DE69935606T2 - Adjuvanzsysteme und impfstoffe - Google Patents

Adjuvanzsysteme und impfstoffe Download PDF

Info

Publication number
DE69935606T2
DE69935606T2 DE69935606T DE69935606T DE69935606T2 DE 69935606 T2 DE69935606 T2 DE 69935606T2 DE 69935606 T DE69935606 T DE 69935606T DE 69935606 T DE69935606 T DE 69935606T DE 69935606 T2 DE69935606 T2 DE 69935606T2
Authority
DE
Germany
Prior art keywords
antigen
aluminum salt
adsorbed
vaccine composition
composition according
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Lifetime
Application number
DE69935606T
Other languages
English (en)
Other versions
DE69935606D1 (de
DE69935606T9 (de
Inventor
Nathalie Garcon
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
GlaxoSmithKline Biologicals SA
Original Assignee
GlaxoSmithKline Biologicals SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27269522&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=DE69935606(T2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from GBGB9822709.3A external-priority patent/GB9822709D0/en
Priority claimed from GBGB9822712.7A external-priority patent/GB9822712D0/en
Priority claimed from GBGB9822703.6A external-priority patent/GB9822703D0/en
Application filed by GlaxoSmithKline Biologicals SA filed Critical GlaxoSmithKline Biologicals SA
Publication of DE69935606D1 publication Critical patent/DE69935606D1/de
Publication of DE69935606T2 publication Critical patent/DE69935606T2/de
Application granted granted Critical
Publication of DE69935606T9 publication Critical patent/DE69935606T9/de
Active legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/002—Protozoa antigens
    • A61K39/015—Hemosporidia antigens, e.g. Plasmodium antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/245—Herpetoviridae, e.g. herpes simplex virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/12—Viral antigens
    • A61K39/29—Hepatitis virus
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A61P31/22—Antivirals for DNA viruses for herpes viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55505—Inorganic adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55561—CpG containing adjuvants; Oligonucleotide containing adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55572—Lipopolysaccharides; Lipid A; Monophosphoryl lipid A
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
    • A61K2039/55511—Organic adjuvants
    • A61K2039/55577—Saponins; Quil A; QS21; ISCOMS
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/70—Multivalent vaccine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/16011—Herpesviridae
    • C12N2710/16611—Simplexvirus, e.g. human herpesvirus 1, 2
    • C12N2710/16634—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2710/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA dsDNA viruses
    • C12N2710/00011—Details
    • C12N2710/20011—Papillomaviridae
    • C12N2710/20034—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2730/00—Reverse transcribing DNA viruses
    • C12N2730/00011—Details
    • C12N2730/10011—Hepadnaviridae
    • C12N2730/10111—Orthohepadnavirus, e.g. hepatitis B virus
    • C12N2730/10134—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
    • C12N2770/00011—Details
    • C12N2770/32011—Picornaviridae
    • C12N2770/32411—Hepatovirus, i.e. hepatitis A virus
    • C12N2770/32434—Use of virus or viral component as vaccine, e.g. live-attenuated or inactivated virus, VLP, viral protein
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Description

  • Impfstoffe
  • Die vorliegende Erfindung betrifft verbesserte Impfstoffe, Adjuvanssysteme und Verfahren zur Herstellung solcher Impfstoffe und Adjuvanssysteme. Insbesondere umfassen die Impfstoffe und Adjuvanssysteme der vorliegenden Erfindung Aluminiumsalze und 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A.
  • Aluminiumsalze sind allgemein fachbekannt als Bereitstellung eines sicheren Exzipienten mit Adjuvansaktivität. Es wird angenommen, daß der Wirkungsmechanismus dieser Adjuvantien die Bildung eines Antigendepots, so daß das Antigen am Injektionsort für bis zu 3 Wochen nach der Verabreichung verbleiben kann, und auch die Bildung von Antigen/Metallsalz-Komplexen einschließt, die leichter durch Antigen-präsentierende Zellen aufgenommen werden. Zusätzlich zu Aluminium wurden andere Metallsalze zur Adsorption von Antigenen verwendet, einschließlich Salzen von Zink, Calcium, Cer, Chrom, Eisen und Beryllium. Die Hydroxid- und Phosphatsalze von Aluminium sind die üblichsten.
  • Impfstofformulierungen, die Aluminiumsalze, Antigen und zusätzliches Immunstimulans enthalten, sind fachbekannt. Solche Formulierungen induzierten stärkere Immunreaktionen im Vergleich mit denjenigen, die durch Aluminiumsalze und Antigen allein stimuliert werden. Die Formulierung dieser Impfstoffzubereitungen beinhaltete zuvor ein spezifisches Herstellungsverfahren, da angenommen wurde, daß das Antigen für das Auftreten optimaler Immunreaktionen am gleichen Aluminiumsalzteilchen wie das Immunstimulans adsorbiert werden muß. Wenn auf diese Weise Antigen durch eine Antigen-präsentierende Zelle aufgenommen wird, übt da koadsorbierte Immunstimulans seine stimulierende Aktivität direkt auf die gleiche Antigen-präsentierende Zelle aus.
  • Impfstofformulierungen auf Aluminiumbasis, in denen das Antigen und das Immunstimulans 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A (3D-MPL) am gleichen Partikel adsorbiert sind, werden in EP 0 576 478 B1 , EP 0 689 454 B1 und EP 0 633 784 B1 beschrieben. In diesen Fällen wird das Antigen zuerst am Aluminiumsalz adsorbiert, gefolgt von der Adsorption des Immunstimulans 3D-MPL an den gleichen Aluminiumsalzpartikeln. Solche Verfahren beinhalten zuerst die Suspension von 3D-MPL durch Ultraschallbehandlung in einem Wasserbad, bis die Partikel eine Größe zwischen 80 und 500 nm erreichen. Das Antigen wird typischerweise an Aluminiumsalz für eine Stunde bei Raumtemperatur unter Rühren adsorbiert. Die 3D-MPL-Suspension wird dann zum adsorbierten Antigen hinzugegeben, und die Formulierung wird bei Raumtemperatur für 1 Stunde inkubiert und dann bei 4°C bis zur Verwendung gehalten.
  • WO 98/15287 offenbart eine Impfstoffzusammensetzung, die Liposome (einschließlich Sterol), QS21 und Alaun und 3-desacyliertes Monophosphoryllipid A als Adjuvans und ein Antigen umfaßt.
  • WO 97/00697 offenbart Impfstoffzusammensetzungen, die ein an Aluminiumphosphat adsorbiertes Polysaccharid-konjugiertes Antigen enthalten.
  • WO 96/26741 offenbart Impfstoffzusammensetzungen, die Hepatitis B-Oberflächenantigen in Kombination mit Aluminiumphosphat und 3-des-O-acyliertem Monophosphoryllipid A enthalten.
  • Die Formulierungsverfahren des Standes der Technik liefern wirksame Impfstoffe in immunologischer Hinsicht, jedoch enthalten sie mehrere kommerzielle Nachteile. Für die Eignung eines Impfstoffs für die humane Verabreichung muß das Verfahren gleichförmig sein und der Kontrolle der guten Herstellungspraxis ("Good Manufacturing Practice", GMP) und Qualitätskontrolle ("Quality Control", QC) unterliegen. In einigen Fällen liefern die Verfahren des Standes der Technik einen Impfstoff, in dem das gesamte Antigen oder alle Antigene auf dem gleichen Partikel von Metallsalz adsorbiert sind. Das Verfahren wird dann durch das Erfordernis verkompliziert, daß 3D-MPL am gleichen Metallpartikel adsorbiert sein soll. Dies kann besonders problematisch im Fall von Kombinationsimpfstoffen sein, die multiple Antigene enthalten (deren Adsorption von der Affinität jedes Antigens für das besondere Metallsalz bei einem gegebenen pH abhängig sein kann). Die Verfahren des Standes der Technik können in Abhängigkeit davon, welche Antigene vorhanden sind, Probleme der Reproduzierbarkeit und Impfstoff-QC haben. Falls irgend etwas unerwünschtes mit der QC eines besonderen Antigens oder ein Ereignis, das zur Kontamination des Impfstoffs führen kann, auftritt, kann dies außerdem zur Verschwendung aller individuellen Komponenten und nicht nur des besonderen Antigens führen, in dem das Problem auftrat. Außerdem können Kombinationsimpfstoffe unter manchen Umständen die aufeinanderfolgende Zugabe der Antigene erfordern, wobei ein solches Verfahren äußerst zeitaufwendig und kostspielig ist. Die Verfahren des Standes der Technik können deshalb komplex, schwierig zu steuern und kostspielig sein.
  • Überraschend haben die vorliegenden Erfinder festgestellt, daß es nicht notwendig ist, Antigen und das 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A an das gleiche Aluminiumpartikel zu adsorbieren. Im Gegensatz zur akzeptierten Ansicht auf diesem Gebiet wurde festgestellt, daß gute Impfstoffe hergestellt werden können, wenn Antigen an besonderen Aluminiumsalzpartikeln adsorbiert wird, die getrennt von denjenigen Aluminiumsalzpartikeln sind, die mit dem 3-des-O-acylierten Monophosphoryllipid A assoziiert sind.
  • Das verbesserte Verfahren umfaßt die Adsorption von Immunstimulans, das 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipd A ist, an ein Aluminiumsalzpartikel, gefolgt von der Adsorption des Antigens an ein anderes Aluminiumsalzpartikel, gefolgt vom Vermischen der diskreten Aluminiumpartikel zur Bildung eines Impfstoffs. Außerdem werden durch die vorliegende Erfindung Impfstoffe bereitgestellt und sind dadurch gekennzeichnet, daß das Immunstimulans, das 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A ist, an Partikeln aus Aluminiumsalz adsorbiert ist und nicht mehr als 20 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an die Aluminiumsalzpartikel fähigen Materials ein Antigen ist und daß die Partikel aus Aluminiumsalz, die an das Antigen adsorbiert sind, dadurch gekennzeichnet sind, daß nicht mehr als 20 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an die Aluminiumsalzpartikel fähigen Materials Monophosphoryllipid A ist.
  • Entsprechend wird ein Verfahren zur Herstellung eines Impfstoffs bereitgestellt, umfassend das Vermischen eines Adjuvans, das 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A umfaßt, das an ein Partikel eines Aluminiumsalzes adsorbiert wurde, dadurch gekennzeichnet, daß nicht mehr als 20 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an das Aluminiumsalzpartikel fähigen Materials ein Antigen ist, mit einem Antigen. Bevorzugt wurde das Antigen an ein Aluminiumsalz voradsorbiert. Das Aluminiumsalz kann identisch mit oder ähnlich dem Aluminiumsalz sein, das an das 3-des-O-acylierte Monophosphoryllipid A adsorbiert ist.
  • Die vorliegende Erfindung stellt ferner eine Impfstoffzusammensetzung bereit, die Immunstimulans, das 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A ist, adsorbiert an ein erstes Partikel eines Aluminiumsalzes, und ein Antigen umfaßt, adsorbiert an ein Aluminiumsalz, dadurch gekennzeichnet, daß die ersten und zweiten Partikel aus Aluminiumsalz unterschiedlich sind.
  • Alternativ umfassen Impfstoffe, die einen Teil der vorliegenden Erfindung bilden, zwei Hauptpopulationen von Komplexen, einen ersten Komplex, der (a) Immunstimulans umfaßt, das 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A ist, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel, dadurch gekennzeichnet, daß nicht mehr als 20 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an die Aluminiumsalzpartikel fähigen Materials ein Antigen ist; und einen zweiten Komplex, der (b) Antigen umfaßt, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel. Auch die Impfstoffzusammensetzung kann zwei Hauptpopulationen von Komplexen umfassen, einen ersten Komplex, der (a) Immunstimulans umfaßt, das 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A ist, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel, dadurch gekennzeichnet, daß nicht mehr als 20 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an das Aluminiumsalzpartikel fähigen Materials ein Antigen ist; und einen zweiten Komplex, der (b) Antigen umfaßt, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel, dadurch gekennzeichnet, das nicht mehr als 20 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an die Aluminiumsalzpartikel fähigen Materials 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A ist.
  • Die in diesen zwei Hauptpopulationen von Komplexen vorhandenen Aluminiumsalze können identisch oder verschieden sein. Außerdem kann im Fall eines Kombinationsimpfstoffs, worin eine Mehrzahl unterschiedlicher Antigene vorhanden sein kann, der zweite Komplex (oben beschrieben) eine Mehrzahl von Antigenen umfassen, die an unterschiedlichen Aluminiumpartikeln adsorbiert sind.
  • Wenn nicht mehr als 20 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an das Partikel aus Aluminiumsalz fähigen Materials Antigen ist, ist es bevorzugt nicht mehr als 10 % und am meisten bevorzugt nicht mehr als 5 %. Alternativ, wenn nicht mehr als 20 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an das Partikel aus Aluminiumsalz fähigen Materials 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A ist, ist es bevorzugt nicht mehr als 10 % und am meisten bevorzugt nicht mehr als 5 %. Routinetests, die dem Fachmann ersichtlich sind, können zur Bestimmung verwendet werden, ob das Antigen und 3-des-O-acylierte Monophosphoryllipid A an unterschiedliche diskrete Partikel adsorbiert sind, ohne Beschränkung einschließend die Trennung des Impfstoffs in zwei unterschiedliche Fraktionen durch freien Fluß der Formulierung in einem elektrischen Feld oder durch Techniken wie die Analyse der Sedimentationsgeschwindigkeit, die besonders geeignet für nicht-teilchenförmige Antigene sind, gefolgt vom Test auf das 3-des-O-acylierte Monophosphoryllipid A oder Antigen in den Fraktionen.
  • Auch bereitgestellt in der vorliegenden Erfindung wird ein Kit, das einen Behälter, der an Aluminiumsalz adsorbiertes 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A aufweist; und einen zweiten Behälter mit an ein Aluminiumsalz adsorbiertem Antigen umfaßt.
  • Das erfindungsgemäße Verfahren ist besonders nützlich, wenn Mengen von Kombinationsimpfstoffen im gewerblichen Maßstab erforderlich sind. Kombinationsimpfstoffe sind Einzeldosisimpfstoffe, die mehr als ein Antigen aus mehr als einem Pathogen enthalten. Solche Impfstoffe können die Anzahl der Impfungen reduzieren, die zur Induzierung von Schutz gegen viele Pathogene und Krankheiten erforderlich sind.
  • Falls zum Beispiel ein Impfstoff AlOH3, 3D-MPL und die Antigene V, W, X, Y, Z umfaßt, beinhalten frühere Verfahren das Formulieren der Antigene und des 3D-MPL am gleichen Partikel aus AlOH3. Solche Verfahren des Standes der Technik erfordern, daß V, W, X, Y, Z an AlOH3 adsorbiert werden, gefolgt von der Zugabe von freiem 3D-MPL zu jedem der voradsorbierten Antigenkomplexe.
  • Im Gegensatz werden im erfindungsgemäßen Formulierungsverfahren Antigen V, W, X, Y, Z jeweils individuell an separate Partikel aus AlOH3 in separaten Behältern adsorbiert. 3D-MPL wird ebenfalls an AlOH3 in einem anderen Behälter adsorbiert. Der Impfstoff wird dann durch einfaches Vermischen des aus jedem der separaten Behälter entnommenen Materials gebildet. In diesem Fall können die Partikel aus AlOH3, das mit dem 3D-MPL assoziiert ist, unterschiedlich gegenüber den Partikeln aus AlOH3 sein, die mit den Antigenen assoziiert sind.
  • Alternativ stellt die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Herstellung eines Impfstoffs bereit, der 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A, Antigen und ein Aluminiumsalz umfaßt, umfassend:
    • 1. Adsorbieren von Antigen an ein erstes Partikel eines Aluminiumsalzes,
    • 2. Adsorbieren der 3-des-O-acylierten Monophosphoryllipid A an ein zweites Partikel eines Aluminiumsalzes und
    • 3. Vermischen der Produkte der obigen Schritte 1 und 2.
  • Die vorliegende Erfindung stellt ein Verfahren zur Herstellung von Impfstoffen bereit, die die im Stand der Technik vorhandenen Probleme ausräumen. Jeder individuelle Antigen-Aluminiumsalz-Komplex kann GMP-Kontrollen unterliegen, und sollte es eine etwaige nachteilige Kontamina tion einer besonderen Antigen-Aluminiumsalz-Zubereitung geben, dann wird die Integrität anderer Antigene und von Immunstimulans-Adjuvans nicht beeinträchtigt werden. Überraschend und im Gegensatz zur akzeptierten Annahme auf dem Gebiet sind die durch das Verfahren der vorliegenden Erfindung hergestellten Impfstoffe so wirksam wie diejenigen, die unter Verwendung des Verfahrens des Standes der Technik hergestellt werden.
  • Monophosphoryllipid A ist eine aus Bakterien stammende Verbindung mit Adjuvansaktivität. Diese toxische Verbindung wurde zur Bildung weniger toxischer Derivate verändert, und ein solches Derivat ist 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A (als 3D-MPL oder d3-MPL bezeichnet, um anzuzeigen, daß Stellung 3 des Glucosamins am reduzierenden Ende des-O-acyliert ist). Zur Herstellung von 3D-MPL siehe GB 2 220 211 A . Chemisch ist es eine Mischung aus 3-desacyliertem Monophosphoryllipid A mit 3, 4, 5 oder 6 acylierten Ketten. Bevorzugt wird in den erfindungsgemäßen Zusammensetzungen MPL aus kleinen Partikeln verwendet. MPL aus kleinen Partikeln hat eine Partikelgröße, so daß es durch ein 0,22 μm-Filter sterilfiltriert werden kann. Solche Zubereitungen werden in WO 94/21292 beschrieben. Weitere Verbesserungen werden in GB 9807933.8 beschrieben, das stabile Zubereitungen von 3D-MPL offenbart, die aus den Tri- und Tetraacyl-Gattungsverwandten bestehen.
  • GB 2 220 211 A erwähnt, daß die Endotoxizität der zuvor verwendeten enterobakteriellen Lipopolysaccharide (LPS) reduziert ist, während die immunogenen Eigenschaften bewahrt werden. Jedoch nannte GB 2 220 211 diese Befunde bloß im Zusammenhang mit bakteriellen (Gram-negativen) Systemen.
  • Die vorliegende Erfindung betrifft das besondere Formulierungsverfahren und die besonderen Eigenschaften des Adjuvans und kann somit mit einer großen Vielzahl von Antigenen verwendet werden. Die erfindungsgemäßen Impfstoffe können für Erst- und Auffrischungsdosen und für die Induzierung von Immunreaktionen gegen eine große Vielzahl von Antigenen und zum Schutz vor Infektion, die dadurch vermittelt wird, verwendet werden. Einige der Pathogene und Antigene werden nachfolgend aufgeführt.
  • Virale Hepatitis, die durch die Hepatitisviren A, B, C, D und E verursacht wird, ist eine sehr verbreitete virale Erkrankung. Über die B- und C-Viren ist sie insbesondere auch verantwortlich für viele Fälle von Leberkrebs. Somit ist die Entwicklung von wirksamen Impfstoffen kritisch und, trotz merklicher Erfolge, eine anhaltende Aufgabe. Eine Übersicht über moderne Hepatitisimpfstoffe, die eine Anzahl von Schlüsselliteraturstellen einschließt, kann gefunden werden in Lancet, 12. Mai 1990 auf Seite 1142 ff. (Prof. A.L.W.F. Eddleston). Siehe auch "Viral Hepatitis and Liver Disease" (B.N. Vyas, J.L. Dienstag und J.H. Hoofnagle, Hrsg. Grune and Stratton, Inc. (1984)) und "Viral Hepatitis and Liver Disease" (Proceedings of the 1990 International Symposium, Hrsg. F.B. Hollinger, S.M. Lemon und H. Margolis, veröffentlicht von Williams and Wilkins).
  • Wie hier verwendet, wird der Ausdruck "Hepatitis B-Antigen" verwendet, um jedes antigene Material zu bezeichnen, das aus einem Hepatitis B-Virus stammt und verwendet werden kann, um Immunität gegen das Virus im Menschen zu induzieren.
  • Infektion mit Hepatitis B-Virus (HBV) ist ein weitverbreitetes Problem, aber Impfstoffe, die für die Massenimmunisierung verwendet werden können, sind jetzt erhältlich, zum Beispiel das Produkt "Engerix-B" (SmithKline Beecham plc), das durch Gentechnik erhalten wird.
  • Die Herstellung von Hepatitis B-Oberflächenantigen (HBsAg) ist gut dokumentiert. Siehe zum Beispiel Harford et al., Develop. Biol. Standard 54, S. 125 (1983), Gregg et al., Biotechnology, 5, S. 479 (1987), EP-A-0 226 846, EP-A-0 299 108 und Literaturstellen darin.
  • Wie hier verwendet, schließt der Begriff "Hepatitis B-Oberflächenantigen" oder "HBsAg" jedes HBsAg-Antigen oder Fragment davon ein, das die Antigenität von HBV-Oberflächenantigen zeigt. Es versteht sich, daß HBsAg wie hier beschrieben zusätzlich zur Sequenz des HBsAg-S-Antigens mit 226 Aminosäuren (siehe Tiollais et al., Nature, 317, 489 (1985) und Literaturstellen darin) nach Wunsch die gesamte oder einen Teil einer Prä-S-Sequenz enthalten kann, wie in den obigen Literaturstellen und in EP-A-0 278 970 beschrieben. Insbesondere kann das HBsAg ein Polypeptid umfassen, das eine Aminosäuresequenz umfaßt, die die Reste 12–52 umfaßt, gefolgt von den Resten 133–145, gefolgt von den Resten 175–400 des L-Proteins von HBsAg, relativ zum offenen Leseraster auf einem Hepatitis B-Virus vom ad-Serotyp (dieses Polypeptid wird als L* bezeichnet; siehe EP 0 414 374 ). HBsAg im Umfang der Erfindung kann auch das in EP 0 198 474 (Endotronics) beschriebene preS1-preS2-S-Polypeptid oder Analoga davon einschließen, wie die in EP 0 304 578 (McCormick and Jones) beschriebenen. HBsAg wie hier beschrieben kann auch Mutanten bezeichnen, zum Beispiel die in WO 91/14703 oder EP 0 511 855 A1 beschriebene "Escape-Mutante", speziell HBsAg, worin die Aminosäuresubstitution in Position 145 von Glycin zu Arginin ist.
  • Normalerweise wird das HBsAg in Partikelform sein. Die Partikel können zum Beispiel S-Protein allein umfassen oder können Verbundpartikel sein, zum Beispiel (L*, S), worin L* wie oben definiert ist und S das S- Protein von HBsAg bezeichnet. Das Partikel ist vorteilhaft in der Form, in der es in Hefe exprimiert wird.
  • Die Komponente, die Schutz gegen Hepatitis A liefert, ist bevorzugt das als "Havrix" (SmithKline Beecham Biologicals) bekannte Produkt, das ein abgetöteter abgeschwächter Impfstoff ist, der aus dem HM-175-Stamm von HAV stammt [siehe "Inactivated Candidate Vaccines for Hepatitis A" von F.E. Andre, A. Hepburn und E. D'Hondt (1980), Prog. Med. Virol., Bd. 37, S. 72–95 und die Produktmonographie "Havrix", veröffentlicht von SmithKline Beecham Biologicals (1991)].
  • Somit wird in einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ein Kombinationsimpfstoff bereitgestellt, der HBsAg und Hepatitis A-Antigen umfaßt. Auch wird durch die vorliegende Erfindung ein Verfahren zur Herstellung eines Hepatits A- und B-Kombinationsimpfstoffs und ein aus dem Verfahren stammendes Produkt bereitgestellt.
  • Andere Kombinationsimpfstoffe sind auf dem Markt verfügbar, einschließlich der InfanrixTM-Reihe, hergestellt von SmithKline Beecham Biologicals. Solche Impfstoffe basieren auf einer "Kern"-Kombination aus Diphtherietoxin-, Tetanustoxin- und B. pertussis-Antigenen. Dieser Impfstoff umfaßt eine Pertussiskomponente (entweder abgetötetes ganzzelliges B. pertussis oder azelluläres Pertussis, das typischerweise aus zwei Antigenen, PT und FHA, und häufig 69 kDa besteht, gegebenenfalls mit einem oder beiden aus Agglutinogen 2 oder Agglutinogen 3). Solche Impfstoffe werden häufig als DTPw (ganze Zelle) oder DTPa (azellulär) bezeichnet.
  • Besondere Kombinationsimpfstoffe im Umfang der Erfindung schließen ein:
    Diphtherie-Tetanus-Pertussis-Hepatitis B (DTP-HB)
    Diphtherie-Tetanus-Hepatitis B (DT-HB)
    Hib-Hepatitis B
    DTP-Hib-Hepatitis B
    IPV (inaktivierter Polioimpfstoff)-DTP-Hib-Hepatitis B
  • Die Pertussiskomponente ist in geeigneter Weise ein ganzzelliger Pertussisimpfstoff oder ein azellulärer Pertussisimpfstoff, der teilweise oder hochgereinigte Antigene enthält. Die obigen Kombinationen können optional eine Komponente einschließen, die gegen Hepatitis A schützt. Bevorzugt ist die Hepatitis A-Komponente Formalin-inaktiviertes HM-175. Vorteilhaft wird das HM-175 durch Behandeln des kultivierten HM-175 mit Trypsin, Abtrennen des intakten Virus von kleinem Protease-verdauten Protein durch Permeationschromatographie und Inaktivieren mit Formalin gereinigt. Vorteilhaft ist der Hepatitis B-Kombinationsimpfstoff ein pädiatrischer Impfstoff.
  • Andere Kombinationsimpfstoffe der vorliegenden Erfindung werden in GB 9805105.5 (SmithKline Beecham Biologicals s.a.) offenbart, wobei solche Kombinationsimpfstoffe besonders vorteilhaft für Impfstoffe für Heranwachsende sind. Bevorzugte Kombinationen beruhen auf einer "Kern"-Kombination eines Hepatitis B-Antigens (Hep B) und eines Herpes Simplex (HSV)-Antigens. Gegebenenfalls können zu diesem "Kern" ein oder mehrere Antigene gegeben werden, die aus der folgenden Gruppe stammen: Epstein Barr-Virus-(EBV)-Antigen, Hepatitis A-Antigen (HepA), humanes Papilloma Virus-(HPV)-Antigen. Diese Kombinationsimpfstoffe können zusätzlich Varicella Zoster-Virus(VZV), humane Cytomegalovirus- (HCMV) oder Toxoplasma-Antigene umfassen.
  • Bevorzugt enthalten die erfindungsgemäßen Impfstofformulierungen ein Antigen oder eine antigene Zusammensetzung, das/die eine Immunreaktion gegen ein humanes Pathogen hervorrufen kann, wobei das Antigen oder die antigene Zusammensetzung aus folgendem stammt: HIV-1 (wie tat, nef, gp120 oder gp160), humane Herpesviren wie gD oder Derivate davon oder unmittelbar frühes Protein wie ICP27 aus HSV1 oder HSV2, Cytomegalovirus (speziell human) (wie gB oder Derivate davon), Rotavirus (einschließlich lebendabgeschwächter Viren), Epstein Barr-Virus (wie gp350 oder Derivate davon), Varicella Zoster-Virus (wie gpI, II und IE63), oder aus einem Hepatitisvirus wie Hepatitis B-Virus (zum Beispiel Hepatitis B-Oberflächenantigen oder ein Derivat davon), Hepatitis A-Virus, Hepatitis C-Virus und Hepatitis E-Virus, oder aus anderen viralen Pathogenen, wie zum Beispiel Paramyxoviren; respiratorischem Synzytialvirus (wie F- und G-Proteine oder Derivate davon), Parainfluenzavirus, Masernvirus, Mumpsvirus, humane Papillomaviren (zum Beispiel HPV6, 11, 16 und 18), Flaviviren (z.B. Gelbfiebervirus, Denguevirus, zeckenbürtiges Enzephalitisvirus, Japanisches Enzephalitisvirus) oder Influenzavirus, oder aus Pathogenen abgeleitet, wie zum Beispiel Neisseria spp., einschließlich N. gonorrhea und N. meningitidis (zum Beispiel Kapselpolysaccharide und Konjugate davon, Transferrin-bindende Proteine, Lactoferrin-bindende Proteine, PilC, Adhäsine); Streptococcus spp., einschließlich S. pneumoniae (zum Beispiel Kapselpolysaccharide und Konjugate davon, PsaA, PspA, Streptolysin, Cholin-bindende Proteine), S. pyogenes (zum Beispiel M-Proteine oder Fragmente davon, C5A-Protease, Lipoteichonsäuren), S. agalactiae, S. mutans; Haemophilus spp., einschließlich H. influenzae Typ B (zum Beispiel PRP und Konjugate davon), nicht-typisierbares H. influenzae (zum Beispiel OMP26, Adhäsine mit hohem Molekulargewicht, P5, P6, Lipoprotein D), H. ducreyi; Moraxella spp., einschließlich M. catarrhalis, auch bekannt als Branhamella catarrhalis (zum Beispiel Adhäsine und Invasine mit hohem und niedrigem Molekulargewicht); Bordetella spp., einschließlich B. pertussis (zum Beispiel Pertactin, Pertussistoxin oder Derivate davon, filamentöses Hämagglutinin, Adenylatcyclase, Fimbrien), B. parapertussis und B. bronchiseptica; Mycobacterium spp., einschließlich M. tuberculosis (zum Beispiel ESAT6, Antigen 85A, -B oder -C), M. bovis, M. leprae, M. avium, M. paratuberculosis, M. smegmatis; Legionella spp., einschließlich L. pneumophila; Escherichia spp., einschließlich enterotoxischem E. coli (zum Beispiel Kolonisierungsfaktoren, hitzelabiles Toxin oder Derivate davon, hitzestabiles Toxin oder Derivate davon), enterohämorrhagisches E. coli, enteropathogenes E. coli (zum Beispiel Shigatoxin-artiges Toxin oder Derivate davon); Vibrio spp., einschließlich V. cholera (zum Beispiel Choleratoxin oder Derivate davon); Shigella spp., einschließlich S. sonnei, S. dysenteriae, S. flexnerii; Yersinia spp., einschließlich Y. enterocolitica (zum Beispiel ein Yop-Protein), Y. pestis, Y. pseudotuberculosis; Campylobacter spp., einschließlich C. jejuni (zum Beispiel Toxine, Adhäsine und Invasine) und C. coli; Salmonella spp., einschließlich S. typhi, S. paratyphi, S. choleraesuis, S. enteritidis; Listeria spp., einschließlich L. monocytogenes; Helicobacter spp., einschließlich H. pylori (zum Beispiel Urease, Catalase, vacuolisierendes Toxin); Pseudomonas spp., einschließlich P. aeruginosa; Staphylococcus spp., einschließlich S. aureus, S. epidermidis; Enterococcus spp., einschließlich E. faecalis, E. faecium; Clostridium spp., einschließlich C. tetani (zum Beispiel Tetanustoxin und Derivate davon), C. botulinum (zum Beispiel Botulinumtoxin und Derivate davon), C. difficile (zum Beispiel Clostridiumtoxine A oder B und Derivate davon); Bacillus spp., einschließlich B. anthracis (zum Beispiel Botulinumtoxin und Derivate davon); Corynebacterium spp., einschließlich C. diphteriae (zum Beispiel Diphterietoxin und Derivate davon); Borrelia spp., einschließlich B. burgdorferi (zum Beispiel OspA, OspC, DbpA, DbpB), B. garinii (zum Beispiel OspA, OspC, DbpA, DbpB), B. afzelii (zum Beispiel OspA, OspC, DbpA, DbpB), B. andersonii (zum Beispiel OspA, OspC, DbpA, DbpB), B. hermsii; Ehrlichia spp., einschließlich E. equi und des Verursachers der humanen granulozytischen Ehrlichiose; Rickettsia spp., einschließlich R. rickettsii; Chlamydia spp., einschließlich C. trachomatis (zum Beispiel MOMP, Heparin-bindende Proteine), C. pneumoniae (zum Beispiel MOMP, Heparin-bindende Proteine), C. psittaci; Leptospira spp., einschließlich L. interrogans; Treponema spp., einschließlich T. pallidum (zum Beispiel die seltenen Außenmembranproteine), T. denticola, T. hyodysenteriae; oder abstammend aus Parasiten wie Plasmodium spp., einschließlich P. falciparum, Toxoplasma spp., einschließlich T. gondii (zum Beispiel SAG2, SAG3, Tg34); Entamoeba spp., einschließlich E. histolytica; Babesia spp., einschließlich B. microti; Trypanosoma spp., einschließlich T. cruzi; Giardia spp., einschließlich G. lamblia; Leshmania spp., einschließlich L. major; Pneumocystis spp., einschließlich P. carinii; Trichomonas spp., einschließlich T. vaginalis; Schisostoma spp., einschließlich S. mansoni, oder abstammend aus Hefe wie Candida spp., einschließlich C. albicans; Cryptococcus spp., einschließlich C. neoformans.
  • In einem bevorzugten Aspekt umfaßt die Impfstofformulierung der Erfindung das HIV-1-Antigen, gp120, speziell bei Expression in CHO-Zellen. In einer weiteren Ausführungsform umfaßt die Impfstofformulierung der Erfindung gD2t wie hier oben definiert.
  • In einer bevorzugten Ausführungsform der vorliegenden Erfindung umfassen Impfstoffe, die das beanspruchte Adjuvans enthalten, die HPV-Viren, die als verantwortlich für Genitalwarzen betrachtet werden (HPV6 oder HPV11 und andere), und die HPV-Viren, die für Gebärmutterhalskrebs verantwortlich sind (HPV16, HPV18 und andere). Besonders bevorzugte Formen von Impfstoff umfassen L1-Partikel oder Capsomere und Fusionsproteine, die ein oder mehrere Antigene umfassen, die aus den HPV6- oder HPV11-Proteinen E6, E7, L1 und L2 ausgewählt sind. Die am meisten bevorzugten Formen von Fusionsprotein sind: L2E7 wie in GB 95 15478.7 offenbart und Protein D(1/3)-E7, offenbart in GB 9717953.5 (WO 99/10375).
  • Impfstoffe der vorliegenden Erfindung umfassen ferner Antigene, die aus Parasiten stammen, die Malaria verursachen. Zum Beispiel schließen bevorzugte Antigene aus Plasmodia falciparum RTS,S und TRAP ein. RTS ist ein Hybridprotein, das im wesentlichen den gesamten C-terminalen Anteil des Circumsporozoit-(CS)-Proteins von P. falciparum umfaßt, gebunden über vier Aminosäuren des preS2-Anteils von Hepatitis B-Oberflächenantigen an das Oberflächen-(S)-Antigen von Hepatitis B-Virus. Seine volle Struktur wird in der internationalen Patentanmeldung Nr. PCT/EP95/02591 offenbart, veröffentlicht als WO 96/10152 unter Beanspruchung der Priorität aus der GB-Patentanmeldung Nr. 9124390.7. Bei Expression in Hefe wird RTS als Lipoproteinpartikel erzeugt, und wenn es mit dem S-Antigen aus HBV koexpri miert wird, erzeugt es ein als RTS,S bekanntes gemischtes Partikel. TRAP-Antigene werden in der internationalen Patentanmeldung Nr. PCT/GB89/00895 beschrieben, veröffentlicht als WO 90/01496. Eine bevorzugte Ausführungsform der vorliegenden Erfindung ist ein Malariaimpfstoff, in dem die antigene Zubereitung eine Kombination der RTS,S- und TRAP-Antigene umfaßt. Andere Plasmodiaantigene, die wahrscheinliche Kandidaten als Komponenten eines mehrstufigen Malariaimpfstoffs sind, sind P. falciparum MSP1, AMA1, MSP3, EBA, GLURP, RAP1, RAP2, Sequestrin, PfEMP1, Pf332, LSA1, LSA3, STRAP, SALSA, PfEXP1, Pfs25, Pfs28, PFS27/75, Pfs16, Pfs48/45, Pfs230 und ihre Analoga in Plasmodium spp.
  • Die Formulierungen können auch ein Antitumorantigen enthalten und nützlich für die immuntherapeutische Behandlung von Krebs sein. Zum Beispiel findet die Impfstofformulierung Verwendung auch mit Tumorabstoßungsantigenen wie denjenigen für Prostata-, Brust-, kolorektalen, Lungen-, Pankreas-, renalen oder Melanomkrebs. Exemplarische Antigene schließen MAGE1 und MAGE3 oder andere MAGE-Antigene zur Behandlung von Melanom, PRAME, BAGE oder GAGE ein (Robbins und Kawakami, 1996, Current Opinions in Immunology 8, S. 628–636; Van den Eynde et al., International Journal of Clinical & Laboratory Research (eingereicht 1997); Correale et al. (1997), Journal of the National Cancer Institute 89, S. 293). Tatsächlich werden diese Antigene in einer großen Reihe von Tumortypen sie Melanom, Lungenkarzinom, Sarkom und Blasenkarzinom exprimiert. Andere Tumor-spezifische Antigene sind geeignet zur Verwendung mit dem Adjuvans der vorliegenden Erfindung und schließen ohne Beschränkung Prostataspezifisches Antigen (PSA) oder Her-2/neu, KSA (GA733), MUC-1 und karzinoembryonisches Antigen (CEA) ein. Andere Antigene wurden allgemein als krebstherapeutische Antigene dargestellt, einschließlich Tyrosinase und Survivin. Entsprechend wird in einem Aspekt der vorliegenden Erfindung ein Impfstoff bereitgestellt, der eine erfindungsgemäße Adjuvanszusammensetzung und ein Tumorabstoßungsantigen umfaßt.
  • Es wird vorhergesehen, daß erfindungsgemäße Zusammensetzungen zur Formulierung von Impfstoffen verwendet werden, die Antigene enthalten, die aus Borrelia sp. stammen. Zum Beispiel können Antigene Nukleinsäure, aus Pathogen stammendes Antigen oder antigene Zubereitungen, rekombinant erzeugtes Protein oder Peptide und chimäre Fusionsproteine einschließen. Insbesondere ist das Antigen OspA. Das OspA kann ein vollständiges reifes Protein in einer lipidierten Form; bezeichnet aufgrund der Wirtszelle (E. coli) bezeichnet (Lipo-OspA), oder ein nicht-lipidiertes Derivat sein.
  • Solche nicht-lipidierten Derivate schließen das nicht-lipidierte NS1-OspA-Fusionsprotein ein, das die ersten 81 N-terminalen Aminosäuren des Nicht-Strukturproteins (NS1) und des Influenzavirus hat, und das vollständige OspA-Protein, und ein anderes, MDP-OspA, ist eine nicht-lipidierte Form von OspA, die 3 zusätzliche N-terminale Aminosäuren trägt.
  • Erfindungsgemäße Impfstoffe können zur Prophylaxe oder Therapie von Allergie verwendet werden. Solche Impfstoffe würden Allergen-spezifische (zum Beispiel Der p1 und pollenbezogene Antigene) und Allergen-unspezifische Antigene (zum Beispiel das Stanworth-Decapeptid) umfassen.
  • Die Menge an Antigen in jeder Impfstoffdosis wird als eine Menge ausgewählt, die eine immunprotektive Reaktion ohne signifikante, nachteilige Nebenwirkungen in typischen Impflingen induziert. Eine solche Menge wird in Abhängigkeit davon variieren, welches spezifische Immunogen eingesetzt wird und wie es angeboten wird. Allgemein wird erwartet, daß jede Dosis 1-1000 μg Antigen, bevorzugt 1–500 μg, bevorzugt 1–100 μg und am meisten bevorzugt 1–50 μg umfassen wird. Eine optimale Menge für einen besonderen Impfstoff kann durch Standardstudien sichergestellt werden, die die Beobachtung geeigneter Immunreaktionen in Probanden beinhalten. Nach einer Erstimpfung können Probanden eine oder mehrere Auffrischungsimmunisierungen in angemessenem Abstand erhalten. Typischerweise wird das Immunstimulans für die humane Verabreichung im Bereich von 1–1000 μg, bevorzugt 10–500 μg, besonders bevorzugt 20–200 μg pro Dosis, besonders bevorzugt 20–100 μg pro Dosis und am meisten bevorzugt 10–50 μg pro Dosis vorhanden sein.
  • Die vorliegende Erfindung sieht ferner die erfindungsgemäßen Impfstoffe zur Verwendung in der Medizin vor. Auch vorgesehen ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Impfstoffe in der Herstellung einer immunprophylaktischen und immuntherapeutischen Behandlung von viralen, bakteriellen, parasitischen Infektionen, Allergie oder Krebs. Die Formulierungen der vorliegenden Erfindung können sowohl für prophylaktische als auch therapeutische Zwecke verwendet werden.
  • Die Impfstoffherstellung wird allgemein beschrieben in "Vaccine Design – the subunit and adjuvant approach", herausgegeben von M.F. Powell und M.J. Newman; 1995, Pharmaceutical Biotechnology (Plenum Press, New York und London, ISBN 0-306-44867-X).
  • Die vorliegende Erfindung wird jetzt ohne Beschränkung durch die folgenden Beispiele veranschaulicht.
  • Beispiel 1, Materialien und Methoden
  • Serologie
  • Die Quantifizierung von Anti-HBs-Antikörper wurde durch ELISA unter Verwendung von HBs (Hep 286) als Hüllantigen durchgeführt. Antigen- und Antikörperlösungen wurden mit 50 μl pro Vertiefung verwendet. Antigen wurde auf eine Endkonzentration von 1 μg/ml in PBS verdünnt und über Nacht bei 4°C an die Vertiefungen von Mikrotiterplatten mit 96 Vertiefungen (Maxisorb Immuno-plate, Nunc, Dänemark) adsorbiert. Die Platten wurden dann für 1 h bei 37°C mit PBS inkubiert, das 1 % Rinderserumalbumin und 0,1 % TWEEN 20 enthielt (Sättigungspuffer; 100 μl/Vertiefung). Zweifache Verdünnungen von Seren (ausgehend mit 1/100 Verdünnung) in Sättigungspuffer wurden zu den HBs-beschichteten Platten gegeben und für 1 h 30 min bei 37°C inkubiert. Die Platten wurden viermal mit PBS, 0,1 % TWEEN 20 gespült, und Biotinkonjugiertes Anti-Maus-IgG1, -IgG2a, -IgG2b oder -Ig (Amersham, UK), verdünnt 1/1000 in Sättigungspuffer, wurde zu jeder Vertiefung hinzugegeben und für 1 h 30 min bei 37°C inkubiert. Nach einem Spülschritt wurde Streptavidin-biotinylierter Peroxidasekomplex (Amersham, UK), verdünnt 1/5000 in Sättigungspuffer, für weitere 30 min bei 37°C hinzugegeben. Die Platten wurden wie oben gespült und für 20 min mit einer Lösung aus o-Phenylendiamin (Sigma) 0,04 % H2O2, 0,03 % in 0,1 % TWEEN 20, 0,05 M Citratpuffer pH 4,5 inkubiert. Die Reaktion wurde mit H2SO4 2 N angehalten und bei 490/630 nm ausgelesen. ELISA-Titer wurden aus einer Referenz von SoftmaxPro (unter Verwendung einer Gleichung mit vier Parametern) berechnet und in EU/ml ausgedrückt.
  • T-Zellproliferation
  • 2 Wochen nach der zweiten Immunisierung wurden Mäuse getötet, und ihre Milz aseptisch in Gruppen entfernt. Zellsuspensionen wurden in RPMI1640-Medium (GIBCO) hergestellt, das 2 mM L-Glutamin, Antibiotika, 5 × 10–5 M 2-Mercaptoethanol und 1 % syngenes normales Mäuseserum enthielt. Milzzellen wurden in einer Endkonzentration von 2 × 106 Zellen/ml in 200 μl in Platten mit 96 rundbödigen Vertiefungen mit unterschiedlichen Konzentrationen (10-0,03 μg/ml) von HBS-Antigen kultiviert. Jeder Test wurde 4-fach durchgeführt. Nach 96 h Kultur bei 37°C unter 5 % CO2 wurden die Zellen für 18 h mit 3H-Thymidin (Amersham, UK, 5 Ci/mmol) mit 0,5 μCi/Vertiefung gepulst und dann auf Unifilterplatten (Packard) mit einem Zellernter geerntet. Die aufgenommene Radioaktivität wurde in einem Szintillationszähler (Topcount, Packard) gemessen. Die Ergebnisse werden in cpm (mittlere Impulse pro Minute in vierfachen Vertiefungen) oder als Stimulationsindizes (mittlere cpm-Werte in Kulturen von Zellen mit Antigen/mittlere cpm-Werte in Kulturen von Zellen ohne Antigen) ausgedrückt.
  • Cytokinproduktion
  • Zwei Wochen nach der zweiten Immunisierung wurden die Mäuse getötet und die Milz aseptisch in Ansammlungen entfernt (3 Ansammlungen pro Gruppe). Zellsuspensionen wurden in RPMI 1640-Medium (GIBCO) hergestellt, das 2 mM L-Glutamin, Antibiotika, 5 × 10–5 M 2-Mercaptoethanol und 5 % fötales Kälberserum enthielt. Die Zellen wurden mit einer Endkonzentration von 5 × 106 Zellen/ml in 1 ml in Platten mit 24 flachbödigen Vertiefungen mit unterschiedlichen Konzentrationen (10-0,1 μg/ml) von HBs-Antigen kultiviert. Überstände wurden 96 h später geerntet und bis zum Test auf Gegenwart von IFNγ und IL-5 durch ELISA eingefroren.
  • IFNγ-Produktion
  • Die Quantifizierung von IFNγ erfolgte durch ELISA unter Verwendung von Reagentien von Genzyme. Proben und Antikörperlösungen wurden mit 50 μl pro Vertiefung verwendet. Mikrotiterplatten mit 96 Vertiefungen (Maxisorb Immuno-plate, Nunc, Dänemark) wurden über Nacht bei 4°C mit 50 μl von Hamster-Anti-Maus-IFNγ, verdünnt mit 1,5 μg/ml in Carbonatpuffer pH 9,5 beschichtet. Die Platten wurden dann für 1 h bei 37°C mit 100 μl von PBS inkubiert, das 1 % Rinderserumalbumin und 0,1 % Tween 20 enthielt (Sättigungspuffer). Zweifache Verdünnungen von Überstand aus In-vitro-Stimulation (ausgehend von 1/2) in Sättigungspuffer wurden zu den Anti-IFNγ-beschichteten Platten hinzugegeben und für 1 h 30 min bei 37°C inkubiert. Die Platten wurden 4-mal mit PBS TWEEN 0,1 % (Waschpuffer) gespült, und Biotin-konjugiertes Ziege-Anti-Maus-IFNγ, verdünnt in Sättigungspuffer auf eine Endkonzentration von 0,5 μg/ml, wurde zu jeder Vertiefung hinzugegeben und für 1 h bei 37°C inkubiert. Nach einem Spülschritt wurde AMDEX-Konjugat (Amersham), verdünnt 1/10000 in Sättigungspuffer, für 30 min bei 37°C hinzugegeben. Die Platten wurden wie oben gespült und mit 50 μl TMB (Biorad) für 10 min inkubiert. Die Reaktion wurde mit H2SO4 0,4 N angehalten und bei 450/630 nm ausgelesen. Konzentrationen wurden unter Verwendung einer Standardkurve (Maus-IFNγ-Standard) durch SoftmaxPro (Gleichung mit vier Parametern) berechnet und in pg/ml ausgedrückt.
  • IL-5-Produktion
  • Die Quantifizierung von IL-5 erfolgte durch ELISA unter Verwendung von Reagentien von Pharmingen. Proben und Antikörperlösungen wurden mit 50 μl pro Vertiefung verwendet. Mikrotiterplatten mit 96 Vertiefungen (Maxisorb Immuno-plate, Nunc, Dänemark) wurden über Nacht bei 4°C mit 50 μl von Ratte-anti-Maus-IL-5, verdünnt auf 1 μg/ml in Carbonatpuffer pH 9,5, beschichtet. Die Platten wurden dann für 1 h bei 37°C mit 100 μl PBS inkubiert, das 1 % Rinderserumalbumin und 0,1 % Tween 20 enthielt (Sättigungspuffer). Zweifache Verdünnungen von Überstand aus In-Vitro-Stimulation (ausgehend von 1/2) in Sättigungspuffer wurden zu den anti-IFNγ-beschichteten Platten hinzugegeben und für 1 h 30 min bei 37°C inkubiert. Die Platten wurden 4-mal mit PBS TWEEN 0,1 % (Waschpuffer) gespült, und Biotin-konjugiertes Ratte-anti-Maus-IL-5, verdünnt in Sättigungspuffer auf eine Endkonzentration von 1 μg/ml, wurde zu jeder Vertiefung hinzugegeben und für 1 h bei 37°C inkubiert. Nach einem Spülschritt wurde AMDEX-Konjugat (Amersham), verdünnt 1/10 000 in Sättigungspuffer, für 30 min bei 37°C hinzugegeben. Die Platten wurden wie oben gewaschen und mit 50 μl TMB (Biorad) für 15 min inkubiert. Die Reaktion wurde mit H2SO4 0,4 N angehalten und bei 450/630 nm ausgelesen. Konzentrationen wurden unter Verwendung einer Standardkurve (rekombinantes Mäuse-IL-5) durch SoftmaxPro (Gleichung mit vier Parametern) berechnet und in pg/ml ausgedrückt.
  • Beispiel 2, Immunogenitätsstudien in Mäusen
  • Zur Untersuchung des Konzepts von MPL auf einem festen teilchenförmigen, antigenfreien Träger wurde eine Immunigenitätsstudie in Balb/C-Mäusen unter Verwendung verschiedener Sequenzen von Formulierungen von HABMPL-Impfstoffen durchgeführt:
  • Tabelle 1: Impfstofforumulierungen
    Figure 00160001
  • Beschreibung des Formulierungsverfahrens:
  • Gruppe 1, das Formulierungsverfahren des Standes der Technik. Das Antigen wird zuerst am Metallsalz adsorbiert, gefolgt von der Zugabe von freiem 3D-MPL, was zur Adsorption von 3D-MPL am gleichen Partikel aus Metallsalz wie das Antigen führt.
  • Gruppe 2 und 3, das erfindungsgemäße Formulierungsverfahren. Das 3D-MPL wird an einem Partikel aus Metallsalz adsorbiert, die Antigene werden an separaten Partikeln aus Metallsalz adsorbiert, gefolgt vom Vermischen der voradsorbierten Komplexe.
  • Immunisierungsschema
  • Gruppen von 10 Mäusen wurden subkutan zweimal in einem Intervall von 4 Wochen mit Formulierungen auf HAB-Basis immunisiert (1/10 Humandosis, d.h. HAV 72 ELU, HBs 2 μg, MPL 5 μg). Am Tag 14 nach II wurden die lymphoproliferative Reaktion und die Cytokinproduktion (IL5/IFNγ) nach In-vitro-Restimulierung von Milzzellen mit HBs und HAV analysiert. Blut wurde aus dem retroorbitalen Sinus am Tag 35 entnommen, und die Antikörperreaktion auf HBs und HAV sowie das induzierte Isotypprofil (nur HBs) wurden durch ELISA überwacht.
  • Ergebnisse
  • Humorale Reaktion (Ig und Isotypen) wurden durch ELISA unter Verwendung von HBs als Hüllantigen für HBV unter Verwendung des Behring-Kits für HAV gemessen. Nur Blutentnahmen 14 Tage nach II wurden analysiert.
  • 1 zeigt Anti-HBs-Ig-Antikörperreaktionen, die an individuellen Seren gemessen wurden und als GMT dargestellt sind.
  • 2 zeigt die Isotypverteilung (IgG1, IgG2a und IgG2b), berechnet aus der Analyse an vereinigten Seren.
  • Keine Unterschiede der Antikörpertiter werden zwischen Gruppe 1 und den neuen Formulierungen (Gruppen 2 und 3) beobachtet. Ferner stimulieren die neuen Formulierungen (Gruppen 2 und 3) ähnliche Anteile von IgG1- und IgG2a/b-Isotypen wie diejenigen, die durch die Formulierungen des Standes der Technik stimuliert werden (Gruppe 1).
  • Zellvermittelte Immunreaktionen
  • Zellvermittelte Immunreaktionen (Lymphproliferation und IFNγ/IL-5-Produktion) wurden 14 Tage nach II nach In-vitro-Restimulation von Milzzellen mit HBs- oder HA-Antigenen gemessen. Für jede Gruppe von Mäusen wurden 5 Tiere getötet und die Milz für die Untersuchung in vitro gesammelt.
  • 3 zeigt die in mit HBs restimulierten Milzzellen überwachte Lymphproliferation.
  • 4 zeigt die in mit HBS restimulierten Milzzellen überwachte Cytokinproduktion.
  • Keine Unterschiede der lymphproliferativen Reaktionen können zwischen den Formulierungen beobachtet werden.
  • Starke IFNγ-Reaktionen (+/– 1000 pg/ml) wurden bei allen Gruppen beobachtet, außerdem wird kein Unterschied der IL-5-Produktion (unterhalb 60 pg/ml) zwischen den Gruppen beobachtet.
  • Schlußfolgerungen
  • Keine signifikanten Unterschiede der humoralen und zellvermittelten Immunreaktionen auf HBsAg wurden zwischen den HABMPL-Formulierungssequenzen beobachtet.
  • Beispiel 3, HSV-Impfung von Meerschweinchen
  • Das vorhergehende Beispiel zeigte die Wirksamkeit der neuen Formulierungen und Verfahren in bezug auf Hepatitis-Antigene. Dieses Beispiel untersuchte die Immunogenität und Schutzwirksamkeit von Herpes Simplex-Virus-gD-Impfstoffen, die mit Alaun und 3D-MPL im klassischen Verfahren formuliert werden, im Vergleich mit dem erfindungsgemäßen Verfahren. Die zwei Impfstoffe wurden im intravaginalen HSV-Schutzmodell mit dem Meerschweinchen verglichen.
  • Figure 00180001
  • Experimentelles Protokoll
  • Gruppen von 12 weiblichen Hartley-Meerschweinchen wurden zweimal an den Tagen 0 und 28 immunisiert. Am Tag 57 wurden die Tiere intravaginal mit 105 pfu von HSV2 MS-Stamm (100 μl) in Kontakt gebracht. Nach der Exposition wurden die Tiere täglich auf klinische Anzeichen von Primärerkrankung am Tag 4 bis 12 überwacht. Blut wurde aus dem retroorbitalen Sinus an den Tagen 14 und 28 nach der zweiten Immunisierung entnommen, und die Anti-gD-Antikörperreaktion (IgG) wurde durch ELISA überwacht.
  • Formulierungsverfahren
  • gD2t aus HSV2 wurde gemäß den in WO 92/16231 beschriebenen Techniken hergestellt. 3D-MPL wurde von Ribi ImmunoChem Inc., Montana, USA, erworben. AlOH3 wurde von Superfos erworben. Formulierungen wurden 15 Tage vor der ersten Injektion hergestellt. Alle Inkubationen wurden bei Raumtemperatur unter Rühren durchgeführt.
  • Gruppe 4, Al(OH)3-basierte Formulierungen (250 μl/Dosis): klassische Weise
  • gD2t (5 μg) wurde an 125 μg Al(OH)3 für 15 min vor der MPL-Zugabe (12,5 μg) adsorbiert. 30 Minuten später wurde die Formulierung mit einer 10-fach konzentrierten PBS-Lösung von pH 7,4 gepuffert. Nach 15 min wurden 500 μg/ml Phenoxyethanol als Konservierungsmittel hinzugegeben. H2O+Al(OH)3+Ag-15m-MPL-30m-10×PBSpH7,4-15m-2-Phenoxy
  • Gruppe 5, Al(OH)3 basierte Formulierungen (250 μl/Dosis): neue Weise
  • gD2t (5 μg) wurde an 100 μg Al(OH)3 für 15 min adsorbiert und als konzentrierter Monobulk gelagert. Andererseits wurde MPL (12,5 μg) an 25 μg Al(OH)3 für 30 min adsorbiert und als anderer konzentrierter Monobulk gelagert. Für die fertige Formulierung wurde das adsorbierte gD2t in H2O und 10-fach konzentriertem PBS pH 7,4 verdünnt. 15 Minuten später wurde adsorbiertes MPL vor der Phenoxyethanolzugabe als Konservierungsmittel hinzugegeben. Al(OH)3+Ag Al(OH)3+MPL H2O+10×PBS pH 7,4+Ads gD2t-15m-Ads MPL-15m-2-Phenoxy
  • Probenquantifizierung
  • Die Quantifizierung von Anti-gD-Antikörper erfolgte durch ELISA unter Verwendung von gD 43B318 als Hüllantigen. Antigen- und Antikörperlösungen wurden mit 50 μl pro Vertiefung verwendet. Antigen wurde auf eine Endkonzentration von 1 μg/ml in PBS verdünnt und über Nacht bei 4°C an die Vertiefungen von Mikrotiterplatten mit 96 Vertiefungen (Maxisorb Immunoplate, Nunc, Dänemark) adsorbiert. Die Platten wurden dann für 1 h bei 37°C mit PBS inkubiert, das 1 % Rinderserumalbumin und 0,1 % Tween 20 enthielt (Sättigungspuffer). Zweifache Verdünnungen der Seren im Sättigungspuffer wurden zu den gD-beschichteten Platten gegeben und für 1 h 30 min bei 37°C inkubiert. Die Platten wurden viermal mit PBS 0,1 % Tween 20 gespült, und Biotin-konjugiertes Anti-Meerschweinchen-IgG (Amersham, UK), verdünnt 1/10 000 in Sättigungspuffer, wurde zu jeder Vertiefung hinzugegeben und für 1 h 30 min bei 37°C inkubiert. Nach einem Spülschritt wurde Streptavidin-biotinylierter Peroxydase-Komplex (Amersham, UK), verdünnt 1/1000 in Sättigungspuffer, für weitere 30 min bei 37°C hinzugegeben. Die Platten wurden wie oben gespült und für 20 min mit einer Lösung aus o-Phenylendiamin (Sigma) 0,04 % H2O2, 0,03 % in 0,1 % Tween 20, 0,05 M Citratpuffer pH 4,5 inkubiert. Die Reaktion wurde mit H2SO4 2 N angehalten und bei 490/630 nm ausgelesen. ELISA-Titer wurden aus einer Referenz durch SoftmaxPro (unter Verwendung einer Gleichung mit vier Parametern) berechnet und in EU/ml ausgedrückt.
  • Statistische Analyse
  • Statistische Analysen wurden an Serologiedaten unter Verwendung von UNISTAT durchgeführt:
    Das für eine einseitige Varianzanalyse eingesetzte Protokoll kann kurz wie folgt beschrieben werden:
    • 1) Logarithmische Transformation der Daten.
    • 2) Kolmogorov-Smirnov-Test an jeder Population (Gruppe) zur Verifizierung der Normalität.
    • 3) Hartley- und Cochran-Tests zur Verifizierung der Homogenität der Varianz zwischen unterschiedlichen Populationen (Gruppen).
    • 4) Varianzanalyse an ausgewählten Daten: 14 Tage nach II oder 28 Tage nach II.
  • Ergebnisse
  • Serologie
  • 5 zeigt zum Zeitpunkt nach II an individuellen Seren gemessene Anti-gD-IgG-Antikörperreaktionen.
  • Kein auffallender Unterschied der Antikörpertiter wird zwischen allen Formulierungen zum Tag 14 nach II (17090–18508 EU/ml für GMT) oder am Tag 28 nach II (10227–11965 EU/ml für GMT) beobachtet. Die einseitige Varianzanalyse wurde separat an durch jede Impfstofforumulierung hervorgerufenen Anti-gD-IgG-Titern durchgeführt, von beiden Zeitpunkten nach logarithmischer Datentransformation. Keine statistisch signifikanten Unterschiede zwischen beiden Formulierungen wurden detektiert (p-Werte = 0,7397 und 0,5078 für Daten 14 Tage nach II bzw. 28 Tage nach II).
  • Schutz vor Krankheit
  • Schutz gegen Primärerkrankung wurde 4 bis 12 Tage nach der Exposition durch Vergleichen mehrerer Parameter in geimpften und unbehandelten Tieren bewertet:
    • – Der Prozentanteil an Tieren mit und ohne Läsionen (vaginal oder äußerlich).
    • – Der primäre Infektionsindex (PI), berechnet für jede Gruppe wie folgt: Σ (Bewertungsmaximum × Auftreten, ausgedrückt in %).
    • – Die Summe der Läsionsbewertungen (Tag 4 bis 12), ausgedrückt als Medianwert, und die Anzahl der Tiere, die Läsionen zeigen (N).
    • – Die mittleren kumulativen Bewertungen, berechnet für jede Gruppe zwischen Tag 4 und Tag 12.
    Tabelle 2 faßt die Läsionsparameter zusammen
    Figure 00210001
    • * Summe der Läsionsbewertungen für die Tage 4 bis 12 nach der Infektion (Tiere ohne Läsionen wurden nicht berücksichtigt). Läsionsbewertungen: keine Läsion (0), Vaginalläsionen (0,5 oder 1), äußere Hautvesikel (2, 4, 8 oder 16).
    • ** Primärer Infektionsindex = (max. Bewertung I) × (Auftreten %); mit I=0, 0,5, 1, 2, 4, 8 oder 16.
  • 6 zeigt die Kurven der kumulativen Läsionsbewertung nach HSV-Exposition.
  • Ein hoher Prozentanteil geimpfter Tiere entwickelte keinerlei Läsion (66 bis 83 %) oder entwickelte vaginale Läsionen. Im Vergleich zeigten 89 % der Tiere der Kontrollgruppe externe Läsionen.
  • Eine starke Reduzierung des primären Infektionsindex wurde in geimpften Tieren beobachtet (97 bis 99 %). Dies war von einer sehr geringen Läsionsschwere begleitet, die für die geimpften Gruppen (Medianwert = 0,5 oder 1) im Vergleich mit der unbehandelten Gruppe (Medianwert = 28) aufgezeichnet wurde.
  • Wie durch die Kurven der kumulativen Bewertungen gezeigt wird, ergaben beide Gruppen (4 und 5) einen sehr guten und vergleichbaren Grad an Schutz gegen Primärerkrankung.
  • Schlußfolgerung
  • Alte und neue Verfahren zur HSV-Impfstofformulierung wurden verglichen. Kein statistisch signifikanter Unterschied wurde zwischen den zwei Verfahren in beiden IgG-Titern oder im Schutz gegen Primärerkrankung beobachtet.
  • Beispiel 4, HPV-Impfung von Mäusen
  • Verschiedene Sequenzen von Formulierungen (AlOH- oder AlPO4-basiert) von humanem Papilomavirus E7-Antigen und 3D-MPL wurden in bezug auf ihre Fähigkeit zur Induzierung Antigen-spezifischer humoraler Reaktionen verglichen. Vergleichbare Ig-Titer werden mit Formulierungen mit gemischter Adsorption von 3D-MPL und Protein D1/3-E7 am gleichen Träger (Weg 1) und mit Formulierungen erhalten, in denen 3D-MPL separat an einen antigenfreien Träger adsorbiert wird (Weg 2). Protein D1/3-E7 wurde gemäß dem Verfahren aus WO 99/10375 hergestellt. Die Antigen- und MPL-Formulierungen waren entweder AlOH-basiert oder AlPO4-basiert. Antigen und 3D-MPL wurden nacheinander an die gleichen Partikel aus Aluminiumsalz adsorbiert (Weg 1), oder separate Adsorptionen erfolgten vor dem Vermischen (Weg 2). Gruppen von 10 Mäusen wurden unter Verwendung der folgenden Formulierungen immunisiert (Beschreibung in Material und Methoden):
    Figure 00220001
  • Die Mäuse wurden zweimal in einem 21-tägigen Intervall auf dem intramuskulären Weg immunisiert. Seren wurden am Tag 35 (14 Tage nach II) aufgefangen und auf Gegenwart von E7-spezifischen Antikörpern analysiert (siehe Material und Methoden). Die Formulierungen wurden 5 Tage vor der ersten Injektion hergestellt. Alle Inkubationen wurden bei Raumtemperatur unter Rühren durchgeführt.
  • I. Al-basierte Formulierungen (50 μl/Dosis): klassische Weise (Weg 1)
  • PD1/3E7 (5 μg) wurde an 50 μg Al(OH)3 oder AlPO4 für 30 min vor der MPL-Zugabe (5 μg) adsorbiert. 30 Minuten später wurde die Formulierung mit einer 10-fach konzentrierten Lösung von PO4, NaCl pH 6,8 gepuffert. Nach 15 min wurden 50 μg/ml Thiomersal als Konservierungsmittel hinzugegeben. H2O+Al+Ag-30m-MPL-30m-10×PNpH6,8-15m-Thio
  • II. Al-basierte Formulierungen (50 μl/Dosis): neue Weise (Weg 2)
  • PD1/3E7 (5 μg) wurde an 10 μg Al(OH)3 oder AlPO4 für 30 min adsorbiert und als konzentrierte Monobulks gelagert. Andererseits wurde MPL (5 μg) an 20 μg Al(OH)3 oder AlPO4 für 30 min adsorbiert und als weitere konzentrierte Monobulks gelagert. Für die fertigen Formulierungen wurde das adsorbierte Antigen in H2O und 10-fach konzentrierter Lösung mit PO4, NaCl pH 6,8 verdünnt, vor Zugabe des adsorbierten MPL und des Rests von Al (20 μg). 13 Minuten später wurden 50 μg/ml Thiomersal als Konservierungsmittel hinzugegeben. Al+Ag Al+MPL H2O+10×PN pH 6,8+Ads PD1/3E7+Ads MPL+Al-30m-Thio
  • Serologie
  • Die Quantifizierung von Anti-E7-Antikörper erfolgte durch ELISA unter Verwendung von E7 (Bollen) als Hüllantigen. Antigen- und Antikörperlösungen wurden mit 50 μl pro Vertiefung verwendet. Das Antigen wurde auf eine Endkonzentration von 3 μg/ml Carbonatpuffer, pH 9,5 verdünnt und über Nacht bei 4°C an die Vertiefungen von Mikrotiterplatten mit 96 Vertiefungen (Maxisorb Immuno-plate, Nunc, Dänemark) adsorbiert. Die Platten wurden dann für 1 h bei 37°C mit PBS inkubiert, das 1 % Rinderserumalbumin und 0,1 % Tween 20 enthielt (Sättigungspuffer). Zweifache Verdünnungen von Seren (beginnend mit 1/100-Verdünnung) im Sättigungspuffer wurden zu den E7-beschichteten Platten gegeben und für 1 h 30 min bei 37°C inkubiert. Die Platten wurden 3-mal mit PBS 0,1 % Tween 20 gespült, und Biotinkonjugiertes Anti-Maus (IgG1, IgG2a oder IgG2b oder IgGtot) (Amersham, UK), verdünnt 1/5000 in Sättigungspuffer, wurde zu jeder Vertiefung hinzugegeben und für 1 h 30 min bei 37°C inkubiert. Nach einem Spülschritt wurde Streptavidin-biotinylierter Peroxidasekomplex (Amersham, UK), verdünnt 1/5000 in Sättigungspuffer, für weitere 30 min bei 37°C hinzugegeben. Die Platten wurden wie oben gespült und für 10 min mit TMB (Tetramethylbenzidin) inkubiert. Die. Reaktion wurde mit H2SO4 4 N angehalten und bei 450 nm ausgelesen. Mittelpunktverdünnungen wurden durch SoftmaxPro (unter Verwendung einer Gleichung mit vier Parametern) berechnet.
  • Ergebnisse
  • Die an vereinigten Seren durch ELISA gemessenen Anti-E7-Ig-Titer, ausgedrückt in EU/ml, sind wie folgt:
    Figure 00240001
  • Vergleichbare Titer werden erhalten, wenn die AlOH-basierten Formulierungen oder die AlPO4-basierten Formulierungen verglichen werden. Wenn MPL zu den AlOH- oder AlPO4-Formulierungen hinzugegeben wird, sind die erreichten Titer oberhalb 10 000 EU/ml im Vergleich zu weniger als 5000 EU/ml für die Al-Formulierungen. Vergleichbare Titer werden mit beiden Formulierungssequenzen erhalten.
  • Verschiedene Sequenzen von Formulierungen (AlOH- oder AlPO4-basiert) von Antigen und MPL wurden in Bezug auf ihre Fähigkeit zur Induzierung der Produktion von Antigen-spezifischen Antikörpern verglichen:
  • Alle Formulierungen, die MPL enthalten, induzieren höhere Grade von E7-spezifischem Ig als Alaun-Formulierungen. Vergleichbare Ig-Titer werden mit Formulierungen mit gemischter Adsorption von MPL und pD1/3-E7 am gleichen Träger (Weg 1) und Formulierungen erhalten, in denen MPL separat an einem antigenfreien Träger adsorbiert ist (weg 2).

Claims (32)

  1. Verfahren zur Herstellung einer Impfstoffzusammensetzung, umfassend die Mischung von a) einer Adjuvanszusammensetzung, umfassend ein Immunstimulans, das 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel, ist, dadurch gekennzeichnet, dass nicht mehr als 20 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an das Aluminiumsalzpartikel befähigten Materials ein Antigen ist, und b) einem Antigen.
  2. Verfahren nach Anspruch 1, wobei nicht mehr als 5 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an das Aluminiumsalzpartikel befähigten Materials ein Antigen ist.
  3. Verfahren nach Anspruch 2, wobei das Aluminiumsalzpartikel frei von adsorbiertem Antigen ist.
  4. Verfahren zur Herstellung einer Impfstoffzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass das Antigen des Schritts (b) an das Aluminiumsalzpartikel adsorbiert wird.
  5. Verfahren zur Herstellung einer Impfstoffzusammensetzung, umfassend ein Immunstimulans, das 3- des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A ist, ein Antigen und ein Aluminiumsalzpartikel, das Folgendes umfasst: (a) Adsorbieren des Antigens an ein erstes Partikel eines Aluminiumsalzes, (b) Adsorbieren des Immunstimulans an ein zweites Partikel eines Aluminiumsalzes und (c) Mischen der Produkte der Schritte (a) und (b).
  6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 5, wobei das Antigen aus der Gruppe ausgewählt ist, die besteht aus: Antigenen, die von humanem Immunschwächevirus, Varicella-Zoster-Virus, Herpes-simplex-Virus Typ 1, Herpes-simplex-Virus Typ 2, humanem Cytomegalievirus, Dengue-Virus, Hepatitis A, B, C oder E, respiratorischem Syncytialvirus, humanem Papillomvirus, Influenza-Virus, Hib, Meningitisvirus, Salmonella, Neisseria, Borrelia, Chlamydia, Bordetella oder Toxoplasma stammen, IgE-Peptiden, Der p1, pollenverwandten Antigenen oder tumorassoziierten Antigenen (TAA), MAGE, BAGE, GAGE, MUC-1, Her-2 neu, LnRH(GnRH), CEA, PSA, KSA oder PRAME.
  7. Verfahren nach Anspruch 6, wobei das Antigen eine Kombination von Hepatitis-A-Antigen und Hepatitis-B-Antigen ist.
  8. Verfahren nach Anspruch 6, wobei das Antigen Hepatitis-B-Oberflächenantigen ist.
  9. Verfahren nach Anspruch 6, wobei das Antigen von humanem Papillomvirus stammt.
  10. Verfahren nach Anspruch 9, wobei das humane Papillomvirus-Antigen von HPV6, 11, 16 oder 18 stammt.
  11. Verfahren nach Anspruch 9 oder 10, wobei das humane Papillomvirus-Antigen ein L1-Partikel oder Capsomer ist.
  12. Impfstoff, der nach dem Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 11 herstellbar ist.
  13. Impfstoffzusammensetzung, umfassend zwei Hauptpopulationen von Komplexen, einen ersten Komplex, der a) ein Immunstimulans umfasst, das 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel, ist, dadurch gekennzeichnet, dass nicht mehr als 20 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an das Aluminiumsalzpartikel befähigten Materials ein Antigen ist; und einen zweiten Komplex, der b) ein Antigen, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel, umfasst.
  14. Impfstoffzusammensetzung nach Anspruch 13, umfassend zwei Hauptpopulationen von Komplexen, einen ersten Komplex, der a) ein Immunstimulans umfasst, das 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel, ist, dadurch gekennzeichnet, dass nicht mehr als 20 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an das Aluminiumsalzpartikel befähigten Materials ein Antigen ist; und einen zweiten Komplex, der b) ein Antigen, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel, umfasst, dadurch gekennzeichnet, dass nicht mehr als 20 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an das Aluminiumsalzpartikel befähigten Materials 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A ist.
  15. Impfstoffzusammensetzung nach Anspruch 13 oder 14, wobei der zweite Komplex b) Antigen, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel, umfasst, dadurch gekennzeichnet, dass nicht mehr als 5 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an das Aluminiumsalz partikel befähigten Materials 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A ist.
  16. Impfstoffzusammensetzung nach Anspruch 15, wobei der zweite Komplex b) Antigen, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel, umfasst, dadurch gekennzeichnet, dass das Aluminiumsalzpartikel frei von adsorbiertem 3-des-O-acyliertem Monophosphoryllipid A ist.
  17. Impfstoffzusammensetzung nach einem der Ansprüche 13 bis 16, wobei der erste Komplex a) ein Immunstimulans, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel, umfasst, dadurch gekennzeichnet, dass nicht mehr als 5 Massen-% des gesamten, zur Adsorption an das Aluminiumsalzpartikel befähigten Materials ein Antigen ist.
  18. Impfstoffzusammensetzung nach Anspruch 17, wobei der erste Komplex a) ein Immunstimulans, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel, umfasst, dadurch gekennzeichnet, dass das Aluminiumsalzpartikel frei von adsorbiertem Antigen ist.
  19. Impfstoffzusammensetzung nach einem der Ansprüche 13 bis 18, wobei das in dem ersten und dem zweiten Komplex vorliegende Aluminiumsalz identisch ist.
  20. Impfstoffzusammensetzung nach einem der Ansprüche 13 bis 19, wobei der zweite Komplex eine Mehrzahl Subkomplexe umfasst, wobei jeder Subkomplex ein anderes Antigen, adsorbiert an ein Aluminiumsalzpartikel, umfasst.
  21. Impfstoffzusammensetzung nach Anspruch 20, wobei das Aluminiumsalz Aluminiumhydroxid oder Aluminiumphosphat ist.
  22. Impfstoffzusammensetzung nach Anspruch 21, wobei das Aluminiumsalz Aluminiumhydroxid ist.
  23. Impfstoffzusammensetzung nach einem der Ansprüche 13 bis 22, wobei das Antigen aus der Gruppe ausgewählt ist, die besteht aus: humanem Immunschwächevirus, Varicella-Zoster-Virus, Herpes-simplex-Virus Typ 1, Herpes-simplex-Virus Typ 2, humanem Cytomegalievirus, Dengue-Virus, Hepatitis A, B, C oder E, respiratorischem Syncytialvirus, humanem Papillomvirus, Influenza-Virus, Hib, Meningitisvirus, Salmonella, Neisseria, Borrelia, Chlamydia, Bordetella oder Toxoplasma, Stanworth-Decapeptid, Der p1, pollenverwandten Antigenen oder krebsassoziierten Antigenen, MAGE, BAGE, GAGE, MUC-1, Her-2 neu, LnRH(GnRH), CEA, PSA, Tyrosinase, Survivin, KSA oder PRAME.
  24. Impfstoffzusammensetzung nach Anspruch 23, wobei das Antigen eine Kombination von Hepatitis-A-Antigen und Hepatitis-B-Antigen ist.
  25. Impfstoffzusammensetzung nach Anspruch 23, wobei das Antigen Hepatitis-B-Oberflächenantigen ist.
  26. Impfstoffzusammensetzung nach Anspruch 23, wobei das Antigen von humanem Papillomvirus stammt.
  27. Impfstoffzusammensetzung nach Anspruch 26, wobei das humane Papillomvirus-Antigen von HPV6, 11, 16 oder 18 stammt.
  28. Impfstoffzusammensetzung nach Anspruch 26 oder 27, wobei das humane Papillomvirus-Antigen ein L1-Partikel oder Capsomer ist.
  29. Impfstoffzusammensetzung nach Anspruch 23, wobei das Antigen ein Plasmodium-Antigen ist, bei dem es sich um ein oder mehrere Antigene handelt, das/die aus der folgenden Gruppe ausgewählt ist/sind: RTS,S und TRAP.
  30. Impfstoffzusammensetzung nach einem der Ansprüche 13 bis 29 zur Verwendung in der Medizin.
  31. Verwendung einer Impfstoffzusammensetzung nach einem der Ansprüche 13 bis 29 zur Herstellung eines Medikaments, das sich zur Prophylaxe oder Behandlung viraler, bakerieller, parasitischer Infektionen, von Allergie oder Krebs eignet.
  32. Kit, umfassend zwei Behälter, wobei ein Behälter 3-des-O-acyliertes Monophosphoryllipid A, adsorbiert an ein Aluminiumsalz, aufweist und der zweite Behälter Antigen, adsorbiert an ein Aluminiumsalz, aufweist.
DE69935606.7T 1998-10-16 1999-10-08 Adjuvanzsysteme und impfstoffe Active DE69935606T9 (de)

Applications Claiming Priority (8)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB9822712 1998-10-16
GBGB9822709.3A GB9822709D0 (en) 1998-10-16 1998-10-16 Vaccine
GB9822709 1998-10-16
GB9822703 1998-10-16
GBGB9822712.7A GB9822712D0 (en) 1998-10-16 1998-10-16 Vaccine
GBGB9822703.6A GB9822703D0 (en) 1998-10-16 1998-10-16 Vaccine
EP99970607A EP1126876B1 (de) 1998-10-16 1999-10-08 Adjuvanzsysteme und impfstoffe
PCT/EP1999/007764 WO2000023105A2 (en) 1998-10-16 1999-10-08 Adjuvant systems and vaccines

Publications (3)

Publication Number Publication Date
DE69935606D1 DE69935606D1 (de) 2007-05-03
DE69935606T2 true DE69935606T2 (de) 2007-11-29
DE69935606T9 DE69935606T9 (de) 2021-03-11

Family

ID=27269522

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE122007000087C Pending DE122007000087I1 (de) 1998-10-16 1999-10-08 Adjuvanzsysteme und impfstoffe
DE69935606.7T Active DE69935606T9 (de) 1998-10-16 1999-10-08 Adjuvanzsysteme und impfstoffe

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
DE122007000087C Pending DE122007000087I1 (de) 1998-10-16 1999-10-08 Adjuvanzsysteme und impfstoffe

Country Status (31)

Country Link
US (3) US7357936B1 (de)
EP (5) EP1797896A1 (de)
JP (3) JP2003519084A (de)
KR (1) KR100629028B1 (de)
CN (3) CN100406060C (de)
AR (1) AR020836A1 (de)
AT (1) ATE357252T1 (de)
AU (1) AU750587B2 (de)
BR (1) BRPI9915545B8 (de)
CA (2) CA2347099C (de)
CO (1) CO5210894A1 (de)
CY (2) CY1106596T1 (de)
CZ (1) CZ301212B6 (de)
DE (2) DE122007000087I1 (de)
DK (1) DK1126876T3 (de)
ES (1) ES2284287T3 (de)
FR (1) FR07C0064I1 (de)
HK (1) HK1038695B (de)
HU (2) HU228473B1 (de)
IL (2) IL142395A0 (de)
LU (1) LU91389I2 (de)
MY (1) MY124689A (de)
NL (1) NL300311I2 (de)
NO (1) NO336250B1 (de)
NZ (1) NZ511113A (de)
PL (1) PL201482B1 (de)
PT (1) PT1126876E (de)
SI (1) SI1126876T1 (de)
TR (1) TR200101055T2 (de)
TW (1) TW586936B (de)
WO (1) WO2000023105A2 (de)

Families Citing this family (243)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6207646B1 (en) 1994-07-15 2001-03-27 University Of Iowa Research Foundation Immunostimulatory nucleic acid molecules
AU1463097A (en) 1996-01-04 1997-08-01 Rican Limited Helicobacter pylori bacterioferritin
US6406705B1 (en) 1997-03-10 2002-06-18 University Of Iowa Research Foundation Use of nucleic acids containing unmethylated CpG dinucleotide as an adjuvant
EP1733735B1 (de) 1998-05-22 2017-03-22 Ottawa Hospital Research Institute Verfahren und Produkte zur Induktion von mukosaler Immunität
DE122007000087I1 (de) * 1998-10-16 2008-03-27 Glaxosmithkline Biolog Sa Adjuvanzsysteme und impfstoffe
US20020061848A1 (en) * 2000-07-20 2002-05-23 Ajay Bhatia Compounds and methods for treatment and diagnosis of chlamydial infection
DE60023300T2 (de) * 1999-06-29 2006-07-06 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Verwendung von cpg als adjuvans für hivimpstoff
US20050002958A1 (en) * 1999-06-29 2005-01-06 Smithkline Beecham Biologicals Sa Vaccines
GB9915204D0 (en) * 1999-06-29 1999-09-01 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
GB9921146D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
GB0025170D0 (en) * 2000-10-13 2000-11-29 Smithkline Beecham Biolog Novel compounds
SG165981A1 (en) 2000-10-27 2010-11-29 Chiron Srl Nucleic acids and proteins from streptococcus groups a & b
JP2004535765A (ja) 2000-12-07 2004-12-02 カイロン コーポレイション 前立腺癌においてアップレギュレートされた内因性レトロウイルス
EP1409533A2 (de) * 2001-01-26 2004-04-21 Walter Reed Army Institute of Research Impfstoff aus rekombinanten plasmodium falciparum protein-1/42
US7306806B2 (en) 2001-01-26 2007-12-11 United States Of America As Represented By The Secretary Of The Army Recombinant P. falciparum merozoite protein-142 vaccine
GB0115176D0 (en) 2001-06-20 2001-08-15 Chiron Spa Capular polysaccharide solubilisation and combination vaccines
US8481043B2 (en) 2001-06-22 2013-07-09 Cpex Pharmaceuticals, Inc. Nasal immunization
JP4370161B2 (ja) 2001-06-29 2009-11-25 ノバルティス バクシンズ アンド ダイアグノスティックス，インコーポレーテッド Ｈｃｖｅ１ｅ２ワクチン組成物
GB0118249D0 (en) 2001-07-26 2001-09-19 Chiron Spa Histidine vaccines
GB0121591D0 (en) 2001-09-06 2001-10-24 Chiron Spa Hybrid and tandem expression of neisserial proteins
AR045702A1 (es) 2001-10-03 2005-11-09 Chiron Corp Composiciones de adyuvantes.
WO2003070909A2 (en) 2002-02-20 2003-08-28 Chiron Corporation Microparticles with adsorbed polypeptide-containing molecules
GB0206360D0 (en) 2002-03-18 2002-05-01 Glaxosmithkline Biolog Sa Viral antigens
EP2302039A1 (de) 2002-06-13 2011-03-30 Novartis Vaccines and Diagnostics, Inc. Virusähnliche Partikel mit HML-2 gag Polypeptid
US7528223B2 (en) 2002-07-24 2009-05-05 Intercell Ag Antigens encoded by alternative reading frames from pathogenic viruses
GB0220194D0 (en) 2002-08-30 2002-10-09 Chiron Spa Improved vesicles
WO2004024182A2 (en) 2002-09-13 2004-03-25 Intercell Ag Method for isolating hepatitis c virus peptides
ATE492288T1 (de) 2002-10-11 2011-01-15 Novartis Vaccines & Diagnostic Polypeptidimpstoffe zum breiten schutz gegen hypervirulente meningokokken-linien
PT2279746E (pt) 2002-11-15 2013-12-09 Novartis Vaccines & Diagnostic Proteínas de superfície de neisseria meningitidis
GB0227346D0 (en) 2002-11-22 2002-12-31 Chiron Spa 741
US7956043B2 (en) 2002-12-11 2011-06-07 Coley Pharmaceutical Group, Inc. 5′ CpG nucleic acids and methods of use
US7858098B2 (en) 2002-12-20 2010-12-28 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Vaccine
WO2004060396A2 (en) 2002-12-27 2004-07-22 Chiron Corporation Immunogenic compositions containing phospholpid
KR100692203B1 (ko) * 2003-01-23 2007-03-09 제일모직주식회사 도광판, 이의 제조 방법, 이를 이용한 백라이트 어셈블리및 이를 이용한 액정표시장치
JP4827726B2 (ja) 2003-01-30 2011-11-30 ノバルティス ヴァクシンズ アンド ダイアグノスティクス エスアールエル 複数の髄膜炎菌血清群に対する注射可能ワクチン
CN100355453C (zh) * 2003-03-24 2007-12-19 英特塞尔股份公司 改进的疫苗
AU2004224746B2 (en) 2003-03-24 2009-04-23 Valneva Austria Gmbh Improved vaccines
US7893096B2 (en) 2003-03-28 2011-02-22 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Use of small molecule compounds for immunopotentiation
GB0308198D0 (en) 2003-04-09 2003-05-14 Chiron Srl ADP-ribosylating bacterial toxin
FR2854803B1 (fr) * 2003-05-16 2005-06-24 Aventis Pasteur Composition vaccinale comprenant du phosphate de fer a titre d'adjuvent vaccinal.
ES2596553T3 (es) 2003-06-02 2017-01-10 Glaxosmithkline Biologicals Sa Composiciones inmunogénicas a base de micropartículas que comprenden toxoide adsorbido y un antígeno que contiene un polisacárido
US7709009B2 (en) 2003-07-31 2010-05-04 Novartis Vaccines And Diagnostics, Srl Immunogenic compositions for streptococcus pyogenes
US20060035242A1 (en) 2004-08-13 2006-02-16 Michelitsch Melissa D Prion-specific peptide reagents
EP1722815A1 (de) 2004-03-09 2006-11-22 Chiron Corporation Influenza-virus-vakzine
GB0409745D0 (en) 2004-04-30 2004-06-09 Chiron Srl Compositions including unconjugated carrier proteins
RU2379052C2 (ru) 2004-04-30 2010-01-20 Чирон С.Р.Л. Вакцинация менингококковыми конъюгатами
GB0500787D0 (en) 2005-01-14 2005-02-23 Chiron Srl Integration of meningococcal conjugate vaccination
GB0410866D0 (en) 2004-05-14 2004-06-16 Chiron Srl Haemophilius influenzae
WO2006078294A2 (en) 2004-05-21 2006-07-27 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. Alphavirus vectors for respiratory pathogen vaccines
US7758866B2 (en) * 2004-06-16 2010-07-20 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Vaccine against HPV16 and HPV18 and at least another HPV type selected from HPV 31, 45 or 52
CA2571421A1 (en) 2004-06-24 2006-01-05 Nicholas Valiante Compounds for immunopotentiation
JP2008508320A (ja) 2004-07-29 2008-03-21 カイロン コーポレイション Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓａｇａｌａｃｔｉａｅのようなグラム陽性細菌に対する免疫原性組成物
GB0424092D0 (en) 2004-10-29 2004-12-01 Chiron Srl Immunogenic bacterial vesicles with outer membrane proteins
JP4993750B2 (ja) 2005-01-27 2012-08-08 チルドレンズ ホスピタル アンド リサーチ センター アット オークランド 髄膜炎菌に起因する疾患に対する広域防御のための、ｇｎａ１８７０を基にした小胞ワクチン
GB0502095D0 (en) 2005-02-01 2005-03-09 Chiron Srl Conjugation of streptococcal capsular saccharides
NZ560930A (en) * 2005-02-16 2011-06-30 Novartis Vaccines & Diagnostic Hepatitis B virus vaccine comprising a hepatitis B virus surface antigen, aluminium phosphate, 3-O-deacylated monophosphoryl lipid A and a triethylammonium ion
SG164344A1 (en) 2005-02-18 2010-09-29 Novartis Vaccines & Diagnostics Srl Immunogens from uropathogenic escherichia coli
EP1858920B1 (de) 2005-02-18 2016-02-03 GlaxoSmithKline Biologicals SA Proteine und nukleinsäuren von meningitis-/sepsis-assoziierten escherichia coli
EA014314B1 (ru) * 2005-08-02 2010-10-29 Новартис Вэксинес Энд Дайэгностикс Срл Пониженная интерференция между маслосодержащими адъювантами и антигенами, содержащими поверхностно-активные вещества
WO2007047749A1 (en) 2005-10-18 2007-04-26 Novartis Vaccines And Diagnostics Inc. Mucosal and systemic immunizations with alphavirus replicon particles
US11707520B2 (en) 2005-11-03 2023-07-25 Seqirus UK Limited Adjuvanted vaccines with non-virion antigens prepared from influenza viruses grown in cell culture
BRPI0618254A2 (pt) * 2005-11-04 2011-08-23 Novartis Vaccines & Diagnostic emulsões com agente tensoativo de fase aquosa livre para fornecer adjuvante às vacinas contra influenza dividido
EP1945252B1 (de) 2005-11-04 2013-05-29 Novartis Vaccines and Diagnostics S.r.l. Squalen adjuvans-impfstoff influenza oberflächen-antigene gereinigt aus in zellkulturen gezüchteten influenza-viren enthaltend
WO2007081447A2 (en) 2005-11-22 2007-07-19 Novartis Vaccines And Diagnostics, Inc. Norovirus and sapovirus antigens
GB0524066D0 (en) 2005-11-25 2006-01-04 Chiron Srl 741 ii
WO2007070660A2 (en) 2005-12-13 2007-06-21 President And Fellows Of Harvard College Scaffolds for cell transplantation
GB0607088D0 (en) 2006-04-07 2006-05-17 Glaxosmithkline Biolog Sa Vaccine
JO2813B1 (en) 2005-12-22 2014-09-15 جلاكسو سميث كلاين بايولوجيكالز اس.ايه A vaccine with multiple pneumococcal saccharides
JP6087041B2 (ja) 2006-01-27 2017-03-08 ノバルティス アーゲー 血球凝集素およびマトリックスタンパク質を含むインフルエンザウイルスワクチン
CA2646539A1 (en) 2006-03-23 2007-09-27 Novartis Ag Imidazoquinoxaline compounds as immunomodulators
WO2007110776A1 (en) 2006-03-24 2007-10-04 Novartis Vaccines And Diagnostics Gmbh & Co Kg Storage of influenza vaccines without refrigeration
MX337528B (es) 2006-03-30 2016-03-09 Glaxosmithkline Biolog Sa Composición inmunogénica que comprende un sacárido capsular estafilocócico o-acetilado y una proteína estafilocócica.
EP2382988A1 (de) 2006-03-31 2011-11-02 Novartis AG Kombinierte mukosale und parenterale Immunisierung gegen HIV
CN1864749B (zh) * 2006-04-12 2010-10-06 成都夸常医学工业有限公司 一种药物组合物及制备方法
US9839685B2 (en) * 2006-04-13 2017-12-12 The Regents Of The University Of Michigan Methods of inducing human immunodeficiency virus-specific immune responses in a host comprising nasally administering compositions comprising a naonemulsion and recombinant GP120 immunogen
CA2656474A1 (en) 2006-06-29 2008-01-03 Novartis Ag Polypeptides from neisseria meningitidis
GB0614460D0 (en) 2006-07-20 2006-08-30 Novartis Ag Vaccines
EP2586790A3 (de) 2006-08-16 2013-08-14 Novartis AG Immunogene von uropathogenen Escherichia coli
ES2536401T3 (es) 2006-09-11 2015-05-25 Novartis Ag Fabricación de vacunas contra virus de la gripe sin usar huevos
US8097419B2 (en) 2006-09-12 2012-01-17 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Compositions and method for rapid, real-time detection of influenza A virus (H1N1) swine 2009
US8080645B2 (en) * 2007-10-01 2011-12-20 Longhorn Vaccines & Diagnostics Llc Biological specimen collection/transport compositions and methods
US9481912B2 (en) 2006-09-12 2016-11-01 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences in biological samples
US8652782B2 (en) 2006-09-12 2014-02-18 Longhorn Vaccines & Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting, identifying and quantitating mycobacterial-specific nucleic acids
US20090181078A1 (en) 2006-09-26 2009-07-16 Infectious Disease Research Institute Vaccine composition containing synthetic adjuvant
SI2484375T1 (en) 2006-09-26 2018-08-31 Infectious Disease Research Institute A vaccine composition comprising a synthetic adjuvant
ES2480491T3 (es) 2006-12-06 2014-07-28 Novartis Ag Vacunas incluyendo antígeno de cuatro cepas de virus de la gripe
GB0700562D0 (en) 2007-01-11 2007-02-21 Novartis Vaccines & Diagnostic Modified Saccharides
PT2167121E (pt) 2007-06-26 2015-12-02 Glaxosmithkline Biolog Sa Vacina compreendendo conjugados de polissacáridos capsulares de streptococcus pneumoniae
BRPI0813866A2 (pt) 2007-06-27 2015-01-06 Novartis Ag Vacinas contra influenza com baixo teor de aditivos
GB0713880D0 (en) 2007-07-17 2007-08-29 Novartis Ag Conjugate purification
GB0714963D0 (en) 2007-08-01 2007-09-12 Novartis Ag Compositions comprising antigens
US9683256B2 (en) 2007-10-01 2017-06-20 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Biological specimen collection and transport system
US11041215B2 (en) 2007-08-24 2021-06-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc PCR ready compositions and methods for detecting and identifying nucleic acid sequences
EP2772267B1 (de) 2007-08-27 2016-04-27 Longhorn Vaccines and Diagnostics, LLC Immunogene Zusammensetzungen und Verfahren
US10004799B2 (en) 2007-08-27 2018-06-26 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Composite antigenic sequences and vaccines
CA2861667C (en) 2007-10-01 2017-06-13 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Biological specimen collection and transport system and methods of use
US11041216B2 (en) 2007-10-01 2021-06-22 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Compositions and methods for detecting and quantifying nucleic acid sequences in blood samples
GB0810305D0 (en) 2008-06-05 2008-07-09 Novartis Ag Influenza vaccination
GB0818453D0 (en) 2008-10-08 2008-11-12 Novartis Ag Fermentation processes for cultivating streptococci and purification processes for obtaining cps therefrom
KR101773114B1 (ko) 2007-12-21 2017-08-30 노파르티스 아게 스트렙토라이신 ｏ의 돌연변이 형태
EP2222710B8 (de) * 2007-12-24 2016-10-12 ID Biomedical Corporation of Quebec Rekombinante rsv-antigene
ES2532946T3 (es) 2008-02-21 2015-04-06 Novartis Ag Polipéptidos PUfH meningocócicos
EP2265640B1 (de) 2008-03-10 2015-11-04 Children's Hospital & Research Center at Oakland Chimere faktor-h-bindende proteine (fhbp), die eine heterologe b-domäne enthalten, und anwendungsverfahren
JP5518041B2 (ja) 2008-03-18 2014-06-11 ノバルティス アーゲー インフルエンザウイルスワクチン抗原の調製における改良
CA2725329C (en) * 2008-05-23 2013-10-01 The Regents Of The University Of Michigan Nanoemulsion vaccines
BRPI0909547A2 (pt) * 2008-05-26 2019-03-06 Cadila Healthcare Ltd. vacina combinada de sarampo - hpv, vetor e hospedero
US9114098B2 (en) 2008-06-04 2015-08-25 The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute Method for using inactivated Japanese encephalitis virus particles as adjuvant
EA201170217A1 (ru) * 2008-07-18 2011-08-30 АйДи БАЙОМЕДИКАЛ КОРПОРЕЙШН ОФ КВЕБЕК Гибридные полипептидные антигены респираторно-синцитиального вируса
GB0815872D0 (en) 2008-09-01 2008-10-08 Pasteur Institut Novel method and compositions
SG10201400388QA (en) 2008-12-09 2014-05-29 Pfizer Vaccines Llc IgE CH3 peptide vaccine
DK2396032T3 (en) 2009-02-10 2016-12-19 Seqirus Uk Ltd Influenza vaccines with reduced amounts of squalene
US9265821B2 (en) * 2009-02-17 2016-02-23 Glaxosmithkline Biologicals Sa Inactivated dengue virus vaccine with aluminium-free adjuvant
NO2403507T3 (de) * 2009-03-05 2018-07-21
EP3549602A1 (de) 2009-03-06 2019-10-09 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Chlamydia-antigene
SI2510947T1 (sl) 2009-04-14 2016-05-31 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Sestavki za imunizacijo proti Staphylococcus aureus
US8574589B2 (en) 2009-05-11 2013-11-05 Novartis Ag Antigen purification process for pertactin antigen
WO2010141861A1 (en) 2009-06-05 2010-12-09 Infectious Disease Research Institute Synthetic glucopyranosyl lipid adjuvants
CA2765364C (en) 2009-06-15 2015-05-26 National University Of Singapore Influenza vaccine, composition, and methods of use
WO2010148111A1 (en) * 2009-06-16 2010-12-23 The Regents Of The University Of Michigan Nanoemulsion vaccines
EA201270062A1 (ru) 2009-06-24 2013-02-28 АйДи БАЙОМЕДИКАЛ КОРПОРЕЙШН ОФ КВЕБЕК Вакцина
ES2583257T3 (es) 2009-06-24 2016-09-20 Glaxosmithkline Biologicals S.A. Antígenos recombinantes del VSR
MA33440B1 (fr) 2009-06-25 2012-07-03 Glaxosmithkline Biolog Sa Nouvelles compositions
CA2767536A1 (en) 2009-07-07 2011-01-13 Novartis Ag Conserved escherichia coli immunogens
BR112012001666A2 (pt) 2009-07-15 2019-09-24 Novartis Ag composições de proteína rsv f e métodos para fazer as mesmas
JP2012532626A (ja) 2009-07-16 2012-12-20 ノバルティス アーゲー 無毒化されたＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉ免疫原
SG177637A1 (en) 2009-07-30 2012-03-29 Pfizer Vaccines Llc Antigenic tau peptides and uses thereof
GB0913680D0 (en) 2009-08-05 2009-09-16 Glaxosmithkline Biolog Sa Immunogenic composition
EP2470554B1 (de) * 2009-08-26 2017-06-28 Selecta Biosciences, Inc. Zusammensetzungen zur induzierung von t-zellen-hilfe
CN102596240B (zh) 2009-08-27 2015-02-04 诺华股份有限公司 包括脑膜炎球菌fHBP序列的杂交多肽
SG10201401516XA (en) 2009-09-03 2014-10-30 Pfizer Vaccines Llc Pcsk9 vaccine
CA2779798C (en) 2009-09-30 2019-03-19 Novartis Ag Conjugation of staphylococcus aureus type 5 and type 8 capsular polysaccharides
GB0918392D0 (en) 2009-10-20 2009-12-02 Novartis Ag Diagnostic and therapeutic methods
MX2012004850A (es) 2009-10-27 2012-05-22 Novartis Ag Polipeptidos fhbp meningococicos modificados.
GB0919690D0 (en) 2009-11-10 2009-12-23 Guy S And St Thomas S Nhs Foun compositions for immunising against staphylococcus aureus
NZ629256A (en) 2009-12-22 2016-02-26 Celldex Therapeutics Inc Vaccine compositions
HUE031184T2 (en) 2010-01-27 2017-06-28 Glaxosmithkline Biologicals Sa Modified tuberculosis antigens
BR122022015250B1 (pt) 2010-03-30 2023-11-07 Children´S Hospital & Research Center At Oakland Composições imunogênicas e seus usos
EP2558069A1 (de) 2010-04-13 2013-02-20 Novartis AG Benzonapthyridinzusammensetzungen und ihre verwendung
AU2011258156B2 (en) 2010-05-26 2016-11-24 Selecta Biosciences, Inc. Multivalent synthetic nanocarrier vaccines
KR20130121699A (ko) 2010-05-28 2013-11-06 테트리스 온라인, 인코포레이티드 상호작용 혼성 비동기 컴퓨터 게임 기반구조
WO2011148382A1 (en) 2010-05-28 2011-12-01 Biological E Limited An improved process for the purification of capsular polysaccharides of haemophilus influenza - b, neisseria meningitis such as serotypes a, c, y and w-135, and other similar related capsular polysaccharides produced from both gram negative and gram positive microorganisms using aluminium phosphate with alcohol.
US8895017B2 (en) 2010-06-07 2014-11-25 Pfizer Inc. HER-2 peptides and vaccines
EP2942061A3 (de) 2010-06-07 2016-01-13 Pfizer Vaccines LLC Ige-ch3-peptidimpfstoff
GB201009861D0 (en) 2010-06-11 2010-07-21 Novartis Ag OMV vaccines
WO2012006293A1 (en) 2010-07-06 2012-01-12 Novartis Ag Norovirus derived immunogenic compositions and methods
US9192661B2 (en) 2010-07-06 2015-11-24 Novartis Ag Delivery of self-replicating RNA using biodegradable polymer particles
GB201101665D0 (en) 2011-01-31 2011-03-16 Novartis Ag Immunogenic compositions
CN102441162B (zh) * 2010-10-04 2018-07-24 免疫产品美国股份有限公司 结核病的治疗和预防
US9994443B2 (en) 2010-11-05 2018-06-12 Selecta Biosciences, Inc. Modified nicotinic compounds and related methods
WO2012085668A2 (en) 2010-12-24 2012-06-28 Novartis Ag Compounds
SI2667892T1 (sl) 2011-01-26 2019-05-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Imunizacijski režim proti RSV
WO2012131504A1 (en) 2011-03-02 2012-10-04 Pfizer Inc. Pcsk9 vaccine
JP5798356B2 (ja) * 2011-04-06 2015-10-21 一般財団法人化学及血清療法研究所 新規インフルエンザワクチン安定化剤
NZ616304A (en) 2011-04-08 2016-01-29 Immune Design Corp Immunogenic compositions and methods of using the compositions for inducing humoral and cellular immune responses
ES2651143T3 (es) 2011-05-13 2018-01-24 Glaxosmithkline Biologicals Sa Antígenos de F de prefusión del VRS
WO2013006569A2 (en) * 2011-07-01 2013-01-10 The Regents Of The University Of California Herpes virus vaccine and methods of use
WO2013006838A1 (en) 2011-07-06 2013-01-10 Novartis Ag Immunogenic combination compositions and uses thereof
EP2729168A2 (de) 2011-07-06 2014-05-14 Novartis AG Immunogene zusammensetzungen und ihre verwendungen
FR2977800B1 (fr) * 2011-07-13 2014-03-14 Sanofi Pasteur Composition vaccinale avec des nanoparticules d'hydroxyde d'aluminium
AU2012290306B2 (en) 2011-07-29 2017-08-17 Selecta Biosciences, Inc. Synthetic nanocarriers that generate humoral and cytotoxic T lymphocyte (CTL) immune responses
WO2013028738A1 (en) 2011-08-22 2013-02-28 Nanobio Corporation Herpes simplex virus nanoemulsion vaccine
CN104093421A (zh) 2011-09-09 2014-10-08 纳诺碧欧公司 纳米乳液呼吸道合胞病毒(rsv)亚单位疫苗
US20150190501A1 (en) 2011-09-12 2015-07-09 Imperial Innovations Limited Methods and compositions for raising an immune response to hiv
EP2793939A1 (de) 2011-12-23 2014-10-29 Novartis AG Stabile zusammensetzungen zur immunisierung gegen staphylococcus aureus
CA2863083C (en) 2012-01-26 2023-09-19 Longhorn Vaccines And Diagnostics, Llc Composite antigenic sequences and vaccines
BR112014023092A8 (pt) 2012-03-18 2017-07-25 Glaxosmithkline Biologicals Sa Composição imunogênica, método para a prevenção de infecção ou doença por hpv em um indivíduo, e, kit
ES2773895T3 (es) * 2012-04-16 2020-07-15 Harvard College Composiciones de sílice mesoporosa para modular las respuestas inmunitarias
EP2659906A1 (de) * 2012-05-01 2013-11-06 Affiris AG Zusammensetzungen
EP2659907A1 (de) * 2012-05-01 2013-11-06 Affiris AG Zusammensetzungen
AU2013262691B2 (en) 2012-05-16 2018-12-20 Immune Design Corp. Vaccines for HSV-2
MX2014014067A (es) 2012-05-22 2015-02-04 Novartis Ag Conjugado de serogrupo x de meningococo.
WO2014005958A1 (en) 2012-07-06 2014-01-09 Novartis Ag Immunogenic compositions and uses thereof
EP2890395A1 (de) 2012-08-31 2015-07-08 Novartis AG Stabilisierte proteine zur immunisierung gegen staphylococcus aureus
EP2890394B1 (de) 2012-08-31 2019-05-01 GlaxoSmithKline Biologicals SA Stabilisierte proteine zur immunisierung gegen staphylococcus aureus
WO2014053521A2 (en) 2012-10-02 2014-04-10 Novartis Ag Nonlinear saccharide conjugates
CN104717977A (zh) 2012-10-03 2015-06-17 诺华股份有限公司 免疫原性组合物
JP6336458B2 (ja) * 2012-10-19 2018-06-06 ハル・アレジー・ホールディング・ベスローテン・フェンノートシャップＨＡＬ Ａｌｌｅｒｇｙ Ｈｏｌｄｉｎｇ Ｂ．Ｖ． 免疫療法のための組成物
CN111249455A (zh) 2012-11-30 2020-06-09 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 假单胞菌抗原和抗原组合
AU2014253791B2 (en) 2013-04-18 2019-05-02 Immune Design Corp. GLA monotherapy for use in cancer treatment
EP2996718B1 (de) 2013-05-15 2020-01-15 The Governors of the University of Alberta E1e2-hcv-impfstoffe und verfahren zur verwendung
US9463198B2 (en) 2013-06-04 2016-10-11 Infectious Disease Research Institute Compositions and methods for reducing or preventing metastasis
EP2870974A1 (de) 2013-11-08 2015-05-13 Novartis AG Salmonella-Konjugatimpfstoffe
PE20212335A1 (es) 2014-01-21 2021-12-16 Pfizer Composiciones inmunogenicas que comprenden antigenos sacaridos capsulares conjugados y usos de los mismos
US11160855B2 (en) 2014-01-21 2021-11-02 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2015123291A1 (en) 2014-02-11 2015-08-20 The Usa, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Pcsk9 vaccine and methods of using the same
ES2769647T3 (es) 2014-03-26 2020-06-26 Glaxosmithkline Biologicals Sa Antígenos estafilocócicos mutantes
NZ729206A (en) 2014-07-23 2022-07-01 Children’S Hospital & Res Center At Oakland Factor h binding protein variants and methods of use thereof
PT3244917T (pt) 2015-01-15 2023-05-31 Pfizer Composições imunogénicas para utilização em vacinas pneumocócicas
EP3250250A4 (de) 2015-01-30 2019-05-22 President and Fellows of Harvard College Peritumorale und intratumorale materialien zur krebstherapie
CA2985652C (en) 2015-05-14 2020-03-10 Gerald W. FISHER Rapid methods for the extraction of nucleic acids from biological samples
WO2016193405A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 Affiris Ag Il-23-p19 vaccines
EP3319988A1 (de) 2015-07-07 2018-05-16 Affiris AG Impfstoffe zur behandlung und prävention von ige-vermittelten krankheiten
KR102225282B1 (ko) 2015-07-21 2021-03-10 화이자 인코포레이티드 접합된 캡슐형 사카라이드 항원을 포함하는 면역원성 조성물, 그를 포함하는 키트 및 그의 용도
EP3377098A1 (de) 2015-11-20 2018-09-26 Pfizer Inc Immunogene zusammensetzungen zur verwendung in pneumokokkenimpfstoffen
EP3411475A4 (de) 2016-02-06 2019-09-11 President and Fellows of Harvard College Rekapitulation der hämatopoietischen nische zur wiederherstellung der immunität
AU2017295704B2 (en) 2016-07-13 2023-07-13 President And Fellows Of Harvard College Antigen-presenting cell-mimetic scaffolds and methods for making and using the same
US11466292B2 (en) 2016-09-29 2022-10-11 Glaxosmithkline Biologicals Sa Compositions and methods of treatment
CN110035772B (zh) 2016-11-25 2023-07-18 财团法人牧岩生命科学研究所 水痘带状疱疹病毒疫苗
WO2018097642A1 (ko) * 2016-11-25 2018-05-31 재단법인 목암생명과학연구소 바리셀라 조스터 바이러스 백신
GB201620968D0 (en) 2016-12-09 2017-01-25 Glaxosmithkline Biologicals Sa Adenovirus polynucleotides and polypeptides
WO2018134693A1 (en) 2017-01-20 2018-07-26 Pfizer Inc. Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines
CN107537035A (zh) * 2017-08-30 2018-01-05 北京恩元华生物科技有限公司 复合佐剂及含复合佐剂的狂犬疫苗及其制备方法和应用
GB201721068D0 (en) 2017-12-15 2018-01-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hepatitis B immunisation regimen and compositions
GB201721069D0 (en) 2017-12-15 2018-01-31 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hepatitis B Immunisation regimen and compositions
US20190275134A1 (en) 2018-03-12 2019-09-12 Janssen Pharmaceuticals, Inc Vaccines against urinary tract infections
CN112638936A (zh) 2018-06-12 2021-04-09 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 腺病毒多核苷酸和多肽
CN112601545A (zh) 2018-08-07 2021-04-02 葛兰素史密丝克莱恩生物有限公司 工艺和疫苗
US11260119B2 (en) 2018-08-24 2022-03-01 Pfizer Inc. Escherichia coli compositions and methods thereof
EP3876982A1 (de) 2018-11-06 2021-09-15 GlaxoSmithKline Biologicals S.A. Immunogene zusammensetzungen
CA3120922A1 (en) 2018-12-12 2020-06-18 Pfizer Inc. Immunogenic multiple hetero-antigen polysaccharide-protein conjugates and uses thereof
WO2020128012A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Glaxosmithkline Biologicals Sa Methods of inducing an immune response
JP7239509B6 (ja) 2019-02-22 2023-03-28 ファイザー・インク 細菌多糖類を精製するための方法
CA3132601A1 (en) 2019-03-05 2020-09-10 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hepatitis b immunisation regimen and compositions
CA3134216A1 (en) 2019-03-18 2020-09-24 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Bioconjugates of e. coli o-antigen polysaccharides, methods of production thereof, and methods of use thereof
CA3134045A1 (en) 2019-03-18 2020-09-24 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Methods of producing bioconjugates of e. coli o-antigen polysaccharides, compositions thereof, and methods of use thereof
WO2020208502A1 (en) 2019-04-10 2020-10-15 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens, kits comprising the same and uses thereof
CN112138155B (zh) * 2019-06-28 2022-04-12 怡道生物科技(苏州)有限公司 一种复合佐剂系统及制备该佐剂的方法
AU2020358862A1 (en) 2019-10-02 2022-04-14 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Staphylococcus peptides and methods of use
EP4051696A1 (de) 2019-11-01 2022-09-07 Pfizer Inc. Escherichia-zusammensetzungen und verfahren dafür
BR112022013720A2 (pt) 2020-01-16 2022-10-11 Janssen Pharmaceuticals Inc Mutante fimh, composições com o mesmo e seu uso
NL2030835B1 (en) 2020-01-24 2022-12-29 Aim Immunotech Inc Methods, compositions, and vaccinces for treating a virus infection
KR20220144393A (ko) 2020-02-21 2022-10-26 화이자 인코포레이티드 당류의 정제
MX2022010350A (es) 2020-02-23 2022-09-19 Pfizer Composiciones de esquerichia coli y sus metodos.
CN111920946B (zh) * 2020-08-07 2021-05-28 合肥诺为尔基因科技服务有限公司 环二核苷酸修饰铝纳米粒疫苗佐剂-传递系统及基于其的SARS-CoV-2亚单位疫苗
AU2021342797B2 (en) 2020-09-17 2024-02-08 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Multivalent vaccine compositions and uses thereof
JP2023546615A (ja) 2020-10-27 2023-11-06 ファイザー・インク 大腸菌組成物およびその方法
WO2022097010A1 (en) 2020-11-04 2022-05-12 Pfizer Inc. Immunogenic compositions for use in pneumococcal vaccines
WO2022101745A2 (en) 2020-11-10 2022-05-19 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
US20220202923A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Pfizer Inc. E. coli fimh mutants and uses thereof
EP4277921A1 (de) 2021-01-12 2023-11-22 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Fimh-mutanten, zusammensetzungen damit und verwendung davon
CA3210363A1 (en) 2021-02-11 2022-08-18 Glaxosmithkline Biologicals Sa Hpv vaccine manufacture
IT202100003470A1 (it) 2021-02-16 2022-08-16 Fond Toscana Life Sciences Vaccines against sars-cov-2
JP2024507828A (ja) 2021-02-19 2024-02-21 サノフィ パスツール インコーポレイテッド Ｂ群髄膜炎菌組換えワクチン
CN115120713A (zh) * 2021-03-25 2022-09-30 四川大学 氢氧化铝-CpG寡核苷酸-多肽复合佐剂、疫苗及制备方法和用途
BR112023019874A2 (pt) 2021-04-01 2023-11-07 Janssen Pharmaceuticals Inc Produção de bioconjugados de e. coli o18
WO2022234483A1 (en) 2021-05-04 2022-11-10 King Abdullah University Of Science And Technology Immuogenic compositions of mutant sars-cov-2 n protein and gene and methods of use thereof
US20220387576A1 (en) 2021-05-28 2022-12-08 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
PE20240090A1 (es) 2021-05-28 2024-01-16 Pfizer Composiciones inmunogenas que comprenden antigenos de sacarido capsular conjugados y sus usos
WO2023092090A1 (en) 2021-11-18 2023-05-25 Matrivax, Inc. Immunogenic fusion protein compositions and methods of use thereof
WO2023135515A1 (en) 2022-01-13 2023-07-20 Pfizer Inc. Immunogenic compositions comprising conjugated capsular saccharide antigens and uses thereof
WO2023161817A1 (en) 2022-02-25 2023-08-31 Pfizer Inc. Methods for incorporating azido groups in bacterial capsular polysaccharides
WO2023218322A1 (en) 2022-05-11 2023-11-16 Pfizer Inc. Process for producing of vaccine formulations with preservatives
WO2024018061A1 (en) 2022-07-22 2024-01-25 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Use of bordetella strains for the treatment of chronic obstructive pulmonary disease

Family Cites Families (64)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0002920B1 (de) 1977-12-20 1982-01-13 The Secretary of State for Defence in Her Britannic Majesty's Government of the United Kingdom of Great Britain and Flüssigkristallanzeigevorrichtungen
DE2837342A1 (de) 1978-08-26 1980-03-06 Henkel Kgaa Verfahren zur herstellung von hefeautolysat
DE3380307D1 (en) 1982-12-23 1989-09-07 Procter & Gamble Ethoxylated amine polymers having clay soil removal/anti-redeposition properties useful in detergent compositions
FI861417A0 (fi) 1985-04-15 1986-04-01 Endotronics Inc Hepatitis b ytantigen framstaelld med rekombinant-dna-teknik, vaccin, diagnostiskt medel och cellinjer samt foerfaranden foer framstaellning daerav.
US4895800A (en) 1985-11-26 1990-01-23 Phillips Petroleum Company Yeast production of hepatitis B surface antigen
EP0278940A3 (de) 1987-01-30 1988-12-07 Smithkline Biologicals S.A. Hepatitis-B-Virus-Oberflächenantigene und sie enthaltende hybride Antigene
AU614755B2 (en) 1987-06-05 1991-09-12 United States of America, as represented by the Secretary, U.S. Department of Commerce, The Autocrine motility factors in cancer diagnosis and management
EP1088830A3 (de) 1987-06-22 2004-04-07 Medeva Holdings B.V. Partikel von Hepatitis B Oberflächenantigen
DE3789866T2 (de) 1987-07-17 1994-09-22 Rhein Biotech Proz & Prod Gmbh DNA-Moleküle, die für FMDH-Kontrollabschnitte und Strukturgene für ein Protein mit FMDH-Aktivität kodieren, sowie deren Anwendung.
JPH085804B2 (ja) 1988-04-28 1996-01-24 財団法人化学及血清療法研究所 Ａ型及びｂ型肝炎混合アジュバントワクチン
US4912094B1 (en) 1988-06-29 1994-02-15 Ribi Immunochem Research Inc. Modified lipopolysaccharides and process of preparation
GB8819209D0 (en) 1988-08-12 1988-09-14 Research Corp Ltd Polypeptide & dna encoding same
DE3834729A1 (de) * 1988-10-12 1990-04-19 Behringwerke Ag Verwendung von zink-oder eisenhydroxid zur adjuvierung von antigenloesungen und auf diese weise adjuvierte antigenloesungen
EP0414374B1 (de) 1989-07-25 1997-10-08 Smithkline Biologicals S.A. Antigene sowie Verfahren zu deren Herstellung
GB9007024D0 (en) 1990-03-29 1990-05-30 Imperial College Novel vaccine
GB9105992D0 (en) * 1991-03-21 1991-05-08 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
CA2067003A1 (en) 1991-04-29 1992-10-30 Peter J. Kniskern Hbsag escape mutant vaccine
WO1993010152A1 (en) 1991-11-16 1993-05-27 Smithkline Beecham Biologicals S.A. HYBRID PROTEIN BETWEEN CS FROM PLASMODIUM AND HBsAG
MY111880A (en) * 1992-03-27 2001-02-28 Smithkline Beecham Biologicals S A Hepatitis vaccines containing 3-0 deacylated monophosphoryl lipid a
US6620414B2 (en) 1992-03-27 2003-09-16 Smithkline Beecham Biologicals (S.A.) Hepatitis vaccines containing 3-0-deacylated monophoshoryl lipid A
NZ253065A (en) 1992-05-23 1996-10-28 Smithkline Beecham Biolog Combination vaccines comprising hepatitis b surface antigens and other antigens wherein aluminium phosphate adjuvant is used to adsorb the hepatitis antigen
DE122007000095I1 (de) * 1992-06-25 2008-03-27 Papillomavirus vakzine
HU219808B (hu) * 1992-06-25 2001-08-28 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Adjuvánst tartalmazó vakcinakompozíció és eljárás annak előállítására
US5618536A (en) 1992-09-03 1997-04-08 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Chimeric papillomavirus-like particles
DE69405551T3 (de) 1993-03-23 2005-10-20 Smithkline Beecham Biologicals S.A. 3-0-deazylierte monophosphoryl lipid a enthaltende impfstoff-zusammensetzungen
CA2163550A1 (en) * 1993-05-25 1994-12-08 Gerald E. Hancock Adjuvants for vaccines against respiratory syncytial virus
DE4322107A1 (de) 1993-07-02 1995-01-12 Siemens Ag Einrichtung zum Auffangen und Kühlen von Kernschmelze
GB9326253D0 (en) 1993-12-23 1994-02-23 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
ATE328068T1 (de) 1994-05-16 2006-06-15 Merck & Co Inc Papillomavirus vakzine
CA2194761C (en) 1994-07-15 2006-12-19 Arthur M. Krieg Immunomodulatory oligonucleotides
US6080408A (en) * 1994-08-22 2000-06-27 Connaught Laboratories Limited Human immunodeficiency virus type 1 nucleic acids devoid of long terminal repeats capable of encoding for non-infectious, immunogenic, retrovirus-like particles
US5698679A (en) * 1994-09-19 1997-12-16 National Jewish Center For Immunology And Respiratory Medicine Product and process for targeting an immune response
WO1996011272A2 (de) 1994-10-07 1996-04-18 Medigene Gesellschaft Für Molekularbiologische Diagnostik, Theraphie Und Technologie Mbh Papillomavirusähnliche partikel, fusionsproteine sowie verfahren zu deren herstellung
WO1996026277A1 (en) * 1995-02-24 1996-08-29 Cantab Pharmaceuticals Research Limited Polypeptides useful as immunotherapeutic agents and methods of polypeptide preparation
GB9503863D0 (en) * 1995-02-25 1995-04-19 Smithkline Beecham Biolog Vaccine compositions
US6488934B1 (en) * 1995-02-25 2002-12-03 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Hepatitis B vaccine
KR0184779B1 (ko) * 1995-04-13 1999-04-01 성재갑 퀼라야 사포나리아 몰리나로부터 분리정제된 사포닌 변이체, 이의 분리정제 방법 및 이를 함유하는 백신 제형
UA56132C2 (uk) 1995-04-25 2003-05-15 Смітклайн Бічем Байолоджікалс С.А. Композиція вакцини (варіанти), спосіб стабілізації qs21 відносно гідролізу (варіанти), спосіб приготування композиції вакцини
GB9620795D0 (en) * 1996-10-05 1996-11-20 Smithkline Beecham Plc Vaccines
US6251405B1 (en) 1995-06-07 2001-06-26 Connaught Laboratories, Inc. Immunological combination compositions and methods
SI1082965T1 (sl) * 1995-06-23 2009-08-31 Glaxosmithkline Biolog Sa Sestavek cepiva, ki vsebuje antigen konjugata polisaharida, adsorbiranega na aluminijevem fosfatu
GB9513261D0 (en) * 1995-06-29 1995-09-06 Smithkline Beecham Biolog Vaccines
US5733011A (en) * 1997-02-06 1998-03-31 Richard A. Young Multiple position tool caddy seat
GB9717953D0 (en) 1997-08-22 1997-10-29 Smithkline Beecham Biolog Vaccine
BR9908599A (pt) 1998-03-09 2000-11-14 Smithkline Beecham Biolog Composições combinadas de vacina
GB9806456D0 (en) * 1998-03-25 1998-05-27 Smithkline Beecham Biolog Vaccine composition
GB9806666D0 (en) 1998-03-27 1998-05-27 Stanley Margaret Antigen preparation and use
US6025468A (en) * 1998-06-20 2000-02-15 United Biomedical, Inc. Artificial T helper cell epitopes as immune stimulators for synthetic peptide immunogens including immunogenic LHRH peptides
US6306404B1 (en) * 1998-07-14 2001-10-23 American Cyanamid Company Adjuvant and vaccine compositions containing monophosphoryl lipid A
CA2339034C (en) * 1998-08-14 2010-10-12 Merck & Co., Inc. Process for purifying human papillomavirus virus-like particles
US6692752B1 (en) 1999-09-08 2004-02-17 Smithkline Beecham Biologicals S.A. Methods of treating human females susceptible to HSV infection
GB9819898D0 (en) 1998-09-11 1998-11-04 Smithkline Beecham Plc New vaccine and method of use
DE122007000087I1 (de) 1998-10-16 2008-03-27 Glaxosmithkline Biolog Sa Adjuvanzsysteme und impfstoffe
AUPP765398A0 (en) * 1998-12-11 1999-01-14 University Of Queensland, The Treatment of papillomavirus infections
WO2001011027A1 (es) 1999-08-06 2001-02-15 Glaxo Wellcome, S.A. Nueva proteina
GB9921147D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
GB9921146D0 (en) 1999-09-07 1999-11-10 Smithkline Beecham Biolog Novel composition
US6908613B2 (en) 2000-06-21 2005-06-21 Medimmune, Inc. Chimeric human papillomavirus (HPV) L1 molecules and uses therefor
GB0110431D0 (en) 2001-04-27 2001-06-20 Glaxosmithkline Biolog Sa Novel compounds
GB0206360D0 (en) * 2002-03-18 2002-05-01 Glaxosmithkline Biolog Sa Viral antigens
US7858098B2 (en) 2002-12-20 2010-12-28 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Vaccine
OA13147A (en) * 2002-12-20 2006-12-13 Glaxosmithkline Biolog Sa HPV-16 and -18 L1 VLP vaccine.
US7196060B2 (en) 2003-09-10 2007-03-27 S-Cell Biosciences, Inc. Method to enhance hematopoiesis
US7758866B2 (en) * 2004-06-16 2010-07-20 Glaxosmithkline Biologicals, S.A. Vaccine against HPV16 and HPV18 and at least another HPV type selected from HPV 31, 45 or 52

Also Published As

Publication number Publication date
NL300311I1 (nl) 2008-02-01
CA2347099C (en) 2014-08-05
BR9915545A (pt) 2001-08-14
US20080226672A1 (en) 2008-09-18
BRPI9915545B8 (pt) 2021-05-25
DE122007000087I1 (de) 2008-03-27
DE69935606D1 (de) 2007-05-03
CN101926993B (zh) 2013-12-04
PT1126876E (pt) 2007-04-30
LU91389I9 (de) 2019-01-02
NL300311I2 (nl) 2008-04-01
JP2012121916A (ja) 2012-06-28
NO20011801L (no) 2001-05-30
PL348121A1 (en) 2002-05-06
NZ511113A (en) 2002-09-27
IL142395A (en) 2006-08-01
CN100406060C (zh) 2008-07-30
CY2007032I1 (el) 2009-11-04
US8628784B2 (en) 2014-01-14
EP1588714A2 (de) 2005-10-26
EP1126876B1 (de) 2007-03-21
CY2007032I2 (el) 2009-11-04
EP1666060A1 (de) 2006-06-07
CA2773698A1 (en) 2000-04-27
TW586936B (en) 2004-05-11
HK1038695B (zh) 2007-09-14
TR200101055T2 (tr) 2001-09-21
WO2000023105A2 (en) 2000-04-27
CN101926993A (zh) 2010-12-29
AU750587B2 (en) 2002-07-25
US7357936B1 (en) 2008-04-15
KR100629028B1 (ko) 2006-09-26
DE69935606T9 (de) 2021-03-11
CY1106596T1 (el) 2010-07-28
US20140105992A1 (en) 2014-04-17
HUS1300050I1 (hu) 2019-06-28
CZ301212B6 (cs) 2009-12-09
HK1038695A1 (en) 2002-03-28
US9623114B2 (en) 2017-04-18
BR9915545B1 (pt) 2013-08-06
NO20011801D0 (no) 2001-04-09
LU91389I2 (fr) 2008-02-14
KR20010075638A (ko) 2001-08-09
JP5667107B2 (ja) 2015-02-12
JP2007262097A (ja) 2007-10-11
CA2773698C (en) 2015-05-19
HUP0203091A3 (en) 2008-04-28
CA2347099A1 (en) 2000-04-27
SI1126876T1 (sl) 2007-08-31
JP5563189B2 (ja) 2014-07-30
CN100558401C (zh) 2009-11-11
FR07C0064I1 (fr) 2008-02-01
CO5210894A1 (es) 2002-10-30
AR020836A1 (es) 2002-05-29
AU1151800A (en) 2000-05-08
PL201482B1 (pl) 2009-04-30
EP2266604A3 (de) 2011-05-11
MY124689A (en) 2006-06-30
WO2000023105A3 (en) 2000-08-03
HU228473B1 (en) 2013-03-28
NO336250B1 (no) 2015-06-29
IL142395A0 (en) 2002-03-10
ES2284287T3 (es) 2007-11-01
EP1797896A1 (de) 2007-06-20
CN1572324A (zh) 2005-02-02
ATE357252T1 (de) 2007-04-15
DK1126876T3 (da) 2007-07-02
HUP0203091A1 (hu) 2002-12-28
CN1330553A (zh) 2002-01-09
CZ20011341A3 (cs) 2001-09-12
EP1126876A2 (de) 2001-08-29
EP2266604A2 (de) 2010-12-29
JP2003519084A (ja) 2003-06-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE69935606T2 (de) Adjuvanzsysteme und impfstoffe
DE69637254T2 (de) Impfstoffe die ein Saponin und ein Sterol enthalten
US6846489B1 (en) Vaccines containing a saponin and a sterol
US20020058047A1 (en) Vaccines
MXPA01003737A (en) Adjuvant systems and vaccines
ZA200102954B (en) Adjuvant systems and vaccines.