PL196626B1 - Nowe pochodne insuliny, sposób ich wytwarzania, prekursory pochodnych insuliny, sekwencje DNA kodujące te prekursory, wektory ekspresyjne, komórka gospodarza, środek farmaceutyczny, roztwór o aktywności insulinowej i zastosowanie nowych pochodnych insuliny - Google Patents
Nowe pochodne insuliny, sposób ich wytwarzania, prekursory pochodnych insuliny, sekwencje DNA kodujące te prekursory, wektory ekspresyjne, komórka gospodarza, środek farmaceutyczny, roztwór o aktywności insulinowej i zastosowanie nowych pochodnych insulinyInfo
- Publication number
- PL196626B1 PL196626B1 PL326936A PL32693698A PL196626B1 PL 196626 B1 PL196626 B1 PL 196626B1 PL 326936 A PL326936 A PL 326936A PL 32693698 A PL32693698 A PL 32693698A PL 196626 B1 PL196626 B1 PL 196626B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- insulin
- amino acid
- gly
- chain
- leu
- Prior art date
Links
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical class N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 262
- 239000002243 precursor Substances 0.000 title claims description 43
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 37
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 title claims description 22
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 title claims description 14
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 title 1
- 230000002608 insulinlike Effects 0.000 title 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims abstract description 38
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 claims description 110
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 76
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 claims description 68
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 claims description 58
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 claims description 58
- 239000004026 insulin derivative Substances 0.000 claims description 56
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims description 45
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 45
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 45
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 claims description 39
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 claims description 39
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 claims description 37
- 108010016616 cysteinylglycine Proteins 0.000 claims description 37
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 36
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 36
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 35
- PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N insulin (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 PBGKTOXHQIOBKM-FHFVDXKLSA-N 0.000 claims description 27
- 101000976075 Homo sapiens Insulin Proteins 0.000 claims description 26
- 108010049041 glutamylalanine Proteins 0.000 claims description 25
- LJUIEESLIAZSFR-SRVKXCTJSA-N His-Leu-Cys Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CN=CN1)N LJUIEESLIAZSFR-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 21
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 19
- DHDOADIPGZTAHT-YUMQZZPRSA-N Gly-Glu-Arg Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCN=C(N)N DHDOADIPGZTAHT-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims description 18
- AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N Leu-Val-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O AIMGJYMCTAABEN-GVXVVHGQSA-N 0.000 claims description 17
- MKIAPEZXQDILRR-YUMQZZPRSA-N Gly-Ser-His Chemical compound C1=C(NC=N1)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CN MKIAPEZXQDILRR-YUMQZZPRSA-N 0.000 claims description 16
- TUIOUEWKFFVNLH-DCAQKATOSA-N Leu-Val-Cys Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O TUIOUEWKFFVNLH-DCAQKATOSA-N 0.000 claims description 16
- FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N dipeptide phenylalanyl-tyrosine Natural products C=1C=C(O)C=CC=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- FEUPVVCGQLNXNP-IRXDYDNUSA-N Gly-Phe-Phe Chemical compound C([C@H](NC(=O)CN)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FEUPVVCGQLNXNP-IRXDYDNUSA-N 0.000 claims description 15
- RGMLUHANLDVMPB-ULQDDVLXSA-N Phe-Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=CC=C1)N RGMLUHANLDVMPB-ULQDDVLXSA-N 0.000 claims description 15
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 15
- KOHBWQDSVCARMI-BWBBJGPYSA-N Cys-Cys-Thr Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O KOHBWQDSVCARMI-BWBBJGPYSA-N 0.000 claims description 14
- 230000009471 action Effects 0.000 claims description 13
- YVKSMSDXKMSIRX-GUBZILKMSA-N Leu-Glu-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O YVKSMSDXKMSIRX-GUBZILKMSA-N 0.000 claims description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 12
- RGQCNKIDEQJEBT-CQDKDKBSSA-N Ala-Leu-Tyr Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 RGQCNKIDEQJEBT-CQDKDKBSSA-N 0.000 claims description 11
- FMLRRBDLBJLJIK-DCAQKATOSA-N Pro-Leu-Ala Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 FMLRRBDLBJLJIK-DCAQKATOSA-N 0.000 claims description 11
- ROLGIBMFNMZANA-GVXVVHGQSA-N Val-Glu-Leu Chemical compound CC(C)C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)NC(=O)[C@H](C(C)C)N ROLGIBMFNMZANA-GVXVVHGQSA-N 0.000 claims description 11
- 108010013768 glutamyl-aspartyl-proline Proteins 0.000 claims description 11
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 claims description 11
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 11
- DLPXTCTVNDTYGJ-JBDRJPRFSA-N Ser-Ile-Cys Chemical compound OC[C@H](N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CS)C(O)=O DLPXTCTVNDTYGJ-JBDRJPRFSA-N 0.000 claims description 10
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 claims description 10
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 claims description 10
- 108010029020 prolylglycine Proteins 0.000 claims description 10
- KUFVXLQLDHJVOG-SHGPDSBTSA-N Ala-Thr-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)NC(=O)[C@H](C)N)O KUFVXLQLDHJVOG-SHGPDSBTSA-N 0.000 claims description 9
- CKOFNWCLWRYUHK-XHNCKOQMSA-N Glu-Asp-Pro Chemical compound C1C[C@@H](N(C1)C(=O)[C@H](CC(=O)O)NC(=O)[C@H](CCC(=O)O)N)C(=O)O CKOFNWCLWRYUHK-XHNCKOQMSA-N 0.000 claims description 9
- UPJONISHZRADBH-XPUUQOCRSA-N Val-Glu Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O UPJONISHZRADBH-XPUUQOCRSA-N 0.000 claims description 9
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 9
- UGVQELHRNUDMAA-BYPYZUCNSA-N Gly-Ala-Gly Chemical compound [NH3+]CC(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC([O-])=O UGVQELHRNUDMAA-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 8
- BUEFQXUHTUZXHR-LURJTMIESA-N Gly-Gly-Pro zwitterion Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O BUEFQXUHTUZXHR-LURJTMIESA-N 0.000 claims description 8
- 101500025354 Homo sapiens Insulin B chain Proteins 0.000 claims description 8
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims description 8
- NEEOBPIXKWSBRF-IUCAKERBSA-N Leu-Glu-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(O)=O NEEOBPIXKWSBRF-IUCAKERBSA-N 0.000 claims description 8
- GAOJCVKPIGHTGO-UWVGGRQHSA-N Lys-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O GAOJCVKPIGHTGO-UWVGGRQHSA-N 0.000 claims description 8
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- IOUPEELXVYPCPG-UHFFFAOYSA-N Valylglycine Chemical compound CC(C)C(N)C(=O)NCC(O)=O IOUPEELXVYPCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 claims description 8
- 108010073093 leucyl-glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 claims description 8
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 8
- -1 residue Chemical compound 0.000 claims description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 8
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 7
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 7
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 claims description 7
- JWOBLHJRDADHLN-KKUMJFAQSA-N Ser-Leu-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O JWOBLHJRDADHLN-KKUMJFAQSA-N 0.000 claims description 7
- XFTYVCHLARBHBQ-FOHZUACHSA-N Thr-Gly-Asn Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XFTYVCHLARBHBQ-FOHZUACHSA-N 0.000 claims description 7
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 claims description 7
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 7
- 108010073969 valyllysine Proteins 0.000 claims description 7
- HPKSHFSEXICTLI-CIUDSAMLSA-N Arg-Glu-Ala Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O HPKSHFSEXICTLI-CIUDSAMLSA-N 0.000 claims description 6
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 claims description 6
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 claims description 6
- 102000007327 Protamines Human genes 0.000 claims description 6
- 108010007568 Protamines Proteins 0.000 claims description 6
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 claims description 6
- XBWKCYFGRXKWGO-SRVKXCTJSA-N Tyr-Cys-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O XBWKCYFGRXKWGO-SRVKXCTJSA-N 0.000 claims description 6
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 108010068380 arginylarginine Proteins 0.000 claims description 6
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 6
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 claims description 6
- SLQQPJBDBVPVQV-JYJNAYRXSA-N Arg-Phe-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O SLQQPJBDBVPVQV-JYJNAYRXSA-N 0.000 claims description 5
- FIXILCYTSAUERA-FXQIFTODSA-N Ser-Ala-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O FIXILCYTSAUERA-FXQIFTODSA-N 0.000 claims description 5
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 claims description 5
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 5
- 108010070643 prolylglutamic acid Proteins 0.000 claims description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims description 4
- TVHCDSBMFQYPNA-RHYQMDGZSA-N Lys-Thr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O TVHCDSBMFQYPNA-RHYQMDGZSA-N 0.000 claims description 4
- OHOVFPKXPZODHS-SJWGOKEGSA-N Tyr-Ile-Pro Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N OHOVFPKXPZODHS-SJWGOKEGSA-N 0.000 claims description 4
- AOIZTZRWMSPPAY-KAOXEZKKSA-N Tyr-Thr-Pro Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)N1CCC[C@@H]1C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=C(C=C2)O)N)O AOIZTZRWMSPPAY-KAOXEZKKSA-N 0.000 claims description 4
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 claims description 4
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 4
- XTMZYFMTYJNABC-ZLUOBGJFSA-N Asn-Ser-Ala Chemical compound C[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(=O)N)N XTMZYFMTYJNABC-ZLUOBGJFSA-N 0.000 claims description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 3
- PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N Ser-Thr-Gly Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)NCC(=O)O)NC(=O)[C@H](CO)N)O PURRNJBBXDDWLX-ZDLURKLDSA-N 0.000 claims description 3
- NZBSVMQZQMEUHI-WZLNRYEVSA-N Tyr-Thr-Ile Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)N NZBSVMQZQMEUHI-WZLNRYEVSA-N 0.000 claims description 3
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 claims description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 3
- 239000004474 valine Substances 0.000 claims description 3
- TWYSSILQABLLME-HJGDQZAQSA-N Glu-Thr-Arg Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O TWYSSILQABLLME-HJGDQZAQSA-N 0.000 claims description 2
- ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N Lys-Thr Chemical compound C[C@@H](O)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCCN ZOKVLMBYDSIDKG-CSMHCCOUSA-N 0.000 claims description 2
- HUKLXYYPZWPXCC-KZVJFYERSA-N Met-Ala-Thr Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O HUKLXYYPZWPXCC-KZVJFYERSA-N 0.000 claims description 2
- 108010024078 alanyl-glycyl-serine Proteins 0.000 claims description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 claims description 2
- 229950008679 protamine sulfate Drugs 0.000 claims 2
- YWWATNIVMOCSAV-UBHSHLNASA-N Ala-Arg-Phe Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](N)C)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 YWWATNIVMOCSAV-UBHSHLNASA-N 0.000 claims 1
- XCLCVBYNGXEVDU-WHFBIAKZSA-N Gly-Asn-Ser Chemical compound NCC(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(O)=O XCLCVBYNGXEVDU-WHFBIAKZSA-N 0.000 claims 1
- RVMNUBQWPVOUKH-HEIBUPTGSA-N Thr-Ser-Thr Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O RVMNUBQWPVOUKH-HEIBUPTGSA-N 0.000 claims 1
- 108010050848 glycylleucine Proteins 0.000 claims 1
- 230000002459 sustained effect Effects 0.000 claims 1
- 108010061238 threonyl-glycine Proteins 0.000 claims 1
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 abstract description 4
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 45
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 25
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 24
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 24
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 22
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 22
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 17
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 17
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 16
- 241001416181 Axis axis Species 0.000 description 11
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 11
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 9
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 9
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 8
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 7
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 7
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 7
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 6
- 101000740205 Homo sapiens Sal-like protein 1 Proteins 0.000 description 6
- 102100037204 Sal-like protein 1 Human genes 0.000 description 6
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 5
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 5
- MHNBYYFXWDUGBW-RPTUDFQQSA-N Phe-Tyr-Thr Chemical compound C[C@H]([C@@H](C(=O)O)NC(=O)[C@H](CC1=CC=C(C=C1)O)NC(=O)[C@H](CC2=CC=CC=C2)N)O MHNBYYFXWDUGBW-RPTUDFQQSA-N 0.000 description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 5
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 5
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 5
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 5
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 5
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 5
- HAVKMRGWNXMCDR-STQMWFEESA-N Arg-Gly-Phe Chemical compound [H]N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(O)=O HAVKMRGWNXMCDR-STQMWFEESA-N 0.000 description 4
- TWROVBNEHJSXDG-IHRRRGAJSA-N His-Leu-Val Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O TWROVBNEHJSXDG-IHRRRGAJSA-N 0.000 description 4
- JGKHAFUAPZCCDU-BZSNNMDCSA-N Leu-Tyr-Leu Chemical compound CC(C)C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C([O-])=O)CC1=CC=C(O)C=C1 JGKHAFUAPZCCDU-BZSNNMDCSA-N 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 4
- LEMUFSYUPGXXCM-JNEQYSBXSA-N caninsulin Chemical compound [Zn].C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC3N=CN=C3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)O)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)CC)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1C=NC=N1 LEMUFSYUPGXXCM-JNEQYSBXSA-N 0.000 description 4
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 4
- XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N glycyl-glycyl-glycine Chemical compound NCC(=O)NCC(=O)NCC(O)=O XKUKSGPZAADMRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 4
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 4
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 4
- 229940048914 protamine Drugs 0.000 description 4
- CXISPYVYMQWFLE-VKHMYHEASA-N Ala-Gly Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)NCC([O-])=O CXISPYVYMQWFLE-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N Arg-Gly Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N XUUXCWCKKCZEAW-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 3
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 3
- 241001646716 Escherichia coli K-12 Species 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- COVXELOAORHTND-LSJOCFKGSA-N Gly-Ile-Val Chemical compound NCC(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O COVXELOAORHTND-LSJOCFKGSA-N 0.000 description 3
- JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N H-Gly-Phe-OH Natural products NCC(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=CC=C1 JBCLFWXMTIKCCB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000005237 Isophane Insulin Human genes 0.000 description 3
- 108010081368 Isophane Insulin Proteins 0.000 description 3
- LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N L-leucine-L-tyrosine Natural products CC(C)CC(N)C(=O)NC(C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LHSGPCFBGJHPCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108010076181 Proinsulin Proteins 0.000 description 3
- 229940123452 Rapid-acting insulin Drugs 0.000 description 3
- 108010026951 Short-Acting Insulin Proteins 0.000 description 3
- XYEXCEPTALHNEV-RCWTZXSCSA-N Thr-Arg-Arg Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O XYEXCEPTALHNEV-RCWTZXSCSA-N 0.000 description 3
- FPCIBLUVDNXPJO-XPUUQOCRSA-N Val-Cys-Gly Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O FPCIBLUVDNXPJO-XPUUQOCRSA-N 0.000 description 3
- 108010047495 alanylglycine Proteins 0.000 description 3
- 108010081551 glycylphenylalanine Proteins 0.000 description 3
- 230000003914 insulin secretion Effects 0.000 description 3
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 3
- 108010012058 leucyltyrosine Proteins 0.000 description 3
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 3
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 3
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 3
- KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N Ala-Glu-Asp Chemical compound C[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(O)=O KXEVYGKATAMXJJ-ACZMJKKPSA-N 0.000 description 2
- UXJCMQFPDWCHKX-DCAQKATOSA-N Arg-Arg-Glu Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O UXJCMQFPDWCHKX-DCAQKATOSA-N 0.000 description 2
- 108010075254 C-Peptide Proteins 0.000 description 2
- GCDLPNRHPWBKJJ-WDSKDSINSA-N Cys-Gly-Glu Chemical compound [H]N[C@@H](CS)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O GCDLPNRHPWBKJJ-WDSKDSINSA-N 0.000 description 2
- ZJICFHQSPWFBKP-AVGNSLFASA-N Glu-Asn-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O ZJICFHQSPWFBKP-AVGNSLFASA-N 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101500025353 Homo sapiens Insulin A chain Proteins 0.000 description 2
- CKRFDMPBSWYOBT-PPCPHDFISA-N Ile-Lys-Thr Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)O)N CKRFDMPBSWYOBT-PPCPHDFISA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- IASQBRJGRVXNJI-YUMQZZPRSA-N Leu-Cys-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O IASQBRJGRVXNJI-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 2
- LHSGPCFBGJHPCY-STQMWFEESA-N Leu-Tyr Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CC1=CC=C(O)C=C1 LHSGPCFBGJHPCY-STQMWFEESA-N 0.000 description 2
- 102000003960 Ligases Human genes 0.000 description 2
- 108090000364 Ligases Proteins 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010005991 Pork Regular Insulin Proteins 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 2
- CICQXRWZNVXFCU-SRVKXCTJSA-N Ser-His-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC1=CNC=N1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O CICQXRWZNVXFCU-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- XKDOQXAXKFQWQJ-SRVKXCTJSA-N Tyr-Cys-Asp Chemical compound C1=CC(=CC=C1C[C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(=O)O)C(=O)O)N)O XKDOQXAXKFQWQJ-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 2
- CDKZJGMPZHPAJC-ULQDDVLXSA-N Tyr-Leu-Val Chemical compound CC(C)[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 CDKZJGMPZHPAJC-ULQDDVLXSA-N 0.000 description 2
- XGJLNBNZNMVJRS-NRPADANISA-N Val-Glu-Ala Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O XGJLNBNZNMVJRS-NRPADANISA-N 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N bovine insulin Chemical class C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H]1CSSC[C@H]2C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3C=CC(O)=CC=3)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=3NC=NC=3)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)CNC1=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O)=O)CSSC[C@@H](C(N2)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CN)[C@@H](C)CC)C(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)C1=CN=CN1 IXIBAKNTJSCKJM-BUBXBXGNSA-N 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 2
- 108010067216 glycyl-glycyl-glycine Proteins 0.000 description 2
- 239000012731 long-acting form Substances 0.000 description 2
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010013359 miniproinsulin Proteins 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000000291 postprandial effect Effects 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- 208000001072 type 2 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- FAAHJOLJYDXKKU-ZHDGNLTBSA-N (2s)-6-amino-2-[[(2s)-1-[(2s,3r)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[(2-aminoacetyl)amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)propanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)CN)C1=CC=C(O)C=C1 FAAHJOLJYDXKKU-ZHDGNLTBSA-N 0.000 description 1
- VOUAQYXWVJDEQY-QENPJCQMSA-N 33017-11-7 Chemical compound OC(=O)CC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N1[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)CCC1 VOUAQYXWVJDEQY-QENPJCQMSA-N 0.000 description 1
- 229940090248 4-hydroxybenzoic acid Drugs 0.000 description 1
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004569 Blindness Diseases 0.000 description 1
- 101001011741 Bos taurus Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000003670 Carboxypeptidase B Human genes 0.000 description 1
- 108090000087 Carboxypeptidase B Proteins 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 208000002249 Diabetes Complications Diseases 0.000 description 1
- 206010012655 Diabetic complications Diseases 0.000 description 1
- 206010061818 Disease progression Diseases 0.000 description 1
- ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N Glu-Ala-Leu Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O ITYRYNUZHPNCIK-GUBZILKMSA-N 0.000 description 1
- NLKVNZUFDPWPNL-YUMQZZPRSA-N Glu-Arg-Gly Chemical compound [H]N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(O)=O NLKVNZUFDPWPNL-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- NSVOVKWEKGEOQB-LURJTMIESA-N Gly-Pro-Gly Chemical compound NCC(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(O)=O NSVOVKWEKGEOQB-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 102000005561 Human Isophane Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108010084048 Human Isophane Insulin Proteins 0.000 description 1
- YWCJXQKATPNPOE-UKJIMTQDSA-N Ile-Val-Glu Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H](C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(=O)O)C(=O)O)N YWCJXQKATPNPOE-UKJIMTQDSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DSXPMZMSJHOKKK-HJOGWXRNSA-N Phe-Phe-Tyr Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](CC1=CC=C(O)C=C1)C(O)=O DSXPMZMSJHOKKK-HJOGWXRNSA-N 0.000 description 1
- FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N Phe-Tyr Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 FSXRLASFHBWESK-HOTGVXAUSA-N 0.000 description 1
- GOUWCZRDTWTODO-YDHLFZDLSA-N Phe-Val-Asn Chemical compound [H]N[C@@H](CC1=CC=CC=C1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O GOUWCZRDTWTODO-YDHLFZDLSA-N 0.000 description 1
- RVQDZELMXZRSSI-IUCAKERBSA-N Pro-Lys Chemical compound NCCCC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H]1CCCN1 RVQDZELMXZRSSI-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- WFIVLLFYUZZWOD-RHYQMDGZSA-N Pro-Lys-Thr Chemical compound [H]N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(O)=O WFIVLLFYUZZWOD-RHYQMDGZSA-N 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 101000757149 Rhizopus oryzae Glucoamylase 1 Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- XKWABWFMQXMUMT-HJGDQZAQSA-N Thr-Pro-Glu Chemical compound [H]N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O XKWABWFMQXMUMT-HJGDQZAQSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKHXYJKMNSSFFL-IUCAKERBSA-N Val-Lys Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCCCN JKHXYJKMNSSFFL-IUCAKERBSA-N 0.000 description 1
- PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N Zinc dication Chemical compound [Zn+2] PTFCDOFLOPIGGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 1
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 1
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000005750 disease progression Effects 0.000 description 1
- 230000008482 dysregulation Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N glycolonitrile Natural products N#CC#N JMANVNJQNLATNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N glycylglycine Chemical compound [NH3+]CC(=O)NCC([O-])=O YMAWOPBAYDPSLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 229940102223 injectable solution Drugs 0.000 description 1
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 1
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 1
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 125000000962 organic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N papa-hydroxy-benzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 FJKROLUGYXJWQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000007180 physiological regulation Effects 0.000 description 1
- 108010066381 preproinsulin Proteins 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000002741 site-directed mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002987 valine group Chemical group [H]N([H])C([H])(C(*)=O)C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 238000012795 verification Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/28—Insulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
- A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/80—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi
- C12N15/81—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi for yeasts
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Obesity (AREA)
- Hematology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Immunology (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
1. Nowe pochodne insuliny o ogólnym wzorze 1, w których (A1-A5) oznaczaj a reszty aminokwasów w pozycjach A1 do A5 lancucha A insuliny ludzkiej, (A12-A19) oznaczaj a reszty aminokwasów w pozycjach A12 do A19 lancucha A insuliny ludzkiej, A21 oznacza Asn, (B8-B18) oznaczaj a reszty aminokwasów w pozy- cjach B8 do B18 lancucha B insuliny ludzkiej, (B20-B26) oznaczaj a reszty aminokwasów w pozycjach B20 do B26 lancucha B insuliny ludzkiej, A8, A9 i A10 oznacza- j a reszty aminokwasów w pozycjach A8, A9 i A10 la n- cucha A insuliny ludzkiej lub insuliny zwierz ecej, B30 oznacza -OH lub reszt e aminokwasu w pozycji B30 lancucha B insuliny ludzkiej lub insuliny zwierz ecej, B1 oznacza reszt e fenyloalaniny (Phe) lub atom wodoru, B3 oznacza reszt e wyst epuj acego w naturze zasado- wego aminokwasu, B27, B28 i B29 oznaczaj a reszty aminokwasów w pozycjach B27, B28 i B29 la ncucha B insuliny ludzkiej lub insuliny zwierz ecej, albo niezale znie reszt e innego wyst epuj acego w naturze aminokwasu, przy czym co najmniej jedna z reszt aminokwasów w pozycjach B27, B28 i B29 la ncucha B jest zast apiona reszt a innego wyst epuj acego w naturze aminokwasu, wybran a z reszt oboj etnych i kwasowych aminokwasów, oraz ich fizjologicznie zgodne sole. PL PL PL PL PL PL
Description
(19) PL (11) 196626 (13) B1 (51) Int.Cl.
C12N 15/17 (2006.01) C12N 15/63 (2006.01) C12N 15/62 (2006.01) (22) Data zgłoszenia: 20.06.1998
| Urząd Patentowy Rzeczypospolitej Polskiej | C07K 14/62 (2006.01) A61K 38/28 (2006.01) |
| Nowe pochodne insuliny, sposób ich wytwarzania, prekursory pochodnych insuliny, (54) sekwencje DNA kodujące te prekursory, wektory ekspresyjne, komórka gospodarza, (54) środek farmaceutyczny, roztwór o aktywności insulinowej i zastosowanie nowych pochodnych insuliny | |
| (73) Uprawniony z patentu: | |
| (30) Pierwszeństwo: | SANOFI-AVENTIS DEUTSCHLAND GmbH, Frankfurt nad Menem,DE |
| 20.06.1997,DE,19726167.1 | |
| (43) Zgłoszenie ogłoszono: 21.12.1998 BUP 26/98 | (72) Twórca(y) wynalazku: Johann Ertl,Bremthal,DE Paul Habermann,Eppstein,DE Karl Geisen,Frankfurt,DE Gerhard Seipke,Hofheim,DE |
| (45) O udzieleniu patentu ogłoszono: 31.01.2008 WUP 01/08 | (74) Pełnomocnik: Zofia Sulima, Sulima Grabowska Sierzputowska, Biuro Patentów i Znaków Towarowych Sp.j. |
(57) 1. Nowe pochodne insuliny o ogólnym wzorze 1, w których (A1-A5) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach A1 do A5 ł a ń cucha A insuliny ludzkiej, (A12-A19) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach A12 do A19 łańcucha A insuliny ludzkiej, A21 oznacza Asn, (B8-B18) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach B8 do B18 łańcucha B insuliny ludzkiej, (B20-B26) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach B20 do B26 łańcucha B insuliny ludzkiej, A8, A9 i A10 oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach A8, A9 i A10 łańcucha A insuliny ludzkiej lub insuliny zwierzęcej, B30 oznacza -OH lub resztę aminokwasu w pozycji B30 łańcucha B insuliny ludzkiej lub insuliny zwierzęcej, B1 oznacza resztę fenyloalaniny (Phe) lub atom wodoru, B3 oznacza resztę występującego w naturze zasadowego aminokwasu, B27, B28 i B29 oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B insuliny ludzkiej lub insuliny zwierzęcej, albo niezależnie resztę innego występującego w naturze aminokwasu, przy czym co najmniej jedna z reszt aminokwasów w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B jest zastąpiona resztą innego występującego w naturze aminokwasu, wybraną z reszt obojętnych i kwasowych aminokwasów, oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
PL 196 626 B1
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są nowe pochodne insuliny, sposób ich wytwarzania, prekursory pochodnych insuliny, sekwencje DNA kodujące te prekursory, wektory ekspresyjne, komórka gospodarza, środek farmaceutyczny, roztwór o aktywności insulinowej i zastosowanie nowych pochodnych insuliny.
Na całym świecie około 120 milionów ludzi cierpi na cukrzycę, w tym około 12 milionów ludzi chorych jest na cukrzycę typu 1 i stosowanie insuliny jest dla nich obecnie jedyną możliwą terapią. Chorzy są skazani przez całe życie na wstrzykiwanie insuliny, z reguły kilka razy dziennie. Chociaż cukrzyca typu 2, na którą cierpi 100 milionów ludzi, nie jest zasadniczo związana z niedoborem insuliny, jednak w wielu przypadkach leczenie insuliną jest uważane za odpowiednią lub jedynie możliwą postać terapii.
Wraz z trwaniem choroby duża liczba pacjentów cierpi na tak zwane powikłania cukrzycowe. Dotyczy to w znacznym stopniu uszkodzeń mikro- i makronaczyniowych, które w zależności od rodzaju i rozległości uszkodzeń prowadzą do niewydolności nerek, ślepoty, utraty kończyn lub do podwyższonego ryzyka chorób serca i układu krążenia.
Przyczyną tego jest przede wszystkim chronicznie podwyższony poziom glukozy we krwi, ponieważ nawet przy starannej terapii insulinowej nie osiąga się normalnego poziomu glukozy, odpowiadającego regulacji fizjologicznej (Ward J.D. (1989) British Medical Bulletin 45, 111-126; Drury P.L. i inni (1989) British Medical Bulletin 45, 127-147; Kohner E.M. (1989) British Medical Bulletin 45, 148-173).
U ludzi zdrowych wydzielanie insuliny jest ś ciś le zwią zane ze stężeniem glukozy we krwi. Podwyższony poziom glukozy, jaki występuje po posiłkach, jest szybko kompensowany podwyższonym uwalnianiem insuliny. Na czczo poziom insuliny w osoczu spada do wartości podstawowej, wystarczającej do ciągłego zaopatrywania w glukozę narządów i tkanek wrażliwych na glukozę. Optymalizacja terapii, tak zwana intensywna terapia insulinowa, jest obecnie ukierunkowana przede wszystkim na to, aby zminimalizować zmiany stężenia glukozy we krwi, szczególnie odchylenia w górę. (Bolli G.B. (1989) Diabetes Res. Clin. Pract. 6, S3-S16; Berger M. (1989) Diabetes Res. Clin. Pract. 6, S25-S32). Prowadzi to do znacznego ograniczenia przypadków uszkodzeń cukrzycowych związanych z postępem choroby (The Diabetes Control and Complications Trial Research Group (1993) N. Engl. J. Med. 329, 977-986).
Biorąc pod uwagę fizjologię wydzielania insuliny można przyjąć, że dla lepszej intensywnej terapii insulinowej, w przypadku preparatów podawanych podskórnie, potrzebne są dwa preparaty insulinowe o różnej dynamice farmakologicznej. Dla kompensacji wzrostu zawartości glukozy we krwi po posiłkach insulina musi szybko dopływać i powinna działać tylko kilka godzin. Dla podstawowego dostarczania, szczególnie w nocy, powinno się dysponować preparatem długo działającym, nie wykazującym żadnego wyraźnego maksimum i dostarczającym insulinę bardzo wolno.
Preparaty oparte na ludzkiej i zwierzęcej insulinie spełniają wymagania intensywnej terapii insulinowej tylko w ograniczonym stopniu. Szybko działająca insulina (stara insulina) po podaniu podskórnym dociera za wolno do krwi i działa zbyt długo. Wskutek tego poposiłkowy poziom insuliny jest zbyt wysoki, a w kilka godzin po posiłku zawartość glukozy we krwi spada w zbyt dużym stopniu (Kang S. i inni (1991) Diabetes Care 14, 142-148; Home P.J. i inni (1989) British Medical Bulletin 45, 92-110; Bolli G.B. (1989) Diabetes Res. Clin. Pract. 6, S3-S16. Natomiast dostępne insuliny podstawowe, przede wszystkim insuliny NPH, cechują się za krótkim czasem działania i wykazują zbyt wyraźne maksimum.
Oprócz możliwości wpływania na profil działania metodami galenowymi, technika genowa stwarza obecnie możliwość wytwarzania pochodnych insuliny o określonych właściwościach, takich jak dostępność i czas działania, przez samą zmianę właściwości strukturalnych. Dzięki zastosowaniu odpowiednich pochodnych insuliny można zatem osiągnąć znacznie lepsze ustawienie poziomu glukozy we krwi, ściślej przypominające stosunki naturalne.
Pochodne insuliny o przyspieszonym działaniu opisano w EP 0214826, EP 0375437 i EP 0678522. EP 0214826 dotyczy związków z podstawieniami między innymi w pozycjach B27 i B28, jednak nie z podstawieniem w pozycji B3. W EP 0678522 opisano pochodne insuliny mające w pozycji B29 reszty różnych aminokwasów, korzystnie proliny, lecz nie kwasu glutaminowego. W EP 0375437 ujawniono pochodne insuliny z resztą lizyny lub argininy w pozycji B28, które ewentualnie dodatkowo mogą być zmodyfikowane w pozycji B3 i/lub A21.
PL 196 626 B1
W EP 0419504 ujawniono pochodne insuliny, chronione przed modyfikacjami chemicznymi, w których zmienione są reszta asparaginy w pozycji B3 i co najmniej jedna inna reszta aminokwasu w pozycjach A5, A15, A18 lub A21. Nie opisano jednak zwią zków z modyfikacjami w pozycjach B27, B28 lub B29. Nie ma tam wskazówki, że te związki mają zmienioną dynamikę farmakologiczną, skutkującą szybszym działaniem.
W WO 92/00321 opisano pochodne insuliny, w których co najmniej jedna reszta aminokwasu w pozycjach B1-B6 jest zastąpiona resztą lizyny lub argininy. Według WO 92/00321 tego rodzaju insuliny wykazują przedłużone działanie. Nie ujawniono jednak związków z modyfikacjami w pozycjach B27, 28, 29.
Istniało zapotrzebowanie na takie pochodne insuliny, które po podaniu, zwłaszcza podskórnym, wykazują przyspieszone działanie w porównaniu z insuliną ludzką, sposób ich wytwarzania, odpowiednie produkty pośrednie oraz ich prekursory.
Pochodnymi insuliny są pochodne naturalnie występujących insulin, a mianowicie insuliny ludzkiej (SEQ ID NO: 1 = łańcuch A insuliny ludzkiej; SEQ ID NO: 2 = łańcuch B insuliny ludzkiej, patrz wykaz sekwencji) lub insulin zwierzęcych, które w wyniku podstawienia co najmniej jednej reszty występującego w naturze aminokwasu i/lub przyłączenia co najmniej jednej reszty aminokwasu i/lub grupy organicznej odróżniają się od odpowiednich, pod innymi względami takich samych, insulin występujących w naturze.
Wynalazek dotyczy nowych pochodnych insuliny o ogólnym wzorze 1, w którym (A1-A5) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach A1 do A5 łańcucha A insuliny ludzkiej, (A12-A19) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach A12 do A19 łańcucha insuliny ludzkiej, A21 oznacza Asn, (B8-B18) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach B8 do B18 łańcucha B insuliny ludzkiej, (B20-B26) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach B20 do B26 łańcucha B insuliny ludzkiej, A8, A9 i A10 oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach A8, A9 i A10 łańcucha A insuliny ludzkiej lub insuliny zwierzęcej, B30 oznacza -OH lub resztę aminokwasu w pozycji B30 łańcucha B insuliny ludzkiej lub insuliny zwierzęcej, B1 oznacza resztę fenyloalaniny (Phe) lub atom wodoru, B3 oznacza resztę występującego w naturze zasadowego aminokwasu, B27, B28 i B29 oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B insuliny ludzkiej lub insuliny zwierzęcej, albo niezależnie resztę innego występującego w naturze aminokwasu, przy czym co najmniej jedna z reszt aminokwasów w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B jest zastąpiona resztą innego występującego w naturze aminokwasu, wybraną z reszt obojętnych i kwasowych aminokwasów, oraz ich fizjologicznie zgodnych soli.
Korzystne są pochodne insuliny, w których A8 oznacza alaninę (Ala), A9 oznacza serynę (Ser), A10 oznacza walinę (Val), a B30 oznacza alaninę (Ala), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
Korzystne są pochodne insuliny, w których A8 oznacza treoninę (Thr), A9 oznacza serynę (Ser), a A10 oznacza izoleucynę (Ile), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
Szczególnie korzystne są pochodne insuliny, w których B30 oznacza alaninę (Ala), oraz ich fizjologicznie zgodne sole lub pochodne, albo pochodne insuliny, w których B30 oznacza treoninę (Thr), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
Korzystne są pochodne insuliny, w których resztę aminokwasu w pozycji B1 łańcucha B stanowi reszta fenyloalaniny (Phe), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
Korzystne są pochodne insuliny, w których resztę aminokwasu w pozycji B3 łańcucha B stanowi reszta histydyny (His), lizyny (Lys) lub argininy (Arg), oraz ich fizjologicznie zgodne sole, a zwłaszcza te pochodne, w których resztę aminokwasu w pozycji B3 łańcucha B stanowi reszta histydyny (His), oraz ich fizjologicznie zgodne sole, albo te pochodne, w których resztę aminokwasu w pozycji B3 łańcucha B stanowi reszta argininy (Arg), oraz ich fizjologicznie zgodne sole, względnie te pochodne, w których resztę aminokwasu w pozycji B3 ł a ń cucha B stanowi reszta lizyny (Lys), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
Korzystne są pochodne insuliny, w których co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta występującego w naturze aminokwasu wybranego z grupy obejmującej izoleucynę (Ile), kwas asparaginowy (Asp) i kwas glutaminowy (Glu), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
Korzystne są pochodne insuliny, w których co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta występującego w naturze aminokwasu wybranego z grupy kwasowych aminokwasów, oraz ich fizjologicznie zgodne sole, a zwłaszcza te pochodne, w których co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta kwasu asparaginowego (Asp), oraz ich fizjologicznie zgodne sole, albo te pochodne, w których co najmniej
PL 196 626 B1 jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta kwasu glutaminowego (Glu), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
Korzystne są pochodne insuliny, w których co najmniej jedna reszta aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B jest zastąpiona resztą występującego w naturze aminokwasu wybranego z grupy oboję tnych aminokwasów, oraz ich fizjologicznie zgodne sole, a zwł aszcza te pochodne, w których co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta izoleucyny (Ile), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
Szczególnie korzystne są pochodne insuliny, w których resztę aminokwasu w pozycji B27 łańcucha B stanowi reszta kwasu asparaginowego (Asp), oraz ich fizjologicznie zgodne sole, albo pochodne insuliny, w których resztę aminokwasu w pozycji B28 łańcucha B stanowi reszta kwasu asparaginowego (Asp), oraz ich fizjologicznie zgodne sole, względnie pochodne insuliny, w których resztę aminokwasu w pozycji B29 łańcucha B stanowi reszta kwasu asparaginowego (Asp), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
Szczególnie korzystne są pochodne insuliny, w których resztę aminokwasu w pozycji B27 łańcucha B stanowi reszta kwasu glutaminowego (Glu), oraz ich fizjologicznie zgodne sole, albo pochodne insuliny, w których resztę aminokwasu w pozycji B28 łańcucha B stanowi reszta kwasu glutaminowego (Glu), oraz ich fizjologicznie zgodne sole, względnie pochodne insuliny, w których resztę aminokwasu w pozycji B29 łańcucha B stanowi reszta kwasu glutaminowego (Glu), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
Szczególnie korzystne są pochodne insuliny, w których resztę aminokwasu w pozycji B28 łańcucha B stanowi reszta izoleucyny (Ile), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
Wyjątkowo korzystne są pochodne insuliny, w których łańcuch B ma sekwencję
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr (SEQ ID NO: 3), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
Korzystne są pochodne insuliny, w których resztę aminokwasu w pozycji B27 łańcucha B stanowi reszta izoleucyny (Ile), oraz ich fizjologicznie zgodne sole, a zwłaszcza pochodne insuliny, w których ł a ń cuch B ma sekwencję
| Phe | Val | Lys | Gin | His | Leu | Cys Gly Ser His Leu Val | Glu | Ala | Leu |
| Tyr | Leu | Val | Cys | Gly | Glu | Arg Gly Phe Phe Tyr Ile | Pro | Lys | Thr |
| (SEQ | ID | NO: | 5) , | oraz | ich | fizjologicznie zgodne sole. |
Wyjątkowo korzystne są pochodne insuliny, w których łańcuch B ma sekwencję
| Phe Val | Lys | Gin | His | Leu | Cys Gly | Ser His | Leu Val | Glu Ala Leu | |||
| Tyr | Leu | Val | Cys | Gly | Glu | Arg Gly | Phe Phe | Tyr Thr | Ile | Lys | Thr |
| (SEQ | ID | NO: | 4) , | oraz | ich | fizjologicznie zgodne sole. |
Wynalazek dotyczy również sposobu wytwarzania nowych pochodnych insuliny oraz ich fizjologicznie zgodnych soli zdefiniowanych powyżej, polegającego na tym, że konstruuje się zdolny do replikacji wektor ekspresyjny zawierający sekwencję DNA kodującą prekursor pochodnej insuliny, w którym reszta aminokwasu w pozycji A1 łańcucha A jest połączona z resztą aminokwasu w pozycji B30 łańcucha B poprzez łańcuch peptydowy o ogólnym wzorze 2, w którym R1n oznacza łańcuch peptydowy mający n reszt aminokwasów, a n oznacza liczbę całkowitą 0-34, a łańcuch B w pozycji B1 jest przedłużony łańcuchem peptydowym o ogólnym wzorze 3, w którym R2m oznacza łańcuch peptydowy mający m reszt aminokwasów, m oznacza liczbę całkowitą 0-40, a p oznacza liczbę 0, 1 lub 2, prowadzi się ekspresję w komórkach gospodarza i uwalnia pochodną insuliny z tego prekursora metodami chemicznymi i/lub enzymatycznymi.
Korzystnie jako komórki gospodarza stosuje się bakterie, a zwłaszcza E. coli.
Korzystnie jako komórki gospodarza stosuje się drożdże, a zwłaszcza Saccharomyces cerevisiae.
W przypadku wytwarzania pochodnej insuliny, w której ł a ń cuch B ma sekwencję SEQ ID NO: 3, albo jej fizjologicznie zgodnej soli, prekursor pochodnej insuliny korzystnie ma następującą sekwencję
PL 196 626 B1
| Met | Ala | Thr | Thr | Ser | Thr Gly Asn Ser Ala Arg | ||||
| Phe | Val | Lys | Gin | His | Leu Cys Gly Ser His Leu | Val | Glu | Ala | Leu |
| Tyr | Leu | Val | Cys | Gly | Glu Arg Gly Phe Phe Tyr | Thr | Pro | Glu | Thr |
| Arg | Arg | Glu | Ala | Glu | Asp Pro Gin Val Gly Gin | Val | Glu | Leu | Gly |
| Gly | Gly | Pro | Gly | Ala | Gly Ser Leu Gin Pro Leu | Ala | Leu | Glu | Gly |
| Ser | Leu | Gin | Lys | Arg | |||||
| Gly | Ile | Val | Glu | Gin | Cys Cys Thr Ser Ile Cys | Ser | Leu | Tyr | Gin |
| Leu | Glu | Asn | Tyr | Cys | Asn (SEQ ID NO: 6). |
W przypadku wytwarzania pochodnej insuliny, w której ł a ń cuch B ma sekwencję SEQ ID NO: 5, albo jej fizjologicznie zgodnej soli, prekursor pochodnej insuliny korzystnie ma następującą sekwencję
| Met | Ala | Thr | Thr | Ser | Thr Gly Asn Ser Ala Arg | ||||
| Phe | Val | Lys | Gin | His | Leu Cys Gly Ser His Leu | Val | Glu | Ala | Leu |
| Tyr | Leu | Val | Cys | Gly | Glu Arg Gly Phe Phe Tyr | Ile | Pro | Lys | Thr |
| Arg | Arg | Glu | Ala | Glu | Asp Pro Gin Val Gly Gin | Val | Glu | Leu | Gly |
| Gly | Gly | Pro | Gly | Ala | Gly Ser Leu Gin Pro Leu | Ala | Leu | Glu | Gly |
| Ser | Leu | Gin | Lys | Arg | |||||
| Gly | Ile | Val | Glu | Gin | Cys Cys Thr Ser Ile Cys | Ser | Leu | Tyr | Gin |
| Leu | Glu | Asn | Tyr | Cys | Asn (SEQ ID NO: 8). |
W przypadku wytwarzania pochodnej insuliny, w której ł a ń cuch B ma sekwencję SEQ ID NO: 4, albo jej fizjologicznie zgodnej soli, prekursor pochodnej insuliny korzystnie ma następującą sekwencję
| Met | Ala | Thr | Thr | Ser | Thr Gly Asn Ser Ala Arg | ||||
| Phe | Val | Lys | Gin | His | Leu Cys Gly Ser His Leu | Val | Glu | Ala | Leu |
| Tyr | Leu | Val | Cys | Gly | Glu Arg Gly Phe Phe Tyr | Thr | Ile | Lys | Thr |
| Arg | Arg | Glu | Ala | Glu | Asp Pro Gin Val Gly Gin | Val | Glu | Leu | Gly |
| Gly | Gly | Pro | Gly | Ala | Gly Ser Leu Gin Pro Leu | Ala | Leu | Glu | Gly |
| Ser | Leu | Gin | Lys | Arg | |||||
| Gly | Ile | Val | Glu | Gin | Cys Cys Thr Ser Ile Cys | Ser | Leu | Tyr | Gin |
| Leu | Glu | Asn | Tyr | Cys | Asn (SEQ ID NO: 7). |
Wynalazek dotyczy ponadto prekursora pochodnej insuliny mającego sekwencję SEQ ID NO: 6. Wynalazek dotyczy również prekursora pochodnej insuliny mającego sekwencję SEQ ID NO: 8. Wynalazek dotyczy także prekursora pochodnej insuliny mającego sekwencję SEQ ID NO: 7.
Wynalazek dotyczy ponadto sekwencji DNA kodującej prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 6.
Wynalazek dotyczy również sekwencji DNA kodującej prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 8.
Wynalazek dotyczy także sekwencji DNA kodującej prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 7.
Wynalazek dotyczy ponadto wektora ekspresyjnego zawierającego sekwencję DNA kodującą prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 6.
Wynalazek dotyczy również wektora ekspresyjnego zawierającego sekwencję DNA kodującą prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 8.
Wynalazek dotyczy także wektora ekspresyjnego zawierającego sekwencję DNA kodującą prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 7.
PL 196 626 B1
Wynalazek dotyczy ponadto komórki gospodarza transformowanej wektorem ekspresyjnym zawierającym sekwencję DNA kodującą prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 lub SEQ ID NO: 8.
Wynalazek dotyczy ponadto środka farmaceutycznego, charakteryzującego się tym, że zawiera co najmniej jedną pochodną insuliny i/lub jej fizjologicznie zgodną sól zdefiniowaną powyżej, korzystnie w postaci rozpuszczonej, bezpostaciowej i/lub krystalicznej, oraz ewentualnie dodatkowo zawiera substancję pomocniczą zapewniającą przedłużone działanie, korzystnie siarczan protaminy, przy czym pochodna insuliny i/lub jej fizjologicznie zgodna sól razem z siarczanem protaminy występuje w postaci substancji współ wykrystalizowanej.
Wynalazek dotyczy także roztworu o aktywności insulinowej do wstrzykiwań, charakteryzującego się tym, że zawiera środek farmaceutyczny zdefiniowany powyżej w postaci rozpuszczonej.
Wynalazek dotyczy ponadto zastosowania pochodnych insuliny i/lub ich fizjologicznie zgodnych soli zdefiniowanych powyżej do wytwarzania środka farmaceutycznego wykazującego aktywność insulinową o szybko występującym działaniu.
W szczególnoś ci wynalazek dotyczy Lys(B3), Glu(B29)-insuliny ludzkiej.
Spośród dwudziestu występujących w naturze aminokwasów kodowanych genetycznie, do obojętnych aminokwasów należą glicyna (Gly), alanina (Ala), walina (Val), leucyna (Leu), izoleucyna (Ile), seryna (Ser), treonina (Thr), cysteina (Cys), metionina (Met), asparagina (Asn), glutamina (Gln), fenylo-alanina (Phe), tyrozyna (Tyr), tryptofan (Trp) i prolina (Pro), do zasadowych aminokwasów należą arginina (Arg), lizyna (Lys) i histydyna (His), a do kwasowych aminokwasów należą kwas asparaginowy (Asp) i glutaminowy (Glu).
Pochodne insuliny według wynalazku oraz ich fizjologicznie zgodne sole korzystnie stanowią pochodne insuliny bydlęcej, insuliny świńskiej lub insuliny ludzkiej, a mianowicie pochodne insuliny o wzorze 1 oraz ich fizjologicznie zgodne sole, w których A8 oznacza resztę alaniny (Ala), A9 oznacza resztę seryny (Ser), A10 oznacza resztę waliny (Val), a B30 oznacza resztę alaniny (Ala) (reszty aminokwasów A8 do A10 i B30 insuliny bydlęcej); A8 oznacza resztę treoniny (Thr), A9 oznacza resztę seryny (Ser), a A10 oznacza resztę izoleucyny (Ile) (reszty aminokwasów A8 do A10 insuliny ludzkiej lub świńskiej), przy czym B30 oznacza resztę alaniny (Ala) (reszta aminokwasu B30 insuliny świńskiej); albo B30 oznacza resztę treoniny (Thr) (reszta aminokwasu B30 insuliny ludzkiej, patrz SEQ ID NO: 2).
Szczególnie korzystne są pochodne insuliny o wzorze 1 oraz ich fizjologicznie zgodne sole, z resztami aminokwasów A8 do A10 i B30 insuliny ludzkiej, które poza tym odznaczają się tym, ż e (A1-A5) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach A1 do A5 łańcucha A insuliny ludzkiej (patrz SEQ ID NO: 1), (A12-A19) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach A12 do A19 łańcucha A insuliny ludzkiej (patrz SEQ ID NO: 1), (B8-B18) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach B8 do B18 łańcucha B insuliny ludzkiej (patrz SEQ ID NO: 2), (B20-B26) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach B20 do B26 łańcucha B insuliny ludzkiej (patrz SEQ ID NO: 2).
Korzystne są także pochodne insuliny o wzorze 1 oraz ich fizjologicznie zgodne sole, w których co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta występującego w naturze aminokwasu, wybraną z grupy reszt obojętnych lub kwasowych aminokwasów; pochodne insuliny o wzorze 1 oraz ich fizjologicznie zgodne sole, w których co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta występującego w naturze aminokwasu, wybrana z grupy obejmującej resztę izoleucyny (Ile), kwasu asparaginowego (Asp) i kwasu glutaminowego (Glu), a korzystnie co najmniej jedna reszta aminokwasu w pozycjach B27, B28 łańcucha B jest zastąpiona resztą występującego w naturze aminokwasu, wybraną z grupy reszt obojętnych aminokwasów, albo szczególnie korzystnie co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta izoleucyny (Ile), albo pochodne insuliny o wzorze 1 oraz ich fizjologicznie zgodne sole, w których co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta występującego w naturze aminokwasu, wybrana z grupy reszt kwasowych aminokwasów, korzystnie co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta kwasu asparaginowego (Asp), korzystnie resztę aminokwasu w pozycji B27 lub B28 łańcucha B stanowi reszta kwasu asparaginowego (Asp), albo co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łań cucha B stanowi reszta kwasu glutaminowego.
Szczególnie korzystne są także pochodne insuliny o wzorze 1 oraz ich fizjologicznie zgodne sole, w których resztę aminokwasu w pozycji B28 łańcucha B stanowi reszta izoleucyny (Ile), a resztę
PL 196 626 B1 aminokwasu w pozycji A21 stanowi reszta asparginy (Asp), przy czym korzystnie łańcuch A ma sekwencję
Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin
Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asp (SEQ ID NO: 9) , a łańcuch
B ma sekwencję
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu
Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr (SEQ ID NO: 10) (Lys(B3), Ile (B28), Asp(A21)-insulina ludzka).
Pochodne insuliny o wzorze 1 można korzystnie wytwarzać drogą inżynierii genetycznej.
W sposobie wytwarzania pochodnych insuliny, w których łań cuch B ma sekwencję SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 4 lub SEQ ID NO: 5, przydatne są wyżej określone prekursory o sekwencjach odpowiednio SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 lub SEQ ID NO: 8.
W przypadku wytwarzania pochodnej insuliny o sekwencjach aminokwasów w postaci SEQ ID NO: 9 (łańcuch A) i SEQ ID NO: 10 (łańcuch B), prekursor tej pochodnej insuliny ma korzystnie następującą sekwencję
| Met Ala | Thr | Thr | Ser | Thr | Gly | Asn Ser Ala | Arg | Phe | Val | Lys | Gin |
| His Leu | Cys | Gly | Ser | His | Leu | Val Glu Ala | Leu | Tyr | Leu | Val | Cys |
| Gly Glu | Arg | Gly | Phe | Phe | Tyr | Thr Ile Lys | Thr | Arg | Arg | Glu | Ala |
| Glu Asp | Pro | Gin | Val | Gly | Gin | Val Glu Leu | Gly | Gly | Gly | Pro | Gly |
| Ala Gly | Ser | Leu | Gin | Pro | Leu | Ala Leu Glu | Gly | Ser | Leu | Gin | Lys |
| Arg Gly | Ile | Val | Glu | Gin | Cys | Cys Thr Ser | Ile | Cys | Ser | Leu | Tyr |
| Gin Leu | Glu | Asn | Tyr | Cys | Asp | (SEQ ID NO: 11) , |
Lys (B3), Ile (B28), Asp (A21)-preproinsulina
Nowe pochodne insuliny o wzorze 1 wytwarza się głównie drogą inżynierii genetycznej z wykorzystaniem ukierunkowanej mutagenezy, znanymi sposobami.
W tym celu dla pożądanej pochodnej insuliny o wzorze 1 konstruuje się genową strukturę kodującą i w komórkach gospodarza, korzystnie w komórkach bakterii, takich jak E. coli, albo drożdży, zwłaszcza Saccharomyces cerevisiae, doprowadza się do ekspresji i gdy struktura genowa koduje białko fuzyjne, z białka fuzyjnego uwalnia się pochodną insuliny o wzorze 1. Analogiczne sposoby opisano np. w EP-A-0211299, EP-A-0227938, EP-A-0229998, EP-A-0286956 i zgłoszeniu patentowym DE P 3821159.
Odszczepienia części stanowiącej białko fuzyjne można dokonać metodami chemicznymi po roztworzeniu komórek, za pomocą chlorowcocyjanu (EP-A-0180920).
W procesie wytwarzania z udziałem prekursorów preproinsuliny zawierających część odpowiadającą białku fuzyjnemu (presekwencja) według US 5358857, odszczepienie części stanowiącej białko fuzyjne następuje w późniejszym etapie, razem z odszczepieniem peptydu C.
Prekursor insuliny poddaje się następnie utleniającej sulfitolizie, np. sposobem według R. C. Marshalla i A. S. Inglisa opisanym w „Practical Protein Chemistry - A Hanbook” (wydawca A. Darbre) 1986, str. 49-53, oraz poddaje się renaturyzacji w obecności tiolu, z utworzeniem prawidłowych mostków disulfidowych, np. metodą opisaną przez G. H. Dixona i A.C. Wardlowa w Nature (1960), str. 721-724.
Prekursor insuliny można także składać bezpośrednio (EP-A-0600372, EP-A-0668292).
Peptyd C usuwa się przez odszczepienie za pomocą trypsyny, np. metodą Kemmlera i innych, J.B.C. (1971), str. 6786-6791, a pochodną insuliny o wzorze 1 oczyszcza się znanymi sposobami, takimi jak chromatografia (np. EP-A-0305760) oraz krystalizacja.
Gdy n we wzorze 2 oznacza 0, odszczepienie za pomocą trypsyny służy do przerwania wiązania peptydowego pomiędzy łańcuchami A i B.
PL 196 626 B1
W tym sposobie koniec C ł a ń cucha B jest zakończony resztą argininy lub dwiema resztami argininy. Można je usunąć enzymatycznie za pomocą karboksypeptydazy B.
Pochodne insuliny według wynalazku wykazują pełną aktywność biologiczną. Wykazano to przez jej dożylne podawanie królikom, w wyniku którego nastąpiło obniżenie poziomu glukozy we krwi (przykłady 5 i 6).
Szybkie działanie po podaniu podskórnym wykazano metodą klamry metabolicznej utrzymującej prawidłowe stężenie cukru we krwi, na psach będących na czczo (przykład 7). Podawano 0,3 lE/kg. Preparatem odniesienia była insulina ludzka. W metodzie klamry metabolicznej mierzy się stężenie glukozy we krwi, w krótkich odstępach czasu po wstrzyknięciu insuliny, i poprzez wlew uzupełnia się glukozę w celu dokładnego skompensowania spadku jej stężenia. Zaletą takiego postępowania jest to, że u zwierząt nie występuje rozregulowanie organizmu, jakie nastąpiłoby przy znacznym spadku stężenia glukozy we krwi, po dawce insuliny. Ilość i czasowy przebieg podawanej glukozy charakteryzuje działanie insuliny. Lys(B3), Glu(B29)-insulina (SEQ ID NO: 3) i Lys(B3), Ile(B28)-insulina (SEQ ID NO: 4) wykazują znaczne szybsze działanie niż insulina ludzka. Maksymalne działanie (szybkość infuzji glukozy) insuliny ludzkiej osiąga się po 100 minutach, natomiast Lys(B3), Glu(B29)-insuliny (SEQ ID NO: 3) po 80 minutach, a Lys(B3), Ile(B28)-insuliny (SEQ ID NO: 4) już po 60 minutach. Dlatego analogi te, wstrzyknięte tuż przed posiłkiem, lepiej kompensują poposiłkowy wzrost stężenia glukozy we krwi niż insulina ludzka.
Opisane pochodne insuliny nadają się zarówno do terapii cukrzycy typu 1, jak i cukrzycy typu 2, korzystnie w połączeniu z insuliną podstawową.
Nośnikami fizjologicznie nieszkodliwymi i zgodnymi z pochodnymi insuliny są jałowe roztwory wodne, którym nadano izotoniczność z krwią przez dodanie gliceryny, soli kuchennej, glukozy. Nośniki te zawierają znane konserwanty, takie jak np. fenol, m-krezol lub ester kwasu p-hydroksybenzoesowego, oraz dodatkowo substancje buforujące, takie jak np. octan sodu, cytrynian sodu, fosforan sodu. Do nastawiania pH stosuje się rozcieńczone kwasy (zwykle HC1) albo zasady (zwykle Na-OH). Preparaty mogą ponadto zawierać jony cynku.
Pochodne insuliny można stosować w preparatach farmaceutycznych w postaci fizjologicznie zgodnych soli. Dowolna część jednej lub kilku pochodnych insuliny może występować w mieszaninie niezależnie od siebie w postaci rozpuszczonej, bezpostaciowej lub krystalicznej.
Czasami korzystne jest dodawać do środka farmaceutycznego według wynalazku odpowiedniej ilości odpowiednich stabilizatorów, zapobiegających wytrącaniu się białek przy obciążeniach termiczno-mechanicznych, w kontakcie z różnymi materiałami. Takie substancje są znane np. z EP-A-18609, DE-A-3240177 lub WO-83/00288.
Pochodne insuliny według wynalazku odznaczają się szybko występującym działaniem. W praktycznej terapii insulinowej zazwyczaj szybko działającą insulinę miesza się z preparatami zawierającymi substancję pomocniczą zapewniającą przedłużone działanie (np. insuliną NPH). W zależności od składu uzyskuje się preparaty, których profil działania odpowiada nakładającym się profilom poszczególnych składników, o ile składniki te są trwałe i na siebie wzajemnie nie wpływają. Po zmieszaniu pochodnej insuliny z ludzką insuliną NPH należy jednak oczekiwać, że szczególnie przy długotrwałym przechowywaniu zachodzi wymiana pomiędzy rozpuszczoną pochodną i krystaliczną insuliną NPH. W wyniku tego zmienia się w nieprzewidywalny sposób zarówno dynamika farmakologiczna insuliny o przedł u ż onym dzia ł aniu, jak i rozpuszczonej, szybko dział ającej insuliny. W celu uniknię cia tego, celowe jest zmieszanie szybko działającej pochodnej podczas stosowania z substancją pomocniczą zapewniającą przedłużone działanie, np. z insuliną NPH. Taką postać pochodnej insuliny o przedłużonym działaniu można dowolnie zmieszać z rozpuszczoną, szybko działającą postacią insuliny, bez zmiany zawartości jednej lub drugiej postaci na skutek procesu wymiany w czasie przechowywania preparatu.
Jakkolwiek wynalazek dotyczy zasadniczo szybko działających pochodnych insuliny, możliwe jest także przygotowanie tego rodzaju pochodnych w postaci o przedłużonym działaniu, przy czym korzystnie jako substancję pomocniczą zapewniającą przedłużone działanie stosuje się siarczan protaminy, a pochodna insuliny i/lub jej fizjologicznie zgodna sól razem z siarczanem protaminy występuje w postaci substancji współwykrystalizowanej.
P r z y k ł a d 1. Konstruowanie Lys(B3)-proinsuliny, jako etap wyjś ciowy dla zwią zanych z wynalazkiem plazmidów w przykładach 2-4
PL 196 626 B1
W opisie patentowym US 5358857 opisano wektor pINT 90d i starter PCR Tir i Insu 11. Skł adniki te służą jako materiały wyjściowe do konstruowania plazmidu pINT 125d, kodującego żądaną Lys(B3)-proinsulinę.
Dodatkowo zsyntetyzowano starter Insu 35 o sekwencji
5' TTT GTG AAG GAG GAG CTG 3' i Insu 36 o sekwencji
5' GAG GTG CTG CTT GAG AAA 3'.
Przeprowadzono reakcję PCR ze starterami Tir i Insu 36 K oraz drugą reakcję ze starterami Insu 11 i Insu 35. Jako matryca posłużył do tego pINT 90d DNA.
Produkty obu reakcji PCR są częściowo komplementarne, toteż gdy połączy się je w trzeciej reakcji PCR ze starterami Tir i Insu 11, otrzymuje się fragment kodujący odmianę proinsuliny zawierającą resztę lizyny w pozycji 3 łańcucha B. W celu oczyszczenia ten fragment PCR wytrąca się w etanolu, suszy, a następnie trawi się enzymami restrykcyjnymi Nco 1 i Sal 1, zgodnie z instrukcjami producenta. Mieszaninę reakcyjną rozdziela się metodą elektroforezy żelowej i wyodrębnia się fragment Nco 1/Sal 1.
W wyżej wspomnianym zgłoszeniu opisano plazmid pINT 91d, kodujący mini-proinsulinę . Gdy za pomocą Nco 1 i Sal 1 odszczepi się sekwencję kodującą mini-proinsulinę i wyodrębni resztkowy plazmid-DNA, to można ten resztkowy plazmid-DNA z otrzymanym fragmentem PCR Nco 1/Sal 1 przekształcić w reakcji z ligazą T 4 w plazmid pINT 125 d. Transformuje się go w E. coli K12, gdzie następuje jego namnażanie, po czym wyodrębnia się go. Po weryfikacji struktury plazmidu metodą analizy sekwencyjnej DNA i analizy restrykcyjnej, pINT 125d-DNA służy jako matryca DNA do wprowadzania dalszych mutacji do tej odmiany proinsuliny.
P r z y k ł a d 2. Konstruowanie Lys (B3) Glu (B29)-proinsuliny
Dla wytworzenia muteiny zsyntetyzowano starter 329 o sekwencji
5' TTC TAC AGA CCC GAG ACC CGC GGC ATC G- 3' i 329b o sekwencji
5' GCC GCG GGT CTC GGG TGT GTA GAA GAA GC 3'
Jako matrycę zastosowano DNA plazmidu pINT125d i pINT91d.
Starter 329a poddaje się reakcji PCR ze starterem Insu 11 na matrycy pINT91d, a starter 329b z Tir (patrz przykład powyżej) na matrycy pINT125d. Oba produkty PCR są częściowo komplementarne, toteż można je ze sobą połączyć w bezpośredniej reakcji PCR i ponownie poddać reakcji ze starterami Tir i Insu 11. Powstaje w ten sposób fragment DNA kodujący żądaną muteinę. Fragment ten podwójnie trawi się enzymami restrykcyjnymi Nco 1 i Sal 1, a następnie powstały fragment Nco 1/Sal 1 wprowadza się do resztkowego plazmidu DNA pINT 91d w reakcji z ligazą T4.
Powstały plazmid pINT 329, po namnożeniu w E. coli K12, weryfikuje się pod względem żądanej struktury metodą analizy restrykcyjnej i analizy sekwencji DNA.
Pochodna proinsuliny kodowana przez ten plazmid charakteryzuje się wymianą obu aminokwasów i członem łączącym C, składającym się z aminokwasu argininy.
P r z y k ł a d 3. Konstruowanie Lys (B3) Ile (B27)-proinsuliny
Konstruowanie przeprowadzono w sposób analogiczny jak w poprzednim przykładzie, z udziałem par starterów:
KB3 JB 27A
5' TTC TAC ATC CCC AAG ACC CGC CG 3' i Insu 11 oraz K B3 J 27B
5' CTT GGG GAT GTA GAA GAA GCC TCG 3' i Tir.
W obu reakcjach PCR jako matrycę zastosowano DNA plazmidu pINT125d. Tak jak to opisano w przykł adzie 1, produkty obu reakcji PCR połączono w trzeciej reakcji i produkt sklonowano w sposób podany w tym przykładzie.
W wyniku tego otrzymano plazmid pINT332.
P r z y k ł a d 4. Konstruowanie Lys (B3) Ile (B28)-proinsuliny
Konstruowanie przeprowadzono w sposób analogiczny jak w przykładzie 3, z udziałem par starterów:
KB3 JB 28A
5' TAC AGA ATC AAG ACC CGC CGG GAG-3' i Insu 11 oraz KB J B28B
PL 196 626 B1
5' GGT CTT GAT TGT GTA GAA GAA GCC TCG-3' i Tir.
W wyniku tego otrzymano plazmid pINT 333.
Ekspresja skonstruowanych odmian insuliny
Plazmidy pINT 329, 332 i 333 transformowano np. każdorazowo w E. coli K12 W3110. Zrekombinowane bakterie, zawierające plazmidy kodujące poszczególne odmiany insuliny, poddano fermentacji zgodnie z przykładem 4 opisu patentowego US 5227293 i w ten sposób otrzymano potrzebny materiał wyjściowy do wytwarzania poszczególnych odmian insuliny.
P r z y k ł a d 5. Konstruowanie Lys (B3) Ile (B28), Asp (A21)-proinsuliny
Konstruowanie przeprowadzono zgodnie z przykładem 3. Zamiast pINT125d matrycą dla reakcji PCR był jednak DNA plazmidu pINT333, skonstruowanego w przykładzie 4. Zastosowano przy tym następującą parę starterów:
P-pint365
5-TTTTTTGTCGACTATTAGTCGCAGTAGTTCTACCAGCTG-3' i Tir.
W wyniku tego otrzymano plazmid pINT 365.
P r z y k ł a d 6. Biologiczna aktywność Lys(B3), Glu(B29)-insuliny po doż ylnym podaniu królikom
T a b e l a 1
| Czas [h] | Insulina ludzka | Lys(B3), Glu(B29)-Insulina |
| 0 | 100 | 100 |
| 0,25 | 89,17 | 89,47 |
| 0,5 | 67,56 | 58,32 |
| 0,75 | 73,24 | 66,59 |
| 1 | 73,13 | 68,21 |
| 1,5 | 78,12 | 71,95 |
| 2 | 89,47 | 80,88 |
| 3 | 107,01 | 94,2 |
| 4 | 104,55 | 99,78 |
królików otrzymał o doż ylnie podane rodzaje insuliny (0,2 lE/kg). W cią gu nastę pnych 4 godzin w podanych punktach czasowych oznaczano stężenie glukozy we krwi i przeliczano je na procenty wartości początkowej dla czasu 0. Wyniki podano w tabeli 1. Średnie wartości nie wykazują znaczących różnic pomiędzy biologiczną aktywnością insuliny ludzkiej i Lys(B3), Glu(B29)-insuliny.
P r z y k ł a d 7. Biologiczna aktywność Lys(B3), Ile(B27)-insuliny i Lys(B3), Ile(B28)-insuliny po dożylnym podaniu królikom królików otrzymał o doż ylnie podane rodzaje insuliny (0,2 lE/kg). W cią gu nastę pnych 4 godzin w podanych punktach czasowych oznaczano stężenie glukozy we krwi i przeliczano je na procenty wartości początkowej dla czasu 0. Wyniki podano w tabeli 2. Średnie wartości nie wykazują znaczących różnic pomiędzy biologiczną aktywnością insuliny ludzkiej, Lys(B3), Ile(B27)-insuliny i Lys(B3), Ile(B28)-insuliny.
T a b e l a 2
| Czas [h] | Insulina H | Lys(B3), Ile (B27)-Insulina | Lys(B3), Ile (B28)-Insulina |
| 1 | 2 | 3 | 4 |
| 0 | 100 | 100 | 100 |
| 0,33 | 67,8 | 62,6 | 63,3 |
| 0,66 | 54,9 | 60,6 | 55,8 |
| 1 | 55,2 | 66,8 | 59,3 |
PL 196 626 B1 cd. tabeli 2
| 1 | 2 | 3 | 4 |
| 1,5 | 63 | 79,2 | 66,7 |
| 2 | 77,8 | 90,9 | 81,6 |
| 3 | 91,5 | 96,3 | 97,2 |
| 4 | 99,5 | 96 | 101,6 |
P r z y k ł a d 8. Dynamika farmakologiczna Lys(B3), Glu(B29)-insuliny i Lys(B3), Ile (B28)insuliny, po podskórnym podaniu psom
Każdorazowo 4 psy otrzymywały podskórny zastrzyk podanych rodzajów insuliny (0,3 lE/kg). Stężenie glukozy we krwi utrzymywano na poziomie 3,7 do 4 mmoli/L przez ciągłą infuzję glukozy. Podano średnią szybkość infuzji glukozy ±SEM, przez 240 minut od momentu wstrzyknięcia (t = 0). Wyniki podano w tabelach 3 i 4 oraz na wykresach przedstawionych na rysunku.
| spadku | Nachylenie w punkcie przegięcia | -0,065 | -0,091 | -0,102 |
| Faza | Punkt przegięcia (min) | 156 | 127 | 104 |
| 3 | 100 | o 00 | 09 | |
| Faza przyrostu | Nachylenie w punkcie przegięcia | >φ H O | 0,227 | 0,267 |
| Punkt przegięcia (min) | n | Γ9 n | 16 | |
| Preparat | Insulina H Hoechsta | Lys(B3),Glu(B29)-Insulina | Lys(B3),Ile(B28)-Insulina |
PL 196 626 B1
Tabela 4. Glukozowa klamra metaboliczna przy podawaniu szybko działających pochodnych
II
G ε' o
m
-Ή •H o
Fi 'M
| we krwi | § o | w | 0,07 | C' o | 0,19 | 0,14 | 0,18 | 0,20 | 0,13 | |
| .1 | σ3 | |||||||||
| 1 | 3 | £ | o v© | os | CO | oo C> | 00 | 3 | ||
| i | •a | rn | c? | CO | rn | co | co | fO | ||
| (U | ||||||||||
| 00 CM e υ pi | $ CZ3 | Czas | min | O | ’Τ | o | v> | 20 | «Λ CM | 30 |
| O | Cl | ’φ | Os | l> | CO | CO | ||||
| e & | 24 | i 73 | O o | 0,5 | CM ł“-M | 0,8 | SO T-M | SO' | CM | |
| I-) | *s | i | śred- nia | o | τΤ | «ΖΊ | >n | co | CO | O |
| tybkość i ukozy | oh a | o θ' | >o | 3,7 | 5,2 | 00 | CM O* | 7,51 | ||
| 3 N | .3 | o | SO | V© | SO | |||||
| óó oh | u | a | CM | CM | m | |||||
| £ | CM | CM | C- | CM | SO | Tt | 00 | |||
| >> N | le/1 | 1 75 | 0,1 | CM O | 0,1 | 0,2 | θ' | ©* | o o* | |
| o | o | |||||||||
| 1 | gluk | 1 | 13 ta | r- | ,85 | s© 00 | o 00 | S© | c-i r- | s© r- |
| s | <u | -fe -a | en | co | c? | co | cT | m* | m | |
| Λ O? | O | 3 N | .a | o | Ό | O | ΜΊ | O | <n | o |
| CM 1 Φ fć? e & | & JŚ | U | a | CM | CM | CO | ||||
| « wM | £ | sem i _1 | 0,00 | 0,08 | 0,18 | 0,60 | 0,96 | 0,65 | 0,22 | |
| • wM | oh | *S Λ | ,00 | 'T CM | V© m | CO O\ | >n C' | co CM | CO c- | |
| Ό **73 k. s o O 1H | a | -to a | o | θ' | θ' | cT | CM* | CO | tn* | |
| 3 N | .| | o | s© | T“M | o | S© | ||||
| tzj ”oh | U | CM | CM | ci | ||||||
| υ £ | c; | 9 | Γ'- o | 3 | 00 o | 04 | 05 | 00 o | en | |
| o | co | o | o* | O | o | o | o* | o | ||
| o | O | |||||||||
| 3 | a | śred- nia | 00 | 00 | Os | CO | CM | |||
| 75 | egl | ε | co | Oy co | 3,9 | 3,9 | 4,0 | <X co | 00 m* | |
| 8 | ężer wi | 3 N | o | Tt | Os | Os | Os | |||
| K w | Ui CC Λ4 | O | CM | CM | ||||||
| Ctf | “> | fi | o | 00 | os | 00 | CO | \o | ||
| .a | 24 | S | o | o | o | ł—H | CM | co | ||
| 1 | 'fi | co | θ' | o | © | o | o | O* | o | |
| £ | kO | 2P | ”S ta | ,00 | Tf | ΠΊ CM | co co | ,44 | 50 | 50 |
| *“75 s | a | 43 -a | o | o | © | o | o | -1 | m | |
| zybl uko | 3 N | a | o | s© | r-M | s© | so | |||
| óo oo | u | s | CM | CM |
PL 196 626 B1 cd. tabeli
| <S | OS o | o | Os O | ^4 | SO | Tj- | 1-H | 8 | 1—4 © | 8 | 3 | 00 ^4 | xs T~4 | © | |
| © | θ' | o* | o | ©' | ©' | o | O* | ©' | © | ©' | ©' | © | ©' | o' | ©' |
| so | en | oo vo | oo | en ^γ | 00 Γγ | en oo | OS SO | ’Γ’Η 00 | Os OO | 00 r- | m 00 | Τ'- SO | SO SO | OS in | <fr r- |
| en | en | en | en | en | en | en | en | en | en | en | en | en | en | rn | en |
| XS | o | <zs | o | m | o | vs | o | ir> | o | ΜΊ | o | X» | Os | ||
| en | XS | ir> | SO | SO | t~~ | Τ' | oo | 00 | OS | OS | o | © | © | ||
| ^•4 | |||||||||||||||
| CS | CS CS | SO Os | 00 r-γ | Os O, | *n 00 | o xs | cs 00 | OS | CS CS | os CS | s- Γ | CS CS | »ZS | en o | |
| ^-4 | ©' | ©’ | — | © | ^“4 | ©” | ^4 | ^-4 | ^-4 | ||||||
| ,50 | ,00 | m r-γ | m CM | O XS | r- | ,00 | ,50 | (N | ,00 | tr> r*«w | X) CS | 00 | 50 | 8,50 | |
| oo | ^4 T“4 | o rH | T-H | O i-H | OS | © | oi | O | oo | © | © | © | |||
| so | ^4 | so | SO | 1“^ | so | so | Ό | so | so | 1 | |||||
| en | xs | XS | so | so | r- | Τ'- | 00 | 00 | OS | Os | © | © | 1—ł | ||
| x> | CS | Os | S | ^4 | s- ^4 | o cs , | ,23 | 00 cs | XI | 00 | CS | Tj- | SO ^•4 | o CM | SO |
| θ' | ©' | o' | θ' | ©' | o | θ' | o | ©' | ©“ | ©' | ©' | © | © | © | © |
| ,66 | ,58 | en Γ-γ | ,81 | T <n | 00 | 0Ί 00 | ^4 00 | O\ | 95 | 69 | 56 | r·' | 59 | 84 | |
| en | cs' | es | ci | cs | en | en | en | en | en | en | m | es | es' | en | en |
| o | XS | © | xs | o | xs | © | xi | © | X) | © | X» | O r*s | © | ||
| 'W | i— | ϋΰ | oo | CA | CA | ||||||||||
| 1-H | |||||||||||||||
| o | r- | O | SO | cs | cs | cs | © | es | <n | © | Os | ||||
| Ί. | o | 00 | Tj- | <s | Tj- | c- | 00 | C' | xs | Os | Tt | 00 | |||
| ©' | θ' | o | o | o | ©’ | o | ©' | ©’ | ©” | ©' | ©' | © | |||
| xs <S | ,00 | ,00 | o o | ,50 | ,50 | o O | ,50 | ,00 | © xs | 25 | 00 | ,00 | r- | xs CS | o o |
| X? | SO | Os | 00 | 00 | 1-H | θ' | 1“H 1“^ | © i-H | 00 | Os | 1-H 'P-H | os | o’ | oo' | |
| SO | T—( | so | SO | r- | SO | so | 96 | ^«4 | SO | f—4 | |||||
| en | Tt | Tj- | xs | xs | SO | so | r-' | c— | oo | oo | Os | © | © | i-H | |
| 1-H | |||||||||||||||
| cs | Τ'- o | ,06 | ,10 | en 1-H | ,06 | © | © | CS | 1—4 | 00 | 22 | © ^—4 | 00 © | OS | |
| θ' | ©' | O* | o | o | ©* | o | © | ©' | ©' | © | ©’ | © | ©' | © | |
| r~ Γ_ | 66‘ | ,09 | oo Os | 1—4 © | en °ϊ | ,08 | 00 OS | 08 | ,03 | 60 | 03 | 66 | 08 | 96 | CS OS |
| en | cs | ci | en | TT | en | Tt | Tj- | es | en | en | |||||
| 'fr | Os | 44 | Os | Os | Tf | os | τΤ | Os | Tj- | os | M· | os | Os | ||
| en | en | ’Φ | ΜΊ | SO | so | T | C— | oo | 00 | oś | Os | O | O | ||
| 0,90 | 0,56 | c— | 0,54 | 0,89 | os 1“H | δ | 00 © f™4 | ^t | 1,09 | 1,29 | 1,08 | 2,33 | 00 SO 1—4 | 1,44 | Ό © |
| o | o | O | xs | ι/Ί | XS | O | X) | xs | © | ir> | W) | O | O | o | |
| U> | o | CM | Γγ | CS | xs | r- | c— | xs | Τ'- | r— | CS | xs | XI | © | |
| X? | st | Ft | <ci | xs' | θ' | so' | t< | o | oo | 00 | 00 | Os’ | oo' | oo' | 00 |
| SO | 1-H | so | so | i-H | so | SO | so | 96 | SO | ||||||
| en | 'T | 'Φ | xs | xs | so | SO | t- | t— | 00 | 00 | Os | © | © | 1—4 | |
| ^4 | f-4 |
PL 196 626 B1 cd. tabeli
| 00 o | I— o | t— © | CS | © CS | 00 © | c- O | Tt | xi © | © © | co | 00 o | 00 o | CS | © |
| o* | © | © | O* | © | © | © | © | © | © | ©* | © | © | © | © |
| co | Tt | wo | © | co | Tt | CS | © | o | oo | r*. | Γ»τ» | \Q | ||
| 00 | 00 | Cs, | cs, | r-^ | t— | r- | © | © | 00 | Γ- | c- | t— | r- | |
| co | co | co | co | co | CO | co | CO | co | co | co | co | co | co | CO |
| © | © | XI | © | m | © | 00 | © | XI | © | 00 | © | ΟΊ | o | •/0 |
| 1“H | CM | CM | co | CO | Tt | Tt | X) | x> | © | © | t— | r- | 00 | 00 |
| ł“H | *>H | i“H | 1-H | Τ·Μ | t-H | |||||||||
| CS | © | CS | © | © | © | Tt | © | Tt | Tt | 00 | co | \© | ||
| CS | o | SO | CM | © | oo | r- | OO | 00 | Tt | Tt | xr | Tt | ||
| © | © | © | © | ©’ | © | © | © | © | © | |||||
| r- | ,50 | ,00 | x> <s | co CO | XI | 8 | © cs | © © | x> c— | © cs | 00 CM | co | s- x> | 00 oo |
| 1— | © | Tt | X? | Tt | Tt | co | Tt | co | cs | cs | 1“^ | © | ||
| © | © | © | CS | © | l | © | CS | © | kO | SO | ||||
| CM | CM | co | CO | Tt | Tt | Xl | X> | © | © | t | 00 | 00 | ||
| o | CO | r*H | wo | </0 | Tt | 00 | i—l | OO | 00 | |||||
| CM | CM | CS | 1—H | © | ł-H | © | © | |||||||
| © | ©“ | o* | © | © | θ' | o* | © | © | © | © | © | © | © | © |
| © | oo | © | oo | r- | Tt | CS | r- | co | o^ | Ό | ||||
| ^t | wo | Γ-γ | 00 | ©, | ©^ | I— | 00 | r~- | oo | © | 00 | oo | o | oo |
| rn | co | co | co | CO | co | co | co* | CO | co | co | co | co | co | co |
| x> | © | x> | © | X» | © | © | © | ΧΊ | © | Xl | © | © | © | irs |
| CM | CM | m | m | Tt | Tt | oo | XI | © | © | © | t— | 00 | 00 | |
| i—l | 1-H | |||||||||||||
| 0,74 | ^t <S | Tt CO | 1,52 | 3 | X» °O- | t— © | Tt i-M | 0,96 | 0,82 | co O | 0,41 | 0,54 | 0,94 | 0,87 |
| m CS | CS | 00 | 00 | © | 00 | OO | xi | xi | OO | © | oo | oo | O | OO |
| © | © i—M | c** cs* | c*** | wo wo | C** s© | CS © | t— Tt | X? | Tt | oo oo*' | t— Tt | co | ©Λ Tt | 2,8! |
| © | © | © | © | © | © | VO | SO | |||||||
| ł-H | CM | CS | co | co | Tt | Tt | 00 | ΧΊ | © | © | c— | c— | 00 | 00 |
| 1-H | 1“H | i“H | i-H | |||||||||||
| 1— | <S | CS | © © | © | CO | CS 1-H | 00 © | 3 | cs | © © | oo 1-H | CS | Tt | © © |
| © | θ' | © | © | © | © | o | © | o | ©* | © | © | © | © | © |
| m | S- | Xł | 1-^ | <s | © | rH | © | ΧΊ | t· | Tj- | 00 | 00 | co | |
| 00 | O | ογ | 00 | © | OO- | ©, | o. | © | © | © | © | © | 00 | © |
| co | *t | co | co | CO | co | co | Tt | Tt | co* | Tt | co’ | Tt | co | Tt |
| Tt | © | Tt | © | Tt | © | © | Tt | © | Tt | © | Tt | Os | Tt | |
| CM | CM | co | co | Tt | XI | X) | © | © | r* | 00 | ||||
| ^4 | fH | i—l | 1-H | t-H | ||||||||||
| t— | 00 | t— | © | © | © | Tt | © | © | © | © | © | Tt | Cs | CM |
| Tt | wo i—H | co | r-H | co T-H | cs T—4 | rH | Tt | 0,7 | x> © | co | x> © | i-M | t· © | |
| «Λ | © | © | ΧΊ | © | © | x> | © | © | © | 00 | co | CO | r-r. | |
| CM | o | o | CS | © | xy | cs | cs | © | © | c- | co | co | © | |
| © | 00 | oo | © | oo | 00 | oo | © | © | xT | Tt | Tt | X? | Tt | |
| © | © | © | © | _ | © | © | l | SO | \O | |||||
| ł^ | CM | CM | CO | co | Tt | Tt | xi | ΧΊ | © | © | r- | r- | 00 | 00 |
| w | fM>4 | i-H |
PL 196 626 B1
| 3 | 00 | T—M | 00 | 00 | δ | O | 00 | to | co | |
| Ο | T-H | o | o | F4 | © | © | © | |||
| © | ο | © | o | © | © | © | © | © | © | O |
| SO | SO | SO | Os | s- | SO | CS | m | Os | ||
| © | s© | SO | r-~ | r- | SO | |||||
| en | en | en | en | en | en | en | en | en | en | en |
| ο | <η | § | o | <r> | © | <n | © | © | ||
| os | os | o | ^-4 | ts | ts | en | en | Tt | ||
| ts | ts | ts | ts | cs | ts | CS | CS | ts | ||
| Tt | os | oo | o | 3 | o | 00 | oo | © | ^4 | |
| in | SO | SO | ts | en | to | so | SO | |||
| Ο | θ' | © | © | o | © | © | © | © | © | |
| os | 00 | Tt | V) | T | ts | Os | T | 00 | ||
| ts | o | OS | Tt | OS | v> | SO | Os | 00 | ||
| f—4 | © | © | © | © | © | © | © | |||
| SO | ts | SO | ts | t | SO | © | ||||
| σ\ | Os | o | O | r*»4 | ^4 | ts | CS | to | en | Tt |
| ts | ts | ts | CS | ts | CS | ts | ts | ts | ||
| ο | Tt | to | Tt | 00 | SO | co | co | 00 | ||
| ł-^ | ,—4 | ^4 | ł-H | Ρ·4 | ts | cs | Ή | |||
| ο | © | © | © | o’ | © | © | © | © | © | © |
| 00 | 00 | ΙΛ | </> | ΜΊ | in | ts | Tt | SO | ||
| ο | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 | 00 | t-' | t- | v> |
| en | en | en | en | en | to | en | to | en | en | to |
| ο | ΙΛ | o | V> | o | U> | o | m | o | m | o |
| os | oś | <5 | o | T-H | cs | ts | to | en | T | |
| 1—t | f“4 | ts | ts | ts | CS | cs | CS | CS | CS | CS |
| F—4 | Tt | SO | ts | en | 00 | SO | r- | C'- | ||
| Τ | 00 | «Λ | SO | SO | SO | m | en | en | Tt | |
| ο | © | o | o” | © | © | © | © | © | o | © |
| to | en | SO | OS | 00 | 00 | «Λ | SO | o | ||
| CS | o | Tf | l> | 00 | r- | © | ||||
| CO | en | ts | ts | 1“4 | ł“4 | © | © | © | ||
| SO | 06 | SO | SO | SO | © | |||||
| os | Os | O | T·4 | ts | ts | en | en | Tt | ||
| 1-^ | ts | ts | ts | cs | ts | ts | ts | CS | ts | |
| en | oo | s- | y*4 | ts | en | ts | ||||
| τ—1 | o | T-^ | o | o | O | ,—4 | T-4 | © | © | |
| ο | o | © | o | c? | © | ©“ | © | ©’ | © | © |
| tS | en | oo | ts | OS | ΜΊ | © | 00 | |||
| os | Os | Os | © | © | O | © | © | |||
| Tt | Tt | en | en | co | M- | 'T | Tt | Tt | Tf | Tt |
| os | T | OS | 04 | OS | S- | Os | Tf | OS | 't | OS |
| 00 | Os | Os | o | ts | cs | en | to | |||
| ^4 | T«M | ts | ts | CS | CS | ts | ts | ts | cs | |
| 1 ts | φ | ts | ts | cs | ts | Tt | 00 | 00 | r- | SO |
| r- | O | Γ- | f | r- | OS | SO | OS | T | en | |
| Η © | o | © | o | © | © | © | © | © | © | © |
| o | r- | r- | r- | en | ,00 | ,00 | t | |||
| 3 en | o | SO | SO | SO | en | r—4 | SO | ł— | ||
| 3 | en | to | T | T | to | en | ts | cs | cs | |
| f-t | so | SO | SO | ,“4 | SO | T-4 | SO | © | ||
| - θ' | Os | O | o | r“M | ts | ts | en | co | ||
| 3 ) | ł“H | ts | ts | ts | CS | ts | ts | CS | ts | ts |
PL 196 626 B1
Wykaz sekwencji (1) Informacja ogólna:
(i) Zgłaszający:
(A) Nazwa: Sanofi-Aventis Deutschland GmbH (B) Ulica: (c) Miasto: Frankfurt nad Menem (D) Kraj związkowy: (E) Państwo: Niemcy (F) Kod pocztowy: 65926 (G) Telefon: 069-305-5307 (H) Telefaks: 069-35-7175 (ii) Tytuł: nowe pochodne insuliny, sposób ich wytwarzania, prekursory pochodnych insuliny, sekwencje DNA kodujące te prekursory, wektory ekspresyjne, komórka gospodarza, środek farmaceutyczny, roztwór o aktywności insulinowej i zastosowanie nowych pochodnych insuliny (iii) Liczba sekwencji: 8 (iv) Sposób odczytu komputerowego:
(A) Typ nośnika: Dyskietka (B) Komputer: kompatybilny z IBM PC (C) System operacyjny:PC-DOS/MS-DOS (D) Oprogramowanie: Patentln Release #1.0, wersja
PL 196 626 B1 (A) Nazwa/klucz : białko (B) Położenie: 1..21 (xi) Opis sekwencji: SEQ ID NO: 1:
Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu 15 10 15
Glu Asn Tyr Cys Asn 20 (2) Informacja o SEQ ID NO: 2:
(i) Charakterystyka sekwencji:
(A) Długość: 30 aminokwasów (B) Typ: aminokwas (C) Niciowość: pojedyncza (D) Topologia: liniowa (ii) Typ cząsteczki: białko (ix) Cechy:
(A) Nazwa/klucz : białko (B) Położenie: 1..30 (xi) Opis sekwencji: SEQ ID NO: 2:
Phe Val Asn Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr 15 10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Lys Thr 20 25 30 (2) Informacja o SEQ ID NO: 3:
(i) Charakterystyka sekwencj i:
(A) Długość: 30 aminokwasów (B) Typ: aminokwas (C) Niciowość: pojedyncza (D) Topologia: liniowa (ii) Typ cząsteczki: białko (ix) Cechy:
(A) Nazwa/klucz : białko (B) Położenie: 1..30
PL 196 626 B1
| (xi) | Opis sekwencj i: | : SEQ ID | NO: | 3: | ||||
| Val | Lys Gin His Leu | Cys Gly | Ser | His | Leu | Val | Glu | Ala |
| 5 | 10 | |||||||
| Val | Cys Gly Glu Arg | Gly Phe | Phe | Tyr | Thr | Pro | Glu | Thr |
| 20 | 25 | 30 |
(2) Informacja o SEQ ID NO: 4:
(i) Charakterystyka sekwencji:
(A) Długość: 30 aminokwasów (B) Typ: aminokwas (C) Niciowość: pojedyncza (D) Topologia: liniowa (ii) Typ cząsteczki: Białko (ix) Cechy:
(A) Nazwa/klucz : białko (B) położenie: 1..30 (xi) Opis sekwencji: SEQ ID NO: 4:
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr 15 10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr 20 25 30 (2) Informacja o SEQ ID NO: 5:
(i) Charakterystyka sekwencji:
(A) Długość: 30 aminokwasów (B) Typ: aminokwas (C) Niciowość: pojedyncza (D) Topologia: liniowa (ii) Typ cząsteczki: białko (ix) Cechy:
(A) Nazwa/klucz : białko (B) Położenie: 1..30 (xi) Opis sekwencji: SEQ ID NO: 5:
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr
PL 196 626 B1
10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Ile Pro Lys Thr 20 25 30 (2) Informacja o SEQ ID NO: 6:
(i) Charakterystyka sekwencj i:
(A) Długość: 97 aminokwasów (B) Typ: aminokwas (C) Niciowość: pojedyncza (D) Topologia: liniowa (ii) Typ cząsteczki: białko (ix) Cechy:
(A) Nazwa/klucz : białko (B) Położenie: 1..97 (xi) Opis sekwencji: SEQ ID NO: 6:
| Met 1 | Ala | Thr | Thr | Ser 5 | Thr | Gly | Asn | Ser | Ala 10 | Arg | Phe | Val | Lys | Gin 15 | His |
| Leu | Cys | Gly | Ser 20 | His | Leu | Val | Glu | Ala 25 | Leu | Tyr | Leu | Val | Cys 30 | Gly | Glu |
| Arg | Gly | Phe 35 | Phe | Tyr | Thr | Pro | Glu 40 | Thr | Arg | Arg | Glu | Ala 45 | Glu | Asp | Pro |
| Gin | Val 50 | Gly | Gin | Val | Glu | Leu 55 | Gly | Gly | Gly | Pro | Gly 60 | Ala | Gly | Ser | Leu |
| Gin 65 | Pro | Leu | Ala | Leu | Glu 70 | Gly | Ser | Leu | Gin | Lys 75 | Arg | Gly | Ile | Val | Glu 80 |
| Gin | Cys | Cys | Thr | Ser 85 | Ile | Cys | Ser | Leu | Tyr 90 | Gin | Leu | Glu | Asn | Tyr 95 | Cys |
Asn (2) Informacja o SEQ ID NO: 7:
(i) Charakterystyka sekwencji:
(A) Długość: 97 aminokwasów (B) Typ: aminokwas (C) Niciowość: pojedyncza (D) Topologia: liniowa
PL 196 626 B1 (ii) Typ cząsteczki: Białko (ix) Cechy:
(A) Nazwa/klucz : białko (B) Położenie: 1..97
| (XX) | Opis sekwencji: | : SEQ ID | NO: | 7: | |||||||||||
| Met 1 | Ala | Thr | Thr | Ser 5 | Thr | Gly | Asn | Ser | Ala 10 | Arg | Phe | Val | Lys | Gin 15 | His |
| Leu | Cys | Gly | Ser 20 | His | Leu | Val | Glu | Ala 25 | Leu | Tyr | Leu | Val | Cys 30 | Gly | Glu |
| Arg | Gly | Phe 35 | Phe | Tyr | Thr | Ile | Lys 40 | Thr | Arg | Arg | Glu | Ala 45 | Glu | Asp | Pro |
| Gin | Val 50 | Gly | Gin | Val | Glu | Leu 55 | Gly | Gly | Gly | Pro | Gly 60 | Ala | Gly | Ser | Leu |
| Gin 65 | Pro | Leu | Ala | Leu | Glu 70 | Gly | Ser | Leu | Gin | Lys 75 | Arg | Gly | Ile | Val | Glu 80 |
| Gin | Cys | Cys | Thr | Ser 85 | Ile | Cys | Ser | Leu | Tyr 90 | Gin | Leu | Glu | Asn | Tyr 95 | Cys |
Asn (2) Informacja o SEQ ID NO: 8:
(i) Charakterystyka sekwencji:
(A) Długość: 97 aminokwasów (B) Typ: aminokwas (C) Niciowość: pojedyncza (D) Topologia: liniowa (ii) Typ cząsteczki: białko (ix) Cechy:
(A) Nazwa/klucz: białko (B) Położenie: 1..97 (xi) Opis sekwencji: SEQ ID NO: 8
| Met 1 | Ala | Thr Thr | Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His | ||||||||||
| 5 | 10 | 15 | |||||||||||
| Leu | Cys | Gly Ser | His | Leu | Val Glu | Ala | Leu | Tyr | Leu | Val | Cys | Gly | Glu |
| 20 | 25 | 30 |
PL 196 626 B1
| Arg | Gly | Phe 35 | Phe | Tyr | Ile | Pro | Lys 40 | Thr | Arg | Arg | Glu | Ala 45 | Glu | Asp | Pro |
| Gin | Val 50 | Gly | Gin | Val | Glu | Leu 55 | Gly | Gly | Gly | Pro | Gly 60 | Ala | Gly | Ser | Leu |
| Gin 65 | Pro | Leu | Ala | Leu | Glu 70 | Gly | Ser | Leu | Gin | Lys 75 | Arg | Gly | Ile | Val | Glu 80 |
| Gin | Cys | Cys | Thr | Ser 85 | Ile | Cys | Ser | Leu | Tyr 90 | Gin | Leu | Glu | Asn | Tyr 95 | Cys |
Asn (2) Informacja o SEQ ID NO: 9:
(i) Charakterystyka sekwencj i:
(A) Długość: 21 aminokwasów (B) Typ: aminokwas (C) Niciowość: pojedyncza (D) Topologia: liniowa (ii) Typ cząsteczki: Białko (ix) Cechy:
(A) Nazwa/klucz : białko (B) Położenie: 1..21 (xi) Opis sekwencji: SEQ ID NO: 9:
Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu 15 10 15
Glu Asn Tyr Cys Asp 20 (2) Informacja o SEQ ID NO: 10:
(i) Charakterystyka sekwencj i:
(A) Długość: 3 0 aminokwasów (B) Typ: aminokwas (C) Niciowość: pojedyncza (D) Topologia: liniowa (ii) Typ cząsteczki: białko (ix) Cechy:
(A) Nazwa/klucz: białko
PL 196 626 B1 (B) Położenie: 1..30 (xi) Opis sekwencji: SEQ ID NO: 10:
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr 15 10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr 20 25 30 (2) Informacja o SEQ ID NO: 11:
(i) Charakterystyka sekwencji:
(A) Długość: 97 aminokwasów (B) Typ: ami nokwas (C) Niciowość: pojedyncza (D) Topologia: liniowa (ii) Typ cząsteczki: Białko (ix) Cechy:
(A) Nazwa/klucz : białko (B) Położenie: 1. . 97
| (xi) | Opis sekwencji: | SEQ ID NO: | 11: | |
| Met | Ala | Thr Thr Ser Thr | Gly Asn Ser | Ala Arg Phe Val Lys Gin His |
| 1 | 5 | 10 15 | ||
| Leu | Cys | Gly Ser His Leu | Val Glu Ala | Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu |
| 20 | 25 | 30 | ||
| Arg | Gly | Phe Phe Tyr Thr | Ile Lys Thr | Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro |
| 35 | 40 | 45 | ||
| Gin | Val | Gly Gin Val Glu | Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu | |
| 50 | 55 | 60 | ||
| Gin | Pro | Leu Ala Leu Glu | Gly Ser Leu | Gin Lys Arg Gly Ile Val Glu |
| 65 | 70 | 75 80 | ||
| Gin | Cys | Cys Thr Ser Ile | Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys | |
| 85 | 90 95 |
Asp
PL 196 626 B1
Claims (51)
- Zastrzeżenia patentowe1. Nowe pochodne insuliny o ogólnym wzorze 1, w których (A1-A5) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach A1 do A5 łańcucha A insuliny ludzkiej, (A12-A19) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach A12 do A19 łańcucha A insuliny ludzkiej, A21 oznacza Asn, (B8-B18) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach B8 do B18 łańcucha B insuliny ludzkiej, (B20-B26) oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach B20 do B26 łańcucha B insuliny ludzkiej, A8, A9 i A10 oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach A8, A9 i A10 łańcucha A insuliny ludzkiej lub insuliny zwierzęcej, B30 oznacza -OH lub resztę aminokwasu w pozycji B30 łańcucha B insuliny ludzkiej lub insuliny zwierzęcej, B1 oznacza resztę fenyloalaniny (Phe) lub atom wodoru, B3 oznacza resztę występującego w naturze zasadowego aminokwasu, B27, B28 i B29 oznaczają reszty aminokwasów w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B insuliny ludzkiej lub insuliny zwierzęcej, albo niezależnie resztę innego występującego w naturze aminokwasu, przy czym co najmniej jedna z reszt aminokwasów w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B jest zastąpiona resztą innego występującego w naturze aminokwasu, wybraną z reszt obojętnych i kwasowych aminokwasów, oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 2. Pochodne insuliny według zastrz. 1, w których A8 oznacza alaninę (Ala), A9 oznacza serynę (Ser), A10 oznacza walinę (Val), a B30 oznacza alaninę (Ala), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 3. Pochodne insuliny wedł ug zastrz. 1, w których A8 oznacza treoninę (Thr), A9 oznacza serynę (Ser), a A10 oznacza izoleucynę (Ile), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 4. Pochodne insuliny według zastrz. 3, w których B30 oznacza alaninę (Ala), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 5. Pochodne insuliny wedł ug zastrz. 3, w których B30 oznacza treoninę (Thr), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 6. Pochodne insuliny według zastrz. 1, w których resztę aminokwasu w pozycji B1 łańcucha B stanowi reszta fenyloalaniny (Phe), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 7. Pochodne insuliny według zastrz. 1, w których resztę aminokwasu w pozycji B3 łańcucha B stanowi reszta histydyny (His), lizyny (Lys) lub argininy (Arg), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 8. Pochodne insuliny według zastrz. 7, w których resztę aminokwasu w pozycji B3 łańcucha B stanowi reszta histydyny (His), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 9. Pochodne insuliny według zastrz. 7, w których resztę aminokwasu w pozycji B3 łańcucha B stanowi reszta argininy (Arg), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 10. Pochodne insuliny według zastrz. 7, w których resztę aminokwasu w pozycji B3 łańcucha B stanowi reszta lizyny (Lys), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 11. Pochodne insuliny według zastrz. 1, w których co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta występującego w naturze aminokwasu wybranego z grupy obejmują cej izoleucynę (Ile), kwas asparaginowy (Asp) i kwas glutaminowy (Glu), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 12. Pochodne insuliny według zastrz. 1, w których co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta występującego w naturze aminokwasu wybranego z grupy kwasowych aminokwasów, oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 13. Pochodne insuliny według zastrz. 12, w których co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta kwasu asparaginowego (Asp), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 14. Pochodne insuliny według zastrz. 12, w których co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta kwasu glutaminowego (Glu), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 15. Pochodne insuliny według zastrz. 1, w których co najmniej jedna reszta aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B jest zastąpiona resztą występującego w naturze aminokwasu wybranego z grupy obojętnych aminokwasów, oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 16. Pochodne insuliny według zastrz. 15, w których co najmniej jedną resztę aminokwasu w pozycjach B27, B28 i B29 łańcucha B stanowi reszta izoleucyny (Ile), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 17. Pochodne insuliny według zastrz. 13, w których resztę aminokwasu w pozycji B27 łańcucha B stanowi reszta kwasu asparaginowego (Asp), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 18. Pochodne insuliny według zastrz. 13, w których resztę aminokwasu w pozycji B28 łańcucha B stanowi reszta kwasu asparaginowego (Asp), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.PL 196 626 B1
- 19. Pochodne insuliny według zastrz. 13, w których resztą aminokwasu w pozycji B29 łańcucha B stanowi reszta kwasu asparaginowego (Asp), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 20. Pochodne insuliny według zastrz. 14, w których resztę aminokwasu w pozycji B27 łańcucha B stanowi reszta kwasu glutaminowego (Glu), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 21. Pochodne insuliny według zastrz. 14, w których resztę aminokwasu w pozycji B28 łańcucha B stanowi reszta kwasu glutaminowego (Glu), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 22. Pochodne insuliny według zastrz. 14, w których resztę aminokwasu w pozycji B29 łańcucha B stanowi reszta kwasu glutaminowego (Glu), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 23. Pochodne insuliny według zastrz. 16, w których resztę aminokwasu w pozycji B28 łańcucha B stanowi reszta izoleucyny (Ile), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 24. Pochodne insuliny według zastrz. 22, w których łańcuch B ma sekwencję Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr (SEQ ID NO: 3) , oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 25. Pochodne insuliny według zastrz. 15, w których resztę aminokwasu w pozycji B27 łańcucha B stanowi reszta izoleucyny (Ile), oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 26. Pochodne insuliny według zastrz. 25, w których łańcuch B ma sekwencję Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Ile Pro Lys Thr (SEQ ID NO: 5) , oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 27. Pochodne insuliny według zastrz. 23, w których łańcuch B ma sekwencję Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr (SEQ ID NO: 4) , oraz ich fizjologicznie zgodne sole.
- 28. Sposób wytwarzania nowych pochodnych insuliny oraz ich fizjologicznie zgodnych soli zdefiniowanych w zastrz. 1, znamienny tym, że konstruuje się zdolny do replikacji wektor ekspresyjny zawierający sekwencję DNA kodującą prekursor pochodnej insuliny, w którym reszta aminokwasu w pozycji A1 łańcucha A jest połączona z resztą aminokwasu w pozycji B30 łańcucha B poprzez łańcuch peptydowy o ogólnym wzorze 2, w którym R1n oznacza łańcuch peptydowy mający n reszt aminokwasów, a n oznacza liczbę całkowitą 0-34, a łańcuch B w pozycji B1 jest przedłużony łańcuchem peptydowym o ogólnym wzorze 3, w którym R2m oznacza łańcuch peptydowy mający m reszt aminokwasów, m oznacza liczbę całkowitą 0-40, a p oznacza liczbę 0, 1 lub 2, prowadzi się ekspresję w komórkach gospodarza i uwalnia pochodną insuliny z tego prekursora metodami chemicznymi i/lub enzymatycznymi.
- 29. Sposób według zastrz. 28, znamienny tym, że jako komórki gospodarza stosuje się bakterie.
- 30. Sposób według zastrz. 29, znamienny tym, że jako bakterie stosuje się E. coli.
- 31. Sposób według zastrz. 28, znamienny tym, że jako komórki gospodarza stosuje się drożdże.
- 32. Sposób według zastrz. 31, znamienny tym, że jako drożdże stosuje się Saccharomyces cerevisiae.
- 33. Sposób według zastrz. 28, znamienny tym, że w przypadku wytwarzania pochodnej insuliny zdefiniowanej w zastrz. 24 prekursor pochodnej insuliny ma następującą sekwencjęPL 196 626 B1 Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asn (SEQ ID NO: 6).
- 34. Sposób według zastrz. 28, znamienny tym, że w przypadku wytwarzania pochodnej insuliny zdefiniowanej w zastrz. 26 prekursor pochodnej insuliny ma następującą sekwencję Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Ile Pro Lys Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asn (SEQ ID NO: 8).
- 35. Sposób według zastrz. 28, znamienny tym, że w przypadku wytwarzania pochodnej insuliny zdefiniowanej w zastrz. 27 prekursor pochodnej insuliny ma następującą sekwencję Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asn (SEQ ID NO: 7).
- 36. Prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 6.
- 37. Prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 8.
- 38. Prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 7.
- 39. Sekwencja DNA kodująca prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 6.
- 40. Sekwencja DNA kodująca prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 8.
- 41. Sekwencja DNA kodująca prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 7.
- 42. Wektor ekspresyjny zawierający sekwencję DNA kodującą prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 6.
- 43. Wektor ekspresyjny zawierający sekwencję DNA kodującą prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 8.
- 44. Wektor ekspresyjny zawierający sekwencję DNA kodującą prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 7.PL 196 626 B1
- 45. Komórka gospodarza transformowana wektorem ekspresyjnym zawierającym sekwencję DNA kodującą prekursor pochodnej insuliny mający sekwencję SEQ ID NO: 6, SEQ ID NO: 7 lub SEQ ID NO: 8.
- 46. Środek farmaceutyczny, znamienny tym, że zawiera co najmniej jedną pochodną insuliny i/lub jej fizjologicznie zgodną sól zdefiniowaną w zastrz. 1.
- 47. Środek farmaceutyczny według zastrz. 46, znamienny tym, że zawiera pochodną insuliny i/lub jej fizjologicznie zgodną sól w postaci rozpuszczonej, bezpostaciowej i/lub krystalicznej.
- 48. Środek farmaceutyczny według zastrz. 47, znamienny tym, że dodatkowo zawiera substancję pomocniczą zapewniającą przedłużone działanie.
- 49. Środek farmaceutyczny według zastrz. 48, znamienny tym, że jako substancję pomocniczą zapewniającą przedłużone działanie zawiera siarczan protaminy, przy czym pochodna insuliny i/lub jej fizjologicznie zgodna sól razem z siarczanem protaminy występuje w postaci substancji współwykrystalizowanej.
- 50. Roztwór o aktywności insulinowej do wstrzykiwań, znamienny tym, że zawiera środek farmaceutyczny zdefiniowany w zastrz. 46 w postaci rozpuszczonej.
- 51. Zastosowanie pochodnych insuliny i/lub ich fizjologicznie zgodnych soli zdefiniowanych w zastrz. 1 do wytwarzania ś rodka farmaceutycznego wykazują cego aktywność insulinową o szybko występującym działaniu.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE19726167A DE19726167B4 (de) | 1997-06-20 | 1997-06-20 | Insulin, Verfahren zu seiner Herstellung und es enthaltende pharmazeutische Zubereitung |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL326936A1 PL326936A1 (en) | 1998-12-21 |
| PL196626B1 true PL196626B1 (pl) | 2008-01-31 |
Family
ID=7833099
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL326936A PL196626B1 (pl) | 1997-06-20 | 1998-06-20 | Nowe pochodne insuliny, sposób ich wytwarzania, prekursory pochodnych insuliny, sekwencje DNA kodujące te prekursory, wektory ekspresyjne, komórka gospodarza, środek farmaceutyczny, roztwór o aktywności insulinowej i zastosowanie nowych pochodnych insuliny |
Country Status (32)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6221633B1 (pl) |
| EP (1) | EP0885961B1 (pl) |
| JP (1) | JP3676573B2 (pl) |
| KR (1) | KR100546225B1 (pl) |
| CN (1) | CN1195777C (pl) |
| AR (1) | AR015899A1 (pl) |
| AT (1) | ATE283919T1 (pl) |
| AU (1) | AU740344C (pl) |
| BR (1) | BRPI9803708B8 (pl) |
| CA (1) | CA2235443C (pl) |
| CY (1) | CY2005004I2 (pl) |
| CZ (1) | CZ295964B6 (pl) |
| DE (3) | DE19726167B4 (pl) |
| DK (1) | DK0885961T3 (pl) |
| ES (1) | ES2232900T3 (pl) |
| FR (1) | FR05C0009I2 (pl) |
| HK (1) | HK1016616A1 (pl) |
| HU (1) | HU221176B1 (pl) |
| ID (1) | ID20462A (pl) |
| IL (1) | IL125006A (pl) |
| LU (1) | LU91138I2 (pl) |
| NL (1) | NL300170I2 (pl) |
| NO (2) | NO321720B1 (pl) |
| NZ (1) | NZ330700A (pl) |
| PL (1) | PL196626B1 (pl) |
| PT (1) | PT885961E (pl) |
| RU (1) | RU2207874C9 (pl) |
| SK (1) | SK285267B6 (pl) |
| TR (1) | TR199801144A3 (pl) |
| TW (1) | TW562806B (pl) |
| UA (1) | UA65529C2 (pl) |
| ZA (1) | ZA985363B (pl) |
Families Citing this family (134)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE19947456A1 (de) * | 1999-10-02 | 2001-04-05 | Aventis Pharma Gmbh | C-Peptid zur verbesserten Herstellung von Insulin und Insulinanaloga |
| US7022674B2 (en) | 1999-12-16 | 2006-04-04 | Eli Lilly And Company | Polypeptide compositions with improved stability |
| US8623379B2 (en) | 2000-03-02 | 2014-01-07 | Emory University | Compositions and methods for generating an immune response |
| AU2002252199B2 (en) | 2001-03-08 | 2008-01-03 | Emory University | MVA expressing modified HIV envelope, GAG, and POL genes |
| DE10114178A1 (de) | 2001-03-23 | 2002-10-10 | Aventis Pharma Gmbh | Zinkfreie und zinkarme Insulinzubereitungen mit verbesserter Stabilität |
| NZ531293A (en) * | 2001-08-22 | 2005-08-26 | Aventis Pharma Gmbh | Pharamceuticals containing 1,4-benzothiepine-1,1-dioxide derivatives and another active substances such as ezetimibe, pamaqueside or tiqueside for treating lipid metabolism and atherosclerotic disorders |
| MXPA04001560A (es) * | 2001-08-28 | 2004-05-17 | Lilly Co Eli | Premezclas de glp-1 e insulina basal. |
| US6884812B2 (en) | 2001-08-31 | 2005-04-26 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Diarylcycloalkyl derivatives, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals |
| ES2278077T3 (es) | 2001-08-31 | 2007-08-01 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Derivados de diarilcicloalquilo, procedimiento para su preparacion y su uso como activadores de ppar. |
| US7399777B2 (en) * | 2001-08-31 | 2008-07-15 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Diarylcycloalkyl derivatives, processes for their preparation and their use as pharmceuticals |
| WO2003035099A1 (en) * | 2001-10-19 | 2003-05-01 | Eli Lilly And Company | Biphasic mixtures of glp-1 and insulin |
| US20050250676A1 (en) * | 2001-11-19 | 2005-11-10 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Method of activating insulin receptor substrate-2 to stimulate insulin production |
| WO2003053460A1 (en) * | 2001-12-19 | 2003-07-03 | Eli Lilly And Company | Crystalline compositions for controlling blood glucose |
| US7078404B2 (en) * | 2002-04-11 | 2006-07-18 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Acyl-3-carboxyphenylurea derivatives, processes for preparing them and their use |
| US7223796B2 (en) * | 2002-04-11 | 2007-05-29 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Acyl-4-carboxyphenylurea derivatives, processes for preparing them and their use |
| ATE496064T1 (de) | 2002-05-07 | 2011-02-15 | Novo Nordisk As | Lösliche formulierungen, die monomeres insulin und acyliertes insulin enthalten |
| US7049341B2 (en) * | 2002-06-07 | 2006-05-23 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | N-benzoylureidocinnamic acid derivatives, processes for preparing them and their use |
| DE10231370B4 (de) * | 2002-07-11 | 2006-04-06 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Thiophenglycosidderivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zur Herstellung dieser Arzneimittel |
| US7262220B2 (en) * | 2002-07-11 | 2007-08-28 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Urea- and urethane-substituted acylureas, process for their preparation and their use |
| DE50312261D1 (de) * | 2002-07-12 | 2010-02-04 | Sanofi Aventis Deutschland | Heterozyklisch substituierte benzoylharnstoffe, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel |
| US20040157922A1 (en) * | 2002-10-04 | 2004-08-12 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Carboxyalkoxy-substituted acyl-carboxyphenylurea derivatives and their use as medicaments |
| US7208504B2 (en) * | 2002-10-12 | 2007-04-24 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Bicyclic inhibitors of hormone sensitive lipase |
| US7193035B2 (en) * | 2002-10-29 | 2007-03-20 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Crystals of insulin analogs and processes for their preparation |
| DE10250297A1 (de) * | 2002-10-29 | 2004-05-19 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Kristalle von Insulinanaloga und Verfahren zu ihrer Herstellung |
| US20040138099A1 (en) * | 2002-11-29 | 2004-07-15 | Draeger Eberhard Kurt | Insulin administration regimens for the treatment of subjects with diabetes |
| DE10258007B4 (de) * | 2002-12-12 | 2006-02-09 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Aromatische Fluorglycosidderivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zur Herstellung dieser Arzneimittel |
| DE10258008B4 (de) * | 2002-12-12 | 2006-02-02 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Heterocyclische Fluorglycosidderivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zur Herstellung dieser Arzneimittel |
| US20040242583A1 (en) * | 2003-01-20 | 2004-12-02 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Pyrimido[5,4-e][1,2,4]triazine-5,7-diones, processes for preparing them and their use |
| US7179941B2 (en) * | 2003-01-23 | 2007-02-20 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Carbonylamino-substituted acyl phenyl urea derivatives, process for their preparation and their use |
| DE10306250A1 (de) | 2003-02-14 | 2004-09-09 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Substituierte N-Arylheterozyklen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel |
| US7196114B2 (en) * | 2003-02-17 | 2007-03-27 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Substituted 3-(benzoylureido) thiophene derivatives, processes for preparing them and their use |
| DE10308351A1 (de) * | 2003-02-27 | 2004-11-25 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | 1,3-substituierte Cycloalkylderivate mit sauren, meist heterocyclischen Gruppen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel |
| DE10308353A1 (de) * | 2003-02-27 | 2004-12-02 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Diarylcycloalkylderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel |
| DE10308352A1 (de) * | 2003-02-27 | 2004-09-09 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Arylcycloalkylderivate mit verzweigten Seitenketten, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Anwendung als Arzneimittel |
| US7173151B2 (en) * | 2003-02-27 | 2007-02-06 | Sanofi-Aventisdeutschand Gmbh | Cycloalkyl-substituted alkanoic acid derivatives, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals |
| DE10308355A1 (de) * | 2003-02-27 | 2004-12-23 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Aryl-cycloalkyl substituierte Alkansäurederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Anwendung als Arzneimittel |
| US7148246B2 (en) * | 2003-02-27 | 2006-12-12 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Cycloalkyl derivatives having bioisosteric carboxylic acid groups, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals |
| US7871607B2 (en) * | 2003-03-05 | 2011-01-18 | Halozyme, Inc. | Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases |
| US7501440B2 (en) * | 2003-03-07 | 2009-03-10 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Substituted benzoylureidopyridylpiperidine-and-pyrrolidinecarboxylic acid derivatives, processes for preparing them and their use |
| DE10314610A1 (de) * | 2003-04-01 | 2004-11-04 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Neues Diphenylazetidinon mit verbesserten physiologischen Eigenschaften, Verfahren zu dessen Herstellung, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und dessen Verwendung |
| US20050054818A1 (en) * | 2003-07-02 | 2005-03-10 | Brader Mark Laurence | Crystalline compositions for controlling blood glucose |
| US7008957B2 (en) * | 2003-07-25 | 2006-03-07 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Bicyclic cyanoheterocycles, process for their preparation and their use as medicaments |
| US7094800B2 (en) * | 2003-07-25 | 2006-08-22 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Cyanopyrrolidides, process for their preparation and their use as medicaments |
| EP2085406A1 (en) * | 2003-07-25 | 2009-08-05 | ConjuChem Biotechnologies Inc. | Long lasting insulin derivatives and methods thereof |
| US7094794B2 (en) * | 2003-07-28 | 2006-08-22 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Substituted thiazole-benzoisothiazole dioxide derivatives, process for their preparation and their use |
| DE10335092B3 (de) * | 2003-08-01 | 2005-02-03 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Substituierte Benzoylureido-o-benzoylamide, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung |
| PT2275439E (pt) | 2003-08-05 | 2014-06-25 | Novo Nordisk As | Novos derivados de insulina |
| US7241787B2 (en) * | 2004-01-25 | 2007-07-10 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Substituted N-cycloexylimidazolinones, process for their preparation and their use as medicaments |
| US7402674B2 (en) * | 2004-01-31 | 2008-07-22 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh, | 7-Phenylamino-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives, process for their preparation and their use as medicaments |
| US7498341B2 (en) * | 2004-01-31 | 2009-03-03 | Sanofi Aventis Deutschland Gmbh | Heterocyclically substituted 7-amino-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives, process for their preparation and their use as medicaments |
| US7470706B2 (en) * | 2004-01-31 | 2008-12-30 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Cycloalkyl-substituted 7-amino-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives, process for their preparation and their use as medicaments |
| DE102004005172A1 (de) * | 2004-02-02 | 2005-08-18 | Aventis Pharma Deutschland Gmbh | Indazolderivate als Inhibitoren der Hormon Sensitiven Lipase |
| EP1586573B1 (en) | 2004-04-01 | 2007-02-07 | Sanofi-Aventis Deutschland GmbH | Oxadiazolones, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals |
| GT200500063A (es) | 2004-04-01 | 2005-10-14 | Metodo para tratar la esquizofrenia y/o anormalidades glucoregulatorias | |
| US7833513B2 (en) | 2004-12-03 | 2010-11-16 | Rhode Island Hospital | Treatment of Alzheimer's Disease |
| DE102005026762A1 (de) | 2005-06-09 | 2006-12-21 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Azolopyridin-2-on-derivate als Inhibitoren von Lipasen und Phospholipasen |
| WO2007081824A2 (en) * | 2006-01-06 | 2007-07-19 | Case Western Reserve University | Fibrillation resistant proteins |
| JP2009527526A (ja) * | 2006-02-21 | 2009-07-30 | ノボ・ノルデイスク・エー／エス | 単鎖インスリンのアナログとその製薬的製剤 |
| CN101443314B (zh) * | 2006-03-13 | 2014-04-09 | 杏林制药株式会社 | 作为gsk-3抑制剂的氨基喹诺酮类 |
| DE102006028862A1 (de) | 2006-06-23 | 2007-12-27 | Merck Patent Gmbh | 3-Amino-imidazo[1,2-a]pyridinderivate |
| EP2061767B1 (de) | 2006-08-08 | 2014-12-17 | Sanofi | Arylaminoaryl-alkyl-substituierte Imidazolidin-2,4-dione, Verfahren zu ihrer Herstellung, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und ihre Verwendung |
| WO2008043033A2 (en) | 2006-10-04 | 2008-04-10 | Case Western Reserve University | Fibrillation-resistant insulin and insulin analogues |
| DE102007002260A1 (de) | 2007-01-16 | 2008-07-31 | Sanofi-Aventis | Verwendung von substituierten Pyranonsäurederivaten zur Herstellung von Medikamenten zur Behandlung des Metabolischen Syndroms |
| DE102007005045B4 (de) | 2007-01-26 | 2008-12-18 | Sanofi-Aventis | Phenothiazin Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel |
| DE102007008420A1 (de) | 2007-02-21 | 2008-08-28 | Merck Patent Gmbh | Benzimidazolderivate |
| EP2025674A1 (de) | 2007-08-15 | 2009-02-18 | sanofi-aventis | Substituierte Tetrahydronaphthaline, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel |
| CN101855228B (zh) * | 2007-09-11 | 2012-10-24 | 杏林制药株式会社 | 作为gsk-3抑制剂的氰基氨基喹诺酮和四唑并氨基喹诺酮 |
| EP2203459B1 (en) | 2007-09-12 | 2016-03-16 | Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. | Spirocyclic aminoquinolones as gsk-3 inhibitors |
| DE102007048716A1 (de) | 2007-10-11 | 2009-04-23 | Merck Patent Gmbh | Imidazo[1,2-a]pyrimidinderivate |
| DE102007054497B3 (de) * | 2007-11-13 | 2009-07-23 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Neue kristalline Diphenylazetidinonhydrate und Verfahren zu deren Herstellung |
| NZ603812A (en) | 2007-11-20 | 2014-06-27 | Ambrx Inc | Modified insulin polypeptides and their uses |
| KR20100111683A (ko) | 2008-01-09 | 2010-10-15 | 사노피-아벤티스 도이칠란트 게엠베하 | 극히 지연된 시간-작용 프로필을 갖는 신규 인슐린 유도체 |
| CA2711749A1 (en) | 2008-01-09 | 2009-07-16 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Novel insulin derivatives having an extremely delayed time-action profile |
| EP2242745A1 (de) * | 2008-02-07 | 2010-10-27 | Sanofi-Aventis | Neue phenyl-substituierte imidazolidine, verfahren zu deren herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung |
| DE102008017590A1 (de) | 2008-04-07 | 2009-10-08 | Merck Patent Gmbh | Glucopyranosidderivate |
| US8993516B2 (en) * | 2008-04-14 | 2015-03-31 | Case Western Reserve University | Meal-time insulin analogues of enhanced stability |
| WO2009132129A2 (en) * | 2008-04-22 | 2009-10-29 | Case Western Reserve University | Isoform-specific insulin analogues |
| TWI394580B (zh) | 2008-04-28 | 2013-05-01 | Halozyme Inc | 超快起作用胰島素組成物 |
| TW201014822A (en) | 2008-07-09 | 2010-04-16 | Sanofi Aventis | Heterocyclic compounds, processes for their preparation, medicaments comprising these compounds, and the use thereof |
| KR20120129875A (ko) | 2008-07-31 | 2012-11-28 | 케이스 웨스턴 리저브 유니버시티 | 염소화 아미노산을 갖는 인슐린 유사체 |
| US9200053B2 (en) | 2008-07-31 | 2015-12-01 | Case Western Reserve University | Insulin analogues containing penta-fluoro-Phenylalanine at position B24 |
| DE102008051834A1 (de) | 2008-10-17 | 2010-04-22 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten |
| DE102009038210A1 (de) | 2009-08-20 | 2011-03-03 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten |
| DE102008053048A1 (de) | 2008-10-24 | 2010-04-29 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten |
| RS56632B1 (sr) | 2008-10-17 | 2018-03-30 | Sanofi Aventis Deutschland | Kombinacija insulina i glp-1-agonista |
| WO2010068601A1 (en) | 2008-12-08 | 2010-06-17 | Sanofi-Aventis | A crystalline heteroaromatic fluoroglycoside hydrate, processes for making, methods of use and pharmaceutical compositions thereof |
| EP2406266B1 (en) * | 2009-03-11 | 2013-12-25 | Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. | 7-cycloalkylaminoquinolones as gsk-3 inhibitors |
| KR20120044358A (ko) * | 2009-07-09 | 2012-05-07 | 바이오콘 리미티드 | 비-선형 구배에 기초한 분취용 크로마토그래피 방법 및 이 방법에 의해 정제된 산물 |
| WO2011012718A1 (en) | 2009-07-31 | 2011-02-03 | Ascendis Pharma As | Prodrugs comprising an insulin linker conjugate |
| BR112012001988A2 (pt) | 2009-07-31 | 2017-05-09 | Sanofi Aventis Deutschland | composição de insulina de ação prolongada |
| DK2470552T3 (en) | 2009-08-26 | 2014-02-17 | Sanofi Sa | NOVEL, CRYSTALLINE, heteroaromatic FLUORGLYCOSIDHYDRATER, MEDICINES COVERING THESE COMPOUNDS AND THEIR USE |
| US8399407B2 (en) * | 2009-09-17 | 2013-03-19 | Case Western Reserve University | Non-standard insulin analogues |
| EP2482823A2 (en) | 2009-10-02 | 2012-08-08 | Sanofi | Use of compounds with sglt-1/sglt-2 inhibitor activity for producing medicaments for treatment of bone diseases |
| CN102711804B (zh) | 2009-11-13 | 2015-09-16 | 赛诺菲-安万特德国有限公司 | 包含glp-1激动剂和甲硫氨酸的药物组合物 |
| AU2010317995B2 (en) | 2009-11-13 | 2014-04-17 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Pharmaceutical composition comprising a GLP-1 agonist, an insulin, and methionine |
| RU2012123642A (ru) | 2009-12-11 | 2014-01-20 | Кейз Вестерн Ризев Юнивесити | Аналоги инсулина, содержащие хлорированные аминокислоты |
| WO2011107494A1 (de) | 2010-03-03 | 2011-09-09 | Sanofi | Neue aromatische glykosidderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung |
| DE102010015123A1 (de) | 2010-04-16 | 2011-10-20 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Benzylamidische Diphenylazetidinone, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung |
| US8530413B2 (en) | 2010-06-21 | 2013-09-10 | Sanofi | Heterocyclically substituted methoxyphenyl derivatives with an oxo group, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments |
| RU2598273C2 (ru) | 2010-06-23 | 2016-09-20 | Ново Нордиск А/С | Производные инсулина, содержащие дополнительные дисульфидные связи |
| TW201215387A (en) | 2010-07-05 | 2012-04-16 | Sanofi Aventis | Spirocyclically substituted 1,3-propane dioxide derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as a medicament |
| TW201215388A (en) | 2010-07-05 | 2012-04-16 | Sanofi Sa | (2-aryloxyacetylamino)phenylpropionic acid derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments |
| TW201221505A (en) | 2010-07-05 | 2012-06-01 | Sanofi Sa | Aryloxyalkylene-substituted hydroxyphenylhexynoic acids, process for preparation thereof and use thereof as a medicament |
| MY162837A (en) | 2010-08-17 | 2017-07-31 | Ambrx Inc | Modified relaxin polypeptides and their uses |
| JP6199186B2 (ja) | 2010-08-30 | 2017-09-20 | サノフィ−アベンティス・ドイチュラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング | ２型糖尿病の治療用の医薬の製造のためのａｖｅ００１０の使用 |
| EP2438930A1 (en) | 2010-09-17 | 2012-04-11 | Sanofi-Aventis Deutschland GmbH | Prodrugs comprising an exendin linker conjugate |
| MA34913B1 (fr) | 2011-01-20 | 2014-02-01 | Zealand Pharma As | Combinaison d'analogues du glucagon acylé à des analogues d'insuline |
| WO2012120050A1 (de) | 2011-03-08 | 2012-09-13 | Sanofi | Neue substituierte phenyl-oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung |
| WO2012120053A1 (de) | 2011-03-08 | 2012-09-13 | Sanofi | Verzweigte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung |
| WO2012120056A1 (de) | 2011-03-08 | 2012-09-13 | Sanofi | Tetrasubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung |
| WO2012120058A1 (de) | 2011-03-08 | 2012-09-13 | Sanofi | Mit benzyl- oder heteromethylengruppen substituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung |
| WO2012120055A1 (de) | 2011-03-08 | 2012-09-13 | Sanofi | Di- und trisubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung |
| WO2012120051A1 (de) | 2011-03-08 | 2012-09-13 | Sanofi | Mit adamantan- oder noradamantan substituierte benzyl-oxathiazinderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung |
| US8901114B2 (en) | 2011-03-08 | 2014-12-02 | Sanofi | Oxathiazine derivatives substituted with carbocycles or heterocycles, method for producing same, drugs containing said compounds, and use thereof |
| US8828994B2 (en) | 2011-03-08 | 2014-09-09 | Sanofi | Di- and tri-substituted oxathiazine derivatives, method for the production thereof, use thereof as medicine and drug containing said derivatives and use thereof |
| WO2012120057A1 (de) | 2011-03-08 | 2012-09-13 | Sanofi | Neue substituierte phenyl-oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung |
| US9821032B2 (en) | 2011-05-13 | 2017-11-21 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Pharmaceutical combination for improving glycemic control as add-on therapy to basal insulin |
| US20130011378A1 (en) | 2011-06-17 | 2013-01-10 | Tzung-Horng Yang | Stable formulations of a hyaluronan-degrading enzyme |
| US10995129B2 (en) * | 2011-07-13 | 2021-05-04 | Case Western Reserve University | Non-standard insulin analogues |
| US9487572B2 (en) * | 2011-07-13 | 2016-11-08 | Case Western Reserve University | Non-standard insulin analogues |
| JP6367115B2 (ja) | 2011-08-29 | 2018-08-01 | サノフィ−アベンティス・ドイチュラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング | ２型糖尿病患者の血糖コントロールに使用する組合せ医薬 |
| TWI559929B (en) | 2011-09-01 | 2016-12-01 | Sanofi Aventis Deutschland | Pharmaceutical composition for use in the treatment of a neurodegenerative disease |
| EP2567959B1 (en) | 2011-09-12 | 2014-04-16 | Sanofi | 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors |
| WO2013037390A1 (en) | 2011-09-12 | 2013-03-21 | Sanofi | 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors |
| EP2760862B1 (en) | 2011-09-27 | 2015-10-21 | Sanofi | 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-alkyl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors |
| DE18200782T1 (de) * | 2012-04-02 | 2021-10-21 | Modernatx, Inc. | Modifizierte polynukleotide zur herstellung von proteinen im zusammenhang mit erkrankungen beim menschen |
| AR090843A1 (es) | 2012-05-09 | 2014-12-10 | Lilly Co Eli | Tratamiento para diabetes comorbida con enfermedad renal cronica |
| US20130315891A1 (en) | 2012-05-25 | 2013-11-28 | Matthew Charles | Formulations of human tissue kallikrein-1 for parenteral delivery and related methods |
| HUE032613T2 (en) | 2012-06-04 | 2017-10-30 | Diamedica Therapeutics Inc | Human tissue kallikrein 1 is glycosylated isoforms |
| KR102569743B1 (ko) | 2014-10-06 | 2023-08-23 | 케이스 웨스턴 리저브 유니버시티 | 이상 단일 사슬 인슐린 유사체 |
| MX2017007699A (es) | 2014-12-12 | 2017-09-18 | Sanofi Aventis Deutschland | Formulacion de proporcion fija de insulina glargina/lixisenatida. |
| TWI748945B (zh) | 2015-03-13 | 2021-12-11 | 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 | 第２型糖尿病病患治療 |
| TW201705975A (zh) | 2015-03-18 | 2017-02-16 | 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 | 第２型糖尿病病患之治療 |
| AU2018230478A1 (en) | 2017-03-09 | 2019-09-12 | Diamedica Inc. | Dosage forms of tissue kallikrein 1 |
Family Cites Families (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3758683A (en) * | 1971-04-30 | 1973-09-11 | R Jackson | Insulin product |
| US3868358A (en) | 1971-04-30 | 1975-02-25 | Lilly Co Eli | Protamine-insulin product |
| US4783441A (en) | 1979-04-30 | 1988-11-08 | Hoechst Aktiengesellschaft | Aqueous protein solutions stable to denaturation |
| EP0018609B1 (de) | 1979-04-30 | 1983-09-21 | Hoechst Aktiengesellschaft | Gegen Denaturierung beständige, wässrige Protein-Lösungen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung |
| AU558474B2 (en) | 1981-07-17 | 1987-01-29 | Nordisk Insulinlaboratorium | A stable aqueous, therapeutic insulin preparation and a process for preparing it |
| NL193099C (nl) | 1981-10-30 | 1998-11-03 | Novo Industri As | Gestabiliseerde insuline-oplossing. |
| DE3440988A1 (de) | 1984-11-09 | 1986-07-10 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Verfahren zur spaltung von peptiden und proteinen an der methionyl-bindung |
| DE3526995A1 (de) | 1985-07-27 | 1987-02-05 | Hoechst Ag | Fusionsproteine, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung |
| PH25772A (en) | 1985-08-30 | 1991-10-18 | Novo Industri As | Insulin analogues, process for their preparation |
| DE3541856A1 (de) | 1985-11-27 | 1987-06-04 | Hoechst Ag | Eukaryotische fusionsproteine, ihre herstellung und verwendung sowie mittel zur durchfuehrung des verfahrens |
| DE3544295A1 (de) | 1985-12-14 | 1987-06-19 | Bayer Ag | Thermoplastische formmassen mit hoher kriechstromfestigkeit |
| DE3726655A1 (de) | 1987-08-11 | 1989-02-23 | Hoechst Ag | Verfahren zur isolierung basischer proteine aus proteingemischen, welche solche basischen proteine enthalten |
| DK257988D0 (da) | 1988-05-11 | 1988-05-11 | Novo Industri As | Nye peptider |
| JPH04502465A (ja) * | 1988-12-23 | 1992-05-07 | ノボ ノルディスク アクティーゼルスカブ | ヒトインシュリン類似物質 |
| NZ232375A (en) * | 1989-02-09 | 1992-04-28 | Lilly Co Eli | Insulin analogues modified at b29 |
| US5358857A (en) | 1989-08-29 | 1994-10-25 | The General Hospital Corp. | Method of preparing fusion proteins |
| DK155690D0 (da) | 1990-06-28 | 1990-06-28 | Novo Nordisk As | Nye peptider |
| DK10191D0 (da) * | 1991-01-22 | 1991-01-22 | Novo Nordisk As | Hidtil ukendte peptider |
| ES2097426T3 (es) | 1992-12-02 | 1997-04-01 | Hoechst Ag | Procedimiento para la obtencion de proinsulina con puentes de cistina correctamente unidos. |
| DE4405179A1 (de) | 1994-02-18 | 1995-08-24 | Hoechst Ag | Verfahren zur Gewinnung von Insulin mit korrekt verbundenen Cystinbrücken |
-
1997
- 1997-06-20 DE DE19726167A patent/DE19726167B4/de not_active Expired - Lifetime
-
1998
- 1998-06-15 DE DE200412000049 patent/DE122004000049I2/de active Active
- 1998-06-15 AT AT98110889T patent/ATE283919T1/de active
- 1998-06-15 ES ES98110889T patent/ES2232900T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-06-15 PT PT98110889T patent/PT885961E/pt unknown
- 1998-06-15 DE DE59812316T patent/DE59812316D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-06-15 DK DK98110889T patent/DK0885961T3/da active
- 1998-06-15 EP EP98110889A patent/EP0885961B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-06-17 SK SK836-98A patent/SK285267B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1998-06-17 NZ NZ330700A patent/NZ330700A/xx not_active IP Right Cessation
- 1998-06-18 US US09/099,307 patent/US6221633B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-06-18 CA CA2235443A patent/CA2235443C/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-06-18 HU HU9801368A patent/HU221176B1/hu active Protection Beyond IP Right Term
- 1998-06-18 TR TR1998/01144A patent/TR199801144A3/tr unknown
- 1998-06-18 CZ CZ19981934A patent/CZ295964B6/cs not_active IP Right Cessation
- 1998-06-18 UA UA98063193A patent/UA65529C2/uk unknown
- 1998-06-18 ID IDP980887A patent/ID20462A/id unknown
- 1998-06-18 AR ARP980102911A patent/AR015899A1/es active IP Right Grant
- 1998-06-18 RU RU98112109/14A patent/RU2207874C9/ru active Protection Beyond IP Right Term
- 1998-06-19 AU AU73064/98A patent/AU740344C/en not_active Expired
- 1998-06-19 KR KR1019980023037A patent/KR100546225B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1998-06-19 ZA ZA985363A patent/ZA985363B/xx unknown
- 1998-06-19 IL IL125006A patent/IL125006A/en not_active IP Right Cessation
- 1998-06-19 NO NO19982860A patent/NO321720B1/no not_active IP Right Cessation
- 1998-06-19 CN CNB981149502A patent/CN1195777C/zh not_active Expired - Lifetime
- 1998-06-19 JP JP17237998A patent/JP3676573B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1998-06-20 PL PL326936A patent/PL196626B1/pl unknown
- 1998-06-22 BR BRPI9803708A patent/BRPI9803708B8/pt not_active IP Right Cessation
- 1998-07-10 TW TW087109743A patent/TW562806B/zh not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-04-21 HK HK99101746A patent/HK1016616A1/xx not_active IP Right Cessation
-
2005
- 2005-01-27 NL NL300170C patent/NL300170I2/nl unknown
- 2005-02-02 LU LU91138C patent/LU91138I2/fr unknown
- 2005-03-21 FR FR05C0009C patent/FR05C0009I2/fr active Active
- 2005-03-28 CY CY200500004C patent/CY2005004I2/el unknown
-
2006
- 2006-10-26 NO NO2006014C patent/NO2006014I1/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL196626B1 (pl) | Nowe pochodne insuliny, sposób ich wytwarzania, prekursory pochodnych insuliny, sekwencje DNA kodujące te prekursory, wektory ekspresyjne, komórka gospodarza, środek farmaceutyczny, roztwór o aktywności insulinowej i zastosowanie nowych pochodnych insuliny | |
| FI79786B (fi) | Foerfarande foer framstaellning ett farmaceutiskt medel foer behandling av diabetes. | |
| US5268453A (en) | Tissue-selective insulin analogs | |
| RU2176646C2 (ru) | Инсулин и его производные с повышенной способностью связывать цинк | |
| WO2018165290A1 (en) | Single-chain insulin analogues stabilized by a fourth disulfide bridge | |
| JP2009542741A (ja) | アミド化されたグラルギンインスリン | |
| IE901004L (en) | Novel insulin compounds | |
| PT804479E (pt) | Método para o tratamento de diabetes mellitus utilizando kgf | |
| AU757275B2 (en) | Novel insulin analogs with enhanced zinc binding | |
| US7193035B2 (en) | Crystals of insulin analogs and processes for their preparation | |
| MXPA98004945A (en) | New insulin derivatives with rapid initiation of efe | |
| MXPA05004440A (es) | Cristales de analogos de insulina y metodo para la produccion de los mismos. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| RECP | Rectifications of patent specification |