PL201482B1 - Sposoby wytwarzania kompozycji szczepionki oraz kompozycja szczepionki - Google Patents

Sposoby wytwarzania kompozycji szczepionki oraz kompozycja szczepionki

Info

Publication number
PL201482B1
PL201482B1 PL348121A PL34812199A PL201482B1 PL 201482 B1 PL201482 B1 PL 201482B1 PL 348121 A PL348121 A PL 348121A PL 34812199 A PL34812199 A PL 34812199A PL 201482 B1 PL201482 B1 PL 201482B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
antigen
adsorbed
aluminum salt
virus
salt particle
Prior art date
Application number
PL348121A
Other languages
English (en)
Other versions
PL348121A1 (en
Inventor
Nathalie Garcon
Original Assignee
Smithkline Beecham Biolog
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27269522&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL201482(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from GBGB9822712.7A external-priority patent/GB9822712D0/en
Priority claimed from GBGB9822709.3A external-priority patent/GB9822709D0/en
Priority claimed from GBGB9822703.6A external-priority patent/GB9822703D0/en
Application filed by Smithkline Beecham Biolog filed Critical Smithkline Beecham Biolog
Publication of PL348121A1 publication Critical patent/PL348121A1/xx
Publication of PL201482B1 publication Critical patent/PL201482B1/pl

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/002—Protozoa antigens
    • A61K39/015—Hemosporidia antigens, e.g. Plasmodium antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/29—Hepatitis virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55561—CpG containing adjuvants; Oligonucleotide containing adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55577—Saponins; Quil A; QS21; ISCOMS
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16611—Simplexvirus, e.g. human herpesvirus 1, 2
    • C12N2710/16634—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/20011—Papillomaviridae
    • C12N2710/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
    • C12N2730/00011—Details
    • C12N2730/10011—Hepadnaviridae
    • C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
    • C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32411—Hepatovirus, i.e. hepatitis A virus
    • C12N2770/32434—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

Przedstawiono sposób wytwarzania kompozycji szczepionki obejmuj acy zmieszanie (a) kompo- zycji adjuwanta zawieraj acej immunostymulant którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A zaadsorbowany na cz astce soli glinu, przy czym nie wi ecej ni z 20% masy ca lego materia lu zdolnego do adsorbowania na cz astce soli glinu jest antygenem, z b) antygenem zaadsorbowanym na cz astce soli glinu. Przedstawiono tak ze sposób wytwarzania kompozycji szczepionki obejmuj acej immunosty- mulant, którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A, antygen i cz astk e soli glinu, obejmuj acy: (a) adsorbowanie antygenu na pierwszej cz astce soli glinu; (b) adsorbowanie immunostymulanta na drugiej cz astce soli glinu; oraz (c) zmieszanie produktów z etapu (a) i (b). Przedstawiono równie z kompozycj e szczepionki obejmuj acej dwie podstawowe populacje kompleksów, pierwszy kompleks obejmuj acy (a) immunostymulant, którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A zaadsorbowany na cz astce soli glinu, przy czym nie wi ecej ni z 20% masy ca lego materia lu zdolnego do adsorbowania na cz astce soli glinu jest antygenem, i drugi kompleks obejmuj acy (b) antygen zaadsorbowany na cz astce soli glinu. PL PL PL PL PL PL

Description

(12) OPIS PATENTOWY (19) PL (11) 201482 (13) B1 (21) Numer zgłoszenia: 348121 (13) (22) Data zgłoszenia: 08.10.1999 (51) Int.Cl.
A61K 39/39 (2006.01) (86) Data i numer zgłoszenia międzynarodowego: A61P 39/12 (2006.01)
08.10.1999, PCT/EP99/07764 A61K 39/29 (2006.01) (87) Data i numer publikacji zgłoszenia międzynarodowego:
27.04.2000, WO00/23105 PCT Gazette nr 17/00 (54) Sposoby wytwarzania kompozycji szczepionki oraz kompozycja szczepionki (30) Pierwszeństwo:
16.10.1998,GB,9822703.6
16.10.1998,GB,9822709.3
16.10.1998,GB,9822712.7 (43) Zgłoszenie ogłoszono:
06.05.2002 BUP 10/02 (73) Uprawniony z patentu:
SMITHKLINE BEECHAM BIOLOGICALS S.A., Rixensart,BE (72) Twórca(y) wynalazku:
Nathalie Garcon,Rixensart,BE (45) O udzieleniu patentu ogłoszono:
(74)
30.04.2009 WUP 04/09
Pełnomocnik:
Jolanta Hawrylak, PATPOL Sp. z o.o.
(57) Przedstawiono sposób wytwarzania kompozycji szczepionki obejmujący zmieszanie (a) kompozycji adjuwanta zawierającej immunostymulant którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A zaadsorbowany na cząstce soli glinu, przy czym nie więcej niż 20% masy całego materiału zdolnego do adsorbowania na cząstce soli glinu jest antygenem, z b) antygenem zaadsorbowanym na cząstce soli glinu. Przedstawiono także sposób wytwarzania kompozycji szczepionki obejmującej immunostymulant, którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A, antygen i cząstkę soli glinu, obejmujący:
(a) adsorbowanie antygenu na pierwszej cząstce soli glinu; (b) adsorbowanie immunostymulanta na drugiej cząstce soli glinu; oraz (c) zmieszanie produktów z etapu (a) i (b). Przedstawiono również kompozycję szczepionki obejmującej dwie podstawowe populacje kompleksów, pierwszy kompleks obejmujący (a) immunostymulant, którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A zaadsorbowany na cząstce soli glinu, przy czym nie więcej niż 20% masy całego materiału zdolnego do adsorbowania na cząstce soli glinu jest antygenem, i drugi kompleks obejmujący (b) antygen zaadsorbowany na cząstce soli glinu.
PL 201 482 B1
Opis wynalazku
Niniejszy wynalazek dotyczy sposobów wytwarzania kompozycji szczepionki oraz kompozycji szczepionki. W szczególności szczepionki obejmują sole glinu i immunostymulant którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A zaadsorbowany na cząstce soli glinu.
Sole glinu są bardzo dobrze znane w stanie techniki jako bezpieczne środki pomocnicze o aktywności adjuwanta. Uważa się, że mechanizm działania takich adjuwantów obejmuje tworzenie antygenowego depotu tak że antygen może pozostawać w miejscu wstrzyknięcia aż do 3 tygodni po podaniu, a również tworzenie kompleksów antygen/sól metalu, które są znacznie łatwiej wchłaniane przez komórki przyjmujące antygen. Do adsorbowania antygenów obok glinu stosowano sole innych metali, w tym sole cynku, wapnia, ceru, chromu, żelaza i berylu. Najpowszechniej stosowane sole to wodorotlenek i fosforan glinu.
Formulacje szczepionek zawierające sole glinu, antygen i dodatkowo immunostymulant są znane w stanie techniki. Takie formulacje wywołują większą odpowiedź immunologiczną w porównaniu do odpowiedzi stymulowanej tylko przez sole glinu i antygen. Formulacje wcześniej znanych szczepionek wymagały specjalnej procedury wytwarzania, ponieważ uważano że aby wystąpiła optymalna odpowiedź immunologiczna to antygen musi być zaadsorbowany na tej samej cząsteczce soli glinu co i immunostymulant. Tym sposobem gdy antygen jest wchł aniany przez komórkę przyjmują cą antygen to współzaadsorbowany immunostymulant rozszerza swoją stymulującą aktywność bezpośrednio w tej samej komórce przyjmującej antygen.
Formulacje szczepionek na bazie glinu, w których antygen i immunostymulant będący 3-de-O-acylowanym monofosforylolipidem A (3D-MPL) są zaadsorbowane na tej samej cząsteczce są opisane w publikacjach EP-0576478B1, EP-0689454B1 i EP-0633784B1. W tych przypadkach najpierw adsorbuje się antygen na soli glinu, a następnie na tej samej cząstce soli glinu adsorbuje się immunostymulant 3D-MPL. Takie procesy wymagają najpierw zawieszenia 3D-MPL przez działanie ultradźwiękami w łaźni wodnej, aż cząstki osiągną wymiar między 80 a 500 nm. Antygen zazwyczaj adsorbuje się na soli glinu przez jedną godzinę w pokojowej temperaturze, z mieszaniem. Zawiesinę 3D-MPL następnie dodaje się do zaadsorbowanego antygenu i formulacje inkubuje się w pokojowej temperaturze przez 1 godzinę, a potem utrzymuje w temperaturze 4°C aż do użycia.
Znane ze stanu techniki sposoby wytwarzania dostarczają silnych pod względem z immunologicznym szczepionek, jednak mają wiele cech niekorzystnych z handlowego punktu widzenia. Aby szczepionka nadawała się do podawania ludziom sposób jej wytwarzania musi być ujednolicony i musi speł niać wymagania dobrej praktyki produkcyjnej (GMP), oraz kontroli jakoś ci (QC). W niektórych przypadkach sposoby znane ze stanu techniki dostarczają szczepionek, w których cały antygen albo lub antygeny są zaadsorbowane na tej samej cząstce soli metalu. Sposób jeszcze bardziej komplikuje się przez wymaganie aby 3D-MPL był zaadsorbowany na tej samej cząstce soli metalu. Może to być szczególnie problematyczne w przypadku szczepionek kombinowanych zawierających wiele antygenów (których adsorbowanie może być zależne od powinowactwa każdego antygenu do wybranej soli metalu przy danym pH). Sposoby znane ze stanu techniki mogą powodować problemy z powtarzalnością i jakością szczepionek w zależności od tego jakie stosuje się antygeny. Ponadto, jeśli stanie się coś niepożądanego z jakością danego antygenu, lub wystąpi zjawisko które może skutkować zanieczyszczeniem szczepionki, to może to spowodować utratę wszystkich pojedynczych komponentów, a nie tylko antygenu który problem spowodował. Ponadto, w niektórych okolicznościach kombinacja szczepionek może wymagać kolejnego dodawana antygenów, a taki sposób pochłania wyjątkowo dużo czasu i jest kosztowny. Zatem sposoby znane ze stanu techniki mogą być skomplikowane, trudne do kontrolowania i kosztowne.
Nieoczekiwanie twórcy niniejszego wynalazku stwierdzili, że nie jest konieczne adsorbowanie antygenu i immunostymulanta na tej samej cząstce. Przeciwnie do akceptowanej w stanie techniki teorii stwierdzono, że można wytworzyć dobre szczepionki gdy antygen adsorbuje się na konkretnych cząstkach soli metalu, które są odrębne od cząstek soli metalu związanych z immunostymulantem.
Ulepszony sposób obejmuje adsorbowanie immunostymulanta na cząstce soli metalu, następnie adsorbowanie antygenu na innej cząstce soli metalu, a potem mieszanie odrębnych cząstek metalicznych dla wytworzenia szczepionki.
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania kompozycji szczepionki obejmujący zmieszanie (a) kompozycji adjuwanta zawierającej immunostymulant, którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A zaadsorbowany na cząstce soli glinu, przy czym nie więcej niż 20% masy całego
PL 201 482 B1 materiału zdolnego do adsorbowania na cząstce soli glinu jest antygenem, z b) antygenem zaadsorbowanym na cząstce soli glinu.
Korzystnie kompozycja adjuwanta zawiera immunostymulant, którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A zaadsorbowany na cząstce soli glinu i nie więcej niż 5% masy całego materiału zdolnego do adsorbowania na cząstce soli glinu jest antygenem, a zwłaszcza cząstka soli glinu jest wolna od zadsorbowanego antygenu.
Korzystnie stosuje się antygen wybrany z grupy obejmującej: antygeny pochodzące z ludzkiego wirusa niedoboru immunologicznego, wirusa Varicella Zoster, wirusa opryszczki zwykłej typu 1, wirusa opryszczki zwykłej typu 2, wirusa cytomegalii, wirusa dengi, wirusa zapalenia wątroby typu A, B, C lub E, wirusa oddechowego, ludzkiego wirusa brodawczaka, wirusa grypy, Hib, wirusa zapalenia opon mózgowych, salmonelli, Neisseria, Borrelia, Chlamydia, Bordetella, Plasmodium lub Toxoplasma, peptydów IgE, Der p1, antygenów związanych z pyłkami kwiatowymi, lub antygenów związanych z rakiem(TMA), MAGE, BAGE, GAGE, MUC-1, Her-2 new, LnRH(GnRH), CEA, PSA, KSA lub PRAME, a szczególnie korzystnie ż e antygen jest kombinacją antygenu Hepatitis A i antygenu Hepatitis B.
Także korzystnie antygen jest antygenem powierzchniowym Hepatitis B.
Korzystnie antygen pochodzi z ludzkiego wirusa brodawczaka, zwłaszcza z ludzkiego wirusa brodawczaka HPV6, 11, 16 albo 18, a szczególnie z ludzkiego wirusa brodawczaka HPV16 albo 18.
Także korzystnie antygen ludzkiego wirusa brodawczaka jest cząstką L1 albo kapsomerem.
Przedmiotem wynalazku jest także sposób wytwarzania kompozycji szczepionki obejmującej immunostymulant, którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A, antygen i cząstkę soli glinu, który obejmuje:
(a) adsorbowanie antygenu na pierwszej cząstce soli glinu;
(b) adsorbowanie immunostymulanta na drugiej cząstce soli glinu; oraz (c) zmieszanie produktów z etapu (a) i (b).
Korzystnie antygen jest wybrany z grupy składającej się z antygenów pochodzących z ludzkiego wirusa niedoboru immunologicznego, wirusa Varicella Zoster, wirusa opryszczki zwykłej typu 1, wirusa opryszczki zwykłej typu 2, wirusa cytomegalii, wirusa dengi, wirusa zapalenia wątroby typu A, B, C lub E, wirusa oddechowego, ludzkiego wirusa brodawczaka, wirusa grypy, Hib, wirusa zapalenia opon mózgowych, salmonelli, Neisseria, Borrelia, Chlamydia, Bordetella, Plasmodium lub Toxoplasma, peptydów IgE, Der p1, antygenów związanych z pyłkami kwiatowymi, lub antygenów związanych z rakiem(TMA), MAGE, BAGE, GAGE, MUC-1, Her-2 new, LnRH(GnRH), CEA, PSA, KSA lub PRAME, zwłaszcza antygen jest kombinacją antygenu Hepatitis A i antygenu Hepatitis B.
Także korzystnie antygen jest antygenem powierzchniowym Hepatitis B.
Korzystnie antygen pochodzi z ludzkiego wirusa brodawczaka, zwłaszcza z ludzkiego wirusa brodawczaka HPV6, 11, 16 albo 18, a w szczególności z ludzkiego wirusa brodawczaka HPV16 albo 18.
Także korzystnie antygen ludzkiego wirusa brodawczaka jest cząstką L1 albo kapsomerem.
Dalszym przedmiotem wynalazku jest kompozycja szczepionki obejmującej dwie podstawowe populacje kompleksów, pierwszy kompleks obejmujący (a) immunostymulant, którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A zaadsorbowany na cząstce soli glinu, w której nie więcej niż 20% masy całego materiału zdolnego do adsorbowania na cząstce soli glinu jest antygenem, i drugi kompleks obejmujący (b) antygen zaadsorbowany na cząstce soli glinu.
Korzystnie drugi kompleks obejmuje (b) antygen zaadsorbowany na cząstce soli glinu i nie więcej niż 20% masy całego materiału zdolnego do adsorbowania na wspomnianej cząstce soli glinu jest immunostymulantem.
Także korzystnie drugi kompleks obejmuje (b) antygen zaadsorbowany na cząstce soli glinu, i nie wię cej niż 5% masy cał ego materiał u zdolnego do adsorbowania na wspomnianej czą stce soli glinu jest immunostymulantem.
W innym korzystnym wykonaniu drugi kompleks obejmuje (b) antygen zaadsorbowany na cząstce soli glinu, i wspomniana cząstka soli glinu jest wolna od zaadsorbowanego immunostymulanta, wtedy korzystnie pierwszy kompleks obejmuje (a) immuniostymulant zaadsorbowany na cząstce soli glinu, i nie więcej niż 5% masy całego materiału zdolnego do adsorbowania na tej cząstce soli glinu jest antygenem.
W innym korzystnym wykonaniu pierwszy kompleks obejmuje (a) immunostymulant zaadsorbowany na wspomnianej cząstce soli glinu, i wspomniana cząstka soli glinu jest wolna od zaadsorbowanego antygenu.
Korzystnie sól glinu występująca w pierwszym i drugim kompleksie są identyczne.
PL 201 482 B1
Także korzystnie drugi kompleks obejmuje wiele podkompleksów, a każdy podkompleks obejmuje różne antygeny zaadsorbowane na cząstce soli glinu, wtedy korzystnie solą glinu jest wodorotlenek glinu albo fosforan glinu.
Korzystnie w kompozycji według wynalazku antygen jest wybrany z grupy składającej się z antygenów pochodzących z ludzkiego wirusa niedoboru immunologicznego, wirusa Vricella Zoster, wirusa opryszczki zwykłej typu 1, wirusa opryszczki zwykłej typu 2, wirusa cytomegalii, wirusa dengi, wirusa zapalenia wątroby typu A, B, C lub E, wirusa oddechowego, ludzkiego wirusa brodawczaka, wirusa grypy, Hib, wirusa zapalenia opon mózgowych, salmonelli, Neisseria, Borrelia, Chlamydia, Bordetella, Plasmodium lub Toxoplasma, peptydów IgE, Der p1, antygenów związanych z pyłkami kwiatowymi, lub antygenów związanych z rakiem(TMA), MAGE, BAGE, GAGE, MUC-1, Her-2 new, LnRH(GnRH), CEA, PSA, KSA lub PRAME, w szczególności jest kombinacją antygenu Hepatitis A i antygenu Hepatitis B.
Korzystnie antygenem jest antygen powierzchniowy Hepatitis B.
Także korzystnie antygen pochodzi z ludzkiego wirusa brodawczaka, zwłaszcza ludzkiego wirusa brodawczaka HPV6, 11, 16 albo 18, a w szczególności ludzkiego wirusa brodawczaka HPY16 albo 18.
Także korzystnie antygenem ludzkiego wirusa brodawczaka jest cząstka L1 albo kapsomer.
Korzystnie w kompozycji według wynalazku antygen jest antygenem plazmodium, który jest jednym albo więcej niż jednym antygenem wybranym z poniższej grupy: RTS,S oraz TRAP.
W wynalazku wykorzystuje się kompozycję adjuwanta zawierającą immunostymulant zaadsorbowany na cząstce soli metalu. Ponadto taka kompozycja adjuwanta jest kompozycją pośrednią, wymaganą do wytworzenia szczepionki sposobem według wynalazku. Korzystnie antygen został wstępnie zaadsorbowany na soli metalu. Taka sól metalu może być identyczna lub podobna do soli metalu, na której zaadsorbowano immunostymulant.
Sole metalu występujące w dwóch głównych populacjach kompleksów mogą być identyczne lub różne. Ponadto w przypadku szczepionki połączonej, gdzie może występować wiele różnych antygenów, drugi kompleks (wyżej opisany) może zawierać wiele antygenów zaadsorbowanych na różnych cząstkach metalu.
Określenie zasadniczo nie zawiera innych antygenów w odniesieniu do niniejszego wynalazku oznacza, że nie więcej niż 20% masowych całego materiału zdolnego do zaadsorbowania na cząstce soli metalu jest innym antygenem, korzystnie nie więcej niż 10%, a najbardziej korzystnie nie więcej niż 5%. Alternatywnie, określenie zasadniczo nie zawiera immunostymulanta w odniesieniu do niniejszego wynalazku oznacza, że nie więcej niż 20% masowych całego materiału zdolnego do zaadsorbowania na cząstce soli metalu jest immunostymulantem, korzystnie nie więcej niż 10%, a najbardziej korzystnie nie więcej niż 5%. Znane fachowcom w tej dziedzinie rutynowe testy można stosować do określenia czy antygen i immunostymulant są zaadsorbowane na różnych odrębnych cząstkach w tym, ale nie ograniczająco, rozdzielenie szczepionki na wyraźne frakcje przez swobodny przepł yw formulacji w polu elektrycznym, albo techniki takie, jak analiza szybkości sedymentacji, która jest szczególnie odpowiednia do niespecyficznych, a następnie ocenę frakcji immunostymulanta lub antygenu.
Rozwiązanie według wynalazku może mieć zastosowanie w zestawie obejmującym jeden pojemnik zawierający immunostymulant zaadsorbowany na soli metalu; i drugi pojemnik zawierający antygen, korzystnie ten antygen jest zaadsorbowany na soli metalu.
Sposób według wynalazku jest szczególnie użyteczny, gdy wymagane jest wytwarzanie szczepionek łączonych na skalę przemysłową. Szczepionki łączone są pojedynczą dawką szczepionki, która zawiera więcej niż jeden antygen przeciw więcej niż jednemu patogenowi. Takie szczepionki mogą zmniejszać liczbę szczepień wymaganych do wywołania ochrony przeciw wielu patogenom i chorobom.
Na przykład, jeżeli szczepionka zawiera AlOH3, 3D-MPL i antygeny V, W, X, Y, Z, to wcześniej znane sposoby wytwarzania obejmowały formułowanie antygenów i 3D-MPL na tej samej cząstce AlOH3. Takie znane ze stanu techniki sposoby wymagały aby antygeny V, W, X, Y, Z adsorbować na AlOH3 a następnie dodawano wolny 3D-MPL na każdy wcześniej zaadsorbowany antygenowy kompleks.
W przeciwień stwie do tego, w sposobie według wynalazku antygeny V, W, X, Y, Z są indywidualnie adsorbowane na odrębnych cząstkach AlOH3 w odrębnych pojemnikach, 3D-MPL jest również adsorbowany na AlOH3 w innym pojemniku. Następnie szczepionkę wytwarza się przez zwykłe
PL 201 482 B1 zmieszanie materiału pobranego z każdego oddzielnego pojemnika. W tym przypadku cząstki AlOH3 związane z 3D-MPL mogą być odrębne od cząstek AlOH3 związanych z antygenami.
Niniejszy wynalazek dostarcza sposobu wytwarzania szczepionek pozwalającego unikać problemów występujących w stanie techniki. Każdy indywidualny kompleks antygen - sól metalu może być poddany kontroli GMP, i jakiegokolwiek zanieczyszczenia preparatu dany antygen - sól metalu nie powinno zakłócać integralności innych antygenów i adjuwanta immunostymulanta. Nieoczekiwanie, w przeciwieństwie do akceptowanego w stanie techniki sposobu myś lenia, szczepionki wytworzone sposobem według niniejszego wynalazku są tak silne jak szczepionki wytworzone sposobem znanym ze stanu techniki.
Monofosforylolipid A jest związkiem pochodzenia bakteryjnego o aktywności adjuwanta i jest immunostymulantem stosowanym w niniejszym wynalazku. Ten toksyczny związek zmieniono tak by tworzył mniej toksyczne pochodne, jedną z nich jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A (określany jako 3D-MPL lub d3-MPL, dla wskazania że pozycja 3 redukującego końca glukozaminy jest de-O-acylowana). Wytwarzanie 3D-MPL opisano w publikacji GB-2220211A. Chemicznie jest to mieszanina 3-deacylowanego monofosforylolipidu A z łańcuchami acylowanymi w pozycjach 3, 4, 5 lub 6. Korzystnie, w kompozycjach według wynalazku stosuje się małe cząstki MPL. Małe cząstki MPL mają taki wymiar, że mogą być sterylizowane przez filtrację na filtrze 0,22 μm. Takie preparaty opisano w publikacji WO 94/21292. Dalsze ulepszenia opisano w publikacji GB-9807933.8, ujawniającej trwale preparaty 3D-MPL składające się z tri i tetraacylowanych kongenerów.
Publikacja patentowa GB-2220211A podaje, że endotoksyczność wcześniej stosowanych enterobakteryjnych lipopolisacharydów (LPS) jest zmniejszona podczas gdy zachowane zostały właściwości immunogeniczne. Jednak publikacja patentowa GB-2220211 podaje, że te odkrycia są jedynie powiązane z układami bakteryjnymi (Gram ujemne).
Niniejszy wynalazek może być stosowany w szerokim zakresie antygenów. Szczepionki według wynalazku mogą być stosowane w początkowych i przypominających dawkach, oraz stosowane do wywoływania immunologicznej odpowiedzi i ochrony przed zakażeniami, w których pośredniczy szeroka gama antygenów. Niektóre z patogenów i antygenów wymieniono poniżej.
Wirusowe zapalenie wątroby wywoływane przez wirusy zapalenia wątroby A, B, C, D i E jest bardzo powszechną chorobą wirusową. W szczególności wirusy B i C są w wielu przypadkach również odpowiedzialne za raka wątroby. Zatem rozwój skutecznych szczepionek jest krytyczny i mimo znacznych sukcesów ciągle jest potrzebny. Przegląd nowoczesnych szczepionek przeciw zapaleniu wątroby zawierający wiele kluczowych odnośników literaturowych można znaleźć w publikacji Lancet, 12 maja 1990 na stronie 1142 ff (Prof. A.L.W.F. Eddleston). Patrz również „Viral Hepatitis and Liver Disease” (Vyas, B.N., Dienstag, J.L. i Hoofnagle, J.H. eds, Grune i Stratton. Inc. (1984) oraz „Viral Hepatitis and Liver Disease” (Proceeding of the 1990 International Symposium, eds F. B. Hollinger, S.M. Lemon i H. Margolis, opublikowanej przez Williams and Wilkins).
Stosowane określenie „antygen hepatitis B” jest używane do określenia dowolnego antygenowego materiału pochodzącego z wirusa zapalenia wątroby B, który może być stosowany do wywoływania odporności na wirusa u ludzi.
Zakażenie wirusem zapalenia wątroby B (hepatitis B -HBV) jest rozprzestrzenionym problemem, ale obecnie dostępne są szczepionki, które mogą być stosowane na skalę masową, np. produkt o nazwie „Engerix-B (SmithKline Beecgham plc) otrzymywany technikami inżynierii genetycznej.
Wytwarzanie antygenu powierzchniowego Hepatitis B (HB-sAg) jest dobrze udokumentowane. Patrz np. publikacja Harford i in. Develop. Biol. Standard 54, strona 125 (1983), Gregg i in. W Biotechnology 5, strona 479 (1987), publikacje patentowe EP-A-0226846, EP-A-0299108, i tam podane odnośniki literaturowe.
Stosowane w opisie określenie „antygen powierzchniowy Hepatitis B lub „HBsAg obejmuje dowolny antygen HBsAg, lub jego fragment wykazujący antygeniczność antygenu powierzchniowego HBV. Należy rozumieć że obok sekwencji 226 aminokwasów antygenu HBsAg S (patrz Tiollais i in., Nature, 317, 489 (1985) i tam podane odnośniki literaturowe) HBsAg jak tu opisany może, jeżeli jest to pożądane, zawierać całość lub część sekwencji pre-S jak opisana w wyżej podanych odnośnikach literaturowych, i publikacji EP-A-0278940. W szczególności HBsAg może zawierać polipeptyd zawierający sekwencję aminokwasów zawierającą reszty 12-52 a następnie reszty 133-145, dalej reszty 175-400 L-proteiny HBsAg względem otwartego odczytującego regionu zębowego na wirusie Hepatitis B serotyp ad (ten polipeptyd jest określany jako L*; patrz EP-0414374). HBsAg w zakresie wynalazku może również zawierać polipedptyd preS1-preS2-S opisany w publikacji EP-0198474 (Endotronics), lub
PL 201 482 B1 jego analogi, jak opisane w EP-0304578 (Mc Cormick and Jones). HBsAg jak tutaj opisany może również odnosić się do mutantów, np. „escape mutant opisany w publikacji WO 91/14703 lub EP0511855A1, zwłaszcza HBsAg, gdy w sekwencji aminokwasów w pozycji 45 podstawiono argininę zamiast glicyny.
Normalnie HBsAg występuje w postaci cząstek. Cząstki mogą zawierać np. samą proteinę S, albo mogą to być cząstki kompozytowe, np. (L*,S) gdzie L* ma znaczenie wyżej podane a S oznacza proteinę S z HBsAg. Takie cząstki są korzystnie w postaci wydzielanej w drożdżach.
Składnikiem nadającym ochronę przeciw Hepatitis A korzystnie jest produkt znany jako „Havrix” (SmithKline Beecham Biologicals), który jest zabitą atenuowaną szczepionką pochodzącą ze szczepu
HM-175 HAV [patrz „Inactivated Candidiate Vaccines for Hepatitis A” F.E. Andre, A. Hepburn i E.D'Hondt (1980), Prog. Med. Virol. Tom 37, strony 72-95 i monografia produktu „Havrix” opublikowana przez SmithKline Beecham Biologicals (1991).
Zatem w korzystnym wykonaniu wynalazku dostarcza on szczepionki połączonej zawierającej antygen HBsAg i antygen Hepatitis A. Wynalazek dostarcza również sposobu wytwarzania połączonej szczepionki Hepatitis A i B, a także produktu wytworzonego tym sposobem.
Inne połączone szczepionki dostępne na rynku obejmują Infanrix™ wytwarzaną przez SmithKline Beecham Biologicals. Takie szczepionki są oparte na „rdzeniowym połączeniu toksyny Diptheria, toksyny Tetanus i antygenów B.pertussis. Taka szczepionka zawiera składnik pertussis (zarówno zabite całe komórki B.pertussis jak acelularne pertussis, które zazwyczaj składają się z dwóch antygenów -PT i FHA, a często 69kDa, ewentualnie z jednym lub dwoma, agglutinogenem 2 lub agglutinogenem 3). Takie szczepionki są często określane jako DTPw (całe komórki) lub DTPa (akomórkowe/acelularne).
Szczególne połączone szczepionki mieszczące się w zakresie wynalazku obejmują:
Diptheria-Tetanus-Pertusssis-Hepatitis B (DTP-HB)
Diptheria-Tetanus-Hepatitis B (DT-HB)
Hib-Hepatitis B
DTP-Hib-Hepatitis B
IPV (inaktywowana szczepionka polio)-DTP-Hepatitis B
Składnik pertussis korzystnie występuje jako szczepionka całych komórek pertussis, albo jako szczepionka acellularna pertussis zawierająca częściowo lub wysoko oczyszczone antygeny. Powyższe kombinacje mogą ewentualnie zawierać składnik chroniący przed Hepatitis A. Korzystnie składnik Hepatitis A jest inaktywowanym formaliną HM-175. Korzystnie HM-175 jest oczyszczony przez traktowanie hodowli HM-175 trypsyną, oddzielanie nienaruszonego wirusa od nadtrawionego proteazą białka przez chromatografię permeacyjną i inaktywowanie formaliną. Korzystnie połączona szczepionka Hepatitis B jest szczepionką dla dzieci.
Inne połączone szczepionki według wynalazku ujawniono w GB-9805105.5 (SmithKline Beecham Biologicals są.), takie połączone szczepionki są szczególnie korzystne jako szczepionki dla nastolatków. Korzystne połączenia opierają się na „rdzeniowej kombinacji antygenu Hepatitis B (Hep B) i antygenu Herpes Simplex (HSV). Ewentualnie do tego „rdzenia można dodać jeden lub więcej niż jeden antygen pochodzący z następującej grupy: antygen Epstein Barr Virus (EBV), antygen Hepatitis A (Hep A), antygen Human Papilloma Virus (HPV). Takie połączone szczepionki mogą dodatkowo zawierać antygen Varicella Zoster Virus (VZV), antygen Human Cytomegalovirus (HCMV) lub antygen toksoplazmy.
Korzystnie formulacje szczepionki według wynalazku zawierają antygen lub antygeniczną kompozycję zdolną do wywoływania odpowiedzi immunologicznej przeciw ludzkim patogenom, przy czym antygen lub antygeniczna kompozycja pochodzi z HIV-1 (tak jak, tat, nef, gp120 lub gp160), ludzkiego wirusa opryszczki, takiego jak gD lub jego pochodnych, albo wczesnego białka pośredniego (Immediate Early), tak jak ICP27 z HSV1 lub HSV2, cytomegalowirusa ((zwłaszcza ludzkiego) (tak jak gB lub jego pochodne), rotawirusa (w tym wirusy żywe/atenuowane), wirusa Epstein Barr (tak jak gp350 lub jego pochodne), wirusa Varicella Zoster (tak jak gpl, II i IE63) lub z wirusów hepatitis, tak jak wirus hepatitis B (np. antygen powierzchniowy Hepatitis B lub jego pochodna), wirus hepatitis A, wirus hepatitis C i wirus hepatitis E, albo z innych patogennych wirusów, takich jak paramykowirusy; wirus oddechowy (tak jak białka F i G lub ich pochodne), wirus paragrypy, wirus odry, wirus świnki, wirusy ludzkiego brodawczaka (np. HPV6, 11, 16 i 18), flawiwirusy (np. wirus żółtej gorączki, wirus Dengue, wirus kleszczowego zapalenia mózgu, wirus japoński zapalenia mózgu) lub wirus grypy, albo pochodzące z bakteryjnych patogenów, tak jak Neisseria spp, w tym N. gonorrhea i N. meningitidis (np. kapsularne
PL 201 482 B1 polisacharydy i ich koniugaty, białka wiążące transferynę, białka wiążące laktoferyznę, PilC, adhezyny); Streptococcus spp, w tym S. pneumoniae (np. kapsularne polisacharydy i ich koniugaty, PsaA, PspA, streptolizyna, białka wiążące cholinę), S. pyogenes (np. białka M lub ich fragmenty, proteaza C5A, kwasy lipoteichowe), S. agalactiae, S. mutans; Haemophilus spp. w tym H. influenzae typ B (np. PRP i jego koniugaty), nietypowe H. influenzae (np. OMP26, adhezyny o dużym ciężarze cząsteczkowym, P5, P6, lipoproteina D), H. ducreyi; Moraxella spp, w tym M. catarrhalis, znana również jako Branhamella catarrhalis (np. adhezyny i inwazyny o dużym i małym ciężarze cząsteczkowym); Bordetella spp. w tym B. pertussis (np. pertaktyna, toksyna pertussis lub jej pochodna, filamenteous hemagglutinin, adenylan cyklazy, fimbriae), B. parapertussis i B. bronchiseptica; Mycobacterium spp., w tym M. tuberculosis (np. ESAT6, antygen 85A, -B lub -C), M. bovis, M. leprae, M. avium, M. paratuberculosis, M. smegmatis; Legionella spp, w tym L. pneumophila; Escherichia spp. w tym enterotoksyczne E. coli (np. czynniki kolonizujące, toksyny nieodporne na temperaturę albo ich pochodne, toksyny odporne na temperaturę albo ich pochodne), enterohemorragiczne E. coli, enteropatogeniczne E. coli (np. toksyna podobna do toksyny shinga lub jej pochodne), Vibrio spp, w tym V. cholera (np. toksyna cholery lub jej pochodne); Shigella spp, w tym S. sonnei, S. dysenteriae, S. flexnerii; Yersinia spp, w tym Y. enterocolitica (np. białko Yop), Y. pestis, Y. pseudotuberculosis; campylobacter spp, w tym C. jejuni (np. toksyny, adhezymy i inwazyny) oraz C. coli; Salmonella spp w tym S. typhi, S. paratyphi, S. choleraesuis, S. enteritidis; Listeria spp. w tym L. monocytogenes; Helicobacter spp., w tym H. pylori (np. ureaza, katalaza, toksyna vacuolatująca); Pseudomonas spp., w tym P. aeruginosa; Staphylococcus spp., w tym S. aureus, S. epidermidis; Enterococcus spp. w tym E. faecalis, E. faecium; Clostridium spp. w tym C. tetani (np. toksyna tetanus i jej pochodne), C. botulinum (np. toksyna botulinum i jej pochodne), C. difficile (np. toksyny A i B clostridium oraz ich pochodne); Bacillus spp. w tym B. anthracis (np. toksyna botulinum i jej pochodne); Corynebacterium spp. w tym C. diphtheriae (np. toksyna diphtheria i jej pochodne); Borrelia spp. w tym B. burgdorferi (np. OsoA, OspC, DbpA, DbpB), B. garinii (np. OspA, OspC, DbpA, DbpB), B. afzelii (np. OspA, OspC, DbpA, DbpB), B. andersonii (np. OspA, OspC, DbpA, DbpB), B. hermsii; Ehrlichia spp. w tym E. equi i czynnik ludzkiego granulocytowego Ehrlichiosis; Rickettsia spp. w tym R. rickettsii; Chlamydia spp. w tym C. trachomatis (np. MOMP, białka wiążące heparynę), C. pneumoniae (np. MOMP, białka wiążące heparynę), C. psittaci; Leptospira spp. w tym L. interrogans; Treponema spp. w tym T. pallidum (np. rzadkie zewnątrz błonowe białka), T. dencitola, T. hyodysenteriae, albo pochodzące z pasożytów jak Plasmodium spp., w tym P. falcioparum; Toxoplasma spp, w tym T. gondii (np. SAG2, SAG3, Tg34); Entamoeba spp. w tym E. histolytica; Babesia spp. w tym B. microti; Trypanosoma spp., w tym T. cruzi; Giardia spp., w tym G. lamblia; Leshmania spp. w tym L. major; Pneumocystis spp. w tym P. carinii; Trichomonas spp., w tym T. vaginalis; Schisostoma spp., w tym S. mansoni, albo pochodzące z droży, jak Candida spp., w tym C. albicans; Cryptococcus spp., w tym C. neoformans.
W korzystnym aspekcie formulacje szczepionki wedł ug wynalazku zawierają antygen HIV-1, gp120, zwłaszcza wydzielony w komórkach CHO. W dalszym wykonaniu kompozycja szczepionki według wynalazku zawiera gD2t jak wyżej opisano.
W korzystnym wykonaniu szczepionki według wynalazku zawierają adjuwant zawierający wirusy HPV uważane za odpowiedzialne za brodawki narządów płciowych, (HPV 6 lub HPV 11 i inne) oraz wirusy HPV odpowiedzialne za raka szyjki macicy (HPV 16, HPV 18 i inne). Szczególnie korzystne postacie szczepionki zawierają cząstki Li lub kapsomery i białka fuzyjne zawierające jeden lub więcej niż jeden antygen wybrany z HPV 6 i HPV 11 białek E6, E7, L1 i L2. Najbardziej korzystnymi postaciami białka fuzyjnego są: L2E7 jak ujawniony w publikacji GB-9515478.7, oraz białko D (1/3)-E7 ujawnione w publikacji GB-9717953.5 (WO 99/10375).
Szczepionki według wynalazku ponadto zawierają antygeny pochodzące z pasożytów powodujących malarię. Na przykład, korzystne są antygeny z Palsmodia falciparum obejmujące RTS,S i TRAP. RTS jest hybrydowym białkiem zawierającym zasadniczo wszystkie C-terminalne części białka circumsporozoitowego (CS) z P. falciparum przyłączone przez cztery aminokwasy części preS2 antygenu powierzchniowego Hepatitis B do powierzchni (S) antygenu wirusa hepatitis B. Jego pełna budowa została ujawniona w zgłoszeniu PCT/EP92/02591, opublikowanym jako WO 93/10152 zastrzegającym pierwszeństwo z UK o numerze 9124390.7. Gdy wydzielany w drożdżach RTS jest produkowany jako cząsteczka lipoproteiny i gdy jest współwydzielana z antygenem S z HBV to tworzą się mieszane cząsteczki znane jako RTS,S. Antygeny TRAP zostały opisane w zgłoszeniu PCT/GB98/00895 opublikowanym jako WO 90/01496. Korzystnym wykonaniem wynalazku jest szczepionka przeciw malarii, w której antygeniczny preparat zawiera połączenie antygenów RTS,S i TRAP. Inne antygeny
PL 201 482 B1 palsmodia, które są potencjalnymi kandydatami jako składniki wieloetapowej szczepionki przeciw malarii to P. faciparum MSP1, AMA1, MSP3, EBA, GLURP, RAP1, RAP2, sekwestryn, PfEMP1, Pf332, LSA1, LSA3, STARP, SALSA, PfEXP1, Pfs25, Pfs28, PFS27/25, Pfs16, Pfs48/45, Pfs230, oraz ich analogi w Palsmodium spp.
Kompozycje mogą również zawierać antygen przeciwrakowy i mogą być użyteczne do immunoterapeutycznego leczenia raka. Na przykład, kompozycja adjuwanta znajduje zastosowanie z antygenami odrzucającymi raka, takiego jak rak prostaty, piersi, okrężnicy, odbytu, płuc, trzustki, nerek i czerniak. Przykładowe antygeny obejmują MAGE1 i MAGE3 oraz inne antygeny MAGE do leczenia czerniaka, PRAME, BAGE lub GAGE (Robbins i Kawakami, 1996, Current Opinions w Immunology 8, strony 628-636; Van den Eynde i in., International Journal of Clinical & Laboratory Research (dostarczone w 1997); Correale i in. (1997), Journal of the National Cancer Institute 89, strona 293. W rzeczywistości takie antygeny są wydzielane w szerokiej gamie raków, takich jak czerniak, rak płuc, mięsak i rak pęcherza. Inne specyficzne wobec raka antygeny są odpowiednie do stosowania z kompozycja adjuwanta jak tutaj opisana i obejmują, ale nie są do nich ograniczone, specyficzne antygeny prostaty (PSA) lub Her-2/neu, KSA (GA733), MUC-1 i antygen karcinoembriotyczny (CEA). Inne antygeny uznane za terapeutyczne antygeny para-rakowe obejmują Tyrosinase i Survivin. Zgodnie z jednym z aspektów wynalazek dostarcza szczepionki zawierającej kompozycję adjuwanta jak tutaj opisana i antygen odrzucają cy raka.
Przewiduje się że kompozycje według wynalazku będą stosowane do formułowania szczepionek zawierających antygeny pochodzące z Borrelia spp. Na przykład, antygeny mogą zawierać kwas nukleinowy, patogen pochodzący z antygenu lub preparaty antygeniczne, białka lub peptydy wytwarzane przez rekombinacje i chimeryczne białka fuzyjne. Szczególnym antygenem jest OspA. OspA może być całkowicie dojrzałym białkiem w postaci zlipidowanej z komórki gospodarza (E. Coli) zakończonym (Lipo-OspA), albo nielipidiowaną pochodną. Takie nielipidowane pochodne obejmują nielipidowane białko fuzyjne NS1-OspA, które ma pierwszych 81 N-terminalnych aminokwasów niestrukturowanego białka (NS1) wirusa grypy, i pełne białko OspA oraz inne, MDP-OspA jest nielipidowaną postacią OspA niosącą 3 dodatkowe N-terminalne aminokwasy.
Szczepionki według wynalazku mogą być stosowane w profilaktyce lub do leczenia alergii. Takie szczepionki powinny zawierać specyficzne alergeny (np. Der p1, i antygeny związane z pyłkami) oraz antygeny nie-specyficznego alergenu (np. dekapeptyd stanworth).
Ilość antygenu w każdej dawce szczepionki jest dobierana jako ilość powodująca immunoochronną odpowiedź bez znacznych szkodliwych efektów ubocznych w typowych szczepieniach. Ilość zmienia się w zależności od specyficznego zastosowanego immunogenu, oraz postaci w jakiej występuje. Na ogół oczekuje się, że każda dawka będzie zawierać 1-1000 μg antygenu, korzystnie 1-500 μg, korzystniej 1-100 μg, bardziej korzystnie 1 do 50 μg. Optymalna ilość dla konkretnej szczepionki może być określana w standardowych badaniach obejmujących obserwację odpowiedniej odpowiedzi immunologicznej u pacjenta. Po początkowym szczepieniu obiekty mogą otrzymać jedną lub kilka immunizacji przypominających (wzmacniających) odpowiednio umiejscowionych. Zazwyczaj dla podawania ludziom immunostymulant powinien występować w ilości 1-1000 μg, korzystnie 10-500 μg, bardziej korzystnie 20-200 μg na dawkę, bardziej korzystnie 20-100 μg na dawkę, a najbardziej korzystnie 10-50 μg na dawkę.
Niniejszy wynalazek ma zastosowanie w medycynie, zwłaszcza w sposobie leczenia ssaków cierpiących lub podatnych na zakażenie patogenami, lub rakiem lub alergenami.
Również ma zastosowanie do wytwarzania immunoprofilaktycznego i immunoleczniczego leku dla zakażeń wirusowych, bakteryjnych, pasożytniczych, alergii lub raka. Kompozycje według wynalazku mogą być stosowane zarówno w celach profilaktycznych jak i terapeutycznych.
Wytwarzanie szczepionek jest ogólnie opisane w publikacji „Vaccine Design - the subunit and adjuvant approach” wydanej przez Powell, M.F. i Newman, M.J.; 1995, Pharmaceutical Biotechnology (Plenum Press, New York and London, ISBN 0-306-44867-X).
Niniejszy wynalazek zostanie zilustrowany, ale nie ograniczony, za pomocą poniższych przykładów.
P r z y k ł a d 1
Materiały i metody
Serologia
Oznaczanie ilościowe przeciwciała anty-HBs prowadzono testem ELISA stosując HBs (Hep 286) jako antygen pokrywający. Stosowano roztwory antygenu i przeciwciała w ilości 50 μl na dołek.
PL 201 482 B1
Antygen rozcieńczano do końcowego stężenia 1 μg/ml w PBS i adsorbowano przez noc w temperaturze 4 C w dołkach w 96 dołkowych płytach do mikromiareczkowania (Maxisorb Immuno-plate, Nunc. Dania). Płyty inkubowano przez 1 godzinę w temperaturze 37oC z PBS zawierającym 1% albuminy serum bydlęcego i 0,1% TWEEN 20 (nasycony bufor: 100 μl/dołek). Dwukrotne rozcieńczenia serum (rozpoczynając od rozcieńczenia 1/100) w nasyconym buforze dodawano do płyt pokrytych HBs i inkubowano przez 1 godzinę 30 minut w temperaturze 37oC. Płyty przemywano czterokrotnie PBS 0,1% TWEEN 20 i do każdego dołka dodawano skoniugowanego z biotyną mysiego przeciwciała IgG1, IgG2a, IgG2b lub Ig (Amersham, UK) rozcieńczonego 1/1000 w nasyconym buforze, i inkubowano przez 1 godzinę 30 minut w temperaturze 37°C. Po etapie mycia dodawano kompleks streptavidin biotynylowana peroksydaza (Amersham, UK) rozcieńczony 1/5000 w nasyconym buforze na dodatkowe 30 minut w temperaturze 37oC. Płyty przemywano jak wyżej opisano i inkubowano przez 20 minut z roztworem o-fenylenodiaminy (Sigma) 0,04% H2O2, 0,03% w 0,1% TWEEN 20, 0,05M bufor cytrynianowy pH 4,5. Reakcję zatrzymywano 2N H2SO4 i odczytywano przy 490/630 nm. Miana ELISA obliczano z odnośników SoftmaxPro (stosując czteroparametrowe równanie) i wyrażono w EU/ml.
Proliferacja komórek T tygodnie po drugim szczepieniu myszy zabijano, aseptycznie w basenie usuwano śledzony. Przygotowano zawiesiny komórek w medium RPMI 1640 (GIBCO) zawierającym 2 mM L-glutaminy, antybiotyki, 5x10-5 M 2-merkaptoetanol i 1% syngenicznego normalnego mysiego serum. Komórki śledziony hodowano do końcowego stężenia 2x106 komórek/ml w 200 μI w okrągło dennych 96 dołkowych płytach z różnymi stężeniami (10-0,03 μg/ml) antygenu HBs. Każdy test prowadzono czterokrotnie. Po 96 godzinach hodowania w temperaturze 37°C w 5% CO2 komórki pulsowano przez 18 godzin 3H-tymidyną (Amersham, UK, 5 Ci/mmol) przy 0,5% μCi/dołek a następnie zbierano na płytkach Unifilter (Packard) za pomocą zbieracza komórek. Wprowadzoną radioaktywność mierzono licznikiem scyntylacyjnym (Topcount, Packard). Wyniki wyrażano w cpm (średnia cpm z czterech dołków) albo jako wskaźnik stymulacji (średnia cpm w hodowli komórek z antygenem/średnia cpm w hodowli komórek bez antygenu).
Wytwarzanie cytokin tygodnie po drugim szczepieniu myszy zabijano, aseptycznie w basenie usuwano śledzony (3 baseny na grupę). Przygotowywano zawiesiny komórek w medium RPMI 1640 (GIBCO) zawierającym 2 mM L-glutaminy, antybiotyki, 5x10-5 M 2-merkaptoetanol i 5% bydlęcego serum płodowego. Komórki hodowano do końcowego stężenia 5x106 komórek/ml w 1 ml w płaskodennych 24 dołkowych płytach z różnymi stężeniami (10-0,1 μg/ml) antygenu HBs. Supernatanty zbierano 96 godzin później i zamrażano do testowania w obecności IFNy i IL-5 w teście ELISA.
Wytwarzanie IFNy
Ilościowe oznaczenie IFNy przeprowadzano za pomocą testu ELISA stosując reagenty z firmy Genzyme. Stosowano roztwory próbek i przeciwciał w ilości 50 μl/dołek. 96 dołkowe płyty do mikromiareczkowania (Maxisorb Immuno-plate, Nunc, Dania) przykryto przez noc w temperaturze 4°C 50 μl chomiczego przeciwciała przeciwko mysiemu IFNy rozcieńczonego 1,5 μg/ml buforem węglanowym pH 9,5. Płyty następnie inkubowano przez 1 godzinę w temperaturze 37°C z 100 μl PBS zawierającego 1% albuminy bydlęcego serum i 0,1% TWEEN 20 (bufor nasycony). Dwukrotne rozcieńczenie supernatanta ze stymulacji in vitro (rozpoczynając od 1/2) w nasyconym buforze dodawano do płytek pokrytych przeciwciałem IFNy i inkubowano przez 1 godzinę 30 minut w temperaturze 37oC. Płyty przemyto 4 krotnie PBS TWEEN 0,1% (bufor myjący) i kozim przeciwciałem przeciw mysiemu IFNy skoniugowanym z biotyną rozcieńczonym nasyconym buforem do końcowego stężenia 0,5 μg/ml dodawano do każdego dołka i inkubowano przez 1 godzinę w temperaturze 37°C. Po etapie mycia, dodawano koniugat AMDEX (Amersham) rozcieńczony 1/10000 nasyconym buforem na 30 minut w temperaturze 37°C. Płyty przemyto jak powyżej i inkubowano z 50 μl TMB (Biorad) przez 10 minut. Reakcję zatrzymywano 0,4N H2SO4 i odczytywano przy 450/630 nm. Stężenia obliczano stosując standardowe krzywe (z mysim przeciwciałem IFNy jako standardem) z firmy SoftmaxPro (równanie czteroparametrowe) i wyrażano w pg/ml.
Wytwarzanie IL-5
Ilościowe oznaczanie IL-5 prowadzono testem ELISA stosując reagenty z firmy Pharmingen. Stosowano roztwory próbek i przeciwciał w ilości 50 μl na dołek. 96 dołkowe płyty do mikromiareczkowania (Maxisorb Immuno-plate, Nunc, Dania) pokryto przez noc w temperaturze 4°C 50 μl szczurzego przeciwciała przeciw mysiemu IL-5 rozcieńczonego do 1 μg/ml w buforze węglanowym pH 9,5.
PL 201 482 B1
Płyty następnie inkubowano przez 1 godzinę w temperaturze 37 C z 100 μΐ PBS zawierającym 1% albuminy serum bydlęcego i 0,1% TWEEN (bufor nasycony). Dwukrotne rozcieńczenia supernatanta ze stymulacji in vitro (rozpoczynając od 1/2) w nasyconym buforze dodawano do płyt pokrytych przeciwciałem IFNy i inkubowano przez 1 godzinę w temperaturze 37oC. Płyty przemyto czterokrotnie PBS TWEEN 0,1% (bufor myjący) i do każdego dołka dano skoniugowane z biotyną szczurze przeciwciała przeciw mysim IL-5 i inkubowano przez 1 godzinę w temperaturze 37oC. Po etapie mycia dodawano koniugat AMDEK (Amersham) rozcieńczony 1/10000 nasyconym buforem na 30 minut w temperaturze 37oC. Płyty przemyto jak powyżej i inkubowano z 50 μl TMB (Biorad) przez 15 minut. Reakcję zatrzymywano 0,4N H2SO4 i odczytywano przy 450/630 nm. Stężenia obliczano stosując krzywe standardowe (rekombinant mysiego IL-5) z firmy SoftmaxPro (równanie czteroparametrowe) i wyrażano w pg/ml.
P r z y k ł a d 2
Badania immunogeniczności na myszach
W celu zbadania konceptu MPL na stałym rozdrobnionym nośniku nie zawierającym antygenu przeprowadzono badanie immunogeniczności na myszach Balb/C stosując różne sekwencje formulacji szczepionek HABMPL:
T a b e l a 1 Formulacje szczepionek
Grupa Formulacja
1 (HB-AlPO4) - 3D-MPL + (HA-Al(OH)s)
2 (3D-MPL-Al(OH)3) + (HA-Al(OH)s) + (HB-AlPO4)
3 (3D-MPL-AlPO4) + (HA-AU(OH)q) + HB-AlPO4)
Opis sposobu formulacji:
Grupa 1, sposób formulacji znany ze stanu techniki. Antygen jest najpierw adsorbowany na soli metalu a następnie przez dodanie wolnego 3D-MPL uzyskano adsorpcje 3D-MPL na tej samej cząsteczce soli metalu co antygen.
Grupa 2 i 3. Sposób formulacji według wynalazku. 3D-MPL adsorbuje się na jednej cząsteczce soli metalu, antygeny adsorbuje się na odrębnych cząsteczkach soli metalu, następnie miesza się wstępnie zaadsorbowane kompleksy.
Schemat immunizacji
Grupy 10 myszy immunizowano podskórnie dwukrotnie z odstępem 4 tygodni formulacjami na bazie HAB. (1/10 dawka dla ludzi, tj . HAV 72 ELU, HBs 2 μg, MPL 5 μg). Na 14 dzień po II szczepieniu analizowano odpowiedź limfoproliferatywną i wytwarzanie cytokin (IL5/IFNy) po restymulacji in vitro komórek śledziony z HBs i HAV. Krew pobierano ze splotu zagałkowego w dniu 35 i za pomocą testu ELISA monitorowano odpowiedź przeciwciała na HBs i HAV jak również indukowany profil izotypowy (tylko HBs).
Wyniki
Humoralne odpowiedzi (Ig i izotypy) mierzono testem ELISA stosując HBs jako pokrywający antygen dla HBV i stosowano zestaw Behring dla HAV. Tylko 14 dni po II analizowano krew.
Figura 1 przedstawia odpowiedzi przeciwciała Ig anty-HBs indywidualnych surowic wyrażone jako GMT.
Figura 2 przedstawia izotypowy rozdział (IgG1, IgG2a i IgG2b) obliczony z analizy zbieranej surowicy.
Nie zaobserwowano różnic w mianach przeciwciał między grupą 1 a nową formulacją (grupa 2 i 3). Ponadto nowe formulacje (grupa 2 i 3) stymulowały podobne proporcje izotypów IgG1 i IgG2a/b jak stymulowane przez formulacje znane ze stanu techniki (grupa 1).
Odpowiedź immunologiczna komórek pośredniczących
Odpowiedzi komórek pośredniczących (limfoproliferacja i wytwarzanie IFNy/IL5) mierzono w 14 dni po II po restymulacji komórek śledziony antygenami HBs lub HA. W każdej grupie myszy poświęcano 5 zwierząt i zbierano śledziony do badań in vitro.
Figura 3 przedstawia monitorowaną limfoproliferację komórek śledziony restymulowanych HBs.
Figura 4 przedstawia monitorowanie wytwarzania cytokiny w komórkach śledziony restymulowanych HBs.
Nie zaobserwowano różnic w odpowiedziach limfoproliferatywnych między formulacjami.
PL 201 482 B1
Zaobserwowano silne odpowiedzi IFNy (+/- 1000 pg/mi; dla wszystkich grup, co więcej nie stwierdzono różnic w wytwarzaniu IL5 (poniżej 60 pg/ml) między grupami.
Wnioski
Nie zaobserwowano znacznych różnic w odpowiedziach humoralnych i komórek pośredniczących między sekwencjami formulacji HABMPL.
P r z y k ł a d 3
Szczepienie HSV na świnkach morskich
Poprzedni przykład przedstawia skuteczność nowych formulacji i sposobów w odniesieniu do antygenów Hepatitis. Ten przykład bada immunogeniczność i skuteczność ochronną szczepionek wirusa Herpes Simplex gD formułowanych z alumem i 3D-MPL sposobem klasycznym w porównaniu do sposobu według wynalazku. Dwie szczepionki porównywano w wewnątrzpochwowym modelu ochronnym HSV na świnkach morskich.
Grupa
4 gD2t (20 pg) + 3D-MPL (50 pg) + AlOH(500 pg)
5 gD2t (20 pg) + AlOH (400 pg) 3D-MPL (50 pg) + AlOH (100 pg)
6 Nietraktowano
Protokół doświadczalny
Grupy 12 samic świnek morskich Hartley immunizowano dwukrotnie w dniach 0 i 28. W dniu 57 zwierzęta prowokowano wewnątrz pochwowo 105 pfu szczepu HSV2 MS (100 pl). Po prowokacji zwierzęta obserwowano codziennie oczekując klinicznych symptomów choroby głównej od dnia 4 do 12. Pobierano krew ze splotu zagałkowego w 14 dniu i 28 dniu po drugiej immunizacji i monitorowano odpowiedź przeciwciał anty-gD (IgG) testem ELISA.
Sposób formułowania
Wytworzono gD2t z HSV2 według techniki opisanej w publikacji patentowej WO 92/16231. 3D-MPL otrzymano z firmy Ribi ImmunoChem Inc., Montana, USA, A1(OH)3 otrzymano z firmy Superfos. Formulacje przygotowywano 15 dni przed pierwszym szczepieniem. Wszystkie inkubacje prowadzono w pokojowej temperaturze z mieszaniem.
Grupa 4 formulacje na bazie Al (OH)3 (250 pl/dawkę) metoda klasyczna gD2t (5 pg) adsorbowano na 125 μg Al(OH)3 przez 15 minut przed dodaniem MPL (12,5 μg).
Trzy minuty później formulacje buforowano 10 krotnie ze stężonym roztworem PBS pH 7,4. Po 15 minutach dodawano 500 μg/ml fenoksyetanolu jako konserwanta.
H2O + Al(OH)3 + Ag-15m-MPL-30m-10xPBS pH 7,4-15m-2-fenoksy
Grupa 5, formulacje na bazie Al (OH)3 (250 μ/dawkę) nowa metoda gD2t (5 pg) adsorbowano na 100 pg Al(OH)3 przez 15 minut i przechowywano jako stężony roztwór macierzysty Oddzielnie, MPL (12,5 pg) adsorbowano na 25 pg Al(OH)3 przez 30 minut i przechowywano jako drugi stężony roztwór macierzysty. Dla wytworzenia końcowej formulacji zaadsorbowany gD2t rozcieńczano H2O i 10 krotnie ze stężonym PBS pH 7,4. Piętnaście minut później dodawano zaadsorbowany MPL przed dodaniem fenoksyetanolu jako konserwanta.
Al (OH)3 + Ag
Al (OH)3 + MPL
H2O + 10xPBS pH 7,4 + Ads gD2t-15m-Ads MPL-15m-2-fenoksy
Ocena ilościowa próbki
Ocenę ilościową przeciwciał anty-gD prowadzono za pomocą testu ELISA stosując gD 43B318 jako antygen pokrywający. Stosowano roztwory antygenu i przeciwciała stosowano w ilości 50 pl ma dołek. Antygen rozcieńczano do końcowego stężenia 1 pg/ml w PBS i adsorbowano przez noc w temperaturze 4oC w 96 dołkowych płytach do mikromiareczkowania (maxisorb Immuno-plate, Nunc, Dania). Płyty następnie inkubowano przez 1 godzinę w temperaturze 37oC z PBS zawierającym 1% albuminę serum bydlęcego i 0,1% TWEEN 20 (bufor nasycony). Dwukrotne rozcieńczenia serum w nasyconym buforze dodawano do pokrytych gD płyt i inkubowano przez 1 godzinę 30 minut w temperaturze 37°C. Płyty przemyto czterokrotnie PBS 0,1% TWEEN 20 i skoniugowanie z biotyną przeciwciała świnki morskiej IgG (Amersham, UK) rozcieńczone 1/10000 nasyconym buforem dodawano do każdego dołka i inkubowano przez 1 godzinę 30 minut w temperaturze 37oC. Po etapie przemycia
PL 201 482 B1 dodawano kompleks streptavidyna - biotynowana peroksydaza (Amersham, UK) rozcieńczony 1/1000 nasyconym buforem na dodatkowe 30 minut w temperaturze 37oC. Płyty przemyto jak powyżej i inkubowano przez 20 minut roztworem o-fenylenoaminy (Sigma) 0,04% H2O2 0,03% w 0,1% TWEEN 20 0,05 M buforze cytrynianowym pH 4,5. Reakcję zatrzymywano 2N H2SO4 i odczytywano przy 490/630 nm. Miana ELISA obliczano z odnośników z firmy SoftmaxPro (stosując czteroparametrowe równanie) i wyrażano w EU/ml.
Analiza statystyczna
Analizę statystyczną prowadzono na danych serologicznych stosując UNISTAT:
Protokół stosowany do analizy jednotorowej wariancji może być krótko opisany następująco:
1. przekształcenie danych w log.
2. Test Kolmogorov Smirnov na każdej populacji (grupie) w celu weryfikacji normalności.
3. Testy Hartley i Cochran w celu weryfikowania jednorodności wariancji między różnymi populacjami (grupami).
4. Analiza wariancji na wybranych danych: 14 dni po II lub danych 28 dni po II.
Wyniki
Serologia
Figura 5 przedstawia odpowiedzi przeciwciał anty gD IgD mierzone po II na pojedynczym serum. Nie zaobserwowano znacznych różnic w mianach przeciwciał między zarówno formulacjami w dniu 14 po II (17090-18508 EU/ml dla GMT) lub 28 dni po II (10227-11965 EU/ml dla GMT). Jednotorowa analiza wariancji została przeprowadzona oddzielnie dla mian IgG przeciw-gD zwiększonych dla formulacji szczepionki od dwóch punktów czasowych po przekształceniu danych w log. Nie stwierdzono znacznych różnic między zarówno formulacjami wykrytymi (wartości p = 0,7397 i 0,5078 odpowiednio dla dnia 14 po II i dnia 28 po II).
Ochrona przed chorobą
Ochrona przeciw chorobie głównej była oceniana między 4 a 12 dniem po prowokowaniu, przez porównanie kilku parametrów u szczepionych i nie traktowanych zwierząt:
• Procent zwierząt z lub bez uszkodzeń (pochwy lub zewnętrznych).
• Podstawowy indeks zakażenia (primary infection - PI) Σ(wartość maksymalna x zasięg w %) • Suma wartości uszkodzeń (dzień 4 do 12) wyrażona jako średnia i liczba zwierząt wykazujących uszkodzenia (N).
• Średnia wartość skumulowana obliczona dla każdej grupy między dniem 4 a 12
T a b e l a 2
Podsumowanie parametrów uszkodzeń
Grupa Zwierzęta bez uszkodzeń (%) Uszkodzenia pochwy (%) Uszkodzenia zewnętrzne (%) Podstawowy indeks zakażenia* Ciężkość uszkodzenia (n) **
4 66,7 25 8,3 29,2 - 97% 1(4)
5 83,3 16,7 0 8,3 - 99% 0,5(2)
6 11,1 0 88,9 844,4 28,3(8)
* suma uszkodzeń dla dnia 4 do 12 po zakażeniu (zwierzęta bez uszkodzeń nie były brane pod uwagę). Wartoś ci uszkodzeń: bez uszkodzeń (0), uszkodzenia pochwy (0,5 lub 1), zewnętrzne pęcherzyki na skórze (2, 4, 8 lub 16).
** podstawowy indeks zakażenia = (maksymalna wartość I) x (zasięg %); z I = 0, 0,5, 1, 2, 4, 8 lub 16.
Figura 6 przedstawia krzywe kumulacyjnych wartości uszkodzeń po prowokowaniu HSV.
Wysoki procent zaszczepionych zwierząt nie rozwinął żadnych uszkodzeń (66% do 83%) lub rozwinął uszkodzenia pochwy. Porównawczo 89% zwierząt z grupy kontrolnej wykazywał zewnętrzne uszkodzenia.
Silne zmniejszenie podstawowego indeksu zakażeń zaobserwowano u zwierząt szczepionych (97% do 99%). Było to związane z bardzo małą ciężkością uszkodzeń zanotowaną dla szczepionych grup (średnia = 0,5 lub 1) w porównaniu z grupą nietraktowaną (średnia = 28).
Jak przedstawiają krzywe wartości skumulowanych obu grup (4 i 5) dały bardzo dobry i porównywalny poziom ochrony przeciw chorobie podstawowej.
Wnioski końcowe
Porównywano stary i nowy sposób wytwarzania szczepionek HSV. Nie zaobserwowano statystycznie znaczących różnic między dwoma sposobami zarówno pod względem miana IgG jak i ochrony przeciw podstawowej chorobie.
PL 201 482 B1
P r z y k ł a d 4
Szczepienie HPV myszy
Różne sekwencje formulacji (na bazie AlOH lub AlPO4) antygenu ludzkiego wirusa brodawczaka E7 i 3D-MPL porównywano w odniesieniu do ich zdolności do wywoływania humoralnych odpowiedzi specyficznego przeciwciała. Otrzymano porównywalne miana Ig dla formulacji z mieszaniną 3D-MPL i białka D1/3-E7 zaadsorbowanych na tym samym nośniku (sposób 1) i formulacji gdzie 3D-MPL był oddzielnie adsorbowany na nośniku nie zawierającym antygenu (sposób 2). Białko D 1/3 E7 przygotowywano zgodnie z procedurą opisaną w publikacji patentowej WO 99/10375. Formulacje antygenu i MPL były na bazie AlOH lub na bazie AlPO4.
Antygen i 3D-MPL adsorbowano kolejno na tych samych cząsteczkach soli glinu (sposób 1) lub prowadzono oddzielne adsorbowania przed zmieszaniem (sposób 2).
Grupy 10 myszy immunizowano stosując następujące formulacje (opis w części zatytułowanej Materiały i sposoby):
Grupa Opis Formulacja
7 ProtD 1/3 E7-AlOH 5 pg ProtD 1/3 E7 zaadsorbowany na AlOH
8 ProtD 1/3 E7-AlOH/MPL 5 pg ProtD 1/3 E7 zaadsorbowany na AlOH z MPL (sposób 1)
9 ProtD 1/3 E7-AlOH/(AlO4/MPL) 5 pg ProtD 1/3 E7 zaadsorbowany na AlOH połączonym z MPL zaadsorbowanym na AlPO4 (sposób 2)
10 ProtD 1/3 E7-AlPO4 5 pg ProtD 1/3 E7 zaadsorbowany na AlPO4
11 ProtD 1/3 E7-AlPO4/MPL 5 pg ProtD 1/3 E7 zaadsorbowany na AlPO4 z MPL (sposób 1)
12 ProtD 1/3 E7-AlPO4/(AIOH/MPL) 5 pg ProtD 1/3 E7 zaadsorbowany na AlPO4 połączony z MPL zaadsorbowanym na AlOH (sposób 2)
13 ProtD 1/3 E7 o/w 5 pg ProtD 1/3 E7 sformułowane w emulsji olej w wodzie 3D-MPL/QS21
Myszy immunizowano dwukrotnie z 21 dniowym odstępem drogą domięśniową. Serum zbierano w dniu 35 (14 dni po II) i analizowano na obecność specyficznych przeciwciał E7 (patrz materiały i metody). Formulacje przygotowywano 5 dni przed pierwszym szczepieniem. Wszystkie inkubacje prowadzono w temperaturze pokojowej z mieszaniem.
I formulacje na bazie Al (50 μl/dawkę): metoda klasyczna (sposób 1)
PD1/3E7 (5 pg) adsorbowano na 50 μg Al(OH)3 lub AlPO4 przez 30 minut przed dodaniem MPL (5 pg). Trzydzieści minut później formulacje buforowano 10-krotnie zatężonym PO4, NaCl pH 6,8. Po 15 minutach dodawano 50 μg/ml tiomersalu jako konserwanta.
H2O + Al + Ag-30m-MPL-30m-10xPNpH6,8-15m-Tio
II Formulacje na bazie Al (50 μl/dawkę) : nowa metoda (sposób 2)
PD1/3E7 (5 pg) adsorbowano na Al(OH)3 lub AlPO4 przez 30 minut i przechowywano jako stężony roztwór macierzysty. Oddzielnie, MPL (5 μg) adsorbowano na 20 μg Al(OH)3 lub Al-PO4 przez 30 minut i przechowywano jako inny stężony roztwór macierzysty. Końcowe formulacje zaadsorbowanego antygenu rozcieńczano H2O i 10 krotnie stężonym roztworem PO4, NaCl pH 6,8 przed dodaniem zaadsorbowanego MPL i reszty Al (20 μg). Trzynaście minut później dodawano 50 μg/ml tiomersalu jako konserwanta.
Al + Ag
Al + MPL
H2O + 10xPN pH6,8 + Ads PD1/3E7 + Ads MPL + Al-30m-tio
Serologia
Oznaczanie ilościowe przeciwciała anti-E7 prowadzono za pomocą testu ELISA stosując E7 (Bollen) jako antygen pokrywający. Stosowano roztwory antygenu i przeciwciała w ilości 50 μl na dołek. Antygen rozcieńczano do końcowego stężenia 3 μg/ml buforem węglanowym pH 9,5 i adsorbowano przez noc w temperaturze 4°C w 96 dołkowej płycie do mikromiareczkowania (Maxisorb Immuno-plate, Nunc, Dania). Następnie płyty inkubowano przez 1 godzinę w temperaturze 37°C z PBS zawierającym 1% albuminy surowicy bydlęcej i 0,1% TWEEN 20 (bufor nasycony). Dwukrotne rozcieńczenia serum (rozpoczynając od rozcieńczenia 1/100) nasyconym buforem dodawano do płyt
PL 201 482 B1 pokrytych E7 i inkubowano przez 1 godzinę i 30 minut w temperaturze 37°C. Płyty przemyto 3 razy PBS 0,1% TWEEN 20 i dodawano do każdego dołka skoniugowane z biotyną (IgG1, IgG2a lub IgG2b lub IgGtot) (Amersham, UK) rozcieńczone 1/5000 nasyconym buforem i inkubowano przez 1 godzinę 30 minut w temperaturze 37°C. Po etapie mycia dodawano kompleks streptavidyna - biotynowana peroksydaza (Amersham, UK) rozcieńczony 1/5000 nasyconym buforem przez nadatkowe 30 minut w temperaturze 37° C. P ł yty przemyto jak powyż ej i inkubowano przez 10 minut TMB (tetra-metylobenzydyna). Reakcję zatrzymywano 4N H2SO4 i odczytywano przy 450 nm. Punkt średni rozcieńczeń obliczano stosując SoftmaxPro (stosując czteroparametrowe równanie).
Wyniki
Miana Ig anty-E7 zmierzone na zebranym serum określone testem ELISA wyrażone w EU/ml są następujące:
Formulacje na bazie E7-A1OH Formulacje na bazie E7-AlPO4
Alum 4434 1651
Alum/MPL 10780 12666
Alum/ (Alum/MPL) 13390 15495
Otrzymano porównywalne miana gdy porównywano formulacje na bazie AlOH lub formulacje na bazie AlPO4. Gdy dodano MPL do formulacji na bazie AlOH lub AlPO4 osiągnięto miana powyżej 10000 EU/ml jako porównanie do mniej niż 5000 EU/ml dla formulacji Al. Otrzymano porównywalne miana dla obu sekwencji formulacji.
Porównywano różne sekwencje formulacji (na bazie AlOH lub AlPO4), antygenu i MPL w odniesieniu do ich zdolności do wywoływania wytwarzania specyficznych przeciwciał antygenów.
Wszystkie formulacje zawierające MPL wywołują większe poziomy Ig specyficznego E7 niż formulacje z alumem. Otrzymano porównywalne miana Ig dla formulacji ze zmieszanym zaadsorbowanym MPL i pD1/3-E7 na tym samym nośniku (sposób 1) i formulacji gdzie MPL był zaadsorbowany oddzielnie na nośniku nie zawierającym antygenu (sposób 2).

Claims (35)

  1. Zastrzeżenia patentowe
    1. Sposób wytwarzania kompozycji szczepionki obejmujący zmieszanie (a) kompozycji adjuwanta zawierającej immunostymulant, którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A zaadsorbowany na cząstce soli glinu, znamienny tym, że nie więcej niż 20% masy całego materiału zdolnego do adsorbowania na cząstce soli glinu jest antygenem, z b) antygenem zaadsorbowanym na cząstce soli glinu.
  2. 2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że kompozycja adjuwanta zawiera immunostymulant którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A zaadsorbowany na cząstce soli glinu i nie więcej niż 5% masy całego materiału zdolnego do adsorbowania na cząstce soli glinu jest antygenem.
  3. 3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że cząstka soli glinu jest wolna od zadsorbowanego antygenu.
  4. 4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że antygen jest wybrany z grupy obejmującej: antygeny pochodzące z ludzkiego wirusa niedoboru immunologicznego, wirusa Varicella Zoster, wirusa opryszczki zwykłej typu 1, wirusa opryszczki zwykłej typu 2, wirusa cytomegalii, wirusa dengi, wirusa zapalenia wątroby typu A, B, C lub E, wirusa oddechowego, ludzkiego wirusa brodawczaka, wirusa grypy, Hib, wirusa zapalenia opon mózgowych, salmonelli, Neisseria, Borrelia, Chlamydia, Bordetella, Plasmodium lub Toxoplasma, peptydów IgE, Der p1, antygenów związanych z pyłkami kwiatowymi, lub antygenów związanych z rakiem(TMA), MAGE, BAGE, GAGE, MUC-1, Her-2 new, LnRH(GnRH), CEA, PSA, KSA lub PRAME.
  5. 5. Sposób według zastrz. 4, znamienny tym, że antygen jest kombinacją antygenu Hepatitis A i antygenu Hepatitis B.
  6. 6. Sposób według zastrz. 4, znamienny tym, że antygen jest antygenem powierzchniowym Hepatitis B.
  7. 7. Sposób według zastrz. 4, znamienny tym, że antygen pochodzi z ludzkiego wirusa brodawczaka.
    PL 201 482 B1
  8. 8. Sposób według zastrz. 7, znamienny tym, że antygen ludzkiego wirusa brodawczaka pochodzi z HPV6, 11, 16 albo 18.
  9. 9. Sposób według zastrz. 8, znamienny tym, że antygen ludzkiego wirusa brodawczaka pochodzi z HPV16 albo 18.
  10. 10. Sposób według zastrz. 8, znamienny tym, że antygen ludzkiego wirusa brodawczaka jest cząstką L1 albo kapsomerem.
  11. 11. Sposób wytwarzania kompozycji szczepionki obejmującej immunostymulant, którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A, antygen i cząstkę soli glinu, znamienny tym, że obejmuje:
    (a) adsorbowanie antygenu na pierwszej cząstce soli glinu;
    (b) adsorbowanie immunostymulanta na drugiej cząstce soli glinu; oraz (c) zmieszanie produktów z etapu (a) i (b).
  12. 12. Sposób według zastrz. 11, znamienny tym, że antygen jest wybrany z grupy składającej się z antygenów pochodzących z ludzkiego wirusa niedoboru immunologicznego, wirusa Varicella Zoster, wirusa opryszczki zwykłej typu 1, wirusa opryszczki zwykłej typu 2, wirusa cytomegalii, wirusa dengi, wirusa zapalenia wątroby typu A, B, C lub E, wirusa oddechowego, ludzkiego wirusa brodawczaka, wirusa grypy, Hib, wirusa zapalenia opon mózgowych, salmonelli, Neisseria, Borrelia, Chlamydia, Bordetella, Plasmodium lub Toxoplasma, peptydów IgE, Der p1, antygenów związanych z pyłkami kwiatowymi, lub antygenów związanych z rakiem(TMA), MAGE, BAGE, GAGE, MUC-1, Her-2 new, LnRH(GnRH), CEA, PSA, KSA lub PRANE.
  13. 13. Sposób według zastrz. 12, znamienny tym, że antygen jest kombinacją antygenu Hepatitis A i antygenu Hepatitis B.
  14. 14. Sposób według zastrz. 12, znamienny tym, że antygen jest antygenem powierzchniowym Hepatitis B.
  15. 15. Sposób według zastrz. 12, znamienny tym, że antygen pochodzi z ludzkiego wirusa brodawczaka.
  16. 16. Sposób według zastrz. 15, znamienny tym, że antygen ludzkiego wirusa brodawczaka pochodzi z HPV6, 11, 16 albo 18.
  17. 17. Sposób według zastrz. 16, znamienny tym, że antygen ludzkiego wirusa brodawczaka pochodzi z HPV16 albo 18.
  18. 18. Sposób według zastrz. 16, znamienny tym, że antygen ludzkiego wirusa brodawczaka jest cząstką L1 albo kapsomerem.
  19. 19. Kompozycja szczepionki obejmującej dwie podstawowe populacje kompleksów, pierwszy kompleks obejmujący (a) immunostymulant, którym jest 3-de-O-acylowany monofosforylolipid A zaadsorbowany na cząstce soli glinu, znamienna tym, że nie więcej niż 20% masy całego materiału zdolnego do adsorbowania na cząstce soli glinu jest antygenem, i drugi kompleks obejmujący (b) antygen zaadsorbowany na cząstce soli glinu.
  20. 20. Kompozycja według zastrz. 19, znamienna tym, że drugi kompleks obejmuje (b) antygen zaadsorbowany na cząstce soli glinu i nie więcej niż 20% masy całego materiału zdolnego do adsorbowania na wspomnianej cząstce soli glinu jest immunostymulantem.
  21. 21. Kompozycja według zastrz. 19, znamienna tym, że drugi kompleks obejmuje (b) antygen zaadsorbowany na cząstce soli glinu, i nie więcej niż 5% masy całego materiału zdolnego do adsorbowania na wspomnianej cząstce soli glinu jest immunostymulantem.
  22. 22. Kompozycja według zastrz. 21, znamienna tym, że drugi kompleks obejmuje (b) antygen zaadsorbowany na cząstce soli glinu, i wspomniana cząstka soli glinu jest wolna od zaadsorbowanego immunostymulanta.
  23. 23. Kompozycja według zastrz. 22, znamienna tym, że pierwszy kompleks obejmuje (a) immuniostymulant zaadsorbowany na cząstce soli glinu, i nie więcej niż 5% masy całego materiału zdolnego do adsorbowania na tej cząstce soli glinu jest antygenem.
  24. 24. Kompozycja według zastrz. 19, znamienna tym, że pierwszy kompleks obejmuje (a) immunostymulant zaadsorbowany na wspomnianej cząstce soli glinu, i wspomniana cząstka soli glinu jest wolna od zaadsorbowanego antygenu.
  25. 25. Kompozycja według zastrz. 19, znamienna tym, że sól glinu występująca w pierwszym i drugim kompleksie są identyczne.
  26. 26. Kompozycja według zastrz. 19, znamienna tym, że drugi kompleks obejmuje wiele podkompleksów, a każdy podkompleks obejmuje różne antygeny zaadsorbowane na cząstce soli glinu.
    PL 201 482 B1
  27. 27. Kompozycja według zastrz. 26, znamienna tym, że solą glinu jest wodorotlenek glinu albo fosforan glinu.
  28. 28. Kompozycja według zastrz. 19, znamienna tym, że antygen jest wybrany z grupy składającej się z antygenów pochodzących z ludzkiego wirusa niedoboru immunologicznego, wirusa Varicella Zoster, wirusa opryszczki zwykłej typu 1, wirusa opryszczki zwykłej typu 2, wirusa cytomegalii, wirusa dengi, wirusa zapalenia wątroby typu A, B, C lub E, wirusa oddechowego, ludzkiego wirusa brodawczaka, wirusa grypy, Hib, wirusa zapalenia opon mózgowych, salmonelli, Neisseria, Borrelia, Chlamydia, Bordetella, Plasmodium lub Toxoplasma, peptydów IgE, Der pl, antygenów związanych z pyłkami kwiatowymi, lub antygenów związanych z rakiem(TMA), MAGE, BAGE, GAGE, MUC-1, Her-2 new, LnRH(GnRH), CEA, PSA, KSA lub PRAME.
  29. 29. Kompozycja według zastrz. 28, znamienna tym, że antygen jest kombinacją antygenu Hepatitis A i antygenu Hepatitis B.
  30. 30. Kompozycja według zastrz. 28, znamienna tym, że antygenem jest antygen powierzchniowy Hepatitis B.
  31. 31. Kompozycja według zastrz. 28, znamienna tym, że antygen pochodzi z ludzkiego wirusa brodawczaka.
  32. 32. Kompozycja według zastrz. 31, znamienna tym, że antygen ludzkiego wirusa brodawczaka pochodzi z HPV6, 11, 16 albo 18.
  33. 33. Kompozycja według zastrz. 32, znamienna tym, że antygen ludzkiego wirusa brodawczaka pochodzi z HPV16 albo 18.
  34. 34. Kompozycja według zastrz. 32, znamienna tym, że antygenem ludzkiego wirusa brodawczaka jest cząstka L1 albo kapsomer.
  35. 35. Kompozycja według zastrz. 28, znamienna tym, że antygen jest antygenem plasmodium który jest jednym albo więcej niż jednym antygenem wybranym z poniższej grupy: RTS,S oraz TRAP.
    PL 201 482 B1
    Rysunki
    FIG. 1 Odpowiedzi przeciwciała Ig anty-HBs mierzona na indywidualnych surowicach i przedstawione jako GMT
PL348121A 1998-10-16 1999-10-08 Sposoby wytwarzania kompozycji szczepionki oraz kompozycja szczepionki PL201482B1 (pl)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB9822712.7A GB9822712D0 (en) 1998-10-16 1998-10-16 Vaccine
GBGB9822709.3A GB9822709D0 (en) 1998-10-16 1998-10-16 Vaccine
GBGB9822703.6A GB9822703D0 (en) 1998-10-16 1998-10-16 Vaccine
PCT/EP1999/007764 WO2000023105A2 (en) 1998-10-16 1999-10-08 Adjuvant systems and vaccines

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL348121A1 PL348121A1 (en) 2002-05-06
PL201482B1 true PL201482B1 (pl) 2009-04-30

Family

ID=27269522

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL348121A PL201482B1 (pl) 1998-10-16 1999-10-08 Sposoby wytwarzania kompozycji szczepionki oraz kompozycja szczepionki

Country Status (31)

Country Link
US (3) US7357936B1 (pl)
EP (5) EP1666060A1 (pl)
JP (3) JP2003519084A (pl)
KR (1) KR100629028B1 (pl)
CN (3) CN101926993B (pl)
AR (1) AR020836A1 (pl)
AT (1) ATE357252T1 (pl)
AU (1) AU750587B2 (pl)
BR (1) BRPI9915545B8 (pl)
CA (2) CA2773698C (pl)
CO (1) CO5210894A1 (pl)
CY (2) CY1106596T1 (pl)
CZ (1) CZ301212B6 (pl)
DE (2) DE69935606T9 (pl)
DK (1) DK1126876T3 (pl)
ES (1) ES2284287T3 (pl)
FR (1) FR07C0064I1 (pl)
HK (1) HK1038695B (pl)
HU (2) HU228473B1 (pl)
IL (2) IL142395A0 (pl)
LU (1) LU91389I2 (pl)
MY (1) MY124689A (pl)
NL (1) NL300311I2 (pl)
NO (1) NO336250B1 (pl)
NZ (1) NZ511113A (pl)
PL (1) PL201482B1 (pl)
PT (1) PT1126876E (pl)
SI (1) SI1126876T1 (pl)
TR (1) TR200101055T2 (pl)
TW (1) TW586936B (pl)
WO (1) WO2000023105A2 (pl)

Families Citing this family (249)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6207646B1 (en) 1994-07-15 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
WO1997025429A1 (en) 1996-01-04 1997-07-17 Rican Limited Helicobacter pylori bacterioferritin
US6406705B1 (en) 1997-03-10 2002-06-18 University Of Iowa Research Foundation Use of nucleic acids containing unmethylated CpG dinucleotide as an adjuvant
ES2272069T3 (es) 1998-05-22 2007-04-16 Ottawa Health Research Institute Metodos y productos para inducir inmunidad en mucosas.
PT1126876E (pt) * 1998-10-16 2007-04-30 Glaxosmithkline Biolog Sa Sistemas adjuvantes e vacinas
US20020061848A1 (en) * 2000-07-20 2002-05-23 Ajay Bhatia Compounds and methods for treatment and diagnosis of chlamydial infection
US20050002958A1 (en) * 1999-06-29 2005-01-06 Smithkline Beecham Biologicals Sa Vaccines
DE60023300T2 (de) * 1999-06-29 2006-07-06 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Verwendung von cpg als adjuvans für hivimpstoff
GB9915204D0 (en) * 1999-06-29 1999-09-01 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
GB9921146D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
GB0025170D0 (en) * 2000-10-13 2000-11-29 Smithkline Beecham Biolog Novel compounds
EP2189473A3 (en) 2000-10-27 2010-08-11 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Nucleic and proteins from streptococcus groups A & B
JP2004535765A (ja) 2000-12-07 2004-12-02 カイロン コーポレイション 前立腺癌においてアップレギュレートされた内因性レトロウイルス
US7306806B2 (en) 2001-01-26 2007-12-11 United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Recombinant P. falciparum merozoite protein-142 vaccine
CA2462946C (en) * 2001-01-26 2014-04-29 Jeffrey A. Lyon Recombinant p. falciparum merozoite protein-142 vaccine
GB0115176D0 (en) 2001-06-20 2001-08-15 Chiron Spa Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines
US8481043B2 (en) 2001-06-22 2013-07-09 Cpex Pharmaceuticals, Inc. Nasal immunization
CZ20033515A3 (cs) 2001-06-29 2005-01-12 Chiron Corporation Kompozice vakcíny HCV E1E2
GB0118249D0 (en) 2001-07-26 2001-09-19 Chiron Spa Histidine vaccines
GB0121591D0 (en) 2001-09-06 2001-10-24 Chiron Spa Hybrid and tandem expression of neisserial proteins
AR045702A1 (es) 2001-10-03 2005-11-09 Chiron Corp Composiciones de adyuvantes.
AU2003215316A1 (en) 2002-02-20 2003-09-09 Chiron Corporation Microparticles with adsorbed polypeptide-containing molecules
GB0206360D0 (en) 2002-03-18 2002-05-01 Glaxosmithkline Biolog Sa Viral antigens
EP1532161B1 (en) 2002-06-13 2012-02-15 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Vectors for expression of hml-2 polypeptides
JP2005533855A (ja) 2002-07-24 2005-11-10 インターツェル・アクチェンゲゼルシャフト 病原性ウイルスからの別のリーディングフレームによりコードされる抗原
GB0220194D0 (en) 2002-08-30 2002-10-09 Chiron Spa Improved vesicles
JP2006504687A (ja) 2002-09-13 2006-02-09 インターツェル・アクチェンゲゼルシャフト Ｃ型肝炎ウイルスペプチドの単離方法
AU2003274511B2 (en) 2002-10-11 2009-06-04 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Polypeptide-vaccines for broad protection against hypervirulent meningococcal lineages
DK2279746T3 (da) 2002-11-15 2013-11-25 Novartis Vaccines & Diagnostic Overfladeproteiner i neisseria meningitidis
GB0227346D0 (en) 2002-11-22 2002-12-31 Chiron Spa 741
AU2003300919A1 (en) 2002-12-11 2004-06-30 Coley Pharmaceutical Gmbh 5' cpg nucleic acids and methods of use
US7858098B2 (en) 2002-12-20 2010-12-28 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Vaccine
WO2004060396A2 (en) * 2002-12-27 2004-07-22 Chiron Corporation Immunogenic compositions containing phospholpid
KR100692203B1 (ko) * 2003-01-23 2007-03-09 제일모직주식회사 도광판, 이의 제조 방법, 이를 이용한 백라이트 어셈블리및 이를 이용한 액정표시장치
WO2004067030A2 (en) 2003-01-30 2004-08-12 Chiron Srl Injectable vaccines against multiple meningococcal serogroups
WO2004084937A1 (en) * 2003-03-24 2004-10-07 Intercell Ag Use of alum and a th1 immune response inducing adjuvant for enhancing immune responses
ES2562456T3 (es) 2003-03-24 2016-03-04 Valneva Austria Gmbh Uso de un adyuvante que induce una respuesta inmune Th1 para mejorar las respuestas inmunes
EP2258365B1 (en) 2003-03-28 2013-05-29 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Use of organic compounds for immunopotentiation
GB0308198D0 (en) 2003-04-09 2003-05-14 Chiron Srl ADP-ribosylating bacterial toxin
FR2854803B1 (fr) * 2003-05-16 2005-06-24 Aventis Pasteur Composition vaccinale comprenant du phosphate de fer a titre d'adjuvent vaccinal.
ES2328697T5 (es) 2003-06-02 2017-07-25 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Composiciones inmunogénicas basadas en micropartículas que comprenden toxoide adsorbido y un antígeno que contiene un polisacárido
ES2505695T3 (es) 2003-07-31 2014-10-10 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Composiciones inmunógenas para Streptococcus pyogenes
US20060035242A1 (en) 2004-08-13 2006-02-16 Michelitsch Melissa D Prion-specific peptide reagents
DE202005022108U1 (de) 2004-03-09 2013-11-12 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Influenza-Virus-Impfstoffe
GB0500787D0 (en) 2005-01-14 2005-02-23 Chiron Srl Integration of meningococcal conjugate vaccination
GB0409745D0 (en) 2004-04-30 2004-06-09 Chiron Srl Compositions including unconjugated carrier proteins
DK1740217T3 (da) 2004-04-30 2011-09-26 Novartis Ag Meningokok-konjugat-vaccination
GB0410866D0 (en) 2004-05-14 2004-06-16 Chiron Srl Haemophilius influenzae
EP1766034B1 (en) 2004-05-21 2014-03-19 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Alphavirus vectors for influenza virus vaccines
US7758866B2 (en) * 2004-06-16 2010-07-20 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Vaccine against HPV16 and HPV18 and at least another HPV type selected from HPV 31, 45 or 52
EP1765313A2 (en) 2004-06-24 2007-03-28 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Compounds for immunopotentiation
EP2612679A1 (en) 2004-07-29 2013-07-10 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Immunogenic compositions for gram positive bacteria such as streptococcus agalactiae
GB0424092D0 (en) 2004-10-29 2004-12-01 Chiron Srl Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins
EP2682126B1 (en) 2005-01-27 2016-11-23 Children's Hospital & Research Center at Oakland GNA1870-based vesicle vaccines for broad spectrum protection against diseases caused by Neisseria meningitidis
GB0502095D0 (en) 2005-02-01 2005-03-09 Chiron Srl Conjugation of streptococcal capsular saccharides
US20090214592A1 (en) * 2005-02-16 2009-08-27 O'hagan Derek Adjuvant composition comprising aluminium phosphate and 3D-MPL
MX291624B (es) 2005-02-18 2011-11-04 Novartis Vaccines & Diagnostic Inmunogenos de escherichia coli uropatogenica.
AU2006214064B2 (en) 2005-02-18 2012-04-26 J. Craig Venter Institute, Inc. Proteins and nucleic acids from meningitis/sepsis-associated escherichia coli
JP2009503051A (ja) * 2005-08-02 2009-01-29 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル 油含有アジュバントと界面活性剤含有アジュバントとの間の干渉の減少
WO2007047749A1 (en) 2005-10-18 2007-04-26 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. Mucosal and systemic immunizations with alphavirus replicon particles
US11707520B2 (en) 2005-11-03 2023-07-25 Seqirus UK Limited Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture
WO2007052061A2 (en) * 2005-11-04 2007-05-10 Novartis Vaccines And Diagnostics Srl Emulsions with free aqueous-phase surfactant as adjuvants for split influenza vaccines
PT2368572T (pt) 2005-11-04 2020-06-16 Seqirus Uk Ltd Vacinas com adjuvante dotadas de antigénios não-virião preparados a partir de vírus da gripe cultivado em cultura celular
CA2630220C (en) 2005-11-22 2020-10-13 Doris Coit Norovirus and sapovirus antigens
GB0524066D0 (en) 2005-11-25 2006-01-04 Chiron Srl 741 ii
ES2804472T3 (es) 2005-12-13 2021-02-08 Harvard College Estructuras para trasplante celular
AR058592A1 (es) 2005-12-22 2008-02-13 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacuna
GB0607088D0 (en) 2006-04-07 2006-05-17 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
KR20080089663A (ko) 2006-01-27 2008-10-07 노바티스 백신즈 앤드 다이아그노스틱스 게엠베하 운트 콤파니 카게 적혈구응집소 및 기질 단백질을 함유한 인플루엔자 백신
ATE539079T1 (de) 2006-03-23 2012-01-15 Novartis Ag Imidazochinoxalinverbindungen als immunmodulatoren
AU2007231027B2 (en) 2006-03-24 2013-10-03 Novartis Influenza Vaccines Marburg Gmbh Storage of influenza vaccines without refrigeration
NZ570805A (en) 2006-03-30 2011-10-28 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine comprising Type 5 and Type 8 capsular polysaccharides from Staphyloccocus aureus
SG173336A1 (en) 2006-03-31 2011-08-29 Novartis Ag Combined mucosal and parenteral immunization against hiv
CN1864749B (zh) * 2006-04-12 2010-10-06 成都夸常医学工业有限公司 一种药物组合物及制备方法
US9839685B2 (en) * 2006-04-13 2017-12-12 The Regents Of The University Of Michigan Methods of inducing human immunodeficiency virus-specific immune responses in a host comprising nasally administering compositions comprising a naonemulsion and recombinant GP120 immunogen
NZ573931A (en) 2006-06-29 2012-03-30 Craig J Venter Inst Inc Polypeptides from neisseria meningitidis
GB0614460D0 (en) 2006-07-20 2006-08-30 Novartis Ag Vaccines
JP2010500399A (ja) 2006-08-16 2010-01-07 ノバルティス アーゲー 尿路病原性大腸菌由来の免疫原
AU2007297178B2 (en) 2006-09-11 2014-07-24 Novartis Ag Making influenza virus vaccines without using eggs
US8097419B2 (en) 2006-09-12 2012-01-17 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Compositions and method for rapid, real-time detection of influenza A virus (H1N1) swine 2009
US9481912B2 (en) 2006-09-12 2016-11-01 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences in biological samples
US8652782B2 (en) 2006-09-12 2014-02-18 Longhorn Vaccines & Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting, identifying and quantitating mycobacterial-specific nucleic acids
US8080645B2 (en) * 2007-10-01 2011-12-20 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Biological specimen collection/transport compositions and methods
US9598462B2 (en) 2012-01-26 2017-03-21 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Composite antigenic sequences and vaccines
PT2486938T (pt) 2006-09-26 2018-06-12 Infectious Disease Res Inst Composição para vacina contendo adjuvante sintético
US20090181078A1 (en) 2006-09-26 2009-07-16 Infectious Disease Research Institute Vaccine composition containing synthetic adjuvant
WO2008068631A2 (en) 2006-12-06 2008-06-12 Novartis Ag Vaccines including antigen from four strains of influenza virus
GB0700562D0 (en) 2007-01-11 2007-02-21 Novartis Vaccines & Diagnostic Modified Saccharides
CN101883583B (zh) 2007-06-26 2017-05-17 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 含有肺炎链球菌荚膜多糖缀合物的疫苗
NZ582595A (en) 2007-06-27 2012-07-27 Novartis Ag Low-additive influenza vaccines
GB0713880D0 (en) 2007-07-17 2007-08-29 Novartis Ag Conjugate purification
GB0714963D0 (en) 2007-08-01 2007-09-12 Novartis Ag Compositions comprising antigens
US9683256B2 (en) 2007-10-01 2017-06-20 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Biological specimen collection and transport system
US11041215B2 (en) 2007-08-24 2021-06-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc PCR ready compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences
US8821885B2 (en) 2007-08-27 2014-09-02 Longhorn Vaccines & Diagnostics, Llc Immunogenic compositions and methods
US10004799B2 (en) 2007-08-27 2018-06-26 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Composite antigenic sequences and vaccines
WO2009085355A2 (en) 2007-10-01 2009-07-09 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Biological specimen collection and transport system and methods of use
US11041216B2 (en) 2007-10-01 2021-06-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting and quantifying nucleic acid sequences in blood samples
GB0810305D0 (en) 2008-06-05 2008-07-09 Novartis Ag Influenza vaccination
GB0818453D0 (en) 2008-10-08 2008-11-12 Novartis Ag Fermentation processes for cultivating streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom
JP5656642B2 (ja) 2007-12-21 2015-01-21 ノバルティス アーゲー ストレプトリシンｏの変異体形態
EP3109258B1 (en) * 2007-12-24 2019-01-23 ID Biomedical Corporation of Quebec Recombinant rsv antigens
CA2716212A1 (en) 2008-02-21 2009-08-27 Novartis Ag Meningococcal fhbp polypeptides
US9511131B2 (en) 2008-03-10 2016-12-06 Children's Hospital & Research Center Oakland Chimeric factor H binding proteins (fHBP) containing a heterologous B domain and methods of use
NZ587798A (en) 2008-03-18 2013-06-28 Novartis Ag Improvements in the preparation of influenza virus vaccine antigens utilising a phosphate buffer
US8877208B2 (en) 2008-05-23 2014-11-04 The Regents Of The University Of Michigan Multivalent nanoemulsion vaccines
CN102099053A (zh) * 2008-05-26 2011-06-15 卡迪拉保健有限公司 麻疹-人乳头瘤组合疫苗
EP2298344B1 (en) 2008-06-04 2016-08-17 The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute Use of inactivated japanese encephalitis virus particle as adjuvant
AU2009270399A1 (en) * 2008-07-18 2010-01-21 Id Biomedical Corporation Of Quebec Chimeric respiratory syncytial virus polypeptide antigens
GB0815872D0 (en) 2008-09-01 2008-10-08 Pasteur Institut Novel method and compositions
KR101644221B1 (ko) 2008-12-09 2016-07-29 화이자 백신스 엘엘씨 ＩｇＥ ＣＨ３ 펩티드 백신
CN102307590A (zh) 2009-02-10 2012-01-04 诺华有限公司 具有减少量的角鲨烯的流感疫苗
EP2398821B1 (en) * 2009-02-17 2017-08-30 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Inactivated dengue virus vaccine with aluminium-free adjuvant
NO2403507T3 (pl) 2009-03-05 2018-07-21
EP2403526B1 (en) 2009-03-06 2019-05-15 GlaxoSmithKline Biologicals SA Chlamydia antigens
JP5830009B2 (ja) 2009-04-14 2015-12-09 ノバルティス アーゲー Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓに対して免疫化するための組成物
EP2430040A1 (en) 2009-05-11 2012-03-21 Novartis AG Antigen purification process for pertactin antigen
TWI494125B (zh) * 2009-06-05 2015-08-01 Infectious Disease Res Inst 合成的葡萄吡喃糖基脂質佐劑
DK2442826T3 (en) 2009-06-15 2015-09-21 Univ Singapore Influenza vaccine, composition and methods of using
EP3020412B1 (en) * 2009-06-16 2017-10-11 The Regents of the University of Michigan An immunogenic composition comprising nanoemulsion inactivated rsv
EA201270062A1 (ru) 2009-06-24 2013-02-28 АйДи БАЙОМЕДИКАЛ КОРПОРЕЙШН ОФ КВЕБЕК Вакцина
DK2445526T3 (en) 2009-06-24 2016-06-27 Glaxosmithkline Biologicals Sa Recombinant RSV antigens.
SG177269A1 (en) 2009-06-25 2012-02-28 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel human papillomavirus (hpv) protein constructs and their use in the prevention of hpv disease
SG177533A1 (en) 2009-07-07 2012-02-28 Novartis Ag Conserved escherichia coli immunogens
US20120164176A1 (en) 2009-07-15 2012-06-28 Kurt Swanson Rsv f protein compositions amd methods for making same
SG178035A1 (en) 2009-07-16 2012-03-29 Novartis Ag Detoxified escherichia coli immunogens
NZ598356A (en) 2009-07-30 2014-06-27 Pfizer Vaccines Llc Antigenic tau peptides and uses thereof
GB0913680D0 (en) 2009-08-05 2009-09-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
EA201592264A1 (ru) * 2009-08-26 2016-08-31 Селекта Байосайенсиз, Инк. Композиции, которые индуцируют хелперное действие т-клеток
JP2013502918A (ja) 2009-08-27 2013-01-31 ノバルティス アーゲー 髄膜炎菌ｆＨＢＰ配列を含むハイブリッドポリペプチド
MX2012002639A (es) 2009-09-03 2012-03-14 Pfizer Vaccines Llc Vacuna de pcsk9.
US8974799B2 (en) 2009-09-30 2015-03-10 Novartis Ag Conjugation of Staphylococcus aureus type 5 and type 8 capsular polysaccharides
GB0918392D0 (en) 2009-10-20 2009-12-02 Novartis Ag Diagnostic and therapeutic methods
EP2493499A1 (en) 2009-10-27 2012-09-05 Novartis AG Modified meningococcal fhbp polypeptides
GB0919690D0 (en) 2009-11-10 2009-12-23 Guy S And St Thomas S Nhs Foun compositions for immunising against staphylococcus aureus
CN107412754A (zh) 2009-12-22 2017-12-01 塞尔德克斯医疗公司 疫苗组合物
KR20120129927A (ko) 2010-01-27 2012-11-28 글락소 그룹 리미티드 변형된 투베르쿨로시스 항원
EP3327028B1 (en) 2010-03-30 2022-03-16 Children's Hospital & Research Center at Oakland Factor h binding proteins (fhbp) with altered properties and methods of use thereof
EP2558069A1 (en) 2010-04-13 2013-02-20 Novartis AG Benzonapthyridine compositions and uses thereof
ES2661978T3 (es) 2010-05-26 2018-04-04 Selecta Biosciences, Inc. Vacunas multivalentes de nanovehículos sintéticos
WO2011148382A1 (en) 2010-05-28 2011-12-01 Biological E Limited An improved process for the purification of capsular polysaccharides of haemophilus influenza - b, neisseria meningitis such as serotypes a, c, y and w-135, and other similar related capsular polysaccharides produced from both gram negative and gram positive microorganisms using aluminium phosphate with alcohol.
WO2011149564A1 (en) 2010-05-28 2011-12-01 Tetris Online, Inc. Interactive hybrid asynchronous computer game infrastructure
EP2942061A3 (en) 2010-06-07 2016-01-13 Pfizer Vaccines LLC Ige ch3 peptide vaccine
EP2576613A1 (en) 2010-06-07 2013-04-10 Pfizer Inc. Her-2 peptides and vaccines
GB201009861D0 (en) 2010-06-11 2010-07-21 Novartis Ag OMV vaccines
CA2804501C (en) 2010-07-06 2021-01-26 Novartis Ag Noro virus derived immunogenic compositions and methods
US9192661B2 (en) 2010-07-06 2015-11-24 Novartis Ag Delivery of self-replicating RNA using biodegradable polymer particles
GB201101665D0 (en) 2011-01-31 2011-03-16 Novartis Ag Immunogenic compositions
CN102441162B (zh) * 2010-10-04 2018-07-24 免疫产品美国股份有限公司 结核病的治疗和预防
EA201390660A1 (ru) 2010-11-05 2013-11-29 Селекта Байосайенсиз, Инк. Модифицированные никотиновые соединения и связанные способы
WO2012085668A2 (en) 2010-12-24 2012-06-28 Novartis Ag Compounds
ES2727836T3 (es) 2011-01-26 2019-10-21 Glaxosmithkline Biologicals Sa Régimen de inmunización del VRS
EP2680883B1 (en) 2011-03-02 2018-09-05 Pfizer Inc Pcsk9 vaccine
JP5798356B2 (ja) * 2011-04-06 2015-10-21 一般財団法人化学及血清療法研究所 新規インフルエンザワクチン安定化剤
AU2012243039B2 (en) 2011-04-08 2017-07-13 Immune Design Corp. Immunogenic compositions and methods of using the compositions for inducing humoral and cellular immune responses
CA2835644C (en) 2011-05-13 2021-06-15 Novartis Ag Pre-fusion rsv f antigens
JP6109165B2 (ja) 2011-07-01 2017-04-05 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア ヘルペスウイルスワクチンおよび使用方法
CA2841047A1 (en) 2011-07-06 2013-01-10 Novartis Ag Immunogenic compositions and uses thereof
CA2840989A1 (en) 2011-07-06 2013-01-10 Novartis Ag Immunogenic combination compositions and uses thereof
FR2977800B1 (fr) 2011-07-13 2014-03-14 Sanofi Pasteur Composition vaccinale avec des nanoparticules d'hydroxyde d'aluminium
CN109172819A (zh) 2011-07-29 2019-01-11 西莱克塔生物科技公司 产生体液和细胞毒性t淋巴细胞（ctl）免疫应答的合成纳米载体
EP3329936A1 (en) 2011-08-22 2018-06-06 Nanobio Corporation Herpes simplex virus nanoemulsion vaccine
US9561271B2 (en) 2011-09-09 2017-02-07 Nanobio Corporation Nanoemulsion respiratory syncytial virus (RSV) subunit vaccine
US20150190501A1 (en) 2011-09-12 2015-07-09 Imperial Innovations Limited Methods and compositions for raising an immune response to hiv
EP2793939A1 (en) 2011-12-23 2014-10-29 Novartis AG Stable compositions for immunising against staphylococcus aureus
JP2015514696A (ja) 2012-03-18 2015-05-21 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム ヒト・パピローマウイルスに対するワクチン接種方法
ES2773895T3 (es) * 2012-04-16 2020-07-15 Harvard College Composiciones de sílice mesoporosa para modular las respuestas inmunitarias
EP2659906A1 (en) 2012-05-01 2013-11-06 Affiris AG Compositions
EP2659907A1 (en) * 2012-05-01 2013-11-06 Affiris AG Compositions
EA034351B1 (ru) 2012-05-16 2020-01-30 Иммьюн Дизайн Корп. Трехкомпонентная вакцина против впг-2 и способы ее применения
US10124051B2 (en) 2012-05-22 2018-11-13 Glaxosmithkline Biologicals Sa Meningococcus serogroup X conjugate
CN104853770A (zh) 2012-07-06 2015-08-19 诺华股份有限公司 免疫原性组合物及其应用
CN104582723A (zh) 2012-08-31 2015-04-29 诺华股份有限公司 用于针对金黄色葡萄球菌的免疫的稳定化的蛋白质
DK2890394T3 (da) 2012-08-31 2019-07-15 Glaxosmithkline Biologicals Sa Stabiliserede proteiner til immunisering mod Staphylococcus aureus
CA2885625A1 (en) 2012-10-02 2014-04-10 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Nonlinear saccharide conjugates
AR092897A1 (es) 2012-10-03 2015-05-06 Novartis Ag Composiciones inmunogenicas
ES2645740T3 (es) * 2012-10-19 2017-12-07 Hal Allergy Holding B.V. Composiciones para inmunoterapia
SI2925355T1 (en) 2012-11-30 2018-04-30 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Antigens and combinations of Pseudomonas antigens
BR112015025709A2 (pt) 2013-04-18 2017-07-18 Immune Design Corp monoterapia com gla para uso em tratamento de câncer
CN112999344A (zh) 2013-05-15 2021-06-22 阿尔伯达大学董事会 E1e2 hcv疫苗及使用方法
US9463198B2 (en) 2013-06-04 2016-10-11 Infectious Disease Research Institute Compositions and methods for reducing or preventing metastasis
EP2870974A1 (en) 2013-11-08 2015-05-13 Novartis AG Salmonella conjugate vaccines
US11160855B2 (en) 2014-01-21 2021-11-02 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
AU2015208821B2 (en) 2014-01-21 2017-11-02 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2015123291A1 (en) 2014-02-11 2015-08-20 The Usa, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Pcsk9 vaccine and methods of using the same
MX2016012538A (es) 2014-03-26 2016-12-14 Glaxosmithkline Biologicals Sa Antigenos estafilococicos mutantes.
JP7348708B2 (ja) 2014-04-30 2023-09-21 プレジデント・アンド・フェロウズ・オブ・ハーバード・カレッジ 組み合わせワクチン装置および癌細胞を殺滅する方法
WO2016014719A1 (en) 2014-07-23 2016-01-28 Children's Hospital & Research Center Oakland Factor h binding protein variants and methods of use thereof
PL3244917T3 (pl) 2015-01-15 2023-07-17 Pfizer Inc. Kompozycje immunogenne do zastosowania w szczepionkach przeciwko pneumokokom
US11786457B2 (en) 2015-01-30 2023-10-17 President And Fellows Of Harvard College Peritumoral and intratumoral materials for cancer therapy
WO2016183292A1 (en) 2015-05-14 2016-11-17 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Rapid methods for the extraction of nucleic acids from biological samples
JP2018521016A (ja) 2015-06-03 2018-08-02 アフィリス・アクチェンゲゼルシャフトＡｆｆｉｒｉｓ Ａｇ ＩＬ−２３−ｐ１９ワクチン
WO2017005851A1 (en) 2015-07-07 2017-01-12 Affiris Ag Vaccines for the treatment and prevention of ige mediated diseases
KR102225282B1 (ko) 2015-07-21 2021-03-10 화이자 인코포레이티드 접합된 캡슐형 사카라이드 항원을 포함하는 면역원성 조성물, 그를 포함하는 키트 및 그의 용도
WO2017085586A1 (en) 2015-11-20 2017-05-26 Pfizer Inc. Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines
CN115531609A (zh) 2016-02-06 2022-12-30 哈佛学院校长同事会 重塑造血巢以重建免疫
AU2017295704B2 (en) 2016-07-13 2023-07-13 President And Fellows Of Harvard College Antigen-presenting cell-mimetic scaffolds and methods for making and using the same
WO2018060288A1 (en) 2016-09-29 2018-04-05 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Compositions and methods of treatment of persistent hpv infection
WO2018097642A1 (ko) * 2016-11-25 2018-05-31 재단법인 목암생명과학연구소 바리셀라 조스터 바이러스 백신
US10874734B2 (en) 2016-11-25 2020-12-29 Mogam Institute For Biomedical Research Varicella zoster virus vaccine
GB201620968D0 (en) 2016-12-09 2017-01-25 Glaxosmithkline Biologicals Sa Adenovirus polynucleotides and polypeptides
HRP20220573T1 (hr) 2017-01-20 2022-06-10 Pfizer Inc. Imunogeni pripravci, namijenjeni upotrebi u pneumokoknim cjepivima
CN107537035A (zh) * 2017-08-30 2018-01-05 北京恩元华生物科技有限公司 复合佐剂及含复合佐剂的狂犬疫苗及其制备方法和应用
GB201721068D0 (en) 2017-12-15 2018-01-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hepatitis B immunisation regimen and compositions
GB201721069D0 (en) 2017-12-15 2018-01-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hepatitis B Immunisation regimen and compositions
TW201946650A (zh) 2018-03-12 2019-12-16 美商詹森藥物公司 針對腹內感染之疫苗
WO2019239311A1 (en) 2018-06-12 2019-12-19 Glaxosmithkline Biologicals Sa Adenovirus polynucleotides and polypeptides
MX2021001479A (es) 2018-08-07 2021-04-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Novedosos procesos y vacunas.
US11260119B2 (en) 2018-08-24 2022-03-01 Pfizer Inc. Escherichia coli compositions and methods thereof
JP7469302B2 (ja) 2018-11-06 2024-04-16 グラクソスミスクライン バイオロジカルズ ソシエテ アノニム 免疫原性組成物
EP3893926A1 (en) 2018-12-12 2021-10-20 Pfizer Inc. Immunogenic multiple hetero-antigen polysaccharide-protein conjugates and uses thereof
EP3897846A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 GlaxoSmithKline Biologicals SA Methods of inducing an immune response
JP7239509B6 (ja) 2019-02-22 2023-03-28 ファイザー・インク 細菌多糖類を精製するための方法
CN113573730A (zh) 2019-03-05 2021-10-29 葛兰素史密斯克莱生物公司 乙型肝炎免疫方案和组合物
WO2020191082A1 (en) 2019-03-18 2020-09-24 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Bioconjugates of e. coli o-antigen polysaccharides, methods of production thereof, and methods of use thereof
AR118389A1 (es) 2019-03-18 2021-09-29 Janssen Pharmaceuticals Inc Métodos de producción de bioconjugados de polisacáridos de e. coli o-antígeno, sus composiciones y métodos de utilización
US20220184199A1 (en) 2019-04-10 2022-06-16 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens, kits comprising the same and uses thereof
CN112138155B (zh) * 2019-06-28 2022-04-12 怡道生物科技(苏州)有限公司 一种复合佐剂系统及制备该佐剂的方法
US20220362368A1 (en) 2019-10-02 2022-11-17 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Staphylococcus peptides and methods of use
MX2022005252A (es) 2019-11-01 2022-06-08 Pfizer Composiciones de escherichia coli y metodos de las mismas.
JP7485771B2 (ja) 2020-01-16 2024-05-16 ヤンセン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド ＦｉｍＨ変異体、その組成物、及びその使用
NL2030835B1 (en) 2020-01-24 2022-12-29 Aim Immunotech Inc Methods, compositions, and vaccinces for treating a virus infection
CN115362177A (zh) 2020-02-21 2022-11-18 辉瑞公司 糖类的纯化
MX2022010350A (es) 2020-02-23 2022-09-19 Pfizer Composiciones de esquerichia coli y sus metodos.
EP4114848A4 (en) 2020-02-26 2024-04-03 Versitech Limited PD-1-BASED VACCINES AGAINST CORONAVIRUS INFECTION
CN111920946B (zh) * 2020-08-07 2021-05-28 合肥诺为尔基因科技服务有限公司 环二核苷酸修饰铝纳米粒疫苗佐剂-传递系统及基于其的SARS-CoV-2亚单位疫苗
EP4213870A1 (en) 2020-09-17 2023-07-26 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Multivalent vaccine compositions and uses thereof
JP2023546615A (ja) 2020-10-27 2023-11-06 ファイザー・インク 大腸菌組成物およびその方法
AU2021373358A1 (en) 2020-11-04 2023-06-01 Pfizer Inc. Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines
CA3200968A1 (en) 2020-11-10 2022-05-19 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
US20220202923A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Pfizer Inc. E. coli fimh mutants and uses thereof
AR124604A1 (es) 2021-01-12 2023-04-12 Janssen Pharmaceuticals Inc Mutantes de fimh, composiciones con los mismos y uso de los mismos
CN117222428A (zh) 2021-02-11 2023-12-12 葛兰素史克生物有限公司 Hpv疫苗生产
IT202100003470A1 (it) 2021-02-16 2022-08-16 Fond Toscana Life Sciences Vaccines against sars-cov-2
TW202245836A (zh) 2021-02-19 2022-12-01 美商賽諾菲巴斯德公司 重組ｂ型腦膜炎球菌疫苗
CN115120713A (zh) * 2021-03-25 2022-09-30 四川大学 氢氧化铝-CpG寡核苷酸-多肽复合佐剂、疫苗及制备方法和用途
TW202304504A (zh) 2021-04-01 2023-02-01 美商詹森藥物公司 大腸桿菌ｏ１８生物軛合物之生產
WO2022234483A1 (en) 2021-05-04 2022-11-10 King Abdullah University Of Science And Technology Immuogenic compositions of mutant sars-cov-2 n protein and gene and methods of use thereof
US20220387576A1 (en) 2021-05-28 2022-12-08 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2022249106A2 (en) 2021-05-28 2022-12-01 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
AU2022391752A1 (en) 2021-11-18 2024-06-13 Matrivax, Inc. Immunogenic fusion protein compositions and methods of use thereof
WO2023135515A1 (en) 2022-01-13 2023-07-20 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2023161817A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Pfizer Inc. Methods for incorporating azido groups in bacterial capsular polysaccharides
WO2023218322A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Pfizer Inc. Process for producing of vaccine formulations with preservatives
WO2024018061A1 (en) 2022-07-22 2024-01-25 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Use of bordetella strains for the treatment of chronic obstructive pulmonary disease
WO2024110827A1 (en) 2022-11-21 2024-05-30 Pfizer Inc. Methods for preparing conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
US20240181028A1 (en) 2022-11-22 2024-06-06 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2024116096A1 (en) 2022-12-01 2024-06-06 Pfizer Inc. Pneumococcal conjugate vaccine formulations
WO2024133160A1 (en) 2022-12-19 2024-06-27 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hepatitis b compositions

Family Cites Families (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0002920B1 (en) 1977-12-20 1982-01-13 The Secretary of State for Defence in Her Britannic Majesty's Government of the United Kingdom of Great Britain and Liquid crystal displays
DE2837342A1 (de) 1978-08-26 1980-03-06 Henkel Kgaa Verfahren zur herstellung von hefeautolysat
EP0111984B1 (en) 1982-12-23 1989-08-02 THE PROCTER & GAMBLE COMPANY Ethoxylated amine polymers having clay soil removal/anti-redeposition properties useful in detergent compositions
FI861417A0 (fi) 1985-04-15 1986-04-01 Endotronics Inc Hepatitis b ytantigen framstaelld med rekombinant-dna-teknik, vaccin, diagnostiskt medel och cellinjer samt foerfaranden foer framstaellning daerav.
US4895800A (en) 1985-11-26 1990-01-23 Phillips Petroleum Company Yeast production of hepatitis B surface antigen
AP56A (en) 1987-01-30 1989-09-26 Smithkline Biologicals S A Hepatitis B virus surface antigens and hybrid antigehs containing them.
EP0362278A4 (en) 1987-06-05 1990-05-14 Us Health FACTORS OF AUTOCRINE MOTILITY IN THE DIAGNOSIS AND TREATMENT OF CANCER.
EP0304578B1 (en) 1987-06-22 2001-10-24 Medeva Holdings Bv Peptide comprising hepatitis B surface antigen
ES2056799T3 (es) 1987-07-17 1994-10-16 Rhein Biotech Ges Fur Biotechn Moleculas de adn codante para las regiones de control fmdh y gen estructural para una proteina que tiene una actividad de fmdh y su uso.
JPH085804B2 (ja) 1988-04-28 1996-01-24 財団法人化学及血清療法研究所 Ａ型及びｂ型肝炎混合アジュバントワクチン
US4912094B1 (en) 1988-06-29 1994-02-15 Ribi Immunochem Research Inc. Modified lipopolysaccharides and process of preparation
GB8819209D0 (en) 1988-08-12 1988-09-14 Research Corp Ltd Polypeptide & dna encoding same
DE3834729A1 (de) * 1988-10-12 1990-04-19 Behringwerke Ag Verwendung von zink-oder eisenhydroxid zur adjuvierung von antigenloesungen und auf diese weise adjuvierte antigenloesungen
SG48175A1 (en) 1989-07-25 1998-04-17 Smithkline Beecham Biolog Novel antigens and method for their preparation
GB9007024D0 (en) 1990-03-29 1990-05-30 Imperial College Novel vaccine
GB9105992D0 (en) * 1991-03-21 1991-05-08 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
CA2067003A1 (en) 1991-04-29 1992-10-30 Peter J. Kniskern Hbsag escape mutant vaccine
SG48390A1 (en) 1991-11-16 1998-04-17 Smithkline Beecham Biolog Hybrid protein between cs from plasmodium and hbs ag
MA22842A1 (fr) 1992-03-27 1993-10-01 Smithkline Beecham Biolog Procede de preparation de compositions de vaccin.
US6620414B2 (en) 1992-03-27 2003-09-16 Smithkline Beecham Biologicals (S.A.) Hepatitis vaccines containing 3-0-deacylated monophoshoryl lipid A
ES2118963T3 (es) 1992-05-23 1998-10-01 Smithkline Beecham Biolog Vacunas combinadas, que contienen antigeno de superficie de la hepatitis b y otros antigenos.
ATE380871T1 (de) * 1992-06-25 2007-12-15 Univ Georgetown Papillomavirus vakzine
DK0671948T3 (da) * 1992-06-25 1997-09-01 Smithkline Beecham Biolog Vaccinepræparat indeholdende adjuvanser
US5618536A (en) 1992-09-03 1997-04-08 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Chimeric papillomavirus-like particles
ATE157882T1 (de) 1993-03-23 1997-09-15 Smithkline Beecham Biolog 3-0-deazylierte monophosphoryl lipid a enthaltende impfstoff-zusammensetzungen
DK0705109T4 (da) * 1993-05-25 2004-05-10 Wyeth Corp Adjuvanser til vacciner mod respiratorisk syncytialvirus
DE4322107A1 (de) 1993-07-02 1995-01-12 Siemens Ag Einrichtung zum Auffangen und Kühlen von Kernschmelze
GB9326253D0 (en) * 1993-12-23 1994-02-23 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
SK147696A3 (en) 1994-05-16 1997-08-06 Merck & Co Inc Isolated and purified protein of papillomavirus, a capside, a viral particle, pharmaceutical composition comprising its, a method of making them and their use
WO1996002555A1 (en) 1994-07-15 1996-02-01 The University Of Iowa Research Foundation Immunomodulatory oligonucleotides
US6080408A (en) * 1994-08-22 2000-06-27 Connaught Laboratories Limited Human immunodeficiency virus type 1 nucleic acids devoid of long terminal repeats capable of encoding for non-infectious, immunogenic, retrovirus-like particles
US5698679A (en) * 1994-09-19 1997-12-16 National Jewish Center For Immunology And Respiratory Medicine Product and process for targeting an immune response
PT809700E (pt) 1994-10-07 2006-09-29 Univ Loyola Chicago Particulas semelhantes ao papilomavirus e proteinas de fusao, assim como metodos para a sua producao
AU4727296A (en) * 1995-02-24 1996-09-11 Cantab Pharmaceuticals Research Limited Polypeptides useful as immunotherapeutic agents and methods of polypeptide preparation
GB9503863D0 (en) * 1995-02-25 1995-04-19 Smithkline Beecham Biolog Vaccine compositions
US6488934B1 (en) * 1995-02-25 2002-12-03 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Hepatitis B vaccine
KR0184779B1 (ko) * 1995-04-13 1999-04-01 성재갑 퀼라야 사포나리아 몰리나로부터 분리정제된 사포닌 변이체, 이의 분리정제 방법 및 이를 함유하는 백신 제형
GB9620795D0 (en) 1996-10-05 1996-11-20 Smithkline Beecham Plc Vaccines
UA56132C2 (uk) 1995-04-25 2003-05-15 Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини
US6251405B1 (en) 1995-06-07 2001-06-26 Connaught Laboratories, Inc. Immunological combination compositions and methods
CN1146444C (zh) * 1995-06-23 2004-04-21 史密斯克莱·比奇曼生物公司 含有吸附于磷酸铝上的多糖偶联抗原的疫苗组合物
GB9513261D0 (en) * 1995-06-29 1995-09-06 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
US5733011A (en) * 1997-02-06 1998-03-31 Richard A. Young Multiple position tool caddy seat
GB9717953D0 (en) 1997-08-22 1997-10-29 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
EP1064025B1 (en) 1998-03-09 2006-09-13 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Combined vaccine compositions
GB9806456D0 (en) * 1998-03-25 1998-05-27 Smithkline Beecham Biolog Vaccine composition
GB9806666D0 (en) 1998-03-27 1998-05-27 Stanley Margaret Antigen preparation and use
US6025468A (en) * 1998-06-20 2000-02-15 United Biomedical, Inc. Artificial T helper cell epitopes as immune stimulators for synthetic peptide immunogens including immunogenic LHRH peptides
US6306404B1 (en) * 1998-07-14 2001-10-23 American Cyanamid Company Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid A
ES2262333T3 (es) * 1998-08-14 2006-11-16 MERCK & CO., INC. Procedimiento para purificar particulas similares a virus de papilomavirus humano.
GB9819898D0 (en) 1998-09-11 1998-11-04 Smithkline Beecham Plc New vaccine and method of use
US6692752B1 (en) * 1999-09-08 2004-02-17 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Methods of treating human females susceptible to HSV infection
PT1126876E (pt) 1998-10-16 2007-04-30 Glaxosmithkline Biolog Sa Sistemas adjuvantes e vacinas
AUPP765398A0 (en) * 1998-12-11 1999-01-14 University Of Queensland, The Treatment of papillomavirus infections
EP1231264A1 (en) 1999-08-06 2002-08-14 Glaxo Wellcome, S.A. New protein
GB9921147D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
GB9921146D0 (en) * 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
US6908613B2 (en) 2000-06-21 2005-06-21 Medimmune, Inc. Chimeric human papillomavirus (HPV) L1 molecules and uses therefor
GB0110431D0 (en) 2001-04-27 2001-06-20 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel compounds
GB0206360D0 (en) * 2002-03-18 2002-05-01 Glaxosmithkline Biolog Sa Viral antigens
KR20120118087A (ko) 2002-12-20 2012-10-25 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. Ｈｐｖ-16 ｌ1 ｖｌｐ 및 ｈｐｖ-18 ｌ1 ｖｌｐ 백신
US7858098B2 (en) 2002-12-20 2010-12-28 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Vaccine
JP2007505128A (ja) 2003-09-10 2007-03-08 エス−セル バイオサイエンシズ、インク． 造血を高める方法
US7758866B2 (en) * 2004-06-16 2010-07-20 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Vaccine against HPV16 and HPV18 and at least another HPV type selected from HPV 31, 45 or 52

Also Published As

Publication number Publication date
CY2007032I1 (el) 2009-11-04
JP5667107B2 (ja) 2015-02-12
AU750587B2 (en) 2002-07-25
PL348121A1 (en) 2002-05-06
HUS1300050I1 (hu) 2019-06-28
EP1797896A1 (en) 2007-06-20
US7357936B1 (en) 2008-04-15
BRPI9915545B8 (pt) 2021-05-25
HUP0203091A3 (en) 2008-04-28
CY1106596T1 (el) 2010-07-28
SI1126876T1 (sl) 2007-08-31
EP1126876B1 (en) 2007-03-21
CN101926993B (zh) 2013-12-04
ATE357252T1 (de) 2007-04-15
DK1126876T3 (da) 2007-07-02
HUP0203091A1 (hu) 2002-12-28
CO5210894A1 (es) 2002-10-30
CZ20011341A3 (cs) 2001-09-12
US20080226672A1 (en) 2008-09-18
DE122007000087I1 (de) 2008-03-27
TW586936B (en) 2004-05-11
JP5563189B2 (ja) 2014-07-30
CN1572324A (zh) 2005-02-02
DE69935606T9 (de) 2021-03-11
CZ301212B6 (cs) 2009-12-09
NZ511113A (en) 2002-09-27
NO336250B1 (no) 2015-06-29
CN100406060C (zh) 2008-07-30
CA2773698A1 (en) 2000-04-27
LU91389I9 (pl) 2019-01-02
ES2284287T3 (es) 2007-11-01
TR200101055T2 (tr) 2001-09-21
WO2000023105A2 (en) 2000-04-27
US8628784B2 (en) 2014-01-14
EP1126876A2 (en) 2001-08-29
BR9915545A (pt) 2001-08-14
CY2007032I2 (el) 2009-11-04
LU91389I2 (fr) 2008-02-14
CA2347099C (en) 2014-08-05
HU228473B1 (en) 2013-03-28
AR020836A1 (es) 2002-05-29
AU1151800A (en) 2000-05-08
JP2007262097A (ja) 2007-10-11
EP2266604A3 (en) 2011-05-11
MY124689A (en) 2006-06-30
IL142395A (en) 2006-08-01
DE69935606D1 (de) 2007-05-03
HK1038695B (zh) 2007-09-14
FR07C0064I1 (fr) 2008-02-01
CA2347099A1 (en) 2000-04-27
US20140105992A1 (en) 2014-04-17
KR100629028B1 (ko) 2006-09-26
EP1588714A2 (en) 2005-10-26
PT1126876E (pt) 2007-04-30
KR20010075638A (ko) 2001-08-09
CN1330553A (zh) 2002-01-09
JP2012121916A (ja) 2012-06-28
DE69935606T2 (de) 2007-11-29
NL300311I1 (nl) 2008-02-01
IL142395A0 (en) 2002-03-10
BR9915545B1 (pt) 2013-08-06
US9623114B2 (en) 2017-04-18
CA2773698C (en) 2015-05-19
JP2003519084A (ja) 2003-06-17
NO20011801D0 (no) 2001-04-09
WO2000023105A3 (en) 2000-08-03
CN100558401C (zh) 2009-11-11
EP1666060A1 (en) 2006-06-07
CN101926993A (zh) 2010-12-29
NL300311I2 (nl) 2008-04-01
EP2266604A2 (en) 2010-12-29
NO20011801L (no) 2001-05-30
HK1038695A1 (en) 2002-03-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US9623114B2 (en) Vaccine
CA2217178C (en) Vaccines containing a saponin and a sterol
US20020058047A1 (en) Vaccines
US20080160047A1 (en) Oil in water emulsions containing saponins
ZA200102954B (en) Adjuvant systems and vaccines.
MXPA01003737A (en) Adjuvant systems and vaccines