EA010595B1

EA010595B1 - Производные простагландинов

Info

Publication number: EA010595B1
Application number: EA200601099A
Authority: EA
Inventors: Эннио Онджини; Франческа Бенедини; Валерио Кироли; Пьеро Дель Сольдато
Original assignee: Никокс С.А.
Priority date: 2004-01-05
Filing date: 2004-12-27
Publication date: 2008-10-30
Also published as: PE20051052A1; US7910767B2; MY147181A; WO2005068421A1; KR20060113753A; UA84726C2; HRP20160500T1; PL1704141T3; TW200526567A; US7629345B2; MA28284A1; MXPA06007678A; NO20151341A1; AU2004313688B2; EP1704141B1; US20080058392A1; DK1704141T3; US20050272743A1; JP2007518716A; PA8620901A1

Abstract

Приведено описание нитропроизводных простагландинов общей формулы (I)где R означает остаток простагландина формулы (II)значения L, X и Y определены в формуле изобретения, или его фармацевтически приемлемая соль, или стереоизомер, имеющие повышенную фармакологическую активность и улучшенную переносимость. Соединения могут быть использованы для лечения глаукомы и гипертензии глаза.

Description

Настоящее изобретение относится к новым производным простагландинов. Более конкретно, настоящее изобретение относится к нитрооксипроизводным простагландинов, к содержащим их фармацевтическим композициям и их применению в качестве лекарственных средств для лечения глаукомы и гипертензии глаза.

Глаукома представляет собой повреждение оптического нерва, часто связанное с повышенным внутриглазным давлением (ΙΟΡ), которое приводит к прогрессирующей, необратимой потере зрения.

Почти 3 млн человек в Соединенных Штатах и 14 млн человек во всем мире имеют глаукому; это третья основная причина слепоты в мире.

Глаукома возникает в том случае, когда нарушение баланса выработки и оттока жидкости в глазу (водянистой влаги) приводит к увеличению глазного давления до опасных уровней.

Известно, что повышенное ΙΟΡ, по меньшей мере, частично можно регулировать введением лекарственных средств, которые либо уменьшают выработку водянистой влаги в глазу, либо увеличивают отток жидкости, такие как β-блокаторы, α-агонисты, холинергические агенты, ингибиторы карбоангидразы или аналоги простагландина.

С лекарственными средствами, обычно используемыми для лечения глаукомы, связано несколько побочных эффектов.

Использование β-блокаторов для местного применения приводит к серьезным побочным эффектам в легких, депрессии, утомлению, спутанности сознания, импотенции, выпадению волос, сердечной недостаточности и брадикардии.

α-Агонисты для местного применения имеют довольно высокую частоту возникновения аллергических или токсических реакций; холинергические агенты для местного применения (миотические средства) могут вызывать зрительные побочные эффекты.

Побочные эффекты, связанные с пероральными ингибиторами карбоангидразы, включают утомление, анорексию, депрессию, парестезию и аномалии уровня электролитов в сыворотке (ТИе Мегск Мапиа1 οί Ωίαβηοδίδ апб Тйегару, 8еуеп1ееп1й Εάίΐίοη, М.Н. Веегк апб К.. Вегкоте Ебйогк, 8ес. 8, СИ. 100).

Наконец, топические аналоги простагландинов (биматопрост, латанопрост, травопрост и унопростон), используемые при лечении глаукомы, могут вызывать офтальмологические побочные эффекты, такие как повышенная пигментация радужной оболочки, раздражение глаза, гиперемия конъюнктивы, воспаление радужной оболочки глаза, увеит и отек пятна (Магйпба1е, ТЫг1у-(Ыгб ебйюп, р. 1445).

В патенте США № 3922293 описаны монокарбоксиацилаты простагландинов Е-типа и их 15в-изомеры в положении С-9 и способы их получения; в патенте США № 6417228 описаны 13-азапростагландины, обладающие функциональной активностью агонистов рецептора РОЕ_2а, и их применение при лечении глаукомы и гипертензии глаза.

В заявке на выдачу патента ΧΥΟ 90/02553 описано применение производных простагландинов РОЛ, РОВ, РОЕ и РОЕ, в которых омега-цепь содержит циклическую структуру, для лечения глаукомы или гипертензии глаза.

В \УО 00/51978 описаны новые нитрозированные и/или нитрозилированные простагландины, в частности новые производные РОЕ_Ь новые композиции и их применение для лечения половых дисфункций.

В патенте США № 5625083 описаны динитроглицериновые сложные эфиры простагландинов, которые могут быть использованы в качестве сосудорасширяющих средств, противогипертонических сердечно-сосудистых средств или бронхорасширяющих средств.

В патенте США № 6211233 описаны соединения общей формулы Α-Χ₁-ΝΟ₂, где А содержит остаток простагландина, в частности РОЕ!, а Χ₁ означает бивалентный связывающий мостик, и их применение для лечения импотенции.

Объектом настоящего изобретения являются новые производные простагландинов, способные не только исключить или, по меньшей мере, уменьшить побочные эффекты, связанные с такими соединениями, но также обладающие улучшенной фармакологической активностью. Неожиданно обнаружено, что нитропроизводные простагландинов имеют значительно улучшенный общий профиль по сравнению с нативными простагландинами как в смысле более широкой фармакологической активности, так и улучшенной переносимости. В частности, установлено, что нитропроизводные простагландинов согласно настоящему изобретению могут быть использованы для лечения глаукомы и гипертензии глаза. Соединения согласно настоящему изобретению показаны для уменьшения внутриглазного давления у пациентов с открытоугольной глаукомой или с хронической закрытоугольной глаукомой, которые перенесли периферическую иридотомию или лазерную иридопластику.

Поэтому объектом настоящего изобретения являются нитропроизводные простагландинов общей формулы (I) и их фармацевтически приемлемые соли или стереоизомеры κ-χ-υ-ονο₂ (I) где К означает остаток простагландина формулы (II)

- 1 010595

где символ---означает одинарную связь или двойную связь;

Ь выбран из следующих групп:

X означает -О-, -8- или -ΝΉ-;

Υ означает двухвалентный радикал, имеющий следующее значение:

а) С₁-С₂₀алкилен с прямой или разветвленной цепью, предпочтительно С₁-С₁₀, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из атомов галогена, гидроксигруппы, -ОNО₂ или Т, где Т означает -ОС(О) (С₁-С₁₀алкил)-ОNО₂ или -О(С₁-С₁₀алкил)-ОNО₂;

циклоалкилен с 5-7 атомами углерода в цикле циклоалкилена, при этом цикл необязательно замещен боковыми цепями Т_ь где Т₁ означает С₁-С₁₀алкил с прямой или разветвленной цепью, предпочтительно СН₃;

где η является целым числом от 0 до 20 и п¹ является целым числом от 1 до 20;

где Х₁=-ОСО- или -СОО-;

К² означает Н или СН₃;

Ζ означает -(СН)_п ¹- или двухвалентный радикал, определенный выше в п.Ь), п¹ имеет значение, определенное выше и п² является целым числом от 0 до 2;

где Υ¹ означает -СН2-СН2-(СН2)п²- или -СН=СН-(СН2)_п ²-;

Ζ означает -(СН)_п ¹- или двухвалентный радикал, определенный выше в п.Ь), п¹, п², К² и Х₁ имеют значения, определенные выше;

где п¹ и К² имеют значения, определенные выше;

К³ означает Н или -СОСН₃;

при условии, что когда Υ выбран из двухвалентных радикалов, указанных в пп.Ь)-Г). концевая группа -ОЫО₂ связана с группой -(СН₂)_п ¹-;

- 2 010595

9)

-С^-Х^^Н-СНгг г —(СНг-СН-Хр^-СНг-СН—т где Х₂ означает -О- или -8-;

п³ является целым числом от 1 до 6, предпочтительно от 1 до 4;

К² имеет значение, определенное выше;

Ь)

Г г “1С]~[С]_л—

К⁶ К⁷ где п⁴ является целым числом от 0 до 10;

п⁵ является целым числом от 1 до 10;

К⁴, К⁵, К⁶, К⁷ являются одинаковыми или разными и означают Н или С1-С₄алкил с прямой или разветвленной цепью, предпочтительно К⁴, К⁵, К⁶, К⁷ означают Н;

где группа -ΟΝΟ₂ связана с где п⁵ имеет значение, определенное выше;

Υ² означает гетероциклическое насыщенное, ненасыщенное или ароматическое 5- или 6-членное кольцо, содержащее один или несколько гетероатомов, выбранных из азота, кислорода, серы, и выбран из

Термин «С1-С₂₀алкилен» в контексте данного описания относится к С1-С₂₀углеводороду с разветвленной или прямой цепью, предпочтительно имеющему от 1 до 10 атомов углерода, такому как метилен, этилен, пропилен, изопропилен, н-бутилен, пентилен, н-гексилен и т.п.

Термин «С1-С10алкил» в контексте данного описания относится к алкильным группам с разветвленной или прямой цепью, содержащим от одного до десяти атомов углерода, включая метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, трет-бутил, пентил, гексил, октил и т.п.

Термин «циклоалкилен» в контексте данного описания относится к циклу, имеющему от 5 до 7 атомов углерода, включая, но не ограничивая указанным, циклопентилен, циклогексилен, необязательно замещенный боковыми цепями, такими как (С1-С1₀)алкил с прямой или разветвленной цепью, предпочтительно СН₃.

Термин «гетероциклический» в контексте данного описания относится к насыщенному, ненасыщенному или ароматическому 5- или 6-членному циклу, содержащему один или несколько гетероатомов, выбранных из азота, кислорода, серы, такому как, например, пиридин, пиразин, пиримидин, пирролидин, морфолин, имидазол и т.п.

- 3 010595

Как указано выше, изобретение также относится к фармацевтически приемлемым солям соединений формулы (I) и их стереоизомерам.

Примерами фармацевтически приемлемых солей являются либо соли неорганических оснований, таких как гидроксиды натрия, калия, кальция и алюминия, либо органических оснований, таких как лизин, аргинин, триэтиламин, дибензиламин, пиперидин и другие приемлемые органические амины.

Соединения согласно настоящему изобретению в том случае, когда они содержат в молекуле один солеобразующий атом азота, могут быть преобразованы в соответствующие соли в результате взаимодействия в органическом растворителе, таком как ацетонитрил, тетрагидрофуран, с соответствующими органическими или неорганическими кислотами.

Примерами органических кислот являются щавелевая, винная, малеиновая, янтарная, лимонная кислоты. Примерами неорганических кислот являются азотная, хлористоводородная, серная, фосфорная кислоты. Предпочтительны соли с азотной кислотой.

Соединения согласно изобретению, которые имеют один или несколько асимметричных атомов углерода, могут существовать в виде оптически чистых энантиомеров, чистых диастереомеров, смесей энантиомеров, смесей диастереомеров, рацемических смесей энантиомеров, рацематов или рацемических смесей. В объем изобретения также входят все возможные изомеры, стереоизомеры и их смеси соединений формулы (I), включая смеси, обогащенные конкретным изомером.

Предпочтительными соединениями формулы (I) являются соединения, в которых К, Ь, X имеют значения, определенные в п.1, и Υ означает двухвалентный радикал, имеющий следующее значение:

а) С₁-С₂₀алкилен с прямой или разветвленной цепью, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из атомов галогена, гидроксигруппы, -ОЫО₂ или Т, где Т означает -ОС(О)(С₁-С₁₀алкил)-ОЫО₂ или -О(С₁-С₁₀алкил)-ОЫО₂;

циклоалкилен с 5-7 атомами углерода в цикле циклоалкилена, при этом цикл необязательно замещен боковыми цепями Т₁, где Т₁ означает С₁-С₁₀алкил с прямой или разветвленной цепью;

где η¹ имеет значение, определенное выше, и η² является целым числом от 0 до 2; Х1=-ОСО- или -СОО- и К² означает Н или СН3;

где η¹, п², К² и Х1 имеют значения, определенные выше; Υ¹ означает -СН2-СН₂- или -СН=СН-(СН₂)_П ²-;

К³ означает Н или -СОСН₃;

при условии, что когда Υ выбран из двухвалентных радикалов, указанных в пп.Ь)-Г). группа -ОЫО₂ связана с группой

- 4 010595

где Х₂ означает -О- или -8-;

п³ является целым числом от 1 до 6 и К² имеет значение, определенное выше;

т	Ϊ
— [С]?-	-Υ*—[С]~
К.⁶	Я’

где п⁴ является целым числом от 0 до 10;

п⁵ является целым числом от 1 до 10;

К⁴, К⁵, К⁶, К⁷ являются одинаковыми или разными и означают Н или С₁-С₄алкил с прямой или разветвленной цепью;

где группа -ОNО₂ связана с

где п⁵ имеет значение, определенное выше;

Предпочтительными соединениями формулы (I) являются соединения, в которых остаток простагландина К выбран из группы, состоящей из латанопроста, травопроста, унопростона и клопростенола, предпочтительно К означает латанопрост.

X предпочтительно означает -О- или -8-.

Предпочтительной группой соединений общей формулы (I) являются соединения, в которых Υ означает двухвалентный радикал, имеющий следующее значение:

а) С₂-С₆алкилен с прямой или разветвленной цепью, необязательно замещенный -ОNО₂ или Т, где Т имеет значение, определенное выше; Ь)

где п является целым числом от 0 до 5; п¹ является целым числом от 1 до 5;

- 5 010595

где Х₂ означает -О- или -8-; η³ равно 1;

В² имеет значение, определенное выше.

Наиболее предпочтительными значениями Υ являются:

а) разветвленный С₂-С₆алкилен или С₂-С₆алкилен с прямой или разветвленной цепью, необязательно замещенный -ΟNΟ₂ или Т, где Т имеет значение, определенное в п.1;

где η равно 0;

η¹ равно 1.

где Х₂ означает -О- или -8-; η³ равно 1; В² означает водород. Другой предпочтительной группой соединений общей формулы (I) являются соединения, в которых Υ означает двухвалентный радикал, имеющий следующее значение:

где Х₁=-ОСО- или -СОО-;

В² означает Н или СН₃;

Ζ означает -(СН)_П ¹- или двухвалентный радикал, определенный выше в п.Ь), где η является целым числом от 0 до 5;

η¹ является целым числом от 1 до 5 и η² является целым числом от 0 до 2;

Ζ означает -(СН)_п ¹- или двухвалентный радикал, определенный выше в п.Ь); η¹, η², В² и Х₁ имеют значения, определенные выше;

где η¹ и В² имеют значения, определенные выше, В³ означает Н или СОСН₃;

при условии, что когда Υ выбран из двухвалентных радикалов, указанных в пп.Ь)-Г), группа -ΟΝΟ₂ связана с группой -(СН₂)_П ¹-;

- 6 010595

где п⁴ является целым числом от 0 до 3; п⁵ является целым числом от 1 до 3;

К⁴, К⁵, К⁶, К⁷ имеют одинаковое значение и являются Н; и где группа -ОNО₂ связана с

Υ² означает 6-членное насыщенное, ненасыщенное или ароматическое гетероциклическое кольцо, содержащее один или два атома азота и выбранное, например, из

Следующие соединения являются предпочтительными соединениями согласно настоящему изобретению:

- 7 010595

- 8 010595

- 9 010595

- 10 010595

- 11 010595

(49}

- 12 010595

(50)

(51)

(52) (53)

(54)

(56)

- 13 010595

- 14 010595

- 15 010595

- 16 010595

- 17 010595

- 18 010595

- 19 010595

Как указано выше, объектом настоящего изобретения также являются фармацевтические композиции, содержащие, по меньшей мере, соединение согласно настоящему изобретению формулы (I) вместе с нетоксичными адъювантами и/или носителями, обычно используемыми в области фармации.

Предпочтительным путем введения является местное введение.

Соединения согласно настоящему изобретению можно вводить в виде растворов, суспензий или эмульсий (дисперсий) в офтальмологически приемлемом наполнителе. Термин «офтальмологически приемлемый наполнитель» в контексте данного описания относится к любому веществу или комбинации веществ, которые не взаимодействуют с соединениями и подходят для введения пациенту.

Предпочтительными являются водные наполнители, подходящие для местного применения на гла зах пациента.

Другие ингредиенты, которые могут быть необходимы для применения в офтальмологических композициях согласно настоящему изобретению, включают противомикробные агенты, консерванты, сорастворители, поверхностно-активные вещества и агенты для получения определенной вязкости.

Изобретение также относится к способу лечения глаукомы или гипертензии глаза, при этом указанный способ заключается в осуществлении контакта эффективного количества композиции, снижающего внутриглазное давление, с глазом, чтобы уменьшить глазное давление и чтобы поддерживать указанное давление на пониженном уровне.

Дозы нитропроизводных простагландинов могут быть определены стандартными клиническими способами и находятся в таком же диапазоне или ниже, чем дозы, описанные для соответствующих недериватизованных, коммерчески доступных соединений простагландинов, которые описаны в Рйу81С1ап'8

Эехк КеГегепсе, МеЛса1 Есопоткб Сотрапу, 1пс., Огабе11, Ν.Τ, 58'¹' Εά., 2004; Т11С ркагтасо1од1са1 Ьа818 оГ

1кегареийс8, Сообтап апб С11тап, ТС. Нагбтап, Ь.Е. ЫтЬЕТ 10^4Ь Εά.

- 20 010595

Композиции содержат 0,1-0,30 мкг, главным образом 1-10 мкг активного соединения в расчете на применение.

Лечение преимущественно можно осуществлять, вводя в глаз пациента по одной капле композиции, соответствующей 30 мкг, примерно 1-2 раза в день.

Дополнительно предполагается, что соединения согласно настоящему изобретению можно применять с другими лекарственными средствами, которые, как известно, полезны при лечении глаукомы или гипертензии глаза, либо отдельно, либо в комбинации. Например, соединения согласно настоящему изобретению можно комбинировать с (ί) β-блокаторами, такими как тимолол, бетаксолол, левобунолол и т.п. (см. патент США № 4952581); (ίί) ингибиторами карбоангидразы, такими как бринзоламид; (ш) адренергическими агонистами, включая производные клонидина, такие как апраклонидин или бримонидин (см. патент США № 5811443). Также предполагается комбинация с нитрооксипроизводными указанных выше соединений, например нитрооксипроизводными β-блокаторов, таких как соединения, описанные в патенте США № 6242432.

Соединения согласно настоящему изобретению могут быть синтезированы следующим образом.

Способ синтеза.

Соединения общей формулы (I), которые определены выше, могут быть получены:

ί) в результате взаимодействия соединения формулы (III)

где Ь имеет значение, определенное выше;

Р означает Н или защитную группу гидроксила, такую как силильные эфиры, такие как триметилсилил, трет-бутилдиметилсилил, или ацетил и группы, описанные в Т.^. Огеепе РгоГесНуе дгоирк ίΐ'ΐ огдашс купШешк, Нагуагб ИшуегШу. Ргекк, 1980, 2'¹ ебШоп, р. 14-118;

означает -ΟΗ, С1 или -Οί.'(Ο)Β|, где Κι означает линейный или разветвленный С1 -С₅алкил;

с соединением формулы (IV) Ζ-Υ-р, где Υ имеет значение, определенное выше, Ζ означает ΗΧ или Ζι, при этом X имеет значение, определенное выше, и Ζ₁ выбран из группы, состоящей из хлора, брома, йода, мезила, тозила;

О означает -ΟΝΟ₂ или Ζ₁; и ίί) в том случае, когда О означает Ζμ превращением соединения, полученного на стадии ί), в нитропроизводное в результате взаимодействия с источником нитрата, таким как нитрат серебра, нитрат лития, нитрат натрия, нитрат калия, нитрат магния, нитрат кальция, нитрат железа, нитрат цинка или нитрат тетраалкиламмония (в котором алкил является С1-С1₀алкилом), в подходящем органическом растворителе, таком как ацетонитрил, тетрагидрофуран, метилэтилкетон, этилацетат, ДМФА, реакцию осуществляют в темноте при температуре от комнатной температуры до температуры кипения растворителя.

Предпочтительным источником нитрата является нитрат серебра; и

ш) необязательно удалением защиты соединений, полученных на стадии ί) или ίί), как описано в Т.^. Огеепе РгоГесДуе дгоирк ш огдашс купШекщ, Нагуагб ИшуегШу Ргекк, 1980, 2^п<| ебйюп, р. 68-86. Использование фторид-иона является предпочтительным способом удаления защитной группы в виде силильного эфира.

Взаимодействие соединения формулы (III), в которой ^=ЮН, Р и X! имеют значение, определенные выше, с соединением формулы (IV), в котором Υ и О имеют значения, определенные выше, Ζ означает НХ, можно осуществить в присутствии дегидратирующего агента, такого как дициклогексилкарбодиимид (ЭСС) или гидрохлорид №-(3-диметиламинопропил)-Ы-этилкарбодиимида (ЕЭАС), и катализатора, такого как Ν,Ν-диметиламинопиридин (ЭМАР). Реакцию осуществляют в безводном инертном органическом растворителе, таком как Ν,Ν'-диметилформамид, тетрагидрофуран, бензол, толуол, диоксан, полигалогенированный алифатический углеводород, при температуре от -20 до 40°С. Реакцию завершают в интервале времени от 30 мин до 36 ч.

Соединения формулы (III), в которых \V=-ΟΗ и Р=Н, являются коммерчески доступными.

Соединения формулы (III), в которых \V=-ΟΗ и Р означает защитную группу гидроксила, могут быть получены из соответствующих соединений, в которых Р=Н, как хорошо известно в данной области, например, как описано в Т.^. Огеепе РгоГесНуе дгоирк ш огдашс купШеык, Нагуагб ИшуегШу Ргекк, 1980, 2¹¹'¹ ебйюп, р. 14-118.

- 21 010595

Взаимодействие соединения формулы (III), в котором ^=-ОС(О)К₁, где К₁ имеет значение, определенное выше, и Р=Н или является защитной группой гидроксила, с соединением формулы (IV), в котором Υ имеет значение, определенное выше, Ζ означает -ОН и О означает -ОЫО₂, можно осуществить в присутствии катализатора, такого как Ν,Ν-диметиламинопиридин (ΌΜΑΡ). Реакцию осуществляют в инертном органическом растворителе, таком как Ν,Ν'-диметилформамид, тетрагидрофуран, бензол, толуол, диоксан, полигалогенированный алифатический углеводород, при температуре от -20 до 40°С. Реакцию завершают в интервале времени от 30 мин до 36 ч.

Соединения формулы (III), в которых ^=-ОС(О)К₁ и Р=Н, могут быть получены из соответствующих кислот, в которых ^=-ОН, в результате взаимодействия с хлорформиатом, таким как изобутилхлорформиат, этилхлорформиат, в присутствии ненуклеофильного основания, такого как триэтиламин, в инертном органическом растворителе, таком как Ν,Ν'-диметилформамид, тетрагидрофуран, полигалогенированный алифатический углеводород при температуре от -20 до 40°С. Реакцию завершают в интервале времени от 1 до 8 ч.

Взаимодействие соединения формулы (III), в котором \У=-ОН и Р=Н, с соединением формулы (IV), в котором Υ имеет значение, определенное выше, Ζ означает Ζ₁ и О означает -ОNО₂, можно осуществить в присутствии органического основания, такого как 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (ΌΒυ), Ν,Ν-диизопропилэтиламин, диизопропиламин, или неорганического основания, такого как карбонат или гидроксид щелочно-земельного металла, карбонат калия, карбонат цезия, в инертном органическом растворителе, таком как Ν,Ν'-диметилформамид, тетрагидрофуран, ацетон, метилэтилкетон, ацетонитрил, полигалогенированный алифатический углеводород, при температуре от -20 до 40°С, предпочтительно от 5 до 25°С. Реакцию завершают в интервале времени от 1 до 8 ч. Когда Ζ1 выбран из хлора или брома, реакцию осуществляют в присутствии соединения йода, такого как КТ

Взаимодействие соединения формулы (III), в котором ^=С1 и Р имеет значение, определенное выше, с соединением формулы (IV), в котором Υ имеет значение, определенное выше, Ζ означает -ОН и О означает -ОNО₂, можно осуществить в присутствии органического основания, такого как Ν,Νдиметиламинопиридин (ОМАР), триэтиламин, пиридин. Реакцию осуществляют в инертном растворителе, таком как Ν,Ν'-диметилформамид, тетрагидрофуран, бензол, толуол, диоксан, полигалогенированный алифатический углеводород, при температуре от -20 до 40°С. Реакцию завершают в интервале времени от 30 мин до 36 ч.

Соединения формулы (III), в которых ^=С1, можно получить из соответствующих кислот, в которых ^=-ОН, в результате взаимодействия с тионил- или оксалилхлоридом, галогенидами Р^ш или Р\ в растворителях, таких как толуол, хлороформ, ДМФА.

Соединения формулы НО-Υ-ОNО₂, в которых Υ имеет значение, определенное выше, могут быть получены следующим образом. Соответствующее производное диола, коммерчески доступное или синтезированное в результате хорошо известных реакций, превращают в НО-Υ-Ζμ где Ζ₁ имеет значение, определенное выше, в результате хорошо известных реакций, например, в результате взаимодействия с тионил- или оксалилхлоридом, галогенидами Р^ш или Р\ мезилхлоридом, тозилхлоридом, в инертных растворителях, таких как толуол, хлороформ, ДМФА и т.д. Превращение в нитропроизводное осуществляют как описано выше. Альтернативно производное диола может быть нитрировано в результате взаимодействия с азотной кислотой и уксусным ангидридом в диапазоне температур от -50 до 0°С согласно способам, хорошо известным в литературе.

Соединения формулы Ζ₁-Υ-ОNО₂, в которых Υ и Ζ₁ имеют значения, определенные выше, можно получить из галогенпроизводного Ζι-Υ-На!, коммерчески доступного или синтезированного согласно способам, хорошо известным в литературе, превращением в нитропроизводное как описано выше.

Соединения формулы Н-Х-Υ-Ζμ в которых X, Υ и Ζ₁ имеют значения, определенные выше, можно получить из гидроксилпроизводного Π-Χ-Υ-ОН, коммерчески доступного или синтезированного согласно способам, хорошо известным в литературе, в результате хорошо известных реакций, например, в результате взаимодействия с тионил- или оксалилхлоридом, галогенидами Р^ш или Р\ мезилхлоридом, тозилхлоридом, в инертных растворителях, таких как толуол, хлороформ, ДМФА и т. д.

Следующие примеры предназначены для дополнительной иллюстрации изобретения без его ограничения.

Пример 1. Синтез 4-(нитроокси)бутилового эфира [1К-[1а^),2а(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2(3-гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 1).

I. Путь синтеза

МЧУ 153.02

Вг

МЧУ72.11

МЧУ 198.02

- 22 010595

II. Эксперимент.

II. 1. Получение 4-бромбутанол.

Тетрагидрофуран (12,5 г - 173 ммоль) в атмосфере азота загружали в реактор, охлажденный до 5-10°С. Затем медленно добавляли бромистый водород (7,0 г, 8 6,5 ммоль) и реакционную смесь перемешивали в течение периода времени, составляющего 4,5 ч, при 5-10°С. Смесь разбавляли 22,5 г холодной воды и рН полученного раствора доводили до 5-7 добавлением 27,65% гидроксида натрия (2,0 г), поддерживая температуру при 5-10°С. Затем раствор дважды экстрагировали дихлорметаном (13,25 г). Объединенные органически фазы промывали 25% раствором соли (7,5 г), рН доводили до 6-7, используя 27,65% гидроксид натрия и сушили над сульфатом магния. Дихлорметан отгоняли и неочищенный 4-бромбутанол (10,3 г, 66,9 ммоль) получали с выходом примерно 77%.

П.2. Получение 4-бромбутилнитрата.

В реакторе, охлажденном до температуры от -5 до 5°С, медленно добавляли дымящую азотную кислоту (8,5 г, 135 ммоль) к раствору 98% серной кислоты (13,0 г, 130 ммоль) в дихлорметане (18,0 г, 212 ммоль). Затем к полученной смеси добавляли 4-бромбутанол (10,2 г, 66,6 ммоль) и реакционную среду перемешивали при температуре от -5 до 5°С в течение периода времени 2-5 ч. Смесь быстро вливали в холодную воду (110 г), поддерживая температуру от -5 до 3°С. После декантирования верхнюю водную фазу экстрагировали дихлорметаном и объединенные органические фазы промывали водой, доводили до рН 6-7 добавлением 27,65% гидроксида натрия, промывали насыщенным раствором соли и сушили над сульфатом магния. Дихлорметан отгоняли в вакууме и неочищенный 4-бромбутилнитрат (12,7 г, 64,1 ммоль) извлекали с выходом примерно 96%.

Π.3. Получение 4-(нитроокси)бутилового эфира [1В-[1а^),2в(В*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2-(3гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты.

Кислоту латанопроста (97,7%, 8-изомер <1%) (213 мг, 0,54 ммоль) растворяли в 5,0 г безводного ДМФА. Добавляли К₂СО₃ (206 мг, 1,49 ммоль), XI (77 мг, 0,46 ммоль) и 4-бромбутилнитрат (805 мг, 25% (мас./мас.) в метиленхлориде, 1,02 ммоль). Реакционную смесь нагревали и перемешивали в роторном испарителе при 45-50°С.

Через 1,5 ч ТСХ (81, СН₂С1₂-МеОН, 5%) показала отсутствие исходной кислоты.

Реакционную смесь разбавляли 100 мл этилацетата, промывали насыщенным раствором соли (3x50 мл), сушили над Мд8О₄ и выпаривали, получая желтоватое масло (420 мг).

¹Н-ЯМР/¹³С-ЯМР показал наличие целевой молекулы как основного продукта вместе с некоторым количеством исходного 4-бромбутилнитрата и ДМФА. ВЭЖХ показала отсутствие исходной кислоты. Остаточный растворитель, 4-бромбутилнитрат и целевой сложный эфир давали основные пики. Сложный эфир бутилнитрат имел сходный с латанопростом УФ-спектр и ожидаемое относительное время удерживания.

Прибор: Вгикег 300 МГц.

Растворитель: СЭС1₃.

^!Н-ЯМР (СЭС1₃) δ: 7,29-7,19 (5Н, м, Аг); 5,45 (1Н, м, СН=СН); 5,38 (1Н, м, СН=СН); 4,48 (2Н, т, СН₂-О^₂); 4,18 (1Н, м, СН-ОН); 4,10 (2Н, т, СООСН₂); 3,95 (1Н, м, СН-ОН); 3,68 (1Н, м, СН-ОН); 2,872,60 (2Н, м); 2,35 (2Н, т); 2,25 (2Н, м); 2,13 (2Н, м); 1,90-1,35 (16Н, м).

¹³С-ЯМР (СЭС1₃) м.д.: 173,94 (С=О); 142,14; 129,55 (С₅); 129,50 (С₆); 128,50; 125,93; 78,80 (С_п); 74,50 (С₉); 72,70 (С-О^₂); 71,39 (С₁₅); 63,57; 52,99 (С₁₂); 51,99 (С₈); 41,30 (С₁₀); 39,16 (С₁₆); 33,66; 32,21; 29,73; 27,04; 26,70; 25,04; 24,91; 23,72; 15,37.

Пример 2. Синтез [2-метокси-4-[2-пропеноилокси(4-нитрооксибутил)]]фенилового эфира.

[1В-[1а^),2в(В*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2-(3-гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5гептеновой кислоты (соединение 11).

А) Получение 4-(бром)бутилового эфира феруловой кислоты.

К раствору феруловой кислоты (1 г, 5,15 ммоль) в тетрагидрофуране (40 мл) добавляли трифенилфосфин (2,7 г, 10,3 ммоль) и тетрабромметан (3,41 г, 10,3 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Смесь фильтровали и растворитель выпаривали в вакууме. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле, элюент н-гексан/этилацетат 7/3. Получали продукт (0,77 г) в виде желтого твердого вещества (выход 46%).

- 23 010595

Т.пл.=83-88°С.

B) Получение 4-(нитроокси)бутилового эфира феруловой кислоты.

Раствор соединения А (0,8 г, 2,43 ммоль) и нитрата серебра (1,2 г, 7,29 ммоль) в ацетонитриле (50 мл) перемешивали при 40°С в темноте в течение 16 ч. Осадок (соли серебра) отфильтровывали и растворитель выпаривали в вакууме. Остаток очищали флэш-хроматографией, элюент н-гексан/этилацетат 75/25. Получали продукт (0,4 г) в виде белого порошка (выход 53%).

Т.пл.=63-64°С.

C) . Получение [2-метокси-4-[2-пропеноилокси(4-нитрооксибутил)]]фенилового эфира [1К-[1а(2),2в(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2-(3-гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты.

К раствору кислоты латанопроста (0,2 г, 0,51 ммоль) в безводном тетрагидрофуране (10 мл) в инертной атмосфере добавляли 4-(нитроокси)бутиловый эфир феруловой кислоты (0,32 г, 1,02 ммоль) и ΌΜΆΡ (каталитическое количество). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли ЕЭЛС (0,14 г, 0,76 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Раствор обрабатывали водой и хлороформом, органические слои обезвоживали сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали флэш-хроматографией, элюент н-гексан/этилацетат 3/7. Получали продукт (0,2 г).

Ή-ЯМР (СПС1₃) δ: 7,55 (1Н, д, СН=СНСО); 7,30-7,03 (8Н, м, Аг); 6,35 (1Н, д, СН=СНСО); 5,48 (2Н, м, СН=СН); 4,52 (2Н, т, СН₂-О^₂); 4,25 (2Н, т, СОО-СН₂); 4,17 (1Н, м, СН-ОН); 3,95 (1Н, м, СН-ОН); 3,85 (3Н, с, ОСН₃); 3,65 (1Н, м, СН-ОН); 2,75 (2Н, м); 2,61 (2Н, т); 2,48-2,20 (5Н, м); 1,9-1,20 (19Н, м).

¹³С-ЯМР (СБС1з) м.д: 171,62 (С=О); 166,69 (С=О); 151,40; 144,36; 142,04; 141,55; 133,21; 129,62; 129,41; 128,40; 125,85, 123,27; 121,27; 117,96; 111,32; 78,81; 74,84; 72,64 (С-О^₂); 71,32; 63,61; 55,94; 52,99; 51,91; 42,54; 39,08; 35,79; 33,37; 32,12; 29,68; 27,03; 26,53; 25,09; 24,90; 23,73.

Пример 3.

Синтез 3-(нитрооксиметил)фенилового эфира [1К-[1а(2),2в(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2-(3гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 4).

1. Получение 3-[(бром)метил]фенола.

3-[(Гидрокси)метил] фенол растворяли в ацетонитриле (300 мл) и дихлорметане (900 мл) и полученную в результате смесь вливали в колбу в атмосфере аргона, включали магнитную мешалку. Затем раствор охлаждали на бане со льдом и добавляли четырехбромистый углерод и трифенилфосфин. Последний добавляли небольшими порциями, чтобы поддерживать температуру примерно 2-3°С.

Раствор перемешивали в течение 1 ч при 2-3°С и затем еще час при комнатной температуре.

После указанного периода времени реакционное превращение (проверяемое по ТСХ с использованием в качестве элюента смеси ЕЮАс/петролейный эфир 3/7) было завершено. Полученную смесь упаривали при пониженном давлении и добавляли 500 мл петролейного эфира и 500 мл ЕЮАс к полученному в результате желтому густому маслу в круглой колбе объемом 2 л. Образовывалось смолистое твердое вещество. Смесь выдерживали при перемешивании при комнатной температуре в течение ночи и затем фильтровали и концентрировали при пониженном давлении, получая примерно 50 г маслянистого остатка. Масло очищали флэш-хроматографией на 600 г силикагеля, используя в качестве элюента смесь ЕЮАс/петролейный эфир 2/8. Дополнительную очистку осуществляли кристаллизацией полученного в результате бромида из петролейного эфира. Получали белое твердое вещество (24 г, 64%).

Анализ.

ТСХ: (ЕЮАс/петролейный эфир 3/7), КГ=0.4.

Чистота по данным ВЭЖХ: >98%;

РТ-ИК (КВг, см^-1): 3252, 1589, 1479, 1392, 1270, 1208, 1155, 952, 880, 791, 741, 686.

2. Получение 3-[(нитроокси)метил] фенола.

3-[(Бром)метил] фенол растворяли в 30 мл ацетонитрила и вливали в колбу, которая находилась вдали от источников света при 0-5°С в атмосфере аргона; включали магнитную мешалку. Затем добавляли нитрат серебра при указанных условиях, поддерживая температуру ниже 5°С. За ходом реакции следили с помощью ТСХ (ЕЮАс/петролейный эфир 3/7 в качестве элюента). Через 4 ч 30 мин превращение было завершено. Затем реакционную смесь фильтровали, осажденное твердое вещество промывали ЕеО и фильтрат разделяли на две партии. Первую партию (15 мл) хранили в атмосфере аргона и в растворе ацетонитрила при -20°С. Вторую партию (15 мл) обрабатывали следующим образом. Раствор ацетонитрила концентрировали при пониженном давлении и полученное в результате масло растворяли в дихлорметане (15 мл) и промывали насыщенным раствором соли (15 мл). Органическую фазу отделяли, а водную фазу дважды экстрагировали дихлорметаном (2x25 мл). Затем объединенные органические фазы сушили над Мд§О₄, фильтровали и упаривали. Остаток очищали флэш-хроматографией на 40 г силикагеля, используя в качестве элюента смесь ЕЮАс/петролейный эфир 2/8. Получали нитрат в виде масла (0,6 г, 67%).

- 24 010595

Анализ.

ТСХ: (ЕЮАс/петролейный эфир 3/7), Ш=0,35.

Чистота по данным ВЭЖХ: >98%.

МС (Ε8Ι-): 168 (М⁺-1).

РТ-ИК (неразбавленное масло, см^-1): 3365, 1632, 1599, 1459, 1282, 1160, 923, 867, 793, 757.

Ή-ЯМР (СВС1з, 300 МГц) δ 5,31 (2Н, с), 5,45 (1Н, уш.с), 6,78-6,84 (2Н, м), 6,87-6,92 (1Н, м), 7,177,24 (1Н, м).

3. Получение 3-(нитрооксиметил) фенилового эфира [1К.-[1а(2),2в(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси2-(3 -гидрокси-5 -фенилпентил)циклопентил]-5 -гептеновой кислоты.

К раствору кислоты латанопроста (0,11 г, 0,28 ммоль) в хлороформе (20 мл) в инертной атмосфере добавляли 3-(нитрооксиметил)фенол (0,01 г, 0,56 ммоль) и ΌΜΆΡ (каталитическое количество). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли ΕΩΛΟ (0,08 г, 0,42 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч. Раствор обрабатывали водой, органические слои обезвоживали сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали флэшхроматографией, элюент н-гексан/этилацетат 3/7. Получали продукт (0,1 г).

Ή-ЯМР (ΟΩΟ1₃) δ: 7,41 (1Н, т, Аг); 7,31-7,10 (8Н, м, Аг); 5,48 (2Н, м, СН=СН); 5,43 (2Н, с, 0Η₂-ΟΝΟ₂); 4,16 (1Н, м, СН-ОН); 3,95 (1Н, м, СН-ОН); 3,65 (1Н, м, СН-ОН); 2,75 (2Н, м); 2,61 (2Н, т); 2,48-2,20 (5Н, м); 1,9-1,20 (11Н, м).

Пример 4. Синтез 4-(нитрооксиметил)бензилового эфира [1Κ-[1α(Ζ),2β(Κ*),3α,5α]]-7-[3,5дигидрокси-2-(3-гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 9).

A) 4-(Бромметил) бензиловый эфир [1К.-[1а^),2в(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2-(3-гидрокси-5фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты.

К раствору кислоты латанопроста (0,5 г, 1,2 ммоль) в хлороформе (50 мл) в инертной атмосфере добавляли 4-(бромметил)бензиловый спирт (0,4 г, 1,92 ммоль) и ΩΜΑΡ (каталитическое количество). Реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли ΕΩΑί'.' (0,37 г, 1,92 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч.

Раствор обрабатывали водой, органические слои обезвоживали сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении.

Остаток очищали флэш-хроматографией, элюент н-гексан/этилацетат 3/7. Получали продукт (0,47 г).

B) 4-(Нитрооксиметил) бензиловый эфир [1К.-[1а^),2в(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2-(3гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты.

Раствор соединения А (0,4 г, 0,7 ммоль) и нитрата серебра (0,23 г, 1,4 ммоль) в ацетонитриле (50 мл) перемешивали при 40°С в темноте в течение 4 ч. Выпавшие в осадок (соли серебра) отфильтровывали и растворитель выпаривали в вакууме. Остаток очищали флэш-хроматографией, элюент нгексан/этилацетат 7/3. Получали продукт (0,15 г) в виде масла.

Ή-ЯМР δ: 7,39 (4Н, с, Аг); 7,31-7,17 (5Н, м, Аг); 5,44 (2Н, м, СН=СН); 5,42 (2Н, с, СН₂-О^₂); 5,30 (2Н, с, О-СН₂-Аг); 4,15 (1Н, м, СН-ОН); 3,95 (1Н, м, СН-ОН); 3,67 (1Н, м, СН-ОН); 2,75 (2Н, м); 2,41 (2Н, т); 2,48-1,20 (16Н, м).

Пример 5. Синтез 3-(нитроокси)пропилового эфира [1К.-[1а^),2в(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2(3-гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 78).

Соединение синтезировали, используя способ, описанный в примере 4, начиная с кислоты латанопроста и 3-бромпропанола.

Пример 6. Синтез 2-(нитроокси)этилового эфира [1К.-[1а^),2в(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2-(3гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 77).

Соединение синтезировали, используя способ, описанный в примере 4, начиная с кислоты латанопроста и 2-бромэтанола.

Пример 7. Синтез 6-(нитроокси)гексилового эфира [1К.-[1а^),2в(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2(3-гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 79).

Соединение синтезировали, используя способ, описанный в примере 4, начиная с кислоты латанопроста и 6-бромгексанола.

Пример 8. Синтез 2-(нитроокси)-1-метилэтилового эфира [1Κ.-[1α(Ζ),2β(Κ*),3α,5α]]-7-[3,5дигидрокси-2-(3-гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 80).

Соединение синтезировали, используя способ, описанный в примере 4, начиная с кислоты латанопроста и 1-бром-2-пропанола.

Пример 9.

Синтез 2-(нитроокси)пропилового эфира [1К.-[1а^),2в(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2-(3гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 81).

Соединение синтезировали, используя способ, описанный в примере 4, начиная с кислоты латанопроста и 2-хлор-1-пропанола.

- 25 010595

Пример 10. Синтез 2-(нитроокси)-1-(нитрооксиметил)этилового эфира [1Κ.-[1α(Ζ),2β(Κ*),3α,5α]]-7[3,5-дигидрокси-2-(3-гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 82).

Соединение синтезировали, используя способ, описанный в примере 4, начиная с кислоты латанопроста и 1,3-дибром-2-пропанола.

Пример 11. Синтез [2-метокси-4-[2-пропеноилокси(2-нитрооксиэтил)]] фенилового эфира [1К.-[1а^),2в(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2-(3-гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 83).

Соединение синтезировали, используя способ, описанный в примере 2, начиная с кислоты латанопроста и 2-(нитроокси)этилового эфира феруловой кислоты.

Пример 12. Синтез 2-метокси-4-[2-пропеноилокси(3-нитрооксиметилфенил)]]фенилового эфира [1К.-[1а^),2в(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2-(3-гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 84).

Соединение синтезировали, используя способ, описанный в примере 2, начиная с кислоты латанопроста и 3-(нитрооксиметил)фенилового эфира феруловой кислоты.

Пример 13. Синтез 2-метокси-4-[2-пропеноилокси(4-нитрооксиметилбензил)]]фенилового эфира [1К.-[1а^),2в(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2-(3-гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 85).

Соединение синтезировали, используя способ, описанный в примере 2, начиная с кислоты латанопроста и 4-(нитрооксиметил)бензилового эфира феруловой кислоты.

Пример 14. Синтез (4-нитрооксиметил)фенилового эфира [1Κ.-[1α(Ζ),2β(Κ*),3α,5α]]-7-[3,5дигидрокси-2-(3-гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 6).

Соединение синтезировали, используя способ, описанный в примере 4, начиная с 4-(хлорметил)фенилового эфира кислоты латанопроста.

Пример 15. Синтез (3-нитрооксиметил)бензилового эфира [1Κ-[1α(Ζ),2β(Κ*),3α,5α]]-7-[3,5дигидрокси-2-(3-гидрокси-5-фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 8).

Соединение синтезировали, используя способ, описанный в примере 4, начиная с 4-(бромметил)бензилового эфира кислоты латанопроста.

Пример 16. Получение офтальмологической композиции с использованием 4-(нитроокси)бутилового эфира [1К.-[1а^),2а(К*),3а,5а]]-7-[3,5-дигидрокси-2-(3-гидрокси-5фенилпентил)циклопентил]-5-гептеновой кислоты (соединение 1)

Ингредиент	Количество (мг/мл)
Соединение 1	0,1
Твин 80	5
Хлорид бензалкония	0,2
Буфер	д.5.

Буфер:

ЫаС1 4,1 мг/мл

ЫаН₂РО₄ (безводный) 4,74 мг/мл №Н₂РО₄ (моногидрат) 4,6 мг/мл

Вода для инъекций с.|5.

Пример 17. Оценка опосредованной оксидом азота активности.

Образование циклического гуанозин-3',5'-монофосфата (еОМР) в клетках глаза вовлечено в регулирование потока водянистой влаги. Таким образом, повышение уровней еОМР приводит к пониженной выработке водянистой влаги и уменьшению внутриглазного давления.

Авторы измеряли влияние тестируемых лекарственных средств на образованием еОМР в хорошо разработанном клеточном анализе.

Использовали недифференцированные клетки феохромоцитомы (РС12). Клетки в монослое инкубировали в течение 45 мин в сбалансированном солевом растворе Хенка с добавлением 10 мМ Нсрсб. 5 мМ МдС1₂ и 0,05% аскорбиновой кислоты с конечным значением рН 7,4 и содержащем 100 мкМ ингибитора фосфодиэстеразы, изометилбутилксантина (1ВМХ), 30 мкМ ингибитора гуанилилциклазы УС-1 и тестируемые лекарственные средства в соответствующей концентрации. Реакцию останавливали удалением буфера для инкубации с последующим добавлением 50 мкл 100% ледяного этанола. Затем планшет сушили в потоке горячего воздуха и остаток растворяли, экстрагировали и анализировали, используя коммерчески доступный набор для ферментного иммуноанализа циклического еОМР.

Результаты представлены в табл. 1. Сопутствующее применение разных концентраций различных нитропроизводных латанопроста (1-50 мкМ) вызывало накопление еОМР зависимым от концентрации образом.

- 26 010595

Полученные эффекты не являются общими с исходным лекарственным средством латанопростом, свидетельствуя, что такие эффекты зависят от высвобождения экзогенного NО.

Таблица 1

Активность и эффективность латанопроста и соответствующих нитропроизводных в отношении накопления сСМР в клеткам феохромоцитомы крыс

Лекарственное средство	ЕС₅₀ (мкМ)	Ещах (¾ по сравнению с наполнителем)
Латанопрост	Не эффективен	Не эффективен
Соединение 1 (пример 1)	2,4	290
Соединение 4 (пример 3)	4,4	450
Соединение 11 (пример 2)	1,5	480

ЕС₅₀=эффективная концентрация, вызывающая половину максимального ответа. Е_тах=максимальный эффект.

Пример 18. Оценка эффективности действия нитропроизводного латанопроста на внутриглазное давление.

В данном исследовании использовали самцов кроликов ΝΖν с массой тела в пределах 3-5 кг. Коротко, способность нитропроизводного латанопроста (соединение 4, пример 3) понижать внутриглазное давление (1ОР) тестировали у животных, предварительно обработанных посредством инъекции внутрь камеры 0,25% инсталлирующего раствора карбомера, до тех пор пока не достигали стабильного увеличения внутриглазного давления. В данном конкретном исследовании тестируемые лекарственные средства вводили в один глаз по схеме дозирования 1 капля/глаз/сутки 5 дней в неделю, используя физиологический раствор, содержащий 0,005% контрольного или тестируемого соединений. 1ОР исследовали через 3 ч после применения лекарственного средства два-три раза в неделю всего в течение 4 недель. Указанную концентрацию выбрали потому, что она соответствует концентрации изопропилового эфира латанопроста, используемого в настоящее время в клинике для лечения повышения 1ОР, наблюдаемого у пациентов с глаукомой. Кроме того, при каждом посещении собирали примерно 200 мкл водянистой влаги, используя иглу 30 калибра, из обоих глаз при анестезии лидокаином для дальнейшей биохимической оценки содержания сСМР, сАМР и нитрита/нитрата.

Инсталляция 0,25% раствора карбомера в глаз приводила к сильному увеличению 1ОР до примерно 40 мм Нд, которое после этого оставалось стабильным. Однако введение соединения 4 (пример 3) по схеме дозировании, указанной в разделе способы, снижало внутриглазное давление у указанных животных примерно на 50% за 7 дней повторяющихся обработок и более чем на 65% к концу исследования (см. табл. 2). В отличие от этого ни кислота латанопроста (данные не показаны), ни ее изопропильное производное не вызывали никакого заметного изменения (см. табл. 2). Учитывая имеющиеся в литературе документальные подтверждения того, что латанопрост фактически не эффективен у кроликов, наблюдаемые эффекты, по-видимому, связаны с присутствием компонента оксида азота ^О) в нитропроизводном латанопроста, а не исходного соединения.

Биохимические измерения сСМР, сАМР и NОx во внутриглазной водянистой влаге дополнительно свидетельствуют о роли NО в снижении 1ОР у указанных животных. Действительно, как показано в табл. 3, количество сСМР и NОx увеличивалось после применения соединения 4 (пример 3) в ходе 4недельной обработки. Указанные эффекты оказались высоко специфичными, так как количество внутриглазного сАМР оставалось неизменным у исследованных животных. Изопропиловый эфир латанопроста значимо не влиял ни на уровни сСМР, сАМР, ни на уровни нитритов при введении в эквимолярных дозах по отношению к дозам ответствующего нитропроизводного (см. табл. 3).

Таблица 2

Реверсия вызванного карбомером увеличения 1ОР до (предварительная обработка) и после инсталляции глаза эквимолярными количествами изопропилового эфира латанопроста или соответствующего нитропроизводного

ЮР мм Нд	Предварительная обработка*	День 2	День 7	День 10	День 15	День 17	День 23	День 25
Изопропиловый эфир латанопрста	37+2	34±2	33±3	30±1	31±2	30±2	32±2	30+2
Соединение 4 (пример 3)	42±2	31±1	26±1	20±1	18±2	16+1	15±1	14±1

*Значения для предварительной обработки соответствовали исходному уровню 1ОР, вызванному внутрикамерной инсталляцией 0,25% раствора карбомера.

- 27 010595

Таблица 3

Влияние изопропилового эфира латанопроста и соответствующего нитропроизводного на содержание сСМР. сАМР и ΝΟχ у обработанных карбомером кроликов

ЮР мм Нд	Предваритель ная обработка*	I неделя	II неделя	III неделя	IV неделя
сСМР (фмоль/мг белка) Изопропиловый эфир латанопроста	87±6	88 + 6	98±6	99+6	100±6
Соединение 4 (пример 3)	88±5	102 + 5	125±5	140±5	160±5
сАМР (фмоль/мг белка) Изопропиловый эфир латанопроста	510±18	550±22	600±30	620+31	625±31
Соединение 4 (пример 3)	520+20	600+25	650+31	680+28	660±22
ΝΟχ (фмоль/мг белка) Изопропиловый эфир латанопроста	16±1	18±2	18±1	19±2	19+2
Соединение 4 (пример 3)	17±1	22±2	25±3	26±3	28±3

*Значения для предварительной обработки соответствовали исходному уровню ΙΟΡ. вызванному внутрикамерной инсталляцией 0.25% раствора карбомера

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Соединение общей формулы (I). или его фармацевтически приемлемая соль. или стереоизомер

Ь выбран из следующих групп:

X означает -Ο-. -8- или -ΝΗ-;

Υ означает двухвалентный радикал. имеющий следующее значение:

a) С₁-С₂₀алкилен с прямой или разветвленной цепью. необязательно замещенный одним или несколькими заместителями. выбранными из группы. состоящей из атомов галогена. гидроксигруппы. -ΟΝΟ₂ или Т. где Т означает -οС(Ο)(С₁-С₁₀алкил)-ΟNΟ₂ или -О(С₁-С₁₀алкил)-ΟNΟ₂;

циклоалкилен с 5-7 атомами углерода в цикле циклоалкилена. при этом цикл необязательно замещен боковыми цепями Т₁. где Т₁ означает С₁-С₁₀алкил с прямой или разветвленной цепью;

b)

- 28 010595 где Х1=-ОСО- или -СОО- и В² означает Н или СН₃;

Ζ означает -(СНЦ¹- или двухвалентный радикал, определенный выше в п.Ь); и¹ имеет значение, определенное выше, и и² является целым числом от 0 до 2;

е) “0Η'-^χ·-^ζ(οκν где Υ¹ означает -СН2-СН2-(СН2)п²- или -СН=СН-(СН2)_П ²-;

Ζ означает -(СНЦ¹- или двухвалентный радикал, определенный выше в п.Ь); и¹, и², В² и Χι имеют значения, определенные выше;

при условии, что когда Υ выбран из двухвалентных радикалов, указанных в пп.Ь)-е), группа -ΟΝΟ₂ связана с группой -(СН₂)п-;

ё) “Г

Г г

--(Сф-СН-Хг)—СНу-СИ-где Х₂ означает -О- или -8-;

и³ является целым числом от 1 до 6 и В² имеет значение, определенное выше.
2. Соединение общей формулы (I) по п.1 или его фармацевтически приемлемая соль или стереоизомер, в котором В, Ь, X имеют значения, определенные в п.1, и Υ означает двухвалентный радикал, имеющий следующее значение:

a) С1-С₂оалкилен с прямой или разветвленной цепью, необязательно замещенный одним или несколькими заместителями, выбранными из группы, состоящей из атомов галогена, гидроксигруппы, -ΟΝΟ₂ или Т, где Т означает -ОС(0)(С1.С1оалкил)-ОЬЮ₂ или -О(С|-С|_Налкил)-ОХО₂:

циклоалкилен с 5-7 атомами углерода в цикле циклоалкилена, при этом цикл необязательно замещен боковыми цепями Т_ь где Τι означает С1-Сюалкил с прямой или разветвленной цепью;

b) где и¹ имеет значение, определенное выше, и и² является целым числом от 0 до 2;

Х1=-ОСО- или -СОО- и В² означает Н или СН₃;

е) “0Η'-^χ·-^ζгде и¹, и², В² и Χι имеют значения, определенные выше;

Υ¹ означает -СН₂-СН₂- или -СН=СН-(СН₂)_П ²-;

при условии, что когда Υ выбран из двухвалентных радикалов, указанных в пп.Ь)-е), группа -ΟΝΟ₂ связана с группой -(СТС),,¹-:

ё) —(СН-СЯ.-^Ц-СН-СН,— £ Ь

Г —(О^-СН-Х^-гСНг-СН— где Х₂ означает -О- или -8-;

и³ является целым числом от 1 до 6 и В² имеет значение, определенное выше;

-29010595
3. Соединение общей формулы (I) по п.1 или 2, в котором Ь выбран из следующих групп:

—(С^-СНз —о ί
4. Соединение общей формулы (I) по любому из пи. 1-3, в котором остаток К выбран из группы, состоящей из травопроста, унопростона и клопростенола.
5. Соединение общей формулы (I) по п.1 или 2, в котором остаток К означает латано прост.
6. Соединение общей формулы (I) по любому из пп.1-5, в котором X означает -О- или
7. Соединение общей формулы (I) по любому из пп.1-6, в котором Υ означает двухвалентный радикал, имеющий следующее значение:

a) С2-С₆алкилен с прямой или разветвленной цепью, необязательно замещенный -ΟΝΟ₂ или Т, где Т имеет значение, определенное в п.1;

b) где η является целым числом от 0 до 5 и п¹ является целым числом от 1 до 5; ё) г г —(СН^-СН-Ха)—СНг-СН— где Х₂ означает -О- или -8-; п³ равно 1;

К² имеет значение, определенное в п.1.
8. Соединение общей формулы (I) по любому из пп.1-6, в котором Υ означает двухвалентный радикал, имеющий следующее значение:

a) С₂-С₆алкилен с прямой или разветвленной цепью, необязательно замещенный -ΟΝΟ₂ или Т, где Т имеет значение, определенное в п.1;

b) где η равно Они¹ равно 1; ё) —(^Η-ΟΗ,-χ,Η-^Η-σΗ— где Х₂ означает -О- или -8-;

п³ равно 1;

К² означает водород.
9. Соединение формулы (I) по любому из пп.1-6, в котором Υ означает двухвалентный радикал, имеющий следующее значение:

Ф где Х1=-ОСО- или -СОО- и К² означает Н или СН₃;

Ζ означает -(СН)п¹- или двухвалентный радикал, определенный в п.1 (значение Ь), где η является целым числом от 0 до 5; п¹ является целым числом от 1 до 5 и п² является целым числом от 0 до 2;

е)

-30010595

Ό“ ^ζгде Υ¹ означает -СН2-СН2-(СН2)П²- или -СН=СН-(СН2)_П ²-;

Ζ означает -(СН)_п ¹-или двухвалентный радикал, определенный выше в п.Ь);

и¹, и², В² и Χι имеют значения, определенные выше;

при условии, что когда Υ выбран из двухвалентных радикалов, указанных в пп.Ь)-е), группа -ΟΝΟ₂ связана с группой -(СНг)п¹.
10. Соединение по π. 1, выбранное из группы, состоящей из (4) но (11)

-31 010595
11. Способ получения соединения общей формулы (I) по п.1, включающий: ί) взаимодействие соединения формулы (III)

- 32 010595 где Ь имеет значение, определенное в п.1;

Ρ означает Н или защитную группу гидроксила;

означает -ОН, С1 или -ОС(О)К1, где К1 означает линейный или разветвленный С1 -С₅алкил;

с соединением формулы (IV) Ζ-Υ-р, где Υ имеет значение, определенное в п.1, Ζ означает НХ или Ζι, при этом X имеет значение, определенное в п.1, и Ζ₁ выбран из группы, состоящей из хлора, брома, йода, мезила, тозила;

О означает -ΟNΟ₂ или Ζ₁;

ίί) когда О означает Ζι, превращение соединения, полученного на стадии 1), в нитропроизводное в результате взаимодействия с источником нитрата и ϊϊΐ) необязательно удаление защиты соединений, полученных на стадии 1) или ίί).
12. Соединение общей формулы (I) по пп.1-10, предназначенное для применения в качестве лекарственного средства.
13. Применение соединения по пп.1-10 для получения лекарственного средства для лечения глаукомы и гипертензии глаза.
14. Фармацевтическая композиция, включающая фармацевтически приемлемый носитель и фармацевтически эффективное количество соединения общей формулы (I), и/или его соли, или стереоизомера по пп.1-10.
15. Фармацевтическая композиция по п.14 в форме, пригодной для местного введения.
16. Фармацевтическая композиция по пп.14, 15, предназначенная для лечения глаукомы и гипертензии глаза.
17. Фармацевтическая композиция по пп.15, 16, содержащая соединение общей формулы (I), форма введения которого представляет собой раствор, суспензию или эмульсию в офтальмологически приемлемом наполнителе.
18. Способ лечения глаукомы или гипертензии глаза, заключающийся в том, что осуществляют контакт глаза с эффективно снижающим внутриглазное давление количеством фармацевтической композиции по пп.14-17, чтобы уменьшить глазное давление и поддерживать указанное давление на пониженном уровне.
19. Фармацевтическая композиция, содержащая смесь соединения формулы (I) по п.1 и (ί) β-блокатора, или (ίί) ингибитора карбоангидразы, или (ιιι) адренергического агониста или его нитрооксипроизводного.
20. Фармацевтическая композиция, содержащая смесь соединения формулы (I) по п.1 и тимола или его нитрооксипроизводного.