CN102778378A - 一种含水蛭素的抗凝载玻片及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种含水蛭素的抗凝载玻片及其制备方法，它是由带有凹面的载玻片与喷涂在凹面中的水蛭素组成；其中所述载玻片凹面深度为0.01-0.30mm；水蛭素用量为纯度93-98%水蛭素浓缩液0.01mg-10mg。实验证明：采用本发明的含水蛭素的抗凝载玻片涂抹待测体液制成涂片，在显微镜下观察到的细胞形态分布均匀，细胞形态结构完整，清晰便于观察、所致涂片无堆积现象，适合于各种染色更易于形态学观察，不影响血液细胞形态、血细胞染色，不影响背景染色效果。本发明的抗凝载玻片给临床上解决了重大课题，为减少患者的痛苦带来了福音，促进了临床检验学的发展。

Description

一种含水蛭素的抗凝载玻片及其制备方法

技术领域

本发明属于医疗器械技术领域，特别是涉及一种含水蛭素的抗凝载玻片及其制备方法。

背景技术

近年来，随着医学科学的迅速发展，疾病的诊断越来越多的是依靠细胞形态的观察分析,例如骨髓液、关节炎液、胸腹水、脑脊髓液 、血液的诊断，它是疾病诊断的重要手段。

体液涂片的制备是一项重要工作，传统体液涂片为防止标本凝固，常常采用不同的抗凝剂，如枸橼酸钠，EDTA,均为化学抗凝剂，这些化学抗凝剂它们易与细胞蛋白质结合，使之变化，干扰细胞蛋白质对染色液选择性吸附作用，极易形成结晶体影响检测。例如，有时临床医生遇到患者特殊体质或某种病症等因素体液标本易凝固，为防止标本凝固，在没用统一认可的对策下，常采用加入肝素的方法作为抗凝剂使体液保持液态，但肝素易使细胞渗透压改变，致使细胞膨胀破裂，肝素液能改变细胞，尤其是红细胞ZETA电位，使红细胞聚集成团状，染色时又因肝素与染色液结合产生因光异色现象，可使细胞染色性发生变化，使染色背景呈淡蓝色。这些抗凝剂均不同程度的影响了细胞形态的观察分析。不合格的体液涂片，导致检验室无法出具正确的检验报告，这也是临床医生无法向患者交待的难题。再例如有些特殊的骨髓检测还需抗凝的骨髓液0.3-0.5毫升，有的甚至需1-2毫升，给患者带来了很大的痛苦。因此，干扰性的抗凝剂不能做到体液分析的基本质量保证。

发明内容

本发明人通过大量的临床试验研究，成功的制备出了一种含水蛭素的抗凝载玻片，在临床检验上采用该抗凝载玻片，将待检体液滴到含水蛭素的抗凝载玻片上，制成含水蛭素的抗凝体液涂片。该体液涂片分布均匀，细胞形态结构完整，清晰便于观察、所致涂片无堆积现象，适合于各种染色更易于形态学观察（原有形态）各种血细胞玻片推片染色看片用，不影响血液细胞形态、血细胞染色，不影响背景染色效果。

本发明的方法，为细胞形态的临床观察分析解决了重大课题，减少了患者的痛苦，给患者带来福音，它的发明填补了医学领域的空白，促进了临床检验学的发展。

为实现上述目的，本发明公开了如下的技术内容：

一种含水蛭素的抗凝载玻片，其特征在于它是由带有凹面的载玻片与喷涂在凹面中的水蛭素组成；其中所述载玻片凹面深度为0.01-0.30mm；所述水蛭素用量为纯度93-98%水蛭素浓缩液0.01mg-10mg，技术指标1mg≥10000IU。

含水蛭素的载玻片,其中纯度93-98%水蛭素浓缩液的用量优选为0.01mg-6mg；0.01mg-4mg ；0.01mg-2mg；0.01mg-1mg； 更加优选水蛭素的用量为0.01mg-0.5mg ；0.01mg-0.3mg。此浓缩液生产完成即为液态，且无重金属，无菌，无杂质等特点。呈无色透明状。

本发明进一步公开了含水蛭素载玻片的制备方法：包括如下的步骤：

（1）在十万级净化车间中，将边缘平齐、磨角无任何毛刺、薄厚均匀的凹面深度为0.01-0.30mm的载玻片（载玻片本身厚度为1-2mm）进行除尘、除菌、除油处理；

（2）将纯度93-98%水蛭素浓缩液0.01mg-10mg喷涂在带凹面的载玻片上，制成含0.01mg-10mg水蛭素的载玻片；

（3）将载玻片保存在2-8℃冰箱内，用前恢复常温后使用。从冰箱中取出载玻片后，使用时应避免水雾出现。

本发明提到的经过除尘、除菌、除油处理的载玻片的处理方法如下：

1、浸泡与净化剂溶液中：备一缸水内有PH中性，无泡洗涤粉或液体去污剂。用量约5升水加入10—15克。水温35-45℃，不得超过60℃将玻片一个一个地放入缸中，可浸泡过液，不可用刷子刷洗。

2、在水中冲洗：用自来水冲洗每一块玻片，轻轻甩干然后浸于净化的水中达15分钟。

3、擦洗与干燥：用无绒毛的软巾擦净玻片，每次一块，将其分别置于一张滤纸上使其干燥，不得成堆，成叠，防止有水纹，划痕，发黄或有模糊斑迹的片子。

本发明提到的载玻片、除油玻片的消毒方法如下： 

1、紫外线消毒：波长为2000—3000A°（2650—2660A°者杀菌最强）。240—280豪微米其中260的作用最强。

2、凹形玻片（凹在一侧）处理相同（或干燥法）。

本发明进一步公开了采用含水蛭素载玻片制备待测体液涂片的方法，其特征在于按如下的步骤进行：

（1）将待测体液滴在含水蛭素的载玻片上，混合均匀；

（2）然后吸出溶液滴在除油玻片上，用磨边片平稳地向前推进至除油玻片的另一端，玻片上便留下含水蛭素的待测体液一薄层，厚度为0.02-0.05mm；

（3）图片制成后，在空气中挥动，使其迅速干燥，显微镜下观察细胞形态；其中所述的待测体液指的是：骨髓液、关节炎液、胸腹水、脑脊髓液 或血液。

本发明更进一步公开了含水蛭素载玻片在制备用于检测体液涂片观察细胞形态中的应用,特别是在检测关节炎液、胸腹水、脑脊髓液或血液方面的应用。

采用含水蛭素的抗凝载玻片制备体液载玻片是一项重要的工作，绝对不可忽视。有时待测体液取材良好，但由于玻片的不清洁或推片技术不佳，而不能得到满意的涂片。如制备的体液涂片太厚细胞重叠则无法辨认细胞的结构；涂片太薄，细胞过于分散，则影响检查速度和准确性，甚至漏诊或误诊。因此必须制备薄厚适宜、分布均匀的涂片是非常重要的。

本发明先后考察了制备体液涂片的厚度，抗凝物水蛭素的用量等因素，具体见如下的实验：

通过上述实验数据，充分说明了如果水蛭素抗凝剂量不足会出现：

（1）骨髓液轻微凝固，达不到预期抗凝效果，抗凝作用时间有限导致出现细胞分布容易分散。

(2)抗凝速度较慢，影响检验结果的准确性。

(3)染色观察容易出现偏差，造成误诊。

综上，抗凝剂量不正确起不到预先抗凝的效果，还会给检验人员造成假象，出现骨髓涂片处理不及时，延缓检测等问题。相较不使用传统抗凝剂更易造成误诊和临床检测失败。

通过上述实验数据，同时也充分说明了如果水蛭素抗凝剂量过大会出现：

（1）由于抗凝剂过多，干燥时间大幅延长，增加检测的时间。容易延误病人病情，不利于特殊情况下的抢救工作。

（2）      细胞分布容易受凝血时间过长及长时间暴露在空气中出现变质的问题。

（3）水蛭素生产成本较高，过多的抗凝剂添加造成此产品的价格昂贵，造成国家医保开支增大，不利于节能减排。

附图说明：

图1为抗凝载玻片；其中1为抗凝载玻片； 2为载玻片凹面；3为凹面中的抗凝剂；4为载玻片的磨砂边缘；5载玻片四边磨成的圆角。

具体实施方式：

下面结合实施例说明本发明，这里所述实施例的方案，不限制本发明，本领域的专业人员按照本发明的精神可以对其进行改进和变化，所述的这些改进和变化都应视为在本发明的范围内，本发明的范围和实质由权利要求来限定。本发明所用到的纯度为93-98%水蛭素浓缩液有市售。

实施例1

含水蛭素的抗凝载玻片，它是由带有凹面的载玻片与喷涂在凹面中的水蛭素组成；其中所述凹面深度为0.02mm；含量98%水蛭素浓缩液用量为含0.01mg。技术指标为1mg≥10000IU。 

实施例2

含水蛭素的抗凝载玻片，它是由带有凹面的载玻片与喷涂在凹面中的水蛭素组成；其中所述凹面深度为0.050mm；含量95%水蛭素浓缩液用量为含0.02mg。技术指标为1mg≥10000IU。  

实施例3

含水蛭素的抗凝载玻片，它是由带有凹面的载玻片与喷涂在凹面中的水蛭素组成；其中所述凹面深度为0.3mm；含量98%水蛭素浓缩液用量为0.05mg。技术指标为1mg≥10000IU。 

实施例4

含水蛭素的抗凝载玻片，它是由带有凹面的载玻片与喷涂在凹面中的水蛭素组成；其中所述凹面深度为0.30mm；含量98%水蛭素浓缩液用量为0.3mg。技术指标为1mg≥10000IU。 

实施例5

     （1-4）载玻片的制备方法：

（1）在十万级净化车间中，将边缘平齐、磨角无任何毛刺、薄厚均匀的凹面深度为0.01-0.30mm的载玻片（载玻片本身厚度为1-2mm）进行除尘、除菌、除油处理；

（2）将纯度93-98%水蛭素浓缩液0.01mg-10mg喷涂在带凹面的载玻片上，制成含0.01mg-10mg的水蛭素抗凝载玻片；

（3）将载玻片保存在2-8℃冰箱内，用前恢复常温后使用。从冰箱中取出载玻片后，使用时应避免水雾出现。

实施例6

含水蛭素载玻片制备待测体液涂片的方法：

（1）将待测体液（血液）滴在含水蛭素的载玻片，用推片混合均匀；

（2）然后吸出溶液滴在除油玻片上，用磨边片平稳地向前推进至除油玻片的另一端，玻片上便留下含水蛭素的待测体液一薄层，厚度为0.03mm；

（3）图片制成后，在空气中挥动，使其迅速干燥，显微镜下观察细胞形态。

实施例7

含水蛭素载玻片制备待测体液涂片的方法：

（1）将待测体液（关节炎液）滴在含水蛭素的载玻片，用推片混合均匀；

（2）然后吸出溶液滴在除油玻片上，用磨边片平稳地向前推进至除油玻片的另一端，玻片上便留下含水蛭素的待测体液一薄层，厚度为0.05mm；

（3）图片制成后，在空气中挥动，使其迅速干燥，显微镜下观察细胞形态。

实施例8

含抗凝水蛭素载玻片制备待测骨髓液涂片的方法：

（1）将待测骨髓液滴在含水蛭素的抗凝载玻片，用推片混合均匀；

（2）然后吸出溶液滴在除油玻片上，用磨边片平稳地向前推进至除油玻片的另一端，玻片上便留下含水蛭素的待测体液一薄层，厚度为0.03mm；

（3）图片制成后，在空气中挥动，使其迅速干燥，显微镜下观察细胞形态。

Claims (4)

1. 一种含水蛭素的载玻片，其特征在于它是由带有凹面的载玻片与喷涂在凹面中的水蛭素组成；其中所述载玻片凹面深度为0.01-0.30mm；所述水蛭素用量为纯度93-98%水蛭素浓缩液0.01mg-10mg。

2.权利要求1所述含水蛭素的载玻片,其特征在于所述水蛭素用量为纯度93-98%水蛭素浓缩液0.01mg-0.3mg。

3. 权利要求1所述含水蛭素载玻片的制备方法：其特征在于按如下的步骤进行：

（1）在十万级净化车间中，将边缘平齐、磨角无任何毛刺、薄厚均匀的凹面深度为0.01-0.30mm的载玻片进行除尘、除菌、除油处理；

（2）将纯度93-98%水蛭素浓缩液0.01mg-10mg喷涂在带凹面的载玻片上，制成含0.01mg-10mg的水蛭素抗凝载玻片；

（3）将载玻片保存在2-8℃冰箱内，用前恢复常温后使用。

4.一种采用含水蛭素载玻片制备待测体液涂片的方法，其特征在于按如下的步骤进行：

 （1）将待测体液滴在含水蛭素的抗凝载玻片，混合均匀；

（2）然后吸出溶液滴在除油玻片上，用磨边片平稳地向前推进至除油玻片的另一端，玻片上便留下含水蛭素的待测体液一薄层，厚度为0.02-0.05mm；

（3）图片制成后，在空气中挥动，使其迅速干燥，显微镜下观察细胞形态；其中所述的待测体液指的是：骨髓液、关节炎液、胸腹水、脑脊髓液或血液。

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