MXPA06007345A

MXPA06007345A - Aposito y metodo para controlar sangrado profuso, severo.

Info

Publication number: MXPA06007345A
Application number: MXPA06007345A
Authority: MX
Inventors: Kenton W Gregory; William P Wiesmann; Todd D Campbell; Simon J Mccarthy
Original assignee: Hemcon Inc
Priority date: 2003-12-23
Filing date: 2004-12-23
Publication date: 2007-03-23
Also published as: KR101148248B1; JP4854084B2; EP1704225A4; EP1704225A2; NO20062551L; IL175964A0; US7371403B2; US8668924B2; CA2548191A1; ZA200605131B; US20110034410A1; US20040243043A1; WO2005062880A8; WO2005062880A2; KR20070009982A; BRPI0417956A; JP2007526026A; EP1704225B1; WO2005062880A3; US20080213344A1

Abstract

La presente invencion esta dirigida a los apositos para heridas de control de hemorragias avanzados, y los metodos para utilizar y producir los mismos. El aposito para herida del sujeto esta construido a partir de un material de no mamifero para el control de sangrado severo. El aposito para herida para controlar el sangrado severo esta formado por un biomaterial que comprende quitosan, un polimero hidrofilico, un polimero poliacrilico o una combinacion de los mismos. El tipo de sangrado severo que amenaza la vida, contemplado por esta invencion es tipicamente del tipo no capaz de ser detenido cuando un aposito para herida convencional de gasa se aplica con la presion convencional a la herida de un sujeto. El aposito para herida es capaz de detener sustancialmente el flujo del sangrado severo que amenaza la vida adhiriendose al sitio de la herida, para cerrar la herida, acelerar la formacion del coagulo de sangre en el sitio de la herida, para reforzar la formacion del coagulo de sangre en el sitio de la herida y evitar el sangrado del sitio de la herida, y para sustancialmente evitar el flujo de sangre fuera del sitio de la herida.

Description

APOSITO Y MÉTODO PARA CONTROLAR SANGRADO PROFUSO, SEVERO CAMPO DE LA INVENCIÓN Esta invención está dirigida a apositos para control de hemorragia, y a métodos para utilizar y producir dichos apositos. El presente aposito está construido a partir de un material de origen no mamífero para el control de sangrado severo. El aposito se forma a partir de un bio-material que comprende quitosana y/u otros polímeros hidrofílicos para controlar el sangrado severo. El material puede comprender de manera alternativa ácido poli-acrílico o una combinación de ácido poli-acrílico con otros polímeros. El tipo de sangrado profuso, severo contemplado por esta invención es del tipo que no puede ser detenido cuando se aplica un aposito de gasa convencional con presión convencional a la herida. El aposito puede detener sustancialmente el flujo del sangrado profuso proveniente de una herida adhiriéndose al sitio de la herida, sellando la herida, acelerando la formación de coágulo sanguíneo en el sitio de la herida, reforzando la formación de coágulo en el sitio de la herida, previniendo el sangrado desde el sitio de la herida, y evitando sustancialmente el flujo de sangre fuera del sitio de la herida.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN Un vendaje avanzado para control de hemorragia y métodos para su aplicación puede aumentar en forma sustancial los métodos hemostáticos disponibles. Hasta la fecha, la aplicación de presión continua con vendajes de gasa sigue siendo la técnica de intervención primaria preferida utilizada para detener el flujo de sangre, en especial el flujo proveniente de heridas con sangrado profuso. Sin embargo, este procedimiento no detiene en forma efectiva ni segura el flujo severo de sangre. Este es, y continúa siendo, un problema de supervivencia importante en el caso de sangrado profuso severo de una herida. Asimismo, está ampliamente aceptado que el sangrado severo es la causa principal de muerte por heridas en el campo de batalla, el cual justifica aproximadamente el 50% de dichas muertes. Se estima que un tercio de estos fallecimientos se pueden prevenir con métodos y dispositivos mejorados para control de hemorragia. Dicho control de hemorragia mejorado también puede demostrar ser útil en escenarios no militares, por ejemplo, hospitales y clínicas veterinarias, en las cuales la hemorragia es la segunda causa principal de muerte después del trauma. Los vendajes hemostáticos actualmente disponibles tales como apositos de colágena o apositos de trombina y fibrina secos están restringidos a uso en aplicaciones quirúrgicas, y no son lo suficientemente resistentes a la disolución en flujo sanguíneo elevado. Estos tampoco poseen suficientes propiedades adhesivas para que sirvan a cualquier propósito práctico en la detención de flujo sanguíneo severo. Estos vendajes hemostáticos quirúrgicos actualmente disponibles también son delicados y por lo tanto propensos a fallar en caso que éstos se dañen mediante plegamiento o cuando se aplica presión. Estos también son susceptibles a disolución en el sangrado hemorrágico. Dicha disolución y colapso de estos vendajes pueden ser catastróficos, debido a que esto puede producir una pérdida de adhesión a la herida y permitir que el sangrado continúe sin detenerse. Existe técnica antecedente que se refiere a quitosana y apositos de quitosana. Por ejemplo, la patente E.U.A. No. 4,394,373 expedida para Malette et al . utiliza quitosana en forma líquida o en polvo para aglutinar la sangre en cantidades de µg/ml. Además, la patente E.U.A. No. 4,452,785 expedida para Malette et al . , está dirigida a un método para obstruir terapéuticamente los vasos sanguíneos inyectando directamente quitosana dentro de los vasos sanguíneos. La patente E.U.A. No. 4,532,134 expedida para Malette et al . , también se refiere a hemostasis, inhibición de fibroplasias, y promoción de regeneración de tejido poniendo en contacto el tejido lesionado con una solución de quitosana o quitosana soluble en agua. La quitosana forma un coágulo, el cual evita el sangrado. La patente E.U.A. No. 5,858,350 expedida para Vournakis et al . se refiere a un procedimiento para elaborar quitina y derivados de quitina de alta pureza, de grado biomédico obtenida a partir de diatomáceas (denominada libre de proteína aunque esto no se demuestra mediante análisis en la patente) . La ventaja propuesta de los llamados materiales de quitina/quitosana libres de proteína es que estos deben ser significativamente menos antigénicos que los materiales de quitina actuales obtenidos a partir de camarón y cangrejo. Mi, F. L., et al., "Fabrication and Characterization of a Sponge-Like Assymetric Chitosan Membrane as a Wound Dressing", Biomaterials, 22 (2) : 165-173 (2001) describen la fabricación y función de cicatrización de heridas de una membrana de quitosana asimétrica que se produce utilizando un método de inversión de fases. Chan, M. W., et al., "Comparison of Poly-N-acetyl Glucosamine (P-GlcNAc) with Absorbable Collagen (Actifoam) , and Fibrin Sealant (Bolheal) for Achieving Hemostasis in a Swine Model of Splenic Hemorrhage", J. Trauma , Injury, Infection, and Critical Care, 48 (3) : 454-458 (2000) describen la evaluación de parches hemostáticos de quitina/quitosana bajo el flujo sanguíneo moderado y exudación típicos de la prueba de denudación capsular de bazo porcino. Colé, D. J., et al., "A Pilot Study Evaluating the Efficacy of a Fully Acetylated poly-N-acetyl glucosamine Membrane Formulation as a Topical Hemostatic Agent", Surgery 126(3): 510:517 (1999) describen la evaluación de agente hemostático en la prueba de denudación capsular de bazo porcino. Sandford, Steinnes A., "Biomedical Applications of High Purity Chitosan" en WATER SOLUBLE POLYMERS, SYNTHESIS, SOLUTION PROPERTIES AND APPLICATIONS, ACS Series 467, (W. S. Shalaby et al. Eds. ACS, Washington, DC 1991, Ch 28,431-445). Este es un documento de revisión general que describe el uso de quitosana con referencia a una esponja de quitosana. Mallette, W.G., et al., "Chitosan: A New Hemostat", Annals of Thoracic Surgery 36(l):55-58, (1983). Véase comentarios concernientes a las patentes de Malette anteriores . Olsen, R., et al., en CHITIN AND CHITOSAN, SOURCES, CHEMISTRY, BIOCHEMISTRY, PHYSICAL PROPERTIES AND APPLICATIONS, Elsevier Applied Science, London and New York, 1989,813-828. Este documento se refiere a la eficiencia de aglutinación de quitosana. La patente japonesa 60142927 cubre una liga médica de quitosana con adhesividad mejorada. La patente japonesa 63090507A2 describe una esponja de quitosana insoluble en agua e insoluble en ácido acético al 2% para aplicación hemostática externa o para protección de una herida. La patente E.U.A. No. 5,700,476 describe esponjas no homogéneas estructuralmente basadas en colágena para apositos y/o para aplicaciones de implante que se forma mediante técnicas de liofilización empleando por lo menos un agente farmacológico y por lo menos una sub-estructura. La patente E.U.A. No. 2,610,625 se refiere a estructuras de esponja sometidas a secado por congelamiento que son altamente efectivas para detener el flujo de sangre u otros fluidos y las cuales pueden ser absorbidas en el cuerpo después de un tiempo. Esta patente describe la preparación de esponja a base de colágena. La patente E.U.A. No. 5,836,970 comprende un aposito formado a partir de una combinación o mezcla de quitosana y alginato. Por lo tanto, existe la necesidad respecto a vendajes hemostáticos mejorados que puedan detener hemorragias severas y que no fallen después que se doblan o se cargan con presión.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN La invención está dirigida a un aposito para primeros auxilios/intervención primaria para el control de sangrado profuso, severo. Actualmente no existen apositos de bajo costo que sean apropiados para el control de sangrado profuso, severo. Existe la necesidad respecto a este tipo de apositos especialmente en el campo de batalla, en el cual típicamente el 50% de las muertes está asociado con una incapacidad para controlar inmediatamente el sangrado severo. El aposito de la invención puede detener sustancialmente el flujo de hemorragia profusa de una herida mediante adhesión al sitio de la herida, sellando la herida, acelerando la formación de coágulo sanguíneo en el sitio de la herida, reforzando la formación de coágulo en el sitio de la herida, evitando el sangrado fuera del sitio de la herida, y evitando sustancialmente el flujo de sangre fuera del sitio de la herida. En una modalidad, se provee una esponja comprimida para el control de hemorragias que comprende un polímero hidrofílico, en la cual la esponja comprimida tiene una densidad de esponja comprimida de 0.6 a 0.15 g/cm3 aproximadamente. El polímero hidrofílico puede ser un alginato, quitosana, una poliamina hidrofílica, un derivado de quitosana, polilisina, polietilenimina, xantano, carragenina, polímero de amonio cuaternario, sulfato de condroitina, un almidón, un polímero celulósico modificado, un dextrano, hialuronano o combinaciones de los mismos. El almidón puede ser de amilasa, amilopectina, y una combinación de amilopectina y amilasa. De preferencia, el polímero hidrofílico es quitosana. De preferencia, la quitosana tiene un peso molecular promedio en peso de por lo menos 100 kDa aproximadamente. De manera más preferida, la quitosana tiene un peso molecular promedio en peso de por lo menos 150 kDa aproximadamente. Más preferido, la quitosana tiene un peso molecular promedio en peso de por lo menos 300 kDa aproximadamente. De preferencia, la quitosana tiene una viscosidad a 25°C en una solución al 1% de ácido acético (AA) con husillo LVl a 30 rpm que es de aproximadamente 100 centipoise hasta aproximadamente 2000 centipoise. Más preferido, la quitosana tiene una viscosidad a 25°C en una solución al 1% de ácido acético (AA) con husillo LVl a 30 rpm que es de aproximadamente 125 centipoise hasta aproximadamente 1000 centipoise. Más preferido aún, la quitosana tiene una viscosidad a 25°C en una solución al 1% de ácido acético (AA) con husillo LVl a 30 rpm que es de aproximadamente 150 centipoise hasta aproximadamente 500 centipoise. La esponja comprimida también puede comprender un ingrediente activo. El ingrediente activo puede incluir, pero no se limita a, calcio, trombina, factor Vlla, factor XIII, tromboxano A2, prostaglandina-2a, factor de crecimiento epidérmico, factor de crecimiento derivado de plaquetas, factor de Von Willebrand, factor de necrosis de tumor (TNF) , TNF-alfa, factor de crecimiento transformante (TGF) , TGF-alfa, TGF-beta, factor de crecimiento tipo insulina, factor de crecimiento de fibroblasto, factor de crecimiento de queratinocito, factor de crecimiento de nervio, penicilina, ampicilina, meticilina, amoxicilina, clavamox, ácido clavulánico, amoxicilina, aztreonam, imipenem, estreptomicina, kanamicina, tobramicina, gentamicina, vancomicina, clindamicina, eritromicina, polimixina, bacitracina, anfotericina, nistatina, rifampicina, tetraciclina, doxiciclina, cloramfenicol y combinaciones de los mismos. En otra modalidad, se provee una esponja de material mixto comprimida para control de hemorragia que comprende una esponja de polímero hidrofílico y una matriz de polímero humectable o matrices de polímero humectable dentro de la esponja y/o en la superficie de la esponja. El polímero hidrofílico puede incluir alginato, una poliamina hidrofílica, un derivado de quitosana, polilisina, polietilenimina, xantano, carragenina, polímero de amonio cuaternario, sulfato de condroitina, un almidón, un material celulósico modificado, un dextrano, hialuronano o combinaciones de los mismos. El almidón puede ser amilasa, amilopectina y una combinación tanto de amilopectina como de amilasa. El polímero humectable puede incluir esteras no tejidas, esteras tejidas, malla de polímero moldeada y esponjas de baja densidad. El polímero humectable puede incluir, pero no se limita a, una quitina, un alginato, una quitosana neutralizada, una quitosana re-acetilada, un ácido poli (glicólico) , un ácido poli (láctico) , una poli(e-caprolactona) , un ácido poli (ß-hidroxibutírico) , un ácido poli (ß-hidroxivalérico) , una polidioxanona, un óxido de poli (etileno) , un ácido poli (málico) , un ácido poli (tartrónico) , un polifosfaceno, un polietileno, un polipropileno, un polímero de metaloceno, un poliuretano, un polímero de cloruro de polivinilo, un poliéster, una poliamida y combinaciones de los mismos. De preferencia, el polímero hidrofílico es quitosana. De preferencia, la quitosana tiene un peso molecular promedio en peso de por lo menos 100 kDa aproximadamente. De manera más preferida, la quitosana tiene un peso molecular promedio en peso de por lo menos 150 kDa aproximadamente. Más preferido, la quitosana tiene un peso molecular promedio en peso de por lo menos 300 kDa aproximadamente. De preferencia, la quitosana tiene una viscosidad a 25°C en una solución al 1% de ácido acético (AA) con husillo LVl a 30 rpm que es de aproximadamente 100 centipoise hasta aproximadamente 2000 centipoise. Más preferido, la quitosana tiene una viscosidad a 25°C en una solución al 1% de ácido acético (A?) con husillo LVl a 30 rpm que es de aproximadamente 125 centipoise hasta aproximadamente 1000 centipoise. Más preferido aún, la quitosana tiene una viscosidad a 25°C en una solución al 1% de ácido acético (AA) que es de .aproximadamente 150 centipoise hasta aproximadamente 500 centipoise. La esponja puede comprender una fibra textil impregnada con un polímero hidrofílico. La fibra textil se impregna con un polímero hidrofílico. De preferencia, el polímero hidrofílico es quitosana. El polímero hidrofílico también puede incluir, pero no se limita a, un alginato, una poliamina hidrofílica, un derivado de quitosana, poli-lisina, polietilenimina, xantano, carragenina, polímero de amonio cuaternario, sulfato de condroitina, un almidón, un polímero celulósico modificado, un dextrano, hialuronano o combinaciones de los mismos. El almidón puede incluir amilasa, amilopectina y una combinación de ambas de amilopectina y amilasa. La malla humectable puede ser una malla no tejida. De preferencia, la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 15 mieras hasta aproximadamente 300 mieras. Más preferido, la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 30 mieras hasta aproximadamente 250 mieras. Más preferido, la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 100 mieras hasta aproximadamente 225 mieras. Más preferido, la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 125 mieras hasta aproximadamente 200 mieras. De manera más preferida, la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 150 mieras hasta aproximadamente 175 mieras. De preferencia, la esponja tiene un área de superficie disponible para contacto con sangre por superficie de base de la esponja de aproximadamente 100 cm2 por cada cm2 hasta aproximadamente 1000 cm2 por cada cm2. Más preferido, la esponja de material mixto comprimida tiene un área de superficie disponible para contacto con sangre por superficie de base de la esponja de aproximadamente 200 cm2 por cada cm2 hasta aproximadamente 800 cm2 por cada cm2. De manera más preferida, la esponja tiene un área de superficie disponible para contacto con sangre por superficie de base de la esponja de aproximadamente 300 cm2 por cada cm2 hasta aproximadamente 500 cm2 por cada cm2. De preferencia, la masa disponible de bio-material de quitosana por área de superficie de la herida es de • aproximadamente 0.02 g/cm2 hasta aproximadamente 1.0 g/cm2. Más preferido, la masa disponible de bio-material de quitosana por área de superficie de la herida es de aproximadamente 0.04 g/cm2 hasta aproximadamente 0.5 g/cm2. De manera más preferida, la masa disponible de bio-material de quitosana por área de superficie de la herida es de aproximadamente 0.06 g/cm2 hasta aproximadamente 0.1 g/cm2. La esponja de material mixto comprimida también puede comprender una capa de soporte de respaldo. La capa de soporte de respaldo puede ser una capa de material polimérico. El material polimérico puede ser un material sintético no biodegradable o un polímero biodegradable normalmente presente en la Naturaleza. Los materiales biodegradables sintéticos pueden incluir ácido poli (glicólico) , ácido poli (láctico) , poli (e-caprolactona) , ácido poli (ß-hidroxibutírico) , ácido poli(ß-hidroxivalérico) , polidioxanona, poli (óxido de etileno), ácido poli (málico) , ácido poli (tartrónico) , polifosfaceno, copolímeros de polietileno, copolímeros de polipropileno, los copolímeros de los monómeros utilizados para sintetizar dichos polímeros o combinaciones de los mismos. Los polímeros normalmente presentes en la Naturaleza pueden incluir quitina, algina, un almidón, dextrano, colágena, albúmina y una combinación de los mismos. Los polímeros sintéticos pueden incluir polietileno, polipropileno, un polímero de metaloceno, un poliuretano, un polímero de cloruro de polivinilo, un poliéster, una poliamida o combinaciones de los mismos. De preferencia, la esponja de material mixto comprimida tiene un grado de adhesión al sitio de la herida de aproximadamente 40 kPa hasta aproximadamente 500 kPa. Más preferido, la esponja de material mixto comprimida tiene un grado de adhesión al sitio de la herida de aproximadamente 60 kPa hasta aproximadamente 250 kPa. De manera más preferida, la esponja de material mixto comprimida tiene un grado de adhesión al sitio de la herida de aproximadamente 100 kPa hasta aproximadamente 200 kPa. La esponja de material mixto comprimida puede formar un material adhesivo en combinación con la sangre que fluye desde dicha herida en una interfaz aposito-sangre. De preferencia, el material adhesivo es un material adhesivo a base de quitosana. De preferencia, el material adhesivo a base de quitosana tiene un pH no mayor de 6.3 aproximadamente cuando se sella la herida. Más preferido, el material adhesivo a base de quitosana de preferencia tiene un pH de no más de 4.5 aproximadamente cuando se sella la herida. De manera más preferida, el material adhesivo a base de quitosana tiene un pH no mayor de 4.0 aproximadamente cuando se sella la herida. El material adhesivo puede comprender un ácido que se selecciona a partir del grupo que consiste de ácido acético, ácido fórmico, ácido láctico, ácido ascórbico, ácido clorhídrico y ácido cítrico. De preferencia, la esponja de material mixto comprimida tiene un espesor que es no menor de 3.0 mm aproximadamente y no mayor de 8 mm aproximadamente. Más preferido, la esponja de material mixto comprimida tiene un espesor que es no menor de 3.5 mm aproximadamente y no mayor de 7 mm aproximadamente . De manera más preferida, la esponja de material mixto comprimida tiene un espesor que es no menor de 4.0 mm aproximadamente y no mayor de 6 mm aproximadamente . De preferencia, la esponja de material mixto comprimida tiene un esfuerzo de tracción final de aproximadamente 0.1 MPa hasta aproximadamente 10 MPa. Más preferido, la esponja de material mixto comprimida tiene un esfuerzo de tracción final de aproximadamente 0.15 MPa hasta aproximadamente 0.8 MPa. De manera más preferida, la esponja de material mixto comprimida tiene un esfuerzo de tracción final de aproximadamente 0.25 MPa hasta aproximadamente 0.5 MPa. De preferencia, la esponja de material mixto comprimida tiene un estiramiento final de aproximadamente 5%. Más preferido, la esponja de material mixto comprimida tiene un estiramiento final de aproximadamente 10%. De manera más preferida, la esponja de material mixto comprimida tiene un estiramiento final de aproximadamente En otra modalidad, se provee un procedimiento para preparar una esponja comprimida para control de hemorragia que comprende (a) preparar mediante congelamiento/liofilización una esponja de baja densidad; y (b) comprimir la esponja de baja densidad a una velocidad preferida de aproximadamente 10 mm por minuto y a una temperatura controlada preferida de 80°C con lo cual se obtiene una esponja comprimida con una densidad de aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 0.2 g/cm3. En otra modalidad se provee un procedimiento para preparar una esponja comprimida para control de hemorragia que comprende (a) preparar una esponja de baja densidad utilizando métodos diferentes a la preparación mediante congelamiento/liofilización de una esponja de baja densidad; y (b) comprimir la esponja de baja densidad subsiguiente a una velocidad de aproximadamente 10 mm por minuto y a una temperatura controlada preferida de aproximadamente 80°C con lo cual se obtiene una esponja comprimida con una densidad de aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 0.2 g/cm3. De preferencia, la esponja de baja densidad tiene una densidad de aproximadamente 0.01 g/cm3 hasta aproximadamente 0.035 g/cm3. De preferencia, la esponja comprimida tiene una densidad de aproximadamente 0.1 g/cm3 hasta aproximadamente 0.15 g/cm3.

En otra modalidad, se provee un procedimiento para preparar una esponja de material mixto comprimida para control de hemorragia que comprende a) des-gasificar la solución de bio-material de quitosana calentando la solución de bio-material de quitosana y aplicando un vacío a la misma; b) congelar la solución de bio-material de quitosana; c) eliminar el agua del interior del bio-material de quitosana congelado sin dañar la integridad estructural del bio-material de quitosana congelado de manera tal que el agua en el bio-material de quitosana pase desde una fase sólida hasta una fase gaseosa; d) comprimir el bio-material de quitosana a una velocidad preferida de aproximadamente 10 mm por minuto con lo cual se obtiene una esponja comprimida con una densidad de aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 0.2 g/cm3; y e) hornear la esponja de quitosana comprimida a 80°C durante 30 minutos. De preferencia, la temperatura se reduce gradualmente a lo largo de un intervalo de tiempo predeterminado durante el congelamiento del bio-material de quitosana del paso (b) . De preferencia, la temperatura del paso (b) es una temperatura de congelamiento final de no más de -25°C aproximadamente. Más preferido, el procedimiento del paso (b) implica una temperatura de congelamiento final de no más de -35°C aproximadamente. De manera más preferida, la temperatura del paso (b) es una temperatura de congelamiento final de no más de -45 °C aproximadamente. La remoción de agua se puede efectuar mediante liofilización del bio-material de quitosana congelado. El procedimiento también puede comprender un paso de adición de argón, nitrógeno y helio de regreso a la solución de quitosana des-gasificada antes del congelamiento. La esponja comprimida se puede esterilizar. De preferencia, la esponja comprimida se esteriliza mediante irradiación gamma. En otra modalidad, se provee un método para evitar sangrado severo en un individuo que comprende administrar una esponja comprimida o una esponja de material mixto comprimida. De preferencia, el individuo es un mamífero. Más preferido, el mamífero es humano. De preferencia, el individuo padece de sangrado severo de modo tal que dé como resultado la pérdida de 30-40% aproximadamente del volumen de sangre total dentro de 20 a 30 minutos si el sangrado se deja sin control. De preferencia, la esponja comprimida o esponja de material mixto comprimida se aplica con una presión de 60 a 80 kPa aproximadamente directamente sobre la lesión sangrante y se mantiene en el sitio durante 3 a 5 minutos antes de liberar, empacar y vendar. En otra modalidad, se provee un estuche de vendaje para tratar sangrado severo que comprende una esponja comprimida o una esponja comprimida de material mixto, rollos de gasa para empacar y una venda Ace para vendar una herida. En otra modalidad, se provee un procedimiento para el acoplamiento y formación de malla (meshing) mecánicos de las esponjas comprimidas o comprimidas de material mixto que comprende presionar los lados de la esponja que entran en contacto con el tejido contra una superficie macrotexturizada. La superficie macrotexturizada puede incluir superficies preparadas mediante grabado químico, superficies preparadas mediante ablación de superficie por haz iónico, superficies preparadas mediante corte mecánico y superficies preparadas mediante ablación con láser. En otra modalidad, se provee un procedimiento para mejorar la tracción mecánica de las esponjas comprimidas o de material mixto comprimidas que comprende presionar los lados de la esponja que entran en contacto con el tejido contra una superficie macrotexturizada. De preferencia, la superficie macrotexturizada se selecciona a partir del grupo que consiste de superficies preparadas mediante grabado químico, y superficies preparadas mediante técnicas de voladura con partículas . En otra modalidad, se provee un procedimiento para limitar o detener la formación de costra gruesa sobre la superficie de las esponjas de material mixto o de material mixto comprimidas que comprende cubrir la superficie de la esponja con una película polimérica, una placa de polímero, una placa de plástico elevada o una película de membrana respirable, impermeable a humedad. En otra modalidad, una esponja de baja densidad, en el cual la esponja se forma comprimiendo una esponja con una densidad inicial de aproximadamente menos de 0.05 g/cm3 hasta que la esponja llegue a una densidad de aproximadamente menos de 0.08 g/cm3. La esponja se puede formar mediante un procedimiento diferente al de congelamiento o liofilización. De preferencia, la esponja se forma utilizando un método que se selecciona a partir del grupo que consiste de un procedimiento de inversión de fase, esponjas que se preparan mediante unión covalente de componentes activos a matrices preformadas, y técnicas de formación de espuma. En otra modalidad, la esponja comprimida y la esponja de material mixto comprimida también puede comprender por lo menos un polímero hidrofílico adicional. El polímero hidrofílico adicional puede incluir, pero no se limita a, alginato, quitosana, una poliamina hidrofílica, un derivado de quitosana, poli-lisina, polietilen-imina, xantano, carragenina, polímero de amonio cuaternario, sulfato de condroitina, un almidón, un polímero celulósico modificado, un dextrano, hialuronano o combinaciones de los mismos. El almidón puede incluir, pero no se limita a, amilasa, amilopectina y una combinación de amilopectina y amilasa. De preferencia, el polímero hidrofílico es quitosana. En otra modalidad se provee una esponja comprimida para control de hemorragia que comprende un polímero hidrofílico, en la cual la esponja comprimida tiene una densidad de esponja comprimida de aproximadamente 0.6 a 0.15 g/cm3 el polímero hidrofóbico puede ser un ácido poliacrílico. De preferencia, la esponja comprimida también puede comprender un ingrediente activo. El ingrediente activo puede incluir, pero no se limita a, calcio, trombina, factor Vlla, factor XIII, tromboxano A2, prostaglandina-2a, factor de crecimiento epidérmico, factor de crecimiento derivado de plaquetas, factor de Von Willebrand, factor de necrosis de tumor (TNF) , TNF-alfa, factor de crecimiento transformante (TGF) , TGF-alfa, TGF-beta, factor de crecimiento tipo insulina, factor de crecimiento de fibroblasto, factor de crecimiento de queratinocito, factor de crecimiento de nervio, penicilina, ampicilina, -meticilina, amoxicilina, clavamox, ácido clavulánico, amoxicilina, aztreonam, imipenem, estreptomicina, kanamicina, tobramicina, gentamicina, vancomicina, clindamicina, eritromicina, polimixina, bacitracina, anfotericina, nistatina, rifampicina, tetraciclina, doxiciclina, cloramfenicol o combinaciones de los mismos. En otra modalidad, se provee una esponja de material mixto comprimida para control de hemorragia que comprende una esponja de polímero hidrofílico y una matriz polimérica humectable o matrices poliméricas humectables dentro de la esponja y/o en la superficie de la esponja; en la cual el polímero hidrofóbico es ácido poliacrílico. Las matrices poliméricas humectables pueden incluir esteras no tejidas, esteras tejidas, malla de polímero moldeada y esponjas de baja densidad. La matriz de polímero humectable puede incluir una quitina, un alginato, una quitosana neutralizada, una quitosana re-acetilada, un ácido poli (glicólico) , un ácido poli (láctico) , una poli(e-caprolactona) , un ácido poli (ß-hidroxibutírico) , un ácido poli (ß-hidroxivalérico) , una polidioxanona, un poli (óxido de etileno), un ácido poli (málico) , un ácido poli (tartrónico) , un polifosfaceno, un polietileno, un polipropileno, un polímero de metaloceno, un poliuretano, un polímero de cloruro de polivinilo, un poliéster, una poliamida o combinaciones de los mismos. La esponja puede comprender una fibra textil impregnada con un polímero hidrofílico. De preferencia, la fibra textil se impregna con un polímero hidrofílico, en el cual el polímero hidrofóbico es ácido poliacrílico. De preferencia, la matriz de polímero humectable es una malla no tejida. De preferencia, la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 15 mieras hasta aproximadamente 300 mieras. Más preferido, la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 30 mieras hasta aproximadamente 250 mieras. Más preferido, la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 100 mieras hasta aproximadamente 225 mieras. Más preferido, la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 125 mieras hasta aproximadamente 200 mieras. De manera más preferida, la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 150 mieras hasta aproximadamente 175 mieras. De preferencia, la esponja tiene un área de superficie disponible para contacto con sangre por superficie de base de la esponja de 100 cm2 por cada cm2 hasta 1000 cm2 por cada cm2 aproximadamente. De manera más preferida, la esponja tiene un área de superficie disponible para contacto con sangre por superficie de base de la esponja de 200 cm2 por cada cm2 hasta 800 cm2 por cada cm2 aproximadamente. De manera más preferida, la esponja tiene un área de superficie disponible para contacto con sangre por superficie de base de la esponja de aproximadamente 300 cm2 por cada cm2 hasta aproximadamente 500 cm2 por cada cm2. La esponja de material mixto comprimida también puede comprender una capa de soporte de respaldo. De preferencia, la capa de soporte de respaldo puede ser una capa de material polimérico. De preferencia, el material polimérico es un material sintético no biodegradable o un polímero biodegradable normalmente presente en la Naturaleza. Los materiales biodegradables sintéticos pueden incluir, pero no se limitan a, ácido poli (glicólico) , ácido poli (láctico) , poli (e-caprolactona) , ácido poli(ß-hidroxibutírico) , ácido poli (ß-hidroxivalérico) , polidioxanona, poli (óxido de etileno), ácido poli (málico) , ácido poli (tartrónico) , polifosfaceno, copolímeros de polietileno, copolímeros de polipropileno, los copolímeros de los monómeros utilizados para sintetizar dichos polímeros o combinaciones de los mismos. Los polímeros normalmente presentes en la Naturaleza pueden incluir, pero no se limitan a, quitina, algina, un almidón, dextrano, colágena, albumen, o combinaciones de los mismos. Los polímeros sintéticos pueden incluir, pero no se limitan a, polietileno, polipropileno, un polímero de metaloceno, un poliuretano, un polímero de cloruro de polivinilo, un poliéster, una poliamida o combinaciones de los mismos. De preferencia, la esponja de material mixto comprimida tiene un grado de adhesión al sitio de la herida de 40 kPa hasta 500 kPa aproximadamente. Más preferido, la esponja de material mixto comprimida tiene un grado de adhesión al sitio de la herida de 60 kPa hasta 250 kPa aproximadamente. De manera más preferida, la esponja de material mixto comprimida tiene un grado de adhesión al sitio de la herida de 100 kPa hasta 200 kPa aproximadamente . La esponja de material mixto comprimida puede formar un material adhesivo en combinación con la sangre que fluye desde dicha herida en una interfaz aposito-sangre De preferencia, el material adhesivo de preferencia tiene un pH de no menos de 5.5 aproximadamente cuando se sella la herida. Más preferido, el material adhesivo de preferencia tiene un pH de no más de aproximadamente 6.5 cuando se sella la herida. De manera más preferida, el material adhesivo de preferencia tiene un pH de no más de aproximadamente 7.5 cuando se sella la herida. De preferencia, el material adhesivo comprende un ácido que se selecciona a partir del grupo que consiste de ácido acético, ácido fórmico, ácido láctico, ácido ascórbico, ácido clorhídrico, y ácido cítrico. De preferencia, la esponja de material mixto comprimida tiene un espesor que es no menor de 3.0 mm aproximadamente y no mayor de 8 mm aproximadamente. Más preferido, la esponja de material mixto comprimida tiene un espesor que es no menor de 3.5 mm aproximadamente y no mayor de 7 mm aproximadamente. De manera más preferida, la esponja de material mixto comprimida tiene un espesor que es no menor de 4.0 mm aproximadamente y no mayor de 6 mm aproximadamente . De preferencia, la esponja de material mixto comprimida tiene un esfuerzo de tracción final de aproximadamente 0.1 MPa hasta aproximadamente 10 MPa. Más preferido, la esponja de material mixto comprimida tiene un esfuerzo de tracción final de aproximadamente 0.15 MPa hasta aproximadamente 0.8 MPa. De manera más preferida, la esponja de material mixto comprimida tiene un esfuerzo de tracción final de aproximadamente 0.25 MPa hasta aproximadamente 0.5 MPa. De preferencia, la esponja de material mixto comprimida tiene un estiramiento final de aproximadamente 5%. Más preferido, la esponja de material mixto comprimida tiene un estiramiento final de aproximadamente 10%. De manera más preferida, la esponja de material mixto comprimida tiene un estiramiento final de aproximadamente 15%. En otra modalidad, se provee un procedimiento para preparar una esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 1 para control de hemorragia que comprende los pasos de (a) preparar mediante congelamiento/liofilización una esponja de baja densidad; y (b) comprimir la esponja de baja densidad a una velocidad preferida de 10 mm por minuto y a una temperatura controlada preferida de 80°C con lo cual se obtiene una esponja comprimida con una densidad de aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 0.2 g/cm3. En otra modalidad, se provee un procedimiento para preparar una esponja comprimida para control de hemorragia que comprende los pasos de (a) preparar una esponja de baja densidad utilizando métodos diferentes a la preparación mediante congelamiento/liofilización de una esponja de baja densidad; y (b) comprimir la esponja de baja densidad subsiguiente a una velocidad de 10 mm por minuto y a una temperatura controlada preferida de 80°C con lo cual se obtiene una esponja comprimida con una densidad de aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 0.2 g/cm3. De preferencia, la esponja de baja densidad tiene una densidad de aproximadamente 0.01 g/cm3 hasta aproximadamente 0.035 g/cm3. De preferencia, la esponja comprimida tiene una densidad de aproximadamente 0.1 g/cm3 hasta aproximadamente 0.15 g/cm3. En otra modalidad, se provee un procedimiento para preparar una esponja de material mixto comprimida para control de hemorragia que comprende a) des-gasificar la solución de bio-material calentando la solución de bio-material y aplicando un vacío a la misma; b) congelar la solución de bio-material; c) eliminar el agua del interior del bio-material congelado sin dañar la integridad estructural del bio-material congelado de modo tal que el agua en el bio-material pase desde una fase sólida hasta una fase gaseosa; d) comprimir el bio-material a una velocidad preferida de aproximadamente 10 mm por minuto con lo cual se obtiene una esponja comprimida con una densidad de aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 0.2 g/cm3; y e) hornear una esponja comprimida a 80 °C durante 30 minutos. De preferencia, la temperatura se reduce gradualmente a lo largo de un intervalo de tiempo predeterminado durante el congelamiento del biomaterial del paso (b) . De preferencia, la temperatura del paso (b) es una temperatura de congelamiento final de no más de -5°C aproximadamente. Más preferido, la temperatura del paso (b) es una temperatura de congelamiento final de no más de -35°C aproximadamente. De manera más preferida, la temperatura del paso (b) es una temperatura de congelamiento final de no más de -25°C aproximadamente. De preferencia, la remoción de agua se efectúa liofilizando el bio-material congelado. El procedimiento también puede comprender un paso de adición de argón, nitrógeno y helio de regreso a la solución de quitosana des-gasificada antes del congelamiento. La esponja puede ser esponja comprimida esterilizada. De preferencia, la esponja comprimida se esteriliza mediante irradiación gamma. En otra modalidad, se provee un método para evitar sangrado severo en un individuo que comprende administrar una esponja comprimida o una esponja de material mixto comprimida. De preferencia, el individuo es un mamífero. Más preferido, el mamífero es humano. De preferencia, el individuo padece de sangrado severo de modo tal que dé como resultado la pérdida de 30-40% aproximadamente del volumen de sangre total dentro de 20 a 30 minutos si el sangrado se deja sin controlar. De preferencia, la esponja comprimida o esponja de material mixto comprimida se aplica con una presión de 60 a 80 kPa aproximadamente directamente sobre la lesión sangrante y se mantiene en el sitio durante 3 a 5 minutos antes de liberar, empacar y vendar la herida. En otra modalidad, se provee un método para evitar el sangrado severo en un individuo que comprende administrar una esponja comprimida o una esponja de material mixto comprimido. De preferencia, el individuo es un mamífero. Más preferido, el mamífero es humano. De preferencia, el individuo padece de sangrado severo de modo tal que dé como resultado la pérdida de 30-40% aproximadamente del volumen de sangre total dentro de 20 a 30 minutos si el sangrado se deja sin controlar. De preferencia, la esponja comprimida o esponja de material mixto comprimida se aplica con una presión de 60 a 80 kPa aproximadamente directamente sobre la lesión sangrante y se mantiene en el sitio durante 3 a 5 minutos antes de liberar, empacar y vendar la herida. En otra modalidad, se provee un estuche de vendaje para tratar sangrado severo que comprende una esponja comprimida o una esponja comprimida de material mixto, rollos de gasa para empacar y una venda Ace para vendar una herida. En otra modalidad, se provee un procedimiento para el acoplamiento y formación de malla mecánicos de las esponjas comprimidas o comprimidas de material mixto que comprende presionar los lados de la esponja que entran en contacto con el tejido contra una superficie macrotexturizada. La superficie macrotexturizada puede incluir superficies preparadas mediante grabado químico, superficies preparadas mediante ablación de superficie por haz iónico, superficies preparadas mediante corte mecánico, y superficies preparadas mediante ablación con láser. En otra modalidad, se provee un procedimiento para mejorar la tracción mecánica de las esponjas comprimidas o de material mixto comprimidas que comprende presionar los lados de la esponja que entran en contacto con el tejido contra una superficie macrotexturizada. De preferencia, la superficie macrotexturizada se selecciona a partir del grupo gue consiste de superficies preparadas mediante grabado químico, y superficies preparadas mediante técnicas de voladura con partículas . En otra modalidad, se provee un procedimiento para limitar o detener la formación de costra gruesa sobre la superficie de las esponjas de material mixto o de material mixto comprimidas que comprende cubrir la superficie de la esponja con una película polimérica, una placa de polímero, una placa de plástico elevada o una película de membrana respirable, impermeable a humedad. En otra modalidad, se provee una esponja de baja densidad, en la cual la esponja se forma comprimiendo una esponja con una densidad de aproximadamente menos de 0.05 g/cm3 hasta que ésta llega a una densidad de aproximadamente menos de 0.08 g/cm3, y en la cual la esponja se forma mediante un procedimiento diferente al de congelamiento o liofilización. De preferencia, la esponja se forma utilizando un método que se selecciona a partir del grupo que consiste de un procedimiento de inversión de fase, esponjas que se preparan mediante unión covalente de componentes activos a matrices preformadas y técnicas de formación de espuma. En otra modalidad, se provee una esponja comprimida y una esponja de material mixto comprimida, en la cual las esponjas también comprenden un polímero hidrofílico en combinación con el ácido poliacrílico. El polímero hidrofílico puede incluir, pero no se limita a, alginato, quitosana, una poliamina hidrofílica, un derivado de quitosana, poli-lisina, polietilen-imina, xantano, carragenina, polímero de amonio cuaternario, sulfato de condroitina, un almidón, un polímero celulósico modificado, un dextrano, hialuronano o combinaciones de los mismos. El almidón puede incluir amilasa, amilopectina y una combinación de amilopectina y amilasa. De preferencia, el polímero hidrofílico es quitosana.

BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS La figura 1 muestra una imagen foto-digital de sección transversal a través de un aposito inicialmente no comprimido . La figura 2 muestra una imagen foto-digital de sección transversal a través de estructuras de laminillas orientadas en un aposito no comprimido. La figura 3 muestra una fotomicrografía de luz de los poros interconectados de la estructura de aposito a base de quitosana seccionada desde la normal a la base. La figura 4 muestra una fotografía de aposito a base de bio-material de quitosana después del calentamiento y compresión. La figura 5 muestra una fotomicrografía de barrido electrónico de una superficie de base típica de aposito de quitosana comprimido. Intercalación de aumento más alto (bar = 100 mieras) . La figura 6 muestra una sección histológica teñida a través del sitio de lesión de bazo/quitosana y la superficie adyacente del bazo. Respuesta de coágulo aglutinado (A) con una mezcla de fibrina/coágulo sanguíneo rico en plaquetas (B) entre parche y bazo. Las figuras demuestran muy buena adhesión entre el bazo y la quitosana. La figura 7 muestra una fotografía de lesión de la aorta torácica sellada con parche de quitosana. La figura 8 muestra una aorta torácica fija que demuestra la lesión de perforación. La figura 9 muestra una sección histológica teñida a través de una lesión de aorta torácica. La figura 10 muestra una fotografía de una falla por presión de estallido in vitro en un aposito fuertemente adherente. La figura 11 muestra un histograma de los resultados de adsorción de agua y sangre para muestras irradiadas con radiación gamma y muestras no irradiadas (es decir, no esterilizadas) .

Las figuras 12A a 12C muestran dibujos detallados del aspecto de una esponja de quitosana típica. Las figuras 13A a 13B muestran el efecto de la compresión sobre la estructura interna de la esponja tal como se observa en esponja con 2% de solución típica seccionada comprimida desde 17 mm hasta 5 mm de espesor. La figura 14 muestra un dibujo detallado de una laminilla individual que muestra las indentaciones de la superficie . La figura 15 muestra un dibujo detallado de la superficie de una laminilla. Las figuras 16A a 16G muestran imágenes de microscopía de barrido electrónico (SEM) de la estructura indentada que se proyecta hacia la superficie superior de la laminilla. Dichas figuras muestran las indentaciones a varios aumentos. La figura 17 muestra una imagen de microscopio de luz con iluminación lateral de una laminilla individual removida cerca de la base de una esponja de quitosana utilizando micro-pinzas. La estructura indentada fina se puede observar proyectándose en la normal hacia la superficie superior de la laminilla.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN A. Esponjas comprimidas y esponjas de material mixto comprimidas La invención se dirige a un aposito para primeros auxilios/intervención primaria para control de sangrado profuso, severo. Dicho sangrado puede ser fatal en lesiones de balas y laceraciones graves de las arterias. Existe una necesidad urgente respecto a este tipo de apositos especialmente en el campo de batalla, en donde típicamente el 50% de todas las muertes están asociadas con una incapacidad para controlar inmediatamente el sangrado severo. Un aposito avanzado para control de sangrado profuso, severo de preferencia debe tener las siguientes propiedades : i) aplicación en forma rápida y fácil en un paso después de retirarlo del paquete; ii) coagulación rápida e intensa de la sangre; iii) adhesión rápida y fuerte al tejido; iv) propiedades cohesivas internas fuertes; v) sellado rápido y fuerte de la herida; vi) resistencia a la disolución bajo flujo sanguíneo intenso; vii) buena adaptación a la lesión; viii) buen asentamiento mecánico inicial del vendaje sobre el tejido para detener el deslizamiento mediante textura controlada de la superficie que entra en contacto con el tejido; y ix) capacidad de ser tratada casi sin comprometer la eficacia. Para este fin, la invención está dirigida a apositos avanzados para control de hemorragia, y métodos para utilizar y producir dichos apositos. El tipo de sangrado profuso, severo, contemplado por esta invención típicamente es el tipo que no puede ser detenido cuando se aplica un aposito convencional de gasa con presión convencional a la herida del individuo. De manera alternativa, la naturaleza del sangrado profuso, severo es tal que éste no se detiene cuando se aplica un aposito convencional de gasa con presión convencional a la herida, y si no se controla con otros medios, puede dar como resultado que la persona caiga en un estado de hipotensión. Dicho de otra manera, el sangrado profuso, severo generalmente no se puede detener cuando se aplica un aposito convencional de gasa con presión convencional a la herida y puede dar como resultado que la presión sistólica sanguínea de la persona caiga a niveles menores de 90 mm de Hg. El sangrado profuso, severo también se puede describir como un flujo elevado constante de sangre mayor de 90 ml aproximadamente de sangre perdida por minuto, de modo tal que aproximadamente en 20 minutos de sangrado se puede perder un volumen mayor del 40% aproximadamente de la sangre total de un individuo de género masculino humano de 70 kg, y el volumen de sangre perdido puede reducir sustancialmente la probabilidad de supervivencia de la persona. Si este tipo de sangrado no se detiene dentro de 5-10 minutos, una persona lesionada puede caer en una condición de hipotensión, tal que la presión arterial sanguínea caiga a menos de 60 mm de Hg. En muchos casos, el sangrado severo es ocasionado por una lesión de proyectil balístico o una lesión de perforación punzo-cortante o una lesión traumática con objeto despuntado. En otros casos, el sangrado severo es ocasionado por coagulopatía o trauma interno o trauma quirúrgico, trauma con vehículo motorizado, accidentes agrícolas, y similares. El aposito de la invención puede detener dicho sangrado severo el cual es ocasionado por una herida sustancial de la arteria o una herida sustancial de las venas que tiene una velocidad de flujo sanguíneo de por lo menos 90 ml/minuto aproximadamente, y que se adhiere al sitio de la herida mediante la aplicación de presión directa al aposito durante un intervalo de tiempo no mayor de cinco minutos aproximadamente. El aposito también actúa rápidamente para sellar la herida, y facilita la coagulación y aglutinación sustancial del sangrado severo del sitio de la herida, y detiene el sangrado severo con la aplicación temporal de presión directa al aposito. El aposito tiene una alta resistencia a la disolución en flujo sanguíneo alto, y tiene propiedades de cohesión interna adecuadas. Este tiene suficiente flexibilidad para ajustarse a la lesión y rigidez para resistir el manejo rudo. El aposito de la presente invención se forma a partir de un bio-material para controlar sangrado severo. De preferencia, el bio-material comprende un material de origen no mamífero. De preferencia, el material de origen no mamífero es poli [ß- (1—4) -2-amino-2-desoxi-D-glucopiranosa], conocido más comúnmente como quitosana. El aposito se configura con una configuración tejida o tipo esponja mediante el uso de pasos que produzcan una estructura o forma intermedia. El bio-material comprende una estructura porosa abierta inter-conectada, y/o estructura de laminillas abiertas orientadas, y/o una estructura tubular abierta, y/o una estructura en panal abierta, y/o una estructura filamentosa. El aposito tiene dominios o poros de espacio libre conectados entre sí con poro de aproximadamente 15 mieras hasta aproximadamente 300 mieras; aproximadamente 30 mieras hasta aproximadamente 250 mieras; aproximadamente 100 mieras hasta aproximadamente 225 mieras; aproximadamente 125 mieras hasta aproximadamente 200 mieras; y de manera más preferida aproximadamente 150 mieras hasta aproximadamente 175 mieras. El aposito tiene un área de superficie disponible para contacto con sangre por superficie de base de dicho aposito de preferencia de por lo menos aproximadamente 100 cm2 por cada cm2, más preferido por lo menos aproximadamente 200 cm2 por cada cm2, y de manera más preferida por lo menos aproximadamente 300 cm2 por cada cm2. La masa disponible de bio-material de quitosana por área de superficie de la herida de preferencia es de aproximadamente 0.02 g/cm2 hasta aproximadamente 1.0 g/cm2; más preferido, la masa disponible de bio-material de quitosana por área de superficie de la herida es de aproximadamente 0.04 g/cm2 hasta aproximadamente 0.5 g/cm2; y más preferido aún, la masa disponible de bio-material de quitosana por área de superficie de la herida es de aproximadamente 0.06 g/cm2 hasta aproximadamente 0.1 g/cm2. Con la frase "por superficie de base" se quiere decir, por ejemplo, que si se toma 1 cm x 1 cm de la superficie de la base la cual está generalmente en contacto con la sangre, entonces se puede esperar que la sangre entre en contacto por lo menos con 100 cm2 de área de superficie de quitosana debido a la estructura de esponja abierta. Las esponjas se pueden preparar mediante procedimientos que incluyen, pero no se limitan a, procedimientos de inversión de fases, congelamiento, liofilización, unión covalente de componentes activos a matrices preformadas y técnicas de formación de espuma. Asimismo, el aposito tiene una velocidad de disolución promedio por superficie de área de base de dicho aposito cuando está adherido a dicho sitio de herida, a una temperatura de aproximadamente 37 °C, de preferencia no mayor de aproximadamente 0.008 gramos por minuto por cm2, más preferido no mayor de aproximadamente 0.005 gramos por minuto por cm2, y más preferido aún no mayor de aproximadamente 0.002 gramos por minuto por cm2. El aposito de la presente invención de preferencia tiene una densidad de por lo menos aproximadamente 0.05 g/cm3, más preferido por lo menos aproximadamente 0.07 g/cm3, y de manera más preferida por lo menos aproximadamente 0.11 g/cm3. Éste puede tener una carga de compresión de preferencia hasta una densidad de compresión de por lo menos aproximadamente 0.05 g/cm3, más preferido por lo menos aproximadamente 0.07 g/cm3, más preferido aún por lo menos aproximadamente 0.095 g/cm3, y de preferencia no mayor de aproximadamente 0.2 g/cm3.

El aposito de la invención típicamente contiene quitosana con peso molecular promedio en número de por lo menos aproximadamente 50 kDa, de preferencia por lo menos aproximadamente 75 kDa, más preferido por lo menos aproximadamente 100 kDa, y de manera más preferida por lo menos aproximadamente 150 kDa (los pesos moleculares se determinan mediante cromatografía por permeación en gel con relación a patrones de referencia de polietilenglicol en acetato de sodio 0.01 M, pH 5.5). De preferencia, el material adhesivo a base de quitosana tiene un pH no mayor de 6.3 aproximadamente cuando se sella la herida. Más preferido, el material adhesivo a base de quitosana de preferencia tiene un pH de no más de 4.5 aproximadamente cuando se sella la herida. De manera más preferida, el material adhesivo a base de quitosana tiene un pH no mayor de 4.0 aproximadamente cuando se sella la herida. Con respecto a apositos en los cuales el polímero hidrofílico es ácido poliacrílico, de preferencia el material adhesivo tiene un pH de no menos de 5.5 aproximadamente cuando se sella la herida. Más preferido, el material adhesivo de preferencia tiene un pH de no menos de aproximadamente 6.5 cuando se sella la herida. De manera más preferida, el material adhesivo a base de quitosana tiene un pH de no menos de aproximadamente 7.5 cuando se sella la herida.

La quitosana también de preferencia tiene un peso molecular promedio en peso de por lo menos aproximadamente 100 kDa, más preferido por lo menos aproximadamente 150 kDa, y de manera más preferida por lo menos aproximadamente 300 kDa (los pesos moleculares se determinan mediante cromatografía por permeación en gel con relación a patrones de referencia de polietilenglicol en acetato de sodio 0.01 M, pH 5.5). La quitosana en el aposito también tiene una viscosidad Brookfield LV DV-II+ a 25°C en una solución de ácido acético (AA) al 1% con un husillo a 30 rpm aproximadamente la cual de preferencia es de aproximadamente 100 centipoise hasta aproximadamente 2000 centipoise, más preferido aproximadamente 125 centipoise hasta aproximadamente 1000 centipoise, y más preferido aún aproximadamente 150 centipoise hasta 500 centipoise. El husillo de preferencia es un husillo LVl, LV2, LV3 o LV4. Los pesos moleculares y viscosidades a las que se hace referencia anteriormente están con respecto a apositos de quitosana sustancialmente pura y apositos que se forman con una capa de quitosana adsorbida en la superficie. En el caso de un aposito que contiene una capa superficial de quitosana unida en forma covalente, entonces se prefieren viscosidades y pesos moleculares de quitosana más bajos. El aposito de la presente invención puede comprender sales catiónicas de quitosana para promover la adhesión a tejido y el sellado del tejido. De preferencia, las sales catiónicas de quitosana pueden incluir, pero no se limitan a, formiato de quitosana, acetato de quitosana, lactato de quitosana, cloruro de quitosana, ascorbato de quitosana y citrato de quitosana. La quitosana tiene un grado de des-acetilación, el cual típicamente es de por lo menos aproximadamente 70%, de preferencia por lo menos aproximadamente 75%, más preferido por lo menos aproximadamente 80%, más preferido aún por lo menos aproximadamente 85%. Es preferible compactar una esponja de baja densidad (densidad < 0.03 g/cm3 sólido), en lugar de compactar una esponja de densidad media (0.1 g/cm3 > densidad > 0.5 g/cm3 en volumen sólido) o una esponja de densidad media, que ya se encuentra a la densidad preferida, hasta su densidad óptima de alrededor de 0.15 g/cm3. Esto se debe a que el procedimiento de formación de la esponja en esponja de baja densidad da como resultado espesores de pared significativamente más delgados entre los poros de la esponja en comparación con los espesores de pared en esponjas con densidad media y densidades más altas. Además, estas esponjas con densidad más alta con frecuencia tienen una estructura más conectada entre sí lo cual incrementa la rigidez de la esponja y reduce la resistencia al agrietamiento. Las paredes delgadas múltiples en las esponjas de baja densidad, cuando se compactan hasta densidades más altas permiten obtener esponjas más flexibles y más resistentes que las esponjas con densidad media y más alta las cuales se producen con más estructuras conectadas entre sí, así como paredes de celda más gruesas y por lo tanto más rígidas. La densificación de la esponja se puede lograr ya sea mediante aplicación unidireccional o bidireccional de una velocidad de compactación controlada a una temperatura fija. Una densificación preferida de esponja se logra mediante compactación unidireccional a 80°C y con un contenido de humedad de esponja entre 2% y 5% en peso aproximadamente. Como un ejemplo de compactación uni-axial, se compacta a una velocidad de compactación controlada una 10.0 cm (dirección x) , x 10.0 cm (dirección y) x 1.70 cm (dirección z) a 10 mm/minuto en la dirección z entre platinas de aluminio planas, orientadas horizontalmente (plano xy) de 63.5 cm x 50.8 cm en una prensa de lanzadera Geo Knight 394-TS a 2.812 kg/cm2 (40 psi). La velocidad de compactación se controla mediante ajuste de presión y uso de una válvula de aguja Parker SPF200B. El espesor final de 0.55 cm de la esponja se controla utilizando por lo menos dos barras espaciadoras de 50 cm x 2 cm x 0.55 cm. La densidad inicial de la esponja es de 0.033 g/cm3. La densidad de la esponja después de la compactación es de 0.10 g/cm3. Se han utilizado otros controles de espaciador tales como 0.15 cm, 0.35 cm y 0.45 cm de altura para lograr esponjas de 0.375 g/cm3, 0.16 g/cm3 y 0.125 g/cm3 respectivamente. Se puede efectuar la compactación bidireccional (compresión de la platina en las direcciones "z" y "x" o "y") para reducir un esponja de 5 cm x 5 cm x 1.7 cm hasta un esponja de 2.5 cm x 2.5 cm x 0.55 cm. Se pueden compactar formas complejas utilizando técnicas de embolsamiento al vacío en las cuales se envuelve una película de plástico cerrada sobre la superficie de la esponja y se retira el aire del interior de la esponja y la camisa de película de plástico hasta un nivel controlado mediante aplicación de un vacío. También se puede utilizar una prensa de rodillos calientes para comprimir la cinta de esponja y otros perfiles de esponja. Se prefiere que dichas cintas y perfiles de esponja estén reforzadas con una malla de material mixto interna si éstas se compactan utilizando una prensa de rodillos. Una modalidad preferida de la compactación de filamentos continuos de esponja de material mixto es aquella en la cual el filamento se estira a través de un dado de varilla revestido con Teflon™ calentado (80°C), con un casquillo controlado a la entrada de alrededor de 2.5 mm de diámetro hasta 0.67 mm de diámetro a compactación completa. Las condiciones de humedad, aplicación de calor y velocidad de compactación controladas se eligen para optimizar la compactación dúctil al tiempo que se reduce al mínimo el colapso quebradizo de la esponja. El colapso quebradizo de la esponja da como resultado pérdida de la integridad mecánica de la esponja mediante agrietamiento. La compactación óptima de la esponja hasta zonas finas conectadas entre sí se logra de manera más adecuada en esponjas con poros esféricos conectados entre sí (por ejemplo dodecaedro) . El tamaño de poro de esponja no compactada es óptimo entre 30 y 120 mieras con espesores de pared de polímero de 1 a 20 mieras. En el caso de esponjas con estructura de laminillas o tipo panal, es más adecuado que la estructura esté orientada uniformemente alrededor de 30 a 40 grados desde la dirección normal de compactación uniaxial. Es posible obtener dicha estructura uniforme durante el congelamiento mediante aplicación de un esfuerzo de corte en la normal a la dirección del gradiente térmico. Dichos esfuerzos cortantes se logran mediante aplicación de carga uniforme en la dirección de congelamiento y con aplicación de carga reducida en la dirección normal a la pérdida de calor. Las estructuras casi verticales se compactan de manera menos fácil sin fractura quebradiza o formación aleatoria de canales. De hecho, las estructuras verticales que se originan a partir de la nucleación de hielo de superficie superior, durante el congelamiento en un molde abierto, conducen a una capa de costra vertical en la esponja que no se compacta fácilmente, que ocasiona rigidez en la esponja y que rápidamente se disuelve cuando entra en contacto con sangre o soluciones acuosas. Además, las estructuras horizontales son indeseables debido a que éstas se compactan elásticamente en la masa y con pérdida de capacidad de inter-conexión de poro en las superficies. Además, en las esponjas tipo laminilla o tipo panal, se desea que la estructura de pared tenga una superficie indentada o ciliada. Dichas superficies en las laminillas o paredes de panal se logran bajo condiciones específicas durante la separación de fase controlada por congelamiento del hielo y el polímero hidrofílico. Normalmente, las indentaciones o cilios son ortogonales con respecto a la superficie de la laminilla o panal proyectándose desde la superficie como paredes delgadas, "dientes", "panales" o columnas de 3 a 10 mieras y 3-10 mieras de longitud en el caso de indentaciones o de 2-3 mieras de diámetro en el caso de cilios. Estos se distribuyen en la laminilla o pared de panal, con frecuencia con regularidad tipo laberinto. Una pared adyacente a la otra a separaciones de 5-10 mieras pero siempre separadas. El grado de las indentaciones parece ser controlado por el peso molecular del polímero, su distribución de peso molecular, el grado de propiedades en solución tipo varilla alargada antes de y durante la separación de fases y el régimen de enfriamiento. Durante la densificación, estas indentaciones actúan para mantener las conexiones de poro estribando un espaciamiento controlado deseado de las laminillas hasta por lo menos 5 a 10 mieras aproximadamente a medida que las laminillas se compactan una contra la otra. Los cilios e indentaciones de superficie también desempeñan un papel importante en la adhesión ayudando al anclaje mecánico y acoplamiento de las superficies. Por lo tanto, la textura de superficie de las estructuras indentadas/ciliadas se conserva de manera más adecuada durante la densificación. Esto se puede lograr mediante compactación de la superficie positiva de esponja hasta una superficie de base negativa. Idealmente, la textura de esta superficie de base es la liberación negativa de la superficie indentada/ciliada. Por lo tanto, con aplicación mínima de carga, la primera superficie se ajusta exactamente dentro de la segunda superficie brindando un contacto de área de superficie máximo entre las dos superficies. Además, al retirar la primera superficie de la segunda, necesariamente debe existir una liberación adecuada de las superficies sin daño o pérdida significativa de superficie. Al igual que este micro-enchavetado de superficies durante la compactación, también es posible crear macro-patrones en la superficie de la esponja mediante aplicación de una superficie de plantilla diseñada contra la cual se compacta la esponja durante el paso de compactación. Dicha formación de patrón puede incluir patrones no deslizantes que pueden ayudar con la aplicación del vendaje hemostático primario a la lesión del tejido. Se pueden compactar formas rectangulares, cilindricas, esféricas, complejas y formas de material mixto hasta las densidades óptimas para el control de las hemorragias. Las esponjas se pueden preparar con formas de material mixto. Una forma de material mixto rectangular típica puede incluir una malla insoluble, pero humectable, no tejida o tejida dentro de la esponja. Esto se puede efectuar típicamente llevando a cabo el procedimiento de separación de fase para formación de esponja con la malla presente dentro de la solución de pre-esponja. Se prefiere un material de malla no tejida debido a que este material es más compatible con el procedimiento de compactación de la esponja y es menos probable que ocasione desgarres en la esponja durante la densificación. Otra modalidad es aquella en la cual se forma una esponja de quitosana de baja densidad a partir de una solución de quitosana de 0.25% a 1% mediante congelamiento/liofilización hasta una esponja de quitosana. Esta esponja después se re-acetila hasta una forma de esponja de quitina mediante inmersión durante por lo menos 24 horas en anhídrido acético al 99% a temperatura ambiente. Esta esponja re-acetilada se puede aplicar después sobre o en una solución para molde de quitosana (1% a 2%) , en la que la solución de quitosana se configura como un esponja mediante congelamiento/liofilización. La esponja de quitosana de material mixto reforzada por la esponja de quitina se compacta posteriormente hasta una densidad óptima. Otra modalidad de la forma de material mixto es una en la cual se forma una esponja de quitosana, de manera más preferida mediante un procedimiento de congelamiento/liofilización. Está esponja de quitosana se neutraliza después mediante lavado con una solución 0.1 M de NaOH, y después se enjuaga con agua para eliminar las sales de sodio e hidróxido de sodio residuales. La esponja de quitosana neutralizada (ahora insoluble en agua y sangre) se coloca en o dentro de una solución acuosa de solución salina de polímero hidrofílico (pH > 7) en un molde apropiado. El molde se coloca en una congeladora/liofilizadora para producir una esponja hidrofílica reforzada con esponja de quitosana neutralizada. La esponja de material mixto subsiguiente se compacta después hasta un espesor apropiado. Una forma de material mixto de esponja cilindrica altamente preferida es aquella en la cual la esponja se forma dentro de una fibra textil húmeda. El diámetro de la esponja y fibra típicamente es de 1-2 mm. La compresión de esta fibra, normal a su eje, da como resultado una fibra impregnada con quitosana flexible de 0.2 a 0.5 mm de diámetro que se puede tejer como una cinta de vendaje médico altamente elástica para administración a lesiones sangrantes internas y lesiones que requieren de superposición, y manipulación de sitios lacerados múltiples para controlar el sangrado. Dicha cinta puede ser extremadamente conveniente para estratificación en heridas de diversos grados de gravedad incluyendo aquellas que sean he orrágicas . El polímero impregnado en la cinta puede acelerar la coagulación local así como la adhesión firme al tejido. Una fibra impregnada con quitosana de este tipo puede proveer la coagulación acelerada en individuos con coagulación plaquetaria normal comprometida tales como hemofílieos y personas en choque. Las esponjas de la invención se pueden acoplar y asegurar utilizando medios mecánicos. Específicamente, el lado de la esponja que va a estar en contacto con las heridas y tejido del individuo durante el uso se puede presionar contra una superficie micro-texturizada. La superficie micro-texturizada puede incluir, pero no se limita a, superficies preparadas mediante corte mecánico y superficies preparadas mediante ablación con láser. La tracción mecánica de la esponja también se puede mejorar presionando la superficie de la esponja que va a estar en contacto con las heridas y tejido del individuo durante el uso contra una superficie macro-texturizada. La superficie macro-texturizada puede incluir, pero no se limita a, superficies que se preparan mediante grabado químico, y superficies que se preparan mediante técnicas de voladura con partículas. La esponja puede comprender una fibra textil impregnada con un polímero hidrofílico. La fibra puede ser cualquier material, sintético o natural, que pueda absorber al polímero hidrofílico. Por ejemplo, la fibra puede ser un material de origen vegetal. De preferencia, la fibra tiene filamentos múltiples. El aposito de esponja puede tener una capa de soporte de respaldo unida a éste que provea y que facilite el manejo y propiedades mecánicas mejoradas. Esta capa de respaldo se puede unir o sujetar al aposito mediante adhesión directa con la capa superior de quitosana, o se puede utilizar un adhesivo tal como el adhesivo para piel a base de acrilato 3M 9942, o pegamento a base de fibrina o pegamento a base de cianoacrilato. Esta capa de soporte de respaldo también de preferencia es sustancialmente insoluble en sangre. La capa de soporte de respaldo también de preferencia es sustancialmente impermeable a sangre. La capa de soporte de respaldo también de preferencia es sustancialmente biodegradable. La capa de soporte de respaldo de preferencia es un material, que permita el manejo firme del vendaje durante la aplicación y la no adhesión a las manos una vez que se aplica el vendaje. De preferencia, el material, que forma el soporte de respaldo es una capa de material polimérico. Los ejemplos de materiales de respaldo preferidos incluyen mallas y/o películas y/o urdimbres de módulo bajo de polímeros sintéticos y de origen natural. Los materiales biodegradables sintéticos pueden incluir, pero no se limitan a, ácido poli (glicólico) , ácido poli (láctico) , poli (e-caprolactona) , ácido poli (ß-hidroxibutírico) , ácido poli (ß-hidroxivalérico) , polidioxanona, poli (óxido de etileno), ácido poli (málico) , ácido poli (tartrónico) , polifosfaceno, copolímeros de polietileno, copolímeros de polipropileno, y los copolímeros de los monómeros utilizados para sintetizar los polímeros antes mencionados o combinaciones de los mismos. Los polímeros biodegradables de origen natural pueden incluir, pero no se limitan a, quitina, algina, almidón, dextrano, colágeno y albúmina. Los polímeros no biodegradables para aplicaciones temporales en heridas externas incluyen polietileno, polipropileno, polímeros de metaloceno, poliuretanos, polímeros de cloruro de polivinilo, poliésteres, poliamidas o combinaciones de los mismos. El aposito de esta invención tiene el grado de adhesión al sitio de la herida el cual de preferencia es de por lo menos aproximadamente 40 kPa, más preferido por lo menos aproximadamente 60 kPa, y de manera más preferida por lo menos aproximadamente 100 kPa. Además, el aposito tiene un espesor que de preferencia es no menor de aproximadamente 3.0 mm, más preferido no menor de aproximadamente 3.5 mm, y más preferido aún no menor de aproximadamente 4.0 mm, y de preferencia no mayor de aproximadamente 8.0 mm, más preferido no mayor de aproximadamente 7.0 mm, y más preferido aún no mayor de aproximadamente 6.5 mm. El aposito (2.5 cm de ancho) de esta invención de preferencia tiene una carga de rotura traccional final de no menos de 1 kg, más preferido por lo menos 1.5 kg y más preferido aún por lo menos 2.25 kg. Este mismo aposito de preferencia tiene un estiramiento final de por lo menos 5%, más preferido por lo menos 10% y más preferido aún por lo menos 15%. El modulo de Young de este aposito de preferencia es menor de 10 MPa, más preferido menor de 3 MPa y más preferido aún menor de 1 MPa. El aposito de preferencia incluye una superficie de tracción complementaria la cual es particularmente útil para la aplicación del aposito a un sitio de herida que incluye una cantidad significativa de sangre superficial. La superficie de tracción complementaria puede comprender por lo menos una superficie exterior que sujeta el sitio de la herida para evitar el deslizamiento del aposito, típicamente en una dirección opuesta a la del sitio de la herida, durante el uso. La superficie de tracción complementaria de preferencia está en forma de un diseño de ranuras (tread) . El aposito de la presente invención puede formar un material adhesivo en combinación con la sangre que fluye desde dicha herida en la interfaz aposito-sangre. En este caso, el material adhesivo a base de quitosana de preferencia tiene un pH de no más de aproximadamente 5.5, más preferido no mayor de aproximadamente 4.5, más preferido no mayor de aproximadamente 4, cuando se sella la herida. Los ácidos típicos utilizados con el propósito de ajustar el pH del aposito de quitosana son los siguientes: ácido acético, ácido fórmico, ácido láctico, ácido ascórbico, ácido clorhídrico y ácido cítrico. La relación molar de anión ácido a grupos funcionales glucosamina en el par catión/anión de quitosana para ajustar el pH hasta el nivel descrito anteriormente de preferencia es de aproximadamente 0.90, más preferido 0.75 aproximadamente, y más preferido aún aproximadamente 0.60.

El aposito se puede configurar a la configuración de la herida para hacer contacto en forma acoplada a la herida, y para facilitar la detención del flujo del sangrado profuso, severo. De manera más particular el aposito se introduce en los intersticios de la herida. De manera más preferida, el aposito se puede ajustar en una configuración tubular. Después, el aposito reconfigurado se inserta dentro de la herida. Esta invención contempla también un método para controlar sangrado profuso, severo proveniente de una herida en el sitio de herida de una persona. El método comprende proveer un aposito formado a partir de un biomaterial que comprende quitosana, adherir dicho aposito al sitio de herida y sustancialmente detener el flujo de dicho sangrado profuso, severo de dicha herida. De preferencia, la herida se sella y se evita el sangrado a partir de dicho sitio de herida. También, de preferencia se evita el sangrado y el flujo de otros fluidos hacia el interior y/o hacia fuera de dicho sitio de herida. El aposito de la invención actúa para producir rápidamente un coágulo fuerte en el sitio de la hemorragia mediante aglutinación de los eritrocitos . Este también puede promover la coagulación acelerando la ruta de coagulación plaquetaria normal. En algunas aplicaciones, la velocidad de disolución del presente aposito es relativamente lenta en comparación con la velocidad de aglutinación, y este equilibrio produce buenos resultados, debido a que la aglutinación a alta velocidad detiene la disolución. Esto demuestra la importancia de la uniformidad de la estructura interna y superficial del aposito. Si esta presente un defecto sustancial en el aposito, tal como un canal ocasionado por los límites del grano o agrietamiento menor, entonces el flujo sanguíneo significativo forma un canal a lo largo del defecto y produce una condición de fuga de sangrado altamente indeseable, la cual puede lixiviar las áreas de aglutinación más pequeñas y menos viscosas a medida que éstas se forman. Además, parece ser que el flujo sanguíneo significativo a presión sobre la superficie de la oblea afecta de manera adversa la adhesión de la herida del aposito de la técnica antecedente, pero no la adhesión a la herida del aposito de esta invención. Un atributo importante preferido del aposito de la invención son los medios para combinar la quitosana con la sangre, mientras que al mismo tiempo se logra la integridad mecánica del "coágulo" resultante y la unión del coágulo a la superficie inmediatamente adyacente a la lesión. El aposito de la presente invención acelera la formación de coágulo sanguíneo en el sitio de la herida, refuerza la formación de coágulo en el sitio de herida y evita el sangrado desde el sitio de herida. Este también evita sustancialmente el flujo de sangre y otros fluidos dentro y/o fuera del sitio de herida. El aposito de la presente invención mantiene su capacidad doble para coagulación y adhesión a un sitio de herida al tiempo que presenta un nivel elevado de elasticidad en un ambiente extremo. La notable elasticidad de este aposito queda ejemplificada por las propiedades físicas formidables del aposito. El aposito de la presente invención, a diferencia de los productos de la técnica antecedente descritos previamente, también tiene una capacidad notable para ajustarse a la forma de la herida al tiempo que mantiene la elasticidad estructural. Esta elasticidad estructural permite que el aposito asuma una forma preferida después de la deformación, sin ninguna pérdida sustancial de propiedades mecánicas. De preferencia, el aposito para control de hemorragias de la invención incluye una superficie que sujeta el área de la herida para evitar sustancialmente el deslizamiento del aposito durante el uso. Típicamente, esta superficie no deslizante del aposito comprende una superficie de tracción. El aposito para control de hemorragia de la presente invención se puede beneficiar de tener una superficie no deslizante efectiva, tal como una superficie de tracción. El aposito para control de hemorragia de la presente invención puede tener un lado liso y un lado rugoso. El lado más rugoso es de preferencia el lado de la superficie para el tejido o el sangrado, si dicho lado demuestra también mejores propiedades adhesivas. Una superficie de tracción puede mejorar la capacidad del aposito para controlar el sangrado arterial rápido suministrando estabilidad incrementada del contacto de superficie (tracción más adecuada) sobre una superficie bien lubricada (tales como aquellas superficies que se presentan en el caso de sangrado severo) . Dicha superficie de tracción ayuda a canalizar la sangre, sin afectar de manera adversa la cinética de adhesión al tiempo que permite un contacto al tejido más controlado y estable durante el período crítico de aplicación del aposito. Por ejemplo, el lado del tejido del vendaje puede tener una superficie de tracción en forma de un diseño de ranuras. Este diseño de ranuras puede evitar que el aposito experimente pérdida de tracción en una dirección opuesta a la herida cuando se aplica a la herida. La superficie no deslizante del aposito para control de hemorragia se puede producir con estrías que no se conecten o se oculten entre sí. De esta manera, a su vez, los canales formados entre las estrías pueden estar completa o parcialmente ocultos uno con respecto al otro y de esta manera proveer una conexión controlada que pueda proveer un flujo sanguíneo controlado de regreso hacia o fuera del área lesionada. El flujo sanguíneo controlado en el área de aplicación del aposito se puede mantener mediante las estrías o tipos específicos de compuertas con capacidad de respuesta en el aposito de control de hemorragia. Las estrías en el fondo de un molde para producir el aposito para control de hemorragia pueden incluir depresiones del tipo que permitan una superficie no deslizante, por ejemplo, en forma de controles de tracción tales como salientes o similares, en los apositos de la presente invención. Por lo tanto, se puede producir un aposito para control de hemorragia que tenga por lo menos una superficie no deslizante, tal como una superficie de tracción. Además, se puede proveer un método para producir dicho aposito. Por último, se puede fabricar un molde para producir un aposito para control de hemorragias . Para tratar hemorragias severas en casos en los cuales las superficies de base y superior adhesivas son convenientes, es posible diseñar el respaldo de soporte de modo tal que éste se pueda desprender fácilmente cuando se requiera de adhesión y coagulación en ambas superficies. Existen numerosas configuraciones para control de hemorragia de los apositos para enfrentar una amplia variedad de tipos posibles de herida hemorrágica. Podrían ser necesarios varios vendajes de configuraciones diferentes (por ejemplo, en una situación de campo de batalla) de modo tal que las personas heridas puedan ser tratadas por la primera persona en responder o incluso por personas también lesionadas. El aposito de la invención puede tolerar una gran cantidad de abuso físico y aún permanecer como una plataforma para control de hemorragia activa. El aposito es ideal para tratar sangrado vascular focal así como heridas tópicas pequeñas. Este también es idóneo para rellenar heridas de entrada compleja en casos en los que el sitio de hemorragia no se puede comprimir fácilmente. Una vez que se logra el control de la hemorragia con la presente invención, la estabilización de una herida en la extremidad, el acercar las orillas de la herida y crear un aposito durable que evite la contaminación y permita la evacuación del herido para una curación definitiva son los requerimientos principales para un aposito para control de hemorragia para civiles y en campo de batalla. Una configuración contemplada del aposito para control de hemorragia es un aposito de 25.4 cm x 45.72 cm con un respaldo elástico, flexible que se pueda unir estrechamente alrededor de una extremidad y asegurar con una lengüeta de sujeción tal como un pegamento adhesivo permanente mediante una superficie posterior desprendible. Esta configuración se puede aproximar a las superficies de la herida y agregar una superficie de control de hemorragia sin comprometer el flujo sanguíneo hacia la extremidad distal, y puede ser aplicado por la primera persona en responder o en algunos casos por el soldado lesionado y puede ser estable bajo movimiento ambulatorio o de la extremidad durante el transporte. Se contempla que el vendaje se puede retirar cortándolo sin adhesión adversa a la herida o a la piel.

B. Métodos para elaborar esponjas comprimidas y esponjas de material mixto comprimidas Se provee un método para producir un aposito que pueda controlar el sangrado profuso, severo proveniente de una herida en un sitio de herida de una persona. Dicho método comprende los pasos de proveer bio-material a base de quitosana como el descrito anteriormente. Los pasos para producir la estructura o forma típicamente se efectúan a partir de una solución y se pueden lograr empleando técnicas tales como congelamiento (para ocasionar la separación de fases) , extrusión en dado sin solvente (para producir un filamento) , electro-hilatura (para producir un filamento) , inversión de fases y precipitación con un no solvente (como el que se utiliza típicamente para producir membranas de filtro y para diálisis) o revestimiento de solución sobre un producto tejido o tipo esponja pre-formado. En el caso de congelamiento, en el cual se forman mediante congelamiento dos o más fases distintas (típicamente el agua se congela hasta formar hielo con diferenciación del bio-material a base de quitosana como una fase sólida separada) , se requiere otro paso para eliminar el solvente congelado (típicamente hielo) , y producir de esta manera el aposito sin perturbar la estructura congelada. Esto se puede lograr mediante un paso de liofilización y/o un paso de sustitución por congelamiento. El filamento se puede configurar como una malla tipo esponja protegida utilizando procedimientos de hilatura no tejidos. De manera alternativa, el filamento se puede producir como una urdimbre afieltrada mediante procedimientos convencionales de hilatura y tejeduría. Otros procedimientos que se pueden utilizar para elaborar dicho producto tipo esponja de bio-material incluyen disolución de agentes formadores de poro a partir de una matriz de quitosana sólida o perforación de material a partir de dicha matriz. De preferencia, el material de quitosana se des-gasifica de los gases atmosféricos generales. Típicamente, desgasificar es la remoción de gas residual suficiente del bio-material a base de quitosana de modo tal que, al ser sometido a una operación de congelamiento subsiguiente, el gas no escape y forme espacios huecos indeseados o burbujas de gas atrapado grandes en el producto de aposito de la presente invención. El paso de desgasificación se puede efectuar calentando un bio-material a base de quitosana, típicamente en forma de una solución, y aplicando después un vacío a la misma. Por ejemplo, la desgasificación se puede efectuar calentando una solución de quitosana a 60 °C aproximadamente inmediatamente antes de aplicar vacío aproximadamente a 500 mTorr durante 5 minutos aproximadamente mientras se agita la solución. Una modalidad de tratamiento de la solución de esponja de bio-material polimérico hidrofílico es la de agregar algunos gases de regreso a la solución después de la desgasificación inicial. Dichos gases pueden incluir pero no se limitan a, argón, nitrógeno y helio. Una ventaja de este paso es que las soluciones que contienen presiones parciales de estos gases forman micro-huecos al congelarse. El micro-hueco es acarreado a través de la esponja a medida que avanza el frente de hielo. Esto deja un canal bien definido y controlado que ayuda a la capacidad de inter-conexión de poro de la esponja. Después, el bio-material de quitosana, el cual típicamente está en forma de solución, se somete a un paso de congelamiento. El congelamiento de preferencia se efectúa enfriando la solución de bío-material de quitosana y reduciendo la temperatura de la solución desde temperatura ambiente hasta una temperatura final por debajo del punto de congelamiento. De esta manera, se puede preparar la estructura preferida del producto de aposito. La temperatura de congelamiento final de preferencia es no mayor de -10 °C aproximadamente, más preferido no mayor de -20 °C aproximadamente, y más preferido aún no mayor de -30 °C aproximadamente. De preferencia, la temperatura se reduce gradualmente a lo largo de un intervalo de tiempo predeterminado. Por ejemplo, la temperatura de congelamiento de una solución de bio-material de quitosana se puede bajar desde temperatura ambiente hasta -45°C mediante la aplicación de una rampa de enfriamiento de temperatura constante de -0.4°C/min aproximadamente hasta -0.8°C/min aproximadamente durante un intervalo de 90 minutos aproximadamente hasta 160 minutos aproximadamente. El bio-material de quitosana congelado se puede someter después a remoción de agua del interior de los intersticios del material congelado. Este paso de remoción de agua se puede lograr sin dañar la integridad estructural del bio-material de quitosana congelado. Esto se puede lograr sin producir una fase líquida sustancial la cual puede alterar el arreglo estructural del aposito final. Por lo tanto, el bio-material de quitosana pasa desde una fase congelada sólida hasta una fase gaseosa sin la formación sustancial de fase líquida intermedia. La manera preferida para implementar la remoción de agua es utilizando un paso de liofilización. La liofilización del bio-material de quitosana congelado se puede efectuar congelando adicionalmente el bio-material de quitosana congelado. Típicamente, después se aplica vacío. Enseguida, se puede calentar el material de quitosana no congelado sometido a vacío. Después, el material de quitosana congelado, sometido a vacío, calentado de preferencia se seca. De manera más específica, el bio-material de quitosana congelado se puede someter a congelamiento subsiguiente de preferencia aproximadamente a -15 °C, más preferido a -25°C aproximadamente, y más preferido aún aproximadamente a -45 °C, durante un intervalo de tiempo preferido de por lo menos aproximadamente 1 hora, más preferido por lo menos aproximadamente 2 horas, y de manera más preferida por lo menos aproximadamente 3 horas. Este paso puede ser seguido por enfriamiento del condensador hasta una temperatura menor de aproximadamente -45 °C, más preferido aproximadamente a -60°C, y más preferido aún aproximadamente a -85°C. Después, se puede aplicar un vacío de preferencia en una cantidad de 150 mTorr aproximadamente como máximo, más preferido 100 mTorr aproximadamente como máximo, y de manera más preferida por lo menos aproximadamente 50 mTorr. Después, el material de quitosana congelado, evacuado se puede calentar de preferencia a -25°C aproximadamente, más preferido aproximadamente a -15 °C, y más preferido aún aproximadamente a -10 °C, durante un intervalo de tiempo preferido de por lo menos aproximadamente 1 hora, más preferido por lo menos aproximadamente 5 horas, y de manera más preferida por lo menos aproximadamente 10 horas. Por último, el secado se puede efectuar de preferencia a una temperatura de aproximadamente 20 °C, más preferido aproximadamente a 15 °C, y más preferido aún aproximadamente a 10 °C, durante un intervalo de tiempo preferido de por lo menos aproximadamente 36 horas, más preferido por lo menos aproximadamente 42 horas, y de manera más preferida por lo menos aproximadamente 48 horas. Posteriormente, el bio-material de quitosana se puede compactar, por ejemplo utilizando platinas calentadas para reducir el espesor e incrementar la densidad de dicho aposito. La temperatura de compactación de preferencia es no menor de aproximadamente 60 °C, más preferido es no menor de aproximadamente 75 °C y no mayor de aproximadamente 85 °C. Después, el bio-material de quitosana compactado de preferencia se pre-acondiciona calentándolo de preferencia a una temperatura de hasta 75 °C aproximadamente, más preferido a una temperatura de hasta 80 °C aproximadamente, y más preferido aún de preferencia a una temperatura de hasta 85 °C aproximadamente. El pre-acondicionamiento típicamente se efectúa durante un intervalo de tiempo de hasta 0.25 horas aproximadamente, de preferencia de hasta 0.35 horas aproximadamente, más preferido de hasta 0.45 horas aproximadamente, y más preferido aún de hasta 0.50 horas aproximadamente, con lo cual se incrementa la fuerza de adhesión y la resistencia a la disolución de dicho aposito, como se describió anteriormente. El aposito procesado se puede someter después a un paso de esterilización. El aposito se puede esterilizar mediante un número de métodos. Por ejemplo, un método preferido es mediante irradiación, tal como mediante irradiación gamma, lo cual también puede incrementar la resistencia a la disolución en sangre, las propiedades de tracción y las propiedades de adhesión del aposito. La irradiación se puede efectuar a un nivel de por lo menos 5 kGy aproximadamente, más preferido de por lo menos 10 kGy aproximadamente, y de manera más preferida por lo menos 15 kGy aproximadamente. El aposito esterilizado se puede empacar posteriormente para almacenamiento en una bolsa sellada térmicamente, purgada con un gas inerte tal como cualquiera de gas argón o nitrógeno. A partir del bio-material de quitosana se produce un aposito, el cual puede retener sustancialmente el flujo de sangrado profuso, severo proveniente de una herida mediante adhesión del aposito al sitio de la herida. El aposito de preferencia sella dicha herida y evita la salida de sangre a partir de dicho sitio de la herida adhiriendo dicho aposito a dicho sitio de herida empleando coagulación y aglutinación del sangrado severo. Este aposito de preferencia se adhiere fuertemente al sitio de la herida, al tiempo que coagula y aglutina los eritrocitos de los alrededores de la herida, de modo tal que únicamente se necesita utilizar presión de preferencia en los primeros cinco minutos de aplicación. En una forma de esta invención, el dispositivo está diseñado para que sea un aposito temporal que se aplica, incluso por practicantes no calificados, con el fin de mantener la persona herida viva hasta que sea posible la intervención médica experimentada.

C. Agentes activos utilizados en esponjas comprimidas La esponja comprimida también puede comprender un ingrediente activo. El ingrediente activo puede ser, pero no se limita a, seroalbúmina de humano, calcio, trombina bovina, trombina de humano (hTrombina) , rhTrombina, factor Vlla, factor XIII, Factor XIII recombinante (rFactor XIII), tromboxano A2, prostaglandina-2a, factor de crecimiento epidérmico, factor de crecimiento derivado de plaquetas, factor de Von Willebrand, factor de necrosis de tumor (TNF) , TNF-alfa, factor de crecimiento transformante (TGF) , TGF-alfa, TGF-beta, factor de crecimiento tipo insulina, factor de crecimiento de fibroblasto, factor de crecimiento de queratinocito, factor de crecimiento de nervio, penicilina, ampicilina, eticilina, amoxicilina, clavamox, ácido clavulánico, amoxicilina, aztreonam, imipenem, estreptomicina, kanamicina, tobramicina, gentamicina, vancomicina, clindamicina, eritromicina, polimixina, bacitracina, anfotericina, nistatina, rifampicina, tetraciclina, doxiciclina y cloramfenicol, o combinaciones de los mismos dependiendo de la naturaleza de la herida o de la condición médica del paciente. Por ejemplo, las heridas recibidas en un escenario militar pueden comprender un antibiótico, un anti-fúngico, y un factor de coagulación. Los pacientes con cáncer en cirugía pueden recibir una combinación diferente de agentes activos.

EJEMPLO 1 Evaluación del control de hemorragia La tabla 1 provee una lista de los principales materiales de quitosana adquiridos para la evaluación de control de hemorragia. Con excepción de los controles Gelfoam™ + trombina, y Surgicel™ para experimentos con bazo porcino y el control de gasa de 10.16 cm x 10.16 cm de Johnson and Johnson para uso en perforaciones aórticas de porcino, los materiales del aposito descritos en la presente invención están todos basados en quitosana.

TABLA 1 10 *Por debajo de los limites aceptados de plomo, mercurio, bismuto, antimonio, estaño, cadmio, plata, cobre y molibdeno. NA = no disponible 15 Se preparan soluciones acuosas (2.00% en peso) en matraces Pyrex de 1 litro, estériles, limpios, provenientes de Ametek, agua ultra-filtrada (UF) y quitosana seca. En el caso de los materiales de quitosana Carbomer, Primex y Genis, se agrega 1.0% o 2.0% en peso de ácido acético glacial (Aldrich 99.99%) a las mezclas acuosas. La disolución se logra agitando el matraz a 40°C durante 12 a 48 horas. Las soluciones se desgasifican mediante aplicación de vacío a 500 mTorr a temperatura ambiente inmediatamente antes del congelamiento. Los apositos se preparan a partir de las soluciones acuosas al 2% de quitosana que se vierten en moldes de aluminio o polietileno revestidos con Teflón™ hasta por lo menos 1.5 cm de profundidad y se congelan en una congeladora Reveo de -80 °C a -45 °C durante 3 horas. De manera alternativa, el congelamiento se efectúa en los anaqueles interiores de una liofilizadora Virtis Génesis 35EL. Se presenta casi un 10% de encogimiento en los apositos y la densidad del aposito final liofilizado está cercana a 0.033 g/cm3. En las figuras 1 y 2 se presentan secciones transversales de dos tipos de apositos moldeados (diferentes velocidades de congelamiento) . Las estructuras observadas (figura 3) son afectadas por las velocidades de enfriamiento en la solución a granel y en las diferentes superficies. Posteriormente, las estructuras en los apositos se controlan mediante formulación, molde (tamaño y forma) y condiciones de congelamiento. Las estructuras de aposito óptimas son aquellas que son de poro abierto que consisten de poros conectados entre sí, uniformes, cercanos a 50 mieras de diámetro o laminillas y estructuras hexagonales normales al plano de enfriamiento. Estas estructuras se pueden controlar, produciendo apositos flexibles pero fuertes de áreas de superficie específica grandes para la coagulación sanguínea altamente eficiente y rápida. Típicamente, el área de superficie específica disponible para dichas estructuras es mayor de 500 cm2/g. La fotomicrografía de barrido electrónico en la figura 5 muestra la estructura de celda abierta típica en la superficie de base de un aposito. Los apositos se calientan en un horno de convección a 80±1°C durante media hora para optimizar la estructura y distribución de concentración de ácido acético. Se ha descubierto que este paso es esencial para optimizar las propiedades adhesivas de los apositos en una zona de hemorragia (típicamente adhesión a la dermis > 40 kPa) . Los apositos se compactan inmediatamente desde 17 mm de espesor hasta 5.5 ± 0.5 mm a 80±5°C bajo una carga cercana a 50 kPa (desde una densidad de aproximadamente 0.03 ± 005 g/cm3 hasta 0.12 ± 0.02 g/cm3).

La figura 4 muestra la apariencia de la base de un aposito de quitosana preferido típico para control de hemorragia después del calentamiento y compresión.

EJEMPLO 2 Preparación y evaluación del aposito Los apositos hemostáticos se preparan de la siguiente manera: a) Se utiliza polvo u hojuelas de quitosana seca con grado de des-acetilación mayor de 85%, menos de 25 ppm de componente metálico y más de 90% de contenido de sólidos secos para preparar una solución acuosa al 2% (en peso) con ácido acético aproximadamente al 2% o 1% (en peso) a 40°C. b) La solución de quitosana proveniente de (a) anterior se desgasifica a presión reducida de hasta 500 mTorr aproximadamente bajo agitación durante por lo menos 5 minutos y se vierte en un molde hasta una profundidad de 1.7 cm. Algunas de las estructuras de espuma, de baja densidad presentan problemas debido a su fácil disolución en una zona de hemorragia. Estos problemas por lo general se evitan mediante des-gasificación completa de la solución. c) El molde que contiene la solución de quitosana desgasificada se congela mediante enfriamiento desde temperatura ambiente hasta -45 °C. Se utiliza a una trampa de enfriamiento lineal a lo largo de un periodo de 90 minutos, y la temperatura se mantiene a -45 °C durante por lo menos otra hora. d) La quitosana congelada se liofiliza después utilizando un condensador que está a una temperatura menor de -70 °C y a un vacío de aproximadamente 100 mTorr. La temperatura del anaquel se aumenta desde -45 °C hasta -15 °C y se mantiene a ese nivel durante 10 horas. Después se efectúa otras 36-48 horas adicionales de liofilización a 10 °C. Se efectúa la liofilización hasta lograr cerca de 2.8% aproximadamente de la masa de placa congelada original. e) A 2.8% de la masa original, el procedimiento se detiene, y el aposito liofilizado se retira del molde. f) El producto formado es un aposito con área de superficie específica elevada, soluble en agua, regulado con ácido que presenta un encogimiento de 10% de su volumen congelado original. La estructura del aposito es generalmente una estructura de poro abierto uniforme con poros que se conectan entre sí de 50 a 80 mieras de diámetro. Utilizando un régimen de enfriamiento ligeramente diferente en el cual no se afecta el súper-enfriamiento, se obtiene una estructura de laminillas/hexagonal (con láminas de quitosana uniformemente delgadas cercanas a 5 mieras de espesor con una separación cercana a 50 mieras entre las láminas) . g) El aposito se compacta después (desde 1.7 cm hasta aproximadamente 0.5 cm de espesor) entre platinas lisas y planas con una temperatura de 80 ± 2°C bajo aplicación de 60 +20 kPa de presión. Enseguida, el aposito se acondiciona en un horno de convección mediante calentamiento a 80 + 5°C durante 30 minutos . i) Cada aposito se almacena después en bolsas Kapak 530 marcadas, selladas térmicamente. j) El aposito compactado resultante es duro, flexible, hemostático, adherente al tejido húmedo y resistente a la disolución por la sangre que fluye. k) Se logran propiedades de disolución mejorada, resistencia a la adhesión mejorada y esterilización mediante exposición del aposito a 15 kGy de irradiación gamma bajo una atmósfera de nitrógeno. La evaluación in vivo de hemostasis de los apositos para control de hemorragia candidatos de composición y estructura variable se analiza en modelos animales de hemorragia cada vez más desafiantes. Se utiliza un modelo de laceración de bazo con el fin de poder evaluar números grandes de apositos candidatos en un modelo reproducible simple y para compararlos con los materiales convencionales . Aunque éste es el modelo de sangrado menos desafiante (sangrado con exudación ligera de aproximadamente 2-5 ml/minuto) , la mayoría de las formulaciones de aposito iniciales no pasan esta prueba. Además todos los geles, polvos de quitosana, no pasan esta prueba mientras que las películas presentan un desempeño muy bajo. Antes de la evaluación en un modelo de hemorragia severa, se evita la coagulación en los cerdos mediante heparina intravenosa sistémica y se evalúan los mejores materiales en un modelo de denudación de bazo encapsulado a (sangrado con exudación intensa de aproximadamente 10-20 ml/minuto) . Aquellos pocos materiales que pasan esta prueba se evalúan después en el modelo de laceración de carótida (aproximadamente 50 ml/minuto) en cerdos tratados con anticoagulante. Las formulaciones para aposito de materiales candidato que pasan esta prueba se evalúan después en el modelo de aortotomía porcina en el cual se efectúan perforaciones de 4 mm de diámetro en las aortas torácica o abdominal. Los materiales que pasan estos modelos de desafío de hemorragia vascular severa (velocidades de sangrado mayores de 100 ml/minuto) también se evalúan en un modelo severo (grado V) de trauma hepático. La evaluación se efectúa en animales sanos que previamente han sido sometidos a los procedimientos y que están programados a ser sacrificados para evaluación. Todos los experimentos se efectúan de conformidad con el documento "Guide for the Care and Use of Laboratory Animal" del Consejo de Investigación Nacional de 1996 y las regulaciones federales aplicables. Después de identificar el animal, se induce la anestesia con telazol a 4-9 mg/kg por vía intramuscular (i.m.). El isoflurano se administra mediante mascarilla y el animal se intuba. Los parches de quitosana para los experimentos de laceración de denudado capsular pueden ser piezas cuadradas de tamaño igual cortadas a partir de un aposito de 37 mm de diámetro o de piezas de aposito de 1.5 cm x 1.5 cm cortadas a partir de un aposito más grande. Los materiales de control de Gelfoam™ + trombina o Surgicel™ se preparan a partir de piezas de 1.5 cm por 1.5 cm. El aposito de gelatina absorbible Gelfoam™ tamaño 100, es suministrado por Pharmacia. La celulosa oxidada, Surgicel™ es suministrada por Ethicon. La trombina tópica (de origen bovino) 10,000 unidades EE.UU. es suministrada por Jones Pharma. El Gelfoam™ + trombina se prepara antes del uso sumergiendo apositos de 1.5 cm x 1.5 cm x 0.8 cm en la trombina durante 30 minutos. Se efectúa una laporato ía ventral de línea media. La mitad superior del bazo se exterioriza (uniendo la herida quirúrgica con tenazas de toalla) . La superficie se mantiene húmeda mediante la aplicación de solución salina estéril a partir de una almohadilla de regazo húmedo . Para la anti-coagulación, la arteria femoral derecha se aisla quirúrgicamente y se le aplica una cánula con una funda 6F, que permite la recolección de muestra de sangre. El tiempo de coagulación activada (ACT) se mide antes de la administración de 5000 unidades de heparina por vía intravenosa, 10 minutos después de la administración de heparina y cada 20 minutos después de esto. Si el nivel de ACT es menor de 200 segundos, se administran 2000 unidades de heparina y se vuelve a medir el ACT después de 10 minutos. Esto se repite hasta que el ACT es > de 200 segundos para asegurar que el animal no tenga coagulación. El área de evaluación en el bazo se marca y mantiene húmeda utilizando las tenazas de toalla y las almohadillas húmedas y exponiendo únicamente la superficie no evaluada más inmediata. Se ejecuta una sola lesión antes de la aplicación de un parche de prueba, de la siguiente manera: (i) en el modelo de laceración, la lesión (8 mm de largo x 4 mm de profundidad) se efectúa utilizando un bisturí del #11 posicionado en fórceps en ángulo recto de modo tal que se proyecten 4 mm de la navaja. (ii) en el modelo de denudación capsular, la lesión (5 mm x 5 mm por 4 mm de hondo) se efectúa utilizando el bisturí del #11 y un par de tijeras quirúrgicas . Después de efectuar la lesión, se permite el sangrado durante 30 segundos. La sangre de superficie se elimina con gasa, después de lo cual se aplica un parche de prueba digitalmente a la lesión utilizando una presión uniforme constante durante 30 segundos. Después se retira la presión digital y se observa el parche durante 2 minutos. En esta etapa, se registra el número de ensayo. Si se presenta re-sangrado observable, se registra el tiempo para volver a sangrar, y comienza el siguiente ensayo (30 segundos de sangrado, se limpia la sangre con gasa, 30 segundos de presión digital seguido por hasta 2 minutos de observación) . El ensayo para un parche de prueba se completa cuando no se presenta re-sangrado en el período de observación de 2 minutos o de 6 si se observan re-sangrado del ensayo. Si la herida continua volviendo a sangrar durante 6 períodos de ensayo, entonces se retira el parche que no funcionó y se aplica un parche de Gelfoam + trombina. Se realiza una nueva lesión y se evalúa otro parche. En el caso del modelo de laceración de la carótida, se cortan parches de quitosana (37 mm x 25 mm) a partir del aposito comprimido de 37 mm de diámetro o de apositos más grandes. Para facilidad en la aplicación, algunos de los apositos tienen una cinta superior de cinta médica de espuma 13 M 9781 unida a la quitosana con adhesivo para piel 3M 9942. El Gelfoam™ + trombina se utiliza como un control. Se efectúa una incisión vertical exponiendo una longitud de 10 cm de arteria carótida. Se retrae la fascia y se disecta el tejido blando circundante hasta que la arteria queda soportada en una base plana de tejido. Se colocan suturas de sujeción próximas y distales a la arteria expuesta. Esta se sujetan con tenazas y se efectúa una incisión de 1.5 cm longitudinalmente en la arteria. Para anti-coagulación, la arteria femoral derecha se aisla quirúrgicamente y se le aplica una cánula con una funda de 6F, lo que permite la recolección de las muestras de sangre. El tiempo de coagulación activada (ACT) se mide antes de la administración de 5,000 unidades de heparina por vía intravenosa, 10 minutos después de la administración de heparina y cada 20 minutos después de esto. Si el nivel de ACT es menor de 200 segundos, se administran 2000 unidades de heparina y se vuelve a medir el ACT después de 10 minutos. Esto se repite hasta que el ACT es > 200 segundos para asegurar que el animal tenga anti-coagulante . Después de efectuar la incisión, la arteria se deja sangrar durante 2 segundos y después se comprime durante 1 minuto. La compresión se retira y las ligaduras se vuelven a sujetar. El área se enjuaga con solución salina. Las ligaduras se sueltan 2 segundos antes de la aplicación de un parche. Se aplica presión uniformemente sobre el parche durante 3 minutos . Si se observa sangrado dentro de 30 minutos después de la aplicación de presión, entonces se vuelven a aplicar otros 3 minutos de presión. Si el parche no se adhiere entonces éste se reemplaza con un nuevo parche. Cada nueva aplicación de presión, o reemplazo de un parche del mismo tipo se trata como períodos de ensayo para dicho tipo de parche. Un ensayo para un aposito particular se considera completo si no se observa sangrado alrededor, o a través del parche en un período de 30 minutos. El material se clasifica con base al número de ensayos que éste tomó para lograr 30 minutos de hemostasis (sin sangrado observable de la herida) . En el caso de perforación de aorta de porcino, se utilizan parches de muestra de apositos de quitosana comprimidos cortados en piezas de 2.5 cm de diámetro o controles de 10.16 cm x 10.16 cm de gasa quirúrgica. Cualquiera o ambas de las aortas abdominal y torácica se exponen mediante laporatomias ventrales de línea central en el caso de la primera y esternotomias en el caso de la última. La fascia y el esternón se sujetan con tenazas y se colocan ligaduras proximales y distales a los sitios de incisión. Mientras se aplican las tenazas de sujeción, se utiliza una navaja de bisturí del #11 para efectuar una incisión de 3 mm a través de la pared de la aorta y se inserta un punzón vascular Medtronic™ de 4 mm de diámetro a través de la incisión para hacer un agujero de 4 mm de diámetro de la aorta. Se retira el punzón y se sueltan las tenazas de sujeción aplicando presión digital al agujero. El parche se sujeta entre los dedos pulgar e índice y el dedo medio se utiliza para aplicar presión al agujero en la aorta. La presión de este dedo medio se libera durante 1 segundo antes de la aplicación del aposito a la zona de sangrado. El aposito se mantiene en su lugar mediante la presión firme aplicada a través del dedo medio al parche a través del agujero aórtico. La sangre mezclada que escapa de la herida durante la aplicación del parche se elimina mediante succión. Después de 3 minutos de presión digital, se retira el dedo y se inspecciona el parche respecto a cualquier señal de sangrado continuo y poca adherencia. Si se observa sangrado continuo o re-sangrado en los primeros 30 minutos después de la aplicación del parche, entonces se aplican 3 minutos adicionales de presión. Si la hemostasis aún no es completa, entonces se prepara otro parche del mismo aposito, se retira el parche usado y comienza un nuevo ensayo. Un ensayo se considera completo si no se observa sangrado en los alrededores o a través del parche en un intervalo de 30 minutos. El material se clasifica con base al número de ensayos que éste toma para lograr 30 minutos de hemostasis (sin sangrado observable de la herida) . Las muestras de control de gasa se aplican en la misma manera que la del aposito de quitosana durante un ensayo. Todos los animales se someten a eutanasia mientras están anestesiados con una inyección de barbituratos [Euthasol, 0.22 ml/kg (1 ml/10 libras)] a través de una vena auricular. Los animales se someten a eutanasia al final del procedimiento experimental o antes del final si el animal experimenta cualesquiera efectos de resistencia a la manipulación. Las pruebas se clasifican desde 0.0 hasta 6.0 de conformidad con el número de ensayos necesarios antes de que se logre el control de la hemorragia y el tiempo para volver a sangrar (únicamente en el caso de ensayos en bazo) . Una prueba en la cual únicamente es necesario un ensayo y no existe re-sangrado se califica como 0.0. Una prueba que requiere de un segundo ensayo y el tiempo para volver a sangrar del primero es 90 segundos se califica como: 120-90 1.0 H = 1.25 (en el caso de un bazo) o 1.0 en los otros 120 modelos . Una prueba que necesite cuatro ensayos para lograr la hemostasis y en la cual el tiempo para el re-sangrado de bazo en el tercer ensayo es de 30 segundos se califica: 120-30 3.0 + = 3.75 120 (en el caso de un bazo) o 3.0 en los otros modelos. Una muestra que falle completamente por disolución rápida, falta de adherencia o sangrado no controlado se califica como 6.0+. En resumen, mientras más deficiente sea la hemostasis, más alta será la calificación tal como se define mediante lo siguiente: R = r + ? en la cual r = número de ensayos para detener el sangrado-1 _ _ A - tiempo para el(los) resa _ngrado(s) en el ensayo previo A = tiempo del o los ensayos Los resultados de los estudios de bazo se presentan en forma resumida en las tablas 2, 3 y 4. La tabla 2 ilustra el comportamiento de las muestras de prueba de quitosana que no están optimizadas con respecto a la composición y estructura. Estos materiales no optimizados varían desde, "peor" para el control negativo Surgicel™ (tabla 4), a comparable y hasta sólo parcialmente mejor. La presencia de solución reguladora de fosfatos produce un parche lentamente hemostático muy poco adherente que es sólo ligeramente más efectivo que Surgicel™. La película de quitosana es moderadamente adherente, provee un sellado razonable al sangrado, sin embargo ésta es sólo muy lentamente hemostática como queda demostrado por la lenta acumulación de sangre por debajo de su superficie transparente. Los ensayos iniciales por lo general muestran señales de una espuma de baja densidad en la superficie superior del aposito moldeado. Se ha descubierto que esta espuma de baja densidad es susceptible a la disolución y el colapso si la superficie superior del aposito se aplica a una zona de sangrado. Se descubrió posteriormente que se puede evitar este efecto de formación de espuma desgasificando las soluciones antes de congelarlas. Se descubrió que los apositos de quitosana de bajo peso molecular (viscosidad relativa de la solución al 1% < 50 cps) son muy susceptibles a la disolución en una zona de sangrado lo que los hace inapropiados para la aplicación en parche. El contra-anión glutamato produce apositos más blandos pero a expensas de producir apositos que se disuelven fácilmente en una zona con sangrado muy abundante. También se encontró que los apositos de baja densidad (aquellos menores de 0.05 g/cm3) con contra-iones acetato se ven fácilmente comprometidos por la disolución y el colapso. La tabla 3 muestra las calificaciones de resultados de los apositos de quitosana optimizados de la composición y estructura preferidos. Estos apositos están constituidos por quitosana con pesos moleculares más altos (viscosidad relativa de solución al 1% mayor de 100 cps) y tienen densidades de aposito cercanas a 0.12 g/cm3. En las pruebas de bazo con sangrado moderado, se encuentra que los resultados para los apositos optimizados, utilizando la prueba W de suma de rangos de Wilcoxon, son indistinguibles del control positivo de Gelfoam™ + trombina (Z = -0.527, p = 0.598). Utilizando el mismo método estadístico, se demuestra que los apositos son significativamente diferentes del control de Surgicel™ con desempeño muy deficiente (Z = -3.96, p = 0.0001) . La figura 6 demuestra (mediante una sección histológica teñida con H y E) la adherencia cercana de los parches de aposito de quitosana optimizados a la superficie del bazo así como la aglutinación de eritrocitos en la vecindad inmediata de la lesión. Las calificaciones para el modelo de lesión de la carótida se presentan en forma resumida en la tabla 5. En este modelo, el parche de quitosana optimizado se desempeña en forma bastante adecuada en los ensayos 3, 5 y 6. La mejora en el desempeño con respecto a los primeros ensayos 1 y 2 se debe a la aplicación del respaldo de soporte (vendaje de espuma 9781 de 3M) a la superficie inmediata superior del aposito. Este respaldo permite que se aplique una presión más uniforme sobre el aposito y permite que la persona que aplica el aposito lo retire de sus dedos fácilmente desde la superficie del parche sin que éstos se adhieran e induzcan el desprendimiento del parche de la herida. El modelo de carótida se utiliza para investigar condiciones de sangrado arterial más severas que las que son posibles en el modelo de lesión de bazo. Se investiga Gelfoam™ + trombina como un posible control positivo pero se descubre que se disuelve en una zona con sangrado muy abundante. La tabla 6 presenta en forma resumida los resultados del modelo de lesión de aorta. Se utiliza vendaje de gasa (10.16 cm x 10.16 cm) como un vendaje de control. Se descubre que el control no puede detener el sangrado severo en todos los periodos de ensayo mientras que los parches aórticos de quitosana optimizada pueden detener y posteriormente coagular rápidamente el nivel muy alto de sangrado observado en esta herida después de sólo 1 o 2 aplicaciones del parche. Se determina la significancia exacta (p = 0.002 de dos colas) para la probabilidad de que no exista diferencia entre las calificaciones de la muestra y del control. En promedio la pérdida de sangre después de la aplicación del parche es mínima (< 50 ml) si la herida se detiene (stanched) en el primer intento. Si se requiere de un segundo intento, la pérdida de sangre después de la aplicación del parche es mayor de 100 ml pero menor de 300 ml. En promedio se pierden menos de 150 ml de sangre después de cada aplicación de parche en el caso del aposito de quitosana mientras que, en el caso de los 3 estudios de control de gasa, se pierde más de 1 litro de sangre por cada animal. En el caso del estudio del aposito de quitosana, la supervivencia es el del 100%, mientras que en el caso del estudio con gasa, no sobrevive ninguno (0%) de los animales. Los parches de quitosana demuestran eficacia hemostática continua a lo largo del periodo de ensayo de 30 minutos y hasta que los animales se sacrifican lo cual por lo general ocurre 1 a 2 horas más tarde. La figura 7 demuestra un parche típico de quitosana que sella una herida torácica grave. En la figura 8 se muestra el lado del lumen (que muestra la herida) de la aorta extirpada sellada por el parche en la figura 7. La figura 9 muestra una fotomicrografía de una sección histológica teñida tomada a través de la lesión de las figuras 7 y 8. Se encuentra evidencia de coagulación fuerte en el sitio de la herida al extirpar e inspeccionar las aortas durante el sacrificio del animal (figura 9) y, en el caso del ensayo número 16, en el cual después de desalojar un parche en un animal vivo (después de más de 30 minutos de la aplicación) no se presenta re-sangrado subsiguiente.

CUADRO 2 10 Tipo denso= apos to denso (aproximadamente 0.12 g cm) Trat. con PBS = a un aposito neutralizado mediante inmersión en solución salina regulada con fosfatos Tipo LD = aposito de baja densidad (aproximadamente 0.03 g/cm3) Tipo FF = un aposito de congelamiento rápido Tipo de película = una película vaciada con solvente (500 mieras) 15 TABLA 3 TABLA 4 10 15 CUADRO 5 Número Animal Tipo de Fuente de Nombre de Lote de Forma de AntiModelo de Clasificación Comentarios de de muestra muestra la muestra muestra la muestra coagulante lesión de resultado los resultados ensayo modelo 1404 Quitosana Primex Chitoclear BN 381 Tipo denso Si Laceración Lesión de primer ensayo. Sangrado profundo en el sitio antes de la aplicación, primeras tres aplicaciones desaceleran el sangrado, la aplicación final cierra el área herida no cubierta inicialmente 1335 Quitosana Primex Chitoclear TM 752 Tipo denso Si Laceración Muestra sin respaldo . Problemas con la aplicación de presión sin dañar el aposito en la zona de sangrado 1335 Quitosana Pronova CL213 Si Laceración El respaldo 3M permite la aplicación de 10 presión sin dañar el aposito 1442 Quitosana Primes Chitoclear Si Laceración 0 Respaldo 3M + buena adhesión y hemostasis rápida 1442 Quitosana Primes Chitoclear Si Laceración 1 Respaldo 3M + buena adhesión y hemostasis rápida 1441 Quitosana Pharmacia Gelfoam+th Si Laceración 6+ No puede detener el sangrado debido a que Gelfoam se disuelve en la zona de sangrado y no es adherente Tipo denso = aposito de esponja densa (aproximadamente 0.12 g/cm) 15 TABLA 6 10 15 TABLA 6 (cont.) 10 15 TABLA 6 (cont.) 10 15 EJEMPLO 3 Control de hemorragia hepática en modelo hepático porcino El Control de Hemorragia, Objetivo de Ciencia y Tecnología (STO) A, del Ejercito de los Estados Unidos de Norteamérica, se establece en el año 2000 para tratar de solucionar la necesidad respecto a control de hemorragia en el campo de batalla. El objetivo estratégico general del STO se puede resumir como el desarrollo de productos y métodos que reduzcan el número de decesos debido a hemorragias en las pérdidas (casualties) en el campo de batalla. Los requisitos para productos y métodos para el control de hemorragia se enumeran de esta manera: Estos deben ser practicables para uso por unjo o más de los siguientes: uno mismo (combatiente herido), compañero (soldado no médico acompañante que ayude al soldado herido) , salvavidas de combate, médico de combate, asistente médico, y cirujano del batallón. Estos deben ser practicables para uso en condiciones frente lejano (far forward) incluyendo terreno accidentado, visibilidad limitada, y condiciones ambientales extremas. Los productos y métodos no deben requerir fuentes eléctricas externas. Todos los dispositivos deben ser portátiles y durables. Se espera que los productos y métodos que se puedan utilizar en el frente lejano también se puedan utilizar en niveles de mando superiores de atención médica. Un objetivo estratégico especifico del STO es el desarrollo de agentes hemostáticos nuevos o mejorados para uso en hemorragia susceptible de compresión bajo condiciones de campo de frente lejano. Se desea un producto individual para uso en sitios susceptibles de compresión o no susceptibles de compresión. Como parte del STO, se efectúa un estudio de control de hemorragia hepática en un modelo de hígado porcino en el Instituto de Investigación Quirúrgica (ISR) del Ejército de los Estados Unidos de Norteamérica en Fort Sam Houston, San Antonio, Texas utilizando el vendaje para control de hemorragia de esta invención. El estudio se efectúa para determinar el efecto del vendaje para control de hemorragia de quitosana sobre la pérdida de sangre y supervivencia en un modelo normalizado de hemorragia venosa severa y daño hepático en cerdos. Este modelo se ha utilizado para estudiar muchos otros vendajes hemostáticos en el ISR del Ejército de los Estados Unidos de Norteamérica. En este estudio se utilizan cerdos de cruza comercial. Los animales se mantienen en un edificio acreditado por la Asociación Internacional para la Evaluación y Acreditación del Cuidado de Animales de Laboratorio. Este estudio es aprobado por el Comité de Cuidado y Uso de Animales Institucionales del Instituto de Investigación Quirúrgica del Ejercito de los Estados Unidos de Norteamérica, Fort Sam Houston, Texas. Los animales reciben cuidado humano de conformidad con la Guia para el Cuidado y Uso de Animales de Laboratorio (Institutos Nacionales de Salud, publicación 86-23, revisada en 1996) . Los animales se asignan al azar para recibir ya sea vendajes de quitosana o esponjas de gasa (véase tabla 7) . La preparación quirúrgica consiste de lo siguiente: los animales se someten a ayuno 36-48 horas antes del procedimiento quirúrgico y el agua se permite ad libitum. Después de pre- edicar con glucopirrolato y una combinación de clorhidrato de tiletamina y clorhidrato de zolazepam (Telazol®, Fort Dodge Laboratories, Fort Dodge, IA) , la anestesia se induce mediante mascarilla utilizando isoflurano al 5%. Los cerdos se intuban, se colocan en un ventilador y se mantienen con isoflurano. Se colocan quirúrgicamente catéteres para la arteria carótida y la vena yugular. Se efectúa la laparotomía y la esplenoctomia y se completa la colocación del catéter para la vejiga urinaria. Se requiere de una temperatura rectal entre 37°C y 39°C, y 15 minutos de presiones arteriales promedio (MAP por sus siglas en inglés) estables antes de procedimientos experimentales adicionales. Se registran la presión sanguínea y la frecuencia cardiaca a intervalos de 10 segundos a lo largo de todo el periodo de estudio utilizando un sistema para recolección de datos continuo ( (Micro-Med®, Louisville, KY) . Las muestras de sangre arterial de linea basal se recolectan a partir de cada animal para confirmar que cada animal presenta cuenta plaquetaria, tiempo de protrombina, tiempo de toromboplastina parcial activada, y concentración de fibrinógeno en plasma normales . Se inducen lesiones hepáticas. El método incluye lo siguiente. El hígado se retrae mediante elevación manual de los lóbulos mediales izquierdo y derecho para permitir la exposición adecuada. Enseguida, se posiciona una tenaza diseñada especialmente con dos puntas afiladas de 4.5 cm configuradas en forma de una "X", con el centro aproximadamente a 2-3 cm dorsales a la intercepción de los lóbulos mediales izquierdo y derecho, en la superficie diafragmática del hígado. La placa base del instrumento se posiciona por debajo del lóbulo cuadrado, sobre la superficie visceral. Atenazando las puntas del instrumento a través del parénquima y los vasos sanguíneos subyacentes de los dos lóbulos mediales de modo tal que las puntas se asienten en las ranuras correspondientes en la placa base del instrumento. Después de la primera penetración del higado, el instrumento se abre y las puntas se retiran y vuelven a colocar hacia la izquierda del animal de modo tal que la segunda aplicación se traslape con la primera en un 50%. Después de este re-posicionamiento el higado se penetra una segunda vez. La documentación de la lesión hepática se logra mediante extirpación e inspección del higado al finalizar el periodo experimental. Las lesiones aparecen como heridas con forma de estrella grandes con un pequeño islote de tejido en el centro, y miden aproximadamente 10 x 8 x 4 cm. Las lesiones pasan de un lado a otro, lacerando uno o más de la vena lobular medial izquierda, vena lobular medial derecha, y vena hepática portal. Treinta segundos después de la lesión, se inicia la resucitación con solución de Ringer con lactato tibia (38°C) en todos los animales. El objetivo de la resucitación es el de regresar a las presiones arteriales promedio de linea basal. El fluido se administra a 260 ml/min. Este régimen de resucitación se continua hasta que se logra el objetivo y se vuelve a iniciar si la MAP decrece, a lo largo del periodo de estudio de 60 minutos. En forma simultánea con el inicio de la resucitación (30 segundos después de la lesión) , los tratamientos se aplican de la siguiente manera. Un aposito se aplica a la superficie del lóbulo cuadrado para cubrir la lesión penetrante y los otros dos apositos se utilizan para rellenar la lesión desde el aspecto diafragmático. Se aplica con presión durante 60 segundos en la dirección dorso ventral. Después de 60 segundos se inspecciona la lesión para determinar si se logra o no la hemostasis. Después se vuelven a re-posicionar las manos del aplicador y se aplica presión durante 60 segundos en la dirección latero-medial, y se efectúa la observación respecto a hemostasis. Esta secuencia se repite para un total de 4 compresiones de 60 segundos. Si la hemostasis es completa después de cualquier compresión, no se efectúan compresiones posteriores. La hemostasis se define como la ausencia de sangrado que se pueda detectar visualmente a partir del sitio de la lesión. Después de completar la aplicación del tratamiento, se cierra el abdomen y el animal se monitorea durante 60 minutos después de la lesión o hasta que muera, lo que suceda primero. La muerte antes de 60 minutos se define como una frecuencia cardiaca de 0. A los 60 minutos, los animales que sobreviven se sacrifican mediante una sobredosis de pentobarbital. Inmediatamente después de inducir la lesión, la sangre se succiona en forma continua desde la cavidad peritoneal hasta el inicio de la aplicación del tratamiento. Se determina el volumen y se designa como pérdida de sangre de pre-tratamiento. Al final del periodo de estudio, se abre cada abdomen y el liquido y la sangre intra-peritoneal coagulada se succionan y se miden. Esto se designa como pérdida de sangre posttratamiento. De manera adicional, se registra el fluido para resucitación total utilizado. El volumen de sangre del animal previo a la lesión se calcula en la forma previamente reportada (Pusateri et al . . Mil . Med. 166,217-222, (2001) ) . Se analizan el peso corporal, volumen calculado de sangre, número de vasos sanguíneos lacerados, MAP basal, tiempo de supervivencia, MAP pre-lesión, pérdida de sangre pre-tratamiento, y puntuaciones de adherencia del vendaje mediante análisis de varianza utilizando el procedimiento GLM de SAS. Los datos se reportan como los mínimos cuadrados de la media ± error estándar de mínimos cuadrados de la media. Los datos se examinan respecto a la heterogenicidad y la no normalidad. Estas condiciones se detectan para los datos de pérdida de sangre posttratamiento y uso de fluido. Por lo tanto, los datos de pérdida de sangre y uso de fluido se transforman en sus logaritmos antes del análisis. Los datos transformados se analizan mediante análisis de varianza. Estos datos se expresan como medias transformadas por retroceso e intervalo de 95% de confianza (Cl de 95%) . Los datos de distribución de hembras y machos, hemostasis y supervivencia se analizan mediante la Prueba Exacta de Fisher utilizando el procedimiento FREQ de SAS. Los datos se reportan como proporciones o porcentajes. Se utilizan pruebas bilaterales para todas las comparaciones. No existen diferencias entre los grupos de tratamiento en cuanto a peso corporal del animal, volumen calculado de sangre, distribución de los géneros de los animales, MAP basal, MAP pre-lesión, número de vasos sanguíneos principales lacerados dentro de la lesión hepática, o pérdida de sangre pre-tratamiento (véase tablas 8 y 9) . La pérdida de sangre post-tratamiento se reduce en el grupo de quitosana, en comparación con el control de aposito de gasa (p = 0.01). No se observa diferencia significativa en el uso de fluido. El porcentaje de supervivencia se incrementa en el grupo de quitosana (p = 0.04). La hemostasis se presenta con mayor frecuencia en el grupo de quitosana a los 3 y 4 minutos después de la lesión (p = 0.03). Los tiempos de supervivencia no se pueden comparar estadísticamente debido al nivel elevado de supervivencia en el grupo de quitosana (véase tabla 10) .

TABLA 7 TABLA 8 TABLA 9 TABLA 10 Este estudio del ISR del Ejercito de los Estados Unidos de Norteamérica (Pusateri et al . J. Trauma , 54,177-182, (2003) ) demuestra, en un estudio independiente, el desempeño significativamente mejorado del aposito de quitosana con respecto a la gasa estándar de 10.16 cm x 10.16 cm. El ISR del Ejercito de los Estados Unidos únicamente ha podido demostrar desempeño significativamente mejorado con respecto a la gasa de 10.16 cm x 10.16 cm en la detención de flujo sanguíneo severo en el caso del aposito del reclamo de esta invención y en el caso de un aposito de trombina y fibrina seco desarrollado por la Cruz Roja. El vendaje de la Cruz Roja es costoso, y también es delicado y propenso a la ruptura.

EJEMPLO 4 Irradiación de vendajes Se preparan apositos para control de hemorragia a base de quitosana de 10.16 cm x 10.16 cm de peso molecular alto con respaldo de espuma porosa 3M 9781 a partir de una fuente de camarón de Islandia (lote S01115-1 de Genis) . Estos se preparan con ácido acético al 2% y solución de quitosana al 2% utilizando una empresa liofilizadora comercial para preparar un lote estéril grande de vendajes de quitosana (Lote # OMLC 2SM114) . Los vendajes se irradian a 15 kGy bajo nitrógeno. Estos se evalúan posteriormente respecto a resistencia a la tracción uniaxial, resistencia al estallido, absorción de sangre, absorción de agua, asi como también respecto a esterilidad. Se efectúan perforaciones de aorta porcina en muestras no irradiadas con radiación gamma en lesiones abdominales y torácicas. Se utilizan siete parches. En promedio, la pérdida de sangre después de la aplicación del parche es < 50 ml . Todos los parches son adherentes, selladores de herida y hemostáticos en su primera aplicación (calificaciones 1 x 0 ) . Todos los animales sobreviven. Se evalúan vendajes no irradiados e irradiados con radiación gamma (Lote # OMLC_2SM114) con una prueba de presión de estallido in vitro desarrollada en el Centro Láser Médico de Oregon, en Portland Oregon. Para efectuar una prueba de estallido, se sumerge una pieza de prueba circular del vendaje de 25 mm de diámetro en sangre entera tratada con citrato durante 10 segundos. La pieza de prueba se coloca después en forma centrada, y se sujeta firmemente con presión digital, sobre una perforación de 4 mm de diámetro en el lado de un tubo de PVC de 50 mm de diámetro durante 3 minutos. Después de esta unión inicial, la presión de fluido dentro del tubo se aumenta a 4.5 ± 0.5 kPa s-1, registrando la presión y el tiempo a intervalos de 0.1 segundos. La presión de estallido se registra como la presión máxima registrada antes de la falla. Se asigna una calificación de falla adhesiva para evaluar la adhesividad relativa del vendaje al sitio de prueba. El sistema de calificación se separa en tres modos distintos de falla. Se asigna una calificación de 1 a una pieza de prueba que se pueda separar fácilmente de la superficie de PVC sin que permanezca quitosana adherida. Se asigna una calificación de 2 cuando la pieza de prueba se desprende fácilmente y cierta cantidad de la quitosana permanece unida al sitio de prueba. Se asigna una calificación de 3 cuando la pieza de prueba únicamente se puede retirar mediante separación cohesiva del aposito total desde la estructura base la cual permanece unida firmemente a la superficie de PVC. La presión de estallido promedio de los vendajes de quitosana irradiados y no irradiados con radiación gamma (media ± desviación estándar, n = 6) sobre un sustrato de PVC utilizando sangre como el medio humectante es de 122 ± 1.9 kPa y 86 ± 20 kPa, respectivamente. Los resultados se analizan estadísticamente utilizando una prueba T (p = 0.007). Las calificaciones de falla adhesiva promedio de vendajes alfa de quitosana irradiados y no irradiados con radiación gamma (media ± desviación estándar, n = 6) sobre un sustrato de PVC utilizando sangre como el medio humectante son ambas de 3 + 0. La figura 10 muestra una imagen de una falla de calificación alta en la cual la falla cohesiva se presenta dentro de la estructura de quitosana. Las propiedades de absorción de sangre y agua de los apositos (Lote # OMLC_2SM114) se determinan sumergiendo piezas de prueba pequeñas (aproximadamente 0.02 g) en sangre o agua durante 3.0 segundos . Se registra la diferencia en masa antes y después de la inmersión. Se determina la masa promedio de medio adsorbido en 3 segundos por 1 gramo de aposito para muestras de quitosana irradiadas y no irradiadas con radiación gamma (n = 4) utilizando sangre o agua como el medio humectante (véase figura 11) . Los resultados se analizan estadísticamente utilizando ANOVA de una via con una prueba Tukey-HSD, p = 0.001. La irradiación gamma reduce en forma significativa la adsorción excesiva de agua en el caso del material no irradiado. Dicha adsorción excesiva de agua puede ocasionar el colapso del aposito (como un gel) con falla adhesiva y estructural subsiguiente. Se evalúan piezas de prueba para resistencia a la tracción de los apositos de quitosana (Lote #• OMLC_2SM114) utilizando un aparato Vitrodyne V1000 de Chatillon Materials Testing equipado con una celda para carga de 5 kg. Las muestras se cortan como piezas en forma de hueso para perro (15 ± 1 mm x 6.5 + 0.5 mm x 5 ± 0.5 mm de calibre x espesor x anchura) y se sujetan entre dos pinzas.

La velocidad de cruceta es de 10 mm/s. Se registran la carga y el desplazamiento a intervalos de 0.1 segundos. Los resultados de tracción de los apositos completos se muestran en la tabla 11. No existen diferencias significativas entre las muestras irradiadas y no irradiadas con radiación gamma con respecto tanto a carga como a deformación mecánica. Se presenta un incremento pequeño en el módulo de Young con irradiación a 15 kGy.

TABLA 11 *calculado para un vendaje de 2.5 cm de ancho Se preparan limpiamente 52 apositos de quitosana de 10.16 cm x 10.16 cm (Lote # 0MLC_2SM114) . De estos apositos de 10.16 cm x 10.16 cm, 46 se empacan en un sobre de empaque doble y se envían a las instalaciones de IsoMedix en Ontario, California para irradiación con radiación gamma a una dosis certificada entre 14-15 kGy. Con estas muestras se envian un conjunto de 8 barras de aposito de quitosana impurificadas con Staphylococus aureus (ATCC 29213) (2.54 cm x 0.533 cm x 0.533 cm) que se cortan a partir del aposito 2SM114#1. Cada barra se inocula con 100 µl de inoculo de MacFarlane. Se extrae con torunda el Staphylococus aureus a partir de un cultivo de control demostrablemente activo. También se incluye un conjunto de control de 4 barras sin Staphylococus . Las muestras de control sin tratamiento con radiación gamma se mantienen en contenedores estériles pequeños en sobres sellados térmicamente a temperatura ambiente y en la oscuridad (véase tabla 12 para un resumen de los controles) .

TABLA 12 Los 46 paquetes de aposito irradiados se abren bajo condiciones estériles con manejo estéril, se une un respaldo de espuma revestido con adhesivo estéril de óxido de etileno (cinta 3M 9781) , se retira una pieza pequeña recortada aproximadamente (3.048 cm x 0.508 cm x 0.061 cm) de cada aposito y respaldo para evaluación de esterilización de aposito individual y los apositos se vuelven a empacar dentro del material de empaque interior original mediante sellado térmico. 40 de estos apositos se marcan con número de lote y número de aposito y se envian para evaluación. Las piezas cortadas y de control se suministran al edificio de microbiología en el Hospital St Vincent para evaluación de esterilidad. Las piezas cortadas y las piezas de control se colocan asépticamente en recipientes para muestra marcados (1.524 cm x 12.7 cm) que contienen medio de crecimiento de tioglicolato enriquecido y se incuban bajo condiciones aerobias a 35°C. Los medios de cultivo se examinan a los 7, 14 y 21 dias respecto a indicaciones de crecimiento. Las muestras se sub-cultivan en medio de agar soya tríptico (TSA) con 5% de sangre de carnero, se incuban a 35°C y se examinan respecto a crecimiento después de 48 horas. Los cultivos individuales se analizan mediante análisis de turbidez y recolección de muestras de subcultivo (swabbing) . Se demuestra la ausencia de cualquier crecimiento y en todos los cultivos y en todos los sub-cultivos a los 7, 14 y 21 dias, incluso aquellos cultivos que no fueron irradiados y se sembraron con Staphylococus aureus . La tinción Gram positiva de cultivos particulares confirma estos hallazgos.

EJEMPLO 5 Preparación de esponja La tabla 13 enumera los polímeros hidrofilicos adquiridos para análisis. Los polímeros hidrofilicos adicionales incluyen polilisina, sulfato de condroitina, almidón y hialuronano. Se preparan soluciones acuosas (2.00% y 8.00% en peso) de agua ultra-filtrada (Ametek) y polvo hidrofilico en botellas limpias de 1 litro (Nalgene) . Las esteras de quitosana no tejidas (PolyMed, Inc.) se convierten en esteras no tejidas de quitina mediante exposición a anhídrido acético (Aldrich 99%) a lo largo de 48 horas a temperatura ambiente. El anhídrido acético residual se lava de la estera utilizando lavados múltiples de agua ultra-filtrada. La exposición de las esteras acetiladas a NaOH (0.5 M) durante 6 horas a temperatura ambiente hidroliza los esteres acetilo en los carbonos 3 y 5 de glucopiranosa sin ninguna hidrólisis de la acetilamida en el carbono de la posición 2 (confirmado mediante análisis FTIR) . Se adquiere una fibra de poliéster (200 mieras bajo carga de 20 N) torcida (1/cm) ultrafina (de 4 mieras de diámetro) de filamentos múltiples (> 50) (Multicraft Plastics, Portland, OR) .

TABLA 13 Se agrega ácido acético glacial (Aldrich 99.99%) a las soluciones acuosas de quitosana al 2% y 8% a 2% y 4% en peso de agua respectivamente. La disolución de las soluciones de polimero hidrofilico se logra mediante rotación axial lenta de las botellas a temperatura ambiente durante un periodo de hasta 24 horas en un agitador de lecho giratorio. Todas las soluciones al 2% pasan fácilmente a solución, y las viscosidades más altas medidas en un viscosimetro Brookfield LVT a 25 °C y aguja del número 2 y número 3 son menores de 2000 centipoise. Las soluciones al 8% de quitosana, ácido alginico y ácido acrilico tienen viscosidades muy altas para ser medidas por el viscosimetro Brookfield. Las soluciones de fluido de muy alta viscosidad en estos casos evitan que las soluciones se puedan verter. En cambio, las soluciones se exprimen, se jalan y se retiran mediante cucharón a partir de sus botellas de plástico para cargar los moldes. Estos últimos fluidos con muy alta viscosidad no se pueden procesar fácilmente en un entorno de fabricación. Las esponjas se forman vertiendo/colocando soluciones acuosas en cavidades de 10.8 cm x 10.8 cm x 2.0 cm, revestidas con Teflón™ en moldes de aluminio hasta 1.7 cm de profundidad en el caso de soluciones acuosas al 2% o 0.45-0.70 cm de profundidad en el caso de soluciones al 8%. Las soluciones, inicialmente temperatura ambiente, se congelan como placas mediante colocación de los moldes de aluminio en anaqueles de refrigeración a temperaturas entre -25 °C y -45 °C durante 3 horas en liofilizadoras Virtis (0.65 m2) o Hull (3.72 m2 o 16.63 m2) . La sublimación del agua desde las placas para producir esponjas poliméricas hidrofilicas se logra utilizando una presión menor de 200 mTorr, condensador a -80 °C con temperatura de anaqueles que se aumenta lentamente desde -45°C hasta 18°C en un lapso de 48 a 60 horas. En el caso de una muestra de las soluciones de quitosana al 2%, se analizan cuatro estrategias para detener la formación de costra (nucleación de hielo en la superficie superior) no deseada en las soluciones de quitosana al 2% durante el congelamiento. Un método es el de colocar una película de polimero delgada sobre la superficie superior de los moldes y en contacto humectante intimo con la superficie de la solución del polimero antes de la colocación en el anaquel frió para congelamiento. Después que la solución se congela como una placa (aproximadamente 1-2 horas) , se retira la película polimérica protectora. La película de cloruro de polivinilideno (por ejemplo, envoltura Sarán™) es particularmente útil, debido a que su temperatura de transición de vidrio está por debajo de -45 °C. La película delgada actúa para evitar que el hielo dendritico formado sobre superficies frias dentro del congelador/liofilizadora se deposite sobre la superficie de la solución de polimero hidrofilico súper-enfriada superior y presente nucleación para una costra de superficie congelada. La segunda estrategia para evitar esta capa de costra es el uso de una placa de acrilico delgada (por ejemplo 3 mm) elevada (utilizando barras espadadoras de 250 mm x 6 mm x 5 mm) colocada inmediatamente encima del molde. Esto tiene ventajas sobre el método de película delgada, debido a que no es necesario interrumpir el ciclo del congelador/liofilizadora para retirar la película polimérica protectora delgada que está en contacto. Un tercer método, indicado en forma más detallada en el ejemplo 7, utiliza la aplicación de respaldo de estera no tejida de quitina permeable, permanente sobre la superficie de las soluciones moldeadas vertidas. Una cuarta estrategia, indicada con mayor detalle en el ejemplo 11, se utiliza para sellar con calor, sacos revestidos con hoja metálica delgada y llenos con solución hidrofilica como la contención de solución durante el congelamiento . Al completarse la liofilización (> 48 horas) , las esponjas se retiran de la secadora, se pesan y guardan en bolsas revestidas con hoja metálica selladas térmicamente. Las esponjas son de 10 cm x 10 cm x 1.7 cm en el caso de soluciones vertidas a 1.7 cm de profundidad y de 10 cm x 10 cm x 0.43 cm en el caso de esponjas vertidas a una profundidad de 0.45-0.7 cm. El análisis de humedad utilizando un analizador de humedad de Arizona Instruments Vapor Pro demuestra un % de humedad residual entre 1% y 4% de la masa de la esponja. El ácido acético residual en las esponjas de quitosana se determina utilizando un titulador automatizado Mettler DL53 y NaOH 0.010 M y está entre 27% y 22% de la masa de la esponja. Las densidades de esponja promedio para las esponjas de quitosana de las soluciones al 2% y 8% son 0.031 + 002 g/cm3 y 0.103 ± 0.014 g/cm3, respectivamente. Las densidades de esponja promedio para las otras esponjas hidrofilicas son 0.0248 ± 0.0036 g/cm3 para las esponjas al 2% y 0.0727 ± 0.0023 g/cm3 para las esponjas al 8%. La diferencia de densidad de 29% promedio entre las esponjas de quitosana y las otras esponjas hidrofilicas es ocasionada principalmente por el ácido acético en las esponjas de quitosana y una pequeña fracción de componentes volátiles no considerados cuando se pesan las esponjas que no son de quitosana. Las esponjas al 2% provenientes de todos los polímeros de prueba hidrofilicos diferentes están todas bien formadas, flexibles y con apariencia y estructura similar. Todas se encogen cerca de un 8% a lo ancho y a lo largo. Las esponjas de alginato y quitosana tienen propiedades cohesivas muy buenas, resisten el desgarre y agrietamiento causadas por la manipulación. Las esponjas de dextrano, carboximetilcelulosa y ácido poliacrilico son menos cohesivas, se agrietan fácilmente y se desgarran con la manipulación. La apariencia típica de una esponja al 2% congelada a una temperatura cercana a -30°C se muestra en la figura 12. Las orillas tienen aspecto liso y están decoradas con un patrón estructural en mosaico regular. El lado superior de la esponja tiene una estructura ligeramente en domo en el centro. El único rasgo aparente es la formación de pústulas regulares de 0.5 mm de diámetro x 0.5 mm de profundidad. La superficie base (es decir, la superficie en contacto con la base del molde de Teflón™ presenta una textura de superficie y regiones aparentes "de cristal individual grande" separadas por los limites del grano. Un corte en sección transversal utilizando navajas de un solo filo (figura 13) demuestra la estructura interna. Los limites de grano en la superficie base se pueden observar como limites que demarcan regiones de laminillas finas orientadas en direcciones diferentes y que probablemente se originan a partir de eventos de nucleación heterogénea diferentes en la superficie del molde. La estructura interna de la esponja se puede describir mediante una capa base de laminillas finas (cada una de 2-5 mieras de espesor) que se extienden hasta y dentro de la esponja y abarcan cerca de 60% del espesor de la esponja. Inmediatamente encima de la laminilla base está una interfaz delgada (< 10 mieras) que separa la capa fina de base de la capa gruesa superior. Esta capa gruesa se origina a partir del hielo dendritico extraño que entra en contacto con la solución de superficie superior cuando la temperatura de la solución superior cae por debajo de 0°C. Las laminillas en esta capa son mayores de 10 mieras de espesor y por lo general están orientadas verticales con respecto a la superficie superior. Estas laminillas verticales, gruesas resisten la compresión en el plano normal con respecto al plano de la esponja. Las esponjas de quitosana formadas mediante protección de la superficie superior contra la nucleación con hielo dendritico no tiene una estructura de costra superior. Estas esponjas tienen desempeño mecánico mejorado en términos de resistencia al agrietamiento, y elasticidad mejorada (flexibilidad) en comparación con esponjas que se forman sin protección de la superficie superior. Todas las superficies de las esponjas al 2% fácilmente adsorben agua o sangre. Todas las esponjas no comprimidas son altamente susceptibles al colapso como un gel si éstas entran en contacto con agua o sangre en exceso durante periodos de tiempo breves (es decir, 5 segundos o más) . Las esponjas al 8% son considerablemente más rígidas que las esponjas al 2%. No se puede observar fácilmente la estructura fina en la base de la esponja, la cual parece cerrada y lisa. Estas esponjas no adsorben sangre y agua tan fácilmente como las esponjas comprimidas al 2%. Al cortar secciones transversales de estas esponjas, se puede observar que la estructura interna no es diferente de aquella en las esponjas al 2%: la estructura vertical superior gruesa está presente a una profundidad cercana a la misma profundidad relativa que en la esponja al 2% (es decir, 30-40%) , y la capa base está constituida por zonas altamente compactas de laminillas orientadas en un ángulo cercano a 30° desde la normal y delimitada por los limites de grano fino. Las esponjas provenientes de la solución al 2% típicamente se compactan calentando platinas de placas paralelas revestidas con Teflón™ a 80°C, y juntando las platinas hasta una distancia de separación constante (típicamente 0.55 cm) a una velocidad constante entre 1200 mm/minuto hasta 5 mm/minuto. La densidad de esponja de una esponja de 1.70 cm de espesor compactada hasta 0.45 cm es de aproximadamente 0.10 g/cm3 . Las esponjas compactadas a menos de 80°C y/o a una velocidad de compresión mayor de 20 mm/minuto son susceptibles a falla mecánica por agrietamiento en los limites de grano y por falla quebradiza. Se encuentra que éste es el caso en las esponjas de quitosana al 2%, de 1.7 cm de espesor compactadas a una velocidad mayor de 60 mm/minuto. De las 864 esponjas, se desechan más de 260 esponjas debido a colapso quebradizo y falla. Cuando la velocidad de compresión se ajusta a 20 mm/minuto solamente se desechan 43 de las 864 esponjas. Cuando la velocidad de compresión se ajusta a 10 mm/minuto, se desechan menos de 9 esponjas. El cambio en estructura de la esponja al compactar a velocidades lentas (< 12 mm/minuto) se muestra en la figura 13. Se puede observar que las laminillas base finas orientadas en un ángulo entre 20° y 40° con respecto a la vertical se pueden densificar fácilmente (75% de compresión) hasta una capa base uniforme, mientras que la capa superior gruesa vertical sólo se densifica parcialmente (aproximadamente 55% de compresión) . A velocidades de compresión lentas, las regiones de limite de grano permanecen en contacto intimo. A velocidades de compresión más altas (> 20 mm/minuto) , es más probable que se separen las regiones de limite de grano Las esponjas comprimidas (observación con respecto a esponjas hidrofilicas) se humectan de manera menos fácil con agua o sangre y éstas son más resistentes a la disolución en ambos medios. Las esponjas comprimidas al 2%, aunque son bien humectadas por la sangre no se disuelven. La resistencia adhesiva de las esponjas comprimidas húmedas se clasifica como PAA > quitosana > CMC > ácido alginico. Una determinante muy importante de una esponja eficaz es la presencia de indentaciones de tamaño microscópico (figura 14) orto-normales a la superficie de las laminillas. Estas indentaciones se proyectan de 3 a 10 mieras desde la superficie de la laminilla como "dientes" pequeños. De manera ideal éstos deben estar distribuidos en forma regular sobre por lo menos una superficie de la laminilla. Estas estructuras son más comunes bajo condiciones controladas cuando las laminillas se forman en orientaciones de crecimiento de laminillas mayores de 30° con respecto a la vertical. Estas también parecen ser controladas por una capacidad para enfriar rápidamente la placa congelada hasta una temperatura menor de -45°C después del periodo inicial de 30 a 60 minutos de congelamiento a -25°C. Después de compactar, las esponjas de quitosana de prueba se hornean en un horno de convección de temperatura constante a 80 °C durante 30 minutos para templar los esfuerzos residuales y eliminar los residuos de ácido acético libre.

EJEMPLO 6 Preparación de esponjas de quitosana al 2% A. Dos muestras de esponjas de quitosana al 2% (N = 3): una muestra se compacta desde 1.7 cm hasta 0.55 cm a 20 mm/minuto mientras que la otra no se compacta. Ambas muestras se hornean a 80 °C durante 30 minutos. Se cortan piezas de prueba cuadradas (5 cm x 5 cm) a partir de cada esponja. Una pieza de prueba se humecta con sangre completa porcina tratada con citrato mediante inmersión de 10 segundos en sangre a temperatura ambiente. Esta se fija en forma centrada sobre una perforación de 4 mm de diámetro en una superficie de 10 cm x 10 cm de PVC transparente de 12 mm de espesor (la cual se hace rugosa utilizando papel lija para agua y en seco de 400 granos) mediante presión digital (200-300 mm de Hg) durante 3 minutos. Se aumenta la presión de la sangre entera porcina a temperatura ambiente en un depósito debajo de la perforación (casi 50 mm de Hg/s) . Se fija un transductor de presión al depósito para medir la presión máxima hasta falla. Las piezas de prueba de esponja (N = 3) que se compactan mantiene la presión hasta una presión mayor de 500 mm de Hg. La falla en estas esponjas se debe a la pérdida de unión adhesiva al PVC. Las piezas de prueba de esponja que no han sido compactadas (N = 3) fallan a una presión menor de 500 mm de Hg y la falla es por colapso de la esponja y disolución en la sangre.

B. Se compactan esponjas de quitosana de solución al 2% (N = 5) desde 1.7 cm hasta 0.55 cm a 10 mm/minuto. Se hornean a 80°C durante 30 minutos; se respaldan con cinta de PVC con espuma y se esterilizan con radiación gamma (15 kGy) . Las piezas de prueba (5 cm x 5 cm) se sumergen en sangre entera porcina a temperatura ambiente durante 10 segundos. La pieza de prueba se une después en forma centrada sobre una perforación de 4 mm de diámetro sobre una superficie de PVC plana y se mantiene con una presión de carga (cerca de 600 mm de Hg) durante 3 minutos. Al final de este periodo, se aumenta la presión de la sangre entera porcina a temperatura ambiente debajo de la perforación (cerca de 50 mm de Hg/s) hasta 300 mm de Hg durante 3 minutos y después se aumenta de nuevo a una velocidad similar hasta que falla la pieza de prueba unida. La falla de la pieza de prueba se presenta cuando la presión de la sangre es mayor de 1800 mm de mercurio. La falla puede ser por ruptura cohesiva, disolución de la capa de costra superior o pérdida adhesiva de la unión al PVC.

C. Se encuentra que una pieza de prueba de esponja de quitosana (4 cm x 4 cm x 0.5 cm) que se prepara a partir de una solución al 8% es efectiva para detener el sangrado en una perforación de aorta porcina aguda de 4 mm de diámetro (presión sanguínea arterial promedio de 70 mm de Hg; pieza de prueba de vendaje hemostática durante más de 30 minutos) . Sin embargo, las esponjas provenientes de la solución de quitosana al 8% son inflexibles y no se pueden ajustar fácilmente a una herida. Por otro lado, las esponjas de la misma densidad, formadas a partir de soluciones de quitosana al 2% pero que se compactan desde 1.37 cm hasta 0.45 cm no sólo son efectivas para detener el sangrado en esta lesión de perforación de aorta, sino que también son fácilmente flexibles y se hacen más flexibles con el tiempo cuando se colocan contra la herida sangrante.

D. Piezas de prueba de 2.54 cm de diámetro (N = 12) provenientes de vendajes de quitosana de solución al 2% lentamente compactadas (1.70 cm hasta 0.45 mm) inicialmente formadas a partir de esponjas libres de costra se unen (presión digital durante 3 minutos a un sangrado inicialmente con flujo libre, presión arterial promedio de 70 mm de Hg) a aortas perforadas (4 mm de diámetro) en 12 cerdos anestesiados. Todas las piezas de prueba detienen el sangrado en la primera aplicación y son hemostáticas a lo largo de un intervalo de por lo menos 30 minutos. En comparación, los vendajes de quitosana formados a partir de vendajes con una capa de costra (N > 100) toman en promedio 0.5 a 1.5 re-aplicaciones de presión para detener el sangrado con respecto al mismo intervalo de tiempo.

E. Se sumergen piezas de prueba ovales (3.8 cm x 3.2 cm) (N = 10) de esponjas de quitosana al 2% compactadas a velocidad rápida (> 50 mm/minuto) en sangre entera porcina a temperatura ambiente durante 10 segundos. Las piezas de prueba se unen después en forma centrada sobre una perforación de 4 mm de diámetro en una superficie de PVC plana y se sujetan con presión digital de 50 mm de Hg durante 3 minutos. Al final de este periodo, la sangre entera porcina, a temperatura ambiente, debajo de la perforación se presuriza (a casi 50 mm de Hg/s) hasta 300 mm de Hg/s durante 3 minutos y después se aumenta de nuevo (aproximadamente a 50 mm de Hg/s) hasta que fallan las piezas de prueba. La falla se califica en términos de presión máxima obtenida, adhesión final al accesorio de prueba, y cohesión de la esponja a granel después de la falla. Estos resultados se comparan con los resultados de análisis similar de 20 piezas de prueba de esponjas de quitosana de 2% que se compactan lentamente (velocidad de compresión < 15 mm/minuto) . Las calificaciones para estallido y adhesión finales son similares; sin embargo 60% de las esponjas compactadas rápidamente tienen las calificaciones de cohesión más bajas posibles debido a disolución que la costra gruesa y gelificación mientras que todos los 20 vendajes compactados lentamente tienen las calificaciones de cohesión más altas.

F. Se preparan dos conjuntos de esponjas de quitosana al 2%. Un conjunto tiene indentaciones de superficie de laminilla sustanciales, el otro conjunto no tiene indentaciones en las superficies de las laminillas. Ambos conjuntos de esponjas se compactan a velocidades de compactación lentas hasta una densidad cercana a 0.10 g/cm3. Las esponjas se hornean a 80°C durante 30 minutos y se respaldan con película de espuma de PVC. En los experimentos de perforación de aorta porcina, el conjunto de esponjas con laminillas indentadas son efectivas para detener el sangrado arterial severo en todos los casos (N = 12) . En las esponjas sin laminillas indentadas (N = 6) ninguna de las piezas de prueba es efectiva para detener el sangrado.

EJEMPLO 7 Preparación de esponja de quitosana con refuerzo de malla de quitina Se coloca una malla no tejida de quitina remojada en agua contra paños absorbentes (Kimwipe™) para reducir la cantidad de agua en la malla de quitina no tejida. La malla se corta como un cuadrado de 10 cm x 10 cm. Esta después se coloca sobre la superficie de una solución de quitosana al 2% vertida en una cavidad de un molde de aluminio de 10.8 cm x 10.8 cm x 2 cm de profundidad. Se observa que la malla permanece suspendida en la superficie de la quitosana y que se presenta cierta cantidad de adsorción de quitosana superficialmente en la malla. La solución de quitosana y la malla se colocan en la liofilizadora de laboratorio (Virtis) . La solución se congela, y el agua se sublima para revelar una esponja con una malla tejida firmemente unida a su superficie. La esponja con la malla de quitina se seca a la misma velocidad que una esponja sin malla de quitina. Una sección de la esponja respaldada con quitina se corta en sección transversal para revelar la infiltración parcial de la quitosana dentro de la malla a una profundidad cercana a 1.5 mm. Sin embargo, la sección también revela que 1 mm de la parte superior de la superficie de la malla está libre de quitosana. La esponja con la superficie mixta de malla de quitina se compacta a 20 mm/minuto entre platinas de placas paralelas calentadas a 80 ± 2°C desde 1.8 cm hasta 0.45 cm de espesor. El corte en sección transversal a través de la esponja después de compactar demuestra que la interfaz entre la malla de quitina y la esponja de quitosana no ha sido dañada por la compactación y que tanto la malla como la esponja están fijas firmemente entre si. Además, la presencia de la malla de quitina detiene la formación de la costra de la esponja (nucleación gruesa de hielo desde la superficie superior hacia abajo) que puede afectar la flexibilidad de la esponja y la resistencia de la esponja a la disolución. La esponja se evalúa en un modelo de perforación aórtica de 4 mm de diámetro porcino aguda. El sangrado en esta lesión no es detenido por piezas de vendaje de quitosana regulares y la pieza de prueba respaldada con malla de quitina se aplica manteniendo la presión digital durante 3 minutos. El cirujano que aplica la pieza de prueba de 2.5 cm de diámetro advierte que la pieza de prueba es particularmente flexible y que él puede retirar su dedo sin que éste se adhiera al respaldo de quitina. La pieza de prueba sella el sitio de la lesión durante un tiempo mayor al periodo de prueba requerido de 30 minutos del protocolo. Este permanece bien adherido al sitio de la lesión y no muestra signos de disolución aún cuando éste no tiene el respaldo impermeable protector normalmente aplicado con este vendaje. Además, se observa que el vendaje se ajusta sobre la lesión debido a que es posible observar un pulso a través de la flexión del vendaje.

EJEMPLO 8 Fibra impregnada con quitosana El multi-filamento de poliéster de 0.05 mm de diámetro sumergido en solución de quitosana al 2% se expande hasta aproximadamente 2 mm de diámetro. La fibra sumergida en quitosana a temperatura ambiente se descansa suavemente sobre una bandeja de aluminio revestida con Teflón hidrofóbica plana sin extraer nada de la solución fuera de la fibra expandida. La charola se coloca sobre el entrepaño de la liofilizadora Virtis a -25°C y se deja congelar. El hielo se retira de la fibra mediante secado por congelamiento dejando una fibra expandida de 2 mm de diámetro impregnada con esponja de quitosana a 0.033 g/cm3. La aplicación de una fuerza de tracción de cerca de 10 N a la fibra expandida y una presión de aproximadamente 500 mm de Hg normal a la superficie de la fibra a través de un dado de prensado no adhesivo de hule de nitrilo ahusado comprime el diámetro de la fibra desde 2 mm hasta 0.7 mm. La fibra presenta flexibilidad adecuada y se prepara para que se teja como un aposito tipo gasa. Una porción de la fibra se hornea a 80°C durante 10 minutos. Esta se sumerge después en sangre durante 10 segundos y se sujeta firmemente contra una superficie de PVC de prueba limpia durante 3 minutos. Esta demuestra buena adhesión.

EJEMPLO 9 Flexión comparativa entre esponjas de baja densidad comprimidas y esponja de alta densidad no compactadas El método de densificación presentado en la descripción reduce una esponja inter-conectada de baja densidad altamente flexible en volumen mediante una reducción controlada en espesor, anchura y/o radio. De preferencia, la flexibilidad de los polímeros hidrofilicos no se modifica con plastificantes tales como ácido glutámico y glicerol, debido a que esta modificación hace que las esponjas sean más susceptibles a la disolución y al colapso de la esponja bajo sangrado severo. Este ejemplo muestra que la compresión de esponjas de baja densidad hasta esponjas de densidad más alta da como resultado esponjas con módulo elástico más bajo que si la esponja de la densidad más alta químicamente idéntica se hubiera formado sin densificación . Con el fin de determinar el módulo elástico (E) , se determinan las deflexiones de la horizontal en experimento con barra voladiza, individual. Las barras rectangulares se cortan a partir de esponjas al 2% compactadas, y esponjas al 8% no compactadas. Las barras son de 9 cm de largo y 2.5 cm de ancho. Estas están ancladas de manera tal que únicamente 6.7 cm de la barra se extienda desde la orilla de una superficie horizontal plana. Se coloca una pesa de 20 g o 30 g sobre la punta de la barra a 6.5 cm a partir del punto de anclaje. La deflexión del punto de 6.5 cm de la barra normal desde la horizontal se mide 3 segundos después de la carga. El módulo elástico (E) se determina a partir de la ecuación E = P.L3/(3y.I) En la cual I = W.h3/12 P = carga (N) ; L = longitud libre de la barra (m) ; "y" = deflexión de la barra a partir de la horizontal (m) ; w = anchura de la barra (m) ; H = altura de la barra en el plano vertical (m) ; I = momento de inercia (m4) .

El espesor de la barra se determina utilizando un calibrador digital. Después de determinar la deflexión de la barra, la barra se corta en piezas de 2.54 cm x 2.54 cm, se pesan y se determina la densidad. Los resultados de la evaluación se muestran en la tabla 2. Se puede observar que las muestras al 8% son todas más resistentes a la flexión que las muestras al 2%. Los módulos elásticos promedio (MPa) para esponja al 2% compactadas son 6.43 ± 3.3, 1.75, 3.5 y 2.9 ± 0.4 para quitosana, ácido poliacrilico, carboximetilcelulosa, y ácido alginico, respectivamente. Los módulos elásticos promedio (MPa) para esponjas al 8% son 10.6 ± 3.3, 12.4, 4.54 y 5.7 ± 2.1 para quitosana, ácido poliacrilico, carboximetilcelulosa, y ácido alginico, respectivamente. La relación de módulos elásticos promedio de las esponjas al 2% compactadas con respecto a las esponjas al 8% es 0.61, 0.14, 0.77 y 0.51 para quitosana, ácido poliacrilico, carboximetilcelulosa, y ácido alginico, respectivamente .

TABLA 14 PAA ácido poliacrilico, CMC = carboximetilcelulosa, AA = ácido alginico EJ?MPLO 10 Se sumergen piezas de prueba (5 cm x 5 cm) de esponjas de ácido poliacrilico mixtas, de solución al 2% compactadas (N = 2) en sangre entera porcina a temperatura ambiente durante 10 segundos. La pieza de prueba se une después en forma centrada sobre una perforación de 4 mm de diámetro sobre una superficie de PVC plana y se mantiene con una presión de carga (750 mm de Hg) durante 3 minutos. Al final de este periodo, se aumenta la presión de la sangre entera porcina a temperatura ambiente debajo de la perforación (cerca de 50 mm de Hg/s) hasta 300 mm de Hg durante 3 minutos y después se aumenta de nuevo a una velocidad similar hasta que falla la pieza de prueba unida. La falla de la pieza de prueba se presenta cuando la presión de la sangre es mayor de 2300 mm de Hg. La falla es por ruptura cohesiva de la esponja.

EJEMPLO 11 Se describe una estrategia para lograr contacto térmico excelente con los entrepaños de congelamiento, detener el curso de formación de costra durante el congelamiento y aplicar un nivel controlado de esfuerzo cortante normal a las laminillas verticales en crecimiento. Se llenan sacos revestidos con lámina metálica delgada, sellados al calor (15 cm x 23 cm) con 200 g de solución de quitosana al 2%. Todo el aire se retira del saco antes del sellado final. Los sacos se colocan en una liofilizadora Virtis de laboratorio entre entrepaños de placas paralelas a -25°C para congelar durante por lo menos 180 minutos. La secadora Virtis tiene una instalación de "tapadera" que permite que el entrepaño superior se pueda bajar sobre el entrepaño inferior y que por lo tanto haga contacto y aplique firmemente una carga a los sacos de hoja metálica delgada, llenos con quitosana, colocados entre espaciadores en el entrepaño inferior. Los sacos se llenan hasta un nivel tal que cuando se baje el entrepaño superior sobre el inferior, el entrepaño superior descanse firmemente sobre la superficie superior del saco lleno con solución. El grado de presión sobre el saco puede ser controlado por el peso libre del entrepaño superior y por el número de sacos que descansan entre los dos entrepaños. En este ejemplo, se utilizan barras espadadoras de 1.7 cm, sólo se colocan 2 sacos entre los entrepaños y la carga sobre los sacos es de aproximadamente 10 kg. Antes de liofilizar, los entrepaños tapados se elevan; las placas congeladas se retiran de sus sacos y se colocan sobre los entrepaños frios de la liofilizadora. La expansión dentro de los sacos durante el congelamiento se acomoda mediante desgarres internos parciales del sello térmico. Las placas se liofilizan posteriormente dentro de las esponjas. El corte en secciones transversales a través de la esponja demuestra estructuras de laminilla uniformes que crecen desde las superficies superior e inferior y se encuentran en la parte media de las esponjas. La estructura superior es la imagen especular de la estructura inferior. Todas estas laminillas están uniformemente orientadas a un ángulo entre 20° y 30° respecto a la vertical y en la dirección opuesta desde el centro hacia la orilla de la esponja. Las esponjas demuestran una ausencia de límites de grano. Las esponjas se compactan desde 1.7 cm de espesor hasta 0.55 cm. Estas tienen propiedades mecánicas excelentes en términos de resistencia a la tracción, flexibilidad y resistencia al desgarre o fracturación al doblarse en forma severa. Las esponjas se hornean, se respaldan con respaldo de espuma de PVC y se irradian con radiación gamma a 15 kGy. Una pieza de prueba oval individual se aplica a la perforación de una aorta en el modelo porcino agudo. Esta es efectiva para detener el sangrado arterial a través del período de prueba de 30 minutos. El cirujano advierte que la muestra tiene excelente flexibilidad.

EJEMPLO 12 Se crea una superficie texturizada positiva simple en una esponja de quitosana de 10 cm x 10 cm x 1.7 cm. Esto se logra utilizando una tarjeta de aluminio con patrón negativo de 10 cm x 10 cm x 0.25 cm. El patrón se efectúa corriendo un papel húmedo y seco de 400 granos sobre la superficie de aluminio plana. Esta superficie se reviste con un colorante rojo no permanente la mayoría del cual se elimina de la porción superior de la superficie frotando con un paño seco. Una esponja de quitosana que se comprime contra esta superficie demuestra la formación de patrón de superficie positivo debido a que éste es revelado por el colorante rojo en la tarjeta de aluminio. Todas las referencias antes discutidas se incorporan en la presente invención para referencia en su totalidad para todos los propósitos. Aunque esta invención se ha presentado y descrito en forma particular con referencia a modalidades preferidas de la misma, los expertos en la técnica entenderán que se pueden hacer en la misma diversos cambios en la forma y detalles sin alejarse de alcance y campo de la invención como quedan definidos por las reivindicaciones anexas.

Claims

NOVEDAD DE LA INVENCIÓN Habiendo descrito el presente invento se considera como novedad y por lo tanto se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes : REIVINDICACIONES 1.- Una esponja comprimida para control de hemorragia que comprende un polímero hidrofílico, caracterizada porque la esponja comprimida tiene una densidad de esponja comprimida de aproximadamente 0.6 a 0.15 g/cm3. 2.- La esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el polímero hidrofílico es un alginato, quitosana, una poliamina hidrofílica, un derivado de quitosana, poli-lisina, polietilen-imina, xantano, carragenina, polímero de amonio cuaternario, sulfato de condroitina, un almidón, un polímero celulósico modificado, un dextrano, hialuronano o una combinación de los mismos. 3.- La esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 2, caracterizada porque el almidón se selecciona a partir del grupo que consiste de amilasa, amilopectina y una combinación de amilopectina y amilasa . 4. - La esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque el polímero hidrofílico es quitosana. 5.- La esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque la quitosana tiene un peso molecular promedio en peso de por lo menos 100 kDa aproximadamente. 6.- La esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque la quitosana tiene un peso molecular promedio en peso de por lo menos 150 kDa aproximadamente. 7.- La esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque la quitosana tiene un peso molecular promedio en peso de por lo menos 300 kDa aproximadamente. 8.- La esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque la quitosana tiene una viscosidad a 25°C en una solución de ácido acético (AA) al 1% la cual es de 100 centipoise aproximadamente hasta 2000 centipoise aproximadamente. 9.- La esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque la quitosana tiene una viscosidad a 25°C en una solución de ácido acético (AA) al 1% la cual es de 125 centipoise aproximadamente hasta 1000 centipoise aproximadamente. 10.- La esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 4, caracterizada porque la quitosana tiene una viscosidad a 25°C en una solución de ácido acético (AA) al 1% la cual es de 150 centipoise aproximadamente hasta 500 centipoise aproximadamente. 11.- La esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 1, caracterizada porque la esponja comprimida comprende también un ingrediente activo. 12.- La esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 11, caracterizada porque el ingrediente activo se selecciona a partir del grupo que consiste de calcio, trombina, factor Vlla, factor XIII, tromboxano A2 , prostaglandina-2a, factor de crecimiento epidérmico, factor de crecimiento derivado de plaquetas, factor de Von illebrand, factor de necrosis de tumor (TNF) , TNF-alfa, factor de crecimiento transformante (TGF) , TGF-alfa, TGF-beta, factor de crecimiento tipo insulina, factor de crecimiento de fibroblasto, factor de crecimiento de queratinocito, factor de crecimiento de nervio, penicilina, ampicilina, meticilina, amoxicilina, clavamox, ácido clavulánico, amoxicilina, aztreonam, imipenem, estreptomicina, kanamicina, tobramicina, gentamicina, vancomicina, clindamicina, eritromicina, polimixina, bacitracina, anfotericina, nistatina, rifampicina, tetraciclina, doxiciclina, cloramfenicol y una combinación de los mismos. 13.- Una esponja de material mixto comprimida para control de hemorragia que comprende una esponja de polímero hidrofílico y una matriz de polímero humectable o matrices de polímero humectable dentro de la esponja y/o en la superficie de la esponja. 14.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque el polímero hidrofílico se selecciona a partir del grupo que consiste de alginato, una poliamina hidrofílica, un derivado de quitosana, poli-lisina, polietilen-imina, xantano, carragenina, polímero de amonio cuaternario, sulfato de condroitina, un almidón, un material celulósico modificado, un dextrano, hialuronano y una combinación de los mismos. 15.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 14, caracterizada porque el almidón se selecciona a partir del grupo que consiste de amilasa, amilopectina y una combinación tanto de amilopectina como de amilasa. 16.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque el polímero humectable se selecciona a partir del grupo que consiste de esteras no tejidas, esteras tejidas, malla de polímero moldeada y esponjas de baja densidad. 17.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 16, caracterizada porque la matriz polimérica humectable se selecciona a partir del grupo que consiste de una quitina, un alginato, una quitosana neutralizada, una quitosana re-acetilada, un ácido poli (glicólico) , un ácido poli (láctico) , una poli (e-caprolactona) , un ácido poli(ß-hidroxibutírico) , un ácido poli (ß-hidroxivalérico) , una polidioxanona, un poli (óxido de etileno), un ácido poli (málico) , un ácido poli (tartrónico) , un polifosfaceno, un polietileno, un polipropileno, un polímero de metaloceno, un poliuretano, un polímero de cloruro de polivinilo, un poliéster, una poliamida y una combinación de los mismos. 18.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque el polímero hidrofílico es quitosana. 19.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque la quitosana tiene un peso molecular promedio en peso de por lo menos 100 kDa aproximadamente. 20.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque la quitosana tiene un peso molecular promedio en peso de por lo menos 150 kDa aproximadamente. 21.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque la quitosana tiene un peso molecular promedio en peso de por lo menos 300 kDa aproximadamente. 22.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque la quitosana tiene una viscosidad a 25 °C en una solución de ácido acético (AA) al 1% la cual es de 100 centipoise aproximadamente hasta 2000 centipoise aproximadamente . 23.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque la quitosana tiene una viscosidad a 25°C en una solución de ácido acético (AA) al 1% la cual es de 125 centipoise aproximadamente hasta 1000 centipoise aproximadamente . 24.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque la quitosana tiene una viscosidad a 25°C en una solución de ácido acético (AA) al 1% la cual es de 150 centipoise aproximadamente hasta 500 centipoise aproximadamente . 25.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja comprende una fibra textil impregnada con un polímero hidrofílico. 26.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 25, caracterizada porque la fibra textil se impregna con un polimero hidrofílico . 27.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 26, caracterizada porque el polímero hidrofílico es quitosana. 28.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 26, caracterizada porque el polímero hidrofílico es alginato, una poliamina hidrofílica, un derivado de quitosana, poli-lisina, polietilen-imina, xantano, carragenina, polimero de amonio cuaternario, sulfato de condroitina, un almidón, un polímero celulósico modificado, un dextrano, hialuronano o una combinación de los mismos. 29.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 28, caracterizada porque el almidón se selecciona a partir del grupo que consiste de amilasa, amilopectina y una combinación tanto de amilopectina como de amilasa. 30.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la malla humectable es una malla no tejida. 31.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 15 mieras hasta aproximadamente 300 mieras. 32.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 30 mieras hasta aproximadamente 250 mieras. 33.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 100 mieras hasta aproximadamente 225 mieras . 34.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 125 mieras hasta aproximadamente 200 mieras . 35.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja contiene poros con diámetros de poro de aproximadamente 150 mieras hasta aproximadamente 175 mieras . 36.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13 caracterizada porque la esponja tiene un área de superficie disponible para contacto con sangre por superficie de base de la esponja de aproximadamente 100 cm2 por cada cm2 hasta aproximadamente 1000 cm2 por cada cm2. 37.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja tiene un área de superficie disponible para contacto con sangre por superficie de base de la esponja de aproximadamente 200 cm2 por cada cm2 hasta aproximadamente 800 cm2 por cada cm2. 38.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja tiene un área de superficie disponible para contacto con sangre por superficie de base de la esponja de aproximadamente 300 cm2 por cada cm2 hasta aproximadamente 500 cm2 por cada cm2. 39.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque la masa disponible de bio-material de quitosana por área de superficie de la herida es de aproximadamente 0.02 g/cm2 hasta aproximadamente 1.0 g/cm2. 40.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque la masa disponible de bio-material de quitosana por área de superficie de la herida es de aproximadamente 0 . 04 g/cm2 hasta aproximadamente 0.5 g/cm2. 41.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 18, caracterizada porque la masa disponible de bio-material de quitosana por área de superficie de la herida es de aproximadamente 0.06 g/cm2 hasta aproximadamente 1.0 g/cm2. 42.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto comprimida también comprende una capa de soporte de respaldo. 43.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 42, caracterizada porque la capa de soporte de respaldo es una capa de material polimérico. 44.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 43, caracterizada porque el material polimérico es un material sintético no biodegradable o un polímero biodegradable normalmente , presente en la naturaleza. 45.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 44, caracterizada porque el material biodegradable sintético se selecciona a partir del grupo que consiste de ácido poli (glicólico) , ácido poli (láctico) , poli (e-caprolactona), ácido poli (ß-hidroxibutírico) , ácido poli (ß-hidroxivalérico) , polidioxanona, poli (óxido de etileno), ácido poli (málico) , ácido poli (tartrónico) , polifosfaceno, los copolímeros de los monómeros utilizados para sintetizar dichos polímeros y combinaciones de los mismos . 46.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 43, caracterizada porque el polímero normalmente presente en la naturaleza se selecciona a partir del grupo que consiste de quitina, algina, un almidón, dextrano, colágena, albúmina y una combinación de los mismos. 47.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 44, caracterizada porque el material no biodegradable sintético se selecciona a partir del grupo que consiste de polietileno, polipropileno, un polímero de metaloceno, un poliuretano, un polímero de cloruro de polivinilo, un poliéster y una poliamida. 48.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto comprimida tiene un grado de adhesión al sitio de la herida de aproximadamente 40 kPa hasta aproximadamente 500 kPa . 49.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto comprimida tiene un grado de adhesión al sitio de la herida de aproximadamente 60 kPa hasta aproximadamente 250 kPa . 50.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto comprimida tiene un grado de adhesión al sitio de la herida de aproximadamente 100 kPa hasta aproximadamente 200 kPa. 51.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto puede formar un material adhesivo en combinación con la sangre que fluye a partir de dicha herida en una interfaz aposito-sangre. 52.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 51, caracterizada porque el material adhesivo es un material adhesivo de quitosana . 53.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 52, caracterizada porque el material adhesivo a base de quitosana de preferencia tiene un pH no mayor de 5.5 aproximadamente cuando se sella la herida. 54.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 52, caracterizada porque el material adhesivo a base de quitosana de preferencia tiene un pH no mayor de 4.5 aproximadamente cuando se sella la herida. 55.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 52, caracterizada porque el material adhesivo a base de quitosana de preferencia tiene un pH no mayor de 4.0 aproximadamente cuando se sella la herida. 56.- La esponja de material mixto de quitosana comprimida de conformidad con la reivindicación 52, caracterizada porque el material adhesivo comprende un ácido que se selecciona a partir del grupo que consiste de ácido acético, ácido fórmico, ácido láctico, ácido ascórbico, ácido clorhídrico y ácido cítrico. 57.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto comprimida tiene un espesor no menor de 3.0 mm aproximadamente y no mayor de 8 mm aproximadamente . 58.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto comprimida tiene un espesor no menor de 3.5 mm aproximadamente y no mayor de 7 mm aproximadamente . 59.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto comprimida tiene un espesor no menor de 4.0 mm aproximadamente y no mayor de 6 mm aproximadamente . 60.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto comprimida tiene un esfuerzo de tracción final de aproximadamente 0.1 MPa hasta aproximadamente 1.0 MPa. 61.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto comprimida tiene un esfuerzo de tracción final de aproximadamente 0.15 MPa hasta aproximadamente 0.8 MPa. 62.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto comprimida tiene un esfuerzo de tracción final de aproximadamente 0.25 MPa hasta aproximadamente 0.5 MPa . 63.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto comprimida tiene un estiramiento final de aproximadamente 5% . 64.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto comprimida tiene un estiramiento final de aproximadamente 10%. 65.- La esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13, caracterizada porque la esponja de material mixto comprimida tiene un estiramiento final de aproximadamente 15%. 66.- Un procedimiento para preparar una esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 1 para control de hemorragia que comprende: (a) preparar mediante congelamiento/liofilización una esponja de baja densidad; y (b) comprimir la esponja de baja densidad a una velocidad preferida de 10 mm por minuto y a una temperatura controlada preferida de 80°C con lo cual se obtiene una esponja comprimida con una densidad de aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 0.2 g/cm3. 67.- Un procedimiento para preparar una esponja comprimida para control de hemorragia de conformidad con la reivindicación 1 que comprende: (a) comprimir la esponja de baja densidad subsiguiente a una velocidad de aproximadamente 10 mm por minuto, a una temperatura controlada de 80°C para obtener una esponja comprimida con una densidad de aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 0.2 g/cm3, y en la cual dicha esponja de baja densidad no ha sido congelada o liofilizada antes de compactar. 68. - El procedimiento de conformidad con la reivindicación 67, caracterizado porque la esponja de baja densidad tiene una densidad de aproximadamente 0.010 g/cm3 hasta aproximadamente 0.035 g/cm3. 69.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 67, caracterizado porque la esponja comprimida tiene una densidad de aproximadamente 0.1 g/cm3 hasta aproximadamente 0.15 g/cm3. 70.- Un procedimiento para preparar una esponja de material mixto comprimida para control de hemorragia de conformidad con la reivindicación 13 que comprende: a) des-gasificar una solución de bio-material de quitosana calentando la solución de bio-material de quitosana y aplicando un vacío a la misma; b) congelar la solución de bio-material de quitosana; c) eliminar el agua del interior del bio-material de quitosana congelado sin dañar la integridad estructural del bio-material de quitosana congelado de manera tal que el agua en el bio-material de quitosana pase desde una fase sólida hasta una fase gaseosa; d) comprimir el bio-material de quitosana a una velocidad preferida de aproximadamente 10 mm por minuto con lo cual se obtiene una esponja comprimida con una densidad de aproximadamente 0.1 hasta aproximadamente 0.2 g/cm3; y e) hornear la esponja de quitosana comprimida a 80 °C aproximadamente durante 30 minutos aproximadamente. 71.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque la temperatura se reduce gradualmente a lo largo de un intervalo de tiempo predeterminado durante el congelamiento del bio-material de quitosana del paso (b) . 72.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque la temperatura del paso (b) es una temperatura de congelamiento final no mayor de -25 °C aproximadamente. 73.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque la temperatura del paso (b) es una temperatura de congelamiento final no mayor de -35 °C aproximadamente. 74.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque la temperatura del paso (b) es una temperatura de congelamiento final no mayor de -45 °C aproximadamente. 75.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque la remoción de agua se efectúa mediante liofilización del bio-material de quitosana congelado. 76.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 70, que comprende también el paso de agregar gases que se seleccionan a partir del grupo que consiste de argón, nitrógeno y helio de regreso a la solución de quitosana des-gasificada antes del congelamiento. 77.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque la esponja comprimida se esteriliza. 78.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 70, caracterizado porque la esponja comprimida se esteriliza mediante irradiación gamma. 79.- Un método para evitar sangrado severo en un individuo que comprende administrar una esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 1 o una esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 13 a dicho individuo en necesidad de lo mismo. 80.- El método de conformidad con la reivindicación 79, caracterizado porque el individuo es un mamífero . 81.- El método de conformidad con la reivindicación 79, caracterizado porque el mamífero es humano . 82.- El método de conformidad con la reivindicación 79, caracterizado porque el individuo padece de sangrado severo de modo tal que puede resultar una pérdida de sangre total de 30-40% en un lapso de 20 a 30 minutos si no se controla el sangrado. 83.- El método de conformidad con la reivindicación 79, caracterizado porque la esponja comprimida o esponja de material mixto comprimida se aplica con una presión de 60 a 80 kPa aproximadamente directamente sobre la lesión sangrante y se mantiene en el sitio durante 3 a 5 minutos antes de liberar, empacar y vendar. 84.- Un estuche de vendaje para tratar sangrado severo que comprende esponjas comprimidas de conformidad con la reivindicación 1 o una esponja comprimida de material mixto de conformidad con la reivindicación 13, rollos de gasa para empacar y una venda Ace para vendar una herida. 85.- Un procedimiento para el acoplamiento y formación de malla mecánicos de las esponjas de conformidad con las reivindicaciones 1 y 13 que comprende presionar los lados de la esponja que entran en contacto con el tejido contra una superficie microtexturizada . 86.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 85, caracterizado porque la superficie microtexturizada se selecciona a partir del grupo que consiste de superficies preparadas mediante grabado químico, superficies preparadas mediante ablación de superficie por haz iónico, superficies preparadas mediante corte mecánico y superficies preparadas mediante ablación con láser. 87.— Un procedimiento para mejorar la tracción mecánica de las esponjas de conformidad con las reivindicaciones 1 y 13 que comprende presionar los lados de la esponja que entran en contacto con el tejido contra una superficie microtexturizada. 88.- El procedimiento de conformidad con la reivindicación 87, caracterizado porque la superficie microtexturizada se selecciona a partir del grupo que consiste de superficies preparadas mediante grabado químico, y superficies preparadas mediante técnicas de voladura con partículas. 89.- Un procedimiento para limitar o detener la formación de costra gruesa sobre la superficie de las esponjas de conformidad con las reivindicaciones 1 y 13 que comprende cubrir la superficie de la esponja con una película polimérica, una placa de polímero, una placa de plástico elevada o una película de membrana respirable, impermeable a humedad. 90.- Una esponja de baja densidad, caracterizada porque la esponja se forma comprimiendo una esponja con una densidad de aproximadamente menos de 0.05 g/cm3 hasta que dicha esponja llegue a una densidad de aproximadamente menos de 0.08 g/cm3, y porque la esponja se forma mediante un procedimiento diferente al de congelamiento o liofilización. 91.- La esponja de baja densidad de conformidad con la reivindicación 90, caracterizada porque la esponja se forma utilizando un método que se selecciona a partir del grupo que consiste de un procedimiento de inversión de fase, esponjas que se preparan mediante unión covalente de componentes activos a matrices preformadas, y técnicas de formación de espuma. 92.- La esponja comprimida y la esponja de material mixto comprimida de conformidad con las reivindicaciones 1 y 13, caracterizadas porque las esponjas también comprenden por lo menos un polímero hidrofílico adicional . 93.- La esponja comprimida y la esponja de material mixto comprimida de conformidad con la reivindicación 92, caracterizadas porque el polimero hidrofílico se selecciona a partir del grupo que consiste de alginato, quitosana, una poliamina hidrofílica, un derivado de quitosana, poli-lisina, polietilen-imina, xantano, carragenina, polímero de amonio cuaternario, sulfato de condroitina, un almidón, un polímero celulósico modificado, un dextrano, hialuronano y una combinación de los mismos. 94.- La esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 93, caracterizada porque el almidón se selecciona a partir del grupo que consiste de amilasa, amilopectina, y una combinación de amilopectina y amilasa. 95.- La esponja comprimida de conformidad con la reivindicación 92, caracterizada porque el polímero hidrofílico es quitosana.