NO337217B1

NO337217B1 - Prostaglandinnitrooksyderivater, fremgangsmåte for fremstilling derav, anvendelse derav, samt farmasøytisk sammensetning som innbefatter slike derivater

Info

Publication number: NO337217B1
Application number: NO20063567A
Authority: NO
Inventors: Piero Del Soldato; Ennio Ongini; Francesca Benedini; Valerio Chiroli
Original assignee: Nicox Sa
Priority date: 2004-01-05
Filing date: 2006-08-07
Publication date: 2016-02-15
Also published as: EP1704141B1; TNSN06210A1; BRPI0418245B1; US20110136904A1; AU2004313688A1; ECSP066684A; KR100854838B1; WO2005068421A8; HRP20160500T1; AU2004313688B2; EP3002277A1; GEP20094780B; US20050272743A1; JP2007518716A; JP3984283B2; US7449469B2; HK1096084A1; BRPI0418245A; US8058467B2; US7629345B2

Description

Foreliggende oppfinnelse angår nye prostaglandinderivater. Mer spesielt angår foreliggende oppfinnelse prostaglandinnitrooksyderivater, farmasøytiske sammensetninger som inneholder dem og deres anvendelse som legemidler for behandling av glukom og okkulær hypertensjon. Oppfinnelsen angår også en framgangsmåte for fremstilling av prostaglandinderivatene.

Glaukom er en optisk nerveskade, ofte assosiert med økt intraokkulært trykk (IOP), som fører til progressivt, irreversibelt tap av syn.

Nesten 3 millioner mennesker i USA og 14 millioner mennesker verden over har glaukom; som er den tredje mest vanlige årsaken til blindhet verden over.

Glaukom opptrer når det er en misbalanse i produksjon og drenering av fluid i øyet (vandigvæske) øker øyetrykket til skadelige nivåer.

Det er kjent at hevet IOP kan i det minste delvis kontrolleres ved å administrere legemidler som enten reduserer produksjon av vandig væske i øyet eller øker fluiddrenering, slik som beta-blokkere, oc-agonister, kolinergiske midler, karbonanhydraseinhibitorer eller prostaglandinanaloger.

Flere bivirkninger er assosiert med legemidlene som vanligvis anvendes for behandling av glukom.

Topiske beta-blokkere viser alvorlige lungebivirkninger, depresjon, svekkelse, konfusjon, impotens, hårtap, hjertesvikt og bradykardi.

Topiske a-agonister har en relativt høy forekomst av allergiske eller toksiske reaksjoner; topiske kolinergiske midler (miotiske midler) kan forårsake visuelle bivirkninger.

Bivirkninger assosisert med orale karbonanhydraseinhibitorer inkluderer svekkelse, anoreksi, depresjon, parestesier og serumelektrolyttabnormaliteter ("The Merck Manual of Diagnosis and Therapy", 17. utgave, M. H. Beers and R. Berkow redaktører, Sec. 8, Ch. 100).

Til slutt kan de topiske prostaglandinanalogene (bimatoprost, latanoprost, travoprost og unoproston) ved anvendelse av glaukom gi okkulære bivirkninger, slik som økt pigmentering av iris, okkulær irritasjon, konjungtival hyperaemi, irititt, uveititt og makulær ødem (Martindale, 33. utgave, s. 1445).

US patent nr. 3.922.293 beskriver monokarboksyakrylater av prostaglandiner F-type og deres 150 isomerer, ved C-9 posisjon, og fremgangsmåter for fremstilling av dem for; US patent nr. 6.417.228 beskriver 13-aza prostaglandiner som har funksjonell PGF2«reseptoragonistaktivitet og deres anvendelser for behandling av glaukom og okkulær hypertensjon.

WO 90/02553 beskriver anvendelse av prostaglandinderivater av PGA, PGB, PGE og PGF, hvori omegakjeden inneholder en ringstruktur, for behandling av glaukom eller okkulær hypertensjon.

WO 00/51978 beskriver nye nitrosaterte og/eller nitrosylerte prostaglandiner, særlig nye derivater av PGEi, nye sammensetninger og deres anvendelse for behandling av seksuelle dysfunsjoner.

US patent nr. 5.625.083 beskriver dinitroglyserolestere av prostaglandiner som kan anvendes som vasodilatorer, antihypertensive kardiovaskulære midler og bronkodilatorer.

US patent nr. 6.211.233 beskriver forbindelser med generell formel A-X1-NO2, hvori A inneholder et prostaglandinresidue, særlig PGEi, og Xi er en bivalent forbindende bro, og deres anvendelse for behandling av impotens.

Det er et formål med foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe nye derivater av prostaglandiner som er i stand til ikke bare å eliminere eller i det minste redusere bivirkninger assosiert med disse forbindelsene, men også å fremvise en forbedret farmakologisk aktivitet. Det er overraskende blitt funnet at prostaglandinnitroderivater har en signifikant forbedret total profil sammenlignet med opprinnelige prostaglandiner både når det gjelder bredere farmakologisk aktivitet og forbedret tolererbarhet. Særlig har det blitt funnet at prostaglandinnitroderivatene ifølge oppfinnelsen kan anvendes for behandling av glukom og okkulær hypertensjon. Forbindelsene ifølge oppfinnelsen er indikert for reduksjon av intraokkulært trykk hos pasienter med åpen-vinkel glukom eller med kronisk vinkel-lukning glukom som gjennomgår periferal iridotomi eller laseriridoplasti.

Et formål med foreliggende oppfinnelse er derfor prostaglandinnitroderivater med generell formel (I) og farmasøytisk akseptable salter eller stereoisomerer derav

hvori R er prostaglandinresiduet med formel (II):

hvori

symbolet ™ representerer en enkeltbinding;

L er:

X er -O- eller -S-;

Y er et bivalent radikal som har følgende betydning: a) rett eller forgrenet C1-C20alkylen;

hvori n er et heltall fra 0 til 20, og n<1>er et heltall fra 1 til 20;

hvori:

Xi = -COO- og R2 er CH3;

n 1 er som definert ovenfor og n 2er et heltall fra 0 til 2;

Y<1>er-CH=CH-(CH2)n<2->;

Zer-CCH^<1->;

med den betingelsen at når Y er valgt fra bivalente radikaler nevnt under b) og e), er

-ON02gruppen bundet til -(CH2)n<1.>

Begrepet "C1-C20alkylen" slik det anvendes heri refererer til forgrenet eller rettkjedet C1-C20hydrokarbon, som foretrukket har fra 1 til 10 karbonatomer slik som metylen, etylen, propylen, isopropylen, n-butylen, pentylen, n-heksylen og lignende.

Begrepet "Ci-Cioalkyl" slik det anvendes heri refererer til forgrenet eller rettkjedet alkylgrupper som innbefatter en til ti karbonatomer, som inkluderer metyl, etyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, t-butyl, pentyl, heksyl, octyl og lignende.

Begrepet "cykloalkylen" slik det anvendes heri refererer til ring som har fra 5 til 7 karbonatomer som inkluderer, men er ikke begrenset til, cyklopentylen, cykloheksylen eventuelt substituert med sidekjeder slik som rett eller forgrenet (Ci-Cio)-alkyl, foretrukket CH3.

Begrepet "heterocyklisk" slik det anvendes heri refererer til mettet, umettet eller aromatisk 5- eller 6-leddet ring, inneholdende en eller flere heteroatomer valgt fra nitrogen, oksygen, svovel, slik som for eksempel pyridin, pyrazin, pyrimidin, pyrrolidin, morfolin, imidazol og lignende.

Slik det er angitt ovenfor inkluderer oppfinnelsen også farmasøytisk akseptable salter av forbindelsen med formel (I) og stereoisomerer derav.

Eksempler på farmasøytisk akseptable salter er enten de med uorganiske baser, slik som natrium, kalium, kalsiumog aluminiumhydroksider, eller med organiske baser, slik som lysin, arginin, trietylamin, dibenzylamin, piperidin og andre akseptable organiske aminer.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen, når de inneholder i molekylet et forsaltbart nitrogenatom, kan omdannes til de korresponderende saltene ved reaksjon i et organisk løsemiddel slik som acetonitril, tetrahydrofuran med de korresponderende organiske eller uorganiske syrene.

Eksempler på organiske syrer er: oksalsyre, vinsyre, maleinsyre, ravsyre, sitronsyre. Eksempler på uorganiske syrer er: salpetersyre, saltsyre, sovelsyre, fosforsyre. Salter med salpetersyre er foretrukket.

Forbindelsen ifølge oppfinnelsen som har et eller flere asymmetriske karbonatomer kan eksistere som optisk rene enantiomerer, rene diastereomerer, enantiomere blandinger, diastereomere blandinger, enantiomere racemiske blandinger, racemater eller racemiske blandinger. Innenfor omfanget av oppfinnelsen er også alle mulige isomerer, stereoisomerer og deres blandinger av forbindelsene med formel (I), som inkluderer blandinger anriket i en spesiell isomer.

En foretrukket gruppe av forbindeler med generell formel (I) er de hvori Y er et bivalent radikal som har følgende betydning:

a) rett eller forgrenet C2-C6alkylen;

hvori n er et heltall fra 0 til 5, og n1 er et heltall fra 1 til 5.

Mest foretrukne betydninger for Y er:

a) rett eller forgrenet C2-C6alkylen;

hvori n er 0, og n<1>er 1.

En annen foretrukket gruppe av forbindelser med generell formel (I) er de hvori Y er et bivalent radikal som har følgende betydning:

hvori: Xi=-COO- ogR2erCH3;

Y<1>er-CH=CH-(CH2)„<2->;

Zer-CCH^<1>;

n<1>er et heltall fra 1 til 5 og n<2>er et heltall fra 0 til 2;

med den betingelsen at -ONO2gruppe er bundet til -(CH^n1.

Følgende er foretrukne forbindelser ifølge oppfinnelsen:

Som nevnt ovenfor er formålet med foreliggende oppfinnelse også farmasøytiske sammensetninger som inneholder minst en forbindelse ifølge oppfinnelsen med formel (I) sammen med ikke-toksiske adjuvanser og/eller bærere som vanligvis anvendes innenfor det farmasøytiske feltet.

Den foretrukne administrasjonsruten er topisk. Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan administreres som løsninger, suspensjoner eller emulsjoner (dispersjoner) i en oftalmisk akseptabel vehikkel. Uttrykket "oftalmisk akseptabel vehikkel" slik det anvendes heri refererer til en hvilken som helst substans eller kombinasjon av substanser som er ikke-reaktive med forbindelsene og egnet for administrasjon til pasient.

Foretrukket er vandige vehikler egnet for topisk anvendelse på pasientens øyne.

Andre ingredienser som kan være ønskelige å anvende i oftalmiske sammensetninger ifølge oppfinnelsen inkluderer antimikrobielle midler, konserveringsmidler, ko-løsemidler, surfaktanter og viskositetsbyggende midler.

Oppfinnelsen angår også forbindelsene med formel (I) og de nevnte farmasøytiske sammensetninger for behandling av glaukom eller okkulær hypertensjon. En effektiv intraokkulær trykkreduserende mengde av en sammensetning bringes i kontakt med øyet for å redusere øyetrykket og for å opprettholde nevnte trykk på et redusert nivå.

Dosene av prostaglandinnitroderivater kan bestemmes ved standard kliniske teknikker og er innenfor samme området eller mindre enn det som er beskrevet for de korresponderende ikke-derivatiserte kommersielt tilgjengelige prostaglandinforbindelsene som rapportert i: "Physician's Desk Reference", Medical Economics Company, Inc., Oradell, N.J., 58. utgave, 2004; "The pharmacological basis of therapeutics", Goodman og Gilman, J. G. Hardman, L. e. Limbird, 10. utgave.

Sammensetningene inneholder 0,1-0,30 ug, særlig 1-10 \ ig, pr. anvendelse av aktiv forbindelse.

Behandlingen kan fordelaktig utføres ved at en dråpe av sammensetningen som korresponderer til ca. 30 ul, administreres ca. 1 til 2 ganger daglig til pasientens øye. Det er videre tiltenkt at forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan anvendes med andre medikamenter som er kjente for å være anvendelige innenfor feltet glaukom eller okkulær hypertensjon, enten separat eller i kombinasjon. For eksempel kan forbindelsen ifølge oppfinnelsen kombineres med (i) beta-blokker, slik som timolol, betaxolol, levobunolol og lignende (se US-patent nr. 4,952,581); (ii) karbonanhydratinhibitorer, slike som brinzolamid; (iii) adrenergiske agonister som inkluderer klonidinderivater, slike som apraklonidin eller brimonidin (se US-patent 5,811,443). Også tiltenkt i kombinasjonen med nitrooksyderivativer av de ovenfor rapporterte forbindelsene, for eksempel nitrooksy derivater av beta-blokkere slike som de som er beskrevet i US-patent nr. 6,242,432.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan syntetiseres på følgende måte.

Forbindelsene med generell formel (I) som definert ovenfor kan oppnås:

i) ved omsetning av en forbindelse med formel (HI)

hvori

L er som definert ovenfor; P er H eller en hydroksylbeskyttende gruppe slik som silyletere, slik som trimetylsilyl, tert-butyl-dimetylsilyl eller acetyl og de som er beskrevet i T. W. Greene "Protective groupes in organic synthesis", Harvard University Press, 1980, 2. utgave, s.14-118;

W er -OH, Cl, eller -OC(0)Rihvori Ri er et lineært eller forgrenet C1-C5alkyl;

med en forbindelse med formel (IV) Z-Y-Q hvori Y er som definert ovenfor, Z er HX eller Zi, værende X som definert ovenfor og Zi valgt fra gruppen som består av: klor, brom, jod, mesyl, tosyl;

Q er -ON02eller Zx og

ii) når Q er Zi, ved omdanning av forbindelsen oppnådd i trinn i) til nitroderivat ved reaksjon med en nitratkilde slik som sølvnitrat, litiumnitrat, natriumnitrat, kaliumnitrat, magnesiumnitrat, kalsiumnitrat, jernnitrat, sinknitrat eller tetraalkylammoniumnitrat (hvori alkyl er C1-C10alkyl) i et passende organisk løsemiddel slik som acetonitril, tetrahydrofuran, metyletylketon, etylacetat, DMF, hvor reaksjonen utføres i mørket ved en temperatur fra romtemperatur til koketemperatur til løsemidlet. Foretrukken nitratkilde er sølvnitrat og

iii) eventuelt avbeskytte forbindelsen oppnådd i trinn i) eller ii) som beskrevet i T. W. Greene "Protective groups in organic synthesis", Harvard University Press, 1980, 2, utgave, s. 68-86. Fluoridion er den foretrukne fremgangsmåten for å fjerne den silyleter beskyttende gruppe. - Reaksjon med en forbindelse med formel (HI) hvori W = -OH, P og Xi er som definert ovenfor, med en forbindelse med formel (IV) hvori Y og Q er som definert ovenfor, Z er HX, kan utføres under nærvær av et dehydreringsmiddel slike som dicykloheksyl-karbodiimid (DCC) eller N'-(3-dimetylaminopropyl)-N-etylkarbodiimidhydroklorid (EDAC) og en katalysator, slik som N,N-dimetylaminopyridin (DMAP). Reaksjonen utføres i et inert organisk løsemiddel tørt slik som N,N'-dimetylformamid, tetrahydrofuran, benzen, toluen, dioksan, et polyhalogenert alifatisk hydrokarbon, ved en temperatur fra -20°C og 40°C. Reaksjonen blir fullstendig i løpet av en tidsperiode på fra 30 minutter til 36 timer.

Forbindelsene med formel (HI) hvori W = -OH og P = H er kommersielt tilgjengelig.

Forbindelsene med formel (HI) hvori W = -OH og P er en hydroksylbeskyttende gruppe kan fremstilles fra de korresponderende forbindelsene hvori P = H så vel som de som er kjent i litteraturen, for eksempel som beskrevet i T. W. Greene "Protective groups in organic synthesis", Harvard University Press, 1980, 2. utgave, s. 14-118.

Reaksjonen mellom en forbindelse med formel (HI) hvori W = -OC(0)Rihvori Ri er som definert ovenfor og P = H eller en hydroksylbeskyttende gruppe, og en forbindelse med formel (TV) hvori Y er som definert ovenfor, Z er -OH og Q er -ONO2kan utføres under nærvær av en katalysator, slik som N,N-dimetylaminopyridin (DMAP).

Reaksjonen utføres i et inert organisk løsemiddel slik som N,N'-dimetylformamid, tetrahydrofuran, benzen, toluen, dioksan, et polyhalogenert alifatisk hydrokarbon, ved en temperatur fra -20°C og 40°C. Reaksjonen er fullstendig i løpe tav et tidsområde på 30 minutter til 36 timer.

Forbindelsen med formel (HI) hvori W = -OC(0)Riog P = H kan oppnås fra de korresponderende syrene hvori W = -OH ved reaksjon med et klorformat slik som isobutylklorformat, etylklorformat under nærvær av en ikke-nukleofil base slik som trietylamin i et inert organisk løsemiddel slik som N,N'-dimetylformamid, tetrahydrofuran, et polyhalogenert alifatisk hydrokarbon, ved en temperatur fra -20°C til 40°C. Reaksjonen er fullstendig i løpet av et tidsområde på 1 til 8 timer.

Reaksjonen mellom en forbindelse med formel (III) hvori W = -OH og P = H,

med en forbindelse med formel (IV) hvori Y er som definert ovenfor, Z er Zi og Q er -ONO2kan utføres under nærvær av en organisk base slik som 1,8-diazabicyklo[5.4.0]undec-7-en (DBU), N,N-diisopropyletylamin, diisopropylamin eller uorganisk base slik som jordalkalimetallkarbonat eller hydroksid, kaliumkarbonat, cesiumkarbonat, i et inert organisk løsemiddel slik som N,N'-dimetylformamid, tetrahydrofuran, aceton, metyletylketon, acetonitril, et polyhalogenert alifatisk hydrokarbon ved en temperatur på fra -20°C til 40°C, foretrukket fra 5°C til 25°C. Reaksjonen er fullstendig innenfor et tidsområde på fra 1 til 8 timer. Når Zi er valgt blant klor eller bom, blir reaksjonen utført under nærvær av en jodforbindelse slik som Kl.

Reaksjonen mellom en forbindelse med formel (III) hvori W = Cl og P er som definert ovenfor, og en forbindelse med formel (IV) hvori Y er som definert ovenfor, Z er -OH og Q er -ONO2kan utføres under nærvær av en organisk base slik som N,N-dimetylaminopyridin (DMAP), trietylamin, pyridin. Reaksjonen utføres i et inert organisk løsemiddel slik som N,N'-dimetylformamid, tetrahydrofuran, benzen, toluen, dioksan, et polyhalogenert alifatisk hydrokarbon ved en temperatur fra -20°C til 40°C. Reaksjonen er fullstendig i løpet av et tidsområde på 30 minutter til 36 timer.

Forbindelser med formel (HI) hvori W = Cl kan oppnås fra de korresponderende syrene hvori W = -OH ved reaksjon med et tionyl eller oksalylklorid, halider av Pm eller P<v>i løsemidler inerte slike som toluen, klorform, DMF.

Forbindelsene med formel HO-Y-ONO2, hvori Y er som definert ovenfor, kan oppnås som følger. Det korresponderende diolderivåtet, kommersielt tilgjengelig eller syntetisert via godt kjente fremgangsmåter, omdannes til HO-Y-Zi, hvori Zi er som definert ovenfor, ved godt kjente reaksjoner, for eksempel ved

reaksjon med tionyl eller oksalylklorid, halider av Pm eller P<v>, mesylklorid, tosylklorid i løsemidler inerte slike som toluen, klorform, DMF, etc. Omdanning til nitroderivatet utføres som ovenfor beskrevet. Alternativt kan diolderivatet nitreres ved reaksjon med salpetersyre og eddiksyreanhydrid i et

temperaturområde fra -50°C til 0°C i henhold til fremgangsmåter godt kjente i litteraturen.

Forbindelsene med formel Z1-Y-ONO2, hvori Y og Zi er som definert over, kan oppnås fra halogenderivatet Zi-Y-Hal, kommersielt tilgjengelig eller syntetisert i henhold til fremgangsmåter kjente i litteraturen, ved omdanning til nitroderivatet som ovenfor beskrevet.

Forbindelsene med formel H-X-Y-Zi, hvori X, Y og Zi er som definert ovenfor,

kan oppnås fra hydroksylderivatet H-X-Y-OH, kommersielt tilgjengelig eller syntetisert i henhold til fremgangsmåter godt kjente i litteraturen, ved godt kjente reaksjoner, for eksempel ved reaksjon med tionylklorid eller oksalylklorid, halider av Pm eller P<v>, mesylklorid, tosylklorid, i løsemidler inerte slik som toluen, klorform, DMF, etc.

Følgende eksempler er for ytterligere å illustrere oppfinnelsen, uten å begrense den.

EKSEMPEL 1

Syntese av [lR-[la(Z),2a(R<*>),3a,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl)cyklopentyl]-5-heptensyre 4-(nitrooksy)butylester (forbindelse 1)

I SYNTESEVEI

II EKSPERIMENTELT

n.l Fremstilling av 4-bromobutanol

Tetrahydrofuran (12,5 g - 173 mmol) tilsettes under nitrogen til en reaktor avkjølt til 5-10°C. Hydrogenbromid (7,0 g - 86,5 mmol) ble deretter tilsatt sakte og reaksjonsmediet røres i 4,5 timer ved 5-10°C. Blandingen fortynnes med 22,5 g kaldt vann og pH til løsningen justeres til pH=5-7 ved tilsetning av 27,65% natriumhydroksid (2,0 g) mens temperaturen holdes ved 5-10°C. Løsningen ble deretter ekstrahert to ganger med diklormehan (13,25 g). De kombinerte organiske fasene vaskes med 25% saltvann (7,5 g), justeres til pH=6-7 med 27,65% natriumhydroksid og tørkes over magnesiumsulfat. Diklormetan destilleres fra og uren 4-bromobutanol (10,3 g - 66,9 mmol) oppnås i et

utbytte på ca. 77%.

II.2 Fremstilling av 4-bromobutylnitrat

I reaktor avkjølt til -5 til 5°C, blir flytende salpetersyre (8,5 g - 135 mmol) sakte tilsatt til en løsning av 98% saltsyre (13,0g-130 mmol) i diklormetan (18,0g-212 mmol). 4- bromobutanol (10,2 g - 66,6 mmol) blir deretter tilsatt til blandingen og reaksjonsmediet røres ved -5 til 5°C i løpet av 2-5 timer. Blandingen helles ut over i kalt vann (110 g) mens temperaturen ble holdt mellom -5°C og 3°C. Etter dekantering blir den øvre vannfasen ekstrahert med diklormetan og de kombinerte organiske fasene vaskes med vann, justeres til pH=6-7 ved tilsetning av 27,65% natriumhydroksid, vaskes med saltvann og tørkes over magnesiumsulfat. Diklormetan destilleres fra under vakuum og uren 4-bromobutylnitrat (12,7 g - 64,1 mmol) utvinnes i et utbytte på ca. 96%.

H.3 Fremstilling av [lR-[la(Z),2P(R<*>),3a,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5- fenylpentyl)cyklopentyl]-5-heptensyre 4-(nitrooksy)butylester

Latanoprostsyre (97,7%, S-isomer <1%) (213 mg, 0,54 mmol) løses i 5,0 g vannfri DMF. K2C03(206 mg, 1,49 mmol), Kl (77 mg, 0,46 mmol) og 4-bromobutylnitrat (805 mg, 25% vekt/vekt i metylenklorid, 1,02 mmol) tilsettes. Reaksjonsblandingen varmes opp og røres på en rotasjonsfordamper ved 45-50°C.

Etter 1,5 timer viser TLC (Si, CEkCb-MeOH, 5%) ikke lenger utgangssyre.

Reaksjonsblandingen fortynnes med 100 ml etylacetat, vaskes med saltvann (3 x 50 ml), tørkes over MgSC>4 og fordampes som gir en gul olje (420 mg).

XH NMR/13C NMR viser målmolekylet som et hovedprodukt sammen med noe utgangs-4-bromobutylnitrat og DMF.

HPLC viser ikke lenger utgangssyre. Restløsemidlet, 4-bromobutylnitrat og målesteren var hovedtoppene. Butylnitratester viser tilsvarende UV-spektrum som latanoprost og relativ retensjonstid var som forventet.

Instrument: Bruker 300 MHz

Løsemiddel: CDC13

^-NMR (CDCI3) 6: 7.29-7.19 (5H, m, Ar); 5.45 (1H, m, CH=CH); 5.38 (1H, m, CH=CH); 4.48 (2H, t, CH^-ONC^); 4.18 (1H, m, CH-OH); 4.10 (2H, t, COOCH2); 3.95 (1H, m, CH-OH); 3.68 (1H, m, CH-OH); 2.87-2.60 (2H, m); 2.35 (2H, t); 2.25 (2H,m); 2.13 (2H,m); 1.90-1.35 (16H, m).

<13>C-NMR (CDCI3) ppm: 173.94 (C=0); 142.14; 129.55 (C5); 129.50 (C6); 128.50; 125.93 78.80 (Cu); 74.50 (C9); 72.70(C-ONO2); 71.39 (d5); 63.57; 52.99 (Ci2); 51.99 (Cg); 41.30 (Cio); 39.16 (Ci6); 33.66; 32.21; 29.73; 27.04; 26.70; 25.04; 24.91; 23.72; 15.37.

EKSEMPEL 2

Syntese av [lR-[la(Z),2p(R<*>),3o,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl)cyklopentyl]-5-heptensyre [2-metoksy-4-[2-propenoyloksy(4-nitrooksybutyl)]]fenylester (forbindelse 11)

Fremstilling av ferulsyre 4-( bromo) butvlester

Til en løsning av ferulsyre (1 g, 5,15 mmol) i tetrahydrofuran (40ml), trifenylfosfin (2,7 g, 10,3 mmol) og tetrabromometan (3,41 g, 10,3 mmol) tilsatt. Blandingen røres ved romtemperatur i 4 timer. Blandingen filtreres og løsemidlet fordampes under vakuum. Det urene residuet renses med silikagelkromatografi, eluert med n-heksan/etylacetat 7/3.

Produktet (0,77g) oppnås som et gult faststoff. (Utbytte 46%)

Smeltepunkt =83-88°C

Fremstilling av ferulsyre 4-( nitrooksv) butylester

Til en løsning av forbindelse A (0,8 g, 2,43 mmol) og sølvnitrat (1,2 g, 7,29 mmol) i acetonitril (50 ml) røres ved 40°C, i mørke i 16 timer. Presipitatet (sølvsalter) filtreres fra og løsemidlet fordampes under vakuum. Residuet renses ved flashkromatografi, eluent n-heksan/etylacetat 75/25. Produktet (0,4 g) oppnås som et hvitt pulver (Utbytte 53%).

Smeltepunkt =63-64°C

Fremstilling av riR- ria( ZV2B( R*). 3a. 5all- 7- r3. 5- dihvdroksv- 2-( 3- hvdroksv- 5-fenvlpentvDcvklopentvll- 5- heptensyre [ 2- metoksv- 4-[ 2- propenoyloksv( 4-nitrooksvbutvDllfenylester

Til en løsning av latanoprostsyre (0,2 g, 0,51 mmol) i tørr tetrahydrofuran (10 ml), i inert atmosfære, blir ferulsyre 4-(nitrooksy)butylester (0,32 g, 1,02 mmol) og DMAP (katalytisk mengde) tilsatt. Reaksjonsblandingen avkjøles til 0°C og ED AC (0,14 g, 0. 76 mmol) tilsettes. Reaksjonsblandingen røres ved romtemperatur i 24 timer. Løsningen behandles med vann og klorform, de organiske sjiktene tørkes med natriumsulfat og konsentreres under redusert trykk. Residuet renses ved flashkromatografi, eluent n-heksan/etylacetat 3/7. Produktet (0,2 g) oppnås.

'H-NMR (CDC13) 6: 7.55 (1H, d, CH=CHCO); 7.30-7.03 (8H, m, Ar); 6.35 (1H, d, CH=CHCO); 5.48 (2H, m, CH=CH); 4.52 (2H, t, CH2-ONO2); 4.25 (2H, t, COO-CH2); 4.17(1H, m, CH-OH); 3.95 (1H, m, CH-OH); 3.85 (3H, s, OCH,); 3.65 (1H, m, CH-OH); 2.75 (2H, m); 2.61 (2H, t); 2.48-2.20 (5H, m); 1.9-1.20 (19H, m).

<13>C-NMR (CDCI3): ppm: 171.62 (C=0); 166.69 (C=0); 151.40; 144.36; 142.04; 141.55; 133.21; 129.62; 129.41; 128.40; 125.85,123.27; 121.27; 117.96; 111.32; 78.81; 74.84; 72.64 (C-ON02); 71.32; 63.61; 55.94; 52.99; 51.91; 42.54; 39.08; 35.79; 33.37; 32.12; 29.68; 27.03; 26.53; 25.09; 24.90; 23.73.

EKSEMPEL 3

Syntese av [lR-[la(Z),2p(R<*>),3(x,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl)cyklopentyl]-5-heptensyre 3-(nitrooksymetyl)fenylester (forbindelse 4)

1. Fremstilling av 3-[( Bromo) metyl1fenol

3-[(Hydroksy)metyl]fenol løses i acetonitril (300 ml) og diklormetan (900ml) og den resulterende blandingen helles over i en kolbe holdt under argon; og magnetisk rører blir satt på. Løsningen blir deretter avkjølt med isbad og karbontetrabromid og trifenilfosfin tilsettes. Sistnevnte tilsettes i små porsjoner for å opprettholde temperaturen ved ca. 2-3 °C.

Løsningen røres i 1 time ved 2-3 °C og deretter i ytterligere en time ved romtemperatur.

Deretter blir reaksjonsomdanning (sjekket med TLC, ved anvendelse av EtOAc/petroleumeter 3/7 som eluent) fullstendig. Den oppnådde blandingen dampes under redusert trykk og 500 ml petroleumeter og 500 ml EtOAc tilsettes til den resulterende gule tykke oljen i en 21 rundkolbe. Et klebrig faststoff dannes. Blandingen holdes under røring ved romtemperatur over natten og deretter blir den filtrert og konsentrert under redusert trykk som gir ca. 50 g av et oljeaktig residu. Oljen renses ved flashkromatografi over 600g silikagel, ved anvendelse av EtOAc/petroleumeter 2/8 som eluent. Ytterligere rensing oppnås ved krystallisering av det resulterende bromidet fra petroleumeter. Et hvitt faststoff oppnås (24 g, 64%).

Analyse

TLC: (EtOAc/Petroleumeter 3/7) Rf =0,4

HPLC renhet: > 98%

FT-IR (KBr, cm"1) : 3252, 1589, 1479, 1392, 1270, 1208, 1155, 952, 880, 791, 741, 686.

2 . Fremstilling av 3-[ fNitrooksy) metyllfenol

3-[(Bromo)metyl]fenol løses i 30 ml acetonitril og helles i kolben, som holdes unna lyskilder ved 0-5°C under argon; og magnetisk røring holdes på. Sølvnitrat tilsettes deretter under disse betingelsene mens temperaturen holdes under 5°C. Reaksjonsforløpet følges med TLC (EtOAc/Petroleumeter 3/7 som eluent). Etter 4 timer og 30 minutter var omdanningen fullstendig. Reaksjonsblandingen blir deretter filtrert, det presipiterte faste stoffet vasket med Et20 og filtratet separert i to batcher. Den første batchen (15 ml) holdes under argon og i acetonitrilløsning ved -20°C. Den andre batchen (15 ml) opparbeides som følger. Acetonitrilløsningen konsentreres under redusert trykk og den resulterende oljen løses i diklormetan (15 ml) og vaskes med saltvann (15 ml). Den organiske fase separeres og vannfasen ekstraheres to ganger med diklormetan (2 x 25 ml). De kombinerte organiske fasene blir deretter tørket over MgS04, filterert og fordampet. Residuet renses ved flashkromatografi over 40 g silikagel ved anvendelse av EtOAc/Petroleumeter 2/8 som eluent. Nitratet oppnås som en olje (0,6 g, 67%).

Analyse

TLC: (EtOAc/Petroleumeter 3/7) Rf =0,35

HPLC renhet: > 98%

MS (ESI-): 168 (M<+->1)

FT-IR ("neat" olje, cm"1) : 3365, 1632, 1599, 1459, 1282, 1160, 923, 867, 793, 757.

<*>H NMR (CDC13, 300 MHz) 5 5.31 (2H, s), 5.45 (1H, br s), 6.78-6.84 (2H, m), 6.87-6.92 (1H, m), 7.17-7.24 (1H, m).

3. Fremstilling av riR- ria( Z), 2B( R*) 3a, 5all- 7- r3, 5- dihvdroksv- 2-( 3- hvdroksv- 5-fenylpentyl) cyklopentyll- 5- heptensyre 3-( nitrooksymetyl) fenylester

Til en løsning av latanoprostsyre (0,11 g, 0,28 mmol) i klorform (20ml), i inert atmosfære, blir 3-(nitrooksymetyl)fenol (0,01 g, 0,56 mmol) og DMAP (katalytisk mengde) tilsatt. Reaksjonsblandingen avkjøles til 0°C og ED AC (0,08 g, 0,42 mmol) tilsettes. Reaksjonsblandingen røres ved romtemperatur i 24 timer. Løsningen behandles med vann, de organiske sjiktene tørkes med natriumsulfat og konsentreres under redusert trykk. Residuet renses ved flashkromatografi, eluent n-heksan/etylacetat 3/7. Produktet (0,1 g) oppnås.

'H-NMR (CDCI3) 6: 7.41 (1H, t, Ar); 7.31-7.10 (8H, m, Ar); 5.48 (2H, m, CH=CH); 5.43 (2H, s, CH2-ONO2); 4.16(1H, m, CH-OH); 3.95 (1H, m, CH-OH); 3.65 (1H, m, CH-OH); 2.75 (2H, m); 2.61 (2H, t); 2.48-2.20 (5H, m); 1.9-1.20 (11H, m).

EKSEMPEL 4

Syntese av [lR-[la(Z),2p(R<*>),3o,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl) cyklopentyl]-5-heptensyre 4-(nitrooksymetyl)benzyl ester (forbindelse 9)

A) [lR-[la(Z),2p(R*),3a,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl) cyklopentyl]-5-heptensyre 4-(bromometyl)benzylester

Til en løsning av latanoprostsyre (0,5 g, 1,2 mmol) i klorform (50ml), i inert atmosfære, blir 4-(bromometyl)benzylalkohol (0,4 g, 1,92 mmol) og DMAP (katalytisk mengde) tilsatt. Reaksjonsblandingen avkjøles til 0°C og ED AC (0,37 g, 1,92 mmol) tilsettes. Reaksjonsblandingen røres ved romtemperatur i 5 timer. Løsningen behandles med vann, de organiske sjiktene tørkes med natriumsulfat og konsentreres under redusert trykk. Residuet renses ved flashkromatografi, eluent n-heksan/etylacetat 3/7. Produktet (0,47 g) oppnås.

B) [lR-[la(Z),2P(R*),3a,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl) cyklopentyl]-5-heptensyre 4-(nitrooksymetyl)benzylester

En løsning av forbindelse A (0,4 g, 0,7 mmol) og sølvnitrat (0,23 g, 1,4 mmol) i acetonitril (50 ml) røres ved 40°C, i mørke, i 4 timer. Presipitatet (sølvsalter) filtreres fra og løsemidlet fordampes under vakuum. Residuet renses ved flashkromatografi, eluent n-heksan/etylacetat 7/3. Produktet (0,15 g) oppnås som en olje.

'H-NMR 8: 7.39 (4H, s, Ar); 7.31-7.17 (5H, m, Ar); 5.44 (2H, m, CH=CH); 5.42 (2H, s, CH2-ON02); 5.30 (2H, s, O-CHjj-Ar); 4.15(1H, m, CH-OH); 3.95 (1H, m, CH-OH); 3.67 (1H, m, CH-OH); 2.75 (2H, m); 2.41 (2H, t); 2.48-1.20 (16H, m).

EKSEMPEL 5

Syntese av [lR-[la(Z),2p(R<*>),3a,5æ]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl) cyklopentyl]-5-heptensyre 3-(nitrooksy)propyl ester (forbindelse 78).

Forbindelsen syntetiseres ved anvendelse av fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4 med utgangspunkt i latanoprostsyre og 3-bromopropanol.

EKSEMPEL 6

Syntese av [lR-[la(Z),2p(R<*>),3a,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl) cyklopentyl]-5-heptensyre 2-(nitrooksy)etylester (forbindelse 77).

Forbindelsen syntetiseres ved anvendelse av fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4 med utgangspunkt i latanoprostsyre og 2-bromoetanol.

EKSEMPEL 7

Syntese av [lR-[la(Z),2p(R<*>),3a,5æ]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl) cyklopentyl]-5-heptensyre 6-(nitrooksy)heksylester (forbindelse 79).

Forbindelsen syntetiseres ved anvendelse av fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4 med utgangspunkt i latanoprostsyre og 6-bromohexanol.

EKSEMPEL 8

Syntese av [lR-[la(Z),2P(R<*>),3a,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl) cyklopentyl]-5-heptensyre 2-(nitrooksy)-l-metyletylester (forbindelse 80).

Forbindelsen syntetiseres ved anvendelse av fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4 med utgangspunkt i latanoprostsyre og l-bromo-2-propanol.

EKSEMPEL 9

Syntese av [lR-[la(Z),2P(R<*>),3a,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl) cyklopentyl]-5-heptensyre 2-(nitrooksy)propylester (forbindelse 81).

Forbindelsen syntetiseres ved anvendelse av fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4 med utgangspunkt i latanoprostsyre og 2-klor-l-propanol.

EKSEMPEL 11

Syntese av [lR-[la(Z),2P(R<*>),3a,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl) cyklopentyl]-5-heptensyre [2-metoksy-4-[2-propenoyloksy(2-nitrooksyetyl)]]fenylester (forbindelse 83).

Forbindelsen syntetiseres ved anvendelse av fremgangsmåten beskrevet i eksempel 2 med utgangspunkt i latanoprostsyre og ferulsyre 2-(nitrooksy)etylester.

EKSEMPEL 14

Syntese av [lR-[la(Z),2P(R<*>),3a,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl) cyklopentyl]-5-heptensyre (4-nitrooxmetyl)fenylester (forbindelse 6).

Forbindelsen syntetiseres ved anvendelse av fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4 med utgangspunkt i latanoprostsyre 4-(klormetyl)fenylester.

EKSEMPEL 15

Syntese av [lR-[la(Z),2P(R<*>),3a,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl) cyklopentyl]-5-heptensyre (3-nitrooksmetyl)benzylester (forbindelse 8).

Forbindelsen syntetiseres ved anvendelse av fremgangsmåten beskrevet i eksempel 4 med utgangspunkt i latanoprostsyre 4-(bromometyl)benzylester.

EKSEMPEL 16

Fremstilling av en oftalmisk sammensetning ved anvendelse av [lR-[la(Z),2a(R<*>),3a,5a]]-7-[3,5-dihydroksy-2-(3-hydroksy-5-fenylpentyl)cyklopentyl]-5-heptensyre 4-(nitrooksy)butylester (forbindelse 1)

Buffer:

NaCl 4,1 mg/ml

NaH2P04(vannfri) 4.74 mg/ml

NaH2PC>4 (monohydrat) 4.6 mg/ml

vann for injeksjon qs.

EKSEMPEL 17

Evaluering av nitrogenoksid- mediert aktivitet

Dannelse av cyklisk guanosin-3',5' monofosfat (cGMP) i celler i øyet er involvert i regulering av vandig væskestrøm. Således hører heving av cGMP nivåer til redusert vandig væskeproduksjon og reduksjon av intraokkulært trykk.

Det ble målt effekter av testlegemidler på cGMP dannelse i en godt etablert celleundersøkelse.

Ikke-diffierensierte feokromocytomceller (PC 12) ble anvendt. Monolagsceller ble inkubert i 45 minutter i Hank's balanserte saltløsning anriket med 10 mM Hepes, 5 mM MgCl2og 0,05% askorbinsyre til en endelig pH-verdi på 7,4 og som inneholder 100 uM av fosfodiesteraseinhibitoren, isometyl-butyl-xantin (IBMX), 30 uM av guanylylcyklaseinhibitoren, YC-1, og testlegemidlene ved passende konsentrasjoner. Reaksjonsblandingen ble terminert ved fjerning av inkuberingsbufferen fulgt av tilsetning av 50 L 100% iskald etanol. Platen ble deretter tørket under varm luftstrøm og residuet løst opp, ekstrahert og analysert ved anvendelse av kommersielt tilgjengelig cyklisk cGMP enzym immunoundersøkelseskit.

Resultatene er rapportert i tabell 1. Samtidig anvendelse av forskjellige konsentrasjoner av forskjellige Latanoprost nitroderivater (1-50 uM) viste cGMP akkumulering på konsentrasjonsavhengig måte.

Disse effektene deles ikke av morlegemidlet Latanoprost som viser at slike effekter er avhengig av frigivelsen av eksogent NO.

EKSEMPEL 18

Evaluering av effekt av Latanoprostnitroderivat på intraokkulært trykk.

Hann NZW kaniner varierende fra 3-5 kg i kroppsvekt ble anvendt i denne studien. Kort fortalt ble evnen til latanoprostnitroderivat (forbindelse 4, eksempel 3) når det gjelder å redusere intraokkulært trykk (IOP) testet på dyr på forhånd behandlet med intrakameral injeksjon av 0,25% karbomerløsningsinstallasjon til etter en stabil økning av intraokkulært trykk ble oppnådd. I denne bestemte studien ble testlegemidler administrert til et øye med doseringsprotokoll på 1 dråpe/øye/dag i 5 dager pr. uke med en fysiologisk løsning som inneholder 0,005% kontroll eller testforbindelser. IOP ble overvåket 3 timer etter legemiddelanvendelse, to-tre ganger ukentlig i totalt 4 uker. Denne konsentrasjonen ble valgt idet den reflekterer den av latanoprostisopropylester samtidig anvendt klinisk for å behandle økning av IOP observert hos glaukomapasienter. Videre, ved hver visitt, ble ca. 200 ul vandig væske samlet opp ved anvendelse av en 30 størrelsesnål fra begge øynene under lidokainanestesi for ytterligere biokjemisk evaluering av cGMP, camp og nitritt/nitratinnhold.

Installasjon av 0,25% karbomerløsning på øyet resulterte i en uttalt økning av IOP til ca. 40 mmHg som holdt seg stabil etterpå. Imidlertid reduserte administrasjon av forbindelse 4 (eks. 3) med doseprogrammet angitt i fremgangsmåtedelen det intraokkulære trykket til disse dyrene med ca. 50% i løpet av 7 dager med repeterende behandlinger og over 65% ved slutten av studien (se tabell 2). Til forskjell fra dette fremviste hverken latanoprostsyre (data ikke vist) eller dens isopropylderivat noen synlig forandring (se tabell 2). Gitt literaturtilgjengelig dokumentasjon om at latanoprost i virkeligheten ikke er effektiv hos kaniner, er de observerte effektene trolig på grunn av tilstedeværelsen av nitrogenoksid (NO) bestanddelen på latanoprostnitroderivatet snarere enn morforbindelsen.

Biokjemiske målinger av cGMP, cAMP og NOx i den intraokkulære vandige moren støtter videre rollen til NO når det gjelder å redusere IOP hos disse dyrene. I virkeligheten, som vist i tabell 3, økte omfanget av cGMP og NOx etterfølgende anvendelse av forbindelse 4 (eks. 3) over 4 ukers behandlingen. Disse effektene synes å være svært spesifikke idet mengden av intraokkulær cAMP holdt seg uforandret hos disse dyrene. Latanoprostisopropylester berørte ikke signifikantnivåene av hverken cGMP, cAMP eller nitriler når gitt ekvimolare doser med det til respektive nitroderivatet (se tabell 3).

Claims

1. Forbindelse,karakterisert vedgenerell formel (I) eller et farmasøytisk akseptabelt salt eller stereoisomer derav

hvori R er prostaglandinresiduet med formel (II):

hvori symbolet ™ representerer en enkeltbinding; L er:

X er -O- eller -S-; Y er et bivalent radikal som har følgende betydning: a) rett eller forgrenet C1-C20alkylen;

hvori n er et heltall fra 0 til 20, og n<1>er et heltall fra 1 til 20;

hvori: Xi = -COO- og R2 er CH3; n<1>er som definert ovenfor og n2 er et heltall fra 0 til 2; Y<1>er-CH=CH-(CH2)„<2->; Zer-CCH^1-; med den betingelsen at når Y er valgt fra bivalente radikaler nevnt under b) og e), er-ON02 gruppen bundet til -(CH2)„1.

2. Forbindelse med generell formel (I) ifølge krav 1,karakterisertved at Y er et bivalent radikal som har følgende betydning: a) rett eller forgrenet C2-C6alkylen;

hvori n er et heltall fra 0 til 5, og n<1>er et heltall fra 1 til 5.

3. Forbindelse med generell formel (I) ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 2 hvori Y er et bivalent radikal som har følgende betydning: a) rett eller forgrenet C2-C6alkylen;

hvori n er 0, ogn<1>er 1.

4. Forbindelse med formel (I) ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 2,karakterisert vedat Y er et bivalent radikal som har følgende betydning:

hvori: Xi = -COO- og R2 er CH3; Y<1>er-CH=CH-(CH2)n<2->; Zer-CCH^<1->; n<1>er et heltall fra 1 til 5 og n<2>er et heltall fra 0 til 2; med den betingelsen at -ONO2gruppen er bundet til -(CH^n1.

5. Forbindelse ifølge krav 1,karakterisert vedat den er valgt fra gruppen som består av:

6. Fremgangsmåte for fremstilling av en forbindelse med generell formel (I) ifølge krav 1,karakterisert vedat fremgangsmåten innbefatter: i) omsette en forbindelse med formel (HI)

hvori L er er som definert i krav 1; P er H eller en hydroksylbeskyttende gruppe og W er -OH, Cl, eller -OC(0)Rihvori Ri er et lineært eller forgrenet C1-C5alkyl; med en forbindelse med formel (IV) Z-Y-Q hvori Y er som definert i krav 1, Z er HX eller Zi, idet X er som definert i krav 1 og Zi valgt fra gruppen som består av: klor, brom, jod, mesyl, tosyl; Q er -0N02 eller Zx og ii) når Q er Zi, omdanne forbindelsen oppnådd i trinn i) til nitroderivatet ved reaksjon med en nitratkilde og iii) eventuelt avbeskytte forbindelsene oppnådd i trinn i) eller ii).

7. Forbindelse med generell formel (I) ifølge krav 1-5, for anvendes som et medikament.

8. Forbindelse ifølge krav 1-5, for anvendelse ved behandling av glaukom eller okkulær hypertensjon.

9. Farmasøytisk sammensetning,karakterisert vedat den innbefatter en farmasøytisk akseptabel bærer og en farmasøytisk effektiv mengde av en forbindelse med generell formel (I) og/eller et salt eller stereoisomer derav som definert i krav 1-5.

10. Farmasøytisk sammensetning ifølge krav 9,karakterisertv e d at den er i en egnet form for topisk administrasjon.

11. Farmasøytisk sammensetning ifølge krav 9 eller 10, for behandling av glaukom og okkulær hypertensjon.

12. Farmasøytisk sammensetning ifølge krav 10 eller 11,karakterisert vedat forbindelsen med generell formel (I) administreres som en løsning, suspensjon eller emulsjon i en oftalmisk akseptabel vehikkel.

13. Farmasøytisk sammensetning,karakterisert vedat den innbefatter en blanding av en forbindelse med formel (I) ifølge krav 1 og (i) en beta- blokker eller (ii) en karbonanhydraseinhibitor eller (iii) en adrenergisk agonist eller et nitrooksyderivat derav.

14. Farmasøytisk sammensetning,karakterisert vedat den innbefatter en blanding av en forbindelse med formel (I) ifølge krav 1 og et timolol eller et nitrooksyderivat derav.