CZ193498A3 - Nové deriváty inzulinu s rychlým začátkem působení, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje - Google Patents

Nové deriváty inzulinu s rychlým začátkem působení, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje Download PDF

Info

Publication number
CZ193498A3
CZ193498A3 CZ981934A CZ193498A CZ193498A3 CZ 193498 A3 CZ193498 A3 CZ 193498A3 CZ 981934 A CZ981934 A CZ 981934A CZ 193498 A CZ193498 A CZ 193498A CZ 193498 A3 CZ193498 A3 CZ 193498A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
gly
amino acid
chain
insulin
glu
Prior art date
Application number
CZ981934A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ295964B6 (cs
Inventor
Johann Dr. Ertl
Paul Dr. Habermann
Karl Dr. Geisen
Gerhard Dr. Seipke
Original Assignee
Hoechst Marion Roussel Deutschland Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=7833099&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ193498(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Hoechst Marion Roussel Deutschland Gmbh filed Critical Hoechst Marion Roussel Deutschland Gmbh
Publication of CZ193498A3 publication Critical patent/CZ193498A3/cs
Publication of CZ295964B6 publication Critical patent/CZ295964B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/62—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/28—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/80—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi
    • C12N15/81—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi for yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Nové deriváty inzulínu s rychlým začátkem působení, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje
Oblast techniky
Vynález popisuje deriváty inzulínu, které ve srovnání s lidským inzulínem vykazují zrychlený' začátek působení, způsob jejich přípravy a jejich použití především ve farmaceutických prostředcích k léčení Diabetes mellitus.
Dosavadní stav techniky
Ve světě trpí asi 120 miliónů lidí na Diabetes mellitus. Mezi nimi je asi 12 miliónů diabetiků typu I, pro které je aplikace inzulínu v současnosti jedinou možností terapie. Postižení jsou doživotně, zpravidla několikrát denně odkázáni na injekci inzulínu. Ačkoli Diabetes typu II, kterým trpí asi 100 miliónů lidí, není primárně způsoben nedostatkem inzulínu, přesto se v mnoha případech léčba inzulínem používá jako příznivá nebo jediná možná forma terapie.
S pokračující dobou trvání onemocnění trpí velký počet pacientů takzvanými opožděnými diabetickými komplikacemi. Jedné se přitom v podstatě o mikro- a makrovaskuiární poškození, které vedou, podle druhu a rozsahu, k selháni ledvin, k oslepnutí, ke ztrátě končetin nebo ke zvýšenému riziku onemocnění srdce nebo oběhového systému.
Příčinou komplikací je v první řadě chronicky zvýšená hladina glukózy v krevním obraze, protože i pečlivá snaha o dosažení normální hladiny glukózy v krvi takovou inzulínovou terapií, jaká by odpovídala fyziologické regulaci, není
Η • ·· • « ♦ * ♦ · · • · ·· ·· · · *
4 · • 4 *·
-2úspěšná (Ward, J. D. (1989) British Medicai Bulletin 45, strana 111 až 126; Drury, P.L. a další (1989) British Medicai Bulletin 45, strana 127 až 147; Kohner, E.M. (1989) British Medicai Bulletin 45, strana 148 až 173).
U zdravých jedinců sekrece, inzulínu úzce závisí na koncentraci glukózy v krvi. Její zvýšená hladina, ke které dochází po požití potravy, je rychle kompenzována zvýšeným uvolňováním inzulínu. V období hladovění klesá hladina inzulínu v plazmě na bazální hodnotu, která zaručuje kontinuální zásobování inzulín-senzitivních orgánů a tkání glukózou. Optimalizace- terapie, takzvaná intenzivní · inzulínová terapie se v současnosti soustředí primárně na to, aby kolísaní koncentrace glukózy v krvi, a to zvláště směrem nahoru, bylo co možná nejmenši (Bolli, G. B. (1989) Diabetes Res. Clin. Pract. 6, strana 3 až 16; Berger, M. (1989) Diabetes Res. Clin. Pract. 6, strana 25 až 32). To pak vede k výraznému snížení výskytu a nástupu poškození během pozdní fáze onemocnění. (The Diabetes Control and Complications Trial Research Group (1993) N. Engl. J. Med, 329, strana 977 až 986).
Z fyziologie sekrece inzulínu je možné odvodit, že pro zlepšenou, intenzivní inzulínovou terapii jsou při použití subkutánně aplikovaných preparátů potřebné dva inzulínové přípravky s odlišnou farmakodynamíkou. Ke kompenzaci vzestupu glukózy v krvi po požití jídla musí inzulín začít účinkovat rychle a může působit jen několik hodin. K bazálnímu zásobováni, především v noci, by- měl být k dispozici preparát, který působí dlouho, nedosahuje žádného výrazného maxima koncentrace a začíná účinkovat jen velmi pomalu.
Preparáty, které jsou odvozeny z lidského a zvířecího inzulínu, splňují nároky inzulínové terapie jenom omezeně. Rychle účinkující inzulín (Alt-inzulín) se po subkutánní
00«
00 • 00 · 0 0 · *0« • 0000 00 «· 00 00
-3aplikaci dostává do krve a na místo působení příliš pomalu a působí po příliš dlouhou dobu. Důsledkem toho je, že postprandiální (po požití potravy) hladina glukózy je příliš vysoká a že za několik hodin po požití potravy hladina glukózy v krvi příliš výrazně klesne (Kang, Ξ. a další (1991) Diabetes Care 14, strana 142 až 148; Home P.J. a další (1989) British Medical Bulletin 45, strana 92 až 110; Bolli, G. B. (1989) Diabetes Res. Clin. Pract. 6, strana S3 až S16). Dostupné bazální inzulíny, především NPHinzulíny, vykazují příliš krátkou dobu působení a dosahují příliš výrazného maxima koncentrace glukózy.
Vedle možnosti ovlivnit profil účinku inzulínu galenickými principy se v současnosti naskytuje možnost navrhnout s pomocí genových technik deriváty inzulínu s určitými vlastnostmi, jako je například začátek působení a doba účinku. Této změny lze dosáhnout tím, že se změní strukturní vlastnosti inzulínu. Použitím vhodných derivátů inzulínu by pak bylo možné dosáhnout podstatně lepší nastavení hladiny glukózy v krvi, které by bylo více podobné přirozeným poměrům.
Deriváty inzulínu se zrychleným začátkem působení jsou popsány v EP 0 214 826, EP 0 375 437 a EP 0 678 522. EP 0 214 826 mimo jiné popisuje substituci v pozici B27 a B28 avšak ne ve spojení se substitucí v pozici B3. EP 0 678 522 popisuje deriváty inzulínu, které mají v pozici B29 různé aminokyseliny, zejména prolin avšak ne kyselinu glutamovou. EP 0 375 437 popisuje inzulínové deriváty s lysinem nebo argininem v pozici B28, které můžou být ještě výhodně modifikovány v pozici B3 a/nebo A21.
V EP 0 419 504 jsou popsány deriváty inzulínu, které jsou chráněny proti chemickým modifikacím, přičemž je zaměněn asparagin v pozici B3 a minimálně ještě jedna další aminokyselina v pozici A5, A15, A18 nebo A21. Kombinace s
-4 φφ φ φφφ * ** φφ modifikacemi v pozicích Β27, Β28 nebo Β29 vsak nebyly dosud popsány. Rovněž nebyl dosud popsán důkaz toho, že tyto sloučeniny mají pozměněnou farmakodynamiku s rychlejším začátkem působení.
Ve WO 92/00321 byly popsány deriváty inzulínu, u kterých je minimálně jedna aminokyselina v pozicích BI až B6 nahrazena lysinem nebo argininem. Takovéto inzulíny vykazují podle WO 92/00321 prodloužený účinek. Kombinace s modifikacemi v pozicích B27, B28 a-B29 však nebyly popsány.
Cílem vynálezu je připravit deriváty inzulínu, které po aplikaci, především po subkutánní aplikaci, vykazují ve srovnáni s lidským inzulínem zrychlený začátek působení.
Deriváty inzulínu jsou deriváty přirozeně se vyskytujících inzulínů, t.j. lidského (viz. Sekvence id.č.:l t.j. A-řetězec lidského inzulínu; Sekvence id.č.:2 t.j. Břetězec lidského inzulínu, sekvenční protokol} nebo zvířecího inzulínu, které se od odpovídajícího, přirozeně se vyskytujícího inzulínu odlišují substitucí alespoň jednoho přirozeně se vyskytujícího aminokyselinového zbytku a/nebo adicí alespoň jednoho aminokyselinového zbytku a/nebo organického zbytku.
Cílem, předloženého patentu je dále poskytnout postup pro přípravu derivátů inzulínů s jmenovanými vlastnostmi, odpovídajících meziproduktů jako i jejich prekurzorů.
Vynález popisuje inzulínový derivát . nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl který splňuje tento cíl, ve kterém je asparagin (Asn) v pozicí B3 řetězce B zaměněn za přirozeně se vyskytující bazický aminokyselinový zbytek a alespoň jeden aminokyselinový zbytek v pozicích B27, B28 nebo B29 B-řetezce je zaměněn za jiný přirozeně se vyskytující aminokyselinový zbytek, přičemž může být fakultativně vyměněn asparagin (Asn) v pozici A21 řetězce A ·« • * • · · 44 · ·4
444 0 4 ·
4 · ·4·
440 4 ·
4 4
44
-5za Asp, Gly, Ser, Thr nebo Ala a fenylalanin (Phe) v pozici Bl řetězce Ba aminokyselinový zbytek v pozici B 30 řetězce B mohou zcela chybět.
Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl jsou znázorněny Vzorcem I
S-S ) r | Vzorec I.
(A1-A5)-Cys-Cys-A8-A9-A10-Cys-(A12-A19)-Cys-A21
S—--S S-s
Bl-Val-B3-Glu-His-Leu-Cys-(B8-B18)-Cys-(B20-B26)-B27-B28-B29-B30 kde (A1-A5) označují aminokyselinové zbytky v pozicích Al až A5 řetězce A lidského (srovnej se Sekvencí id.č.:l) nebo zvířecího inzulínu, (A12-A19) označují aminokyselinové zbytky v pozicích A12 až A19 řetězce A lidského (srovnej se Sekvencí id.č.:l) nebo zvířecího inzulínu, (B8-B18) označují aminokyselinové zbytky v pozicích B8 až B18 řetězce B lidského, (srovnej se Sekvencí id.č.:2) nebo zvířecího inzulínu, (B20-B26) označují aminokyselinové zbytky v pozicích B20 až B26 řetězce B lidského (srovnej se Sekvencí id.č.:2) nebo zvířecího inzulínu,
A8, A9, A10 označují aminokyselinové pozicích A8, A9 a A10 řetězce Alidského Sekvencí id.č.: 1) nebo zvířecího inzulínu, zbytky v (srovnej se
A21 je Asn, Asp, Gly, Ser, Thr nebo Ala • » φ · * • » · ··· ·· « * * • · · · ·· «* φ · ·· ·«· · φ « « • Φ ·♦
-6Β30 označuje -OH nebo aminokyselinový zbytek v pozicí S30 řetězce B lidského {srovnej se Sekvencí id.č.:2) nebo zvířecího inzulínu
B1 . označuje fenylalaninový zbytek (Phe) nebo atom vodíku i
B3 označuje přirozeně se vyskytující .bazický aminokyselinový zbytek i <
B27, B26 a B29 označují aminokyselinové zbytky v pozicích B27, B28, a B29 řetězce B lidského (srovnej se Sekvencí id.č.:2) nebo zvířecího inzulínu nebo vždy jiný přirozeně se vyskytující aminokyselinový zbytek, přičemž alespoň jeden aminokyselinový zbytek v pozici B27, B28 a B29 řetězce B je vyměněn , za jiný přirozeně se vyskytující aminokyselinový zbytek.
Z dvaceti přirozeně se vyskytujících aminokyselin, které jsou geneticky kódovány, jsou v dalším textu glycin (Gly) , alanin (Ala), valin (Val), leucin (Leu), isoleucin (Ile), serin (Ser), threonin (Thr), cystein (Cys), methionin (Met), asparagin (Asn), glutamin (Gin), fenylalanin (Phe), tyrosin (Tyr), tryptofan (Trp) a prolin (Pro) označovány jako neutrální aminokyseliny, aminokyseliny arginin (Arg), lysin (Lys) a histidin (His) jako bazické a aminokyseliny kyselina asparagová (Asp) a kyselina glutamová (Glu) jako kyselé aminokyseliny.
Výhodné jsou deriváty inzulínu podle vynálezu nebo jejich fyziologicky přijatelné soli odvozené od hovězího, vepřového nebo lidského inzulínu, zvláště výhodné jsou pak deriváty inzulínu nebo jejich fyziologicky přijatelné soli podle Vzorce I , kde
A8 znamená alanin (Ala),
A9 serin (Ser), φ
• φφφ « ··
-7φφφ φ φ
Α10 valin (Val) a
Β30 alanin (Ala) (aminokyselinové zbytky A8 až A10 a
B30 hovězího insulinu);
A8 znamená threonin (Thr),
A9 serin (Ser) a
A10 isoleucin dle) (aminokyselinové zbytky A8 až A10 lidského nebo prasečího insulinu), přičemž
B30 znamená alanin (Ala) (aminokyselinový zbytek B30 prasečího insulinu) nebo
B30 znamená threonin (Thr) (aminokyselinový zbytek B30 lidského insulinu, srovnej se Sekvencí id.č.:2).
Ve zvláště výhodném provedení vynálezu má derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I aminokyselinové zbytky A8 až A10 a B30 lidského inzulínu a dále:
(Al až A5) označuje aminokyselinové zbytky v pozicích Al až A5 řetězce A lidského inzulínu (srovnej se Sekvencí id.č.: 1), (A12 až A19) aminokyselinové zbytky v pozicích A12 až A19 řetězce A lidského inzulínu (srovnej se Sekvencí, id.č.:1), (B8 až B18) aminokyselinové zbytky v pozicích B8 až B18 řetězce B lidského inzulínu (srovnej se Sekvencí id.č.:2) a (B20 až B26) aminokyselinové zbytky v pozicích B20 až B26 řetězce B lidského inzulínu (srovnej se Sekvencí id.č.:2).
• ·· · fl fl·· · · fl* ·· · ♦ · ·· flfl flfl* * * • flfl flflfl· · * · ··· flfl ·· ·· ·» flfl
-8V dalších výhodných provedeních vynálezu má derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I v pozici Bi řetězce B fenylalaninový zbytek (Phe) nebo derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl Vzorce I, který má jako aminokyselinový zbytek v pozici B3 řetězce B histidin (His), lysin (Lys) nebo arginin (Arg).
V jiném výhodném provedení vynálezu má derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B nahrazen jedním přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem, který patří do skupiny tvořené neutrálními nebo kyselými aminokyselinami.
Vynález dále popisuje výhodný derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl podle Vzorce I kde alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem, který je vybrán ze skupiny tvořené aminokyselinami: isoleucin (Ile), kyselina asparagová (Asp) a kyselina glutamová (Glu); a ve zvláště výhodném je alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27 a B28 řetězce B nahrazen přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem, který je vybrán ze skupiny neutrálních aminokyselin, nebo v dalším obzvláště výhodném provedení vynálezu je alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B derivátu inzulínu podle vynálezu isoleucinovým zbytkem (Ile) .
Vynález dále popisuje výhodný derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl podle Vzorce I, kde alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem, který je vybrán ze skupiny kyselých aminokyselin; nebo výhodně kde alespoň jeden z
-99 4 »94 4444 · ·44· 4 944
4499 444
44 44 44 44 44 aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je zbytek kyseliny asparagové (Asp); nebo výhodně- kde aminokyselinový zbytek v pozicích B27 nebo B28 řetězce B je zbytkem kyseliny asparagové (Asp), nebo ještě výhodněji kde alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je zbytkem kyseliny glutamové (Glu).
Výhodným provedením vynálezu je.také derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, kde je aminokyselinový zbytek v pozici B29 řetězce B zbytkem kyseliny asparagové (Asp).
Dalším výhodným provedením vynálezu je derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B27 řetězce B zbytkem kyseliny glutamové (Glu); nebo derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B28 řetězce B zbytkem kyseliny glutamové (Glu) nebo derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl Vzorce I, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B29 řetězce B zbytkem kyseliny glutamové (Glu).
Zvláště výhodným provedením vynálezu je derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, který se vyznačuje tím, že řetězec B vykazuje sekvenci
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr (Sekvence id.č.:3), například lidský mutantní inzulín Lys (B3), Glu (B29) .
Dalším zvláště výhodným provedením vynálezu je derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B27 řetězce
5 9 • ·· »4 6 9 · 99 4 «99 «9 «99 9
9 · 9· «9 ·9· · ·
999 9 9 · 9 9 9 9
99« 9« «· 99 99 ··
-10Β zbytkem aminokyseliny isoleucinu (Ile); a zvláště výhodným pak je zejména derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, ve kterém B-řetězec vykazuje sekvenci
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Sér His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Ile Pro Lys Thr (Sekvence id.č.:5), například lidský mutantní inzulín Lys (B3), Ile (B27).
Dalším výhodným provedením vynálezu je derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce · I, ve kterém je v pozici B28 řetězce B isoleucinový zbytek (Ile); a zvláště výhodným pak je zejména derivát inzulínu, nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, ve;, kterém B-řetězec vykazuje sekvenci:
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val· Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr (Sekvence id.č.:4), například lidský mutantní inzulín Lys? (B3), Ile (B28).
Dalším výhodným provedením vynálezu je derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, který se vyznačuje tím, že aminokyselinový zbytek v pozici B28 řetězce B je isoleucin (Ile) a aminokyselinový zbytek v pozici A21 je asparagin (Asp); zejména výhodný pak je derivát inzulínu jehož A-řetězec vykazuje sekvenci:
Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr.Gin
Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asp (Sekvence id.č.: 9} a B-řetězec sekvenci
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu
Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr
-11·· ·· · *
· · 0« • · · • t · »♦ · « *
Φ · ·· ··· · ·
0 * • Φ ·» (Sekvence id.č.:10), například lidský mutantní inzulín (Lys (B3), Ile (B28), Asp (A21).
Deriváty inzulínu podle vzorce I je možné připravit pomocí genových technologií.
Vynález dále popisuje způsob přípravy derivátu inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelné soli podle Vzorce I konstrukcí replikovatelného expresního systému, který obsahuje DNA sekvenci kódující prekurzor derivátu inzulínu, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozicí Al řetězce A spojen s aminokyselinovým zbytkem B30 řetězce B peptidovým řetězcem podle Vzorce II
-Arg- II kde, R1!, - znamená peptidový řetězec, s n aminokyselinovými zbytky přičemž n je celé číslo z intervalu od 0 do 34; a řetězec Bje v pozici BI prodloužen o peptidový řetězec podle Vzorce III
Met-R2,r- (Arg) p- III kde, Rv: dole znamená peptidový řetězec s m aminokyselinovými zbytky přičemž m celé číslo od 0 do 40, ve výhodném provedení vynálezu od 0 po 9, a p znamená 0, 1 nebo 2, přičemž pro p=0 končí R2m výhodně aminokyselinou lysinem (Lys). Exprese v hostitelské buňce a uvolnění derivátu inzulínu z jeho prekurzorů je realizováno chemickými a/nebo enzymatickými způsoby.
Ve způsobu podle vynálezu může být hostitelskou buňkou bakterie, zejména pak bakterie E. coli.
Ve způsobu podle vynálezu může být hostitelskou buňkou rovněž kvasinka, přičemž ve výhodném provedení vynálezu je touto buňkou kvasinka Saccharomyces cerevisiae.
«φφφ φφφ ··· • φφ φφφ® φ φφφ
-12 Φ* * φ φ φ φφ φφφφφ φφ φφ φφ φφ
Κ přípravě derivátu inzulínu s aminokyselinovou sekvencí podle Sekvence id.č.:9 (řetězec A) a Sekvence id.č.:10 (řetězec B) je výhodně použit prekurzor derivátu inzulínu se sekvencí:
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin
His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys
Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr Arg Arg Glu Ala
Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly
Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys
Arg Gly Ile Val. Glu Gin Cys Cys Thr· Ser Ile Cys Ser Leu Tyr
Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asp
(Sekvence i d.č. : 11 }, Lys (B3) , I :ie (B28 ) , Asp (A21 )-
preproinsulin.
K přípravě derivátu insulinu s aminokyselinovou sekvencí podle Sekvence id.č.:3 je výhodně použit prekurzor derivátu inzulínu še sekvencí:
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu
Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr
Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly
Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly
Ser Leu Gin Lys Arg
Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser. Ile Cys Ser Leu Tyr Gin
Leu Glu Asn Tyr Cys Asn
(Sekvence id.č.: 6), Lys (B3), Glu (B29)-preproinsulin.
K přípravě derivátu inzulínu s aminokyselinovou sekvencí podle Sekvence id.č.:5 je výhodně použit prekurzor derivátu inzulínu se sekvencí:
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu « 9
-139 *· • * *'
9»· ·* • · *
9 999 • 9 9
9 9 *9 ··
Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Ile Pro Lys Thr
Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly
Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly
Ser Leu Gin Lys Arg
Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin
Leu Glu Asn Tyr Cys Asn
(Sekvence id.č.:8), Lys (B3), Ile (B27)-preproinsulin.
K přípravě derivátu inzulínu s aminokyselinovou sekvencí podle Sekvence id.č.:4 je výhodně použit prekurzor derivátu inzulínu se sekvencí:
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala •Leu
Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr
Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly
Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu .Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly
Ser Leu Gin Lys Arg
Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin
Leu Glu Asn Tyr Cys Asn
(Sekvence id.č.:7), Lys (B3), Ile (B28)-preproinsulin.
Vynález rovněž popisuje jmenované prekurzory výhodného derivátu inzulínu, totiž peptidy podle Sekvence id.č.:11, Sekvence id.č.:6, Sekvence id.č.:7 a Sekvence id.č.: 8; sekvence DNA, které kódují vzpomínané prekurzory, expresní systémy, které obsahují tyto DNA sekvence jakož i hostitelské buňky, které jsou transformovány tímto expresním systémem.
Derivátu inzulínu podle Vzorce I se připravují hlavně genovými technikami prostřednictvím cílené mutageneze pomocí způsobů známých ze stavu techniky.
Pro požadovaný derivát inzulínu Vzorce I se konstruuje genová struktura, která je poté exprimována v hostitelské
«Φ · · • ·· » « 9 t · • · « 9 ··
• 9 • · ·
• · · 9 » • · • • ·
··· «« ·· 99 ··
buňce, výhodně v bakterii E. coli nebo v kvasince, zejména v kvasince Saccharomyces cerevisiae. V případě kdy genová struktura kóduje fúzní protein, je z něho uvolněn derivát inzulínu podle Vzorce I; analogické způsoby jsou popsány například v EP-A-0 211 299, EP-A-0 227 938, EP-A-0 229 998, EP-A 0 286 956 a v DE-patentové přihlášce číslo P 38 21 159.
.Odštěpení fúzní části proteinu po rozbití buňky může být realizováno chemicky haiogencyanem (viz. EP-A-0 180 920} .
Při výrobě derivátu inzulínu prostřednictvím preproinzulínového prekurzoru, který obsahuje část fúzního proteinu (presekvence) podle US 5,358,857 dochází k odštěpení fúzní části v dalším kroku spolu s odštěpením Cterminálního peptidu.
Inzulínový prekurzor je dále podroben oxidační sulfitolýze podle metody popsané například R.C. Marshall a A.S. Inglis v Practical Protein Chemistry - A Handbook (vydavatel A. Darbre) 1986, strany 49 až 53 a následně je v přítomnosti thiolu renaturován za tvorby požadovaných disulfidických můstků způsobem popsaným například G.H. Dixon a A.C. Wardlow v Nátuře (1960}, strana 721 až 724.
Inzulínový prekurzor může být složen také přímo, viz EP-A-0 600 372;. EP-A-0 668 292.
C-terminální peptid se odstraní štěpením trypsinem například způsobem popsaným v Kemmler a další, J.B.C. (1971), strana 6786 až 6791 a derivát inzulínu Vzorce I je přečištěn prostřednictvím známých technik, například chromatograficky viz EP-A-0 305 760 a krystalizaci.
V případě, kdy je n ve Vzorci II rovno nule, štěpení trypsinem slouží k rozštěpení peptidové vazby mezi řetězcem A a B.
-15• ♦· · * * «
V tomto způsobu končí řetězec B na C-konci argininem nebo dvěma argininovými zbytky. Ty mohou být odstraněny prostřednictvím karboxypeptidázy B.
Inzulínový derivát podle vynálezu má plnou biologickou aktivitu. To bylo prokázáno prostřednictvím intravenózní aplikace na králíkům a z poklesu glukózy v jejich krvi (Přiklad 5 a 6).
Rychlejší nástup účinku inzulínového derivátu po subkutánní aplikaci byl prokázán euglykemickou clamp technikou na hladovějícím psovi (Příklad 7) . Bylo podáváno 0,3 IU/kg derivátu inzulínu a jako referenční preparát byl použit lidský inzulín. Při clamp technice je po aplikáci inzulínu v krátkých časových intervalech, měřená hladina: glukózy v krvi a stejné množství glukózy je aplikováno, aby se kompenzoval její pokles. Výhodou metody je, že u zvířat nenastupuje genová regulace, která by se dala očekávat v případě rychlého úbytku krevní glukózy po podání inzulínu. Množství a časový průběh glukózy podané infuzí, charakterizují působení inzulínu. Inzulíny Lys(B3), Glu(B29)- (Sekvence id.č.:3) a .Lys(B3),Ile (B28)- (Sekvence id.č.:4) vykazují zřetelně rychlejší zažátek působení než lidský inzulín. K maximálnímu účinku (infúzní rychlosti glukózy} je dosaženo s lidským inzulínem 100 minut po aplikaci zatímco s inzulínem Lys(B3),Glu (B29)- (Sekvence id.č.:3) 80 minut a s inzulínem Lys(B3),Ile(B28)- (Sekvence id.č.:4) jíž po 60minutách. Proto by měla tato analoga lépe kompenzovat postprandiální nárůst glukózy v krvi než lidský inzulín, když se aplikují krátce před jídlem.
Popsané inzulínové deriváty jsou vhodné k terapii diabetes mellitus typu I jakož i typu II zejména ve spojení s bazálním inzulínem.
-16• · • ··· • · * • · ·
♦ · «
9»
Vynález se proto také týká použití derivátu inzulínu a/nebo jeho fyziologicky přijatelné' soli podle Vzorce I k výrobě farmaceutického přípravku, který vykazuje rychlý začátek působení.
Jako fyziologicky nezávadné a s inzulínovým derivátem snášené nosné médium je vhodný sterilní vodní roztok například glukózy, glycerínu, kuchyňské soli, který je izotonický vůči krvi a který také obsahuje konzervační prostředek jako je například fenol, m-kresol nebo .ester kyseliny p-hydroxybenzoové. Nosné médium může navíc obsahovat pufr, například acetát sodný, citrát sodný, fosfát sodný. K nastavení pH se používají zředěné kyseliny (obvykle HCI) popřípadě louhy (NaOH). Přípravek může dále obsahovat ionty zinku.
Deriváty inzulínu mohou být použity ve farmaceutických přípravcích ve formě jejich fyziologicky přijatelných soli, jako jsou soli amonné nebo alkalické. Libovolný díl jednoho nebo několika derivátů inzulínu podle Vzorce I nebo derivát inzulínu podle Vzorce I mohou existovat ve směsi dalších těchto derivátů inzulínu vždy navzájem nezávisle, v rozpuštěné, amorfní a/nebo v krystalické formě.
Někdy je výhodné k přípravku podle vynálezu přidat patřičné množství vhodného stabilizátoru, který zabrání precipitaci proteinů při termicko-mechanické námaze přípravku při kontaktu s různými materiály. Takovéto stabilizátory jsou například popsány v patentech EP-A-18609 DE-A 32 40 177 nebo WO-83/00288.
Vynález dále popisuje farmaceutický přípravek, který obsahuje alespoň jeden derivát inzulínu a/nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl podle Vzorce I, zejména v rozpuštěné, amorfní a/nebo krystalické formě.
-17«toto* · · · to··· • ·· · » ··· « · ·♦ to* ♦♦· ·· · · ♦··· · • to· ···· ··· «•to ·· ·· ·· ·· ·
Derivát inzulínu podle vynálezu se vyznačuje rychlým začátkem působení. V praktické inzulínové terapii je podle okolností vhodné rychle působící inzulín smíchat s přípravkem, který obsahuje depotní pomocnou látku (např. NPH-inzulín). Následkem toho je podle složení přípravku jeho profil účinku složen z profilů' jednotlivých komponent, jestliže jsou jednotlivé komponenty směsi stabilní a navzájem se neovlivňuji. Při smíchání inzulínového derivátu s lidským NPH-inzulínem se však dá očekávat, že zejména při dlouhodobém skladování dochází k výměně mezi rozpuštěným derivátem a krystalickým NPH-inzulínem. Proto může být farmakodynamika depotního inzulínu jakož i rozpuštěného inzulínu s rychlým pozměněna nepředvídatelným způsobem. Proto je vhodné připravit rychle působící derivát s použitím depotní pomocné látky - jako je například NPH-inzulín. Tato depotní forma inzulínového derivátu může být libovolně míchána s rozpuštěnou rychle působící formou bez toho, aby se složení jedné nebo druhé formy v průběhu skladování měnilo.
Ačkoli vynález popisuje především rychle působící inzulínový derivát, zahrnuje také možnost připravit tento derivát pro lepši mísitelnost jako depotní formy, přičemž se jako depotní pomocná látka používá zejména aprotaminsulfát a inzulínový derivát a/nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl se pak převede na kokristalickou formu s protaminsulfátem.
Vynález dále popisuje injikovatelný roztok, který obsahuje farmaceutické přípravky podle vynálezu v rozpuštěné formě.
-18• · 4 · 4 · · 4 · · * • ·« 4 4 444 · 4 ·· • · 4*4 «« * « 444 4 4 «44 4 4 · 4 44« «44 ·· 44 44 44 «4
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1: Konstrukce proinzulínu Lys (B3) jako východisko .. pro plazmidy podle příkladů 2 až 4
V patentu Spojených států US 5,258,857 je popsán vektor pINT μ 90d jakož i PCR primery Tir a Insu 11. Tyto komponenty slouží jakožto výchozí materiál pro konstrukci plazmidu pINT
125d, který kóduje požadovaný proinzulín Lys (B3). Dodatečně byl syntetizován primer Insu 35 se sekvencí:
5' TTT GTG AAG CÁG CAC CTG 3’ a primer Insu 36 se sekvencí:
5' CAG GTG CTG CTT CAC AAA 3 ' .
Poté byla provedena jedna PCR reakce pomocí primerů Tir a Insu 36 a druhá PCR reakce za použití primerů Insu 11 a Insu 35. Jako templát byl využit plazmid pINT 90d.
Produkty obou reakcí jsou navzájem částečně komplementární takže je lze použít jako templáty pro další PCR reakci s primery Tir a Insu 11. Produktem této reakce byl sjednocený fragment kódující variantu proinzulínu, která obsahuje v pozici 3 řetězce B aminokyselinu lysin. Tento * PCR fragment byl poté přečištěn ethanolem, vysušen a poté se naštěpen restrikčními enzymy Ncol a Sall. Reakční směs byla * po restrikci elektroforeticky rozdělena a byl vyizolován požadovaný fragment Ncol/Sal 1.
V citované přihlášce je popsána plazmid pINT 91d, který kóduje mini-proinzulín. Sekvence kódující miniproinzulín byla vyštěpena pomocí restrikčních enzymů Ncol a Sall a byl vyizolován zbývající plazmid. Do tohoto plazmidu byl vložen Ncol/Sall PCR fragment pomocí T4 ligázy za vzniku plazmidu pINT 125d. Tímto plazmidem byly transformovány bakterie E.coli K12, namnoženy a plazmid opětovně
< v 9 * * • » 9 • •
9 ·· • 9 • 9 · 9 · 9«
• 9
• 9 · • 9 • 9 ♦ 9 9
999 99 99 99 »9 VI
1 vyizolován. Struktura plazmidu byla překontrolována pomoci DNA-sekvenování a restrikční analýzy. Po této analýze byla DNA plazmidu pINT 125d použita jako templát pro vložení dalších mutací do této varianty genu pro proinzulín.
Příklad 2: Konstrukce proinzulínu Lys (B3) Glu (B29)
Pro přípravu mutovaných proteinů byly nasyntetizovány dva primery: primer 329 se sekvencí
5' TTC TAC ACA CCC GAG AČC CGC GGC ATC G - 3 ’ a primer 329b se sekvencí
5' GCC GCG GGT CTC GGG TGT GTA GAA GAA GC 3'
Jako templátu bylo použito DNA z plazmidů pINT125d a pINT91d. Primer 329a byl použit v PCR reakci spolu s primerem Insu 11 a plazmidem pINT 91d jakožto templátem a primer 329b byl použit v další PCR reakci s primerem Tir (viz příklad 1) a plazmidem pINT 125d. Vzhledem k tomu, že jsou oba produkty částečně komplementární, lze je spojit v další přímé PCR reakci s primery Tir a Insu 11. Vziklý fragment DNA kóduje protein s požadovanou mutací. Tento fragment byl poté naštěpen enzymy Ncol a Sall a vzniklý Ncol/Sall fragment byl pomocí T4-ligázy vložen do zbytkového plazmidu pINT 91d.
Tímto postupem byl vytvořen plazmid pINT 32 9, který byl po amplifikaci v E.coli .kmene K12 podroben sekvenční a restrikční analýze, čímž byla ověřena jeho struktura.
Derivát proinzulínu kódovaný tímto plazmidem je charakterizován jak výše uvedenou záměnou aminokyselin tak i C-spojovacím peptidem, který sestává z argininu.
-20·· » · • ·· » · • * «·♦ * 0 0 0 • 0 0 0
0· 0« · 0 · 0 0 00
000 0 ·
0 0
0·
Příklad 3: Konstrukce proinzulínu Lys (B3) lle (B27)
Konstrukce tohoto proinzulínu byla provedena způsobem popsaným v předešlém příkladu s tím, že bylo použito následujících párů primerů:
primer KB3 JB 27A se sekvencí
5' TTC TAC ATC CCC AAG ACC CGC CG 3' spolu s prímerem Insu 11 a primer K B3 J 27B se sekvencí
5' CTT GGG GAT GTA GAA GAA GCC TCG 3’ spolu s prímerem Tir.
Jako templát posloužil v obou PCR reakcích plazmid pINT 125d. Produkty obou reakcí byly spojeny třetí PCR reakcí tak, jak bylo popsáno v příkladu 1 a vzniklý produkt bvl nakloňován do plazmidu obdobným způsobem za vzniku plazmidu pINT332.
Příklad 4: Konstrukce proinzulínu Lys (B3) lle (B28)
Konstrukce tohoto proinzulínu byla provedena způsobem popsaným v příkladu 3 s tím, že bylo použito následujících párů primerů:
primer KB3 JB 28A se sekvencí
5' TAC ACA ATC AAG ACC CGC CGG GAG - 3' spolu s prímerem Insu 11 a primer KB J B28B se sekvencí
5' GGT CTT GAT TGT GTA GAA GAA GCC TCG - 3' spolu s prímerem Tir.
Způsobem obdobným výše popsanému byl vytvořen plazmid pINT 333.
-21φφ : :
• φ*· :: .
•φφ ·
Exprese zkonstruovaných variant inzulínu
Bakterie E. coli kmene K12 byly transformovány pomocí plazmidu pINT 329, 332 a 333. Rekombínantní bakterie obsahující přídslušné plazmidy byly kultivovány podle příkladu 4 Patentu Spojených států číslo 5227293. Tak byly připraveny požadované výchozí suroviny pro výrobu příslušných variant inzulínu.
Příklad 5: Konstrukce proinzulínu Lys (B3), Ile (B28), Asp (A21)
Konstrukce tohoto proinzulínu byla provedena způsobem· popsaným v příkladu 3. Místo plazmidu pINT 125d však byl jakožto templát pro PCR reakci použit plazmid pINT 333, připravený v příkladu 4. Pro vložení mutace byly použity následující primery:
primer P-pint365
5'-TTTTTTGTCGACTATTAGTCGCAGTAGTTCTACCAGCTG-3’ a primer Tir.
Vzniklý plazmid byl označen pINT 365.
Příklad 6: Biologická aktivita inzulínu Lys(B3),Glu(B29) po intravenózní aplikaci králíkovi
Čas [h] Lidský inzulín Inzulín Lys (B3) ,Glu(B29)
0 100 100
0,25 89,17 89,47
0,5 67, 56 58,32
0,75 73,24 66,59
1 73,13 68,21
1,5 78,12 71,95
-22• 1 ·· · · * φ' · ··♦ • · · * • · · « *» ·· φ · • *· ··· » * • * * ♦· ·*
Čas [h] Lidský inzulín Inzulín Lys (B3) ,Glu(B29)
2 89, 47 80,88
3 107,01 94,2
4 104,55 99,78
králíků obdrželo intravenózně uvedený inzulín v dávce 0,2 IU/kg. V průběhu následujících čtyř hodin byly v uvedených okamžicích stanovovány koncentrace krevní glukózy a byly vztahovány k počáteční hodnotě v čase 0. Průměrné hodnoty nevykazují žádné významné rozdíly biologické aktivity mezi lidským inzulínem a inzulínem Lys(B3), Glu(B29).
Příklad 7: Biologická aktivita inzulínů Lys(B3),Ile (B27) a Lys(B3),Ile(B28) po intravenózní aplikaci králíkovi králíků obdrželo intravenózně uvedený inzulín v dávce 0,2 IU/kg. V průběhu následujících čtyř hodin byly v uvedených okamžicích stanovovány koncentrace krevní, glukózy a byly vztahovány k počáteční hodnotě v čase 0. Průměrné hodnoty nevykazují žádné významné rozdíly biologické aktivity mezi lidským inzulínem a inzulíny Lys(B3),Ile(B27) a Lys(B3) , Ile(B28) .
Čas [h] Lidský inzulín Inzulín Lys(B3), Ile(B27) Inzulín Lys(B3), Ile(B28)
0 100 100 100
0,33 67,8 62, 6 63,3
0, 66 54,9 60, 6 55, 8
1 55,2 66,8 59, 3
1,5 63 79,2 66,7
«· · ♦
• 44
4« « 4 4
4 ·44
4 4 ·
4 » · ·· ► 4 « · , 4 44 • 44 4 ·
4 4 ··
Čas [h] Lidský inzulín Inzulín Lys(B3), Ile(B27) Inzulín Lys(B3), Ile(B28)
2 77,8 90, 9 81,6
3 91, 5 96, 3 97,2
4 99, 5 96 101, 6
Příklad 8: Farmakodynamika inzulínu Lys(B3),Glu (B29) a Lys (B3),Ile (B28) po subkutánní aplikaci do psího organismu
Psů (po čtyřech pro každý inzulín) byla subkutánně podána dávka 0,3 lU/kg inzulínu. Koncentrace krevní glukózy byla kontinuální infuzí udržována na 3,7 až 4 mmol/1. V tabulce jsou uvedeny průměrné' hodnoty infúzní rychlosti glukózy ± sřední chyba průměru (SEM). Hodnoty jsou uváděny v intervalu 0 (okamžik aplikace) až 240 minut.
-24»w » » · » » φφφφ φ ·· · · ··· «φφφ
- - · · φ φ φ φφφ φ φ •φφφ φφφ φφ φφ φφ φφ
Průběh koncentrací glukózy u hladovějících psů po podání derivátů
QJ
Ή >0 '2 d
υ
Ι>Ί
Μ σι
2 Ή I—I 2 Ν 2 Ή >
Ν
Ό
Λί f-Η im φ
Ν β
Ή
4-)
Ώ
Ο
4β υ
>
κ ο
λ
Ή
U
Ή
ΓΊ β
>
'(Ο
Ό β
β .-4
Ή
Ο
Μ a
Μ
IJ
Φ e
β φ
Oj ií β
ο
II
4-) >
>φ β
β '(0
4->
β
4*!
η β
<Ώ tm
Λ4 \
Ω )—ί η
ο
X ttí ι—I Ή β Ή >ν (0
Λ!
>
'β
Ω
’258 3 d d • · ··· • · · « • · * I ·· ·· » flfl fl ► · ·* ··· · · • · · • fl flfl g
o
Λ!
•H >O >3 ^1 u
N •H •3
4J '(fl >
H
S-l
QJ
Ό
Ή
Ό
Ό
O a
o a
»3
Cfl a
n.
υ '>
>0 (fl
X ω
ω
-H
M ><D £
o
Li
CL
O
II jj ><u c
c 'TJ
-U
Jfcí
X □
ífl
CP o
H σ>
o >·
M '0 .X j—l σ» υ
«3
-U d
o?
u d
o
-d >Φ
X) *2 kl
Oj
Ή £
•H >0
Π3
X >
'(C
Q
JĚ LU □ 7 « οι — ._ O g £ — á £ _
MU . i o 5 a
(U
ST c
CM qj □3 υ
CJ O — JÉ _ Σ = ω
-Q J* w
N J< £ -2 '<= lí
1¼.
.c _g .c υ
E
Ól MU E E
O a
cn
CD
Ό
Ό
X □ T_
I e c Φ u
Š
O
CO
Č- P-· O) 'ΤΦΟΠΝφΟΟ^Ο^^ίΟ «- (M w ® trt
Α’ΓΓΓΓ^ΓΓΑ^Ο^τ-^^οοοΟ’-·-’ó ό d ai ó ai ό ó o 6 a ο ό o’ d ό ό d d d d d o cď r*. r~ cm *- o o o ·6 d d o o ^OrtrtíO^^Orteo — rta>rtrt’-rt®rtr^<Ort,fl· NcpíLňrtCcOíOOOBřsrsScOfljčijsecCcůihN rtrtddddrtd.dddddddddrtrtd rtdd ifl O ·- rt
Ol fs. h, fx π n m rt ‘n‘?!í,9'3Oín<3t0rtmoinoO0irt£y3SÍ*2S5íjS?5£2!2 o *- o «*- ·* o o o<MO^<M»OrteNrtfMrtrtrt^t — CNMb*<Ni-O<MOťOCMw-^0) i- * ř Ó r- O «- O t-’ rrt d
S 8 S S S 8 E 8 K 8 K S 8 8 8 £ 8 8 8 8 S 8 rU«i-T-Q^ — — —· - - — —· —· — — - - — — --’
O rt t* o rt
O O O CO
N <E V to
S <o
Οτ-ί0τ-®»-Φ<Μα3
QxrřJNrtrtTV
Σ ω
to *I>
E ‘5 (Λ
RJ
O £ -8 5 S 3 C - rn ě rtl ™ <Λ
O
X £
Π3
O □ T_ ra -s
I i c
o c
o
Λ
IU
O 2 i '2«
JÉ 'c _
Ě
J3 cn
II
I
X
Q d
O> mí E E o ín rCN »d o «- «- o το d d d m cď to
CM rt d o <O ιΛ αΰ
CM »- wd d d
CM V Φ O Φ r- C\| r* d o © o d rt íú □ rt rt rt rt n ch o rt rt rt rt e0 d
írtooajfloroqcotfir-íneO^· dddddddddddd r* co m to r*. d d d d d ^otoomg^OOOirtoinciiooirtginggSSStMefirtSS u> cn o r* cc π CM rt tf> V (N V d d — d o rt o o a -ro^cDtnwmtnioQQOOQQQOOwa OíNrtO>r-ťNřv(Nqoq35«ňqinqu5eNO ddddcMddiocodsod*“d* *“ddd to r* tť) irt ca <ΰ rř*.-«t<o^-incartrtN*^(Oart£0^o αααοοο^’-Ο’-αι-’-οο*rtrtddrtrtdddddddddd č»sůrt^iOCNh«rtrtfla rtrtrtrtrtrtCDt>-rtort rtrtrtrt^rrtrtrtrt^d rt Λ U# T Uí v * «_ — CM CN rt o rt o o o rt d
O «r o i- ·- *«Ί <N
O g to to ň cm ifí d cď tO T« cn ?5 rt
CM rt rt rt CM
PM O * o d d o d o *T Irt ^(Mffld rt rt rt rt rt < d d d d rt
ST <r rt rt *
Sů0rteq^tof*«®r^rt0«0^ Ortd^o^wrt — rtťNtM ovrtio^rQQQOQtnintortio<oowtf)4noooiortOtooOO Ο^ΝΛΑΛΑΙΟΛΟΜΝηβΝΝΙΟΝΝΝίΒηδΝΟΟΝίΐίΟΡΙ ddddd^dio^^iodr-df^r^dddrtdddrtddrted dd {O^ÍO^íOi-ťOi-COr-COr-CO^Cť) íMn^v^rinirttůcos^cocooo^
-26vvv* 9*9*
99 9 9 99* · 9 ·· «9 999 99 9 999 · 9 « « 9 9 · 9 9 999
9999· 99 «9 99 9«
Průběh koncentraci glukózy u lačných psů po podání derivátů inzulínu s rychlým účinkem x
ω cn
H u
«11 ε
CL
O
II
JJ >0) c
c «rtj □
xs in cn
O ζ_ σ> _c o > E ti ti e _
KU ε
•3
O rt
Q το Ó tn ifl a o d d
T- O
O d rt rt o o o' d ta © C CN ti 03 υ c ti o 3= JC to
O •I i « £ i A _
Ol F — ti c
Cl >ti E E £ c ta •a 5
401 TC c
ti v u rt a Ϊ S g a § o * e ,s ε
tfl <0 o
£ £ £ □ Jí -
2 c ~ 01 £ rtt
O) mu e e o
.o ta ‘O 5
X
řr
1—< Ό
Bť
F-U J O
•^1 c
c: > ti
H 3
HJ 4)
O
aí 2
Jd c
> φ
mU ”55 o c
a -C i
o X
c
Σ
LU ω
, 5
T > Ί- ω X £ ™ <0
JC r2 c □> £ — IV S a> « a £ E .£ '2 _1
Ϊ „ c ti ·,= <J Σ
CM o tú co d d rtrtrtrtrtrtrtrt
Srn o m
LO <ů (O m © m o m o r> a3 co <5 05 o
T“ V- »- *- CN v-^TT-eOrtCVtJiCO © d d o d d d d o’ ó to to m e*i -T > ίΊ Ν B Λ rt CN <N d ti rt to £N ti r* rt rt
Nri momomom© (NíNCNCNCNCMCNCN o o »- tq bo a o O <o cm rt rt to ai *- d o d d d to d © <0 cn m ťst rr* rt
CN
D£fl:ÚcONíCí'··®® rtdrtrtrtrtrtrtrt tn tn m cQ Φ flO rt rt rti rt rt rt rt rt monom ti a> a> o o —— ~ 1» CM CM ©monom -- - ň iN n en
CM CN CN CM ft| CN ti *- a d d rt v~ O ’Γ d d »- CO CN rt a tn o co to mrnmommoom «in-Tm-^rtvcMrt i- o
CŇ CN ti d
p-. o d e-CO’“©’-® — ©’-©©
OOOO^-^-CNCMrtrtV ^^CNCNCNCNfNCN. CNCNCN
O ~ 1- 1- o >- o o o d d o d d o mti^rrCNrtmcN O O O »-T- i-OO ó d o a d o d o m >· o o rt ti rt CM rt ti
O c o T- i— σι
N rt * ’Τ ί* rt — cm o m t-.
» o q o *7 rt rt τρ n· -r
3® ti ? 05 Ν' <3> *T
O O O »- CN »- fN CN CM CN CN
-T 05 rt rt CN CN
CN CN CN r-, f» r*.
o d d o *ř ti ti ρ*
O ti Oi T o d o o
Smoomrtrtí‘-rt©fs.
íNqqr-»rtrtortq<o t*» ti <d mi v m n* rt λ rt
CN CN CN CN ti CN rt CN CN
• toto to to to to • toto·· · to·· • · · ·< ··· to · to · · · · · · ·· ·· ·· ··
Průběh koncentrací glukózy u hladovějících psů po podaní derivátů inzulínu s rychlým účinkem
Dávka činila 1 x 0,3 IU/kg subkutánně v t=0 formát dat(průměr ± SEM)
Rychlost infuze glukózy (mg.min'1.kg1)
Minut
Minut • ·* • · !
« · · ι·» »· » · • 0 0 04
4 · 4 • 4 0 4 «9 ·· • 4 4
0 0 »0 0 0 *
0 0 ·«
-28INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 1:
{i! CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 21 aminokyseliní (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: I až 21 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 1
Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu 15 10 15
Glu Asn Tyr Cys Asn 20
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 2:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 30 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 30 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 2
Phe Val Asn Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr 15 10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Lys Thr 20 25 30
-29 « v w « 4*4« • 44 9 · 944 9 4 44
999 *9 44 «44 j 4 * 9 · 9499 999
949 44 94 94 49 94
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 3:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 30 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 30 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 3
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr 15 10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe· Phe Tyr Thr Pro Glu Thr 20 25 30
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 4:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA:. 30 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 30 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 4
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr 15 10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr 20 25 30 •
0 • · 0 · »· *
• ·0· 0 0 • 0 · · • · 000 · 0 0 «0 • 0
-30INFORMACE O SEKVENCI ID. C. 5:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 30 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 30 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 5
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr 15 10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Ile Pro Lys Thr 20 25 30
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 6:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 97 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 97 (Xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: δ
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His
1 5 10 15
Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu
20 25 30
Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro
35 40 45
♦· ♦ • »·· • · · • φ · · • • ι • ·♦ Φ · k « · • •
v t · · ·
• « · ·
»·« ·· ··
-31-
Gln Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly 50 55 Pro Gly 60 Ala Gly Ser Leu
Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin 65 70 Lys 75 Arg Gly Ile Val Glu 80
Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr 85 9Ό Asn INFORMACE 0 SEKVENCI ID. Č. 7: (i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE: (A) DÉLKA: 97 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY: (A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 97 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 7 Gin Leu Glu Asn Tyr Cys 95
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala 15 10 Arg Phe Val Lys Gin His 15
Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu 20 25 Tyr Leu Val Cys Gly Glu 30
Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr Arg Arg 35 40 Glu Ala 45 Glu Asp Pro
Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly 50 55 Pro Gly 60 Ala Gly Ser Leu
Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin 65 70 Lys 75 Arg Gly Ile Val Glu 80
Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr 85 90 Gin Leu Glu Asn Tyr Cys 95
Asn
-32INFORMACE O SEKVENCI ID, Č. 8:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 97aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1' až 97 (xí) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 3
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His
1 5 10 15
Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu
20 25 30
Arg Gly Phe Phe Tyr Ile Pro Lys Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro
35 40 45
Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu
50 55 60
Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg Gly Ile Val Glu
65 70 75 80
Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys
90 95
Asn
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 9:
(i) . CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 21 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) ' TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein
-33(B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 21 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 9
Gly lle Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser lle Cys Ser Leu Tyr Gin Leu 15 10 15
Glu Asn Tyr Cys Asp 20
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 10:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 30 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 30 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 10 Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr
5 10 '15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr lle Lys Thr
25 30
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 11:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 97 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno ÍD) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 97 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 11 • 0
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His
1 5 10 15
Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu
20 25 30
Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro
35 40 45
Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu
50 55 60
Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg Gly Ile Val Glu
65 70 75 80
Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys
90 95

Claims (51)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl, kde aminokyselina asparagin (Asp) v pozici B3 řetězce B je nahrazena přirozeně se vyskytující bazickou aminokyselinou a alespoň jedna z aminokyselin v pozicích B27, B28 nebo B29 řetězce B je nahrazena jinou přirozenou neutrální nebo kyselou aminokyselinou přičemž může být rovněž asparagin v pozici A21 řetězce A nahrazen aminokyselinami Asp, Gly, Ser, Thr nebo Ala a aminokyselina fenylalanin (Phe) v pozici Bl řetězce B a aminokyselina v pozici B30 řetězce B mohou zcela chybět.
  2. 2. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 1, obecného vzorce I s-s (A1-A5)-Cys-Cys-AQ-AS-AiO-Cys-(A12-A19)-Cys-A21
    I zs-S S-s
    Bl-Val-B3-Glu-His-Leu-Cys-(B8-B18)-Cys-(B20-B26)-B27-B28-B29-B30 kde (A1-A5) jsou aminokyselinové zbytky v pozicích Al až A5 řetězce A lidského nebo zvířecího inzulínu (A12-A19) jsou aminokyselinové zbytky v pozicích A12 až A19 řetězce A lidského nebo zvířecího inzulínu
    A21 je Asn, Asp, Gly, Ser, Thr nebo Ala
    -36• ·· · (B8-B18) jsou aminokyselinové zbytky v pozicích B8 až B18 řetězce B lidského nebo zvířecího inzulínu (B20-B26) jsou aminokyselinové zbytky vpozicích B20 až B26 řetězce B lidského nebo zvířecího inzulínu
    A8,A9,A10 jsou aminokyselinové zbytky v pozicích A8, A9 a. A10 řetězce A lidského nebo zvířecího inzulínu
    B30 je OH nebo aminokyselinový zbytek v pozici
    B30 řetězce B lidského nebo zvířecího inzulínu
    B1 je zbytek aminokyseliny fenylalaninu (Phe) nebo vodíkový atom
    B27,B28 a B29 jsou aminokyselinové zbytky v pozici B27, B28 a B29 řetězce B lidského ,nebo zvířecího inzulinu nebo vždy jeden jiný přirozeně se vyskytující aminokyselinový zbytek, přičemž vždy alespoň jeden ze zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je nahrazen přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem který je vybrán ze skupiny tvořené neutrálními nebo kyselými aminokyselinami.
    Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl obecného vzorce I podle nároku 2, ve kterém
    A8 je A9- je A10 je B30 je
    alanin (Ala), serin (Ser), valin (Val) a alanin (Ala) .
  3. 3.
    9 « ·
    -374, Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 2, ve kterém
    A8 je threonin (Thr),
    A9 je serin (Ser) a
    A10 je isoleucin (Ile) ,
  4. 5. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 4 obecného vzorce I, ve kterém symbol B30 znamená alanin (Ala).
  5. 6. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 4 obecného vzorce I, ve kterém symbol B30 ve Vzorci I. znamená threonin (Thr).
  6. 7. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 6' obecného vzorce I, ve kterém symboly znamenaj i (A1-A5) jsou aminokyselinové zbytky v pozicích Al až A5 řetězce A lidského inzulínu (A12-A19) jsou aminokyselinové zbytky v pozicích A12 až A19 řetězce A lidského inzulínu (B8-B18) jsou aminokyselinové zbytky v pozicích B8 až B18 řetězce B lidského nebo zvířecího inzulínu (B20-B26) jsou aminokyselinové zbytky v pozicích B20 až B26 řetězce B lidského nebo zvířecího inzulínu
    Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle alespoň jednoho z nároků 1 až 7, ve kterém
  7. 8.
    • to • to* • toto to • · * · · · · ··· « « • » to «toto* *·· aminokyselinový zbytek v pozici B1 řetězce B je zbytek aminokyseliny fenylalaninu (Phe).
  8. 9. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle alespoň jednoho z nároků 1 až 8, ve kterém aminokyselinový zbytek v pozici B3 řetězce B je zbytek aminokyseliny histidinu (His), lysinu (Lys) nebo argininu (Arg).
    il
  9. 10. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 9, ve kterém aminokyselinový zbytek v pozici B3 řetězce B je zbytek aminokyseliny histidinu (His).
  10. 11. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 9, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B3 řetězce B zbytkem aminokyseliny argininu (Arg) .
  11. 12. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 9, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B3 řetězce B· zbytkem aminokyseliny lysinu (Lys).
  12. 13. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle alespoň jednoho z nároků 1 až 12, ve kterém alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B přísluší přirozeně se vyskytující aminokyselině, která je vybrána ze skupiny tvořené isoleucinem (Zle), kyselinou asparagovou (Asp) a kyselinou glutamovou (Glu).
    v · • *♦ • A · · · • · ··· · • · * * · · · · » ·*· ·· v » · · · · · ····· ·· ·· 4 · 44
    -3914. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle alespoň jednoho z nároků 1 až 13, ve kterém alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B přísluší přirozeně se vyskytující aminokyselině, která je vybrána ze skupiny tvořené kyselými aminokyselinami.
  13. 15. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 14, ve kterém je alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B zbytkem kyseliny asparagové (Asp).
  14. 16. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 14, ve kterém je alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B zbytkem kyseliny glutamové.
  15. 17. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle alespoň jednoho z nároků 1 až 13, ve kterém alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B přísluší přirozeně se vyskytující aminokyselině, která je vybrána ze skupiny tvořené neutrálními aminokyselinami.
  16. 18. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 17, ve kterém je alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B zbytkem aminokyseliny isoleucinu (Ile).
  17. 19. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 15, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B27 řetězce B zbytkem kyseliny asparagové (Asp) .
    « 9 ··· 99
    -409 9 99
    9 9 9 9
    9· 99
    9 9« 9
    9 9 99
    999 9 9
    9 9 9
    99 9*
  18. 20. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 15, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B28 řetězce B zbytkem kyseliny asparagové (Asp) .
  19. 21. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 15, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B29 řetězce B zbytkem kyseliny asparagové (Asp) .
  20. 22. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 16, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B27 řetězce B je zbytkem kyseliny glutamové (Glu).
  21. 23. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 16, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B28 řetězce B zbytkem kyseliny glutamové (Glu).
  22. 24. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 16, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B29 řetězce B zbytkem kyseliny glutamové (Glu).
  23. 25. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 18 ·, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B28 řetězce B zbytkem aminokyselinu isoleucinu (Ile) .
  24. 26. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle alespoň jednoho z nároků 1 až 25 , ve kterém je řetězce A zbytkem w* 0 0 * 00 • 00 • 0 0
    000 0« -41* · ·
    0 0 0·· « 0 0 ·0 a · · · «0 *· • 0 » · t 0 00
    0·· 0 * • 0 I ·· «· aminokyselinový zbytek v pozici A21 kyseliny asparagové (Asp).
  25. 27. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 26, ve kterém řetězec A obsahuje sekvenci
    Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asp (Sekvence id.č . : 9) a řetězec B obsahuje sekvenci Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr (Sekvence id.č.: 10). Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl
    podle nároku 24, ve kterém řetězec B obsahuje sekvenci
    Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr (Sekvence id. č. : 3) .
  26. 29. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 18, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B27 řetězce B zbytkem aminokyseliny isoleucinu (Ile).
    ►'
  27. 30. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 29, ve kterém řetězec B obsahuje sekvenci Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Ile Pro Lys Thr (Sekvence id.č.: 5).
  28. 31. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 25, ve kterém řetězec B obsahuje sekvenci
    - - » w V » w V··· * ·· « · ·· · » ·«· • · · ·«·· ··» ·· ·· ·« »· · .·
    Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr (Sekvence id.č.: 4).
  29. 32. Způsob přípravy derivátu inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelné soli podle alespoň jednoho z nároků 1 až 30 vyznačující se tím, že zahrnuje konstrukci replikovatelného expresivního přenašeče, který obsahuje sekvenci DNA kódující prekurzor derivátu inzulínu, v němž je aminokyselinový zbytek v pozici Al řetězce A spojen s· aminokyselinovým zbytkem B30 řetězce B peptidovým řetězcem podle vzorce II
    -R1n-Arg- II.
    kde značí peptid s n aminokyselinovými zbytky a n je celé číslo z intervalu 0 až 34 a řetězec B je v pozici B1 prodloužen peptidovým řetězcem podle vzorce III
    Met-R2m-(Arg)p- III.
    kde R2m je peptid s m aminokyselinovými zbytky a m je celé Číslo z intervalu 0 až 40 a p je 0, 1 nebo 2 a dále zahrnuje expresi v hostitelských buňkách a postranslační úpravy derivátu inzulínu z prekurzoru chemickým a/nebo enzymatickým způsobem.
  30. 33. Způsob podle nároku 32 vyznačující se tím, že hostitelská buňka je buňka bakteriální.
  31. 34. Způsob podle nároku 33 vyznačující se tím, že bakteriální buňka je E. coli.
    »» « « · • • r • · • ♦· t · ·· • • • · • « * ·· ·» • · « · ·· • ·· • « « ·
    -4335. Způsob podle nároku 32 vyznačující se tím, že hostitelská buňka je kvasinka.
  32. 36. Způsob podle nároku 35 vyznačující se tím, že kvasinka je Sacharomyces cerevisiae.
  33. 37. Způsob podle libovolného z nároků 32 až 36 na přípravu derivátu inzulínu podle nároku '2 6 vyznačující se tím, že prekurzor inzulínu obsahuje sekvenci
    Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu· Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asp ( Sekv ence id. č. : 1 1) .
  34. 38. Způsob podle libovolného z nároků 32 až 36 na přípravu derivátu inzulínu podle nároku 28 vyznačující se tím, že prekurzor inzulínu obsahuje sekvenci
    Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asn ( (Sekvence id. č. :6 ) ·
    ·· V 0 0 • 04 9
    0 v 4 04 0
    0 4 • *0 *00 «400 »·· •40 0» 00 00 ·0 04
    -4439. Způsob podle libovolného z nároků 32 až 36 na přípravu derivátu inzulínu podle nároku 30 vyznačující se tím, že prekurzor inzulínu obsahuje sekvenci
    Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His·· Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Ile Pro Lys Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val, Glu Leu Gly Gly Gly Pro dy Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser' Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asn ( Sekvence id. č. : 8 ) ·
  35. 40. Způsob podle libovolného z nároků 32 až 36 na přípravu derivátu inzulínu podle nároku 31 vyznačující se tím, že prekurzor inzulínu obsahuje sekvenci
    Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asn ( Sekv ence id. č. :7 ) .
  36. 41. Prekurzor derivátu inzulínu podle nároku 37.
  37. 42. Prekurzor derivátu inzulínu podle nároku 38.
  38. 43. Prekurzor derivátu inzulínu podle nároku 39.
    -45* 9 4 «
    Β 4 9*
  39. 44. Prekurzor derivátu inzulínu podle nároku 40.
  40. 45. Sekvence DNA, která kóduje prekurzor inzulínu podle nároku 41.
  41. 46. Sekvence DNA, která kóduje prekurzor inzulínu podle nároku 42.
  42. 47. Sekvence DNA, která kóduje prekurzor inzulínu podle nároku 43.
  43. 48. Sekvence DNA, která kóduje prekurzor inzulínu podle
    nároku 44. 49. Expresivní přenašeč vyznačuj tím, že obsahuj e sekvenci DNA podle 50. Expresivní přenašeč vyznačuj tím, že obsahuj se sekvenci DNA podle 51. Expresivní přenašeč vyznačuj tím, že obsahuje sekvenci DNA podle :
  44. 52. Expresivní přenašeč vyznačující se tím, že obsahuje sekvenci DNA podle nároku 48.
  45. 53. Hostitelská buňka transformovaná expresivním přenašečem podle libovolného z nároků 49 až 52.
  46. 54. Farmaceutický přípravek vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden derivát inzulínu * · φφφ
    Σ ’ » » «ΦΦΦ
    J ·♦ * · Φ Φφ φ · Φ® ·· * · · · · Φ « ΦΦΦΦ « • · · Φ » · φ ·Φφ ♦·· ·· ·· ·· ΦΦ φφ
    -46a/nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl podle alespoň jednoho z nároků 1 až 30.
    Λ’
  47. 55. Farmaceutický přípravek vyznačující se derivát inzulínu a/nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl v rozpuštěné , amorfní nebo krystalické formě.
    podle nároku 54 tím, že obsahuje
  48. 56. Farmaceutický přípravek podle vyznačující se tím, že depotní pomocnou látku.
    nároku 54 dále obsahuje
  49. 57. Farmaceutický přípravek podle nároku 56 vyznačující se tím, že depotní pomocná látka je protamin sulfát a derivát inzulínu a/nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl jsou ve formě společného krystalu.
  50. 58. Injikovatelný roztok s inzulínovou aktivitou vyznačující se tím, že obsahuje farmaceutický přípravek podle libovolného z nároků 54 až 56 v rozpuštěné formě.
  51. 59. Použití derivátu inzulínu a/nebo jeho fyziologicky přijatelné soli podle alespoň jednoho z nároků 1 až 31 k výrobě farmaceutického přípravku, který vykazuje inzulínovou aktivity s rychlým účinkem.
CZ19981934A 1997-06-20 1998-06-18 Nové deriváty inzulinu s rychlým začátkem působení, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje CZ295964B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19726167A DE19726167B4 (de) 1997-06-20 1997-06-20 Insulin, Verfahren zu seiner Herstellung und es enthaltende pharmazeutische Zubereitung

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ193498A3 true CZ193498A3 (cs) 1999-11-17
CZ295964B6 CZ295964B6 (cs) 2005-12-14

Family

ID=7833099

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19981934A CZ295964B6 (cs) 1997-06-20 1998-06-18 Nové deriváty inzulinu s rychlým začátkem působení, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje

Country Status (31)

Country Link
US (1) US6221633B1 (cs)
EP (1) EP0885961B1 (cs)
JP (1) JP3676573B2 (cs)
KR (1) KR100546225B1 (cs)
CN (1) CN1195777C (cs)
AR (1) AR015899A1 (cs)
AT (1) ATE283919T1 (cs)
AU (1) AU740344C (cs)
BR (1) BRPI9803708B8 (cs)
CA (1) CA2235443C (cs)
CY (1) CY2005004I2 (cs)
CZ (1) CZ295964B6 (cs)
DE (3) DE19726167B4 (cs)
DK (1) DK0885961T3 (cs)
ES (1) ES2232900T3 (cs)
FR (1) FR05C0009I2 (cs)
HU (1) HU221176B1 (cs)
ID (1) ID20462A (cs)
IL (1) IL125006A (cs)
LU (1) LU91138I2 (cs)
NL (1) NL300170I2 (cs)
NO (2) NO321720B1 (cs)
NZ (1) NZ330700A (cs)
PL (1) PL196626B1 (cs)
PT (1) PT885961E (cs)
RU (1) RU2207874C9 (cs)
SK (1) SK285267B6 (cs)
TR (1) TR199801144A2 (cs)
TW (1) TW562806B (cs)
UA (1) UA65529C2 (cs)
ZA (1) ZA985363B (cs)

Families Citing this family (134)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19947456A1 (de) * 1999-10-02 2001-04-05 Aventis Pharma Gmbh C-Peptid zur verbesserten Herstellung von Insulin und Insulinanaloga
US7022674B2 (en) 1999-12-16 2006-04-04 Eli Lilly And Company Polypeptide compositions with improved stability
US8623379B2 (en) 2000-03-02 2014-01-07 Emory University Compositions and methods for generating an immune response
CN100446812C (zh) 2001-03-08 2008-12-31 美国国有健康与人类服务部 表达修饰的hiv包膜、gag和pol基因的mva
DE10114178A1 (de) * 2001-03-23 2002-10-10 Aventis Pharma Gmbh Zinkfreie und zinkarme Insulinzubereitungen mit verbesserter Stabilität
NZ531293A (en) * 2001-08-22 2005-08-26 Aventis Pharma Gmbh Pharamceuticals containing 1,4-benzothiepine-1,1-dioxide derivatives and another active substances such as ezetimibe, pamaqueside or tiqueside for treating lipid metabolism and atherosclerotic disorders
US7238663B2 (en) * 2001-08-28 2007-07-03 Eli Lilly And Company Pre-mixes of GLP-1 and basal insulin
US7399777B2 (en) * 2001-08-31 2008-07-15 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Diarylcycloalkyl derivatives, processes for their preparation and their use as pharmceuticals
KR100915108B1 (ko) 2001-08-31 2009-09-03 사노피-아벤티스 도이칠란트 게엠베하 Ｐｐａｒ-활성화제로서의 디아릴사이클로알킬 유도체 및 이를 포함하는 약제학적 조성물
US6884812B2 (en) 2001-08-31 2005-04-26 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Diarylcycloalkyl derivatives, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals
CA2463803A1 (en) * 2001-10-19 2003-05-01 Eli Lilly And Company Biphasic mixtures of glp-1 and insulin
US20050250676A1 (en) * 2001-11-19 2005-11-10 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Method of activating insulin receptor substrate-2 to stimulate insulin production
WO2003053460A1 (en) * 2001-12-19 2003-07-03 Eli Lilly And Company Crystalline compositions for controlling blood glucose
US7078404B2 (en) * 2002-04-11 2006-07-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Acyl-3-carboxyphenylurea derivatives, processes for preparing them and their use
US7223796B2 (en) * 2002-04-11 2007-05-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Acyl-4-carboxyphenylurea derivatives, processes for preparing them and their use
EP1506230B1 (en) 2002-05-07 2011-01-19 Novo Nordisk A/S Soluble formulations comprising monomeric insulin and acylated insulin
US7049341B2 (en) * 2002-06-07 2006-05-23 Aventis Pharma Deutschland Gmbh N-benzoylureidocinnamic acid derivatives, processes for preparing them and their use
DE10231370B4 (de) * 2002-07-11 2006-04-06 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Thiophenglycosidderivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zur Herstellung dieser Arzneimittel
US7262220B2 (en) * 2002-07-11 2007-08-28 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Urea- and urethane-substituted acylureas, process for their preparation and their use
ATE452879T1 (de) * 2002-07-12 2010-01-15 Sanofi Aventis Deutschland Heterozyklisch substituierte benzoylharnstoffe, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als arzneimittel
US20040157922A1 (en) * 2002-10-04 2004-08-12 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Carboxyalkoxy-substituted acyl-carboxyphenylurea derivatives and their use as medicaments
US7208504B2 (en) * 2002-10-12 2007-04-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Bicyclic inhibitors of hormone sensitive lipase
DE10250297A1 (de) * 2002-10-29 2004-05-19 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Kristalle von Insulinanaloga und Verfahren zu ihrer Herstellung
US7193035B2 (en) * 2002-10-29 2007-03-20 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Crystals of insulin analogs and processes for their preparation
US20040138099A1 (en) * 2002-11-29 2004-07-15 Draeger Eberhard Kurt Insulin administration regimens for the treatment of subjects with diabetes
DE10258007B4 (de) * 2002-12-12 2006-02-09 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Aromatische Fluorglycosidderivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zur Herstellung dieser Arzneimittel
DE10258008B4 (de) * 2002-12-12 2006-02-02 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Heterocyclische Fluorglycosidderivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zur Herstellung dieser Arzneimittel
US20040242583A1 (en) * 2003-01-20 2004-12-02 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Pyrimido[5,4-e][1,2,4]triazine-5,7-diones, processes for preparing them and their use
US7179941B2 (en) * 2003-01-23 2007-02-20 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Carbonylamino-substituted acyl phenyl urea derivatives, process for their preparation and their use
DE10306250A1 (de) 2003-02-14 2004-09-09 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Substituierte N-Arylheterozyklen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
US7196114B2 (en) * 2003-02-17 2007-03-27 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted 3-(benzoylureido) thiophene derivatives, processes for preparing them and their use
DE10308352A1 (de) * 2003-02-27 2004-09-09 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Arylcycloalkylderivate mit verzweigten Seitenketten, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Anwendung als Arzneimittel
DE10308355A1 (de) * 2003-02-27 2004-12-23 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Aryl-cycloalkyl substituierte Alkansäurederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Anwendung als Arzneimittel
US7173151B2 (en) * 2003-02-27 2007-02-06 Sanofi-Aventisdeutschand Gmbh Cycloalkyl-substituted alkanoic acid derivatives, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals
US7148246B2 (en) * 2003-02-27 2006-12-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cycloalkyl derivatives having bioisosteric carboxylic acid groups, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals
DE10308351A1 (de) * 2003-02-27 2004-11-25 Aventis Pharma Deutschland Gmbh 1,3-substituierte Cycloalkylderivate mit sauren, meist heterocyclischen Gruppen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE10308353A1 (de) * 2003-02-27 2004-12-02 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Diarylcycloalkylderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
US7871607B2 (en) * 2003-03-05 2011-01-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases
US7501440B2 (en) * 2003-03-07 2009-03-10 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted benzoylureidopyridylpiperidine-and-pyrrolidinecarboxylic acid derivatives, processes for preparing them and their use
DE10314610A1 (de) * 2003-04-01 2004-11-04 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Neues Diphenylazetidinon mit verbesserten physiologischen Eigenschaften, Verfahren zu dessen Herstellung, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und dessen Verwendung
US20050054818A1 (en) * 2003-07-02 2005-03-10 Brader Mark Laurence Crystalline compositions for controlling blood glucose
US7094800B2 (en) * 2003-07-25 2006-08-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cyanopyrrolidides, process for their preparation and their use as medicaments
SI1648933T1 (sl) * 2003-07-25 2010-01-29 Conjuchem Biotechnologies Inc Dolgo delujoäś inzulinski derivat in metoda zanj
US7008957B2 (en) * 2003-07-25 2006-03-07 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Bicyclic cyanoheterocycles, process for their preparation and their use as medicaments
US7094794B2 (en) * 2003-07-28 2006-08-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted thiazole-benzoisothiazole dioxide derivatives, process for their preparation and their use
DE10335092B3 (de) * 2003-08-01 2005-02-03 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Substituierte Benzoylureido-o-benzoylamide, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
CN1829738B (zh) 2003-08-05 2012-07-04 诺沃挪第克公司 新型胰岛素衍生物
US7241787B2 (en) * 2004-01-25 2007-07-10 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted N-cycloexylimidazolinones, process for their preparation and their use as medicaments
US7402674B2 (en) * 2004-01-31 2008-07-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh, 7-Phenylamino-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives, process for their preparation and their use as medicaments
US7470706B2 (en) * 2004-01-31 2008-12-30 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cycloalkyl-substituted 7-amino-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives, process for their preparation and their use as medicaments
US7498341B2 (en) * 2004-01-31 2009-03-03 Sanofi Aventis Deutschland Gmbh Heterocyclically substituted 7-amino-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives, process for their preparation and their use as medicaments
DE102004005172A1 (de) * 2004-02-02 2005-08-18 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Indazolderivate als Inhibitoren der Hormon Sensitiven Lipase
GT200500063A (es) 2004-04-01 2005-10-14 Metodo para tratar la esquizofrenia y/o anormalidades glucoregulatorias
DE602004004631D1 (de) 2004-04-01 2007-03-22 Sanofi Aventis Deutschland Oxadiazolone, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie ihre Verwendung als Pharmazeutika
US7833513B2 (en) 2004-12-03 2010-11-16 Rhode Island Hospital Treatment of Alzheimer's Disease
DE102005026762A1 (de) 2005-06-09 2006-12-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Azolopyridin-2-on-derivate als Inhibitoren von Lipasen und Phospholipasen
US8343914B2 (en) * 2006-01-06 2013-01-01 Case Western Reserve University Fibrillation resistant proteins
US20090069216A1 (en) * 2006-02-21 2009-03-12 Novo Nordisk A/S Single-Chain Insulin Analogues and Pharmaceutical Formulations Thereof
CN101443314B (zh) * 2006-03-13 2014-04-09 杏林制药株式会社 作为gsk-3抑制剂的氨基喹诺酮类
DE102006028862A1 (de) 2006-06-23 2007-12-27 Merck Patent Gmbh 3-Amino-imidazo[1,2-a]pyridinderivate
CA2666193A1 (en) 2006-08-08 2008-02-14 Sanofi-Aventis Arylaminoaryl-alkyl-substituted imidazolidine-2,4-diones, process for preparing them, medicaments comprising these compounds, and their use
ES2554773T3 (es) 2006-10-04 2015-12-23 Case Western Reserve University Insulina y análogos de la insulina resistentes a la fibrilación
DE102007002260A1 (de) * 2007-01-16 2008-07-31 Sanofi-Aventis Verwendung von substituierten Pyranonsäurederivaten zur Herstellung von Medikamenten zur Behandlung des Metabolischen Syndroms
DE102007005045B4 (de) 2007-01-26 2008-12-18 Sanofi-Aventis Phenothiazin Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE102007008420A1 (de) 2007-02-21 2008-08-28 Merck Patent Gmbh Benzimidazolderivate
EP2025674A1 (de) 2007-08-15 2009-02-18 sanofi-aventis Substituierte Tetrahydronaphthaline, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
CA2699151A1 (en) * 2007-09-11 2009-03-19 Activx Biosciences, Inc. Cyanoaminoquinolones and tetrazoloaminoquinolones as gsk-3 inhibitors
JP5373799B2 (ja) 2007-09-12 2013-12-18 杏林製薬株式会社 Ｇｓｋ−３阻害剤としてのスピロ環式アミノキノロン
DE102007048716A1 (de) 2007-10-11 2009-04-23 Merck Patent Gmbh Imidazo[1,2-a]pyrimidinderivate
DE102007054497B3 (de) 2007-11-13 2009-07-23 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue kristalline Diphenylazetidinonhydrate und Verfahren zu deren Herstellung
EP2217265B1 (en) 2007-11-20 2017-05-10 Ambrx, Inc. Modified insulin polypeptides and their uses
JP5694779B2 (ja) 2008-01-09 2015-04-01 サノフィ−アベンティス・ドイチュラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング 極度に遅延した時間作用プロファイルを有する新規なインスリン誘導体
CN101970476B (zh) 2008-01-09 2014-08-27 塞诺菲-安万特德国有限公司 具有超延迟时效特征的胰岛素衍生物
WO2009097995A1 (de) * 2008-02-07 2009-08-13 Sanofi-Aventis Neue phenyl-substituierte imidazolidine, verfahren zu deren herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
DE102008017590A1 (de) 2008-04-07 2009-10-08 Merck Patent Gmbh Glucopyranosidderivate
US8993516B2 (en) * 2008-04-14 2015-03-31 Case Western Reserve University Meal-time insulin analogues of enhanced stability
US20110195896A1 (en) * 2008-04-22 2011-08-11 Case Western Reserve University Isoform-specific insulin analogues
TWI394580B (zh) 2008-04-28 2013-05-01 Halozyme Inc 超快起作用胰島素組成物
WO2010003624A2 (en) 2008-07-09 2010-01-14 Sanofi-Aventis Heterocyclic compounds, processes for their preparation, medicaments comprising these compounds, and the use thereof
US9200053B2 (en) 2008-07-31 2015-12-01 Case Western Reserve University Insulin analogues containing penta-fluoro-Phenylalanine at position B24
KR20120129875A (ko) 2008-07-31 2012-11-28 케이스 웨스턴 리저브 유니버시티 염소화 아미노산을 갖는 인슐린 유사체
DE102008051834A1 (de) 2008-10-17 2010-04-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten
DE102008053048A1 (de) 2008-10-24 2010-04-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten
KR101820024B1 (ko) 2008-10-17 2018-01-18 사노피-아벤티스 도이칠란트 게엠베하 인슐린과 ｇｌｐ－1 효능제의 병용물
DE102009038210A1 (de) 2009-08-20 2011-03-03 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten
WO2010068601A1 (en) 2008-12-08 2010-06-17 Sanofi-Aventis A crystalline heteroaromatic fluoroglycoside hydrate, processes for making, methods of use and pharmaceutical compositions thereof
MX2011009414A (es) * 2009-03-11 2011-10-19 Kyorin Seiyaku Kk 7-cicloalquiloaminoquinolonas como inhibidores de gsk-3.
US20120123089A1 (en) * 2009-07-09 2012-05-17 Biocon Limited Preparative non-linear gradient based chromatographic method and purified products thereof
WO2011012718A1 (en) 2009-07-31 2011-02-03 Ascendis Pharma As Prodrugs comprising an insulin linker conjugate
PL2459171T3 (pl) 2009-07-31 2017-11-30 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Kompozycja insuliny o długim działaniu
BR112012003973A2 (pt) 2009-08-26 2015-09-08 Sanofi Sa hidratos de fluoroglicosídeo heteroaromático cristalinos, produtos farmacêuticos compreendendo estes compostos e seu uso
US8399407B2 (en) * 2009-09-17 2013-03-19 Case Western Reserve University Non-standard insulin analogues
JP2013506635A (ja) 2009-10-02 2013-02-28 サノフイ 骨疾患を処置するための薬剤を製造するためのｓｇｌｔ−１／ｓｇｌｔ−２阻害剤活性を有する化合物の使用
SI2554183T1 (en) 2009-11-13 2018-08-31 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh A pharmaceutical composition comprising the GLP-1 agonist and insulin and methionine
PT2498801T (pt) 2009-11-13 2018-05-02 Sanofi Aventis Deutschland Composição farmacêutica compreendendo despro36exendin-4(1-39)-lys6-nh2 e metionina
US9079975B2 (en) 2009-12-11 2015-07-14 Case Western Reserve University Insulin analogues with chlorinated amino acids
WO2011107494A1 (de) 2010-03-03 2011-09-09 Sanofi Neue aromatische glykosidderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
DE102010015123A1 (de) 2010-04-16 2011-10-20 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Benzylamidische Diphenylazetidinone, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung
US8530413B2 (en) 2010-06-21 2013-09-10 Sanofi Heterocyclically substituted methoxyphenyl derivatives with an oxo group, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
US8853155B2 (en) 2010-06-23 2014-10-07 Novo Nordisk A/S Insulin derivatives containing additional disulfide bonds
TW201221505A (en) 2010-07-05 2012-06-01 Sanofi Sa Aryloxyalkylene-substituted hydroxyphenylhexynoic acids, process for preparation thereof and use thereof as a medicament
TW201215387A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Aventis Spirocyclically substituted 1,3-propane dioxide derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as a medicament
TW201215388A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Sa (2-aryloxyacetylamino)phenylpropionic acid derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
HUE045845T2 (hu) 2010-08-17 2021-12-28 Ambrx Inc Módosított relaxin polipeptidek és felhasználásuk
KR101823320B1 (ko) 2010-08-30 2018-01-31 사노피-아벤티스 도이칠란트 게엠베하 제２형 진성 당뇨병 치료용 약제를 제조하기 위한 ａｖｅ００１０의 용도
EP2438930A1 (en) 2010-09-17 2012-04-11 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Prodrugs comprising an exendin linker conjugate
TW201247702A (en) 2011-01-20 2012-12-01 Zealand Pharma As Use of acylated glucagon analogues
US8809324B2 (en) 2011-03-08 2014-08-19 Sanofi Substituted phenyl-oxathiazine derivatives, method for producing them, drugs containing said compounds and the use thereof
WO2012120051A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Mit adamantan- oder noradamantan substituierte benzyl-oxathiazinderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
US8895547B2 (en) 2011-03-08 2014-11-25 Sanofi Substituted phenyl-oxathiazine derivatives, method for producing them, drugs containing said compounds and the use thereof
WO2012120054A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Di- und trisubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
WO2012120055A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Di- und trisubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
WO2012120053A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Verzweigte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
US8871758B2 (en) 2011-03-08 2014-10-28 Sanofi Tetrasubstituted oxathiazine derivatives, method for producing them, their use as medicine and drug containing said derivatives and the use thereof
WO2012120052A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Mit carbozyklen oder heterozyklen substituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
EP2683701B1 (de) 2011-03-08 2014-12-24 Sanofi Mit benzyl- oder heteromethylengruppen substituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
US9821032B2 (en) 2011-05-13 2017-11-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Pharmaceutical combination for improving glycemic control as add-on therapy to basal insulin
US20130011378A1 (en) 2011-06-17 2013-01-10 Tzung-Horng Yang Stable formulations of a hyaluronan-degrading enzyme
US9487572B2 (en) * 2011-07-13 2016-11-08 Case Western Reserve University Non-standard insulin analogues
US10995129B2 (en) * 2011-07-13 2021-05-04 Case Western Reserve University Non-standard insulin analogues
ES2550357T3 (es) 2011-08-29 2015-11-06 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Combinación farmacéutica para su uso en el control glucémico en pacientes de diabetes de tipo 2
TWI559929B (en) 2011-09-01 2016-12-01 Sanofi Aventis Deutschland Pharmaceutical composition for use in the treatment of a neurodegenerative disease
EP2567959B1 (en) 2011-09-12 2014-04-16 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
WO2013037390A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
EP2760862B1 (en) 2011-09-27 2015-10-21 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-alkyl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
EP2833894A4 (en) * 2012-04-02 2016-08-17 Moderna Therapeutics Inc MODIFIED POLYNUCLEOTIDES FOR THE PREPARATION OF COSMETIC PROTEINS AND PEPTIDES
AR090843A1 (es) * 2012-05-09 2014-12-10 Lilly Co Eli Tratamiento para diabetes comorbida con enfermedad renal cronica
WO2013173923A1 (en) 2012-05-25 2013-11-28 Diamedica, Inc. Formulations of human tissue kallikrein-1 for parenteral delivery and related methods
PL2854841T3 (pl) 2012-06-04 2017-08-31 Diamedica Inc. Izoformy glikozylacji ludzkiej kalikreiny tkankowej 1
CN107108716A (zh) 2014-10-06 2017-08-29 卡斯西部储备大学 双相性单链胰岛素类似物
CN107206058A (zh) 2014-12-12 2017-09-26 赛诺菲-安万特德国有限公司 甘精胰岛素/利西拉来固定比率配制剂
TWI748945B (zh) 2015-03-13 2021-12-11 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患治療
TW201705975A (zh) 2015-03-18 2017-02-16 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患之治療
KR20250006907A (ko) 2017-03-09 2025-01-13 다이어메디카 인코포레이티드 조직 칼리크레인 1의 투약 형태

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3868358A (en) 1971-04-30 1975-02-25 Lilly Co Eli Protamine-insulin product
US3758683A (en) * 1971-04-30 1973-09-11 R Jackson Insulin product
DE3064888D1 (en) 1979-04-30 1983-10-27 Hoechst Ag Aqueous solutions of proteins stable against denaturization, process for their manufacture, and their utilization
US4783441A (en) 1979-04-30 1988-11-08 Hoechst Aktiengesellschaft Aqueous protein solutions stable to denaturation
WO1983000288A1 (en) 1981-07-17 1983-02-03 Balschmidt, Per A stable aqueous, therapeutic insulin preparation and a process for preparing it
NL193099C (nl) 1981-10-30 1998-11-03 Novo Industri As Gestabiliseerde insuline-oplossing.
DE3440988A1 (de) 1984-11-09 1986-07-10 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Verfahren zur spaltung von peptiden und proteinen an der methionyl-bindung
DE3526995A1 (de) 1985-07-27 1987-02-05 Hoechst Ag Fusionsproteine, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
PH25772A (en) 1985-08-30 1991-10-18 Novo Industri As Insulin analogues, process for their preparation
DE3541856A1 (de) 1985-11-27 1987-06-04 Hoechst Ag Eukaryotische fusionsproteine, ihre herstellung und verwendung sowie mittel zur durchfuehrung des verfahrens
DE3544295A1 (de) 1985-12-14 1987-06-19 Bayer Ag Thermoplastische formmassen mit hoher kriechstromfestigkeit
DE3726655A1 (de) 1987-08-11 1989-02-23 Hoechst Ag Verfahren zur isolierung basischer proteine aus proteingemischen, welche solche basischen proteine enthalten
DK257988D0 (da) 1988-05-11 1988-05-11 Novo Industri As Nye peptider
WO1990007522A1 (en) * 1988-12-23 1990-07-12 Novo Nordisk A/S Human insulin analogues
IL93282A (en) * 1989-02-09 1995-08-31 Lilly Co Eli Insulin analogues
US5358857A (en) 1989-08-29 1994-10-25 The General Hospital Corp. Method of preparing fusion proteins
DK155690D0 (da) 1990-06-28 1990-06-28 Novo Nordisk As Nye peptider
DK10191D0 (da) * 1991-01-22 1991-01-22 Novo Nordisk As Hidtil ukendte peptider
SG46612A1 (en) 1992-12-02 1998-02-20 Hoechst Ag Process for obtaining proinsulin in processing correctly linked cystine bridges
DE4405179A1 (de) 1994-02-18 1995-08-24 Hoechst Ag Verfahren zur Gewinnung von Insulin mit korrekt verbundenen Cystinbrücken

Also Published As

Publication number Publication date
TR199801144A3 (tr) 1999-01-18
NZ330700A (en) 1999-11-29
RU2207874C9 (ru) 2007-12-20
NL300170I1 (nl) 2005-04-01
HU9801368D0 (en) 1998-08-28
AU7306498A (en) 1998-12-24
ID20462A (id) 1998-12-24
AU740344B2 (en) 2001-11-01
AU740344C (en) 2006-12-07
DK0885961T3 (da) 2005-03-21
BR9803708A (pt) 2000-03-28
KR19990007117A (ko) 1999-01-25
SK83698A3 (en) 1999-01-11
UA65529C2 (uk) 2004-04-15
BRPI9803708B1 (pt) 2016-09-27
FR05C0009I2 (fr) 2007-07-27
HK1016616A1 (en) 1999-11-05
NO321720B1 (no) 2006-06-26
CN1195777C (zh) 2005-04-06
CA2235443C (en) 2011-11-01
HU221176B1 (en) 2002-08-28
PL326936A1 (en) 1998-12-21
HUP9801368A3 (en) 1999-09-28
HUP9801368A1 (hu) 1999-05-28
DE59812316D1 (de) 2005-01-05
IL125006A (en) 2006-12-31
DE122004000049I1 (de) 2005-05-04
JPH119291A (ja) 1999-01-19
US6221633B1 (en) 2001-04-24
KR100546225B1 (ko) 2006-10-19
CZ295964B6 (cs) 2005-12-14
ZA985363B (en) 1999-01-19
BRPI9803708B8 (pt) 2021-05-25
EP0885961B1 (de) 2004-12-01
NL300170I2 (nl) 2005-07-01
CA2235443A1 (en) 1998-12-20
CY2005004I1 (el) 2009-11-04
NO982860L (no) 1998-12-21
ES2232900T3 (es) 2005-06-01
EP0885961A1 (de) 1998-12-23
FR05C0009I1 (cs) 2005-09-30
IL125006A0 (en) 1999-01-26
TW562806B (en) 2003-11-21
PL196626B1 (pl) 2008-01-31
DE19726167B4 (de) 2008-01-24
DE122004000049I2 (de) 2006-02-23
RU2207874C2 (ru) 2003-07-10
JP3676573B2 (ja) 2005-07-27
TR199801144A2 (xx) 1999-01-18
PT885961E (pt) 2005-03-31
DE19726167A1 (de) 1999-01-28
ATE283919T1 (de) 2004-12-15
NO2006014I1 (no) 2006-11-13
NO982860D0 (no) 1998-06-19
CY2005004I2 (el) 2009-11-04
LU91138I2 (fr) 2005-04-04
NO2006014I2 (cs) 2012-02-13
SK285267B6 (sk) 2006-10-05
AR015899A1 (es) 2001-05-30
CN1203238A (zh) 1998-12-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ193498A3 (cs) Nové deriváty inzulinu s rychlým začátkem působení, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje
RU2524423C2 (ru) Новые производные инсулина с чрезвычайно замедленным профилем время/действие
RU2529952C2 (ru) Новые производные инсулина с сильно замедленным профилем время/действие
JP5325778B2 (ja) アミド化されたグラルギンインスリン
JP5695909B2 (ja) 極度に遅延した時間作用プロファイルを有する新規なインスリン誘導体
RU2176646C2 (ru) Инсулин и его производные с повышенной способностью связывать цинк
IE901004L (en) Novel insulin compounds
AU757275B2 (en) Novel insulin analogs with enhanced zinc binding
MXPA98004945A (en) New insulin derivatives with rapid initiation of efe

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MK4A Patent expired

Effective date: 20180618

MK4A Patent expired

Effective date: 20190927