CZ295964B6 - Nové deriváty inzulinu s rychlým začátkem působení, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje - Google Patents

Nové deriváty inzulinu s rychlým začátkem působení, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje Download PDF

Info

Publication number
CZ295964B6
CZ295964B6 CZ19981934A CZ193498A CZ295964B6 CZ 295964 B6 CZ295964 B6 CZ 295964B6 CZ 19981934 A CZ19981934 A CZ 19981934A CZ 193498 A CZ193498 A CZ 193498A CZ 295964 B6 CZ295964 B6 CZ 295964B6
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
amino acid
chain
insulin
glu
insulin derivative
Prior art date
Application number
CZ19981934A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ193498A3 (cs
Inventor
Johann Dr. Ertl
Paul Dr. Habermann
Karl Dr. Geisen
Gerhard Dr. Seipke
Original Assignee
Sanofi - Aventis Deutschland GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=7833099&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ295964(B6) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Sanofi - Aventis Deutschland GmbH filed Critical Sanofi - Aventis Deutschland GmbH
Publication of CZ193498A3 publication Critical patent/CZ193498A3/cs
Publication of CZ295964B6 publication Critical patent/CZ295964B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/575—Hormones
    • C07K14/62—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/28—Insulins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/70—Vectors or expression systems specially adapted for E. coli
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/80—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi
    • C12N15/81—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for fungi for yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

Popisují se deriváty izulinu, které ve srovnání s lidským izulinem vykazují zrychlený začátek působení, způsob jejich přípravy a jejich použití především ve farmaceutických prostředcích k léčení diabetes mellitus. Zvláště se popisují deriváty inzulinu nebo jejich fyziologicky přijatelné soli, kde v původní pozici asparaginu (Asn) v poloze B3 řetězce B je zbytek přirozeně se vyskytující bazické aminokyseliny a B27, B28 a B29 jsou aminokyselinové zbytky v pozici B27, B28 a B29 řetězce B lidského nebo zvířecího inzulinu nebo vždy jeden jiný přirozeně se vyskytující aminokyselinový zbytek, přičemž vždy alespoň jeden ze zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je nahrazen přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem, který je vybrán ze skupiny tvořené neutrálními nebo kyselými aminokyselinami, přičemž aminokyselina fenylalanin (Phe) v pozici B1 řetězce B a aminokyselina v pozici B30 řetězce B mohou zcela chybět. Současně je v řetězci A v poloze A21 aminokyselina asparagin (Asn).

Description

Oblast techniky
Vynález popisuje deriváty inzulínu, které ve srovnání s lidským inzulínem vykazují zrychlený začátek působení, způsob jejich přípravy a jejich použití především ve farmaceutických prostředcích k léčení Diabetes mellitus.
Dosavadní stav techniky
Ve světě trpí asi 120 miliónů lidí na Diabetes mellitus. Mezi nimi je asi 12 miliónů diabetiků typu I, pro které je aplikace inzulínu v současnosti jedinou možností terapie. Postižení jsou doživotně, zpravidla několikrát denně odkázáni na injekci inzulínu. Ačkoli Diabetes typu II, kterým trpí asi 100 miliónů lidí, není primárně způsoben nedostatkem inzulínu, přesto se v mnoha případech léčba inzulínem používá jako příznivá nebo jediná možná forma terapie.
S pokračující dobou trvání onemocnění trpí velký počet pacientů takzvanými opožděnými diabetickými komplikacemi. Jedná se přitom v podstatě o mikro- a makrovaskulámí poškozeni, které vedou, podle druhu a rozsahu, k selhání ledvin, k oslepnutí, ke ztrátě končetin nebo ke zvýšenému riziku onemocnění srdce nebo oběhového systému.
Příčinou komplikací je v první řadě chronicky zvýšená hladina glukózy v krevním obraze, protože i pečlivá snaha o dosažení normální hladiny glukózy v krvi takovou inzulínovou terapií, jaká by odpovídala fyziologické regulaci, není úspěšná (Ward, J. D. (1989) British Medical Bulletin 45, strana 111 až 126; Drury, P. L. a další (1989) British Medical Bulletin 45, strana 127 až 147; Kohner, Ε. M. (1989) British Medical Bulletin 45, strana 148 až 173).
U zdravých jedinců sekrece inzulínu úzce závisí na koncentraci glukózy v krvi. Její zvýšená hladina, ke které dochází po použití potravy, je rychle kompenzována zvýšeným uvolňováním inzulínu. V období hladovění klesá hladina inzulínu v plazmě na bazální hodnotu, která zaručuje kontinuální zásobování inzulin-senzitivních orgánů a tkání glukózou. Optimalizace terapie, takzvaná intenzivní inzulínová terapie se v současnosti soustředí primárně na to, aby kolísání koncentrace glukózy v krvi, a to zvláště směrem nahoru, bylo co možná nejmenší (Bolli, G. B. (1989) Diabetes Res. Clin. Pract. 6, strana 3 až 16; Berger, M. (1989) Diabetes Res. Clin. Prací. 6, strana 25 až 32). To pak vede k výraznému snížení výskytu a nástupu poškození během pozdní fáze onemocnění. (The Diabetes Control and Complications Trial Research Group (1993) N. Engl. J. Med. 329, strana 977 až 986).
Z fyziologie sekrece inzulínu je možné odvodit, že pro zlepšenou, intenzivní inzulínovou terapii jsou při použití subkutánně aplikovaných preparátů potřebné dva inzulínové přípravky s odlišnou farmakodynamikou. Ke kompenzaci vzestupu glukózy v krvi po požití jídla musí inzulín začít účinkovat rychle a může působit jen několik hodin. K bazálnímu zásobování, především v noci, by měl být k dispozici preparát, který působí dlouho, nedosahuje žádného výrazného maxima koncentrace a začíná účinkovat jen velmi pomalu.
Preparáty, které jsou odvozeny z lidského a zvířecího inzulínu, splňují nároky inzulínové terapie jenom omezeně. Rychle účinkující inzulín (Alt-inzulin) se po subkutánní aplikaci dostává do krve a na místo působení příliš pomalu a působí po příliš dlouhou dobu. Důsledkem toho je, že postprandiální (po použití potravy) hladina glukózy je příliš vysoká a že za několik hodin po požití potravy hladina glukózy v krvi příliš výrazně klesne (Kang, S. a další (1991) Diabetes Care 14, strana 142 až 148; Home P. J. a další (1989) British Medical Bulletin 45, strana 92 až 110; Bolli, G. B. (1989) Diabetes Res. Clin. Pract. 6, strana S3 až S15). Dostupné bazální inzulíny,
-1 CZ 295964 B6 především NPH-inzulíny, vykazují příliš krátkou dobu působení a dosahují příliš výrazného maxima koncentrace glukózy.
Vedle možnosti ovlivnit profil účinku inzulínu galenickými principy se v současnosti naskytuje možnost navrhnout s pomocí genových technik deriváty inzulínu s určitými vlastnostmi, jako je například začátek působení a doba účinku. Této změny lze dosáhnout tím, že se změní strukturní vlastnosti inzulínu. Použitím vhodných derivátů inzulínu by pak bylo možné dosáhnout podstatně lepší nastavení hladiny glukózy v krvi, které by bylo více podobné přirozeným poměrům.
Deriváty inzulínu se zrychleným začátkem působení jsou popsány v EP 0 214 826, EP 0 375 437 a EP 0 678 522. EP 0 214 826 mimo jiné popisuje substituci v pozici B27 a B28 avšak ne ve spojení se substitucí v pozici B3. EP 0 678 522 popisuje deriváty inzulínu, které mají v pozici B29 různé aminokyseliny, zejména prolin avšak ne kyselinu glutamovou. EP 0 375 437 popisuje inzulínové deriváty s lysinem nebo argininem v pozici B28, které můžou být ještě výhodně modifikovány v pozici B3 a/nebo A21.
V EP 0 419 504 jsou popsány deriváty inzulínu, které jsou chráněny proti chemickým modifikacím, přičemž je zaměněn asparagin v pozici B3 a minimálně ještě jedna další aminokyselina v pozici A5, A15, A18 nebo A21. Kombinace s modifikacemi v pozicích B27, B28 nebo B29 však nebyly dosud popsány. Rovněž nebyl dosud popsán důkaz toho, že tyto sloučeniny mají pozměněnou farmakodynamiku s rychlejším začátkem působení.
Ve WO 92/00321 byly popsány deriváty inzulínu, u kterých je minimálně jedna aminokyselina v pozicích B1 až B6 nahrazena lysinem nebo argininem. Takovéto inzulíny vykazují podle WO 92/00321 prodloužený účinek. Kombinace s modifikacemi v pozicích B27, B28 a B29 však nebyly popsány.
Cílem vynálezu je připravit deriváty inzulínu, které po aplikaci, především po subkutánní aplikaci, vykazují ve srovnání s lidským inzulínem zrychlený začátek působení.
Deriváty inzulínu jsou deriváty přirozeně se vyskytujících inzulínů, tj. lidského (viz. Sekvence id.č.: 1 tj. A-řetězec lidského inzulínu; Sekvence id.č.:2 tj. B-řetězec lidského inzulínu, sekvenční protokol) nebo zvířecího inzulínu, které se od odpovídajícího, přirozeně se vyskytujícího inzulínu odlišují substitucí alespoň jednoho přirozeně se vyskytujícího aminokyselinového zbytku a/nebo adicí alespoň jednoho aminokyselinového zbytku a/nebo organického zbytku.
Cílem předloženého patentuje dále poskytnout postup pro přípravu derivátů inzulínu s jmenovanými vlastnostmi, odpovídajících meziproduktů jako i jejich prekurzorů.
Vynález popisuje inzulínový derivát nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl který splňuje tento cíl, ve kterém je asparagin (Asn) v pozici B3 řetězce B zaměněn za přirozeně se vyskytující bazický aminokyselinový zbytek a alespoň jeden aminokyselinový zbytek v pozicích B27, B28 nebo B29 B-řetězce je zaměněn za jiný přirozeně se vyskytující aminokyselinový zbytek, přičemž může být fakultativně vyměněn asparagin (Asn) v pozici A21 řetězce A za Asp, Gly, Ser, Thr nebo Ala a fenylalanin (Phe) v pozici B1 řetězce Ba aminokyselinový zbytek v pozici B30 řetězce B mohou zcela chybět.
Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl jsou znázorněny Vzorcem I
-2CZ 295964 B6
SS j | Vzorec I.
(Α1-Ά5) -Cys~Cys-”A8-A9-A10-Cys (A12-A19) -Cys-A21
Ii
S-———s ss
Bl-Val-B3-Glu-His~LeU“Cys-(Β8-Β1Θ)-Cys-(B20-B26)-B27-B28-B29-B30 kde (A1-A5) označují aminokyselinové zbytky v pozicích Al až A5 řetězce A lidského (srovnej se Sekvencí id.č.: 1) nebo zvířecího inzulínu, (A12-A19) označují aminokyselinové zbytky v pozicích A12 až A19 řetězce A lidského (srovnej se Sekvencí id.č.: 1) nebo zvířecího inzulínu, (B8-B18) označují aminokyselinové zbytky v pozicích B8 až B18 řetězce B lidského (srovnej se Sekvencí id.č.:2) nebo zvířecího inzulínu, (B20-B26) označují aminokyselinové zbytky v pozicích B20 až B26 řetězce B lidského (srovnej se Sekvencí id.č.:2) nebo zvířecího inzulínu,
A8, A9, A10 označují aminokyselinové zbytky v pozicích A8, A9 a A10 řetězce A lidského (srovnej se Sekvenci id.č.: 1) nebo zvířecího inzulínu,
A21 je Asn, Asp, Gly, Ser, Thr nebo Ala
B30 označuje -OH nebo aminokyselinový zbytek v pozici B30 řetězce B lidského (srovnej se Sekvencí id.č.:2) nebo zvířecího inzulínu
Bl označuje fenylalaninový zbytek (Phe) nebo atom vodíku
B3 označuje přirozeně se vyskytující bazický aminokyselinový zbytek
B27, B26 a B29 označují aminokyselinové zbytky v pozicích B27, B28, a B29 řetězce B lidského (srovnej se Sekvencí id.č.:2) nebo zvířecího inzulínu nebo vždy jiný přirozeně se vyskytující aminokyselinový zbytek, přičemž alespoň jeden aminokyselinový zbytek v pozici B27, B28 a B29 řetězce B je vyměněn za jiný přirozeně se vyskytující aminokyselinový zbytek.
Z dvaceti přirozeně se vyskytujících aminokyselin, které jsou geneticky kódovány, jsou v dalším textu glycin (Gly), alanin (Ala), valin (Val), Leucin (Leu), izoleucin (Ile), serin (Ser), threonin (Thr), cystein (Cys), methionin (Met), asparagin (Asn), glutamin (Gin), fenylalanin (Phe), tyrosin (Tyr), tryptofan (Trp) a prolin (Pro) označovány jako neutrální aminokyseliny, aminokyseliny arginin (Arg), lysin (Lys) a histidin (His) jako bazické a aminokyseliny kyselina asparagová (Asp) a kyselina glutamová (Glu) jako kyselé aminokyseliny.
Výhodné jsou deriváty inzulínu podle vynálezu nebo jejich fyziologicky přijatelné soli odvozené od hovězího, vepřového nebo lidského inzulínu, zvláště výhodné jsou pak deriváty inzulínu nebo jejich fyziologicky přijatelné soli podle Vzorce I, kde
A8 znamená alanin (Ala),
A9 serin (Ser),
A10 valin (Val) a
B30 alanin (Ala) (aminokyselinové zbytky A8 ažAlO a B30 hovězího inzulínu);
A8 znamená threonin (Thr),
A9 serin (Ser) a
-3CZ 295964 B6
A10 izoieucin (Ile) (aminokyselinové zbytky A8 až A10 lidského nebo prasečího inzulínu), přičemž
B30 znamená alanin (Ala) (aminokyselinový zbytek B30 prasečího inzulínu) nebo
B30 znamená threonin (Thr) (aminokyselinový zbytek B30 lidského inzulínu, srovnej se Sekvencí id.č.:2).
Ve zvláště výhodném provedení vynálezu má derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I aminokyselinové zbytky A8 až A10 a B30 lidského inzulínu a (Al až A5) označuje aminokyselinové zbytky v pozicích Al až A5 řetězce A lidského inzulínu (srovnej se Sekvencí id.č.: 1), (A 12 až A19) aminokyselinové zbytky v pozicích A12 až A19 řetězce A lidského inzulínu (srovnej se Sekvencí id.č.: 1), (B8 až B18) aminokyselinové zbytky v pozicích A8 až B18 řetězce B lidského inzulínu (srovnej se Sekvencí id.č.:2) a (B20 až B26) aminokyselinové zbytky v pozicích B20 až B26 řetězce B lidského inzulínu (srovnej se Sekvencí id.č.:2).
V dalších výhodných provedeních vynálezu má derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce 1 v pozici B1 řetězce B fenylalaninový zbytek (Phe) nebo derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl Vzorce I, který má jako aminokyselinový zbytek v pozici B3 řetězce B histidin (His), lysin (Lys) nebo arginin (Arg).
V jiném výhodném provedení vynálezu má derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B nahrazen jedním přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem, který patří do skupiny tvořené neutrálními nebo kyselými aminokyselinami.
Vynález dále popisuje výhodný derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl podle Vzorce I kde alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem, který je vybrán ze skupiny tvořené aminokyselinami: izoieucin (Ile), kyselina asparagová (Asp) a kyselina glutamová (Glu); a ve zvláště výhodném je alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27 a B28 řetězce B nahrazen přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem, který je vybrán ze skupiny neutrálních aminokyselin, nebo v dalším obzvláště výhodném provedení vynálezu je alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B derivátu inzulínu podle vynálezu izoleucinovým zbytkem (Ile).
Vynález dále popisuje výhodný derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl podle Vzorce I, kde alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem, který je vybrán ze skupiny kyselých aminokyselin; nebo výhodně kde alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je zbytek kyseliny asparagové (Asp); nebo výhodně kde aminokyselinový zbytek v pozicích B27 nebo B28 řetězce B je zbytkem kyseliny asparagové (Asp), nebo ještě výhodněji kde alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je zbytkem kyseliny glutamové (Glu).
Výhodným provedením vynálezu je také derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, kde je aminokyselinový zbytek v pozici B29 řetězce B zbytkem kyseliny asparagové (Asp).
-4CZ 295964 B6
Dalším výhodným provedením vynálezu je derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B27 řetězce B zbytkem kyseliny glutamové (Glu); nebo derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B28 řetězce B zbytkem kyseliny glutamové (Glu) nebo derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl Vzorce I, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B29 řetězce B zbytkem kyseliny glutamové (Glu).
Zvláště výhodným provedením vynálezu je derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, který se vyznačuje tím, že řetězec B vykazuje sekvenci
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr (Sekvence id.č.:3), například lidský mutantní inzulín Lys (B3), Glu (B29).
Dalším zvláště výhodným provedením vynálezu je derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici B27 řetězce B zbytkem aminokyseliny izoleucinu (Ile); a zvláště výhodným pak je zejména derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, ve kterém B-řetězec vykazuje sekvenci
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Ile Pro Lys Thr (Sekvence id.č.:5), například lidský mutantní inzulín Lys (B3), Ile (B27).
Dalším výhodným provedením vynálezu je derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, ve kterém je v pozici B28 řetězce B izoleucinový zbytek (Ile); a zvláště výhodným pak je zejména derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, ve kterém B-řetězec vykazuje sekvenci
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr (Sekvence id.č.:4), například lidský mutantní inzulín Lys (B3), Ile (B28).
Dalším výhodným provedením vynálezu je derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle Vzorce I, který se vyznačuje tím, že aminokyselinový zbytek v pozici B28 řetězce B je izoleucin (Ile) a aminokyselinový zbytek v pozici A21 je asparagin (Asp); zejména výhodný pak je derivát inzulínu jehož A-řetězec vykazuje sekvenci
Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asp (Sekvence id.č.: 9) a B-řetězec sekvenci
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr (Sekvence id.č.:10), například lidský mutantní inzulín (Lys (B3), Ile (B28), Asp (A21).
Deriváty inzulínu podle vzorce I je možné připravit pomocí genových technologií.
Vynález dále popisuje způsob přípravy derivátu inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelné soli podle Vzorce I konstrukcí replikovatelného expresního systému, který obsahuje DNA sekvenci kódující prekurzor derivátu inzulínu, ve kterém je aminokyselinový zbytek v pozici Al řetězce A spojen s aminokyselinovým zbytkem B30 řetězce B peptidovým řet&cem podle Vzorce II
-5CZ 295964 B6
R'n-Arg- II kde, R‘n - znamená peptidový řetězec s n aminokyselinovými zbytky přičemž n je celé číslo z intervalu od 0 do 34; a řetězec B je v pozici B1 prodloužen o peptidový řetězec podle Vzorce III
Met-R2 m-(Arg)p- III kde, R2m dole znamená peptidový řetězec s m aminokyselinovými zbytky přičemž m celé číslo od 0 do 40, ve výhodném provedení vynálezu od 0 do 9, a p znamená 0, 1 nebo 2, přičemž pro p=0 končí R2m výhodně aminokyselinovou lysinem (Lys). Exprese v hostitelské buňce a uvolnění derivátu inzulínu z jeho prekurzoru je realizováno chemickými a/nebo enzymatickými způsoby.
Ve způsobu podle vynálezu může být hostitelskou buňkou bakterie, zejména pak bakterie E. coli.
Ve způsobu podle vynálezu může být hostitelskou buňkou rovněž kvasinka, přičemž ve výhodném provedení vynálezu je touto buňkou kvasinka Saccharomyces cerevisiae.
K přípravě derivátu inzulínu s aminokyselinovou sekvencí podle Sekvence id.č.:9 (řetězec A) a
Sekvence id.č.: 10 (řetězec B) je výhodně použit prekurzor derivátu inzulínu se sekvencí:
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin
His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys
Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr Arg Arg Glu Ala
G1U Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly
Al a Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys
Arg Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr
Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asp
(Sekvence id.č.: 11), Lys (B3), Ile (B28), Asp (A21)-preproinzulin.
K přípravě derivátu inzulínu s aminokyselinovou sekvencí podle Sekvence id.č.:3 je výhodně použit prekurzor derivátu inzulínu se sekvencí:
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu
Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr
Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly
Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly
Ser Leu Gin Lys Arg
Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin
Leu Glu Asn Tyr Cys Asn
(Sekvence id.č.: 6), Lys (B3), Glu (B29)-preproinzulin.
K přípravě derivátu inzulínu s aminokyselinovou sekvenci podle Sekvence id.č.:5 je výhodně použit prekurzor derivátu inzulínu se sekvencí:
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu
-6CZ 295964 B6
Tyr Leu Val cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Ile Pro Lys Thr
Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val G1 y Gin Val Glu Leu Gly
cly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly
Ser Leu Gin Lys Arg
Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin
Leu Glu Asn Tyr Cys Asn
(Sekvence id l.č. : :8) , Lys (B3) , Ile (B27)- -preproinsulj „n.
(Sekvence id.č.:8), Lys (B3), Ile (B27)-preproinzulin.
K přípravě derivátu inzulínu s aminokyselinovou sekvencí podle Sekvence id.č.:4 je výhodně použit prekurzor derivátu inzulínu se sekvencí:
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu
Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr
Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly
θίγ Giy Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly
Ser Leu Gin Lys Arg
Gly Ile Val Glu Gin cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin
Leu Glu Asn Tyr Cys Asn
(Sekvence id.č.:7), Lys (B3), Ile (B28)-preproinzulin.
Vynález rovněž popisuje jmenované prekurzory výhodného derivátu inzulínu, totiž peptidy podle Sekvence id.č.:l 1, Sekvence id.č.:6, Sekvence id,č,:7 a Sekvence id.č.: 8; sekvence DNA, které kódují vzpomínané prekurzory, expresní systémy, které obsahují tyto DNA sekvence jakož i hostitelské buňky, které jsou transformovány tímto expresním systémem.
Derivátu inzulínu podle Vzorce I se připravují hlavně genovými technikami prostřednictvím cílené mutageneze pomocí způsobů známých ze stavu techniky.
Pro požadovaný derivát inzulínu Vzorce I se konstruuje genová struktura, která je poté exprimována v hostitelské buňce, výhodně v bakterii E. coli nebo v kvasince, zejména v kvasince Saccharomyces cerevisiae. V případě kdy genová struktura kóduje fúzní protein, je z něho uvolněn derivát inzulínu podle Vzorce I; analogické způsoby jsou popsány například vEP-A-0 211 299, EP-A-0 227 938, EP-A-0 229 998, EP-A 0 286 956 a v DE-patentové přihlášce číslo P38 21 159.
Odštěpení fúzní části proteinu po rozbití buňky může být realizováno chemicky halogencyanem (viz. EP-A-0 180 920).
Při výrobě derivátu inzulínu prostřednictvím preproinzulinového prekurzoru, kteiý obsahuje část fúzního proteinu (presekvence) podle US 5 358 857 dochází k odštěpení fúzní části v dalším kroku spolu s odštěpením C-terminálního peptidu.
Inzulínový prekurzor je dále podroben oxidační sulfitolýze podle metody popsané například R. C. Marshall a A. S. Inglis v „Practical Protein Chemistry - A Handbook“ (vydavatel A. Darbre) 1986, strany 49 až 53 a následně je v přítomnosti thiolu renaturován za tvorby požadovaných disulfídických můstků způsobem popsaným například G. H. Dixon a A. C. Wardlow v Nátuře (1960), strana 721 až 724.
Inzulínový prekurzor může být složen také přímo, viz EP-A-0 600 372; EP-A-0 668 292.
C-terminální peptid se odstraní štěpením trypsinem - například způsobem popsaným v Kemmler a další, J. B. C. (1971), strana 6786 až 6791 a derivát inzulínu Vzorce I je přečištěn prostřednictvím známých technik, například chromatografícky viz EP-A-0 305 760 a krystalizací.
V případě, kdy je n ve Vzorci II rovno nule, štěpení trypsinem slouží k rozštěpení peptidové vazby mezi řetězcem A a B.
V tomto způsobu končí řetězec B na C-konci argininem nebo dvěma argininovými zbytky. Ty mohou být odstraněny prostřednictvím karboxypeptidázy B.
Inzulínový derivát podle vynálezu má plnou biologickou aktivitu. To bylo prokázáno prostřednictvím intravenózní aplikace na králíkům a zpoklesu glukózy v jejich krvi (Příklad 5 a 6).
Rychlejší nástup účinku inzulínového derivátu po subkutánní aplikaci byl prokázán euglykemickou clamp technikou na hladovějícím psovi (Příklad 7). Bylo podáváno 0,3 IU/kg derivátu inzulínu a jako referenční preparát byl použit lidský inzulín. Při clamp technice je po aplikaci inzulínu v krátkých časových intervalech měřená hladina glukózy v krvi a stejné množství glukózy je aplikováno, aby se kompenzoval její pokles. Výhodou metody je, že u zvířat nenastupuje genová regulace, která by se dala očekávat v případě rychlého úbytku krevní glukózy po podání inzulínu. Množství a časový průběh glukózy podané infuzí, charakterizují působení inzulínu. Inzulíny Lys(B3), Glu(B29)- (Sekvence id.č.:3) a Lys(B3), Ile(B28)~ (Sekvence id.č.:4) vykazují zřetelně rychlejší začátek působení než lidský inzulín. K maximálnímu účinku (infúzní rychlosti glukózy) je dosaženo s lidským inzulínem 100 minut po aplikaci zatímco s inzulínem Lys(B3),Glu(B29)(Sekvence id.č.:3) 80 minut a s inzulínem Lys(B3),Ile(B28)- (Sekvence id.č.:4) již po 60 minutách. Proto by měla tato analoga lépe kompenzovat postprandiální nárůst glukózy v krvi než lidský inzulín, když se aplikují krátce před jídlem.
Popsané inzulínové deriváty jsou vhodné k terapii diabetes mellitus typu I jakož i typu II zejména ve spojení s bazálním inzulínem.
Vynález se proto také týká použití derivátu inzulínu a/nebo jeho fyziologicky přijatelné soli podle Vzorce I k výrobě farmaceutického přípravku, který vykazuje rychlý začátek působení.
Jako fyziologicky nezávadné a s inzulínovým derivátem snášené nosné médium je vhodný sterilní vodní roztok například glukózy, glycerinu, kuchyňské soli, který je izotonický vůči krvi a který také obsahuje konzervační prostředek jako je například fenol, m-kresol nebo ester kyseliny p-hydroxybenzoové. Nosné médium může navíc obsahovat pufr, například acetát sodný, citrát sodný, fosfát sodný. K nastavení pH se používají zředěné kyseliny (obvykle HC1) popřípadě louhy (NaOH). Přípravek může dále obsahovat ionty zinku.
Deriváty inzulínu mohou být použity ve farmaceutických přípravcích ve formě jejich fyziologicky přijatelných solí, jako jsou soli amonné nebo alkalické. Libovolný díl jednoho nebo několika derivátů inzulínu podle Vzorce I nebo derivát inzulínu podle Vzorce I mohou existovat ve směsi dalších těchto derivátů inzulínu vždy navzájem nezávisle, v rozpuštěné, amorfní a/nebo v krystalické formě.
Někdy je výhodné k přípravku podle vynálezu přidat patřičné množství vhodného stabilizátoru, který zabrání precipitaci proteinů při termicko-mechanické námaze přípravku při kontaktu s různými materiály. Takovéto stabilizátory jsou například popsány v patentech EP-A-18609 DE-A 32 40 177 nebo přihlášce WO 83/00288.
-8CZ 295964 B6
Vynález dále popisuje farmaceutický přípravek, který obsahuje alespoň jeden derivát inzulínu a/nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl podle Vzorce I, zejména v rozpuštěné, amorfní a/nebo krystalické formě.
Derivát inzulínu podle vynálezu se vyznačuje rychlým začátkem působení. V praktické inzulínové terapii je podle okolností vhodné rychle působící inzulín smíchat s přípravkem, který obsahuje depotní pomocnou látku (např. NPH-inzulin). Následkem toho je podle složení přípravku jeho profil účinku složen z profilů jednotlivých komponent, jestliže jsou jednotlivé komponenty směsi stabilní a navzájem se neovlivňují. Při smíchání inzulínového derivátu s lidským NPH-inzulinem se však dá očekávat, že zejména při dlouhodobém skladování dochází k výměně mezi rozpuštěným derivátem a krystalickým NPH-inzulinem. Proto může být farmakodynamika depotního inzulínu jakož i rozpuštěného inzulínu s rychlým pozměněna nepředvídatelným způsobem. Proto je vhodné připravit rychle působící derivát s použitím depotní pomocné látky - jako je například NPH-inzulin. Tato depotní forma inzulínového derivátu může být libovolně míchána s rozpuštěnou rychle působící formou bez toho, aby se složení jedné nebo druhé formy v průběhu skladování měnilo.
Ačkoli vynález popisuje především rychle působící inzulínový derivát, zahrnuje také možnost připravit tento derivát pro lepší mísitelnost jako depotní formy, přičemž se jako depotní pomocná látka používá zejména aprotaminsulfát a inzulínový derivát a/nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl se pak převede na kokrystalickou formu sprotaminsulfátem.
Vynález dále popisuje injikovatelný roztok, který obsahuje farmaceutické přípravky podle vynálezu v rozpuštěné formě.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Konstrukce proinzulinu Lys (B3) jako východisko pro plazmidy podle příkladů 2 až 4
V patentu Spojených států US 5 258 857 je popsán vektor pINT 90d jakož i PCR primeiy Tir a Insu 11. Tyto komponenty slouží jakožto výchozí materiál pro konstrukci plazmidu pINT 125d, který kóduje požadovaný proinzulin Lys (B3). Dodatečně byl syntetizován primer Insu 35 se sekvencí:
5' TTT GTG AAG CAG CAC CTG 3' a primer Insu 36 se sekvencí:
5' CAG GTG CTG CTT CAC AAA 3'.
Poté byla provedena jedna PCR reakce pomocí primerů Tir a Insu 36 a druhá PCR reakce za použití primerů Insu 11 a Insu 35. Jako templát byl využit plazmid pINT 90d.
Produkty obou reakcí jsou navzájem částečně komplementární takže je lze použít jako templáty pro další PCR reakci s primery Tir a Insu 11. Produktem této reakce byl sjednocený fragment kódující variantu proinzulinu, která obsahuje v pozici 3 řetězce B aminokyselinu lysin. Tento PCR fragment byl poté přečištěn ethanolem, vysušen a poté naštěpen restrikčními enzymy Ncol a Sall. Reakční směs byla po restrikci elektroforeticky rozdělena a byl vyizolován požadovaný fragment Ncol/Sal 1.
V citované přihlášce je popsána plazmid pINT 9 ld, který kóduje mini-proinzulin. Sekvence kódující mini-proinzulin byla vyštěpena pomocí restrikčních enzymů Ncol a Sall a byl vyizolován zbývající plazmid. Do tohoto plazmidu byl vložen Ncol/Sall PCR fragment pomocí T4 ligázy za vzniku plazmidu pINT 125d. Tímto plazmidem byly transformovány bakterie E.coli K12,
-9CZ 295964 B6 namnoženy a plazmid opětovně vyizolován. Struktura plazmidu byla překontrolována pomocí DNA-sekvenování a restrikčni analýzy. Po této analýze byla DNA plazmidu pINT 125d použita jako templát pro vložení dalších mutací do této varianty genu pro proinzulin.
Příklad 2
Konstrukce proinzulinu Lys (B3) Glu (B29)
Pro přípravu mutovaných proteinů byly nasyntetizovány dva primery: primer 329 se sekvencí
5' TTC TAC ACA CCC GAG ACC CGC GGC ATC - 3' a primer 329b se sekvencí
5' GCC GCG GGT CTC GGG TGT GTA GAA GAA GC 3'.
Jako templátu bylo použito DNA zplazmidů pINT125d a pINT91d. Primer 329a byl použit v PCR reakci spolu s primerem Insu 11 a plazmidem pINT 91 d jakožto templátem a primer 329b byl použit v další PCR reakci s primerem Tir (viz příklad 1) a plazmidem pINT 125d. Vzhledem ktomu, že jsou oba produkty částečně komplementární, lze je spojit v další přímé PCR reakci s primery Tir a Insu 11. Vzniklý fragment DNA kóduje protein s požadovanou mutací. Tento fragment byl poté naštěpen enzymy Ncol a Sall a vzniklý Ncol/Sall fragment byl pomocí T4 ligázy vložen do zbytkového plazmidu pINT 9 ld.
Tímto postupem byl vytvořen plazmid pINT 329, který byl po amplifikaci vE.coli kmene K12 podroben sekvenční a restrikčni analýze, čímž byla ověřena jeho struktura.
Derivát proinzulinu kódovaný tímto plazmidem je charakterizován jak výše uvedenou záměnou aminokyselin tak i C-spoj ovacím peptidem, který sestává z argininu.
Příklad 3
Konstrukce proinzulinu Lys (B3) lle (B27)
Konstrukce tohoto proinzulinu byla provedena způsobem popsaným v předešlém příkladu s tím, že bylo použito následujících párů primerů:
primer KB3 JB 27A se sekvencí
5' TTC TAC ATC CCC AAG ACC CGC CG 3' spolu s primerem Insu 11 a primer K B3 J 27B se sekvencí
5' CTT GGG GAT GTA GAA GAA GCC TCG 3' spolu s primerem Tir.
Jako templát posloužil v obou PCR reakcích plazmid pINT 125d. Produkty obou reakcí byly spojeny třetí PCR reakcí tak, jak bylo popsáno v příkladu 1 a vzniklý produkt byl nakloňován do plazmidu obdobným způsobem za vzniku plazmidu pINT332.
Příklad 4
Konstrukce proinzulinu Lys (B3) lle (B28)
Konstrukce tohoto proinzulinu byla provedena způsobem popsaným v příkladu 3 s tím, že bylo použito následujících párů primerů:
-10CZ 295964 B6 primer KB3 JB 28A se sekvencí
5' TAC ACA ATC AAG ACC CGC CGG GAG - 3' spolu s primerem Insu 11 a primer KB J B28B se sekvencí
5' GGT CTT GAT TGT GTA GAA GAA GCC TCG - 3' spolu s primerem Tir.
Způsobem obdobným výše popsanému byl vytvořen plazmid pINT 333.
Exprese zkonstruovaných variant inzulínu
Bakterie E. coli kmene K12 byly transformovány pomocí plazmidů pINT 329, 332 a 333. Rekombinantní bakterie obsahující příslušné plazmidy byly kultivovány podle příkladu 4 Patentu Spojených států US 5 227 293. Tak byly připraveny požadované výchozí suroviny pro výrobu příslušných variant inzulínu.
Příklad 5
Konstrukce proinzulinu Lys (B3), Ile (B28), Asp (A21)
Konstrukce tohoto proinzulinu byla provedena způsobem popsaným v příkladu 3. Místo plazmidu pINT 125d však byl jakožto templát pro PCR reakci použit plazmid pINT 333, připravený v příkladu 4. Pro vložení mutace byly použity následující primery:
primer P-pint365 '-TTTTTTGTCGACTATTAGTCGC AGTAGTTCTACC AGCTG-3' a primer Tir.
Vzniklý plazmid byl označen pINT 365.
Příklad 6
Biologická aktivita inzulínu Lys (B3), Glu (B29) po intravenózní aplikaci králíkovi
Čas [h] Lidský inzulín Inzulín Lys (B3), Glu (B29)
0 100 100
0,25 89,17 89,47
0,5 67,56 58,32
0,75 73,24 66,59
1 73,13 68,21
1,5 78,12 71,95
2 89,47 80,88
3 107,01 94,2
4 104,55 99,78
králíků obdrželo intravenózně uvedený inzulín v dávce 0,2 IU/kg. V průběhu následujících čtyř hodin byly v uvedených okamžicích stanovovány koncentrace krevní glukózy a byly vztahovány k počáteční hodnotě v čase 0. Průměrné hodnoty nevykazují žádné významné rozdíly biologické aktivity mezi lidským inzulínem a inzulínem Lys(B3),Glu(B29).
Příklad 7
Biologická aktivita inzulínů Lys (B3), Ile (B27) a Lys (B3), Ile (B28) po intravenózní aplikaci králíkovi
-11 CZ 295964 B6 králíků obdrželo intravenózně uvedený inzulin v dávce 0,2 IU/kg. V průběhu následujících čtyř hodin byly v uvedených okamžicích stanovovány koncentrace krevní glukózy a byly vztahovány k počáteční hodnotě v čase 0. Průměrné hodnoty nevykazují žádné významné rozdíly biologické aktivity mezi lidským inzulínem a inzulíny Lys (B3), Ile (B27) a Lys (B3), Ile (B28).
Čas [h] Lidský inzulin Inzulin Lys (B3), Ile (B27) Inzulin Lys (B3), Ile (B28)
0 100 100 100
0,33 67,8 62,6 63,3
0,66 54,9 60,6 55,8
1 55,2 66,8 59,3
1,5 63 79,2 66,7
2 77,8 90,9 81,6
3 91,5 96,3 97,2
4 99,5 96 101,6
Příklad 8
Farmakodynamika inzulínu Lys (B3), Glu (B29) a Lys (B3), Ile (B28) po subkutánní aplikaci do psího organizmu
Psů (po čtyřech pro každý inzulin) byla subkutánně podána dávka 0,3 IU/kg inzulínu. Koncentrace krevní glukózy byla kontinuální infuzí udržována na 3,7 až 4 mmol/1. V tabulce jsou uvedeny průměrné hodnoty infúzní rychlosti glukózy ± střední chyba průměru (SEM). Hodnoty jsou uváděny v intervalu 0 (okamžik aplikace) až 240 minut.
Průběh koncentrací glukózy u hladovějících psů po podání derivátů inzulínu s rychlým účinkem
Parametry profilu udávajícího rychlost infuze glukózy Dávka činila 1 x 0,3 IU/kg subkutánně v t=0, n=4
Preparát Vzestupná fáze tmax Sestupná fáze
Inflexní bod (min) Směrnice v infl. bodě (min) Inflexní bod (min) Směrnice v infl. bodě
H-inzulin Hoechst 43 0,144 100 156 -0,065
Inzulin Lys (B3), Glu (B29) 33 0,227 80 127 -0,091
Inzulin Lys (B3), Ile (B28) 16 0,267 60 104 -0,102
-12CZ 295964 B6
Průběh koncentrací glukózy u lačných psů po podání derivátů inzulínu s rychlým účinkem
Dávka činila 1 x 0,3 IU/kg subkutánně v t=0 (průměr ± SEM)
H-inzulin Hoechst Inzulín Lys (B3), Glu(B29) Inzulín Lys(B3), Ile(B29)
rychlost influze koncentrace krevní rychlost infuze glukózy koncentrace krevní glukózy rychlost influze glukózy koncentrace krevní glukózy
Čas glukózy nig.min^kg·1 Čas glukózy mmol.r1 Čas mg.minlkg 1 Čas mg.min l.kg '
Čas mmol.l Čas mmol.l 1
Min průměr SEM Min Min průměr Min průměr SEM Min průměr SEM Min průměr SEM Min průměr SEM
0 0,00 0,00 0 3,98 0,07 0 0,00 0,00 0 3,77 0,12 0 0,00 0,00 0 3,74 0,07
6 0,14 0,01 4 3,97 0,04 6 0,24 0,08 5 3,85 0,22 6 1,54 0,53 4 3,60 0,17
11 0,23 0,08 9 3,98 0,08 11 0,36 0,18 10 3,86 0,17 11 3,75 1,24 10 3,49 0,19
16 0,35 0,19 14 3,99 0,04 16 0,95 0,60 15 3,86 0,22 16 5,25 0,89 15 3,53 0,14
21 0,44 0,18 19 4,01 0,05 21 2,75 0,96 20 3,61 0,16 21 8,25 1,67 20 3,38 0,18
26 1,50 0,25 24 3,85 0,08 26 3,25 0,65 25 3,73 0,14 26 7,25 1,63 25 3,81 0,20
31 3,50 0,56 29 3,82 0,13 31 3,75 0,22 30 3,76 0,08 31 7,50 1,25 30 3,64 0,13
36 5,50 0,90 34 3,77 0,13 36 5,25 0,41 35 3,66 0,15 36 8,50 1,15 35 3,65 0,12
41 4,50 0,56 39 3,99 0,07 41 6,00 0,00 40 3,71 0,12 41 11,00 1,12 40 3,63 0,09
46 4,00 1,17 44 4,09 0,11 46 9,00 0,87 45 3,58 0,19 46 11,75 0,22 45 3,68 0,10
51 5,25 0,54 49 3,98 0,06 51 8,00 0,00 50 3,73 0,14 51 10,75 0,96 50 3,81 0,09
56 5,75 0,89 54 4,01 0,10 56 8,50 0,56 55 3,81 0,11 56 11,25 1,78 55 3,73 0,11
61 7,25 1,19 59 3,93 0,13 61 11,50 0,43 60 3,57 0,14 61 10,50 1,09 60 3,78 0,16
66 6,50 1,09 64 4,08 0,06 67 10,00 1,22 65 3,81 0,20 66 9,75 1,85 65 3,83 0,14
71 7,75 1,08 69 3,98 0,01 71 11,50 0,43 70 3,85 0,23 71 11,00 1,50 70 3,69 0,11
76 7,75 1,14 74 4,08 0,10 76 11,00 1,70 75 3,81 0,28 76 10,50 0,83 75 3,81 0,06
81 8,50 1,09 79 4,03 0,12 81 10,50 0,83 80 3,94 0,15 81 9,25 1,19 80 3,89 0,01
86 8,75 1,29 84 4,09 0,15 86 8,25 1,75 85 3,95 0,18 86 10,00 1,22 85 3,78 0,02
91 8,75 1,08 89 4,03 0,18 91 9,00 0,50 90 3,69 0,12 91 8,75 1,29 90 3,83 0,04
96 9,25 2,33 94 3,99 0,22 96 11,00 0,94 95 3,56 0,14 96 10,25 0,74 95 3,67 0,11
101 8,50 1,68 99 4,08 0,10 101 9,75 0,41 100 3,71 0,16 101 10,00 1,22 100 3,66 0,18
106 8,50 1,44 104 3,96 0,08 106 10,25 0,89 105 3,59 0,20 106 10,50 1,15 105 3,59 0,15
111 8,00 1,06 109 3,92 0,19 111 8,00 0,94 110 3,84 0,16 111 8,50 1,03 109 3,74 0,10
116 9,25 1,47 114 3,83 0,17 116 10,25 0,74 115 3,46 0,10 116 7,75 0,22 115 3,81 0,08
121 8,00 1,58 119 4,04 0,21 121 10,25 1,24 120 3,58 0,25 121 7,50 1,09 120 3,83 0,07
126 8,00 1,37 124 3,95 0,12 126 9,75 1,34 125 3,70 0,23 126 6,00 1,62 125 3,94 0,07
131 9,25 1,19 129 3,81 0,09 131 7,75 1,52 130 3,88 0,21 131 4,25 1,29 130 3,95 0,12
136 8,50 1,30 134 3,92 0,16 136 5,50 1,44 135 3,97 0,15 136 5,33 1J9 135 3,70 0,20
141 8,50 1,25 139 3,86 0,13 141 6,75 1,85 140 3,64 0,15 142 4,75 1,19 140 3,71 0,08
146 8,25 1,24 144 3,91 0,12 146 6,25 1,67 145 3,71 0,14 146 4,00 0,94 145 3,73 0,07
151 7,00 1,46 149 4,06 0,08 151 4,75 1,14 150 3,82 0,08 151 3,25 0,89 150 3,74 0,14
156 6,25 1,29 154 4,05 0,04 156 5,75 0,96 155 3,71 0,11 156 4,00 0,81 155 3,62 0,05
161 6,00 0,79 159 3,97 0,12 161 4,75 0,82 160 3,81 0,11 162 3,75 0,54 160 3,69 0,09
166 5,00 0,50 164 4,04 0,09 166 5,50 1,03 165 3,67 0,15 166 2,25 0,54 165 3,80 0,13
171 4,75 1,39 169 3,95 0,15 171 4,75 0,41 169 3,81 0,04 171 2,25 0,41 170 3,75 0,05
176 4,33 0,54 174 4,01 0,12 176 3,75 0,54 175 3,83 0,08 176 1,63 0,48 175 3,77 0,05
181 5,33 1,19 179 3,88 0,14 181 4,00 0,94 180 3,75 0,16 181 1,54 0,53 180 3,77 0,12
186 4,67 0,72 184 4,03 0,09 186 2,88 0,87 185 3,85 0,14 186 0,88 0,46 185 3,76 0,10
191 3,33 0,72 189 4,12 0,11 191 3,25 0,41 190 3,78 0,10 191 1,19 0,54 190 3,76 0,04
196 3,00 0,00 194 4,13 0,03 196 3,13 0,84 195 3,81 0,14 195 1,28 0,79 195 3,76 0,08
201 3,67 0,72 199 3,98 0,11 201 2,13 0,51 200 3,88 0,13 202 1,07 0,58 200 3,71 0,11
206 4,67 0,72 204 3,91 0,05 206 2,06 0,66 205 3,85 0,14 206 0,94 0,60 205 3,66 0,08
211 4,67 0,72 209 3,92 0,08 211 1,79 0,62 210 3,85 0,17 212 1,41 1,04 210 3,69 0,08
216 3,33 0,72 214 4,09 0,04 216 1,78 0,63 215 3,85 0,18 217 0,95 0,60 215 3,74 0,09
221 3,00 0,94 219 4,05 0,11 221 1,41 0,58 220 3,87 0,16 221 0,54 0,21 220 3,66 0,17
226 2,17 0,68 224 4,17 0,12 226 0,78 0,36 225 3,85 0,13 226 0,72 0,37 225 3,72 0,10
231 2,67 0,98 229 4,00 0,13 231 0,85 0,37 230 3,72 0,23 231 0,69 0,38 230 3,75 0,08
236 2,00 0,47 234 4,01 0,05 236 0,76 0,51 235 3,74 0,21 237 0,94 0,60 235 3,71 0,03
240 1,17 0,36 239 4,08 0,02 240 1,07 0,47 240 3,56 0,18 240 0,88 0,61 240 3,69 0,03
- 13CZ 295964 B6
Průběh koncentrací glukózy u hladovějících psů po podání derivátů inzulínu s rychlým účinkem
Dávka činila 1 x 0,3 IU/kg subkutánně v t=0 formát dat (průměr ± SEM)
5 p···.;
—..........................................................s
Minut
5,0
Minut
210 240
Lil
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 1:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 21 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 21 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 1
-14CZ 295964 B6
Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu 15 10 15
Glu Asn Tyr Cys Asn
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 2:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 30 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 30 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 2
Phe Val Asn Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr 15 10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Lys Thr
25 30
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 3:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 30 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 30 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 3
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr 15 10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr
25 30
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 4:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 30 aminokyselin
-15CZ 295964 B6 (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 30 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 4
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr 15 10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr lle Lys Thr
25 30
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 5:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 30 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 30 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 5
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr 15 10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr lle Pro Lys Thr
25 30
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 6:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 97 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 97
-16CZ 295964 B6 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 6
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His
1 5 10 15
Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val cys Gly Glu
20 25 30
Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro
35 40 45
Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu
50 55 60
Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg Gly Ile Val Glu
65 70 75 80
Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys
90 95
Asn
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 7:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 97 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 97 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 7
Met 1 Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn 5 Ser Ala Arg Phe Val 10 Lys Gin 15 His
Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu
20 25 30
Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro
35 40 45
Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu
50 55 60
Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg Gly Ile Val Glu
65 70 75 80
Gin Cys Cys Thr Ser Ile cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr cys
85 90 95
Asn
- 17CZ 295964 B6
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 8:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 97 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 97 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 8
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His
1 5 10 15
Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu
20 25 30
Arg G1Y Phe Phe Tyr Ile Pro Lys Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro
35 40 45
Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu
50 55 60
Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg Glv Ile Val G1 u
65 70 75 80
Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Gin Leu G-i-U Asn Tyr Cys
85 90 95
Asn
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 9:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 21 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 21 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 9
-18CZ 295964 B6
Gly Ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu 1 5 10 15
Glu Asn Tyr Cys Asp
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 10:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 30 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 30 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 10
Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr 15 10 15
Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr
25 30
INFORMACE O SEKVENCI ID. Č. 11:
(i) CHARAKTERISTIKA SEKVENCE:
(A) DÉLKA: 97 aminokyselin (B) TYP: aminokyselina (C) POČET VLÁKEN: jedno (D) TOPOLOGIE: lineární (ii) TYP MOLEKULY: protein (ix) CHARAKTERISTICKÉ RYSY:
(A) JMÉNO/KLÍČ: protein (B) UMÍSTĚNÍ: 1 až 97 (xi) POPIS SEKVENCE: SEKVENCE ID.Č: 11
-19CZ 295964 B6
Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg Phe Val Lys Gin His
1 5 10 15
Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu
20 25 30
Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro
35 40 45
Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu
50 55 60
Gin Pro Leu A1& Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg Gly Ile Val Glu
65 70 75 80
Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr cys
85 90 95
Asp

Claims (52)

  1. PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl obecného vzorce (A1 -A5)-Cys-Cys-A8~A9-A10-Cys-(A12~A19j-Cys-A21
    I,
    B1-VabB3-Gln-His-Leu-Cys-(B8^B18>Cys-(B20-B2S)-B27-B28-B29B30 kde (A1-A5) zvíře(A12-A19) jsou aminokyselinové zbytky v pozicích Al až A5 řetězce A lidského nebo čího inzulínu jsou aminokyselinové zbytky v pozicích A12 až A19 řetězce A lidského nebo zvířecího inzulínu
    A21 je Asn, (B8-B18) jsou aminokyselinové zbytky v pozicích B8 až B18 řetězce B lidského nebo zvířecího inzulínu (B20-B26) jsou aminokyselinové zbytky v pozicích B20 až B26 řetězce B lidského nebo zvířecího inzulínu,
    A8, A9, A10 jsou aminokyselinové zbytky v pozicích A8, A9 a Al 0 řetězce A lidského nebo zvířecího inzulínu
    -20CZ 295964 B6
    B30 je OH nebo aminokyselinový zbytek v pozici B30 řetězce B lidského nebo zvířecího inzulínu
    B1 je zbytek aminokyseliny fenylalaninu (Phe) nebo vodíkový atom,
    B3 je zbytek přirozeně se vyskytující bazické aminokyseliny
    B27, B28 a B29 jsou aminokyselinové zbytky v pozici B27, B28 a B29 řetězce B lidského nebo zvířecího inzulínu nebo vždy jeden jiný přirozeně se vyskytující aminokyselinový zbytek, přičemž vždy alespoň jeden ze zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je nahrazen přirozeně se vyskytujícím aminokyselinovým zbytkem, který je vybrán ze skupiny tvořené neutrálními nebo kyselými aminokyselinami.
  2. 2. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 1, kde
    A8 je alanin (Ala),
    A9 je serin (Ser),
    A10 je valin (Val) a
    B30 je alanin (Ala).
  3. 3. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 1, kde
    A8 je threonin (Thr),
    A9 je serin (Ser) a
    A10 je izoleucin (Ile).
  4. 4. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 3, kde B30 je alanin (Ala).
  5. 5. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 3, kde B30 je threonin (Thr).
  6. 6. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle alespoň jednoho z nároků 1 až5, kde aminokyselinový zbytek v pozici B1 řetězce B je zbytek aminokyseliny fenylalaninu (Phe).
  7. 7. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle alespoň jednoho z nároků 1 až 6, kde aminokyselinový zbytek v pozici B3 řetězce B je zbytek aminokyseliny histidinu (His), lysinu (Lys) nebo argininu (Arg).
  8. 8. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 7, kde aminokyselinový zbytek v pozici B3 řetězce B je zbytek aminokyseliny histidinu (His).
  9. 9. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 7, kde aminokyselinový zbytek v pozici B3 řetězce B je zbytek aminokyseliny argininu (Arg).
  10. 10. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 7, kde aminokyselinový zbytek v pozici B3 řetězce B je zbytek aminokyseliny lysinu (Lys).
  11. 11. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle alespoň jednoho z nároků 1 až
    10, kde alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je zbytek přirozeně se vyskytující aminokyseliny, která je vybrána ze skupiny tvořené izoleucinem (Ile), kyselinou asparagovou (Asp) a kyselinou glutamovou (Glu).
  12. 12. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle alespoň jednoho z nároku 1 až
    11, kde alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je zbytek přirozeně se vyskytující aminokyseliny, která je vybrána ze skupiny tvořené kyselými aminokyselinami.
    -21 CZ 295964 B6
  13. 13. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 12, kde alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je zbytkem kyseliny asparagové (Asp).
  14. 14. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 12, kde alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je zbytkem kyseliny glutamové (Glu).
  15. 15. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle alespoň jednoho z nároků 1 až 10, kde alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B přísluší přirozeně se vyskytující aminokyselině, která je vybrána ze skupiny tvořené neutrálními aminokyselinami.
  16. 16. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 15, kde alespoň jeden z aminokyselinových zbytků v pozicích B27, B28 a B29 řetězce B je zbytkem aminokyseliny izoleucinu (lle).
  17. 17. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 13, kde aminokyselinový zbytek v pozici B27 řetězce B je zbytek kyseliny asparagové (Asp).
  18. 18. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 13, kde aminokyselinový zbytek v pozici B28 řetězce B je zbytek kyseliny asparagové (Asp).
  19. 19. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 13, kde aminokyselinový zbytek v pozici B29 řetězce B je zbytek kyseliny asparagové (Asp).
  20. 20. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 14, kde aminokyselinový zbytek v pozici B27 řetězce B je zbytek kyseliny glutamové (Glu).
  21. 21. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 14, kde aminokyselinový zbytek v pozici B28 řetězce B je zbytek kyseliny glutamové (Glu).
  22. 22. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 14, kde aminokyselinový zbytek v pozici B29 řetězce B je zbytek kyseliny glutamové (Glu).
  23. 23. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 16, kde aminokyselinový zbytek v pozici B28 řetězce B je zbytek aminokyseliny izoleucinu (lle).
  24. 24. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 22, kde řetězec B má sekvenci (sekvence id.č.:3):
    Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu
    Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr
  25. 25. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 15, kde aminokyselinový zbytek v pozici B27 řetězce B je zbytek aminokyseliny izoleucinu (lle).
  26. 26. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 25, kde řetězec B má sekvenci (sekvence id.č.: 5):
    Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu
    Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr lle Pro Lys Thr
    -22CZ 295964 B6
  27. 27. Derivát inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl podle nároku 25, kde řetězec B má sekvenci (sekvence id.č.: 4):
    Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu
    Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Ile Lys Thr
  28. 28. Způsob přípravy derivátu inzulínu nebo jeho fyziologicky přijatelné soli podle alespoň jednoho z nároků laž27, vyznačující se tím, že zahrnuje konstrukci replikovatelného expresního vektoru, který obsahuje sekvenci DNA kódující prekurzor derivátu inzulínu, v němž je aminokyselinový zbytek v pozici Al řetězce A spojen s aminokyselinovým zbytkem B30 řetězce B peptidovým řetězcem podle vzorce II
    Π, kde R'n značí peptid s n aminokyselinovými zbytky a n je celé číslo z intervalu 0 až 34 a řetězec B je v pozici B1 prodloužen peptidovým řetězcem podle vzorce III
    Met-R2 m-(Arg)pΙΠ.
    kde R2 m je peptid s m aminokyselinovými zbytky a m je celé číslo z intervalu 0 až 40 a p je 0, 1 nebo 2 a dále zahrnuje expresi v hostitelských buňkách a uvolnění inzulínu zprekurzoru chemickým a/nebo enzymatickým způsobem.
  29. 29. Způsob podle nároku 28, vyznačující se tím, že hostitelská buňka je buňka bakteriální.
  30. 30. Způsob podle nároku 29, v y z n a č u j í c í se t í m , že bakteriální buňka je E. coli.
  31. 31. Způsob podle nároku 28, v y z n a č u j í c í se t í m , že hostitelská buňka je kvasinka.
  32. 32. Způsob podle nároku 31, vyznačující se tím, že kvasinka je Sacharomyces cerevisiae.
  33. 33. Způsob podle libovolného z nároků 28 až 32 pro přípravu derivátu inzulínu podle nároku 24, vyznačující se tím, že prekurzor inzulínu má sekvenci (sekvence id. č.:6):
    Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg
    Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr Pro Glu Thr Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly Ser Leu Gin Lys Arg
    Gly ile Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ile Cys Ser Leu Tyr Gin Leu Glu Asn Tyr Cys Asn
    -23CZ 295964 B6
  34. 34. Způsob podle libovolného z nároků 28 až 32 pro přípravu derivátu inzulínu podle nároku 26, vyznačující se tím, že prekurzor inzulínu má sekvenci (sekvence id. č.:8):
    Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg
    Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu
    Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr lle Pro Lys Thr
    Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly
    Gly Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly
    Ser Leu Gin Lys Arg
    Gíy lle Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser Ue Cys Ser Leu Tyr Gin
    Leu Glu Asn Tyr Cys Asn
  35. 35. Způsob podle libovolného z nároků 28 až 32 pro přípravu derivátu inzulínu podle nároku 27, vyznačující se t í m , že prekurzor inzulínu má sekvenci (sekvence id. č.:7):
    Met Ala Thr Thr Ser Thr Gly Asn Ser Ala Arg
    Phe Val Lys Gin His Leu Cys Gly Ser His Leu Val Glu Ala Leu
    Tyr Leu Val Cys Gly Glu Arg Gly Phe Phe Tyr Thr lle Lys Thr
    Arg Arg Glu Ala Glu Asp Pro Gin Val Gly Gin Val Glu Leu Gly
    Gíy Gly Pro Gly Ala Gly Ser Leu Gin Pro Leu Ala Leu Glu Gly
    Ser Leu Gin Lys Arg
    Gly lle Val Glu Gin Cys Cys Thr Ser lle Cys Ser Leu Tyr Gin
    Leu Glu Asn Tyr Cys Asn
  36. 36. Prekurzor derivátu inzulínu podle nároku 33.
  37. 37. Prekurzor derivátu inzulínu podle nároku 34.
  38. 38. Prekurzor derivátu inzulínu podle nároku 3 5.
  39. 39. Sekvence DNA, která kóduje prekurzor derivátu inzulínu podle nároku 36.
  40. 40. Sekvence DNA, která kóduje prekurzor derivátu inzulínu podle nároku 37.
  41. 41. Sekvence DNA, která kóduje prekurzor derivátu inzulínu podle nároku 38.
  42. 42. Expresní vektor obsahující sekvenci DNA podle nároku 39.
  43. 43. Expresní vektor obsahující sekvenci DNA podle nároku 40.
  44. 44. Expresní vektor obsahující sekvenci DNA podle nároku 41.
    -24CZ 295964 B6
  45. 45. Hostitelská buňka transformovaná expresním vektorem podle kteréhokoliv z nároků 42 až 44.
  46. 46. Farmaceutický přípravek, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden derivát inzulínu a/nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl podle alespoň jednoho z nároků 1 až 27.
  47. 47. Farmaceutický přípravek podle nároku 46, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jeden derivát inzulínu a/nebo jeho fyziologicky přijatelnou sůl v rozpuštěné, amorfní nebo krystalické formě.
  48. 48. Farmaceutický přípravek podle nároku 47, vyzn ač u j ící se tí m , že dále obsahuje depotní pomocnou látku.
  49. 49. Farmaceutický přípravek podle nároku 48, vyznačující se tím, že depotní pomocná látka je protaminsulfát, přičemž derivát inzulínu a/nebo jeho fyziologicky přijatelná sůl je přítomna společně s protaminsulfátem v kokrystalizované formě.
  50. 50. Roztok pro injekce, vyznačující se tím, že obsahuje farmaceutický přípravek podle kteréhokoliv z nároků 46 až 49 v rozpuštěné formě.
  51. 51. Použití derivátu inzulínu a/nebo jeho fyziologicky přijatelné soli podle alespoň jednoho z nároků 1 až 27 pro výrobu farmaceutického přípravku, který projevuje inzulínovou aktivitu s rychlým nástupem účinku.
  52. 52. Derivát inzulínu, kterým je Lys (B3), Glu (B29) humánní inzulín.
CZ19981934A 1997-06-20 1998-06-18 Nové deriváty inzulinu s rychlým začátkem působení, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje CZ295964B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19726167A DE19726167B4 (de) 1997-06-20 1997-06-20 Insulin, Verfahren zu seiner Herstellung und es enthaltende pharmazeutische Zubereitung

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ193498A3 CZ193498A3 (cs) 1999-11-17
CZ295964B6 true CZ295964B6 (cs) 2005-12-14

Family

ID=7833099

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ19981934A CZ295964B6 (cs) 1997-06-20 1998-06-18 Nové deriváty inzulinu s rychlým začátkem působení, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje

Country Status (31)

Country Link
US (1) US6221633B1 (cs)
EP (1) EP0885961B1 (cs)
JP (1) JP3676573B2 (cs)
KR (1) KR100546225B1 (cs)
CN (1) CN1195777C (cs)
AR (1) AR015899A1 (cs)
AT (1) ATE283919T1 (cs)
AU (1) AU740344C (cs)
BR (1) BRPI9803708B8 (cs)
CA (1) CA2235443C (cs)
CY (1) CY2005004I1 (cs)
CZ (1) CZ295964B6 (cs)
DE (3) DE19726167B4 (cs)
DK (1) DK0885961T3 (cs)
ES (1) ES2232900T3 (cs)
FR (1) FR05C0009I2 (cs)
HU (1) HU221176B1 (cs)
ID (1) ID20462A (cs)
IL (1) IL125006A (cs)
LU (1) LU91138I2 (cs)
NL (1) NL300170I2 (cs)
NO (2) NO321720B1 (cs)
NZ (1) NZ330700A (cs)
PL (1) PL196626B1 (cs)
PT (1) PT885961E (cs)
RU (1) RU2207874C9 (cs)
SK (1) SK285267B6 (cs)
TR (1) TR199801144A3 (cs)
TW (1) TW562806B (cs)
UA (1) UA65529C2 (cs)
ZA (1) ZA985363B (cs)

Families Citing this family (134)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE19947456A1 (de) 1999-10-02 2001-04-05 Aventis Pharma Gmbh C-Peptid zur verbesserten Herstellung von Insulin und Insulinanaloga
US7022674B2 (en) 1999-12-16 2006-04-04 Eli Lilly And Company Polypeptide compositions with improved stability
US8623379B2 (en) 2000-03-02 2014-01-07 Emory University Compositions and methods for generating an immune response
CN100446812C (zh) 2001-03-08 2008-12-31 美国国有健康与人类服务部 表达修饰的hiv包膜、gag和pol基因的mva
DE10114178A1 (de) * 2001-03-23 2002-10-10 Aventis Pharma Gmbh Zinkfreie und zinkarme Insulinzubereitungen mit verbesserter Stabilität
EP1425018B1 (de) * 2001-08-22 2008-10-22 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Kombinationspräparate von 1,4- benzothiepin-1,1-dioxidderivaten mit weiteren wirkstoffen und deren verwendung
JP2005508895A (ja) * 2001-08-28 2005-04-07 イーライ・リリー・アンド・カンパニー Ｇｌｐ−１および基礎インスリンの予備混合物
US7399777B2 (en) * 2001-08-31 2008-07-15 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Diarylcycloalkyl derivatives, processes for their preparation and their use as pharmceuticals
US6884812B2 (en) 2001-08-31 2005-04-26 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Diarylcycloalkyl derivatives, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals
NZ531440A (en) 2001-08-31 2005-10-28 Aventis Pharma Gmbh Diaryl cycloalkyl derivatives, method for producing the same and the use thereof as PPAR activators
CN1571676A (zh) * 2001-10-19 2005-01-26 伊莱利利公司 Glp－1和胰岛素的双相混合物
US20050250676A1 (en) * 2001-11-19 2005-11-10 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Method of activating insulin receptor substrate-2 to stimulate insulin production
AU2002346491A1 (en) * 2001-12-19 2003-07-09 Eli Lilly And Company Crystalline compositions for controlling blood glucose
US7223796B2 (en) * 2002-04-11 2007-05-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Acyl-4-carboxyphenylurea derivatives, processes for preparing them and their use
US7078404B2 (en) * 2002-04-11 2006-07-18 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Acyl-3-carboxyphenylurea derivatives, processes for preparing them and their use
ES2360182T3 (es) 2002-05-07 2011-06-01 Novo Nordisk A/S Formulaciones solubles que comprenden insulina monomérica e insulina acilada.
US7049341B2 (en) * 2002-06-07 2006-05-23 Aventis Pharma Deutschland Gmbh N-benzoylureidocinnamic acid derivatives, processes for preparing them and their use
DE10231370B4 (de) * 2002-07-11 2006-04-06 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Thiophenglycosidderivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zur Herstellung dieser Arzneimittel
US7262220B2 (en) * 2002-07-11 2007-08-28 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Urea- and urethane-substituted acylureas, process for their preparation and their use
OA12881A (en) * 2002-07-12 2006-09-15 Aventis Pharma Gmbh Heterocyclially substituted benzoylureas, method for their production and their use as medicaments.
US20040157922A1 (en) * 2002-10-04 2004-08-12 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Carboxyalkoxy-substituted acyl-carboxyphenylurea derivatives and their use as medicaments
US7208504B2 (en) * 2002-10-12 2007-04-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Bicyclic inhibitors of hormone sensitive lipase
US7193035B2 (en) * 2002-10-29 2007-03-20 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Crystals of insulin analogs and processes for their preparation
DE10250297A1 (de) * 2002-10-29 2004-05-19 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Kristalle von Insulinanaloga und Verfahren zu ihrer Herstellung
US20040138099A1 (en) * 2002-11-29 2004-07-15 Draeger Eberhard Kurt Insulin administration regimens for the treatment of subjects with diabetes
DE10258008B4 (de) * 2002-12-12 2006-02-02 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Heterocyclische Fluorglycosidderivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zur Herstellung dieser Arzneimittel
DE10258007B4 (de) * 2002-12-12 2006-02-09 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Aromatische Fluorglycosidderivate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und Verfahren zur Herstellung dieser Arzneimittel
US20040242583A1 (en) * 2003-01-20 2004-12-02 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Pyrimido[5,4-e][1,2,4]triazine-5,7-diones, processes for preparing them and their use
US7179941B2 (en) * 2003-01-23 2007-02-20 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Carbonylamino-substituted acyl phenyl urea derivatives, process for their preparation and their use
DE10306250A1 (de) 2003-02-14 2004-09-09 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Substituierte N-Arylheterozyklen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
US7196114B2 (en) * 2003-02-17 2007-03-27 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted 3-(benzoylureido) thiophene derivatives, processes for preparing them and their use
DE10308355A1 (de) * 2003-02-27 2004-12-23 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Aryl-cycloalkyl substituierte Alkansäurederivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Anwendung als Arzneimittel
DE10308351A1 (de) * 2003-02-27 2004-11-25 Aventis Pharma Deutschland Gmbh 1,3-substituierte Cycloalkylderivate mit sauren, meist heterocyclischen Gruppen, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
US7173151B2 (en) * 2003-02-27 2007-02-06 Sanofi-Aventisdeutschand Gmbh Cycloalkyl-substituted alkanoic acid derivatives, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals
US7148246B2 (en) * 2003-02-27 2006-12-12 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cycloalkyl derivatives having bioisosteric carboxylic acid groups, processes for their preparation and their use as pharmaceuticals
DE10308353A1 (de) * 2003-02-27 2004-12-02 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Diarylcycloalkylderivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE10308352A1 (de) * 2003-02-27 2004-09-09 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Arylcycloalkylderivate mit verzweigten Seitenketten, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Anwendung als Arzneimittel
US7871607B2 (en) * 2003-03-05 2011-01-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases
US7501440B2 (en) * 2003-03-07 2009-03-10 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted benzoylureidopyridylpiperidine-and-pyrrolidinecarboxylic acid derivatives, processes for preparing them and their use
DE10314610A1 (de) * 2003-04-01 2004-11-04 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Neues Diphenylazetidinon mit verbesserten physiologischen Eigenschaften, Verfahren zu dessen Herstellung, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und dessen Verwendung
US20050054818A1 (en) * 2003-07-02 2005-03-10 Brader Mark Laurence Crystalline compositions for controlling blood glucose
SI1648933T1 (sl) * 2003-07-25 2010-01-29 Conjuchem Biotechnologies Inc Dolgo delujoäś inzulinski derivat in metoda zanj
US7008957B2 (en) * 2003-07-25 2006-03-07 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Bicyclic cyanoheterocycles, process for their preparation and their use as medicaments
US7094800B2 (en) * 2003-07-25 2006-08-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cyanopyrrolidides, process for their preparation and their use as medicaments
US7094794B2 (en) * 2003-07-28 2006-08-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted thiazole-benzoisothiazole dioxide derivatives, process for their preparation and their use
DE10335092B3 (de) * 2003-08-01 2005-02-03 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Substituierte Benzoylureido-o-benzoylamide, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
SI2107069T1 (sl) 2003-08-05 2013-04-30 Novo Nordisk A/S Novi inzulinski derivati
US7241787B2 (en) * 2004-01-25 2007-07-10 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Substituted N-cycloexylimidazolinones, process for their preparation and their use as medicaments
US7498341B2 (en) * 2004-01-31 2009-03-03 Sanofi Aventis Deutschland Gmbh Heterocyclically substituted 7-amino-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives, process for their preparation and their use as medicaments
US7402674B2 (en) * 2004-01-31 2008-07-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh, 7-Phenylamino-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives, process for their preparation and their use as medicaments
US7470706B2 (en) * 2004-01-31 2008-12-30 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Cycloalkyl-substituted 7-amino-4-quinolone-3-carboxylic acid derivatives, process for their preparation and their use as medicaments
DE102004005172A1 (de) * 2004-02-02 2005-08-18 Aventis Pharma Deutschland Gmbh Indazolderivate als Inhibitoren der Hormon Sensitiven Lipase
DE602004004631D1 (de) 2004-04-01 2007-03-22 Sanofi Aventis Deutschland Oxadiazolone, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie ihre Verwendung als Pharmazeutika
GT200500063A (es) 2004-04-01 2005-10-14 Metodo para tratar la esquizofrenia y/o anormalidades glucoregulatorias
US7833513B2 (en) 2004-12-03 2010-11-16 Rhode Island Hospital Treatment of Alzheimer's Disease
DE102005026762A1 (de) 2005-06-09 2006-12-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Azolopyridin-2-on-derivate als Inhibitoren von Lipasen und Phospholipasen
US8343914B2 (en) * 2006-01-06 2013-01-01 Case Western Reserve University Fibrillation resistant proteins
US20090069216A1 (en) * 2006-02-21 2009-03-12 Novo Nordisk A/S Single-Chain Insulin Analogues and Pharmaceutical Formulations Thereof
CN101443314B (zh) 2006-03-13 2014-04-09 杏林制药株式会社 作为gsk-3抑制剂的氨基喹诺酮类
DE102006028862A1 (de) 2006-06-23 2007-12-27 Merck Patent Gmbh 3-Amino-imidazo[1,2-a]pyridinderivate
AU2007283113A1 (en) 2006-08-08 2008-02-14 Sanofi-Aventis Arylaminoaryl-alkyl-substituted imidazolidine-2,4-diones, processes for preparing them, medicaments comprising these compounds, and their use
ES2554773T3 (es) * 2006-10-04 2015-12-23 Case Western Reserve University Insulina y análogos de la insulina resistentes a la fibrilación
DE102007002260A1 (de) 2007-01-16 2008-07-31 Sanofi-Aventis Verwendung von substituierten Pyranonsäurederivaten zur Herstellung von Medikamenten zur Behandlung des Metabolischen Syndroms
DE102007005045B4 (de) 2007-01-26 2008-12-18 Sanofi-Aventis Phenothiazin Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
DE102007008420A1 (de) 2007-02-21 2008-08-28 Merck Patent Gmbh Benzimidazolderivate
EP2025674A1 (de) 2007-08-15 2009-02-18 sanofi-aventis Substituierte Tetrahydronaphthaline, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
KR101563018B1 (ko) * 2007-09-11 2015-10-23 교린 세이야꾸 가부시키 가이샤 Ｇｓｋ-３ 억제제로서의 시아노아미노퀴놀론 및 테트라졸로아미노퀴놀론
KR101597841B1 (ko) 2007-09-12 2016-02-26 교린 세이야꾸 가부시키 가이샤 Ｇｓｋ-３ 억제제로서의 스피로시클릭 아미노퀴놀론
DE102007048716A1 (de) 2007-10-11 2009-04-23 Merck Patent Gmbh Imidazo[1,2-a]pyrimidinderivate
DE102007063671A1 (de) 2007-11-13 2009-06-25 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Neue kristalline Diphenylazetidinonhydrate, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung
MX338336B (es) 2007-11-20 2016-04-07 Ambrx Inc Polipeptidos de insulina modificados y sus usos.
CN102007143B (zh) 2008-01-09 2015-08-26 塞诺菲-安万特德国有限公司 具有超延迟时效特征的新型胰岛素衍生物
JP5695909B2 (ja) 2008-01-09 2015-04-08 サノフィ−アベンティス・ドイチュラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング 極度に遅延した時間作用プロファイルを有する新規なインスリン誘導体
EP2242745A1 (de) * 2008-02-07 2010-10-27 Sanofi-Aventis Neue phenyl-substituierte imidazolidine, verfahren zu deren herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
DE102008017590A1 (de) 2008-04-07 2009-10-08 Merck Patent Gmbh Glucopyranosidderivate
WO2009129250A2 (en) * 2008-04-14 2009-10-22 Case Western Reserve University Meal-time insulin analogues of enhanced stability
KR20110021758A (ko) * 2008-04-22 2011-03-04 케이스 웨스턴 리저브 유니버시티 이형체-특이적 인슐린 유사체
TWI394580B (zh) 2008-04-28 2013-05-01 Halozyme Inc 超快起作用胰島素組成物
UY31968A (es) 2008-07-09 2010-01-29 Sanofi Aventis Nuevos derivados heterocíclicos, sus procesos para su preparación, y sus usos terapéuticos
US9200053B2 (en) 2008-07-31 2015-12-01 Case Western Reserve University Insulin analogues containing penta-fluoro-Phenylalanine at position B24
KR20120129875A (ko) 2008-07-31 2012-11-28 케이스 웨스턴 리저브 유니버시티 염소화 아미노산을 갖는 인슐린 유사체
WO2011072288A2 (en) 2009-12-11 2011-06-16 Case Western Reserve University Insulin analogues with chlorinated amino acids
DE102009038210A1 (de) 2009-08-20 2011-03-03 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten
SI2349324T1 (en) 2008-10-17 2018-01-31 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh The combination of insulin and agonist GLP-1
DE102008053048A1 (de) 2008-10-24 2010-04-29 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten
DE102008051834A1 (de) 2008-10-17 2010-04-22 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Kombination von einem Insulin und einem GLP-1-Agonisten
WO2010068601A1 (en) 2008-12-08 2010-06-17 Sanofi-Aventis A crystalline heteroaromatic fluoroglycoside hydrate, processes for making, methods of use and pharmaceutical compositions thereof
US8071591B2 (en) * 2009-03-11 2011-12-06 Kyorin Pharmaceutical Co., Ltd. 7-cycloalkylaminoquinolones as GSK-3 inhibitors
CN102471367A (zh) * 2009-07-09 2012-05-23 拜康有限公司 一种制备非线性梯度色谱法及其纯化的产物
CN102548583B (zh) 2009-07-31 2015-04-22 赛诺菲-安万特德国有限公司 包含胰岛素连接物缀合物的前药
CN102625695B (zh) 2009-07-31 2015-05-27 赛诺菲-安万特德国有限公司 长效胰岛素组合物
JP2013503135A (ja) 2009-08-26 2013-01-31 サノフイ 新規な結晶性複素芳香族フルオログリコシド水和物、その化合物を含んでなる医薬及びその使用
US8399407B2 (en) * 2009-09-17 2013-03-19 Case Western Reserve University Non-standard insulin analogues
JP2013506635A (ja) 2009-10-02 2013-02-28 サノフイ 骨疾患を処置するための薬剤を製造するためのｓｇｌｔ−１／ｓｇｌｔ−２阻害剤活性を有する化合物の使用
NZ599848A (en) 2009-11-13 2013-08-30 Sanofi Aventis Deutschland Pharmaceutical composition comprising a glp-1 agonist, an insulin, and methionine
ES2965209T3 (es) 2009-11-13 2024-04-11 Sanofi Aventis Deutschland Composición farmacéutica que comprende desPro36exendina-4(1-39)-Lys6-NH2 y metionina
WO2011107494A1 (de) 2010-03-03 2011-09-09 Sanofi Neue aromatische glykosidderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
DE102010015123A1 (de) 2010-04-16 2011-10-20 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Benzylamidische Diphenylazetidinone, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung
US8530413B2 (en) 2010-06-21 2013-09-10 Sanofi Heterocyclically substituted methoxyphenyl derivatives with an oxo group, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
CA2802510A1 (en) 2010-06-23 2011-12-29 Novo Nordisk A/S Insulin derivatives containing additional disulfide bonds
TW201215387A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Aventis Spirocyclically substituted 1,3-propane dioxide derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as a medicament
TW201215388A (en) 2010-07-05 2012-04-16 Sanofi Sa (2-aryloxyacetylamino)phenylpropionic acid derivatives, processes for preparation thereof and use thereof as medicaments
TW201221505A (en) 2010-07-05 2012-06-01 Sanofi Sa Aryloxyalkylene-substituted hydroxyphenylhexynoic acids, process for preparation thereof and use thereof as a medicament
PL3572091T3 (pl) 2010-08-17 2024-07-29 Ambrx, Inc. Zmodyfikowane polipeptydy relaksyny i ich zastosowania
JP6199186B2 (ja) 2010-08-30 2017-09-20 サノフィ−アベンティス・ドイチュラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング ２型糖尿病の治療用の医薬の製造のためのａｖｅ００１０の使用
EP2438930A1 (en) 2010-09-17 2012-04-11 Sanofi-Aventis Deutschland GmbH Prodrugs comprising an exendin linker conjugate
AU2012208349A1 (en) 2011-01-20 2013-07-18 Zealand Pharma A/S Combination of acylated glucagon analogues with insulin analogues
US8828994B2 (en) 2011-03-08 2014-09-09 Sanofi Di- and tri-substituted oxathiazine derivatives, method for the production thereof, use thereof as medicine and drug containing said derivatives and use thereof
WO2012120056A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Tetrasubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
WO2012120058A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Mit benzyl- oder heteromethylengruppen substituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
WO2012120053A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Verzweigte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
WO2012120051A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Mit adamantan- oder noradamantan substituierte benzyl-oxathiazinderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
US8901114B2 (en) 2011-03-08 2014-12-02 Sanofi Oxathiazine derivatives substituted with carbocycles or heterocycles, method for producing same, drugs containing said compounds, and use thereof
WO2012120057A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Neue substituierte phenyl-oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und deren verwendung
US8809324B2 (en) 2011-03-08 2014-08-19 Sanofi Substituted phenyl-oxathiazine derivatives, method for producing them, drugs containing said compounds and the use thereof
WO2012120055A1 (de) 2011-03-08 2012-09-13 Sanofi Di- und trisubstituierte oxathiazinderivate, verfahren zu deren herstellung, ihre verwendung als medikament sowie sie enthaltendes arzneimittel und deren verwendung
US9821032B2 (en) 2011-05-13 2017-11-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Pharmaceutical combination for improving glycemic control as add-on therapy to basal insulin
US9993529B2 (en) 2011-06-17 2018-06-12 Halozyme, Inc. Stable formulations of a hyaluronan-degrading enzyme
US10995129B2 (en) * 2011-07-13 2021-05-04 Case Western Reserve University Non-standard insulin analogues
US9487572B2 (en) * 2011-07-13 2016-11-08 Case Western Reserve University Non-standard insulin analogues
CN108079281A (zh) 2011-08-29 2018-05-29 赛诺菲-安万特德国有限公司 用于2型糖尿病患者中的血糖控制的药物组合
AR087744A1 (es) 2011-09-01 2014-04-16 Sanofi Aventis Deutschland Composicion farmaceutica para uso en el tratamiento de una enfermedad neurodegenerativa
EP2567959B1 (en) 2011-09-12 2014-04-16 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
WO2013037390A1 (en) 2011-09-12 2013-03-21 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-styryl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
WO2013045413A1 (en) 2011-09-27 2013-04-04 Sanofi 6-(4-hydroxy-phenyl)-3-alkyl-1h-pyrazolo[3,4-b]pyridine-4-carboxylic acid amide derivatives as kinase inhibitors
CA2868393A1 (en) * 2012-04-02 2013-10-10 Moderna Therapeutics, Inc. Modified polynucleotides for the production of oncology-related proteins and peptides
AR090843A1 (es) 2012-05-09 2014-12-10 Lilly Co Eli Tratamiento para diabetes comorbida con enfermedad renal cronica
WO2013173923A1 (en) 2012-05-25 2013-11-28 Diamedica, Inc. Formulations of human tissue kallikrein-1 for parenteral delivery and related methods
US20130323222A1 (en) 2012-06-04 2013-12-05 Matthew Charles Human tissue kallikrein 1 glycosylation isoforms
KR102569743B1 (ko) 2014-10-06 2023-08-23 케이스 웨스턴 리저브 유니버시티 이상 단일 사슬 인슐린 유사체
JP6970615B2 (ja) 2014-12-12 2021-11-24 サノフィ−アベンティス・ドイチュラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング インスリングラルギン／リキシセナチド固定比処方
TWI748945B (zh) 2015-03-13 2021-12-11 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患治療
TW201705975A (zh) 2015-03-18 2017-02-16 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患之治療
US11857608B2 (en) 2017-03-09 2024-01-02 Diamedica Inc. Dosage forms of tissue kallikrein 1

Family Cites Families (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3758683A (en) * 1971-04-30 1973-09-11 R Jackson Insulin product
US3868358A (en) 1971-04-30 1975-02-25 Lilly Co Eli Protamine-insulin product
DE3064888D1 (en) 1979-04-30 1983-10-27 Hoechst Ag Aqueous solutions of proteins stable against denaturization, process for their manufacture, and their utilization
US4783441A (en) 1979-04-30 1988-11-08 Hoechst Aktiengesellschaft Aqueous protein solutions stable to denaturation
WO1983000288A1 (en) 1981-07-17 1983-02-03 Balschmidt, Per A stable aqueous, therapeutic insulin preparation and a process for preparing it
NL193099C (nl) 1981-10-30 1998-11-03 Novo Industri As Gestabiliseerde insuline-oplossing.
DE3440988A1 (de) 1984-11-09 1986-07-10 Hoechst Ag, 6230 Frankfurt Verfahren zur spaltung von peptiden und proteinen an der methionyl-bindung
DE3526995A1 (de) 1985-07-27 1987-02-05 Hoechst Ag Fusionsproteine, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung
PH25772A (en) 1985-08-30 1991-10-18 Novo Industri As Insulin analogues, process for their preparation
DE3541856A1 (de) 1985-11-27 1987-06-04 Hoechst Ag Eukaryotische fusionsproteine, ihre herstellung und verwendung sowie mittel zur durchfuehrung des verfahrens
DE3544295A1 (de) 1985-12-14 1987-06-19 Bayer Ag Thermoplastische formmassen mit hoher kriechstromfestigkeit
DE3726655A1 (de) 1987-08-11 1989-02-23 Hoechst Ag Verfahren zur isolierung basischer proteine aus proteingemischen, welche solche basischen proteine enthalten
DK257988D0 (da) 1988-05-11 1988-05-11 Novo Industri As Nye peptider
AU641631B2 (en) * 1988-12-23 1993-09-30 Novo Nordisk A/S Human insulin analogues
NZ232375A (en) * 1989-02-09 1992-04-28 Lilly Co Eli Insulin analogues modified at b29
US5358857A (en) 1989-08-29 1994-10-25 The General Hospital Corp. Method of preparing fusion proteins
DK155690D0 (da) 1990-06-28 1990-06-28 Novo Nordisk As Nye peptider
DK10191D0 (da) * 1991-01-22 1991-01-22 Novo Nordisk As Hidtil ukendte peptider
DK0600372T3 (da) 1992-12-02 1997-08-11 Hoechst Ag Fremgangsmåde til fremstilling af proinsulin med korrekt forbundne cystinbroer.
DE4405179A1 (de) 1994-02-18 1995-08-24 Hoechst Ag Verfahren zur Gewinnung von Insulin mit korrekt verbundenen Cystinbrücken

Also Published As

Publication number Publication date
FR05C0009I2 (fr) 2007-07-27
CN1195777C (zh) 2005-04-06
BRPI9803708B1 (pt) 2016-09-27
RU2207874C9 (ru) 2007-12-20
HK1016616A1 (en) 1999-11-05
ATE283919T1 (de) 2004-12-15
ES2232900T3 (es) 2005-06-01
NL300170I2 (nl) 2005-07-01
KR19990007117A (ko) 1999-01-25
ID20462A (id) 1998-12-24
US6221633B1 (en) 2001-04-24
BRPI9803708B8 (pt) 2021-05-25
CZ193498A3 (cs) 1999-11-17
CA2235443C (en) 2011-11-01
JPH119291A (ja) 1999-01-19
AU7306498A (en) 1998-12-24
NO2006014I2 (cs) 2012-02-13
LU91138I2 (fr) 2005-04-04
HU221176B1 (en) 2002-08-28
BR9803708A (pt) 2000-03-28
AU740344B2 (en) 2001-11-01
AU740344C (en) 2006-12-07
DE19726167B4 (de) 2008-01-24
PL326936A1 (en) 1998-12-21
IL125006A0 (en) 1999-01-26
NO321720B1 (no) 2006-06-26
EP0885961B1 (de) 2004-12-01
NZ330700A (en) 1999-11-29
HUP9801368A3 (en) 1999-09-28
CY2005004I2 (el) 2009-11-04
CY2005004I1 (el) 2009-11-04
DE19726167A1 (de) 1999-01-28
CA2235443A1 (en) 1998-12-20
RU2207874C2 (ru) 2003-07-10
DE122004000049I2 (de) 2006-02-23
TR199801144A2 (xx) 1999-01-18
PT885961E (pt) 2005-03-31
TW562806B (en) 2003-11-21
NL300170I1 (nl) 2005-04-01
IL125006A (en) 2006-12-31
SK83698A3 (en) 1999-01-11
NO982860D0 (no) 1998-06-19
EP0885961A1 (de) 1998-12-23
ZA985363B (en) 1999-01-19
NO982860L (no) 1998-12-21
KR100546225B1 (ko) 2006-10-19
PL196626B1 (pl) 2008-01-31
DE122004000049I1 (de) 2005-05-04
SK285267B6 (sk) 2006-10-05
AR015899A1 (es) 2001-05-30
UA65529C2 (uk) 2004-04-15
NO2006014I1 (no) 2006-11-13
HU9801368D0 (en) 1998-08-28
DE59812316D1 (de) 2005-01-05
HUP9801368A1 (hu) 1999-05-28
TR199801144A3 (tr) 1999-01-18
DK0885961T3 (da) 2005-03-21
CN1203238A (zh) 1998-12-30
JP3676573B2 (ja) 2005-07-27
FR05C0009I1 (cs) 2005-09-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ295964B6 (cs) Nové deriváty inzulinu s rychlým začátkem působení, způsob jejich přípravy a farmaceutický prostředek, který je obsahuje
RU2524423C2 (ru) Новые производные инсулина с чрезвычайно замедленным профилем время/действие
JP5325778B2 (ja) アミド化されたグラルギンインスリン
RU2176646C2 (ru) Инсулин и его производные с повышенной способностью связывать цинк
US5268453A (en) Tissue-selective insulin analogs
JP2011509269A (ja) 極度に遅延した時間作用プロファイルを有する新規なインスリン誘導体
JP4402296B2 (ja) 亜鉛結合性が増大された新規なインスリン同族体
US7193035B2 (en) Crystals of insulin analogs and processes for their preparation
MXPA98004945A (en) New insulin derivatives with rapid initiation of efe
CA2503670A1 (en) Crystals of insulin analogues and method for the production thereof
HK1148542B (en) Insulin derivatives having an extremely delayed time-action profile

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic
MK4A Patent expired

Effective date: 20180618

MK4A Patent expired

Effective date: 20190927