюбилизирующему агенту.
Указанные стадии кристаллизации могут быть опущены, когда изомеры положения арилкетона химической формулы 2 уже выделены и очищены.
Введение карбамоильного фрагмента в спиртовое производное (R)-конфигурации химической формулы 3 приводит к получению карбамата (R)-конфигурации, представленного химической формулой 1:
Химическая формула 3
Figure 00000017
Химическая формула 1
Figure 00000018
где
R1 и R2 независимо выбраны из группы, включающей водород, галоген, перфторалкил, алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, тиоалкоксигрупу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода, и алкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода; и один из А1 и А2 представляет собой СН, а другой представляет собой N.
На стадии карбаминирования для введения карбамоильного фрагмента могут применяться, например, неорганический цианат-органическая кислота, изоцианат-вода или карбонильное соединение-аммиак.
Для карбаминирования с помощью смеси неорганический цианат-органическая кислота спиртовое производное (R)-конфигурации химической формулы 3 растворяется в органическом растворителе, например диэтилэфире, тетрагидрофуране, 1,4-диоксане, ацетонитриле, дихлорметане, хлороформе или их смеси, и полученный раствор смешивается с от 1 до 4 эквивалентами неорганического цианата, такого как цианат натрия, и органической кислотой, такой как метансульфоновая кислота или уксусная кислота с последующим взаимодействием при температуре примерно от -10 до 70°С.
Что касается применения смеси изоцианат-вода, к раствору спиртового производного (R)-конфигурации химической формулы 3 в органическом растворителе, например диэтиловом эфире, тетрагидрофуране, 1,4-диоксане, ацетонитриле, дихлорметане, хлороформе и их смеси, добавляют от 1 до 4 эквивалентов изоцианата, например, хлорсульфонилизоцианата, трихлорацетилизоцианата, триметилсилилизоцианата, и полученная смесь взаимодействует при температуре в интервале примерно от -50 до 40°С. После этого без очистки к смеси добавляют от 1 до 20 эквивалентов воды для индуцирования гидролиза.
Что касается применения смеси карбонильное соединение-аммиак, к раствору спиртового соединения (R)-конфигурации химической формулы 3 в органическом растворителе, например, диэтилэфире, тетрагидрофуране, 1,4-диоксане, ацетонитриле, дихлорметане, хлороформе или их смеси, добавляют от 1 до 4 эквивалентов карбонильного соединения, например 1,1'-карбонилдиимидазола, карбамоилхлорида, дисукцинилкарбоната, фосгена, трифосфена или хлорформиата, и полученная смесь взаимодействует при температуре примерно от -10 до 70°С с последующим добавлением от 1 до 10 эквивалентов аммиака без очистки.
После карбаминирования карбаматное соединение химической формулы 1, полученное таким образом, может подвергаться очистке до высокой оптической и химической чистоты с помощью кристаллизации. Кристаллизация включает добавление солибилизирующего агента к продукту карбаминирования; последующее добавление осаждающего вещества необязательно, выделение осадка фильтрацией; концентрирование фильтрата и добавление дополнительного осаждающего вещества. Для фармацевтического применения предпочтительна всегда конечная очистка карбаминированного продукта перед применением, но стадия кристаллизации может быть в процессе и ранее.
Примеры солюбилизирующего агента включают, но без ограничения, ацетон, ацетонитрил, тетрагидрофуран, этилацетат, дихлорметан, хлороформ, 1,4-диоксан, низший спирт, содержащий от 1 до 4 атомов углерода, а также их смеси. Солюбилизирующий агент может быть использован в количестве от нуля до 20 мл (об./масс.) из расчета на массу (г) продукта реакции.
Примеры осаждающего вещества включают, но без ограничения, воду, низшие спирты, содержащие от 1 до 4 атомов углерода, диэтиловый эфир, пентан, гексан, циклогексан, гептан и их смеси. Осаждающее вещество может медленно добавляться в количестве от нуля до 40 мл (об./масс.) из расчета на массу продукта реакции.
Способ согласно настоящему изобретению, включающий энантиоселективное ферментативное восстановление, может предоставлять карбаматные соединения высокой оптической чистоты. Кроме того, мягкие условия реакции, которые необходимы для способа согласно настоящему изобретению, гарантируют безопасность процесса. Далее, стадия кристаллизации, которая может применяться в крупномасштабном производстве до или после энантиоселективного ферментативного восстановления или после карбаминирования, приводит получению карбаматных соединений более высокой химической чистоты. Карбаматные соединения, полученные в соответствии с настоящим изобретением, являются весьма полезными в лечении расстройств ЦНС, таких как судороги.
Способ осуществления изобретения
Лучше понять настоящее изобретение можно с помощью представленных далее примеров, которые являются иллюстративными, но не должны рассматриваться как ограничивающие область настоящего изобретения.
Пример получения 1: Получение 1-(2-хлорфенил)-2- (1,2,3,4-тетразол-1-ил)этан-1-она
К суспензии 2-бром-2'-хлорацетофенона (228,3 г, 0,978 моль) и карбоната калия (161,6 г, 1,170 моль) в ацетонитриле (2000 мл) при комнатной температуре добавляют 35% (масс./масс.) раствор 1Н-тетразолдиметилформамида (215,1 г, 1,080 моль). Реакционную смесь перемешивают в течение 2 часов при 45°С и упаривают при пониженном давлении для удаления примерно 1500 мл растворителя. Полученный концентрат разбавляют этилацетатом (2000 мл) и промывают 10% раствором соли (3×2000 мл). Органический слой, выделенный таким образом, упаривают при пониженном давлении, получая 216,4 г маслянистого твердого остатка. К раствору твердого остатка в этилацетате (432 мл) медленно добавляют гептан (600 мл). Образовавшийся осадок собирают фильтрацией при комнатной температуре и промывают, получая 90,1 г (0,405 моль) 1-(2-хлорфенил)-2-(1,2,3,4-тетразол-1-ил)этан-1-она (далее в описании называемый «1N кетон»).
1H-ЯМР (CDCl3) 8,87 (с, 1H), д7,77 (д, 1H), д7,39-7,62 (м, 3H), д5,98 (с, 2Н).
Пример получения 2: Получение 1-(2-хлорфенил)-2-(1,2,3,4-тетразол-2-ил)этан-1-она
Фильтрат, полученный после фильтрации продукта примера 1, концентрируют, затем растворяют в изопропаноле (100 мл) и к полученному раствору добавляют гептан (400 мл) для завершения кристаллизации. Выпавшие кристаллы собирают фильтрацией и промывают при 5°С, получая 1-(2-хлорфенил)-2-(1,2,3,4-тетразол-2-ил)этан-1-он (далее в описании называемый «2N кетон») в виде твердого вещества (94,7 г, 0,425 моль).
1H-ЯМР (CDCl3) д8,62 (с, 1H), д7,72 (д, 1H), д7,35-7,55 (м, 3H), д6,17 (с, 2Н).
Пример получения 3: Получение спиртового производного (R)-конфигурации энантиоселективным ферментативным восстановлением с помощью различных оксидоредуктаз.
Приготавливают четыре раствора, описанных ниже:
Ферментный раствор 1
Компетентные клетки E. coli StarBL21 (DE3) (Invitrogen) трансформируют с конструкторами экспрессии pET21-MIX, кодирующими оксидоредуктазную SEQ ID NO: 1. После этого E. coli колонии, трансформированные с конструкторами результирующей экспрессии, выращивают в 200 мл LB среды (1% триптон, 0,5% дрожжи и 1% раствор хлорида натрия) с 50 мкг/мл ампициллина или 40 мкг/мл канамицина, соответственно, до достижения оптической плотности 0,5, измеренной при 550 нм. Экспрессию желаемого рекомбинантного белка индуцируют добавлением изопропилтиогалактосида (isopropylthiogalactoside - IPTG) до концентрации 0,1 мМ. После 16 часов индукции при 25°С и 220 оборотах в минуту клетки собирают и замораживают при -20°С. В ходе получения растворов ферментов 30 г клеток снова суспендируют в 150 мл триэтаноламинного буфера (TEA 100 нм, 2 мМ MgCl2, 10% глицерина, рН 8) и гомогенизируют в гомогенизаторе высокого давления. Полученный ферментный раствор смешивают с 150 мл глицерина и хранят при температуре -20°С.
Ферментный раствор 2
RB791 клетки (генетический источник E.coli, Yale, США) трансформируют с конструктами экспрессии pET21-MIX, кодирующими оксидоредуктазную SEQ ID NO: 2. E. coli колонии, трансформированные с конструкторами результирующей экспрессии, после этого выращивают в 200 мл LB среды (1% триптон, 0,5% дрожжей и 1% хлорида натрия) с 50 мкг/мл ампициллина или 40 мкг/мл канамицина, соответственно, до достижения оптической плотности 0,5, измеренной при 550 нм. Экспрессию желаемого рекомбинантного белка индуцируют добавлением изопропилтиогалактосида (isopropylthiogalactoside - IPTG) до концентрации 0,1 мМ. После 16 часов индукции при 25°С и 220 оборотах в минуту клетки собирают и замораживают при -20°С. В ходе получения растворов ферментов 30 г клеток снова суспендируют в 150 мл триэтаноламинного буфера (TEA 100 нм, 2 мМ MgCl2, 10% глицерина, рН 8) и гомогенизируют в гомогенизаторе высокого давления. Полученный ферментный раствор смешивают с 150 мл глицерина и хранят при температуре -20°С.
Ферментный раствор 3
Ферментный раствор 3 получают в соответствии с методикой получения ферментного раствора 1, но с тем отличием, что конструкторы экспрессии pET21-MIX, кодирующие оксидоредуктазную SEQ ID NO: 3, используют вместо конструкторов экспрессии pET21-MIX, кодирующих оксидоредуктазную SEQ ID NO: 1.
Ферментный раствор 4
Ферментный раствор 4 получают в соответствии с методикой получения ферментного раствора 2, но с тем отличием, что конструкторы экспрессии pET21-MIX, кодирующие оксидоредуктазную SEQ ID NO: 4, используют вместо конструкторов экспрессии pET21-MIX, кодирующих оксидоредуктазную SEQ ID NO: 2.
Различные оксидоредуктазы, содержащиеся в каждом ферментном растворе с 1 по 4, исследуют описанным далее образом для превращения 1-(2-хлорфенил)-2-(1,2,3,4-тетразол-1-ил)этан-1-она (1N кетон) и 1-(2-хлорфенил)-2-(1,2,3,4-тетразол-2-ил)этан-1-она (2N кетон) в соответствующий 1-(2-хлорфенил)-2-(1,2,3,4-тетразол-1-ил)этан-1-ол (называемый далее «1N спирт») и 1-(2-хлорфенил)-2-(1,2,3,4-тетразол-2-ил)этан-1-ол (называемый далее «2N спирт»), соответственно.
Реакционный раствор А
160 мкл буфера (TEA 100 нМ, 2 мМ MgCl2, 10% глицерина, рН 8)
100 мкл NADPH (40 мг/мл)
40 мкл 2-пропанола
50 мкл ферментного раствора 1
2 мг 1N кетона или 2N кетона
Реакционный раствор B
160 мкл буфера (TEA 100 нМ, 2 мМ MgCl2, 10% глицерина, рН 8)
100 мкл NADPH (40 мг/мл)
40 мкл 2-пропанола
50 мкл ферментного раствора 2
2 мг 1N кетона или 2N кетона
Реакционный раствор C
350 мкл буфера (TEA 100 нм, 2 мМ MgCl2, 10% глицерина, рН 8)
0,05 мг NADP
50 мкл ферментного раствора 3
10 мг 1N кетона или 2N кетона
250 мкл 4-метил-2-пентанола
50 мкл ферментного (оксидоредуктаза из Thermoanerobium brockii) раствора для регенерации кофактора.
Реакционный раствор D
350 мкл буфера (TEA 100 нМ, 2 мМ MgCl2, 10% глицерина, рН 8)
0,05 мг NADP
50 мкл ферментного раствора 4
10 мг 1N кетона или 2N кетона
250 мкл 4-метил-2-пентанола
50 мкл ферментного (оксидоредуктаза из Thermoanerobium brockii) раствора для регенерации кофактора.
После 24-часового инкубирования каждого реакционного раствора A, B, C и D к каждому реакционному раствору добавляют 1 мл ацетонитрила, после чего каждый реакционный раствор центрифугируют и переносят емкость для ВЭЖХ анализа на энантиомерный избыток и степень конверсии. Конверсия и значения энантиомерных избытков (ЭИ значения) продуктов, приведенные в таблице 1 ниже, рассчитывают по следующим формулам:
Коэффициент конверсии (%) = [(Площадь продукта)/ (Площадь реагента + площадь продукта)]×100
Значение ЭИ (%) = [(Площадь R-конфигурации - площадь S-конфигурации)/(Площадь R-конфигурации + площадь S-конфигурации)]×100
Таблица 1
Использованный реакционный раствор Конверсия (% восстановленного кетона) Значение ЭИ
% ЭИ (энантиомер)
R-2N спирт, 2b R-1N спирт, 2а
Реакционный раствор А >98 89(R) >98(R)
Реакционный раствор В >98 >99(R) >99(R)
Реакционный раствор С >98 95(R) >99(R)
Реакционный раствор D >98 98(R) 95(R)
Пример получения 4: Ферментативное восстановление с использованием оксидоредуктазы SEQ NO: 2
Для превращения 1N/2N кетонов в R-1N/R-2N спирт 30 мкл раствора фермента 2, содержащего оксидоредуктазу SEQ NO 2, добавляют в смесь 300 мкл буфера (100 мМ TEA, рН 8, 1 мМ MgCl2, 10% глицерина), 100 мг смеси 1N и 2N кетонов (1N:2N=14%:86%), 0,04 мг NADF и 300 мкл 2-бутанола. Реакционную смесь выдерживают при комнатной температуре при тщательном перемешивании. Спустя 48 часов более 98% кетонов было восстановлено до смеси следующего состава: 80% R-2N спирта, 0% S-2N спирта, 20% R-1N спирта, 0% S-1N спирта; 0% 1N кетона; 0% 2N кетона.
После общей обработки смеси и перекристаллизации продукта из смеси этилацетат/гексан получают оптически чистые спирты, которые показаны ниже:
(R)-1-(2-хлорфенил)-2-(1,2,3,4-тетразол-1-ил)этан-1-ол (1N спирт)
1H-ЯМР (CDCl3) д8,74 (с, 1H), д7,21-7,63 (м, 4H), д5,57 (м, 1H), д4,90 (д, 1H), д4,50 (д, 1H), д3,18 (д, 1H);
(R)-1-(2-хлорфенил)-2-(1,2,3,4-тетразол-2-ил)этан-1-ол (2N спирт)
1H-ЯМР (CDCl3) д8,55 (с, 1H), д7,28-7,66 (м, 4H), д5,73 (д, 1H), д4,98 (д, 1H), д4,83 (д, 1H), д3,38 (уш., 1H).
Получение карбамата
Пример получения 5: Получение (R)-1-(2-хлорфенил)-2-(тетразол-2-ил)этилового эфира карбаминовой кислоты
50 мл раствора фермента 2, содержащего оксидоредуктазную SEQ NO: 2, добавляют в смесь 250 мл буфера (100 мМ TEA, рН 8, 1 мМ MgCl2, 10% глицерина), 50 г (225 ммоль) 1-(2-хлорфенил)-2-(1,2,3,4-тетразол-2-ил)этан-1-она (2N кетон), 4 мг NAD, 300 мл 2-пропанола и 150 мл бутилацетата. Реакционную смесь перемешивают при комнатной температуре. Спустя 48 часов более 98% 2N кетона восстановлено до соответствующего (R)-1-(2-хлорфенил)-2-(1,2,3,4-тетразол-2-ил)этан-1-ола (R-2N спирт) с величиной ЭИ>99%. К полученной смеси добавляют 500 мл этилацетата. После разделения слоев органический слой промывают 10% раствором соли (3х500 мл). Полученный таким образом органический слой сушат над сульфатом магния, фильтруют и фильтрат упаривают при пониженном давлении, получая 50,4 г (224 ммоль) 1-(2-хлорфенил)-2-(1,2,3,4-тетразол-2-ил)этан-1-ола (R-2N спирт, оптическая чистота 99,9%) в виде маслянистого остатка. К полученному сырому продукту добавляют 450 мл тетрагидрофурана. Смесь охлаждают до -15°С, к смеси медленно добавляют 38 г (267 ммоль) хлорсульфонилизоцианата и полученную смесь перемешивают при температуре от -10°С в течение 2 часов. Реакцию гасят медленным добавлением воды. Полученный раствор концентрируют при пониженном давлении, отгоняя примерно 300 мл растворителя. Концентрат разбавляют 600 мл этилацетата и промывают 10% раствором соли (3×500 мл). Органический слой концентрируют при пониженном давлении, полученный концентрат растворяют в изопропаноле (90 мл) и к раствору медленно добавляют гептан (180 мл), что приводит к завершению кристаллизации. Полученный таким образом осадок собирают фильтрацией и промывают, получая 51,8 г (194 ммоль) (R)-1-(2-хлорфенил)-2-(тетразол-2-ил)этилового эфира карбаминовой кислоты (оптическая чистота 99,9%).
1H-ЯМР (ацетон-d6) д8,74 (с, 1H), д7,38-7,54 (м, 4H), д6,59 (м, 1H), д6,16 (уш., 2Н), д4,90 (д, 1H), д5,09 (м, 2H).
Как отмечалось ранее, карбаматные соединения высокой оптической и химической чистоты могут быть получены экономически эффективно в соответствии с настоящим изобретением.
Хотя предпочтительные варианты осуществления настоящего изобретения были раскрыты для иллюстративных целей, специалистам данной области техники будет понятно, что возможны различные модификации, дополнения и замещения без выхода за пределы существа и объема изобретения, которые описаны в прилагаемой формулы изобретения.
Текст с перечнем последовательностей
Аминокислотные последовательности
SEQ ID NO: 1: Oryctolagus cuniculus из DSMZ 22167 кролика
Figure 00000019
SEQ ID NO: 2: последовательность карбонилредуктазы белка Candida magnoliae DSMZ 22052
Figure 00000020
SEQ ID NO: 3: последовательность карбонилредуктазы белка Candida vaccinii CBS7318
Figure 00000021
SEQ ID NO: 4: последовательность карбонилредуктазы белка Candida magnoliae CBS6396
Figure 00000022
ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ НУКЛЕИНОВЫХ КИСЛОТ
SEQ ID NO: 5: Oryctolagus cuniculus из DSMZ 22167 кролика
Figure 00000023
SEQ ID NO: 6: Последовательность нуклеиновой кислоты карбонилредуктазы Candida magnoliae DSMZ 22052
Figure 00000024
SEQ ID NO: 7: Последовательность нуклеиновой кислоты карбонилредуктазы Candida vaccinii CBS7318
Figure 00000025
SEQ ID NO: 8: Последовательность нуклеиновой кислоты карбонилредуктазы Candida magnoliae CBS6396
Figure 00000026

Claims (18)

1. Способ получения арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты, представленного химической формулой 1, включающий
энантиоселективное ферментативное восстановление арилкетона, представленного химической формулой 2, до спиртового производного (R)-конфигурации, представленного химической формулой 3; и
карбаминирование указанного спирта
Химическая формула 1
Figure 00000027

Химическая формула 2
Figure 00000028

Химическая формула 3
Figure 00000029

где
R1 и R2 независимо выбраны из группы, включающей водород, галоген, перфторалкил, алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, тиоалкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода, и алкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода;
один из A1 и А2 представляет собой СН, а другой представляет собой N,
указанное энантиоселективное ферментативное восстановление проводится в реакционной смеси, включающей указанное соединение Химической формулы 2, оксидоредуктазу, имеющую по меньшей мере 90% гомологию с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3 или SEQ ID NO:4, NADH или NADPH в качестве кофактора, который окисляется в процессе восстановления и постоянно регенерируется, косубстрат, включающий вторичный спирт, представленный формулой RxRyCHOH, где Rx представляет собой углерод и х представляет собой целое число от 1 до 10 и Ry представляет собой водород и у представляет собой целое число, равное удвоенному значению х плюс два, и подходящий буфер.
2. Способ по п.1, где оксидоредуктаза инкодирована, соответственно, последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7 или SEQ ID NO:8 или последовательностью нуклеиновой кислоты, которая гибридизуется до SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7 или SEQ ID NO:8.
3. Способ по п.2, где оксидоредуктаза может быть выделена из Candida magnolia, Candida vaccinii или Oryctolagus cuniculus.
4 . Способ по п.1, где оксидоредуктаза присутствует в реакционной смеси в полностью очищенном состоянии, частично очищенном состоянии или в клетках микроорганизмов, которые ее экспрессируют.
5. Способ по п.4, где оксидоредуктаза присутствует в клетках микроорганизмов, которые ее экспрессируют, и где указанные клетки представляют собой клетки в нативном состоянии, клетки с нарушенной проницаемостью мембраны или клетки в лизированном состоянии.
6. Способ по п.5, где клетки микроорганизмов представляют собой трансформированные клетки Escherichia coli.
7. Способ по п.1, где регенерация оксисленного кофактора является результатом окисления указанного косубстрата.
8. Способ по п.1, где указанный косубстрат представляет собой вторичный спирт, выбранный из группы, включающей 2-пропанол, 2-бутанол, 2-пентанол, 4-метил-2-пентанол, 2-гептанол и 2-октанол.
9. Способ по п.1, где указанная оксидоредуктаза оказывает влияние как на восстановление арилкетона химической формулы 2, так и на окисление косубстрата.
10. Способ по п.1, где стадия карбаминирования проводится посредством взаимодействия спиртового производного (R)-конфигурации химической формулы 3 с неорганическим цианатом и органической кислотой.
11. Способ по п.1, где стадия карбаминирования проводится посредством гидролиза продукта, полученного в результате взаимодействия спиртового производного (R)-конфигурации химической формулы 3 с изоцианатным соединением, выбранным из группы, включающей хлорсульфонилизоцианат, трихлорацетилизоцианат и триметилсилилизоцианат.
12. Способ по п.1, где стадия карбамирования проводится посредством введения аммиака в продукт, полученный в результате взаимодействия спиртового производного (R)-конфигурации химической формулы 3 с карбонильным соединением, включая 1,1-карбодиимидазол, карбамоилгалогенид, дисукцинилкарбонат, фосген, трифосген или хлорформиат.
13. Способ по п.1, дополнительно включающий стадию кристаллизации после по меньшей мере одной стадии энантиоселективного ферментативного восстановления и стадии карбамирования.
14. Способ по п.13, где стадия кристаллизации включает
добавление к продукту реакции солюбилизирующего агента, выбранного из ацетона, ацетонитрила, тетрагидрофурана, этилацетата, дихлорметана, хлороформа, 1,4-диоксана, низшего спирта, содержащего от 1 до 4 атомов углерода, и их смеси;
добавление осаждающего вещества, выбранного из группы, включающей воду, низший спирт, содержащий от 1 до 4 атомов углерода, диэтиловый эфир, пентан, гексан, циклогексан, гептан и их смесь.
15. Способ по п.1, дополнительно включающий стадию получения арилкетона химической формулы 2 взаимодействием согласно реакции замещения арилкетона, представленного ниже химической формулой 4, с тетразолом, представленным химической формулой 5:
Химическая формула 4
Figure 00000030

Химическая формула 5
Figure 00000031

где R1 и R2 принимают значения, определенные в п.1; и
X представляет собой удаляемую группу, выбранную из галогенида и сульфоната.
16. Способ по п.15, дополнительно включающий стадию кристаллизации, которая включает
добавление солюбилизирующего агента, выбранного из ацетона, ацетонитрила, тетрагидрофурана, этилацетата, дихлорметана, хлороформа, 1,4-диоксана, низшего спирта, содержащего от 1 до 4 атомов углерода, и их смеси, к продукту, полученному реакцией замещения; и
добавление осаждающего вещества, выбранного из воды, низшего спирта, содержащего от 1 до 4 атомов углерода, диэтилового эфира, пентана, гексана, циклогексана, гептанов и их смеси.
17. Способ получения спиртового производного, представленного химической формулой 3, энантиоселективным ферментативным восстановлением арилкетона, представленного химической формулой 2:
Химическая формула 2
Figure 00000032

Химическая формула 3
Figure 00000033

где
R1 и R2 независимо выбраны из группы, включающей водород, галоген, перфторалкил, алкил, содержащий от 1 до 8 атомов углерода, тиоалкоксигруппу, содержащую от 1 до 8 атомов углерода, и алкоксигруппу, включающую от 1 до 8 атомов углерода;
один из А1 и А2 представляет собой СН, а другой представляет собой N; и
указанное восстановление проводится в реакционной смеси, содержащей указанное соединение химической формулы 2, оксидоредуктазу, имеющую по меньшей мере 90% гомологию с аминокислотными последовательностями SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3 или SEQ ID NO:4, NADH или NADPH в качестве кофактора, который окисляется в процессе восстановления и постоянно регенерируется, косубстрат, содержащий вторичный спирт, представленный формулой RxRyCHOH, где Rx представляет собой углерод и х представляет собой целое число от 1 до 10, Ry представляет собой водород и y представляет собой целое число, равное удвоенному значению х плюс два, и подходящий буфер.
18. Способ по п.17, где оксидоредуктаза кодируется, соответственно, последовательностью нуклеиновой кислоты SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7 или SEQ ID NO:8 или последовательности нуклеиновой кислоты, которая гибридизуется до SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7 или SEQ ID NO:8, соответственно.
19. Способ по п.17, где оксидоредуктаза может быть выделена из Candida magnolia, Candida vaccinii или Oryctolagus cuniculus.
RU2012119801/04A 2009-10-15 2010-10-15 Способ получения (r)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты RU2539983C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US25186709P 2009-10-15 2009-10-15
US61/251,867 2009-10-15
PCT/KR2010/007069 WO2011046380A2 (en) 2009-10-15 2010-10-15 Method for preparation of carbamic acid (r)-1-aryl-2-tetrazolyl-ethyl ester

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2012119801A RU2012119801A (ru) 2013-11-20
RU2539983C2 true RU2539983C2 (ru) 2015-01-27

Family

ID=43876717

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2012119801/04A RU2539983C2 (ru) 2009-10-15 2010-10-15 Способ получения (r)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты

Country Status (19)

Country Link
US (3) US8404461B2 (ru)
EP (1) EP2488505B1 (ru)
JP (1) JP5797656B2 (ru)
KR (1) KR101708437B1 (ru)
CN (1) CN102574821B (ru)
AU (1) AU2010307466B2 (ru)
BR (1) BR112012008858B1 (ru)
CA (1) CA2776743C (ru)
CL (1) CL2012000959A1 (ru)
ES (1) ES2536488T3 (ru)
HK (1) HK1172625A1 (ru)
HU (1) HUE025816T2 (ru)
IL (1) IL218787A0 (ru)
MX (1) MX2012004055A (ru)
MY (1) MY162997A (ru)
PL (1) PL2488505T3 (ru)
RU (1) RU2539983C2 (ru)
WO (1) WO2011046380A2 (ru)
ZA (1) ZA201202629B (ru)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2751504C2 (ru) * 2016-05-19 2021-07-14 ЭсКей БАЙОФАРМАСЬЮТИКАЛЗ КО., ЛТД. Применение карбамата для предупреждения или лечения невралгии тройничного нерва
RU2793742C2 (ru) * 2017-11-14 2023-04-05 ЭсКей БАЙОФАРМАСЬЮТИКАЛЗ КО., ЛТД. Применение карбаматного соединения для снижения или лечения нарушений развития, включая синдром хрупкой x-хромосомы, синдром ангельмана или синдром ретта

Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX2011009824A (es) 2009-03-23 2012-01-25 Glenmark Pharmaceuticals Sa Derivados de pirimidina-diona fusionados como moduladores del trpa1.
US8404461B2 (en) 2009-10-15 2013-03-26 SK Biopharmaceutical Co. Ltd. Method for preparation of carbamic acid (R)-1-aryl-2-tetrazolyl-ethyl ester
CN103694187A (zh) * 2014-01-06 2014-04-02 四川大学 5-氨基-1-苯甲酰氨基四唑及其金属配合物
KR102421006B1 (ko) * 2016-05-19 2022-07-14 에스케이바이오팜 주식회사 두통의 예방학적 치료를 위한 카바메이트 화합물의 용도
KR102489052B1 (ko) * 2016-05-19 2023-01-16 에스케이바이오팜 주식회사 섬유근육통 또는 섬유근육통의 연관된 기능적 증후군을 예방 또는 치료하기 위한 카바메이트 화합물의 용도
IL267195B2 (en) 2016-12-14 2024-05-01 Sk Biopharmaceuticals Co Ltd Use of carbamate compounds to prevent, alleviate, or treat bipolar disorder
CA3046296A1 (en) * 2016-12-14 2018-06-21 Sk Biopharmaceuticals Co., Ltd. Orally disintegrated tablet comprising carbamate compound
MX2019006941A (es) 2016-12-14 2019-09-06 Sk Biopharmaceuticals Co Ltd Uso de compuesto de carbamato para prevenir, aliviar o tratar temblores o el sindrome de temblor.
KR102635931B1 (ko) 2016-12-14 2024-02-13 에스케이바이오팜 주식회사 가려움증의 예방, 경감 또는 치료를 위한 카바메이트 화합물의 용도
WO2018111006A1 (ko) 2016-12-14 2018-06-21 에스케이바이오팜 주식회사 탈수초성 질환의 예방, 경감 또는 치료를 위한 카바메이트 화합물의 용도
US12070447B2 (en) 2016-12-14 2024-08-27 Sk Biopharmaceuticals Co., Ltd. Parenteral liquid preparation comprising carbamate compound
PL3711758T3 (pl) * 2017-11-14 2024-07-01 Sk Biopharmaceuticals Co., Ltd. Zastosowanie związku karbaminianowego do zapobiegania, łagodzenia lub leczenia napadów nieświadomości lub padaczki wykazującej napady nieświadomości
US11389429B2 (en) 2017-11-14 2022-07-19 Sk Biopharmaceuticals Co., Ltd. Use of carbamate compound for preventing, alleviating or treating myotonia
WO2019098633A1 (ko) 2017-11-14 2019-05-23 에스케이바이오팜 주식회사 내장통 또는 내장 질환에서 기인한 통증을 예방, 경감 또는 치료하기 위한 카바메이트 화합물의 용도
ES2973111T3 (es) 2017-11-14 2024-06-18 Sk Biopharmaceuticals Co Ltd Uso de un compuesto de carbamato para prevenir o tratar enfermedades asociadas con el aumento de la corriente tardía de sodio
CA3081224A1 (en) 2017-11-14 2019-05-23 Sk Biopharmaceuticals Co., Ltd. Use of carbamate compound for reducing or treating developmental disorders including fragile x syndrome, angelman syndrome or rett syndrome
AU2018367733B2 (en) 2017-11-14 2024-06-20 Sk Biopharmaceuticals Co., Ltd. Blend containing carbamate compound for prevention, mitigation, or treatment of schizophrenia
CN113242735A (zh) 2018-09-21 2021-08-10 爱思开生物制药株式会社 使用氨基甲酸酯化合物预防、缓解或治疗并发的癫痫发作
CA3112166A1 (en) * 2018-09-21 2020-03-26 Sk Biopharmaceuticals Co., Ltd. Carbamate compound and use of formulation comprising same in preventing, alleviating, or treating acute stress disorder or post-traumatic stress disorder
KR20210062029A (ko) 2018-10-19 2021-05-28 에스케이바이오팜 주식회사 카바메이트 화합물의 당뇨병성 말초 신경병증 또는 화학요법 유발 말초 신경병증의 예방, 완화 또는 치료를 위한 용도
US10611737B1 (en) 2019-10-24 2020-04-07 Sk Biopharmaceuticals Co., Ltd. Method for preparing aryl 2-tetrazol-2-yl ketone with improved selectivity
MX2022004740A (es) * 2019-10-24 2022-05-16 Sk Biopharmaceuticals Co Ltd Metodo para preparar aril 2-tetrazol-2-il cetona con selectividad mejorada.
IL293096A (en) 2019-11-22 2022-07-01 Sk Biopharmaceuticals Co Ltd A pharmaceutical preparation for oral administration containing a carbamate compound and a method for its preparation
CN111705096A (zh) * 2020-06-29 2020-09-25 上海舒泽生物科技研究所 一种酶转化法生产β-烟酰胺单核苷酸的方法
WO2022031099A1 (ko) 2020-08-06 2022-02-10 에스케이바이오팜 주식회사 카바메이트 화합물을 포함하는 경구용 고형 제제 및 이의 제조방법
ES2931000B2 (es) * 2022-07-14 2023-07-07 Univ Madrid Complutense Proceso para la preparación de cenobamato

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030130521A1 (en) * 1999-02-16 2003-07-10 Kaneka Corporation Substituted acetylpyridine derivatives and process for the preparation of intermediates for optically active beta3 agonist by the use of the same
US20060211099A1 (en) * 2003-04-07 2006-09-21 Basf Aktiengesellschaft L-carnitin dehydrogenases, their derivatives and method for producing substituted (s) alkanols
WO2006112685A1 (en) * 2005-04-22 2006-10-26 Sk Holdings Co., Ltd. Neurotherapeutic azole compounds
RU2508290C2 (ru) * 2009-06-22 2014-02-27 ЭсКей БАЙОФАРМАСЬЮТИКАЛЗ КО., ЛТД. Способ получения (r)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты

Family Cites Families (74)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS61134339A (ja) 1984-12-05 1986-06-21 Seitetsu Kagaku Co Ltd α−ジケトンの立体特異的還元による光学活性アルコ−ルならびにその製造方法
JPH054943A (ja) 1990-08-30 1993-01-14 Sagami Chem Res Center 光学活性β，δ−ジケト酸エステル及びその還元体
EP0538693A3 (en) 1991-10-23 1994-08-17 Squibb & Sons Inc Stereoselective preparation of halophenyl alcohols
JP3672307B2 (ja) 1992-03-13 2005-07-20 フォルシュングスツェントルム・ユーリッヒ・ゲゼルシャフト・ミト・ベシュレンクテル・ハフツング 新規ケトエステル‐還元酵素，その製造方法及びこれを酵素酸化還元反応に使用する方法
WO1994007888A1 (en) 1992-09-25 1994-04-14 Chiroscience Limited Chiral compounds and their use
CA2103932A1 (en) 1992-11-05 1994-05-06 Ramesh N. Patel Stereoselective reduction of ketones
JPH0759592A (ja) 1993-08-25 1995-03-07 Osaka City 光学活性ジオールの製造方法
JP3574682B2 (ja) 1993-09-24 2004-10-06 ダイセル化学工業株式会社 新規な酵素、該酵素を製造する方法、該酵素をコードするｄｎａ、該ｄｎａを含む形質転換体、該酵素による光学活性アルコール等の製造方法
PL177372B1 (pl) 1995-03-30 1999-11-30 Akad Rolnicza Sposób otrzymywaniaoptycznie czynnych alkoholi aromatycznych
DE19610984A1 (de) 1996-03-21 1997-09-25 Boehringer Mannheim Gmbh Alkohol-Dehydrogenase und deren Verwendung zur enzymatischen Herstellung chiraler Hydroxyverbindungen
JPH1094399A (ja) 1996-09-24 1998-04-14 Fukui Pref Gov Sangyo Shinko Zaidan 酵素を用いる光学活性アルコールの製造法
AU4032997A (en) 1997-02-07 1998-08-26 Kaneka Corporation Novel carbonyl reductase, gene that encodes the same, and method of utilizing these
DE19707008A1 (de) 1997-02-21 1998-08-27 Basf Ag Verfahren zur Herstellung von enantiomerenreinen Alkoholen
JPH10248591A (ja) 1997-03-06 1998-09-22 Sumitomo Chem Co Ltd 光学活性アルコールの製造方法
JPH10287634A (ja) 1997-04-11 1998-10-27 Otsuka Pharmaceut Co Ltd ベンゼン誘導体
JPH11130761A (ja) 1997-10-24 1999-05-18 Otsuka Pharmaceut Co Ltd ベンゾチアゾール誘導体
JP2000236883A (ja) 1998-12-21 2000-09-05 Daicel Chem Ind Ltd 新規なカルボニル還元酵素、該酵素の製造方法、該酵素をコードするｄｎａおよびこれを利用したアルコールの製造方法
CA2360376C (en) 1999-12-03 2005-04-26 Noriyuki Kizaki Novel carbonyl reductase, gene thereof and method of using the same
DE10037101A1 (de) 2000-07-27 2002-02-07 Degussa Rekombinant hergestellte Enzyme mit verbesserter NAD(H)-Akzeptanz
MXPA03008437A (es) 2001-03-22 2004-01-29 Bristol Myers Squibb Co Reduccion estereoselectiva de acetofenona substituida.
DE10119274A1 (de) 2001-04-20 2002-10-31 Juelich Enzyme Products Gmbh Enzymatisches Verfahren zur enantioselektiven Reduktion von Ketoverbindungen
JP4630486B2 (ja) 2001-05-28 2011-02-09 ダイセル化学工業株式会社 新規な（ｒ）−２，３−ブタンジオール脱水素酵素、その製造方法、及びこれを利用した光学活性アルコールの製造方法
JP2003230398A (ja) 2001-12-07 2003-08-19 Daicel Chem Ind Ltd 光学活性アルコールの製造方法
TW200305645A (en) 2002-03-19 2003-11-01 Mitsubishi Chem Corp Novel carbonyl reductase, gene encoding the same and process for producing optically active alcohols using the same
JP2003289895A (ja) 2002-04-03 2003-10-14 Sumitomo Chem Co Ltd メチレンジオキシフェニル基を有するケトン化合物の不斉還元による光学活性アルコール化合物の製造方法
AU2003235980A1 (en) 2002-04-30 2003-11-17 Kaneka Corporation Novel carbonyl reductase, gene thereof and use of the same
US7056540B2 (en) 2002-10-29 2006-06-06 Council Of Scientific And Industrial Research Enzymatic process for the preparation of optically active alcohols from ketones using tuberous root Daucus carota
JP4366097B2 (ja) 2003-02-28 2009-11-18 住友化学株式会社 還元酵素遺伝子及びその利用
JP4295531B2 (ja) 2003-03-10 2009-07-15 三菱化学株式会社 新規カルボニル還元酵素及びこれをコードするｄｎａ、ならびにこれらを利用した光学活性アルコールの製造方法
JP2004313033A (ja) 2003-04-14 2004-11-11 Daiichi Fine Chemical Co Ltd 新規なカルボニル還元酵素及びそれをコードする遺伝子並びにその用途
JP4213524B2 (ja) 2003-04-17 2009-01-21 ダイセル化学工業株式会社 新規なカルボニル還元酵素、その酵素をコードするｄｎａを含むポリヌクレオチド、その製造方法、およびこれを利用した光学活性アルコールの製造方法
JP4294382B2 (ja) 2003-06-06 2009-07-08 ダイセル化学工業株式会社 （２ｓ，３ｓ）−２，３−ブタンジオール脱水素酵素
DE10327454A1 (de) 2003-06-18 2005-01-20 Juelich Enzyme Products Gmbh Oxidoreduktase aus Pichia capsulata
JP4205496B2 (ja) 2003-06-19 2009-01-07 三菱化学株式会社 新規カルボニル還元酵素及びこれをコードするｄｎａ、ならびにこれらを利用した光学活性アルコールの製造方法
DE102004037669A1 (de) 2003-08-13 2005-03-10 Juelich Enzyme Products Gmbh (R)- und (S)-1,4-Dichlor-butan-2-ol und Verfahren zu deren Herstellung durch enantioselektive enzymatische Reduktion von 1,4-Dichlor-butan-2-on
SG128683A1 (en) 2003-10-31 2007-01-30 Daiichi Fine Chem Co Ltd Novel plasmids and utilization thereof
DE10354779A1 (de) 2003-11-21 2005-06-23 Juelich Enzyme Products Gmbh Oxidoreduktase aus Metschnikowia zobellii
EP1712630A4 (en) 2004-02-04 2008-04-16 Api Corp PROCESS FOR THE PRODUCTION OF OPTICALLY ACTIVE ALCOHOL AND OPTICALLY ACTIVE CARBOXYLIC ACID
JP2005218348A (ja) 2004-02-05 2005-08-18 Daicel Chem Ind Ltd 光学活性α−ヒドロキシアミドの製造方法
DE102004022686A1 (de) 2004-05-05 2005-11-24 Basf Ag Verfahren zur Herstellung optisch aktiver Alkohole
AT413541B (de) 2004-05-10 2006-03-15 Iep Gmbh Verfahren zur herstellung von 2-butanol
JP2007274901A (ja) 2004-05-12 2007-10-25 Taisho Pharmaceut Co Ltd 光学活性プロパルギルアルコールの製造方法
DE102004029112B4 (de) 2004-06-11 2007-06-21 Julich Chiral Solutions Gmbh Alkoholdehydrogenase zur stereoselektiven Gewinnung von Hydroxyverbindungen
WO2006046455A1 (ja) 2004-10-27 2006-05-04 Kaneka Corporation 新規カルボニル還元酵素、その遺伝子、およびその利用法
AT501928B1 (de) 2004-10-27 2010-09-15 Iep Gmbh Verfahren zur herstellung von chiralen alkoholen
DE102004059376A1 (de) 2004-12-09 2006-06-22 Consortium für elektrochemische Industrie GmbH GDH-Mutante mit verbesserter chemischer Stabilität
US20060177913A1 (en) 2005-02-08 2006-08-10 Consortium Fur Elektrochemische Industrie Gmbh Process for enantioselective enzymatic reduction of keto compounds
AT501496B1 (de) 2005-02-21 2007-03-15 Iep Gmbh Verfahren zur enantioselektiven enzymatischen reduktion von ketoverbindungen
US20080038803A1 (en) 2005-02-25 2008-02-14 Akira Iwasaki Process for Producing Optically Active Secondary Alcohol
DE102005010804A1 (de) 2005-03-07 2006-09-14 Basf Ag Verfahren zur Herstellung optisch aktiver Alkohole
US7393667B2 (en) 2005-05-31 2008-07-01 Bristol-Myers Squibb Company Stereoselective reduction process for the preparation of pyrrolotriazine compounds
AT502395B1 (de) 2005-07-27 2007-03-15 Iep Gmbh Oxidoreduktasen zur stereoselektiven reduktion von ketoverbindungen
JP4745762B2 (ja) 2005-09-02 2011-08-10 住友化学株式会社 還元酵素及びその利用
DE102005044736A1 (de) 2005-09-19 2007-03-22 Basf Ag Neue Dehydrogenasen, deren Derivate und ein Verfahren zur Herstellung von optisch aktiven Alkanolen
AT502185B1 (de) 2005-09-23 2007-02-15 Iep Gmbh Verfahren zur enantioselektiven enzymatischen reduktion von ketoverbindungen
AT503017B1 (de) * 2005-12-19 2007-07-15 Iep Gmbh Verfahren zur enantioselektiven enzymatischen reduktion von hydroxyketoverbindungen
WO2007099764A1 (ja) 2006-02-28 2007-09-07 Kaneka Corporation 新規カルボニル還元酵素、その遺伝子、およびそれらを利用した光学活性アルコールの製造方法
WO2007099994A1 (ja) 2006-03-02 2007-09-07 Kaneka Corporation 新規カルボニル還元酵素、その遺伝子、ベクター、形質転換体、およびそれらを利用した光学活性アルコールの製造方法
DE102006010994A1 (de) 2006-03-09 2007-09-13 Wacker Chemie Ag Verfahren zur enzymatischen Herstellung von chiralen Alkoholen
ATE529507T1 (de) 2006-03-31 2011-11-15 Kaneka Corp Verfahren zur produktion von erythro- oder threo- 2-amino-3-hydroxypropionsäureester, neuartige carbonylreduktase, gen für die reduktase, vektor, transformante und verfahren zur produktion von optisch aktivem alkohol unter verwendung dieser
CN101501202A (zh) 2006-06-05 2009-08-05 大赛璐化学工业株式会社 光学活性醇的制造方法
JP4903512B2 (ja) 2006-07-13 2012-03-28 住友化学株式会社 還元酵素遺伝子を含む発現ベクター
WO2008035187A2 (en) 2006-09-21 2008-03-27 Dow Global Technologies Inc. Alcohol dehydrogenase from agromyces sp. and a method of producing a chiral secondary alcohol using same
DE102006055047A1 (de) 2006-11-22 2008-05-29 Wacker Chemie Ag Verfahren zur Herstellung von Dihydroxy-Verbindungen aus Diketo-Verbindungen durch enzymkatalysierte enantioselektive Reduktion
DE102006056526A1 (de) 2006-11-30 2008-06-05 Archimica Gmbh Verfahren zur stereoselektiven Synthese von chiralen Epoxiden durch ADH-Reduktion von alpha-Abgangsgruppen-substituierten Ketonen und Cyclisierung
AT504542B1 (de) 2006-12-07 2008-09-15 Iep Gmbh Verfahren zur enantioselektiven enzymatischen reduktion von secodionderivaten
JP5503534B2 (ja) 2007-06-20 2014-05-28 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア アゾアルクス（Ａｚｏａｒｃｕｓ）ＳｐＥｂＮ１脱水素酵素を用いる光学活性アルコールの製造方法
TWI601825B (zh) 2007-09-27 2017-10-11 Ｉｅｐ有限公司 對映異構選擇性酶催化還原中間產物之方法
DE102007052112A1 (de) 2007-10-30 2009-05-07 Chiracon Gmbh Pflanzliche Biokatalysatoren zur Herstellung optisch aktiver Hydroxyverbindungen
WO2009070822A2 (en) 2007-12-05 2009-06-11 Angewandte Biokatalyse Kompetenzzentrum Gmbh Recombinant pichia pastoris cell
CN101314787A (zh) 2008-06-24 2008-12-03 江苏华荣生物科技有限公司 用红酵母还原酶制剂制备光学活性手性仲醇的方法
CN101319236A (zh) 2008-07-01 2008-12-10 江南大学 水/离子液体两相体系中生物催化不对称还原羰基化合物的方法
CN101358183B (zh) 2008-09-03 2010-07-14 华东理工大学 红豆羰基还原酶、制备方法和用途
US8404461B2 (en) 2009-10-15 2013-03-26 SK Biopharmaceutical Co. Ltd. Method for preparation of carbamic acid (R)-1-aryl-2-tetrazolyl-ethyl ester

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20030130521A1 (en) * 1999-02-16 2003-07-10 Kaneka Corporation Substituted acetylpyridine derivatives and process for the preparation of intermediates for optically active beta3 agonist by the use of the same
US20060211099A1 (en) * 2003-04-07 2006-09-21 Basf Aktiengesellschaft L-carnitin dehydrogenases, their derivatives and method for producing substituted (s) alkanols
WO2006112685A1 (en) * 2005-04-22 2006-10-26 Sk Holdings Co., Ltd. Neurotherapeutic azole compounds
RU2508290C2 (ru) * 2009-06-22 2014-02-27 ЭсКей БАЙОФАРМАСЬЮТИКАЛЗ КО., ЛТД. Способ получения (r)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SHERIF A.F. ROSTOM ET AL.: 'Azole antimicrobial pharmacophore-based tetrazoles: Synthesis and biological evaluation as potential antimicrobial and anticonvulsant agents' BIOORGANIC & MEDICINAL CHEMISTRY,2009, vol. 1, no. 6, pages 2410 - 2422 *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2751504C2 (ru) * 2016-05-19 2021-07-14 ЭсКей БАЙОФАРМАСЬЮТИКАЛЗ КО., ЛТД. Применение карбамата для предупреждения или лечения невралгии тройничного нерва
RU2793742C2 (ru) * 2017-11-14 2023-04-05 ЭсКей БАЙОФАРМАСЬЮТИКАЛЗ КО., ЛТД. Применение карбаматного соединения для снижения или лечения нарушений развития, включая синдром хрупкой x-хромосомы, синдром ангельмана или синдром ретта

Also Published As

Publication number Publication date
WO2011046380A3 (en) 2011-10-20
EP2488505A4 (en) 2013-05-01
IL218787A0 (en) 2012-06-28
ES2536488T3 (es) 2015-05-25
US20110111467A1 (en) 2011-05-12
US9434970B2 (en) 2016-09-06
HUE025816T2 (en) 2016-04-28
PL2488505T3 (pl) 2015-10-30
MX2012004055A (es) 2012-08-31
CN102574821B (zh) 2015-03-18
RU2012119801A (ru) 2013-11-20
CN102574821A (zh) 2012-07-11
JP2013507911A (ja) 2013-03-07
CL2012000959A1 (es) 2012-10-12
HK1172625A1 (en) 2013-04-26
BR112012008858B1 (pt) 2021-07-20
US8404461B2 (en) 2013-03-26
US9068207B2 (en) 2015-06-30
CA2776743C (en) 2017-03-28
US20140073018A1 (en) 2014-03-13
JP5797656B2 (ja) 2015-10-21
US20150252398A1 (en) 2015-09-10
ZA201202629B (en) 2012-12-27
WO2011046380A2 (en) 2011-04-21
CA2776743A1 (en) 2011-04-21
EP2488505B1 (en) 2015-02-25
EP2488505A2 (en) 2012-08-22
BR112012008858A2 (pt) 2015-09-22
KR20120087124A (ko) 2012-08-06
KR101708437B1 (ko) 2017-02-20
MY162997A (en) 2017-07-31
AU2010307466B2 (en) 2015-02-05
AU2010307466A1 (en) 2012-04-19

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2539983C2 (ru) Способ получения (r)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты
RU2508290C2 (ru) Способ получения (r)-1-арил-2-тетразолилэтилового эфира карбаминовой кислоты
US11124478B2 (en) Process for making beta 3 agonists and intermediates
CN115404249B (zh) 一种(s)-尼古丁中间体的制备方法及其应用
WO2017022846A1 (ja) ピタバスタチンカルシウムの製造方法
US20090275094A1 (en) Process for producing sulfur-containing hydroxycarboxylic acid
WO2007097336A1 (ja) （２ｒ，３ｒ）および（２ｓ，３ｓ）－３－フェニルイソセリン誘導体の製造法
RU2808087C1 (ru) Способ получения арил-2-тетразол-2-илкетона c улучшенной селективностью
JP2022553754A (ja) 選択性が向上されたアリール２－テトラゾール－２－イルケトンを製造する方法
JP2024138888A (ja) カルバミン酸アリール－２－テトラゾリルエチルエステルの製造方法