MXPA04011129A

MXPA04011129A - Sistema de recoleccion de muestra de inhibidor de proteasa.

Info

Publication number: MXPA04011129A
Application number: MXPA04011129A
Authority: MX
Inventors: Lin Fu-Chung
Original assignee: Becton Dickinson Co
Priority date: 2002-05-13
Filing date: 2003-05-13
Publication date: 2005-02-17
Also published as: JP4496407B2; US7645425B2; US20040013575A1; EP2260942A3; US7985387B2; AU2003234382A1; CN1662307A; EP2260942A2; KR20060007346A; US20100280414A1; AU2003234382B2; US20080241001A1; EP1549434A1; CA2484876C; CA2484876A1; WO2003097237A2; BR0309976A; US7309468B2; CN102353569A; JP2005525126A

Abstract

Un metodo y dispositivo para recolectar una muestra biologica, particularmente una muestra de sangre entera, incluye cuando menos un agente de estabilizacion en una cantidad efectiva para estabilizar e inhibir la degradacion de proteina y/o fragmentacion. El agente de estabilizacion, es capaz de estabilizar las proteasas de una muestra biologica, en particular en el momento de la recoleccion, mediante la inhibicion de degradacion de proteina y/o fragmentacion en la muestra durante el almacenamiento de la misma. El agente de estabilizacion comprende o consiste de uno o mas inhibidores de proteasa.

Description

SISTEMA DE RECOLECCIÓN DE MUESTRA DE INHIBIDOR DE PROTEASA Esta solicitud reclama la prioridad de la Solicitud de Patente Provisional de E.U.A. No. de Serie 60/379,399, que se presentó el 13 de mayo de 2002. CAMPO DE LA INVENCIÓN La presente invención está dirigida a un método y dispositivo para recolectar y estabilizar una muestra biológica, particularmente una muestra sangre entera, directamente de un paciente. Más específicamente, la presente invención se relaciona con recipientes de recolección de muestra que tienen un aditivo de estabilización contenido en el mismo para estabilizar proteasas inmediatamente a la recolección de una muestra biológica y para inhibir la degradación de proteina y/o fragmentación durante el almacenamiento de la misma. ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN En instalaciones de diagnóstico clínico, frecuentemente ha sido necesario recoger muestras biológicas tales como sangre entera, concentrados de células rojas de sangre, concentrados de plaqueta, concentrados de leucocito, tejido, aspirados de médula de hueso, plasma, suero, fluido espinal cerebral, feces, orina, células cultivadas, saliva, secreciones orales, secreciones nasales y lo semejante en diversos recipientes o tubos para prueba y análisis subsecuentes. De manera típica, las muestran luego deben transportarse a una ubicación diferente, tal como un laboratorio, en donde el personal conduce las pruebas específicas en las muestras. Generalmente, pasa una cantidad de tiempo considerable entre obtener la muestra y analizarla. Un problema común y recurrente, por lo tanto, es el mantenimiento de la muestra biológica de una manera que impida la degradación, alteración o destrucción de materiales esenciales durante las manipulaciones y/o preparaciones que preceden al análisis de la muestra biológica como un espécimen de prueba. Todas las células contienen un número de proteasas y, en tanto las células estén intactas, las proteasas no dañan los componentes celulares . Una vez que las células se congelan, rompen o interrumpen, sin embargo, las enzimas de proteasa empiezan a reaccionar en proteínas células no específicamente, degradando rápidamente de esta manera las proteínas celulares. En aislamiento de proteína, esto puede conducir a proteínas degradadas o fragmentadas. Esto también puede conducir a una declinación en niveles de proteína durante almacenamiento y transporte de las muestras biológicas, limitando de esta manera la sensibilidad de los métodos de prueba. El rendimiento ---de las proteínas, por lo tanto, se puede reducir drásticamente y puede poner en peligro todos los experimentos subsecuentes adicionales, tales como por ejemplo, cuantificación de proteína, trazar de gel de 2-D de proteínas, desarrollo de droga. El manchado del Oeste, análisis de gene reportero, inmunoprecipitaciones, etiquetado de epitope, ensayos de actividad de proteina específica, etc. Se ha reconocido desde hace tiempo que la muestra de fluido corporal se debe mantener y conservar durante las manipulaciones y/o preparaciones que preceden el análisis como un espécimen de prueba. Se ha desarrollado un número de composiciones diferentes para mantener la estabilidad de la fracción celular o los componentes no celulares de una muestra de prueba durante las etapas de preparación. Estas incluyen, por ejemplo, el uso de un fosfato soluble en agua tal como ATP y un agente de quelación para la conservación de células enteras o componentes celulares (Publicación EP 431385-A) ; el uso de ácido, droga antíbacteriana, y compuesto de flúor en combinación para estabilización de células en orina (Publicación de Patente japonesa 05249104-A) ; el uso de una solución acuosa de etanol, diol alifático y polietilenglicol para conservar célula o componentes de fluido de sangre (Publicación de Patente japonesa 03295465-A) ; una composición de reactivo para ensayos biológicos que contiene un complejo de cobalto trivalente soluble en agua reducible, tinte metalizable, y polímero soluble en agua (Patente de E.U.A. No. 5,171,669); una solución de control de estabilidad para determinación de urobilinógeno en muestras de orina (Patentes de E.U.A. Nos. 4, 677,075 y 4,703,013); el uso de una solución acuosa que contiene tampón de fosfato, albúmina, glicina, y cisteína para estabilizar dehidrogenasas (Publicación de Patente alemana DE2629808-A) ; una composición de estabilización que comprende un tampón, alanina y manitol para estabilización de composiciones de proteina secadas por congelación (Publicación EP6829440A1) ; y el uso de polielectrolito catiónico y poliol cíclico en soluciones acuosas para estabilizar proteínas contra desnaturalización durante secado (Patente de E.U.A. No. 5,240,843). Un número de preparaciones de estabilización se han fabricado y vendido comercialmente, un ejemplo notorio siendo las tabletas de coctel de inhibidor de proteasa COMPLETE(R> para la inhibición de proteasas durante extracciones de tejidos anímales y de plantas . A pesar del desarrollo y disponibilidad comercial de preparaciones y composiciones de estabilización, la mayoría increíble de estas son muy limitadas en cuanto a su utilidad y eficacia, y no se prestan sin mayor modificación y alteraciones a problemas clínicos específicos o una amplía variedad de diferentes ajustes clínicos y analíticos. Por ejemplo, muchas de estas composiciones no estabilizan las proteasas en la muestra, cayendo de esta manera a conservar proteínas sensibles en las muestras biológicas.

En el área de recolección de sangre, un aditivo común generalmente usado en muestras de sangre antes de centrifugación para separar la sangre en capas de célula es un aditivo de anticoagulación. De manera típica, el aditivo de anticoagulación es un citrato o heparina tamponado en una solución acuosa. Los tubos de recolección de sangre que contienen un anticoagulante se fabrican y venden come etalmente . Un ejemplo de dicho tubo se describe en la Patente de E.X.A. No. 5, 667, 963 a Smith y col. También se han hecho esfuerzos para prevenir la degradación de péptidos añadiendo EDTA y/o inhibidores de proteólisis a la muestra. Por ejemplo, la Patente de E.XJ.A. No. 5,541,116 describe el uso de dos inhibidores de proteasa, anastatina y leupeptina, en combinación con EDTA. para estabilizar péptidos en sangre entera, suero o muestras de plasma. La patente, sin embargo, describe estabilizar las muestras añadiendo una cantidad adecuada de la corobínación de estabilización a las propias muestras después de que se han obtenido o después de descongelar en situaciones en donde la muestra se habia congelado previamente después de la recolección de la misma. Adicionalmente, se sabe que en algunos laboratorios que estudias proteómicas, cocteles de inhibidor de proteasa se retiran manualmente hacia jeringas y luego se inyectan hacia tubos de recolección de sangre. Este procedimiento, sin embargo, es peligroso debido a la probabilidad de daños con punta de aguja. Además, los volúmenes de cocteles de inhibidor de proteasa están sujetados a variabilidad de técnico a técnico debido al método manual de cargar los cocteles de inhibidor de proteasa hacia los tubos . El interés de normalización de industria para un coctel de proteasa, es decir, una combinación de inhibidores de proteasa, también es significativo, Antes que nada, diferentes compañías y diferentes investigadores están introduciendo un espectro de inhibidores de proteasa a muestras recogidas, particularmente sangre o un componente de la misma. Las diferencias de efectividad y comportamiento de los inhibidores de proteasa y combinaciones de los mismos, ostensiblemente, no están bien estudiados, y por lo tanto, es extremadamente difícil correlacionar los resultados analíticos de un investigador con los resultados de otro investigador. Por ejemplo, un gel 2-D podría presentar un cierto juego de información para sangre que se ha introducido a un coctel de inhibidor de proteasa suministro por Sigma-Aldrích Company y sin embargo presentar un juego de información diferente para sangre introducida a un coctel de inhibidor de proteasa suministrado por Beckton, Dkcikinson and Company o por Hoffmann-La Roche, Inc. Además, la mayoría de los inhibidores de proteasa varían en toxicidad desde suavemente tóxicos a altamente tóxicos . En la actualidad, no hay control y/o limite a exposición potencial a estas toxinas, comprometiendo de esta manera la seguridad de trabajadores de cuidado de salud y de laboratorio. Se deben tomar medidas para inhibir la proteasa endógena para el aislamiento u purificación de proteínas.

También se deben tomar medidas que conduzcan a normalización de la industria. Consecuentemente existe una necesidad continua en la industria de un método mejorado y un dispositivo de recolección de sangre u otras muestras biológicas que conserven las proteínas presentes en las muestras biológicas. COMPENDIO DE LA INVENCIÓN Sorprendentemente, se ha encontrado ahora que recoger una muestra biológica de un paciente e introducir esa muestra en un recipiente que contiene un agente de estabilización puede ser eficiente al mantener el contenido y composición de proteína. La inclusión del agente de estabilización dentro del dispositivo de recolección para contacto inmediato con la muestra biológica impide substancíalmente la degradación y/o fragmentación de proteínas que de otra manera ocurre entre el momento en que la muestra se recoge y se añade el agente de estabilización. Como resultado, el porcentaje de proteínas intactas ' se aumenta grandemente. La presente invención, por lo tanto, está dirigida a métodos y dispositivos para recoger una muestra biológica. Más particularmente, la invención está dirigida a un recipiente de recolección y a un método para recoger una muestra biológica, que comprende poner en contacto inmediatamente la muestra con un aditivo de estabilización, para inhibi la proteasa endógena para el aislamiento y purificación de proteínas. El agente de estabilización de la invención es un agente apropiado que es capaz de inhibir, prevenir o reducir la ocurrencia de degradación y/o fragmentación de proteína durante el almacenamiento de la muestra biológica. Consecuentemente, un aspecto primario de la presente invención es proporcionar un método y dispositivo para recoger una muestra biológica directamente de un paciente en presencia de un estabilizador capaz de inhibidor la proteasa endógena para el aislamiento y purificación de proteínas . El aditivo de estabilización está presente en una cantidad efectiva para estabilizar la muestra biológica y para inhibir la proteasa endógena para el aislamiento y purificación de proteínas. Deseablemente, la muestra es sangre entera o un componente de la misma; sin embargo, la muestra puede ser cualquier muestra que contenga proteína. Un aspecto de la presente invención es preparar una muestra biológica que es estable a temperatura ambiente durante períodos de tiempo prolongados con poca o ninguna degradación o fragmentación de proteinas. Consecuentemente, se proporcionar un método para producir una muestra biológica que es estable a temperatura ambiente durante periodos de tiempo prolongados con poca o ninguna incidencia de degradación o f agmentación de proteinas durante el almacenamiento . Un aspecto adicional de la invención es proporcionar un método y dispositivo para inhibir la degradación o fragmentación de proteínas en una muestra biológica . Otro aspecto de la invención es proporcionar un recipiente de recolección para recibir y recoger una muestra biológica en donde el recipiente está previamente sellado con una cantidad medida de un agente de estabilización» El agente de estabilización se puede suministrar en la forma def por ejemplo, un líquido, un aerosol líquido o sólido, un granulo, un polvo o un gel a cualquier superficie del recipiente . Un aspecto adicional de la presente invención es proporcionar un método para estabilizar una muestra biológica, particularmente sangre completa o un componente de la misma, inmediatamente después de la recolección del paciente para inhibir o impedir la degradación o fragmentación de proteína cuando la muestra se almacena a diversas temperaturas .

Otro aspecto de la presente invención es proporcionar un recipiente evacuado que se suministra con una cantidad efectiva de un agente de estabilización,- en donde el recipiente tiene- una presión interna suficientemente baja para atraer un volumen predeterminado de una muestra biológica hacia el recipiente. Todavía otro aspecto de la presente invención es proporcionar un recipiente de recolecció de sangre para recoger una cantidad de sangre y mezclar la sangre con un agente de estabilización en el punto de recolección para producir una muestra de sangre que es estable impidiendo la degradación o fragmentación de proteínas de modo que el aislamiento y purificación de proteínas en la muestra se puede conducir en un momento posterior. Los aspectos de la invención se logran básicamente proporcionando un aparato para recoger una muestra biológica. El aparato generalmente incluye un recipiente que comprende cuando menos una pared interior que define una porción de depósito para contener un volumen de una muestra biológica y cuando menos una abertura en comunicación con la porción de depósito. El recipiente incluye cuando menos un agente de estabilización en una cantidad efectiva para conservar la muestra biológica e impedir o inhibir la degradación o fragmentación de proteínas. De preferencia, el recipiente se trata previamente con un agente de estabilización antes de la recolección de la muestra. Los aspectos de la invención se logran adicionalmente proporcionando un método para preparar una muestra biológica estable, que incluye proporcionar un recipiente de recolección de muestra. Deseablemente, el recipiente tiene cuando menos una pared lateral y un fondo que define una cámara interna en donde la cámara interna del recipiente incluye cuando menos un agente de estabilización en una cantidad suficiente para prevenir o inhibir la degradación o fragmentación de proteínas y conservar una muestra biológica. Una muestra biológica se obtiene, y la muestra biológica se mezcla con el agente de estabilización para formar una muestra biológica estabilizada. En una modalidad, la muestra se introduce directamente hacia el recipiente que incluye el cuando menos un agente de estabilización. Los aspectos de la invención también se logran proporcionando un método para recoger y estabilizar una muestra de sangre entera, que comprende proporcionar un recipiente de recolección de muestra que tiene cuando menos una pared lateral y un fondo que define una cámara interna. El recipiente se proporciona con una cantidad efectiva de un agente de estabilización para estabilizar las proteínas en la muestra de sangre entera. La cámara interna tiene una presión que es de preferencia menor que la presión atmosférica. Una muestra de sangre entera se recoge directamente del paciente en un recipiente de recolección,, y la muestra de sangre se mezcla con el agente de estabilización para formar una muestra de sangre entera estable. A medida que la muestra biológica se atrae hacia el dispositivo de recolección,- se expone inmediatamente al agente de estabilización, y el proceso de proteger analitos de proteína empieza inmediatamente después de la introducción de la muestra. los métodos y dispositivos de recolección de la presente invención tienen diversas ventajas distintas. Una ventaja de los dispositivos de recolección es el ofrecimiento de un sistema, de preferencia un sistema cerrado, que incluye el agente de estabilización y gue protege la muestra de exposiciones perjudiciales. Otra ventaja es liberación de trabajo de fabricación manual de dichos sistemas " de recolección. Todavía otra ventaja es producción de linea de ruta de dichos dispositivos de recolección, medíante lo cual las medidas y procedimientos de control de calidad se aplican al producto. Todavía otra ventaja es la normalización de dichos dispositivos de recolección en donde ningunas normas de industria existen actualmente y en donde la industria está pidiendo dicha normalización. Ademásf la importancia de investigación y análisis de proteína se aumenta conservando y siendo capaz de caracterizar y estudiar proteínas en un estado que está tan cerca al estado en vivo como es posible. Estos aspectos, ventajas y otras particularidades salientes de la presente invención se harán más evidentes a partir de la siguiente descripción detallada de la invención particularmente cuando se considera en conjunción con los dibujos . BREVE DESCRIPCIÓN DE LOS DIBUJOS La Figura 1 es una vista en perspectiva de un tubo de recolección de sangre típico. La Figura 2 es una vista en perspectiva de una placa de prueba. La Figura 3a es una vista en perspectiva de un conjunto de recolección de muestra, mientras que la Figura 3b es una vista en sección del conjunto de recolección de muestra . La Figura 4 es una vista en sección longitudinal de una je inga- La Figura 5 es una vista en sección longitudinal de otra modalidad de una jeringa. La Figura 6a es una vista lateral de un conjunto de catéter, mientras que la Figura 6b es una vista lateral parcial del catéter. La Figura 7 es una vista en perspectiva de una pipeta. La Figura 8 es una vista en perspectiva que ilustra una bolsa de recolección de sangre. DESCRIPCIÓN DETALLADA. DE LA INVENCIÓN Aún cuando esta invención se satisface por modalidades en muchas formas diferentes, se describirán en la presente con detalle modalidades preferidas de la invención, con el entendimiento de que la presente exposición se debe considerar como ejemplo de los principios de la invención y no se pretende que limiten la invención a las modalidades ilustradas y descritas. Se pueden hacer numerosas variaciones por personas expertas en el ramo sin abandonar el espíritu de la invención. El alcance de la invención se medirá por las reivindicaciones anexas y sus equivalentes. La presente invención está dirigida a métodos y dispositivos para estabilizar una muestra biológica para permitir mejor el aislamiento y purificación de proteínas. Más particularmente, la presente invención está dirigida a métodos y dispositivos para inhibir degradación y/o fragmentación de proteína en una muestra biológica durante el almacenamiento. De conformidad con la presente invención, el dispositivo comprende un recipiente que contiene un cantidad de un agente de estabilización para mezclarse con una muestra biológica inmediatamente a la recolección de la muestra. Asimismo, de conformidad con la presente invención, el método comprende proporcionar un recipiente de recolección de muestra que contiene un agente de estabilización en una cantidad suficiente para impedir o inhibir la degradación y/o fragmentación de proteínas y añadir al recipiente una muestra biológica. Aún cuando es posible usar la presente invención con cualquier muestra biológica que contiene proteína, de preferencia la muestra biológica es cualquier fluido corporal retirado de un paciente. Más preferentemente, la muestra biológica es sangre entera o un componente de la misma. Los ejemplos de otras muestras biológicas incluyen composiciones que contienen célula tales como concentrados de célula roja de sangre, concentrados de plaqueta concentrados de leucocito, plasma, suero, orina, aspirados de médula de hueso, fluido espinal cerebral, tejido, células feces, salive y secreciones orales, secreciones nasales, fluido linfático y lo semejante. El sistema de recolección de muestra de la presente invención puede abarcar cualquier dispositivo de recolección que incluye, pero no se limita a, tubos tales como tubos de prueba y tubos centrífugos; dispositivos de recolección de sangre de sistema cerrado, tales como bolsas de recolección; jeringas, especialmente jeringas previamente llenadas; placas de microtítulo y otras de múltiples pozos; disposiciones; tubería; recipientes de laboratorio tales como frascos, frascos de extractor, botellas de rodillo, víales, platinas de microscopio, conjuntos de platina de microscopio cubreobjetos, películas y substratos porosos y conjuntos; pipetas y puntas de pipeta, etc., recipientes de tejido y otras de recolección de muestra biológica; y cualquier otro recipiente apropiado para retener una muestra biológica, así como recipientes y elementos involucrados para transferir muestras. En un aspecto particularmente deseable de la invención, se usa un tubo de recolección de muestra que tiene un miembro de separación (v.gr., un elemento de separación mecánico o un gel) para separar componentes de sangre. En dicho aspecto, el interior del tubo y/o el exterior del miembro de separación . se puede tratar con el agente de estabilización. De conformidad con la presente invención, el dispositivo de recolección contiene un agente de estabilización para estabilizar la muestra biológica. El plástico o vidrio se usa frecuentemente para fabricar el dispositivo de recolección usado en la presente invención. Algunos materiales preferidos utilizados para fabricar el dispositivo de recolección incluyen polipropileno, polietileno, tereftalato de polietileno, poliestireno, policarbonato y celulósicos. Plásticos más costosos tales como politetrafluoretileno y otros polímeros fluorados también se pueden usar. Además de los materiales arriba mencionados, ejemplos de otros materiales apropiados para los dispositivos de recolección utilizados en la presente invención incluyen poliolefinas, poliamidas, poliésteres, siliconas, poliuretanos, epoxis, acrílicos, poliacrilatos, polisulfonas, polimetacrilatos, PEEK, políímída y fluorpolímeros tales como PTFE Teflon(R) , FEP Teflon!R!, Tefzel( ), poli (fluoruro de vinilideno) , PVDF y resinas de perfluoroalcoxi . Los productos de vidrio incluyendo vidrio de sílice también se usan para fabricar los dispositivos de recolección. Un producto de vidrio de ejemplo es PYREXtR) (disponible de Corning Glass, Corning, New York) . Dispositivos de recolección de cerámica se pueden utilizar de conformidad con modalidades de la invención.

Productos celulósicos tales como recipientes de papel y papel reforzado se pueden usar para formar dispositivos de recolección de conformidad con la invención. El agente de estabilización de la invención es un agente apropiado que es capaz de inhibir actividad de proteasa (es decir, enzima de proteína} y la destrucción de proteínas durante almacenamiento de una muestra biológica-El agente estabiliza la muestra biológica, tal como una muestra de sangre, para producir una composición estable que inhibe o previene la degradación y/o fragmentación de proteínas presentes en la muestra biológica. De conformidad con una modalidad de la presente invención, el dispositivo de recolección se trata previamente con el agente de estabilización, de preferencia por el fabricante,- y se empaca en una forma lista para usarse. De manera típica, el dispositivo de recolección empacado está estéril y también se empaca en materiales de empaque estériles» La presente invención se podría utilizar por compañías farmacéuticas, compañías de biotecnología, organizaciones de investigación por contrato, investigadores de universidad, hospitales de investigación y cualquier institución e individuo que esté interesado en estudiar proteínas. La presente invención permitiría a los investigadores proteger conveniente y fácilmente y procesar muestras de proteína para análisis de corriente abajo. El dispositivo de recolección de conformidad con la presente invención serviría como un dispositivo de recolección de muestra de extremo frontal que ayuda objetivos analíticos que incluyen, pero no están limitados a lo siguiente: banco que proteínaf identificación y caracterización de proteína, expresión de proteína, cuantificación de proteína, interacción de prot.eína-proteínaf desarrollo de ensayos de función de proteína, descubrimiento y validación de meta de proteína, toxicología predictiva, determinación de acción de droga, validación de droga, análisis estructural de proteína 3-D y modelaje de computadora^ De preferencia, el agente de estabilización comprende o consiste de cuando menos un inhibidor de proteasa. Los ejemplos apropiados incluyen, pero no están limitados a, inhibidores de proteasas tales como proteasas de serina, proteasas de cisteina, proteasas aspárticas, metaloproteasas, proteasas de tiol, exopeptidasas y lo semejante. De estos, los inhibidores de proteasa de serina y cisteina son de interés particular, con inhibidores de metaloproteasa siendo también significativos. Ejemplos no limitativos de inhibidores de proteasa de serina incluyen antidolor, aprotinina, quimostatina, elastatinal, fluoruro de fenilmetilsulfonilo (PMSF), AMPSF TLCK, TPCK, inhibidor de leupeptina y tripsina de frijol de soya» Los inhibidores de proteasas de cisteina incluyen, por ejemplo, IAA (ácido indolacético) y E-64. Los ejemplos apropiados de inhibidores de proteasa aspártica incluyen pepstatina y VdLPFFVdL. Ejemplos no limitativos de inhibidores de metaloproteasas incluyen EDTA.f asi como 1, 10-fenantrolina y fosforamodon. Los inhibidores de exopeptidasas incluyen, por ejemplo, amastatina, bastatina, diprotina A y diprotina B. Los ejemplos apropiados adicionales de inhibidores de proteasa incluyen alfa-2-macroglobulina, inhibidor de bripsina de frijol de soya o frijol de lima, inhibidor de proteasa pancreática, ovostatina de clara de huevo y cistatina de clara de huevo . Las combinaciones de inhibidores de proteasa, comúnmente referidos como un "coctel de inhibición de proteasa" por proveedores comerciales de dichos inhibidores, también se pueden usar como el agente de estabilización. Estos '"cocteles" por lo general son ventajosos en que proporcionan estabilización para una gama de proteínas de interés; por lo tanto. un agente - de estabilización que contiene más de dos inhibidores de proteasa es generalmente deseable. El agente de estabilización puede estar en cualquier forma apropiada iacluyendo, pero no limitado a, una solución, suspensión u otro líquido, un gránulo, una tableta, una cápsula, un material secado por aspersión., un material secada por congelación, un polvo,- una partícula, un gel, cristales o un material liofilizado. Debido a que la vida media de muchos inhibidores de proteasa es corta, el agente de estabilización se introduce de preferencia hacia el dispositivo de recolección de tal manera como para optimizar la vida de anaquel del inhibidor de proteasa» La líofílízación parece ser particularmente útil en que proporciona buena estabilidad y también permite esterilización subsecuente, ambas de las cuales son. clave-desde un punto de vista de automatización y normalización. El agente de estabilización puede estar colocado sobre cualquier superficie del dispositivo de recolección.

El agente de estabilización también puede estar colocado en tapones y sellos para cerrar dichos dispositivos o en inserciones mecánicas, u otras, colocadas dentro de dichos dispositivos. De preferencia, el agente de estabilización está colocado en cualquier lugar a lo largo de cuando menos una pared interior del dispositivo de recolección o en cualquier lugar dentro de la porción de depósito. Además, algunos inhibidores de proteasa exhiben sensibilidad a la luz. De esta manera, puede ser deseable proteger el agente de la luz. Para dichos inhibidores, el uso de un tubo opaco, v_-gr_-, un tubo color ámbar, seria ventajoso. Alternativamente, colocar el agente hacia una cápsula que lo protege de la exposición a la luz, v.gr., en forma de polvo, y luego colocar la cápsula dentro del tubo también dirigirla este interés. Encapsular el agente también puede prevenir otras interacciones indeseables entre el agente y otros elementos en el recipiente. Los materiales de cápsula que se disuelven durante la recolección de muestra son bien conocidos en el ramo. El agente de estabilización se puede aplicar al dispositivo de recolección mediante cualquier número de métodos. Por ejemplo, el agente de estabilización se puede secar por aspersión, surtir de manera suelta o liofilizar sobre la superficie de la pared interior del dispositivo de recolección. Alte nativamente, el agente de estabilización, tal como cuando est en forma de gel o liquido, por ejemplo, se puede colocar en la porción de depósito en el dispositivo de recolección. Métodos adicionales para proporcionar el dispositivo de recolección con el agente de estabilización también son posibles. De manera típica, para disponer la cantidad deseada de agente en un recipiente, se reconstituye una forma sólida del agente y luego surte la cantidad apropiada de liquido hacia el recipiente. El líquido se puede secar por aspersión,- disponer hacia el fondo del recipiente o liofilizarse subsecuentemente... La cantidad y colocación del agente de estabilización se determinan por diversas variables, incluyen-do el modo de aplicación, el agente de estabilización específico usado, el volumen interno y la presión interna del dispositivo de recolección, y el volumen de la muestra biológica llevada hacia el recipiente. La concentración del agente de estabilización es suficiente para estabilizar las proteasas y para prevenir la degradación de proteína» La concentración del agente de estabilización por mi del espécimen, dependiendo del agente de estabilización específico usado, es aproximadamente 1-200 uM, 0.1-10 mM o 0.6-25 ug. El Cuadro í proporciona una lista no limitativa de inhibidores de proteasa y escalas apropiadas para su concentración por mililitro de espécimen que se puede utilizar como el agente de estabilización r CUADRO ? Inhibidor de Proteasa Concentración por mililitro de espécimen AEBSF <5 mM, de preferencia <1 mM Amastatina 1-10 uM AntidoLor 1-100 uM Antitrambina III Uso a concentración equimolar con proteasa pAPMSF 10-100 uM Aprotinina 0.6-2 ug Bestatina 1-200 uM, de preferencia 1-10 uM Quimostatina 10-100 uM Cistatina Uso a concentración equimolar con proteasa 3, 4-dicloroisocumarina 5-100 uM DFP 100 uM Diprotina A 10-50 uM E-64 1-10 uM Ebelactona A 1-2 ug Ebelactona B 1-2 ug EDTA y sus sales 0.1-10 mM, de preferencia -1Q mM Elastatinal 10-100 uM Leupeptina 0.1-100 uM, de preferencia 10-100 uM A 2-Macroglobulina uso a concentraciones equiraolares con proteasa Pepstatina 1 uM Fosforamidón 25 ug (8.5 uM) PMSF 0.1 a 1 mM TLCK 10-100 uM TPC 10-100 uM Inhibidor de tripsina. Uso a concentración equimolar con frijol de soya proteasa Los agentes de estabilización útiles en la presente invención pueden incluir además los siguientes: CUADRO II Clase de Inhibidor Compuesto Serina Aprotinina AEBSF-HC1 Antitrombina APMSF-HC1 DFP Tripsina Cisterna E-64 Serina/Cisterna Leupeptina TPCK TLCK-CH1 (L-l-cloro-3- [4-tosilamido] -7- amino=2ehe tattona=HCl) Antidolor-HCl Metaloproteasas EDTA Bestatina Fosforanmodón Amastatina-HCl Aspártico/Caldalor pepstatina N-acetil-leu-leu-norleucinal N-acetil-leu-leu-metioninal Además del agente de estabilización, el dispositivo de la presente invención también puede contener medio portador (v.gr., agua o alcohol), medio de estabilización {v.gr., polivinilpirrolidona, trehalosa manitol, etc.), y/o uno más otros aditivos para tratar la muestra biológica. Los aditivos apropiados incluyen, pero no están limitados a, fenol, mezclas de fenol/cloroformo, alcoholes, aldehidos, cetonas, ácidos orgánicos, sales de ácidos orgánicos, sales de metal alcalino de haluros, agentes de quelación orgánicos, tintes fluorescentes, anticuerpos, agentes aglutinantes, anticoagulantes tales como citrato de sodio, heparina, EDTA de potasio y lo semejante, y cualquier otro reactivo o combinación de reactivos normalmente utilizados para tratar muestras biológicas para análisis . Otros aditivos potenciales incluyen antioxidantes y agentes reductores, que pueden ayudar a conservar la confirmación de proteina, v.gr., conservar acoplamientos de grupo de sulfhidrílo * También puede ser ventajoso incluir un agente de tampón. De preferencia, el portador y aditivos no degradan proteínas. Cuando el agente de estabilización está en forma de tableta, se pueden incluir, si se desea, materiales de desintegración de tableta farmacéutica, que son conocidos por aquellos expertas en el ramo. Los métodos de la presente invención incluyen obtener una muestra biológica e introducir la muestra hacia el recipiente que contiene el agente de estabilización». En modalidades preferidas, la muestra biológica se retira del paciente directamente hacia el recipiente de recolección sin que intervengan ningunos pasos de proceso. Se ha encontrado que recoger la muestra biológica directamente del paciente, tal como cuando se recoge una muestra de sangre entera, e introduciendo la muestra directamente hacia el recipiente que contiene el agente de estabilización se impide substancialrnente la degradación y/o fragmentación de proteínas que ocurre de otra manera cuando la muestra se almacena antes de combinarla con el agente de estabilizació . El método de la presente invención es útil tanto con sistemas de recolección abiertos como con sistemas de recolección cerrados en donde la abertura está cerrada por medio de cierre. En una modalidad preferida, el dispositivo de recolección de la presente invención es para retirar una muestra de sangre entera directamente de un paciente para estabilizar las proteínas inmediatamente en el punto de recolección. El dispositivo puede ser un sistema evacuado para recoger sangre. Alternativamente, el dispositivo puede ser un sistema parcialmente evacuado o no evacuado para recoger sangre. Un ejemplo apropiado de un sistema evacuado es un tubo cerrado. Una extracción con jeringa manual es un ejemplo apropiado de ambos, un sistema parcialmente evacuado y uno no evacuado. Los sistemas no evacuados también pueden incluir sistemas de extracción automáticos. Los sistemas evacuados son particularmente preferidos. Haciendo referencia a los dibujos en los que los caracteres de referencia semejantes se refieren a partes similares a través de las diversas vistas de los mismos, la Figura 1 muestra un dispositivo 10 de recolección de sangre típica, que incluye un recipiente 12 que define una cámara 14 interna. En la modalidad ilustrada, el recipiente 12 es un tubo hueco que tiene una pared 16 lateral, un extremo 18 inferior cerrado y un extremo 20 superior abierto.-Opcionalmente, se proporciona un miembro 13 de separación dentro de la cámara 14 de recipiente» El miembro 13 de separación sirve para ayudar a separar componentes de la muestra, por ejemplo, mediante centrifugación. El recipiente 12 está dimensionado para recoger un volumen apropiado de fluido biológico, de preferencia sangre. El medio 22 de cierre para' cubrir el extremo 20 abierto para cerrar el recipiente 12 es necesario en donde se demanda un producto estéril. Para tubos convencionales, una tapa de tornillo es normalmente suficiente. Para tubos de recolección evacuados, un tapón elastoméricos, de ajuste hermético, se. emplea generalmente para contener el vacío durante los períodos de almacenamiento requeridos. De preferencia, el cierre 22 forma un sello capaz de cerrar efectivamente el recipiente 12 y retener una muestra biológica en la cámara 14» El cierre 22 puede ser uno de una variedad de formas que incluyen, pero no se limitan a, cierres de caucho, cierres HEMOGUARDÍR) , sellos metálicos, sellos de caucho con banda de metal y sellos de diferentes polímeros y diseños. Un escudo 24 protector puede quedar sobre el cierre 22. El recipiente 12 también contiene un agente de estabilización de conformidad con la presente invención. El recipiente 12 puede estar hecho de vidrio, plástico u otros materiales apropiados. De preferencia, el recipiente 12 es transparente. Ejemplos no limitativos de materiales terraoplásticos transparentes apropiados para el recipiente 12 son policarbonatos . polietileno, polipropileno y tereftalato de polietileno» Los materiales plásticos pueden ser materiales impermeables al oxígeno o pueden contener una capa impermeable o semipermeable, al oxigeno. Alternativamente, el recipiente 12 se puede hacer de un material plástico permeable al agua y aire. El agente de estabilización se puede proporcionar al recipiente usando cualquier medio apropiado. En un aspecto, el agente de estabilización está en una solución liquida y se coloca hacia el recipiente. Subsecuentemente, la solución se puede liofilízar medíante métodos que son conocidos en el ramo, tales como por ejemplo, secado por congelación. Por ejemplo, congelando la solución y luego calentando lentamente después de la congelación mientras que simultáneamente se aplica un vacío, el polvo secado por congelación permanece en el tubo de recolección. ün aditivo tal como un excipiente, por ejemplo, PVP o trehalosa, se puede añadir a la solución de agente de estabilización antes del secado por congelación de manera que el agente de estabilización resultante se granule en el recipiente, El secado al vacio también se puede usar después de añadir la solución de estabilización. En otro aspecto, el agente de estabilización se forma hacia un aerosol líquido o sólido y se rocía hacia una o más superficies del interior del recipiente. La presión en la cámara 14 se selecciona para atraer un volumen predeterminado de muestra biológica hacia la cámara -14» De preferencia, el cierre 22 está hecho de un material elástico que es capaz de mantener el diferencial de presión interno entre presión atmosférica y una presión menor que la atmosférica» El cierre 22 es tal que se puede perforar por una aguja 26 u otra cánula para introducir una muestra biológica hacia el recipiente 12 como se conoce en el ramo» De preferencia, el cierre 22 es resellable. Los materiales apropiados para el cierre 22 incluyen, por ejemplo, caucho de silicona, caucho natural, caucho de estireno butadieno, copolímero de etíleno-propíleno y policloropreno.

Los ejemplos apropiados del recipiente 12 incluyen tubos de una sola pared y de múltiples capas» Un ejemplo más especifico de un recipiente 12 apropiado se describe en la Patente de E.U.A. No. 5,860,937 a Cohén, que se incorpora por la presente por referencia en su totalidad. Un proceso de fabricación útil para dispositivos de conformidad con la presente invención involucra obtener un recipiente de recolección; añadir cuando menos un inhibidor de proteasa al recipiente; liofilizar el cuando menos un inhibidor de proteasa; evacuar el recipiente; y esterilizar el recipiente , El cuando menos un inhibidor de proteasa se puede surtir hacia el recipiente en forma de solución» Después de añadir el inhibidor de proteasa al recipiente de recolección,- se puede añadir un miembro de separación al recipiente,, si se desea. Un ejemplo de un proceso de liofilización/evacuación apropiado es como sigue: el recipiente se congela a una temperatura de aproximadamente -40°C a una presión de aproximadamente 760 mm durante aproximadamente 6 a 8 horas; el recipiente se seca a medida que la temperatura se desliza de -40 °C a aproximadamente 25&C, a una presión de aproximadamente 0.05 mm, durante aproximadamente 8 a 10 horas; y el recipiente se evacúa luego a una temperatura de aproximadamente 25 °C y una presión de aproximadamente 120 mm durante alrededor de 0.1 horas. De preferencia, la técnica de esterilización es con radiación de cobalto 60. Como se anota, el recipiente 12 también puede contener un gel, un miembro de separación mecánico u otro (v.gr., papel de filtro o lo semejante). En tales casos, el agente de estabilización se puede secar por aspersión y/o liofilizar de una superficie exterior del medio de separación. El recipiente 12 también puede ser un dispositivo de recolección para preparación de plasma de sangre. Dicho dispositivo de recolección comprende, además del agente de estabilización, un elemento para separar plasma de sangre entera humana o animal El elemento para separar plasma de sangre entera puede ser un miembro de separación tal como una formulación de gel o un medio mecánico. El gel es deseablemente una formulación de gel polimérico tixotróplco» El gel puede ser un homopolimero o un copolímero y puede incluir geles a base de silicona, tales como por ejemplo. polisiloxanos, o geles a base de hidrocarburo orgánico, tales como por ejemplo, pollacrillcos, poliésteres, poliolefinas, polibutadienos cis oxidados, polibutenos, mezclas de aceite de frijol de soya epoxidado e hidrocarburos clorados, copolimeros de diácidos y propandioles, ciclpentadienos hidrogenados y copolimeros de alfa-olefinas con dialquilmaleatos * El gel deseablemente aisla el plasma de las células de la muestra de sangre en el tubo sirviendo como un medio de separación de densidad. Un ejemplo de un tubo de preparación de plasma apropiado se describe en la Patente de E.U.A» No» 5,-906,744 a Carroll y col», que se incorpora por la presente por referencia en su totalidad. De esta manera, la estabilización se puede proporcionar tanto antes, durante como después de centrifugación para separar el plasma de la sangre» En el caso de un material de separación de gel, puede ser deseable proporcionar separación fisica/quimica entre el agente de estabilización y el gel, v»gr», uso de una cápsula como se discute arriba. Por ejemplo, si se incorporan porciones del agente hacia o reaccionan con. el gel, la efectividad del agente se puede reducir. Por la misma razón, cuando un elemento de separación mecánico se usa, el elemento es de manera deseable substancialmente inerte al agente de estabilización,- y esto refleja una ventaja significativa de dicho separador. Proporcionando un elemento de separación en tubos de plasma, contra centrifugación sin un elemento de separación, es particularmente ventajoso. Específicamente, debido que el lisado de célula libera las proteasas que degradan proteínas de interés, entre mejor es la separación entre las células (es decir, la sangre coagulada) y el plasma, mejor es la estabilidad de las proteínas en la muestra de plasma. Los separadores mecánicos útiles se encuentran, por ejemplo, en las Patentes de E»U»A» Nos» 6,516, 953,* 6,406, 671; 6, 409,528; y 6,497,325, los contenidos de las cuales se incorporan por la presente por referencia en su totalidad» El recipiente 12 también puede ser un tubo de recolección para separar centrífugamente linfocitos y monocitos de fases más pesadas de una muestra de sangre entera que comprende, además del agente de estabilización, un medio de gradiente de densidad líquida y un medio para impedir- el mezclado del medio de gradiente de densidad líquida con una muestra de sangre antes de la centrifugación» Un ejemplo de un tubo de recolección de linfocito/monocito apropiado se describe en la Patente de E.U.A. No, 5,053,134 a Luderer y col., que se incorpora por la presente como referencia en su totalidad. Otros tubos de recolección de sangre comercialmente disponibles apropiados para uso en la presente invención incluyen los siguientes, todos los cuales se venden por Becton. Dickinson and Company, Franklin Lakes, New Jersey, con todos los registros y marcas pertenecientes a Becton, Dickinson and Company: tubos de hematología VACUTAINERlR) , nos. de catálogo 367650-1, 367661, 6405, 6385, 6564, 367653, 3657665, 367658, 367669, 6450-8, 6535-37 y 367662; tubos VACUTAINERlR) 2EDTA, nos. de catálogo 367841-2, 367841-2, 367856 y 367861; tubos VACUTAINERÍR) PST, nos. de catálogo 367793-4, 6698, 6595 y 6672; tubos VACUTAINER(R) CPT, nos. ce catálogo 362753 y 362760-1; tubos VACUTAINER(R> SST, nos. De catálogo 367782-89, 6509-17 y 6590-92, y tubos VACUTAINERlR) ACD nos. de catálogo 367756,- 364012 y 4816. En otra modalidad, la invención proporciona un juego que tiene cuando menos dos recipientes que comprenden uno o más agentes de estabilización.. Por ejemplo, el juego puede comprender un tubo de recolección primario, v.gr., un tubo de separación de plasma que tiene un elemento de separación en el mismo, y un tubo secundario para prueba,-v.gr,, para verter o surtir de otra manera el plasma recogido al mismo. Ambos tendrían en los mismos agente de estabilización,- para asegurar que las proteínas de interés permanezcan estables. Opcionalmente, el juego podría incluir un dispositivo de transferencia de tubo a tubo para impedir la necesidad de verter u otras prácticas de transferencia inseguras, en cuyo caso el tubo secundario estaría a una presión reducida para atraer el plasma. Alguien que utiliza dicho juego recogería una muestra en el tubo primario, centrifugaría, transferiría la muestra de interés al tubo de prueba secundario, y realizar la prueba. El tubo de prueba secundario podría ser de una variedad de tamaños, dependiendo de la prueba deseada. En otra modalidad, el recipiente es un tubo con dos extremos abiertos que tienen cierres en los mismos. Dicho tubo permitirá muestrear, r.gr., para un tubo de separación de plasma con un elemento de separación en el mismo, ya sea la muestra de plasma o la muestra de coágulo. En todavía otra modalidad, el dispositivo de recolección de la presente invención comprende una placa de prueba, tal como por ejemplo, una placa de un solo o múltiples pozos, una placa de microtítulo, una placa de cultivo de tejido o lo seme ante. Una placa de prueba típica por lo general comprende uno o más pozos, que son de preferencia cilindricos» Como se muestra en la Figura 2, una placa 30 de prueba incluye una superficie 32 superior y una superficie 34 inferior. La placa 30 de prueba incluye además un número de pozos 36 cada uno comprendiendo una pared 38 lateral que se extiende desde la superficie 32 superior de la placa a la superficie 34 inferior de la placa. Cada pozo comprende una porción 40 superior y una porción 44 inferior» La porción 40 superior comprende un extremo 42 abierto que se extiende a la porción 44 inferior, que comprende un extremo 46 cerrado» La porción 44 inferior puede ser plana, cónica (puntiaguda) o redondeada» La capacidad de cada pozo 36 típicamente varía de varios mililitros (mi) a menos de aproximadamente 0.5 mi. Los pozos 36 pueden acomodar cada uno en el mismo un agente de estabilización de conformidad con la presente invención. El número de pozos 36 en la placa 30 de prueba no es crítico» Puede haber cualquier número de pozos, aún cuando placas de prueba de seis, doce, veinticuatro, cuarenta y ocho y noventa y seis pozos se conocen comúnmente y están disponibles. En la Figura 2, se ilustra una placa de prueba de seis pozos, meramente para propósitos de ejemplo, y la invención no depende del número de pozos . La mayoría de las placas de múltiples pozos convencionales tienen los pozos dispuestos en hileras y columnas ortogonales de manera de poder identificar claramente los pozos individuales que se están usando» Desde luego, la disposición, de los pozos en la placa 30 de prueba no es una limitación esencial de la presente invención porque cualquier disposición de pozos se contempla por la invención, La placa 30 se puede formar de materiales termoplásticos mediante formación al vacío, moldeo de lámina, moldeo por inyección u otras técnicas similares. Los materiales termoplásticos apropiados incluyen, pero no están limitados a poliestireno, cloruro de polivinilo, polícarbonato, tereftalato de polietileno y lo semejante» De preferencia, la placa 30 es transparente. Rodeando los pozos y formando el borde exterior de la placa 30 de prueba se encuentran las paredes 38 laterales. En la presente modalidad, la placa 30 de prueba tiene seis (6) paredes laterales. Las placas de prueba bien conocidas son de forma de rectángulo o cuadrilátera, aún cuando para propósitos de la presente invención, la placa se puede fabricar en cualquier configuración práctica. Los ejemplos de placas de prueba apropiadas que contienen una pluralidad de poz.os se describen en la Patente de E.U.A. No. 5,882, 922 a Tyndorf y col., Patente de E.IT.A. No. 5,801,055 a Henderson y Patente de E.U.A. No. 5, 681,743 a Brian y col., cada una de las cuales se incorpora por la presente como referencia en su totalidad. En todavía otra modalidad, el dispositivo de recolección de conformidad con la presente invención puede ser un conjunto de recolección de muestra para la recolección, transporte y surtido de muestras biológicas. El conjunto de recolección generalmente incluye una pluralidad de pozos de muestra para recoger muestras biológicas individuales. Los pozos de muestra se soportan en una bandeja de muestra en una orientación espaciada. La bandeja de muestra puede estar soportada dentro de una caja que encierra la bandeja de muestra y permite el transporte seguro y eficiente de los pozos de muestra. La bandeja de muestra se acomoda moviblemente dentro de la caja para movimiento entre una primera posición que encierra la pluralidad de pozos de muestra. a una segunda posición que hace exteriormente accesible uno de los pozos de muestra de manera que la muestra se pueda surtir manualmente de la bandeja. Como se muestra en las Figuras 3a y 3b, la bandeja 50 de muestra incluye una pluralidad de depresiones longitudinalmente espaciadas que forman pozos 52 de recolección espécimen. La bandeja 50 de muestra se puede formar de un material plástico apropiadamente deformable. Los pozos 52 tienen un fondo 54 y un extremo 56 abierto» Se contempla que los pozos de muestra sean de la forma de miembros semejantes a copa de extremo abierto. Los pozos 52 están construidos para tener suficiente profundidad de manera de retener un volumen apropiado de una muestra biológica. Los pozos 52 pueden cada uno acomodar en los mismos un agente de estabilización de conformidad con la presente invención» Mientras que la bandeja 50 de la presente invención se muestra teniendo una sola hilera de pozos 52 formados en la mismar la presente invención contempla que los pozos se pueden proporcionar en cualquier número o cualquier disposición deseable para una situación de prueba particular. El conjunto de recolección de muestra puede incluir una caja 57 de recolección de muestra. Durante la recolección de una muestra biológica dentro de los pozos 52, la bandeja 50 de muestra se puede insertar hacia el extremo 58 abierto de la caja 57 de recolección de muestra y luego dentro del interior 59 de la caja 57 de recolección de muestra hasta que todos los pozos 52 están encerrados en la misma. Un conjunto de recolección de muestra apropiado se describe en la Patente de E.U.A. No. 6,357,· 583 Bl a Rainen, que se incorpora por la presente como referencia en su totalidad. De conformidad con otra modalidad de la presente invención, como se ilustra en la Figura 4, el dispositivo de recolección comprende una jeringa y, más preferentemente, una jeringa previamente llenada con un agente de estabilización de conformidad con la presente invención. Una jeringa tipica comprende un barril generalmente cilindrico que tiene extremos próximo y distante opuestos con cuando menos una cámara formada entre los extremos para recibir una substancial tal como una muestra biológica» Un émbolo está de manera típica dispuesto sellablemente dentro del barril y movible con respecto al mismo, y medios de sello se pueden disponer sellablemente cerca del extremo distante del barril» Haciendo ahora referencia a la Figura 4, se muestra una jeringa 60, que incluye un barril o cilindro 62 alargado, que tiene un extremo 64 próximo abierto y un extremo 66 distante, con cuando menos una cámara 68 hueca formada entre los extremos próximo y distante para recibir una muestra biológica, En la modalidad ilustrada, el extremo 66 distante incluye una protección 70 de aguja. La protección de aguja mantiene a la jeringa, así como la aguja, estériles durante el almacenamiento . El barril de la jeringa incluye un agente de estabilización. De preferencia, el barril de la jeringa se llena previamente con el agente de estabilización» Las jeringas previamente llenadas, como ss conoce el término en el ramo, son jeringas que se llenan por el fabricante del relleno y embarcadas al proveedor de cuidado de saluda listas para uso. Un émbolo 72 se puede situar en el extremo 64 próximo, abierto. El émbolo 72 se puede mover por medio de una varilla 74 de émbolo,- que se asegura el émbolo, por ejemplo,, mediante atornillado- En el mismo extremo en donde está situado el émbolo, el barril puede tener un agarre 76 de dedo, que se asegura al barril de conformidad con el principio llamado de tapa de presión* El agarre 76 de dedo de preferencia consiste de material ligeramente elástico, por ejemplo plástico. En otra modalidad (no mostrada),- el agarre de dedo es una parte semejante a pestaña del barril que se proyecta radialmente hacia afuera. Desde luego, son posibles otras construcciones conocidas por aquellos experimentados en el ramo. Un tapón. 78, que cierra el barril, se puede situar en el extremo del barril remoto del émbolo. El émbolo y el tapón se fabrican de preferencia de un material elástico y, más preferentemente, de caucho de una calidad farmacéutica. En la modalidad ilustrada, una aguja 80 de inyección se asegura al barril por medio de un sujetador 82 de aguja. El sujetador de aguja tiene un cuello 84, que sujeta la aguja, una flecha 86 y un collarín. 88. El sujetador de aguja se fabrica de preferencia de material ligeramente elástico que tiene resistencia a la deformación, tal como por ejemplo, plástico, y se asegura el extremo del barril por medio de una construcción de tapa de presión En la alternativa, el sujetador de aguja se puede asegurar al barril por medio de una conexión atornillada o adhesiva, o cuando el barril también comprende un collarín, por medio de un anillo de sujeción. En la última modalidad, el sujetador de aguja también se puede rebordear alrededor de un collarín del barril . Aún cuando el barril de jeringa ilustrado en esta modalidad incluye un collarín 88 de tipo Luer de sujeción, queda dentro del alcance de la presente invención incluir barriles de jeringa sin un collarín, barriles de jeringa que tienen una boquilla excéntricamente colocada y diversas otras estructuras semejantes a boquilla adaptadas para aceptar, ya sea permanente o removiblemente, una cánula de aguja o conjunto de cánula de aguja. Solamente se requiere que haya una abertura n el extremo distante del barril de jeringa en comunicación de fluido con el interior del barril de jeringa. Una o más ranuras 90 se pueden rebajar en la pared interna de la flecha 86 y la cara posterior del cuello 84. La ranura o ranuras se extienden hacía el extremo posterior de la cánula. En sección transversal, las ranuras pueden ser partes de un círculo, pero también son posibles otras formas, siempre y cuando el tamaño sea tal que el líquido de inyección suficiente se pueda pasar fácilmente a través; esto se logra si el diámetro de la ranura o la sección transversal total de las ranuras es cuando menos tan grande como aquella de la cánula. La flecha 86 del sujetador 82 de aguja se construye de manera que cuando el tapón 78 se deslice axialmente hacia adelante, se recibe, con fricción, por la flecha; por lo tanto, aparte de las ranuras 90 rebajadas en la flecha, el diámetro interior de la flecha es aproximadamente tan grande como aquel del barril 62, La flecha 86 del sujetador 82 de aguja es ligeramente más larga que el tapón 78, de manera que la parte 92 de las ranuras adyacentes al barril está libre cuando el tapón se mueve hacia adelante contra la pared posterior del cuello del sujetador de aguja. Si se desea, la protección 70 de aguja se puede construir de manera de servir como una varilla de émbolo. En ese caso, antes del uso de la jeringa, la protección de aguja se remueve de la aguja y se asegura en el otro extremo de la jeringa al émbolo, Generalmente, una jeringa que comprende un protector de aguja tiene un miembro de seguridad, que indica si el protector de aguja se ha removido previamente. Dicho miembro de seguridad en la forma de una tapa se describe, por ejemplo, en la Patente de E.U.A. No. 3,995,630. En modalidades adicionales, la jeringa no se almacena con una aguja en posición, es decir, es una jeringa sin aguja como se conoce en el ramo. Esto se ilustra en la Figura 5. Con dicha jeringa, antes del uso, la aguja está colocada en el cuello 84 del sujetador 82 de aguja por medio de un cubo de aguja. Un llamado cono Luer se usa de preferencia para esta conexión. En esta modalidad, la abertura 94 en el cuello del sujetador de aguja se cierra en el exterior por una tapa 96 protectora, que asegura la esterilidad de la jeringa asi como del sujetador de aguja. La ranura 90 rebajada en el sujetador de aguja se proyecta hacia el extremo de la abertura de cuello. Un ejemplo de una jeringa apropiada se describe en la Patente de E.U.A. No. 6,027,481 a Barrelle y col., que se incorpora por la presente por referencia en su totalidad. Otros ejemplos de jeringas apropiadas se describen por ejemplo en. la Patente de E.U.A. No. 4,964.866 a Szwarc, Patente de E.U.A. No. 4,986,818 a Imbert y col., Patente de E.U.A. No. 5, 607,400 a Thibault y col., y Patente de E.U.A. No. 6,263,641 Bl a Odell y col., cada una de las cuales se incorpora por la presente por referencia en su totalidad. En una modalidad adicional, el dispositivo de recolección de la presente invención comprende un catéter. Como es sabido en el ramo, los catéteres se emplean comúnmente cuando un paciente requiere dosis repetidas de medicamento u otras substancias. Un catéter permite administración repetida y continua de médicamente directamente hacia la corriente sanguínea de un paciente, u otra región del cuerpo, sin inyecciones repetidas. Típicamente,- los catéteres tienen un lumen tubular hueco,- un extremo próximo y un extremo distante. El extremo distante del catéter, que puede estar abierto o cerrado, se inserta hacia la vena o arteria de un paciente. La Figura 6a ilustra un conjunto de catéter de ejemplo que incluye un catéter 100 flexible que tiene una pared 102 lateral cilindrica que describe un lumen 1043 a través de la misma, un extremo 106" próximo y un extremo 108 distante cerrado que, en esta modalidad ilustrada, tiene una superficie qllO exterior redondeada para facilitar la inserción del catéter al paciente. Como se ilustra en la Figura 6b, el catéter 100 incluye una hendidura 112 a través de la pared 102 lateral adyacente al extremo 108 distante y se define por dos caras 114 y 116 opuestas formadas en la pared lateral. El catéter 100 incluye un agente de estabilización de conformidad con la presente invención, de preferencia en el lumen del catéter. El extremo próximo del catéter está conectado a un alojamiento 118 de catéter que tiene un conducto 120 a través del mismo. El conducta 120 en el alojamiento de catéter y lumen 104 en el catéter están en comunicación de fluido. Una manija 122 de control de válvula que tiene un pasaje 124 a través de la misma está conectada giratoriamente al alojamiento 118 de catéter de manera que el pasaje 124 está en comunicación de fluido con el conducto 120. La manija 122 de control de y el alojamiento 118 de catéter se retienen juntos en vista de la pestaña 126" próxima en el alojamiento de catéter que, acopla la ranura 128 rotacional en la manija de control de válvula. Esta estructura permite que la manija de control de válvula gire con respecto al alojamiento de catéter, pero impide que los dos elementos se separen. Un ejemplo de un catéter apropiado se describe en la Patente de E.U.A. No. 4,737,152 a Alchas, que se incorpora por la presente como referencia en su totalidad. En una modalidad todavía adicional, el dispositivo de recolección de la presente invención comprende una pipeta. En instalaciones de laboratorio, es bien sabido usar una pipeta para extraer un cierto volumen de un fluido biológico de un recipiente y para transportar y surtir parte o todo el volumen extraído a otro recipiente. De manera típica, las pipetas son generalmente miembros tubulares huecos que se utilizan aplicando succión en un extremo superior abierto, o boquilla, a fin de extraer o aspirar una cantidad de medio fluido hacia el tubo hueco. Un diferencial de presión mantenido cerrando la abertura de boquilla retiene el fluido dentro de la pipeta permitiendo el transporte del medio fluido a otro recipiente» La apertura selectiva de la boquilla permite que una cantidad del medio fluido contenido en la pipeta se surta. Un cierto grado de precisión en la cantidad de fluido surtido se proporciona por las porciones de extremo ahusadas reduciendo la cantidad de fluido perdido debido a goteo. Haciendo ahora referencia a la Figura 7, se muestra una pipeta 200 de ejemplo» La pipeta 200 es generalmente un miembro tubular alargado definido por una pared 202 tubular de espesor generalmente uniforme. Dentro de la pared 202 tubular, un interior 204 de pipeta se define para acomodar un volumen dado de medio fluido, por ejemplo, una muestra biológica. La pipeta 200 incluye una porción 206 de cuerpo general alargada, generalmente cilindrica que es coextensiva con el interio 204. El cuerpo 206 de pipeta puede estar llenado previamente Con un agente de estabilización de conformidad con la presente invención. ? fin de aspirar y surtir un fluido biológico, la pipeta 200 incluye una porción 208 surtidora en un extremo del cuerpo 206 y una boquilla 210 en el otro extremo. Ambas, la porción 208 surtidora y la boquilla 210 están en comunicación con el interior 204 de pipeta 200 de manera de permitir aspirar y surtir del fluido a través de la porción 208 surtidora creando un diferencial de presión selectivo dentro del interior 204 de la pipeta 200 utilizando la boquilla 210. Este diferencial de presión se puede crear manualmente abriendo y cerrando la boquilla 210 o se puede crear mediante uso de ayudas mecánicas de pipeta.

La pipeta 200 se puede construir de vidrio o un material termoplástico tal como policarbonatof polietileno, poliéster, poliestireno, polipropileno, polisulfona, poliuretano, acetato de vinilideno vinilo o lo semejante. Las pipetas termopLásticas han reemplazando en gran parte las pipetas de vidrio para muchos usos. El material de pipeta 200 puede ser transparente, translúcido u opaco. Los ejemplos de pipetas apropiadas se describen, por ejemplo en la Patente de E.U.A. No. 6,280,689 Bl a Stevens y Patente de E.ü.A. No. 6,343,717 Bl a Zhang y col., ambas de las cuales se incorporan por la presente por referencia en su totalidad. El dispositivo de recolección de la presente invención también puede comprender una bolsa de recolección apropiada para retener una muestra biológica, tal como por ejemplo, una bolsa de recolección de sangre, bolsa de plasma de sangre, una bolsa de revestimiento, una bolsa de plaquetas o lo semejante. Para facilidad de descripción, se describirá ahora una bolsa de recolección de sangre con referencia a la Figura 8 „ La Figura 8 ilustra una bolsa 300 de recolección de sangre para acomodar sangre recogida. La bolsa 300 de recolección de sangre tiene un cuerpo 302 formado sobreponiendo un par de piezas idénticamente cortadas de un material de hoja hecho de una resina, que se describirá más específicamente más adelante, y posee flexibilidad y fusión (es decir, fusión térmica, fusión de alta frecuencia o lo semejante) o uniendo adhesivamente una a otra la periferia de la porción 304 de sello de cada una de las piezas de material de hoja. Una porción 306 de acomodo de sangre que acomoda sangre recogida se forma en una porción interna rodeada con porción 304 de sello del cuerpo 302. La bolsa 300 de recolección de sangre de preferencia contiene un agente de estabilización de conformidad con la presente invención. Un extremo del tubo 308 flexible que comunica con la porción 306 de acomodo de sangre está conectado con el cuerpo 302 en una porción superior del mismo. Una aguja 310 de recolección de sangre está instalada en el otro extremo del tubo 308 flexible a través de un cubo 312. Una tapa 314, que es para cubrir la aguja 310 de recolección de sangre, se puede instalar en el cubo 312. Dos aberturas 316 y 318, cada una sellada con una lengüeta de desprendimiento, se puede formar en una porción superior del cuerpo 302 de manera que se puedan abrir. La composición, características y lo semejante del material de las hojas que componen el cuerpo 302 de la bolsa 300 de recolección de sangre no se limita a las especificadas. En este caso, como el material de hoja que componente la bolsa 300 colectora de sangre, se usa de preferencia cloruro de polivinilo suave o materiales que contienen el cloruro de polivinilo suave como su componente principal. Por ejemplo. un copolimero que contiene el cloruro de polivinilo suave como el componente principal y una cantidad pequeña de material macromolecular, una mezcla de polímero,, una aleación de polímero y lo semejante se puede utilizar. Como el plastificante para el cloruro de polivinilo suave, se puede utilizar de preferencia dioctilftalato (DEHP, di) 2~etilhexil) ftalato) y (DnDP, di (n-decíl) ftalato) . El contenido de dicho plastificante en el cloruro de polivinilo está de preferencia en la escala aproximadamente de 30 a 70 partes en peso, basada en 100 partes en peso de cloruro de polivinilo. Las otras substancias que son efectivamente utilizables para el material de ' hoja de la bolsa 300 de recolección de sangre son poliolefinas, es decir, los productos de homopolimerización o copolimerización de olefinas o diolefiñas tales como etileno, propileno, butadieno e isopreno. Los ejemplos típicos incluyen polietileno, polipropileno, copolimero de etileno acetato de vinilo (EVA) , mezclas de polímero formadas entre EVA y diversos elastómeros termoplásticos y combinaciones arbitrarias de los mismos. Estos poliésteres tales como tereftalato de polietileno (PET), tereftalato de polibutileno (PBT, tereftalato de polí-1, 4-ciclohexano dímetílo (PCHT) y cloruro de polivinilideno también son utilizables.

En todavía otra modalidad, el dispositivo de recolección de la presente invención puede ser un recipiente de laboratorio que. contiene el agente de estabilización. Recipientes particulares que se pueden utilizar de conformidad con la presente^ invención incluyen, por ejemplo, viales, frascos, frascos de mezclado, botellas de rodillo, platinas de microscopio, conjuntos de platina de microscopio, cámaras de muestra para dispositivos analíticos, cintas, laminados, disposiciones, tubería y lo semejante. Los recipientes de laboratorio de conformidad con la presente invención tienen cuando menos una superficie de operación. Muchos recipientes de conformidad con la invención tienen cuando menos una pared interior, que define una porción de depósito para contener la muestra biológica, y cuando menos una abertura en comunicación con la porción de depósito. Plástico o vidrio se utiliza frecuentemente para fabricar los recipientes de laboratorio. Algunos materiales preferidos usados para fabricar recipientes de laboratorio incluyen polipropileno, polietileno, tereftalato de políetileno, poiiestireno, policarbonato y celulósicos ? Debido a que el polipropileno es económico, es un material particularmente preferido para recipientes de laboratorio usados para manejar y transportar cantidades diminutas y precisas de muestra biológica. los ejemplos de otros materiales apropiados para recipientes de laboratorio de la presente invención incluyen poliolefinas, poliamidas,. poliésteres, siliconas, poliuretanos, epoxis, acrílícos, poliacrilatos, poliésteres, polisulfonas, polimetacrilatos, PEEK, poliimida y fluorpolimeros » Los productos de vidrio incluyendo vidrio de sílice también se usan para fabricar recipientes de laboratorio. EJEMPLOS Se hicieron sistemas de recolección de conformidad con la presente invención utilizando el siguiente equipo: (1) un revestidor por aspersión,- (2) un secador,- (3) un liofilizador, (4) un surtidor de un paso (o pipeta) para surtir el agente de estabilización en solución, y (5) un sellador térmico para sellar bolsas de barrera» EJEMPLO 1 - TUBOS DE PLÁSTICO CON SEPARADOR MECÁNICO Mil quinientos (1,500) tubos de plástico se revistieron por aspersión con una solución de heparina de litio y se secaron. Se preparó un agente de estabilización disolviendo coctel de inhibidor de proteasa SIGMA(R) en agua desionizada usando aproximadamente 22 mi de agua desionizada por vial de inhibidor de proteasa. En cada tubo se colocaron aproximadamente 300 ul de la solución de agente de estabilización» Se ensambló un separador mecánico hacia los cierres (cierres lubricados con silicona HEMOGUARDÍB) ) de cada tubo y luego se colocaron los conjuntos de cierre/separador en los tubos. A continuación, los tubos se liofilizaron y evacuaron» Los tubos luego se colocaron en paquetes de barrera, aproximadamente cinco (5) tubos por bolsa, con desecador. Las bolsas se sellaron térmicamente, y el producto se esterilizó» EJEMPLO 2 - TUBOS DE VIDRIO CON SEPARADOR MECÁNICO Se siguió el procedimiento del Ejemplo 1, esta vez usando tubos de vidrio, EJEMPLO 3 - TUBOS DE PLÁSTICO CON SEPARADOR MECÁNICO Se siguió nuevamente el procedimiento del Ejemplo 1, excepto que la solución de agente de estabilización también incluye alrededor de 0.5 a alrededor de 20% de trehalosa . Un ejemplo apropiado de una formulación para un coctel de. inliibidor de proteasa es como sigue: aproximadamente 800 ug/rnl de benzamidina HCL, aproximadamente 500 ug/ml de fenantrolina, aproximadamente 500 ug/ml de agrotinina, aproximadamente 500 ug/ml de leupeptina, aproximadamente 500 ug/ml de pepstatina A y aproximadamente 50 ug/ml de PMSF, El coctel está en la forma de un polvo liofilizado. Antes del uso, aproximadamente 1 mi de etanol puro se añade al polvo liofilizado para obtener un coctel de inhibidor de proteasa 50X. Aún cuando se han seleccionado diversas modalidades para demostrar la invención, se entenderá por los expertos en el ramo que se pueden hacer varias modificaciones adiciones sin abandonar el alcance de la invención como define en las reivindicaciones anexas.

Claims

REIVINDICACIONES 1.- Un aparato para recoger una muestra biológica, que comprende.: un recipiente que tiene una porción de depósito para recibir la muestra y cuando menos un agente de estabilización de proteina en el depósito del recipiente. 2.- El aparato de conformidad con la reivindicación 1, en donde el recipiente se selecciona del grupo que consiste en tubos, dispositivos de recolección de sangre de sistema cerrado, bolsas de recolección, jeringas, jeringas previamente llenadas, catéteres, placas de microtitulo, dispositivos de recolección de múltiples pozos, frascos, frascos de extractor centrífugo, botellas de rodillo, viales, pipetas, puntas de pipeta y recipientes de tejido y otros de recolección de muestra biológica. 3*- El aparato de conformidad con la reivindicación 1, en donde el recipiente es un tubo que tiene un primer extremo y un segundo extremo. 4.- El aparato de conformidad con la reivindicación 3, que comprende además un miembro de separación dispuesto en el recipiente. 5.- El aparato de conformidad con la reivindicación 4, en donde el miembro de separación es un elemento de separación mecánica. 6. - El aparato de conformidad con la reivindicación 5, en donde el elemento de separación mecánica está cuando menos parcialmente revestido con el cuando menos un agente de estabilización. 7.- El aparato de conformidad con la reivindicación 5, en donde el elemento de separación mecánica es substancialmente inerte con respecto al agente de estabilización, 8. - El aparato de conformidad con la reivindicación 4, en donde el miembro de separación es un gel = 9. - El aparato de conformidad con la reivindicación 8, en donde el miembro de separación de gel está físicamente separado del agente de estabilización . 10. - El aparato de conformidad con la reivindicación 1, en donde el agente de estabilización de proteína está en una forma seleccionada del grupo que consiste de una solución, suspensión u otro líquido, un gránulo, una tableta, una cápsula, un material secado por aspersión, un material secado por congelación, un polvo, una partícula, un gel, cristales o un material liofilizado. 11. - El aparato de conformidad con la reivindicación 10, en donde el agente de estabilización de proteína está liofilizado. 12. - El aparato de conformidad con la reivindicación 1, en donde el agente de estabilización de proteina comprende cuando menos un inhibidor de proteasa. 13.- Al aparato de conformidad con la reivindicación 12, en donde el cuando menos un inhibidor de proteasa se selecciona del grupo que consiste en proteasas de serina, proteasas de cisterna, proteasas aspárticas, metaloproteasas, proteasas de tiol, exopeptidasas y combinaciones de las mismas. 14. - El aparato de conformidad con la reivindicación 13, en donde el inhibidor de proteasa comprende una proteasa de serina y una proteasa de cisterna. 15. - El aparato de conformidad con la reivindicación 14, en donde el inhibidor de proteasa comprende además una metaloproteasa. 16.- El aparato de conformidad con la reivindicación 12, en donde el cuando menos un inhibidor de proteasa comprende un coctel de inhibidor de proteasa. 17. - El aparato de conformidad con la reivindicación 1, en donde el agente de estabilización comprende más de dos inhibidores de proteasa. 18.- El aparatG de conformidad con la reivindicación 15, en donde los inhibidores de proteasa incluyen serie,, cisteína y metaloproteasas. 19.- El aparato de conformidad con la reivindicación 1, que comprende además un medio portador. 20. - el aparato de conformidad con la reivindicación 1. que comprende además un medio de estabilización. 21. - El aparato de conformidad con la reivindicación 20,. en donde el medio de estabilización es trehalosa. 22. - El aparato de conformidad con la reivindicación 1, que comprende además cuando menos un antioxidante . 23. - El aparato de conformidad con la reivindicación le que comprende además cuando menos un agente reductor . 24. - El aparato de conformidad con la reivindicación 1. que comprende además cuando menos un agente de tampón. 25. - El aparato de conformidad con la reivindicación 3. que comprende además un medio de cierre para sellar el primer extremo. 26. - El aparato de conformidad con la reivindicación 25. en donde el tubo está parcialmente evacuado . 27. - El aparato de conformidad con la reivindicación 26,. en donde el agente de estabilización de proteina está liofilizado. 28. - El aparato de conformidad con la reivindicación 27, en donde el agente de estabilización de proteina comprende más de dos inhibidores de proteasa. 29. - el aparato de conformidad con la reivindicación 27, en donde el tubo comprende además un anticoagulante = 30. - El aparato de conformidad con la reivindicación 29, en donde el anticoagulante se seca por aspersión hacia cuando menos una porción de una pared interior . 31. - El aparato de conformidad con la reivindicación 29, en donde el an icoagulante comprende una sal de EDTA. 32. - El aparato de conformidad con la reivindicadoa 29, en doade el anticoagulante comprende íieparina . 33. - Un tubo para recoger y estabilizar una muestra biológica, que comprende: un primer extremo, un segundo extremo y cuando menos una pared interior que define una porción de depósito para recibir la muestra; por lo menos un agente de estabilización de proteina en el depósito del recipiente; un gel polimerico tixotrópico en el depósito; y un elemento para mantene la separación del agente de estabilización de proteina y el gel. 34. - El tubo de conformidad con la reivindicación 33,- en donde e-1 elemento para mantener la. separación es una. cá s la . 35. - El tubo de conformidad con la reivindicación 34, que comprende además un medio de cierre para sellar el primer extremo. 36. - El tubo de conformidad con la reivindicación 35, en donde el medio de cierre es perforable por una aguja para suministrar la muestra al tubo. 37. - El tubo de conformidad con la reivindicación 35, en donde el tubo está parcialmente evacuado, 38. - El tubo de conformidad con la reivindicación 37, en donde el agente de estabilización de proteina está liofilizado- 39.- El tubo de conformidad con la reivindicación 38, en donde el agente de estabilización de proteina comprende más de dos inhibidores de proteasa. 40. - El tubo de conformidad con la reivindicación 38, en donde el tubo comprende además un anticoagulante secado por aspersión hacia cuando menos una porción de la pared interior. 41. - Un tubo para recoger y estabilizar una muestra biológica, que comprende: un primer extremo, un segundo extremo y cuando menos una pared interior que define una porción de depósito para recibir la muestra; cuando menos un agente de estabilización de proteina en el depósito del tubo; y un elemento de separación mecánico en el depósito. 42,- El tubo de conformidad con la reivindicación. 41, en donde el elemento de separación mecánico es substancialmente inerte con respecto al agente de estabilización^ 43. - El tubo de conformidad con la reivindicación 41, que comprende además un medio de cierre para sellar el primer extremo» 44. - El tubo de conformidad con la reivindicación 43, en donde el medio de cierre es perforable por una aguja para suministrac la muestca al tubo 45.- El tubo de conformidad con la reivindicación 43, en donde el tubo está parcialmente evacuado. 6,- El tubo de conformidad con la reivindicación 45, en donde el agente de estabilización de proteina está liofilizado. 47,- El tubo de conformidad con la reivindicación 46, en donde el agente de estabilización de proteina comprende más de dos inhibidores de proteasa. 8,- El tubo de conformidad coa la relviadicacíóii 46, en donde el tubo comprende además un anticoagulante secado por aspersión hacia cuando menos una porción de la pared interior. 49,- Una placa de prueba para cultivar células que comprende : una base substancialmente plana que tiene una superficie superior y una superficie inferior; cuando menos un pozo que se extiende desde la superficie superior a la superficie inferior; y un agente de estabilización de proteina dentro del por lo menos un pozo. 50.- La placa de prueba de conformidad con la reivindicación 49, en donde la placa de prueba se selecciona del grupo que consiste en placas de uno solo o múltiples pozos, placas de microtitulo, y placas de cultivo de tejido. 51. - La placa de prueba de conformidad con la reivindicación 49, en donde el agente de estabilización comprende uno o más inhibidores de proteasa. 52. - Un conjunto de recolección de muestra, que comprendet una bandeja de muestra que tiene una pluralidad de pozos de muestra sustentados por la bandeja en registro separado para recoger muestras biológicas discretas; una caja de bandeja de muestra para sustentar y encerrar la bandeja de muestra; y un agente de estabilización de proteina dentro de los pozos de muestra. 53. - El conjunto de recolección de muestra de conformidad con la reivindicación 52, en donde la bandeja de muestra está acomodada moviblemente dentro de la caja de bandeja de muestra para movimiento entre una primera posición que encierra la pluralidad de pozos de muestra a una segunda posición que hace exteriormente accesible cuando menos uno de los pozos de muestra. 54. - El conjunto de recolección de muestra de conformidad con la reivindicación 52, en donde el agente de estabilización comprende uno o más inhibidores de proteasa. 55. - Un conjunto de jeringa, que comprende: un barril cilindrico que tiene un extremo próximo abierto, un extremo distante y una cámara hueca entre los extremos próximo y distante para recibir una muestra biológica; un émbolo colocado en el extremo próximo abierto; una aguja asegurada al barril; y un agente de estabilización de proteina dentro de la cámara. 56.- El conjunto de jeringa de conformidad con la reivindicación 55, en donde el agente de estabilización comprende uno o más inhibidores de proteasa. 57.- Un conjunto de catéter, que comprende: un catéter flexible adaptado para inserción hacia el sistema vascular que tiene una pared lateral cilindrica ai que describe un lumen a través de la misma, un extremo próximo y un extremo distante cerrado; y un agente de estabilización de proteina dispuesto dentro del lumen. 58.- El conjunto de catéter de conformidad con la reivindicación 57, en donde el agente de estabilización comprende uno o más inhibidores de proteasa. 59. - Una pipeta, que comprende: una porción de cuerpo principal cilindrica que tiene primer y segundo extremos, una pared tubular y un interior de pipeta; una porción surtidora colocada en el primer extremo del cuerpo y una boquilla colocada en el segundo extremo del cuerpo; y un agente de estabilización de proteina dispuesto dentro del cuerpo de pipeta. 60. - La pipeta de conformidad con la reivindicación 59, en donde el agente de estabilización comprende uno o más inhibidores de proteasa. 61.- Una bola de recolección de sangre para acomodar sangre recogida, que comprende: un cuerpo que tiene una porción superior; una porción de acomodo de sangre que tiene un interior y un exterior, conectada a la porción superior del cuerpo; ?-r una porción de sello que rodea el exterior de la porción de acomodo de sangre; y un agente de estabilización de proteina dispuesto dentro del interior de la porción de acomodo de sangre. 62. - La bolsa de recolección de sangre de conformidad con la reivindicación 61, en donde el agente de estabilización comprende uno o más inhibidores de proteasa. 63. - Un dispositivo de laboratorio, que comprende: cuando menos una superficie de operación; y un agente de estabilización de proteína colocado en la cuando menos una superficie de operación. 64. - El recipiente de laboratorio de conformidad con la reivindicación 63, en donde el recipiente se selecciona del grupo que consiste en platinas de microscopio, conjuntos de platina de microscopio, cámaras de muestra para dispositivos analíticos, cintas, laminados, disposiciones y tubería . 65.- El recipiente de laboratorio de conformidad con la reivindicación 64, en donde el agente de estabilización comprende uno o más inhibidores de proteasa. 66. - El recipiente de laboratorio de conformidad con la reivindicación 63, que comprende además cuando menos una pared interior que define una porción de depósito y por lo menos una abertura en comunicación con la porción de depósito . £.1 67. - El recipiente de laboratorio de conformidad con la reivindicación 66, en donde el recipiente se selecciona del grupo que consiste en viales, frascos, frascos de extractor centrifugo, botellas de rodillo y recipientes de recolección de tejido y de otra muestra biológica. 68. - El recipiente de laboratorio de conformidad con la reivindicación 67, en donde el agente de estabilización comprende uno o más inhibidores de proteasa. 69. - Un juego para recoger y almacenar una muestra biológica para prueba subsecuente, que comprende: un tubo de recolección primario que tiene un elemento separador en el mismo; y un tubo secundario; en donde el tubo de recolección primario y el tubo secundario contienen uno o más agentes de estabilización de proteína . 70. - El juego de conformidad con la reivindicación 69, en donde el uno o más agentes de estabilización están en una forma seleccionada del grupo que consiste en una solución, suspensión u otro líquido, un gránulo, una tableta, una cápsula, un material secado por aspersión, un material secado por congelación, un polvo, una partícula, un gel, cristales o un material liofilizado. 71. - El juego de conformidad con la reivindicación 70, en donde el uno o más agentes de estabilización están liofilizados . 72. - El juego de conformidad con la reivindicación 69, en donde el elemento separador es un elemento de separación mecánico. 73. - El juego de conformidad con la reivindicación 72, en donde el elemento de separación mecánico está cuando menos parcialmente revestido con uno o más agentes de estabilización. 74. - El juego de conformidad con la reivindicación 73, en donde el elemento de separación mecánico es substancialmente inerte con respecto al uno o más agentes de estabilización . 75. - El juego de conformidad con la reivindicación 69, en donde el elemento separador es un gel. 76. - El juego de conformidad con la reivindicación 75, en donde el gel está físicamente separado del agente de estabilización. 77. - El juego de conformidad con la reivindicación 69, en donde el agente de estabilización comprende cuando menos un inhibidor de proteasa. 78.- El juego de conformidad con la reivindicación 77, en donde el cuando menos un inhibidor de proteasa se selecciona del grupo que consiste en proteasas de serina, proteasas de cisterna, proteasas aspárticas, metaloproteasas, proteasas de tiol, exopeptidasas y combinaciones de las mismas . 79.- El juego de conformidad con la reivindicación 78, en donde el cuando menos un inhibidor de proteasa comprende una proteasa de serina y una proteasa de cisterna . 80.- El juego de conformidad con la reivindicación 79, en donde el cuando menos un inhibidor de proteasa comprende además una metaloproteasa. 81. - El juego de conformidad con la reivindicación 69, en donde el agente de estabilización comprende más de dos inhibidores de proteasa. 82. - El juego de conformidad con la reivindicación 81, en donde el cuando menos un inhibidor de proteasa incluye serina, cisteina y metaloproteasas . 83. - El juego de conformidad con la reivindicación 69, en donde el tubo primario o secundario o ambos contienen además un medio portador. 84. - El juego de conformidad con la reivindicación 69, en donde el tubo primario o secundario o ambos, contienen además un medio de estabilización. 85.- El juego de conformidad con la reivindicación 84, en donde el medio de estabilización es trahalosa. 86.- El juego de conformidad con la reivindicación 69, en donde el tubo primario o secundario, o ambos contienen además cuando menos un antioxidante. 87.- El juego de conformidad con la reivindicación 69, en donde el tubo primario o secundario, o ambos, contienen además cuando menos un agente reductor. 88. - El juego de conformidad con la reivindicación 69, en donde el tubo primario o secundario, o ambos contienen además cuando menos un agente de tampón. 89. - El juego de conformidad con la reivindicación 69, que comprende además un dispositivo de transferencia de tubo a tubo. 90. - El juego de conformidad con la reivindicación 89, en donde el segundo tubo se mantiene a una presión para atraer la muestra del primer tubo a través del dispositivo de transferencia de tubo a tubo y hacia el segundo tubo. 91. - Un método para estabilizar una muestra biológica, que comprende: proporcionar un recipiente de recolección de muestra; y disponer la muestra biológica hacia el recipiente de recolección de manera que la muestra se ponga en contacto con un agente de estabilización de proteina. 92.- El método de conformidad con la reivindicación 91, en donde el recipiente de recolección de muestra incluye un agente de estabilización antes de recoger la muestra biológica. 93. - El método de con ormidad con la reivindicación 91, en donde disponer la muestra biológica hacia el recipiente y el contacto de la muestra con el agente de estabilización se realizan en el mismo recipiente de recolección . 94. - El método de conformidad con la reivindicación 93, en donde el recipiente de recolección se evac a y tiene una presión interna predeterminada suficiente para atraer un volumen predeterminado de la muestra hacia el recipiente de recolección. 95. - El método de conformidad con la reivindicación 91, en donde el agente de estabilización está en una forma seleccionada del grupo que consiste en una solución, suspensión u otro liquido, un gránulo, una tableta, una cápsula, un material secado por aspersión, un material secado por congelación, un polvo, una partícula, un gel, cristales y un material liofílizado. 96. - El método de conformidad con la reivindicación 95, en donde el agente de estabilización está liofílizado. 97. - El método de conformidad con la reivindicación 91, en donde el recipiente de recolección se selecciona a partir del grupo que consiste en tubos, dispositivos de recolección de sangre de sistema cerrado, bolsas de recolección, jeringas, placas de microtltulo, dispositivos de recolección de múltiples pozos, frascos, frascos de extractor centrífugo, botellas de rodillo y viales 98. - El método de conformidad con la reivindicación 97, en donde el recipiente de recolección es un tubo. 99. - El método de conformidad con la reivindicación 98, en donde el recipiente de recolección incluye un miembro de separación. 100. - El método de conformidad con la reivindicación 99, en donde el miembro de separación está cuando menos parcialmente revestido con el agente de estabilización. 101. - El método de conformidad con la reivindicación 99, en donde el miembro de separación es un elemento de separación mecánico. 102. - El método de conformidad con la reivindicación 101, en donde el elemento de separación mecánico es inerte con respecto al agente de estabilización. 103. - El método de conformidad con la rei indicación 99, en donde el miembro de separación es un gel. 104.- El método de conformidad con la reivindicación 91, en donde el agente de estabilización comprende cuando menos un inhibidor de proteasa. 105.- El método de conformidad con la reivindicación 104, en donde el cuando menos un inhibidor de proteasa se selecciona a partir del grupo que consiste en pxoteasas de serina, proteasas de cisteína, proteasas aspárticas, metaloproteasas, proteasas de tiol, exopeptidasas y combinaciones de las mismas. 106. - El método de conformidad con la reivindicación 105, en donde el inhibidor de proteasa comprende una proteasa de serina y una proteasa de cisteína. 107. - El método de conformidad con la reivindicación 106, en donde el inhibidor de proteasa comprende además una metaloproteasa. 108.- el método de conformidad con la reivindicación 104, en donde el cuando menos un inhibidor de proteasa comprende un coctel de inhibidor de proteasa. 109. - El método de conformidad con la reivindicación 91, en donde el agente de estabilización comprende más de dos inhibidores de proteasa. 110. - El método de conformidad con la reivindicación 109, en donde los inhibidores de proteasa incluyen serina, cisteína y metaloproteasas. 111. - El método de conformidad con la reivindicación 91, en donde el recipiente de recolección incluye un medio portador. 112. - El método de conformidad con la reivindicación 91, en donde el recipiente de recolección incluye un medio de estabilización. 113.- El método de conformidad con la reivindicación 112, en donde el medio de estabilización es trehalosa. 114. - El método de conformidad con la reivindicación 91, en donde el recipiente de recolección incluye cuando menos un antioxidante . 115. - El método de conformidad con la reivindicación 91, en donde el recipiente de recolección incluye cuando menos un agente reductor. 116. - El método de conformidad con la reivindicación 91, en donde el recipiente de recolección incluye cuando menos un agente de tampón. 117. - El método de conformidad con la reivindicación 91, en donde la muestra biológica se selecciona a partir del grupo que consiste en sangre entera o un componente de la misma, concentrados de célula de sangre roja, concentrados de plaqueta, concentrados de leucocito, plasma, suero, orina, aspirados de médula de hueso, fluido cerebro espinal, tejido, células, feces, saliva y secreciones orales, secreciones nasales y fluido linfático. 118.- El método de conformidad con la reivindicación 117, en donde la muestra biológica es sangre entera. 119.- El método de conformidad con la reivindicación 118, en donde la sangre, entera se recoge de un paciente directamente hacia el recipiente de recolección. 120. - El método de conformidad con la reivindicación 119, en donde el recipiente de recolección incluye el agente de estabilización antes de que la sangre se recoja del paciente. 121. - Un método para hacer un recipiente de recolección para recoger una muestra biológico, que comprende: proporcionar un recipiente de recolección; disponer cuando menos un inhibidor de proteasa en el recipiente; liofilizar el cuando menos un inhibidor de proteasa; evacuar y sellar el recipiente; y esterilizar el recipiente. 122. - El método de conformidad con la reivindicación 121, en donde el recipiente de recolección es un tubo . 123. - _ El método de conformidad con la reivindicación 121, en donde el cuando menos un inhibidor de proteasa se selecciona del grupo que consiste de proteasas de serina, proteasas de cisterna, proteasas aspárticas, metaloproteasas, proteasas de tiol, exopeptidasas y combinaciones de los mismos . 124. - El método de conformidad con la reivindicación 123, en donde el inhibidor de proteasa comprende una proteasa de serina y una proteasa de cisterna. 125.- El método de conformidad con la reivindicación 124, en donde el inhibidor- de proteasa comprende además una metaloproteasa . 126.- El método de conformidad con la reivindicación 121, en donde el cuando menos un inhibidor de proteasa comprende un coctel de inhibidor de proteasa. 127. - El método de conformidad con la reivindicación 126, en donde el coctel inhibidor de proteasa comprende serian, cisteina y metaloproteasas . 128. - El método de conformidad con la reivindicación 122, que comprende además colocar en el tubo un miembro de separación. 129. - El método de conformidad con la reivindicación 128, en donde el miembro de separación es un elemento de separación mecánico. 130. - El método de conformidad con la reivindicación 129, en donde el miembro de separación es un gel . 131.- El método de conformidad con la reivindicación 122, que comprende además disponer un anticoagulante hacia el tubo. } 132.- El método de conformidad con la reivindicación 131, en donde el anticoagulante se dispone hacia el tubo mediante secado por aspersión. 133. - El método de conformidad con la reivindicación 131, en donde el anticoagulante comprende una sal de EDTA. 134. - El método de conformidad con la reivindicación 131, en donde el anticoagulante comprende heparina . 135. - Un proceso para aislamiento de proteina, que comprende : proporcionar un recipiente que comprende un agente de estabilización de proteina de uno o más inhibidores de proteasa; añadir una muestra biológica al recipiente; y aislar la proteina de la muestra biológica. 136. - El proceso de conformidad con la reivindicación 135, en donde el recipiente de recolección es un tubo. 137. - El proceso de conformidad con la reivindicación 136, que comprende ademas un miembro de separación dispuesto en el recipiente. 138. - El proceso de conformidad con la reivindicación 137, en donde el miembro de separación es un elemento de separación mecánico. 139. - El proceso de conformidad con la reivindicación 138, en donde el elemento de separación mecánico está cuando menos parcialmente revestido con el por lo menos un agente de estabilización. 140. - El proceso de conformidad con la reivindicación 138, en donde el elemento de separación mecánico es substancialmente inerte con respecto al agente de estabilización. 141. - El proceso de conformidad con la reivindicación 137 , en donde el miembro de separación es un gel. 142. - El proceso de conformidad con la reivindicación 141, en donde el miembro de separación de gel está separado físicamente del agente de estabilización. 143. - El proceso de conformidad con la reivindicación 136, en donde el agente de estabilización comprende cuando menos un inhibidor de proteasa. 144. - El proceso de conformidad con la reivindicación 143, en donde el cuando menos un inhibidor de proteasa se selecciona del grupo que consiste en proteasas de serina, proteasas de cisterna, proteasas aspárticas, metaloproteasas, proteasas de tiol, exopeptidasas y combinaciones de las mismas . 145. - El proceso de conformidad con la reivindicación 144, en donde el cuando menos un inhibidor de proteasa comprende una proteasa de serina y una proteasa de cistern . 146. - El proceso de conformidad con la reivindicación 145, en donde el inhibidor de proteasa comprende además una m a.lQpr.Qtea.sa... 147. - El proceso de conformidad con la reivindicación 143 , en donde el cuando menos un inhibidor de proteasa comprende, un. coctel de inhibidor de proteasa. 148. - El proceso de conformidad con la reivindicación 136, en donde el agente de estabilización comprende más de dos inhibidores de proteasa, 149. - El proceso de conformidad con la reivindicación 148, en donde los inhibidores de proteasa incluyen serina, cisterna y metaloproteasas . 150. - El proceso de conformidad con la reivindicación 136, en donde el tubo está parcialmente evacuado * 151. - El proceso de conformidad con la reivindicación 150, en donde el agente de estabilización está liofilizado * 152. - El proceso de conformidad con la reivindicación 151, en donde el agente de estabilización comprende más de dos inhibidores de proteasa. 153. - El proceso de conformidad con la reivindicación 151, en donde el tubo comprende además un anticoagulante . 154. - El proceso de conformidad con la reivindicación 153, en donde el anticoagulante se seca por aspersión hacia cuando menos una porción de una pared interior del tubo , 155. - El proceso de conformidad con la reivindicación 153, en donde el anticoagulante comprende una sal de ??1?.. 156. - El proceso de conformidad con la reivindicación 153, en donde el anticoagulante comprende freparina.